ES2897790T3 - Un agente que aumenta la expresión del agonista asociado a Bcl2 de la muerte celular para el tratamiento del cáncer - Google Patents

Abstract

Una composición farmacéutica en una forma de dosificación oral sólida, que comprende de 0,01 mg hasta 50 mg por comprimido de un agente que aumenta la expresión de BAD (muerte celular de agonista asociado a Bcl2), en que la que el agente es 6-β-naltrexol, o sus sales farmacéuticamente aceptables, para ser usada en el tratamiento de cáncer conjuntamente con un agente quimioterapéutico.

Description

DESCRIPCIÓN

Un agente que aumenta la expresión del agonista asociado a Bcl2 de la muerte celular para el tratamiento del cáncer

Campo de la invención

La descripción se refiere a agentes que aumentan la expresión de biomarcadores tumorales para ser usados en el tratamiento de cáncer conjuntamente con un agente quimioterapéutico. En particular, la invención se refiere a una composición farmacéutica en una forma de dosificación oral que comprende desde 0,01 mg hasta 50 mg por comprimido de un agente que aumenta la expresión de BAD (muerte celular de agonista asociado a Bcl2), en que el agente es 6-p-naltrexol, o sus sales farmacéuticamente aceptables, para ser usado en el tratamiento del cáncer conjuntamente con un agente quimioterapéutico.

Antecedentes de la invención

El éxito de muchas terapias de cáncer está explicado por la administración conjunta, junto con moléculas de tipo adyuvante. Sin una utilidad terapéutica independiente, los adyuvantes son responsables de cebar el sistema inmune de un sujeto, de forma que el compuesto activo dirigido a diana al cáncer puede conseguir un efecto terapéutico máximo.

Como los adyuvantes normalmente modulan la respuesta inmune de un paciente, son usados lo más habitualmente de forma conjunta con vacunas de cáncer o productos biológicos como anticuerpos terapéuticos humanizados. Actúan para mejorar el sistema inmune de un paciente para aumentar la producción de anticuerpos, en respuesta a una estimulación con una vacuna de cáncer o suprimiendo o rebajando la inmunogenicidad del paciente hacia un anticuerpo terapéutico ajeno. Por tanto, los adyuvantes desempeñan una función importante en la dirección de terapias de cáncer inmunes hacia un resultado terapéutico satisfactorio.

A menudo, las inmunoterapias serán combinadas con más terapias de tratamiento de cáncer tradicionales, como la radioterapia y quimioterapia. Para ciertos tipos de cánceres en los que no existe una inmunoterapia eficaz, solo pueden ser administradas terapias tradicionales. Los tratamientos tradicionales del cáncer pueden ser administrados también en combinación, de forma que el efecto terapéutico puede ser mayor tras una administración conjunta que con la suma de los efectos tras una administración independiente.

A pesar de su mayor eficacia, la combinación de terapias de cáncer tradicionales puede exacerbar efectos secundarios experimentados por el paciente, que dan lugar a menudo a una terminación temprana del régimen de tratamiento. Por tanto, el efecto sinérgico beneficioso de administrar conjuntamente múltiples agentes anticancerígenos puede resultar irrealizable debido a la naturaleza enérgica de la terapia.

El desarrollo de nuevos tratamientos con una mayor eficacia y efectos secundarios reducidos evitaría la necesidad de administrar conjuntamente ciertas terapias de cáncer, evitando así los efectos secundarios enérgicos que conducen a menudo a una terminación prematura del tratamiento. Alternativamente, el desarrollo de moléculas de tipo adyuvante que estimulan la eficacia terapéutica de los agentes quimioterapéuticos conseguiría un resultado similar.

Por tanto, hay una necesidad de desarrollar agentes que estimulen la utilidad terapéutica de los agentes quimioterapéuticos con el fin de minimizar los efectos secundarios perjudiciales que de otra forma se producirían en los regímenes de tratamiento de cáncer agresivos. El documento US-A-2003/0139352 describe una combinación de un agente antitumoral y un inhibidor opioide del transportador de fármacos ABC, como naltrexona o nalmefeno, para ser usado en pacientes con un cáncer resistente a múltiples fármacos.

Compendio de la invención

La invención se define por medio de las reivindicaciones. Cualquier materia objeto que se sitúe fuera del alcance de las reivindicaciones se proporciona solamente para fines de información. Se ha encontrado pos los presentes inventores que los agentes que estimulan la expresión del agonista asociado a Bcl2 de la muerte celular (BAD) pueden mejorar la citotoxicidad de los agentes quimioterapéuticos en múltiples líneas celulares de cáncer. Este aumento de la citotoxicidad global es independiente de la citotoxicidad del agente que aumenta la expresión de BAD, que por sí mismo tiene un efecto citotóxico nulo o mínimo.

Según un primer aspecto de la invención, se proporciona una composición farmacéutica en forma de dosificación oral sólida que comprende de 0,01 mg a 50 mg por comprimido de un agente que aumenta la expresión de BAD (muerte celular de agonista asociado a Bcl2), en que el agente es 6-p-naltrexol, o sus sales farmacéuticamente aceptables, para ser usado en el tratamiento de cáncer conjuntamente con un agente quimioterapéutico.

Según un aspecto de la descripción, se proporciona un método para seleccionar un sujeto que tiene cáncer para un tratamiento con un agente que aumenta la expresión de BAD, que comprende las etapas de: (a) obtener una muestra del sujeto que se sospecha que lo necesita; (b) medir la concentración de BAD en la muestra y (c) comparar la concentración medida de BAD con un valor de referencia, de forma que si el sujeto tiene una concentración de BAD aproximadamente equivalente o menor al valor de referencia, el sujeto es seleccionado para una administración con un agente que aumenta la expresión de BAD.

Según otro aspecto de la descripción, se proporciona un método para seleccionar un agente que aumenta la expresión de BAD para ser usado en el tratamiento de cáncer conjuntamente con un agente terapéutico, que comprende las etapas de: (a) incubar células con un agente de ensayo; (b) medir la concentración de BAD después de una incubación con el agente de ensayo y (c) comparar las veces que cambia la expresión de BAD entre las células y un valor testigo, de forma que si las veces que cambia expresión de BAD es al menos un 10%, el agente es identificado como un agente para ser usado en el tratamiento de cáncer conjuntamente con un agente quimioterapéutico.

Según un aspecto adicional de la descripción, se proporciona un método de tratamiento de un sujeto que tiene cáncer, que comprende la administración de un agente anticancerígeno, caracterizado porque el sujeto que va a ser tratado tiene un aumento de un 10% del nivel de expresión de BAD en células tumorales, con relación a un testigo.

