ES2352731T3 - Procedimiento de radiofluoración de vectores biologicamente activos. - Google Patents

Procedimiento de radiofluoración de vectores biologicamente activos. Download PDF

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ES2352731T3 ES04720084T ES04720084T ES2352731T3 ES 2352731 T3 ES2352731 T3 ES 2352731T3 ES 04720084 T ES04720084 T ES 04720084T ES 04720084 T ES04720084 T ES 04720084T ES 2352731 T3 ES2352731 T3 ES 2352731T3
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Abstract

Un procedimiento para radiofluoración que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (I) con un compuesto de fórmula (II): **(Ver fórmula)**18F-(Engarce)-R2 (II) o, un compuesto de fórmula (III) con un compuesto de fórmula (IV) **(Ver fórmula)**18F-(Engarce)-R4 (IV) en las que R1 es un resto aldehído, un resto cetona, un aldehído protegido tal como un acetal, una cetona protegida, tal como un cetal, o una funcionalidad, tal como diol o un resto serina N-terminal, que puede oxidarse de forma rápida y eficaz para dar un aldehído o cetona usando un agente de oxidación; R2 es un grupo seleccionado entre amina primaria, amina secundaria, hidroxilamina, hidrazina, hidrazida, aminoxi, fenilhidrazina, semicarbazida y tiosemicarbazida, y preferentemente es un grupo hidrazina, hidrazida o aminoxi; R3 es un grupo seleccionado entre amina primaria, amina secundaria, hidroxilamina, hidrazina, hidrazida, aminoxi, fenilhidrazina, semicarbazida o tiosemicarbazida, y preferentemente es un grupo hidrazina, hidrazida o aminoxi; R4 es un resto aldehído, un resto cetona, un aldehído protegido tal como un acetal, una cetona protegida, tal como un cetal, o una funcionalidad, tal como diol o un resto serina N-terminal, que puede oxidarse de forma rápida y eficaz para dar un aldehído o cetona usando un agente de oxidación; para dar un conjugado de fórmula (V) o (VI), respectivamente: en las que X es -CO-NH-, -NH-, -O-, -NHCONH-o NHCSNH-, y es preferentemente -CO-NH-, NH-o -O-; Y es H o sustituyentes alquilo o arilo; y el grupo de Engarce en los compuestos de fórmulas (II), (IV), (V) y (VI) se selecciona entre en las que: **(Ver fórmula)****(Ver fórmula)****(Ver fórmula)**n es un número entero de 0 a 20; m es un número entero de 1 a 10; p es el número entero 0 ó 1; Z es O oS.

Description

CAMPO DE LA INVENCIÓN
La presente invención se refiere a agentes de diagnóstico y radiodiagnóstico, incluyendo vectores biológicamente activos marcados con núclidos emisores de positrones. Además, se refiere a procedimientos y reactivos para la [18F]-fluoración de vectores, definiéndose un vector como una molécula con afinidad para una diana biológica específica, y preferentemente es un péptido. Los conjugados marcados con 18F resultantes son útiles como productos radiofarmacéuticos, específicamente para su uso en Tomografía por Emisión de Positrones (PET). ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
La aplicación de péptidos radiomarcados bioactivos para la formación de imágenes de diagnóstico está ganando importancia en la medicina nuclear. Las moléculas biológicamente activas que interactúan de forma selectiva con tipos celulares específicos son útiles para el suministro de radiactividad a tejidos diana. Por ejemplo, los péptidos radiomarcados tienen un potencial significativo para el suministro de radionúclidos a tumores, infartos y tejidos infectados para la formación de imágenes de diagnóstico y radioterapia. 18F, con su vida media de aproximadamente 110 minutos, es el núclido emisor de positrones de elección para numerosos estudios des formación de imágenes de receptores. Por lo tanto, los péptidos bioactivos marcados con 18F tienen un gran potencial clínico debido a su utilidad en PET para detectar y caracterizar de forma cuantitativa una gran diversidad de enfermedades.
Una dificultad que se presenta con los péptidos marcados con 18F es que la preparación de los agentes de marcado con 18F existentes requiere mucho tiempo. Sólo se consigue un marcado eficaz de péptidos y proteínas con 18F mediante el uso de grupos prostéticos adecuados. Se han propuesto varios de dichos grupos prostéticos en la bibliografía, incluyendo 4-[18F]fluorobenzoato de N-succinimidilo, m-maleimido-N-(p-[18F]fluorobencil)-benzamida, N-(p[18F]fluorofenil)maleimida y bromuro de 4-[18F]fluorofenacilo. Casi todas las metodologías usadas en la actualidad para el marcado de péptidos y proteínas con 18F utilizan ésteres activos del sintón marcado con flúor. Como los péptidos y proteínas pueden contener una multitud de grupos funcionales que pueden reaccionar con los ésteres activos, estos procedimientos actuales no son específicos de sitio. Por ejemplo, un péptido que contiene tres restos de lisina tiene tres funciones amina, todas ellas igualmente reactivas al sintón marcado. Por lo tanto, sigue existiendo una necesidad de grupos prostéticos marcados con 18F y metodologías, que permitan una introducción quimioselectiva rápida de 18F, particularmente en péptidos, en
18F
condiciones moderadas para dar productos marcados con con un alto rendimiento radioquímico y pureza. Además, existe una necesidad de dichas metodologías que sean susceptibles de automatización para facilitar la preparación de productos radiofarmacéuticos en el escenario clínico.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
La presente invención proporciona un procedimiento para radiofluoración que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (I) con un compuesto de fórmula (II):
imagen1
18F-(Engarce)-R2 (II)
o,
un compuesto de fórmula (III) con un compuesto de fórmula (IV)
imagen1
10
18F-(Engarce)-R4 (IV) en las que R1 es un resto aldehído, un resto cetona, un aldehído protegido tal como un acetal, una cetona protegida, tal como un cetal, o una funcionalidad, tal como diol o un resto serina N-terminal,
15 que puede oxidarse de forma rápida y eficaz para dar un aldehído o cetona usando un agente de oxidación; R2 es un grupo funcional que, en condiciones moderadas tales como tampón acuoso, reacciona de forma específica para el sitio con R1, produciendo un conjugado estable. R2 puede ser derivados de amoniaco tales como amina primaria, amina secundaria, hidroxilamina,
20 hidrazina, hidrazida, aminoxi, fenilhidrazina, semicarbazida o tiosemicarbazida, y preferentemente es un grupo hidrazina, hidrazida o aminoxi; R3 es un grupo funcional que reacciona de forma específica para el sitio con R4, R3 puede ser derivados de amoniaco tales como amina primaria, amina secundaria, hidroxilamina, hidrazina, hidrazida, aminoxi, fenilhidrazina, semicarbazida o tiosemicarbazida, y preferentemente es un
25 grupo hidrazina, hidrazida o aminoxi; R4 es un resto aldehído, un resto cetona, un aldehído protegido tal como un acetal, una cetona protegida, tal como un cetal, o una funcionalidad, tal como diol o un resto serina N-terminal, que puede oxidarse de forma rápida y eficaz para dar un aldehído o cetona usando un agente de oxidación; para dar un conjugado de fórmula (V) o (VI), respectivamente: en las que X es -CO-NH-, -NH-, -O-, -NHCONH-o NHCSNH-, y es preferentemente -CO-NH-, NH-o -O-; Y es H o sustituyentes alquilo o arilo; y el grupo de Engarce en los compuestos de fórmulas (II), (IV), (V) y (VI) se selecciona entre en las que:
imagen1
imagen1
imagen1
n es un número entero de 0 a 20;
m es un número entero de 1 a 10;
p es el número entero 0 ó 1;
Z es O oS.
El grupo de Engarce en los compuestos de fórmulas (II), (IV), (V) y (VI) se elige para proporcionar buenas farmacocinéticas in vivo, tales como características de excreción favorables en el conjugado resultante de fórmula (V) o (VI). El uso de grupos de engarce con diferentes lipofilias y/o carga puede cambiar significativamente las farmacocinéticas in vivo del péptido para adaptarse a la necesidad diagnóstica. Por ejemplo, cuando es deseable que un conjugado de fórmula (V) o (VI) se elimine del cuerpo por excreción renal, se usa un engarce hidrófilo, y cuando es deseable que la eliminación se realice por excreción hepatobiliar, se usa un engarce hidrófobo. Se ha descubierto que los engarces que incluyen un resto polietilenglicol retrasan la eliminación en sangre, lo cual es deseable en algunas circunstancias.
Adecuadamente, el aldehído R1 se genera por oxidación in situ de un vector funcionalizado con un precursor que contiene un grupo 1,2-diol o 1,2-aminoalcohol. Por ejemplo, este último puede insertarse en la secuencia peptídica directamente durante la síntesis usando el aminoácido Fmoc-Dpr(Boc-Ser)-OH descrito por Wahl y col. en Tetrahedron Letts. 37, 6861 (1996). De forma análoga, un aldehído R4 en un compuesto de fórmula (IV) puede generarse por oxidación de un precursor.
Los agentes de oxidación adecuados que pueden usarse para generar el resto R1 o R4 en los compuestos de fórmulas (I) y (IV), respectivamente, incluyen peryodato, ácido peryódico, ácido paraperyódico, metaperyodato sódico y metaperyodato potásico.
Cada uno de R1 y R4 en los compuestos de fórmulas (I) y (IV) y aspectos relacionados de la invención se selecciona preferentemente entre -CHO, >C=O, -CH(-O-alquil C1-4-O-) tal como -CH(-OCH2CH2O-) y -CH(Oalquilo C1-4)2 tal como -CH (OCH3)2, y en un aspecto preferido, R1 y R4 son -CHO.
Cada uno de R2 y R3 en los compuestos de fórmulas (II) y (III) y aspectos relacionados de la invención se selecciona preferentemente entre -NHNH2, -C(O)NHNH2 y -ONH2 y son preferentemente -ONH2.
Y, en los compuestos de fórmulas (V) y (VI) y aspectos relacionados de la invención, es preferentemente H, alquilo C1-6 (tal como metilo) o fenilo.
La reacción puede realizarse en un disolvente adecuado, por ejemplo, en un tampón acuoso en el intervalo de pH de 2 a 11, adecuadamente de 3 a 11, más adecuadamente de 3 a 6, y a una temperatura no extrema de 5 a 70ºC, preferentemente a la temperatura ambiente.
