ES2882602T3 - Azasetrón para usar en el tratamiento de la pérdida auditiva - Google Patents

Abstract

Un inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones para usar en el tratamiento de la pérdida auditiva neurosensorial en un sujeto que lo necesite, en donde la pérdida auditiva neurosensorial es pérdida auditiva neurosensorial idiopática, pérdida auditiva neurosensorial inducida por ruido, pérdida auditiva neurosensorial relacionada con la edad o pérdida auditiva neurosensorial inducida por fármacos ototóxicos, y en donde dicho inhibidor de calcineurina es azasetrón o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

Description

DESCRIPCIÓN

Azasetrón para usar en el tratamiento de la pérdida auditiva

Campo de la invención

La presente invención se refiere al tratamiento de la pérdida auditiva neurosensorial.

Antecedentes de la invención

Aproximadamente 360 millones de personas en todo el mundo sufren de pérdida auditiva discapacitante. El porcentaje de adultos con pérdida auditiva discapacitante aumenta de aproximadamente el 2 % de la población de 45 a 54 años, al 8,5 % de 55 a 64 años, y aproximadamente el 25 % de los de 65 a 74 años y el 50 % en sujetos de más de 75 años. Por lo tanto, existe una necesidad importante de métodos para tratar o prevenir la pérdida auditiva.

La pérdida auditiva neurosensorial es causada por daño a las células ciliadas sensoriales y neuronas de la cóclea y es el tipo más común de pérdida auditiva permanente. Entre los adultos, las dos causas principales de la pérdida auditiva neurosensorial son la exposición excesiva al ruido y el envejecimiento, mientras que otras causas incluyen enfermedades (incluida la hipertensión y la diabetes), fármacos ototóxicos, traumatismo craneoencefálico, tumores, exposición a explosiones, enfermedad autoinmune del oído interno, causas idiopáticas, infecciones virales y bacterianas.

Los pacientes que sufren de pérdida auditiva tienen dificultades para comunicarse y con frecuencia desarrollan tinnitus, lo que resulta en una reducción de la calidad de vida debido a sentimientos de soledad, aislamiento, frustración, ansiedad y depresión. Además, la pérdida auditiva tiene un impacto severo en el desarrollo del lenguaje en los niños, la educación y las oportunidades laborales. Una complicación adicional de la pérdida auditiva neurosensorial incluye el deterioro cognitivo acelerado (Lin y otros, 2013. JAMA Intern Med. 173 (4): 293-299).

Actualmente no existe ningún tratamiento farmacéutico aprobado y los metaanálisis recientes del uso estándar de atención fuera de etiqueta de la terapia con corticosteroides han concluido que ni la administración sistémica ni intratimpánica tiene efecto de tratamiento significativo alguno (Crane y otros, 2015. Laryngoscope. 125 (1):209-17).

Se ha demostrado en modelos preclínicos que la inhibición de la proteína fosfatasa calcineurina (que media la señalización neurodegenerativa a través de la inflamación, la degeneración estructural, el estrés oxidativo y las vías de muerte celular programada después del estrés celular y la agresión) por los fármacos inmunosupresores ciclosporina A y tacrolimus reduce la pérdida auditiva en modelos pre-clínicos de pérdida auditiva inducida por ruido (Uemaetomari y otros, 2005. Hearing Res. 209(1-2):86-90; Bas y otros, 2009. Acta Otolaryngol. 129(4): 385-9) y en 2 casos de hipoacusia neurosensorial súbita idiopática e hipoacusia neurosensorial súbita autoinmune (McClelland y otros, 2005. Acta Otolaryngol. 125(12): 1356-60; Di Leo y otros, 2011. Acta Otorhinolaryngol Ital. 31(6): 399-401).

Sin embargo, el uso de los inhibidores aprobados de calcineurina (ICN), ciclosporina A y tacrolimus en la medicina de trasplante, no solo es inmunosupresor, sino que también se asocia con efectos adversos graves tales como hiperlipidemia, diabetes mellitus, hipertensión, nefrotoxicidad y neurotoxicidad, así como también farmacocinética individual impredecible y farmacodinámicaNaesens & Sarwal, 2010. Transplantation. 89(11): 1308-9). Mientras que la combinación de una mala correlación dosis-nivel, una asociación impredecible nivel-efecto y una relación poco clara nivel-toxicidad (Naesens y otros, 2009. Clin J Am Soc Nephrol. 4(2): 481-508) con efectos adversos graves que dan como resultado una ventana terapéutica estrecha e individual (que requiere un control intensivo) pueden ser aceptables en afecciones potencialmente mortales tal como la terapia postrasplante antirrechazo, estas características no hacen que los ICN tradicionales sean candidatos a fármacos aceptables para el tratamiento de la pérdida auditiva neurosensorial.

Los inventores demostraron sorprendentemente que ciertos miembros de la familia de los setrones capaces de inhibir la proteína fosfatasa calcineurina trataron efectivamente la pérdida auditiva en un modelo animal preclínico cuando se administraron después de un traumatismo acústico. Este efecto del tratamiento conduce a resultados auditivos significativamente mejores que en los animales tratados con placebo e incluso funciona mejor que un ICN tradicional, a pesar de una potencia mucho menor en términos de inhibición de la calcineurina. El efecto del tratamiento no fue compartido por compuestos de setrón sin capacidad inhibidora de calcineurina.

Por lo tanto, la presente invención está dirigida al azasetrón, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, como un agente terapéutico seguro y efectivo para usar en el tratamiento de la pérdida auditiva neurosensorial.

Resumen

La presente invención se refiere, así, a un inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones para usar en el tratamiento de la pérdida auditiva neurosensorial en un sujeto que lo necesite, en donde la pérdida auditiva neurosensorial es una pérdida auditiva neurosensorial idiopática, una pérdida auditiva neurosensorial inducida por ruido, pérdida auditiva neurosensorial o pérdida auditiva neurosensorial inducida por fármacos ototóxicos, y en donde dicho inhibidor de calcineurina es azasetrón o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

En una modalidad, dicha pérdida auditiva neurosensorial es una disminución auditiva de al menos 20 dB en al menos tres frecuencias contiguas. En otra modalidad, dicha pérdida auditiva neurosensorial es sordera total.

En una modalidad, dicha pérdida auditiva neurosensorial es unilateral o bilateral.

En una modalidad, dicha pérdida auditiva neurosensorial es una pérdida auditiva neurosensorial repentina.

En una modalidad, dicha pérdida auditiva neurosensorial es una pérdida auditiva neurosensorial inducida por ruido.

En una modalidad, dicha pérdida auditiva neurosensorial es una pérdida auditiva neurosensorial inducida por fármacos ototóxicos, seleccionándose el fármaco ototóxico que induce la pérdida auditiva neurosensorial del grupo que consiste en aminoglucósidos, agentes quimioterapéuticos, diuréticos del asa, antimetabolitos y salicilatos.

En una modalidad, dicho sujeto se ve afectado con pérdida auditiva durante menos de 7 días.

En una modalidad, el inhibidor de calcineurina debe administrarse sistémicamente, administrarse tópicamente o inyectarse intratimpánicamente.

En una modalidad, el inhibidor de calcineurina se administrará de 1 a 3 veces al día.

En una modalidad, el inhibidor de calcineurina debe administrarse durante al menos 30 días.

Definiciones

En la presente descripción, los siguientes términos tienen los siguientes significados:

- "Pérdida auditiva" se refiere a una pérdida auditiva de al menos 10 dB, preferentemente de al menos 20 dB, con mayor preferencia de al menos 30 dB en tres frecuencias consecutivas en un audiograma estándar. La pérdida auditiva puede ser unilateral (es decir, impacta solo un oído de un sujeto) o bilateral (es decir, impacta ambos oídos de un sujeto).

- "Pérdida auditiva neurosensorial" se refiere a un tipo de pérdida auditiva causada por una anomalía y/o daño en las células ciliadas sensoriales y neuronas de la cóclea, o del nervio auditivo o aspectos superiores de la percepción o procesamiento auditivo central. Las células ciliadas sensoriales y las neuronas de la cóclea o el nervio auditivo pueden ser anormales al nacer o dañarse durante el tiempo de vida (ver más abajo una lista de posibles causas de pérdida auditiva neurosensorial).

- "Tratamiento" o "tratando" se refiere tanto al tratamiento terapéutico como a las medidas profilácticas o preventivas; en donde el objeto es prevenir o ralentizar (disminuir) la pérdida aditiva. Los que necesitan tratamiento incluyen los que ya tienen pérdida auditiva, así como también los propensos a tener pérdida auditiva o en los que la pérdida auditiva debe prevenirse. Un sujeto es "tratado" con éxito por pérdida auditiva si, después de recibir una cantidad terapéutica de un compuesto de acuerdo con la presente invención, el sujeto muestra una mejora auditiva observable y/o medible, y/o una mejor calidad de vida. Los parámetros anteriores para evaluar el tratamiento exitoso y la mejora de la pérdida auditiva pueden medirse fácilmente mediante procedimientos de rutina familiares para un médico, tal como, por ejemplo, la audiometría.

- "Cantidad terapéuticamente efectiva" significa el nivel o la cantidad de un compuesto al que se apunta, sin causar efectos secundarios negativos o adversos significativos al objetivo, (1) retrasar o prevenir la aparición de la pérdida auditiva; (2) ralentizar o detener la progresión, agravamiento o deterioro de la pérdida auditiva; (3) provocar una mejoría de los síntomas de la pérdida auditiva; (4) reducir la gravedad o la incidencia de la pérdida auditiva; o (5) curar la pérdida auditiva. Puede administrarse una cantidad terapéuticamente efectiva antes del inicio de la pérdida auditiva, para una acción profiláctica o preventiva. Alternativa o adicionalmente, la cantidad terapéuticamente efectiva puede administrarse después del inicio de la pérdida auditiva, para una acción terapéutica.

- Por "farmacéuticamente aceptable" significa que los ingredientes de una composición farmacéutica son compatibles entre sí y no perjudiciales para el sujeto al que se administra.

