ES2745479T3 - Combinación que comprende un inhibidor de MEK y un inhibidor de B-raf - Google Patents

Abstract

Una combinación que comprende: (i) un compuesto de fórmula (I)**Fórmula** o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable de este; y (ii) un compuesto de fórmula (II)**Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

Description

DESCRIPCIÓN

Combinación que comprende un inhibidor de MEK y un inhibidor de B-raf

Campo de la invención

La presente divulgación se refiere a composiciones para su uso en un método de tratamiento del cáncer en un mamífero y a combinaciones útiles en tal tratamiento. En particular, la presente invención se refiere a una combinación novedosa que comprende el inhibidor de MEK W-{3-[3-ciclopropil-5-(2-fluoro-4-yodofenilamino)6,8-dimetil;-2,4,7-trioxo-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirido[4,3-a(]pirimidin-1-il]fenil}acetamida, o un solvato o sal farmacéuticamente aceptable de esta, con el inhibidor de B-Raf W-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida o una sal farmacéuticamente aceptable de esta, composiciones farmacéuticas que comprenden los mismos y tales combinaciones y composiciones para su uso en el tratamiento de afecciones en las que la inhibición de MEK y/o B-Raf resulta beneficiosa, p. ej., el cáncer.

Antecedentes de la invención

El tratamiento eficaz de trastornos hiperproliferativos, incluido el cáncer, es un objetivo continuado en el campo de la oncología. Por lo general, el cáncer es el resultado de la desregulación de los procesos normales que controlan la división celular, la diferenciación y la muerte celular apoptótica y se caracteriza por la proliferación de células malignas que tienen el potencial de crecimiento ilimitado, expansión local y metástasis sistémica. La desregulación de los procesos normales incluye anomalías en las vías de transducción de señales y la respuesta a factores que difieren de los que se encuentran en las células normales.

Una gran familia de enzimas importantes es la familia de enzimas de las proteína-cinasas. Actualmente, existen aproximadamente 500 proteína-cinasas conocidas diferentes. Las proteína-cinasas sirven para catalizar la fosforilación de una cadena lateral de un aminoácido en varias proteínas mediante la transferencia del Y -fosfato del complejo ATP-Mg2+ a dicha cadena lateral del aminoácido. Estas enzimas controlan la mayoría de los procesos de señalización dentro de las células, con lo que gobiernan la función, crecimiento, diferenciación y destrucción (apoptosis) de las células mediante la fosforilación reversible de los grupos hidroxilo de los residuos de serina, treonina y tirosina en las proteínas. Varios estudios han demostrado que las proteína-cinasas son reguladores clave de muchas funciones celulares, que incluyen la transducción de señales, regulación de la transcripción, motilidad celular y división celular. También se ha demostrado que varios oncogenes codifican proteína-cinasas, lo cual sugiere que las cinasas desempeñan ciertas funciones en la oncogénesis. Estos procesos están muy regulados, a menudo mediante vías entrecruzadas complejas en las que cada cinasa estará regulada a su vez por una o más cinasas. Como consecuencia, una actividad anómala o inadecuada de una proteína-cinasa puede contribuir al aumento de estados patológicos asociados con tal actividad anómala de la cinasa, incluidos trastornos proliferativos benignos y malignos, así como también enfermedades resultantes de la activación inadecuada del sistema nervioso e inmunitario. Debido a su relevancia fisiológica, variedad y presencia generalizada, las proteína-cinasas se han convertido en una de las familias de enzimas más importantes y más ampliamente estudiadas en la investigación médica y bioquímica.

La familia de enzimas de las proteína-cinasas se clasifican habitualmente en dos subfamilias principales: las cinasas de tirosinas de proteínas y las cinasas de serinas/treoninas de proteínas, en función del residuo aminoacídico que fosforilan. Las cinasas de serinas/treoninas de proteínas (PSTK, por sus siglas en inglés) incluyen proteína-cinasas dependientes de GMP cíclico y AMP cíclico, proteína-cinasas dependientes de fosfolípidos y calcio, proteínas-cinasas dependientes de calmodulina y calcio, caseína-cinasas, proteína-cinasas del ciclo de división celular y otras. Normalmente, estas cinasas son citoplasmáticas o están asociadas con fracciones particuladas de las células, posiblemente mediante el anclaje a proteínas. La actividad anómala de cinasas de serinas/treoninas de proteínas se ha relacionado o se sospecha que está presente en una serie de patologías tales como la artritis reumatoide, psoriasis, choque séptico, pérdida ósea, muchos tipos de cáncer y otras enfermedades proliferativas. Por consiguiente, las serina/treonina-cinasas y las vías de transducción de señales de las que forman parte son dianas importantes para el diseño de fármacos. Las tirosina-cinasas fosforilan residuos de tirosina. Las tirosina-cinasas desempeñan una función igualmente importante en la regulación celular. Estas cinasas incluyen varios receptores para moléculas tales como factores de crecimiento y hormonas, incluido el receptor del factor de crecimiento epidérmico, el receptor de la insulina, el receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas y otros. Varios estudios han indicado que muchas tirosinacinasas son proteínas de transmembrana con los dominios de sus receptores localizados en el exterior de la célula y sus dominios de cinasa en el interior. También se están realizando trabajos exhaustivos para identificar moduladores de tirosina-cinasas.

Estas tirosina-cinasas que son receptores (RTK, por sus siglas en inglés) catalizan la fosforilación de ciertos residuos aminoacídicos de tipo tirosilo en varias proteínas, incluidas ellas mismas, que gobiernan el crecimiento, la proliferación y la diferenciación celular.

Posteriormente a las RTK se encuentran varias vías de señalización, entre ellas la vía de cinasas Ras-Raf-MEK-ERK. Actualmente existe constancia de que la activación de las proteínas GTPasas Ras como respuesta a factores de crecimiento, hormonas, citocinas, etc. estimula la fosforilación y activación de las cinasas Raf. A continuación, estas cinasas fosforilan y activan las proteína-cinasas intracelulares MEK1 y MEK2, las cuales a su vez fosforilan y activan otras proteínas-cinasas, ERK1 y 2. Esta vía de señalización, también conocida como cascada citoplasmática o vía de proteína-cinasas activada por mitógeno (MAPK, por sus siglas en inglés), media las respuestas celulares frente a señales de crecimiento. La función principal de esta consiste en conectar la actividad de los receptores en la membrana celular con la modificación de dianas citoplasmáticas o nucleares que gobiernan la proliferación, diferenciación y supervivencia de las células.

La activación constitutiva de esta vía es suficiente para inducir la transformación celular. Se ha observado frecuentemente en cánceres humanos una activación desregulada de la vía de la cinasa MAP debida a la activación anómala de tirosina-cinasas que son receptores, mutaciones en Ras o mutaciones en Raf, y representa un factor importante a la hora de determinar el control anómalo del crecimiento. En neoplasias humanas, las mutaciones en Ras son habituales y se han identificado en aproximadamente un 30% de los cánceres. La familia Ras de proteínas GTP-asas (proteínas que convierten el trifosfato de guanosina en difosfato de guanosina) transfieren señales desde receptores de factores de crecimiento activados hasta sus parejas intracelulares que se encuentra en un punto posterior. Entre las dianas captadas por Ras activas unidas a la membrana, destaca la familia Raf de cinasas de serinas/treoninas de proteínas. La familia Raf se compone de tres cinasas relacionadas (Raf A, B y C) que actúan como efectores posteriores de Ras. La activación de Raf mediada por Ras desencadena a su vez la activación de MEK1 y MEK2 (cinasas MAP / ERK 1 y 2), las cuales a su vez fosforilan ERK1 y ERK2 (cinasas reguladas por señales extracelulares 1 y 2) en la tirosina-185 y la treonina-183. Las cinasas ERK1 y ERK2 activadas se trasladan y acumulan en el núcleo, donde pueden fosforilar varios sustratos, incluidos los factores de transcripción que controlan el crecimiento y la supervivencia celular. Dada la importancia de la vía de Ras /Raf / MEK / ERK en el desarrollo de cánceres humanos, los componentes de tipo cinasa de la cascada de señalización están surgiendo como dianas potencialmente importantes para la modulación de la evolución de la enfermedad en el cáncer y otras enfermedades proliferativas.

MEK1 y MEK2 son miembros de una familia más grande de cinasas de especificidad dual (MEK1-7) que fosforilan residuos de treonina y tirosina de varias cinasas MAP. MEK1 y MEK2 están codificadas por diferentes genes, pero comparten una homología elevada (80%) tanto con los dominios de cinasa catalíticos C-terminales como con la mayoría de la región reguladora N-terminal. No se han encontrado formas oncogénicas de MEK1 ni MEK2 en cánceres humanos, pero se ha demostrado que la activación constitutiva de MEK provoca una transformación celular. Además de Raf, MEK también puede ser activada por otro oncogén. Hasta ahora, los únicos sustratos conocidos de MEK1 y MEK2 son ERK1 y ERK2. Esta especificidad inusual por el sustrato, además de la capacidad única de fosforilar residuos tanto de tirosina como de treonina, sitúa a MEK1 y MEK2 en un punto crítico en la cascada de transducción de señales que les permite integrar muchas señales extracelulares en la vía de MAPK.

Por consiguiente, se ha reconocido que un inhibidor de una proteína de la vía de cinasas MAPK (p. ej., MEK) debería ser valioso tanto como agente antiproliferativo como proapoptótico y antiinvasivo para su uso en la contención y/o el tratamiento de una enfermedad proliferativa o invasiva.

Además, también existe constancia de que un compuesto que tenga actividad inhibidora de MEK induce de forma eficaz la inhibición de la actividad de ERK1/2 y la supresión de la proliferación celular (The Journal of Biological Chemistry, vol. 276, N ° 4 págs. 2686-2692, 2001) y cabe esperar que el compuesto muestre efectos sobre enfermedades provocadas por una proliferación celular no deseada tales como el cáncer y/o la génesis de tumores.

Se ha identificado que mutaciones en varias GTPasas Ras y la cinasa B-Raf pueden provocar una activación sostenida y constitutiva de la vía de MAPK, provocando en última instancia un incremento de la supervivencia y la división celular. Como consecuencia de ello, estas mutaciones se han relacionado estrechamente con el establecimiento, desarrollo y evolución de una amplia gama de cánceres humanos. La función biológica de las cinasas Raf, y específicamente la de B-Raf, en la transducción de señales se describe en Davies, H. et al., Nature (2002) 9:1-6; Garnett, M.J. y Marais, R., Cancer Cell (2004) 6:313-319; Zebisch, A. y Troppmair, J., Cell. Mol. Life Sci. (2006) 63:1314-1330; Midgley, R.S. y Kerr, D.J., Crit. Rev. Onc/Hematol. (2002) 44:109-120; Smith, R.A. et al., Curr. Top. Med. Chem. (2006) 6:1071-1089; y Downward, J., Nat. Rev. Cancer(2003) 3:11-22.

Se han encontrado mutaciones de origen natural de la cinasa B-Raf que activan la señalización de la vía de MAPK en un elevado porcentaje de melanomas humanos (Davies (2002) supra) y cánceres de tiroides (Cohen et al. J. Nat. Cancer Inst. (2003) 95(8) 625-627 y Kimura et al. Cancer Res. (2003) 63(7) 1454-1457), así como también con frecuencias más bajas, aunque aún significativas, en los siguientes casos:

adenocarcinoma de Barret (Garnett et al., Cancer Cell (2004) 6313-319 y Sommerer et al. Oncogene (2004) 23(2) 554-558), carcinomas del tracto biliar (Zebisch et al., Cell. Mol. Life Sci. (2006) 631314-1330), cáncer de mama (Davies (2002) supra), cáncer cervical (Moreno-Bueno et al. Clin. Cáncer Res. (2006) 12(12) 3865-3866), colangiocarcinoma (Tannapfel et al. Gut (2003) 52(5) 706-712), tumores del sistema nervioso central, que incluyen tumores primarios del SNC tales como glioblastomas, astrocitomas y ependimomas (Knobbe et al. Acta Neuropathol. (Berl.) (2004) 108(6) 467-470, Davies (2002) supra y Garnett et al., Cancer Cell (2004) supra) y tumores secundarios del SNC (es decir, metástasis en el sistema nervioso central de tumores originados fuera del sistema nervioso central), cáncer colorrectal, incluido el carcinoma de colon e intestino grueso (Yuen et al. Cancer Res. (2002) 62(22) 6451-6455, Davies (2002) supra y Zebisch et al., Cell. Mol. Life Sci. (2006), cáncer gástrico (Lee et al. Oncogene (2003) 22(44) 6942-6945), carcinoma de cuello y cabeza, incluido el carcinoma de células escamosas de cuello y cabeza (Cohen et al. J. Nat. Cancer Inst. (2003) 95(8) 625-627 y Weber et al. Oncogene (2003) 22(30) 4757-4759), cánceres hematológicos incluidas las leucemias (Garnett et al., Cancer Cell (2004) supra, en particular la leucemia linfoblástica aguda (Garnett et al., Cancer Cell (2004) supra y Gustafsson et al. Leukemia (2005) 19(2) 310-312), leucemia mielógena aguda (LMA) (Lee et al. Leukemia (2004) 18(1) 170-172 y Christiansen et al. Leukemia (2005) 19(12) 2232-2240), síndromes mielodisplásicos (Christiansen et al. Leukemia (2005) supra) y leucemia mielógena crónica (Mizuchi et al. Biochem. Biophys. Res. Commun. (2005) 326(3) 645-651); linfoma hodgkiano (Figl et al. Arch. Dermatol. (2007) 143(4) 495-499) y linfoma no hodgkiano (Lee et al. Br. J. Cancer (2003) 89(10) 1958-1960), leucemia megacarioblástica (Eychene et al. Oncogene (1995) 10(6) 1159-1165) y mieloma múltiple (Ng et al. Br. J. Haematol. (2003) 123(4) 637-645), carcinoma hepatocelular (Garnett et al., Cancer Cell (2004), cáncer de pulmón (Brose et al. Cancer Res. (2002) 62(23) 6997-7000, Cohen et al. J. Nat. Cancer Inst. (2003) supra y Davies (2002) supra), incluido el cáncer de pulmón de células microcíticas (Pardo et al. EMBO J. (2006) 25(13) 3078-3088) y el cáncer de pulmón de células no microcíticas (Davies (2002) supra), cáncer de ovario (Russell y McCluggage J. Pathol. (2004) 203(2) 617-619 y Davies (2002) supra), cáncer endométrico (Garnett et al., Cancer Cell (2004) supra y Moreno-Bueno et al. Clin. Cancer Res. (2006) supra), cáncer pancreático (Ishimura et al. Cancer Lett. (2003) 199(2) 169-173), adenoma pituitario (De Martino et al. J. Endocrinol. Invest. (2007) 30(1) RC1-3), cáncer de próstata (Cho et al. Int. J. Cancer (2006) 119(8) 1858-1862), cáncer renal (Nagy et al. Int. J. Cancer (2003) 106(6) 980-981), sarcoma (Davies (2002) supra) y cánceres de piel (Rodriguez-Viciana et al. Science (2006) 311 (5765) 1287-1290 y Davies (2002) supra). La sobreexpresión de c-Raf se ha relacionado con la LMA (Zebisch et al., Cancer Res. (2006) 66(7) 3401-3408 y Zebisch (Cell. Mol. Life Sci. (2006)) y la eritroleucemia (Zebisch et al., Cell. Mol. Life Sci. (2006).

Como resultado de la función desempeñada por las cinasas de la familia Raf en estos cánceres y de estudios exploratorios con una serie de agentes preclínicos y terapéuticos, incluido uno dirigido selectivamente a la inhibición de la actividad de la cinasa B-Raf (King A.J. et al., (2006) Cancer Res. 66:11100-11105), se acepta generalmente que los inhibidores de una o más cinasas de la familia Raf serán útiles para el tratamiento de tales cánceres u otras afecciones asociadas con la cinasa Raf.

La mutación de B-Raf también se ha relacionado con otras afecciones, incluido el síndrome cardiofaciocutáneo (Rodriguez-Viciana et al. Science (2006) 311 (5765) 1287-1290) y la enfermedad renal poliquística (Nagao et al Kidney Int. (2003) 63(2) 427-437).

Existe constancia de que las combinaciones de inhibidores de MEK con inhibidores de B-raf son útiles en el tratamiento del cáncer (WO 2008/120004). El inhibidor de MEK específico de fórmula (I) según se divulga en la presente se describe, por ejemplo, en el documento WO 2005/121142.

Aunque se han producido muchos avances recientes en el tratamiento del cáncer con compuestos tales como los inhibidores de MEK y B-Raf, sigue siendo necesario un tratamiento más eficaz y/o mejorado de un individuo que padece los efectos del cáncer.

Compendio de la invención

Los inventores de la presente han identificado una combinación de agentes quimioterapéuticos que proporciona una mayor actividad en comparación con la monoterapia. En particular, se describe la combinación de fármacos que incluye el inhibidor de MEK N-{3-[3-ciclopropil-5-(2-fluoro-4-yodofenilamino)6,8-dimetil-2,4,7-trioxo-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirido[4,3-d]pirimidin-1-il]fenil}acetamida, o un solvato o sal farmacéuticamente aceptable de esta,

combinada con el inhibidor de B-Raf N-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida o una sal farmacéuticamente aceptable de esta.

El inhibidor de MEK de la invención se representa mediante la estructura de fórmula (I):

o un solvato o sal farmacéuticamente aceptable de esta (a la que se hace referencia colectivamente en la presente como «compuesto A»).

El inhibidor de B-Raf de la invención se representa mediante la estructura de fórmula (II):

o una sal farmacéuticamente aceptable de esta (a la que se hace referencia colectivamente en la presente como «compuesto B»).

En un primer aspecto de la presente invención, se proporciona una combinación que comprende:

(i) un compuesto de fórmula (I):

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable de este;

y

(ii) un compuesto de fórmula (II)

o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

En otro aspecto de la invención, se proporciona una combinación que comprende N-(3-[3-ciclopropil-5-(2-fluoro-4-yodofenilamino)6,8-dimetil-2,4,7-trioxo-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirido[4,3-a]pirimidin-1-il]fenil}acetamida sulfóxido de dimetilo (solvato) y metanosulfonato de N-(3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida.