La presente invención proporciona una estrategia más quimioselectiva para el radiomarcado en la que se preselecciona el sitio exacto de introducción de la marca durante la síntesis del péptido o precursor de vector. La reacción de ligación que se produce en un sitio predeterminado en el vector sólo da un producto posible. Por lo tanto, esta metodología es quimioselectiva, y su aplicación se considera genérica para una gran diversidad de péptidos, biomoléculas y fármacos de bajo peso molecular.
En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un procedimiento para radiofluoración que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (Ia) con un compuesto de fórmula (IIa):
imagen1
18F-(Engarce)-O-NH2 (IIa)
o,
un compuesto de fórmula (IIIa) con un compuesto de fórmula (IVa)
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18F-(Engarce)-R4 (IVa) en las que R1 y R4 son como se han definido anteriormente para los compuestos de fórmula (I) y (IV), respectivamente; cada uno de los el grupo de Engarce en los compuestos de fórmulas (IIa) y (IVa) es un grupo hidrocarbilo C1-60, adecuadamente un grupo hidrocarbilo C1-30, que incluye opcionalmente de 1 a 30 heteroátomos, adecuadamente de 1 a 10 heteroátomos, tales como oxígeno o nitrógeno. Los grupos de Engarce adecuados incluyen cadenas alquilo, alquenilo y alquinilo, anillos aromáticos, poliaromáticos y heteroaromáticos, y polímeros que comprenden etilenglicol, aminoácidos, o subunidades carbohidrato; para dar un conjugado de fórmula (Va) o (VIa), respectivamente: en las que Y es H o sustituyentes alquilo o arilo; y el grupo de Engarce es como se ha definido para el compuesto de fórmula (IIa) o (IVa).
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El término "grupo hidrocarbilo" se refiere a un sustituyente orgánico que consiste en
carbono e hidrógeno, pudiendo incluir dichos grupos porciones saturadas, insaturadas o
aromáticas.
En un aspecto preferido, la presente invención proporciona un procedimiento para radiofluoración que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (VII):
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10 con un compuesto de fórmula (VIII), (IX), (X) o (XI): 18F-(CH2CH2O)n-(CH2)m-CHO (VIII)
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en las que:
n es un número entero de 0 a 20;
m es un número entero de 1 a 10;
X es -CO-NH-, -NH-o -O-y es preferentemente -O
Y es H o sustituyentes alquilo o arilo
para dar a compuestos de fórmula (XII-XV), respectivamente:
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en las que X es como se ha definido para el compuesto de fórmula (VII), m y n son como se han definido para los compuestos de fórmula (VIII a XI). Esta reacción puede realizarse en un disolvente adecuado, por ejemplo, en un tampón 5 acuoso en el intervalo de pH de 2 a 11, adecuadamente de 3 a 11, más adecuadamente de 3 a 6, y a una temperatura no extrema de 5 a 70ºC, preferentemente a la temperatura ambiente.
Cuando se usa un resto amina en el vector compuesto de fórmula (I) o (III) o el sintón de fórmula (II) o (IV) como grupo funcional, y también en los aspectos descritos de forma más específica de la invención, también se considera útil incluir una etapa reductora con el fin de
10 estabilizar la base de Schiff resultante. Los agentes reductores adecuados para esta etapa son bien conocidos por los expertos en la materia e incluyen borohidruro sódico y cianoborohidruro sódico. En un aspecto preferido adicional, la presente invención proporciona un procedimiento para radiofluoración que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (XVI):
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en la que Y es H, alquilo o un sustituyente arilo preferentemente con compuestos de fórmula (XVII), (XVIII),(XIX) o (XX): 18F-(CH2-CH2-O)n-(CH2)m-W-NH2 (XVII)
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en las que m y n son como se han definido para los compuestos anteriores y W = -CONH-, NH-o -O-para dar un compuesto de fórmula (XXI), (XXII), (XXIII) o (XXIV), respectivamente:
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en las que W = -CONH-, -NH-o -O-, m y n son como se han definido para los compuestos de fórmula (XIII a XI) e Y es H o un resto alquilo o arilo.
Esta reacción puede realizarse en un disolvente adecuado, por ejemplo, en un tampón 10 acuoso en el intervalo de pH de 2 a 11, adecuadamente de 3 a 11, más adecuadamente de 3 a 6, y a una temperatura no extrema de 5 a 70ºC, preferentemente a la temperatura ambiente. En las fórmulas (I) y (III) y en otros aspectos de la invención, a menos que se indique
específicamente otra cosa, los vectores adecuados para el marcado son péptidos, que pueden incluir análogos de somatostatina, tales como octreótido, bombesina, péptido intestinal vasoactivo, análogos de péptidos quimiotácticos, hormona estimuladora de α-melanocitos, neurotensina, péptido Arg-Gly-Asp y sus análogos, péptido de conexión de proinsulina humano, endotelina, angiotensina y formil-norleucil-leucil-fenilalanil-norleucil-tirosil-lisina. Son péptidos preferidos para el marcado el péptido Arg-Gly-Asp y sus análogos, tales como los descritos en los documentos WO 01/77415 y WO 03/006491. Los péptidos preferidos comprenden el fragmento
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En un aspecto particular, el péptido en la fórmula (I) o (III) es de fórmula (A):
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en laqueX7 es-NH2 o
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en la que a es un número entero de 1 a 10, preferentemente a es 1.
Como se apreciará por el experto, los procedimientos de la invención también pueden
usarse para la radiofluoración de otras biomoléculas tales como proteínas, hormonas,
oligonucleótidos y fragmentos de anticuerpos, así como fármacos de tipo molécula pequeña para proporcionar una diversidad de trazadores de PET. En las fórmulas (IIa) y (IVa) y en otros aspectos de la invención, a menos que se indique específicamente otra cosa, el Engarce es un grupo hidrocarbilo C1-60, adecuadamente un grupo
5 hidrocarbilo C1-30 que incluye opcionalmente de 1 a 30 heteroátomos, adecuadamente de 1 a 10 heteroátomos, tales como oxígeno o nitrógeno, y se elige para proporcionar buenas farmacocinéticas in vivo. Los grupos de Engarce adecuados incluyen cadenas alquilo, alquenilo y alquinilo, anillos aromáticos, poliaromáticos y heteroaromáticos, y polímeros que comprenden etilenglicol, aminoácidos o subunidades carbohidrato. Los grupos de Engarce preferidos en las
10 fórmulas (IIa) y (IVa) y en otros aspectos de la invención incluyen los seleccionados entre: en las que:
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n es un número entero de 0 a 20;
m es un número entero de 1 a 10;
p es el número entero 0 ó 1;
Z es O oS.
Los grupos de engarce particularmente preferidos en las fórmulas (IIa) y (IVa) y en otros
aspectos de la invención pueden seleccionarse entre:
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-(CH2)1-6
10 -CH2C≡C-(CH2CH2O)2-20-(CH2)1-3
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Los compuestos de fórmula (I) y (III) pueden prepararse por procedimientos convencionales de síntesis de péptidos, por ejemplo, síntesis de péptidos en fase sólida, por 15 ejemplo, como se describe en Atherton, E. y Sheppard, R.C.; "Solid Phase Synthesis"; IRL Press: Oxford, 1989. La incorporación de los grupos R1 y R3 en un compuesto de fórmula (I) o
(III) puede realizarse por reacción del extremo N o C del péptido con algún otro grupo funcional contenido dentro de la secuencia peptídica, modificación que no afecta a las características de unión del vector. En un ejemplo preferido, el grupo aminoxi, NH2-O-, puede introducirse
20 directamente en la secuencia peptídica usando los aminoácidos Fmoc-Ams(Boc)-OH o FmocDpr(Boc-Aoa)-OH suministrados por Novabiochem. Los grupos funcionales R1 y R3 se introducen preferentemente por formación de un enlace amida estable formado por reacción de una función amina peptídica con un ácido activado e introducida durante o después de la síntesis de péptidos. Cuando el precursor es un ácido, entonces R1 y R3 pueden introducirse usando agentes de activación in situ tales como hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)
5 1,1,3,3-tetrametiluronio (HBTU) o N-óxido de hexafluorofosfato de N-[(dimetilamino)-1H-1,2,3triazolo[4,5-b]piridin-1-ilmetileno]-N-metilmetanaminio (HATU).
En otro aspecto, la presente invención proporciona nuevos grupos 18F-prostéticos, útiles para marcar péptidos y proteínas, por ejemplo, por los procedimientos descritos anteriormente. Por consiguiente, se proporciona un compuesto de fórmula (II) o de fórmula (IV), o un
10 compuesto de fórmula (IIa), (IVa), (VIII), (IX), (X), (XI), (XVII), (XVIII), (XIX) o (XX); todas como se han definido anteriormente, con la condiciones de que:
(i)
en los compuestos de fórmula (II), si el engarce es fenilo, entonces R2 sea aminoxi (adecuadamente -ONH2);
(ii)
en los compuestos de fórmula (IV), el engarce no sea fenilo;
15 (iii) en los compuestos de fórmula (IVa), el engarce no sea fenilo o fenilo sustituido con halo, hidroxi o benciloxi;
(iv) en los compuestos de fórmula (X), n no sea 0.
Los compuestos preferidos de fórmula (IV) para su uso en los procedimientos descritos en el presente documento y que se reivindican per se incluyen:
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18F-(CH2)1-6-CHO 18F-CH2C≡C-CHO 18F-(CH2CH2O)2-20-(CH2)-CHO
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En otro aspecto, la presente invención proporciona compuestos de fórmula (I) y (III) así como los compuestos de fórmula (Ia), (IIIa), (VII), (XVI); todos como se han definido anteriormente. Los compuestos preferidos de fórmula (I), (III), (Ia), (IIIa), (VII) y (XVI) son aquellos en los que le vector es el péptido Arg-Gly-Asp o un análogo del mismo como se ha descrito anteriormente, y especialmente en los que el vector es de fórmula (A):
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En un aspecto más, la presente invención proporciona conjugados radiomarcados de fórmulas (V) y (VI), así como los compuestos de fórmulas (Va), (VIa), (XII), (XIII), (XIV), (XV), (XXI), (XXII), (XXIII), (XXIV); todos como se han definido anteriormente. Los compuestos preferidos de fórmulas (V), (VI), (Va), (VIa), (XIII), (XIII), (XIV), (XV), (XXI), (XXII), (XXIII) y
(XXIV) son aquellos en los que el vector es el péptido Arg-Gly-Asp o un análogo del mismo como se ha descrito anteriormente, y especialmente en los que el vector es de fórmula (A):
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en laqueX7 es-NH2 o
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10 en la que a es un número entero de 1 a 10, preferentemente a es 1. Los compuestos de fórmula (II) pueden prepararse a partir de los precursores correspondientes de fórmula (XXV):
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en la que L es un grupo saliente, preferentemente un p-toluenosulfonato,
15 trifluorometanosulfonato o metanosulfonato o un haluro y el Engarce es como se ha definido previamente y en el que X es preferentemente -CO-NH-, -NH-o -O-, R5 y R6 son H o un grupo protector adecuado tal como el t-butiloxicarbonilo por reacción con [18F]-fluoruro acuoso producido en ciclotrón, adecuadamente preactivado por evaporación en una base (por ejemplo, en tetrabutilamonio o K2CO3/Kryptofix-222), en un disolvente adecuado tal como acetonitrilo,
20 N,N-dimetilformamida o dimetilsulfóxido, típicamente a la temperatura ambiente o a temperatura elevada, por ejemplo hasta 150ºC, adecuadamente de 60 a 120ºC o por calentamiento con microondas, seguido de retirada de cualquier grupo protector de N usando procedimientos convencionales tales como tratamiento acidolítico.