- A "excipiente farmacéuticamente aceptable" se refiere un excipiente que no produce una reacción adversa, alérgica u otra reacción adversa cuando se administra a un animal, preferentemente un ser humano. Incluye todos y cada uno de los solventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y retardadores de la absorción. Para la administración humana, las preparaciones deben cumplir con los estándares de esterilidad, pirogenicidad, seguridad general y pureza requeridos por oficinas reguladoras, tal como, por ejemplo, la Oficina de la FDA o la EMA.

- El término "sujeto" en la presente descripción se refiere a un mamífero, preferentemente un ser humano. En una modalidad, un sujeto puede ser un "paciente", es decir, un animal de sangre caliente, con mayor preferencia un ser humano, que/el cual está esperando recibir o está recibiendo atención médica o fue/es/será objeto de un procedimiento médico, o es monitoreado por el desarrollo de una enfermedad.

- "Alquilo" se refiere a cualquier cadena hidrocarbonada saturada lineal o ramificada, con 1 a 12 átomos de carbono, preferentemente de 1 a 8 átomos de carbono, y con mayor preferencia metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, nbutilo, sec-butilo, isobutilo, terc-butilo, pentilo, hexilo, heptilo u octilo.

- "Halógeno" se refiere a flúor, cloro, bromo o yodo.

- "Alcoxi" se refiere a cualquier grupo -O-alquilo, en donde el alquilo es como se definió anteriormente. Los grupos alcoxi adecuados incluyen, por ejemplo, metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, F-butoxi, sec-butoxi, npentoxi, pentiloxi, hexiloxi, heptiloxi u octiloxi.

- "Amino" se refiere a cualquier compuesto derivado del NH amoniaca^ por sustitución de uno o más átomos de hidrógeno por un radical orgánico. Amino preferentemente se refiere a -NH2, -NHR y -NRR', en donde R y R' son preferentemente grupos alquilo. Por lo tanto, "amino" incluye grupos monoalquilamino y dialquilamino.

- "Acilamino" se refiere a los grupos -NRC(O) alquilo, -NRC(O) cicloalquilo, -NRC(O) cicloalquenilo, -NRC(O) alquenilo, -NRC(O) alquinilo, -NRC(O) arilo, -NRC(O)heteroarilo y -NRC(O)heterocíclico, en donde R es hidrógeno o alquilo. Preferentemente, "acilamino" se refiere a C2-5 alcanolamino tales como, por ejemplo, acetilamino, propionilamino, butirilamino o pivaloilamino.

- "Alquilamino" se refiere a cualquier -W-alquilo e incluye grupos en donde el resto amino está sustituido con monoo di-alquilo, en los que alquilo es como se definió anteriormente. Los grupos alquilamino adecuados incluyen metilamino, etilamino, propilamino, isopropilamino, butilamino, hexilamino, octilamino, dimetilamino, dietilamino, dipropilamino, diisopropilamino, dibutilamino, dihexilamino o dioctilamino.

- "Fenilalquilo" se refiere a un grupo fenilo que comprende un resto alquilo, preferentemente dicho fenilalquilo es un "fenilo C1-4 alquilo ", es decir, un grupo que comprende un resto alquilo que lleva de 1 a 4 átomos de carbono. Los compuestos de fenilalquilo adecuados incluyen bencilo, 2-feniletilo, 1 -feniletilo, 3-fenilpropilo y 4-fenilbutilo. Los sustituyentes del núcleo de fenilo pueden seleccionarse del grupo que comprende de 1 a 3 átomos de halógeno, grupos alcoxi, grupos alquilo, grupos nitro, grupos amino, grupos trifluorometilo, grupos carboxi y grupos alcoxicarbonilo.

- "Fenoxialquilo" se refiere a un grupo fenoxi que comprende un resto alquilo, preferentemente dicho fenoxialquilo es un "fenoxi C1-4 alquilo", es decir, un grupo que comprende un resto alquilo que lleva de 1 a 4 átomos de carbono. Los compuestos de fenilalquilo adecuados incluyen fenoximetilo, 2-fenoxietilo, 3-fenoxipropilo y 4-fenoxibutilo. Los sustituyentes del núcleo de fenilo pueden seleccionarse del grupo que comprende de 1 a 3 átomos de halógeno, grupos alcoxi, grupos alquilo, grupos nitro, grupos amino, grupos trifluorometilo, grupos carboxi y grupos alcoxicarbonilo.

- "Aproximadamente" precediendo una cifra significa más o menos el 10 % del valor de dicha cifra.

Descripción detallada

La invención se define mediante las reivindicaciones. Cualquier tema que quede fuera del alcance de las reivindicaciones se proporciona solo con propósitos informativos.

Los inventores demostraron (véanse los Ejemplos) que algunos, pero no todos, los compuestos de la familia de los setrones actúan como inhibidores de la calcineurina. Además, se demostró sorprendentemente que estos inhibidores de la calcineurina de la familia de los setrones presentan un potencial terapéuti

neurosensorial.

La presente invención se refiere a azasetrón o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para usar en el tratamiento de la pérdida auditiva neurosensorial en un sujeto, siendo dicha pérdida auditiva neurosensorial una pérdida auditiva neurosensorial idiopática, pérdida auditiva neurosensorial inducida por ruido, pérdida auditiva neurosensorial relacionada con la edad o pérdida auditiva neurosensorial inducida por fármacos ototóxicos.

La familia de los setrones es una familia de antagonistas de la serotonina 5-HT3 e incluye los siguientes compuestos: azasetrón, ondansetrón, palonosetrón, tropisetrón, lerisetrón, alosetrón, granisetrón, dolasetrón, bemesetrón, ramosetrón, itasetrón, zacoprida y cilansetrón. Se conocen en la técnica métodos para determinar si un compuesto de esta familia es un inhibidor de calcineurina. Un ejemplo de tal método se muestra en el Ejemplo 1, y corresponde a la Prueba A descrita más abajo.

En un aspecto, la presente descripción se refiere a compuestos de la familia de los setrones capaces de inhibir la actividad de la calcineurina en las condiciones de la Prueba A.

De acuerdo con la Prueba A, la actividad fosfatasa calcineurina se evalúa en neuronas granulares cerebelosas (CGN) mediante el uso de un kit de ensayo colorimétrico basado en la cuantificación del complejo verde formado entre verde malaquita, molibdato y fosfato libre liberado. Las CGN se separan de las placas, por ejemplo, mediante raspado, se aclaran en solución tampón tris (TBS) helada y se cuentan. Aproximadamente 10 millones de células se lisan en 1 ml del tampón de lisis proporcionado y se centrifugan a 150 000 xg a 4 °C durante 45 min, y el sobrenadante puede almacenarse a -70 °C hasta el análisis. Antes del ensayo de la actividad de la calcineurina, el fosfato y los nucleótidos libres se eliminan del extracto celular mediante filtración en gel. Para asegurar la eliminación completa del fosfato, puede añadirse el reactivo verde de malaquita, que volverá el color verde en presencia de fosfato. Se añade un sustrato de calcineurina específico a los extractos celulares libres de fosfato y, tras un período de incubación adecuado, se aplica el reactivo verde de malaquita. La rápida formación de color verde de la reacción se mide, por ejemplo, en un espectrofotómetro. El color desarrollado es proporcional a la actividad de la calcineurina fosfatasa de las muestras. Los valores de absorbancia, leídos a 620 nm, pueden así transformarse en porcentaje de actividad de calcineurina con relación al tratamiento de control K25 (100 %).

En una modalidad, el inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones de la invención es capaz de inhibir la actividad de la calcineurina en al menos un 20 %, preferentemente al menos un 30, 40, 50, 60, 70, 80 % o más cuando se usa en una dosis de 10 nM, 50, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 o 1000 nM. En una modalidad, el inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones de la invención es capaz de inhibir la actividad de la calcineurina en al menos un 50 %, preferentemente al menos un 60, 70, 80 % o más cuando se usa a una dosis de 1000 nM. De acuerdo con la presente descripción, el inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones se selecciona del grupo que comprende azasetrón, ondansetrón, tropisetrón, ramosetrón, sales y análogos de estos.

Las sales farmacéuticamente aceptables de compuestos de setrón que pueden usarse en la presente invención son sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables, tales como, por ejemplo, con ácidos inorgánicos, tales como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico o un ácido fosfórico, o con ácidos carboxílicos o sulfónicos orgánicos adecuados, por ejemplo ácidos alifáticos mono o dicarboxílicos, tales como ácido trifluoroacético, ácido acético, ácido propiónico, ácido glicólico, ácido succínico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido hidroximaleico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico o ácido oxálico, o ácido amino ácidos tales como arginina o lisina, ácidos carboxílicos aromáticos, tales como ácido benzoico, ácido 2-fenoxibenzoico, ácido 2-acetoxibenzoico, ácido salicílico, ácido 4-aminosalicílico, ácidos carboxílicos aromático-alifáticos, tales como ácido mandélico o ácido cinámico ácido, ácidos carboxílicos heteroaromáticos, tales como ácido nicotínico o ácido isonicotínico, ácidos sulfónicos alifáticos, tales como metano-, etano- o 2-hidroxietanosulfónico, en particular ácido metanosulfónico d, o ácidos sulfónicos aromáticos, por ejemplo ácido benceno-, p-tolueno- o naftaleno-2-sulfónico.

De acuerdo con la presente descripción, el inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones es azasetrón, ondansetrón o una sal de estos, o un análogo de estos.

De acuerdo con la invención, el inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones es el azasetrón o una sal de este.

Azasetrón es 6-cloro-3,4-dihidro-N(8-metil-8-azabiciclo-[3.2.1]-oct-3-il)-2,4-dimetil-3-oxo-2H-1,4-benzoxazina-8-carboxamida, que también puede denominarseN-(1-azabiciclo[2.2.2]octan-8-il)-6-cloro-4-metil-3-oxo-1,4-benzoxazin-8-carboxamida.

