ES2607467T3 - Composiciones de microencapsulación, métodos para hacerlas, métodos de uso y productos de las mismas - Google Patents

Composiciones de microencapsulación, métodos para hacerlas, métodos de uso y productos de las mismas Download PDF

Info

Publication number
ES2607467T3
ES2607467T3 ES08771394.7T ES08771394T ES2607467T3 ES 2607467 T3 ES2607467 T3 ES 2607467T3 ES 08771394 T ES08771394 T ES 08771394T ES 2607467 T3 ES2607467 T3 ES 2607467T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
acid
product
protein
hydrolysis
group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES08771394.7T
Other languages
English (en)
Inventor
Todd Wills
Brian J. Connolly
Srinivasan Subramanian
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
DSM IP Assets BV
Original Assignee
DSM IP Assets BV
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by DSM IP Assets BV filed Critical DSM IP Assets BV
Application granted granted Critical
Publication of ES2607467T3 publication Critical patent/ES2607467T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5052—Proteins, e.g. albumin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/38—Other non-alcoholic beverages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/52—Adding ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A23L27/20—Synthetic spices, flavouring agents or condiments
    • A23L27/21—Synthetic spices, flavouring agents or condiments containing amino acids
    • A23L27/215—Synthetic spices, flavouring agents or condiments containing amino acids heated in the presence of reducing sugars, e.g. Maillard's non-enzymatic browning
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A23L27/70—Fixation, conservation, or encapsulation of flavouring agents
    • A23L27/72—Encapsulation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/115—Fatty acids or derivatives thereof; Fats or oils
    • A23L33/12—Fatty acids or derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/15—Vitamins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/16—Inorganic salts, minerals or trace elements
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/175—Amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L7/00—Cereal-derived products; Malt products; Preparation or treatment thereof
    • A23L7/10—Cereal-derived products
    • A23L7/117—Flakes or other shapes of ready-to-eat type; Semi-finished or partly-finished products therefor
    • A23L7/122—Coated, filled, multilayered or hollow ready-to-eat cereals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
    • A61K8/11—Encapsulated compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A61K9/1075—Microemulsions or submicron emulsions; Preconcentrates or solids thereof; Micelles, e.g. made of phospholipids or block copolymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5015—Organic compounds, e.g. fats, sugars
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/41—Particular ingredients further characterized by their size
    • A61K2800/412—Microsized, i.e. having sizes between 0.1 and 100 microns
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/4891—Coated capsules; Multilayered drug free capsule shells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5073—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals having two or more different coatings optionally including drug-containing subcoatings

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Pediatric Medicine (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Un método de preparación de un producto encapsulado, que comprende hacer reaccionar una solución que comprende al menos una proteína seleccionada del grupo que consiste en sólidos de lactosuero, aislado de proteínas de lactosuero y proteína de soja y al menos un azúcar reductor seleccionado del grupo que consiste en glucosa y maltosa, a un pH inicial de al menos aproximadamente 10, para lograr un grado de hidrólisis de proteínas de entre aproximadamente 1% y aproximadamente 15%, en donde la reacción es a una temperatura de al menos 90ºC; combinar la disolución que ha reaccionado con una composición que comprende un material de núcleo; en donde la disolución que ha reaccionado forma un material de encapsulación sobre la composición que comprende el material de núcleo, y en donde el material de núcleo comprende un ácido graso poliinsaturado seleccionado del grupo que consiste en ácido docosahexaenoico (DHA), ácido docosapentaenoico (DPA), ácido araquidónico (ARA), ácido eicosapentaenoico (EPA), ácido estearidónico (SDA), ácido linolénico (LA), ácido alfa-linoleico (ALA), ácido gamma linolénico (GLA), ácido linolénico conjugado (CLA) y mezclas de los mismos.

Description

5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
DESCRIPCION
Composiciones de microencapsulacion, metodos para hacerlas, metodos de uso y productos de las mismas.
Campo de la invencion
Esta invencion se refiere a composiciones de encapsulacion y metodos para hacerlas, asf como a su uso para hacer composiciones encapsuladas que contienen materiales de nucleo, que incluyen acidos grasos poliinsaturados.
Antecedentes de la invencion
La encapsulacion de compuestos puede protegerlos del cambio qmmico, ffsico o biologico indeseable o la rotura mientras retienen su eficacia, tal como la eficacia biologica o fisiologica. La encapsulacion tambien es eficaz para mejorar las propiedades de manipulacion de un material pegajoso, proporcionar liberacion controlada de sustancias tales como farmacos o plaguicidas, enmascarar el sabor u olor del compuesto, por ejemplo. La microencapsulacion de un lfquido, tal como un aceite, permite la formacion de una parffcula que presenta una superficie externa seca con un aceite ocluido. A menudo las parffculas son un polvo fluido. Por lo tanto, la microencapsulacion permite de forma eficaz la conversion de lfquidos en polvos. Las microcapsulas comprenden parffculas aproximadamente esfericas que contienen una sustancia encapsulada (atrapada). La parffcula normalmente tiene algun tipo de cubierta, a menudo una cubierta polimerica, tal como una cubierta de polipeptido o polisacarido, y el producto activo encapsulado se encuentra dentro de la cubierta. Algunos compuestos y composiciones, tales como acidos grasos poliinsaturados (PUFA), vitaminas, minerales, antioxidantes, hormonas, aminoacidos, protemas, hidratos de carbono, coenzimas, y agentes de sabor, sensibles a una serie de factores, pueden perder la actividad biologica u otra actividad deseada cuando no estan protegidos. Ademas, los productos (por ejemplo, productos de descomposicion, productos de degradacion y productos de oxidacion) que son resultado del cambio qmmico, ffsico o biologico o la rotura de compuestos y composiciones labiles, pueden carecer de la funcion biologica deseada y/o tener caracteffsticas no deseadas, tales como sabores desagradables, olores indeseados, actividad que promueve la irritacion, y similares. A menudo es necesario introducir compuestos y composiciones labiles, que son susceptibles al cambio qmmico, ffsico o biologico o la rotura, en productos farmaceuticos, nutricionales, incluyendo nutriceuticos y productos industriales. En algunos casos, es deseable la proteccion de dichos compuestos y composiciones. Con respecto a los PUFA en particular, es conveniente proteger dichos lfpidos en alimentos del oxfgeno, metales en trazas y otras sustancias que atacan los dobles enlaces de los PUFA. Dicha proteccion reduce la probabilidad de problemas organolepticos, es decir, problemas relacionados con los sentidos (sabor, color, olor, sensacion), tales como sabores desagradables y olores indeseados, y otros problemas, tales como la perdida de la actividad fisiologica. Dicha proteccion podffa aumentar potencialmente la vida en anaquel de los productos que los contienen.
Se conocen numerosas tecnicas para la microencapsulacion dependiendo de la naturaleza de la sustancia encapsulada y del tipo de material de cubierta usado. Los metodos ffpicamente implican solidificar pequenas gotas de lfquido emulsionado cambiando la temperatura, evaporando el disolvente o anadiendo agentes de reticulacion qmmica. Dichos metodos incluyen, por ejemplo, secado por atomizacion, polimerizacion interfacial, encapsulacion por fusion en caliente, encapsulacion por separacion de fases (separacion del disolvente y evaporacion del disolvente), emulsion espontanea, microencapsulacion por evaporacion del disolvente, microencapsulacion por separacion del disolvente, coacervacion, y formacion de microesferas a baja temperatura y nanoencapsulacion por inversion de fase (PIN). La microencapsulacion es adecuada para farmacos, vitaminas y complementos alimenticios puesto que este proceso es adaptable variando los ingredientes y las condiciones de la encapsulacion.
Hay una necesidad particular de proporcionar formas microencapsuladas de grasas o aceites, tales como aceites vegetales y marinos, que contienen PUFA. Dichas formas microencapsuladas beneficiaffan las propiedades de digeribilidad, estabilidad, resistencia a cambio qmmico, ffsico o biologico o la rotura. Los aceites microencapsulados se podffan proporcionar convenientemente en una forma en polvo fluida. Dicho polvo se puede mezclar facilmente con otros componentes secos o lfquidos para formar un producto util.
Sin embargo, la capacidad de microencapsulacion puede estar limitada por factores debido a la naturaleza del procedimiento de microencapsulacion o el compuesto o composicion que se va a encapsular. Dichos factores podffan incluir pH, temperatura, uniformidad, viscosidad, hidrofobicidad, peso molecular y similares. Ademas, un procedimiento de microencapsulacion dado puede tener limitaciones inherentes. Por ejemplo, en las tecnicas de microencapsulacion en las que se usa calor para el secado, los compuestos aromaticos de bajo punto de ebullicion pueden perderse durante el procedimiento de secado, Ademas, el nucleo puede adherirse a la superficie del material de encapsulacion, presentando potencial para la mayor oxidacion y cambios en el equilibrio de sabores del producto terminado. En algunos casos, las condiciones de almacenamiento deben controlarse con cuidado para evitar un aumento de la actividad con el agua y por lo tanto la estabilidad de la capsula y retencion de compuestos volatiles dentro de la capsula. Durante la microencapsulacion de secado por atomizacion, la temperatura de entrada de la alimentacion puede no ser suficientemente alta y dar como resultado el secado incompleto y la pegajosidad en la camara de secado y formacion de aglomerados en el almacenamiento. Tambien se puede producir la inconsistencia de las parffculas en algunas condiciones del procedimiento. A temperaturas que son demasiado bajas, las parffculas pueden hincharse y se pueden formar grietas en la superficie de las parffculas. Esto puede producir la perdida de
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
compuestos volatiles y compromete la calidad del producto final. Otro inconveniente mas es que los recubrimientos producidos a menudo son solubles en agua y sensibles a la temperatura. Los autores de la presente invencion han reconocido los problemas anteriores y que, por lo tanto, es necesario proporcionar materiales y procedimientos adicionales para la encapsulacion de compuestos y composiciones susceptibles al cambio qmmico, ffsico o biologico o la rotura.
El documento US 2006/286205 describe la preparacion de un polvo de emulsion de hidrolizado usando hidrolisis enzimatica y reacciones de oscurecimiento para modificar el sabor del polvo resultante. El caldo de fermentacion que comprende microorganismos Schizochytrium se hidrolizo enzimaticamente con alcalasa, lo que dio como resultado la hidrolisis parcial. Despues, la mezcla se calento a una temperatura de 95°C y el pH se llevo a un valor de 9,5. Una vez alcanzada la temperatura, se anadieron lactosa, maltodextrina y jarabe de mafz con alto contenido en fructosa. Esta etapa inactiva las enzimas, promueve la hidrolisis adicional de protemas, y la combinacion de los productos de hidrolisis de protemas con los azucares produce productos de reacciones de oscurecimiento (p. ej., productos de la reaccion de Maillard y productos de caramelizacion). Esta mezcla se dejo reaccionar durante 2 horas y despues se dejo enfriar a 60°C. Tras el enfriamiento, se anadio aceite DHA Martek, asf como casema. Esta mezcla se homogeneizo a 750 bar en un homogeneizador Panda 2 k (Niro-Soavi) manteniendo una temperatura de 60°C. El caldo resultante despues se seco por pulverizacion en un secador por pulverizacion Buchi B-290 con una temperatura interior de 170°C y una temperatura exterior de 70°C.
El documento WO 01/74175 A1 describe un metodo de formacion de una emulsion de un aceite sensible al oxfgeno por encapsulacion del mismo, que incluye las etapas de: a) preparar una mezcla acuosa de una protema y un hidrato de carbono que contiene un grupo azucar reductor; b) calentar la mezcla de 60°C a 160°C durante un periodo para permitir suficientes productos de reaccion de Maillard para formar sin coagulacion; c) dispersar dicho aceite en la fase acuosa; d) homogeneizar la mezcla para obtener una emulsion. Estos productos de la reaccion de Maillard formados con materiales protemicos formadores de pelmula seleccionados producen materiales de encapsulacion superiores para aceites e ingredientes solubles en aceite sensibles al oxfgeno. La protema preferiblemente es soluble y es necesario que sea estable en el intervalo de calentamiento de la reaccion de Maillard e incluye casema, protemas de soja y lactosuero, gelatina, albumina de huevo y protemas hidrolizadas con mas grupos aminoacidos libres, incluyendo hidrolizado de protema de soja. El hidrato de carbono preferido es un azucar con un grupo reductor, preferiblemente seleccionado del grupo que consiste en monosacaridos (p. ej., glucosa, fructosa), disacaridos (p. ej., maltosa, lactosa), trisacaridos, oligosacaridos y jarabes de glucosa. El pH de la fase acuosa es entre 4 y 10. Los aceites incluyen los que contienen acidos grasos poliinsaturados tales como aceite de canola, aceite de borraja, aceite de onagra, aceite de cartamo, aceite de girasol, aceite de linaza, aceite de germen de trigo y aceite de pepita de uva, y aceites marinos obtenidos de peces tales como atun, arenque, caballa, sardina, tugado de bacalao y tiburon. Las grasas lacteas y otras grasas que son sensibles al oxfgeno tambien se pueden encapsular. Los ingredientes solubles en aceites que necesitan proteccion del oxfgeno incluyen vitamina A [retinol], vitamina D [calciferol], vitamina E, tocoferoles, tocotrienoles, vitamina K [quinona] y beta-caroteno [pro-vitamina-A].
Resumen de la invencion
La presente invencion proporciona un metodo para preparar una composicion de encapsulacion, que comprende hacer reaccionar una solucion que comprende protema y azucar reductor a un pH inicial de al menos aproximadamente 10, para lograr un grado de hidrolisis de protemas de entre aproximadamente 1% y aproximadamente 15%, como se reivindica.
La invencion proporciona ademas un producto encapsulado, que comprende una composicion que comprende un material de nucleo; y un material de encapsulacion en la composicion, en donde el material de encapsulacion se forma a partir de protema hidrolizada que tiene un grado de hidrolisis de protema de entre aproximadamente 1% y aproximadamente 15% y a partir de productos de caramelizacion, como se reivindica.
La invencion proporciona ademas un producto seleccionado del grupo que consiste en un alimento, un producto cosmetico, un producto farmaceutico, un producto nutriceutico y un producto industrial, en donde el producto comprende el producto encapsulado descrito antes, como se reivindica.
