ES2354483T3 - Derivados de triaza-benzo(e)azuleno para el tratamiento de tumores. - Google Patents

Abstract

Compuestos de la fórmula I **(Ver fórmula)** en la queR1significa H, A, OH, OA, NO2, NH2, NHA, NA2, Hal, CN, A-COO, COOH, COOA o CONR4R5, R2, R3 significan respectivamente, de manera independiente entre sí, H, A, alquenilo con 2 hasta 6 átomos de carbono, alquinilo con 2 hasta 6 átomos de carbono o Hal,R4, R5 significan respectivamente, de manera independiente entre sí, H o A,Asignifica alquilo no ramificado o ramificado con 1, con 2, con 3, con 4, con 5, con 6, con 7, con 8, con 9 o con 10 átomos de carbono, pudiendo estar reemplazados desde 1 hasta 7 átomos de H por F, Halsignifica F, Cl, Br o I, así como sus derivados, sus solvatos, sus sales, sus tautómeros y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

Description

Derivados de triaza-benzo[e]azuleno para el tratamiento de tumores.

Fundamento de la invención

La invención tenía como tarea encontrar nuevos compuestos con propiedades valiosas, de manera especial aquellos que pudieran ser empleados para la fabricación de medicamentos.

La presente invención se refiere a compuestos y al empleo de los compuestos, en los que juega un papel la inhibición, la regulación y/o la modulación de la transducción de las señales de las cinasas, de manera especial de las cinasas del receptor TGF-beta, así mismo la invención se refiere a composiciones farmacéuticas, que contienen estos compuestos, así como al empleo de los compuestos para llevar a cabo el tratamiento de enfermedades condicionadas por las cinasas.

El factor beta de transformación celular (transforming growth factor beta) es el prototipo de la superfamilia TGF-beta, una familia de factores del crecimiento pleitrópico, altamente conservada, que ejerce importantes funciones tanto durante el desarrolle embrionario así como, también, en el organismo adulto. En los mamíferos han sido identificadas tres isoformas del TGF-beta (TGF-beta 1, 2 y 3), representando el TGF-beta 1, la isoforma mas frecuente (Kingsley (1994) Genes Deva 8: 133-146). El TGF-beta 3 es expresado, por ejemplo, únicamente en células mesenquimales mientras que, por el contrario, el TGF-beta 1 se encuentra en las células mesenquimales y epiteliales. El TGF-beta es sintetizado como preproteína y es segregado en forma inactiva en la matriz extracelular (Derynck (1985) Nature 316: 701-705; Bottinger (1996) PNAS 93: 5877-5882). De la misma manera, puede estar enlazada una de las 4 isoformas de las proteínas de enlace TRGF-beta latentes (Latent TGF-beta Binding Proteins (LTBP 1-4)) sobre el TGF-beta (Gentry (1988) Mol Cell Biol 8: 4162-4168, Munger (1997) Kindey Int 51: 1376-1382), además de la prorregión disociada, que se denomina también péptido asociado latente (Latency Associated Peptide (LAP)) y que permanece asociada con la región madura. Todavía no ha sido aclarada por completo la activación de los complejos inactivos, que es necesaria para llevar a cabo el despliegue del efecto biológico del TGF-beta. Desde luego se requiere, con seguridad, un procesamiento proteolítico, por ejemplo por medio de plasmina, de transglutaminasa del plasma o de trombospondina (Munger (1997) Kindey Int 51: 1376-1382). El ligando TGF-beta activado induce su efecto biológico a través de tres receptores TGF-beta, que están situados en la membrana, los receptores de tipo I y de tipo II, que son expresados de forma ubicua, y los receptores de tipo III constituidos por el betaglicano y por la endoglina, siendo expresado esta último solamente en las células del endotelio (Gougos (1990) J Biol Chem 264: 8361-8364, Lopes-Casillas (1994) J Cell Biol 124: 557-568). Ninguno de los dos receptores TGF-beta de tipo III tiene dominios de cinasa intracelulares, que posibiliten una retransmisión de las señales hasta la célula. Puesto que los receptores TGF-beta de tipo III enlazan a las tres isoformas del TGF-beta con elevada afinidad y, así mismo, el receptor TGF-beta de tipo II tiene una elevada afinidad para los ligandos, que están enlazados sobre el receptor de tipo III, probablemente la función biológica consiste en la regulación de la disponibilidad de los ligandos para los receptores TGF-beta de tipo I y de tipo II (Lastres (1996) J Cell Biol 133: 1109-1121; Lopes-Casillas (1993) Cell 73: 1435-1344). Los receptores de tipo I y de tipo II, que están estrechamente emparentados desde el punto de vista estructural, tienen una la región citoplasmática un dominio de serina/treonina-cinasa, que es responsable de la retransmisión de las señales. El receptor TGF-beta de tipo II enlaza el TGF-beta, después de lo cual es recrutado el receptor TGF-beta de tipo I para formar este complejo retransmisor de las señales. El dominio de serina/treonina-cinasa del receptor de tipo II es constituyentemente activo y puede llevar a cabo la fosforilación en este complejo de los restos serilo en el dominio denominado GS del receptor de tipo I. Esta fosforilación lleva a cabo la activación de la cinasa del receptor de tipo I que, por su parte, puede llevar a cabo, ahora, la fosforilación de los mediadores de las señales intracelulares, la proteína SMAD y, de este modo, puede llevar a cabo la iniciación de la retransmisión intracelular de las señales (resumido en la publicación de Derynck (1997) Biochim Biophys Acta 1333: F105-F150). Las proteínas de la familia SMAD sirven como substratos para todas las cinasas del receptor de las familias TGF-beta. Hasta el presente han sido identificadas 8 proteínas SMAD, que se subdividen en 3 grupos: (1) las SMADs asociadas con el receptor (R-SMADs) son substratos directos de las cinasas del receptor TGF-\beta (SMAD1, 2, 3, 5, 8); (2) las co-SMADs, que se asocian con las R-SMADs durante la cascada de señales (SMAD4); y (3) las SMADs inhibidoras (SMAD6, 7), que inhiben la actividad de las proteínas SMAD, que han sido citadas más arriba. Entre las diversas R-SMADs, la SMAD2 y la SMAD3 son los mediadores de las señales específicos del TGF-beta. Por lo tanto, en la cascada de señales del TGF-beta, las SMAD2/SMAD3 llevarán a cabo la fosforilación del receptor TGF-beta de tipo I, por lo que pueden ser asociadas a la SMAD4. El complejo formado, que está constituido por SMAD2/SMAD3 y por SMAD4, puede ser translocalizado ahora hasta el núcleo de la célula puede llevar a cabo en el mismo, de manera directa o a través de otra proteína, la transcripción del gen regulado por el TGF-beta (resumido en la publicación Itoh (2000) Eur J Biochem 267: 6954-6967; Shi (2003) Cell 113: 685-700).

El espectro de las funciones del TGF-beta presenta un amplio abanico y depende del tipo celular y del estado de diferenciación (Roberts (1990) Handbook of Experimental Pharmacology: 419-472). A las funciones celulares, que son influenciadas por el TGF-beta, pertenecen: la apoptosis, la proliferación, la diferenciación, la movilidad y la adherencia celular. Por lo tanto el TGF-beta juega un papel importante en los procesos biológicos más diversos. Durante el desarrollo embrional son expresados en los lugares de la morfogérnesis y, de manera especial, en los puntos con interacción epitelial mesenquimal y son inducidos en dichos puntos importantes procesos de diferenciación (Pelton (1991) J Cell Biol 115: 1091-1105). El TGF-beta ejerce también una punción clave en la autonutrición y en el mantenimiento de un estado indiferenciado de las células madre (Mishra (2005) Science 310: 68-71). Por otra parte, el TGF-beta también cumple una función importante en la regulación del sistema inmune. En general, actúa de forma inmunosupresora, puesto que, entre otras cosas inhibe la proliferación de los linfocitos y limita la actividad de los macrófagos tisulares. De este modo, el TGF-beta permite que las reacciones inflamatorias remitan de nuevo y ayuda de este modo a evitar reacciones inmunes en exceso (Bogdan (1993) Ann NY Acad Sci 685: 713-739, resumido en la publicación Letterio (1998) Annu Rev Immunol 16: 137-161). Otra función del TGF-beta consiste en la regulación de la proliferación celular. El TGF-beta inhibe el crecimiento de las células de origen endotelial, epitelial y hematopoyético, pero fomenta el crecimiento de las células de origen mesenquimal (Tucker (1984) Science 226: 705-707, Shipley (1986) Cancer Res 46: 2068-2071, Shipley (1985) PNAS 82: 4147-4151). Otra función importante del TGF-beta consiste en la regulación de la adherencia celular y de las interacciones de célula a célula. El TGF-beta fomenta la formación de la matriz extracelular por medio de la inducción de proteínas de la matriz extracelular tales como, por ejemplo, la fibronectina y el colágeno. De manera adicional, el TGF-beta reduce la expresión de las metaloproteasas degradadotas de la matriz y los inhibidores de las metaloproteasas (Roberts (1990) Ann NY Acad Sci 580: 225-232; Ignotz (1986) J Biol Chem 261: 4337-4345; Overall (1989) J Biol Chem 264: 1860-1869); Edwards (1987) EMBO J 6: 1899-1904).

El amplio espectro de actividad del TGF-beta implica, que el TGF-beta juega un papel importante en muchos supuestos fisiológicos, tales como la curación de las heridas y en los procesos patológicos, tales como el cáncer y la fibrosis.

El TGF-beta es una de los factores clave del crecimiento en la curación de las heridas (resumido en O'Kane (1997) Int J Biochem Cell Biol 29: 79-89). Durante la fase de granulación, es liberado el TGF-beta en el lugar de la herida a partir de las plaquetas sanguíneas. Por lo tanto, el TGF-beta regula su propia producción en macrófagos e induce la secreción de otros factores de crecimiento por ejemplo por medio de los monicitos. Las funciones más importantes durante la curación de las heridas comprenden la estimulación de la quimiotaxis de las células inflamatorias, la síntesis de la matriz extracelular y la regulación de la proliferación, la diferenciación y la expresión génica de todos los tipos de células, que participan en todos los procesos importantes en la curación de las heridas.

Bajo condiciones patológicas, estos efectos inductores del TGF-beta, de manera especial la regulación de la producción de la matriz extracelular (ECM) conducen a la fibrosis o bien conducen a cicatrices en la piel (Border (1994) N Engl J Med 331: 1286-1292).

En el caso de las enfermedades fibróticas, de las nefropatías diabéticas y de la glomerulonefritis pudo demostrarse, que el TGF-beta fomenta la hipertrofia celular renal y la acumulación patógena de la matriz extracelular. La interrupción de la vía de la señal del TGF-beta por medio de un tratamiento con anticuerpo anti-TGF-beta impide la expansión de la matriz mesangial, la disminución progresiva de la función renal y reduce las lesiones establecidas de la glomerulopatía diabética en los animales diabéticos (Border (1990) 346: 371-374, Yu (2004) Kindney Int 66: 1774-1784, Fukasawah (2004) Kindney Int 65: 63-74, Sharma (1996) Diabetes 45: 522-530).

El TGF-beta juega también un papel importante en la fibrosis hepática. La activación de las células hepáticas estrelladas (en inglés hepatic stellate cell), que son esenciales para el desarrollo de la fibrosis hepática, para dar miofibroblastos, que son los productores principales de la matriz extracelular en el ámbito del desarrollo de una cirrosis hepática, es estimulada por el TGF-beta. En este caso, también pudo mostrarse que la interrupción de la vía de señalización del TGF-beta reduce la fibrosis en modelos experimentales (Yata (2002) Hepatology 35: 1022-1030; Arias (2003) BMC Gastroenterol 3:29).

De igual modo, el TGF-beta ejerce una función clave en la génesis del cáncer (resumido en la publicación Derynck (2001) Nature Genetics: 29: 117-129; Elliott (2005) J Clin Onc 23: 2078-2093). El TGF-beta se opone en los estadios iniciales del desarrollo del cáncer a la génesis del cáncer. Este efecto supresor de los tumores está basado, fundamentalmente, en la capacidad que tiene el TGF-beta para inhibir la división de las células epiteliales. Por el contrario, el TGF-beta fomenta el crecimiento del cáncer y la formación de las metástasis en los estadios tardíos de los tumores. Esto puede ser atribuido a que la mayoría de los tumores epiteliales desarrollan una resistencia frente al efecto inhibidor del crecimiento del TGF-beta y a que el TGF-beta fomenta, al mismo tiempo, el crecimiento de las células tumorales a través de otros mecanismos. A estos mecanismos pertenecen el fomento de la angiogenesis, el efecto inmunosupresor, eludiendo las células tumorales la función de control del sistema inmune (en inglés immunosurveillance) y el fomento de la invasividad y de la formación de metástasis. La formación de un fenotipo invasor de las células tumorales es una condición previa principal para la formación de metástasis. El TGF-beta fomenta este proceso a través de su capacidad para regular la adherencia celular, la motilidad y la formación de la matriz extracelular. Por otra parte, el TGF-beta induce la transformación de un fenotipo epitelial de las células en un fenotipo mesenquimal invasivo (en inglés Epitheliale Mesenchymale Transition = EMT). El importante papel, que juega el TGF-beta en el fomento del crecimiento del cáncer, queda demostrado también por medio de investigaciones, que indican una correlación entre una fuerte expresión del TGF-beta y un mal pronóstico. Se encontró un nivel elevado de TGF-beta, entre otros, en pacientes con cáncer de próstata, de mama, de intestino y de pulmón (Wikström (1998) Prostate 37: 19-29; Hasegawa (2001) Cancer 91: 964-971; Friedman (1995), Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 4: 549-54). Como consecuencia de los efectos promotores del canecer, que han sido descritos más arriba, del TGF-beta, la inhibición de la vía de señalización del TGF-beta, por ejemplo por medio de la inhibición del receptor del TGF-beta de tipo I, se ofrece como concepto terapéutico. En un gran número de ensayos preclínicos puede ponerse de manifiesto, que en realidad la interrupción de la vía de señalización del TGF-beta inhibía el crecimiento del cáncer. De este modo, el tratamiento con el receptor TGF-beta tipo II, soluble, reduce la formación de las metástasis en los ratones transgénicos, que desarrollan cáncer de mama invasivo en el transcurso del tiempo (Muraoka (2002) J Clin Invest 109: 1551-1559, Yang (2002) J Clin Invest 109: 1607-1615). Las líneas celulares, que expresan un receptor TGF-beta tipo II defectuoso, muestran una disminución del crecimiento de los tumores y de las metástasis (Oft (1998) Curr Biol 8: 1243-1252, McEachern (2001) Int J Cancer 91: 76-82, Yin (1999) J Clin Invest 103: 197-206).