Descripción de los dibujos

La invención se define adicionalmente mediante referencia a los siguientes dibujos, en los cuales:

Las Figuras 1a y b muestran el efecto de diferentes concentraciones de 6-p-naltrexol sobre el nivel de expresión de células BAD, p21, pAKT, ciclina B1 y CDK1 en células HCT116.

La Figura 2 muestra la citostasis (a y b) y la citotoxicidad (c y d) en células A549 (a y c) y células HCT116 (b y d) tras la administración conjunta de 6-p-naltrexol 10 nM o 10 |jm en combinación con GEM o OXP. Se administró una muestra testigo de células en las que no se usó 6-p-naltrexol.

La Figura 3 muestra el aumento dependiente de la dosis en el nivel de expresión de BAD en células de cáncer de mamas en respuesta a concentraciones diferentes de 6-p-naltrexol.

La Figura 4 muestra la cistostasis (a) y la citotoxicidad (b) en una línea de células de cáncer de mamas tras la administración de 6-p-naltrexol (6BN (u)) 10 nM (6BN (n)) o 10 jm solo o en combinación con gencitabina (GEM) u oxaliplatino (OXP). Se muestran también los resultados de testigos de células a los que no se administró agente (UN)o9 GEM o OXP solamente

Descripción detallada de la invención

La invención se basa en el descubrimiento de que los agentes que aumentan la expresión de BAD aumenta la sensibilidad de las células de cáncer respecto a agentes quimioterapéuticos. Esto está ilustrado mediante el uso de 6-p-naltrexol (como está reivindicado). Por tanto, la administración conjunta de 6-p-naltrexol conjuntamente con un agente quimioterapéutico puede estimular la eficacia terapéutica de un régimen de tratamiento anticancerígenos. Al aumentar la eficacia terapéutica, el 6-p-naltrexol puede evitar la necesidad de poner en práctica estrategia terapéuticas particularmente agresivas que a menudo manifiestan efectos secundarios complicados para el sujeto. Además, el efecto de aumentar la eficacia podría rescatar agentes quimioterapéuticos particulares que han mostrado una eficacia limitada en el tratamiento de cánceres partículas.

Los inventores han encontrado que la actividad de 6-p-naltrexol es independiente de cualquier actividad citotóxica. Por tanto, aunque de forma aislada el 6-p-naltrexol tiene un efecto terapéutico inapreciable, el agente puede ser usado para mejorar la citotoxicidad de agentes quimioterapéuticos con los que se administración de forma conjunto. La capacidad del 6-p-naltrexol para mejorar la actividad terapéutica se observa en al menos tres líneas celulares independientemente, usando al menos dos clases distintas de agente quimioterapéutica, sugiriendo así que los efectos del 6-p-naltrexol son aplicables a la estimulación de la eficacia terapéutica de múltiples agentes quimioterapéuticos para ser usados en el tratamiento de múltiples cánceres.

Aunque no se desean vinculaciones teóricas, el 6-p-naltrexol parece que altera el fenotipo de la célula cancerígena de forma que aumenta la sensibilidad de la célula respecto a los agentes quimioterapéuticos. Un marcador particular de la expresión que es alterada en respuesta a 6-p-naltrexol, es BAD. Por tanto, el nivel de expresión o, como se usa de forma intercambiable en la presente memoria descriptiva, “el nivel” de BAD puede ser usado para determinar que una célula cancerígena es sensibilizada para la administración posterior de un agente anticancerígeno. Por lo tanto, está previsto que cualquier agente que aumente la expresión de BAD podría ser usado para aumentar la sensibilidad de una célula cancerígena s un agente quimioterapéutico.

La invención puede ser adicionalmente comprendida haciendo referencia a las siguientes definiciones:

Como se usa en la presente memoria descriptiva "6-p-naltrexol” se refiere a 17-ciclopropilmetil)-4,5-epoximorfinan-3,6 beta, 14-triol (n° CAS 49625-89-0) y sus sales farmacéuticamente aceptables, solvatos, hidratos, estereoisómeros y clatratos del mismo. El 6-pnaltrexol es un metabolito activo principal de naltrexona.

Como se usa en la presente memoria descriptiva, “expresión creciente” y sus sinónimos se refiere a un aumento del nivel de expresión (es decir el “nivel”) de biomarcadores celulares particulares tras la administración de 6-p-naltrexol. El nivel aumentado de expresión de biomarcadores celulares específicos indica que la célula cancerígena ha experimentado una respuesta deseada tras la administración con un primer agente y, por tanto, es sensibilizada al efecto citotóxico de un agente quimioterapéutico. El nivel de expresión de los biomarcadores puede ser medido en una muestra usando un cierto número de métodos analíticos disponibles para el experto en la técnica que incluyen, pero sin limitación electroforesis de gel y análisis de transferencia Western, 2D-PAGe, cromatografía de columna, perfilado de ribosomas o espectrometría de masas. El nivel aumentado de expresión puede ser determinado comparando el nivel de expresión del biomarcador desde antes o después de la administración de 6-p-naltrexol. El nivel de expresión del biomarcador antes de la administración de 6-p-naltrexol puede ser denominado testigo. En algunos casos, y para la medición de biomarcadores particulares, puede ser deseable purificar el biomarcador a partir de un medio celular antes de analizar el nivel de expresión. El tipo de estrategia de purificación usada dependerá del tipo de biomarcador que está siendo analizado. En general, las técnicas para la purificación de biomarcadores, son bien conocidas por los expertos en la técnica y una lista no exhaustiva de técnicas se puede encontrar en la publicación: Protein Purification Techniques, Second Edition, Simon Roe, Oxford University Press (2001).

Un biomarcador de interés particular en el contexto de la invención es BAD. El BA, también conocido como agonista asociado a Bcl2 de la muerte celular, es un miembro de la familia de proteínas proapoptóticas solo de BH3, que inicia la muerte celular tras la activación, estando ampliamente regulada su actividad por modificaciones posttransnacionales que integran una diversidad de señales de supervivencia y muerte celular (Danial 2009). El BAD favorece específicamente la apoptosis a través de la unión y la neutralización de sus asociados antiapóptóticos BCL2, BCL-X^l y BCL-W, ubicados en la mitocondria, en la que el BAD transloca (a partir del citosol) tras la retirada de las señales de supervivencia del factor de crecimiento. La presente invención ilustra que los niveles de BAD son aumentados en respuesta a la administración de 6-p-naltrexol. Cualquier molécula que aumente el nivel de expresión de BAD está abarcada por este aspecto de la descripción, pero no forma parte de la invención reivindicada. Preferentemente, cualquier agente a cualquier régimen de dosificación que aumente el nivel de expresión de BAD en al menos un 5%, o al menos 10% o al menos 20%, o al menos 30%, o al menos 40%, en relación al testigo, está abarcado por un aspecto reivindicado de la descripción. Más preferentemente, el agente aumenta el nivel de expresión de BAD en al menos 10% en relación a un testigo. Más preferentemente, el agente aumenta el nivel de expresión de BAD en 25% a 100% en relación a un testigo.

