ES2927528T3 - Compuestos heterocíclicos y su utilización en la prevención o el tratamiento de infecciones bacterianas - Google Patents

Compuestos heterocíclicos y su utilización en la prevención o el tratamiento de infecciones bacterianas Download PDF

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Christophe Simon
Chrystelle Oliveira
Fralliec Géraldine Le
Julie Brias
Laurence Farescour
Sophie Vomscheid
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Abstract

La invención se relaciona con un compuesto de fórmula (I) y un racemato, un enantiómero, un diastereoisómero, un isómero geométrico o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, y su uso como agente antibacteriano. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Compuestos heterocíclicos y su utilización en la prevención o el tratamiento de infecciones bacterianas
La presente invención se refiere a compuestos heterocíclicos, su proceso de preparación, composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos y su uso, opcionalmente en combinación con otros agentes antibacterianos y/o compuestos beta-lactámicos, para uso en la prevención o tratamiento de infecciones bacterianas. La presente invención también se refiere al uso de estos compuestos como inhibidores de p-lactamasa y/o como agentes antibacterianos.
Se ha descrito que existe una evolución continua de la resistencia antibacteriana que podría conducir a cepas bacterianas contra las que los compuestos antibacterianos conocidos son ineficaces.
Se conocen por el documento WO2014141132 compuestos heterocíclicos como agentes antibacterianos e inhibidores de beta-lactamasas.
El documento WO2013150296 describe compuestos heterocíclicos como inhibidores de beta-lactamasa.
El documento US2010093784 describe compuestos heterocíclicos como medicamento antibacteriano.
El documento WO2016081452 describe una combinación de compuesto heterocíclico y sulbactam para el tratamiento de infecciones bacterianas.
Los documentos EP3091018 y WO2016177862 describen compuestos heterocíclicos y su uso para prevenir o tratar infecciones bacterianas.
Por lo tanto, existe la necesidad de proporcionar compuestos y composiciones eficaces que puedan superar la resistencia bacteriana a los antibióticos.
El objetivo de la presente invención es proporcionar compuestos heterocíclicos que puedan usarse como agentes antibacterianos y/o inhibidores de beta-lactamasas.
Un objetivo de la presente invención también es proporcionar compuestos heterocíclicos que pueden usarse para la prevención o para el tratamiento de infecciones bacterianas.
Otro objetivo de la presente invención es proporcionar compuestos heterocíclicos que puedan superar la resistencia bacteriana a los antibióticos.
Un objetivo de la presente invención también es proporcionar composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos heterocíclicos, opcionalmente en combinación con uno o más agentes antibacterianos, para la prevención o el tratamiento de infecciones bacterianas y que pueden superar la resistencia bacteriana a los antibióticos.
Otros objetivos aparecerán a lo largo de la descripción de la invención.
Todas las referencias a métodos de tratamiento en la siguiente memoria descriptiva deben entenderse como referentes a compuestos, composiciones farmacéuticas o kits para usar en un método de tratamiento.
Por lo tanto, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I)
Figure imgf000002_0001
en la que
• R1 representa un heterociclo de 5 miembros, opcionalmente sustituido por uno o más T1, saturado, parcialmente insaturado o aromático que comprende al menos un átomo de nitrógeno, estando el heterociclo unido a la estructura por el átomo de nitrógeno, al menos uno de los átomos de nitrógeno puede estar cuaternizado;
• R2 representa -SO3H, -CFHCOOH o -CF2COOH;
• T1, idéntico o diferente, representa independientemente un átomo de flúor; =O; -C(O)Q1; (CH2)m-S(O)2-NQ1Q2; -(CH2)m-C(=NOQ1)Q3; -(X)-(CH2)p-S(O)2NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-S(O)2NQ1Q2; -(CH2)m-O-(CH2)p-O-(CH2)p-NQ1Q2; -(CH2)mOQ1; -(CH2)m-CN; -(CH2)m-OC(O)Q'; -(CH2)m-C(O)OQ1; -(CH2)m-OC(O)OQ1; -(CH2)m-OC(O)nQ1Q2; -(CH2W C(O)nQ1Q2; -(CH2)m-C(O)ONQ1Q2; -(CH2)m-C(O)nQ1OQ2; -(CH2)m-C(O)nQ1-NQ1Q2; -(CH2)m-NQ1C(O)Q2; -(CH2)m-NQ1S(O)2NQ1Q2; -(CH2)m-NQ1S(O)2Q2; -(CH2)m-NQ1C(O)OQ2; -(CH2)m-NQ1C(O)nQ1Q2; -(CH2)m-NQ1Q2; -(CH2)m-NH-C(NHQ3)=NQ4; -(CH2)m-NH-CH=NQ3; -(CH2)m-C(NHQ3)=NQ4; -(X)-(CH2)pOQ1; -(X)-(CH2)n-CN; -(X)-(CH2)p-OC(O)Q1; -(X)-(CH2)n-C(O)OQ1; -(X)-(CH2)p-OC(O)OQ1; -(X)-(CH2)p-OC(O)nQ1Q2; -(X)-(CH2)n-C(O)nQ1Q2; -(X)-(CH2)n-C(O)ONQ1Q2; -(X)-(CH2)n-C(O)nQ1OQ2; -(X)-(CH2)n-C(O)nQ1-NQ1Q2; -(X)-(CH2)p-NQ1C(O)Q2; -(X)-(CH2)p-NQ1S(O)2NQ1Q2; -(X)-(CH2)p-NQ1S(O)2Q2; -(X)-(CH2)p-NQ1C(O)OQ2; -(X)-(CH2)p-NQ1C(O)nQ1Q2; -(X)-(CH2)p-NQ1Q2; -(X)-(CH2)p-NHC(NHQ3)=NQ4; -(X)-(CH2)p-NH-CH=NQ3; -(X)-(CH2)n-C(NHQ3)=NQ4; -C(O)-(CH2)nOQ1; -C(O)-(CH2)n-CN; -C(O)-(CH2)n-OC(O)Q1; -C(O)-(CH2)n-C(O)OQ1; -C(O)-(CH2)n-OC(O)OQ1; -C(O)-(CH2)n-OC(O)NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-C(O)NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-C(O)ONQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-C(O)NQ1OQ2; -C(O)-(CH2)n-C(O)NQ1-NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-NQ1C(O)Q2; -C(O)-(CH2)n-NQ1S(O)2NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-NQ1S(O)2Q2; -C(O)-(CH2)n-NQ1C(O)OQ2; -C(O)-(CH2)n-NQ1C(O)NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-NH-C(NHQ3)=NQ4; -C(O)-(CH2)n-NH-CH=NQ3; -C(O)-(CH2)n-C(NHQ3)=NQ4 o T1, idéntico o diferente, representa independientemente un -(CH2)m-(heterociclo de 4, 5 o 6 miembros saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático) no sustituido o sustituido por uno o más T2; -(X)-(CH2)m-(heterociclo de 4, 5 o 6 miembros saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático); alquilo (C1-C3); fluoroalquilo (C1-C3); -(X)-alquilo (C1-C3); -(X)-fluoroalquilo (C1-C3); -(CH2)m-cicloalquilo (C3-C6); -(X)-(CH2)m-cicloalquilo (C3-C6); - (CH2)mciclofluoroalquilo (C3-C6); -(X)-(CH2)m-ciclofluoroalquilo (C3-C6); -C(O)-(CH2)m-(heterociclo de 4, 5 o 6 miembros saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático); -C(O)-alquilo (C1-C3); -C(O)-fluoroalquilo (C1-C3); -C(O)O-fluoroalquilo (C1-C3); -C(O)-(CH2)m-cicloalquilo (C3-C6); -C(O)-(CH2)m-cicloalquilo (C3-C6); -C(O)-(CH2)mciclofluoroalquilo (C3-C6); -C(O)-(CH2)m-ciclofluoroalquilo (C3-C6);
• T2, idéntico o diferente, representa independientemente -OH; -NH2; -CONH2;
• Q1 y Q2 , idénticos o diferentes, representan independientemente un átomo de hidrógeno; -(CH2)r-NHQ3; -(CH2)r-NH -C(NHQ3)=NQ4; -(CH2)r-NH-CH=NQ3; (CH2)n-C(NHQ3)=NQ4;-(CH2)r-OQ3;-(CH2)n-CONHQ3; o
un alquilo (C1-C3) no sustituido o sustituido por uno o más T2; fluoroalquilo (C1-C3); (CH2)m-(heterociclo de 4, 5 o 6 miembros que comprende al menos un átomo de nitrógeno) saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático; o Q1, Q2 y el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman juntos un heterociclo de 4, 5 o 6 miembros no sustituido o sustituido por uno o más T2, saturado o parcialmente insaturado, que comprende 1,2 o 3 heteroátomos;
• Q3 y Q4, idénticos o diferentes, representan independientemente un átomo de hidrógeno o alquilo (C1-C3);
• m, idéntico o diferente, representa independientemente 0, 1,2 o 3;
• n, idéntico o diferente, representa independientemente 1, 2 o 3;
• p, idéntico o diferente, representa independientemente 2 o 3;
• r es 1, 2 ó 3 cuando el (CH2)r está directamente unido a un átomo de carbono o 2 o 3 en caso contrario, preferiblemente r es 2 o 3;
• X, idéntico o diferente, representa independientemente a O; S; S(O); S(O)2 o N(Q3);
en el que
• cualquier átomo de carbono presente dentro de un grupo seleccionado de alquilo, cicloalquilo, fluoroalquilo, ciclofluoroalquilo y heterociclo puede oxidarse para formar un grupo C=O;
• cualquier átomo de azufre presente dentro de un heterociclo puede oxidarse para formar un grupo S=O o un grupo S(O)2;
• cualquier átomo de nitrógeno presente dentro de un heterociclo o presente dentro de un grupo en el que está trisustituido formando así un grupo amino terciario, puede cuaternizarse adicionalmente con un grupo metilo;
y un racemato, un enantiómero, un diastereoisómero, un isómero geométrico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,
Figure imgf000003_0001
La presente invención también se refiere a compuestos de fórmula (I*)
Figure imgf000004_0001
en la que
R 1 y R 2 son como se definen para los compuestos de fórmula (I).
Preferiblemente, en los compuestos de fórmula (I) o (I*), R1 representa un heterociclo, opcionalmente sustituido por uno o más T1, insaturado, parcialmente saturado o aromático que comprende al menos un átomo de nitrógeno y opcionalmente uno, dos o tres, preferiblemente uno o dos, otros heteroátomos elegidos entre N, O o S, estando el heterociclo unido a la estructura por el átomo de nitrógeno, al menos uno de los átomos de nitrógeno puede estar cuaternizado.
Preferiblemente, en los compuestos de fórmula (I) o (I*), T1 representa =O, un átomo de flúor, -(CH2)m-NQ1Q2; -CN; -(CH2)m-C(O)NQ1Q2; -(CH2)m-OQ1; -(C ^^ -C O O Q 1; -(CH2)m-C(O)NQ1NQ1Q2; -(CH2)m-NQ1NQ1Q2; -(CH2)mO(CH2)p-O-(CH2)p-NQ1Q2; -(CH2)m-NQ1S(O)2Q2; un -( CH2)m-(heterociclo saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático de 4, 5 o 6 miembros) no sustituido o sustituido por uno o más T2, -(X)-(CH2)m-(heterociclo saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático de 4, 5 o 6 miembros); fluoroalquilo (C1-C3); -(CH2)m-C(NOQ1)Q3; -(CH2)m-C(O)NQ1OQ2, donde Q1, Q2, Q3, m y n son como se definen anteriormente.
Preferiblemente , en los compuestos de fórmula (I) o (I*), T1 representa =O, un átomo de flúor, -(CH2)m-NH2, -CN, -(CH2)m-C(O)nH2, -(CH2)m-COOH, -O-(CH2)2NH2, -C(O)NHNHC(O)Het, -NHCONH2, -(CH2)2-O-(CH2)2-O(CH2)2NH2, -NH-S(O2)-NH2, -Het, C(O)CH3, -C(=NOH)CH3, -CF3, -CONHO(CH2)2NH2, -OHet, -CH2-Het, donde Het es un heterociclo, saturado, parcialmente insaturado o aromático, que comprende 4, 5 o 6 miembros y al menos un heteroátomo elegido entre N, O o S, donde m es como se define anteriormente.
Preferiblemente, en los compuestos de fórmula (I) o (I*), T1 representa un átomo de flúor; =O; -C(O)Q1; -(CH2)m-S(O)2-NQ1Q2; -(CH2)m-C(= NOQ1)Q3;-(CH2)mOQ1;-(CH2)m-CN; -(CH2)m-C(O)OQ1;-(CH2)m-C(O)NQ1Q2; -(CH2)m-C(O)NQ1OQ2; -(CH2)m-NQ1C(O)Q2; -(CH2)m-NQ1Q2; o
T1, idéntico o diferente, representa independientemente un -(CH2)m-(heterociclo saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático de 4, 5 ó 6 miembros) no sustituido o sustituido por uno o más T2; alquilo (C1-C3); fluoroalquilo (C1-C3).
Preferiblemente, R1 no está sustituido o cuando R 1 no es un heterociclo aromático, T1 puede ser =O.
En una realización, cuando R1 no es un heterociclo aromático, tiene la siguiente fórmula:
Figure imgf000004_0002
En una realización, R1 representa un heterociclo aromático de 5 miembros, opcionalmente sustituido por uno o más T1, que comprende al menos un átomo de nitrógeno, estando el heterociclo unido a la estructura por el átomo de nitrógeno, o un 2-oxo -tiazol-3-ilo, en el que al menos uno de los átomos de nitrógeno puede estar cuaternizado.
Figure imgf000004_0003
Figure imgf000005_0001
estando el ciclo opcionalmente sustituido por uno o más T1, tal como se define anteriormente, preferiblemente ningún T1.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I) o (I*), R 1 se elige entre:
Figure imgf000005_0002
Preferiblemente, en los compuestos de fórmula (I) o (I*), R1 se elige entre
yT^'X Í1 íl Í11
Figure imgf000005_0003
V N n ' n ' n N
wL wL v í |
estando el ciclo opcionalmente sustituido por uno o más T1, tal como se ha definido anteriormente, preferiblemente no hay sustituyente.
Figure imgf000005_0004
estando el ciclo opcionalmente sustituido por uno o más T1, tal como se define anteriormente, preferiblemente no hay sustituyente T1.
Preferiblemente, en los compuestos de fórmula (I) o (I*), R2 representa -SO3H o -CF2COOH. En una realización, R2 es -SO3H o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.
Todas las preferencias de R1 y R2 pueden combinarse para dar realizaciones según la invención.
En una realización, Q1 y Q2, idénticos o diferentes, representan independientemente un átomo de hidrógeno; -(CH2)r-NHQ3; -(CH2)r-OQ3; -(CH2VCONHQ3; o
un -(CH2)m-(heterociclo de 4, 5 o 6 miembros que comprende al menos un átomo de nitrógeno, saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático) no sustituido o sustituido por uno o más T 2, alquilo (C1-C3); o
Q1, Q2 y el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman juntos un heterociclo de 4, 5 o 6 miembros no sustituido o sustituido por uno o más T2, saturado o parcialmente insaturado que comprende 1, 2 o 3 heteroátomos.
Preferiblemente, los compuestos de fórmula (I) o (I*) se eligen entre:
[7-oxo-3-(2-oxo-tiazol-3-il)-1,6-diaza-biciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio [7-oxo-3-(triazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio [7-oxo-3-(triazol-2-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio difluoro-(7-oxo-3-pirazoM-iM,6-diaza-bicido[3.2.1]oct-3-en-6-Noxi)-acetato de litio [7-oxo-3-(1,2,4-triazol-1-il)-1,6-diazabicido[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio [(5R)-7-oxo-3-(triazol-1-il)-1,6-diazabicido[3.2.1 ]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
En una realización, los compuestos de fórmula (I) o (I*) se eligen entre:
[3-(4-carbamoNpirazoM-N)-7-oxo-1,6-diazabiddo[3.2.1]od-3-en-6-N] sulfato de sodio (7)
[3-(4-danopirazol)-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiddo[3.2.1]od-3-en-6-il] sulfato de sodio (8)
[7-oxo-3-(4-metoxipirazoM-il))-1,6-diazabiddo[3.2.1]od-3-en-6-il] sulfato de sodio (9)
hidrogenosulfato de [3-[3-(2-aminoetil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] (10)
[3-[3-(2-hidroxietilcarbamoil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio (11)
[3-[3-(hidroximetil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]]oct-3-en-6-il] sulfato de trietilamonio (12)
[3-[3-[(2-aminotiazol-5-carbonil)amino]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (13) (7-oxo-3-(4-fluoropirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il)sulfato de sodio (14) [3-(4-metilenamoniopirazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato (15)
[7-oxo-3-(4-sulfamoilpirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (16)
[3-(3-carbonitrilepirazol-1-il)-7- oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (17)
[7-oxo-3-(3-fluoropirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[ 3.2.1] oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (18)
[3-(3-carbamoilpirazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (19)
[7-oxo-3-[4-(N-morfolina)-pirazol-1-il)]-1,6-diaza-biciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (20)
[3-(4-acetamidepirazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio (21)
[7-oxo-3-[4-(trifluorometil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio (22)
(7-oxo-3-(3-carboxamida-5-metil-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il) sulfato de sodio (23)
[7-oxo-3-[4-carboxamida,N-(2-amoniometoxi)-pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato (24)
[7-oxo-3-[3-(tiazol-2-ilcarbamoil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (25)
(7-oxo-3-(3-carboxamida-4-fluoro-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il) sulfato de sodio (26)
(7-oxo-3-(3-(metoxicarbamoil)-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il)sulfato de sodio (27-1)
(7-oxo-3-(5-(metoxicarbamoil)-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il) sulfato de sodio (27-2)
(7-oxo-3-(3-acetilpirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il) sulfato de sodio (28)
Hidrógenosulfato de (7-oxo-3-(3-[(Z,E)-N-(2-aminoetoxi)-C-metil-carbonimidoil]-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo) (29)
(7-oxo-3-(3-carboxamida-5-fluoro-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il) sulfato de sodio (30)
(7-oxo-3-[3-(morfolina-4-carbonil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il) sulfato de sodio (31) Hidrogenosulfato de (7-oxo-3-[3-(4-piperidilcarbamoil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo) (32)
{[3-(N-acetamido)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il}sulfato de trietilamonio (33)
{7-oxo-3-[3-(tiazol-2-carbonilamino)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il} sulfato de sodio (34)
[7-oxo-3-[3-(metileno-2-amoniotiazol)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (35-1)
2.2.2- trifluoroacetato [7-oxo-3-[3-(metileno-2-amoniotiazol)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato (35­ 2)
[7-oxo-3-[3-(oxazol-2-ilcarbamoil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (37) hidrogenosulfato 3[3-[4-(2-aminoetilcarbamoil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] (38)
[3-[4-[(Z,E)-N-hidroxi-C-metil-carbonimidoil]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (39) [3-(4-acetilpirazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (40)
Hidrogenosulfato de [3-[4-(2-aminoetil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] (41)
2.2.2- trifluoroacetato [7-oxo -3-(4-piperazin-4-io-1-ilpirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] hidrogenosulfato (42)
[7-oxo-3-(3,4,5-trideuteriopirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (43)
[7-oxo-3-(tetrazol-2-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (44)
[3-[3-(2-amino-2-oxo-etil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (45) Hidrogenosulfato de [3-[3-(2-aminoetoxicarbamoil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] (46)
[3-[3-(2-hidroxietoxicarbamoil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (47)
[3-[3-[2-(2-amoniometilamino)-2-oxo-etil]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio (48-1) 2.2.2- trifluoroacetato [3-[3-[2-(2-amoniometilamino)-2-oxo-etil]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1] oct-3-en-6-il] sulfato (48-2)
[3-[3-(amoniometil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio (49-1)
2.2.2- trifluoroacetato [3-[3-(amoniometil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato (49-2)
[3-[3-[(2-hidroxiacetil)amino]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (50)
[3-[3-(3-hidroxipropanoilamino)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio (51)
[3-[3-[(2-amino-2-oxo-etoxi)carbamoil]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (52)
[7-oxo-3-(4-tiazol-2-iltriazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (55)
[3-(4-carbamoiltriazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (56)
[3-[4-(amoniometil)triazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (57-1)
2.2.2- trifluoroacetato [3-[4-(amoniometil)triazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato (57-2)
[3-[4-(dimetilamino)metiltriazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (59) Hidrogenosulfato de [3-[4-(metilaminometil)triazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] (60)
[[3-[4-(carboximetil)triazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato disódico (61)
hidrogenosulfato de [3-[4-(2-aminoetoxicarbamoil)triazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabicido[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] (63)
[3-[4-(hidroximetil)triazol- 1-il]-7-oxo-1,6-diazabicido[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (64)
[3-[4-(propanoato)triazoM-N]-7-oxo-1,6-diazabiddo[3.2.1]oct-3-en-6-N] sulfato disódico (65)
Hidrogenosulfato de [3-(4-(2-(metilamino)acetamida)triazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] (66) hidrogenosulfato de [3-(4-(2-(metilamino)etanol)triazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] (67)
[3-[5-(2-hidroxietil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio (68)
[3-[3-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (69)
[3-[2-(hidroximetil)imidazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (70)
[3-[4-(hidroximetil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (71)
hidrogenosulfato de [3-[3-(2-morfolinoetilcarbamoil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] (72)
[3-[2-(3-amino-3-oxo-propil)imidazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de trimetilamonio (73) [3-[4-(2-hidroxietilsulfamoil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (74)
[3-[3-[(1S)-1,2-dihidroxietil]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio (76) Hidrogenosulfato de [3-[3-[tiazol-5-carbonil]amino]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] (77)
[3-(2-oxazolil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il-sulfato de sodio (78)
Hidrogenosulfato de [7-oxo-3-[3-(1,2,4-tiadiazol-5-ilcarbamoil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] (79) [7-oxo-3-[3-(2-piridilcarbamoil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (80) hidrogenosulfato de [7-oxo-3-[3-[[(3S)-pirrolidin-3-il]carbamoil]pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] (82) hidrogenosulfato de [7-oxo-3-[3-[[(3R)-pirrolidin-3-il]carbamoil]pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] (83) [7-oxo-3-[3-(1,3,4-tiadiazol-2-ilcarbamoil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (84)
[7-oxo-3-[3-(pirazol-3-ilcarbamoil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio (85).
El término "alquilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo de hidrocarburo alifático que puede ser lineal o ramificado, que tiene de 1 a 3 átomos de carbono en la cadena, a menos que se especifique lo contrario. Los grupos alquilo preferidos tienen 1 o 2 átomos de carbono en la cadena. Los ejemplos específicos de grupos alquilo incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo. Preferiblemente, el grupo alquilo es metilo o etilo.
El término "fluoroalquilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo sustituido con al menos un átomo de flúor. El término "alquilo" es como se define anteriormente. Los ejemplos específicos de grupos fluoroalquilo incluyen, pero no se limitan a, trifluorometilo, difluorometilo, fluorometilo.
El término "cicloalquilo" se refiere a un anillo de hidrocarburo no aromático monocíclico o bicíclico saturado de 3 a 6 átomos de carbono, preferiblemente de 3 a 4 átomos de carbono, que puede comprender una o más insaturaciones. Los ejemplos específicos de grupos cicloalquilo monocíclicos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo. Preferiblemente, el grupo cicloalquilo es ciclopropilo o ciclobutilo.
El término "ciclofluoroalquilo" se refiere a un grupo cicloalquilo sustituido con al menos un átomo de flúor. El término "cicloalquilo" es como se define anteriormente. Los ejemplos específicos de grupos ciclofluoroalquilo incluyen ciclofluoropropilo, ciclodifluoropropilo, ciclofluorobutilo, ciclodifluorobutilo.
El término "heterociclo", como se usa en este documento y sin una definición contraria específicamente mencionada, ya sea solo o en combinación con otro radical, se refiere a un radical hidrocarburo monocíclico saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático, preferiblemente a un radical hidrocarburo de 4 a 10 miembros que comprende al menos un heteroátomo, tal como N, O, S, S(O) o S(O)2. Preferiblemente, el heterociclo es un radical hidrocarburo monocíclico saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático, preferiblemente un radical hidrocarburo de 4 a 6 miembros, que comprende al menos un átomo de nitrógeno y al menos otro heteroátomo, tal como N, O, S, S(O) o S(O)2. Los átomos de carbono del heterociclo también se pueden oxidar para formar un grupo C(O). Los heterociclos adecuados también se describen en Handbook of Chemistry and Physics, 76th Edition, CRC Press, Inc., 1995-1996, páginas 2-25 a 2-26. Ejemplos de grupos heterocíclicos incluyen pero no se limitan a azetidinilo, oxetanilo, oxazolilo, oxazolidinilo, oxadiazolilo, pirrolilo, pirrolidinilo, piridilo, tetrahidropiridinilo, piperidinilo, morfolinilo, pirazolilo, pirimidinilo, pirazinilo, tetrazolilo, imidazolilo, tienilo, tiazolilo, furanilo, tiadiazolilo, iso , triazolilo, tetrazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, 2-pirrolidinonilo, imidazol-2,4-diona, 1,2,4-oxadiazol-5-ona, 1,5-dihidropirrolil-2-ona, pirazinona, piridazinona, piridona, pirimidona, dioxanilo, pirrolidinilo, imidazolidinilo, piranilo, tetrahidrofuranilo, dioxolanilo, tetrahidropiranilo. Preferentemente, el heterociclo comprende de 1 a 4 heteroátomos elegidos entre N, O o S, preferentemente 1, 2 ó 3 heteroátomos.
Además, algunos compuestos según esta invención pueden contener un grupo amino básico y, por lo tanto, pueden formar una sal zwitteriónica interna (o zwitterión) con el grupo ácido -OSO3H, -OCFHCO2H o -OCF2CO2 H y dichas sales zwitteriónicas internas también están incluidas en esta invención.
La expresión "opcionalmente sustituido" significa "no sustituido o sustituido por grupos químicos que se definen con más detalle" o "grupos químicos sustituidos o sin sustituir que se definen con más detalle".
El término "racemato" se emplea aquí para referirse a una cantidad igual de dos enantiómeros específicos.
El término "enantiómero" se emplea aquí para referirse a uno de los dos estereoisómeros específicos que es una imagen especular no superponible entre sí pero que está relacionado entre sí por reflexión.
Los compuestos según la invención pueden incluir uno o más átomos de carbono asimétricos y, por lo tanto, pueden existir en forma de isómeros ópticos, así como en forma de mezclas racémicas o no racémicas de los mismos. Los compuestos según la invención se pueden utilizar como un solo isómero o como una mezcla de formas isoméricas estereoquímicas. Los diastereoisómeros, es decir, los isómeros estereoquímicos no superponibles, pueden separarse por medios convencionales tales como cromatografía, destilación, cristalización o sublimación. Los isómeros ópticos (enantiómeros) se pueden obtener utilizando materiales de partida ópticamente activos, mediante la resolución de las mezclas racémicas según procesos convencionales, por ejemplo, mediante la formación de sales diastereoisómeras mediante el tratamiento con un ácido o una base ópticamente activos o mediante el uso de una columna de cromatografía quiral.
Como se usa en el presente documento, la expresión "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a derivados de los compuestos descritos en los que el compuesto original se modifica fabricando sales ácidas o básicas del mismo. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, sales de ácidos minerales u orgánicos de residuos básicos, tales como aminas; sales alcalinas u orgánicas de residuos ácidos, tales como ácidos carboxílicos o ácido aminohidroxil-O-sulfónico; y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención se pueden sintetizar a partir del compuesto original que comprende un residuo básico o ácido, mediante métodos químicos convencionales. Además, la expresión “sal farmacéuticamente aceptable” se refiere a sales de adición de ácidos o bases inorgánicos y orgánicos relativamente no tóxicas de los compuestos de la presente invención. Estas sales se pueden preparar in situ durante el aislamiento final y la purificación de los compuestos. En particular, las sales de adición de ácido se pueden preparar haciendo reaccionar por separado el compuesto purificado en su forma purificada con un ácido orgánico o inorgánico y aislando la sal así formada. Entre los ejemplos de sales de adición de ácido están el bromhidrato, clorhidrato, yodhidrato, sulfamato, sulfato, bisulfato, fosfato, nitrato, acetato, propionato, succinato, oxalato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, borato, benzoato, lactato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, tartrato, naftilato, mesilato, glucoheptanato, glucoronato, glutamato, lactobionato, malonato, salicilato, metilenbis-b-hidroxinaftoato, ácido gentísico, isetionato, di-p-toluoiltartrato, etanosulfonato, bencenosulfonato, sulfamato de ciclohexilo, sales de quinateslaurilsulfonato, y similares. Los ejemplos de sales de adición de base incluyen sales de amonio, tales como trometamina, meglumina, epolamina, etc., sales de metales, tales como sales de sodio, litio, potasio, calcio, zinc o magnesio con bases orgánicas, tales como sales de diciclohexilamina, N-metil-D-glucamina. Pueden encontrarse listas de sales adecuadas en Remington's Pharmaceutical Sciences, 17a ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, p. 1418, PH Stahl, CG Wermuth, Handbook of pharmaceutical salts - Properties, Selection and Use, Wiley-VCH, 2002 y SM Berge et al. "Pharmaceutical Salts" J. Pharm. Sci, 66: p.1-19 (1977).
Los compuestos según la invención también incluyen compuestos marcados isotópicamente en los que uno o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene el mismo número atómico, pero una masa atómica o número de masa diferente de la masa atómica o número de masa que normalmente se encuentra en la naturaleza. Los ejemplos de isótopos adecuados para su inclusión en los compuestos descritos anteriormente y no se limitan a 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 18F, 19F, 13N, 15N, 33S, 34S, 35S, 36S, 17O o 18O. Los compuestos marcados isotópicamente son útiles en estudios de distribución de fármacos y/o sustratos en tejidos. La sustitución con isótopos más pesados, tales como el deuterio (2H) proporciona una mayor estabilidad metabólica (por ejemplo, mayor vida media in vivo o requisitos de dosificación reducidos). Los compuestos marcados isotópicamente se preparan mediante cualquier método adecuado o mediante procesos que utilizan un reactivo marcado isotópicamente apropiado en sustitución del reactivo no marcado que se emplea en cualquier otro caso.
La invención proporciona compuestos que tienen propiedades antibacterianas y/o compuestos que actúan como inhibidores de p-lactamasas.
Los compuestos de la presente invención se pueden preparar como se describe en los siguientes esquemas.
Figure imgf000009_0001
) Pd(PPh-),, AcOH, DCM
\ Complejo de trióxido de azufre-piridina
pindina
Figure imgf000009_0003
rcambio iónico Dowex Na+
Figure imgf000009_0002
E squem a 1
Figure imgf000010_0001
Esquem a 3
Figure imgf000011_0001
Los procesos particulares representados en los esquemas de la parte experimental para la preparación de compuestos según la invención, en los que R1, R 2 representan varios sustituyentes, también pueden adaptarse para preparar compuestos adicionales según la invención. A partir de estos procesos pueden derivarse otros procesos para la preparación de compuestos según la invención.
También se describen compuestos de fórmula
Figure imgf000011_0002
en las que
R1 es como se define para los compuestos de fórmula (I) o (I*),
Y es halógeno, -B(OR)2 o SnR3 en los que R es alquilo o los OR están unidos entre sí con B para formar un ciclo que comprende por ejemplo 5 miembros; y
PG, es un grupo protector, por ejemplo elegido entre alilo, bencilo, terc-butildimetilsililo (TBDMS), terc-butoxicarbonilo (Boc).
Estos compuestos son especialmente compuestos intermedios para la preparación de los compuestos de fórmula (I), (I*) de acuerdo con la invención.
La invención proporciona también los compuestos de acuerdo con la invención para su uso en el control de bacterias. A continuación, el compuesto de acuerdo con la invención se utiliza habitualmente en combinación con como mínimo un excipiente farmacéuticamente aceptable.
La expresión “farmacéuticamente aceptable” se utiliza en el presente documento para hacer referencia a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de administración que están dentro del ámbito de buen juicio médico, adecuado para utilizarse en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin toxicidad, irritación, respuesta alérgica u otros problemas o complicaciones excesivas, y corresponden a una proporción de beneficio/riesgo razonable.
La presente invención proporciona también una composición, preferiblemente una composición farmacéutica, que comprende como mínimo un compuesto de acuerdo con la invención en una mezcla con un excipiente farmacéuticamente aceptable. Por lo tanto, la composición de acuerdo con la invención puede comprender como mínimo un compuesto seleccionado entre compuestos de fórmula (I), (I*) en una mezcla con un excipiente farmacéuticamente aceptable.
La composición de acuerdo con la invención puede comprender adicionalmente como mínimo uno o más agentes antibacterianos, preferiblemente como mínimo uno de estos agentes antibacterianos es una beta-lactama.
El término “beta-lactama” o “p-lactama” hace referencia a compuestos antibacterianos que comprenden una unidad de p-lactama, es decir un grupo químico o resto de p-lactama.
El término “portador farmacéuticamente aceptable” o “excipiente farmacéuticamente aceptable” se utiliza para cualquier excipiente, disolvente, medio de dispersión, retardador de absorción, diluyente o adyuvante etc., tal como agentes conservantes o antioxidantes, diluyentes, agentes disgregantes, agentes humectantes, agentes emulsionantes, agentes de suspensión, disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos, agentes isotónicos y retardantes de absorción y similares, que no producen una reacción secundaria, por ejemplo, una reacción alérgica, en humanos o animales. Típicamente, los ejemplos no limitativos de excipientes incluyen manitol, lactosa, estearato de magnesio, sacárido de sodio, talco, celulosa, croscarmelosa de sodio, glucosa, gelatina, almidón, lactosa, fosfato de dicalcio, sacarosa, caolín, carbonato de magnesio, agentes humectantes, agentes emulsionantes, agentes solubilizantes, agua estéril, solución salina, tampones de pH, tensioactivos no iónicos, lubricantes, agentes estabilizantes, agentes de unión y aceites comestibles, tales como aceite de cacahuete, aceites de sésamo y similares. Adicionalmente, se pueden incluir diferentes excipientes utilizados de manera habitual en la técnica. Los portadores o excipientes farmacéuticamente aceptables se conocen bien por un experto en la técnica e incluyen aquellos descritos en Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company, Easton, EE. UU., 1985), Merck Index (Merck & Company, Rahway, N.J.), Gilman et al (Eds. The pharmacological basis of therapeutics, 8a Edición, Pergamon press., 1990). Excepto cuando algún medio o adyuvante convencional sea incompatible con el ingrediente activo de acuerdo con la invención, se contempla su uso en las composiciones terapéuticas.
La expresión “agente antibacteriano” tal como se utiliza en el presente documento, hace referencia a cualquier sustancia, compuesto o su combinación que es capaz de inhibir, reducir o prevenir el crecimiento de bacterias, inhibir o reducir la capacidad de bacterias de producir infección en un sujeto, o inhibir o reducir la capacidad de bacterias de multiplicarse o permanecer ineficaces en el ambiente, o disminuir la ineficacia o la virulencia de bacterias.
El agente antibacteriano puede seleccionarse entre las siguientes familias: aminoglucósidos, beta-lactamas, glicilciclinas, tetraciclinas, quinolonas, fluoroquinolonas, glicopéptidos, lipopéptidos, macrólidos, ketólidos, lincosamidas, estreptograminas, oxazolidinonas y polimixinas por sí solos o en una mezcla. Preferiblemente, el agente antibacteriano adicional se selecciona entre las familias de beta-lactama, y más preferiblemente entre penicilina, cefalosporinas, penems, carbapenems y monobactam, por sí solo o en una mezcla.
Entre la penicilina el agente antibacteriano se selecciona preferiblemente entre el grupo que consiste en amoxicilina, ampicilina, azlocilina, mezlocilina, apalcilina, hetacilina, bacampicilina, carbenicilina, sulbenicilina, temocilina, ticarcilina, piperacilina, mecilinam, pivmecilinam, meticilina, ciclacilina, talampacilina, aspoxicilina, oxacilina, cloxacilina, dicloxacilina, flucloxacilina, nafcilina y pivampicilina por sí solo o en una mezcla.
Entre la cefalosporina, el agente antibacteriano se selecciona preferiblemente entre el grupo que consiste en cefatriazina, cefazolina, cefoxitina, cefalexina, cefradina, ceftizoxima, cefacetril, cefbuperazona, cefprozilo, ceftobiprol, ceftobiprol medocarilo, ceftarolina, ceftarolina fosaminil, cefalonio, cefminox, ceforanida, cefotetan, ceftibuteno, cefcapeno pivoxilo, cefditoren pivoxilo, cefdaloxima cefroxadina, ceftolozano y S-649266, cefalotina, cefaloridina, cefaclor, cefadroxilo, cefamandol, cefazolina, cefalexina, cefradina, ceftizoxima, cefacetrilo, cefotiam, cefotaxima, cefsulodina, cefoperazona, cefmenoxima, cefmetazol, cefaloglicina, cefonicida, cefodizima, cefpiroma, ceftazidima, ceftriaxona, cefpiramida, cefbuperazona, cefozoprán, cefepima, cefoselís, cefluprenam, cefuzonamo, cefpimizol, cefclidina, cefixima, ceftibuteno, cefdinir, cefpodoxima axetil, cefpodoxima proxetil, cefteram pivoxilo, cefetamet pivoxilo, cefcapeno pivoxilo, cefditoren pivoxilo, cefuroxima, cefuroxima axetil, loracarbef y latamoxef por sí solo o en una mezcla. Entre los carbapenémicos, el agente antibacteriano se selecciona preferiblemente entre el grupo que consiste en imipenem, doripenem, meropenem, biapenem, ertapenem y panipenem, por sí solo o en una mezcla.
Entre el monobactam, el agente antibacteriano se selecciona preferiblemente entre el grupo que consiste en aztreonam, tigemonam, carumonam, BAL30072 y nocardicina A, por sí solo o en una mezcla.
La presente invención también se refiere a una composición que comprende como mínimo un compuesto de fórmulas (I), (I*), de acuerdo con la invención y ceftazidima.
La presente invención también proporciona un kit que comprende:
- una composición farmacéutica de acuerdo con la invención, y
- como mínimo una otra composición que comprende uno o más agentes antibacterianos, preferiblemente como mínimo uno de estos agentes antibacterianos es beta-lactama.
Las dos composiciones pueden prepararse cada una por separado con un portador farmacéuticamente aceptable específico y a continuación pueden mezclarse, especialmente extemporáneamente.
La presente invención también hace referencia a un kit que comprende:
- una composición farmacéutica que comprende como mínimo un compuesto de fórmulas (I) o (I*), de acuerdo con la invención; y
- una composición farmacéutica que comprende ceftazidima.
La presente invención también se refiere a un compuesto seleccionado entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*), de acuerdo con la invención para su uso como un medicamento.
La presente invención también se refiere a un compuesto seleccionado entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*), de acuerdo con la invención para su uso en la preparación de un medicamento.
La presente invención también se refiere a un compuesto seleccionado entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*) de acuerdo con la invención para su uso como un agente antibacteriano.
La presente invención también se refiere al uso de un compuesto seleccionado entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*) de acuerdo con la invención o al uso de una composición farmacéutica de acuerdo con la invención para la preparación de un medicamento que comprende agente antibacteriano.
La presente invención también se refiere al uso de un compuesto seleccionado entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*) de acuerdo con la invención o al uso de una composición farmacéutica de acuerdo con la invención para la preparación de un medicamento que comprende inhibidor de beta-lactamasa.
La presente invención también se refiere al uso de un compuesto seleccionado entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*) de acuerdo con la invención o al uso de una composición farmacéutica de acuerdo con la invención para la preparación de un medicamento que comprende agente antibacteriano y un inhibidor de beta-lactamasa.
La presente invención también se refiere a un compuesto seleccionado entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*) de acuerdo con la invención o una composición farmacéutica de acuerdo con la invención o un kit de acuerdo con la invención para su uso en el tratamiento o para la prevención de como mínimo una infección bacteriana.
La presente invención también se refiere al uso de un compuesto seleccionado entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*) de acuerdo con la invención o al uso de una composición farmacéutica de acuerdo con la invención o al uso de un kit de acuerdo con la invención para la preparación de un medicamento útil en el tratamiento o la prevención de como mínimo una infección bacteriana.
Los términos “prevención”, “prevenir” y “que previene” tal como se utilizan en el presente documento significan la administración de un compuesto o una composición de acuerdo con la invención para prevenir la infección por bacterias o para prevenir la aparición de infección y/o enfermedades relacionadas. Los términos “prevención”, “prevenir” y “que previene” también abarcan la administración de un compuesto o una composición de acuerdo con la presente invención para prevenir como mínimo una infección bacteriana, administrando a un paciente vulnerable a la infección o en cualquier caso en riesgo de ser infectado por esta bacteria.
Los términos “tratamiento”, “tratar” o “que trata” tal como se utilizan en el presente documento pretenden significar de manera particular la administración de un tratamiento que comprende un compuesto o una composición de acuerdo con la invención a un paciente que padece una infección. Los términos “tratamiento”, “tratar” o “que trata” tal como se utilizan en el presente documento, también hacen referencia a un compuesto o una composición de acuerdo con la invención, opcionalmente en combinación con uno o más agentes antibacterianos adicionales, para:
- reducir o eliminar infección bacteriana o uno o más síntomas asociados con una infección bacteriana, o - retrasar la evolución de una infección bacteriana o de uno o más síntomas asociados con una infección bacteriana, o
- reducir la gravedad de una infección bacteriana o de uno o más síntomas asociados con una infección bacteriana, o
- suprimir la manifestación clínica de una infección bacteriana, o
- suprimir la manifestación de síntomas adversos causados por una infección bacteriana.
La expresión “ infección” o “ infección bacteriana” tal como se utiliza en el presente documento, incluye la presencia de bacterias en o sobre un sujeto, que si su crecimiento se inhibiera, provocaría un beneficio para el sujeto. Como tal, el término “infección” o “infección bacteriana” además de hacer referencia a la presencia de bacterias también se refiere a flora normal, que no es deseable. El término “infección” incluye infección causada por bacterias. Los ejemplos de tales infecciones bacterianas son infección de tracto urinario (UTI), infecciones de riñón (pielonefritis), infecciones ginecológicas y obstétricas, infección de tracto respiratorio (ITR), exacerbación aguda de bronquitis crónica (AECB), neumonía adquirida en la comunidad (NAC), neumonía adquirida en hospital (NAH), neumonía asociada al ventilador (NAV), neumonía intraabdominal (IAI), otitis media aguda, sinusitis aguda, sepsis, sepsis relacionada con catéter, chancroide, clamidia, infecciones de la piel, bacteremia.
El término “crecimiento” tal como se utiliza en el presente documento, hace referencia al crecimiento de uno o más microorganismos e incluye la reproducción o la expansión de población de un microorganismo, tal como bacteria. El término incluye también el mantenimiento de los procesos metabólicos en acción de un microorganismo, que incluyen procesos que mantienen al microorganismo vivo.
De acuerdo con la invención, las bacterias se seleccionan entre bacterias gram positivas o bacterias gram-negativas, preferiblemente bacterias gram negativas. De acuerdo con la invención, las bacterias pueden seleccionarse también entre las bacterias que producen “beta-lactamasa” o “p-lactamasa”. Estas bacterias se conocen bien por un experto en la técnica. El término “beta-lactamasa” o “p-lactamasa” tal como se utiliza en el presente documento, hace referencia a cualquier enzima o proteína o cualquier otra sustancia que es capaz de romper un anillo de beta-lactama. El término “beta-lactamasa” o “p-lactamasa” incluye enzimas que se producen por bacterias y que tienen la habilidad de hidrolizar, parcialmente o completamente, al anillo de beta-lactama presente en un compuesto tal como un agente antibacteriano.
Entre las bacterias gram positivas, las bacterias de acuerdo con la invención se seleccionan preferiblemente entre especies de Staphylococcus, Streptococcus, Staphylococcus (que incluyen Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis), especies de Streptococcus (que incluyen Streptococcus pneumonia, Streptococcus agalactiae), especies de Enterococcus (que incluyen Enterococcus faecalis y Enterococcus faecium).
Entre las bacterias gram negativas, las bacterias de acuerdo con la invención se seleccionan preferiblemente entre especies de Acinetobacter (que incluyen Acinetobacter baumannii), especies de Citrobacter, especies de Escherichia (que incluyen Escherichia coli), Haemophilus influenza, Morganella morganii, especies de Klebsiella (que incluyen Klebsiella pneumonia), especies de Enterobacter (que incluyen Enterobacter cloacae), Neisseria gonorrhoeae, especies de Burkholderia (que incluyen Burkholderia cepacia), especies de Proteus (que incluyen Proteus mirabilis), especies de Serratia (que incluyen Serratia marcescens), Pseudomonas aeruginosa.
Por consiguiente, la presente invención se refiere a un compuesto seleccionado entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*) de acuerdo con la invención o a una composición farmacéutica de acuerdo con la invención o a un kit de acuerdo con la invención para su uso en el tratamiento o para la prevención de una infección bacteriana, preferiblemente, causada por las bacterias que producen una o más beta-lactamasas. Preferiblemente, las bacterias se seleccionan entre bacterias gram positivas o bacterias gram-negativas, más preferiblemente bacterias gram negativas.
La presente invención también se refiere al uso de un compuesto seleccionado entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*) de acuerdo con la invención o a una composición farmacéutica de acuerdo con la invención para la preparación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de una infección bacteriana, preferiblemente, causada por las bacterias que producen una o más beta-lactamasas. Preferiblemente, las bacterias se seleccionan entre bacterias gram positivas o bacterias gram-negativas, más preferiblemente bacterias gram negativas.
La presente invención también se refiere a un kit de acuerdo con la invención para su uso en su administración simultánea, separada o posterior a un paciente que lo necesita en el tratamiento o en la prevención de infecciones bacterianas, preferiblemente causadas por las bacterias que producen una o más beta-lactamasas. Preferiblemente, las bacterias se seleccionan entre bacterias gram positivas o bacterias gram-negativas, más preferiblemente bacterias gram negativas.
La presente invención también se refiere a un compuesto seleccionado entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*) de acuerdo con la invención para su uso en combinación con uno o más agentes antibacterianos adicionales, preferiblemente, como mínimo uno de los agentes antibacterianos adicionales siendo un compuesto de beta lactama, para el tratamiento o para la prevención de infecciones bacterianas, preferiblemente, causadas por las bacterias que producen una o más beta-lactamasas. Preferiblemente, las bacterias se seleccionan entre bacterias gram positivas o bacterias gram-negativas, más preferiblemente bacterias gram negativas, y en donde un compuesto se selecciona entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*) de acuerdo con la invención y el agente antibacteriano adicional se administran simultáneamente, por separado o posteriormente.
La presente invención se refiere también a un compuesto seleccionado entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*) de acuerdo con la invención o a una composición farmacéutica de acuerdo con la invención o a un kit de acuerdo con la invención para su uso en la prevención o el tratamiento de infecciones bacterianas, preferiblemente, de una infección bacteriana, causada por las bacterias que producen una o más beta-lactamasas. Preferiblemente, las bacterias se seleccionan entre bacterias gram positivas o bacterias gram-negativas, más preferiblemente bacterias gram negativas.
También se describe un procedimiento para el tratamiento o la prevención de infecciones bacterianas, preferiblemente causadas por las bacterias que producen una o más beta-lactamasas que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto que se selecciona entre los compuestos de fórmulas (I) o (I*) de acuerdo con la invención, o de una composición farmacéutica de acuerdo con la invención o de un kit de acuerdo con la invención a un paciente que lo necesita. Preferiblemente, las bacterias se seleccionan entre bacterias gram positivas o bacterias gram negativas, más preferiblemente bacterias gram negativas.
El término “paciente” significa una persona o un animal en riesgo de ser infectado por bacterias o una persona o un animal siendo infectado por bacterias, preferiblemente por bacterias gram positivas y por gram negativas, más preferiblemente por bacterias gram negativas. Tal como se utiliza en el presente documento, el término “paciente” se refiere a una persona o un animal de sangre caliente, tal como, un mamífero, preferiblemente un humano o un niño humano, que está afectado por o tiene el potencial de estar afectado por una o más infecciones y afecciones descritas en el presente documento. La identificación de estos sujetos que necesitan tratamiento de enfermedades y afecciones descritas en el presente documento se encuentra dentro de la capacidad y el conocimiento de un experto en la técnica. Un experto veterinario o clínico en la técnica puede identificar fácilmente mediante pruebas clínicas, examen físico, historial médico/familiar o pruebas biológicas y diagnósticas, a aquellos sujetos que necesitan tal tratamiento.
La expresión “cantidad terapéuticamente eficaz” o “cantidad farmacéuticamente eficaz” tal como se utiliza en el presente documento, hace referencia a una cantidad de un compuesto de acuerdo con la invención, que cuando se administra a un paciente que lo necesita, es suficiente para un tratamiento eficaz de estados de enfermedad, afecciones o trastornos para los que el compuesto tiene utilidad. Tal cantidad sería suficiente para provocar la respuesta biológica o médica de un sistema de tejidos, o paciente que se busca por un investigador o un médico clínico. La cantidad de un compuesto de acuerdo con la invención que constituye una “cantidad terapéuticamente eficaz” variará, dependiendo de manera importante del compuesto en sí y su actividad biológica, la composición utilizada para la administración, el tiempo de administración, la vía de administración, la velocidad de excreción del compuesto, la duración del tratamiento, el tipo de estado de enfermedad o trastorno que se está tratando y su gravedad, fármacos utilizados en combinación con o casualmente con los compuestos de la invención, y la edad, peso corporal, salud general, sexo y dieta del paciente. Un experto en la técnica puede determinar dicha “cantidad terapéuticamente eficaz” en vista de su propio conocimiento y de esta divulgación. Preferiblemente, el compuesto de acuerdo con la invención se administra a una cantidad comprendida entre 0,1 y 30 g por día.
