ES2449697T3

ES2449697T3 - Compuestos de pirrolo[2,3-d]pirazina-7-il-pirimidina

Info

Publication number: ES2449697T3
Application number: ES10788014.8T
Authority: ES
Inventors: Margarita Wucherer-Plietker; Christina Esdar
Original assignee: Merck Patent GmbH
Current assignee: Merck Patent GmbH
Priority date: 2009-12-23
Filing date: 2010-11-24
Publication date: 2014-03-20
Anticipated expiration: 2030-11-24
Also published as: US8999986B2; JP5718359B2; EP2516442A1; CN102666544B; JP2013515686A; WO2011076327A1; CA2785329C; CN102666544A; AU2010335639B2; AU2010335639A1; AR079570A1; EP2516442B1; DE102009060175A1; CA2785329A1; US20120270880A1

Abstract

Compuestos de la fórmula I**Fórmula** en donde R1 representa [C(R3)2]mHet 1 o [C(R3)2]mAr', R2 representa C(R3)(R4)Ar o C(R3)(R4)Het, R3 representa H o A', R4 representa [C(R3)2]mOH o [C(R3)2]mOA, R5 representa N(R3)2, R6 representa H o Hal, Ar representa un fenilo no sustituido, o mono- o di- sustituido por Hal, Ar' representa un fenilo no sustituido, o mono- o di- sustituido por Hal y/o por (CH2)mCN, Het representa un heterociclo mononuclear aromático no sustituido, o mono-o di- sustituido por Hal, con 1 a 4átomos de N, O y/o S, Het1 representa un heterociclo mononuclear aromático con 1 a 4 átomos de N, O y/o S, que puede ser no sustituidoo mono- o di- sustituido por Hal, A, [C(R3)2]mCOHet2, [C(R3)2]mN(R3)2 y/o [C(R3)2]mHet2, Het2 representa un heterociclo mononuclear o binuclear, aromático, saturado o insaturado no sustituido o mono-o disustituidopor A y/o OH, con 1 a 2 átomos de N y/o de O, A representa un alquilo no ramificado o ramificado con 1-10 átomos de C, en donde 1-7 átomos de H puedenreemplazarse por F, Cl y/o Br, y/o en donde uno o dos grupos CH no contiguos y/o grupos CH2 puedenreemplazarse por NR3 y/u O,o alquilo cíclico con 3-7 átomos de C, A' representa un alquilo no ramificado o ramificado con 1-6 átomos de C, en donde 1-5 átomos de H pueden serreemplazados por F, Hal representa F, Cl, Br o I, m representa 0, 1, 2, 3 ó 4.

Description

Compuestos de pirrolo[2,3-d]pirazina-7-il-pirimidina La presente invención hace referencia a compuestos de la fórmula I

5 en donde

R1 representa [C(R3)2]mHet1 o [C(R3)2]mAr’,

R2 representa C(R3)(R4)Ar o C(R3)(R4)Het,

R3 representa H o A’,

R4 representa [C(R3)2]mOH o [C(R3)2]mOA,

10 R5 representa N(R3)2,

R6 representa H o Hal,

Ar representa un fenilo no sustituido, o mono- o di- sustituido por Hal, Ar' representa un fenilo no sustituido, o mono- o di- sustituido por Hal y/o por (CH2)mCN, Het representa un heterociclo mononuclear aromático no sustituido, o mono-o di- sustituido por Hal, con 1 a 4

15 átomos de N, O y/o S, Het1 representa un heterociclo mononuclear aromático con 1 a 4 átomos de N, O y/o S, que puede ser no sustituido

o mono- o di- sustituido por Hal, A, [C(R3)2]mCOHet2, [C(R3)2]mN(R3)2 y/o [C(R3)2]mHet2,

Het2 representa un heterociclo mononuclear o binuclear, aromático, saturado o insaturado no sustituido o mono-o disustituido por A y/o OH, con 1 a 2 átomos de N y/o de O,

20 A representa un alquilo no ramificado o ramificado con 1-10 átomos de C, en donde 1-7 átomos de H pueden ser reemplazados por F, Cl y/o Br, y/o en donde uno o dos grupos CH no contiguos y/o grupos CH2 pueden reemplazarse por NR3 y/u O, o alquilo cíclico con 3-7 átomos de C,

A' representa un alquilo no ramificado o ramificado con 1-6 átomos de C, en donde 1-5 átomos de H pueden ser reemplazados por F, 25 Hal representa F, Cl, Br o I,

m representa 0, 1, 2, 3 ó 4, así como sus sales, tautómeros y estereoisómeros que pueden utilizarse farmacéuticamente, incluyendo las mezclas de los mismos en cualquier proporción.

Es objeto de la presente invención el hallar nuevos compuestos con propiedades valiosas, en particular compuestos que puedan utilizarse para preparar medicamentos.

Se ha comprobado que los compuestos de la fórmula I y sus sales y/o solvatos, en caso de una buena compatibilidad, poseen propiedades farmacológicas muy valiosas.

En particular muestran un efecto inhibitorio de la proliferación celular / vitalidad celular como antogonistas o agonistas. Los compuestos acordes a la invención, por tanto, pueden utilizarse para combatir y/o tratar tumores, crecimiento de tumores y/o metástasis tumoral. El efecto antiproliferativo puede probarse en un ensayo de proliferación / ensayo de vitalidad.

Otros compuestos heterocíclicos, como los derivados de pirimidinil-2-amina, se describen en la solicitud WO 2008/155000.

Los derivados de 4-(pirrolopiridinil)-pirimidinil-2-amina son descritos por P.M. Fresneda y otros en Tetrahedron 57 (2001) 2355-2363.

Los derivados de 4-(pirrolopiridinil)-pirimidinil-2-amina fueron descritos por A. Karpov en la presentación de su tesis doctoral en la Universidad de Heidelberg, en abril de 2005.

En la solicitud WO 2004/089913 se describen derivados de amino-piridina que portan un radical 2,2,6,6-tetrametilpiperidina-4-il, para el tratamiento de enfermedades inflamatorias y autoinmunes.

Otros compuestos bicíclicos heterocíclicos son descritos como inhibidores de quinasa en las solicitudes WO 2006/058074 y WO 2007/107221.

Conforme a ello, los compuestos acordes a la invención o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, pueden administrarse para el tratamiento de cáncer, inclusive de carcinomas sólidos, como por ejemplo de carcinomas (por ejemplo de los pulmones, del páncreas, de la gándula tiroides, de la vejiga o del cólon), de enfermedades mieloides (por ejemplo leucemia mieloide) o adenoma (por ejemplo adenoma velloso de cólon).

Entre los tumores figuran además la leucemia monicítica, carcinoma cerebral, urogenital, del sistema linfático, de estómago, de laringe, pulmonar, como por ejemplo, entre éstos, adenocarcinoma pulmonar y carcinoma pulmonar microcelular, carcinoma pancreático y/o carcinoma de pecho.

Los compuestos pueden utilizarse además en el tratamiento de inmunodeficiencias inducidas por VIH-1 (virus de inmunodeficiencia humana virus deTipo 1).

Como enfermedades hiperproliferativas cancerosas se consideran el cáncer cerebral, cáncer de pulmón, cáncer del epitelio escamoso, cáncer de vejiga, cáncer de estómago, cáncer pancreático, cáncer de hígado, cáncer de riñón, cáncer colorrectal, cáncer de pecho, cáncer de cabeza, cáncer de cuello, cáncer de esófago, cáncer ginecológico, cáncer de la glándula tiroides, linfomas, leucemia crónica y leucemia aguda. La presente invención apunta en particular al tratamiento del crecimiento celular canceroso. Por tanto, son objeto de la presente invención los compuestos acordes a la invención como medicamentos y/o como componentes activos de los medicamentos en el tratamiento y/o en la profilaxis de las enfermedades mencionadas y la utilización de compuestos acordes a la invención para la preparación de un producto farmacéutico para el tratamiento y/o la profilaxis de las enfermedades mencionadas, como también un procedimiento para el tratamiento de las enfermedades mencionadas, el cual comprende la administración de uno o varios compuestos acordes a la invención a un paciente que requiera una administración de esa clase.

Puede demostrarse que los compuestos acordes a la invención presentan un efecto antiproliferativo. Los compuestos acordes a la invención se administran a un paciente que presenta una enfermedad hiperproliferativa, por ejemplo para inhibir el crecimiento del tumor, para reducir una inflamación que se encuentra acompañada de una enfermedad linfoproliferativa, para inhibir el rechazo al trasplante o el daño neurológico debido a la reparación de tejidos. Los presentes compuestos pueden utilizarse con fines profiláticos o terapéuticos. El concepto "tratar o tratamiento", dentro de este contexto, hace referencia tanto a la prevención de enfermedades, como también al tratamiento de afecciones preexistentes. La prevención de proliferación / vitalidad se logra mediante la administración de compuestos acordes a la invención antes del desarrollo de la enfermedad evidente, por ejemplo para evitar el crecimiento del tumor. De forma alternativa, los compuestos se utilizan para el tratamiento de enfermedades permanentes, estabilizando o mejorando los síntomas clínicos del paciente.

El huésped o paciente puede pertenecer a cualquier especie de mamíferos, por ejemplo a una especie de primates, en particular seres humanos; roedores, inclusive ratones, ratas y hamsters; conejos; caballos, bovinos, perros,

gatos, etc. Los modelos animales son relevantes para ensayos experimentales, puesto que proporcionan un modelo para el tratamiento de una enfermedad del ser humano.

La susceptibilidad de una célula determinada con respecto al tratamiento con los compuestos acordes a la invención puede determinarse in vitro mediante pruebas. Por lo general, un cultivo celular es incubado con un compuesto acorde a la invención en distintas concentraciones por un tiempo suficiente como para permitir que los agentes activos puedan inducir la muerte celular o para inhibir la proliferación celular, la vitalidad celular o la migración; este tiempo, generalmente, puede ser de entre una hora y una semana. Para las pruebas in vitro pueden utilizarse células cultivadas de una muestra de biopsia. Se determina entonces la cantidad de células que permanecen aún después del tratamiento. La dosis varía en función del compuesto específico utilizado, de la enfermedad específica, del estado del paciente, etc. Por lo general, una dosis terapéutica es suficiente para reducir considerablemente la población de células en el tejido-diana, mientras que se mantiene la viabilidad del paciente. El tratamiento, habitualmente, se continúa hasta que se logra una reducción considerable, por ejemplo de por lo menos el 50%, de la disminución de la carga celular y puede continuarse hasta que esencialmente se compruebe la ausencia de las células no deseadas en el cuerpo.

Existen muchas enfermedades acompañadas de una desregulación de la proliferación celular y de muerte celular (apoptosis). Las siguientes afecciones son consideradas como afecciones de interés dentro de este contexto, pero no deben considerarse de forma restrictiva. Los compuestos acordes a la invención son de utilidad en el tratamiento de una serie de afecciones diferentes, en las cuales se presenta una proliferación y/o migración de células musculares lisas y/o células inflamatorias en la capa íntima de un vaso, que resultan en un riego sanguíneo limitado de este vaso, por ejemplo en el caso de lesiones oclusivas neointimales. Como enfermedades vasculares oclusivas en caso de trasplantes, consideradas de interés dentro de este contexto, pueden mencionarse la arterioesclerosis, enfermedad vascular coronaria después de un trasplante, estenosis de la vena después de un trasplante, restenosis peri anastomótica en caso de prótesis, restenosis después de angioplastia o colocación de stent y similares.

Los compuestos de la fórmula I actúan también como reguladores, moduladores o inhibidores de proteinquinasas, en especial del tipo serina/treonina quinasa, entre las cuales, entre otras, se encuentran las quinasas 1 dependientes de fosfoinosítidos (PDK 1). Un cierto efecto muestran los compuestos acordes a la invención en la inhibición de la serina/treonina quinasas PDK1.

PDK1 fosforila y activa un subgrupo de la familia de AGC proteinquinasas, que comprende PKB, SGK, S6K e isoformas PKC. Estas quinasas participan en la vía de transmisión de señales PI3K y controlan funciones celulares fundamentales como la supervivencia, el crecimiento y la diferenciación. Con ello, PDK1 consiste en un regulador importante de diversos efectos metabólicos, proliferativos y efectos vinculados a la preservación de la vida.

Las enfermedades ocasionadas por proteinquinasas se caracterizan por una actividad anómala o por una hiperactividad de las proteinquinasas de esta clase. Una actividad anómala hace referencia a: (1) la expresión en células que habitualmente no expresan estas proteinquinasas; (2) una expresión aumentada de quinasas que conduce a una proliferación de células no deseada, como cáncer; o a (3) una actividad aumentada de quinasas que conduce a una proliferación de células no deseada, como cáncer, y/o a una hiperactividad de las proteinquinasas correspondientes. La hiperactividad hace referencia a una amplificación del gen que codifica una proteinquinasa determinada, o a la producción de un espejo de actividad que puede tener correlación con una enfermedad de proliferación celular (es decir, con un espejo de quinasa ascendente aumenta la gravedad de uno o de varios síntomas de la enfermedad de proliferación celular); la disponibilidad biológica de una proteinquinasa puede ser influenciada también por la presencia o la falta de un conjunto de proteínas de unión de esa quinasa.