De acuerdo con la presente descripción, un análogo de azasetrón se describe en la Patente de US US4,892,872. Análogos de azasetrón descritos en US4,892,872 son compuestos de benzoxazina de fórmula:

en donde R1 y R2 son iguales o diferentes, y cada uno representa hidrógeno o C i-8 alquilo; R3 representa hidrógeno, C i-8 alquilo, fenilalquilo o fenilalquilo sustituido; R4 y R5 son iguales o diferentes, y cada uno representa hidrógeno, halógeno, (C1-C8) alquilo, alcoxi, amino, acilamino, C2-5 alquilamino, hidroxi o nitro; X representa oxígeno o NH; R6 representa un grupo de la fórmula:

en donde m e s O o l ,

o un grupo de la fórmula:

en donde R7 representa C i-8 alquilo, fenilo C i-4 alquilo, fenoxialquilo, fenilo sustituido C i-4 alquilo o fenoxialquilo sustituido, R8 representa hidrógeno o C1-8 alcoxi y m es como se definió anteriormente,

o un grupo de la fórmula:

en donde R9 representa C1-8 alquilo, fenilo C1-4 alquilo o fenilo sustituido C1-4 alquilo, n es 0 o 1, y m es como se definió anteriormente,

o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

Ejemplos de análogos de azasetrón incluyen 6-cloro-3,4-dihidro-2-metil-3-oxo-N-(3-quinuclidinil)-2H-1,4-benzoxazina-8-carboxamida, 6-cloro-3,4-dihidro-2,4-dimetil-3-oxo-N-(3-quinuclidinil)-2H-benzoxazina-8-carboxamida, 6-cloro-2-etil-3,4-dihidro-4-metil-3-oxo-N-(3-quinuclidinil)-2H-1,4-benzoxazina-8-carboxamida,6-cloro-3,4-dihidro-4-metil-3-oxo-N-(3-quinuclidinil)-2H-1,4-benzoxazina-8-carboxamida, 6-bromo-3,4-dihidro-2,4-dimetil-3-oxo-N-(3-quinuclidinil)-2H-1,4-benzoxazina-8-carboxamida y 6-cloro-3,4-dihidro-2,2,4-trimetil-3-oxo-N-(3-quinuclidin-l)-2H-1,4-benzoxazina-8-carboxamida y sales farmacéuticamente aceptables de estos.

Como se indica a continuación, de acuerdo con la presente invención, la pérdida auditiva es la pérdida auditiva neurosensorial, siendo dicha pérdida auditiva neurosensorial una pérdida auditiva neurosensorial idiopática, una pérdida auditiva neurosensorial inducida por ruido, una pérdida auditiva neurosensorial relacionada con la edad o una pérdida auditiva neurosensorial inducida por fármacos ototóxicos.

En una modalidad, la presente invención se refiere al tratamiento agudo de la pérdida auditiva. Como se usa en la presente descripción, los términos "tratamiento agudo de la pérdida auditiva" se refieren a un tratamiento que se inició tan pronto como sea posible después del inicio de la pérdida auditiva, tal como, a lo máximo, 7 días después del inicio de la pérdida auditiva. En una modalidad, el tratamiento comienza a lo máximo 1 día, 2 días, 3 días, 4 días, 5 días, 6 días o a lo máximo 7 días después del inicio de la pérdida auditiva.

En una modalidad, el término "aparición de pérdida auditiva" puede referirse a la exposición a la causa de la pérdida auditiva (tal como, por ejemplo, exposición a ruidos fuertes para la pérdida auditiva inducida por ruido). En otra modalidad, el término "aparición de pérdida auditiva" puede referirse al diagnóstico de pérdida auditiva realizado por un médico. En otra modalidad, el término "aparición de pérdida auditiva" puede referirse a la percepción por parte del sujeto de una pérdida, preferentemente de una pérdida significativa, de la capacidad auditiva, o a la percepción por parte del sujeto de una pérdida de la capacidad auditiva que impacta significativamente en su calidad de vida.

El tratamiento agudo de la pérdida auditiva es de especial interés debido a que permite prevenirla hipoacusia crónica y el tinnitus, ya que los procesos degenerativos en la cóclea tal como el estrés oxidativo y la apoptosis no solo se inician directamente después de una agresión, sino que permanecen activos hasta 4 semanas resultando en una continua muerte celular significativa durante 2-3 semanas después del insulto (Yang y otros, 2004. Hear Res. 196(1-2): 69-76; Yamashita y otros, 2004. Brain Res. 1019(1-2): 201-9). Como la degeneración significativa y la muerte celular aún continúan después de una semana después de la agresión, el tratamiento iniciado al menos hasta este punto tiene el potencial de mejorar significativamente los resultados a largo plazo.

En una modalidad, la presente invención se refiere al tratamiento crónico de la pérdida auditiva, en particular para el tratamiento de la pérdida auditiva inducida por la edad o para la prevención del empeoramiento de la pérdida auditiva inducida por la edad. En una modalidad, el término "tratamiento crónico" significa un tratamiento por un período de tiempo indefinido, tal como, por ejemplo, durante 1 año, o durante 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20 años o más.

En una modalidad, el término "pérdida auditiva" se refiere a una disminución auditiva de al menos 10 dB, o 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 dB o más en al menos tres frecuencias contiguas. En una modalidad, "pérdida auditiva" se refiere a sordera total.

En una modalidad, la pérdida auditiva es una pérdida auditiva bilateral, lo que significa que se observa una disminución auditiva en ambos oídos del sujeto. En otra modalidad, la pérdida auditiva es unilateral, es decir sólo se observa en un oído, mientras que la capacidad auditiva del otro es normal.

El intervalo auditivo normal suele ser de 20 Hz a 20 000 Hz. En una modalidad, la pérdida auditiva puede afectar a todas las frecuencias de sonido. En otra modalidad, la pérdida auditiva solo afecta a algunas frecuencias de sonido, tal como por ejemplo, la pérdida auditiva en las frecuencias bajas (como, por ejemplo, hasta 500, 1000 o 2000 Hz, mientras que la audición en frecuencias más altas es normal) o la pérdida auditiva de alta frecuencia (como, por ejemplo, pérdida auditiva a partir de 4000, 6000, 8000 o 10000 Hz).

Los expertos en la técnica conocen bien los métodos para medir la pérdida auditiva. Ejemplos de tales métodos incluyen prueba de diapasón, prueba de conducción ósea, audiograma de tono puro, medición de ABR (respuestas auditivas del tronco encefálico), medición de DPOAE (emisiones otoacústicas de producto de distorsión), medición de TEOAE (emisiones otoacústicas evocadas transitoriamente), prueba de habla en ruido y prueba de comprensión.

La pérdida auditiva incluye pérdida auditiva neurosensorial, pérdida auditiva conductiva y pérdida auditiva mixta (en donde la pérdida auditiva mixta es una combinación de pérdida auditiva neurosensorial y conductiva).

La pérdida auditiva conductiva es el resultado de anomalías del oído externo, la membrana timpánica, el espacio del oído medio o los huesecillos. Puede resultar de la impactación del cerumen, líquido del oído medio, otitis media, cuerpos extraños, membrana timpánica perforada, edema del canal por otitis externa, otosclerosis, traumatismo o colesteatoma (todas estas afecciones pueden diagnosticarse mediante otoscopia).

La pérdida auditiva neurosensorial y la pérdida auditiva conductiva pueden distinguirse de acuerdo con pruebas bien conocidas por el experto en la técnica, que incluyen pruebas de Weber y Rinne, otoscopia y audiometría.

De acuerdo con la presente invención, la pérdida auditiva es una pérdida auditiva neurosensorial, siendo dicha pérdida auditiva una pérdida auditiva neurosensorial idiopática, una pérdida auditiva neurosensorial inducida por ruido, una pérdida auditiva neurosensorial relacionada con la edad o una pérdida auditiva neurosensorial inducida por fármacos ototóxicos.

De acuerdo con la presente invención, la pérdida auditiva no es una pérdida auditiva conductiva o no incluye la pérdida auditiva conductiva.

En un aspecto de la descripción, la pérdida auditiva es la pérdida auditiva repentina (SHL). La pérdida auditiva repentina puede definirse mediante el siguiente criterio audiométrico: disminución auditiva de al menos 10 dB, 20 dB, 30 dB o más en al menos tres frecuencias contiguas, evolucionando dentro de 3 días o menos. Debido a que la audiometría premórbida generalmente no está disponible, para la pérdida auditiva unilateral, la pérdida auditiva puede definirse como relacionada con los umbrales del oído opuesto. En una modalidad particular, la pérdida auditiva neurosensorial es una pérdida auditiva neurosensorial repentina (SSNHL).

La pérdida auditiva repentina, preferentemente SSNHL, puede ser el resultado de un schwannoma vestibular (neuroma acústico), accidente cerebrovascular, neoplasia maligna, isquemia vascular del oído interno, fístula perilinfa o causas autoinmunes (incluida la alergia a IgE o IgG) u otras causas (tal como, por ejemplo, causas enumeradas más abajo). Sin embargo, se identifica una causa de SSNHL en solo 10 a 15 % de los pacientes en el momento de la presentación.

En una modalidad, la SSNHL es idiopática, lo que significa que no se identificó ninguna causa a pesar de una investigación adecuada.

Ejemplos de causas de pérdida auditiva neurosensorial incluyen exposición excesiva al ruido (tal como, por ejemplo, exposición a un ruido de más de 70 dB, 80 dB, 90 dB, 100 dB, 110 dB, 120 dB, 130 dB o más), envejecimiento, afectación del oído interno por agentes infecciosos (tales como, por ejemplo, infecciones virales y bacterianas), autoinmunidad (como, por ejemplo, enfermedad autoinmune del oído interno) o vasculopatía, enfermedades (como hipertensión y diabetes), fármacos ototóxicos, traumatismo craneoencefálico, tumores o exposición a explosiones.

En una modalidad, la pérdida auditiva neurosensorial es congénita, es decir, las células ciliadas sensoriales y las neuronas de la cóclea o del nervio auditivo eran anormales al nacer. Ejemplos de causas de pérdida auditiva congénita, preferentemente pérdida auditiva neurosensorial congénita, incluyen la falta de desarrollo (aplasia) de la cóclea, síndromes cromosómicos, colesteatoma congénito, progresivo familiar retardado, síndrome de rubéola congénita y transmisión del citomegalovirus humano (HCMV) a un feto en desarrollo durante el embarazo.

