ES2913051T3 - Reguladores de CFTR y métodos de uso de los mismos - Google Patents

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Alan Verkman
Marc Levin
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Mark Kurth
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University of California
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Abstract

Un compuesto seleccionado del grupo que consiste en: **(Ver fórmula)** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

DESCRIPCIÓN
Reguladores de CFTR y métodos de uso de los mismos
Referencias cruzadas a solicitudes relacionadas
Esta solicitud reivindica el beneficio de la solicitud provisional de los Estados Unidos Núm. 62/387,579, presentada el 24 de diciembre de 2015, y la solicitud provisional de los Estados Unidos Núm. 62/376,808, presentada el 18 de agosto de 2016.
Declaración sobre los derechos a las invenciones realizadas bajo la investigación y el desarrollo patrocinados federalmente
Esta invención se realizó con el apoyo del gobierno con los números de subvención TR000004, EY023981, EY013574, EB000415, DK035124, DK072517 y DK101373 otorgados por los Institutos Nacionales de Salud. El gobierno tiene determinados derechos sobre la invención.
Antecedentes de la invención
El estreñimiento es un padecimiento clínico común en adultos y niños que afecta negativamente la calidad de vida. Se ha estimado que la prevalencia del estreñimiento crónico es del 15 % en la población de Estados Unidos, con costos de atención médica estimados en aproximadamente 7 mil millones de dólares anuales, con más de 500 millones de dólares gastados en laxantes. El pilar de la terapia del estreñimiento incluye laxantes y muchos de ellos están disponibles sin receta (fibra soluble, polietilenglicol, probióticos, etc.). Hay dos activadores de los canales de cloruro aprobados por la FDA, lubiprostona y linaclotida, para el tratamiento del estreñimiento, pero los ensayos clínicos mostraron una eficacia variable y poco impresionante de ambos medicamentos. A pesar del amplio intervalo de opciones terapéuticas, existe una necesidad continua de fármacos seguros y efectivos para tratar el estreñimiento.
El ojo seco es un trastorno heterogéneo de la película lagrimal que provoca incomodidad en los ojos, alteraciones visuales y patologías de la superficie ocular, y sigue siendo una necesidad insatisfecha en las enfermedades oculares con opciones terapéuticas efectivas disponibles limitadas. El ojo seco es un importante problema de salud pública en una población que envejece y afecta hasta un tercio de la población mundial, incluidos 5 millones de estadounidenses de 50 años o más. Las lágrimas artificiales de venta libre y los tapones lagrimales implantables se utilizan con frecuencia para el alivio sintomático. Los enfoques terapéuticos implican reducir la inflamación de la superficie ocular o aumentar la secreción de lágrimas/mucina. El único medicamento actualmente aprobado para el ojo seco es la ciclosporina tópica, un antiinflamatorio que no elimina todos los síntomas en la mayoría de los pacientes con ojo seco. La patente WO 2005/112630 se relaciona con los derivados de la quinoxalin-2-ona y su uso como agentes de protección de cultivos. La patente WO 94/11355 describe un derivado de 3,4-dihidro-1-(2-hidroxifenil)-2(1H)-quinoxalinona que tiene efectos vasodilatadores e hipotensores. La patente WO 99/50254 describe quinoxalinonas y su uso en el tratamiento o prevención de estados patológicos en mamíferos caracterizados por trombosis anormal. La patente de Estados Unidos 4296 114 describe 3,4-dihidro-3-oxopirido[2,3-b]-pirazinas y usos de las mismas.
En consecuencia, se necesitan tratamientos adicionales para el ojo seco de moderado a severo. En la presente descripción se encuentran descritas, entre otras, soluciones a estos y otros problemas en la técnica.
Breve resumen de la invención
La presente invención se define por las reivindicaciones. Cualquier materia que quede fuera del alcance de las reivindicaciones se proporciona solo con propósitos informativos. Cualquier referencia en la descripción a métodos para el tratamiento del cuerpo humano o animal mediante terapia se refiere a los compuestos y composiciones farmacéuticas de la presente invención para su uso en los métodos para el tratamiento del cuerpo humano o animal mediante terapia.
En un primer aspecto de la invención, se proporciona un compuesto seleccionado del grupo que consiste en:
Figure imgf000002_0001
Figure imgf000003_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En un segundo aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de Fórmula (I):
Figure imgf000004_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde
L1 es -CH2-;
R20 es
Figure imgf000004_0002
piridilo no sustituido, furanilo no sustituido o tiofenilo no sustituido; o
L1-R20 es
Figure imgf000004_0003
R1, y R4 son hidrógeno;
R2 es hidrógeno o halógeno;
R3 es -NO2;
R5 es hidrógeno, -NO2 o -NH2;
o R2 y R3 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos,
Figure imgf000004_0004
R6 es hidrógeno o halógeno;
R7 es hidrógeno;
R8 es hidrógeno o halógeno;
R9 es hidrógeno, -CH3 o halógeno;
R10 y R11 son hidrógeno o halógeno; y
R12, R13 y R14 son hidrógeno,
con la condición de que cuando R3 es -NO2 y R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, entonces R5 no es -NH2, o
con la condición de que cuando R3 es -NO2 y R5 es -NH2, entonces al menos uno de R6, R7, R8 y R9 no es hidrógeno, y
con la condición de que cuando R5 es -NH2 y R3 es -NO2, entonces R9 es -Cl. También se proporciona en la presente descripción una composición farmacéutica que comprende un excipiente farmacéuticamente aceptable y un compuesto de Fórmula I:
Figure imgf000004_0005
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:
L1 es -CH2-;
R20 es
Figure imgf000005_0001
piridilo no sustituido, furanilo no sustituido o tiofenilo no sustituido; o
L1-R20 es
Figure imgf000005_0002
R1 y R4 son hidrógeno;
R2 es hidrógeno o halógeno;
R3 es -NO2;
R5 es hidrógeno, -NO2 o -NH2;
o R2 y R3 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos,
.N
O
Figure imgf000005_0003
N
R6 es hidrógeno o halógeno;
R7 es hidrógeno;
R8 es hidrógeno o halógeno;
R9 es hidrógeno, -CH3 o halógeno;
R10 y R11 son hidrógeno o halógeno; y
R12, R13 y R14 son hidrógeno,
con la condición de que cuando R3 es -NO2 y R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, entonces R5 no es -NH2, o con la condición de que cuando R3 es -NO2 y R5 es -NH2, entonces al menos uno de R6, R7, R8 y R9 no es hidrógeno,
con la condición de que cuando R5 es -NH2 y R3 es -NO2, entonces R9 es -Cl; y
con la condición de que cuando L1-R20 es
Figure imgf000005_0004
, entonces R3 es -NO2.
También se proporciona en la presente descripción una composición farmacéutica que comprende un excipiente farmacéuticamente aceptable y un compuesto seleccionado de:
Figure imgf000006_0001
, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En la presente descripción también se proporciona un compuesto de Fórmula (I) para su uso en:
(i) el tratamiento del estreñimiento en un sujeto que lo necesite; o
(ii) el tratamiento del trastorno del ojo seco en un sujeto que lo necesite; o
(iii) aumentar el lagrimeo en un sujeto que lo necesite; o
(iv) activar un regulador de conductancia transmembrana de fibrosis quística (CFTR) en un sujeto que lo necesite; o
(v) el tratamiento de una enfermedad hepática colestásica en un sujeto que lo necesite; o
(vi) el tratamiento de una enfermedad o trastorno pulmonar en un sujeto que lo necesite, en donde la Fórmula (I) es:
Figure imgf000007_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,
en donde:
L1 es -CH2-;
R20 es
Figure imgf000007_0002
piridilo no sustituido, furanilo no sustituido o tiofenilo no sustituido; o
L1-R20 es
Figure imgf000007_0003
R1 y R4 son hidrógeno;
R2 es hidrógeno o halógeno;
R3 es -NO2;
R5 es hidrógeno, -NO2 o -NH2;
o R2 y R3 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos,
Figure imgf000007_0004
R6 es hidrógeno o halógeno;
R7 es hidrógeno;
R8 es hidrógeno o halógeno;
R9 es hidrógeno, -CH3 o halógeno;
R10 y R11 son hidrógeno o halógeno; y
R12, R13 y R14 son hidrógeno.
Breve descripción de las figuras
Figura 1. Estrategia para el desarrollo preclínico de activadores CFTR para la terapia del ojo seco. Los activadores de CFTR de tipo salvaje humano identificados mediante cribado de alto rendimiento se confirman y caracterizan mediante el uso de ensayos electrofisiológicos y bioquímicos, y luego se analizan en ratones vivos para determinar su actividad en la superficie ocular mediante mediciones de diferencia de potencial y secreción de fluido lagrimal. A continuación, se analizan las propiedades farmacocinéticas y la eficacia de los mejores compuestos en un modelo de roedor con ojo seco.
Figuras 2A-2D. Caracterización in vitro de activadores de CFTR. Figura 2A) (Parte Superior) Estructuras químicas. (Parte Inferior) Corriente de cortocircuito representativa (Isc) medida en células de tiroides de rata Fischer (FRT) que expresan CFTR de tipo salvaje. La corriente CFTR fue estimulada por compuestos de prueba y forskolina, e inhibida por CFTRinh-172 (10 pM). Figura 2B) Dependencia de la concentración de los activadores de CFTR (cada conjunto de datos se deriva de un experimento de dosis-respuesta único como en A y ajustado mediante el uso de una curva exponencial). La activación del cien por ciento de CFTR se define como la producida por forskolina 20 pM. Figura 2C) Medición de Isc para VX-770 hecha como en A. Figura 2D) Concentración de cAMP celular en células FRT en respuesta a la incubación durante 10 min con compuestos de ensayo 5 pM sin o con forskolina (fsk, 100 nM). Los controles positivos incluyeron forskolina (100 nM y 20 pM) y forskolina más 3-isobutil-1-metilxantina (IBMX, 100 pM) (media ± SeM, n= 4-8).
Figuras 3A-3E. Mediciones de diferencia de potencial (PD) de activadores CFTR en la superficie ocular en ratones vivos. Figura 3A) (Izquierda) Fotografía de un ratón anestesiado que demuestra la perfusión de la superficie ocular para la medición de la PD. El catéter de perfusión, unido al electrodo de medición, se orienta perpendicular a la superficie ocular. Las pinzas de sujeción cruzada retraen el párpado superior para exponer la córnea y la conjuntiva bulbar/palbebral para la perfusión. El electrodo de referencia se conecta a tierra a través de una aguja de mariposa subcutánea. (Derecha) Esquema del rastreo de PD para un experimento típico que prueba la actividad de CFTR, como se describe en Resultados. Figura 3B) Mediciones representativas de PD de la superficie ocular en ratones de tipo salvaje. Las composiciones de la solución se detallan en la Referencia 22. Concentraciones: amilorida, 100 pM; forskolina y CFTRinh-172, 10 pM; compuestos de prueba, 1-10 pM como se indica. Figura 3C) Estudio como en C, pero con VX-770, 1-10 pM, como se indica. Figura 3D) Resumen de APD en ratones de tipo salvaje producidos por forskolina (20 pM) o compuestos de prueba o VX-770 (1 pM cada uno). Las PD se registraron en presencia de amilorida 100 pM y en presencia de un gradiente de Cf apical externo (media ± SEM, 8-20 ojos por agonista probado). Figura 3E) Mediciones representativas de PD de la superficie ocular en ratones CF. Estudio como en B y C, CFTRact-K032, 1-10 pM como se indica.
Figuras 4A-4D. Medición de la secreción de fluido lagrimal de activadores CFTR en ratones vivos. Figura 4A) El fluido lagrimal se midió justo antes y en los momentos indicados después de la aplicación tópica de una sola dosis de vehículo (PBS, polisorbato al 0,5 %, DMSO al 0,5 %), toxina del cólera (0,1 pg/ml), forskolina (20 pM) o forskolina IBMX (250 pM). El efecto de la toxina del cólera se midió después de anestesiar previamente la superficie ocular con lidocaína al 4 % para suprimir la irritación y la secreción lagrimal refleja (media ± SEM, 6-10 ojos por condición). Figura 4B) Evolución temporal de la secreción lagrimal tras la administración tópica del compuesto indicado. Concentraciones: CFTRact-B074, 100 pM; CFTRact-J027, 50 pM; CFTRact-K089, 50 pM; VX-770, 10 pM (media ± SEM, 6-18 ojos). Figura 4C) Efecto de la dosificación repetida. CFTRact-J027 (0,1 nmol) se aplicó tópicamente tres veces al día durante dos días. Las mediciones del fluido lagrimal se realizaron después de la dosis 1 y la dosis 2 el día 1, y la dosis 5 el día 2 (media ± SEM, n = 6 ojos). Figura 4D) Falta de efecto de los activadores de CFTR sobre la secreción de fluido lagrimal en ratones CF, con compuestos probados a las mismas concentraciones que en B. Figuras 5A-5C. Farmacología de compuestos. Figura 5A) Determinación de cantidades de CFTRact-K089 por cromatografía líquida/espectroscopia de masas (LC/MS) en el fluido lagrimal en los momentos indicados después de la administración de una dosis única (0,1 nmol). Áreas representativas de picos sustraídas de la base de los lavados de lágrimas (izquierda) y las medias de la cantidad correspondiente recuperada (derecha) (media ± SEM, 4 ojos por punto de tiempo). Las líneas discontinuas indican las cantidades calculadas superior e inferior de CFTRact-K089 requerido para lograr la concentración EC50. Figura 5B) Tinción con verde de lisamina de la córnea en ratones BALB/c, medida en una escala de 12 puntos (ver Métodos) después de 14 días de tratamiento tres veces al día con activadores de CFTR (0,1 nmol) o vehículo (media ± SEM, 6 ojos por grupo). Como control positivo se muestran las puntuaciones de los ratones tratados con vehículo después de la escisión de la glándula lagrimal (LGE) el día 0 (n = 11 ojos; *P<0,001 en comparación con otros grupos). Figura 5C) Citotoxicidad medida por el ensayo Alamar Blue en células FRT incubadas con compuestos de prueba durante 1 o 24 h (DMSO al 10 % como control positivo; *P<0,05 en comparación con las células no tratadas; P=0,02 y 0,0006 para 1 y 24 h, respectivamente) (media ± SEM, n = 4). Figuras 6A-6C. CFTRact-K089 tópico restaura la secreción lagrimal y previene la alteración del epitelio corneal después de la LGE. Figura 6A) Secreción lagrimal basal después de la LGE extraorbital en ratones BALB/c, comparando ojos tratados con CFTRact-K089 (media ± SEM, 15 ojos) con el vehículo (n=11 ojos). El volumen lagrimal se midió inmediatamente antes de la LGE y luego una hora después de la primera dosis diaria en los días 4, 10 y 14 después de la LGE. *P<0,001. Figura 6B) Fotografías representativas de ojos antes de la LGE (izquierda) y el día 14 después de la LGE (derecha) en ojos tratados con vehículos (superior) y ojos tratados con CFTRact-K089 (inferior). Figura 6C) Disrupción del epitelio corneal después de la LGE medida por la puntuación de LG en una escala de 12 puntos en los mismos ojos que en A (media ± SEM). *P<0,001.
Figura 7. Un resumen de valores EC50 y Vmax para compuestos analizados frente a CFTR. Un cribado de alto rendimiento funcional basado en células de 120 000 compuestos a 10 pM identificó 20 clases químicas de activadores de moléculas pequeñas de CFTR de tipo salvaje que produjeron >95 % de la activación máxima de CFTR. El cribado se realizó en células epiteliales FRT que expresan conjuntamente CFTR de tipo salvaje humano y un sensor de haluro de YFP citoplásmico en formato de 96 pocillos (26, 31, 32). Los detalles del cribado principal se informarán por separado. El cribado secundario involucró mediciones de Isc en células FRT que expresan CFTR pretratadas con forskolina submáxima (50 nM). Veintiún compuestos de ocho clases químicas produjeron grandes aumentos en Isc a 1 pM (>75 % de la corriente máxima producida por 20 pM de forskolina).
Figuras 8A-8D. Identificación de activadores CFTR de molécula pequeña. Figura 8A. Descripción del proyecto. Figura 8B. Cribado del activador de CFTR mediante el uso de células FRT que coexpresan la proteína de detección de yoduro YFP y CFTR de tipo salvaje humano. Se añadieron compuestos de ensayo a 10 pM durante 10 min a temperatura ambiente en presencia de forskolina (125 nM) antes de la adición de yoduro. Ejemplos de datos de pocillos individuales de una placa de 96 pocillos que muestran la activación de CFTR por CFTRact-J027. Figura 8C. Estructuras de activadores CFTR que emergen del cribado. Figura 8D. Síntesis de CFTRact-J027.
Figuras 9A-9E. Caracterización de la activación de CFTR por CFTRact-J027. Corriente de cortocircuito medida en células FRT que expresan CFTR de tipo salvaje humano (Figura 9A) y AF508-CFTR (Figura 9C) que muestran respuestas a las concentraciones indicadas de forskolina (fsk), CFTRact-J027 y VX-770. Las células FRT que expresan AF508-CFTR se corrigieron con VX-809 3 pM a 37 °C durante 24 h antes de la medición. Se añadió CFTRinh-172 (Inh-172, 10 pM) donde se indica. Figura 9B. Activación dependiente de la concentración de CFTRact-J027 de la corriente CFTR Cl-(SE; n = 3 cultivos). Figura 9D. Corriente de cortocircuito en colon de ratón que muestra respuestas a concentraciones indicadas de forskolina (fsk), CFTRact-J027 y CFTRinh-172. Figura 9E. Ensayo de la concentración de cAMP en células FRT medida después de 10 minutos de incubación con las concentraciones indicadas de forskolina y CFTRact-J027 5 pM. Los controles positivos incluyeron forskolina (100 nM y 20 pM) y forskolina más 3-isobutil-1-metilxantina (IBMX, 100 pM) (media ± SE, n=4-8).
Figuras 10A-10D. CFTRact-J027 normaliza la producción de heces y el contenido de agua en ratones tratados con loperamida. Figura 10A. Modelo de ratón de estreñimiento con loperamida (izquierda). Peso de las heces de tres horas, número de gránulos y contenido de agua de las heces en ratones (media ± SE, 6 ratones por grupo). Figura 10B. El mismo estudio que en A, pero con ratones con fibrosis quística que carecen de función CFTR (3-6 ratones por grupo). Figura 10C. El mismo estudio que en A, pero con un análogo químico inactivo de CFTRact-J027 (se muestra la estructura). Figura 10D. Dosis-respuesta para la administración intraperitoneal de CFTRact-J027 en ratones tratados con loperamida (4-6 ratones por grupo). Se usó el análisis de varianza de una vía para A y B, se usó la prueba t de Student para C, *p<0,05, ***p<0,001, ns: no significativo.
Figuras 11A-11C. CFTRact-J027 administrado por vía oral normaliza la producción de heces y el contenido de agua en ratones tratados con loperamida. Figura 11A. Protocolo de estudio (izquierda) y producción de heces, número de gránulos y contenido de agua como se muestra en la Figura 3 (media ± SE, 6 ratones por grupo). Figura 11B. Estudio dosis-respuesta de CFTRact-J027 administrado por vía oral en ratones tratados con loperamida (4-6 ratones por grupo). Figura 11C. El mismo estudio que en la Figura 11A, pero con lubiprostona oral (0,5 mg/kg) o linaclotida (0,5 mg/kg) (5-6 ratones por grupo). Análisis de varianza de una sola vía, *p<0,05, **p<0,01, ***p<0,001, ns: no significativo.
Figuras 12A-12D. Acción de CFTRact-J027 sobre la secreción, absorción y motilidad de fluidos intestinales. Figura 12A. Tiempo de tránsito intestinal completo en ratones de control y tratados con loperamida de tipo salvaje (izquierda) y con fibrosis quística (derecha) (media ± SE, 3-5 ratones por grupo). Donde se indica loperamida (0,3 mg/kg) y CFTRact-J027 (10 mg/kg) se administró por vía intraperitoneal en el tiempo 0 (media ± SE, 6 ratones por grupo). Análisis de varianza de una sola vía, **p<0,01, ***p<0,001, ns: no significativo. Figura 12B. Contracción de tiras intestinales aisladas. Se suspendieron tiras de íleon y colon (~2 cm) en tampón de Krebs-Henseleit con 0,5 g y 0,2 g de tensión, respectivamente. Donde se indica CFTRact-J027, loperamida y carbacol se añadieron a la cámara del órgano. Figura 12c . Secreción de fluido intestinal medida en asas yeyunales medias cerradas en ratones de tipo salvaje (panel superior). Las asas se inyectaron con 100 pL de vehículo o 100 pg de CFTRact-J027. El peso/longitud del asa se midió a los 90 min (media ± SE, 4 asas por grupo). Experimentos similares realizados en ratones con fibrosis quística (panel inferior). Figura 12D. Absorción de fluido intestinal medida en asas yeyunales medias en ratones con fibrosis quística. Las asas se inyectaron con 100 pL de vehículo o 0,1 mg de CFTRact-J027. El peso/longitud del asa se midió a los 30 min. Resumen de la absorción de fluidos (media ± SE, 4 asas por grupo). Prueba t de Student, **p<0,01, ***p<0,001, ns: no significativo.
Figuras 13A-13E. Farmacocinética, distribución tisular y toxicidad de CFTRact-J027. Figura 13A. Estabilidad metabólica in vitro de CFTRact-J027 analizada en microsomas de hígado de ratón después de la incubación durante tiempos específicos. Figura 13B. Curva de concentración plasmática estándar para lC-MS (izquierda) y cinética de la concentración de CFTRact-J027 en plasma determinada por LC/MS después de la administración intraperitoneal u oral en bolo de 10 mg/kg de CFTRact-J027 en el tiempo cero (derecha, media ± SE, 3 ratones por grupo). Figura 13C. Toxicidad in vitro medida por el ensayo Alamar Blue en células FRT. Figura 13D. Peso corporal y proporción de peso húmedo/seco de los pulmones en ratones que recibieron 10 mg/kg de CFTRact-J027 por vía oral durante 7 días (media ± SE, 5 ratones por grupo). Figura 13E. Protocolo de administración crónica (izquierda) y eficacia administración oral de CFTRact-J027 después de 7 días (media ± SE, 5 ratones por grupo). prueba t de Student, *p<0,05, **p<0,01, ***p<0,001, ns: no significativo.
Figuras 14A-14D. Síntesis y análisis de estructura-actividad de activadores CFTR de fenilquinoxalinona. Figura 14A: Esquema general de la síntesis. Figura 14B: Activación dependiente de la concentración de CFTR por fenilquinoxalinonas seleccionadas en células FRT que expresan CFTR de tipo salvaje (media ± SEM, n = 3). La línea discontinua indica la respuesta a forskolina 125 nM. Figura 14C: Determinantes estructurales de la activación de fenilquinoxalinona de CFTR de tipo salvaje. Figura 14D: Medición de corriente de cortocircuito en células FRT que expresan células CFTR de tipo salvaje que muestran respuestas a concentraciones indicadas de forskolina (fsk), CFTRact-J135 y CFTRinh-172 (representativo de 3 experimentos).
Figuras 15A-15D. Análisis de parche abrazadera de activación de CFTR por CFTRact-J027. Figura 15A: Pinza de parche de células completas representativa en células FRT que expresan CFTR de tipo salvaje humano. Cada panel muestra las corrientes de membrana superpuestas provocadas por tensiones entre -100 y 100 mV (con pasos de 20 mV). Las células se expusieron a una concentración submáxima de forskolina (fsk, 150 nM) y luego a CFTRact-J027 (1 pM) seguido de CFTRinh-172 (10 pM). Figura 15B: Relaciones corriente-tensión del experimento en A. Figura 15C: Conductancia de membrana deducida de experimentos como en B (media ± SEM, 4 experimentos). Figura 15D: Corrientes medidas en el experimento de pinza de parche adentro y afuera. CFTR fue activado por ATP submáximo y subunidad catalítica de proteína quinasa A (PKA), seguido de CFTRact-J027 (1 |jM). El protocolo de estimulación por tensión fue el mismo que se usó para los experimentos con células completas. Datos representativos de tres conjuntos de experimentos.
Figuras 16A-16C. Eficacia de CFTRact-J027 en modelos de ratón de estreñimiento agudo. Figura 16A: Protocolo experimental (izquierda) y peso de heces de 3 horas, número de gránulos y contenido de agua en ratones tratados con CFTRact-J027 (10 mg/kg, po) o vehículo 1 h antes de la escopolamina (0,5 mg/kg, ip) (media ± SEM, 4 ratones por grupo). Figura 16B: Protocolo experimental (izquierda) y peso de heces de 3 horas y número de gránulos en ratones tratados con CFTRact-J027 (10 mg/kg, ip) o vehículo 1 h después de escopolamina (0,5 mg/kg, ip) o loperamida (0,3 mg/kg, ip) (media ± SEM, 4 ratones por grupo). Figura 16C: Protocolo experimental (izquierda) y peso de heces de 3 horas y número de gránulos en ratones tratados con CFTRact-J027 (10 mg/kg, po) o vehículo 1 h después de escopolamina (0,5 mg/kg, ip) o loperamida (0,3 mg/kg, ip) (media ± SEM, 4 ratones por grupo). Se usó un análisis de varianza de una vía para la Figura 16A y la Figura 16B, se usó la prueba t de Student para la Figura 16C; *p<0,05, **p<0,01, ***P<0,001, ns: no significativo.
Figuras 17A-17B. CFTRact-J027 revierte el estreñimiento en ratones C3H/HeJ con estreñimiento crónico. Figura 17A: Peso de heces de cuatro horas, número de gránulos y contenido de agua (izquierda) y cambio porcentual en estos parámetros después de CFTRact-J027 (10 mg/kg, po) o tratamiento con vehículo (centro) en ratones C3H/HeJ y C3H/HeOuJ (media ± SEM, 10 ratones por grupo). El protocolo experimental está arriba a la derecha. Figura 17B: Tiempo de tránsito intestinal completo en ratones C3H/HeJ y C3H/HeOuJ tratados con CFTRact-J027 (10 mg/kg, ip) o vehículo en el tiempo cero (media ± SEM, 5 ratones por grupo). prueba t de Student, *p<0,05, **p<0,01, ***P<0,001, ns: no significativo. Todos los experimentos se realizaron en animales emparejados.
Figuras 18A-18B. CFTRact-J027 se metaboliza rápidamente por los microsomas hepáticos humanos y es estable a los ácidos gástricos. Figura 18A: Estabilidad metabólica in vitro de CFTRact-J027 analizado en microsomas de hígado humano en presencia de NADPH después de la incubación durante tiempos específicos, con cromatogramas representativos a la izquierda. Figura 18B: Estabilidad de CFTRact-J027 en fluido gástrico simulado (pH 2) después de 3 h de incubación, con cromatogramas representativos a la izquierda (media ± SEM, n=3).
Figuras 19A-19B. Eficacia relativa de CFTRact-J027 con lubiprostona y linaclotida para aumentar la secreción de fluido intestinal y la producción de heces. Figura 19A: La secreción de fluido intestinal se midió en asas medioyeyunales cerradas en ratones. Las asas se inyectaron con 100 j L de vehículo o 100 jg de CFTRact-J027, lubiprostona o linaclotida. El peso/longitud del asa se midió a los 90 min (media ± SEM, 4-8 asas por grupo, fotos representativas a la derecha). Figura 19B: Peso de heces de tres horas, número de gránulos y contenido de agua en ratones tratados por vía oral con CFTRact-J027 (10 mg/kg), lubiprostona (0,5 mg/kg), linaclotida (0,5 mg/kg) o vehículo en un modelo de estreñimiento con escopolamina como se hizo en Figura 16A (media ± SEM, 4 ratones por grupo). Análisis de varianza de una sola vía, *p<0,05, **p<0,01, ***P<0,001.
Figura 20. CFTRact-J027 produce inflamación en enteroides generados a partir del intestino delgado humano. Aumento porcentual en el área enteroide, según se deduce por microscopía de fluorescencia confocal de enteroides teñidos con calceína, con relación al área inicial. Datos mostrados para enteroides de yeyuno (izquierda) y duodeno (derecha) humanos. Media ± SEM, n > 10 enteroides para cada condición.
Figura 21. Estructura de un potente activador CFTR de fenilquinoxalinona.
Figura 22. Mediciones de corriente de cortocircuito en células FRT que expresan CFTR de tipo salvaje humano que muestran respuestas a la concentración indicada de forskolina (fsk), CFTRinh-172 y 1c o 3j (representativo de 3 experimentos).
Figuras 23A-23D. Caracterización in vitro del compuesto 1c. Figura 23A. cAMP celular en células FRT en respuesta a la incubación durante 10 min con 1c 10 pM sin o con forskolina 90 nM (fsk). Los controles positivos incluyeron fsk (100 nM y 20 pM) y fsk IBMX (20 pM 100 pM) (media ± SEM, n = 4). Figura 23B. Calcio citoplasmático medido por fluorescencia Fluo-4. Las células FRT se pretrataron durante 5 min con 1c 10 pM (o control), con ATP 100 pM añadido como agonista de calcio como se indica. Figura 23C. Actividad de CaCC medida en células HT-29 que expresan YFP que no muestran activación (adición de yoduro) o inhibición (adición de yoduro ATP) por 1c 10 pM. Figura 23D. Actividad de TMEM16A medida en células FRT que expresan YFP que no muestran activación (adición de yoduro) o inhibición (adición de yoduro ATP) por 1c 10 pM.
Figura 24. Eficacia del compuesto 1c en un modelo de ratón de estreñimiento agudo. Orden (de izquierda a derecha, de arriba a abajo): Protocolo experimental, peso de heces de 3 horas, número de gránulos y contenido de agua en ratones tratados con 1c (por vía oral) o vehículo 1 h antes de la loperamida (media ± SEM, 4 ratones por grupo). Figura 25. Estabilidad metabólica in vitro de 1c. 1c restante después de la incubación con microsomas hepáticos de ratón en presencia de NADPH, en comparación con el compuesto de referencia 4.
Descripción detallada de la invención
Las abreviaturas que se usan en la presente descripción tienen su significado convencional dentro de las técnicas químicas y biológicas. Las estructuras y fórmulas químicas que se establecen en la presente descripción se construyen de acuerdo con las reglas estándar de valencia química que se conocen en las técnicas químicas.
Cuando los grupos sustituyentes se especifican mediante sus fórmulas químicas convencionales, escritas de izquierda a derecha, también abarcan los sustituyentes químicamente idénticos que resultarían de escribir la estructura de derecha a izquierda, por ejemplo, -CH2O- es equivalente a -OCH2-.
El término "alquilo", por sí mismo o como parte de otro sustituyente, significa, a menos que se indique de cualquier otra manera, una cadena de carbono (o carbono) lineal (es decir, no ramificada) o ramificada, o sus combinaciones, que puede estar completamente saturada, mono o poliinsaturada y puede incluir radicales mono, di y multivalentes, que tienen el número de átomos de carbono designado (es decir, C1-C10 significa de uno a diez carbonos). El alquilo es una cadena no ciclada. Ejemplos de radicales hidrocarbonados saturados incluyen, pero no se limitan a, grupos tales como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, t-butilo, isobutilo, sec-butilo, (ciclohexil) metilo, homólogos e isómeros de, por ejemplo, n-pentilo, n-hexilo, n-heptilo, n-octilo y similares. Un grupo alquilo insaturado es uno que tiene uno o más enlaces dobles o triples. Los ejemplos de grupos alquilo insaturados incluyen, pero no se limitan a, vinilo, 2-propenilo, crotilo, 2-isopentenilo, 2-(butadienilo), 2,4-pentadienilo, 3-(1,4-pentadienilo), etinilo, 1- y 3-propinilo, 3-butinilo y los homólogos e isómeros superiores. Un alcoxi es un alquilo unido al resto de la molécula a través de un oxígeno enlazador (-O-).
El término "alquileno", por sí mismo o como parte de otro sustituyente, significa, a menos que se indique de cualquier otra manera, un radical divalente derivado de un alquilo, como se ejemplifica, pero sin limitarse a, -CH2CH2CH2CH2-. Típicamente, un grupo alquilo (o alquileno) tendrá de 1 a 24 átomos de carbono, los preferidos en la presente invención son aquellos grupos que tienen 10 o menos átomos de carbono. Un "alquilo inferior" o "alquileno inferior" es un grupo alquilo o alquileno de cadena más corta, que tiene generalmente ocho o menos átomos de carbono. El término "alquenileno", por sí mismo o como parte de otro sustituyente, significa, a menos que se indique de cualquier otra manera, un radical divalente derivado de un alqueno.
El término "heteroalquilo", solo o en combinación con otro término, significa, a menos que se indique de cualquier otra manera, una cadena lineal o ramificada estable, o sus combinaciones, que incluye al menos un átomo de carbono y al menos un heteroátomo (por ejemplo, seleccionado del grupo que consiste en O, N, P, Si y S), y en donde los átomos de nitrógeno y azufre pueden oxidarse opcionalmente y el heteroátomo de nitrógeno puede cuaternizarse opcionalmente. Los heteroátomos (por ejemplo, O, N, P, S, B, As y Si) pueden colocarse en cualquier posición interior del grupo heteroalquilo o en la posición en la que el grupo alquilo está unido al resto de la molécula. El heteroalquilo es una cadena no ciclada. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a: -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2, -S(O)-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH=CH-O-CH3, -Si(CH3)3, -CH2-CH=N-OCH3, -CH=CH-N(CH3) -CH3, -O-CH3, -O-CH2-CH3y -CN. Pueden ser consecutivos hasta dos o tres heteroátomos, como, por ejemplo, -CH2-NH-OCH3 y -CH2-O-Si(CH3)3.
De manera similar, el término "heteroalquileno", por sí mismo o como parte de otro sustituyente, significa, a menos que se indique de cualquier otra manera, un radical divalente derivado de heteroalquilo, como se ejemplifica, pero sin limitarse a, -CH2-CH2-S-CH2-CH2- y -CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-. Para los grupos heteroalquileno, los heteroátomos también pueden ocupar cualquiera de los terminales de la cadena o ambos (por ejemplo, alquilenoxi, alquilendioxi, alquilenamino, alquilendiamino, y similares). Más aun, para los grupos de enlace alquileno y heteroalquileno, ninguna orientación del grupo de enlace está implícita en la dirección en la que se escribe la fórmula del grupo de enlace. Por ejemplo, la fórmula -C(O)2R'- representa tanto -C(O)2R'- como -R'C(O)2-. Como se describió anteriormente, los grupos heteroalquilo, como se usan en la presente descripción, incluyen aquellos grupos que están unidos al resto de la molécula a través de un heteroátomo, tales como -C(O)R', -C(O)NR', -NR'R", -OR', -SR' y/o -SO2R'. Cuando se dice "heteroalquilo", seguido de las menciones de grupos heteroalquilo específicos, como -NR'R" o similares, se debe entender que los términos heteroalquilo y -NR'R" no son redundantes ni mutuamente excluyentes. Por el contrario, los grupos heteroalquilo específicos se recitan para añadir claridad. Por lo tanto, el término "heteroalquilo" no debe interpretarse en la presente descripción como que excluye grupos heteroalquilo específicos, tales como -NR'R" o similares.
Los términos "cicloalquilo" y "heterocicloalquilo", por sí mismos o en combinación con otros términos, significan, a menos que se indique de cualquier otra manera, versiones cíclicas de "alquilo" y "heteroalquilo", respectivamente. El cicloalquilo y el heteroalquilo no son aromáticos. Adicionalmente, para el heterocicloalquilo, un heteroátomo puede ocupar la posición en la cual el heterociclo se une al resto de la molécula. Los ejemplos de cicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, 1-ciclohexenilo, 3-ciclohexenilo, cicloheptilo y similares. Los ejemplos de heterocicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, 1-(1,2,5,6-tetrahidropiridilo), 1-piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo, 4-morfolinilo, 3-morfolinilo, tetrahidrofurano-2-ilo, tetrahidrofuran-3-ilo, tetrahidrotien-2-ilo, tetrahidrotien-3-ilo, 1 -piperazinilo, 2-piperazinilo y similares. Un "cicloalquileno" y un "heterocicloalquileno", solos o como parte de otro sustituyente, significa un radical divalente que se deriva de un cicloalquilo y heterocicloalquilo, respectivamente.
Los términos "halo" o "halógeno," por sí mismos o como parte de otro sustituyente, significan a menos que se indique de cualquier otra manera, un átomo de flúor, cloro, bromo, o yodo. Adicionalmente, los términos tales como "haloalquilo" tienen la intención de incluir monohaloalquilo y polihaloalquilo. Por ejemplo, el término "halo(Ci-C4)alquilo" incluye, pero no se limita a, fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 4-clorobutilo, 3-bromopropilo y similares.
El término "acilo" significa, a menos que se indique de cualquier otra manera, -C(O)R donde R es un alquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido o heteroarilo sustituido o no sustituido.
El término "arilo" significa, a menos que se indique de cualquier otra manera, un sustituyente hidrocarbonado poliinsaturado, aromático, que puede ser un único anillo o múltiples anillos (preferentemente de 1 a 3 anillos), que se fusionan entre sí (es decir, arilo de anillo fusionado) o se enlazan covalentemente. Un arilo de anillo fusionado se refiere a múltiples anillos fusionados en donde al menos uno de los anillos fusionados es un anillo de arilo. El término "heteroarilo" se refiere a grupos (o anillos) arilo que contienen al menos un heteroátomo tal como N, O, y S, en donde los átomos de nitrógeno y azufre se oxidan opcionalmente, y los átomos de nitrógeno están en estado cuaternario opcionalmente. Así, el término "heteroarilo" incluye grupos heteroarilo de anillo fusionado (es decir, múltiples anillos que se fusionan entre si en donde al menos uno de los anillos fusionados es un anillo heteroaromático). Un heteroarileno de anillo 5,6-fusionado se refiere a dos anillos fusionados entre sí, en donde un anillo tiene 5 miembros y el otro anillo tiene 6 miembros, y en donde al menos un anillo es un anillo heteroarilo. Igualmente, un heteroarileno de anillo 6,6-fusionado se refiere a dos anillos fusionados entre sí, en donde un anillo tiene 6 miembros y el otro anillo tiene 6 miembros, y donde al menos un anillo es un anillo heteroarilo. Y un heteroarileno de anillo 6,5-fusionado se refiere a dos anillos fusionados entre sí, en el que un anillo tiene 6 miembros y el otro anillo tiene 5 miembros, y en donde al menos un anillo es un anillo heteroarilo. Un grupo heteroarilo puede unirse al resto de la molécula a través de un carbono o un heteroátomo. Los ejemplos no limitantes de grupos arilo y heteroarilo incluyen fenilo, naftilo, pirrolilo, pirazolilo, piridazinilo, triazinilo, pirimidinilo, imidazolilo, pirazinilo, purinilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, furilo, tienilo, piridilo, pirimidilo, benzotiazolilo, benzoxazoilo, bencimidazolilo, benzofurano, isobenzofuranilo, indolilo, isoindolilo, benzotiofenilo, isoquinolilo, quinoxalinilo, quinolilo, 1-naftilo, 2-naftilo, 4-bifenilo, 1 -pirrolilo, 2-pirrolilo, 3-pirrolilo, 3-pirazolilo, 2-imidazolilo, 4-imidazolilo, pirazinilo, 2-oxazolilo, 4-oxazolilo, 2-fenil-4-oxazolilo, 5-oxazolilo, 3-isoxazolilo, 4-isoxazolilo, 5-isoxazolilo, 2-tiazolilo, 4-tiazolilo, 5-tiazolilo, 2-furilo, 3-furilo, 2-tienilo, 3-tienilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 2-pirimidilo, 4-pirimidilo, 5-benzotiazolilo, purinilo, 2-bencimidazolilo, 5-indolilo, 1-isoquinolilo, 5-isoquinolilo, 2-quinoxalinilo, 5-quinoxalinilo, 3-quinolilo y 6-quinolilo. Los sustituyentes para cada uno de los sistemas de anillos arilo y heteroarilo anteriormente mencionados son seleccionados del grupo de sustituyentes aceptables descritos más abajo. Un "arileno" y un "heteroarileno", solos o como parte de otro sustituyente, significan un radical divalente derivado de un arilo y heteroarilo, respectivamente. Un sustituyente del grupo heteroarilo puede ser un -O- unido a un heteroátomo de nitrógeno en el anillo.
Un "arilo-heterocicloalquilo de anillos condensados" es un arilo condensado con un heterocicloalquilo. Un "heteroarilo-heterocicloalquilo de anillos condensados" es un heteroarilo condensado con un heterocicloalquilo. Un "heterocicloalquilo-cicloalquilo de anillos condensados" es un heterocicloalquilo condensado con un cicloalquilo. Un "heterocicloalquilo-heterocicloalquilo de anillos condensados" es un heterocicloalquilo condensado con otro heterocicloalquilo. El arilo-heterocicloalquilo de anillos condensados, el heteroarilo-heterocicloalquilo de anillos condensados, el heterocicloalquilo-cicloalquilo de anillos condensados o el heterocicloalquilo-heterocicloalquilo de anillos condensados pueden estar independientemente sustituidos o no sustituidos con uno o más de los sustituyentes descritos en la presente descripción. El arilo-heterocicloalquilo de anillos condensados, el heteroariloheterocicloalquilo de anillos condensados, el heterocicloalquilo-cicloalquilo de anillos condensados o el heterocicloalquilo-heterocicloalquilo de anillos condensados pueden nombrarse cada uno independientemente de acuerdo con el tamaño de cada uno de los anillos condensados. Así, por ejemplo, el anillo condensado 6,5 ariloheterocicloalquilo describe un resto arilo de 6 miembros condensado con un heterocicloalquilo de 5 miembros. Los anillos espirocíclicos son dos o más anillos en donde los anillos adyacentes están unidos a través de un solo átomo. Los anillos individuales dentro de los anillos espirocíclicos pueden ser idénticos o diferentes. Los anillos individuales en los anillos espirocíclicos pueden estar sustituidos o no y pueden tener diferentes sustituyentes de otros anillos individuales dentro de un conjunto de anillos espirocíclicos. Los posibles sustituyentes para anillos individuales dentro de anillos espirocíclicos son los posibles sustituyentes para el mismo anillo cuando no forma parte de anillos espirocíclicos (por ejemplo, sustituyentes para anillos cicloalquilo o heterocicloalquilo). Los anillos espirocíclicos pueden ser cicloalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquileno sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido o heterocicloalquileno sustituido o no sustituido, y los anillos individuales dentro de un grupo de anillos espirocíclico pueden ser cualquiera de la lista inmediatamente anterior, incluso tener todos los anillos de un tipo (por ejemplo, todos anillos heterocicloalquileno sustituido en donde cada anillo puede ser el mismo o diferente heterocicloalquileno sustituido). Cuando se hace referencia a un sistema de anillos espirocíclicos, los anillos espirocíclicos heterocíclicos significan anillos espirocíclicos en donde al menos un anillo es un anillo heterocíclico y en donde cada anillo puede ser un anillo diferente. Cuando se hace referencia a un sistema de anillos espirocíclicos, anillos espirocíclicos sustituidos significa que al menos un anillo está sustituido y cada sustituyente puede ser opcionalmente diferente.
El término "oxo", como se usa en la presente descripción, significa un oxígeno que se une por doble enlace a un átomo de carbono.
Cada uno de los términos anteriores (por ejemplo, "alquilo", "heteroalquilo", "arilo" y "heteroarilo") incluyen formas tanto sustituidas como no sustituidas del radical que se indica. Los sustituyentes preferidos para cada tipo de radical se proporcionan más abajo.
Los sustituyentes para los radicales alquilo y heteroalquilo (incluidos los grupos a menudo denominados alquileno, alquenilo, heteroalquileno, heteroalquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, cicloalquenilo y heterocicloalquenilo) pueden ser uno o más de una variedad de grupos seleccionados, pero sin limitarse a, -OR', =O, =NR', =N-OR', -NR'R", -SR', -halógeno, -SiR'R"Rm, -OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR'-C(O)NR"Rm, -NR"C(O)2R', -NR-C(NR'R"R'")=NRm', -NR-C(NR'R")=NRm, -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R", -NRSO2R', -NR'NR"Rm, -ONR'R", -NR'C=(O)NR"NRmRm', -CN, -NO2, -NR'SO2R", -NR"C=(O)R", -NR'C(O)-OR", -NR'OR", en un número que va de cero a (2m'+1), donde m' es el número total de átomos de carbono en tal radical. R, R', R", Rm y Rm' se refieren cada uno preferentemente de forma independiente a hidrógeno, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, arilo sustituido con 1-3 halógenos), heteroarilo sustituido o no sustituido, alquilo sustituido o no sustituido, grupos alcoxi o tioalcoxi, o grupos arilalquilo. Cuando un compuesto de la invención incluye más de un grupo R, por ejemplo, cada uno de los grupos R se selecciona independientemente como cada grupo R', R", Rm y Rm' cuando está presente más de uno de estos grupos. Cuando R' y R" están unidos al mismo átomo de nitrógeno, pueden combinarse con el átomo de nitrógeno para formar un anillo de 4-, 5-, 6- o 7-miembros. Por ejemplo, -NR'R" incluye, pero no se limita a, 1 -pirrolidinilo y 4-morfolinilo. De la discusión anterior de sustituyentes, un experto en la técnica entenderá que el término "alquilo" tiene la intención de incluir grupos que incluyen átomos de carbono vinculados a grupos distintos de los grupos de hidrógeno, tales como haloalquilo (por ejemplo, -CF3 y -CH2CF3) y acilo (por ejemplo, -C(O)CH3, -C(O)CF3, -C(O) CH2OCH3, y similares).
Similar a los sustituyentes descritos para el radical alquilo, los sustituyentes para los grupos arilo y heteroarilo varían y se seleccionan de, por ejemplo: -OR', -NR'R", -SR', -halógeno, -SiR'R"Rm, -OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR'-C(O)NR"Rm, -NR"C(O)2R', -NR-C(NR'R"Rm)=NR..., -NR-C(NR'R")=NRm, -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R", -NRSO2R', -NR'NR"Rm, -ONR'R", -NR'C=(O)NR"NRmR"", -CN, -NO2, -R', -N3, -CH(F)2, fluoro(Ci-C4)alcoxi, y fluoro (Ci-C4)alquilo, -NR'SO2R", -NR'C=(O)R", -NR'C(O)-OR", -NR'OR", en un número que va de cero al número total de valencias abiertas en el sistema de anillos aromáticos; y donde R ', R", Rm y Rm' se seleccionan preferentemente de forma independiente de hidrógeno, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido y heteroarilo sustituido o no sustituido. Cuando un compuesto de la invención incluye más de un grupo R, por ejemplo, cada uno de los grupos R se selecciona independientemente como lo son cada grupo R', R", Rm y Rm' cuando está presente más de uno de estos grupos.
Los sustituyentes de los anillos (por ejemplo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, cicloalquileno, heterocicloalquileno, arileno o heteroarileno) pueden representarse como sustituyentes en el anillo en lugar de en un átomo específico de un anillo (comúnmente denominado sustituyente flotante). En tal caso, el sustituyente puede estar unido a cualquiera de los átomos del anillo (obedeciendo las reglas de valencia química) y en el caso de anillos fusionados o anillos espirocíclicos, un sustituyente que se representa como asociado con un miembro de los anillos condensados o anillos espirocíclicos (un sustituyente flotante en un solo anillo), puede ser un sustituyente en cualquiera de los anillos fusionados o anillos espirocíclicos (un sustituyente flotante en múltiples anillos). Cuando un sustituyente está unido a un anillo, pero no a un átomo específico (un sustituyente flotante), y un subíndice para el sustituyente es un número entero mayor que uno, los múltiples sustituyentes pueden estar en el mismo átomo, mismo anillo, diferentes átomos, diferentes anillos fusionados, diferentes anillos espirocíclicos y cada sustituyente puede ser opcionalmente diferente. Cuando un punto de unión de un anillo al resto de una molécula no se limita a un solo átomo (un sustituyente flotante), el punto de acoplamiento puede ser cualquier átomo del anillo y, en el caso de un anillo condensado o un anillo espirocíclico, cualquier átomo de cualquiera de los anillos fusionados o anillos espirocíclicos mientras obedezcan las reglas de valencia química. Cuando un anillo, anillos fusionados o anillos espirocíclicos contienen uno o más heteroátomos en el anillo y el anillo, los anillos fusionados o los anillos espirocíclicos se muestran con uno más sustituyentes flotantes (incluidos, pero sin limitarse a, puntos de unión al resto de la molécula), los sustituyentes flotantes pueden estar unidos a los heteroátomos. Cuando los heteroátomos del anillo se muestran unidos a uno o más hidrógenos (por ejemplo, un nitrógeno del anillo con dos enlaces a los átomos del anillo y un tercer enlace a un hidrógeno) en la estructura o fórmula con el sustituyente flotante, cuando el heteroátomo está unido al sustituyente flotante, se entenderá que el sustituyente sustituye al hidrógeno, obedeciendo las reglas de la valencia química.
Dos o más sustituyentes se pueden unir opcionalmente para formar grupos arilo, heteroarilo, cicloalquilo, o heterocicloalquilo. Dichos sustituyentes denominados formadores de anillos se encuentran típicamente, aunque no necesariamente, unidos a una estructura de base cíclica. En una modalidad, los sustituyentes formadores de anillos están unidos a miembros adyacentes de la estructura base. Por ejemplo, dos sustituyentes formadores de anillos unidos a miembros adyacentes de una estructura de base cíclica crean una estructura de anillo fusionado. En otra modalidad, los sustituyentes formadores de anillos se unen a un solo miembro de la estructura base. Por ejemplo, dos sustituyentes formadores de anillos unidos a un solo miembro de una estructura de base cíclica crean una estructura espirocíclica. En otra modalidad más, los sustituyentes formadores de anillos se unen a miembros no adyacentes de la estructura base.
Dos de los sustituyentes en átomos adyacentes del anillo arilo o heteroarilo pueden formar opcionalmente un anillo de fórmula -T-C(O)-(CRR')q-U-, en donde T y U son independientemente -NR-, -O-, -CRR'-, o un enlace simple, y q es un número entero de 0 a 3. Alternativamente, dos de los sustituyentes en átomos adyacentes del anillo arilo o heteroarilo se pueden reemplazar opcionalmente con un sustituyente de la fórmula -A-(CH2)r-B-, en donde A y B son independientemente -CRR'-, -O-, -NR-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2NR'-, o un enlace sencillo, y r es un número entero de 1 a 4. Uno de los enlaces sencillos del nuevo anillo que así se forma se puede reemplazar opcionalmente con un doble enlace. Alternativamente, dos de los sustituyentes en los átomos adyacentes del anillo de arilo o heteroarilo pueden reemplazarse opcionalmente con un sustituyente de fórmula -(CRR')s-X'-(C"R"Rm)d-, donde s y d son independientemente números enteros de 0 a 3, y X' es -O-, -NR'-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, o -S(O)2NR'-. Los sustituyentes R, R', R" y Rm se seleccionan preferentemente de forma independiente entre hidrógeno, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido y heteroarilo sustituido o no sustituido.
Como se usa en la presente descripción los términos "heteroátomo" o "heteroátomo de anillo" incluyen oxígeno (O), nitrógeno (N), azufre (S), fósforo (P), boro (B), arsénico (As) y silicio (Si).
Un "grupo sustituyente", como se usa en la presente, significa un grupo seleccionado de los siguientes restos: (A) oxo, halógeno, -CF3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO2C -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC=(O)NHNH2, -NHC=(O)NH2, -NHSO2H, -NHC=(O)H, -NHC(O)-OH, -NHOH, -OCF3, -OCHF2, alquilo no sustituido, heteroalquilo no sustituido, cicloalquilo no sustituido, heterocicloalquilo no sustituido, arilo no sustituido, heteroarilo no sustituido y
(B) alquilo, heteroalquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo y heteroarilo, sustituidos con al menos un sustituyente seleccionado entre:
(i) oxo, halógeno, -CF3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO2C -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC=(O)NHNH2, -NHC=(O)NH2, -NHSO2H, -NHC=(O)H, -NHC(O)-OH, -NHOH, -OCF3, -OCHF2, alquilo no sustituido, heteroalquilo no sustituido, cicloalquilo no sustituido, heterocicloalquilo no sustituido, arilo no sustituido, heteroarilo no sustituido y
(ii) alquilo, heteroalquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo y heteroarilo, sustituidos con al menos un sustituyente seleccionado entre:
(a) oxo, halógeno, -CF3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO2O, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC=(O)NHNH2, -NHC=(O)NH2, -NHSO2H, -NHC=(O)H, -NHC(O)-OH, -NHOH, -OCF3, -OCHF2, alquilo no sustituido, heteroalquilo no sustituido, cicloalquilo no sustituido, heterocicloalquilo no sustituido, arilo no sustituido, heteroarilo no sustituido y
(b) alquilo, heteroalquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo, sustituido con al menos un sustituyente seleccionado entre: oxo, halógeno, -CF3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO2Cl, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC=(O)NHNH2, -NHC=(O)NH2, -NHSO2H, -NHC=(O)H, -NHC(O)-OH, -NHOH, -OCF3, -OCHF2, alquilo no sustituido, heteroalquilo no sustituido, cicloalquilo no sustituido, heterocicloalquilo no sustituido, arilo no sustituido y heteroarilo no sustituido.
Un "sustituyente de tamaño limitado" o "grupo sustituyente de tamaño limitado", como se usa en la presente, significa un grupo seleccionado de todos los sustituyentes descritos anteriormente para un "grupo sustituyente", en donde cada alquilo sustituido o no sustituido es un alquilo C1-C20 sustituido o no sustituido, cada heteroalquilo sustituido o no sustituido es un heteroalquilo de 2 a 2o miembros sustituido o no sustituido, cada cicloalquilo sustituido o no sustituido es un cicloalquilo C3-C8 sustituido o no sustituido, cada heterocicloalquilo sustituido o no sustituido es un heterocicloalquilo de 3 a 8 miembros sustituido o no sustituido, cada arilo sustituido o no sustituido es un arilo C6-C10 sustituido o no sustituido, y cada heteroarilo sustituido o no sustituido es un heteroarilo de 5 a 10 miembros sustituido o no sustituido.
