ES2601029T3

ES2601029T3 - Derivado de ciclosporina

Info

Publication number: ES2601029T3
Application number: ES12751509.6T
Authority: ES
Inventors: Gunter Fischer; Miroslav Malesevic; Frank Erdmann; Jan KÜHLING; Michael Bukrinsky; Stephanie Constant; Gerd Rühter; Peter Nussbaumer; Klaus Dinkel
Original assignee: Max Planck Gesellschaft zur Foerderung der Wissenschaften eV; Lead Discovery Center GmbH
Current assignee: Max Planck Gesellschaft zur Foerderung der Wissenschaften eV; Lead Discovery Center GmbH
Priority date: 2011-08-30
Filing date: 2012-08-29
Publication date: 2017-02-14
Anticipated expiration: 2032-08-29
Also published as: EP2751127B1; DE102011111991A1; AU2012300934A1; JP2014531417A; CA2845663A1; CA2845663C; AU2012300934B2; US9453051B2; JP6240072B2; US20140316104A1; CN103842372A; EP2751127A1; WO2013030208A1

Abstract

Compuesto de fórmula 1**Fórmula** donde A es un aminoácido de la siguiente fórmula II,**Fórmula** donde los enlaces, que terminan en las líneas onduladas representan enlaces a las unidades B y K y R9 es un grupo de la siguiente fórmula III, y**Fórmula** en el que R8 es un grupo de la siguiente fórmula IV, o**Fórmula** en el que R8 es un grupo de la siguiente fórmula V, o**Fórmula** en el que R8 es un grupo de la siguiente fórmula VI, o**Fórmula** en el que R8 es un grupo de la siguiente fórmula VII, o**Fórmula** donde R8 es un grupo de la siguiente fórmula VIII, en el que los residuos de L-R2 y R3 pueden estar unidos a los 65 mismos o diferentes anillos de fenilo, o**Fórmula** donde R8 es un grupo de la siguiente fórmula IX, y en donde los residuos de L-R2 y R3 pueden estar unidos a los mismos o diferentes anillos Q2 o Q3, o**Fórmula** donde R8 es un grupo de la siguiente fórmula X, y en el que los residuos de L-R2 y R3 pueden estar unidos a los mismos o diferentes anillos Q2 o Q3, o**Fórmula** donde R8 es un grupo de la siguiente fórmula XI, y en la que los residuos de L-R2 y R3 pueden estar unidos a los mismos o diferentes anillos Q2 o Q3, o**Fórmula** donde R8 es un grupo de la siguiente fórmula XII, y en el que los residuos de L-R2 y R3 pueden estar unidos a los mismos o diferentes anillos de fenilo, o**Fórmula** en el que R8 es un grupo de la siguiente fórmula XIII,**Fórmula** donde el grupo de fórmula II se une covalentemente a la alfa-aminoácido B en la fórmula I a través de su CO mediante la formación de un enlace amida y N-Ro en la fórmula II está unido covalentemente a un grupo carboxi de K mediante la formación de un enlace amida, en el que B es un aminoácido, seleccionado de entre el siguiente grupo: ácido alfa-aminobutírico; alanina; treonina; valina; norvalina; y moléculas de ácido alfa-aminobutírico, alanina, treonina, valina o norvalina modificados con un grupo hidroxi en la cadena lateral; C representa sarcosina; D es un aminoácido, seleccionado de entre el siguiente grupo: leucina; N-metilleucina; valina; gamma-hidroxi-N-metilleucina; y gamma-hidroxileucina; E es un