ES2891249T3 - Nuevos biomarcadores para estimar el riesgo de fracaso del aloinjerto y de mortalidad del paciente después del trasplante de órganos - Google Patents

Nuevos biomarcadores para estimar el riesgo de fracaso del aloinjerto y de mortalidad del paciente después del trasplante de órganos Download PDF

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Abstract

Un procedimiento para estimar el riesgo de fracaso del aloinjerto y de mortalidad del paciente que se asocia con el fracaso del aloinjerto en un paciente después de un trasplante de órgano que comprende a) evaluar el estado de vitamina K en sangre, plasma o suero que se extrae o toma de dicho paciente después del trasplante por medición del grado de carboxilación de las proteínas Gla extrahepáticas circulantes, b) proporcionar un esquema de referencia que muestre el estado de vitamina K de una población de referencia de personas sanas en el que se midió el grado de carboxilación de las proteínas Gla extrahepáticas circulantes de la misma manera que en el paso a), c) comparar el valor que se obtuvo en el paso a) con el esquema de referencia del paso b), en el que un valor fuera del rango normal de dicho esquema de referencia es indicativo de un riesgo de fracaso del aloinjerto y/o de mortalidad del paciente.

Description

DESCRIPCIÓN
Nuevos biomarcadores para estimar el riesgo de fracaso del aloinjerto y de mortalidad del paciente después del trasplante de órganos
Campo de la invención
La presente invención pertenece al campo del diagnóstico clínico. En particular, la invención se refiere al uso de proteínas que contienen gamma-carboxiglutamato como biomarcadores para estimar el riesgo de fracaso del aloinjerto y de mortalidad en pacientes que se sometieron a un trasplante de órganos.
Antecedentes de la invención
La vitamina K puede presentarse en dos formas diferentes: K1 y K2. Mientras que K1 comprende una sola estructura química (filoquinona), K2 es un nombre de grupo para la familia de las menaquinonas (abreviado como MK-n), que tienen en común una estructura de anillo de naftoquinona metilada como grupo funcional, pero que varían en la longitud de su cadena lateral poliisoprenoide. En la nomenclatura generalmente adoptada, n representa el número de residuos isoprenilo en MK-n. El número de residuos de isoprenilo en la cadena lateral puede variar de 1 (en MK-1) a 13 (en m K-13). Las diferentes formas de la vitamina K comparten la función como coenzima de la enzima postraduccional gammaglutamato carboxilasa (GCCX), pero se reportan diferencias sustanciales con respecto a la absorción, el transporte y la farmacocinética {Schurgers LJ, Vermeer C. Biochim Biophys Acta 1570 (2002) 27-32}. Mientras que K1 es preferentemente utilizada por el hígado, las vitaminas K2 (principalmente las menaquinonas de cadena larga MK-7 a MK-10) se transportan fácilmente a tejidos extrahepáticos, como huesos, arterias y tejido adiposo. Las vitaminas K disponibles comercialmente incluyen K1, MK-4 y MK-7.
El producto de la acción de la vitamina K es el aminoácido inusual ácido gammacarboxi-glutámico, abreviado como Gla. Actualmente, se han descubierto 17 proteínas que contienen Gla y en aquellos casos en los que se conocen sus funciones desempeñan un papel clave en la regulación de importantes procesos fisiológicos, incluida la hemostasia, el metabolismo del calcio y el crecimiento y supervivencia de la célula {Berkner KL, Runge KW. J Thromb Haemostas 2 (2004) 2118-2132}. Dado que se descubren nuevas proteínas Gla casi cada dos años {Viegas CS y otros. Am J Pathol 175 (2009) 2288-2298}, es de esperar que en un futuro próximo se identifiquen más procesos controlados por proteína Gla. En todas las proteínas Gla cuya función se conoce, los residuos Gla son esenciales para la actividad y funcionalidad de estas proteínas, mientras que las proteínas que carecen de estos residuos son defectuosas {Berkner KL, Runge KW. J Thromb Haemostas 2 (2004) 2118-2132}. Ahora se comienza a comprender la especificidad con la que las estructuras del dominio Gla facilitan la interacción de las proteínas de coagulación dependientes de la vitamina K con las membranas de la célula {Huang M y otros, Nature Struct Biol 10 (2003) 751-756}. Asimismo, se acepta bien que los residuos Gla de la osteocalcina confieren la unión de la proteína a la matriz de hidroxiapatita del hueso de una manera que sugiere fuertemente la selectividad y funcionalidad {Hoang QQ. Nature 425 (2003) 977-980}.
Todas las proteínas Gla implicadas en la hemostasia se sintetizan en el hígado: cuatro factores de coagulación sanguínea (II, VII, IX y X) y tres proteínas inhibidoras de la coagulación (C, S y Z). Estas proteínas se denominan generalmente "proteínas Gla hepáticas" en referencia a su origen. En la población normal sana, la ingesta de vitamina K es suficiente para cubrir las necesidades del hígado, así en los adultos sanos todos los factores de coagulación están completamente carboxilados.
Además de las proteínas Gla hepáticas, también conocemos las proteínas Gla extrahepáticas, es decir, aquellas proteínas Gla que se sintetizan fuera del hígado. Como se detallará debajo, la mayoría de las proteínas Gla extrahepáticas están sustancialmente subcarboxiladas con un 20-30 % del antígeno total presente en el estado deficiente de Gla (y por tanto inactivo). Algunos ejemplos son la osteocalcina de proteína Gla ósea (OC) y la proteína Gla de la matriz vascular (MGP) {Knapen MH y otros, Ann Int Med 111 (1989) 1001-1005; Cranenburg EC y otros, Thromb Haemostas 104 (2010) 811-822}. Mientras que la función de la MGP como inhibidor de la calcificación de tejidos blandos es bien conocida {Schurgers LJ y otros, Thromb Haem 100 (2008) 593-603}, la función de OC permanece como un tema de debate incluso 30 años después de su descubrimiento. La función principal de la proteína rica en Gla (GRP) recientemente descubierta probablemente también esté relacionada con la inhibición de la calcificación, particularmente en el cartílago {Cancella ML y otros, Adv Nutr 3 (2012) 174-181}.