La invencion tambien proporciona un metodo para preparar un producto encapsulado, que comprende hacer reaccionar una solucion que comprende al menos una protema y al menos un azucar reductor a un pH inicial de al menos aproximadamente 10, para lograr un grado de hidrolisis de protemas de entre aproximadamente 1% y aproximadamente 15%; combinar la solucion que ha reaccionado con una composicion que comprende un material de nucleo; en donde la solucion que ha reaccionado forma un material de encapsulacion sobre la composicion que comprende el material de nucleo, como se reivindica.
La invencion tambien proporciona productos encapsulados preparados por este metodo, que incluyen un alimento, un producto cosmetico, un producto farmaceutico, un producto nutriceutico o un producto industrial, como se reivindica.
En algunas realizaciones, la protema hidrolizada tiene una distribucion uniforme de los productos de hidrolisis.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
La protema se selecciona del grupo que consiste en casema, solidos de lactosuero, aislado de protemas de lactosuero, protema de soja. El azucar reductor se selecciona del grupo que consiste en glucosa y maltosa.
En algunas realizaciones, el grado de hidrolisis de protemas es entre aproximadamente 2% y aproximadamente 10%, y en otras realizaciones, entre aproximadamente 3% y aproximadamente 8%.
En algunas realizaciones, los productos de caramelizacion se producen durante la etapa de reaccion.
En algunas reacciones, los productos de la reaccion de Maillard se producen durante la etapa de reaccion.
En algunas realizaciones, la reaccion es a una temperatura de al menos aproximadamente 90°C durante aproximadamente 1 hora.
En algunas realizaciones, la hidrolisis de protemas es no enzimatica.
El material de encapsulacion se forma haciendo reaccionar una solucion que comprende protema y azucar reductor a un pH inicial de al menos aproximadamente 10, para lograr un grado de hidrolisis de protemas de entre aproximadamente 1% y aproximadamente 15%.
En algunas realizaciones de los productos, el material de encapsulacion comprende productos de caramelizacion, y en otras realizaciones, el material de encapsulacion comprende productos de la reaccion de Maillard.
El material de nucleo puede ser un acido graso poliinsaturado.
La planta puede ser una planta oleaginosa y/o planta de cultivo. Cuando la planta es una planta oleaginosa, la fuente puede ser la semilla oleaginosa de la planta oleaginosa.
La fuente de la planta y/o semilla oleaginosa puede ser soja, mafz, cartamo, girasol, canola, lino, cacahuete, mostaza, colza, garbanzo, algodon, lenteja, trebol blanco, oliva, palma, borraja, onagra, linaza y tabaco, o mezclas de los mismos.
La fuente tambien puede ser una planta geneticamente modificada, una semilla oleaginosa geneticamente modificada y un microorganismo geneticamente modificado, en donde la modificacion genetica preferiblemente comprende la introduccion de genes de policetido sintasa.
La fuente tambien puede ser un microorganismo seleccionado del grupo que consiste en Thraustochytriales, dinoflagelados, y Mortierella. Los Thraustochytriales pueden incluir Schizochytrium y Thraustochytrium. Los dinoflagelados pueden ser del genero Crypthecodinium.
La fuente animal puede ser un animal acuatico.
El material de nucleo comprende un acido graso poliinsaturado seleccionado del grupo que consiste en acido docosahexaenoico (DHA), acido docosapentaenoico (DPA), acido araquidonico (ARA), acido eicosapentaenoico (EPA), acido estearidonico (SDA), acido linolenico (LA), acido alfa-linoleico (ALA), acido gamma linolenico (GLA), acido linolenico conjugado (CLA) y mezclas de los mismos.
En algunas realizaciones de los productos, el material de encapsulacion se prepara por un metodo que se selecciona del grupo que consiste en secado en lecho fluido, secado en tambor (pelfcula), coacervacion, polimerizacion interfacial, procesamiento en lecho fluido, recubrimiento en paila, gelificacion por pulverizacion, mezcla horizontal en cinta helicoidal, disco de centrifugacion, coextrusion centnfuga, complejacion de inclusion, estabilizacion de emulsion, recubrimiento por pulverizacion, extrusion, nanoencapsulacion en liposomas, microencapsulacion en fluido supercntico, polimerizacion en suspension, procedimiento de deshidratacion en fno, y procedimientos de dispersion por evaporacion.
En algunas realizaciones, se pueden formar un segundo y adicionales materiales de encapsulacion sobre el producto encapsulado. En algunas realizaciones, el segundo material de encapsulacion es un recubrimiento de granulacion y se puede aplicar por granulacion.
En algunas realizaciones de los productos, el producto es insoluble en agua, ffsicamente estable durante al menos aproximadamente 30 dfas, y/o oxidativamente estable durante al menos aproximadamente 30 dfas.
En algunas realizaciones de los productos, el producto tiene un tamano de partroulas de entre aproximadamente 10 pm y aproximadamente 3000 pm.
En algunas realizaciones de los productos, el producto comprende material de nucleo en una cantidad entre aproximadamente 1 por ciento en peso y aproximadamente 50 por ciento en peso.
En algunas realizaciones de los productos, el producto esta en una forma seleccionada del grupo que consiste en un
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
polvo fluido, una perla, un chip y una escama.
El alimento puede ser un alimento Kquido y/o un alimento solido. Los alimentos Kquidos incluyen bebidas, bebidas energeticas, formulas infantiles, comidas Kquidas, zumos de frutas, huevos Kquidos, leche, productos lacteos, y jarabes multivitammicos.
Los alimentos incluyen alimentos infantiles, yogurt, queso, cereales, mezclas en polvo, productos horneados, barritas de comida y carnes procesadas.
Breve descripcion de los dibujos
La figura 1 muestra un esquema de un procedimiento descrito en el ejemplo 3.
La figura 2 muestra la distribucion del tamano de partmulas (volumen frente a log de tamano de partmulas) despues del primer y segundo paso de homogeneizacion para la emulsion n° 2 que tambien es representativo para la emulsion 1 y 3. (♦ = emulsion n° 2, primer paso; ▲= emulsion n° 2, segundo paso).
La figura 3 muestra la distribucion del tamano de partmulas (volumen frente a log de tamano de partmulas) de polvos secados por pulverizacion. Tambien se muestra el polvo secado por pulverizacion recogido despues de ciclon para el polvo 1. (■ = Polvo 1, recogido del punto de recoleccion principal de la secadora; ▲ = Polvo 1, recogido del ciclon; ♦ = Polvo 3, recogido del punto de recoleccion principal del secador; O = Polvo 3, recogido del punto de recoleccion principal del secador)
Descripcion detallada de la invencion
La presente invencion proporciona composiciones de encapsulacion y metodos relacionados para su preparacion, asf como su uso para hacer composiciones encapsuladas que contienen materiales de nucleo. Las composiciones de encapsulacion de la presente invencion tienen excelentes propiedades formadoras de pelmula para la encapsulacion eficaz. Los productos encapsulados resultantes incluyen productos en polvo altamente estables con altas capacidades de carga (es decir, la relacion de producto a la composicion total de producto mas material de encapsulacion). Como se usa en la presente memoria, el termino “un” o “una” se refiere a uno o mas de esa entidad, por ejemplo, un PUFA se refiere a uno o mas PUFA o al menos un PUFA. Como tal, los terminos “un” (o “una), “uno o mas” y “al menos uno” se pueden usar de forma intercambiable en la presente memoria. Tambien hay que indicar que los terminos “comprender”, “incluir” y “tener” se pueden usar de forma intercambiable.
En una primera realizacion, la invencion proporciona un metodo para preparar una composicion de encapsulacion haciendo reaccionar una solucion que contiene protema y azucar reductor y que tiene un pH inicial de al menos aproximadamente 10. Como se usa en la presente memoria, hacer reaccionar se refiere a anadir o mezclar dos o mas reactivos en condiciones adecuadas para producir el producto indicado y/o deseado. Debe apreciarse que la reaccion que produce el producto indicado y/o deseado puede no resultar necesariamente directamente de la combinacion de los dos reactivos que se anadieron inicialmente, es decir, que puede haber uno o mas productos intermedios que se producen en la mezcla que finalmente conducen a la formacion del producto indicado y/o deseado. La solucion se hace reaccionar para lograr un grado de hidrolisis de protema de entre aproximadamente 1% y aproximadamente 15%. El grado de hidrolisis se puede determinar de varias formas, incluyendo analisis de pesos moleculares de los fragmentos hidrolizados o la distribucion de los mismos, p. ej., por cromatograffa por exclusion de tamanos; determinacion de la viscosidad de la preparacion; determinacion de la dispersibilidad de la preparacion; determinacion de la cantidad de grupos finales de protema; o cualquier combinacion de estas y otras tecnicas adecuadas. En general, no es necesario medir realmente el grado de hidrolisis, puesto que la reaccion de hidrolisis es autolimitante. Como se explica con detalle en otra parte en la presente memoria, la reaccion de hidrolisis empieza a un pH inicial alto y al avanzar la reaccion el pH disminuye y se aproxima a neutro, momento en el que la reaccion se detiene.
Las protemas que se pueden usar para producir la composicion de encapsulacion o el producto encapsulado incluyen solidos de lactosuero, aislado de protemas de lactosuero, protema de soja. En algunas realizaciones, la protema puede ser una protema hidrolizada por enzima. Una protema hidrolizada por enzima se puede preparar por metodos conocidos para los expertos en la tecnica o se puede obtener de una fuente comercial. Merece la pena senalar que una protema hidrolizada por enzima se somete a hidrolisis adicional como se describe en la presente memoria (p. ej., a pH de inicio alto durante una etapa de reaccion), pero en general no es adecuada como material de encapsulacion por sf misma. Sin estar limitado por la teona, se cree que una composicion que resulta de una hidrolisis de protemas como se describe en la presente memoria, contribuye a las caractensticas deseables del producto encapsulado resultante. La hidrolisis de protemas a pH inicial alto da como resultado productos de hidrolisis que tienen una distribucion uniforme de longitudes de productos de hidrolisis, puesto que los sitos de hidrolisis son mas o menos aleatorios. Como se usa en la presente memoria, los productos de hidrolisis de protemas con una distribucion relativamente uniforme de longitudes de protemas se refiere a productos de hidrolisis de protemas que se producen por hidrolisis de una protema o peptido de una forma aleatoria. En cambio, las protemas hidrolizadas por enzima no son hidrolizadas aleatoriamente y no producen una distribucion uniforme de longitudes
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
de productos de hidrolisis. Una composicion que tiene una distribucion uniforme de longitudes de productos de hidrolisis, cuando se analiza por SDS-PAGE, tipicamente produce una estela de productos de pesos moleculares de bajos a altos, sin fragmento particular dominante. Las protemas hidrolizadas por enzima, por otra parte, tipicamente muestran varios fragmentos dominantes en SDS-PAGE.
La distribucion uniforme de pesos moleculares de la protema se puede definir como sigue: la protema hidrolizada tendra un intervalo de pesos moleculares. A lo largo de un intervalo de pesos moleculares en una distribucion uniforme de productos de hidrolisis, si el intervalo se divide en 10 partes iguales, cada parte representa 5-15% de la muestra o poblacion.
En otra realizacion, la protema hidrolizada preferiblemente tiene una distribucion de pesos moleculares que es esencialmente igual a una distribucion de pesos moleculares de aislado de protema de soja hidrolizada obtenido cuando el aislado de protema de soja hidrolizada y el hidrato de carbono se hidratan en agua, el pH se ajusta a 10,511,0 con NaOH y se calienta a reflujo a 90-95°C durante 60 minutos. En otra realizacion, la distribucion de pesos moleculares es esencialmente igual a una distribucion de pesos moleculares de aislado de protema de soja hidrolizada obtenido cuando la protema se hidrata a un nivel de 5-15% con hidrato de carbono, el pH se ajusta a
10.5- 11,0 con NaOH y se calienta a reflujo a 90-95°C durante 60 minutos. En otra realizacion, la distribucion de pesos moleculares es esencialmente igual a una distribucion de pesos moleculares de aislado de protema de soja hidrolizada obtenido cuando la protema se hidrata a un nivel de 8-12% con hidrato de carbono, el pH se ajusta a
10.5- 11,0 con NaOH y se calienta a reflujo a 90-95°C durante 60 minutos. En otra realizacion, la distribucion de pesos moleculares es esencialmente igual a una distribucion de pesos moleculares de aislado de protema de soja hidrolizada obtenido cuando la protema se hidrata a un nivel de 10%. La distribucion uniforme de los pesos moleculares de la protema se puede obtener modificando el tiempo y la temperatura de la reaccion de forma adecuada. Cuando la temperatura se reduce, el tiempo de reaccion aumenta.
El azucar reductor es un azucar con un grupo funcional cetona o aldehudo, que permite que el azucar actua como una agente reductor. En diferentes realizaciones, el azucar reductor puede incluir glucosa y maltosa. Como se usa en la presente memoria, la expresion azucar reductor tambien incluye fuentes complejas de azucares reductores. Por ejemplo, las fuentes complejas adecuadas incluyen jarabe de mafz, solidos de jarabe de mafz y almidones modificados tales como almidones qmmicamente modificados y almidones hidrolizados o dextrinas, tales como maltodextrina. Los almidones hidrolizados (dextrinas) se usan en algunas realizaciones. En algunas realizaciones, el azucar reductor se forma in situ, por ejemplo, un compuesto que no es por sf mismo un azucar reductor, pero que comprende azucares reductores. Por ejemplo, el almidon no es un azucar reductor, pero es un polfmero de glucosa, que es un azucar reductor. La hidrolisis del almidon, por medios qrnmicos o enzimaticos, da glucosa. Esta hidrolisis de almidon, por medios qrnmicos o enzimaticos, da glucosa. Esta hidrolisis puede tener lugar in situ, para proporcionar el azucar reductor glucosa.
La cantidad relativa de azucares y protema usados para formar el material de encapsulacion de la presente invencion puede variar. En realizaciones preferidas, la relacion de azucar: protema puede estar en el intervalo de aproximadamente 5:1 a aproximadamente 1:5, de aproximadamente 3:1 a aproximadamente 1:3 y puede ser aproximadamente 1:1. Ademas, la cantidad total de azucar y protema en la solucion puede variar y puede estar en el intervalo hasta los lfmites de solubilidad para un conjunto de condiciones dado.
En algunas realizaciones, la protema y el azucar reductor estan presentes en el mismo material fuente. Por ejemplo, el concentrado de protemas de lactosuero contiene tanto protema como azucar reductor (en forma de lactosa). Los solidos de leche deshidratada tambien contienen protema y azucar reductor (en forma de lactosa). Una mezcla de hidrolizado de biomasa o celulas lisadas tambien puede contener protemas y azucares reductores. En algunos casos, los azucares reductores se proporcionan en el medio de cultivo y no son completamente metabolizados por los microorganismos, y por lo tanto permanecen en la mezcla de hidrolizado de biomasa o celulas lisadas.
Como se usa en la presente memoria, un pH inicial alto es un pH de al menos aproximadamente 10 y puede ser cualquier pH superior a aproximadamente 10. Por ejemplo, se puede usar un pH inicial de aproximadamente 10,1, 10,2, 10,3, 10,4, 10,5, 10,6, 10,7, 10,8, 10,9, etc., en la presente invencion. Ademas, el pH inicial tfpicamente puede ser por debajo de aproximadamente 12, y en algunas realizaciones a o por debajo de aproximadamente 11.
En varias realizaciones, el grado de hidrolisis de protemas logrado durante la etapa de reaccion puede ser entre aproximadamente 2% y aproximadamente 10% o entre aproximadamente 3% y aproximadamente 8%. La hidrolisis de protemas se produce en el procedimiento de la invencion como resultado de las condiciones de pH y temperatura en los procedimientos de la invencion y por lo tanto, es hidrolisis no enzimatica.
En algunas realizaciones, los productos de caramelizacion se producen durante la etapa de reaccion. La caramelizacion se refiere a la degradacion termica de azucares que conduce a la formacion de compuestos volatiles (que en general producen un aroma de caramelo) y productos de color marron (que proporcionan un color de caramelo). Como la reaccion de Maillard (vease mas adelante), la caramelizacion es un tipo de oscurecimiento no enzimatico. La generacion de aromas y colores en la caramelizacion termicamente inducida requiere que los azucares, normalmente estructuras de monosacaridos, experimenten primero transposiciones intramoleculares. La
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
reaccion produce la liberacion de H+ y, por lo tanto, el pH de la disolucion que experimenta la caramelizacion disminuira al avanzar la reaccion. Como se ha indicado antes, la etapa de reaccion en las realizaciones de la presente invencion tiene lugar a un pH inicial de al menos aproximadamente 10. Sin embargo, a lo largo del transcurso de la reaccion de caramelizacion, el pH disminuira por debajo de aproximadamente 10. En algunas realizaciones, la reaccion de caramelizacion avanzara hasta completarse. Cuando se complete, el pH de la reaccion se acercara a pH neutro y estara en el intervalo de aproximadamente pH 6 a aproximadamente pH 8.
En una realizacion adicional, el metodo para preparar una composicion de encapsulacion o producto encapsulado comprende ademas producir productos de reaccion de Maillard (MRP) durante la etapa de reaccion. La reaccion de Maillard ocurre cuando reaccionan azucares reductores y aminoacidos. El azucar reductor en la reaccion puede actuar como un agente reductor en la reaccion de Maillard. Esta reaccion ocurre en la mayona de los alimentos al calentarlos. La qmmica de la reaccion de Maillard puede afectar de forma conveniente a los sabores y colores de una amplia variedad de alimentos y bebidas. Sin estar limitado por la teona, se cree que la formacion de los MRP en los productos de la invencion produce aromas y sabores que son convenientes para la inclusion en alimentos u otros productos que se consumen. Los MRP tambien pueden tener actividad antioxidante, y sin estar limitados por la teona, se cree que esta propiedad que imparten los MRP aumentaba la estabilidad y vida en anaquel de los productos de la presente invencion. Las reacciones de Maillard son bien conocidas y a partir de la memoria descriptiva detallada de la presente memoria, se pueden determinar la temperatura y el tiempo requeridos para llevar a cabo la reaccion en la extension deseada.
Los MRP se pueden incluir en los metodos y productos de la presente invencion en una serie de formas. En el procedimiento de hacer reaccionar una disolucion que incluye protema y azucar reductor, la temperatura y el tiempo de reaccion se pueden ajustar para promover la formacion de MRP. En general, la temperatura de dicha reaccion puede estar en el intervalo de aproximadamente 20°C a aproximadamente 150°C, siendo preferido de aproximadamente 80°C a aproximadamente 110°C. El tiempo de la reaccion puede estar en el intervalo de aproximadamente 1 minuto a aproximadamente varias horas, dependiendo de la temperatura. Al intervalo de temperatura mas alto preferido, el tiempo de reaccion es preferiblemente de aproximadamente 1 minuto a aproximadamente 20 minutos.
En una segunda realizacion, la invencion proporciona un metodo para preparar un producto encapsulado, preparando la composicion de encapsulacion descrita antes (haciendo reaccionar una solucion que contiene protema y azucar reductor a un pH inicial de al menos aproximadamente 10 para lograr un grado de hidrolisis de protemas entre aproximadamente 1% y aproximadamente 15%). La solucion que ha reaccionado se combina con una composicion que comprende un material de nucleo. Este metodo incluye ademas formar un material de encapsulacion a partir de la solucion que ha reaccionado sobre la composicion que comprende el material de nucleo.
El material de nucleo es un compuesto labil.
El compuesto labil es un PUFA. El PUFA puede ser acido docosahexaenoico C22:6(n-3) (DHA), acido docosapentaenoico omega-3 C22:5(n-3) (DPA), acido docosapentaenoico omega-6 C22:5(n-6) (DPA), acido araquidonico C20:4(n-6) (ARA), acido eicosapentaenoico C20:5(n-3) (EPA), acido estearidonico, acido linolenico, acido alfa-linoleico (ALA), acido gamma linolenico (GLA), acido linolenico conjugado (CLA) o mezclas de los mismos. Los PUFA pueden estar en cualquiera de las formas comunes encontradas en lfpidos naturales que incluyen, pero no se limitan a triacilgliceroles, diacilgliceroles, monoacilgliceroles, fosfolfpidos, acidos grasos libres o en formas derivadas naturales o sinteticas de estos acidos grasos (p. ej., sales de calcio de acidos grasos, esteres de acidos grasos, incluyendo esteres de metilo, esteres de etilo y similares). La referencia a un aceite u otra composicion que comprende un PUFA LC, como se usa en la presente memoria, puede referirse a una composicion que comprende un solo PUFA LC tal como el DHA o una composicion que comprende una mezcla de PUFA LC tales como DHA y EPA; o DHA y ARA; o DHA, EPA y ARA, etc.
Los PUFA se pueden obtener a partir de o derivar de una planta (incluyendo oleaginosas), un microorganismo, un animal, o mezclas de los anteriores. Los microorganismos pueden ser algas, bacterias, hongos o protistas. Las fuentes microbianas y los metodos de crecimiento de microorganismos que comprenden nutrientes y/o PUFA se conocen en la tecnica (Industrial Microbiology and Biotechnology, 2a edicion, 1999, American Society for Microbiology). Por ejemplo, los microorganismos se pueden cultivar en un medio de fermentacion en un fermentador. Los PUFA producidos por microorganismos se pueden usar en los metodos y composiciones de la presente invencion. En algunas realizaciones, los organismos incluyen los seleccionados del grupo que consiste en algas doradas (tales como microorganismos del reino Stramenopiles), algas verdes, diatomeas, dinoflagelados (tales como microorganismos del orden Dinophyceae que incluye miembros del genero Crypthecodinium tales como, por ejemplo, Crypthecodinium cohnii), levaduras, y hongos del genero Mucor y Mortierella, que incluyen, pero no limitados a Mortierella alpina y Mortierella sect. schmuckeri. Los miembros del grupo microbiano Stramenopiles incluyen microalgas y microorganismos de tipo algas, que incluyen los siguientes grupos de microorganismos: Hamatores, Proteromonads, Opalines, Develpayella, Diplophrys, Labrinthulids, Thraustochytrids, Biosecids, Oomycetes, Hypochytridiomycetes, Commation, Reticulosphaera, Pelagomonas, Pelagococcus, Ollicola, Aureococcus, Parmales, Diatoms, Xanthophytes, Phaeophytes (algas marrones), Eustigmatophytes, Raphidophytes,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
Synurids, Axodines (que incluyen Rhizochromulinaales, Pedinellales, Dictyochales), Chrysomeridales, Sarcinochrysidales, Hydrurales, Hibberdiales, y Chromulinales. Los Thraustochytrids incluyen los generos Schizochytrium (las especies incluyen aggregatum, limnaceum, mangrovei, minutum, octosporum), Thraustochytrium (las especies incluyen arudimentale, aureum, benthicola, globosum, kinnei, motivum, multirudimentale, pachydermum, proliferum, roseum, striatum), Ulkenia (las especies incluyen amoeboidea, kerguelensis, minuta, profunda, radiate, sailens, sarkariana, schizochytrops, visurgensis, yorkensis), Aplanochytrium (las especies incluyen haliotidis, kerguelensis, profunda, stocchinoi), Japonochytrium (las especies incluyen marinum), Althornia (las especies incluyen crouchii), y Elina (las especies incluyen marisalba, sinorifica). Los Labrinthulids incluyen los generos Labyrinthula (las especies incluyen algeriensis, coenocystis, chattonii, macrocystis, macrocystis atlantica, macrocystis macrocystis, marina, minuta, roscoffensis, valkanovii, vitellina, vitellina pacifica, vitellina vitellina, zopfi), Labyrinthomyxa (las especies incluyen marina), Labyrinthuloides (las especies incluyen haliotidis, yorkensis), Diplophrys (las especies incluyen archeri), Pyrrhosorus* (las especies incluyen marinus), Sorodiplophrys* (las especies incluyen stercorea), Chlamydomyxa* (las especies incluyen labyrinthuloides, montana). (* = no hay un consenso general de la situacion taxonomica exacta de estos generos).
Los microorganismos adecuados incluyen los que son capaces de producir lfpidos que comprenden los materiales de nucleo de acidos grasos poliinsaturados omega-3 y/o omega-6, y en particular se describiran microorganismos que son capaces de producir DHA, DPA, EPA o ARA). Mas en particular, los microorganismos preferidos son algas, tales como Thraustochytrids del orden Thraustochytriales, que incluyen Thraustochytrium (que incluye Ulkenia) y Schizochytrium e incluyendo Thraustochytriales que se describen en las patentes de eE.UU. n° 5.340.594 y 5.340.742, concedidas a varios concesionarios. Mas preferiblemente, los microorganismos se seleccionan del grupo que consiste en microorganismos que tienen las caractensticas de identificacion en ATCC numero 20888, ATCc numero 20889, ATCC numero 20890, ATCC numero 20891 y ATCC numero 20892. Aunque hay algun desacuerdo entre expertos de si Ulkenia es un genero separado del genero Thraustochytrium, para los fines de esta solicitud, el genero Thraustochytrium incluira Ulkenia. Tambien se prefieren cepas de Mortierella schmuckeri (p. ej., incluyendo ATCC 74371) y Mortierella alpina. Tambien se prefieren cepas de Crypthecodinium cohnii, que incluyen microorganismos que tienen las caractensticas identificadoras de ATCC N° 30021, 30334-30348, 30541-30543, 30555-30557, 30571, 30572, 30772-30775, 30812, 40750, 50050-50060, y 50297-50300. Tambien se prefieren microorganismos oleaginosos. Como se usa en la presente memoria, “microorganismos oleaginosos” se definen como microorganismos capaces de acumular mas de 20% del peso seco de sus celulas en forma de lfpidos. Los microorganismos geneticamente modificados que producen PUFA tambien son adecuados para la presente invencion. Estos pueden incluir microorganismos productores de PUFA naturales que se han modificado geneticamente, asf como microorganismos que no producen PUFA de forma natural, pero que se han modificado geneticamente para que lo hagan.
Los organismos adecuados se pueden obtener a partir de una serie de fuentes disponibles, incluyendo la recoleccion del entorno natural. Por ejemplo, la American Type Culture Collection indica actualmente muchas cepas disponibles al publico de microorganismos identificados antes. Como se usa en la presente memoria, cualquier organismo, o cualquier tipo espedfico de organismos, incluye cepas de tipo natural, mutantes o tipos recombinantes. Las condiciones de crecimiento en las que cultivar o multiplicar estos organismos son conocidos en la tecnica, y se describen condiciones de crecimiento adecuadas para al menos algunos de estos organismos, por ejemplo, en la patente de EE.UU. n° 5.130.242, patente de EE.UU. n° 5.407.957, patente de EE.UU. n° 5.397.591, patente de EE.UU. n° 5.492.938, y patente de EE.UU. n° 5.711.983.
Los aceites microbianos preferidos que son utiles en la presente invencion incluyen los que se describen en la publicacion de solicitud de patente de EE.UU. n° 2007-0003686 (titulada "Polyunsaturated Fatty Acid-Containing Oil Product and Uses and Production Thereof,"). Algunos de dichos aceites no estan sometidos a frigelizacion. Un aceite microbiano preferido se conoce como Martek DHA™-HM y se produce mediante un procedimiento como se describe en las solicitudes de patente anteriores, que incluye un procedimiento de extraccion con propanol y agua que produce un producto con caractensticas semisolidas.
Otra fuente de PUFA en las composiciones y metodos de la presente invencion incluye una fuente vegetal, tal como plantas oleaginosas. Las plantas productoras de PUFA, en realizaciones alternativas, pueden incluir las modificadas geneticamente para expresar genes que producen PUFA y las que producen PUFA de forma natural. Dichos genes pueden incluir genes que codifican protemas implicadas en las rutas de smtesis de acidos grasos clasicas, o genes que codifican protemas implicadas en la ruta de la PUFA policetido sintasa (PKS). Los genes y protemas implicados en las rutas de smtesis de acidos grasos clasicas, y organismos geneticamente modificados, tales como plantas transformadas con dichos genes, se describen, por ejemplo, en Napier y Sayanova, Proceedings of the Nutrition Society (2005), 64:387-393; Robert et al., Functional Plant Biology (2005) 32:473-479; o publicacion de solicitud de patente de EE.UU. n° 2004/0172682. La ruta de PUFA PKS, los genes y protemas incluidos en estas rutas, microorganismos geneticamente modificados y plantas transformadas con dichos genes para la expresion y produccion de PUFA, se describen en detalle en: patente de EE.UU. n° 6.140.486, patente de EE.UU. n° 6.566.583; patente de EE.UU. n° 7.247.461, patente de EE.UU. n° 7.211.418, patente de EE.UU. n° 7.217.856, patente de EE.UU. n° 7.271.315, publicacion PCT n°WO 05/097982, y patente de EE.UU. n° 7.208.590.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
Los cultivos de oleaginosas adecuados para usar en la presente invencion incluyen soja, mafz, cartamo, girasol, canola, lino, cacahuete, mostaza, colza, garbanzo, algodon, lenteja, trebol blanco, oliva, palma, borraja, onagra, linaza y tabaco, que se han modificado geneticamente para producir PUFA como se ha descrito antes.
Las tecnicas de transformacion genetica para microorganismos y plantas son bien conocidas en la tecnica. Las tecnicas de transformacion para microorganismos son bien conocidos en la tecnica y se describen, por ejemplo, en Sambrook et al., 1989, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Labs Press. Se describe con detalle una tecnica general para la transformacion de dinoflagelados, que se pueden adaptar para usar con Crypthecodinium cohnii, en Lohuis and Miller, The Plant Journal (1998) 13(3): 427-435. Se describe con detalle una tecnica general para la transformacion genetica de Thraustochytrids en la publicacion de solicitud de patente de EE.UU. n° 20030166207, publicada el 4 de septiembre, 2003. Los metodos para la modificacion genetica de plantas son bien conocidos en la tecnica. Por ejemplo, se han desarrollado numerosos metodos para la transformacion de plantas, incluyendo protocolos de transformacion biologica y ffsica. Vease, por ejemplo, Miki et al., "Procedures for Introducing Foreign DNA into Plants" en Methods in Plant Molecular Biology and Biotechnology, Glick, B.R. y Thompson, J.E. Eds. (CRC Press, Inc., Boca Raton, 1993) pag. 67-88. Ademas, estan disponibles vectores y metodos de cultivo in vivo para transformacion de tejidos o celulas vegetales y regeneracion de plantas. Vease, por ejemplo, Gruber et al., "Vectors for Plant Transformation" en Methods in Plant Molecular Biology and Biotechnology, Glick, B.R. y Thompson, J.E. Eds. (CRC Press, Inc., Boca Raton, 1993) pag. 89-119. Vease tambien, Horsch et al., Science 227:1229 (1985); Kado, C.I., Crit. Rev. Plant. Sci. 10:1 (1991); Moloney et al., Plant Cell Reports 8:238 (1989); patente de EE.UU. n° 4.940.838; patente de EE.UU. n° 5.464.763; Sanford et al., Part. Sci. Technol. 5:27 (1987); Sanford, J.C., Trends Biotech. 6:299 (1988); Sanford, J.C., Physiol. Plant 79:206 (1990); Klein et al., Biotechnology 10:268 (1992); Zhang et al., Bio/Technology 9:996 (1991); Deshayes et al., EMBO J, 4:2731 (1985); Christou et al., Proc Natl. Acad. Sci. USA 84:3962 (1987); Hain et al., Mol. Gen. Genet. 199:161 (1985); Draper et al., Plant Cell Physiol. 23:451 (1982); Donn et al., En Abstracts of VIIth International Congress on Plant Cell and Tissue Culture IAPTC, A2-38, p. 53 (1990); D'Halluin et al., Plant Cell 4:1495-1505 (1992) y Spencer et al., Plant Mol. Biol. 24:51-61 (1994).
Cuando las plantas oleaginosas son la fuente de PUFA, las semillas se pueden recoger y procesar para separar cualquier impureza, desecho o partes indigeribles de las semillas recogidas. Las etapas de procesamiento vanan dependiendo del tipo de oleaginosa y son conocidas en la tecnica. Las etapas de procesamiento pueden incluir trillado (tal como, por ejemplo, cuando las semillas de soja se separan de las vainas), descascarado (separar la cubierta exterior seca o cascara de un fruto, semilla o nuez), secado, limpieza, trituracion, molienda y descascarillado. Despues de que las semillas se han procesado para eliminar cualquier impureza, desecho o material indigerible, se pueden anadir a una disolucion acuosa y despues mezclar para producir una suspension. En algunas realizaciones, la molienda, trituracion o descascarillado se llevan a cabo antes de mezclar con agua. Una suspension producida de esta forma se puede tratar y procesar de la misma forma descrita para un caldo de fermentacion microbiano.
Otra fuente de biomasa de nutrientes, que incluyen PUFA, en las composiciones y metodos de la presente invencion incluyen una fuente animal. Los ejemplos de fuentes animales incluyen animales acuaticos (p. ej., peces, mairnferos marinos y crustaceos tales como krill y otros eufausidos) y tejidos animales (p. ej., cerebro, tngado, ojos, etc.) y productos animales tales como huevos o leche. Se conocen tecnicas para recuperar aceites que contienen PUFA de dichas fuentes.
En el caso de una celula entera, biomasa o semillas oleaginosas, se reconocera que estos pueden incluir un PUFA, una vitamina y otro compuesto beneficioso. Las celulas enteras y semillas oleaginosas incluyen las descritas antes como fuentes de PUFA. Como se usa en la presente memoria, la biomasa se puede referir a multiples celulas enteras que, en agregado constituyen una biomasa. Una masa microbiana puede referirse a una biomasa que no se ha separado del medio de cultivo en el que se cultivo el organismo de biomasa. Un ejemplo de un medio de cultivo es un caldo de fermentacion. En una realizacion adicional, la biomasa se separa de su medio de cultivo por una separacion de solido/lfquido anterior al tratamiento por metodos de la presente invencion. Las tecnicas de separacion de solido/lfquido tfpicas incluyen centrifugacion, filtracion y prensado con filtro de membrana (placa y marco de filtro prensa con membranas de prensado). Esta biomasa (recogida) normalmente tiene un contenido de materia seca que vana entre 5% y 60%. Si el contenido de agua es demasiado alto, se puede eliminar agua de la biomasa por cualquier metodo conocido en la tecnica, tal como, por ejemplo, secado por atomizacion, secado en lecho fluidizado, liofilizacion, congelacion-secado, secado en bandejas, secado en bandejas con vado, secado en tambor, secado por disolvente, secado por excipiente, secado en mezclador/reactor de vado, secado usando secado por atomizacion en lecho, secado por atomizacion fluidizado, secado en transportador, ultrafiltracion, evaporacion, deshidratacion osmotica, congelacion, extrusion, adicion de absorbente, u otros metodos similares o combinaciones de los mismos. Las tecnicas de secado a las que se hace referencia en la presente memoria son bien conocidas en la tecnica. Por ejemplo, el secado por excipiente se refiere a un procedimiento donde un disolvente miscible con agua, se usa para sustituir el agua. La biomasa opcionalmente se puede lavar con el fin de reducir los componentes extracelulares. El caldo de fermentacion se puede secar y despues reconstituir hasta un contenido de humedad de cualquier nivel deseado antes de tratamiento por cualquiera de los metodos de la presente invencion.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
Los materiales de nucleo de celulas enteras, biomasa o semillas oleaginosas se pueden encapsular usando los metodos de la presente invencion, siempre que las celulas enteras, biomasa o semillas oleaginosas sean procesadas en una forma que es ffsicamente adecuada para la encapsulacion. ^picamente, esto requiere el procesado de las celulas enteras o biomasa, de modo que el tamano medio de partfculas sea submicrometrico, y preferiblemente en el intervalo de aproximadamente 0,1 pm a aproximadamente 0,5 pm. Los metodos de procesamiento para semillas oleaginosas se describen en otra parte en la presente memoria. Ademas, se pueden aplicar enzimas hidrolizadoras a la biomasa seca para formar un hidrolizado de biomasa.
En una realizacion adicional, la composicion encapsulada comprende un hidrolizado de biomasa emulsionado. Dichas composiciones y metodos para hacer estas, se describen en detalle en la solicitud de patente provisional de EE.UU. n° de serie 60/680.740, presentada el 12 de mayo, 2005; solicitud de patente provisional de EE.UU. n° de serie 60/781.430, presentada el 10 de marzo, 2006; y solicitud de patente de EE.UU. n° de serie 11/433.752, presentada el 12 de mayo, 2006. Brevemente, se obtiene un hidrolizado de biomasa emulsionado por hidrolisis de una biomasa que contiene nutrientes para producir una biomasa hidrolizada, y emulsion de la biomasa hidrolizada para formar un producto estable. El producto estable tfpicamente es una emulsion o una composicion seca que resulta del posterior secado de la emulsion.
La etapa de formacion de un material de encapsulacion a partir de la solucion que a reaccionado sobre la composicion que comprende el material de nucleo, se puede hacer por cualquier metodo conocido en la tecnica. Por ejemplo, la solucion que ha reaccionado y la composicion que comprende un material de nucleo se pueden secar por atomizacion. Se conocen otros metodos de encapsulacion, tales como secado en lecho fluido, secado en tambor (pelfcula), coacervacion, polimerizacion interfacial, procesado en lecho fluido, recubrimiento en paila, gelificacion por pulverizacion, mezcla horizontal en cinta helicoidal, disco de centrifugacion, coextrusion centnfuga, complejacion de inclusion, estabilizacion de emulsion, recubrimiento por pulverizacion, extrusion, nanoencapsulacion en liposomas, microencapsulacion en fluido supercntico, polimerizacion en suspension, procedimientos de deshidratacion en fno, procedimientos de dispersion por evaporacion, y metodos que aprovechan la solubilidad diferencial de recubrimientos a diferentes temperaturas.
Sin querer estar limitado por ninguna teona, se cree que el material de encapsulacion protege la composicion que comprende el material de nucleo para reducir la probabilidad de o el grado con el que el material de nucleo experimenta un cambio qrnmico, ffsico o biologico o se rompe. El material de encapsulacion puede formar un recubrimiento continuo sobre la composicion que comprende el material de nucleo (encapsulacion 100%) o alternativamente, forma un recubrimiento no continuo (p. ej., a un nivel que proporciona cubrimiento sustancial del material del nucleo, por ejemplo, cubrimiento del 80%, 90%, 95%, o 99% de la superficie espedfica). En otras realizaciones, el material de encapsulacion puede ser una matriz en la que esta atrapado el material de nucleo.
Se resumen a continuacion algunas tecnicas de encapsulacion de ejemplo. Debe reconocerse que la referencia a diferentes tecnicas resumidas a continuacion incluye la descripcion de la presente memoria y variaciones de las descripciones conocidas por los expertos en la tecnica. Tambien estan contempladas otras tecnicas de encapsulacion en la presente invencion.
En general, para la microencapsulacion de un producto de aceite, tal como un aceite que contiene PUFA descrito en la presente memoria, es importante formar una emulsion del aceite por combinacion con la fase acuosa que contienen los materiales de nucleo. En general se desea una emulsion que contiene pequenas gotas de aceite de aproximadamente 200 nm de diametro, denominada emulsion final, para el fin de la microencapsulacion. Se puede preparar una emulsion gruesa de aceite en una fase acuosa, caracterizada por pequenas gotas de aceite de tamano de aproximadamente 1000 nm de diametro como etapa intermedia para preparar una emulsion fina. Una emulsion gruesa se puede preparar por metodos conocidos, que incluyen tratamiento con ultrasonidos y mezclamiento con alta cizalladura. Una vez formada una emulsion adecuada, un experto en la materia puede determinar los metodos de microencapsulacion adecuados basados en las caractensticas de mulsion tales como el contenido de solidos.
En el secado por atomizacion, el material de nucleo que se va a encapsular se dispersa o disuelve en una solucion que incluye un material de cubierta. En aplicacion de alimentos, tfpicamente la solucion es acuosa y la solucion incluye un polfmero u otro material de cubierta. Una vez que se ha formado una emulsion estable, la solucion o dispersion se bombea a traves de un inyector de micronizacion dirigido por un flujo de gas comprimido, y el aerosol resultante se suspende en un ciclon de aire calentado. La temperatura de entrada a menudo es tan alta como es posible sin causar dano a los ingredientes y otros efectos indeseables. En estas condiciones, la suspension atomizada forma micelas. El pequeno tamano de las gotas (en promedio 100 micrometros de diametro) da una superficie espedfica relativamente grande que seca rapidamente. Al secarse el agua, el vehfculo forma una cubierta endurecida alrededor del material de nucleo. Las micropartfculas solidificadas, deshidratadas, pasan a una segunda camara y son atrapadas en un matraz de recoleccion.
Se usa la policondensacion interfacial para encapsular un material de nucleo de la siguiente forma. Se disuelven un monomero y el material de nucleo en un disolvente. Se disuelve un segundo monomero en un segundo disolvente (tfpicamente acuoso) que es inmiscible con el primero. Se forma una emulsion suspendiendo la primera solucion en la segunda solucion mediante agitacion. Una vez que la emulsion se estabiliza, se anade un iniciador a la fase
10
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
acuosa produciendo la polimerizacion interfacial en la interfase de cada pequena gota de emulsion.
En la encapsulacion por fusion en caliente el material de nucleo se anade al polfmero fundido. Esta mezcla se suspende como pequenas gotas fundidas en un no disolvente para el polfmero (a menudo basado en aceite) que se ha calentado a aproximadamente 10°C por encima del punto de fusion del polfmero. La emulsion se mantiene mediante agitacion energica, mientras que el bano de no disolvente se enfna rapidamente por debajo de la temperatura de transicion vftrea del poKmero, haciendo que las pequenas gotas fundidas solidifiquen y atrapen el material de nucleo.
En la encapsulacion por evaporacion de disolvente, un polfmero tipicamente se disuelve en un disolvente organico inmiscible con el agua y el material que se va a encapsular se anade a la solucion del polfmero como una suspension o solucion en disolvente organico. Se forma una emulsion anadiendo esta suspension o solucion a un recipiente de agua agitada energicamente (que a menudo contiene un agente tensioactivo para estabilizar la emulsion). El disolvente organico se evapora mientras se continua agitando. La evaporacion produce la precipitacion del polfmero, formando microcapsulas de solido que contienen el material de nucleo.
El procedimiento de evaporacion del disolvente esta disenado para atrapar un material de nucleo lfquido en polfmero, copolfmero o microcapsulas de copolfmero. El polfmero o copolfmero se disuelve en una mezcla miscible de disolvente y no disolvente, a una concentracion del no disolvente que es intermedia entre la concentracion que producina separacion de fase (es decir, punto de turbidez). El material de nucleo lfquido se anade a la solucion mientras se agita para formar una emulsion y se dispersa el material como pequenas gotas. El disolvente y no disolvente se vaporiza, vaporizandose el disolvente a una velocidad mas rapida, haciendo que el polfmero o copolfmero se separe de la fase y migre hacia la superficie de las pequenas gotas del material de nucleo. Esta solucion de fases separadas despues se transfiere a un volumen agitado de no disolvente, haciendo que cualquier polfmero o copolfmero disuelto que quede precipite y extrayendo cualquier disolvente residual de la membrana formada. El resultado es una microcapsula compuesta de polfmero o cubierta de copolfmero con un nucleo de material lfquido.
En la encapsulacion por separacion de disolvente, tipicamente un polfmero se disuelve en un disolvente organico miscible con aceite y el material que se va a encapsular se anade a la solucion de polfmero en forma de una suspension o solucion en un disolvente organico. Se forma una emulsion anadiendo esta suspension o solucion a un recipiente de aceite energicamente agitado, en el que el aceite es un no disolvente para el polfmero y la solucion de polfmero/disolvente es inmiscible en el aceite. El disolvente organico se separa por difusion en la fase de aceite mientras se continua agitando. La separacion del disolvente produce la precipitacion del polfmero, formando microcapsulas solidas que contienen material de nucleo.
En la encapsulacion por separacion de fase, el material que se va a encapsular se dispersa en una solucion de polfmero mediante agitacion. Mientras se continua suspendiendo uniformemente el material mediante agitacion, se anade lentamente el no disolvente para el polfmero, a la disolucion para disminuir la solubilidad del polfmero. Dependiendo de la solubilidad del polfmero en el disolvente y el no disolvente, el polfmero o bien precipita o se separan las fases en una fase rica en polfmero y una fase pobre en polfmero. En condiciones adecuadas, el polfmero en la fase rica en polfmero migrara a la interfase con la fase continua, encapsulando el material de nucleo en una pequena gota con una cubierta de polfmero exterior.
La emulsion espontanea implica solidificar las pequenas gotas de polfmero lfquido emulsionado cambiando la temperatura, evaporando el disolvente o anadiendo agentes qmmicos de reticulacion. Las propiedades ffsicas y qrnmicas del material de encapsulacion y el material que se va a encapsular, dictan los metodos de encapsulacion adecuados. Factores tales como la hidrofobicidad, peso molecular, estabilidad qrnmica y estabilidad termica afectan a la encapsulacion.
La coacervacion es un procedimiento que implica la separacion de disoluciones coloidales en dos o mas capas lfquidas inmiscibles (Dowben, R. General Physiology, Harper & Row, New York, 1969, pag. 142-143). Mediante el procedimiento de coacervacion, se pueden producir composiciones compuestas de dos o mas fases y conocidas como coacervados. Los ingredientes que comprende el sistema coacervado de dos fases estan presentes en ambas fases; sin embargo, la fase rica en coloide tiene una mayor concentracion de los componentes que la fase pobre en coloide.
Se ha descrito la formacion de microesferas a baja temperatura, vease, p. ej., la patente de EE.UU. n° 5.019.400. El metodo es un procedimiento para preparar microesferas que implica el uso de temperaturas muy bajas para congelar mezclas de polfmero-agente biologicamente activo en microesferas polfmeras. El polfmero en general se disuelve en un disolvente junto con un agente activo que puede estar disuelto en el disolvente o disperso en el disolvente en forma de micropartfculas. La mezcla de polfmero/agente activo se atomiza en un recipiente que contiene un no disolvente, solo o congelado y se recubre con un gas licuado, a una temperatura inferior al punto de congelacion de la solucion de polfmero/agente activo. El gas licuado fno o lfquido congela inmediatamente las pequenas gotas de polfmero. Cuando las pequenas gotas y el no disolvente para el polfmero se calientan, el disolvente en las pequenas gotas se descongela y es extrafdo en el no disolvente, produciendo en endurecimiento
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
de las microesferas.
La encapsulacion por separacion de fase en general procede mas rapidamente que los procedimientos descritos en los parrafos precedentes. Se disuelve un poKmero en el disolvente. Despues, un agente que se va a encapsular se disuelve o dispersa en ese disolvente. Despues la mezcla se combina con un exceso de no disolvente y se emulsiona y estabiliza, de modo que el disolvente de polfmero ya no es la fase continua. Se aplican condiciones de emulsion agresivas con el fin de producir microgotas del disolvente de polfmero. Despues de emulsion, la emulsion estable se introduce en un volumen grande de no disolvente para extraer el disolvente de polfmero y formar micropartfculas. El tamano de las micropartfculas se determina por el tamano de las microgotas del disolvente de polfmero.
Otro metodo de encapsulacion es por nanoencapsulacion por inversion de fase (PIN). En la PIN, un polfmero se disuelve en una cantidad eficaz de un disolvente. El agente que se va a encapsular se disuelve o dispersa tambien en la cantidad eficaz del disolvente. El polfmero, el agente y el disolvente juntos forman una mezcla que tiene una fase continua, en donde el disolvente es la fase continua. La mezcla se introduce en una cantidad eficaz de un no disolvente para producir la formacion espontanea del producto microencapsulado, en donde el disolvente y el no disolvente son miscibles.
En la preparacion de un material de encapsulacion de una composicion que comprende un material de nucleo, las condiciones las puede controlar el experto en la tecnica para dar el material encapsulado con las caractensticas deseadas. Por ejemplo, el experto en la tecnica puede variar el tamano medio de partfculas, la hidrofobicidad, biocompatibilidad, relacion de material de nucleo a material de encapsulacion, estabilidad termica, y similares.
En algunas realizaciones, este metodo incluye ademas manipular el material de nucleo en condiciones que reducen la degradacion oxidativa antes de la encapsulacion. Dicha manipulacion puede incluir, por ejemplo, mantener el producto en una atmosfera inerte, la adicion de antioxidantes al material de nucleo, etc.
Materiales de encapsulacion adicionales, por ejemplo, un segundo material de encapsulacion, un tercer material de encapsulacion, un cuarto material de encapsulacion, un quinto material de encapsulacion, etc., tambien estan contemplados en la presente invencion. Los materiales de encapsulacion adicionales se pueden aplicar por metodos descritos en la presente memoria, y pueden proporcionar propiedades deseables adicionales a los productos. Por ejemplo, los materiales de encapsulacion adicionales pueden potenciar ademas la vida en anaquel de los productos, o modificar las propiedades de liberacion del producto para proporcionar la liberacion controlada o liberacion retrasada del material de nucleo. Sin pretender estar limitados por la teona, un segundo (o mas) material de encapsulacion se cree que protege mas la composicion que comprende el material de nucleo para reducir la probabilidad o el grado con el que experimenta un cambio qrnmico, ffsico o biologico o se rompe. El segundo material de encapsulacion puede formar un recubrimiento continuo sobre el material de encapsulacion (encapsulacion de 100%) o alternativamente, forma un recubrimiento no continuo (p. ej., a un nivel que proporciona el cubrimiento sustancial del material de encapsulacion, por ejemplo cubre 80%, 90%, 95% o 99% de la superficie espedfica del material de encapsulacion). En otras realizaciones, el segundo material de encapsulacion puede ser una matriz en la que esta atrapado el material de encapsulacion.
El segundo material de encapsulacion se puede aplicar por cualquier metodo conocido en la tecnica, tal como secado por atomizacion, secado en lecho fluido, secado en tambor (pelfcula), coacervacion, polimerizacion interfacial, procesamiento en lecho fluido, recubrimiento en paila, gelificacion por pulverizacion, mezcla horizontal en cinta helicoidal, disco de centrifugacion, coextrusion centnfuga, complejacion de inclusion, estabilizacion de emulsion, recubrimiento por pulverizacion, extrusion, nanoencapsulacion en liposomas, microencapsulacion en fluido supercntico, polimerizacion en suspension, procedimiento de deshidratacion en fno, enfriamiento/refrigeracion por atomizacion (granulacion), procedimientos de dispersion por evaporacion, y metodos que aprovechan la solubilidad diferencial de recubrimientos a diferentes temperaturas. Aunque un segundo material de encapsulacion puede encapsular una sola partfcula discreta (es decir, una partfcula que es un material de encapsulacion de una composicion que comprende un material de nucleo), un segundo material de encapsulacion puede encapsular alternativamente una pluralidad de partfculas discretas dentro de una segunda partfcula encapsulada sola. Es decir, la presente invencion contempla un producto encapsulado de multiples nucleos que comprende una coleccion de productos encapsulados primarios, comprendiendo cada producto encapsulado primario un material de nucleo y un primer material de encapsulacion sobre el material de nucleo; y un segundo material de encapsulacion que rodea la coleccion.
En realizaciones preferidas, el segundo material de encapsulacion del material de encapsulacion es un recubrimiento de granulado. El granulado es un procedimiento de encapsulacion de compuestos en una matriz fundida a alta temperatura, en donde el material granulado pasa de solido a lfquido por encima de temperatura ambiente. Los materiales y metodos preferidos para la granulacion se describen en la publicacion de solicitud de patente internacional n° WO 2007/150047, titulada "Encapsulated Labile Compound Compositions And Methods Of Making The Same".
En una tercera realizacion, la presente invencion proporciona productos que se pueden obtener por los metodos de
12
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
la invencion. En una realizacion, la invencion proporciona un producto encapsulado que incluye una composicion que comprende un material de nucleo; y un material de encapsulacion sobre la composicion. El material de encapsulacion se forma a partir de protema hidrolizada que tiene un grado de hidrolisis de protemas entre aproximadamente 1% y aproximadamente 15% y a partir de productos de caramelizacion. Dicho producto se puede preparar haciendo reaccionar una disolucion que comprende protema y azucar reductor a un pH inicial de al menos aproximadamente 10 para lograr un grado de hidrolisis de protemas entre aproximadamente 1% y aproximadamente 15%, como se reivindica.
Los productos de la presente invencion se pueden caracterizar en general por parametros tales como tamano y distribucion de partmulas, geometna de parffculas, contenido activo y distribucion, mecanismo de liberacion y estabilidad en el almacenamiento. En algunas realizaciones en las que el producto esta en forma de un polvo, el producto tiene un tamano de parffculas de entre aproximadamente 10 pm y aproximadamente 3000 pm, y en otra realizacion entre aproximadamente 40 pm y 300 pm. La mayoffa de las tecnicas de medicion de tamanos de parffculas suponen que el material que se esta midiendo es esferico. Para parffculas de formas irregulares, la aproximacion a la esfera equivalente es util en cuanto que simplifica el modo en que se representan las distribuciones de tamanos de parffculas, pero diferentes tecnicas de medicion de tamanos de parffculas pueden producir resultados diferentes. En el caso de parffculas no esfericas, el tamano de parffculas se puede dar como, por ejemplo, el tamano de una esfera de la misma longitud maxima, el tamano de una esfera de la misma longitud minima, el tamano de una esfera del mismo peso, el tamano de una esfera del mismo volumen, el tamano de una esfera de la misma superficie espedfica, el tamano de una esfera que pasa por el mismo aparato de tamiz, y el tamano de una esfera con la misma velocidad de sedimentacion. Los productos de la presente invencion son solubles en agua; sin embargo, se pueden hacer insolubles en agua por la adicion de un segundo material de encapsulacion tal como un recubrimiento por granulacion.
Los productos de la invencion en general son ffsicamente estables. En algunas realizaciones, el producto es ffsicamente estable durante al menos aproximadamente 30 dfas, al menos aproximadamente 60 dfas, al menos aproximadamente 90 dfas, al menos aproximadamente 120 dfas, al menos aproximadamente 1 ano, al menos aproximadamente 3 anos, o al menos aproximadamente 5 anos. La estabilidad ffsica se refiere a la capacidad de un producto para mantener su aspecto ffsico a lo largo del tiempo. Por ejemplo, la estructura de un producto con el material de encapsulacion de la composicion, se mantiene sustancialmente, por ejemplo, sin migracion de la composicion a traves del material de encapsulacion.
En algunas realizaciones, los productos de la invencion son oxidativamente estables. Como se usa en la presente memoria, la estabilidad oxidativa se refiere a la falta de oxidacion significativa en el material de nucleo a lo largo de un periodo de tiempo. La estabilidad oxidativa de las grasas y aceites la puede determinar el experto en la tecnica. Por ejemplo, los valores de peroxido indican la cantidad de peroxidos presentes en la grasa y en general se expresan en miliequivalentes de oxfgeno por kg de grasa o aceite. Ademas, los valores de anisidina miden componentes carbonilo (aldelffdos y cetonas) que se forman durante el deterioro de los aceites. Los valores de anisidina se pueden determinar como se describe en “IUPAC, Standard Methods for the Analysis of Oils, Fats and Derivatives”, 6a Ed. (1979), Pergamon Press, Oxford, Metodo 2.504, pagina 143. Los productos de la invencion, en algunas realizaciones, tienen un valor de peroxido menor de aproximadamente 2, o menor de aproximadamente 1. En otras realizaciones, los productos de la invencion tienen un valor de anisidina menor de aproximadamente 1. En algunas realizaciones, el producto es oxidativamente estable durante al menos aproximadamente 30 dfas, al menos aproximadamente 60 dfas, al menos aproximadamente 90 dfas, al menos aproximadamente 120 dfas, al menos aproximadamente 1 ano, al menos aproximadamente 3 anos, o al menos aproximadamente 5 anos.
En otras realizaciones de la invencion, los productos tienen aromas o sabores deseados. En algunas realizaciones, un aroma o sabor deseado se debe a la presencia de productos de la reaccion de Maillard. En otras realizaciones, se imparte al producto un aroma o sabor deseable, o falta de un aroma o sabor indeseable, por la estabilidad ffsica y oxidativa del producto. La presencia de aromas y sabores deseables la puede evaluar el experto en la tecnica. Por ejemplo, las caracteffsticas de olor en la habitacion de aceites de cocina se pueden caracterizar de forma reproducible mediante paneles de prueba entrenados en las pruebas de olor en habitacion (Mounts, J. Am. Oil Chem. Soc. 56:659-663, 1979). Una prueba normalizada para la evaluacion sensorial de aceites vegetales comestibles se presenta en “AOCS' Recommended Practice Cg 2-83 for the Flavor Evaluation of Vegetable Oils” (Methods and Standard Practices of the AOCS, 4a Edicion (1989)). La tecnica abarca la preparacion y presentacion de muestras convencionales, asf como de patrones de referencias y el metodo para puntuar los aceites. Se puede pedir a los integrantes del panel que clasifiquen los productos en una escala hedonica. Dicha escala puede ser una escala de 1-10 usada para el olor y sabor general en la que 10 se asigna a “insfpido completo” y 1 a “detestable fuerte”. La puntuacion mas alta indica mejor producto en terminos de aroma y sabor. En algunas realizaciones, los productos de la presente invencion tendran una puntuacion de al menos aproximadamente 5, al menos aproximadamente 6, al menos aproximadamente 7, al menos aproximadamente 8, al menos aproximadamente 9 o aproximadamente 10 en dicha prueba. Dichas evaluaciones se pueden llevar a cabo en diferentes marcos de tiempo, tal como tras la produccion del producto, al menos aproximadamente 60 dfas despues de la produccion, al menos aproximadamente 90 dfas despues de la produccion, al menos aproximadamente 120 dfas despues de la produccion, al menos aproximadamente 1 ano despues de la produccion, al menos aproximadamente 3 anos
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
despues de la produccion, o al menos aproximadamente 5 anos despues de la produccion.
