JP7044294B2 - 音響外傷難聴モデル動物の作製用の音響暴露装置 - Google Patents
音響外傷難聴モデル動物の作製用の音響暴露装置 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7044294B2 JP7044294B2 JP2017181755A JP2017181755A JP7044294B2 JP 7044294 B2 JP7044294 B2 JP 7044294B2 JP 2017181755 A JP2017181755 A JP 2017181755A JP 2017181755 A JP2017181755 A JP 2017181755A JP 7044294 B2 JP7044294 B2 JP 7044294B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- acoustic
- sound
- khz
- deafness
- model animal
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Landscapes
- Measurement Of The Respiration, Hearing Ability, Form, And Blood Characteristics Of Living Organisms (AREA)
Description
[2] 前記周波数が、1kHz~32kHzのいずれかの周波数を中心とするオクターブバンドである、[1]に記載の音響暴露装置。
[3] 前記周波数が、4kHz~16kHzのいずれかの周波数を中心とするオクターブバンドである、[1]又は[2]に記載の音響暴露装置。
[4] 前記音圧レベルが、125dB~150dBである、[1]~[3]のいずれか1項に記載の音響暴露装置。
[5] 前記音響発生装置が少なくとも2つの外部出力装置を有する、[1]~[4]のいずれか1項に記載の音響暴露装置。
本明細書において、「音響外傷難聴モデル動物」とは、音響負荷によって聴覚に障害が生じた動物であって、音響負荷が課されていない同一種の動物と比較して聴覚が低下した動物をいう。
音響外傷難聴モデル動物の難聴の程度を評価する方法については、公知の方法を用いることができ、例えば、聴性脳幹反応(Auditory Brain-stem Response:ABR)や、耳音響放射(Otoacoustic emission:OAE)を調べることにより評価することができる。
本発明により、ヒトへの臨床応用にも適用可能な研究を実施可能な音響外傷難聴モデル動物を、再現性よく提供可能となる。音響外傷難聴モデル動物の作製方法は、以下の工程を含んでいる。
本発明により、音響外傷難聴モデル動物が提供される。提供された音響外傷難聴モデル動物は、特に治療等を行わない限り、一定期間聴力が回復せず、難聴状態を維持するものであって、左右の難聴レベルにほとんど差が無い音響外傷難聴モデル動物である。そのため、従来の音響外傷難聴モデル動物で課題となっていた、左右の難聴レベルの差異に起因する陰影聴取による測定誤差が少なく、正確な聴力測定を可能とする。
聴力正常のコモンマーモセット(2~9歳、日本クレア)を用いた。イソフルラン3~5%と、三種混合筋注麻酔(メデトメジン 40μg/kg、ミダゾラム 0.4mg/kg、ブトルファノール 0.40mg/kg)で導入し、人工呼吸器で挿管管理した個体を、防音箱内に入れて音響暴露装置下に置いた。音響暴露にはPDBT35/パイルドライバー社製スピーカーを使用し、音響条件1)単一スピーカーによる8kHz中心124dBオクターブバンド、音響条件2)2つのスピーカーによる8kHz中心130dBオクターブバンドの二つの音響条件で、3時間暴露した。音響暴露中のコモンマーモセットの心拍数、経皮的血中酸素飽和度、直腸音、呼気中二酸化炭素濃度・イソフルラン濃度をモニターした。音響曝露には以下の装置を用いた。
・スピーカー:パイルドライバー社製 PDBT35
・ラック(高さ12cm×横20cm×奥行15cm)
・直径3mmの針金(スピーカーをラックに固定、位置調整用)
・バンドノイズ発生装置:RION オージオメーター AA-67N
・パワーアンプ:XLS 1502(AMCRON(登録商標))
音響外傷の機能評価として、以下の機器と手順により、音響暴露前後のABR(図2)及びDPOAE(図3)を検出した。
・ABR測定・音響発生装置(TDT(登録商標)MF1,RP2.1,PA5,RA16)
・スピーカー(TDT(登録商標)ED1)鼓膜より1cmに設置
・音刺激:クリック音:0.1msec pulses
トーンバースト音:1.0msec duration
・解析ソフト:BioSigRPにて得られた波形を解析した。
・測定プローブ:ER-10C(Etymotic Research)
・測定音響信号のデジタル化:RP2.1(TDT(登録商標))
・Microphone Amplifier(バイオリサーチ社に委託し作成)
・波形取得解析用PC:Dell Optilex 3020
・波形解析ソフト:LabViewにて国際医療福祉大学原田竜彦先生により作成。
組織学的に評価するために、音響暴露後のコモンマーモセットからコルチ器を採取して、抗myo7a抗体を用いて免疫染色を行い、蝸牛有毛細胞数を定量した(図4~図6)。以下に手順を具体的に示す。
(2)組織固定・・・正円窓、卵円窓より4%パラホルムアルデヒド溶液を注入し、50mlコニカルチューブ内で4%パラホルムアルデヒド溶液内で4℃にて2日間留置した。
(3)脱灰・・・内耳は骨組織で覆われているため、脱灰を要する。固定後のサンプルをEDTA(0.5mM)溶液に入れ替え、室温で3週間脱灰した。
(4)組織採取・・・脱灰した骨包を取り外し、蝸牛のコルチ器を採取した。
(5)免疫染色・・・蝸牛有毛細胞マーカーであるMyo7aを、マウス産生抗Myo7a抗体(Developmental Studies Hybridoma Bank、Antibody ID:AB_2282417)と、ドンキー産生抗マウスIgG抗体(ライフテクノロジーズ社、カタログ番号:A21202)を用いて免疫染色を行った。
(6)組織観察・・・免疫染色後はコンフォーカル顕微鏡(ZEISS LSM880)にて観察し画像撮影を行った。
(7)画像解析・・・画像解析ソフトImageJを用いて、細胞数をカウントした。
また、行動解析として録画・録音による発語数・種類を以下の機器を用いて記録した。