El compuesto de acuerdo con la invención puede proporcionarse en una solución acuosa de tampón fisiológicao para la administración parenteral. El compuesto de la presente invención es capaz de ser administrado en formas de dosis unitaria, en donde la expresión “dosis unitaria” significa una dosis única que es capaz de ser administrada a un paciente y que se puede manejar y empaquetar fácilmente, permaneciendo como una dosis unitaria físicamente y químicamente estable, que comprende o el compuesto activo en sí o como una composición farmacéuticamente aceptable, tal como se describe en el presente documento. El compuesto proporcionado en el presente documento se puede formular en composiciones farmacéuticas mezclándolo con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. Tales composiciones de dosis unitaria pueden prepararse para su uso para la administración oral, particularmente en forma de comprimidos, cápsulas simples o cápsulas blandas de gel; o por la vía intranasal, particularmente en forma de polvos, gotas nasales o aerosoles; o por la vía dérmica, por ejemplo, por la vía tópica en pomadas, cremas, lociones, geles o aerosoles, o mediante parches transdérmicos.
La composición farmacéutica se puede administrar de manera conveniente en forma de unidad de dosificación y se puede preparar utilizando cualquier procedimiento bien conocido en la técnica farmacéutica, por ejemplo, tal como se describe en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20a edición; Gennaro, A. R., Ed.; Lippincott Williams & Wilkins: Filadelfia, PA, 2000.
Las formulaciones preferidas incluyen composiciones farmacéuticas en donde un compuesto de acuerdo con la presente invención se formula para la administración oral o parenteral.
Para la administración oral, pastillas, polvos, cápsulas, comprimidos, trociscos y similares pueden contener uno o más de los siguientes ingredientes o compuestos de una naturaleza similar: un aglutinante, tal como celulosa microcristalina o goma tragacanto; un diluyente, tal como almidón o lactosa; un disgregante, tal como almidón y derivados de celulosa; un lubricante, tal como estearato de magnesio; un glidante, tal como dióxido de silicio coloidal; un agente edulcorante, tal como sacarosa o sacarina; o un agente aromatizante, tal como menta o salicilato de metilo. Las cápsulas pueden estar en forma de una cápsula dura o una cápsula blanda, que se fabrican generalmente a partir de mezclas de gelatina mezcladas opcionalmente con plastificantes, así como también una cápsula de almidón. Adicionalmente, las formas de unidad de dosificación pueden contener otros materiales diferentes que modifican la forma física de unidad de dosificación, por ejemplo, recubrimientos de azúcar, goma laca o agentes entéricos. Otras formas de unidades de dosificación orales de jarabe o elixir pueden contener agentes edulcorantes, conservantes, colorantes, pigmentos y aromatizantes. Adicionalmente, los compuestos activos se pueden incorporar en preparaciones y formulaciones de disolución rápida, liberación modificada o liberación sostenida y en donde tales formulaciones de liberación sostenida son preferiblemente bimodales. Los comprimidos preferidos contienen lactosa, almidón de maíz, silicato de magnesio, croscarmelosa de sodio, povidona, estearato de magnesio o talco en cualquier combinación.
Las preparaciones líquidas para la administración parenteral incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones estériles acuosas o no acuosas. Las composiciones líquidas pueden incluir también aglutinantes, tampones, conservantes, agentes quelantes, edulcorantes, agentes aromatizantes y colorantes y similares. Los disolventes no acuosos incluyen alcoholes, propilenglicol, polietilenglicol, aceites vegetales, tal como aceite de oliva y ésteres orgánicos, tal como oleato de etilo. Los portadores acuosos incluyen mezclas de alcoholes y agua, medios tamponados y solución salina. Particularmente, polímero biocompatible, biodegradable de lactida, copolímero de lactida/glicolida o copolímeros de polioxietileno-polioxipropileno pueden ser excipientes útiles para controlar la liberación del compuesto activo. Los vehículos intravenosos pueden incluir rellenos fluidos y nutrientes, rellenos de electrolitos tales como aquellos basados en dextrosa de Ringer y similares. Otros sistemas de administración parenteral potencialmente útiles para los compuestos activos incluyen partículas de copolímero de etileno-acetato de vinilo, bombas osmóticas, sistemas de infusión implantables y liposomas.
Las vías alternativas de administración incluyen formulaciones para inhalación, que incluyen tales medios como polvo seco, aerosol o gotas. Estos pueden ser soluciones acuosas que comprenden, por ejemplo, polioxietileno-9-lauril éter, glicocolato y deoxicolato o soluciones aceitosas para su administración en forma de gotas nasales o como un gel para la aplicación por la vía intranasal. Las formulaciones para la administración bucal incluyen, por ejemplo, píldoras o pastillas y pueden incluir también una base saborizante, tal como sacarosa o acacia y otros excipientes, tal como glicocolato. Las formulaciones adecuadas para la administración rectal se presentan preferiblemente como supositorios de dosis unitaria, con un portador con base sólida y pueden incluir un salicilato. Las formulaciones para la administración tópica en la piel preferiblemente adoptan la forma de una pomada, crema, loción, pasta, gel, spray, aerosol o aceite. Los portadores que se pueden utilizar incluyen vaselina, lanolina, polietilenglicoles, alcoholes o sus combinaciones. Las formulaciones adecuadas para la administración transdérmica pueden presentarse como parches discretos y pueden ser emulsiones lipofílicas o tamponadas, soluciones acuosas, disueltas y/o dispersadas en un polímero o un adhesivo.
Ejemplos
Los siguientes ejemplos se proporcionan con el propósito de ilustrar la presente invención y de ninguna manera deben interpretarse como limitantes del alcance de la presente invención.
La primera parte representa la preparación de los compuestos (compuestos intermedios y finales) mientras que la segunda parte describe la evaluación de la actividad antibacteriana de los compuestos según la invención.
Preparación de los compuestos y actividad biológica:
Las abreviaturas o símbolos utilizados en este documento incluyen:
ACN: acetonitrilo
AcOH: ácido acético
Bn: bencilo
Boc: terc-butoxicarbonilo
Boc2O: anhídrido de terc-butoxicarbonilo
br: amplio (señal de RMN)
Cbz: carboxibencilo
CbzCl: cloroformiato de bencilo
UFC: unidades formadoras de colonias
CLSI: Clinical Laboratory Standards Institute
d: doblete
DBU: 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno
DCM: diclorometano
DCE: 1,2-dicloroetano
dd: doblete de doblete
ddd : doblete de doblete de doblete
ddt : doblete de doblete de triplete
dq: doblete de cuarteto
dt : doblete de triplete
DIAD: azodicarboxilato de diisopropilo
DIPEA: N,N-diisopropiletilamina
DMA: dimetilacetamida
DMAP: N,N-dimetil-4-aminopiridina
DMCyDA: trans-N,N'-dimetilciclohexan-1,2-diamina
DMF: N,N-dimetilformamida
DMSO: dimetilsulfóxido
EDCHCl: Clorhidrato de N-(3-Dimetilaminopropilo)-N'-etilcarbodiimida
EtOAc: acetato de etilo
Et2O: éter dietílico
h: horas
HATU: 3-óxido hexafluorofosfato de 1-[Bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio HOBt: hidrato de 1-hidroxibenzotriazol
iPrOH: isopropanol
m: multiplete
min: minutos
MeOH: metanol
MeONa: metóxido de sodio
MIC: concentración inhibitoria mínima
MS o EM: espectrometría de masas
MsCl: cloruro de metanosulfonilo
RMN: espectroscopia de resonancia magnética nuclear
Nos: nosilo, nitrobencenosulfonilo
Pd(Ph3)4: tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0)
PG: grupo protector
PhSH: tiofenol
PhSiH3: fenilsilano
PPh3: trifenilfosfina
Ppm: partes por millón
q: cuarteto
ta : temperatura ambiente
s: singlete
t: triplete
td: triplete de doblete
TBd Ms CI: cloruro de terc-butildimetilsililo
TBDPSCI: terc-butildifenilclorosilano
tBuOH: terc-butanol
tBuOK: terc-butóxido de potasio
TEA: trietilamina
Tf: trifluorometanosulfonato
TFA: ácido trifluoroacético
THF: tetrahidrofurano
TLC: cromatografía en capa fina
Tr: tritilo (trifenilmetilo)
Ejemplo 1: síntesis de [7-oxo-3-(2-oxo-t¡azol-3-¡l)-1.6-diaza-b¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio
Figure imgf000018_0001
En un matraz de fondo redondo de 500 ml, en atmósfera de nitrógeno, se disolvió tBuOK (2,7 g, 24,07 mmol) en THF anhidro (180 ml) y la solución resultante se enfrió a 0 °C. Se añadió N-bencil-N-acetonilglicinato de etilo (1a) (sintetizado según los procedimientos descritos en la literatura (J.Org.Chem. 2006, 71(21), 8256, J.Med.Chem. 2012, 55(11), 5403, WO2013/181741) (6 g, 24,07 mmol) disuelto en Th F anhidro (60 ml) con un embudo de goteo durante 5 min. La solución viscosa resultante se agitó durante 30 min a 0 °C (LC/MS mostró la formación de la correspondiente diona m/z ([M+H]+204, [M+H2o +H]+222, [MH]-202).
A 0 °C, se añadió N-(5-cloro-2-piridil)bis(trifluorometanosulfonimida) (reactivo de Comins) (9,7 g, 24,07 mmol) disuelto en THF (20 ml) y la reacción se agitó durante un 30 minutos adicionales. La mezcla de reacción se diluyó con Et2O y la solución se lavó con H2O. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (tolueno/acetona 100/0 a 95/5 o ciclohexano/EtOAc 100/0 a 50/50) para proporcionar el intermedio (1b) que se trituró en una mezcla de éter de petróleo y dietiléter (9/1) a -78°C. Después de la filtración, se obtuvo el intermedio (1b) como un sólido blanco (5,80 g, 17,29 mmol, 71 %) y se almacenó en el congelador.
EM m/z ([M+H]+) 336.
RMN1H (300 MHz, CDCla): 6(ppm) 3,27 (s, 2H), 3,49 (s, 2H), 3,73 (s, 2H), 6,17 (t, 1,3 Hz, 1H), 7,27 -7,40 (m, 5H). Etapa 2: preparación del intermedio 1-benc¡l-5-yodo-2,6-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-ona (1c)
En un matraz de fondo redondo de 1 litro bajo atmósfera de nitrógeno, se disolvió el intermedio (1b) (16,1 g, 48,02 mmol) en acetona (480 ml). Se añadió Lil anhidro (12,9 g, 96,03 mmol) y la solución de color amarillo pálido resultante se agitó durante 3,5 h a 45 °C. La mezcla se concentró a sequedad bajo presión reducida. El residuo se diluyó con DCM (350 ml) haciendo precipitar las sales que se filtraron sobre una almohadilla de celite®. El filtrado se lavó con H2O (2 x 100 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para proporcionar el intermedio (1c) (15,3 g, se esperaban 15,0 g) como un sólido amarillo pálido.
EM m/z ([M+H]+) 314.
RMN 1H (300 MHz, CDCh): 8(ppm) 3,29 (br s, 2H), 3,66 (br s, 2H), 3,73 (br s, 2H), 6,89 (t, 1,7 Hz, 1H ), 7,29-7,37 (m, 5H).
Etapa 3: preparación del intermedio 1-benc¡l-5-yodo-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡r¡d¡n-3-ol (1d)
En un matraz de fondo redondo de tres bocas de 1 litro en atmósfera de nitrógeno, se disolvió el intermedio (1c) (15,3 g, 48,02 mmol teóricos) en una mezcla de MeOH/THF 5/1 (0,16 M) y se enfrió hasta 0°. C. Después de 15 min, se añadió NaBH4(2,1 g, 55,2 mmol) en pequeñas porciones durante 10 min. La reacción se completó en 10 min. Los disolventes se extrajeron al vacío a temperatura ambiente hasta un volumen de aproximadamente 60 ml. A continuación, la mezcla se diluyó con DCM (500 ml) y se lavó con hielo triturado/H2O (100 ml). La capa acuosa se extrajo con DCM (2x30 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se evaporaron a sequedad y se obtuvo el intermedio en bruto (1d) (15,4 g, se esperaban 15,1 g) como un sólido que se usó sin purificación adicional.
EM m/z ([M+H]+) 316.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8(ppm) 2,36 (br s, 1H), 2,57 (dd, J = 12,0, 2,4 Hz, 1H), 2,86 (dd, J = 12,0, 2,4 Hz) , 1H), 3,04 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 3,43 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 3,61 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 3,66 (d, J = 11,5 Hz, 1H) ), 3,99-4,06 (m, 1H), 6,52-6,57 (m, 1H), 7,28-7,38 (m, 5H).
Etapa 4: preparación del intermedio N-aliloxi-N-(1-bencil-5-yodo-3,6-dihidro-2H-piridin-3-il)-2-nitrobencenosulfonamida (1e)
A una solución del intermedio (1d) (15,4 g, 48,02 mmol teóricamente) en THF anhidro (400 ml) se añadieron sucesivamente PPh3(15,1 g, 57,6 mmol), N-aliloxi-2-nitrobencenosulfonamida (18,6 g, 72,0 mmol) y DIAD (11,3 ml, 57,6 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 15 min, la mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía “flash” sobre gel de sílice (éter de petróleo/Et2O 100/0 a 40/60) para proporcionar el intermedio (1e) (39,0 g, se esperaban 26,7 g) contaminado por un exceso de N-aliloxi-2-nitro-bencenosulfonamida sin reaccionar y DIAD reducido. El residuo oleoso se cubrió con éter diisopropílico frío haciendo precipitar parcialmente DIAD reducido. Después de la filtración del sólido blanco, se recuperó el intermedio (1e) (34 g) y se usó sin más purificación en la siguiente etapa.
EM m/z ([M+H]+) 556.
Etapa 5: preparación del intermedio N-al¡lox¡-1-benc¡l-5-yodo-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡r¡d¡n-3-am¡na (1f)
En atmósfera de nitrógeno, se añadió K2CO3 (50,0 g, 360, 1 mmol) a una solución del intermedio (1e) (48,02 mmol teóricamente) en ACN (400 ml) en presencia de PhSH (25, 0 ml, 240, 1 mmol). Después de agitar durante 3 ha ta, la mezcla de reacción se filtró sobre celite® y la torta se lavó con DCM (3 x 150 ml). El filtrado se concentró y la suspensión amarilla en bruto (60 g) se vertió en heptano (500 ml) produciendo un precipitado de DIAD reducido. Después de la filtración y concentración del filtrado, se obtuvo un aceite amarillo claro (51 g). Una primera purificación por cromatografía “flash” sobre gel de sílice (éter de petróleo/ Et2O 100/0 a 40/60) seguido de una segunda purificación (DCM 100% a continuación DCM/EtOAc 15/85) proporcionó el intermedio (1f) como un sólido amarillo pálido después de la trituración (12,2 g, 68% en 4 etapas).
EM m/z ([M+H]+) 371.
RMN 1H (400 MHz, CDCta): 8 (ppm) 2,48 (dd, J = 11,7, 3,4 Hz, 1H), 2,96-3,08 (m, 2H), 3,34 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 3,57 (br s, 1H), 3,60 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 3,65 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 4,09-4,22 (m, 2H), 5,15-5,30 (m, 2H), 5,73 (br s, 1H), 5,84-5,96 (m, 1H), 6,37-6,43 (m, 1H), 7,25-7,38 (m, 5H).
Etapa 6: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-yodo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (1 g)
En un matraz de fondo redondo de tres bocas de 2 litros en atmósfera inerte con un embudo de adición y un condensador de H2O, se diluyó el intermedio (1f) (12,2 g, 32,96 mmol) en DCE anhidro (350 ml). Se añadió una solución de trifosgeno (12,7 g, 42,84 mmol) en DCE (150 ml) a temperatura ambiente durante 5 min y la solución se agitó hasta que la solución de color amarillo pálido se convirtió en una suspensión blanca. A continuación, la mezcla de reacción se calentó a 55 °C durante 20 min.
A continuación se añadió gota a gota una solución de Nal seco (49,2 g, 329,6 mmol) en acetona seca (170 ml) y la suspensión amarilla se convirtió en una suspensión marrón que se calentó a 65 °C durante 25 min. Se añadió cuidadosamente gota a gota piridina (66 ml, 823,9 mmol) durante 10 min. La reacción se agitó durante 30 min a 65°C. La reacción se enfrió hasta 0°C, se diluyó con DCM (600 ml), se filtró sobre celite® y se concentró a sequedad al vacío. El residuo marrón se diluyó con DCM (600 ml), se filtró sobre celite® y se lavó con una solución acuosa 0,2 M de NaH2PO4 (2 x 200 ml) y una solución acuosa 1 M de Na2S2O3 (2 x 200 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se concentró al vacío. El residuo (14,5 g) se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (éter de petróleo/Et2O 100/0 a 40/60) para proporcionar el intermedio (1 g) (7,1 g, 23,2 mmol, 70 %) como un aceite naranja. EM m/z ([M+H]+) 307.
RMN 1H (300 MHz, CDCh): 8(ppm) 3,21 (d, 10,8 Hz, 1H), 3,51-3,58 (m, 1H), 3,83-3,86 (m, 1H), 3,90 (dd, J = 18,0, 2,2 Hz, 1H), 4,07 (dd, J = 18,0, 1,4 Hz, 1H), 4,36-4,53 (m, 2H), 5,28-5,46 (m, 2H), 5,95-6,13 (m, 1H) , 6,87-6,97 (m, 1H). Etapa 7: preparación del intermedio 6-aliloxi-3-(2-oxo-tiazol-3-il)-1,6-diaza-biciclo[3.2.1]oct-3-en-7-ona (1h).
Una mezcla de intermedio (1 g) (0,1 g, 0,33 mmol), 3H-tiazol-2-ona (0,05 g, 0,49 mmol), clorhidrato de N,N-dimetilglicina (0,007 g, 0,05 mmol), Cul (0,006 g, 0,033 mmol) y K2CO3 seco (0,137 g, 0,99 mmol) en DMSO (6 ml) bajo argón (80-100°C) se calentó durante un par de horas (de 1 a 18 h ) . La mezcla se vertió en H2O y a continuación se extrajo con DCM. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 90/10) para proporcionar el intermedio (1h) (0,092 g, 0,33 mmol, rendimiento cuantitativo).
EM m/z ([M+H]+) 280
RMN 1H (400 MHz, CDCh): 8(ppm) 3,18 (d, 11,1 Hz, 1H), 3,48 (dd, J = 2,6, 10,9 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 17,6 Hz) , 1H), 4,07-4,08 (m, 1H), 4,25 (dd, 2,0, 17,6 Hz, 1H), 4,37-4,48 (m, 2H), 5,31-5,42 (m, 2H), 5,91-6,09 (m, 1H ), 6,16 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,44-6,50 (m, 1H), 6,58 (d, 5,6 Hz, 1H).
Etapa 8: preparación del intermedio 6-hidroxi-3-(2-oxo-tiazol-3-il)-1,6-diaza-biciclo[3.2.1]oct-3-en-7-ona (1i).
Se desgasificó una solución del intermedio (1h) (0,098 g, 0,35 mmol) en DCM anhidro (3,5 ml) durante 10 min en atmósfera de argón. Se añadieron sucesivamente AcOH (0,040 ml, 0,7 mmol) y Pd(PPh3)4 (0,203 g, 0,175 mmol). Después de agitar durante 30 min a temperatura ambiente, la mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” en fase inversa C-18 (H2O/ACN 99/1 a 80/20). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron para proporcionar el intermedio (1i) (0,083 g, 0,35 mmol, rendimiento cuantitativo).
EM m/z ([M+H]+) 240
RMN 1H (400 MHz, CDCh): 8(ppm) 3,05 (d, 10,6 Hz, 1H), 3,42 (dd, J = 2,4, 10,6 Hz, 1H), 3,94 (d, J = 17,7 Hz , 1H), 4,13 (dd, J = 2,7, 5,4 Hz, 1H), 4,19 (dd, J = 1,9, 17,7 Hz, 1H), 6,11 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 6,70 (d, 5,5 Hz, 1H).
Etapa 9: preparación de [7-oxo-3-(2-oxo-t¡azol-3-¡l)-1,6-d¡aza-b¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de de sodio (Ejemplo U
A una solución del intermedio (1¡) (0,083 g, 0,35 mmol) en piridina anhidra (4 ml) bajo atmósfera inerte se añadió complejo de trióxido de azufre y piridina (0,225 g, 1,42 mmol). Después de agitar durante 18 h, la mezcla heterogénea se concentró al vacío. Se añadió DCM al residuo y se filtraron los sólidos. El filtrado se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/MeOH: 100/0 a 80/20) para dar 0,017 g de un sólido que se aplicó en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron para proporcionar el ejemplo (1) (0,0074 g, 0,02 mmol, 6%).
EM m/z ([MH]-) 318.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,45 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,65 (dd, J = 2,6, 11,4 Hz, 1H), 4,13 (d, J = 17,8 Hz, 1H), 4,27 (dd, 2,1, 17,8 Hz, 1H), 4,55 (dd, J = 2,7, 5,5 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 6,55-6,70 (m , 1H), 6,87 (d, J = 5,4 Hz, 1H).
Ejemplo 2: síntesis de [7-oxo-3-(tr¡azol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio
Etapa 1a
Figure imgf000021_0001
Etapa 1a: preparación de los intermedios 6-aliloxi-3-(triazol-1-il)-1.6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-7-ona (2a) y 6-aliloxi-3-( triazol-2-il)-1.6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-7-ona (2b)
Una mezcla de intermedio (1 g) (629 mg, 2.05 mmol). 1H-1.2.3-triazol (237 pl. 4.10 mmol). dipivaloilmetano (86 pl.
0.41 mmol). Cul (37 mg. 0.20 mmol) mmol) y K2CO3 seco (567 mg. 4.4o mmol) en DMSO (20 ml) bajo argón (80-100°C) se calentó durante un par de horas (de 1 a 30 h) . La mezcla se concentró a sequedad bajo flujo de nitrógeno. El residuo se purificó sobre gel de sílice (DCM/EtOAc: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (2a) (243 mg. 0.982 mmol. 48 %) como un aceite amarillo y el intermedio (2b) (131 mg. 0.530 mmol. 26%) como un aceite amarillo.
6-aliloxi-3-(triazol-1-il)-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-7-ona (2a)
EM m/z ([M+H]+) 248. ([2M+H]+) 495.
RMN 1H (300 MHz. CDCla): 8(ppm) 3.20 (dd. J = 11.0. 0.7 Hz. 1H). 3.58 (ddd. 11.0. 2.9. 1.1 Hz. 1H). 4.16 (dd . J = 5.4.
2.8 Hz. 1H). 4.30-4.55 (m. 4H). 5.30-5.41 (m. 2H). 5.95-6.08 (m. 1H). 6.64-6.68 (m. 1H). 7.72 (d . J = 1.2 Hz. 1H). 7.76 (d. J = 1.2 Hz. 1H). RMN 13C (75 MHz. CDCla): 8 (ppm) 134.1. 133.7. 132.5. 120.6. 120.4. 116.4. 77.3. 75.5. 56.7. 53.1.
49.8.
6-aliloxi-3-(triazol-2-il)-1.6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-7-ona (2b)
EM m/z ([M+H]+) 248.
RMN 1H (400 MHz. CDCls): 8(ppm) 3.17 (d. 10.9 Hz. 1H). 3.52-3.60 (m. 1H). 4.16 (dd. J = 5.6. 2.7 Hz. 1H) .4.26 (dd. J = 17.9. 2.0 Hz. 1H). 4.44 (qd. J = 12.3. 6.3 Hz. 2H). 4.63 (d. J = 17.8 Hz. 1H). 5.27-5.43 (m. 2H). 6.03 (ddt. J = 16.9.
10.3. 6.4 Hz. 1H). 6.99 (d. J = 5.5 Hz. 1H). 7.69 (s. 2H).
RMN 13C (75 MHz. CDCls): 8(ppm) 170.1. 135.6. 135.3. 132.8. 120.3. 114.2. 76.7. 60.4. 56.8. 52.7. 50.1.
Etapa 1b: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-(tr¡azol-1-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (2a)
En un matraz sellado de 100 ml en atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (1 g) (4 g, 13,07 mmol) con DMSO anhidro (40 ml). Se añadieron sucesivamente Cul (249 mg, 1,31 mmol), azida de sodio (1,27 g, 19,60 mmol), ascorbato de sodio (259 mg, 1,31 mmol) y DMCyDA (309 pl, 1,96 mmol). La solución verde se volvió rápidamente marrón. La mezcla se agitó a ta durante 30 min hasta la conversión total del material de partida. A continuación, se añadió etiniltrimetilsilano (2,21 ml, 15,68 mmol) a la mezcla que se agitó a ta durante 30 min hasta la conversión total de la azida intermedia. La mezcla se diluyó con H2O (400 ml) y se extrajo con EtOAc (3x200 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4) y se concentraron al vacío para dar 4,50 g de un aceite marrón. Este aceite se disolvió en THF anhidro (87 ml) y se añadió 3HF.TEA (2,13 ml, 13,07 mmol) a la solución, que se agitó durante 1 hora a 50 °C. La mezcla se concentró al vacío y el crudo (6,35 g) se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 0/100) para dar el intermedio (2a) (1,30 g, 5,25 mmol, 40 %) como un aceite amarillo que cristalizó como un sólido amarillo.
EM m/z ([M+H]+) 248, ([2M+H]+) 495.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 6(ppm) 3,20 (dd, J = 11,0, 0,7 Hz, 1H), 3,58 (ddd, J = 11,0, 2,9, 1,1 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 5,4, 2,8 Hz, 1H), 4,30-4,55 (m, 4H), 5,30-5,41 (m, 2H), 5,95-6,08 (m, 1H), 6,64-6,68 (m, 1H), 7,72 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 1,2 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación de [7-oxo-3-(tr¡azol-1-¡l)-1.6-d¡azabic¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (Ejemplo 2)
A una solución del intermedio (2a) (150 mg, 0,607 mmol) en DCM anhidro (6,1 ml) se añadieron AcOH glacial (69 pl, 1,21 mmol) y Pd(PPh3)4(351 mg, 0,303 mmol). Después de 45 min de agitación a temperatura ambiente, se añadieron a la mezcla de reacción piridina (6,1 ml) y complejo de trióxido de azufre y piridina (483 mg, 3,03 mmol). La suspensión resultante se protegió de la luz y se agitó durante la noche hasta que se completó la reacción. La mezcla de reacción se concentró, a continuación se diluyó con DCM y se filtró. El filtrado se concentró al vacío y a continuación se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para producir 7-oxo-3-(triazol-1-il) -1,6-diazabic¡clo[3.2.1]oct-3-en-6-¡l]sulfato de trifenil-(propenil)-fosfonio (215,7 mg) como una espuma de color amarillo pálido. Esta espuma se disolvió en un mínimo de una mezcla H2O/ACN 20/80 y se aplicó sobre una columna de forma de sodio Dowex (Dowex®50WX8 de forma hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron y concentraron (temperatura del baño < 30°C). El compuesto se diluyó en H2O, se filtró en Millipore 0,22 pM, se congeló y liofilizó para dar el ejemplo (2) (96 mg, 0,310 mmol, 51 % en 3 etapas, pureza 95 %) como un sólido amorfo de color beige.
EM m/z ([MH]-) 286.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 5(ppm) 3,52 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,73 (dd, J = 11,5, 2,8 Hz, 1H), 4,42-4,56 ( m, 2H), 4,65 (dd, J = 5,6, 2,9 Hz, 1H), 6,91-6,93 (m, 1H), 7,85 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 1,3 Hz, 1H) ).
Ejemplo 3: síntesis de [7-oxo-3-(tr¡azol-2-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.1loct-3-en-6-illsulfato de sodio
Figure imgf000022_0001
Etapa 1: preparación de [7-oxo-3-(tr¡azol-2-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (ejemplo 3)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 2), el intermedio (2b) (180 mg, 0,725 mmol) se convirtió en el ejemplo (3) (102 mg, 0,330 mmol, 46 %) como un sólido blanco después de la liofilización.
EM m/z ([M+H]+) 288.
EM m/z ([MH]-) 286.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,39 (d, 11,3 Hz, 1H), 3,58-3,66 (m, 1H), 4,40 (d, J = 1,6 Hz, 2H) , 4,54 (dd, J = 5,7, 2,7 Hz, 1H), 6,89 (dd, J = 5,4, 1,5 Hz, 1H), 7,81 (s, 2H).
Figure imgf000023_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-p¡razol-1-¡l-1,6-d¡aza-b¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (4a).
Utilizando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo 1 (etapa 7), el ¡ntermed¡o (1 g) (0,5 g, 1,63 mmol) se conv¡rt¡ó por reacc¡ón con 1H-pirazol (0,169 g, 2,45 mmol) en el intermedio (4a) (0,349 g, 1,42 mmol, 86%) después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 90/10).
EM m/z ([M+H]+) 247.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8(ppm): 3,15 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,53 (dd, J = 2,1, 10,8 Hz, 1H), 4,10 (dd, J = 2,5, 5,5 Hz, 1H), 4,21 (dd, J = 1,9, 17,6 Hz, 1H), 4,34-4,53 (m, 3H), 5,28-5,33 (m, 1H), 5,37 (dq, J = 1,3, 17,2 Hz, 1H), 6,02 (ddt, J = 6,4, 10,3, 17,0 Hz, 1H), 6,32-6,37 (m, 1H), 6,46 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 1,5 Hz) , 1H), 7,61 (d, J = 2,5 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 6-h¡drox¡-3-p¡razol-1-¡l-1,6-d¡aza-b¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (4b).
Se desgasificó una solución del intermedio (4a) (0,100 g, 0,41 mmol) en DCM anhidro (4 ml) durante 10 min en atmósfera de argón. Se añadieron sucesivamente AcOH (0,047 ml, 0,81 mmol) y Pd(PPh3)4 (0,237 g, 0,205 mmol). Después de agitar durante 30 min a temperatura ambiente, el precipitado se filtró y se lavó con DCM para proporcionar 0,05 mg de un sólido blanco. El filtrado se purificó por TLC preparativa sobre gel de sílice (DCM/acetona 60/40) para dar 0,013 g adicionales. Los sólidos se combinaron para proporcionar el intermedio (4b) (0,063 g, 0,31 mmol, 75%).
EM m/z ([M+H]+) 207.
RMN1H (400 MHz, DMSO-da): 8(ppm): 3,22 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 3,36 (dd, J = 2,0, 10,8 Hz, 1H), 4,02 (dd , J = 2,5, 5,6 Hz, 1H), 4,18 (d, J = 1,1 Hz, 2H), 6,43-6,47 (m, 1H), 6,65 (d, 5,0 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 1,5 Hz , 1H), 8,18 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 9,65 (s, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio d¡fluoro-(7-oxo-3-p¡razol-1-¡l-1.6-d¡aza-bic¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lox¡)-acetato de etilo (4c).
El intermedio (4b) (0,154 g, 0,75 mmol) se solubilizó en DMSO (7,5 ml) con DBU (0,123 ml, 0,825 mmol) y bromodifluoroacetato de etilo (0,250 ml, 1,94 mmol) y se agitó durante 30 min. La mezcla se lavó con NaH2PO42M y el producto se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se filtró sobre una capa de sílice y a continuación se concentró al vacío. El residuo se trituró en Et2O y se filtró sobre una membrana de PTFE para proporcionar el intermedio (4c) (0,155 g, 0,47 mmol, 63%).
EM m/z ([M+H]+) 329.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8(ppm): 1,38 (t, 7,2 Hz, 3H), 3,25 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 3,66 (dd, J = 1,7, 11,1 Hz, 1H), 4,24­ 4,44 (m, 4H), 4,59 (dd, J = 0,9, 17,7 Hz, 1H), 6,39 (dd, J = 1,8, 2,5 Hz, 1H), 6,40-6,45 (m, 1H) , 7,60 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 4: preparación de d¡fluoro-(7-oxo-3-p¡razol-1-¡l-1.6-d¡aza-b¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lox¡)-acetato de litio (Ejemplo 4 .
A una solución del intermedio (4c) (0,143 g, 0,435 mmol) en THF (4 ml) y H2O (0,4 ml) a 0 °C se le añadió gota a gota una solución de LiOH 0,1 N (4,8 ml, 0,48 mmol ). Cuando el control indicó que la reacción se había completado, la mezcla se neutralizó con HCl (0,1 N) (0,7 ml) a 0°C. La solución se congeló para evaporar el THF al vacío y liofilizar la solución acuosa. El residuo se trituró en Et2O y se filtró sobre una membrana de PTFE. A continuación, el sólido se purificó sobre gel de sílice (¡PrOH). Las fracciones que contenían el producto deseado se concentraron al vacío. El sólido se trituró en Et2O y el sólido resultante se solubilizó en H2O para liofilizar y proporcionar el ejemplo (4 (0,88 g, 0,286 mmol, 66%).
EM m/z ([M+H]+) 301.
RMN 1H (300 MHz, D2O) 8 (ppm): 3,44 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,66 (ddd, J = 0,9, 2,7, 11,3 Hz, 1H), 4,38 (d , J = 1,4 Hz, 2H), 4,49 (dd, J = 2,5, 5,6 Hz, 1H), 6,48 (dd, J = 2,0, 2,6 Hz, 1H), 6,56-6,61 (m, 1H), 7,69 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Ejemplo 5: síntesis de [7-oxo-3-(1.2.4-tr¡azol-1-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio
Etapa 1
KgCOg, Cul
Figure imgf000025_0001
Etapa 3
1) complejo de trióxido de azufre-tri
, TEA, tBuOH/H20
2) intercambio iónico Dowex Na+
Figure imgf000025_0002
Ejemplo 5
Etapa 1: preparación del intermedio 6-aliloxi-3-(1.2.4-triazol-1-il)-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-7-ona (5a) Usando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a). el intermedio (1g) (200 mg, 0.65 mmol) se convirtió por reacción con 1.2.4-triazol (54 mg. 0.78 mmol) en el intermedio (5a) (110 mg. 0.44 mmol. 48 %) como un aceite de naranja después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 50/50). EM m/z ([M+H]+) 248.
RMN 1H (400 MHz. CDCh): ó(ppm) 3.17 (d. J = 10.9 Hz. 1H). 3.57 (dd. J = 10.9. 2.0 Hz. 1H). 4.14 (dd. J = 5.5. 2.6 Hz.
1H). 4.18 (dd. J = 17.6. 2.6 Hz. 1H). 4.35-4.50 (m. 3H). 5.30-5.34 (m. 1H). 5.37 (dq. J = 17.2. 1.4 Hz) . 1H). 5.96-6.07 (m. 1H). 6.68 (d. J = 5.4 Hz. 1H). 7.97 (s. 1H). 8.26 (s. 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 6-h¡drox¡-3-(1.2.4-tr¡azol-1-il)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (5b)
En atmósfera inerte. se añadieron PhS¡H3 (32 pl. 0.308 mmol) y Pd(PPh3)4 (7 mg. 0.006 mmol) a una solución del intermedio (5a) (51 mg. 0.154 mmol) en DCM anhidro (2 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y se filtró. El precipitado se lavó con DCM (2 ml) para dar el intermedio (5b) (26 mg. 0.125 mmol. 81 %) que se usó sin más purificación.
EM m/z ([M+H]+) 208.
Etapa 3: preparación de [7-oxo-3-(1.2.4-tr¡azol-1-il)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio (Ejemplo 5) El intermedio (5b) (13 mg. 0.063 mmol) se disolvió en una mezcla de tBuOH (0.3 ml) y H2O (0.3 ml). Se añadió TEA (2.2 pl. 0.016 mmol) y complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (10 mg. 0.075 mmol). La mezcla se agitó a ta durante 2 h y a continuación se concentró al vacío. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100). Las fracciones que contenían el intermedio esperado se combinaron y concentraron al vacío. El residuo se disolvió en H2O y se convirtió después del intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex ® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H 2O) en el ejemplo (5 (5 mg. 0.016 mmol. 26%).
EM m/z ([MH]-) 286.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm): 3,47 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,71 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 4,41 (dd, J = 17,5, 1,9 Hz, 1H), 4,61 (dd, J = 5,6, 2,8 Hz, 1H), 6,85 (d, 5,6 Hz, 1H), 8,12 (s, 1H), 8,71 (s, 1H).
Ejemplo 6: síntesis de [(5R)-7-oxo-3-(tr¡azol-1-¡l)-1.6-d¡azabic¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio
Figure imgf000026_0001
Etapa 1: preparación de los intermedios (5R)-6-al¡lox¡-3-(tr¡azol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (6a) y (5S)-6-al¡lox¡-3-(tr¡azol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (6b)
Ambos enantiómeros del intermedio (2a) (1021 mg, 4,13 mmol) se separaron mediante cromatografía de fluidos supercríticos (LUX C45 pm, 250 x 21,2 mm, ¡PrOH/CO235/65, 50 ml/min) para proporcionar el intermedio (6a) (455 mg, 1,84 mmol, 44 %, 98,9 % ee, tiempo de retención 2,23 min) y el intermedio (6b) (482 mg, 1,95 mmol, 47 %, 97,6 % ee, tiempo de retención 2,48 min).
EM m/z ([M+H]+) 248.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8(ppm) 3,20 (d, 11,0 Hz, 1H), 3,54-3,63 (m, 1H), 4,16 (dd, J = 5,5, 2,7 Hz, 1H) , 4,34 (dd, J = 17,9, 2,0 Hz, 1H), 4,38-4,57 (m, 3H), 5,30-5,35 (m, 1H), 5,38 (dq, J = 17,2, 1,4 Hz, 1H), 5,95-6,10 (m, 1H), 6,62­ 6,70 (m, 1H), 7,73 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 1,2 Hz, 1H).
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,49 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,71 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz, 1H), 4,42 (dd, J = 17,7, 1,3 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 17,7, 1,9 Hz, 1H), 4,63 (dd, J = 5,6, 2,7 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,24 (d, J = 1,3 Hz, 1H).
Método preparativo
Columna: Lux C4 (21,2 mm x 250 mm, 5 pm)
Condiciones ¡socráticas 35:65 IPA:CO2
Caudal: 50 ml/min
Detección: UV 242 nm
BPR 125 BarG
Método analítico:
Columna: Lux C4 (4,6 mm x 250 mm, 5 pm)
Condiciones ¡socráticas 35:65 IPA:CO2
Caudal: 4 ml/min
Detección: 210-400 nm
BPR 125 BarG
Temperatura de la columna 40 °C
Etapa 2: preparación de [(5R)-7-oxo-3-(tr¡azol-1-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l]sulfato de sodio (Ejemplo 6) Utilizando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo 2 (etapa 2). el ¡ntermed¡o (6a) (422 mg, 1.70 mmol) se conv¡rt¡ó en el ejemplo (6 (0,243 g. 0,785 mmol. 46 %) después de la liofilización. EM m/z ([MH]') 286.
RMN 1H (300 MHz. D2O): 8 (ppm) 3.49 (d. J = 11.4 Hz. 1H). 3.71 (dd. J = 11.4. 2.8 Hz. 1H). 4.42 (dd. J = 17.7. 1.3 Hz.
1H). 4.51 (dd. J = 17.7. 1.9 Hz. 1H). 4.63 (dd. J = 5.6. 2.7 Hz. 1H). 6.90 (d. J = 5.7 Hz. 1H). 7.82 (d. J = 1.3 Hz. 1H).
8.24 (d. J = 1.3 Hz. 1H).
Figure imgf000027_0001
Una mezcla del intermedio (1 g) (0.250 g. 0.817 mmol). amida del ácido 1H-pirazol-4-carboxílico (0.182 g. 1.633 mmol). clorhidrato de N.N-dimetilglicina (0.017 g. 0.122 mmol). Cul (0.016 g. 0.082 mmol) y K2CO3 (0.339 g. 2.45 mmol) en DMSO (8.2 ml) bajo argón se calentó a 80 °C durante 18 h . A continuación. la mezcla se diluyó con H2O y el producto se extrajo con DCM y n-BuOH. La capa orgánica se concentró al vacío. El producto en bruto se solubilizó en IPA. Los productos insolubles se filtraron sobre una membrana de PTFE y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar el intermedio (7a) (0.220 g. 0.760 mmol. 93%).
EM m/z ([M+H]+) 290.
RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 8 (ppm): 3.27 (d. J = 10.9 Hz. 1H). 3.32-3.35 (m. 1H). 4.15 (d. J = 17.4 Hz. 1H). 4.26 (dd. J = 1.9. 17.4 Hz. 1H). 4.30 (dd. J = 2.4. 5.7 Hz. 1H). 4.39 (d. J = 6.0 Hz. 2H). 5.27 (d. J = 10.5 Hz . 1H). 5.33-5.41 (m. 1H). 5.90-6.01 (m. 1H). 6.68 (d. J = 5.4 Hz. 1H). 7.17 (s. 1H). 7.62 (s. 1H). 8.01 ( s. 1H). 8.54 (s. 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 1-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azabic¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)p¡razol-4-carboxam¡da (7b) Se desgasificó una solución del intermedio (7a) (0.100 g. 0.345 mmol) en DCM anhidro (5 ml) durante 10 min en atmósfera de argón. Se añadieron sucesivamente AcOH (0.040 ml. 0.69 mmol) y Pd(PPh3)4 (0.090 g. 0.345 mmol). Después de agitar durante 30 min a temperatura ambiente. la mezcla se concentró. El residuo se trituró en Et2O y se filtró para proporcionar el intermedio (7b) (0,558 g, 0,224 mmol, 64%).
EM m/z ([M+H]+) 250.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 8 (ppm): 3,22 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,34-3,38 (m, 1H), 4,05 (dd, J = 2,5, 5,5 Hz) , 1H), 4,11 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,21 (dd, J = 1,7, 17,4 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,17 (br s, 1H), 7,63 (br s, 1H), 8,00 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 9,72 (br s, 1H).
Etapa 3: preparación de [3-(4-carbamo¡lp¡razol-1-¡l)-7-oxo-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (Ejemplo 7)
A una solución del intermedio (7b) (0,537 g, 0,215 mmol) en piridina anhidra (2,5 ml) bajo atmósfera inerte se añadió complejo de trióxido de azufre y piridina (0,139 g, 0,872 mmol). Después de agitar durante 18 h, la mezcla heterogénea se concentró al vacío. Se añadió DCM al residuo y se filtraron los productos insolubles. El filtrado se concentró al vacío y el producto se aplicó en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con agua). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron para dar un sólido que se purificó en gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 98/2) y se aplicó de nuevo en una columna de forma de sodio Dowex para proporcionar el ejemplo (7) (0,117 g, 0,033 mmol, 15%).
EM m/z ([MH]-) 328.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 8(ppm): 3,46 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,70 (dd, J = 2,5, 11,2 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 17,6 Hz , 1H), 4,41 (dd, J = 1,6, 17,6 Hz, 1H), 4,60 (dd, J = 2,5, 5,6 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,03 (s, 1H) , 8,37 (s, 1H).
Figure imgf000028_0001
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1 g) (0,2 g, 0,653 mmol) se convirtió por reacción con 1H-pirazol-4-carbonitrilo (0,122 g, 1,307 mmol) en el intermedio (8a) (0,177 g, 0,653 mmol, rendimiento cuantitativo) que contenía aproximadamente 30 % de 1H-pirazol-4-carbonitrilo después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (i-PrOH).
EM m/z ([M+H]+) 272.
RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 8 (ppm): 3,13 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,54 (dd, J = 2,2, 11,0 Hz, 1H), 4,12-4,19 (m, 2H ), 4,31­ 4,51 (m, 3H), 5,21-5,45 (m, 2H), 5,88-6,11 (m, 1H), 6,63 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 8,05 (s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 1-(6-H¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡aza-b¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-il)-1H-p¡razol-4-carbon¡tr¡lo (8b).
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 7 (etapa 2), el intermedio (8a) (177 mg, 0,65 mmol) se convirtió en el intermedio (8b) (0,132 g, 0,57 mmol, 88 %) que contenía aproximadamente un 30 % de óxido de trifenilfosfina después de purificación en gel de sílice (DCM/Acetona 100/0 a 70/30) seguido de trituración en Et2O.
EM m/z ([M+H]+) 232.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8 (ppm): 3,10 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,42-3,53 (m, 1H), 4,08 (dd, J = 2,6, 5,5 Hz, 1H), 4,15 (dd, J = 17,7, 1,8 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 6,67 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,83 (s, 1H), 8,09 ( s, 1H).
Etapa 3: preparación de [3-(4-c¡anop¡razol-1-¡l)-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (Ejemplo 8). A una solución del intermedio (8b) (0,132 g, 0,57 mmol) en piridina anhidra (5,7 ml) bajo atmósfera inerte se añadió complejo de trióxido de azufre y piridina (0,368 g, 3,31 mmol). Después de agitar durante 18 h a ta, la mezcla heterogénea se concentró al vacío. Se añadió DCM al residuo y los sólidos se filtraron. El filtrado se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona 100/0 a 0/100) para dar un sólido que se aplica en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con agua). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron para proporcionar el ejemplo (8) (0,334 g, 0,010 mmol, 17%).
EM m/z ([MH]-) 310.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 8 (ppm): 3,45 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,70 (dd, J = 2,4, 11,4 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 4,61 (dd, J = 2,6, 5,6 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,05 (s, 1H), 8,50 (s, 1H).
Figure imgf000029_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 6-aliloxi-3-(4-metoxipirazol-1-il)-1.6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-7-ona (9a) Utilizando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo 1 (etapa 7). el ¡ntermed¡o (1 g) (0.26 g. 0.85 mmol) se conv¡rt¡ó por reacc¡ón con 4-metoxi-1H-pirazol (125 mg. 1.27 mmol) en el intermedio (9a) (114 mg. 0.41 mmol. 49 %) como un sólido amarillo después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100). EM m/z ([M+H]+) 277.
RMN 1H (300 MHz. acetona-d6) 83.26 (dd. J = 10.8. 0.7 Hz. 1H). 3.39-3.44 (m. 1H). 3.74 (s. 3H). 4.17 (dd. J = 17.5.
1.9 Hz. 1H). 4.24 (ddd. J = 5.6. 2.7. 0.7 Hz. 1H). 4.34 (dd. J = 0.7. 17.4 Hz. 1H). 4.37-4.41 (m. 2H). 5.20 -5.25 (m. 1H).
5.32-5.39 (m. 1H). 5.93-6.07 (m. 1H). 6.40-6.44 (m. 1H). 7.34 (d. J = 0.8 Hz. 1H). 7.76 (d . J = 0.8 Hz. 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 6-h¡drox¡-3-(4-metox¡p¡razol-1-il)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (9b) En atmósfera inerte. se añadieron sucesivamente PhS¡H3 (100 pl. 0.80 mmol) y Pd(PPh3)4 (18.6 mg. 0.02 mmol) a una solución del intermedio (9a) (111 mg. 0.40 mmol) en solución anhidra. DCM (3.7 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. A continuación. la mezcla se concentró bajo un flujo de argón y el residuo se purificó por cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (9b) (142 mg. 0.60 mmol).
EM m/z ([M+H]+) 237.
Etapa 3: preparación de [7-oxo-3-(4-metox¡p¡razol-1-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-il1sulfato de sodio (Ejemplo 9). A una solución del intermedio (9b) (142 mg. 0.60 mmol) en ¡PrOH/H2O (3.2 ml/1.2 ml) en atmósfera inerte se le añadió complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (67 mg. 0.48 mmol) y TEA (14 pl. 0.1 mmol). La mezcla se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se concentró bajo un flujo de argón. El residuo se disolvió en un mínimo de H2O/ACN (1:1) y se pasó a través de una columna de intercambio iónico cargada con forma de sodio de Dowex (Dowex ® 50WX8 forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se liofilizaron y el residuo se purificó a continuación por cromatografía “flash” en gel de sílice de fase inversa C18 (H 2O/MeCN 99/1) para proporcionar el ejemplo (9) (28 mg. 0.06 mmol. 20 %) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H]+) 317
EM m/z ([MH]-) 315.
RMN 1H (400 MHz. D2O) 83.45 (d. J = 11.3 Hz. 1H). 3.69 (dd. J = 11.3. 2.9 Hz. 1H). 3.81 (s. 3H). 4.36 (s. 2H). 4.57 (dd. J = 5.7. 2.7 Hz. 1H). 6.49 (d. J = 5.7 Hz. 1H). 7.50 (s. 1H). 7.73 (s. 1H).
Ejemplo 10: síntesis de hidrogenosulfato de [3-[3-(2-am¡noet¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1
Figure imgf000031_0001
Se añadió B0C2O (0,295 g, 1,35 mmol) a una solución de 2-(1H-pirazol-3-il)etanamina (0,15 g, 1,35 mmol) en DCM (15 ml) bajo argón. La mezcla se agitó durante 18 horas y a continuación se lavó con agua y salmuera. El residuo se purificó sobre gel de sílice (DCM/acetona 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (10a) (0,186 g, 0,88 mmol, 65%).
EM m/z ([M+H]+) 212.