Otra escala para evaluar las propiedades sensoriales es la escala Spectrum para la intensidad, una escala sensorial para aromas y sabores desarrollada por Sensory Spectra. Meilgaard, et al. (1999), SENSORY EVALUATION TECHNIQUES, 3a ed., CRC Press, Florida; Apendice l1.2., y descrito con mas detalle en los ejemplos.
La cantidad de material de nucleo en los productos de la invencion variara dependiendo del tipo de compuestos, los materiales de encapsulacion usados y los metodos usados para formar el producto. En algunas realizaciones, el producto comprende material de nucleo en una cantidad de al menos aproximadamente 1 a 20 por ciento en peso, en incrementos de 1% hasta de aproximadamente 40 a 80 por ciento en peso, en incrementos de 1%, por ejemplo, entre aproximadamente 1 por ciento en peso y aproximadamente 80 por ciento en peso, entre aproximadamente 5 por ciento en peso y aproximadamente 70 por ciento en peso, entre aproximadamente 10 por ciento en peso y aproximadamente 60 por ciento en peso, entre aproximadamente 15 por ciento en peso y aproximadamente 50 por ciento en peso, o entre aproximadamente 1 por ciento en peso y aproximadamente 50 por ciento en peso.
Los productos de la presente invencion se pueden incorporar en productos nutricionales (que incluyen alimentos, complementos de alimentacion, piensos, complementos de piensos y productos nutriceuticos), productos cosmeticos, productos farmaceuticos y productos industriales. Los productos pueden estar en forma de comprimidos masticables, comprimidos de disolucion rapida, comprimidos efervescentes, polvos reconstituibles, elixires, lfquidos, soluciones, suspensiones, emulsiones, comprimidos, comprimidos de multiples capas, comprimidos de bicapa, capsulas, capsulas de gelatina blanda, capsulas de gelatina dura, comprimidos oblongos, pastillas para chupar, pastillas masticables, perlas, polvos, granulos, partfculas, granulos dispersables, complementos dieteticos, alimentos geneticamente modificados, productos a base de hierbas, y alimentos procesados.
Un producto nutricional se puede usar directamente como un alimento, complemento de alimento, pienso, complemento de pienso, o como un ingrediente en cualquiera de los anteriores. Los alimentos pueden ser alimentos lfquidos o alimentos solidos. Los alimentos lfquidos incluyen, por ejemplo, formulas infantiles, comidas lfquidas, huevos lfquidos, jarabes multivitammicos, sustitutos de comidas, alimentos medicinales, sopas y jarabes y bebidas. Como se usa en la presente memoria, una bebida es cualquiera de diferentes lfquidos para beber. Las bebidas incluyen, por ejemplo, bebidas energeticas, zumos de frutas, leche y productos lacteos. Los alimentos solidos incluyen alimentos infantiles, yogurt, queso, cereales, mezclas en polvo, productos horneados, que incluyen, por ejemplo, artfculos tales como pasteles, pasteles de queso, tartas, bizcochos pequenos, galletas, barritas, panes, panecillos, galletas, magdalenas, bollos, tortas y picatostes, barritas de comida que incluyen barritas energeticas y carnes procesadas. Tambien estan incluidas pastas, batidos, helados; postres congelados; yogures helados; mezclas de barquillos de helados; aderezos para ensaladas; y mezclas de sustitutos de huevo, productos horneados tales como galletas, galletas saladas, productos dulces, pasteles de tentempie, tartas, barritas de granola/aperitivo y pasteles para tostador; aperitivos salados tales como patatas fritas, chips de mafz, chips de tortilla, aperitivos extruidos, palomitas, pretzeles, patatas fritas, y nueces; aperitivos para especialidades tales como salsas, aperitivos de frutos secos, aperitivos de carne, cortezas de cerdo, barritas de comida saludable y pasteles de arroz/mafz; y aperitivos dulces como caramelos. En algunas realizaciones, que incluyen en particular algunos alimentos solidos, el producto se puede procesar en forma de partfculas. Por ejemplo, la forma en partfculas se puede seleccionar del grupo que consiste en una perla, un chip y un copo.
Los piensos o complementos de piensos se pueden preparar para cualquier animal, incluyendo cualquier animal de comparua o mascota, o para cualquier animal cuyos productos sean consumidos por los seres humanos. El termino “animal” significa cualquier organismo que pertenece al reino animal e incluye, sin limitacion, cualquier animal del cual se obtenga carne de aves de corral, pescado, vaca, cerdo o cordero. El pescado se obtiene, sin limitacion de peces, gambas y mariscos. Los productos animales incluyen cualquier producto derivado de dichos animales, incluyendo, sin limitacion, carne, huevos, leche u otros productos. Cuando se alimenta a dichos animales, se pueden incorporar nutrientes tales como PUFA LC en la carne, leche, huevos y otros productos de dichos animales para aumentar el contenido de esos nutrientes.
Un producto cosmetico es un producto que se aplica a la piel y puede funcionar para mejorar el aspecto de la piel o para proporcionar algun beneficio dermatologico a la piel.
Un producto industrial es un producto tal como una materia prima para la fabricacion de pinturas, combustibles, aceite, fluidos para trabajar el caucho o fluidos para trabajar metales.
Objetos, ventajas y nuevas caractensticas adicionales de esta invencion seran evidentes para los expertos en la tecnica tras examinar los siguientes ejemplos de la misma, que no se pretende que sean limitantes.
Ejemplos
Ejemplo 1
Este ejemplo describe un metodo general para la preparacion de los aceites microencapsulados y el ejemplo 2
5
10
15
20
25
30
35
describe ademas la preparacion de aceites microencapsulados espedficos.
Los niveles de uso de los ingredientes se indican en la tabla 1. Una fuente de protema y una fraccion de hidrato de carbono para la caramelizacion, se hidratan en agua durante 30 minutos a 55-60°C con agitacion constante. Una vez que los ingredientes se han hidratado y dispersado completamente, el pH se ajusta a 10,5-11,0 con NaOH. La solucion ajustada se calienta a reflujo a 90-95°C durante 60 minutos (el tiempo empieza a 90°C). Despues de la reaccion de hidrolisis/caramelizacion, la solucion se enfna y se mide el pH. Si el pH es mayor que 7, se anade gota a gota solucion de acido cftrico hasta que se obtiene un pH final de aproximadamente 7,0. Finalmente, se anaden aceite microalgal Martek DHA™-HM obtenido Schizochytrium, hidrato de carbono adicional y ascorbato sodico, a la solucion enfriada y se mezcla durante 3 minutos a 4.000 rpm para formar una emulsion gruesa. El tamano de partmulas de la emulsion gruesa se reduce mas mediante homogenizacion 1 paso a 500 bar. La emulsion se seco por atomizacion a una temperatura de entrada de 180°C y una temperatura de salida de 80°C mediante una unidad de secado por atomizacion Buchi 190 con dos inyectores de fluido.
Tabla 1. Lista tfpica de ingredientes
Ingrediente
Nivel de uso (%)
Agua
50
Hidrato de carbono para la caramelizacion (p. ej., glucosa)
30
Protema (p. ej., aislado de protema de soja)
10
Aceite Martek DHA™-HM
5
Hidrato de carbono adicional (p. ej., glucosa)
3,5
Ascorbato sodico
1,5
Total
100%
Ejemplo 2
Este ejemplo describe la preparacion de aceites microencapsulados por el metodo del ejemplo 1 y variaciones del metodo.
A. El metodo del ejemplo 1 se llevo a cabo con aislado de protema de soja (SPI) y glucosa (un azucar reductor) para preparar aceite Martek DHA™-HM microencapsulado.
B. El metodo del ejemplo 1 para preparar aceite Martek DHA™-HM microencapsulado se llevo a cabo con SPI y glucosa, excepto que el SPI no se hidrolizo. Es decir, la reaccion de caramelizacion se llevo a cabo en ausencia de SPI. El SPI e hidrato de carbono adicional se anadieron despues de la etapa de caramelizacion y enfriamiento, pero antes de la adicion del aceite para emulsion.
C. El metodo del ejemplo 1 para preparar aceite Martek DHA™-HM microencapsulado se llevo a cabo con SPI y sacarosa (un azucar no reductor).
D. El metodo del ejemplo 1 para preparar aceite Martek DHA™-HM microencapsulado se llevo a cabo con un aislado de protemas de soja hidrolizado (HSPI) disponible en el comercio que tema 28% de hidrolisis, y glucosa.
E. El aceite Martek DHA™-HM microencapsulado se preparo con SPI y glucosa. Este procedimiento se llevo a cabo de forma similar al ejemplo 1; excepto que el protocolo de hidrolisis se llevo a cabo con adicion de acido y se separo el azucar de la disolucion para determinar si la adicion de acido exogeno catalizana la hidrolisis de protema. El aislado de protemas de soja se hidrato, el pH se ajusto a 10,7 y se calento (90-95°C) durante 60 minutos. A lo largo de la etapa de calentamiento, se anadio una solucion de acido cftrico al 10% de forma exogena. Se tuvo cuidado para imitar el procedimiento del ejemplo 1, en el que se cree que los acidos se forman lentamente durante la reaccion de hidrolisis/caramelizacion. El pH se siguio constantemente y al final del ciclo de calor de 60 minutos, el pH final era aproximadamente 7,0. Siguiendo el procedimiento modificado, se anadieron el resto de los ingredientes.
F. Resultados
La estabilidad final del polvo y caractensticas del metodo y alternativas se indican a continuacion en la tabla 2.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Tabla 2. Caractensticas de estabilidad y prototipos seleccionados
Ejemplo n°
Muestra Aceite libre (%) Periodo de induccion (semanas)
Espacio de cabeza
Sensorial
2A
Hidrolisis de SPI / Glucosa 0,71 11 9
2B
No hidrolisis de SPI / Caramelizacion de glucosa 8,97 3 6
2C
Hidrolisis de SPI / Sacarosa 2,16 5 2
2D
HSPI comercial (28% de hidrolisis) / Glucosa N/A N/A N/A
2E
Hidrolisis modificada de SPI (adicion de acido) / Glucosa 1,10 2 7
Nota: N/A: Emulsion inestable, sin procesado adicional
El rendimiento y estabilidad de los productos finales se evaluaron midiendo el aceite libre, espacio de cabeza y caractensticas sensoriales del producto (polvo). El aceite libre es una medida cuantitativa que demuestra la eficacia de la encapsulacion. La eficacia se evalua determinando la cantidad de aceite superficial facilmente extrafble presente en el polvo. El bajo contenido de aceite libre indica que los ingredientes y los procedimientos de la encapsulacion son suficientes para producir un producto muy uniforme; sin embargo, la eficacia de la encapsulacion solo no puede predecir la estabilidad del producto. Puesto que la oxidacion de lfpidos es el mayor factor que contribuye a la estabilidad del propio producto, la medida de productos de oxidacion proporciona un metodo util de evaluacion de las matrices de encapsulacion. Las medidas de los productos de oxidacion secundarios tales como hexanal y propanal se usan ampliamente como marcadores para controlar la oxidacion de los acidos grasos omega- 3. Dichas medidas acopladas con el analisis sensorial proporcionan un metodo reproducible para predecir con precision la vida en anaquel. Los resultados del espacio de cabeza presentados se obtienen de muestras en condiciones de almacenamiento aceleradas (40°C). Dichas condiciones aceleran los tiempos de reaccion, acortando asf la cantidad de tiempo necesaria para evaluar la vida en anaquel. El periodo de induccion del espacio de cabeza se define por la presencia inicial de productos de oxidacion (propanal o hexanal), de modo que un periodo de induccion mayor indica un producto oxidativamente mas estable.
El ejemplo 2A ilustra los resultados obtenidos tfpicamente con el metodo de hidrolisis de la presente invencion. Los datos de estabilidad en la tabla 2 indican la funcionalidad de la presente invencion. Los resultados indican que mejora mucho el rendimiento del polvo cuando se usa dicho metodo. Una comparacion directa entre el ejemplo 2A y el ejemplo 2B, que tiene los mismos ingredientes que el ejemplo 2A pero sin hidrolisis, demuestra la eficacia del procedimiento de hidrolisis de la presente invencion. La muestra no hidrolizada contiene un contenido de aceite libre mucho mayor, asf como especio de cabeza y periodos de induccion sensoriales limitados. Puesto que las muestras se prepararon con los mismos ingredientes, las diferencias de rendimiento se pueden atribuir a la mayor funcionalidad de la protema impartida por el metodo de hidrolisis.
Los productos microencapsulados preparados con el azucar no reductor sacarosa en el ejemplo 2C presentan cantidad elevada de aceite libre y estabilidad limitada. La perdida de la funcionalidad de los ingredientes en este ejemplo esta relacionada directamente con la falta de hidrolisis de protemas como indica la falta de cambio de pH. Se cree que debido a la incapacidad de la sacarosa para actuar como un azucar reductor, no se forman los productos de oscurecimiento de Maillard y de caramelizacion de naturaleza acida. La falta de formacion de producto acido probablemente prevema que se produjera la reaccion de hidrolisis.
Cuando la protema de soja se sustituyo por un aislado de protemas de soja hidrolizado disponible en el comercio caracterizado por 28% de grado de hidrolisis (DH) en el ejemplo 2D, se observaron caractensticas de emulsion malas. Tras la mezcla con cizalladura y posterior homogeneizacion, se produjo la separacion inmediata. Dicha inestabilidad de la emulsion evita el procesamiento posterior puesto que los ingredientes no estan uniformemente dispersos. La falta de estabilidad de la emulsion en este caso es mas que la debida probablemente a la excesiva hidrolisis de protema. Sin querer estar limitado por la teona, el metodo de hidrolisis qrnmica en el ejemplo 1, se cree que escinde protemas aleatoriamente produciendo fragmentos peptfdicos de tamanos uniformes. La naturaleza limitada y la escision aleatoria de la hidrolisis qrnmica producen una distribucion de tamanos de fragmentos peptfdicos grande, creando una red compleja entretejida de diferentes longitudes de protemas cuando se usa como un emulsionante. Se cree que las protemas hidrolizadas enzimaticamente contienen peptidos mucho mas pequenos y una distribucion de peptidos mas pequenos en general que lo que se encuentra en los productos hidrolizados qmmicamente. La funcionalidad de dichos peptidos se reducina mucho puesto que afecta a la capacidad de los fragmentos mas pequenos para formar un recubrimiento estable alrededor de las pequenas gotas de aceite.
