ES2885052T3 - Formulación multifuncional compuesta por ingredientes naturales y método de preparación/fabricación de la misma - Google Patents
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Abstract
Formulación en gel que consiste en un gel, una nanoforma hidrosoluble de curcumina, una nanoforma hidrosoluble de un extracto etanólico de Emblica officinalis y una nanoforma hidrosoluble de un extracto etanólico de Camellia sinensis, donde dicho gel es gel de Aloe vera o silicio, y donde dichas nanoformas hidrosolubles se pueden obtener de la siguiente manera: - nanoforma de curcumina: - proporcionar curcumina; - preparar una solución de dicha curcumina al 5-10 % en NaOH 1 M con mezcla continua; - neutralizar la solución obtenida con HCl 5 N y ajustar el pH a 5,5; - sonicar la solución obtenida durante 5 horas con una amplitud de 25 kHz mientras se mantiene la temperatura por debajo de 30 °C; - nanoforma de Emblica officinalis: - añadir una planta seca y molida, dicha planta es fruta, a una solución de etanol y mantenerla bajo un agitador magnético durante aproximadamente 20 h a 60 °C; - separar el extracto etanólico mediante centrifugación a 8000 rpm durante 15 min; - dejar secar el sobrenadante en un evaporador rotativo o en un horno a 30 °C-85 °C; - preparar la solución de la concentración deseada disolviendo el extracto seco en una solución de etanol al 10 %-20 % y sonicar dicha solución de 15 min a 5 horas con una amplitud de al menos 25 kHz a temperatura del hielo; - evaporar el exceso de etanol para formar un extracto vegetal hidrosoluble; - nanoforma de Camellia sinensis: - los mismos pasos que para dicha nanoforma de Emblica officinalis, pero donde dichas plantas son hojas.
Description
DESCRIPCIÓN
Formulación multifuncional compuesta por ingredientes naturales y método de preparación/fabricación de la misma
CAMPO DE LA INVENCIÓN:
[0001] La presente invención se refiere al campo de la biotecnología médica.
[0002] Más particularmente, la presente invención se refiere a proporcionar un producto innovador para la cicatrización de heridas.
[0003] La presente invención proporciona nuevos productos para su uso en el campo de la cicatrización de heridas y la formulación anticancerígena.
[0004] Aun más particularmente, la presente invención se refiere al campo de los apósitos y parches para la cicatrización de heridas.
[0005] La presente invención proporciona una matriz de cicatrización de heridas que comprende una variedad de ingredientes naturales que trabajan juntos de manera sinérgica para conseguir los resultados deseados.
[0006] Además, la presente invención proporciona nuevos productos para su uso en el campo de la formulación contra el Alzhéimer y de la esclerosis múltiple.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN:
[0007] Esta invención se refiere a una formulación en gel de compuestos fitofármacos que contienen gel natural usando gel preparado utilizando materiales similares a un gel natural y o una base de silicio de calidad médica biocompatible recubierta sobre una matriz porosa y transpirable de poliuretano o algodón para su uso en el tratamiento de heridas y úlceras en humanos y animales. También se refiere a la formulación de parches transdérmicos para la administración de los fitofármacos. La invención comprende las propiedades de potenciales antiinflamatorios, antioxidantes, antimicrobianos, anticancerígenos y de cicatrización de heridas. Además, la invención también comprende útiles para el alzhéimer y la esclerosis múltiple.
[0008] El uso de apósitos para heridas para cubrir y proteger heridas es muy conocido. Preferiblemente, el apósito para heridas debería proporcionar un entorno estéril en el sitio de la herida y debería absorber rápidamente los exudados de la herida mientras se mantiene una superficie húmeda de la herida. El apósito debería interferir lo menos posible en la cicatrización de heridas y debería ser fácil de quitar y reemplazar con un trauma mínimo. Finalmente, el apósito para heridas debería ser económico de fabricar, compacto y adaptable a todas las superficies de la piel.
[0009] El proceso de cicatrización de heridas consta de tres fases durante que las cuales el tejido lesionado se repara, regenera y el nuevo tejido se reorganiza en una cicatriz. Los fibroblastos, las células endoteliales y las células epiteliales migran al lugar de la herida. Estos fibroblastos producen el colágeno necesario para la reparación de heridas. En la reepitelización, las células epiteliales migran desde los bordes libres del tejido a través de la herida. Este evento es seguido por la proliferación de células epiteliales en la periferia de la herida. La investigación también ha mostrado que la reepitelización se ve reforzada por la presencia de apósitos oclusivos para heridas que mantienen una barrera contra la humedad.
[0010] Hay una gran variedad de tratamientos y modalidades para el tratamiento de heridas y úlceras, como se describe aquí. Estos van desde aplicaciones de antibióticos, capas oclusivas, vendajes, cataplasmas, dispositivos mecánicos que reducen la evaporación del agua y muchos otros. Sin embargo, todas estas modalidades tienen un inconveniente en común; todas mejoran la cicatrización de heridas al apoyar los mecanismos corporales para curar la herida. Desafortunadamente, el proceso de curación pasiva da como resultado mucha decepción porque el cuerpo puede tener inmunidad comprometida u otras funciones corporales que pueden no funcionar de manera óptima. Lo que se necesita es una modalidad de tratamiento que regenere activamente la piel, la dermis y la epidermis. En la invención descrita aquí, la composición específica promueve activamente la cicatrización estimulando las células madre que están presentes incluso en heridas profundas y quemaduras para regenerar el tejido perdido. Por definición, las células madre están presentes en todos los tejidos que se renuevan a sí mismos. Se cree que estas células son longevas, tienen un gran potencial para la división celular y, en última instancia, son las responsables de la homeostasis de los tejidos en estado estable. Las células madre normalmente tienen un ciclo lento. Sin embargo, pueden inducirse para entrar en el grupo proliferativo en respuesta a determinados estímulos de crecimiento. Se ha informado que varios factores de crecimiento son útiles para modular la actividad de las células madre. Por ejemplo, se cree que las citocinas, como el factor de necrosis tumoral (TNF), el factor de crecimiento epidérmico (EGF), el factor de crecimiento transfomante (TGF) y la interleucina-1 (IL-1) son útiles. Debido a que las células madre normalmente tienen un
ciclo lento, pero proliferan rápidamente tras la estimulación inductiva, pueden ser objetivos atractivos para las citocinas.
[0011] Se han propuesto varios productos herbales para el tratamiento de heridas y úlceras. La patente de EE. UU. n.° 6,133,440 proporciona un método rápido y eficiente para la preparación y el aislamiento de polisacáridos biológicamente activos de Aloe, "Immuno-10" y el uso de polisacáridos, como agentes imunoestimulantes, inmumoduladores y de cicatrización de heridas. La patente de EE. UU. n.° 6,027,728 comprende una selección de materiales herbales con efectos curativos combinados en forma de polvo para su aplicación a la piel humana para lograr la regeneración de la piel, particularmente para su aplicación a la piel humana afectada por eccema, psoriasis, reacciones alérgicas, erupción inflamatoria y similares. El proceso de aplicación es crítico para la eficacia de la presente invención. La aplicación del polvo de hierbas en la piel está destinada a provocar una inflamación temporal. Puede incluirse una variedad de otros extractos herbales, y las composiciones pueden adoptar la forma de una crema o una pomada a base de ghee, o pueden estar en forma de polvo adecuado para preparar decocciones en agua caliente. La patente de EE. UU. n.° 5,766,614 es una nueva composición para el tratamiento de quemaduras que proporciona cicatrización a la piel de personas que han sufrido quemaduras o padecen otras complicaciones cutáneas que requieren curación. La patente de EE.UU. n.° 6,126,950 se refiere a una formulación de crema herbal para talones y palmas agrietados. Esta está compuesta por una cera natural, como emulsionante, extracto de curcuma y la resina de Acacia o Colophonium o Shorea. La resina aporta un efecto sinérgico en la unión y cicatrización de la piel con extracto de hierbas curativas naturales seleccionado de los extractos acuosos de curcuma, neem y alantonina.
La WO 2014/147638 se refiere a una matriz de cicatrización de heridas para mejorar la cicatrización de heridas que comprende un lecho de herida compuesto por un tejido hidrófilo recubierto con quitosano de ion híbrido de bajo peso molecular, en un lado, y partícula de curcumina y extracto de tulsi, en el otro lado.
