ES2750642A1

ES2750642A1 - Composición farmacéutica que comprende proteína amiloide P de suero para tratar la insuficiencia renal aguda o crónica

Info

Publication number: ES2750642A1
Application number: ES201800212A
Authority: ES
Inventors: Aroeira Luiz Guilherme Stark; Carrera Andrea Fernandez
Original assignee: Universidade de Vigo
Current assignee: Universidade de Vigo
Priority date: 2018-09-26
Filing date: 2018-09-26
Publication date: 2020-03-26

Abstract

Medicamentos que contienen proteína amiloide P de suero para prevenir el desarrollo de la fibrosis. La invención se refiere a una solución acuosa estéril para la diálisis peritoneal que comprende proteína amiloide P de suero, electrólitos y uno o más agentes osmóticos para el tratamiento de pacientes con fallo renal sometidos a la diálisis peritoneal. De esta manera la solución cumple la función de las soluciones de diálisis, además de reducir el déficit de ultrafiltración y el deterioro de la membrana peritoneal causados por la exposición a las soluciones de diálisis.

Description

DESCRIPCIÓN

Composición farmacéutica que comprende proteína amiloide P de suero para tratar la insuficiencia renal aguda o crónica.

Sector de la técnica

La presente invención se refiere a una solución hipertónica que comprende proteína amiloide P de suero, electrolitos y uno o más agentes osmóticos para el tratamiento de pacientes con fallo renal sometidos a la diálisis peritoneal.

Antecedentes de la invención

La diálisis peritoneal es una terapia sustitutiva del riñón, donde la membrana peritoneal se utiliza como una membrana semipermeable. Esta técnica consiste en la administración, en la cavidad peritoneal, de una solución hiperosmótica, que genera un gradiente osmótico entre la sangre y cavidad peritoneal, a través de la membrana peritoneal. De esta forma se consigue eliminar el exceso de líquido y metabolitos hacia la cavidad peritoneal. Después de un periodo de tiempo la solución de diálisis es sustituida por una nueva. A pesar de las ventajas de la diálisis peritoneal frente a la hemodiálisis, solo el 10% de los pacientes mundiales con insuficiencia renal es tratado con diálisis peritoneal. Esto puede ser explicado por el hecho de que la continua exposición a las soluciones de diálisis provoca el deterioro de la membrana peritoneal y la pérdida de la función dializante.

El agente osmótico más utilizado es la glucosa, por ser económico y seguro. Las soluciones de diálisis convencionales tienen altas concentraciones de glucosa y los productos de degradación de la glucosa (GDP), lactato y bajo pH son irritantes para la membrana peritoneal y tiene efectos negativos a nivel sistémico. A nivel local, la exposición a las soluciones de diálisis reduce la viabilidad de las células mesoteliales, inflamación de bajo grado, angiogénesis (formación de nuevos vasos sanguíneos) y fibrosis. Ésta última causa el engrosamiento de la membrana peritoneal. Estas alteraciones morfológicas de la membrana peritoneal conducen hacia la pérdida parcial de la función dializante, que causa la transferencia del paciente a hemodiálisis.

Además, a nivel sistémico, la pérdida parcial de la función dializante de la membrana peritoneal lleva a una mayor absorción de la glucosa, que afecta a su estado nutricional, y provoca retención de líquidos, lo que lleva a una sobrecarga cardíaca y aumento de riesgo cardiovascular (García-López, E., Lindholm, B., Davies, S. "An update on peritoneal dialysis SolutionsNat Rev Nephrol 8(4): 224-33. (2012)).

Actualmente se busca mejorar la biocompatibilidad de las soluciones de diálisis sustituyendo la glucosa como agente osmótico, para disminuir los niveles de GDP. Actualmente se están comercializando soluciones de diálisis cuyos agentes osmóticos son aminoácidos (soluciones sin GDP) o icodextrina (solución con bajos niveles de GDP). La ausencia o disminución del GDP hacen que estas soluciones sean más fisiológicas. Sin embargo, algunos inconvenientes impiden su utilización como única solución de diálisis, teniendo que ser alternada con soluciones de glucosa. La solución con aminoácidos tienen menor poder osmótico que la glucosa y fue desarrollada para un intercambio diario en pacientes malnutridos. Además del elevado coste y su utilización continuada puede llevar a un aumento de la uremia y acidosis. La icodextrina es absorbida más lentamente que la glucosa siendo recomendada para intercambios largos y para pacientes con fallo de ultrafiltración. Sin embargo, la acumulación de metabolitos circulantes de icodextrina, el aumento del riesgo de peritonitis aséptica y las alergias restringen su utilización apenas a un intercambio diario.