aminoácido, seleccionado de entre el siguiente grupo: valina; norvalina; y una valina modificada o norvalina en el que un átomo de carbono de la cadena lateral está sustituido por un grupo hidroxi; F es un aminoácido, seleccionado de entre el siguiente grupo: leucina; N-metilleucina; gamma-hidroxi-N-metilleucina; y gamma-hidroxileucina; G es igual a ácido alfa-aminobutírico o alanina; H es igual a D-alanina o D-serina; I y J son aminoácidos, seleccionados independientemente entre sí entre el grupo siguiente: leucina; N-metilleucina; gamma-hidroxi-N-metilleucina; y gamma-hidroxileucina; K es igual a N-metilvalina o valina; donde los aminoácidos B a K están unidos entre sí mediante la formación de enlaces amida; donde los símbolos e índices utilizados tienen los siguientes significados: X representa O, S, o N-R1; Y representa O, S, N-R1, -CH2- o -CH2CH2-; A tal como se utiliza en las fórmulas IX, X, XI y representa CH o N; L representa un enlace, -CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, -CH>=CH-, -CH>=CHCH2-, - CH2CH>=CH-, -CH2CH2CH>=CH-, -CH2CH>=CHCH2- , -CH>=CHCH2CH2-, -OCH2-, -OCH2CH2-, -OCH2CH2CH2-, - OCH2CH>=CH-, -CONH-, -CONHCH2 o -CONHCH2CH2-, -CONHCH2CH2OCH2CH2- o - CONHCH2CH2OCH2CH2OCH2CH2-; Q1 representa, junto con los dos átomos del anillo condensado un anillo aromático o heteroaromático de entre el grupo de benceno, piridina, pirimidina, piridazina, pirazina, triazina, tiofeno, furano, pirrol, tiazol, isotiazol, oxazol, isoxazol, imidazol o pirazol; Q2 representa, junto con los dos átomos del anillo condensado un anillo aromático o heteroaromático de entre el grupo de benceno, piridina, pirimidina, piridazina, pirazina, triazina, tiofeno, furano, pirrol, tiazol, isotiazol, oxazol, isoxazol, imidazol, pirazol, tiadiazol, oxadiazol o triazol; Q3 define el anillo de seis miembros en el que se encuentra; Ro representa H o CH3; R1 representa H, (C1-C4)-alquilo o bencilo, que también puede estar sustituido por un grupo -COOH; R2 representa un grupo desprotonable polar Ps seleccionado del grupo que consiste en: a) -COOH, -SO3H, -CONH2, -CONHNH2, -SO2NH2, -PO3H2, -PO(OH)(NH2), -CO(NHOH), -CO(-NH(O- C1-C4- alquilo)), -CSNH2, -NHCONH2, -N(OH)CONH2, -NHCO(NHOH)-, -NHCSNH2, -CSNHNH2; b)**Fórmula** y R >= -(C1-C4-alquilo), -O(C1-C4-alquilo), -NH(C1-C4-alquilo), -NH(C1-C4-alquenilo), (sustituido) arilo, (sustituido) O-arilo, (sustituido) NH-arilo, -CF3 y otros grupos fluorados (C1-C4-alquilo); c)**Fórmula** y R >= (C1-C4-alquilo), (subsituted) arilo, -CF3 y otros grupos fluorados 20 (C1-C4-alquilo) y; e)**Fórmula** y R >= -(C1-C4-alquilo), -O(C1-C4-alquilo), -NH(C1-C4-alquilo), -NH(C1-C4-alquenilo), (sustituido) arilo, (sustituido) O-arilo, (sustituido) NH-arilo, -CF3 y otros grupos fluorados (C1-C4-alquilo; f)**Fórmula** donde R >= H, -(C1-C4-alquilo) -CF3 y otros grupos fluorados 10 (C1-C4-alquilo). g) -OH y -SH, siempre que L represente un enlace sencillo covalente, y que-OH o -SH sólo pueden ser un