[0012] La formulación de gel herbal de la presente invención consiste en un gel, una nanoforma hidrosoluble de curcumina, una nanoforma hidrosoluble de un extracto etanólico de Emblica officinalis y una nanoforma hidrosoluble de un extracto etanólico de Camellia sinensis, donde dicho gel es gel de Aloe vera o silicio. Una formulación de gel herbal de la presente descripción consiste en un extracto no acuoso de hierbas naturales de Curcuma longa, curcumina, extracto no acuoso de Emblica officinalis y Camellia sinensis y polímeros, a saber, gelatina, colágeno, carboximetilcelulosa, alginato, alcohol polivinílico, polivinilpirrilidona o equivalentes. La propiedad de cicatrización, incluida la naturaleza antimicrobiana, antiinflamatoria y antioxidante de la curcumina, está bien establecida y se han utilizado gel de Aloe vera y silicio, que también son bien conocidos para el tratamiento de las heridas. Los otros dos extractos usados, es decir, Emblica officinalis y Camellia sinensis también son bien conocidos por sus potenciales antimicrobianos, antioxidantes y antiinflamatorios, incluidos los agentes promotores de la cicatrización de heridas. La acción sinérgica del extracto de Curcuma longa, curcumina, Emblica officinalis y Camellia sinensis junto con gel de Aloe vera y/o silicio acelera la cicatrización, une la piel y la vuelve suave y flexible. Se ha añadido una composición a base de silicio que mejora la propiedad calmante y cicatrizante junto con el Aloe vera y otras composiciones utilizadas. Además, esta formulación se ha recubierto sobre la matriz porosa y transpirable de poliuretano y/o algodón para convertirla en una solución completa para apósitos para heridas. Además, estas nanoformulaciones se combinan con parches transdérmicos para dispositivos de administración transdérmica de fármacos que, preferiblemente, administran fármacos contra el cáncer.
El estado de la técnica relevante para esta invención consiste en diversas composiciones de cicatrización de heridas, antimicrobianas, antioxidantes y antiinflamatorias compuestas de uno o algunos de los ingredientes anteriores y otras mezclas de hierbas y químicas. Además, también tiene potencial contra el cáncer.
Se sabe en la técnica que la cicatrización de heridas en la piel puede mejorarse mediante la aplicación tópica de composiciones de vitaminas, hierbas y/o químicas en el área afectada o mediante la ingestión de algunas de dichas composiciones. Sin embargo, las invenciones existentes abordan de manera inadecuada la necesidad de una composición terapéutica que sea totalmente natural, proporcione un alivio rápido del dolor y actúe como antimicrobiana y antioxidante, reduzca la inflamación y mejore la cicatrización de heridas y úlceras; y también actúe como agentes anticancerígenos.
La patente de EE. UU. n.° 5,466,542 es una composición farmacéutica para el tratamiento de trastornos de la piel que comprende extractos herbales para proporcionar un agente antiinflamatorio, un estimulante adrenocortical y un agente de protección de cortisol. La patente de EE. UU. n.° 5,648,380 es una composición terapéutica antiinflamatoria para la cicatrización de heridas compuesta por un agente antiinflamatorio y una composición para la cicatrización de heridas. La composición para la cicatrizción de heridas está compuesta por piruvato, un antioxidante y una mezcla de ácidos grasos saturados e insaturados. El agente antiinflamatorio se puede elegir de un grupo que consiste en etodalco, aceite de onagra, salsalato, cortisona y otros seleccionados. El antioxidante se puede elegir de un grupo que consiste en todos los tipos de vitamina A, vitamina C, vitamina E y mezclas de las mismas. La composición también está compuesta por un soporte farmacéuticamente aceptable. La patente de EE. UU. n.° 5,663,208 es una composición de cicatrización de heridas antifúngica con un agente antifúngico compuesto por ácido láctico y sórbico, terconazol o otros seleccionados. La patente de EE. UU. n.° 5,652,274 de A. Martín, presentó una composición terapéutica para la cicatrización de heridas compuesta por piruvato y antioxidante y una mezcla de ácidos grasos saturados e insaturados. La patente de EE. UU. n.° 5,916,573 es un tratamiento tópico de la piel, compuesto por aceite de semilla de uva, un agente hidratante que se puede elegir de un grupo que consiste en aceite de vitamina E, aceite de onagra y otros seleccionados, un
aminoácido y agua desionizada. La patente de EE. UU. n.° 6,183,761 de D. L. Bissett, presentada el 12 de marzo de 1999, es una composición para regular la apariencia de la piel compuesta por un compuesto de vitamina B3, un compuesto policíclico, flavanonas, calconas, isoflavonas, cumarinas, cromonas, dicomaroles, cromanoles, esteroles, otros seleccionados y mezclas de los mismos. Se puede hacer referencia adicional a Ganta S, Devalapally H, Amiji M. Curcumin enhances oral bioavailability and anti-tumor therapeutic efficacy of paclitaxel upon administraron in nanoemulsion formulation. J pharm sci 2010; 99: 4630-41. Barik A, Praveen N, Indira Priyadarsini K, Kumar m, mohan h. Curcumin loaded hydrogels as probable drug delivery systems. National academy science letters 2005; 28: 383-8. Bisht S, Feldmann G, Soni S, Ravi R, Karikar C, Maitra A, Maitra A. Polymeric nanoparticle-encapsulated curcumin ("nanocurcumin"): a novel strategy for human cancer therapy. J nanobiotechnology 2007; 5: 3. Curcumin derivatives with improved water solubility compared to curcumin and medicaments containing the same (US20030153512). La WO 2014/147638 se refiere a una matriz de cicatrización de heridas para mejorar la cicatrización de heridas que comprende un lecho de la herida compuesto por un tejido hidrófilo recubierto con quitosano de ion híbrido de bajo peso molecular, en un lado, y partícula de curcumina y extracto de tulsi, en el otro lado.
[0013] Como se describe anteriormente, existen varias composiciones, y están compuestas por hierbas, productos químicos y vitaminas. Sin embargo, ninguna de las invenciones del estado de la técnica enseña sobre una composición que use los ingredientes proporcionados en la presente invención y que muestre eficiencia. Por lo tanto, es muy importante proporcionar soluciones que puedan resolver los problemas anteriores de manera innovadora. La presente invención proporciona dicha solución.
Además, ninguna parte del estado de la técnica divulga una invención que utilice una composición terapéutica natural administrada tópicamente para el tratamiento de enfermedades y heridas compuesta por una mezcla de extracto de nanocurcumina, nanoEmblica y nanoCamellia contenido en gel a base de Aloe vera y/o silicio. Además, esta misma está recubierta por una matriz porosa y transpirable. Además, la misma se formula en combinación o individualmente como parche transdérmico para el sistema de administración transdérmica de fármacos para la terapia de tejidos comprometidos que incluyen la terapia contra el cáncer. Además, la invención también comprende un uso beneficioso para el alzhéimer y la esclerosis múltiple.
La invención descrita aquí comprende una mezcla de cuatro hierbas y un polímero o silicio sintético, que (tres de cada cuatro hierbas) se extrae sumergiéndolos en un solvente no acuoso, por ejemplo, más del 99 % de etanol o una proporción diferente de solvente, por ejemplo, 1: 2.5 p/p de acetona: etanol y se formula para hacerse hidrosoluble para memorar la biodisponibilidad. Además, esta formulación se ha mejorado en términos de mejor eficacia usando un modelo de sándwich biopolimérico y/o polímero sintético, es decir, silicio o ambos. Los polímeros pueden ser sintéticos de biopolímeros. Los biopolímeros pueden contener una fuente de proteína, por ejemplo, colágeno, gelatina o polisacacárido, por ejemplo, quitosano carboximetilcelulosa o ambos.
La preparación fitofarmacéutica de la invención descrita está destinada a aliviar el dolor, proporciona un efecto calmante y, tras un uso repetido, tiene la capacidad de cicatrizar las heridas al proporcionar un entorno de cicatrización húmedo y al estimular células madre para regenerar los tejidos perdidos. El parche transdérmico formulado con una preparación fitofarmacéutica destinada al sistema de administración transdérmica, preferiblemente para la terapia contra el cáncer, ya sea individualmente o en combinación.
En la presente invención, la curcumina no hidrosoluble de Curcuma longa, el extracto de Emblica officinalis y Camillia sinensis se han sometido a un tratamiento físico-químico para solubilizarse en agua y se ha desarrollado una formulación nanométrica hidrosoluble para mejorar la biodisponibilidad de las biomoléculas bioactivas, tenía insolubilidad en agua inherente.