RMN 1H (400 MHz, CDCh): 6(ppm) 1,43 (s, 9H), 2,88 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,31-3,56 (m, 2H), 4,94 (br s , 1H), 6,13 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 2,1 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio N-[2-[1-(6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)pirazol-3-illetillcarbamato de terc-butilo (10b).
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1g) (0,207 g, 0,68 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (10a) (0,186 g, 0,88 mmol) en el intermedio (10b) (0,158 g , 0,405 mmol, 59 %) después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona 100/0 a 90/10).
EM m/z ([M+H]+) 390.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 5(ppm) 1,44 (s, 9H), 2,78 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,14 (d, 10,7 Hz, 1H), 3,42 (q , J = 6,6 Hz, 2H), 3,53 (dd, J = 2,1, 10,8 Hz, 1H), 4,09 (dd, J = 2,5, 5,5 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 1,8, 17,5 Hz, 1H), 4,37-4,50 (m, 3H), 4,84 (br s, 1H), 5,27-5,41 (m, 2H), 5,96-6,08 ( m, 1H), 6,17 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,42 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 2,5 Hz, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio N-[2-[1-(6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)pirazol-3-illetillcarbamato de terc-butilo (10c).
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 8 (etapa 2), el intermedio (10b) (158 mg, 0,405 mmol) se convirtió en el intermedio (10c) (118 mg, 0,338 mmol, 83 %) después de la purificación en gel de sílice (DCM /Acetona 100/0 a 70/30).
EM m/z ([M+H]+) 350.
RMN 1H (400 MHz, CDCta): 6(ppm) 1,39 (s, 9H), 2,75 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,07 (d, 10,7 Hz, 1H), 3,30-3,48 (m, 3H), 4,02 (dd, J = 2,6, 5,5 Hz, 1H), 4,10 (dd, J = 1,5, 17,6 Hz, 1H), 4,36 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 5,00 (br s , 1H), 6,14 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,44 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 2,5 Hz, 1H).
Etapa 4: preparación del intermedio [3-[3-[2-(terc-butoxvcarbonilamino)etil1pirazol-1-il]-7-oxo-1.6-diazabicido[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (10d).
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 8 (etapa 3), el intermedio (10c) (118 mg, 0,338 mmol) se convirtió en el intermedio (10d) (57 mg, 0,126 mmol, 37 %) después de la purificación en gel de sílice (DCM /MeOH 100/0 a 90/10) y etapa a través de una columna de forma de sodio Dowex.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 6(ppm) 1,35 (br s, 9H), 2,77 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,34 (t, J = 6,4 Hz, 2H) , 3,42 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 2,2, 11,3 Hz, 1H), 4,33 (s, 2H), 4,56 (dd, J = 2,5, 5,6 Hz, 1H), 6,36 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 7,78 (s, 1H).
Etapa 5: preparación de hidrogenosulfato de [3-[3-(2-aminoetil)nirazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-ilo] (Ejemplo 10).
El intermedio (10d) (57 mg, 0,126 mmol) se solubilizó en TFA (1 ml) en atmósfera inerte a 0 °C. Después de agitar durante 15 min, la mezcla se secó bajo un flujo de azote. El sólido se trituró con ACN, se filtró sobre una membrana de PTFE y se secó al vacío en presencia de P2O5 para proporcionar el ejemplo (10) (25,7 mg, 0,078 mmol, 82%). EM m/z ([MH]-) 328.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 6(ppm) 2,86 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,10 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,23 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,39 (dd, J = 2,5, 11,0 Hz, 1H), 4,21 (s, 2H), 4,35 (dd, J = 2,4, 5,6 Hz, 1H), 6,38 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,72 (br s, 3H), 8,14 (d, J = 2,5 Hz, 1H).
Ejemplo 11: síntesis de [3-[3-(2-h¡drox¡et¡lcarbamo¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio
Figure imgf000033_0001
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), se convirtió el intermedio (1 g) (0,250 g, 0,817 mmol) por reacción con N-(2-hidroxietil)-1H-pirazol-3-carboxamida (0,165 g, 1,062 mmol) en el intermedio (11a) (0,272 g, 0,817 mmol, rendimiento cuantitativo) que se usó sin purificación adicional.
EM m/z ([M+H]+) 334.
Etapa 2: preparación del intermedio 1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡ciclo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)-N-[2-[terc-but¡l(d¡met¡l) sililloxietillpirazol-3-carboxamida (11b).
A una solución del intermedio (11a) (0,272 g, 0,817 mmol) en THF anhidro (8 ml) en atmósfera inerte se añadió TBDMSCI (0,185 g, 1,225 mmol) e imidazol (0,945 g, 1,390 mmol). Después de agitar durante 18 h, la reacción se diluyó con agua y el producto se extrajo con AcOEt y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 85/15) para proporcionar el intermedio (11b) (0,126 g, 0,281 moles, 34%).
EM m/z ([M+H]+) 448.
RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 6(ppm): 0,04 (s, 3H), 0,05 (s, 3H), 0,89 (s, 9H), 3,11 (d, 10,8 Hz, 1H), 3,46 -3,54 (m, 3H), 3.73 (t, J = 5,3 Hz, 2H), 4,07-4,17 (m, 2H), 4,33-4,46 (m, 3H), 5,25-5,37 (m, 2H), 5,93-6,03 (m, 1H), 6,48 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio N-[2-[terc-butil(dimetil)silil1oxietil1-1-(6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en- 3-¡l)pirazol-3-carboxam¡da (11c).
Se desgasificó una solución del intermedio (11b) (0,126 g, 0,281 mmol) en DCM anhidro (2,9 ml) durante 10 min en atmósfera de argón. Se añadieron sucesivamente AcOH (0,032 ml, 0,562 mmol), Pd(PPh3)4 (0,049 g, 0,042 mmol) y PPh3 (0,074 g, 0,281 mmol). Después de agitar durante 30 min a temperatura ambiente, la mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó sobre gel de sílice (DCM/acetona 100/0 a 70/30) para proporcionar el intermedio (11c) (63 mg, 0,154 mmol, 55%).
EM m/z ([M+H]+) 408.
Etapa 4: preparación del intermedio [3-[3-[2-[terc-but¡l(dimet¡l)s¡l¡l1ox¡et¡l carbamo¡l1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡ciclo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio (11d).
A una solución del intermedio (11c) (63 mg, 0,155 mmol) en la mezcla de tBuOH/H2O: 1/1 (1,7 ml) se añadió complejo de trióxido de azufre y trietilamina (26 mg, 0,185 mmol) y Et3N (6 pl, 0,039 mmol). Después de agitar durante 2 h, la mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona 100/0 a 0/100) para dar un sólido que se aplica en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con agua). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron para proporcionar el intermedio (11d) (37 mg, 0,072 mmol, 46%).
EM m/z ([M+H1+) 488.
Etapa 5: preparación de [3-[3-(2-h¡drox¡et¡lcarbamo¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (Ejemplo 11).
El intermedio (11d) se solubilizó en TFA (0,037 g, 0,072 mmol) a 0 °C en atmósfera inerte. Después de agitar durante 1 h, la mezcla se secó con flujo de nitrógeno. El residuo se trituró en Et2O y después se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (agua/ACN: 98/2). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron. El sólido se aplicó en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con agua). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron para proporcionar el ejemplo (11) (15 mg, 0,029 mmol, 40%).
EM m/z ([MH1‘) 372.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 5(ppm) 3,44 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,51 (t, J = 5,5 Hz, 2H), 3,70 (dd, J = 2,8 , 11,2 Hz, 1H), 3.74 (t, J = 5,5 Hz, 2H), 4,40 (s, 2H), 4,58 (dd, J = 2,5, 5,5 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 5,5 Hz, 1H ), 6,83 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Ejemplo 12: síntesis de [3-[3-(h¡drox¡met¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de trietilamonio
Figure imgf000035_0001
A una solución de (1H-pirazol-3-il)-metanol (0,150 g, 1,53 mmol) en DMF anhidra (8 ml) bajo argón se añadieron TBDMSCI (0,345 g, 2,29 mmol) e imidazol (0,177 g, 2,60 milimoles). La mezcla se agitó a ta durante 18 h. La mezcla se extrajo con una mezcla de EtOAc/Et2O 1/1 y se lavó con agua para proporcionar el intermedio (12a) (0,324 g, 1,53 mmol, rendimiento cuantitativo) que se usó sin purificación adicional.
EM m/z ([M+H]+) 213.
Etapa 2: preparación del intermedio 6-aliloxi-3-[3-[[terc-butil(dimetil)silil1oximetil1pirazol-1-il1-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-7-ona (12b).
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1g) (0,292 g, 0,95 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (12a) (0,324 g, 1,526 mmol) en el intermedio (12b) (0,124 g , 0,317 mmol, 33 %) después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona 100/0 a 95/5).
EM m/z ([M+H]+) 391.
RMN 1H (400 MHz, CDCI3): 8(ppm) 0,08 (s, 6H), 0,90 (s, 9H), 3,13 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 3,52 (dd, J = 2,2, 10,7 Hz, 1H), 4,08 (dd, J = 2,4, 5,5 Hz, 1H), 4,17 (dd, J = 1,8, 17,6 Hz, 1H), 4,36-4,49 (m, 3H), 4,69 (s, 2H ), 5,22-5,44 (m, 2H), 5,96­ 6,07 (m, 1H), 6,35 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,40 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 2,5 Hz, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio 3-[3-[[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡met¡l1p¡razol-1-¡l1-6-h¡drox¡-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (12c).
Usando el proced¡m¡ento descr¡to en el Ejemplo 11 (etapa 3), el ¡ntermed¡o (12b) (124 mg, 0,317 mmol) se conv¡rt¡ó en el ¡ntermed¡o (12c) (111 mg, 0,317 mmol, rend¡m¡ento cuant¡tat¡vo) después de la pur¡f¡cac¡ón en gel de síl¡ce (DCM/Acetona 100/0 a 70/30).
EM m/z ([M+H]+) 351.
RMN 1H (400 MHz, CDCh) 8(ppm): 0,08 (s, 6H), 0,91 (s, 9H), 3,12 (d, 10,7 Hz, 1H), 3,50 (dd, J = 2,3, 10,7 Hz, 1H), 4,05 (dd, J = 2,5, 5,5 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 1,8, 17,6 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,70 (s, 2H), 6,36 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,43 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 2,5 Hz, 1H).
Etapa 4: preparac¡ón del ¡ntermed¡o [3-[3-[[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡met¡l1p¡razol-1-¡l-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en -6-¡l1sulfato de p¡r¡d¡n¡o (12d).
A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (12c ) (0,111 g, 0,317 mmol) en p¡r¡d¡na anh¡dra (3,2 ml) en atmósfera ¡nerte se añad¡ó complejo de tr¡óx¡do de azufre y p¡r¡d¡na (0,204 g, 1,28 mmol). Después de ag¡tar durante 18 h, la mezcla heterogénea se concentró al vacío. Se añad¡ó DCM al res¡duo y los sól¡dos se f¡ltraron. El f¡ltrado se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona 100/0 a 0/100) para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (12d) (0,067 g, 0,131 mmol, 41%).
EM m/z ([M+H1+) 431.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8(ppm) 0,08 (s, 6H), 0,90 (s, 9H), 3,17 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,72 (dd, J = 2,1, 10,9 Hz, 1H), 4,19 (dd, J = 1,7, 17,9 Hz, 1H), 4,43 (d, J = 17,9 Hz, 1H), 4,57 (dd, J = 2,5, 5,6 Hz, 1H), 4,67 ( s, 2H), 6,34 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,40 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,96 (dd, J = 6,7, 6,7 Hz, 2H), 8,43 (dd, J = 1,5, 6,7, 6,7 Hz, 1H), 9,02 (dd, J = 1,5, 6,7 Hz, 2H).
Etapa 5: preparac¡ón de [3-[3-(h¡drox¡met¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de tr¡et¡lamon¡o (Ejemplo 12).
Se añad¡ó tr¡h¡drofluoruro de tr¡et¡lam¡na (0,022 ml, 0,131 mmol) a una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (12d) (0,067 g, 0,131 mmol) en ACN anh¡dro (1,3 ml) en atmósfera ¡nerte. Después de ag¡tar durante 140 m¡n a 40°C, la mezcla se concentró en flujo de n¡trógeno. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona 100/0 a 0/100) para proporc¡onar el ejemplo (12) (0,031 g, 0,074 mmol, 56%).
EM m/z ([M+H1+) 317.
RMN 1H (400 MHz, acetona-d6): 5(ppm) 1,32 (t, J = 7,3 Hz, 9H), 3,30 (qd, J = 4,8, 14,6 Hz, 6H), 3,33 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,51 (dd, J = 2,1, 11,0 Hz, 1H), 4,16-4,28 (m, 2H), 4,34 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,45 (dd, J = 2,5 , 5,6 Hz, 1H), 4,56 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 6,42 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,56 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 8,44 (br s, 1H).
Ejemplo 13: síntes¡s [3-[3-[(2-am¡not¡azol-5-carbon¡l)am¡no1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sod¡o
Figure imgf000037_0001
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1 g) (2 g, 6,53 mmol) se convirtió por reacción con 3-nitro-1H-pirazol (0,960 g, 8,49 mmol) en el intermedio (13a) (1,42 g, 4,875 mmol, 74 %) después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona 100/0 a 94/6) y a continuación trituración en Et2O.
EM m/z ([M+H]+) 292.
RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 8(ppm): 3,15 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,56 (dd, J = 2,1, 11,0 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 2,4, 5,5 Hz, 1H), 4,24 (dd, J = 1,9, 17,7 Hz, 1H), 4,34-4,49 (m, 3H), 5,28-5,41 (m, 2H), 5,94-6,06 (m, 1H), 6,71 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-(3-am¡no-p¡razol-1-¡l)-1.6-d¡aza-b¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (13b).
Se añad¡eron z¡nc (3,19 g, 48,75 mmol) y AcOH (2,8 ml, 48,75 mmol) a una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (13a) (1,42 g, 4,875 mmol) en DCM anh¡dro (48 ml) a 0 °C. Después de ag¡tar durante 1h a 0°C, la mezcla se f¡ltró sobre torta de Cel¡te y el f¡ltrado se vert¡ó ¡nmed¡atamente en c¡clohexano a 10°C. El DCM de la mezcla se evaporó bajo un flujo de n¡trógeno y el prec¡p¡tado se f¡ltró sobre una membrana de PTFE para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (13b) (1,27 g, 4,87 mmol, rend¡m¡ento cuant¡tat¡vo).
EM m/z ([M+H1+) 262.
RMN 1H (400 MHz, CDCh): 8(ppm) 3,11 (d, 10,7 Hz, 1H), 3,50 (dd, 2,2, 10,7 Hz, 1H), 3,77 (br s, 2H), 4,03-4,11 (m, 2H), 4,34 (d, J = 17,8 Hz, 1H), 4,36-4,48 (m, 2H), 5,27-5,39 (m, 2H), 5,73 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,96 -6,06 (m, 1H), 6,28 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 3: preparac¡ón del ¡ntermed¡o N-[5-[[1-[6-al¡lox¡-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo [3.2.11oct-3-en-3-¡l1p¡razol-3-¡l1carbamo¡l1t¡azol-2-¡l1carbamato de terc-but¡lo (13c).
A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (13b) (0,214 g, 0,818 mmol) en DMA (8 ml) en atmósfera ¡nerte a 0 °C se le añad¡ó gota a gota una soluc¡ón de N-(5-clorocarbon¡lt¡azol-2-¡l)carbamato de terc-but¡lo (preparado como se descr¡be en la patente WO2014102759) (0,215 g, 0,818 mmol) en DMA (1,5 ml). Después de ag¡tar durante 35 m¡n, la mezcla se concentró bajo un flujo de n¡trógeno. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/EtOAc 100/0 a 0/100) y se tr¡turó con Et2O para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (13c) (0,399 g, 0,818 mmol, rend¡m¡ento cuant¡tat¡vo).
EM m/z ([M+H1+) 488.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 8(ppm) 1,50 (s, 9H), 3,27 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,30-3,36 (m, 1H), 4,16-4,29 (m, 3H), 4,39 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 5,23-5,26 (m, 1H), 5,32-5,40 (m, 1H), 5,90-6,01 (m, 1H), 6,53 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H), 11,11 (s, 1H), 11,80 (s, 1H).
Etapa 4: preparac¡ón del ¡ntermed¡o N-[1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)p¡razol-3-¡l1-N-[2-(tercbutox¡carbon¡lam¡no)t¡azol-5-carbon¡l1carbamato de terc-but¡lo (13d) y N-[1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)p¡razol-3-¡l1-N-[2-[b¡s(terc-butox¡carbon¡l)am¡no1t¡azol-5-carbon¡l1carbamato de terc-but¡lo (13e)
A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (13c) (0,030 g, 0,061 mmol) en p¡r¡d¡na anh¡dra (0,3 ml) en atmósfera ¡nerte a 0 °C se añad¡eron Boc2O (0,133 g, 0,61 mmol) y DMAP (0,008 g, 0,006 m¡l¡moles). Después de ag¡tar durante 1 h, la mezcla se concentró bajo un flujo de n¡trógeno. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 90/10) para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (13d) (0,014 g, 0,024 mmol, 39 %) y el ¡ntermed¡o (13e) (0,020 g, 0,029 mmol, 47%).
EM m/z ([M+H1+) 588.
Intermed¡o (13d)
RMN 1H (300 MHz, CDCla) 8(ppm): 1,45 (s, 9H), 1,56 (s, 9H), 3,10 (d, 10,8 Hz, 1H), 3,49 (dd, J = 2,7, 10,7 Hz, 1H), 4.06 (dd, J = 2,4, 5,6 Hz, 1H), 4,12 (dd, J = 1,8, 17,7 Hz, 1H), 4,32 (dd, J = 1,1, 17,7 Hz, 1H), 4,33-4,49 (m, 2H), 5,26­ 5,39 (m, 2H), 5,93-6,08 (m, 1H), 6,40 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 6,42 (br s, 1H), 7,57 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,88 (s, 1H), 11,03 (br s, 1H).
Intermed¡o (13e)
RMN 1H (300 MHz, CDCls) 5(ppm): 1,45 (s, 9H), 1,47 (s, 9H), 1,53 (s, 9H), 1,56 (s, 9H), 1,59 (s, 9H), 1,61 (s, 9H), 3,10 (2d, J = 10,7 Hz, 1H), 3,47-3,54 (m, 1H), 4,04-4,16 (m, 2H), 4,28-4,49 (m, 3H), 5,27 -5,40 (m, 2H), 5,93-6,08 (m, 1H), 6,36 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 6,37 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 6,42 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,46 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,93 (s, 1H).
Etapa 5: preparac¡ón del ¡ntermed¡o N-[1-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)p¡razol-3-¡l1- N-[2-(tercbutox¡carbon¡lam¡no)t¡azol-5-carbon¡l1carbamato de terc-but¡lo (13f).
Ut¡l¡zando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo 7 (etapa 2), el ¡ntermed¡o (13d) (132 mg, 0,225 mmol) se conv¡rt¡ó en el ¡ntermed¡o (13f) (0,59 mg, 0,108 mmol, 48 %) después de la pur¡f¡cac¡ón en gel de síl¡ce (DCM /Acetona 100/0 a 70/30).
EM m/z ([M+H]+) 548.
Etapa 6: preparación del intermedio [3-[3-[terc-butoxicarbonil-[2-(terc-butoxicarbonilamino)tiazol-5-carbon¡l1am¡no1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo [3.2.1] oct-3-en-6-il1 sulfato de piridinio (13 g).
A una solución del intermedio (13 f) (0,224 g, 0,346 mmol) en piridina anhidra (3,5 ml) en atmósfera inerte se añadió complejo de trióxido de azufre y piridina (0,223 g, 1,40 mmol). Después de agitar durante 16 h, la mezcla heterogénea se concentró al vacío. Se añadió DCM al residuo y los sólidos se filtraron. El filtrado se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (13 g) (0,141 g, 0,199 mmol, 57%).
EM m/z ([M+H]+) 628.
RMN 1H (400 MHz, ace tona^) 6(ppm): 1,45 (s, 9H), 1,54 (s, 9H), 3,31 (d, 10,8 Hz, 1H), 3,48 (dd, J = 2,2, 10,8 Hz, 1H), 4,17 (dd, J = 1,8, 17,6 Hz, 1H), 4,22 (dd, J = 1,2, 17,6 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 2,6, 5,6 Hz, 1H), 6,53 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 8,15-8,20 (m, 1H), 8,68-8,73 (m, 2H), 9,06 (dd, J = 1,6, 6,8 Hz, 2H), 10,69 (br s, 1H).
Etapa 7: preparación [3-[3-[(2-aminotiazol-5-carbonil)aminolpirazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-illsulfato de sodio (Ejemplo 13).
Se agitó una solución del intermedio (13 g) (0,064 g, 0,090 mmol) en TFA (0,5 ml) en atmósfera inerte a -14 °C durante 30 min y a continuación a 0 °C durante 4 h. La mezcla se concentró bajo un flujo de nitrógeno. El sólido se trituró con Et2O y ACN para proporcionar un sólido amarillo que se aplicó en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con agua). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron. El sólido se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (agua a ACN). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron para proporcionar el ejemplo (13) (2,7 mg, 0,006 mmol, 6%).
EM m/z ([MH1‘) 428.
RMN 1H (300 MHz, D2O) 5(ppm): 3,45 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,71 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,36 (s, 2 H ), 4,58 (dd, J = 2,1, 5,7 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,79 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Ejemplo 14: síntesis de (7-oxo-3-(4-fluorop¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l) sulfato de sodio
Figure imgf000039_0001
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a), el intermedio (1g) (250 mg, 0,817 mmol) se convirtió por reacción con 4-fluoro-1H-pirazol (84,4 mg, 0,980 mmol) en el intermedio (14a) (179 mg, 0,678 mmol, 83 %) como un aceite después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 50/50).
EM m/z ([M+H1+) 264, ([2M+H1+) 529.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 5(ppm) 3,12 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,52 (ddd, J = 11,0, 2,9, 1,1 Hz, 1H), 4,09 (dd, J = 5,6, 2,8 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 17,7, 1,9 Hz, 1H), 4,36-4,50 (m, 3H), 5,29-5,40 (m, 2H), 5,95-6,08 (m, 1H), 6,31-6,33 (m, 1H), 7,42 (dd, J = 4,2, 0,7 Hz, 1H), 7,51 (dd, J = 4,8, 0,7 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación de (7-oxo-3-(4-fluorop¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l) sulfato de de sodio (Ejemplo 14)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 2), el intermedio (14a) (179 mg, 0,678 mmol) se convirtió en el ejemplo (14) (115 mg, 0,352 mmol, 52 %) como un sólido blanco después de la liofilización.
EM m/z ([MH]-) 303.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8(ppm) 3,44 (dd, J = 11,3, 0,7 Hz, 1H), 3,69 (ddd, J = 11,3, 2,9, 1,1 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 1,5 Hz, 2H), 4,58-4,60 (m, 1H), 6,53-6,57 (m, 1H), 7,62 (dd, J = 4,0, 0,7 Hz, 1H), 7,93 (dd, J = 4,4, 0,8 Hz, 1H).
RMN 19F (282 MHz, D2O): 8(ppm) -174,56 (t, 4,2 Hz, 1F).
Ejemplo 15: síntesis [3-(4-met¡lenamon¡op¡razol-1-¡l)-7-oxo-1.6-d¡azabic¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato
Figure imgf000040_0001
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a), se convirtió el intermedio (1 g) (500 mg, 1,63 mmol) por reacción con N-(1H-pirazol-4-ilmetil)carbamato de terc-butilo (387 mg, 1,96 mmol) en el intermedio (15a) (362 mg, 0,869 mmol, 53 %) como un aceite amarillo después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 50/50).
EM m/z ([M+H]+) 376.
RMN 1H (300 MHz, CDCla) 81,45 (s, 9H), 3,13 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,53 (dd, J = 10,8, 2,3 Hz, 1H), 4,07-4,21 (m, 5H), 4,38-4,46 (m, 2H), 4,74 (br s, 1H), 5,28-5,40 (m, 2H), 5,95-6,08 (m, 1H), 6,40 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,56 (s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio [3-[4-[(terc-butoxicarbonilamino)metil1pirazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-il1 sulfato de sodio (15b)
En atmósfera inerte, se añadieron PhSiH3 (238 pl, 1,93 mmol) y Pd(PPh3)4(45 mg, 0,039 mmol) a una solución del intermedio (15a) (362 mg, 0,869 mmol) en DCM anhidro (35 ml). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 h. Se añadieron a la mezcla de reacción piridina (35 ml) y complejo de trióxido de azufre y piridina (769 mg, 4,83 mmol). La suspensión resultante se protegió de la luz y se agitó durante la noche hasta que se completó la reacción. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida, a continuación se diluyó con d Cm y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida y a continuación se purificó por cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 80/20). Las fracciones que contenían el intermedio esperado se combinaron y concentraron para dar un sólido marrón. Este sólido se disolvió en un mínimo de una mezcla H2O/ACN y se convirtió después del intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O) en el intermedio (15b) (142 mg, 0,300 mmol, 31 %) como un sólido marrón.
EM m/z ([MH]-) 414.
RMN 1H (300 MHz, D2O) 81,41 (s, 9H), 3,43 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,67 (dd, J = 11,3, 2,6 Hz, 1H), 4,12-4,15 (m, 2H), 4,32-4,36 (m, 2H), 4,55 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,84 (s, 1H).
Etapa 3: preparación [3-(4-met¡lenamon¡op¡razol-1-¡l)-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lo ] sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato (Ejemplo 15)
El intermedio (15b) (10 mg, 0,021 mmol) se disolvió en una mezcla de DCM/TFA (2:1) (0,5 ml). La mezcla se agitó a 0°C durante 30 min. El residuo se trituró en Et2O y DCM. El sólido se diluyó en H2O y se liofilizó para dar el ejemplo (15) (1,4 mg, 0,003 mmol, 12%) como un sólido blanco.
EM m/z ([MH]-) 314.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 83,46 (d, 11,3 Hz, 1H), 3,70 (dd, J = 11,3, 2,0 Hz, 1H), 4,12-4,18 (m, 2H), 4,36- 4,40 (m, 2H), 4,59 (dd, J = 5,7, 2,7 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,78 (s, 1H), 8,08 (s, 1H).
RMN 19F (367 MHz, D2O) 8-75,54 (s, 3 F ).
Ejemplo 16: síntesis de [7-oxo-3-(4-sulfamo¡lp¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio
Etapa 1
Figure imgf000041_0001
Etapa 1: preparación del intermedio N-(6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-3-il)nirazol-4-sulfonamida (16a) Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a), el intermedio (1 g) (400 mg, 1,31 mmol) se convirtió por reacción con 1H-pirazol-4-sulfonamida (231 mg, 1,57 mmol) en el intermedio (16a) (362 mg, 0,869 mmol, 53 %) como un aceite amarillo después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 80/20).
EM m/z ([M+H]+) 326.
EM m/z ([MH]-) 324.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 83,15 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,53 (dd, J = 10,9, 2,0 Hz, 1H), 4,13-4,18 (m, 2H), 4,35 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,37-4,48 (m, 2H), 5,30-5,34 (m, 2H), 5,33-5,40 (m, 2H), 5,95-6,05 (m, 1H), 6,62 (d , J = 4,9 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H), 8,10 (s, 1H).
Etapa 2: preparación de [7-oxo-3-(4-sulfamo¡lp¡razol-1-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (Ejemplo 16)
En atmósfera inerte, se añadieron PhSiH3 (99 pl, 0,805 mmol) y Pd(PPh3)4(19 mg, 0,016 mmol) a una solución del intermedio (16a) (131 mg, 0,403 mmol) en DCM anhidro (13 ml). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 h. La suspensión resultante se filtró para dar el intermedio N-(6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-3-il)pirazol-4-sulfonamida como un sólido pardo. En atmósfera inerte, este intermedio N-(6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-3-il)pirazol-4-sulfonamida (31 mg, 0,109 mmol) se diluyó en piridina anhidra (4 ml). Se añadió complejo de trióxido de azufre y piridina (87 mg, 0,543 mmol) a la mezcla de reacción. La suspensión resultante se protegió de la luz y se agitó durante la noche hasta que se completó la reacción. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 100/0 a 98/2). Las fracciones que contenían el compuesto esperado se ensamblaron y convirtieron después del intercambio iónico con una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O) en el ejemplo (16) (1,4 mg, 0,003 mmol, 3 %) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H]+) 366.
EM m/z ([MH]-) 364.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 83,48 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,72 (dd, J = 11,4, 2,7 Hz, 1H), 4,37 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 17,5, 1,9 Hz, 1H), 4,63 (dd, J = 5,6, 2,7 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 8,05 (s, 1H), 8,51 (s, 1H).
Ejemplo 17: síntesis de [3-(3-carbon¡tr¡lep¡razol-1-¡l)-7-oxo-1.6-d¡azabic¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio
Step 1
Figure imgf000042_0001
Etapa 1: preparación del intermedio N-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)-3-carbon¡tr¡lp¡razol (17a)
En atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (1 g) (200 mg, 0,653 mmol) con DMSO anhidro (6,5 ml). Se añadieron sucesivamente NH-pirazol-3-carbonitrilo (122 mg, 1,31 mmol), K2CO3 seco (271 mg, 1,96 mmol), Cul (12 mg, 0,065 mmol) y clorhidrato de N,N-dimetilglicina (14 mg, 0,098 mmol). La suspensión azul se calentó a 100°C. Después de 18 h, la mezcla se diluyó en H2O (10 ml) y se añadió EtOAc (20 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3x20 ml) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El compuesto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 50/50) para dar el intermedio (17a) (66 mg, 0,243 mmol, 37 %) como un aceite amarillo.
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1 g) (0,2 g, 0,653 mmol) se convirtió por reacción con NH-pirazol-3-carbonitrilo (122 mg, 1,31 mmol) en el intermedio (17a) (66 mg, 0,243 mmol, 37 %) como un aceite amarillo después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc 100/0 a 50/50).
EM m/z ([M+H]+) 272.
EM m/z ([MH]-) 270.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 83,14 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,56 (ddd, J = 10,9, 2,7, 1,1 Hz, 1H), 4,14 (dd, J = 5,6, 2,7 Hz, 1H), 4,20 (dd, J = 17,8, 2,0 Hz, 1H), 4,38-4,49 (m, 3H), 5,32 (ddd, J = 10,3, 1,4, 1,1 Hz, 1H), 5,38 (ddd, J = 17,2, 1,4, 1,1 Hz, 1H), 5,96-6,08 (m, 1H), 6,62 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación de [3-(3-carbon¡tr¡lp¡razol-1-¡l)-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (Ejemplo 17)
En atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (17a) (66 mg, 0,243 mmol) en DCM anhidro (2,5 ml). Se añadieron sucesivamente AcOH (28 pl, 0,487 mmol) y Pd(PPh3)4 (141 mg, 0,122 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 h. La mezcla se concentró y purificó sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 70/30) para proporcionar el intermedio N-(6-h¡drox¡-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.1]oct-3-en-3-¡l)-3-carbonitr¡lep¡razol. En atmósfera inerte, este intermedio N-(6-h¡drox¡-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.1]oct-3-en-3-¡l)-3-carbon¡tr¡lp¡razol se diluyó en piridina anhidra (2,5 ml). Se añadió complejo de trióxido de azufre y piridina (194 mg, 1,21 mmol) a la mezcla de reacción. La suspensión resultante se protegió de la luz y se agitó durante la noche hasta que se completó la reacción. La mezcla de reacción se concentró, a continuación se disolvió en un mínimo de H2O (y un poco de ACN) y se convirtió después del intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 forma hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O) en el ejemplo (17) (12,5 mg, 0,038 mmol, 15%) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H]+) 312.
EM m/z ([MH]-) 310.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 83,47 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,71 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz, 1H), 4,37 (d, J = 17,4 Hz , 1H), 4,42 (dd, J = 17,4, 1,4 Hz, 1H), 4,62 (dd, J = 5,7, 2,8 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Figure imgf000043_0001
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1 g) (0,26 g, 0,85 mmol) se convirtió por reacción con 3-fluoro-1H-pirazol (110 mg, 1,27 mmol) en el intermedio (18a) (186 mg, 0,70 mmol, 82 %) como un aceite amarillo después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (éter de petróleo/acetona: 100/0 a 0/100).
EM m/z ([M+H]+) 265.
RMN 1H (400 MHz, acetona) 83,27 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,43 (ddd, J = 0,6, 2,6, 10,9 Hz, 1H), 4,17 (dd, J = 17,4, 1,8 Hz, 1H), 4,21-4,30 (m, 2H), 4,36-4,45 (m, 2H), 5,20-5,26 (m, 1H), 5,32-5,39 (m, 1H), 5,95-6,06 (m, 1H), 6,10 (dd, J = 5,8, 2,7 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,91 (t, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 3-(3-fluorop¡razol-1-¡l)-6-h¡drox¡-1,6-d¡azab¡c¡clo [3.2.11oct-3-en-7-ona (18b)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 9 (etapa 2), el intermedio (18a) (190 mg, 0,73 mmol) se convirtió en el intermedio (18b) (56 mg, 0,25 mmol, 34 %) después de la purificación en gel de sílice (DCM /acetona: 100/0 a 0/100).
EM m/z ([M+H]+) 225.
Etapa 3: preparación de [7-oxo-3-(3-fluorop¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de de sodio (Ejemplo 18).
A una solución del intermedio (18b) (56 mg, 0,25 mmol) en piridina anhidra (5,68 ml) en atmósfera inerte se añadió complejo de trióxido de azufre y piridina (193 mg, 3,27 mmol). La suspensión resultante se agitó durante la noche. La mezcla se concentró bajo un flujo de argón. El residuo se disolvió en un mínimo de H2O/ACN (1:1) y se pasó a través de una columna de intercambio iónico cargada con columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se liofilizaron y el residuo se purificó por cromatografía “flash” en gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/MeCN 99/1) para proporcionar el ejemplo (18) (19 mg, 0,06 mmol, 8 %) como un sólido blanco. EM m/z ([MH]-) 303.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 83,43 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 11,3, 2,4 Hz, 1H), 4,26-4,36 (m, 2H) 4,56 (dd, J = 5,7, 2,7 Hz, 1H), 6,11 (dd, J = 5,7, 2,7 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 7,78 (t, J = 2,7 Hz, 1H) ).
Figure imgf000044_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-il)p¡razol-3-carboxam¡da (19a) Usando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1 g) (100 mg, 0,33 mmol) se convirtió por reacción con 1H-pirazol-3-carboxamida (44 mg, 0,39 mmol) en el intermedio (19a) (30 mg, 0,10 mmol, 31 %) como un sólido blanco después de la purificación por recristalización en acetona.
EM m/z ([M+H]+) 290.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 83,25-3,36 (m, 2H), 4,16-4,35 (m, 3H), 4,39 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 5,27(d, J = 10,6, 1H), 5,32-5,42 (m, 1H), 5,92-6,00 (m, 1H), 6,63-6,84 (m, 2H), 7,36 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 8,23 (d , J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 1-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)p¡razol-3-carboxam¡da (19b) A una suspensión desgasificada del intermedio (19a) (26 mg, 0,09 mmol) en DCM anhidro (1 ml) se añadieron PhS¡H3 (22 |jl, 0,18 mmol) y Pd(PPh3)4 (4 mg, 0,0034 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 horas y el sólido se filtró. El sólido se lavó con ¡Pr2O para proporcionar el intermedio puro (19b) (19 mg, 0,076 mmol, 86%).
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 83,23 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,37 (dd, J = 10,8, 2,8 Hz, 1H), 4,05 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 4,18 (dd, J = 17,6, 1,9 Hz, 1H), 4,27 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 6,69-6,86 (m, 2H), 7,36 (s, 1H), 7,63 ( s, 1H), 8,23 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 9,68 (s, 1H).
Etapa 3: preparación de [3-(3-carbamo¡lp¡razol-1-¡l)-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (Ejemplo 19)
A una solución del intermedio (19b) (14 mg, 0,056 mmol) en piridina anhidra (0,4 ml) en atmósfera inerte se añadió complejo de trióxido de azufre y piridina (45 mg, 0,28 mmol). Después de agitar durante 18 horas a temperatura ambiente, la mezcla heterogénea se concentró al vacío. Se añadió THF al residuo y se filtraron los sólidos. El sólido se trituró en acetonitrilo y a continuación el filtrado se concentró al vacío para proporcionar un sólido que se solubilizó en una mezcla de agua y acetonitrilo y se aplicó en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con agua). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron. A continuación, el sólido se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice inverso C18 (agua/acetonitrilo 98/2 a 0/100) para proporcionar el ejemplo (19) (4,1 mg, 0,011 mmol, 20%).
EM m/z ([MH]-) 328
RMN 1H (400 MHz, D2O) 81,89 (s, 1H), 3,45 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,61-3,75 (m, 1H), 4,31-4,49 (m, 2H ), 4,58 (dd, J = 5,7, 2,7 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 2,7 Hz, 1H) ).
Figure imgf000045_0001
A una mezcla agitada de 4-amino-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (512 mg, 2,795 mmol) y éter bis(2-bromoetílico) (778 mg, 3,354 mmol) en DMF (28 ml) se añadió DIPEA (1,46 ml, 8,384 mmol) y la solución resultante se agitó a 90 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con AcOEt, se lavó dos veces con agua y a continuación con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 80/20) para proporcionar el intermedio (20a) (282 mg, 1,113 mmol, 40 %) como un sólido marrón claro.
EM m/z ([M+H]+) 254.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 8 (ppm) 1,55 (s, 9H), 2,93 (dd, J = 5,1, 4,2 Hz, 4H), 3,69 (dd, J = 5,1, 4,2 Hz, 4H), 7,62 (d, J = 0,7 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 0,7 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 4-(N-morfolina)-1H-p¡razol (20b)
A una mezcla agitada del intermedio (20a) (282 mg, 1,113 mmol) en DCM (5,6 ml) se le añadió una solución de HCl 4 M en dioxano (2,78 ml, 11,13 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora El precipitado formado se concentró por evaporación con flujo de aire. El residuo se lavó con DCM, Et2O, acetona y a continuación AcOEt para obtener un sólido marrón claro (113 mg). La sal de clorhidrato de pirazol se repartió entre AcOEt y una solución acuosa saturada de NaHCO3 y se agitó 5 min a temperatura ambiente. A continuación, la capa orgánica se aisló y la acuosa se extrajo tres veces con AcOEt. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron a presión reducida para proporcionar el intermedio (20b) (90 mg, 0,588 mmol, 53 %) como un sólido marrón claro.
EM m/z ([M+H]+) 154.
RMN 1H (400 MHz, CDCh): 8(ppm) 2,91-2,95 (m, 4H), 3,80-3,84 (m, 4H), 7,74 (s, 2H).
Etapa 3: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-[4-(N-morfol¡na)-p¡razol-1-¡l1-1,6-d¡aza-b¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (20c)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a), el intermedio (1g) (171 mg, 0,559 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (20b) (90 mg, 0,587 mmol) en el intermedio (20c) (181 mg , 0,546 mmol, 98 %) como una espuma marrón después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 70/30).
EM m/z ([M+H]+) 332.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8(ppm): 2,88-2,93 (m, 4H), 3,11 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 3,49 (dd, J = 10,7, 2,2 Hz , 1H), 3,78­ 3,82 (m, 4H), 4,06 (dd, J = 5,6, 2,4 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 17,6, 1,8 Hz, 1H), 4,34-4,48 (m, 3H), 5,26-5,30 (m, 1H), 5,31­ 5,38 (m, 1H), 5,93-6,06 (m, 1H), 6,22 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,09 (s, 1H), 7,28 (s, 1H).
Etapa 4: preparación de [7-oxo-3-[4-(N-morfol¡na)-p¡razol-1-¡l)-1,6-d¡aza-b¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio (Ejemplo 20)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 2), el intermedio (20c) (181 mg, 0,546 mmol) se convirtió en el ejemplo (20) (40 mg, 0,102 mmol, 19 % en 3 etapas) como un sólido marrón claro después de la liofilización. EM m/z ([M+H]+) 372.
EM m/z ([MH]-) 370.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8(ppm) 2,98-3,03 (m, 4H), 3,43 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,68 (d, J = 11,4 Hz, 1H ), 3,84-3,89 (m, 4H), 4,34 (s, 2H), 4,57 (dd, J = 5,9, 2,5 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,56 (s, 1H) , 7,65 (s, 1H).
Figure imgf000046_0001
Etapa 1: preparación del intermedio N-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azabic¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)-4-acetam¡dep¡razol (21a) Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1 g) (121 g, 0,395 mmol) se convirtió por reacción con 1H-pirazol-4-acetamida (99 mg, 0,791 mmol) en el intermedio (21a) (50,5 mg, 0,166 mmol, 42 %) como un aceite amarillo después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 40/60).
EM m/z ([M+H1+) 304.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 83,14 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,43 (s, 2H), 3,53 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 4,10 (dd , J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 4,19 (dd, J = 17,6, 1,9 Hz, 1H), 4,37-4,49 (m, 3H), 5,31 (ddd, J = 10,3, 1,5, 1,4 Hz, 1H), 5,37 (ddd, J = 17,2, 1,5, 1,4 Hz, 1H), 5,42 (br s, 1H), 5,57 (br s, 1H), 5,96-6,06 (m, 1H), 6,43 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,62 (s, 1H).
Etapa 2: preparación de [3-(4-acetam¡dep¡razol-1-¡l)-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (Ejemplo 21)
En atmósfera ¡nerte, el ¡ntermed¡o (21a) (50 mg, 0.165 mmol) se diluyó en DCM anh¡dro (1.7 ml). Se añad¡eron sucesivamente AcOH (19 pl, 0,330 mmol) y Pd(PPh3)4 (95 mg. 0,082 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a ta durante 2 h. La mezcla se concentró a pres¡ón reduc¡da. El producto en bruto se trituró con DCM y se f¡ltró para proporc¡onar el ¡ntermed¡o N-(6-h¡drox¡-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)-4-acetam¡dap¡razol. En atmósfera ¡nerte, este ¡ntermed¡o (20 mg, 0,076 mmol) se d¡luyó en p¡r¡d¡na anh¡dra (0,8 ml). Se añad¡ó complejo de tr¡óx¡do de azufre y p¡r¡d¡na (60,5 mg, 0,380 mmol) a la mezcla de reacc¡ón. La suspens¡ón resultante se proteg¡ó de la luz y se ag¡tó durante la noche hasta que se completó la reacc¡ón. La mezcla de reacc¡ón se concentró y a cont¡nuac¡ón se pur¡f¡có por cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce de fase ¡nversa C18 (H2O/ACN: 100/0 a 98/2). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y concentraron. El res¡duo se d¡solv¡ó en un mín¡mo de H2O y se conv¡rt¡ó después del ¡ntercamb¡o ¡ón¡co con columna de forma de sod¡o Dowex (Dowex®50WX8 de forma de h¡drógeno almacenada con una soluc¡ón acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O) en el ejemplo (21) (3 mg, 0,008 mmol, 5 % en 3 etapas) como un sól¡do blanco.
EM m/z ([M+H]+) 344.
EM m/z ([MH]-) 342.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 83,46 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,52 (s, 2H), 3,69 (dd, J = 11,3, 2,7 Hz, 1H), 4,35 ( dd, J = 17,4, 1,1 Hz, 1H), 4,39 (dd, J = 17,4, 1,6 Hz, 1H), 4,58 (dd, J = 5,6, 2,7 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 5,8 Hz, 1H) ), 7,64 (s, 1H), 7,90 (s, 1H).
Figure imgf000047_0001
Ut¡l¡zando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo 1 (etapa 7), el ¡ntermed¡o (1 g) (0,26 g, 0,85 mmol) se conv¡rt¡ó por reacc¡ón con 4-(tr¡fluoromet¡l)-1H-p¡razol (165 mg, 1,19 mmol) en el ¡ntermed¡o (22a) (0,181 g, 0,58 mmol, 68 %) como un sólido blanco después de la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (Heptano/AcOEt 100/0 a 0/100).
EM m/z ([M+H]+) 315.
RMN 1H (400 MHz, acetona) 53,62 (dd, J = 11,0, 0,7 Hz, 1H), 3,46 (ddd, J = 10,9, 2,8, 1,0 Hz, 1H), 4,28 (dd, J = 17,5, 1,9 Hz, 1H), 4,31-4,43 (m, 4H), 5,22-5,26 (m, 1H), 5,34-5,39 (m, 1H), 5,96-6,06 (m, 1H), 6,83-6,86 (m, 1H) ), 7,95 (s, 1H), 8,56 (s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 6-hidroxi-3-[4-(trifluorometil)nirazol-1-il1-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-7-ona (22b)
Bajo atmósfera inerte, a una solución del intermedio (22a) (119 mg, 0,38 mmol) en DCM anhidro (3,8 ml) se le añadieron sucesivamente AcOH (43 pl, 0,76 mmol), Pph3 (99 mg, 0,38 mmol) y Pd(PPH3)4 (66 mg, 0,06 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. A continuación, la mezcla se concentró bajo un flujo de argón y el residuo se purificó por cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (22b) (105 mg, 0,38 mmol).
EM m/z ([M+H]+) 275.
Etapa 3: preparación de [7-oxo-3-[4-(trifluorometil)nirazol-1-il1-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-il1sulfato de sodio (Ejemplo 22 )
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 9), el intermedio (22b) (100 mg, 0,36 mmol) se convirtió en el ejemplo (22) (0,181 g, 0,58 mmol, 78 %) como un sólido blanco después de pasar por la columna de intercambio iónico y purificación sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H 2 O/MeCN 99/1).
EM m/z ([M+H1+) 355.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 53,44 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 4,39 (dd, J = 1,2, 17,5 Hz, 1H), 4,58 (dd, J = 5,7, 2,7 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,96 (s, 1H), 8,40 (s, 1H).
Ejemplo 23: síntesis de (7-oxo-3-(3-carboxam¡da-5-met¡l-p¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l) sulfato de sodio
Figure imgf000048_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 6-aliloxi-3-(3-carboxamida-5-metil-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-7-ona (23a)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1 g) (0,25 g, 0,817 mmol) se convirtió por reacción con 5-metil-1H-pirazol-3-carboxamida (123 mg, 0,98 mmol) en el intermedio (23a) (95,7 mg, 0,315 mmol, 39 %) como un sólido beige después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 50/50) y a continuación trituración en acetona.
EM m/z ([M+H1+) 304, ([2M+H1+) 607.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 5(ppm) 2,33 (s, 3H), 3,28-3,36 (m, 2H), 4,01 (dd, 17,6, 2,0 Hz, 1H), 4,19 ( d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,31 (dd, J = 5,6, 2,3 Hz, 1H), 4,38-4,40 (m, 2H), 5,24-5,39 (m, 2H), 5,91-6,01 (m, 1H) , 6,46 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 6,52 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,56 (s, 1H).
Etapa 2: preparación de (7-oxo-3-(3-carboxam¡da-5-met¡l-p¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l) sulfato de sodio (Ejemplo 23)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 2), el intermedio (23a) (76 mg, 0,251 mmol) se convirtió en el ejemplo (23) (58,4 mg, 0,160 mmol, 52 %) como un sólido blanco después de la liofilización.
EM m/z ([MH]-) 342, ([2M - H]-) 685.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 2,32 (s, 3H), 3,51 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,69 (dd, J = 11,5, 2,8 Hz 1H), 4,12-4,29 (m, 2H), 4,61 (dd, J = 5,5, 2,6 Hz, 1H), 6,50-6,59 (m, 2H).
Ejemplo 24: síntesis [7-oxo-3-[4-carboxam¡da.N-(2-amon¡ometox¡)-p¡razol-1-¡l1-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato
Figure imgf000049_0001
Etapa 1: preparac¡ón del ¡ntermed¡o [4-carboxam¡da, N-(2-am¡noetox¡)-p¡razol1 carbamato de terc-but¡lo (24a) En atmósfera ¡nerte se diluyó ác¡do NH-p¡razol-4-carboxíl¡co (207 mg, 1,87 mmol) en DMF anh¡dro (19 ml). Se añad¡eron suces¡vamente HOBtH2O (367 mg, 2,40 mmol) y EDCHCl (460 mg, 2,40 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 10 m¡n. Se añad¡eron N-(2-am¡nox¡et¡l)carbamato de terc-but¡lo (325 mg, 1,87 mmol) y DIPEA (420 pl, 2,40 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a ta durante 16 h. La mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío y se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 20/80) para dar el ¡ntermed¡o (24a) (198 mg, 0,72 mmol, 39 %) como un sól¡do blanco.
EM m/z ([M+H]+) 271.
EM m/z ([MH]-) 269.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 81,42 (s, 9H), 3,38-3,41 (m, 2H), 3,92-3,95 (m, 2H), 5,56 (br s, 1H), 8,02 (s , 2H), 10,52 (s, 1H).
Etapa 2: preparac¡ón del ¡ntermed¡o [1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)1p¡razol-4-carboxam¡da. N-(2-am¡noetox¡)1ox¡butanoato de terc-but¡lo (24b)
Ut¡l¡zando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo 1 (etapa 7), el ¡ntermed¡o (1g) (112 mg, 0,37 mmol) se conv¡rt¡ó por reacc¡ón con el ¡ntermed¡o (24a) (198 mg, 0,73 mmol) en el ¡ntermed¡o (24b) (83 mg , 0,18 mmol, 49 %) como un ace¡te amar¡llo después de la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 30/70). EM m/z ([M+H]+) 449.
