ES2606605T3 - Vacuna para el BVDV - Google Patents

Vacuna para el BVDV Download PDF

Info

Publication number
ES2606605T3
ES2606605T3 ES11760764.8T ES11760764T ES2606605T3 ES 2606605 T3 ES2606605 T3 ES 2606605T3 ES 11760764 T ES11760764 T ES 11760764T ES 2606605 T3 ES2606605 T3 ES 2606605T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
bvdv
pbvdv1b
synth
fragment
δnpro
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES11760764.8T
Other languages
English (en)
Inventor
Martin Beer
Ilona Reimann
Patricia Koenig
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Intervet International BV
Original Assignee
Intervet International BV
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Intervet International BV filed Critical Intervet International BV
Application granted granted Critical
Publication of ES2606605T3 publication Critical patent/ES2606605T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/295—Polyvalent viral antigens; Mixtures of viral and bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/40—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum bacterial
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/42—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum viral
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24311—Pestivirus, e.g. bovine viral diarrhea virus
    • C12N2770/24322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24311—Pestivirus, e.g. bovine viral diarrhea virus
    • C12N2770/24334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24311—Pestivirus, e.g. bovine viral diarrhea virus
    • C12N2770/24361—Methods of inactivation or attenuation
    • C12N2770/24362—Methods of inactivation or attenuation by genetic engineering

Abstract

Vacuna combinada para la protección de rumiantes susceptibles frente al BVDV, caracterizada por que la vacuna comprende un primer BVDV que pertenece a un primer tipo y porta un gen E2 del BVDV de dicho primer tipo, un segundo BVDV que pertenece a un primer tipo, en el que el gen E2 del BVDV que pertenece a dicho primer tipo se reemplaza por el gen E2 del BVDV que pertenece a un segundo tipo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable, y en la que dicho primer BVDV y dicho segundo BVDV tienen la misma estructura.