Las soluciones de diálisis peritoneal que utilizan la glucosa como agente osmótico también han mejorado su biocompatibilidad. Esto es gracias a la utilización de sistemas con más de una cámara, que permite separar el tampón de la glucosa, y que ha permitido la reducción de la concentración de GDP y la utilización de pH próximo a la neutralidad en las soluciones de última generación. Estas nuevas soluciones de diálisis son más fisiológicas, mejorando la viabilidad de la membrana peritoneal, causando menor inflamación y mejorando la inmunidad peritoneal. En modelos animales las soluciones con baja concentración de GDP inducen menor producción de VEGF, sugiriendo una menor angiogénesis. Por estas características éstas son consideradas soluciones biocompatibles. Sin embargo, no está claro que la utilización de las soluciones con bajo GDP aumenten la supervivencia del paciente o la efectividad de la terapia (García-López, E., Lindholm, B., Davies, S. "An update on peritoneal dialysis Solutions." Nat Rev Nephrol 8(4): 224-33. (2012)). La utilización de las soluciones de diálisis peritoneal biocompatibles supone un aumento en los costes de la terapia, limitando el acceso a estas soluciones de diálisis en los países más pobres.

Las soluciones biocompatibles no están exentas de problemas. La utilización de soluciones con bajos niveles de GDP y pH neutro está relacionada con un déficit de ultrafiltración que es transitorio. Pacientes tratados con líquidos bajos en GDP tienen mayor transporte de pequeños solutos y menor ultrafiltración (Bajo, MA. et al., "Low- GDP peritoneal dialysis fluid ('balance') has less impact in vitro and ex vivo on epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) of mesothelial cells than a standard fluid." Nephrol Dial Transplant. 26(1): 282-91 (2010) y Fernández-Perpen, A. et al. "Influence of bicarbonate/low-GDP peritoneal dialysis fluid (BicaVera) on in vitro and ex vivo epithelial-to-mesenchymal transition of mesothelial cells" Perit Dial Int. 32(3): 292-304. (2012). Con esto la terapia no funciona bien, causando una mayor absorción de glucosa y acumulación de líquido en el paciente.

La diálisis promueve la migración de los macrófagos a la cavidad peritoneal, potenciando la inflamación e inmunidad, que previene las infecciones. Por otro lado, los macrófagos reclutados a los lugares de inflamación secretan grandes cantidades de TGF-p, que causa fibrosis. En modelos experimentales de fibrosis en riñón (Kang, YS. et al., “CCR2 antagonism improves insulin resistance, lipid metabolism, and diabetic nephropathy in type 2 diabetic mice”. Kidney Int. 78:883-94. (2010); Kitagawa K, et al., “Blockade of CCR2 ameliorates Progressive fibrosis in kidney”. Am J Pathol. 165(1):237-46. (2004).), hígado (Karlmark KR, et al., “Hepatic recruitment of the inflammatory Gr1+ monocyte subset upon liver injury promotes hepatic fibrosis." Hepatology. 50(1):261-74. (2009)) y corazón (Xu J et al., “CCR2 mediates the uptake of bone marrow-derived fibroblast precursors in angiotensin ll-induced cardiac fibrosis". Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 301(2):H538-4. (2011)), se ha observado que la reducción de la actividad del TGF-p previene el desarrollo de la fibrosis. Por lo tanto, otra forma de prevenir la fibrosis peritoneal sería a través de la regulación de los mecanismos resultantes de la señalización por TGF-p. En este sentido, la utilización de la proteína amiloide P de suero en las soluciones de diálisis podría prevenir el desarrollo de la fibrosis peritoneal.

Las soluciones de diálisis en el mercado, convencionales o de última generación presentan deficiencias que pueden comprometer tanto la terapia como la calidad y la vida de los pacientes. De esta forma, es necesario el desarrollo de nuevas soluciones de diálisis peritoneal que solucionen o mejoren las deficiencias del estado de la técnica. Varias pruebas han buscado mejorar la ultrafiltración o prevenir el deterioro de la membrana peritoneal (JP4379636; USP 6214802; USP 6342500; USP 6753341; USP 6803363; WO 00/53013; WO 201107630 A1; ES2382513B2). En la presente invención se ha desarrollado una nueva solución de diálisis peritoneal que mejora o previene las deficiencias de las otras soluciones descritas en el estado de la técnica, prolongando el tiempo de estancia de los pacientes en DP y posteriormente su calidad de vida.

Explicación de la invención

La invención se refiere a una solución hipertónica que comprende proteína amiloide P de suero, electrolitos y uno o más agentes osmóticos para el tratamiento de pacientes con fallo renal sometidos a la diálisis peritoneal. De esta manera la solución cumple la función de las soluciones de diálisis, además de reducir el déficit de ultrafiltración y el deterioro de la membrana peritoneal causados por la exposición a las soluciones de diálisis.