Como se usa en la presente memoria descriptiva, el término “sujeto” se refiere a cualquier animal (por ejemplo, un mamífero), incluidos seres humanos, primates no humanos, cánidos, felinos y roedores, que va a ser el receptor de un tratamiento en el que va a ser usado el agente que aumenta la expresión de BAD según la presente invención. Normalmente, los términos “sujeto” y “paciente” son usados de forma intercambiable en la presente memoria descriptiva en referencia a un sujeto humano.

Como se usa en la presente memoria descriptiva, “agente quimioterapéutico” tiene su significado convencional, usado en la técnica. Las expresiones, “agente quimioterapéutico” y “agente anticancerígeno” se usan de forma sinónima en la presente memoria descriptiva.

Según un primer aspecto de la invención, se proporciona un agente que aumenta la expresión de BAD para ser usado en el tratamiento de cáncer conjuntamente con un agente quimioterapéutico como se específica en las reivindicaciones, de forma que “conjuntamente” significa que el agente forma parte de un régimen de tratamiento anticancerígeno junto con un agente quimioterapéutico.

En ciertas realizaciones, el agente va a ser administrado en una cantidad eficaz para aumentar la expresión de BAD en al menos 5% o al menos 10%, o al menos 20%, o al menos 30%, o al menos 40% en relación a un testigo. Preferentemente, el agente va a ser administrado en una cantidad eficaz para aumentar el nivel de expresión de BAD en al menos 10% en relación al testigo. En ciertas realizaciones, el testigo es el nivel de expresión de BAD en una muestra obtenida a partir del sujeto antes de la administración del agente. Un experto en la técnica será capaz de determinar estas cantidades eficaces realizando experimentos de laboratorio rutinarios para medir el aumento del nivel de expresión de BAD en respuesta a la administración de cantidades crecientes de un agente. En ciertas realizaciones, la muestra biológica obtenida a partir del sujeto para ser usada en el método es sangre, plasma, suero, fluido linfático, un tejido o células derivadas de una muestra de tejido. Preferentemente, la muestra es obtenida a partir de una biopsia tumoral del sujeto. Las técnicas convencionales para obtener cualquiera de las muestras biológicas anteriores de un sujeto son bien conocidas por un experto en la técnica.

Según la descripción, el agente que aumenta la expresión de BAD se selecciona entre la lista que consiste en 6-pnaltrexol, naloxona, metilnaltrexona o sus sales farmacéuticamente aceptables. Según la invención, el agente es 6-p-naltrexol o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En ciertas realizaciones, el 6-p-naltrexol va a ser administrado en una cantidad eficaz para aumentar la concentración en plasma sanguíneo de 6-p-naltrexol hasta al menos 0,34 ng/ml o al menos 3,4 ng/ml, o al menos 34 ng/ml o al menos 340 ng/ml. En ciertas realizaciones, el 6-p-naltrexol va a ser administrado en una cantidad eficaz para aumentar la concentración en plasma sanguíneo de 6-p-naltrexol en el intervalo de 0.3 ng/ml a 3400 ng/ml, preferentemente en el intervalo de 34 ng/ml a 3400 ng/ml, más preferentemente de 340 ng/ml a 3400 ng/ml. La cantidad eficaz para conseguir esta cantidad puede ser determinada usando cualquier número de técnicas convencionales conocidas por un experto en la técnica. Por ejemplo, un experto en la técnica podría realizar una espectrometría de masas sobre una muestra de plasma sanguíneo obtenido a partir del sujeto con el fin de determinar el aumento en la concentración de 6-p-naltrexol en la muestra después de la administración de una cantidad de 6-p-naltrexol. La cantidad eficaz es la cantidad determinada para llevar a cabo el aumento deseado en la concentración de plasma sanguíneo.

Como se usa en la presente memoria descriptiva, los términos “tratamiento” y “tratar” se refieren ambos a 1) mediciones terapéuticas que curan, ralentizan y/o detienen el progreso de un estado o trastorno patológico diagnosticado y 2) mediciones profilácticas o preventivas que previenen y/o ralentizan el desarrollo de un estado o trastorno patológico dirigido a diana. Por tanto, los que necesitan un tratamiento incluyen los que ya tienen el trastorno, los que son propensos a tener el trastorno y aquellos en los que se va a prevenir el trastorno. En algunos casos, un sujeto es satisfactoriamente “tratado” para un tumor/cáncer según la presente invención si el sujeto muestra uno o más de lo que sigue: una reducción en el número, o ausencia completa de células cancerígenas; una reducción en el tamaño tumoral; inhibición o ausencia o infiltración de células cancerígenas en órganos periféricos que incluyen, por ejemplo, la extensión del cáncer en el tejido blando y los huesos; la inhibición o ausencia de metástasis tumorales; inhibición o ausencia de crecimiento tumoral; morbilidad y mortalidad reducidas; reducción en la tumerigenicidad, frecuencia tumorigénica o capacidad tumorigénica de un tumor; reducción del número o frecuencia de células madre cancerígenas en un tumor; diferenciación de células tumorigénicas hasta un estado no tumorigénico; o alguna combinación de estos efectos.

Como se usa en la presente memoria descriptiva, el término “tumor/cáncer” se refiere a cualquier masa de tejido que resulte de un crecimiento celular excesivo, proliferación y/o supervivencia, tanto benigno (no canceroso) como maligno (canceroso) que incluye lesiones precancerígenas. Los términos “tumor/cáncer” y “neoplasma” se pueden usar de forma intercambiable. La expresión” célula tumoral” se refiere a células o células derivadas del tumor/cáncer. Como se usa en la presente memoria descriptiva, la expresión “célula cancerígena” se refiere a una célula o línea celular inmortalizada derivada de un tumor o cáncer.

En ciertas realizaciones, el agente que aumenta la expresión de BAD puede ser administrado aparte de forma simultánea separada o secuencial con el agente terapéutico.

Como se usa en la presente memoria descriptiva, los términos “administración concurrente” o “concurrentemente” o “simultáneo” o “secuencial” o “separado” significan la administración del agente que aumenta la expresión de BAD y el efecto quimioterapéutico se produce como parte del mismo régimen de tratamiento.

Administración “simultánea”, como se define en la presente memoria descriptiva, incluye la administración del agente que aumenta la expresión de BAD y el agente terapéutico en aproximadamente 2 horas o aproximadamente 1 horas o menos uno respecto al otro, incluso más preferentemente al mismo tiempo.