En otro aspecto de la presente invención, se proporciona una combinación que comprende:

(i) un compuesto de fórmula (I):

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable de este; y

(ii) un compuesto de fórmula (II):

o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en terapia.

En otro aspecto de la presente invención, se proporciona una combinación que comprende:

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable de este; y

(¡i) un compuesto de fórmula (II):

o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento del cáncer.

En otro aspecto de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende: I un compuesto de fórmula I:

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable de este; y

(¡I) un compuesto de fórmula (II):

o una sal farmacéuticamente aceptable de este junto con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable. En otro aspecto, se proporciona el uso de una combinación que comprende

I un compuesto de fórmula I

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable de este; y

(ii) un compuesto de fórmula (II):

o una sal farmacéuticamente aceptable de este en la elaboración de un medicamento para el tratamiento del cáncer.

También se describe una composición para su uso en un método de tratamiento del cáncer en un ser humano que lo necesite que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de una combinación de W-{3-[3-ciclopropil-5-(2-fluoro-4-yodofenilamino)6,8-dimetil-2,4,7-trioxo-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirido[4,3-a]pirimidin-1 -il]fenil}acetamida, o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable de esta, y W-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1 -dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida o una sal farmacéuticamente aceptable de esta.

También se describe una composición para su uso en un método de tratamiento del cáncer en un ser humano que lo necesite que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de una combinación de un solvato de W-{3-[3-c¡cloprop¡l-5-(2-fluoro-4-yodofen¡lam¡no)6,8-d¡met¡l-2,4,7-tr¡oxo-3,4,6,7-tetrah¡dro-2H-p¡r¡do[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-1-il]fenil}acetamida con sulfóxido de dimetilo y metanosulfonato de /V-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1 -dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida.

También se describe una composición para su uso en un método de tratamiento del cáncer en un mamífero que lo necesite que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de una combinación de la invención donde la combinación se administra dentro de un periodo específico y para una duración de tiempo.

Breve descripción de las figuras

La FIGURA 1 es una gráfica que muestra la inhibición del crecimiento del tumor debida a la administración del inhibidor de MEK que es el Compuesto A, el inhibidor de B-Raf que es el Compuesto B y la combinación de estos.

La FIGURA 2 es una gráfica que muestra la inhibición del crecimiento del tumor debida a la administración del inhibidor de MEK que es el Compuesto A, el inhibidor de B-Raf que es el Compuesto B y la combinación de estos.

Descripción detallada de la invención

Tal como se utiliza en la presente, el inhibidor de MEK W-{3-[3-c¡cloprop¡l-5-(2-fluoro-4-yodofen¡lam¡no)6,8-d¡met¡l-2,4,7-trioxo-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirido[4,3-a]pirimidin-1-il]fenil}acetamida, o un solvato o sal farmacéuticamente aceptable de esta, se representa mediante un compuesto de fórmula (I):

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable de este. Por conveniencia, el grupo del compuesto y los solvatos o sales posibles se denomina de forma colectiva Compuesto A, lo que significa que la referencia al Compuesto A se referirá a cualquiera de entre el compuesto o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable de este como alternativa.

Dependiendo de la convención de nomenclatura, el compuesto de fórmula (I) también se puede denominar adecuadamente W-{3-[3-c¡cloprop¡l-5-[(2-fluoro-4-yodofen¡l)am¡no]-6,8-d¡met¡l-2,4,7-tr¡oxo-3,4,6,7-tetrah¡drop¡r¡do[4,3-a]pirimidin-1(2H)-il]fenil}acetamida.

Tal como se utiliza en la presente, el inhibidor de B-Raf W-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de esta, se representa mediante un compuesto de fórmula (II):

o una sal farmacéuticamente aceptable de este. Por conveniencia, el grupo del compuesto y las sales posibles se denomina de forma colectiva Compuesto B, lo que significa que la referencia al Compuesto B se referirá a cualquiera de entre el compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable de este como alternativa.

La expresión «combinación de la invención», tal como se utiliza en la presente, se refiere a una combinación que comprende el Compuesto A y el Compuesto B.

El término «neoplasma», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un crecimiento anómalo de células o tejido y se sobreentiende que incluye crecimientos benignos, es decir, no cancerosos y crecimientos malignos, es decir, cancerosos. El término «neoplásico» significa o se refiere a un neoplasma.

Se sobreentiende que el término «agente», tal como se utiliza en la presente, significa una sustancia que produce un efecto deseado en un tejido, sistema, animal, mamífero, ser humano u otro sujeto. Por consiguiente, se sobreentiende que la expresión «agente antineoplásico» significa una sustancia que produce un efecto antineoplásico en un tejido, sistema, animal, mamífero, ser humano u otro sujeto. También se sobreentiende que un «agente» puede ser un compuesto único o una combinación o composición de dos o más compuestos.

El término «tratar» y derivados de este, tal como se utilizan en la presente, se refieren a una terapia terapéutica. Al hacer referencia a una afección particular, tratar significa: (1) mejorar la afección o una o más de las manifestaciones biológicas de la afección, (2) interferir con (a) uno o más puntos en la cascada biológica que provoca o es responsable de la afección o (b) una o más de las manifestaciones biológicas de la afección (3) aliviar uno o más de los síntomas, efectos o efectos secundarios asociados con la afección o uno o más de los síntomas, efectos o efectos secundarios asociados con la afección o el tratamiento de esta, o (4) ralentizar la evolución de la afección o una o más de las manifestaciones biológicas de la afección.

Se sobreentiende que la «prevención», tal como se utiliza en la presente, se refiere a la administración profiláctica de un fármaco para disminuir sustancialmente la probabilidad o gravedad de una afección o manifestación biológica de esta, o para retrasar el inicio de tal afección o manifestación biológica de esta. El experto apreciará que la «prevención» no es un término absoluto. La terapia profiláctica es adecuada, por ejemplo, cuando se considera que un sujeto corre un riesgo elevado de desarrollar cáncer, tal como cuando un sujeto tiene un marcado historial familiar de cáncer o cuando un sujeto ha sido expuesto a un carcinógeno.

La expresión «cantidad eficaz», tal como se utiliza en la presente, significa aquella cantidad de un fármaco o agente farmacéutico que provocará la respuesta biológica o médica de un tejido, sistema, animal o ser humano que está buscando, por ejemplo, un investigador o médico. Además, la expresión «cantidad terapéuticamente eficaz» significa cualquier cantidad que, en comparación con un sujeto correspondiente que no haya recibido tal cantidad, da como resultado un tratamiento, curación o prevención mejorados, o una mejora de una enfermedad, trastorno o efecto secundario, o una reducción en la velocidad de avance de una enfermedad o trastorno. La expresión también incluye dentro de su alcance cantidades eficaces para mejorar la función fisiológica normal.

Los Compuestos A y/o B pueden contener uno o más átomos quirales, o de otro modo pueden existir como enantiómeros. Por consiguiente, los compuestos de esta invención incluyen mezclas de enantiómeros, así como también enantiómeros purificados o mezclas enriquecidas enantioméricamente. Además, se sobreentiende que todos los tautómeros y mezclas de tautómeros se incluyen dentro del alcance del Compuesto A y el Compuesto B.

Además, se sobreentiende que los compuestos A y B se pueden presentar, por separado o ambos, como solvatos. El término «solvato», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un complejo de estequiometría variable formado por un soluto (en esta invención, los compuestos de fórmula (I) o (II) o una sal de estos y un disolvente. Tales disolventes, a los efectos de la invención, puede que no interfieran con la actividad biológica del soluto. Los ejemplos de disolventes adecuados incluyen, sin carácter limitante, agua, metanol, sulfóxido de dimetilo, etanol y ácido acético. En una realización, el disolvente utilizado es un disolvente farmacéuticamente aceptable. Los ejemplos de disolventes farmacéuticamente aceptables incluyen, sin carácter limitante, agua, etanol y ácido acético. En otra realización, el disolvente utilizado es agua.

Los Compuestos A y B pueden tener la capacidad de cristalizar en más de una forma, característica que se conoce como polimorfismo, y se sobreentiende que tales formas polimórficas («polimorfos») se encuentran dentro del alcance de los Compuestos A y B. Por lo general, el polimorfismo puede ocurrir como respuesta a cambios en la temperatura o presión o ambas y también puede ser el resultado de variaciones en el proceso de cristalización. Los polimorfos se pueden distinguir mediante varias características físicas conocidas en la técnica tales como patrones de difracción de rayos X, solubilidad y punto de fusión.

En el documento WO 2005/121142 se describe y reivindica que el Compuesto A, junto con sales farmacéuticamente aceptables de este y también como solvatos de este, es útil como inhibidor de la actividad de MEK, particularmente en el tratamiento del cáncer. El Compuesto A es el compuesto del Ejemplo 4-1. El Compuesto A se puede preparar según se describe en el documento WO 2005/121142.

Convenientemente, el Compuesto A se encuentra en forma de un solvato de sulfóxido de dimetilo. Convenientemente, el Compuesto A se encuentra en forma de una sal de sodio. Convenientemente, el Compuesto A se encuentra en forma de un solvato seleccionado entre: hidrato, ácido acético, etanol, nitrometano, clorobenceno, 1 -pentanol, alcohol isopropílico, etilenglicol y 3-metil-1 -butanol. Estos solvatos y formas salinas pueden ser preparados por un experto en la técnica a partir de la descripción que se encuentra el documento WO 2005/121142.

En la solicitud de patente de PCT PCT/US09/42682 se describe y reivindica que el Compuesto B, junto con sales farmacéuticamente aceptables de este, es útil como inhibidor de la actividad de B-Raf, particularmente en el tratamiento del cáncer. El Compuesto B está representado en los Ejemplos 58a - 58e de la solicitud. La solicitud de PCT se publicó el 12 de noviembre de 2009 como la publicación WO2009/137391.

Más concretamente, el Compuesto B se puede preparar de acuerdo con los métodos que se indican a continuación:

Método 1: Compuesto B (primera forma cristalina) - A/-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida

Una suspensión de W-{3-[5-(2-cloro-4-pirimidinil)-2-(1,1 -dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida (196 mg, 0.364 mmol) y amoniaco en metanol 7 M (8 ml, 56.0 mmol) se calentó en un tubo sellado hasta 90 °C durante 24 h. La reacción se diluyó con DCM, se le añadió gel de sílice y se concentró. El producto crudo se cromatografió en gel de sílice eluyendo con desde un 100% de DCM hasta [DCM:(EtOAc:MeOH 9:1)] 1:1. Las fracciones limpias se concentraron para proporcionar el producto crudo. El producto crudo se purificó de nuevo mediante HPLC de fase inversa (un gradiente de acetonitrilo:agua con un 0.1% de TFA en ambos). Las fracciones limpias combinadas se concentraron, a continuación se repartieron entre DCM y NaHCO3 saturado. La fase de DCM se separó y se secó con Na2SO4. Se obtuvo el compuesto del título, A/-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida (94 mg, 47% de rendimiento). 1H r Mn (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 10.83 (s, 1 H), 7.93 (d, J=5.2 Hz, 1 H), 7.55 - 7.70 (m, 1 H), 7.35 - 7.43 (m, 1 H), 7.31 (t, J=6.3 Hz, 1 H), 7.14 - 7.27 (m, 3 H), 6.70 (s, 2 H), 5.79 (d, J=5.13 Hz, 1 H), 1.35 (s, 9 H). MS (ESI): 519.9 [M+H]+.

Método 2: Compuesto B (forma cristalina alternativa) - A/-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida Se combinaron 19.6 mg de W-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida (se puede preparar de acuerdo con el ejemplo 58a) con 500 L de acetato de etilo en un vial de 2 mL a temperatura ambiente. La suspensión se sometió a ciclos de temperatura entre 0-40 °C durante 48 h. Se permitió que la suspensión resultante se enfriara hasta temperatura ambiente y se recolectaron los sólidos mediante filtración al vacío. Los sólidos se analizaron mediante análisis de Raman, DRXP, DSC/TGA, los cuales indicaron la presencia de una forma cristalina diferente de la forma cristalina resultante del Ejemplo 58a anterior.

Método 3: Compuesto B (forma cristalina alternativa, lote grande) - W-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil) 1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida

Paso A: 3-{[(2,6-difluorofenil)sulfonil]amino}-2-fluorobenzoato de metilo

Se introdujo 3-amino-2-fluorobenzoato de metilo (50 g, 1 eq) en un reactor seguido de diclorometano (250 mL, 5 vol). El contenido se agitó y se enfrió hasta ~15 °C, y se añadió piridina (26.2 mL, 1.1 eq). Tras la adición de la piridina, el contenido del reactor se ajustó hasta ~15 °C y se inició la adición de cloruro de 2,6-diflurorobencenosulfonilo (39.7 mL, 1.0 eq) mediante un embudo de adición. Durante la adición, la temperatura se mantuvo < 25 °C. Tras completar la adición, el contenido del reactor se calentó hasta 20-25 °C y se mantuvo durante toda la noche. Se añadió acetato de etilo (150 mL) y se eliminó el diclorometano mediante destilación. Una vez que se completó la destilación, la mezcla de reacción se diluyó a continuación una vez más con acetato de etilo (5 vol) y se concentró. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (10 vol) y agua (4 vol) y el contenido se calentó hasta 50-55 °C con agitación hasta que se disolvieron todos los sólidos. Se dejaron reposar las fases y se separaron. La fase orgánica se diluyó con agua (4 vol) y el contenido se calentó hasta 50-55 °C durante 20-30 min. Se dejaron reposar las fases y a continuación se separaron y la fase de acetato de etilo se evaporó a presión reducida hasta ~3 volúmenes. Se añadió acetato de etilo (5 vol.) y se evaporó de nuevo a presión reducida hasta ~3 volúmenes. A continuación, se añadió ciclohexano (9 vol) al reactor y el contenido se calentó hasta reflujo durante 30 min, a continuación se enfrió hasta 0 °C. Se filtraron los sólidos y se lavaron con ciclohexano (2 x 100 mL). Los sólidos se secaron al aire durante toda la noche para obtener 3-{[(2,6-difluorofenil)sulfonil]amino}-2-fluorobenzoato de metilo (94.1 g, 91%).

Paso B: N-{3-[(2-cloro-4-pirimidinil)acetil]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida

Se disolvió 3-{[(2,6-difluorofenil)sulfonil]amino}-2-fluorobenzoato de metilo (490 g, 1 eq.), preparado por lo general de acuerdo con el Paso A anterior, en THF (2.45 L, 5 vol) y se agitó y se enfrió hasta 0-3 °C. Se introdujo una solución 1 M de bis(trimetilsilil)amiduro de litio en THF (5.25 L, 3.7 eq.) en la mezcla de reacción seguida de la adición de 2-cloro-4-metilpirimidina (238 g, 1.3 eq.) en THF (2.45 L, 5 vol). A continuación, la reacción se agitó durante 1 h. La reacción se desactivó con HCl 4.5 M (3.92 L, 8 vol). La fase acuosa (fase inferior) se separó y se descartó. La fase orgánica se concentró a presión reducida hasta ~2 L. Se añadió IPAC (acetato de isopropilo) (2.45 L) a la mezcla de reacción, la cual se concentró a continuación hasta ~2 L. Se añadió IPAC (0.5 L) y MTBE (2.45 L) y se agitó durante toda la noche en atmósfera de N2. Se filtraron los sólidos. Se volvieron a combinar los sólidos y el filtrado madre y se agitaron durante varias horas. Los sólidos se filtraron y se lavaron con MTBE (~5 vol). Los sólidos se colocaron en un horno de vacío a 50 °C durante toda la noche. Los sólidos se secaron en un horno de vacío a 30 °C durante el fin de semana para obtener N-{3-[(2-cloro-4-pirimidinil)acetil]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobenzenosulfonamida (479 g, 72%).

Paso C: N-{3-[5-(2-cloro-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida

En un recipiente reactor, se introdujo N-{3-[(2-cloro-4-pirimidinil)acetil]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida (30 g, 1 eq) seguida de diclorometano (300 mL). La suspensión de la reacción se enfrió hasta ~10 °C y se añadió N-bromosuccinimida («NBS») (12.09 g, 1 eq) en 3 porciones aproximadamente iguales, agitando durante 10-15 minutos entre cada adición. Después de la adición final de NBS, la mezcla de reacción se calentó hasta ~20 °C y se agitó durante 45 min. A continuación, se añadió agua (5 vol) al recipiente de reacción y la mezcla se agitó y a continuación se separaron las fases. Se añadió agua (5 vol) de nuevo a la fase de diclorometano y la mezcla se agitó y se separaron las fases. Las fases de diclorometano se concentraron hasta ~120 mL. Se añadió acetato de etilo (7 vol) a la mezcla de reacción y se concentró hasta ~120 mL. A continuación, se añadió dimetilacetamida (270 mL) a la mezcla de reacción y se enfrió hasta ~10 °C. Se añadió 2,2-dimetilpropanotioamida (1.3 g, 0.5 eq) en 2 porciones iguales al contenido del reactor con agitación durante ~5 minutos entre las adiciones. La reacción se calentó hasta 20-25 °C. Después de 45 min, el contenido del recipiente se calentó hasta 75 °C y se mantuvo durante 1.75 horas. A continuación, la mezcla de reacción se enfrió hasta 5°C y se añadió lentamente agua (270 ml) manteniendo la temperatura por debajo de 30 °C. A continuación, se introdujo acetato de etilo (4 vol), se agitó la mezcla y se separaron las fases. Se introdujo de nuevo acetato de etilo (7 vol) en la fase acuosa y el contenido se agitó y se separó. Se introdujo de nuevo acetato de etilo (7 vol) en la fase acuosa y el contenido se agitó y se separó. Las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con agua (4 vol) 4 veces y se agitaron durante toda la noche a 20-25 °C. Las fases orgánicas se concentraron a continuación al vacío con calentamiento hasta 120 mL. A continuación, el contenido del recipiente se calentó hasta 50 °C y se añadieron heptanos (120 mL) lentamente. Tras la adición de los heptanos, el contenido del recipiente se calentó hasta reflujo, a continuación se enfrió hasta 0 °C y se mantuvo durante ~2 h. Los sólidos se filtraron y se lavaron con heptanos (2 x 2 vol). A continuación, el producto sólido se secó al vacío a 30 °C para obtener N-{3-[5-(2-cloro-4-pirimidinil)-2-(1,1 -dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida (28.8 g, 80%).