Los estados, "que se caracterizan por una actividad acrecentada del TGF-\beta ", comprenden aquellos estados, en los que la síntesis del TGF-\beta está estimulada de tal manera, que se presenta un nivel acrecentado de TGF-\beta, o en los que está activada de manera indeseable la proteína latente del TGF-\beta o en los que está trasformada la proteína activa del TGF-\beta o en los que los receptores TGF-\beta están altamente regulados o en los que la proteína del TGF-\beta presenta una formación acrecentada en las células o en la matriz extracelular en el foco de la enfermedad. De este modo, la "actividad acrecentada" se refiere, en cualquier caso, a un estado arbitrario, en el que la actividad biológica del TGF-\beta es indeseablemente elevada, co independencia del origen.

Se ha relacionado una serie de enfermedades co la sobreproducción de TGF-\beta1. Los inhibidores de la vía intracelular de las señales del TGF-\beta son tratamientos adecuados para las enfermedades fibroproliferantes. Las enfermedades fibroproliferantes comprenden trastornos renales específicos, que van acompañados por una actividad desregulada del TGF-\beta, y fuertes fibrosis, con inclusión de la glomerulonefritis (GN), como la GN mesangial proliferante, inmuno-GN y GN en media luna. Otros estados renales comprenden la nefropatía diabética, la fibrosis intersticial renal, la fibrosis renal en pacientes trasplantados, que reciben ciclosporina, y la nefropatía emparejada con el HIV. Los trastornos colágeno-vasculares comprenden la esclerosis progresiva, la polimiositis, la esclerodermia, la dermatomiositis, la fascitis eosinofila, la morfea o aquellos trastornos, que van emparejados con la aparición del síndrome de Raynaud. Las fibrosis pulmonares, que están provocadas por una actividad excesiva del TGF-\beta, comprenden el síndrome del trastorno respiratorio en adultos, la fibrosis pulmonar idiopática y la fibrosos pulmonar intersticial, que va emparejada con frecuencia con trastornos autoinmunes, tales como el lupus sistémico eritematoso y la esclerodermia, el contacto químico o las alergias. Otro trastorno autoinmune, que va emparejado con las propiedades fibroproliferentes, es la artritis reumatoide.

Las enfermedades oculares, que van emparejadas con un estado fibroproliferante, comprenden una vitreorretinopatía proliferante, que se presenta con ocasión de una operación de refijación de la retina, la extracción de cataratas con un implante de lente intraocular, y la operación de drenaje post-glaucoma, y van emparejadas con una producción excesiva del TGF-\beta1.

Las enfermedades fibróticas, que van emparejadas con una producción excesiva del TGF-\beta1, pueden ser subdivididas en estados crónicos, tales como la fibrosis renal, pulmonar y hepática, y en estado agudos, tales como la cicatrización de la piel y la restenosis (Chamberlain, J. Cardiovascular Drug Reviews, 19(4): 329-344). La síntesis y la secreción del TGF-\beta1 por parte de las células tumorales pueden conducir, de la misma manera, a una inmunosupresión, como la que se observa en el caso de los pacientes con tumores agresivos del cerebro o de mama (Arteaga, et al. (1993) J. Clin. Invest. 92: 2569-2576). El desarrollo de la infección por Leishmania en el caso de los ratones queda drásticamente modificado por medio del TGF-\beta1 (Barral-Netto, et al. (1992) Science 257: 545-547). El TGF-\beta1 empeora la enfermedad mientras que, por el contrario, los anticuerpos del TGF-\beta1 detuvieron el avance de la enfermedad en caso de los ratones genéticamente vulnerables. Los ratones genéticamente resistentes se volvieron vulnerables frente a la infección por Leishmania por medio de la administración del TGF-\beta1.

Los profundos efectos sobre los depósitos de la matriz extracelular han sido expuestos de manera resumida (Rocco y Ziyadeh (1991) en la publicación Contemporary Issues in Nephrology v.23, Hormones, autocoids and the kidney, Hrsg. Jay Stein, Churchill Livingston, New York p. 391-410; Roberts, et al. (1988) Rec. Prog. Hormone Res. 44: 157-197) y comprenden la estimulación de la síntesis y la inhibición de la degradación de los componentes de la matriz extracelular. Puesto que las propiedades estructurales y filtrantes del glomérulo están determinadas, en gran parte, por la composición de la matriz extracelular de mesangio y de la membrana glomerular, no es sorprendente que el TGF-\beta1 tenga efectos profundos sobre los riñones. El enriquecimiento de la matriz mesangial en el caso de la glomerulonefritis proliferante (Border, et al., (1990) Kidney Int. 37: 689-695) y de la nefropatía diabética (Mauer, et al. (1984) J. Clin. Invest. 74: 1143-1155) con características claras y dominantes de las enfermedades. Los niveles de TGF-\beta1 están acrecentados en el caso de la glomerulosclerosis diabética en el caso de los seres humanos (neuropatía avanzada) (Yamamoto, et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. 90: 1814-1818). El TGF-\beta1 es un inductor importante en la génesis de la fibrosis renal en un aserie de modelos con animales (Phan, et al. (1990) Kidney Int. 37: 426; Okuda, et al. (1990) J. Clin. Invest. 86: 453). Se demostró la represión de la glomerulonefritis inducida experimentalmente en ratas por medio del antisuero contra el TGF-\beta1 (Border, et al. (1990) Nature 346: 371) y por medio de una proteína de la matriz extracelular, la decorina, que pueden enlazar al TGF-\beta1 (Border, et al. (1992) Nature 360: 361-363).

Una cantidad excesiva de TGF-\beta1 conduce a la formación de tejido cicatricial de la piel. La neutralización de los anticuerpos del TGF-\beta1, que fueron inyectados en ratas en los bordes de heridas en curación, produjeron la inhibición, de conformidad con los hallazgos, la formación cicatrices, si que las ratas sufriesen un menoscabo en cuanto a la curación de las heridas o a la solidez de la herida (Shah, et al. (1992) Lancet 339: 213-214). Al mismo tiempo era menor la angiogénesis, se redujo el número de los macrófagos y de los monocitos en la herida y se redujo la magnitud de los depósitos desorganizados de fibras de colágeno en el tejido cicatricial.

El TGF-\beta1 puede ser un factor en el caso del espesamiento progresivo de la pared arterial, que es provocado por la proliferación de las células musculares lisas y por los depósitos de la matriz extracelular en la arteria después de la vasculoplastia con balón. El diámetro de la arteria cerrada de nuevo puede estar reducida en un 90% por medio de este espesamiento y, puesto que la mayor parte de la reducción del diámetro se debe a la matriz extracelular, y no a los cuerpos de las células musculares lisas, estos vasos pueden ser abiertos de nuevo hasta el 50%, reduciéndose sencillamente el deposito en exceso de la matriz extracelular. En el caso de arterias de cerdo no dañadas, que fueron sometidas a una transfixión in vivo con un gen del TGF-\beta1, la expresión génica del TGF-\beta1 estuvo emparejada tanto con la síntesis de la matriz extracelular así con una hiperplasia (Nabel, et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci USA 90: 10759-10763). La hiperplasia, inducida por el TGF-\beta1 no fue tan abundante como la que se indujo con PDGF-BB pero, sin embargo, la matriz extracelular estaba más marcada en el caso de los tranfectantes del TGF-\beta1. No se produjeron depósitos de matriz extracelular en el caso de una hiperplasia inducida por medio del FGF-1 (una forma secretada de FGF) en el caso de este modelo de transmisión génica en el cardo (Nabel (1993) Nature 362: 844-846).

Existen diversos tipos de cáncer, pidiendo ser nocivo el TGF-\beta1 generado por el tumor. Las células de cáncer de próstata MATLyLu en el caso de las ratas (Steiner y Barrack (1992) Mol. Endocrinol 6: 15-25) y las células de cáncer de mama MCF-7 en el caso de los seres humanos (Arteaga, et al. (1993) Cell Growth and Differ. 4: 193-201) fueron tumorigenas y metastasícas, después de la transfección con un vector, que expresó el TGF-\beta1 de ratón. El TGF-\beta1 estaba emparejado con angiogénesis, metástasis y un mal pronóstico en el caso de la próstata de los seres humanos y del cáncer de intestino avanzado (Wikstrom, P., et al. (1988) Prostate 37; 19-29; Saito, H., et al. (1999) Cancer 86: 1455-1462). El en caso del cáncer de mama, un mal pronóstico va emparejado con el TGF-\beta acrecentado (Dickson, et al. (1987) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84: 837-841; Kasid, et al. (1987) Cancer Res. 47: 5733-5738; Daly, et al. (1990) J. Cell Biochem. 43: 199-211; Barrett-Lee, et al. (1990) Br. J. Cancer 61: 612-617; King, et al (1989) J. Steroid Biochem. 34: 133-138; Welch, et al (1990) Proc. Natl. Acad. Sci USA 87: 7678-7682; Walker et al. (1992) Eur. J. Cancer 238: 641-644), y la inducción del TGF-\beta1 por medio de un tratamiento con Tamoxifen (Butta, et al. (1992) Cancer Res. 52: 4261-4264) estaba emparejada con un fracaso del tratamiento con Tamoxifen en el caso del cáncer de mama (Thompson, et al. (1991) Br. J. Cancer 63: 609-614). Los anticuerpos anti-TGF-\beta1 inhiben el crecimiento de las células del cáncer de mama humano MDA-231 en el caso de ratones atímicos (Arteaga, et al. (1993) J. Clin. Invest. 92: 2569-2576), un tratamiento, que está correlacionado con un aumento de la actividad de las células asesinas naturales en el bazo. Las células CHO, que están transfectadas con TGF-\beta1 latente, también muestra una actividad NK rebajada y un crecimiento tumoral acrecentado en ratones desnudos (Wallick, et al. (1990) J. Exp. Med. 172: 177-1784). Por lo tanto, puede ser provocada una inmunosupresión endocrina por medio del TGF-\beta secretado por los tumores de mama. Las concentraciones elevadas en plasma del TGF-\beta1 muestran un mal pronóstico para aquellos pacientes que tienen un cáncer de mama avanzado (Anscher, et al. (1993) N. Engl. J. Med. 328: 1592-1598). Los pacientes con un elevado TGF-\beta en circulación antes de la quimioterapia a dosis elevadas y con trasplante autólogo de médula ósea tienen un elevado riesgo de una enfermedad ven oclusiva hepática (entre el 15 y el 50% de todos los pacientes con una tasa de mortalidad de hasta el 50% inclusive) y una neumonitis intersticial idiopática (entre el 40 y el 60% de todos los pacientes). El significado de este hallazgo consiste en que 1) pueden ser empleados niveles acrecentados en plasma de TGF-\beta1 para llevar a cabo la identificación de los pacientes en riego y en que 2) una reducción del TGF-\beta1 puede hacer descender la morbilidad y la mortalidad de estos tratamientos usuales para los pacientes con cáncer de mama.

Muchas células malignas secretan factor de crecimiento \beta (TGF-\beta) transformado, que es un potente inmunosupresor, lo cual sugiere que la producción del TGF-\beta pude representar un mecanismo significativo de escape tumoral ante la inmunovigilancia del huésped. El establecimiento de una subpoblación de leucocitos con vía de señalización interrumpida del TGF-\beta en el huésped, portador del tumor, ofrece una potente medida para llevar a cabo una inmunoterapia del cáncer. Un modelo animal transgénico con la vía de señalización interrumpida del TGF-\beta en las células T puede extinguir un tumor de linfoma normalmente letal, que produzca la sobreexpresión del TGF-\beta, EL4 (Gorelik y Flavell, (2001) Nature Medicine 7(10): 1118-1122). La regulación a la baja de la secreción del TGF-\beta en las células tumorales conduce al restablecimiento de la inmunogenicidad en el huésped mientras que, por el contrario, la insensibilidad de las células T frente al TGF-\beta conduce a una diferenciación acelerada y a una autoinmunidad, cuyos elementos pueden ser necesarios, para combatir a los tumores que expresan anti-antígeno en un huésped que se ha transformado en tolerante. Los efectos inmunosupresores del TGF-\beta también participan en el caso de una subpoblación de pacientes con HIV con una inmunorreacción menor que la pronosticada en base al número de sus células CD4/CD8-T (Garba, et al., J. Immunology (2002) 168: 2247-2254). Un anticuerpo neutralizador del TGF-\beta pudo invertir el efecto en el cultivo, lo cual indica que los inhibidores de la vía de señalización del TGF-\beta podrían ser adecuados para llevar a cabo la inversión de la inmunosupresión, que se presenta en el caso de esta porción de pacientes afectados de HIV.