La curcumina es un candidato no hidrosoluble aislado de Curcuma longa, sus eficacias biológicas incluyen actividades antitumorales, antiinflamatorias y antioxidantes. Además, la curcumina muestra un potencial terapéutico para trastornos neurológicos, tales como la enfermedad de alzhéimer. Una ventaja prometedora de la curcumina es que presenta efectos secundarios mínimos en aplicaciones clínicas, como el fármaco. Sin embargo, la aplicabilidad práctica de la curcumina es limitada debido a su baja biodisponibilidad que se debe a la escasa solubilidad acuosa, la escasa absorción gastrointestinal, el eficiente metabolismo de primer paso y la rápida eliminación. Por lo tanto, un sistema de administración de fármacos eficiente será una tecnología revolucionaria para la aplicación médica exitosa de la curcumina. Se emplean dos métodos principales para aumentar la biodisponibilidad de la curcumina. Una estrategia se basa en la modificación química de la molécula de curcumina en derivados hidrosolubles. La curcumina posee dos grupos hidroxilo terminales reactivos. Estos derivados de curcumina hidrosolubles podrían ser patentables y considerarse como candidatos a fármacos. Otra estrategia se basa en el sistema de administración de fármacos con nanopartículas. Se han probado muchos tipos de mezclas con nanopartículas de curcumina que utilizan polímeros (por ejemplo, PLGA) como soportes de administración de fármacos. Varias patentes están alineadas para la formulación de curcumina para aumentar su biodisponibilidad incluyen US 20070148263, WO 2007103435, US 6063402, US 9192644, US 9259401, US 8759403, US 8772265. Estos sistemas de administración de fármacos con nanopartículas parecen ser una estrategia prometedora para la administración de curcumina. Sin embargo, se requiere alguna otra reivindicación o algún otro informe (patente de EE.UU. 8785380) sobre el polvo de curcumina seco suspendido en exceso de agua que contiene, con o sin hidrocoloides bajo ultrasonido mediado por ultrasonido, homogeneización o trituración criogénica y base para el soporte, pero ninguno de ellos proporciona curcumina hidrosoluble y en forma nano y/u otros fitoquímicos no hidrosolubles en la misma forma que la curcumina. En la presente invención, usando un tratamiento físico-químico simple, los propios fitofármacos bioactivos no hidrosolubles
tenían tamaño nanométrico y eran hidrosolubles sin añadir ningún polímero o tensioactivo o emulsionante o cualquier factor equivalente informado, como nanoformuladores y soportes hidrófilos.
Como se indicó anteriormente, de forma similar, la extracción no acuosa de Emblica officinalis y Camellia sinensis y otras plantas o hierbas también era no hidrosoluble y tenía bioactividades potenciales, pero menos biodisponibilidad. En la presente invención, adoptamos otro método, es decir, el tratamiento físico-químico para convertir la curcumina no hidrosoluble pura y el extracto no acuoso (no hidrosoluble) de Emblica officinalis y Camellia sinensis en hidrosoluble y de tamaño nanométrico sin usar ningún soporte polimérico en términos de partículas o fibra o gel. Dicho tratamiento físico-químico incluye la alteración del pH en diferentes intervalos de tiempo y ultrasonidos. Después de esto, los extractos solubilizados en agua que incluyen curcumina se liofilizaron y se disolvieron directamente en agua pura para obtener extracto hidrosoluble. La forma nano de curcumina, el extracto fitoquímico de Emblica officinalis y Camellia sinensis y otras plantas medicinales también pueden obtenerse mediante homogeneización a alta presión, seguida de liofilización y, además, disolverse directamente en agua pura para obtener un extracto hidrosoluble. Además, este enfoque se ha extendido y usado para hacer hidrosoluble a los otros extractos herbales acuosos poco hidrosolubles o no hidrosolubles.
[0014] Sin embargo, ninguna de las invenciones mencionadas anteriormente en el estado de la técnica proporciona un producto y una formulación asociada que sea tan eficaz como la proporcionada en esta invención. La presente invención proporciona una formulación con biodisponibilidad mejorada de sus ingredientes, aplicada sobre una matriz de cicatrización de heridas de múltiples usos con vendaje. Además, también proporciona la solución como anticancerígena, contra el alzhéimer y contra la esclerosis múltiple en forma de parche transdérmico y/o inyectables.
OBJETOS DE LA INVENCIÓN
[0015] El objetivo principal de la presente invención es proporcionar una matriz de cicatrización de heridas y un vendaje.
[0016] Otro objetivo de la invención es proporcionar una matriz de cicatrización de heridas de múltiples usos con vendaje.
[0017] Otro objetivo de la invención es proporcionar una formulación con biodisponibilidad mejorada de sus ingredientes.
[0018] Otro objetivo de la invención es proporcionar una matriz de cicatrización de heridas que esté compuesta de los ingredientes naturales.
[0019] Otro objetivo de la invención es proporcionar una matriz/un vendaje que muestre buenas propiedades antibióticas, antiinflamatorias y/o antioxidantes y potenciales anticancerígenos. Otro objetivo de la invención es proporcionar un producto que también sea útil para el alzhéimer y la esclerosis múltiple.
[0020] Otro objetivo de la invención es proporcionar un vendaje en el que todos los componentes de la matriz actúen de forma sinérgica para proporcionar los resultados de cicatrización deseados.
RESUMEN DE LA INVENCIÓN
[0021] La presente invención proporciona una formulación con biodisponibilidad mejorada de sus ingredientes, que trabajan juntos de manera sinérgica. Dicha formulación de la presente invención se aplica sobre una matriz de cicatrización de heridas de múltiples usos con vendaje.
[0022] La presente invención se refiere a una formulación natural y un vendaje de matriz asociado para tejidos comprometidos, es decir, piel que tiene heridas o melanoma. La formulación comprende una formulación nano e hidrosoluble de extracto herbal no hidrosoluble para mejorar su biodisponibilidad.
[0023] La parte más importante es que los ingredientes naturales no hidrosolubles se usan como parte de la formulación y su biodisponibilidad se mejora en gran medida para hacerlos eficaces en mucho más rango/mucha más cantidad de lo que ya se conoce en el estado de la técnica.
[0024] Dado que los componentes en la formulación provienen de recursos herbales/naturales, es muy segura y ecológica y no produce ningún efecto adverso en la piel. La formulación de gel herbal de la presente invención consiste en un extracto herbal natural de Curcuma longa, curcumina, extracto etanólico, preferiblemente no acuoso, de Emblica officinalis y Camellia sinensis y silicio y/o Aloe vera. El gel se puede usar directamente sobre el tejido comprometido o combinado con un soporte no adherente de matriz porosa transpirable de poliuretano o gasa de algodón o equivalente. Los ingredientes activos del gel, es decir, agentes/extractos solubilizados en agua nanoformulados, por ejemplo, nanocurcumina pura hidrosoluble, también se formulan como un parche transdérmico de administración de fármacos para la administración de moléculas herbales para el tratamiento del
cáncer, es decir, melanoma. Además, la presente invención también comprende un uso beneficioso para el alzhéimer y la esclerosis múltiple.
DECLARACIÓN DE LA INVENCIÓN
[0025] Por consiguiente, la presente invención proporciona un apósito/vendaje biocompatible, multifuncional, flexible y listo para usarse y un método de fabricación del mismo, donde dicho apósito comprende una estructura basada en matriz, que tiene una pluralidad de biopolímeros o polímeros sintéticos en forma de una formulación, donde todos los ingredientes trabajan juntos en sinergia, dicha matriz contenida con la nanoforma hidrosoluble de fitofármacos no acuosos extraídos con solvente, no hidrosolubles, de distintas fuentes naturales, y un gel que es de fuentes herbales, animales o sintéticas; de manera que los ingredientes de la formulación tienen una biodisponibilidad mucho mayor que sus valores conocidos naturalmente, lo que la hace altamente eficaz para la cicatrización de heridas, la administración de fármacos y la terapia contra el cáncer.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS
[0026]
Figura 1: Potencial antioxidante in vitro de extractos de tamaño nanométrico tratados físico-químicos. Los datos muestran el valor IC50 del extracto, es decir, la concentración a la que e1H2O2 se inhibe en un 50 %. NCu:- curcumina de tamaño nanométrico; NEo:- extracto de tamaño nanométrico de Emblica officinalis; NCs:-extracto de tamaño nanométrico de Camellia sinensis; NCu-NEo-NCs:- 1:1:1 proporción de NCu, NEo y NCs.
