ES2347166T3 - Amidas de acido carboxilico de tienopirrol sustituidas, amidas de acido carboxilico de pirrolotiazol y analogos relacionados, como inhibidores de la caseina quinasa i epsilon. - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II): **(Ver fórmula)** en la que X es S o S(O)n; R1 es H o alquilo C1-C6; R2 es NR5R6; R3 es arilo o heterociclo; R4 es H, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, aril-(alquilo C1-C6), heterociclo-(alquilo C1-C6), alcoxi C1-C6, aril-(alcoxi C1-C6), heterociclo-(alcoxi C1-C6), CF3, halógeno, SH, alquiltio C1-6, aril-(alquiltio C1-C6), heterociclo-(alquiltio C1-C6), NO2, NH2, NR5R6, aril-(alquilamino C1-C6), heterociclo-(alquilamino C1-C6), o XR3, en el que X y R3 son como se han definido anteriormente; R5 es H o alquilo C1-C6; R6 es H o alquilo C1-C6; L es N o CR7 en el que R7 es H o alquilo C1-C6; M es S, O o NR8 en el que R8 es H, alquilo C1-C6, aril-(alquilo C1-C6), heterociclo-(alquilo C1-C6) o acilo; n es 1 ó 2; donde arilo significa cualquier anillo de carbono monocíclico, bicíclico o tricíclico, de hasta siete miembros en cada anillo, en el que al menos un anillo es aromático y está sin sustituir o sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados entre el grupo que consiste en metilendioxi, hidroxi, alcoxi C1-C6, halógeno, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO2, -NH2, -NH(alquilo C1-C6), -N(alquilo C1-C6)2, -NH-acilo y -N(alquil C1-C6)acilo. donde acilo se refiere a un grupo H-(C=O)-, alquil C1-C6-(C=O)-, aril-(C=O)-, aril(alquil C1-C6)-(C=O)-, heteroci-clo-(C=O)- o heterociclo(alquil C1-C6)-(C=O)-; donde heterociclo significa un anillo monocíclico estable de 5 a 7 miembros o bicíclico estable de 8 a 11 miembros que está saturado o insaturado, y que consiste en átomos de carbono y de uno a tres heteroátomos seleccionados entre el grupo que consiste en N, O y S, y donde los heteroátomos nitrógeno y azufre pueden estar opcionalmente oxidados, y el heteroátomo nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado, e incluyendo cualquier grupo bicíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos definidos anteriormente está condensado con un anillo de benceno, estando el heterociclo sin sustituir o sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados entre el grupo que consiste en alcoxi C1-C6, hidroxi, halógeno, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO2, -NH2,-NH(alquilo C1-C6), -N(alquilo C1-C6)2, -NH-acilo y -N(alquil C1-C6)acilo; o un estereoisómero, enantiómero, racemato o tautómero del mismo; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

Amidas de ácido carboxílico de tienopirrol sustituidas, amidas de ácido carboxílico de pirrolotiazol y análogos relacionados, como inhibidores de la caseína quinasa I\varepsilon.

Antecedentes de la invención 1. Campo de la invención

Esta invención se refiere a una serie de amidas del ácido 4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico, amidas del ácido 4H-pirrolo[2,3-d]tiazol-5-carboxílico, amidas del ácido 6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico, amidas del ácido 4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico y análogos relacionados. Más específicamente, la invención se refiere a amidas del ácido 4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico, amidas del ácido 4H-pirrolo[2,3-d]tiazol-5-carboxílico, amidas del ácido 6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico, amidas del ácido 4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico 3-ariltio-sustituidas y 3-heterociclotio-sustituidas y análogos relacionados y a métodos para elaborar los compuestos de la invención. Los compuestos de la invención son inhibidores de la fosforilación por la caseína quinasa humana I\varepsilon de la proteína del reloj humano Period (hPER) y, por lo tanto, son útiles como agentes farmacéuticos, especialmente en el tratamiento y/o prevención de enfermedades y trastornos asociados con el sistema nervioso central.

2. Descripción de la técnica

Muchos organismos, que varían desde células sencillas hasta el ser humano, presentan variaciones rítmicas en el comportamiento. Cuando el ritmo persiste en condiciones constantes y tiene un periodo de aproximadamente un día, dependiendo un poco de la temperatura, el ritmo se denomina "circadiano" (Konopka, R.J. y Benzer, S. (1971) Proc. Nat. Acad. Sci. USA 68, 2112-2116).

Los ritmos circadianos están generados por marcapasos endógenos biológicos (relojes circadianos) y están presentes en la mayoría de los organismos vivientes, incluyendo seres humanos, hongos, insectos y bacterias (Dunlap, J. C. (1999) Cell 96, 271-290; Hastings, J.W. et al. Circadian Rhythms, The Physiology of Biological Timing. En: Prosser, C.L. ed. Neural and Integrative Animal Physiology, New York: Wiley-Liss (1991) 435-546; Allada, R. et al. (1998) Cell 93, 791-804; Kondo et al. (1994) Science 266, 1233-1236; Crosthwaite, S.K. et al. (1997) Science 276, 763-769; Shearman, L.P. et al. (1997) Neuron, 19, 1261-1269). Los ritmos circadianos son auto-sustentadores y constantes incluso en condiciones de oscuridad total, pero pueden sincronizarse (embarcarse) en un nuevo régimen de día/noche por señales ambientales tales como ciclos de luz y de temperatura (Pittendrigh, C.S. (1993) Annu. Rev. Physiol., 55, 16-54; Takahashi, J.S. (1995) Annu. Rev. Neurosci. 18, 531-553; Albrecht, U. et al. (1997) Cell, 91, 1055-1064). Los relojes circadianos son esenciales para mantener los ritmos biológicos y regulan una diversidad de comportamientos circadianos tales como fluctuaciones diarias en el comportamiento, en la ingesta de alimentos y en el ciclo de sueño/vigilia, así como cambios fisiológicos tales como la secreción de hormonas y fluctuaciones en la temperatura corporal (Hastings, M. (1997) Trends Neurosci. 20, 459-464; Reppert, S.M. y Weaver, D.R. (1997) Cell 89, 487-490).

Estudios genéticos y moleculares de la mosca de la fruta Drosophila melanogaster condujeron al esclarecimiento de algunos de los genes implicados en la ritmicidad circadiana. Estos estudios condujeron al reconocimiento de una ruta que está muy auto-regulada y compuesta por un bucle de retroalimentación negativa basada en la transcripción/traducción (Dunlap, J.C. (1999) Cell, 96, 271-290; Dunlap, J.C. (1996) Annu. Rev. Genet. 30, 579-601; Hall, J. C. (1996) Neuron, 17, 799-802). Los elementos nucleares del oscilador circadiano en Drosophila consisten en dos proteínas estimuladoras dCLOCK/dBMAL (CYCLE) y dos proteínas inhibidoras dPERIOD (dPER) y dTIMELESS (dTIM). dCLOCK y dBMAL heterodimerizan formando el factor de transcripción dCLOCK/dBMAL que promueve la expresión de dos genes que se denominan Drosophila Period (dper) y Drosophila Timeless (dtim). Finalmente, se transcriben los ARNm de estos genes para producir las proteínas dPER y dTIM, respectivamente. Durante varias horas, los productos proteicos dPER y dTIM se sintetizan y fosforilan en el citoplasma, alcanzan un nivel crítico y forman heterodímeros que se translocan al núcleo. Una vez en el núcleo, dPER y dTIM funcionan como reguladores negativos de su propia transcripción, disminuye la acumulación de dPER y dTIM y comienza de nuevo la activación de dper y dtim por dCLOCK/dBMAL (Zylka, M.J. et al. (1998) Neuron 20, 1103-1110; Lowrey, P.L. et al. (2000) 288, 483-491). Se ha demostrado que el gen dper es un elemento necesario para controlar los ritmos circadianos en el comportamiento de eclosión de adultos (el surgimiento de la mosca adulta desde la pupa) y la actividad locomotora (Konopka, R.J., & Benzer, S. (1971) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 68, 2112-2116). Algunas mutaciones de sentido equívoco (missense) del gen per pueden acortar (per^{S}) o alargar (per^{L}) el periodo de ritmos circadianos, mientras que las mutaciones sin sentido (nonsense) (perº) producen una arritmicidad en sus comportamientos (Hall, J.C. (1995) Trends Neurosci. 18, 230-240).