Paso D: N-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1 -dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida

En un reactor a presión de 1 gal, una mezcla de N-{3-[5-(2-cloro-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida (120 g), preparada de acuerdo con el Paso C anterior, e hidróxido de amonio (28-30%, 2.4 L, 20 vol) se calentó en el reactor a presión sellado hasta 98-103 °C y se agitó a esta temperatura durante 2 horas. La reacción se enfrió lentamente hasta temperatura ambiente (20 °C) y se agitó durante toda la noche. Los sólidos se filtraron, se lavaron con una cantidad mínima de las aguas madre y se secaron al vacío. Los sólidos se añadieron a una mezcla de EtOAc (15 vol)/ agua (2 vol) y se calentaron hasta obtener una disolución completa a 60­ 70 °C y la fase acuosa se separó y se descartó. Se añadió agua (1 vol) a la fase de EtOAC y esta se neutralizó con HCl ac. hasta un pH de ~5.4-5.5 y se añadió agua (1 vol). La fase acuosa se separó y se descartó a 60-70 °C. La fase orgánica se lavó con agua (1 vol) a 60-70 °C y la fase acuosa se separó y se descartó. La fase orgánica se filtró a 60 °C y se concentró hasta 3 volúmenes. Se introdujo EtOAc (6 vol) en la mezcla y se calentó y agitó a 72 °C durante 10 min, a continuación se enfrió hasta 20 °C y se agitó durante toda la noche. Se eliminó el EtOAc mediante destilación al vacío hasta concentrar la mezcla de reacción hasta ~3 volúmenes. La mezcla de reacción se mantuvo a ~65-70 °C durante ~30 min. Se introdujeron cristales del producto que tenían la misma forma cristalina que los preparados en el Ejemplo 58b (y que se pueden preparar mediante el procedimiento del Ejemplo 58b) anterior en una suspensión de heptanos. Se añadió heptano (9 vol) lentamente a 65-70 °C. La suspensión se agitó a 65-70 °C durante 2-3 horas y a continuación se enfrió lentamente hasta 0-5 °C. El producto se filtró, se lavó con EtOAc/heptano (3/1 v/v, 4 vol) y se secó a 45 °C al vacío para obtener N-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1 -dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida (102.3 g, 88%).

Método 4: Compuesto B (sal de mesilato) - metanosulfonato de N-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1 -dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida

A una solución de W-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida (204 mg, 0.393 mmol) en isopropanol (2 mL), se añadió ácido metanosulfónico (0.131 mL, 0.393 mmol) y se permitió que la solución se agitara a temperatura ambiente durante 3 horas. Se formó un precipitado blanco y la suspensión se filtró y se lavó con éter dietílico para obtener el producto del título como un sólido cristalino blanco (210 mg, 83% de rendimiento). 1H RMN (400 MHz, DMSO-06) 5 ppm 10.85 (s, 1 H) 7.92 - 8.05 (m, 1 H) 7.56 - 7.72 (m, 1 H) 6.91 - 7.50 (m, 7 H) 5.83 - 5.98 (m, 1 H) 2.18 - 2.32 (m, 3 H) 1.36 (s, 9 H). MS (ESI): 520.0 [M+H]+.

Método 5: Compuesto B (realización alternativa de la sal de mesilato) - metanosulfonato de A/-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1 -dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida

Se combinó W-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1 -dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida (que se puede preparar de acuerdo con el ejemplo 58a) (2.37g, 4.56 mmol) con acetonitrilo prefiltrado (5.25 vol, 12.4 mL). Se añadió una solución prefiltrada de ácido metanosulfónico (1.1 eq., 5.02 mmol, 0.48 g) en H2O (0.75 eq., 1.78 mL) a 20 °C. La temperatura de la mezcla resultante se incrementó hasta 50-60 °C a la vez que se mantenía una velocidad de agitación baja. Una vez que la temperatura de la mezcla alcanzó 50-60 °C, se añadió una suspensión de núcleos de cristalización de metanosulfonato de W-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1 -dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida (al 1.0% p/p suspendidos en 0.2 vol de acetonitrilo prefiltrado) y la mezcla se dejó madurar a la vez que se agitaba a una velocidad lo suficientemente rápida para evitar que los sólidos sedimentaran a 50-60 °C durante 2 h. A continuación, la mezcla se enfrió hasta 0-5 °C a 0.25 °C/min y se mantuvo a 0-5 °C durante 6 h. La mezcla se filtró y la masa húmeda retenida sobre el filtro se lavó dos veces con acetonitrilo prefiltrado. El primer lavado consistió en 14.2 ml (6 vol) de acetonitrilo prefiltrado y el segundo lavado consistió en 9.5 ml (4 vol) de acetonitrilo prefiltrado. El sólido húmedo se secó a 50 °C al vacío, para proporcionar 2.39 g (85.1 % de rendimiento) de producto.

Habitualmente, las sales de la presente divulgación son sales farmacéuticamente aceptables. Las sales englobadas en la expresión «sales farmacéuticamente aceptables» se refiere a sales atóxicas de los compuestos de esta invención. Las sales de los compuestos de la presente invención pueden comprender sales de adición de ácido derivadas de un nitrógeno en un sustituyente de un compuesto de la presente invención. Las sales representativas incluyen las siguientes sales: acetato, bencenosulfonato, benzoato, bicarbonato, bisulfato, bitartrato, borato, bromuro, edetato de calcio, camsilato, carbonato, cloruro, clavulanato, citrato, diclorhidrato, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, gluceptato, gluconato, glutamato, glicolilarsanilato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromhidrato, clorhidrato, hidroxinaftoato, yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, laurato, malato, maleato, mandelato, mesilato, metilbromuro, metilnitrato, metilsulfato, maleato de monopotasio, mucato, napsilato, nitrato, W-metilglucamina, oxalato, pamoato (embonato), palmitato, pantotenato, fosfato/difosfato, poligalacturonato, potasio, salicilato, sodio, estearato, subacetato, succinato, tanato, tartrato, teoclato, tosilato, trietioduro, trimetilamonio y valerato. Otras sales, que no sean farmacéuticamente aceptables, pueden ser útiles en la preparación de los compuestos de esta divulgación y estas constituyen un aspecto adicional de la divulgación. Las sales pueden ser preparadas fácilmente por un experto en la técnica.

Aunque es posible que, para su uso en terapia, los compuestos A y B se puedan administrar como el agente químico puro, es posible presentar el principio activo como una composición farmacéutica. Por consiguiente, la invención proporciona además composiciones farmacéuticas, que incluyen un compuesto A y/o un compuesto B, y uno o más excipientes, diluyentes o portadores farmacéuticamente aceptables. Los compuestos A y B son como se han descrito anteriormente. El (los) portador(es), diluyente(s) o excipiente(s) debe(n) ser aceptable(s) en el sentido de que sea(n) compatible(s) con los otros ingredientes de la formulación, que posibilite(n) una formulación farmacéutica y que no sea(n) perjudicial(es) para su receptor. También se describe un proceso para la preparación de una composición farmacéutica que incluye mezclar un Compuesto A y/o Compuesto B con uno o más excipientes, diluyentes o portadores farmacéuticamente aceptables. Tales elementos de las composiciones farmacéuticas utilizados se pueden presentar en combinaciones farmacéuticas por separado o se pueden formular conjuntamente en una composición farmacéutica. Por consiguiente, la invención proporciona además una combinación de composiciones farmacéuticas, una de las cuales incluye el Compuesto A y uno o más excipientes, diluyentes o portadores farmacéuticamente aceptables y una composición farmacéutica que contiene el Compuesto B y excipientes, diluyentes o portadores farmacéuticamente aceptables.

El Compuesto A y el Compuesto B son como se han descrito anteriormente y se pueden utilizar en cualquiera de las composiciones descritas anteriormente.

Las composiciones farmacéuticas se pueden presentar en formas farmacéuticas unitarias que contienen una cantidad predeterminada del principio activo por dosis unitaria. Como saben los expertos en la técnica, la cantidad de principio activo por dosis dependerá de la afección que se esté tratando, la vía de administración y la edad, el peso y el estado general del paciente. Las composiciones de dosis unitarias preferidas son aquellas que contienen una dosis o subdosis diaria, o una fracción adecuada de esta, de un principio activo. Además, tales composiciones farmacéuticas se pueden preparar mediante cualquiera de los métodos muy conocidos en el campo de la farmacia.

Los Compuestos A y B se pueden administrar mediante cualquier vía adecuada. Las vías adecuadas incluyen la oral, rectal, nasal, tópica (incluida la bucal y sublingual), vaginal y parenteral (incluida la subcutánea, intramuscular, intravenosa, intradérmica, intratecal y epidural). Se apreciará que la vía preferida puede variar con, por ejemplo, la afección del receptor de la combinación y el cáncer que se ha de tratar. También se apreciará que cada uno de los agentes administrados se puede administrar mediante la misma vía o mediante vías diferentes y que los Compuestos A y B se pueden combinar conjuntamente en una composición farmacéutica.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para la administración oral se pueden presentar como unidades discretas tales como cápsulas o comprimidos; polvos o gránulos; soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; batidos o espumas comestibles; emulsiones líquidas de aceite en agua o emulsiones líquidas de agua en aceite.

Por ejemplo, para la administración oral en forma de un comprimido o cápsula, el componente farmacológico activo se puede combinar con un portador inerte farmacéuticamente aceptable, atóxico, oral tal como etanol, glicerol, agua y similares. Los polvos se preparan moliendo el compuesto hasta un tamaño fino adecuado y mezclándolo con un portador farmacéutico molido de forma similar tal como un carbohidrato comestible como, por ejemplo, almidón o manitol. También puede haber presente un agente saborizante, conservante, dispersante o colorante.

Las cápsulas se obtienen preparando una mezcla en polvo tal como se ha descrito anteriormente y rellenando con estas cubiertas de gelatina formadas. Se pueden añadir agentes deslizantes y lubricantes tales como sílice coloidal, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio o polietilenglicol sólido a la mezcla en polvo antes de la operación de rellenado. También se puede añadir un agente desintegrante o solubilizante tal como agar-agar, carbonato de calcio o carbonato de sodio para mejorar la disponibilidad del medicamento cuando se ingiere la cápsula.

Además, cuando se desee o sea necesario, también se pueden añadir agentes aglutinantes, lubricantes, desintegrantes y colorantes adecuados para la granulación, la mezcla en polvo se puede hacer pasar por la máquina de formación de comprimidos y el resultado son unidades formadas de forma imperfecta que se rompen en gránulos. Los gránulos se pueden lubricar e incorporar en la mezcla. Los aglutinantes adecuados incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas sintéticas y naturales tales como acacia, tragacanto o alginato de sodio, carboximetilcelulosa, polietilenglicol, ceras y similares. Los lubricantes utilizados en estas formas farmacéuticas incluyen oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio y similares. Los desintegrantes incluyen, sin carácter limitante, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma xantana y similares. Los comprimidos se formulan, por ejemplo, preparando una mezcla en polvo, granulándola o comprimiéndola, añadiéndole un lubricante y desintegrante y prensándola para obtener comprimidos. Una mezcla en polvo se prepara mezclando el compuesto, molido de forma conveniente, con un diluyente o una base según se ha descrito anteriormente y, opcionalmente, con un aglutinante tal como carboximetilcelulosa, un alginato, gelatina o polivinilpirrolidona, una solución retardante tal como parafina, un acelerador de la resorción tal como una sal cuaternaria y/o un agente de absorción tal como bentonita, caolín o fosfato de dicalcio. La mezcla en polvo se puede granular mediante humectación con un aglutinante tal como un jarabe, una pasta de almidón, mucílago de acacia o soluciones de materiales poliméricos o celulósicos y forzando su paso a través de un tamiz. Como alternativa, para prevenir la adhesión al comprimido, se forman tintes mediante la adición de ácido esteárico, una sal de tipo estearato, talco o aceite mineral. A continuación, la mezcla lubricada se prensa para obtener comprimidos. Los compuestos de la presente invención también se pueden combinar con un portador inerte fluido y se pueden prensar para obtener comprimidos directamente sin necesidad de los pasos de granulación o compresión. Se puede proporcionar un recubrimiento protector opaco o transparente constituido por un recubrimiento sellante de goma laca, un recubrimiento de azúcar o material polimérico y un recubrimiento pulido de cera. Se pueden añadir materiales colorantes a estos recubrimientos para diferenciar distintas dosis unitarias.

Se pueden preparar fluidos orales tales como una solución, jarabes y elixires en una forma farmacéutica unitaria de modo que una cantidad dada contenga una cantidad predeterminada del compuesto. Los jarabes se pueden preparar disolviendo el compuesto en una disolución acuosa de sabor adecuado, mientras que los elixires se preparan utilizando un vehículo alcohólico atóxico. Las suspensiones se pueden formular dispersando el compuesto en un vehículo atóxico. También se pueden añadir solubilizantes y emulsionantes tales como alcoholes isostearílicos etoxilados y éteres de sorbitol polioxietilenados, conservantes, un aditivo de sabor tal como aceite de menta o edulcorantes naturales o sacarina u otros edulcorantes artificiales, y similares.

Cuando resulte adecuado, las composiciones para administración oral se pueden microencapsular. La composición también se puede preparar para prolongar o sostener la liberación, por ejemplo, recubriendo o embebiendo material particulado en polímeros, cera o similares.

Los agentes para su uso de acuerdo con la presente invención también se pueden administrar en forma de sistemas de suministro de liposomas tales como vesículas unilamelares pequeñas, vesículas unilamelares grandes y vesículas multilamelares. Los liposomas se pueden formar a partir de varios fosfolípidos tales como colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas.

Los agentes para su uso de acuerdo con la presente invención también se pueden suministrar mediante el uso de anticuerpos monoclonales como portadores individuales a los que se acoplan las moléculas del compuesto. Los compuestos también se pueden acoplar con polímeros solubles como portadores farmacológicos que pueden actuar como diana. Tales polímeros pueden incluir polivinilpirrolidona, un copolímero de pirano, polihidroxipropilmetacrilamida-fenol, polihidroxietilaspartamida-fenol o polietilenoxidopolilisina sustituida con residuos de palmitoílo. Además, los compuestos se pueden acoplar a una clase de polímeros biodegradables útiles a la hora de conseguir una liberación controlada de un fármaco, por ejemplo, ácido poliláctico, poliépsilon-caprolactona, ácido polihidroxibutírico, poliortoésteres, poliacetales, polidihidropiranos, policianoacrilatos y copolímeros en bloque anfifáticos o reticulados de hidrogeles.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para la administración transdérmica se pueden presentar como parches discretos diseñados para permanecer en contacto íntimo con la epidermis del receptor durante un periodo de tiempo prolongado. Por ejemplo, el principio activo se puede liberar a partir del parche mediante iontoforesis tal como se describe en general en Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986).

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para la administración tópica se pueden formular como ungüentos, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, esprays, aerosoles o aceites.

Para tratamientos oculares o de otros tejidos externos, por ejemplo, la boca y la piel, las composiciones se aplican preferentemente como una crema o un ungüento tópico. Cuando se formula en un ungüento, el principio activo se puede emplear con una base del ungüento o bien parafínica o miscible en agua. Como alternativa, el principio activo se puede formular en una crema con una base de la crema de aceite en agua o una base de agua en aceite.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para administraciones tópicas en el ojo incluyen los colirios, donde el principio activo se disuelve o suspende en un portador adecuado, especialmente un disolvente acuoso.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para la administración tópica en la boca incluyen grageas, pastillas y enjuagues bucales.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para la administración rectal se pueden presentar como supositorios o como enemas.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para la administración nasal donde el portador es un sólido incluyen un polvo grueso con un tamaño de partícula, por ejemplo, en el intervalo de 20 a 500 micras, que se administra siguiendo una acción de esnifar, es decir, mediante la inhalación rápida a través del pasaje nasal a partir de un envase en el que se encuentra el polvo cerca de la nariz. Las composiciones adecuadas en las que el portador es un líquido, para su administración como espray nasal o como gotas nasales, incluyen soluciones acuosas u oleosas del principio activo.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para la administración por inhalación incluyen nebulizaciones o polvos de partículas finas que se pueden generar mediante varios tipos de insufladores, nebulizadores o aerosoles presurizados de dosis fija.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para la administración vaginal se pueden presentar como composiciones en forma de pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o espray.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para la administración parenteral incluyen soluciones estériles no acuosas para inyección que pueden contener antioxidantes, tampones, agentes bacteriostáticos y solutos que hacen que la formulación sea isotónica con la sangre del receptor deseado; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes. Las composiciones se pueden presentar en envases de dosis unitarias o de múltiples dosis, por ejemplo, viales y ampollas selladas, y se pueden almacenar en un estado de secado por congelación (liofilizado) que requiere tan solo la adición del portador líquido estéril, por ejemplo, agua para inyecciones, inmediatamente antes de su uso. Se pueden preparar suspensiones y soluciones para inyección extemporáneas a partir de comprimidos, gránulos y polvos estériles.

Se debe sobreentender que, además de los ingredientes particularmente mencionados anteriormente, las composiciones pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica según el tipo de formulación en cuestión, por ejemplo, los adecuados para la administración oral pueden incluir agentes saborizantes.