Un "sustituyente inferior" o "grupo sustituyente inferior", como se usa en la presente, significa un grupo seleccionado de todos los sustituyentes descritos anteriormente para un "grupo sustituyente", en donde cada alquilo sustituido o no sustituido es un alquilo C1-C8 sustituido o no sustituido, cada heteroalquilo sustituido o no sustituido es un heteroalquilo de 2 a 8 miembros sustituido o no sustituido, cada cicloalquilo sustituido o no sustituido es un cicloalquilo C3-C7 sustituido o no sustituido, cada heterocicloalquilo sustituido o no sustituido es un heterocicloalquilo de 3 a 7 miembros sustituido o no sustituido, cada arilo sustituido o no sustituido es un arilo C6-C10 sustituido o no sustituido, y cada heteroarilo sustituido o no sustituido es un heteroarilo de 5 a 9 miembros sustituido o no sustituido.
En algunas modalidades, cada grupo sustituido descrito en los compuestos en la presente descripción se sustituye con al menos un grupo sustituyente. Más específicamente, en algunas modalidades, cada alquilo sustituido, heteroalquilo sustituido, cicloalquilo sustituido, heterocicloalquilo sustituido, arilo sustituido, heteroarilo sustituido, alquileno sustituido, heteroalquileno sustituido, cicloalquileno sustituido, heterocicloalquileno sustituido, arileno sustituido, y/o heteroarileno sustituido descritos en los compuestos en la presente descripción se sustituyen con al menos un grupo sustituyente. En otras modalidades, al menos uno o todos estos grupos se sustituyen con al menos un grupo sustituyente limitado por tamaño. En otras modalidades, al menos uno o todos estos grupos se sustituyen con al menos un grupo sustituyente inferior.
En otras modalidades de los compuestos en la presente descripción, cada alquilo sustituido o no sustituido puede ser un alquilo C1-C20 sustituido o no sustituido, cada heteroalquilo sustituido o no sustituido es un heteroalquilo de 2 a 20 miembros sustituido o no sustituido, cada cicloalquilo sustituido o no sustituido es un cicloalquilo C3-C8 sustituido o no sustituido, cada heterocicloalquilo sustituido o no sustituido es un heterocicloalquilo de 3 a 8 miembros sustituido o no sustituido, cada arilo sustituido o no sustituido es un arilo C6-C10 sustituido o no sustituido y/o cada heteroarilo sustituido o no sustituido es un heteroarilo de 5 a 10 miembros sustituido o no sustituido. En algunas modalidades de los compuestos en la presente descripción, cada alquileno sustituido o no sustituido es un alquileno C1-C20 sustituido o no sustituido, cada heteroalquileno sustituido o no sustituido es un heteroalquileno de 2 a 20 miembros sustituido o no sustituido, cada cicloalquileno sustituido o no sustituido es un cicloalquileno C3-C8 sustituido o no sustituido, cada heterocicloalquileno sustituido o no sustituido es un heterocicloalquileno de 3 a 8 miembros sustituido o no sustituido, cada arileno sustituido o no sustituido es un arileno C6-C10 sustituido o no sustituido, y/o cada heteroarileno sustituido o no sustituido es un heteroarileno de 5 a 10 miembros sustituido o no sustituido.
En algunas modalidades, cada alquilo sustituido o no sustituido es un alquilo C1-C8 sustituido o no sustituido, cada heteroalquilo sustituido o no sustituido es un heteroalquilo de 2 a 8 miembros sustituido o no sustituido, cada cicloalquilo sustituido o no sustituido es un cicloalquilo C3-C7 sustituido o no sustituido, cada heterocicloalquilo sustituido o no sustituido es un heterocicloalquilo de 3 a 7 miembros sustituido o no sustituido, cada arilo sustituido o no sustituido es un arilo C6-C10 sustituido o no sustituido, y/o cada heteroarilo sustituido o no sustituido es un heteroarilo de 5 a 9 miembros sustituido o no sustituido. En algunas modalidades, cada alquileno sustituido o no sustituido es un alquileno C1-C8 sustituido o no sustituido, cada heteroalquileno sustituido o no sustituido es un heteroalquileno de 2 a 8 miembros sustituido o no sustituido, cada cicloalquileno sustituido o no sustituido es un cicloalquileno C3-C7 sustituido o no sustituido, cada heterocicloalquileno sustituido o no sustituido es un heterocicloalquileno de 3 a 7 miembros sustituido o no sustituido, cada arileno sustituido o no sustituido es un arileno C6-C10 sustituido o no sustituido, y/o cada heteroarileno sustituido o no sustituido es un heteroarileno de 5 a 9 miembros sustituido o no sustituido. En algunas modalidades, el compuesto es una especie química expuesta en la sección de Ejemplos, figuras o tablas más abajo.
Ciertos compuestos descritos en la presente descripción poseen átomos de carbono asimétricos (centros ópticos o quirales) o enlaces dobles; los enantiómeros, racematos, diastereómeros, tautómeros, isómeros geométricos, formas estereoisométricas que pueden definirse, en términos de estereoquímica absoluta, como (R)- o (S)- o, como (D)- o (L)- para aminoácidos, y los isómeros individuales están incluidos dentro del alcance de la presente invención. Los compuestos de la presente invención no incluyen los que se conocen en la técnica que son demasiado inestables para sintetizarlos y/o aislarlos. La presente invención pretende incluir compuestos en formas racémicas y ópticamente puras. Los activos ópticamente (R)- y (S)-, o los isómeros (D)- y (L)- pueden prepararse mediante el uso de sintones quirales o reactivos quirales, o resolverse mediante el uso de técnicas convencionales. Cuando los compuestos descritos en la presente descripción contienen enlaces olefínicos u otros centros de asimetría geométrica, y al menos que se especifique de cualquier otra manera, se pretende que los compuestos incluyan isómeros geométricos tanto E como Z.
Como se usa en la presente descripción, el término "isómeros" se refiere a compuestos que tienen el mismo número y tipo de átomos, y por lo tanto el mismo peso molecular, pero que difieren con respecto al arreglo estructural o configuración de los átomos.
El término "tautómero", como se usa en la presente descripción, se refiere a uno de dos o más isómeros estructurales que existen en equilibrio y que se convierten fácilmente de una forma isomérica a otra.
Será evidente para un experto en la técnica que ciertos compuestos de esta invención pueden existir en formas tautoméricas, todas estas formas tautoméricas de los compuestos están dentro del alcance de la invención.
A menos que se indique de cualquier otra manera, las estructuras representadas en la presente descripción también incluyen todas las formas estereoquímicas de la estructura; es decir, las configuraciones (R) y (S) para cada centro asimétrico. Por lo tanto, los isómeros estereoquímicos individuales, así como también las mezclas enantioméricas y diastereoisómeras de los presentes compuestos, generalmente reconocidos como estables por los expertos en la técnica, están dentro del alcance de la invención.
A menos que se indique de cualquier otra manera, las estructuras representadas en la presente descripción también incluyen compuestos que difieren solo en la presencia de uno o más átomos enriquecidos isotópicamente. Por ejemplo, compuestos que tienen las presentes estructuras excepto por el reemplazo de hidrógeno por deuterio o tritio, reemplazo de fluoruro por 18F, o la sustitución de un carbono por carbono enriquecido 13C- o 14C- están dentro del alcance de esta invención.
Los compuestos de la presente invención pueden también contener proporciones no naturales de isótopos atómicos en uno o más de los átomos que constituyen tales compuestos. Por ejemplo, los compuestos pueden estar radiomarcados con isótopos radiactivos, como por ejemplo tritio (3H), fluoruro (18F), yodo-125 (125I), o carbono-14 (14C). Todas las variaciones isotópicas de los compuestos de la presente invención, ya sean radiactivos o no, están incluidas dentro del alcance de la presente invención.
El símbolo "va/v'" denota el punto de unión de un residuo químico al remanente de una molécula o fórmula química.
Cuando un resto está sustituido con un sustituyente R, el grupo puede denominarse "R sustituido". Cuando un resto es R sustituido, el resto está sustituido con al menos un sustituyente R y cada sustituyente R es opcionalmente diferente. Cuando un grupo R en particular está presente en la descripción de un género químico (como la Fórmula (I)), puede usarse un símbolo decimal romano para distinguir cada aparición de ese grupo R en particular. Por ejemplo, cuando múltiples sustituyentes R13 están presentes, cada sustituyente R13 se puede distinguir como R131, R132, r133, r134, etc., en donde cada R131, R132, R133, R134, etc. se define dentro del alcance de la definición de R13 y opcionalmente de manera diferente. Los términos "un" o "una", como se usan en la presente descripción, significan uno o más. Además, la frase "sustituido con un", como se usa en la presente, significa que el grupo especificado puede estar sustituido con uno o más de cualquiera o todos los sustituyentes mencionados. Por ejemplo, cuando un grupo, como un grupo alquilo o heteroarilo, está "sustituido con un alquilo C1-C20 no sustituido, o heteroalquilo de 2 a 20 miembros no sustituido", el grupo puede contener uno o más alquilos C1-C20 no sustituidos y/o uno o más heteroalquilos de 2 a 20 miembros no sustituidos.
La descripción de los compuestos de la presente invención está limitada por los principios de enlace químico conocidos para los expertos en la técnica. En consecuencia, cuando un grupo puede ser sustituido por uno o más de una serie de sustituyentes, dichas sustituciones se seleccionan para cumplir con los principios de enlace químico y para dar compuestos que no son intrínsecamente inestables y/o que serían conocidos por un experto ordinario en la técnica como probablemente inestables en condiciones ambientales, tales como condiciones acuosas, neutras y varias condiciones fisiológicas conocidas. Por ejemplo, un heterocicloalquilo o heteroarilo se une al resto de la molécula a través de un heteroátomo en el anillo de conformidad con los principios de enlace químico conocidos para los expertos en la técnica, evitando de esta manera compuestos intrínsecamente inestables.
"Análogo" o "análogos" se utilizan de acuerdo con el sentido común y corriente dentro de la Química y la Biología y se refieren a un compuesto químico que es estructuralmente similar a otro compuesto (es decir, un llamado compuesto de "referencia") pero difiere en composición, por ejemplo, en el reemplazo de un átomo por otro átomo de un elemento diferente, o en la presencia de un grupo funcional particular, o en el reemplazo de un grupo funcional por otro grupo funcional, o en la estereoquímica absoluta de uno o más centros quirales del compuesto de referencia. En consecuencia, un análogo es un compuesto que es similar o comparable a un compuesto de referencia en función y apariencia, pero no en estructura u origen.
Los términos "regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística" y "CFTR" se usan en la presente de forma intercambiable y de acuerdo con su significado ordinario común y se refieren a proteínas con nombres iguales o similares y fragmentos funcionales y homólogos de las mismas. El término incluye cualquier forma recombinante o de origen natural, o sus variantes, que mantengan la actividad de CFTR (por ejemplo, dentro de al menos un 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 95 % o 100 % de actividad en comparación con CFTR).
El término "sales farmacéuticamente aceptables" tiene la intención de incluir sales de los compuestos activos que se preparan con ácidos o bases relativamente no tóxicos, en dependencia de los sustituyentes particulares encontrados en los compuestos que se describen en la presente descripción. Cuando los compuestos de la presente invención contienen funcionalidades relativamente ácidas, las sales de adición básicas se pueden obtener al colocar en contacto la forma neutra de tales compuestos con una cantidad suficiente de la base deseada, ya sea pura o en un solvente inerte adecuado. Ejemplos de sales de adición básicas farmacéuticamente aceptables incluyen la sal de sodio, potasio, calcio, amonio, amino orgánico, o magnesio, o una sal similar. Cuando los compuestos de la presente invención contienen funcionalidades relativamente básicas, las sales de adición ácidas se pueden obtener al colocar en contacto la forma neutra de tales compuestos con una cantidad suficiente del ácido deseado, ya sea puro o en un solvente inerte adecuado. Ejemplos de sales de adición ácidas farmacéuticamente aceptables incluyen aquellas que se derivan de ácidos inorgánicos como los ácidos clorhídrico, bromhídrico, nítrico, carbónico, monohidrogenocarbónico, fosfórico, monohidrogenofosfórico, dihidrogenofosfórico, sulfúrico, monohidrogenosulfúrico, yodhídrico o fosforoso y similares, así como también las sales que se derivan de ácidos orgánicos relativamente no tóxicos como acético, propiónico, isobutírico, maleico, malónico, benzoico, succínico, subérico, fumárico, láctico, mandélico, ftálico, bencenosulfónico, p-tolilsulfónico, cítrico, tartárico, oxálico, metanosulfónico y similares. También se incluyen sales de aminoácidos tales como arginato y similares, y sales de ácidos orgánicos como ácidos glucurónico o galacturónico y similares (ver, por ejemplo, Berge y otros, "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19). Ciertos compuestos específicos de la presente invención contienen funcionalidades tanto básicas como ácidas que permiten que los compuestos se conviertan en sales de adición ya sea básicas o ácidas.
Por lo tanto, los compuestos de la presente invención pueden existir como sales, como por ejemplo con ácidos farmacéuticamente aceptables. La presente invención incluye tales sales. Ejemplos de tales sales incluyen clorhidratos, bromhidratos, sulfatos, metanosulfonatos, nitratos, maleatos, acetatos, citratos, fumaratos, tartratos (por ejemplo, (+)-tartratos, (-)-tartratos o mezclas de los mismos, incluidas mezclas racémicas), succinatos, benzoatos y sales con aminoácidos tal como el ácido glutámico. Estas sales se pueden preparar mediante métodos conocidos para los expertos en la técnica.
Las formas neutras de los compuestos se regeneran preferentemente al colocar en contacto la sal con una base o ácido y al aislar el compuesto parental de la manera convencional. La forma parental del compuesto difiere de las diversas formas de sal en ciertas propiedades físicas, tales como solubilidad en solventes polares.
Además de las formas de sal, la presente invención proporciona compuestos que están en forma de profármaco. Los profármacos de los compuestos descritos en la presente descripción incluyen compuestos que fácilmente experimentan cambios químicos o enzimáticos en condiciones fisiológicas para proporcionar los compuestos de la presente invención. Adicionalmente, los profármacos se pueden convertir en los compuestos de la presente invención por métodos químicos o bioquímicos en un ambiente ex vivo. Por ejemplo, los profármacos se pueden convertir lentamente en un compuesto de la presente invención cuando se colocan en un parche transdérmico tipo reservorio con una enzima o reactivo químico adecuado.
Ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en formas no solvatadas, así como también en formas solvatadas, que incluyen las formas hidratadas. En general, las formas solvatadas son equivalentes a las formas no solvatadas y se incluyen dentro del alcance de la presente invención. Ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en múltiples formas cristalinas o amorfas. En general, todas las formas físicas son equivalentes para los usos contemplados en la presente invención y se pretende que estén dentro del alcance de la presente invención.
Como se usa en la presente descripción, el término "sal" se refiere a sales ácidas o básicas de los compuestos usados en los métodos de la presente invención. Ejemplos ilustrativos de sales aceptables son las sales de ácidos minerales (ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido fosfórico y similares), las sales de ácidos orgánicos (ácido acético, ácido propiónico, ácido glutámico, ácido cítrico y similares), las sales de amonio cuaternario (yoduro de metilo, yoduro de etilo, y similares).
Los términos "tratar" o "tratamiento" se refieren a cualquier indicio de éxito en el tratamiento o mejora de una lesión, enfermedad, patología o afección, incluido cualquier parámetro objetivo o subjetivo, como la reducción; remisión; disminución de los síntomas o hacer la lesión, patología o afección más tolerable para el paciente; ralentización de la velocidad de degeneración o declive; hacer que el punto final de la degeneración sea menos debilitante; o mejorar el bienestar físico o mental de un paciente. El tratamiento o la mejora de los síntomas pueden basarse en parámetros objetivos o subjetivos, incluidos los resultados de un examen físico, exámenes neuropsiquiátricos y/o una evaluación psiquiátrica. El término "tratar" y las conjugaciones del mismo, incluyen la prevención de una lesión, patología, afección, o enfermedad.
Una "cantidad efectiva" es una cantidad suficiente para lograr un propósito establecido (por ejemplo, lograr el efecto por el que se administra, tratar una enfermedad, reducir la actividad enzimática, aumentar la actividad enzimática, reducir uno o más síntomas de una enfermedad o afección). Un ejemplo de una "cantidad efectiva" es una cantidad suficiente para contribuir al tratamiento, prevención, o reducción de un síntoma o síntomas de una enfermedad, que se podría también referir como una "cantidad terapéuticamente efectiva." Una "reducción" de un síntoma o síntomas (y los equivalentes gramaticales de esta frase) significa la disminución de la gravedad o la frecuencia del(los) síntoma(s), o la eliminación del(los) síntoma(s). Una "cantidad profilácticamente efectiva" de un fármaco es una cantidad de un fármaco que, cuando se administra a un sujeto, tendrá el efecto profiláctico que se pretende, por ejemplo, prevenir o retrasar la aparición (o reaparición) de una lesión, enfermedad, patología o afección, o reducir la posibilidad de aparición (o recurrencia) de una lesión, enfermedad, patología o afección, o sus síntomas. El efecto profiláctico completo no necesariamente ocurre por la administración de una dosis, y puede ocurrir solo después de la administración de una serie de dosis. Por lo tanto, una cantidad profilácticamente efectiva se puede administrar en una o más administraciones. Las cantidades exactas dependerán del propósito del tratamiento, y un experto en la técnica podrá determinarlas mediante el uso de técnicas conocidas (ver, por ejemplo, Lieberman, Pharmaceutical Dosage Forms (vols. 1-3, 1992); Lloyd, The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding (1999); Pickar, Dosage Calculations (1999); y Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20a edición, 2003, Gennaro, Ed., Lippincott, Williams & Wilkins).
Para cualquier compuesto descrito en la presente descripción, la cantidad terapéuticamente efectiva puede determinarse inicialmente a partir de ensayos en cultivos celulares. Las concentraciones objetivo serán aquellas concentraciones de compuesto(s) activo(s) que son capaces de lograr los métodos descritos en la presente descripción, medidos con el uso de los métodos descritos en la presente descripción o conocidos en la técnica. Como se conoce bien en la técnica, las cantidades terapéuticamente efectivas para su uso en seres humanos también pueden determinarse a partir de modelos animales. Por ejemplo, una dosis para humanos se puede formular para lograr una concentración que se ha encontrado que es efectiva en animales. La dosificación en seres humanos se puede ajustar mediante el control de la eficacia de los compuestos y el ajuste de la dosificación hacia arriba o hacia abajo, como se describió anteriormente. El ajuste de la dosis para lograr una eficacia máxima basado en los métodos descritos anteriormente y otros métodos está dentro de las capacidades del experto en la técnica. Las dosificaciones se pueden variar en dependencia de los requerimientos del paciente y el compuesto a emplear. La dosis administrada a un paciente, en el contexto de la presente invención, debería ser suficiente para lograr una respuesta terapéutica beneficiosa en el paciente a lo largo del tiempo. El tamaño de la dosis también estará determinado por la existencia, naturaleza y extensión de cualquier efecto secundario adverso. La determinación de la dosis apropiada para una situación particular está dentro de la habilidad del médico. Generalmente, el tratamiento se inicia con dosificaciones que son menores que la dosis óptima del compuesto. A partir de entonces, la dosificación se aumenta mediante incrementos pequeños hasta que se alcanza el efecto óptimo bajo las circunstancias.
Las cantidades de dosificación e intervalos se pueden ajustar individualmente para proporcionar niveles del compuesto administrado efectivos para la indicación clínica particular a tratar. Esto proporcionará un régimen terapéutico que es acorde con la gravedad del estado de la enfermedad del individuo.
Mediante la utilización de las enseñanzas proporcionadas en la presente descripción, se puede planificar un régimen de tratamiento profiláctico o terapéutico efectivo que no cause una toxicidad sustancial y, sin embargo, sea eficaz para tratar los síntomas clínicos demostrados por el paciente en particular. Esta planificación debe implicar la elección cuidadosa del compuesto activo teniendo en cuenta factores como la potencia del compuesto, la biodisponibilidad relativa, el peso corporal del paciente, la presencia y la gravedad de los efectos secundarios adversos, el modo de administración preferido y el perfil de toxicidad del agente seleccionado.
Los términos "control" o "experimento de control" se usan de acuerdo con su significado normal y corriente y se refieren a un experimento en el que los sujetos o reactivos del experimento se tratan como en un experimento paralelo excepto por la omisión de un procedimiento, reactivo o variable del experimento. En algunos casos, el control se usa como estándar de comparación para evaluar los efectos experimentales. En modalidades, un control es la medida de la actividad de una proteína en ausencia de un compuesto como se describe en la presente descripción (que incluye modalidades y ejemplos).
"Poner en contacto" se usa de acuerdo con su significado corriente y se refiere al proceso de permitir que al menos dos especies distintas (por ejemplo, compuestos químicos que incluyen biomoléculas o células) se vuelvan lo suficientemente próximas para reaccionar, interactuar o tocar físicamente. Debe ser apreciado, sin embargo, que el producto de reacción resultante puede producirse directamente a partir de una reacción entre los reactivos añadidos o de un intermedio de uno o más de los reactivos añadidos que pueden producirse en la mezcla de reacción.
El término "poner en contacto" puede incluir permitir que dos especies reaccionen, interactúen o se toquen físicamente, en donde las dos especies pueden ser un compuesto como se describe en la presente descripción y una proteína o enzima. El poner en contacto puede incluir permitir que un compuesto descrito en la presente descripción interactúe con una proteína o enzima que esté implicada en una trayectoria de señalización.
Como se define en la presente descripción, el término "activación", "activar" y similares en referencia a una interacción proteína-activador significa afectar positivamente (por ejemplo, aumentar) la actividad o función de la proteína con relación a la actividad o función de la proteína en ausencia del activador. La activación puede referirse a la reducción de una enfermedad o síntomas de una enfermedad. La activación puede referirse a un aumento en la actividad de una proteína o un ácido nucleico objetivo en particular. La proteína puede ser un regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística. Por lo tanto, la activación incluye, al menos en parte, aumentar parcial o totalmente la estimulación, aumentar, promover o acelerar la activación, o activar, sensibilizar o regular positivamente la transducción de señales o la actividad enzimática o la cantidad de una proteína.
El término "modulador" se refiere a una composición que aumenta o disminuye el nivel de una molécula objetivo o la función de una molécula objetivo o el estado físico de la molécula objetivo.
El término "modular" se usa de acuerdo con su significado normal y corriente y se refiere al acto de cambiar o variar una o más propiedades. "Modulación" se refiere al proceso de cambiar o variar una o más propiedades. Por ejemplo, un modulador de una proteína objetivo cambia mediante el aumento o disminución de una propiedad o función de la molécula objetivo o la cantidad de la molécula objetivo. Un modulador de una enfermedad disminuye un síntoma, causa o característica de la enfermedad objetivo.
Los términos "selectivo" o "selectividad" o similares de un compuesto se refieren a la capacidad del compuesto para discriminar entre objetivos moleculares. Los términos "específico", "específicamente", "especificidad" o similares de un compuesto se refieren a la capacidad del compuesto para causar una acción particular, tal como la inhibición, a un objetivo molecular particular con una acción mínima o nula a otras proteínas en la célula.
Los términos "excipiente farmacéuticamente aceptable" y "portador farmacéuticamente aceptable" se refieren a una sustancia que ayuda a la administración de un agente activo y a la absorción por un sujeto y se puede incluir en las composiciones de la presente invención sin causar un efecto toxicológico adverso significativo en el paciente. Los ejemplos no limitativos de excipientes farmacéuticamente aceptables incluyen agua, NaCl, soluciones salinas normales, lactato de Ringer, sacarosa normal, glucosa normal, aglutinantes, rellenos, desintegrantes, lubricantes, recubrimientos, edulcorantes, sabores, soluciones salinas (como la solución de Ringer), alcoholes, aceites, gelatinas, carbohidratos tales como lactosa, amilosa o almidón, ésteres de ácidos grasos, hidroximetilcelulosa, polivinilpirrolidina, colorantes, y similares. Tales preparaciones se pueden esterilizar y, si se desea, se pueden mezclar con agentes auxiliares tales como lubricantes, conservantes, estabilizadores, agentes humectantes, emulsionantes, sales para influir en la presión osmótica, amortiguadores, colorantes, y/o sustancias aromáticas y similares que no reaccionan de forma perjudicial con los compuestos de la invención. Un experto en la técnica reconocerá que otros excipientes farmacéuticos son útiles en la presente invención.
El término "preparación" pretende incluir la formulación del compuesto activo con el material encapsulado como un portador que proporciona una cápsula en la cual el componente activo con o sin otros portadores, se rodea por un portador, que está por tanto en asociación con él. De manera similar, se incluyen obleas y pastillas. Los comprimidos, polvos, cápsulas, píldoras, obleas, y pastillas pueden usarse como formas de dosificación sólidas adecuadas para la administración oral.
Como se usa en la presente, el término "administrar1' significa administración oral, administración como supositorio, contacto tópico, administración intravenosa, parental, intraperitoneal, intramuscular, intralesional, intratecal, intranasal o subcutánea, o la implantación de un dispositivo de liberación lenta, por ejemplo, una bomba miniosmótica, al sujeto. La administración es por cualquier vía, que incluye parenteral y transmucosa (por ejemplo, bucal, sublingual, palatal, gingival, nasal, vaginal, rectal o transdérmica). La administración parenteral incluye, por ejemplo, intravenosa, intramuscular, intraarterial, intradérmica, subcutánea, intraperitoneal, intraventricular e intracraneal. Otros modos de suministrar, incluyen, pero no se limitan a, el uso de formulaciones liposomales, infusión intravenosa, parches transdérmicos, etc.
Las composiciones descritas en la presente descripción pueden administrarse por vía transdérmica, por vía tópica, formuladas como barras aplicadoras, soluciones, suspensiones, emulsiones, geles, cremas, ungüentos, pastas, jaleas, pinturas, polvos y aerosoles. Las preparaciones orales incluyen comprimidos, píldoras, polvos, grageas, cápsulas, líquidos, pastillas, obleas, geles, jarabes, pastas, suspensiones, etc., adecuados para la ingestión por parte del paciente. Las preparaciones en forma sólida incluyen polvos, comprimidos, píldoras, cápsulas, obleas, supositorios, y gránulos dispersables. Las preparaciones en forma líquida incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones, por ejemplo, agua o soluciones de agua/propilenglicol. Las composiciones de la presente invención pueden incluir adicionalmente componentes para proporcionar liberación sostenida y/o comodidad. Dichos componentes incluyen polímeros mucomiméticos aniónicos de alto peso molecular, polisacáridos gelificantes y sustratos portadores de fármacos finamente divididos. Estos componentes se discuten en mayor detalle en las patentes de Estados Unidos Núms. 4,911,920; 5,403,841; 5,212,162; y 4,861,760. Las composiciones descritas en la presente descripción también se pueden suministrar como microesferas para una liberación lenta en el cuerpo. Por ejemplo, las microesferas se pueden administrar mediante inyección intradérmica de microesferas que contienen el fármaco, que se libera lentamente por vía subcutánea (ver Rao, J. Biomater Sci. Polym. Ed. 7: 623-645, 1995; como formulaciones de gel biodegradables e inyectables (ver, por ejemplo, Gao Pharm. Res. 12: 857-863, 1995); o, como microesferas para administración oral (ver, por ejemplo, Eyles, J. Pharm. Pharmacol. 49: 669-674, 1997). En otra modalidad, las formulaciones de las composiciones de la presente invención se pueden suministrar mediante el uso de liposomas que se fusionan con la membrana celular o se endocitan, es decir, mediante el empleo de ligandos de receptor que se unen al liposoma, que se unen a receptores proteicos membranales en la superficie de la célula dando como resultado endocitosis. Mediante el uso de liposomas, particularmente donde la superficie del liposoma lleva ligandos de receptores específicos para células diana, o de cualquier otra manera se dirigen preferentemente a un órgano específico, se puede enfocar en el suministro de las composiciones de la presente invención en las células diana in vivo. (Ver, por ejemplo, Al-Muhammed, J. Microencapsul. 13:293-306, 1996; Chonn, Curr. Opin. Biotechnol. 6:698-708, 1995; Ostro, Am. J. Hosp. Pharm. 46:1576-1587, 1989). Las composiciones también se pueden suministrar como nanopartículas.
Las composiciones farmacéuticas pueden incluir composiciones en donde el ingrediente activo (por ejemplo, los compuestos descritos en la presente descripción, incluidas las modalidades o los ejemplos) está contenido en una cantidad terapéuticamente efectiva, es decir, en una cantidad efectiva para lograr su propósito previsto. La cantidad efectiva real para una aplicación particular dependerá, entre otros, de la afección a tratar. Cuando se administran en métodos para tratar una enfermedad, tales composiciones contendrán una cantidad efectiva de ingrediente activo para lograr el resultado deseado, por ejemplo, modulando la actividad de una molécula objetivo y/o reduciendo, eliminando o ralentizando la progresión de los síntomas de la enfermedad.
La dosificación y la frecuencia (dosis única o múltiples) administradas a un mamífero pueden variar dependiendo de una variedad de factores, por ejemplo, si el mamífero padece otra enfermedad y su vía de administración; tamaño, edad, sexo, salud, peso corporal, índice de masa corporal y dieta del receptor; naturaleza y extensión de los síntomas de la enfermedad que se está tratando, tipo de tratamiento concurrente, complicaciones de la enfermedad que se está tratando u otros problemas relacionados con la salud. Se pueden usar otros regímenes o agentes terapéuticos junto con los métodos y compuestos de los solicitantes de la invención. El ajuste y manipulación de las dosificaciones establecidas (por ejemplo, frecuencia y duración) están dentro de la capacidad de los expertos en la técnica.
Los compuestos descritos en la presente descripción pueden usarse en combinación entre sí o con otros fármacos activos que se sabe que son útiles en el tratamiento de una enfermedad (por ejemplo, contra el estreñimiento, contra el ojo seco, contra la enfermedad o trastorno pulmonar o contra la enfermedad hepática) o con agentes adyuvantes que pueden no ser efectivos solos, pero pueden contribuir a la eficacia del agente activo. Por lo tanto, los compuestos descritos en la presente descripción se pueden coadministrar entre sí o con otros fármacos activos que se sabe que son útiles en el tratamiento de una enfermedad.
Por "coadministrar" se entiende que un compuesto descrito en la presente descripción se administra al mismo tiempo, justo antes o justo después de la administración de una o más terapias adicionales, por ejemplo, un agente contra el estreñimiento o contra el ojo seco como se describe en la presente descripción. Los compuestos descritos en la presente descripción pueden administrarse solos o pueden administrarse conjuntamente al paciente. La coadministración pretende incluir la administración simultánea o secuencial del compuesto individualmente o en combinación (más de un compuesto o agente). Por lo tanto, las preparaciones también se pueden combinar, cuando se desee, con otras sustancias activas (por ejemplo, agentes contra el estreñimiento o contra el ojo seco).
La coadministración incluye la administración de un agente activo (por ejemplo, un complejo descrito en la presente descripción) dentro de las 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 20 o 24 horas de administración de un segundo agente activo (por ejemplo, agentes contra el estreñimiento o contra el ojo seco). También se contemplan en la presente descripción modalidades en las que la coadministración incluye administrar un agente activo dentro de las 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 20 o 24 horas de administración de un segundo agente activo. La coadministración incluye administrar dos agentes activos simultáneamente, aproximadamente simultáneamente (por ejemplo, dentro de aproximadamente 1, 5, 10, 15, 20 o 30 minutos entre sí), o secuencialmente en cualquier orden. La coadministración se puede lograr mediante coformulación, es decir, preparando una única composición farmacéutica que incluya ambos agentes activos. En otras modalidades, los agentes activos se pueden formular por separado. Los agentes activos y/o adyuvantes pueden unirse o conjugarse entre sí. Los compuestos descritos en la presente descripción pueden combinarse con tratamientos para el estreñimiento y los trastornos del ojo seco.
El término "asociado" o "asociado con" en el contexto de una sustancia o actividad o función de una sustancia asociada con una enfermedad significa que la enfermedad o un síntoma de la enfermedad lo causa (en total o en parte) la sustancia o la actividad o función de la sustancia, o un efecto secundario del compuesto (por ejemplo, toxicidad) lo causa (en total o en parte) la sustancia o la actividad o función de la sustancia.
"Paciente", "sujeto", "paciente que lo necesita" y "sujeto que lo necesita" se usan indistintamente en la presente descripción y se refieren a un organismo vivo que sufre o es propenso a una enfermedad o afección que puede tratarse mediante la administración de una composición farmacéutica como se proporciona en la presente descripción. Los ejemplos no limitantes incluyen seres humanos, otros mamíferos, bovinos, ratas, ratones, perros, monos, cabras, ovejas, vacas, ciervos y otros animales no mamíferos. En algunas modalidades, un paciente es un humano.
"Enfermedad" o "condición" se refieren a un estado de ánimo o estado de salud de un paciente o sujeto capaz de ser tratado con los compuestos o métodos proporcionados en la presente descripción. La enfermedad como se usa en la presente descripción puede referirse a estreñimiento o trastornos del ojo seco.
Los ejemplos de agentes contra el estreñimiento incluyen, pero no se limitan a, difenilmetanos, Lactobacillus paracasei, linaclotida y lubiprostona. Los ejemplos de agentes contra el ojo seco incluyen, pero no se limitan a, ciclosporina tópica, P321 (un inhibidor de ENaC) y Diquafosol.
I. Composiciones
Las siguientes modalidades no están de acuerdo con la invención reivindicada y se presentan únicamente con fines informativos.
Se describen compuestos que tienen la fórmula (I):
Figure imgf000021_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. L1 es un enlace, -S-, -N(R15)- (por ejemplo -NH-), -C(O)N(R15)-, o
alquileno sustituido o no sustituido. R20 es heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido
o heteroarilo sustituido o no sustituido; o -L1-R20 es C2 no sustituido o un alquilo superior (por ejemplo, alquilo C2-C10
no sustituido, C2-C6 no sustituido, C2-C5 no sustituido o C2-C4 no sustituido). L1-R20 es alquilo C2-C4 no sustituido. R1
es hidrógeno, halógeno, -CX113, -CHX1^, -CH2X11, -CN, -SOn1R1A, -SOv1NR1BR1C, -NHNR1BR1C, -ONR1BR1C, -NHC(O)NHNR1BR1C, -NHC(O)NR1BR1C, -N(O)m1 -NR1BR1C, -C(O)R1D, -C(O)OR1D, -C(O)NR1BR1C, -OR1A, -NR1BSO2R1A, -NR1BC(O)R1D, -NR1BC(O)OR1D, -NR1BOR1D, -OCX113, -OCHX112, alquilo sustituido o no sustituido,
heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no
sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido. R2 es hidrógeno, halógeno, -CX213,
-CHX212, -CH2X21, -CN, -SOn2R2A, -SOv2NR2BR2C, -NHNR2BR2C, -ONR2BR2C, -NHC(O)NHNR2BR2C, -NHC(O)NR2BR2C,
-N(O)m2, -NR2BR2C, -C(O)R2D, -C(O)OR2D, -C(O)NR2BR2C, -OR2A, -NR2BSO2R2A, -NR2BC(O)R2D, -NR NR2BOR2D, -OCX213, -Oc HX212, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo
sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo
sustituido o no sustituido. R3 es hidrógeno, halógeno, -CX313, -CHX312, -CH2X31, -CN, -SOn3R3A, -SOv3NR3BR3C, -NHNR3BR3C, -ONR3BR3C, -NHC(O)NHNR3BR3C, -NHC(O)NR3BR3C, -N(O)m3, -NR3BR3C, -C(O)R3D, -C(O)OR3D, -C(O)NR3BR3C, -OR3A, -NR3BSO2R3A, -NR3BC(O)R3D, -NR3BC(O)OR3D, -NR3BOR3D, -OCX313, -OCHX312, alquilo
sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido,
heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido. R4
es hidrógeno, halógeno, -CX413, -CHX412, -CH2X41, -CN, -SOn4R4A, -SOv4NR4BR4C, -NHNR4BR4C, -ONR4BR4C, -NHC(O)NHNR4BR4C, -NHC(O)NR4BR4C, -N(O)m4, -NR4BR4C, -C(O)R4D, -C(O)OR4D, -C(O)NR4BR4C, -OR4A, -NR4BSO2R4A, -NR4BC(O)R4D, -NR4BC(O)OR4D, -NR4BOR4D, -OCX413, -OCHX412, alquilo sustituido o no sustituido,
heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no
sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido. R5 es hidrógeno, halógeno, -CX513,
-CHX512, -CH2X51, -CN, -SOn5R5A, -SOv5NR5BR5C, -NHNR5BR5C, -ONR5BR5C, -NHC(O)NHNR5BR5C, -NHC(O)NR5BR5C
-N(O)m5, -NR5BR5C, -C(O)R5D, -C(O)NR5BR5C, -OR5A, -NR5BSO2R5A, -NR5BC(O)R5D, -NR5BC(O)OR5D, -NR OCX513, -OCHX512, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o
no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no
sustituido. R1 y R2, R2 y R3, R3 y R4, o R1 y R5 se unen opcionalmente para formar, junt están unidos, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no
sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido. R6 es hidrógeno, halógeno, -CX613, -CHX612, -CH2X61, -CN, -SOn6R6A, -SOv6NR6BR6C, -NHNR6BR6C, -ONR6BR6C, -NHC(O)NHNR6BR6C, -NHC(O)NR6BR6C -N(O)m6, -NR6BR6C, -C(O)R6D, -C(O)OR6D, -C(O)NR6BR6C, -OR6A, -NR6BSO2R6A, -NR6BC(O)R6D, -NR6BC(O)OR6D, -NR6B, -OCX613, -OCHX612, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no
sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no
sustituido. R7 es hidrógeno, halógeno, -CX713, -CHX712, -CH2X71, -CN, -SOnrR7A, -SOvrNR7BR7C, -NHNR7BR7C, -ONR7BR7C, -NHC(O)NHNR7BR7C, -NHC(O)NR7BR7C, -N(O)m7, -NR7BR7C, -C(O)R7D, -C(O)OR7D, -C(O)NR7BR7C, -OR7A,
-NR7BSO2R7A, -NR7AC(O)R7C, -NR7BC(O)OR7D, -NR7BOR7D, -OCX713, -OCHX712, alquilo sustituido o no sustituido,
heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no
sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido. R8 es hidrógeno, halógeno, -CX813,
-CHX812, -CH2X81, -CN, -SOn8R8A, -SOv8NR8BR8C, -NHNR8BR8C, -ONR8BR8C, -NHC(O)NHNR8BR8C, -NHC(O)NR8BR8C,
-N(O)m8, -NR8BR8C, -C(O)R8D, -C(O)OR8D, -C(O)NR8BR8C, -OR8A, -NR8BSO2R8A, -NR8BC(O)R8D, -NR NR8BOR8D, -OCX813, -OCHX812, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo
sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo
sustituido o no sustituido. R9 es hidrógeno, halógeno, -CX913, -CHX912, -CH2X91, -CN, -SOn9R9A, -SOv9NR9BR9C, -NHNR9BR9C, -ONR9BR9C, -NHC(O)NHNR9BR9C, -NHC(O)NR9BR9C, -N(O)m9, -NR9BR9C, -C(O)R9D, -C(O)OR9D, -C(O)NR9BR9C, -OR9A, -NR9BSO2R9A, -NR9BC(O)R9D, -NR9BC(O)OR9D, -NR9BOR9D, -OCX913, -OCHX912, alquilo
sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido,
heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido.
R15 es hidrógeno, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no
sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no
sustituido. R1A, R1B, R1C, R1D, R2A, R2B, R2C, R2D, R3A, R3B, R3C, R3D, R4A, R4B, R6C, R6D, R7A, R7B, R7C, R7D, R8A, R8B, R8C, R8D, R9A, R9B, R9C y R9D son independientem CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)-OH, -NHOH, -OCF3, -OCCI3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCI2, -OCHBr2, -OCHI2, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido; los sustituyentes R1B, R1C, R2B, R2C, R3B, R3C, R4B, R4C, R5B, R5C, R6B, R6C, R7B, R7C, R8B, rsc, r9b y R ánidos al mismo átomo de nitrógeno se pueden unir opcionalmente para formar un heterocicloalquilo sustituido o no sustituido o heteroarilo sustituido o no sustituido. X11, X21, X31, X41, X51, X61, X71, X81, independientemente -Cl, -Br, -I o -F. Los símbolos n1, n2, n3, n4, n5, n6, n7, n8 y n9 son independientemente un número entero de 0 a 4. Los símbolos m1, m2, m3, m4, m5, m6, m7, m8, m9, v1, v2, v3, v4, v5, v6, v7, v8 y v9 son independientemente 1 o 2.
En las modalidades, n1 es 0. En las modalidades, n1 es 1. En las modalidades, n1 es 2. En las modalidades, n1 es
3. En las modalidades, n1 es 4. En las modalidades, n2 es 0. En las modalidades, n2 es 1. En las modalidades, n2 es 2. En las modalidades, n2 es 3. En las modalidades, n2 es 4. En las modalidades, n3 es 0. En las modalidades, n3 es 1. En las modalidades, n3 es 2. En las modalidades, n3 es 3. En las modalidades, n3 es 4. En las modalidades, n4 es 0. En las modalidades, n4 es 1. En las modalidades, n4 es 2. En las modalidades, n4 es 3. En las modalidades, n4 es 4. En las modalidades, n5 es 0. En las modalidades, n5 es 1. En las modalidades, n5 es 2.
En las modalidades, n5 es 3. En las modalidades, n5 es 4. En las modalidades, n6 es 0. En las modalidades, n6 es
1. En las modalidades, n6 es 2. En las modalidades, n6 es 3. En las modalidades, n6 es 4. En las modalidades, n7 es 0. En las modalidades, n7 es 1. En las modalidades, n7 es 2. En las modalidades, n7 es 3. En las modalidades, n7 es 4. En las modalidades, n8 es 0. En las modalidades, n8 es 1. En las modalidades, n8 es 2. En las modalidades, n8 es 3. En las modalidades, n8 es 4. En las modalidades, n9 es 0. En las modalidades, n9 es 1. En las modalidades, n9 es 2. En las modalidades, n9 es 3. En las modalidades, n9 es 4. En las modalidades, m1 es 1.
En las modalidades, m1 es 2. En las modalidades, m2 es 1. En las modalidades, m2 es 2. En las modalidades, m3 es 1. En las modalidades, m3 es 2. En las modalidades, m4 es 1. En las modalidades, m4 es 2. En las modalidades, m5 es 1. En las modalidades, m5 es 2. En las modalidades, m6 es 1. En las modalidades, m6 es 2. En las modalidades, m7 es 1. En las modalidades, m7 es 2. En las modalidades, m8 es 1. En las modalidades, m8 es 2. En las modalidades, m9 es 1. En las modalidades, m9 es 2. En las modalidades, v1 es 1. En las modalidades, v1 es 2.
En las modalidades, v2 es 1. En las modalidades, v2 es 2. En las modalidades, v3 es 1. En las modalidades, v3 es
2. En las modalidades, v4 es 1. En las modalidades, v4 es 2. En las modalidades, v5 es 1. En las modalidades, v5
es 2. En las modalidades, v6 es 1. En las modalidades, v6 es 2. En las modalidades, v7 es 1. En las modalidades, v7 es 2. En las modalidades, v8 es 1. En las modalidades, v8 es 2. En las modalidades, v9 es 1. En las modalidades, v9 es 2.
En las modalidades, cuando L1 es alquileno C1-C3 no sustituido, R20 es arilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, R3 es -N(O)m3 y m3 es 1 o 2, entonces R5 no es -NR5BR5C. En las modalidades, cuando L1 es alquileno C1-C3 no sustituido, R20 es arilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, R3 es -N(O)m3 y m3 es 2, entonces R5 no es -NR5BR5C. En las modalidades, cuando L1 es alquileno C1-C3 no sustituido, R20 es arilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R3 es -NO2, entonces R5 no es -NR5BR5C. En las modalidades, cuando L1 es alquileno C1-C4 no sustituido, R20 es arilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R3 es -NO2, entonces R5 no es -NHR5C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- o -CH2-CH2-, R20 es
fenilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y cuando R3 es -NO2, entonces R5 no es -NR5BR5C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- o -CH2-CH2-, R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R3 es -NO2, entonces R5 no es -NHR5C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- o -CH2-CH2-, R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R3 es -NO2, entonces R5 no es -NH2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2-, R20 es fenilo sustituido o no sustituido y R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, entonces
R3 no es -NO2 y R5 no es -NR5BR5C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2-, R20 es fenilo sustituido o no sustituido y R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, entonces R3 no es -NO2 y R5 no es -NH2. En las modalidades, cuando R3 es -NO2, entonces R5 no es -NH2. En las modalidades, cuando R3 es -NO2 y R5 es -NH2, entonces al menos uno de R6, R7, R8 y R9 no es hidrógeno. En las modalidades, cuando R3 es -NO2 y R5 es -NH2, R6, R7, R8 y R9 no son hidrógeno.
En las modalidades, cuando L1 es alquileno C1-C3 no sustituido, R20 es arilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, R1 es -N(O)m1 y m1 es 1 o 2, entonces R4 no es -NR4BR4C. En las modalidades, cuando L1 es alquileno C1-C3 no sustituido, R20 es arilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, R1 es -N(O)m1 y m1 es 2, entonces R4 no es -NR4BR4C. En las modalidades, cuando L1 es alquileno C1-C3 no sustituido, R20 es arilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R1 es -NO2, entonces R4 no es -NR4BR4C. En las modalidades, cuando L1 es alquileno C1-C4 no sustituido, R20 es arilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R1 es -NO2, entonces R4 no es -NHR4C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- o -CH2CH2-, R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y cuando R1 es -NO2, entonces R4 no es -NR4BR4C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- o -CH2CH2-, R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R1 es -NO2, entonces R4 no es -NHR4C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- o -CH2CH2-, R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R1 es -NO2, entonces R4 no es -NH2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2-, R20 es fenilo sustituido o no sustituido y R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, entonces
R1 no es -NO2 y R4 no es -NR4BR4C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2-, R20 es fenilo sustituido o no sustituido y R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, entonces R1 no es -NO2 y R4 no es -NH2. En las modalidades, cuando R1 es -NO2, entonces R4 no es -NH2
En las modalidades, cuando -L1-R20 es alquilo C2-C4 no sustituido, entonces al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, cuando -L1-R20 es alquilo C2-C4 no sustituido, entonces al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, cuando -L1-R20 es alquilo C2-C4 no sustituido, entonces al menos uno de R1, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es metilo, etilo o etenilo, entonces al menos uno de R1, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es metilo, etilo o etenilo, entonces al menos uno de R2 o R3 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es metilo, etilo o etenilo, entonces R3 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es metilo, entonces R3 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2-y R20 es etilo, entonces R3 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es etenilo, entonces R3 es -NO2.
En las modalidades, cuando L1 es un enlace o alquileno C1-C3 no sustituido y R20 es heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros) o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros), entonces R1, R2, R3, R4 y R5 no son hidrógeno. En las modalidades, cuando L1 es un enlace o -CH2- y R20 es heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros) o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros), entonces al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros) o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros), entonces al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros), entonces al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros), entonces al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros), entonces al menos uno de R1, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros), entonces al menos uno de R1, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros) o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros), entonces R1 o R3 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros) o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros), entonces R1 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros) o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros), entonces R3 es -NO2.
En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es piridilo, furanilo o tiofenilo sustituidos o no sustituidos, entonces R1, R2, R3, R4 y R5 no son hidrógeno. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es piridilo, furanilo o tiofenilo sustituidos o no sustituidos, al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es piridilo, furanilo o tiofenilo no sustituidos, entonces al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es piridilo, furanilo o tiofenilo no sustituidos, al menos uno de R1, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es piridilo, furanilo o tiofenilo no sustituidos, R1 o R3 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es piridilo, furanilo o tiofenilo no sustituidos, R1 es -NO2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es piridilo, furanilo o tiofenilo no sustituidos, R3 es -NO2.
En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es arilo C6-C8 sustituido o no sustituido, entonces R1, R2, R3, R4 y R5 no son hidrógeno. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es arilo C6-C8 sustituido o no sustituido, entonces al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es halógeno, NO2, NH2, COOCH3, COOH, CN o alquilo C1-C3 sustituido o R2 y R3 se une para formar, junto con los átomos a los que están unidos, heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es arilo C6-C8 sustituido o no sustituido, entonces al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es halógeno, NO2, NH2, COOCH3, COOH, CN o alquilo C1-C3 sustituido En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es arilo C6-C8 sustituido o no sustituido, entonces R2 y R3 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es arilo C6-C8 sustituido o no sustituido, entonces al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es halógeno, NO2, NH2, COOCH3, COOH, CN o alquilo C1-C3 sustituido. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es fenilo sustituido o no sustituido, entonces al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es halógeno, NO2, NH2, COOCH3, COOH, CN o alquilo C1-C3 sustituido. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es fenilo no sustituido, entonces al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es halógeno, NO2, NH2, COOCH3, COOH, CN o alquilo C1-C3 sustituido. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es fenilo no sustituido, entonces al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es halógeno, NO2, NH2, COOCH3, COOH, CN o CF3. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es arilo C6-C8 sustituido o no sustituido, entonces R2 y R3 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es fenilo sustituido o no sustituido, entonces R2 y R3 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, cuando L1 es -CH2-y R20 es fenilo no sustituido, entonces R2 y R3 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es fenilo no sustituido, entonces R2 y R3 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, En las modalidades, R2-R3 es =N-O-N=.
En las modalidades, L1 es -O-, -S-, -N(R15)-, -C(O)N(R15)-, -C(O)-, alquileno sustituido o no sustituido o heteroalquileno sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es -O-, -S-, -NH-, -C(O)NH-, -C(O)-, o alquileno C1-C3 sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es -O-, -S-, -NH-, -C(O)NH-, -C(O)-, o alquileno C1-C3 no sustituido. En las modalidades, L1 es alquileno C1-C3 sustituido o no sustituido o heteroalquileno de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es alquileno C1-C3 sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es alquileno C1-C3 no sustituido. En las modalidades, L1 es -CH2- o -CH2-CH2-. En las modalidades, L1 es -O-, -S-, -N(R15)-, -C(O)N(R15)-, -C(O)- o -CH2-.
En las modalidades, R20 es arilo sustituido o no sustituido o heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R20 es arilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R20 es heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R20 es fenilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R20 es
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Además, se proporcionan en la presente descripción, pero no se reivindican, compuestos que tienen la fórmula (IA):
Figure imgf000024_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Los símbolos L1, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9y R15 son como se describen en la presente descripción. Los símbolos n1, n2, n3, n4, n5, n6, n7, n8 y n9 son independientemente un número entero de 0 a 4; y los símbolos m1, m2, m3, m4, m5, m6, m7, m8, m9, v1, v2, v3, v4, v5, v6, v7, v8 y v9 son independientemente 1 o 2 en la fórmula (IA) son como se define anteriormente y en la presente descripción. En las modalidades, L1 es-O-, -S-, -N(R15)-, -C(O)N(R15)-, -C(O)-, alquileno sustituido o no sustituido (por ejemplo, C1-C3) o heteroalquileno sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 2 a 6 miembros o de 2 a 4 miembros). En las modalidades, L1 es -O-, -S-, -N(R15)-, -C(O)n(r 15)-, -C(O)-, alquileno C1-C3 no sustituido. En las modalidades, L1 es -O-, -S-, -N(R15)-, -C(O)N(R15)-, -C(O)- o -CH2-. R10 es hidrógeno, halógeno, -CX1013, -CHX1012, -CH2X101, -CN, -SOn10R10A, -SOv10NR10BR10C, -NHNR10BR10C, -ONR10BR10C, -NHC(O)NHNR10BR10C, -NHC(O)NR10BR10C, -N(O)m10, -NR10BR10C, -C(O)R10D, -C(O)OR10D, -C(O)NR10BR10C, -OR10A, -NR1OBSO2R10A, -NR10BC(O)R10D, -NR10BC(O)OR10D, -NR10BOR10D, -OCX1013, -OCHX1012, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R10 es hidrógeno, halógeno, -CX1013, -CHX1012, -CH2X101, -CN, -SOn10R10 A, -SOv10NR10BR10C, -NHNR10BR10C, -ONR10BR10C, -NHC(O)NHNR10BR10C, -NHC(O)NR10BR10C, -N(O)m10, -C(O)R10D, -C(O)OR10D, -C(O)NR10BR10C, -OR10A, -NR10BSO2R10 A, -NR10BC(O)R10D, -NR10BC(O)OR10D, -NR10BOR10D, -OCX1013, -OCHX1012, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, o arilo sustituido o no sustituido. R11 es hidrógeno, halógeno, -CX1113, -CHX1112, -CH2X111, -CN, -SOnnR11A, -SOvnNR11BR11C, -NHNR11BR11C, -ONR11BR11C, -NHC(O)NHNR11BR11C, -NHC(O)NR11BR11C, -N(O)m11, -NR11BR11C, -C(O)R11D, -C(O)OR11D, -C(O)NR11BR11C, -OR11A, -NR11BSO2R11A, -NR11BC(O)R11D, -NR11BC(O)OR11D, -NR11BOR11D, -OCX1113, -OCHX1112, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R11 es hidrógeno, halógeno, -CX1113, -CHX1112, -CH2X111, -CN, -SOnnR11A, -SOvnNR11BR11C, -NHNR11BR11C, -ONR11BR11C, -NHC(O)NHNR11BR11C, -NHC(O)NR11BR11C, -N(O)m11, -C(O)R11D, -C(O)OR11D, -C(O)NR11BR11C, -OR11A, -NR11BSO2R11A, -NR11BC(O)R11D, -NR11BC(O)OR11D, -n R11BOR11D, -OCX1113, -OCHX1112, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido o arilo sustituido o no sustituido. R12 es hidrógeno, halógeno, -CX1213, -CHX1212 -CH2X121, -CN, -SOn12R12A, -SOv12NR12BR12C, -NHNR12BR12C, -ONR12BR12C, -NHC(O)NHNR12BR12C, -NHC(O)NR12BR12C, -N(O)m12, -NR12BR12C, -C(O)R12D, -C(O)OR12D, -C(O)NR12BR12C, -OR12A, -NR12BSO2R12A, -NR12BC(O)R12D, -NR12BC(O)OR12D, -NR12BOR12D, -OCX1213, -OCHX1212, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R12 es hidrógeno, halógeno, -CX1213, -CHX1212, -CH2X121, -CN, -SOni2R12A, -SOvi2NR12BR12C, -NHNR12BR12C, -ONR12BR12C, -NHC(O)NHNR12BR12C, -NHC(O)NR12BR12C, -N(O)m12-C(O)R12D, -C(O)OR12D, -C(O)NR12BR12C, -OR12A, -NR12BSO2R12A, -NR12BC(O)R12D, -NR12BC(O)OR12D, -NR12BOR12D, -OCX1213, -OCHX1212, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, o arilo sustituido o no sustituido. R13 es hidrógeno, halógeno, -CX1313, -CHX1312, -CH2X131, -CN, -SOn13R13A, -SOv13NR13BR13C, -NHNR13BR13C, -ONR13BR13C, -NHC(O)NHNR13BR13C, -NHC(O)NR13BR13C, -N(O)m13, -NR13BR13C, -C(O)R13D, -C(O)OR13D, -C(O)NR13BR13C, -OR13A, -NR13BSO2R13A, -NR13BC(O)R13D, -NR13BC(O)OR13D, -NR13BOR13D, -OCX1313, -OCHX1312, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R13 es hidrógeno, halógeno, -CX1313, -CHX1312, -CH2X131,
-CN, -SOn13R13A, -SOv13NR13BR13C, -NHNR13BR13C, -ONR13BR13C, -NHC(O)NHNR13BR13C, -NHC(O)NR13BR13C, -N(O)m13, -C(O)R13D, -C(O)OR13D, -C(O)NR13BR13C, -OR13A, -NR13BSO2R13A, -NR13BC(O)R13D, -NR13BC(O)OR13D, -NR13BOR13D, -OCX1313, -OCHX1312, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido o arilo sustituido o no sustituido. R14 es hidrógeno, halógeno, -CX1413, -CHX1412, -CH2X141, -CN, -SOn14R14A, -SOv14NR14BR14C, -NHNR14BR14C, -ONR14BR14C, -NHC(O)NHNR14BR14C, -NHC(O)NR14BR14C, -N(O)m14, -NR14BR14C, -C(O)R14D, -C(O)OR14D, -C(O)NR14BR14C, -OR14A, -NR14BSO2R14A, -NR14BC(O)R14D, -NR14BC(O)OR14D, -NR14BOR14D, -OCX1413, -OCHX1412, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R14 es hidrógeno, halógeno, -CX1413, -CHX1412, -CH2X141, -CN, -SOn14R14A, -SOv14NR14BR14C, -NHNR14BR14C, -ONR14BR14C, -NHC(O)NHNR14BR14C, -NHC(O)NR14BR14C, -N(O)m14, -C(O)R14D, -C(O)OR14D, -C(O)NR14BR14C, -OR14A, -NR14BSO2R14A, -NR14BC(O)R14D, -NR14BC(O)OR14D, -NR14BOR14D, -OCX1413, -OCHX1412, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, o arilo sustituido o no sustituido R10A, R10B R10C R10D R11A, R11B R11C R11D R12A R12B R12C R12D R13A R13B R13C R13D R14A, R14B R14C y
R14D son independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)-OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, alquilo sustituido o no sustituido, heteroalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, o heteroarilo sustituido o no sustituido; los sustituyentes R10B, R10C, R11B, R11C, R12B, R12C, R13B, R13C, R14B y R14C unidos al mismo átomo de nitrógeno se pueden unir opcionalmente para formar un heterocicloalquilo sustituido o no sustituido o heteroarilo sustituido o no sustituido. X101, X111, X121, X131 y
X141 son independientemente -Cl, -Br, -I o -F. El símbolo n10, n11, n12, n13 y n14 es un número entero de 0 a 4.