Por lo tanto, un aspecto esencial de la presente invención se refiere a una solución para la diálisis peritoneal que comprende los siguientes elementos:

a) agua:

b) al menos un electrolito;

c) al menos una solución tampón;

d) al menos un agente osmótico;

e) una proteína amiloide P de suero.

En una realización preferida, los electrolitos Na+, K+, Mg2+, Ca2+, CI- de diferentes sales o cualquier combinación de los mismos. Donde la concentración de los electrolitos varía entre: a) Na 50-200 mmol/l

b) K 0-4 mmol/l

c) Mg 0-2 mmol/l

d) Ca 0,5-3 mmol/l

e) Cl 50-200 mmol/l.

En otra realización preferida, la solución tampón pude ser lactato, bicarbonato, la combinación de los mismos o L-histidina.

En otra realización preferida, el agente osmótico de la solución de diálisis peritoneal, utilizado para remover el exceso de líquido y metabolitos de la sangre se selecciona entre glucosa, polímero de glucosa, manitol, glicerol, aminoácidos, péptidos, polipéptidos, albúmina o cualquier combinación de los mismos con osmolaridad entre 100 y 700 mosm/l.

Otro aspecto esencial de la presente invención se refiere al uso de la solución de diálisis para la elaboración de un medicamento. Una realización se refiere al uso de la solución de diálisis para la elaboración de un medicamento para la prevención y/o tratamiento de enfermedades renales.

Una realización se refiere al uso de la solución de diálisis para la elaboración de un medicamento para la prevención y/o tratamiento de enfermedades renales.

Otra realización preferida se refiere al uso de la solución de diálisis para la elaboración de un medicamento para la prevención y/o tratamiento del déficit de ultrafiltración.

Otra realización preferida se refiere al uso de la solución de diálisis para la elaboración de un medicamento para la prevención y/o tratamiento del alto transporte de la membrana peritoneal.

Otra realización preferida se refiere al uso de la solución de diálisis para la elaboración de un medicamento para la prevención y/o tratamiento del deterioro de la membrana peritoneal.

Otra realización preferida se refiere al uso de la solución de diálisis para la elaboración de un medicamento para la prevención y/o tratamiento del engrosamiento de la membrana peritoneal.

Otra realización preferida se refiere al uso de la solución de diálisis para la elaboración de un medicamento para la prevención y/o tratamiento de la insuficiencia renal.

La solución de diálisis de la presente invención es administrada de una a cuatro veces al día en un volumen de 1 a 3 litros por dosis. La solución es administrada a pacientes que sufren insuficiencia renal de acuerdo a los métodos normalmente utilizados para realizar diálisis peritoneal.

Breve descripción de los dibujos

Figura 1: compara el efecto del tratamiento con la nueva solución de diálisis (SD2) frente a la convencional más dañina (SD1).

Figura 2: Cuantificación del deterioro de la membrana peritoneal de los ratones tratados con los diferentes líquidos de diálisis.

Realización preferente de la invención

Los siguientes ejemplos ilustran la presente invención. Sin embargo, estos ejemplos no son limitativos. Tienen carácter informativo y en ningún caso se limitan a las metodologías empleadas, las cuales pueden ser alteradas con el fin de alcanzar unos resultados similares.

Ejemplo

Modelo de exposición de la membrana peritoneal de ratón a las soluciones de diálisis peritoneal. Ratones C57BL/6j no urémicos, hembras, de 12 a 16 semanas de edad fueron adquiridos en Charles River (Barcelona) y mantenidos en un animalario convencional. A través de microcirugía, se instaló un catéter con un puerto subcutáneo (minute mice port, Access Technologies, Skokie, IL) en la cavidad peritoneal de los ratones, como se ha descrito anteriormente (González-Mateo, GT, Perit Dial Int. 2009; 29:227-30). La solución de diálisis (2 ml) es instilada en la cavidad peritoneal a través del puerto subcutáneo todos los días del experimento. Utilizamos dos tipos de soluciones de diálisis que presentan características de las soluciones comercializadas. La solución de diálisis 1 (SD1) corresponde a una solución convencional con pH bajo y altos niveles de GDP. La solución SD2 es una solución convencional de convencional con pH bajo, altos niveles de GDP y que contiene la proteína amiloide P de suero.