Se han detectado especies de MGP carboxiladas (cMGP) y no carboxiladas (ucMGP) en plasma humano normal {Cranenburg EC y otros, Thromb. Haemostas. 104 (2010) 811-822; Schurgers LJ y otros, Blood 109 (2007) 3279­ 3283}. Mientras que la fracción total de ucMGP (t-ucMGP) resultó ser un "marcador de enfermedad" con el potencial diagnóstico de monitorear la cantidad de calcio arterial predominante {Cranenburg EC y otros, Thromb. Haemostas.
101 (2009) 359-366}, se demostró que la fracción conocida como desfosfo-MGP no carboxilada (dp-ucMGP) indica el estado general de vitamina K y es un "marcador de riesgo" que se asocia directamente con el riesgo futuro de calcificación y la mortalidad cardiovascular {Schurgers LJ y otros, Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 5 (2010) 568-575}.
Además de los ensayos específicos de conformación para dp-ucMGP, también están disponibles comercialmente ensayos específicos de conformación para OC (OC carboxilada (cOC) y OC no carboxilada (ucOC), respectivamente). La ucOC o el cociente ucOC/cOC o el cociente ucOC/OC total se utilizan a menudo para vincular el estado de vitamina K con una baja densidad mineral ósea y riesgo de fractura {Szulc PJ y otros, J. Clin. Invest. 91 (1993) 1769-1774; Luukinen H y otros, J. Bone Miner. Res. 15 (2000) 2473-2478, van Summeren y otros, Brit J Nutr 100 (2008) 852-858}. En general, las proteínas Gla no carboxiladas son marcadores de insuficiencia de vitamina K y de un mayor riesgo de enfermedad, principalmente en las enfermedades relacionadas con la edad {McCann JC y Ames BN. Am J Clin Nutr 90 (2009) 889-907}.
Vermeer C ha descrito ensayos específicos de conformación para MGP, entre otros en la literatura de patentes (EP 1190259, EP 1591791, US 6,746,847, US 7,700,296 y US 8,003,075). Se demostró su uso diagnóstico para enfermedades cardiovasculares y artritis reumatoide. Sin embargo, estas publicaciones de patentes no dicen nada sobre el uso de la MGP no carboxilada (en particular dp-ucMGP) como marcador de la respuesta inmunitaria y el fracaso del trasplante de órganos.
Recientemente, la ingesta dietética de vitamina K se asocia con la inflamación. Se encontró que la ingesta alta de vitamina K1 y los niveles altos de vitamina K1 circulante se correlacionan con niveles bajos del marcador de inflamación CRP {Shea MK y otros, Am J Epidemiol 167 (2008) 313-320}. Los autores indican que el mecanismo no puede ser en base a la función clásica de la vitamina K (carboxilación de proteínas postraduccional) sino en un aumento en la expresión de genes que se relacionan con la inflamación. La inflamación puede ser el resultado tanto de la composición genética como de una respuesta inmunitaria adquirida, y generalmente va acompañada de un aumento en la producción de citocinas, que incluyen TNF-alfa, interleucina-1 e interleucina-6.
Sin embargo, en el rechazo posterior al trasplante de órganos, se atribuye un papel prominente a diferentes mecanismos, principalmente los que se asocian con un aumento de las proteínas HLA y los linfocitos T {Sun HJ y otros, Transpl. Immunol. 25 (2011)42-48; Loupy A y otros, Nat. Rev. Nephrol. 8 (2012) 348-357}. Hasta ahora no se ha descrito ni sugerido el papel de la vitamina K o la importancia de la suficiencia de vitamina K en este procedimiento.
La única divulgación del uso de vitamina K en pacientes trasplantados es para tratar las hemorragias relacionadas con la deficiencia de vitamina K caracterizadas por un tiempo prolongado de protrombina o tromboplastina parcial durante la primera semana posoperatoria para evitar complicaciones hemorrágicas (sangrado) {Prasad GV y otros, Am J Kidney Dis 33 (1999) 963-965}-Obviamente, el único propósito de esta aplicación de vitamina K de corto plazo es restaurar las reservas hepáticas de vitamina K que se pueden agotar perioperatoriamente; de esta forma se normaliza el sistema de coagulación sanguínea de modo que se previene el sangrado posoperatorio.
El documento WO 2005/054503 divulga un procedimiento para monitorear el rechazo de trasplantes en un sujeto que comprende monitorear el nivel de ARNm o la expresión de proteína correspondiente de una serie de transcritos génicos, entre ellos el ARNm de MGP y su producto de traducción MGP, y comparar los niveles antes de y en un momento predeterminado después del trasplante. El procedimiento no dice nada, sin embargo, sobre la modificación y activación postraduccionales de las proteínas marcadoras. Además, no hay divulgación sobre otras proteínas Gla que incluyen osteocalcina y GRP.
Kiji y otros, Transplantation Proceedings 36 (2004) 2415-2417 divulga que 9 días después del trasplante los niveles de expresión de la MGP (según las mediciones del nivel de ARNm) en aortas de rata trasplantadas fueron significativamente menores en aloinjertos que en isoinjertos. Se concluyó que es probable que el rechazo inmunológico inhiba la expresión de la MGP en aloinjertos vasculares, lo que resulta en una calcificación de inicio tardío. Sin embargo, solo se midió la expresión de ARNm a nivel de tejido. No hay ninguna divulgación de la síntesis de proteínas y la modificación postraduccional ni del uso de fracciones de m Gp circulantes como marcador del riesgo de rechazo de aloinjertos.
Actualmente, en los pacientes con trasplante de riñón el fracaso del aloinjerto ocurre con mayor frecuencia entre 1 y 10 años después del trasplante, y es difícil evaluar quién está en riesgo de pérdida temprana del aloinjerto y de muerte.
Hay, por lo tanto, una necesidad de un análisis de sangre simple que sea útil para identificar a los pacientes con alto riesgo de fracaso del aloinjerto y de mortalidad, lo que permitirá a los médicos intervenir y adaptar la medicación y así contribuirá a mejorar el tratamiento de los pacientes después del trasplante de órganos.