Los símbolos m10, m il, m12, m13, m14, v10, v i l , v12, v13 y v14 son independientemente 1 o 2. Las siguientes modalidades no están de acuerdo con la invención y se proporcionan únicamente con fines ilustrativos.
En las modalidades, L1 es -O-, -S-, -N(R15)-(por ejemplo, -NH-), -C(O)N(R15)-, -C(O)-, alquileno sustituido o no sustituido o heteroalquileno sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es alquileno sustituido o no sustituido.
En las modalidades, L1 es alquileno no sustituido. En las modalidades, L1 es alquileno C1-C10 sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es alquileno Co1-C5 sustituido o no sustituid. En las modalidades, L1 es alquileno
C1-C3 sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es alquileno C1-C10 no sustituido. En las modalidades, L1 es alquileno C1-C5 no sustituido. En las modalidades, L1 es alquileno C1-C3 no sustituido. En las modalidades, L1 es -CH2-.
En las modalidades, R6, R7, R8 y R9 son independientemente hidrógeno o alquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R6, R7, R8 y R9 son independientemente hidrógeno o alquilo no sustituido. En las modalidades, R6, R7,
R8 y R9 son independientemente hidrógeno o alquilo C1-C10 sustituido o no sustituido (por ejemplo, C1-C5). En las modalidades, R6, R7, R8 y R9 son independientemente hidrógeno o alquilo C1-C10 no sustituido (por ejemplo, C1-C5).
En las modalidades, R6, R7, R8 y R9 son independientemente hidrógeno.
En las modalidades, al menos dos de R1, R2, R3, R4, R5 son independientemente hidrógeno. En las modalidades, R1 es hidrógeno, halógeno -NO2, -NR1BR1C, NR1BC(O)R1D o alquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R2 es hidrógeno, halógeno -NO2, -NR2BR2C, NR2BC(O)R2D o alquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R3 es hidrógeno, halógeno -NO2, -NR3BR3C, NR3BC(O)R3D o alquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R4 es hidrógeno, halógeno -NO2, -NR4BR4C, NR4BC(O)R4D o alquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R5 es hidrógeno, halógeno -NO2, -NR5BR5C, NR5BC(O)R5D o alquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R15 es independientemente hidrógeno o alquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R10, R11, R12, R13 y R14 son independientemente hidrógeno. En las modalidades, R1, R2 y R4 son independientemente hidrógeno. En las modalidades, R3 es -NO2. En las modalidades, R5 es -NH2. En las modalidades, R1 es -NO2. En las modalidades, R4 es -NH2.
En las modalidades, cuando L1 es alquileno C1-C4, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R3 es -NR5BR5C. En las modalidades, cuando L1 es alquileno C1-C4, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R3 es -NO2, entonces
R5 no es -NHR5C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- o -CH2CH2-, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R3 es -NO2, entonces R5 no es -NR5BR5C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- o -CH2CH2-, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y
R3 es -NO2, entonces R5 no es -NHR5C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- o -CH2CH2-, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R3 es -NO2, entonces R5 no es -NH2. En las modalidades, cuando L1 es -CH2-, R6, R7, R8 y R9 son
hidrógeno, R3 no es -NO2 y R5 no es -NR5BR5C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2-, R6, R7, R8 y R9 son
hidrógeno, R3 no es -NO2 y R5 no es -NH2. En las modalidades, cuando R3 es -NO2, entonces R5 no es -NH2.
En las modalidades, cuando L1 es alquileno C1-C4, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R1 es -NO2, entonces R4 no es -NR4BR4C. En las modalidades, cuando L1 es alquileno C1-C4, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R1 es -NO2, entonces
R4 no es -NHR4C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- o -CH2CH2-, R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R6,
R7, R8 y R9 son hidrógeno y R1 es -NO2, entonces R4 no es -NR5BR5C. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- o -CH2CH2-, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R1 es -NO2, entonces R4 no es -NHR4C. En las modalidades, cuando L1 es
-CH2- o -CH2CH2-, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R1 es -NO2, entonces R4 no es -NH2. E L1 es -CH2-, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, R1 no es -NO2 y R4 no es -NR5BR5C. En las modalidades, cuando -CH2-,
R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, R1 no es -NO2 y R4 no es -NH2. En las
modalidades, cuando R1 es -NO2, entonces R4 no es -NH2.
En las modalidades, L1 es alquileno C1-C5 sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es alquileno C1-C3
sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es alquileno C1-C5 no sustituido. En las modalidades, L1 es
alquileno C1-C3 no sustituido. En las modalidades, L1 es -CH2- o -CH2CH2-. En las modalidades, L1 es -CH2-. En las
Figure imgf000026_0001
En la fórmula I
Figure imgf000026_0002
R12, R13y descripción.
En las modalidades, R1 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX113, -CHX112, -CH2X11, -CN, -SOn1R1A, -SOv1NR1BR1C, -NHNR1BR1C, -ONR1BR1C, -NHC(O)NHNR1BR1C, -NHC(O)NR1BR1C, -N(O)m1, -NR1BR1C, -C(O)R1D, -C(O)OR1D, -C(O)NR1BR1C, -OR1A, -NR1BSO2R1A, -NR1BC(O)R1D, -NR1BC(O)OR1D, -NR1BOR1D, -OCX113, -OCHX1^
(por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R1E-alquilo sustituido o no sustituido, R1E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R1E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R1E-heterocicloalquilo sustituido o
no sustituido, R1E-arilo sustituido o no sustituido, o R1E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R1
es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX113, -CHX112, -CH2X11, -CN, -SOn1R1A, -SOv1NR1BR1C, -NHNR1BR1C, -ONR1BR1C, -NHC(O)NHNR1BR1C, -NHC(O)NR1BR1C, -N(O)m1, -NR1BR1C, -C(O)R1D, -C(O)OR1D, -C(O)NR1BR1C, -OR1A, -NR1BSO2R1A, -NR1BC(O)R1D, -NR1BC(O)OR1D, -NR1BOR1D, -OCX113, -OCHX112 (por ejemplo,
hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R1E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R1E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R1E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R1E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R1E-fenilo sustituido o no sustituido, o R1E-heteroarilo
de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
R1E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OcI3, -oChF2, -OChCI2, -OCHBr2, -OCHI2, R1F-alquilo sustituido o no sustituido,
R1F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R1F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R1F-heterocicloalquilo sustituido
o no sustituido, R1F-arilo sustituido o no sustituido, o R1F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades,
R1E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCI3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCI2, -OCHBr2, -OCHI2, R1F-alquilo C1-C6 susti sustituido, R1F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R1F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R1F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R1F-fenilo sustituido o no sustituido, o R1F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R2 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX213, -CHX212, -CH2X21, -CN, -SOn2R2A, -SOv2NR2BR2C, -NHNR2BR2C, -ONR2BR2C, -NHC(O)NHNR2BR2C, -NHC(O)NR2BR2C, -N(O)m2, -NR2BR2C, -C(O)R2D, -C(O)OR2D, -C(O)NR2BR2C, -OR2A, -NR2BSO2R2A, -NR2BC(O)R2D, -NR2BC(O)OR2D, -NR2BOR2D, -OCX213, -OCHX212 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R2E-alquilo sustituido o no sustituido, R2E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R2E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R2E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R2E-arilo sustituido o no sustituido, o R2E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R2 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX213, -CHX212, -CH2X21, -CN, -SOn2R2A, -SOv2NR2BR2C, -NHNR2BR2C, -ONR2BR2C, -NHC(O)NHNR2BR2C, -NHC(O)NR2BR2C, -N(O)m2, -NR2BR2C, -C(O)R2D, -C(O)OR2D, -C(O)NR2BR2C, -OR2A, -NR2BSO2R2A, -NR2BC(O)R2D, -NR2BC(O)OR2D, -NR2BOR2D, -OCX213, -OCHX212 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R2E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R2E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R2E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R2E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R2E-fenilo sustituido o no sustituido, o R2E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. En las modalidades, R2 es haloalquilo. En las modalidades, R2 es C1-C6 haloalquilo.
R2E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R2F-alquilo sustituido o no sustituido, R2F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R2F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R2F-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R2F-arilo sustituido o no sustituido, o R2F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R2E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R2F-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R2F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R2F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R2F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R2F-fenilo sustituido o no sustituido, o R2F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R3 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX313, -CHX312, -CH2X31, -CN, -SOn3R3A, -SOv3NR3BR3C, -NHNR3BR3C, -ONR3BR3C, -NHC(O)NHNR3BR3C, -NHC(O)NR3BR3C, -N(O)m3, -NR3BR3C, -C(O)R3D, -C(O)OR3D, -C(O)NR3BR3C, -OR3A, -NR3BSO2R3A, -NR3BC(O)R3D, -NR3BC(O)OR3D, -NR3BOR3D, -OCX313, -OCHX312 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R3E-alquilo sustituido o no sustituido, R3E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R3E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R3E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R3E-arilo sustituido o no sustituido, o R3E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R3 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX313, -CHX312, -CH2X31, -CN, -SOn3R3A, -SOv3NR3BR3C, -NHNR3BR3C, -ONR3BR3C, -NHC(O)NHNR3BR3C, -NHC(O)NR3BR3C, -N(O)m3, -NR3BR3C, -C(O)R3D, -C(O)OR3D, -C(O)NR3BR3C, -OR3A, -NR3BSO2R3A, -NR3BC(O)R3D, -NR3BC(O)OR3D, -NR3BOR3D, -OCX313, -OCHX312 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2), R3E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R3E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R3E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R3E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R3E-fenilo sustituido o no sustituido, o R3E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
R3E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R3F-alquilo sustituido o no sustituido, R3F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R3F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R3F-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R3F-arilo sustituido o no sustituido, o R3F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R3E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R3F-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R3F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R3F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R3F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R3F-fenilo sustituido o no sustituido, o R3F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R4 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX413, -CHX412, -CH2X41, -CN, -SOn4R4A, -SOv4NR4BR4C, -NHNR4BR4C, -ONR4BR4C, -NHC(O)NHNR4BR4C, -NHC(O)NR4BR4C, -N(O)m4, -NR4BR4C, -C(O)R4D, C(O)OR4D, -C(O)NR4BR4C, -OR4A, -NR4BSO2R4A, -NR4BC(O)R4D, -NR4BC(O)OR4D, -NR4BOR4D, -OCX413, -OCHX412 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R4E-alquilo sustituido o no sustituido, R4E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R4E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R4E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R4E-arilo sustituido o no sustituido, o R4E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R4 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX413, -CHX412, -CH2X41, -CN, -SOn4R4A, -SOv4NR4BR4C, -NHNR4BR4C, -ONR4BR4C, -NHC(O)NHNR4BR4C, -NHC(O)NR4BR4C, -N(O)m4, -NR4BR4C, -C(O)R4D, -C(O)OR4D, -C(O)NR4BR4C, -OR4A, -NR4BSO2R4A, -NR4BC(O)R4D, -NR4BC(O)OR4D, -NR4BOR4D, -OCX413, -OCHX412 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R4E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R4E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R4E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R4E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R4E-fenilo sustituido o no sustituido, o R4E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R3 y R4 se pueden unir opcionalmente para formar un R4E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido o R4E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
R4E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R4F-alquilo sustituido o no sustituido, R4F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R4F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R4F-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R4F-arilo sustituido o no sustituido, o R4F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R4E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R4F-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R4F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R4F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R4F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R4F-fenilo sustituido o no sustituido, o R4F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R5 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX513, -CHX512, -CH2X51, -CN, -SOn5R5A, -SOv5NR5BR5C, -NHNR5BR5C, -ONR5BR5C, -NHC(O)NHNR5BR5C, -NHC(O)NR5BR5C, -N(O)m5, -NR5BR5C, -C(O)R5D, -C(O)OR5D, -C(O)NR5BR5C, -OR5A, -NR5BSO2R5A, -NR5B(O)R5D, -NR5BC(O)OR5D, -NR5BOR5D, -OCX513, -OCHX512 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -Oc Hc I2, -OCHBr2, -OCHI2), R5E-alquilo sustituido o no sustituido, R5E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R5E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R5E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R5E-arilo sustituido o no sustituido, o R5E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R5 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX513, -CHX512, -CH2X51, -CN, -SOn5R5A, -SOv5NR5BR5C, -NHNR5BR5C, -ONR5BR5C, -NHC(O)NHNR5BR5C, -NHC(O)NR5BR5C, -N(O)m5, -NR5BR5C, -C(O)R5D, -C(O)OR5D, -C(O)NR5BR5C, -OR5A, -NR5BSO2R5A, -NR5BC(O)R5D, -NR5BC(O)OR5D, -NR5BOR5D, -OCX513, -OCHX512 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCI3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCI2, -OCHBr2, -OCHI2), R5E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R5E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R5E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R5E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R5E-fenilo sustituido o no sustituido, o R5E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
R5E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCI3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCI2, -OCHBr2, -OCHI2, R5F-alquilo sustituido o no sustituido, R5F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R5F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R5F-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R5F-arilo sustituido o no sustituido, o R5F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R5E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCI3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCI2, -OCHBr2, -OCHI2, R5F-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R5F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R5F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R5F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R5F-fenilo sustituido o no sustituido, o R5F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R1 y R2, R2 y R3, R3 y R4, o R1 y R5 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, cicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6), heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo), o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R1 y R2, R2 y R3, R3 y R4, o R1 y R5 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, cicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6), heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo), o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R1 y R2, R2 y R3, R3 y R4, o R1 y R5 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6), arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo), o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R1 y R2, R2 y R3, R3 y R4, o R1 y R5 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo), o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R1 y R2, R2 y R3, R3 y R4, o R1 y R5 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros).
En las modalidades, R2 y R3 se unen para formar R2E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R2E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R2E-arilo sustituido o no sustituido, o R2E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R2 y R3 se unen para formar R2E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R2E-arilo sustituido o no sustituido, o R2E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R2 y R3 se unen para formar R2E-arilo sustituido o no sustituido, o R2E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R2E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R2 y R3 se unen para formar R2E-heteroarilo de 5-6 miembros sustituido o no sustituido. En las modalidades, R2 y R3 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos,
Figure imgf000029_0001
En otras palabras, R2 -R3 se unen para formar =N-
Figure imgf000029_0002
En la modalidad, el compuesto tiene la Fórmula IC:
Figure imgf000029_0003
En la Fórmula IC, R1, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13 y R14 son como se describen en la presente descripción. En las modalidades, el com uesto es
Figure imgf000029_0004
En las modalidades, R6 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX613, -CHX612, -CH2X61, -CN, -SOn6R6A, -SOv6NR6BR6C, -NHNR6BR6C, -ONR6BR6C, -NHC(O)NHNR6BR6C-NHC(O)NR6BR6C, -N(O)m6, -NR6BR6C-C(O)R6D -C(O)OR6D -C(O)NR6BR6C, -OR6A, -NR6BSO2R6A, -NR6BC(O)R6D, -NR6BC(O)OR6D, -NR6BOR6D, -OCX613, -OCHX612 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OcI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R6E-alquilo sustituido o no sustituido, R6E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R6E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R6E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R6E-arilo sustituido o no sustituido, o R6E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R6 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX613, -CHX612, -CH2X61, -CN, -SOn6R6A, -SOv6NR6BR6C, NHNR6BR6C, -ONR6BR6C, -NHC(O)NHNR6BR6C, _NHC(O)NR6BR6C, -N(O)m6, -NR6BR6C, -C(O)R6D, -C(O)OR6D, -C(O)NR6BR6C, -OR6A -NR6BSO2R6A, -NR6BC(O)R6D, -NR6BC(O)OR6D, -NR6BOR6D, -OCX613, -OCHX612 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2), R6E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R6E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R6E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R6E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R6E-fenilo sustituido o no sustituido, o R6E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
R6E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R6F-alquilo sustituido o no sustituido, R6F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R6F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R6F-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R6F-arilo sustituido o no sustituido, o R6F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R6E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R6F-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R6F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R6F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R6F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R6F-fenilo sustituido o no sustituido, o R6F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R7 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX713, -CHX712, -CH2X71, -CN, -SOn7R7A, -SOv/NR7BR7C, -NHNR7BR7C, -ONR7BR7C, -NHC(O)NHNR7BR7C, -NHC(O)NR7BR7C, -N(O)m7, -NR7BR7C, -C(O)R7D, -C(O)OR7D, -C(O)NR7BR7C, -OR7A, -NR7BSO2R7A, -NR7BC(O)R7D, -NR7BC(O)OR7D, -NR7BOR7D, -OCX713, -OCHX712 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R7E-alquilo sustituido o no sustituido, R7E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R7E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R7E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R7E-arilo sustituido o no sustituido, o R7E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R7 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX713, -CHX712, -CH2X71, -CN, -SOn7R7A, -SOv7NR7BR7C, -NHNR7BR7C, -ONR7BR7C, -NHC(O)NHNR7BR7C, -NHC(O)NR7BR7C, -N(O)m7, -NR7BR7C, -C(O)R7D, -C(O)OR7D, -C(O)NR7BR7C, -OR7A, -NR7BSO2R7A, -NR7BC(O)R7D, -NR7BC(O)OR7D, -NR7BOR7D, -OCX713, -OCHX712 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R7E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R7E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R7E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R7E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R7E-fenilo sustituido o no sustituido, o R7E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
R7E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R7F-alquilo sustituido o no sustituido, R7F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R7F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R7F-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R7F-arilo sustituido o no sustituido, o R7F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R7E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R7F-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R7F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R7F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R7F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R7F-fenilo sustituido o no sustituido, o R7F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R20y R7 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, cicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6), heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo) o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, L1 es un enlace y R20y R7 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, cicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6), heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo) o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R20y R7 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, cicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6), heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros) o arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo). En las modalidades, R20y R7 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, cicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6) o heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros). En las modalidades, R20y R7 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros). En las modalidades, R20y R7 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, heterocicloalquilo de 6 miembros sustituido o no sustituido (por ejemplo, morfolinilo). En las modalidades, R20 y R7 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, morfolinilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R20y R7 se unen para formar R7E- y/o R10E-cidoalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6), R7E- y/o R10E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), R7E-y/o R10E-arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo) o R7E- y/o R10E-heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R20y R7 se unen para formar R7E- y/o R10E-cicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6), R7E- y/o R10E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros) o R7E- y/o R10E-arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo). En las modalidades, R20y R7 se unen para formar R7E- y/o R10E-cicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6) o R7E- y/o R10E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros). En las modalidades, R20y R7 se unen para formar R7E-y/o R10E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R20 y R7 se unen para formar R7E- y/o R10E-morfolinilo sustituido o no sustituido.
En las modalidades, el compuesto es
Figure imgf000031_0001
En las modalidades, R7E es hidrógeno. En las modalidades, R10E es hidrógeno. En las modalidades, R10E es arilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R10E es fenilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R10E es fenilo. En las modalidades, R1, R2, R3, R4y R5son independientemente hidrógeno, NO2, NH2, o NHAc. En las modalidades, R1, R2 y R4 son hidrógeno. En las modalidades, R3 y R5son independientemente NO2, NH2, o NHAc. En las modalidades, R3 es NO2 y R5son NH2o NHAc.
En las modalidades, R8 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX813, -CHX812, -CH2X81, -CN, -SOnsR8a, -SOvsNR8BR8C, -NHNR8BR8C, -ONR8BR8C, -NHC(O)NHNR8BR8C, -NHC(O)NR8BR8C, -N(O)ms, -NR8BR8C, -C(O)R8D, -C(O)OR8D, -C(O)NR8BR8C, -OR8A, -NR8BSO2R8A, -NR8BC(O)R8D, -NR8BC(O)OR8D, -NR8BOR8D, -OCX813, -OCHX812(por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R8E-alquilo sustituido o no sustituido, R8E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R8E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R8E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R8E-arilo sustituido o no sustituido, o R8E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R8 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX813, -CHX812, -CH2X81, -CN, -SOn8R8A, -SOv8NR8BR8C, -NHNR8BR8C, -ONR8BR8C, -NHC(O)NHNR8BR8C, -NHC(O)NR8BR8C, -N(O)m8, -NR8BR8C, -C(O)R8D, -C(O)OR8D, -C(O)NR8BR8C, -OR8A, -NR8BSO2R8A, -NR8BC(O)R8D, -NR8BC(O)OR8D, -NR8BOR8D, -OCX813, -OCHX812 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OcHcI2, -OCHBr2, -oChI2), R8E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R8E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R8E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R8E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R8E-fenilo sustituido o no sustituido, o R8E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
R8E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCI3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCI2, -OcHBr2, -OCHI2, R8F-alquilo sustituido o no sustituido, R8F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R8F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R8F-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R8F-arilo sustituido o no sustituido, o R8F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R8E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCI3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCI2, -OCHBr2, -OCHI2, R8F-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R8F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R8F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R8F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R8F-fenilo sustituido o no sustituido, o R8F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R9 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX913, -CHX912, -CH2X91, -CN, -SOn9R9A, -SOv9nr9bR9C, -NHNR9BR9C, -ONR9BR9C, -NHC(O)NHNR9BR9C, -NHC(O)NR9BR9C, -N(O)m9, -NR9BR9C, -C(O)R9D, -C(O)OR9D, _C(O)NR9BR9C, -OR9A, -NR9BSO2R9A, -NR9B C(O)R9D, -NR9BC(O)OR9D, -NR9BOR9D, -OCX913, -OCHX912 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -Co Oh , -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -Oc I3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R9E-alquilo sustituido o no sustituido, R9E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R9E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R9E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R9E-arilo sustituido o no sustituido, o R9E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R9 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX913, -CHX912, -CH2X91, -CN, -SOn9R9A, -SOv9NR9BR9C, -NHNR9BR9C, -ONR9BR9C, -NHC(O)NHNR9BR9C, -NHC(O)NR9BR9C, -N(O)m9, -NR9BR9C, -C(O)R9D, -C(O)OR9D, -C(O)NR9BR9C, -OR9A, -NR9BSO2R9A, -NR9BC(O)R9D, -NR9BC(O)OR9D, -NR9BOR9D, -OCX913, -OCHX912 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R9E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R9E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R9E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R9E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R9E-fenilo sustituido o no sustituido, o R9E-heteroarilo
de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
R9E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OcI3, -oChF2, -OChCI2, -OCHBr2, -OCHI2, R9F-alquilo sustituido o no sustituido,
R9F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R9F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R9F-heterocicloalquilo sustituido
o no sustituido, R9F-arilo sustituido o no sustituido, o R9F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades,
R9E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCI3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCI2, -OCHBr2, -OCHI2, R9F-alquilo C1-C6 susti sustituido, R9F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R9F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R9F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R9F-fenilo sustituido o no sustituido, o
R9F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R6 y R9, R8 y R9, o R7 y R8 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, cicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6), heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo), o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R6 y R9, R8 y R9, o R7 y R8 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, cicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6), heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo), o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R6 y R9, R8 y R9 o R7 y
R8 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo), o heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R6 y R9, R8 y R9 R7 y R8 se unen para formar, junto
con los átomos a los que están unidos, arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo), o heteroarilo sustituido o
no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R1 y R2, R2 y R3, R3 y R4, o R1 y R5 se unen
para formar, junto con los átomos a los que están unidos, arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo). En las modalidades, R1 y R2, R2 y R3, R3 y R4, o R1 y R5se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, fenilo sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R8 y R9 se unen para formar R8E-cicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6), R8E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), R8E-arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo) o R8E-heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades,
R8y R9 se unen para formar R8E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), R8E-arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo) o R8E-heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R8 y R9 se unen para formar R8E-arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo) o R8E-heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R8 y R9 se unen
para formar R8E-arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo). En las modalidades, R8 y R9 se unen para
formar, junto con los átomos a los que están unidos, R8E-arilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo). En las modalidades, R8 y R9 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, R8E-fenilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R8 y R9 se unen para formar, junto con los átomos a los que
están unidos, fenilo sustituido al menos con un halógeno, metilo o etilo. En las modalidades, R8 y R9 se unen para
formar, junto con los átomos a los que están unidos, fenilo sustituido al menos con dos halógenos, metilo o etilo. En
las modalidades, R6 y R7 son hidrógeno.
En las modalidades, el compuesto es
en donde n8 es un número entero de 0 a 4. En las modalidades, R8E es halógeno o metilo. En las modalidades, R8E es halógeno.
En las modalidades, R6 y R9 se unen para formar R6E-cicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6), R6E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), R6E-arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo) o R6E-heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R6y R9 se unen para formar R6E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), R6E-arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo) o R6E-heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R6 y R9 se unen para formar R6E-arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo) o R6E-heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R6 y R9 se unen para formar R6E-arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo). En las modalidades, R6 y R9 se unen para formar R6E-arilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo). En las modalidades, R6 y R9 se unen para formar R6E-fenilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R6 y R9 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, fenilo sustituido al menos con un halógeno, metilo o etilo. En las modalidades, R6y R9 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, fenilo sustituido al menos con dos halógenos, metilo o etilo. En las modalidades, R7y R8 son hidrógeno. En las modalidades, el compuesto es
Figure imgf000033_0001
en donde n6 es un número entero de 0 a 4. En las modalidades, R6E es halógeno o metilo. En las modalidades, R6E es halógeno.
En las modalidades, R7 y R8 se unen para formar R7E-cicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, C3-C6), R7E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), R7E-arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo) o R7E-heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R7y R8 se unen para formar R7E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 3 a 6 miembros), R7E-arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo) o R7E-heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R7 y R8 se unen para formar R7E-arilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo) o R7E-heteroarilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, de 5 a 6 miembros). En las modalidades, R7 y R8 se unen para formar R7E-arilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido (por ejemplo, fenilo). En las modalidades, R7 y R8 se unen para formar R7E-fenilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R7 y R8 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, fenilo sustituido al menos con un halógeno, metilo o etilo. En las modalidades, R7 y R8 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos, fenilo sustituido al menos con dos halógenos,
Figure imgf000033_0002
es halógeno.
En las modalidades, R10 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1013, -CHX1012, -CH2X101, -CN, -SOn10R10A, -SOv10NR10BR10C, -NHNR10BR10C, -ONR10BR10C, -NHC(O)NHNR10BR10C, -NHC(O)NR10BR10C, -N(O)m10, -NR10BR10C, -C(O)R10D, -C(O)OR10D, -C(O)NR10BR10C, -OR10A, -NR10BSO2R10A, -NR10BC(O)R10D, -NR10BC(O)OR10D, -NR10BOR10D, -OCX1013, -OCHX1012 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R10E-alquilo sustituido o no sustituido, R10E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R10E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R10E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R10E-arilo sustituido o no sustituido, o R10E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R10 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1013, -CHX1012, -CH2X101, -CN, -SOn10R10A, -SOv10NR10BR10C, -NHNR10BR10C, -ONR10BR10C, -NHC(O)NHNR10BR10C, -NHC(O)NR10BR10C, -N(O)m10, -NR10BR10C, -C(O)R10D, -C(O)OR10D, -C(O)NR10BR10C, -OR10A, -NR10BSO2R10A, -NR10BC(O)R10D, NR10BC(O)OR10D, -NR10BOR10D, _OCX1013, -OCHXm12 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2), R10E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R10E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R10E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R10E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R10E-fenilo sustituido o no sustituido, o R10E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R10 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1013, -CHX1012, -CH2X101, -CN, -SOn10R10A, -SOv10NR10BR10C, -NHNR10BR10C, -ONR10BR10C, -NHC(O)NHNR10BR10C, -NHC(O)NR10BR10C, -N(O)m10, -C(O)R10D, -C(O)OR10D, -C(O)NR10BR10C, -OR10A, -NR10BSO2R10A, -NR10BC(O)R10D, -NR1OBC(O)OR10D, -NR10BOR10D, -OCX1013, -OCHX1012 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -COOH, -CONH2, -NO2,
-SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R10E-alquilo sustituido o no sustituido,
R10E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R10E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, o R10E-arilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R10 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1013, -CHX1012, -CH2X101, -CN, -SOn10R10A, -SOv10NR10BR10C, -NHNR10BR10C, -ONR10BR10C, -NHC(O)NHNR10BR10C, -NHC(O)NR10BR10C, -N(O)m10, -C(O)R10D, -C(O)OR10D, -C(O)NR10BR10C, -OR10A, -NR10BSO2R10A, -NR10BC(O)R10D, -NR10BC(O)OR10D, -NR10BOR10D, -OCX1013, -OCHX1012 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -COOH, -CONH2, -NO2,
-SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R10E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R10E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R10E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, o R10E-fenilo sustituido o no sustituido.
R10E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R10F-alquilo sustituido o no sustituido,
R10F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R10F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R10F-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R10F-arilo sustituido o no sustituido, o R10F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R10E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R10F-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R10F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R10F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R10F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R10F-fenilo sustituido o no sustituido, o R10F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R11 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1113, -CHX1112, -CH2X111, -CN, -SOn11R11A, -SOv11NR11BR11C, -NHNR11BR11C, -ONR11BR11C, -NHC(O)NHNR11BR11C, -NHC(O)NR11BR11C, -N(O)m11, -NR11BR11C, -C(O)R11D, -C(O)OR11D, -C(O)NR11BR11C, -OR11A, -NR11BSO2R11A, -NR11BC(O)R11D, -NR11BC(O)OR11D, -NR11BOR11D, -OCX1113, -OCHX1112 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2), R11E-alquilo sustituido o no sustituido, R11E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R11E-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R11E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R11E-arilo sustituido o no sustituido, o R11E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R11 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1113, -CHX1112, -CH2X111, -CN, -SOn11R11A, -SOv11NR11BR11C, -NHNR11BR11C, -ONR11BR11C, -NHC(O)NHNR11BR11C, -NHC(O)NR11BR11C, -N(O)m11, -NR11BR11C, -C(O)R11D, -C(O)OR11D, -C(O)NR11BR11C, -OR11A, -NR1BSO2R11A, -NR11BC(O)R11D, -NR11BC(O)OR11D, -NR11BOR11D, -OCX1113, -OCHX1112 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R11E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R11E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R11E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R11E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R11E-fenilo sustituido o no sustituido, o R11E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R11 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1113, -CHX1112, -CH2X111, -CN, -SOn11R11A, -SOv11NR11BR11C, -NHNR11BR11C, -ONR11BR11C, -NHC(O)NHNR11BR11C, -NHC(O)NR11BR11C, -N(O)m11,, -C(O)R11D, -C(O)OR11D, -C(O)NR11BR11C, -OR11A, -NR11BSO2R11A, -NR11BC(O)R11D, -NR11BC(O)OR11D, -n r 11Bo r 11D, -OCX1113, -OCHX1112 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH,, -COOH, -CONH2, -NO2,
-SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2), R11E-alquilo sustituido o no sustituido,
R11E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R11E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, o R11E-arilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R11 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1113, -CHX1112, -CH2X111, -CN, -SOn11 R11A, -SOv11NR11BR11C, -NHNR11BR11C, -ONR11BR11C, -NHC(O)NHNR11BR11C, -NHC(O)NR11BR11C, -N(O)m11, -C(O)R11D, -C(O)OR11D, -C(O)NR11BR11C, -OR11A, -NR11BSO2R11A, -NR11BC(O)R11D, -NR11BC(O)OR11D, -NR11BOR11D, -OCX11^ , -OCHX1112 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -COOH, -CONH2, -NO2,
-SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2), R11E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R11E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R11E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, o R11E-fenilo sustituido o no sustituido.
R11E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R11F-alquilo sustituido o no sustituido,
R11F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R11F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R11F-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R11F-arilo sustituido o no sustituido, o R11F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R11E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R11F-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R11F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R11F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R11F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R11F-fenilo sustituido o no sustituido, o R11F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R12 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1213, -CHX1212, -CH2X121, -CN, -SOn12R12A, -SOv12NR12BR12C, -NHNR12BR12C, -ONR12BR12C, -NHC(O)NHNR12BR12C, -NHC(O)NR12BR12C, -N(O)m12, -NR12BR12C, -C(O)R12D, -C(O)OR12D, -C(O)NR12BR12C, -OR12A, -NR12BSO2R12A, -NR12BC(O)R12D, -NR12BC(O)OR12D, -NR12BOR12D, -OCX1213, -OCHX1212 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R12E-alquilo sustituido o no sustituido, R12E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R12E-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R12E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R12E-arilo sustituido o no sustituido, o R12E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R12 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1213, -CHX1212, -CH2X121, -CN, -SOn12R12A, -SOv12NR12BR12C, -NHNR12BR12C, -ONR12BR12C, -NHC(O)NHNR12BR12C, -NHC(O)NR12BR12C, -N(O)m12, -NR12BR12C, -C(O)R12D, -C(O)OR12D, -C(O)NR12BR12C, -OR12A, -NR12BSO2R12A, -NR12BC(O)R12D, -NR12BC(O)OR12D, -NR12BOR12D, -OCX1213, -OCHX1212 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R12E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R12E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R12E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R12E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R12E-fenilo sustituido o no sustituido, o R12E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R12 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1213, -CHX1212, -CH2X121, -CN, -SOn12R12A, -SOv12NR12BR12C, -NHNR12BR12C, -ONR12BR12C, -NHC(O)NHNR12BR12C, -NHC(O)NR12BR12C, -N(O)m12, -C(O)R12D, -C(O)OR12D, -C(O)NR12BR12C, -OR12A, -NR12BSO2R12A, -NR12BC(O)R12D, -NR12BC(O)OR12D, -NR12BOR12D, -OCX1213, -OCHX1212 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -COOH, -CONH2, -NO2,
-SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R12E-alquilo sustituido o no sustituido,
R12E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R12E-cicloalquilo sustituido o no sustituido o R12E-arilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R12 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1213, -CHX1212, -CH2X121, -CN, -SOn12R12A, -SOv12NR12BR12C, -NHNR12BR12C, -ONR12BR12C, -NHC(O)NHNR12BR12C, -NHC(O)NR12BR12C, -N(O)m12, -C(O)R12D, -C(O)OR12D, -C(O)NR12BR12C, -OR12A, -NR12BSO2R12A, -NR12BC(O)R12D, -NR12BC(O)OR12D, -NR12BOR12D, -OCX1213, -OCHX1212 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -COOH, -CONH2, -NO2,
-SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R12E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R12E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R12E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido o R12E-fenilo sustituido o no sustituido.
R12E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R12F-alquilo sustituido o no sustituido,
R12F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R12F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R12F-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R12F-arilo sustituido o no sustituido, o R12F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R12E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R12F-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R12F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R12F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R12F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R12F-fenilo sustituido o no sustituido, o R12F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R13 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1313, -CHX1312, -CH2X131, -CN, -SOn13R13A, -SOv13NR13BR13C, -NHNR13BR13C, -ONR13BR13C, -NHC(O)NHNR13BR13C, -NHC(O)NR13BR13C, -N(O)m13, -NR13BR13C, -C(O)R13D, -C(O)OR13D, -C(O)NR13BR13C, -OR13A, -NR13BSO2R13A, -NR13BC(O)R13D, -NR13BC(O)OR13D, -NR13BOR13D, -OCX1313, -OCHX1312 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCI3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCI2, -OCHBr2, -OCHI2), R13E-alquilo sustituido o no sustituido, R13E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R13E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R13E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R13E-arilo sustituido o no sustituido, o R13E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R13 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1313, -CHX1312, -CH2X131 -CN, -SOn13R13A, -SOv13NR13BR13C, -NHNR13BR13C, -ONR13BR13C, -NHC(O)NHNR13BR13C, -NHC(O)NR13BR13C, -N(O)m13, -NR13BR13C, -C(O)R13D, -C(O)OR13D, -C(O)NR13BR13C, -OR13A, -NR13BSO2R13A, -NR13BC(O)R13D, -NR13BC(O)OR13D, -NR13BOR13D, -OCX13^ , -OCHX13^ (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R13E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R13E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R13E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R13E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R13E-fenilo sustituido o no sustituido, o R13E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R13 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1313, -CHX1312, -CH2X131, -CN, -SOn13R13A, -SOv13NR13BR13C, -NHNR13BR13C, -ONR13BR13C, -NHC(O)NHNR13BR13C, -NHC(O)NR13BR13C, -N(O)m13, -C(O)R13D, -C(O)OR13D, -C(O)NR13BR13C, -OR13A, -NR13BSO2R13A, -NR13BC(O)R13D, -NR13BC(O)OR13D, -NR13BOR13D, -OCX1313, -OCHX1312 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R13E-alquilo sustituido o no sustituido, R13E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R13E-cicloalquilo sustituido o no sustituido o R13E-arilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R13 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1313, -CHX1312, -CH2X131, -CN, -SOn13R13A, -SOv13NR13BR13C, -NHNR13BR13C, -ONR13BR13C, -NHC(O)NHNR13BR13C, -NHC(O)NR13BR13C, -N(O)m13, -C(O)R13D, -C(O)OR13D, -C(O)NR13BR13C, -OR13A, -NR13BSO2R13A, -NR13BC(O)R13D, -NR13BC(O)OR13D, -NR13BOR13D, -OCX1313, -OCHX1312 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R13E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R13E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R13E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, o R13E-fenilo sustituido o no sustituido.
R13E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R13F-alquilo sustituido o no sustituido, R13F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R13F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R13F-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R13F-arilo sustituido o no sustituido, o R13F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R13E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R13F-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R13F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R13F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R13F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R13F-fenilo sustituido o no sustituido, o R13F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R14 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1413, -CHX1412, -CH2X141, -CN, -SOn14R14A, -SOv14NR14BR14C, -NHNR14BR14C, -ONR14BR14C, -NHC(O)NHNR14R14C, -NHC(O)NR14BR14C, -N(O)m14, -NR14BR14C, -C(O)R14D, -C(O)OR14D, -C(O)NR14BR14C, -OR14A, -NR14BSO2R14A, -NR14BC(O)R14D, -NR14BC(O)OR14D, -NR14BOR14D, -OCX1413, -OCHX1412 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R14E-alquilo sustituido o no sustituido, R14E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R14E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R14E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R14E-arilo sustituido o no sustituido, o R14E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R14 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1413, -CHX1412, -CH2X141, -CN, -SOn14R14A, -SOv14NR14BR14C, -NHNR14BR14C, -ONR14BR14C, -NHC(O)NHNR14BR14C, -NHC(O)NR14BR14C, -N(O)m14, -NR14BR14C, -C(O)R14D, -C(O)OR14D, -C(O)NR14BR14C, -OR14A, -NR14BSO2R14A, -NR14BC(O)R14D, -NR14BC(O)OR14D, -NR14BOR14D,, -OCX1413, -OCHX1412 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R14E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R14E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R14E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R14E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R14E-fenilo sustituido o no sustituido, o R14E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R14 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1413, -CHX1412, -CH2X141, -CN, -SOn14R14A, -SOv14NR14BR14C, -NHNR14BR14C, -ONR14BR14C, -NHC(O)NHNR14BR14C, -NHC(O)NR14BR14C, -N(O)m14, -C(O)R14D, -C(O)OR14D, -C(O)NR14BR14C, -OR14A, -NR14BSO2R14A, -NR14BC(O)R14D, -NR14BC(O)OR14D, -NR14BOR14D, -OCX1413, -OCHX1412 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R14E-alquilo sustituido o no sustituido, R14E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R14E-cicloalquilo sustituido o no sustituido o R14E-arilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R14 es independientemente hidrógeno, halógeno, -CX1413, -CHX1412, -CH2X141, -CN, -SOni414A, -SOv14NR14BR14C, -NHNR14BR14C, -ONR14BR14C, -NHC(O)NR14BR14C, -NHC(O)NR14BR14C, -N(O)m14, -C(O)R14D, -C(O)OR14D, -C(O)14BR14C, -OR14A, -NR14BSO2R14A, -NR14BC(O)R14D, -NR14BC(O)OR14D, -R14BOR14D, -OCX1413, _OCHX1412 (por ejemplo, hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2), R14E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R14E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R14E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, o R14E-fenilo sustituido o no sustituido.
R14E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R14F-alquilo sustituido o no sustituido, R14F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R14F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R14F-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R14F-arilo sustituido o no sustituido, o R14F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R14E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R14F-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R14F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R14F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R14F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R14F-fenilo sustituido o no sustituido, o R14F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R15 es independientemente hidrógeno, R15E-alquilo sustituido o no sustituido, R15E-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R15E-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R15E-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R15E-arilo sustituido o no sustituido, o R15E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R15 es independientemente hidrógeno, R15E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R15E-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R15E-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R15E-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R15E-fenilo sustituido o no sustituido, o R15E-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
R15E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R15F-alquilo sustituido o no sustituido, R15F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R15F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R15F-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R15F-arilo sustituido o no sustituido, o R15F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R15E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R15F-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R15F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R15F-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R15F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R15F-fenilo sustituido o no sustituido, o R15F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R1A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R1AF-alquilo sustituido o no sustituido, R1AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R1AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R1AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R1AF-arilo sustituido o no sustituido, o R1AF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R1A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R1AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R1AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R1AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R1AF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R1AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R1AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R1B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R1BF-alquilo sustituido o no sustituido, R1BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R1BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R1BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R1BF-arilo sustituido o no sustituido, o R1BF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R1B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R1BF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R1BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R1BF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R1BF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R1BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R1BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R1C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R1CF-alquilo
sustituido o no sustituido, R1CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R1CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R1CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R1CF-arilo sustituido o no sustituido, o R1CF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R1C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R1CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R1CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R1CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R1CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R1CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R1CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R1B y R1C
unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R1CF-heterocicloalquilo de 3 a 6
miembros sustituido o no sustituido o R1CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R1D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R1DF-alquilo
sustituido o no sustituido, R1DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R1DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R1DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R1DF-arilo sustituido o no sustituido, o R1DF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R1D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R1DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R1DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R1DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R1DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R1DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R1DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R2A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2, R2AF-alquilo
sustituido o no sustituido, R2AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R2AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R2AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R2AF-arilo sustituido o no sustituido, o R2AF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R2A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R2AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R2AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R2AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R2AF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R2AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R2AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R2B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R2BF-alquilo
sustituido o no sustituido, R2BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R2BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R2BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R2BF-arilo sustituido o no sustituido, o R2BF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R2B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R2BF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R2BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R2BF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R2BF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R2BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R2BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R2C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R2CF-alquilo
sustituido o no sustituido, R2CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R2CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R2CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R2CF-arilo sustituido o no sustituido, o R2CF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R2C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R2CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R2CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R2CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R2CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R2CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R2CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R2B y R2C
unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R2CF-heterocicloalquilo de 3 a 6
miembros sustituido o no sustituido o R2CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R2D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCI3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCI2, -OCHBr2, -OCHI2, R2DF-alquilo sustituido o no sustituido, R2DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R2DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R2DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R2DF-arilo sustituido o no sustituido, o R2DF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R2D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2, R2DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R2DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R2DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R2DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R2DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R2DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R3A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R3AF-alquilo sustituido o no sustituido, R3AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R3AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R3AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R3AF-arilo sustituido o no sustituido, o R3AF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R3A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R3AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R3AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R3AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R3AF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R3AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R3AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R3B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R3BF-alquilo sustituido o no sustituido, R3BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R3BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R3BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R3BF-arilo sustituido o no sustituido, o R3BF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R3B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R3BF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R3BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R3BF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R3BF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R3BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R3BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R3C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R3CF-alquilo sustituido o no sustituido, R3CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R3CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R3CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R3CF-arilo sustituido o no sustituido, o R3CF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R3C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R3CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R3CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R3CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R3CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R3CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R3CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R3B y R3C unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R3CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido o R3CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R3D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R3DF-alquilo sustituido o no sustituido, R3DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R3DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R3DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R3DF-arilo sustituido o no sustituido, o R3DF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R3D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R3DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R3DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R3DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R3DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R3DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R3DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R4A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R4AF-alquilo sustituido o no sustituido, R4AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R4AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R4AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R4AF-arilo sustituido o no sustituido, o R4AF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R4A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCI3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCI2, -OCHBr2, -OCHI2, R4AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R4AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R4AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R4FA-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R4AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R4AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R4B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2, R4BF-alquilo sustituido o no sustituido, R4BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R4BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R4BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R4BF-arilo sustituido o no sustituido, o R4BF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R4B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R4BF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R4BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R4BF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R4BF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R4BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R4BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R4C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R4CF-alquilo sustituido o no sustituido, R4CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R4CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R4CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R4CF-arilo sustituido o no sustituido, o R4CF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R4C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2, R4CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R4CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R4CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R4CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R4CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R4CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R4B y R4C unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R4CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido o R4CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R4D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R4DF-alquilo sustituido o no sustituido, R4DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R4DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R4DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R4DF-arilo sustituido o no sustituido, o R4DF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R4D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R4DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R4DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R4DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R4DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R4DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R4DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R5A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R5AF-alquilo sustituido o no sustituido, R5AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R5AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R5AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R5AF-arilo sustituido o no sustituido, o R5AF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R5A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R5AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R5AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R5AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R5AF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R5AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R5AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R5B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R5BF-alquilo sustituido o no sustituido, R5BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R5BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R5BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R5BF-arilo sustituido o no sustituido, o R5BF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R5B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R5BF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R5BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R5BFcicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R5BF-heteroddoalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R5BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R5BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R5C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R5CF-alquilo sustituido o no sustituido, R5CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R5CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R5CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R5CF-arilo sustituido o no sustituido, o R5CF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R5C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R5CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R5CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R5CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R5CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R5CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R5CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R5B y R5C unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R5CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido o R5CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R5D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R5DF-alquilo sustituido o no sustituido, R5DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R5DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R5DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R5DF-arilo sustituido o no sustituido, o R5DF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R5D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R5DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R5DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R5DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R5DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R5DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R5DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R6A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R6AF-alquilo sustituido o no sustituido, R6AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R6AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R6AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R6AF-arilo sustituido o no sustituido, o R6AF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R6A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R6AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R6AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R6AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R6AF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R6AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R6AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R6B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R6BF-alquilo sustituido o no sustituido, R6BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R6BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R6BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R6BF-arilo sustituido o no sustituido, o R6BF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R6B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R6BF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R6BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R6BF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R6BF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R6BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R6BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R6C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R6CF-alquilo sustituido o no sustituido, R6CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R6CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R6CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R6CF-arilo sustituido o no sustituido, o R6CF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R6C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R6CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R6CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R6CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R6CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R6CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R6CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R6B y R6C unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R6CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido o R6CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R6D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R6DF-alquilo
sustituido o no sustituido, R6DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R6DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R6DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R6DF-arilo sustituido o no sustituido, o R6DF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R6D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R6DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R6DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R6DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R6DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R6DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R6DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R7A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R7AF-alquilo
sustituido o no sustituido, R7AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R7AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R7AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R7AF-arilo sustituido o no sustituido, o R7AF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R7A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2,
R7AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R7AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R7AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R7AF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R7AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R7AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R7B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, --OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R7BF-alquilo
sustituido o no sustituido, R7BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R7BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R7BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R7BF-arilo sustituido o no sustituido, o R7BF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R7B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2,
R7BF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R7BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R7BF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R7BF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R7BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R7BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R7C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R7CF-alquilo
sustituido o no sustituido, R7CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R7CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R7CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R7CF-arilo sustituido o no sustituido, o R7CF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R7C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R7CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R7CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R7CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R7CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R7CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R7CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R7B y R7C
unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R7CF-heterocicloalquilo de 3 a 6
miembros sustituido o no sustituido o R7CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R7D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R7DF-alquilo
sustituido o no sustituido, R7DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R7DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R7DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R7DF-arilo sustituido o no sustituido, o R7DF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R7D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R7DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R7DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R7DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R7DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R7DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R7DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R8A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R8AF-alquilo
sustituido o no sustituido, R8AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R8AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R8AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R8AF-arilo sustituido o no sustituido, o R8AF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R8A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R8AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R8AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R8AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R8AF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R8AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R8AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R8B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2, R8BF-alquilo
sustituido o no sustituido, R8BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R8BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R8BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R8BF-arilo sustituido o no sustituido, o R8BF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R8B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R8BF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R8BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R8BF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R8BF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R8BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R8BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R8C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R8CF-alquilo
sustituido o no sustituido, R8CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R8CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R8CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R8CF-arilo sustituido o no sustituido, o R8CF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R8C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R8CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R8CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R8CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R8CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R8CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R8CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R8B y R8C
unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R8CF-heterocicloalquilo de 3 a 6
miembros sustituido o no sustituido o R8CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R8D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R8DF-alquilo
sustituido o no sustituido, R8DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R8DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R8DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R8DF-arilo sustituido o no sustituido, o R8DF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R8D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R8DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R8DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R8DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R8DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R8DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R8DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R9A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R9AF-alquilo
sustituido o no sustituido, R9AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R9AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R9AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R9AF-arilo sustituido o no sustituido, o R9AF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R9A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R9AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R9AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R9AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R9AF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R9AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R9AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R9B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R9BF-alquilo
sustituido o no sustituido, R9BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R9BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R9BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R9BF-arilo sustituido o no sustituido, o R9BF-heteroarilo sustituido o
no sustituido. En las modalidades, R9B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R9BF-alquilo Ci-Ca sustituido o no sustituido,
Figure imgf000044_0001
R9BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R9BF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R9BF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R9BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R9BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R9C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R9CF-alquilo sustituido o no sustituido, R9CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R9CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R9CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R9CF-arilo sustituido o no sustituido, o R9CF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R9C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R9CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R9CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R9CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R9CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R9CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R9CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R9B y R9C unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R9CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido o R9CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R9D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R9DF-alquilo sustituido o no sustituido, R9DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R9DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R9DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R9DF-arilo sustituido o no sustituido, o R9DF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R9D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCl3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R9DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R9DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R9DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R9DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R9DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R9DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R10A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R10AF-alquilo sustituido o no sustituido, R10AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R10AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R10AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R10AF-arilo sustituido o no sustituido, o R10AF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R10A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R10AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R10AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R10AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R10AF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R10AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R10AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R10B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R10BF-alquilo sustituido o no sustituido, R10BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R10BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R10BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R10BF-arilo sustituido o no sustituido, o R10BF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R10B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R10BF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R10BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R10BF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R10BF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R10BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R10BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R10C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R10CF-alquilo sustituido o no sustituido, R10CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R10CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R10CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R10CF-arilo sustituido o no sustituido, o R10CF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R10C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R10CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R10CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R10CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R10CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R10CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R10CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R10B y R10C unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R10CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido o R10CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R10D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R10DF-alquilo sustituido o no sustituido, R10DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R10DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R10DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R10DF-arilo sustituido o no sustituido, o R10DF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R10D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2, R10DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R10DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R10DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R10DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R10DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R10DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R11A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R11AF-alquilo sustituido o no sustituido, R11AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R11AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R11AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R11AF-arilo sustituido o no sustituido, o R11AF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R11A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R11AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R11AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R11AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R11AF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R11AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R11AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R11B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2, R11BF-alquilo sustituido o no sustituido, R11BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R11BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R11BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R11BF-arilo sustituido o no sustituido, o R11BF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R11B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R11BF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R11BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R11BF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R11BF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R11BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R11BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R11C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Ch, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R11CF-alquilo sustituido o no sustituido, R11CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R11CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R11CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R11CF-arilo sustituido o no sustituido, o R11CF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R11C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R11CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R11CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R11CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R11CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R11CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R11CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R11B y R11C unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R11CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido o R11CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R11D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Ch, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R11DF-alquilo sustituido o no sustituido, R11DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R11DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R11DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R11DF-arilo sustituido o no sustituido, o R11DF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R11D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R11DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R11DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R11DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R11DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R11DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R11DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R12A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R12AF-alquilo sustituido o no sustituido, R12AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R12AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R12AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R12AF-arilo sustituido o no sustituido, o R12AF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R12A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R12AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R12AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R12AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R12AF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R12AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R12AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R12B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R12BF-alquilo sustituido o no sustituido, R12BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R12BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R12BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R12BF-arilo sustituido o no sustituido, o R12BF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R12B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R12BF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R12BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R12BF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R12BF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R12BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R12BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R12C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R12CF-alquilo sustituido o no sustituido, R12CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R12CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R12CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R12CF-arilo sustituido o no sustituido, o R12CF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R12C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R12CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R12CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R12CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R12CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R12CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R12CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R12B y R12C unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R12CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido o R12CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R12D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Ch, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2, R12DF-alquilo sustituido o no sustituido, R12DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R12DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R12DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R12DF-arilo sustituido o no sustituido, o R12DF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R12D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R12DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R12DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R12DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R12DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R12DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R12DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R13A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Ch, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R13AF-alquilo sustituido o no sustituido, R13AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R13AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R13AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R13AF-arilo sustituido o no sustituido, o R13AF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R13A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R13AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R13AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R13AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R13AF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R13AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R13AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R13B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R13BF-alquilo sustituido o no sustituido, R13BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R13BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, Ri3BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R13BF-arilo sustituido o no sustituido, o R13BF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R13B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCI3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R13BF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R13BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R13BF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R13BF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R13BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R13BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R13C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R13CF-alquilo sustituido o no sustituido, R13CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R13CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R13CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R13CF-arilo sustituido o no sustituido, o R13CF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R13C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2, R13CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R13CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R13CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R13CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R13CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R13CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R13B y R13C unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R13CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido o R13CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R13D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Ch, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R13DF-alquilo sustituido o no sustituido, R13DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R13DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R13DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R13DF-arilo sustituido o no sustituido, o R13DF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R13D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R13DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R13DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R13DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R13DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R13DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R13DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R14A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R14AF-alquilo sustituido o no sustituido, R14AF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R14AF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R14AF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R14AF-arilo sustituido o no sustituido, o R14AF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R14A es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R14AF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R14AF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R14AF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R14AF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R14AF-fenilo sustituido o no sustituido, o R14AF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R14B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Ch, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R14BF-alquilo sustituido o no sustituido, R14BF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R14BF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R14BF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R14BF-arilo sustituido o no sustituido, o R14BF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R14B es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCh, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R14BF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R14BF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R14BF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R14BF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R14BF-fenilo sustituido o no sustituido, o R14BF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R14C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R14CF-alquilo sustituido o no sustituido, R14CF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R14CF-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R14CF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R14CF-arilo sustituido o no sustituido, o R14CF-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R14C es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R14CF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R14CF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R14CF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R14CF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R14CF-fenilo sustituido o no sustituido, o R14CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido. R14B y R14C
unidos al mismo átomo de nitrógeno pueden unirse opcionalmente para formar un R14CF-heterocicloalquilo de 3 a 6
miembros sustituido o no sustituido o R14CF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, R14D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -Cl3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NH NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R14DF-alquilo
sustituido o no sustituido, R14DF-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R14DF-cicloalquilo sustituido o no sustituido,
R14DF-heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, R14DF-arilo sustituido o no sustituido, o R14DF-heteroarilo sustituido
o no sustituido. En las modalidades, R14D es independientemente hidrógeno, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN,
-OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2,
R14DF-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido, R14DF-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R14DF-cicloalquilo C3-C6 sustituido o no sustituido, R14DF-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido,
R14DF-fenilo sustituido o no sustituido, o R14DF-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
En las modalidades, L1 es independientemente un enlace, -O-, -S-, -NR15-(por ejemplo -NH-), -C(O)NR15-, -C(O)-,
R17E-alquileno sustituido o no sustituido o R17E-heteroalquileno sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es
independientemente -O-, -S-, -NH-, -C(O)NR15-, -C(O)-, R17E-alquileno C1-C3 sustituido o no sustituido o R17E-heteroalquileno de 2 a 3 miembros sustituido o no sustituido.