・録音機器:マイクロフォンAT9913(オーディオテクニカ社)を用いて録音録画を同時に実施した。
音響条件1)を負荷した2体のコモンマーモセットでは、1体でABR閾値の大きな変動を認め、恒久的閾値上昇が認められたが、1体は一過性閾値上昇に留まっていた。他方、音響条件2)では、安定したABRでの恒久的閾値上昇と、DPOAEレベル低下・閾値上昇が得られ(図2及び3)、蝸牛有毛細胞の減少(図4~6)、発語数の変化・低下も確認された(表1)。
10 音響発生装置
11 音響増幅装置
12 外部出力装置
13 アーム
20 ラック
30 気管内チューブ
31 人工呼吸器
40 プローブ
41 パルオキシメーター
S 音響外傷難聴モデル動物
Claims (5)
- 1kHz~32kHzの周波数を有する、100dB~150dBの音圧レベルの音響を発生させる音響発生装置を具備し、
前記音響発生装置が2つの外部出力装置を有し、
前記2つの外部出力装置が、音響外傷難聴モデル動物の外耳道入口部の位置に配置されることを特徴とする、音響外傷難聴モデル動物の作製用の音響暴露装置。 - 前記2つの外部出力装置が吊り下げられるラック、又は、前記2つの外部出力装置を自立させるスタンドをさらに具備する、請求項1に記載の音響暴露装置。
- 前記周波数が、1kHz~32kHzのいずれかの周波数を中心とするオクターブバンドである、請求項1又は2に記載の音響暴露装置。
- 前記周波数が、4kHz~16kHzのいずれかの周波数を中心とするオクターブバンドである、請求項1~3のいずれか1項に記載の音響暴露装置。
- 前記音圧レベルが、125dB~150dBである、請求項1~4のいずれか1項に記載の音響暴露装置。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2017181755A JP7044294B2 (ja) | 2017-09-21 | 2017-09-21 | 音響外傷難聴モデル動物の作製用の音響暴露装置 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2017181755A JP7044294B2 (ja) | 2017-09-21 | 2017-09-21 | 音響外傷難聴モデル動物の作製用の音響暴露装置 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019056844A JP2019056844A (ja) | 2019-04-11 |
JP7044294B2 true JP7044294B2 (ja) | 2022-03-30 |
Family
ID=66106302
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017181755A Active JP7044294B2 (ja) | 2017-09-21 | 2017-09-21 | 音響外傷難聴モデル動物の作製用の音響暴露装置 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP7044294B2 (ja) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005089802A1 (ja) | 2004-03-24 | 2005-09-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Il-6アンタゴニストを有効成分として含有する内耳障害治療剤 |
JP2011037738A (ja) | 2009-08-08 | 2011-02-24 | Chube Univ | 難聴又は耳鳴りの予防・治療剤 |
WO2016184900A1 (en) | 2015-05-18 | 2016-11-24 | Sensorion | Calcineurin inhibitors of the setron family for the treatment of hearing loss |
-
2017
- 2017-09-21 JP JP2017181755A patent/JP7044294B2/ja active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005089802A1 (ja) | 2004-03-24 | 2005-09-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Il-6アンタゴニストを有効成分として含有する内耳障害治療剤 |
JP2011037738A (ja) | 2009-08-08 | 2011-02-24 | Chube Univ | 難聴又は耳鳴りの予防・治療剤 |
WO2016184900A1 (en) | 2015-05-18 | 2016-11-24 | Sensorion | Calcineurin inhibitors of the setron family for the treatment of hearing loss |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Hearing Research,Elsevier,2017年07月08日,vol.353,pp.213-223 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2019056844A (ja) | 2019-04-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Moller | Hearing: its physiology and pathophysiology | |
Longenecker et al. | Development of tinnitus in CBA/CaJ mice following sound exposure | |
Brittan-Powell et al. | The auditory brainstem response in two lizard species | |
US20130303941A1 (en) | Method and Apparatus for Evaluating Dynamic Middle Ear Muscle Activity | |