Durante las etapas iniciales de la carcinogenesis, el TGF-\beta1 puede actuar como potentes supresores de los tumores y puede inducir el efecto de algunos agentes quimioprventivos. En un punto determinado durante el desarrollo y el curso de los neoplasmas malignos pare que las células tumorales quedan excluidas de la inhibición del crecimiento, que depende del TGF-\beta paralelamente a la aparición de TGF-\beta biológicamente activo en el microambiente. El doble papel de la supresión tumoral o bien del fomento tumoral del TGF-\beta se puso de manifiesto en la forma más clara en un sistema transgénico, que sobreexpresa al TGF-\beta en queratinocitos. Los transgénicos eran resistentes, ciertamente, frente a la formación de las lesiones benignas de la piel pero, sin embargo, se aumentó drásticamente la tasa de la conversión en metástasis en los transgénicos (Cui, et al. (1996) Cell 86(4): 531-42). La producción del TGF-\beta1 por parte de las células malignas en tumores primarios parece que aumenta en las etapas avanzadas de la progresión tumoral. Se ha puesto de manifiesto por medio de investigaciones en el caso de muchos tipos de cáncer del epitelio de la piel, que la producción acrecentada del TGF-\beta por parte del cáncer en el caso de los seres humanos se presenta como episodio relativamente tardío durante la progresión del tumor. Por otra parte, este TGF-\beta, que está asociado con los tumores, contribuye a que las células tumorales consigan una ventaja selectiva y fomenta la progresión del tumor. Los efectos del TGF-\beta sobre la interacción célula-célula y célula-estroma conduce a una mayor tendencia a la invasión y a las metástasis. El TGF-\beta, que está asociado con los tumores, puede posibilitar que las células tumorales queden excluidas de la inmunovigilancia, dado que constituye un potente inhibidor de la expansión clonal de los linfocitos activados. De la misma manera, se ha puesto de manifiesto, que el TGF-\beta inhibe la producción de la angiostatina. Las modalidades para la terapia del cáncer, tales como la terapia por irradiación y quimioterapia, inducen la producción del TGF-\beta activado en el tumor, con lo que se selecciona el crecimiento de las células malignas, que son resistentes frente a los efectos inhibidores del crecimiento del TGF-\beta. Por lo tanto, estos tratamientos anticancerosos aumentan el peligro y aceleran el desarrollo de tumores con crecimiento acrecentado y mayor capacidad invasora. En esta situación, los agentes que activen la transducción de la señal inducida por el TGF-\beta, una estrategia terapéutica muy eficiente. Se ha observado, que la resistencia de las células tumorales frente al TGF-\beta hace ineficaces a una gran parte de los efectos citotóxicos de la terapia por irradiación y de la quimioterapia, y que la activación en el estroma del TGF-\beta, que depende del tratamiento incluso puede ser dañino, dado que vuelve conductor al microambiente frente a la progresión del tumor y contribuye al deterioro tisular, lo cual conduce a una fibrosis. El desarrollo de los inhibidores de la transducción de señal del TGF-\beta tiene, probablemente, una ventaja para el tratamiento del cáncer avanzado de manera individual y en combinación con otras terapias.

Los compuestos son adecuados para llevar a cabo el tratamiento del cáncer y de otros estados de enfermedad, que queden influenciados por el TGF-\beta, por medio de la inhibición del TGF-\beta en un paciente, que lo requiera, administrándose al paciente el o los compuesto(s). De la misma manera, el TGF-\beta también es adecuado contra la las enfermedades de aterosclerosis (T.A. McCaffrey: TGF-\betas and TGF-\beta Receptors in Atherosclerosis: Cytokine and Growth Factor Reviews 2000, 11, 103-114) y en las enfermedades de Alzheimer (Masliah, E.; Ho, G.; Wyss-Coray, T.: Functional Role of TGF-\beta in Alzheimer's Disease Microvascular Injury: Lessons from Transgenic Mice: Neurochemistry International 2001, 39, 393-400).

Se ha encontrado que los compuestos, de conformidad con la invención, y sus sales tienen propiedades farmacológicas muy valiosas, con una buena compatibilidad.

De manera especial, las cinasas del TGF\beta-receptor I muestran propiedades inhibidoras.

De manera preferente, los compuestos, de conformidad con la invención, muestran una ventajosa actividad biológica, que puede ser fácilmente demostrada en ensayos basados en enzimas, por ejemplo en ensayos como los que están aquí descritos. En los ensayos, de este tipo, basados en enzimas, los compuestos de conformidad con la invención muestran y provocan, de manera preferente, un efecto inhibidor, que es documentado, de manera usual, por medio del valor IC_{50} en un intervalo adecuado, de manera preferente en el intervalo micromolar y, de una manera más preferente en el intervalo nanomolar.

Tal como ha sido aquí indicado, estas vías de señalización son relevantes para diversas enfermedades. Por lo tanto, los compuestos de conformidad con la invención son útiles para la profilaxis y/o para el tratamiento de enfermedades, que dependen de las citadas vías de señalización por medio de la interacción con una o varias de las vías de señalización, que han sido citadas más arriba. Por lo tanto, el objeto de la presente invención está constituido por los compuestos de conformidad con la invención, como promotores o como inhibidores, de manera preferente como inhibidores de las vías de señalización, que han sido aquí descritas. De manera preferente, el objeto de la invención está constituido por los compuestos de conformidad con la invención como promotores o como inhibidores, de manera preferente como inhibidores de la vía de señalización del TGF\beta.

Otro objeto de la presente invención consiste en el empleo de uno o de varios compuestos, de conformidad con la invención, para llevar a cabo el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, de manera preferente de las enfermedades que han sido aquí descritas, que son provocadas., inducidas y/o propagadas por una actividad acrecentada del TGF\beta.

Por lo tanto, el objeto de la presente invención consiste en los compuestos, de conformidad con la invención, como medicamentos y/o como principios activos para medicamentos en el tratamiento y/o la profilaxis de las citadas enfermedades y en el empleo de los compuestos, de conformidad con la invención, para llevar a cabo la fabricación de un producto farmacéutico destinado al tratamiento y/o a la profilaxis de las enfermedades citadas así como, también, un procedimiento para llevar a cabo el tratamiento de las enfermedades citadas, que comprende la administración de uno o de varios compuestos, de conformidad con la invención, a un paciente que requiera una administración de este tipo.

El huésped o paciente puede pertenecer a cualquier especie de mamíferos, por ejemplo a una especie de primates, especialmente los seres humanos; a los roedores, con inclusión de los ratones, las ratas y los hámsteres; los conejos; los caballos, las vacas, los perros, los gatos, etc. Son interesantes modelos con animales para las investigaciones experimentales, poniendo éstos a disposición un modelo para el tratamiento de una enfermedad de los seres humanos.

La susceptibilidad de una célula determinada frente al tratamiento con los compuestos de conformidad con la invención puede ser determinada por medio de ensayos in vitro. De manera típica se combinará un cultivo de la célula con un compuesto de conformidad con la invención a diversas concentraciones durante un tiempo suficiente para que se posibilite a los agentes activos a inducir la muerte celular o para inhibir la migración, usualmente entre aproximadamente una hora y una semana. Para el ensayo in vitro pueden ser empleadas células cultivadas procedentes de una muestra tomada por biopsia. Las células supervivientes, que quedan remanentes después del tratamiento, son computadas.

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La dosis varía en función del compuesto específico empleado, de la enfermedad específica, del estado del paciente, etc. De manera típica es suficiente una dosis terapéutica para reducir considerablemente la población celular no deseada en el tejido diana, mientras que se mantiene la supervivencia del paciente. El tratamiento se proseguirá en general hasta que se presente una reducción considerable, por ejemplo al menos una reducción del 50% aproximadamente de la carga celular y puede proseguirse hasta que ya no se detecten en el cuerpo, de manera esencial, células no deseadas.

Para la identificación de una vía de transmisión de las señales y para demostrar las interacciones entre las diversas vías de transmisión de las señales se desarrollaron modelos o sistemas de modelos adecuados por parte de diversos científicos, por ejemplo modelos de cultivo celular (por ejemplo Khwaja et al., EMBO, 1997, 16, 2783-93) y modelos con animales transgénicos (por ejemplo White et al., Oncogene, 2001, 20, 7064-7072). Para la determinación de ciertas etapas en la cascada de la transmisión de las señales pueden ser aprovechados los compuestos metabolizantes para modular la señal (por ejemplo Stephens et al., Biochemical J., 2000, 351, 95-105). De igual modo, los compuestos de conformidad con la invención pueden ser empleados como reactivos para el ensayo de las vías de transmisión de las señales en función de la cinasa en animales y/o en modelos de cultivos celulares o en las enfermedades clínicas citadas en esta solicitud.

La medida de la actividad de la cinasa es una técnica perfectamente conocida por el técnico en la materia. Los sistemas de ensayo genéricos para la determinación de la actividad de la cinasa con substratos, por ejemplo la histona (por ejemplo Alessi et al., FEBS Lett. 1996, 399, 3, páginas 333-338) o con la mielinaproteína básica han sido descritos en la literatura (por ejemplo Campos-González, R. y Glenney, Jr., J.R. 1992, J. Biol. Chem. 267, página 14535).

Para la identificación de los inhibidores de la cinasa están disponibles diversos sistemas de ensayo. En el caso del ensayo de escintilación por proximidad (Sorg et al., J. of. Biomolecular Screening, 2002, 7, 11-19) y en el caso del ensayo FlashPlate se mide la fosforilación radioactiva de una proteína o péptido como substrato con \gammaATP. Cuando esté presente un compuesto inhibidor no se podrá detectar una señal radioactiva o se detectará una señal radioactiva debilitada. Además son útiles como procedimientos de ensayo las tecnologías de transferencia homogénea de energía por resonancia por fluorescencia con resolución en el tiempo (Homogeneous Time-resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer- (HTR-FRET)) y las tecnologías de polarización por fluorescencia (FP) (Sills et al., J. of Biomolecular Screening, 2002, 191-214).

Otros procedimientos de ensayo no radioactivos ELISA emplean fosfo-anticuerpos específicos (fosfo-AK). El fosfo-AK enlaza únicamente el substrato fosforilado. Este enlace puede ser detectado con un segundo anticuerpo anti-cordero peroxidasaconjugado por medio de la quimioluminiscencia (Ross et al., 2002, Biochem. J., inmediatamente antes de la publicación, Manuscrito BJ20020786).

Estado de la técnica

Las triazolo-1,5-benzodiazepinas son conocidas por la publicación DE 2 318 673.

Los autores L. Kosychova et al. han descrito en la publicación Chemistry of Heterocyclic Compounds, Vol. 40, 811-815 (2004) otras 5,6-dihidro-4H-[1,2,4]triazolo-a][1,5]-benzodiazepinas para la lucha contra los tumores.

Los autores V. Ambrogi et al. han descrito en la publicación J. Heterocyclic Chem. 31, 1349-1352 (1994) derivados de 4,5-dihidro-s-triazolo[3,4-d][1,5]benzotiazepina, que contienen azufre.

Los autores V. Ambrogi et al. han descrito en la publicación II Farmaco 48, 665-676 (1993) 1,4-benzotiazinas y 1,5-benzotiazepinas con efecto sobre el sistema nervioso central.

En la publicación WO 03/042211 A1 han sido divulgados otros derivados de triazol a título de inhibidores del TGF-beta.

De la misma manera,, se conocen otros derivados de triazol como inhibidores del TGF-beta por la publicación WO 2004/026307 A1.

En la publicación WO 02/094833 han sido descritos derivados de pirrol bicíclicos a título de inhibidores del TGF-beta.

Resumen de la invención

La invención se refiere a compuestos de la fórmula I

1

en la que

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R^{1}

significa H, A, OH, OA, NO_{2}, NH_{2}, NHA, NA_{2}, Hal, CN, A-COO, COOH, COOA o CONR^{4}R^{5},

R^{2}, R^{3} significan respectivamente, de manera independiente entre sí, H, A, alquenilo con 2 hasta 6 átomos de carbono, alquinilo con 2 hasta 6 átomos de carbono o Hal,

R^{4}, R^{5} significan respectivamente, de manera independiente entre sí, H o A,

A

significa alquilo no ramificado o ramificado con 1, con 2, con 3, con 4, con 5, con 6, con 7, con 8, con 9 o con 10 átomos de carbono, pudiendo estar reemplazados desde 1 hasta 7 átomos de H por F,

Hal

significa F, Cl, Br o I,

así como sus derivados, sus solvatos, sus sales, sus tautómeros y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

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El objeto de la invención está constituido, así mismo, por las formas ópticamente activas (estereoisómeros), los enantiómeros, los racematos, los diastereómeros así como por los hidratos y los solvatos de estos compuestos. Se entenderá por solvatos de los compuestos, aquellas adiciones de moléculas de disolvente inerte sobre los compuestos, que se forman como consecuencia de su fuerza de atracción mutua. Los solvatos son, por ejemplo, los monohidratos o los dihidratos o los alcoholatos.

El concepto de "cantidad activa" significa aquella cantidad de un medicamento o de un principio activo farmacéutico, que produzca una respuesta biológica o medicinal en un tejido, en un sistema, en un animal o en un ser humano, que, por ejemplo, sea buscada o pretendida por parte de un investigador o de un médico.