EM m/z ([MH]-) 447.
RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 51,46 (s, 9H), 3,15 (d, 11,2 Hz, 1H), 3,43 (dd, 5,7, 5,7 Hz, 2H), 3,54 (dd, J = 11,2,2,0 Hz, 1H), 3,93 (dd, J = 4,9, 4,9 Hz, 2H), 4,13 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 4,18 (dd, J = 17,8, 1,9 Hz, 1H), 4,37 -4,49 (m, 3H), 5,21 (br s, 1H), 5,31 (dd, J = 10,2, 1,5 Hz, 1H), 5,37 (ddt, J = 17,2, 1,5, 1,4 Hz, 1H), 5,96-6,06 ( m, 1H), 6,59 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 10,05 (s, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio f1-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)1p¡razol-4-carboxam¡da. N-(2-aminoetox¡)1ox¡butanoato de terc-butilo (24c)
En atmósfera inerte, se añadieron PhSiH3 (45 pl, 0,368 mmol) y Pd(PPh3)4(11 mg, 0,009 mmol) a una solución del intermedio (24b) (83 mg, 0,181 mmol) en DCM ( 1,8 ml). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 h. La mezcla se concentró y a continuación se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 20/80). Las fracciones que contenían el intermedio esperado se combinaron y concentraron para dar el intermedio (24c) (30 mg, 0,074 mmol, 41%).
EM m/z ([M+H]+) 409.
RMN 1H (400 MHz, CDCh) 51,41 (s, 9H), 3,09 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,27-3,41 (m, 2H), 3,46 (d, J = 8,8 Hz) , 1H), 3,86­ 4,00 (m, 2H), 4,03-4,10 (m, 2H), 4,03-4,34 (m, 1H), 5,79 (br s, 1H), 6,60 (d, J = 5,1 Hz, 1H) , 7,89 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 10,69 (s, 1H).
Etapa 4: preparación de [7-oxo-3-[4-carboxam¡da.N-(2-amon¡ometox¡)-p¡razol-1-¡l1-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio y 2.2.2-tr¡fluoroacetato (Ejemplo 24)
El intermedio (24c) (30 mg, 0,074 mmol) se diluyó en agua/tBuOH (1:1) (0,74 ml). Se añadieron sucesivamente complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (12 mg, 0,089 mmol) y TEA (3 pl, 0,043 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El compuesto en bruto se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para dar el sulfato intermedio correspondiente como un aceite incoloro. Este intermedio (10 mg, 0,020 mmol) se disolvió en una mezcla de DCM/TFA (5:1) (0,4 ml) a 0 °C y la mezcla se agitó a 0 °C durante 30 min. El residuo se trituró en Et2O y DCM. El sólido se diluyó en H2O y se liofilizó para dar el ejemplo (24) (3,4 mg, 0,007 mmol, 9 % en 2 etapas).
EM m/z ([M+H]+) 389.
EM m/z ([MH]-) 387.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 53,31-3,35 (m, 2H), 3,45 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 3,69 (dd, J = 11,5, 2,1 Hz, 1H) 4,22-4,26 (m, 2H), 4,34 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,40 (dd, J = 17,6, 1,8 Hz, 1H), 4,60 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 8,37 (s, 1H).
RMN 19F (367 MHz, D2O) 5-75,56 (s, 3F).
Ejemplo 25: síntesis de [7-oxo-3-[3-(t¡azol-2-¡lcarbamoil)p¡razol-1-¡l]-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.1]oct-3-en-6-¡l] sulfato de sodio
Etapa 2
Figure imgf000051_0001
25c Ejem plo 25
Etapa 1: preparación del intermedio N-tiazol-2-il-1H-pirazol-3-carboxamida (25a)
En atmósfera inerte, se diluyeron ácido 1H-pirazol-3-carboxílico (245 mg, 2,19 mmol) y DMAP (668 mg, 5,46 mmol) en DMF anhidro (10 ml). Se añadió en porciones EDCHCl (1,05 g, 5,46 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 min. Se añadió gota a gota una mezcla de 2-aminotiazol (219 mg, 2,19 mmol) en DMF (5 ml). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró y se trituró con DCM para dar el intermedio (25a) (168 mg, 0,865 mmol, 39 %) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H]+)195.
EM m/z ([MH]-)193.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 86,98 (br s, 1H), 7,26 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 7,91 ( br s, 1H), 12,02 (br s, 1H), 13,58 (br s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio N-(6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-3-il)-3-(N-tiazol-2-ilcarboxamida)pirazol (25b)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1g) (123 mg, 0,402 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (25a) (156 mg, 0,804 mmol) en el intermedio (25b) (71 mg, 0,191 mmol, 48 %) como un sólido blanco después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100).
EM m/z ([M+H]+) 373.
EM m/z ([MH]-) 371.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 83,18 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,58 (ddd, J = 11,0, 2,9, 1,1 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 5,5, 2,6 Hz, 1H), 4,23 (dd, J = 17,6, 1,9 Hz, 1H), 4,39-4,51 (m, 3H), 5,33 (dd, J = 10,3, 1,6 Hz, 1H), 5,39 (ddd, J = 17,6 , 1,6, 1,4 Hz, 1H), 5,98-6,08 (m, 1H), 6,63 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 2,7 Hz , 1H), 7,50 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 10,04 (br s, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio N-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)-3-(N-t¡azol-2-¡l carboxamida)pirazol (25c)
En atmósfera inerte, el intermedio (25b) (71 mg, 0,191 mmol) se diluyó en DCM anhidro (2,3 ml). Se añadieron sucesivamente AcOH (27 pl, 0,466 mmol), Pd(PPh3)4 (40 mg, 0,035 mmol) y PPh3 (61 mg, 0,233 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se concentró a presión reducida y a continuación se purificó por cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 30/70). Las fracciones que contenían el intermedio esperado se combinaron y concentraron para dar el intermedio (25c) (51 mg, 0,153 mmol, 80 %) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H]+) 333.
EM m/z ([MH]-) 331.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 83,24 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,38 (dd, J = 11,0, 2,6 Hz, 1H), 4,07 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 4,22 (dd, J = 17,7, 2,0 Hz, 1H), 4,37 (dd, J = 17,7, 1,0 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 8,37 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 9,70 (s, 1H) , 12,36 (s, 1H).
Etapa 4: preparación de [7-oxo-3-[3-(t¡azol-2-¡lcarbamo¡l)p¡razol-1-¡l1-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio (Ejemplo 25)
El intermedio (25c) (45,5 mg, 0,137 mmol) se diluyó en agua/tBuOH (1:1) (1,4 ml). Se añadieron sucesivamente complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (23 mg, 0,164 mmol) y TEA (5 pl, 0,034 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El compuesto en bruto se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 100/0 a 80/20). Las fracciones que contenían el intermedio esperado se combinaron y concentraron para dar un sólido blanco. Este sólido se disolvió en un mínimo de H2O y se convirtió después del intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex®50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H 2O) al ejemplo (25) (25 mg, 0,056 mmol, 41 %) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H]+) 413.
EM m/z ([MH]-)411.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 83,44 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,71 (dd, J = 11,4, 2,6 Hz, 1H), 4,36 (dd, J = 17,6, 1,6 Hz, 1H), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,60 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Ejemplo 26: síntesis de (7-oxo-3-(3-carboxam¡da-4-fluoro-p¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l) sulfato de sodio
Figure imgf000052_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 6-aliloxi-3-(3-carboxamida-4-fluoro-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-7-ona (26a)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1 g) (220 mg, 0,719 mmol) se convirtió por reacción con 3-carboxamida-4-fluoro-1H-pirazol (111 mg, 0,862 mmol) en el intermedio (26a) (63 mg, 0,206 mmol, 29 %) como un sólido blanco después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 50/50) y a continuación trituración en acetona.
EM m/z ([M+H1+) 308, ([2M+H1+) 615.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-d 6): 5 (ppm) 3,24-3,35 (m, 2H), 4,17-4,40 (m, 5H), 5,25-5,40 (m, 2H), 5,91-6,01 (m, 1H), 6,71-6,73 (m, 1H), 7,49 (br s, 1H), 7,66 (br s, 1H), 8,50 (d, J = 4,4 Hz, 1H).
19F-RMN (282 MHz, DMSO-d6): 5 (ppm)-169,53 (d, J = 4,4 Hz, 1F).
Etapa 2: preparación de (7-oxo-3-(3-carboxam¡da-4-fluoro-p¡razol-1-¡l)-1.6-d¡azabic¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l) sulfato de sodio (Ejemplo 26)
Usando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo 2 (etapa 2), el ¡ntermed¡o (26a) (63 mg, 0,203 mmol) se conv¡rt¡ó en el ejemplo (26) (20,6 mg, 0,056 mmol, 27 %) como un sólido blanco después de la l¡of¡l¡zac¡ón.
EM m/z ([M+H]+) 348.
EM m/z ([MH]-) 346, ([2M-H]-) 693.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 5 (ppm) 3,42 (d, 11,3 Hz, 1H), 3,66-3,71 (m, 1H), 4,35-4,39 (m, 2H), 4,59 ( dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 6,66-6,68 (m, 1H), 7,99 (d, J = 4,4 Hz, 1H). RMN 19F (282 MHz, D2O): 5 (ppm) -168,25 (d, J = 4,6 Hz, 1F).
Figure imgf000053_0001
Etapa 1: preparac¡ón del ¡ntermed¡o N-metox¡-1H-p¡razol-3-carboxam¡da (27a)
En atmósfera ¡nerte, se d¡luyó ác¡do 1H-p¡razol-3-carboxíl¡co (250 mg, 2,23 mmol) en DMF anh¡dro (7,4 ml) y se añad¡eron sucesivamente H O Bt-^O (444 mg, 2,90 mmol) y EDC HCl (556 mg, 2,90 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 10 m¡n. Se añad¡eron clorh¡drato de metox¡am¡na (335 mg, 4,01 mmol) y DIPEA (1,17 ml, 6,69 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a ta durante 16 h. La mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío y se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/metanol: 100/0 a 90/10) y a cont¡nuac¡ón med¡ante fase ¡nversa C-18 (H2O/ACN: 98/2 a 50/50) para dar el ¡ntermed¡o (27a) (297,5 mg, 2,11 mmol, 94%) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H]+) 142.
EM m/z ([MH]-) 140.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-d 6): 5 (ppm) 3,65 (s, 3H), 6,63 (t, 2,2 Hz, 1H), 7,82 (dd, J = 2,4, 1,4 Hz, 1H) , 11,49 (s, 1H), 13,27 (s, 1H).
Etapa 2: preparac¡ón del ¡ntermed¡o 6-al¡lox¡-3-(3-(metox¡carbamo¡l)-p¡razol-1-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona y 6-al¡lox¡- 3-(5-(metox¡carbamo¡l)-p¡razol-1-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (27b)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1g) (250 mg, 0,817 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (27a) (127 mg, 0,898 mmol) en una mezcla inseparable de regioisómeros (27b) (58 mg, 0,181 mmol, 22 %, relación de regioisómeros: 55/45) como una goma amarilla después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100).
EM m/z ([M+H]+) 320, ([2M+H]+) 639.
EM m/z ([MH]-) 318.
RMN 1H (300 MHz, CDCh): 8 (ppm) 3,13 (d, J = 11,0 Hz, 0,45 H), 3,28 (d, J = 10,8 Hz, 0,55 H), 3,43-3,61 (m, 1H), 3,83 (s, 1,35H), 3,86 (s, 1,65H), 4,02-4,31 (m, 2H), 4,32-4,53 (m, 3H), 5,15-5,46 (m, 2H), 5,79-6,16 ( m, 1H), 6,39 (d, J = 5,5 Hz, 0,55H), 6,52 (d, J = 5,6 Hz, 0,45H), 6,61 (d, J = 1,9 Hz, 0,55H), 6,89 (d, J = 2,6 Hz, 0,45H), 7,50 (d, J = 1,8 Hz, 0,55H), 7,65 (d, J = 2,6 Hz, 0,45H), 9,37 (br s, 0,55H), 9,51 (s, 0,45H).
Etapa 3: preparación de (7-oxo-3-(3-(metox¡carbamo¡l)-p¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l) sulfato de sodio y (7-oxo-3-(5-(metox¡carbamo¡l)-p¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l) sulfato de sodio (Ejemplo 27) Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 2), los intermedios (27b) (58 mg, 0,181 mmol) se convirtieron en el ejemplo (36) como una mezcla de regioisómeros (25,4 mg, 0,067 mmol, 37 %, relación de regioisómeros: 56/44) como un sólido blanco después de la liofilización.
EM m/z ([MH]-) 358, ([2M - H]-) 717.
EM m/z ([M+H-SO3H ]+) 280, ([M+H]+) 360.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,35 (d, J = 8,6 Hz, 0,44 H), 3,38 (d, J = 8,7 Hz, 0,56 H), 3,59 (dt, J = 2,9, 1,6 Hz, 0,56H), 3,62 (dt, J = 2,9, 1,8 Hz, 0,44H), 3,74 (s, 1,68H), 3,76 (s, 1,32H), 4,01-4,21 (m, 1H) , 4,29 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 4,48 (dd, J = 5,5, 2,6 Hz, 0,44H), 4,51 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 0,56H), 6,41 (d, J = 5,3 Hz, 0,44 H), 6,63 (dt, J = 5,6, 1,3 Hz, 0,56 H), 6,67 (d, J = 2,1 Hz, 0,44 H), 6,72 (d, J = 2,7 Hz, 0,56 H), 7,62 (d , J = 2,1 Hz, 0,44 H), 7,88 (d, J = 2,7 Hz, 0,56 H).
Ejemplo 28: síntesis de (7-oxo-3-(3-acet¡lp¡razol-1-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l) sulfato de sodio
Etapa 1
Figure imgf000054_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-(3-acet¡lp¡razol-1-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (28a) Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a), el intermedio (1 g) (450 mg, 1,47 mmol) se convirtió por reacción con 1-(1H-pirazol-3-il)etanona (194 mg, 1,76 mmol) en el intermedio (28a) (336 mg, 1,17 mmol, 79 %) como un aceite después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 50/50).
EM m/z ([M+H]+) 289, ([2M+H]+) 577.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 (ppm) 2,55 (s, 3H), 3,16 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,54-3,58 (m, 1H), 4,11-4,17 ( m, 1H), 4,22 (dd, J = 17,8, 1,9 Hz, 1H), 4,37-4,57 (m, 3H), 5,30-5,41 (m, 2H), 6,02 (dddd, J = 17,1, 10,3, 6,7, 6,1 Hz, 1H), 6,55-6,58 (m, 1H), 6,84 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación de (7-oxo-3-(3-acet¡lp¡razol-1-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l) sulfato de de sodio (Ejemplo 28)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 2), el intermedio (28a) (50 mg, 0,173 mmol) se convirtió en el ejemplo (28) (31,7 mg, 0,090 mmol, 52 %) como un sólido blanco después de la liofilización.
EM m/z ([MH]-) 327, ([2M - H]-) 655.
EM m/z ([M+H-SO3H]+) 249, ([M+H]+) 329.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 2,59 (s, 3H), 3,46 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,67-3,72 (m, 1H), 4,42 ( d, J = 1,5 Hz, 2H), 4,60 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 6,79 (dd, J = 5,8, 1,3 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Figure imgf000055_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-(3-[(Z.E)-N-[2-(terc-butox¡carbon¡lam¡no)etox¡1-C-metil-carbon¡m¡do¡l1-p¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo [3.2.11oct-3-en-7-ona (29a)
En un matraz de 50 ml en atmósfera inerte, se disolvieron el intermedio (28a) (282 mg, 0,978 mmol) y [2-(aminooxi)etil]carbamato de terc-butilo (189,6 mg, 1,076 mmol) en piridina anhidra (9,8 mmol). Se añadió una gota de una mezcla de HCl 12 M/MeOH 1/1 y la mezcla de reacción se agitó durante la noche a ta. La mezcla se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 30/70) para dar el intermedio (29a) (419 mg, 0,938 mmol, 96 %, Z/E: 15/85) como una goma viscosa.
EM m/z ([M+H-Boc]+) 347, ([M+H-tBu]+) 391, ([M+H]+) 447.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 (ppm) 1,49 (s, 9H), 2,26 (s, 3H), 3,19 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,50-3,60 (m, 3H), 4,12-4,27 (m, 4H), 4,39-4,60 (m, 3H), 4,97 (br s, 1H), 5,33-5,45 (m, 2H), 6,07 (dddd, J = 17,0, 10,3, 6,7, 6,0 Hz, 1H), 6,50 (dd, J = 5,5, 1,2 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio de (7-oxo-3-(3-[(Z,E)-N -[2-(terc-butox¡carbon¡lam¡no)etox¡1-C-met¡l-carbon¡m¡do¡l1-p¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo [3.2.1]oct-3-en-6-il)sulfato de sodio (29b)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 2), el intermedio (29a) (441 mg, 0,988 mmol) se convirtió en el intermedio (29b) (129,7 mg, 0,255 mmol, 26 %, relación Z/E: 17/ 83) como un sólido blanco después de la liofilización.
EM m/z ([MH]-) 485.
EM m/z ([M+H-Boc-SO3H]+) 307, ([M+H-Boc]+) 387, ([M+H]+) 487.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 1,33 (s, 9H), 2,21 (s, 3H), 3,30-3,48 (m, 3H), 3,67 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,18-4,22 (m, 2H), 4,36 (br s, 2H), 4,55 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 6,64 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 6,70 (d, 2,7 Hz, 1H), 7,87 (d, 2,7 Hz, 1H). Etapa 3: preparación de hidrogenosulfato de (7-oxo-3-(3-[(Z,E)-N-(2-am¡noetox¡)-C-met¡l-carbon¡m¡do¡l]-p¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡ciclo[3.2.11 oct-3-en-6-ilo) (Ejemplo 29)
Se disolvió el intermedio (29b) (117 mg, 0,230 mmol) en una mezcla 2,5/1 de DCM/TFA (2,8 ml, 0,08 M) a 0 °C en atmósfera inerte. Después de agitar durante 45 min (conversión del material de partida monitorizado por LC/MS), se añadió Et2O frío (3 ml) a 0°C. Después de agitar durante 10 min a 0 °C, el precipitado se filtró (Pall VWR 514-4084, 045 |jm, GH polypro, Nanosep ® MF) y se lavó con Et2O frío. A continuación, el sólido se trituró en ACN para formar el compuesto zwitteriónico. El sólido blanco se filtró y se lavó con ACN. El sólido se disolvió en agua MilliQ® y se liofilizó para proporcionar el ejemplo (29) (58,8 mg, 0,177 mmol, 77 %, relación Z/E: 14/86) como un sólido blanco.
EM m/z ([MH]-) 385, ([2M - H]-) 771.
EM m/z ([M+H-SO3H ]+) 307, ([M+H]+) 387.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 2,17 (s, 3H), 3,30-3,45 (m, 3H), 3,64 (dd, J = 11,5, 2,6 Hz, 1H) 4,26-4,43 (m, 4H), 4,52 (dd, J = 5,8, 2,6 Hz, 1H), 6,56 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,77 (d , J = 2,7 Hz, 1H).
Figure imgf000056_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 5-fluoro-1H-pirazol-3-carboxam¡da (30a)
Se disolvió 5-fluoro-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo (200 mg, 1,26 mmol) en NH37 M en MeOH (3,6 ml) y solución concentrada de hidróxido de amonio (3,6 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El disolvente se evaporó a presión reducida para dar el intermedio (30a) (150 mg, 0,920 mmol, 92 %) como un sólido blanco que se usó para la siguiente etapa sin más purificación.
EM m/z ([M+H]+) 130.
EM m/z ([MH]-) 128.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-da): 8 (ppm) 6,49 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 13,10 (br s , 1H).
RMN 19F (282 MHz, DMSO-d6): 8 (ppm) -131,06 (s, 1F).
Etapa 2: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-(3-carboxam¡da-5-fluoro-p¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (30b)
Usando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo 2 (etapa 1a), el ¡ntermed¡o (1g) (225 mg, 0,735 mmol) se conv¡rt¡ó por reacc¡ón con el ¡ntermed¡o (30a) (123 mg, 0,956 mmol) en el ¡ntermed¡o (30b) (19 mg , 0,061 mmol, 8 %) como un sól¡do be¡ge después de la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 0/100).
EM m/z ([M+H]+) 308, ([2M+H]+) 615.
EM m/z ([MH]-) 306.
RMN 1H (300 MHz, MeOD): 8 (ppm) 3,33 (m, 1H), 3,48 (d, 10,1 Hz, 1H), 4,04-4,53 (m, 5H), 5,25-5,45 (m, 2H ), 6,03 (ddt, J = 16,7, 10,4, 6,3 Hz, 1H), 6,40 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 5,5 Hz, 1H).
RMN 19F (282 MHz, MeOD): 8 (ppm) -128,49 (s, 1F ).
Etapa 3: preparac¡ón de (7-oxo-3-(3-carboxam¡da-5-fluoro-p¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l) sulfato de sod¡o (Ejemplo 30)
Ut¡l¡zando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo 2 (etapa 2), el ¡ntermed¡o (30b) (18 mg, 0,059 mmol) se conv¡rt¡ó en el ejemplo (30) (7,2 mg, 0,019 mmol, 33 %) como un sól¡do blanco después de la l¡of¡l¡zac¡ón.
EM m/z ([M+H]+) 348, ([M+H-SO3H ]+) 268.
EM m/z ([MH]-) 347, ([2M - H]-) 693.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 8 (ppm) 3,20-3,46 (m, 2H), 4,18 (br s, 2H), 4,41 (dd, J = 5,7, 2,5 Hz, 1H ), 6,50 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 6,56-6,65 (m, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,80 (s, 1H). RMN 19F (282 MHz, DMSO-d6): 8 (ppm) -126,94 (s, 1F). Ejemplo 31: síntes¡s de (7-oxo-3-[3-(morfol¡na-4-carbon¡l)n¡razol-1-¡l1-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l) sulfato de sod¡o
Figure imgf000058_0001
Dipirazolo[3,1-a:3',1'-d]pirazina-4,9-diona (preparado según Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2015, 25(15), 3024-3029) (300 mg , 1,59 mmol) y morfolina (293 pl, 3,35 mmol) se disolvieron en THF anhidro (8 ml) y se agitaron a 80 °C durante 1 hora y media. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se evaporó a presión reducida para producir el intermedio (31a) (500 mg, 2,75 mmol, 87 %) como un sólido beige que se usó para la siguiente etapa sin más purificación.
EM m/z ([M+H]+) 182.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 (ppm) 3,49-4,17 (m, 8H), 6,67 (d, 2,3 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 2,3 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 6-aliloxi-3-[3-(morfolina-4-carbonil)nirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-7-ona (31b)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a), el intermedio (1g) (250 mg, 0,817 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (31a) (192 mg, 1,062 mmol) en el intermedio (31b) (271 mg , 0,753 mmol, 92 %) como una goma naranja después de la purificación por cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100).
EM m/z ([M+H]+) 360, ([2M+H]+) 719.
RMN 1H (300 MHz, CDCl3): 8 (ppm) 3,14 (d, 10,8 Hz, 1H), 3,49-3,61 (m, 1H), 3,68-3,80 (m, 6H), 4,02 (t, 4,8 Hz, 2H), 4,08-4,23 (m, 2H), 4,35-4,53 (m, 3H), 5,25-5,44 (m, 2H), 6,02 (dddd, J = 17,1, 10,3, 6,7, 6,1 Hz, 1H) , 6,49 (dt, J = 5,5, 1,2 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 3: preparación de (7-oxo-3-[3-(morfolina-4-carbonil)nirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-il) sulfato de sodio (Ejemplo 31)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 2), el intermedio (31b) (246 mg, 0,683 mmol) se convirtió en el ejemplo (31) (173 mg, 0,409 mmol, 60 %) como un sólido blanco después de la liofilización.
EM m/z ([M+H]+) 400, ([M+H-SO3H ]+) 320.
EM m/z ([MH]-) 398, ([2M - H]-) 797.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,44 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,64-3,86 (m, 9H), 4,29-4,44 (m, 2H), 4,58 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 6,70-6,71 (m, 2H), 7,99 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Figure imgf000059_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 4-(1H-p¡razol-3-carbon¡lamino)p¡per¡d¡na-1-carbox¡lato de terc-butilo (32a) Dipirazolo[3,1-a:3',1'-d]pirazina-4,9-diona (preparado según Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2015, 25(15), 3024-3029) (250 mg , 1,33 mmol) y 4-aminopiperidina-1-carboxilato de terc-butilo (532,2 mg, 2,66 mmol) se disolvieron en THF anhidro (6,6 ml) y se agitaron a 80 °C durante 1 hora y 10 minutos. La mezcla de reacción se evaporó a presión reducida y se purificó sobre una capa de gel de sílice (DCM/acetona: 50/50) para producir el intermedio (32a) (755 mg, 2,56 mmol, 97 %) como un sólido beige.
EM m/z ([M+H-Boc]+) 195, ([M+H-tBu]+) 239, ([M+H]+) 295.
EM m/z ([MH]') 293.
RMN 1H (300 MHz, MeOD): 8 (ppm) 1,46 (s, 9H), 1,47-1,56 (m, 2H), 1,92 (d, 11,4 Hz, 2H), 2,92 (br s, 2H) , 3,88-4,22 (m, 3H), 6,75 (s, 1H), 7,69 (s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-[3-[(1-terc-butox¡carbon¡l-4-p¡per¡d¡l)carbamo¡l1p¡razol-1-¡l1-1,6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3- en-7-ona (32b)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a), el intermedio (1g) (250 mg, 0,817 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (32a) (313 mg, 1,06 mmol) en el intermedio (32b) (289 mg, 0,611 mmol, 75 %) como una goma naranja después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100).
EM m/z ([M+H-tBu]+) 417, ([M+H-Boc]+) 373, ([2M+H]+) 945.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 1,46 (s, 9H), 1,46-1,48 (m, 2H), 1,97 (dd, 12,7, 3,7 Hz, 2H), 2,90 (t, 12,5 Hz, 2H), 3,14 (d, 10,9 Hz, 1H), 3,55 (ddd, 10,8, 2,8, 1,1 Hz, 1H), 3,98-4,21 (m, 5H), 4,36-4,55 (m, 2H), 5,23- 5,47 (m, 2H), 6,01 (dddd, J = 17,1, 10,3, 6,7, 6,1 Hz, 1H), 6,53 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,87 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio (7-oxo-3[3-[(1-terc-butoxicarbonil-4-piperidil)carbamoil1pirazol-1-il1-1,6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3 -en-6-il)sulfato de sodio (32c)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 2), el intermedio (32b) (279 mg, 0,590 mmol) se convirtió en el intermedio (32c) (131,2 mg, 0,245 mmol, 41 %) como un sólido blanco después de la liofilización.
EM m/z ([MH]-) 511.
EM m/z ([M+H-tBu-SO 3 H]+) 377, ([M+H-SO 3 H]+) 457
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 1,34-1,48 (m, 2H), 1,42 (s, 9H), 1,89 (d, J = 12,7 Hz, 2H), 2,90 ( t, J = 12,6 Hz, 2H), 3,42 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,60-3,72 (m, 1H), 3,90-4,10 (m, 3H), 4,37 (br s, 2H), 4,55 ( dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 4: preparación de hidrogenosulfato de (7-oxo-3-[3-(4-piperidilcarbamoil)nirazol-1-il1-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-ilo) (Ejemplo 32)
El intermedio (32c) (40 mg, 0,075 mmol) se disolvió en una mezcla 2,5/1 de DCM/TFA (0,93 ml, 0,08 M) a 0 °C en atmósfera inerte. Después de agitar durante 45 min (conversión del material de partida monitorizado por LC/MS), se añadió Et2O frío (1 ml) a 0°C. Después de agitar durante 10 min a 0 °C, el precipitado se filtró (Pall VWR 514-4084, 045 |jm, GH polypro, Nanosep ® MF) y se lavó con Et2O frío. A continuación, el sólido se trituró en ACN para formar el compuesto zwitteriónico. El sólido blanco se filtró y se lavó con CN. El sólido se purificó mediante fase inversa C-18 (H2O/ACN: 98/2 a 30/70) para proporcionar después de la liofilización el ejemplo (32) (18 mg, 0,044 mmol, 59 %) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H1+)413, ([M+H-SO3H 1+) 333.
EM m/z ([MH1-) 411.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 1,71-1,95 (m, 2H ), 2,09-2,28 (m, 2H), 3,13 (td, 12,9, 3,1 Hz, 2H), 3,40 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,44-3,56 (m, 2H), 3,60-3,73 (dd, J = 11,6, 3,7 Hz, 1H), 4,09 (m, 1H), 4,34 (d, J = 1,4 Hz, 2H), 4,55 (dd, J = 5,7, 2,5 Hz, 1H), 6,63-6,71 (d, J = 5,6 Hz 1H), 6,76 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Ejemplo 33: síntesis de {[3-(N-acetamido)nirazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-il} sulfato de trietilamonio
Figure imgf000061_0001
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1 g) (200 mg, 0,653 mmol) se convirtió por reacción con N-(1H-pirazol-3-il)acetamida (164 mg, 1,31 mmol) en el intermedio (33a) (72 mg, 0,237 mmol, 36 %) como un aceite de naranja después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 50/50).
EM m/z ([M+H]+) 304.
EM m/z ([MH]-) 302.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 82,10 (s, 3H), 3,10 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,47 (dd, J = 10,8, 2,2 Hz, 1H), 4,06 (dd , J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 4,13 (dd, J = 17,7, 1,9 Hz, 1H), 4,34-4,44 (m, 3H), 5,27 (dd, J = 10,4, 1,1 Hz, 1H), 5,33 ( ddd, J = 17,2, 1,4, 1,1 Hz, 1H), 5,92-6,02 (m, 1H), 6,28 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,49 (d , J = 2,6 Hz, 1H), 8,90 (s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio N-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-il)-3-(N-acetam¡do)p¡razol (33b)
En atmósfera inerte, el intermedio (33a) (72 mg, 0,237 mmol) se diluyó en DCM anhidro (2,4 ml). Se añadieron sucesivamente AcOH (29 pl, 0,477 mmol), Pd(PPh3)4 (41 mg, 0,036 mmol) y PPh3 (63 mg, 0,238 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 h. La mezcla se filtró para proporcionar el intermedio (33b) (50 mg, 0,190 mmol, 80 %) como un sólido blanquecino.
EM m/z ([M+H]+) 264.
EM m/z ([MH]-) 262.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 82,00 (s, 3H), 3,20 (d, 10,7 Hz, 1H), 3,34 (dd, 10,7, 2,9 Hz, 1H), 4,00 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 4,10 (dd, J = 17,5, 1,1 Hz, 1H), 4,15 (dd, J = 17,5, 1,6 Hz, 1H), 6,51 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,67 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 9,64 (br s, 1H), 10,63 (s, 1H).
Etapa 3: preparación de {[3-(N-acetamido)pirazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-il} sulfato de trietilamonio (Ejemplo 33)
El intermedio (33b) (46 mg, 0,175 mmol) se diluyó en agua/tBuOH (1:1) (1,7 ml). Se añadieron sucesivamente complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (29 mg, 0,208 mmol) y TEA (6 pl, 0,043 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El compuesto en bruto se concentró y se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 100/0 a 90/10) para dar el ejemplo (33) (24 mg, 0,054 mmol, 31 %) como un sólido blanquecino.
EM m/z ([M+H]+) 344.
EM m/z ([MH]-) 342.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 81,24 (t, 7,3 Hz, 9H), 2,14 (s, 3H), 3,16 (q, 7,3 Hz, 6H), 3,40 (d, J = 11,2 Hz) , 1H), 3,65 (dd, J = 11,2, 2,5 Hz, 1H), 4,31 (m, 2H), 4,53 (dd, J = 5,7, 2,7 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 5,7 Hz, 1H) , 6,55 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 2,8 Hz, 1H).
Ejemplo 34: síntesis de {7-oxo-3-[3-(tiazol-2-carbonilamino)nirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-il} sulfato de sodio
Etapa 1
Figure imgf000062_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-(3-n¡trop¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (34a) Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1 g) (2,00 g, 6,53 mmol) se convirtió por reacción con 3-nitro-1H-pirazol (961 mg, 8,49 mmol) en el intermedio (34a) (1,07 g, 3,61 mmol, 55 %) como un sólido blanco después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 70/30) y a continuación trituración en Et2O.
EM m/z ([M+H]+) 292.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 83,15 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,57 (dd, J = 11,0, 2,8 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 5,5, 2,5 Hz) , 1H), 4,25 (dd, J = 17,7, 1,9 Hz, 1H), 4,38-4,49 (m, 3H), 5,33 (ddd, J = 10,3, 1,7, 0,9 Hz, 1H), 5,38 (ddd, J = 17,2 , 1,7, 1,4 Hz, 1H), 5,96-6,06 (m, 1H), 6,72 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Etapa 2: Preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-(3-am¡nop¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (34b) En atmósfera inerte, el intermedio (34a) (1,07 g, 3,61 mmol) y AcOH (2,1 ml, 36,84 mmol) se diluyeron en DCM (37 ml). La solución se enfrió a 0°C y a continuación se añadió polvo de Zn (2,4 g, 36,84 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1,5 h. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró. El residuo se trituró con Et2O para dar el intermedio (34b) (958 mg, 2,75 mmol, 76%).
EM m/z ([M+H]+) 262.
RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 83,16 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 3,50 (dd, J = 10,7, 2,6 Hz, 1H), 4,04-4,06 (m, 1H), 4,08 (dd, J = 12,8, 2,2 Hz, 1H), 4,30 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 4,36-4,48 (m, 2H), 5,30 (dd, J = 10,3, 1,6, 1,3 Hz, 1H), 5,36 (ddd, J = 17,2, 1,6, 1,4 Hz, 1H), 5,74 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,96-6,06 (m, 1H), 6,30 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 2,6 Hz, 1H). Etapa 3: Preparación del intermedio N-[N-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-il)p¡razol-3-¡l1t¡azol-2-carboxamida (34c)
En atmósfera inerte, el intermedio (34b) (500 mg, 1,91 mmol) se diluyó en DMA (19 ml). Se añadió cloruro de 1,3-tiazol-2-carbonilo (565 mg, 3,83 mmol). La mezcla se agitó a ta durante 2 h. El precipitado formado se filtró y se lavó con Et2O para dar el intermedio (34c) (386 mg, 1,01 mmol, 53%) como un sólido blanquecino.
EM m/z ([M+H]+) 373.
EM m/z ([MH]-) 371.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 83,27 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,33 (dd, J = 10,9, 2,4 Hz, 1H), 4,19 (dd, J = 17,4, 1,2 Hz, 1H), 4,24 (dd, J = 17,4, 1,5 Hz, 1H), 4,29 (dd, J = 5,7, 2,4 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 5,26 (ddd, J = 10,4, 1,6, 1,4 Hz, 1H), 5,37 (ddd, J = 17,3, 1,6, 1,6 Hz, 1H), 5,91-6,01 (m, 1H), 6,57 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 10,99 (br s, 1H).
Etapa 4: Preparación del intermedio N-[N-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)p¡razol-3-¡l1t¡azol -2-carbonil carbamato de terc-butilo (34d)
En atmósfera inerte, el intermedio (34c) (226 mg, 0,61 mmol) se diluyó en DCM (6 ml). Se añadieron BoC2O (154 pl, 0,67 mmol), TEA (93 pl, 0,67 mmol) y DMAP (7 mg, 0,06 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. El compuesto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 70/30) para dar el intermedio (34d) (295 mg, 0,54 mmol, 88 %) como un aceite incoloro. EM m/z ([M+H]+) 473.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 81,39 (s, 9H), 3,10 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,50 (dd, J = 10,8, 2,8 Hz, 1H), 4,07 (dd , J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 4,14 (dd, J = 17,6, 1,8 Hz, 1H), 4,32 (dd, J = 17,6, 1,0 Hz, 1H), 4,38-4,48 (m, 2H), 5,30 ( ddd, J = 10,3, 1,6, 1,4 Hz, 1H), 5,36 (dd, J = 17,2, 1,4 Hz, 1H), 5,96-6,06 (m, 1H), 6,41 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,42 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 3,1 Hz, 1H).
Etapa 5: Preparación de {7-oxo-3-[3-(t¡azol-2-carbon¡lam¡no)n¡razol-1-¡l1-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l> sulfato de sodio (Ejemplo 34)
En atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (34d) (290 mg, 0,61 mmol) en DCM anhidro (6 ml). Se añadieron sucesivamente AcOH (70 pl, 1,23 mmol) y Pd(PPH3)4 (354 mg, 0,31 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 h. Después de 2 h, se añadieron a la mezcla de reacción, piridina anhidra (6 ml) y complejo de trióxido de azufre y piridina (488 mg, 3,06 mmol). La suspensión resultante se protegió de la luz y se agitó durante la noche hasta que se completó la reacción. La mezcla de reacción se concentró y a continuación se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y concentraron. El intermedio obtenido (195 mg, 0,24 mmol) se disolvió en un mínimo de H2O/acetona (1:1) y se convirtió después del intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y liofilizaron. El sólido obtenido se trituró en agua (5 ml) y se agitó a 0°C durante 8 h. La mezcla se filtró y se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 100/0 a 60/40). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y liofilizaron para dar el ejemplo (34) (5 mg, 0,11 mmol, 18 % en 3 etapas) como un sólido amarillo.
EM m/z ([M+H]+) 413.
EM m/z ([MH]-)411.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-d 6 ) 83,27 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,39 (dd, J = 11,0, 2,3 Hz, 1H), 4,19-4,23 (m, 2H) , 4,37 (dd, J = 5,7, 2,4 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 3,1 Hz, 1H) , 8,14 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 11,02 (br s, 1H).
Ejemplo 35: síntesis de [7-oxo-3-[3-(met¡leno-2-amon¡ot¡azol)p¡razol-1-¡l1-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio y 2.2.2-tr¡fluoroacetato
Figure imgf000064_0001
Dipirazolo[3,1-a:3',1'-d]pirazina-4,9-diona (preparado según Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2015, 25(15), 3024-3029) (500 mg, 2,66 mmol) y 2-aminotiazol (532 mg, 5,32 mmol) se diluyeron en THF (5 ml). La mezcla de reacción se calentó a 60 °C durante 2 h. Después de enfriar hasta ta, la mezcla se filtró, se lavó con ACN y Et2O para dar el intermedio (35a) (843 mg, 4,34 mmol, 82 %) como un sólido blanquecino.
EM m/z ([M+H]+) 195.
EM m/z ([MH]-) 193.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-da) 87,00 (s, 1H), 7,26 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 7,88 (s , 1H), 12.04 (br s, 1H), 13.57 (br s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio N-(1H-pirazol-3-ilmetil)tiazol-2-amina (35b)
En atmósfera inerte, a una solución del intermedio (35a) (750 mg, 3,86 mmol) en THF (8 ml) a 0 °C, se le añadió una solución de LiAlH4 en THF (2 M, 3,9 ml, 7,72 mmol) gota a gota. La mezcla se calentó a reflujo durante 4 h. Después de enfriar hasta ta, la mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y a continuación se inactivó con agua y se filtró. El filtrado se extrajo con EtOAc (5x50 ml). La capa orgánica se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró para dar el intermedio (35b) (342 mg, 1,89 mmol, 49%) como un sólido blanquecino.
EM m/z ([M+H]+) 181.
EM m/z ([MH]-) 179.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 84,40 (m, 2H), 6,18 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 7,02 (d , J = 3,7 Hz, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 12,62 (br s, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio 6-aliloxi-3-[3-[(tiazol-2-ilamino)metil]pirazol-1-in-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-7-ona (35c)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1 g) (420 mg, 1,37 mmol) se convirtió por reacción con N-(1H-pirazol-3-ilmetil)tiazol-2-amina (35b) (322 mg, 1,78 mmol) en el intermedio (35c) (194 mg, 0,49 mmol, 35 %) como un aceite naranja después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100).
EM m/z ([M+H]+) 359.
EM m/z ([MH]') 357.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 83,14 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,53 (dd, J = 10,8, 1,9 Hz, 1H), 4,10 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz) , 1H), 4,17 (dd, J = 17,6, 1,9 Hz, 1H), 4,37-4,54 (m, 3H), 4,50 (m, 2H), 5,31 (m, 1H), 3,37 (ddd, J = 17,2, 1,6 , 1,4 Hz, 1H), 5,97-6,07 (m, 1H), 6,35 (d, J = 2,5 Hz, 1H) 6,46 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,54 (s, 1H), 7,14 (s, 1H), 7,55 (d, J = 2,5 Hz, 1H). Etapa 4: preparación del intermedio {[1-(6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-3-il)pirazol-3-ilmetilenamino}-N -tiazol-2-il-carbamato de terc-butilo (35d)
En atmósfera inerte, el intermedio (35c) (166 mg, 0,46 mmol) se diluyó en DCM (5 ml). Se añadieron Boc2O (117 pl, 0,51 mmol), TEA (71 pl, 0,51 mmol) y DMAP (6 mg, 0,05 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. El compuesto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 20/80) para dar el intermedio (35d) (137 mg, 0,29 mmol, 62 %) como un aceite amarillo. EM m/z ([M+H]+) 459.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 81,53 (s, 9H), 3,11 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 3,51 (dd, J = 10,7, 1,9 Hz, 1H), 4,06 (dd , J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 4,15 (dd, J = 17,6, 1,9 Hz, 1H), 4,36-4,48 (m, 3H), 5,30 (dd, J = 10,3, 1,3 Hz, 1H), 5,33-5,35 (m, 2H), 5,38 (ddd, J = 17,2, 1,6, 1,4 Hz, 1H), 6,01 (dddd, J = 17,6, 10,3, 6,7, 6,0 Hz, 1H), 6,24 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 6,37 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 2,6 Hz, 1H) .
Etapa 5: preparación del intermedio {3-[terc-butoxicarbonil-N-(tiazol-2-il)-3-aminometilpirazol-1-in-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct- 3-en-6-il} sulfato de sodio (35e)
En atmósfera inerte, el intermedio (35d) (127 mg, 0,28 mmol) se diluyó en DCM anhidro (2,8 ml). Se añadieron sucesivamente AcOH (32 pl, 0,55 mmol) y Pd(PP^)4 (160 mg, 0,14 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 h. A continuación se añadieron a la mezcla de reacción, piridina anhidra (2,8 ml) y complejo de trióxido de azufre y piridina (220 mg, 1,38 mmol). La suspensión resultante se protegió de la luz y se agitó durante la noche hasta que se completó la reacción. La mezcla de reacción se concentró y a continuación se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y concentraron. El residuo se disolvió en un mínimo de H2O/ACN (1:1) y se convirtió después del intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex ® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O) para dar el intermedio (35e) (68 mg, 0,13 mmol, 47 %) como un sólido amarillo.
EM m/z ([M+H]+) 499.
EM m/z ([MH]-) 497.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 81,48 (s, 9H), 3,24 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,35 (dd, J = 10,9, 2,5 Hz, 1H), 4,12 -4,16 (m, 2H), 4,32 (dd, J = 5,7, 2,5 Hz, 1H), 5,23 (s, 2H), 6,20 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 6: preparación de [7-oxo-3-[3-(met¡len-2-amon¡ot¡azol)pirazol-1-¡l1-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct--en-6-il1 sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato (Ejemplo 35)
El intermedio (35e) (57 mg, 0,11 mmol) se disolvió en una mezcla de DCM/TFA (3:2) (2,2 ml) y se agitó a 0 °C. Después de 48 horas a 0°C, la mezcla se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 100/0 a 70/30). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron y liofilizaron para dar el ejemplo (35) (1,7 mg, 0,003 mmol, 3 %) como un sólido de color rosa claro.
EM m/z ([M+H]+) 399.
EM m/z ([MH]-) 397.
RMN 1H (300 MHz, D2O) 83,44 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 11,4, 2,1 Hz, 1H), 4,34-4,37 (m, 2H) 4,49-4,51 (m, 2H), 4,56 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 6,45 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,58 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 6,68 (d , J = 3,8 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 7,38 (br s, 1H), 7,84 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,45 (br s, 1H).
RMN 19F (367 MHz, D2O) 8 -75,55 (s, 3F).
Ejemplo 37: síntesis de [7-oxo-3-[3-(oxazol-2-¡lcarbamo¡l)p¡razol-1-¡l1-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio
Figure imgf000066_0001
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1 g) (500 mg, 1,63 mmol) se convirtió por reacción con 1 H-pirazol-3-carboxilato de terc-butilo (550 mg, 3,27 mmol) en el intermedio (37a) (300 mg, 0,78 mmol, 48 %) como un aceite amarillo después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 50/50).
EM m/z ([M+H]+) 347.
EM m/z ([MH]-) 345.
RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 81,58 (s, 9H), 3,13 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,53 (dd, J = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 4,11 (dd , J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 4,27 (dd, J = 17,7, 1,8 Hz, 1H), 4,37-4,49 (m, 3H), 5,31 (dt, J = 10,4, 1,6 Hz, 1H), 5,37 ( ddd, J = 17,2, 1,6, 1,4 Hz, 1H), 5,96-6,06 (m, 1H), 6,58 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,60 (d , J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio ácido N-(6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-3-il)pirazol-3-carboxílico (37b)
El intermedio (37a) (300 mg, 0,78 mmol) se disolvió en una mezcla de DCM y TFA (5:1) (4,3 ml). La mezcla se agitó a ta durante 4 h. La mezcla se concentró y a continuación se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 60/40). Las fracciones que contenían el intermedio esperado se combinaron y concentraron para dar el intermedio (37b) (162 mg, 0,53 mmol, 68 %) como un sólido amarillo.
EM m/z ([M+H]+) 291.
EM m/z ([MH]-) 289.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) 83,27 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,34 (dd, J = 11,0, 2,6 Hz, 1H), 4,24 (m, 2H), 4,32 (dd, J = 5.6, 2,2 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 5,26 (dd, J = 10,4, 1,9 Hz, 1H), 5,36 (dd, J = 17,4, 1,9, 1,6 Hz, 1H), 5,89-6,02 (m, 1H), 6,77 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,29 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 12,99 (br s, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio N-(6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-3-il)-3-(N-oxazol-2-ilcarboxamida)pirazol (37c)
En atmósfera inerte, el intermedio (37b) (300 mg, 1,03 mmol) se diluyó en DMF anhidro (10 ml). Se añadieron sucesivamente HOBt H2O (206 mg, 1,34 mmol) y EDC.HCl (258 mg, 1,34 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 min. Se añadieron 2-aminooxazol (304 mg, 3,62 mmol) y DIPEA (451 pl, 2,58 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 16 h. A continuación, la mezcla se diluyó en H2O (150 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3x150 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con NaHCO3 saturado, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El compuesto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 40/60) para proporcionar el intermedio (37c) (182 mg, 0,42 mmol, 41 %) como un aceite incoloro. EM m/z ([M+H]+) 357.
EM m/z ([MH]-) 355.
RMN 1H (400 MHz, CDCh) 83,17 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,57 (dd, J = 10,9, 1,9 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 5,5, 2,6 Hz) , 1H), 4,23 (dd, J = 17,6, 1,9 Hz, 1H), 4,29-4,50 (m, 3H), 5,33 (dd, J = 10,3, 1,5 Hz, 1H), 5,38 (dd, J = 17,6, 1,5 , 1,4 Hz, 1H), 5,98-6,08 (m, 1H), 6,65 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 1,1 Hz, 1H) ), 7,51 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,02 (br s, 1H).
Etapa 4: preparación de [7-oxo-3-[3-(oxazol-2-¡lcarbamo¡l)p¡razol-1-¡l1-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio (ejemplo 37)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 2), el intermedio (37c) (106 mg, 0,30 mmol) se convirtió en el ejemplo (37) (46 mg, 0,11 mmol, 40 % en tres etapas) como un sólido amarillo claro después de la purificación por cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) antes del intercambio iónico en Dowex.
EM m/z ([M+H]+) 397.
EM m/z ([MH]-) 395.
RMN 1H (300 MHz, D2O) 83,45 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 3,70 (dd, J = 11,1, 1,9 Hz, 1H), 4,40-4,46 (m, 2H) 4,60 (dd, J = 5.6, 2,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 8,03 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Ejemplo 38: síntesis de hidrogenosulfato de 3[3-[4-(2-am¡noet¡lcarbamo¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lo1
Etapa 2
Figure imgf000068_0001
Etapa 1: preparación del intermedio N-[2-(1H-pirazol-4-carbonilamino)etil]carbamato de terc-butilo (38a)
Se disolvió ácido 1H-pirazol-4-carboxílico (50 mg, 4,46 mmol) en DMF (45 ml). Se añadieron N-(2-aminoetil)carbamato de terc-butilo (1,44 ml, 9,82 mmol), HATU (1,87 g, 4,91 mmol) y DIPeA (2,33 ml, 13,4 mmol) y la mezcla se agitó a 50 °C durante la noche. Después de la concentración, el residuo se purificó sobre gel de sílice (DCM/MeOH: 100/0 a 80/20) para proporcionar el intermedio (38a) (408 mg, 1,61 mmol, 36%).
EM m/z ([M+H]+) 255.
RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 8 (ppm) 1,42 (s, 9H), 3,25 (t, 6,1 Hz, 2H), 3,41 (t, 6,1 Hz, 2H), 8,04 (s, 2H).
Etapa 2: preparación del intermedio N-[2-[[1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)p¡razol-4 -carbonillaminoletillcarbamato de terc-butilo (38b)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1g) (0,15 g, 0,49 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (38a) (0,14 g, 0,55 mmol) en el intermedio (38b) (0,138 g , 0,32 mmol, 66 %) tras la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100).