Administración “separada” como se define en la presente memoria descriptiva, incluye la administración del agente que aumenta la expresión de BAD y el agente quimioterapéutico, más de aproximadamente 12 horas, o aproximadamente 8 horas, o aproximadamente 6 horas, o aproximadamente 4 horas o aproximadamente 2 horas. Administración “secuencial” como se define en la presente memoria descriptiva, incluye la administración del agente que aumenta la expresión de BAD y el agente quimioterapéutico, cada uno en parte alícuotas y/o dosis y/o ocasiones separadas múltiples. El agente que aumenta la expresión de BAD puede ser administrado al sujeto antes o después de la administración del agente quimioterapéutico. Alternativamente, el agente quimioterapéutico continúa siendo aplicado al sujeto después de que cesa el tratamiento con el agente que aumenta la expresión de BAD. En ciertas realizaciones, el agente quimioterapéutico va a ser administrado después de que se haya administrado el agente que aumenta la expresión de BAD.

En ciertas realizaciones, el agente quimioterapéutico es administrado una vez que es aumentado el nivel de expresión de BAD en al menos 5%, o al menos 10% o al menos 20%, o al menos 30%, o al menos 40% en relación al testigo. Preferentemente, el agente quimioterapéutico va a ser administrado una vez que es aumentado el nivel de expresión de BAD en al menos 10% en relación a un testigo.

En ciertas realizaciones, el agente y el agente quimioterapéutico van a ser administrados de forma simultánea. Además, según dicho primer aspecto, el agente quimioterapéutico puede ser seleccionado entre el grupo que consiste en inhibidores de PI3-quinasa inhibidores de AKT, taxanos, antimetabolitos, agentes de alquilación, inhibidores del ciclo celular, inhibidores de topoisomerasas y anticuerpos citotóxicos. El agente quimioterapéutico puede ser administrado de cualquier forma convencional, siendo ampliamente dependiente el método de administración del inhibidor señalizador de moléculas pequeñas que va a ser usado. Consecuentemente, está prevista la administración mediante las vías, entre otras, parenteral, oral, sublingual, nasal y/o pulmonar.

Cuando el agente quimioterapéutico es un inhibidor de PI3-quinasa, los ejemplos adecuados incluyen wortmanina, LY294002, desmetoxiviridina, IC87114, NVP-BEZ235, BAY 80-6946, BKM120, GDC-0941, GDC-9080; incluidas sus combinaciones; y las sales farmacéuticamente aceptables, solvatos, hidratos, estereoisómeros y clatratos de cualquiera de los que anteceden.

Cuando el agente quimioterapéutico es un inhibidor de AKT, los ejemplos adecuados incluyen MK-2206, GCK 690693, perifosina, PHT-427, AT7867, honokiol, PF-04691502; incluidas sus combinaciones y las sales farmacéuticamente aceptables, solvatos, hidratos, estereoisómeros y clatratos de cualquiera de los que anteceden. Cuando el agente quimioterapéutico es un taxano, los ejemplos adecuados incluyen paclitaxel y docetaxel; incluidas sus combinaciones; y las sales farmacéuticamente aceptables, solvatos, hidratos, estereoisómeros y catratos de cualquiera de los que anteceden.

Cuando el agente quimioterapéutico es un antimetabolito, los ejemplos adecuados incluyen metotrexato, 5-fluorouracilo, capecitabina, citosinarabinosido (Cytarabin), gencitabina, 6-tioguanina, pentostatina, azatioprina, 6-mercaptopurina, fluodarabina y cladribina; incluidas sus combinaciones las sales farmacéuticamente aceptable, solvatos, hidratos, estereoisómeros y clatratos de cualquiera de los que anteceden. La gencitabina es un antimetabolito especialmente preferido. A modo de ejemplo, la gencitabina puede ser administrada a una dosis (por administración) de 800-1200 mg/m2, preferentemente 900-1100 mg/m2, por ejemplo, aproximadamente 1000 mg/m2 o 1000 mg/m2.

Cuando el agente quiomioterapéutico es un agente de alquilación, los ejemplos adecuados incluyen mecloretamina, ciclofosfamida, ifosmamida, trofosfamida, melfanal (L-sarcolisina), cloroambucilo, hexametil-melamina, tiotepa, busulfán, carmustina (BCNU) estreptozocina (estreptozotocina), dacarbazina (DTIC; dimetiltriazenoimidazol ecarboxamida), temozolomida y oxaliplatino; incluidas sus combinaciones; y sus sales farmacéuticamente aceptables, solvatos, hidratos, estereoisómeros y clatratos de cualquiera de los que anteceden. La ciclofosfamida y el oxaliplatino son agentes de alquilación especialmente preferidos. A modo de ejemplo, el oxaliplatino puede ser administrado a una dosis (por administración de 65-105 mg/m2, preferentemente 75-95 mg/m2, por ejemplo aproximadamente 85 mg/m2 o 85 mg/m2. A modo de ejemplo, la ciclofosfamida puede ser administrada a una dosis (por administración de hasta 1800 mg/m2,, por ejemplo, 400-1800 mg/m2.

Cuando el agente quimioterapéutico es un inhibidor del ciclo celular, los ejemplos adecuados incluyen epotilona, vincristina, , Vinblastine, UCN-01, 17AAG, XL844, CHIR-124, PF-00477736, CEP-3891, Flavopiridol, berberina, P276-00, tetrameprocol, isoflavona daidzeina, BI2536, BI6727, GSK461364, Cyclapolin, ON-01910, NMS-P937, TAK-960, Ispinesib, Monastrol, AZD4877, LY2523355, ARRY-520, MK-0731, SB743921, GSK923295, Lonafarnib, proTAME, Bortezomib, MLN9708, ONX0912, CEP-18770; incluidas sus combinaciones, y las sales farmacéuticamente aceptables, solvatos, hidratos, estereoisómeros y clatratos de cualquiera de los que anteceden; un ejemplo particularmente adecuado de inhibidores del ciclo celular incluye hespaeradina, ZM447439, VX-680, MLN-8054, PHA-739358, AT-9283, AZD1152, MLN8237, ENMD2076, SU6668, incluidas sus combinaciones; y otros inhibidores de aurora quinasas y sus sales farmacéuticamente aceptables, solvatos, hidratos, estereosómeros y clatratos de cualquiera de los que anteceden.

En ciertas realizaciones, el agente quimioterapéutico es un antimetabolito, preferentemente gencitabina.