R17E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCh, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCl2, -OCHBr2, -OCHI2, R17F-alquilo sustituido o no sustituido,
R17F-heteroalquilo sustituido o no sustituido, R17F-cicloalquilo sustituido o no sustituido, R17F-heterocicloalquilo
sustituido o no sustituido, R17F-arilo sustituido o no sustituido, o R17F-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las
modalidades, R17E es independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CCl3, -CBr3, -CI3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2,
-NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC(O)NHNH2, -NHC(O)NH2, -NHSO2H, -NHC(O)H, -NHC(O)OH, -NHOH, -OCF3, -OCCl3, -OCBr3, -OCI3, -OCHF2, -OCHCh, -OCHBr2, -OCHI2, R17F-alquilo C1-C6
sustituido o no sustituido, R17F-heteroalquilo de 2 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R17F-cicloalquilo C3-C6
sustituido o no sustituido, R17F-heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros sustituido o no sustituido, R17F-fenilo sustituido o
no sustituido, o R17F-heteroarilo de 5 a 6 miembros sustituido o no sustituido.
R1F r2F r3F r4F r5F r6F r7F r8F r9F r10F r11F r12F r13F r14F r15F r17F r1AF r1BF r1CF r1DF r2AF r2BF
R2CF r2dF r3AF R3BF , R3CF r3DF r4AF r4BF r4CF R4DF ’r5AF ’ r5BF ’ r5CF , R5DF, r6AF , R6BF , R6CF , R6DF , r7AF , R7BF ,
R7CF , R7DF , R8AF , R8BF, R8CF , R8DF ’ r9AF ’ r9BF ’ r9CF ’ r9DF ’r10AF , r10bF r1oCf r10DF r11AF r11BF R11CF R11DF ’r12AF ,
R12BF, R12CF, R12DF, R13AF, R13BF, R13CF, R13DF, R14AF, R14bF, R14cF and R14DF son independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC=(O)NH NHC=(O)NH2, -NHSO2H, -NHC=(O)H, -NHC(O)-OH, -NHOH, -OCF3, -OCHF2, alquilo no sustituido, heteroalquilo no
sustituido, cicloalquilo no sustituido, heterocicloalquilo no sustituido, arilo no sustituido o heteroarilo no sustituido. En
las modalidades, R1F, R2F, R3F, R4F, R5F, R6F, R7F, R8F, R9F, R10F, R11F, R12F, R13F, R14F, R15F, R17F, R1AF, R1BF, R1CF,
r1DF r2AF r2BF r2CF r2DF r3AF r3BF r3CF r3DF r4AF r4BF r4CF r4DF r5AF r5BF r5CF r5DF r6AF r6BF r6CF
r6DF , r7AF , R7BF, R7CF r7DF r8AF r8BF r8CF r8dF r9aF r9bF r9cF r9dF r1oAf R1OBF r11cF r11df R12AF ' r12bf r12cf R12DF ’r13af , r13Bf r13cf ’r13df ' r14aF r14Bf r14cf and r14Df son
independientemente oxo, halógeno, -CF3, -CN, -OH, -NH2, -COOH, -CONH2, -NO2, -SH, -SO3H, -SO4H, -SO2NH2, -NHNH2, -ONH2, -NHC=(O)NHNH2, -NHC=(O)NH2, -NHSO2H, -NHC=(O)H, -NHC(O)-OH, -NHOH, -OCF3, -OCHF2,
alquilo C1-C6 no sustituido, heteroalquilo de 2 a 6 miembros no sustituido, cicloalquilo C3-C6 no sustituido,
heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros no sustituido, fenilo no sustituido o heteroarilo de 5 a 6 miembros no sustituido.
En algunas modalidades, un compuesto como se describe en la presente descripción puede incluir múltiples
instancias de R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R17, m1, m2, m3, m4, m5, m6, m7, m8,
m9, m10, m11, m12, m13, m14, n1, n2, n3, n4, n5, n6, n7, n8, n9, n10, n11, n12, n13, n14, v1, v2, v3, v4, v5, v6, v7,
v8, v9, v10, v11, v12, vl3, vl4 y/u otras variables. En dichas modalidades, cada variable puede ser opcionalmente
diferente y etiquetarse apropiadamente para distinguir cada grupo para una mayor claridad. Por ejemplo, donde
cada R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, m11, m12, m13, m14, n1, n2, n3, n4, n5, n6, n7, n8, n9, n10, n11, n12, nl3, nl4, v1, v2, v3, v4, v5, v6, v7, v8, v9, v10
v11, v12, vl3 y/o v14 es diferente, estas pueden estar referidas, por ejemplo, como R11, R12, R13, R14, R15, R16
R1.7 r2.1 r2.2 r2.3 r2.4 r2.5 r2.6 r2.7 r3.1 r3.2 r3.3 r3.4 r3.5 r3.6 r3.7 r4.1 r4.2 r4.3 r4.4 r4.5 r4.6 r4.7 r5
r5.2 R5.3 R5.4 r5.5 r5.6 r5.7 r6.1 r6.2 r6.3 r6.4 r6.5 r6.6 r7.1 r7.2 r7.3 r7.4 r7.5 r7.6 r8.1 r8.2 R8.3 R8.4 R8.5
r8.6 , R9.1, R9.2 , r9.3, r9.4 , r9.5 , r9.6 r10.1 r10.2 r10.3 R10.4 R1O.5 R1O.6 ’r11.1 r11.2 Rh ’3 r11.4 r11.5 R11.6 R12.1 ’r12.2
R12.3 R12.4 R12.5 R12.6 R13.1 R13.2 R13.3 R13.4 R13.5 R13.6 R14.1 R14.2 R14.3 R14.4 R14.5 R14.6 R15E.1 R15E.2 R15E.3
R15E.4 R15E.5 R15E.6 R17E.1 R17E.2 R17E.3 R17E.4 R17E.5 R17E.6 m11 m12 m13 m14 m15 m16 m21 m22 m23 m24
m25 m26 m31 m32 m33 m34 m35 m36 m41 m42 m43 m44 m45 m46 m51 m52 m53 m54 m55 m66 m61 m62
m63 m64 m65 m66 m71 m72 m73 m74 m75 m76 m81 m82 m83 m84 m85 m86 m91 m92 m93 m94 m95 m96
m1O1 , m1O2 , m1O3 , m1O4, m1O5, m1O6, m111 m112, m113, m114, m115, m116, m121, m122, m123, m124, m125, m126
m131, m132, m133, m134, m135, m136, m141, m142, m143, m144, m145, m146, n11, n12, n13, n14, n15, n16, n21, n22,
n23, n24, n25, n26, n31, n32, n33, n34, n35, n36, n41, n42, n43, n44, n45, n46, n51, n52, n53, n54, n55, n56, n61, n62, n63,
n64, n65, n66, n71, n72, n73, n74, n75, n76, n81, n82, n83, n84, n85, n86, n91, n92, n93, n94, n95, n96, n101, n102, n103,
n104, n105, n106, n111, n112, n113, n114, n115, n116, n121, n122, n123, n124, n125, n126, n131, n132, n133, n134, n135,
n136, n141, n142, n143, n144, n145, n146, v i1, v12, v13, v14, v15, v16, V21, v22, v23, v24, v25, v26, V31, v32, v33, v34, v35,
v36, V41, v42, v43, v44, v45, v46, V51, v52, v53, v54, v55, v56, V61, v62, v63, v64, v65, v66, V71, v72, v73, v74, v75, v76, V81,
v82, v83, v84, v85, v86, V91, v92, v93, v94, v95, v96, V101, v102, v103, v104, v105, v106, V111, v112, v113, v114, v115,
v116, V121, v122, v123, v124, v125, v126, V131, v132, v133, v134, v135, v136, V141, v142, v143, v144, v145, v146, en
donde la definición de R1 es asumida por R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17, la definición de R2 es asumida por R21,
R22, R23, R24, R25, R26, R27, la definición de R3 es asumida por R31, R32, R33, R34, R35, R36, R37, la definición de
R4 es asumida por R41, R42, R43, R44, R45, R46, R47, la definición de R5 es asumida por R51, R52, R53, R54, R55,
R56, R57, la definición de R6 es asumida por R61, R62, R63, R64, R65, R66, la definición de R7 es asumida por R71,
R72, R73, R74, R75, R76, la definición de R8 es asumida por R81, R82, R83, R84, R85, R86, la definición de R9 es
asumida por R91, R92, R93, R94, R95, R96, la definición de R10 es asumida por R101, R102, R103, R104, R105, R106, la
definición de R11 es asumida por R11.1, R11.2, R11.3, R11.4, R11.5, R11.6, la definición de R12 es asumida por R12.1, R12.2,
R12.3, R12.4, R12.5, R12.6, la definición de R13 es asumida por R13.1, R13.2, R13.3, R13.4, R13.5, R13.6, la definición de R14 es
asumida por R141, R142, R143, R144, R145, R146, la definición de R15E es asumida por R15E1, R15E2, R15E3, R15E4,
R15E5, R15E6, la definición de R17E es asumida por R17E1, R17E2, R17E3, R17E4, R17E5, R17E6, la definición de m1 es
asumida por m11, m12, m13, m14, m15, m16, la definición de m2 es asumida por m21, m22, m23, m24, m25, m26, la
definición de m3 es asumida por m31, m32, m33, m34, m35, m36, la definición de m4 es asumida por m41, m42, m43,
m44, m45, m46, la definición de m5 es asumida por m51, m52, m53, m54, m55, m56, la definición de m6 es asumida
por m61, m62, m63, m64, m65, m66, la definición de m7 es asumida por m71, m72, m73, m74, m75, m76, la definición de
m8 es asumida por m81, m82, m83, m84, m85, m86, la definición de m9 es asumida por m91, m92, m93, m94, m95,
m96, la definición de m10 es asumida por m101, m102, m103, m104, m105, m106, la definición de m11 es asumida por
m111, m112, m113, m114, m115, m16, la definición de m12 es asumida por m121, m122, m123, m124, m125, m126, la
definición de m13 es asumida por m131, m132, m133, m134, m135, m136, la definición de m14 es asumida por m141,
m142, m143, m144, m145, m146, la definición de n1 es asumida por n11, n12, n13, n14, n15, n16, la definición de n2 es
asumida por n21, n22, n23, n24, n25, n26, la definición de n3 es asumida por n31, n32, n33, n34, n35, n36, la definición
de n4 es asumida por n41, n42, n43, n44, n45, n46, la definición de n5 es asumida por n5\ n52, n53, n54, n55, n56, la
definición de n6 es asumida por n61, n62, n63, n64, n65, n66, la definición de n7 es asumida por n71, n75, n76, la definición de n8 es asumida por n81, n82, n83, n84, n85, n86, la definición de n9 es n93, n94, n95, n96, la definición de n10 es asumida por n101, n102, n103, n104, n105, n106, la definición de n11 es
asumida por n111, n112, n113, n114, n115, n116, la definición de n12 es asumida por n121, n122, n123, n124, n125,
n126, la definición de n13 es asumida por n131, n132, n133, n134, n135, n136, la definición de n14 es asumida por
n141, n142, n143, n144, n145, n146, la definición de v1 es asumida por V11, v12, v13, v14, v15, v16, la definición de v2
es asumida por v21, v22, v23, v24, v25, v26, la definición de v3 es asumida por v31, v32, v33, v34, v35, v36, de v4 es asumida por v41, v42, v43, v44, v45, v46, la definición de v5 es asumida por v51, v52, v53, v54, v55, v56, la
definición de v6 es asumida por v61, v62, v63, v64, v65, v66, la definición de v7 es asumida por v71, v72, v73, v74, v75,
v76, la definición de v8 es asumida por v81, v82, v83, v84, v85, v86, la definición de v9 es asumida por v91, v92, v93,
v94, v95, v96, la definición de v10 es asumida por V101, v102, v103, v104, v105, v106, la definición de v11 es asumida
por V111, v112, v113, v114, v115, v116, la definición de v12 es asumida por V121, v122, v123, v124, v125, v126, la
definición de v13 es asumida por V131, v132, v133, v134, v135, v136, y la definición de v14 es asumida por V141, v142,
v143, v144, v145, v146.
Las variables usadas dentro de una definición de R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R17,
m1, m2, m3, m4, m5, m6, m7, m8, m9, m10, m11, m12, ml3, ml4, ml5, ml6, ml7, n1, n2, n3, n4, n5, n6, n7, n8, n9,
n10, n11, n12, n13, n14, n15, n16, n17, v1, v2, v3, v4, v5, v6, v7, v8, v9, v10, v11, v12, v13, v14 y/u otras variables
que aparecen en múltiples instancias y son diferentes pueden etiquetarse apropiadamente de manera similar para
distinguir cada grupo para una mayor claridad.
En las modalidades, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno. En las modalidades, R10, R11, R12, R13 y R14 son
independientemente hidrógeno. En las modalidades, al menos dos de R1, R2, R3, R4, R5 son independientemente
hidrógeno. En las modalidades, R1 es hidrógeno, halógeno, -CN, -NO2, -NR1BR1C, NR1BC(O)R1D, -C(O)OR1D o alquilo
sustituido o no sustituido; R2 es hidrógeno, halógeno, -CN, -NO2, -NR2BR2C, NR2BC(O)R2D, -C(0)Or2D o alquilo
sustituido o no sustituido; R3 es hidrógeno, halógeno, -CN, -NO2, -NR3BR3C, NR3BC(O)R3D,, -C(O)O3D o alquilo
sustituido o no sustituido; R4 es hidrógeno, halógeno, -CN, -NO2, -NR4BR4C, NR4Bc(o)r4D,, -c(o)o4D o alquilo
sustituido o no sustituido; R5 es hidrógeno, halógeno, -CN, -NO2, -NR5BR5C, NR5BC(O)R5D,, -C(O)O5D o alquilo
sustituido o no sustituido. En las modalidades, R1B, R2B, R3B, R4B, R5B R1C, R2C, R3C, R4C, R5C, R5D son independientemente hidrógeno o metilo. En las modalidades, al menos dos de R1, R2, R4 y R5 son
hidrógeno; R3 es -NO2.
En las modalidades, -L1-R20 es alquilo sustituido o no sustituido o heteroalquilo sustituido o no sustituido. En las
modalidades, -L1-R20 es alquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es alquilo C2-C20 sustituido o
no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es alquilo C2-C10 sustituido o no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es
alquilo C2-C6 sustituido o no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es alquilo C2-C4 sustituido o no sustituido. En las
modalidades, -L1-R20 es R10E-alquilo sustituido o no sustituido o R10E-heteroalquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es R10E-alquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es R10E-alquilo C2-C20 sustituido o no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es R10E-alquilo C2-C10 sustituido o no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es R10E-alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es R10E-alquilo C2-C5 sustituido o no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es R10E-alquilo C2-C4 sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es -CH2-, R20 es R10E-alquilo C 1-C3sustituido o no sustituido. En las modalidades, -L1 es -CH2-, R20 es R10E-metilo, etilo o etenilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, -L1 es -CH2, R20 es metilo, etilo o etenilo.
En las modalidades, -L1-R20 es alquilo sustituido o no sustituido o heteroalquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es alquilo no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es alquilo C2-C20 no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es alquilo C2-C10 no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es alquilo C2-C6 no sustituido. En las modalidades, -L1-R20 es alquilo C2-C4 no sustituido. En las modalidades, L1 es -CH2-, R20 es alquilo C1-C3 no sustituido. En las modalidades, L1 es -CH2-, R20 es metilo, etilo o etenilo. En las modalidades, L1 es -CH2, R20 es metilo, etilo o etenilo. En las modalidades, L1-R20 es
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En las modalidades, cuando -L1 es -CH2-, R20 es metilo, etilo o etenilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son independientemente hidrógeno. En las modalidades, R10, R11, R12, R13 y R14 son independientemente hidrógeno. En las modalidades, al menos dos de R1, R2, R4 y R5 son hidrógeno. En las modalidades, R6, R7, R8 y independientemente hidrógeno o alquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R6, R7, R8 y R9 son independientemente hidrógeno o alquilo no sustituido. En las modalidades, R6, R7, R8 y R9 son independientemente hidrógeno o alquilo C1-C10 sustituido o no sustituido (por ejemplo, C1-C5). En las modalidades, R6, R7, R8 y R9 son independientemente hidrógeno o alquilo C1-C10 no sustituido (por ejemplo, C1-C5). En las modalidades, R6, R7, R8 y R9 son independientemente hidrógeno. En las modalidades, R10, R11, R12, R13 y R14son independientemente hidrógeno o alquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R10, R11, R12, R13 y R14son independientemente hidrógeno o alquilo no sustituido. En las modalidades, R10, R11, R12, R13 y R14son independientemente hidrógeno o alquilo C1-C10 sustituido o no sustituido (por ejemplo, C1-C5). En las modalidades, R10, R11, R12, R13 y R14son independientemente hidrógeno o alquilo C1-C10 no sustituido (por ejemplo, C1-C5). En las modalidades, R10, R11, R12, R13 y R14son independientemente hidrógeno. En las modalidades, al menos dos de R1, R2, R4 y R5 son hidrógeno y R3 es -NO2.
En las modalidades, L1 es alquileno sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es R1E-alquileno sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es alquileno C1-C3 sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es R1E-alquileno C1-C3 sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es -CH2- o -CH2CH2-. En las modalidades, R20 es heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R20 es R1E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R20 es heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R20 es R1E-piridilo, tiofenilo o furanilo sustituidos o no sustituidos. En las modalidades, R20 es piridilo, tiofenilo o furanilo. En las modalidades, el compuesto tiene la Fórmula IH:
Figure imgf000050_0002
Figure imgf000051_0001
En las fórmulas IH, IJ e IK, R1, R2, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13 y/o R14son como se describen en la presente descripción. En las modalidades, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno. En las modalidades, R10, R11, R14 son hidrógeno.
En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es heteroarilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno.
En las modalidades, al menos uno de R1, R2, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, uno de R2, R3, R4 y R5 es -NO2. En las modalidades, uno de R2 y R3 es -NO2. En las modalidades, al menos dos de R1, R2, R4 y R5 son hidrógeno; y R3 es -NO2. En las modalidades, R3 es -NO2. En las modalidades, al menos dos de R1, R2, R4 y R5 son hidrógeno; R3 es -NO2. En las modalidades, R1, R4 y R5 son hidrógeno y R2 o R3 es -R2, R4 y R5 son hidrógeno y R3 es -NO2.
De acuerdo con la invención, el com uesto es:
Figure imgf000052_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
Las siguientes modalidades no están de acuerdo con la invención y se presentan únicamente con fines ilustrativos. En las modalidades, cuando R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, R3 es -N(O)m3 y m3 es 1 o 2, entonces R5 no es -NR5BR5C. En las modalidades, cuando R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, R3 es -N(O)m3 y m3 es 2, entonces R5 no es -NR5BR5C. En las modalidades, cuando R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R3 es -NO2, entonces R5 no es -NR5BR5C. En las modalidades, cuando R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R3 es -NO2, entonces R5 no es -NH2. En las modalidades, cuando R20 es fenilo sustituido o no sustituido, al menos dos de R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R3 es -NO2, entonces R5 no es -NH2. En las modalidades, cuando R20 es fenilo sustituido o no sustituido, al menos uno de R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R3 es -NO2, entonces R5 no es -NH2. En las modalidades, cuando R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno y R3 es -NO2, entonces R5 no es -NH2. En las modalidades, cuando R3 es -NO2 y R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, entonces R5 no es -NH2. En las modalidades, cuando R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R3 no es2 y R5 es -NH2, entonces al menos uno de R6, R7, R8 y R9 no es hidrógeno. En las modalidades, cuando R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R3 es -NO2 y R5 es -NR5BR5C, entonces al menos uno de R6, R7, R8 y R9 no es hidrógeno. En las modalidades, cuando R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R3 es -NO2 y R5 es -NH2, entonces al menos dos de R6, R7, R8 y R9 no es hidrógeno. En las modalidades, cuando R20 es fenilo sustituido o no sustituido, R3es -NO2 y R5 es -NR5BR5C, entonces al menos dos de R6, R7, R8 y R9 no es hidrógeno.
En las modalidades, L1 es -CH2-. En las modalidades, R20 es
Figure imgf000053_0001
-piridilo no sustituido, tiofenilo no sustituido. En las modalidades, L1-R20 es
Figure imgf000053_0002
En las modalidades, R1y R4 son hidrógeno. En las modalidades, R2 es hidrógeno o halógeno. En las modalidades, R3 es -NO2, -CN o halógeno. En las modalidades, R5 es hidrógeno, -NO2, o -NH2. En las modalidades, R2 y R3 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos,
Figure imgf000053_0003
En las modalidades, R2-R3 es =N-O-N=, R6 es hidrógeno o halógeno. En las modalidades, R7 es hidrógeno. En las modalidades, R8 es hidrógeno o halógeno. En las modalidades, R9 es hidrógeno, -CH3, o halógeno. En las modalidades, R10 y R11 son hidrógeno o halógeno. En las modalidades, R12, R13y R14 son hidrógeno.
En las modalidades, R20 es
Figure imgf000053_0004
R5 es hidrógeno o -NH2; R3 es -NO2; R6, R7 y R8 son hidrógeno; R9 es hidrógeno o halógeno; R10, R11 R12, R13y R14 son hidrógeno.
En las modalidades, R3 es -NO2 y R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, entonces R5 no es -NH2. En las modalidades, cuando R3 es -NO2 y R5 es -NH2, entonces al menos uno de R6, R7, R8 y R9 no es hidrógeno. En las modalidades, cuando R5 es -NH2 y R3 es -NO2, entonces R9 es halógeno. En las modalidades, cuando R5 es -NH2 y R3 es -NO2, entonces R9 es -F. En las modalidades, cuando R5 es -NH2 y R3 es -NO2, entonces R9 es -Br. En las modalidades, cuando R5 es -NH2 y R3 es -NO2, entonces R9 es -Cl.
En las modalidades, el compuesto es un compuesto descrito en la presente descripción (por ejemplo, en un aspecto, modalidad, ejemplo, tabla, figura, esquema, apéndice o reivindicación).
II. Composiciones farmacéuticas
También se proporcionan en la presente descripción formulaciones farmacéuticas. En las modalidades que se describen, pero no se reivindican, las formulaciones farmacéuticas (por ejemplo, fórmulas I, IA, IB, IC, ID, IE, IF, IG, IH, IJ e IK) incluyen los compuestos descritos anteriormente (incluidas todas sus modalidades) y un excipiente farmacéuticamente aceptable. Se describe, pero no se reivindica, una composición farmacéutica que incluye un compuesto de Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un excipiente farmacéuticamente aceptable:
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Las siguientes modalidades no están de acuerdo con la invención y se presentan únicamente con fines ilustrativos.
En las modalidades, L1 es un enlace, -S-, -N(R15)-, -C(O)N(R15)- o alquileno sustituido o no sustituido, y R20 es heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido o heteroarilo sustituido o no sustituido; o -L1-R20 es alquilo C2-C4 no sustituido. R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, describen en la presente descripción.
En las modalidades, L1 es -CH2-. En las modalidades, R6, R7, R8 y R9 son independientemente hidrógeno; R10, R11,
R12, R13 y R14 son independientemente hidrógeno. En las modalidades, al menos dos de R1, R2, R3, R4, R5 son independientemente hidrógeno. En las modalidades, R1 es hidrógeno, halógeno, -CN, -NO2, -NR1BR1C, NR1BC(O)R1D, -C(O)OR1D o alquilo sustituido o no sustituido; R2 es hidrógeno, halógeno, -CN, -NO2, -NR2BR2C, NR2Bc (o )r2D, -c (o )o R2D o alquilo sustituido o no sustituido; R3 es hidrógeno, halógeno, -CN, -NO2, -NR3BR3C, NR3Bc (o )r3D, -C(O)OR3D o alquilo sustituido o no sustituido; R4 es hidrógeno, halógeno, -CN, -NO2, -NR4BR4C, NR4Bc (o )r4D, -c (o )o R4D o alquilo sustituido o no sustituido; R5 es hidrógeno, halógeno, -CN, -NO2, -NR5BR5C, NR5Bc (o )r5D,, -C(O)OR5D o alquilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R1B, R2B, R3B, R4B, R5B, R1C, R2C,
R3C, R4C, R5C, R1D, R2D, R3D, R4D y R5D son independientemente hidrógeno o metilo. En las modalidades, al menos dos de R1, R2, R4 y R5 son hidrógeno; y R3 es -NO2.
En las modalidades, L1 es alquileno sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es R1E-alquileno sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es alquileno C1-C3 sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es R1E-alquileno C1-C3 sustituido o no sustituido. En las modalidades, L1 es -CH2- o -CH2CH2-. En las modalidades, R20 es heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R20 es R1E-heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R20 es heteroarilo sustituido o no sustituido. En las modalidades, R20 es R1E-piridilo, tiofenilo o furanilo sustituidos o no sustituidos. En las modalidades, R20 es piridilo, tiofenilo o furanilo.
En las modalidades, R6, R7, R8 y R9 son de forma independiente. En las modalidades, cuando L1 es -CH2- y R20 es heteroarilo sustituido o no sustituido, R6, R7, R8 y R9 son independientemente hidrógeno. En las modalidades, al menos dos de R1, R2, R4 y R5 son hidrógeno; y R3 es -NO2.
De acuerdo con la invención, el com uesto se selecciona de:
Figure imgf000055_0001
En las modalidades de las composiciones farmacéuticas, el compuesto, o su sal farmacéuticamente aceptable, se incluye en una cantidad terapéuticamente efectiva.
1. Formulaciones
La composición farmacéutica se puede preparar y administrar en una amplia variedad de formulaciones de dosificación. Los compuestos descritos pueden administrarse por vía oral, rectal o mediante inyección (por ejemplo, por vía intravenosa, intramuscular, intracutánea, subcutánea, intraduodenal o intraperitoneal).
Para preparar composiciones farmacéuticas a partir de los compuestos descritos en la presente descripción, los portadores farmacéuticamente aceptables pueden ser sólidos o líquidos. Las preparaciones en forma sólida incluyen polvos, comprimidos, píldoras, cápsulas, obleas, supositorios, y gránulos dispersables. Un portador sólido puede ser una o más sustancias que también pueden actuar como diluyentes, agentes saborizantes, aglutinantes, conservantes, agentes de desintegración de comprimidos o material de encapsulación.
En polvos, el portador puede ser un sólido finamente dividido en una mezcla con el componente activo finamente dividido. En tabletas, el componente activo se puede mezclar con el portador que tiene las propiedades aglutinantes necesarias en proporciones adecuadas y compactarse en la forma y tamaño deseados.
Los polvos y tabletas preferentemente contienen de 5 % a 70 % del compuesto activo. Los portadores adecuados son carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, azúcar, lactosa, pectina, dextrina, almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, una cera de bajo punto de fusión, manteca de cacao, y similares. El término "preparación" pretende incluir la formulación del compuesto activo con el material encapsulado como un portador que proporciona una cápsula en la cual el componente activo con o sin otros portadores, se rodea por un portador, que está por lo tanto en asociación con él. De manera similar, se incluyen obleas y pastillas. Los comprimidos, polvos, cápsulas, píldoras, obleas, y pastillas pueden usarse como formas de dosificación sólidas adecuadas para la administración oral.
Para preparar los supositorios, una cera de punto de fusión bajo, tal como una mezcla de glicéridos de ácidos grasos o manteca de cacao, se funde primero y el componente activo se dispersa homogéneamente en ella, por agitación. La mezcla homogénea fundida se vierte después en moldes de tamaños convenientes, se permite que se enfríe, y de esta manera que solidifique.
Las preparaciones en forma líquida incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones, por ejemplo, agua o soluciones de agua/propilenglicol. Para la inyección parenteral, las preparaciones líquidas se pueden formular en solución en acuosa de polietilenglicol.
Las soluciones acuosas adecuadas para uso oral se pueden preparar por disolución del componente activo en agua y añadir agentes colorantes, saborizantes, estabilizadores, y espesantes adecuados como se desee. Se pueden preparar suspensiones acuosas adecuadas para uso oral al dispersar el componente activo finamente dividido en agua con material viscoso, tal como gomas naturales o sintéticas, resinas, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio y otros agentes de suspensión bien conocidos.
También se incluyen las preparaciones en forma sólida que se pretende se conviertan, brevemente antes del uso, en preparaciones de forma líquida para la administración oral. Tales formas líquidas incluyen soluciones, suspensiones, y emulsiones. Estas preparaciones pueden contener, en adición al componente activo, colorantes, saborizantes, estabilizadores, amortiguadores, endulzantes artificiales y naturales, dispersantes, espesantes, agentes solubilizadores, y similares.
La preparación farmacéutica es preferentemente en forma de dosificación unitaria. En tal forma la preparación se subdivide en dosis unitarias que contienen cantidades apropiadas del componente activo. La forma de dosificación unitaria puede ser una preparación empaquetada, en donde el empaque contiene cantidades discretas de la preparación, tales como comprimidos, cápsulas, y polvos empacados en viales o ampollas. También, la forma de dosificación unitaria puede ser una cápsula, comprimido, oblea, o pastilla, o puede ser el número apropiado de cualquiera de estas en la forma empaquetada.
La cantidad de componente activo en una preparación de dosis unitaria se puede variar o ajustar de 0,1 mg a 10000 mg de acuerdo con la aplicación particular y la potencia del componente activo. La composición puede, si se desea, contener también otros agentes terapéuticos compatibles.
Algunos compuestos pueden tener una solubilidad limitada en agua y, por lo tanto, pueden requerir un surfactante u otro cosolvente apropiado en la composición. Dichos cosolventes incluyen: Polisorbato 20, 60 y 80; Pluronic F-68, F-84 y P-103; ciclodextrina; y aceite de ricino polioxil 35. Dichos cosolventes se emplean típicamente a un nivel entre aproximadamente el 0,01 % y aproximadamente el 2 % en peso. Puede ser conveniente una viscosidad mayor que la de las soluciones acuosas simples para disminuir la variabilidad en la dosificación de las formulaciones, para disminuir la separación física de los componentes de una suspensión o emulsión de la formulación y/o de cualquier otra manera para mejorar la formulación. Tales agentes viscosificantes incluyen, por ejemplo, alcohol polivinílico, polivinilo pirrolidona, metil celulosa, hidroxi propil metilcelulosa, hidroxietil celulosa, carboximetil celulosa, hidroxi propil celulosa, sulfato de condroitina y sus sales, ácido hialurónico y sus sales, y combinaciones de los anteriores. Tales agentes se emplean típicamente a un nivel entre aproximadamente 0,01 % y aproximadamente 2 % en peso. Las composiciones farmacéuticas pueden incluir adicionalmente componentes para proporcionar liberación sostenida y/o comodidad. Dichos componentes incluyen polímeros mucomiméticos aniónicos de alto peso molecular, polisacáridos gelificantes y sustratos portadores de fármacos finamente divididos. Estos componentes se discuten en mayor detalle en las patentes de Estados Unidos Núms. 4,911,920; 5,403,841; 5,212,162; y 4,861,760.
La composición farmacéutica puede estar destinada a uso intravenoso. El excipiente farmacéuticamente aceptable puede incluir tampones para ajustar el pH a un intervalo conveniente para uso intravenoso. Se conocen muchos tampones que incluyen sales de ácidos inorgánicos tales como fosfato, borato y sulfato.
2. Dosis efectivas
La composición farmacéutica puede incluir composiciones en donde el ingrediente activo está contenido en una cantidad terapéuticamente efectiva, es decir, en una cantidad efectiva para conseguir el fin previsto. La cantidad efectiva real para una aplicación particular dependerá, entre otros, de la afección a tratar.
La dosificación y la frecuencia (dosis únicas o múltiples) de los compuestos administrados pueden variar en dependencia de una variedad de factores, incluidos la vía de administración; tamaño, edad, sexo, salud, peso corporal, índice de masa corporal y dieta del receptor; naturaleza y extensión de los síntomas de la enfermedad que se está tratando; presencia de otras enfermedades u otros problemas relacionados con la salud; tipo de tratamiento concurrente; y complicaciones de cualquier enfermedad o régimen de tratamiento. Pueden usarse otros regímenes o agentes terapéuticos junto con los métodos y compuestos descritos en la presente descripción.
Las cantidades terapéuticamente efectivas para usar en humanos pueden determinarse a partir de modelos animales. Por ejemplo, una dosis para humanos se puede formular para lograr una concentración que se ha encontrado que es efectiva en animales. La dosificación en humanos se puede ajustar al monitorear la respuesta del estreñimiento u ojo seco al tratamiento y ajustando la dosificación hacia arriba o hacia abajo, como se describió anteriormente.
Las dosis pueden variar en dependencia de los requisitos del sujeto y del compuesto que se emplee. La dosis administrada a un sujeto, en el contexto de las composiciones farmacéuticas presentadas en la presente descripción, debería ser suficiente para lograr una respuesta terapéutica beneficiosa en el sujeto a lo largo del tiempo. El tamaño de la dosis también se determinará mediante la existencia, naturaleza, y magnitud de cualquier efecto secundario adverso. Generalmente, el tratamiento se inicia con dosis más pequeñas, que son menores a la dosis óptima del compuesto. A partir de entonces, la dosificación se aumenta mediante incrementos pequeños hasta que se alcanza el efecto óptimo bajo las circunstancias.
Las cantidades de dosificación y los intervalos se pueden ajustar individualmente para proporcionar niveles de los compuestos administrados efectivos para la indicación clínica particular que se está tratando. Esto proporcionará un régimen terapéutico que es acorde con la gravedad del estado de la enfermedad del individuo.
Mediante la utilización de las enseñanzas proporcionadas en la presente descripción, se puede planificar un régimen de tratamiento profiláctico o terapéutico efectivo que no cause una toxicidad sustancial y, sin embargo, sea totalmente efectivo para tratar los síntomas clínicos demostrados por el paciente en particular. Esta planificación debe implicar la elección cuidadosa del compuesto activo al considerar factores como la potencia del compuesto, la biodisponibilidad relativa, el peso corporal del paciente, la presencia y gravedad de los efectos secundarios adversos, el modo preferente de administración y el perfil de toxicidad del agente seleccionado.
3. Toxicidad
La relación entre la toxicidad y el efecto terapéutico de un compuesto en particular es su índice terapéutico y se puede expresar como la relación entre la DL 50 (la cantidad de compuesto letal en el 50 % de la población) y DE50 (la cantidad de compuesto efectiva en el 50 % de la población). Se prefieren los compuestos que muestran elevados índices terapéuticos. Los datos del índice terapéutico obtenidos a partir de ensayos de cultivo celular y/o estudios en animales pueden usarse para formular un intervalo de dosis para uso en humanos. La dosificación de tales compuestos se encuentra preferentemente dentro de un intervalo de concentraciones plasmáticas que incluyen la DE50 con poca o ninguna toxicidad. La dosificación puede variar dentro de ese intervalo en dependencia de la forma de dosificación que se emplea, y de la vía de administración que se utiliza. Ver, por ejemplo, Fingl y otros, en: THE PHARMACOLOGICAL BASIS OF THERAPEUTICS, Ch.1, p.l, 1975. El médico individual puede elegir la formulación exacta, vía de administración y dosificación en vista de la condición del paciente y el método particular en el que se usa el compuesto.
Cuando se necesita o se desea la aplicación parenteral, las mezclas particularmente adecuadas para los compuestos incluidos en la composición farmacéutica pueden ser soluciones estériles inyectables, soluciones oleosas o acuosas, así como también suspensiones, emulsiones o implantes, incluidos los supositorios. En particular, los portadores para administración parenteral incluyen soluciones acuosas de dextrosa, solución salina, agua pura, etanol, glicerol, propilenglicol, aceite de cacahuete, aceite de sésamo, polímeros de bloques de polioxietileno y similares. Las ampollas son dosificaciones unitarias convenientes. Las mezclas farmacéuticas adecuadas para su uso en las composiciones farmacéuticas presentadas en la presente descripción pueden incluir las descritas, por ejemplo, en Pharmaceutical Sciences (17th Ed., Mack Pub. Co., Easton, PA) y WO 96/05309.
III. Métodos de activación
En la presente descripción se describen, además, pero no se reivindican, métodos para activar el regulador transmembrana de fibrosis quística (CFTR). En un aspecto, el método incluye poner en contacto CFTR con una cantidad efectiva de un compuesto de Fórmula I que puede activar CFTR:
Figure imgf000058_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En compuestos de Fórmula I, L1 es un enlace, -O-, -S-, -N(R15)-, -C(O)N(R15)-, -C(O)-, alquileno sustituido o no sustituido o heteroalquileno sustituido o no sustituido, y R20 es cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido o heteroarilo sustituido o no sustituido; o -L1-R20 es alquilo sustituido o no sustituido. R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 y R15 son como se describen en la presente descripción. El contacto puede realizarse in vitro. El contacto puede realizarse in vivo.
IV. Métodos de tratamiento
En la presente descripción se describen, además, pero no se reivindican, métodos para tratar una enfermedad o trastorno en un sujeto que lo necesite mediante la administración de una cantidad efectiva de un compuesto de Fórmula I:
Figure imgf000058_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En compuestos de Fórmula I, L1 es un enlace, -O-, -S-, -NR15-, -C(O)NR15-, -C(O)-, alquileno sustituido o no sustituido o heteroalquileno sustituido o no sustituido, y R20 es cicloalquilo sustituido o no sustituido, heterocicloalquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido o heteroarilo sustituido o no sustituido; o -L1-R20 es alquilo sustituido o no sustituido. R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 y R15 son como se describen en la presente descripción.
Se describe, pero no se reivindica, un método para tratar el estreñimiento en un sujeto que lo necesite, incluyendo el método administrar al sujeto una cantidad efectiva de un compuesto como se describe en la presente descripción. En otro aspecto, es un método para tratar un trastorno de ojo seco en un sujeto que lo necesite, incluyendo el método administrar al sujeto una cantidad efectiva de un compuesto como se describe en la presente descripción. En otro aspecto más, es un método para aumentar el lagrimeo en un sujeto que lo necesite, incluyendo el método administrar al sujeto una cantidad efectiva de un compuesto como se describe en la presente descripción. El estreñimiento puede ser estreñimiento inducido por opioides. El estreñimiento puede ser estreñimiento idiopático crónico. El estreñimiento puede ser síndrome del intestino irritable con predominio de estreñimiento. El trastorno del ojo seco puede ser un trastorno de la glándula lagrimal.
También se describe, pero no se reivindica, un método para tratar una enfermedad colestásica del hígado en un sujeto que lo necesite, incluida la administración al sujeto de una cantidad efectiva de un compuesto como se describe en la presente descripción. En otro aspecto, se proporciona un método para tratar una enfermedad o trastorno pulmonar en un sujeto que lo necesite, incluida la administración al sujeto de una cantidad efectiva de un compuesto como se describe en la presente descripción. En las modalidades, la enfermedad o trastorno pulmonar es una enfermedad pulmonar obstructiva crónica (por ejemplo, bronquitis, asma, disfunción pulmonar inducida por el humo del cigarrillo).
V. Otros Aspectos
Para los propósitos de esta sección, el término "alquilo" se refiere e incluye estructuras de hidrocarburos univalentes lineales o ramificadas y sus combinaciones, que pueden estar completamente saturadas, mono o poliinsaturadas, con el número de átomos de carbono designado (es decir, C1-C10 significa de uno a diez carbonos). Los grupos alquilo particulares son aquellos que tienen de 1 a 20 átomos de carbono (un "alquilo C1-C20"). Los grupos alquilo más particulares son aquellos que tienen de 1 a 8 átomos de carbono (un "alquilo CrCa"), de 3 a 8 átomos de carbono (un "alquilo C3-C8"), de 1 a 6 átomos de carbono (un "alquilo C1-C6"), de 1 a 5 átomos de carbono (un "alquilo C1-C5"), o de 1 a 4 átomos de carbono (un "alquilo C1-C4"). Los ejemplos de radicales de hidrocarburos saturados incluyen, entre otros, grupos como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, t-butilo, isobutilo, sec-butilo, homólogos e isómeros de, por ejemplo, n-pentilo, n-hexilo, n-heptilo, n-octilo y similares. Un grupo alquilo insaturado es uno que tiene uno o más enlaces dobles o triples. Los ejemplos de grupos alquilo insaturados incluyen, entre otros, vinilo, 2-propenilo, crotilo, 2-isopentenilo, 2-(butadienilo), 2,4-pentadienilo, 3-(1,4-pentadienilo), etinilo, 1 -y 3-propinilo, 3-butinilo y los homólogos e isómeros superiores. Ejemplos de alquilo C1-C4 saturado incluyen metilo (CH3), etilo (C2H5), propilo (C3H7) y butilo (C4H9). Ejemplos de alquilo C1-C6 saturado incluyen metilo (CH3), etilo (C2H5), propilo (C3H7), butilo (C4H9), pentilo (C5H11) y hexilo (C6H13).
Un grupo alquilo puede estar sustituido (es decir, uno o más átomos de hidrógeno se reemplazan con radicales univalentes o divalentes) con uno o más sustituyentes, tales como los radicales descritos en la presente descripción, por ejemplo, fluoro, cloro, bromo, yodo, hidroxilo, alcoxi, tio, amino, acilamino, alcoxicarbonilamido, carboxilo, acilo, alcoxicarbonilo, sulfonilo, cicloalquilo, arilo, heterociclilo y heteroarilo, y otros grupos funcionales conocidos en la técnica. Un "perfluoroalquilo" se refiere a un grupo alquilo en el que cada átomo de hidrógeno se reemplaza con un átomo de flúor. Ejemplos de perfluoroalquilo C1-C6 saturado incluyen trifluorometilo (CF3), pentafluoroetilo (C2F5), heptafluoropropilo (C3F7), nonafluorobutilo (C4F9), undecafluoropentilo (C5F11) y tridecafluorohexilo (C6F13).
Para los propósitos de esta sección, el término "cicloalquilo" se refiere e incluye estructuras de hidrocarburos univalentes cíclicos, que pueden estar completamente saturados, mono o poliinsaturados, que tienen el número de átomos de carbono designado (es decir, C1-C10 significa de uno a diez carbonos). El cicloalquilo puede constar de un anillo, como el ciclohexilo, o de varios anillos, como los adamantinos, pero excluye los grupos arilo. Un cicloalquilo que comprende más de un anillo puede estar fusionado, en forma de espiro o puenteado, o sus combinaciones. Un cicloalquilo preferido es un hidrocarburo cíclico que tiene de 3 a 13 átomos de carbono anulares. Un cicloalquilo más preferido es un hidrocarburo cíclico que tiene de 3 a 8 átomos de carbono anulares (un "cicloalquilo C3-C8"). Los ejemplos de cicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, 1-ciclohexenilo, 3-ciclohexenilo, cicloheptilo, norbornilo y similares.
Para los fines de esta sección, el término "heterociclo" o "heterociclilo" se refiere a un grupo no aromático saturado o insaturado que tiene de 1 a 10 átomos de carbono anulares y de 1 a 4 heteroátomos anulares, como nitrógeno, azufre u oxígeno, y similares, en donde los átomos de nitrógeno y azufre están opcionalmente oxidados, y los átomos de nitrógeno están opcionalmente cuaternizados. Un grupo heterociclilo puede tener un solo anillo o múltiples anillos condensados, pero excluye los grupos heteroarilo. Un heterociclo que comprende más de un anillo puede estar fusionado, en forma espiro o puenteado, o sus combinaciones. En los sistemas de anillos fusionados, uno o más de los anillos fusionados pueden ser arilo o heteroarilo. Los ejemplos de grupos heterociclilo incluyen, entre otros, tetrahidropiranilo, dihidropiranilo, piperidinilo, piperazinilo, pirrolidinilo, tiazolinilo, tiazolidinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, 2,3-dihidrobenzo[b]tiofen-2-ilo, 4-amino-2-oxopirimidin-1(2H)-ilo, y similares. Para los fines de esta sección, el término "arilo" se refiere e incluye sustituyentes de hidrocarburos aromáticos poliinsaturados. El arilo puede contener anillos fusionados adicionales (por ejemplo, de 1 a 3 anillos), incluidos anillos de arilo, heteroarilo, cicloalquilo y/o heterociclilo condensados adicionales. En una variación, el grupo arilo contiene de 6 a 14 átomos de carbono anulares. Los ejemplos de grupos arilo incluyen, pero no se limitan a, fenilo, naftilo, bifenilo y similares.
Para los fines de esta sección, el término "heteroarilo" se refiere e incluye grupos cíclicos aromáticos insaturados que tienen de 1 a 10 átomos de carbono anulares y al menos un heteroátomo anular, incluidos, entre otros, heteroátomos como nitrógeno, oxígeno y azufre, en donde los átomos de nitrógeno y azufre se oxidan opcionalmente, y los átomos de nitrógeno se cuaternizan opcionalmente. Un grupo heteroarilo se puede unir al resto de la molécula en un carbono anular o en un heteroátomo anular. El heteroarilo puede contener anillos condensados adicionales (por ejemplo, de 1 a 3 anillos), incluidos anillos arilo, heteroarilo, cicloalquilo y/o heterociclilo condensados adicionales. Los ejemplos de grupos heteroarilo incluyen, pero no se limitan a, piridilo, pirimidilo, tiofenilo, furanilo, tiazolilo y similares.
Los grupos cicloalquilo, arilo, heterociclilo y heteroarilo a los que se hace referencia dentro de esta sección también pueden estar sustituidos con uno o más sustituyentes, como los radicales detallados en la presente descripción, por ejemplo, fluoro, cloro, bromo, yodo, hidroxilo, alcoxi, tio, amino, acilamino, alcoxicarbonilamido, carboxilo, acilo, alcoxicarbonilo, sulfonilo, alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclilo y heteroarilo, y otros grupos funcionales conocidos en la técnica.
Para los fines de esta sección, el término "portador farmacéuticamente aceptable" se refiere a un ingrediente de una formulación farmacéutica, que no sea un ingrediente activo, que no sea tóxico para un sujeto. Un portador farmacéuticamente aceptable incluye, pero no se limita a, un tampón, excipiente, estabilizador o conservante, como los conocidos en la técnica, por ejemplo, descritos en Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980).
Como se usa en esta sección, "tratamiento" o "tratar" es un enfoque para obtener resultados beneficiosos o deseados que incluyen preferentemente resultados clínicos. Por ejemplo, los resultados clínicos beneficiosos o deseados incluyen, pero no se limitan a, uno o más de los siguientes: disminución de los síntomas resultantes de la enfermedad, aumentar la calidad de vida de quienes padecen la enfermedad, disminuir la dosis de otros medicamentos necesarios para tratar la enfermedad, retrasar la progresión de la enfermedad y/o prolongar la supervivencia de los individuos.
Tal como se usa en esta sección, la frase "retrasar el desarrollo de una enfermedad" significa diferir, dificultar, desacelerar, retardar, estabilizar y/o posponer el desarrollo de la enfermedad (como son estreñimiento, ojo seco, enfermedad o trastorno pulmonar, enfermedad pulmonar o enfermedad hepática). Este retraso puede variar en la duración del tiempo, en dependencia de la historia de la enfermedad y/o del individuo que se está tratando. Como es evidente para un experto en la técnica, un retraso suficiente o significativo puede, en efecto, abarcar la prevención, en el sentido de que el individuo no desarrolle la enfermedad.
Tal como se utiliza en esta sección, una "dosis efectiva" o "cantidad efectiva" de fármaco, compuesto o composición farmacéutica es una cantidad suficiente para lograr resultados beneficiosos o deseados. Para uso profiláctico, los resultados beneficiosos o deseados incluyen resultados como eliminar o reducir el riesgo, disminuir la gravedad o retrasar la aparición de la enfermedad, incluidos los síntomas bioquímicos, histológicos y/o conductuales de la enfermedad, sus complicaciones y los fenotipos patológicos intermedios que se presentan durante el desarrollo de la enfermedad. Para uso terapéutico, los resultados beneficiosos o deseados incluyen resultados clínicos como la disminución de uno o más síntomas resultantes de la enfermedad, el aumento de la calidad de vida de quienes padecen la enfermedad, la disminución de la dosis de otros medicamentos necesarios para tratar la enfermedad, la mejora del efecto de otra medicación tal como a través de la focalización, para retrasar la progresión de la enfermedad y/o prolongar la supervivencia. Una dosificación efectiva se puede administrar en una o más administraciones. Para los fines de esta sección, una dosificación efectiva de un fármaco, compuesto o composición farmacéutica es una cantidad suficiente para lograr un tratamiento profiláctico o terapéutico, ya sea directa o indirectamente. Como se entiende en el contexto clínico, una dosificación efectiva de un fármaco, compuesto o composición farmacéutica puede lograrse o no junto con otro fármaco, compuesto o composición farmacéutica. Por lo tanto, se puede considerar una "dosis efectiva" en el contexto de la administración de uno o más agentes terapéuticos, y se puede considerar que un solo agente se administra en una cantidad efectiva si, junto con uno o más agentes, se puede lograr un resultado conveniente.
Como se usa en esta sección, "junto con" se refiere a la administración de una modalidad de tratamiento además de otra modalidad de tratamiento. Como tal, "junto con" se refiere a la administración de una modalidad de tratamiento antes, durante o después de la administración de la otra modalidad de tratamiento al individuo.
A menos que se indique claramente de cualquier otra manera, para los fines de esta sección, el término "individuo" como se usa en la presente descripción se refiere a un mamífero, incluidos, entre otros, bovinos, equinos, felinos, conejos, caninos, roedores o primates (por ejemplo, humanos). En algunas modalidades, un individuo es un ser humano. En algunas modalidades, un individuo es un primate no humano tal como chimpancés y otras especies de simios y monos. En algunas modalidades, un individuo es un animal de granja como vacas, caballos, ovejas, cabras y cerdos; mascotas como conejos, perros y gatos; animales de laboratorio, incluidos roedores, como ratas, ratones y cobayos; y similares. Los aspectos descritos en esta sección pueden tener utilidad tanto en medicina humana como en el contexto veterinario.
Como se usa en la presente descripción, las formas singulares "uno", "una", "el/la" incluyen los referentes en plural a menos que el contexto claramente lo indique de cualquier otra manera.