Los compuestos de fórmula (IV) pueden prepararse a partir de los precursores correspondientes de fórmula (XXVI):
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5 o un derivado protegido de los mismos, en la que L es un grupo saliente, preferentemente un ptoluenosulfonato, trifluorometanosulfonato o metanosulfonato o un haluro y el Engarce es como se ha definido previamente e Y es preferentemente H o sustituyentes alquilo o arilo por reacción con [18F]-fluoruro acuoso producido en ciclotrón, adecuadamente preactivado por evaporación en una base (por ejemplo, en tetrabutilamonio o K2CO3/Kryptofix-222), en un
10 disolvente adecuado tal como acetonitrilo, N,N-dimetilformamida o dimetilsulfóxido, típicamente a la temperatura ambiente o a una temperatura elevada, por ejemplo hasta 120ºC. La función aldehído o cetona de los compuestos de fórmula (XXVI) también puede generarse rápidamente a partir de sus precursores protegidos, tales como acetales o cetales por simple tratamiento ácido seguido de fluoración. En un ejemplo preferido, los compuestos de fórmula (IV) se
15 preparan a partir de compuestos de fórmula (XXVII)
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en la que L es un grupo saliente tal como p-toluenosulfonato, trifluorometanosulfonato, metanosulfonato o un haluro, y el engarce es como se ha definido anteriormente y está unido mediante un enlace amida a un derivado de serina protegido. En este caso, el grupo protector 20 de O, R6, es preferentemente t-butilo y R5 es como se ha definido anteriormente. Se hace reaccionar con [18F]-fluoruro acuoso producido en ciclotrón, adecuadamente preactivado por evaporación en una base (por ejemplo, en tetrabutilamonio o K2CO3/Kryptofix-222), en un disolvente adecuado tal como acetonitrilo, N,N-dimetilformamida o dimetilsulfóxido, típicamente a la temperatura ambiente o a una temperatura elevada, por ejemplo hasta 150ºC, 25 adecuadamente de 60 a 120ºC o por calentamiento con microondas, seguido de retirada de O y N-protección y oxidación para dar el aldehído con un agente de oxidación tal como peryodato. En un aspecto preferido, los compuestos de fórmulas (IV) pueden prepararse sobre un soporte sólido, tal como perlas poliméricas, recubrimientos o dispositivos a microescala, por ejemplo, sobre una resina usando una estrategia BAL como se describe por Brask y col. en
Bioorg. Med. Chem. Lett. 11 (2001) 697-700. Los aldehídos peptídicos se sintetizan partiendo con una aminación reductora de aldehído de O-PAL sobre resina PEG-AMPS con aminoacetaldehído dimetil acetal seguido de acilación con el componente de engarce. En este aspecto, el exceso de reactivos y subproductos de la reacción de radiofluoración puede separarse del producto unido a polímero por lavado. Mediante tratamiento ácido se obtienen compuestos de fórmula (IV) directamente a partir del soporte sólido que se muestra a continuación.
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en las que L y el engarce son como se han descrito anteriormente.
10 Esta estrategia puede ser particularmente adecuada para la producción automatizada de los compuestos de fórmulas (IV). La presente invención también proporciona una composición radiofarmacéutica que comprende una cantidad eficaz (por ejemplo, una cantidad eficaz para su uso en la formación de imágenes por PET in vivo) de un compuesto de fórmula general (V) o (VI), o un compuesto
15 de fórmula (Va), (VIa), (XII), (XIII), (XIV), (XV), (XXI), (XXII), (XXIII) o (XXIV); todos como se han definido anteriormente; junto con uno o más adyuvantes, excipientes o diluyentes farmacéuticamente aceptables. Una realización preferida de la invención se refiere a un compuesto de fórmula general
(V) o (VI), o un compuesto de fórmula (Va), (VIa), (XII), (XIII), (XIV), (XV), (XXI), (XXII), (XXIII) o
(XXIV); todos como se han definido anteriormente, para el uso médico y particularmente para su uso en la formación de imágenes de tumores (adecuadamente por PET); en los que el vector es el péptido Arg-Gly-Asp o un análogo del mismo, tal como los descritos en el documento WO 01/77415 y WO 03/006491, preferentemente un péptido que comprende el fragmento
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más preferentemente el péptido de fórmula (A):
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en laqueX7 es-NH2 o
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en la que a es un número entero de 1 a 10, preferentemente a es 1.
Los conjugados radiomarcados de la invención pueden administrarse a pacientes para
la formación de imágenes por PET en cantidades suficientes para producir la señal deseada,
siendo normalmente suficientes dosificaciones de radionúclidos típicas de 0,01 a 100 mCi,
15 preferentemente de 0,1 a 50 mCi, para 70 kg de peso corporal. Por lo tanto, los conjugados radiomarcados de acuerdo con la invención pueden formularse para la administración usando vehículos o excipientes fisiológicamente aceptables de una manera que está totalmente dentro del conocimiento del experto en la materia. Por ejemplo, los compuestos, opcionalmente con la adición de excipientes farmacéuticamente aceptables, pueden estar suspendidos o disueltos en un medio acuoso, esterilizándose después la solución o suspensión resultante. Vista desde un aspecto adicional, la invención proporciona el uso de un conjugado radiomarcado de la invención para la fabricación de un producto radiofarmacéutico para su uso en un procedimiento de formación de imágenes in vivo, adecuadamente PET, y preferentemente para la formación de imágenes de tumores; que implica la administración de dicho producto radiofarmacéutico a un cuerpo humano o animal y la generación de una imagen de al menos parte de dicho cuerpo.
Vista desde otro aspecto adicional, la invención proporciona un compuesto para su uso en un procedimiento de formación de imágenes in vivo de un cuerpo humano o animal, comprendiendo el procedimiento administrar un producto radiofarmacéutico a dicho cuerpo, por ejemplo en el sistema vascular y generar una imagen de al menos una parte de dicho cuerpo en el que se ha distribuido dicho producto radiofarmacéutico usando PET, comprendiendo dicho producto radiofarmacéutico un conjugado radiomarcado de acuerdo con la invención.
Vista desde un aspecto adicional, la invención proporciona un compuesto para su uso en un procedimiento para monitorizar el efecto de tratamiento de un cuerpo humano o animal con un fármaco para combatir una afección asociada con el cáncer, preferentemente angiogénesis, por ejemplo un agente citotóxico, comprendiendo dicho procedimiento administrar a dicho cuerpo un conjugado radiomarcado de acuerdo con la invención y detectar la captación de dicho conjugado por receptores celulares, preferentemente receptores de células endoteliales y, en particular, receptores de αvβ3, realizándose dicha administración y detección opcionalmente, pero preferentemente, de forma repetida, por ejemplo antes, durante y después del tratamiento con dicho fármaco.
Los procedimientos y compuestos de la presente invención pueden usarse en forma de un kit para la preparación de un trazador radiofluorado que comprende un grupo prostético de fórmula (II) o (IV) y un compuesto de fórmula (I) o (III).
Dicho kit para la preparación de un trazador radiofluorado puede comprender un grupo prostético de fórmula (XXV) y un compuesto de fórmula (I), o un grupo prostético de fórmula
(XXVI) o (XXVII), y un compuesto de fórmula (III).
En el uso de los kits, el compuesto de fórmula (XXV) se convertirá en el compuesto correspondiente de fórmula (II) y el compuesto de fórmula (XXVI) o (XXVII) se convertirá en el compuesto correspondiente de fórmula (IV), respectivamente, usando procedimientos descritos anteriormente. Preferentemente, el compuesto de fórmula (II) y (IV) puede separarse de los
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reactivos de desecho pasando la mezcla de reacción a través de un cartucho de Extracción de Fase Sólida (SPE). El cartucho de SPE puede comprender una almohadilla de grafito, fase estacionaria C18 o resina de intercambio iónico. Después, el compuesto de fórmula (II) y (IV) se añadirá a los compuestos de fórmula (I) y (III), respectivamente, que pueden disolverse adecuadamente en tampón acuoso (pH 3-11). Después de la reacción a una temperatura no extrema durante 1 a 70 minutos, el péptido marcado puede purificarse, por ejemplo, por SPE, y recogerse. EJEMPLOS
La invención se ilustra por medio d e ejemplos en los que se usan las siguientes abreviaturas:
HPLC : cromatografía líquida de alta resolución
RMN : resonancia magnética nuclear
TFA : ácido trifluoroacético.
h : horas min: minuto(s) DMAP : 4-(dimetilamino)piridina THF : tetrahidrofurano DCM : diclorometano DMF : N,N-dimetilformamida TBAF: fluoruro de tetrabutilamonio MeOH: metanol TLC: cromatografía de capa fina TIS: triisopropilsilano DMSO: dimetilsulfóxido PyAOP :[hexafluorofosfato de 7-azabenzotriazol-1-iloxitris(pirrolidino)fosfonio] Boc: t-butoxicarbonilo
Ejemplo 1 Preparación de triflato de 4-trimetilamoniobenzaldehído (compuesto 1)
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Este compuesto se sintetizó de acuerdo con el procedimiento descrito por Haka y col.
(J. Labelled Cpds.& Radiopharms 1989 27(7) 823).
Ejemplo 2 Preparación de 2-(2-{2-[2-(2-fluoro-etoxi)-etoxi]-etoxi}-etoxi)-1,1-dimetoxi-etano (compuesto 7)
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a) 2-(2-{2-[2-(2,2-Dimetoxi-etoxi)-etoxi]-etoxi}-etoxi)-etil éster del ácido acético (Compuesto 4)
5 A una suspensión en agitación de hidruro sódico (248 mg, 5,15 mmol en aceite mineral) en THF (5 ml) se le añadió a través de una jeringa una solución de 2-{2-[2-(2-hidroxi-etoxi)etoxi]-etoxi}-etanol (Compuesto 2) (1,0 g, 5,15 mmol) en THF (5 ml) a temperatura ambiente. Después de que cesara el desprendimiento de gas, la mezcla se agitó durante 45 minutos a temperatura ambiente, tiempo durante el cual se obtuvo una solución de color ligeramente
10 amarillo transparente. Se añadió bromoacetaldehído (8,71 g, 51,5 mmol) mediante una jeringa y la mezcla se agitó durante 24 horas. Después, se añadió acetato de etilo (3 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas más. La mezcla se vertió en éter (100 ml) y se extrajo una vez con cada uno de K2CO3 acuoso al 10% (30 ml) y salmuera (30 ml). La fase orgánica se secó (Na2SO4), se filtró y se evaporó. El aceite residual se destiló para eliminar el
15 exceso de bromoacetaldehído y el producto en bruto residual se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetato de etilo al 100%, proporcionando el producto (355 mg, 21%) en forma de un aceite incoloro. b) 2-(2-{2-[2-(2,2-Dimetoxi-etoxi)-etoxi]-etoxi}-etoxi)-etanol (Compuesto 5) Se añadió NaOH 1 N/Metanol (1 ml) a una solución en agitación de 2-(2-{2-[2-(2,2
20 dimetoxi-etoxi)-etoxi]-etoxi}-etoxi)-etil éster del ácido acético (Compuesto 4) (110 mg, 0,34 mmol) en metanol (3 ml) a temperatura ambiente. La reacción se controló por TLC (CHCl3/MeOH, 9:1) y se completó en 30 minutos. El disolvente se evaporó y el residuo se
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purificó por cromatografía ultrarrápida (CHCl3/MeOH, 9:1), proporcionando el producto (73 mg, 76%) en forma de un aceite incoloro. c) 2-(2-{2-[2-(2,2-Dimetoxi-etoxi)-etoxi]-etoxi}-etoxi)-etil éster del ácido metanosulfónico (Compuesto 6)
A una solución en agitación del alcohol (Compuesto 5) (60 mg, 0,21 mmol) y trietilamina (59 ml, 0,42 mmol) en THF (1 ml) se le añadió cloruro de metanosulfonilo (24:1, 0,30 mmol). La reacción se controló por TLC (CHCl3/MeOH, 9:1). Después de 2 horas, la sal clorhidrato de trietilamina precipitada se retiró por filtración. El disolvente se evaporó y el producto (75 mg, 99%) se obtuvo después de la cromatografía ultrarrápida usando cloroformo/metanol (9:1) en forma de un aceite. d) 2-2-[2-(2-Fluoro-etoxi)-etoxi]-etoxi}-etoxi)-1,1-dimetoxi-etano (Compuesto 7)
Una mezcla del sulfonato (Compuesto 6) (75 mg, 0,21 mmol) y TBAF (1,1 M en THF, 573 ml, 0,63 mmol) en acetonitrilo (8 ml) se calentó a 90ºC durante 30 minutos. La monitorización por TLC (acetato de etilo) mostró que la reacción se había completado. Después de enfriar a temperatura ambiente y de la evaporación del disolvente, el residuo se sometió a cromatografía ultrarrápida (acetato de etilo), proporcionando el producto (56 mg, 93%) en forma de un aceite incoloro. Ejemplo 3 Preparación de 4-(3-fluoropropoxi)benzaldehído (Compuesto 10)
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a) 4-(3-hidroxietoxi)benzaldehído (Compuesto 8)
Una solución de 4-hidroxibenzaldehído (Fluka, 4,9 g, 0,040 mol), carbonato sódico (4,7 g, 0,044 mol) y 3-bromo-1-propanol (6,1 g, 0,044 mol) en DMF (30 ml) se calentó a 140ºC durante 8 h. La mezcla de reacción se enfrió y se concentró y el residuo se recogió en éter, se lavó con agua y se secó (Na2SO4). La filtración y la concentración dieron 4,6 g (64%) de un jarabe de color amarillo que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. La estructura se confirmó mediante análisis por RMN. b) 3-(4-Formilfenoxi)etil éster del ácido metanosulfónico (Compuesto 9)
A una solución del alcohol 12 (1,4 g, 8,0 mmol) en diclorometano (10 ml) se le añadieron trietilamina (1,2 ml, 8,5 mmol) y cloruro de mesilo (0,62 ml, 8,0 mmol). Después de agitar durante 1,5 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se lavó con agua y se secó (Na2SO4), dando 1,8 g de material en bruto (aceite de color amarillo). Se purificó una alícuota de 290 mg por cromatografía de fase inversa (columna Phenomenex Luna C18(2) 5 µm 21,2 x 250 mm, disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = acetonitrilo/TFA al 0,1%; gradiente del 2040% de B durante 60 min; flujo 10,0 ml/min, detección UV a 254 nm), dando 244 mg de material sólido de color blanco después de la liofilización. La estructura se confirmó mediante
5 análisis por RMN. c) 4-(3-fluoropropoxi)benzaldehído (Compuesto 10)
Se disolvieron fluoruro potásico (Fluka, 7,2 mg, 0,124 mmol) y kryptofix 222 (Fluka, 46,7 mg, 0,124 mmol) en acetonitrilo seco (2,5 ml). Después de 10 min, la mezcla se añadió a una solución agitada del 3-(4-formilfenoxi)propil éster del ácido metanosulfónico 13 (16,0 mg, 0,062
10 mmol) en acetonitrilo seco (1,5 ml). La mezcla de reacción se calentó a 60ºC durante 30 minutos. El producto se confirmó por HPLC analítica (columna Phenomenex Luna C18(2) 3 µm 4,6 x 50 mm, disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = acetonitrilo/TFA al 0,1%; gradiente del 10-80% de B durante 10 min; flujo 2,0 ml/min, detección UV a 214 y 254 nm) co-eluyendo con patrón comercial (Fluorochem) a 5,0 minutos.
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Ejemplo 4 Preparación de 1,1-Dimetoxi-4-fluorometilciclohexano (Compuesto 14)
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a) 4-Hidroximetilciclohexanona (Compuesto 11) Este compuesto se sintetizó de acuerdo con el procedimiento descrito por Borden y col.
(J. Org. Chem., 1985, 50, 531-534. El producto se caracterizó por RMN 1H y 13C. b) 1,1-Dimetoxi-4-hidroximetilciclohexano (Compuesto 12)
5 Una solución de la cetona 11 (2,54 g, 19,8 mmol), ortoformiato de trimetilo (9,75 ml, 89,1 mmol) y ácido p-toluenosulfónico (150 mg, 0,79 mmol) en metanol seco (30 ml) se agitó en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente durante 24 h. La mezcla de reacción se neutralizó con carbonato potásico sólido (4 g), se filtró los disolventes se evaporaron. El producto en bruto se disolvió en DCM (30 ml) y se lavó con agua (40 ml). La fase orgánica se
10 secó (Na2SO4), se filtró y se evaporó. El aceite de color amarillo en bruto (3,0 g) se destiló a 85ºC (0,2 mmHg), proporcionando el producto (1,69 g, 49%) en forma de un aceite incoloro. El producto se caracterizó por RMN 1H y 13C. c) 4,4-Dimetoxi-ciclohexilmetil éster del ácido metanosulfónico (Compuesto 13) A una solución enfriada (0ºC) del alcohol 12 (275 mg, 1,58 mmol) y trietilamina (3,3 ml,
15 23,7 mmol) en DCM seco (5 ml) en una atmósfera de nitrógeno se le añadió gota a gota cloruro de metanosulfonilo (246 ul, 3,16 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La sal clorhidrato de trietilamina precipitada se retiró por filtración y los disolventes se evaporaron. El producto en bruto se disolvió en DCM (30 ml), se lavó con agua (2 x 20 ml), se secó (Na2SO4), se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por
20 cromatografía ultrarrápida (EtOAc:Éter de pet.:NH3 (50:50:4), proporcionando el producto (214 mg, 54%) en forma de un aceite de color amarillo pálido. El producto se caracterizó por RMN 1H y 13C.
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Ejemplo 5 Preparación de Precursor Peptídico (Compuesto 15) El péptido, Compuesto 14, se sintetizó usando síntesis de péptidos convencional. El
compuesto 14 (150 mg, 0,12 mmol) en DMF se añadió a una solución de ácido Boc
aminoxiacético (34,4 mg, 0,18 mmol), PyAOP (93,9 mg, 0,18 mmol) y NMM (40 µl, 0,36 mmol)
en DMF. La DMF se evaporó a presión reducida después de 12 horas y el producto en bruto se
purificó por cromatografía preparativa de fase inversa (columna Phenomenex Luna C18, 00G
5 4253-V0; disolventes A = agua/TFA al 0,1% y B = CH3CN/TFA al 0,1%; gradiente del 10-50%
de B durante 60 min; flujo 50 ml/minuto; detección a 254 nm), proporcionando 97,1 mg (57%)
del compuesto puro (HPLC analítica: columna Phenomenex Luna C18, 00G-4252-E0;
disolventes: A = agua + TFA al 0,1%/B = CH3CN + TFA al 0,1%, gradiente: 10-50% de B
durante 20 min; flujo 1,0 ml/minuto; tiempo de retención 19,4 minutos, detectado a 214 y 254 10 nm). Se realizó una caracterización adicional usando espectrometría de masas, dando un valor
m/z de 1431,2 [M-H+].