EM m/z ([2M+H]+) 865.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 (ppm) 1,40 (s, 9H), 3,13 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,28-3,38 (m, 2H), 3,39-3,57 ( m, 3H), 4,07­ 4,21 (m, 2H), 4,31-4,51 (m, 3H), 5,20-5,42 (m, 3H), 5,89-6,08 (m, 1H), 6,54 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 8,07 (s, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio N-[2-[[1-(6-hidroxi-7-oxo-1.6-diazabicvclo[3.2.11oct-3-en-3-il)nirazol-4 -carbonillaminoletillcarbamato de terc-butilo (38c)
En atmósfera inerte. se añadieron fenilsilano (68 pl. 0.546 mmol) y Pd(PPh3)4 (16 mg. 0.014 mmol) a una solución del intermedio (38b) (118 mg. 0.273 mmol) en DCM anhidro ( 2.8 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h 30 y se concentró. El producto en bruto se purificó sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (38c) (52 mg. 0.132 mmol. 48%).
EM m/z ([M+H]+) 393.
Etapa 4: preparación del intermedio [3-[4-[2-(terc-butoxicarbonilamino)etilcarbamoil1pirazol-1-il1-7-oxo-1.6-diazabic¡clo[3.2.11oct-3-en- 6-¡l1 sulfato de sodio (38d)
El intermedio (38c) (52 mg. 0.132 mmol) se disolvió en una mezcla de tBuOH (0.7 ml) y H2O (0.7 ml). Se añadió TEA (4.6 pl. 0.032 mmol) y complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (22 mg. 0.158 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h y a continuación se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el intermedio esperado se combinaron y concentraron al vacío. El residuo se disolvió en H2O y se convirtió después del intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex ® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H 2O) a intermedio (38d) (25 mg. 0.050 mmol. 39%).
EM m/z ([MH1‘) 471.
Etapa 5: preparación de hidrogenosulfato de [3-[4-(2-aminoetilcarbamoil)nirazol-1-il1-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-ilo1 (ejemplo 38)
El intermedio (38d) (25 mg. 0.050 mmol) se disolvió en DCM (0.5 ml). A 0°C. se añadió TFA (0.25 ml) y la mezcla se agitó a 0°C durante 20 min. Se añadió Et2O para dar un precipitado y se eliminó la fase etérea. El residuo se trituró varias veces en ACN y el sólido obtenido se secó bajo azote. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y concentraron al vacío para dar el ejemplo (38) (6.1 mg. 0.016 mmol. 34%).
EM m/z ([MH1+) 373.
RMN 1H (400 MHz. D2O): 8 (ppm) 3.24 (t. J = 5.8 Hz. 2H). 3.45 (d. J = 11.4 Hz. 1H). 3.66 (t. J = 5.9 Hz. 2H). 3.67-3.72 (m. 1H). 4.34 (dd. J = 17.5. 1.2 Hz. 1H). 4.40 (dd. J = 17.5. 1.8 Hz. 1H). 4.60 (dd. J = 5.7. 2.6 Hz. 1H). 6.73 (d. J = 5.5 Hz. 1H). 8.01 (s. 1H). 8.35 (s. 1H).
Ejemplo 39: síntesis [3-[4-[(Z.E)-N-h¡drox¡-C-met¡l-carbon¡m¡do¡l1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡ciclo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio
Figure imgf000070_0001
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a), el intermedio (1 g) (250 mg, 0,817 mmol) se convirtió por reacción con 1-(1H-pirazol-4-il)etanona (108 mg, 0,98 mmol) en el intermedio (39a) (197 mg, 0,553 mmol, 68 %) después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 100/0). EM m/z ([M+H]+) 289.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 8 (ppm) 2,46 (s, 3H), 3,17 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 3,57 (dd, J = 1,8, 10,9 Hz, 1H) , 4,10-4,25 (m, 2H), 4,39-4,52 (m, 3H), 5,30-5,43 (m, 2H), 5,97-6,09 (m, 1H), 6,65 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,96 (s, 1H), 8,08 (s, 1H). Etapa 2: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-[4-[(Z.E)-N-h¡drox¡-C-met¡l-carbon¡m¡do¡l1p¡razol-1-¡l1-1,6-diazabic¡clo[3.2.11oct -3-en-7-ona (39b)
Se añadió clorhidrato de hidroxilamina (90 mg, 1,302 mmol) y piridina (141 pl, 1,735 mmol) a una solución del intermedio (39a) (25 mg, 0,867 mmol) en MeOH (8,7 ml). Después de agitar durante 2 ha ta, la mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 100/0) para proporcionar el intermedio (39b) (100 mg, 0,330 mmol, 38 %) como un aceite amarillo.
EM m/z ([M+H]+) 304.
Etapa 3: preparación del intermedio [(Z.E)-1-[1-(6-aliloxi-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-3-il)nirazol-4 -illetilidenaminol carbonato de terc-butilo (39c)
A una solución del intermedio (39b) (100 mg. 0.33 mmol) en DCM (3.3 ml) se añadieron Boc2O (108 mg. 0.495 mmol). TEA (70 pl. 0.495 mmol) y DMAP (40 mg. 0.33 milimoles). Después de agitar durante 1 h a ta. la mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 100/0) para proporcionar el intermedio (39c) (110 mg. 0.273 mmol. relación Z/E: 62/38. 83 %) como un aceite incoloro.
EM m/z ([M+H]+) 404. ([2M+H]+) 807.
RMN 1H (400 MHz. CDCla): 8 (ppm) 1.58 (s. 9H). 2.30 (s. 1.86H). 2.34 (s. 1.14H). 3.16 (d. J = 10.9 Hz. 0.62H). 3.19 (d. J = 10.9 Hz. 0.38H). 3.52-3.62 (m. 1H). 4.13-4.27 (m. 2H). 4.38-4.53 (m. 3H). 5.29-5.44 (m. 2H). 5.98-6.10 (m. 1H).
6.56 (d. J = 5.4 Hz. 0.62H). 6.64 (d. J = 5.4 Hz. 0.38H). 7.90 (s. 0.62H). 7.99 (s. 0.38 H). 8.00 (s. 0.62 H). 8.21 (s. 0.38 H).
Etapa 4: preparación de intermedio [(Z.E)-1-[1-(6-hidroxi-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-3-il)pirazol-4-¡lletilidenaminol carbonato de terc-butilo (39d)
Se desgasificó una solución del intermedio (39c) (110 mg. 0.273 mmol) en DCM anhidro (2.7 ml) durante 10 min en atmósfera de argón. Se añadieron sucesivamente fenilsilano (67 pl. 0.546 mmol) y Pd(PPH3)4(13 mg. 0.011 mmol). Después de agitar durante 2 h a ta. la mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 100/0) para proporcionar el intermedio (39d) (31 mg.
0.062 mmol. 22 %) como un polvo naranja contaminado con óxido de trifenilfosfina.
EM m/z ([M+H]+) 364.
Etapa 5: preparación de [3-[4-[(Z.E)-N-hidroxi-C-metil-carbonimidoil1pirazol-1-il]-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.11 oct-3-en-6-il] sulfato de sodio (ejemplo 39)
A una solución del intermedio (39d) (31 mg. 0.062 mmol) en tBuOH (0.427 ml) y agua (0.427 ml) en atmósfera inerte se añadió complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (14.3 mg. 0.102 mmol) y TEA (3.0 pl. 0.021 milimoles). Después de agitar durante 2 h. la mezcla heterogénea se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: gradiente de 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron para proporcionar 14 mg de un sólido que se aplicó en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron y concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: gradiente de 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron. congelaron y liofilizaron para proporcionar el ejemplo (39) (5.8 mg. 0.015 mmol. proporción Z/E 50/50.
18 %) como un polvo blanco.
EM m/z ([MH]-) 342.
RMN 1H (400 MHz. D2O): 8 (ppm) 2.12 (s. 1.5 H). 2.13 (s. 1.5 H). 3.39 (dd. J = 11.3. 3.9 Hz. 1 H). 3.60 -3.67 (m. 1H).
4.24-4.37 (m. 2H). 4.50-4.56 (m. 1H). 6.58 (d. J = 5.7 Hz. 0.5H). 6.64 (d. J = 5.7 Hz. 0.5H) ). 7.83 (s. 0.5H). 8.11 (s.
1H). 8.47 (s. 0.5H).
Ejemplo 40: síntesis de [3-(4-acetilpirazol-1 -il)-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.1 ]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio
Figure imgf000071_0001
39 a 40 a E jem plo 40
Etapa 1: preparación del intermedio 3-(4-acet¡lp¡razol-1-¡l)-6-h¡drox¡-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (40a).
Se desgasificó una solución del intermedio (39a) (145 mg, 0,407 mmol) en DCM anhidro (4,1 ml) durante 10 min en atmósfera de argón. Se añadieron sucesivamente AcOH (47 pl, 0,815 mmol) y Pd(PPH3)4 (236 mg, 0,204 mmol). Después de agitar durante 2 h a ta, la mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 100/0) para proporcionar el intermedio (40a) (90 mg, 0,150 mmol, 37 %) como un polvo amarillo contaminado con óxido de trifenilfosfina.
EM m/z ([M+H]+) 249
RMN 1H (400 MHz, acetona-de): 8 (ppm) 2,42 (s, 3H), 3,31 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,47 (dd, J = 10,8, 2,8 Hz, 1H ), 4,15 (dd, J = 5,5, 2,7 Hz, 1H), 4,26 (dd, J = 17,4, 1,9 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 17,3 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 5,4 Hz , 1H), 8,00 (s, 1H), 8,61 (s, 1H).
Etapa 2: preparación de [3-(4-acet¡lp¡razol-1-¡l)-7-oxo-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (ejemplo 40)
A una solución del intermedio (40a) (85 mg, 0,20 mmol) en tBuOH (1,01 ml) y H2O (1,01 ml) en atmósfera inerte se añadió complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (33,8 mg, 0,243 mmol) y TEA (7,1 pl, 0,051 mmol). Después de agitar durante 1 h, la mezcla heterogénea se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron para proporcionar 67 mg de un sólido que se aplicó en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron para proporcionar 35 mg de un sólido que se purificó de nuevo por cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron para proporcionar el ejemplo (40) (22,8 mg, 0,065 mmol, 30 %) como un polvo blanco.
EM m/z ([MH]-) 327.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm): 2,46 (s, 3H), 3,41 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,65 (dd, J = 11,4, 2,1 Hz, 1H), 4,33 (dd, J = 7,2, 1,3 Hz, 2H), 4,55 (dd, J = 5,6, 2,5 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,06 (s, 1H), 8,49 (s, 1H).
Ejemplo 41: síntesis de hidrogenosulfato de [3-[4-(2-am¡noet¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lo1
Etapa 1
Figure imgf000072_0001
Figure imgf000072_0002
Figure imgf000072_0003
41c E je m p lo 41
Etapa 1: preparación del intermedio N-[2-[1-(6-aliloxi-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)pirazol-4-illetillcarbamato de terc-butilo (41a)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7). el intermedio (1 g) (0.25 g. 0.82 mmol) se convirtió por reacción con N-[2-(1H-pirazol-4-il)et¡lo] carbamato de terc-butilo (0.275 g. 1.31 mmol) en el intermedio (41a) (0.208 g.
0.53 mmol. 66 %) después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 80/20).
EM m/z ([M+H]+) 390.
RMN 1H (400 MHz. CDCla): 8 (ppm) 1.44 (s. 9H). 2.64 (t. J = 6.8 Hz. 2H). 3.14 (d. J = 10.7 Hz. 1H). 3.25 -3.34 (m. 2H).
3.52 (dd. J = 10.8. 2.2 Hz. 1H). 4.09 (dd. J = 5.5. 2.5 Hz. 1H). 4.19 (dd. J = 17.6. 1.8 Hz. 1H). 4.26-4.54 (m. 3H). 4.57 (br s. 1H). 5.27-5.42 (m. 2H). 5.96-6.08 (m. 1H). 6.37 (d. J = 5.4 Hz. 1H). 7.41 (s . 1H). 7.45 (s. 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio N-[2-[1-(6-hidroxi-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)pirazol-4-illetillcarbamato de terc-butilo (41b)
En atmósfera inerte. se añadieron fenilsilano (123 pl. 1.028 mmol) y Pd(PPh3)4 (30 mg. 0.026 mmol) a una solución del intermedio (41a) (200 mg. 0.514 mmol) en DCM anhidro (3.4 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y se concentró. El producto en bruto se purificó sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 80/20) para proporcionar el intermedio (41b) (85 mg. 0.244 mmol. 48 %) contaminado con óxido de trifenilfosfina. EM m/z ([M+H]+) 350.
Etapa 3: preparación [3-[4-[2-(terc-butox¡carbon¡lam¡no)et¡l1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-il1 sulfato de sodio (41c)
El intermedio (41b) (33 mg. 0.094 mmol) se disolvió en una mezcla de tBuOH (0.47 ml) y H2O (0.47 ml). Se añadió TEA (3.3 pl. 0.024 mmol) y complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (16 mg. 0.113 mmol). La mezcla se agitó a ta durante 2 h y a continuación se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el intermedio esperado se combinaron y concentraron al vacío. El residuo se disolvió en H2O y se convirtió después del intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex ® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O) al intermedio (41c) (18 mg. 0.040 mmol. 43 %).
EM m/z ([MH1‘) 428.
Etapa 4: preparación de hidrogenosulfato de [3-[4-(2-am¡noet¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lo1 (ejemplo 41)
Se añadió TFA (300 pl) a una solución del Intermedio (41c) (18 mg. 0.040 mmol) en tolueno (600 pl). La mezcla se agitó a ta durante 30 min y a continuación se concentró bajo azote. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el producto esperado se combinaron y concentraron al vacío para dar el ejemplo (41) (1.6 mg. 0.005 mmol. 13%).
EM m/z ([MH1‘) 328.
RMN 1H (400 MHz. D2O): 8 (ppm) 2.89 (t. J = 7.2 Hz. 2H). 3.21 (t. J = 7.2 Hz. 2H). 3.45 (d. J = 11.3 Hz. 1H). 3.66-3.73 (m. 1H). 4.33 (d. J = 17.5 Hz. 1H). 4.39 (dd. J = 17.5. 1.8 Hz. 1H). 4.58 (dd. J = 5.7. 2.7 Hz . 1H). 6.58 (d. J = 5.5 Hz.
1H). 7.65 (s. 1H). 7.89 (s. 1H).
Ejemplo 42: síntesis de 2.2.2-trifluoroacetato [7-oxo-3-(4-p¡peraz¡n-4-¡o-1-¡lpirazol-1-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3 -en-6-¡l1 hidrogenosulfato
Figure imgf000074_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 4-(1-bencilpirazol-4-il)piperazina-1-carboxilato de terc-butilo (42a)
En un matraz sellado, se disolvió 1-bencil-4-yodo-pirazol (7,2 g, 25,35 mmol) en DMSO (72 ml). La solución se desgasificó bajo argón durante 5 min. A continuación se añadieron piperazina-1-carboxilato de terc-butilo (5,67 g, 30,42 mmol), S-prolina (1,17 g, 10,14 mmol), Cul (0,965 g, 5,07 mmol) y K2CO3 (10,51 g, 76,05 mmol) y la mezcla se agitó a 100°C durante la noche. La mezcla se vertió en H2O y a continuación se extrajo con DCM. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 80//20) para proporcionar el intermedio (42a) (3,88 g, 11,34 mmol, 45%).
EM m/z ([M+H]+) 343.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 1,46 (s, 9H), 2,86 (t, J = 5,1 Hz, 4H), 3,53 (t, J = 5,1 Hz, 4H), 5,22 (s, 2H), 6,93 (s, 1H), 7,16-7,21 (m, 2H), 7,25-7,37 (m, 4H).
Etapa 2: preparación del intermedio 4-(1H-pirazol-4-¡l)p¡peraz¡na-1-carbox¡lato de terc-butilo (42b)
El intermedio (42a) (0,3 g, 0,88 mmol) se disolvió en DMSO (0,6 ml). Se añadió una solución de tBuOK 1M en THF (8,8 mmol, 8,8 ml) y la mezcla se agitó con burbujeo de oxígeno durante 30 min. Se añadió de nuevo una solución de tBuOK 1 M en THF (5 mmol, 5 ml) y la mezcla se agitó con burbujeo de oxígeno durante 20 min. La mezcla de reacción se inactivó mediante la adición de solución de cloruro de amonio, se diluyó con agua y se extrajo con AcOEt. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (42b) (156 mg, 0,62 mmol, 71%).
EM m/z ([M+H]+) 253.
RMN 1H (400 MHz, CDCI3): 8 (ppm) 1,47 (s, 9H), 2,91 (t, J = 5,2 Hz, 4H), 3,57 (t, J = 5,2 Hz, 4H), 7,25 (s, 2H).
Etapa 3: preparación del intermedio 4-[1-(6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)nirazol-4-il1piperazina-1-carboxilato de terc-butilo (42c)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a), el intermedio (1g) (0,53 g, 1,74 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (42b) (0,53 g, 2,08 mmol) en el intermedio (42c) (0,5 g , 1,16 mmol, 67 %) tras la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 50/50).
EM m/z ([M+H]+) 431.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 1,47 (s, 9H), 2,87 (t, J = 5,2 Hz, 4H), 3,13 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 3,47 -3,59 (m, 5H), 4,07 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 4,18 (dd, J = 17,6, 1,8 Hz, 1H), 4,35-4,50 (m, 3H), 5,26-5,42 (m , 2H), 5,96-6,07 (m, 1H), 6,24 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,10 (br s, 1H), 7,31 (br s, 1H).
Etapa 4: preparación del intermedio 4-[1-(6-hidroxi-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)nirazol-4-il1piperazina-1-carboxilato de terc-butilo (42d)
En atmósfera inerte, se añadieron ácido acético (133 pl, 2,32 mmol) y Pd(PPh3)4 (335 mg, 0,29 mmol) a una solución del intermedio (42c) (250 mg, 0,581 mmol) en DCM anhidro (5,8 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h 30 y se concentró. El producto en bruto se purificó sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (42d) (180 mg, 0,461 mmol, 80%).
EM m/z ([M+H]+) 391.
Etapa 5: preparación de [3-[4-(4-terc-butox¡carbon¡lp¡peraz¡n-1-¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en- 6-il1 sulfato de trimetilamonio (42e)
El intermedio (42d) (180 mg, 0,461 mmol) se disolvió en una mezcla de tBuOH (2,3 ml) y H2O (2,3 ml). Se añadieron TEA (16 pl, 0,115 mmol) y complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (77 mg, 0,553 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche y a continuación se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN 98/2 a 0/100) para proporcionar el intermedio (42e) (154 mg, 0,291 mmol, 64%).
EM m/z ([MH1‘) 469.
Etapa 6: preparación de 2,2,2-trifluoroacetato [7-oxo-3-(4-p¡peraz¡n-4-¡o-1-¡lp¡razol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3 -en-6-il1 hidrogenosulfato (ejemplo 42)
El intermedio (42e) (130 mg, 0,245 mmol) se disolvió en DCM (1,2 ml). A 0°C, se añadió TFA (0,6 ml) y la mezcla se agitó a 0°C durante 45 min. Se añadió Et2O para dar un precipitado, se eliminó la fase etérea. El residuo se trituró varias veces en ACN y el sólido obtenido se secó bajo azote. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y concentraron al vacío para dar el ejemplo (42) (5,4 mg, 0,012 mmol, 5%).
EM m/z ([MH1‘) 369.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,20-3,29 (m, 4H), 3,35-3,46 (m, 5H), 3,61-3,70 (m, 1H), 4,32 (s, 2H), 4,55 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 6,44 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,62 (s, 1H).
Ejemplo 43: síntesis de [7-oxo-3-(3.4.5-tr¡deuter¡orp¡razol-1-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio
Figure imgf000076_0001
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a), el intermedio (1 g) (200 mg, 0,65 mmol) se convirtió por reacción con 3,4,5-trideuterio-1H-pirazol (preparado como se describe en Catalysis Communication, 2001,2: 125­ 128) (56 mg, 0,78 mmol) en el intermedio (43a) (101 mg, 0,41 mmol, 63 %) después de la purificación mediante cromatografía “flash” en gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 90/10).
EM m/z ([M+H]+) 250.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 3,14 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,52 (dd, J = 10,8, 2,3 Hz, 1H), 4,09 (dd, J = 5,6, 2,7 Hz, 1H), 4,20 (dd, J = 17,5, 1,9 Hz, 1H), 4,35-4,50 (m, 3H), 5,27-5,31 (m, 1H), 5,32-5,39 (m, 1H), 5,94 -6,06 (m, 1H), 6,45 (d, J = 5,5 Hz, 2H).
Etapa 2: preparación de [7-oxo-3-(3.4.5-tr¡deuter¡op¡razol-1-¡l)-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio (Ejemplo 43)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 2), el intermedio (43a) (100 mg, 0,40 mmol) se convirtió en el ejemplo (43) (43 mg, 0,14 mmol, 35 %) después de la purificación mediante cromatografía “flash” en fase inversa C18 en gel de sílice (H2O/ACN 98/2 a ACN) seguida de liofilización.
EM m/z ([MH]-) 288.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,43 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,66 (dd, J = 11,3, 2,1 Hz, 1H), 4,32-4,37 (m, 2H), 4,55 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 5,6 Hz, 1H).
Ejemplo 44: síntesis [7-oxo-3-(tetrazol-2-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio
Figure imgf000077_0001
44e Ejem plo 44
Etapa 1: preparación del intermedio 1-benc¡l-5-(tetrazol-2-¡l)-2,6-d¡h¡drop¡r¡d¡n-3-ona (44a)
A 0 °C, se añad¡eron tetrazol al 3 % en peso en ACN (57,4 g, 32,8 mmol) y Na2CO3 (4,14 g, 39,42 mmol) a una soluc¡ón de (1-benc¡l-5-oxo-2 ,6-dihidropiridin-3-il) tr¡fluorometanosulfonato (2,2 g, 6,57 mmol) en DMF (16,4 ml). La mezcla se ag¡tó a 0 °C durante 4 h, a cont¡nuac¡ón se d¡luyó con agua y se extrajo con AcOEt. La capa orgán¡ca se secó sobre Na2SO4, se f¡ltró y se concentró al vacío. El producto en bruto se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/MeOH: 100/0 a 90/10) para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (44a) (370 mg, 1,45 mmol, 22 %).
EM m/z ([MH]-) 254.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 3,36 (br s, 2H), 3,86 (s, 2H), 4,15 (br s, 2H), 7,00 (t, J = 1,5 Hz, 1H), 7,28-7,42 (m, 5H), 8,66 (s, 1H).
Etapa 2: preparac¡ón del ¡ntermed¡o 1-benc¡l-5-(tetrazol-2-¡l)-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡r¡d¡n-3-ol (44b)
El ¡ntermed¡o (44a) (428 mg, 1,68 mmol) se d¡solv¡ó en una mezcla de MeOH (15 ml) y THF (3 ml). A 0 °C, se añad¡eron CeCl3 seco (163 mg, 1,68 mmol) y NaBH4 (70 mg, 1,85 mmol). La mezcla se agitó a 0°C durante 30 m¡n, a cont¡nuac¡ón se añad¡eron sucesivamente acetona y H2O. La mezcla se concentró. Se añad¡eron H2O y soluc¡ón de NH4Cl al res¡duo y el producto deseado se extrajo con AcOEt. La capa orgán¡ca se secó sobre Na2SO4, se f¡ltró y se concentró al vacío El producto en bruto se purificó sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 70/30) hasta el ¡ntermed¡o (44b) (407 mg, 1,58 mmol, 95%).
EM m/z ([M+H]+) 258.
RMN 1H (400 MHz, CDCI3): 5 (ppm) 2,40 (br s, 1H), 2,67 (dd, J = 11,8, 2,9 Hz, 1H), 2,96 (dd, J = 11,9, 3,2 Hz) , 1H), 3.44 (d, J = 16,6 Hz, 1H), 3,72-3,88 (m, 2H), 4,03 (d, J = 16,6 Hz, 1H), 4,38 (br s, 1H), 6,91 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 7,27­ 7,41 (m, 5H), 8,53 (s, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio N-aliloxi-N-[1-bencil-5-(tetrazol-2-il)-3,6-dihidro-2H-piridin-3-il]-2-nitrobencenosulfonamida (44c)
En atmósfera de argón, se disolvió el intermedio (44b) (400 mg, 1,56 mmol) en tolueno (16 ml), N-aliloxi-2-nitrobencenosulfonamida (402 mg, 1,56 mmol) y PPh3 (409 mg, 1,56 mmol). A 0 °C, se añadió por porción DTAD (395 mg, 1,71 mmol) a la mezcla que se agitó a ta durante 4 h. Después de la concentración, el residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 80/20) para proporcionar el intermedio (44c) (714 mg, 1.44 mmol, 92 %).
EM m/z ([M+H]+) 498.
RMN 1H (400 MHz, CDCh): 5 (ppm) 2,85 (br s, 2H), 3,53-3,90 (m, 4H), 4,46-4,58 (m, 2H), 4,94 (br s, 1H ), 5,16-5,29 (m, 2H), 5,82 (ddt, J = 16,8, 10,4, 6,4 Hz, 1H), 6,48 (br s, 1H), 7,27-7,38 (m, 5H), 7,49-7,84 (m, 3H), 8,09 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 8,47 (s, 1H).
Etapa 4: preparación del intermedio N-al¡lox¡-1-benc¡l-5-(tetrazol-2-¡l)-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡r¡d¡n-3-am¡na (44d)
A 0 °C, se añadieron K2CO3 (1,48 g, 10,72 mmol) y tiofenol (732 pl, 7,14 mmol) a una solución del intermedio (44c) (710 mg, 1,43 mmol) en ACN (14 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h 30 min. El producto en bruto se filtró sobre celite, se lavó con ACN y DCM. El filtrado se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 70/30) para proporcionar el intermedio (44d) (368 mg, 1,18 mmol, 83%).
EM m/z ([M+H]+) 313.
RMN 1H (400 MHz, CDCh): 5 (ppm) 2,58 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 3,09 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 3,44 (d, J = 16,5 Hz , 1H), 3,70-4,00 (m, 4H), 4,20 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 5,14-5,33 (m, 2H), 5,75 (br s, 1H), 5,92 (ddt, J = 16,5, 11,0, 5,9 Hz, 1H), 6,82 (br s, 1H), 7,28-7,43 (m, 5H), 8,51 (s, 1H).
Etapa 5: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-(tetrazol-2-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (44e)
Se añadió una solución de trifosgeno (455 mg, 1,53 mmol) en DCE (2 ml) a una solución del intermedio (44d) (368 mg, 1,18 mmol) en DCE (12 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Se añadió una solución de Nal (1,77 g, 11,8 mmol) en acetona (7,5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. A continuación, la solución se calentó a 55 °C durante 15 min y se añadió piridina (2,38 ml, 29,5 mmol). La mezcla se agitó a 55°C durante 2h 30. Después de enfriar y diluir con DCM, la mezcla se filtró sobre celite y el filtrado se concentró. El residuo se disolvió en DCM. La capa orgánica se lavó con una solución de Na2S2O3 y se secó sobre Na2SO4, se filtró y concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (tolueno/acetona: 100/0 a 80/20) para proporcionar el intermedio (44e) (132 mg, 0,53 mmol, 45%).
EM m/z ([M+H]+) 249.
RMN 1H (300 MHz, CDCh): 5 (ppm) 3,20 (d, 11,0 Hz, 1H), 3,61 (ddd, 11,2, 2,9, 1,2 Hz, 1H), 4,23 (dd, J = 5,5, 2,3 Hz, 1H), 4,34 (dd, J = 18,0, 2,0 Hz, 1H), 4,38-4,52 (m, 2H), 4,65 (dd, J = 18,0, 1,2 Hz, 1H), 5,28-5,43 (m, 2H) ), 5,94-6,10 (m, 1H), 7,25-7,29 (m, 1H), 8,54 (s, 1H).
Etapa 6: preparación de [7-oxo-3-(tetrazol-2-¡l)-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (Ejemplo 44)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 2), el intermedio (44e) (130 mg, 0,52 mmol) se convirtió en el ejemplo (44) (5 mg, 0,02 mmol, 8 %) después de la purificación mediante cromatografía “flash” en C18-fase inversa en gel de sílice (H2O/ACN 99/1 a 0/100) seguida de liofilización.
EM m/z ([MH]-) 287.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 5 (ppm) 3,52 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 3,75 (ddd, J = 11,5, 2,8, 1,1 Hz, 1H), 4,57 (dd , J = 3,6, 1,6 Hz, 2H), 4,70 (dd, J = 5,6, 2,7 Hz, 1H), 7,35 (dd, J = 5,6, 1,5 Hz, 1H), 8,82 (s, 1H).
Ejemplo 45: síntesis de [3-[3-(2-am¡no-2-oxo-et¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en- 6-il] sulfato de sodio
Figure imgf000079_0001
Se calentó una mezcla de éster metílico del ácido (1H-pirazol-3-il)-acético (0,50 g, 3,57 mmol) en amoníaco 7 M en MeOH (20 ml, 140 mmol) a 55 °C durante 4 días. La mezcla de reacción se concentró al vacío para proporcionar el intermedio (45a) (0,44 g, 3,52 mmol, 98 %) como un polvo rosa.
EM m/z ([M+H]+) 126.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): 8 (ppm) 3,39 (s, 2H), 6,10 (d, 2,0 Hz, 1H), 6,90 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 12,52 (br s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 2-[1-(6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)nirazol-3-il]acetamida (45b) Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1g) (600 mg, 1,96 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (45a) (490 mg, 3,27 mmol) en el intermedio (45b) (200 mg , 0,66 mmol, 34%) como producto mayoritario (proporción 83/16) de la mezcla de ambos regioisómeros tras purificación por cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/Acetona: 60/40 a 30/70).
EM m/z ([M+H]+) 304.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) : 8 (ppm) 3,15 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,49-3,55 (m, 1H), 3,60 (s, 2H), 4,12 (dd, J = 2,6, 5,6 Hz, 1H), 4,17 (dd, J = 2,0, 17,5 Hz, 1H), 4,37-4,51 (m, 3H), 5,29-5,44 (m, 2H), 5,53 (s, 1H), 5,97 -6,08 (m, 1H), 6,30 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,37 (s, 1H), 6,46-6,48 (m, 1H), 7,57 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio 2-[1-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)p¡razol-3-¡l1acetam¡da (45c)
En atmósfera inerte, se diluyó una solución del intermedio (45b) (130 mg, 0,66 mmol) en DCM anhidro (18 ml). Se añadieron sucesivamente PhSiH3 (326 pl, 2,64 mmol) y Pd(PPh3)4 (76 mg, 0,066 mmol). Después de agitar durante 1 h, se añadió DCM y el sólido se filtró para proporcionar el intermedio (45c) (70 mg, 0,26 mmol, 63 %).
EM m/z ([MH]-) 263.
Etapa 4: preparación de [3-[3-(2-am¡no-2-oxo-et¡iyrazol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (Ejemplo 45)
A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (45c ) (70 mg, 0.26 mmol) en p¡r¡d¡na anh¡dra (3 ml) en atmósfera ¡nerte se añad¡ó complejo de tr¡óx¡do de azufre y p¡r¡d¡na (212 mg. 1,33 mmol). Después de ag¡tar durante 18 h, se añad¡ó DCM al res¡duo y el sól¡do se f¡ltró y se lavó con DCM/acetona (50/50). El f¡ltrado se evaporó para dar un sól¡do que se apl¡có en una columna de forma de sod¡o Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de h¡drógeno almacenada con una soluc¡ón acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con agua). Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se comb¡naron, congelaron y l¡of¡l¡zaron para dar una mezcla de ambos reg¡o¡sómeros con el ejemplo (45) como producto pr¡nc¡pal (proporc¡ón 91/9) (46 mg, 0,13 mmol, 51 %, polvo blanco).
EM m/z ([MH]-) 342.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,35 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,56 (s, 3H), 4,26 (t, J = 1,7 Hz, 2H) 4,46 (dd, J = 5,7, 2,7 Hz, 1H), 6,32 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 6,46-6,53 (m, 1H), 7,77 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Ejemplo 46: síntes¡s de h¡drogenosulfato de [3-[3-(2-am¡noetox¡carbamo¡l)n¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lo1
Figure imgf000080_0001
Se añad¡eron N-(2-am¡noox¡et¡lo)carbamato de terc-but¡lo (510 mg, 2,90 mmol), HATU (932 mg, 2,45 mmol) y DIPEA (1,16 ml, 6,69 mmol) a una soluc¡ón de ác¡do 1H-p¡razol-3-carboxíl¡co (250 mg, 2,23 mmol) en DMF (11 ml). La mezcla se ag¡tó a 40°C durante la noche. Después de la concentrac¡ón, la ad¡c¡ón de agua y la extracc¡ón con AcOEt, la capa orgán¡ca se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío y el res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 70/30) para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (46a) (575 mg, 2,13 mmol, 95 %).
EM m/z ([M+H1+) 271.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d 6): 8 (ppm) 1,39 (s, 9H), 3,14-3,22 (m, 2H), 3,80 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 6,66 ( s, 1H), 6,82 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 11,37 (s, 1H), 13,31 (s, 1H).
Etapa 2: preparac¡ón del ¡ntermed¡o N-[2-[[1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)p¡razol-3-carbon¡l1am¡no1ox¡et¡l1carbamato de terc-but¡lo (46b)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a), el intermedio (1g) (0,30 g, 0,98 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (46a) (0,32 g, 1,17 mmol) en el intermedio (46b) (0,147 g, 0,33 mmol, 25 %) con una relación 8/2 a favor del isómero deseado después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 60/40).
EM m/z ([M+H]+) 449.
RMN 1HH (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 1,45 (s, 9H), 3,13 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,27-3,57 (m, 3H), 3,90-4,02 ( m, 2H), 4,09-4,21 (m, 2H), 4,35-4,50 (m, 3H), 5,25-5,40 (m, 2H), 5,50-5,72 (m, 1H), 5,90-6,07 (m, 1H), 6,42 (d, J = 5,4 Hz, 0,2 H), 6,54 (d, J = 5,5 Hz, 0,8 H), 6,64 (d, J = 1,9 Hz, 0,2 H), 6,88 (d, J = 2,6 Hz, 0,8 H) ), 7,52 (br s, 0,2 H), 7,66 (d, J = 2,6 Hz, 0,8 H), 9,71 (br s, 0,8 H), 10,37 (br s, 0,2 H).
Etapa 3: preparación del intermedio [3-[3-[2-(terc-butoxicarbonilamino)etoxicarbamoil1pirazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de trifen¡l-[(E)-prop-1-en¡l1fosfon¡o (46c)
En atmósfera inerte, se añadieron ácido acético (46 pl, 0,80 mmol) y Pd(PPh3)4 (231 mg, 0,20 mmol) a una solución del intermedio (46b) (180 mg, 0,40 mmol) en DCM anhidro (4 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, a continuación se añadieron piridina (4 ml) y complejo de trióxido de azufre y piridina (319 mg, 2,00 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche en la oscuridad. La mezcla se diluyó con DCM y se filtró. El filtrado se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (46c) (135 mg, 0,17 mmol, 43 %) con una proporción de 8/2 a favor del isómero deseado.
EM m/z ([MH1‘) 487.
Etapa 5: preparación de hidrogenosulfato de [3-[3-(2-aminoetoxicarbamoil)nirazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-ilo1 (Ejemplo 46)
A 0 °C, se añadió TFA (0,2 ml) a una solución del intermedio (46c) (70 mg, 0,063 mmol) en DCM (0,6 ml). La mezcla se agitó a 0°C durante 40 min. Se añadió Et2O para dar un precipitado, se eliminó la fase etérea. El residuo se trituró varias veces en ACN y el sólido obtenido se secó bajo azote. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y concentraron al vacío para dar el ejemplo (46) (10 mg, 0,026 mmol, 42%).
EM m/z ([MH1‘) 387.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,25-3,35 (m, 2H ), 3,38-3,49 (m, 1H), 3,66 (dd, J = 11,4, 2,9 Hz, 1H) , 4,05 (d, J = 17,7 Hz, 0,2H), 4,18-4,26 (m, 2,2H), 4,36 (d, J = 1,5 Hz, 1,6H), 4,49-4,61 (m, 1H), 6,51 (d, J = 5,4 Hz, 0,2H), 6,69-6,74 (m, 1H), 6,83 (d, J = 2,7 Hz, 0,8H), 7,67 (d, J = 2,0 Hz, 0,2H), 7,98 (d, J = 2,7 Hz, 0,8 H).
Ejemplo 47: síntesis de [3-[3-(2-h¡drox¡etox¡carbamo¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-il1 sulfato de sodio
Figure imgf000082_0001
Se añadieron sucesivamente DMAP (80 mg, 0,65 mmol), imidazol (1,10 g, 16,22 mmol) y TBDPSCI (2,2 ml, 8,44 mmol) a una solución de 2-aminooxietanol (500 mg, 6,49 mmol) en DCM (33 ml). La mezcla se agitó a ta durante 18 h. Los productos insolubles se filtraron y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/MeOH: 100/0 a 80/20) para proporcionar el intermedio (47a) (2,1 g, 6,49 mmol, 100%). EM m/z ([M+H]+) 316.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 (ppm) 1,06 (s, 9H), 3,80-3,91 (m, 4H), 7,34-7,46 (m, 6H), 7,64-7,73 (m, 4H ).
Etapa 2: preparación del intermedio N-[2-[terc-but¡l(d¡fen¡l)s¡l¡l1oxietox¡l-1H-p¡razol-3-carboxam¡da) (47b)
Se añadieron sucesivamente el intermedio (47a) (1,052 g, 3,34 mmol), HATU (932 mg, 2,45 mmol) y DIPEA (1,16 ml, 6,69 mmol) a una solución de ácido 1H-pirazol-3-carboxílico (250 mg, 2,23 mmol) en DMF (11 ml). La mezcla se agitó a 40°C durante la noche y a continuación se concentró. El residuo se solubilizó en agua y a continuación se extrajo con AcOEt. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 70/30) para proporcionar el intermedio (47b) (600 mg, 1,47 mmol, 66%).
EM m/z ([MH]-) 408.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 8 (ppm) 1,00 (s, 9H), 3,87 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 4,01 (t, J = 5,0 Hz, 2H) , 6,65 (s, 1H), 7,37-7,51 (m, 6H), 7,60-7,69 (m, 4H), 7,83 (s, 1H), 11,47 (s, 1H), 13,27 (s, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio 1-(6-aliloxi-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-vl)-N-[2-[terc-butil(difenil) sililloxietoxilpirazol-3-carboxamida (47c)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a). el intermedio (1g) (0.20 g. 0.65 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (47b) (0.32 g. 0.78 mmol) en el intermedio (47c) (0.089 g . 0.15 mmol. 24 %) con una relación 6/4 a favor del isómero deseado tras la purificación por cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 50/50).
EM m/z ([M+H]+) 588.
RMN 1H (400 MHz. CDCla) 81.03-1.09 (m. 9H). 2.65-2.87 (m. 2H). 3.06-3.33 (m. 1H). 3.44-3.56 (m. 1H). 3.84-3.98 (m.
2H). 3.98-4.18 (m. 3H). 4.25-4.52 (m. 3H). 5.22-5.42 (m. 2H). 5.89-6.09 (m. 1H). 6.29-6.53 (m . 1H). 6.89 (d. J = 2.6 Hz. 0.6H). 7.31-7.49 (m. 6H). 7.62 (d. J = 2.6 Hz. 0.4H). 7.64-7.72 (m. 4H). 8.83 (br s. 0.4 H). 9.29 (s. 0.6 H).
Etapa 4: preparación del intermedio [3-[3-[2-[terc-butil(difenil)silil1oxietoxicarbamoil1pirazol-1-il1-7-oxo-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-il1sulfato de trifen¡l-[(E)-prop-1-en¡l1fosfon¡o (47d)
En atmósfera inerte. se añadieron ácido acético (18 pl. 0.30 mmol) y Pd(PPh3)4 (87 mg. 0.07 mmol) a una solución del intermedio (47c) (89 mg. 0.15 mmol) en DCM anhidro (1.5 ml). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 h 30. a continuación se añadieron piridina (1.5 ml) y complejo de trióxido de azufre y piridina (120 mg. 0. 75 mmol) y la mezcla se agitó a ta durante la noche en la oscuridad. La mezcla se diluyó con DCM y se filtró. El filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (47d) (38 mg. 0.04 mmol. 28 %) con una relación 6/4 a favor de la isómero deseado.
EM m/z ([MH1‘) 626.
Etapa 5: preparación de sulfato de [3-[3-(2-h¡drox¡etox¡carbamo¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-il1 de sodio (Ejemplo 47)
A 0 °C. se añadió 3HF.NEt3 (6.7 pl. 0.041 mmol) a una solución del intermedio (47d) (38 mg. 0.041 mmol) en THF (0.2 ml). La mezcla se agitó a 0°C durante 1 h. Se añadió más 3HF.NEt3 (26.8 pl. 0.164 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Después de la concentración. se añadió Et2O para dar un precipitado que se filtró. El precipitado se disolvió en ACN (0.2 ml). Se añadió una solución de Nal (60 mg. 0.40 mmol) en ACN (0.3 ml) y la mezcla se agitó a ta durante 2 h. El precipitado se filtró. se lavó con ACN y se purificó por cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y concentraron al vacío para dar el ejemplo (47) (7.7 mg. 0.019 mmol. 47 %) con una proporción de 7/3 a favor del isómero deseado.
EM m/z ([MH1‘) 388.
RMN 1H (300 MHz. D2O) 83.38-3.47 (m. 1H). 3.59-3.72 (m. 1H). 3.78-3.85 (m. 2H). 4.03-4.41 (m. 4H). 4.50-4.59 (m.
1H). 6.44-6.85 (m. 2H). 7.68 (d. J = 2.1 Hz. 0.3H). 7.97 (d. J = 2.7 Hz. 0.7H).
Ejemplo 48: síntesis de [3-[3-[2-(2-amon¡omet¡lam¡no)-2-oxo-etil1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6- diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-il1sulfato de sodio y 2.2.2-trifluoroacetato
Figure imgf000084_0001
Se diluyó una mezcla de éster metílico del ácido (1H-pirazol-3-il)-acético (0,85 g, 6,07 mmol) y NaOH 6N (1,27 ml, 7,65 mmol) en MeOH (17 ml). Después de agitar 1 noche, la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se diluyó con agua y se acidificó con HCl al 37% hasta pH 1. La mezcla se concentró bajo flujo de nitrógeno. Se añadió ACN y el sólido se filtró para proporcionar el intermedio (48a) (200 mg, 6,07 mmol, 100%).
EM m/z ([M+H]+) 127.
RMN 1H(300 MHz, CDCla): 8 (ppm) 4,61 (s, 2H), 6,14 (s, 1H), 7,46 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,02 (s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio N-[2-[[2-(1H-p¡razol-3-il)acet¡l1am¡no1et¡l1carbamato de terc-butilo (48b)
A una solución del intermedio (48a) (0,75 g, 5,79 mmol) en DMF anhidra (30 ml) se añadieron HATU (1,7 g, 6,37 mmol), DIPEA (6,1 ml, 34,74 mmol) y N-(2-aminoetil)carbamato de terc-butilo (1,2 ml, 7,52 mmol). La suspensión se agitó 1 noche a ta. El residuo se concentró al vacío y se purificó sobre gel de sílice (DCM/acetona: 70/30 a 30/70) para proporcionar el intermedio (XXb) (620 mg, 2,31 mmol, 40 %) como un polvo marrón.
EM m/z ([M+H]+) 269.
RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 8 (ppm) 1,44 (s, 9H), 3,16 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 3,26-3,30 (m, 2H), 3,58 (s, 2H), 6,26 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 2,2 Hz, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio N-[2-[[2-[1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l) pirazol-3-illacetillaminoletillcarbamato de terc-butilo (48c)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1g) (352 mg, 1,15 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (48b) (620 mg, 2,32 mmol) en el intermedio (48c) (220 mg, 0,49 mmol, 43 %) tras la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 70/30 a 30/70).
EM m/z ([M+H]+) 347.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 1,45 (s, 9H), 3,12-3,43 (m, 5H), 3,50-3,66 (m, 3H), 4,14-4,24 (m, 2H ), 4,40-4,55 (m, 3H), 4,92 (br s, 1H), 5,33-5,47 (m, 2H), 5,96-6,12 (m, 1H), 6,31 (br s, 1H), 6,49 (br s, 1H), 6,60 (br s, 1H), 7,57 (br s, 1H).
Etapa 4: preparación del intermedio N-[2-[[2-[1-(6-h¡drox¡-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l) pirazol-3-¡llacetillaminoletillcarbamato de terc-butilo (48d)
En atmósfera inerte, se diluyó una solución del intermedio (48c) (50 mg, 0,11 mmol) en DCM anhidro (2,8 ml). Se añadieron sucesivamente AcOH (13 pl, 0,22 mmol) y Pd(PPH3)4 (64 mg, 0,055 mmol). Después de agitar durante 2 h, el residuo se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 70/30 a 50/50) para proporcionar el intermedio (48 d) (30 mg, 0,073 mmol, 67 %).
EM m/z ([M+H]+) 407.
Etapa 5: preparación del intermedio de [3-[3-[2-[2-(terc-butoxicarbon¡lam¡no) etilaminol-2-oxo-etil1pirazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazab¡c¡clo[3.2 .11de oct-3-en-6-il1 sulfato de sodio (48e)
A una solución del intermedio (48d) (30 mg, 0,073 mmol) en piridina anhidra (3 ml) en atmósfera inerte se añadió complejo de trióxido de azufre y piridina (58 mg, 0,365 mmol). Después de agitar durante 18 h, se añadió DCM al residuo y se filtró el sólido. El filtrado se evaporó para dar un sólido que se aplicó en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con agua). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron para dar una mezcla de regioisómeros con el intermedio (48e) como producto principal (proporción 80/20) (20 mg, 0,039 mmol, 54%).
EM m/z ([MH1‘) 485.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 1,33 (s, 9H), 3,13-3,18 (m, 2H), 3,23-3,30 (m, 2H), 3,41 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,57­ 3,68 (m, 3H), 4,32 (s, 2H), 4,53 (dd, J = 2,6, 5,7 Hz, 1H), 6,38 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 6,56 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,84 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 6: preparación de [3-[3-[2-(2-amon¡omet¡lam¡no)-2-oxo-et¡l1p¡razol-q-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato 2.2.2-tr¡fluoroacetato de sodio (Ejemplo 48)
El intermedio (48e) (20 mg, 0,04 mmol) se solubilizó en TFA (350 pl) y DCM (1,25 ml) a 0 °C en atmósfera inerte. Después de agitar durante 1 h, se añadió Et2O. El precipitado se trituró varias veces con Et2O y a continuación con ACN para dar el ejemplo 48 (4,7 mg, 0,011 mmol, 30%) como un polvo amarillo.
EM m/z ([MH1‘) 385.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,05-3,08 (m, 2H), 3,35-3,38 (m, 1H), 3,42-3,45 (m, 2H), 3,58-3,63 ( m, 2H), 4,15­ 4,19 (m, 1H), 4,27-4,30 (m, 2H), 4,49 (dd, J = 5,6, 2,7 Hz, 1H), 6,34 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 6,51 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Ejemplo 49: síntesis de [3-[3-(amon¡omet¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en- 6-¡l1 sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato
Figure imgf000086_0001
Etapa 1: preparación del intermedio N-[[1-(6-aliloxi-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)nirazol-3-il1 metillcarbamato de terc-butilo (49a)
Ut¡l¡zando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7). el intermedio (1 g) (700 mg, 2.30 mmol) se convirtió por reacción con N-(1H-pirazol-3-ilmetil)carbamato de terc-butilo (910 mg. 4.60 mmol) en el intermedio (49a) (380 mg. 1.01 mmol. 44 %) después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 80/20).
EM m/z ([M+H]+) 376.
RMN 1H (400 MHz. CDCla): 8 (ppm) 8 1.41 (s. 9H). 3.08 (d. J = 10.8 Hz. 1H). 3.46 (dd. J = 2.8. 10.9 Hz. 1H ). 4.03­ 4.15 (m. 2H). 4.19-4.24 (m. 2H). 4.32-4.43 (m. 3H). 5.14 (br s. 1H). 5.23-5.35 (m. 2H). 5.96 (ddt. J = 6.3. 10.3. 16.8 Hz.
1H). 6.22 (d. J = 2.6 Hz. 1H). 6.37 (d. J = 5.5 Hz. 1H). 7.49 (d. J = 2.6 Hz. 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio N-[[1-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azabic¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)p¡razol-3-¡l1 metillcarbamato de terc-butilo (49b)
En atmósfera inerte. se diluyó una solución del intermedio (49a) (50 mg. 0.11 mmol) en DCM anhidro (1 ml). Se añadieron sucesivamente PhS¡H3 (7.4 pl. 0.08 mmol) y Pd(PPH3)4 (2.4 mg. 0.002 mmol). Después de agitar durante 2 h 30. el residuo se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 70/30) para proporcionar el intermedio (49b) (13 mg. 0.038 mmol. 98 %).
EM m/z ([M+H]+) 336.