Se entiende que el aspecto y las variaciones de los aspectos descritos en esta sección incluyen aspectos y variaciones "que consisten" y/o "que consisten esencialmente en".
La terapia del estreñimiento incluye laxantes que aumentan el volumen de las heces, tales como la fibra soluble; crean una carga osmótica, como el polietilenglicol; o estimulan la contracción intestinal, como los difenilmetanos. También hay laxantes de superficie que ablandan las heces como el docusato de sodio y probióticos como el Lactobacillus paracasei [3]. El fármaco linaclotida, aprobado por la FDA, un péptido agonista del receptor de guanilato ciclasa C, actúa inhibiendo el dolor visceral, estimulando la motilidad intestinal y aumentando la secreción intestinal [4, 5]. Se cree que un segundo fármaco aprobado, la lubiprostona, un análogo de la prostaglandina E, activa un supuesto canal ClC-2 de enterocitos [6], aunque los datos del mecanismo son menos claros. A pesar del amplio intervalo de opciones terapéuticas, existe una necesidad continua de fármacos seguros y efectivos para tratar el estreñimiento.
Sin pretender ceñirse a la teoría, la activación del canal de cloruro del regulador transmembrana de la fibrosis quística (CFTR) impulsa la secreción del fluido intestinal, lo que mantiene la lubricación del contenido luminal. Se plantea la hipótesis de que la activación directa de CFTR puede causar la secreción de fluidos y invertir la deshidratación excesiva de las heces que se encuentra en el estreñimiento.
La secreción de fluido intestinal implica activar la secreción de Cl- a través del epitelio del enterocito a través del cotransportador Na+/ K+/ 2Cl-(NKCC1) de membrana basolateral y el canal Cl- del regulador transmembrana de fibrosis quística de la membrana luminal (CFTR) y el canal de Cl- activado por Ca2+ (CaCC). Las fuerzas electroquímicas y osmóticas creadas por la secreción de Cl- impulsan la secreción de Na+ y agua [7]. En el cólera y la diarrea del viajero, CFTR es fuertemente activado por enterotoxinas bacterianas a través de la elevación de nucleótidos cíclicos intracelulares [8, 9]. CFTR es un objetivo atractivo para aumentar la secreción de fluidos intestinales en el estreñimiento, ya que se expresa fuertemente en todo el intestino y su activación aumenta fuertemente la secreción de fluidos intestinales. Es poco probable que un activador que se dirija directamente a CFTR produzca la secreción de fluido intestinal masiva e incontrolada que se observa en el cólera porque las enterotoxinas en el cólera actúan de manera irreversible para producir una elevación sostenida del cAMP citoplasmático, que no solo activa CFTR sino también los canales de K+ basolaterales, que aumentan la fuerza impulsora electroquímica para la secreción de Cl-; las enterotoxinas del cólera también inhiben el intercambiador de Na+/H+ luminal NHE3 involucrado en la absorción de fluidos intestinales [10, 11].
Motivados por estas consideraciones y la necesidad continua de una terapia farmacológica segura y efectiva para el estreñimiento, se informa en la presente descripción sobre la identificación y caracterización de moléculas pequeñas activadoras dirigidas a CFTR de potencia nanomolar con acción prosecretora en el intestino y eficacia en el estreñimiento.
Mediante el cribado de alto rendimiento de un activador de CFTR de molécula pequeña de afinidad nanomolar, se identificó CFTRact-J027 y se demostró que tiene acción prosecretora en el intestino del ratón y eficacia para normalizar la producción de heces en un modelo de estreñimiento inducido por loperamida en ratones. El estreñimiento sigue siendo un problema clínico importante en entornos ambulatorios y hospitalizados. El estreñimiento inducido por opioides es un efecto adverso común en pacientes después de una cirugía, sometidos a quimioterapia y con dolor crónico.
La activación dirigida a CFTR se suma a los diversos mecanismos de acción de las terapias contra el estreñimiento. Es notable que la activación pura de CFTR es capaz de producir una corriente robusta de Cl- y una respuesta de secreción de fluidos en el intestino, sin causar elevación global de la concentración de nucleótidos cíclicos, estimulación directa de la contractilidad intestinal, ni alteración de la absorción de fluidos intestinales. La linaclotida es un péptido agonista del receptor de guanilato ciclasa C que aumenta la concentración de GMPc en las células intestinales. La linaclotida inhibe la activación de las neuronas sensoriales colónicas y activa las neuronas motoras, lo que reduce el dolor y aumenta la contracción del músculo liso intestinal; además, la elevación de la concentración de GMPc en los enterocitos puede activar CFTR y tener una acción prosecretora [4, 5]. Se cree que un segundo fármaco aprobado, el análogo de prostaglandina E lubiprostona, activa un supuesto canal ClC-2 de enterocitos [6], aunque los datos del mecanismo son menos claros. En comparación con estos fármacos, un activador de CFTR puro tiene un mecanismo de acción único y bien validado y no produce una respuesta global de nucleótidos cíclicos en múltiples tipos de células. Es de destacar que la linaclotida y la lubiprostona mostraron una eficacia limitada en los ensayos clínicos. La linaclotida fue efectiva en ~20 % de los pacientes con estreñimiento crónico, de los cuales ~5 % también respondieron al placebo [15], y la lubiprostona fue efectiva en ~13 % de los pacientes con IBS-C, de los cuales ~7 % respondieron al placebo [16]. Basado en nuestros datos de ratones que muestran una eficacia sustancialmente mayor de CFTRact-J027 en comparación con las dosis supramáximas de linaclotida o lubiprostona, especulamos que los activadores de CFTR pueden tener una mayor eficacia en los ensayos clínicos.
CFTRact-J027 es más potente para la activación de CFTR de tipo salvaje que VX-770 (ivacaftor), el fármaco aprobado por la FDA para el tratamiento de la fibrosis quística (CF) causada por ciertas mutaciones de activación de CFTR. En células FRT que expresan CFTR de tipo salvaje, la medición de corriente de cortocircuito mostró una activación casi completa de CFTR por CFTRact-J027 a 3 pM, mientras que VX-770 activó CFTR al máximo solo en un 15 %. Sin embargo, CFTRact-J027 fue sustancialmente menos potente que ivacaftor como "potenciador" de la activación de los canales de cloruro defectuosos de la mutación más común causante de CF, AF508, lo cual no es inesperado, ya que la eficacia del potenciador en la CF es específica de la mutación. Además de su posible utilidad terapéutica para el estreñimiento, un activador de molécula pequeña de CFTR de tipo salvaje puede ser útil para el tratamiento de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica y la bronquitis, el asma, la disfunción pulmonar inducida por el humo del cigarrillo, el ojo seco y la enfermedad hepática colestásica [17-19].
Las quinoxalinonas sustituidas se informaron como antagonistas selectivos de la proteína 1 de resistencia a múltiples fármacos del transportador de salida de membrana [20]. También se ha informado que las quinoxalinonas muestran actividad antidiabética al estimular la secreción de insulina en las células INS-1 pancreáticas [21] y actividad inhibitoria contra las serina proteasas para la terapia potencial de trastornos trombóticos [22]. Recientemente, se ha informado que las quinoxalinonas inhiben la aldosa reductasa [23]. Estos informes sugieren que el armazón de quinoxalinona tiene propiedades similares a las de un fármaco. Sintéticamente, la quinoxalinona se puede preparar en una a cuatro etapas a partir de materiales de partida disponibles comercialmente [24], lo que permite una síntesis sencilla de análogos específicos.
Además de las acciones fuera del objetivo específicas del compuesto, el perfil de efectos secundarios potenciales de un activador de CFTR podría incluir actividad prosecretora en las vías respiratorias/pulmones y varios epitelios glandulares y de otro tipo. Los efectos fuera del objetivo para la terapia del estreñimiento podrían limitarse mediante la administración oral de un activador de CFTR con absorción intestinal limitada y/o eliminación sistémica rápida para minimizar la exposición sistémica. Cuando CFTRact-J027 se administró por vía oral en una dosis alta (10 mg/kg) mostró una biodisponibilidad muy baja con niveles en sangre muy por debajo de la EC50 para la activación de CFTR, que puede deberse al efecto de primer paso como lo demuestra su rápido metabolismo in vitro en los microsomas hepáticos. CFTRact-J027 no mostró una citotoxicidad in vitro significativa a una concentración de 25 jM, >100 veces mayor que su EC50 para la activación de CFTR, o toxicidad in vivo en ratones en un estudio de 7 días a una dosis eficaz máxima que normalizó la producción de heces en el modelo de loperamida de estreñimiento. La acción fuera del objetivo potencialmente más significativa, la estimulación de la secreción de fluidos de los pulmones/vías respiratorias, no se observó como lo demuestra el contenido normal de agua en los pulmones en los ratones tratados durante 7 días. Estos estudios de toxicidad limitada ofrecen una prueba de concepto para la aplicación de un activador de CFTR en el estreñimiento.
En resumen, los datos presentados en la presente descripción demuestran la acción prosecretora de un activador de CFTR en intestino de ratón para su uso en el tratamiento de varios tipos de estreñimiento, que podrían incluir estreñimiento inducido por opioides, estreñimiento idiopático crónico y síndrome del intestino irritable con predominio de estreñimiento.
Los trastornos del ojo seco, incluido el síndrome de Sjogren, constituyen un problema común en la población que envejece con opciones terapéuticas efectivas limitadas disponibles. El canal de Cl- activado por cAMP del CFTR (regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística) es un importante canal de cloruro prosecretor en la superficie ocular. Se investigó si los compuestos que se dirigen a CFTR pueden corregir la película lagrimal anormal en el ojo seco. Se evaluaron activadores de molécula pequeña de CFTR de tipo salvaje humano identificados mediante cribado de alto rendimiento en cultivos celulares y ensayos in vivo para seleccionar compuestos que estimulen la secreción de fluidos impulsada por Cl- a través de la superficie ocular en ratones. Un aminofenil-1,3,5-triazina, CFTRact-K089, activó completamente CFTR en cultivos celulares con EC50 ~250 nM y produjo una hiperpolarización de ~8,5 mV en la diferencia de potencial de la superficie ocular. Cuando se administró por vía tópica, CFTRact-K089 duplicó la secreción lagrimal basal durante cuatro horas y no tuvo efecto en ratones CF. CFTRact-K089 mostró una biodisponibilidad sostenida en la película lagrimal sin absorción sistémica detectable. En un modelo en ratón de ojo seco con deficiencia acuosa producido por la escisión de la glándula lagrimal, la administración tópica de 0,1 nmol de CFTRact-K089 tres veces al día restauró la secreción lagrimal a los niveles basales y evitó por completo la alteración del epitelio corneal observada en los controles tratados con vehículo. Los datos presentados en la presente descripción demuestran la utilidad potencial de los activadores dirigidos a CFTR como un nuevo tratamiento prosecretor para el ojo seco.
El noventa y cuatro por ciento de los oftalmólogos encuestados creen que se necesitan tratamientos adicionales para el ojo seco de moderado a severo (7).
La superficie ocular es una colección de tejidos epiteliales y glandulares anatómicamente continuos que están unidos funcionalmente para mantener la película lagrimal (8). Si bien el lagrimeo contribuye con la mayor parte del lagrimeo reflejo, la córnea y la conjuntiva regulan el volumen y la composición de las lágrimas basales. Los principales determinantes del movimiento del agua a través de la superficie ocular hacia la película lagrimal incluyen la secreción de cloruro (Cl-) apical a través de transportadores Cl- dependientes de cAMP y calcio (Ca2+) y la absorción de sodio (Na+) en gran medida a través del canal de Na+ epitelial (ENaC).
Con respecto a los candidatos pro-secretores para la terapia del ojo seco, un inhibidor de ENaC, P321, ha entrado recientemente en estudios de fase 1/2 (9). Diquafosol, un análogo de UTP que se dirige a los receptores P2Y2 epiteliales de superficie y estimula la secreción de Cl- y de mucina por señalización de Ca2+ (10), está aprobado para el ojo seco en Japón (11, 12) pero falló en los ensayos de fase III en los Estados Unidos.
El regulador de conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR) es un canal Cl- activado por cAMP expresado en algunas células epiteliales secretoras, incluidas las de la córnea y la conjuntiva (14-16). Encontramos una capacidad sustancial para activar el Cl- facilitado por CFTR en la superficie ocular en ratones (21, 22), como se mostró subsecuentemente en la conjuntiva de rata (23), lo que proporciona una base racional para la investigación de los activadores de CFTR como una estrategia prosecretora para el ojo seco. El único activador de CFTR clínicamente aprobado, VX-770 (ivacaftor), está indicado para potenciar la activación del canal de ciertos mutantes de CFTR que causan CF, pero solo activa débilmente el CFTR de tipo salvaje (24, 25).
Se evaluaron nuevos activadores de molécula pequeña de CFTR de tipo salvaje identificados mediante cribado de alto rendimiento como terapia tópica potencial para el ojo seco para demostrar la eficacia de los activadores de CFTR recientemente identificados en un modelo de ratón con ojo seco.
Se investigó la utilidad potencial de los activadores de molécula pequeña de CFTR para la terapia del ojo seco. Después de varias fallas en desarrollos previos, el ojo seco sigue siendo una necesidad insatisfecha en la enfermedad ocular. Se planteó la hipótesis de que los compuestos prosecretores dirigidos a CFTR podrían normalizar el volumen de la película lagrimal y las propiedades de la superficie ocular en el ojo seco (21, 22). En los trastornos del ojo seco, la hiperosmolaridad de la película lagrimal estimula la señalización proinflamatoria, la secreción de citocinas y metaloproteinasas y la alteración de la integridad de las células epiteliales de la córnea (35­ 38). Al minimizar la hiperosmolaridad de la película lagrimal, se prevé que la activación de CFTR prevenga estos cambios posteriores en la superficie ocular.
Los activadores de CFTR de molécula pequeña se identificaron mediante un cribado de alto rendimiento que produjo una secreción sostenida de fluido acuoso impulsada por C- a través de la superficie ocular por un mecanismo que involucra la activación directa de CFTR en lugar de la señalización de cAMP anterior. La justificación para elegir compuestos que activan CFTR directamente fue minimizar los posibles efectos fuera del objetivo de la estimulación generalizada de cAMP y reducir la posibilidad de taquifilaxia para los compuestos que se dirigen a los receptores de señalización. Estos compuestos tenían una EC50 nanomolar baja para la activación de CFTR humano in vitro y produjeron una activación completa a concentraciones más altas. Se demostraron en ratones grandes hiperpolarizaciones de PD dependientes de CFTR e hipersecreción lagrimal. Las actividades sustanciales de los compuestos en ratones y humanos facilitarán la traslación de datos a humanos.
Se encontró que CFTRact-K089 restauró la secreción lagrimal y previno la alteración epitelial en un modelo experimental de ratón con insuficiencia lagrimal. Los activadores de CFTR pueden ser particularmente adecuados para los trastornos de la glándula lagrimal, como el síndrome de Sjogren primario, al estimular el transporte de fluidos a través del epitelio corneal y conjuntival intactos. Es probable que los activadores de CFTR ejerzan su principal efecto prosecretor en la superficie ocular, aunque existe un efecto indirecto para la expresión y función de CFTR en la glándula lagrimal (39-42). La estimulación directa de la secreción lagrimal es poco probable en los estudios aquí hechos debido a la penetración mínima del compuesto en los tejidos lagrimales después de la administración tópica y la eficacia demostrada del compuesto en un modelo de insuficiencia lagrimal. En la superficie ocular, la conjuntiva probablemente aporta la mayor parte de la secreción de fluido dada su área superficial mucho más grande en comparación con la córnea (43).
Se tienen en cuenta terapias prosecretoras alternativas dirigidas a diferentes canales iónicos de la superficie ocular. El único activador de CFTR aprobado por la FDA, VX-770, se desarrolló como un "potenciador" para tratar la CF al corregir la activación del canal de ciertas mutaciones de CFTR (44). Sin embargo, VX-770 mostró una actividad relativamente pequeña contra CFTR de tipo salvaje en cultivos celulares y en ratones in vivo. La aplicación crónica de VX-770 también puede disminuir la expresión funcional de CFTR (24) y causar cataratas (observadas en ratas jóvenes; ref. 42), lo que probablemente sea un efecto fuera del objetivo porque CFTR no se expresa en el cristalino. Un agonista indirecto de los canales de Cl- activado por Ca2+, el diquafosol, aumenta tanto la secreción acuosa como la de mucina. Sin embargo, el diquafosol falló en los ensayos de fase III, probablemente debido a la elevación inducida transitoria de Ca2+ y activación del canal Cl-, lo que produce una mínima secreción neta de fluido. Los activadores de CFTR, que producen una secreción sostenida de fluido lagrimal, superan esta limitación. CFTRact-K089 y CFTRact-J027 mostraron una farmacodinámica favorable y pueden administrarse convenientemente por vía tópica varias veces al día en una formulación oftálmica estándar.
Los datos presentados en la presente descripción muestran que la activación de CFTR por sí sola facilita la salida sostenida del flujo de Cl- y la secreción de fluidos, lo que sugiere que la conductancia del K+ basal, sin aumento de nucleótido cíclico o señalización de Ca2+, es suficiente para apoyar el transporte de fluidos en la superficie ocular. Aún así, la sinergia potencial de un agonista de CFTR y un activador de canales K+ o un inhibidor de ENaC se podría explorar para aumentar aún más la secreción de lágrimas para la terapia del ojo seco.
La eficacia de CFTRact-K089 en un modelo de ratón clínicamente relevante de enfermedad de ojo seco por deficiencia acuosa se demostró para la terapia tópica con activador CFTR prosecretor para restaurar la secreción lagrimal basal y prevenir la patología de la superficie ocular. En comparación con los enfoques inmunosupresores, la activación de CFTR tiene la ventaja de abordar un evento temprano en la patogénesis del ojo seco. Por lo tanto, nuestros datos respaldan el potencial de desarrollo de los activadores CFTR como la primera terapia para el ojo seco en su clase.
Los ejemplos en la presente descripción proporcionan una descripción adicional de esta sección.
Aunque la sección anterior se describió con cierto detalle a modo de ilustración y ejemplo con el propósito de facilitar la comprensión, es evidente para los expertos en la técnica que se pueden realizar ciertos cambios y modificaciones menores a la misma a la luz de las enseñanzas previas. Por lo tanto, la descripción y los ejemplos no deben interpretarse como limitantes del alcance de cualquier invención descrita en la presente descripción.
Todas las referencias citadas en la presente descripción, incluidas las solicitudes de patente y las publicaciones, se describen en la presente descripción
VI. EJEMPLOS
Ejemplo 1. Estreñimiento
Se realizó un cribado de alto rendimiento basado en células para 120000 moléculas pequeñas sintéticas similares a fármacos. Se caracterizó el mecanismo de acción de los compuestos activos y se probó un compuesto líder en un modelo de estreñimiento inducido por loperamida en ratones.
Se identificaron varias clases de nuevos activadores de CFTR, uno de los cuales, la fenilquinoxalinona CFTRact-J027, activó totalmente la conductancia de cloruro CFTR con EC50 ~ 200 nM, sin causar elevación de cAMP citoplasmático. CFTRact-J027 administrado por vía oral normalizó la producción de heces y el contenido de agua en un modelo de estreñimiento de ratón inducido por loperamida con ED50 ~0,5 mg/kg; CFTRact-J027 no tuvo efecto en ratones con fibrosis quística que carecían de CFTR funcional. Las mediciones de corriente de cortocircuito, secreción de fluidos y motilidad intestinal en ratones indicaron una acción prosecretora de CFTRact-J027 sin estimulación directa de la motilidad intestinal. La administración oral de 10 mg/kg de CFTRact-J027 mostró biodisponibilidad mínima, metabolismo hepático rápido y niveles en sangre <200 nM, y sin toxicidad aparente después de la administración crónica.
CFTRact-J027 o activadores alternativos de molécula pequeña dirigidos a CFTR pueden ser eficaces para el tratamiento del estreñimiento.
El cribado de alto rendimiento se realizó mediante el uso de una colección diversa de 120000 compuestos sintéticos similares a fármacos obtenidos de ChemDiv Inc. (San Diego, California, EE. UU.) y Asinex (Winston-Salem, Carolina del Norte, EE. UU.). Para el análisis de estructura-actividad, se probaron 600 análogos comercialmente disponibles (ChemDiv Inc.) de compuestos activos identificados en el cribado primario. Se compraron otros productos químicos de Sigma-Aldrich (St. Louis, Missouri, EE. UU.) a menos que se indique de cualquier otra manera.
Síntesis de CFTRact-J027. A una solución de o-fenilendiamina (1 g, 9,24 mmol) en DMF (30 ml) se le añadió carbonato de potasio (2,5 g, 18,4 mmol) y bromuro de bencilo (0,73 ml, 6,2 mmol) y luego se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con CH2Ch, se lavó con agua, se secó sobre MgSO4 y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida para dar el intermediario N1-bencilbenceno-1,2-diamina como un líquido marrón. 1H NMR (300 MHz, CDCfe): 87,45-7,31 (m, 5H), 6,86-6,69 (m, 4H), 4,35 (s, 2H), 3,50 (br, 3H); MS: m/z 199 (M+H). Luego, una solución del intermediario (400 mg, 2 mmol) y 5-nitroisatina (380 mg, 2 mmol) en ácido acético (5 ml) se puso a reflujo durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se eliminó a presión reducida. El residuo se disolvió con metanol y se añadió ácido acético para cristalizar 3-(2-amino-5-nitrofenil)-1-bencilquinoxalin-2(1H)-ona (CFTRact-J027) como un polvo amarillo con >99 % de pureza. 1H NMR (300 MHz, DMSO-cfe): 89,15 (d, 1H, J = 2,8Hz), 8,07 (dd, 1H, J = 2,7, 9,2 Hz), 7,97 (dd, 1H, J = 1,2, 7,9 Hz), 7,82 (brs, 2H), 7,60-7,27 (m, 7H), 6,92 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 5,59 (brs, 2H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-cfe): 8 155,0, 154,6, 153,3, 136,3, 135,3, 132,8, 132,2, 131,0, 130,0, 129,5, 129,1, 127,7, 127,3, 126,8, 124,1, 116,1, 115,9, 115,4, 45,9; MS: m/z 373 (M+H).
Cultivo de células. Se generaron células de tiroides de rata Fischer (FRT) que expresan de manera estable conjuntamente CFTR de tipo salvaje humano y la proteína fluorescente amarilla sensible a haluros (YFP)-H148Q como se describió previamente [12]. Las células se cultivaron en plástico en medio de Ham F12 modificado por Coon suplementado con suero fetal bovino al 10 %, L-glutamina 2 mM, 100 unidades/ml de penicilina y 100 pg/ml de estreptomicina. Para el cribado de alto rendimiento, las células se sembraron en microplacas negras de 96 pocillos (Corning-Costar Corp., Corning, Nueva York, EE. UU.) a una densidad de 20 000 células por pocillo. El cribado se realizó 24-48 horas después de la siembra.
Cribado de alto rendimiento. El cribado se llevó a cabo mediante el uso de un sistema integrado Beckman Coulter equipado con un sistema de manipulación de líquidos y dos lectores de placas de fluorescencia FLUOstar (BMG Labtechnologies, Durham, Carolina del Norte, EE. UU.), cada uno equipado con bombas de jeringa doble y filtros de excitación de 500 ± 10 nm y emisión de 535 ± 15 nm (detalles en ref. 12). Las células FRT que expresan CFTR e YFP se cultivaron a 37 °C/5 % de CO2 de 24 a 48 horas después del sembrado. En el momento del ensayo, las células se lavaron tres veces con solución salina tamponada con fosfato (PBS) y luego se incubaron durante 10 min con 60 pl de PBS que contenía los compuestos de prueba (a 10 pM) y una baja concentración de forskolina (125 nM). Cada pocillo se ensayó individualmente para influjo de I' en un lector de placas mediante el registro de la fluorescencia continuamente (200 ms por punto) durante 2 s (línea de base) y luego durante 12 s después de la adición rápida (<1 s) de 165 pL de PBS en el que 137 mM de Cl- fue reemplazado por I-. La velocidad de inicio de influjo de I- se calculó mediante el uso de regresión exponencial. Todas las placas compuestas contenían controles negativos (vehículo DMSO) y controles positivos (forskolina 20 |j M).
Medición de corriente de cortocircuito. La corriente de cortocircuito se midió en células FRT que expresaban de forma estable CFTR humano de tipo salvaje cultivadas en filtros porosos como se describió [12]. La solución basolateral contenía NaCl 130 mM, KCl 2,7 mM, KH2PO41,5 mM, CaCh 1 mM, MgCh 0,5 mM, glucosa 10 mM y Na-HEPES 10 mM (pH 7,3, 37 °C). En la solución apical se reemplazó NaCl 65 mM por gluconato de Na y el CaCh se aumentó a 2 mM, y la membrana basolateral se permeabilizó con 250 jg/ml de anfotericina B. La corriente de cortocircuito se midió en colon de ratón adulto recién extraído a 37 °C mediante el uso de tampón de bicarbonato de Krebs simétrico.
Ensayo de cAMP. La actividad de cAMP intracelular se midió mediante el uso de un ensayo de luminiscencia GloSensor (Promega Corp., Madison, Wisconson, EE. UU.). Las células nulas FRT se transfectaron de forma estable con el plásmido cAMP pGloSensor y se sembraron en microplacas blancas de 96 pocillos y se cultivaron hasta la confluencia. Las células se lavaron tres veces con PBS y se incubaron con CFTRact-J0275 jM durante 10 min en ausencia y presencia de forskolina 100 nM. El cAMP se analizó de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
Farmacocinética Todos los experimentos con animales fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la UCSF. Ratones hembra CD1 se trataron con 10 mg/kg de CFTRact-J027 (solución salina que contiene 5 % de DMSO y 10 % de Kolliphor HS 15) por vía intraperitoneal (ip) u oral. La sangre se recogió a los 15, 30, 60, 150, 240 y 360 min después del tratamiento mediante punción orbital y se centrifugó a 5000 rpm durante 15 min para separar el plasma. Las muestras de plasma (60 j L) se mezclaron con 300 jL de acetonitrilo y se centrifugaron a 13000 rpm durante 20 min, y se usaron 90 jL del sobrenadante para LC/MS. El sistema de solvente consistía en un gradiente lineal de 5 a 95 % de acetonitrilo durante 16 min (flujo de 0,2 ml/min). Los espectros de masas se adquirieron en un espectrómetro de masas (Waters 2695 y Micromass ZQ) mediante el uso de ionización por electropulverización (+), intervalo de masas de 10 0 a 1500 Da, tensión de cono de 40 V. Se prepararon estándares de calibración en plasma para los ratones no tratados a los que se añadieron cantidades conocidas de CFTRact-J027.
Estabilidad metabólica in vitro. Se incubó CFTRact-J027 (5 jM) durante tiempos específicos a 37 °C con microsomas de hígado de ratón (1 mg de proteína/ml; Sigma-Aldrich) en tampón de fosfato de potasio (100 mM) que contenía NADPH 1 mM, como se describió [13]. A continuación, la mezcla se enfrió en hielo y se añadieron 0,5 ml de acetato de etilo enfriado con hielo. Las muestras se centrifugaron durante 15 min a 3000 rpm, el sobrenadante se evaporó a sequedad y el residuo se disolvió en 100 jL de fase móvil (acetonitrilo:agua, 3:1) para LC/MS y se analizó como se describió anteriormente.
Modelo murino de estreñimiento. Se administró loperamida (0,3 mg/kg, ip, Sigma-Aldrich) a ratones CD1 hembra (de 8 a 10 semanas de edad) para producir estreñimiento. Varias cantidades de CFTRact-J027 (0,1, 0,3, 1, 3 y 10 mg/kg) se administraron al mismo tiempo (para administración ip) o 1 h antes (para administración oral) de la loperamida. Los ratones de control se trataron solo con vehículo. Algunos ratones se trataron por vía oral con lubiprostona (0,5 mg/kg, Sigma-Aldrich) o linaclotida (0,5 mg/kg, Toronto Research Chemicals Inc., Toronto, Ontario, Canadá). Después de la inyección de loperamida, los ratones se colocaron individualmente en jaulas metabólicas con comida y agua ad libitum. Se recogieron muestras de heces durante 3 h y se cuantificó el peso total de las heces y el número de gránulos fecales. Para medir el contenido de agua en las heces, las muestras de heces se secaron a 80 °C durante 24 h y el contenido de agua se calculó como [peso húmedo - peso seco]/peso húmedo. Se realizaron estudios similares en ratones con fibrosis quística (CF) (AF508 homocigotos) que carecían de CFTR funcional. Se realizaron algunos estudios mediante el uso del análogo químicamente similar pero inactivo de CFTRact-J027, 3-(2-amino-5-nitrofenil)-1-(metil)-2(1H)-quinoxalinona.
Tránsito intestinal in vivo y contractilidad intestinal ex vivo. El tiempo de tránsito por el intestino entero se determinó mediante el uso de un marcador administrado por vía oral ( 200 jL, 5 % de azul de Evans, 5 % de goma arábiga) y mediante la medición del tiempo de su aparición en las heces. A los ratones se les administró loperamida y CFTRact-J027 (10 mg/kg) o vehículo por vía intraperitoneal en tiempo cero. Para las mediciones de contractilidad ex vivo, los ratones se sacrificaron mediante sobredosis de avertin (200 mg/kg, 2,2,2-tribrometanol, Sigma-Aldrich) y se aislaron segmentos de íleon y colon de ~2 cm de longitud y se lavaron con tampón Krebs-Henseleit. Los extremos de los segmentos intestinales se ataron, se conectaron a un transductor de fuerza (Biopac Systems, Goleta, CA, EE. UU.) y los tejidos se transfirieron a una cámara de órganos (Biopac Systems) que contenía tampón Krebs-Henseleit a 37 °C aireado con 95 % de O2, 5 % CO2. El íleon y el colon se estabilizaron durante 60 min con tensiones de reposo de 0,5 y 0,2 g respectivamente, y las soluciones se cambiaron cada 15 min. Se registraron los efectos de CFTRact-J027 sobre la línea de base y las contracciones intestinales isométricas suprimidas por loperamida.
Secreción y absorción intestinal in vivo. A los ratones (de tipo salvaje o CF) se les dio acceso a agua con dextrosa al 5 % pero no a alimentos sólidos durante 24 h antes de los experimentos. Los ratones se anestesiaron con isoflurano y la temperatura corporal se mantuvo durante la cirugía a 36-38 °C mediante el uso de una almohadilla térmica. Se hizo una pequeña incisión abdominal para exponer el intestino delgado y se aislaron mediante suturas las asas yeyunales medias cerradas (de 2 a 3 cm de longitud). Las asas se inyectaron con 100 pL de vehículo solo o 100 pg de CFTRact-J027 en el vehículo. La incisión abdominal se cerró con suturas y se permitió que los ratones se recuperaran de la anestesia. Se retiraron las asas intestinales a los 90 min y se midieron la longitud y el peso de las asas para cuantificar la secreción de fluido. La absorción intestinal se midió en ratones CF (para evitar la secreción) como se describió anteriormente, excepto que las asas se retiraron a los 0 o 30 min. La absorción se calculó como 1-(peso del asa a los 0 min - peso del asa a los 30 min)/peso del asa a los 0 min.
Estudios de toxicidad y administración crónica. A los ratones se les administró 10 mg/kg de CFTRact-J027 o vehículo por vía oral una vez al día durante 7 días. Una hora después de la dosis final, los ratones se trataron con loperamida (0,3 mg/kg, ip) y se recogieron las heces durante 3 h. La toxicidad in vivo se evaluó en estos ratones mediante la medición de la proporción de peso húmedo/seco de los pulmones, hemograma completo (HEMAVET 950FS, Drew Scientific Inc., Florida, EE. UU.) y química sérica (Idexx Laboratories Inc., Sacramento, California, EE. UU.) 4 h después de la última dosis de CFTRact-J027. La citotoxicidad in vitro se midió en células FRT incubadas con CFTRact-J02725 pM para 8 y 24 h. La citotoxicidad se midió mediante el ensayo Alamar Blue de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Invitrogen, Carlsbad, California, EE. UU.).
Análisis estadístico. Los experimentos con dos grupos se analizaron con la prueba t de Student, y con 3 grupos o más el análisis se hizo con análisis de varianza unidireccional y prueba de comparaciones múltiples post-hoc Newman-Keuls. p<0,05 se tomó como estadísticamente significativo.
Tabla 1. Hemograma completo y química sérica de ratones tratados durante 7 días con 10 mg/kg de CFTRact-J027 o vehículo or vía oral una vez al día media ± SE, 5 ratones or ru o . Prueba t de Student.
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Ejemplo 2. Ojo Seco
Ratones. Los ratones de tipo salvaje (WT) y CF (mutante AF508-CFTR homocigótico) con antecedente genético CD1 se criaron en el Centro para Animales de la Universidad de California en San Francisco (UCSF). Se utilizaron ratones de 8 a 12 semanas de edad (25 a 35 g). Se adquirieron ratones hembra BALB/c (7-8 semanas de edad) del Laboratorio Harlan (Livermore, CA, EE. UU.). Los protocolos con animales fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la UCSF y cumplían con la Declaración ARVO para el Uso de Animales en la Investigación Oftálmica y de la Visión.
Corriente de cortocircuito. Se cultivaron células de tiroides de rata Fischer (FRT) que expresan de forma estable CFTR humano de tipo salvaje en insertos Snapwell (Corning Costar, Corning NY, eE. UU.) para las mediciones de corriente de cortocircuito (Isc). Después de 6-9 días en cultivo, cuando la resistencia transepitelial era >1000 Q/cm2, los insertos se montaron en un sistema de cámara Ussing (World Precision Instruments, Sarasota, FL, EE. UU.). La solución basolateral contenía NaCl 130 mM, KCl 2,7 mM, KH2PO41,5 mM, CaCh 1 mM, MgCh 0,5 mM, glucosa 10 mM y Na-HEPES 10 mM (pH 7,3). En la solución de baño apical, se reemplazó NaCl 65 mM por gluconato de Na y se aumentó CaCl2 a 2 mM. Ambas soluciones se burbujearon con aire y se mantuvieron a 37 °C. La membrana basolateral se permeabilizó con 250 pg/ml de anfotericina B (26, 27). Las semicámaras se conectaron a una abrazadera de tensión DVC-1000 a través de electrodos Ag/AgCl y puentes de agar KCl 3 M para registrar la Isc.
Ensayos de cAMP y citotoxicidad. La actividad del cAMP intracelular se midió mediante el uso de un ensayo de luminiscencia GloSensor (Promega Corp., Madison, WI, EE. UU.). Las células FRT transfectadas de forma estable con el plásmido cAMP pGloSensor (Promega Corp.) se cultivaron en microplacas blancas de 96 pocillos (Corning Costar) durante la noche. A continuación, las células se lavaron tres veces con PBS y se incubaron con el compuesto de prueba 5 pM durante 10 min en ausencia y presencia de forskolina 100 nM. Para analizar la citotoxicidad, las células FRT se cultivaron durante la noche en pocillos de microplaca Costar de 96 pocillos negros y se incubaron con los compuestos de prueba hasta 100 pM (la máxima solubilidad en PBS) durante 1 o 24 h. La citotoxicidad se midió mediante el ensayo Alamar Blue de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Invitrogen, Carlsbad, CA, EE. UU.).
Mediciones de la diferencia de potencial en la superficie ocular. La PD transepitelial de circuito abierto se midió continuamente en ratones anestesiados en respuesta a perfusiones en serie de diferentes soluciones sobre la superficie ocular, como se describió (21). Los ratones se anestesiaron con Avertin (2,2,2-tribromoetanol, 125 mg/kg intraperitoneal, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EE. UU.), y la temperatura central se mantuvo a 37 °C mediante el uso de una almohadilla térmica. Los ojos se orientaron con la córnea y la conjuntiva mirando hacia arriba y se expusieron retrayendo el párpado con pinzas de acción cruzada. Las soluciones eran isosmolares (320 ± 10 mOsM; composiciones proporcionadas en la ref. 21) y contenían indometacina 10 pM para evitar la activación de CFTR por prostaglandinas. La superficie ocular se perfundió a 6 ml/min a través de un tubo de plástico mediante el uso de un sistema de válvula de pinzamiento por gravedad de múltiples depósitos (ALA Scientific, Westbury, NY, EE. UU.) y una bomba peristáltica de flujo variable (modelo de flujo medio; Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ, EE. EE.UU). Se fijó un catéter sonda a 1 mm por encima de la córnea mediante el uso de un microposicionador y se colocó una cánula de succión a 3 mm de la órbita. El electrodo de medición estaba en contacto con el catéter de perfusión y conectado a un voltímetro de alta impedancia (IsoMilivolt Meter; WPI). El electrodo de referencia se conectó a tierra mediante una aguja alada de calibre 2 1 rellenada con solución salina isosmolar y se insertó por vía subcutánea en el abdomen. Los electrodos de medición y referencia consistieron en Ag/AgCl con puentes de agar KCl 3 M.
Secreción lagrimal. Para medir la producción de lágrimas no estimuladas, se colocaron hilos de rojo fenol (Zone-Quick, Oasis Medical, Glendora, CA, EE. UU.) durante 10 s en los cantos laterales de ratones anestesiados con isofluorano mediante el uso de fórceps de joyero. El volumen de lágrimas se midió como la longitud del hilo humedecido, tal como se visualiza bajo un microscopio de disección. Se utilizaron mediciones en serie para evaluar la farmacodinámica del compuesto después de la aplicación de gotas de 2 pl de formulaciones del compuesto (50­ 100 pM de compuesto en PBS que contenía polisorbato al 0,5 % y DMSO al 0,5 %) en comparación con el vehículo.
Tinción verde lisamina. Para evaluar la alteración del epitelio corneal, se aplicaron 5 pl de colorante verde de lisamina (LG) (1 %) a la superficie ocular de ratones anestesiados con isofluorano. Las fotografías del ojo se tomaron con una cámara digital Nikon adaptada a un microscopio estéreo con zoom Olympus (Olympus, Center Valley, PA, EE. UU.). Cada cuadrante corneal fue puntuado en una escala de 3 puntos por un observador ciego y entrenado, con la magnitud de la tinción en cada cuadrante clasificada como: 0 , sin tinción; 1 , tinción esporádica (que afecta a <25 % de la superficie total); grado 2, tinción punteada difusa (25-75 %); y grado 3, tinción punteada coalescente (>75 %). La calificación total se informa como la suma de las puntuaciones de los cuatro cuadrantes, que van de 0 a 1 2.
Farmacocinética y distribución tisular. Para determinar el tiempo de residencia de los activadores de CFTR en la película lagrimal preocular de ratón, los compuestos se recuperaron para cromatografía líquida/espectroscopia de masas (LC/MS) después de la administración oftálmica de una sola dosis. Se recuperaron tres lavados de ojos (3 pL de PBS cada uno) de los cantos lateral y medial con tubos microcapilares de 5 pL (Drummond Scientific Co., Broomhall, PA, EE. UU.) después del parpadeo manual del párpado (9). Los lavados agrupados se diluyeron con acetonitrilo/agua (1:1) que contenía ácido fórmico al 0,1 % y se analizaron por LC/MS mediante el uso de una columna Xterra MS C18 (2,1 mm * 100 mm, tamaño de partícula de 3,5 pm) conectada a un sistema de suministro de solvente HPLC Waters 2695 y un espectrómetro de masas Waters Micromass ZQ con ionización por electropulverización positiva.
Para estudiar la acumulación del compuesto en tejidos sistémicos, se analizó sangre, cerebro, riñón e hígado de ratón después de 14 días de dosificación tópica tres veces al día (0,1 nmol, 2 pL, 50 pM). Se recogieron muestras de sangre del ventrículo izquierdo en minitubos K3 EDTA (Greiner, Kremsmunster, Austria) y se centrifugaron (28). El sobrenadante se extrajo con un volumen igual de acetato de etilo y el extracto se secó con una corriente de aire. Los órganos de los ratones tratados y de control se extrajeron después de la perfusión ventricular con PBS heparinizado (10 unidades/ml), se pesaron, se mezclaron con ácido acético y agua (100 pl/g de tejido) y se homogeneizaron (29). Se añadió acetato de etilo (10 ml/g de tejido), las muestras se agitaron y centrifugaron (3000 rpm durante 15 min) y el sobrenadante que contenía acetato de etilo se evaporó. Los residuos obtenidos a partir de extractos orgánicos de suero y homogeneizados de órganos se reconstituyeron y analizaron mediante LC/MS como se describió anteriormente.
Modelo de ratón de ojo seco producido por escisión de glándula lagrimal. Se adaptó un modelo de ojo seco con deficiencia de humor acuoso por escisión de la glándula lagrimal (LGE) a partir de un método informado (30). La glándula lagrimal extraorbitaria se expuso a cada lado de ratones BALB/c hembra de tipo salvaje (7-8 semanas de edad) mediante incisiones cutáneas lineales de 3 mm. Se cauterizaron las vías lagrimales y se extirpó toda la glándula bilateralmente, evitando vasos y nervios faciales. Cada una de las incisiones se cerró con una única sutura de seda interrumpida 6-0. El tejido lagrimal orbitario permaneció funcional. Se excluyeron los ojos con sensibilidad corneal reducida (<5 % de los ratones estudiados), identificados a partir de úlceras corneales neurotróficas dentro de 1 día de la LGE. Los ratones se aleatorizaron para recibir cualquier tratamiento (en ambos ojos) con CFTRact-K089 (0,1 nmol) o vehículo. Los ratones se trataron tres veces al día (8 AM, 2 PM y 8 PM) durante 2 semanas comenzando el Día 1 después de la LGE. La secreción lagrimal y la tinción de LG se realizaron inmediatamente antes y una hora después de la dosis inicial en los días 4, 10 y 14 después de la LGE.
Estadística. Los datos se expresaron como la media ± error estándar de la media (SEM). Para las comparaciones directas entre dos medias, se utilizó la prueba t de Student bilateral. Para las mediciones longitudinales de la secreción lagrimal y las puntuaciones LG en el estudio de prevención del ojo seco, se utilizó una regresión lineal de efectos mixtos, ajustando la no independencia de las mediciones tomadas en el mismo ojo y en ambos ojos del mismo animal. El análisis se realizó en R v.3.2 para Mac (R Foundation for Statistical Computing, Viena, Austria), mediante el uso de los paquetes lme4 y robustlmm.
Caracterización de activadores CFTR de molécula pequeña Un cribado de alto rendimiento funcional basado en células de 120 000 compuestos a 10 pM identificó 20 clases químicas de activadores de moléculas pequeñas de CFTR de tipo salvaje que produjeron >95 % de la activación máxima de CFTR. El cribado se realizó en células epiteliales FRT que expresan conjuntamente CFTR de tipo salvaje humano y un sensor de haluro de YFP citoplásmico en formato de 96 pocillos (26, 31, 32). El cribado secundario involucró mediciones de Isc en células FRT que expresan CFTR pretratadas con forskolina submáxima (50 nM). Veintiún compuestos de ocho clases químicas produjeron grandes aumentos en Isc a 1 pM (>75 % de la corriente máxima producida por 20 pM de forskolina). Un resumen de los valores de EC50 y Vmax para cada compuesto se proporcionan en la Figura 7.
Las estructuras de los activadores de las cuatro clases químicas más activas se muestran en la Figura 2A, junto con los correspondientes datos de dependencia de la concentración de las mediciones de Isc. Cada compuesto activó completamente a CFTR, ya que una alta concentración de forskolina produjo un pequeño aumento adicional en Isc, y el aumento de Isc fue completamente inhibido por un inhibidor de CFTR, CFTRinh-172. Los valores EC50 oscilaron entre 20 y 350 nM (Figura 2b ). VX-770 mostró una actividad relativamente débil contra CFTR de tipo salvaje (Figura 2C). CFTRact-K032 y CFTRact-K089 mostraron una activación de CFTR incompleta (~50 % Vmax).
Se buscaron compuestos que se dirigieran directamente a CFTR sin causar una elevación del cAMP celular para minimizar los posibles efectos fuera del objetivo (Figura 2D). Los compuestos que producen elevaciones en cAMP intracelular (de las Clases O, Q y R), probablemente por inhibición de la fosfodiesterasa, se excluyeron de consideraciones posteriores. Se seleccionaron compuestos de potencia nanomolar de las Clases B, J y K, que no aumentaron el cAMP, para su posterior caracterización en ratones vivos.
Los activadores de CFTR aumentan el cloruro de la superficie ocular y la secreción de fluidos in vivo. Se utilizó un método de diferencia de potencial (PD) de circuito abierto desarrollado en nuestro laboratorio para evaluar la actividad del compuesto en la superficie ocular in vivo, como se muestra en la Figura 3A (21). La función del canal de Cl- se cuantificó mediante la medición de la PD durante la perfusión continua de la superficie ocular con una serie de soluciones que imponían un gradiente de Cl- transepitelial y contenían varios agonistas y/o inhibidores del canal. Primero se perfundió la superficie ocular con solución salina isosmolar para registrar la PD de línea base. Luego se agregó amilorida al perfundido, seguido de cambio a una solución de Cl- baja en la que Cl- está con un anión impermeable, gluconato. Estas maniobras permiten la visualización directa de la activación de CFTR en respuesta a la adición de activadores de CFTR candidatos.
La Figura 3B muestra grandes hiperpolarizaciones después de la exposición a CFTRact-B074, CFTRact-J027 y CFTRact-K089, que aumentaron relativamente poco con forskolina y fueron revertidos por CFTRinh-172. En comparación, VX-770 produjo cambios mínimos en la PD de la superficie ocular (Figura 3C). La Figura 3D resume los datos de PD para los activadores indicados, con datos para compuestos adicionales informados en la Figura 7. Los estudios de control realizados en ratones CF que carecían de CFTR funcional no mostraron cambios en la PD después de la adición de cada uno de los compuestos probados, con una curva representativa mostrada para CFTRact-K032 (Figura 3E).
A continuación, se probaron los activadores de CFTR para determinar su eficacia en el aumento de la producción de lágrimas en ratones. Los experimentos preliminares identificaron una formulación oftálmica estándar (0,5 % de polisorbato) que aumentó la solubilidad del compuesto y la duración de la acción. Después de una dosis tópica única, los activadores indirectos de CFTR, la toxina del cólera, la forskolina y la 3-isobutil-1-metilxantina (IBMX) aumentaron sustancialmente la secreción lagrimal basal a los 30 min, pero estos efectos fueron transitorios e indetectables después de 2 horas (Figura 4A). Sin embargo, los activadores directos de CFTR identificados en la presente, CFTRact-B074, CFTRact-J027 y CFTRact-K089, aumentaron la secreción de fluido lagrimal en aproximadamente dos veces durante al menos cuatro horas. VX-770 produjo poca secreción lagrimal (Figura 4B). Las administraciones tópicas repetidas (tres veces al día durante un máximo de 2 semanas) produjeron hipersecreción lagrimal sostenida sin taquifilaxia (Figura 4C). Los activadores de CFTR no aumentaron la secreción de fluido lagrimal en ratones con CF, lo que demuestra una orientación selectiva de CFTR (Figura 4D).
T o x ic id a d y fa rm a c o c in é tic a Los métodos de recolección de lágrimas se validaron al demostrar la recuperación reproducible de tetrametilrodamina dextrano (3 kDa) de la superficie ocular hasta seis horas después de la instilación. La farmacocinética de CFTRact-K089 en la superficie ocular se determinó mediante LC/MS de lavados de lágrimas recuperados. Después de la instilación de 0,1 nmol de CFTRact-K089 (2 jL, 50 jM) a la superficie ocular, se recuperaron 7,9 ± 2,4 pmol y 0,011 ± 0,004 pmol a los cinco minutos y seis horas, respectivamente (Figura 5A). La cantidad de CFTRact-K089 requerido para la activación de 50 % CFTR (EC50 ~ 250 nM) se encuentra entre las líneas discontinuas, lo que refleja las concentraciones calculadas a partir de los volúmenes de lágrimas normales informados más alto y más bajo en ratones (33, 34). La cantidad de CFTRact-K089 recuperado del fluido lagrimal predice niveles terapéuticos durante al menos seis horas. La farmacocinética del fluido lagrimal de CFTRact-J027 no se pudo medir porque la sensibilidad de LC/MS era baja para este compuesto.
Después de dos semanas de dosificación tres veces al día, las cantidades de CFTRact-K089 y CFTRact-J027 estaban por debajo de los límites de detección (~10 y ~700 fmol, respectivamente) en sangre, cerebro, hígado y riñón de ratón, lo que indica una acumulación sistémica mínima. Los ratones tratados crónicamente no mostraron signos de toxicidad ocular, según lo confirmado mediante evaluación con lámpara de hendidura para hiperemia conjuntival, inflamación de la cámara anterior y claridad del cristalino. La tinción LG no mostró alteración del epitelio corneal o conjuntival (Figura 5B). Los compuestos tampoco produjeron citotoxicidad in vitro apreciable en cultivos celulares a concentraciones de hasta 10 0 jM (Figura 5C).
El activador de CFTR previene el ojo seco en un modelo de escisión de glándula lagrimal en ratones. Sobre la base de su farmacocinética favorable de la película lagrimal, se seleccionó CFTRact-K089 para la prueba en un modelo de ratón de ojo seco por deficiencia acuosa producido por LGE. Después de la LGE extraorbital en ratones BALB/c, los ratones tratados con CFTRact-K089 (0,1 nmol, administrado tres veces al día) mantuvieron el volumen lagrimal basal, mientras que el volumen lagrimal de los ratones tratados con vehículo se redujo significativamente en todos los puntos de tiempo posteriores (Figura 6 A), y durante al menos 30 días. De manera similar a lo que se informó en ratones C57/bl6 (30), la disminución del lagrimeo en ratones BALB/c tratados con vehículo se asoció con una alteración epitelial progresiva desde el día 0 hasta el día 14, que se muestra pictóricamente (Figura 6 B superior) y cuantitativamente (Figura 6 C). CFTRact-K089 no solo restauró la secreción lagrimal en ratones con LGE, sino que evitó notablemente la alteración del epitelio de la superficie ocular en todos los puntos de tiempo (Figura 6 B inferior, Figura 6 C). Los ojos tratados con vehículo desarrollaron epiteliopatía corneal progresiva y difusa (aumento de la puntuación LG de 7,3 ± 0,6 en el día 14), mientras que los ojos tratados con CFTRact-K089 tuvieron una tinción mínima de LG en todos los puntos temporales (cambio de puntuación LG, -0,6 ± 0,6).
Se entiende que los ejemplos y modalidades descritos en la presente descripción son para propósitos ilustrativos solamente y que, a la luz de lo anterior, varias modificaciones o cambios serán sugeridos a las personas expertas en la técnica y deben incluirse dentro del espíritu y ámbito de esta solicitud y alcance de las reivindicaciones adjuntas.
Ejemplo 3 - Estreñimiento II
Resumen. A n te c e d e n te s & O b je tivos : El estreñimiento es un problema clínico común que afecta negativamente la calidad de vida y está asociado con costos significativos de atención médica. La activación del canal de cloruro del regulador transmembrana de la fibrosis quística (CFTR) es la trayectoria principal que impulsa la secreción de fluido en el intestino, lo que mantiene la lubricación del contenido luminal. Presumimos que la activación directa de CFTR provocaría la secreción de líquidos y revertiría la deshidratación excesiva de las heces que se encuentra en el estreñimiento. M étod os : Se realizó un cribado de alto rendimiento basado en células para 120000 moléculas pequeñas sintéticas similares a fármacos. Se caracterizó el mecanismo de acción de los compuestos activos y se probó un compuesto líder en un modelo de estreñimiento inducido por loperamida en ratones. R e su lta d o s : Se identificaron varias clases de nuevos activadores de CFTR, uno de los cuales, la fenilquinoxalinona CFTRact-J027, activó totalmente la conductancia de cloruro de CFTR con EC50 ~ 200 nM, sin causar elevación de cAMP citoplasmático. CFTRact-J027 administrado por vía oral normalizó la producción de heces y el contenido de agua en un modelo de estreñimiento de ratón inducido por loperamida con ED50 ~0,5 mg/kg; CFTRact-J027 no tuvo efecto en ratones con fibrosis quística que carecían de CFTR funcional. Las mediciones de corriente de cortocircuito, secreción de fluidos y motilidad intestinal en ratones indicaron una acción prosecretora de CFTRact-J027 sin estimulación directa de la motilidad intestinal. La administración oral de 10 mg/kg de CFTRact-J027 mostró biodisponibilidad mínima, metabolismo hepático rápido y niveles en sangre <200 nM, y sin toxicidad aparente después de la administración crónica. Conclusiones: CFTRact-J027 o activadores alternativos de molécula pequeña dirigidos a CFTR pueden ser eficaces para el tratamiento del estreñimiento.
Introducción.
El estreñimiento es un padecimiento clínico común en adultos y niños que afecta negativamente la calidad de vida. Se ha estimado que la prevalencia del estreñimiento crónico es del 15 % en la población de EE. UU., con costos anuales de atención médica estimados en ~7 mil millones de dólares con más de 800 millones de dólares gastados en laxantes [1, 2]. El pilar de la terapia del estreñimiento incluye laxantes que aumentan el volumen de las heces, como la fibra soluble; crean una carga osmótica, como el polietilenglicol; o estimulan la contracción intestinal, como los difenilmetanos. También hay laxantes de superficie que ablandan las heces como el docusato de sodio y probióticos como el Lactobacillus paracasei [3]. El fármaco linaclotida, aprobado por la FDA, un péptido agonista del receptor de guanilato ciclasa C, actúa inhibiendo el dolor visceral, estimulando la motilidad intestinal y aumentando la secreción intestinal [4, 5]. Se cree que un segundo fármaco aprobado, la lubiprostona, un análogo de la prostaglandina E, activa un supuesto canal ClC-2 de enterocitos [6 ], aunque los datos del mecanismo son menos claros. A pesar del amplio intervalo de opciones terapéuticas, existe una necesidad continua de fármacos seguros y efectivos para tratar el estreñimiento.