Por otra parte, el concepto de "cantidad terapéuticamente activa" significa aquella cantidad que, en comparación con un sujeto correspondiente, que no haya recibido esta cantidad, tenga como consecuencia lo siguiente:

un tratamiento curativo mejorado, una curación, una prevención o una eliminación de una enfermedad, de un cuadro patológico, de un estado patológico, de un padecimiento, de un trastorno o de efectos secundarios o, incluso, la disminución del avance de una enfermedad, de un padecimiento o de un trastorno.

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El concepto de "cantidad terapéuticamente activa" abarca, así mismo, aquellas cantidades, que sean eficaces para elevar la función fisiológica normal.

El objeto de la invención está constituido, así mismo, por mezclas de los compuestos de la fórmula I, por ejemplo mezclas de dos diastereómeros, a modo de ejemplo en la proporción de 1:1, de 1:2, de 1:3, de 1:4, de 1:5, de 1:10, de 1:100 o de 1:1.000. De manera especialmente preferente se trata, en este caso, de mezclas de compuestos estereoisómeros.

El objeto de la invención está constituido por los compuestos de la fórmula I y sus sales, así como por un procedimiento para la obtención de los compuestos de la fórmula I así como de sus derivados, sus sales, sus solvatos, sus tautómeros y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, caracterizado porque

a)

se hace reaccionar un compuesto de la fórmula II

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2

\vskip1.000000\baselineskip

en la que R^{1} y R^{2} tienen el significado que ha sido dado en la reivindicación 1,

\newpage

con un compuesto de la fórmula III

3

en la que R^{3} tiene el significado que ha sido dado en la reivindicación 1,

o

b)

se transforma un resto R^{1} en otro resto R^{1}, por disociación un éter,

y/o

se transforma una base o un ácido de la fórmula I en una de sus sales.

\vskip1.000000\baselineskip

En lo que se antecede y a continuación, los restos R^{1}, R^{2} y R^{3} tienen los significados que han sido dados en el caso de la fórmula I, en tanto en cuanto no se diga expresamente otra cosa.

A significa alquilo, no está ramificado (lineal) o está ramificado, y tiene 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 átomos de carbono. De manera preferente, A significa metilo, además etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec.-butilo o terc.-butilo, así mismo, también, pentilo, 1-, 2- o 3-metilbutilo, 1,1-, 1,2- o 2,2-dimetilpropilo, 1-etilpropilo, hexilo, 1-, 2-, 3- o 4-metilpentilo, 1,1-, 1,2-, 1,3-, 2,2-, 2,3- o 3,3-dimetilbutilo, 1- o 2-etilbutilo, 1-etil-1-metilpropilo, 1-etil-2-metilpropilo, 1,1,2- o 1,2,2-trimetilpropilo, de manera más preferente, por ejemplo, triflúormetilo.

De manera muy especialmente preferente, A significa alquilo con 1, con 2, con 3, con 4, con 5 o con 6 átomos de carbono, de manera preferente significa metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec.-butilo, terc.-butilo, pentilo, hexilo, triflúormetilo, pentaflúoretilo o 1,1,1-triflúoretilo.

De manera preferente, R^{1} significa H, OH, OA, Hal, CN o A-COO.

De manera preferente, R^{2} significa H o A.

De manera preferente, R^{3} significa A.

En el conjunto de la invención se cumple, que todos los restos, que se presenten varias veces, pueden ser iguales o diferentes es decir, que son independientes entre sí.

Los compuestos de la fórmula I pueden presentar uno o varios centros quirales y, por lo tanto, estar presentes en diversas formas estereoisómeras. La fórmula I abarca todas estas formas.

Por lo tanto, constituyen el objeto de la invención, de manera especial, aquellos compuestos de la fórmula I, en los cuales, al menos, uno de los restos citados tenga uno de los significados preferentes que han sido indicados precedentemente. Algunos grupos preferentes de compuestos pueden ser expresados por medio de las siguientes fórmulas parciales Ia hasta Id, que corresponden a la fórmula I y en las que los restos, que no han sido designados con mayor detalle, tienen los significados que han sido indicados en el caso de la fórmula I, en la que, sin embargo,

4

5

así como sus derivados, sus sales, sus solvatos, sus tautómeros y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

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Los compuestos de la fórmula I y, así mismo, los productos de partida para su obtención, son preparados, por lo demás, según métodos en sí conocidos, como los que han sido descritos en la literatura (por ejemplo en los manuales tal como Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart) y, concretamente, bajo condiciones de la reacción que son conocidas y adecuadas para las reacciones indicadas. En este caso pueden ser utilizadas, también, variantes conocidas, que no han sido citadas aquí con mayor detalle.

Los productos de partida de las fórmulas II y III son conocidos por regla general. Cuando éstos sean nuevos, podrán ser preparados según métodos en sí conocidos.

Los compuestos de la fórmula I pueden ser obtenidos, de manera preferente, haciéndose reaccionar un compuesto de la fórmula II con un compuesto de la fórmula III. La reacción se lleva a cabo, por regla general, en un disolvente inerte. El tiempo necesario para la reacción se encuentra comprendido, de conformidad con las condiciones empleadas, entre algunos minutos y 14 días, la temperatura de la reacción está comprendida entre aproximadamente 0º y 160º, normalmente está comprendida entre 20º y 150º, de manera especialmente preferente está comprendida entre 80 y 130ºC.

Como disolventes inertes son adecuados, por ejemplo, los hidrocarburos tales como el hexano, el éter de petróleo, el benceno, el tolueno o el xileno; los hidrocarburos clorados tales como el tricloroetileno, el 1,2-dicloroetano, el tetracloruro de carbono, el cloroformo o el diclorometano; los alcoholes tales como el metanol, el etanol, el isopropanol, el n-propanol, el n-butanol o el terc.-butanol; los éteres tales como el dietiléter, el diisopropiléter, el tetrahidrofurano (THF) o el dioxano; los glicoléteres tales como el etilenglicolmonometiléter o el etilenglicolmonoetiléter (metilglicol o etilglicol), el etilenglicoldimetiléter (diglimo); las cetonas tales como la acetona o la butanona; las amidas tales como la acetamida, la dimetilacetamida, la 1-metil-pirrolidinona (NMP) o la dimetilformamida (DMF); los nitrilos tal como el acetonitrilo; los sulfóxidos tal como el dimetilsulfóxido (DMSO); el sulfuro de carbono; los ácidos carboxílicos tales como el ácido fórmico o el ácido acético; los nitrocompuestos tales como el nitrometano o el nitrobenceno; los ésteres tales como el acetato de etilo o mezclas de los disolventes citados. El n-butanol, la NMP y/o la DMF son especialmente preferentes.

Para llevar a cabo la disociación de éteres es adecuado el tratamiento con tribromuro de boro bajo condiciones estándar.

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Sales farmacéuticas y otras formas

Los compuestos citados de conformidad con la invención pueden ser empleados en su forma no salina definitiva. Por otro lado la presente invención abarca también el empleo de estos compuestos en forma de sus sales farmacéuticamente aceptables, que pueden derivarse de diversos ácidos orgánicos e inorgánicos y de diversas bases orgánicas e inorgánicas según las formas de proceder conocidas en el ramo. Las formas salinas de los compuestos de conformidad con la invención, farmacéuticamente aceptables, se preparan en su mayor parte de manera convencional. En tanto en cuanto el compuesto de conformidad con la invención contenga un grupo de ácido carboxílico, podrá ser formada una de sus sales adecuadas por medio de la reacción del compuesto con una base adecuada para dar la correspondiente sal de adición con bases. Tales bases son, por ejemplo, los hidróxidos de los metales alcalinos, entre los cuales se encuentran el hidróxido de potasio, el hidróxido de sodio y el hidróxido de litio; los hidróxidos de los metales alcalinotérreos tales como el hidróxido de bario y el hidróxido de calcio; los alcoholatos de los metales alcalinos, por ejemplo el metanolato de potasio y el propanolato de sodio; así como diversas bases orgánicas tales como la piperidina, la dietanolamina y la N-metilglutamina. Las sales de aluminio de los compuestos de conformidad con la invención pertenecen igualmente a este grupo. En el caso de determinados compuestos de conformidad con la invención pueden ser formadas las sales de adición con ácidos por medio del tratamiento de estos compuestos con ácidos orgánicos e inorgánicos farmacéuticamente aceptables, por ejemplo los ácidos hidrácidos halogenados tales como el ácido clorhídrico, el ácido bromhídrico o el ácido yodhídrico, con otros ácidos minerales y con sus sales correspondientes tales como el sulfato, el nitrato o el fosfato y similares así como los sulfonatos de alquilo y de monoarilo tales como el etanosulfonato, el toluenosulfonato y el bencenosulfonato, así como otros ácidos orgánicos y sus sales correspondientes tales como el acetato, el triflúoracetato, el tartrato, el maleato, el succinato, el citrato, el benzoato, el salicilato, el ascorbato y similares. Por lo tanto pertenecen a las sales de adición con ácidos farmacéuticamente aceptables de los compuestos de conformidad con la invención las siguientes: el acetato, el adipato, el alginato, el arginato, el aspartato, el benzoato, el bencenosulfonato (besilato), el bisulfato, el bisulfito, el bromuro, el butirato, el alcanforato, el alcanforsulfonato, el caprilato, el cloruro, el clorobenzoato, el citrato, el ciclopentanopropionato, el digluconato, el dihidrógenofosfato, el dinitrobenzoato, el dodecilsulfato, el etanosulfonato, el fumarato, el galacterato (procedente del ácido múcico), el galacturonato, el glucoheptanoato, el gluconato, el glutamato, el glicerofosfato, el hemisuccinato, el hemisulfato, el heptanoato, el hexanoato, el hipurato, el hidrocloruro, el hidrobromuro, el hidroyoduro, el 2-hidroxietanosulfonato, el yoduro, el isetionato, el isobutirato, el lactato, el lactobionato, el malato, el maleato, el malonato, el mandelato, el metafosfato, el metanosulfonato, el metilbenzoato, el monohidrógenofosfato, el 2-naftalinasulfonato, el nicotinato, el nitrato, el oxalato, el oleato, el pamoato, el pectinato, el persulfato, el fenilacetato, el 3-fenilpropionato, el fosfato, el fosfonato, el ftalato, lo cual no representa ningún tipo de limitación.

Además, pertenecen a las sales con bases de los compuestos de conformidad con la invención las sales de aluminio, de amonio, de calcio, de cobre, férricas(III), ferrosas(II), de litio, de magnesio, mangánicas(III), manganosas(II), de potasio, de sodio y de cinc, lo cual no debe representar ningún tipo de limitación. Entre las sales precedentemente citadas son preferentes el amonio; las sales de metales alcalinos de sodio y de potasio, así como las sales de metales alcalinotérreos de calcio y de magnesio. A las sales de los compuestos de conformidad con la invención, que se derivan de las bases no tóxicas orgánicas farmacéuticamente aceptables pertenecen las sales de las aminas primarias, secundarias y terciarias, las aminas substituidas, entre las cuales se encuentran también las aminas substituidas de origen natural, las aminas cíclicas así como las resinas intercambiadoras de iones básicas, por ejemplo la arginina, la betaína, la cofeína, la cloroprocaína, la colina, la N,N'-dibenciletilendiamina (benzatina), la diciclohexilamina, la dietanolamina, la dietilamina, el 2-dietilaminoetanol, el 2-dimetilaminoetanol, la etanolamina, la etilendiamina, la N-etilmorfolina, la N-etilpiperidina, la glucamina, la glucosamina, la histidina, la hidrabamina, la iso-propilamina, la lidocaína, la lisina, la meglumina, la N-metil-D-glucamina, la morfolina, la piperazina, la piperidina, las resinas poliamínicas, la procaína, la purina, la teobromina, la trietanolamina, la trietilamina, la trimetilamina, la tripropilamina así como la tris-(hidroximetil)-metilamina (trometamina), lo cual no debe representar ningún tipo de limitación.

Los compuestos de la presente invención, que contengan grupos nitrogenados básicos, pueden ser cuaternizados con agentes tales como los halogenuros de alquilo (con 1 a 4 átomos de carbono), por ejemplo con el cloruro, el bromuro y el yoduro de metilo, de etilo, de isopropilo y de terc-.butilo; los sulfatos de dialquilo (con 1 a 4 átomos de carbono), por ejemplo el sulfato de dimetilo, de dietilo y de diamilo; los halogenuros de alquilo (con 10 a 18 átomos de carbono), por ejemplo el cloruro, el bromuro y el yoduro de decilo, de dodecilo, de laurilo, de miristilo y de estearilo; así como los halogenuros de aril-alquilo (con 1 a 4 átomos de carbono), por ejemplo el cloruro de bencilo y el bromuro de fenetilo. Con estas sales pueden ser preparados compuestos, de conformidad con la invención, tanto solubles en agua así como también solubles en aceite.

A las sales farmacéuticas precedentemente citadas, que son preferentes, pertenecen el acetato, el triflúoracetato, el besilato, el citrato, el fumarato, el gluconato, el hemisuccinato, el hipurato, el hidrocloruro, el hidrobromuro, el isetionato, el mandelato, la meglumina, el nitrato, el oleato, el fosfonato, el pivalato, el fosfato de sodio, el estearato, el sulfato, el sulfosalicilato, el tartrato, el tiomalato, el tosilato y la trometamina, lo cual no debe representar ningún tipo de limitación.