Figura 2: Zona media de inhibición de E. Coli, S. Bacillus, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa y Candida albicans usando la formulación F1-F5 y la solución antimicrobiana IX a las 24 h. F1: Curcumina -Emblica officinalis - Camellia sinensis; F2: Camellia sinensis - Emblica officinalis - curcumina; F3: Emblica officinalis - Vit E - Camellia sinensis - curcumina; F4: Camellia sinensis - Aloe vera - Emblica officinalis - Aloe vera - curcumina - Aloe vera; F5: Camellia sinensis - silicio - Emblica officinalis - Aloe vera - Vit E - curcumina; 1X: solución antimicrobiana 1X
Figura 3: Se descubrió que el promedio de LD50 de los extractos de curcumina solubilizados en agua de tamaño nanométrico en las líneas celulares cancerígenas HCT-15, KB y INT-407 era de 4,5 pg/ml. Se descubrió que una formulación combinada que usa extracto hidrosoluble de tamaño nanométrico tiene LD50 a una concentración menor de 1 pg/ml. NCu:- curcumina de tamaño nanométrico; NEo:- extracto de tamaño nanométrico de Emblica officinalis; NCs:- extracto de tamaño nanométrico de Camellia sinensis; NCu-NEo-NCs:- 1:1:1 proporción de NCu, NEo y NCs.
Figura 4: Imagen de microscopio electrónico de barrido de nanocurcumina hidrosoluble preparada mediante tratamiento físico-químico.
Figura 5: Imagen de microscopio electrónico de barrido de un nanoextracto hidrosoluble de Emblica officinalis preparado mediante tratamiento físico-químico.
Figura 6: Imagen de microscopio electrónico de barrido de nanoextracto hidrosoluble de Camellia sinensis preparada mediante tratamiento físico-químico.
Figura 7: Imagen de microscopio de luz de la línea celular HCT-15 a las 24 h sin tratamiento con nanocurcumina hidrosoluble preparada mediante tratamiento físico-químico.
Figura 8: Imagen de microscopio de luz de la línea celular HCT-15 a las 24 h con tratamiento con 3,5 pg/ml de nanocurcumina hidrosoluble preparada mediante tratamiento físico-químico.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
[0027] Cabe señalar que la descripción particular y las formas de realización establecidas en la especificación por debajo son meramente ejemplos de la amplia variedad y disposición de instrucciones que se pueden emplear con la presente invención. Todas las características descritas en esta especificación se pueden reemplazar por otras características similares o alternativas que realicen propósitos similares, iguales o equivalentes. Por lo tanto, a menos que se indique expresamente lo contrario, todas están dentro del alcance de la presente invención. Por lo tanto, debe entenderse que esta especificación se ha descrito por medio de las formas de realización más preferidas y con fines ilustrativos y no limitativos.
[0028] La presente invención proporciona una formulación con biodisponibilidad mejorada de sus ingredientes, que trabajan juntos de manera sinérgica. Dicha formulación de la presente invención se aplica sobre una matriz de cicatrización de heridas de múltiples usos con vendaje.
La presente invención se refiere a una formulación natural y un vendaje de matriz asociado para tejidos comprometidos, es decir, piel que tiene heridas o melanoma. La formulación en gel consiste en un gel, una nanoforma hidrosoluble de curcumina, una nanoforma hidrosoluble de un extracto etanólico de Emblica officinalis y una nanoforma hidrosoluble de un extracto etanólico de Camellia sinensis, donde dicho gel es gel de Aloe vera o silicio, donde la formulación nano e hidrosoluble del extracto herbal no hidrosoluble mejora su biodisponibilidad. La parte más importante es que los ingredientes no hidrosolubles naturales se usan como parte de la formulación y su biodisponibilidad se mejora en gran medida para hacerlos más eficaces, en mucho más rango/mucha más cantidad de lo que ya se conoce en el estado de la técnica.
Dado que los componentes en la formulación provienen de recursos herbales/naturales, es muy segura y ecológica y no produce ningún efecto adverso en la piel. La formulación de gel herbal de la presente descripción consiste en un extracto herbal natural de Curcuma longa, curcumina, extracto preferiblemente etanólico no acuoso de Emblica officinalis y Camellia sinensis y silicio y/o Aloe vera. La formulación de gel herbal de la presente invención consiste en un extracto herbal natural de Curcuma longa, curcumina, extracto etanólico de Emblica officinalis y Camellia sinensis y silicio y/o Aloe vera. El gel se puede usar directamente sobre el tejido comprometido o combinado con un soporte no adherente de matriz porosa transpirable de poliuretano o gasa de algodón o equivalente. Los ingredientes activos del gel, es decir, agentes/extractos solubilizados en agua nanoformulados, por ejemplo, la nanocurcumina pura hidrosoluble también se formulan como un parche transdérmico de administración de fármacos para la administración de moléculas herbales para el tratamiento del cáncer, es decir, melanoma. Además, la presente invención también comprende el uso beneficioso para el alzhéimer y la esclerosis múltiple.
[0029] La presente invención proporciona una matriz de cicatrización del lecho de herida que contiene características antibióticas, antioxidantes, antiinflamatorias, anticancerígenas y biocompatibles dentro o sobre las superficies de las heridas. Además, la presente invención también es beneficiosa para el tratamiento del alzhéimer y la esclerosis múltiple.
El lecho de la matriz está en forma de tejido o forma de vendaje o forma de haces de fibra o malla o forma de gel o forma de parche transdérmico (por ejemplo, silicio) o forma de película transpirable y matriz porosa de polímero, por ejemplo, poliuretano (PU). La matriz de base podría ser cualquiera de las mencionadas anteriormente que se puede recubrir tridimensionalmente con nanoformulación bioactiva de gel de Aloe vera o de silicio que contiene curcumina, Emblica y extracto de Camellia como una capa primaria y que, en un lado, está recubierta con capa por capa de la nanoformulación bioactiva de gel de Aloe vera o de silicio que contiene extracto de curcumina, Emblica y Camellia que tiene mayor concentración. Este recubrimiento diferencial de múltiples capas forma una barrera graduada y una capa de liberación de la formulación. La nanoformulación se puede recubrir en capas con extracto bioactivo individual o en una combinación diferente de cuatro, es decir, extracto de Curcuma, Curcumina; Emblica y Camellia. El recubrimiento en capas también se puede realizar de forma alternativa, de forma individual o en combinaciones de algunos o todos. Además, el mismo podría alterarse usando una formulación en gel a base de silicio. El parche transdérmico basado en material de base de silicio también se puede usar para suministrar el extracto bioactivo, preferiblemente extracto de Curcuma, nanocurcumina para tratar la terapia contra el cáncer, preferiblemente el melanoma.
Por lo tanto, la invención proporciona una matriz con cicatrización de heridas multifuncional y terapia contra el cáncer. Los componentes naturales que se usan en varias composiciones para valores medicinales aquí son: extracto de Curcuma, curcumina, extracto de Emblica, extracto de Camellia, extracto de Aloe vera y/o gel de Aloe vera o gel equivalente.
También se pueden usar otras composiciones como gel a base de silicio, ya sea sola o en combinación con Aloe gel y/o extractos de los cuatro.
Otra composición más como gel o parche a base de silicio, ya sea sola o en combinación con gel de Aloe y/o extractos de los cuatro, preferiblemente nanocurcumina sola o en combinación con nanoextracto de extracto de Emblica, extracto de Camellia, se puede usar como parche contra el cáncer, preferiblemente para el melanoma.
[0030] Las formas de realización de la presente invención proporcionan las matrices que presentan propiedades antimicrobianas, antiinflamatorias, antioxidantes y anticancerígenas. La matriz está en forma de tejido o forma de vendaje o forma de fibra o forma de gel o forma de parche transdérmico que tiene microagujas. La mezcla de componentes de la matriz de cicatrización del cáncer (preferiblemente melanoma) de la matriz del lecho de la herida con nanocurcumina, con o sin sus otros componentes. La nanocurcumina y otros nanoextractos se obtienen mediante un tratamiento físico-químico del polvo extraído con etanol insoluble acuoso (polvo extraído insoluble acuoso según la divulgación) seguido de una onda ultrasónica de al menos 25 KHz durante 15 min - 5 h a temperatura de hielo para obtener la gradación del tamaño de partícula y la solución acuosa mixta del algunos de los extractos o todos juntos en diferentes proporciones. Un método para administrar nanopartículas de curcumina que se dirigen al melanoma es preferiblemente mediante enfoques de administración transdérmica de fármacos a base de silicio usando un parche transdérmico que tiene microagujas.
