ES2922179T3 - Procedimiento para producir PACs purificadas y azúcar a partir de zumo de fruta, y composiciones que comprenden los mismos - Google Patents

Procedimiento para producir PACs purificadas y azúcar a partir de zumo de fruta, y composiciones que comprenden los mismos Download PDF

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Abstract

Esta divulgación se relaciona con un extracto de proantocianidina, el extracto que comprende azúcares de los procesos de jugo de fruta para preparar lo mismo, así como con el uso del extracto o una composición de los mismos como alimentos o composición neutracéutica. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Procedimiento para producir PACs purificadas y azúcar a partir de zumo de fruta, y composiciones que comprenden los mismos
Antecedentes de la descripción
Ciertas frutas son ricas en azúcares naturales y componentes bioactivos, que incluyen antocianinas, proantocianidinas (PACs) y otros compuestos fenólicos.
Las proantocianidinas o taninos condensados son compuestos poliméricos fenólicos de unidades de flavanol, tales como catequina, epicatequina y sus derivados.
La conciencia pública sobre las capacidades antioxidantes y eliminadoras de radicales libres de estos compuestos fenólicos se debe en gran medida al potencial de estos compuestos para mejorar la salud humana de muchas maneras. Las reducciones de las enfermedades cardiovasculares, las enfermedades cerebrovasculares y la mortalidad por cáncer son solo algunos de los ejemplos notables asociados con estos compuestos fenólicos. Los avances recientes en el campo de los nutracéuticos han mostrado que los compuestos que se encuentran en las uvas exhiben incluso más beneficios de lo que se creía inicialmente.
El documento US 2015/126598 describe un procedimiento que comprende adsorber una fracción soluble en agua, que puede ser zumo de arándano sobre un soporte no polar, lavar con un disolvente polar, en particular un alcohol, recuperar la fracción polar que comprende azúcares; y lavar con un disolvente no polar para recuperar la fracción no polar que comprende compuestos fenólicos no polares, tales como antocianos.
El documento US 2006/177525 describe un procedimiento que comprende proporcionar un extracto líquido obtenido con una sal y/o alcaloide, adsorber el extracto líquido obtenido sobre una resina, eluir con agua para obtener una fracción que contiene azúcares y ácidos, y eluir las proantocianidinas con un disolvente orgánico tal como etanol. El documento US 2011/048413 describe un procedimiento para producir productos de azúcar a partir de frutas, que comprende las etapas de proporcionar un zumo de fruta que comprende glucosa libre y fructosa libre, desmineralizar y decolorar el zumo de fruta para que su contenido sólido comprenda de 99% en peso a 99.99% en peso de una mezcla de sustancias elegidas del grupo formado por sacáridos, alcoholes y flavonoides u otros polifenoles; y separar por cromatografía el zumo de fruta desmineralizado y decolorado para obtener al menos una fracción enriquecida en glucosa y/o una fracción enriquecida en fructosa del zumo de fruta.
El documento DE 2624795 se refiere a un procedimiento para separar carbohidratos de melazas, sin embargo, dos ejemplos revelan un procedimiento que hace circular un zumo de manzana en una columna que contiene una resina de intercambio catiónico fuerte, una fracción del eluido a continuación se hace circular en un lecho de carbono y lo resultante se hace circular en una columna de resina de desionización que contiene tres partes de una resina aniónica fuerte en forma de hidróxido y dos partes de una resina catiónica fuerte en forma de hidrógeno.
La captura y concentración selectiva de PACs y azúcares de zumos de este modo sigue siendo de interés para poder suministrar esos compuestos a los consumidores.
Sumario de la descripción
Un aspecto de la descripción se refiere a un extracto de proantocianidina o una composición del mismo como se describe aquí.
Otro aspecto de la descripción se refiere a un extracto que comprende azúcares de un zumo de fruta.