En mamíferos, los núcleos supraquiasmáticos (SCN) del hipotálamo anterior son el sitio de un reloj biológico principal (como revisión, véase Panda et al, (2002) Nature 417, 329-335; Reppert, S.M. y Weaver, D.R. (1997) Cell, 89, 487-490). El reloj de los SCN se embarca en el día de 24 horas por el ciclo diario de luz-oscuridad, actuando la luz a través de rutas de retina a SCN tanto directas como indirectas (Klein, D.C. et al. (1991) Suprachiasmatic Nuclei: The Mind's Clock, Oxford Univeristy Press, New York). En los SCN de roedores, se han identificado y clonado tres genes Per, y se denominan Per1 de ratón (mPer1), mPer2 y mPer3. Las proteínas producto de estos genes de mamífero (mPER1, mPER2, mPER3) comparten varias regiones de homología entre ellas y cada gen Per de mamífero codifica una proteína con un dominio de dimerización de proteínas denominado PAS (PAS es un acrónimo de las tres primeras proteínas, PER, ARNT y SIM, encontradas que comparten este dominio de dimerización importante desde el punto de vista funcional) que es muy homólogo con el dominio PAS del PER de insectos. Todos los niveles de proteína y de ARN mensajero (ARNm) de Per oscilan durante el día circadiano y están implicados íntimamente en la regulación tanto positiva como negativa del reloj biológico, pero sólo mPER1 y mPER2 oscilan en respuesta a la luz (Zylka, M.J. et al. (1998) Neuron 20, 1103-1110,; Albrecht, U. et al., (1997) Cell 91, 1055-1064; Shearman, L.P. et al. (1997) Neuron 19, 1261-1269). Se ha clonado el homólogo en mamíferos del gen Drosophila tim y se ha denominado mTim. Sin embargo, no hubo indicios de interacciones mPER-mTIM análogas a las observadas en Drosophila, y se sugirió que las interacciones PER-PER pueden haber reemplazado la función de dímeros PER-TIM en las tareas moleculares del reloj circadiano de mamíferos (Zylka, M.J. et al., (1998) Neuron 21, 1115-1122). Otra posibilidad es que los ritmos en PER1 y PER2 forman bucles de retroalimentación negativa que regulan la actividad transcripcional de la proteína Clock (a través de sus dominios PAS) que, a su vez, dirige la expresión de uno o los dos genes Per (Shearman, L.P. et al. (1997) Neuron 19, 1261-1269).

La comprensión de las funciones de los tres genes mPer en el reloj de los mamíferos ha sido el objeto de muchas investigaciones. La homología estructural de las proteínas mPER con dPER condujo a la expectativa de que las proteínas mPER funcionaran como elementos negativos en el bucle de retroalimentación de mamíferos. Se cree que la PER1 está involucrada en la regulación negativa de su propia transcripción en el bucle de retroalimentación, pero evidencias recientes señalan que está involucrada en la ruta de entrada (Hastings, M. H. et al. (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 26, 15211-15216). PER2 es la proteína mejor caracterizada, y los ratones mutantes en mPER2 (mPer2^{Brdm1}), que carecen de 87 restos en la parte carboxilo del dominio de dimerización PAS, tienen un ritmo circadiano acortado en situaciones normales de luz-oscuridad, pero muestran arritmicidad en la oscuridad completa. La mutación también disminuye la expresión oscilante tanto de mPer1 como de mPer2 en los SCN, indicando que mPer2 puede regular mPer1 en vivo (Zheng, B. et al. (1999) Nature 400, 169-173). Se ha demostrado que PER2 tiene una función doble en la regulación de los "engranajes" del reloj central (Shearman, L.P. et al. (2000) Science 288, 1013-1018). En ese estudio, se demostró que PER2 se unía a proteínas del criptocromo (CRY) y se translocaba al núcleo, donde CRY regulaba negativamente la transcripción dirigida por los complejos transcripcionales positivos CLOCK y BMAL1. Tras la entrada en el núcleo, PER2 iniciaba el brazo positivo del reloj regulando positivamente la transcripción de BMAL1 por un mecanismo aún no identificado. La función de la PER3 se comprende mal; sin embargo, en ratones en los que se ha inactivado mPer3, se observa un ligero efecto sobre la actividad circadiana y, por lo tanto, se ha sugerido que PER3 está implicada en las rutas de salida de control circadiano (Shearman, L.P. et al. (2000) Mol. Cell. Biol. 17, 6269-6275). Se ha informado que las proteínas mPER interaccionan entre ellas y que la mPER3 puede servir de portador de la mPER1 y la mPER2 para llevarlas dentro del núcleo, lo cual es crítico para la generación de las señales circadianas en el SCN (Kume, K. et al. (1999) Cell 98, 193-205; Takano, A. et al. (2000), FEBS Letters, 477, 106-112).

Se ha postulado que la fosforilación de los componentes del reloj circadiano regula la duración del ciclo. La primera evidencia genética de que una proteína quinasa específica regula el ritmo circadiano de Drosophila fue el descubrimiento del nuevo gen doubletime (dbt), que codifica una proteína serina/treonina quinasa (Price J.L. et al. (1998) Cell 94, 83-95; Kloss B. et al. (1998) Cell 94, 97-107). Algunas mutaciones de sentido equívoco en el dbt producen una alteración del ritmo circadiano. Los alelos nulos de dbt ocasionan la hipofosforilación de dPER y arritmia.

Las quinasas de mamífero más relacionadas con DBT son la caseína quinasa I\varepsilon (CKI\varepsilon) y la caseína quinasa I\delta (CKI\delta). Se ha demostrado que ambas quinasas se unen a mPER1, y varios estudios han demostrado que la CKI\varepsilon fosforila tanto la PER1 de ratón como la humana (Price J. L. et al. (1998) Cell 94, 83-95; Kloss B. et al. (1998) Cell 94, 97-107). En un estudio con células 293T de riñón embrionario humano co-transfectadas con hCKI\varepsilon de tipo salvaje, hPER1 mostró un aumento significativo de fosforilación (puesto de manifiesto por un cambio en la masa molecular). En este estudio, la hPER1 fosforilada tenía una vida media de aproximadamente doce horas, mientras que la hPER1 no fosforilada permanecía estable en la célula durante más de 24 horas, lo que sugería que la fosforilación de hPER1 conduce a una reducción de la estabilidad de la proteína (Kessler, G.A. et al. (2000) NeuroReport, 11, 951-955). Otro estudio también demostró que las consecuencias de la fosforilación de PER1 por hCKI\varepsilon incluyen tanto la retención citoplásmica como la inestabilidad de la proteína (Vielhaber, E. et al. (2000) Mol. Cell. Biol. 13, 4888-4899; Takano, A. et al. (2000) FEBS Letters 477, 106-112).