[0031] En consecuencia, se proporciona una formulación y un vendaje biocompatible, multifuncional, flexible, listo para usarse y un método de fabricación del mismo, donde dicha formulación y dicho vendaje comprenden una estructura a base de matriz, que tiene una pluralidad de biopolímeros o polímeros sintéticos en forma de una formulación, donde todos los ingredientes trabajan juntos en sinergia, dicha matriz contenida con la nanoforma hidrosoluble de fitofármacos no acuosos, extraídos con solvente y no hidrosolubles de distintas fuentes naturales,
y un gel que es de fuentes hierbales, animales o sintéticas; de tal manera que los ingredientes de la formulación tienen una biodisponibilidad mucho mayor que sus valores naturalmente conocidos, lo que los hace altamente eficaces para la cicatrización de heridas, la administración de fármacos, la terapia contra el cáncer, contra el alzhéimer y contra la esclerosis múltiple; donde:
- según la divulgación, dicha pluralidad de biopolímeros se selecciona de, pero de forma no limitada, Acacia catechu, Azadirachta indica, Curcuma longa, Camellia sinensis, Mimosa púdica, Ocimum sanctum, Phyllanthus emblica, Ricinus communis, Terminalia arjuna, Withania somnifera, Bacopa monnieri, etc,, combinada con un gel que puede ser una fuente natural, como alginato, Aloe vera, carboximetilcelulosa, gelatina, pectina o polímeros sintéticos, como silicio/siloxano/dimeticona/meticona/siloxisilicato y sus derivados;
- según la invención, dicha pluralidad de biopolímeros consiste en una nanoforma hidrosoluble de curcumina, una nanoforma hidrosoluble de un extracto etanólico de Emblica officinalis y una nanoforma hidrosoluble de un extracto etanólico de Camellia sinensis, y donde dicho gel es gel de Aloe vera o silicio.
[0032] En otra forma de realización, dicho lecho de matriz está en forma de tejido o forma de vendaje o forma de haces de fibras o malla o forma de gel o forma de parche transdérmico (por ejemplo, silicio) o forma de película transpirable y matriz porosa de polímero, por ejemplo, poliuretano (PU).
[0033] En otra forma de realización, dicha matriz de base está recubierta tridimensionalmente, preferiblemente con nanoformulación bioactiva de gel de Aloe vera o de silicio que contiene extracto de curcumina, Emblica y Camellia como una capa primaria y que, por un lado, está recubierta con capa por capa de la nanoformulación bioactiva de gel de Aloe vera o silicio que contiene extracto de curcumina, Emblica y Camellia que tiene mayor concentración, de manera que este recubrimiento diferencial de múltiples capas forma una barrera graduada y una capa de liberación de la formulación.
[0034] En otra forma de realización, dicha nanoformulación está recubierta con capas o con extracto bioactivo individual o en combinación diferente de cuatro, es decir, extracto de Curcuma, curcumina; Emblica y Camellia.
[0035] En otra forma de realización, dicho recubrimiento con capas también se realiza de forma alternada, de forma individual o en combinaciones de algunos o todos o alterados usando una formulación en gel a base de silicio.
[0036] En otra forma de realización, dicho parche transdérmico basado en material a base de silicio se utiliza para administrar los extractos bioactivos, preferiblemente extracto de Curcuma, nanocurcumina para tratar la terapia contra el cáncer, preferiblemente el melanoma.
[0037] En otra forma de realización de la divulgación, dicho sistema comprende un apósito a base de matriz biocompatible, multifuncional, flexible y listo para usar, que contiene una nanoforma soluble en agua de fitofarmacéutico no hidrosoluble, no acuoso, extraído con solvente de diferentes fuentes vegetales, y gel que puede ser de fuentes vegetales, animales o sintéticas, para la cicatrización eficaz de heridas, la terapia contra el cáncer y la fabricación de los mismos. En otra forma de realización de la invención, dicho sistema comprende un apósito a base de matriz biocompatible, multifuncional, flexible, listo para usar, que contiene una nanoforma hidrosoluble de curcumina, una nanoforma hidrosoluble de un extracto etanólico de Emblica officinalis y una nanoforma hidrosoluble de un extracto etanólico de Camellia sinensis, y un gel que es gel de Aloe vera o silicio.
[0038] En otra forma de realización, dicho apósito se fabrica usando un material adecuado, seleccionado de un poliuretano de calidad médica o película de polímero equivalente o algodón en forma de gasa tejida o no tejida, espuma o soporte celular hecho de biopolímeros, de manera que permita que el aire fluya a través de él haciendo el vendaje transpirable.
[0039] En otra forma de realización, dicho apósito consiste en una capa de recubrimiento sobre la matriz, donde dicho recubrimiento es de naturaleza gelatinosa y está incorporado con la formulación de fitofarmacéutico de la invención, extraído de distintas fuentes vegetales que favorecen la cicatrización de heridas y regeneración de la piel, donde en dicha formulación todos los ingredientes trabajan juntos en sinergia y tiene una biodisponibilidad mejorada de ingredientes naturalmente no hidrosolubles.
[0040] En otra forma de realización de la divulgación, dicha formulación del fitofarmacéutico comprende un extracto hidrosoluble que se prepara a partir de dos o más fuentes vegetales seleccionadas de, pero de forma no limitada, Emblica officinalis, Acacia catechu, Azadirachta indica, Curcuma longa, Camellia sinensis, Mimosa pudica, Ocimum sanctum, Phyllanthus emblica, Ricinus communis, Terminalia arjuna, Withania somnifera, Bacopa monnieri, etc., combinados con un gel que puede ser una fuente natural, como alginato, Aloe vera, carboximetilcelulosa, gelatina, pectina, etc. o pueden ser polímeros sintéticos, como silicio/siloxano/dimeticona/meticona/siloxisilicata y sus derivados, alcohol polivinílico, polivinilpirrolidona, etc.
[0041] En otra forma de realización, dicha formulación del fitofarmacéutico comprende un extracto hidrosoluble que se puede obtener mezclando diferentes extractos no acuosos usando un solvente no acuoso de plantas, preferiblemente Emblica officinalis, en el rango del 0,5 %-20 %, Camellia sinensis en el rango del 1 %-20 %, y preparando una solución de curcumina hidrosoluble en el rango del 0,1 %-12 % mezclada con gel de Aloe vera en el rango del 0,2 %-12 % junto con 0,5-9 % de tocoferol o todo mezclado, acompañado de nanoplata o nanoplata mezclada con Aloe vera acompañada de Aloe vera capa por capa.
[0042] En otra forma de realización, una formulación de matriz de capa por capa se realiza preparando una solución de Aloe Vera al 0,3-2,5 % en agua, seguido de una solución de plata nanocristalina usando plata al 1-10 %, 0,5-6 partes de solución de Aloe vera al 0,5-3 % y 0,3-5 partes de solución de nanoplata y mezclando la solución uniformemente usando un agitador a la velocidad de 800-1200 rpm durante 10-40 min y cubriendo la matriz transpirable porosa no adherente, preferiblemente recubrimiento en 3D, luego secar la matriz recubierta a 25-175 °C en presencia o ausencia de luz y repetir este paso 2-10 veces, preferiblemente 2-3 veces; preparar una solución de Aloe Vera al 2-6 % en agua y otra solución de Aloe vera al 2-10 % en una solución de nanoplata preparada anteriormente; coger la gasa recubierta seca previamente para dar capas de 10-500 |_im de grosor de 2-10 % de Aloe vera en una solución de nanoplata en un lado usando la máquina de recubrimiento, después recubrir con 10-500 |_im de Aloe vera al 2-6% en agua en el mismo lado o en ambos lados y repetir el proceso 2 10 veces con o sin secar la matriz entre los pasos de recubrimiento; secar la matriz recubierta intermedia y final a 25-175 °C en presencia o ausencia de luz; combinar opcionalmente los pasos usados para nanoplata con nanofitoextractos en la proporción 0,2-20 de ambos, preferiblemente la proporción 1:4 o reemplazar opcionalmente los pasos usados para nanoplata, nanoplata con otras nanopartículas de otro metal y/o sus derivados, es decir, oro, zinc, óxido de zinc, cobre, óxido de cobre, etc.; también opcionalmente en pasos usados para nanoplata, reemplazar totalmente las nanopartículas metálicas por nanofitoextractos y recubrirlas alternativamente solas o junto con gel de Aloe vera para obtener el producto final deseado.