Sumario de la invención
La presente invención proporciona en un aspecto un procedimiento para estimar el riesgo de fracaso del aloinjerto y de mortalidad del paciente que se asocia con el fracaso del aloinjerto en un paciente después de un trasplante de órgano que comprende los pasos siguientes:
a) evaluar el estado de vitamina K en sangre, plasma o suero que se extrae o toma de dicho paciente después del trasplante por medición del grado de carboxilación de las proteínas Gla extrahepáticas circulantes, b) proporcionar un esquema de referencia que muestre el estado de vitamina K de una población de referencia de personas sanas en el que se midió el grado de carboxilación de las proteínas Gla extrahepáticas circulantes de la misma manera que en el paso a)
c) comparar el valor que se obtuvo en el paso a) con el esquema de referencia del paso b), en el que un valor fuera del rango normal de dicho esquema de referencia es indicativo de un riesgo de fracaso del aloinjerto y/o de mortalidad del paciente.
Preferentemente, la proteína Gla se selecciona del grupo que consiste en proteína Gla de matriz (MGP), que es la realización preferente, protrombina, cualquiera de los factores de coagulación VII, IX y X, proteínas inhibidoras de la coagulación C, S y Z, osteocalcina, proteína Gla de matriz, GRP, Gas6, periostina, factor similar a la periostina y cualquiera de las cuatro proteínas Gla transmembrana.
El grado de carboxilación de las proteínas Gla extrahepáticas circulantes se evaluó preferentemente a partir de una de MGP no carboxilada total (t-ucMGP), fosfo-MGP no carboxilada (p-ucMGP), desfosfo-MGP no carboxilada (dpucMGP), que es la realización más preferente, ucOC (también se prefiere) y ucGRP.
Cuando se mide dp-ucMGP, un valor por debajo del rango normal del esquema de referencia es indicativo de un riesgo bajo y un valor de dp-ucMGP mayor que el rango normal es indicativo de un riesgo más alto, cuyo grado se correlaciona con la desviación del rango normal.
El trasplante de órganos al que pertenece la presente invención es principalmente, pero no exclusivamente, trasplante de riñón y por lo tanto los pacientes son principalmente pacientes de trasplante de riñón.
En otro aspecto la presente invención proporciona el uso de un ensayo específico de conformación para cOC, dpcMGP o cGRP en el seguimiento de pacientes después del trasplante de órganos.
En un aspecto adicional la presente invención proporciona un procedimiento para estimar el riesgo de fracaso del aloinjerto y de mortalidad del paciente que se asocia con dicho fracaso del aloinjerto después del trasplante de órgano el cual comprende evaluar las formas circulantes no carboxiladas y/o carboxiladas de proteínas Gla como un biomarcador en la sangre de dicho paciente.
Preferentemente, se usa un ensayo específico de conformación para evaluar una o más formas circulantes no carboxiladas y/o carboxiladas de proteínas Gla en la sangre o el plasma de dichos pacientes. Dichas una o más formas no carboxiladas y/o carboxiladas de proteínas Gla se seleccionan preferentemente del grupo que consiste en especies de osteocalcina (OC) no carboxiladas y/o carboxiladas, especies de proteína Gla de matriz no carboxiladas y/o carboxiladas (MGP) y especies de proteína rica en Gla (GRP) no carboxiladas y/o carboxiladas.
Preferentemente, se evaluaron las formas circulantes de proteínas Gla no carboxiladas, es decir, dp-ucMGP, ucOC y ucGRP, ya que este procedimiento es básicamente el más sensible en comparación con las pruebas para las especies carboxiladas correspondientes.
En otro aspecto la presente invención proporciona el uso de un ensayo específico de conformación para cOC, dpcMGP o cGRP en el seguimiento de pacientes después del trasplante de órganos.
Estos y otros aspectos de la presente invención se describirán con más detalle en la descripción detallada que sigue.
Breve descripción de las figuras
Figura 1:Estado deficiente de vitamina K en pacientes después de un trasplante de riñón. Las barras de error representan la SD. La diferencia entre los pacientes con ingesta normal y baja de vitamina K fue significativa para p<0,05, la diferencia entre el grupo de referencia sano y los pacientes con ingesta normal de vitamina K fue significativa para p<0,005 (prueba t de Student).
Figura 2:La dp-ucMGP y la ucOC más altas en plasma se asocian con un aumento del riesgo de mortalidad. Los tres subgrupos representan terciles (igual tamaño) de la población total de pacientes.
Figura 3:La dp-ucMGP y la ucOC más altas en plasma se asocian con un aumento del riesgo de mortalidad cardiovascular.
Figura 4:La dp-ucMGP y la ucOC más altas en plasma se asocian con un aumento del riesgo de fracaso del injerto (no censurado).
Figura 5:La dp-ucMGP y la ucOC más altas en plasma se asocian con un aumento del riesgo del criterio de valoración combinado de mortalidad y fracaso del injerto.
Figura 6:Fracciones significativas tanto de MGP y osteocalcina aparecen en su conformación no carboxilada (= deficiencia de vitamina K) en adultos sanos.
Figura 7:Correlación entre ucOC y dp-ucMGP.
Definiciones:
El término "fracaso del aloinjerto", como se usa en la presente memoria, se define como una pérdida aguda o crónica de la función del órgano que se trasplanta y se considera un estado irreversible de disfunción del órgano que se trasplanta. En el ejemplo del trasplante de riñón, el fracaso del aloinjerto es la pérdida de función tan grave que el paciente necesita volver a la terapia de reemplazo renal (es decir, hemodiálisis, diálisis peritoneal o retrasplante). Por lo general esto es necesario cuando la GFR es < 10 ml/min y el paciente tiene molestias urémicas (encefalopatía, pericarditis, etc.), hiperpotasemia, retención de líquidos grave, etc.