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Ejemplo 6 -Ligación quimioselectiva del Compuesto 1 con el Compuesto 15 para dar el Compuesto 16
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La desprotección del péptido 15 se realizó mediante la adición de TFA que contenía agua al 5% a 10 mg de péptido. El péptido Boc-desprotegido (5,9 mg, 0,0044 mmol) en 1 ml de agua se añadió a 4-fluorobenzaldehído (Compuesto 1) (1,1 mg, 0,94 µl, 0,0089 mmol) en 1 ml
5 de acetonitrilo. El pH de la mezcla era 3,5. Después de 45 minutos a 70ºC, la mezcla se purificó dos veces por cromatografía preparativa de fase inversa (columna Phenomenex Luna C18, 00G-4253-N0; disolventes: A = agua + TFA al 0,1%/B = CH3CN + TFA al 0,1%, gradiente: 1040% de B durante 30 min; flujo 5,0 ml/minuto; detectado a 214 nm), proporcionando 2,0 mg (32%) del compuesto puro (HPLC analítica: columna Phenomenex Luna C18, 00G-4252-E0,
10 disolventes: A = agua + TFA al 0,1%/B = CH3CN + TFA al 0,1%, gradiente: 10-50% de B durante 20 min; flujo 1,0 ml/minuto; tiempo de retención 16,3 minutos, detectado a 214 y 254 nm). Se realizó una caracterización adicional usando espectrometría de masas, dando un valor m/z de 1437,2, [M-H+]. Ejemplo 7 -Ligación quimioselectiva del Compuesto 7 con el Compuesto 15 para dar el
15 Compuesto 17
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El grupo protector en el 2-(2-{2-[2-(2-fluoro-etoxi)-etoxi]-etoxi}-etoxi)-1,1-dimetoxietano 6 (3,9 mg, 0,016 mmol) se retiró usando HCl (cons.) en acetonitrilo (1:1) (0,5 ml). La mezcla se dejó durante 15 minutos y después se añadió al péptido Boc-desprotegido, obtenido por
5 tratamiento (Compuesto 9) (10 mg, 0,007 mmol) con TFA que contenía agua al 5% y después evaporación de TFA a presión reducida después de 20 min. El pH de la mezcla se ajustó a 4 con amoniaco y después se calentó a 70ºC durante 20 minutos. La reacción se monitorizó usando HPLC analítica y CL-EM y se purificó por cromatografía preparativa de fase inversa (columna Phenomenex Luna C18, 00G-4253-N0; disolventes: A = agua + TFA al 0,1%/B =
10 CH3CN + TFA al 0,1%, gradiente: 10-50% de B durante 30 min; flujo 5,0 ml/minuto; detectado a 214 nm), proporcionando 5,5 mg (51%) del compuesto puro (HPLC analítica: columna Phenomenex Luna C18, 00G-4252-E0; disolventes: A = agua + TFA al 0,1%/B = CH3CN + TFA al 0,1%, gradiente: 10-50% de B durante 20 min; flujo 1,0 ml/minuto; tiempo de retención 14,3 y 14,7 minutos, detectado a 214 y 254 nm). Se realizó una caracterización adicional usando
15 espectrometría de masas, dando un valor m/z de 1551,1, [M-H+]. Ejemplo 8 Radiosíntesis del 18F-Compuesto 16 a) Radiosíntesis del 18F-Compuesto 1
Se secó azeotrópicamente 18F-fluoruro (hasta 370 MBq) en presencia de Kryptofix 222 (12-14 mg en 0,5 ml de MeCN) y carbonato potásico (100 µl de una solución 0,1 M en agua) 20 por calentamiento en una atmósfera de N2 a 125ºC durante 15 min. Durante este tiempo, se añadieron 2 x 1 ml de MeCN y se evaporaron. Después de enfriar a <40ºC, se añadió una solución de triflato de trimetilamonio benzaldehído (3-7 mg en 0,7 ml de DMSO). El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 120ºC durante 15 min para efectuar el marcado. La mezcla de reacción en bruto se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó por
adición a 10 ml de agua. La mezcla se pasó secuencialmente a través de un cartucho Sep-pak CM-plus (acondicionado con 10 ml de agua) y un cartucho SepPak C18-plus (acondicionado con 20 ml de EtOH y 20 ml de H2O). Los cartuchos se lavaron abundantemente con agua (10 ml) y el producto 18F-fluorobenzaldehído se eluyó del cartucho SepPak C18-plus con MeOH (1 ml). b) Conjugación del Compuesto 15 y 4-18F-fluorobenzaldehído
El compuesto 15 (4-5 mg) se trató con agua al 5% en TFA durante 5 min a temperatura ambiente. Después, los disolventes se retiraron por evaporación al vacío. El péptido se disolvió de nuevo en tampón NH4OAc 0,5 M, pH 4 (0,5 ml) y se combinó con 4-18F-fluorobenzaldehído en el recipiente de reacción. El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 70ºC durante 15 min para efectuar la conjugación. Después de enfriar a temperatura ambiente, se obtuvo el producto por radio HPLC preparativa (Columna Phenomenex Prodigy ODS-Prep, 250 x 10 mm, 10 µ, 4 ml/min, disolvente A: H2O (TFA al 0,5%), disolvente B: CH3CN (TFA al 0,5%), gradiente: 10% de B durante 5 min, 10-40% de B en 15 min). Ejemplo 9 Radiosíntesis del 18F-compuesto 17 a) Radiosíntesis del 18F-Compuesto 7
A un vial Wheaton (2 ml) cargado con Kryptofix 222 (10 mg), carbonato potásico (1 mg en 50 ml de agua) y acetonitrilo (0,8 ml) se le añadió el agua que contenía flúor-18 (10 mCi, 1 ml). El disolvente se retiró por calentamiento a 110ºC durante 30 min en una corriente de nitrógeno. Se añadió acetonitrilo anhidro (0,5 ml) y se evaporó como antes. Esta etapa se repitió dos veces. Se añadió una solución del compuesto 6 (1 mg) en DMSO anhidro (0,2 ml). Después de calentar con microondas (5 min, 160ºC, 150→50 W), la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se aplicó a un cartucho SepPak tC18-plus que se había acondicionado con MeCN (5 ml) y H2O (20 ml). El cartucho se lavó abundantemente con agua (10 ml) y el producto eluyendo con MeCN (0,5 ml). El disolvente se evaporó usando una corriente de nitrógeno a 80ºC. Se añadió una mezcla de HCl (34 µl, 12 M) y MeCN (34 µl) y el vial se dejó a temperatura ambiente durante 5 min. b) Conjugación del Compuesto 15 y el 18F-Compuesto 7
El compuesto 15 (3 mg) se hizo reaccionar con TFA/H2O al 5% (0,2 ml). Después de reposar durante 1 min a temperatura ambiente, el disolvente se retiró mediante una corriente de nitrógeno. Se añadió hidróxido de amonio (38 ml, 28%) al vial que contenía el 18FCompuesto 7 desprotegido. La mezcla neutralizada se transfirió al vial que contenía el compuesto desprotegido 15 en tampón de acetato amónico (50 ml, pH 4,0, 0,5 M). El vial se incubó a 70ºC durante 7 min. Después de enfriar a temperatura ambiente y añadir fase móvil de HPLC (100 µl, MeCN al 20%, H2O al 80%, TFA al 0,5%), se obtuvo el producto por radio
HPLC preparativa [columna: Luna C18(2), Phenomenex, 100 x 10 mm, 5 µ, 4 ml/min, disolvente A: H2O (TFA al 0,5%), disolvente B: CH3CN (TFA al 0,5%), gradiente: 10-50% de B en 20 min]. Ejemplo 10 Síntesis de 4-(fluorometil)benzoil]hidrazida -Compuesto 23
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Preparación de 2-[4-(fluorometil)benzoil]hidrazino-1,1,2-tricarboxilato de tri-terc-butilo para la conjugación con péptidos modificados con aldehído o cetona. a) Síntesis de 2-[4-(hidroximetil)benzoil]-hidrazino-1-carboxilato de terc-butilo -Compuesto 18
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10 Una solución de pentafluorofenilo éster del ácido 4-hidroximetilbenzoico (Milligen, 0,60 g, 1,9 mmol), hidroxibenzotriazol (0,29 g, 1,9 mmol), carbazato de terc-butilo (Fluka, 0,29 g, 2,2 mmol) y diisopropiletilamina (0,68 ml, 4,0 mmol) en diclorometano (20 ml) se calentó a reflujo durante 3 horas. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el producto se purificó por cromatografía en columna (sílice, 9:1 de acetato de etilo/hexano). Rendimiento 0,50 g (90%).
