ES2368862T3 - Determinación del grado de metilación de adn. - Google Patents

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Abstract

Procedimiento para determinar el grado de metilación de ADN normalizado que comprende las etapas: a) determinación cuantitativa de la presencia de un transposón o fragmento del mismo en un ADN genómico que comprende la amplificación del ADN no bisulfitado con al menos un par de cebadores, que es específico para un transposón o fragmento del mismo, o amplificación del ADN bisulfitado con al menos un par de cebadores que es específico para un transposón bisulfitado o fragmento del mismo, en el que los cebadores no comprenden ninguna posición metilada diferencial del transposón, realizándose la determinación cuantitativa por medio de PCR en tiempo real para determinar un valor de umbral de ciclo; b) determinación cuantitativa de la existencia de al menos una C metilada diferencial de un dinucleótido CpG dentro del mismo transposón o fragmento del mismo, que comprende la amplificación del ADN bisulfitado con al menos un par de cebadores, que es específico para el transposón o fragmento del mismo y que comprende al menos un cebador, que comprende al menos una posición metilada diferencial del transposón, usándose el mismo ADN que en la etapa a) y realizándose la determinación cuantitativa por medio de PCR en tiempo real para determinar un valor de umbral de ciclo; y c) determinación del grado de metilación de ADN normalizado a través de la proporción de los valores de umbral de ciclo determinados en las etapas a) y b).

Description

Determinación del grado de metilación de ADN
La invención se encuentra dentro del campo de la epigenética, especialmente de la metilación de ADN. Proporciona un procedimiento de amplificación para la detección de modificaciones epigenéticas que son relevantes para el diagnóstico clínico. Además se proporcionan cebadores específicos para este procedimiento de amplificación.
Los mecanismos epigenéticos provocan modificaciones de la expresión génica, que no van acompañadas de una modificación de la secuencia codificante de los genes, sin embargo por ejemplo pueden transmitirse de manera mitótica. Los patrones de metilación de ADN se transmiten de manera acoplada a la replicación de la célula madre a las células hijas. Por consiguiente se garantiza la transmisión hereditaria de la información epigenética. En eucariotas superiores, la metilación de ADN representa, junto al silenciamiento asociado a ARN y la modificación de histonas, el mecanismo epigenético mejor estudiado (Serman et al., Coll Antropol. 2006; 30(3):665-71).
El genoma humano tiene en una célula sana diferenciada un patrón de metilación de ADN específico y en gran medida invariable que contribuye de manera y modo decisivo en la expresión génica. Según esto están sin metilar regiones genómicas con función reguladora para la transcripción en muchos casos, mientras que están metiladas secciones genómicas sin actividad transcripcional.
La metilación de ADN tiene lugar en los restos de citosina del ácido nucleico y preferentemente en dinucleótidos con una secuencia citosina-guanina (CpG). La modificación de bases más importante en eucariotas es la metilación en la posición 5’ de la citosina.
En una célula tumoral, que se caracteriza entre otras cosas por una elevada tasa de proliferación, una expresión génica modificada y anomalías cromosómicas, el patrón de metilación genómico es aberrante (Schulz, DNA methylation in urological malignancies. Int J Oncol. 1998; 151-67). En muchas publicaciones pertinentes de esta especialidad se sostiene de manera unánime la opinión de que estas modificaciones epigenéticas albergan un potencial inmenso, relevante de manera diagnóstica y pronóstica, cuya evaluación puede conducir a procedimientos modernos de la detección temprana, pronóstico y seguimiento del cáncer.
Dado que, sin embargo, en caso de tejido tumoral se producen anomalías cromosómicas, es decir este tejido en comparación con el tejido sano presenta una dotación genómica distinta, el problema básico consiste en determinar una metilación de ADN aberrante de este tipo no sólo de manera cualitativa, sino también de manera cuantitativa y normalizada. Sólo una determinación de permite una comparación directa de dos muestras de las cuales una presenta posiblemente anomalías cromosómicas.
Este objetivo se consigue según la invención mediante el procedimiento según la reivindicación 1, así como mediante los desarrollos y perfeccionamientos ventajosos de las reivindicaciones subordinadas. La presente invención proporciona para resolver estos problemas procedimientos para determinar la metilación de ADN normalizada y procedimientos para determinar el grado de metilación de ADN relativo entre al menos dos muestras.
En un primer aspecto se da a conocer un procedimiento para determinar el grado de metilación de ADN normalizado, que comprende las etapas: a) determinar cuantitativamente la presencia de un transposón o fragmento del mismo en un ADN; b) determinar cuantitativamente la existencia de al menos una C metilada diferencial de un dinucleótido CpG del transposón o fragmento del mismo; y c) determinar el grado de metilación de ADN normalizado a través de los valores determinados en las etapas a) y b).
Según esto, la presente invención usa la observación sorprendente de que el grado de metilación del transposón distribuido aleatoriamente por todo el genoma puede considerarse como representativo para el grado de metilación de todo el genoma. El principio de la invención se basa en determinar en una primera etapa cuantitativamente la presencia de un transposón (o fragmento del mismo) en una ADN de por ejemplo una muestra y determinar en una etapa adicional cuantitativamente la presencia de al menos una citosina metilada diferencial de un dinucleótido CpG del mismo transposón (o fragmento del mismo) en el mismo ADN. A través de la proporción de los valores determinados puede determinarse entonces un grado de metilación de ADN normalizado que es representativo para todo el genoma.
La metilación de ADN es un mecanismo post-replicativo, epigenético, que en eucariotas es de considerable significado para la regulación génica. En caso de eucariotas, la adición de un grupo metilo en el átomo de carbono n.º 5 de la base de pirimidina de la citosina desempeña el papel dominante para la formación de 5-metilcitosina (5mC). Esta adición de metilo se cataliza in vivo mediante una transferencia del grupo metilo desde la Sadenosilmetionina (donador de metilo) hasta la citosina (aceptor de metilo) con ayuda de ADN-metilasas (DNMT) y se produce preferentemente en citosinas que se encuentran localizadas en 5’ con respecto a una guanina (CpG).
5mC
En el genoma de vertebrados se produce exclusivamente en dinucleótidos CpG (Bestor. The DNA methyltransferases of mammals. Hum Mol Genet 2000; 2395-2402) y en el genoma humano están metiladas en la mayoría de los casos ambas citosinas del dinucleótido CpG palindrómico.
Los dinucleótidos CpG están muy mal representados debido a mecanismos evolutivos y a la tendencia de la metilcitosina a desaminarse de manera espontánea al menos en el genoma de mamíferos con un frecuencia del 0,8 % (el contenido en GC promedio en seres humanos asciende a aproximadamente el 40 %, lo que debería conducir a un frecuencia calculada del dinucleótido CpG del 4 %) y se producen por regla general sólo en “islas de CpG” de manera acumulada, que con frecuencia se encuentran en los NTR de 5’ ó 3’ de genes (Gardiner-Garden & Frommer. CpG islands in vertebrate genomes. J Mol Biol 1987; 261-282). El origen de esta limitación en zonas no codificantes es probablemente el riesgo elevado de mutaciones puntuales mediante la desaminación de 5mC para dar timina (Laird & Jaenisch. The role of DNA methylation in cancer genetic and epigenetics. Annu Rev Genet 1996; 441-464).
Las islas de CpG tienen un tamaño de aproximadamente 500 pb -4 kb y un elevado contenido en GC de > 55 %. Presentan una frecuencia elevada de diez a veinte veces del dinucleótido 5’-CpG-3’. Más de tres cuartos de todos los genes humanos (aproximadamente 25.000) presentan islas de CpG en sus regiones de inicio.
Generalmente, genes con alta actividad transcripcional se encuentran en las regiones genómicas no metiladas. Por el contrario en regiones metiladas se encuentran genes que no son activos o tienen sólo poca actividad transcripcional. Existe una reticulación de metilación de ADN y condensación de cromatina, dado que generalmente son inactivos los genes en heterocromatina densamente empaquetada. Un empaquetamiento denso de este tipo de la cromatina se inicia mediante la desacetilación y metilación de las histonas H3 y H4, lo que conlleva a una unión más consiste de los nucleosomas en el ADN y por consiguiente resulta una peor accesibilidad del ADN para la maquinaria de transcripción (Jenuwein. Re-SET-ting heterochromatin by histone methyltransferases. Trends Cell Biol 2001; 266-273). La proteína que se une a ADN CpG-metilado, MeCP2, puede reclutar histona-desacetilasas e iniciar la condensación de la cromatina (Razin & Razin. CpG methylation, chromatin structure and gene silencing-a threeway connection. EMBO J. 1998; 4905-4908). También las histona-metilasas pueden llevar sin embargo ADNmetiltransferasas a regiones heterocromáticas y por consiguiente producir allí la metilación de ADN (Tamaru & Selker. A histone H3 methyltransferase controls DNA methylation in Neurospora crassa. Nature 2001; 277-283). Además la acetilación de histonas conduce probablemente a la desmetilación activa de la respectiva sección génica (Cervoni & Szyf. Demethylase activity is directed by histone acetylation. J. Biol. Chem. 2001; 40778-40787).
Según se mencionó anteriormente, las metilaciones de ADN irregulares se transmiten en la mayoría de los casos de manera estable a las células hijas y pueden ser por tanto el origen de enfermedades con frecuencia a nivel de órganos. Especialmente, las células tumorales muestran, por ejemplo, con frecuencia patrones de metilación que se desvían significativamente de los de un tejido sano. Por tanto se considera usar el análisis del grado de metilación para , por ejemplo, aplicaciones diagnósticas. Además se considera también una modificación/corrección dirigida del estado de metilación para el objetivo de la regulación génica.
Para el análisis del estado de metilación de ácidos nucleicos, especialmente del estado de metilación de sitios de CpG específicos, ha mostrado su eficacia la bisulfitación con por ejemplo amplificación/secuenciación posterior que describió por primera vez Frommer et al. (Proc Natl Acad Sci USA. 1992; 89(5):1827-31). En caso de la bisulfitación se transforman bases de citosina no metiladas del ácido nucleico en bases de uracilo, mientras que las bases de citosina metiladas permanecen sin modificar. Un resumen de diversas técnicas para el análisis del estado de metilación de ácidos nucleicos, especialmente la bisulfitación, se encuentran en Fraga et al., Biotechniques. 2002; 33(3):632, 634, 636-49 y Laird, Nat Rev Cancer. 2003;3(4):253-66. La reacción de bisulfitación conduce, por tanto, dependiendo del estado de metilación del ácido nucleico de partida a secuencias de ácidos nucleicos con secuencia distinta, tras cuyo análisis puede deducirse entre otras cosas mediante PCR o secuenciación el estado de metilación del ácido nucleico de partida.
Este análisis del grado de metilación de una muestra, como por ejemplo tejido o una biopsia, encuentra sus límites rápidamente con procedimientos convencionales, en cuanto deba realizarse una comparación de esta muestra con otra muestra y entre las dos muestras exista una dotación genómica distinta. Según se mencionó anteriormente, las células tumorales concretamente presentan en muchos casos anomalías cromosómicas no equilibradas. Entre ellas se encuentran ganancias y pérdidas de cromosomas completos, brazos de cromosomas individuales y secciones de secuencia de ADN más cortas. Varios estudios proporcionan pruebas de que estas inestabilidades genómicas de las células tumorales se producen por un grado bajo de la metilación de ADN. Según esto se muestra el grado de la hipometilación de ADN proporcionalmente a la inestabilidad genómicas y a la agresividad tumoral.
La presente invención aprovecha la observación sorprendente de que el grado de metilación del transposón distribuido aleatoriamente por todo el genoma puede considerarse como representativo para el grado de metilación de todo el genoma. Por consiguiente es posible una determinación normalizada del grado de metilación del genoma, cuando junto a la presencia cuantitativa al menos de una metilación diferencial dentro de un transposón se determina también la presencia cuantitativa del transposón “en sí” en el genoma.
El documento WO 2008/134596 describe un procedimiento para determinar el “índice de desmetilación”, en el que se relaciona el número de copias del transposón no metilado con el número de copias de la cantidad total de transposón.
El término “transposón”, según se usa en el presente documento, significa una sección de ADN de determinada longitud en el genoma. Un transposón comprende uno o varios genes y tiene la posibilidad de modificar su sitio en el genoma (transposición). Los transposones pueden ser elementos, cuya etapa intermedia móvil se forma de ARN (retroelementos; transposón de clase I), o aquéllos cuya fase móvil es ADN (transposón de ADN; transposón de clase II).
El término “transposón”, según se usa en el presente documento, incluye siempre también fragmentos de un transposón de este tipo. Tales fragmentos de un transposón surgen a lo largo de la evolución en el genoma, dado que un transposón “defectuoso” no está expuesto a ninguna presión de selección y por consiguiente puede modificarse la secuencia original mediante mutaciones en el genoma. De ese modo no se encuentran en el genoma con frecuencia los transposones completos, sino tan sólo regiones parciales del mismo de nuevo, que se producen, por ejemplo, mediante una inserción adicional de un transposón o deleciones que se encuentran en la mayor parte de los casos en la región de 5’. Por un fragmento de un transposón se entiende preferentemente una región de ácido nucleico contigua con una longitud de ≥ 40 pb, ≥ 80 pb, ≥ 100 pb, preferentemente ≥ 150 pb, aún más preferentemente ≥ 200 pb, que presenta al menos una homología del 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, 97 %, 98 %, preferentemente del 98,5 %, 99 %, 99,5 % y aún más preferentemente del 99,7 %, 99,9 % o más con respecto a la correspondiente región de ácido nucleico del transposón. Una homología de este tipo puede determinarse, por ejemplo, a través del algoritmo FASTA. De manera equivalente con transposón puede entenderse también “elemento que puede transponerse”.
Los transposones de ADN autónomos están compuestos por secuencias de ADN que codifican para la enzima transposasa. La transposasa puede “escindir” un transposón del genoma, puede transportarlo a un nuevo sitio en el genoma e insertarlo allí en el genoma. Este proceso se llama transposición conservadora. Ejemplos de transposones de ADN son: Ac (activador) de elementos que pueden transponerse (transposón autónomo) o Ds (disociador) de elementos que pueden transponerse (transposón no autónomo sin transposasa propia).
Los retrotransposones representan la mayoría de los elementos que pueden transponerse eucariotas y están formados de manera más compleja. La célula huésped los reconoce como secuencia de ADN “normal” dentro del genoma y por consiguiente la maquinaria de transcripción de la célula huésped los lee y los transcribe en ARN. Los retrotransposones codifican, sin embargo, para una transcriptasa inversa, que permite una transformación de ARN en ADN. Esta transposasa realiza también la inserción del ADN formado en el genoma de la célula huésped. Este proceso se llama transposición replicativa. Mientras permanezca funcional el retrotransposón, se generan por tanto varias copias en el genoma.
El número de transposones activos en el genoma de un organismo varía en gran medida con la especie. En el genoma humano es activo, por ejemplo, únicamente una parte muy pequeña de los transposones. Según esto se parte de que son activos sólo aproximadamente 50 transposones LINE (véase más abajo) y prácticamente ningún transposón de ADN, con lo que puede considerarse casi constante el número de transposones a lo largo de la vida de un ser humano.
Hay dos tipos principales de retrotransposones: retrotransposones virales y no virales.
Los retrotransposones virales tienen de la manera más amplia propiedades muy similares a los retrovirus. Ejemplos de retrotransposones virales son: elementos Ty que pueden transponerse y elementos drosophilacopia que pueden transponerse.
Los retrotransposones no virales representan la mayoría de todos los transposones en animales mamíferos. Como ejemplos pueden nombrarse especialmente: LINE (long interspersed (transposable) elements, elementos (que pueden transponerse) dispersos largos), SINE (short interspersed (transposable) elements, elementos (que pueden transponerse) dispersos cortos), y elementos Alu.
En el genoma humano se producen aproximadamente 850.000 LINE y 1.500.00 SINE. Entro los SINE se encuentran también los elementos Alu, que representan el grupo de elementos que pueden transponerse que se produce con más frecuencia en el genoma humano y constituyen aproximadamente el 5 % del genoma.
A los retrotransposones virales pueden pertenecer también los HERV (retrovirus endógenos humanos). Se clasifican mediante una posición de aminoácidos característica en subfamilias (por ejemplo HERV-K, HERV-W). Constituyen aproximadamente el 8 % del genoma humano. Tienen su origen en infecciones retrovirales de la línea germinal que han tenido lugar de manera repetida como consecuencia de la evolución del ser humano. Mediante mutaciones y deleciones se han vuelto sin actividad transcripcional, sin embargo, la mayor parte de estos elementos genéticos. Sólo algunos presentan una organización de longitud completa con los genes virales gag, pol y env. Éstos están flanqueados entonces por la secuencia LTR (long terminal repeat, repetición terminal larga), que contienen módulos de secuencia reguladores. Mediante la metilación de ADN se paralizan los HERV potencialmente activos para que no puedan interferir con la integridad de la expresión génica de una célula sana. Por el contario se encuentra en diversas entidades tumorales una elevada transcripción de HERV y también una biosíntesis de proteína de HERV.
Con la denominación “grado de metilación” debe querer decirse en el presente documento la desmetilación o la metilación de un ADN. Un ADN considerado puede estar presente de manera a bien metilada o desmetilada en al menos un sitio. Dado que este estado es uno binario y con ello la desmetilación y la metilación están relacionadas directamente entre sí en una determinada posición, el grado de metilación puede determinarse o bien a través de la
desmetilación y/o la metilación en este al menos un sitio. Por consiguiente puede determinarse el grado de metilación de ADN normalizado, así como también el grado de metilación relativo a través de la metilación y/o desmetilación del ADN.
Se usan en el presente documento los términos “cebador” y “oligonucleótido” de manera sinónima. Un cebador se considera específico para una secuencia dada, cuando presenta ≥ 75 %, ≥ 80 %, ≥ 85 %, ≥ 90 %, preferentemente ≥ 95 %, ≥ 97 %, aún más preferentemente ≥ 99 %,o ≥ 99,5 % de identidad de secuencia con respecto a la secuencia considerada o su complemento. En una forma especialmente preferente, el cebador presenta el 100 % de identidad de secuencia con respecto a la secuencia considerada o su complemento. En otras formas de realización preferentes, el cebador se considera entonces específico para una secuencia dada cuando se hibrida en condiciones de alta salinidad con ésta (o su complemento).
Por la expresión “condiciones de alta salinidad” se entiende a continuación un medio que usa un tampón de alta salinidad, preferentemente un tampón de alta salinidad que contiene sales caotrópicas. Mediante la alta salinidad, preferentemente que presenta sales caotrópicas, se reduce la solubilidad de ácidos nucleicos en agua. Es fundamental la ruptura de puentes de hidrógeno y unido a ello una reducción de la estabilización de estructuras secundarias y terciarias de los ácidos nucleicos en agua. Si sólo se presenta una superficie polar como donadora de puentes de hidrógeno, los ácidos nucleicos se unen a esta superficie, dado que experimentan allí una mejor estabilización que en agua. Si se reduce la concentración salina, será el agua de nuevo un mejor donador de puentes de hidrógeno que la superficie polar y los ácidos nucleicos pueden desprenderse de nuevo de la superficie.
Por la expresión “tampón de alta salinidad” se entiende especialmente (pero sin limitarse a ello) un tampón que presenta una alta concentración salina (preferentemente sustancias caotrópicas), preferentemente ≥ 100 mM, más preferentemente ≥ 500 mM y aún más preferentemente ≥ 1 M.
Por la expresión “sustancias caotrópicas” o “sales caotrópicas” se entienden especialmente (pero sin limitarse a ello) sustancias que modifican la estructura secundaria, terciaria y/o cuaternaria de proteínas y/o ácidos nucleicos y dejan intacta al menos la estructura primaria, reducen la solubilidad de sustancias polares en agua y/o refuerzan las interacciones hidrófobas. Sustancias caotrópicas preferentes son clorhidrato de guanidina, (iso)tiocianato de guanidinio, yoduro de sodio, perclorato de sodio, yoduro de potasio, (iso)tiocianato de sodio y/o urea.
Por el término “amplificación” o “reacción de amplificación” se entiende un procedimiento que permite al menos duplicar la concentración de una secuencia de ácido nucleico considerada.
Se diferencia en este caso entre reacciones de amplificación isotérmicas y termocíclicas. Con la primera la temperatura se mantiene durante todo el procedimiento siempre igual, mientras que con la última se realizan ciclos térmicos con cuya ayuda se controla la reacción y la amplificación.
Reacciones de amplificación isotérmicas preferentes son por ejemplo
amplificación isotérmica mediada por lazo (LAMP),
amplificación a base de secuencias de ácido nucleico (NASBA),
reacción en cadena por círculo rodante (RCCR), o amplificación por círculo rodante (RCA), y/o
amplificación mediada por transcripción (TMA)
Reacciones de amplificación termocíclicas preferentes son por ejemplo
reacción en cadena de la ligasa (LCR), y/o
reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
Por la expresión “reacción en cadena de la polimerasa” (PCR) se entiende un procedimiento para la multiplicación in vitro de ácidos nucleicos, según se describe, por ejemplo, en Bartlett & Stirling (2003).
Por la expresión “reacción en cadena de la ligasa” (LCR) se entiende un procedimiento de detección para las cantidades más bajas de ácidos nucleicos, que funciona de manera similar a la reacción en cadena de la polimerasa, únicamente con el uso de otra enzima (en lugar de la polimerasa una ligasa). Dos muestras por cadena de ADN se ligan a una muestra. Los amplificados de un ciclo que se producen, con frecuencia sólo de 30-50 pb de longitud, sirven en los siguientes ciclos incluso de nuevo como punto de partida para el cebador complementario.
Por la expresión “amplificación isotérmica mediada por lazo” (LAMP) se entiende un procedimiento para la amplificación isotérmica de ácidos nucleicos, en el que se usan 6 cebadores distintos que reconocen regiones determinadas en la secuencia diana y se unen a las mismas. LAMP usa una ADN polimerasa con actividad de desplazamiento de cadena y transcurre a una temperatura constante de aproximadamente 65 ºC. La amplificación y la detección de la secuencia diana tiene lugar en una única etapa.
Por la expresión “amplificación a base de secuencias de ácido nucleico” (NASBA), se entiende un procedimiento para amplificar ARN (Compton 1991). A este respecto se proporciona una matriz de ARN a una mezcla de reacción y un primer cebador se une a la secuencia complementaria en la región del extremo 3’ de la matriz. A continuación se polimeriza con una transcriptasa inversa de la cadena de ADN complementaria a la matriz. Con ayuda de RNasa H se digiere entonces la matriz de ARN (RNasa H digiere sólo ARN en híbridos ARN-ADN, no ARN monocatenario). A continuación se une un segundo cebador al extremo 5’ de la cadena de ADN. Éste se usa por la ARN polimerasa T7 como punto de partida para la síntesis de una molécula de ARN complementaria a la cadena de ADN, que puede usarse entonces de nuevo como matriz de partida. NASBA se realiza a una temperatura constante de normalmente 41 ºC y proporciona en circunstancias determinadas resultados más rápidos y mejores que la PCR.
Por la expresión “amplificación mediada por transcripción” (TMA) se entiende un procedimiento de amplificación isotérmico desarrollado por la empresa estadounidense Gen-Probe, que es similar a NASBA y en el que se usan igualmente ARN polimerasa y transcriptasa inversa (Hill, 2001).
La expresión “reacción en cadena por círculo rodante” (RCCR) o “amplificación por círculo rodante” (RCA) se refiere a un procedimiento de amplificación que imita la replicación de ácidos nucleicos general según el principio de círculo rodante y se describe entre otros en el documento US5854033.
Por la expresión “PCR en tiempo real” también PCR cuantitativa o qPCR (no confundir con PCR de transcriptasa inversa) se entiende un procedimiento que se basa en el principio de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) conocida, y adicionalmente permite la cuantificación del ADN amplificada. La cuantificación se realiza con ayuda de mediciones de fluorescencia, que se registran durante un ciclo de PCR (de ahí el nombre “tiempo real”). La fluorescencia aumenta proporcionalmente con la cantidad de los productos de PCR. Al final de un curso (que está constituido por varios ciclos) se realiza por medio de señales de fluorescencia obtenidas la cuantificación en la fase exponencial de la PCR. Sólo en la fase exponencial de la PCR (que dura pocos ciclos en un curso) es posible la cuantificación correcta, dado que durante esta fase imperan las condiciones de reacción óptimas. Por consiguiente, estos procedimientos se diferencian de otros procedimientos de PCR cuantitativos, que realizan tras el transcurso de la PCR un análisis cuantitativo (por ejemplo PCR competitiva), en la mayoría de los casos con la inclusión de una separación mediante electroforesis en gel de los fragmentos de PCR.