No ha habido ninguna razón bioquímica para elegir entre CKI\varepsilon o CKI\delta como un posible regulador en mamíferos hasta que Lowery et al. [(2000) Science 288, 483-491] descubrieron que en el hámster Syrian Golden, mutaciones semidominantes en CKI\varepsilon (mutación tau, Ralph, M.R. y Menaker, M. (1988) Science 241, 1225-1227) produjeron un día circadiano acortado tanto en animales heterocigotos (22 h) como en animales homocigotos (20 h). En este caso, los niveles reducidos de actividad CKI\varepsilon dieron como resultado menor fosforilación de PER con niveles presumiblemente mayores de proteína PER citoplásmica que conducían a una mayor entrada nuclear y una alteración de los ciclos circadianos. Más recientemente, se ha sugerido que CKI\delta también puede estar implicada en la regulación de la ritmicidad circadiana por medio de la modificación postraduccional de las proteínas del reloj de los mamíferos hPER1 y hPER2 [Camacho, F. et al., (2001) FEBS Letters 489(2,3), 159-165]. De esta manera, los inhibidores, incluyendo inhibidores de molécula pequeña, de la CKI\varepsilon y/o CKI\delta de mamífero o de humano proporcionan un medio nuevo para el cambio de fase o para restablecer el ritmo circadiano. Como se describe más adelante, la alteración del ritmo circadiano puede encontrar utilidad para el tratamiento de trastornos del sueño o del estado de ánimo.

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La patente de Estados Unidos 6.555.328 B1 describe métodos de selección en las células para identificar compuestos que alteran los ritmos circadianos basados en un compuesto de ensayo que altera la capacidad de la caseína quinasa 1\varepsilon humana y/o la caseína quinasa 1\delta humana para fosforilar las proteínas del reloj humano hPER1, hPER2 y hPER3. Por ejemplo, se cotransfectan células HEK293T con hCKI\varepsilon y Per1 o Per2. Para evaluar la relevancia de la inhibición de CKI\varepsilon y de los inhibidores de CKI\varepsilon en la biología circadiana, se desarrolló un ensayo celular de alto rendimiento (33rd Annual Meeting, Soc. for Neurosci., 8-12 de noviembre de 2003, Abstract números 284.1, 284.2, y 284.3) en el que podía controlarse el ritmo circadiano de una manera rutinaria. El ensayo consta de fibroblastos Rat-1 que expresan de manera estable una construcción Mper1-luc, permitiendo de esta manera la determinación de la activación rítmica del promotor de Mper1 en células vivas por medio de la estimación repetitiva de la actividad luciferasa controlando la producción de luz durante varios días. El formato de medición repetida del ensayo permite una evaluación precisa y reproducible de los efectos dependientes de la concentración de inhibidores de CKI\varepsilon sobre el ritmo circadiano y proporciona el nexo para relacionar la inhibición de CKI\varepsilon con la alteración del ritmo circadiano.

Los trastornos del sueño se han clasificado en cuatro categorías principales que incluyen trastornos del sueño primarios (disomnias y parasomnias), trastornos del sueño asociados con trastornos médicos/psiquiátricos y una categoría propuesta de trastornos del sueño que no pueden clasificarse debido a que no se dispone de suficientes datos. Se cree que los trastornos del sueño primarios se producen por anormalidades en los sistemas intrínsecos responsables de la generación de sueño-vigilia (sistema homeostático) o la temporización (sistema circadiano). Las disomnias son trastornos en el inicio o mantenimiento del sueño e incluyen insomnio primario, hipersomnia (somnolencia excesiva), narcolepsia, trastorno del sueño relacionado con la respiración, trastorno del sueño del ritmo circadiano y disomnias no especificadas de otra manera. El insomnio primario se caracteriza por la persistencia (>1 mes) en la dificultad de iniciar y mantener el sueño o de mantener un sueño reconstituyente. Las dificultades en el sueño asociadas con el insomnio primario ocasionan desasosiego o molestias significativas, incluyendo irritabilidad durante el día, pérdida de atención y concentración, fatiga y malestar, y deterioro del estado de ánimo y la motivación. Los trastornos del ritmo circadiano del sueño incluyen el síndrome de desfase horario por viaje prolongado en avión (jet lag), trastorno del sueño por trabajo en turnos, síndrome de fase de sueño adelantada y síndrome de fase de sueño retrasada (J. Wagner, M. L. Wagner y W. A. Hening, Annals of Pharmacotherapy (1998) 32, 680-691). Los individuos en un paradigma de sueño forzado demuestran una mayor vigilia, como porcentaje de tiempo de sueño, en ciertos periodos del día circadiano (Dijk y Lockley, J. Appl. Physiol. (2002) 92, 852-862). Se ha aceptado generalmente que con la edad hay un adelanto en nuestro ritmo circadiano para dormir y que a menudo produce un sueño de menor calidad (Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. (2002) 282, E297-E303). De esta manera, el sueño que sucede fuera de la fase circadiana puede sufrir en términos cualitativos y cuantitativos, como se ilustra adicionalmente por alteraciones del sueño por trabajo en turnos y de desfase horario. La alteración del reloj circadiano humano puede causar trastornos del sueño y los agentes que modulan la ritmicidad circadiana, tales como un inhibidor de CKI\varepsilon y/o CKI\delta, pueden ser útiles para el tratamiento de trastornos del sueño y particularmente de trastornos del sueño del ritmo circadiano.

Los trastornos de los estados de ánimo se dividen en trastornos depresivos ("depresión unipolar"), trastornos bipolares, y dos trastornos basados en la etiología que incluyen el trastorno del estado de ánimo debido a un estado médico general y el trastorno del estado de ánimo inducido por sustancias. Los trastornos depresivos se subclasifican como trastorno depresivo mayor, trastorno distímico y trastorno depresivo no especificado de otra manera. Los trastornos bipolares se subclasifican como trastorno bipolar I y trastorno bipolar II. Se ha observado que el "modelo estacional" de especificación puede aplicarse a trastornos depresivos mayores que son recurrentes y al modelo de episodios depresivos mayores en el trastorno bipolar I y el trastorno bipolar II. Anergia importante, hipersomnia, comer con exceso, ganancia de peso y un deseo vehemente de hidratos de carbono a menudo caracterizan los episodios depresivos mayores que se producen con un patrón estacional. No está claro si un patrón estacional es más probable en un trastorno depresivo mayor que es recurrente o en trastornos bipolares. Sin embargo, entre los trastornos bipolares parece que un patrón estacional es más probable en trastornos bipolares II que en trastornos bipolares I. En algunos individuos, el inicio de episodios maníacos o hipomaníacos también parece estar asociado a una estación particular. El modelo estacional de tipo invernal parece variar con la latitud, la edad y el sexo. La prevalencia aumenta con latitudes mayores, las personas más jóvenes tienen mayor riesgo de padecer episodios depresivos invernales y las mujeres constituyen de 60% a 90% de las personas con el modelo estacional. El trastorno afectivo estacional (TAE), un término utilizado generalmente en la bibliografía, es un subtipo de trastorno del estado de ánimo que en el Manual Diagnóstico y Estadístico de los Trastornos Mentales IV (DSM-IV) (American Psychiatric Association: Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, Cuarta Edición, Revisión de Texto. Washington, DC, American Psychiatric Association, 2000) se denota por la expresión "con modelo estacional" cuando describe un modelo estacional de episodios depresivos mayores en el trastorno bipolar I, trastorno bipolar II o trastorno depresivo mayor recurrente (E. M. Tam et al., Can. J. Psychiatry (1995) 40, 457-466). En DSM-IV se describen las características y diagnóstico de los trastornos depresivos, trastorno depresivo mayor, episodio depresivo mayor, trastorno bipolar I, trastorno bipolar II y los efectos estacionales.