A menos que se defina de otro modo, en todos los protocolos de dosificación descritos en la presente, el régimen de los compuestos administrados no tiene por qué empezar con el inicio del tratamiento y terminar con el final del tratamiento, tan solo se requiere que el número de días consecutivos en los que se administran ambos compuestos y el número opcional de días consecutivos en los que solo se administra uno de los compuestos componentes, o el protocolo de dosificación indicado, incluida la cantidad administrada del compuesto, tengan lugar en algún momento durante el transcurso del tratamiento.

Los Compuestos A y B se pueden emplear combinados de acuerdo con la invención mediante la administración simultánea en una composición farmacéutica unitaria que incluya ambos compuestos. Como alternativa, la combinación se puede administrar por separado en composiciones farmacéuticas separadas, incluyendo cada una uno de los compuestos A y B de forma secuencial, donde, por ejemplo, el Compuesto A o el Compuesto B se administra en primer lugar y el otro en segundo lugar. Tal administración secuencial puede ser cercana en el tiempo (p. ej., de forma simultánea) o lejana en el tiempo. Además, no importa si los compuestos se administran en la misma forma farmacéutica, p. ej., un compuesto se puede administrar por vía tópica y el otro compuesto se puede administrar por vía oral. Convenientemente, ambos compuestos se administran por vía oral.

Por lo tanto, en una realización, una o más dosis del Compuesto A se administran simultáneamente o por separado con una o más dosis del Compuesto B.

A menos que se defina de otro modo, en todos los protocolos de dosificación descritos en la presente, el régimen de los compuestos administrados no tiene por qué empezar con el inicio del tratamiento y terminar con el final del tratamiento, tan solo se requiere que el número de días consecutivos en los que se administran ambos compuestos y el número opcional de días consecutivos en los que solo se administra uno de los compuestos componentes, o el protocolo de dosificación indicado, incluida la cantidad administrada del compuesto, tengan lugar en algún momento durante el transcurso del tratamiento.

En una realización, se administran múltiples dosis del Compuesto A simultáneamente o por separado con múltiples dosis del Compuesto B.

En una realización, se administran múltiples dosis del Compuesto A simultáneamente o por separado con una dosis del Compuesto B.

En una realización, se administra una dosis del Compuesto A simultáneamente o por separado con múltiples dosis del Compuesto B.

En una realización, se administra una dosis del Compuesto A simultáneamente o por separado con una dosis del Compuesto B.

En todas las realizaciones anteriores, el Compuesto A se puede administrar en primer lugar o el Compuesto B se puede administrar en primer lugar.

Las combinaciones se pueden presentar como un kit combinado. La expresión «kit combinado» o «kit de partes», tal como se utiliza en la presente, se refiere a la composición o composiciones farmacéuticas que se utilizan para administrar el Compuesto A y el Compuesto B de acuerdo con la invención. Cuando ambos compuestos se administran simultáneamente, el kit combinado puede contener el Compuesto A y el Compuesto B en una única composición farmacéutica, tal como un comprimido, o en composiciones farmacéuticas separadas. Cuando los Compuestos A y B no se administran simultáneamente, el kit combinado contendrá el Compuesto A y el Compuesto B en composiciones farmacéuticas separadas en un único envase o el Compuesto A y el Compuesto B en composiciones farmacéuticas separadas en envases separados.

En un aspecto, se proporciona un kit de partes que comprende los componentes:

Compuesto A asociado con un portador, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables; y Compuesto B asociado con un portador, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.

En una realización de la invención, el kit de partes comprende los siguientes componentes:

Compuesto A asociado con un portador, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables; y Compuesto B asociado con un portador, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables,

donde los componentes se proporcionan en una forma que es adecuada para la administración secuencial, simultánea y/o por separado.

En una realización, el kit de partes comprende:

un primer envase que comprende el Compuesto A asociado con un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable; y

un segundo envase que comprende el Compuesto B asociado con un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable, y un medio de envase para contener dicho primer y segundo envase.

El kit combinado también se puede proporcionar con una instrucción tal como las instrucciones de administración y dosificación. Tales instrucciones de administración y dosificación pueden ser del tipo que se proporciona a un médico, por ejemplo, con una etiqueta del producto farmacológico, o pueden ser del tipo que es proporcionado por un médico tal como instrucciones para un paciente.

Se sobreentenderá que en la expresión «dosis de carga», tal como se utiliza en la presente, se refiere a una única dosis o un régimen de corta duración del Compuesto A o el Compuesto B que tiene una dosis superior a la dosis de mantenimiento administrada al sujeto para, por ejemplo, incrementar rápidamente el nivel de concentración en sangre del fármaco. Convenientemente, un régimen de corta duración para su uso en la presente será: de 1 a 14 días; convenientemente de 1 a 7 días; convenientemente de 1 a 3 días; convenientemente durante tres días; convenientemente durante dos días; convenientemente durante un día. En algunas realizaciones, la «dosis de carga» puede incrementar la concentración en sangre del fármaco hasta un nivel terapéuticamente eficaz. En algunas realizaciones, la «dosis de carga» puede incrementar la concentración en sangre del fármaco hasta un nivel terapéuticamente eficaz junto con una dosis de mantenimiento del fármaco. La «dosis de carga» se puede administrar una vez al día o más de una vez al día (p. ej., hasta 4 veces al día). Convenientemente, la «dosis de carga» se administrará una vez al día. Convenientemente, la dosis de carga será una cantidad de 2 a 100 veces la dosis de mantenimiento; convenientemente, de 2 a 10 veces; convenientemente de 2 a 5 veces; convenientemente 2 veces; convenientemente 3 veces; convenientemente 4 veces; convenientemente 5 veces. Convenientemente, la dosis de carga se administrará de 1 a 7 días; convenientemente de 1 a 5 días; convenientemente de 1 a 3 días; convenientemente durante 1 día; convenientemente durante 2 días; convenientemente durante 3 días, seguida de un protocolo de dosificación de mantenimiento.

Se sobreentenderá que la expresión «dosis de mantenimiento», tal como se utiliza en la presente, se refiere a una dosis que se administra en serie (por ejemplo, al menos dos veces) y que tiene como objetivo o bien incrementar lentamente los niveles de concentración en sangre del compuesto hasta un nivel terapéuticamente eficaz o mantener tal nivel terapéuticamente eficaz. La dosis de mantenimiento se administra por lo general una vez al día y la dosis diaria de la dosis de mantenimiento es inferior a la dosis diaria total de la dosis de carga.

Convenientemente, las combinaciones de esta invención se administran dentro de un «periodo especificado».

Se pretende que la expresión «periodo especificado» y sus derivados, tal como se utilizan en la presente, se refieran al intervalo de tiempo entre la administración de uno de entre el Compuesto A y el Compuesto B y el otro de entre el Compuesto A y el Compuesto B. A menos que se defina de otro modo, el periodo especificado puede incluir la administración simultánea. Cuando ambos compuestos de la invención se administran una vez al día, el periodo especificado se refiere a la administración del Compuesto A y el Compuesto B durante un solo día. Cuando uno o ambos compuestos de la invención se administran más de una vez al día, el periodo especificado se calcula basándose en la primera administración de cada compuesto en un día específico. Todas las administraciones de un compuesto de la invención que sean posteriores a la primera durante un día específico no se consideran cuando se calcula el periodo especificado.

Convenientemente, si los compuestos se administran dentro de un «periodo especificado» y no se administran simultáneamente, se administran ambos dentro de un periodo de aproximadamente 24 horas entre sí - en este caso, el periodo especificado será de aproximadamente 24 horas; convenientemente, se administrarán ambos dentro de un periodo de aproximadamente 12 horas entre sí - en este caso, el periodo especificado será de aproximadamente 12 horas; convenientemente, se administrarán ambos dentro de un periodo de aproximadamente 11 horas entre sí - en este caso, el periodo especificado será de aproximadamente 11 horas; convenientemente, se administrarán ambos dentro de un periodo de aproximadamente 10 horas entre sí - en este caso, el periodo especificado será de aproximadamente 10 horas; convenientemente, se administrarán ambos dentro de un periodo de aproximadamente 9 horas entre sí - en este caso, el periodo especificado será de aproximadamente 9 horas; convenientemente, se administrarán ambos dentro de un periodo de aproximadamente 8 horas entre sí - en este caso, el periodo especificado será de aproximadamente 8 horas; convenientemente, se administrarán ambos dentro de un periodo de aproximadamente 7 horas entre sí - en este caso, el periodo especificado será de aproximadamente 7 horas; convenientemente, se administrarán ambos dentro de un periodo de aproximadamente 6 horas entre sí - en este caso, el periodo especificado será de aproximadamente 6 horas; convenientemente, se administrarán ambos dentro de un periodo de aproximadamente 5 horas entre sí - en este caso, el periodo especificado será de aproximadamente 5 horas; convenientemente, se administrarán ambos dentro de un periodo de aproximadamente 4 horas entre sí - en este caso, el periodo especificado será de aproximadamente 4 horas; convenientemente, se administrarán ambos dentro de un periodo de aproximadamente 3 horas entre sí - en este caso, el periodo especificado será de aproximadamente 3 horas; convenientemente, se administrarán ambos dentro de un periodo de aproximadamente 2 horas entre sí - en este caso, el periodo especificado será de aproximadamente 2 horas; convenientemente, se administrarán ambos dentro de un periodo de aproximadamente 1 hora entre sí - en este caso, el periodo especificado será de aproximadamente 1 hora. Tal como se utiliza en la presente, la administración del Compuesto A y el Compuesto B con menos de aproximadamente 45 minutos entre sí se considera una administración simultánea.

Convenientemente, cuando la combinación de la invención se administra durante un «periodo especificado», los compuestos se coadministrarán durante un «lapso de tiempo».

Se pretende que la expresión «lapso de tiempo» y sus derivados, tal como se utilizan en la presente, se refieran a que ambos compuestos de la invención se administran durante un número indicado de días consecutivos.

Respecto a la administración en un «periodo especificado»:

Convenientemente, ambos compuestos se administrarán dentro de un periodo especificado durante al menos un día - en este caso, el lapso de tiempo será de al menos un día; convenientemente, durante el transcurso del tratamiento, ambos compuestos se administrarán dentro de un periodo especificado durante al menos 3 días consecutivos - en este caso, el lapso de tiempo será de al menos 3 días; convenientemente, durante el transcurso del tratamiento, ambos compuestos se administrarán dentro de un periodo especificado durante al menos 5 días consecutivos - en este caso, el lapso de tiempo será de al menos 5 días; convenientemente, durante el transcurso del tratamiento, ambos compuestos se administrarán dentro de un periodo especificado durante al menos 7 días consecutivos - en este caso, el lapso de tiempo será de al menos 7 días; convenientemente, durante el transcurso del tratamiento, ambos compuestos se administrarán dentro de un periodo especificado durante al menos 14 días consecutivos - en este caso, el lapso de tiempo será de al menos 14 días; convenientemente, durante el transcurso del tratamiento, ambos compuestos se administrarán dentro de un periodo especificado durante al menos 30 días consecutivos - en este caso, el lapso de tiempo será de al menos 30 días.

Adicionalmente, respecto a la administración en un «periodo especificado»:

Convenientemente, durante el transcurso del tratamiento, el Compuesto A y el Compuesto B se administrarán dentro de un periodo especificado durante de 1 a 4 días en un periodo de 7 días y, durante los otros días del periodo de 7 días, el Compuesto A se administrará solo. Convenientemente, este protocolo de 7 días se repite durante 2 ciclos o durante 14 días; convenientemente, durante 4 ciclos o 28 días; convenientemente, para una administración continuada.

Convenientemente, durante el transcurso del tratamiento, el Compuesto A y el Compuesto B se administrarán dentro de un periodo especificado durante de 1 a 4 días en un periodo de 7 días y, durante los otros días del periodo de 7 días, el Compuesto B se administrará solo. Convenientemente, este protocolo de 7 días se repite durante 2 ciclos o durante 14 días; convenientemente, durante 4 ciclos o 28 días; convenientemente, para una administración continuada. Convenientemente, el Compuesto B se administra en días consecutivos durante el periodo de 7 días. Convenientemente, el Compuesto B se administra siguiendo un patrón de un día sí y un día no durante cada periodo de 7 días.

Convenientemente, durante el transcurso del tratamiento, el Compuesto A y el Compuesto B se administrarán dentro de un periodo especificado durante 3 días en un periodo de 7 días y, durante los otros días del periodo de 7 días, el Compuesto B se administrará solo. Convenientemente, este protocolo de 7 días se repite durante 2 ciclos o durante 14 días; convenientemente, durante 4 ciclos o 28 días; convenientemente, para una administración continuada. Convenientemente, el Compuesto A se administrará en 3 días consecutivos durante el periodo de 7 días.

Convenientemente, durante el transcurso del tratamiento, el Compuesto A y el Compuesto B se administrarán dentro de un periodo especificado durante 2 días en un periodo de 7 días y, durante los otros días del periodo de 7 días, el Compuesto B se administrará solo. Convenientemente, este protocolo de 7 días se repite durante 2 ciclos o durante 14 días; convenientemente, durante 4 ciclos o 28 días; convenientemente, para una administración continuada. Convenientemente, el Compuesto A se administrará en 2 días consecutivos durante el periodo de 7 días.

Convenientemente, durante el transcurso del tratamiento, el Compuesto A y el Compuesto B se administrarán dentro de un periodo especificado durante 1 día en un periodo de 7 días y, durante los otros días del periodo de 7 días, el Compuesto B se administrará solo. Convenientemente, este protocolo de 7 días se repite durante 2 ciclos o durante 14 días; convenientemente, durante 4 ciclos o 28 días; convenientemente, para una administración continuada.

Convenientemente, si los compuestos no se administran durante un «periodo especificado», se administran de forma secuencial. Se pretende que la expresión «administración secuencial» y sus derivados, tal como se utilizan en la presente, se refieran a que uno de entre el Compuesto A y el Compuesto B se administra durante dos o más días consecutivos y el otro de entre el Compuesto A y el Compuesto B se administra posteriormente durante dos o más días consecutivos. También se contempla en la presente una vacación farmacológica utilizada entre la administración secuencial de uno de entre el Compuesto A y el Compuesto B y el otro de entre el Compuesto A y el Compuesto B. Una vacación farmacológica, tal como se utiliza en la presente, es un periodo de días después de la administración secuencial de uno de entre el Compuesto A y el Compuesto B y antes de la administración del otro de entre el Compuesto A y el Compuesto B donde no se administra ni el Compuesto A ni el Compuesto B. Convenientemente, la vacación farmacológica será un periodo de días seleccionado entre: 1 día, 2 días, 3 días, 4 días, 5 días, 6 días, 7 días, 8 días, 9 días, 10 días, 11 días, 12 días, 13 días y 14 días.

Respecto a la administración secuencial:

Convenientemente, uno de entre el Compuesto A y el Compuesto B se administra durante de 1 a 30 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica opcional, seguida de la administración del otro de entre el Compuesto A y el Compuesto B durante de 1 a 30 días consecutivos. Convenientemente, uno de entre el Compuesto A y el Compuesto B se administra durante de 2 a 21 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica opcional, seguida de la administración del otro de entre el Compuesto A y el Compuesto B durante de 2 a 21 días consecutivos. Convenientemente, uno de entre el Compuesto A y el Compuesto B se administra durante de 2 a 14 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 1 a 14 días, seguida de la administración del otro de entre el Compuesto A y el Compuesto B durante de 2 a 14 días consecutivos. Convenientemente, uno de entre el Compuesto A y el Compuesto B se administra durante de 3 a 7 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 3 a 10 días, seguida de la administración del otro de entre el Compuesto A y el Compuesto B durante de 3 a 7 días consecutivos.

Convenientemente, el Compuesto B se administrará en primer lugar en la secuencia, seguido de una vacación farmacológica opcional, seguida de la administración del Compuesto A. Convenientemente, el Compuesto B se administra durante de 1 a 21 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica opcional, seguida de la administración del Compuesto A durante de 1 a 21 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto B se administra durante de 3 a 21 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 1 a 14 días, seguida de la administración del Compuesto A durante de 3 a 21 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto B se administra durante de 3 a 21 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 3 a 14 días, seguida de la administración del Compuesto A durante de 3 a 21 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto B se administra durante 21 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica opcional, seguida de la administración del Compuesto A durante 14 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto B se administra durante 14 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 1 a 14 días, seguida de la administración del Compuesto A durante 14 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto B se administra durante 7 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 3 a 10 días, seguida de la administración del Compuesto A durante 7 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto B se administra durante 3 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 3 a 14 días, seguida de la administración del Compuesto A durante 7 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto B se administra durante 3 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 3 a 10 días, seguida de la administración del Compuesto A durante 3 días consecutivos.

Convenientemente, el Compuesto A se administrará en primer lugar en la secuencia, seguido de una vacación farmacológica opcional, seguida de la administración del Compuesto B. Convenientemente, el Compuesto A se administra durante de 1 a 21 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica opcional, seguida de la administración del Compuesto B durante de 1 a 21 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto A se administra durante de 3 a 21 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 1 a 14 días, seguida de la administración del Compuesto B durante de 3 a 21 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto A se administra durante de 3 a 21 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 3 a 14 días, seguida de la administración del Compuesto B durante de 3 a 21 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto A se administra durante 21 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica opcional, seguida de la administración del Compuesto B durante 14 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto A se administra durante 14 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 1 a 14 días, seguida de la administración del Compuesto B durante 14 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto A se administra durante 7 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 3 a 10 días, seguida de la administración del Compuesto B durante 7 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto A se administra durante 3 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 3 a 14 días, seguida de la administración del Compuesto B durante 7 días consecutivos. Convenientemente, el Compuesto A se administra durante 3 días consecutivos, seguido de una vacación farmacológica de 3 a 10 días, seguida de la administración del Compuesto B durante 3 días consecutivos.

Se sobreentiende que una administración durante un «periodo especificado» y una administración «secuencial» pueden ir seguidas de una dosificación repetida o pueden ir seguidas de un protocolo de dosificación alternativo, y una vacación farmacológica puede preceder a la dosificación repetida o al protocolo de dosificación alternativo.

Convenientemente, la cantidad del Compuesto A (basada en el peso de la cantidad no solvatada/en forma no salina) administrada como parte de la combinación de acuerdo con la presente invención será una cantidad seleccionada entre aproximadamente 0.125 mg y aproximadamente 10 mg; convenientemente, la cantidad se seleccionará entre aproximadamente 0.25 mg y aproximadamente 9 mg; convenientemente, la cantidad se seleccionará e aproximadamente 0.25 mg y aproximadamente 8 mg; convenientemente, la cantidad se seleccionará e aproximadamente 0.5 mg y aproximadamente 8 mg; convenientemente, la cantidad se seleccionará entre aproximadamente 0.5 mg y aproximadamente 7 mg; convenientemente, la cantidad se selecciona entre aproximadamente 1 mg y aproximadamente 7 mg; convenientemente, la cantidad será de aproximadamente 5 mg.

Por consiguiente, la cantidad del Compuesto A administrada como parte de la combinación de acuerdo con la presente invención será una cantidad seleccionada entre aproximadamente 0.125 mg y aproximadamente 10 mg. Por ejemplo, la cantidad del Compuesto A administrada como parte de la combinación de acuerdo con la presente invención puede ser de 0.125 mg, 0.25 mg, 0.5 mg, 0.75 mg, 1 mg, 1.5 mg, 2 mg, 2.5 mg, 3 mg, 3.5 mg, 4 mg, 4.5 mg, 5 mg, 5.5 mg, 6 mg, 6.5 mg, 7 mg, 7.5 mg, 8 mg, 8.5 mg, 9 mg, 9.5 mg, 10 mg.

Convenientemente, la cantidad del Compuesto B (basada en el peso de la cantidad no solvatada/en forma no salina) administrada como parte de la combinación de acuerdo con la presente invención será una cantidad seleccionada entre aproximadamente 10 mg y aproximadamente 600 mg. Convenientemente, la cantidad se seleccionará entre aproximadamente 30 mg y aproximadamente 300 mg; convenientemente, la cantidad se seleccionará entre aproximadamente 30 mg y aproximadamente 280 mg; convenientemente, la cantidad se seleccionará entre aproximadamente 40 mg y aproximadamente 260 mg; convenientemente, la cantidad se seleccionará entre aproximadamente 60 mg y aproximadamente 240 mg; convenientemente, la cantidad se seleccionará entre aproximadamente 80 mg y aproximadamente 220 mg; convenientemente, la cantidad se seleccionará entre aproximadamente 90 mg y aproximadamente 210 mg; convenientemente, la cantidad se seleccionará entre aproximadamente 100 mg y aproximadamente 200 mg convenientemente, la cantidad se seleccionará entre aproximadamente 110 mg y aproximadamente 190 mg convenientemente, la cantidad se seleccionará entre aproximadamente 120 mg y aproximadamente 180 mg convenientemente, la cantidad se seleccionará entre aproximadamente 130 mg y aproximadamente 170 mg convenientemente, la cantidad se seleccionará entre aproximadamente 140 mg y aproximadamente 160mg; convenientemente, la cantidad será de 150 mg. Por consiguiente, la cantidad del Compuesto B administrada como parte de la combinación de acuerdo con la presente invención será una cantidad seleccionada entre aproximadamente 10 mg y aproximadamente 300 mg. Por ejemplo, la cantidad del Compuesto B administrada como parte de la combinación de acuerdo con la presente invención se selecciona adecuadamente entre 10 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 85 mg, 90 mg, 95 mg,

100 mg, 105 mg, 110 mg, 115 mg, 120 mg, 125 mg, 130 mg, 135 mg, 140 mg, 145 mg, 150 mg, 155 mg, 160 mg, 165 mg, 170 mg, 175 mg, 180 mg, 185 mg, 190 mg, 195 mg, 200 mg, 205 mg, 210 mg, 215 mg, 220 mg, 225 mg, 230 mg,

235 mg, 240 mg, 245 mg, 250 mg, 255 mg, 260 mg, 265 mg, 270 mg, 275 mg, 280 mg, 285 mg, 290 mg, 295 mg y

300 mg. Convenientemente, la cantidad seleccionada del Compuesto B se administra de 1 a 4 veces al día.

Convenientemente, la cantidad seleccionada del Compuesto B se administra dos veces al día. Convenientemente, el Compuesto B se administra en una cantidad de 150 mg dos veces al día. Convenientemente, la cantidad seleccionada del Compuesto B se administra una vez al día.

Tal como se utilizan en la presente, todas las cantidades especificadas para el Compuesto A y el Compuesto B se indican como la cantidad de compuesto libre o en forma no salina.

Uso en terapia

Se cree que las combinaciones de la invención tienen utilidad en trastornos en los que la inhibición de MEK y/o B-Raf resulta beneficiosa.

Por lo tanto, la presente invención proporciona una combinación de la invención, para su uso en terapia, en particular en el tratamiento de trastornos en los que la inhibición de la actividad de MEK y/o B-Raf resulta beneficiosa, en particular el cáncer.

Un aspecto adicional de la divulgación proporciona una composición para su uso en un método de tratamiento de un trastorno en el que la inhibición de MEK y/o B-Raf resulta beneficiosa, que comprende administrar una combinación de la invención.

Un aspecto adicional de la presente invención proporciona el uso de una combinación de la invención en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de un trastorno en el que la inhibición de MEK y/o B-Raf resulta beneficiosa.

Habitualmente, el trastorno es un cáncer de modo que la inhibición de MEK y/o B-Raf tiene un efecto beneficioso. Los ejemplos de cánceres que son adecuados para el tratamiento con la combinación de la invención incluyen, sin carácter limitante, tanto formas primarias como metastásicas de cánceres de cabeza y cuello, mama, pulmón, colon, ovario y próstata. Convenientemente, el cáncer se selecciona entre: cerebral (gliomas), glioblastomas, astrocitomas, glioblastoma multiforme, síndrome de Bannayan-Zonana, enfermedad de Cowden, enfermedad de Lhermitte-Duclos, de mama, cáncer de mama inflamatorio, tumor de Wilm, sarcoma de Ewing, rabdomiosarcoma, ependimoma, meduloblastoma, de colon, cabeza y cuello, riñón, pulmón, hígado, melanoma, ovario, pancreático, de próstata, sarcoma, osteosarcoma, tumor óseo de células gigantes, cáncer de tiroides, leucemia linfoblástica de linfocitos T, leucemia mielógena crónica, leucemia linfocítica crónica, leucemia de células pilosas, leucemia linfoblástica aguda, leucemia mielógena aguda, LMA, leucemia neutrofílica crónica, leucemia linfoblástica aguda de linfocitos T, plasmacitoma, leucemia inmunoblástica de células grandes, leucemia de células del manto, leucemia megacarioblástica con mieloma múltiple, mieloma múltiple, leucemia megacariocítica aguda, leucemia promielocítica, eritroleucemia, linfoma maligno, linfoma hodgkiniano, linfoma no hodgkiniano, linfoma linfoblástico de linfocitos T, linfoma de Burkitt, linfoma folicular, neuroblastoma, cáncer de vejiga, cáncer urotelial, cáncer de pulmón, cáncer de vulva, cáncer cervical, cáncer endometrial, cáncer renal, mesotelioma, cáncer de esófago, cáncer de las glándulas salivales, cáncer hepatocelular, cáncer gástrico, cáncer nasofaríngeo, cáncer bucal, cáncer de la boca, TEGI (tumor del estroma gastrointestinal) y cáncer testicular.

Adicionalmente, los ejemplos de un cáncer que se ha de tratar incluyen adenocarcinoma de Barrett; carcinomas del tracto biliar; cáncer de mama; cáncer cervical; colangiocarcinoma; tumores del sistema nervioso central que incluyen tumores primarios del SNC tales como glioblastomas, astrocitomas (p. ej., glioblastoma multiforme) y ependimomas, y tumores secundarios del SNC (es decir, metástasis hasta el sistema nervioso central de tumores originados fuera del sistema nervioso central; cáncer colorrectal que incluye el carcinoma de colon e intestino grueso; cáncer gástrico; carcinoma de cabeza y cuello que incluye el carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello; cánceres hematológicos que incluyen leucemias y linfomas tales como leucemia linfoblástica aguda, leucemia mielógena aguda (LMA), síndromes mielodisplásicos, leucemia mielógena crónica, linfoma hodgkiniano, linfoma no hodhkiniano, leucemia megacarioblástica, mieloma múltiple y eritroleucemia; carcinoma hepatocelular; cáncer de pulmón que incluye cáncer de pulmón de células microcíticas y cáncer de pulmón de células no microcíticas; cáncer de ovario; cáncer endometrial; cáncer pancreático; adenoma pituitario; cáncer de próstata; cáncer renal; sarcoma; cánceres de piel que incluyen melanomas; y cánceres de tiroides.

Convenientemente, la presente divulgación se refiere a un método para tratar o reducir la gravedad de un cáncer seleccionado entre: cerebral (gliomas), glioblastomas, síndrome de Bannayan-Zonana, enfermedad de Cowden, enfermedad de Lhermitte-Duclos, de mama, colon, cabeza y cuello, riñón, pulmón, hígado, melanoma, de ovario, pancreático, de próstata, sarcoma y de tiroides.

Convenientemente, la presente divulgación se refiere a un método para tratar o reducir la gravedad de un cáncer seleccionado entre el de ovario, mama, pancreático y de próstata.

La combinación de la invención se puede utilizar sola o combinada con uno o más agentes terapéuticos diferentes. Por lo tanto, la invención proporciona, en un aspecto adicional, una combinación adicional que comprende una combinación de la invención con un agente o agentes terapéuticos adicionales, composiciones y medicamentos que comprenden la combinación y el uso de la combinación adicional, las composiciones y los medicamentos en terapia, en particular en el tratamiento de enfermedades sensibles a la inhibición de MEK y/o una cinasa B.

En la realización, la combinación de la invención se puede emplear con otros métodos terapéuticos de tratamiento del cáncer. En particular, en una terapia antineoplásica, se contempla la terapia combinada con otros agentes quimioterapéuticos, agentes hormonales, anticuerpos, así como también tratamientos quirúrgicos y/o de radiación distintos a los mencionados anteriormente. Las terapias combinadas de acuerdo con la presente invención, por lo tanto, incluyen la administración del Compuesto A y el Compuesto B, así como el uso opcional de otros agentes terapéuticos, incluidos otros agentes antineoplásicos. Tal combinación de agentes se puede administrar conjuntamente o por separado y, cuando se administra por separado, esto puede ocurrir de forma simultánea o secuencial en cualquier orden, tanto de forma cercana como lejana en el tiempo. En una realización, la combinación farmacéutica incluye el Compuesto A y el Compuesto B, y opcionalmente al menos un agente antineoplásico adicional.

Según se ha indicado, las cantidades terapéuticamente eficaces del Compuesto A y el Compuesto B se han expuesto anteriormente. La cantidad terapéuticamente eficaz de los agentes terapéuticos adicionales de la presente invención dependerá de una serie de factores, que incluyen, por ejemplo, la edad y el peso del mamífero, la afección exacta que requiere tratamiento, la gravedad de la afección, la naturaleza de la formulación y la vía de administración. En última instancia, la cantidad terapéuticamente eficaz quedará a la discreción del veterinario o médico responsable. Los tiempos relativos de administración se seleccionarán con el fin de conseguir el efecto terapéutico combinado deseado.

En una realización, la terapia contra el cáncer adicional es quirúrgica y/o radioterapia.

En una realización, la terapia contra el cáncer adicional es al menos un agente antineoplásico adicional.

En la combinación, se puede utilizar cualquier agente antineoplásico que tenga actividad frente a un tumor sensible que se esté tratando. Los agentes antineoplásicos típicos útiles incluyen, sin carácter limitante, agentes antimicrotubulares tales como diterpenoides y alcaloides de la vinca; complejos de coordinación de platino; agentes alquilantes tales como mostazas de nitrógeno, oxazafosforinas, alquilsulfonatos, nitrosoureas y triacenos; agentes antibióticos tales como antraciclinas, actinomicinas y bleomicina; inhibidores de la topoisomerasa II tales como epipodofilotoxinas; antimetabolitos tales como análogos de purina y pirimidina y compuestos de anti-folato; inhibidores de la topoisomerasa I tales como las camptotecinas; hormonas y análogos hormonales; inhibidores de la vía de transducción de señales; inhibidores de la angiogénesis de tipo tirosina-cinasa que no son receptores; agentes inmunoterapéuticos; agentes proapoptóticos; e inhibidores de la señalización del ciclo celular.

Agentes antimicrotubulares o antimitóticos: Los agentes antimicrotubulares o antimitóticos son agentes específicos de la fase que son activos contra los microtúbulos de las células tumorales durante M o la fase de mitosis del ciclo celular. Los ejemplos de agentes antimicrotubulares incluyen, sin carácter limitante, diterpenoides y alcaloides de la vinca.

Los diterpenoides, los cuales derivan de fuentes naturales, son agentes anticancerígenos específicos de la fase que operan en las fases G2/M del ciclo celular. Se cree que los diterpenoides estabilizan la subunidad de p-tubulina de los microtúbulos, uniéndose a esta proteína. Al parecer, entonces se inhibe el desacoplamiento de la proteína, con lo que se detiene la mitosis y se provoca a continuación la muerte celular. Los ejemplos de diterpenoides incluyen, sin carácter limitante, el paclitaxel y su análogo docetaxel.

El paclitaxel, 5p,20-epoxi-1,2a,4,7p,10p,13a-hexahidroxitax-11-en-9-ona 4,10-diacetato 2-benzoato 13-éster con (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilisoserina; es un producto diterpénico natural que se aísla del tejo del Pacífico Taxus brevifolia y se puede adquirir de proveedores comerciales como TAXOL® en forma de solución inyectable. Es un miembro de la familia de terpenos de los taxanos. El paclitaxel ha sido aprobado para uso clínico en el tratamiento de cáncer de ovario refractario en los Estados Unidos (Markman et al., Yale Journal of Biology and Medicine, 64:583, 1991; McGuire et al., Ann. Intem, Med., 111:273,1989) y para el tratamiento de cáncer de mama (Holmes et al., J. Nat. Cancer Inst., 83:1797,1991). Es un candidato potencial para el tratamiento de neoplasmas en la piel (Einzig et al., Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 20:46) y carcinomas de cabeza y cuello (Forastire et al., Sem. Oncol., 20:56, 1990). El compuesto también muestra potencial para el tratamiento de la enfermedad renal poliquística (Woo et al., Nature, 368:750. 1994), el cáncer de pulmón y la malaria. El tratamiento de los pacientes con paclitaxel da como resultado la supresión de la médula ósea (linajes de células múltiples, Ignoff, R.J. et al., Cancer Chemotherapy Pocket Guide, 1998) que se relaciona con la duración de la dosis por encima de una concentración umbral (50 nM) (Kearns, C.M. et al., Seminars in Oncology, 3(6) págs.16-23, 1995).

El docetaxel, (2R,3S)-N-carboxi-3-fenilisoserina, éster N-terf-butílico, 13-éster con 5p-20-epoxi-1,2a,4,7p,10p,13ahexahidroxitax-11-en-9-ona 4-acetato 2-benzoato, trihidrato; se puede adquirir de proveedores comerciales en forma de solución inyectable como TAXOTERE®. El docetaxel se prescribe para el tratamiento del cáncer de mama. El docetaxel es un derivado semisintético del paclitaxel q.v., que se prepara utilizando un precursor natural, la 10-desacetilbacatina III, que se extrae de la aguja del tejo europeo.

Los alcaloides de la vinca son agentes antineoplásicos específicos de la fase que derivan de la planta hierba doncella. Los alcaloides de la vinca actúan en la fase M (mitosis) del ciclo celular uniéndose específicamente a la tubulina. Como consecuencia, la molécula de tubulina unida es incapaz de polimerizarse para formar microtúbulos. Se cree que se detiene la mitosis en la metafase y le sigue la muerte celular. Los ejemplos de alcaloides de la vinca incluyen, sin carácter limitante, vinblastina, vincristina y vinorelbina.

La vinblastina, sulfato de vincaleucoblastina, se puede adquirir de proveedores comerciales como VELBAN® en forma de solución inyectable. Aunque se puede prescribir como terapia de segunda línea para varios tumores sólidos, se prescribe principalmente en el tratamiento del cáncer testicular y varios linfomas, incluida la enfermedad hodgkiniana; y linfomas linfocíticos e histiocíticos. La mielosupresión es el efecto secundario limitante de la dosis para la vinblastina.

La vincristina, vincaleucoblastina, 22-oxo-, sulfato, se puede adquirir de proveedores comerciales como ONCOVIN® en forma de solución inyectable. La vincristina se prescribe para el tratamiento de leucemias agudas y también encuentra aplicación en regímenes de tratamiento para linfomas malignos hodgkinianos y no hodgkinianos. La alopecia y los efectos neurológicos son los efectos secundarios más habituales de la vincristina y, en menor grado, se producen efectos de mucositis gastrointestinal y mielosupresión.

La vinorelbina, 3',4'-didehidro-4'-desoxi-C'-norvincaleucoblastina [R-(R*,R*)-2,3-dihidroxibutanodioato (1:2) (sal)], que se puede adquirir de proveedores comerciales en forma de solución inyectable de tartrato de vinorelbina (NAVELBINE®), es un alcaloide de la vinca semisintético. La vinorelbina se prescribe como agente único o combinado con otros agentes quimioterapéuticos, tales como el cisplatino, en el tratamiento de varios tumores sólidos, en particular los cánceres de pulmón de células no microcíticas, de mama avanzados y de próstata refractarios hormonales. La mielosupresión es el efecto secundario limitante de la dosis más habitual para la vinorelbina.

Complejos de coordinación de platino: Los complejos de coordinación de platino son agentes contra el cáncer que no son específicos de la fase, los cuales interaccionan con el ADN. Los complejos de platino entran en las células tumorales, experimentan la incorporación de agua y forman reticulaciones intra- e intercatenarias con el ADN, lo que provoca efectos biológicos adversos en el tumor. Los ejemplos de complejos de coordinación de platino incluyen, sin carácter limitante, oxaliplatino, cisplatino y carboplatino.