En otra modalidad, se adquiere pérdida auditiva neurosensorial, es decir, las células ciliadas sensoriales y las neuronas de la cóclea o del nervio auditivo eran normales al nacer, pero se dañaron subsecuentemente.

Ejemplos de causas de pérdida auditiva adquirida, preferentemente pérdida auditiva neurosensorial adquirida, incluyen causas inflamatorias, fármacos ototóxicos, traumatismos físicos (tales como, por ejemplo, una lesión en la cabeza, una fractura del hueso temporal que afecta la cóclea y el oído medio, o una lesión por cizallamiento que afectan al VIII par craneal), exposición al ruido, presbiacusia, tumores o enfermedades.

Ejemplos de causas inflamatorias de pérdida auditiva neurosensorial incluyen enfermedades autoinflamatorias (tal como, por ejemplo, síndrome de Muckle-Wells), laberintitis supurativa, meningitis, paperas o sarampión.

Ejemplos de causas virales de pérdida auditiva neurosensorial incluyen sífilis, paperas o sarampión.

Ejemplos de fármacos ototóxicos que pueden causar pérdida auditiva neurosensorial incluyen aminoglucósidos (tal como, por ejemplo, tobramicina), agentes quimioterapéuticos (como, por ejemplo, fármacos con platino, incluidos cisplatino, carboplatino, oxaliplatino, satraplatino, picoplatino, tetraplatino, transplatino, nedaplatino, ormaplatino, PtÓyR, RDACH], piriplatino, ZD0473, BBR3464 y Pt-1C3), diuréticos de asa (como, por ejemplo, furosemida), antimetabolitos (como, por ejemplo, metotrexato) y salicilatos (como, por ejemplo, aspirina).

La presbiacusia se refiere a la pérdida auditiva que típicamente, pero no solo, ocurre en el intervalo de alta frecuencia (4000 Hz a 8000 Hz), principalmente en los ancianos. Algunos lo consideran un proceso degenerativo, aunque nunca se ha demostrado una relación con el envejecimiento.

Los ejemplos de tumores que pueden inducir una pérdida auditiva neurosensorial incluyen el tumor del ángulo pontocerebeloso, tales como, por ejemplo, el neuroma acústico y el meningioma.

Un ejemplo de enfermedad que conduce a la pérdida auditiva neurosensorial es la enfermedad de Meniere. Típicamente, pero no solo, causa pérdida auditiva neurosensorial en el intervalo de baja frecuencia (125 Hz a 1000 Hz). De acuerdo con la presente invención, la pérdida auditiva neurosensorial no es el resultado de la enfermedad de Meniere ni está asociada a ella.

Otros ejemplos de causas de pérdida auditiva neurosensorial incluyen enfermedades autoinmunes (tal como, por ejemplo, granulomatosis con poliangeítis), adenoides que no desaparecen en la adolescencia provocando la obstrucción de la trompa de Eustaquio, provocando pérdida auditiva conductiva e infecciones nasales que pueden extenderse a la oído medio, SIDA, a Rc , VIH (y posteriores infecciones oportunistas), clamidia, síndrome de alcoholismo fetal, parto prematuro, otosclerosis, infarto de la circulación posterior y enfermedad de Charcot-Marie-Tooth.

En una modalidad, la pérdida auditiva neurosensorial se hereda, por ejemplo, es el resultado de una predisposición genética del sujeto. Se han identificado más de 40 genes que causan sordera, incluidos DFNB1 (también conocido como Conexina 26 o GJB) y MT-TL1. Entre los ejemplos de síndromes que provocan pérdida auditiva se incluyen el síndrome de Stickler, el síndrome de Waardenburg, el síndrome de Pendred, el síndrome del acueducto vestibular grande y el síndrome de Usher.

En una modalidad, la pérdida auditiva neurosensorial es idiopática, es decir, sin causa identificada.

En una modalidad, la pérdida auditiva neurosensorial es una pérdida auditiva neurosensorial inducida por ruido. La pérdida auditiva puede ser inducida, por ejemplo, por la exposición a ruidos fuertes (tales como, por ejemplo, de más de 90 dB, 100 dB, 110 dB, 120 dB, 130 dB o más) o por una exposición prolongada a ruidos menos fuertes. De hecho, cuanto más fuerte sea el ruido, menor será la cantidad segura de exposición. Por ejemplo, la cantidad de exposición diaria segura a 85 dB es de 8 horas, mientras que es de solo 2 horas a 91 dB.

En una modalidad, la pérdida auditiva neurosensorial es una pérdida auditiva neurosensorial inducida por la edad. Por lo tanto, en una modalidad, el sujeto a tratar de acuerdo con la presente invención tiene al menos 30, 40, 50, 60, 70, 80 años o más.

En una modalidad, el sujeto que recibe el compuesto de setrón de la invención experimenta pérdida auditiva durante al menos 24 horas, es decir, de acuerdo con esta modalidad, los sujetos con sólo una pérdida auditiva temporal están excluidos del alcance de la presente invención.

Por lo tanto, en una modalidad, el sujeto comienza a recibir el tratamiento de la invención entre 24 horas y 7 días después del inicio de la pérdida auditiva. En una modalidad, el sujeto comienza a recibir el tratamiento de la invención entre 24 horas y 2, 3, 4, 5 o 6 días después del inicio de la pérdida auditiva. De acuerdo con esta modalidad, el término "tratamiento agudo de la pérdida auditiva" puede referirse así a un tratamiento que comienza entre 24 horas y 2, 3, 4, 5, 6 o 7 días después del inicio de la pérdida auditiva.

En una modalidad, el sujeto tiene riesgo de pérdida auditiva. Los ejemplos de riesgo de pérdida auditiva incluyen predisposición genética a la pérdida auditiva, antecedentes familiares de pérdida auditiva, antecedentes de episodios previos de pérdida auditiva, exposición al ruido, exposición a agentes ototóxicos (incluidos fármacos ototóxicos) y envejecimiento.

En una modalidad, el compuesto de la invención puede administrarse antes del inicio de la pérdida auditiva, tal como, por ejemplo, antes de la exposición a un ruido o agente que pueda causar pérdida auditiva. Como se usa en la presente descripción, cuando el compuesto de la invención se usa para tratar o prevenir la pérdida auditiva inducida por ruido, "antes de" puede referirse a una administración unas pocas horas o minutos antes de la exposición al ruido. En otra modalidad, el compuesto de la invención también puede administrarse durante o después de la exposición a un ruido o agente que puede causar pérdida auditiva, tal como, por ejemplo, unos minutos u horas después.

En otra modalidad, el compuesto de la invención puede administrarse para disminuir la pérdida auditiva en curso relacionada con la edad. Como se usa en la presente descripción, cuando el compuesto de la invención se usa para tratar o prevenir la pérdida auditiva relacionada con la edad, "antes de" se refiere a la administración después de que se haya determinado el riesgo de, o el comienzo de, la pérdida auditiva relacionada con la edad, pero antes de su continuo empeoramiento.

En una modalidad, el sujeto es un niño o un adolescente. En otra modalidad, el sujeto es un adulto, es decir, un sujeto de al menos 18 o 20 años o más. En otra modalidad, el sujeto tiene al menos 30, 40, 50, 60, 70, 80 años o más.

En una modalidad, el sujeto es un hombre. En otra modalidad, el sujeto es una mujer.

En una modalidad, el sujeto no se ve afectado y/o diagnosticado con una enfermedad vestibular, es decir, enfermedades de los nervios vestibulares o de los núcleos vestibulares responsables de la disfunción vestibular. Ejemplos de enfermedades vestibulares incluyen vértigo (tales como, por ejemplo, vértigo paroxístico benigno y vértigo episódico familiar), neuritis vestibular, enfermedad de Meniere (como, por ejemplo, enfermedad de Meniere crónica), hidropesía endolinfática, fístula perilinfática, trastornos vestibulares resultantes de traumatismo craneoencefálico, hemorragia laberíntica, laberíntica crónica o aguda (como, por ejemplo, de origen viral, inmune o bacteriano), laberinto serosa, barotraumatismo del vestíbulo, enfermedad autoinmune del oído interno, migraña vestibular, migraña asociada a síndromes vestibulares, síndromes vestibulares resultantes procedentes del tratamiento quirúrgico del oído medio, tumor del oído medio, tumor del saco endolinfático, tumor del ángulo pontocerebeloso, tumores del hueso pontocerebeloso o temporal que afectan a los nervios vestibulares y/o al laberinto, tumores del tallo cerebral o lesiones asociadas con trastornos vestibulares (como, por ejemplo, esclerosis múltiple, accidente cerebrovascular o angeítis), canalopatías del oído interno, los schwannomas vestibulares y presbivestibulia. En una modalidad, el sujeto no se ve afectado por una disfunción vestibular aguda (tales como, por ejemplo, barotraumatismo, enfermedad de Meniere o vértigo asociado a migraña). En otra modalidad, el sujeto no se ve afectado por disfunción vestibular crónica (tal como, por ejemplo, secuelas de disfunción vestibular aguda o presbvestibulia).

En otra modalidad, el sujeto no presenta daño alguno vestibular o lesión vestibular. Ejemplos de trastorno vestibular lesional incluyen neuritis vestibular, neuronitis viral, laberintitis, laberintitis endolinfática viral, ototoxicidad inducida por fármacos, enfermedad de Meniere, hidropesía endolinfática, traumatismo craneoencefálico con deficiencias vestibulares lesionales, hemorragia laberíntica, infección laberíntica aguda o crónica, laberintitis serosa, enfermedad autoinmune del oído interno, presbvestibulia y alteraciones vestibulares tóxicas.

En otra modalidad, el sujeto no se ve afectado portinnitus.

También se describe en la presente descripción una composición que comprende o que consiste de un inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones como se describe anteriormente.

También se describe en la presente descripción una composición farmacéutica que comprende o que consiste de o consiste esencialmente de un inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones como se describe anteriormente en combinación con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

También se describe en la presente descripción un medicamento que comprende o que consiste de o consiste esencialmente de un inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones como se describió anteriormente.