sustituyente en un anillo Q1, Q2 o Q3 y es al mismo tiempo vinculado a un átomo de carbono que es adyacente a un átomo de nitrógeno o un grupo Ps', que se puede convertir en condiciones fisiológicas a Ps, o un grupo protonable polar Pb seleccionado del grupo que consiste en a)**Fórmula** donde Ra, Rb y Rc representan H y -(C1-C4-alquilo), Ra y Rb pueden ser juntos -(CH2CH2) - o -(CH2CH2CH2)-y Rb y Rc pueden ser, junto con el átomo de nitrógeno pirrolidina, piperidina o morfolina; b)**Fórmula** donde Ra, Rb, Rc y Rd representan H y -(C1-C4-alquilo), Ra y Rb, Ra y Rd, así como Rb y Rd pueden ser juntos - (CH2CH2) - o -(CH2CH2CH2) - y Rb y Rc puede ser juntos con el átomo de nitrógeno pirrolidina, piperidina o morfolina; c) un grupo amino seleccionado entre -NH2, (C1-C6)alquilo-amino, (C1-C6)dialquilo-amino, pirrolidina, piperidina, morfolina o piperazina, que puede estar sustituido en la posición 4 coN(C1-C6)alquilo, -(C1-C6)alcanoilo, bencilo, benzoilo o fenilo, en donde estos sustituyentes llevan opcionalmente un grupo -COOH o un grupo Pb ', que se puede convertir en condiciones fisiológicas a Pb; R3 representa H, (C1-C6)-alquilo, (C1-C6)-alcoxi, -OH, (C1-C6)-alquiltio, (C1-C6)alquilsulfonilo, -SH, -CF3, - COOH, -COO((C1-C6)alquilo)), -CONH2, -CO-NH((C1-C6)alquilo-amino), -CON((C1-C6) alquilo)2, nitro, halógeno, ciano, amino, (C1-C6)alquilo-amino o (C1-C6)dialquil-amino; o R3 existe en forma de un par de electrones libres, si se uniría a un heteroátomo de los anillos Q1, Q2 o Q3; R4 y R5 representan independientemente el uno del otro H, (C1-C6)-alquilo, (C1-C6)-alcoxi, -CF3, halógeno o pueden formar juntos -OCH2O-o -OCH2CH2O-, si R4 y R5 están unidos al anillo en posición orto entre sí; R7 representa H, -OH, -OCOOR12, -OCOR13, -OCONR14R15, -O-tetrahidropirano-2-ilo), -O-(tetrahidrofurano- 2-ilo), -O-CHR16-OR17 o -SiR18R19R20; R10 y R11 representan independientemente uno del otro H, (C1-C6)-alquilo, -CF3 o halógeno; o R10 y R11 forman juntos -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2- o -CH2CH2CH2CH2CH2-; R12 representa (C1-C6)-alquilo, bencilo o fenilo, en el que opcionalmente el grupo alquilo está sustituido con flúor o cloro y bencilo y fenilo están opcionalmente sustituidos por uno o más sustituyentes seleccionados de entre el grupo de (C1-C6)-alquilo, (C1-C6)-alcoxi, -CF3, ciano, nitro o halógeno; R13 representa H o R12; R14 y R15 representan independientemente uno del otro H, (C1-C6)-alquilo, bencilo o fenilo, en el que, si es necesario, bencilo y fenilo pueden estar sustituidos por uno o más sustituyentes seleccionados de 5 entre el grupo de (C1-C6)-alquilo, (C1-C6)-alcoxi, -CF3, ciano, nitro o halógeno; R16 representa H o (C1-C6)-alquilo; R17 representa (C1-C6)-alquilo, bencilo o fenilo R18, R19 y R20 representan independientemente el uno del otro (C1-C6)-alquilo, bencilo o fenilo; o una sal farmacéuticamente aceptable, así como una forma tautomérica, enantiomérica u otra estereoisomérica de la misma.