La secreción de fluido intestinal implica activar la secreción de Cl' a través del epitelio del enterocito a través del cotransportador Na+/ K+/ 2Cl' (NKCC1) de membrana basolateral y el canal Cl- del regulador transmembrana de fibrosis quística de la membrana luminal (CFTR) y el canal de Cl- activado por Ca2+ (CaCC). Las fuerzas electroquímicas y osmóticas creadas por la secreción de Cl- impulsan la secreción de Na+ y agua [7]. En el cólera y la diarrea del viajero, CFTR es fuertemente activado por enterotoxinas bacterianas a través de la elevación de nucleótidos cíclicos intracelulares [8 , 9]. CFTR es un objetivo atractivo para aumentar la secreción de fluidos intestinales en el estreñimiento, ya que se expresa fuertemente en todo el intestino y su activación aumenta fuertemente la secreción de fluidos intestinales. Es poco probable que un activador que se dirija directamente a CFTR produzca la secreción de fluido intestinal masiva e incontrolada que se observa en el cólera porque las enterotoxinas en el cólera actúan de manera irreversible para producir una elevación sostenida del cAMP citoplasmático, que no solo activa CFTR sino también los canales de K+ basolaterales, que aumentan la fuerza impulsora electroquímica para la secreción de Cl-; las enterotoxinas del cólera también inhiben el intercambiador de Na+/H+ luminal NHE3 involucrado en la absorción de fluidos intestinales [10, 11].
Motivados por estas consideraciones y la necesidad continua de una terapia farmacológica segura y efectiva para el estreñimiento, en la presente informamos la identificación y caracterización de un activador de molécula pequeña dirigido a CFTR de potencia nanomolar, y brindamos una prueba de concepto para su acción prosecretora en intestino y eficacia en el estreñimiento.
Métodos.
Materiales. El cribado de alto rendimiento se realizó mediante el uso de una colección diversa de 120 000 compuestos sintéticos similares a fármacos obtenidos de ChemDiv Inc. (San Diego, California, EE. UU.) y Asinex (Winston-Salem, Carolina del Norte, EE. UU.). Para el análisis de estructura-actividad, se probaron 600 análogos comercialmente disponibles (ChemDiv Inc.) de compuestos activos identificados en el cribado primario. Se compraron otros productos químicos de Sigma-Aldrich (St. Louis, Missouri, EE. UU.) a menos que se indique de cualquier otra manera.
Síntesis de CFTRact-J027. A una solución de o-fenilendiamina (1 g, 9,24 mmol) en DMF (30 ml) se le añadió carbonato de potasio (2,5 g, 18,4 mmol) y bromuro de bencilo (0,73 ml, 6,2 mmol) y luego se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con CH2Ch, se lavó con agua, se secó sobre MgSO4 y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida para dar el intermediario N1-bencilbenceno-1,2-diamina como un líquido marrón. 1 H NMR (300 MHz, CDCfe): 6 7,45-7,31 (m, 5H), 6,86-6,69 (m, 4H), 4,35 (s, 2H), 3,50 (br, 3H); MS: m/z 199 (M+H). Luego, una solución del intermediario (400 mg, 2 mmol) y 5-nitroisatina (380 mg, 2 mmol) en ácido acético (5 ml) se puso a reflujo durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se eliminó a presión reducida. El residuo se disolvió con metanol y se añadió ácido acético para cristalizar 3-(2-amino-5-nitrofenil)-1-bencilquinoxalin-2(1H)-ona (CFTRact-J027) como un polvo amarillo con >99 % de pureza. 1 H NMR (300 MHz, DMSO-cfe): 6 9,15 (d, 1H, J = 2,8 Hz), 8,07 (dd, 1H, J = 2,7, 9,2 Hz), 7,97 (dd, 1H, J = 1,2, 7,9 Hz), 7,82 (brs, 2H), 7,60-7,27 (m, 7H), 6,92 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 5,59 (brs, 2H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-cfe): 6 155,0, 154,6, 153,3, 136,3, 135,3, 132,8, 132,2, 131,0, 130,0, 129,5, 129,1, 127,7, 127,3, 126,8, 124,1, 116,1, 115,9, 115,4, 45,9; MS: m/z 373 (M+H).
Cultivo de células. Se generaron células de tiroides de rata Fischer (FRT) que expresan de manera estable conjuntamente CFTR de tipo salvaje humano y la proteína fluorescente amarilla sensible a haluros (YFP) -H148Q como se describió previamente [12]. Las células se cultivaron en plástico en medio de Ham F12 modificado por Coon suplementado con suero fetal bovino al 10 %, L-glutamina 2 mM, 100 unidades/ml de penicilina y 100 pg/ml de estreptomicina. Para el cribado de alto rendimiento, las células se sembraron en microplacas negras de 96 pocilios (Corning-Costar Corp., Corning, Nueva York, EE. UU.) a una densidad de 20 000 células por pocillo. El cribado se realizó 24-48 horas después de la siembra.
Cribado de alto rendimiento. El cribado se llevó a cabo mediante el uso de un sistema integrado Beckman Coulter equipado con un sistema de manipulación de líquidos y dos lectores de placas de fluorescencia FLUOstar (BMG Labtechnologies, Durham, Carolina del Norte, EE. UU.), cada uno equipado con bombas de jeringa doble y filtros de excitación de 500 ± 10 nm y emisión de 535 ± 15 nm (detalles en ref. 12). Las células FRT que expresan CFTR e YFP se cultivaron a 37 °C/5 % de CO2 de 24 a 48 horas después del sembrado. En el momento del ensayo, las células se lavaron tres veces con solución salina tamponada con fosfato (PBS) y luego se incubaron durante 10 min con 60 |jl de PBS que contenía los compuestos de prueba (a 10 jM ) y una baja concentración de forskolina (125 nM). Cada pocillo se ensayó individualmente para influjo de I- en un lector de placas mediante el registro de la fluorescencia continuamente ( 200 ms por punto) durante 2 s (línea de base) y luego durante 1 2 s después de la adición rápida (<1 s) de 165 jL de PBS en el que 137 mM de Cl- fue reemplazado por I-. La velocidad de inicio de influjo de I- se calculó mediante el uso de regresión exponencial. Todas las placas compuestas contenían controles negativos (vehículo DMSO) y controles positivos (forskolina 20 jM).
Medición de corriente de cortocircuito. La corriente de cortocircuito se midió en células FRT que expresaban de forma estable CFTR humano de tipo salvaje cultivadas en filtros porosos como se describió [12]. La solución basolateral contenía NaCl 130 mM, KCl 2,7 mM, KH2PO41,5 mM, CaCh 1 mM, MgCh 0,5 mM, glucosa 10 mM y Na-HEPES 10 mM (pH 7,3, 37 °C). En la solución apical se reemplazó NaCl 65 mM por gluconato de Na y el CaCh se aumentó a 2 mM, y la membrana basolateral se permeabilizó con 250 jg/ml de anfotericina B. La corriente de cortocircuito se midió en colon de ratón adulto recién extraído a 37 °C mediante el uso de tampón de bicarbonato de Krebs simétrico.
Ensayo de cAMP. La actividad de cAMP intracelular se midió mediante el uso de un ensayo de luminiscencia GloSensor (Promega Corp., Madison, Wisconson, EE. UU.). Las células nulas FRT se transfectaron de forma estable con el plásmido cAMP pGloSensor y se sembraron en microplacas blancas de 96 pocillos y se cultivaron hasta la confluencia. Las células se lavaron tres veces con PBS y se incubaron con CFTRact-J0275 jM durante 10 min en ausencia y presencia de forskolina 100 nM. El cAMP se analizó de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
Farmacocinética. Todos los experimentos con animales fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la UCSF. Ratones hembra CD1 se trataron con 10 mg/kg de CFTRact-J027 (solución salina que contiene 5 % de DMSO y 10 % de Kolliphor HS 15) por vía intraperitoneal (ip) u oral. La sangre se recogió a los 15, 30, 60, 150, 240 y 360 min después del tratamiento mediante punción orbital y se centrifugó a 5000 rpm durante 15 min para separar el plasma. Las muestras de plasma (60 jL ) se mezclaron con 300 jL de acetonitrilo y se centrifugaron a 13000 rpm durante 20 min, y se usaron 90 jL del sobrenadante para LC/MS. El sistema de solvente consistía en un gradiente lineal de 5 a 95 % de acetonitrilo durante 16 min (flujo de 0,2 ml/min). Los espectros de masas se adquirieron en un espectrómetro de masas (Waters 2695 y Micromass ZQ) mediante el uso de ionización por electropulverización (+), intervalo de masas de 10 0 a 1500 Da, tensión de cono de 40 V. Se prepararon estándares de calibración en plasma para los ratones no tratados a los que se añadieron cantidades conocidas de CFTRact-J027.
Estabilidad metabólica in vitro. Se incubó CFTRact-J027 (5 jM ) durante tiempos específicos a 37 °C con microsomas de hígado de ratón (1 mg de proteína/ml; Sigma-Aldrich) en tampón de fosfato de potasio (100 mM) que contenía NADPH 1 mM, como se describió [13]. A continuación, la mezcla se enfrió en hielo y se añadieron 0,5 ml de acetato de etilo enfriado con hielo. Las muestras se centrifugaron durante 15 min a 3000 rpm, el sobrenadante se evaporó a sequedad y el residuo se disolvió en 100 jL de fase móvil (acetonitrilo:agua, 3:1) para LC/MS y se analizó como se describió anteriormente.
Modelo murino de estreñimiento. Se administró loperamida (0,3 mg/kg, ip, Sigma-Aldrich) a ratones CD1 hembra (de 8 a 10 semanas de edad) para producir estreñimiento. Varias cantidades de CFTRact-J027 (0,1, 0,3, 1, 3 y 10 mg/kg) se administraron al mismo tiempo (para administración ip) o 1 h antes (para administración oral) de la loperamida. Los ratones de control se trataron solo con vehículo. Algunos ratones se trataron por vía oral con lubiprostona (0,5 mg/kg, Sigma-Aldrich) o linaclotida (0,5 mg/kg, Toronto Research Chemicals Inc., Toronto, Ontario, Canadá). Después de la inyección de loperamida, los ratones se colocaron individualmente enjaulas metabólicas con comida y agua ad libitum. Se recogieron muestras de heces durante 3 h y se cuantificó el peso total de las heces y el número de gránulos fecales. Para medir el contenido de agua en las heces, las muestras de heces se secaron a 80 °C durante 24 h y el contenido de agua se calculó como [peso húmedo - peso seco]/peso húmedo. Se realizaron estudios similares en ratones con fibrosis quística (CF) (AF508 homocigotos) que carecían de CFTR funcional. Se realizaron algunos estudios mediante el uso del análogo químicamente similar pero inactivo de CFTRact-J027, 3-(2-amino-5-nitrofenil)-1-(metil)-2(1H)-quinoxalinona.
Tránsito intestinal in vivo y contractilidad intestinal ex vivo. El tiempo de tránsito por el intestino entero se determinó mediante el uso de un marcador administrado por vía oral ( 200 jL, 5 % de azul de Evans, 5 % de goma arábiga) y mediante la medición del tiempo de su aparición en las heces. A los ratones se les administró loperamida y CFTRact-J027 (10 mg/kg) o vehículo por vía intraperitoneal en tiempo cero. Para las mediciones de contractilidad ex vivo, los ratones se sacrificaron mediante sobredosis de avertin (200 mg/kg, 2,2,2-tribrometanol, Sigma-Aldrich) y se aislaron segmentos de íleon y colon de ~2 cm de longitud y se lavaron con tampón Krebs-Henseleit. Los extremos de los segmentos intestinales se ataron, se conectaron a un transductor de fuerza (Biopac Systems, Goleta, CA, EE. UU.) y los tejidos se transfirieron a una cámara de órganos (Biopac Systems) que contenía tampón Krebs-Henseleit a 37 °C aireado con 95 % de O2, 5 % CO2. El íleon y el colon se estabilizaron durante 60 min con tensiones de reposo de 0,5 y 0,2 g respectivamente, y las soluciones se cambiaron cada 15 min. Se registraron los efectos de CFTRact-J027 sobre la línea de base y las contracciones intestinales isométricas suprimidas por loperamida.
Secreción y absorción intestinal in vivo. A los ratones (de tipo salvaje o CF) se les dio acceso a agua con dextrosa al 5 % pero no a alimentos sólidos durante 24 h antes de los experimentos. Los ratones se anestesiaron con isoflurano y la temperatura corporal se mantuvo durante la cirugía a 36-38 °C mediante el uso de una almohadilla térmica. Se hizo una pequeña incisión abdominal para exponer el intestino delgado y se aislaron mediante suturas las asas yeyunales medias cerradas (de 2 a 3 cm de longitud). Las asas se inyectaron con 100 pL de vehículo solo o 100 pg de CFTRact-J027 en el vehículo. La incisión abdominal se cerró con suturas y se permitió que los ratones se recuperaran de la anestesia. Se retiraron las asas intestinales a los 90 min y se midieron la longitud y el peso de las asas para cuantificar la secreción de fluido. La absorción intestinal se midió en ratones CF (para evitar la secreción) como se describió anteriormente, excepto que las asas se retiraron a los 0 o 30 min. La absorción se calculó como 1-(peso del asa a los 0 min - peso del asa a los 30 min)/peso del asa a los 0 min.
Estudios de toxicidad y administración crónica. A los ratones se les administró 10 mg/kg de CFTRact-J027 o vehículo por vía oral una vez al día durante 7 días. Una hora después de la dosis final, los ratones se trataron con loperamida (0,3 mg/kg, ip) y se recogieron las heces durante 3 h. La toxicidad in vivo se evaluó en estos ratones mediante la medición de la proporción de peso húmedo/seco de los pulmones, hemograma completo (HEMAVET 950FS, Drew Scientific Inc., Florida, EE. UU.) y química sérica (Idexx Laboratories Inc., Sacramento, California, EE. UU.) 4 h después de la última dosis de CFTRact-J027. La citotoxicidad in vitro se midió en células FRT incubadas con CFTRact-J02725 pM para 8 y 24 h. La citotoxicidad se midió mediante el ensayo Alamar Blue de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Invitrogen, Carlsbad, California, EE. UU.).
Análisis estadístico. Los experimentos con dos grupos se analizaron con la prueba t de Student, y con 3 grupos o más el análisis se hizo con análisis de varianza unidireccional y prueba de comparaciones múltiples post-hoc Newman-Keuls. p<0,05 se tomó como estadísticamente significativo.
Resultados.
Identificación y caracterización in vitro de activadores CFTR de molécula pequeña. El objetivo era identificar un potente activador dirigido a CFTR con actividad prosecretora en el intestino para probar su eficacia en un modelo de estreñimiento en ratón. La Figura 8 A resume la estrategia del proyecto. Los compuestos evaluados en la presente incluyeron moléculas pequeñas identificadas en cribados anteriores de activadores/potenciadores de CFTR [14] y de un nuevo cribado de moléculas pequeñas sintéticas no probadas previamente. Los compuestos más activos que surgieron del cribado, junto con los análogos químicos disponibles comercialmente, se priorizaron en función de un estudio inicial del mecanismo de acción (ensayo de elevación de cAMP), toxicidad in vitro, acción prosecretora en el intestino del ratón y eficacia en un modelo de estreñimiento en ratón. La Figura 8 B muestra el método de cribado del lector de placas basado en células en el que se midió la velocidad inicial de influjo de yoduro en células FRT que expresan de forma estable CFTR de tipo salvaje humano y el sensor de haluro fluorescente YFP después de la adición de yoduro extracelular. Un activador CFTR aumenta la pendiente inicial de la curva de extinción de la fluorescencia.
La Figura 8 C muestra estructuras químicas de seis clases de activadores candidatos de CFTR identificados a partir de los cribados. Con base en los criterios enumerados anteriormente, centramos los estudios posteriores en CFTRact-J027, una 3-fenil-quinoxalinona con propiedades similares a las de las drogas. CFTRact-J027 se sintetizó en forma cristalina pura en dos etapas (Figura 8 D).
Las mediciones de corriente de cortocircuito en células FTR que expresan CFTR mostraron que CFTRact-J027 activó completamente a CFTR (Figura 9A), ya que el agonista de cAMP forskolina no produjo más aumento en la corriente, con una EC50 ~ 200 nM (Figura 9B). Curiosamente, CFTRact-J027 fue solo un potenciador débil de AF508-CFTR, como se estudió en células FRT que expresaban AF508-CFTR después de una incubación durante la noche con un corrector (Figura 9C). La secreción de Cl- en colon de ratón recién aislado mostró un aumento dependiente de la concentración en la corriente de cortocircuito con EC50 ~ 300 nM (Figura 9D). El aumento en la corriente a elevado CFTRact-J027 se incrementó aún más por la forskolina, lo que puede ser una consecuencia de la activación de un canal K+ sensible a cAMP de membrana basolateral que aumenta la fuerza impulsora de la membrana apical para la secreción de Ch El aumento de corriente fue completamente inhibido por un inhibidor selectivo de CFTR. La Figura 9E muestra que CFTRact-J027 no eleva el cAMP celular cuando se agrega solo, y no aumenta aún más el cAMP cuando se agrega junto con forskolina, lo que sugiere que la activación de CFTR implica un mecanismo de interacción directa en lugar de una acción indirecta a través de la elevación del cAMP.
CFTRact-J027 normaliza la producción de heces en un modelo de estreñimiento en ratón. CFTRact-J027 se estudió en el modelo bien establecido de estreñimiento inducido por loperamida en ratones en el que se midieron el peso de las heces, el número de gránulos y el contenido de agua durante 3 horas después de la administración intraperitoneal de loperamida (Figura 10A). Administración intraperitoneal de CFTRact-J027 a 10 mg/kg normalizó cada uno de los parámetros de las heces. CFTRact-J027 no afectó la producción de heces ni el contenido de agua en los ratones de control (no tratados con loperamida). Es importante destacar que CFTRact-J027 no tuvo efecto en ratones con fibrosis quística que carecían de CFTR funcional (Figura 10B), ni fue un análogo químico inactivo de CFTRact-J027 efectivo en ratones de tipo salvaje (Figura 10C). Estos resultados respaldan una acción selectiva CFTR de CFTRact-J027. Los estudios de dosis-respuesta en ratones mostraron una ED50 de 2 mg/kg en el modelo de loperamida por administración ip de CFTRact-J027 (Figura 10D).
La administración oral de 10 mg/kg de CFTRact-J027 1 h antes de la administración de loperamida también fue efectiva para normalizar la producción de heces y el contenido de agua en ratones tratados con loperamida, sin efecto en los ratones de control (Figura 11A). La ED50 para la administración oral fue de 0,5 mg/kg, sustancialmente menor que para la administración ip (Figura 11B). En estudios paralelos, la administración oral de los fármacos aprobados lubiprostona o linaclotida en dosis mg/kg de 250 a 500 veces mayores que las administradas a humanos para el tratamiento del estreñimiento, fue menos efectiva para normalizar la producción de heces, al producir el 50 % y el 35 % de la respuesta máxima de CFTRact-J027, respectivamente (Figura 11C).
Acciones de CFTRact-J027 sobre el tránsito intestinal, la motilidad y el transporte de fluidos. La acción de CFTRact-J027 sobre el tránsito intestinal y la motilidad se midió in vivo y en tiras intestinales aisladas, respectivamente. El tiempo de tránsito intestinal completo, medido por la aparición de un marcador en las heces después de la sonda oral en bolo en el momento de la administración de loperamida ip y CFTRact-J027, fue normalizado por CFTRact-J027 (Figura 12A, panel izquierdo). CFTRact-J027 no tuvo ningún efecto sobre el tiempo de tránsito intestinal completo en ratones con fibrosis quística (panel derecho). Las mediciones in vitro de la contracción intestinal no mostraron ningún efecto de CFTRact-J027 añadido solo o en presencia de loperamida 10 pM en tiras aisladas de íleon y colon de ratón (Figura 12B). CFTRact-J027 puede aumentar el tránsito intestinal in vivo al estimular la motilidad mediante el estiramiento de la pared intestinal inducido por la secreción, sin efecto directo sobre el músculo liso intestinal.
Para investigar directamente los efectos de CFTRact-J027 sobre la secreción y absorción de fluidos intestinales, se utilizó un modelo de asa intestinal cerrada in vivo. CFTRact-J027 se inyectó en asas yeyunales medias cerradas y se midió la acumulación de fluido a los 90 min. CFTRact-J027 produjo un aumento del 140 % en la relación peso/longitud del asa, lo que indica secreción de fluido en la luz intestinal en ratones de tipo salvaje (Figura 12C, panel superior), pero no tuvo efecto en ratones con fibrosis quística (panel inferior), lo que respalda un mecanismo de acción selectivo a CFTR. También se utilizó un modelo de asa cerrada para estudiar la acción de CFTRact-J027 sobre la absorción de fluidos intestinales. Se inyectó fluido sin o con cFTRact-J027 en asas medias yeyunales cerradas de ratones con fibrosis quística (para evitar confundir la secreción de fluido) y se midió la absorción de líquido a los 30 min. CFTRact-J027 no afectó la absorción de fluidos intestinales (Figura 12D).
Farmacología y toxicidad de CFTRact-J027 en ratones. La estabilidad metabólica in vitro de CFTRact-J027 se midió mediante incubación con microsomas de hígado de ratón en presencia de NADPH. CFTRact-J027 se metabolizó rápidamente con una semivida de eliminación de ~21 min, quedando solo el 7 % del compuesto original a los 60 min (Figura 13A).
La farmacocinética se midió en ratones después de la administración intraperitoneal u oral en bolo de 10 mg/kg de CFTRact-J027. Después de la administración ip la concentración de CFTRact-J027 en suero disminuyó con una semivida de eliminación de ~16 min y fue indetectable a los 150 min (Figura 13B). Después de la administración oral la concentración de CFTRact-J027 en suero alcanzó 180 nM a los 30 min y fue indetectable en otros puntos de tiempo (Figura 13B).
Estudios toxicológicos preliminares de CFTRact-J027 se realizaron en cultivos celulares y ratones. CFTRact-J027, a una concentración de 20 pM cerca de su límite de solubilidad, no mostró citotoxicidad según lo medido por el ensayo Alamar Blue (Figura 13C). En los ratones tratados durante 7 días, CFTRact-J027 no afectó la química sérica principal ni los parámetros sanguíneos (Tabla 1, Ejemplo 1), ni cambió el peso corporal ni produjo acumulación de fluido en las vías respiratorias/pulmones (Figura 13D).
Por último, para determinar si CFTRact-J027 administrado crónicamente mantuvo la eficacia, los ratones se trataron por vía oral durante 7 días con 10 mg/kg de CFTRact-J027 o vehículo, y se administró loperamida 1 hora después de la última dosis. La Figura 13E muestra que CFTRact-J027 administrado crónicamente siguió siendo efectivo para normalizar la producción de heces y el contenido de agua después de la loperamida.
Discusión.
Identificamos mediante cribado de alto rendimiento un activador de CFTR de molécula pequeña y afinidad nanomolar, CFTRact-J027, y demostró su acción prosecretora en intestino de ratón y su eficacia para normalizar la producción de heces en un modelo de estreñimiento inducido por loperamida en ratón. El estreñimiento sigue siendo un problema clínico importante en entornos ambulatorios y hospitalizados. El estreñimiento inducido por opioides es un efecto adverso común en pacientes después de una cirugía, sometidos a quimioterapia y con dolor crónico. La activación dirigida a CFTR se suma a los diversos mecanismos de acción de las terapias contra el estreñimiento. Es notable que la activación pura de CFTR es capaz de producir una corriente robusta de Cl- y una respuesta de secreción de fluidos en el intestino, sin causar elevación global de la concentración de nucleótidos cíclicos, estimulación directa de la contractilidad intestinal, ni alteración de la absorción de fluidos intestinales. La linaclotida es un péptido agonista del receptor de guanilato ciclasa C que aumenta la concentración de GMPc en las células intestinales. La linaclotida inhibe la activación de las neuronas sensoriales colónicas y activa las neuronas motoras, lo que reduce el dolor y aumenta la contracción del músculo liso intestinal; además, la elevación de la concentración de GMPc en los enterocitos puede activar CFTR y tener una acción prosecretora [4, 5]. Se cree que un segundo fármaco aprobado, el análogo de prostaglandina E lubiprostona, activa un supuesto canal ClC-2 de enterocitos [6 ], aunque los datos del mecanismo son menos claros. En comparación con estos fármacos, un activador de CFTR puro tiene un mecanismo de acción único y bien validado y no produce una respuesta global de nucleótidos cíclicos en múltiples tipos de células. Es de destacar que la linaclotida y la lubiprostona mostraron una eficacia limitada en los ensayos clínicos. La linaclotida fue efectiva en ~20 % de los pacientes con estreñimiento crónico, de los cuales ~5 % también respondieron al placebo [15], y la lubiprostona fue efectiva en ~13 % de los pacientes con IBS-C, de los cuales ~7 % respondieron al placebo [16]. Basado en nuestros datos de ratones que muestran una eficacia sustancialmente mayor de CFTRact-J027 en comparación con las dosis supramáximas de linaclotida o lubiprostona, especulamos que los activadores de CFTR pueden tener una mayor eficacia en los ensayos clínicos.
CFTRact-J027 es sustancialmente más potente para la activación de CFTR de tipo salvaje que VX-770 (ivacaftor), el fármaco aprobado por la FDA para el tratamiento de la fibrosis quística (CF) causada por ciertas mutaciones de activación de CFTR. En células FRT que expresan CFTR de tipo salvaje, la medición de corriente de cortocircuito mostró una activación casi completa de CFTR por CFTRact-j027 a 3 pM, mientras que VX-770 activó CFTR al máximo solo en un 15 %. Sin embargo, CFTRact-J027 fue sustancialmente menos potente que ivacaftor como "potenciador" de la activación de los canales de cloruro defectuosos de la mutación más común causante de CF, AF508, lo cual no es inesperado, ya que la eficacia del potenciador en la CF es específica de la mutación. Además de su posible utilidad terapéutica para el estreñimiento, un activador de molécula pequeña de CFTR de tipo salvaje puede ser útil para el tratamiento de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica y la bronquitis, el asma, la disfunción pulmonar inducida por el humo del cigarrillo, el ojo seco y la enfermedad hepática colestásica [17-19]. Las quinoxalinonas sustituidas se informaron como antagonistas selectivos de la proteína 1 de resistencia a múltiples fármacos del transportador de salida de membrana [20]. También se ha informado que las quinoxalinonas muestran actividad antidiabética al estimular la secreción de insulina en las células INS-1 pancreáticas [21] y actividad inhibitoria contra las serina proteasas para la terapia potencial de trastornos trombóticos [2 2 ]. Recientemente, se ha informado que las quinoxalinonas inhiben la aldosa reductasa [23]. Estos informes sugieren que el armazón de quinoxalinona tiene propiedades similares a las de un fármaco. Sintéticamente, la quinoxalinona se puede preparar en una a cuatro etapas a partir de materiales de partida disponibles comercialmente [24], lo que permite una síntesis sencilla de análogos específicos.
Además de las acciones fuera del objetivo específicas del compuesto, el perfil de efectos secundarios potenciales de un activador de CFTR podría incluir actividad prosecretora en las vías respiratorias/pulmones y varios epitelios glandulares y de otro tipo. Los efectos fuera del objetivo para la terapia del estreñimiento podrían limitarse mediante la administración oral de un activador de CFTR con absorción intestinal limitada y/o eliminación sistémica rápida para minimizar la exposición sistémica. Cuando CFTRact-J027 se administró por vía oral en una dosis alta (10 mg/kg) mostró una biodisponibilidad muy baja con niveles en sangre muy por debajo de la EC50 para la activación de CFTR, que puede deberse al efecto de primer paso como lo demuestra su rápido metabolismo in vitro en los microsomas hepáticos. CFTRact-J027 no mostró una citotoxicidad in vitro significativa a una concentración de 25 pM, >100 veces mayor que su EC50 para la activación de CFTR, o toxicidad in vivo en ratones en un estudio de 7 días a una dosis eficaz máxima que normalizó la producción de heces en el modelo de estreñimiento con loperamida. La acción fuera del objetivo potencialmente más significativa, la estimulación de la secreción de fluidos de los pulmones/vías respiratorias, no se observó como lo demuestra el contenido normal de agua en los pulmones en los ratones tratados durante 7 días. Estos estudios de toxicidad limitada ofrecen una prueba de concepto para la aplicación de un activador de CFTR en el estreñimiento.
En resumen, sin pretender limitarse a la teoría, se cree que los datos presentados en la presente descripción proporcionan evidencia de la acción prosecretora de un activador de CFTR en intestino de ratón y prueba de concepto para su uso en el tratamiento de varios tipos de estreñimiento, lo que podría incluir el estreñimiento inducido por opioides, el estreñimiento idiopático crónico y el síndrome del intestino irritable con predominio del estreñimiento.
Referencias (Ejemplo 3).
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Ejemplo 4 - Ojo seco - II
Abreviaturas: CFTR, regulador de conductancia transmembrana de fibrosis quística; cAMP, monofosfato de adenosina cíclico; ENaC, canal de sodio epitelial; YFP, proteína amarilla fluorescente; CF, fibrosis quística; células FRT, células tiroideas de rata Fischer; Isc, corriente de cortocircuito; PD, diferencia de potencial; IBMX, 3-isobutil-1-metilxantina; fsk, forskolina; LC/MS, cromatografía líquida/espectroscopia de masas; LG, verde lisamina; LGE, escisión de glándula lagrimal.
Resumen. Los trastornos del ojo seco, incluido el síndrome de Sjogren, constituyen un problema común en la población que envejece con opciones terapéuticas efectivas limitadas disponibles. El canal de Cl activado por cAMP CFTR (regulador de conductancia transmembrana de fibrosis quística) es un importante canal de cloruro prosecretor en la superficie ocular. En la presente, investigamos si los compuestos que se dirigen a CFTR pueden corregir la película lagrimal anormal en el ojo seco. Se evaluaron activadores de molécula pequeña de CFTR de tipo salvaje humano identificados mediante cribado de alto rendimiento en cultivos celulares y ensayos in vivo para seleccionar compuestos que estimulen la secreción de fluidos impulsada por Cl- a través de la superficie ocular en ratones. Un aminofenil-1,3,5-triazina, CFTRact-K089, activó completamente CFTR en cultivos celulares con EC50 ~250 nM y produjo una hiperpolarización de ~8,5 mV en la diferencia de potencial de la superficie ocular. Cuando se administró por vía tópica, CFTRact-K089 duplicó la secreción lagrimal basal durante cuatro horas y no tuvo efecto en ratones CF. CFTRact-K089 mostró una biodisponibilidad sostenida en la película lagrimal sin absorción sistémica detectable. En un modelo en ratón de ojo seco con deficiencia acuosa producido por la escisión de la glándula lagrimal, la administración tópica de 0,1 nmol de CFTRact-K089 tres veces al día restauró la secreción lagrimal a los niveles basales y evitó por completo la alteración del epitelio corneal observada en los controles tratados con vehículo. Nuestros resultados respaldan la utilidad potencial de los activadores dirigidos a CFTR como un nuevo tratamiento prosecretor para el ojo seco.
Introducción.
El ojo seco es un grupo heterogéneo de trastornos con características comunes de reducción del volumen lagrimal e hiperosmolaridad del fluido lagrimal, que conducen a la inflamación de la superficie ocular. Las consecuencias clínicas, que incluyen incomodidad en los ojos y alteraciones visuales, representan un importante problema de salud pública en una población que envejece. El ojo seco afecta hasta un tercio de la población mundial (1), que incluye cinco millones de estadounidenses de 50 años o más (2, 3). La carga económica del ojo seco es sustancial, con costos anuales directos de atención médica estimados en $3840 millones de dólares en los Estados Unidos (4). El noventa y cuatro por ciento de los oftalmólogos encuestados creen que se necesitan tratamientos adicionales para el ojo seco de moderado a severo (7).
La superficie ocular es una colección de tejidos epiteliales y glandulares anatómicamente continuos que están unidos funcionalmente para mantener la película lagrimal (8 ). Si bien el lagrimeo contribuye con la mayor parte del lagrimeo reflejo, la córnea y la conjuntiva regulan el volumen y la composición de las lágrimas basales. Los principales determinantes del movimiento del agua a través de la superficie ocular hacia la película lagrimal incluyen la secreción de cloruro (Cl-) apical a través de transportadores Cl- dependientes de cAMP y calcio (Ca2+) y la absorción de sodio (Na+) en gran medida a través del canal de Na+ epitelial (ENaC).
El regulador de conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR) es un canal Cl- activado por cAMP expresado en algunas células epiteliales secretoras, incluidas las de la córnea y la conjuntiva (14-16). Encontramos una capacidad sustancial para activar el Cl- facilitado por CFTR en la superficie ocular en ratones (21, 22), como se mostró subsecuentemente en la conjuntiva de rata (23), lo que proporciona una base racional para la investigación de los activadores de CFTR como una estrategia prosecretora para el ojo seco. El único activador de CFTR clínicamente aprobado, VX-770 (ivacaftor), está indicado para potenciar la activación del canal de ciertos mutantes de CFTR que causan CF, pero solo activa débilmente el CFTR de tipo salvaje (24, 25).
En la presente, evaluamos y priorizamos nuevos activadores de moléculas pequeñas de CFTR de tipo salvaje identificados por cribado de alto rendimiento como terapia tópica potencial para el ojo seco, con la estrategia de investigación resumida en la Figura 1. El objetivo fue mejorar nuestros activadores CFTR previamente identificados (26), que carecen de la potencia y las propiedades químicas adecuadas para avanzar al desarrollo clínico, y demostrar la eficacia de los activadores CFTR recientemente identificados en un modelo de ratón con ojo seco. Materiales y métodos.
Ratones. Los ratones de tipo salvaje (WT) y CF (mutante AF508-CFTR homocigótico) con antecedente genético CD1 se criaron en el Centro para Animales de la Universidad de California en San Francisco (UCSF). Se utilizaron ratones de 8 a 12 semanas de edad (25 a 35 g). Se adquirieron ratones hembra BALB/c (7-8 semanas de edad) del Laboratorio Harlan (Livermore, CA, EE. UU.). Los protocolos con animales fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la UCSF y cumplían con la Declaración ARVO para el Uso de Animales en la Investigación Oftálmica y de la Visión.
Corriente de cortocircuito. Se cultivaron células de tiroides de rata Fischer (FRT) que expresan de forma estable CFTR humano de tipo salvaje en insertos Snapwell (Corning Costar, Corning NY, eE. UU.) para las mediciones de corriente de cortocircuito (Isc). Después de 6-9 días en cultivo, cuando la resistencia transepitelial era >1000 Q/cm2, los insertos se montaron en un sistema de cámara Ussing (World Precision Instruments, Sarasota, FL, EE. UU.). La solución basolateral contenía NaCl 130 mM, KCl 2,7 mM, KH2PO4 1,5 mM, CaCh 1 mM, MgCh 0,5 mM, glucosa 10 mM y Na-HEPES 10 mM (pH 7,3). En la solución de baño apical, se reemplazó NaCl 65 mM por gluconato de Na y el CaCl2 se aumentó a 2 mM. Ambas soluciones se burbujearon con aire y se mantuvieron a 37 °C. La membrana basolateral se permeabilizó con 250 pg/ml de anfotericina B (26, 27). Las semicámaras se conectaron a una abrazadera de tensión DVC-1000 a través de electrodos Ag/AgCl y puentes de agar KCl 3 M para registrar la Isc. Ensayos de cAMP y citotoxicidad. La actividad del cAMP intracelular se midió mediante el uso de un ensayo de luminiscencia GloSensor (Promega Corp., Madison, WI, EE. UU.). Las células FRT transfectadas de forma estable con el plásmido cAMP pGloSensor (Promega Corp.) se cultivaron en microplacas blancas de 96 pocilios (Corning Costar) durante la noche. A continuación, las células se lavaron tres veces con PBS y se incubaron con el compuesto de prueba 5 pM durante 10 min en ausencia y presencia de forskolina 100 nM. Para analizar la citotoxicidad, las células FRT se cultivaron durante la noche en pocillos de microplaca Costar de 96 pocillos negros y se incubaron con los compuestos de prueba hasta 100 pM (la máxima solubilidad en PBS) durante 1 o 24 h. La citotoxicidad se midió mediante el ensayo Alamar Blue de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Invitrogen, Carlsbad, CA, EE. UU.).
Mediciones de la diferencia de potencial en la superficie ocular. La PD transepitelial de circuito abierto se midió continuamente en ratones anestesiados en respuesta a perfusiones en serie de diferentes soluciones sobre la superficie ocular, como se describió (21). Los ratones se anestesiaron con Avertin (2,2,2-tribromoetanol, 125 mg/kg intraperitoneal, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EE. UU.), y la temperatura central se mantuvo a 37 °C mediante el uso de una almohadilla térmica. Los ojos se orientaron con la córnea y la conjuntiva mirando hacia arriba y se expusieron retrayendo el párpado con pinzas de acción cruzada. Las soluciones eran isosmolares (320 ± 10 mOsM; composiciones proporcionadas en la ref. 21) y contenían indometacina 10 pM para evitar la activación de CFTR por prostaglandinas. La superficie ocular se perfundió a 6 ml/min a través de un tubo de plástico mediante el uso de un sistema de válvula de pinzamiento por gravedad de múltiples depósitos (ALA Scientific, Westbury, NY, EE. UU.) y una bomba peristáltica de flujo variable (modelo de flujo medio; Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ, EE. UU). Se fijó un catéter sonda a 1 mm por encima de la córnea mediante el uso de un microposicionador y se colocó una cánula de succión a 3 mm de la órbita. El electrodo de medición estaba en contacto con el catéter de perfusión y conectado a un voltímetro de alta impedancia (IsoMilivolt Meter; WPI). El electrodo de referencia se conectó a tierra mediante una aguja alada de calibre 2 1 rellenada con solución salina isosmolar y se insertó por vía subcutánea en el abdomen. Los electrodos de medición y referencia consistieron en Ag/AgCl con puentes de agar KCl 3 M.
Secreción lagrimal. Para medir la producción de lágrimas no estimuladas, se colocaron hilos de rojo fenol (Zone-Quick, Oasis Medical, Glendora, CA, EE. UU.) durante 10 s en los cantos laterales de ratones anestesiados con isofluorano mediante el uso de fórceps de joyero. El volumen de lágrimas se midió como la longitud del hilo humedecido, tal como se visualiza bajo un microscopio de disección. Se utilizaron mediciones en serie para evaluar la farmacodinámica del compuesto después de la aplicación de gotas de 2 pl de formulaciones del compuesto (50­ 100 pM de compuesto en PBS que contenía polisorbato al 0,5 % y DMSO al 0,5 %) en comparación con el vehículo.
Tinción verde lisamina. Para evaluar la alteración del epitelio corneal, se aplicaron 5 pl de colorante verde de lisamina (LG) (1 %) a la superficie ocular de ratones anestesiados con isofluorano. Las fotografías del ojo se tomaron con una cámara digital Nikon adaptada a un microscopio estéreo con zoom Olympus (Olympus, Center Valley, PA, EE. UU.). Cada cuadrante corneal fue puntuado en una escala de 3 puntos por un observador ciego y entrenado, con la magnitud de la tinción en cada cuadrante clasificada como: 0 , sin tinción; 1 , tinción esporádica (que afecta a <25 % de la superficie total); grado 2, tinción punteada difusa (25-75 %); y grado 3, tinción punteada coalescente (>75 %). La calificación total se informa como la suma de las puntuaciones de los cuatro cuadrantes, que van de 0 a 1 2.
Farmacocinética y distribución tisular. Para determinar el tiempo de residencia de los activadores de CFTR en la película lagrimal preocular de ratón, los compuestos se recuperaron para cromatografía líquida/espectroscopia de masas (LC/MS) después de la administración oftálmica de una sola dosis. Se recuperaron tres lavados de ojos (3 pL de PBS cada uno) de los cantos lateral y medial con tubos microcapilares de 5 pL (Drummond Scientific Co., Broomhall, PA, EE. UU.) después del parpadeo manual del párpado (9). Los lavados agrupados se diluyeron con acetonitrilo/agua (1:1) que contenía ácido fórmico al 0,1 % y se analizaron por LC/MS mediante el uso de una columna Xterra MS C18 (2,1 mm * 100 mm, tamaño de partícula de 3,5 pm) conectada a un sistema de suministro de solvente HPLC Waters 2695 y un espectrómetro de masas Waters Micromass ZQ con ionización por electropulverización positiva.
Para estudiar la acumulación del compuesto en tejidos sistémicos, se analizó sangre, cerebro, riñón e hígado de ratón después de 14 días de dosificación tópica tres veces al día (0,1 nmol, 2 pL, 50 pM). Se recogieron muestras de sangre del ventrículo izquierdo en minitubos K3 EDTA (Greiner, Kremsmunster, Austria) y se centrifugaron (28). El sobrenadante se extrajo con un volumen igual de acetato de etilo y el extracto se secó con una corriente de aire. Los órganos de los ratones tratados y de control se extrajeron después de la perfusión ventricular con PBS heparinizado (10 unidades/ml), se pesaron, se mezclaron con ácido acético y agua (100 pl/g de tejido) y se homogeneizaron (29). Se añadió acetato de etilo (10 ml/g de tejido), las muestras se agitaron y centrifugaron (3000 rpm durante 15 min) y el sobrenadante que contenía acetato de etilo se evaporó. Los residuos obtenidos a partir de extractos orgánicos de suero y homogeneizados de órganos se reconstituyeron y analizaron mediante LC/MS como se describió anteriormente.
Modelo de ratón de ojo seco producido por escisión de glándula lagrimal. Se adaptó un modelo de ojo seco con deficiencia de humor acuoso por escisión de la glándula lagrimal (LGE) a partir de un método informado (30). La glándula lagrimal extraorbitaria se expuso a cada lado de ratones BALB/c hembra de tipo salvaje (7-8 semanas de edad) mediante incisiones cutáneas lineales de 3 mm. Se cauterizaron las vías lagrimales y se extirpó toda la glándula bilateralmente, evitando vasos y nervios faciales. Cada una de las incisiones se cerró con una única sutura de seda interrumpida 6-0. El tejido lagrimal orbitario permaneció funcional. Se excluyeron los ojos con sensibilidad corneal reducida (<5 % de los ratones estudiados), identificados a partir de úlceras corneales neurotróficas dentro de 1 día de la LGE. Los ratones se aleatorizaron para recibir cualquier tratamiento (en ambos ojos) con CFTRact-K089 (0,1 nmol) o vehículo. Los ratones se trataron tres veces al día (8 AM, 2 PM y 8 PM) durante 2 semanas comenzando el Día 1 después de la LGE. La secreción lagrimal y la tinción de LG se realizaron inmediatamente antes y una hora después de la dosis inicial en los días 4, 10 y 14 después de la LGE.
Estadística. Los datos se expresaron como la media ± error estándar de la media (SEM). Para las comparaciones directas entre dos medias, se utilizó la prueba t de Student bilateral. Para las mediciones longitudinales de la secreción lagrimal y las puntuaciones LG en el estudio de prevención del ojo seco, se utilizó una regresión lineal de efectos mixtos, ajustando la no independencia de las mediciones tomadas en el mismo ojo y en ambos ojos del mismo animal. El análisis se realizó en R v.3.2 para Mac (R Foundation for Statistical Computing, Viena, Austria), mediante el uso de los paquetes lme4 y robustlmm.
Resultados.
Caracterización de activadores CFTR de molécula pequeña. Un cribado de alto rendimiento funcional basado en células de 120 000 compuestos a 10 pM identificó 20 clases químicas de activadores de moléculas pequeñas de CFTR de tipo salvaje que produjeron >95 % de la activación máxima de CFTR. El cribado se realizó en células epiteliales FRT que expresan conjuntamente CFTR de tipo salvaje humano y un sensor de haluro de YFP citoplásmico en formato de 96 pocillos (26, 31, 32). El cribado secundario involucró mediciones de Isc en células FRT que expresan CFTR pretratadas con forskolina submáxima (50 nM). Veintiún compuestos de ocho clases químicas produjeron grandes aumentos en Isc a 1 pM (>75 % de la corriente máxima producida por 20 pM de forskolina). Un resumen de los valores de EC50 y Vmax para cada compuesto se proporcionan en la Figura 7.
Las estructuras de los activadores de las cuatro clases químicas más activas se muestran en la Figura 2A, junto con los correspondientes datos de dependencia de la concentración de las mediciones de Isc. Cada compuesto activó completamente a CFTR, ya que una alta concentración de forskolina produjo un pequeño aumento adicional en Isc, y el aumento de Isc fue completamente inhibido por un inhibidor de CFTR, CFTRinh-172. Los valores EC50 oscilaron entre 20 y 350 nM (Figura 2b). VX-770 mostró una actividad relativamente débil contra CFTR de tipo salvaje (Figura 2C). CFTRact-K032 y CFTRact-K089 tuvieron una potencia más baja y mostraron menos activación de CFTR (~50 % Vmax).
Se buscaron compuestos que se dirigieran directamente a CFTR sin causar una elevación del cAMP celular para minimizar los posibles efectos fuera del objetivo (Figura 2D). Los compuestos que producen elevaciones en cAMP intracelular (de las Clases O, Q y R), probablemente por inhibición de la fosfodiesterasa, se excluyeron de consideraciones posteriores. Se seleccionaron compuestos de potencia nanomolar de las Clases B, J y K, que no aumentaron el cAMP, para su posterior caracterización en ratones vivos.
Los activadores de CFTR aumentan el cloruro de la superficie ocular y la secreción de fluidos in vivo. Se utilizó un método de diferencia de potencial (PD) de circuito abierto desarrollado en nuestro laboratorio para evaluar la actividad del compuesto en la superficie ocular in vivo, como se muestra en la Figura 3A (21). La función del canal de Cl- se cuantificó mediante la medición de la PD durante la perfusión continua de la superficie ocular con una serie de soluciones que imponían un gradiente de Cl- transepitelial y contenían varios agonistas y/o inhibidores del canal. Primero se perfundió la superficie ocular con solución salina isosmolar para registrar la PD de línea base. Luego se agregó amilorida al perfundido, seguido de cambio a una solución de Cl- bajo en la que Cl- está con un anión impermeable, gluconato. Estas maniobras permiten la visualización directa de la activación de CFTR en respuesta a la adición de activadores de CFTR candidatos.
La Figura 3B muestra grandes hiperpolarizaciones después de la exposición a CFTRact-B074, CFTRact-J027 y CFTRact-K089, que aumentaron relativamente poco con forskolina y fueron revertidos por CFTRinh-172. En comparación, VX-770 produjo cambios mínimos en la PD de la superficie ocular (Figura 3C). La Figura 3D resume los datos de PD para los activadores indicados, con datos para compuestos adicionales informados en la Figura 7. Los estudios de control realizados en ratones CF que carecían de CFTR funcional no mostraron cambios en la PD después de la adición de cada uno de los compuestos probados, con una curva representativa mostrada para CFTRact-K032 (Figura 3E).
A continuación, se probaron los activadores de CFTR para determinar su eficacia en el aumento de la producción de lágrimas en ratones. Los experimentos preliminares identificaron una formulación oftálmica estándar (0,5 % de polisorbato) que aumentó la solubilidad del compuesto y la duración de la acción. Después de una dosis tópica única, los activadores indirectos de CFTR, la toxina del cólera, la forskolina y la 3-isobutil-1-metilxantina (IBMX) aumentaron sustancialmente la secreción lagrimal basal a los 30 min, pero estos efectos fueron transitorios e indetectables después de 2 horas (Figura 4A). Sin embargo, los activadores directos de CFTR identificados en la presente, CFTRact-B074, CFTRact-J027 y CFTRact-K089, aumentaron la secreción de fluido lagrimal en aproximadamente dos veces durante al menos cuatro horas. VX-770 produjo poca secreción lagrimal (Figura 4B). Las administraciones tópicas repetidas (tres veces al día durante un máximo de 2 semanas) produjeron hipersecreción lagrimal sostenida sin taquifilaxia (Figura 4C). Los activadores de CFTR no aumentaron la secreción de fluido lagrimal en ratones con CF, lo que demuestra una orientación selectiva de CFTR (Figura 4D).
Toxicidad y farmacocinética. Los métodos de recolección de lágrimas se validaron al demostrar la recuperación reproducible de tetrametilrodamina dextrano (3 kDa) de la superficie ocular hasta seis horas después de la instilación. La farmacocinética de CFTRact-K089 en la superficie ocular se determinó mediante LC/MS de lavados de lágrimas recuperados. Después de la instilación de 0,1 nmol de CFTRact-K089 (2 jL, 50 jM) a la superficie ocular, se recuperaron 7,9 ± 2,4 pmol y 0,011 ± 0,004 pmol a los cinco minutos y seis horas, respectivamente (Figura 5A). La cantidad de CFTRact-K089 requerido para la activación de 50 % CFTR (EC50 ~ 250 nM) se encuentra entre las líneas discontinuas, lo que refleja las concentraciones calculadas a partir de los volúmenes de lágrimas normales informados más alto y más bajo en ratones (33, 34). La cantidad de CFTRact-K089 recuperado del fluido lagrimal predice niveles terapéuticos durante al menos seis horas. La farmacocinética del fluido lagrimal de CFTRact-J027 no se pudo medir porque la sensibilidad de LC/MS era baja para este compuesto.
Después de dos semanas de dosificación tres veces al día, las cantidades de CFTRact-K089 y CFTRact-J027 estaban por debajo de los límites de detección (~10 y ~700 fmol, respectivamente) en sangre, cerebro, hígado y riñón de ratón, lo que indica una acumulación sistémica mínima. Los ratones tratados crónicamente no mostraron signos de toxicidad ocular, según lo confirmado mediante evaluación con lámpara de hendidura para hiperemia conjuntival, inflamación de la cámara anterior y claridad del cristalino. La tinción LG no mostró alteración del epitelio corneal o conjuntival (Figura 5B). Los compuestos tampoco produjeron citotoxicidad in vitro apreciable en cultivos celulares a concentraciones de hasta 10 0 jM (Figura 5C).
El activador de CFTR previene el ojo seco en un modelo de escisión de glándula lagrimal en ratones. Sobre la base de su farmacocinética favorable de la película lagrimal, se seleccionó CFTRact-K089 para la prueba en un modelo de ratón de ojo seco por deficiencia acuosa producido por LGE. Después de la LGE extraorbital en ratones BALB/c, los ratones tratados con CFTRact-K089 (0,1 nmol, administrado tres veces al día) mantuvieron el volumen lagrimal basal, mientras que el volumen lagrimal de los ratones tratados con vehículo se redujo significativamente en todos los puntos de tiempo posteriores (Figura 6 A), y durante al menos 30 días. De manera similar a lo que se informó en ratones C57/bl6 (30), la disminución del lagrimeo en ratones BALB/c tratados con vehículo se asoció con una alteración epitelial progresiva desde el día 0 hasta el día 14, que se muestra pictóricamente (Figura 6 B superior) y cuantitativamente (Figura 6 C). CFTRact-K089 no solo restauró la secreción lagrimal en ratones con LGE sino que evitó notablemente la alteración del epitelio de la superficie ocular en todos los puntos de tiempo (Figura 6 B). Los ojos tratados con vehículo desarrollaron epiteliopatía corneal progresiva y difusa (aumento de la puntuación LG de 7,3 ± 0,6 en el día 14), mientras que los ojos tratados con CFTRact-K089 tuvieron una tinción mínima de LG en todos los puntos temporales (cambio de puntuación LG, -0,6 ± 0,6).
Discusión.
Un objetivo de este estudio fue investigar la utilidad potencial de los activadores de CFTR de molécula pequeña para la terapia del ojo seco. Después de varias fallas en desarrollos previos, el ojo seco sigue siendo una necesidad insatisfecha en la enfermedad ocular. En los trastornos del ojo seco, la hiperosmolaridad de la película lagrimal estimula la señalización proinflamatoria, la secreción de citocinas y metaloproteinasas y la alteración de la integridad de las células epiteliales de la córnea (35-38). Al minimizar la hiperosmolaridad de la película lagrimal, se prevé que la activación de CFTR prevenga estos cambios posteriores en la superficie ocular.
Identificamos activadores de CFTR de molécula pequeña mediante cribado de alto rendimiento que produjeron una sostenida secreción de fluido acuoso impulsada por Cf a través de la superficie ocular por un mecanismo que involucra la activación directa de CFTR en lugar de la señalización de cAMp anterior. La justificación para elegir compuestos que activan CFTR directamente fue minimizar los posibles efectos fuera del objetivo de la estimulación generalizada de cAMP y reducir la posibilidad de taquifilaxia para los compuestos que se dirigen a los receptores de señalización. Estos compuestos tenían una EC50 nanomolar baja para la activación de CFTR humano in vitro y produjeron una activación completa a concentraciones más altas. Se demostraron en ratones grandes hiperpolarizaciones de PD dependientes de CFTR e hipersecreción lagrimal. Las actividades sustanciales de los compuestos en ratones y humanos facilitarán la traslación de datos a humanos.
Encontramos que CFTRact-K089 restauró la secreción lagrimal y previno la alteración epitelial en un modelo experimental de ratón con insuficiencia lagrimal. Los activadores de CFTR pueden ser particularmente adecuados para los trastornos de la glándula lagrimal, como el síndrome de Sjogren primario, al estimular el transporte de fluidos a través del epitelio corneal y conjuntival intactos. Los activadores de CFTR probablemente ejerzan su principal efecto prosecretor en la superficie ocular, aunque existe una expresión y función indirectas de CFTR en la glándula lagrimal (39-42). La estimulación directa de la secreción lagrimal es poco probable en los estudios aquí hechos debido a la penetración mínima del compuesto en los tejidos lagrimales después de la administración tópica y la eficacia demostrada del compuesto en un modelo de insuficiencia lagrimal. En la superficie ocular, la conjuntiva probablemente aporta la mayor parte de la secreción de fluido dada su área superficial mucho más grande en comparación con la córnea (43).
Se tienen en cuenta terapias prosecretoras alternativas dirigidas a diferentes canales iónicos de la superficie ocular. El único activador de CFTR aprobado por la FDA, VX-770, se desarrolló como un "potenciador" para tratar la CF al corregir la activación del canal de ciertas mutaciones de CFTR (44). Sin embargo, VX-770 mostró una actividad relativamente pequeña contra CFTR de tipo salvaje en cultivos celulares y en ratones in vivo. La aplicación crónica de VX-770 también puede disminuir la expresión funcional de CFTR (24) y causar cataratas (observadas en ratas jóvenes; ref.42), lo que probablemente sea un efecto fuera del objetivo porque CFTR no se expresa en el cristalino.
CFTRact-K089 y CFTRact-J027 mostraron una farmacodinámica favorable y pueden administrarse convenientemente por vía tópica varias veces al día en una formulación oftálmica estándar.