Para la detección se tienen en cuenta colorantes como por ejemplo bromuro de etidio, verde I SYBR así como sondas FRET o los denominados oligonucleótidos Double-Dye (también denominados sondas TaqMan).
La expresión “valor CT” (Threshold Cycle = “ciclo umbral”) significa el ciclo de PCR, en el que puede detectarse por primera vez un amplificado; según esto se mide por regla general la fluorescencia y se indica el ciclo en el que ésta última aumenta por primera vez de manera significativa sobre la fluorescencia de fondo.
En la fase inicial de una reacción de PCR, la cantidad de molde (es decir de ADN que va a amplificarse) está aún limitada, mientras que en la fase final de la amplificación la cantidad de los productos aumenta de manera que se llega a la inhibición mediante ésta, se hibridan los fragmentos de producto de manera creciente entre sí y los productos de partida de consumen lentamente. Sólo en la fase que se encuentra intermedia a éstas existe una relación exponencial entre el número de ciclos de amplificación y la cantidad de amplificado (“fase exponencial”). Para la determinación del momento en el que comienza la fase exponencial se usa el valor CT mencionado.
Un valor CT bajo indica además que es suficiente ya un número de ciclos de PCR bajo para un primer aumento significativo de la fluorescencia sobre el ruido de fondo (o sea estaba presente relativamente mucho molde), mientras que un valor CT alto indica de manera correspondiente a esto que se requieren para ello muchos ciclos de PCR (o sea estaba presente relativamente poco molde).
En un primer aspecto, la presente invención se refiere a un procedimiento para determinar el grado de metilación de ADN normalizado que comprende las etapas: a) determinar cuantitativamente la presencia de un transposón o fragmento del mismo en un ADN; b) determinar cuantitativamente la existencia de al menos una C metilada diferencial de un dinucleótido CpG del transposón o fragmento del mismo; y c) determinar el grado de metilación de ADN normalizado a través de los valores determinados en las etapas a) y b).
Por consiguiente, según la invención se determina cuantitativamente en una primera etapa la presencia de un transposón en un ADN dado (por ejemplo aislado de una biopsia). Esta etapa proporciona un valor que da información sobre la densidad/frecuencia (con respecto al ADN usado) o la cantidad del transposón en el ADN sometido a prueba, o sea por ejemplo cuántas copias del transposón están presentes en el ADN sometido a prueba. En una forma de realización preferente se realiza esta determinación en un ADN previamente bisulfitado.
En una segunda etapa se determina cuantitativamente la presencia de al menos una citosina metilada diferencial de un dinucleótido CpG dentro del transposón detectado en la primera etapa. En una forma de realización preferente se usa según esto el mismo ADN que en la primera etapa. Por ejemplo, el ADN aislado de una muestra puede dividirse en dos partes, conteniendo cada parte preferentemente la misma cantidad de ADN. En otra forma de realización preferente se realiza esta determinación en la segunda etapa de un ADN bisulfitado (acerca de esta etapa se entra en detalle más adelante). El valor obtenido da así información sobre la presencia de citosinas metiladas o desmetiladas en muchas posiciones distintas, distribuidas aleatoriamente en el genoma. Por consiguiente, esta segunda etapa proporciona información sobre el número/la cantidad de citosinas metiladas diferenciales dentro del transposón determinado en la primera etapa. Luego se determina el grado de la metilación diferencial de la citosina en el transposón sometido a prueba.
Dado que los transposones están distribuidos aleatoriamente por el genoma, puede realizarse una normalización por medio de los dos valores obtenidos en una etapa siguiente, en la que se relacionan entre sí los valores determinados en la primera y segunda etapa. Debido al alto número de transposones en el genoma se proporciona un buen tamaño de muestra. Por consiguiente, el valor obtenido de la metilación de ADN normalizada refleja un valor de la metilación diferencial, que puede considerarse normalizado con respecto al genoma respectivo considerado.
En otras formas de realización pueden cambiarse la primera y la segunda etapa de su secuencia temporal o realizarse simultáneamente, por ejemplo por medio de PCR en tiempo real.
Por “determinación cuantitativa” debe entenderse en el presente documento una detección de la presencia de un transposón o de la presencia de una metilación diferencial. Según esto no debe realizarse una detección simple, cualitativa, es decir se contesta la pregunta de si está presente un transposón o una metilación diferencial en el ADN sometido a prueba, sino que esta presencia también debe cuantificarse (por ejemplo mediante datos de cantidad, números de copias y similares).
El experto conoce distintos procedimientos para realizar una determinación cuantitativa de este tipo. En una forma de realización preferente se realiza esta determinación cuantitativa a través de una amplificación con medición posterior de la cantidad del amplificado generado. En una forma de realización más preferente, la amplificación es una PCR. En otra forma de realización aún más preferente se realiza la determinación cuantitativa por medio de PCR en tiempo real para determinar el valor CT. En otra forma de realización se realiza la determinación cuantitativa a través de una hibridación de una sonda marcada (por ejemplo sonda de ácido nucleico) con determinación posterior de la altura de la señal generada mediante la marcación (directa o indirectamente). En otra forma de realización se realiza una hibridación in situ (por ejemplo FISH) con determinación posterior de la altura de la señal generada mediante la marcación. Otros procedimientos para tales determinaciones cuantitativas son la detección con anticuerpos específicos para 5-metil-citosina, o la detección indirecta de factores que se unen al ADN metilado por medio de anticuerpos específicos. A tales factores pertenecen por ejemplo el represor nuclear MeCP2, que se une a posiciones de CpG simétricamente metiladas del genoma, así como MBD1, MBD2, MBD4.
En otras formas de realización el ADN se deriva de organismos, tejidos, células, biopsias, o una muestra. Preferentemente el ADN es ADN aislado. En una forma de realización el ADN aislado es ADN genómico y/o eucariota. Preferentemente este ADN es el ADN de un vertebrado, aún más preferentemente el de una ser humano. En otra forma de realización preferente, la preparación del ADN no comprende la propia toma de muestras, sino que se basa en material de muestra ya obtenido. En otra forma de realización preferente, los tejidos, células, biopsias, muestras de los que se deriva el ADN se derivan de un individuo sano o un individuo enfermo o pacientes.
En otras formas de realización la muestra se selecciona del grupo constituido por una muestra de sangre, una muestra tisular, una muestra de saliva, una muestra de orina, un frotis y una muestra de heces. En una forma de realización preferente la muestra es una muestra de orina. Esto es especialmente ventajoso para la detección de un carcinoma de vejiga y/o próstata.
En otras formas de realización de la invención, el transposón se selecciona del grupo constituido por un elemento LINE, un elemento Alu (secuencia consenso Alu; Kariya et al. Gene. 1987;53(1):1-10), un elemento HERV o un fragmento de los mismos. En una forma de realización especial, el transposón es un elemento LINE-1 (n.º de registro de GenBank M80343) o un fragmento del mismo. De manera aún más preferente, el fragmento del transposón es la región promotora de un transposón. Esto tiene la ventaja de que está presente una alta frecuencia de CpG y por consiguiente puede determinarse mejor el grado de metilación. En la forma de realización más preferente, el fragmento del transposón es la región promotora de un elemento LINE-1.
Por “metilación diferencial” se entiende en el presente documento el estado de metilación existente en las posibles formas de desarrollo distintas de un ADN dado. Si se habla de una “metilación diferencial de una citosina” (C), entonces se entiende por esto el estado de metilación de la respectiva citosina. Éste puede ser binario o bien metilado, es decir esta citosina se encuentra como 5mC, o puede estar no metilada (o desmetilada), es decir la respectiva citosina no presenta ningún grupo 5-etilo.
Un procedimiento preferido para determinar la existencia de una metilación diferencial (o la existencia de una metilación diferencial de una citosina) se basa en la bisulfitación de ADN con análisis posterior del ADN bisulfitado generado.
Para llegar desde ADN aislado hasta ADN transformado con bisulfito, se transforma éste mediante una reacción bisulfitación suficientemente conocida por el experto. Según esto se transforman las citosinas no metiladas del ADN mediante el bisulfito en uracilo. Como consecuencia de la transformación pueden existir diversas variantes de un ácido nucleico transformado que dependen del número de citosinas no metiladas de este ácido nucleico. Un ácido nucleico, que por ejemplo puede contener 2 citosinas según esto, en cada caso según el estado de metilación de estas citosinas, conduce a 4 variantes distintas tras la bisulfitación, dado que puede/pueden encontrarse no metilada(s) o bien ninguna, la primera, la segunda o bien las dos citosinas y se transforma/transforman en uracilo. Estas variantes distintas pueden detectarse en una forma de realización preferente por medio de cebadores específicos o conjunto de cebadores. A la transformación puede incorporarse, en una forma de realización, una etapa adicional de purificación del ADN bisulfitado. En otra forma de realización, el procedimiento de la invención comprende la bisulfitación del ADN como etapa adicional. Preferentemente como primera etapa, o antes de la determinación cuantitativa de la existencia de una citosina metilada diferencial de un dinucleótido CpG.
En otra forma de realización especialmente preferente comprende la etapa a) la amplificación del ADN no bisulfitado con al menos un par de cebadores, que es específico para un transposón o fragmento del mismo, o como alternativa la amplificación del ADN bisulfitado con al menos un par de cebadores que es específico para un transposón bisulfitado o fragmento del mismo, no comprendiendo los cebadores ninguna posición metilada diferencial del transposón, es decir no comprendiendo ninguna C o U/T transformados de un dinucleótido CpG; además comprende la etapa b) la amplificación del ADN bisulfitado con al menos un par de cebadores, que es específico para el transposón o fragmento del mismo (que se determinó n la etapa a)) y que comprende al menos un cebador, que comprende al menos una posición metilada diferencial del transposón, es decir puede discriminarse entre al menos una C de un CpG metilado y al menos un U/T de un CpG bisulfitado no metilado; además comprende la etapa c) la determinación del grado de metilación de ADN normalizado a través de la proporción de los amplificados formados en las etapas a) y b).
En otras palabras, para la determinación en la etapa a) puede encontrarse el ADN o bien no bisulfitado (o sea por ejemplo directamente tras el aislamiento de una muestra) o bien ya bisulfitado. En el primer caso puede usarse cualquier cebador específico para el transposón para su amplificación; en el último caso debería de encargarse de que los cebadores usados no comprendan ningún sitio metilado diferencial (o sea ninguna citosina de un dinucleótido CpG). En una forma de realización preferente se usa en las etapas a) y b) el mismo volumen de ADN, a este respecto se ha aislado el ADN preferentemente en una mezcla de reacción de una muestra. Aún más preferentemente se usan en la etapa a) y b) iguales cantidades de ADN. También a este respecto se ha aislado el ADN preferentemente en una mezcla de reacción de una muestra.
En la etapa b), que se realiza siempre con ADN bisulfitado, esto es precisamente lo contrario; en este caso debería comprender al menos un cebador al menos un sitio metilado diferencial del transposón amplificado en la etapa a) (o sea al menos una citosina de un dinucleótido CpG). A este respecto no desempeña ningún papel si el al menos un cebador es específico para el al menos un sitio metilado diferencial en la cadena sentido o la antisentido del ADN. Por consiguiente, a través de este(estos) cebador(es) puede determinarse una metilación del ADN de partida existente o no existente en la posición dada sometida a prueba. Si se obtiene un amplificado con cebadores, que son específicos para un CpG, entonces existe en el respectivo sitio una metilación del ADN original, dado que no se realiza ninguna transformación en caso de la reacción de bisulfitación. Si se obtiene un amplificado con cebadores que son específicos para un CpG bisulfitado, entonces no existe en el respectivo sitio ninguna metilación (una desmetilación) del ADN original. Según esto puede determinarse (en cada caso según el tipo de cebadores usados) la metilación o la desmetilación.
Puede determinarse para la determinación según la invención del grado de metilación o bien la metilación o bien la desmetilación del ADN del transposón, dado que estos dos estados se corresponden directamente entre sí. Si se usa según esto un par de cebadores específicos para CpG, entonces se determina el grado de metilación del ADN a través de la metilación; si se usa un par de cebadores específicos para un CpG bisulfitado, entonces se determina el grado de metilación del ADN a través de la desmetilación.
En una forma de realización preferente, al menos un cebador del al menos un par de cebadores es específico para al menos una posición metilada diferencial del transposón; aún más preferentemente, los dos cebadores del al menos un par de cebadores son específicos para al menos una posición metilada diferencial del transposón. Esto tiene la ventaja de que se consigue una mejor especificidad y mejor amplificación.
En otras formas de realización preferentes, los cebadores usados son específicos para más de una posición metilada diferencial. Tales cebadores son específicos para más de una citosina de un CpG o CpG bisulfitado. En formas de realización especialmente preferentes, los cebadores son específicos para 2, 3, 4 o más de 4 posiciones metiladas diferenciales.
Dado que los cebadores son además específicos para un transposón, éstos son específicos en una forma de realización preferente para un elemento LINE, un elemento Alu, un elemento HERV, un elemento HERV-K o un fragmento de los mismos. En una forma de realización especialmente preferente, los cebadores son específicos para un elemento LINE-1 o un fragmento del mismo. Aún más preferentemente, los cebadores son específicos para la región promotora de un transposón. Esto tiene la ventaja de que está presente una alta frecuencia de CpG y por consiguiente puede determinarse mejor el grado de metilación. En la forma de realización más preferente, los cebadores son específicos para la región promotora de un elemento LINE-1.
En otra forma de realización, los cebadores usados tienen un longitud al menos de 15 nucleótidos, preferentemente una longitud de 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 o más de 25 nucleótidos. Un par de cebadores puede comprender cebadores con distintas longitudes. En una forma de realización preferente, los cebadores tienen una longitud de 18 a 35 nucleótidos, En otra forma de realización preferente, los cebadores tienen una longitud de 20-30 nucleótidos.
En una forma de realización preferente, los cebadores de un par de cebadores son específicos o bien exclusivamente para al menos una citosina de un dinucleótido CpG o bien exclusivamente para al menos una 5 citosina de un dinucleótido CpG bisulfitado.
Los cebadores pueden comprender al menos un nucleótido en cada sitio específico para una posición metilada diferencial, es decir en el extremo 5’ del oligonucleótido de cebador, en el extremo 3’ o cada posición entremedias. En una forma de realización especialmente preferente se encuentra el al menos un nucleótido específico para una posición metilada diferencial, en el extremo 3’ del oligonucleótido de cebador. Esto tiene la ventaja de una
10 especificidad elevada.
En otra forma de realización especialmente preferente, los pares de cebadores usados en la etapa a) y etapa b) se encuentran directamente adyacentes a la región amplificada del transposón. La expresión “directamente adyacente” debe entenderse según esto de modo que entre las regiones del transposón amplificadas en la etapa a) y en la etapa b) se encuentra una distancia de ≤ 6000 pb, ≤ 5000 pb, ≤ 4000 pb, ≤ 3000 pb, ≤ 2000 pb, ≤ 1000 pb, ≤ 800 pb,
15 ≤ 600 pb, ≤ 500 pb, más preferentemente ≤ 400 pb o ≤ 300 pb y aún más preferentemente ≤ 200 pb o ≤ 100 pb. En formas de realización aún más preferentes es esta distancia ≤ 80 pb, ≤ 50 pb, o ≤ 10 pb. En otras formas de realización aún más preferentes es la distancia 0 pb, o se solapan las zonas amplificadas.
El experto puede generar debido a su conocimiento una pluralidad de cebadores según la invención que son específicos para al menos una posición metilada diferencial de un transposón. Esto debe describirse a continuación
20 mediante la región promotora del elemento LINE-1.
La secuencia de ácido nucleico de esta región promotora del elemento LINE-1 (N.º de registro de GenBank M80343) es:
en la que se destacaron CpG mediante mayúsculas.
25 En el caso de una metilación completa de esta secuencia promotora con bisulfitación posterior resulta según esto la siguiente secuencia de ácido nucleico (SEC ID N.º 1):
en la que el CpG metilado y los nucleótidos transformados mediante la bisulfitación de C en U (o T) están representados en mayúsculas.
30 En el caso de un desmetilación completa de esta secuencia promotora con bisulfitación posterior resulta según esto la siguiente secuencia de ácido nucleico (SEC ID N.º 2):
en la que los CpG desmetilados (y transformados) y los nucleótidos transformados mediante la bisulfitación de C en U (o T) están representados en mayúsculas.
Debido a que SEC ID N.º 1 y SEC ID N.º 2 pueden discriminar según esto cebadores, entre en al menos un sitio se seleccionan ADN metilados diferenciales. Lógicamente es familiar para el experto que también se proporcione una cadena antisentido a la cadena sentido mostrada. En este caso están presentes los dinucleótidos 5’-CpG-3’ que corresponden a los dinucleótidos 5’-CpG-3’, que igualmente se encuentran metilados de manera diferencial. Según esto pueden seleccionarse también cebadores por medio de la información de secuencia de la cadena antisentido.
Dado que tras la reacción de bisulfitación la cadena sentido y antisentido ya no son complementarias entre sí, pueden generarse en caso de la existencia de una posición metilada diferencial además cuatro cebadores específicos distintos: 1) de secuencia idéntica y específico para la cadena sentido transformada, 2) complementario y específico para la cadena sentido transformada, 3) de secuencia idéntica y específico para la cadena antisentido transformada, 4) complementario y específico para la cadena antisentido transformada. Dado que la posición metilada diferencial puede encontrarse en dos estados, resultan por consiguiente ocho posibles cebadores.
Como ejemplo se parte de la secuencia de ADN bicatenaria:
5’-AGCACGT-3’ (sentido)
3 ’-TCGTGCA-5’ (antisentido)
Tras la reacción de bisulfitación resulta de la misma, según en cada caso el estado de metilación, respectivamente las dos cadenas ya no complementarias:
metilada: 5’-AGUACGT-3’ y 3’-TUGTGCA-5’;
desmetilada: 5’-AGUAUGT-3’ y 3’-TUGTGUA-5’.
Para cada una de estas 4 secuencias puede generarse sólo para la amplificación un cebador de secuencia idéntica y un cebador que es complementario a la secuencia, o sea:
metilada:
5’-AGUACGT-3’ y 5’-ACGTACT-3’, 5’-ACGTGUT-3’ y 5’-AACACGT-3’,
desmetilada:
5’-AGUAUGT-3’ y 5’-ACATACT-3’, 5’-AUGTGUT-3’ y 5’-AACACAT-3’.
Ejemplos y formas de realización aún más preferentes para tales cebadores, que son específicos para una o varias citosinas (bisulfitadas) de dinucleótidos CpG y con ello son específicos para al menos una posición metilada diferencial de un transposón, se proporcionan en la SEC ID N.º 3 -1048 o las tablas 1 -12. Según esto, las tablas 1 4 proporcionan cebadores especialmente preferentes para el elemento LINE-1, las tablas 5 -8 proporcionan cebadores especialmente preferentes para el elemento Alu y las tablas 9 -12 proporcionan cebadores especialmente preferentes para el elemento HERV-K. Los cebadores se proporcionan en orientación 5’ -3’.
En formas de realización preferentes, la invención se refiere a los siguientes oligonucleótidos de este tipo y a su uso en el procedimiento según la invención:
secuencias de cebador de secuencia idéntica o complementarias que son específicas para la cadena sentido
o antisentido, metilada o desmetilada transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1, es decir SEC ID N.º 3 -436; más preferentemente SEC ID N.º 3 -112, o SEC ID N.º 113 -220, o SEC ID N.º 221 -336, o SEC ID N.º 337 -436; aún más preferentemente SEC ID N.º 3 -57, o SEC ID N.º 58 -112, o SEC ID N.º 113 -166, o SEC ID N.º 167 -220, o SEC ID N.º 221 -278, o SEC ID N.º 279 -336, o SEC ID N.º 337 -386, o SEC ID N.º 387 -436.
Secuencias de cebadores de secuencia idéntica o complementarias que son específicas para la cadena sentido o antisentido, metilada o desmetilada transformada con bisulfito del elemento Alu, es decir SEC ID N.º 437 -612; más preferentemente SEC ID N.º 437 -476, o SEC ID N.º 477 -522, o SEC ID N.º 523 -570, o SEC ID N.º 571 -612; aún más preferentemente SEC ID N.º 437 -456, o SEC ID N.º 457 -476, o SEC ID N.º 477 -499, o SEC ID N.º 500 5 522, o SEC ID N.º 523 -546, o SEC ID N.º 547 -570, o SEC ID N.º 571 -591, o SEC ID N.º 592 -612.
Secuencias de cebadores de secuencia idéntica o complementarias que son específicas para la cadena sentido o antisentido, metilada o desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K, es decir SEC ID N.º 613 1048; más preferentemente SEC ID N.º 613 -708, o SEC ID N.º 709 -796, o SEC ID N.º 797 -922, o SEC ID N.º 923 -1048; aún más preferentemente SEC ID N.º 613 -660, o SEC ID N.º 661 -708, o SEC ID N.º 709 -752, o SEC