La vitamina K, como se usa en la presente memoria, se refiere a filoquinona (también conocida como vitamina K1); y menaquinona (también conocida como vitamina K2). Dentro del grupo de la vitamina K2, se hace especial referencia a la menaquinona-4 (MK-4) y las menaquinonas de cadena larga (MK-7, MK-8 y MK-9), en particular a la menaquinona-7 (MK-7). Se acepta generalmente que la fracción de naftoquinona que tienen en común es el grupo funcional, por lo que el mecanismo de acción es similar para todas las vitaminas K. Sin embargo, se pueden esperar diferencias con respecto a la absorción intestinal, el transporte, la distribución en los tejidos y la biodisponibilidad. Como se usa en la presente memoria, el término "estado de la vitamina K" se refiere al grado en que se han carboxilado diversas proteínas Gla. Una carboxilación deficiente significa que el suministro de vitamina K en el tejido del que se origina la proteína Gla ha sido muy bajo para asegurar su carboxilación completa.
En general, se hace una distinción entre el estado de la vitamina K hepática (carboxilación de factores de la coagulación) y el estado de la vitamina K extrahepática. El hígado produce los factores de la coagulación sanguínea dependientes de la vitamina K. El estado insuficiente de la vitamina K hepática es extremadamente raro; por lo tanto, los factores de coagulación no son marcadores sensibles del estado de la vitamina K. En la presente solicitud de patente, el estado de la vitamina K de una persona se considerará deficiente cuando el nivel circulante de la proteína Gla extrahepática MGP (que se mide como dp-ucMGP) está por encima del nivel normal superior en adultos sanos. Asimismo, el estado de la vitamina K de una persona también se considera bajo cuando el nivel circulante de la proteína Gla extrahepática proteína osteocalcina está por encima del nivel normal superior en adultos sanos. La DpucMGP se origina a partir de tejidos distintos del hígado, principalmente arterias y cartílagos.
Asimismo, ucOC se origina principalmente en el hueso. Además, se proporcionan pruebas de que existe una fuerte correlación entre los niveles circulantes de ucOC y dp-ucMGP, lo que sugiere que otras proteínas Gla extrahepáticas pueden usarse de manera similar como marcadores del estado de la vitamina K extrahepática.
Como se usa en la presente memoria, el término "cohorte de estudio" se define como la población (grupo de sujetos, grupo de pacientes) en la que se realiza el estudio particular.
En consecuencia, y a menos que se indique lo contrario, los parámetros numéricos descritos en la siguiente memoria descriptiva y las reivindicaciones anexas son aproximaciones que pueden variar en dependencia de las propiedades deseadas que se busca obtener por la presente invención. Por lo menos, y no como un intento de limitar la aplicación de la doctrina de los equivalentes al ámbito de las reivindicaciones, cada parámetro numérico se debe al menos interpretar a la luz del número de dígitos significativos informados y mediante la aplicación de técnicas de redondeo habituales.
A pesar de los rangos numéricos y parámetros descritos, el amplio ámbito de la invención son aproximaciones, los valores numéricos descritos en los ejemplos específicos se informan tan precisos como sea posible. Cualquier valor numérico, sin embargo, contiene ciertos errores inherentes que resultan de la desviación estándar encontrada en sus respectivas mediciones de prueba. Además, se entiende que todos los rangos divulgados en la presente memoria abarcan todos y cada uno de los subrangos que se incluyen en ellos. Por ejemplo, un rango de "1 a 10" incluye todos y cada uno de los subrangos entre (y que incluyen) el valor mínimo de 1 y el valor máximo de 10, es decir, todos y cada uno de los subrangos que tiene un valor mínimo igual o mayor que 1 y un valor máximo igual o menor que 10, por ejemplo, 5,5 a 10.
Cabe señalar que, como se usa en esta memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares "un", "una" y "el/la" incluyen referencias en plural a menos que expresa e inequívocamente se limite a una referencia. Así, por ejemplo, la referencia a "un monómero" incluye dos o más monómeros.
Descripción detallada de la invención
La presente invención se basa en el sorprendente descubrimiento de que el estado de la vitamina K, que se mide por el grado de carboxilación de las proteínas Gla extrahepáticas circulantes, se correlaciona inversamente con el fracaso del aloinjerto y la mortalidad del paciente en pacientes después de un trasplante de riñón.
Por lo tanto, la invención proporciona el uso de especies de MGP no carboxiladas o incompletamente carboxiladas como biomarcador para monitorear el riesgo de fracaso del trasplante y de mortalidad en pacientes después de un trasplante de órganos. El monitoreo puede comenzar convenientemente 1-2 meses después de la cirugía, cuando los pacientes se hayan estabilizado. Posteriormente, el monitoreo se puede repetir regularmente, por ejemplo, una o dos veces al año.
Si bien la invención se ejemplifica con la proteína Gla de matriz (MGP) no carboxilada, en este momento se conocen diecisiete proteínas Gla y todas pueden usarse para este propósito, es decir, la evaluación del estado de la vitamina K en un paciente después de un trasplante de órganos, y están, por tanto, dentro del ámbito de la presente invención. Las proteínas Gla descritas hoy incluyen: protrombina, factores de coagulación VII, IX y X, proteínas inhibidoras de la coagulación C, S y Z, osteocalcina, proteína de matriz Gla (MGP), proteína rica en Gla (GRP, también conocida como UCMA), Gas6, periostina, factor similar a la periostina y cuatro proteínas Gla transmembrana. La MGP no carboxilada se presenta en dos formas: una que contiene residuos de fosfoserina y una segunda forma en la que los residuos de serina no se han fosforilado. En consecuencia, se pueden desarrollar pruebas para la MGP no carboxilada total (t-ucMGP), la fosfo-MGP no carboxilada (p-ucMGP) y la desfosfo-MGP no carboxilada (dp-ucMGP). Dado que la medición de dp-ucMGP es más sensible que la de t-ucMGP y p-ucMGP, la presente invención se ejemplifica con dp-ucMGP que es una realización preferente. Sin embargo, se entenderá que la invención no se limita a esta realización.