Otro aspecto se refiere a un procedimiento para producir un extracto de proantocianidina como se describe aquí. Otro aspecto se refiere a un procedimiento para producir un extracto que comprende azúcares de un zumo de fruta como se describe aquí.
Otro aspecto se refiere al uso del extracto de proantocianidina o una composición del mismo como se describe aquí como composición alimenticia o nutracéutica.
Una composición alimenticia o nutracéutica que comprende el extracto de proantocianidina como se describe aquí. Una composición alimenticia o nutracéutica que comprende el extracto que comprende azúcares de un zumo de fruta como se describe aquí.
Descripción de los dibujos
La Fig. 1 ilustra el posicionamiento de las especies en el separador bajo SSMB para zumos de arándano; y La Fig. 2 ilustra el posicionamiento de las especies en el separador bajo SSMB para zumos de arándano y granada.
Descripción detallada
Los inventores han encontrado sorprendentemente que el agua puede usarse como la única fase móvil en un procedimiento para extraer PACs de disoluciones acuosas que comprenden proantocianidinas. Por lo tanto, sorprendentemente, el presente procedimiento permite evitar las desventajas del uso de disolventes orgánicos tóxicos y costosos.
La presente invención proporciona un procedimiento para producir un extracto de proantocianidina que comprende la elución de un zumo de fruta que comprende dichas proantocianidinas en una resina estirénica de intercambio catiónico funcionalizada con grupos ácido sulfónico usando una fase móvil que consiste en agua, y en el que las fracciones que comprenden dichas proantocianidinas se recuperan para proporcionar dicho extracto de proantocianidina.
La presente invención proporciona además un procedimiento para producir un extracto que comprende azúcares de un zumo de fruta (y opcionalmente algunas moléculas orgánicas pequeñas, como ácidos orgánicos), comprendiendo el procedimiento la etapa de eluir dicho zumo de fruta en una resina estirénica de intercambio catiónico funcionalizada con grupos ácido sulfónico, usando una fase móvil que consiste en agua y recuperando dichos azúcares del zumo de fruta.
En una realización, el zumo de frutas comprende de alrededor de 5 a 60% (o preferiblemente de 30 a 60%) peso/peso de proantocianidinas en base a la materia seca.
En una realización, el zumo de fruta es zumo de arándano (Vaccinum Macrocarpon), madreselva azul (Familia: madreselva), granada (Malum granatum), grosella negra (Familia: Grossulariaceae), grosella roja (Ribes rubrum y gooseberries redcurrant Maquerau Rustica), arándano azul (Vaccinum & Myrtillus), Mora (Meuron / Rubus), Fresa (Fragaria -Familia: Rosaceae & Fragaria Vesca & Fragaria Virginiana), Frambuesa (Rubus Idaeus), Acai (Euterpe oleracea), Acerola (Cereza Caraíbe), Baya de Goji (Lycium barbarum o Familia chinense: Solanaceae), Cinorrodón (fruto de Rosa canina), Madroño (Arbutus unedo, Familia: Ericaceae), Arrayán (Myrtus communis, Familia: Myrtaceae), Guaraná (Paullinia cupana), Baya de café (Coffea), Nueces de cola (Cola Nitida o Acuminata, Familia: Sterculiaceae) o el fruto del ciruelo de Japón (Prunus Mume (híbrido de albaricoque - ciruela) y Prunus Salicina (ciruelo)).
En una realización, el zumo de fruta es de una fruta/zumo que tiene una Absorbancia total de radicales oxígeno (ORAC Total) de 2500 a 30000 y más. Los valores de ORAC se pueden medir y se registran como se describe en USDA Data Base for the Oxygen Radical Absorbance Capacity (ORAC) of Selected Foods, Release 2 (May 2010), U.S. Department of Agriculture o en http://www.orac-info-portal.de/download/ORAC R2.pdf y esta referencia se incorpora aquí como referencia.