Los tipos de cáncer más importantes que pueden ser tratados utilizando un compuesto conforme a la invención comprenden el cáncer colorrectar, cáncer pulmonar microcelular, cáncer pulmonar no-microcelular, el mieloma múltiple, así como el carcinoma de células renales y el carcinoma endometrial, en particular también tipos de cáncer en los cuales se encuentra mutada la PTEN, entre otros en el cáncer de mama, cáncer de próstata y glioblastoma.

Además, los compuestos acordes a la invención, en el caso de ciertas quimioterapias existentes para el cáncer, pueden utilizarse también para lograr efectos aditivos o sinergísticos, para restablecer la efectividad de ciertas quimioterapias y radioterapias existentes para combatir el cáncer.

Son objeto de la presente invención también las formas ópticamente activas (estereoisómeros), sales, los enantiómeros, los racematos, los diastereómeros así como hidratos y solvatos de esos compuestos. Como solvatos de los compuestos se entienden adiciones de moléculas inertes de disolventes en los compuestos, las cuales se conforman debido a su atracción recíproca. Por ejemplo, los mono- o di-hidratos o los alcoholatos son solvatos. Como derivados que pueden utilizarse farmacéuticamente se entienden por ejemplo las sales de los compuestos según la invención, así como también los así llamados compuestos profármacos.

Como derivados profármacos se entienden compuestos modificados de la fórmula I modificados por ejemplo con grupos alquilo o acilo, azúcares u oligopéptidos que en el organismo se descomponen rápidamente en los compuestos activos según la invención.

Entre éstos figuran también derivados de polímeros biodegradables de los compuestos según la invención, tal como se describe por ejemplo en J. Pharm. 115, 61-67 (1995).

La expresión "cantidad efectiva" significa la cantidad de un medicamento o de una sustancia farmacéutica que provoca una respuesta biológica o medicinal en un tejido, sistema, animal o ser humano, donde dicha respuesta es la pretendida o buscada por un médico o investigador.

Asimismo, la expresión "cantidad terapéuticamente efectiva" hace referencia a una cantidad que, en comparación con un sujeto correspondiente que no ha recibido esta cantidad, tiene como consecuencia lo siguiente:

un tratamiento terapéutico mejorado, cura, prevención o eliminación de una enfermedad, de un cuadro clínico, de un estado de la enfermedad, de una afección, de un trastorno o de efectos secundarios, así como también la disminución del avance de una enfermedad, de una afección o de un trastorno.

La denominación "cantidad terapéuticamente efectiva" comprende también las cantidades que son eficaces para mejorar el funcionamiento fisiológico normal.

Es además objeto de la invención la utilización de mezclas de los compuestos de la fórmula I, como por ejemplo mezclas de dos diastereómeros, por ejemplo en una proporción de 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:10, 1:100 ó 1:1000.

De forma especialmente preferente las mezclas consisten en compuestos estereoisómeros.

Son objeto de la presente invención los compuestos de la fórmula I y sus sales, así como un procedimiento para producir compuestos de la fórmula I, así como sus sales, tautómeros y estereoisómeros que pueden utilizarse farmacéuticamente, caracterizado porque

a) para producir compuestos de la fórmula I,

en donde R5 representa NH2 y R6 representa H,

un compuesto de la fórmula II

en donde R1 y R2 representan lo indicado en la reivindicación 1, se hace reaccionar con guanidina o con una de sus sales, o b) se lo libera de uno de sus derivados funcionales a través del tratamiento con un agente solvolizante o

hidrogenolizante,

y/o una base o un ácido de la fórmula I es convertido en una de sus sales.

En cuanto a lo mencionado anteriormente y a lo subsiguiente, los radicales R1, R2, R3, R4, R5 y R6 poseen las representaciones indicadas en la fórmula I, a menos que se indique lo contrario de forma explícita.

A representa un alquilo, no ramificado (lineal) o ramificado, y posee 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ó 10 átomos de C. A, de forma preferente, representa metilo, además etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, butilo sec. o terc., también pentilo, 1-, 2- ó 3- metilbutilo, 1,1- , 1,2- ó 2,2-dimetilpropilo, 1-etilpropilo, hexilo, 1- , 2- , 3- ó 4-metilpentilo, 1,1- , 1,2, 1,3- , 2,2- , 2,3- ó 3,3-dimetilbutilo, 1- ó 2-etilbutilo, 1-etilo- 1-metilpropilo, 1-etil-2-metilpropilo, 1,1,2- ó 1,2,2trimetilpropilo, de forma aún más preferente por ejemplo trifluormetilo.

A, de forma especialmente preferente, representa alquilo con 1, 2, 3, 4, 5 ó 6 átomos de C, preferentemente metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, butilo secundario, butilo terciario, pentilo, hexilo, trifluormetilo, pentafluoretilo ó 1,1,1-trifluoretilo, en donde de forma preferente también uno o dos grupos CH y/o CH2 pueden ser reemplazados por O y/o por NR3. A, por consiguiente, representa por ejemplo también CH2OCH3 o CH2OCH2CH2NH2.

A', de forma preferente, representa alquilo con 1, 2, 3, 4, 5 ó 6 átomos de C, preferentemente metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, butilo secundario, butilo terciario, pentilo, hexilo, trifluormetilo, pentafluoretilo, 1,1,1trifluoretilo, difluormetilo, fluormetilo, CH(CH2F)2, CH2CH2F o CH2CHF2.

Cicloalquilo representa ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo o cicloheptilo.

Hal, de forma preferente, representa F, Cl o Br, pero también I, de forma especialmente preferente F o Cl.

En otra forma de ejecución, de manera preferente, Ar representa un fenilo no sustituido o mono- o di- sustituido por Hal.

En otra forma de ejecución, de manera preferente, Ar' representa un fenilo no sustituido o mono- o di- sustituido por Hal y/o por (CH2)mCN.

En otra forma de ejecución, de manera preferente, Het representa un heterociclo mononuclear aromático no sustituido, o mono-o di- sustituido por Hal, con 1 a 4 átomos de N, O y/o S,

Het, de manera especialmente preferente, representa tiazolilo, tiofenilo, furanilo, pirrolilo, oxazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, pirazolilo, imidazolilo, triazolilo, tiadiazolilo, piridazinilo, pirazinilo, piridinilo o pirimidinilo,

donde los heterociclos también pueden ser mono- o di- sustituidos por Hal.

En otra forma de ejecución, de manera preferente, Het1 representa un heterociclo mononuclear aromático con 1 a 4 átomos de N, O y/o S, que puede ser no sustituido o mono- o di- sustituido por Hal, A, [C(R3)2]mCOHet2, [C(R3)2]mN(R3)2 y/o (C(R3)2]mHet2.

Het1, de manera especialmente preferente, representa tiazolilo, tiofenilo, furanilo, pirrolilo, oxazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, pirazolilo, imidazolilo, triazolilo, tiadiazolilo, piridazinilo, pirazinilo, piridinilo o pirimidinilo,

en donde los heterociclos también pueden ser mono- o di- sustituidos por Hal, A, [C(R3)2]mCOHet2, [C(R3)2]mN(R3)2 y/o por [C(R3)2]mHet2.

En otra forma de ejecución, de manera preferente, Het2 representa un heterociclo mononuclear o binuclear, aromático, saturado o insaturado no sustituido o mono-o di- sustituido por A y/o OH, con 1 a 2 átomos de N y/o de O.

Het2, de manera especialmente preferente, representa piperidinilo, pirrolidinilo, morfolinilo, piperazinilo, imidazolidinilo, oxazolidinilo, tetrahidroisoquinolilo o tetrahidropiranilo, donde los heterociclos pueden también ser mono- o di- sustituidos por A y/o por OH.

Para la invención en su totalidad aplica que todos los radicales que se presentan repetidas veces pueden ser iguales

o distintos, es decir que son independientes unos de otros.

Los compuestos de la fórmula I pueden poseer uno o varios centros quirales y, por tanto, pueden presentarse en diferentes formas estereoisómeras. La fórmula I comprende todas estas formas.

A este respecto, son objeto de la presente invención en particular aquellos compuestos de la fórmula I, en los cuales al menos uno de los radicales mencionados posee la representación preferente, indicada anteriormente. Algunos grupos preferentes de compuestos pueden ser expresados a través de las siguientes subfórmulas Ia a Ig correspondientes a la fórmula I, en donde los radicales que no se encuentran indicados en detalle poseen la representación indicada en la fórmula I, sin embargo donde

en Ia, Ar representa un fenilo no sustituido, o mono- o di- sustituido por Hal;

en Ib, Ar' representa un alqueno no ramificado o ramificado con 1-8 átomos de C, en donde 1-7 átomos de H pueden ser reemplazados por F, Cl y/o Br,

en Ic, Ar1 representa un fenilo no sustituido, o mono- o di- sustituido por Hal y/o por (CH2)mCN,

en Id, Het, representa tiazolilo, tiofenilo, furanilo, pirrolilo, oxazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, pirazolilo, imidazolilo, triazolilo, tiadiazolilo, piridazinilo, pirazinilo, piridinilo o pirimidinilo, en donde los heterociclos también pueden ser mono- o di- sustituidos por Hal. en Ie, Het1, representa tiazolilo, tiofenilo, furanilo, pirrolilo, oxazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, pirazolilo, imidazolilo,

triazolilo, tiadiazolilo, piridazinilo, pirazinilo, piridinilo o pirimidinilo,

en donde los heterociclos también pueden ser mono- o di- sustituidos por Hal, A, [C(R3)2]mCO)Het2, [C(R3)2]mN(R3)2 y/ o por [C(R3)2]mHet2;

en If, Het2, representa piperidinilo, pirrolidinilo, morfolinilo, piperazinilo, imidazolidinilo, oxazolidinilo, tetrahidroisoquinolilo o tetrahidropiranilo, donde los heterociclos pueden también ser mono- o di- sustituidos por A y/o por OH.

en Ig, R1 representa [C(R3)2]mHet1 o [C(R3)2]mAr’,

R2 representa C(R3)(R4)Ar o C(R3)(R4)Het,

R3 representa H o A’,

R4 representa [C(R3)2]mOH o [C(R3)2]mOA,

R5 representa N(R3)2,

R6 representa H o Hal,

átomos de N, O y/o S, Het1 representa un heterociclo mononuclear aromático con 1 a 4 átomos de N, O y/o S, que puede ser no sustituido

Het2 representa un heterociclo mononuclear o binuclear, aromático, saturado o insaturado no sustituido o mono-o di

sustituido por A y/o OH, con 1 a 2 átomos de N y/o de O, A representa un alquilo no ramificado o ramificado con 1-10 átomos de C, en donde 1-7 átomos de H pueden ser reemplazados por F, Cl y/o por Br,

y/o en donde uno o dos grupos CH no contiguos y/o grupos CH2 pueden reemplazarse por NR3 y/u O, o alquilo cíclico con 3-7 átomos de C, A' representa un alquilo no ramificado o ramificado con 1-6 átomos de C, en donde 1-5 átomos de H pueden ser

reemplazados por F, Hal representa F, Cl, Br o I, m representa 0, 1, 2, 3 ó 4,

así como sus solvatos, sales, tautómeros y estereoisómeros que pueden utilizarse farmacéuticamente, incluyendo las mezclas de los mismos en cualquier proporción.

Los compuestos de la fórmula I y también las sustancias iniciales para su preparación se producen por lo general de acuerdo con métodos conocidos, tal como se describe en la bibliografía (por ejemplo en las publicaciones fundamentales, tal como en Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart) y mediante condiciones de reacción que son conocidas y apropiadas para las conversiones mencionadas. Pueden aplicarse además otras variantes conocidas que no se encuentran descritas aquí de forma detallada.

De forma preferente, los compuestos de la fórmula I se obtienen al hacer reaccionar compuestos de la fórmula II con una sal de guanidina, como por ejemplo carbonato de guanidina.

Los compuestos de la fórmula II por lo general son conocidos. Si se trata de compuestos nuevos, sin embargo, éstos pueden ser producidos de acuerdo con métodos conocidos.

Por lo general, la reacción tiene lugar en un disolvente inerte en presencia de un medio fijador de ácido, de forma preferente en presencia de una base orgánica como DIPEA, trietilamina, dimetilanilina, piridina o quinolina.

También puede ser conveniente agregar un hidróxido de un metal alcalino o alcalinotérreo o de otra sal de un ácido débil de los metales alcalinos o alcalinotérreos, preferentemente de potasio, sodio, calcio o cesio.

El tiempo de reacción, según las condiciones que se aplican, se ubica entre algunos minutos y 14 días, la temperatura de reacción entre unos -15° y 150°, normalmente entre 40° y 130° y de forma especialmente preferente entre 60°C y 110°.

Como disolventes inertes son adecuados por ejemplo los hidrocarburos como hexano, petroleter, benceno, tolueno o xileno; hidrocarburos clorados como tricloroetileno, 1,2-dicloroetano, tetracloruro de carbono, cloroformo o diclorometano; alcoholes como metanol, etanol, isopropanol, n-propanol, n-butanol o terc.-butanol; éter como éter dietílico, éter diisopropílico, tetrahidrofurano (THF) o dioxano; éter glicólico como etilenglicol monometil eter o monoetil eter (metilglicol o etilglicol), 1,2- dimetoxietano (diglima); cetonas como acetona o butanona; amidas como acetamida, dimetilacetamida o dimetilformamida (DMF); nitrilos como acetonitrilo; sulfóxidos como dimetilsulfóxido (DMSO); sulfuro de carbono; ácidos carboxílicos como ácido fórmico o ácido acético; nitroderivados como nitrometano o nitrobenceno; ésteres como acetato de etilo o mezclas de los disolventes mencionados.

Se consideran como especialmente preferentes los éteres glicólicos, como etilenglicol monometil eter, THF, diclorometano o DMF.

La disociación de un éter se efectúa utilizando métodos conocidos por el experto.

Un método estándar para la disociación del éter, por ejemplo de un éter metílico, consiste en la utilización de tribromuro de boro.

Los grupos que pueden separarse hidrogenoliticamente, por ejemplo en la disociación de un bencil éter, pueden disociarse por ejemplo a través del tratamiento con hidrógeno en presencia de un catalizador (por ejemplo de un catalizador de metal noble como paladio, de manera conveniente en un portador como carbón). Como disolventes son adecuados los arriba mencionados, en particular por ejemplo alcoholes como metanol, etanol o amidas como DMF. La hidrogenólisis se efectúa por lo general a temperaturas de entre 0 y 100° y a una presión de entre aproximadamente 1 y 200 bar, preferentemente a 20-30° y 1-10 bar.

Los ésteres pueden ser saponificados por ejemplo con ácido acético o con NaOH o KOH en agua, agua-THF o agua-dioxano a temperaturas de entre 0 y 100°.

Las alquilaciones en nitrógeno se efectúan bajo condiciones estándar, ya conocidas por el experto.

Los compuestos de la fórmula I, además, pueden obtenerse al ser liberados de uno de sus derivados funcionales a través de solvólisis, en particular hidrólisis, o a través de hidrogenólisis.

Las sustancias iniciales consideradas como preferentes para la solvólisis o la hidrogenólisis son aquellas que contienen grupos amino y/o hidroxi protegidos correspondientes en lugar de uno o varios grupos amino y/o hidroxi libres, preferentemente aquellas que en lugar de un átomo de H que se encuentra unido a un átomo de N portan un grupo protector de amino, por ejemplo aquellos que corresponden a la fórmula I pero que en lugar de un grupo NH2contienen un grupo NHR'- (en donde R' representa un grupo protector de amino, por ejemplo B. BOC o CBZ).

Asimismo, se consideran como sustancias iniciales preferentes aquellas que en lugar del átomo de H de un grupo hidroxi portan un grupo de protección hidroxi, por ejemplo aquellas que corresponden a la fórmula I pero que en lugar de un grupo hidroxifenilo contienen un grupo fenilo R"O- (en donde R'' representa un grupo protector de hidroxi).

En la molécula de la sustancia inicial pueden encontrarse presentes también varios grupos amino y/o hidroxi protegidos - iguales o diferentes. En caso de que los grupos protectores existentes sean diferentes unos de otros, en muchos casos, pueden ser disociados de forma selectiva.

El término "grupo protector de amino" por lo general es conocido y hace referencia a grupos que son adecuados para proteger (bloquear) un grupo amino frente a reacciones químicas, pero los cuales pueden separarse con facilidad después de que haya tenido lugar la reacción química deseada en otros lugares de la molécula. Se consideran como grupos típicos de esta clase los grupos acilo, arilo, aralcoximetilo o aralquilo no sustituidos o sustituidos. Puesto que los grupos protectores de amino se eliminan después de la reacción deseada (o secuencia de reacción), su tipo y tamaño no son críticos; no obstante se consideran preferentes aquellos con 1-20, en especial con 1-8 átomos de carbono. El término “grupo protector de acilo”, dentro del contexto del presente procedimiento, debe entenderse en el sentido más amplio. Dicha expresión comprende grupos acilo derivados de ácidos carboxílicos o sulfónicos alifáticos, aralifáticos, aromáticos o heterocíclicos, así como en particular grupos alcoxicarbonilo, ariloxicarbonilo y, ante todo, aralcoxicarbonilo. Son ejemplos de grupos acilo de este tipo alcanoilo, como acetilo, propionilo, butirilo; aralcanoilo, como fenilacetilo; aroilo, como benzoilo o toluilo; ariloxicarbonilo, como POA; alcoxicarbonilo, como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, BOC, 2-yodoetoxicarbonilo; aralquiloxicarbonilo, como CBZ ("carbobenzoxi"), 4-metoxibenciloxicarbonilo, FMOC; arilsulfonilo, como Mtr, Pbf o Pmc. Los grupos protectores de amino considerados como preferentes son BOC y Mtr, además de CBZ, Fmoc, bencilo y acetilo.

El término "grupo protector de hidroxi" por lo general es igualmente conocido y hace referencia a grupos que son adecuados para proteger un grupo hidroxi frente a reacciones químicas, pero los cuales pueden separarse con facilidad después de que haya tenido lugar la reacción química deseada en otros lugares de la molécula. Se consideran como grupos típicos de esta clase los grupos arriba mencionados arilo, aralquilo o acilo, así como también los grupos alquilo. La naturaleza y el tamaño de los grupos protectores de hidroxi no son críticos puesto que son separados nuevamente después de la reacción química o secuencia de reacción deseadas; se consideran preferentes los grupos con 1-20, en especial con 1-10 átomos de carbono. Son ejemplos de grupos protectores de hidroxi, entro otros, terc.-butoxicarbonilo, bencilo, p-nitrobenzoilo, p-toluenolsulfonilo, terc.-butilo y acetilo, donde bencilo y terc.- butilo se consideran especialmente preferentes. Los grupos COOH- en ácido asparagínico y ácido glutámico son protegidos preferentemente en forma de su terc.-butil éster (por ejemplo Asp(OBut)).

La liberación de los compuestos de la fórmula I de sus derivados funcionales se logra - según el grupo protector utilizado- por ejemplo con ácidos fuertes, de forma conveniente con TFA o ácido perclórico, pero también con otros ácidos inorgánicos fuertes como ácido clorhídrico o ácido sulfúrico, ácidos carboxílicos orgánicos fuertes como ácido tricloro acético o ácidos sulfónicos como benceno o ácido p-toluensulfónico. Es posible que se encuentre presente un disolvente inerte adicional, pero no siempre es necesario. Como disolventes inertes son adecuados, preferentemente, ácidos carboxílicos orgánicos como ácido acético, éter como tetrahidrofurano o dioxano, amidas como DMF, hidrocarburos halogenados como diclorometano, también alcoholes como metanol, etanol o isopropanol, así como agua. Se consideran además las mezclas de los disolventes arriba mencionados. Preferentemente el TFA se utiliza de modo que exceda la cantidad necesaria para la reacción sin agregar otro disolvente, el ácido perclórico se utiliza en forma de una mezcla de ácido acético y 70 % en peso de ácido perclórico en una proporción de 9:1. Las temperaturas de reacción para la disociación, de manera conveniente, se ubican entre 0 y unos 50°, preferentemente se trabaja a una temperatura de entre 15 y 30° (temperatura ambiente).

Los grupos BOC, OBut, Pbf, Pmc y Mtr, preferentemente, pueden ser disociados por ejemplo con TFA en diclorometano o con unos 3 a 5n HCl en dioxano a 15-30°, y el grupo FMOC- con una solución del 5 al 50% en peso de dimetilamina, dietilamina o piperidina en DMF a 15-30°.

Los grupos protectores que pueden separarse hidrogenoliticamente (por ejemplo CBZ o bencilo), pueden disociarse por ejemplo a través del tratamiento con hidrógeno en presencia de un catalizador (por ejemplo de un catalizador de metal noble como paladio, de manera conveniente en un portador como carbón). Como disolventes son adecuados los arriba mencionados, en particular por ejemplo alcoholes como metanol, etanol o amidas como DMF. La hidrogenólisis se efectúa por lo general a temperaturas de entre 0 y 100° y a una presión de entre aproximadamente 1 y 200 bar, preferentemente a 20-30° y 1-10 bar. Una hidrogenólisis del grupo CBZ se logra por ejemplo de forma adecuada en 5 a 10 % en peso de Pd/C en metanol o con formiato de amonio (en lugar de hidrógeno) en Pd/C en metanol/DMF a 20-30°.

La transformación de un radical R6 = H en un radical R6 = F puede efectuarse mediante la reacción con Selectfluort® en un disovente, como por ejemplo en THF.

Sales farmacéuticas y otras formas

Los compuestos mencionados acordes a la invención pueden utilizarse en su forma no salina definitiva. Por otra parte, la presente invención comprende también la utilización de estos compuestos en forma de sus sales farmacéuticamente aceptables que pueden ser derivadas de diferentes ácidos y bases orgánicos e inorgánicos, de acuerdo con procedimientos especializados conocidos. Las formas de sal farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la fórmula I, en su mayor parte, se producen de modo convencional. Siempre que el compuesto de la fórmula I contenga un grupo de ácido carboxílico, una de sus sales adecuadas puede formarse al hacer reaccionar el compuesto con una base adecuada para formar una sal de adición básica correspondiente. Las bases de esta clase son, por ejemplo, los hidróxidos de metales alcalinos, entre ellos el hidróxido de potasio, hidróxido de sodio y el hidróxido de litio; hidróxidos de metales de tierra alcalina como hidróxido de bario e hidróxido de calcio; alcoholatos de metales alcalinos, por ejemplo etanolato de potasio y propanolato de sodio; así como diferentes bases orgánicas como piperidina, dietanolamina y N-metilglutamina. Se consideran igualmente las sales de aluminio de los compuestos de la fórmula I. En el caso de determinados compuestos de la fórmula I, las sales de adición básica pueden formarse debido a que estos compuestos son tratados con ácidos orgánicos e inorgánicos farmacéuticamente aceptables, por ejemplo haluros de hidrógeno como cloruro de hidrógeno, bromuro de hidrógeno

o yoduro de hidrógeno, otros ácidos minerales y sus sales correspondientes, como sulfato, nitrato o fosfato y similares, así como alquilsulfonatos y monoarilsulfonatos, como etanosulfonato, toluenosulfonato y bencenosulfonato, así como otros ácidos orgánicos y sus sales correspondientes, como acetato, trifluoracetato, tartrato, maleato, succinato, citrato, benzoato, salicilato, ascorbato y similares. Conforme a ello, entre las sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la fórmula I figuran las siguientes: acetato, adipato, alginato, arginato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato (besilato), bisulfato, bisulfito, bromuro, butirato, alcanforato, alcanforsulfonato, caprilato, cloruro, clorobenzoato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dihidrógeno fosfato, dinitrobenzoato, dodecilsulfato, etanosulfonato, fumarato, galacterato (del ácido múcico), galacturonato, glucoheptanoato, gluconato, glutamato, glicerofosfato, hemisuccinato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hipurato, hidrocloruro, hidrobromuro, hidroyoduro, 2-hidroxietanosulfonato, yoduro, isetionato, isobutirato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, metafosfato, metanosulfonato, metilbenzoato, monohidrogenfosfato, 2-naftalensulfonato, nicotinato, nitrato, oxalato, oleato, pamoato, pectinato, persulfato, fenilacetato, 3-fenilpropionato, fosfato, fosfonato, ftalato, lo cual sin embargo no debe considerarse de forma restrictiva.

Asimismo, entre las sales base de los compuestos acordes a la invención figuran las sales de aluminio, amonio, calcio, cobre, hierro(III), hierro(II), litio, magnesio-, manganeso(III)-, manganeso(II), potasio, sodio y cinc, lo cual sin embargo no debe considerarse de forma restrictiva. Con relación a las sales mencionadas arriba, se consideran preferentes las sales de amonio; las sales de metales alcalinos sodio y potasio, así como las sales de metales de tierra alcalina calcio y magnesio. Entre las sales de los compuestos de la fórmula I, derivadas de bases orgánicas no tóxicas, farmacéuticamente aceptables, figuran sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas, entre éstas también aminas sustituidas de forma natural, aminas cíclicas, así como resinas básicas de intercambio iónico, por ejemplo arginina, betaína, cafeína, cloroprocaína, colina, N,N’-dibenciletilendiamina (benzatina), diciclohexilamina, dietanolamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etilmorfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, iso-propilamina, lidocaína, lisina, meglumina, N-metil-D-glucamina, morfolina, piperazina, piperidina, resinas de poliamina, procaína, purina, teobromina, trietanolamina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, así como tris-(hidroximetil)-metilamina (trometamina), lo cual sin embargo no debe considerarse de forma restrictiva.