10 IDN.º753-796,oSECIDN.º797-859,oSECIDN.º860-922,oSECIDN.º923-985,oSECIDN.º986-1048.
Tabla 1: secuencias de cebador de secuencia idéntica preferentes, específicas para la cadena sentido metilada o desmetilada transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
GGGGAGGAGTTAAGATGGTC
3 GGGGAGGAGTTAAGATGGTT 58
GGTCGAATAGGAATAGTTTC
4 GGTTGAATAGGAATAGTTTT 59
TTCGGTTTATAGTTTTTAGC
5 TTTGGTTTATAGTTTTTAGT 60
TTATAGTTTTTAGCGTGAGC
6 TTATAGTTTTTAGTGTGAGT 61
TAGTTTTTAGCGTGAGCGAC
7 TAGTTTTTAGTGTGAGTGAT 62
GCGTGAGCGACGTAGAAGAC
8 GTGTGAGTGATGTAGAAGAT 63
GTATTTTTATTTGAGGTATC
9 GTATTTTTATTTGAGGTATT 64
GGGAGTGTTAGATAGTGGGC
10 GGGAGTGTTAGATAGTGGGT 65
GCGTAGGTTAGTGTGTGTGC
11 GTGTAGGTTAGTGTGTGTGT 66
GGTTAGTGTGTGTGCGTATC
12 GGTTAGTGTGTGTGTGTATT 67
AGTGTGTGTGCGTATCGTGC
13 AGTGTGTGTGTGTATTGTGT 68
TGTGTGTGCGTATCGTGCGC
14 TGTGTGTGTGTATTGTGTGT 69
GTGCGTATCGTGCGCGAGTC
15 GTGTGTATTGTGTGTGAGTT 70
TGCGCGAGTCGAAGTAGGGC
16 TGTGTGAGTTGAAGTAGGGT 71
TATTGTTTTATTTGGGAAGC
17 TATTGTTTTATTTGGGAAGT 72
GAGTTAAAGAAAGGGGTGAC
18 GAGTTAAAGAAAGGGGTGAT 73
TAAAGAAAGGGGTGACGGTC
19 TAAAGAAAGGGGTGATGGTT 74
ACGGTCGTATTTGGAAAATC
20 ATGGTTGTATTTGGAAAATT 75
AAATCGGGTTATTTTTATTC
21 AAATTGGGTTATTTTTATTT 76
TATTTTTATTCGAATATTGC
22 TATTTTTATTTGAATATTGT 77
AATATTGCGTTTTTTAGATC
23 AATATTGTGTTTTTTAGATT 78
TTTAGATCGGTTTAAGAAAC
24 TTTAGATTGGTTTAAGAAAT 79
AGATCGGTTTAAGAAACGGC
25 AGATTGGTTTAAGAAATGGT 80
TTTAAGAAACGGCGTATTAC
26 TTTAAGAAATGGTGTATTAT 81
TTATATTTTATATTTGGTTC
27 TTATATTTTATATTTGGTTT 82
TTTGGTTCGGAGGGTTTTAC
28 TTTGGTTTGGAGGGTTTTAT 83
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
TCGGAGGGTTTTACGTTTAC
29 TTGGAGGGTTTTATGTTTAT 84
TTTTACGTTTACGGAATTTC
30 TTTTATGTTTATGGAATTTT 85
TTGAGATTAAATTGTAAGGC
31 TTGAGATTAAATTGTAAGGT 86
TTAAATTGTAAGGCGGTAAC
32 TTAAATTGTAAGGTGGTAAT 87
AACGAGGTTGGGGGAGGGGC
33 AATGAGGTTGGGGGAGGGGT 88
AGGTTGGGGGAGGGGCGTTC
34 AGGTTGGGGGAGGGGTGTTT 89
TTTAGGTAAATAAAGTAGTC
35 TTTAGGTAAATAAAGTAGTT 90
ATAAAGTAGTCGGGAAGTTC
36 ATAAAGTAGTTGGGAAGTTT 91
AGTAGTGGTTTTTTTAGTAC
37 AGTAGTGGTTTTTTTAGTAT 92
GTAGTTGGAGATTTGAGAAC
38 GTAGTTGGAGATTTGAGAAT 93
GTTTTTGATTTTTGATTTTC
39 GTTTTTGATTTTTGATTTTT 94
GGTATATTGATATTTTATAC
40 GGTATATTGATATTTTATAT 95
TTAGAAAGGATATTTATATC
41 TTAGAAAGGATATTTATATT 96
AAAATTGGAAATTTTAAAAC
42 AAAATTGGAAATTTTAAAAT 97
GAAATTTTAAAACGTAGAGC
43 GAAATTTTAAAATGTAGAGT 98
TTTTTTTTTTTTAAAGGAAC
44 TTTTTTTTTTTTAAAGGAAT 99
GGATGGAGAATGATTTTGAC
45 GGATGGAGAATGATTTTGAT 100
GAGAGAAGAAGGTTTTAGAC
46 GAGAGAAGAAGGTTTTAGAT 101
ATTAAATTATTTTGAGTTAC
47 ATTAAATTATTTTGAGTTAT 102
GGAGTTGAAAATTAAGGTTC
48 GGAGTTGAAAATTAAGGTTT 103
AATTAAGGTTCGAGAATTAC
49 AATTAAGGTTTGAGAATTAT 104
ATGTAGAAGTTTTAGGAGTC
50 ATGTAGAAGTTTTAGGAGTT 105
GAAGTTTTAGGAGTCGATGC
51 GAAGTTTTAGGAGTTGATGT 106
TGAAATGAATGAAATGAAGC
52 TGAAATGAATGAAATGAAGT 107
TGTGAAAAGATTAAATTTAC
53 TGTGAAAAGATTAAATTTAT 108
ATTTAGTAAGGTAGGTTAAC
54 ATTTAGTAAGGTAGGTTAAT 109
ATTTAGGAAATATAGAGAAC
55 ATTTAGGAAATATAGAGAAT 110
GTTATAAAGATATTTTTC
56 GTTATAAAGATATTTTTT 111
GGTAGTTAGAGAGAAAGGTC
57 GGTAGTTAGAGAGAAAGGTT 112
Tabla 2: secuencias de cebador complementarias preferentes, específicas para la cadena sentido metilada o desmetilada transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
TTTCCTTTAAAAATAACCCG
113 TTTCCTTTAAAAATAACCCA 167
TCTTAAAATTACTCTTCTCG
114 TCTTAAAATTACTCTTCTCA 168
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
CGAAAAATATCTTTATAACG
115 CAAAAAATATCTTTATAACA 169
ATATTTCCTAAATCTAAACG
116 ATATTTCCTAAATCTAAACA 170
TCAAATACACCAATCAAACG
117 TCAAATACACCAATCAAACA 171
TCTCTAAACTTCCCTTCTCG
118 TCTCTAAACTTCCCTTCTCA 172
CCCTTTCTTCCAATTAATCG
119 CCCTTTCTTCCAATTAATCA 173
TCTTCCAATTAATCGCATCG
120 TCTTCCAATTAATCACATCA 174
AAACTTCTACATTCTTCACG
121 AAACTTCTACATTCTTCACA 175
CATTCTTCACGTAATTCTCG
122 CATTCTTCACATAATTCTCA 176
TTAATTTAAATATCCTCCCG
123 TTAATTTAAATATCCTCCCA 177
AACTCAAAATAATTTAATCG
124 AACTCAAAATAATTTAATCA 178
AACCTTCTTCTCTCAACTCG
125 AACCTTCTTCTCTCAACTCA 179
ATTACTAATAAAAAACTACG
126 ATTACTAATAAAAAACTACA 180
CCTTTAAAAAAAAAAAAACG
127 CCTTTAAAAAAAAAAAAACA 181
AAAAAAAAAAACGCTCTACG
128 AAAAAAAAAAACACTCTACA 182
AATATACAAATAAATTTTCG
129 AATATACAAATAAATTTTCA 183
TCTATTAAAATACCCTACCG
130 TCTATTAAAATACCCTACCA 184
CCTCCCAATTAAACTACTCG
131 CCTCCCAATTAAACTACTCA 185
AAAAACAATCTATCTACCCG
132 AAAAACAATCTATCTACCCA 186
TTCTCAAATCTCCAACTACG
133 TTCTCAAATCTCCAACTACA 187
AATAAACTCCACCCAATTCG
134 AATAAACTCCACCCAATTCA 188
CACCCAATTCGAACTTCCCG
135 CACCCAATTCAAACTTCCCA 189
AACCTAAACAATAACGAACG
136 AACCTAAACAATAACAAACA 190
ACGCCCCTCCCCCAACCTCG
137 ACACCCCTCCCCCAACCTCA 191
CTCCCCCAACCTCGTTACCG
138 CTCCCCCAACCTCATTACCA 192
TACTATACTAACAATCAACG
139 TACTATACTAACAATCAACA 193
TAACAATCAACGAAATTCCG
140 TAACAATCAACAAAATTCCA 194
TCAACGAAATTCCGTAAACG
141 TCAACAAAATTCCATAAACA 195
CGTAAACGTAAAACCCTCCG
142 CATAAACATAAAACCCTCCA 196
AAATATAAAATATAATCTCG
143 AAATATAAAATATAATCTCA 197
AAATATAATCTCGTAATACG
144 AAATATAATCTCATAATACA 198
TATAATCTCGTAATACGCCG
145 TATAATCTCATAATACACCA 199
ATACGCCGTTTCTTAAACCG
146 ATACACCATTTCTTAAACCA 200
TTAAACCGATCTAAAAAACG
147 TTAAACCAATCTAAAAAACA 201
TCTAAAAAACGCAATATTCG
148 TCTAAAAAACACAATATTCA 202
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
ATTCGAATAAAAATAACCCG
149 ATTCAAATAAAAATAACCCA 203
AACCCGATTTTCCAAATACG
150 AACCCAATTTTCCAAATACA 204
CGATTTTCCAAATACGACCG
151 CAATTTTCCAAATACAACCA 205
AAACTCCCTAACCCCTTACG
152 AAACTCCCTAACCCCTTACA 206
CCAAATAAAACAATACCTCG
153 CCAAATAAAACAATACCTCA 207
CAATACCTCGCCCTACTTCG
154 CAATACCTCACCCTACTTCA 208
CCTCGCCCTACTTCGACTCG
155 CCTCACCCTACTTCAACTCA 209
TCGCCCTACTTCGACTCGCG
156 TCACCCTACTTCAACTCACA 210
CCTACTTCGACTCGCGCACG
157 CCTACTTCAACTCACACACA 211
TTCGACTCGCGCACGATACG
158 TTCAACTCACACACAATACA 212
CGCACACACACTAACCTACG
159 CACACACACACTAACCTACA 213
TCCCTAATAAAATAAACCCG
160 TCCCTAATAAAATAAACCCA 214
TAAAAATACAAAAATCACCG
161 TAAAAATACAAAAATCACCA 215
AAAAATCACCGTCTTCTACG
162 AAAAATCACCATCTTCTACA 216
AATCACCGTCTTCTACGTCG
163 AATCACCATCTTCTACATCA 217
CGTCTTCTACGTCGCTCACG
164 CATCTTCTACATCACTCACA 218
ACGCTAAAAACTATAAACCG
165 ACACTAAAAACTATAAACCA 219
ACCGAAACTATTCCTATTCG
166 ACCAAAACTATTCCTATTCA 220
Tabla 3: secuencias de cebador de secuencia idéntica preferentes, específicas para la cadena antisentido metilada o desmetilada transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
TGTAGTTTTTTTTTAGTTTC
221 TGTAGTTTTTTTTTAGTTTT 279
TTTTGGTATGATTTTGTAGC
222 TTTTGGTATGATTTTGTAGT 280
ATTTTGTAGCGGTTGGTATC
223 ATTTTGTAGTGGTTGGTATT 281
TGGTTTGTAGGGTTTTTGTC
224 TGGTTTGTAGGGTTTTTGTT 282
TTTTTTTTTGAGGGTAATTC
225 TTTTTTTTTGAGGGTAATTT 283
GTTTTGGAGTTGTTTTTTTC
226 GTTTTGGAGTTGTTTTTTTT 284
TGTATTTTTTGAATTTGAAC
227 TGTATTTTTTGAATTTGAAT 285
TTTAGGTATATTAATTAGAC
228 TTTAGGTATATTAATTAGAT 286
TTTTTTAAATTTTTTTTTTC
229 TTTTTTAAATTTTTTTTTTT 287
ATTTTTTTTTTTAGTTGATC
230 ATTTTTTTTTTTAGTTGATT 288
TTTTTTTAGTTGATCGTATC
231 TTTTTTTAGTTGATTGTATT 289
GAGGTTTTTGTATTTTTTAC
232 GAGGTTTTTGTATTTTTTAT 290
GTATTTTTTACGTAGTTTTC
233 GTATTTTTTATGTAGTTTTT 291
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
TTTGGTTTGAATGTTTTTTC
234 TTTGGTTTGAATGTTTTTTT 292
TAGTTTAGAGTAATTTGATC
235 TAGTTTAGAGTAATTTGATT 293
AAGTTTTTTTTTTTTAGTTC
236 AAGTTTTTTTTTTTTAGTTT 294
TGTTGTTGGTGAGGAATTGC
237 TGTTGTTGGTGAGGAATTGT 295
TTTTTTGGAGGAGGAGAGGC
238 TTTTTTGGAGGAGGAGAGGT 296
GAGGAGGAGAGGCGTTTTGC
239 GAGGAGGAGAGGTGTTTTGT 297
TGATGTATAGATGGGTTTTC
240 TGATGTATAGATGGGTTTTT 298
GTTTGTTGGAATATTTTGTC
241 GTTTGTTGGAATATTTTGTT 299
GTTTTTTAGTTAGGTTGTTC
242 GTTTTTTAGTTAGGTTGTTT 300
AGGAGGTAGTTTGTTTGTTC
243 AGGAGGTAGTTTGTTTGTTT 301
GTTTTTAGATTTTTAGTTGC
244 GTTTTTAGATTTTTAGTTGT 302
TGGTGGGTTTTATTTAGTTC
245 TGGTGGGTTTTATTTAGTTT 303
TTATTTAGTTCGAGTTTTTC
246 TTATTTAGTTTGAGTTTTTT 304
AAGTAAGTTTGGGTAATGGC
247 AAGTAAGTTTGGGTAATGGT 305
AAGTTTGGGTAATGGCGGGC
248 AAGTTTGGGTAATGGTGGGT 306
GGCGTTTTTTTTTTAGTTTC
249 GGTGTTTTTTTTTTAGTTTT 307
TTTTTTTTAGTTTCGTTGTC
250 TTTTTTTTAGTTTTGTTGTT 308
TTGTTGTGTTAGTAATTAGC
251 TTGTTGTGTTAGTAATTAGT 309
TTAGTAATTAGCGAGATTTC
252 TTAGTAATTAGTGAGATTTT 310
ATTAGCGAGATTTCGTGGGC
253 ATTAGTGAGATTTTGTGGGT 311
TCGTGGGCGTAGGATTTTTC
254 TTGTGGGTGTAGGATTTTTT 312
TAGGTGTGGGATATAGTTTC
255 TAGGTGTGGGATATAGTTTT 313
GGGATATAGTTTCGTGGTGC
256 GGGATATAGTTTTGTGGTGT 314
ATATAGTTTCGTGGTGCGTC
257 ATATAGTTTTGTGGTGTGTT 315
GGTGCGTCGTTTTTTAAGTC
258 GGTGTGTTGTTTTTTAAGTT 316
TTTAAGTCGGTTTGAAAAGC
259 TTTAAGTTGGTTTGAAAAGT 317
GTTTGAAAAGCGTAATATTC
260 GTTTGAAAAGTGTAATATTT 318
TATTCGGGTGGGAGTGATTC
261 TATTTGGGTGGGAGTGATTT 319
TGATTCGATTTTTTAGGTGC
262 TGATTTGATTTTTTAGGTGT 320
TCGATTTTTTAGGTGCGATC
263 TTGATTTTTTAGGTGTGATT 321
GGAATTTTTTGATTTTTTGC
264 GGAATTTTTTGATTTTTTGT 322
TTTAGGTGAGGTAATGTTTC
265 TTTAGGTGAGGTAATGTTTT 323
GTAATGTTTCGTTTTGTTTC
266 GTAATGTTTTGTTTTGTTTT 324
GTTTCGTTTTGTTTCGGTTC
267 GTTTTGTTTTGTTTTGGTTT 325
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
TTCGTTTTGTTTCGGTTCGC
268 TTTGTTTTGTTTTGGTTTGT 326
TTTTGTTTCGGTTCGCGTAC
269 TTTTGTTTTGGTTTGTGTAT 327
TTTCGGTTCGCGTACGGTGC
270 TTTTGGTTTGTGTATGGTGT 328
GCGTATATATATTGGTTTGC
271 GTGTATATATATTGGTTTGT 329
TTTTTTAGTGAGATGAATTC
272 TTTTTTAGTGAGATGAATTT 330
ATGGAAATGTAGAAATTATC
273 ATGGAAATGTAGAAATTATT 331
TAGAAATTATCGTTTTTTGC
274 TAGAAATTATTGTTTTTTGT 332
AAATTATCGTTTTTTGCGTC
275 AAATTATTGTTTTTTGTGTT 333
TCGTTTTTTGCGTCGTTTAC
276 TTGTTTTTTGTGTTGTTTAT 334
TACGTTGGGAGTTGTAGATC
277 TATGTTGGGAGTTGTAGATT 335
GATCGGAGTTGTTTTTATTC
278 GATTGGAGTTGTTTTTATTT 336
Tabla 4: secuencias de cebador complementarias preferentes, específicas para la cadena antisentido metilada o desmetilada transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1. Tabla 5: secuencias de cebador de secuencia idéntica preferentes, específicas para la cadena sentido metilada o desmetilada transformada con bisulfito del elemento Alu. Tabla 6: secuencias de cebador complementarias preferentes, específicas para la cadena sentido metilada o desmetilada transformada con bisulfito del elemento Alu. Tabla 7: secuencias de cebador de secuencia idéntica preferentes, específicas para la cadena antisentido metilada o desmetilada transformada con bisulfito del elemento Alu. Tabla 8: secuencias de cebador complementarias preferentes, específicas para la cadena antisentido metilada o desmetilada transformada con bisulfito del elemento Alu.
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
AAAAAAAAACCAAAATAACCG
337 AAAAAAAAACCAAAATAACCA 387
AACCGAATAAAAACAACTCCG
338 AACCAAATAAAAACAACTCCA 388
TCCGATCTACAACTCCCAACG
339 TCCAATCTACAACTCCCAACA 389
CTACAACTCCCAACGTAAACG
340 CTACAACTCCCAACATAAACA 390
CAACTCCCAACGTAAACGACG
341 CAACTCCCAACATAAACAACA 391
ACGTAAACGACGCAAAAAACG
342 ACATAAACAACACAAAAAACA 392
ACATTTCCATCTAAAATACCG
343 ACATTTCCATCTAAAATACCA 393
AAAAATACCAAACAATAAACG
344 AAAAATACCAAACAATAAACA 394
ACGCAAACCAATATATATACG
345 ACACAAACCAATATATATACA 395
AACCAATATATATACGCACCG
346 AACCAATATATATACACACCA 396
AATATATATACGCACCGTACG
347 AATATATATACACACCATACA 397
TATATATACGCACCGTACGCG
348 TATATATACACACCATACACA 398
ATACGCACCGTACGCGAACCG
349 ATACACACCATACACAAACCA 399
TACGCGAACCGAAACAAAACG
350 TACACAAACCAAAACAAAACA 400
CATTACCTCACCTAAAAAACG
351 CATTACCTCACCTAAAAAACA 401
AAATCAAAAAAAAAAATAACG
352 AAATCAAAAAAAAAAATAACA 402
CAAAAAAAAAAATAACGATCG
353 CAAAAAAAAAAATAACAATCA 403
ACGATCGCACCTAAAAAATCG
354 ACAATCACACCTAAAAAATCA 404
AAATCGAATCACTCCCACCCG
355 AAATCAAATCACTCCCACCCA 405
CACTCCCACCCGAATATTACG
356 CACTCCCACCCAAATATTACA 406
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
AATATTACGCTTTTCAAACCG
357 AATATTACACTTTTCAAACCA 407
TTCAAACCGACTTAAAAAACG
358 TTCAAACCAACTTAAAAAACA 408
AAACCGACTTAAAAAACGACG
359 AAACCAACTTAAAAAACAACA 409
CTTAAAAAACGACGCACCACG
360 CTTAAAAAACAACACACCACA 410
CTATATCCCACACCTAACTCG
361 CTATATCCCACACCTAACTCA 411
CCTAACTCGAAAAATCCTACG
362 CCTAACTCAAAAAATCCTACA 412
TCGAAAAATCCTACGCCCACG
363 TCAAAAAATCCTACACCCACA 413
TCCTACGCCCACGAAATCTCG
364 TCCTACACCCACAAAATCTCA 414
CTAAAATCAAACTACAAAACG
365 CTAAAATCAAACTACAAAACA 415
TCAAACTACAAAACGACAACG
366 TCAAACTACAAAACAACAACA 416
AACGAAACTAAAAAAAAAACG
367 AACAAAACTAAAAAAAAAACA 417
AAACTAAAAAAAAAACGCCCG
368 AAACTAAAAAAAAAACACCCA 418
CTTAAATAAACAAAACAACCG
369 CTTAAATAAACAAAACAACCA 419
ACAAAACAACCGAAAAACTCG
370 ACAAAACAACCAAAAAACTCA 420
AACAATAATTCTCCCAACACG
371 AACAATAATTCTCCCAACACA 421
GCAACTAAAAATCTAAAAACG
372 GCAACTAAAAATCTAAAAACA 422
ATCCCTAACTCCTAACCCCCG
373 ATCCCTAACTCCTAACCCCCA 423
AACACACTAACACCTCACACG
374 AACACACTAACACCTCACACA 424
CCAAAAAAAACATCTACACCG
375 CCAAAAAAAACATCTACACCA 425
AAAACTAAAAACTCTAAAACG
376 AAAACTAAAAACTCTAAAACA 426
AAAACTCTAAAACGCAAAACG
377 AAAACTCTAAAACACAAAACA 427
CTCTCCTCCTCCAAAAAAACG
378 CTCTCCTCCTCCAAAAAAACA 428
AAATAAAAAATAATTTTAACG
379 AAATAAAAAATAATTTTAACA 429
AAAAAAAAAAAACTTCAAACG
380 AAAAAAAAAAAACTTCAAACA 430
ATCAAATTACTCTAAACTACG
381 ATCAAATTACTCTAAACTACA 431
AAAACTAAAAACCAAAACTCG
382 AAAACTAAAAACCAAAACTCA 432
AACCAAAACTCGAAAACTACG
383 AACCAAAACTCAAAAACTACA 433
ATACAAAAACCTCAAAAACCG
384 ATACAAAAACCTCAAAAACCA 434
AAAACCTCAAAAACCGATACG
385 AAAACCTCAAAAACCAATACA 435
TAAAATAAATAAAATAAAACG
386 TAAAATAAATAAAATAAAACA 436
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
GGTCGGGCGCGGTGGTTTAC
437 GGTTGGGTGTGGTGGTTTAT 457
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
TTTTAGTATTTTGGGAGGTC
438 TTTTAGTATTTTGGGAGGTT 458
GTATTTTGGGAGGTCGAGGC
439 GTATTTTGGGAGGTTGAGGT 459
TTTGGGAGGTCGAGGCGGGC
440 TTTGGGAGGTTGAGGTGGGT 460
TTATTTGAGGTTAGGAGATC
441 TTATTTGAGGTTAGGAGATT 461
GGTTAATATGGTGAAATTTC
442 GGTTAATATGGTGAAATTTT 462
TAAAAATATAAAAATTAGTC
443 TAAAAATATAAAAATTAGTT 463
AATATAAAAATTAGTCGGGC
444 AATATAAAAATTAGTTGGGT 464
AATTAGTCGGGCGTGGTGGC
445 AATTAGTTGGGTGTGGTGGT 465
TTAGTCGGGCGTGGTGGCGC
446 TTAGTTGGGTGTGGTGGTGT 466
AGTCGGGCGTGGTGGCGCGC
447 AGTTGGGTGTGGTGGTGTGT 467
GTTTGTAATTTTAGTTATTC
448 GTTTGTAATTTTAGTTATTT 468
GAGGTTGAGGTAGGAGAATC
449 GAGGTTGAGGTAGGAGAATT 469
TAGGAGAATCGTTTGAATTC
450 TAGGAGAATTGTTTGAATTT 470
ATCGTTTGAATTCGGGAGGC
451 ATTGTTTGAATTTGGGAGGT 471
GGTTGTAGTGAGTCGAGATC
452 GGTTGTAGTGAGTTGAGATT 472
TTGTAGTGAGTCGAGATCGC
453 TTGTAGTGAGTTGAGATTGT 473
TATTGTATTTTAGTTTGGGC
454 TATTGTATTTTAGTTTGGGT 474
TTTAGTTTGGGCGATAGAGC
455 TTTAGTTTGGGTGATAGAGT 475
GGGCGATAGAGCGAGATTTC
456 GGGTGATAGAGTGAGATTTT 476
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
TTTTTTAAAACGAAATCTCG
477 TTTTTTAAAACAAAATCTCA 500
AACGAAATCTCGCTCTATCG
478 AACAAAATCTCACTCTATCA 501
CAAACTAAAATACAATAACG
479 CAAACTAAAATACAATAACA 502
AACTAAAATACAATAACGCG
480 AACTAAAATACAATAACACA 503
AATACAATAACGCGATCTCG
481 AATACAATAACACAATCTCA 504
TCGACTCACTACAACCTCCG
482 TCAACTCACTACAACCTCCA 505
ACTACAACCTCCGCCTCCCG
483 ACTACAACCTCCACCTCCCA 506
CCGCCTCCCGAATTCAAACG
484 CCACCTCCCAAATTCAAACA 507
TCTCCTACCTCAACCTCCCG
485 TCTCCTACCTCAACCTCCCA 508
AATAACTAAAATTACAAACG
486 AATAACTAAAATTACAAACA 509
TAACTAAAATTACAAACGCG
487 TAACTAAAATTACAAACACA 510
ACTAAAATTACAAACGCGCG
488 ACTAAAATTACAAACACACA 511
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
TACAAACGCGCGCCACCACG
489 TACAAACACACACCACCACA 512
AACGCGCGCCACCACGCCCG
490 AACACACACCACCACACCCA 513
TTATATTTTTAATAAAAACG
491 TTATATTTTTAATAAAAACA 514
TATTAACCAAAATAATCTCG
492 TATTAACCAAAATAATCTCA 515
TCCTAACCTCAAATAATCCG
493 TCCTAACCTCAAATAATCCA 516
AACCTCAAATAATCCGCCCG
494 AACCTCAAATAATCCACCCA 517
CAAATAATCCGCCCGCCTCG
495 CAAATAATCCACCCACCTCA 518
AAATACTAAAATTACAAACG
496 AAATACTAAAATTACAAACA 519
ATTACAAACGTAAACCACCG
497 ATTACAAACATAAACCACCA 520
TACAAACGTAAACCACCGCG
498 TACAAACATAAACCACCACA 521
AACGTAAACCACCGCGCCCG
499 AACGTAAACCACCGCGCCCA 522
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
TTTTTTTGAGACGGAGTTTC
523 TTTTTTTGAGACTGAGTTTT 547
AGACGGAGTTTCGTTTTGTC
524 AGACTGAGTTTCTTTTTGTT 548
AGACGGAGTTTCGTTTTGTC
525 AGACTGAGTTTCTTTTTGTT 549
TTAGGTTGGAGTGTAGTGGC
526 TTAGGTTGGAGTGTAGTGGT 550
AGGTTGGAGTGTAGTGGCGC
527 AGGTTGGAGTGTAGTGGCTT 551
GAGTGTAGTGGCGCGATTTC
528 GAGTGTAGTGGCTCTATTTT 552
TTCGGTTTATTGTAATTTTC
529 TTCTGTTTATTGTAATTTTT 553
TATTGTAATTTTCGTTTTTC
530 TATTGTAATTTTCTTTTTTT 554
TTCGTTTTTCGGGTTTAAGC
531 TTCTTTTTTCTGGTTTAAGT 555
TTTTTTTGTTTTAGTTTTTC
532 TTTTTTTGTTTTAGTTTTTT 556
GAGTAGTTGGGATTATAGGC
533 GAGTAGTTGGGATTATAGGT 557
GTAGTTGGGATTATAGGCGC
534 GTAGTTGGGATTATAGGCTT 558
AGTTGGGATTATAGGCGCGC
535 AGTTGGGATTATAGGCTCTT 559
TTATAGGCGCGCGTTATTAC
536 TTATAGGCTCTCTTTATTAT 560
AGGCGCGCGTTATTACGTTC
537 AGGCTCTCTTTATTACTTTT 561
TTTGTATTTTTAGTAGAGAC
538 TTTGTATTTTTAGTAGAGAT 562
ATGTTGGTTAGGATGGTTTC
539 ATGTTGGTTAGGATGGTTTT 563
TTTTTGATTTTAGGTGATTC
540 TTTTTGATTTTAGGTGATTT 564
TGATTTTAGGTGATTCGTTC
541 TGATTTTAGGTGATTCTTTT 565
TTAGGTGATTCGTTCGTTTC
542 TTAGGTGATTCTTTCTTTTT 566
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
AAAGTGTTGGGATTATAGGC
543 AAAGTGTTGGGATTATAGGT 567
GATTATAGGCGTGAGTTATC
544 GATTATAGGCTTGAGTTATT 568
TTATAGGCGTGAGTTATCGC
545 TTATAGGCTTGAGTTATCTT 569
AGGCGTGAGTTATCGCGTTC
546 AGGCTTGAGTTATCTCTTTT 570
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
ACCGAACGCGATAACTCACG
571 ACCAAACACAATAACTCACA 592
CCCAACACTTTAAAAAACCG
572 CCCAACACTTTAAAAAACCA 593
CACTTTAAAAAACCGAAACG
573 CACTTTAAAAAACCAAAACA 594
TTAAAAAACCGAAACGAACG
574 TTAAAAAACCAAAACAAACA 595
CACCTAAAATCAAAAAATCG
575 CACCTAAAATCAAAAAATCA 596
ACCAACATAATAAAACCCCG
576 ACCAACATAATAAAACCCCA 597
AAAAATACAAAAATTAACCG
577 AAAAATACAAAAATTAACCA 598
ATACAAAAATTAACCGAACG
578 ATACAAAAATTAACCAAACA 599
ATTAACCGAACGTAATAACG
579 ATTAACCAAACATAATAACA 600
TAACCGAACGTAATAACGCG
580 TAACCAAACATAATAACACA 601
ACCGAACGTAATAACGCGCG
581 ACCAAACATAATAACACACA 602
CCTATAATCCCAACTACTCG
582 CCTATAATCCCAACTACTCA 603
GAACTAAAACAAAAAAATCG
583 GAACTAAAACAAAAAAATCA 604
AAAAAAATCGCTTAAACCCG
584 AAAAAAATCACTTAAACCCA 605
TCGCTTAAACCCGAAAAACG
585 TCACTTAAACCCAAAAAACA 606
ACGAAAATTACAATAAACCG
586 ACAAAAATTACAATAAACCA 607
ATTACAATAAACCGAAATCG
587 ATTACAATAAACCAAAATCA 608
TACAATAAACCGAAATCGCG
588 TACAATAAACCAAAATCACA 609
ACTACACTCCAACCTAAACG
589 ACTACACTCCAACCTAAACA 610
CCAACCTAAACGACAAAACG
590 CCAACCTAAACAACAAAACA 611
AACGACAAAACGAAACTCCG
591 AACAACAAAACAAAACTCCA 612
Tabla 9: secuencias de cebador de secuencia idéntica preferentes, específicas para la cadena sentido metilada o desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K.
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
ATGATTTTATTTTTAATTTC
613 ATGATTTTATTTTTAATTTT 661
GGGTTAAATGGATTAAGGGC
614 GGGTTAAATGGATTAAGGGT 662
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
TTTAGGGATATAAAAATTGC
615 TTTAGGGATATAAAAATTGT 663
AGAGTTTGAAATATGGTTTC
616 AGAGTTTGAAATATGGTTTT 664
GGGAAGGGAAAGATTTGATC
617 GGGAAGGGAAAGATTTGATT 665
ATTTGATCGTTTTTTAGTTC
618 ATTTGATCTTTTTTTAGTTT 666
TTTGGGTAATGGAATGTTTC
619 TTTGGGTAATGGAATGTTTT 667
AATGTTTCGGTATAAAATTC
620 AATGTTTCTGTATAAAATTT 668
GGTATAAAATTCGATTGTAC
621 GGTATAAAATTCTATTGTAT 669
ATGTAAAGATTTTTGTTTAC
622 ATGTAAAGATTTTTGTTTAT 670
TTTTTTAGAGAAATATTTAC
623 TTTTTTAGAGAAATATTTAT 671
GGATTTTTTATATGTTGAAC
624 GGATTTTTTATATGTTGAAT 672
ATGTTGAACGTTGGTTTTTC
625 ATGTTGAACTTTGGTTTTTT 673
AGTTTTTTATTGTATTTTAC
626 AGTTTTTTATTGTATTTTAT 674
TTTTTTATTTGGTGTTTAAC
627 TTTTTTATTTGGTGTTTAAT 675
TTTGGGGTGAAGGTATATTC
628 TTTGGGGTGAAGGTATATTT 676
GGGTGAAGGTATATTCGAGC
629 GGGTGAAGGTATATTCTAGT 677
GTGGTTATTGAGGATAAGTC
630 GTGGTTATTGAGGATAAGTT 678
ATAAGTCGATAAGAGATTTC
631 ATAAGTCTATAAGAGATTTT 679
ATATTTATAGTTAGTTTTAC
632 ATATTTATAGTTAGTTTTAT 680
TACGGTAAGTTTGTGTATTC
633 TACTGTAAGTTTGTGTATTT 681
TATTTTAAATAGAAGATAGC
634 TATTTTAAATAGAAGATAGT 682
AAAAAATTTTAGAAGGAAAC
635 AAAAAATTTTAGAAGGAAAT 683
AAACGGAAATTTTATATTGC
636 AAACTGAAATTTTATATTGT 684
TGCGAATATGTAGTAGAGTC
637 TGCTAATATGTAGTAGAGTT 685
TCGTTAATGGTTTAGTTAAC
638 TCTTTAATGGTTTAGTTAAT 686
GTTATTAGAGTTTAAATTAC
639 GTTATTAGAGTTTAAATTAT 687
TTTTAGTAGGTTAGGTGATC
640 TTTTAGTAGGTTAGGTGATT 688
GTAATATTATAATTTTAAGC
641 GTAATATTATAATTTTAAGT 689
GTTTATTAATATTGGTTATC
642 GTTTATTAATATTGGTTATT 690
ATTAATATTGGTTATCGGTC
643 ATTAATATTGGTTATCTGTT 691
ATCGGTCGAATTTTAGTATC
644 ATCTGTCTAATTTTAGTATT 692
AGGGAGTTATATTTTTAGTC
645 AGGGAGTTATATTAGTT 693
AAGGAAGGAGATATTGAGGC
646 AAGGAAGGAGATATTGAGGT 694
GCGTGGTAATTTTTAGTAAC
647 GCTTGGTAATTTTTAGTAAT 695
TTTTTAGTAACGTTAGAATC
648 TTTTTAGTAACTTTAGAATT 696
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
ATGTGGATTTTTGTGTTTAC
649 ATGTGGATTTTTGTGTTTAT 697
GATTTTTGTGTTTACGGATC
650 GATTTTTGTGTTTACTGATT 698
TTTGTGTTTACGGATCGATC
651 TTTGTGTTTACTGATCTATT 699
GATCGATCGTGGGAGGTTTC
652 GATCTATCTTGGGAGGTTTT 700
TGATTGAAATATTAAAAGGC
653 TGATTGAAATATTAAAAGGT 701
TTATAAATTTTATATTAATC
654 TTATAAATTTTATATTAATT 702
TAGGTGTATTTAATAGTTTC
655 TAGGTGTATTTAATAGTTTT 703
TTCGAAGAGATAGTGATATC
656 TTCTAAGAGATAGTGATATT 704
GAGATAGTGATATCGAGAAC
657 GAGATAGTGATATCTAGAAT 705
CGAGAACGGGTTATGATGAC
658 CTAGAACTGGTTATGATGAT 706
CGGGTTATGATGACGATGGC
659 CTGGTTATGATGACTATGGT 707
ATGACGATGGCGGTTTTGTC
660 ATGACTATGGCTGTTTTGTT 708

Tabla 10: Secuencias de cebadores complementarias preferentes, específicas para la cadena sentido metilada o desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K.
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
AAAAAAAATAAAAAAACCCG
709 AAAAAAAATAAAAAAACCCA 753
AAAAACCCGAAAAACCAACG
710 AAAAACCCAAAAAACCAACA 754
TCAACATATAAAAAATCCCG
711 TCAACATATAAAAAATCCCA 755
CATTCATAAATATTTCTCCG
712 CATTCATAAATATTTCTCCA 756
AAAATCAACAAACAAACACG
713 AAAATCAACAAACAAACACA 757
AAACATCTCAATACTTTACG
714 AAACATCTCAATACTTTACA 758
ATAAATAAAATATTCAATCG
715 ATAAATAAAATATTCAATCA 759
AAAATCCCTACGACCTTTCG
716 AAAATCCCTACAACCTTTCA 760
ATTTCCCCCTTTTCTTTTCG
717 ATTTCCCCCTTTTCTTTTCA 761
TTTTCTTTTCGACAAAACCG
718 TTTTCTTTTCAACAAAACCA 762
TTTCGACAAAACCGCCATCG
719 TTTCAACAAAACCACCATCA 763
GCCATCGTCATCATAACCCG
720 GCCATCATCATCATAACCCA 764
GTCATCATAACCCGTTCTCG
721 GTCATCATAACCCATTCTCA 765
TCGATATCACTATCTCTTCG
722 TCAATATCACTATCTCTTCA 766
AACAAAACAAACACACAACG
723 AACAAAACAAACACACAACA 767
TAACAAAATTAAAATTTACG
724 TAACAAAATTAAAATTTACA 768
TTTTAAATCTATTTAAAACG
725 TTTTAAATCTATTTAAAACA 769
CAAAATATAAATAAATAACG
726 CAAAATATAAATAAATAACA 770
AAATAACGAAACCTCCCACG
727 AAATAACAAAACCTCCCACA 771
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
AACGAAACCTCCCACGATCG
728 AACAAAACCTCCCACAATCA 772
AACCTCCCACGATCGATCCG
729 AACCTCCCACAATCAATCCA 773
GCAACTTTATAAAAAAACCG
730 GCAACTTTATAAAAAAACCA 774
TTAAAATAAAATTTAAATCG
731 TTAAAATAAAATTTAAATCA 775
ATAATATAAAATAACTTACG
732 ATAATATAAAATAACTTACA 776
CTAAACTTTCTATTAAATCG
733 CTAAACTTTCTATTAAATCA 777
TTTCTATTAAATCGCTATCG
734 TTTCTATTAAATCACTATCA 778
AACGATCATAATAATTTCCG
735 AACAATCATAATAATTTCCA 779
CATTATTATAACAAATCTCG
736 CATTATTATAACAAATCTCA 780
CTTCTAAAACTATACCTACG
737 CTTCTAAAACTATACCTACA 781
CTAAAACTATACCTACGCCG
738 CTAAAACTATACCTACACCA 782
ACATTATCTCCTAATAAACG
739 ACATTATCTCCTAATAAACA 783
TAACTTTCTAAAAATAACCG
740 TAACTTTCTAAAAATAACCA 784
ATAACCGATACTAAAATTCG
741 ATAACCAATACTAAAATTCA 785
CCGATACTAAAATTCGACCG
742 CCAATACTAAAATTCAACCA 786
CTTATTTTCTCTAACCTACG
743 CTTATTTTCTCTAACCTACA 787
TTCGCAATATAAAATTTCCG
744 TTCACAATATAAAATTTCCA 788
TATCACCCTAACTTCTTCCG
745 TATCACCCTAACTTCTTCCA 789
CCGAATACACAAACTTACCG
746 CCAAATACACAAACTTACCA 790
ACTAACTATAAATATACTCG
747 ACTAACTATAAATATACTCA 791
ACTTATCCTCAATAACCACG
748 ACTTATCCTCAATAACCACA 792
ATCCTCAATAACCACGCTCG
749 ATCCTCAATAACCACACTCA 793
ACACCTATAAATATTTCTCG
750 ACACCTATAAATATTTCTCA 794
AAAAACCCGAAAAACCAACG
751 AAAAACCCAAAAAACCAACA 795
AAAATAAACAAACAAACACG
752 AAAATAAACAAACAAACACA 796

Tabla 11: secuencias de cebador de secuencia idéntica preferentes, específicas para la cadena antisentido metilada
o desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K.
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
AGAAAGAAATAAGGGGGTTC
797 AGAAAGAAATAAGGGGGTTT 860
AGGGGGTTCGGGGAATTAGC
798 AGGGGGTTCTGGGAATTAGT 861
TTTAGTATATGGAGGATTTC
799 TTTAGTATATGGAGGATTTT 862
TTAGTATTTATTGATTATTC
800 TTAGTATTTATTGATTATTT 863
TTATTCGTGGGTGTTTTTTC
801 TTATTCTTGGGTGTTTTTTT 864
GAGGGTTAGTAGATAAATAC
802 GAGGGTTAGTAGATAAATAT 865
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
TAAATATTTTAATGTTTTAC
803 TAAATATTTTAATGTTTTAT 866
AGTAGATGGAATGTTTAATC
804 AGTAGATGGAATGTTTAATT 867
TTTTAGTATAGATTTTTTAC
805 TTTTAGTATAGATTTTTTAT 868
ATAGATTTTTTACGGGTGTC
806 ATAGATTTTTTACTGGTGTT 869
TTAGGTTTTTTTTTTTTTAC
807 TTAGGTTTTTTTTTTTTTAT 870
TTTTAGGTAGAGGTTTTTGC
808 TTTTAGGTAGAGGTTTTTGT 871
AGAGGTTTTTGCGGTTTTTC
809 AGAGGTTTTTGCTGTTTTTT 872
GTATATGTTTTAGAGAGTAC
810 GTATATGTTTTAGAGAGTAT 873
TATTTTTTTTTTTTTTTTTC
811 TATTTTTTTTTTTTTTTTTT 874
TTTTTTTTTTCGATAAAATC
812 TTTTTTTTTTCTATAAAATT 875
TTTTCGATAAAATCGTTATC
813 TTTTCTATAAAATCTTTATT 876
CGTTATCGTTATTATGGTTC
814 CTTTATCTTTATTATGGTTT 877
CGTTATTATGGTTCGTTTTC
815 CTTTATTATGGTTCTTTTTT 878
TTCGATGTTATTGTTTTTTC
816 TTCTATGTTATTGTTTTTTT 879
AGATAAAATAGGTATATAAC
817 AGATAAAATAGGTATATAAT 880
GTGATAGGGTTAAGATTTGC
818 GTGATAGGGTTAAGATTTGT 881
TAATTTTTGTTATAGTAGTC
819 TAATTTTTGTTATAGTAGTT 882
TTTTTGGATTTATTTAAAAC
820 TTTTTGGATTTATTTAAAAT 883
TTAAAATATGGATGGATGGC
821 TTAAAATATGGATGGATGGT 884
TGGATGGCGAGGTTTTTTAC
822 TGGATGGCTAGGTTTTTTAT 885
TGGCGAGGTTTTTTACGGTC
823 TGGCTAGGTTTTTTACTGTT 886
AGGTTTTTTACGGTCGGTTC
824 AGGTTTTTTACTGTCTGTTT 887
TGTTTTTATTAGTAGAATAC
825 TGTTTTTATTAGTAGAATAT 888
CGTAATTTTGTAAAGGAATC
826 CTTAATTTTGTAAAGGAATT 889
GTTAGAATGGAATTTAGGTC
827 GTTAGAATGGAATTTAGGTT 890
GATAGTATAAAATGGTTTAC
828 GATAGTATAAAATGGTTTAT 891
TTATTTGTGTATTTGGATAC
829 TTATTTGTGTATTTGGATAT 892
ATTGTGGTAGAATTGATTTC
830 ATTGTGGTAGAATTGATTTT 893
GTTTAATTTATAATAGTTTC
831 GTTTAATTTATAATAGTTTT 894
GTTTTGTAAATAATTTATTC
832 GTTTTGTAAATAATTTATTT 895
CGTGGTTTGAGTGATATTTC
833 CTTGGTTTGAGTGATATTTT 896
TTTAGGTTTGGTAGGGTAGC
834 TTTAGGTTTGGTAGGGTAGT 897
TGATTGGTGTTATTATTTTC
835 TGATTGGTGTTATTATTTTT 898
GTTATTATTTTCGTGGAGGC
836 GTTATTATTTTCTTGGAGGT 899
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
GTATTATATATGTAGAATTC
837 GTATTATATATGTAGAATTT 900
AGTATTTTTTAAAGGTTTAC
838 AGTATTTTTTAAAGGTTTAT 901
AGGAATGTTTAGAGTTGGTC
839 AGGAATGTTTAGAGTTGGTT 902
ATGGGGTTATATAATGTAGC
840 ATGGGGTTATATAATGTAGT 903
TTATTGTTGTAATAAATTTC
841 TTATTGTTGTAATAAATTTT 904
ATTTTTGAGGTTGTGTTTAC
842 ATTTTTGAGGTTGTGTTTAT 905
TTTGAGGTTGTGTTTACGTC
843 TTTGAGGTTGTGTTTACTTT 906
TTATAAGTATAGTTTTATGC
844 TTATAAGTATAGTTTTATGT 907
TTTTTTTTTTAGGTGGTATC
845 TTTTTTTTTTAGGTGGTATT 908
TAGGTGGTATCGGTTTTAAC
846 TAGGTGGTATCTGTTTTAAT 909
TTGATTTTTTGGGGGTGGTC
847 TTGATTTTTTGGGGGTGGTT 910
GGTGGTCGATATTGAAGTTC
848 GGTGGTCTATATTGAAGTTT 911
GTCGATATTGAAGTTCGGTC
849 GTCTATATTGAAGTTCTGTT 912
TTTTATTTTTTTTAATTTGC
850 TTTTATTTTTTTTAATTTGT 913
GTTTGAGGTTGTAATGTTAC
851 GTTTGAGGTTGTAATGTTAT 914
GCGTTGATTGAGTTATTAAC
852 GCTTTGATTGAGTTATTAAT 915
TTGTTATTTTAGTTTTTTTC
853 TTGTTATTTTAGTTTTTTTT 916
TTCGAGTGTATAAGTTTATC
854 TTCTAGTGTATAAGTTTATT 917
GATTTGTTTTTAATGATTAC
855 GATTTGTTTTTAATGATTAT 918
TGTTTTTAATGATTACGTTC
856 TGTTTTTAATGATTACTTTT 919
TATATTTGTGGGTGTTTTTC
857 TATATTTGTGGGTGTTTTTT 920
AGAAAGAAATAAGGGGGTTC
858 AGAAAGAAATAAGGGGGTTT 921
AGGGGGTTCGGGGAATTAAC
859 AGGGGGTTCTGGGAATTAAT 922

Tabla 12: secuencias de cebador complementarias preferentes, específicas para la cadena antisentido metilada o desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K.
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
TAACCTTACCCCCAACCCCG
923 TAACCTTACCCCCAACCCCA 986
AATTAAATAAATTAAAAACG
924 AATTAAATAAATTAAAAACA 987
CCAAAAACACAAAAACTACG
925 CCAAAAACACAAAAACTACA 988
AAATCTAAAATATAACCTCG
926 AAATCTAAAATATAACCTCA 989
AAAAAAAAAAAACCTAACCG
927 AAAAAAAAAAAACCTAACCA 990
CCTAACCGTCCCCCAACCCG
928 CCTAACCATCCCCCAACCCA 991
CTAAACAATAAAATATCTCG
929 CTAAACAATAAAATATCTCA 992
ATATCTCGATATAAAACCCG
930 ATATCTCAATATAAAACCCA 993
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
ATATAAAACCCGATTATACG
931 ATATAAAACCCAATTATACA 994
TACAAAAACCTTTATTCACG
932 TACAAAAACCTTTATTCACA 995
CTCTCAAAAAAACACCCACG
933 CTCTCAAAAAAACACCCACA 996
AATCCTCCATATACTAAACG
934 AATCCTCCATATACTAAACA 997
TACTAAACGTTAATTCCCCG
935 TACTAAACATTAATTCCCCA 998
ATCTCTCATTACACCTTACG
936 ATCTCTCATTACACCTTACA 999
CCTTCATCTAATACCCAACG
937 CCTTCATCTAATACCCAACA 1000
CTAAAATAAAAATACACTCG
938 CTAAAATAAAAATACACTCA 1001
AATAAAAATACACTCGAACG
939 AATAAAAATACACTCAAACA 1002
TAATCATTAAAAACAAATCG
940 TAATCATTAAAAACAAATCA 1003
ATTTCAAACAAAAAATAACG
941 ATTTCAAACAAAAAATAACA 1004
AAAAATCCCAAAAAAAAACG
942 AAAAATCCCAAAAAAAAACA 1005
AACGAAAACTTTACATTACG
943 AACAAAAACTTTACATTACA 1006
ACGAATATATAACAAAACCG
944 ACAAATATATAACAAAACCA 1007
CGTTAATAACTCAATCAACG
945 CATTAATAACTCAATCAACA 1008
CCATTAAAATCTAAACCACG
946 CCATTAAAATCTAAACCACA 1009
TTCAACAAATCAAATAACCG
947 TTCAACAAATCAAATAACCA 1010
TAACATTACAACCTCAAACG
948 TAACATTACAACCTCAAACA 1011
CTTATCAATACTAACCACCG
949 CTTATCAATACTAACCACCA 1012
TCAATACTAACCACCGACCG
950 TCAATACTAACCACCAACCA 1013
CCGACCGAACTTCAATATCG
951 CCAACCAAACTTCAATATCA 1014
ATTACCAATAAAAAAACCCG
952 ATTACCAATAAAAAAACCCA 1015
AATAAAATTAATAACATACG
953 AATAAAATTAATAACATACA 1016
ATTAATAACATACGAAAACG
954 ATTAATAACATACAAAAACA 1017
TCAAAATATATAAAAACCCG
955 TCAAAATATATAAAAACCCA 1018
ATAAAATTAAAAAAACTACG
956 ATAAAATTAAAAAAACTACA 1019
AAAATAAACAACCATTATCG
957 AAAATAAACAACCATTATCA 1020
CTAATCTTAAAAAAATCACG
958 CTAATCTTAAAAAAATCACA 1021
AATTTAAAAACACTAATCCG
959 AATTTAAAAACACTAATCCA 1022
AACTATTACAAAACTTATCG
960 AACTATTACAAAACTTATCA 1023
TATTACAAAACTTATCGACG
961 TATTACAAAACTTATCAACA 1024
TATTACAACAATAAAATACG
962 TATTACAACAATAAAATACA 1025
AAAAATATTAATTAAATTCG
963 AAAAATATTAATTAAATTCA 1026
ATTAATCCGACAAAATTACG
964 ATTAATCCAACAAAATTACA 1027
Metilada
SEC ID N.º Desmetilada SEC ID N.º
TCAAAACTCCATATCAATCG
965 TCAAAACTCCATATCAATCA 1028
CAAAAAAAAACGCCTCCACG
966 CAAAAAAAAACACCTCCACA 1029
GAAATATCACTCAAACCACG
967 GAAATATCACTCAAACCACA 1030
ATTATAAATTAAACACCTCG
968 ATTATAAATTAAACACCTCA 1031
ACTCAAAACAAACTCAATCG
969 ACTCAAAACAAACTCAATCA 1032
ACAAATAAATCCAACTATCG
970 ACAAATAAATCCAACTATCA 1033
AAATCCAACTATCGATAACG
971 AAATCCAACTATCAATAACA 1034
ACTTTAAAAACAAAATATCG
972 ACTTTAAAAACAAAATATCA 1035
TAAACCATTTTATACTATCG
973 TAAACCATTTTATACTATCA 1036
ACCTAAATTCCATTCTAACG
974 ACCTAAATTCCATTCTAACA 1037
TATAAATCCCTATATCCACG
975 TATAAATCCCTATATCCACA 1038
ATCCCTATATCCACGAACCG
976 ATCCCTATATCCACAAACCA 1039
CTATATCCACGAACCGACCG
977 CTATATCCACAAACCAACCA 1040
ACCGACCGTAAAAAACCTCG
978 ACCAACCATAAAAAACCTCA 1041
CACTAAAACATAATTAAACG
979 CACTAAAACATAATTAAACA 1042
AAAAATTACTAATAACCTCG
980 AAAAATTACTAATAACCTCA 1043
CCGAAAAAACAATAACATCG
981 CCAAAAAAACAATAACATCA 1044
AAACAATAACATCGAAAACG
982 AAACAATAACATCAAAAACA 1045
GAAAACGAACCATAATAACG
983 GAAAACAAACCATAATAACA 1046
GAACCATAATAACGATAACG
984 GAACCATAATAACAATAACA 1047
TAACGATAACGATTTTATCG
985 TAACAATAACAATTTTATCA 1048
El experto reconocerá que cada una de las secuencias de oligonucleótido expuestas en las tablas 1 -12 ha de entenderse únicamente como secuencia de núcleo que puede acortarse o alargarse desde el extremo 5’ y/o desde el extremo 3’. Esto vale para todos los oligonucleótidos/cebadores dados a conocer en esta invención. En una forma 5 de realización preferente, los oligonucleótidos representados en las tablas 1 -12 están alargados aproximadamente entre 1 -20 nucleótidos desde el extremo 5’ y/o desde el extremo 3’; aún más preferentemente, los oligonucleótidos están alargados aproximadamente entre 5 -15 nucleótidos desde el extremo 5’ y/o desde el extremo 3’. En otra forma de realización, los oligonucleótidos están acortados aproximadamente hasta en total 5 nucleótidos desde el extremo 5’ y/o extremo 3’, permaneciendo el oligonucleótido siempre específico para al menos un CpG o CpG
10 bisulfitado.