También se describe en la presente descripción una composición nutracéutica que comprende o que consiste de o consiste esencialmente en un inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones, como se describió anteriormente. En particular, en la presente descripción se describe una composición nutracéutica para tratar la pérdida auditiva relacionada con la edad en un sujeto que lo necesite.

Como se usa en la presente descripción, el término "que consiste esencialmente en", con referencia a una composición farmacéutica o medicamento o composición nutracéutica de la divulgación, significa que el al menos un inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones es el único agente terapéutico o agente con una actividad biológica dentro de dicha composición farmacéutica o medicamento o composición nutracéutica.

En la composición, composición farmacéutica, medicamento o composición nutracéutica descrita en la presente descripción, el compuesto de setrón, solo o en combinación con otro principio activo, puede administrarse en una forma de administración unitaria, como una mezcla con soportes farmacéuticos convencionales, a un sujeto. Las formas de administración unitaria adecuadas comprenden formas de vía oral tales como comprimidos, cápsulas de gel, polvos, gránulos y suspensiones o soluciones orales, formas de administración sublingual y bucal, aerosoles, implantes, subcutánea, transdérmica, tópica, intraperitoneal, intramuscular, intravenosa, subdérmica, transdérmica, formas de administración intratecal, intratimpánica e intranasal y formas de administración rectal.

Preferentemente, la composición, composición farmacéutica, medicamento o composición nutracéutica contiene vehículos que son farmacéuticamente aceptables para una formulación capaz de inyectarse, preferentemente sistémica o intratimpánicamente inyectada. Estas pueden ser, en particular, soluciones salinas isotónicas, estériles (fosfato monosódico o disódico, cloruro de sodio, potasio, calcio o magnesio o mezclas de tales sales), o composiciones secas, especialmente liofilizadas, que tras la adición, en dependencia del caso, de agua esterilizada o suero fisiológico, permiten la constitución de soluciones inyectables. En un aspecto de la descripción, la composición, composición farmacéutica, medicamento o composición nutracéutica tiene forma de gel.

En un aspecto de la descripción, la composición, composición farmacéutica, medicamento o composición nutracéutica comprende matrices de liberación sostenida, tales como polímeros biodegradables.

Ejemplos de formas farmacéuticas adecuadas para uso inyectable incluyen soluciones o dispersiones acuosas estériles; formulación en gel; formulaciones que incluyen aceite de sésamo, aceite de cacahuete o propilenglicol acuoso; y polvos estériles para la preparación extemporánea de soluciones o dispersiones inyectables estériles. En todos los casos, la forma debe ser estéril y fluida hasta el punto de que sea fácilmente inyectable. Debería ser estable bajo las condiciones de fabricación y almacenamiento y debería preservarse contra la acción de contaminación de los microorganismos, tales como bacterias y hongos.

Las soluciones que comprenden un compuesto de setrón de la invención como base libre o sales farmacológicamente aceptables pueden prepararse en agua mezcladas adecuadamente con un surfactante, tal como hidroxipropilcelulosa. Las dispersiones pueden prepararse también en glicerina, polietilenglicoles líquidos y sus mezclas y en aceites. Bajo condiciones ordinarias de almacenamiento y uso, estas preparaciones contienen un conservante para prevenir el crecimiento de microorganismos.

El compuesto de setrón de la invención puede formularse en una composición en forma neutra o de sal. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen las sales de adición de ácido (formadas con los grupos amino libres de la proteína) y que se forman con ácidos inorgánicos tales como, por ejemplo, ácido clorhídrico o fosfórico, o ácidos orgánicos tales como acético, oxálico, tartárico y mandélico. Las sales formadas con los grupos carboxilo libres también pueden derivarse de bases inorgánicas tales como, por ejemplo, hidróxidos de sodio, potasio, amonio, calcio o férrico, y bases orgánicas tales como isopropilamina, trimetilamina, histidina y procaína.

El portador también puede ser un solvente o medio de dispersión que contenga, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol líquido), mezclas adecuadas de estos y aceites vegetales. La fluidez adecuada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento, tal como la lecitina, con el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de la dispersión, y con el uso de surfactantes. La prevención de la acción de los microorganismos puede realizarse mediante diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico y timerosal. En muchos casos, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares o cloruro de sodio. La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede proporcionarse mediante el uso en las composiciones de agentes de absorción retardada, por ejemplo, monoestearato de aluminio y gelatina.

Pueden prepararse soluciones inyectables estériles incorporando el compuesto de setrón en la cantidad requerida en el solvente apropiado con uno o varios de los otros ingredientes enumerados en la presente descripción, según se requiera, seguido de esterilización por filtración. Generalmente, las dispersiones se preparan mediante la incorporación de varios ingredientes activos esterilizados en un vehículo estéril que contiene el medio de dispersión básico y otros ingredientes requeridos de los enumerados anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos de preparación preferidos son las técnicas de secado al vacío y liofilización que producen un polvo del ingrediente activo además de cualquier ingrediente adicional deseado de una solución de este, previamente esterilizada por filtración.

Después de la formulación, las soluciones serán administradas de forma compatible con la formulación de dosificación y en una cantidad tal que sea terapéuticamente efectiva. Las formulaciones se administran fácilmente en una variedad de formas de dosificación, tales como el tipo de soluciones inyectables descritas anteriormente, pero también pueden emplearse cápsulas de liberación de fármacos.

Para la administración parenteral en una solución acuosa, por ejemplo, si es necesario la solución deberá regularse adecuadamente con tampón y primero, el diluyente líquido se hace isotónico con suficiente solución salina o glucosa. Estas soluciones acuosas particulares son especialmente adecuadas para la administración intravenosa, intramuscular, subcutánea e intraperitoneal. En relación con esto, a la luz de la presente descripción los medios acuosos estériles que pueden emplearse serán conocidos por los expertos en la técnica. Por ejemplo, una dosificación podría disolverse en 1 ml de solución isotónica de NaCl y añadirse a 1000 ml de líquido de hipodermoclisis o inyectarse en el sitio de infusión propuesto. Algunas variaciones en la dosificación ocurrirán necesariamente en dependencia de la afección del sujeto a tratar.

La persona responsable de la administración determinará, en cualquier caso, la dosis apropiada para el sujeto individual. El compuesto de setrón de la invención puede formularse dentro de una mezcla terapéutica para comprender de 0,01 a 1000 mg, preferentemente de 1 a 400 mg, con mayor preferencia de 5 a 100 mg por dosis aproximadamente. También, pueden administrarse múltiples dosis.

En adición de los compuestos de la invención formulados para administración parenteral, tales como inyección intravenosa o intramuscular, otras formas farmacéuticamente aceptables incluyen, por ejemplo, tabletas u otros sólidos para administración oral; formulaciones liposomales; cápsulas de liberación prolongada; y cualquier otro formulario usado actualmente.

En una modalidad, va a administrarse al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de dicho inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones de la invención.

En una modalidad, la cantidad terapéuticamente efectiva está en el intervalo de 1 a 10000 mg/ml del compuesto de setrón de la invención, preferentemente de 50 a 5000 mg/ml, con mayor preferencia de 200 a 2000 mg/ml del compuesto de setrón de la invención. En una modalidad, la cantidad terapéuticamente efectiva está en el intervalo de 1 a 10000 mg/ml del compuesto de setrón de la invención, preferentemente de 2 a 2000 mg/ml, con mayor preferencia de 5 a 500 mg/ml del compuesto de setrón de la invención.

En una modalidad, la cantidad terapéuticamente efectiva está en el intervalo de 1 a 10000 mg/g del compuesto de setrón de la invención, preferentemente de 50 a 5000 mg/g, con mayor preferencia de 200 a 2000 mg/g del compuesto de setrón de la invención. En otra modalidad, la cantidad terapéuticamente efectiva está en el intervalo de aproximadamente 1 a 10000 mg/g del compuesto de setrón de la invención, preferentemente de 2 a 2000 mg/g, con mayor preferencia de 5 a 500 mg/g del compuesto de setrón de la invención.

Se debe entender que el médico tratante decidirá el uso diario total del compuesto de setrón de la invención, composición, composición farmacéutica, medicamento o composición nutracéutica de la presente descripción dentro del alcance de un buen juicio médico. El nivel de dosis terapéuticamente efectivo específico para cualquier paciente en particular dependerá de una variedad de factores que incluyen la pérdida auditiva que se está tratando y la gravedad de la pérdida auditiva; actividad del compuesto de setrón específico empleado; la composición específica empleada, la edad, el peso corporal, la salud general, el sexo y la dieta del sujeto; el momento de administración, la vía de administración y la velocidad de excreción del compuesto de setrón específico empleado; la duración del tratamiento; fármacos usados en combinación o coincidentes con el polipéptido específico empleado; y factores similares bien conocidos en las técnicas médicas. Por ejemplo, es correcto para los expertos dentro de la técnica comenzar con dosis del compuesto a niveles inferiores que las requeridas para lograr el efecto terapéutico deseado y aumentar gradualmente la dosificación hasta que se logre el efecto deseado.

Sin embargo, la dosificación diaria del compuesto de setrón de la invención puede variarse en un amplio intervalo de 0,01 a 500 mg por adulto por día. En otra modalidad, la dosificación diaria del compuesto de setrón de la invención puede variarse en un amplio intervalo de 1 a 10000 mg por adulto por día, preferentemente de 2 a 2000 mg por adulto por día, con mayor preferencia de 5 a 500 mg por adulto por día. Preferentemente, las composiciones contienen 0,01, 0,05, 0,1, 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 10,0, 15,0, 20,0, 25,0, 50,0, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 1000 o 2000 mg del ingrediente activo para el ajuste sintomático de la dosificación al paciente a tratar. Una medicación contiene típicamente de 0,01 mg a 500 mg del ingrediente activo, preferentemente de 1 mg a 100 mg del ingrediente activo. En una modalidad, la composición de la descripción contiene de 1 mg a 10000 mg del ingrediente activo, preferentemente de 2 mg a 2000 mg, con mayor preferencia de 5 mg a 500 mg del ingrediente activo. La composición de la descripción puede comprender el compuesto de setrón en un intervalo de 1 mg a 100 mg, preferentemente de 5 mg a 20 mg, con mayor preferencia de 10 mg. La composición de la descripción también puede comprender el compuesto de setrón en un intervalo de 1 mg a 10000 mg, preferentemente de 2 mg a 2000 mg, con mayor preferencia de 5 mg a 500 mg. Normalmente se suministra una cantidad efectiva del fármaco a un nivel de dosificación de 0,01 mg/kg a 2 mg/kg de peso corporal por día, especialmente de 0,05 mg/kg a 0,4 mg/kg de peso corporal por día, con mayor preferencia de 0,1-0,3 mg/kg de peso corporal por día. En una modalidad, se suministra una cantidad efectiva del compuesto de setrón a un nivel de dosificación de 0,01 mg/kg a 100 mg/kg de peso corporal por día, especialmente de 0,02 mg/kg a 20 mg/kg de peso corporal por día, con mayor preferencia de 0,05 mg/kg a 5 mg/kg de peso corporal por día.