[0043] En otra forma de realización de la divulgación, dicho solvente no acuoso es preferiblemente metanol, hexano, tolueno, cloroformo, diclorometano, cloruro de metileno, acetona, solo o en combinación con otro solvente en proporción de 1:1 - 0,1:5 peso/peso. Mientras que, en otra forma de realización de la invención, dicho solvente no acuoso es etanol.
[0044] En otra forma de realización, diferentes mezclas de nanoformulación solubilizada en agua de extracto no acuoso tienen un rango del 0,2-15 %.
[0045] En otra forma de realización más, el fitofarmacéutico de tamaño nanométrico solubilizado en agua se formula, además, en un nanosoporte para la administración dirigida en forma de nanopartículas, liposoma, polímero nanoencapsulado, de tamaño 0,3-500 nm, enlazador conjugado o ligando conjugado para una administración sostenida, controlada y dirigida a la lucha contra el cáncer, el alzhéimer y la esclerosis múltiple.
[0046] En otra forma de realización, en un nanosoporte para la administración dirigida en forma de nanopartícula, liposoma, polímero nanoencapsulado, de tamaño 0,3-500 nm, donde el enlazador conjugado o el ligando conjugado están relacionados con un receptor de la barrera hematoencefálica, un receptor cerebral de tumor hematoencefálico, un receptor de angiogénesis; un péptido de penetración celular - péptido TAT (AYGRKKRRQRRR), un receptor de transferrina, receptores nicotínicos de acetilcolina (nAChR), receptores de células endoteliales capilares encefálicas, una integrina av03-cRGD, un péptido LVD; un péptido NG2 proteoglicano-TH10 tAa SGVRMH, un receptor EGFR, un receptor COX-2, ER , PR 17b-beta estradiol, usados para tratar tumores con resultados positivos para receptores de estrógeno o progesterona, mAb HER2 anti-HER2, KRRQQKIRKYTMRR, triple positivo, triple negativo, receptor de folato y otros equivalentes.
[0047] En otra forma de realización, la forma encapsulada de dichos fitofármacos está conjugado con un enlazador o conjugado con un ligando.
[0048] En otra forma de realización, dicha nanoformulación de tamaño nanométrico se recubre sobre el stent para formar parte del constituyente para preparar el stent liberador de fármaco.
[0049] En otra forma de realización, los polímeros sintéticos, como silicio/siloxano/ dimeticona/meticona/siloxisilicato y sus derivados pueden contener nanopartículas de plata solubilizadas acuosas o no acuosas en el rango del 0,1-11 %.
[0050] En otra forma de realización, la nanoplata solubilizada no acuosa está preferiblemente en tolueno y/o hexano.
[0051] En otra forma de realización, para obtener un parche de silicio cargado con nanoplata pura, preferiblemente se mezcla nanoplata solubilizada en tolueno con adhesivo de silicio suave para la piel y se mantiene durante 5-25 min bajo flujo de aire preferiblemente al vacío a temperatura ambiente seguido de curado a 60 a 90 °C durante un período de tiempo de 10 min durante toda la noche.
[0052] En otra forma de realización, la estratificación de cada zona de los agentes bioactivos puede ser de 1 jm -500 |jm.
[0053] En otra forma de realización, dicha matriz es a base de silicio, contiene extractos de nanofito y/o nanoplata o ambos o solo como un parche a base de silicio puede ser o no con microagujas. Los extractos de nanofito y la nanoplata se pueden adsorber, enlazar, conjugar o encapsular con micro o nanosoportes.
[0054] En otra forma de realización, dicha matriz es a base de silicio y contiene extractos de nanofito y/o nanoplata o ambos o solo como un parche a base de silicio, fabricados usando 0,5-15 % de extractos de nanofito, nanocurcumina o curcumina y extractos de nanofito; y recubriendo la solución sobre una superficie no adherente, preferiblemente una película de poliuretano y luego manteniéndola a 25-120 °C, preferiblemente a 80 °C durante mínimo 30 min durante toda la noche.
[0055] En otra forma de realización, dicha formulación está acompañada de polímeros, como gelatina, colágeno, quitosano, alcohol polivinílico, polivinilpirrilidona, polietilenglicol, mucopolisacáridos, carboximetilcelulosa.
[0056] En otra forma de realización, los extractos de etanol preferidos se preparan a partir de las hojas de Camellia sinensis y el fruto de Emblica officinalis, en los siguientes pasos:
- añadir planta seca y molida a un solvente no acuoso al 100 %, por ejemplo, solución de etanol y mantener sobre agitador magnético durante 20 h a 60 °C;
- separar el extracto etanólico por centrifugación a 8000 rpm durante 15 min;
- dejar secar el sobrenadante en el evaporador rotativo o en el horno a 30 °C - 85 °C;
- preparar la solución de la concentración deseada disolviendo el extracto etanólico seco en una solución de etanol al 10 %-20 % y sonicación a una amplitud de 5-85 durante 15 min a 5 h, seguido de la evaporación del exceso de etanol para formar un extracto vegetal hidrosoluble.
[0057] En otra forma de realización, dicho apósito se prepara recubriendo la formulación fitofarmacéutica sobre el apósito de algodón tejido, seguido de secado al aire a temperatura ambiente en la oscuridad.
[0058] En otra forma de realización, dicho apósito se esteriliza usando irradiación gamma.
[0059] En otra forma de realización, dicho apósito es flexible y, por lo tanto, se utiliza para cubrir la superficie irregular de los tejidos comprometidos del cuerpo.
[0060] En otra forma de realización, dicho apósito se usa para el tratamiento de heridas y también se usa como sistema de administración transdérmica de fármacos, preferiblemente de parche de silicio con microagujas para la administración de fitofarmacéuticos activos y su soporte para el tratamiento del cáncer, preferiblemente melanoma.
[0061] En otra forma de realización, dicho apósito posee propiedades antimicrobianas para prevenir el crecimiento de microorganismos sobre las heridas, lo que acelera el proceso de cicatrización.
[0062] En otra forma de realización, dicho apósito es capaz de absorber exudados de las heridas para proporcionar condiciones favorables para la reparación de heridas.
[0063] En otra forma de realización, dicho apósito se puede usar para varias aplicaciones, como heridas exudadas en caso de úlceras de pie diabético, úlceras venosas o se puede usar para cubrir el sitio de la herida creada debido a quemaduras y también después procedimientos quirúrgicos.
[0064] En otra forma de realización, dicho apósito se prepara preferiblemente en forma de gasa o parque no adherente.
VENTAJAS DE LA INVENCIÓN:
[0065] La presente invención es principalmente para fines médicos y la amplia gama de aplicaciones de la invención son las siguientes:
• antimicrobianas
• antiinflamatorias
• analgésicas
• antioxidantes
• de cicatrización de heridas
• de envenenamiento por radiación
• modula la inmunidad
• biocompatibles
• hemostáticas
• no alérgicas
• de tecnología basada en nano para la liberación de fármacos
• de propiedades anticancerígenas
• para la esclerosis múltiple
• para la enfermedad de alzhéimer
Ejemplos:
[0066] Los siguientes ejemplos tienen únicamente el propósito de ilustrar y no deberían interpretarse como limitantes del alcance de la presente invención.
EJEMPLO 1
[0067] La preparación del extracto no acuoso de Emblica officinalis, Camellia sinensis y Curcuma longa se realiza preferiblemente usando el 99,99 % de etanol, seguido de evaporación del solvente para obtener extracto no hidrosoluble. El extracto no hidrosoluble se sometió a un tratamiento físico-químico alterando el pH de la solución, seguido de un tratamiento ultrasónico a un amplitud de 5-25 durante 2 a 5 h para obtener una fracción de tamaño nanométrico hidrosoluble de extractos no acuosos (por ejemplo, etanólicos). Se preparó otro enfoque más de curcumina, una solución 1M de NaOH (el pH de la solución fue 12,5-12,6). Se preparó una solución de curcumina al 5-10 % en una solución 1 M de NaOH con mezcla continua. La solución preparada se neutralizó luego con HCl 5 N y luego se ajustó a pH 5,5. A continuación, la solución preparada se sonicó durante 5 h con amplitud de 25 y la temperatura se mantuvo por debajo de 30 °C. La nanoformulación obtenida se ensayó en cuanto a potenciales antimicrobianos, antiinflamatorios, antioxidantes y/o anticancerígenos.