Galazyuk et al. | Long-lasting forward suppression of spontaneous firing in auditory neurons: implication to the residual inhibition of tinnitus | |
Lasky et al. | The development of the auditory system from conception to term | |
Linnenschmidt et al. | Ontogeny of auditory brainstem responses in the bat, Phyllostomus discolor | |
Jones et al. | Concurrent development of the head and pinnae and the acoustical cues to sound location in a precocious species, the chinchilla (Chinchilla lanigera) | |
McFadden et al. | Onset and development of auditory brainstem responses in the Mongolian gerbil (Meriones unguiculatus) | |
May et al. | Impairments of the medial olivocochlear system increase the risk of noise-induced auditory neuropathy in laboratory mice | |
Saunders et al. | Brain-stem evoked responses as an index of hearing thresholds in one-day-old chicks and ducklings. | |
Guinan Jr et al. | Altered mapping of sound frequency to cochlear place in ears with endolymphatic hydrops provide insight into the pitch anomaly of diplacusis | |
Frisina et al. | Auditory sensitivity and the outer hair cell system in the CBA mouse model of age-related hearing loss | |
JP7044294B2 (ja) | 音響外傷難聴モデル動物の作製用の音響暴露装置 | |
JP6999896B2 (ja) | 音響外傷難聴モデル動物の作製方法及びそれにより作製される音響外傷難聴モデル動物 | |
Aitkin et al. | Development of hearing and vocalization in a marsupial, the Northern Quoll, Dasyurus hallucatus | |
Buchwald et al. | The feline isolation call | |
Venker-van Haagen | Ear, nose, throat, and tracheobronchial diseases in dogs and cats | |
Maltby | A Dictionary of Audiology | |
Irvine | Effects of reflex middle-ear muscle contractions on cochlear responses to bone-conducted sound | |
Brandt et al. | Demonstration of a portable system for auditory brainstem recordings based on pure tone masking difference | |
Suresh et al. | Frequency-following response to steady-state vowel in quiet and background noise among marching band participants with normal hearing | |
Suthakar | Changes to the descending auditory system in hearing loss: focus on auditory efferents | |
Kurnaz et al. | Evaluation of cochlear implant users’ performance using middle and late latency responses | |
Zhao et al. | Functional Change in the Caudal Pontine Reticular Nucleus Induced by Age‐Related Hearing Loss |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200901 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20210714 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210727 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210921 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20211109 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20211215 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220222 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220307 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7044294 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |