ES2547211T3 - Dispositivo de guía para la migración celular y método de guía para la migración celular que usa tal dispositivo - Google Patents
Dispositivo de guía para la migración celular y método de guía para la migración celular que usa tal dispositivo Download PDFInfo
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Abstract
Dispositivo de guía (1) para la migración celular que comprende una superficie de soporte (2) provista con células (3), y un sustrato (5), presentando dichos sustrato (5) una superficie texturizada (6 ; 6' ; 6") colocada enfrente de la superficie de soporte (2) y puesta en contacto con las células (3) colocadas sobre la superficie de soporte (2) de un modo tal que las células (3) se confinen entre la superficie de soporte (2) y la superficie texturizada (6 ; 6' ; 6"), teniendo dicha superficie texturizada (6 ; 6' ; 6") una estructura tridimensional anisótropa (8 ; 8' ; 8") que presenta un motivo de repetición de acuerdo con un eje de repetición (X), presentando dicho motivo de repetición una sucesión de espacios de guía (15 ; 25 ; 35) adyacentes de acuerdo con el eje de repetición (X), siendo adaptado cada uno de dichos espacios de guía (15 ; 25 ; 35) para recibir al menos una parte de una de las células (3) y orientado de acuerdo con una dirección de anisotropía (A1 ; A2 ; A3a, A3b) para guiar un desplazamiento de las células (3) en la dirección de anisotropía (A1 ; A2 ; A3a, A3b).
Description
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55
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E12773050
11-09-2015
En cada cavidad 15, la primera superficie de guía 14 se adapta para bloquear el desplazamiento de las células 3 en una dirección opuesta a la segunda superficie de guía 16 y la segunda superficie de guía 16 ese adapta para autorizar el desplazamiento de las células 3 en una dirección opuesta a la primera superficie de guía 14. Las cavidades 15 entonces pueden guiar un desplazamiento de las células 3 transportadas por la superficie de soporte 2 en la dirección de anisotropía A1, es decir, en la dirección del eje de repetición X que va de la base 17 hacia el vértice 18 de la cavidad 15.
La figura 4A es una imagen en contraste de fases de células confinadas bajo las proyecciones triangulares 10. Los triángulos claros sobre la figura 4A representan las cavidades 15, las proyecciones triangulares 10 estando representadas por los triángulos oscuros. La figura 4B es un histograma que proporciona un sesgo inducido en la dirección de la migración de 167 células confinadas bajo la estructura que se ha descrito anteriormente, después de 24 horas de migración. En las figuras 4A y 4B, una flecha a la dirección de los puntos de las cavidades 15 triangulares.
El histograma muestra entonces una dirección privilegiada de migración que corresponde a la dirección de acuerdo con la que se orientan las cavidades 15.
El método de guía que se acaba de describir usa una superficie texturizada 6 cuya estructura tridimensional 8 o textura está sesgada en una dirección, dicha dirección de anisotropía A1, de modo que las células 3 puedan aplicar una presión más fácilmente en una dirección (aquí, hacia la segunda superficie de guía 16) que en otra (aquí, hacia la primera superficie de guía 14), o puedan sujetarse más fácilmente en una dirección (aquí, hacia la primera superficie de guía 14) que en otra ( aquí, hacia la segunda superficie de guía 16), o se puedan deformar más fácilmente en una de (aquí, hacia la segunda superficie de guía 16) que en otra (aquí, hacia la primera superficie de guía 14). Una anisotropía de interacción de este tipo entra en la cédula 3 y el sustrato 5 induce la dirección de migración preferente, en la imagen de la estructura denominada trinquete Browniano (« Brownian ratchet ») que se ha descrito anteriormente.
En el modo de realización que se ha descrito anteriormente, la dirección de anisotropía A1 se define por una concavidad girada hacia la primera superficie de guía 14 y formada por dos paredes laterales rectilíneas que convergen la una hacia la otra. Sin embargo, se pueden proporcionar otras formas para el espacio de guía con el fin de realizar una concavidad girada hacia la primera superficie de guía 14 y, desde allí, una dirección de anisotropía A1 paralela al eje de repetición X, que va de la primera superficie de guía 14 a la segunda superficie de guía 16. Por ejemplo, la concavidad podría ser redondeada, estando formada en particular por dos paredes laterales curvadas que convergen la una hacia la otra o por una sola pared lateral curvada.
Sin embargo, la invención no se limita a la realización de una concavidad para orientar la dirección de anisotropía A1 de forma paralela al eje de repetición X, desde la primera superficie de guía 14 hacia la segunda superficie de guía
16.
Por ejemplo, en una variante representará sobre la figura 5, los elementos de guía se realizan en forma de proyecciones alargadas 20 extendiéndose cada una de acuerdo con el eje transversal Y, perpendicular al eje de repetición X. Cada proyección alargada 20 lleva une primera superficie de guía 24, perpendicular al eje de repetición X, y una segunda superficie de guía 26, inclinada con respecto a un plano perpendicular a la superficie de la base 7.
En esta variante, solamente la superficie texturizada 6’ del sustrato 5 difiere de la que se ha descrito anteriormente. Por lo tanto, la descripción detallada del sustrato 5 y de otros elementos idénticos no se volverá a repetir y se hará referencia a la descripción que ya se ha realizado para más detalles.
Como se ha descrito anteriormente, la primera superficie de guía 24 de una de las proyecciones alargadas 20 se coloca con respecto a la segunda de superficie de guía 26 de la proyección alargada 20 adyacente. De este modo, las proyecciones alargadas 20 forman, entre ellas, una pluralidad de padres de superficies de guía adyacentes las unas con respecto a las otras de acuerdo con el eje de repetición X y definen un motivo de repetición de acuerdo con este eje de repetición X.
Cada uno de los pares de las superficies de guía comprende una de las primeras superficies de guía 24 y la segunda superficie de guía 26 enfrentada, delimitando entre ellas un espacio de guía.
En esta variante del primer modo de realización, el espacio de guía comprende una ranura 25 que se extiende de acuerdo con el eje transversal Y. El motivo de repetición presenta entonces una sucesión de ranuras 25 de acuerdo con el eje de repetición X. Cada una de las ranuras 25 está adaptada para recibir al menos una parte de una de las células 3. La ranura 25 presenta una dimensión máxima, medida en el fondo de la ranura 25 entre la primera 24 y segunda superficies 26 de guía, inferior a 200 µm, preferentemente inferior a 100 µm. De forma ventajosa, la dimensión máxima de la ranura 25 corresponde ligeramente un tamaño de las células 3 y está comprendido, por ejemplo, entre 5 µm y 60 µm, preferentemente entre 15 µm y 30 µm. La ranura 25 presenta, además, una profundidad, medida de forma perpendicular a la superficie de la base 7, inferior a 200 µm, preferentemente inferior
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