El rango de dp-ucMGP circulante en adultos aparentemente sanos está entre 100 y 650 pmol/L, con una tendencia al extremo más alto de este rango a medida que aumenta la edad. Por encima de 650 pmol/L se considera claramente anormal y solo unos pocos individuos tienen valores > 500 pmol/L. El promedio para la población de referencia adulta normal es de 450 pmol/L de dp-ucMGP en plasma. Estos valores se evaluaron después de medir > 1000 individuos aparentemente sanos con edades comprendidas entre los 25 y los 75 años; el 95 % de todos los valores se encuentran dentro del rango de 100-500 pmol/L, que en consecuencia se designa como "el rango normal".
El estado de la vitamina K se considera inadecuado o insuficiente cuando las concentraciones circulantes de proteínas Gla no carboxiladas superan el valor normal superior. Para dp-ucMGP el valor normal superior se establece en 500 pmol/L (pM).
De acuerdo con la invención, se proporciona un esquema de referencia que muestra los rangos de los valores de dp-ucMGP en plasma que indican una escala de riesgo de mortalidad y fracaso del injerto. Los pacientes trasplantados se subdividen en tres terciles para la dp-ucMGP circulante: <833 pmol/L; 833-1,306 pmol/L y > 1,306 pmol/L. Los sujetos en terciles con aumento de dp-ucMGP tenían un aumento del riesgo de mortalidad y de fracaso del injerto. En consecuencia, la escala de riesgo de mortalidad y de fracaso del injerto se puede establecer de la siguiente manera:
• Riesgo bajo: dp-ucMGP en plasma < 450 pmol/L
• Riesgo levemente elevado: dp-ucMGP en plasma entre 451-832 pmol/L
• Riesgo sustancial: dp-ucMGP en plasma entre 833-1,306 pmol/L
• Riesgo alto: dp-ucMGP en plasma > 1,306 pmol/L
En este esquema, el riesgo más bajo se atribuye a aquellos que tienen dp-ucMGP por debajo del valor promedio de la población de referencia normal ("sana"), los tres grupos con un aumento del riesgo se definen sobre la base de los terciles en el grupo de pacientes como se muestra en la Figura 5
Aunque el esquema anterior proporciona una herramienta conveniente para clasificar a los pacientes, estará claro que existe un aumento gradual del riesgo al aumentar los niveles de dp-ucMGP entre 100 y 5000 pmol/L. Además, puede usarse un factor de corrección por edad, sexo o raza. Finalmente, también el diseño del ensayo dp-ucMGP y la afinidad de los anticuerpos que se usan en el mismo pueden influir en los valores precisos dados en esta clasificación. Por lo tanto, un prospecto en el kit debe contener los valores de referencia normales y los rangos para escalas de riesgo más altos, mientras que el profesional médico debe decidir cómo interpretar el valor del paciente frente a esta información de fondo.
La clasificación de un paciente individual se llevará a cabo mediante la extracción de sangre, generalmente por punción venosa, y evaluación del valor de dp-ucMGP y/o ucMGP. La evaluación se lleva a cabo de acuerdo con la tecnología que es bien conocida por un experto en la técnica. El valor que se observa se comparará con los rangos dados en la tabla de referencia anterior. De esta manera, el paciente se clasificará en: riesgo bajo, riesgo ligeramente elevado, riesgo sustancial o riesgo alto de fracaso del órgano y/o de muerte. Esto ayudará al equipo de trasplante a optimizar el tratamiento. La medición repetida del valor de dp-ucMGP del paciente (por ejemplo, cada seis meses) ayudará a monitorear adecuadamente el perfil de riesgo del paciente y a implementar los cambios necesarios en el tratamiento en una fase temprana.
La presente invención proporciona además el uso de otras especies de MGP o antígeno MGP total para monitorear el riesgo de fracaso del trasplante y de mortalidad en pacientes trasplantados. Estas formas de MGP incluyen especies carboxiladas (que serán más altas cuando las especies no carboxiladas sean menores) como dp-cMGP, pero también MGP no carboxilada total (t-ucMGP) como marcador de calcificación arterial y supervivencia. La evaluación se puede realizar como se describe, entre otras cosas, en Cranenburg E.C.M., Koos, R., Schurgers, L.J., Magdeleyns, E., Schoonbrood, T.H.M., Landewe, R., Brandenburg, V.M., Bekers, O., Vermeer, C. Characterization and potential diagnostic value of circulating matrix Gla protein (MGP) species. Thromb. Haemostas. 104 (2010) 811­ 822, y debe compararse con tablas de referencia preparadas para la fracción de MGP correspondiente.
En otro aspecto, la presente invención incluye el uso de ensayos específicos de conformación para cualquiera de las otras proteínas Gla, como ucOC y cOC, para monitorear el riesgo de fracaso del trasplante y de mortalidad en pacientes trasplantados. En todos los casos los ensayos para proteínas Gla no carboxiladas darán valores que aumentan al aumentar la insuficiencia de vitamina K, mientras que los ensayos para proteínas Gla carboxiladas darán valores decrecientes al aumentar la insuficiencia de vitamina K. Para ucOC se encontró que el rango normal estaba entre 0,5 y 4,0 pg/L con un valor normal superior de 4,0 pg/L. Estos valores se midieron de forma similar a la descrita para dp-ucMGP, pero mediante el uso de un kit comercial para ucOC (kit GLU-OC de Takara, Japón).
Une vez descrita de forma general la invención, la misma puede entenderse más fácilmente mediante la siguiente referencia a la parte experimental que incluye los ejemplos y los dibujos que la acompañan, que se proporcionan a modo de ilustración y no pretenden limitar la presente invención a menos que se especifique. Por el contrario, se desea que la invención cubra todas las alternativas, modificaciones y equivalentes, que pueden incluirse en la invención como se define en las reivindicaciones adjuntas.