En ciertas realizaciones, el agente quimioterapéutico es un agente de alquilación, preferentemente oxaliplatino. La presente invención puede ser usada para tratar cánceres que incluyen sarcoma, carcinoma, adenocarcinoma, melanoma, mieloma, blastoma, glioma, linfoma o leucemia. Ejemplos de cánceres incluyen, por ejemplo, carcinoma, sarcoma, adenocarcinoma, melanoma, neural (blastoma, glioma), mesotelioma y trastornos neoplásticos retículoendoteliales, linfáticos o hemapotoyéticos (por ejemplo, mieloma, linfoma o leucemia). En aspectos particulares, un tumor o cáncer incluye un adenocarcinoma de pulmón, carcinoma de pulmón, carcinoma gástrico difuso o intersticial, adenocarcinoma de colon, adenocarcinoma de próstata, carcinoma de esófago, carcinoma de mamas, adenocarcinoma de páncreas, adenocarcinoma de ovarios, adenocarcinoma de la glándula adrenal, adenocarcinoma del endometrio o adenocarcinoma uterino.

Los tumores y cánceres, incluyen los tipos benignos, malignos, metastáticos y no metastáticos e incluye cualquier fase (I, II, III, IV, V) o grado (G1, g2, G3, etc.) de un tumor, o cáncer o metástasis que está en progreso, empeorando, estabilizado o en remisión. Los cánceres que pueden ser tratados según la invención incluyen, pero sin limitación: vejiga, sangre, hueso, médula ósea, cerebro, mamas, colon, esófago, gastrointestinal, gingival, cabeza, riñón, hígado, pulmón, nasofaringe, cuello, ovarios, próstata, piel, estómago, testículos, lengua o útero. Preferentemente, el cáncer se selecciona entre cáncer de próstata, cáncer de hígado, cáncer renal, cáncer de pulmón, cáncer de mamas, cáncer colorrectal, cáncer pancreático, cáncer de cerebro, cáncer hepatocelular, linfoma, leucemia, cáncer gástrico, cáncer de cuello uterino, cáncer de ovarios, cáncer de tiroides, melanoma, cáncer de cabeza y de cuello, cáncer de la piel y sarcoma de tejidos blandos y/o otras formas de carcinoma. El tumor puede ser un tumor metastático o maligno.

En ciertas realizaciones, el cáncer que va a ser tratado se selecciona entre la lista que consiste en cáncer de pulmón, cáncer de colon, cáncer de mamas, cáncer pancreático, linfoma o glioma.

En ciertas realizaciones, el cáncer que va a ser tratado es, preferentemente, cáncer de mamas.

En ciertas realizaciones, el cáncer que va a ser tratado es preferentemente cáncer de mamas. En ciertas realizaciones, el cáncer que va a ser tratado es cáncer de pulmón o cáncer de colon. Preferentemente, el cáncer que va a ser tratado es cáncer de colon.

En un aspecto de la descripción, se proporciona un método para seleccionar un sujeto que tiene un cáncer para un tratamiento con un agente que aumenta el nivel de expresión de BAD, que comprende las etapas de: (a) obtener una muestra biológica del sujeto del cáncer que se sospecha que lo necesita; (b) medir la concentración de BAD en la muestra y (c) comparar la concentración medida de BAD con un valor de referencia, de forma que si el sujeto tiene una concentración de BAD más o menos equivalente o menor que el valor de referencia, el sujeto se selecciona para la administración de un agente que aumenta la expresión de BAD.

La expresión “más o menos” es usada en la presente memoria descriptiva para proporcionar un soporte literal para el valor exacto al que precede la expresión, así como un valor que es cercano o aproximado al valor al que precede la expresión. Al determinar si el valor es cercano o aproximado a un valor citado específico, el valor cercano o aproximado que se cita puede ser un valor que, en el contexto en el que se presenta, proporciona el equivalente sustancial del valor específicamente citado. Por ejemplo, “más o menos” puede significar que el valor está en un 1%, o 2%, o 5% del valor de referencia.

En ciertos aspectos de la descripción, el método puede ser usado para verificar la eficacia terapéutica de un agente que aumenta la expresión de BAD, que comprende realizar las etapas (a) a (c) según el aspecto medio de la descripción después de que se haya suministrado el agente a un sujeto.

La verificación del nivel de expresión de BAD después de la administración del agente hace posible que un agente quimioterapéutico sea posteriormente administrado, una vez que el sujeto ha sido sensibilizado al agente quimioterapéutico. Si la concentración de BAD es de al menos 5%, al menos 10% o al menos 20%, o al menos 30%, o al menos 40%, preferentemente al menos 10% mayor que el valor de referencia después de la administración del agente, el sujeto puede ser seleccionado para una administración con un agente quimioterapéutico. Alternativamente, si la concentración de BAD es de menos 5%, 10%, 20%, 30% o 40% mayor que el valor de referencia, el sujeto puede seleccionado para una nueva administración del agente que aumenta la expresión de BAD. Preferentemente, cuando la concentración de BAD es de menos de 10% mayor que el valor de referencia después de la administración del agente, el sujeto puede ser seleccionado para una nueva administración del agente que aumenta la expresión de BAD.

Según el aspecto anterior de la descripción, las expresiones “valor de referencia” y “valor del testigo” se usan de forma intercambiable en la presente memoria descriptiva. El valor de “referencia” para ser usado en el método puede ser el nivel de expresión de BAD determinado a partir de la muestra obtenida de un sujeto sano. Como se usa en la presente memoria descriptiva, un “sujeto sano” se refiere a un sujeto que no padece cáncer. El valor de referencia puede ser determinado midiendo el nivel de expresión de BAD en la muestra obtenida a partir de un sujeto sano en el tiempo en que realiza el método del aspecto anterior de la descripción. Alternativamente, el valor de referencia puede ser un valor previamente determinado a partir de una medición anterior del nivel de expresión de BAD en una muestra equivalente obtenida a partir de un individuo sano. Cuando se verifica la eficacia terapéutica del agente que aumenta la expresión de BAD, el valor de referencia puede ser el derivado de un sujeto sano o el valor de referencia puede ser la concentración de BAD medida en la muestra previamente obtenida del sujeto, es decir el valor de referencia puede ser el nivel de expresión de BAD en una muestra obtenida del sujeto antes de la administración del agente.

En ciertos aspectos, la muestra biológica obtenida a partir del sujeto para ser usada en el método es sangre, plasma, suero, fluido linfático, un tejido o células derivadas de una muestra de tejido. Preferentemente, la muestra es obtenida a partir de una biopsia tumoral del sujeto. Las técnicas convencionales para obtener cualquiera de las muestras biológicas anteriores a partir de un sujeto son bien conocidas por un experto en la técnica.

En ciertos aspectos, el nivel de expresión de BAD se determina realizando un método seleccionado entre la lista que consiste en transferencia Western, análisis de expresión de mRNA, perfilado de ribosomas, citometría de flujo o espectrometría de masas. El nivel de expresión de BAD puede ser determinado también usando otros métodos analíticos convencionales para un experto en la técnica.