Los pacientes que padecen trastornos depresivos mayores, incluyendo SAD que se caracteriza por episodios depresivos recurrentes típicamente en invierno, han mostrado que responden positivamente a terapia con luz (Kripke, Journal of Affective Disorders (1998) 49(2), 109-117). El éxito del tratamiento con luz brillante en pacientes con TAE y depresión mayor produjo la propuesta de varias hipótesis para explicar el mecanismo subyacente de acción del efecto terapéutico de la luz. Estas hipótesis incluían la "hipótesis del ritmo circadiano" que sugiere que el efecto antidepresivo de la luz brillante podría asociarse con un cambio de fase del marcapasos circadiano con respecto al sueño (E. M. Tam et al., Can. J. Psychiatry (1995) 40, 457-466). Confirmando la asociación entre la terapia luminosa y el ritmo circadiano, la terapia luminosa clínicamente eficaz en los trastornos depresivos mayores produce un cambio concomitante en la fase circadiana y la eficacia clínica de la terapia luminosa parece depender de la capacidad de cambio de fase de la terapia luminosa (Czeisler et al., The Journal of Physiology (2000) 526 (Parte 3), 683-694; Terman et al., Arch. Gen. Psychiatry (2001) 58, 69-75). Adicionalmente, se ha demostrado que la terapia con luz acelera y aumenta la eficacia del tratamiento farmacológico de trastornos depresivos mayores (Benedetti et al., J. Clin. Psychiatry (2003) 64, 648-653). De esta manera, sería de esperar que la inhibición de la caseína quinasa I\varepsilon y/o la caseína quinasa I\delta produjera un cambio de fase circadiano y tal inhibición representa una posible monoterapia o terapia combinada clínicamente eficaz para trastornos del estado de ánimo.

Se debe señalar que la perturbación del sueño es un síntoma de criterio para muchos trastornos psiquiátricos (W. V. McCall, J. Clin. Psychiatry (2001) 62 (supl. 10), 27-32). Las alteraciones del sueño son una característica común de trastornos depresivos y el insomnio es un alteración del sueño que se presenta con frecuencia en la depresión, apareciendo en más de 90% de los pacientes deprimidos (M.E. Thase, J. Clin. Psychiatry (1999) 60 (supl. 17), 28-31). La evidencia acumulada sostiene una patogénesis común para el insomnio primario y el trastorno depresivo mayor. Se ha propuesto la hipótesis de que la hiperactividad del factor de liberación de corticotropina (CRF) (debido a una predisposición genética o posiblemente estrés prematuro) y el estrés inducen un proceso que conduce a alteraciones del sueño exageradas y prolongadas, y finalmente a un insomnio primario. El ritmo circadiano en la secreción del CRF en condiciones no estresantes puede tener un papel en la expresión normal del sueño-vigilia (G. S. Richardson y T. Roth, J. Clin Psychiatry (2001) 62 (supl. 10), 39-45). De esta manera, los agentes que modulan la ritmicidad circadiana, por ejemplo, por inhibición de la caseína quinasa I\varepsilon y/o la caseína quinasa I\delta, pueden ser útiles para el tratamiento de trastornos depresivos debido a los efectos sobre la secreción del CRF.

Todas las referencias descritas anteriormente en la presente memoria se incorporan en la presente memoria como referencia en su totalidad.

Meggio, F et al. European Journal of Biochemistry, vol. 187, 1990, 89-94 describen un estudio de la especificidad y modo de acción de 17 análogos de 5,6-Dicloro-1-(\beta-D-ribofuranosil)benzoimidazol como inhibidores de caseína quinasa.

Mashhoon, N. et al. J. Biol. Chem., vol. 275, 2000, 20052-20060 describen un estudio de la capacidad de 3-[(2,4,6-trimetoxifenil)metilidenil]-indolin-2-ona (IC261) para inhibir la caseína quinasa-1.

Ning, K. et al. Nature Neuroscience, vol. 7, Mayo de 2004, 489-490 describen un estudio del papel de las caseína quinasas I\varepsilon-I\delta en la modulación de la función del receptor GABA_{A} en células de reloj de los núcleos supraquiasmáticos (SCN).

Por lo tanto, es un objetivo de esta invención proporcionar una serie de amidas del ácido 4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico, amidas del ácido 4H-pirrolo[2,3-d]tiazol-5-carboxílico, amidas del ácido 6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico, amidas del ácido 4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico sustituidas y análogos relacionados que son inhibidores de la caseína quinasa I\varepsilon. Este objetivo y otros objetivos de esta invención se hacen evidentes a partir de la discusión detallada de la invención siguiente.

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Compendio de la invención

La presente invención proporciona amidas del ácido 4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico, amidas del ácido 4H-pirrolo[2,3-d]tiazol-5-carboxílico, amidas del ácido 6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico, amidas del ácido 4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico sustituidas y análogos relacionados de fórmula (I) y de fórmula (II), y los estereoisómeros, enantiómeros, racematos y tautómeros de dichos compuestos y sus sales farmacéuticamente aceptables, como inhibidores de la actividad de la caseína quinasa I\varepsilon humana, y los compuestos de fórmula (I) y de fórmula (II) para su uso como agentes farmacéuticos en el tratamiento de enfermedades y trastornos del sistema nervioso central, tales como, por ejemplo, trastornos del ánimo, incluyendo trastorno depresivo mayor, trastorno bipolar I y II, y trastornos de sueño, incluyendo trastornos del ritmo circadiano del sueño, tales como trastorno de sueño por trabajo en turnos, síndrome de desfase horario por viaje prolongado en avión, síndrome de fase de sueño adelantada y síndrome de fase de sueño retardada. La presente invención también proporciona métodos para elaborar los compuestos de fórmula (I) y fórmula (II) de la invención.

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Por consiguiente, una amplia realización de la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II):

1

en la que

X es S o S(O)_{n};

R_{1} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

R_{2} es NR_{5}R_{6};

R_{3} es arilo o heterociclo;

R_{4} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, aril-(alquilo C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquilo C_{1}-C_{6}), alcoxi C_{1}-C_{6}, aril-(alcoxi C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alcoxi C_{1}-C_{6}), CF_{3}, halógeno, SH, alquiltio C_{1-6}, aril-(alquiltio C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquiltio C_{1}-C_{6}), NO_{2}, NH_{2}, NR_{5}R_{6}, aril-(alquilamino C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquilamino C_{1}-C_{6}), o XR_{3}, en el que X y R_{3} son como se han definido anteriormente;

R_{5} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

R_{6} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

L es N o CR_{7} en el que R_{7} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

M es S, O o NR_{8} en el que R_{8} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, aril-(alquilo C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquilo C_{1}-C_{6}) o acilo;

n es 1 ó 2; o

un estereosiómero, enantiómero, racemato o tautómero del mismo; o

una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Otra realización de la presente descripción se refiere a un método para inhibir la actividad de la caseína quinasa I\varepsilon en un paciente que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II).