En conclusión, sin desear limitarse a la teoría, se cree que la eficacia de CFTRact-K089 en un modelo de ratón clínicamente relevante de la enfermedad del ojo seco por deficiencia acuosa proporciona una prueba de principio para la terapia tópica con activador CFTR prosecretor para restaurar la secreción lagrimal basal y prevenir la patología de la superficie ocular. En comparación con los enfoques inmunosupresores, la activación de CFTR tiene la ventaja de abordar un evento temprano en la patogénesis del ojo seco. Por lo tanto, nuestros datos respaldan el potencial de desarrollo de los activadores CFTR como la primera terapia para el ojo seco en su clase.
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Ejemplo 5. Activador de CFTR fenilquinoxalinona como posible terapia prosecretora para el estreñimiento.
Resumen. El estreñimiento es una condición común para la cual los tratamientos actuales pueden tener una eficacia limitada. Mediante un cribado de alto rendimiento, recientemente identificamos un activador fenilquinoxalinona del canal de cloruro del regulador de conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR) que estimuló la secreción de fluido intestinal y normalizó la producción de heces en un modelo de ratón con estreñimiento inducido por opioides (Cil y otros. Cell Mol Gastroenterol Hepatol 2:317-327, 2016). En la presente, informamos el análisis estructura y actividad de la fenilquinoxalinona, mecanismo de acción, datos de eficacia animal en modelos agudos y crónicos de estreñimiento y datos funcionales en enterocitos humanos de cultivo primario ex vivo. El análisis de estructura y actividad se realizó en 175 análogos de fenilquinoxalinona, incluidos 15 compuestos sintetizados. El compuesto más potente, CFTRact-J027, activó CFTR con EC50 ~ 200 nM, con análisis de pinza de parche que muestra una relación lineal de corriente-tensión de CFTR con activación directa de CFTR. CFTRact-J027 corrigió la producción reducida de heces y la hidratación en un modelo de ratón con estreñimiento agudo producido por escopolamina y en una variedad de ratón con estreñimiento crónico (C3H/HeJ). La comparación directa con los fármacos prosecretores aprobados lubiprostona y linaclotida mostró una secreción de fluido intestinal sustancialmente mayor con CFTRact-J027, así como también una mayor eficacia en un modelo de estreñimiento. Como evidencia para respaldar la eficacia en el estreñimiento humano, CFTRact-J027 aumentó el transporte de fluido transepitelial en enteroides generados a partir del intestino delgado humano normal. Además, CFTRact-J027 se metabolizó rápidamente in vitro en microsomas hepáticos humanos, lo que sugiere una exposición sistémica mínima tras la administración oral. Estos datos establecen la estructura-actividad y los datos mecánicos de los activadores de CFTR de fenilquinoxalinona y respaldan su posible eficacia en el estreñimiento humano.
Introducción.
El estreñimiento es un problema clínico común que afecta al 15 % de la población de los EE. UU., con costos anuales de atención médica estimados en ~7 mil millones de dólares, de los cuales >800 millones de dólares se gastan en laxantes (1). Los tipos de estreñimiento más frecuentes incluyen el estreñimiento idiopático crónico (CIC), el estreñimiento inducido por opioides (OIC) y el síndrome del intestino irritable con predominio de estreñimiento (SII-C). Las opciones de tratamiento actuales incluyen modificación de la dieta y laxantes de venta libre, incluidos agentes que aumentan el volumen de las heces, las ablandan, crean una carga osmótica o estimulan la contracción intestinal (2). Hay tres medicamentos recetados aprobados por la FDA para el tratamiento de varios tipos de estreñimiento: linaclotida, un péptido agonista del receptor de guanilato ciclasa C que actúa mediante la inhibición el dolor visceral, estimula la motilidad intestinal y aumenta la secreción intestinal (3); lubiprostona, un análogo de la prostaglandina E que se cree que activa el canal ClC-2 de los enterocitos y quizás el CFTR (4, 5); y naloxegol, un antagonista del receptor de opioide p de acción periférica (6 ). Estos medicamentos aprobados por la FDA generalmente mostraron eficacia en el 40-50 % de los pacientes en diferentes ensayos clínicos, aunque con una respuesta inicial del paciente al placebo del 25-35% (7-9). A pesar del amplio intervalo de opciones terapéuticas, existe una necesidad continua de fármacos seguros y efectivos para tratar el estreñimiento.
Recientemente introdujimos la idea de la terapia prosecretora para el estreñimiento mediante la activación directa del canal Cl- del regulador de conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR), basado en la idea de que el aumento de la secreción de líquido intestinal aumentaría la hidratación de las heces y, por lo tanto, aceleraría el tránsito intestinal. La secreción de líquido intestinal implica activar la secreción de Cl - a través del epitelio del enterocito, que está controlado por los canales de Cl- de la membrana apical, incluyendo CFTR y quizás los canales de Cl- activados por Ca2+. CFTR es un objetivo convincente para la terapia del estreñimiento ya que su sobreactivación por enterotoxinas bacterianas en el cólera y la diarrea del viajero (E. coli enterotoxigénica) produce una secreción intestinal marcada (10, 11). Recientemente informamos que la fenilquinoxalinona CFTRact-J027, un activador de CFTR de molécula pequeña identificado por cribado de alto rendimiento, aumentó la secreción de líquido intestinal y normalizó de la producción de heces, el contenido de agua en las heces y el tránsito intestinal en un modelo de ratón con estreñimiento agudo producido por loperamida (12). El compuesto no tuvo efecto en ratones con deficiencia de CFTR, no mostró toxicidad y tuvo una exposición sistémica mínima después de la administración oral debido al rápido metabolismo hepático.
En la presente, para el desarrollo de fenilquinoxalinonas para la terapia del estreñimiento, entre otras indicaciones, estudiamos las relaciones entre la estructura y la actividad del compuesto, el mecanismo de acción mediante el análisis de pinza de parche y la eficacia en animales en modelos de estreñimiento agudo y crónico en roedores. Además, se realizaron estudios funcionales en enterocitos humanos para respaldar su utilidad para el tratamiento del estreñimiento en humanos.
Materiales y métodos.
Abreviaturas. Regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR), estreñimiento idiopático crónico (CIC), estreñimiento inducido por opioides (OIC), síndrome del intestino irritable con predominio de estreñimiento (IBS-C), partes por millón (ppm), solución salina tamponada con fosfato (PBS), espectrometría de masas por cromatografía líquida (LC/MS), receptor de endotelina B (Ednrb).
Procedimientos generales de química. Todos los productos químicos se compraron a proveedores comerciales y se usaron sin purificación adicional. Los análogos comerciales se adquirieron de ChemDiv (San Diego, CA). Todos los demás productos químicos se adquirieron de Sigma-Aldrich (St. Louis, MO) a menos que se indique de cualquier otra manera. La cromatografía analítica en capa fina se llevó a cabo en placas recubiertas previamente (gel de sílice 60 F254, 250 |jm de grosor) y se visualizó con luz UV. La cromatografía ultrarrápida se realizó mediante el uso de gel de sílice de 60 A, 32-63 jm (Fisher Scientific, Waltham, MA). Concentración al vacío se refiere a la evaporación rotatoria a presión reducida. los espectros de r m n se registraron a 400, 600 u 800 MHz a temperatura ambiente con acetona-cfe, DMSO-cfó o CDCh como solventes. Los espectr°s de 13C RMN se registraron a l00, 150 o 200 MHz a temperatura ambiente. Los cambios químicos se informan en partes por millón (ppm) con relación al pico de solvente residual. Los espectros de masas de alta resolución se adquirieron en un espectrómetro de masas LTQ Orbitrap XL equipado con una fuente de ionización por electropulverización (ThermoFisher, San Jose, CA), que funciona en el modo de iones positivos. Las muestras se introdujeron en la fuente mediante inyección en lazo a un régimen de flujo de 200 jl/min en un sistema de solventes 1:1 de acetonitrilo/agua con ácido fórmico al 0,1 %. Los espectros de masas se adquirieron mediante el uso de Xcalibur, versión 2.0.7 SP1 (ThermoFinnigan, San Jose, CA). Los espectros se calibraron externamente mediante el uso de la mezcla de calibración estándar y luego se calibraron internamente a <2 ppm con la herramienta interna del detector de masa. Los datos analíticos se informan en Datos Complementarios.
Síntesis de CFTRact-J102-J105, J109, J134-J141 (Trayectoria I).
Trayectoria I/RXN 1: N-bencil-R2-sustituido-2-nitroanilinas (1). Una solución agitada de R2-sustituido-2-nitroanilina (4 mmol) y bromuro de bencilo (5 mmol) en agua (8 ml) se selló en un tubo de vidrio de pared gruesa (10 ml) y se calentó a 110 °C durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con acetato de etilo y se añadió bicarbonato de sodio sólido (4 mmol). La mezcla resultante se lavó con agua y la capa orgánica se secó sobre MgSO4. Después de la filtración, la capa orgánica se concentró al vacío y el producto final se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice para producir nitroanilina de color brillante 1.
Trayectoria I/RXN 2: N1-bencil-R2-sustituido-1,2-diaminobenceno (2). Se disolvió nitroanilina 1 (5 mmol) en etanol (~100 mL; requiere calentamiento) y, después de enfriar a temperatura ambiente, se añadieron a la solución Zn (50 mmol) y HCl 4 M (4 mL). La mezcla se agitó hasta que se consumió el de color brillante de 1, momento en el cual la solución se filtró a través de una capa de Celite y se eliminó el solvente al vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo y la mezcla se neutralizó con NaOH 1 M. La solución de acetato de etilo se lavó con agua, se secó sobre MgSO4, se filtró y concentró al vacío. El producto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice para producir 2 como un aceite viscoso de color oscuro.
Trayectoria I/RXN 3: N-(2-(4-bencil-R2-sustituido-3-oxo-3,4-dihidroquinoxalin-2-il)-R3-sustituido-fenil)acetamida (3). Una solución de 2 (0,5 mmol) y 1-acetil-(R3sustituido)indolina-2,3-diona (0,5 mmol) en ácido acético glacial (20 ml) se calentó a 90 °C durante la noche. Al enfriar a temperatura ambiente se eliminó el solvente al vacío y el producto se lavó con etanol y se filtró para producir 3, que se usó sin purificación adicional.
Trayectoria I/RXN 4: 3-(2-amino-R3-sustituido-fenil)-1-bencil-R2-sustituido-quinoxalin-2(1H)-ona (4). A una solución de 3 (0,2 mmol) en metanol (125 ml) se añadió HCl 4 M (2,5 ml) y la mezcla resultante se calentó a 80 °C durante la noche. Al enfriar a temperatura ambiente, se eliminó el solvente al vacío y la mezcla de reacción se neutralizó con una solución de NaOH 1 M. El producto 4 se extrajo con acetato de etilo o diclorometano y se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida.
Síntesis de CFTRact-J133, J142-144 (Trayectoria II)
Trayectoria II/RXN 5: N-(R3-sustituido-2-(3-oxo-3,4-dihidroquinoxalin-2-il)fenil)acetamida (5). Una solución de 1-acetil-(R3-sustituido)indolina -2,3-diona (1 mmol) y o-fenilendiamina (1 mmol) en tolueno (10 ml) se calentó a 120 °C durante la noche. El precipitado marrón resultante de 5 se recogió por filtración, se lavó secuencialmente con tolueno y hexano y luego se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
Trayectoria II/RXN 6 : N-(2-(4-R1-sustituido-bencil-3-oxo-3,4-dihidroquinoxalin-2-il)-R3-sustituido-fenil)acetamida (6 ). Una solución de 5 (0,5 mmol), R1-sustituido bromuro de bencilo (0,6 mmol) y K2CO3 (1 mmol) en DMF (20 ml) se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo o diclorometano. La capa orgánica se lavó secuencialmente con agua y salmuera y luego se secó sobre MgSO4. La filtración y eliminación del solvente produjo 6 como un producto marrón que se lavó con etanol y se usó en la reacción de desacilación descrita anteriormente sin purificación adicional.
Cultivo de células. Las células de tiroides de rata Fischer (FRT) que coexpresan de forma estable CFTR de tipo salvaje humano y la proteína fluorescente amarilla sensible a haluros (YFP) -H148Q fueron como se describió (13). Las células se cultivaron en plástico en medio de Ham F12 modificado por Coon suplementado con suero fetal bovino al 10 %, L-glutamina 2 mM, 100 unidades/ml de penicilina y 100 jg/ml de estreptomicina. Para los ensayos de lector de placas, las células se sembraron en microplacas negras de 96 pocillos (Corning-Costar Corp., Nueva York, NY) a una densidad de 20000 células por pocillo y se analizaron 24-48 horas después de la siembra.
Ensayo de lector de placas de actividad CFTR. La actividad de CFTR se probó como se describió (13). Brevemente, las células se lavaron tres veces con solución salina tamponada con fosfato (PBS) y luego se incubaron durante 10 min con 60 jl de PBS que contenía los compuestos de prueba (a 10 jM) y una baja concentración de forskolina (125 nM). El influjo de I- se midió en un lector de placas registrando la fluorescencia continuamente (200 ms por punto) durante 2 s (línea de base) y luego durante 12 s después de la adición rápida (<1 s) de 165 jL de PBS en el que se reemplazó 137 mM de Cl- por I-. La velocidad inicial de influjo de I- se calculó mediante el uso de regresión exponencial.
Medición de corriente de cortocircuito. La corriente de cortocircuito se midió en células FRT que expresan de manera estable CFTR de tipo salvaje humano cultivadas en filtros porosos como se describió (14). La solución basolateral contenía (en mM): 120 NaCl, 5 KCl, 1 CaCh, 1 MgCh, 10 glucosa, 25 NaHCOa y 5 HEPES (pH 7,4, 37 °C). En la solución apical se reemplazó NaCl 60 mM por gluconato de Na, y el CaCh se aumentó a 2 mM, y la membrana basolateral se permeabilizó con 250 jg/ml de anfotericina B.
Experimentos de pinza de parche. Las corrientes de membrana de células enteras y de adentro hacia afuera se registraron en células FRT que expresan de manera estable CFTR de tipo salvaje humano. Para experimentos con células completas, la solución extracelular (baño) contenía (en mM): 150 NaCl, 1 CaCh, 1 MgCh, 10 glucosa, 10 manitol, 10 Na-HEPES (pH 7,4). La solución de pipeta (intracelular) contenía (en mM): 120 CsCl, 10 TEA-Cl, 0,5 EGTA, 1 MgCl2, 10 Cs-HEPES, 40 manitol, 1 ATP (7,4). Para experimentos de pinza de parche de adentro hacia afuera, la solución de pipeta contenía (en mM): 150 cloruro de N-metil-D-glucamina (NMDG-Cl), 3 CaCh, 2 MgCh, 10 Na-Hepes (pH 7,3). La solución de baño contenía (en mM): 150 NMDG-Cl, 2 MgCh, 10 EgTa, 10 Na-Hepes, 1 ATP (pH 7,3) y 125 nM de subunidad catalítica de proteína quinasa A (Promega, Sunnyvale, CA). La resistencia eléctrica de la pipeta para los experimentos en células completas y de adentro hacia afuera fue de 3 a 5 MQ. El protocolo para la estimulación consistió en etapas de tensión de 600 ms de -100 a 100 mV en incrementos de 20 mV a partir de un potencial de mantenimiento de -60 mV. El intervalo entre etapas fue de 4 s. Las corrientes de membrana se filtraron a 1 kHz y se digitalizaron a 5 kHz. Los datos se analizaron utilizando el software Igor (Wavemetrics, Portland, OR) con un software personalizado proporcionado amablemente por el Dr. Oscar Moran.
Ácido gástrico y estabilidad metabólica in vitro. Para estudiar la estabilidad del ácido gástrico se disolvió CFTRact-J027 (10 jM) en fluido gástrico simulado (0,2 NaCl, 0,7 % HCl, pH 2) y se incubó durante 3 h a 37 °C. Para estudiar la estabilidad metabólica in vitro se incubó CFTRact-J027 (5 jM) durante tiempos específicos a 37 °C con microsomas de hígado humano (1 mg de proteína/ml; Sigma-Aldrich) en tampón de fosfato de potasio (100 mM) que contenía NADPH 1 mM. Después de períodos de incubación especificados, las mezclas se enfriaron en hielo y se añadió 0,5 ml de acetato de etilo enfriado con hielo. Las muestras se centrifugaron durante 15 min a 3000 rpm, los sobrenadantes se evaporaron a sequedad y los residuos se disolvieron en 100 jL de fase móvil (acetonitrilo: agua, 3:1) y se analizaron mediante espectrometría de masas por cromatografía líquida (LC/MS). El sistema de solventes consistía en un gradiente lineal de 5 a 95 % de acetonitrilo durante 16 min (flujo de 0,2 ml/min). Los espectros de masas se adquirieron en un espectrómetro de masas (Waters 2695 y Micromass ZQ, Milford, MA) mediante el uso de ionización por electropulverización (+), rango de masa de 100 a 1500 Da, tensión de cono de 40 V.
Animales. Los experimentos con animales fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la UCSF. Los animales se alojaron en jaulas comunitarias en un ambiente de temperatura y humedad controlado con un ciclo de luz/oscuridad de 1 2 horas y se les proporcionó comida y agua estándar para roedores ad libitum. Los ratones CD1 hembra de tipo salvaje se criaron en el Centro de Recursos para Animales de Laboratorio de la UCSF. Los ratones hembra C3H/HeJ, que tienen una mutación espontánea en TLR4 (Tlr4lps-d) y sus ratones de control de base C3H/HeOuJ se adquirieron de Jackson Laboratories (Bar Harbor, ME).
Modelos de estreñimiento en ratones. A los ratones CD1 (de 8 a 10 semanas de edad) se les administró loperamida (0,3 mg/kg) o escopolamina (0,5 mg/kg) por vía intraperitoneal (ip) para inducir el estreñimiento. Se administró CFTRact-J027 (10 mg/kg, en solución salina que contenía DMSO al 5 % y Kolliphor HS 15 al 10 %) por vía ip u oral (po) 1 h antes, al mismo tiempo, o 1 h después de la loperamida/escopolamina en diferentes experimentos. Los ratones de control se trataron solo con vehículo. Algunos ratones fueron tratados por vía oral con lubiprostona (0,5 mg/kg) o linaclotida (0,5 mg/kg, Toronto Research Chemicals Inc., Toronto, Ontario, Canadá). En los puntos de tiempo designados, los ratones se colocaron individualmente en jaulas metabólicas con alimento y agua proporcionados ad libitum. Se recogieron muestras de heces durante 3 h y se determinó el peso total de las heces y el número de gránulos fecales. Las muestras de heces se secaron a 80 °C durante 24 h y el contenido de agua de las heces se calculó como [peso húmedo-peso seco]/peso húmedo.
La eficacia de CFTRact-J027 administrado por vía oral (10 mg/kg) también se probó en una variante de ratón con estreñimiento genético (15) (C3H/HeJ, de 8 a 11 semanas de edad) y sus contrapartes de tipo salvaje (C3H/HeOuJ, de 8 a 11 semanas de edad). Los ratones se colocaron en jaulas metabólicas después de la administración de CFTRact-J027 o vehículo a tiempo cero y se recogieron las heces durante 4 h. El peso de las heces, el número de gránulos y el contenido de agua se determinaron como se describió anteriormente. Se midió el tiempo de tránsito del intestino completo para evaluar la motilidad intestinal, en el que a los ratones tratados con CFTRact-J027 (10 mg/kg, ip) o vehículo en el tiempo cero se les dio 100 jL de marcador azul (5 % de azul de Evans, 5 % de goma arábiga) por vía oral. Se determinó el tiempo de aparición del tinte azul en las heces. Todos los experimentos en ratones C3H/HeJ y C3H/HeOuJ se realizaron en animales emparejados para minimizar la variabilidad.
Modelo de asa cerrada de secreción de líquido intestinal. A los ratones se les dio acceso a agua con dextrosa al 5 % pero no a alimentos sólidos durante 24 h antes de los experimentos. Los ratones se anestesiaron con isoflurano y la temperatura corporal se mantuvo durante la cirugía a 36-38 °C mediante el uso de una almohadilla térmica. Se hizo una pequeña incisión abdominal para exponer el intestino delgado y se aislaron mediante suturas las asas yeyunales medias cerradas (de 2 a 3 cm de longitud). Las asas se inyectaron con 100 ^L de vehículo solo o 100 ^g de CFTRact-J027, lubiprostona o linaclotida en vehículo. La incisión abdominal se cerró con suturas y se permitió que los ratones se recuperaran de la anestesia. Se retiraron las asas intestinales a los 90 min y se midieron la longitud y el peso de las asas para cuantificar la secreción de fluido.
Mediciones de inflamación en enteroides humanos. Los tejidos de sujetos humanos se obtuvieron con la aprobación de la Junta de Revisión Institucional de la Facultad de Medicina de la Universidad Johns Hopkins (protocolo NA_00038329). Se obtuvieron muestras de biopsia duodenal y yeyunal de adultos durante una endoscopia de rutina en el Hospital Johns Hopkins. El aislamiento de la cripta, la propagación y el cultivo de enteroides fueron como se describió (16). Para la medición de la inflamación, los enteroides se sembraron en placas de 35 mm con cubreobjetos en el fondo con 1,5 ml de medio. El día del experimento, el medio se reemplazó con 3 ml de DMEM/F12 avanzado y los enteroides se incubaron con éster acetoximetílico de verde de calceína 1 mM durante 1 h a 37 °C para marcar el citoplasma. El volumen relativo de enteroide después de la adición de concentraciones específicas de forskolina se midió mediante el uso de un microscopio confocal de barrido láser (Fluoview FV10i-LIV; Olympus) a 37 °C, 5 % de CO2y 95% de humedad relativa. En algunos estudios el CFTRact-J027 se agregó 10 min antes que la forskolina. Las imágenes se adquirieron cada 10 minutos y se analizaron con el software MetaMorph versión 7.7 (Olympus) para cuantificar las áreas de enteroides.
Análisis estadístico. Los experimentos con dos grupos se analizaron con la prueba t de Student; cuando había tres o más grupos, el análisis se hizo con análisis de varianza de una vía y prueba de comparaciones múltiples post-hoc de Newman-Keuls. p<0,05 se tomó como estadísticamente significativo.
Datos analíticos.
1H NMR (600 MHz, DMSO-cfe) 59,09 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,03 (dd, J = 9,2, 2,8 Hz, 1H), 7,95 (dd, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H), 7,77 (s, 2H), 7,62 (s, 1H), 7,56 (ddd, J = 8 ,6 , 7,2, 1,6 Hz, 1H), 7,48-7,40 (m, 2H), 7,38 (dd, J =15,2, 1,1 Hz, 1H), 7,32 (dt, J = 7,8, 1,3 Hz, 1H), 7,27 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6 , 88 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 5,54 (s, 2H). 13C NMR (151 MHz, DMSO) 5 154,98, 154,64, 153,50, 139,18, 135,42, 132,76, 132,29, 131,21, 131,08, 130,71, 130,18, 129,99, 129,49, 126,79, 126,42, 124,16, 122,40, 116,24, 115,92, 115,24, 45,54. HRMS ^ H ^ B r ^ O s H]+: calculado 451,0406 / encontrado 451,0404.
1H NMR (800 MHz, DMSO-^) 510,27 (s, 1H), 8,57 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,21 (d, J =9,2 Hz, 1H), 7,94 (dd, J =7,9, 1,5 Hz, 1H), 7,61 (ddd, J = 8,7, 7,1, 1,6 Hz, 1H), 7,51 -7,45 (m, 1H), 7,45-7,39 (m, 3H), 7,35 (q, J = 7,7, 7,0 Hz, 3H), 7,28 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 5,55 (s, 2H), 2,01 (s, 3H). 13C NMR (201 MHz, DMSO) 5169,26, 154,72, 154,30, 143,54, 142,57, 136,23, 133,47, 133,14, 131,44, 130,30, 129,04, 128,13, 127,79, 127,47, 127,16, 125,50, 124,15, 122,90, 115,55, 45,80, 24,42. HRMS [C2aH1snorte4O4 + H]+: calculado 415,1401 / encontrado 415,1389.
Figure imgf000087_0001
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) 59,25 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,02 (dd, J = 9,3, 2,8 Hz, 1H), 7,93 (s, 2H), 7,56 (dd, J = 9,1,2,4 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 4,4 Hz, 4H), 7,25 (td, J = 5,3, 2,7 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 5,54 (s, 2H). 13C NMR (151 MHz, DMSO) 5155,18, 154,39, 154,32, 136,01, 135,37, 132,85, 131,71, 130,47, 129,77, 129,11, 128,83, 128,01, 127,79, 127,30, 126,98, 117,05, 116,27, 115,26, 46,21. HRMS [C2 iH i5ClN4O3 + H]+: calculado 407,0911 / encontrado 407,0908.
Figure imgf000088_0001
1 H NMR (600 MHz, Cloroformo-d) 58,04 (dd, J = 10,7, 3,0 Hz, 1H), 7,67 - 7,63 (m, 1H), 7,35 - 7,29 (m, 2H), 7,31 -7,23 (m, 4H), 7,19 (d, J = 8 , 6 Hz, 1H), 6,98 (ddd, J = 8 ,8 , 7,6, 3,0 Hz, 1H), 6,72 (dd, J =8,9, 4,9 Hz, 1H), 5,55 (s, 2H), 5,41 (s, 2H), 2,42 (s, 3H). 13C NMR (101 MHz, CDCla) 5154,94 (d, Jq-f = 235 Hz), 154,55, 154,08, 143,91, 135,32, 133,82, 132,33, 131,69, 130,26, 129,55, 128,94, 127,71, 126,98, 119,85 (d, J q-f = 7 Hz), 118,50 (d, J q-f = 23 Hz), 118,05 (d, Jq-f = 7 Hz), 117,82 (d, Jq-f = 24 Hz), 114,20, 46,39, 20,64. HRMS [C22H18FN3O H]+: calculado 360,1512 / encontrado 360,1505.
3-(2-Amino-5-yodofenil)-1-bencil-6-metilquinoxalin-2(1H)-ona (CFTR act -J141).
Figure imgf000089_0001
1 H NMR (600 MHz, Cloroformo-d) 58,59 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 8,27-8,19 (m, 1H), 7,89 (dq, J= 8,1, 1,7 Hz, 1H), 7,52­ 7,39 (m, 4H), 7,41 -7,33 (m, 1H), 7,04 (dq, J = 8,4, 1,5 Hz, 1H), 6,95-6,87 (m, 1H), 6,57 (dd, J = 8,7, 1,4 Hz, 1H), 5,95 (s, 2H), 5,75 (s, 2H). 13C NMR (151 MHz, CDCh) 5 154,47, 153,57, 147,50, 140,08, 139,82, 134,17, 132,26, 132,11, 130,64, 130,61, 129,84, 129,75, 128,53, 127,10, 125,78, 124,32, 119,23, 117,09, 113,89, 113,79, 44,61. HRMS [C21H15 IN4O3 + H]+: calculado 499,0267 / encontrado 499,0251.
Figure imgf000090_0001
1H NMR (600 MHz, Cloroformo-d) 1H NMR (600 MHz, Cloroformo-d) 58,59 (s, 1H), 8,23 (d, J = 6 Hz, 1H), 7,87 (ddd, J = 8,1, 3,9, 1,5 Hz, 1H), 7,81 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz, 1H), 7,53 - 7,42 (m, 2H), 7,37 (dq, J = 23,7, 8,3, 7,8 Hz, 2H), 7,28 - 7,19 (m, 1H), 7,09 (dq, J = 24,8, 8,7, 7,9 Hz, 2H), 6,90- 6,77 (m, 1H), 6,57 (d, J = 8 , 6 Hz, 1H), 5,77 (d, J = 2,2 Hz, 2H). 13C NMR (151 MHz, CDCla) 5154,56, 153,56, 147,43, 140,04, 139,81, 138,68, 133,49, 133,22, 132,28, 131,88, 130,76, 130,65, 129,87, 128,75, 128,20, 126,78, 124,31, 119,23, 116,89, 113,84, 111,25, 44,59. HRMS [C22H15IN4O H]+: calculado 479,0369 / encontrado 479,0362.
Resultados.
Síntesis y análisis de estructura-actividad de activadores CFTR de fenilquinoxalinona. Una información limitada de la relación estructura-actividad (SAR) surgió del análisis de 160 análogos de fenilquinoxalinona disponibles comercialmente, ya que la mayoría tenía estructuras bastante diferentes o múltiples modificaciones de sustituyentes en relación con CFTRact-J027. La Tabla 2 informa la actividad de CFTR de los análogos comerciales seleccionados más estrechamente relacionados con CFTRact-J027 (J051 - J062). El sustituyente bencilo (R1) en la fenilquinoxalinona pareció ser importante, así como el no sustituido (CFTRact-J051), el metilo (CFTRact-j052) y el fenilacetilo (CFTRact-J058) redujeron grandemente la actividad. La sustitución limitada (posición R2) en el anillo de quinoxalinona mostró que un grupo nitro (CFTRact-J054) fue tolerado. Los cambios de sustituyentes en el anillo de fenilo también modulan fuertemente la actividad, por ejemplo, el cambio de los sustituyentes R3 y R4 a N-bencilo y bromo (CFTRact-J056) o N-acetilo y no sustituido (CFTRact-J057) redujeron grandemente la actividad. Debido a la información limitada de los compuestos comerciales, se llevó a cabo la síntesis de análogos específicos.
Tabla 2. Activación de CFT or análo os de fenil uinoxalinona.
Figure imgf000091_0001
EC so aproximada de análogos comerciales (CFTRact-J051 - J062) deducida del análisis de dos puntos de concentración. EC50 de compuestos sintetizados medidas a partir de un estudio de dosis-respuesta completo.
Se desarrollaron dos rutas para sintetizar los análogos de fenilquinoxalinonas (Figura 14A). La Trayectoria I comienza con N-bencilación de 2-nitroanilina apropiada ( ^ 1) y la subsiguiente reducción del grupo nitro para dar el análogo 1,2-diamino 2. La condensación de esta diamina con la apropiada N-acilisatina en ácido acético libera quinoxalin-2(1H)-ona 3; los intentos de efectuar esta transformación con isatinas no aciladas normalmente producían el producto deseado con bajo rendimiento. Finalmente, la desacilación catalizada por ácido de 3 dio como resultado la quinoxalin-2(1H)-ona 4. La Trayectoria II permitió la introducción tardía del resto N-bencilo, pero requiere el uso de una 1 ,2 -diamina simétrica (en la presente, 1 ,2 -diaminobenceno) para evitar la formación de regioisómeros en la quinoxalin-2 (1 H)-ona 5. La N-bencilación con el apropiado bromuro de bencilo da como resultado quinoxalin-2 (1 H)-ona 6 y la desacilación dio la quinoxalin-2(1H)-ona 4.
La actividad de CFTR se midió mediante el uso de un ensayo de lector de placa de influjo de yoduro después de la adición extracelular de yoduro en células FRT que expresan de manera estable CFTR de tipo salvaje humano y un sensor de haluro fluorescente YFP. La Figura 14B muestra los datos de dependencia de la concentración de los compuestos seleccionados, con los valores EC50 para los compuestos dados en la Tabla 2.
La Figura 14C resume los resultados de estructura-actividad para los compuestos sintetizados informados en la Tabla 2 (compuestos con designaciones J1##). En general, tener un grupo de sustitución (R1 ) en el grupo bencilo, especialmente en las posiciones para- u orto-, redujo la actividad (CFTRact-J102, -J103, -J104, -J143, -J144). La acetilación del grupo amino en CFTRact-J027, para dar CFTRact-J109, también redujo la actividad. Análogos con sustitución de haluro en la posición 6 (R2) del anillo central de quinoxalinona (CFTRact-J105, -J135, -J136) dieron una actividad similar o ligeramente reducida en comparación con CFTRact-J027, y la modificación de R2 a un sustituyente metilo fue tolerada (CFTRact-J141). Cambiar el 5-nitro en el anillo de fenilo de la fenilquinoxalinona a 5-fluoro, 5-bromo o 5-yodo redujo ligeramente la actividad (por ejemplo, comparar CFTRact-J134 a -J027), mientras que cambiar a la posición 6 (comparar CFTRact-J134 a -J142) redujo la actividad grandemente. CFTRact-J135, el análogo sintetizado más potente, activó completamente CFTR (Figura 14D), ya que el agonista de cAMP forskolina produjo un aumento adicional mínimo en la corriente, con EC50 ~300 nM, que fue comparable a CFTRact-J027. Como ninguno de los análogos comerciales y sintetizados fue significativamente más potente que CFTRact-J027, que ya demostró tener propiedades farmacológicas favorables y eficacia en ratones (1 2 ), se realizaron estudios posteriores con CFTRact-J027.
La electrofisiología de la pinza de parche muestra la activación directa de CFTR por CFTRact-J027. La pinza de parche se realizó para investigar el mecanismo de activación de CFTR por CFTRact-J027. En registros de células enteras, CFTR se activó parcialmente mediante una concentración baja de forskolina (150 nM) para proporcionar una estimulación máxima de ~25 %. La adición de CFTRact-J0271 pM en la condición extracelular aumentó aún más la actividad de CFTR en más de cuatro veces (Figuras 15A-15C). Las corrientes activadas por forskolina y CFTRact-J027 cambiaron linealmente con la tensión aplicada y fueron bloqueadas por CFTRinh-172 10 pM. La activación de CFTR también se midió en condiciones libres de células mediante el uso de la configuración de pinza de parche de adentro hacia afuera mediante el uso de puntas de pipeta grandes para obtener macroparches que contenían múltiples canales de CFTR. Después de inducir la fosforilación con ATP submáximo y la subunidad catalítica de la proteína quinasa A, CFTRact-J027 incrementó fuertemente la actividad de CFTR (Figura 15D). CFTRact-J027, por lo tanto, activa CFTR mediante un mecanismo de enlace directo, lo que es consistente con datos anteriores que muestran que CFTRact-J027 no eleva la concentración de cAMP celular (12).
Eficacia de CFTRact-J027 en un modelo de ratón de estreñimiento agudo inducido por escopolamina. Anteriormente mostramos la eficacia de CFTRact-J027 en un modelo de ratón de estreñimiento inducido por loperamida (12). Para mostrar la eficacia en un modelo alternativo de estreñimiento agudo en ratón sin opioide, CFTRact-J027 se administró por vía oral 1 hora antes que la escopolamina. La Figura 16A muestra la normalización de los parámetros de las heces por CFTRact-J027 en los ratones tratados con escopolamina. CFTRact-J027 también fue efectivo cuando se administró por vía intraperitoneal después del desarrollo de estreñimiento en modelos de loperamida y escopolamina (Figura 16B). Sin embargo, CFTRact-J027 no fue efectivo cuando se administró por vía oral después del desarrollo de estreñimiento (Figura 16C), lo cual no es inesperado ya que tanto la escopolamina como la loperamida retrasan el vaciamiento gástrico y el tránsito intestinal, lo que probablemente previene el suministro de CFTRact-J027 a su sitio de acción.
Eficacia de CFTRact-J027 en un modelo genético de ratón de estreñimiento crónico. CFTRact-J027 también se probó en un modelo genético de ratón (C3H/HeJ) de estreñimiento crónico. Los ratones C3H/HeJ tienen una mutación espontánea en el gen del receptor tipo Toll 4 (Tlr4lps-d), que provoca interacciones deterioradas entre la microbiota intestinal y las neuronas entéricas, lo que da como resultado una supervivencia neuronal entérica reducida con un tránsito intestinal retrasado y una disminución de la producción de heces (15). Descubrimos que los ratones C3H/HeJ tienen una producción de heces reducida en ~30 % en comparación con los ratones de control en un entorno similar (C3H/HeOuJ), con un contenido de agua en las heces notablemente reducido y un tiempo de tránsito intestinal prolongado. La administración oral de 10 mg/kg de CFTRact-J027 aumentó el peso de las heces, el número de gránulos y el contenido de agua en las 4 h en ratones C3H/HeJ al nivel de los controles de tipo salvaje (Figura 17A). CFTRact-J027 normalizó el aumento del tiempo de tránsito del intestino completo en ratones C3H/HeJ (Figura 17B), pero no afectó a los parámetros de las heces ni al tiempo de tránsito del intestino completo en los ratones de control de tipo salvaje.
CFTRact-J027 es estable en ácido gástrico y rápidamente metabolizado por microsomas hepáticos humanos. La incubación de CFTRact-J02710 pM en fluido gástrico simulado (pH 2) a 37 °C durante 3 h no mostró degradación del compuesto (Figura 18A). Las medidas de estabilidad metabólica in vitro en microsomas hepáticos humanos revelaron un rápido metabolismo del compuesto (vida media de eliminación ~35 min), y sólo quedó el 34 % del compuesto a los 60 min (Figura 18B).
Mayor eficacia de CFTRact-J027 en comparación con lubiprostona y linaclotida para aumentar la secreción intestinal y normalizar los parámetros de las heces en el estreñimiento. La eficacia de CFTRact-J027 en el aumento de la secreción intestinal se comparó con la de los fármacos prosecretores aprobados lubiprostona y linaclotida. En un primer conjunto de estudios, la acumulación de fluido intestinal se midió en un modelo de asa intestinal cerrada. Se inyectaron asas medioyeyunales cerradas con CFTRact-J027 o fármaco de prueba, y se cuantificó la acumulación de fluido después de 90 min. Se produjo una acumulación de fluido intestinal significativamente mayor con CFTRact-J027 en comparación con dosis iguales de lubiprostona o linaclotida (Figura 19A). En un segundo grupo de estudios, se comparó la eficacia del fármaco en un modelo de ratón de estreñimiento inducido por escopolamina. CFTRact J027 fue más eficaz para aumentar la producción de heces, el número de gránulos y el contenido de agua en comparación con dosis supramáximas (250-500 veces mayor que la dosis humana en mg/kg) de lubiprostona y linaclotida (Figura 19B).
CFTRact-J027 aumentó la secreción de fluidos en enteroides generados a partir de duodeno y yeyuno humanos normales. Para estudiar la eficacia de CFTRact-J027 en un sistema modelo de relevancia directa para el intestino humano, se midieron las respuestas de inflamación en enteroides generados a partir de duodeno y yeyuno humanos normales. Los enteroides comprenden una capa epitelial sellada de enterocitos con CFTR expresado en la membrana luminal interna, en la que la activación de CFTR produce una respuesta de inflamación durante decenas de minutos (16, 17). Los enteroides generados a partir de duodeno y yeyuno humanos mostraron una respuesta de inflamación lenta a forskolina 0,1 o 0,2 pM (Figura 20), que aumentó con el pretratamiento durante l0 min con CFTRact-J027, con mayor efecto observado para enteroides del yeyuno. La respuesta producida por CFTRact-J027 fue aproximadamente el 50 % de la producida por la forskolina máxima (5 pM).
Discusión.
CFTRact-J027 mostró eficacia en modelos de estreñimiento en roedores inducido por agentes antimotilidad opioides y no opioides, así como también en ratones C3H/HeJ con estreñimiento crónico. Los agentes antimotilidad opioides y no opioides se utilizan ampliamente para probar laxantes en roedores, ya que estos modelos son técnicamente simples e informativos en estudios a corto plazo, y los modelos de opioides tienen una gran relevancia para la OIC en humanos. Sin embargo, pueden tener una relevancia limitada para CIC e IBS-C humanos, que son afecciones crónicas. Los modelos genéticos de estreñimiento crónico tienen más relevancia para la CIC y el IBS-C humanos debido a su fenotipo crónico y no requieren intervenciones farmacológicas dirigidas a la motilidad intestinal. Aunque hay modelos genéticamente estreñidos de la enfermedad de Hirschprung con mutaciones espontáneas en receptor de endotelina B (Ednrb) y mutación dirigida en el ligando Ednrb endotelina 3 que manifiestan colon agangliónico (18­ 20), en la presente usamos ratones C3H/HeJ porque manifiestan estreñimiento crónico, pero con un fenotipo más leve y supervivencia normal (15), lo que los hace más relevantes para CIC y IBS-C que no ponen en peligro la vida. Encontramos que CFTRact-J027 fue efectivo tanto en modelos de estreñimiento farmacológicos y genéticos, lo que respalda su uso potencial en formas agudas y diversas de estreñimiento crónico en humanos, incluidos CIC, IBS-C y OIC.
Se desarrolló un enfoque modular para la síntesis eficaz de análogos de fenilquinoxalinona mediante el uso de nitroanilinas, bromuros de bencilo e isatinas sustituidas. Las fenilquinoxalinonas más potentes tienen propiedades farmacológicas favorables, que incluyen la presencia de múltiples aceptores de enlaces de hidrógeno, peso molecular promedio de ~400 Da, aLogP de ~4,0 y áreas superficiales polares topológicas de ~80 A2 (21, 22).
Los estudios de pinza de parche indicaron la activación directa de CFTR por CFTRact-J027. Activación de CFTR por CFTRact-J027 requirió un bajo nivel de fosforilación, como lo produjo la forskolina submáxima en registros de células enteras y ATP/subunidad catalítica de proteína quinasa A en parches de adentro hacia afuera, y por una baja concentración de forskolina en mediciones de inflamación de enteroide. También se requiere la fosforilación de CFTR basal para otros activadores de CFTR, incluido el compuesto clínicamente aprobado VX-770, un potenciador de algunos mutantes CFTR que causan fibrosis quística (23). La relación corriente-tensión en células estimuladas con CFTRact-J027 fue lineal, como se esperaba para la función mediada por CFTR. La activación de CFTR por CFTRact-J027 en parches de adentro hacia afuera indica un mecanismo de activación directa, probablemente en un sitio del dominio citoplasmático de CFTR. Se necesitan más estudios para definir el sitio de unión preciso de CFTRact-J027 en CFTr , que probablemente sean bastante desafiantes debido al gran tamaño de CFTR y su complejo mecanismo de activación. De hecho, se desconoce el sitio de acción de los potenciadores y correctores clínicamente aprobados de mutantes CFTR que causan fibrosis quística.
Encontramos un mayor efecto de CFTRact-J027 en comparación con lubiprostona o linaclotida para estimular la secreción de fluido en el intestino del ratón, lo que se tradujo en una mayor eficacia para aumentar la producción de heces y la hidratación en un modelo de estreñimiento con escopolamina. La mayor eficacia de CFTRact-J027 puede deberse a una mayor secreción intestinal. Se cree que la lubiprostona y la linaclotida actúan principalmente al inducir la secreción de fluido intestinal, aunque por diferentes mecanismos. Estos compuestos activan indirectamente las vías secretoras intestinales al aumentar los niveles de nucleótidos cíclicos celulares a través de sus acciones sobre los receptores de prostanoides y guanilato ciclasa C, respectivamente (3, 5). La activación no selectiva de las vías de los nucleótidos cíclicos puede ser responsable en parte de los efectos secundarios de estos fármacos. En comparación con la lubiprostona y la linaclotida, los activadores de CFTR de acción directa tienen un mecanismo de acción definido que se dirige a un solo transportador de iones prosecretores, con menos posibilidad de efectos secundarios debido a la ausencia de una elevación global de nucleótidos cíclicos (24). Además, es menos probable que induzca la taquifilaxia si se dirige directamente a CFTR en lugar de a los receptores anteriores o a las vías de señalización. Si la mayor acción terapéutica de CFTRact-J027 comparado con lubiprostona o linaclotida visto en la presente en ratones se trasladará a humanos, debe esperar los datos de los ensayos clínicos.
Los resultados preclínicos en la presente respaldan las pruebas de CFTRact-J027 o activadores alternativos dirigidos a CFTR en el estreñimiento en humanos. Previamente reportamos una ED50 de 0,5 mg/kg para CFTRact-J027 administrado por vía oral en un modelo de loperamida en ratones, lo que se traduce en una dosis de 35 mg para un humano de 70 kg. La duración del efecto para CFTRact-J027 es de al menos 3-4 h en ratones, lo que sugiere que una administración de una vez al día puede ser adecuada para el tratamiento del estreñimiento en humanos. Estudios de farmacología en ratones (12) y el rápido metabolismo encontrado aquí con microsomas hepáticos humanos (t-i/235 min) predicen una exposición sistémica mínima después de la administración oral de CFTRact-J027 debido al rápido metabolismo hepático probablemente por un mecanismo de primer paso, aunque se necesitarán mediciones farmacocinéticas formales en humanos. Se espera que la exposición sistémica mínima limite los efectos extraintestinales fuera del objetivo de CFTRact-J027, como lo demuestran nuestros estudios de toxicidad previos en ratones que no muestran ningún efecto oral crónico en dosis altas de CFTRact-J027 en recuentos sanguíneos, química sérica y contenido de agua pulmonar (12). Un efecto secundario potencial de cualquier laxante es la diarrea, que puede ocurrir con CFTRact-J027 de manera dependiente de la dosis y requiere un ajuste de dosis apropiado.
En conclusión, nuestros resultados muestran que una molécula pequeña dirigida a CFTR aumenta la secreción de fluido intestinal y es eficaz por vía oral en modelos de ratón con estreñimiento agudo y crónico. CFTRact-J027 indujo la secreción de fluido de enterocitos en enteroides humanos y mostró un metabolismo rápido en microsomas hepáticos humanos, lo que respalda su utilidad para el estreñimiento humano.
Referencias (Ejemplo 5).
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Ejemplo 6 - Activadores CFTR de fenilquinoxalinona de alta potencia
Abreviaturas: CFTR, regulador de conductancia transmembrana de fibrosis quística; DMF, dimetilformamida; DMSO, sulfóxido de dimetilo; FTR, tiroides de rata Fischer; YFP, proteína amarilla fluorescente; PBS, solución salina tamponada con fosfato; TA, temperatura ambiente; TLC, cromatografía en capa fina.
Resumen. Anteriormente identificamos la fenilquinoxalinona CFTRact-J027 (4) como un activador de CFTR con un EC50 de ~200 nM, y demostramos su eficacia terapéutica en modelos de estreñimiento en ratones. En la presente, se realizaron estudios de estructura y actividad en 36 análogos de fenilquinoxalinona sintetizados para identificar compuestos con potencia mejorada y estabilidad metabólica alterada. La síntesis del núcleo de fenilquinoxalinona se realizó generalmente por condensación de 1,2-fenilendiaminas con feniloxoacetatos sustituidos. Los estudios de estructura-actividad establecieron, entre otras características, la naturaleza privilegiada de un resto nitro correctamente posicionado en el grupo 3-arilo. Los análogos sintetizados mostraron una potencia de activación de CFTR mejorada en comparación con 4 con EC50 hasta 21 nM y con mayor estabilidad metabólica. Los activadores de CFTR tienen indicaciones terapéuticas potenciales en estreñimiento, ojo seco, enfermedades hepáticas colestáticas y trastornos inflamatorios pulmonares.
Introducción.
El regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR) es un canal de cloruro regulado por cAMP que se expresa en el epitelio de los mamíferos en los sistemas respiratorio, gastrointestinal y reproductivo, así como también en las glándulas exocrinas y otros tejidos [1]. Las mutaciones de pérdida de función en CFTR causan fibrosis quística, y la sobreactivación de CFTR causa ciertas diarreas secretoras, como en el cólera y la diarrea del viajero [2 ]. CFTR se considera un objetivo farmacológico importante, con activadores de CFTR de beneficio potencial para el estreñimiento [3,4], ojo seco [5], trastornos inflamatorios pulmonares [6 ] y enfermedad hepática colestásica; los inhibidores de CFTr de tipo salvaje pueden ser útiles para el tratamiento de ciertas diarreas secretoras y la enfermedad renal poliquística [7,8]; y los correctores y potenciadores de CFTR mutantes para el tratamiento de la fibrosis quística [9].
Previamente identificamos mediante cribado de alto rendimiento la fenilquinoxalinona CFTRact-J027 (Comp 4; Figura 21) como un activador de CFTR y demostramos su eficacia para normalizar la producción de heces, la hidratación y el tránsito intestinal en un modelo de ratón con estreñimiento inducido por opioides [3]. La fenilquinoxalinona 4 activó la conductancia de cloruro del CFTR con una EC50 de ~200 nM y no mostró acciones o toxicidad aparentes fuera del objetivo después de la administración crónica en ratones. En un estudio de seguimiento [4], Comp 4 demostró mediante pinza de parche y estudios bioquímicos que se dirigía directamente a CFTR, y se demostró que activaba CFTR en enterocitos humanos y normalizaba los parámetros de las heces en modelos de ratón con estreñimiento agudo y crónico. Las comparaciones lado a lado de la secreción de fluido intestinal y la producción de heces en modelos de estreñimiento mostraron una mayor eficacia de 4 que las dosis supramáximas de los medicamentos aprobados por la FDA, lubiprosona y linaclotida.
Aquí, motivados por la potencial utilidad terapéutica de los activadores de CFTR basados en fenilquinoxalinona en el estreñimiento y otras enfermedades, sintetizamos 36 análogos de fenilquinoxalinona 4 para establecer relaciones estructura-actividad e identificar compuestos con mayor potencia. Además, aunque que el rápido metabolismo hepático de 4 da como resultado una exposición sistémica mínima luego de la administración oral en ratones, lo cual es deseable para el tratamiento del estreñimiento, también buscamos activadores de CFTR de fenilquinoxalinona con mayor estabilidad metabólica para el tratamiento de trastornos pulmonares y hepáticos donde la exposición sistémica es necesaria.
Química
Síntesis general de fenilquinoxalinonas. La mayor parte de la fenilquinoxalinona en este estudio se sintetizó convenientemente en cuatro etapas a partir de acetofenonas (Esquema 1 a continuación). Generamos el núcleo de fenilquinoxalinona mediante la condensación de o-fenilendiaminas con feniloxoacetatos sustituidos (6 ), que se sintetizaron siguiendo los métodos de la literatura [10]. Brevemente, la acetofenona sustituida se bromó doblemente con bromo en 1,4-dioxano para dar 5, luego se calentó en DMSO seguido de la adición de metanol para dar 6. La fenilquinoxalinona 7 fue ^-alquilada mediante el uso de K2CO3 y R-X en DMF [11] y los productos puros (1-3) se obtuvieron mediante cromatografía en columna.
Figure imgf000096_0001
(a) Br2, 1,4-dioxano; (b) DMSO, A; MeOH; (c) tolueno; d) R-Br, K2CO3, DMF.
La fenilquinoxalinona la se preparó como se describe en el Esquema 2. El tratamiento de 3-fluoro-4-nitrobenzoato de metilo (8 ) con 2-cianoacetato de metilo en condiciones básicas produjo el intermedio 9 [12]. La oxidación aeróbica catalizada por yoduro de cobre (I) posterior [12] proporcionó 2-oxo-2-fenilacetato de metilo 10 y, a partir de aquí, se preparó el objetivo 1a en paralelo a la química empleada en el Esquema 1. Con 1a en la mano, se lograron la saponificación y la nitro reducción como se describe en el Esquema 3 para producir los análogos 1b, 1j y 1 k.
Figure imgf000097_0001
Los análogos de fenilquinoxalinona de anillo restringido 16 y 20 se prepararon como se describe en el Esquema 4. El 2-amino-3-nitrofenol se N- y O-alquiló con 1,2-dibromoetano para generar el intermediario 14 y la subsiguiente reducción con nitro y condensación de la diamina resultante con 1-acetil-5-nitroindolina-2,3-diona condujo sin problemas al analógico 16 [13]. Mediante el empleo de 2-bromo-1-feniletano-1-ona en lugar de 1,2-dibromoetano y 5-nitroindolina-2,3-diona en lugar de 1-acetil-5-nitroindolina-2,3-diona, se produjo el análogo 20 [14]. Curiosamente, la reacción de 5-fluoroización de N-bencil-1,2-diaminobenceno (en analogía con el protocolo empleado para preparar los compuestos 16, 20 y 4) condujo a 22 y el intento de desacilación de 21 (X = NO2) condujo a 23.
Figure imgf000098_0001
(a) KOH, DMF; (b) H2, Pd/C, MeOH; (c) HOAc, tolueno; (d) K2CO3, ACN (e) HCl, MeOH.
Resultados y Discusión.
Modificaciones del anillo 3-arilo. El compuesto 4 contiene un anillo 2-amino-5-nitrofenílico en la posición 3 del núcleo de quinoxalinona (Figura 21) y nuestro primer esfuerzo fue modificar este anillo. Se sintetizaron racionalmente varios compuestos (Tabla 3) y se determinaron sus actividades mediante el uso de un ensayo de lector de placas. El compuesto más activo fue CFTRact-J125 (1c), que solo carece del grupo 2-amino en C2 del anillo 3-arilo en comparación con 4, y mostró una potencia aproximadamente 10 veces mayor en comparación con 4. Luego sintetizamos una serie de análogos que retienen esta eliminación del grupo amino. Por el contrario, a la alta actividad de 1c, los compuestos sin el grupo 3-nitro tenían una actividad significativamente menor (1h), lo que indica la naturaleza privilegiada del grupo 3-nitro en 1c.
Tabla 3, Activación de CFTR con variación en anillo 3-arilo (EC50 se Informa en |jM,
EC a:=9 ,S as N O
"O '
Figure imgf000099_0001
1| 1m
ECkfO.018
Se sintetizaron compuestos bioisostéricos que contenían reemplazos de -COOR del resto -NO2 en el grupo 3-arilo de acuerdo con los Esquemas 2 y 3. Se encontró que el análogo de ácido carboxílico 1k era inactivo, mientras que el análogo de éster metílico 1j era moderadamente potente. La combinación de un 2 -NO2 con un 5-COOMe o un 5-COOH (1a y 1b, respectivamente) dio como resultado una actividad muy baja. La desviación posicional del grupo nitro también dio como resultado una actividad reducida, como con los análogos 2-nitro o 4-nitro de 1d y 1e, respectivamente. La introducción de otros grupos funcionales, como 4 -CF3 o 3-Br, en lugar de 3 -NO2 de 1c también mostraron baja actividad (1f y 1g, respectivamente). La adición de un flúor en C4 de 1c (es decir, 1i) redujo la actividad. Los reemplazos del grupo nitro con un nitrilo bioisostérico (11) redujeron en gran medida la actividad, pero curiosamente, el benzoxadiazol bioisostérico (1m) mostró una potencia comparable al análogo nitro (1c).
Modificaciones del núcleo de quinoxalinona. Con 1c como líder, se llevaron a cabo modificaciones de la cadena principal de quinoxalinona (Tabla 4). La sustitución de halógeno en la posición 6, como 6-CI (2b) o 6-Br (2f), mostró una buena actividad, aunque menor que la de 1c. La sustitución en las posiciones 5, 7 u 8 generalmente resultó en una menor actividad. La disustitución en las posiciones 6 y 7 (dicloro; 2d/difluoro; 2g/dimetilo; 2i) redujo la actividad.