En una realización, el zumo de fruta es un zumo que tiene un pH que varía de 2 a 10, preferiblemente de 2 a 5 y preferiblemente de 4.5 y menos, o más preferiblemente de alrededor de 2 a 5 o de 2 a 4.5.
El zumo de fruta como se usa aquí se puede desacidificar (según el procedimiento definido en WO 2018/054904, incorporado aquí como referencia) o no, y concentrar o no, por ejemplo para que tenga un índice de concentración que puede estar comprendido entre 5 y 65 grados Brix, y por ejemplo alrededor de 50 Brix.
La resina es una resina de intercambio catiónico fuerte (es decir, que comprende iones cargados positivamente (cationes)).
Como se indicó anteriormente, la resina de intercambio catiónico es una resina estirénica funcionalizada con grupos ácido sulfónico.
En una realización, la resina tiene una capacidad de intercambio de alrededor de 1.5 a 2.2 eq/l, preferiblemente de alrededor de 1.5 a 1.8 eq/l.
En una realización, la resina tiene un contenido de humedad de alrededor de 50 a 60% como sal de Na+, preferiblemente de alrededor de 55 a 60%.
En una realización, la resina tiene un coeficiente de uniformidad (en lo sucesivo abreviado "UC", donde UC = d60/d10: diámetro para el 60% de la masa de las perlas/diámetro para el 10% de la masa de las perlas) de menos de alrededor de 1.2, o preferiblemente menos de alrededor de 1.1.
En una realización, la resina tiene un tamaño medio de alrededor de 100 a 400 gm y preferiblemente de alrededor de 200 a 350 gm.
Sin limitación, los ejemplos de resinas de intercambio catiónico fuerte disponibles comercialmente incluyen DOWEX™99/350, DOWEX™99/320, DOWEX™99/310, DOWEX™99/280, DOWEX™99/220, Rohm & Haas CR1320, Rohm & Haas CR1310, Lanxess MDS 1368, Finex CS13CG, Finex CS12CG, CS11CG, DIAION™ UBK530, DIAON™ UBK510, DIAON™ UBK550 y PUROLITE™ PCR642.
Sin estar vinculados a la teoría, se cree que los resultados sorprendentes del procedimiento aquí descrito pueden implicar dos tipos de interacciones de los componentes comprendidos en la disolución acuosa que comprende las proantocianidinas en las resinas:
i) exclusión por tamaño según la cual las moléculas más grandes no logran entrar en los poros de la resina, mientras que las moléculas más pequeñas se difunden en la resina, se retienen y a continuación se lavan con agua como fase móvil;
ii) los ácidos orgánicos no disociados se retienen en la resina mediante enlaces de hidrógeno.
El resultado es que los azúcares y otras moléculas pequeñas (así como los ácidos orgánicos), que tienen un peso molecular (MW) por debajo de alrededor de 300 Da, contenidos en la disolución acuosa que comprende las proantocianidinas son retenidos por la resina y las proantocianidinas, que son moléculas que tienen un MW de 400Da y superior, son excluidas. La elución continua de la fase móvil (agua) hará que los compuestos retenidos finalmente se liberen de la resina.
En una realización, el procedimiento comprende además la etapa de recuperar, por separado de dichas proantocianidinas, al menos uno de los azúcares y/u otras moléculas pequeñas (así como ácidos orgánicos), que tienen un peso molecular (MW) por debajo de alrededor de 300 Da de dichas disoluciones acuosas que comprenden proantocianidinas.
En una realización, el procedimiento proporciona un factor edulcorante aumentado de dicho extracto que comprende azúcares de un zumo de fruta, según la siguiente ecuación:
[azúcar total de la fracción de azúcar (g/l) / proantocianidina de la fracción de azúcar (g/l)] / [azúcar total de la alimentación (g/l) / proantocianidina de la alimentación (g/l)] = superior a 1; al menos alrededor de 5 (± alrededor del 10%), al menos alrededor de 10 (± alrededor del 10%), preferiblemente al menos alrededor de 20 (± alrededor del 10%), o al menos alrededor de 20 (± alrededor del 10%), o al menos alrededor de 50 (± alrededor del 10%).