Etapa 3: preparación de [3-[3-[(terc-butoxvcarbon¡lam¡no)met¡l1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio (49c)
A una solución del intermedio (49b) (13 mg. 0.04 mmol) en piridina anhidra (0.5 ml) en atmósfera inerte se añadió complejo de trióxido de azufre y piridina (26 mg. 0.20 mmol). Después de agitar durante 18 h. se añadió DCM al residuo y el sólido se filtró y se lavó con DCM. El filtrado se evaporó para dar un sólido que se aplicó en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex®50WX8 forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con agua). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron. congelaron y liofilizaron para proporcionar el intermedio (49c)
(10 mg. 0.02 mmol. 50%).
EM m/z ([MH]-) 415.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 1,38 (s, 9H), 3,40 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,59-3,68 (m, 1H), 4,19 (s , 2H), 4,30 (s, 2H), 4,52 (dd, J = 2,6, 5,7 Hz, 1H), 6,35 (s, 1H), 6,52 (d, 5,7 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 2,7 Hz , 1H).
Etapa 4: preparación [3-[3-(amon¡omet¡l)n¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡ciclo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato (Ejemplo 49)
El intermedio (49c) (10 mg, 0,02 mmol) se solubilizó en TFA (250 j l) y DCM (750 j l) a 0 °C en atmósfera inerte. Después de agitar durante 1 h, el residuo se trituró varias veces con Et2O y ACN a 0 °C para dar el ejemplo (49) (2,5 mg, 0,0079 mmol, 33 %) como un polvo amarillo.
EM m/z ([MH]-) 314.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 83,42-3,48 (m, 1H), 3,67-3,72 (m, 1H), 4,22 (s, 2H), 4,38 (d, j = 1,6 Hz, 2H), 4,58 (dd, J = 2,5, 5,7 Hz, 1H), 6,27 (s, 1H), 6,53 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Figure imgf000087_0001
Etapa 1: preparación del intermedio N-[1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)p¡razol-3-¡l1-2-terc -but¡l(difen¡l)s¡l¡l1ox¡-acetam¡da (50a)
A 0 °C, se añadieron TEA (0,24 ml, 1,78 mmol) y cloruro de pivaloílo (88 jl, 0,71 mmol) a una solución de ácido 2-[terc-but¡l(d¡fenil)s¡lil1ox¡acético (224 mg, 0,71 mmol) en DCM (6 ml). La mezcla se agitó a 0°C durante 45 min. A continuación, se añadió una solución del intermedio (13b) (155 mg, 0,59 mmol) en DCM (2,5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Después de la concentración, el producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 80/20) para proporcionar el intermedio (50a) (260 mg, 0,47 mmol, 79 %).
EM m/z ([M+H1+) 558.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 (ppm) 1,14 (s, 9H), 3,14 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,50-3,58 (m, 1H), 4,07-4,19 ( m, 2H), 4,21 (s, 2H), 4,36-4,53 (m, 3H), 5,30-5,43 (m, 2H), 5,95-6,10 (m, 1H), 6,43 (d, J = 5,4 Hz, 1H) , 6,89 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,37-7,48 (m, 6H), 7,50 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,60-7,69 (m, 4H), 9,03 (s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio [3-[3-[[2-[terc-but¡l(d¡fen¡l)s¡l¡l1ox¡acet¡l1am¡nolp¡razol-1-il1-7-oxo-1,6-d¡azab¡ciclo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de trifen¡l-[(E)-prop-1-en¡l1fosfon¡o (50b)
En atmósfera inerte, se añadieron ácido acético (52 jL , 0,90 mmol) y Pd(PPh3)4 (260 mg, 0,22 mmol) a una solución del intermedio (50a) (250 mg, 0,45 mmol) en DCM anhidro (4,5 ml). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 h 30, a continuación se añadieron piridina (4, 5 ml) y complejo de trióxido de azufre y piridina (357 mg, 2, 25 mmol) y la mezcla se agitó a ta durante la noche en la oscuridad. La mezcla se diluyó con DCM, el precipitado obtenido se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (50b) (269 mg, 0,30 mmol, 67%).
EM m/z ([MH]-) 596.
Etapa 3: preparación de [3-[3-[(2-h¡drox¡vacet¡l)am¡no1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azabic¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de trietilamonio (50c)
El intermedio (50b) (269 mg. 0.30 mmol) se disolvió en ACN (1.5 ml). A continuación. se añadió 3HF.NEt3 (98 pl. 0.59 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El sólido obtenido se filtró para dar el intermedio (50c) (89 mg. 0.19 mmol. 65%).
EM m/z ([MH]-) 358.
RMN 1H (300 MHz. DO): 8 (ppm) 1.26 (t. J = 7.3 Hz. 9H). 3.18 (q. J = 7.3 Hz. 6H). 3.43 (d. J = 11.3 Hz. 1H). 3.62-3.72 (m. 1H). 4.24 (s. 2H). 4.34 (d. J = 1.5 Hz. 2H). 4.55 (dd. J = 5.7. 2.6 Hz. 1H). 6.58 (d . J = 5.8 Hz. 1H). 6.62 (d. J = 2.7 Hz. 1H). 7.85 (d. J = 2.7 Hz. 1H).
Etapa 4: preparación de [3-[3-[(2-h¡drox¡acet¡l)am¡nolp¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-il1 sulfato de sodio (Ejemplo 50)
El intermedio (50c) (75 mg. 0.16 mmol) se disolvió en H2O y se convirtió después del intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2 N y lavada hasta pH neutro con H2O) en el ejemplo (50) (55 mg. 0.14 mmol. 89%).
EM m/z ([MH1‘) 358.
RMN 1H (300 MHz. D2O): 8 (ppm) 3.43 (d. J = 11.3 Hz. 1H). 3.61-3.73 (m. 1H). 4.24 (s. 2H). 4.34 (d . J = 1.5 Hz. 2H).
4.55 (dd. J = 5.7. 2.6 Hz. 1H). 6.53-6.61 (m. 1H). 6.61 (d. J = 2.7 Hz. 1H). 7.84 (d. J = 2.7 Hz. 1H).
Ejemplo 51: síntesis de [3-[3-(3-hidroxipropanoilamino)pirazol-1-il1-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-il1 sulfato de sodio
Figure imgf000088_0001
Etapa 1: preparación del intermedio N-[1-(6-aliloxi-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)nirazol-3-il1-3-[tercbut¡l(difen¡l)s¡l¡l1ox¡propanam¡da (51a)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 50 (etapa 1). el intermedio (13b) (100 mg. 0.38 mmol) se convirtió por reacción con ácido 3-[terc-butil(difenil)silil1oxipropanoico (151 mg. 0.46 mmol ) en el intermedio (51a) (130 mg. 0.23 mmol. 50 %) después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 80/20).
EM m/z ([M+H]+) 572.
RMN 1H (300 MHz, CDCI3): 8 (ppm) 1,11 (s, 9H), 2,57 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,13 (d, 10,8 Hz, 1H), 3,52 (dd , J = 10,7, 2,7 Hz, 1H), 3,96 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 4,04-4,18 (m, 2H), 4,34-4,54 (m, 3H), 5,27-5,44 (m, 2H), 5,94-6,11 (m, 1H), 6,34 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,87 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,35-7,49 (m, 6H), 7,51 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,63-7,72 (m, 4H), 9,21 (s, 1H). Etapa 2: preparación del intermedio [3-[3-[3-[terc-butil(difenil)silil1oxipropanoilamino1pirazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de trifen¡l-[(E)-prop-1-en¡l1fosfon¡o (51b)
Ut¡l¡zando el procedimiento descrito en el ejemplo 50 (etapa 2), el intermedio (51a) (130 mg, 0,23 mmol) se convirtió en el intermedio (51b) (107 mg, 0,12 mmol, 52 %) después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/Acetona: 100/0 a 0/100).
EM m/z ([MH1-) 610.
Etapa 3: preparación de [3-[3-(3-h¡drox¡propano¡lam¡no)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de trifen¡l-[(E)-prop-1-en¡l1fosfon¡o (51c)
El intermedio (51b) (107 mg, 0,12 mmol) se disolvió en ACN (1,2 ml) y a continuación se añadió 3HF.NEt3 (39 pl, 0,23 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Después de la concentración, el producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 99/1 a 0/100) para proporcionar el intermedio (51c) (40 mg, 0,059 mmol, 51%).
EM m/z ([MH1‘) 372.
Etapa 4: preparación de [3-[3-(3-h¡drox¡propano¡lam¡no)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (Ejemplo 51)
El intermedio (51c) (40 mg, 0,059 mmol) se convirtió después del intercambio iónico con una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2 N y lavada hasta pH neutro con H 2 O) en el Ejemplo (51) (12 mg, 0,03 mmol, 52 %).
EM m/z ([MH1‘) 372.
RMN 1H (300 MHz, D 2O): 8 (ppm) 2,66 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,42 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,63-3,71 (m, 1H ), 3,91 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 4,33 (d, J = 1,5 Hz, 2H), 4,55 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 5,7 Hz, 1H) ), 6,60 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Ejemplo 52: síntesis de [3-[3-[(2-am¡no-2-oxo-etox¡)carbamo¡l1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3 -en-6-il1 sulfato de sodio
Figure imgf000090_0001
Etapa 1: preparación de 1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)-N-(2-am¡no-2-oxo-etox¡)p¡razol-3-carboxamida (52a)
Usando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo 36 (etapa 4). el ¡ntermed¡o (36c) (126 mg, 0.434 mmol) se conv¡rt¡ó por reacc¡ón con clorh¡drato de 2-am¡noox¡acetam¡da (51 mg. 0.659 mmol) en el ¡ntermed¡o (52a) (70 mg. 0.193 mmol.
44 %) después de la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona 100/0 a 0/100). EM m/z ([MH]-) 361.
EM m/z ([M+H]+) 363.
Etapa 2: preparac¡ón de N-(2-am¡no-2-oxo-etox¡)-1-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)p¡razol-3-carboxam¡da (52b)
El ¡ntermed¡o (52a) (70 mg. 0.193 mmol) se d¡solv¡ó en DCM anh¡dro (1.4 ml). La soluc¡ón se desgas¡f¡có 10 m¡n en atmósfera de argón y se añad¡eron suces¡vamente AcOH (22 pl. 0.386 mmol) y Pd(PPh3)4 (111 mg. 0.097 mmol). Después de ag¡tar durante 45 m¡n a temperatura amb¡ente. se f¡ltró un sól¡do blanco para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (52b) (40 mg. 0.122 mmol. 28 % en 2 etapas).
EM m/z ([M+H]+) 323.
EM m/z ([MH]-) 321.
Etapa 3: preparac¡ón [3-[3-[(2-am¡no-2-oxo-etox¡)carbamo¡l1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sod¡o (Ejemplo 52)
A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (52b) (40 mg. 0.122 mmol) en p¡r¡d¡na anh¡dra (0.720 ml) en atmósfera ¡nerte se añad¡ó complejo de tr¡óx¡do de azufre y p¡r¡d¡na (98 mg. 0.613 mmol). Después de ag¡tar durante 18 h. la mezcla heterogénea se concentró al vacío. Se añad¡ó DCM al res¡duo y la mezcla se f¡ltró para el¡m¡nar las sales. Se h¡zo la m¡sma operac¡ón con acetona y ACN. A cont¡nuac¡ón. el f¡ltrado se apl¡có en una columna de forma de sod¡o Dowex (Dowex® 50WX8 forma de h¡drógeno almacenada con una soluc¡ón acuosa de NaOH 2 N y lavada hasta pH neutro con agua). Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se comb¡naron. congelaron. l¡of¡l¡zaron y pur¡f¡caron med¡ante cromatografía en gel de síl¡ce de fase ¡nversa C18 (agua/ACN: 99/1) para dar el ejemplo (52) (2 mg. 0.005 mmol, 4%).
EM m/z ([MH]-) 401.
EM m/z ([M+H]+) 403.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,44 (d, 10,2 Hz, 1H), 3,65-3,72 (m, 1H), 4,39 (d, J = 1,4 Hz, 2H) 4,53 (s, 2H), 4,56­ 4,60 (m, 1H), 6,73-6,75 (m, 1H), 6,85 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Ejemplo 55: síntesis de [7-oxo-3-(4-t¡azol-2-¡ltr¡azol-1-¡l)-1.6-d¡azabic¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio
Figure imgf000091_0001
En un matraz sellado de 5 ml en atmósfera ¡nerte, se d¡luyó el ¡ntermed¡o (1 g) (250 mg, 0,82 mmol) con DMSO anh¡dro (3 ml). Se añad¡eron suces¡vamente CuI (16 mg, 0,08 mmol), az¡da de sod¡o (80 mg, 1,22 mmol), ascorbato de sod¡o (16 mg, 0,08 mmol) y DMCyDA (19 pl, 0,12 mmol). La soluc¡ón verde se volv¡ó ráp¡damente marrón. La mezcla se ag¡tó a temperatura amb¡ente hasta que se completó la reacc¡ón. Después de 1 h, se añad¡ó a la mezcla 2-et¡n¡lt¡azol (89 pl, 0,98 mmol). La mezcla se agitó a temperatura amb¡ente hasta la desapar¡c¡ón de la az¡da ¡ntermed¡a. Después de 30 m¡n, la mezcla se d¡luyó con H2O (30 ml) y se extrajo con EtOAc (3x15 ml). Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron (Na2SO4) y se concentró al vacío para dar un ace¡te marrón que se pur¡f¡có por cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (c¡clohexano/EtOAc: 100/0 a 0/100) para dar el ¡ntermed¡o (55a) (80 mg, 0,24 mmol, 30 %) como un sól¡do marrón.
EM m/z ([M+H]+) 331, ([2M+H]+) 661.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 (ppm) 3,22 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,60 (dd, J = 11,0, 2,8 Hz, 1H), 4,19 (dd, J = 5,5, 2,6 Hz, 1H), 4,29-4,64 (m, 4H), 5,26 -5,45 (m, 2H), 6,03 (ddt, J = 16,8, 10,3, 6,4 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 8,28 (s, 1H).
Etapa 2: preparac¡ón del ¡ntermed¡o 6-h¡drox¡-3-(4-t¡azol-2-¡ltr¡azol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (55b) Usando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo (4) (etapa 2), el ¡ntermed¡o (55a) (80 mg, 0,24 mmol) se conv¡rt¡ó en el ¡ntermed¡o (55b) (32 mg, 0,11 mmol, 45 %) después de la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía “flash”. sobre gel de sílice (DCM/Acetona: 100/0 a 0/100).
EM m/z ([M+H]+) 291.
Etapa 3: preparación de [7-oxo-3-(4-t¡azol-2-¡ltr¡azol-1-¡l)-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio (ejemplo 55)
Ut¡l¡zando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo (5) (etapa 3), el ¡ntermed¡o (55b) (32 mg, 0,11 mmol) se conv¡rt¡ó después del ¡ntercamb¡o ¡ón¡co (columna de forma de sod¡o Dowex) en el ejemplo (55) (31 mg, 0,08 mmol, 70%) como un polvo blanco.
EM m/z ([MH]-) 369.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,53 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 3,77 (dd, J = 11,6, 2,8 Hz, 1H), 4,39-4,56 ( m, 2H), 4,70 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 7,59-7,69 (m, 1H), 7,77-7,82 (m, 1H), 8,40-8,48 (m, 1H).
Ejemplo 56: síntes¡s de [3-(4-carbamo¡ltr¡azol-1-¡l)-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11 oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sod¡o
Figure imgf000092_0001
En un matraz sellado de 5 ml en atmósfera ¡nerte, se d¡luyó el ¡ntermed¡o (1 g) (250 mg, 0,82 mmol) con DMSO anh¡dro (3 ml). Se añad¡eron suces¡vamente Cul (16 mg, 0,08 mmol), az¡da de sod¡o (80 mg, 1,22 mmol), ascorbato de sod¡o (16 mg, 0,08 mmol) y DMCyDA (19 pl, 0,12 mmol). La soluc¡ón verde se volv¡ó ráp¡damente marrón. La mezcla se ag¡tó a temperatura amb¡ente hasta que se completó la reacc¡ón. Después de 45 m¡n, se añad¡ó prop¡olam¡da (68 mg, 0,98 mmol) y la mezcla se ag¡tó a temperatura amb¡ente hasta que desaparec¡ó la az¡da ¡ntermed¡a. Después de 1 h, la mezcla de reacc¡ón se concentró bajo flujo de n¡trógeno. El producto en bruto se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (c¡clohexano/EtoAc: 100/0 a 0/100) y se trituró con Et2O para dar el ¡ntermed¡o (56a) (88 mg, 0,30 mmol, 37 %) como un sól¡do blanco.
EM m/z ([M+H]+) 291, ([2M+H]+) 581.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8(ppm) 3,19 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,54-3,63 (m, 1H), 4,19 (dd, J = 5,5, 2,6 Hz) , 1H), 4,30 (dd, J = 17,8, 2,0 Hz, 1H), 4,36-4,50 (m, 2H), 4,54 (dd, J = 17,8, 1,1 Hz, 1H), 5,28-5,42 (m, 2H), 5,85-6,09 (m, 2H), 6,74-6,80 (m, 1H), 7,08 (s, 1H), 8,36 (s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 1-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-vl)tr¡azol-4-carboxam¡da (56b) Se desgas¡f¡có una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (56a) (88 mg, 0,30 mmol) en DCM anh¡dro (4 ml) durante 10 m¡n en atmósfera de argón. Se añad¡eron sucesivamente AcOH (35 pl, 0,61 mmol) y Pd(PPH3)4 (0,18 g, 0,15 mmol). Después de ag¡tar durante 2 h 30 a temperatura amb¡ente, el prec¡p¡tado se f¡ltró y se lavó con DCM para proporc¡onar un sólido blanco (45 mg). El sól¡do se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce de fase ¡nversa C18 (H2O/ACN: 100/0 a 0/100). Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se comb¡naron, congelaron y l¡of¡l¡zaron para dar el ¡ntermed¡o (56b) (25 mg, 0,10 mmol, 33 %) como un sól¡do blanco.
EM m/z ([M+H]+) 251.
Etapa 3: preparac¡ón de f3-(4-carbamo¡ltr¡azol-1-¡l)-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clof3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sod¡o (ejemplo 56)
Usando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo (5) (etapa 3), el ¡ntermed¡o (56b) (25 mg, 0,10 mmol) se conv¡rt¡ó después del ¡ntercamb¡o ¡ón¡co (columna de forma de sod¡o Dowex) y cromatografía “flash” en gel de síl¡ce de fase ¡nversa C18 (H2O/ACN: 98/2) en el ejemplo (56) (14 mg, 0,04 mmol, 39 %) como un polvo blanco.
EM m/z ([M+H-SO3H ]+) 251, ([M+H]+) 331.
EM m/z ([MH]-) 329.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,51 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,73 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 17,7, 1,3 Hz, 1H), 4,52 (dd, J = 17,7, 1,9 Hz, 1H), (m, 1H), 4,66 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,70 (s, 1H). Ejemplo 57: síntes¡s [3-[4-(amon¡omet¡l)tr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en- 6-¡n sulfato de sod¡o y 2,2,2-tr¡fluoroacetato
Figure imgf000093_0001
metillcarbamato de terc-butilo (57a)
En un matraz sellado de 5 ml en atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (1 g) (250 mg, 0,82 mmol) con DMSO anhidro (3 ml). Se añadieron sucesivamente CuI (16 mg, 0,08 mmol), azida de sodio (80 mg, 1,22 mmol), ascorbato de sodio (68 mg, 0,34 mmol), N-Boc-propargilamina (152 mg, 0,98 mmol) y DMCyDA (19 pl, 0,12 mmol). La solución verde se volvió rápidamente marrón. La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta que se completó la reacción. Después de 1 h, la mezcla de reacción se diluyó en H2O (30 ml) y se extrajo con EtoAc (3x15 ml). Las fases orgánicas se secaron (Na2SO4), se concentraron y el crudo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 0/100) para dar el intermedio (57a) (259 mg, 0,69 mmol, 84%) como un aceite amarillo. EM m/z ([M+H]+) 377, ([2M+H]+) 753.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 1,44 (s, 9H), 3,18 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,52-3,61 (m, 1H), 4,15 (dd , J = 5,5, 2,6 Hz, 1H), 4,30 (dd, J = 17,9, 2,0 Hz, 1H), 4,36-4,55 (m, 5H), 5,11 (br s, 1H), 5,28-5,43 (m, 2H) , 6,01 (ddt, J = 16,9, 10,3, 6,4 Hz, 1H), 6,57-6,65 (m, 1H), 7,73 (s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio N-[[1-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)tr¡azol-4-¡l] metillcarbamato de terc-butilo (57b)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo (4) (etapa 2), el intermedio (57a) (259 mg, 0,69 mmol) se convirtió en el intermedio (57b) (104 mg, 0,31 mmol, 45 %) como un aceite de naranja contaminado con óxido de trifenilfosfina. EM m/z ([M+H]+) 337.
Etapa 3: preparación de [3-[4-[(terc-butoxicarbonilamino)metil]triazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio (57c)
El intermedio (57b) (104 mg, 0,31 mmol) se disolvió en una mezcla de tBuOH (1,5 ml) y H2O (1,5 ml). Se añadió TEA (11 pL, 0,08 mmol) y complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (52 mg, 0,37 mmol) y la mezcla se agitó durante la noche a ta. La mezcla de reacción se concentró al vacío y se purificó directamente por cromatografía en fase inversa C-18 (H2O/ACN: 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el intermedio esperado se combinaron y concentraron al vacío. El residuo se disolvió en H2O y se convirtió después del intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex ® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O) en el intermedio (57c) (58 mg, 0,13 mmol, 42 %) como un polvo blanco después de la liofilización. EM m/z ([M+H]+) 331.
EM m/z ([MH]-) 329.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 1,39 (s, 9H), 3,48 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,70 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz 1H), 4,32 (s, 2H), 4,40 (dd, J = 17,7, 1,2 Hz, 1H), 4,48 (dd, J = 17,7, 1,9 Hz, 1H), 4,62 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 6,86 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,13 (s, 1H).
Etapa 4: Preparación [3-[4-(amon¡omet¡l)tr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato (ejemplo 57)
A una suspensión del intermedio (57c) (46 mg, 0,11 mmol) en DCM anhidro (2 ml) enfriada a 0 °C se le añadió lentamente una solución de TFA (160 pl, 2,10 mmol) en DCM anhidro (1 ml). Después de agitar durante 1 hora a 0 °C y 1 hora a ta, la mezcla se diluyó en Et2O (5 ml). El precipitado formado se aisló y se lavó con ACN y DCM y, a continuación, se secó. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” en fase inversa C-18 (H2O/ACN: 99/1). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron para proporcionar el ejemplo (57) (4,9 mg, 0,01 mmol, 7 %) como un sólido blanco.
EM m/z ([MH]') 315.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,49 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,71 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz, 1H), 4,33-4,55 ( m, 4H), 4,63 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 6,88-6,95 (m, 1H), 8,37 (s, 1H).
RMN 19F (367 MHz, D2O) 8 -75,54 (s, 3F).
Ejemplo 59: Síntesis de [3-[4-(d¡met¡lam¡no)met¡ltr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio
Figure imgf000095_0001
En un matraz sellado de 5 ml en atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (1 g) (250 mg, 0,82 mmol) con DMSO anhidro (3 ml). Se añadieron sucesivamente CuI (16 mg, 0,08 mmol), azida de sodio (80 mg, 1,22 mmol), ascorbato de sodio ( l6 mg, 0,08 mmol), 3-dimetilamino-1-propino (105 pl, 0,98 mmol) y DMCyDA (19 pl, 0,12 mmol). La solución verde se volvió rápidamente marrón. La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta que se completó la reacción. Después de 1 h, la mezcla de reacción se concentró bajo flujo de nitrógeno. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: gradiente de 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron para dar el intermedio (59a) (196 mg, 0,64 mmol, 79 %) como un aceite marrón.
EM m/z ([M+H]+) 305.
EM m/z ([MH]-) 303.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 2,24 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 3,18 (dd, J = 11,0, 2,2 Hz, 1H), 3,51-3,64 (m, 3H), 4,14 (dt, J = 5,4, 2,0 Hz, 1H), 4,25-4,34 (m, 1H), 4,36-4,56 (m, 3H), 5,27-5,42 (m, 2H), 5,92-6,08 (m, 1H), 6,61 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,71 (s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 3-[4-(d¡met¡lam¡no)met¡ltr¡azol-1-¡l1-6-h¡drox¡-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (59b)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo (4) (etapa 2), el intermedio (59a) (196 mg, 0,64 mmol) se convirtió en el intermedio (59b) (150 mg, 0,57 mmol, 88 %) como un aceite marrón. EM m/z ([M+H]+) 265.
Etapa 3: preparación de [3-[4-(d¡met¡lam¡no)met¡ltr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (ejemplo 59)
El intermedio (59b) (150 mg, 0,57 mmol) se disolvió en una mezcla de tBuOH (1 ml) y H2O (1 ml). Se añadió TEA (20 pl, 0,14 mmol) y complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (95 mg, 0,68 mmol). La mezcla se agitó durante la noche a ta y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el intermedio esperado se combinaron y concentraron al vacío. El residuo se disolvió en H2O y se convirtió después del intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex ® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O) en el ejemplo (59) (3,8 mg, 0,01 mmol, 1,8%) como un polvo blanco después de la liofilización.
EM m/z ([M+H]+) 345.
EM m/z ([MH]-) 343.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 2,83 (s, 6H), 3,48 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,70 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz, 1H), 4,35-4,57 (m, 4H), 4,63 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,49 (s, 1H).
Figure imgf000096_0001
Etapa 1: preparación del intermedio N-[[1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡ciclo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)tr¡azol-4-¡l1 aminometill-N-metil-carbamato de terc-butilo (60a)
En un matraz sellado de 5 ml en atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (1 g) (250 mg, 0,82 mmol) con DMSO anhidro (3 ml). Se añadieron sucesivamente Cul (16 mg, 0,08 mmol), azida de sodio (80 mg, 1,22 mmol), ascorbato de sodio (16 mg, 0,08 mmol), Boc-N-metilpropargilamina (147 mg, 0,86 mmol) y DMCyDA (19 pl, 0,12 mmol). La solución verde se volvió rápidamente marrón. La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta que se completó la reacción. Después de 1 h, la mezcla de reacción se diluyó en H2O (5 ml) y se extrajo con EtOAc (3x5 ml). Las fases orgánicas se secaron (Na2SO4) y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 0/100) para dar el intermedio (60a) (293 mg, 0,75 mmol, 92 %) como un aceite marrón. EM m/z ([M+H]+) 391.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8(ppm) 1,44 (s, 9H), 2,88 (s, 3H), 3,17 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,55 (dd, J = 11,0, 2,7 Hz, 1H), 4,05-4,19 (m, 1H), 4,29 (dd, J = 17,9, 2,0 Hz, 1H), 4,34-4,56 (m, 5H), 5,28-5,42 (m, 2H), 5,89-6,09 (m, 1H), 6,54­ 6,64 (m, 1H), 7,64 (br s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio [3-[4-[[terc-butoxicarbonil(metil)amino1metil1triazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazabic¡clo[3.2.11oct-3- en-6-il1 sulfato de sodio (60b)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo (2) (etapa 2), el intermedio (60a) (250 mg, 0,64 mmol) se convirtió en el intermedio (60b) (72 mg, 0,16 mmol, 25 %) como un sólido beige. EM m/z ([M+H]+) 431.
EM m/z ([MH]-) 429.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 1,36 (s, 9H), 2,89 (s, 3H), 3,47 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,64-3,76 ( m, 1H), 4,33-4,54 (m, 4H), 4,62 (dd, J = 5,6, 2,5 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,15 (s, 1H).
Etapa 3: preparación de hidrogenosulfato de [3-[4-(metilaminometil)triazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-ilo] (ejemplo 60)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo (15) (etapa 3), el intermedio (60b) (88 mg, 0,19 mmol) se convirtió en el ejemplo (60) (15 mg, 0,05 mmol, 24%).
EM m/z ([MH]-) 330.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-d 6): 8(ppm) 2,61 (s, 3H), 3,35 (m, 1H), 3,45 (d, 11,1 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 17,8 Hz, 1H), 4,29 (s, 2H), 4,41 (dd, J = 17,5, 2,0 Hz, 1H), 4,47 (dd, J = 5,6, 2,4 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 5,6 Hz) , 1H), 8,67 (s, 1H), 8,89 (br s, 1H).
Ejemplo 61: síntesis de [[3-[4-(carbox¡met¡l)tr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de disodio
Figure imgf000097_0001
En un matraz sellado de 10 ml en atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (1 g) (500 mg, 1,63 mmol) con DMSO anhidro (6 ml). Se añadieron sucesivamente Cul (50 mg, 0,27 mmol), azida de sodio (160 mg, 2,45 mmol), ascorbato de sodio (53 mg, 0,27 mmol), ácido but-3-inoico (164 mg, 1,95 mmol) y DMCyDA (38 pl, 0,24 mmol). La solución verde se volvió rápidamente marrón. La mezcla se agitó a ta hasta que se completó la reacción. Después de 5 h, la reacción se trató con HCl 1 N (10 ml) y se extrajo con EtOAc (5 * 5 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), concentraron y purificaron mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: gradiente 95/5 a 0/100). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron y liofilizaron para proporcionar el intermedio (61a) (189 mg, 0,62 mmol, 38 %) como un sólido verde.
EM m/z ([M+H]+) 306.
EM m/z ([MH]-) 304.
RMN 1H (400 MHz, MeOD): 8 (ppm) 3,32-3,39 (m, 1H), 3,44-3,55 (m, 1H), 3,64 (s, 2H), 4,28-4,48 (m, 5H ), 5,24-5,46 (m, 2H), 5,93-6,13 (m, 1H), 6,83 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,16 (br s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 2-[1-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-il)tr¡azol-4-¡l1acetato de propeniltrifenilfosfonio (61b)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo (4) (etapa 2), el intermedio (61a) (185 mg, 0,61 mmol) se convirtió en el intermedio (61b) (321 mg, 0,57 mmol, 93 %) como un aceite marrón. EM m/z ([M+H]+) 266.
EM m/z ([MH]-) 264, ([2M-H]-) 529.
Etapa 3: preparación de [[3-[4-(carbox¡met¡l)tr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 disódico (ejemplo 61) Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo (5) (etapa 3), el intermedio (61b) (300 mg, 0,53 mmol) se convirtió en el ejemplo (61) (26 mg, 0,07 mmol, 13 %) como un polvo beige. EM m/z ([M+H]+) 346.
EM m/z ([MH]-) 344.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,51 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,60 (m, 2H), 3,72 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz 1H), 4,39-4,60 (m, 2H), 4,63 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,17 (br s, 1H).
Figure imgf000098_0001
Etapa 1: preparación del intermedio N-[2-(prop-2-inoilamino)oxietil]carbamato de terc-butilo (63a) A una solución de ácido prop-2-inoico (62 pl, 1,00 mmol) y EDCHCl (206 mg, 1,00 mmol) en DCM (5 ml) se añadió a 0 °C una solución de N -(2-aminooxietilo)carbamato de terc-butilo (176 mg, 1,00 mmol) en DCM (3 ml). La reacción se agitó durante la noche a ta. A continuación, la mezcla de reacción se filtró para eliminar los sólidos. El filtrado se diluyó en Et2O (5 ml), se filtró y se concentró a presión reducida para proporcionar el intermedio (63a) (229 mg, 1,00 mmol, rendimiento cuantitativo) como un aceite pardo usado en la etapa siguiente sin purificación adicional.
EM m/z ([M+Na]+) 251.
EM m/z ([MH]-) 227.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8(ppm) 1,45 (s, 9H), 2,88 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 3,35-3,44 (m, 2H), 3,91 (t , J = 4,8 Hz, 2H), 5,09 (s, 1H), 9,51 (s, 1H).
Etapa______2 ______preparación_____ de______ N-[2-[[1-(6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-3-il)triazol-4-carbonillaminoloxietillcarbamato de terc-butilo (63b)
En un matraz sellado de 5 ml en atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (1 g) (250 mg, 0,82 mmol) con DMSO anhidro (3 ml). Se añadieron sucesivamente Cul (32 mg, 0,16 mmol), azida de sodio (80 mg, 1,22 mmol), ascorbato de sodio (32 mg, 0,16 mmol), intermedio (63a) (229 mg, 0,98 mmol) y DMCyDA (19 pL, 0,12 mmol). La solución verde se volvió rápidamente marrón. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y a continuación se concentró bajo flujo de nitrógeno. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para dar el intermedio (63b) (251 mg, 0,56 mmol, 68 %) como un sólido marrón.
EM m/z ([M+H]+) 450, ([2M+H]+) 899.
EM m/z ([MH]-) 448, ([2M-H]-) 897.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 8(ppm) 1,39 (s, 9H), 3,16-3,26 (m, 2H), 3,28-3,43 (m, 2H), 3,86 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,33-4,46 (m, 4H), 5,33-5,46 (m, 2H), 5,88-6,07 (m, 1H), 6,84 (t , J = 5,8 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 9,13 (s, 1H), 11,94 (s, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio N-[2-[[1-(6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-3-il)triazol-4-carboninaminoloxietincarbamato de terc-butilo (63c)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo (4) (etapa 2), el intermedio (63b) (251 mg, 0,56 mmol) se convirtió en el intermedio (63c) (68 mg, 0,17 mmol, 30 %) como un sólido amarillo contaminado con óxido de trifenilfosfina. EM m/z ([M+H]+) 410.
EM m/z ([MH]-) 408.
Etapa 4: preparación del intermedio f3-f4-f2-(terc-butoxicarbonilamino)etoxicarbamoilltriazol-1-ill-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en- 6-il] sulfato de sodio (63d)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo (5) (etapa 3), el intermedio (63c) (76 mg, 0,19 mmol) se convirtió en el intermedio (63d) (11 mg, 0,02 mmol, 11 %) como un sólido beige. EM m/z ([MH]-) 488.
Etapa 5: preparación de hidrogenosulfato de [3-[4-(2-am¡noetox¡carbamo¡l)tr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lo1 (ejemplo 63)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo (15) (etapa 3), el intermedio (63d) (11 mg, 0,02 mmol) se convirtió en el ejemplo (63) (1,9 mg, 0,005 mmol, 23 %) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H]+) 390.
EM m/z ([MH]-) 388.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,27-3,37 (m, 2H), 3,49 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,72 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz, 1H), 4,17­ 4,27 (m, 2H), 4,37-4,58 (m, 2H), 4,64 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,57 (s, 1H).
Ejemplo 64: síntesis de [3-[4-(h¡drox¡met¡l)tr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio Etapa 1
1) NaN,, Cul ascorbato Na
Figure imgf000100_0001
Figure imgf000100_0002
64c Ejemplo 64
Etapa 1: preparación del intermedio 6-alilox¡-3-[4-ffterc butil(dimetil)silil1oximetil1triazol-1-il1-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-7-ona (64a)
En un matraz sellado de 5 ml en atmósfera inerte. se diluyó el intermedio (1 g) (250 mg, 0.82 mmol) con DMSO anhidro (3 ml). Se añadieron sucesivamente CuI (16 mg. 0.08 mmol). azida de sodio (80 mg. 1,22 mmol). ascorbato de sodio (16 mg. 0.08 mmol). terc-butil-dimetil(2-propiniloxi)silano (192 pl. 0.95 mmol) y DMCyDA (19 pl. 0.12 mmol). La solución verde se volvió rápidamente naranja. La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta que se completó la reacción. Después de 1 h 30. la mezcla de reacción se diluyó con H2O (5 ml) y se extrajo con EtOAc (5x5 ml). Las fases orgánicas se secaron (Na2SO4) y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtoAc: 100/0 a 0/100) para dar el intermedio (64a) (252 mg. 0.64 mmol. 79 %) como un aceite amarillo.
EM m/z ([M+H]+) 392. ([2M+H]+) 783.
RMN 1H (400 MHz. CDCla): 6(ppm) 0.09 (s. 3H). 0.13 (s. 3H). 0.92 (s. 9H). 3.19 (d. J = 10.9 Hz. 1H ). 3.52-3.63 (m.
1H). 4.15 (dd. J = 5.6. 2.6 Hz. 1H). 4.32 (dd. J = 17.9. 2.0 Hz. 1H). 4.36-4.58 (m. 3H). 4.84 (d. J = 0.9 Hz. 2H). 5.26­ 5.45 (m. 2H). 5.92-6.12 (m. 1H). 6.57-6.66 (m. 1H). 7.65 (m. 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 3-[4-[[terc-butil(dimetil)silil1oximetil1triazol-1-il1-6-hidroxi-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en- 7-ona (64b)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo (4) (etapa 2). el intermedio (64a) (252 mg. 0.64 mmol) se convirtió en el intermedio (64b) (0.64 mmol. rendimiento cuantitativo estimado) como un aceite de naranja contaminado con trifenilfosfina óxido después de la purificación en gel de sílice (DCM/Acetona: 100/0 a 0/100). La mezcla se utilizará para la siguiente etapa sin más purificación.
EM m/z ([M+H1+) 352.
Etapa 3: preparación [3-[4-[[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡met¡l1tr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en -6-¡l1 sulfato de piridinio (64c)
A una solución del intermedio (64b) (0.64 mmol) en piridina anhidra (6 ml) en atmósfera inerte se añadió complejo de piridina y trióxido de azufre (512 mg. 3.22 mmol). Después de agitar durante 1 h 30. la mezcla heterogénea se concentró al vacío. Se añadió DCM al residuo y se filtraron los sólidos. El filtrado se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para dar el intermedio (64c) (110 mg. 0.22 mmol. 33 % en 2 etapas) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H]+) 432.
EM m/z ([MH]-) 430.
RMN 1H (400 MHz, CDCI3): 8 (ppm) 0,09 (s, 3H), 0,11 (s, 3H), 0,91 (s, 9H), 3,15-3,25 (m, 1H), 3,78 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,32 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 4,51 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 4,65 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 4,81 (s , 2H), 6,64 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,92-8,01 (m, 2H), 8,45 (ddd, J = 7,8, 7,8, 1,6 Hz, 1H), 8,99- 9,06 (m, 2H).
Etapa 4: preparación de [3-[4-(h¡drox¡met¡l)tr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (ejemplo 64)
A una suspensión del intermedio (64c) (110 mg, 0,22 mmol) en THF anhidro (4,5 ml) se añadió lentamente 3HFTEA (70 |jl, 0,43 mmol). Después de agitar durante 2 horas a 20°C y 3 horas a 50°C, la mezcla se concentró a sequedad. El aceite se aplicó en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron para proporcionar el ejemplo (64) (72 mg, 0,21 mmol, 99 %) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H]+) 318.
EM m/z ([MH]-) 316.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,50 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,72 (ddd, J = 11,4, 2,8, 1,0 Hz, 1H), 4,44 ( dd, J = 17,7, 1,3 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 17,7, 1,9 Hz, 1H), 4,64 (dd, J = 5,6, 2,7 Hz, 1H), 4,73 (s, 2H), 6,90 (d , J = 5,6 Hz, 1H), 8,24 (s, 1H).
Ejemplo 65: síntesis de [3-[4-(propanoato)tr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato disódico
Figure imgf000101_0001
Figure imgf000101_0003
Figure imgf000101_0002
Etapa 1: preparación del intermedio ácido 3-[1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1,6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)tr¡azol-4-¡l1propanoico (65a)
En un matraz sellado de 5 ml en atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (1 g) (250 mg, 0,82 mmol) con DMSO anhidro (3 ml). Se añadieron sucesivamente Cul (50 mg, 0,26 mmol), azida de sodio (80 mg, 1,22 mmol), ascorbato de sodio (50 mg, 0,25 mmol), ácido 4-pentinoico (92 mg, 0,94 mmol) y DMCyDA (20 pl, 0,12 mmol). La solución verde se volvió rápidamente marrón. La mezcla se agitó a ta durante 2 h. A continuación, la mezcla de reacción se trató con HCl 1 N (10 ml) y se extrajo con EtOAc (5 x 5 ml). Las fases orgánicas se secaron (Na2SO4) y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 100/0 a 0/100) para dar el intermedio (65a) (137 mg, 0,43 mmol, 52%) como un aceite marrón.
EM m/z ([M+H]+) 320, ([2M+H]+) 639.
EM m/z ([2M-H]-) 637.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 2,69 (dd, J = 7,1, 7,1 Hz, 2H), 2,96 (dd, J = 7,1, 7,1 Hz, 2H), 3,16 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,45-3,53 (m, 1H), 4,15 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 4,22 (dd, J = 17,8, 1,9 Hz, 1H), 4,31-4,45 (m , 3H), 5,26 (dd, J = 10,2, 1,4 Hz, 1H), 5,29-5,37 (m, 1H), 5,94 (ddt, J = 16,9, 10,3, 6,4 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,66 (s, 1H), 8,95 (br s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio ácido 3-[1-(6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-3-il)triazol-4-illpropanoico (65b)
Se desgasificó una solución del intermedio (65a) (137 mg, 0,43 mmol) en DCM anhidro (4 ml) durante 10 min en atmósfera de argón. Se añadieron sucesivamente AcOH (49 pl, 0,86 mmol) y Pd(PPH3)4 (248 mg, 0,22 mmol). Después de agitar durante 1 ha ta, el precipitado se filtró y se lavó con DCM para producir el intermedio (65b) (120 mg, 0,43 mmol, rendimiento cuantitativo).
EM m/z ([M+H]+) 280.
EM m/z ([MH]-) 278, ([2M-H]-) 557.
Etapa 3: preparación de [3-[4-(propanoato)tr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de disodio (ejemplo 65)
El intermedio (65b) (0,43 mmol) se disolvió en una mezcla de tBuOH (2 ml) y H2O (2 ml). Se añadieron TEA (15 pl, 0,10 mmol) y complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (72 mg, 0,52 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 19 horas y a continuación se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el intermedio esperado se combinaron y concentraron al vacío. El residuo se disolvió en H2O y se convirtió después del intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O) en el ejemplo (65) (10 mg, 0,03 mmol, 6 % en 2 etapas).
EM m/z ([M+H]+) 360.
EM m/z ([MH]-) 358.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 2,64-2,79 (m, 2H), 2,91-3,09 (m, 2H), 3,46 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,62 -3,82 (m, 1H), 4,21-4,48 (m, 2H), 4,48-4,64 (m, 1H), 6,77-6,86 (m, 1H), 7,99-8,16 (m, 1H).
Ejemplo 66: síntesis de hidrogenosulfato de [3-(4-(2-(metilamino)acetamida)triazol-1-il)-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lo1
Figure imgf000103_0001
66d E jem plo 66
Etapa 1: preparación del intermedio N-acetamida-N-prop-2-inil-carbamato de terc-butilo (66a)
A una solución de N-(2-amino-2-oxo-etil)carbamato de terc-butilo (300 mg, 1,72 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió hidruro de sodio al 60 % a 0 °C en aceite (103 mg, 2,58 mmol). La mezcla se agitó durante 30 min y a continuación se añadió bromuro de propargilo (323 pl, 4,30 mmol). Al final de la introducción, la reacción se agitó durante la noche a ta. Se añadieron a la mezcla MeOH (1 ml) y a continuación H2O (10 ml). La solución se extrajo con Et2O (3 * 10 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4) y se concentraron a presión reducida. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (66a) (146 mg, 0,69 mmol, 40 %) como un aceite amarillo.
EM m/z ([M+H]+) 213.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 6(ppm) 1,47 (s, 9H), 2,28 (s, 1H), 3,96 (s, 2H), 4,15 (s, 2H), 5,62 (s , 1H), 6,06 (s, 1H). Etapa 2: preparación de N-[[1-(6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)triazol-4-il1metil]-N-acetamidocarbamato de terc-butilo (66b)
En un matraz sellado de 5 ml en atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (1 g) (188 mg, 0,61 mmol) con DMSO anhidro (2,5 ml). Se añadió sucesivamente Cul (58 mg, 0,31 mmol), azida de sodio (60 mg, 0,92 mmol), ascorbato de sodio (58 mg, 0,31 mmol), intermedio (66a) (150 mg, 0,71 mmol) y DMCyDA (14 pl, 0,09 mmol). La solución verde se volvió rápidamente marrón. La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta que se completó la reacción. Después de 1 h, la mezcla de reacción se trató con HCl 1 N (10 ml) y se extrajo con EtOAc (5x5 ml). Las fases orgánicas se secaron (Na2SO4), se concentraron y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para dar el intermedio (66b) (136 mg, 0,31 mmol, 51%) como un aceite marrón.
EM m/z ([M+H]+) 434.
Etapa 3: preparación del intermedio N-acetam¡da-N-[[1l-(6-h¡drox¡-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)tr¡azol-4 illmetillcarbamato de terc-butilo (66c)
Se desgasificó una solución del intermedio (66b) (136 mg, 0,31 mmol) en DCM anhidro (4 ml) durante 10 min en atmósfera de argón. Se añadieron sucesivamente AcOH (36 pl, 0,63 mmol) y Pd(PPH3)4 (181 mg, 0,16 mmol). Después de 1 h, la reacción se concentró a presión reducida. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 95/5 a 0/100) para dar el intermedio (66c) (38 mg, 0,10 mmol, 30%) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H]+) 394.
EM m/z ([2M-H]-) 785.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 1,38 (s, 9H), 3,37 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 3,59 (dd, J = 11,1,2,9 Hz, 1H), 3,99 (dd, J = 5,4, 2,6 Hz, 2H), 4,22-4,43 (m, 3H), 4,58 (s, 2H), 6,92 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,18 (s, 1H ).
Etapa 4: preparación del intermedio [3-[4-[[(2-amino-2-oxo-etil)-terc-butoxicarbonil-amino]lmetil]triazol-1-il]-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l] sulfato de sodio (66d)
El intermedio (66c) (38 mg, 0,10 mmol) se disolvió en una mezcla de tBuOH (1 ml) y H2O (1 ml). Se añadieron TEA (3 pl, 0,02 mmol) y complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (16 mg, 0,12 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y a continuación se concentró al vacío. El residuo se disolvió en H2O y se eluyó en una columna de intercambio iónico Dowex de forma de sodio (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracciones con el compuesto deseado se combinaron y concentraron. El residuo se purificó por cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 100/0 a 0/100) para proporcionar después de la liofilización el intermedio (66d) (27 mg, 0,06 mmol, 56 %) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H]+) 474.
EM m/z ([MH]-) 472.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 1,41 (s, 9H), 3,49 (d, 11,4 Hz, 1H), 3,71 (d, 11,4 Hz, 1H), 4,00 (d , J = 15,1 Hz, 2H), 4,37-4,54 (m, 2H), 4,57-4,67 (m, 3H), 6,87 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H).
Etapa 5: preparación de hidrogenosulfato de [3-(4-(2-(metilamino)acetamida)triazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] (ejemplo 66)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo (15) (etapa 3), el intermedio (66d) (27 mg, 0,06 mmol) se convirtió en el ejemplo (66) (4,6 mg, 0,01 mmol, 22 %) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H]+) 374.
EM m/z ([MH]') 372.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,48 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,70 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz, 1H), 3,89 (s 2H), 4,34-4,45 (m, 3H), 4,50 (dd, J = 17,8, 1,9 Hz, 1H), 4,62 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 5,6 Hz, 1H) ), 8,41 (s, 1H).
Ejemplo 67: síntesis de hidrogenosulfato de [3-(4-(2-(metilamino)etanol)triazol-1il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo]
Figure imgf000105_0001
Etapa 1: preparación del intermedio N-[2-[terc-butil(dimetil)silil1loxietil1 carbamato de terc-butilo (67a)
A una solución de Boc-Glicinol (520 mg, 3,22 mmol) en DCM (7 ml) se añadió TBDMSCI (533 mg, 3,54 mmol), imidazol (329 mg, 4,83 mmol) y DMAP (59 mg, 0,48 mmol). La mezcla se agitó durante la noche a ta. Se añadió solución acuosa saturada de NH4Cl (20 ml) a la mezcla y la solución se extrajo con DCM (3x20 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4) y se concentraron a presión reducida. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 70/30 a 0/100) para dar el intermedio (67a) (336 mg, 1,22 mmol, 38 %) como un aceite amarillo.
EM m/z ([M+H-Boc]+) 176.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 (ppm) 0,06 (s, 6H), 0,89 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 3,23 (dd, J = 5,6, 5,2 Hz), 2H), 3,66 (dd, J = 5,6, 5,2 Hz, 2H), 4,83 (s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio N-[2-[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1oxiet¡l1-N-prop-2-¡n¡l-carbamato de terc-butilo (67b) A una solución del intermedio (67a) (336 mg, 1,22 mmol) en THF (3 ml) se le añadió hidruro de sodio al 60 % a 0 °C en aceite (73 mg, 1,83 mmol). La mezcla se agitó durante 1 h 30 y a continuación se añadió bromuro de propargilo (229 |jl, 3,05 mmol). Al final de la introducción, la reacción se agitó durante la noche a ta. Se añadieron a la mezcla MeOH (1 ml) y a continuación H2O (10 ml). La solución se extrajo con Et2O (3x10 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4) y se concentraron a presión reducida. El crudo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 90/10 a 0/100) para proporcionar el intermedio (67b) (130 mg, 0,41 mmol, 34 %) como un aceite amarillo.
EM m/z ([M+H-Boc]+) 214, ([M+Na]+) 336.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 (ppm) 0,04 (s, 3H), 0,06 (s, 3H), 0,89 (s, 9H), 1,47 (s, 9H), 2,18 (s , 1H), 3,42 (dd, J = 5,9, 5,4 Hz, 2H), 3,74 (s, 2H), 4,13 (m, 2H).