En ciertos aspectos de la descripción, el agente que aumenta la expresión de BAD se selecciona entre el grupo que consiste en 6-p-naltrexol, naloxona, metil-naltrexona o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Según la invención, el agente que aumenta la expresión de BAD es 6-p-naltrexol o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En ciertos aspectos, el agente quimioterapéutico se selecciona entre el grupo que consiste en inhibidores de PI3-quinasa, inhibidores de AKT, taxanos, antimetabolitos, agentes de alquilación, inhibidores del ciclo celular, inhibidores de topoisomerasa y anticuerpos citotóxicos.

En ciertas realizaciones, el sujeto con cáncer tiene un cáncer seleccionado entre la lista que consiste en cáncer de pulmón, cáncer de colon, cáncer de mamas, cáncer pancreático, linfoma o glioma. Preferentemente, el sujeto con cáncer tiene un cáncer de colón o un cáncer de pulmón. En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de colon. En ciertas realizaciones, el cáncer es cáncer de mamas.

Según un aspecto adicional de la descripción, se proporciona un método para seleccionar un agente que aumenta la expresión de BAD para ser usado en el tratamiento de cáncer conjuntamente con un agente quimioterapéutico, que comprende las etapas de: (a) incubar células con un agente de ensayo; (b) medir la concentración de BAD después de la incubación con el agente de ensayo y (c) comparar el aumento del nivel de expresión de BAD entre las células y un valor testigo, de forma que si el aumento del nivel de expresión de BAD es al menos un 5%, o al menos un 10%, o al menos un 20% o al menos 30%, o al menos 40% en relación a un testigo, el agente es identificado como un agente para ser usado en el tratamiento de cáncer conjuntamente con un agente quimioterapéutico. Preferentemente, cuando el agente aumenta el nivel de expresión de BAD en al menos 10% en comparación con el testigo, el agente es identificado como un agente para ser usado en el tratamiento de cáncer conjuntamente con un agente quimioterapéutico.

Con el fin de realizar el método de este aspecto de la descripción, el experto en la técnica podría emplear cualquier número de técnicas de cultivo de células estándar rutinariamente usadas en los protocolos de selección de fármacos in vitro. Por ejemplo, se podría usar un formato de cultivo de células in vitro de múltiples pocillos, haciendo posible que se seleccionen múltiples agentes candidatos de forma simultánea a concentraciones múltiples. Por tanto, a partir de este formato, el experto en la técnica sería capaz de determinar los agentes más adecuados analizando el modo en que la expresión de BAD aumenta en función de la concentración de agente. Con el fin de determinar el nivel de expresión de BAD, se puede realizar por un experto en la técnica cualquier número de métodos conocidos en la técnica que incluyen, pero sin limitación, RT-PCR, transferencia Western, inmunohistoquímica y derivados adecuados de los que anteceden. Las veces que cambia la expresión se puede determinar haciendo referencia a un valor testigo derivado de una población de células que ha sido incubada con un agente vehículo o sin agente alguno, de modo que el agente vehículo es una molécula que se conoce que aumenta el nivel de expresión de BAD. Los agentes vehículos adecuados serían los conocidos por un experto en la técnica o, alternativamente, un agente vehículo adecuado podrá ser un agente que no aumente la expresión de BAD según se determina a partir del método de selección. Alternativamente, el valor testigo puede ser un valor predeterminado correspondiente al nivel endógeno de expresión de BAD en una población de células en el ensayo.

En una realización de este aspecto de la descripción, las células son o derivan de una línea celular inmortalizada, preferentemente de origen humano. Una línea celular “inmortalizada” se refiere a una población de células que, debido a una mutación, experimentan una proliferación indefinida y evadir la senescencia celular normal. Por ejemplo, las células pueden ser o pueden derivar de SH-SY5Y, Hep-G2, HEK 293, RAW 264.7, HeLa, MRC-5, A2780, CACO-2, THP 1, A549, PD 30, MCF7, SNL 76/7, C2C12, Jurkat E6.1, U937, L929, 3T3 L1, HL60, PC-12, HT29, OE33, OE19, NIH 3T3, MDA-MB-231, K562, U-87 MG, PD-25, A2780cis, B9, CHO-K1, MDCK, 1321N1, A431, ATDC5, HUVEC, Vero, Fao, J774A.1, MC3T3-E1, J774.2, PNT1A, U-2 OS, HCT 116, MA104, BEAS-2B, NB2-11, BHK 21, NS0, Neuro 2a, T47D, 1301, PNT2, PC-3, TF1, COS-7, MDCK, NCI-322, SK,N.SH, LNCaP.FGC, OE21, PSN1, ISHIKAWA, MFE-280, MG-63, RK 13, célula EoL-1, VCaP, tsA201, CHO, HT 1080, PANC-1, Saos-2, SK-OV-3, COV434, Hep 3B, A375, AGS, CAKI 2, COLO 205, COR-L23, IMR 32, QT 35, WI 38, HMVII, HT55, o células TK6. Según un aspecto adicional de la descripción, se proporciona un método de tratamiento de un sujeto que tiene cáncer, que comprende la administración de un agente anticancerígeno, caracterizado porque el sujeto que va a ser tratado tiene un aumento del 10% del nivel de expresión de BAD en células tumorales, con relación a un testigo.

Este aspecto de la descripción está basado en el descubrimiento de que las células tumorales con un nivel aumentado de expresión de BAD son más sensibilizadas a los efectos de los agentes anticancerígenos. Como se usa en la presente memoria descriptiva, “sensibilizada” se refiere a una susceptibilidad aumentada de la célula cancerígena a la citotoxicidad en respuesta a la administración de un agente anticancerígeno, de forma que la “sensibilidad” aumentada es debida a un aumento en el nivel de expresión de BAD en relación a un testigo. El aumento del nivel de expresión de BAD puede ser una característica inherente de la célula tumoral. O el aumento del nivel de expresión puede ser inducido pos la administración de un agente que aumenta la expresión de BAD. El aumento del nivel de expresión puede ser determinado con respecto al nivel basal de expresión de BAD en una célula no cancerosa en un sujeto al que se va a administrar un agente anticancerígeno. En este caso, el nivel basal de expresión en la célula no cancerosa se denomina testigo. Alternativamente, el nivel basal de expresión de BA puede ser un valor predeterminado derivado del nivel de expresión de BAD en una célula no cancerosa en un sujeto sano.