Por lo tanto, esta descripción proporciona un procedimiento para producir un extracto que comprende azúcares de un zumo de fruta (y opcionalmente algunas moléculas orgánicas pequeñas, como ácidos orgánicos), comprendiendo el procedimiento la etapa de eluir dicho zumo de fruta (o zumo de fruta desacidificado y/o zumo de fruta concentrado) en una resina de intercambio catiónico fuerte usando una fase móvil que consiste en agua. Los azúcares son preferiblemente fructosa, glucosa o una mezcla de los mismos.
En una realización, el zumo de fruta comprende proantocianidinas.
En una realización, el extracto de azúcar tiene un pH sustancialmente el mismo (es decir, ±5-10%) que el del zumo de fruta (o zumo de fruta desacidificado y/o zumo de fruta concentrado) y tiene un pH que varía de 2 a 10, preferiblemente, del 2 a 5.
En una realización, el extracto de azúcar tiene un pH sustancialmente el mismo (es decir, ± 5-10%) que el del zumo de fruta (o zumo de fruta desacidificado y/o zumo de fruta concentrado), tiene un índice Brix que varía de 5 a 65 grados Brix, y preferiblemente tiene un pH que varía de 2 a 10, preferiblemente de 2 a 5.
En una realización, el extracto de azúcar tiene una relación:
Azúcares totales (en g/l) / Proantocianidina (en g/l) = al menos 400, al menos 1000, al menos 5000, preferiblemente al menos 7000, preferiblemente al menos 8000, o preferiblemente al menos 10000.
El procedimiento y las resinas se seleccionan de modo que los azúcares de la fruta y las moléculas pequeñas (así como los ácidos orgánicos), para ejemplos que tienen un peso molecular (MW) inferior a alrededor de 300 Da, se retienen en la resina y las proantocianidinas (que tienen un MW de 400Da y superiores), se excluyen.
Las disoluciones acuosas que comprenden proantocianidinas son un zumo de fruta.
El presente procedimiento se lleva a cabo sin ningún disolvente orgánico (o una combinación de los mismos) como fase móvil (es decir, la fase móvil consiste en agua) para la elución. Los disolventes típicos usados en la técnica anterior incluyen alcohol, tal como etanol, metanol; acetato de etilo y acetona.
En una realización, el procedimiento comprende una etapa de pretratamiento para clarificar el zumo a usar. Esta aclaración puede hacerse por cualquier técnica existente que esté totalmente al alcance de una persona experta en la materia. Los ejemplos de estas técnicas de clarificación incluyen la centrifugación y la filtración (en particular filtración por membrana, diatomeas o placa) del zumo. En una realización, el zumo es zumo filtrado que no comprende sustancialmente ninguna partícula mayor de 10 micrómetros. Esta etapa de pretratamiento tiene la ventaja de prevenir la obstrucción de la columna.
No se contempla el uso de ningún disolvente orgánico (tal como extracción líquido/líquido) antes de llevar a cabo el procedimiento, lo que asegura que el zumo de fruta no se expone a un disolvente orgánico.
Las proantocianidinas obtenidas de acuerdo con el procedimiento definido aquí (es decir, como una disolución acuosa) pueden evaporarse o evaporarse parcialmente (o concentrarse), hasta grados Brix más altos, tales como de 5 a 65 Brix o alrededor de 50 Brix) y/o añadirse directamente a los alimentos o bebidas. La disolución de proantocianidinas se puede secar alternativamente (por ejemplo, mediante liofilización) para obtener una composición de proantocianidinas seca.