En una modalidad, el compuesto de la invención debe administrarse tópicamente, preferentemente debe aplicarse tópicamente en el oído externo o en el canal auditivo. Los ejemplos de formulaciones adaptadas a la administración tópica incluyen gotas para los oídos, soluciones o geles tópicos.

En una modalidad, el compuesto de la invención debe inyectarse intratimpánicamente. Los ejemplos de formulaciones adaptadas a la inyección intratimpánica incluyen soluciones, tales como, por ejemplo, soluciones acuosas estériles, geles, dispersiones, emulsiones, suspensiones, formas sólidas adecuadas para preparar soluciones o suspensiones tras la adición de un líquido antes de su uso tales como, por ejemplo, formas en polvo y liposomales.

En una modalidad preferida, el compuesto de setrón de la invención debe administrarse por vía sistémica, tal como, por ejemplo, administrado por vía oral, administrado por vía intranasal o inyectado (incluyendo, por ejemplo, inyectado por vía intraperitoneal, intravenosa, subcutánea o intramuscular).

En una modalidad, el compuesto de setrón de la invención, la composición, la composición farmacéutica, el medicamento o la composición nutracéutica de la descripción deben administrarse por vía oral. Ejemplos de formas adaptadas para la administración oral incluyen comprimidos, comprimidos bucodispersantes/que se desintegran por vía oral, comprimidos efervescentes, polvos, gránulos, píldoras (incluidas píldoras recubiertas de azúcar), grageas, cápsulas (incluidas cápsulas de gelatina blanda), jarabes, líquidos, geles u otras soluciones bebibles, suspensiones, pastas y formas liposomales.

En una modalidad, se inyecta el compuesto de setrón de la invención, la composición, la composición farmacéutica, el medicamento o la composición nutracéutica de la descripción. Por lo tanto, de acuerdo con esta modalidad, el compuesto de setrón de la invención, la composición, la composición farmacéutica, el medicamento o la composición nutracéutica de la descripción está en una forma adaptada para inyección, tales como, por ejemplo, intramuscular, subcutánea, intradérmica, inyección o infusión transdérmica o intravenosa. Ejemplos de formas adaptadas para inyección incluyen soluciones, tales como, por ejemplo, soluciones acuosas estériles, geles, dispersiones, emulsiones, suspensiones, formas sólidas adecuadas para preparar soluciones o suspensiones tras la adición de un líquido antes de su uso, tales como, por ejemplo, formas en polvo y liposomales.

En un aspecto de la divulgación, la composición nutracéutica descrita en la presente descripción debe administrarse por vía oral al sujeto. Ejemplos de formas adaptadas para la administración oral incluyen comprimidos, comprimidos bucodispersantes/que se desintegran por vía oral, comprimidos efervescentes, polvos, gránulos, píldoras (incluidas píldoras recubiertas de azúcar), grageas, cápsulas (incluidas cápsulas de gelatina blanda), jarabes, líquidos, geles u otras soluciones bebibles, suspensiones, pastas y formas liposomales. En un aspecto de la divulgación, la composición nutracéutica descrita en la presente descripción tiene forma de aditivo alimentario, aditivo de bebida, suplemento dietético o producto nutricional.

En una modalidad, el compuesto de setrón de la invención es para administración tres veces al día, dos veces al día, una vez al día, una vez cada 2 días, una vez cada 3 días, dos veces a la semana, una vez a la semana o menos, preferentemente, el compuesto de setrón de la invención es para administración de una a tres veces al día.

En una modalidad, el compuesto de setrón se administra durante un período de tiempo de aproximadamente 1 semana, o de 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 semanas o más, o de 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 meses o más. En una modalidad, el compuesto de setrón es para la administración hasta una audición normal, o hasta que el sujeto recupere el 50 %, 60, 70, 80, 90 % o más de su capacidad auditiva. La recuperación de la capacidad auditiva puede medirse mediante métodos bien conocidos por el experto en la técnica, incluida la prueba del diapasón, la prueba de conducción ósea, el audiograma de tono puro, la medición de ABR (respuestas auditivas del tronco encefálico), la medición de DPOAE (emisiones otoacústicas de productos de distorsión), la TEOAE (transitoriamente) emisiones otoacústicas evocadas), prueba de habla en ruido y prueba de comprensión de palabras.

En una modalidad, el compuesto de setrón de la invención es el único compuesto terapéutico que se administra al sujeto para tratar la pérdida auditiva.

En otra modalidad, el compuesto de setrón de la invención puede administrarse en combinación con otro compuesto terapéuti

También se describe en la presente descripción un inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones para su uso en la mejora auditiva en un sujeto que lo necesite. Preferentemente, se administrará al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva del inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones.

De acuerdo con esta descripción, el sujeto se ve afectado, preferentemente se le diagnostica, pérdida auditiva, preferentemente pérdida auditiva neurosensorial, con mayor preferencia pérdida auditiva neurosensorial inducida por ruido o pérdida auditiva neurosensorial relacionada con la edad.

De acuerdo con esta descripción, la mejora de las capacidades auditivas puede corresponder a un umbral ABR reducido y/o a una amplitud DPOAE aumentada.

También se describe en la presente descripción un inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones para usar en la reducción de la pérdida de células ciliadas externas en la cóclea en un sujeto que lo necesite. Preferentemente, se administrará al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva del inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones.

De acuerdo con esta descripción, la pérdida de las células ciliadas externas puede ser inducida por un traumatismo acústico, tales como, por ejemplo, exposición a ruidos fuertes, envejecimiento, enfermedades (incluida la hipertensión y la diabetes), fármacos ototóxicos, traumatismo craneoencefálico, tumores, exposición a explosión, enfermedad autoinmune del oído interno, causas idiopáticas, infecciones virales o bacterianas.

Breve descripción de las figuras

La Figura 1 es un conjunto de histogramas que muestran el efecto de la aplicación del compuesto de setrón sobre la actividad de la calcineurina fosfatasa después de 4 DIV. (A) Ondansetrón, (B) Granisetrón, (C) Tropisetrón, (D) Ramosetrón y (E) Azasetrón. * significancia p < 0,05.

Figura 2 es un conjunto de histogramas que muestran los umbrales de respuesta auditiva del tronco encefálico (ABR) registrados para los 6 grupos de tratamiento al inicio del estudio (A), 24 horas después de la inducción del traumatismo acústico (B) y 14 días después del traumatismo acústico (C).

La Figura 3 es un conjunto de histogramas que muestran las amplitudes de las emisiones otoacústicas del producto de distorsión (DPOAE) determinadas para los 6 grupos de tratamiento al inicio del estudio (A), 24 horas después de la inducción del traumatismo acústico (B) y 14 días después del traumatismo acústico (C).

La Figura 4 es un histograma que muestra el cambio de umbral de ABR desde el inicio del estudio a D14 para todos los grupos de tratamiento.

La Figura 5 es un histograma que muestra la recuperación del umbral ABR desde 24 horas después del traumatismo acústico hasta D14 para todos los grupos de tratamiento.

La Figura 6 es un histograma que muestra la pérdida de amplitud de DPOAE desde el inicio del estudio hasta D14 para todos los grupos de tratamiento.

La Figura 7 es un histograma que muestra la recuperación de la amplitud de DPOAE desde 24 horas después del traumatismo acústico hasta D14 para todos los grupos de tratamiento.

La Figura 8 es un gráfico que muestra la pérdida media de células ciliadas externas como una función de la distancia normalizada desde el ápice para los grupos tratados con placebo, granisetrón, tacrolimus o azasetrón en cócleas fijadas en D14 después de un traumatismo acústico.

EJEMPLOS

La presente invención se ilustra además mediante los ejemplos siguientes.

Ejemplo 1: Inhibición in vitro de la actividad de la calcineurina por compuestos de setrón

Cultivo de células

Las células granulares cerebelosas se disociaron del cerebelo de crías de rata Wistar de 7 días como se describe en (Kramer y otros, 2003. Mol Cell Neurosci. 23 (2): 325-30). Brevemente, se retiraron los cerebelos, se enjuagaron en HBSS-BSA, se trituraron, se digirieron con tripsina al 0,025 % y se incubaron a 37 °C durante 15 minutos. Para detener la digestión, se añadió DMEM que contenía suero fetal bovino al 10 %; luego se obtuvo una suspensión de células individuales pipeteando hacia arriba y hacia abajo el tejido sedimentado. Seguido de la centrifugación, las células se contaron mediante el uso de una prueba de exclusión con azul tripán en una cámara Burker. Este método se basa en la capacidad de las células viables para excluir el azul tripán debido a sus membranas celulares intactas, dejándolas sin teñir mientras que las células no viables absorben el tinte. Se sembraron células a 3.2 * 105/cm2 en medio DMEM Hepes modificado, suplementado con suero fetal bovino al 10 %, 100 pg/ml de piruvato y 100 pg/ml de gentamicina en placas de poliestireno de 12 pocillos de cultivo tisular (CELLSTAR) recubiertas con poli-L-lisina. Después de 24 horas, se añadió arabinofuranósido de citosina 10 pM para inhibir el crecimiento de células no neuronales. Todas las intervenciones farmacológicas comenzaron en este momento en el medio de cultivo que contenía KCl (K25) 25 mM, lo que provocó la despolarización de las células granulares y consecuentemente activó la maquinaria de expresión génica. Además, la viabilidad de las neuronas granulares fue mayor en este medio y, por lo tanto, proporciona la posibilidad de mantener las células durante varios días. De hecho, se requiere KCl 25 mM en el medio para que los cultivos de CGN mantengan la actividad de calcineurina adecuada y la maduración y despolarización celular (Kramer y otros, 2003. Mol Cell Neurosci. 23(2): 325-30; Vallano y otros, 2006. Neuropharmacology. 50(6): 651-60).