Cohorte de estudio: La cohorte de estudio en la que se realizó la presente invención se ha descrito en detalle en otra parte {de Vries AP y otros, Am. J Transpl. 4 (2004) 1675-1683}. En resumen, la Junta de Revisión Institucional de la Universidad de Groningen aprobó el protocolo de estudio (METC 2001/039), que se incorporó en el seguimiento ambulatorio del Programa de Trasplante Renal de Groningen. El seguimiento ambulatorio constituye un sistema de vigilancia continua en el que los pacientes visitan la clínica ambulatoria con una frecuencia decreciente, de acuerdo con las directrices de la Sociedad Americana de Trasplante, es decir, desde dos veces por semana inmediatamente después del alta hospitalaria hasta dos veces al año a largo plazo después del trasplante. Entre agosto de 2001 y julio de 2003, todos los adultos receptores de aloinjertos que sobrevivieron con un aloinjerto funcional más allá del primer año después del trasplante (1 año después del trasplante se consideró como la referencia) fueron idóneos para participar en su próxima visita a la clínica ambulatoria (fecha índice). Después de la visita de referencia, todos los participantes visitaron la clínica ambulatoria al menos una vez al año. También se invitó a participar a los pacientes que recibieron un trasplante combinado (es decir, riñón/páncreas o riñón/hígado). Se excluyó de la participación a los pacientes con enfermedades sistémicas aparentes o conocidas (por ejemplo, neoplasias o infecciones oportunistas) en la fecha índice. Un total de 606 de 847 (72 %) receptores de trasplante renal idóneos firmaron un consentimiento informado por escrito.
Procedimientos: Las características relevantes del donante, el receptor y el trasplante se extrajeron de la Base de Datos de Trasplante Renal de Groningen. Esta base de datos contiene información de todos los trasplantes renales que se han realizado en el Centro de Trasplante Renal de Groningen desde 1968. Además, la base de datos contiene los resultados de las visitas ambulatorias (por ejemplo, peso corporal, creatinina sérica, aclaramiento de creatinina en base a la recolección de orina de 24 h y proteinuria) a 1 mes, 6 meses, 1 año, 2 años y cada cinco años después del trasplante. Se extrajo de la base de datos la edad del donante y del receptor, el sexo, la etnia, la enfermedad renal primaria, el tipo y la duración de la terapia de diálisis, el tipo y la fecha del trasplante, el número de trasplantes previos, los tiempos de isquemia fría y caliente, número de incompatibilidades de antígeno leucocitario humano (h La ), función retardada del injerto (es decir, días de oliguria postrasplante), estado de citomegalovirus (CMV), tipo de tratamiento de rechazo agudo, peso corporal de referencia, aclaramiento de creatinina en 24 h y proteinuria de referencia. La condición de fumador en la fecha índice se obtuvo mediante un cuestionario de autoinforme que se envió a los participantes por correo. La inmunosupresión estándar consistió en lo siguiente: Azatioprina (100 mg/d) y prednisolona desde 1968 hasta 1989. Formulación estándar de ciclosporina (Sandimmune, Novartis: 10 mg/kg; niveles mínimos de 175-200 Ig/L en los primeros 3 meses, 150 Ig/L entre 3 y 12 meses después del trasplante y 100 g/L a partir de entonces) y prednisolona (comenzar con 20 mg/d, disminuir rápidamente a 10 mg/d) desde enero de 1989 hasta febrero de 1993. Microemulsión de ciclosporina (Neoral, Novartis Pharma B.V., Arnhem, Países Bajos; 10 mg/kg; niveles mínimos idénticos) y prednisolona desde marzo de 1993 hasta mayo de 1996. Se añadió micofenolato mofetil (Cellcept, Roche, Nederland B.V., Woerden, Países Bajos; 2 g/d) desde mayo de 1997 hasta la fecha. La medicación actual se extrajo de la historia clínica. La nefrotoxicidad del inhibidor de la calcineurina se definió como la interrupción del uso del inhibidor de la calcineurina o la conversión de un inhibidor de la calcineurina en otro entre la referencia y la fecha índice.
Se extrajo sangre después de un período de 8-12 h de ayuno durante la noche para preparar suero y plasma con citrato, que se submuestrearon y congelaron a -80 °C hasta su uso. La función del aloinjerto renal se evaluó como el aclaramiento de creatinina urinaria de 24 h (CrCl), es decir, la excreción de creatinina urinaria en 24 h dividida por la concentración de creatinina sérica. El estado de la vitamina K se evaluó a partir de las concentraciones en plasma de dp-ucMGP como se describe en otra parte {Cranenburg EC y otros, Thromb. Haemostas. 104 (2010) 811-822} y de ucOC mediante el uso de un kit de prueba ELISA de doble anticuerpo comercial (Takara Shuzo Co. Ltd., Otsu, Shiga, Japón). Se analizó una mezcla de suero control interno en todas las placas ELISA. Los criterios de valoración principales de este estudio fueron el fracaso del injerto censurado por muerte y el cambio en la función renal. El fracaso del injerto censurado por muerte se definió como el regreso a la terapia de diálisis o retrasplante. El cambio en la función renal se definió como la GFR estimada (eGFR) de referencia, a la que se resta la eGFR en la última visita de seguimiento, dividida por el tiempo desde el inicio hasta el seguimiento y expresada en mililitros por minuto por 1,73 m2 por año. Esto se prefiere a una pendiente porque la disminución de la función renal en la disfunción crónica del trasplante generalmente no ocurre de manera lineal. Por lo tanto, calcular una pendiente en lugar de un cambio en la eGFR subestimará la verdadera disminución de la función renal de un paciente. Para los pacientes que fallecieron con un injerto en funcionamiento (n = 78), la eGFR en el seguimiento se definió como la función renal en la última visita a la clínica ambulatoria antes de la muerte, y para los pacientes con fracaso del injerto (n = 42), la eGFR en el seguimiento fue definida como la eGFR en la última visita a la clínica ambulatoria antes de iniciar la terapia de diálisis o el retrasplante. No hubo pérdidas durante el seguimiento.