Los compuestos de la presente invención que poseen grupos básicos que contienen nitrógeno pueden ser cuaternizados a través de medios como (C1-C4) halogenuros de alquilo, por ejemplo cloruro, bromuro y yoduro de metilo, de etilo, de isopropilo y de butilo terciario; Di(C1-C4) alquil sulfatos, por ejemplo sulfato de dimetilo, de dietilo y de diamilo; (C10-C18)halogenuros de alquilo, por ejemplo cloruro, bromuro y yoduro de decilo, dodecilo, laurilo, miristilo y estearilo; así como (C1-C4)halogenuros de alquilo, por ejemplo cloruro de bencilo y bromuro de fenetilo. Mediante sales de esta clase pueden preparase tanto compuestos acordes a la invención solubles en agua como solubles en aceite.

Con relación a las sales farmacéuticas mencionas anteriormente, se consideran preferentes el acetato, tifluoracetato, besilato,citrato, fumarato, gluconato, hemisuccinato, hipurato, hidrocloruro, hidrobromuro, isetionato, mandelato, meglumina, nitrato, oleato, fosfonato, pivalato, fosfato de sodio, estearato, sulfato, sulfosalicilato, tartrato, tiomalato, tosilato y trometamina, lo cual sin embargo no debe considerarse de forma restrictiva.

Las sales de adición ácida de compuestos básicos de la fórmula I se producen debido a que la forma base libre es puesta en contacto con una cantidad suficiente del ácido deseado, de manera que la sal se presenta del modo tradicional. La base libre puede ser regenerada al poner en contacto la forma de sal con una base, aislando la base libre del modo tradicional. Las formas de base libres se diferencian en cierto modo de sus formas de sal correspondientes con respecto a determinadas propiedades físicas, como la solubilidad en disolventes polares; no obstante, dentro del marco de la presente invención, las sales corresponden a sus respectivas formas de base libres.

Tal como se ha indicado, las sales de adición básica de los compuestos de la fórmula I, farmacéuticamente aceptables, se forman con metales o aminas como metales alcalinos y metales de tierra alcalina o con aminas orgánicas. El sodio, potasio, magnesio y calcio se consideran metales preferentes. Como aminas orgánicas preferentes se consideran la N,N’-dibenziletilendiamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilendiamina, N-metilD-glucamina y procaína.

Las sales de adición básica de compuestos ácidos acordes a la invención se producen debido a que la forma del ácido libre es puesta en contacto con una cantidad suficiente de la base deseada, de manera que la sal se presenta del modo tradicional. El ácido libre puede ser regenerado al poner en contacto la forma de la sal con un ácido, aislando el ácido libre del modo tradicional. Las formas de ácidos libres se diferencian en cierto modo de sus formas de sal correspondientes con respecto a determinadas propiedades físicas, como la solubilidad en disolventes polares; no obstante, dentro del marco de la presente invención, las sales corresponden a sus respectivas formas de ácidos libres.

Si un compuesto acorde a la invención contiene más de un grupo que puede formar sales farmacéuticamente aceptables de esta clase, entonces la invención comprende también sales múltiples. Entre las formas de sales múltiples típicas figuran por ejemplo el bitartrato, diacetato, difumarato, dimeglumina, difosfato, sal disódica, y trihidrocloruro, lo cual sin embargo no debe considerarse de forma restrictiva.

Con respecto a lo mencionado anteriormente, puede observarse que, dentro de este contexto, la expresión "sal farmacéuticamente aceptable" debe comprenderse como una sustancia activa que contiene un compuesto de la fórmula I en forma de una de sus sales, en particular cuando esta forma de sal, en comparación con la forma libre de la sustancia activa o de otra forma de sal de la sustancia activa, utilizada anteriormente, proporciona a la sustancia activa propiedades farmacocinéticas mejoradas. La forma de sal farmacéuticamente aceptable de la sustancia activa puede también otorgar a esta sustancia activa primero una propiedad farmacocinética deseada de la que antes no disponía, e incluso puede influenciar positivamente la farmacodinámica de esta sustancia activa con respecto a su efectividad terapéutica en el cuerpo.

Además, son objeto de la presente invención los medicamentos que contienen al menos un compuesto de la fórmula I y/o sus sales, solvatos y estereoisómeros que pueden utilizarse farmacéuticamente, incluyendo las mezclas de los mismos en cualquier proporción, así como eventualmente excipientes y/o adyuvantes.

Las formulaciones farmacéuticas pueden presentarse en forma de unidades de dosis que contienen una cantidad determinada de sustancia activa por unidad de dosis. A modo de ejemplo, una unidad de esta clase puede contener de 0,5 mg a 1 g, preferentemente de 1 mg a 700 mg, y de forma especialmente preferente de 5 mg a 100 mg de un compuesto acorde a la invención, según el estado de la enfermedad tratada, la vía de administración y la edad, peso y estado del paciente; o las formulaciones farmacéuticas pueden presentarse en forma de unidades de dosis que contengan una cantidad predeterminada de sustancia activa por unidad de dosis. Se consideran formulaciones de unidades de dosis preferentes aquellas que, tal como se indicó anteriormente, contienen una dosis diaria o una dosis fraccionada, o una fracción correspondiente, de una sustancia activa. Las formulaciones farmacéuticas de esta clase, asimismo, pueden ser producidas mediante un procedimiento conocido de forma general en el área farmacéutica.

Las formulaciones farmacéuticas pueden adaptarse para ser administradas por cualquier vía apropiada, por ejemplo por vía oral (inclusive bucal o sublingual), rectal, nasal, local (inclusive bucal, sublingual o transdérmica), vaginal o parenteral (inclusive subcutánea, intramuscular, intravenosa o intradérmica). Las formulaciones de esta clase pueden producirse mediante todos los procedimientos conocidos en el área farmacéutica, por ejemplo reuniendo la sustancia activa con el o los excipientes o adyuvantes.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para ser administradas por vía oral pueden presentarse como unidades separadas, por ejemplo como cápsulas o comprimidos; polvo o granulados; soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; espumas o cremas comestibles; emulsiones líquidas de aceite en agua o emulsiones líquidas de agua en aceite.

De este modo, en el caso de una administración por vía oral, por ejemplo en forma de un comprimido o una cápsula, los componentes de la sustancia activa pueden combinarse con un excipiente inerte oral, no tóxico y farmacéuticamente aceptable, como por ejemplo etanol, glicerina, agua, entre otros. Los polvos se preparan trirurando el compuesto hasta lograr un tamaño fino adecuado y mezclándolo con un excipiente triturado farmacéuticamente de forma similar, por ejemplo con un hidrato de carbono comestible, como por ejemplo almidón o manitol. Eventualmente pueden agregarse también aromatizantes, conservantes, dispersantes y colorantes.

Las cápsulas se preparan realizando una mezcla en polvo tal como se describió más arriba y llenando con ella cápsulas de gelatina moldeada. Antes del proceso de llenado, a la mezcla en polvo se pueden agregar deslizantes y lubricantes, como por ejemplo ácido silícico, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio o polietilenglicol en

forma sólida. En caso necesario, puede añadirse también un agente disgregante o un agente solubilizante, como por ejemplo agar-agar, carbonato de calcio o carbonato sódico, para mejorar la disponibilidad del medicamento después de ingerir la cápsula.

Además, en caso de que sea necesario o si así se lo desee, pueden incorporarse a la mezcla también agentes aglutinantes, lubricantes, disgregantes o colorantes. Entre los aglutinantes adecuados figuran el almidón, gelatina, azúcares naturales, como por ejemplo glucosa o beta lactosa, edulcorantes a base de maíz, gomas naturales y sintéticas, como por ejemplo goma arábica, goma tragacanto o alginato sódico, carboximetilcelulosa, polietilenglicol, ceras, entre otros. Entre los lubricantes utilizados en estas formas de dosis figuran el oleato sódico, estearato sódico, estearato de magnesio, benzoato sódico, acetato sócido, cloruro sódico, entre otros. Entre los agentes disgregantes, de forma no restrictiva, figuran el almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, xantano, entre otros. Los comprimidos se formulan, por ejemplo, preparando, granulando o comprimiendo en seco una mezcla en polvo, añadiendo un lubricante y un agente disgregante y comprimiendo todo. Una mezcla en polvo se prepara mezclando de forma adecuada un compuesto triturado con un diluyente o con una base, tal como se describió anteriormente y, eventualmente, con un aglutinante, como por ejemplo carboximetilcelulosa, con un alginato, gelatina o polivinil pirrolidón, con un retardador de disolución, como por ejemplo parafina, con un acelerador de resorción, como por ejemplo una sal cuaternaria y/o un agente de absorción, como por ejemplo bentonita, caolinita o fosfato dicálcico. La mezcla en polvo puede ser granulada por ejemplo humedeciendo un aglutinante, como por ejemplo jarabe, pasta de almidón, mucílago de acadia o soluciones a base de celulosa o materiales de polímeros, y prensándola a través de un tamiz. De forma alternativa con respecto a la granulación, la mezcla en polvo puede ser procesada por una pastilladora, donde se producen grumos conformados de forma irregular que se rompen en gránulos. Los granulados pueden ser lubricados agregando ácido esteárico, una sal de estearato, talco o aceite mineral para impedir que se adhieran a los moldes de los comprimidos. La mezcla lubricada es entonces prensada para formar los comprimidos. Los compuestos acordes a la invención pueden ser combinados también con un excipiente inerte de flujo libre y ser entonces prensados directamente para formar comprimidos sin la realización del paso de granulación o de compresión en seco. Puede estar presente una capa protectora transparente u opaca, compuesta por un sellado de goma laca, una capa de azúcar o de material de polímeros y una capa de brillo de cera. A estos recubrimientos se les puede agregar colorantes para poder diferenciar entre unidades de dosis diferentes.

Los líquidos orales, como por ejemplo soluciones, jarabes y elixires, pueden prepararse en forma de unidades de dosis, de manera que una cantidad indicada comprenda una cantidad predeterminada del compuesto. Los jarabes pueden prepararse disolviendo el compuesto en una solución acuosa con un sabor adecuado, mientras que los elixires se preparan utilizando un vehículo (excipiente) alcohólico no tóxico. Las suspensiones pueden ser formuladas a través de la dispersión del compuesto en un vehículo no tóxico. Eventualmente pueden agregarse agentes solubilizantes y emulsionantes, como por ejemplo, entre otros, alcoholes isoestearílicos etoxilados y sorbitoléter de polioxietileno, conservantes, aditivos saborizantes, como por ejemplo aceite de menta o edulcorantes naturales o sacarina, u otros edulcorantes artificiales.

Las formulaciones de las unidades de dosis para administración por vía oral, eventualmente, pueden incluirse en microcápsulas. Las formulaciones pueden prepararse de manera que la liberación se prolongue o se retarde, por ejemplo a través del recubrimiento o la inclusión del material particulado en polímeros, cera, entre otros.

Los compuestos de la fórmula I, así como las sales y solvatos de éstos pueden ser administrados también en forma de sistemas de suministro de liposomas, como por ejemplo vesículas unilamerales pequeñas, vesículas unilamerales grandes y vesículas multilamerales. Los liposomas pueden formarse a partir de diferentes fosfolípidos, como por ejemplo colesterol, estearilamina o fosfatidilcolina.

Los compuestos de la fórmula I, así como las sales y solvatos de los mismos pueden suministrarse también utilizando anticuerpos monoclonales como portadores individuales, a los que pueden acoplarse las moléculas del compuesto. Los compuestos también pueden acoplarse a polímeros solubles como excipientes dirigidos a una diana determinada. Los polímeros de esta clase pueden comprender polivinil pirrolidón, copolímero de pirano, polihidroxi propil metacrilamida fenol, polihidroxi etil aspartamida fenol o polietilenglicol polilisina, sustituido con radicales de palmitoil. Asimismo, los compuestos pueden acoplarse a un tipo de polímeros biológicamente degradables que son adecuados para lograr una liberación controlada de una sustancia medicinal, por ejemplo ácidos polilácticos, poli epsilon caprolactona, ácido polihidroxibutírico, poli-orto-éster, poliacetal, poli dihidroxipirano, policianoacrilato y copolímeros en bloque reticulados transversalmente o anfipáticos de hidrogeles.

Las formulaciones adaptadas para una administración transdérmica pueden presentarse como emplastos individuales para un contacto prolongado y próximo con la epidermis del receptor. De este manera, a modo de ejemplo, la sustancia activa puede suministrarse desde el emplasto mediante iontoforesis, tal como se describe de modo general en Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986).

Los compuestos farmacéuticos adaptados para ser administrados por vía tópica pueden ser formulados como pomadas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, sprays, aerosoles o aceites.

Para tratamientos del ojo o de otros tejidos, por ejemplo de la boca y de la piel, las formulaciones se aplican preferentemente como cremas o pomadas tópicas. En el caso de la formulación de una pomada, la sustancia activa puede ser empleada con una base de crema parafínica o que pueda mezclarse con agua. De forma alternativa, la sustancia activa puede ser formulada para formar una crema con una base de crema de agua en aceite o una base de aceite en agua.

Entre las formulaciones farmacéuticas adaptadas para una aplicación tópica en el ojo figuran las gotas oftálmicas, donde la sustancia activa se encuentra disuelta o suspendida en un excipiente adecuado, en especial en un disolvente acuoso.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para una aplicación tópica en la boca comprenden pastillas, comprimidos para chupar y enjuagues bucales.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para ser administradas por vía rectal pueden presentarse en forma de supositorios o de lavativas.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para ser administradas por vía nasal, en las cuales la sustancia portadora es una sustancia sólida, contienen un polvo grueso con un tamaño de las partículas dentro del rango de 20-500 micrómetros que se suministra del mismo modo en el que se utiliza el rapé, es decir, a través de una inhalación rápida a través de las vías nasales desde un contenedor con el polvo que se sostiene de forma próxima a las vías nasales. Las formulaciones adaptadas para ser administradas como espray nasal o gotas para la nariz, con un líquido como sustancia portadora, comprenden soluciones de sustancia activa en agua o aceite.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para ser administradas a través de inhalación comprenden polvos de partículas finas o niebla que pueden ser producidas mediante diferentes tipos de dosificadores que se encuentran bajo presión, con aerosoles, nebulizadores o insufladores.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para ser administradas por vía vaginal pueden presentarse como pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o formulaciones en forma de espray.

Entre las formulaciones farmacéuticas adaptadas para ser administradas por vía parenteral figuran las soluciones para inyección estériles acuosas y no acuosas que contienen antioxidantes, tampones químicos, bacteriostatos y solutos, a través de las cuales la formulación se realiza isotónicamente con la sangre del receptor a ser tratado; así como suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden contener agentes de suspensión y espesantes. Las formulaciones pueden presentarse en dosis individuales o en envases para varias dosis, por ejemplo en ampollas y frascos sellados, y pueden almacenarse en un estado deshidratado por congelación (liofilizado), de manera que sólo se requiera el agregado del líquido portador estéril, por ejemplo agua a los fines de una inyección, inmediatamente antes de la utilización. Las soluciones para inyección y las suspensiones preparadas de acuerdo con una receta pueden prepararse en base a polvos estériles, granulados y comprimidos.

Se entiende que las formulaciones, junto con los componentes especialmente mencionados más arriba, pueden contener otros agentes utilizados habitualmente en esta área especializada, relativos al respectivo tipo de formulación; de este modo, por ejemplo, las formulaciones adaptadas para ser administradas por vía oral pueden contener sustancias saborizantes.

Una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula I depende de una serie de factores, inclusive por ejemplo de la edad y peso del animal, del estado exacto de la enfermedad que requiere el tratamiento, así como de su gravedad, del estado de la formulación, así como de la vía de administración y, por último, es determinada por el médico o veterinario que se encuentre a cargo del tratamiento. No obstante, por lo general, una cantidad efectiva de un compuesto acorde a la invención, para el tratamiento de crecimiento neoplástico, por ejemplo en el caso de carcinoma de intestino grueso o de pecho, se ubica dentro del rango de 0,1 a 100 mg/kg del peso corporal del receptor (del mamífero) por día y, de forma típica, dentro del rango de 1 a 10 mg/kg del peso corporal por día. De este modo, en el caso de un mamífero adulto con un peso de 70 kg, la cantidad efectiva por día sería por lo general de entre 70 y 700 mg, donde esa cantidad puede ser administrada como dosis individual por día o, del modo más habitual, en una serie de dosis fraccionadas (por ejemplo dos, tres, cuatro, cinco o seis) por día, de manera que la cantidad diaria total de la dosis es la misma. Una cantidad efectiva de una sal o solvato, o de un derivado fisiológicamente funcional de éstos, puede determinarse por sí misma como parte de la cantidad efectiva del compuesto acorde a la invención. Puede suponerse que son adecuadas dosis similares para el tratamiento de los otros estados de la enfermedad, mencionados anteriormente.

Además, son objeto de la presente invención los medicamentos que contienen al menos un compuesto de la fórmula I, y/o sus sales, solvatos y estereoisómeros que pueden utilizarse farmacéuticamente, incluyendo las mezclas de los mismos en cualquier proporción, y al menos otro componente activo del medicamento.

Es objeto de la presente invención también un conjunto (kit) compuesto por envolturas separadas de

(a): una cantidad efectiva de un compuesto de la fórmula I y/o sus sales, solvatos y estereoisómeros que pueden utilizarse farmacéuticamente, incluyendo las mezclas de los mismos en cualquier proporción, y

(b): una cantidad efectiva de otro componente activo del medicamento.

El conjunto comprende recipientes adecuados, como cajas o cajas de cartón, botellas individuales, bolsas o ampollas. El conjunto puede por ejemplo comprender ampollas separadas en las cuales respectivamente se encuentra presente, disuelta o de forma liofilizada, una cantidad efectiva de un compuesto de la fórmula I y/o sus sales, solvatos y estereoisómeros que pueden utilizarse farmacéuticamente, incluyendo las mezclas de los mismos en cualquier proporción, y una cantidad efectiva de otra sustancia activa del medicamento.

UTILIZACIÓN

Los presentes compuestos son adecuados como sustancias farmacéuticamente activas para mamíferos, en especial para los seres humanos, en el tratamiento y el control de enfermedades cancerosas.

La presente invención comprende la utilización de los compuestos de la fórmula I y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables, para preparar un medicamento para el tratamiento o la prevención del cáncer. Los carcinomas considerados especialmente para el tratamiento pertenecen al grupo del carcinoma cerebral, carcinoma del tracto urogenital, carcinoma del sistema linfático, carcinoma de estómago, carcinoma de laringe y carcinoma pulmonar o cáncer intestinal. Otro grupo de formas de cáncer consideradas son la leucemia monicítica, adenocarcinoma pulmonar, carcinoma pulmonar microcelular, carcinoma pancreático, glioblastoma y carcinoma de pecho.

Se encuentra comprendida también la utilización de los compuestos de la fórmula I y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables, para preparar un medicamento para el tratamiento y/o para combatir una enfermedad condicionada por tumores en un mamífero, donde, conforme a este procedimiento, a un mamífero enfermo que necesita un tratamiento de este tipo se le administra una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto acorde a la invención. La cantidad terapéutica depende de la respectiva enfermedad y puede ser determinada por el experto sin realizar una gran inversión.

La utilización se considera especialmente preferente para el tratamiento de una enfermedad, donde la enfermedad consiste en un tumor sólido.

De forma preferente, el tumor sólido se selecciona del grupo de los tumores del epitelio escamoso, de la vejiga, del estómago, de los riñones, de cabeza y cuello, del esófago, del cuello uterino, de la glándula tiroides, del intestino, del hígado, del cerebro, de la próstata, del tracto urogenital, del sistema lifático, del estómago, de la laringe y/o del pulmón.

De forma aún más preferente, el tumor se selecciona del grupo conformado por el adenocarcinoma pulmonar, carcinoma pulmonar microcelular, cáncer de páncreas, glioblastoma, carcinoma de cólon y carcinoma de pecho.

Aún más preferente se considera la utilización para el tratamiento de un tumor del sistema sanguíneo e inmune, preferentemente para el tratamiento de un tumor seleccionado del grupo de las leucemias mieloides agudas, de la leucemia mieloide crónica, de la leucemia linfática aguda y/o de la leucemia linfática crónica.

Además, es objeto de la presente invención la utilización de los compuestos acordes a la invención para el tratamiento de patologías óseas, donde la patología ósea proviene del grupo del osteosarcoma, osteoartritis y raquitismo.

Los compuestos de la fórmula I pueden administrarse también junto con agentes terapéuticos bien conocidos que se seleccionan para la afección a ser tratada en base a su respectiva idoneidad. Los presentes compuestos son adecuados también para ser combinados con agentes anticancerígenos conocidos. Entre estos agentes anticancerígenos conocidos figuran los siguientes: moduladores de receptor de estrógeno, moduladores de receptor de andrógeno, moduladores de receptor de retinoide, agentes citotóxicos, agentes antiproliferativos, inhibidores de proteina prenil transferasa, inhibidores de HMG-CoA reductasa, inhibidores de VIH proteasa, inhibidores de transcriptasa reversa, así como otros inhibidores de angiogénesis. Los presentes compuestos son adecuados en particular para un empleo junto con radioterapia.

El término "moduladores de receptor de estrógeno" hace referencia a compuestos que interfieren en la unión de estrógeno con el receptor o que lo inhiben, independientemente de cómo esto suceda. Entre los moduladores de receptor de estrógeno figuran, por ejemplo, tamoxifeno, raloxifeno, idoxifeno, LY353381, LY 117081, toremifeno,

fulvestrant, 4- [7- (2,2,- dimetil- -1- oxopropoxi- 4- metil- 2-[4- [-2, (1- piperidinil) etoxi]fenil]-2H-1-benzopirano-3 il] fenil-2,2- dimetilpropanoato, 4, 4’-dihidroxibenzofenona- 2,4- dinitrofenilhidrazona y SH646, lo cual sin embargo no debe considerarse de forma restrictiva.

El término "moduladores de receptor de andrógeno" hace referencia a compuestos que interfieren en la unión de andrógeno con el receptor o que lo inhiben, independientemente de cómo esto suceda. Entre los moduladores de receptor de andrógeno figuran, por ejemplo, finasterida y otros 5a-inhibidores de reductasa, nilutamida, flutamida, bicalutamida, liarozol y acetato de abiraterona.

El término "moduladores de receptor de retinoide" hace referencia a compuestos que interfieren en la unión de retinoides con el receptor o que lo inhiben, independientemente de cómo esto suceda. Entre los moduladores de receptor de retinoide de esta clase figuran, por ejemplo, bexaroteno, tretinoina, 13- cis- ácido retinoico, 9- cis- ácido retinoico, a- difluorometilornitina, ILX23-7553, trans- N-(4’- hidroxifenil)retinamida y N-4-carboxifenilretinamida.

El término "agentes citotóxicos" hace referencia a compuestos que, en primer lugar, a través de un efecto directo sobre la función celular, conducen a la muerte celular, o a compuestos que inhiben la meiosis celular o interfieren en la misma; entre éstos figuran agentes alquilantes, factores de necrosis tumoral, agentes intercalantes, inhibidores de microtúbulos e inhibidores de topoisomerasa.

Entre los agentes citotóxicos figuran por ejemplo la tirapazimina, sertenef, cachectina, ifosfamida, tasonermina, lonidamina, carboplatina, altretamina, prednimustina, dibromodulcito, ranimustina, fotemustina, nedaplatina, oxaliplatina, temozolomida, heptaplatina, estramustina, tosilato de improsulfano, trofosfamida, nimustina, cloruro de dibrospidio, pumitepa, lobaplatina, satraplatina, profiromicina, cisplatina, irofulveno, dexifosfamida, cis- dicloruro de amina (2-metilpridina) platina, bencilguanina, glufosfamida, GPX100, (trans, trans, trans)- bis- mu- (hexano-1,6, 6diamina)- mu-[diamina- platina(II)]bis [diamina(cloro)platina(II)]-tetracloruro, diarizidinilspermina, trióxido de arsénico 1- (11- dodecilamino- 10- hidroxiundecil)- 3, 7- dimetilxantina, zorubicina, idarubicina, daunorubicina, bisantreno, mitoxantrona, pirarubicina, pinafida, valrubicina, amrubicina, antineoplaston, 3’- desamino- -3,7’- morfolino- 13desoxo -10- hidroxicarminomicina, annamicina, galarubicina, elinafida, MEN10755 y 4- desmetoxi- -3- desamino- 3aziridinil- -4- metilsulfonil- daunorubicina (véase la solicitud WO 00/50032), lo cual sin embargo no debe considerarse de forma restrictiva.

Entre los inhibidores de microtúbulos figuran, por ejemplo, paclitaxel, sulfato de vindesina, 3’,4’-dideshidro-4’- desoxi8’-norvincaleucoblastina, docetaxol, rizoxina, dolastatina, isetionato de mivobulina, auristatina, cemadotina, RPR109881, BMS184476, vinflunina, criptoficina, 2,3,4,5,6-pentafluor- N-(3-fluor-4-metoxifenil) benzolsulfonamida, anhidrovinblastina, N,N- dimetil- L- valil- L- valil- N- metil- L- valil- L- prolil- L- prolin- t- butilamida, TDX258 y BMS188797. Son inhibidores de topoisomerasa, por ejemplo, topotecán, hicaptamina, irinotecán, rubitecán, 6etoxipropionil-3’,4’-O-exo-benciliden-cartreusina, 9-metoxi-N,N-dimetil-5-nitropirazolo[3,4,5-kl]acridina-2(6H)propanoamina, 1-amino-9-etil-5-flúor-2,3-dihidro-9-hidroxi-4-metil-1H,12H-benzo [de] pirano[3’,4’:b,7]indolizino [1,2b]quinolina-10,13 (9H,15H)-diona, lurtotecán, 7-[2-(N-isopropilamino)etil]-(20S)camptotecina, BNP1350, BNPI1100, BN80915, BN80942, etoposid-fosfato, teniposida, sobuzoxano, 2’-dimetilamino-2’-desoxi- etopósido, GL331, N-[2-(dimetilamino) etil]-9-hidroxi-5,6-dimetil-6H-pirido [4,3-b]carbazol-1-carboxamida, asulacrina, (5a,5aB,8aa,9b)-9-[2-[N-[2-(dimetilamino)etil]-N-metilamino]etil] -5-[4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil]- 5,5a,6,8,8a,9hexohidrofuro(3’,4’:6,7) nafto(2,3-d)- 1,3-dioxol-6-ona, 2,3-(metilendioxi) -5-metil-7-hidroxi-8-metoxibenzo [ c]fenantridinio, 6,9-bis[(2-aminoetil) amino]benzo [g] isoquinolina-5,10-diona, 5-(3-aminopropil amino)- 7,10-dihidroxi-2(2-hidroxietilaminometil)-6H-pirazolo [4,5,1-de] -acridina-6-ona, N-[1-[2 (dietilamino) etilamino]-7- metoxi- 9-oxo-9Htioxanteno-4-ilmetil] formamida, N-(2-(dimetilamino)-etil) acridina-4-carboxamida, 6-[[2-(dimetilamino) etil]amino] -3hidroxi-7H-indeno [2,1-c]quinolina-7-ona y dimesna.

Entre los "agentes antiproliferativos" figuran los oligonucleótidos RNA y DNA antisentido como G3139, ODN698, RVASKRAS, GEM231 e INX3001, así como antimetabolitos como enocitabina, carmofur, tegafur, pentostatina, doxifluridina, trimetrexato, fludarabina, capecitabina, galocitabina, octofosfato de citarabina, hidrato de sodio de fosteabina, raltitrexed, paltitrexid, emitefur, tiazofurina, decitabina, nolatrexed, pemetrexed, nelzarabina, 2’-desoxi- 2’-metiliden - citidina, 2’-flúor metilen-2’-desoxicitidina, N-[5-(2,3-dihidrobenzofuril)- sulfonil]-N’-(3,4-diclorofenil) urea, N6-[4-desoxi- 0,4-[N2-[2(E),4(E)-tetra decadienoil] -glicilamino]-L-glicero-B-L-manoheptopiranosil]adenina, aplidin, ecteinascidina, troxacitabina, ácido 4-[2-amino-4-oxo-4,6,7,8-tetrahidro-3H-pirimidino[5,4-b][1,4]tiazina-6- il-(S)-etil]2,5-tienoil-L-glutamínico, aminopterina, 5-flurouracil, alanosina, éster de ácido acético11-acetil-8-(carbamoiloximetil)4-formil-6-metoxi-14-oxa-1,11-diazatetraciclo(7.4.1.0.0)-tetradeca-2,4,6-trien-9-ilo, swainsonina, lometrexol, dexrazoxano, metioninasa, 2’-cian-2’-desoxi-N4-palmitoil-1-B-D-arabinofuranosilcitosina y 3-aminopiridin-2carboxaldehído- tiosemicarbazona. Los “agentes antiproliferantivos” comprenden, también, otros anticuerpos monoclonales contra los factores del crecimiento diferentes de los que se han indicado ya entre los “inhibidores de la angiogénesis”, como el trastuzumab, así como supresores de tumores, como el p53, que pueden ser secretados mediante transferencia genética recombinante a través de virus (véase por ejemplo la patente norteamericana US Nº 6,069,134).

Prueba de efectividad de inhibidores farmacológicos en cuanto a la proliferación/vitalidad de células tumorales in vitro.

1. Precedentes

En la presente descripción de una prueba se describe la inhibición de la proliferación de células tumorales / vitalidad de células tumorales a través de sustancias activas.

Las células se siembran a una densidad celular adecuada en placas de microtitulación (formato de 96 pocillos) y se agregan las sustancias de prueba en forma de una serie de concentración. Después de otros cuatro días de cultivo en un medio a base de suero, la proliferación de células tumorales / la vitalidad de las células tumorales puede determinarse mediante un sistema de prueba de azul de Alamar.

2. Ejecución del ensayo

2.1 Cultivo celular

Por ejemplo, líneas de células de carcinoma de cólon, líneas de células del ovario, líneas de células de la próstata o líneas de células del pecho, etc., que pueden adquirirse comercialmente.

Las células se cultivan en medio. A intervalos de varios días, las células se desprenden de las bandejas de cultivo con la ayuda de solución de tripsina y se siembran en una dilución adecuada en un medio fresco. Las células se cultivan a 37°Celsius y con un 10% de CO2.

2.2 Siembra de las células

Una cantidad definida de células (por ejemplo 2000 células) se siembra por cultivo/pocillo en un volumen de 180µl de medio de cultivo en placas de microtitulación (placas de cultivo de 96 pocillos) con una pipeta de varios canales. A continuación, las células se cultivan en una incubadora de CO2 (37°C y 10% de CO2).

2.3. Agregado de las sustancias de prueba

Las sustancias de prueba se disuelven por ejemplo en DMSO y seguidamente son introducidas en una concentración adecuada (eventualmente de una serie de dilución) en el medio de cultivo celular. Los grados de dilución pueden adecuarse según la eficiencia de las sustancias activas y la expansión deseada de las concentraciones. Las sustancias de prueba se mezclan en concentraciones adecuadas con el medio de cultivo celular. La adición de las sustancias de prueba a las células puede efectuarse el mismo día que tiene lugar la siembra de las células. Para ello se suministran respectivamente 20µl de la solución de sustancia desde la placa de pre-dilución hacia los cultivos/pocillos. Las células se cultivan otros 4 días a 37°Celsius y con un 10% de CO2.

2.4.: Medición de la reacción colorimétrica

Por pocillo se suministran respectivamente 20 µl de reactivo azul de Alamar y las placas de microtitulación se incuban por ejemplo durante otras siete horas en una incubadora (a 37°C y 10% de CO2). Las placas se miden en un lector con un filtro fluorescente con una longitud de onda de 540nm. Las placas pueden agitarse de forma leve directamente antes de la medición.

3.: Valoración

El valor de absortividad del control del medio (sin utilizar células ni sustancias de prueba) se resta de todos los otros valores de absortividad. Los controles (células sin sustancia de prueba) se fijan iguales al 100 por ciento, estableciéndose para ello una relación con todos los otros valores de absortividad (por ejemplo en % del control), expresado:

Cálculo:

100 * (valor con células y sustancia de prueba – valor del control del medio

valor con células – valor del control del medio

16 5

La determinación de valores IC50 (50% en peso de inhibición) tiene lugar con la ayuda de programas de estadística, como por ejemplo RS1. Los datos IC50 de los compuestos acordes a la invención se indican en la tabla 1.

4. Prueba para la inhibición de PDK1

Los ensayos se realizan en un sistema de Flashplate con una placa de microtitulación de 384 pocillos.

Por pocillo se incubaron respectivamente la muestra de PDK1 His6- PDK1 (�1 -50)( 3.4 nM), (h1- 1), el sustrato PDK1- biotina- bA-bA-KTFCGTPEYLAPEVRREP-RILSEEEQEMFRDFDYIADWC (400 nM), 4 µM ATP (con 0.2mCi33P- ATP/ pocillo) y la sustancia de prueba en 50µl de solución de prueba de uso común por 60 minutos a 30°C. Las sustancias de prueba se emplean en concentraciones correspondientes (eventualmente en una serie de dilución). El control se realiza sin sustancia de prueba. La reacción es detenida y lavada mediante métodos corrientes. La actividad de la quinasa es medida a través de la radiactividad incorporada en Topcount. Para determinar la reacción de quinasa no específica (valor en blanco) los ensayos se realizan en presencia de 100 nM de estaurosporina.

5. Valoración

La radiactividad (descomposición por minuto) del valor en blanco (sin utilizar sustancia de prueba en presencia de estaurosporina) se resta de todos los otros valores de radiactividad. Los controles (actividad de la quinasa sin sustancia de prueba) se fijan iguales al 100 por ciento, estableciéndose para ello una relación con todos los otros valores de radiactividad (por ejemplo en % del control), expresado:

Cálculo:

100 * (valor de la actividad de la quinasa con sustancia de prueba – valor en blanco

(valor del control – valor en blanco)

Material: Nº de referencia Fabricante

Placas: de microtitulación para (Nunclon Surface 96well Plate) 167008 Nunc

cultivo celular: (placa de 96 pocillos)

DMEM: P04-03550 Pan Biotech

PBS (10x) Dulbecco: 14200-067 Gibco

Placa de 96 pocillos (polipropileno): 267334 Nunc

AlamarBlue™ (azul de Alamar): BUF012B Serotec

FCS: 1302 Pan Biotech GmbH

Solución de tripsina/EDTA 10x: L 2153 Biochrom AG

Recipientes de cultivo de 75cm2: 353136 BD Falcon

A2780: 93112519 ECACC

Colo205: CCL222 ATCC

MCF7: HTB22 ATCC

PC3: CRL-1435 ATCC

Placas Flash de 384 pocillos: SMP410A001PK Perkin Elmer

APCI- MS (atmospheric pressure chemical ionization-mass spectrometry / ionización química por presión atmosférica - espectrometría de masas) (M+H)+.

Método para la prueba celular de inhibidores PDK1 quinasa en células PC3

El ensayo celular para determinar la actividad de PDK1 quinasa se realiza como ensayo Luminex en un formato de

5 96 pocillos. Células PC3 se siembran con 20.000 células por pocillo en 100 µl de medio (45% RPM11460 / 45% Ham’s F12 / 10% FCS) y se incuban el día siguiente por 30 minutos con una dilución serial de la sustancia de prueba (7 concentraciones) y condiciones libres de suero. A continuación, las células son lisadas con 90 µl de tampón químico de lisado (20mM Tris/HCl pH 8,0, 150mM NaCl, 1 % NP40, 10% glicerol, 1 % inhibidor de fosfatasa I, 1 % inhibidor de fosfatasa II, 0,1% coctel inhibidor de proteasa III, 0,01 % benzonasa) por pocillo, y los lisados se

10 separan mediante centrifugación de los componentes celulares insolubles a través de una placa de filtrado de 96 pocillos (0,65 µm). Los lisados son incubados mediante agitación a 4ºC con Luminex- Beads, a los que se acopla un anticuerpo PBK anti-total. Al día siguiente tiene lugar la detección mediante la adición de un anticuerpo fosfo-T308-PKB, así como de un anticuerpo secundario marcado de peroxidasa específico de la clase. La comprobación de fosfo - T308-PKB se efectúa a través de la medición en un aparato Luminex 100 mediante la determinación de 100

15 casos por cavidad en 60 segundos de tiempo de medición. Como blanco farmacológico se restan de todas las otras cargas las señales obtenidas de células que fueron tratadas con 10 µM de estaurosporina. Como valor de control de la fosforilación máxima de PKB en T308 se utilizan las señales de células que fueron tratadas sólo con el disolvente (0,3% DMSO). Los valores de las cargas tratadas con sustancia de prueba se calculan como porcentaje del control y los valores IC50 se determinan mediante RS1.

20 Descripción del método de HPLC preparativo:

Tipo de columna: Chromolith-prep RP-18e 100-25, Detección: UV 230 nM

Disolvente A: agua + 0,1% ácido trifluoroacético

Disolvente B: acetonitrilo + 0,1% ácido trifluoroacético

Tasa de flujo: 30 ml/min

25 Gradiente: 0 min 99% agua, 10 min 1 % agua

Descripción del método HPLC/MS:

Tipo de columna: Chromolith SpeedROD RP-18e 50-4,6mm

Disolvente A: agua + 0.05% ácido fórmico

Disolvente B: acetonitrilo + 0.04% ácido fórmico

30 Tasa de flujo: 2.4 mL/min

Gradiente: 0 min 4% B, 2.8 min 100% B

Los compuestos acordes a la invención se producen según el siguiente esquema:

Ejemplo 1

Producción de 4-[1-(3-fluor-fenil)-1-metoximetoxi-etil]-6-(2-bromo-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il)-pirimidina-2-ilamina ("A1"), 4-[1-(3-fluor-fenil)-1-metoximetoxi-etil]-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina- -2-ilamina

("A2"),

1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(3-fluor-fenil)-etanol ("A3"),

2-(3-fluor-fenil)-but-3-in-2-ol (12.73 g, 77.54 mmol) se disuelve en THF (350 ml), se baja la temperatura de la

solución de reacción a 0ºC mediante enfriamiento, y a continuación se agrega a modo de porciones una suspensión

5 de NaH (60% en peso, en aceite de parafina, 2.79 g, 93.05 mmol). Se calienta a temperatura ambiente, se agita

durante 30 minutos a temperatura ambiente y se agrega entonces éter metílico de clorometil (7.5 ml, 93.047 mmol).

La mezcla de reacción se agita otras 16 horas hasta completar la reacción a temperatura ambiente. Se agrega agua

lentamente y a continuación se diluye con acetato de etilo. La fase orgánica se lava con solución saturada de NaCI,

se seca mediante Na2SO4 y se concentra formando un residuo en vacío. El residuo se agrega en silica gel y se 10 limpia mediante cromatografía flash (petroléter: acetato de etilo 9:1). El producto se obtiene como un líquido

amarillento.

Las sustancias sólidas Cs2CO3 (1.072 g, 3.29 mmol), Cul (10 mg, 0.053 mmol), Pd(OAc)2 (25 mg, 0.11 mmol) y Mo (CO)6 (492 mg, 1.864 mmol) se colocan en un recipiente para reacción, a continuación se agregan uno tras otro 2

15 bromo-7-iodo-pirrolo[2,3-b]pirazina-5-carboxil-ácido terc.- butil éster (500 mg, 1.097 mmol) disuelto en CH3CN (7 ml) y 1-fluor-3-(1-metoximetoxi-1-metil-prop-2- inil)-benzol (343 mg, 1.65 mmol) disuelto en tolueno (7 ml). Finalmente se agrega P (tert-Bu)3 (0.140 ml, 0.551 mmol). La mezcla de reacción se agita durante 5 minutos a 80ºC. El disolvente se concentra en vacío y el residuo se utiliza inmediatamente en la siguiente reacción.

2-bromo-7-[4-(3-fluor-fenil)-4-metoximetoxi-pent-2-inoilo]-pirrolo[2,3-b]pirazina-5-ácido carboxílico- terc.- butil-éster (300 mg, 0.304 mmol) se disuelve en monometiléter de etilenglicol (15 ml), K2CO3 (252 mg, 1.823 mmol), se agrega carbonato de guanidina (219 mg, 1.216 mmol) y se agita durante 3 horas a 130°C. Se enfría a temperatura

5 ambiente, la mezcla de reacción se mezcla con acetato de etilo y la fase orgánica se extrae tres veces con agua. La fase orgánica se seca mediante Na2SO4, la sustancia sólida se filtra y el disolvente se concentra en vacío. El residuo continúa utilizándose directamente. Se obtiene 4-(2-bromo-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il)-6-[1-(3-fluor-fenil)-1metoximetoxi-etil]-pirimidina-2-ilamina ("A1") (HPLC/MS Rt=2.14 min, [M+H] 474).

4-(2-bromo-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il)-6-[1-(3-fluor-fenil)-1-metoxi-metoxi-etil]-pirimidina-2-ilamina (0.249g, 0.395 10 mmol) se disuelve en DMF (7 ml), se agregan 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolano-2-il)-1H-pirazol

(0.164 g, 0.790 mmol) y Pd[PPh3]4 (0.046 mg, 0.040 mmol), la solución de reacción se aclara 5 minutos con nitrógeno, a continuación se agrega una solución de 2N Na2CO3 (1.5 ml). Se agita durante 1 hora a 130ºC. Se baja la temperatura hasta alcanzar la temperatura ambiente, se mezcla con acetato de etilo, la fase orgánica se extrae tres veces con agua, se separa la fase acuosa y la fase orgánica se seca con sulfato de sodio. Se filtra la sustancia

15 sólida y el residuo se concentra en vacío. Éste se purifica mediante RP-HPLC y se obtiene 4-[1-(3-fluor-fenil)-1metoximetoxi-etil]- 6-[2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-2-ilamina ("A2"), (HPLC/MS Rt=1.72 min, [M+H] 475); 1H-NMR [DMSO-d6]: 5

[ppm] = 12.72 (br, 1 H), 8.72 (s, 1 H), 8.49 (m, 1H), 8.33 (s, 1 H), 8.31 (s, 1 H), 8.11 (s, 1 H), 7.43 (m, 1 H), 7.32 (m, 2H), 7.13 (m, 1 H), 4.79 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 1.98 (s, 3H);

20 IC50 [PDK1]= 1.2e-007 M; IC50 [P-PKB T308] 8.10e-007 M.

4-[1-(3-fluor-fenil)-1-metoximetoxi-etil]-6-[2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7- il]-pirimidina-2-ilamina (234 mg, 0.25 mmol) se disuelve en MeOH (10 ml), se agrega 25 % en peso de HCl (1 ml, 5.14 mmol) y se agita aproximadamente durante 1.5 horas a 50°C. El disolvente se concentra en vacío. El residuo se concentra mediante HPLC a través de RP- 18e. Se obtiene 1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]

25 pirimidina-4-il}- 1-(3-fluor-fenil)-etanol ("A3"); (HPLC/MS Rt=1.53 min, [M+H] 431);

1H-NMR [DMSO-d6]: 5[ppm] = 12.8 (br, 1 H), 8.75 (s, 1 H), 8.51 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 8.09 (s, 1 H),

7.45 (m, 3H), 7.20 (br, 2H), 3.96 (s, 3H); IC50 [PDK1]= 7.1e-008 M; IC50 [célula]= 5.3e-007 M.

Los siguientes compuestos se obtienen de forma análoga:

1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-fenil-etanol ("A4") HPLC/MS 413; IC50 [PDK1]= 5.5e-008 M; IC50 [célula]= 5.7e-007 M;

1H-NMR [DMSO-d6] 5[ppm] 12.9 (br, 1 H), 8.73 (s, 1 H), 8.53 (s, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 7.62 (m, 2H), 7.4-7.3 (m, 4H), 3.90 (s, 3H), 1.95 (s, 3H); 4-(1-metoximetoxi-1-fenil-etil)-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina- 2-ilamina ("A5")

HPLC/MS 457; IC50 [PDK1]= 9e-008 M; IC50 [célula]= 4.2e-007 M; 1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(2-fluor-fenil)- etanol ("A6")

10 HPLC/MS 431; IC50 [PDK1]= 3.1e-008 M; IC50 [célula]= 1.9e-007 M.

4-[1-(2-fluor-fenil)-1-metoximetoxi-etil]-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7- il]-pirimidina-2-ilamina ("A7")

HPLC/MS 475; IC50 [PDK1]= 7.7e-008 M; IC50 [célula]= 2.6e-007 M;

1H-NMR [DMSO-d6] 5[ppm] 12.57 (br, 1 H), 8.68 (s, 1 H), 8.43 (s, 1 H), 8.23 (s, 1 H), 8.18 (s, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 7.79 (t, J=7.8 Hz, 1 H), 7.41 (m, 1 H), 7.32 (t, J=7.32 Hz, 1 H), 7.11 (m, 1 H), 4.76 (dd, J = 22.6, 6.9 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H),

3.17 (s, 3H), 1.96 (s, 3H). (S)-1-{2-amino-6-[2-(1-meti)-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(2-fluor-fenil)- etanol ("A8")

estereoquímica absoluta desconocida; HPLC/MS 431; IC50 [PDK1]= 4.3e-008 M; IC50 [célula]= 5.7e-007 M;

10 1H-NMR [DMSO-d6] 5[ppm] 8.65 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.91 - 7.80 (m, 2H), 7.50 - 7.39 (m, 1H), 7.35 (td, J = 7.6, 1.1 Hz, 1H), 7.18 - 7.03 (m, 1H), 3.91 (d, J = 8.1 Hz, 3H), 2.01 (s, 3H). Separación mediante SFC: CO2 con 40% de metanol y 0.5% de dietilamina; Tipo de columna: Chiracel OJ-H, 250x4.6 mm, detección: 220 nM, Rt =1.81 min; (R)-1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(2-fluor-fenil)- etanol ("A9")

estereoquímica absoluta desconocida; HPLC/MS 431; IC50 [PDK1]= 4.7e-008 M; IC50 [célula]= 1.50e-007 M; Separación mediante SFC: CO2 con 40% de metanol y 0.5% de dietilamina; Tipo de columna: Chiracel OJ-H, 250x4.6 mm, detección: 220 nM, Rt =11.42 min; 1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-fenil-propano-1- ol ("A10")

1-(2-fluorfenil)-1-{2-metilamino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]pirimidina- 4-il}-etanol ("A11")

1-(2-fluorfenil)-1-{2-metoxi-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]pirimidina-4- il}-etanol ("A12")

1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-piridina-4-il-propano- 1-ol ("A13")

1-{2-metilamino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-piridina-4- il-propano-1-ol ("A14")

1-{2-dimetilamino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-piridina-4- il-propano-1ol ("A15")

1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-2-metil-1-fenilpropano- 1-ol ("A16")

(4-{7-[2-amino-6-(1-hidroxi-1-fenil-etil)-pirimidina-4-il]-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-2-il}-fenil)-acetonitrilo ("A17")

1-{2-amino-6-[2-(6-amino-piridina-3-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-fenil-etanol ("A18") 1-{2-amino-6-[2-(6-piperazina-1-il-piridina-3-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-fenil-etanol ("A19")

1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-2-dimetilamino-1- fenil-etanol ("A20")

2-(4-{7-[2-amino-6-(1-hidroxi-1-fenil-etil)-pirimidina-4-il]-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-2-il}-pirazol-1-il)-1- piperidina-1-iletanona ("A21")

2-(4-{7-[2-amino-6-(1-hidroxi-1-fenil-etil)-pirimidina-4-il]-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-2-il}-pirazol-1-il)1-(3,4- dihidro-1Hisoquinolina-2-il-etanona ("A22")

4-[1-(2-amino-etoxi)-1-(2-fluor-fenil)-etil]-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina- 2ilamina ("A23")

1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(2-fluor-fenil)-propano-1-ol ("A24"),

IC50 [PDK1]= 5.4e-008 M; IC50 [célula]= 9.20e-008 M;

1H-NMR [DMSO-d6] 5[ppm] 12.94 (br, 1 H), 8.71 (s, 1 H), 8.54 (s, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 8.09 (s, 1H), 7.91 (m, 2H), 7.44 (m, 1 H), 7.37 (t, J=7.5 Hz, 1 H), 7.16 (dd, J=11.6, 8.3 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 2.39 (m, 2H), 0.86 (t, J=7.2 Hz, 3H);

1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(3-fluor-fenil)-propano-1-ol ("A25")

IC50 [PDK1]= 3.60e-008 M; IC50 [célula]= 1.10e-007 M; 1H-NMR [DMSO-d6] 5[ppm] 12.97 (br, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.37 (s, 1 H), 8.25 (s, 1 H), 8.14 (s, 1H), 7.49

10 7.41 (m, 3H), 7.13 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 2.41 (m, 2H), 0.87 (m, 3H);

1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(3-fluor-piridina-4-il)-propano1-ol ("A26")

IC50 [PDK1]= 4.40e-008 M; IC50 [célula]= 5.80e-007 M;

1H-NMR [DMSO-d6] 5[ppm] 12.9 (br, 1 H), 8.73 (s, 1 H), 8.58-8.51 (m, 3H), 8.17 (s, 1 H), 8.13 (s, 1 H), 8.02 (s, 1 H),

7.87 (m, 1 H), 3.94 (s, 3H), 2.43 (m, 2H), 0.85 (m, 3H);

4-[1-(3-fluor-piridina-4-il)-1-metoximetoxi-propil]-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina7-il]-pirimidina2-ilamina ("A27")

IC50 [PDK1]= 9.00e-008 M; IC50 [célula]= 6.00e-007 M; HPLC/MS [M+] 490;

1-{2 amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-piridina-4-il-propano- 1-ol ("A28")

10 IC50 [PDK1]= 1.70e-008 M; IC50 [célula]= 1.60e-007 M;

1H-NMR [DMSO-d6] 5[ppm] 12.7 (br, 1H), 8.72 (m, 3H), 8.45 (d, 1 H), 8.37 (s, 1H), 8.36 (s, 1 H), 8.18 (s, 1 H), 7.99 (m, 2H), 6.45 (br, 1 H), 6.85 (br), 3.97 (s, 3H), 2.39 (m, 2H), 0.83 (t, J=5Hz, 3H);

(S)-1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(3-fluor-fenil)-propano-1-ol ("A29")

Enantiómero, estereoquímica absoluta desconocida; HPLC/MS 445; IC50 [PDK1]= 9.0e-008 M; IC50 [célula]= 2.2e009 M; Separación mediante SFC con CO2 + 25% de 2-propanol + 0,5% de dietilamina; Tipo de columna: 0,46 x 25 cm Chiralpak IA;

(R)-1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(3-fluor-fenil)-propano-1-ol ("A30"),

Enantiómero, estereoquímica absoluta desconocida; HPLC/MS 445;

IC50 [PDK1]= 1.8e-008 M; IC50 [célula]= 2.1 e-008 M;

Separación mediante SFC con CO2 + 25% de 2-propanol + 0,5% de dietilamina; 10 Tipo de columna: 0,46 x 25 cm Chiralpak IA;

(S)-1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(2-fluor-fenil)-propano-1-ol