Determinación del deterioro de la membrana peritoneal

El deterioro de la membrana peritoneal fue determinado por el engrosamiento de la membrana peritoneal. Para ello, después de 30 días de exposición a la solución de diálisis los ratones fueron sacrificados y se extrajeron biopsias de la membrana peritoneal, que fueron fijadas en solución de Bouin e incluidas en parafina. Las biopsias se cortaron a 5 pm y fueron teñidas con hematoxilina y eosina. El grosor de la membrana peritoneal se determinó por microscopía directa, utilizando el microscopio directo Nikon eclipse (Nikon, Tokio, Japón) con el software NIS-Elements D versión 4.30.02 de Nikon. La medida de cada individuo se determinó por la mediana de las mediciones obtenidas a cada 50 pm bajo el objetivo de 20X.

Recogida y análisis de los datos

Cada experimento se realizó con cinco ratones por grupo por lo menos. Los resultados se expresaron en gráficos de cajas, donde se representan los tres cuartiles y los valores mínimo y máximo de los datos. Para el análisis de los datos utilizamos la prueba no paramétrica Mann-Whitney U test.

Para el estudio de correlación se utilizó la correlación de Spearman. Todos los análisis se realizaron utilizando Prism 5 (GraphPad Software, Inc., La Jolla, USA).

Resultados

La utilización de soluciones convencionales SD1 (bio-incompatible) y con bajo niveles de GDP conlleva a un deterioro de la membrana peritoneal caracterizada por una mayor inflamación y fibrosis, lo que provoca el engrasamiento de la membrana peritoneal (Figura 1). Los ratones tratados con SD2 presentan menor inflamación del tejido y un menor grosor de la membrana peritoneal que los ratones tratados con la SD1 (Figura 1). La cuantificación del grosor de la membrana está mostrada en la Figura 2. Los resultados demuestran que los dos líquidos de diálisis testados promueven el engrosamiento de la membrana peritoneal cuando comparamos con los controles, no tratados. Sin embargo, el engrosamiento de la membrana peritoneal fue mayor en los ratones tratados con SD1 que los tratados con SD2.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Solución de diálisis que contiene proteína amiloide P de suero, caracterizado que comprende los siguientes elementos:

a) agua

b) al menos un electrolito;

b) al menos una solución tampón;

c) al menos un agente osmótico;

d) proteína amiloide P de suero.

2. Solución de diálisis que contiene proteína amiloide P de suero según reivindicación 1, donde los electrolitos se seleccionan del siguiente grupo formado por: los electrolitos Na+, K+ Mg2+, Ca2+, Cl- o cualquier combinación de los mismos.

3. Solución de diálisis que contiene proteína amiloide P de suero según reivindicación 2, donde cada electrolito tiene el siguiente rango de concentraciones: Na 50-200 mmol/l; K 0-4 mmol/l; Mg 0-2 mmol/l; Ca 0,5-3 mmol/l; Cl 50-200 mmol/l.

4. Solución de diálisis que contiene proteína amiloide P de suero, según reivindicaciones 1 a 3, donde la solución tampón se selecciona entre lactato, bicarbonato, la combinación de los mismos o L-histidina en la concentración adecuada.

5. Solución de diálisis que contiene proteína amiloide P de suero, según reivindicaciones 1 a 4, donde el agente osmótico se selecciona del grupo formado por glucosa, polímero de glucosa, manitol, glicerol, aminoácidos, péptidos, polipéptidos, albúmina o cualquier combinación de los mismos con osmolaridad entre 100 y 700 mosm/l.

6. Solución de diálisis que contiene proteína amiloide P de suero según reivindicaciones 1 a 5, donde la concentración de proteína amiloide P de suero puede variar entre 0,1 pg a 1mg/ml de la solución.

7. Solución de diálisis que contiene proteína amiloide P de suero según reivindicaciones 1 a 6, y que podrá contener además un antagonista de CCR2.

8. Solución de diálisis que contiene al menos un antagonista de CCR2 según las reivindicaciones 1 a 7, donde el antagonista de CCR2 se selecciona entre compuestos orgánicos de germanio tales como propagermanio, espirogermanio y polímero de ácido 3-Oxigermilpropiónico.

9. Uso de la solución de diálisis que contiene proteína amiloide P de suero para la elaboración de un medicamento.

10. Uso de la solución de diálisis que contiene proteína amiloide P de suero para la elaboración de un medicamento para la prevención y/o tratamiento de enfermedades renales.

11. Uso de la solución de diálisis que contiene proteína amiloide P de suero para la elaboración de un medicamento para la prevención y/o tratamiento del déficit de ultrafiltración.

12. Uso de la solución de diálisis que contiene proteína amiloide P de suero para la elaboración de un medicamento para la prevención y/o tratamiento del deterioro de la membrana peritoneal.

13. Uso de la solución de diálisis que contiene proteína amiloide P de suero para la elaboración de un medicamento para la prevención y/o tratamiento del fallo de ultrafiltración.