15 HPLC analítica: columna Phenomenex Luna C18(2) 3 µm 4,6 x 50 mm; disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = acetonitrilo/TFA al 0,1%; gradiente del 10-80% de B durante 10 min; flujo 2,0 ml/min; tiempo de retención 2,38 minutos detectado a 214 y 254 nm. El análisis por RMN estaba de acuerdo con la estructura. b) Síntesis de 2-[4-(terc-butildifenilsiloximetil)benzoil]hidrazino-1-carboxilato de terc-butilo
20 Compuesto 19
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Una solución de terc-butildifenilclorosilano (0,57 ml, 2,2 mmol), 2-[4-(hidroximetil)benzoil]hidrazino-1-carboxilato de terc-butilo (0,48 g, 1,8 mmol) e imidazol (0,37 g, 5,4 mmol) en diclorometano (60 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 1 h 15 min. La solución se
extrajo con carboanto ácido potásico acuoso (pH 3, 3 x 20 ml) y se secó (Na2SO4). El producto se analizó por HPLC (columna Phenomenex Luna C18(2) 3 µm 4,6 x 50 mm; disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = acetonitrilo/TFA al 0,1%; gradiente del 60-100% de B durante 10 min; flujo 2,0 ml/min; tiempo de retención 3,37 minutos detectado a 214 y 254 nm). La solución se concentró y el producto se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. c) Síntesis de 2-[4-(terc-butildifenilsiloximetil)benzoil]hidrazino-1,1,2-tricarboxilato de tri-tercbutilo -Compuesto 20
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A una solución de 2-[4-(terc-butildifenilsiloximetil)benzoil]hidrazino-1-carboxilato de terc
10 butilo (69 mg, 0,14 mmol) en diclorometano (15 ml) se le añadieron DMAP (20 mg, 0,16 mmol), trietilamina (0,13 ml, 0,96 mmol) y dicarbonato de di-terc-butilo (90 mg, 0,41 mmol). Después de 2 horas, el disolvente se evaporó a presión reducida y el producto en bruto se purificó por cromatografía en columna (sílice, hexano/acetato de etilo, 4:1 (HPLC analítica:columna Phenomenex Luna C18(2) 3 µm, 4,6 x 50 mm; disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B =
15 acetonitrilo/TFA al 0,1%; gradiente del 60-100% de B durante 10 min; flujo 2,0 ml/min; tiempo de retención 7,85 minutos detectado a 214 y 254 nm). La estructura se confirmó mediante análisis por RMN. d) Síntesis de 2-[4-(hidroximetil)benzoil]hidrazino-1,1,2-tricarboxilato de tri-terc-butilo Compuesto 21
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20
A una solución de 2-[4-(terc-butildifenilsiloximetil)benzoil]hidrazino-1,1,2-tricarboxilato de tri-terc-butilo (0,37 g, 0,52 mmol) en THF (25 ml) se le añadió fluoruro de tetrabutilamonio (1,1 M en THF, 0,50 ml, 0,55 mmol). Después de 50 min, se añadió una solución acuosa de cloruro de amonio (10%, 10 ml). Después de 10 min, la mezcla se extrajo con diclorometano (3 x 15
25 ml) y la fase orgánica se secó (Na2SO4). La solución se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna (sílice, 1:1 de hexano/acetato de etilo), dando 0,21 g (84%) del producto (HPLC analítica: columna Phenomenex Luna C18(2) 3 µm 4,6 x 50 mm; disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = acetonitrilo/TFA al 0,1%; gradiente del 60-100% de B durante 10 min; flujo 2,0 ml/min; tiempo de retención 1,38 min detectado a 214 y 254 nm). La estructura se confirmó mediante análisis por RMN. e) Síntesis de 2-[4-(metanosulfonatometil)benzoil]hidrazino-1,1,2-tricarboxilato de tri-terc-butilo -Compuesto 21
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A una solución agitada de 2-[4-(hidroximetil)benzoil]hidrazino-1,1,2-tricarboxilato de tri
10 terc-butilo (0,22 g, 0,48 mmol) y trietilamina (0,080 ml, 0,57 mmol) en diclorometano (40 ml) se le añadió cloruro de metanosulfonilo (0,040 ml, 0,52 mmol). Después de 2 h, se añadió una segunda porción de cloruro de metanosulfonilo y trietilamina (las mismas cantidades). Después de 12 horas, el análisis por HPLC analítica (columna Phenomenex Luna C18(2) 3 µm 4,6 x 50 mm; disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = acetonitrilo/TFA al 0,1%; gradiente del 10-80%
15 de B durante 10 min; flujo 2,0 ml/min; tiempo de retención 8,25 minutos con detección a 214 y 254 nm) indicó que la reacción se había completado. La mezcla se filtró a través de sílice y se concentró al vacío. El producto se purificó por cromatografía en columna (sílice, 1:1 de hexano/acetato de etilo), produciendo 0,21 g (81%). El análisis por RMN estaba de acuerdo con la estructura.
20 f) Síntesis de 2-[4-(flourometil)benzoil]hidrazino-1,1,2-tricarboxilato de tri-terc-butilo Compuesto 22
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Se disolvieron fluoruro potásico (3,0 mg, 0,052 mmol) y Kryptofix 222 (Fluka, 20 mg, 0,053 mmol) en acetonitrilo seco (0,6 ml). Después de 15 min, la mezcla se añadió a una 25 solución agitada de 2-[4-(metanosulfonatometil)benzoil]hidrazino-1,1,2-tricarboxilato de tri-tercbutilo (14 mg, 0,026 mmol) en acetonitrilo seco (0,4 ml). La mezcla de reacción se calentó a 60ºC durante 15 min. El producto se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Luna C18(2) 5 µm 21,2 x 250 mm; disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = acetonitrilo/TFA al 0,1%; gradiente del 60-100% de B durante 60 min; flujo 10,0 ml/min; tiempo de retención 33 5 minutos detectado a 214 nm). Rendimiento 3,2 mg (26%). HPLC analítica: columna Phenomenex Luna C18 (2) 3 µm 4,6 x 50 mm; disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = acetonitrilo/TFA al 0,1%; gradiente del 10-80% de B durante 10 min; flujo 2,0 ml/min; tiempo de retención 8,78 minutos detectado a 214 y 254 nm. La estructura se confirmó mediante análisis por RMN. La desprotección del Compuesto 22 para producir el Compuesto 23 se realizó en
10 TFA al 50%/DCM durante 15 minutos. Ejemplo 11 Preparación de 2-[2-(2-fluorometil-fenilsulfanil)-etil]-[1,3]dioxolano para conjugación con péptidos modificados con aminoxi, hidrazina o hidrazida -Compuesto 27
imagen1
a) Síntesis de [2-(2-[1,3]dioxolan-2-iletilsulfanil)fenil]metanol Compuesto 24
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15
Se añadió 2-(2-bromoetil)-1,3-dioxolano (223 µl, 1,86 mmol) a alcohol 2mercaptobencílico (52,3 mg, 0,37 mmol) y carbonato potásico (102,3, 0,74 mmol) en DMF. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche antes de que la DMF se evaporara a presión reducida y el producto en bruto se purificó por cromatografía preparativa de fase
20 inversa (columna Vydac 21STP1022; disolventes A = agua/TFA al 0,1% y B = CH3CN/TFA al 0,1%; gradiente del 10-50% de B durante 40 min; flujo 10 ml/minuto; detección a 214 nm). Se obtuvo un rendimiento de 65,1 mg de material purificado (HPLC analítica: columna Vydac 218TP54; disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = CH3CN/TFA al 0,1%; gradiente del 10-50% de B durante 20 min; flujo 1,0 ml/minuto; tiempo de retención 15,017 minutos detectado a 214 y
25 254 nm). b) Síntesis de 2-[2-(2-clorometil-fenilsulfanil)-etil]-[1,3]dioxolano -Compuesto 25
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Se añadió cloruro de mesilo (65 µl, 0,83 mmol) a una solución de [2-(2-[1,3]dioxolan-2-iletilsulfanil)-fenil]-metanol (40 mg, 0,17 mmol) y trietilamina (116 µl; 0,83 mmol) en THF. Después de 5 días, el precipitado se retiró por filtración, THF se evaporó a presión reducida y
5 el producto en bruto se purificó por cromatografía preparativa de fase inversa (columna Vydac 218TP1022; disolventes A = agua/TFA al 0,1% y B = CH3CN/TFA al 0,1%; gradiente del 4080% de B durante 40 min; flujo 10 ml/minuto; detección a 254 nm). Las fracciones se dejaron en el frigorífico durante una noche y a la fase de acetonitrilo se le añadió éter dietílico, se secó (Na2SO4) y se evaporó a presión reducida. Se obtuvo un rendimiento de 24,5 mg de material
10 purificado (HPLC analítica: columna Vydac 218TP54; disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = CH3CN/TFA al 0,1%; gradiente del 40-80% de B durante 20 min; flujo 1,0 ml/minuto; tiempo de retención 10,4 minutos detectado a 214 y 254 nm). Estructura verificada por RMN. c) Síntesis de 2-[2-(2-fluorometil-fenilsulfanil)-etil]-[1,3]dioxolano -Compuesto 26
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15 Se disolvieron fluoruro potásico (3,5 mg, 0,060 mmol) y kryptofix 222 (22,5 mg, 0,060 mmol) en acetonitrilo (1 ml) y se añadieron a 2-[2-(2-clorometilfenilsulfanil)-etil]-[1,3]dioxolano (7,7 mg, 0,030 mmol) en acetonitrilo (1 ml). La mezcla de reacción se calentó a 70ºC durante 30 minutos. El producto en bruto se purificó por cromatografía preparativa de fase inversa (columna Vydac 218TP1022; disolventes A = agua/TFA al 0,1% y B = CH3CN/TFA al 0,1%;
20 gradiente del 40-80% de B durante 40 min; flujo 10 ml/minuto; detección a 254 nm). Las fracciones se dejaron en el frigorífico durante una noche y a la fase de acetonitrilo se le añadió éter dietílico, se secó (Na2SO4) y se evaporó a presión reducida. (HPLC analítica: columna Vydac 218TP54; disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = CH3CN/TFA al 0,1%; gradiente del 40-80% de B durante 20 min; flujo 1,0 ml/minuto; tiempo de retención 9,200 minutos detectado
25 a 214 y 254 nm). Estructura verificada por RMN. Ejemplo 12 Síntesis de 4-fluorometilbenzaldehído -Compuesto 29
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a) Síntesis de metanosulfonato de (4-formilfenil)metilo Compuesto 28
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Se añadió cloruro de mesilo (12,8 µl, 0,16 mmol) a una solución de dimetilacetato de 4
5 (hidroximetil)benzaldehído (30 mg, 0,16 mmol) y trietilamina (22,9 µl, 0,16 mmol) en THF. Después de 1 hora, se añadieron otro equivalente de cloruro de mesilo y trietilamina. El precipitado se retiró por filtración después de 1 hora y el THF se evaporó a presión reducida. El producto en bruto se purificó usando una columna corta de sílice y DCM, proporcionando 42,0 mg (98%) de producto puro. (HPLC analítica: columna Phenomenex Luna 00B-4251-E0,
10 disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = CH3CN/TFA al 0,1%; gradiente del 5-50% de B durante 10 min; flujo 2,0 ml/minuto; tiempo de retención 4,900 minutos detectado a 214 y 254 nm). Estructura verificada por RMN. b) Síntesis de 4-fluorometilbenzaldehído -Compuesto 29
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15 Se disolvieron KF (2,7 mg, 0,047 mmol) y kryptofix 222 (17,6 mg, 0,047 mmol) en acetonitrilo (1 ml) y se añadieron a metanosulfonato de (4-formilfenil)metilo (10 mg, 0,047 mmol) en acetonitrilo (1 ml). La mezcla de reacción se calentó a 65ºC durante 10 minutos. El producto en bruto se purificó usando una columna corta de sílice y éter dietílico. (HPLC analítica: columna Phenomenex Luna 00B-4251-E0, disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B =
20 CH3CN/TFA al 0,1%; gradiente del 5-50% de B durante 10 min; flujo 2,0 ml/minuto; tiempo de retención 5,1 minutos detectado a 214 y 254 nm). Ejemplo 13 Síntesis de análogo de oxitocina funcionalizado (disulfuro Cys1-6); [BocNHOCH2COAhx-Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2] Compuesto 30
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Ahx-Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2 protegido: Unión de la secuencia de aminoácidos usando síntesis completamente automatizada (ABI 433A). La resina se puso en un aparato burbujeador manual y se escindió con TFA con agua al 5% y TIS al 5% presentes.