Etapa 3: preparación de N-[[1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azabic¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)tr¡azol-4-¡l1met¡l1-N-[2-[terc but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡et¡l1carbamato de terc-butilo (67c)
En un matraz sellado de 5 ml en atmósfera ¡nerte, se d¡luyó el ¡ntermed¡o (1 g) (194 mg, 0,64 mmol) con DMSO anh¡dro (2,5 ml). Se añad¡eron sucesivamente Cul (18 mg, 0,10 mmol), az¡da de sod¡o (62 mg, 0,95 mmol), ascorbato de sod¡o ( l8 mg, 0,10 mmol), ¡ntermed¡o (67b) (229 mg, 0,73 mmol) y DMCyDA (15 pl, 0,10 mmol). La soluc¡ón verde se volv¡ó ráp¡damente marrón. La mezcla se ag¡tó a temperatura amb¡ente hasta que se completó la reacc¡ón. Después de 1 h 30, la mezcla de reacc¡ón se trató con H2O (5 ml) y se extrajo con EtoAc (3x5 ml). Las fases orgán¡cas se secaron (Na2SO4), se concentraron y el producto en bruto se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (c¡clohexano/EtOAc: 100/0 a 0/100) para dar el ¡ntermed¡o (67c) (186 mg, 0,35 m mol, 55%) como un ace¡te ¡ncoloro. EM m/z ([M+H]+) 535.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 0,05 (s, 6H), 0,89 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 3,17 (d, J = 11,4 Hz, 1H ), 3,33-3,41 (m, 2H), 3,57 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,66-3,79 (m, 2H), 4,12-4,17 (m, 1H), 4,31 (d, J = 17,8 Hz, 1H), 4,37-4,62 (m, 5H), 5,28­ 5,43 (m, 3H), 5,94-6,09 (m, 1H), 6,59 (d, J = 5,4 Hz, 1H).
Etapa 4: preparac¡ón de ¡ntermed¡o [3-[4-[[terc-butox¡carbon¡l-[2-[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡et¡l1am¡no1met¡l1tr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de propen¡ltr¡fen¡lfosfon¡o (67d)
A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (67c) (186 mg, 0,35 mmol) en DCM anh¡dro (4 ml) se le añad¡eron AcOH glac¡al (40 pl, 0,70 mmol) y Pd(PPh3)4 (201 mg, 0,17 mmol). Después de 1 h de ag¡tac¡ón a temperatura amb¡ente, la reacc¡ón se concentró a pres¡ón reduc¡da. Se añad¡eron p¡r¡d¡na (4 ml) y complejo de tr¡óx¡do de azufre y p¡r¡d¡na (277 mg, 1,74 mmol). La suspens¡ón resultante se proteg¡ó de la luz y se ag¡tó hasta que se completó la reacc¡ón. Después de 1 h 30, la mezcla de reacc¡ón se concentró, a cont¡nuac¡ón se d¡luyó con DCM y se f¡ltró. El f¡ltrado se concentró al vacío y a cont¡nuac¡ón se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para produc¡r el ¡ntermed¡o (67d) (117 mg, 0,13 mmol, 38 %) como un ace¡te amar¡llo.
EM m/z ([M+H1+) 575.
EM m/z ([MH1‘) 573.
Etapa 5: preparac¡ón del ¡ntermed¡o h¡drógenosulfato de [3-[4-[[2-[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡et¡lam¡no1 met¡l1tr¡azol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11 oct-3-en-6-¡lo1 (67e)
A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (67d) (117 mg, 0,13 mmol) en DCM anh¡dro (3 ml) enfr¡ada a 0 °C se le añad¡ó lentamente una soluc¡ón de TFA (225 pl, 2,94 mmol) en DCM anh¡dro (2 ml). Después de ag¡tar durante 1 ha 0 °C, la mezcla se d¡luyó en Et2O (10 ml). La soluc¡ón se concentró bajo flujo de n¡trógeno. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (grad¡ente de DCM/acetona/MeOH: 100/0/0 a 0/100/0 a 0/0/100). Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se comb¡naron y concentraron a pres¡ón reduc¡da para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (67e) (26 mg, 0,06 mmol, 41 %) como un sól¡do be¡ge.
EM m/z ([M+H1+) 475.
EM m/z ([MH1‘) 473.
Etapa 6: preparac¡ón de h¡drogenosulfato de [3-(4-(2-(met¡lam¡no)etanol)tr¡azol-1-¡l)-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lo1 (ejemplo 67)
A una suspens¡ón del ¡ntermed¡o (67e) (26 mg, 0,06 mmol) en THF anh¡dro (2 ml) se le añad¡ó lentamente 3HFTEA (9 pl, 0,06 mmol) y la reacc¡ón se ag¡tó durante la noche a ta. La mezcla se concentró para dar un ace¡te marrón. Este ace¡te se apl¡có en una columna de forma de sod¡o Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de h¡drógeno almacenada con una soluc¡ón acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se comb¡naron y concentraron. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce de fase ¡nversa C18 (H2O/ACN: 98/2 a 95/5). Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se comb¡naron, congelaron y l¡of¡l¡zaron para proporc¡onar el ejemplo (67) (1,4 mg, 0,004 mmol, 7 %) como un sól¡do blanco.
EM m/z ([M+H1+) 361.
EM m/z ([MH1‘) 359.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,16-3,26 (m, 2H), 3,48 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,70 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz, 1H), 3,78­ 3,88 (m, 2H), 4,35-4,57 (m, 4H), 4,63 (dd, J = 5,6, 2,5 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,42 (s, 1H).
Ejemplo 68: síntes¡s de [3-[5-(2-h¡drox¡et¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sod¡o.
Figure imgf000107_0001
Una mezcla de 2-(1H-pirazol-3-il)etanol (400 mg, 3,57 mmol), TBDMSCI (928 pl, 5,35 mmol), imidazol (389 mg, 5,71 mmol) y DMAP (480 mg, 3,93 mmol) en DMF (17,8 ml) bajo argón se calentó a 50 °C durante 1 hora. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 100/0) para proporcionar el intermedio (68a) (744 mg, 3,29 mmol, 92 %) como un aceite incoloro.
EM m/z ([M+H]+) 227.
RMN 1H (300 MHz, CDCh): 8 (ppm) 0,00 (s, 6H), 0,85 (s, 9H), 2,82 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,82 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 6,03 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 1,9 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 6-aliloxi-3-[5-[2-[terc-butil(dimetil)silil1oxieti1pirazol-1-il1-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3- en-7-ona (68b) y 6-al¡lox¡-3-[3-[2-[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡et¡l1p¡razol-1-¡l1-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct -3-en-7-ona (68c) Usando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1g) (400 mg, 1,31 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (68a) (355 mg, 1,57 mmol) en los intermedios (68b) (42 mg , 0,105 mmol, 8 %) como un aceite naranja y (68c) (130 mg, 0,32 mmol, 25 %) como un polvo amarillo, después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc y a continuación DCM/acetona).
Intermedio 68b
EM m/z ([M+H1+) 405.
RMN 1H (300 MHz, CDCla): 8 (ppm) 0,00 (d, J = 3,1 Hz, 6H), 0,84 (s, 9H), 2,88 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,20 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 3,44-3,51 (m, 1H), 3,75-3,90 (m, 2H), 4,05 (dd, J = 5,5, 2,5 Hz, 1H), 4,11 (dd, J = 17,8 , 1,1 Hz, 1H), 4,21 (dd, J = 17,8, 1,9 Hz, 1H), 4,34-4,50 (m, 2H), 5,23-5,38 (m, 2H), 6,00 (dddd, J = 17,1, 10,3, 6 ,6 ,6 ,0 Hz, 1H), 6,16 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,26-6,33 (m, 1H), 7,45 (d, J = 1,8 Hz, 1H).
Intermedio 68c
EM m/z ([M+H]+) 405.
RMN 1H (300 MHz, CDCI3): 8 (ppm) 0,00 (s, 6H), 0,85 (s, 9H), 2,80 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 3,11 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 3,46­ 3,52 (m, 1H), 3,80 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 4,05 (dd, J = 5,6, 2,5 Hz, 1H), 4,13 (dd, J = 17,5, 1,9 Hz, 1H), 4,32-4,49 (m, 3H), 5,23-5,39 (m, 2H), 6,00 (dddd, J = 17,0, 10,3, 6,7, 6,0 Hz, 1H), 6,18 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,35-6,40 (m, 1H), 7,44 (d, J = 2,5 Hz, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio 3-[5-[2-[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡et¡l1p¡razol-1-¡l1-6-h¡drox¡-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3- en-7-ona (68d)
Se desgas¡f¡có una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (68b) (42 mg, 0,093 mmol) en DCM anh¡dro (4,1 ml) durante 10 m¡n en atmósfera de argón. Se añad¡eron sucesivamente AcOH (12 pl, 0,208 mmol) y Pd(PPH3)4(60 mg, 0,052 mmol). Después de ag¡tar durante 2 ha ta, se añad¡ó AcOH (6 pl, 0,10 mmol). Después de ag¡tar durante 3 h 30 a ta, la mezcla se concentró al vacío. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (68d) (30 mg) como un ace¡te amar¡llo contam¡nado con óx¡do de tr¡fen¡lfosf¡na.
EM m/z ([M+H]+) 365.
Etapa 4: preparac¡ón de [3-[5-[2-[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡et¡l1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de tr¡met¡lamon¡o (68e)
A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (68d) (30 mg) en tBuOH (0,412 ml) y H2O (0,412 ml) en atmósfera ¡nerte se añad¡ó complejo de tr¡met¡lam¡na y tr¡óx¡do de azufre (14 mg, 0,099 mmol) y TEA (2,9 pl, 0,021 m¡l¡moles). Después de ag¡tar durante 1 h a ta, se añad¡ó complejo de tr¡met¡lam¡na y tr¡óx¡do de azufre (7 mg, 0,045 mmol). Después de ag¡tar durante 16 horas a temperatura amb¡ente, la mezcla se concentró al vacío. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (68e) (15 mg, 0,026 mmol, 28 % en 2 etapas) como un polvo blanco.
EM m/z ([M+H1+) 445.
EM m/z ([MH1‘) 443.
Etapa 5: preparac¡ón de [3-[5-(2-h¡drox¡et¡l)n¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sod¡o (ejemplo 68)
A una suspens¡ón del ¡ntermed¡o (68e) (15 mg, 0,030 mmol) en ACN anh¡dro (0,3 ml) se le añad¡ó lentamente 3HF.TEA (4,9 pl, 0,030 mmol). Después de ag¡tar durante 7 horas a 40°C, la mezcla se concentró para dar un polvo amar¡llo. Este polvo se apl¡có en una columna de forma de sod¡o Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de h¡drógeno almacenada con una soluc¡ón acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se comb¡naron, congelaron y l¡of¡l¡zaron para proporc¡onar el ejemplo (68) (7,5 mg, 0,021 mmol, 75 %) como un sól¡do blanco.
EM m/z ([MH1‘) 329.
RMN 1H (400 MHz, D 2 O): 8 (ppm) 2,94 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 3,52 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,66-3,73 (m, 1H ), 3,83 (td, J = 6,3, 1,7 Hz, 2H), 4,04 (d, J = 17,9 Hz, 1H), 4,23 (dd, J = 17,9, 2,1 Hz, 1H), 4,60 (dd, J = 5,5, 2,6 Hz, 1H), 6,35 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,49-6,59 (m, 1H), 7,61 (d, J = 2,0 Hz, 1H).
Ejemplo 69: síntes¡s de [3-[3-[2-[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡et¡l1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sod¡o
Figure imgf000109_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 3-[3-[2-[terc-but¡l(d¡iT iet¡l)s¡l¡l1ox¡et¡l1p¡razol-1-¡l1-6-h¡drox¡-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3- en-7-ona (69a)
Se desgas¡f¡có una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (68c) (125 mg. 0.309 mmol) en DCM anh¡dro (3.1 ml) durante 10 m¡n en atmósfera de argón. Se añad¡eron suces¡vamente AcOH (0.036 ml. 0.618 mmol) y Pd(PPh3)4 (179 mg. 0.154 mmol). Después de ag¡tar durante 1 h a ta. la mezcla se concentró al vacío. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (69a) (51 mg) como un ace¡te ¡ncoloro contam¡nado con óx¡do de tr¡fen¡lfosf¡na.
EM m/z ([M]+) 365.
Etapa 2: preparac¡ón de f3-f3-f2-fterc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡et¡l1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de tr¡met¡lamon¡o (69b)
A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (69a) (76 mg) en tBuOH (1.05 ml) y H2O (1.05 ml) en atmósfera ¡nerte. se añad¡ó complejo de tr¡met¡lam¡na y tr¡óx¡do de azufre (35 mg. 0.251 mmol) y tr¡etllamlna (7.3 pl. 0.052 mmol). Después de ag¡tar durante 1 h a ta. se añad¡ó complejo de tnmet¡lam¡na y tr¡óx¡do de azufre (16 mg. 0.0115 mmol). Después de ag¡tar durante 16 ha ta. la mezcla se concentró al vacío y el res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporc¡onar [3-[3-[2-[terc-but¡l(d¡metM)sMM]ox¡etM]p¡razol-1-M]-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.1]oct-3-en-6-M]sulfato de tr¡met¡lamon¡o (69b) (39 mg. 0.077 mmol. 25 % en 2 etapas) como un polvo blanco.
EM m/z ([MH1‘) 443.
Etapa 3: preparac¡ón de [3-[3-[2-[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡et¡l1p¡razol-1-¡l-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sod¡o (ejemplo 69)
A una suspens¡ón del ¡ntermed¡o (69b) (39 mg. 0.077 mmol) en ACN anh¡dro (0.775 ml) se añad¡ó lentamente 3HF.TEA (12.6 pl. 0.078 mmol). Después de ag¡tar durante 2 h 30 a 40 °C. se añad¡ó 3HF.TEA (12.6 pl. 0.078 mmol). Después de ag¡tar durante 4 h 30 a 40 °C. se añad¡ó 3HF.TEA (12.6 pl. 0.078 mmol). Después de ag¡tar durante 8 horas a 40 °C y 16 horas a temperatura amb¡ente. la mezcla se concentró para dar un polvo amar¡llo. Este polvo se aplicó en una columna de forma de sod¡o Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de h¡drógeno almacenada con una soluc¡ón acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se comb¡naron. congelaron y MofíNzaron para proporc¡onar un sól¡do blanco que se pur¡f¡có dos veces med¡ante cromatografía “flash” en gel de síl¡ce de fase ¡nversa C18 (H2O/ACN: 98/2 a 95/5). Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se comb¡naron. congelaron y MofM¡zaron para proporc¡onar el ejemplo (69) (3 mg. 0.0085 mmol. 11 %) como un polvo be¡ge.
EM m/z ([MH1‘) 329.
RMN 1H (300 MHz. D2O): 8 (ppm) 2.85 (t. J = 6.5 Hz. 2H). 3.43 (d. J = 11.3 Hz. 1H). 3.67 (dd. J = 11.3.2.4 Hz. 1H).
3.83 (t. J = 6.5 Hz. 2H). 4.33 (s. 2H). 4.55 (dd. J = 5.7. 2.6 Hz. 1H). 6.37 (d. J = 2.6 Hz. 1H ). 6.54 (d. J = 5.6 Hz. 1H).
7.80 (d. J = 2.6 Hz. 1H).
Ejemplo 70: síntesis de [3-[2-(h¡drox¡met¡l)¡m¡dazol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azabic¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio
Figure imgf000110_0001
Etapa 1: preparación del intermedio terc-but¡l-(1H-¡m¡dazol-2-¡lmetoxi)-d¡met¡l-s¡lano (70a)
Una mezcla de 1H-imidazol-2-ilmetanol (30 mg, 3.06 mmol). TBDMSCI (795 pl. 4.59 mmol). imidazol (0.333 g. 4.89 mmol) y DMAP (411 mg. 3.366 mmol) en DMF ( 15.3 ml) bajo argón se agitó durante 4 h 30 a ta y se calentó a 40 °C durante 1 h para tener una conversión total del material de partida. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 50/50) para proporcionar el intermedio (70a) (592 mg. 2.45 mmol. 80 %) como un aceite incoloro.
EM m/z ([M+H]+) 213.
RMN 1H (300 MHz. CDCla): 8 (ppm) 0.11 (s. 6H). 0.93 (s. 9H). 4.82 (s. 2H). 7.01 (s. 2H).
Etapa 2: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-[2-[[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1oximet¡l1¡m¡dazol-1-¡l1-1.6-diazabic¡clo[3.2.11oct-3-en- 7-ona (70b)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a). el intermedio (1g) (300 mg. 0.98 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (70a) (0.32 g. 0.78 mmol) en el intermedio (70b) (239 mg .0.50 mmol. 51 %) como aceite amarillo después de la purificación por cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 50/50). EM m/z ([M+H1+) 391.
RMN 1H (300 MHz. CDCla): 8 (ppm) 0.00 (d. J = 2.3 Hz. 6H). 0.80 (s. 9H). 3.10 (d. J = 10.8 Hz. 1H). 3.46 (ddd. J = 10.9. 2.8. 1.2 Hz. 1H). 3.92-4.09 (m. 3H). 4.27-4.45 (m. 2H). 4.50-4.68 (m. 2H). 5.20-5.36 (m. 2H) . 5.94 (dddd. J = 17.1. 10.3. 6.7. 6.0 Hz. 1H). 6.55 (dd. J = 5.7. 1.4 Hz. 1H). 6.81 (d. J = 1.4 Hz. 1H). 6.91 (d. J = 1.4 Hz. 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio [3-[2-[[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡met¡l1¡m¡dazol-1-¡l1-7-oxo-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-il1 sulfato de alil(tr¡fen¡l)fosfon¡o (70c)
Se desgasificó una solución del intermedio (70b) (120 mg. 0.252 mmol) en DCM anhidro (2.52 ml) durante 10 min en atmósfera de argón. Se añadieron sucesivamente AcOH (29 pl. 0.504 mmol) y Pd(PP^)4 (146 mg. 0.126 mmol). Después de 1 h 30 de agitación a temperatura ambiente. se añadieron a la mezcla de reacción piridina (2.52 ml) y complejo de trióxido de azufre y piridina (200 mg. 1.26 mmol). La suspensión resultante se protegió de la luz y se agitó durante la noche hasta que se completó la reacción. La mezcla de reacción se concentró. a continuación se diluyó con DCM y se filtró. El filtrado se concentró al vacío y a continuación se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (70c).
(78 mg, 0,106 mmol, 42 %) como un polvo amarillo.
EM m/z ([M+H]+) 431.
Etapa 4: preparación de [3-[2-(h¡drox¡met¡l)¡m¡dazol-1-¡l1-7-oxo-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (ejemplo 70)
A una suspensión del intermedio (70c) (78 mg. 0.107 mmol) en ACN anhidro (1.06 ml) se añadió lentamente 3HF.TEA (17.4 pl. 0.107 mmol). Después de agitar durante 7 ha 40 °C y 17 h a ta. la mezcla se concentró para dar un aceite amarillo. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron para proporcionar 27 mg de un sólido que se aplicó en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron. congelaron y liofilizaron para proporcionar el ejemplo (70) (5.8 mg.
0.017 mmol. 16 %) como un sólido blanco.
EM m/z ([MH]-) 315.
RMN 1H (400 MHz. D2O): 8 (ppm) 3.50 (d. J = 11.6 Hz. 1H). 3.70 (dd. J = 11.6. 2.8 Hz. 1H). 4.02 (dd. J = 18.0. 1.1 Hz.
1H). 4.27 (dd. J = 17.9. 2.2 Hz. 1H). 4.61 (dd. J = 5.4. 2.6 Hz. 1H). 4.81 (s. 2H). 6.80 (d. J = 5.4 Hz. 1H). 7.37 (d. J = 2.0 Hz. 1H). 7.43 (d. J = 2.0 Hz. 1H).
Ejemplo 71: síntesis de [3-[4-(h¡drox¡met¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio Etapa 1
Figure imgf000112_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-f4-ffterc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡met¡l1p¡razol-1-¡l1-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en- 7-ona (71a)
Ut¡l¡zando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo 1 (etapa 7). el ¡ntermed¡o (1 g) (230 mg, 0.751 mmol) se conv¡rt¡ó por reacc¡ón con terc-but¡l-d¡i r iet¡l-(1H-p¡razol-4-¡liTietox¡)s¡lano (obten¡do según al protocolo descr¡to en WO 2010/108902) (239 mg. 1,113 mmol) en el ¡ntermed¡o (71a) (209 mg. 0.535 mmol. 71 %) después de la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía “flash” en gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 95 /5).
EM m/z ([M+H]+) 391.
RMN 1H (300 MHz. CDCla): 6 (ppm) 0.07 (s. 6H). 0.90 (s. 9H). 3.13 (d. J = 10.7 Hz. 1H). 3.52 (dd. J = 10.4.2.3 Hz.
1H). 4.08 (dd. J = 2.4. 5.5 Hz. 1H). 4.18 (dd. J = 1.8. 17.6 Hz. 1H). 4.40-4.48 (m. 3H). 4.60 (s. 2H) .5.30-5.40 (m. 2H).
5.96-6.08 (m. 1H). 6.40 (d. J = 5.4 Hz. 1H). 7.48 (s. 1H). 7.52 (s. 1H).
Etapa 2: preparac¡ón del ¡ntermed¡o 3-[4-[[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡met¡l1p¡razol-1-¡l1-6-h¡drox¡-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en- 7-ona (71b)
El intermedio (71a) (140 mg, 0,358 mmol) se disuelve en DCM anhidro (2,6 ml). La solución se desgasificó 10 min en atmósfera de argón y se añadieron sucesivamente AcOH (41 pl, 0,717 mmol) y Pd(PPh3)4 (207 mg, 0,179 mmol). Después de agitar durante 1 h a ta, la mezcla se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (71b) (55 mg, 0,158 mmol, 44%). EM m/z ([M+H]+) 351.
Etapa 3: preparación del intermedio [3-[4-[[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡met¡l1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11 oct-3-en-6-il1 sulfato de piridin-1-io (71c)
A una solución del intermedio (71b) (55 mg, 0,157 mmol) en piridina anhidra (0,920 ml) en atmósfera inerte se añadió complejo de trióxido de azufre y piridina (125 mg, 0,783 mmol). Después de agitar durante 18 h a ta, la mezcla heterogénea se concentró al vacío. Se añadió DCM al residuo y los sólidos se filtraron. El filtrado se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (71c) (62 mg, 0,122 mmol, 77%).
EM m/z ([M+H1+) 431.
EM m/z ([MH1‘) 429.
Etapa 4: preparación del intermedio [3-[4-(hidroximetil)nirazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-il1sulfato de trietilamonio (71d)
A una solución del intermedio (71c) (60 mg, 0,118 mmol) en ACN (1,2 ml) en atmósfera inerte se añadió trihidrofluoruro de trietilamina (19 pl, 0,118 mmol). Después de agitar durante 2,5 h a 40 °C, la mezcla se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía “flash” en gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 98/2 a 0/100) para producir el intermedio (71 d) (49 mg, 0,117 mmol, rendimiento cuantitativo) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H1+) 317.
EM m/z ([MH1‘) 315.
Etapa 5: preparación de [3-[4-(hidroximetil)nirazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-il1sulfato de sodio (Ejemplo 71)
El intermedio (71d) (49 mg, 0,117 mmol) se disolvió en un mínimo de H2O y unas pocas gotas de ACN y se aplicó en una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron. Se añadió MeOH al residuo y los sólidos se filtraron. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el ejemplo (71) (22 mg, 0,066 mmol, 56%).
EM m/z ([M+H1+) 317.
EM m/z ([MH1‘) 315.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,44 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 3,65-3,70 (m, 1H), 4,35-4,36 (m, 2H), 4,54-4,57 (m, 3H), 6,56-6,63 (m, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,95-7,85 (m, 1H).
Ejemplo 72: síntesis de hidrogenosulfato de [3-[3-(2-morfolinoetilcarbamoil)nirazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-ilo1
Figure imgf000114_0001
Una mezcla de dipirazolo[3,1-a:3',1'-d]pirazina-4,9-diona (preparada según Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2015, 25(15), 3024-3029) (30 mg, 0,159 mmol), 2-morfolinoetanamina (42 mg, 0,319 mmol) en THF (0,32 ml) se calentó a 80 °C durante 18 h. La mezcla se concentró al vacío para proporcionar el intermedio (72a) (70 mg, 0,313 mmol, 98 %) como un aceite marrón.
EM m/z ([M+H]+) 225.
RMN 1H (400 MHz, CDCh): 8 (ppm) 2,48 (s, 4H), 2,58 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 3,52 (q, J = 5,9 Hz, 2H), 3,60 -3,77 (m, 4H), 6,74 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,69 (br s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 1-(6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)-N-(2-morfolinoetil)pirazol-3-carboxamida (72b)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 2 (etapa 1a), el intermedio (1g) (168 mg, 0,55 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (72a) (185 mg, 0,824 mmol) en el intermedio (72b) (217 mg , 0,54 mmol, 99 %) como un aceite amarillo, después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 100/0).
EM m/z ([M+H]+) 403.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 2,50-2,63 (m, 4H), 2,60-2,69 (m, 2H), 3,18 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,50- 3,63 (m, 3H), 3,78 (q, J = 4,5 Hz, 4H), 4,13-4,26 (m, 2H), 4,36-4,59 (m, 3H), 5,31-5,48 (m, 2H), 6,04 (ddt, J = 17,0, 10,3, 6,5 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio 1-(6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)-N-(2-morfolinoetil)pirazol-3-carboxamida (72c)
Se desgasificó una solución del intermedio (72b) (149 mg, 0,296 mmol) en DCM anhidro (2,9 ml) durante 10 min en atmósfera de argón. Se añadieron sucesivamente AcOH (34 pl, 0,59 mmol) y Pd(PP^)4 (172 mg, 0,148 mmol). Después de agitar durante 1 h 30 a temperatura ambiente, la mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 98/2 a 0/100) para proporcionar el intermedio (72c) (46 mg, 0,127 mmol, 43 %) como un polvo amarillo.
EM m/z ([M+H]+) 363.
Etapa 4: preparación de hidrogenosulfato de [3-[3-(2-morfolinoetilcarbamoil)nirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lo1 (ejemplo 72)
A una solución del intermedio (72c) (28 mg, 0,077 mmol) en tBuOH (0,39 ml) y H2O (0,39 ml) en atmósfera inerte se añadió complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (12,9 mg, 0,093 mmol) y TEA (2,7 pl, 0,019 mmol). Después de agitar durante 23 h, la mezcla heterogénea se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron para proporcionar el ejemplo (72) (14 mg, 0,031 mmol, 41 %) como un polvo blanco.
EM m/z ([M+H]+) 443.
EM m/z ([MH]-) 441.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,11-3,29 (m, 6H), 3,44 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,63-3,77 (m, 2H), 3,84 -3,96 (m, 5H), 4,39 (br s, 2H), 4,58 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 6,73 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 2,7 Hz , 1H), 7,97 (d, J = 2,7 Hz,
Figure imgf000115_0001
Etapa 1: preparación del intermedio 3-(1H-im¡dazol-2-il)propenam¡da (73a)
Se añadieron sucesivamente 3-(1H-imidazol-2-il)propanoato de etilo (0,50 g, 2,826 mmol), amoníaco acuoso al 30 % (2 ml) y solución metanólica de amoníaco 7 M (2 ml). Después de 42 h de agitación a temperatura ambiente, se filtró la mezcla de reacción. El filtrado se concentró al vacío para dar el intermedio (73a) (0,318 g, 2,28 mmol, 81 %) como un polvo blanco.
EM m/z ([M+H]+) 140.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 8 (ppm) 2,41-2,49 (m, 2H), 2,75-2,83 (m, 2H), 6,70-6,95 (m, 3H), 7,37 (br s, 1H), 11,65 (br s, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 3-[1-(6-aliloxi-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)imidazol-2-il1propenamida (73b)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7). el intermedio (1 g) (400 mg, 1.31 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (73a) (218 mg. 1.57 mmol) en el intermedio (73b) (261 mg. 0.823 mmol. 63 %) como un aceite verde. después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 98/2 a 0/100).
EM m/z ([M+H]+) 318.
RMN1H (300 MHz. DMSO-d6): 8 (ppm) 2.42-2.61 (m. 2H). 2.70-2.90 (m. 2H). 3.27-3.43 (m. 3H). 3.81 (d . J = 17.5 Hz.
1H). 4.03 (d. J = 18.3 Hz. 1H). 4.31 (d. J = 5.6 Hz. 1H). 4.40 (dt. J = 6.0. 1.3 Hz. 1H). 5.23-5.44 (m. 2H). 5.89-6.06 (m.
1H). 6.44 (d. J = 5.4 Hz. 1H). 6.79 (br s. 2H). 7.15 (br s. 1H). 7.32 (br s. 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio 3-[1-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-il)¡m¡dazol-2-¡l1propenam¡da (73c)
Se desgasificó una solución del intermedio (73b) (60 mg. 0.189 mmol) en DCM anhidro (1.89 ml) durante 10 min en atmósfera de argón. Se añadieron sucesivamente AcOH (22 pl. 0.378 mmol) y Pd(PPH3)4 (109 mg. 0.095 mmol). Después de 2 h 30 de agitación a temperatura ambiente. la mezcla se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” en fase inversa C18 sobre gel de sílice (H2O/ACN: 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron. congelaron y liofilizaron para proporcionar el intermedio (73c) (70 mg) como un polvo amarillo con óxido de trifenilfosfina.
EM m/z ([M+H]+) 278.
Etapa 4: preparación de [3-[2-(3-am¡no-3-oxo-prop¡l)¡m¡dazol-1-¡l1-7-oxo-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en- 6-¡l1 sulfato de trimetilamonio (ejemplo 73)
A una solución del intermedio (73c) (70 mg. 0.25 mmol) en tBuOH (1.26 ml) y H2O (1.26 ml) en atmósfera inerte se añadió complejo de trimetilamina y trióxido de azufre (42.2 mg. 0.303 mmol) y TEA (8.9 pl. 0.063 mmol). Después de agitar durante 2 h 20. la mezcla heterogénea se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron y purificaron de nuevo mediante cromatografía “flash” en gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 99/1 a 95/5) para proporcionar el ejemplo (73) (4 mg. 0.0055 mmol. 2 %) como un polvo blanco contaminado con complejo trimetilamina y trióxido de azufre.
EM m/z ([M+H1+) 358.
EM m/z ([MH1‘) 356.
RMN 1H (300 MHz. D2O): 8 (ppm) 2.69-2.82 (m. 2H). 3.15 (td. J = 7.1. 3.1 Hz. 2H). 3.23 (s. 9H). 3.55 (d. J = 11.6 Hz.
1H). 3.72 (dd. J = 11.5. 2.6 Hz. 1H). 3.99 (d. J = 18.6 Hz. 1H). 4.28 (dd. J = 18.1. 2.2 Hz. 1H) .4.64 (dd. J = 5.4. 2.6 Hz. 1H). 6.83 (d. J = 5.2 Hz. 1H). 7.30-7.32 (m. 1H). 7.35 (d. J = 2.0 Hz. 1H).
Ejemplo 74: síntesis de [3-[4-(2-hidroxietilsulfamoil)nirazol-1-il1-7-oxo-1.6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-il1 sulfato de sodio
Figure imgf000117_0001
A una solución de 2-aminoetanol (223 mg, 3,652 mmol) en DCM anhidro (36,5 ml) en atmósfera inerte se añadieron cloruro de 2-(metoximetil)pirazol-3-sulfonilo (1,0 g, 4,747 mmol) y TEA ( 1,02 ml, 7,304 milimoles). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y a continuación se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/MeOH: 95/5 a 0/100) hasta el intermedio (74a) (0,733 g, 3,116 mmol, 85%).
EM m/z ([M+H]+) 236.
EM m/z ([MH]-) 234.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 2,6-2,66 (m, 1H), 3,29-3,33 (m, 2H), 3,36 (s, 3H), 3,69-3,74 (m, 2H) ), 5,33 (br s, 1H), 5,44 (s, 2H), 6,80 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 2,4 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio N-(2-hidrox¡et¡l)-1H-p¡razol-3-sulfonamida (74b)
A una solución del intermedio (74a) (0,673 g, 2,86 mmol) en HCl 4N en dioxano (28,6 ml) en atmósfera inerte se añadió HCl 4N (8 ml). La mezcla se calentó durante 4 horas a 50°C. La mezcla heterogénea se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 95/5) para producir el intermedio (74b) (310 mg, 1,62 mmol, 56%).
EM m/z ([M+H]+) 192.
EM m/z ([MH]-) 191.
RMN 1H (300 MHz, MeOD): 8 (ppm) 3,09 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,57 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 6,71 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 2,4 Hz, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio N-[2-[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1oxiet¡l1-1H-p¡razol-3-sulfonam¡da (74c)
A una solución del intermedio (74b) (0,264 g, 1,381 mmol) en DMF anhidra en atmósfera inerte se añadieron TBDMSCI (312 mg, 0,207 mmol), imidazol (160 mg, 0,235 mmol) y DMAP (169 mg, 1,381 mmol). Después de agitar durante 1,5 h a ta, la mezcla heterogénea se diluyó con EtOAc y Et2O. La capa orgánica se lavó con H2O se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. La mezcla se evaporó para producir el intermedio (74c) (374 mg, 1,224 mmol, 88%). EM m/z ([M+H]+) 306.
EM m/z ([MH]-) 304.
Etapa 4: preparación del intermedio 1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azabic¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)-N-[2-[terc-but¡l(d¡met¡l) sililloxietillpirazol-4-sulfonamida (74d)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo 1 (etapa 7), el intermedio (1g) (266 mg, 0,868 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (74c) (371 mg, 1,273 mmol) en el intermedio (74d) (96 mg , 0,198 mmol, 23 %) después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (DCM/acetona: 100/0 a 70/30). EM m/z ([M+H]+) 484.
EM m/z ([MH]-) 482.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 0,05 (s, 6H), 0,08 (s, 9H), 3,13 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,20 (q, J = 5,6 Hz, 2H), 3,55 (dd, J = 10,6, 2,4 Hz, 1H), 3,69-3,74 (m, 2H), 4,13 (dd, J = 5,5, 2,5 Hz, 1H), 4,16-4,25 (m, 1H ), 4,38-4,50 (m, 3H), 4,99 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 5,31-5,41 (m, 2H), 5,97-6,07 (m, 1H), 6,61 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 2,6 Hz, 1H).
Etapa 5: preparación del intermedio [3-[4-[2-[terc-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l1ox¡et¡lsulfamo¡l1p¡razol-1-¡l-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de tr¡fen¡l-[(E)-prop-1-en¡l1fosfon¡o (74e)
El intermedio (74d) (100 mg, 0,207 mmol) se disolvió en DCM anhidro (1,5 ml). Se añadieron sucesivamente AcOH (2 |jl, 0,414 mmol) y Pd(PPh3)4 (120 mg, 0,103 mmol) y se agitó durante 45 min a ta. Se añadieron piridina (1,2 ml) y complejo de trióxido de azufre y piridina (165 mg, 1,036 mmol) y se agitó durante 18 h. La mezcla heterogénea se concentró al vacío, se añadió DCM al residuo y se filtraron las sales. El filtrado se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (74e) (49 mg, 0,059 mmol, 28 % en 2 etapas).
EM m/z ([M+H]+) 524.
EM m/z ([MH]-) 522.
Etapa 6: preparación de [3-[4-(2-h¡drox¡et¡lsulfamo¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (Ejemplo 74)
A una solución del intermedio (74e) (49 mg, 0,059 mmol) en ACN (590 j l) en atmósfera inerte, se añadió 3HF.TEA (10 jl, 0,059 mmol). Después de agitar durante 18 horas a temperatura ambiente, la mezcla se concentró al vacío. El crudo se disolvió en una mezcla 8/2 H2O/ACN y se aplicó a una columna de forma de sodio Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron. Se añadió MeOH al residuo y los sólidos se filtraron. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el ejemplo (74) (22 mg, 0,050 mmol, 85%). EM m/z ([M+H]+) 410.
EM m/z ([MH]-) 408.
RMN 1H (400MHz, D2O): 8 (ppm) 3,12 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,42 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,59 (t, J = 5,4 Hz) , 2H), 3,67 (dd, J = 11,4, 2,2 Hz, 1H), 4,36 (d, J = 3,5 Hz, 2H), 4,58 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Ejemplo 76: síntesis de [3-[3-[(1S)-1.2-d¡h¡drox¡et¡l1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio
Figure imgf000119_0001
Etapa 1: preparación del intermedio (E)-3-(d¡met¡lam¡no)-1-f(4R)-2.2-d¡met¡l-1,3-d¡oxolan-4-¡l1prop-2-en-1-ona (76a )
Se calentó 1-[(4R)-2,2-D¡met¡l-1,3-d¡oxolan-4-¡l]etanona (obtenida según el protocolo descrito en Organic Letters, 1999. 1(7), 1067) (1,27 g , 8,64 mmol) en N,N-dimetilformamida dimetil acetal (9,6 ml) a 100 °C durante 23 h. La reacción se vertió en agua (50 ml) y la mezcla se extrajo con DCM (4 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron con Na2SO4 y el disolvente se eliminó a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 50/50) para proporcionar el intermedio (76a) (3,31 g, 6,32 mmol, 73 %) como un aceite de naranja contaminado con DMF.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 1,43 (s, 3H), 1,50 (s, 3H), 2,89 (s, 3H), 2,97 (s, 3H), 3,99 (dd, J = 8,4, 6,4 Hz, 1H), 4,27 (dd, J = 8,4, 7,5 Hz, 1H), 4,48 (dd, J = 7,5, 6,4 Hz, 1H), 5,49 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 12,7 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 3-[(4S)-2,2-dimetil-1,3-d¡oxolan-4-¡l]-1H-p¡razol (76b)
Se disolvió una mezcla del intermedio (76a) (3,31 g, 6,32 mmol) y una solución acuosa al 50 % de hidrato de hidracina (1,23 ml, 12,6 mmol) en EtOH (63 ml). Después de agitar durante 1 hora a 90°C, la mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (ciclohexano/EtOAc: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (76b) (832 mg, 4,45 mmol, 70 %) como un aceite amarillo.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8(ppm) 1,40 (br s, 3H), 1,43 (br s, 3H), 3,92 (dd, 8,2, 7,2 Hz, 1H), 4,25 (dd, J = 8,2, 6,3 Hz, 1H), 5,16 (dd, J = 7,2, 6,3 Hz, 1H), 6,27 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 2,3 Hz, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-f3-(4S)-2.2-d¡met¡l-1.3-d¡oxolan-4-¡l1p¡razol-1-¡l1-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.
11oct-3-en-7-ona (76c)
Usando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo 1 (etapa 7). el ¡ntermed¡o (1g) (250 mg, 0.82 mmol) se conv¡rt¡ó por reacc¡ón con el ¡ntermed¡o (76b) (165 mg. 0.98 mmol) en el ¡ntermed¡o (76c) (163 mg . 0.36 mmol. 44 %) como un ace¡te pardo después de la pur¡f¡cac¡ón por cromatografía sobre gel de síl¡ce (c¡clohexano/EtOAc: 100/0 a 0/100). EM m/z ([M+H]+) 347.
RMN 1H (400 MHz. CDCla): 5 (ppm) 1.46 (s. 3H). 1.50 (s. 3H). 3.15 (d. J = 10.8 Hz. 1H). 3.54 (ddd. J = 10.8. 3.1. 1.0 Hz. 1H). 3.99 (dd. J = 8.4. 7.2 Hz. 1H). 4.10 (dd. J = 5.6. 2.7 Hz. 1H). 4.14-4.22 (m. 1H). 4.27-4.36 (m. 1H). 4.38-4.52 (m. 3H). 5.14 (t. J = 6.8 Hz. 1H). 5.30-5.42 (m. 2H). 5.97-6.11 (m. 1H). 6.40-6.43 (m .1H). 6.43-6.48 (m. 1H). 7.54-7.59 (m. 1H).
Etapa 4: preparac¡ón del ¡ntermed¡o 6-h¡drox¡-3-[3-[(4S)-2.2-d¡met¡l-1.3-d¡oxolan-4-¡l1p¡razol-1-¡l1-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.113-oct-en-7-ona (76d)
Se desgas¡f¡có una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (76c) (163 mg. 0.36 mmol) en DCM anh¡dro (3.6 ml) durante 10 m¡n en atmósfera de argón. Se añad¡eron sucesivamente AcOH (41 pl. 0.72 mmol) y Pd(PPH3)4 (210 mg. 0.18 mmol). Después de ag¡tar durante 1h 30 a temperatura amb¡ente. se añad¡eron sucesivamente AcOH (10 pl. 0.17 mmol) y Pd(PPH3)4 (50 mg. 0.04 mmol). Después de ag¡tar durante 2 horas más a temperatura amb¡ente. la mezcla se concentró al vacío. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (76d) (95 mg) como un ace¡te amar¡llo contam¡nado con óx¡do de tr¡fen¡lfosf¡na. EM m/z ([M+H1+) 307.
Etapa 5: preparac¡ón del ¡ntermed¡o [3-[3-[(4S)-2.2-d¡met¡l-1.3-d¡oxolan-4-¡l1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo [3.2.11 oct-3-en-6-¡l1 sulfato de tr¡met¡lamon¡o (76e)
A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (76d) (95 mg) en tBuOH (1.1 ml) y agua (1.1 ml) en atmósfera ¡nerte se añad¡ó complejo de tr¡met¡lam¡na y tr¡óx¡do de azufre (36 mg. 0.26 mmol) y tr¡et¡lam¡na (8 pl. 0.05 m¡l¡moles). Después de ag¡tar durante 16 h. la mezcla heterogénea se concentró al vacío. El crudo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” en gel de síl¡ce de fase ¡nversa C18 (agua/ACN: 98/2 a 0/100) para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (76e) (46 mg. 0.10 mmol. 28 % en 2 etapas) como un polvo marrón.
EM m/z ([M+H1+) 387/307.
EM m/z ([MH1‘) 385.
Etapa 6: preparac¡ón de [3-[3-[(1S)-1.2-d¡h¡drox¡et¡l1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sod¡o (ejemplo 76)
El ¡ntermed¡o (76e) (46 mg. 0.10 mmol) se d¡solv¡ó en una mezcla de DCM/TFA (3:1) (260 pl) a 0 °C en atmósfera ¡nerte. Después de ag¡tar durante 1 hora y 15 m¡nutos. se añad¡ó Et2O frío (3 ml) a 0°C. Después de ag¡tar durante 10 m¡n a 0 °C. el prec¡p¡tado se f¡ltró y se lavó con Et2O frío y ACN frío. El f¡ltrado se concentró al vacío. Este sól¡do se apl¡có en una columna de forma de sod¡o Dowex (Dowex®50WX8 de forma de h¡drógeno almacenada con una soluc¡ón acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se comb¡naron. congelaron y l¡of¡l¡zaron para proporc¡onar un sól¡do blanco que se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” en gel de síl¡ce de fase ¡nversa C18 (agua/ACN: 99/1 a 95/5) para proporc¡onar el ejemplo (76) (0.5 mg. 0.0001 mmol. 1 %) como un polvo blanco contam¡nado con (1S)-1-(1H-p¡razol-3-¡l)etano-1.2-d¡ol.
EM m/z ([M+H1+) 347.
EM m/z ([MH1‘) 345.
RMN 1H (400 MHz. D2O): 5 (ppm) 3.39 (d. J = 11.4 Hz. 1H). 3.63 (dd. J = 11.4. 2.7 Hz. 1H). 3.70-3.82 (m .2H). 4.29­ 4.33 (m. 2H). 4.51 (dd. J = 5.7. 2.7 Hz. 1H). 4.74-4.86 (m. 1H). 6.44 (d. J = 2.7 Hz. 1H). 6.55 ( d. J = 5.6 Hz. 1H). 7.82 (d. J = 2.7 Hz. 1H).
Ejemplo 77: síntes¡s de h¡drogenosulfato de [3-[3-[t¡azol-5-carbon¡l1am¡nol1p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lo1
Figure imgf000121_0001
En un tubo sellado, una solución de ácido 5-tiazolcarboxílico (400 mg, 3,10 mmol) en cloruro de tionilo (2,3 ml) se calentó a 80 °C durante 5 h. A continuación, la mezcla se concentró a presión reducida (coevaporada dos veces con tolueno) para proporcionar el intermedio (77a) (422 mg, 2,87 mmol, 92 %) como un sólido amarillo que se usó sin purificación adicional.
Etapa 2: preparación del intermedio 5-[[N-[6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il]pirazol-3-¡llcarbamoilltiazol-2-ilo (77b)
A una solución del intermedio (13b) (100 mg, 0,38 mmol) en DMA (1 ml) en atmósfera inerte a 0 °C se le añadió gota a gota una solución del intermedio (77a) (84 mg, 0,57 mmol) en DMA (0,9 ml). Después de agitar durante 45 min a temperatura ambiente, la mezcla se inactivó con agua (20 ml) y se agitó a 0 °C durante 10 min. El precipitado formado se filtró, se lavó dos veces con agua y, a continuación, con pentano, se secó a presión reducida para proporcionar el intermedio (77b) (87 mg, 0,23 mmol, 61 %) como un sólido blanquecino.
EM m/z ([M+H]+) 373.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 (ppm): 3,28 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,33 (dd, J = 10,8, 2,1 Hz, 1H), 4,21-4,25 ( m, 2H), 4,29 (dd, J = 5,6, 2,4 Hz, 1H), 4,37-4,41 (m, 2H), 5,27 (dd, J = 10,4, 1,6 Hz, 1H), 5,37 (dd, J = 17,3, 1,6 Hz, 1H), 5,91­ 6,01 (m, 1H), 6,55 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,79 (s, 1H), 9,29 (s, 1H), 11,43 (br s, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio N-[5-[[N-[6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l1p¡razol-3 illcarbamoilltiazol-2-illcarbamato de terc-butilo (77c)
A una solución del intermedio (77b) (72 mg, 0,19 mmol) en DCM (1,9 ml) en atmósfera inerte a temperatura ambiente, se añadieron sucesivamente Boc2<O (63 mg, 0,29 mmol), Et3N (41 pl, 0,29 mmol) y DMAP (24 mg, 0,19 mmol). Después de agitar a ta durante 4 h, la mezcla se concentró hasta sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/EtOAc: 100/0 a 0/100) para proporcionar el intermedio (77c) (63 mg, 0,13 mmol, 64 %) como un sólido naranja.
EM m/z ([M+H]+) 473.
RMN 1H (300 MHz, CDCla) 8(ppm): 1,45 (s, 9H), 3,10 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,51 (dd, J = 10,8, 1,8 Hz, 1H) , 4,08 (dd, J = 5,6, 2,5 Hz, 1H), 4,11 (dd, J = 17,8, 1,8 Hz, 1H), 4,32 (dd, J = 17,8, 1,1 Hz, 1H), 4,36-4,48 (m, 2H ), 5,31 (dd, J = 10,3, 1,5 Hz, 1H), 5,36 (dd, J = 17,2, 1,5 Hz, 1H), 5,96-6,06 (m, 1H), 6,37 (d, J = 2,6 Hz, 1H) , 6,44 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,23 (d, J = 0,7 Hz, 1H), 8,91 (d, J = 0,7 Hz, 1H).
Etapa 4: preparación del intermedio [3-[3-[terc-butoxicarbonil-[tiazol-5-carbonil]amino]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabic¡clo[3.2. 1] oct-3-en-6-¡l]sulfato de trifen¡l(al¡l)fosfonio (77d)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo (2) (etapa 2), el intermedio (77c) (63 mg, 0,13 mmol) se convirtió en el intermedio (77d) (9 mg, 0,011 mmol, 98 %) como un sólido blanco después de purificación sobre gel de sílice (DCM/Acetona 100/0 a 0/100).
EM m/z ([M+H]+) 513/433.
EM m/z ([MH]-) 511.
Etapa 5: preparación de hidrogenosulfato de [3-[3-[tiazol-5-carbonil]amino]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] (Ejemplo 77)
Una solución del intermedio (77d) (9 mg, 0,011 mmol) en una mezcla de DCM/TFA (3:1) (0,6 ml) en atmósfera inerte a 0 °C se agitó durante 1 hora, a continuación se agitó con Et2O (1 ml) y se continuó agitando a 0°C durante 5 min. A continuación, se extrajeron los disolventes de la mezcla y se añadió Et2O (1 ml) al residuo y se continuó agitando a temperatura ambiente durante 5 min. Esta secuencia se realizó dos veces con Et2O (1 ml) y a continuación dos veces con ACN (1 ml) para proporcionar el ejemplo (77) (0,5 mg, 0,001 mmol, 1 %) como un sólido blanco después de la purificación mediante cromatografía “flash” en gel de sílice de fase inversa C18 (ACN/agua: 2/98 a 30/70).
EM m/z ([M+H]+) 413.
RMN 1H (300 MHz, D2O) 8 (ppm): 2,94 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,25 (d, J = 12,8, 1,8 Hz, 1H), 3,47 (d, j = 11,2 Hz, 1H), 3,72 (dd, J = 11,2, 1,8 Hz, 1H), 4,60 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 6,64 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 6,73 (d , J = 2,7 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,55 (s, 1H), 9,22 (s, 1H).