En una realización, el extracto de PACs tiene una relación de [(Abs. @ 280 nm (PACs) / azúcar para la fracción de antocianidina) / (Abs. @ 280 nm (PACs) / azúcar para la Alimentación)] (± alrededor del 10 %) = al menos alrededor de 5, preferiblemente al menos alrededor de 10, o al menos alrededor de 20.
No pertenece a la invención una composición alimenticia que comprenda proantocianidinas como se prepara aquí, por ejemplo, como una disolución o una composición seca de proantocianidinas.
Ejemplos
Ejemplo 1: cromatografía (SMB)
El lecho móvil simulado (SMB) es una aplicación bien conocida en la técnica agroquímica (especialmente útil para separar azúcares, ácidos orgánicos y otros compuestos). En resumen, un SMB es un sistema de cromatografía en contracorriente. Las bombas y las válvulas de entrada se desplazan regularmente en función del tiempo de etapa una columna hacia adelante, simulando un flujo contracorriente de resina. La distribución de columnas entre entradas y salidas es constante sea cual sea la etapa. Después de 4 etapas, el sistema ha realizado una revolución o un ciclo. Resina
En el siguiente ejemplo, la resina es una resina catiónica fuerte a base de poliestireno que tiene las siguientes características:
Tabla 1:
Figure imgf000005_0001
Métodos analíticos
a. Determinación de materia seca por refractometría
La materia seca de los zumos se estima midiendo el grado brix en una escala de sacarosa.
b. Determinación de ácidos orgánicos
Los ácidos orgánicos se miden por HPLC:
Columna: BIORAD HPX87H 7.8 * 300 mm
Eluyente: H2SO43MM a 1 ml/min, 60°C.
Los ácidos se dosifican según una curva de calibración establecida a concentraciones de 0.1,0.5, 1 y 1.5 g/l. c. Determinación de polifenoles totales
La absorbancia se mide a 280 nm, que es proporcional a la concentración de dobles enlaces de carbono, que son específicos de los polifenoles. Esta absorbancia se considera proporcional a la concentración de proantocianidinas en nuestra materia prima.
c. Determinación de azúcares totales
La determinación de azúcares (glucosa y fructosa) es por un método de HPLC con una columna Aminex HPX87K, eluyente KH2 PO40.13 g/l y detector refractométrico. Calibración de glucosa y fructosa en 4 puntos de concentración 0.
Se ensayaron varias composiciones de zumo de arándano como se resume en la Tabla 2
Tabla 2:
Figure imgf000006_0001
(1) Zumo crudo (con tratamiento de neutralización o retirada de ácido)
(2) pH ajustado con NaOH a 3.3
(3) Preparado de acuerdo con el procedimiento descrito en Reynaud et al. WO 2018/054904 que se incorpora aquí como referencia.
* estimación a partir de la absorbancia a 280 nm.
** concentración total de ácidos y sus sales correspondientes.
El procedimiento se realizó con el siguiente equipo:
- Columna: vidrio de doble capa de 25 * 1000 mm y pistón ajustable con vidrio sinterizado de 100 pm de porosidad;
- Baño de agua circulante para mantener la temperatura;
- Bomba peristáltica;
- Muestreador automático.
Cargando la columna
La carga de la columna se lleva a cabo sobre el material previamente calentado a la temperatura de ensayo. La columna se llena con agua, a continuación se inyecta la resina como una suspensión en agua. El nivel de resina se ajusta después de hacer circular agua a la temperatura y caudal de ensayo durante 30 minutos.
Resina de relleno
La resina se acondiciona inyectando ácido sulfúrico 1 N, 3 BVs o 200% de la capacidad total de la resina.
Relleno de la columna
La columna debe equilibrarse con el producto antes de realizar los ensayos. Se inyectan 5 BVs de la disolución a cargar para estabilizar la columna, a continuación se lava. Los pistones se ajustan para eliminar el volumen muerto de la columna.