Se investigo un procedimiento de hidrolisis modificado como se describe en el ejemplo 2E para determinar si la adicion de acido exogeno catalizana la hidrolisis de protemas. Se logro hidrolisis limitada con el metodo modificado; sin embargo, el polvo tema ligeramente mayor cantidad de aceite libre y periodos de induccion menores. Se cree que la reaccion compleja de hidrolisis de protemas, el oscurecimiento de Maillard y la caramelizacion obtenidos usando el metodo del ejemplo 1 y 2A proporcionan un sistema de recubrimiento unico. Los resultados indican que los polvos producidos con el metodo del ejemplo 2A presentan caractensticas de producto superiores cuando se comparan con los metodos alternativos investigados en los ejemplos 2B-2E.
5
10
15
20
25
Ejemplo 3
A. Formulaciones
Las formulaciones y composiciones calculadas de las emulsiones para hacer polvos secados por atomizacion se enumeran en la tabla 3.
Tabla 3. Formulaciones y composiciones de emulsiones para hacer polvos liofilizados
Formulacion
Emulsion n° 1 (%) Emulsion n° 2 (%) Emulsion n° 3 (%) Proveedor
DHA™-HM
23,4 16,2 16,2 Martek HM 75-4088
Aceite de mafz
0 7,2 0 Mazola
Stable-Flake® S
0 0 7,2 Cargill
Monogliceridos
0,234 0,234 0,234 Danisco
Agente de enmascaramiento
0,351 0,351 0,351 Firmenich
Vitablend™ TAP1010
0 0,0288 0,0288 Vitablend
Aislado de protemas de soja BiPRO®
4 4 4 Davisco
Jarabe de maltosa 65% (caramelizado)
3,5 3,5 3,5 Cargill
Jarabe de maltosa 65%
8 8 8 Cargill
Jarabe de glucosa 95%
2,3 2,3 4,6 Cargill
Ascorbato sodico
1,2 1,2 1,2 Weisheng
Agua
57,015 56,986 54,686
Total
100 100 100
Composiciones calculadas de las emulsiones
n° 1 n° 2 n° 3
Solidos totales (%)
38,87 38,90 39,65
Protema total (%)
3,60 3,60 3,60
Grasa total (%)
23,68 23,71 23,71
DHA total (%)
8,19 5,67 5,67
Hidratos de carbono totales (%)
11,45 11,45 12,20
Cenizas totales (%)
0,13 0,13 0,13
Solidos totales (%) - medidos
NA 41,17 41,00
Como se muestra en la tabla 3, la carga de aceite total en la formulacion es 24%. La diferencia entre las tres formulaciones esta en la cantidad de aceite DHA™-HM. Se anadio una pequena cantidad de TAP 1010 a la n° 2 y 3 para compensar la ausencia de antioxidantes en el aceite de mafz y Stable-flake S. El tamano del lote de la emulsion era 230 kg. El contenido de solidos totales de las emulsiones era 40% antes del secado por atomizacion.
Las etapas basicas llevadas a cabo en estas formulaciones eran 1) hidrolisis de protemas en una fase de agua que contiene azucares en agua, protema e hidroxido sodico, 2) mezcla de la fase de aceite que contiene aceite microbiano que contiene DHA, monogliceridos, Vitablend™ TAP1010 (una mezcla antioxidante que contiene 10% de toxoferoles mixtos, 10% de palmitato de ascorbilo, 40% de lecitina de soja y 40% de aceite de girasol alto oleico) y agente de enmascaramiento con fase de agua hidrolizada para formar una emulsion gruesa, 3) formacion de una emulsion fina por homogeneizacion, y 4) secado por atomizacion. El diagrama del procedimiento para ilustrar el procedimiento se muestra en la figura 1.
B. Hidrolisis de protemas de lactosuero
Se combinaron agua, aislado de protemas de lactosuero y porciones de jarabe de maltosa en el tanque de la fase de agua. La protema se hidrato durante 30 minutos a 55°C con mezcla lenta antes de ajustar el pH de la mezcla a 10,7 usando hidroxido sodico al 50% (p/p). Despues la mezcla se calento a 90-95°C y se mantuvo a esta temperatura durante 40-45 minutos antes de retirar el calentamiento. El proceso tardo aproximadamente 1 hora para calentar la mezcla a la temperatura, Despues de enfriar, el pH de la mezcla era aproximadamente 7,2-7,5 a 60°C. Se anadio ascorbato sodico para neutralizar mas el pH. La maltosa y jarabe de glucosa restante se anadieron en este momento. Despues se anadio acido cftrico para disminuir el pH entre 6,8 y 7,0 antes de combinar con la fase de aceite. Las cantidades reales usadas de hidroxido sodico al 50% y acido cftrico se pueden encontrar en la tabla 4.
Tabla 4. Cantidad de hidroxido sodico y acido cftrico usados para la hidrolisis de protemas de lactosuero
Emulsiones
n° 1 n° 2 n° 3
NaOH al 50% (p/p) usado (kg)
1,18 1,22 1,12
Acido cftrico usado (kg)
0,436 0,410 No disponible
C. Formacion de una emulsion
Emulsion gruesa. Se llevo a cabo mezclamiento con alta cizalladura en la mezcla de la fase acuosa y fase de aceite durante 15 minutos a 3550 rpm a aproximadamente 65°C. La formulacion n° 3 uso Stable-flake® S en la formulacion, 5 que tema un punto de fusion de 70°C. Durante los 15 minutos de alta cizalladura antes de homogeneizacion, a la temperatura de 60°C, el Stable-flake® S solidifico y salio a flote en la superficie del tanque de emulsion. Esta mezcla se calento a 71°C para volver a fundir la grasa en el tanque y producir una emulsion gruesa homogenea antes de homogeneizacion.
Emulsion fina. La emulsion gruesa n° 1 se mantuvo en el tanque a 60,5°C durante ligeramente mas tiempo que la 10 emulsion n° 2 o la emulsion n° 3 antes de homogeneizar. Se llevo a cabo un primer paso de homogeneizacion a aproximadamente 65°C y 360 bar. Se llevo a cabo un segundo paso de homogeneizacion a aproximadamente 45°C y 50 bar. La temperatura puede subir mas que estos objetivos, por lo tanto, la temperatura se controla con cuidado durante este procedimiento. Las distribuciones de tamanos de partfculas de la emulsion despues del primer paso y segundo paso de homogeneizacion se muestran en la tabla 5 y figura 2. Un segundo paso de la emulsion por la 15 homogeneizacion disminuyo el tamano de partfculas d(0,5) de 0,161 a 0,145 ym y estrecho la distribucion de tamanos comparado con el tamano de partfculas despues del primer paso. Esto podna ser beneficioso para reducir el contenido de aceite libre en polvos secados por atomizacion y mejora la estabilidad del polvo.
Tabla 5. Influencia del numero de pasos de homogeneizacion en los tamanos de partfculas de la emulsion
Emulsiones
n° 1 n° 2 n° 3
Paso de homogeneizacion
1er Paso 1er Paso 1er Paso
Tamano de partfculas d(0,5)
0,163 0,161 0,157
D[3,2]
0,136 0,135 0,133
D[4,3]
0,223 0,221 0,219
Uniformidad
0,719 0,719 0,734
Temperatura entrada (°C)
72 66,1 76,7
Temperatura salida (°C)
70,5 57,8 72,2
Emulsiones
n° 1 n° 2 n° 3
Paso de homogeneizacion
2° Paso 2° Paso 2° Paso
d(0,5)
No disponible 0,145 0,149
D[3,2]
No disponible 0,122 0,129
D[4,3]
No disponible 0,183 0,194
Uniformidad
No disponible 0,606 0,623
Temperatura entrada (°C)
68,9 61,1 72,2
Temperatura salida (°C)
59,4 55,6 63,9
20 Nota:
1. El instrumento usado para las mediciones de partfculas era Malvern Mastersizer Hydro2000
2. d (0,5) - diametro medio promedio; D[3,2] - diametro medio ponderado en superficie; D[4,3] - diametro medio ponderado en volumen
3. Uniformidad - una medida de las desviaciones absolutas de la mediana
25 4. Temperatura entrada/salida eran la temperatura real medida durante la homogeneizacion
D. Secado por atomizacion
Despues de homogeneizar la emulsion, se puso en un tambor y se transporto a un secador por atomizacion, La emulsion se seco por atomizacion a una temperatura de entrada de 150°C y una temperatura de salida de 75°C mediante el aparato Niro Tall Form Spray Dryer™ capaz de procesar 500 kilogramos de material por hora. La 30 presion del inyector era 138 bar con un inyector SE60 y el caudal era 7,5 kg/min.
Para cada ejecucion, se recogieron aproximadamente 72 kg de polvo del punto de recoleccion principal del secador y de los ciclones. El polvo recogido del punto de recoleccion principal estaba caliente (65°C) cuando se recogio. Aunque los polvos se pusieron en un refrigerador tan pronto como fue posible despues del secado, este polvo se sometio a mas tension que los polvos que estaban fnos cuando se recogieron. La distribucion de los tamanos de 35 partfculas de los polvos se puede encontrar en la tabla 7 y figura 3. Como se esperaba, el polvo recogido del ciclon es mucho mas fino que el polvo recogido por el punto de recoleccion principal.
Tras el secado, suponiendo que la cantidad de adicion de fosfato tricalcico era 2% y el contenido de humedad alcanzado era 3%; las composiciones de los 3 polvos se muestran en la tabla 6.
Tabla 6. Composiciones calculadas de polvo secado por atomizacion y rendimiento
Contenido en polvo - nucleo (%)
Polvo n° 1 Polvo n° 2 Polvo n° 3
Humedad total (%)
3,00 3,00 3,00
Solidos totales (%)-TCP
95,00 95,00 95,00
Protema total (%)
8,81 8,80 8,63
Grasa total (%)
57,88 57,90 56,81
DHA total (%)
20,02 13,85 13,59
Hidratos de carbono totales (%)
27,99 27,97 29,23
Fosfato tricalcico (TCP)
2,00 2,00 2,00
Cenizas totales (%) - TCP
0,32 0,32 0,32
Total (%)
100,00 100,00 100,00
Rendimiento teorico del polvo (kg)
92,17 92,23 94,01
Contenido de humedad medido del polvo (%)
3,04 2,89 2,68
5 Tabla 7. Distribuciones de tamanos de partfculas de polvos secados por atomizacion
Polvos
Polvo n° 1 Polvo n° 1 Polvo n° 2 Polvo n° 3
Codigo
0514 1C 0514 1C cyclone 0514 2C 0514 3C
Tamano de partfculas d(0,1)
27,062 17,33 32,865 27,038
D(0,5)
65,21 47,906 74,61 65,33
D(3,2)
47,86 30,823 56,37 47,23
D(4,3)
72,63 53,967 82,35 72,38
d(0,5) objetivo
60 N/A 60 60
Nota:
1. d (0,1) - 10% de las partfculas tienen tamano de partfculas menor que este diametro; d(0,5) - diametro medio promedio; D[3,2] - diametro medio ponderado en superficie; D[4,3] - diametro medio ponderado en volumen
Los resultados analfticos de los polvos secados por atomizacion para la potencia de DHA y el contenido de aceite 10 libre se muestran en la tabla 8. Hay algunas discrepancias entre el contenido potencia de DHA medido por diferentes laboratorios debido a los diferentes metodos de extraccion. Los tres polvos teman contenido bajo de aceite libre (por debajo de 0,8%).
Tabla 8. Potencia de DHA y contenido de aceite libre para los polvos secados por atomizacion
Nombre del polvo
Contenido de DHA (mg/g) Aceite libre medido (%)
Esperado
Medido (Lab 1) Medido (Lab 2)
n° 1
200,2 201,70 205,2 0,72
n° 2
138,5 140,82 124,4 0,67
n° 3
135,9 138,23 162,0 0,57
15 Se evaluaron los aromas de los tres polvos usando la escala de intensidad Spectrum, una escala sensorial para los aromas y sabores desarrollada por Sensory Spectra, Meilgaard, et al, (1999), SENSORY EVALUATION TECHNIQUES, 3a ed., CRC Press, Florida; Appenidix 11.2. Brevemente, esta es una escala de 0-15 para compuestos aromaticos en la que 0 representa nada, 2 representa bajo, 5 represente bajo-medio, 7,5 representa medio, 10 representa medio-alto, 12 representa alto y 15 representa muy alto. Los resultados se muestran en la 20 tabla 9. No se percibieron notas malolientes; sin embargo, se percibieron notas artificiales junto con olor dulce de tipo caramelo/azucar moreno. Los tres polvos tienen caractensticas de aromas similares.
Tabla 9. Evaluacion sensorial de polvos secados por atomizacion (aromas)
Propiedades
Polvo n° 1 Polvo n° 2 Polvo n° 3
Impacto total
4,5 4,5 4,5
Maloliente
0 0 0
Artificial
3 2 2
Dulce (tipo caramelo/azucar moreno)
1,5 2 2
Tambien se llevo a cabo un estudio de la evaluacion sensorial a largo plazo en los polvos 1-3. Se pidio a los
19
integrantes de los paneles que clasificaran el olor en una escala de 1 a 5, siendo 3 rancio y siendo mejor la puntuacion mas baja. Se eligio un punto de corte de 3 como referencia para una buena caractenstica sensorial. Los polvos 1-3 teman una puntuacion sensorial de menos de 3 durante 6 semanas, indicando la capacidad del polvo para proteger los componentes del aceite frente a la oxidacion y otras reacciones que producen sabores.