En un aspecto adicional, se proporciona un método de tratamiento de un sujeto que tiene cáncer, que comprende administrar al sujeto un agente anticancerígeno, caracterizado porque el sujeto que va a ser tratado tiene un aumento de 10% en el nivel de expresión de BAD en células tumorales en relación a un testigo. El nivel de expresión de BAD en el sujeto puede ser aumentado administrando un agente para ser usado en el tratamiento de cáncer conjuntamente con un agente quimioterapéutico.

En un aspecto adicional de la descripción, se proporciona el uso de un agente que aumenta la expresión de BAD en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de cáncer, en el que el medicamento va a ser administrado conjuntamente con un agente quimioterapéutico.

Dicho método o dicho uso tiene las mismas características opcionales y preferidas aplicables a la invención.

Para su uso en a invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende 6-p-natrexol o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. La composición farmacéutica puede ser proporcionada en forma de una solución oral, una pastilla, una cápsula, una preparación inyectable, infusible, un supositorio, una píldora o un comprimido. Según la invención, la composición farmacéutica se proporciona en formas de dosificaciones orales sólidas, particularmente en forma de un comprimido.

Como se usa en la presente memoria descriptiva, la expresión “composición farmacéutica” significa, por ejemplo, una mezcla que contiene una cantidad especificada de un compuesto o compuestos terapéuticos, por ejemplo, una cantidad terapéuticamente eficaz, en un vehículo farmacéuticamente aceptable, para ser administrada a un mamífero, por ejemplo, un ser humano, con el fin de tratar una enfermedad.

Como se usa en la presente memoria descriptiva, la expresión “farmacéuticamente aceptable” se refiere a los compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que, dentro del alcance de un criterio médico adecuado, sean adecuados para estar en contacto con los tejidos de mamíferos, especialmente seres humanos, sin una toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica y otras complicaciones problemáticas proporcionadas con una relación beneficio/riesgo razonable.

El término “formulación" está previsto que incluya la mezcla de (o de los) compuesto(s) activo(s) con un material encapsulante como portador, que proporcione una forma de dosificación sólida en la que el compuesto activo (con o sin otros vehículos está rodeado por un portador que, por tanto, está en asociación con el mismo. Análogamente, se incluyen sellos. Los comprimidos, polvos, sellos y cápsulas pueden ser usados como formas de dosificación sólidas adecuadas para una administración oral.

La formulación farmacéutica puede estar en forma de dosificación unitaria. En esta forma, la composición se divide en dosis que contienen cantidades apropiadas del (o de los) componente(s) activo(s). La forma de dosificación unitaria puede ser una preparación envasada, conteniendo el envase cantidades discretas de las preparaciones, por ejemplo, comprimidos envasados, cápsulas y polvos en viales o ampollas. La forma de dosificación única puede ser también una cápsula, sello o comprimido en sí mismo, o puede ser el número apropiado de cualquiera de estas formas envasadas.

Según la invención, el producto de 6-p-naltrexol que va a ser empleado en as presentes composiciones en una forma de dosificación oral sólida contiene una cantidad terapéuticamente eficaz de 6-p-naltrexol, que es de 0,1 mg hasta 50 mg, preferentemente de 0,01 mg a 40 mg, lo más preferentemente de 0,01 a 20 mg del producto de 6-meta-naltrexol por comprimido; por ejemplo, 0,01 mg, 0,0 mg, 0,1 mg, 0,3 mg, 0,5 mg, 1 mg, 2 mg, 3 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, o 50 mg de producto de 6-p-naltrexol por comprimido. En ciertas realizaciones, la composición comprende la cantidad apropiada de dosificaciones de producto de 6-p-naltrexol para tener en cuenta la degradación, si existe, de producto de 6-p-naltrexol. En ciertas realizaciones, la composición comprende de 3 mg a 4,5 mg.

La composición farmacéutica puede ser proporcionada en forma de una combinación del producto de 6-p-naltrexol y una combinación de excipientes farmacéuticamente aceptables. Como se usa en la presente memoria descriptiva, el término “excipiente” se refiere a un ingrediente farmacéuticamente aceptable que es comúnmente usado en la técnica farmacéutica para la preparación de formulaciones de dosificación oral sólidas. Ejemplos de categorías de excipientes incluyen, pero sin limitación aglutinantes, disgregantes, lubricantes, adyuvantes de flujo, estabilizadores, materiales de carga y diluyentes. La cantidad de cada excipiente usado puede variar dentro de intervalos convencionales en la técnica. Las siguientes referencias describen técnicas y excipientes usados para formular formas de dosificación oral. Véase la publicación The Handbook of Pharmaceutical Excipients, 4th edition, Rowe et al., Eds., American Pharmaceuticals Association (2003); y Remington: the Science and Practice of Pharmacy, 20th edition, Gennaro, Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2000).

Los excipientes adecuados incluyen carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, lactosa, monohidrato de lactosa, azúcar, pectina, dextrina, almidón, tragacanto, celulosa microcristalina, metil-celulosa, carboximetil-celulosa de sodio, almidón de maíz, sílice anhidra coloidal, dióxido de titanio, una cera de bajo punto de fusión y manteca de cacao.

En otra realización, la composición farmacéutica comprende al menos un excipiente.

La invención se ilustra adicionalmente por medio de los siguientes ejemplos no limitativos.

Ejemplos

Ejemplo 1

Determinación del nivel de expresión de BAD después de la administración de 6-p-naltrexol.

Con el fin de determinar el efecto de 6-p-naltrexol o naltrexona sobre el nivel de expresión de BAD, bAKT, p21, ciclina B1 y CDK1 HCT116, se sembraron células de cáncer de colon HCT116 en placas de 6 pocillos a una densidad de 2 x 105 células/pocillo y se permitió que se adhirieran durante una noche. Las células se cultivaron seguidamente en presencia de naltrexona o 6-p-naltrexol a concentraciones de 10 nm a 10 |jm durante 48 h adicionales. Las células se recolectaron seguidamente y se trataron para mediciones de BAD o pAKT, p21, ciclina B1 y CDK1 HCT116 usando técnicas de inmunotransferencia estándar.

Los resultados muestran que el 6-p-naltrexol 10 jm aumenta el nivel de expresión de BAD en células HCT116 en más de 10%, mientras que las concentraciones de naltrexona y 6-p-naltrexol 1 nm tienen un efecto insignificante sobre el nivel de expresión de BAD.