Los cultivos recibieron medio simple (control K25) o medio que contenía un compuesto de setrón en forma de sal de HCl (Tocris Bioscience, Bristol, Reino Unido) a concentraciones de 10 nM, 100 nM o 1000 nM durante 4 días in vitro (DIV).

Ensayo de actividad de calcineurina

La actividad de fosfatasa de la calcineurina se evaluó en CGN mediante el uso de un kit de ensayo colorimétrico basado en la cuantificación del complejo verde formado entre el verde de malaquita, el molibdato y el fosfato libre liberado. Los CGN se separaron de las placas raspando, se enjuagaron en solución tampón tris (TBS) helada y se contaron. Aproximadamente 10 millones de células se lisan en 1 ml del tampón de lisis proporcionado y se centrifugaron a 150000 xg a 4 °C durante 45 minutos, y el sobrenadante se almacenó a -70 °C hasta el análisis. Antes del ensayo de actividad de calcineurina, el fosfato y los nucleótidos libres se eliminaron del extracto celular mediante filtración en gel. Para asegurar la eliminación completa del fosfato, se añadió el reactivo verde de malaquita, que volverá el color verde en presencia de fosfato. Se añadió un sustrato de calcineurina específico a los extractos celulares libres de fosfato y, tras un período de incubación apropiado, se aplicó el reactivo verde de malaquita. La rápida formación de color verde de la reacción se midió en un espectrofotómetro. El color desarrollado es proporcional a la actividad de la calcineurina fosfatasa de las muestras. Los valores de absorbancia, leídos a 620 nm, se transformaron en porcentaje de actividad de calcineurina con relación al tratamiento de control K25 (100 %). Para cada tratamiento, se evalúan cinco cultivos independientes y cada muestra se procesa por triplicado.

Estadística

El análisis estadístico se realizó mediante el uso de un ANOVA de una vía seguido de la prueba post-hoc de Tukey para comparaciones múltiples. Los resultados se dan como media ± DE y con un valor de p menor o igual a 0,05 considerado significativo.

Resultados

Como se muestra en la Figura 1, el ondansetrón HCl, el tropisetrón HCl, el ramosetrón HCl y el azasetrón HCl inhibieron significativamente la actividad de la calcineurina fosfatasa, mientras que el granisetrón HCl no tuvo ningún efecto. Para el ondansetrón HCl y el tropisetrón HCl, la inhibición de la calcineurina fue significativa de 10-1000 nM, para el ramosetrón HCl a 100 y 1000 nM, mientras que el efecto inhibidor de calcineurina del azasetrón HCl solo alcanzó significancia a 1000 nM debido a una mayor variabilidad tanto de las condiciones de control como de prueba para esta ejecución de ensayo en particular. La inhibición de la calcineurina aumentó en diferente grado al aumentar las concentraciones de tropisetrón HCl, ramosetrón HCl y azasetrón HCl, mientras que a la inversa disminuyó al aumentar la concentración del ondansetrón HCl. Esto demuestra que la inhibición de la calcineurina por los compuestos de la familia de los setrones es compuesto específico y no un efecto de clase.

Ejemplo 2: Tratamiento in vivo de la pérdida auditiva inducida por traumatismos acústicos mediante compuestos de setrón

Animales

Todos los experimentos se realizaron mediante el uso de ratas Wistar macho de 7 semanas (CERJ, Le Genest, Francia) de acuerdo con las regulaciones del Ministerio de Agricultura francés y la Directiva del Consejo de la Comunidad Europea no. 86/609/CEE, OJL 358. Las ratas se alimentaron con una dieta estándar ad libitum y se mantuvieron en un ciclo de luz-oscuridad de 12 horas.

Audiometría

Las respuestas auditivas del tronco encefálico (ABR) y las emisiones otoacústicas de productos de distorsión (DPOAE) se registraron mediante el uso de una estación de trabajo auditiva RZ6 (Tucker-Davis Technologies, Alachua, FL, EE. UU.) Con animales profundamente anestesiados con 90 mg/kg de ketamina y 10 mg/kg de xilacina y colocados sobre una almohadilla térmica recirculante a 35 °C dentro de un cubículo de atenuación del sonido (Med Associates Inc., St. Albans, VT, EE.UU.) durante todo el experimento.

Para las grabaciones ABR, se colocaron subdérmicamente tres electrodos de aguja de acero inoxidable sobre el vértice, la mastoides derecha y la pata trasera derecha de cada animal. Tone-pips (5 ms de duración presentada a una velocidad de 21/s) a 8, 16 y 24 kHz, se administraron al oído derecho mediante el uso de un altavoz MF-1 calibrado en configuración de campo cerrado (Tucker-Davis Technologies, Alachua, FL, EE. UU.) con intensidad atenuada hasta que no pueda registrarse una respuesta reproducible. Cerca del umbral ABR, se promediaron las respuestas a 1000 estímulos acústicos en etapas de 5 dB. Las respuestas se filtraron en paso bajo a 3 kHz.

Los DPOAE se grabaron mediante el uso de ER10B micrófono DPOAE de bajo ruido (Etymotic Research, Inc., Elk Grove Village, IL, EE. UU.) con estímulos acústicos emitidos por dos altavoces MF-1 calibrados en configuración de campo cerrado (Tucker-Davis Technologies, Alachua, FL, EE.UU). Los DPOAE se registraron a niveles de estímulo fijos (L1 = L2 = 70 dB SPL), con una relación f2/f1 de 1,2. Las respuestas se registraron a 4, 8, 16, 24 y 32 kHz.

Traumatismo acústico

Los animales fueron expuestos a un ruido de banda de octava de 121 dB (8-16 kHz) durante 2 horas en grupos de 4 ratas, colocados en compartimentos individuales de una jaula circular hecha a medida colocada en una plataforma de 30 cm de diámetro que giraba a 3 vueltas/minuto (Aqila Innovación, Valbonne, Francia). El ruido de banda de octava calibrado generado por el software RZ6 SigGen fue amplificado aún más por un amplificador Crown D-75 en modo puente (Crown Audio, Elkhart, IN, EE. UU.) y entregado por cuatro tweeters de compresión Beyma CP16 (Acustica Beyma SL, Moncada, Valencia, España) colocados a 39 cm por encima de la plataforma giratoria, cada uno a 10 cm del centro de la plataforma.

Tratamiento con fármaco

Los animales se trataron mediante inyección intraperitoneal diaria durante 14 días comenzando inmediatamente después de la inducción del traumatismo acústico y subsecuentemente se repitió cada 24 horas. Los compuestos de setrón granisetrón HCl, ondansetrón HCl, tropisetrón HCl y azasetrón HCl (Tocris Bioscience, Bristol, Reino Unido) se administraron disueltos en solución salina (1,6 ml/kg) mientras que el Tacrolimus (Selleck Chemicals, Houston, TX, EE. UU.) se disolvió en una solución compuesta 10 % de etanol-100 %/10 % Kolliphor EL/1 % Tween 80/79 % salina (1,0 ml/kg). Los animales tratados con placebo recibieron inyecciones de 1,6 ml/kg de solución salina siguiendo el mismo programa de tratamiento.

Histología

Después de la audiometría el día 14, los animales fueron profundamente anestesiados con una inyección intraperitoneal de pentobarbital (100 mg/kg). Se retiraron las cócleas, se fijaron con paraformaldehído al 4 %, pH 7,4, se descalcificaron con EDTA al 10 %, pH 7,4 y luego se tiñeron con miosina VIIa 1/1000. Las células ciliadas internas y externas (IHC y OHC) se observaron con la ayuda de un Zeiss AxiolmagerZ1/Apotome(Zeiss, Francia) y se contaron en segmentos de epitelio sensorial de 0,20 mm de largo desde el ápice hasta la base para obtener un cocleograma. Subsecuentemente se calculó la pérdida media de COH por grupo en función de la distancia normalizada desde el ápice en contenedores del 2,5 % de la longitud total, mediante el uso de la longitud total de cada muestra histológica. Los recuentos de células pueden obtenerse de manera confiable hasta el 90 % de la distancia total desde el ápice (correspondiente a la región tonotópica hasta de 0 kHz a -50 kHz en ratas, Viberg y Canlon, 2004. Hear Res. 197(1-2): 1-10), mientras que el último 10 % fue demasiado variable debido a los daños sufridos durante la disección.

Estadística

El análisis estadístico se realizó mediante el uso de un ANOVA de dos vías (datos de audiometría: frecuencia y grupo de tratamiento. Cocleogramas: distancia normalizada desde el ápice y grupo de tratamiento) seguido de la prueba post-hoc de Holm-Sidak para comparaciones múltiples. Los resultados se dan como media ± SEM y el valor de p menor o igual a 0,05 se considera significativo.

Resultados

La capacidad de tres compuestos de setrón inhibidores de la calcineurina (azasetrón HCl, 4,22 mg/kg, ondansetrón HCl, 4 mg/kg y tropisetrón HCl, 3,5 mg/kg) y un compuesto de setrón sin efecto inhibidor de calcineurina (granisetrón HCl, 3,8 mg/kg) para reducir la pérdida auditiva después de un traumatismo acústico en dosis equimolares se compararon con el efecto de un inhibidor de calcineurina de referencia (tacrolimus, 1,5 mg/kg) en condiciones aleatorias y controladas con placebo. Se realizó una audiometría de línea de base (medidas ABR y DPOAE) para cada animal 3 días antes de que se indujera el traumatismo acústico. Subsecuentemente, se repitieron las medidas de audiometría 24 horas y 14 días después del traumatismo acústico.