En otra forma de realización preferente, los cebadores de un par de cebadores tienen una Tm casi idéntica, preferentemente una Tm, que diverge ≤ 3 ºC, ≤ 2 ºC, ≤ 1 ºC, ≤ 0,5 ºC, ≤ 0,2ºC o ≤ 0,1 ºC.
En otra forma de realización preferente, las regiones de secuencia incluidas por los cebadores tienen una longitud de ≥ 1y ≤ 3000 pb, más preferentemente ≥ 10 y ≤ 2000 pb, aún más preferentemente ≥ 30 y ≤ 800 pb y lo más
15 preferentemente ≥ 50 y ≤ 300 pb.
El experto reconocerá que no sólo puede usarse un par de cebadores, sino también una pluralidad de los mismos. En otra forma de realización se realiza el procedimiento por tanto con 2, 3, 4, 5 o más de 5 pares de cebadores, que son específicos para un transposón o fragmento del mismo y que comprenden respectivamente al menos un cebador que es específico para al menos una citosina de un dinucleótido CpG o una citosina bisulfitada de un
20 dinucleótido CpG. Preferentemente, estos varios pares de cebadores tienen una Tm casi idéntica.
Además se amplifica en la etapa a) o bien el ADN no bisulfitado con al menos un par de cebadores, cuyo par de
cebadores es específico para regiones del mismo transposón o fragmento del mismo; o bien se amplifica un ADN bisulfitado con al menos un par de cebadores, que igualmente es específico para el transposón, no comprendiendo sin embargo los cebadores ninguna posición metilada diferencial del transposón. En una forma de realización preferente se usan, según esto, cebadores que son específicos para regiones siempre desmetiladas del transposón. Según esto, el experto puede determinar mediante análisis de secuencias previo qué posiciones se encuentran siempre sin metilar en un genoma dado. Dado que en caso de vertebrados se producen 5mC exclusivamente en dinucleótidos CpG, por consiguiente pueden seleccionarse para estos casos regiones que no contienen ninguna citosina de tales secuencias CpG.
Las tablas 13 -18 reproducen oligonucleótidos preferentes de este tipo para la normalización, que pueden usarse para la etapa a) del procedimiento y en caso de usar ADN bisulfitado. Las tablas 13 -14 dan a conocer cebadores preferentes para el elemento LINE-1, las tablas 15 -16 dan a conocer cebadores preferentes para el elemento Alu y las tablas 17 -18 dan a conocer cebadores preferentes para el elemento HERV-K. Los amplificados generados mediante esta etapa de amplificación pueden usarse entonces para la normalización según la invención.
En formas de realización preferentes, la invención se refiere a los siguientes oligonucleótidos de este tipo para la normalización y su uso en el procedimiento según la invención:
Secuencias de cebadores de secuencia idéntica o complementarias, que son específicas para la cadena sentido o antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1, es decir SEC ID N.º 1049 -1227; más preferentemente SEC ID N.º 1049 -1145, o SEC ID N.º 1146 -1227; aún más preferentemente SEC ID N.º 1049 -1096, o SEC ID N.º 1097 -1145, o SEC ID N.º 1146 -1192, o SEC ID N.º 1193 -1227.
Secuencias de cebadores de secuencia idéntica o complementarias, que son específicas para la cadena sentido o antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu, es decir SEC ID N.º 1228 -1257; más preferentemente SEC ID N.º 1228 -1243, o SEC ID N.º 1244 -1257; aún más preferentemente SEC ID N.º 1228 -1237, o SEC ID N.º 1238 -1243, o SEC ID N.º 1244 -1250, o SEC ID N.º 1251 -1257.
Secuencias de cebadores de secuencia idéntica o complementarias, que son específicas para la cadena sentido o antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K, es decir SEC ID N.º 1258 -1415; más preferentemente SEC ID N.º 1258 -1323, o SEC ID N.º 1324 -1415; aún más preferentemente SEC ID N.º 1258 -1289, o SEC ID N.º 1290 -1323, o SEC ID N.º 1324 -1371, o SEC ID N.º 1372 -1415.
Tabla 13: secuencias de cebador de secuencia idéntica y complementarias preferentes, específicas para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
Idéntica en secuencia
SEC ID N.º Complementaria SEC ID N.º
GTGATTTTTGTATTTTTATT
1049 CTCTATATTTCCTAAATCTA 1097
GGTTTATTTTATTAGGGAGT
1050 TTAACCTACCTTACTAAATT 1098
AGGGAGTGTTAGATAGTGGG
1051 TAAATAATATCCTACAAAAT 1099
AGGTATTGTTTTATTTGGGA
1052 CACATCACTTTCAAATACAC 1100
TAAGGGGTTAGGGAGTTTTT
1053 ATTTAATCTTTTCACATAAT 1101
TTTTTGAGTTAAAGAAAGGG
1054 CTTAAAAACTTTACTCATTT 1102
AGATTATATTTTATATTTGG
1055 TTATTCTTTTTTCTCTAAAC 1103
TTGATTGTTAGTATAGTAGT
1056 TTCATTTCATTCATTTCATC 1104
TTTGAGATTAAATTGTAAGG
1057 ATACCCTTTCTTCCAATTAA 1105
TTATTGTTTAGGTTTGTTTA
1058 CCTAAAACTTCTACATTCTT 1106
GTTTAGGTAAATAAAGTAGT
1059 ATTTTCAACTCCATCAACTC 1107
AATTGGGTGGAGTTTATTAT
1060 TTATTCTAATTATACATTCT 1108
TAGTTTAAGGAGGTTTGTTT
1061 AAAATTTTCAACTTCTTTAC 1109
GTTTTTGTAGGTTTTATTTT
1062 GTAACTCAAAATAATTTAAT 1110
TGGGGGTAGGGTATAGATAA
1063 AAAACCTTCTTCTCTCAACT 1111
Idéntica en secuencia
SEC ID N.º Complementaria SEC ID N.º
ATAAAAAGATAGTAGTAATT
1064 GTCAAAATCATTCTCCATCC 1112
TTTGTAGATTTAAGTGTTTT
1065 ATTCTATTACTAATAAAAAA 1113
TGTTTGATAGTTTTGAAGAG
1066 GTTCCTTTAAAAAAAAAAAA 1114
GAGTAGTGGTTTTTTTAGTA
1067 TTTAAAATTTCCAATTTTTC 1115
GGTAGATAGATTGTTTTTTT
1068 CCCATCTTTATAATTTTATC 1116
AAGTGGGTTTTTGATTTTTG
1069 TAATCTTTAATAATAATAAT 1117
ATTTTCGAGTAGTTTAATTG
1070 TAAATATCCTTTCTAATTAT 1118
GGAGGTATTTTTTAGTAGGG
1071 CAAACAAAACCCTCAACTAC 1119
GGGTATATTGATATTTTATA
1072 GTATAAAATATCAATATACC 1120
GTAGGGTATTTTAATAGATT
1073 AAATACCTCCCAATTAAACT 1121
TGTAGTTGAGGGTTTTGTTT
1074 AAAATCAAAAACCCACTTAA 1122
TTAGAAGGAAAATTAATAAT
1075 AAAAAAACAATCTATCTACC 1123
ATTAGAAAGGATATTTATAT
1076 GTTCTCAAATCTCCAACTA 1124
AAAATTTATTTGTATATTAT
1077 ACTAAAAAAACCACTACTCT 1125
TATTATTAAAGATTAAAAGT
1078 AAACAAAAACACTTAAATCT 1126
AGATAAAATTATAAAGATGG
1079 ATTACTACTATCTTTTTATT 1127
GGAAAAAATAGAATAGAAAA
1080 CCCCAAAAATAAAACCTACA 1128
AAAAATTGGAAATTTTAAAA
1081 CAAACCTCCTTAAACTATAA 1129
TTTTTTTTTTTTTAAAGGAA
1082 TTTACCTAAACAAACCTAAA 1130
TAGTTTTTTATTAGTAATAG
1083 CAATTTAATCTCAAACTACT 1131
AATAAAGTTGGATGGAGAAT
1084 CCAAATATAAAATATAATCT 1132
AGTTGAGAGAAGAAGGTTTT
1085 CACCCCTTTCTTTAACTCAA 1133
AGACGATTAAATTATTTTGA
1086 AAAAACTCCCTAACCCCTTA 1134
GGAGGATATTTAAATTAAAG
1087 TCCCAAATAAAACAATACCT 1135
GTAAAGAAGTTGAAAATTTT
1088 TCTAACACTCCCTAATAAAA 1136
TGAAAAAAATTTAGAAGAAT
1089 ACCTCAAATAAAAATACAAA 1137
GTATAATTAGAATAATTAAT
1090 ACCATCTTAACTCCTCCCCC 1138
ATAGAGAAGTGTTTAAAGGA
1091 CACTAAAACATAATTAAACA 1139
GTTGATGGAGTTGAAAATTA
1092 AAAAATTACTAATAACCTCA 1140
TGAAGAATGTAGAAGTTTTA
1093 CCAAAAAAACAATAACATCA 1141
ATTAATTGGAAGAAAGGGTA
1094 AAACAATAACATCAAAAACA 1142
TTAGTAATGGAAGATGAAAT
1095 GAAAACAAACCATAATAACA 1143
AGAAGGGAAGTTTAGAGAAA
1096 GAACCATAATAACAATAACA 1144

Tabla 14: secuencias de cebador de secuencia idéntica y complementarias preferentes, específicas para la cadena 29
antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
Idéntica en secuencia
SEC ID N.º Complementaria SEC ID N.º
AattttgttgatTTtttTaa
1146 tctAcatttccatctAaAAt 1193
gtgtTtTtatttTTttTagt
1147 taAAAaAtAccaAacaAtAA 1194
aatgtgtttgTtTttgTttt
1148 AaAttccctttctAaAtcaa 1195
TaattttggatTtttTTtgT
1149 actatatcccacacctAAct 1196
tTTTtTtaTaTaTtgTtttg
1150 acaAcaAtctAaAatcaaac 1197
gtatgtggtgtTtttgttTt
1151 AActtActtaAAtaaacaaa 1198
aTatTtttatttTtgTTttT
1152 caccacaActcaaAAaAAcc 1199
aggttgttTagtttTTatgt
1153 ctAAAAAcaAAAcacaAaca 1200
tgTaTtgtggtTtgagagat
1154 AacttaaAtAtccctAtctA 1201
aTtatgtggtTaattttgga
1155 aaAaAaAcaAtAAttctccc 1202
gatttggggtggagagttTt
1156 caaAtAAAtccctAactcct 1203
ttTTtgggtatTTttgttga
1157 ccaAcaAAAAcacactAaca 1204
tgttaaagtTtTTTattatt
1158 tAaAAAtcctAtctAttaAa 1205
gTtttatgaatTtgggtgTt
1159 AaaAaccaaaaAtaAataaa 1206
tgttgaattgatTTTtttaT
1160 aacaAaacaaaActAAatAA 1207
atTagagaTtaggattgTaa
1161 tAaAaAaaAaaAActtcaAa 1208
ttggtagatTttTTtTTatT
1162 aaccaaaAAcaaaAaaAttA 1209
gTaTaTtgatgggtTttgaT
1163 tataactaAaataaccaata 1210
tTttttaattgTagaattta
1164 AatAAaActAaaaaccaaAA 1211
tttgTtTattagttgatgTa
1165 aatAcaAaaAcctcaAAaAc 1212
ttaTattttggTatgatttt
1166 caAcaatAAaaAatAaaatA 1213
gtgTttTTttTaggagTtTt
1167 aAaAaaaaaaAaataaaaaA 1214
aaagtattttatttTtTTtt
1168 AaaatatAAAactatAtAaa 1215
aaattTtgggttgaaaattT
1169 tAaaaAtAatAtAAaAaatA 1216
ggTtgTTTttaaTatttttt
1170 tAcaAAatattatccaAAaA 1217
aTaattatgtgtTttggagt
1171 AattcaAAaaatacaAaAaa 1218
gttTTattTtTTaTatTaTt
1172 AattcaccaaaAttAaaatA 1219
aTatagtTTTatatttTttg
1173 aaaAcccatcaAactaacaA 1220
TtgataTTTtttTttTTagt
1174 AaaAaAaAtAAAAAccaata 1221
TTtgaggTttTtgTattTtt
1175 aAccaaactaaActtcataa 1222
atTagTtTTtttaagTaTtt
1176 aaatAttAaAaAattttAtc 1223
tttTaaTttTtttgTTtttg
1177 AcactaaacatAAaaaAAaa 1224
gaagTTttTttTtTtTagTt
1178 atcatAccaaaatAtaaaAa 1225
Idéntica en secuencia
SEC ID N.º Complementaria SEC ID N.º
tgttTtgttgTtggtgagga
1179 atcaactaatAaAcaaaatc 1226
tgatggtgatgtaTagatgg
1180 caAAatcaaattcacacata 1227
TTtTagTtgTaggtTtgttg
1181
agtgtgTTTTtgTtgggggg
1182
TTTaTttgaggaggTagtTt
1183
gTtgtTagaTagggaTaTtt
1184
TtgtgTTTtgTTTTTagagg
1185
agTtgtggtgggTtTTaTTT
1186
ttaagTaagTTtgggTaatg
1187
ttgatTtTagaTtgTtgtgT
1188
TTaggtgtgggatatagtTt
1189
tttTtttgaTtTagaaaggg
1190
TtggTaTtTTTtagtgagat
1191
TagatggaaatgTagaaatT
1192

Tabla 15: secuencias de cebador de secuencia idéntica y complementarias preferentes, específicas para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu.
De secuencia idéntica
SEC ID N.º Complementaria SEC ID N.º
GTTTGTAATTTTAGTATTTT
1228 CCCAAACTAAAATACAATAA 1238
ATTTTAGTATTTTGGGAGGT
1229 ATTCTCCTACCTCAACCTCC 1239
GGATTATTTGAGGTTAGGAG
1230 TTTTATATTTTTAATAAAAA 1240
GAGATTATTTTGGTTAATAT
1231 CATATTAACCAAAATAATCT 1241
TGGTTAATATGGTGAAATTT
1232 TCTCCTAACCTCAAATAATC 1242
GTTTTTATTAAAAATATAAA
1233 CAAAATACTAAAATTACAAA 1243
TTAAAAATATAAAAATTAGT
1234
GTTTGTAATTTTAGTTATT
1235
GGGAGGTTGAGGTAGGAGAA
1236
GTTATTGTATTTTAGTTTGG
1237

Tabla 16: secuencias de cebador de secuencia idéntica y complementarias preferentes, específicas para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu.
Idéntica en secuencia
SEC ID N.º Complementaria SEC ID N.º
TTTAGGTTGGAGTGTAGTGG
1244 ATCCCAACACTTTAAAAAAC 1251
ATTTTTTTGTTTTAGTTTTT
1245 AATCACCTAAAATCAAAAAA 1252
GAGTAGTTGGGATTATAGG
1246 TCCTAACCAACATAATAAAA 1253
Idéntica en secuencia
SEC ID N.º Complementaria SEC ID N.º
TTTTTGTATTTTTAGTAGAG
1247 TACTAAAAATACAAAAATTA 1254
TTTTATTATGTTGGTTAGGA
1248 GCCTATAATCCCAACTACT 1255
ATTTTTTGATTTTAGGTGAT
1249 GAAAAACTAAAACAAAAAAA 1256
TTTTTAAAGTGTTGGGATTA
1250 CCACTACACTCCAACCTAAA 1257

Tabla 17: secuencias de cebador de secuencia idéntica y complementarias preferentes, específicas para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K.
Idéntica en secuencia
SEC ID N.º Complementaria SEC ID N.º
gtagttgagataagaggaag
1258 cttaatatttattaatcatt 1290
agggagaaattattttaggg
1259 tacatacacataaacatctc 1291
taaagtattgagatgtttat
1260 ttccctatctcaataaataa 1292
atatattttttttttagaga
1261 aacattccattacccaaaaa 1293
gaaatatttataggtgtgga
1262 ctcacataaaaaaaaacctt 1294
ggggtaaattaaaattaaaa
1263 taaaaaataataataactct 1295
atagaataattttgtttatg
1264 tccatttaacccaaaattta 1296
agtaggtaggaagggtaata
1265 aacaaaaaaatttttcttaa 1297
gttttagaattattttaaat
1266 actaacaacaaacaaaacaa 1298
Ggaagttgtataatagattg
1267 tcctaacaccaaatttaaat 1299
aattagtggggttattagag
1268 ctaaaataaaattatcttct 1300
gatttaattgttagtagttt
1269 tattctaaaatcataaacct 1301
tatggtattatttagtaggt
1270 aacttaccaatttttaatca 1302
gaaagagggagtaaaatagt
1271 aatcaaaatataaataaata 1303
gaattgatggggtataagaa
1272 aactaatttaataactatat 1304
taagtattaatgtaaaatga
1273 tatacttatatttatctaaa 1305
agagtttgggaaaaaattta
1274 cttaaaacaaattttccctt 1306
atagtaagataaggtttaaa
1275 catcctaatactctccctaa 1307
gatgtaattttagagtatgt
1276 cattataaaacttcaaatat 1308
atattgggttagttaatgtt
1277 taaaattttccactaactta 1309
ataaaaaatttttataggag
1278 cattactaaaaccatcaata 1310
ttagaagtgtattaaagtat
1279 tttactaataaatataaaac 1311
tggtttatatagggttaaaa
1280 atataaaatctcaatacttt 1312
ttagttatatggatggataa
1281 aaccttaatatataacaaaa 1313
gatttaatttttaattggta
1282 aactcccctaaaaacaaaaa 1314
atattttgattgaaatatta
1283 ctctacctattattataata 1315
gagtattattgggatatggt
1284 tctaaaattacatctaatcc 1316
Idéntica en secuencia
SEC ID N.º Complementaria SEC ID N.º
ttatgattataaattttata
1285 accctacctactaaataata 1317
agtagatataggagatttta
1286 acctcctataattaattata 1318
tttgtttaggaaagttaggt
1287 attttaataaaactaaaata 1319
tttattgagatagggaaaaa
1288 cataaacaaaataaaaaatt 1320
ataaatattaagggaattta
1289 ctaatcctcctcaacacaaa 1321
ccttcaaacatctattaac
1322
ttaacaacatctcaaaacaa
1323

Tabla 18: secuencias de cebador de secuencia idéntica y complementarias preferentes, específicas para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K.
Idéntica en secuencia
SEC ID N.º Complementaria SEC ID N.º
tTTTttagtatttattgatT
1324 atctatAaccttacccccaa 1372
ggggatgtgtTagggtTaTa
1325 aacaAatActtAaaAAcaAc 1373
tgTatTatagaTaaggtaaa
1326 aatctcaaAtacccaAAAac 1374
atatgTataTaTataaaTat
1327 tccccatAtAaAaAtctAaa 1375
tttttTTTtatTtTagtaga
1328 AaAAaAAattaAtataaAaA 1376
gatgtTttTTtTttTtTtTa
1329 caccttaAAActAAaAAtAA 1377
ggatggtTaggtTtttTTTt
1330 cacatctccctctcaAaAaa 1378
agattagggagtggtgatga
1331 tttttcttttccaaAtctct 1379
ttgaTaTagTaTatgtttTa
1332 tttctctAAAAtAaaAAtac 1380
gattaaTagTatTtTaaggT
1333 cttaActtcattaaaattct 1381
gtaaTaatTtTatTtTtTtt
1334 aAcaAAtaAAaaAAAtaata 1382
gatttataatTatagtaTtt
1335 aattacaAAaAAtAatatat 1383
aaTtTTtgTaattgTTtTag
1336 ccaactAccaAtaActtatc 1384
tggaaatgtTtaaagtgaga
1337 aAtaAAcaAAAtaAtAaatt 1385
gTtTagaTtTattataaatt
1338 ccaAataaaAAtctttttaA 1386
TtgTaattaaagtaaaaatg
1339 tttacaatttaaAacttAAt 1387
ggtttaataaTtatatttTT
1340 aAttaAaActatctAcctta 1388
tTttggggtagagattTTtt
1341 ccattaaAccattaaaaAAa 1389
TtgagTaattgtggtagaat
1342 AtcaaaatAAtcatttaaaa 1390
TTaaaTtaaaaTttTtgtat
1343 tAataaaaatAAAcaaccat 1391
gataagtgaatTtaTtgtta
1344 caacccccactAtcccaaAt 1392
aggTattaaaTatTTtggtg
1345 AtAccaAtccaAAaAacaAA 1393
taTttTtataggattatTTa
1346 aaatcaAtAAccaaaaaatt 1394
aTttTaaatgtTtagtgggt
1347 tAaccaaAatAAAatatata 1395
tatttTTTatgtTttatttt
1348 taattcaAaaAaaatccaAc 1396
gTtagattaagttgTatTtg
1349 AaAAttAccaatAcaAAact 1397
agttgTaTaTatgaaatgtg
1350 atcccttaAccccactccaa 1398
tTtTaaTatTTTttgtagTT
1351 AtAAaaatAacccaAacaaa 1399
gTTaTttttTTattgTtgga
1352 AAaaaaAtAActtacacaAA 1400
TtattttgtTtgggtTattt
1353 aaAaaacttcccattttata 1401
tatTtTTTagTaatttttga
1354 acttattcacatttcatAtA 1402
GatttTttTtgaattaTaaa
1355 cacatAaaAAaaaactaatt 1403
TTTatTttggtTataatttt
1356 taatAataAtAtatAAAtac 1404
ggTTTtaagTaatgtaaaat
1357 cttatcaaaAatcattaaaa 1405
aatTTttTaagTtgttttTT
1358 tAcacaaAtAaAtccaActA 1406
TTttaatatatggTaggagt
1359 ctataacctAtAaaaattAt 1407
aagattagtTTtaTagtTtT
1360 AcaaaaAaattctacaaAat 1408
tTaaatttagaatgaTattg
1361 tAaAtctAaAcatcactAAA 1409
tgTttgggTTataagTatag
1362 tAttAttaAtctAcaAAtAt 1410
gTtTttttgaaTTttgtTtt
1363 aAAAtAAtAcaaAatAtAct 1411
atagttgatTtgTatTtatg
1364 taAtataaAaAAaaaAcatA 1412
taTtgttttaTtTTTtTttt
1365 actAccttaAAActAAaAAt 1413
gaTttTtTaataatttTatg
1366 tattAtcttAtAaccctAac 1414
aaatggttTtaaagTtgTtt
1367 tccaccttatAaAaaacacc 1415
TTtTTaTaTTtgtgggtgtt
1368
Taatagtggggagagggtga
1369
ggaaaTagatgTTttTTtTt
1370
Tttgagattagggagtggtg
1371
El experto podrá preparar también para cada otro transposón o fragmento del mismo cebadores según el esquema explicado anteriormente.
La determinación del grado de metilación de ADN normalizado se determina según la invención a través de la 5 proporción de los amplificados formados en las dos etapas de amplificación (etapa a) y b)). En formas de realización preferentes se determina la proporción a través de las cantidades formadas de amplificado, de manera más preferente a través del aumento del amplificado formado por ciclo de amplificación, de manera aún más preferente a través del valor umbral de ciclo (ct) durante una PCR en tiempo real.
En una forma de realización se determina y se interrelaciona la cantidad total de los dos amplificados formados tras
10 un número de ciclos de amplificación. Para la determinación de los amplificados formados, el experto conoce una serie de procedimientos distintos, incluyendo procedimientos espectroscópicos, la coloración por medio de bromuro de etidio o plata y determinación densitométrica, o la marcación radiactiva con determinación posterior mediante, por ejemplo, medición por centelleo.