Tabla 4. Activación de CFTR con variación en núcleo quinoxalinona [EC» se informa en pM.
Figure imgf000100_0001
Modificaciones del N^sustituyente. A continuación, modificamos el grupo N^bencilo (Tabla 5). Anteriormente informamos que no se toleraba colocar sustituyentes en el anillo bencilo [4]. Sin embargo, los análogos de heterociclo como el tiofenilo (3j), el furanilo (3i) y el piridilo (3h) mostraron una actividad comparable. Entre las cadenas cortas, los grupos alilo y etilo mostraron una actividad moderada, pero los grupos metilo y propilo tuvieron poca actividad (3a-e). El reemplazo del fenilo con un grupo aromático más grande, como el naftilo, redujo significativamente la actividad (3f y 3g).
Tabla 5, Activación de CFTR con variación en el W’-sustituyente (ECstt se informa en uM
Figure imgf000100_0002
Compuestos con anillos restringidos. Motivados por nuestros hallazgos previos de que los anillos restringidos pueden mejorar la actividad de un corrector CFTR [15], a continuación, examinamos dos tipos diferentes de análogos restringidos (Esquema 4) con rotación obstaculizada del grupo N1-alquilo (16 y 20) o el anillo de fenilo (22 y 23). Como se mostró anteriormente, la versión N-acetilada de 4 tiene una actividad muy baja [4]; por lo tanto, intentamos sintetizar 16 sin un grupo N-acilo, pero fallaron tanto el intento de desacilación de 16 como la condensación con 5-nitroisatina. Las actividades de 16 (EC50 = >10 pM) y 20 (EC50 = 0,82 pM) no fueron mayores que la de 4 (ver Tabla 6). Los compuestos de anillo fenilo restringido 22 y 23 fueron subproductos inesperados de la reacción de desacilación (véanse Esquema 4 y Tabla 6). Estos compuestos son púrpura y rojo, respectivamente, como consecuencia de sus sistemas aromáticos extendidos, y esos colores son diferentes del color amarillo brillante de la mayoría de los derivados de 4. La formación de heterociclos intramoleculares en este sistema podría ser facilitada por la presencia del grupo CF3 atrayente de electrones en la cadena principal de la quinoxalinona bajo estas condiciones de desacilación ácida. Con otros sustituyentes en la cadena principal de quinoxalinona, solo se formaron pequeñas cantidades de subproducto rojizo no caracterizado durante la etapa de desacilación, lo que sugiere una cantidad mínima de formación de subproducto.
Tabla 6. Activación de CFTR con análogos de anillo restringido (ECsd se informa en |jM.
Figure imgf000101_0001
Biología.
Caracterización in vitro de fenilquinoxalinonas. Los activadores de CFTR de fenilquinoxalinona con la potencia más alta según lo determinado por el ensayo del lector de placas, 1c y CFTRact-J170 (3j; Tabla 5), fueron caracterizaron adicionalmente. Las mediciones de corriente de cortocircuito se realizaron mediante el uso de células FRT que expresan CFTR en presencia de un gradiente de cloruro transepitelial y con permeabilización de la membrana basolateral de la célula; en consecuencia, la corriente es una medida directa y lineal de la conductancia del cloruro de CFTR. Los datos representativos en la Figura 22 para 1c y 3j muestran un pequeño aumento en la corriente luego de la adición de una baja concentración de forskolina, seguido de aumentos dependientes de la concentración en la corriente luego de las adiciones del activador. Los valores EC50 fueron de 21 y 70 nM para 1c y 3j, respectivamente.
Se estudió adicionalmente la especificidad CFTR del compuesto más potente, 1c. A 10 pM, 1c no afectó el nivel de cAMP celular (Figura 23A), ni elevó el calcio citoplasmático ni inhibió la elevación del calcio citoplasmático estimulada por ATP (Figura 23B). Además, 1c a 10 pM no inhibió ni activó los canales de cloruro activados por calcio en células HT-29 (Figura 23C) o en células FRT que expresan TMEM16A (Figura 23D).
Eficacia de 1c en un modelo de estreñimiento agudo en ratón inducido por loperamida. Anteriormente demostramos la eficacia de 4 en un modelo de estreñimiento en ratones inducido por loperamida [3,4]. En la presente, se probó la eficacia de 1c. Se administró la fenilquinoxalinona 1c por vía oral a ratones 1 h antes de la loperamida, y se recogieron muestras de heces 3 h después de la loperamida. La Figura 24 muestra que la administración oral de 1c normalizó completamente el peso de las heces, el número de gránulos y la hidratación con la mitad de la dosis efectiva máxima (ED50) < 1 mg/kg.
Se demostró previamente que la fenilquinoxalinona 4 tiene una biodisponibilidad oral mínima y un metabolismo rápido [3,4]. Aunque estas propiedades son favorables para aplicaciones "tópicas" en el tratamiento del estreñimiento y el ojo seco en las que no se necesita la exposición sistémica, no son favorables para el tratamiento de enfermedades hepáticas y pulmonares en las que se desea la exposición sistémica y la acumulación en órganos. La Figura 25 muestra un metabolismo microsómico hepático in vitro de 1c sustancialmente más lento en comparación con 4, con casi el 100 % de 4 metabolizado a los 60 min en comparación con <40 % del metabolismo de 1c.
En conclusión, la síntesis de 36 fenilquinoxalinonas estableció relaciones estructura-actividad e identificó compuestos con una potencia mejorada 10 veces mayor y una mayor estabilidad metabólica que el compuesto de referencia 4. El análogo más potente, 1c, mostró selectividad de CFTR y eficacia en un modelo de ratón de estreñimiento agudo inducido por opioides. La activación de CFTR por fenilquinoxalinonas puede tener utilidad en el estreñimiento y el ojo seco, como lo respaldan los datos experimentales anteriores en animales, así como también en los trastornos pulmonares inflamatorios y la colestasis hepática.
Detalles y datos experimentales.
Se usó 1H-NMR para establecer la pureza y, según estos espectros, todos los compuestos analizados tuvieron una pureza de >95 %.
Ensayos funcionales de CFTR. Las células tiroideas de rata Fischer (FRT) que expresan conjuntamente de forma estable CFTR de tipo salvaje humano y la proteína fluorescente amarilla sensible a haluros (YFP) -H148Q se cultivaron como se describió [16]. Los ensayos de lector de placas de fluorescencia de la función CFTR se realizaron como se describió [16], en los que placas de 96 pocillos que contenían cultivos celulares casi confluentes se lavaron con solución salina tamponada con fosfato (pBs) y se incubaron durante 10 minutos con PBS que contenía el compuesto de prueba y forskolina 125 nM. Los ensayos de influjo de yoduro en las células se realizaron en pocillos individuales mediante la medición continua de la fluorescencia de YFP (proteína fluorescente amarilla) justo 2 s antes (para la línea de base) y 12 s después de la adición de una solución que contenía yoduro (yoduro final 140 mM). El ensayo de actividad de TMEM16A se realizó de manera similar, como se describió [17], mediante el uso de células FRT que coexpresan YFP y TMEM16A. La actividad de CaCC no TMEMI6A se ensayó como se describió [18] en células HT-29 que expresan YFP. En cada ensayo, la velocidad de influjo de yoduro y las curvas dependientes de la concentración se calcularon como se describió [16-18]. Para la medición de la corriente de cortocircuito, las células se cultivaron en filtros porosos y la corriente se midió en presencia de un gradiente de cloruro transepitelial y después de la permeabilización de la membrana basolateral, como se describió [19]. La medición del AMP cíclico y del calcio citoplásmico se realizó como se describió [17,20].
Modelo de estreñimiento agudo de loperamida en ratones. Los experimentos con ratones fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la UCSF. Como se describió [3], a los ratones CD1 (de 8 a 10 semanas de edad) se les administró 0,3 mg/kg de loperamida por vía intraperitoneal (ip) y se colocaron en jaulas metabólicas con libre acceso a alimentos y agua. Se recogieron muestras de heces durante 3 h para determinar el peso total de las heces, el número de gránulos fecales y el contenido de agua en las heces (mediante medidas de peso húmedo y seco). El compuesto 1c (o vehículo de control) se administró por vía oral 1 h antes que la loperamida.
Estabilidad metabólica in vitro. El compuesto de prueba (a 5 |j M) se incubó durante tiempos específicos a 37 °C con microsomas de hígado de ratón (1 mg de proteína/ml; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) en tampón de fosfato de potasio que contenía NADPH 1 mM, como se describió [3]. Después de la extracción con acetato de etilo, se analizó el compuesto original no metabolizado mediante LC/MS.
Procedimiento general para la síntesis de derivados de dibromofenilpropanodiona (5). Se burbujeó 1,4-dioxano (15 ml) con N2 durante 10 min con agitación. Se añadió Br2 (2 mL, 39 mmol) y la solución se agitó durante 30 min con burbujeo lento de N2. Se disolvió acetofenona sustituida (12 mmol) en 1,4-dioxano (20 ml) y se añadió. La solución mixta se agitó durante 3 h, se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua (3x) y salmuera, luego se secó sobre sulfato de magnesio. El solvente se eliminó al vacío para producir un aceite rojizo de 5, que se usó para la siguiente etapa sin purificación adicional.
Procedimiento general para la síntesis de derivados de oxofenilacetato (6). Se añadió DMSO anhidro (15 ml) al producto oleoso de 5 y se calentó a 75 °C durante la noche. La solución se enfrió a temperatura ambiente y se añadió metanol (10 ml) y se agitó durante la noche. La solución se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua (3x) y salmuera y se secó sobre sulfato de magnesio. El producto aceitoso marrón se usó en la siguiente etapa sin purificación.
Procedimiento general para la síntesis de derivados de N-H fenilquinoxalinona (7). El feniloxoacetato sustituido (6,1 mmol) se mezcló con o-fenilendiamina (1 mmol) en tolueno (20 ml) y se calentó a 70 °C durante la noche. El precipitado que se formó se recogió por filtración, se trituró con tolueno y hexano y se usó en la siguiente etapa sin purificación.
Procedimiento general para la N-alquilación de fenilquinaxolinona (1-3). El compuesto 7 (0,5 mmol) se disolvió en DMF (20 ml), bromuro de bencilo (0,6 mmol) y K2CO3 (1 mmol) y la mezcla se agitó durante la noche. La solución se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó tres veces con agua. La capa orgánica se lavó con salmuera y se secó sobre sulfato de magnesio. El producto final obtenido tras la evaporación del solvente se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida.
3-(4-bencil-3-oxo-3,4-dihidroquinoxalin-2-il)-4-nitrobenzoato de metilo (1a). Se mezcló 3-fluoro-4-nitrobenzoato de metilo (8 , 1,0 g, 5 mmol) con CS2CO3 (3,3 g, 10 mmol) en DMSO (20 ml). Se añadió cianoacetato de metilo (1,0 g, 10 mmol) y la solución se calentó a 130 °C durante 4 h y luego se mantuvo a 90 °C durante la noche. Después de enfriar, la mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo y la capa orgánica se lavó con HCl 1N, agua (3x) y salmuera. Después de secar sobre sulfato de magnesio y filtrar, el solvente se eliminó al vacío para producir 9 como un aceite púrpura, que se usó sin purificación en la siguiente etapa.
El intermediario bruto 9 (1,8 g, 6,5 mmol) se disolvió en acetonitrilo (20 ml) y se añadieron Cul (1 g, 5,3 mmol) y 1,10-fenantrolina (0,23 g, 1,3 mmol). La mezcla se hizo reaccionar a 50 °C durante la noche con un globo de O2. Después de enfriar, la solución se filtró a través de CELITE® y se concentró al vacío. El producto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida para producir 10 incoloro después de la evaporación del solvente. Rendimiento = 0,66 g (38 %).
El intermediario 10 (163 mg, 0,61 mmol) se mezcló con o-fenilendiamina (78 mg, 0,72 mmol) en tolueno (30 ml) y se calentó a 70 °C durante la noche. El precipitado de color tostado resultante de 11 se recogió por filtración, se trituró con tolueno y hexano y se secó al aire; se usó en la siguiente etapa sin purificación. Rendimiento = 185 mg (93 %). El intermediario 11 (185 mg, 0,57 mmol) se mezcló con bromuro de bencilo (150 mg, 0,88 mmol) y K2CO3 (170 mg, 1,2 mmol) en DMF (10 ml) y se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Después de la dilución con agua, la solución se extrajo con acetato de etilo, se lavó con agua (3x) y salmuera y se secó sobre MgSO4. La eliminación del solvente y la purificación por cromatografía en columna dieron 1a. Rendimiento = 149 mg (63 %). 1H NMR (400 MHz, CDCh) 8 8,40 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,22 (dd, J = 8,5, 1,9 Hz, 1H), 8,13 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,89 (dd, J = 8,0, 1,6 Hz, 1H), 7,50 - 7,37 (m, 1H), 7,36 - 7,06 (m, 7H), 5,44 (s, 2H), 3,92 (s, 3H). 13C NMR (101 MHz, CDCh) 8 164,83, 154,65, 154,19, 151,57, 134,82, 134,73, 133,30, 133,17, 132,98, 131,80, 131,61, 131,28, 130,79, 129,05, 127,83, 126,89, 124,22, 124,20, 114,82, 52,91, 46,25. HRMS [C23H1/N306+H]+ : calculado 416,1247 / encontrado 416,1253.
ácido 3-(4-bencil-3-oxo-3,4-dihidroquinoxalin-2-il)-4-nitrobenzoico (1b). El compuesto 1a (10 mg, 0,024 mmol) se disolvió en etanol caliente (30 ml). Se añadió hidróxido de sodio (0,1 g, 2,5 mmol) disuelto en agua (5 ml) y la mezcla se agitó durante 1 h. La solución enfriada se acidificó con HCl 1 N y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua y salmuera, luego se secó sobre MgSO4. El disolvente se eliminó al vacío y el producto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida. Rendimiento = 9 mg (93 %). 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 8 8,39 (s, 1H), 8,30 (d, J = 1,4 Hz, 2H), 7,98 (dd, J = 8,0, 1,4 Hz, 1H), 7,62 (ddd, J = 8 ,6 , 7,2, 1,5 Hz, 1H), 7,56 - 7,39 (m, 2H), 7,39 - 7,09 (m, 5H), 5,53 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, DMSO-de) 8 165,89, 154,75, 154,16, 151,48, 135,90, 133,43, 133,14, 132,95, 132,23, 131,82, 131,49, 130,53, 129,19, 127,93, 127,19, 124,88, 124,65, 115,88, 45,52. HRMS [C22H15N306+H]+: calculado 402,1090 / encontrado 402,1085.
1-bencil-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (1c). Rendimiento = 150 mg (70 %). 1H NMR (400 MHz, CDCh) 8 9,37 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8 ,88 (ddd, J = 7,9, 1,7, 1,1 Hz, 1H), 8,37 (ddd, J = 8,3, 2,3, 1,1 Hz, 1H), 8,03 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz, 1H), 7,70 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,55 (ddd, J = 8 ,6 , 7,3, 1,6 Hz, 1H), 7,47 - 7,30 (m, 7H), 5,63 (s, 2H). 13C NMR (151 MHz, CDCh) 8 154,51, 151,07, 148,25, 137,44, 135,48, 135,02, 133,08, 132,97, 131,27, 130,92, 129,00, 128,93, 127,82, 126,92, 124,70, 124,13, 114,50, 109,99, 46,23. HRMS [C21F116N303+H]+ : calculado 358,1192 / encontrado 358,1188.
1-bencil-3-(2-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (1d). Rendimiento = 108 mg (69 %). 1H NMR (400 MHz, CDCh) 8 8,18 (dd, J = 8,1, 1,1 Hz, 1H), 7,97 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz, 1H), 7,87 - 7,73 (m, 2H), 7,65 (ddd, J = 8,7, 7,0, 2,0 Hz, 1H), 7,48 (ddd, J = 8 ,6 , 7,3, 1,6 Hz, 1H), 7,42 - 7,24 (m, 7H), 5,52 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCh) 8 155,76, 154,35, 149,16, 135,01, 133,82, 133,30, 132,94, 131,72, 131,66, 131,00, 130,58, 129,04, 127,78, 126,96, 126,92, 124,09, 124.08, 114,83, 46,19. HRMS [C21H15N303+H]+ : calculado 358,1192 / encontrado 358,1187.
1-bencil-3-(4-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (1e). Rendimiento = 94 mg (49 %). 1H NMR (400 MHz, CDCh) 8 8,76 -8,56 (m, 2H), 8,42 - 8,23 (m, 2H), 8,01 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz, 1H), 7,56 (ddd, J = 8 ,6 , 7,3, 1,6 Hz, 1H), 7,47 - 7,29 (m, 7H), 5,62 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCh) 8 154,55, 151,50, 148,67, 141,76, 134,97, 133,20, 133,02, 131,58, 131.08, 130,67, 129,05, 127,90, 126,93, 124,25, 123,14, 114,58, 46,29. HRMS [C21H15N303+H]+ : calculado 358,1192 / encontrado 358,1187.
1-bencil-3-(4-(trifluorometil)fenil)quinoxalin-2(1H)-ona (1f). Rendimiento = 120 mg (83 %). 1H NMR (600 MHz, CDCh) 8 8,53 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,98 (dd, J = 8,0, 1,6 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,50 (ddd, J = 8 ,6 , 7,2, 1,6 Hz, 1H), 7,42 - 7,26 (m, 7H), 5,59 (s, 2H). 13C NMR (151 MHz, CDCh) 8 154,61, 152,55, 139,23, 135,16, 133,25, 132,96, 131,91 (q, Jc-f = 33 Hz), 130,90, 130,85, 129,97, 128,93, 127,74, 126,92, 124,88 (br), 124,23 (q, Jc-f =325 Hz), 123,92, 114,40, 46,18. HRMS [C22H-i5F3N2O+H]+ : calculado 381,1215 / encontrado 381,1206.
1-bencil-3-(3-bromofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (1g). Rendimiento = 295 mg (75 %). 1 H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 8,62 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 8,42 (dt, J = 7,9, 1,3 Hz, 1H), 7,99 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz, 1H), 7,65 (ddd, J = 8,0, 2,1, 1,0 Hz, 1H), 7,50 (ddd, J = 8 ,6 , 7,3, 1,6 Hz, 1H), 7,44 - 7,29 (m, 8 H), 5,60 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCI3) 8 154,58, 152,33, 137.85, 135,18, 133,32, 133,20, 132,83, 132,49, 130,82, 130,76, 129,60, 129,00, 128,35, 127,78, 126,93, 123,99, 122,29, 114,42, 46,20. HRMS [C21H15BrN2O+H]+ : calculado 391,0446 / encontrado 391,0442.
1-bencil1-3-fenilquinoxalin-2(1H)-ona (1h). Rendimiento = 62 mg (44 %). 1 H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 8,40 (ddd, J = 6,3, 2,9, 1,5 Hz, 2H), 7,99 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz, 1H), 7,53 (tt, J = 3,9, 2,4 Hz, 3H), 7,48 (ddd, J = 8 ,6 , 7,3, 1,6 Hz, 1H), 7,40 - 7,18 (m, 7H), 5,61 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCI3) 8 154,80, 154,23, 136,01, 135,37, 133,38, 132,76, 130,60, 130,45, 130,32, 129,66, 128,95, 128,13, 127,71, 126,99, 123,81, 114,36, 46,15. HRMS [C^H-^O+Hr : calculado 313,1341 / encontrado 313,1341.
1-bencil-3-(4-fluoro-3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (1i). Rendimiento = 127 mg (71 %). 1 H NMR (600 MHz, CDCI3) 8 9,31 (dd, J = 7,5, 2,3 Hz, 1H), 8,87 (ddd, J = 8 ,8 , 4,3, 2,3 Hz, 1H), 7,98 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz, 1H), 7,52 (ddd, J = 8 ,6 , 7,2, 1,5 Hz, 1H), 7,45 - 7,36 (m, 2H), 7,36 - 7,31 (m, 3H), 7,28 (dt, J = 9,7, 3,1 Hz, 3H), 5,59 (s, 2H). 13C NMR (75 MHz, CDCI3) 8 158,19, 154,54 (d, JC-F=12 Hz), 149,65, 136,75, 136,63, 134,89, 132,92 (br), 132,79 (br), 131,41, 130.86, 129,03, 127,88, 127,67 (br), 126,87, 124,28, 118,06, 117,79, 114,56. 46,25. HRMS [C21H-mFN303+H]+ : calculado 376,1098 / encontrado 376,1092.
4-amino-3-(4-bencil-3-oxo-3,4-dihidroquinoxalin-2-il)benzoato de metilo (1j). El compuesto 1a (120 mg, 0,29 mmol) se disolvió en etanol caliente (50 ml). Después de enfriar, se añadió una solución de NH4Cl saturada (30 mL) y polvo de Zn (1 g) y la mezcla se agitó durante 3 h. La solución se filtró a través de CELITE®, se concentró y purificó por cromatografía en columna ultrarrápida. Rendimiento = 100 mg (90 %). 1 H NMR (600 MHz, CDCI3) 8 9 , 26 - 8,97 (m, 1H), 7,91 (ddd, J = 8 ,6 , 2,1, 0,9 Hz, 1H), 7,83 (dt, J = 8,0, 1,2 Hz, 1H), 7,45 (ddt, J = 8,5, 7,2, 1,2 Hz, 1H), 7,38-7,11 (m, 7H), 6,77 (dd, J = 8 ,6 , 0,8 Hz, 1H), 6,18 (s, 2H), 5,59 (s, 2H), 3,87 (d, J = 0,9 Hz, 3H). 13C NMR (151 MHz, CDCI3) 8 154,68, 154,23, 151,69, 135,24, 134,67, 132,68, 132,44, 132,17, 130,20, 129,51, 128,90, 127,67, 126,94, 123,79, 118,49, 117,26, 116,47, 114,44, 51,61, 46,44. HRMS [C23H1gN303+H]+ : calculado 386,1505 / encontrado 386,1509.
ácido 4-amino-3-(4-bencil-3-oxo-3,4-dihidroquinoxalin-2-il)benzoico (1k). El compuesto 1j (20 mg, 0,052 mmol) se disolvió en metanol (100 ml) a 85°C. Se añadieron KOH (0,2 g, 3,6 mmol) y agua (30 ml) y la solución se calentó a reflujo durante la noche. El solvente se eliminó al vacío y se acidificó con HCl 1 N. El producto se extrajo con diclorometano. Rendimiento = 13 mg (67 %). 1 H NMR (600 MHz, acetona-de) 89,20 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,89 (dd, J = 8.0, 1,5 Hz, 1H), 7,84 (dd, J = 8 ,6 , 2,1 Hz, 1H), 7,51 (ddd, J = 8,5, 7,1, 1,5 Hz, 1H), 7,47 (dd, J = 8,5, 1,4 Hz, 1H), 7,43 - 7,30 (m, 5H), 7,30 - 7,19 (m, 1H), 7,08 (s, 2H), 6,93 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 5,67 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, acetona-de) 8 166,89, 154,55, 154,34, 152,99, 136,23, 135,27, 132,57, 132,28, 132,11, 130,02, 129,31, 128,70, 127.32, 126,98, 123,52, 116,81, 116,56, 115,85, 114,84, 45,73. HRMS [C22H17 N303+H]+ : calculado 372,1348 / encontrado 372,1351.
3-(4-bencil-3-oxo-3,4-dihidroquinoxalin-2-il)benzonitrilo (1l). Rendimiento = 27 mg (62 %). 1 H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 8,81 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 8,72 (dt, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 7,97 (dd, J = 8,0, 1,6 Hz, 1H), 7,76 (dq, J = 7,7, 1,4 Hz, 1H), 7,60 (td, J = 7,9, 1,8 Hz, 1H), 7,51 (ddd, J = 8 ,6 , 7,3, 1,6 Hz, 1H), 7,41 - 7,26 (m, 7H), 5,58 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCI3) 8 154,54, 151,35, 137,00, 135,02, 133,85, 133,45, 133,13, 132,93, 131,27, 130,90, 129,04, 128,92, 127,88, 126,94, 124,20, 118,73, 114,53, 112,46, 46,26. HRMS [C22H16N3O+H]+ : calculado 338,1293 / encontrado 338,1290.
3-(benzo[c][1,2,5]oxadiazol-5-il)-1-bencilquinoxalin-2(1H)-ona (1m). Rendimiento = 30 mg (75 %). 1 H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 9,37 - 9,25 (m, 1H), 8,83 (ddd, J = 7,8, 1,7, 1,1 Hz, 1H), 8,34 (ddd, J = 8,2, 2,4, 1,1 Hz, 1H), 8,00 (dd, J = 8.0, 1,4 Hz, 1H), 7,71 - 7,55 (m, 3H), 7,42 (ddd, J = 8,3, 7,0, 1,4 Hz, 1H), 7,25 (dd, J = 5,2, 1,3 Hz, 2H), 7,20 (dt, J = 3,5, 1,0 Hz, 1H), 6,97 (dd, J = 5,1, 3,5 Hz, 1H), 5,70 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCI3) 8 154,04, 151,18, 148,25, 137.33, 136,88, 135,52, 133,15, 132,49, 131,35, 131,18, 129,04, 127,58, 126,85, 126,01, 124,84, 124,70, 124,31, 113,96, 41,24. HRMS [C21H14N402+H]+: calculado 355,1195 / encontrado 355,1207.
1-bencil-7-cloro-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (2a). Rendimiento = 31 mg (15 %). 1 H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 9,35 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8 ,86 (dt, J = 7,9, 1,3 Hz, 1H), 8,36 (ddd, J = 8,2, 2,4, 1,1 Hz, 1H), 7,99 - 7,85 (m, 1H), 7,68 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 - 7,30 (m, 7H), 5,56 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCI3) 8 154,27, 151,03, 148,24, 137,44, 137,07, 135,52, 134,44, 133,77, 131,97, 131,58, 129,19, 129,09, 128,12, 126,95, 125,02, 124,79, 124,71, 114,47, 46,42. HRMS [C21H-mCIN303+H]+ : calculado 392,0802 / encontrado 392,0810.
1-bencil-6-cloro-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (2b). Rendimiento = 56 mg (31 %). 1 H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 9,37 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8,87 (dt, J = 7,9, 1,3 Hz, 1H), 8,39 (ddd, J = 8,2, 2,4, 1,1 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,70 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,49 (dd, J = 9,0, 2,4 Hz, 1H), 7,42-7,20 (m, 6 H), 5,60 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCI3) 8 154,22, 152,30, 148,24, 137,00, 135,59, 134,61, 133,57, 131,59, 131,31, 130,09, 129,60, 129,15, 129,11, 128,06, 126,85, 125,19, 124,86, 115,71,46,44. HRMS [C2-iH-mCIN303+H]+: calculado 392,0802 / encontrado 392,0819.
1-bencil-5-doro-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (2c). Rendimiento = 8 mg (8 %). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 9,51 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8,96 (dt, J = 7,9, 1,4 Hz, 1H), 8,39 (ddd, J = 8,2, 2,4, 1,1 Hz, 1H), 7,71 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7,57 - 7,40 (m, 2H), 7,40 - 7,18 (m, 6 H), 5,63 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCI3) 8 154,25, 150,92, 148,29, 137,14, 135.84, 135,73, 134,66, 134,45, 131,23, 129,73, 129,16, 129,12, 128,01, 126,80, 125,26, 125,10, 125,03, 113,41, 46,67. HRMS [C21H-mCIN303+H]+ : calculado 392,0802 / encontrado 392,0813.
1-bencil-6,7-didoro-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (2d). Rendimiento = 13 mg (31 %). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 9,35 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8 ,86 (ddt, J = 7,9, 2,8, 1,3 Hz, 1H), 8,46 - 8,28 (m, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,70 (td, J = 8,1, 3,8 Hz, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,43 - 7,28 (m, 5H), 5,56 (d, J = 6 ,8 Hz, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCI3) 8 154,00, 152,23, 148,25, 136,73, 135,57, 134,16, 132,21, 132,08, 131,98, 131,53, 129,28, 129,18, 128,27, 126,90, 125,35, 124.85, 124,73, 115,94, 46,56. HRMS [C21H13Cl2 N303+H]+ : calculado 426,0412 / encontrado 426,0405.
1-bencil-7-bromo-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (2e). Rendimiento = 47 mg (15 %). 1H NMR (400 MHz, CDCh) 8 9,35 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8 ,86 (dt, J = 7,9, 1,3 Hz, 1H), 8,37 (dd, J = 8,4, 2,3 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,69 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,46 - 7,29 (m, 5H), 5,56 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCh) 8 154,22, 151,28, 148,25, 137,08, 135,52, 134,44, 133,89, 132,07, 131,89, 129,20, 129,11, 128,13, 127,65, 126,97, 125,69, 125.05, 124,73, 117,46, 46,40. HRMS [C2-iH-MBrN303+H]+ : calculado 436,0297 / encontrado 436,0291.
1-bencil-6,7-difluoro-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (2g). Rendimiento = 13 mg (10 %). 1H NMR (400 MHz, CDCh) 8 9,35 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8,85 (dt, J = 7,9, 1,4 Hz, 1H), 8,38 (ddd, J = 8,2, 2,4, 1,1 Hz, 1H), 7,82 (dd, J = 10,0, 8,2 Hz, 1H), 7,70 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7,47 - 7,22 (m, 5H), 7,15 (dd, J = 11,3, 7,0 Hz, 1H), 5,55 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCh) 8 154,16, 152,20 (dd, Jc-f=257, 15 Hz), 151,47, 148,25, 147,15 (dd, Jc-f= 250, 15 Hz), 136,87, 135,49, 134,17, 130,27 (br), 129,41 (br), 129,28, 129,15, 128,26, 126,85, 125,17, 124,73, 118,26 (dd, Jc-f = 18, 2 Hz), 103,22 (d, Jc-f = 23 Hz), 46,87. HRMS [C2-iH13F2N303+H]+ : calculado 394,1003 /encontrado 394,0996.
1-bencil-8-metil-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (2h). Rendimiento = 36 mg (28 %). 1H NMR (600 MHz, CDCh) 8 9,41 (s, 1H), 8,91 (dt, J = 7,9, 1,3 Hz, 1H), 8,43 - 8,10 (m, 1H), 7,66 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,50 - 7,20 (m, 8 H), 5,60 (s, 2H), 2,79 (s, 3H). 13C NMR (151 MHz, CDCh) 8 154,44, 148,96, 148,33, 139,84, 137,88, 135,41, 135,20, 133,19, 131,65, 131,10, 128,92, 128,87, 127,70, 126,84, 125,30, 124,69, 124,54, 112,42, 46,31, 17,59. HRMS ^ 22^ 7^ 03+^+: calculado 372,1348 encontrado 372,1343.
1-bencil-6,7-dimetil-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (2i). Rendimiento = 13 mg (31 %). 1H NMR (400 MHz, CDCh) 8 9,35 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8 ,86 (dt, J = 7,8, 1,4 Hz, 1H), 8,33 (ddd, J = 8,2, 2,4, 1,1 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,66 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,43 - 7,22 (m, 5H), 7,13 (s, 1H), 5,59 (s, 2H), 2,38 (d, J = 1,2 Hz, 6 H). 13C NMR (101 MHz, CDCh) 8 154,59, 149,83, 148,21, 141,67, 137,78, 135,44, 135,23, 133,39, 131,66, 131,12, 130,88, 129,00, 128,93, 127,76, 126,91, 124,59, 124,47, 114,91, 46,11, 20,84, 19,21. HRMS [C23H19N303+H]+: calculado 386,1505 / encontrado 386,1499.
1-bencil-6-bromo-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (2j). Rendimiento = 106 mg (34 %). 1H NMR (400 MHz, CDCh) 8 9,44 - 9,22 (m, 1H), 8,87 (dt, J = 7,9, 1,4 Hz, 1H), 8,38 (ddd, J = 8,2, 2,4, 1,2 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,70 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 8,9, 2,3 Hz, 1H), 7,44 - 7,26 (m, 5H), 7,23 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 5,59 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCh) 8 154,22, 152,22, 148,24, 136,98, 135,59, 134,58, 134,02, 133,86, 133,18, 132,02, 129,14, 128,07, 126,97, 126,85, 125,20, 124,86, 116,82, 115,98, 46,41. HRMS [C21H-,4BrN303+H]+: calculado 436,0297 / encontrado 436,0290.
3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (3a). Rendimiento = 220 mg (75 %). 1H NMR (400 MHz, DMSO-de) 8 12,76 (s, 1H), 9,31 - 9,12 (m, 1H), 8,78 (ddd, J = 7,9, 1,7, 1,1 Hz, 1H), 8,38 (ddd, J = 8,2, 2,4, 1,1 Hz, 1H), 7,96 - 7,88 (m, 1 H), 7,82 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,71 - 7,48 (m, 1H), 7,47 - 7,25 (m, 2H). 13C NMR (101 MHz, DMSO-de) 8 155,02, 152,12, 147,99, 137,43, 135,81, 132,85, 132,34, 131,58, 130,08, 129,52, 125,19, 124,22, 124,15, 115,77. HRMS [C-mH9N303+H]+: calculado 268,0722 / encontrado 268,0713.
1-metil-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (3b). Rendimiento = 39 mg (74 %). 1H NMR (600 MHz, CDCh) 8 9,29 (s, 1H), 8,79 (dt, J = 7,9, 1,4 Hz, 1H), 8,33 (ddd, J = 8,2, 2,3, 1,1 Hz, 1H), 7,99 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz, 1H), 7,74 - 7,54 (m, 2H), 7,54 - 7,32 (m, 2H), 3,81 (s, 3H). 13C NMR (151 MHz, CDCh) 8 154,43, 151,10, 148,27, 137,51, 135,36, 133,59, 132.86, 131,25, 130,83, 128,89, 124,65, 124,64, 124,05, 113,68, 29,34. HRMS [C15Hh N303+H]+ : calculado 282,0879 / encontrado 282,0870.
1-etil-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (3c). Rendimiento = 54 mg (70 %). 1H NMR (400 MHz, CDCh) 8 9,44 - 9,14 (m, 1H), 8,83 (ddd, J = 7,9, 1,7, 1,1 Hz, 1H), 8,34 (ddd, J = 8,2, 2,4, 1,1 Hz, 1H), 8,09 - 7,88 (m, 1H), 7,77 - 7,58 (m, 2H), 7,53 - 7,36 (m, 2H), 4,44 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,47 (t, J = 7,2 Hz, 3H). 13C NMR (101 MHz, CDCh) 8 153,96, 151.05, 148,19, 137,50, 135,49, 133,16, 132,53, 131,32, 131,10, 128,97, 124,71, 123,96, 113,61, 37,80, 12,44. HRMS [C16H-i3N303+H]+ : calculado 296,1035 / encontrado 296,1037.
1-propil-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (3d). Rendimiento = 13 mg (23 %). 1H NMR (600 MHz, CDCh) 8 9,30 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 8,80 (dt, J = 7,9, 1,3 Hz, 1H), 8,32 (ddd, J =8,1, 2,3, 1,1 Hz, 1H), 7,99 (dd, J = 8,0, 1,4 Hz, 1H), 7,73 - 7,55 (m, 2H), 7,52 - 7,32 (m, 2H), 4,38 - 4,17 (m, 2H), 1,87 (hept, J = 7,5 Hz, 2H), 1,10 (t, J = 7,4 Hz, 3H). 13C NMR (151 MHz, CDCla) 8 154,18, 151,04, 148,25, 137,55, 135,40, 133,11, 132,82, 131,14, 131,04, 128,86, 124,67, 124,61, 123,85, 113,72, 44,19, 20,67, 11,34. HRMS [C-i/H-isNaOs+Hr : calculado 310,1192 / encontrado 310,1182.
1-alil-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (3e). Rendimiento = 91 mg (79 %). 1H NMR (400 MHz, CDCfe) 8 9,34 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 8,92 - 8,73 (m, 1H), 8,35 (ddd, J = 8,2, 2,4, 1,1 Hz, 1H), 8,02 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz, 1H), 7,77 - 7,54 (m, 2H), 7,51 - 7,32 (m, 2H), 6,02 (ddt, J = 17,3, 10,4, 5,2 Hz, 1H), 5,42 - 5,15 (m, 2H), 5,03 (dt, J = 5,2,1,8 Hz, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCI3) 8 154,02, 151,05, 148,20, 137,41, 135,51, 133,01, 132,81, 131,28, 130,92, 130,36, 128,99, 124,77, 124,71, 124,15, 118,44, 114,30, 44,88. HRMS [C17H13N303+H]+: calculado 308,1035 / encontrado 308,1036. 1-(naftalin-1-ilmetil)-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (3f). Rendimiento = 54 mg (35 %). 1H NMR (600 MHz, CDCfe) 8 9,39 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8,89 (dt, J = 7,9, 1,4 Hz, 1H), 8,32 (ddd, J = 8,3, 2,4, 1,1 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,08 - 8,01 (m, 1H), 7,94 (dd, J = 8,3, 1,2 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,71 - 7,62 (m, 2H), 7,59 (ddd, J = 8,1, 6,9, 1,1 Hz, 1H), 7,46 - 7,33 (m, 2H), 7,32 - 7,22 (m, 1H), 7,08 (dd, J = 8,0, 1,6 Hz, 1H), 6,83 (dd, J = 7,3, 1,2 Hz, 1H), 6,04 (s, 2H). 13C NMR (151 MHz, CDCfe) 8 154,50, 150,92, 148,33, 137,43, 135,48, 133,92, 133,15, 133,12, 131,33, 130,85, 130,52, 129,24, 129,17, 128,91, 128,19, 128,17, 126,71, 126,12, 125,38, 124,73, 124,20, 122,30, 122,07, 114,77, 44,04. HRMS [C25H1yN303+H]+ : calculado 408,1348 / encontrado 408,1342.
1-(naftalin-2-ilmetil)-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (3g). Rendimiento = 80 mg (75 %). 1H NMR (400 MHz, CDCfe) 8 9,40 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8,91 (ddd, J = 7,9, 1,7, 1,1 Hz, 1H), 8,38 (ddd, J = 8,2, 2,4, 1,1 Hz, 1H), 8,09 - 7,98 (m, 1H), 7,91 - 7,80 (m, 2H), 7,78 (dd, J = 6,2, 3,4 Hz, 1H), 7,74 - 7,65 (m, 2H), 7,57 - 7,44 (m, 4H), 7,41 (ddd, J = 8,3, 7,6, 1,2 Hz, 2H), 5,79 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCfe) 8 154,64, 151,22, 148,26, 137,47, 135,59, 133,33, 133,16, 132,99, 132,85, 132,47, 131,39, 130,98, 129,06, 127,75, 126,53, 126,24, 125,72, 124,86, 124,79, 124,72, 124,27, 114,63, 46,52. HRMS [C25H17N303+H]+ : calculado 408,1348 encontrado 408,1339.
3-(3-nitrofenil)-1-(piridin-2-ilmetil)quinoxalin-2(1H)-ona (3h). Rendimiento = 82 mg (90 %). 1H NMR (400 MHz, CDCfe) 8 9,37 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8 ,86 (dt, J = 7,9, 1,4 Hz, 1H), 8,61 (dt, J = 4,8, 1,4 Hz, 1H), 8,36 (ddd, J = 8,2, 2,3, 1,1 Hz, 1H), 8,01 (dd, J = 8,1, 1,3 Hz, 1H), 7,75 - 7,62 (m, 2H), 7,62 - 7,51 (m, 2H), 7,41 (ddd, J = 8,2, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,24 (ddd, J = 7,5, 4,9, 1,1 Hz, 1H), 5,73 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCfe) 8 155,11, 154,53, 151,10, 149,49, 148,23, 137,43, 137,27, 135,52, 133,10, 131,43, 130,79, 129,03, 124,82, 124,74, 124,31, 122,98, 122,23, 115,06, 48,25. HRMS [C20H14N403+H]+ : calculado 359,1144 / encontrado 359,1138.
1-(furan-2-ilmetil)-3-(3-nitrofenil)quinoxalin-2(1H)-ona (3i). Rendimiento = 238 mg (67 %) 1H NMR (400 MHz, CDCfe) 8 9,32 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8,83 (dt, J = 7,8, 1,4 Hz, 1H), 8,34 (ddd, J = 8,2, 2,3, 1,1 Hz, 1H), 8,00 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz, 1H), 7,78 - 7,51 (m, 3H), 7,44 (ddd, J= 8,3, 7,0, 1,5 Hz, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,49 (d, J=3,2 Hz, 1H), 6,36 (dd, J = 3,3, 1,9 Hz, 1H), 5,56 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCfe) 8 154,03, 151,07, 148,57, 148,19, 142,62, 137,34, 135,51, 133,01, 132,82, 131,33, 130,92, 129,00, 124,79, 124,69, 124,26, 114,38, 110,74, 109,85, 39,18. HRMS [C-igH13N304+H]+: calculado 348,0985 / encontrado 348,0984.
3-(3-nitrofenil)-1-(tiofen-2-ilmetil)quinoxalin-2(1H)-ona (3j). Rendimiento = 48 mg (35 %) 1H NMR (400 MHz, CDCfe) 8 9,36 - 9,28 (m, 1H), 8,83 (ddd, J = 7,8, 1,7, 1,1 Hz, 1H), 8,34 (ddd, J = 8,2, 2,4, 1,1 Hz, 1H), 8,06 - 7,95 (m, 1H), 7,72-7,55 (m, 3H), 7,42 (ddd, J= 8,3, 7,0, 1,4 Hz, 1H), 7,25 - 7,23 (m, 1H), 7,20 (dq, J = 3,5, 0,9 Hz, 1H), 6,97 (dd, J = 5,1, 3,5 Hz, 1H), 5,70 (s, 2H). 13C NMR (101 MHz, CDCfe) 8 154,05, 151,18, 148,25, 137,33, 136,88, 135,53, 133,15, 132,49, 131,35, 131,18, 129,05, 127,58, 126,86, 126,02, 124,85, 124,70, 124,32, 113,96, 41,24. HRMS [C1gH13N303S+H]+: calculado 364,0756 / encontrado 364,0749.
N-(4-nitro-2-(5-oxo-2,3-dihidro-5H-[1,4]oxazino[4,3,2-de]quinoxalin-6-il)fenil) acetamida (16). Se disolvió 2-amino-3-nitrofenol (1 g, 6,5 mmol) en DMF (15 ml). Se añadieron 1,2-dibromoetano (0,7 ml, 8,1 mmol) y KOH (0,3 g, 5,3 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo a 160 °C durante 3 d. Después de enfriar, la solución se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. La solución de acetato de etilo se lavó con agua y salmuera y luego se secó con sulfato de magnesio. Después de la filtración y concentración al vacío, el producto se purificó por cromatografía en columna con una mezcla 30:70 de acetato de etilo/hexano para producir el intermediario 14 como un producto cristalino rojo. Este producto rojo se disolvió en metanol (20 ml) y se añadió Pd/C (0,1 g). se burbujeó H2 durante 2 h hasta que la solución se volvió casi incolora. La solución se filtró a través de CELITE®, y el solvente se eliminó al vacío para producir 3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]oxazin-5-amina (intermediario 15) como un aceite de color marrón claro (0,102 g, 10 %), que se utilizó directamente en la siguiente etapa. Esta 3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]oxazin-5-amina (15: 0,102 g, 0,68 mmol) se disolvió en una mezcla de 20 ml de ácido acético y 20 ml de tolueno. Se añadió N-acil-5-nitroisatina (0,22 g, 0,94 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo a 90 °C durante la noche. Después de enfriar, el solvente se eliminó al vacío y el residuo se lavó con etanol para producir 16 como un aceite de color marrón oscuro. Rendimiento = 0,246 g, (99 %). 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 8 10,19 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,34 (s, 2H), 7,52 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7,32 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,46 (t, J = 4,9 Hz, 2H), 4,19 (t, J = 4,8 Hz, 2H), 2,04 (s, 3H). 13C NMR (101 MHz, DMSO-cfe) 8 169,41, 154,38, 152,13, 143,50, 143,22, 142,31, 132,85, 127,02, 126,93, 125,65, 123,98, 122,47, 122,07, 121,23, 117,02, 63,92, 24,63. HRMS [C22H16N404+H]+ : calculado 401,1250 / encontrado 401,1237.
6-(2-amino-5-nitrofenil)-3-fenil-2,3-dihidro-5H-[1,4]oxazino[4,3,2-de]quinoxalin-5-ona (20). Se mezcló 2-amino-3-nitrofenol 0,83 g (5,4 mmol) con K2CO3 (1,13 g, 8,2 mmol) en acetonitrilo (100 mL). Se añadió 2-bromoacetofenona (1,3 g, 6,5 mmol) en porciones y se agitó durante la noche. Se añadió acetato de etilo (100 ml) y la solución se filtró, se lavó con agua, HCl 1 N y salmuera. La solución se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y el solvente se eliminó al vacío. El producto bruto resultante (18) se disolvió parcialmente en metanol caliente (100 ml). Después de enfriar, se añadió Pd/C (0,2 g) y se burbujeó H2 hasta que se consumió el material de partida según se controló por TLC. La solución se filtró a través de CELITE®y el solvente se eliminó al vacío. La diamina resultante se purificó por cromatografía en columna con una mezcla 30:70 de acetato de etilo/hexano. Se obtuvo un aceite marrón anaranjado del intermediario 19. Rendimiento = 0,6 g, (50 %). Esta 3-fenil-3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]oxazin-5-amina (19: 0,2 g, 0,9 mmol) se disolvió en una mezcla de ácido acético (20 ml) y tolueno (40 ml). Se añadió 5-nitroisatina (0,17 g, 0,88 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo a 100 °C durante 2 h. Después de enfriar, el solvente se eliminó al vacío y el producto se purificó por cromatografía en columna con una mezcla 30:70 de acetato de etilo/hexano para producir 20. Rendimiento = 16 mg (5 %). 1H NMR (600 MHz, DMSO-de) 8 9,21 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,08 - 7,87 (m, 3H), 7,64 (dd, J = 8,1, 1,2 Hz, 1H), 7,39 - 7,21 (m, 4H), 7,21 - 7,09 (m, 3H), 6,90 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 5,98 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 4,74 (dd, J = 11,8, 1,3 Hz, 1H), 4,45 (dd, J = 11,7, 2,8 Hz, 1H). 13C NMR (151 MHz, DMSO-de) 8 155,09, 153,39, 151.79, 142,99, 138,01, 135,39, 131,91, 129,46, 129,04, 128,08, 126,93, 126,72, 124,09, 122,12, 120,45, 116,57, 116,25, 115,20, 109,99, 69,48, 53,31. HRMS [C18H14N405+H]+ : calculado 367,1043 / encontrado 367,1038.
5-bencil-9-fluoro-2-(trifluorometil)-5a,10a-dihidro-5H-indolo[2,3-13]quinoxalina (22). Rendimiento = 98 mg (15 %). 1H NMR (600 MHz, CDCh) 8 8,57 (s, 1H), 7,96 (dd, J = 7,6, 2,6 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,63 (dd, J = 8 ,6 , 4,2 Hz, 1H), 7,41 (td, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,35 - 7,26 (m, 5H), 6,06 (s, 2H). 13C NMR (151 MHz, CDCla) 8 158,71 (d, Jc-f = 240 Hz), 154,95, 147,04, 134,09, 133,93, 131,33, 129,19, 128,76 (br), 128,27, 126.80, 126,32 (br), 125,80 (d, Jc-f = 33 Hz), 123,77, 123,73 (q, Jc-f = 272 Hz), 120,58 (q, Jc_F = 24 Hz), 119,80, 119,75, 115,35, 109,43 (d, Jc-f = 24 Hz), 49,35. HRMS ^ H - ^ ^ H ^ : calculado 396,1124 / encontrado 396,1105.
5-bencil-9-nitro-2-(trifluorometil)-5a,10a-dihidro-5H-indolo[2,3-b]quinoxalina (23). Rendimiento = 17 mg (22 %). 1H NMR (800 MHz, DMSO-de) 8 9,01 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,71 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,59 (dd, J = 8,7, 2,4 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 8,17 (dd, J = 9,0, 2,2 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,45 - 7,37 (m, 2H), 7,35 - 7,31 (m, 2H), 7,31 - 7,23 (m, 1H), 6,25 (s, 2H). 13C NMR (201 MHz, DMSO-de) 8 163,95, 154,04, 150,17, 141,98, 135,07, 134,96, 132,05, 129,30, 128,91, 128,50 (br), 128,33, 127,48, 127,44 (br), 125,48 (q, Jc-f = 26 Hz), 124,29 (q, Jc-f = 204 Hz), 123,34, 119,35, 118,91, 118,21,49,67. HRMS [C22H1aFaN402+H]+: calculado 423,1069 / encontrado 423,1062.
Referencias (Ejemplo 6 )
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Claims (1)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto seleccionado del ruo ue consiste en:
    Figure imgf000109_0001
    Figure imgf000110_0001
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
    Un compuesto de la Fórmula I:
    Figure imgf000110_0002
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde
    L1 es -CH2-;
    R20 es
    Figure imgf000110_0003
    -piridilo no sustituido, furanilo no sustituido o tiofenilo no sustituido; o
    L1-R20 es
    Figure imgf000110_0004
    R1 y R4 son hidrógeno;
    R2 es hidrógeno o halógeno;
    R3 es -NO2;
    R5 es hidrógeno, -NO2 o -NH2;
    o R2 y R3 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos,
    Figure imgf000110_0005
    R6 es hidrógeno o halógeno;
    R7 es hidrógeno;
    R8 es hidrógeno o halógeno;
    R9 es hidrógeno, -CH3 o halógeno;
    R10 y R11 son hidrógeno o halógeno; y
    R12, R13 y R14 son hidrógeno,
    con la condición de que cuando R3 es -NO2 y R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, entonces R5 no es -NH2, o con la condición de que cuando R3 es -NO2 y R5 es -NH2, entonces al menos uno de R6, R7, R8 y R9 no es hidrógeno, y
    con la condición de que cuando R5 es -NH2 y R3 es -NO2 , entonces R9 es -Cl.
    El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en donde:
    Figure imgf000111_0001
    R3 es -NO2;
    R5 es hidrógeno o -NH2; y
    R6, R7y R8 son hidrógeno;
    preferentemente en donde R6, R7, R8, R10, R11, R12, R13y R14 son hidrógeno, y R9 es hidrógeno o halógeno. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en donde L1 es -CH2-; y R20 es
    Figure imgf000111_0002
    El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en donde L1 es -CH2-; y R20 es piridilo no sustituido, furanilo no sustituido o tiofenilo no sustituido;
    El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en donde L1-R20 es
    Figure imgf000111_0003
    Una composición farmacéutica que comprende un excipiente farmacéuticamente aceptable y un compuesto de Fórmula I:
    Figure imgf000111_0004
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,
    en donde:
    L1 es -CH2-;
    R20 es
    Figure imgf000111_0005
    piridilo no sustituido, furanilo no sustituido o tiofenilo no sustituido; o
    L1-R20 es
    Figure imgf000111_0006
    R1 y R4 son hidrógeno;
    R2 es hidrógeno o halógeno;
    R3 es -NO2;
    R5 es hidrógeno, -NO2 o -NH2;
    o R2 y R3 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos,
    Figure imgf000112_0001
    R6 es hidrógeno o halógeno;
    R7 es hidrógeno;
    R8 es hidrógeno o halógeno;
    R9 es hidrógeno, -CH3 o halógeno;
    R10 y R11 son hidrógeno o halógeno; y
    R12, R13 y R14 son hidrógeno,
    con la condición de que cuando R3 es -NO2 y R6, R7, R8 y R9 son hidrógeno, entonces R5 no es -NH2, o con la condición de que cuando R3 es -NO2 y R5 es -NH2, entonces al menos uno de R6, R7, R8 y R9 no es hidrógeno,
    con la condición de que cuando R5 es -NH2 y R3 es -NO2, entonces R9 es -Cl; y
    con la condición de que cuando L1-R20 es
    Figure imgf000112_0002
    entonces R3 es -NO2.
    8. Una composición farmacéutica que comprende un excipiente farmacéuticamente aceptable y un compuesto seleccionado de:
    Figure imgf000113_0001
    Un compuesto de Fórmula (I) para su uso en:
    (i) el tratamiento del estreñimiento en un sujeto que lo necesite; o
    (ii) el tratamiento del trastorno del ojo seco en un sujeto que lo necesite; o
    (iii) aumentar el lagrimeo en un sujeto que lo necesite; o
    (iv) activar un regulador de conductancia transmembrana de fibrosis quística (CFTR) en un sujeto que lo necesite; o
    (v) el tratamiento de una enfermedad hepática colestásica en un sujeto que lo necesite; o
    (vi) el tratamiento de una enfermedad o trastorno pulmonar en un sujeto que lo necesite,
    en donde la Fórmula (I) es:
    Figure imgf000113_0002
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:
    L1 es -CH2-;
    R20 es
    Figure imgf000113_0003
    -piridilo no sustituido, furanilo no sustituido o tiofenilo no sustituido; o
    L1-R20 es
    Figure imgf000114_0001
    R1 y R4 son hidrógeno;
    R2 es hidrógeno o halógeno;
    R3 es -NO2;
    R5 es hidrógeno, -NO2 o -NH2;
    o R2 y R3 se unen para formar, junto con los átomos a los que están unidos,
    Figure imgf000114_0002
    R6 es hidrógeno o halógeno;
    R7 es hidrógeno;
    R8 es hidrógeno o halógeno;
    R9 es hidrógeno, -CH3 o halógeno;
    R10 y R11 son hidrógeno o halógeno; y
    R12, R13 y R14 son hidrógeno.
    10. El compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 9, en donde el uso es para tratar el estreñimiento.
    11. El compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 9 o 10, en donde tratar el estreñimiento comprende además administrar un agente antiestreñimiento.
    12. El compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 9 a 11, en donde el estreñimiento es estreñimiento inducido por opioides, estreñimiento idiopático crónico o síndrome del intestino irritable con predominio del estreñimiento.
    13. El compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 9, en donde el uso es para tratar una enfermedad o trastorno pulmonar.
    14. El compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 13, en donde la enfermedad o trastorno pulmonar es enfermedad pulmonar obstructiva crónica, bronquitis, asma o disfunción pulmonar inducida por el humo del cigarrillo.
    15. El compuesto para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 9 a 14, en donde el compuesto es
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