Las Figuras 2 y 3 ilustran las medidas de audiometría (umbrales ABR y amplitudes DPOAE) determinadas para todos los grupos de tratamiento al inicio del estudio, 24 horas y 14 días después del traumatismo acústico. Para umbrales ABR superiores a 90 dB, se atribuyó un valor máximo de 95 dB. Seguido de la audiometría al inicio del estudio, se observó un fuerte cambio de umbral ABR positivo (hasta -70 dB) para todos los grupos acompañado de una pérdida severa de amplitud de DPOAE en todas las frecuencias, lo que significa una transmisión de la señal auditiva fuertemente reducida y una reducción de la función amplificadora de las células ciliadas externas. A los 14 días después del traumatismo acústico, las funciones auditivas mejoraron diferencialmente entre los grupos de tratamiento y en todas las frecuencias: Los umbrales de ABR mejoraron por ~7-33 dB y amplitudes DPOAE por —0-17 dB. En comparación con los animales tratados con placebo, el grupo tratado con azasetrón HCl mostró tendencialmente mejores resultados auditivos en todas las frecuencias y el grupo tratado con tacrolimus y ondansetrón HCl mostró una mejora en algunas frecuencias, mientras que los grupos tratados con granisetrón HCl o tropisetrón HCl tuvieron tendencialmente peores umbrales de ABR y Amplitudes de DPOAE que el grupo placebo. Tenga en cuenta que de 11 animales tratados con tacrolimus, 5 murieron entre el inicio del tratamiento y el final del estudio (solo 6 animales completaron el estudio) mientras que solo 2 animales de 30 se perdieron para los otros 5 grupos combinados (debido a complicaciones de la anestesia). Esto subraya aún más la posibilidad de que se produzcan efectos adversos seguido del tratamiento repetido con inhibidores de la calcineurina clásicos.

Cuantificar y comparar la diferencia en los efectos del tratamiento entre los grupos mientras se tiene en cuenta el inicio del estudio individual y la variabilidad del trauma, la pérdida auditiva (cambio de umbral ABR y pérdida de amplitud de DPOAE) en D14 con relación a al inicio del estudio, así como también la recuperación funcional auditiva a partir de las 24 horas a D14 (cambio de umbral ABR y pérdida de amplitud DPOAE) se determinaron para todos los grupos de tratamiento.

El grupo tratado con azasetrón HCl tuvo ambos cambios de umbral ABR significativamente más bajos en el día 14 (Figura 4, p = 0,003) y mejor recuperación del umbral de ABR desde las 24 horas hasta el día 14 (Figura 5, p < 0,001) en comparación con placebo, mientras que el grupo tratado con ondansetrón HCl tuvo un cambio de umbral ABR más bajo en el día 14 (Figura 4) en comparación con el placebo (sin alcanzar significación). Los grupos tratados con granisetrón HCl y tropisetrón HCl mostraron fuertes tendencias hacia cambios de umbral ABR más altos (Figura 4) y disminución del umbral de recuperación. El tratamiento con el inhibidor específico de la calcineurina tacrolimus, no tuvo un efecto importante sobre las medidas del umbral de ABR.

En comparación con el grupo tratado con placebo, el tratamiento con azasetrón HCl resultó en una pérdida significativamente reducida de amplitudes de DPOAE (p <0,001) desde el inicio del estudio hasta el día 14 (Figura 6) así como también una recuperación significativamente mejor de las amplitudes de DPOAE (p <0,001) desde las 24 horas posteriores al trauma hasta el día 14 (Figura 7), sugiriendo una reducción de la pérdida de células ciliadas externas en la cóclea. Mientras hubo una tendencia hacia una reducción de la pérdida de amplitud de DPOAE y una mejor recuperación en los grupos tratados con ondansetrón HCl y tacrolimus en algunas frecuencias, esto no alcanzó significación estadística. Tampoco lo hizo la tendencia hacia una mayor pérdida de amplitud de DPOAE y una recuperación reducida después del tratamiento con granisetrón HCl o tropisetrón HCl.

Para soportar aún más las conclusiones de los datos de audiometría funcional, se determinó la pérdida de células ciliadas externas en cuatro grupos de tratamiento mediante la construcción de citococleogramas a partir de preparaciones histológicas de cócleas fijadas después de la audiometría el día 14.

De acuerdo con la pérdida significativamente reducida de amplitudes de DPOAE después del tratamiento con azasetrón HCl, este grupo también mostró una pérdida media significativamente menor (Figura 8) de las células ciliadas externas (OHC, la fuente de las señales DPOAE) en comparación con el placebo (p <0,05). Ni el granisetrón HCl ni los grupos tratados con tacrolimus fueron significativamente diferentes del placebo.

En conjunto, los datos demuestran un efecto de tratamiento significativo y fuerte del azasetrón, miembro de la familia del setrón, que inhibe la calcineurina, y tendencias similares para el ondansetrón, sobre las medidas funcionales e histológicas de la pérdida auditiva inducida por ruido.

De hecho, en comparación con el tratamiento con placebo, los cambios en los umbrales de ABR inducidos por el tratamiento con azasetrón se redujeron en -35-60 % (para el tratamiento con ondansetrón, -10-30 %), pérdida de amplitud DPOAE por ~60 % (para ondansetrón -10-30 %) y la pérdida media de células ciliadas externas por -50-75 %.

Por el contrario, el granisetrón (un compuesto de setrón sin efecto inhibidor de calcineurina) y el tropisetrón tuvieron un impacto negativo en los cambios del umbral de ABR (-17-40 % mayor cambio de umbral en el día 14 que el placebo) una tendencia hacia peores amplitudes de DPOAE y pérdida de OHC. El tratamiento con el inhibidor específico de la calcineurina, tacrolimus, mostró tendencias hacia la mejora de la pérdida de amplitud de DPOAE en algunas frecuencias, pero no tuvo efecto sobre los cambios del umbral ABR en esta pérdida auditiva realista (cambios iniciales graves del umbral de hasta 70 dB) y el tratamiento (los tratamientos solo se iniciaron después de la sobreexposición acústica) paradigma. Por el contrario, con los resultados publicados previamente con inhibidores específicos de la calcineurina mediante el uso de un paradigma de pérdida auditiva más leve (-cambios de umbral ABR iniciales de 10 dB), el inicio del tratamiento antes del traumatismo acústico o ambos (Uemaetomari y otros, 2005. Hearing Res. 209(1-2): 86-90; Bas y otros, 2009. Acta Otolaryngol. 129(4): 385-9).

En conclusión, estos datos demuestran efectos protectores significativos del tratamiento con azasetrón, un miembro de la familia del setrón inhibidor de calcineurina, con tendencias similares para el ondansetrón en un modelo de pérdida auditiva neurosensorial grave (incluso superando al inhibidor específico de la calcineurina, tacrolimus), mientras que el granisetrón, un miembro de la familia del setrón, que carece de la capacidad de inhibir la calcineurina, no tuvo efectos o incluso deletéreos sobre los resultados auditivos. Estos datos soportan el uso de miembros de la familia del setrón que inhiben la calcineurina, en particular el azasetrón y el ondansetrón, en el tratamiento de la pérdida auditiva neurosensorial. Las mejoras significativas del umbral de ABR determinadas para el grupo tratado con azasetrón corresponden a una "mejora marcada hasta la recuperación completa" en comparación con sólo una "mejoría leve" para el grupo de placebo, de acuerdo con los criterios audiológicos clínicos típicos (Furuhashi y otros, 2002. Clin Otolaryngol Allied Sci. 27(6): 458-63). De manera similar, los datos de investigaciones clínicas recientes han demostrado que la preservación o mejora temprana de las respuestas DPOAE (un efecto significativo del tratamiento con azasetrón) es altamente predictiva de una mejora significativa a largo plazo de la capacidad auditiva en pacientes que sufren pérdida auditiva neurosensorial súbita idiopática (Shupaky otros, 2014. Otol Neurotol. 35(10): 1691-7).

Claims (11)

REIVINDICACIONES

1. Un inhibidor de calcineurina de la familia de los setrones para usar en el tratamiento de la pérdida auditiva neurosensorial en un sujeto que lo necesite, en donde la pérdida auditiva neurosensorial es pérdida auditiva neurosensorial idiopática, pérdida auditiva neurosensorial inducida por ruido, pérdida auditiva neurosensorial relacionada con la edad o pérdida auditiva neurosensorial inducida por fármacos ototóxicos, y en donde dicho inhibidor de calcineurina es azasetrón o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

2. El inhibidor de calcineurina para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicha pérdida auditiva neurosensorial es una disminución auditiva de al menos 20 dB en al menos tres frecuencias contiguas.

3. El inhibidor de calcineurina para usar de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde dicha pérdida auditiva neurosensorial es sordera total.

4. El inhibidor de calcineurina para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde dicha pérdida auditiva neurosensorial es unilateral o bilateral.

5. El inhibidor de calcineurina para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde dicha pérdida auditiva neurosensorial es una pérdida auditiva neurosensorial repentina.

6. El inhibidor de calcineurina para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde dicha pérdida auditiva neurosensorial es una pérdida auditiva neurosensorial inducida por ruido.

7. El inhibidor de calcineurina para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde dicha pérdida auditiva neurosensorial es una pérdida auditiva neurosensorial inducida por fármacos ototóxicos, y en donde el fármaco ototóxico que induce la pérdida auditiva neurosensorial se selecciona del grupo que consiste en aminoglucósidos, agentes quimioterapéuticos, diuréticos de asa, antimetabolitos y salicilatos.

8. El inhibidor de calcineurina para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde dicho sujeto se ve afectado por una pérdida auditiva neurosensorial durante menos de 7 días

9. El inhibidor de calcineurina para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en donde dicho inhibidor de calcineurina debe administrarse sistémicamente, administrarse tópicamente o inyectarse intratimpánicamente.

10. El inhibidor de calcineurina para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde dicho inhibidor de calcineurina debe administrarse de 1 a 3 veces al día.

11. El inhibidor de calcineurina para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en donde dicho inhibidor de calcineurina debe administrarse durante al menos 30 días.