Los zumos anteriores de la tabla 1 se eluyen en la columna y los resultados se resumen en la Tabla 3:
Tabla 3
Figure imgf000007_0001
* En base a materia seca, medida con una balanza IR. ** [azúcar total de la fracción de azúcar (g/l) / proantocianidina de la fracción de azúcar (g/l)]/ [azúcar total de la alimentación (g/l)/ proantocianidina de la alimentación (g/l)] Se observa que, a pesar de que los productos de la alimentación tenían un contenido medio de proantocianidina de alrededor del 0.2% de las especies medidas, la separación entre antocianinas y el resto del material de zumo de arándano funcionó en los tres tipos de zumos de arándano ensayados. Las fracciones de antocianina recuperadas alcanzaron purezas de 15.9 a 33.2%, y la fracción azúcar/ácido solo contiene de 0.07 a 0.1% de antocianinas. Ejemplo 2: SSMB
El procedimiento de SSMB (descrito a continuación) se desarrolló en la década de 1990 para mejorar el rendimiento de SMB; siendo su principal mejora con respecto a SMB que la etapa de SMB se divide en subetapas para una mayor precisión de inyección y recuperación. Se obtiene de este modo una menor dispersión de picos al tener flujos discontinuos de inyección y recuperación. El SSMB también es una aplicación bien conocida en la técnica agroquímica. Secuencial del SSMB:
Un período se define como la secuencia de las siguientes 3 subetapas (y con referencia a las FIGS 1 y 2):
- desplazamiento del producto hacia la siguiente columna en circuito cerrado;
- inyección del eluyente en la zona 1 para recuperar el refinado (RA) en la zona 3;
- a continuación, en paralelo, inyección de la alimentación en la zona 3 para recuperar la segunda fracción de refinado e inyección del eluyente en la zona 1 para recuperar el extracto (EX).
Un período está constituido por la secuencia de las etapas adyacentes. Al final de cada etapa, los puntos de inyección y recuperación se desplazan 1/ith de revolución (siendo i el número de columnas del separador) y la secuencia se repite de nuevo. Cuando se han llevado a cabo i periodos, el sistema ha realizado un ciclo completo. Por lo general, se necesitan de 5 a 6 ciclos para estabilizar el sistema.
Resina
La resina usada para los ensayos es DOWEX 99 Ca 220 equilibrada en ácido sulfúrico 0.5 mol/l. Se ensayaron dos composiciones de zumo como se resume en la Tabla 5:
Figure imgf000008_0001
(3) Preparado de acuerdo con el procedimiento descrito en Raynaud et al. WO 2018/054904 que se incorpora aquí como referencia. Además, los zumos han sido concentrados por ósmosis inversa.
** concentración total de ácidos y sus correspondientes sales
Métodos analíticos
Los métodos analíticos en los siguientes ejemplos son como se describe en el ejemplo anterior.
Configuración del SSMB
El sistema consta de un autómata, un separador, que consiste en 6 columnas de vidrio de doble camisa termoestable con una altura máxima de 110 cm y un diámetro interior real de 2.66 cm (555 ml de resina/m), 6 bombas accionadas magnéticamente 0-400 ml (hasta 4 bombas de entrada 2 bombas de refuerzo), una matriz de electroválvulas acopladas a electroválvulas proporcionales, que permiten cambiar los líquidos en las columnas y regular las presiones de salida del separador y los sensores de presión de 0-10 bar. Cada columna se llena con una resina de cromatografía estabilizada con una disolución de ácido sulfúrico de 0.5 mol/l.
esuta os para zumo e ar n ano
Los resultados se resumen en la Tabla 4:
Figure imgf000009_0001
La figura 1 ilustra el posicionamiento de las especies en el separador. El zumo a someter a separación se inyecta en la zona 3. Las antocianidas (Abs a 280 nm) tienen menos afinidad que los ácidos orgánicos y azúcares por la resina y son conducidos por el eluyente (agua) a la zona 3 para ser eluidos en el refinado (RA). Algunas de las antocianidas se adsorben en la zona 4 (zona tampón) y son recicladas por la contracorriente de la resina a la zona 3. Los ácidos orgánicos y los azúcares tienen más afinidad por la resina y son conducidos a la zona 2. La zona 1 es pura en ácidos orgánicos y la contracorriente de eluyente permite eluirlos en el extracto (EX).