5 E. Estudio de estabilidad a 40°C
Se puso cada polvo en un vial para analisis del espacio de cabeza por GC y se almaceno a 40°C durante varias semanas. Despues se analizo el espacio de cabeza de cada muestra por GC para determinar la cantidad de compuestos analizados indicativos de oxidacion de PUFA en el aceite que contiene DHA. Los cinco compuestos de analisis elegidos era: propanal, 2-pentenal, hexanal, 1-octa-3-ono y 1-octen-3-ol. Se analizaron los compuestos de 10 analisis en el espacio de cabeza por cromatograffa de gases del especio de cabeza semanalmente. Se eligio un punto de corte de 1 ppm para los compuestos volatiles (compuestos de analisis) como referencia. Los polvos 1-3 teman menos de 1 ppm de compuestos volatiles durante 16-17 semanas, indicando la capacidad del polvo para proteger los componentes del aceite de la oxidacion.
En resumen, los polvos hechos teman un tamano medio d(0,5) de 60 micrometros, contenido de aceite libre inferior 15 a 0,8%. Los tres polvos teman propiedades sensoriales similares, que incluyen olores artificial junto con dulce/de tipo azucar moreno, con una puntuacion de impacto global de 4,5. Ademas, los polvos son estables a la oxidacion. Este procedimiento es robusto y se puede llevar a mayor escala.

Claims (13)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    REIVINDICACIONES
    1. - Un metodo de preparacion de un producto encapsulado, que comprende
    hacer reaccionar una solucion que comprende al menos una protema seleccionada del grupo que consiste en solidos de lactosuero, aislado de protemas de lactosuero y protema de soja y al menos un azucar reductor seleccionado del grupo que consiste en glucosa y maltosa, a un pH inicial de al menos aproximadamente 10, para lograr un grado de hidrolisis de protemas de entre aproximadamente 1% y aproximadamente 15%, en donde la reaccion es a una temperatura de al menos 90°C;
    combinar la disolucion que ha reaccionado con una composicion que comprende un material de nucleo;
    en donde la disolucion que ha reaccionado forma un material de encapsulacion sobre la composicion que comprende el material de nucleo, y en donde
    el material de nucleo comprende un acido graso poliinsaturado seleccionado del grupo que consiste en acido docosahexaenoico (DHA), acido docosapentaenoico (DPA), acido araquidonico (ARA), acido eicosapentaenoico (EPA), acido estearidonico (SDA), acido linolenico (LA), acido alfa-linoleico (ALA), acido gamma linolenico (GLA), acido linolenico conjugado (CLA) y mezclas de los mismos.
  2. 2. - El metodo de la reivindicacion 1, en donde el grado de hidrolisis de protemas es entre aproximadamente 2% y aproximadamente 10%.
  3. 3. - El metodo de cualquiera de las reivindicaciones 1-2, en donde la reaccion es durante aproximadamente una hora.
  4. 4. - El metodo de cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde la hidrolisis de protemas es no enzimatica.
  5. 5. - El metodo de cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde el pH inicial se selecciona del grupo que consiste en un pH entre 10 y 14, un pH entre 11 y 12, y un pH entre 10 y 11.
  6. 6. - El metodo de cualquiera de las reivindicaciones 1-5, que ademas comprende aplicar un segundo material de encapsulacion al producto encapsulado.
  7. 7. - El metodo de la reivindicacion 6, en donde la aplicacion de un segundo material de encapsulacion es por granulacion.
  8. 8. - Un producto encapsulado, que comprende:
    una composicion que comprende un material de nucleo de compuesto labil seleccionado del grupo que consiste en un acido graso poliinsaturado seleccionado del grupo que consiste en acido docosahexaenoico (DHA), acido docosapentaenoico (DPA), acido araquidonico (ARA), acido eicosapentaenoico (EPA), acido estearidonico (SDA), acido linolenico (LA), acido alfa-linoleico (ALA), acido gamma linolenico (GLA), acido linolenico conjugado (CLA) y mezclas de los mismos; y
    un material de encapsulacion sobre la composicion, en donde el material de encapsulacion se forma de protema hidrolizada que tiene un grado de hidrolisis de protemas entre aproximadamente 1% y aproximadamente 15% y de productos de caramelizacion,
    en donde el material de encapsulacion se puede obtener haciendo reaccionar una disolucion que comprende protema seleccionada del grupo que consiste en solidos de lactosuero, aislado de protemas de lactosuero y protema de soja, y azucar reductor seleccionado del grupo que consiste en glucosa y maltosa, a un pH inicial de al menos aproximadamente 10 para lograr un grado de hidrolisis de protemas de entre aproximadamente 1% y aproximadamente 15%, y la reaccion es a una temperatura de al menos aproximadamente 90°C.
  9. 9. - El producto encapsulado de la reivindicacion 8, en donde la reaccion es durante al menos aproximadamente una hora.
  10. 10. - El producto encapsulado de cualquiera de las reivindicaciones 8-9, en donde el pH inicial se selecciona del grupo que consiste en un pH entre 10 y 14, un pH entre 11 y 12 y un pH entre 10 y 11.
  11. 11. - El producto encapsulado de cualquiera de las reivindicaciones 8-10, en donde el grado de hidrolisis de protemas es entre aproximadamente 2% y aproximadamente 10%.
  12. 12. - El producto encapsulado de cualquiera de las reivindicaciones 8-11, en donde el material de encapsulacion comprende productos de la reaccion de Maillard.
  13. 13. - Un producto seleccionado del grupo que consiste en un alimento, un producto cosmetico, un producto
    farmaceutico, un producto nutriceutico y un producto industrial, en donde el producto comprende el producto de cualquiera de las reivindicaciones 8-12.
ES08771394.7T 2007-06-19 2008-06-18 Composiciones de microencapsulación, métodos para hacerlas, métodos de uso y productos de las mismas Active ES2607467T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US94504007P 2007-06-19 2007-06-19
US945040P 2007-06-19
PCT/US2008/067383 WO2008157629A1 (en) 2007-06-19 2008-06-18 Microencapsulating compositions, methods of making, methods of using and products thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2607467T3 true ES2607467T3 (es) 2017-03-31

Family

ID=40156687

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES08771394.7T Active ES2607467T3 (es) 2007-06-19 2008-06-18 Composiciones de microencapsulación, métodos para hacerlas, métodos de uso y productos de las mismas

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20090004233A1 (es)
EP (1) EP2166874B1 (es)
AU (1) AU2008265715A1 (es)
CA (1) CA2689590C (es)
ES (1) ES2607467T3 (es)
TW (1) TWI437962B (es)
WO (1) WO2008157629A1 (es)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8221809B2 (en) * 2006-06-22 2012-07-17 Martek Biosciences Corporation Encapsulated labile compound compositions and methods of making the same
EP2217088A1 (en) * 2007-11-29 2010-08-18 NIZO Food Research B.V. Method for making protein-based encapsulates
US20100215758A1 (en) * 2009-02-25 2010-08-26 Joar Opheim Effervescent nutritional and/or dietary supplement composition
FR2955743B1 (fr) 2010-02-03 2016-04-29 Roquette Freres Confiseries aux proteines de pois
US9381252B2 (en) 2010-07-16 2016-07-05 Universidad De Navarra Nanoparticles for encapsulation of compounds, the production and uses thereof
PL228401B1 (pl) * 2011-05-30 2018-03-30 Leenlife Polska Spolka Akcyjna Spożywczy środek prozdrowotny zawierający estry etylowe kwasów tłuszczowych zwłaszcza oleju lnianego i sposób jego otrzymywania
AU2012280935A1 (en) * 2011-11-10 2013-05-30 Clover Corporation Limited Encapsulation of food ingredients supplements and pharmaceuticals
EP2638810A1 (en) 2012-03-15 2013-09-18 N.V. Nutricia Process for preparing infant formula
CN104643099B (zh) * 2015-02-12 2017-03-15 杭州天龙集团有限公司 一种α‑亚麻酸食品添加剂的生产方法
CN104820052A (zh) * 2015-04-28 2015-08-05 国家烟草质量监督检验中心 一种快速预警烟草及烟草制品霉变的方法
KR20180040604A (ko) * 2015-08-14 2018-04-20 러셀 더블유. 데이 지질, 지질-함유 재료, 및 생리활성 영양물의 반추위 보호
CN105211883A (zh) * 2015-08-24 2016-01-06 华南理工大学 一种食品级辅酶q10微胶囊及其制备方法和应用
WO2017144435A1 (en) * 2016-02-26 2017-08-31 Dsm Ip Assets B.V. Novel coating system (ii)
CN109169967A (zh) * 2018-09-17 2019-01-11 东北农业大学 一种微胶囊化粉末油脂的制备方法
CN109022509B (zh) * 2018-09-17 2021-07-06 杭州园泰生物科技有限公司 一种提高隐甲藻dha产量的方法
GR20180100482A (el) * 2018-10-24 2020-05-18 Αλεξανδρος Ηλια Παπαδοπουλος Ποσιμο υδατικο διαλυμα ενισχυμενης βιολογικης αξιας
CN109674374B (zh) * 2019-01-24 2021-08-10 宁波大学 一种可撕多功能毛巾及其制备方法
TW202128136A (zh) * 2019-10-16 2021-08-01 澳大利亞商克樓佛股份有限公司 營養和藥物組成物之蛋白質包封
CN113061170B (zh) * 2019-12-16 2023-04-07 青海师范大学 一种苜蓿抗氧化糖蛋白及其制备方法和应用
EP4032525A1 (en) * 2021-01-26 2022-07-27 Miyoshi Europe Microalgae calcareous compositions and uses thereof

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3819838A (en) * 1970-08-04 1974-06-25 Bush Boake Allen Ltd Encapsulated flavoring composition
US4217370A (en) * 1977-08-25 1980-08-12 Blue Wing Corporation Lipid-containing feed supplements and foodstuffs
US4675189A (en) * 1980-11-18 1987-06-23 Syntex (U.S.A.) Inc. Microencapsulation of water soluble active polypeptides
US4957748A (en) * 1987-03-23 1990-09-18 The Board Of Regents Of The University Of Nebraska Ruminant feed, method of making and method of using
US5143737A (en) * 1989-10-13 1992-09-01 The Regents Of The University Of California Method to produce unsaturated milk fat and meat from ruminant animals
US5153177A (en) * 1991-01-10 1992-10-06 Basf Corporation Process for incorporating a material in a crosslinked gelatin, and product therefrom
DE4141351A1 (de) * 1991-12-14 1993-06-17 Basf Ag Stabile pulverfoermige vitamin- und/oder carotinoid-praeparate und verfahren zu deren herstellung
DK88692D0 (da) * 1992-07-06 1992-07-06 Danochemo As Fremgangsmaade til fremstilling af mikrokapsler
US5693835A (en) * 1994-01-27 1997-12-02 Snow Brand Milk Products Co., Ltd. Fish oil having decreased fish odor and a method for preparing the same
US5789001A (en) * 1995-06-09 1998-08-04 University Of Nebraska Ruminant feed and method for making
US6444227B1 (en) * 1999-08-05 2002-09-03 Roche Vitamins Inc. Process for preparing fat soluble beadlets
AUPQ660700A0 (en) * 2000-03-31 2000-05-04 Australian Food Industry Science Centre Calcium fortification of milk
PH12001000675B1 (en) * 2000-04-04 2009-09-22 Australian Food Ind Sci Ct Encapsulation of food ingredients
EP1294236B1 (en) * 2000-06-01 2008-08-13 United Feeds, Inc. Animal food and method
US6974592B2 (en) * 2002-04-11 2005-12-13 Ocean Nutrition Canada Limited Encapsulated agglomeration of microcapsules and method for the preparation thereof
NZ539777A (en) * 2002-11-04 2008-02-29 Ocean Nutrition Canada Ltd Microcapsules having multiple shells and method for the preparation thereof
US20040191390A1 (en) * 2003-03-31 2004-09-30 Lee John H. Encapsulated oil and fat products with free fatty acids
EP1643845B1 (en) * 2003-07-15 2011-11-02 DSM IP Assets B.V. Powderous formulations of fat-soluble active ingredients
US20050233002A1 (en) * 2004-04-15 2005-10-20 Trubiano Paolo C Encapsulation of oxygen sensitive agents
US7455865B2 (en) * 2004-04-22 2008-11-25 Wynn Starr Flavors, Inc. Shelf-stable flavored oil encapsulated salt
US8048652B2 (en) * 2005-05-12 2011-11-01 Martek Biosciences Corporation Biomass hydrolysate and uses and production thereof
US8221809B2 (en) * 2006-06-22 2012-07-17 Martek Biosciences Corporation Encapsulated labile compound compositions and methods of making the same

Also Published As

Publication number Publication date
AU2008265715A1 (en) 2008-12-24
EP2166874A1 (en) 2010-03-31
TWI437962B (zh) 2014-05-21
EP2166874B1 (en) 2016-09-28
US20090004233A1 (en) 2009-01-01
CA2689590C (en) 2017-06-06
CA2689590A1 (en) 2008-12-24
EP2166874A4 (en) 2015-01-21
WO2008157629A1 (en) 2008-12-24
TW200908891A (en) 2009-03-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2607467T3 (es) Composiciones de microencapsulación, métodos para hacerlas, métodos de uso y productos de las mismas
US8221809B2 (en) Encapsulated labile compound compositions and methods of making the same
ES2668640T5 (es) Composiciones de compuestos lábiles encapsulados y métodos para preparar las mismas
US20080096964A1 (en) Food Fortification with Polyunsaturated Fatty Acids
EP1843668B1 (en) Powder compositions
KR20090045929A (ko) 유아용 조제유에서 ＤＰＡ(ｎ-6) 오일의 용도
AU2018259160B2 (en) Encapsulated nutritional and pharmaceutical compositions
Chang et al. Stability and in vitro release behaviour of encapsulated omega fatty acid-rich oils in lentil protein isolate-based microcapsules
JP2011229505A (ja) アスタキサンチンを含む練粉焼成食品
Nickerson et al. Protection and masking of omega-3 and-6 oils via microencapsulation
US20080026109A1 (en) Sweetened Oil Compositions and Methods of Making
AU2018273928B2 (en) Stabilized compositions for the controlled delivery of probiotics and methods of production thereof
TWI494135B (zh) 囊封易變性化合物組成物及其製造方法
Zhu Co-encapsulation of β-carotene, lutein, zeaxanthin and fish oil: An investigation of drying kinetics, powder properties, in vitro digestion and cellular uptake of carotenoids
Ta et al. 7 Microencapsulation of Gac Aril Oil
WO2020019019A1 (en) Protein encapsulation of nutritional and pharmaceutical compositions
TW202128136A (zh) 營養和藥物組成物之蛋白質包封