El cisplatino, cis-diaminodicloroplatino, se puede adquirir de proveedores comerciales como PLATINOL® en forma de solución inyectable. El cisplatino se prescribe principalmente para el tratamiento de cáncer de ovario y testicular metastásico y cáncer de vejiga avanzado.

El carboplatino, platino, diamina [1,1-ciclobutanodicarboxilato(2-)-O,O'], se puede adquirir de proveedores comerciales como PARAPLATIN® en forma de solución inyectable. El carboplatino se prescribe principalmente en la primera y segunda línea de tratamiento del carcinoma de ovario avanzado.

Agentes alquilantes: Los agentes alquilantes son agentes específicos contra el cáncer que no dependen de la fase y son electrófilos fuertes. Normalmente, los agentes alquilantes forman enlaces covalentes, mediante alquilación, con el ADN a través de restos nucleófilos de la molécula de ADN tales como grupos fosfato, amino, sulfhidrilo, hidroxilo, carboxilo e imidazol. Tal alquilación altera la función del ácido nucleico, lo que provoca la muerte celular. Los ejemplos de agentes alquilantes incluyen, sin carácter limitante, mostazas de nitrógeno tales como ciclofosfamida, melfalán y clorambucilo; alquilsulfonatos tales como busulfán; nitrosoureas tales como carmustina; y triacenos tales como dacarbacina.

La ciclofosfamida, 2-[bis(2-cloroetil)amino]tetrahidro-2H-1,3,2-oxazafosforina 2-óxido monohidrato, se puede adquirir de proveedores comerciales en forma de solución inyectable o comprimidos como CYTOXAN®. La ciclofosfamida se prescribe como agente único o combinado con otros agentes quimioterapéuticos, para el tratamiento de linfomas malignos, mieloma múltiple y leucemias.

El mefalán, 4-[bis(2-cloroetil)amino]-L-fenilalanina, se puede adquirir de proveedores comerciales en forma de solución inyectable o comprimidos como ALKERAN®. El mefalán se prescribe para el tratamiento paliativo de mieloma múltiple y carcinoma epitelial no extirpable del ovario. La supresión de la médula ósea es el efecto secundario limitante de la dosis más habitual para el mefalán.

El clorambucilo, ácido 4-[bis(2-cloroetil)amino]bencenobutanoico, se puede adquirir de proveedores comerciales como LEUKERAN® en forma de comprimidos. El clorambucilo se prescribe para el tratamiento paliativo de la leucemia linfática crónica y linfomas malignos tales como linfosarcoma, linfoma folicular de células grandes y enfermedad hodgkiniana.

El busulfán, dimetanosulfonato de 1,4-butanediol, se puede adquirir de proveedores comerciales como MYLERAN® en forma de comprimidos. El busulfán se prescribe para el tratamiento paliativo de la leucemia mielógena crónica.

La carmustina, 1,3-[bis(2-cloroetil)-1-nitrosourea, se puede adquirir de proveedores comerciales en forma de viales individuales de material liofilizado como BiCNU®. La carmustina se prescribe para el tratamiento paliativo como agente único o combinado con otros agentes para tumores cerebrales, mieloma múltiple, enfermedad hodgkiniana y linfomas no hodgkinianos.

La dacarbacina, 5-(3,3-dimetil-1-triaceno)imidazol-4-carboxamida, se puede adquirir de proveedores comerciales en forma de viales individuales de material como DTIC-Dome®. La dacarbacina se prescribe para el tratamiento de melanoma maligno metastásico y, combinada con otros agentes, para el tratamiento de línea secundaria de la enfermedad hodgkiniana.

Agentes antineoplásicos antibióticos: Los agentes antineoplásicos antibióticos son agentes que no son específicos de la fase, los cuales se unen o intercalan con el ADN. Habitualmente, tal acción da como resultado complejos de ADN estables o rotura de la hebra, lo cual altera la función ordinaria de los ácidos nucleicos y conlleva la muerte celular. Los ejemplos de agentes antineoplásicos antibióticos incluyen, sin carácter limitante, antinomicinas tales como dactinomicina, antrociclinas tales como daunorrubicina y doxorrubicina; y bleomicinas.

La dactinomicina, también conocida como actinomicina D, se puede adquirir de proveedores comerciables en forma inyectable como COSMEGEN®. La dactinomicina se prescribe para el tratamiento del tumor de Wilm y rabdomiosarcoma.

La daunorrubicina, clorhidrato de (8S-ds-)-8-acetil-10-[(3-amino-2,3,6-tridesoxi-a-L-lixo-hexopiranosil)oxi]-7,8,9,10-tetrahidro-6,8,11-trihidroxi-1-metoxi-5,12-naftacenodiona, se puede adquirir de proveedores comerciales en forma inyectable liposómica como DAUNOXOME® o en forma inyectable como CERUBIDINE®. La daunorrubicina se prescribe para inducir la remisión en el tratamiento de la leucemia no linfocítica aguda y el sarcoma de Kaposi asociado con el VIH avanzado.

La doxorrubicina, clorhidrato de (8S, 10S)-10-[(3-amino-2,3,6-tridesoxi-a-L-lixo-hexopiranosil)oxi]-8-glicoloil, 7,8,9,10-tetrahidro-6,8,11-trihidroxi-1-metoxi-5,12 naftacenodiona, se puede adquirir de proveedores comerciales en forma inyectable como RUBEX® o ADRIAMYCIN RDF®. La doxorrubicina se prescribe principalmente para el tratamiento de la leucemia linfoblástica aguda y la leucemia mieloblástica aguda, pero también es un componente útil en el tratamiento de algunos tumores sólidos y linfomas.

La bleomicina, una mezcla de antibióticos glicopeptídicos citotóxicos que se aísla a partir de una cepa de Streptomyces verticillus, se puede adquirir de proveedores comerciales como BLENOXANE®. La bleomicina se prescribe como tratamiento paliativo, como agente único o combinado con otros agentes, para el carcinoma de células escamosas, linfomas y carcinomas testiculares.

Inhibidores de la topoisomerasa II: Los inhibidores de la topoisomerasa II incluyen, sin carácter limitante, las epipodofilotoxinas.

Las epipodofilotoxinas son agentes antineoplásicos específicos de la fase que derivan de la planta de la mandrágora. Normalmente, las epipodofilotoxinas afectan a las células en las fases S y G2 del ciclo celular formando un complejo terciario con la topoisomerasa II y el ADN, que provoca roturas en las hebras del ADN. Las roturas de las hebras se acumulan y les sigue la muerte celular. Los ejemplos de epipodofilotoxinas incluyen, sin carácter limitante, el etopósido y tenipósido.

El etopósido, 4'-desmetil-epipodofilotoxina 9 [4,6-0-(R)-etiliden-p-D-glucopiranósido], se puede adquirir de proveedores comerciales en forma de solución inyectable o cápsulas como VePESID® y se conoce habitualmente como VP-16. El etopósido se prescribe como agente único o combinado con otros agentes quimioterapéuticos para el tratamiento de cánceres testiculares y de pulmón de células no microcíticas.

El tenipósido, 4'-desmetil-epipodofilotoxina 9 [4,6-0-(R)-teniliden-p-D-glucopiranósido], se puede adquirir de proveedores comerciales en forma de solución inyectable como VUMON® y se conoce habitualmente como VM-26. El tenipósido se prescribe como agente único o combinado con otros agentes quimioterapéuticos para el tratamiento de leucemia aguda en niños.

Agentes neoplásicos antimetabolitos: Los agentes neoplásicos antimetabolitos son agentes antineoplásicos específicos de la fase que actúan en la fase S (síntesis del ADN) del ciclo celular inhibiendo la síntesis del ADN o inhibiendo la síntesis de bases púricas o pirimidínicas y, por lo tanto, limitando la síntesis de ADN. Como consecuencia, la fase S no procede y le sigue la muerte celular. Los ejemplos de agentes antineoplásicos antimetabolitos incluyen, sin carácter limitante, fluorouracilo, metotrexato, citarabina, mecaptopurina, tioguanina y gemcitabina.

El 5-fluorouracilo, 5-fluoro-2,4-(1 H,3H)pirimidinodiona, se puede adquirir de proveedores comerciales como fluorouracilo. La administración de 5- fluorouracilo conduce a la inhibición de la síntesis de timidilato y además se incorpora tanto en el ADN como en el ARN. Normalmente, el resultado es la muerte celular. El 5-fluorouracilo se prescribe como agente único o combinado con otros agentes quimioterapéuticos para el tratamiento de carcinomas de mama, colon, recto, estómago y páncreas. Otros análogos de fluoropirimidina incluyen 5-fluorodesoxiuridina (floxuridina) y monofosfato de 5-fluorodesoxiuridina.

La citarabina, 4-amino-1-p-D-arabinofuranosil-2-(1H)-pirimidinona, se puede adquirir de proveedores comerciales como CYTOSAR-U® y se conoce habitualmente como Ara-C. Se cree que en la citarabina exhibe especificidad por la fase celular en la fase S, inhibiendo la elongación de la cadena de ADN mediante la incorporación terminal de la citarabina en la cadena de ADN en crecimiento. La citarabina se prescribe como agente único o combinado con otros agentes quimioterapéuticos para el tratamiento de leucemia aguda. Otros análogos de citidina incluyen 5-azacitidina y 2',2'-difluorodesoxicitidina (gemcitabina).

La mercaptopurina, 1,7-dihidro-6H-purin-6-tiona monohidratada, se puede adquirir de proveedores comerciales como PURINETHOL®. La mercaptopurina exhibe especificidad por la fase celular en la fase S inhibiendo la síntesis de ADN mediante un mecanismo que todavía no ha sido especificado. La mercaptopurina se prescribe como agente único o combinado con otros agentes quimioterapéuticos para el tratamiento de leucemia aguda. Un análogo útil de la mercaptopurina es la azatioprina.

La tioguanina, 2-amino-1,7-dihidro-6H-purin-6-tiona, se puede adquirir de proveedores comerciales como TABLOID®. La tioguanina exhibe especificidad por la fase celular en la fase S inhibiendo la síntesis de ADN mediante un mecanismo que todavía no ha sido especificado. La tioguanina se prescribe como agente único o combinado con otros agentes quimioterapéuticos para el tratamiento de leucemia aguda. Otros análogos de la purina incluyen pentostatina, eritrohidroxinoniladenina, fosfato de fludarabina y cladribina.

La gemcitabina, monoclorhidrato de 2'-desoxi-2',2'-difluorocitidina (isómero p), se puede adquirir de proveedores comerciales como GEMZAR®. La gemcitabina exhibe especificidad por la fase celular en la fase S y bloquea la evolución de las células a través del límite de G1/S. La gemcitabina se prescribe combinada con cisplatino para el tratamiento del cáncer de pulmón de células no microcíticas localmente avanzado y se prescribe sola para el tratamiento de cáncer pancreático localmente avanzado. El metotrexato, ácido W-[4[(2,4-diamino-6-pteridinil)metil]metilamino]benzoil]-L-glutámico, se puede adquirir de proveedores comerciales como metotrexato sódico. El metotrexato exhibe efectos en la fase celular específicamente en la fase S mediante la inhibición de la síntesis, reparación y/o replicación del ADN a través de la inhibición de la ácido dihidrofólico-reductasa, que se requiere para la síntesis de timidilato y nucleótidos de purina. El metotrexato se prescribe como agente único o combinado con otros agentes quimioterapéuticos para el tratamiento de coriocarcinoma, leucemia meníngea, linfoma no hodgkiniano y carcinomas de mama, cabeza, cuello, ovario y bejiga.

Inhibidores de la topoisomerasa I: Las camptotecinas, que incluyen la camptotecina y derivados de la camptotecina, están disponibles o en desarrollo como inhibidores de la topoisomerasa I. Se cree que la actividad citotóxica de las camptotecinas está relacionada con su actividad inhibidora de la topoisomerasa I. Los ejemplos de camptotecinas incluyen, sin carácter limitante, irinotecán, topotecán y las diferentes formas ópticas de 7-(4-metilpiperazinometilen)-10,11 -etilenodioxi-20-camptotecina que se describen a continuación.

El irinotecán HCl, clorhidrato de (4S)-4,11-dietil-4-hidroxi-9-[(4-piperidinopiperidino)carboniloxi]-1H-pirano[3',4',6,7]indolizino[1,2-¿>]quinolin-3,14(4H,12H)-diona, se puede adquirir de proveedores comerciales como CAMPTOSAR® en forma de solución inyectable. El irinotecán es un derivado de la camptotecina que se une, junto con su metabolito activo SN- 38, al complejo de topoisomerasa I - ADN. Se cree que la citotoxicidad se produce como resultado de roturas bicatenarias irreparables provocadas por la interacción del complejo ternario topoisomerasa I : ADN : irinotecán o SN-38 con las enzimas de replicación. El irinotecán se prescribe para el tratamiento del cáncer metastásico de colon o recto.

El topotecán HCl, monoclorhidrato de (S)-10-[(dimetilamino)metil]-4-etil-4,9-dihidroxi-1 H-pirano[3',4',6,7]indolizino[1,2-¿>]quinolin-3,14-(4H,12H)-diona, se puede adquirir de proveedores comerciales como HYCAMTIN® en forma de solución inyectable. El topotecán es un derivado de la camptotecina que se une al complejo de topoisomerasa I - ADN y evita la ligación de nuevo de las roturas monocatenarias provocadas por la topoisomerasa I como respuesta a la tensión torsional de la molécula de ADN. El topotecán se prescribe para el tratamiento de línea secundaria del carcinoma metastásico de ovario y el cáncer de pulmón de células microcíticas.

Hormonas y análogos hormonales: Las hormonas y los análogos hormonales son compuestos útiles para tratar cánceres en los que existe una correlación entre la(s) hormona(s) y el crecimiento y/o falta de crecimiento del cáncer. Los ejemplos de hormonas y análogos hormonales útiles en el tratamiento del cáncer incluyen, sin carácter limitante, adrenocorticosteroides tales como prednisona y prednisolona, que son útiles en el tratamiento de linfoma maligno y leucemia aguda en niños; aminoglutetimida y otros inhibidores de aromatasas tales como anastrozol, letrazol, vorazol y exemestano, útiles en el tratamiento de carcinoma adrenocortical y carcinoma de mama dependiente de hormonas que contiene receptores de estrógeno; progestrinas tales como acetato de megestrol, útiles en el tratamiento de cáncer de mama dependiente de hormonas y carcinoma endometrial; estrógenos, andrógenos y antiandrógenos tales como flutamida, nilutamida, bicalutamida, acetato de ciproterona y 5a-reductasas tales como finasterida y dutasterida, útiles en el tratamiento de carcinoma prostático e hipertrofia prostática benigna; antiestrógenos tales como tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, yodoxifeno, así como también moduladores de receptores de estrógenos selectivos (SERMS, por sus siglas en inglés) tales como los que se describen en las Patentes de EE. UU. N.os 5681 835, 5877 219 y 6 207 716, útiles en el tratamiento de carcinoma de mama dependiente de hormonas y otros cánceres susceptibles; y la hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) y sus análogos, que estimulan la liberación de la hormona luteinizante (LH) y/o la hormona estimuladora de los folículos (FSH) para el tratamiento de carcinoma prostático, por ejemplo, agonistas y antagonistas de LHRH tales como acetato de goserelina y luprolida.

Inhibidores de la vía de transducción de señales: Los inhibidores de la vía de transducción de señales son aquellos inhibidores que bloquean o inhiben un proceso químico que provoca un cambio intracelular. Tal como se utiliza en la presente, este cambio es la proliferación o diferenciación celular. Los inhibidores de la transducción de señales útiles en la presente invención incluyen inhibidores de tirosina-cinasas que son receptores, tirosina-cinasas que no son receptores, bloqueadores de los dominios SH2/SH3, serina/treonina-cinasas, fosfotidilinositol-3-cinasas, señalización de mioinositol y oncogenes de Ras.

Varias cinasas de tirosinas de proteínas catalizan la fosforilación de residuos de tirosilo específicos en varias proteínas que participan en la regulación del crecimiento celular. Tales cinasas de tirosinas de proteínas se pueden clasificar a grandes rasgos como cinasas que son receptores y que no son receptores.

Las tirosina-cinasas que son receptores son proteínas de transmembrana que tienen un dominio de unión al ligando extracelular, un dominio de transmembrana y un dominio de tirosina-cinasa. Las tirosina-cinasas que son receptores participan en la regulación del crecimiento celular y se denominan por lo general receptores de los factores de crecimiento. Se ha demostrado que la activación inadecuada o descontrolada de muchas de estas cinasas, es decir, una actividad anómala de los receptores de los factores de crecimiento de tipo cinasa, por ejemplo, mediante sobreexpresión o mutación, da como resultado un crecimiento celular descontrolado. Por consiguiente, la actividad anómala de tales cinasas se ha relacionado con el crecimiento de tejido maligno. Como consecuencia, los inhibidores de tales cinasas podrían proporcionar métodos de tratamiento contra el cáncer. Los receptores de los factores de crecimiento incluyen, por ejemplo, el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFr), receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFr), erbB2, erbB4, ret, receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFr), tirosina-cinasa con dominios de homología del factor de crecimiento epidérmico y similares a la inmunoglobulina (TIE-2), receptor del factor de crecimiento de la insulina I (IGFI), factor estimulador de colonias de macrófagos (cfms), BTK, ckit, cmet, receptores del factor de crecimiento de fibroblastos (FGF), receptores de Trk (TrkA, TrkB y TrkC), receptores de efrina (eph) y el protooncogén RET. Varios inhibidores de receptores de crecimiento se encuentran en desarrollo e incluyen antagonistas de ligandos, anticuerpos, inhibidores de tirosina-cinasas y oligonucleótidos antisentido. Los receptores de factores de crecimiento y agentes que inhiben la función de los receptores de factores de crecimiento se describen, por ejemplo, en Kath, John C., Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(6):803-818; Shawver etal. DDT Vol 2, N.° 2 febrero de 1997; y Lofts, F. J. etal., "Growth factor receptors as targets'', New Molecular Targets for Cáncer Chemotherapy, ed. Workman, Paul and Kerr, David, CRC press 1994, Londres.