Las sales de adición con ácidos de los compuestos básicos de conformidad con la invención se preparan poniéndose en contacto la forma básica libre con una cantidad suficiente del ácido deseado, con lo cual se prepara la sal de manera usual. La base libre puede ser regenerada por medio de la puesta en contacto de la forma salina con una base y aislamiento de la base libre de manera usual. Las formas básicas libres se diferencian en cierto sentido de sus correspondientes formas salinas en lo que se refiere a determinadas propiedades físicas tales como la solubilidad en los disolventes polares; en el ámbito de la invención las sales corresponden, sin embargo, por lo demás, a sus correspondientes formas básicas libres. Tal como se ha citado, se forman las sales de adición con bases de los compuestos de conformidad con la invención, farmacéuticamente aceptables, con metales o con aminas tales como los metales alcalinos y los metales alcalinotérreos o con las aminas orgánicas. Los metales preferentes son el sodio, el potasio, el magnesio y el calcio. Las aminas orgánicas preferentes son la N,N'-dibenciletilendiamina, la cloroprocaína, la colina, la dietanolamina, la etilendiamina, la N-metil-D-glucamina y la procaína.

Las sales de adición con bases de los compuestos ácidos, de conformidad con la invención, se preparan poniéndose en contacto la forma ácida libre con una cantidad suficiente de la base deseada, con lo cual se forma la sal de manera usual. El ácido libre puede ser regenerado por medio de la puesta en contacto de la forma salina con un ácido y por medio del aislamiento del ácido libre de manera usual. Las formas ácidas libres se diferencian en cierto sentido de sus formas salinas correspondientes en lo que se refiere a determinadas propiedades físicas, tal como la solubilidad en los disolventes polares; en el ámbito de la invención las sales corresponden, sin embargo, por lo demás, a sus correspondientes formas ácidas libres.

Cuando un compuesto de conformidad con la invención contenga más de un grupo, que pueda formar tales sales farmacéuticamente aceptables, la invención abarcará también sales múltiples. A las formas salinas múltiples típicas pertenecen, por ejemplo, el bitartrato, el diacetato, el difumarato, la dimeglumina, el difosfato, el disodio y el trihidrocloruro, lo cual no debe representar ningún tipo de limitación.

En lo que se refiere a lo que se ha dicho anteriormente se observa que debe ser entendido por el concepto de "sal farmacéuticamente aceptable" en el presente contexto, un principio activo que contenga un compuesto de conformidad con la invención en forma de una de sus sales, especialmente cuando esta forma salina proporcione propiedades farmacocinéticas mejoradas al principio activo en comparación con la forma libre del principio activo o en comparación con cualquier otra forma salina del principio activo, que hubiera sido empleada con anterioridad. La forma salina farmacéuticamente aceptable del principio activo podrá proporcionar a este principio activo por primera vez una propiedad farmacocinética deseada, de la cual no disponía inicialmente, e incluso puede influenciar positivamente en el cuerpo sobre la farmacodinámica de este principio activo en lo que se refiere a su actividad terapéutica.

De la misma manera, constituyen un objeto de la invención los medicamentos que contengan, al menos, un compuesto de conformidad con la invención y/o sus derivados, sus solvatos y sus estereoisómeros, farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, así como, en caso dado, excipientes y/o productos auxiliares.

Las formulaciones farmacéuticas pueden ser administradas en forma de unidades de dosificación, que contengan una cantidad predeterminada de principio activo por unidad de dosificación. Una unidad de este tipo puede contener, por ejemplo, entre 0,5 mg y 1 g, de manera preferente entre 1 mg y 700 mg, de manera especialmente preferente entre 5 mg y 100 mg de un compuesto de conformidad con la invención, de acuerdo con el estado patológico tratado, de la vía de administración y de la edad, del peso y del estado del paciente, o las formulaciones farmacéuticas pueden ser administradas en forma de unidades de dosificación, que contengan cantidades predeterminadas de principio activo por unidad de dosificación. Las formulaciones de las unidades de dosificación preferentes son aquellas, que contengan una dosis diaria o una dosis parcial, como se ha indicado precedentemente, o una fracción correspondiente de la misma de un principio activo. De igual modo, tales formulaciones farmacéuticas pueden ser preparadas con un procedimiento conocido en general en el sector farmacéutico.

Las formulaciones farmacéuticas pueden ser adaptadas para llevar a cabo la administración a través de cualquier vía adecuada, por ejemplo por vía oral (con inclusión de la vía bucal o bien de la vía sublingual), la vía rectal, la vía nasal, la vía tópica (con inclusión de la vía bucal, de la vía sublingual o de la vía transdérmica), la vía vaginal o la vía parenteral (con inclusión de la vía subcutánea, de la vía intramuscular, de la vía intravenosa o de la vía intradérmica). Tales formulaciones pueden ser preparadas de conformidad con todos los procedimientos conocidos en el sector farmacéutico, combinándose, por ejemplo, el principio activo con el o bien con los excipientes o con el o bien con los productos auxiliares.

Las formulaciones farmacéuticas, adaptadas para la administración oral, pueden ser administradas como unidades independientes, tales como, por ejemplo, cápsulas o tabletas; en forma de polvo o de granulado; en forma de soluciones o de suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; en espumas comestibles o en alimentos en forma de espuma; o como emulsiones líquidas de aceite-en-agua o como emulsiones líquidas de agua-en-aceite.

Por lo tanto, los componentes del principio activo pueden ser combinados con un excipiente inerte oral, no tóxico y farmacéuticamente aceptable, tal como por, ejemplo, el etanol, la glicerina, el agua y similares, por ejemplo en el caso de una administración oral en forma de una tableta o de una cápsula. Los polvos se preparan por medio de un desmenuzado del compuesto hasta un tamaño de finura adecuada y mezcla con un excipiente farmacéutico desmenuzado de manera similar, tal como por ejemplo con un hidrato de carbono comestible tal como por ejemplo el almidón o la manita. De igual modo, pueden estar presentes un producto mejorador del sabor, un agente para la conservación, un agente dispersante y un colorante.

Las cápsulas don preparadas por medio de la formación de una mezcla en polvo tal como se ha descrito precedentemente y su envasado en revestimientos de gelatina moldeados. Como paso previo al proceso de envasado, pueden ser añadidos a la mezcla en polvo agentes para mejorar el deslizamiento y lubrificantes tales como por ejemplo el ácido silícico altamente dispersado, el talco, el estearato de magnesio, el estearato de calcio o el polietilenglicol en forma sólida. De igual modo, puede ser añadido un agente de desintegración o un solubilizante tal como, por ejemplo, el agar-agar, el carbonato de calcio o el carbonato de sodio para mejorar la disponibilidad del medicamento tras la ingestión de la cápsula. De igual modo, también pueden ser incorporados a la mezcla, cuando esto sea deseable o necesario, agentes aglutinantes, lubrificantes y de desintegración adecuados así como colorantes. A los agentes aglutinantes adecuados pertenecen el almidón, la gelatina, los azúcares naturales, tales como por ejemplo la glucosa o la beta-lactosa, los edulcorantes a partir del maíz, las gomas naturales y sintéticas, tales como por ejemplo la acacia, el tragacanto o el alginato de sodio, la carboximetilcelulosa, el polietilenglicol, las ceras y similares. A los agentes lubrificantes empleados en estas formas de dosificación pertenecen el oleato de sodio, el estearato de sodio, el estearato de magnesio, el benzoato de sodio, el acetato de sodio, el cloruro de sodio y similares. A los agentes de desintegración pertenecen, sin que esto represente ningún tipo de limitación, el almidón, la metilcelulosa, el agar, la bentonita, la goma de xantano y similares. Las tabletas se formulan preparándose, por ejemplo, una mezcla en polvo, que se granula o que se prensa en seco, añadiéndose un agente lubrificante y un agente de desintegración y el conjunto se prensa para dar tabletas. Se prepara una mezcla en polvo mezclándose el compuesto, desmenuzado de manera adecuada, con un diluyente o con una base, tal como se ha descrito precedentemente y, en caso dado, con un agente aglutinante, tal como por ejemplo la carboximetilcelulosa, con un alginato, gelatina o polivinilpirrolidona, con un ralentizador de la disolución, tal como por ejemplo la parafina, con un acelerador de la resorción, tal como por ejemplo una sal cuaternaria y/o un agente de absorción, tal como por ejemplo la bentonita, el caolín o el fosfato dicálcico. La mezcla en polvo puede ser granulada por medio de una humectación de la misma con un agente aglutinante, tal como por ejemplo jarabe, pasta de almidón, colada de acacia o soluciones constituidas por materiales celulósicos o por materiales polímeros y prensado a través de un tamiz. Como alternativa a la granulación puede hacerse pasar la mezcla en polvo a través de una máquina entabletadora, formándose grumos de forma irregular, que se rompen en granulados. Los granulados pueden ser engrasados por medio de la adición de ácido esteárico, de una sal de estearato, de talco o de aceite mineral para impedir una adherencia sobre los moldes de colada para las tabletas. La mezcla engrasada se prensa entonces para dar tabletas. Los compuestos de conformidad con la invención pueden ser combinados, también, con un excipiente inerte de libre fluencia y a continuación pueden ser prensados directamente para proporcionar tabletas, sin la realización de la fase de granulación o de la fase de prensado en seco. Puede estar presente una capa protectora transparente o no transparente, constituida por un sellado formado a partir de goma laca, una capa formada por azúcar o material polímero y una capa brillante formada por cera. Pueden ser añadidos colorantes a estos recubrimientos con objeto de poder distinguir entre diversas unidades de dosificación.

Los líquidos orales tales como por ejemplo las soluciones, los jarabes y los elíxires pueden ser preparados en forma de unidades de dosificación de tal manera, que una cantidad dada contenga una cantidad predeterminada del compuesto. Los jarabes pueden ser preparados por medio de la disolución del compuesto en una solución acuosa con un sabor adecuado, mientras que los elíxires son preparados por medio del empleo de un vehículo alcohólico no tóxico. Las suspensiones pueden ser formuladas por medio de la dispersión del compuesto en un vehículo no tóxico. De igual modo, pueden ser añadidos agentes solubilizantes y agentes emulsionantes, tales como por ejemplo los alcoholes isoestearílicos etoxilados y los polioxietilensorbitoléteres, agentes para la conservación, aditivos para mejorar el sabor, tales como por ejemplo la esencia de menta piperita o edulcorantes naturales o sacarina u otros edulcorantes sintéticos, y similares.

Las formulaciones de las unidades de dosificación para la administración oral pueden ser incluidas, en caso dado, en microcápsulas. De igual modo, la formulación puede ser preparada de tal manera, que se prolongue o se ralentice la liberación, por ejemplo por medio del recubrimiento o de la incrustación del material en forma de partículas en polímeros, ceras y similares.

Los compuestos de conformidad con la invención así como las sales, los solvatos y los derivados fisiológicamente funcionales de los mismos pueden ser administrados, también, en forma de sistemas de aporte en liposomas, tales como por ejemplo pequeñas vesículas unilaminares, grandes vesículas unilaminares y vesículas multilaminares. Los liposomas pueden ser formados a partir de diversos fosfolípidos, tales como, por ejemplo, la colesterina, la estearilamina o las fosfatidilcolinas.

Los compuestos de conformidad con la invención, así como las sales, los solvatos y los derivados fisiológicamente funcionales de los mismos, pueden ser administrados también por medio del empleo de anticuerpos monoclonales a título de excipientes individuales, copulados con la molécula del compuesto. De la misma manera, los compuestos pueden ser copulados con polímeros solubles a título de excipientes medicinales orientados a su objetivo. Tales polímeros pueden comprender la polivinilpirrolidona, los copolímeros de pirano, el polihidroxipropilmetacrilamidofenol, el polihidroxietilaspartoamidofenol o la polietilenóxidopolilisina, substituida con restos de palmitoilo. Además, los compuestos pueden estar copulados sobre una clase de polímeros biodegradables, que sean adecuados para conseguir una liberación controlada de un medicamento, por ejemplo el ácido poliláctico, la poliépsilon-caprolactona, el ácido polihidroxibutírico, los poliortoésteres, los poliacetales, los polidihidroxipiranos, los policianoacrilatos y los copolímeros bloque reticulados o anfipáticos de hidrogeles.

Las formulaciones farmacéuticas, adaptadas para la administración transdérmica, pueden ser administradas en forma de emplasto autónomo para un contacto prolongado, estrecho, con la epidermis del receptor. De este modo, el principio activo puede ser aportado al emplaste, por ejemplo, por medio de iontofóresis, como se ha descrito en general en la publicación Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986).

Los compuestos farmacéuticos, adaptados para la administración tópica, pueden ser formulados en forma de ungüentos, de cremas, de suspensiones, de lociones, de polvos, de soluciones, de pastas, de geles, de nebulizados, de aerosoles o de aceites.

Las formulaciones se aplican, de manera preferente, en forma de ungüentos o de cremas tópicas destinados al tratamiento del ojo o de otros tejidos externos, por ejemplo de la boca o de la piel. Cuando se realiza la formulación para formar un ungüento, el principio activo puede ser empleado o bien con una base para cremas parafínica o bien con una base para cremas miscible con el agua. De manera alternativa, el principio activo puede ser formulado para dar una crema con una base para cremas de aceite-en-agua o con una base para cremas de agua-en-aceite.

A las formulaciones farmacéuticas, adaptadas para la aplicación tópica en el ojo, pertenecen las gotas oculares, estando disuelto o suspendido el principio activo en un excipiente adecuado, especialmente en un disolvente acuoso.

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Las formulaciones farmacéuticas, adaptadas para la aplicación tópica en la boca, comprenden tabletas para ser disueltas en la boca, pastillas y enjuagues bucales.

Las formulaciones farmacéuticas, adaptadas para la administración rectal, pueden ser administradas en forma de supositorios o de enemas.