Description

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en dónde y R = H, -(C1-C4-alquilo), -CF3 y otros grupos fluorados (C1-C4-alquilo).

55: g) OH y SH, con la condición de que L es un enlace covalente, y que -OH o -SH sólo pueden ocurrir como un sustituyente en un anillo Q1, Q2 o Q3 y está unido a un átomo de carbono que se encuentra cerca de un átomo de nitrógeno.

60: [0019] Se prefiere particularmente de acuerdo con la invención que el grupo Ps es uno de los siguientes grupos, que preferentemente directamente a través de un enlace covalente está unido al heterociclo de las fórmulas IV -XII: -COOH, -OH, -SH, -CONH2, -CONHNH2, -SO3H, -SO2NH2, y el grupo

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Compuesto 49:

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Compuesto 50:

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Compuesto 59:

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45 Compuesto 60:

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[0053] Los anteriores y los siguientes grupos enumerados en la presente se unen a la aplicación al punto en el que termina el enlace con la línea ondulada.

[0054] Si formas tautoméricas son posibles para los compuestos 4 hasta 68, estos también están cubiertos por el tautómero especificado y son objeto de la presente solicitud.

[0055] Al igual que en la presente invención tienen especial preferencia los compuestos 5, 13, 20, 22, 28, 31, 33, 34, 35, 37, 42, 43, 45, 46 y 48, en particular, los compuestos 5 y 33, demostrados.

[0056] Bajo (C1-C4)-alquilo o (C1-C6)alquilo, se entiende en la presente solicitud un grupo alquilo lineal o ramificado que tiene de 1 a 4 o de 1 a 6 átomos de carbono, más preferiblemente 1 a 4C-átomos y aún más preferiblemente de 1 a 3 C-átomos. -CH-Individuales o grupos -CH2-pueden estar reemplazados por N, NH, O o S. Del mismo modo, pueden estar reemplazados por átomos de flúor, 1 o más átomos de H del grupo alquilo. Ejemplos de estos grupos son los siguientes: metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, iso-butilo, s-butilo, t-butilo, 2-metilbutilo, n-pentilo, spentilo, t-pentilo, n-hexilo, 2,2-(di-etilo) -etilo, trifluorometilo, pentafluoroetilo y 2,2,2-trifluoroetilo, con metilo y etilo, se prefieren.

[0057] Por (C2-C6)-alquenilo se entiende en la presente solicitud un grupo lineal o ramificado de restos hidrocarbonados que tienen de 2 a 6C átomos, preferiblemente 2 a 4 átomos de carbono y particularmente preferiblemente de 2 a 3 C-átomos, en los que uno o más doble enlaces, preferentemente un doble enlace entre dos átomos de carbono presentes. -CH-Individuales o grupos -CH2-pueden estar reemplazados por N, NH, O o S. Del mismo modo, pueden estar reemplazados por átomos de flúor, 1 o más átomos de H del grupo alquenilo. Ejemplos de estos grupos incluyen: etenilo, propenilo, butenilo, pentenilo, hexenilo, siendo especialmente preferidos los radicales etenilo y propenilo.

[0058] Por -NH(C1-C4-alquenilo) se entiende en la presente invención, como se define anteriormente, (C1C4)alquenilo que está unido a través de una unidad -NH-. Las mismas preferencias sirven en el caso de (C1-C4)alquenilo.

[0059] Por (C3-C6)-Cicloalquilo se entiende en la presente invención, un grupo hidrocarburo cíclico que tiene de 3 a 6 átomos de carbono en el anillo. Grupos-CH2 individuales pueden estar reemplazados por N, NH, O o S. Del mismo modo, pueden estar reemplazados por átomos de flúor, 1 o más átomos de H del grupo alquilo. Ejemplos de estos grupos son los siguientes: ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo. Ciclohexilo es particularmente preferido.

[0060] Por (C1-C6)-alcoxi o -O(C1-C4-alquilo) se entiende en la presente invención, un (C1-C6)alquilo o un (C1-C4)alquilo como anteriormente se ha definido, que está unido a través de un átomo de oxígeno. Son especialmente preferidos aquí metoxi y etoxi.

[0061] Por (C1-C6)-alquiltio se entiende en la presente invención, un (C1-C6)-alquilo como se define anteriormente

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inflamación de la gama de espesores aserrada, daño por reperfusión, artritis reumatoide y vasculitis.

[0099] Entre el cáncer antes mencionado se entiende según la invención preferentemente -pero no exhaustivamente -cáncer de pulmón, cáncer de vejiga, cáncer de hígado, cáncer de páncreas y/o cáncer de mama.

[0100] La enfermedad degenerativa muscular antes mencionada se refiere en la presente invención preferiblemente a distrofia muscular, colágeno IV-miopatías y lesión por reperfusión miocárdica.