EJEMPLO 2
[0068] La nanoformulación obtenida en el ejemplo uno se somete, además, a una formulación usando materiales a base de silicio/siloxano/dimeticona/meticona/siloxisilicato, tales como la mezcla elastomérica de silicio de Dow Corning y adhesivo suave para la piel, etc. de Dow Corning. Los sujetos mezclados se mantienen para curar a una temperatura que varía de 10-150 °C para obtener una matriz gelatinosa, menos pegajosa y parches pegajosos. Dicha nanoformulación podría cargarse individualmente o en combinación sobre los parches a base de silicio con microagujas destinadas a la administración transdérmica de fármacos. La individualidad de dicha nanoformulación, como la curcumina pura hidrosoluble, podría cargarse sobre las microagujas que contienen un parche de silicio, como un parche transdérmico para la terapia del melanoma. La formulación en gel obtenida anteriormente también puede contener tocoferol, vit E y glicerol.
EJEMPLO 3
[0069] La nanoformulación obtenida en el ejemplo se recubre sobre el tejido, preferiblemente el tejido no adherente o la película de poliuretano (PU) o la espuma o la matriz transpirable. En una formulación de matriz de apósito, la nanoformulación de los tres extractos de Emblica officinalis, Camellia sinensis y Curcuma longa en la proporción de 1:1:1 a una concentración al 5-15 % se recubre sobre el prerrecubrimiento de silicio y/o Aloe vera, tejido o la película de PU o espuma o matriz transpirable y se seca a 4 - 25 °C, seguido de múltiples ciclos de recubrimiento-secado capa por capa para obtener una gradación diferente de los agentes bioactivos. El grosor de las capas de cada zona de capas puede ser de 1 |_im-500 |_im. La gradación de múltiples capas de agentes bioactivos nanoformulados podría sere de diferentes formas, tales como (F1) Curcumina-Embica officinalis-Camellia sinensis (F2) Camellia sinensis- Emblica officinalis- Curcumina (F3) Emblica officinalis- Vit E-Camellia sinensis- Curcumina (F4) Camellia sinensis-Aloe vera-Emblica officinalis-Curcumina-Aloe vera (F5) Camellia sinensis-silicio-Emblica Officinalis-Aloe vera- Vit E-Curcumina y así sucesivamente.
EJEMPLO 4
[0070] Tome 10-50 ml de adhesivo suave para la piel de Dow Corning y añada 2-9 ml de nanopartículas de Curcumina disueltas en la solución Dow Corning SpE 2011 y mezcle uniformemente, y luego haga una mezcla completa usando la mezcla completa de adhesivo suave para la piel. Vierta la solución sobre una película de PU y manténgala en un horno de circulación de aire a 80 °C durante 10 min. En otro enfoque, manténgala en el horno a 80 °C durante 30 min y a 100 °C. En otro enfoque más, las nanopartículas de curcumina se pueden reemplazar o combinar con nanopartículas de plata. Para obtener solo un parche de silicio cargado con nanoplata, se mezcla nanoplata solubilizada en tolueno con el adhesivo suave para la piel de Dow Corning y se mantiene durante 5-25 min bajo un flujo de aire o al vacío a temperatura ambiente, seguido de curado a 80 °C durante 10 min durante toda la noche.
EJEMPLO 5
[0071] Tome 20 ml de una solución de nanopartícula de curcumina a 5 %, añada 5 ml de extracto de Camellia sinensis al 5 % en agua, y luego añada extracto de Emblica officinalis al 5 % en agua. Mezcle la solución completa sonicando la mezcla de extracto como se indica en el ejemplo 1. Recubra la mezcla sobre la gasa de algodón de tejido (recubierta con una solución no adherente) usando la máquina de recubrimiento. Deje que la gasa recubierta se seque al aire a 25 °C. En otro enfoque, tome 50 ml de una solución de nanopartículas de curcumina y use la solución para recubrir la gasa prerrecubierta usando la máquina de recubrimiento. Deje que la gasa recubierta se seque al aire a 25 °C. Antes del recubrimiento, todos los extractos de tamaño nanométrico eran de 0,5 % de gel reconstituido de Aloe vera.
EJEMPLO 6
[0072] Tome 15 ml de una solución de alcohol polivinílico al 7,5 %, a continuación añada 12 ml de una solución de gelatina al 10 % y luego añada 1ml de solución de quitosano al 2 %, PEG 200 y glicerol. Mezcle la solución para preparar una mezcla homogénea a la que se añaden 5 ml de Dow Corning Soft Skin Adhesive Complete Pack. Mezcle la solución para formar una mezcla homogénea y luego vierta la mezcla sobre las películas de PU y deje secar al aire o en el horno a 60 °C. En otra formulación, tome 15 ml de una solución de alcohol polivinílico al 7,5 %, a continuación añada 12 ml de una solución de gelatina al 10 % y luego añada 1 ml de solución de quitosano al 2 %, PEG 400 y glicerol. Mezcle la solución para preparar una mezcla homogénea a la que se añaden 5 ml de Dow corning skin adhesive y mezcle la solución para formar una mezcla homogénea y a la que se añaden 2 ml de nanopartículas de curcumina disueltas en la solución Dow corning SPE solution 2011, mezcle esta debidamente, y luego vierta la mezcla sobre las películas de PU o gasas no adherentes y deje secar al aire o en el horno a 60 °C. En otra formulación más, tome 15 ml de una solución de alcohol polivinílico al 7,5 %, a continuación añada 12 ml de una solución de gelatina al 10 % y luego añada 1 ml de solución de quitosano al 2 %, PEG 200 y glicerol. Mezcle la solución para preparar una mezcla homogénea a la que se añaden 5 ml de Dow corning skin adhesive. Mezcle la solución para formar una mezcla homogénea y a la que se añade 2 ml de nanopartículas de plata con o sin nanocurcumina, mezcle esta debidamente, y luego vierta la mezcla sobre las películas de PU y deje secar al aire o en el horno a 60 °C.
EJEMPLO 7
[0073] Prepare una solución P15 al 0,5 % en agua de calidad USP, seguido de una reparación de una solución de plata nanocristalina con un 1-10 % de plata. Ahora tome 3 partes de una solución de Aloe vera al 0,5-3 % y 1 parte de una solución de nanoplata y mezcle la solución usando uniformemente un agitador a la velocidad de 800-1000 rpm durante 10-20 min y recubra la gasa inteligente recubierta no adherente y/u otra matriz anteriormente mencionada. La matriz recubierta obtenida se seca a 25-175 °C, lo que evita la exposición a la luz mientras se seca y se repite este paso. Ahora prepare una solución de Aloe vera al 2-6 % en agua y otra solución de Aloe vera al 2-10 % en la solución de nanoplata preparada anteriormente.
[0074] Tome la gasa recubierta secada previamente para proporcionar capas de 10-100 p de grosor de Aloe vera al 2-10 % en una solución de nanoplata, en un lado, usando la máquina de recubrimiento y luego recubrir con 10 100 p Aloe vera al 2-6 % en agua en el mismo lado usando la máquina de recubrimiento y repetir el proceso con o sin secar la matriz entre los pasos de recubrimiento. El secado de la matriz recubierta intermedia y final se realiza a 25-175 °C, evitando la exposición a la luz durante el secado. Los productos obtenidos se evaluaron en ratones para determinar su potencial de cicatrización de heridas en comparación con los apósitos existentes en el mercado de la clase.
EXPLICACIÓN DE LOS EXPERIMENTOS REALIZADOS:
[0075] La nanoformulación multifuncional preparada tiene eficacia como antimicrobiana, biocompatible, antioxidante, antiinflamatoria y anticancerígena. Se llevaron a cabo varios experimentos para controlar dicha eficacia de la matriz. Las actividades antimicrobianas fueron estudios que usaron las siguientes bacterias y hongos, es decir, Bacillus subtilis, Escherichia col., Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus (incluido MRSA), Candida albicans, Aspergillus niger.