Las formulaciones farmacéuticas, adaptadas para la administración nasal, en las que la substancia excipiente es un producto sólido, contienen un polvo de tamaño grosero con un tamaño de las partículas, por ejemplo, en el intervalo comprendido entre 20 y 500 micras, que se administra de la misma forma y manera en la que se toma el tabaco para estornudar, es decir por medio de una inhalación rápida a través de la vía nasal a partir de un recipiente con el polvo que se mantiene próximo a la nariz. Las formulaciones adecuadas para la administración en forma de aerosol nasal o de gotas
nasales con un líquido como substancia excipiente comprenden soluciones del principio activo en agua o en aceite.

Las formulaciones farmacéuticas, adaptadas para la administración por inhalación, comprenden polvos o nebulizados de partículas muy finas, que pueden ser generados por medio de diversos modos de expendedores de dosis, que se encuentran bajo presión, con aerosoles, nebulizadores o insufladores.

Las formulaciones farmacéuticas, adaptadas para la administración vaginal, pueden ser administradas en forma de pesarios, de tampones, de cremas, de geles, de pastas, de espumas o de formulaciones en forma de aerosol.

A las formulaciones farmacéuticas, adaptadas para la administración parenteral, pertenecen las soluciones para inyección acuosas y no acuosas, estériles, que contienen antioxidantes, tampones, bacteriostáticos y solutos, por medio de los cuales se vuelve isotónica la formulación con la sangre del receptor que debe ser tratado; así como las suspensiones acuosas y no acuosas, estériles, que pueden contener agentes de suspensión y espesantes. Las formulaciones pueden ser administradas en recipientes que contengan una dosis individual o que contengan dosis múltiples, por ejemplo ampollas y viales sellados y pueden ser almacenadas en estado secado por congelación (liofilizado) de tal manera que únicamente se requiera la adición de líquidos excipientes estériles, por ejemplo agua para finalidades de inyección, inmediatamente antes de su utilización. Las soluciones para inyección y las suspensiones, realizadas de acuerdo con una recepta, pueden ser preparadas a partir de polvos estériles, de granulados y de tabletas.

Es evidente que las formulaciones pueden contener, además de los constituyentes citados precedentemente de manera especial, otros agentes usuales en el ramo con relación al tipo correspondiente de la formulación; de este modo las formulaciones adecuadas para la administración oral pueden contener, por ejemplo, productos para mejorar el sabor.

Una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto de conformidad con la invención depende de una serie de factores, con inclusión, por ejemplo, de la edad y del peso del animal, del estado patológico exacto, que requiera el tratamiento, así como del grado de gravedad, de las características de la formulación así como de la vía de administración y, finalmente, se determina por el médico o bien por el veterinario que realizan el tratamiento. Sin embargo, una cantidad activa de un compuesto, de conformidad con la invención, para llevar a cabo el tratamiento del crecimiento neoplástico, por ejemplo del carcinoma del intestino grueso o del carcinoma de mama, se encuentra en general en el intervalo comprendido entre 0,1 y 100 mg/kg de peso corporal del receptor (mamíferos) por día y, de manera especialmente típica, en el intervalo comprendido entre 1 y 10 mg/kg de peso corporal por día. De este modo, para un mamífero adulto con un peso de 70 kg la cantidad real por día estaría comprendida, usualmente, entre 70 y 700 mg, pudiéndose administrar esta cantidad como dosis unitaria por día o, usualmente, en una serie de dosis parciales (tal como por ejemplo dos, tres, cuatro, cinco o seis) por día de tal manera, que la dosis total diaria sea la misma. Una cantidad activa de una sal o de un solvato o de un derivado fisiológicamente funcional del mismo puede ser determinada como parte de la cantidad activa del compuesto, de conformidad con la invención, per se. Se puede suponer que son adecuadas dosificaciones similares destinadas al tratamiento de los otros estados patológicos precedentemente citados.

De igual modo, el objeto de la invención está constituido por medicamentos que contienen, al menos, un compuesto de conformidad con la invención y/o sus derivados, sus solvatos y sus estereoisómeros, farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones y, al menos, otro principio activo para medicamentos.

El objeto de la invención está constituido también por un estuche (kit), constituido por envases independientes de

(a)

una cantidad activa de un compuesto de conformidad con la invención y/o de sus derivados, sus solvatos y sus estereoisómeros, farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, y

(b)

una cantidad activa de otro principio activo para medicamentos.

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El estuche contiene recipientes adecuados tales como cajitas o envases de cartón, viales individuales, bolsas o ampollas. El estuche puede contener por ejemplo ampollas independientes, en las cuales estén presentes respectivamente una cantidad activa de un compuesto de la conformidad con la invención y/o de sus derivados, de sus solvatos y de sus estereoisómeros, farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, y una cantidad activa de otro principio activo para medicamentos disuelto o en forma liofilizada.

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Empleo

Los compuestos, de conformidad con la invención, así como sus derivados, sus sales, sus solvatos, sus tautómeros y sus estereoisómeros, farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, son adecuados como principios activos farmacéuticos para los animales mamíferos, de manera especial para los seres humanos, para llevar a cabo la fabricación de un medicamento para llevar a cabo el tratamiento y/o para combatir el cáncer. El crecimientos de los tumores, el crecimiento de las metástasis, la fibrosis, la restenosis, la infección por HIV, el Alzheimer, la aterosclerosis y/o para fomentar la curación de las heridas.

Es especialmente preferente el empleo para el tratamiento de una enfermedad, en la que la enfermedad sea un tumor sólido.

El tumor sólido se elige, de manera preferente, entre el grupo de los tumores del epitelio plano, de la vejiga, del estómago, de los riñones, de la cabeza y del cuello, el esófago, del cuello de la matriz, de la glándula tiroides, del intestino, del hígado, del cerebro, de la próstata, del tracto urogenital, del sistema linfático, del estómago, de la laringe y/o del pulmón.

Por otra parte, el tumor sólido es elegido, de manera preferente, entre el grupo formado por el adenocarcinoma de pulmón, el carcinoma de pulmón microcelular, el cáncer del páncreas, el gliobastoma, el carcinoma de colon y el carcinoma de mama.

De igual modo, es preferente el empleo para llevar a cabo el tratamiento de un tumor del sistema sanguíneo y del sistema inmune, de manera preferente para llevar a cabo el tratamiento de un tumor elegido entre el grupo formado por la leucemia mielitica aguda, la leucemia mielítica crónica, la leucemia linfática aguda y/o la leucemia linfática crónica.

Los compuestos presentes son adecuados, de igual modo, para la combinación con agentes anticancerosos conocidos. A estos agentes anticancerosos conocidos pertenecen los siguientes: los moduladores del receptor de los estrógenos, los moduladores del receptor de los andrógenos, los moduladores del receptor de retinoide, los citotóxicos, los agentes antiproliferantes, los inhibidores de la prenil-proteínatransferasa, los inhibidores de la HMG-CoA-reductasa, los inhibidores de la HIV-proteasa, los inhibidores de la transcriptasa inversa así como otros inhibidores de la angiogénesis. Los compuestos presentes son adecuados de manera especial para el empleo conjunto con radioterapia. Los efectos sinérgicos de la inhibición del VEGF en combinación con radioterapia han sido descritos en el ámbito profesional (véase la publicación WO 00/61186).

El concepto de "moduladores del receptor de los estrógenos" se refiere a aquellos compuestos que perturben o inhiban el enlace de los estrógenos sobre el receptor y, concretamente, independientemente del modo en que esto se produzca. A los moduladores del receptor de los estrógenos pertenecen, por ejemplo, Tamoxifen, Raloxifen, Idoxifen, LY353381, LY 117081, Toremifen, Fulvestrant, el propanoato de 4-[7-(2,2-dimetil-1-oxopropoxi-4-metil-2-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]-2H-1-benzopiran-3-il]fenil-2,2-dimetilo, la 4,4'-dihidroxibenzofenon-2,4-dinitrofenilhidrazona y el SH646, lo cual no debe representar ningún tipo de limitación.

El concepto de "moduladores del receptor de los andrógenos" se refiere a aquellos compuestos que perturben o que inhiban el enlace de los andrógenos sobre el receptor y, concretamente, independientemente del modo en que esto se produzca. A los moduladores del receptor de los andrógenos pertenecen, por ejemplo, el Finasterid y otros inhibidores de la 5\alpha-reductasa, el Nilutamid, el Flutamid, el Bicalutamid, el Liarozol y el acetato de Abirateron.

El concepto de "moduladores del receptor de retinoide" se refiere a aquellos compuestos que perturben o inhiban el enlace de los retinoides sobre el receptor y, concretamente, independientemente del modo en que esto suceda. A tales moduladores del receptor de retinoide pertenecen, por ejemplo, el Bexaroten, el Tretinoin, el ácido 13-cis-retínico, el ácido 9-cis-retínico, la \alpha-diflúormetilornitina, el ILX23-7553, la trans-N-(4'-hidroxifenil)retinamida y la N-4-carboxifenilretinamida.

El concepto de "citotóxicos" se refiere a aquellos compuestos que conducen, en primer lugar, por medio de la acción directa sobre la función celular a la muerte celular o que inhiben o que perturban la miosis celular, entre los cuales se encuentran los agentes de alquilación, los factores de la necrosis tumoral, los agentes intercalantes, los inhibidores de la microtubulina y los inhibidores de la topoisomerasa.

A los citotóxicos pertenecen, por ejemplo, Tirapazimin, Sertenef, Cachectin, Ifosfamid, Tasonermin, Lonidamin, Carboplatin, Altretamin, Prednimustin, Dibromdulcit, Ranimustin, Fotemustin, Nedaplatin, Oxaliplatin, Temozolomid, Heptaplatin, Estramustin, tosilato de Improsulfan, Trofosfamid, Nimustin, cloruro de Dibrospidium, Pumitepa, Lobaplatin, Satraplatin, Profiromycin, Cisplatin, Irofulven, Dexifosfamid, cis-aminodicloro(2-metilpiridin)platino, bencilguanina, Glufosfamid, GPX100, tetracloruro de (trans,trans,trans)-bis-mu-(hexan-1,6-diamina)-mu-[diamina-platino(II)]bis-[diamina(cloro)platino(II)], Diarizidinylspermin, trióxido de arsénico, 1-(11-dodecilamino-10-hidroxiundecil)-3,7-dimetilxantina, Zorubicin, Idarubicin, Daunorubicin, Bisantren, Mitoxantron, Pirarubicin, Pinafid, Valrubicin, Amrubicin, Antineoplaston, 3'-desamino-3'-morfolino-13-desoxo-10-hidroxicarminomicina, Annamycin,
Galarubicin, Elinafid, MEN10755 y 4-desmetoxi-3-desamino-3-aziridinil-4-metilsulfonildaunorubicina (véase la publicación WO 00/50032), lo cual no representan ningún tipo de limitación.

A los inhibidores de la microtubulina pertenecen, por ejemplo, Paclitaxel, sulfato de Vindesin, 3',4'-dideshidro-4'-desoxi-8'-norvincaleucoblastina, Docetaxol, Rhizoxin, Dolastatin, Mivobulin-isetionato, Auristatin, Cemadotin, RPR109881, BMS184476, Vinflunin, Cryptophycin, 2,3,4,5,6-pentaflúor-N-(3-flúor-4-metoxifenil)bencenosulfonamida, Anhydrovinblastin, N,N-dimetil-L-valil-L-valil-N-metil-L-valil-L-prolil-L-prolin-t-butilamida, TDX258 y BMS188797.

Los inhibidores de la topoisomerasa son, por ejemplo, Topotecan, Hycaptamin, Irinotecan, Rubitecan, 6-etoxipropionil-3',4'-O-exo-bencilidencartreusina, 9-metoxi-N,N-dimetil-5-nitropirazol[3,4,5-kl]acridin-2-(6H)propanamina, 1-amino-9-etil-5-flúor-2,3-dihidro-9-hidroxi-4-metil-1H,12H-benzo[de]pirano[3',4':b,7]indolizino[1,2b]quinolin-
10,13(9H,15H)-diona, Lurtotecan, 7-[2-(N-isopropilamino)etil]-(20S)camptotecina, BNP1350, BNP11100, BN80915, BN80942, fosfato de Etoposid, Teniposid, Sobuzoxan, 2'-dimetilamino-2'-desoxi-etoposid, GL331, N-[2-(dimetilami-
no)etil]-9-hidroxi-5,6-dimetil-6H-pirido[4,3-b]carbazol-1-carboxamida, Asulacrin, (5a,5aB,8aa,9b)-9-[2-[N-[2-(di-
metilamino)etil]-N-metilamino]etil]-5-[4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil]5,5a,6,8,8a,9-hexohidrofuro(3',4':6,7)nafto(2,3-
d)-1,3-dioxol-6-ona, 2,3-(metilendioxi)-5-metil-7-hidroxi-8-metoxibenzo[c]fenantridinio, 6,9-bis[(2-aminoetil)amino]benzo[g]isoquinolin-5,10-diona, 5-(3-aminopropilamino)-7,10-dihidroxi-2-(2-hidroxietilaminometil)-6H-pirazol
[4,5,1-de]-acridin-6-ona, N-[1-[2-(dietilamino)etilamino]-7-metoxi-9-oxo-9H-tioxanten-4-ilmetil]formamida, N-(2-(dimetil-amino)-etil)acridin-4-carboxamida, 6-[[2-(dimetilamino)-etil]amino]-3-hidroxi-7H-indeno[2,1-c]quinolin-7-ona y Dimesna.