[0101] Las enfermedades neurodegenerativas mencionadas anteriormente de acuerdo con la invención, preferiblemente se seleccionan de: enfermedad de Alzheimer, Parkinson, Huntington, atrofia múltiple sistémica, esclerosis múltiple, parálisis cerebral, apoplejía, neuropatía diabética, esclerosis lateral amiotrófica, daño de la médula espinal y esclerosis cerebral.

[0102] La enfermedad mencionada, que se acompaña de una pérdida de la homeostasis del calcio celular, se refiere a la presente invención preferiblemente infarto de miocardio, accidente cerebrovascular, hepatotoxicidad aguda, colestasis y lesión por reperfusión de órganos trasplantados.

[0103] Los compuestos de la fórmula I anterior de la presente invención son inhibidores de la actividad enzimática no inmunosupresor,es extracelularmente eficaces de ciclofilinas extracelulares. Como tales, los compuestos son útiles para el tratamiento y/o prevención de enfermedades agudas y crónicas mediadas por ciclofilina. Los compuestos son preferiblemente, pero no exclusivamente, adecuados para el tratamiento o prevención de enfermedades inflamatorias persistentes o crónicas, inflamación neurogénica así como fibrosis inflamatoria asociada y el edema. Esto incluye, pero no se limita a las reacciones agudas excesivas inflamatorias (quemaduras, inflamación post-operatoria), inflamación gastrointestinal (colitis, enfermedad de Crohn), sepsis, enfermedades de las vías respiratorias (asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica), vasculopatía inflamatoria (ateroesclerosis, lesión por reperfusión), la artritis reumatoide, enfermedades inflamatorias de la piel (psoriasis, dermatitis atópica), enfermedades oculares (queratoconjuntivitis) y las enfermedades inflamatorias del sistema nervioso central y periférico (Parkinson, accidente cerebrovascular, esclerosis múltiple).

[0104] En otro aspecto, la invención se refiere a un método para el enriquecimiento de ingredientes activos en un compartimiento extracelular de un objeto multicelular, que comprende las etapas de:

-Proporcionar un compuesto de acuerdo con la fórmula I anterior o el compuesto acoplado al indicador de acuerdo con la invención;

-La puesta en contacto de dichos compuestos con un objeto multicelular.

[0105] En particular, el enriquecimiento en el presente procedimiento se trata de un enriquecimiento in vitro. Por esto se quiere decir que el objeto multicelular es un área separada del mismo cuerpo vivo.

[0106] Por "espacio extracelular" se entiende todas las áreas que se encuentran fuera del citosol y la membrana que encierra citosol. Esto incluye las emisiones, por ejemplo, en solución de cultivo de suspensión celular.

[0107] En relación al objeto multicelular puede ser cualquier objeto que se compone de al menos dos células biológicas idénticas o diferentes.

[0108] El término "célula biológica" incluye tanto la salud humana, animal y vegetal y las células bacterianas y organismos unicelulares. Si las células biológicas se tratan de células bacterianas o organismos unicelulares, el término "objeto multicelular" comprenderá una acumulación de varias células, tal como se entiende, por ejemplo, una colonia de células de un cultivo bacteriano. Si las células biológicas se tratan de células humanas o animales, el término "objeto multicelular" comprenderá una parte separada del cuerpo, tal como un trasplante, particularmente un órgano, una célula, un miembro o un injerto de tejido, sangre o fracción de sangre, tal como plasma sanguíneo o células en cultivo in vitro humanas y/o animales, como por ejemplo un cultivo de tejido de dos dimensiones o un cultivo esferoide de las células. Si las células biológicas se tratan de células vegetales, el término "objeto multicelular" comprenderá parte de una planta, tal como por ejemplo hojas, raíces o tallos o incluso una planta entera.