En una forma de realización preferente se realiza la determinación de los amplificados formados en las dos etapas
15 de amplificación con ayuda de la PCR en tiempo real durante la formación de los propios amplificados. En otra forma de realización preferente se realiza la determinación de los amplificados formados en las dos etapas de amplificación simultáneamente durante una PCR en tiempo real.
Según la determinación de los amplificados formados en las dos etapas de amplificación se normaliza el valor para el amplificado en la segunda etapa de amplificación (etapa b)) por medio del valor para el amplificado en la primera etapa de amplificación (etapa a)); por ejemplo mediante la división o resta de los valores determinados. Mediante esto se determina un grado de metilación normalizado en toda la existencia de la región de ADN sometida a prueba (es decir la (des)metilación normalizada), que puede tomarse como representativo para el grado de metilación del genoma total.
En una forma de realización preferente se realizan las amplificaciones de las etapas a) y b) así como la determinación de los amplificados formados por medio de la PCR en tiempo real. Según esto se determinan valores de umbral de ciclo (ct), tanto para el par de cebadores, que es específico para al menos una posición metilada diferencial del transposón (etapa b), ctm), como para el par de cebadores que es específico para una zona no diferencial metilada del transposón (etapa a), ctk). El valor ct describe el ciclo de la PCR, en el que la señal de fluorescencia aumenta por primera vez significativamente sobre la fluorescencia de fondo y marca con ello el inicio de la fase exponencial de la PCR. Después se resta el valor ct de la etapa a) del valor ct de la etapa b) para llegar al grado de metilación normalizado (Δct). El Δct puede calcularse, por tanto, como: Δct =ctm-ctk.
Según se mencionó anteriormente, el procedimiento según la invención permite igualmente la comparación del grado de metilación de dos genomas con dotación genómica diferente (por ejemplo en caso de multiplicaciones irregulares que se producen parcialmente en células tumorales de cromosomas individuales; trisomías o similares). En caso de una comparación del grado de metilación normalizado de un ADN de un “genoma normal” (control) con el de un paciente, grados de metilación distintos entre los dos genomas pueden dar indicaciones sobre una enfermedad. El procedimiento según la invención para determinar un grado de metilación de ADN relativo es con ello de inmenso significado para el diagnóstico (clínico).
Un segundo aspecto de la presente invención se refiere, por tanto, a un procedimiento para determinar el grado de metilación de ADN relativo que comprende las etapas: a) determinar el grado de metilación normalizado según las etapas a) a c) del primer aspecto de la invención para un primer ADN y un segundo ADN; y b) determinar el grado de metilación de ADN relativo a través de la proporción de los grados de metilación normalizados determinados para el primer y el segundo ADN.
En otras palabras se realiza el procedimiento descrito anteriormente del primer aspecto de la invención para dos ADN distintos que pueden proceder por ejemplo de distintas muestras (clínicas) y se relacionan los grados de metilación normalizados obtenidos de los dos ADN uno con respecto al otro. A partir de la proporción de los dos grados de metilación uno con respecto al otro pueden proponerse entonces conclusiones y/o diagnósticos por ejemplo con respecto a una enfermedad cancerígena.
En una forma de realización se determina el grado de metilación relativo de más de dos ADN. En otra forma de realización se relaciona el grado metilación de al menos un ADN que va a someterse a prueba con un valor medio de los grados de metilación de más de un “genoma normal”. Por ejemplo se determina para ello el grado de metilación normalizado del ADN de ≥ 10, ≥ 50, o ≥ 100 personas de experimentación sanas y se relaciona el valor medio calculado a partir de esto con el grado de metilación de ADN normalizado de un paciente. En otra forma de realización se relaciona el grado de metilación de ADN normalizado de un paciente con el grado de metilación de ADN normalizado de una muestra individual o el grado de metilación de ADN normalizado promedio de varias muestras/ADN (preferentemente ≥ 10, ≥ 50, o ≥ 100), conteniendo estas últimas muestras ADN que presenta el patrón de metilación de una enfermedad.
En una forma de realización, al menos uno de los dos ADN procede de una muestra; preferentemente se aisló el ADN de esta muestra. En una forma de realización preferente, los dos ADN proceden de respectivamente una muestra. En otra forma de realización preferente, la primea muestra es una muestra de un individuo sano, mientras que la segunda muestra es la muestra de un paciente. En otra forma de realización preferente, la primera muestra es una muestra que comprende al menos una célula tumoral y la segunda muestra es la muestra de un paciente. La primera muestra/ADN sirve con ello como control negativo o positivo con el que se compara la muestra del paciente. En otra forma de realización, el control positivo es HT1376-ADN.
En otra forma de realización se realizó la determinación del grado de metilación normalizado de uno de los dos ADN ya más de un día, una semana, un mes o un año antes de la determinación del grado de metilación normalizado del segundo ADN.
En otra forma de realización, al menos una de las dos muestras se selecciona del grupo constituido por una muestra de sangre, una muestra de tejido, una muestra de saliva, una muestra de orina, un frotis y una muestra de heces. En una forma de realización preferente, la muestra es una muestra de orina.
En otra etapa del procedimiento según la invención se realiza la determinación del grado de metilación de ADN relativo a través de la proporción de los grados de metilación normalizados determinados para el primer y para el segundo ADN, por ejemplo mediante división o resta de los valores determinados.
En una forma de realización preferente se realizó la determinación del grado de metilación normalizado según se describió anteriormente por medio de la PCR en tiempo real. Si la diferencia del valor Δct del segundo ADN (Δct2), que por ejemplo puede proceder de una muestra de un paciente que va a someterse a prueba y del valor Δct del primer ADN (Δct1), que por ejemplo puede proceder de una muestra de referencia se calcula como ΔΔct = Δct2 -Δct1, entonces puede indicarse el grado de metilación relativo del segundo ADN como 2-ΔΔct. Según esto se calcula la metilación relativa del segundo ADN con respecto al primer ADN, en caso de que se usaran cebadores para la amplificación que fueran específicos para una citosina de un CpG y se calcula la desmetilación relativa en caso de que se usaran cebadores para la amplificación que fueran específicos para la citosina bisulfitada de un CpG.
El experto sabe que la proporción de los amplificados formados en las dos etapas de amplificación puede determinarse por medio de medición repetida y formación del valor medio para aumentar la precisión del procedimiento. En una forma de realización de la invención se calcula, por tanto, un valor medio de varios valores ct
o cantidades de amplificado determinados para un ADN.
En otra forma de realización, la invención da a conocer un procedimiento para detectar o para diagnosticar una enfermedad, que se relaciona con una metilación de ADN modificada. En una forma de realización preferente una enfermedad de este tipo es un tumor. En otra forma de realización preferente se forma, según esto, el grado de metilación relativo del ADN a partir de una muestra de referencia y una muestra que va a someterse a prueba (por ejemplo a partir de una de las muestras enumeradas anteriormente como una muestra orina o de saliva de un paciente). En una forma de realización preferente se diagnostica/detecta el tumor en un individuo o en una muestra de un individuo.
En una forma de realización de la invención, la muestra de referencia procede de un individuo sano y/o el ADN obtenido de la misma presenta un grado de metilación que prevalece en caso de ausencia de un tumor. En otra forma de realización de la invención, la muestra de referencia procede de un individuo enfermo de un tumor y/o presenta un grado de metilación que prevalece en presencia de un tumor. En una forma de realización preferente de la invención, la muestra de referencia procede de un individuo enfermo, en el que se tipificó la enfermedad tumoral. La muestra de referencia puede estar compuesta también por células tumorales cultivadas y preferentemente tipificadas, como por ejemplo células HT1376. Según se mencionó anteriormente pueden usarse para la muestra de referencia también valores medios de varias muestras de referencia.
En una forma de realización de la invención, la obtención de las muestras del individuo es parte del procedimiento según la invención, en otra forma de realización especial de la invención, la obtención de las muestras del individuo no es parte del procedimiento según la invención.
Si el grado de metilación de ADN normalizado de la muestra de un paciente se desvía del grado de metilación de ADN normalizado de la muestra de referencia, es decir, por ejemplo una división de los dos valores para la formación del grado de metilación de ADN relativo da como resultado un valor distinto de 1, entonces esto es un indicio de la existencia de una enfermedad que se relaciona con una metilación de ADN modificada; preferentemente un tumor
En una forma de realización, una metilación de ADN reducida, una desmetilación de ADN reducida, una metilación de ADN aumentada o una desmetilación de ADN aumentada del ADN de la muestra con respecto al ADN de la referencia indica la presencia de una enfermedad de este tipo.
En una forma de realización preferente, una metilación de ADN reducida o una desmetilación de ADN aumentada del ADN de la muestra con respecto al ADN de la referencia indica la presencia de un tumor. En una forma de realización aún más preferente de la invención, la diferencia en la reducción de la metilación de ADN o el aumento de la desmetilación de ADN está correlacionada con agresividad del tumor.
En otras formas de realización preferentes este tumor se selecciona del grupo constituido por: tumor de vejiga, tumor de próstata, carcinoma de mama, carcinoma bronquial, leucemia, cáncer intestinal, tumor testicular, carcinoma nasofaríngeo, cáncer del cuello uterino, carcinoma de páncreas y/o cáncer de estómago.
En otro aspecto, la invención se refiere a un oligonucleótido que, por ejemplo, puede usarse como cebador en las etapas de amplificación en el procedimiento de la presente invención.
En una forma de realización, el oligonucleótido es específico para un transposón o fragmento del mismo, seleccionándose el transposón del grupo constituido por un elemento LINE, un elemento Alu, un elemento HERV, un elemento HERV-K o un fragmento de los mismos. En una forma de realización especial, el transposón es un elemento LINE-1 o un fragmento del mismo. De manera aún más preferente, el fragmento del transposón es la región promotora del elemento LINE-1. En una forma de realización preferente, el oligonucleótido es de secuencia idéntica o complementario a la cadena sentido o la antisentido del transposón bisulfitado y comprende al menos una posición metilada diferencial del transposón. En otra forma de realización preferente, el oligonucleótido es de secuencia idéntica o complementario a la cadena sentido o a la antisentido del transposón bisulfitado y no comprende ninguna posición metilada diferencial del transposón.
En una forma de realización preferente, el oligonucleótido comprende al menos una posición metilada diferencial del transposón. En otra forma de realización, el oligonucleótido es específico para una región del transposón que siempre se encuentra desmetilada; preferentemente para una región que no contiene ninguna citosina de dinucleótidos CpG.
En otra forma de realización preferente, el oligonucleótido tiene una longitud de ≥ 15 nucleótidos; preferentemente ≥ 18, ≥ 19, ≥ 20, ≥ 21, ≥ 22, ≥ 23, ≥ 24, o ≥ 25 nucleótidos. En otra forma de realización preferente, el oligonucleótido tiene una longitud de ≥ 18 y ≤ 35 nucleótido; aún más preferentemente tiene una longitud de ≥ 20 y ≤ 30 nucleótidos
En otra forma de realización, el oligonucleótido presenta la secuencia que se selecciona del grupo constituido por SEC ID N.º 3 -1415.
En otra forma de realización, el oligonucleótido comprende una secuencia que se selecciona del grupo constituido por SEC ID N.º 3 -1048, pudiéndose acortar o alargar (según el respectivo transposón) la secuencia por el extremo 5’ y/o por el extremo 3’. En una forma de realización preferente, el oligonucleótido según la invención se alarga aproximadamente entre 1-20 nucleótidos por el extremo 5’ y/o por el extremo 3’; aún más preferentemente, el oligonucleótido se alarga aproximadamente entre 5 -15 nucleótidos por el extremo 5’ y/o por el 3’. En otra forma de realización se acorta el oligonucleótido aproximadamente hasta en total 5 nucleótidos por el extremo 5’ y/o extremo 3’, permaneciendo el oligonucleótido siempre específico para al menos un CpG o CpG bisulfitado.
En otra forma de realización, el oligonucleótido comprende el al menos un nucleótido específico para una posición metilada diferencial en una posición cualquiera en el oligonucleótido, es decir en el extremo 5’ del oligonucleótido, en el extremo 3’ o cada posición entremedias. En una forma de realización especialmente preferente, el al menos un nucleótido específico para una posición metilada diferencial se encuentra en el extremo 3’ del oligonucleótido. Esto tiene la ventaja de una alta especificidad.
En otras formas de realización, el oligonucleótido se selecciona del grupo constituido por SEC ID N.º 3 -436; más preferentemente SEC ID N.º 3 -112, o SEC ID N.º 113 -220, o SEC ID N.º 221 -336, o SEC ID N.º 337 -436; aún más preferentemente SEC ID N.º 3 -57, o SEC ID N.º 58 -112, o SEC ID N.º 113 -166, o SEC ID N.º 167-220, o SEC ID N.º 221-278, o SEC ID N.º 279-336, o SEC ID N.º 337-386, o SEC ID N.º 387-436.
En otras formas de realización, el oligonucleótido se selecciona del grupo constituido por SEC ID N.º 437 -612; más preferentemente SEC ID N.º 437 -476, o SEC ID N.º 477 -522, o SEC ID N.º 523 -570, o SEC ID N.º 571 -612; aún más preferentemente SEC ID N.º 437 -456, o SEC ID N.º 457 -476, o SEC ID N.º 477 -499, o SEC ID N.º 500 522, o SEC ID N.º 523 -546, o SEC ID N.º 547 -570, o SEC ID N.º 571 -591, o SEC ID N.º 592 -612.
En otras formas de realización, el oligonucleótido se selecciona del grupo constituido por SEC ID N.º 613 -1048; más preferentemente SEC ID N.º 613 -708, o SEC ID N.º 709 -796, o SEC ID N.º 797 -922, o SEC ID N.º 923 1048; aún más preferentemente SEC ID N.º 613 -660, o SEC ID N.º 661 -708, o SEC ID N.º 709 -752, o SEC ID N.º 753 -796, o SEC ID N.º 797 -859, o SEC ID N.º 860 -922, o SEC ID N.º 923 -985, o SEC ID N.º 986 -1048.
En otras formas de realización, el oligonucleótido se selecciona del grupo constituido por SEC ID N.º 1049 -1227; más preferentemente SEC ID N.º 1049 -1145, o SEC ID N.º 1146 -1227; aún más preferentemente SEC ID N.º 1049 -1096, o SEC ID N.º 1097 -1145, o SEC ID N.º 1146 -1192, o SEC ID N.º 1193 -1227.
En otras formas de realización, el oligonucleótido se selecciona del grupo constituido por SEC ID N.º 1228 -1257; más preferentemente SEC ID N.º 1228 -1243, o SEC ID N.º 1244-1257; aún más preferentemente SEC ID N.º 1228 -1237, o SEC ID N.º 1238 -1243, o SEC ID N.º 1244 -1250, o SEC ID N.º 1251 -1257.
En otras formas de realización, el oligonucleótido se selecciona del grupo constituido por SEC ID N.º 1258 -1415; más preferentemente SEC ID N.º 1258 -1323, o SEC ID N.º 1324 -1415; aún más preferentemente SEC ID N.º 1258 -1289, o SEC ID N.º 1290 -1323, o SEC ID N.º 1324 -1371, o SEC ID N.º 1372 -1415.
La figura 1 muestra el resultado de la determinación de la metilación de ADN relativa de ADN tumoral en etapas de dilución distintas (con urotelio sano) según una forma de realización preferente de la invención.
La figura 2 muestra el resultado de la determinación de la desmetilación de ADN relativa de 4 muestras de pacientes en comparación como personas de experimentación sanas según una forma de realización preferente de la invención.
EJEMPLOS
Ejemplo 1
El ADN de la línea de células de carcinoma de urotelio HT1376-ADN, de un carcinoma de urotelio así como de epitelio de vejiga sano se aislaron con un kit que puede obtenerse comercialmente (Qiagen; QIAamp DNA blood kit). El ADN de la línea de células de carcinoma de urotelio se diluye en distintas etapas de dilución con ADN del epitelio de vejiga sano. Después se realizó una bisulfitación del ADN en las distintas mezclas de reacción por medio del kit de bisulfito EpiTect (Qiagen). A continuación de esto se realizó la determinación según la invención del grado de metilación relativo de las muestras individuales con respecto al ADN del epitelio de la vejiga sano.
Para cada muestra se determinó cada valor por triplicado y se formaron los valores medios. La amplificación se realizó por medio de PCR en tiempo real. Se usaron cebadores que eran específicos para las siguientes secuencias promotoras LINE-1: 5‘-GCGCGAGTCGAAGTAGGGC para el cebador directo
5 5‘-CTCCGAACCAAATATAAAATATAATCTCG para el cebador inverso Estos dos cebadores incluyen una región de 193 pb del elemento LINE-1 y son específicos para ADN metilado. Para la zona siempre desmetilada se usaron cebadores con las siguientes secuencias:
5’-AGGTTTTATTTTTGGGGGTAGGGTATAG como cebador directo 5’-CCCCTACTAAAAAATACCTCCCAATTAAAC como cebador inverso 10 La PCR se realizó con las siguientes condiciones (por reacción):
Reactivo
Volumen (µl)
Sybergreen
12,5
(Quiagen)
Cebador en 5’
1
10 pmol/µl
Cebador en 3’
1
10 pmol/µl
ADN ( 10 ng)
1
Agua
10,5
Total
25
Condiciones del ciclador
95 ºC durante 15’
95 ºC durante 55’
54 ºC durante 30’’
35x
72 ºC durante 30’
4 ºC durante ∞
El resultado del estudio con el uso de los cebadores que son específicos para el ADN metilado puede observarse en la figura 1. Puede distinguirse que puede realizarse una detección segura de 2 ng del ADN de tumor de una mezcla
15 1:10 con ADN de urotelio sano. Ejemplo 2 Se repitió el ejemplo 1 con cebadores que son específicos para la secuencia LINE1 desmetilada. Estos cebadores tenían las siguientes secuencias: 5’-GTGTGTATTGTGTGTGAGTTGAAGTAGGGT para el cebador directo
20 5’ -ACCCTCCAAACCAAATATAAAATATAATCTCA para el cebador inverso Estos dos cebadores incluyen una región de 207 pb del elemento LINE-1 y son específicos para el ADN desmetilado.
Según esto se usaron como muestras, sin embargo, muestras de orina de personas de experimentación sanas y pacientes con carcinoma de urotelio. Se usaron ml de orina y 10 ng de ADN bisulfitado.
La figura 2 muestra el resultado de este experimento. Puede distinguirse que en 3 de 4 muestras de los pacientes con carcinoma de urotelio pudo detectarse una hipometilación significativa en comparación con las 6 muestras 5 control usadas.
LISTA DE SECUENCIAS
<110> Universidad Heinrich-Heine Düsseldorf, transferencia tecnológica y de investigación
<120> Determinación del grado de metilación de ADN 10 <130> UD40114
<160> 1415
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1 15 <211> 420
<212> ADN
<213> SEC ID N.º1
<400> 1
<210> 2
<211> 420
<212> ADN 25 <213> SEC ID N.º2
<400> 2
<210> 3
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 3 ggggaggagt taagatggtc 20
<210> 4
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 4 ggtcgaatag gaatagtttc 20
<210> 5
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 5 ttcggtttat agtttttagc 20
<210> 6
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 6 ttatagtttt tagcgtgagc 20
<210> 7
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 7 tagtttttag cgtgagcgac 20
<210> 8
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 8 gcgtgagcga cgtagaagac 20
<210> 9
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 9 gtatttttat ttgaggtatc 20
<210> 10
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 10
gggagtgtta gatagtgggc 20
<210> 11
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 11 gcgtaggtta gtgtgtgtgc 20
<210> 12
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 12 ggttagtgtg tgtgcgtatc 20
<210> 13
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 13 agtgtgtgtg cgtatcgtgc 20
<210> 14
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 14 tgtgtgtgcg tatcgtgcgc 20
<210> 15
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 15 gtgcgtatcg tgcgcgagtc 20
<210> 16
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 16 tgcgcgagtc gaagtagggc 20
<210> 17
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 17 tattgtttta tttgggaagc 20
<210> 18
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 18 gagttaaaga aaggggtgac 20
<210> 19
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 19 taaagaaagg ggtgacggtc 20
<210> 20
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 20 acggtcgtat ttggaaaatc 20
<210> 21
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 21 aaatcgggtt atttttattc 20
<210> 22
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 22 tatttttatt cgaatattgc 20
<210> 23
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 23 aatattgcgt tttttagatc 20
<210> 24
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 24 tttagatcgg tttaagaaac 20
<210> 25
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 25 agatcggttt aagaaacggc 20
<210> 26
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 26 tttaagaaac ggcgtattac 20
<210> 27
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 27 ttatatttta tatttggttc 20
<210> 28
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 28 tttggttcgg agggttttac 20
<210> 29
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 29 tcggagggtt ttacgtttac 20
<210> 30
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 30 ttttacgttt acggaatttc 20
<210> 31
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 31 ttgagattaa attgtaaggc 20
<210> 32
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 32 ttaaattgta aggcggtaac 20
<210> 33
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 33 aacgaggttg ggggaggggc 20
<210> 34
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 34 aggttggggg aggggcgttc 20
<210> 35
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 35 tttaggtaaa taaagtagtc 20
<210> 36
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 36 ataaagtagt cgggaagttc 20
<210> 37
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 37 agtagtggtt tttttagtac 20
<210> 38
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 38 gtagttggag atttgagaac 20
<210> 39
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 39 gtttttgatt tttgattttc 20
<210> 40
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 40 ggtatattga tattttatac 20
<210> 41
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 41 ttagaaagga tatttatatc 20
<210> 42
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 42 aaaattggaa attttaaaac 20
<210> 43
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 43 gaaattttaa aacgtagagc 20
<210> 44
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 44 tttttttttt ttaaaggaac 20
<210> 45
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 45 ggatggagaa tgattttgac 20
<210> 46
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 46 gagagaagaa ggttttagac 20
<210> 47
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 47 attaaattat tttgagttac 20
<210> 48
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 48 ggagttgaaa attaaggttc 20
<210> 49
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 49 aattaaggtt cgagaattac 20
<210> 50
<211> 19
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 50 tgtagaagtt ttaggagtc 19
<210> 51
<211> 19
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 51 gaagttttag gagtcgatg 19
<210> 52
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 52 tgaaatgaat gaaatgaagc 20
<210> 53
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 53 tgtgaaaaga ttaaatttac 20
<210> 54
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 54 atttagtaag gtaggttaac 20
<210> 55
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 55 atttaggaaa tatagagaac 20
<210> 56
<211> 18
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 56 gttataaaga tatttttc 18
<210> 57
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 57 ggtagttaga gagaaaggtc 20
<210> 58
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 58 ggggaggagt taagatggtt 20
<210> 59
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 59 ggttgaatag gaatagtttt 20
<210> 60
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 60 tttggtttat agtttttagt 20
<210> 61
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 61 ttatagtttt tagtgtgagt 20
<210> 62
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 62 tagtttttag tgtgagtgat 20
<210> 63
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 63 gtgtgagtga tgtagaagat 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 64 gtatttttat ttgaggtatt 20
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<211> 20
<212> ADN
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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taaagaaagg ggtgatggtt 20
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 95 ggtatattga tattttatat 20
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 103 ggagttgaaa attaaggttt 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 108 tgtgaaaaga ttaaatttat 20
<210> 109
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 109 atttagtaag gtaggttaat 20
<210> 110
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 110 atttaggaaa tatagagaat 20
<210> 111
<211> 18
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 112
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 112 ggtagttaga gagaaaggtt 20
<210> 113
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 115
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 115 cgaaaaatat ctttataacg 20
<210> 116
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 117
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 118
<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 120
<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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aaacttctac attcttcacg 20
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<210> 126
<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<210> 128
<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 130
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 131
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 132
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 132 aaaaacaatc tatctacccg 20
<210> 133
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 133 ttctcaaatc tccaactacg 20
<210> 134
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 134 aataaactcc acccaattcg 20
<210> 135
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 135 cacccaattc gaacttcccg 20
<210> 136
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 136 aacctaaaca ataacgaacg 20
<210> 137
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 137 acgcccctcc cccaacctcg 20
<210> 138
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 138
ctcccccaac ctcgttaccg 20
<210> 139
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 139 tactatacta acaatcaacg 20
<210> 140
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 140 taacaatcaa cgaaattccg 20
<210> 141
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 141 tcaacgaaat tccgtaaacg 20
<210> 142
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 143
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 145
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<210> 148
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 148 tctaaaaaac gcaatattcg 20
<210> 149
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 149 attcgaataa aaataacccg 20
<210> 150
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 150 aacccgattt tccaaatacg 20
<210> 151
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 151 cgattttcca aatacgaccg 20
<210> 152
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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cctcgcccta cttcgactcg 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<212> ADN
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<210> 163
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 164
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 165
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 165 acgctaaaaa ctataaaccg 20
<210> 166
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 166 accgaaacta ttcctattcg 20
<210> 167
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 167 tttcctttaa aaataaccca 20
<210> 168
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 168 tcttaaaatt actcttctca 20
<210> 169
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 169 caaaaaatat ctttataaca 20
<210> 170
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 170 atatttccta aatctaaaca 20
<210> 171
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 171 tcaaatacac caatcaaaca 20
<210> 172
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 172
tctctaaact tcccttctca 20
<210> 173
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 173 ccctttcttc caattaatca 20
<210> 174
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 174 tcttccaatt aatcacatca 20
<210> 175
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 175 aaacttctac attcttcaca 20
<210> 176
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 176 cattcttcac ataattctca 20
<210> 177
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 177 ttaatttaaa tatcctccca 20
<210> 178
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 178 aactcaaaat aatttaatca 20
<210> 179
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 179 aaccttcttc tctcaactca 20
<210> 180
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 180 aaccttcttc tctcaactca 20
<210> 181
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 181 cctttaaaaa aaaaaaaaca 20
<210> 182
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 182 aaaaaaaaaa acactctaca 20
<210> 183
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 183 aatatacaaa taaattttca 20
<210> 184
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 184 tctattaaaa taccctacca 20
<210> 185
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 185 cctcccaatt aaactactca 20
<210> 186
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 186 aaaaacaatc tatctaccca 20
<210> 187
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 187 ttctcaaatc tccaactaca 20
<210> 188
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 188 aataaactcc acccaattca 20
<210> 189
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la *región promotora del elemento LINE-1
<400> 189
cacccaattc aaacttccca 20
<210> 190
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 190 aacctaaaca ataacaaaca 20
<210> 191
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 191 acacccctcc cccaacctca 20
<210> 192
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 192 ctcccccaac ctcattacca 20
<210> 193
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 193 tactatacta acaatcaaca 20
<210> 194
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 194 taacaatcaa caaaattcca 20
<210> 195
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 195 tcaacaaaat tccataaaca 20
<210> 196
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 196 cataaacata aaaccctcca 20
<210> 197
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 197 aaatataaaa tataatctca 20
<210> 198
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 198 aaatataatc tcataataca 20
<210> 199
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 199 tataatctca taatacacca 20
<210> 200
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 200 atacaccatt tcttaaacca 20
<210> 201
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 201 ttaaaccaat ctaaaaaaca 20
<210> 202
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 202 tctaaaaaac acaatattca 20
<210> 203
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 203 attcaaataa aaataaccca 20
<210> 204
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 204 aacccaattt tccaaataca 20
<210> 205
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 205 caattttcca aatacaacca 20
<210> 206
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 206
aaactcccta accccttaca 20
<210> 207
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 207 ccaaataaaa caatacctca 20
<210> 208
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 208 caatacctca ccctacttca 20
<210> 209
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 209 cctcacccta cttcaactca 20
<210> 210
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 210 tcaccctact tcaactcaca 20
<210> 211
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 211 cctacttcaa ctcacacaca 20
<210> 212
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 212 ttcaactcac acacaataca 20
<210> 213
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 213 cacacacaca ctaacctaca 20
<210> 214
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 214 tccctaataa aataaaccca 20
<210> 215
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 215 taaaaataca aaaatcacca 20
<210> 216
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 216 aaaaatcacc atcttctaca 20
<210> 217
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 217 aatcaccatc ttctacatca 20
<210> 218
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 218 catcttctac atcactcaca 20
<210> 219
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 219 acactaaaaa ctataaacca 20
<210> 220
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador COMPLEMENTARIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 220 accaaaacta ttcctattca 20
<210> 221
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
<400> 221 tgtagttttt ttttagtttc 20
<210> 222
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
<400> 222 ttttggtatg attttgtagc 20
<210> 223
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
<400> 223
attttgtagc ggttggtatc 20
<210> 224
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
<400> 224 tggtttgtag ggtttttgtc 20
<210> 225
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
<400> 225 tttttttttg agggtaattc 20
<210> 226
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
<400> 226 gttttggagt tgtttttttc 20
<210> 227
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
<400> 227 tgtatttttt gaatttgaac 20
<210> 228
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
<400> 228 tttaggtata ttaattagac 20
<210> 229
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
<400> 229 ttttttaaat tttttttttc 20
<210> 230
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
<400> 230 attttttttt ttagttgatc 20
<210> 231
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
<400> 231 tttttttagt tgatcgtatc 20
<210> 232
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
<400> 232 gaggtttttg tattttttac 20
<210> 233
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
<400> 233 gtatttttta cgtagttttc 20
<210> 234
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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<210> 235
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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tgatgtatag atgggttttc 20
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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tagaaattat cgttttttgc 20
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1.