A los "agentes antiproliferantes" pertenecen los oligonucleótidos ARN no codificantes y ADN no codificantes tales como G3139, ODN698, RVASKRAS, GEM231 e INX3001, así como los antimetabolitos tales como Enocitabin, Carmofur, Tegafur, Pentostatin, Doxifluridin, Trimetrexat, Fludarabin, Capecitabin, Galocitabin, Cytarabin-ocfosfat, Fosteabin-hidrato de sodio, Raltitrexed, Paltitrexid, Emitefur, Tiazofurin, Decitabin, Nolatrexed, Pemetrexed, Nelzarabin, 2'-desoxi-2'-metilidencitidina, 2'-flúormetilen-2'-desoxicitidina, N-[5-(2,3-dihidrobenzofuril)sulfonil]-N'-(3,4-diclorofenil)urea, N6-[4-desoxi-4-[N2-[2(E),4(E)-tetradecadienoil]glicilamino]-L-glicero-B-L-manoheptopiranosil]adenina, Aplidin, Ecteinascidin, Troxacitabine, ácido 4-[2-amino-4-oxo-4,6,7,8-tetrahidro-3H-pirimidino[5,4-b][1,4]tiazin-6-il-(S)-etil]-2,5-tienoil-L-glutámico, Aminopterin, 5-Flurouracil, Alanosin, acetato de 11-acetil-8-(carbamoiloxime-
til)-4-formil-6-metoxi-14-oxa-1,11-diazatetraciclo(7.4.1.0.0)-tetradeca-2,4,6-trien-9-ilo, Swainsonin, Lometrexol,
Dexrazoxan, Methioninase, 2'-cian-2'-desoxi-N4-palmitoil-1-B-D-arabinofuranosilcitosina y 3-aminopiridin-2-carboxaldehídotiosemicarbazona. Los "agentes antiproliferantes" contienen también otros anticuerpos monoclonales contra los factores del crecimiento como los que se han indicado ya bajo el concepto de "inhibidores de la angiogénesis", tal como el Trastuzumab, así como los genes supresores de los tumores, como el p53, que pueden ser segregados por medio de la transferencia génica recombinante inducida por virus (véase por ejemplo la publicación de la patente norteamericana US Nr. 6,069,134).

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Ensayo in vitro-(enzimático-) para llevar a cabo la determinación de la actividad de los inhibidores de la inhibición de los efectos inducidos por el TGF-beta

A título de ejemplo se ensaya la capacidad de los inhibidores para aumentar la inhibición del crecimiento inducido por el TGF-beta.

Se siembran células de la línea celular del epitelio pulmonar Mv1Lu según densidades celulares definidas en una placa de microtitulación con 96 pocillos y se cultivan dura te la noche bajo condiciones estándar. Al día siguiente se substituye el medio por un medio que contiene un 0,5% de FCS y 1 ng/ml de TGF-beta, y se aportan las substancias de ensayo a concentraciones definidas, por regla general en forma de series de diluciones con etapas quíntuples. La concentración del disolvente DMSO es contante con un valor de un 0,5%. Al cabo de otros dos días se lleva a cabo el teñido con violeta cristal de las células. Después de la extracción del violeta cristal a partir de las células fijadas, se mide la absorción a 550 nm por medio de una espectrofotometría. Esta absorción puede ser empleada como magnitud cuantitativa de las células adherentes presentes y, por lo tanto, de la proliferación celular durante el cultivo.

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(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA 1 Inhibición de TGF-beta

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Ensayo celular para llevar a cabo la verificación de los inhibidores de la TGF-beta-receptor-I-cinasa

El ensayo de cinasa se lleva a cabo como Flaschplate de 384 pocillos. Se lleva a cabo la incubación de 31,2 nM GST-ALK5, 439 nM GST-SMAD2 y 3 mM ATP (con 0,3 \muCi ^{33}P-ATP/pocillo) en un volumen total de 35 \mul (20 mM HEPES, 10 mM MgCl, 5 mM MnCl, 1 mM DTT, 0,1% de BSA, pH 7,4) sin o con substancia de ensayo (5-10 concentraciones) durante 45 minutos a 30ºC. La reacción se detiene con 25 \mul de solución 200 mM de EDTA, al cabo de 30 minutos a la temperatura ambiente se separa por medio de una filtración por succión y los pocillos se lavan 3 veces con 100 \mul, cada vez, de solución al 0,9% de NaCl. La radioactividad se calcula en el dispositivo Topcount. Los valores IC_{50} son calculados con RS1.

En lo que antecede y a continuación, todas las temperaturas están dadas en ºC. En los ejemplos siguientes el concepto de "elaboración usual" significa: se añade, en caso necesario, agua, se regula, en caso necesario, el valor del pH entre 2 y 10, según la constitución del producto final, se extrae con acetato de etilo o con diclorometano, se separa, se seca la fase orgánica sobre sulfato de sodio, se concentra por evaporación y se purifica por medio de una cromatografía sobre gel de sílice y/o por medio de una cristalización. Valores Rf sobre gel de sílice; eluyente: acetato de etilo/metanol 9:1.

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APCI-MS (ionización química a presión atmosférica- espectrometría de masas -atmospheric pressure chemical ionization - mass spectrometry-) (M+H)^{+}.

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Tiempo de retención R_{t} [minutos]: La determinación se lleva a cabo con HPLC

Columna: Chromolith SpeedROD, 50 x 4.6 mm^{2} (Nr. de catálogo 1.51450.0001) de Merck

Gradiente: 5.0 min, t = 0 min, A:B = 95:5, t = 4,4 min: A:B = 25:75,

t = 4,5 min bis t = 5,0 min: A:B = 0:100

Flujo: 3.00 ml/min

Eluyente A: Agua + 0, 1% de TFA (ácido triflúoracético),

Eluyente B: Acetonitrilo + 0,08% de TFA

Longitud de onda: 220 nm

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Esquema de síntesis general

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En lugar de la nitración (HNO_{3}/H_{2}SO_{4}) es posible, de la misma manera, también las bromación con subsiguiente intercambio por CN o por OMe (véase el ejemplo).

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Ejemplo 1 Obtención del 8-metoxi-4-metil-1-(6-metil-piridin-2-il)-5,6-dihidro-4H-2,3,10b-triaza-benz[e]azuleno ("A1")

1.1 Se disuelve 1,00 g de sodio en 10 ml de metanol en un matraz de tres cuellos de 100 ml, inertizado con nitrógeno. La mezcla se calienta hasta 35ºC. Se disuelve 1,00 g de 7-bromo-3-metil-2,3,4,5-tetrahidro-1H-1-benzazepin-2-ona [obtención de conformidad con K. Hino et al., Chem. Pharm. Bull. 36, 2386-2400, 1988] en 12 ml de DMF. Una vez que se ha disuelto el sodio por completo, se aporta la benzazepinona. A continuación se aportan 1,47 g más de yoduro de cobre (I). La mezcla de la reacción se calienta a 120ºC (temperatura del baño de aceite) (RF) y, de este modo, se agita durante la noche.

Para llevar a cabo la elaboración se enfría la reacción hasta la temperatura ambiente (RT). La mezcla se separa por medio de una filtración por succión a través de una frita cargada con gel de sílice, Se lleva a cabo un buen lavado final con DMF. El filtrado se concentra por evaporación en el rotavapor de alto vacío. El residuo se recoge en diclorometano y se extrae con lejía de hidróxido de sodio, p = 2%. La fase acuosa se extrae ulteriormente con DCM. Las fases orgánicas reunidas se lavan con solución concentrada de sal común, se secan sobre sulfato de sodio, se filtran y se concentran por evaporación hasta residuo.

El residuo se raspa con bencina de petróleo, se separa por medio de una filtración por succión y se someten un buen lavado final.

Rendimiento: 0,6610 g cristales violeta de 7-metoxi-3-metil-2,3,4,5-tetrahidro-1H-1-benzazepin-2-ona.

1.2 Se suspenden 655 mg de 7-metoxi-3-metil-2,3,4,5-tetrahidro-1H-1-benzazepin-2-ona en 15 ml de tolueno en un matraz redondo de 100 ml. Se añaden 1,012 g de 2,4-disulfuro de 2,4-bis-(4-fenoxi-fenil)-1,3,2,4-ditiadifosfetan. La suspensión amarilla se calienta a reflujo bajo agitación y se hierva durante 1,5 h.

La carga se vierte a continuación sobre agua helada y se prosigue la elaboración de manera usual.

Rendimiento: 1,5645 g de 7-metoxi-3-metil-1,3,4,5-tetrahidro-1-benzazepin-2-tiona.

1.3 Se disuelven 1,5645 g de 7-metoxi-3-metil-1,3,4,5-tetrahidro-1-benzazepin-2-tiona en 20 ml de 1-butanol en un matraz redondo de 100 ml. Se añaden 1,68 g de hidrazina del ácido 6-metil-piridin-2-carboxílico. La mezcla de la reacción se calienta a reflujo y se hierve durante la noche a 120ºC (temperatura del baño de aceite).

Para llevar a cabo la elaboración se enfría la carga, bajo agitación, hasta 40ºC y se diluye con 50 ml de acetato de etilo. La solución de color pardo rojizo se lava tres veces con 20 ml cada vez de solución semiconcentrada de sal común. La fase orgánica se seca durante la noche sobre sulfato de sodio, se filtra y se concentra por evaporación hasta residuo.

El residuo se recoge en acetato de etilo se extrae dos veces con ácido cítrico al 5%. Por último se desplaza de nuevo el valor del pH de la fase orgánica por medio de una extracción por agitación con solución semiconcentrada de bicarbonato, hasta la zona básica. La fase orgánica se seca sobre sulfato de sodio, se filtra y se concentra por evaporación hasta residuo. El residuo se somete a una cromatografía sobre gel de sílice.

Condiciones de la columna:

Longitud: 30 cm Diámetro: 3,5 cm Carga: Gel de sílice 60 (0,04-0,063 mm)

Eluyente: DCM/metanol, 95:5

Se obtienen 585 mg de "A1", EI-MS [M^{+}] 320,

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^{1}H-RMN (500 MHz, DMSO-d_{6}) \delta [ppm]: 7,8 (1H, t), 7,7 (1H,d), 7,3 (1H,d), 7,0 (1H,d), 6,95 (H,d), 6,8 (1H,dd), 3,85 (3H,s), 2,7 (3H,m), 2,4 (1H,m), 2,3 (3H,s), 1,9 (1H,m), 1,3 (3H,br).

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Ejemplo 2 Obtención del 8-hidroxi-4-metil-1-(6-metil-piridin-2-il)-5,6-dihidro-4H-2,3,10b-triaza-benz[e]azuleno ("A2")

Se disuelven 400 mg de 8-metoxi-4-metil-1-(6-metil-piridin-2-il)-5,6-dihidro-4H-2,3,10b-triaza-benz[e]azuleno en 15 ml de diclorometano seco en un matraz redondo de 100 ml. Se añaden 0,56 ml de tribromuro de boro. La solución se agita durante 4 horas a la RT.

A continuación se vierte la carga sobre una mezcla constituida por agua helada y solución concentrada de bicarbonato y se lleva a cabo la elaboración de manera usual.

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El residuo se purifica por medio de una cromatografía flash. Condiciones de la columna:

Longitud: 30 cm, Diámetro: 3,5 cm, Carga: Gel de sílice 60 (0,04-0,063 mm)

Eluyente: DCM/metanol, 95:5 (2 L)

Se obtienen 305 mg de aceite amarillento. El aceite se purifica por medio de una HPLC preparativa. Se obtienen 119 mg de "A2" en forma de sal de TFA.

Contenido HPLC: 99,6%; HPLC-MS [M+H^{+}] 307;

^{1}H-RMN (500 MHz, DMSO-d_{6}) \delta [ppm]: 9,7 (1H,s), 7,8 (1H, t), 7,7 (1H,d), 7,3 (1H,d), 6,9 (1H,d), 6,8 (1H,d), 6,6 (1H,dd), 2,7 (3H,m), 2,4 (1H,m), 2,3 (3H,s), 1,8 (1H,m), 1,3 (3H,br).

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Ejemplo 3 Obtención del 8-flúor-5-metil-1-(6-metil-piridin-2-il)-5,6-dihidro-4H-2,3,10b-triaza-benzo[e]azuleno ("A3")

3.1 Se disuelven 1,2884 g de 4-metil-1,3,4,5-tetrahidro-1-benzazepin-2-ona en ácido sulfúrico (20 ml) y la solución se enfría a -10ºC. Ahora se añade lentamente HNO_{3} (1,6 ml) a través de un embudo de goteo. Se prosigue la agitación durante 15 min.

La solución de la reacción se vierte sobre agua helada y el precipitado formado se separa por medio de una filtración y se lava bien con agua.

Se obtienen 1,3852 g de 4-metil-7-nitro-1,3,4,5-tetrahidro-1-benzazepin-2-ona. La substancia se disuelve en metanol y se hidrogena (Pd-C al 5%).

Se obtienen 770 mg de 4-metil-7-amino-1,3,4,5-tetrahidro-1-benzazepin-2-ona;

^{1}H-RMN (500 MHz, DMSO-d_{6}) \delta [ppm]: 9,0 (1H,s), 6,6 (1H,d), 6,41 (1H,s), 6,39 (1H,d), 4,4 (2H,br), 2,7 (2H,m), 2,4 (1H,m), 2,1 (2H,m), 1,7 (1H,m), 1,0 (3H,d).