Otra realización de la presente descripción se refiere a un método para tratar a un paciente que padece una enfermedad o trastorno mejorado por la inhibición de la actividad de la caseína quinasa I\varepsilon que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II).

Una realización adicional de la presente invención se refiere a la preparación de un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II).

Descripción detallada de la invención

Como se usa en la presente memoria, "estereoisómero" es un término general usado para todos los isómeros de moléculas individuales que únicamente difieren en la orientación de sus átomos en el espacio. El término estereoisómero incluye isómeros de imagen especular (enantiómeros), mezclas de isómeros de imagen especular (racematos, mezclas racémicas), isómeros geométricos (cis/trans o E/Z) e isómeros de compuestos con más de un centro quiral que no son imágenes especulares entre sí (diastereoisómeros). Los compuestos de la presente invención pueden tener centros asimétricos y aparecer en forma de racematos, mezclas racémicas, diastereoisómeros individuales o enantiómeros, o pueden existir en forma de isómeros geométricos, incluyéndose todas las formas isoméricas de dichos compuestos en la presente invención.

Como se usa en la presente memoria, "R" y "S" se usan tal como se usan comúnmente en la química orgánica para indicar una configuración específica de un centro quiral. El término "R" (rectus) se refiere a la configuración de un centro con una relación de las prioridades de los grupos en el sentido de las agujas del reloj (de mayor a menor) cuando se mira del enlace hacia el grupo de menor prioridad. El término "S" (siniestro) se refiere a la configuración de un centro quiral con una relación de prioridades de los grupos en el sentido contrario al de las agujas del reloj (de mayor a menor) cuando se mira desde el enlace hacia el grupo de menor prioridad. La prioridad de los grupos se basa en reglas de secuencia en las que la prioridad se basa en primer lugar en el número atómico (en orden de número atómico decreciente). Una lista y un análisis de las propiedades se incluye en Stereochemistry of Organic Compounds, Ernest L. Eliel, Samuel H. Wilen y Lewes N. Mander, editores, Wiley-Interscience, John Wiley & Sons, Inc., Nueva York, 1994.

Además del sistema (R)-(S), también puede utilizarse en la presente memoria el antiguo sistema D-L para indicar la configuración absoluta, especialmente con referencia a los aminoácidos. En este sistema, una fórmula en proyección Fischer se orienta para que el carbono número 1 de la cadena principal esté arriba. El prefijo "D" se usa para representar la configuración absoluta del isómero en el que el grupo funcional (determinante) está en el lado derecho del carbono del centro quiral y "L" aquél del isómero sobre el que se encuentra a la izquierda.

Como se usa en la presente memoria, el término "tautómero" o "tautomería" se refiere a la coexistencia de dos (o más) compuestos que difieren únicamente uno de otro en la posición de uno (o más) átomos móviles y en la distribución de los electrones, por ejemplo, tautómeros o tautomería ceto-enólica.

Como se usa en la presente memoria, "alquilo" se refiere a un grupo hidrocarburo alifático, de cadena lineal o ramificada, saturado, que tiene de uno a seis átomos de carbono, e incluye metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, terc-butilo y similares. En el significado de "alquilo" se incluyen "alquileno" o "alquilenilo" como se definen más adelante en la presente memoria.

Como se usa en este documento, "alquileno" o "alquilenilo" se refiere a una cadena alifática, saturada, divalente, lineal o ramificada, de uno a seis átomos de carbono y que incluye grupos metilenilo, etilenilo, propilenilo, isopropilenilo, butilenilo, isobutilenilo, t-butilenilo, pentilenilo, isopentilenilo, hexilenilo y similares.

Como se usa en la presente memoria, "alquenilo" se refiere a una cadena alifática, insaturada, monovalente, lineal o ramificada, que tiene de dos a seis átomos de carbono e incluye etenilo (también denominado vinilo), 1-metiletenilo, 1-metil-1-propenilo, 1-butenilo, 1-hexenilo, 2-metil-2-propenilo, 2,4-hexadienilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 2-butenilo, 2-pentenilo y grupos similares.

Como se usa en la presente memoria, "alquinilo" es una cadena alifática, insaturada, monovalente, lineal o ramificada, que tiene de dos a seis átomos de carbono con al menos un triple enlace e incluye etinilo, 1-propinilo, 1-butinilo, 1-hexinilo, 2-propinilo, 2-butinilo, 2-pentinilo y grupos similares.

Como se usa en la presente memoria, "alcoxi" o "alquiloxi" se refiere a un sustituyente monovalente que consiste en una cadena alquilo, lineal o ramificada, que tiene de uno a seis átomos de carbono, unida mediante un átomo de oxígeno del éter y que tiene su enlace de valencia libre del átomo de oxígeno del éter, e incluye metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, sec-butoxi, terc-butoxi y grupos similares.

Como se usa en la presente memoria, "alquiltio" se refiere a un sustituyente monovalente que consiste en una cadena alquilo, lineal o ramificada, que tiene de uno a seis átomos de carbono unidos a través de un átomo de azufre y que tiene su valencia libre unida por el azufre, e incluye grupos metiltio, etiltio, propiltio, isopropiltio, butiltio, sec-butiltio, terc-butiltio y similares.

Como se usa en la presente memoria, "alqueniloxi" se refiere a una cadena alifática, insaturada, monovalente, lineal o ramificada, que tiene de dos a seis átomos de carbono unidos a través de un átomo de oxígeno del éter y que tiene su valencia libre unida por el oxígeno del éter, e incluye grupos eteniloxi (también conocido como viniloxi), 1-metileteniloxi, 1-metil-1-propeniloxi, 1-buteniloxi, 1-hexeniloxi, 2-metil-2-propenilo, 2,4-hexadieniloxi, 1-propeniloxi, 2-propeniloxi, 2-buteniloxi, 2-penteniloxi y similares.

Como se usa en la presente memoria, "alquiniloxi" se refiere a una cadena alifática insaturada, lineal o ramificada, que tiene de dos a seis átomos de carbono y al menos un triple enlace unido mediante un átomo de oxígeno del éter y que tiene su enlace de valencia libre del oxígeno del éter, e incluye etiniloxi, 1-propiniloxi, 1-butiniloxi, 1-hexiniloxi, 2-propiniloxi, 2-butiniloxi, 2-pentiniloxi y grupos similares.

Como se usa en la presente memoria, la expresión "cicloalquilo C_{3}-C_{8}" se refiere a una estructura de anillo hidrocarburo saturado que contiene de tres a ocho átomos de carbono e incluye ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y similares.