Las tirosina-cinasas que no son cinasas de tipo receptores de factores de crecimiento se denominan tirosina-cinasas que no son receptores. Las tirosina-cinasas que no son receptores útiles en la presente invención, las cuales son dianas o dianas potenciales de fármacos contra el cáncer, incluyen cSrc, Lck, Fyn, Yes, Jak, cAbl, FAK (cinasa de adhesión focal), tirosina-cinasa de Bruton y Bcr-Abl. Tales cinasas que no son receptores y los agentes que inhiben la función de las tirosina-cinasas que no son receptores se describen en Sinh, S. y Corey, S.J., (1999) Journal of Hematotherapy and Stem Cell Research 8 (5): 465 - 80; and Bolen, J.B., Brugge, J.S., (1997) Annual review of Immunology. 15: 371-404.

Los bloqueadores de los dominios SH2/SH3 son agentes que alteran la unión del dominio SH2 o SH3 en varias enzimas o proteínas adaptadoras, que incluyen la subunidad p85 de PI3-K, cinasas de la familia Src, moléculas adaptadoras (Shc, Crk, Nck, Grb2) y Ras-GAP. En Smithgall, T.E. (1995), Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 34(3) 125-32, se discuten los dominios SH2/SH3 como dianas para fármacos contra el cáncer.

Inhibidores de serina/treonina-cinasas, que incluyen bloqueadores de la cascada de cinasas MAP, los cuales incluyen bloqueadores de cinasas Raf (rafk), cinasa regulada por vía extracelular o por mitógeno (MEK) y cinasas reguladas por vía extracelular (ERK); y bloqueadores de los miembros de la familia C de proteína-cinasas, que incluyen los bloqueadores de PKC (alfa, beta, gamma, epsilon, mu, lambda, iota, zeta). Familia de cinasas IkB (IKKa, IKKb), cinasas de la familia PKB, miembros de la familia de cinasas akt y cinasas que son receptores de TGF beta. Tales serina/treonina-cinasas y sus inhibidores se describen en Yamamoto, T., Taya, S., Kaibuchi, K., (1999), Journal of Biochemistry. 126 (5) 799-803; Brodt, P, Samani, A. y Navab, R. (2000), Biochemical Pharmacology, 60. 1101-1107; Massague, J., Weis-Garcia, F. (1996) Cancer Surveys. 27:41-64; Philip, P.A. y Harris, A.L. (1995), Cancer Treatment and Research. 78: 3-27, Lackey, K. et al. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, (10), 2000, 223-226; Patente de EE. UU. N^ 6268391; y Martinez-Iacaci, L. et al., Int. J. Cancer (2000), 88(1), 44-52.

Los inhibidores de los miembros de la familia de fosfotidilinositol-3-cinasas, incluidos los bloqueadores de la PI3-cinasa, ATM, DNA-PK y Ku también son útiles en la presente invención. Tales cinasas se discuten en Abraham, R.T. (1996), Current Opinion in Immunology. 8 (3) 412-8; Canman, C.E., Lim, D.S. (1998), Oncogene 17 (25) 3301-3308; Jackson, S.P. (1997), International Journal of Biochemistry and Cell Biology. 29 (7):935-8; y Zhong, H. et al., Cancer res, (2000) 60(6), 1541-1545.

En la presente invención, también son útiles los inhibidores de la señalización del mioinositol tales como los bloqueadores de la fosfolipasa C y análogos del mioinositol. Tales inhibidores de señales se describen en Powis, G. y Kozikowski A., (1994) New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy ed., Paul Workman y David Kerr, CRC press 1994, Londres.

Otro grupo de inhibidores de la vía de transducción de señales son los inhibidores del oncogén Ras. Tales inhibidores incluyen inhibidores de la farnesilo-transferasa, geranilo-geranilo-transferasa y proteasas CAAX, así como también oligonucleótidos antisentido, ribozimas e inmunoterapia. Se ha demostrado que tales inhibidores bloquean la activación de ras en células que contienen ras mutado de origen natural, con lo que actúan como agentes contra la proliferación. La inhibición del oncogén Ras se discute en Scharovsky, O.G., Rozados, V.R., Gervasoni, S.I. Matar, P. (2000), Journal of Biomedical Science. 7(4) 292-8; Ashby, M.N. (1998), Current Opinión in Lipidology. 9 (2) 99 -102; y BioChim. Biophys. Acta, (19899) 1423(3):19-30.

Según se ha mencionado anteriormente, los antagonistas de tipo anticuerpo para la unión de ligandos de tipo cinasa que son receptores también pueden actuar como inhibidores de la transducción de señales. Este grupo de inhibidores de la vía de transducción de señales incluye el uso de anticuerpos humanizados para el dominio de unión al ligando extracelular de las tirosina-cinasas que son receptores. Por ejemplo, el anticuerpo específico para EGFR Imclone C225 (remítase a Green, M.C. etal., MonoclonalAntibody Therapy forSolid Tumors, Cancer Treat. Rev, (2000), 26(4), 269-286); el anticuerpo para erbB2 Herceptin ® (remítase a Tyrosine Kinase Signalling in Breast cancer:erbB Family Receptor Tyrosine Kinases, Breast cancer Res., 2000, 2(3), 176-183); y el anticuerpo específico para VEGFR2 2CB (remítase a Brekken, R.A. et al., Selective Inhibition of VEGFR2 Activity by a monoclonal Anti-VEGF antibody blocks tumor growth in mice, Cancer Res. (2000) 60, 5117-5124).

Agentes antiangiogénicos: Los agentes antiangiogénicos, incluidos los inhibidores de la angiogénesis de MEK que no son receptores, también pueden ser útiles. Agentes antiangiogénicos tales como los que inhiben los efectos del factor de crecimiento endotelial vascular (por ejemplo, el anticuerpo anti-factor de crecimiento celular endotelial vascular bevacizumab [Avastin™] y compuestos que actúan mediante otros mecanismos (por ejemplo, linomida, inhibidores de la función de la integrina avp3, endostatina y angiostatina);

Agentes inmunoterapéuticos: Los agentes empleados en regímenes inmunoterapéuticos también pueden ser útiles combinados con los compuestos de fórmula (I). Estrategias inmunoterapéuticas, incluidas, por ejemplo, estrategias in vivo y ex vivo para incrementar la inmunogenicidad de las células tumorales de un paciente tales como la transfección con citocinas tales como interleucina-2, interleucina 4 o factor estimulador de colonias de macrófagos, estrategias para reducir la anergia de los linfocitos T, estrategias que utilizan células inmunitarias transfectadas tales como células dendríticas transfectadas con citocinas, estrategias que utilizan líneas de células tumorales transfectadas con citocinas y estrategias que utilizan anticuerpos anti-idiotípicos.

Agentes proapoptóticos: Los agentes utilizados en regímenes proapoptóticos (p. ej., oligonucleótidos antisentido bcl-2) también se pueden utilizar en la combinación de la presente invención.

Inhibidores de la señalización del ciclo celular: Los inhibidores de la señalización del ciclo celular inhiben moléculas que participan en el control del ciclo celular. Una familia de cinasas de proteínas que se denominan cinasas dependientes de ciclina (CDK) y su interacción con una familia de proteínas que se denominan ciclinas controla la evolución a través del ciclo de las células eucariotas. La activación y desactivación coordinada de diferentes complejos de ciclina/CDK es necesaria para una evolución normal a través del ciclo celular. Varios inhibidores de la señalización del ciclo celular están en desarrollo. Por ejemplo, se describen ejemplos de cinasas dependientes de ciclina, que incluyen CDK2, CDK4 y CDK6, e inhibidores de las mismas en, por ejemplo, Rosania et al., Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(2):215-230.

En una realización, la combinación de la presente invención comprende un compuesto de fórmula I o un solvato o una sal de este y al menos un agente antineoplásico seleccionado entre agentes antimicrotubulares, complejos de coordinación de platino, agentes alquilantes, agentes antibióticos, inhibidores de la topoisomerasa II, antimetabolitos, inhibidores de la topoisomerasa I, hormonas y análogos hormonales, inhibidores de la vía de transducción de señales, inhibidores de la angiogénesis de MEK de tipo tirosina que no son receptores, agentes inmunoterapéuticos, agentes proapoptóticos e inhibidores de la señalización del ciclo celular.

En una realización, la combinación de la presente invención comprende un compuesto de fórmula I o un solvato o una sal de este y al menos un agente antineoplásico que es un agente antimicrotubular seleccionado entre diterpenoides y alcaloides de la vinca.

En una realización adicional, dicho al menos un agente antineoplásico es un diterpenoide.

En una realización adicional, dicho al menos un agente antineoplásico es un alcaloide de la vinca.

En una realización, la combinación de la presente invención comprende un compuesto de fórmula I o un solvato o una sal de este y al menos un agente antineoplásico, el cual es un complejo de coordinación de platino.

En una realización adicional, dicho al menos un agente antineoplásico es paclitaxel, carboplatino o vinorelbina.

En una realización adicional, dicho al menos un agente antineoplásico es carboplatino.

En una realización adicional, dicho al menos un agente antineoplásico es vinorelbina.

En una realización adicional, dicho al menos un agente antineoplásico es paclitaxel.

En una realización, la combinación de la presente invención comprende un compuesto de fórmula I o un solvato o una sal de este y al menos un agente antineoplásico, el cual es un inhibidor de la vía de transducción de señales.

En una realización adicional, el inhibidor de la vía de transducción de señales es un inhibidor de una cinasa que es un receptor de factores de crecimiento VEGFR2, TIE2, PDGFR, BTK, erbB2, EGFr, IGFR-1, TrkA, TrkB, TrkC o c-fms. En una realización adicional, el inhibidor de la vía de transducción de señales es un inhibidor de una serina/treoninacinasa rafk, akt o PKC-zeta.

En una realización adicional, el inhibidor de la vía de transducción de señales es un inhibidor de una tirosina-cinasa que no es un receptor seleccionada entre la familia src de cinasas.

En una realización adicional, el inhibidor de la vía de transducción de señales es un inhibidor de c-src.

En una realización adicional, el inhibidor de la vía de transducción de señales es un inhibidor del oncogén Ras seleccionado entre inhibidores de farnesilo-transferasa y geranilo-geranilo-transferasa.

En una realización adicional, el inhibidor de la vía de transducción de señales es un inhibidor de una serina/treoninacinasa seleccionada del grupo constituido por PI3K.

En una realización adicional, el inhibidor de la vía de transducción de señales es un inhibidor de EGFr/erbB2 dual, por ejemplo, W-{3-cloro-4-[(3-fluorobencil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonol)etil]amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina (estructura siguiente):

En una realización, la combinación de la presente invención comprende un compuesto de fórmula I o un solvato o una sal de este y al menos un agente antineoplásico, el cual es un inhibidor de la señalización del ciclo celular.

En una realización adicional, el inhibidor de la señalización del ciclo celular es un inhibidor de CDK2, CDK4 o CDK6. En una realización, el mamífero en los métodos y usos de la presente invención es un ser humano.

Convenientemente, la presente divulgación se refiere a un método para tratar o reducir la gravedad de un cáncer en el que cada uno de Raf, Ras, MEK y PI3K/Pten es o bien de origen natural o mutado. Esto incluye, sin carácter limitante, pacientes que tienen cánceres en los que RAF está mutado, RAS es de origen natural, MEK es de origen natural y PI3K/PTEN es de origen natural; RAF está mutado, RAS está mutado, MEK es de origen natural y PI3K/PTEN es de origen natural; RAF está mutado, RAS está mutado, MEK está mutado y PI3K/PTEN es de origen natural; y RAF está mutado, RAS es de origen natural, MEK está mutado y PI3K/PTEN es de origen natural.

La expresión «de origen natural», según se sobreentiende en la técnica, se refiere a una secuencia de polinucleótido o polipéptido que se encuentra en una población nativa sin modificación genética. Como también se sobreentiende en la técnica, «mutado» incluye una secuencia de polinucleótido o polipéptido que tiene al menos una modificación en un ácido nucleico o aminoácido en comparación con el ácido nucleico o aminoácido correspondiente que se encuentra en un polinucleótido o polipéptido de origen natural, respectivamente. En el término mutado se incluye el polimorfismo de un único nucleótido (SNP, por sus siglas en inglés), donde existe una única distinción de pares de bases en la secuencia de una hebra de ácido nucleico en comparación con la hebra de ácido nucleico que se encuentra de forma más predominante (de origen natural).

Los cánceres en los que Raf, Ras, MEK están mutados o son de origen natural, o PI3K/Pten está mutado se identifican mediante métodos conocidos. Por ejemplo, se pueden identificar células tumorales mutadas o de origen natural mediante técnicas de amplificación y secuenciación de ADN, técnicas de detección de ADN y ARN, que incluyen, sin carácter limitante, inmunotransferencia de Northern y Southern, respectivamente, y/o varias tecnologías de biochip y matriz. Los polipéptidos mutados y de origen natural se pueden detectar mediante varias técnicas, que incluyen, sin carácter limitante, técnicas de inmunodiagnóstico tales como ELISA, inmunotransferencia de Western o inmunocitoquímica. Convenientemente, se pueden utilizar métodos de polimerización activada por pirofosforólisis (PAP) y/o PCR. Liu, Q et al.; Human Mutation 23:426-436 (2004).

Ejemplos

Ejemplo de referencia 1 - Composición de cápsulas

Una forma farmacéutica oral para administrar una combinación de la presente invención se produce rellenando una cápsula de gelatina dura de dos piezas estándar con los ingredientes en las proporciones que se muestran en la Tabla A a continuación.

Tabla A

INGREDIENTES CANTIDADES

Clorhidrato de /V-(3-[3-ciclopropil-5-(2-fluoro-4-yodofenilamino)6,8-dimetil- 5 mg

2,4,7-trioxo-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirido[4,3-d]pirimidin-1 -il]fenil}acetamida

(Compuesto A)

Metanosulfonato de W-(3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3- 100 mg

tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida (la sal de tipo

metanosulfonato del Compuesto B)

Manitol 250 mg

Talco 125 mg

Estearato de magnesio 8 mg

Ejemplo 2

ENSAYOS

Estudios de combinación in vitro de inhibidores de BRAF y MEK en líneas de células cancerosas de múltiples orígenes que codifican diferentes mutaciones

A. Intervalos de concentraciones A

Se llevaron a cabo experimentos de combinaciones de fármacos en placas de 384 pocillos. Se colocaron células en placas de 384 pocillos con una densidad de 500 células/pocillo en un medio de cultivo adecuado para cada tipo de célula, suplementado con un 10% de FBS y un 1% de penicilina/estreptomicina, y se incubaron durante toda la noche a 37 °C con un 5% de CO2. Se evaluaron en matriz dieciséis concentraciones con una dilución de factor 2 para cada fármaco con el fin de determinar la inhibición del crecimiento celular. Las concentraciones evaluadas para el compuesto A (forma libre) fueron de 1 pM - 0.03 nM y para el compuesto B (solvato de DMSO) fueron de 10 pM - 0.3 nM. Las células se trataron con la combinación de compuestos y se incubaron a 37 °C durante 72 horas. El crecimiento celular se midió utilizando el reactivo CellTiter-Glo® de acuerdo con el protocolo del proveedor y las señales se registraron en un lector PerkinElmer EnVision™ programado en modo de luminiscencia con una lectura de 0.5 segundos. Los resultados se expresan como un porcentaje de inhibición en comparación con células tratadas con DMSO y se realizó una corrección del fondo restando los valores procedentes de pocillos que no contenían células.

La respuesta (porcentaje de inhibición en comparación con muestras no tratadas y normalizado respecto al medio solo) del compuesto «A» con una concentración «a» (Ra) y del compuesto «B» con una concentración «b» (Rb) se compara con la respuesta de la mezcla de los compuestos «A» y «B» con concentraciones «a» y «b», respectivamente (Rab). Utilizando estos valores, se calculó el exceso respecto al agente único más elevado (EOHSA, por sus siglas en inglés) para cada concentración de cada una de las líneas celulares evaluadas:

Rab > 10% del valor más elevado entre Ra y Rb = más que aditivo

Rab <- 10% del valor más elevado entre Ra y Rb = más antagonismo

Utilizando esta fórmula, si Rab es superior, en un 10% o más, al valor más elevado entre Ra y Rb, se considera que la combinación de fármacos es más que aditiva. Si Rab es inferior, en un 10% o más, al valor más elevado entre Ra y Rb, la combinación de fármacos es antagonística.

Para cada una de las líneas celulares evaluadas, se registró el número de combinaciones en la matriz de 16 X 16 con una respuesta más que aditiva (aquellas en las que Rab es más de un 10% superior al valor más elevado entre Ra y Rb). El número de combinaciones más que aditivas (entre las 264 evaluadas) se resume en la Tabla 1. En esta tabla, se observó que las combinaciones de concentraciones en una línea celular dada eran particularmente beneficiosas (recuadro gris) si más de un 20% (51 combinaciones de entre las 256 evaluadas) de las combinaciones evaluadas mostraron > 10% de EOHSA.

Tabla 1: Efecto de la combinación de inhibidores de MEK BRAF en múlti les líneas de células cancerosas.

Estos datos demuestran que la combinación del Compuesto A y el Compuesto B es favorable en múltiples líneas de células cancerosas de múltiples orígenes independientemente del estado mutacional de los oncogenes clave en las vías de MAPK o AKT/PI3K/PTEN.

B. Intervalos de concentraciones B

Se llevó a cabo una evaluación similar al de la Sección A anterior de la combinación del Compuesto A y el Compuesto B utilizando los datos generados en la Sección A, pero únicamente para concentraciones de los fármacos que se consideraron clínicamente relevantes (100 nM - 3 nM). Estas concentraciones se seleccionaron como aquellas que tenían tendencia a ser eficaces pero atóxicas en modelos preclínicos de xenoinjertos en ratones. Utilizando estas concentraciones, se evaluaron un total de 25 combinaciones de fármacos para cada línea celular y los resultados se resumen en la Tabla 2.