3.2 Se disuelven 453 mg de tetrafluoroborato de nitrosilo en 40 ml de acetonitrilo seco en un matraz de tres cuellos de 250 ml con embudo de goteo, termómetro y tubo secador. La solución se enfría bajo agitación hasta 0ºC. Ahora se añade, gota a gota, la suspensión constituida por 0,76 g de 4-metil-7-amino-1,3,4,5-tetrahidro-1-benzazepin-2-ona en 20 ml de acetonitrilo seco. La temperatura se mantiene con el baño de refrigeración entre -2 y 0ºC. Se prosigue la agitación durante 45 minutos a esta temperatura.

Para llevar a cabo la elaboración de la sal de diazonio se añaden a la solución 100 ml de dietiléter seco. Se agita durante 30 minutos y se deja calentar hasta la RT. La solución de la carga se concentra en el evaporador rotativo.

El residuo oleaginoso, obtenido, se añade, en porciones, en 60 ml de tolueno a ebullición. Después de la adición se prosigue la ebullición durante otros 15 minutos a reflujo.

La mezcla de la reacción se enfría hasta la RT y se filtra a través de gel de sílice (Celite). La torta de la nutscha se lava ulteriormente con varias porciones de cloroformo. El filtrado se concentra por evaporación hasta residuo. El producto en bruto se purifica por medio de una cromatografía flash. Condiciones de la columna:

Longitud: 30 cm, Diámetro: 3,5 cm, Carga: Gel de sílice 60 (0,04-0,063 mm)

Eluyente: PE/EE, 7:3 (1 I)

Se obtienen 144 mg de 7-flúor-4-metil-1,3,4,5-tetrahidro-1-benzazepin-2-ona; ^{1}H-RMN (500 MHz, DMSO-d_{6}) \delta [ppm]: 7,1 (1H,dd), 7,05 (1H,m), 6,97 (1H,dd), 2,8 (1H,m), 2,45 (1H,m), 2,3 (2H,m), 2,2 (1H,m), 1,8 (1H,m), 1,0 (3H,d).

3.3 A partir de 144 mg de 7-flúor-4-metil-1,3,4,5-tetrahidro-1-benzazepin-2-ona se obtiene, de manera análoga a la del ejemplo 1, después de la reacción con el reactivo de Lawesson modificado y subsiguiente reacción para dar el triazol, 32 mg de 8-flúor-5-metil-1-(6-metil-piridin-2-il)-5,6-dihidro-4H-2,3,10b-triaza-benzo[e]azuleno ("A3"); EI-MS [M^{+}] 308;

^{1}H-RMN (500 MHz, DMSO-d_{6}) \delta [ppm]: 7,8 (2H,m), 7,3 (2H,m), 7,2 (2H,m), 3,1 (1H,br), 2,8 (3H,br), 2,2 (3H,s), 1,9 (1H,br), 1,0 (3H,d).

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Ejemplo 4 Obtención del 8-cloro-6-metil-1-(6-metil-piridin-2-il)-5,6-dihidro-4H-2,3,10b-triaza-benzo[e]azuleno ("A4")

Se nitran 2,9 g de 5-metil-1,3,4,5-tetrahidro-1-benzazepin-2-ona de manera análoga a la del ejemplo 3.1. Después de la elaboración por medio de una cromatografía a través de gel de sílice, se obtienen 1,9 g de 5-metil-7-nitro-1,3,4,5-tetrahidro-1-benzazepin-2-ona; ^{1}H-RMN (500 MHz, DMSO-d_{6}) \delta [ppm]: 10,1 (1H, s), 8,13 (1H,dd), 8,07 (1H, d), 7,2 (1H,d), 3,1 (1H,m), 2,2 (3H,s), 1,8 (1H,m), 1,4 (3H,d).

La substancia se hidrogena para dar la 5-metil-7-amino-1,3,4,5-tetrahidro-1-benzazepin-2-ona.

Se disuelven 1,2 g del aminocompuesto en 30 ml de ácido clorhídrico y se enfrían a 0ºC. Entre 0 y 5ºC se añade, gota a gota, una solución fría de nitrito de sodio (439,1 mg) en agua. Se forma una solución parda. Una vez concluida la adición se prosigue la agitación durante otros 30 minutos aproximadamente a 0ºC. Se añade, gota a gota, a la solución de diazonio, que ha sido preparada, a 0ºC, una solución fría formada por cloruro de Cu(I) (873,5 mg) en 20 ml de ácido clorhídrico. Una vez concluida la adición se deja calentar lentamente hasta la RT. Para la elaboración se recoge la solución de la reacción en 100 ml de agua y se lava 3x con acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se lavan 2x con HCl 1 N y con agua. Se seca sobre sulfato de sodio y se elimina el disolvente en el evaporador rotativo.

Se obtienen 780 mg de 7-cloro-5-metil-1,3,4,5-tetrahidro-1-benzazepin-2-ona.

La reacción ulterior de 250 mg del producto con el reactivo de Lawesson modificado y subsiguiente reacción con hidrazina del ácido 6-metil-piridin-2-carboxílico proporciona 80 mg de 8-cloro-6-metil-1-(6-metil-piridin-2-il)-5,6-dihidro-4H-2,3,10b-triaza-benzo[e]azuleno, triflúoracetato ("A4"); HPLC-MS [M+H^{+}] 325.

De manera análoga a la de los ejemplos precedentes se obtienen los compuestos siguientes

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12

Los ejemplos siguientes se refieren a medicamentos:

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Ejemplo A Viales para inyección

Se ajusta una solución de 100 g de un principio activo de la fórmula I y de 5 g de hidrógenofosfato disódico en 3 litros de agua bidestilada, a pH 6,5, empleándose ácido clorhídrico 2 N, se filtra en medio estéril, se transfiere en viales para inyección, se liofilizan bajo condiciones estériles y se cierran en medio estéril. Cada vial para inyección contiene 5 mg de principio activo.

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Ejemplo B Supositorios

Se funde una mezcla de 20 g de un principio activo de la fórmula I con 100 g de lecitina de soja y 1.400 g de manteca de cacao, se vierte en moldes y se deja enfriar. Cada supositorio contiene 20 mg de principio activo.

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Ejemplo C Solución

Se prepara una solución a partir de 1 g de un principio activo de la fórmula I, de 9,38 g de NaH_{2}PO_{4} \cdot 2 H_{2}O, de 28,48 g de Na_{2}HPO_{4} \cdot 12 H_{2}O y de 0,1 g de cloruro de benzalconio en 940 ml de agua bidestilada. Se ajusta el pH a 6,8, se completa hasta 1 litro y se esteriliza por medio de irradiación. Esta solución puede ser empleada en forma de colirio.

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Ejemplo D Ungüentos

Se mezclan 500 mg de un principio activo de la fórmula I con 99,5 g de vaselina bajo condiciones asépticas.

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Ejemplo E Tabletas

Se prensa, de manera habitual, una mezcla de 1 kg de principio activo de la fórmula I, de 4 kg de lactosa, de 1,2 kg de almidón de patata, de 0,2 kg de talco y de 0,1 kg de estearato de magnesio para dar tabletas de tal manera, que cada tableta contenga 10 mg de principio activo.

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Ejemplo F Grageas

Se prensan tabletas de manera análoga a la del ejemplo E, que, a continuación, se revisten, de manera habitual, con un revestimiento de sacarosa, almidón de patata, talco, tragacanto y colorante.

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Ejemplo G Cápsulas

Se introducen, de manera habitual, 2 kg de principio activo de la fórmula I en cápsulas de gelatina dura de tal manera, que cada cápsula contenga 20 mg de principio activo.

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Ejemplo H Ampollas

Se filtra, de manera estéril, una solución de 1 kg de principio activo de la fórmula I en 60 litros de agua bidestilada, se transfiere a ampollas, se liofilizan bajo condiciones estériles y se cierran de manera estéril. Cada ampolla contiene 10 mg de principio activo.

Claims (14)

1. Compuestos de la fórmula I

13

en la que

R^{1}

significa H, A, OH, OA, NO_{2}, NH_{2}, NHA, NA_{2}, Hal, CN, A-COO, COOH, COOA o CONR^{4}R^{5},

R^{2}, R^{3} significan respectivamente, de manera independiente entre sí, H, A, alquenilo con 2 hasta 6 átomos de carbono, alquinilo con 2 hasta 6 átomos de carbono o Hal,

R^{4}, R^{5} significan respectivamente, de manera independiente entre sí, H o A,

A

significa alquilo no ramificado o ramificado con 1, con 2, con 3, con 4, con 5, con 6, con 7, con 8, con 9 o con 10 átomos de carbono, pudiendo estar reemplazados desde 1 hasta 7 átomos de H por F,

Hal

significa F, Cl, Br o I,

así como sus derivados, sus solvatos, sus sales, sus tautómeros y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

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2. Compuestos según la reivindicación 1, en los que

R^{1}

significa H, OH, OA, Hal, CN o A-COO,

así como sus derivados, sus solvatos, sus sales y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

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3. Compuestos según la reivindicación 1 o 2, en los que

R^{2}

significa H o A,

así como sus derivados, sus solvatos, sus sales y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

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4. Compuestos según la reivindicación 1, 2 o 3, en la que

R^{3}

significa A,

así como sus derivados, sus solvatos, sus sales y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

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5. Compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 4, en los que

A

significa alquilo no ramificado o ramificado con 1, con 2, con 3, con 4, con 5 o con 6 átomos de carbono, pudiendo estar reemplazados desde 1 hasta 5 átomos de H por F,

así como sus derivados, sus solvatos, sus sales y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

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6. Compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 5, en los que

R^{1}

significa H, OH, OA, Hal, CN o A-COO,

R^{2}

significa H o A,

R^{3}

significa A,

A

significa alquilo no ramificado o ramificado con 1, con 2, con 3, con 4, con 5 o con 6 átomos de carbono, pudiendo estar reemplazados desde 1 hasta 5 átomos de H por F,

Hal

significa F, Cl, Br o I,

así como sus derivados, sus solvatos, sus sales y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

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7. Compuestos según la reivindicación 1 elegidos entre el grupo constituido por

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14

15

16

así como sus derivados, sus solvatos, sus sales y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

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8. Procedimiento para la obtención de compuestos de la fórmula I según las reivindicaciones 1 a 7 así como de sus derivados, sus sales, sus solvatos, sus tautómeros y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, caracterizado porque

a)

se hace reaccionar un compuesto de la fórmula II

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17

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en la que R^{1} y R^{2} tienen el significado dado en la reivindicación 1,

con un compuesto de la fórmula III

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18

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en la que R^{3} tiene el significado dado en la reivindicación 1,

o

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b)

se transforma un resto R^{1} en otro resto R^{1}, por disociación un éter,

y/o

se transforma una base o un ácido de la fórmula I en una de sus sales.

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9. Medicamento que contiene, al menos, un compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 1 a 7 y/o sus derivados, sus solvatos, sus sales y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, así como, en caso dado, excipientes y/o productos auxiliares.

10. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 1 a 7 así como de sus derivados, sus sales, sus solvatos, sus tautómeros y sus estereoisómeros, farmacéuticamente empleables, para la fabricación de un medicamento para llevar a cabo el tratamiento y/o a para combatir el cáncer, el crecimiento de los tumores, el crecimiento de las metástasis, la fibrosis, la restenosis, la infección por HIV, el Alzheimer, la aterosclerosis, y/o para fomentar la curación de las heridas.

11. Empleo según la reivindicación 10, en el que el tumor se elige entre el grupo de los tumores del epitelio plano, de la vejiga, del estómago, de los riñones, de la cabeza, del cuello, del esófago, del cuello de la matriz, de la glándula tiroides, del intestino, del hígado, del cerebro, de la próstata, del tracto urogenital, del sistema linfático, del estómago, de la laringe, del pulmón, el adenocarcinoma de pulmón, el carcinoma de pulmón microcelular, el cáncer del páncreas, el gliobastoma, el carcinoma de colon, el carcinoma de mama, del sistema sanguíneo y del sistema inmune, la leucemia mielitica aguda, la leucemia mielítica crónica, la leucemia linfática aguda, la leucemia linfática crónica.

12. Empleo de los compuestos según la reivindicación 10 y/o de sus sales y sus solvatos, fisiológicamente aceptables, para la fabricación de un medicamento para llevar a cabo el tratamiento de tumores sólidos, llevándose a cabo la administración de una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto de la fórmula I en combinación con un compuesto del grupo 1) modulador del receptor de los estrógenos, 2) modulador del receptor de los andrógenos, 3) modulador del receptor de retinoide, 4) citotóxico, 5) agente antiproliferante, 6) inhibidor de la prenil-proteínatransferasa, 7) inhibidor de la HMG-CoA-reductasa, 8) inhibidor de la HIV-proteasa, 9) inhibidor de la transcriptasa inversa así como 10) otro inhibidor de la angiogénesis.

13. Empleo de los compuestos según la reivindicación 10 y/o de sus sales y sus solvatos, fisiológicamente aceptables, para la fabricación de un medicamento para llevar a cabo el tratamiento de tumores sólidos, llevándose a cabo la administración de una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto de la fórmula I en combinación con radioterapia y de un compuesto del grupo 1) modulador del receptor de los estrógenos, 2) modulador del receptor de los andrógenos, 3) modulador del receptor de retinoide, 4) citotóxico, 5) agente antiproliferante, 6) inhibidor de la prenil-proteínatransferasa, 7) inhibidor de la HMG-CoA-reductasa, 8) inhibidor de la HIV-proteasa, 9) inhibidor de la transcriptasa inversa así como 10) otro inhibidor de la angiogénesis.

14. Medicamento que contiene, al menos, un compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 1 a 7 y/o sus derivados, sus solvatos y sus estereoisómeros farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones y, al menos, otro principio activo para medicamentos.