Ejemplo 2

El aumento del nivel de expresión de BAD estimula la eficacia de agentes anticancerígenos

Se ensayó el impacto de combinar 6-p-naltrexol con otros agentes de quimioterapia cultivando células según un esquema de tratamiento que implicaba dos fases de tratamiento. La primera fase implicaba cebar con 6-p-naltrexol 10 nm o 6-p-naltrexol jm durante 48 h, antes de un tratamiento con otro fármaco durante 48 h adicionales. Se sembraron células A549 y HCT116 en placas de 6 pocillos a una densidad de 2 x 105 células/pocillo y se dejaron adherir durante una noche. Los medios se retiraron después de 48 h y las células se aclararon suavemente con medio exento de fármaco. Seguidamente se añadió a las células medio de cultivo de reciente aportación que contenía gemcitabine (GEM). Las concentraciones de los agentes de quimioterapia usados fueron de aproximadamente 1/4 IC50, según se estableció previamente [Liu WM, Fowler DW, Smith P, Dalgleish AG. El pretratamiento con quimioterapia puede mejorar la antigenicidad y la inmunogenicidad de tumores favoreciendo respuestas inmunes adaptables. Br J Cancer. 2010 Jan 5; 102(1 ):115-23. doi: 10.1038/sj.bjc.6605465.]. las células se dejaron seguidamente durante 48 h adicionales antes de una valoración del número de células de viabilidad mediante recuento celular usando colorante azul de tripano como una forma de discriminar las células vivas y muertas. La citostasis estuvo indicada por una reducción del número de células y no reducción asociada en la viabilidad celular.

Los experimentos muestran que cuando se añade 6-p-naltrexol en una cantidad eficaz para elevar el nivel de expresión de BAD en al menos un 10%, se aumenta el efecto citotóxico de ambos agentes quimioterapéuticos. Este efecto es observado en ausencia de cualquier aumento independiente de la citotoxicidas provocado por la administración de 6-p-naltrexol solo (Figura 2c y d, 6BL-0 10 o 6BN-0 10 jM). además, el efecto citotóxico aumentado es mayor cuando se aumenta en mayor medida el nivel de expresión de BAD (es decir, administrando una dosis mayor de 6-p-naltrexol).

Por tanto, los experimentos muestran que un agente que aumenta la expresión de BAD es capaz de mejorar la eficacia terapéutica de agentes anticancerígenos particulares.

Ejemplo 3

Determinación del efecto de 6BN sobre una línea celular cancerígena

Se completaron experimentos similares a los realizados en células A549 y HCT116 en la línea celular de cáncer de mamas MCF-7 para valorar los efectos de 6BN sobre la expresión de proteínas mediante transferencia Western y los resultados indican que el 6BN indujo un aumento dependiente de la dosis en la expresión de proteína BAD proapoptótica (Figura 3). El efecto de combinar 6 bn con los agentes quimioterapéuticos gemcitabina u oxaliplatino se ensayó cultivando células MCF-7 con 6BN (10 nm o 10 |jm) de forma concomitante con gemcitabina (0,5 |jm) u oxaliplatino (0,5 jm). Seguidamente se valoró el número y la viabilidad de las células después de 48 h usando exclusión de colorante azul de tripano como un medio para discriminar las células vivas/muertas. Los resultados indicaron que la combinación de 6BN 10 jm con cualquier quimioterapia provocó el mayor efecto sobre la viabilidad celular (Figura 4).

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Una composición farmacéutica en una forma de dosificación oral sólida, que comprende de 0,01 mg hasta 50 mg por comprimido de un agente que aumenta la expresión de BAD (muerte celular de agonista asociado a Bcl2), en que la que el agente es 6-p-naltrexol, o sus sales farmacéuticamente aceptables, para ser usada en el tratamiento de cáncer conjuntamente con un agente quimioterapéutico.

2. La composición farmacéutica para ser usada según la reivindicación 1, en la que el agente va a ser administrado en una cantidad eficaz para aumentar la expresión de BAD en al menos 5%, o al menos 10%, o al menos 20%, o al menos 30%, o al menos 40%, con relación a un testigo.

3. La composición farmacéutica para ser usada según las reivindicaciones 1 o 2, en la que el 6-p-naltrexol va a ser administrado en una cantidad eficaz para aumentar la concentración en plasma sanguíneo de 6-p-naltrexol desde 0,34 ng/ml hasta 3400 ng/ml, o más.

4. La composición farmacéutica para ser usada según la reivindicación 3, en la que el 6-p-naltrexol va a ser administrado en una cantidad eficaz para aumentar la concentración en plasma sanguíneo de 6-p-naltrexol desde 34 ng/ml hasta 3400 ng/ml, o más.

5. La composición farmacéutica para ser usada según la reivindicación 4, en la que el 6-p-naltrexol va a ser administrado en una cantidad eficaz para aumentar la concentración en plasma sanguíneo de 6-p-naltrexol desde 340 ng/ml hasta 3400 ng/ml.

6. La composición farmacéutica para ser usada según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, para una administración separada, secuencial o simultánea con un agente quimioterapéutico.

7. La composición farmacéutica para ser usada según la reivindicación 6, de forma que la composición farmacéutica y el agente quimioterapéutico van a ser administrado de forma secuencial o separada.

8. La composición farmacéutica para ser usada según cualquiera de las reivindicaciones 6 o 7, en la que el agente quimioterapéutico va a ser administrado después de que se haya administrado la composición farmacéutica que comprende el agente que aumenta la expresión de BAD.

9. La composición farmacéutica para ser usada según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, en la que el agente quimioterapéutico va a ser administrado una vez que el nivel de expresión de BAD es aumentado en al menos 5%, o al menos 10%, o al menos 20% o al menos 30%, o al menos 40% con relación a un testigo, preferentemente en la que el agente quimioterapéutico va a ser administrado una vez que el nivel de expresión de BAD es aumentado en al menos 10% con relación a un testigo.

10. La composición farmacéutica para ser usada según la reivindicación 6, en que la composición farmacéutica que comprende el agente y el agente quimioterapéutico se administra de forma simultánea.

11. La composición farmacéutica para ser usada según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 10, en la que el agente quimioterapéutico se selecciona entre el grupo que consiste en inhibidores de PI3-quinasa, inhibidores de AKT, taxanos, antimetabolitos, agentes de alquilación, inhibidores del ciclo celular, inhibidores de topoisomerasa y anticuerpos citotóxicos.

12. La composición farmacéutica para ser usada según la reivindicación 11, en la que el agente quimioterapéutico es un antimetabolito, preferentemente gemcitabina.

13. La composición farmacéutica para ser usada según la reivindicación 11, en la que el agente quimioterapéutico es un agente de alquilación, preferentemente seleccionado entre oxaliplatino o ciclofosfamida.

14. La composición farmacéutica para ser usada según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que el cáncer que va a ser tratado se selecciona entre la lista que consiste en cáncer de pulmón, cáncer de colon, cáncer de mamas, cáncer pancreático, linfoma o glioma.

15. La composición farmacéutica para ser usada según la reivindicación 14, en la que el cáncer es cáncer de pulmón o cáncer de colon o cáncer, preferentemente, cáncer de mamas.