Los niveles plasmáticos de referencia de dp-ucMGP y ucOC se midieron mediante ELISA en una cohorte de receptores de trasplante de riñón ambulatorios estables (n = 528) a 7,8 ± 6,4 (media ± SD) años después del trasplante. Las asociaciones entre los niveles de dp-ucMGP y el resultado combinado de mortalidad y fracaso del injerto se analizaron mediante un análisis de regresión de Cox multivariante que se ajustó por edad, sexo, eGFR proteinuria, hemoglobina, circunferencia de la cintura, tabaquismo, diabetes, colesterol total, colestero1HDL y presión arterial sistólica. Los análisis de sensibilidad se realizaron en un subgrupo con eGFR >30 y <90 ml/min. Resultados: La mediana de los niveles plasmáticos de dp-ucMGP ascendieron a 1,039 pmol/L y el 91 % de la población estaba por encima del nivel normal superior de 500 pmol/L, lo que indica insuficiencia de vitamina K. Después de 6,4 ± 1,7 años de seguimiento más allá de la referencia, 171 (28 %) fallecieron o desarrollaron fracaso del injerto. Los niveles plasmáticos de dp-ucMGP se asociaron positivamente con un aumento del riesgo del criterio de valoración combinado de mortalidad por todas las causas y fracaso del injerto (cociente de riesgos instantáneos del modelo completo 1,86 por aumento de 1 SD [IC del 95 % 1,23-2,82], p = 0,004). Los análisis por tercil de dpucMGP y los análisis de sensibilidad proporcionaron resultados similares.
Para ucOC, la mediana de los niveles circulantes fue 7,3 ng/L y el 87 % de la población estaba por encima del nivel normal superior de 4,0 ng/L, lo que indica insuficiencia de vitamina K. Al igual que dp-ucMGP, también los niveles de ucOC se asociaron positivamente con un aumento del riesgo del criterio de valoración combinado de mortalidad por todas las causas y fracaso del injerto (cociente de riesgos instantáneos del modelo completo 1,78 por aumento de 1 SD [IC del 95 % 1,15-1,53], p = 0,005). Los análisis por tercil de ucOC y los análisis de sensibilidad proporcionaron resultados similares.
Conclusiones: El estado deficiente de vitamina K, según se concluye por la dp-ucMGP o la ucOC circulante es un factor de riesgo independiente de mortalidad y fracaso del injerto después del trasplante de riñón.
Ejemplo 1
Los pacientes de trasplante tienen un estado deficiente de vitamina K según se decide a partir de sus niveles de proteína Gla no carboxilada circulantes (Figura 1). En 60 receptores de trasplantes de riñón, la ingesta de vitamina K se estimó mediante el uso de registros de alimentación de cuatro días. La ingesta total de vitamina K estuvo por debajo del nivel que se recomienda (hombres: 120 pg/día, mujeres: 90 pg/día) en el 50 % de todos los sujetos, tanto en hombres (15/30 pacientes) como en mujeres (15/30 pacientes). El estado de la vitamina K se evaluó por medición de la dp-ucMGP y ucOC circulantes, y se comparó con 60 sujetos sanos de la misma edad y sexo con una ingesta adecuada de vitamina K. La mayoría de los pacientes tenían niveles plasmáticos de dp-ucMGP y ucOC por encima del rango normal, lo que es indicativo de un estado deficiente de vitamina K. Los pacientes con ingestas de vitamina K por debajo de la ingesta recomendada tenían niveles más altos de dp-ucMGP y ucOC que aquellos con ingestas adecuadas.
Ejemplo 2
El dp-ucMGP en plasma es un marcador del fracaso del aloinjerto y de la mortalidad del receptor del trasplante (Figuras 2-5). En la cohorte del estudio, el 91 % de los pacientes trasplantados tenían niveles de dp-ucMGP > 500 pmol/L (nivel superior del rango normal en adultos sanos). La mediana [IQR] en la población actual (sesgada) fue 1,039 [733-1,542] pmol/L. La cohorte total del estudio (n=528) se dividió en terciles y en cada tercil los pacientes se monitorearon durante 7 años después del trasplante. En las Figuras 2-5 se muestran la mortalidad acumulada por todas las causas, la mortalidad cardiovascular, el fracaso del aloinjerto y la combinación de mortalidad por todas las causas fracaso del injerto. La Tabla 1 debajo muestra las estadísticas detalladas para cada una de estas figuras para dp-ucMGP. Se obtuvieron resultados comparables para ucOC (datos no mostrados).
Tabla 1
Análisis de regresión de Cox para las Figuras 2-5
Niveles de dp-ucMGP (por 1 pmol/L) y resultados
Crudo
st. beta IC del 95 % P
Mortalidad 1,36 1,19-1,55 <0,001 Mortalidad CV 1,43 1,20-1,70 <0,001
fracaso del injerto 1,49 1,23-1,81 <0,001 Combinación 1,39 1,24-1,56 <0,001
Ajuste por edad y sexo
st. beta IC del 95 % P
Mortalidad 1,28 1,11-1,48 0,001
Mortalidad CV 1,34 1,11-1,61 0,001
fracaso del injerto 1,56 1,28-1,89 <0,001 Combinación 1,33 1,18-1,50 <0,001
Ajuste por edad, sexo, aclaramiento de creatinina, proteinuria
st. beta IC del 95 % P
Mortalidad 1,23 1,05-1,45 0,012
Mortalidad CV 1,31 1,06-1,61 0,011
fracaso del injerto 1,29 1,01-1,65 0,04 Combinación 1,26 1,09-1,44 0,001
Ajuste por edad, sexo, aclaramiento de creatinina, proteinuria, Hb, uso de ACEi/ARB, circunferencia de la cintura, tabaquismo, diabetes, colesterol total, colestero1HDL y presión arterial sistólica
st. beta IC del 95 % P
Mortalidad 1,20 1,02-1,41 0,02
Mortalidad CV 1,30 1,07-1,60 0,01
fracaso del injerto 1,35 1,00-1,82 0,048 Combinación 1,22 1,06-1,41 0,005
Ejemplo 3
Tanto dp-ucMGP como ucOC se encuentran en la circulación de la cohorte de estudio. (Figura 6). Se midieron las especies carboxiladas y no carboxiladas de osteocalcina y MGP mediante el uso de ensayos específicos de conformación como se describe en otra parte. Resultó que entre el 20 y el 30 % de los antígenos circulantes aparecían en estado no carboxilado. Las cuatro pruebas diferentes que se muestran en esta figura se realizaron en muestras de los mismos individuos.