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<212> ADN
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<212> ADN
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la cadena ANTISENTIDO
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la cadena ANTISENTIDO
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la cadena ANTISENTIDO
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20
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la cadena ANTISENTIDO
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20
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<211> 20
<212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
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20
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la cadena ANTISENTIDO
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20
<210> 285 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
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20
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la cadena ANTISENTIDO
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20
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<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
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<210> 289
<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<210> 291
<211> 20
<212> ADN
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gtatttttta tgtagttttt
20
<210> 292 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 292 tttggtttga atgttttttt
20
<210> 293 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
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20
<210> 294 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 294 aagttttttt tttttagttt
20
<210> 295 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
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20
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la cadena ANTISENTIDO
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20
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la cadena ANTISENTIDO
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20
<210> 298 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
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20
<210> 299 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
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20
<210> 300 <211> 20
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
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20
<210> 301 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
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20
<210> 302 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
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20
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la cadena ANTISENTIDO
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la cadena ANTISENTIDO
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la cadena ANTISENTIDO
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20
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la cadena ANTISENTIDO
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la cadena ANTISENTIDO
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la cadena ANTISENTIDO
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20
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la cadena ANTISENTIDO
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20
<210> 310 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
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20
<210> 311 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
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20
<210> 312 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 312 ttgtgggtgt aggatttttt
20
<210> 313 <212> ADN
<211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 313 taggtgtggg atatagtttt
20
<210> 314 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 314 gggatatagt tttgtggtgt
20
<210> 315 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 315 atatagtttt gtggtgtgtt
20
<210> 316 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 316 ggtgtgttgt tttttaagtt
20
<210> 317 <211> 20
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 317 tttaagttgg tttgaaaagt
20
<210> 318 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 318 gtttgaaaag tgtaatattt
20
<210> 319 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 319 tatttgggtg ggagtgattt
20
<210> 320 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 320 tgatttgatt ttttaggtgt
20
<210> 321 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 321 ttgatttttt aggtgtgatt
20
<210> 322 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 322 ggaatttttt gattttttgt
20
<210> 323 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 323 tttaggtgag gtaatgtttt
20
<210> 324 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 324 gtaatgtttt gttttgtttt
20
<210> 325 <211> 20 <212> ADN <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 325 <210> 330 <212> ADN
gttttgtttt gttttggttt
20
<210> 326 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 326 tttgttttgt tttggtttgt
20
<210> 327 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 327 ttttgttttg gtttgtgtat
20
<210> 328 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 328 ttttggtttg tgtatggtgt 20 <210> 329 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 329 gtgtatatat attggtttgt
20
<211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
400> 330 ttttttagtg agatgaattt
20
<210> 331 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 331 atggaaatgt agaaattatt
20
<210> 332 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 332 tagaaattat tgttttttgt
20
<210> 333 <211> 20 <212> ADN <213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
la cadena ANTISENTIDO
<400> 333 aaattattgt tttttgtgtt
20
<210> 334 <211> 20
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 334 ttgttttttg tgttgtttat 20
<210> 335
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 335 tatgttggga gttgtagatt 20
<210> 336
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 336 gattggagtt gtttttattt 20
<210> 337
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 337 aaaaaaaaac caaaataacc g 21
<210> 338
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 338 aaccgaataa aaacaactcc g 21
<210> 339
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 339 tccgatctac aactcccaac g 21
<210> 340
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 340 ctacaactcc caacgtaaac g 21
<210> 341
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 341 caactcccaa cgtaaacgac g 21
<210> 342
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 342 acgtaaacga cgcaaaaaac g 21
<210> 343
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 343 acatttccat ctaaaatacc g *21
<210> 344
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 344 aaaaatacca aacaataaac g 21
<210> 345
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 345 acgcaaacca atatatatac g 21
<210> 346
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 346 aaccaatata tatacgcacc g 21
<210> 347
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 347 aatatatata cgcaccgtac g 21
<210> 348
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 348 tatatatacg caccgtacgc g 21
<210> 349
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 349 atacgcaccg tacgcgaacc g 21
<210> 350
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 350 tacgcgaacc gaaacaaaac g 21
<210> 351
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 351 cattacctca cctaaaaaac g 21
<210> 352
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 352 aaatcaaaaa aaaaaataac g 21
<210> 353
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 353 caaaaaaaaa aataacgatc g 21
<210> 354
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 354 acgatcgcac ctaaaaaatc g 21
<210> 355
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 355 aaatcgaatc actcccaccc g 21
<210> 356
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 356 cactcccacc cgaatattac g 21
<210> 357
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 357 aatattacgc ttttcaaacc g 21
<210> 358
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 358 ttcaaaccga cttaaaaaac g 21
<210> 359
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 359 aaaccgactt aaaaaacgac g 21
<210> 360
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 360 cttaaaaaac gacgcaccac g 21
<210> 361
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 361 ctatatccca cacctaactc g 21
<210> 362
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 362 cctaactcga aaaatcctac g 21
<210> 363
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 363 tcgaaaaatc ctacgcccac g 21
<210> 364
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 364 tcctacgccc acgaaatctc g 21
<210> 365
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 365 21 ctaaaatcaa actacaaaac g 21
<210> 366
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 366 tcaaactaca aaacgacaac g 21
<210> 367
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 367 aacgaaacta aaaaaaaaac g 21
<210> 368
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 368 aaactaaaaa aaaaacgccc g 21
<210> 369
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 369 cttaaataaa caaaacaacc g 21
<210> 370
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 370 acaaaacaac cgaaaaactc g 21
<210> 371
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 371 aacaataatt ctcccaacac g 21
<210> 372
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 372 gcaactaaaa atctaaaaac g 21
<210> 373
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 373 atccctaact cctaaccccc g 21
<210> 374
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 374 aacacactaa cacctcacac g 21
<210> 375
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 375 ccaaaaaaaa catctacacc g 21
<210> 376
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 376 aaaactaaaa actctaaaac g 21
<210> 377
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 377 aaaactctaa aacgcaaaac g 21
<210> 378
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 378 ctctcctcct ccaaaaaaac g 21
<210> 379
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 379 aaataaaaaa taattttaac g 21
<210> 380
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 380 aaaaaaaaaa aacttcaaac g 21
<210> 381
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 381 atcaaattac tctaaactac g 21
<210> 382
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 382 aaaactaaaa accaaaactc g 21
<210> 383
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 383 aaccaaaact cgaaaactac g 21
<210> 384
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 384 atacaaaaac ctcaaaaacc g 21
<210> 385
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 385 21 aaaacctcaa aaaccgatac g 21
<210> 386
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 386 taaaataaat aaaataaaac g 21
<210> 387
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 387 aaaaaaaaac caaaataacc a 21
<210> 388
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 388 aaccaaataa aaacaactcc a 21
<210> 389
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 389 tccaatctac aactcccaac a 21
<210> 390
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 390 ctacaactcc caacataaac a 21
<210> 391
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 391 caactcccaa cataaacaac a 21
<210> 392
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 392 acataaacaa cacaaaaaac a 21
<210> 393
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 393
acatttccat ctaaaatacc a 21
<210> 394
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 394 aaaaatacca aacaataaac a 21
<210> 395
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 395 acacaaacca atatatatac a 21
<210> 396
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 396 aaccaatata tatacacacc a 21
<210> 397
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 397 aatatatata cacaccatac a 21
<210> 398
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 398 tatatataca caccatacac a 21
<210> 399
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 399 atacacacca tacacaaacc a 21
<210> 400
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 400 tacacaaacc aaaacaaaac a 21
<210> 401
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 401 cattacctca cctaaaaaac a 21
<210> 402
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 402 aaatcaaaaa aaaaaataac a 21
<210> 403
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 403 caaaaaaaaa aataacaatc a 21
<210> 404
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 404 acaatcacac ctaaaaaatc a 21
<210> 405
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 405 aaatcaaatc actcccaccc a 21
<210> 406
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 406 cactcccacc caaatattac a 21
<210> 407
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 407 aatattacac ttttcaaacc a 21
<210> 408
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 408 ttcaaaccaa cttaaaaaac a 21
<210> 409
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 409 aaaccaactt aaaaaacaac a 21
<210> 410
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 410
cttaaaaaac aacacaccac a 21
<210> 411
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 411 ctatatccca cacctaactc a 21
<210> 412
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 412 cctaactcaa aaaatcctac a 21
<210> 413
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 413 tcaaaaaatc ctacacccac a 21
<210> 414
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 414 tcctacaccc acaaaatctc a 21
<210> 415
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 415 ctaaaatcaa actacaaaac a 21
<210> 416
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 416 tcaaactaca aaacaacaac a 21
<210> 417
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 417 aacaaaacta aaaaaaaaac a 21
<210> 418
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 418 aaactaaaaa aaaaacaccc a 21
<210> 419
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 419 cttaaataaa caaaacaacc a 21
<210> 420
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 420 acaaaacaac caaaaaactc a 21
<210> 421
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 421 aacaataatt ctcccaacac a 21
<210> 422
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 422 gcaactaaaa atctaaaaac a 21
<210> 423
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 423 atccctaact cctaaccccc a 21
<210> 424
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 424 aacacactaa cacctcacac a 21
<210> 425
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 425 ccaaaaaaaa catctacacc a 21
<210> 426
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 426 aaaactaaaa actctaaaac a 21
<210> 427
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 427
aaaactctaa aacacaaaac a 21
<210> 428
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 428 ctctcctcct ccaaaaaaac a 21
<210> 429
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 429 aaataaaaaa taattttaac a 21
<210> 430
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 430 aaaaaaaaaa aacttcaaac a 21
<210> 431
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 431 atcaaattac tctaaactac a 21
<210> 432
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 432 aaaactaaaa accaaaactc a 21
<210> 433
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 433 aaccaaaact caaaaactac a 21
<210> 434
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 434 atacaaaaac ctcaaaaacc a 21
<210> 435
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 435 aaaacctcaa aaaccaatac a 21
<210> 436
<211> 21
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento Line-1
<400> 436 taaaataaat aaaataaaac a 21
<210> 437
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 437 ggtcgggcgc ggtggtttac 20
<210> 438
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 438 ttttagtatt ttgggaggtc 20
<210> 439
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 439 gtattttggg aggtcgaggc 20
<210> 440
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 440 tttgggaggt cgaggcgggc 20
<210> 441
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 441 ttatttgagg ttaggagatc 20
<210> 442
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 442 ggttaatatg gtgaaatttc 20
<210> 443
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 443 taaaaatata aaaattagtc 20
<210> 444
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 444 aatataaaaa ttagtcgggc 20
<210> 445
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 445 aattagtcgg gcgtggtggc 20
<210> 446
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 446 ttagtcgggc gtggtggcgc 20
<210> 447
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 447 agtcgggcgt ggtggcgcgc 20
<210> 448
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 448 gtttgtaatt ttagttattc 20
<210> 449
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 449 gaggttgagg taggagaatc 20
<210> 450
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 450 taggagaatc gtttgaattc 20
<210> 451
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 451 atcgtttgaa ttcgggaggc 20
<210> 452
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 452 ggttgtagtg agtcgagatc 20
<210> 453
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 453 ttgtagtgag tcgagatcgc 20
<210> 454
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 454 tattgtattt tagtttgggc 20
<210> 455
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 455 tttagtttgg gcgatagagc 20
<210> 456
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 456 gggcgataga gcgagatttc 20
<210> 457
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 457 g gttgggtgt ggtggtttat 20
<210> 458
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 458 ttttagtatt ttgggaggtt 20
<210> 459
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 459 gtattttggg aggttgaggt 20
<210> 460
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 460 tttgggaggt tgaggtgggt 20
<210> 461
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 461 ttatttgagg ttaggagatt 20
<210> 462
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 462 ggttaatatg gtgaaatttt 20
<210> 463
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 463 taaaaatata aaaattagtt 20
<210> 464
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 464 aatataaaaa ttagttgggt 20
<210> 465
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 465 aattagttgg gtgtggtggt 20
<210> 466
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 466 ttagttgggt gtggtggtgt 20
<210> 467
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 467 agttgggtgt ggtggtgtgt 20
<210> 468
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 468 gtttgtaatt ttagttattt 20
<210> 469
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 469 gaggttgagg taggagaatt 20
<210> 470
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 470 taggagaatt gtttgaattt 20
<210> 471
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 471 attgtttgaa tttgggaggt 20
<210> 472
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 472 ggttgtagtg agttgagatt 20
<210> 473
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 473 ttgtagtgag ttgagattgt 20
<210> 474
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 474 tattgtattt tagtttgggt 20
<210> 475
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 475 tttagtttgg gtgatagagt 20
<210> 476
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 476 gggtgataga gtgagatttt 20
<210> 477
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 477 ttttttaaaa cgaaatctcg 20
<210> 478
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 478 aacgaaatct cgctctatcg 20
<210> 479
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 479 caaactaaaa tacaataacg 20
<210> 480
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 480 aactaaaata caataacgcg 20
<210> 481
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 481 aatacaataa cgcgatctcg 20
<210> 482
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 482 tcgactcact acaacctccg 20
<210> 483
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 483 actacaacct ccgcctcccg 20
<210> 484
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 484 ccgcctcccg aattcaaacg 20
<210> 485
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 485 tctcctacct caacctcccg 20
<210> 486
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 486 aataactaaa attacaaacg 20
<210> 487
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 487 taactaaaat tacaaacgcg 20
<210> 488
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 488 actaaaatta caaacgcgcg 20
<210> 489
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 489 tacaaacgcg cgccaccacg 20
<210> 490
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 490 aacgcgcgcc accacgcccg 20
<210> 491
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 491 ttatattttt aataaaaacg 20
<210> 492
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 492 tattaaccaa aataatctcg 20
<210> 493
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 493 tcctaacctc aaataatccg 20
<210> 494
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 494 aacctcaaat aatccgcccg 20
<210> 495
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 495 caaataatcc gcccgcctcg 20
<210> 496
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 496 aaatactaaa attacaaacg 20
<210> 497
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 497 attacaaacg taaaccaccg 20
<210> 498
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 498 tacaaacgta aaccaccgcg 20
<210> 499
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 499 aacgtaaacc accgcgcccg 20
<210> 500
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 500 ttttttaaaa caaaatctca 20
<210> 501
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 501 aacaaaatct cactctatca 20
<210> 502
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 502 caaactaaaa tacaataaca 20
<210> 503
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 503 aactaaaata caataacaca 20
<210> 504
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 504 aatacaataa cacaatctca 20
<210> 505
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 505 tcaactcact acaacctcca 20
<210> 506
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 506 actacaacct ccacctccca 20
<210> 507
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 507 ccacctccca aattcaaaca 20
<210> 508
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 508 tctcctacct caacctccca 20
<210> 509
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 509 aataactaaa attacaaaca 20
<210> 510
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 510 taactaaaat tacaaacaca 20
<210> 511
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 511 actaaaatta caaacacaca 20
<210> 512
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 512
tacaaacaca caccaccaca 20
<210> 513
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 513 aacacacacc accacaccca 20
<210> 514
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 514 ttatattttt aataaaaaca 20
<210> 515
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 515 tattaaccaa aataatctca 20
<210> 516
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 516 tcctaacctc aaataatcca 20
<210> 517
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 517 aacctcaaat aatccaccca 20
<210> 518
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 518 caaataatcc acccacctca 20
<210> 519
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 519 aaatactaaa attacaaaca 20
<210> 520
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 520 attacaaaca taaaccacca 20
<210> 521
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 521 tacaaacata aaccaccaca 20
<210> 522
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 522 aacgtaaacc accgcgccca 20
<210> 523
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 523 tttttttgag acggagtttc 20
<210> 524
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 524 agacggagtt tcgttttgtc 20
<210> 525
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 525 agacggagtt tcgttttgtc 20
<210> 526
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 526 ttaggttgga gtgtagtggc 20
<210> 527
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 527 aggttggagt gtagtggcgc 20
<210> 528
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 528 gagtgtagtg gcgcgatttc 20
<210> 529
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 529 ttcggtttat tgtaattttc 20
<210> 530
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 530 tattgtaatt ttcgtttttc 20
<210> 531
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 531 ttcgtttttc gggtttaagc 20
<210> 532
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 532 tttttttgtt ttagtttttc 20
<210> 533
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 533 gagtagttgg gattataggc 20
<210> 534
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
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<210> 535
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 535 agttgggatt ataggcgcgc 20
<210> 536
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 536 ttataggcgc gcgttattac 20
<210> 537
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 537 aggcgcgcgt tattacgttc 20
<210> 538
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 538 tttgtatttt tagtagagac 20
<210> 539
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 539 atgttggtta ggatggtttc 20
<210> 540
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 540 tttttgattt taggtgattc 20
<210> 541
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 541 tgattttagg tgattcgttc 20
<210> 542
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 542 ttaggtgatt cgttcgtttc 20
<210> 543
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 543 aaagtgttgg gattataggc 20
<210> 544
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 544 gattataggc gtgagttatc 20
<210> 545
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 545 ttataggcgt gagttatcgc 20
<210> 546
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 546
aggcgtgagt tatcgcgttc
20
<210> 547 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 547 tttttttgag actgagtttt
20
<210> 548 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 548 agactgagtt tctttttgtt
20
<210> 549 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 549 agactgagtt tctttttgtt
20
<210> 550 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 550 ttaggttgga gtgtagtggt
20
<210> 551 <212> ADN <400> 559
<211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 551 aggttggagt gtagtggctt
20
<210> 552 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 552 gagtgtagtg gctctatttt
20
<210> 553 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 553 ttctgtttat tgtaattttt
20
<210> 554 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 554 tattgtaatt ttcttttttt
20
<210> 555 <211> 20
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 555 ttcttttttc tggtttaagt
20
<210> 556 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 556 tttttttgtt ttagtttttt
20
<210> 557 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 557 gagtagttgg gattataggt
20
<210> 558 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 558 gtagttggga ttataggctt
20
<210> 559 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
agttgggatt ataggctctt
20
<210> 560 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 560 ttataggctc tctttattat
20
<210> 561 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 561 aggctctctt tattactttt
20
<210> 562 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 562 tttgtatttt tagtagagat
20
<210> 563 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 563 atgttggtta ggatggtttt
20
<210> 564 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 564 tttttgattt taggtgattt
20
<210> 565 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 565 tgattttagg tgattctttt
20
<210> 566 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 566 ttaggtgatt ctttcttttt
20
<210> 567 <211> 20 <212> ADN <213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, transformada con bisulfito del elemento Alu
específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA
<400> 567 aaagtgttgg gattataggt
20
<210> 568
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 568 gattataggc ttgagttatt 20
<210> 569
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 569 ttataggctt gagttatctt 20
<210> 570
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 570 aggcttgagt tatctctttt 20
<210> 571
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 571 accgaacgcg ataactcacg 20
<210> 572
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 572 cccaacactt taaaaaaccg 20
<210> 573
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 573 cactttaaaa aaccgaaacg 20
<210> 574
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 574 ttaaaaaacc gaaacgaacg 20
<210> 575
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 575 cacctaaaat caaaaaatcg 20
<210> 576
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 576
accaacataa taaaaccccg 20
<210> 577
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 577 aaaaatacaa aaattaaccg 20
<210> 578
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 578 atacaaaaat taaccgaacg 20
<210> 579
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 579 attaaccgaa cgtaataacg 20
<210> 580
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 580 taaccgaacg taataacgcg 20
<210> 581
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 581 accgaacgta ataacgcgcg 20
<210> 582
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 582 cctataatcc caactactcg 20
<210> 583
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 583 gaactaaaac aaaaaaatcg 20
<210> 584
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 584 aaaaaaatcg cttaaacccg 20
<210> 585
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 585 tcgcttaaac ccgaaaaacg 20
<210> 586
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 586 acgaaaatta caataaaccg 20
<210> 587
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 587 attacaataa accgaaatcg 20
<210> 588
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 588 tacaataaac cgaaatcgcg 20
<210> 589
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 589 actacactcc aacctaaacg 20
<210> 590
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 590 ccaacctaaa cgacaaaacg 20
<210> 591
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 591 aacgacaaaa cgaaactccg 20
<210> 592
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 592 accaaacaca ataactcaca 20
<210> 593
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 593 cccaacactt taaaaaacca 20
<210> 594
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 594 cactttaaaa aaccaaaaca 20
<210> 595
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 595 ttaaaaaacc aaaacaaaca 20
<210> 596
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 596 cacctaaaat caaaaaatca 20
<210> 597
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 597 accaacataa taaaacccca 20
<210> 598
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 598 aaaaatacaa aaattaacca 20
<210> 599
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 599 atacaaaaat taaccaaaca 20
<210> 600
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 600 attaaccaaa cataataaca 20
<210> 601
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 601 taaccaaaca taataacaca 20
<210> 602
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 602 accaaacata ataacacaca 20
<210> 603
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 603 cctataatcc caactactca 20
<210> 604
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 604 gaactaaaac aaaaaaatca 20
<210> 605
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 605 aaaaaaatca cttaaaccca 20
<210> 606
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 606
tcacttaaac ccaaaaaaca 20
<210> 607
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 607 acaaaaatta caataaacca 20
<210> 608
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 608 attacaataa accaaaatca 20
<210> 609
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 609 tacaataaac caaaatcaca 20
<210> 610
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 610 actacactcc aacctaaaca 20
<210> 611
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 611 ccaacctaaa caacaaaaca 20
<210> 612
<211> 20
<212> ADN
<213> CEBADOR COMPLEMENTARIO, específico para la cadena ANTISENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 612 aacaacaaaa caaaactcca 20
<210> 613
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 613 atgattttat ttttaatttc 20
<210> 614
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 614 gggttaaatg gattaagggc 20
<210> 615
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 615 tttagggata taaaaattgc 20
<210> 616
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 616 agagtttgaa atatggtttc 20
<210> 617
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 617 gggaagggaa agatttgatc 20
<210> 618
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 618 atttgatcgt tttttagttc 20
<210> 619
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 619 tttgggtaat ggaatgtttc 20
<210> 620
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 620 aatgtttcgg tataaaattc 20
<210> 621
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 621 ggtataaaat tcgattgtac 20
<210> 622
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 622 atgtaaagat ttttgtttac 20
<210> 623
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 623
ttttttagag aaatatttac 20
<210> 624
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 624 ggatttttta tatgttgaac 20
<210> 625
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 625 atgttgaacg ttggtttttc 20
<210> 626
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 626 agttttttat tgtattttac 20
<210> 627
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 627 ttttttattt ggtgtttaac 20
<210> 628
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 628 tttggggtga aggtatattc 20
<210> 629
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 629 gggtgaaggt atattcgagc 20
<210> 630
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 630 gtggttattg aggataagtc 20
<210> 631
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 631 ataagtcgat aagagatttc 20
<210> 632
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 632 atatttatag ttagttttac 20
<210> 633
<211> 19
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 633 tacggtaagt ttgtgtatt 19
<210> 634
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 634 tattttaaat agaagatagc 20
<210> 635
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 635 aaaaaatttt agaaggaaac 20
<210> 636
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 636 aaacggaaat tttatattgc 20
<210> 637
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 637 tgcgaatatg tagtagagtc 20
<210> 638
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 638 tcgttaatgg tttagttaac 20
<210> 639
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 639 gttattagag tttaaattac 20
<210> 640
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 640
ttttagtagg ttaggtgatc 20
<210> 641
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 641 gtaatattat aattttaagc 20
<210> 642