[0109] De acuerdo con la invención el objeto multicelular se trata de un órgano separado o parte del cuerpo, la sangre o una fracción de sangre, un cultivo celular o una planta. en los que caen los compuestos 1 a 3

[0110] Además, la presente invención también proporciona el uso de un compuesto de fórmula XIV mostrado a continuación -en los compuestos 1 a 3 -para la preparación de un compuesto de acuerdo con la anterior fórmula I o del compuesto acoplado a indicador de acuerdo con la invención, el cual se deriva de la ciclosporina A. En otras palabras, la presente invención se refiere también a un procedimiento para la preparación de un compuesto de este tipo de acuerdo con la anterior fórmula I de acuerdo con la invención o compuesto acoplado a indicador usando un

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Tabla 1:

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Compuesto: Inhibición de Cyp18wt IC50 [nM] Inhibición Indirecta de calcineurina IC50 [nM] NFAT-Reportador-Ensayo de Gen IC50 [nM]

Cyclosporina A: ~8 85 31,4

4: 264 >10000

5: 9, 6 >10000 >10000

6: 700

7: 11,9 6900 >10000

8: 90,4

9: 13,9 7000 >10000

10: 11,5 6900 >10000

11: 13,0 4700 10000

12: 31,4 2000

13: 11,1 >10000 >10000

14: 36,4 3200

15: 4,8 >10000 >10000

16: 15,1 7500

17: >50 >10000

18: 1,4 10000 >10000

19: 5,4 7000 >10000

20: 6,7 >10000 >10000

21: 22,2 >10000 5300

22: 8,7 >10000 >10000

23: 3,8 >10000 >10000

24: 6,2 >10000 >10000

25: 22,0 7900 10000

26: 10,8 6200 >10000

27: 5, 9 6400 7400

28: 60,0 >10000 >10000

29: 29, 5 >10000 10000

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30: 29,1 10000 >10000

31: 39,9 10000 >10000

32: 24,9 >10000 >10000

33: 9,8 >10000 >10000

34: 16,4 6400 >10000

35: 12,0 4800 >10000

36: 1000 >10000 >10000

37: 61,5 >10000 >10000

38: 14,3 3340 3800

39: 6,1 >10000 10000

40: 5,5 8000 >10000

41: 3,0 >10000 >10000

42: 57,7 9500 10000

43: 45,3 10000 5300

44: 9,2 >10000 >10000

45: 3,2 >10000 >10000

46: 13,1 6630 >10000

47: 13,2 >10000 >10000

48: 8,7 >10000

49: 30,9 >10000

50: 7,3 10000

51: 7,3 >10000

52: 8,0 >10000

53: 12,7 4200

54: 7,1 7200

55: 209,3 >10000

56: >1000 >10000

57: 16,9

60: ∼10

61: ∼10

62: 4,4

63: 5, 1

64: 17,2 10000

65: 20,2 >10000

66: 15,0 >10000

67: 8,4 >10000

68: 8,5 >10000

Ejemplo 72: Determinación de la permeabilidad celular en células Jurkat

[0218] Las células Jurkat del cultivo de células se recogieron y se centrifugaron. El medio se desechó y las células se lavaron una vez con medio RPMI (sin rojo de fenol, 10% de FCS, HEPES, gentamicina). Las células se resuspendieron en un medio ajustado a una concentración de células de 1.0x105-3.0x105 células/ml y después con

55 un derivado fluorescente CsA (0,5 µm-2,0 µm) a 37°C, 5 a 10% de CO2 y 100% de humedad se incuba. Las células se centrifugaron a continuación, el medio de desechó, el sedimento celular se lavó una vez con medio y se resuspendieron las células en un medio nuevo. Las células se incubaron con la concentración apropiada (0,01 µM a 100 µM) del compuesto de ensayo a ensayar para un medio a cuatro horas y después se centrifugaron de nuevo. Se desechó el medio, se lavaron una vez con 1 ml de PBS y se suspendieron en 500 µl de PBS. El análisis se realizó mediante la medición de FACS mediante la cuantificación del derivado de CsA fluorescente desplazado. La referencia (sin inhibidor), se añadió mientras al 100%. Los resultados para el compuesto 5 y para la ciclosporina a partir de este sistema de programa de prueba (Figura 1) muestran que el compuesto 5 en comparación con CsA no tiene la capacidad de penetrar las células.

65 Ejemplo 73: Determinación de la permeabilidad celular en las membranas celulares Caco2

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