Se calculó el número de combinaciones con Rab > 10% del valor más elevado entre Ra y Rb de las 25 combinaciones clínicamente relevantes evaluadas y se expresaron como un porcentaje en la Tabla 2.

Tabla 2: combinación in vitro de inhibidores de MEK y BRAF utilizando concentraciones de fármacos clínicamente relevantes

Los datos demuestran que la combinación del Compuesto A y el Compuesto B es favorable en la mayoría de líneas celulares evaluadas para concentraciones de los fármacos clínicas relevantes y muy favorable para las líneas de células mutadas BRAFV600E y KRAS evaluadas, independientemente del estado mutacional de la vía de PI3K/PTEN.

Inhibición del crecimiento celular in vitro en líneas de células tumorales

Métodos:

Líneas celulares y condiciones de crecimiento - Las líneas de tumores humanos de colon, Colo-205, DLD-1, HCT-8, HT-29, LS-1034, NCI-H508, RKO, SW1417, SW1463, SW480 y SW837, y la línea de melanoma humano A375 eran de ATCC. A375PF11 se obtuvo a partir de A375. 12R5-1, 12R5-3, 12R8-1, 12R8-3, 16R5-2, 16R6-3 y 16R6-4 son clones de células individuales que derivan de poblaciones mixtas de células A375PF11 que se seleccionaron para crecer en el Compuesto A hasta concentraciones de 1200 y 1600 nM, exhibiendo por lo tanto resistencia adquirida al Compuesto B. Todas las líneas se cultivaron en medio RPMi 1640 que contenía un 10% de suero bovino fetal (FBS).

Ensayos de inhibición del crecimiento celular y análisis de los datos de la combinación - Todas las células se cultivaron durante un mínimo de 72 horas antes de colocar las células en la placa. Las células se evaluaron en una placa de cultivo tisular de 96 pocillos (NUNC 136102) de medio RPMI que contenía un 10% de FBS para todas las células con una densidad de 1000 células por pocillo. Aproximadamente 24 horas después de colocarlas en la placa, las células fueron expuestas a diez diluciones en serie de factor tres del compuesto o la combinación de los agentes con una relación molar a molar constante de 1:10 de Compuesto A (solvato de DMSO) respecto a Compuesto B (forma libre) en medio RPMI que contenía un 10% de FBS. Las concentraciones evaluadas para el Compuesto A fueron de 1 pM -0.05 nM y para el Compuesto B fueron de 10 pM - 0.5 nM. Las células se incubaron en presencia de los compuestos durante 3 días. Se determinaron los niveles de ATP añadiendo Cell Titer Glo® (Promega) de acuerdo con el protocolo del proveedor. En resumen, se añadió Cell Titer Glo® en cada placa, se incubó durante 30 minutos y a continuación se registró la señal luminiscente en el lector de placas SpectraMax L con un tiempo de integración de 0.5 s.

La inhibición del crecimiento celular se estimó después del tratamiento con el compuesto o la combinación de compuestos durante tres días y se comparó la señal con la de las células tratadas con vehículo (DMSO). El crecimiento celular se calculó respecto al de los pocillos de control tratados con vehículo (DMSO). La concentración del compuesto que inhibe un 50% del crecimiento celular de control (CI50) se interpoló cuando y = 50% del control de vehículo utilizando una regresión no lineal con la ecuación y=(A+(B-A)/(1+(C/x)AD))), donde A es la respuesta mínima (ymín), B es la respuesta máxima (ymáx), C es el punto de inflexión de la curva (CE50) y D es el coeficiente de Hill.

Los efectos de la combinación sobre la potencia se evaluaron utilizando el Índice de combinación (IC), el cual se calculó con los valores de CI50 retrointerpolados y la ecuación mutualmente no exclusiva derivada de Chou y Talalay (1):

IC = Da/Cl50(a) Db/CMb) (Da x Db)/(Cl5ü(a) x C M b))

donde Cl50(a) es el valor de CI50 del Compuesto A; Cl50(b) es el valor de CI50 para el Compuesto B; Da es la concentración del Compuesto A combinado con el Compuesto B que inhibió un 50% del crecimiento celular; y Db es la concentración del Compuesto B combinado con el Compuesto A que inhibió un 50% del crecimiento celular. En general, un valor de IC < 0.9, entre 0.9 y 1.1, o > 1.1 indica sinergia, aditividad y antagonismo, respectivamente. En general, cuanto mayor sea el número de IC, mayor será la fuerza de la sinergia.

Los efectos de la combinación sobre la escala de la respuesta se cuantificaron según el exceso respecto al agente único más elevado (EOHSA), basándose en el concepto de mezcla no lineal que ha sido descrito detalladamente por Peterson y Novick (2007) y Peterson (2010) [(2;3) [Peterson y Novick, 2007; Peterson, 2010]. Los valores de EOHSA se definen como incrementos en la mejoría (en este caso, en la diferencia de «puntos porcentuales» (ppt)) producida por la combinación respecto al mejor agente único en su nivel de dosis del componente para la combinación. Para los tratamientos con un único agente y con la combinación, las células fueron expuestas a los compuestos con una relación de dosis fija, y las curvas de dosis-respuesta se ajustaron a los datos experimentales y se analizaron utilizando modelos de regresión. Para niveles de dosis totales especificados de CI50 a lo largo de la curva de dosis-respuesta, se determinó la combinación de dosis (correspondiente a CI50) para provocar inferencias estadísticas de EOHSA. Más específicamente, se dice que un experimento de fármacos combinados que implica un fármaco 1 con una dosis d1 y un fármaco 2 con una dosis d2 (es decir, la dosis total equivale a d1+d2) tiene un valor de EOHSA positivo si la respuesta media para la combinación es mejor que la respuesta media para el fármaco 1 con la dosis d1 o el fármaco 2 con la dosis d2.

Resultados:

Se determinó el efecto de inhibición del crecimiento celular por parte de un inhibidor de MEK, que es el Compuesto A, un inhibidor de BRAF, que es el Compuesto B, y su combinación en un panel de líneas de células tumorales humanas. Los valores medios de CI50 (de al menos dos experimentos independientes) y los efectos de la combinación para CI50 se resumen en la Tabla 3 con los estados de mutación de BRAF y KRAS.

Respecto a la Tabla 3, las cuatro líneas celulares de colon con la mutación V600E de BRAF presentaron sensibilidad al Compuesto A con valores de CI50 comprendidos entre 0.001 pM y 0.025 pM, y al Compuesto B con valores de CI50 comprendidos entre 0.018 pM y 5.654 pM. La combinación del Compuesto A y el Compuesto B fuese enérgica con valores de IC comprendidos entre 0.25 y 0.73 y/o una inhibición del crecimiento celular mejorada con valores de EOHSA comprendidos entre 7 y 26 ppt en estas cuatro líneas con la mutación V600E de BRAF. Las siete líneas de colon sin la mutación V600E de BRAF (con la mutación G596R de BRAF o con mutaciones de KRAS) fueron insensibles al Compuesto B (CI50 > 10 pM), sin embargo fueron muy sensibles a la inhibición del crecimiento celular por parte del Compuesto A con valores de CI50 comprendidos en el intervalo de 0.001 a 0.093 pM en seis de las siete líneas. La combinación del Compuesto A y el Compuesto B presentó una inhibición del crecimiento celular mejorada en la línea de tumor de colon DLD1, y un beneficio mínimo o no añadido respecto al tratamiento con un único compuesto, el Compuesto A, en las otras seis líneas de células de colon.

Para las líneas de melanoma enumeradas en la Tabla 3, las células A375PF11 con la mutación V600E de BRAF fueron muy sensibles o bien al Compuesto A (CI50 = 0.001 pM) o al Compuesto B (CI50 = 0.012 pM) como agente único. La combinación del Compuesto A y el Compuesto B fue sinérgica con un valor de IC de 0.3 en las células A375PF11. Las líneas de melanoma 12R8-3, 12R8-1, 12R5-3 y 16R6-3 fueron resistentes al Compuesto B (CI50 > 10pM), moderadamente sensibles al Compuesto A con valores de CI50 comprendidos en el intervalo de 0.058 pM a 0.109 y respondieron a la combinación del Compuesto A y el Compuesto B con valores de CI50 comprendidos en el intervalo de 0.018 a 0.023 pM para el Compuesto A y 0.178-0.234 pM para el Compuesto B. Las líneas de melanoma 16R5-2, 16R6-4 y 12R5-1 fueron resistentes o insensibles o bien al Compuesto A o al Compuesto B solo, sin embargo se volvieron sensibles a la combinación del Compuesto A y el Compuesto B con valores de CI50 comprendidos en el intervalo de 0.018 a 0.039 pM para el Compuesto A y 0.177-0.386 pM para el Compuesto B. La combinación del Compuesto A y el Compuesto B también mostró una mejora de la inhibición del crecimiento celular en todas estas líneas de melanoma. Cabe destacar que no se pudieron calcular los valores de IC, por consiguiente, no se aplican cuando los valores del agente único estaban fuera del intervalo evaluado.

Es interesante observar que la administración combinada del Compuesto A y el Compuesto B en las líneas celulares mutadas de melanoma y colon BRAF-V600E mostró un efecto sinérgico demostrado por los valores de IC < 0.9, o dio como resultado un valor de CI50 menor en comparación con el del Compuesto A o el Compuesto B, administrado por sí solo, donde al menos uno de los agentes únicos no dio como resultado un 50% de inhibición en el intervalo evaluado.

Tabla 3. Inhibición del crecimiento celular por parte del Compuesto A, el Compuesto B y su combinación en líneas de células tumorales humanas.

Leyenda de la Tabla 3:

CI50: la concentración del Compuesto como agente único, o la concentración del Compuesto A o B combinado cuando la relación molar del Compuesto A y el Compuesto B = 1:10, que reduce el crecimiento celular en un 50%;

IC: Índice de combinación; N/A = no se aplica

EOHSA: Exceso respecto al agente único más elevado, medido como un porcentaje.

Lista de referencias

(1) Chou TC, Talalay P. Quantitative analysis of dose-effect relationships: the combined effects of múltiple drugs or enzyme inhibitors. Adv Enzyme Regul 1984; 22:27-55.

(2) Peterson JJ, Novick SJ. Nonlinear blending: a useful general concept for the assessment of combination drug synergy. J Recept Signal Transduct Res 2007; 27(2-3):125-46.

(3) Peterson J. A Review of Synergy Concepts of Nonlinear Blending and Dose-Reduction Profiles. Frontiers of Bioscience S2, 483-503. 2010.

Modelo de xenoinjerto en ratón A

Se establecieron modelos de xenoinjerto A utilizando células A375P F11 (líneas celulares de melanoma humano que codifican la mutación BRafV600E) a partir de células cultivadas en un cultivo tisular y recolectadas de forma aséptica utilizando una digestión de tripsina. Las células tumorales se inyectaron por vía subcutánea en ratones atímicos hembra (cepa nu/nu) con una densidad comprendida entre 5x106 y 107 células en martigel al 50%. Se permitió que se establecieran los tumores. La dosificación se inició el día 24 después del implante, que correspondió a un volumen del tumor medio de ~200 mm3.

Este modelo de tumor de xenoinjerto humano utilizó 4 grupos de ratones, con 8 ratones por grupo. Los ratones se identificaron mediante un microchip subcutáneo (sc) o tatuajes.

Un primer grupo de animales de control portadores del tumor tratados con placebo o no tratados actuaron como controles. A un segundo grupo se le administró una dosis por vía oral una vez al día de W-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida (forma de base libre cristalina) (Compuesto B). A un tercer grupo se le administró una dosis por vía oral una vez al día de un solvato de N-{3-[3-ciclopropil-5-(2-fluoro-4-yodofenilamino)6,8-dimetil-2,4,7-trioxo-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirido[4,3-d]pirimidin-1-il]fenil}acetamida con sulfóxido de dimetilo (Compuesto A). A un cuarto grupo se le administró una dosis por vía oral una vez al día de una combinación de N-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida (forma de base libre cristalina) y un solvato de N-{3-[3-ciclopropil-5-(2-fluoro-4-yodofenilamino)6,8-dimetil-2,4,7-trioxo-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirido[4,3-d]pirimidin-1 -il]fenil}acetamida con sulfóxido de dimetilo. Cada fármaco se proporcionó en una suspensión de un 0.5% de HPMC/0.2% de TWEEN 80.

Los tamaños de los tumores se midieron dos veces por semana utilizando calibres de Vernier. El volumen del tumor se calculó a partir de medidas bidimensionales utilizando una ecuación que aproxima el volumen de un elipsoide achatado:

Volumen del tumor en mm cúbicos = (longitud x anchura2) x 0.5

Las medidas se indican en la Figura 1 tras un tratamiento de 36 días. Los datos mostraron que la combinación de los inhibidores de MEK y B-Raf es beneficiosa en comparación con la administración de cada agente de forma individual.

Modelo de xenoinjerto en ratón B

Se recolectaron células A375P a partir de frascos de cultivo exponiéndolas a un 0.25% de tripsina/EDTA durante 5 min a 37 °C. Las células desprendidas se recolectaron, se centrifugaron (1500 rpm, 5 min, 4 °C) y se lavaron para eliminar la solución de tripsina. Las células se suspendieron de nuevo en PBS sin magnesio ni calcio y se contaron. Las células se centrifugaron igual que anteriormente para eliminar el PBS y se creó una suspensión de células únicas o bien en un 50% de Matrigel: 50% de PBS (v:v) o en un 100% de PBS de modo que una inyección subcutánea de 100 gL suministraría el número requerido de células por ratón. La línea de melanoma A375P se inyectó con Matrigel con una densidad de 1.75 millones de células por ratón por vía subcutánea en ratones CD-1 nu/nu hembra de 8-10 semanas de edad. Los tumores se establecieron (-150-300 mm3) para todas las líneas celulares en 2-4 semanas después de la inyección.

El Compuesto A (solvato de DMSO) y el Compuesto B (forma libre) se administraron por vía oral a los ratones con las dosis indicadas en 0.2 ml/20 gramos de peso corporal en un 0.5% de HPMC (hidroxipropilmetilcelulosa, cat. de Sigma # H7509) y un 0.2% de Tween 80 (cat. de Sigma # P1754) en agua destilada, pH 7.0-8.0.

Se identificaron los ratones con tumores de tamaños similares (150 - 200 mm3). La longitud y anchura de los tumores se midieron con calibres de mano y los pesos corporales de los ratones se midieron utilizando una balanza de laboratorio. Los ratones se colocaron en grupos de ocho o siete correspondientemente y se les administraron dosis orales de o bien vehículo, un compuesto individual o la combinación de compuestos. Se pesaron los ratones y se midieron los tumores dos veces por semana durante el transcurso del estudio. Los datos presentados en la Figura 2 demuestran que la combinación del Compuesto A (0.1 mg/kg) y el Compuesto B (30 mg/kg) administrada diariamente durante 33 días (días 24 a 56 tras el implante) es más eficaz que cada agente por sí solo.

Claims (22)

REIVINDICACIONES

1. Una combinación que comprende:

(i) un compuesto de fórmula I

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable de este;

y

(ii) un compuesto de fórmula (II)

o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

2. Una combinación de acuerdo con la reivindicación 1, donde el compuesto de fórmula (I) está en forma del solvato con sulfóxido de dimetilo y el compuesto de fórmula (II) está en forma de la sal de tipo metanosulfonato.

3. Un kit combinado que comprende una combinación de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 junto con un portador o portadores farmacéuticamente aceptables.

4. Una composición farmacéutica que comprende una combinación de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 junto con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.

5. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 4 para su uso en el tratamiento del cáncer.

6. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 4 para su uso en el tratamiento de melanoma.

7. El uso de una combinación de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 en la elaboración de un medicamento para el tratamiento del cáncer.

8. El uso de un kit combinado de acuerdo con la reivindicación 3 en la elaboración de un medicamento para el tratamiento del cáncer.

9. Una combinación de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para su uso en terapia.

10. Una combinación de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para su uso en el tratamiento del cáncer.

11. Una combinación para su uso de acuerdo con la reivindicación 10, donde el cáncer es un melanoma.

12. Una combinación para su uso de acuerdo con la reivindicación 11, donde el melanoma es un melanoma con la mutación V600E de BRAF.

13. Un kit combinado de acuerdo con la reivindicación 3 para su uso en terapia.

14. Un kit combinado de acuerdo con la reivindicación 3 para su uso en el tratamiento del cáncer.

15. Un kit combinado para su uso de acuerdo con la reivindicación 14, donde el cáncer es un melanoma.

16. Un kit combinado para su uso de acuerdo con la reivindicación 15, donde el melanoma es un melanoma con la mutación V600E de BRAF.

17. Una combinación para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 9 a 12, o un kit combinado para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 16, donde la cantidad del compuesto de fórmula (I) que se administra como parte de la combinación o kit combinado se selecciona de 1 mg a 7 mg.

18. Una combinación para su uso o un kit combinado para su uso de acuerdo con la reivindicación 17, donde la cantidad del compuesto de fórmula (I) que se administra como parte de la combinación o kit combinado es de 2 mg.

19. Una combinación para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 9 a 12, o un kit combinado para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 16, donde la cantidad del compuesto de fórmula (II) que se administra como parte de la combinación o kit combinado se selecciona de 100 mg a 200 mg.

20. Una combinación para su uso o un kit combinado para su uso de acuerdo con la reivindicación 19, donde la cantidad del compuesto de fórmula (II) que se administra como parte de la combinación o kit combinado es de 150 mg.

21. Una combinación para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 9 a 12, o un kit combinado para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 16, donde el compuesto de fórmula (II) se administra dos veces al día.

22. Una combinación para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 9 a 12, o un kit combinado para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 16, donde una dosis del compuesto de fórmula (I) se administra de forma simultánea o por separado con múltiples dosis del compuesto de fórmula (II).