("A31"),

Enantiómero, estereoquímica absoluta desconocida; HPLC/MS 445;

15 IC50 [PDK1]= 2.4e-008 M; IC50 [célula]= 4.8e-009 M; Separación mediante SFC con CO2 + 30% de 2-propanol + 0,5% de dietilamina; Tipo de columna: 0,46 x 25 cm Chiralpak AD-H; Rt=3.91 min; (R)-1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(2-fluor-fenil)-propano-1-ol

("A32"),

Enantiómero, estereoquímica absoluta desconocida; HPLC/MS 445; IC50 [PDK1]= 9.5e-008 M; IC50 [célula]= 2.9e-009 M; Separación mediante SFC con CO2 + 30% de 2-propanol + 0,5% de dietilamina; Tipo de columna: 0,46 x 25 cm Chiralpak AD-H; Rt=5.49 min; 1-{2-amino-6-[2-(1-isopropil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(2-fluor-fenil)-etanol

("A33"),

IC50 [PDK1]= 3.5e-007 M; IC50 [célula]= 2.5e-007 M;

10 1H-NMR [DMSO-d6] 5[ppm] 8.78 (s, 1 H), 8.71 (s, 1H), 8.36 (s, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 8.02 (s, 1 H), 7.94 (m, 1 H), 7.48 (m, 1 H), 7.39 (m, 1 H), 7.17 (m, 1 H), 4.68 (m, 1 H), 2.11 (s, 3H), 1.43 (d, 6H). Los siguientes ejemplos hacen referencia a medicamentos:

Ejemplo A: Recipientes de inyección

Una solución de 100 g de una sustancia activa de la fórmula I y 5 g de fosfato disódico hidrogenado es

15 estandarizada en 3 l de agua doblemente destilada con 2 N de ácido clorhídrico a un pH de 6,5; es filtrada de forma estéril, vertida en recipientes de inyección, liofilizada bajo condiciones estériles, donde dichos recipientes se cierran de forma estéril. Cada recipiente para inyección contiene 5 mg de sustancia activa.

Ejemplo B: Supositorios

Una mezcla de 20 g de una sustancia activa de la fórmula I se funde con 100 g de lecitina de soja y 1400 g de 20 manteca de cacao, se vierte en moldes y se deja enfriar. Cada supositorio contiene 20 mg de sustancia activa.

Ejemplo C: Solución

Se prepara una solución a partir de 1 g de una sustancia activa de la fórmula I, 9,38 g de NaH2PO4 • 2 H2O, 28,48 g de Na2HPO4 • 12 H2O y 0,1 g de cloruro de benzalconio en 940 ml de agua doblemente destilada. Se regula a un pH de 6,8; se completa 1 litro y se esteriliza a través de radiación. Esta solución puede utilizarse en forma de gotas oftálmicas.

5 Ejemplo D: Pomada

Se mezclan 500 mg de una sustancia activa de la fórmula I con 99,5 g de vaselina, en condiciones asépticas.

Ejemplo E: Comprimidos

Una mezcla de 1 kg de sustancia activa de la fórmula I, 4 kg de lactosa, 1,2 kg de almidón de patata, 0,2 kg de talco y 0,1 kg de estearato de magnesio es comprimida del modo habitual para formar comprimidos, de manera que cada 10 uno de los comprimidos contenga 10 mg de sustancia activa.

Ejemplo F: Grageas

De forma análoga al ejemplo E, se forman comprimidos que a continuación, del modo habitual, son recubiertos con una capa de sacarosa, almidón de patata, talco, goma tragacanto y colorante.

Ejemplo G: Cápsulas

15 2 kg de sustancia activa de la fórmula I son llenados del modo habitual en cápsulas de gelatina dura, de manera que cada cápsula contenga 20 mg de la sustancia activa.

Ejemplo H: Ampollas

Una solución de 1 kg de sustancia activa de la fórmula I es filtrada de forma estéril en 60 l de agua doblemente destilada, vertida en ampollas, donde éstas son liofilizadas bajo condiciones estériles y cerradas de forma ésteril. 20 Cada ampolla contiene 10 mg de sustancia activa.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Compuestos de la fórmula I

en donde

5 R1 representa [C(R3)2]mHet1 o [C(R3)2]mAr’,

R2 representa C(R3)(R4)Ar o C(R3)(R4)Het,

R3 representa H o A’,

R4 representa [C(R3)2]mOH o [C(R3)2]mOA,

R5 representa N(R3)2,

10 R6 representa H o Hal, Ar representa un fenilo no sustituido, o mono- o di- sustituido por Hal,

Ar' representa un fenilo no sustituido, o mono- o di- sustituido por Hal y/o por (CH2)mCN, Het representa un heterociclo mononuclear aromático no sustituido, o mono-o di- sustituido por Hal, con 1 a 4 átomos de N, O y/o S, 15 Het1 representa un heterociclo mononuclear aromático con 1 a 4 átomos de N, O y/o S, que puede ser no sustituido

o mono- o di- sustituido por Hal, A, [C(R3)2]mCOHet2, [C(R3)2]mN(R3)2 y/o [C(R3)2]mHet2,

Het2 representa un heterociclo mononuclear o binuclear, aromático, saturado o insaturado no sustituido o mono-o disustituido por A y/o OH, con 1 a 2 átomos de N y/o de O, A representa un alquilo no ramificado o ramificado con 1-10 átomos de C, en donde 1-7 átomos de H pueden 20 reemplazarse por F, Cl y/o Br, y/o en donde uno o dos grupos CH no contiguos y/o grupos CH2 pueden reemplazarse por NR3 y/u O, o alquilo cíclico con 3-7 átomos de C, A' representa un alquilo no ramificado o ramificado con 1-6 átomos de C, en donde 1-5 átomos de H pueden ser 25 reemplazados por F, Hal representa F, Cl, Br o I,

m representa 0, 1, 2, 3 ó 4, así como sus sales, tautómeros y estereoisómeros que pueden utilizarse farmacéuticamente, incluyendo las mezclas de los mismos en cualquier proporción.
2. Compuestos según la reivindicación 1, seleccionados del grupo 4-[1-(3-fluor-fenil)-1-metoximetoxi-etil]-6-(2-bromo-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il)-pirimidina-2-ilamina ("A1"), 4-[1-(3-fluor-fenil)-1-metoximetoxi-etil]-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina- 2-ilamina

("A2"), 1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(3-fluor-fenil)-etanol ("A3"), 1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-fenil-etanol ("A4"), 4-(1-metoximetoxi-1-fenil-etil)-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-2- ilamina ("A5"), 1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(2-fluor-fenil)-etanol ("A6"), 4-[1-(2-fluor-fenil)-1-metoximetoxi-etil]-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]- pirimidina-2-ilamina

("A7"),

(S)-1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(2-fluor-fenil)- etanol ("A8"), 1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-fenil-propano-1-ol ("A10"), 1-(2-fluorfenil)-1-{2-metilamino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]pirimidina-4-il}-etanol

("A11"),

1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-piridina-4-il-propano-1-ol ("A13"), 1-{2-metilamino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-piridina-4-il-propano- 1-ol

("A14"),

1-{2-dimetilamino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-piridina-4-ilpropano-1-ol ("A15"), 1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-2-metil-1-fenil-propano- 1-ol

("A16"), (4-{7-[2-amino-6-(1-hidroxi-1-fenil-etil)-pirimidina-4-il]-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-2-il}-fenil)-acetonitrilo ("A17"), 1-{2-amino-6-[2-(6-amino-piridina-3-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-fenil-etanol ("A18"), 1-{2-amino-6-[2-(6-piperazina-1-il-piridina-3-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-fenil-etanol ("A19"), 1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-2-dimetilamino-1-fenil- etanol

("A20"),

2-(4-{7-[2-amino-6-(1-hidroxi-1-fenil-etil)-pirimidina-4-il]-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-2-il}-pirazol-1-il)-1-piperidina- 1-iletanona ("A21"), 2-(4-{7-[2-amino-6-(1-hidroxi-1-fenil-etil)-pirimidina-4-il]-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-2-il}-pirazol-1-il)-1-(3,4- dihidro-1H

isoquinolina-2-il-etanona ("A22"),

4-[1-(2-amino-etoxi)-1-(2-fluor-fenil)-etil]-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina- 2ilamina ("A23"), 1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(2-fluor-fenil)-propano- 1-ol

("A24"), 1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(3-fluor-fenil)-propano- 1-ol ("A25"),

1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(3-fluor-piridina-4-il)-propano1-ol ("A26"),

4-[1-(3-fluor-piridina-4-il)-1-metoximetoxi-propil]-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina2-ilamina ("A27"),

1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-piridina-4-il-propano-1-ol ("A28"),

(S)-1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(3-fluor-fenil)-propano-1-ol ("A29"),

(R)-1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(3-fluor-fenil)-propano-1-ol ("A30"),

(S)-1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(2-fluor-fenil)-propano-1-ol ("A31"),

(R)-1-{2-amino-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(2-fluor-fenil)-propano-1-ol ("A32"),

1-{2-amino-6-[2-(1-isopropil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]-pirimidina-4-il}-1-(2-fluor-fenil)-etanol ("A33"),

así como sus sales, tautómeros y estereoisómeros que pueden utilizarse farmacéuticamente, incluyendo las mezclas de los mismos en cualquier proporción.
3. Procedimiento para preparar compuestos de la fórmula I según las reivindicaciones 1-2, así como sus sales, tautómeros y estereoisómeros que pueden utilizarse farmacéuticamente, caracterizado porque

a) para producir compuestos de la fórmula I,

en donde R5 representa NH2 y R6 representa H,

un compuesto de la fórmula II

en donde R1 y R2 representan lo indicado en la reivindicación 1, se hace reaccionar con guanidina o con una de sus sales, o b) se lo libera de uno de sus derivados funcionales a través del tratamiento con un agente solvolizante o

hidrogenolizante, y/o una base o un ácido de la fórmula I es convertido en una de sus sales.
4.

Medicamentos que contienen al menos un compuesto según la reivindicación 1 y/o sus sales, tautómeros y estereoisómeros que pueden utilizarse farmacéuticamente, incluyendo las mezclas de los mismos en cualquier proporción, así como eventualmente excipientes y/o adyuvantes.
5.

Utilización de compuestos según la reivindicación 1, así como sus sales, tautómeros y estereoisómeros que pueden utilizarse farmacéuticamente, incluyendo las mezclas de los mismos en cualquier proporción, para preparar un medicamento para el tratamiento de tumores, crecimiento de tumores, metástasis tumoral y/o SIDA.
6.

Utilización según la reivindicación 5, donde el tumor proviene del grupo de los tumores del epitelio escamoso, de la vejiga, del estómago, de los riñones, de cabeza y cuello, del esófago, del cuello uterino, de la glándula tiroides, del intestino, del hígado, del cerebro, de la próstata, del tracto urogenital, del sistema linfático, del estómago, de la laringe y/o del pulmón.
7.

Utilización según la reivindicación 5, donde el tumor proviene del grupo constituido por leucemia monicítica, adenocarcinoma pulmonar, carcinoma pulmonar microcelular, carcinoma pancreático, carcinoma de colon, glioblastoma y/o carcinoma de pecho.
8.

Utilización según la reivindicación 5, donde el tumor consiste en un tumor del sistema sanguíneo e inmune.
9.

Utilización según la reivindicación 5, donde el tumor proviene del grupo constituido por leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica, leucemia linfática aguda y/o leucemia linfática crónica.
10.

Utilización de compuestos según la reivindicación 1 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para producir un medicamento para tratar tumores, donde se administra una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula I en combinación con un compuesto del grupo 1) modulador de receptor de estrógeno, 2) modulador de receptor de andrógeno, 3) modulador de receptor de retinoide, 4) agente citotóxico, 5) agente antiproliferativo, 6) inhibidor de proteína prenil transferasa, 7) inhibidor de HMG-CoA reductasa, 8) inhibidor de VIH proteasa, 9) inhibidor de transcriptasa reversa y 10) otros inhibidores de angiogénesis.
11.

Utilización de compuestos según la reivindicación 1 y/o de sus sales y solvatos fisiológicamente aceptables para producir un medicamento para tratar tumores, donde se administra una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula I en combinación con radioterapia y con un compuesto del grupo 1) modulador de receptor de estrógeno, 2) modulador de receptor de andrógeno, 3) modulador de receptor de retinoide, 4) agente citotóxico, 5) agente antiproliferativo, 6) inhibidor de proteína prenil transferasa, 7) inhibidor de HMG-CoA reductasa, 8) inhibidor de VIH proteasa, 9) inhibidor de transcriptasa reversa y 10) otros inhibidores de angiogénesis.
12.

El compuesto

1-(2-fluorfenil)-1-{2-metoxi-6-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina-7-il]pirimidina-4-il}-etanol ("A12")

así como sus sales, tautómeros y estereoisómeros que pueden utilizarse farmacéuticamente, incluyendo las mezclas de los mismos en cualquier proporción.