Resultados para zumo de granada
La Fig. 2 ilustra un sistema similar al anterior pero con zumo de granada que no contiene ácido quínico. La relación antocianida/ácido es mayor. Esto da como resultado una mayor pureza de antocianinas en la zona 3. Las especies generalmente mantienen el mismo comportamiento que con el zumo de arándano.
Figure imgf000009_0002

Claims (14)

REIVINDICACIONES
1. Un procedimiento para producir un extracto que comprende azúcares de un zumo de fruta, y opcionalmente pequeñas moléculas orgánicas (tales como ácidos orgánicos), comprendiendo el procedimiento la etapa de eluir dicho zumo de fruta en una resina estirénica de intercambio catiónico funcionalizada con grupos ácido sulfónico, usando una fase móvil que consiste en agua y recuperar dichos azúcares de dicho zumo de fruta.
2. Un procedimiento para producir un extracto de proantocianidina que comprende eluir un zumo de fruta que comprende dichas proantocianidinas en una resina estirénica de intercambio catiónico funcionalizada con grupos ácido sulfónico, usando una fase móvil que consiste en agua, y en el que las fracciones que comprenden dichas proantocianidinas se recuperan para proporcionar dicho extracto de proantocianidina.
3. El procedimiento de la reivindicación 1 o 2, en el que dicho zumo de fruta comprende de 5 a 60%, preferiblemente de 30 a 60%, peso/peso de proantocianidinas en base a la materia seca.
4. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicho zumo es zumo de arándano, madreselva azul, granada, grosella negra, grosella roja, arándano azul, mora, fresa, frambuesa, acai, acerola, baya de goji, cinorrodón, madroño, mirto, guaraná, baya de café, nueces de cola.
5. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicho zumo de fruta es de una fruta y/o zumo que tiene una Capacidad de Absorbancia de Radicales Oxígeno (ORAC) de al menos 2500.
6. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicho zumo de fruta es un zumo que tiene un pH que varía de 2 a 10, preferiblemente, de 2 a 5.
7. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que dicho zumo de fruta se desacidifica para producir un zumo de fruta desacidificado antes de dicha etapa de eluir el zumo de fruta desacidificado en dicha resina de intercambio catiónico fuerte.
8. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que dicho zumo de fruta o dicho zumo de fruta desacidificado se concentra antes de dicha etapa de eluir el zumo de fruta o el zumo de fruta desacidificado en dicha resina de intercambio catiónico fuerte.
9. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que dicho zumo de fruta o zumo de fruta desacidificado tiene un índice Brix que varía de 5 a 65 grados Brix, o alternativamente alrededor de 50 Brix.
10. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que dicha resina tiene una capacidad de intercambio de 1.5 a 2.2 eq/l, preferiblemente de 1.5 a 1.8 eq/l.
11. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en el que dicha resina tiene un coeficiente de uniformidad (UC) inferior a 1.2, o preferiblemente inferior a 1.1.
12. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en el que dicha resina tiene un tamaño medio de 100 a 400 pm y preferiblemente de 200 a 350 pm.
13. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 12, que comprende además una etapa de recuperar, por separado de dichas proantocianidinas, al menos uno de los azúcares y/u otras moléculas pequeñas que tienen un peso molecular (MW) por debajo de 300 Da de dicho zumo de fruta o zumo de fruta desacidificado que comprende proantocianidinas.
14. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, que comprende además una etapa de pretratamiento para clarificar dicho zumo de fruta o zumo de fruta desacidificado o zumo de fruta concentrado.
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