Description

imagen1
imagen2
imagen3
imagen4
et al., 2001), respectivamente. Los cebadores para la mutagénesis se sintetizaron en MWGBiotech y biomers.net GmbH y se enumeran en la tabla 1.
Tabla 1: Secuencia de nucleótidos de los cebadores utilizados para la mutagénesis dirigida y para la PCR Phusion
Cebador
Secuencia 5’→3’a Región genómica
Mut_2009_F
imagen5 24302462b (sentido+)
Mut_2009_R
imagen6 24622430b (sentido)
Ph 10375 F
imagen7 1036310393b (sentido+)
Ph_10551R
CGTCACTGTAGGTGTGTCTTAGGC 1055110528b (sentido)
CP711973F
Gcaagaactagcccagtcacg 1197311993b (sentido+)
CP7_3C_R
1184311824c (sentido)
Ph_E2CS_F
imagen8 24232444b (sentido+)
Ph E2CS R
cacctgccccatactggacacctatagctacttgctctgac 35853567b (sentido)
Ph_E1CS_F
catggtttggggcatatgcagcaagtccatactgtgatgtg 18401859b (sentido+)
alos nucleótidos distintos de la secuencia BVDV1 CP7 (n.º de referencia secuencias de BVDV2 CS8644 (no publicadas) están en cursiva bposición de nucleótidos que corresponde a la secuencia de BVDV CP7 cposición de nucleótidos que corresponde a pBVDV1b_synth_ΔNpro
U63479) están subrayados; las
pBVDV1b_synth_ΔNpro se constituyó a partir de cinco plásmidos que albergaban los fragmentos de secuencia sintética (1.fragment_pGA15, 2. fragment_pMA, 3. fragment_pMK, 4. fragment_pMA, Syn_BsaI_fragment_pMK_RQ) 10 sintetizados todos in vitro por GENEART AG (Regensburg, Alemania). Utilizando los fragmentos sintéticos y sus sitios de restricción exclusivos, se generó una construcción plasmídica de longitud completa. Los procedimientos de digestiones con enzimas de restricción y de clonación se realizaron de acuerdo con protocolos convencionales. Los fragmentos de secuencia sintética se describen a continuación. La construcción del clon de ADNc infeccioso pBVDV1b_synth_ΔNpro se muestra en la figura 1. El emplazamiento de los sitios de restricción y de las posiciones
15 de nucleótido que corresponden al genoma del BVDV (la cepa más similar es CP7) se indican mediante flechas.
1. fragment_pGA15 contiene los nucleótidos 1 a 3357 (sitio de Acc65I) que corresponden a BVDV1bΔNpro. En el NTR 5’ se añadió la secuencia del promotor T7 para permitir la transcripción in vitro así como los sitios SnaBI y NheI. Se eliminó un segundo sitio de Acc65I2007 mediante una mutación silenciosa de GGTACC a ATATCC.
20 2. fragment_pMA contiene los nucleótidos 3357 a 6228 (sitio de BlpI).
3.
fragmentpMK contiene los nucleótidos 6288 a 7956 (sitio de BstBI).
4.
fragment_pMA contiene los nucleótidos 7956 a 11816 (sitio de SmaI). Se eliminó un segundo sitio de BstBI7965 mediante una mutación silenciosa de TTCGAA a TTCGAG.
25 Syn_BsaI fragment_pMK_RQ contiene los nucleótidos 11244 a 11816 (sitio de SmaI) con el NTR 3’ y un sitio de SmaI para la linealización del ADN plasmídico antes de la transcripción in vitro.
Para la generación de pBVDV1b_synth_ΔNpro se digirió con SmaI y se desfosforiló un plásmido soporte, y se eluyó tras la electroforesis en gel de agarosa.
30 1.Fragment_pMA se digirió con SnaBI y SmaI, y se aisló el fragmento específico del virus. Ambos fragmentos se ligaron, dando como resultado el plásmido pAFr1. Más tarde, el plásmido pA_Fr1 se linealizó utilizando Acc65I y BlpI
BlpI6228
y se insertó el fragmento Acc65I3351 aislado del plásmido. 2.fragment_pMA, dando como resultado el plásmido pA_Fr1/2. El plásmido pMA_Fr3/4 se generó mediante ligamiento del plásmido 4.fragment_pMA digerido 35 con NheI y BstBI7956 y un fragmento BlpI6628/BstBI7956 aislado del plásmido 3.fragment_pMK. Este plásmido se digirió posteriormente con BlpI6628/SmaI11816, y el fragmento BlpI6628/SmaI11816 resultante se ligó en el plásmido pA_Fr1/2 BlpI6628/SmaI.
Dentro del plásmido pAFr1/2/3/4 resultante se sustituyó el fragmento BsaI por el fragmento BsaI aislado del plásmido Syn_BsaI fragment_pMK_RQ, conduciendo a la construcción de ADNc de longitud completa pAFr1/2/3/4/5. Para la generación de la progenie de virus infeccioso, se insertaron dos mutaciones mediante
6
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
G2011TG9948T,