Una correlación significativa (R2 = 0,7, p < 0,001) se encontró entre ucOC y dp-ucMGP (Figura 7). Esto demuestra que tanto dp-ucMGP como ucOC son marcadores que pueden usarse para detectar un estado deficiente de vitamina K. Se definió un rango normal para dp-ucMGP entre 200 y 500 pmol/L, un rango normal para ucOC entre 1,2 y 4,0 pg/L.

Claims (8)

REIVINDICACIONES
1. Un procedimiento para estimar el riesgo de fracaso del aloinjerto y de mortalidad del paciente que se asocia con el fracaso del aloinjerto en un paciente después de un trasplante de órgano que comprende
a) evaluar el estado de vitamina K en sangre, plasma o suero que se extrae o toma de dicho paciente después del trasplante por medición del grado de carboxilación de las proteínas Gla extrahepáticas circulantes,
b) proporcionar un esquema de referencia que muestre el estado de vitamina K de una población de referencia de personas sanas en el que se midió el grado de carboxilación de las proteínas Gla extrahepáticas circulantes de la misma manera que en el paso a),
c) comparar el valor que se obtuvo en el paso a) con el esquema de referencia del paso b), en el que un valor fuera del rango normal de dicho esquema de referencia es indicativo de un riesgo de fracaso del aloinjerto y/o de mortalidad del paciente.
2. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que la proteína Gla se selecciona del grupo que consiste en MGP, protrombina, cualquiera de los factores de coagulación VII, IX y X, proteínas inhibidoras de la coagulación C, S y Z, osteocalcina, proteína Gla de matriz, GRP, Gas6, periostina, factor similar a la periostina y cualquiera de las cuatro proteínas Gla transmembrana.
3. El procedimiento de la reivindicación 2, en el que la proteína Gla es MGP.
4. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicho grado de carboxilación de proteínas Gla extrahepáticas circulantes se evalúa a partir de MGP no carboxilada total (t-ucMGP), fosfo-MGP no carboxilada (p-ucMGP), desfosfo-MGP no carboxilada (dp-ucMGP), ucOC y ucGRP.
5. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que un valor de dp-ucMGP por debajo del rango normal de dicho esquema de referencia es indicativo de un riesgo bajo y un valor de dpucMGP mayor que el rango normal es indicativo de un riesgo más alto, cuyo grado se correlaciona con la desviación del rango normal.
6. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicho trasplante de órgano es un trasplante de riñón y dicho paciente es un paciente de trasplante de riñón.
7. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicho grado de carboxilación de las proteínas Gla extrahepáticas circulantes se evalúa a partir de uno de cOC, dp-cMGP y cGRP.
8. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que los ensayos para proteínas Gla no carboxiladas dan valores crecientes al aumentar la insuficiencia de vitamina K y los ensayos para las proteínas Gla carboxiladas dan valores decrecientes al aumentar la insuficiencia de vitamina K.
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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5635478A (en) * 1989-09-18 1997-06-03 Yale University Use of calcitonin gene-related peptide to regulate immune response
WO2000008495A2 (en) * 1998-08-06 2000-02-17 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Antiproliferative naphthoquinones, derivatives, compositions, and uses thereof
US7700296B2 (en) 1999-07-04 2010-04-20 Mgp Diagnostics As Diagnostic assay for human Matrix Gla-protein and its use as a biomarker
ES2296634T3 (es) 1999-07-04 2008-05-01 Cardiovascular Research Institute Of Maastricht (Carim) Ensayo de diagnostico para proteina gla de matriz humana y su utilizacion como biomarcador.
PT1153548E (pt) 2000-05-12 2007-08-08 Nattopharma Asa Produto alimentar contendo vitamina k
AU2003304180A1 (en) * 2002-09-24 2005-01-04 Dow, Kenneth, Centocor, Inc. Growth arrest specific gene 6 peptides, antibodies, compositions, methods and uses
US20070111210A1 (en) * 2003-12-03 2007-05-17 Marc Bigaud Biomarkers for graft rejection
WO2005107731A1 (ja) * 2004-05-12 2005-11-17 Eisai R & D Management Co., Ltd. ビタミンk2を有効成分として含む治療剤
RU2318500C2 (ru) * 2005-10-18 2008-03-10 Общество С Ограниченной Ответственностью "Митотехнология" Способ воздействия на организм путем адресной доставки биологически активных веществ в митохондрии, фармацевтическая композиция для его осуществления и соединение, применяемое для этой цели
WO2008147283A1 (en) * 2007-05-25 2008-12-04 Leif Salford The use of zeburaline for the treatment of autoimmune diseases or immune rejection of transplants
CA2805745C (en) * 2010-07-19 2019-01-15 Summa Health System Vitamin c and chromium-free vitamin k, and compositions thereof for treating an nfkb-mediated condition or disease

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Cirillo et al. Chronic kidney disease in children: an update
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Sonkar et al. Vitamin D levels and other biochemical parameters of mineral bone disorders and their association with diastolic dysfunction and left ventricular mass in young nondiabetic adult patients with chronic kidney disease
Genc et al. Vitamin D in childhood cancer: a promising anticancer agent
Nakamura et al. Cluster analysis of indicators of liver functional and preoperative low branched-chain amino acid tyrosine ration indicate a high risk of early recurrence in analysis of 165 hepatocellular carcinoma patients after initial hepatectomy
Tobin et al. Cystatin C levels in plasma and peripheral blood mononuclear cells among hyperhomocysteinaemic subjects: effect of treatment with B-vitamins
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Onorati et al. Role of gender in short-and long-term outcomes after surgery for type A aortic dissection: analysis of a multicentre European registry
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Naser et al. Evaluation of some biomarkers (phosphorus, Parathyroid hormone, Calcium, vitamin D) in patient's serum with chronic kidney disease (CKD)
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