5 El TFA se evaporó a presión reducida después de una hora. El precipitado resultante se lavó con éter y se secó al aire. Al precipitado se le añadieron TFA y DMSO (95:5). Después de 2 horas, el TFA se evaporó a presión reducida y al residuo se le añadió éter dietílico. El precipitado resultante se lavó con éter y se secó al aire. El péptido (70,6 mg, 0,063 mmol) en DMF (5 ml) se añadió a una solución de ácido Boc-aminoxiacético (23,9 mg, 0,13 mmol),
10 PyAOP (65,2 mg, 0,13 mmol) y NMM (27,5 µl, 0,25 mmol) en DMF (5 ml). La DMF se evaporó a presión reducida después de 12 horas. El producto en bruto se purificó por cromatografía preparativa de fase inversa (columna Vydac 218TP1022; disolventes A = agua/TFA al 0,1% y B = CH3CN/TFA al 0,1%; gradiente del 10-60% de B durante 40 min; flujo 10 ml/minuto; detección a 230 nm). (HPLC analítica: columna Vydac 218TP54; disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B =
15 CH3CN/TFA al 0,1%; gradiente del 10-50% de B durante 20 min; flujo 1,0 ml/minuto; tiempo de retención 16,5 minutos detectado a 214 y 254 nm). Se realizó una caracterización adicional usando espectrometría de masas, dando un valor m/z de 1293,0 [MH+]. Ejemplo 14 Conjugación de 4-fluorometil-benzaldehído con oxitocina (disulfuro Cys1-6);
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El grupo protector de Boc se escindió de oxitocina (disulfuro Cys 1-6); [Boc-NHOCH2CO
Ahx-Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2] (3,0 mg, 0,0023 mmol) usando TFA y agua al 5%. El TFA se evaporó a presión reducida después de 30 minutos, se añadió 4-fluorometilbenzaldehído (1,5 mg, 0,011 mmol) disuelto en agua (0,5 ml) y el pH se ajustó a 4 con amoniaco diluido. La mezcla se calentó a 70ºC durante 50 minutos. (HPLC analítica: columna
5 Phenomenex Luna 00B-4251-E0, disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = CH3CN/TFA al 0,1%; gradiente del 10-60% de B durante 10 min; flujo 2,0 ml/minuto; tiempo de retención 6,3 minutos detectado a 214 y 254 nm).. La caracterización adicional se realizó usando espectrometría de masas, dando un valor m/z de 1313,1 [MH+]. Ejemplo 14 Conjugación de 3-(2-fluorometil-fenilsulfanil)-propionaldehído con oxitocina
10 (disulfuro Cys1-6); [NH2OCH2CO-Ahx-Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2] -Compuesto
imagen6
El grupo Boc se retiró del resto peptídico como se ha descrito en el ejemplo 6 antes de la conjugación. El grupo protector del 3-(2-fluorometil-fenilsulfanil)-propionaldehído (0,81 mg, 15 0,0034 mmol) se retiró usando HCl 1 N en 0,1 ml de acetonitrilo (1:1). La mezcla se dejó durante 30 minutos antes de que se añadiera al péptido (2,0 mg, 0,0017 mmol) en 0,4 ml de agua y el pH se ajustó a 4 con amoniaco diluido. La mezcla se calentó a 70ºC durante 50 minutos. (HPLC analítica: columna Vydac 218TP54, disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = CH3CN/TFA al 0,1%; gradiente del 10-50% de B durante 20 min; flujo 1,0 ml/minuto; tiempo de
20 retención 19,8 minutos detectado a 214 y 254 nm). Se realizó una caracterización adicional usando espectrometría de masas, dando un valor m/z de 1373,5 [MH+]. Ejemplo 15 Conjugación del Compuesto 7 con oxitocina (disulfuro Cys1-6);[NH2OCH2CO-AhxCys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2] -Compuesto 33
imagen1
El grupo protector de Boc se escindió de oxitocina (disulfuro Cys1-6); [Boc-NHOCH2COAhx-Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2] (2,5 mg, 0,0019 mmol) usando TFA y agua al 5%. El TFA se evaporó a presión reducida después de 30 min. El grupo protector del
5 compuesto 7 (1,0 mg, 0,0041 mmol) se retiró usando 0,5 ml de HCl 1 N en acetonitrilo (1:1). La mezcla se dejó durante 30 minutos antes de que se añadiera al péptido y el pH se ajustó a 4 con amoniaco diluido. La mezcla se calentó a 70ºC durante 15 minutos. (HPLC analítica: columna Vydac 218TP54, disolventes: A = agua/TFA al 0,1% y B = CH3CN/TFA al 0,1%; gradiente del 10-50% de B durante 20 min; flujo 1,0 ml/minuto; tiempos de retención 15,1 y
10 15,4 minutos detectados a 214 y 254 nm). Se realizó una caracterización adicional usando espectrometría de masas, dando un valor m/z de 1413,5 [MH+]. La invención descrita y reivindicada en el presente documento no tiene su alcance limitado por las realizaciones específicas desveladas en el presente documento, ya que estas realizaciones sólo pretenden servir como ilustración de diversos aspectos de la invención. Se
15 pretende que cualquier realización equivalente esté dentro del alcance de la presente invención. De hecho, diversas modificaciones de la invención, además de las mostradas y descritas en el presente documento, serán obvias para los expertos en la materia a partir de la descripción anterior. Dichas modificaciones también pretenden estar dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas.
20

Claims (24)







  1. 37
    1. Un procedimiento para radiofluoración que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (I) con un compuesto de fórmula (II):
    imagen1
    18F-(Engarce)-R2 (II)
    o,
    un compuesto de fórmula (III) con un compuesto de fórmula (IV)
    imagen1
    18F-(Engarce)-R4 (IV) en las que R1 es un resto aldehído, un resto cetona, un aldehído protegido tal como un acetal, una cetona protegida, tal como un cetal, o una funcionalidad, tal como diol o un resto serina N-terminal, que puede oxidarse de forma rápida y eficaz para dar un aldehído o cetona usando un agente de oxidación; R2 es un grupo seleccionado entre amina primaria, amina secundaria, hidroxilamina, hidrazina, hidrazida, aminoxi, fenilhidrazina, semicarbazida y tiosemicarbazida, y preferentemente es un grupo hidrazina, hidrazida o aminoxi; R3 es un grupo seleccionado entre amina primaria, amina secundaria, hidroxilamina, hidrazina, hidrazida, aminoxi, fenilhidrazina, semicarbazida o tiosemicarbazida, y preferentemente es un grupo hidrazina, hidrazida o aminoxi; R4 es un resto aldehído, un resto cetona, un aldehído protegido tal como un acetal, una cetona protegida, tal como un cetal, o una funcionalidad, tal como diol o un resto serina N-terminal, que puede oxidarse de forma rápida y eficaz para dar un aldehído o cetona usando un agente de oxidación; para dar un conjugado de fórmula (V) o (VI), respectivamente: en las que X es -CO-NH-, -NH-, -O-, -NHCONH-o NHCSNH-, y es preferentemente -CO-NH-, NH-o -O-; Y es H o sustituyentes alquilo o arilo; y el grupo de Engarce en los compuestos de fórmulas (II), (IV), (V) y (VI) se selecciona entre en las que:
    imagen1
    imagen1
    imagen1
    n es un número entero de 0 a 20;
    m es un número entero de 1 a 10;
    5 p es el número entero 0 ó 1;
    Z es O oS.
  2. 2. Un procedimiento para radiofluoración que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (Ia) con un compuesto de fórmula (IIa):
    10
    imagen1
    18F-(Engarce)-O-NH2 (IIa) o, un compuesto de fórmula (IIIa) con un compuesto de fórmula (IVa)
    imagen1
    15 18F-(Engarce)-R4 (IVa) en las que R1 y R4 son como se han definido en la reivindicación 1; cada uno de los grupos de Engarce en los compuestos de fórmulas (IIa) y (IVa) es un grupo hidrocarbilo C1-60, adecuadamente un grupo hidrocarbilo C1-30, que incluye opcionalmente de 1 a 30 heteroátomos, adecuadamente de 1 a 10 heteroátomos, tales como oxígeno o nitrógeno;
    20 para dar un conjugado de fórmula (Va) o (VIa), respectivamente: en las que Y es H o sustituyentes alquilo o arilo; y el grupo de Engarce es como se ha definido para el compuesto de fórmula (IIa) o (IVa).
    imagen1
    5 3. Un procedimiento para radiofluoración de acuerdo con la reivindicación 1 que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (VII):
    imagen1
    con un compuesto de fórmula (VIII), (IX), (X) o (XI): 18F-(CH2CH2O)n-(CH2)m-CHO (VIII)
    imagen2
    en las que:
    n es un número entero de 0 a 20;
    m es un número entero de 1 a 10; 15 X es -CO-NH-, -NH-o -O-y es preferentemente -O
    Y es H o sustituyentes alquilo o arilo
    para dar a compuestos de fórmula (XII-XV), respectivamente: en las que X es como se ha definido para el compuesto de fórmula (VII), m y n son como se han definido para los compuestos de fórmula (VIII a XI).
    imagen1
    5 4. Un procedimiento para radiofluoración de acuerdo con la reivindicación 1 que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (XVI):
    imagen1
    en la que Y es H, alquilo o un sustituyente arilo
    preferentemente con compuestos de fórmula (XVII), (XVIII),(XIX) o (XX): 10 18F-(CH2-CH2-O)n-(CH2)m-W-NH2 (XVII)
    imagen1
    en la que m es un número entero de 1 a 10, n es un número entero de 0 a 20, y W = -CONH-, -NH-o -O-para dar un compuesto de fórmula (XXI), (XXII), (XXIII) o (XXIV), respectivamente:
    imagen1
    5 en la que W = -CONH-, -NH-o -O-, m y n son como se han definido para los compuestos de fórmula (XIII a XI) e Y es H o un resto alquilo o arilo.
  3. 5. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 en el que 10 el vector es el péptido Arg-Gly-Asp o un análogo del mismo.
  4. 6.
    Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 5 en le que le vector comprende el fragmento
  5. 7.
    Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 5 ó 6 en el que el vector es de fórmula (A):
    imagen1
    imagen1
    en laqueX7 es-NH2 o
    imagen3
  6. 8. Un compuesto de fórmula (II) como se ha definido en la reivindicación 1 o un compuesto de fórmula (IIa) como se ha definido en la reivindicación 2, con la condición de que:
    10 en los compuestos de fórmula (II), si el engarce es fenilo, entonces R2 sea aminoxi (adecuadamente -ONH2).