Como se usa en la presente memoria, "arilo" o "Ar" significa cualquier anillo de carbono monocíclico, bicíclico o tricíclico, de hasta siete miembros en cada anillo, en el que al menos un anillo es aromático y está sin sustituir o sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados entre el grupo que consiste en metilendioxi, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{6}, halógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1}-C_{6}), -N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2}, -NH-acilo y -N(alquil C_{1}-C_{6})acilo. Los ejemplos de "arilo" o "Ar" incluyen fenilo, 2-clorofenilo, 3-clorofenilo, 4-clorofenilo, 2-fluorofenilo, 3-fluorofenilo, 4-fluorofenilo, 2-bromofenilo, 3-bromofenilo, 4-bromofenilo, 2-trifluorometilfenilo, 3-trifluorometilfenilo, 4-trifluorometilfenilo, 2-metoxifenilo, 3-metoxifenilo, 4-metoxifenilo, 2-aminofenilo, 3-aminofenilo, 4-aminofenilo, 2-metilfenilo, 3-metilfenilo, 4-metilfenilo, 2-nitrofenilo, 3-nitrofenilo, 4-nitrofenilo, 2,4-diclorofenilo, 2,3-diclorofenilo, 3,5-dimetilfenilo, 2-trifluorometoxifenilo, 3-trifluorometoxifenilo, 4-trifluorometoxifenilo, naftilo, tetrahidronaftilo y bifenilo.

Como se usa en la presente memoria, la expresión "aril-(alquilo C_{1}-C_{6})" se refiere a un grupo arilo, como se ha definido anteriormente, unido a una cadena alquileno, lineal o ramificada, que contiene de uno a seis átomos de carbono y que tiene su enlace de valencia libre de uno de los átomos de carbono de la cadena alquileno. Los ejemplos de "aril-(alquilo C_{1}-C_{6})" incluyen fenilmetilo (bencilo), feniletilo, p-metoxibencilo, p-fluorobencilo, p-clorobencilo y grupos similares.

Como se usa en la presente memoria, la expresión "aril-(alcoxi C_{1}-C_{6})" se refiere a un grupo arilo, como se ha definido anteriormente, unido a una cadena alquileno, lineal o ramificada, que contiene de uno a seis átomos de carbono, unida mediante un átomo de oxígeno del éter y que tiene su enlace de valencia libre del átomo de oxígeno del éter. Los jemplos de aril-(alcoxi C_{1}-C_{6}) incluyen fenilmetoxi (benciloxi), feniletoxi y grupos similares.

Como se usa en la presente memoria, la expresión "aril-(alquilamino C_{1}-C_{6})" se refiere a un grupo arilo, como se ha definido anteriormente, unido mediante una cadena alquileno, lineal o ramificada, que contiene de uno a seis átomos de carbono, unida mediante un átomo de nitrógeno y que tiene su enlace de valencia libre del átomo de nitrógeno en la que dicho átomo de nitrógeno está opcionalmente sustituido con un hidrógeno o un alquilo C_{1}-C_{6}. Los ejemplos de aril-(alquilo C_{1}-C_{6}-amino) incluyen fenilmetilamino (bencilamino), feniletilamino, N-metil-N-bencilamino y grupos similares.

Como se usa en la presente memoria, la expresión "aril-(alquiltio C_{1}-C_{6})" se refiere a un grupo arilo, como se ha definido anteriormente, unido por una cadena alquileno, lineal o ramificada, que contiene de uno a seis átomos de carbono, unida mediante un átomo de azufre y que tiene su enlace de valencia libre del átomo de azufre. Los ejemplos de aril-(alquilo C_{1}-C_{6}-tio) incluyen fenilmetiltio (benciltio), feniletiltio y los grupos similares.

Como se usa en la presente memoria, el término "acilo" se refiere a un grupo H-(C=O)-, alquil C_{1}-C_{6}-(C=O)-, aril-(C=O)-, aril(alquil C_{1}-C_{6})-(C=O)-, heterociclo-(C=O)- o heterociclo(alquil C_{1}-C_{6})-(C=O)-, en el que el alquilo, arilo y heterociclo son como se definen en la presente memoria, y que tiene su valencia libre unida por el resto carbonilo (C=O). En el significado de "acetilo" se incluyen acetilo, propionilo, butirilo, isobutirilo, trifluoroacetilo, tricloroacetilo, benzoílo y grupos similares.

Como se usa en la presente memoria, el término "heterociclo" o "heterocíclico" se refiere a un anillo heterocíclico monocíclico estable de 5 a 7 miembros o bicíclico estable de 8 a 11 miembros que está saturado o insaturado, y que consiste en átomos de carbono y de uno a tres heteroátomos seleccionados entre el grupo que consiste en N, O y S, y en el que los heteroátomos nitrógeno y azufre pueden estar opcionalmente oxidados, y el heteroátomo nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado, incluyendo cualquier grupo bicíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos definidos anteriormente está condensado con un anillo de benceno. El anillo heterocíclico puede estar unido en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que dé como resultado la creación de una estructura estable. El anillo heterocíclico puede estar sin sustituir o sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados entre el grupo que consiste en alcoxi C_{1}-C_{6}, hidroxi, halógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1}-C_{6}), -N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2}, -NH-acilo y -N(alquilo C_{1}-C_{6})acilo. Los ejemplos de dichos elementos heterocíclicos incluyen piperidinilo, piperazinilo, 2-oxopiperazinilo, 2-oxopiperidinilo, 2-oxopirrolidinilo, 2-oxoazepinilo, azepinilo, pirrolilo, pirrolidinilo, pirazolilo, pirazolidinilo, imidazolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, oxazolilo, oxazolidinilo, isoxazolilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, tiazolilo, tiazolidinilo, isotiazolilo, quinuclidinilo, isotiazolidinilo, indolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, benzoimidazolilo, tiadiazolilo, benzopiranilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, furilo, tetrahidrofurilo, benzofuranilo, tetrahidropiranilo, tienilo, benzotienilo, tiamorfolinilo y oxadiazolilo.

Como se usa en la presente memoria, la expresión "heterociclo-(alquilo C_{1}-C_{6})" o "heterocíclico-(alquilo C_{1}-C_{6})" se refiere a un anillo heterociclo o heterocíclico, como se ha definido anteriormente, unido por una cadena alquileno, lineal o ramificada, que contiene de uno a seis átomos de carbono, con otro átomo de carbono o con un heteroátomo seleccionado entre el grupo que consiste en O, N y S. En el significado de heterociclo-(alquilo C_{1}-C_{6}) o heterocíclico-(alquilo C_{1}-C_{6}) se incluyen 4-piridinilmetilo, 3-piridinilmetilo, 2-piridinilmetilo, 2-furanometilo, 2-tienilo (2-tiofenometilo), 5-nitro-2-tienilo, 5-(2-clorofenil)-2-furanometilo, 1-(fenilsulfonil)-1H-pirrol-2-metilo y grupos similares.

Como se usa en la presente memoria, la expresión "heterociclo-(alcoxi C_{1}-C_{6})" o "heterocíclico-(alcoxi C_{1}-C_{6})" se refiere a un anillo heterociclo o heterocíclico, como se ha definido anteriormente, unido con una cadena alquileno, lineal o ramificada, que contiene de uno a seis átomos de carbono, unida mediante un átomo de oxígeno del éter y que tiene su enlace de valencia libre del átomo de oxígeno del éter. En el significado de heterociclo-(alcoxi C_{1}-C_{6}) o heterocíclico-(alcoxi C_{1}-C_{6}) se incluyen 2-tienilmetoxi, 3-tienilmetoxi, 2-furanometoxi, 3-furanometoxi, 4-piridinilmetoxi, 3-piridinilmetoxi, 2-piridinilmetoxi y grupos similares.