mutagénesis dirigida, y dando como resultado la construcción de ADNc de longitud completa infecciosa pBVDV1b_synth_ΔNpro.
Construcción de pBVDV1b_synth
El clon de ADNc de longitud completa pBVDV1b_synth se construyó a base de pBVDV1b_synth_ΔNpro mediante la inserción de un fragmento Acc65I/3793 XhoI208 del plásmido pBVDV1b_deltaNS (nucleótidos 14597) en pBVDV1b_synth_ΔNpro (Figura 2). Para tal fin, el plásmido pBVDV1b_synth_ΔNpro se digirió con Acc65I3357 y XhoI231, y se ligó con el fragmento Acc65I/3793 XhoI208 de pBVDV1bdeltaNS.
Construcción de pBVDV1b_synth_ΔNpro_BVDV2_E2
El clon de ADNc de longitud completa de BVDV, pBVDV1b_synth_ΔNpro_BVDV2_E2, es una construcción quimérica de BVDVlb/BVDV2 que se generó mediante la sustitución de la región genómica que codifica E2 del pBVDV1b_synth_ΔNpro (nucleótidos 20093130) por la región genómica que codifica E2 del BVDV2 (aislado CS8644; Wolfmeyer et al., 1997). El clon del pestivirus quimérico pBVDV1b_synth_ΔNpro_BVDV2_E2 se construyó mediante PCR Pushion (Figura 3a). En una primera etapa, se generó un megacebador de E2 mediante PCR utilizando los cebadores PhE2CS_F y Ph_E2CS_R. Como molde para la PCR, se utilizó el plásmido pGEM_E1E2_CS, que contiene la región genómica que codifica E1 y E2 del aislado BVDV2 CS8644. En una segunda PCR, la PCR Phusion, se introdujeron las secuencias de E2CS8644 en el plásmido de longitud completa pBVDV1b_synth_ΔNpro utilizando el megacebador de E2 y pBVDV1b_synth_ΔNpro como molde.
Construcción de pBVDV1b_synth_ΔNpro_BVDV2E2
El clon de ADNc de longitud completa del BVDV, pBVDV1b_synth_ΔNpro_BVDV2_E1E2 es una construcción quimérica BVDVlb/BVDV2 que se generó mediante la sustitución de la región genómica que codifica E1 y E2 de pBVDV1b_synth_ΔNpro (nucleótidos 14243130) por la región genómica que codifica E1 y E2 del BVDV2 (aislado CS8644; Wolfmeyer et al., 1997). El clon de pestivirus quimérico pBVDV1b_synth_ΔNpro_BVDV2_E1E2 se construyó mediante PCR Pushion (Figura 3b). En una primera etapa, se generó un megacebador de E1E2 mediante PCR, utilizando los cebadores PhE1CS_F y Ph_E2CS_R. Como molde para la PCR se utilizó el plásmido pGEM_E1E2_CS. Mediante PCR Phusion se introdujeron las secuencias de E1 y E2CS8644 en el plásmido de longitud completa pBVDV1b_synth_ΔNpro utilizando el megacebador de E1E2 y pBVDV1b_synth_ΔNpro como molde.
Fig. 1: Representación esquemática del genoma del BVDV y de la construcción de pBVDV1b_synth_ΔNpro. El genoma vírico se sintetizó en cinco fragmentos (Geneart AG), 1.fragment_pGA15, 2.fragment_pMA, 3.fragment_pMK, 4.fragment_pMA y Syn_BsaI_fragment_pMK_RQ (recuadros en azul claro). El plásmido 1.fragmento:pGA15 aloja la deleción de Npro (ΔNpro). En el NTR 5’ se añadió la secuencia del promotor T7 para permitir la transcripción in vitro. Para la linealización del plásmido se introdujo un sitio de restricción de SmaI en el NTR 3’. El emplazamiento de los sitios de restricción y de las posiciones de nucleótido que corresponden al genoma
1bΔNpro
de BVDV (mayor similitud con la cepa BVDV CP7) se indican mediante flechas negras cortas. La construcción de ADNc de longitud completa pBVDV1b_synth_ΔNpro se constituyó exclusivamente a partir de los cinco fragmentos sintetizados, como se demuestra mediante las flechas grises y los recuadros azul claro. No se utilizó ARN o ADNc de virus para la construcción. Las etapas de mutagénesis in vitro durante la construcción se indican mediante estrellas. Los recuadros sombreados representan la región de las proteínas estructurales del BVDV. Las líneas en los extremos izquierdo y derecho indican las regiones no traducidas. Npro, autoproteasa; C, proteína de la cápside; Erns , E1, E2, proteínas de la envoltura; p7, NS2 a NS5, proteínas no estructurales.