Ejemplo 78: síntesis de [3-(2-oxazol¡l)p¡razol-1-¡l-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lsulfato de sodio
Figure imgf000123_0001
Etapa 1: preparación del intermedio (E)-3-(dimetilamino)-1-(2-oxazolil)-prop-2-en-1-ona (78a)
En atmósfera inerte, se diluyó 1-(oxazol-2-il)etanona (500 mg, 4,50 mmol) en N,N-dimetilformamida dimetilacetal (0,74 ml, 5,60 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 100 °C durante 16 h. A continuación, la mezcla se diluyó con H2O (5 ml) y se añadió DCM (5 ml). La capa acuosa se extrajo con DCM (5x5 ml) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y concentraron para dar el intermedio (78a) (656 mg, 3,95 mmol, 88%) como un sólido naranja.
EM m/z ([M+H]+) 167.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 82,96 (s, 3H), 3,18 (s, 3H), 6,01 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 0,7 Hz, 1H ), 7,74 (d, J = 0,7 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 10,3 Hz, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 3-(2-oxazol¡l)-1H-p¡razol (78b)
En un matraz equipado con un condensador, se solubilizó el intermedio (78a) (656 mg, 3,95 mmol) en EtOH (39 ml). Se añadió hidrazina (0,76 ml, 7,77 mmol) y la mezcla se calentó a 90°C. Después de 1 h de reacción, la mezcla se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 20/80) para dar el intermedio (78b) (374 mg, 2,77 mmol, 70 %) como un sólido amarillo.
EM m/z ([M+H]+) 136.
EM m/z ([MH]-) 134.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 86,92 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 8,22 (bs, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio 6-al¡lox¡-3-[3-(2-oxazol¡l)p¡razol-1-¡l1-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-7-ona (78c) En atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (1 g) (200 mg, 0,653 mmol) con DMSO anhidro (6,5 ml). Se añadieron sucesivamente el intermedio (78b) (106 mg, 0,784 mmol), K2CO3 seco (271 mg, 1,96 mmol), Cul (12 mg, 0,065 mmol) y sal clorhidrato de N,N-dimetilglicina (14 mg, 0,098 mmol). La suspensión azul se calentó a 100°C. Después de 18 h, la mezcla se diluyó en H2O (20 ml) y se añadió EtOAc (20 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (5x20 ml) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con H2O y a continuación se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El compuesto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 50/50) para dar el intermedio (78c) (55 mg, 0,176 mmol, 25 %) como un aceite amarillo.
EM m/z ([M+H]+) 314.
EM m/z ([MH]-) 312.
RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 83,16 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,56 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,13 (dd, J = 5,5/2,5 Hz, 1H ), 4,30 (dd, J = 17,8/2,5 Hz, 1H), 4,38-4,50 (m, 2H), 4,51 (d, J = 17,8 Hz, 1H), 5,31 (dd, J = 10,3/1,7/1,0 Hz, 1H), 5,38 (ddd, J = 17,2/1,7/1,4 Hz, 1H), 5,97-6,07 (m, 1H), 6,62 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 2,6 Hz, 1H) ), 7,24 (s, 1H), 7,68 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H).
Etapa 4: preparación de [3-(2-oxazol¡l)p¡razol-1-¡l1-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l-sulfato de sodio (Ejemplo 78)
En atmósfera ¡nerte, se d¡luyó el ¡ntermed¡o (78c) (49 mg, 0,156 mmol) en DCM anh¡dro (1,6 ml). Se añad¡eron suces¡vamente AcOH (18 pl, 0,316 mmol) y Pd(PPH3)4 (91 mg, 0,078 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a ta durante 2 h. A cont¡nuac¡ón, se añad¡eron a la mezcla de reacc¡ón p¡r¡d¡na anh¡dra (1,6 ml) y complejo de tr¡óx¡do de azufre y p¡r¡d¡na (125 mg, 0,782 mmol). La suspens¡ón resultante se proteg¡ó de la luz y se ag¡tó durante la noche hasta que se completó la reacc¡ón. La mezcla de reacc¡ón se concentró y se tr¡turó con DCM y a cont¡nuac¡ón se f¡ltró. El f¡ltrado se concentró y a cont¡nuac¡ón se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 0/100). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y concentraron. El res¡duo se d¡solv¡ó en un mín¡mo de H2O/ACN (2:1) y conv¡rt¡ó, después del ¡ntercamb¡o ¡ón¡co con columna de forma de sod¡o Dowex (Dowex ® 50WX8 de forma de h¡drógeno almacenada con una soluc¡ón acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O) para proporc¡onar el ejemplo (78) (18 mg, 0,043 mmol, 36 %) como un sól¡do blanquec¡no.
EM m/z ([M+H]+) 354/274.
EM m/z ([MH]-) 352.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 83,50 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,74 (dd, J = 11,3/2,6 Hz, 1H), 4,42-4,48 (m, 2H) 4,64 (dd, J = 5,6/2,6 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,33 (t, J = 0,9 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Ejemplo 79: síntes¡s de h¡drogenosulfato de [7-oxo-3-[3-(1,2,4-t¡ad¡azol-5-¡lcarbamo¡l)n¡razol-1-¡l1-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en -6-¡lo1
Figure imgf000124_0001
En atmósfera ¡nerte, se d¡luyó el ¡ntermed¡o (36c) (150 mg, 0,52 mmol) en una mezcla de DMF anh¡dra (3 ml). Se añad¡eron sucesivamente HATU (198 mg, 0,52 mmol), DIPEA (91 pl, 0,52 mmol) y 1,2,4-t¡ad¡azol-5-am¡na (53 mg, 0,52 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante la noche a ta. A cont¡nuac¡ón, la mezcla se d¡luyó con H2O. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgán¡cas se comb¡naron, se lavaron con NaHCO3 saturado, se secaron sobre Na2SO4, se f¡ltraron y se concentraron. El compuesto en bruto se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 60/40) para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (79a) (194 mg, 0,71 mmol, rend¡m¡ento cuant¡tat¡vo) como un ace¡te ¡ncoloro.
EM m/z ([M+H1+) 374.
EM m/z ([MH1‘) 372.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8 (ppm) 3,18 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,59 (dd, J = 2,1, 11,0 Hz, 1H), 4,18 (dd, J = 2,6, 5,5 Hz, 1H), 4,23 (dd, J = 1,9, 17,6 Hz, 1H), 4,40-4,50 (m, 3H), 5,30-5,42 (m, 2H), 5,98-6,08 (m, 1H), 6,67 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,68 (br s, 1H), 7,07 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,37 (s, 1H).
Etapa 2: preparación de hidrogenosulfato de [7-oxo-3-[3-(1,2,4-tiad¡azol-5-¡lcarbamo¡l)n¡razol-1-¡l1-1,6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en -6-ilol (Ejemplo 79)
A una solución del intermedio (79a) (130 mg, 0,35 mmol) en DCM anhidro (3 ml) se añadieron AcOH glacial (40 pl, 0,70 mmol) y Pd(PPh3)4 (203 mg, 0,18 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, a continuación se añadieron piridina (3 ml) y complejo de trióxido de azufre y piridina (280 mg, 1,75 mmol). La suspensión resultante se protegió de la luz y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se concentró, a continuación se diluyó con DCM y se filtró. El filtrado se concentró al vacío y después se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100). El sólido se trituró con ACN para proporcionar el ejemplo (79) (14 mg, 0,03 mmol, 10 % en dos etapas) como un sólido beige.
EM m/z ([M+H]+) 414.
EM m/z ([MH]-)412.
RMN 1H (300 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,50 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,75 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,46 (m, 2H), 4,66 (dd, J = 2,4, 5,6 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 2,6 Hz, 1H) , 8,41 (s, 1H).
Ejemplo 80: síntesis de [7-oxo-3-[3-(2-p¡r¡d¡lcarbamo¡l)p¡razol-1-¡l1-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de de sodio
Figure imgf000125_0001
Se diluyeron dicetopiperazina (200 mg, 1,06 mmol) y 2-aminopiridina (300 mg, 3,19 mmol) en THF (2 ml). La mezcla de reacción se calentó a 70 °C durante 4 h. Después de enfriar hasta ta, la mezcla se filtró, se lavó con ACN y Et2O para dar el intermedio (80a) (129 mg, 0,62 mmol, 29 %) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H1+) 189.
EM m/z ([MH1‘) 187.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,03 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,16 (ddd, J = 7,4/4,4/1,0 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 2,4 Hz , 1H), 7,86 (ddd, J = 8,5/7,4/1,9 Hz, 1H), 8,37 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 8,53 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 10,10 (bs, 1H).
Etapa 2: preparación del intermedio 1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)-N-(2-pir¡d¡l)n¡razol-3-carboxamida (80b)
En atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (1 g) (150 mg, 0,49 mmol) con DMSO anhidro (4,9 ml). Se añadieron sucesivamente el intermedio (80a) (111 mg, 0,59 mmol), K2CO3 seco (203 mg, 1,47 mmol), Cul (9 mg, 0,05 mmol) y sal clorhidrato de N,N-dimetilglicina (10 mg, 0,07 mmol). La suspensión azul se calentó a 100°C. Después de 18 h, la mezcla se diluyó en H2O (20 ml) y se añadió EtOAc (20 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (4 x 20 ml) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y concentraron. El compuesto en bruto se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 50/50) para dar el intermedio (80b) (79 mg, 0,19 mmol, 40 %) como un aceite amarillo.
EM m/z ([M+H]+) 367.
EM m/z ([MH]-) 365.
RMN 1H (400 MHz, CDCh) 83,17 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,57 (dd, J = 10,9/1,7 Hz, 1H), 4,14 (dd, J = 5,6/2,6 Hz , 1H), 4,24 (dd, J = 17,6/1,9 Hz, 1H), 4,39-4,51 (m, 2H), 4,50 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 5,32 (dd, J = 10,3/1,7/1,0 Hz, 1H), 5,38 (ddd, J = 17,2/1,7/1,4 Hz, 1H), 5,98-6,08 (m, 1H), 6,63 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 2,6 Hz , 1H), 7,06 (ddd, J = 7,4/4,8/1,1 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,74 (ddd, J = 8,9/7,4/1,7 Hz, 1H), 8,32- 8,34 (m, 2H), 9,21 (bs, 1H).
Etapa 3: preparación de [7-oxo-3-[3-(2-p¡r¡d¡lcarbamo¡l)p¡razol-1-¡l1-1.6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1sulfato de sodio (Ejemplo 80)
En atmósfera inerte, se diluyó el intermedio (80b) (79 mg, 0,19 mmol) en DCM anhidro (2,2 ml). Se añadieron sucesivamente AcOH (25 pl, 0,43 mmol) y Pd(PPH3)4 (125 mg, 0,11 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 h. A continuación, se añadieron a la mezcla de reacción piridina anhidra (2,2 ml) y complejo de trióxido de azufre y piridina (2 mg, 1,08 mmol). La suspensión resultante se protegió de la luz y se agitó durante la noche hasta que se completó la reacción. La mezcla de reacción se concentró y se trituró con d Cm y a continuación se filtró. El filtrado se concentró y a continuación se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y concentraron. El residuo se disolvió en un mínimo de H2O/ACN (1:1) y se convirtió, después del intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex ® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O) para dar el ejemplo (80) (8 mg, 0,02 mmol, 8 %) como un sólido amarillo.
EM m/z ([M+H]+) 407/327.
EM m/z ([MH]-) 405.
1H RMN (400 MHz, D2O) 83,49 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,74 (dd, J = 11,3/2,6 Hz, 1H), 4,44 (dd, J = 18,1/1,4 Hz, 1H), 4,49 (d, J = 18,1 Hz, 1H), 4,64 (dd, J = 5,7/2,6 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,24-7,30 (m, 1H), 7,88-7,91 (m, 2H), 8,00 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,34 (d, J = 5,1 Hz, 1H).
Ejemplo 82: síntesis de hidrogenosulfato de [7-oxo-3-[3-[[(3S)-pirrolidin-3-il1carbamoil1pirazol-1-il1-1,6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-ilo1
Figure imgf000127_0001
Una mezcla de dipirazolo[3,1-a:3',1'-d]pirazina-4,9-diona (200 mg, 1,06 mmol) y (S)-1-Boc-3-aminopirrolidina (396 mg, 2,12 mmol) en THF (10 ml) se calentó a 80 °C durante 1 h. La mezcla se concentró al vacío para proporcionar el intermedio (82a) que se usó sin más purificación.
EM m/z ([MH]-) 279.
Etapa 2: preparación del intermedio (3S)-3-[[1-(6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il))pirazol-3-carbonillaminollpirrolidin-1-carboxilato de terc-butilo (82b)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo (2) (etapa 1a), el intermedio (1g) (200 mg, 0,65 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (82a) (192 mg, 0,69 mmol) en el intermedio (82b) (190 mg, 0,41 mmol, 63 %) tras una purificación por cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona 100/0 a 60/40).
EM m/z ([M+H-tBu]+) 403, ([M+H-Boc]+) 359.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8 1,47 (s, 9H), 1,87-2,05 (m, 1H), 2,19-2,31 (m, 1H), 3,15 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,19-3,37 (m, 1H), 3,39-3,61 (m, 3H), 3,66-3,79 (m, 1H), 4,04-4,22 (m, 2H), 4,33-4,55 (m, 3H), 4,56-4,68 ( m, 1H), 5,23-5,46 (m, 2H), 5,93-6,11 (m, 1H), 6,56 (m, 1H), 6,83 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 2,6 Hz , 1H), 7,62 (br s, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio de [3-[3-[[(3S)-1-terc-butoxicarbonilpirrolidin-3-il1carbamoil1pirazol-1-il1-7-oxo-1,6-d¡azab¡ciclo[3.2.11oct-3-en-6-¡l1 sulfato de sodio (82c)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo (2) (etapa 2), el intermedio (82b) (190 mg, 0,41 mmol) se convirtió en el intermedio (82c) (103 mg, 0,20 mmol, 48 % en 3 etapas) como blanco sólido.
EM m/z ([M]-) 497.
Etapa 4: preparación de hidrogenosulfato de [7-oxo-3-[3-[[(3S)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l1carbamo¡l1p¡razol-1-¡l1-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡lo] (Ejemplo 82)
A una solución del intermedio (82c) (50 mg, 0,10 mmol) en DCM (1 ml) a 0 °C se añadió TFA (0,5 ml). La mezcla se mantuvo a 0°C durante 1 h. Se añadió Et2O y el precipitado se filtró. El sólido se trituró en ACN y a continuación se filtró. A continuación, el sólido se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (agua/ACN: 98/2 a 0/100) para proporcionar el ejemplo (82) (8 mg, 0,02 mmol, 21 %) como una mezcla de diastereisómeros.
EM m/z ([M+H]+) 399.
EM m/z ([MH]-) 397.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 8 (ppm) 2,14-2,28 (m, 1H), 2,39-2,53 (m, 1H), 3,38-3,53 (m, 3H), 3,55-3,76 (m , 3H), 4,40 (s, 2H), 4,61 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 4,64-4,73 (m, 1H), 6,74 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,94 y 7,95 (d, J = 2,7 Hz, 1H).
Ejemplo 83: síntesis de hidrogenosulfato de [7-oxo-3-[3-[[(3R)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l1carbamo¡l1p¡razol-1-¡l1-1.6-
Figure imgf000128_0001
Una mezcla de dipirazolo[3,1-a:3',1'-d]pirazina-4,9-diona (200 mg, 1,06 mmol) y (R)-1-Boc-3-aminopirrolidina (396 mg, 2,12 mmol) en THF (10 ml) se calentó a 80 °C durante 1 h. La mezcla se concentró al vacío para proporcionar el intermedio (83a) que se usó sin más purificación.
EM m/z ([MH]-) 279.
Etapa 2: preparación del intermedio (3R)-3-[[1-(6-aliloxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)pirazol-3-carbonillaminolpirrolidin-1-carboxilato de terc-butilo (83b)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo (2) (etapa 1a), el intermedio (1g) (200 mg, 0,65 mmol) se convirtió por reacción con el intermedio (83a) (192 mg, 0,69 mmol) en el intermedio (83b) ( 198 mg, 0,43 mmol, 66 %) tras una purificación por cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona 100/0 a 60/40).
EM m/z ([M+H-tBu]+) 403, ([M+H-Boc]+) 359.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 81,47 (s, 9H), 1,87-2,05 (m, 1H), 2,19-2,31 (m, 1H), 3,15 (d, J = 10,9 Hz, 1H) , 3,19-3,37 (m, 1H), 3,39-3,61 (m, 3H), 3,66-3,79 (m, 1H), 4,04-4,22 (m, 2H), 4,33-4,55 (m, 3H), 4,56-4,68 ( m, 1H), 5,23-5,46 (m, 2H), 5,93-6,11 (m, 1H), 6,56 (m, 1H), 6,83 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 2,6 Hz , 1H), 7,62 (br s, 1H).
Etapa 3: preparación del intermedio [3-[3-[[(3R)-1-terc-butoxicarbonilpirrolidin-3-il1carbamoil1pirazol-1-il1-7-oxo-1,6-diazabic¡clo[3.2.11 oct-3-en-6-il1 sulfato de sodio (83c)
Usando el procedimiento descrito en el ejemplo (2) (etapa 2), el intermedio (83b) (198 mg, 0,43 mmol) se convirtió en el intermedio (83c) (98 mg, 0,19 mmol, 43 % en 3 etapas) como blanco sólido.
EM m/z ([M1‘) 497.
Etapa 4: preparación de hidrogenosulfato de [7-oxo-3-[3-[[(3R)-pirrolidin-3-il1carbamoil1pirazol-1-il1-1,6-diazab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-ilo1 (Ejemplo 83)
Utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo (82) (etapa 4), el intermedio (83c) (80 mg, 0,15 mmol) se convirtió en el ejemplo (83) (26 mg, 0,07 mmol, 42 %) como una mezcla de diastereoisómeros.
EM m/z ([M+H1+) 399.
EM m/z ([MH1‘) 397.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 8 (ppm) 2,10-2,29 (m, 1H), 2,35-2,57 (m, 1H), 3,34-3,54 (m, 3H), 3,56-3,76 (m , 3H), 4,37 (s, 2H), 4,59 (dd, J = 5,7, 2,6 Hz, 1H), 4,62-4,71 (m, 1H), 6,70 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,79 y 6,80 ( d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,89 y 7,90 (d, J = 2,6, 1H).
Ejemplo 84: síntesis de [7-oxo-3-[3-(1,3,4-tiadiazol-2-ilcarbarmoil)nirazol-1-il1-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-il1 sulfato de sodio
Figure imgf000130_0001
36c
84a 84b
Etapa 3
1) Et-N, NMe,SO„, tBuOH, H„0
2) resina intercam bio Na+ Dowex
Figure imgf000130_0002
Ejem plo 84
Etapa 1: Preparación de 1-(6-al¡lox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.1]oct-3-en-3-¡l)-N-(1.3.4-t¡ad¡azol-2-¡l)p¡razol-3-carboxamida (84a)
Usando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo (79) (etapa 1). el ¡ntermed¡o (36c) (80 mg, 0.28 mmol) se conv¡rt¡ó por reacc¡ón con 1,3,4-t¡ad¡azol-2-am¡na (28 mg. 0,28 mmol) en el ¡ntermed¡o (84a) (8 mg. 0,02 mmol. 8 %) después de la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) y tr¡turac¡ón en DCM. EM m/z ([M+H]+) 374.
EM m/z ([MH]-) 372.
RMN 1H (400 MHz, MeOD): 6 (ppm) 3,33-3,35 (m. 1H). 3,52-3,54 (m. 1H). 4,32 (dd. J = 5.6. 2.6 Hz. 1H). 4,36 (dd. J = 2.1. 17,6 Hz. 1H). 4,42-4,46 (m. 2H). 4.49 (d. J = 17,6 Hz. 1H). 5,28-5,42 (m. 2H). 6,01-6,08 (m. 1H) ). 6,83 (d. J = 5.6 Hz. 1H). 7,05 (d. J = 2.6 Hz. 1H). 8,15 (d. J = 2.6 Hz. 1H). 9.09 (s. 1H).
Etapa 2: Preparac¡ón de 1-(6-h¡drox¡-7-oxo-1.6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-3-¡l)-N-(1,3.4-t¡ad¡azol-2-¡l)p¡razol-3-carboxam¡da (84b)
En atmósfera ¡nerte, a una suspens¡ón del ¡ntermed¡o (84a) (8.1 mg. 0,02 mmol) en DCM anh¡dro (155 pL) se añad¡eron sucesivamente AcOH (3 pl, 0,04 mmol) y Pd(PPh3)4 (13 mg. 0,01 mmoles). La mezcla se agitó a temperatura amb¡ente durante 1 hora. Se añad¡ó Et2O a la suspens¡ón resultante y el prec¡p¡tado se f¡ltró para proporc¡onar el ¡ntermed¡o (84b) (5 mg. 0,016 mmol. 71 %) como un sól¡do blanco.
EM m/z ([M+H]+) 334.
EM m/z ([MH]-) 332.
RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6): 6 (ppm) 3,25 (d. J = 10,9 Hz. 1H). 3,35-3,40 (m. 1H). 4,09 (dd. J = 5.5. 2.5 Hz. 1H).
4,23 (dd, J = 17,6, 1,9 Hz, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 6,93 (br s, 1H), 7,11 (br s, 1H), 8,39 (s, 1H), 9,19 (br s, 1H), 11,93 (br s, 1H), 12,87 (br s, 1H).
Etapa 3: Preparación de [7-oxo-3-[3-(1,3,4-t¡ad¡azol-2-¡lcarbamo¡l)n¡razol-1-¡l1-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l] sulfato de sodio (Ejemplo 84)
A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o (84b) (5 mg, 0,016 mmol) en una mezcla tBuOH/H2O (1:1) (160 j l) se le añad¡eron NMe3SO3 (3 mg, 0,018 mmol) y Et3N (0,5 j l, 0,004 mmol). La suspens¡ón resultante se proteg¡ó de la luz y se ag¡tó durante 45 m¡n a ta. La mezcla se concentró al vacío y después se pur¡f¡có med¡ante cromatografía “flash” sobre gel de síl¡ce de fase ¡nversa C18 (agua/ACN: 95/5 a 0/100). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron, congelaron y l¡of¡l¡zaron. El res¡duo se d¡solv¡ó en una mezcla agua/ACN (9:1) y se conv¡rt¡ó después del ¡ntercamb¡o ¡ón¡co con columna de forma de sod¡o Dowex (Dowex® 50WX8 de forma de h¡drógeno almacenada con una soluc¡ón acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se comb¡naron, congelaron y l¡of¡l¡zaron para dar el ejemplo (84) (4 mg, 0,009 mmol, 69 % en 2 etapas) como un sól¡do blanquec¡no.
EM m/z ([M+H]+) 414.
EM m/z ([MH]-)412.
RMN 1H (400 MHz, D2O): 8 (ppm) 3,50 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,75 (dd, J = 11,4, 2,4 Hz, 1H), 4,46 (m, 2H) , 4,65 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 2,7 Hz, 1H) , 9,12 (s, 1H).
Ejemplo 85: síntes¡s de [7-oxo-3-[3-(p¡razol-3-¡lcarbamo¡l)n¡razol-1-¡l1-1,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.11oct-3-en-6-¡l] sulfato de sod¡o
Figure imgf000131_0001
Usando el proced¡m¡ento descr¡to en el ejemplo (79) (etapa 1), el ¡ntermed¡o (36c) (130 mg, 0,45 mmol) se conv¡rt¡ó por reacción con 3-aminopirazoM-carboxNato de terc-butilo (82 mg, 0,45 mmol) en intermedio (85a) (117 mg, 0,26 mmol, 57 %) después de la purificación mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100).
EM m/z ([M+H]+) 456.
EM m/z ([MH]-) 454.
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 8 (ppm) 1,66 (s, 9H), 3,18 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,57 (dd, J = 10,9, 2,1 Hz, 1H) , 4,15 (dd, J = 5,5, 2,5 Hz, 1H), 4,22 (dd, J = 17,6, 1,9 Hz, 1H), 4,39-4,52 (m, 3H), 5,30-5,43 (m, 2H), 5,98-6,09 (m, 1H), 6,60 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 2,6 Hz , 1H), 8,01 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 9,31 (s, 1H).
Etapa 2: preparación de 3-[[1-(6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-3-il)pirazol-3-carbonil1amino1pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (85b)
Bajo atmósfera inerte, a una solución del intermedio (85a) (115 mg, 0,25 mmol) en DCM anhidro (1,8 ml), se añadieron sucesivamente AcOH (29 pl, 0,51 mmol) y Pd(PPh3)4 (146 mg, 0,13 milimoles). Después de agitar durante 1 h, el crudo se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (DCM/acetona: 100/0 a 0/100) para producir el intermedio (85b) (105 mg, 0,25 mmol, rendimiento cuantitativo) como un sólido amarillo pálido.
EM m/z ([M+H]+) 416.
EM m/z ([MH]') 414.
RMN 1H (400 MHz, MeOD): 8 (ppm) 1,65 (s, 9H), 3,30 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,53 (dd, J = 10,9, 2,4 Hz, 1H), 4,13 (dd, J = 5,5, 2,6 Hz, 1H), 4,33 (dd, J = 17,7, 2,0 Hz, 1H), 4,45 (dd, J = 17,7, 1,1 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 5,5 Hz) , 1H), 6,96 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,15 (d, J = 2,9 Hz, 1H) ).
Etapa 3: preparación de [7-oxo-3-[3-(pirazol-3-ilcarbamoil)nirazol-1-il1-1,6-diazabiciclo[3.2.11oct-3-en-6-il1 sulfato de sodio (Ejemplo 85)
A una solución del intermedio (85b) (102 mg, 0,25 mmol) en una mezcla de t-BuOH/H2O (1:1) (1,2 ml) se le añadió NMe3SO3 (41 mg, 0,30 mmol) y TEA (9 pl, 0,06 mmol). La suspensión resultante se protegió de la luz y se agitó durante 1 h a ta. La mezcla se concentró al vacío y después se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (agua/ACN: 95/5 a 0/100). Las fracciones que contenían el producto se combinaron, congelaron y liofilizaron. El residuo se disolvió en una mezcla H2O/ACN (9:1) y se convirtió después de intercambio iónico con columna de forma de sodio Dowex (Dowex ® 50WX8 de forma de hidrógeno almacenada con una solución acuosa de NaOH 2N y lavada hasta pH neutro con H2O). Las fracciones que contenían el compuesto deseado se combinaron, congelaron y liofilizaron. El residuo se purificó mediante cromatografía “flash” sobre gel de sílice de fase inversa C18 (H2O/ACN: 98/2 a 0/100). Las fracciones que contenían el intermedio esperado se concentraron al vacío para proporcionar el ejemplo (85) (10 mg, 0,02 mmol, 6 % en 2 etapas) como un sólido blanco.
EM m/z ([M+H1+) 396.
EM m/z ([MH1-) 394.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 8 (ppm) 3,51 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,74 (dd, J = 11,4, 2,4 Hz, 1H), 4,48-4,51 (m, 2H ), 4,65 (dd, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 6,55-6,60 (m, 1H), 6,83 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 2,7 Hz, 0,6H), 7,06 (d, J = 2,7 Hz, 0,4H), 7,73-7,78 (m, 1H), 8,09 (d, J = 2,7 Hz, 0,6H), 8,19 (d, J = 2,7 Hz, 0,4H).
Ejemplo 86: actividad biológica
Método 1: actividad inhibidora de B-lactamasa, determinación de ICsn (tablas 1 y 2)
La actividad enzimática se monitorizó mediante medición espectrofotométrica de la hidrólisis de nitrocefina (NCF -TOKU-E, N005) a 485 nm, a temperatura ambiente y en tampón de ensayo A: Fosfato 100 mM pH 7, glicerol al 2% y albúmina de suero bovino 0,1 mg/ml (Sigma, B4287). Las enzimas se clonaron en el vector de expresión de E. coli, se expresaron y purificaron internamente usando procedimientos clásicos. A una placa de poliestireno transparente (Corning, 3628) se agregaron en cada pocillo 5 pl de DMSO o diluciones de inhibidor en DMSO y 80 pl de enzima en tampón A. Las placas se leyeron inmediatamente a 485 nm en un espectrofotómetro de microplacas (BioTek, PowerWave HT) para permitir la sustracción de la referencia. Después de una preincubación de 30 min a temperatura ambiente, finalmente se agregaron 15 pl de NCF (200 pM final) en cada pocillo. Las concentraciones finales de enzima fueron 0,1 nM (TEM-1), 0,075 nM (SHV-1), 0,4 nM (CTX-M-15), 1 nM (KPC-2), 0,2 nM (P99 AmpC), 0,2 nM (CMY-37), 0,4 nM (AmpC P. ae rug ino sa ), 0,2 nM (OXA-1), 1,2 nM (OXA-11), 0,4 nM (OXA-15) y 0,3 nM (OXA-48). Después de 20 minutos de incubación a temperatura ambiente, las placas se leyeron nuevamente a 485 nm. La actividad enzimática se obtuvo restando a la señal final la referencia y se convirtió en inhibición enzimática utilizando pocilios no inhibidos. Se ajsutaron las curvas IC50 a un modelo clásico de equilibrio de Langmuir con pendiente de Hill usando XLFIT (IDBS).
T l 1: I M r l ivi inhi i r l f-l m
Figure imgf000133_0001
Figure imgf000134_0001
Figure imgf000135_0002
T l 2: I mM r l ivi inhi i r l -l m nin i n
Figure imgf000135_0001
Figure imgf000136_0001
Figure imgf000137_0003
Método 2: MIC de compuestos y sinergia con ceftazidima frente a aislados bacterianos (tablas 3, 4, 5 y 6)
Los compuestos de la presente invención se evaluaron frente a cepas bacterianas genotipadas solas o en combinación con la p-lactama ceftazidima (CAZ). En los ensayos, las MIC de dichos compuestos, o de ceftazidima, a concentraciones fijas de dichos compuestos, se determinaron por el método de microdilución en caldo según el Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI - M7-A7). Brevemente, los compuestos solos según la invención se prepararon en DMSO y se colocaron (2 pl cada uno) en placas de poliestireno estériles (Corning, 3788). Los compuestos y las diluciones de ceftazidima se prepararon en DMSO y se colocaron (1 pL cada uno) en placas de poliestireno estériles (Corning, 3788). Las suspensiones bacterianas en fase logarítmica se ajustaron a una densidad final de 5*105ufc/ml en caldo Mueller-Hinton con ajuste de cationes (Becton-Dickinson) y se añadieron a cada pocillo (98 pl). Las microplacas se incubaron durante 16-20 h a 35 °C en aire ambiente. La MIC de los compuestos se definió como la concentración más baja de dichos compuestos que impidió el crecimiento bacteriano según se leyó mediante inspección visual. La MIC de ceftazidima en cada concentración de compuesto se definió como la concentración más baja de ceftazidima que impidió el crecimiento bacteriano según se leyó mediante inspección visual.
T l : E i ri n iliz n l rmin i n MI
Figure imgf000137_0001
T l 4: MI m
Figure imgf000137_0002
Figure imgf000138_0001
T l : MI m in i n f zi im m
Figure imgf000138_0002
Figure imgf000138_0003
Figure imgf000139_0001
Tabla 6: MIC de compuestos y combinaciones ceftazidima/compuesto

Claims (1)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Compuesto de fórmula (I)
    Figure imgf000140_0001
    Figure imgf000140_0002
    en la que
    • R1 representa un heterociclo de 5 miembros, opcionalmente sustituido por uno o más T1, saturado, parcialmente insaturado o aromático que comprende al menos un átomo de nitrógeno, estando el heterociclo unido a la estructura por el átomo de nitrógeno, al menos uno de los átomos de nitrógeno puede estar cuaternizado;
    • R2 representa -SO3H, -CFHCOOH o -CF2COOH;
    • T1, idéntico o diferente, representa independientemente un átomo de flúor; =O; -C(O)Q1; (CH2)m-S(O)2-NQ1Q2; -(CH2)m-C(=NOQ1)Q3; -(X)-(CH2)p-S(O)2NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-S(O)2NQ1Q2; -(CH2)m-O-(CH2)p-O-(CH2)p-NQ1Q2; -(CH2)mOQ1; -(CH2)m-CN; -(CH2)m-OC(O)Q'; -(CH2)m-C(O)OQ1; -(CH2)m-OC(O)OQ1; -(CH2)m-OC(O)nQ1Q2; -(CH2)m-C(O)nQ1Q2; -(CH2)m-C(O)ONQ1Q2; -(CH2)m-C(O)nQ1OQ2; -(CH2)m-C(O)nQ1-NQ1Q2; -(CH2)m-NQ1C(O)Q2; -(CH2)m-NQ1S(O)2NQ1Q2; -(CH2)m-NQ1S(O)2Q2; -(CH2)m-NQ1C(O)OQ2; -(CH2)m-NQ1C(O)nQ1Q2; -(CH2)m-NQ1Q2; -(CH2)m-NH-C(NHQ3)=NQ4; -(CH2)m-NH-CH=NQ3; -(CH2)m-C(NHQ3)=NQ4; -(X)-(CH2)pOQ1; -(X)-(CH2)n-CN; -(X)-(CH2)p-OC(O)Q1; -(X)-(CH2)n-C(O)OQ1; -(X)-(CH2)p-OC(O)OQ1; -(X)-(CH2)p-OC(O)nQ1Q2; -(X)-(CH2)n-C(O)nQ1Q2; -(X)-(CH2)n-C(O)ONQ1Q2; -(X)-(CH2)n-C(O)nQ1OQ2; -(X)-(CH2)n-C(O)nQ1-NQ1Q2; -(X)-(CH2)p-NQ1C(O)Q2; -(X)-(CH2)p-NQ1S(O)2NQ1Q2; -(X)-(CH2)p-NQ1S(O)2Q2; -(X)-(CH2)p-NQ1C(O)OQ2; -(X)-(CH2)p-NQ1C(O)nQ1Q2; -(X)-(CH2)p-NQ1Q2; -(X)-(CH2)p-NHC(NHQ3)=NQ4; -(X)-(CH2)p-NH-CH=NQ3; -(X)-(CH2)n-C(NHQ3)=NQ4; -C(O)-(CH2)nOQ1; -C(O)-(CH2)n-CN; -C(O)-(CH2)n-OC(O)Q1; -C(O)-(CH2)n-C(O)OQ1; -C(O)-(CH2)n-OC(O)OQ1; -C(O)-(CH2)n-OC(O)NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-C(O)NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-C(O)ONQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-C(O)NQ1OQ2; -C(O)-(CH2)n-C(O)NQ1-NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-NQ1C(O)Q2; -C(O)-(CH2)n-NQ1S(O)2NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-NQ1S(O)2Q2; -C(O)-(CH2)n-NQ1C(O)OQ2; -C(O)-(CH2)n-NQ1C(O)NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-NQ1Q2; -C(O)-(CH2)n-NH-C(NHQ3)=NQ4; -C(O)-(CH2)n-NH-CH=NQ3; -C(O)-(CH2)n-C(NHQ3)=NQ4 o T1, idéntico o diferente, representa independientemente un -(CH2)m-(heterociclo de 4, 5 o 6 miembros saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático) no sustituido o sustituido por uno o más T2; -(X)-(CH2)m-(heterociclo de 4, 5 o 6 miembros saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático); alquilo (C1-C3); fluoroalquilo (C1-C3); -(X)-alquilo (C1-C3); -(X)-fluoroalquilo (C1-C3); -(CH2)m-cicloalquilo (C3-C6); -(X)-(CH2)m-cicloalquilo (C3-C6); -(CH2)m-ciclofluoroalquilo (C3-C6); -(X)-(CH2)m-ciclofluoroalquilo (C3-C6); -C(O)-(CH2)m-(heterociclo de 4, 5 o 6 miembros saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático); -C(O)-alquilo (C1-C3); -C(O)-fluoroalquilo (C1-C3); -C(O)O-fluoroalquilo (C1-C3); -C(O)-(CH2)m-cicloalquilo (C3-C6); -C(O)-(CH2)m-cicloalquilo (C3-C6); -C(O)-(CH2)m-ciclofluoroalquilo (C3-C6); -C(O)-(CH2)m-ciclofluoroalquilo (C3-C6);
    • T2, idéntico o diferente, representa independientemente -OH; -NH2; -CONH2;
    • Q1 y Q2 , idénticos o diferentes, representan independientemente un átomo de hidrógeno; -(CH2)r-NHQ3; -(CH2)r-NH -C(NHQ3)=NQ4; -(CH2)r-NH-CH=NQ3; (CH2)n-C(NHQ3)=NQ4;-(CH2)r-OQ3;-(CH2)n-CONHQ3; o
    un alquilo (C1-C3); fluoroalquilo (C1-C3); (CH2)m-(heterociclo de 4, 5 o 6 miembros que comprende al menos un átomo de nitrógeno) saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático, no sustituido o sustituido por uno o más T2; o Q1, Q2 y el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman juntos un heterociclo de 4, 5 o 6 miembros no sustituido o sustituido por uno o más T2, saturado o parcialmente insaturado, que comprende 1, 2 o 3 heteroátomos;
    • Q3 y Q4, idénticos o diferentes, representan independientemente un átomo de hidrógeno o alquilo (C1-C3);
    • m, idéntico o diferente, representa independientemente 0, 1, 2 o 3;
    • n, idéntico o diferente, representa independientemente 1, 2 o 3;
    • p, idéntico o diferente, representa independientemente 2 o 3;
    • r es 1, 2 ó 3 cuando el (CH2)r está directamente unido a un átomo de carbono o 2 o 3 en caso contrario, preferiblemente r es 2 o 3;
    • X, idéntico o diferente, representa independientemente a O; S; S(O); S(O)2 o N(Q3);
    en el que
    • cualquier átomo de carbono presente dentro de un grupo seleccionado de alquilo, cicloalquilo, fluoroalquilo, ciclofluoroalquilo y heterociclo puede oxidarse para formar un grupo C=O;
    • cualquier átomo de azufre presente dentro de un heterociclo puede oxidarse para formar un grupo S=O o un grupo S(O)2;
    • cualquier átomo de nitrógeno presente dentro de un heterociclo o presente dentro de un grupo en el que está trisustituido formando así un grupo amino terciario, puede cuaternizarse adicionalmente con un grupo metilo;
    y un racemato, un enantiómero, un diastereoisómero, un isómero geométrico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,
    con excepción de los siguientes compuestos:
    Figure imgf000141_0001
    en la que R1 y R2 son como se definen en la reivindicación 1.
    3. Compuesto, según la reivindicación 1 o 2, en el que R1 representa un heterociclo, opcionalmente sustituido por uno o más T1, insaturado, parcialmente saturado o aromático, que comprende al menos un átomo de nitrógeno y opcionalmente uno, dos o tres, preferiblemente uno o dos, otros heteroátomos elegidos entre N, O o S, estando el heterociclo unido a la estructura por el átomo de nitrógeno, al menos uno de los átomos de nitrógeno puede estar cuaternizado.4
    4. Compuesto, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que T1 idéntico o diferente, independientemente representa un átomo de flúor; =O; -C(O)Q1; -(CH2)m-S(O)2-NQ1Q2;-(CH2)m-C(=NOQ1)Q3; -(C ^ ^ O Q 1; -(CH2)m-CN; -(CH2)m-C(O)OQ1;-(CH2)m-C(O)NQ1Q2; -(CH2)m-C(O)NQ1OQ2; -(CH2)m-NQ1C(O)Q2; -(CH2)m-NQ1Q2; o T1, idéntico o diferente, representa independientemente un -(CH2)m-(heterociclo de 4, 5 ó 6 miembros saturado, parcial o totalmente insaturado o aromático) no sustituido o sustituido por uno o más T2; alquilo (C1-C3); o fluoroalquilo (C1-C3).
    Figure imgf000141_0002
    estando el ciclo opcionalmente sustituido por uno o más T1 tal como se define en las reivindicaciones 1 o 4.
    6. Compuesto, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que R 1 se elige entre:
    Figure imgf000142_0001
    estando el ciclo opcionalmente sustituido por uno o más T1, tal como se define en las reivindicaciones 1 o 4.
    7. Compuesto, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R2 representa -SO3H o -CF2COOH.
    8. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, elegido entre:
    [7-oxo-3-(2-oxo-tiazol-3-il)-1,6-diaza-biciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio
    [7-oxo-3-(triazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio
    [7-oxo-3-(triazol-2-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    difluoro-(7-oxo-3-pirazol-1-il-1,6-diaza-biciclo[3.2.1]oct-3-en-6-iloxi)-acetato de litio
    [7-oxo-3-(1,2,4-triazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [(5R)-7-oxo-3-(triazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-(4-carbamoilpirazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-(4-cianopirazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [7-oxo-3-(4-metoxipirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    Hidrogenosulfato de [3-[3-(2-aminoetil)]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo]
    [3-[3-(2-hidroxietilcarbamoil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-[3-(hidroximetil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de trietilamonio
    [3-[3-[(2-aminotiazol-5-carbonil)amino]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio
    (7-oxo-3-(4-fluoropirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il) sulfato de sodio
    [3-(4-metilenamoniopirazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato [7-oxo-3-(4-sulfamoilpirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-(3-carbonitrilepirazol-1- il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [7-oxo-3-(3-fluoropirazol-1-il)-1,6- diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-(3-carbamoilpirazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [7-oxo-3-[4-(N-morfolina)-pirazol-1-il)]-1,6-diaza-biciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-(4-acetamidepirazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [7-oxo-3 -[4-(trifluorometil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    (7-oxo-3-(3-carboxamida-5-metil-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il) sulfato de sodio
    [7-oxo-3-[4-carboxamida,W-(2-amoniometoxi)-pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3- en-6-il] sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato
    [7-oxo-3-[3-(tiazol-2-ilcarbamoil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    (7-oxo-3-(3-carboxamida-4-fluoro-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il) sulfato de sodio
    (7-oxo-3-(3-(metoxicarbamoil)-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il) sulfato de sodio
    (7-oxo-3-(5-(metoxicarbamoil)-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il) sulfato de sodio
    (7-oxo-3-(3-acetilpirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il)sulfato de sodio
    Hidrógenosulfato de (7-oxo-3-(3-[(Z,E)-N-(2-aminoetoxi)-C-metil-carbonimidoil]-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo)
    (7-oxo-3-(3-carboxamida-5-fluoro-pirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il) sulfato de sodio
    (7-oxo-3-[3-(morfolina-4-carbonil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il) de sodio
    hidrogenoulfato de (7-oxo-3-[3-(4-piperidilcarbamoil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo)
    {[3-(N-acetamido)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il} sulfato de trietilamonio
    {7-oxo-3-[3-(tiazol-2-carbonilamino)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il} sulfato de sodio
    [7-oxo-3-[3-(metileno-2-amoniotiazol)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato
    [7-oxo-3-[3-(oxazol-2-ilcarbamoil)pirazol-1-il] -1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio hidrogenosulfato de 3[3-[4-(2-aminoetilcarbamoil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo]
    [3-[4-[(Z,E)-N-hidroxi-C-metil-carbonimidoil]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio [3-(4-acetilpirazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    Hidrogenosulfato de [3-[4-(2-aminoetilo)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo]
    2,2,2-trifluoroacetato [7-oxo-3-(4-piperazin-4-io-1-ilpirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] hidrogenosulfato [7-oxo-3-(3,4 ,5-trideuteriopirazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [7-oxo-3-(tetrazol-2-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de de sodio
    [3-[3-(2-amino-2-oxo-etil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio
    hidrogenosulfato de [3-[3-(2-aminoetoxicarbamoil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo]
    [3-[3-(2-hidroxietoxicarbamoil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-[3-[2-(2-amoniometilamino)-2-oxo-etil]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato
    [3-[3-(amoniometil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato
    [3-[3-[(2-hidroxiacetil)amino]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabicido[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio
    [3-[3-(3-hidroxipropanoilamino)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabicido[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-[3-[(2-amino-2-oxo-etoxi)carbamoil]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio [7-oxo-3-(4-tiazol-2-iltriazol-1 -il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-(4-carbamoiltriazol-1)-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-[4-(amoniometil)triazol-1 -il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio y 2,2,2-trifluoroacetato [3-[4-(dimetilamino)metiltriazol-1-il]-7-oxo- 1,6-diazabiciclo [3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio hidrogenosulfato de [3-[4-(metilaminometil)triazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-io]
    [[3-[4-(carboximetil)triazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de disodio hidrogenosulfato de [3-[4-(2-aminoetoxicarbamoil)triazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo]
    [3-[4-(hidroximetil)triazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-[4-(propanoato)triazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato disódico
    hidrogenosulfato de [3-(4-(2-(metilamino)acetamida)triazol-1-il)-7-oxo-1,6- diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] hidrogenosulfato de [3-(4-(2-(metilamino)etanol)triazol-1-il)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo]
    [3-[5-(2-hidroxietil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-[3-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]pirazol-1 -il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1 ]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio [3-[2-(hidroximetil)imidazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-[4-(hidroximetil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    hidrogenosulfato de [3-[3-(2-morfolinoetilcarbamoil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] [3-[2-(3-amino-3-oxo-propil)imidazol -1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de trimetilamonio [3-[4-(2-hidroxietilsulfamoil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [3-[3-[(1S)-1,2-dihidroxietil]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio hidrogenosulfato de [3-[3-[tiazol-5-carbonil]amino]pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] [3-(2-oxazolil)pirazol-1-il]-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il sulfato de sodio
    Hidrogenosulfato de [7-oxo-3-[3-(1,2,4-tiadiazol-5-ilcarbamoil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] [7-oxo-3-[3-(2-piridilcarbamoil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio Hidrogenosulfato de [7-oxo-3-[3-[[(3S)-pirrolidin-3-il]carbamoil]pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] Hidrogenosulfato de [7-oxo-3-[3-[[(3R)-pirrolidin-3-il]carbamoil]pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-ilo] [7-oxo-3-[3-(1,3,4-tiadiazol-2-ilcarbamoil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio [7-oxo-3-[3-(pirazol-3-ilcarbamoil)pirazol-1-il]-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio.
    9. Compuesto, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, elegido entre:
    [7-oxo-3-(triazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio
    [7-oxo-3-(1,2,4-triazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il] sulfato de sodio.
    Figure imgf000143_0001
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
    11. Compuesto, según la reivindicación 10, que es:
    [7-oxo-3-(triazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio.
    Figure imgf000143_0002
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
    13. Compuesto, según la reivindicación 12, que es:
    [(5R)-7-oxo-3-(triazol-1-il)-1,6-diazabiciclo[3.2.1]oct-3-en-6-il]sulfato de sodio.
    14. Composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
    15. Composición farmacéutica, según la reivindicación 14, que comprende además al menos un compuesto seleccionado entre un compuesto antibacteriano, preferiblemente un compuesto de p-lactama.
    16. Composición farmacéutica según una de las reivindicaciones 14 o 15, que comprende
    • un único compuesto, según una de las reivindicaciones 1 a 13;
    • un compuesto según una de las reivindicaciones 1 a 13 y uno o más compuestos antibacterianos;
    • un compuesto según una de las reivindicaciones 1 a 13 y uno o más compuestos de p-lactama;
    • un compuesto según una de las reivindicaciones 1 a 13, uno o más compuestos antibacterianos y uno o más compuestos de p-lactama.
    17. Composición farmacéutica, según una de las reivindicaciones 15 ó 16, en la que
    • el compuesto antibacteriano se selecciona entre aminoglucósidos, p-lactamas, glicilciclinas, tetraciclinas, quinolonas, fluoroquinolonas, glicopéptidos, lipopéptidos, macrólidos, cetólidos, lincosamidas, estreptograminas, oxazolidinonas, polimixinas y mezclas de los mismos; o
    • el compuesto de p-lactama se selecciona entre p-lactamas y mezclas de las mismas, preferiblemente penicilina, cefalosporinas, penems, carbapenems y monobactamas.
    18. Composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 y ceftazidima.
    19. Kit que comprende una composición farmacéutica, según una de las reivindicaciones 14 a 16, y al menos una segunda composición, según una de las reivindicaciones 14 a 16.
    20. Kit que comprende:
    ■ una composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13; y
    ■ una composición farmacéutica que comprende ceftazidima.
    21. Compuesto o composición, según una de las reivindicaciones 1 a 18, para su uso como medicamento.
    22. Compuesto o composición, según una de las reivindicaciones 1 a 18, para:
    - su uso para tratar o prevenir una infección bacteriana; o
    - su uso como agente antibacteriano y/o como inhibidor de p-lactamasa; o
    - su uso para tratar o prevenir una infección bacteriana causada por bacterias productoras de una o más plactamasas; o
    - su uso para tratar o prevenir una infección bacteriana causada por una bacteria grampositiva o por una bacteria gramnegativa, preferentemente una infección bacteriana causada por una bacteria gramnegativa.
    23. Compuesto o composición, según una de las reivindicaciones 1 a 18, para usar en el tratamiento o prevención de infecciones bacterianas.
    24. Compuesto o composición para su uso, según la reivindicación 22, en los que la infección bacteriana se elige entre infección del tracto urinario (uTl), infecciones renales (pielonefritis), infecciones ginecológicas y obstétricas, infección del tracto respiratorio (RTI), exacerbación aguda de bronquitis crónica (AECB), neumonía adquirida en la comunidad (CAP), neumonía adquirida en el hospital (HAP), neumonía asociada al ventilador (VAP), neumonía intraabdominal (IAI), otitis media aguda, sinusitis aguda, sepsis, sepsis relacionada con catéter, cancroide, clamidia, infecciones de la piel o bacteriemia.
    25. Kit, según la reivindicación 19 o 20, para su uso en el tratamiento o prevención de infecciones bacterianas mediante su administración simultánea, separada o secuencial a paciente que lo necesite.
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