Como se usa en la presente memoria, la expresión "heterociclo-(alquilamino C_{1}-C_{6})" o "heterocíclico-(alquilamino C_{1}-C_{6})" se refiere a un heterociclo o anillo heterocíclico, como se ha definido anteriormente, unido por una cadena alquileno, lineal o ramificada, que contiene de uno a seis átomos de carbono, unida mediante un átomo de nitrógeno y que tiene su enlace de valencia libre del átomo de nitrógeno, en el que dicho átomo de nitrógeno está opcionalmente sustituido con un hidrógeno o un alquilo C_{1}-C_{6}. Dentro del significado de heterociclo(alquilamino C_{1}-C_{6}) o heterocíclico(alquilamino C_{1}-C_{6}) se incluyen los grupos 2-tienilmetilamino, 3-tienilmetilamino, 2-furanmetilamino, 3-furanmetilamino, 4-piridinilmetilamino, 3-piridinilmetilamino, 2-piridinilmetilamino y similares.

Como se usa en la presente memoria, la expresión "heterociclo-(alquiltio C_{1}-C_{6})" o "heterocíclico-(alquiltio C_{1}-C_{6})" se refiere a un heterociclo o anillo heterocíclico, como se ha definido anteriormente, unido por una cadena alquileno, lineal o ramificada, que contiene de uno a seis átomos de carbono, unida mediante un átomo de azufre y que tiene su enlace de valencia libre del átomo de azufre. Están incluidos en el significado de heterociclo-(alquilo C_{1}-C_{6}-tio) o heterocíclico-(alquilo C_{1}-C_{6}-tio) el 2-tienilmetiltio, 3-tienilmetiltio, 2-furanometiltio, 3-furanometiltio, 4-piridinilmetiltio, 3-piridinilmetiltio, 2-piridinilmetiltio y grupos similares.

Como se usa en la presente memoria, el término "halógeno", "hal" o "halo" se refiere a un miembro de la familia de flúor, cloro, bromo o yodo.

Cuando cualquier variable (por ejemplo, arilo, heterociclo, R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{4}, R_{5}, R_{6}, R_{7}, R_{8} y X) se encuentra más de una vez en cualquier constituyente o en un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) de esta invención, su definición en cada caso es independiente de su definición en cualquier otro caso, a menos que se indique lo contrario. Además, las combinaciones de los sustituyentes y/o variables se permiten únicamente si las tales combinaciones dan como resultado compuestos estables.

Como se usa en la presente memoria, el término "tratar", "para tratar" o "tratamiento" se refiere a:

(i)

prevenir que se produzca una enfermedad, trastorno o afección en un paciente que pueda estar predispuesto a la enfermedad, trastorno y/o afección, pero que aún no se ha diagnosticado que lo padezca;

(ii)

inhibir una enfermedad, trastorno o afección, es decir, detener su desarrollo; o

(iii)

aliviar una enfermedad, trastorno o afección, es decir, provocar la regresión de la enfermedad, trastorno y/o afección.

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Como se usa en la presente memoria, el término "paciente" se refiere a un animal de sangre caliente, tal como un mamífero, que padece una enfermedad, trastorno o afección particular. Se entiende explícitamente que las cobayas, perros, gatos, ratas, ratones, caballos, vacas, ganado, ovejas y seres humanos son ejemplos de animales dentro del alcance del significado del término.

Como se usa en la presente memoria, el término "enfermedad" se refiere a una dolencia, malestar o a una interrupción, suspensión o trastorno de funciones, sistemas u órganos corporales.

Como se usa en la presente memoria, el término "trastorno" se refiere a una perturbación de la función, de la estructura o de ambas que se produce como resultado de un fallo genético o embriológico en el desarrollo, o de factores exógenos tales como intoxicación, lesión o enfermedad.

Como se usa en la presente memoria, el término "afección" se refiere a un estado de existencia, salud o capacidad física.

Como se usa en la presente memoria, el término "profilaxis" se refiere a la prevención de una enfermedad.

Como se usa en la presente memoria, la expresión "trastorno del sueño", "trastornos del sueño" o "perturbación del sueño" se refiere a insomnio.

Como se usa en la presente memoria, el término "insomnio" se refiere a la incapacidad de dormir en ausencia de impedimentos externos, tales como ruido, luz brillante, etc., durante el periodo en el que debería producirse normalmente el sueño, y la incapacidad de dormir puede variar en grado desde inquietud o sueño alterado a un acortamiento de la longitud normal del sueño o una vigilia absoluta. El término "insomnio" incluye insomnio primario, insomnio relacionado con un trastorno mental, insomnio inducido por sustancias e insomnio del ritmo circadiano que es el insomnio debido a un cambio en el programa normal de sueño-vigilia (cambios, trastorno del sueño por trabajo en turnos, desfase horario o síndrome de desfase horario, etc.).

Como se usa en la presente memoria, la expresión "insomnio primario" significa dificultad para iniciar el sueño, para mantener el sueño o para tener un sueño reconstituyente, que no se debe a un trastorno mental o a los efectos fisiológicos de la administración o interrupción de ciertas sustancias (insomnio inducido por sustancias).

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Como se usa en la presente memoria, la expresión "trastorno del sueño del ritmo circadiano" incluye el desfase horario o síndrome de desfase horario, trastornos del sueño trabajo en turnos, síndrome de la fase de sueño avanzada y síndrome de la fase de sueño retrasada.

Como se usa en la presente memoria, la expresión "cantidad inhibidora eficaz de un compuesto" o "cantidad inhibidora eficaz de la caseína quinasa I\varepsilon de un compuesto" significa suficiente compuesto como para que esté biodisponible por medio de la vía de administración apropiada para tratar a un paciente que padece una enfermedad, trastorno o afección susceptible de dicho tratamiento.

Como se usa en la presente memoria, la expresión "una cantidad terapéuticamente eficaz" significa una cantidad de un compuesto que es eficaz para tratar la enfermedad, trastorno o afección mencionados.

Como se usa en la presente memoria, la frase "alargamiento del periodo del ritmo circadiano" se refiere al aumento del intervalo entre acontecimientos seminales en un proceso que se produce regularmente con una frecuencia de aproximadamente una vez cada 24 horas.

Como se usa en la presente memoria, la frase "acortamiento del periodo del ritmo circadiano" se refiere a la reducción del intervalo entre acontecimientos seminales en un proceso que se produce regularmente con una frecuencia de aproximadamente una vez cada 24 horas.

Como se usa en la presente memoria, la expresión "sal farmacéuticamente aceptable" pretende aplicarse a cualquier sal, tanto si ya se conoce como si se descubre en el futuro, que se usa por un experto en la materia, que es una sal de adición orgánica o inorgánica, no tóxica, que es adecuada para su uso como una sustancia farmacéutica. Las bases ilustrativas que forman sales adecuadas incluyen hidróxidos de metales alcalinos o alcalinotérreos, tales como hidróxidos de sodio, potasio, calcio o magnesio; amoniaco y aminas alifáticas, cíclicas o aromáticas, tales como metilamina, dimetilamina, trietilamina, dietilamina, isopropildietilamina, piridina y picolina. Los ácidos ilustrativos que forman sales incluyen ácidos inorgánicos, tales como, por ejemplo, los ácidos clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfórico, y similares, y ácidos carboxílicos orgánicos, tales como, por ejemplo, los ácidos acético, propiónico, glicólico, láctico, pirúvico, malónico, succínico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, maleico, hidroximaleico y dihidroximaleico, benzoico, fenilacético, 4-aminobenzoico, 4-hidroxibenzoico, antranílico, cinnámico, salicílico, 4-aminosalicílico, 2-fenoxibenzoico, 2-acetoxibenzoico, mandélico y similares, y ácidos sulfónicos orgánicos, tales como los ácidos metanosulfónico, bencenosulfónico y p-toluenosulfónico.