Fig. 2: Representación esquemática del genoma del BVDV y de la construcción pBVDV1b_synth de longitud completa. Los recuadros sombreados representan la región de las proteínas estructurales del BVDV. Las líneas en los extremos izquierdo y derecho indican las regiones no traducidas. Npro, autoproteasa; C, proteína de la cápside; Erns, E1, E2, proteínas de la envoltura; p7, NS2 a NS5, proteínas no estructurales. La construcción de ADNc pBVDV1b_synth de longitud completa se construyó mediante la inserción en pBVDV1b_synth_ΔNpro de un fragmento Acc65I/3793 XhoI208 del plásmido pBVDVlbdeltaNS que contiene partes de la secuencia de un fragmento del BVDVlb (nucleótidos 14597) que incluye la región genómica que codifica Npro.
Fig. 3: Representación esquemática del genoma del BVDV y de la construcción de las construcciones E2/E1E2
quiméricas a base de pBVDV1b_synth. Los recuadros sombreados representan la región de las proteínas Npro
estructurales del BVDV. Las líneas en los extremos izquierdo y derecho indican regiones no traducidas. , autoproteasa; C, proteína de la cápside; Erns , E1, E2, proteínas de la envoltura; p7, NS2 a NS5, proteínas no estructurales. Los clones del pestivirus quimérico pBVDV1b_synth_ΔNpro_BVDV2_E2 (a) y pBVDV1b_synth_ΔNpro_BVDV2_E1E2 (b) se construyeron utilizando el clon de ADNc pBVDV1b_synth_ΔNpro de longitud
7
imagen9
imagen10
imagen11
imagen12
imagen13
12
imagen14
imagen15
imagen16
imagen17
BVDV1 SE5508: los títulos más elevados BVDV 2 HI916: títulos elevados (más bajos que el grupo de solo aplicación de BVDV2Npro) BVDV2 890: valores y tendencias similares
5 controles (no vacunados)
• se mantuvieron seronegativos, durante el periodo de vacunación se mantuvieron basales en sus títulos
I.II. infección de exposición (día 60)
10
controles:
signos clínicos y hemograma: 15 • elevación bifásica de las temperaturas corporales: una ligera en el día 3 y una pronunciada en los días 8 y 9
p. exp. con valores de grupo medios máximos de hasta 41 ºC.
• mostraron signos típicos y claros de enfermedad clínica: elevación distinguible de las puntuaciones clínicas,
llegando a un máximo en los días 8 y 10: síntomas respiratorios notables (tos y rinorrea mucopurulenta), 20 depresión con apetito reducido, 2 animales tuvieron una diarrea acuosa durante 2 a 3 días
• desarrollaron una leucopenia severa: disminución bi a trifásica (días 3, 7 y 13 p. exp.) en los recuentos de leucocitos, con niveles máximos de reducción del 48 % en el día 7 p. exp.
25 • los recuentos de trombocitos no estaban tan fuertemente afectados como se esperaba: reducción media hasta un máximo del 35 % en el día 3 p. exp. Recuentos notablemente aumentados tras la infección aguda en los controles (hasta valores medios del 195 %), lo que corresponde a la gravedad de la infección y la enfermedad
aislamiento de virus: 30
• el virus de exposición fue detectable en las muestras de hisopado nasal en todos los animales de control desde el día 61 hasta el día 71  viremia de virus de exposición larga y distinguible en el grupo de control durante hasta 11 días (día 62 – día 73)
35 serología:
• todos los animales de control puntuaron de forma positiva en el ELISA de bloqueo de NS3 desde el día 14
p. exp. en adelante
40 • títulos neutralizantes detectables desde el día 14 en adelante frente a las tres cepas; títulos más altos frente a las cepas de BVDV2
BVDV2ΔC
45 signos clínicos y hemograma
• elevación de la temperatura corporal el día 7 pero se mantuvo en el intervalo fisiológico
• los efectos clínicos de la infección de exposición estaban claramente reducidos en comparación con los controles 50
•
solo un único descenso de los recuentos de leucocitos: disminución máxima de aproximadamente el 12 % en el día 4 p. exp.; se recuperó rápidamente hasta los recuentos preinfección (día 7 p. exp.)
•
recuentos de trombocitos: una única disminución menos notable.
55 aislamiento de virus:
• duración y niveles de la presencia nasal de virus notablemente reducidos: todos los animales lo presentaron en
los días 1 a 4 viremia de virus de exposición: BVDV2ΔC también claramente reducido en tiempo y cantidad: 4 60 animales, 1 día
serología:
• los anticuerpos para NS3 estaban ligeramente reforzados; se alcanzaron valores de bloqueo medios del 100 % 65 eneldía89
17
imagen18
imagen19
imagen20
imagen21
imagen22
imagen23
imagen24
imagen25
imagen26
imagen27
imagen28