  7. 9. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 8 de fórmula (XVII), (XVIII), (XIX), o
    (XX): 15 18F-(CH2-CH2-O)n-(CH2)m-W-NH2 (XVII) en las que m es un número entero de 1 a 10, n es un número entero de 1 a 20, y W = -CONH-, -NH-o -O-.
    imagen1
    imagen1
    5 10. Un compuesto de fórmula (IV) como se ha definido en la reivindicación 1 o un compuesto de fórmula (IVa) como se ha definido en la reivindicación 2; con las condiciones de que:
    (i) en los compuestos de fórmula (IV), el engarce no sea fenilo
    (ii) en los compuestos de fórmula (IVa), el engarce no sea fenilo o fenilo sustituido con 10 halo, hidroxi o benciloxi.
  8. 11. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 10 de fórmula (VIII), (IX), (X) o (XI): 18F-(CH2CH2O)n-(CH2)m-CHO (VIII)
    imagen1
    15 en las que:
    n es un número entero de 0 a 20;
    m es un número entero de 1 a 10;
    X es -CO-NH-, -NH-o -O-y es preferentemente -O
    Y es H o sustituyentes alquilo o arilo con la condición de que en los compuestos de fórmula (X), n no sea 0.
  9. 12. Un compuesto de fórmula (I) o (III) como se ha definido en la reivindicación 1 o de 5 fórmula (Ia) o (IIIa) como se ha definido en la reivindicación 2.
  10. 13. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 12 en el que el vector es el péptido Arg-Gly-Asp o un análogo del mismo.
    10 14. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 12 ó 13 en el que el vector es de fórmula (A):
    imagen1
    en laqueX7 es-NH2 o
    imagen1
    15 en la que a es un número entero de 1 a 10, preferentemente a es 1.
  11. 15.
    Un compuesto de fórmulas (V) o (VI) como se ha definido en la reivindicación 1.
  12. 16.
    Un compuesto de fórmula (Va) o (VIa) como se ha definido en la reivindicación 2.
  13. 17.
    Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 15 de fórmula (XII), (XIII), (XIV), (XV) como se ha definido en la reivindicación 3.
    20
  14. 18. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 15 de fórmula (XXI), (XXII), (XXIII), 25 (XXIV) como se ha definido en la reivindicación 4.
  15. 19.
    Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 15 a 18 en el que el vector es el péptido Arg-Gly-Asp o un análogo del mismo.
  16. 20.
    Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 19 en el que el vector comprende el fragmento:
  17. 21.
    Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 19 en el que el vector es de fórmula (A):
    imagen1
    imagen1
    10 en laqueX7 es-NH2 o
    imagen1
    en la que a es un número entero de 1 a 10, preferentemente a es 1.
  18. 22.
    El compuesto de acuerdo con la reivindicación 19 de fórmula:
  19. 23.
    Una composición radiofarmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 15 a 22; junto con uno o más adyuvantes, excipientes o diluyentes farmacéuticamente aceptables.
  20. 24.
    Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 15 a 22 para el uso médico.
  21. 25.
    Uso de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 15 a 22 para la fabricación de un producto radiofarmacéutico para su uso en un procedimiento de formación de imágenes in vivo.
  22. 26.
    Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 24 para su uso en un procedimiento de formación de imágenes in vivo.
  23. 27.
    Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 26 en el que le procedimiento de formación de imágenes in vivo comprende administrar un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 15 a 22 a dicho cuerpo y generar una imagen de al menos una parte de dicho cuerpo al que se ha distribuido dicho compuesto usando PET.
  24. 28.
    Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 24 para su uso en un procedimiento de monitorización del efecto de tratamiento de un cuerpo humano o animal con un fármaco para combatir una afección asociada con el cáncer, preferentemente angiogénesis, comprendiendo dicho procedimiento administrar a dicho cuerpo un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 22 y detectar la asimilación de dicho conjugado por receptores celulares, efectuándose dicha administración y detección, opcionalmente, pero preferentemente, antes, durante y después del tratamiento con dicho fármaco.
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Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ530156A (en) * 2001-07-10 2007-04-27 Ge Healthcare As Peptide-based compounds for targeting integrin receptors for use as diagnostic imaging agents
GB0420365D0 (en) * 2004-09-14 2004-10-13 Hammersmith Imanet Ltd Radiolabelled insulin
GB0420344D0 (en) 2004-09-14 2004-10-13 Amersham Plc Diagnostic compounds
WO2007027385A2 (en) * 2005-08-31 2007-03-08 Immunomedics, Inc. F-18 peptides for pre targeted positron emission tomography imaging
WO2007148089A2 (en) * 2006-06-21 2007-12-27 Hammersmith Imanet Limited Radiolabelling methods
EP3056509A1 (en) 2006-09-08 2016-08-17 Piramal Imaging SA Bombesin analogues for use in diagnosis
AU2007304508A1 (en) * 2006-10-02 2008-04-10 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Silicon derivatives for pet imaging
US7902332B2 (en) 2006-11-30 2011-03-08 General Electric Company Fluorine-labeled compounds
ATE471724T1 (de) * 2006-12-11 2010-07-15 Ge Healthcare As Radioaktiv markierte verbindungen auf peptidbasis und ihre verwendung
WO2008072976A2 (en) * 2006-12-13 2008-06-19 Ge Healthcare As Synthesis of a radiofluorinated peptide using microwave activation technology
WO2008075966A2 (en) * 2006-12-18 2008-06-26 Ge Healthcare As Synthesis of a radiofluorinated peptide using photolabile protecting groups
US8138191B2 (en) 2007-01-11 2012-03-20 Critical Outcome Technologies Inc. Inhibitor compounds and cancer treatment methods
JP4989241B2 (ja) * 2007-01-29 2012-08-01 静岡県公立大学法人 ［１８ｆ］標識化合物及びその製造方法、並びに［１８ｆ］標識リポソーム及び［１８ｆ］標識リポソーム製剤の製造方法
EA200901142A1 (ru) * 2007-03-01 2010-04-30 Байер Шеринг Фарма Акциенгезельшафт 18f фторбензоильные меченые биологически активные соединения в качестве диагностических визуализирующих средств, а также бензотриазол-1-илоксибензоильные, 2,5-(диоксопирролидин-1-илокси)бензоильные и триметиламмониобензоильные предшественники
WO2009079797A1 (en) 2007-12-26 2009-07-02 Critical Outcome Technologies, Inc. Compounds and method for treatment of cancer
US8415510B2 (en) * 2008-02-28 2013-04-09 Ge Healthcare Limited Synthesis of a PEG-6 moiety from commercial low-cost chemicals
GB0819293D0 (en) * 2008-10-21 2008-11-26 Hammersmith Imanet Ltd Radiofluorination
GB0819280D0 (en) * 2008-10-21 2008-11-26 Gen Electric Imgaing and radiotherapy methods
US20120165650A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 General Electric Company Her2 binders
GB0901483D0 (en) * 2009-01-29 2009-03-11 Ge Healthcare Ltd Radioiodination method
GB0905438D0 (en) 2009-03-30 2009-05-13 Ge Healthcare Ltd Radiolabelling reagents and methods
GB0905515D0 (en) * 2009-03-31 2009-05-13 Ge Healthcare Ltd Radiolabelling methods
GB0922014D0 (en) 2009-12-17 2010-02-03 Ge Healthcare Ltd Novel integrin binders
US20120229804A1 (en) 2009-12-21 2012-09-13 Medi-Physics, Inc. Borosilicate glassware and silica based qma's in 18f nucleophilic substitution: influence of aluminum, boron and silicon on the reactivity of the 18f- ion
US20120251449A1 (en) * 2009-12-22 2012-10-04 Vijaya Raj Kuniyil Kulangara Aldh: a compound for cancer stem cell imaging
CA2999435A1 (en) 2010-04-01 2011-10-06 Critical Outcome Technologies Inc. Compounds and method for treatment of hiv
GB201013808D0 (en) * 2010-08-18 2010-09-29 Ge Healthcare Ltd Peptide radiotracer compositions
RU2013122649A (ru) * 2010-12-01 2015-01-10 ДжиИ ХЕЛТКЕР ЛИМИТЕД Способ радиоактивного коньюгирования
GB201020314D0 (en) * 2010-12-01 2011-01-12 Ge Healthcare Ltd Apoptosis pet imaging agents
CA2820387A1 (en) 2010-12-09 2012-06-14 Ge Healthcare Limited Radiotracer compositions
CN103370084B (zh) 2010-12-21 2016-11-09 通用电气健康护理有限公司 苯胺在肟连接的放射稳定化中的应用
EP2661284A1 (en) 2010-12-22 2013-11-13 GE Healthcare UK Limited Her2 binding peptides labelled with a 18f - containing organosilicon compound
CA3159948A1 (en) 2010-12-22 2012-07-19 General Electric Company Radiolabled her2 binding peptides
WO2013048832A1 (en) 2011-09-29 2013-04-04 Ge Healthcare Limited 18 f - labelled 6 - ( 2 - fluoroethoxy) - 2 - naphthaldehyde for detecting cancer stem cells
WO2013048811A1 (en) 2011-09-30 2013-04-04 Ge Healthcare Limited Imaging and radiotherapy methods for tumour stem cells
GB201205703D0 (en) 2012-03-30 2012-05-16 Ge Healthcare Ltd Synthon composition
GB201221266D0 (en) 2012-11-27 2013-01-09 Ge Healthcare Ltd Aldehyde compositions
GB201314936D0 (en) 2013-08-21 2013-10-02 Ge Healthcare Ltd Radiolabelling method
GB201322456D0 (en) 2013-12-18 2014-02-05 Ge Healthcare Ltd Radiotracer compositions and methods
WO2016036794A1 (en) 2014-09-03 2016-03-10 Immunogen, Inc. Conjugates comprising cell-binding agents and cytotoxic agents
KR102458116B1 (ko) 2014-12-04 2022-10-24 지이 헬쓰케어 리미티드 방사성 약제로부터의 아세트알데히드의 제거 방법
WO2020205544A1 (en) * 2019-03-29 2020-10-08 Cary Douglas D Use of ketone bodies medical imaging and diagnostics

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2302360C (en) * 1997-09-03 2005-11-15 Immunomedics, Inc. Fluorination of proteins and peptides for f-18 positron emission tomography
GB0206750D0 (en) * 2002-03-22 2002-05-01 Amersham Plc Radiofluorination methods

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Publication number Publication date
DE602004029237D1 (de) 2010-11-04
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