[0076] La biocompatibilidad, la propiedad antioxidante y antiinflamatoria de dicha matriz se evaluó usando la línea celular fibroblástica L929 de ratón y la viabilidad de fibroblastos dérmicos humanos, H2O2, la inhibición de DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidrazilo) y el ensayo de inhibición de Cox, Lox, respectivamente. La eficacia contra el cáncer se evaluó usando MCF-7, KB, INT-407, HCT-15, Colo-205, A-431, línea celular Hela y la toxicidad se comparó usando fibroblasto primario humano normal (HNPF). Los resultados obtenidos del potencial antioxidante de la formulación contenida en extracto de tamaño nanométrico fueron considerados eficaces. El potencial antioxidante in vitro de algunos de los extractos y las formulaciones de tamaño nanométrico se muestra en la figura 1. De forma similar, la actividad antimicrobiana, el potencial antiinflamatorio y anticancerígeno también fueron considerablemente eficaces y los datos de algunos de ellos se muestran en esta patente. La solución acuosa de nanoformulación de los tres fitoextractos en diferentes combinaciones a una concentración de base por debajo del 5 % también dio como resultado una reducción del 99,999 % en UFC/ml microbianos en todos los
marcos de tiempo de 30, 60, 90 y 120 segundos utilizando el método de eliminación del tiempo. La figura 2 muestra el potencial antimicrobiano de la formulación (F1-F5). La figura 3 muestra la concentración letal de los extractos de tamaño nanométrico hidrosolubles. Se descubrió que el promedio de LD50 de nanocurcumina en todas las líneas celulares cancerígenas usadas era de 4,5 pg/ml, lo que clasifica el mismo como agente anticancerígeno en una concentración muy baja. Además, se descubrió que la formulación combinada que usa extracto soluble en agua de tamaño nanométrico tiene LD50 a una concentración menor a 1 pg/ml e incluso va más allá de 0,2 pg/ml dependiendo de los tipos de células (figura 3). Además, la toxicidad de la dosis en HNPF fue muy baja incluso en dosis muy altas de más de 30 pg/ml, la nueva solución de nanofitos no fue tóxica para HNPF, que muestra el potencial de LD50 contra las líneas celulares cancerígenas mientras mantiene las células normales casi intactas. Las propiedades anticancerígenas de algunas de las líneas celulares cancerígenas utilizadas se muestran en la figura 3.
[0077] Los tamaños obtenidos del tratamiento físico-químico del extracto fueron inferiores a 500 nm, como se muestra en el microscopio electrónico de barrido de las figuras 4, 5 y 6. Y se descubrió que la LD50 de la nanocurcumina en HCT-15 era de 3,5 pg/ml. La morfología y la muerte dependiente de la concentración de las líneas celulares HCT-15 se muestran en las figuras 7 y 8 y la figura 3, respectivamente. La experimentación de la cicatrización de heridas en ratones fue significativamente eficaz en cuanto a epitelización, contracción de heridas y manejo de la inflamación y el dolor en comparación con otros grupos de ratones que usaron apósitos existentes de la misma clase.
[0078] Se descubrió que los resultados obtenidos del potencial y las propiedades del producto de esta invención eran considerablemente eficaces. Este producto ha dado como resultado una reducción del 99,999 % en UFC/ml microbianos en todos los marcos de tiempo de 30, 60, 90 y 120 segundos utilizando el método de eliminación del tiempo. Esto indica claramente el avance técnico en comparación con el estado de la técnica.
Claims (20)
1. Formulación en gel que consiste en un gel, una nanoforma hidrosoluble de curcumina, una nanoforma hidrosoluble de un extracto etanólico de Emblica officinalis y una nanoforma hidrosoluble de un extracto etanólico de Camellia sinensis, donde dicho gel es gel de Aloe vera o silicio, y donde dichas nanoformas hidrosolubles se pueden obtener de la siguiente manera:
- nanoforma de curcumina:
° proporcionar curcumina;
° preparar una solución de dicha curcumina al 5-10 % en NaOH 1 M con mezcla continua;
° neutralizar la solución obtenida con HCl 5 N y ajustar el pH a 5,5;
° sonicar la solución obtenida durante 5 horas con una amplitud de 25 kHz mientras se mantiene la temperatura por debajo de 30 °C;
- nanoforma de Emblica officinalis:
o añadir una planta seca y molida, dicha planta es fruta, a una solución de etanol y mantenerla bajo un agitador magnético durante aproximadamente 20 h a 60 °C;
o separar el extracto etanólico mediante centrifugación a 8000 rpm durante 15 min;
o dejar secar el sobrenadante en un evaporador rotativo o en un horno a 30 °C-85 °C;
o preparar la solución de la concentración deseada disolviendo el extracto seco en una solución de etanol al 10 %-20 % y sonicar dicha solución de 15 min a 5 horas con una amplitud de al menos 25 kHz a temperatura del hielo;
o evaporar el exceso de etanol para formar un extracto vegetal hidrosoluble;
- nanoforma de Camellia sinensis:
o los mismos pasos que para dicha nanoforma de Emblica officinalis, pero donde dichas plantas son hojas.
2. Formulación en gel según la reivindicación 1, donde dicho gel es gel de Aloe vera y se usa en el rango del 0,2 %-12 %.
3. Formulación en gel según la reivindicación 1 o 2, donde dichos extractos etanólicos de Emblica officinalis y Camellia sinensis están en el rango del 0,5 %-20 % y 1 %-20 %, respectivamente, y dicha curcumina está presente en el rango del 0,1 %-12 %.
4. Formulación en gel según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde las nanoformas hidrosolubles se formulan además en un nanosoporte en forma de nanopartículas, liposoma o polímero nanoencapsulado.
5. Formulación en gel según la reivindicación 4, donde dicho nanosoporte tiene un tamaño de 0,3-500 nm.
6. Formulación en gel según la reivindicación 4 o 5, donde dicho nanosoporte está conectado con un enlazador o conjugado con un ligando.
7. Formulación en gel según la reivindicación 6, donde dicho enlazador o ligando se refiere a un receptor de barrera hematoencefálica, un receptor de tumor hematoencefálico, un receptor de angiogénesis, un péptido de penetración celular - péptido TAT AYGRKKRRQRRR, un receptor de transferrina, receptores nicotínicos de acetilcolina (nAChRs), receptores de células endoteliales capilares encefálicos, una integrina av03-cRGD, un péptido LVD, un péptido NG2 proteoglicano-TH10 TAASGv Rm H, un receptor EGFR, un receptor COX-2, un receptor de estrógeno, un receptor de progesterona, 17b-beta-estradiol, un anticuerpo anti-HER2, una localización nuclear señal KRRQQKlRKYTMRR y un receptor de folato.
8. Matriz de lecho de herida recubierta tridimensionalmente con una formulación en gel según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 como capa primaria.
9. Matriz de lecho de herida según la reivindicación 8, que está recubierto en un lado con capa por capa de una formulación en gel según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, donde curcumina, Emblica officinalis y Camellia sinensis están presentes en una mayor concentración para formar una barrera graduada y una capa de liberación de dicha formulación.
10. Matriz de lecho de herida según la reivindicación 8 o 9, donde dicha matriz está en forma de tejido, vendaje, haces de fibras, malla, gel, parche transdérmico o película transpirable y matriz porosa de polímero.
11. Matriz de lecho de herida según la reivindicación 10, donde dicho parche transdérmico tiene microagujas.
12. Apósito de cicatrización de heridas, donde una matriz de poliuretano y/o algodón está recubierta con una formulación en gel según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7.
13. Apósito de cicatrización de heridas según la reivindicación 12, donde dicho poliuretano es un poliuretano de calidad médica.
14. Apósito de cicatrización de heridas según la reivindicación 12, donde dicho algodón está en forma de gasa tejida o no tejida, espuma o portador celular.
15. Apósito de cicatrización de heridas según cualquiera de las reivindicaciones 12 a 14, donde dicho apósito es transpirable.
16. Formulación en gel según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 para su uso en el tratamiento de heridas y úlceras en humanos y animales.
17. Formulación en gel según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 para su uso en el tratamiento del cáncer.
18. Formulación en gel para su uso según la reivindicación 17, donde dicho cáncer es melanoma.
19. Formulación en gel según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, que es una formulación en gel antimicrobiana, antioxidante o anticancerígena.
20. Formulación en gel según la reivindicación 19, que es una formulación en gel anticancerígena y donde dicho cáncer es melanoma.
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