Claims (1)

  1. imagen1
ES11760764.8T 2010-09-21 2011-09-21 Vacuna para el BVDV Active ES2606605T3 (es)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US38501010P 2010-09-21 2010-09-21
EP10177931 2010-09-21
US385010P 2010-09-21
EP10177931 2010-09-21
PCT/EP2011/066377 WO2012038454A1 (en) 2010-09-21 2011-09-21 Bvdv vaccine

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2606605T3 true ES2606605T3 (es) 2017-03-24

Family

ID=43110616

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES11760764.8T Active ES2606605T3 (es) 2010-09-21 2011-09-21 Vacuna para el BVDV

Country Status (11)

Country Link
US (1) US9878030B2 (es)
EP (1) EP2618841B1 (es)
CN (1) CN103338785B (es)
AU (1) AU2011306957C1 (es)
BR (1) BR112013006515B1 (es)
CA (1) CA2811243C (es)
ES (1) ES2606605T3 (es)
MX (1) MX347911B (es)
RU (1) RU2578943C2 (es)
WO (1) WO2012038454A1 (es)
ZA (1) ZA201301950B (es)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103338785B (zh) 2010-09-21 2015-01-14 英特维特国际股份有限公司 Bvdv疫苗
WO2014043215A1 (en) 2012-09-11 2014-03-20 The Texas A&M University System Bi-specifc diabodies for masking and targeting vaccines
CN105949286A (zh) * 2016-07-04 2016-09-21 中国兽医药品监察所 牛病毒性腹泻病毒i型e2蛋白的表达及应用
CN108456663B (zh) * 2018-03-26 2021-09-21 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种1型牛病毒性腹泻病毒样颗粒及其制备与应用
CN108614121B (zh) * 2018-05-04 2020-11-20 山东师范大学 牛病毒性腹泻病毒e2蛋白抗原多表位融合肽及其制备与应用
CN111533813B (zh) * 2020-07-09 2020-10-16 苏州世诺生物技术有限公司 牛病毒性腹泻病毒重组亚单位疫苗
CN113403256B (zh) * 2021-06-16 2023-04-18 中国农业科学院特产研究所 一种稳定产生牛病毒性腹泻病毒抗原的细胞系及抗体胶体金检测试纸条的制备方法

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6001613A (en) 1996-05-24 1999-12-14 Board Of Regents Of University Of Nebraska Plasmid bearing a cDNA copy of the genome of bovine viral diarrhea virus, chimeric derivatives thereof, and method of producing an infectious bovine viral diarrhea virus using said plasmid
EP0965639A1 (en) 1998-06-05 1999-12-22 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Attenuated pestiviruses
US6168942B1 (en) 1998-11-10 2001-01-02 Pfizer Inc. Attenuated forms of bovine viral diarrhea virus
EP1104676A1 (en) 1999-11-30 2001-06-06 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Safe attenuated bovine viral diarrhea viruses for use in pregnant cows
CA2363493C (en) 2000-11-22 2006-06-06 Xuemei Cao Attenuated forms of bovine viral diarrhea virus
US6974575B2 (en) * 2001-08-28 2005-12-13 Pfizer Inc. Generation of type I/type II hybrid form of bovine viral diarrhea virus for use as vaccine
DE10143813A1 (de) 2001-09-06 2003-04-10 Boehringer Ingelheim Vetmed Infektiöser Rindervirusdiarrhoe-Virusklon
EP1727562B1 (en) * 2004-03-17 2008-06-18 Pharmacia & Upjohn Company LLC Method of vaccination against testicular bvdv infection
DE102004025452A1 (de) * 2004-05-19 2006-01-19 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Vakzine enthaltend BVDV
UY29915A1 (es) 2005-11-15 2007-06-29 Boehringer Ingelheim Vetmed Vacuna combinada que comprende un virus atenuado de la diarrea viral bovina
RU2524426C2 (ru) * 2008-12-03 2014-07-27 Пфайзер Инк. ВИРУС ДИАРЕИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА С МОДИФИЦИРОВАННЫМ БЕЛКОМ Erns
CN103338785B (zh) 2010-09-21 2015-01-14 英特维特国际股份有限公司 Bvdv疫苗