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 642 gtttattaat attggttatc 20
<210> 643
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 643 attaatattg gttatcggtc 20
<210> 644
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 644 atcggtcgaa ttttagtatc 20
<210> 645
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 645 agggagttat atttttagtc 20
<210> 646
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 646 aaggaaggag atattgaggc 20
<210> 647
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 647 gcgtggtaat ttttagtaac 20
<210> 648
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 649
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 649 atgtggattt ttgtgtttac 20
<210> 650
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 650 gatttttgtg tttacggatc 20
<210> 651
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 651 tttgtgttta cggatcgatc 20
<210> 652
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 652 gatcgatcgt gggaggtttc 20
<210> 653
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 653 tgattgaaat attaaaaggc 20
<210> 654
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 654 ttataaattt tatattaatc 20
<210> 655
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 655 taggtgtatt taatagtttc 20
<210> 656
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 656 ttcgaagaga tagtgatatc 20
<210> 657
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 657
gagatagtga tatcgagaac 20
<210> 658
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 658 cgagaacggg ttatgatgac 20
<210> 659
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 659 cgggttatga tgacgatggc 20
<210> 660
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 660 atgacgatgg cggttttgtc 20
<210> 661
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 661 atgattttat ttttaatttt 20
<210> 662
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 663
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 663 tttagggata taaaaattgt 20
<210> 664
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 664 agagtttgaa atatggtttt 20
<210> 665
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador IDÉNTICA EN SECUENCIA, específica para la cadena SENTIDO DESMETILADA transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 665 gggaagggaa agatttgatt 20
<210> 666
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<212> ADN
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<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 755 tcaacatata aaaaatccca 20
<210> 756
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 756 cattcataaa tatttctcca 20
<210> 757
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 757 aaaatcaaca aacaaacaca 20
<210> 758
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 758 aaacatctca atactttaca 20
<210> 759
<211> 20
<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<400> 768
taacaaaatt aaaatttaca 20
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 775 ttaaaataaa atttaaatca 20
<210> 776
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 777
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 778
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 778 tttctattaa atcactatca 20
<210> 779
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 780
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 781
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 781 cttctaaaac tatacctaca 20
<210> 782
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 783
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 784 taactttcta aaaataacca 20
<210> 785
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 785
ataaccaata ctaaaattca 20
<210> 786
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 787
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 788
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 789
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 790
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 791
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 791 actaactata aatatactca 20
<210> 792
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 792 acttatcctc aataaccaca 20
<210> 793
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 793 atcctcaata accacactca 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 794 acacctataa atatttctca 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena sentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 799
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 801
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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gagggttagt agataaatac 20
<210> 803
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 805 ttttagtata gattttttac 20
<210> 806
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 806 atagattttt tacgggtgtc 20
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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taatttttgt tatagtagtc 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 821
<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 827
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 828
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 828 gatagtataa aatggtttac 20
<210> 829
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 829 ttatttgtgt atttggatac 20
<210> 830
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 831
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 832
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 836
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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gttattattt tcgtggaggc 20
<210> 837
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 848
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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ttgttatttt agtttttttc 20
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 866
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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ttaggttttt ttttttttat 20
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<211> 20
<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<210> 881
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<212> ADN
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gtattatata tgtagaattt 20
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<211> 20
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 921
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
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<210> 923
<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 925
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
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<211> 20
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<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido metilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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tactaaacat taattcccca 20
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<212> ADN
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attaccaata aaaaaaccca 20
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<210> 1026
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1026 aaaaatatta attaaattca 20
<210> 1027
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1027 attaatccaa caaaattaca 20
<210> 1028
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1028
tcaaaactcc atatcaatca 20
<210> 1029
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1029 caaaaaaaaa cacctccaca 20
<210> 1030
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1030 gaaatatcac tcaaaccaca 20
<210> 1031
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1031 attataaatt aaacacctca 20
<210> 1032
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1032 actcaaaaca aactcaatca 20
<210> 1033
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1033 acaaataaat ccaactatca 20
<210> 1034
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1034 aaatccaact atcaataaca 20
<210> 1035
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1035 actttaaaaa caaaatatca 20
<210> 1036
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1036 taaaccattt tatactatca 20
<210> 1037
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1037 acctaaattc cattctaaca 20
<210> 1038
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1038 tataaatccc tatatccaca 20
<210> 1039
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1039 atccctatat ccacaaacca 20
<210> 1040
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1040 ctatatccac aaaccaacca 20
<210> 1041
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1041 20
accaaccata aaaaacctca 20
<210> 1042
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1042 cactaaaaca taattaaaca 20
<210> 1043
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1043 aaaaattact aataacctca 20
<210> 1044
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1044 ccaaaaaaac aataacatca 20
<210> 1045
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1045 aaacaataac atcaaaaaca 20
<210> 1046
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1046 gaaaacaaac cataataaca 20
<210> 1047
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1047 gaaccataat aacaataaca 20
<210> 1048
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador complementaria, específica para la cadena antisentido desmetilada transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1048 taacaataac aattttatca 20
<210> 1049
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1049 gtgatttttg tatttttatt 20
<210> 1050
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1050 ggtttatttt attagggagt 20
<210> 1051
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1051 agggagtgtt agatagtggg 20
<210> 1052
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1052 aggtattgtt ttatttggga 20
<210> 1053
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1053 taaggggtta gggagttttt 20
<210> 1054
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1054 tttttgagtt aaagaaaggg 20
<210> 1055
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1055 agattatatt ttatatttgg 20
<210> 1056
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1056 ttgattgtta gtatagtagt 20
<210> 1057
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1057 tttgagatta aattgtaagg 20
<210> 1058
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1058 ttattgttta ggtttgttta 20
<210> 1059
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1059 gtttaggtaa ataaagtagt 20
<210> 1060
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1060 aattgggtgg agtttattat 20
<210> 1061
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1061 tagtttaagg aggtttgttt 20
<210> 1062
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1062 gtttttgtag gttttatttt 20
<210> 1063
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1063 tgggggtagg gtatagataa 20
<210> 1064
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1064 ataaaaagat agtagtaatt 20
<210> 1065
<211> 20
<212> ADN
<213> Cebador DE SECUENCIA IDÉNTICA, específico para la cadena SENTIDO METILADA transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1065 tttgtagatt taagtgtttt 20
<210> 1066
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1066 tgtttgatag ttttgaagag 20
<210> 1067
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1067 gagtagtggt ttttttagta 20
<210> 1068
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1068 ggtagataga ttgttttttt 20
<210> 1069
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1069 aagtgggttt ttgatttttg 20
<210> 1070
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1070 attttcgagt agtttaattg 20
<210> 1071
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1071
ggaggtattt tttagtaggg 20
<210> 1072
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1072 gtagggtatt ttaatagatt 20
<210> 1073
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1073 gtagggtatt ttaatagatt 20
<210> 1074
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1074 tgtagttgag ggttttgttt 20
<210> 1075
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1075 ttagaaggaa aattaataat 20
<210> 1076
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1076 attagaaagg atatttatat 20
<210> 1077
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1077 aaaatttatt tgtatattat 20
<210> 1078
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1078 tattattaaa gattaaaagt 20
<210> 1079
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1079 agataaaatt ataaagatgg 20
<210> 1080
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1080 ggaaaaaata gaatagaaaa 20
<210> 1081
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1081 aaaaattgga aattttaaaa 20
<210> 1082
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1082 tttttttttt tttaaaggaa 20
<210> 1083
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1083 tagtttttta ttagtaatag 20
<210> 1084
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1084 aataaagttg gatggagaat 20
<210> 1085
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1085 agttgagaga agaaggtttt 20
<210> 1086
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1086 agacgattaa attattttga 20
<210> 1087
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1087 ggaggatatt taaattaaag 20
<210> 1088
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1088
gtaaagaagt tgaaaatttt 20
<210> 1089
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 1090
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1090 gtataattag aataattaat 20
<210> 1091
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1091 atagagaagt gtttaaagga 20
<210> 1092
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1092 gttgatggag ttgaaaatta 20
<210> 1093
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1093 tgaagaatgt agaagtttta 20
<210> 1094
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1094 attaattgga agaaagggta 20
<210> 1095
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1095 ttagtaatgg aagatgaaat 20
<210> 1096
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1096 agaagggaag tttagagaaa 20
<210> 1097
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1097 ctctatattt cctaaatcta 20
<210> 1098
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1098 ttaacctacc ttactaaatt 20
<210> 1099
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1099 taaataatat cctacaaaat 20
<210> 1100
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1100 cacatcactt tcaaatacac 20
<210> 1101
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1101 atttaatctt ttcacataat 20
<210> 1102
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1102 cttaaaaact ttactcattt 20
<210> 1103
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1103 ttattctttt ttctctaaac 20
<210> 1104
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1104 ttcatttcat tcatttcatc 20
<210> 1105
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1105
ataccctttc ttccaattaa 20
<210> 1106
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1106 cctaaaactt ctacattctt 20
<210> 1107
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1107 attttcaact ccatcaactc 20
<210> 1108
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1108 ttattctaat tatacattct 20
<210> 1109
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1109 aaaattttca acttctttac 20
<210> 1110
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1110 gtaactcaaa ataatttaat 20
<210> 1111
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<212> ADN <
213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<212> ADN <
213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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tcccaaataa aacaatacct 20
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<210> 1161
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<210> 1185
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1188 ttgattttag attgttgtgt 20
<210> 1189
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<212> ADN
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<212> ADN
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<212> ADN
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<210> 1195
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1195 aaattccctt tctaaatcaa 20
<210> 1196
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1196 actatatccc acacctaact 20
<210> 1197
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1197 acaacaatct aaaatcaaac 20
<210> 1198
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1198 aacttactta aataaacaaa 20
<210> 1199
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1199
caccacaact caaaaaaacc 20
<210> 1200
<211> 20
<212> ADN
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<400> 1200 ctaaaaacaa aacacaaaca 20
<210> 1201
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1201 aacttaaata tccctatcta 20
<210> 1202
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1202 aaaaaaacaa taattctccc 20
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<400> 1209 aaccaaaaac aaaaaaatta 20
<210> 1210
<211> 20
<212> ADN
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<210> 1211
<211> 20
<212> ADN
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<400> 1211 aataaaacta aaaaccaaaa 20
<210> 1212
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1212 aatacaaaaa cctcaaaaac 20
<210> 1213
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 1214
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1214 aaaaaaaaaa aaataaaaaa 20
<210> 1215
<211> 20
<212> ADN
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<210> 1216
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1216
taaaaataat ataaaaaata 20
<210> 1217
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 1218
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1218 aattcaaaaa atacaaaaaa 20
<210> 1219
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 1220
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 1221
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 1222
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<210> 1223
<211> 20
<212> ADN
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<210> 1224
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1224 acactaaaca taaaaaaaaa 20
<210> 1225
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1225 atcataccaa aatataaaaa 20
<210> 1226
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito de la región promotora del elemento LINE-1
<400> 1227 caaaatcaaa ttcacacata 20
<210> 1228
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1228 gtttgtaatt ttagtatttt 20
<210> 1229
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1229
attttagtat tttgggaggt 20
<210> 1230
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1230 ggattatttg aggttaggag 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1231 gagattattt tggttaatat 20
<210> 1232
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
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<210> 1233
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1233 gtttttatta aaaatataaa 20
<210> 1234
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1234 ttaaaaatat aaaaattagt 20
<210> 1235
<211> 19
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1237 gttattgtat tttagtttgg 20
<210> 1238
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1238 cccaaactaa aatacaataa 20
<210> 1239
<211> 20
<212> ADN <
213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1239 attctcctac ctcaacctcc 20
<210> 1240
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1240 ttttatattt ttaataaaaa 20
<210> 1241
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1241 catattaacc aaaataatct 20
<210> 1242
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1242 tctcctaacc tcaaataatc 20
<210> 1243
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento Alu
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<210> 1244
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1245 atttttttgt tttagttttt 20
<210> 1246
<211> 19
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1246 gagtagttgg gattatagg 19
<210> 1247
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1247 tttttgtatt tttagtagag 20
<210> 1248
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1248 ttttattatg ttggttagga 20
<210> 1249
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1249 attttttgat tttaggtgat 20
<210> 1250
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1250 tttttaaagt gttgggatta 20
<210> 1251
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1251 atcccaacac tttaaaaaac 20
<210> 1252
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1252 aatcacctaa aatcaaaaaa 20
<210> 1253
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
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<210> 1254
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1254 tactaaaaat acaaaaatta 20
<210> 1255
<211> 19
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
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<210> 1256
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
<400> 1256 gaaaaactaa aacaaaaaaa 20
<210> 1257
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento Alu
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<210> 1258
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1259
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1259
agggagaaat tattttaggg 20
<210> 1260
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1260 taaagtattg agatgtttat 20
<210> 1261
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1261 atatattttt tttttagaga 20
<210> 1262
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1262 gaaatattta taggtgtgga 20
<210> 1263
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1263 ggggtaaatt aaaattaaaa 20
<210> 1264
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1264 atagaataat tttgtttatg 20
<210> 1265
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1266
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1266 gttttagaat tattttaaat 20
<210> 1267
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1267 ggaagttgta taatagattg 20
<210> 1268
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1269
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1269 gatttaattg ttagtagttt 20
<210> 1270
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1270 tatggtatta tttagtaggt 20
<210> 1271
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1271 gaaagaggga gtaaaatagt 20
<210> 1272
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1272 gaattgatgg ggtataagaa 20
<210> 1273
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1273 taagtattaa tgtaaaatga 20
<210> 1274
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1274 agagtttggg aaaaaattta 20
<210> 1275
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1275 atagtaagat aaggtttaaa 20
<210> 1276
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1276 gatgtaattt tagagtatgt 20
<210> 1277
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1278
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1278 ataaaaaatt tttataggag 20
<210> 1279
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1280
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1282
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1282 gatttaattt ttaattggta 20
<210> 1283
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1283 atattttgat tgaaatatta 20
<210> 1284
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1284 gagtattatt gggatatggt 20
<210> 1285
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1285 ttatgattat aaattttata 20
<210> 1286
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1286 agtagatata ggagatttta 20
<210> 1287
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1287 tttgtttagg aaagttaggt 20
<210> 1288
<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1289 ataaatatta agggaattta 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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aacattccat tacccaaaaa 20
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
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<210> 1298
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1299
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1301
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1301 tattctaaaa tcataaacct 20
<210> 1302
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1302 aacttaccaa tttttaatca 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1306
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1306 cttaaaacaa attttccctt 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1308 cattataaaa cttcaaatat 20
<210> 1309
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1310
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1310
cattactaaa accatcaata 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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ctctacctat tattataata 20
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1321
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1321 ctaatcctcc tcaacacaaa 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1322 ccttcaaaca tctatttaac 20
<210> 1323
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena sentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1324
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1328
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1329
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1331
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1332
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1333
<211> 20
<212> ADN <
213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1333 gattaatagt attttaaggt 20
<210> 1334
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1335
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1336
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1338
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1339
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1340
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1342
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1343
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1344
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
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tttattttgg ttataatttt 20
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<211> 20
<212> ADN
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<400> 1357
ggttttaagt aatgtaaaat 20
<210> 1358
<211> 20
<212> ADN
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<210> 1359
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1359 ttttaatata tggtaggagt 20
<210> 1360
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1361
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<210> 1362
<211> 20
<212> ADN
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<210> 1363
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
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<212> ADN
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<210> 1367
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
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<212> ADN
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1370 ggaaatagat gttttttttt 20
<210> 1371
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1371 tttgagatta gggagtggtg 20
<210> 1372
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1372 atctataacc ttacccccaa 20
<210> 1373
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1373 aacaaatact taaaaacaac 20
<210> 1374
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1374
aatctcaaat acccaaaaac 20
<210> 1375
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1375 tccccatata aaaatctaaa 20
<210> 1376
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1376 aaaaaaaatt aatataaaaa 20
<210> 1377
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1377 caccttaaaa ctaaaaataa 20
<210> 1378
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1378 cacatctccc tctcaaaaaa 20
<210> 1379
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1379 tttttctttt ccaaatctct 20
<210> 1380
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1380 tttctctaaa ataaaaatac 20
<210> 1381
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1381 cttaacttca ttaaaattct 20
<210> 1382
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1382 aacaaataaa aaaaataata 20
<210> 1383
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1383 aattacaaaa aataatatat 20
<210> 1384
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1384 ccaactacca ataacttatc 20
<210> 1385
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1385 aataaacaaa ataataaatt 20
<210> 1386
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1386 ccaaataaaa atctttttaa 20
<210> 1387
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1387 tttacaattt aaaacttaat 20
<210> 1388
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1388 aattaaaact atctacctta 20
<210> 1389
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1389 ccattaaacc attaaaaaaa 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1390 atcaaaataa tcatttaaaa 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1391
taataaaaat aaacaaccat 20
<210> 1392
<211> 20
<212> ADN
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<400> 1392 caacccccac tatcccaaat 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1393 ataccaatcc aaaaaacaaa 20
<210> 1394
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1394 aaatcaataa ccaaaaaatt 20
<210> 1395
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1395 taaccaaaat aaaatatata 20
<210> 1396
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1396 taattcaaaa aaaatccaac 20
<210> 1397
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1397 aaaattacca atacaaaact 20
<210> 1398
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1398 atcccttaac cccactccaa 20
<210> 1399
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1399 ataaaaataa cccaaacaaa 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1400 aaaaaaataa cttacacaaa 20
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<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1401 aaaaaacttc ccattttata 20
<210> 1402
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1402 acttattcac atttcatata 20
<210> 1403
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1403 cacataaaaa aaaactaatt 20
<210> 1404
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1404
taataataat atataaatac 20
<210> 1405
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1405 cttatcaaaa atcattaaaa 20
<210> 1406
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1406 tacacaaata aatccaacta 20
<210> 1407
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1407 ctataaccta taaaaattat 20
<210> 1408
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1408 acaaaaaaat tctacaaaat 20
<210> 1409
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1409 taaatctaaa catcactaaa 20
<210> 1410
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1410 tattattaat ctacaaatat 20
<210> 1411
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1411 aaaataatac aaaatatact 20
<210> 1412
<211> 20
<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1412 taatataaaa aaaaaacata 20
<210> 1413
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1413 actaccttaa aactaaaaat 20
<210> 1414
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1414 tattatctta taaccctaac 20
<210> 1415
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<212> ADN
<213> Secuencia de cebador idéntica en secuencia y complementaria, específica para la cadena antisentido transformada con bisulfito del elemento HERV-K
<400> 1415 tccaccttat aaaaaacacc 20

Claims (10)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Procedimiento para determinar el grado de metilación de ADN normalizado que comprende las etapas:
    a) determinación cuantitativa de la presencia de un transposón o fragmento del mismo en un ADN genómico que comprende la amplificación del ADN no bisulfitado con al menos un par de cebadores, que es específico para un transposón o fragmento del mismo, o amplificación del ADN bisulfitado con al menos un par de cebadores que es específico para un transposón bisulfitado o fragmento del mismo, en el que los cebadores no comprenden ninguna posición metilada diferencial del transposón, realizándose la determinación cuantitativa por medio de PCR en tiempo real para determinar un valor de umbral de ciclo;
    b) determinación cuantitativa de la existencia de al menos una C metilada diferencial de un dinucleótido CpG dentro del mismo transposón o fragmento del mismo, que comprende la amplificación del ADN bisulfitado con al menos un par de cebadores, que es específico para el transposón o fragmento del mismo y que comprende al menos un cebador, que comprende al menos una posición metilada diferencial del transposón, usándose el mismo ADN que en la etapa a) y realizándose la determinación cuantitativa por medio de PCR en tiempo real para determinar un valor de umbral de ciclo; y
    c) determinación del grado de metilación de ADN normalizado a través de la proporción de los valores de umbral de ciclo determinados en las etapas a) y b).
  2. 2.
    Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el transposón o fragmento del mismo se selecciona del grupo constituido por un elemento LINE, un elemento LINE-1, un elemento Alu, un elemento HERV y preferentemente la región promotora de un elemento LINE-1.
  3. 3.
    Procedimiento según la reivindicación 1, en el que ambos cebadores del par de cebadores de la etapa b) comprenden al menos una posición metilada de modo diferencial del transposón.
  4. 4.
    Procedimiento según una de las reivindicaciones anteriores, en el que el cebador de la etapa b) comprende 2, 3 ó 4 posiciones metiladas de modo diferencial del transposón.
  5. 5.
    Procedimiento según una de las reivindicaciones anteriores, en el que el cebador presenta en su extremo 3’ una posición metilada de modo diferencial del transposón.
  6. 6.
    Procedimiento según una de las reivindicaciones anteriores, en el que el al menos un cebador de la etapa b) comprende un oligonucleótido que se selecciona del grupo constituido por SEC ID N.º 3 -1048.
  7. 7.
    Procedimiento para determinar el grado de metilación de ADN relativo que comprende las etapas:
    a) determinación del grado de metilación de acuerdo con las etapas a) a c) según la reivindicación 1 para un primer ADN y un segundo ADN; y
    b) determinación del grado de metilación de ADN relativo a través de la proporción de los grados de metilación determinados para el primer y el segundo ADN.
  8. 8.
    Procedimiento según la reivindicación 7 para diagnosticar una enfermedad que se relaciona con una metilación de ADN modificada, en el que el primer ADN es una muestra de referencia y el segundo ADN procede de una muestra que va a someterse a prueba.
  9. 9.
    Procedimiento según la reivindicación 8, en el que la enfermedad es un tumor.
  10. 10.
    Uso al menos de un oligonucleótido seleccionado del grupo constituido por SEC ID N.º 3 -SEC ID N.º 1415, preferentemente SEC ID N.º 3 -436 y/o SEC ID N.º 1049 -1227 para determinar el grado de metilación de ADN normalizado según la reivindicación 1.
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