Also Published As

Publication number Publication date
ZA201301950B (en) 2014-03-26
BR112013006515A2 (pt) 2016-08-02
US20130195892A1 (en) 2013-08-01
EP2618841B1 (en) 2016-10-19
CN103338785A (zh) 2013-10-02
AU2011306957B2 (en) 2014-07-24
CN103338785B (zh) 2015-01-14
CA2811243C (en) 2019-03-05
RU2578943C2 (ru) 2016-03-27
BR112013006515B1 (pt) 2020-04-28
EP2618841A1 (en) 2013-07-31
WO2012038454A1 (en) 2012-03-29
AU2011306957C1 (en) 2014-08-28
AU2011306957A1 (en) 2013-04-11
RU2013118351A (ru) 2014-10-27
MX2013003245A (es) 2013-05-22
MX347911B (es) 2017-05-17
US9878030B2 (en) 2018-01-30
CA2811243A1 (en) 2012-03-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2606605T3 (es) Vacuna para el BVDV
Bailey et al. Functional analysis of RNA structures present at the 3′ extremity of the murine norovirus genome: the variable polypyrimidine tract plays a role in viral virulence
Zou et al. Genetic analysis revealed LX4 genotype strains of avian infectious bronchitis virus became predominant in recent years in Sichuan area, China
AU2020277165B2 (en) Feline calicivirus vaccine
US9457076B2 (en) Method for producing vaccinal viral strain of a virus of the Reoviridae family
US11534417B2 (en) Enhanced expression of RNA vectors
Guo et al. Recombinant infectious hematopoietic necrosis virus expressing infectious pancreatic necrosis virus VP2 protein induces immunity against both pathogens
Uprety et al. Recent advances in rotavirus reverse genetics and its utilization in basic research and vaccine development
CN114272365A (zh) 一种基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒构建及其作为疫苗的应用
CN108753739B (zh) 表达猪瘟病毒e2蛋白的重组伪狂犬病毒毒株及其制备方法和应用
TWI638048B (zh) 高成長腸病毒71型(ev71)病毒株及其疫苗
Zhang et al. Recent insights into reverse genetics of norovirus
CN115386556A (zh) 一株串联表达非洲猪瘟病毒p30、p54基因重组伪狂犬病毒基因工程疫苗及其应用
Ghetas et al. Isolation and molecular identification of IBV isolates in different governorates in Egypt
Huyzers Local implementation and optimization of rotavirus reverse genetics systems
Duong et al. Expression and Purification Capsid Proteins Vp0, Vp1 and Vp3 of foot and Mouth Disease Virus Type O in Escherichia Coli
Razmyar et al. Rapid differentiation between very virulent and classical infectious bursal disease viruses isolated in Iran by RT-PCR/REA
Tsai et al. THE FEASIBILITY OF CONSTRUCTING A PORCINE TESCHOVIRUS INFECTIOUS cDNA CLONE TAGGED WITH iLOV FLUORESCENT PROTEIN RESCUED AS A VISIBLE MARKER VIRUS
Liedeman Transient transgene expression of human coronavirus nl63 orf3 protein
AU2008331293B2 (en) Method for producing vaccinal viral strain of a virus of the Reoviridae family
Goodfellow Calicivirus reverse genetics
PEYGHAMBARI et al. Rapid differentiation between very virulent and classical infectious bursal disease viruses isolated in Iran by RTPCR/REA
Alshaikhahmed Developing Virus-Like Particles (VLPs) and Heterologous VLPs Vaccines for Epizootic Hemorrhagic Disease Virus (EHDV) Serotypes
Khodabandehloo et al. Cloning of Rota Virus Outer Capsid Protein (VP7) Gene into the pGEM Vector