Como se usa en la presente memoria, "vehículo farmacéutico" o "vehículo farmacéuticamente aceptable" se refiere a excipientes farmacéuticos conocidos útiles en la formulación de compuestos farmacéuticamente activos para la administración, y que son esencialmente no tóxicos y no sensibilizantes en condiciones de uso. La proporción exacta de estos excipientes se determina por la solubilidad y propiedades químicas del compuesto activo, la vía de administración elegida, así como por la práctica farmacéutica convencional. En la práctica de los métodos de esta invención, el principio activo se incorpora preferiblemente en una composición que contiene un vehículo farmacéutico, aunque los compuestos son eficaces y pueden administrarse en y por sí mismos. Es decir, la proporción de principio activo puede variar de aproximadamente 1% a aproximadamente 90% en peso.

Las abreviaturas adicionales que pueden aparecer en esta solicitud tendrán los siguientes significados:

Me (metilo), Et (etilo), Ph (fenilo), Et_{3}N (trietilamina), p-TsOH (ácido para-toluenosulfónico), TsCl (cloruro de para-toluenosulfonilo), hept (heptano), DMF (dimetilformamida), NMP (1-metil-2-pirrolidinona o N-metil-2-pirrolidinona), IPA (isopropanol o isopropilalcohol), DBU (1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno), DBN (1,5-diazabiciclo[4.3.0]non-5-eno), ta o t.a. (temperatura ambiente), min o min. (minutos), h (hora u horas), UV (ultravioleta), LCMS (espectrometría de masas por cromatografía líquida), t-Boc o Boc (terc-butoxicarbonilo), Bn (bencilo), t-Bu (butilo terciario), i-Pr (isopropilo), TFA (ácido trifluoroacético), HOAc (ácido acético), EtOAc (acetato de etilo), Et_{2}O (éter dietílico), EtOH (etanol), DIEA (diisopropiletilamina), EDC (hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida); HOBT (1-hidroxibenzotriazol), g (gramo), mg (miligramo), \mug (microgramo), ng (nanogramo), ml (mililitro), \mul (microlitro), l (litro), HPLC (cromatografía líquida de alta resolución), TLC, tlc o Tlc (cromatografía de capa fina), g/l (gramos por litro), SiO_{2} (gel de sílice), l/min (litros por minuto), ml/min (mililitros por minuto), mmol (milimol), M (molar), mM (milimolar), \muM (micromolar), nM (nanomolar), \muCi (microCurie), CPM (cuentas por minuto), rpm (revoluciones por minuto), mm (milímetro), \mum (micrómetro), \mu (micra), nm (nanómetro), ppm (partes por millón), kPa [psi] (kilopascales [libras por pulgada cuadrada]), equiv. (equivalente), T_{R} (Tiempo de retención), ºC (grados Celsius) y K (Kelvin).

\newpage

Por consiguiente, una amplia realización de la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II):

2

en las que X es S o S(O)_{n}; R_{1} es H o alquilo C_{1}-C_{6}; R_{2} es NR_{5}R_{6}; R_{3} es arilo o heterociclo; R_{4} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, aril-(alquilo C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquilo C_{1}-C_{6}), alcoxi C_{1}-C_{6}, aril-(alcoxi C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alcoxi C_{1}-C_{6}), CF_{3}, halógeno, SH, alquiltio C_{1}-C_{6}, aril-(alquiltio C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquiltio C_{1}-C_{6}), NO_{2}, NH_{2}, NR_{5}R_{6}, aril-(alquilamino C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquilamino C_{1}-C_{6}), o XR_{3}, en el que X y R_{3} son como se han definido anteriormente; R_{5} es H o alquilo C_{1}-C_{6}; R_{6} es H o alquilo C_{1}-C_{6}; L es N o CR_{7} en el que R_{7} es H o alquilo C_{1}-C_{6}; M es S, O o NR_{8} en el que R_{8} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, aril-(alquilo C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquilo C_{1}-C_{6}) o acilo; y n es 1 ó 2;

Una realización adicional de esta invención se refiere a los compuestos de fórmula (I) o de fórmula (II) en la que cada uno de M y X es S.

Otra realización de esta invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que L es CR_{7} y cada uno de M y X es S.

Una realización adicional de esta invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que cada uno de M y X es S, L es CR_{7} y R_{7} es H. Los siguientes compuestos son ejemplos representativos dentro del alcance de esta realización:

amida del ácido 6-fenilsulfanil-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(3-fluorofenil-sulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(4-clorofenil-sulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(2-aminofenil-sulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(piridin-2-ilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-p-tolilsulfanil-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(tiofen-2-il-sulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(3,5-dicloro-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(piridin-4-ilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-m-tolilsulfanil-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-o-tolilsulfanil-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(2,3-dicloro-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(2,5-dicloro-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(2-etil-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(3-bromo-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(3,5-dimetil-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(3-metoxi-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(2-metoxi-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(2-trifluorometil-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(2-fluoro-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico, y

amida del ácido 6-(3-trifluorometoxi-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico.

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Otra realización adicional de esta invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que L es N, y cada uno de M y X es S. Los siguientes compuestos son ejemplos representativos dentro del alcance de esta realización:

amida del ácido 6-fenilsulfanil-4H-pirrolo[2,3-d]tiazol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(3-fluoro-fenilsulfanil)-4H-pirrolo[2,3-d]tiazol-5-carboxílico, y

amida del ácido 6-(piridin-2-ilsulfanil-4H-pirrolo[2,3-d]tiazol-5-carboxílico.

Otra realización de esta invención se refiere a compuestos de fórmula (II) en la que L es CR_{7} y cada uno de M y X es S.

Una realización adicional de esta invención se refiere a compuestos de fórmula (II) en la que cada uno de M y X es S, L es CR_{7} y R_{7} es H. Los siguientes compuestos son ejemplos representativos dentro del alcance de esta realización:

amida del ácido 4-(piridin-2-ilsulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 4-(fenilsulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(3-fluorofenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 4-(piridin-4-ilsulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 4-(3,5-diclorofenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 4-(tiofen-2-il-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 4-(3-bromofenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 4-(3-metoxifenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 4-(2-metoxifenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

amida del ácido 4-(3-clorofenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico, y

amida del ácido 4-(3-metilfenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico.

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Otra realización adicional de esta invención se refiere a compuestos de fórmula (II) en la que L es N, y cada uno de M y X es S. Los siguientes compuestos son ejemplos representativos dentro del alcance de esta realización:

amida del ácido 2-metil-6-fenil-sulfanil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(3-metoxifenil-sulfanil)-2-metil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(3-fluorofenil-sulfanil)-2-metil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(3-clorofenil-sulfanil)-2-metil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-(3-trifluorometoxi-fenilsulfanil)-2-metil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

amida del ácido 2,6-bis-fenilsulfanil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

amida del ácido 2,6-bis-(3-metoxi-fenilsulfanil)-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

amida del ácido 6-fenilsulfanil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico, y

amida del ácido 6-(3-metoxifenil-sulfanil)-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico.

Otra realización de la presente invención se refiere a un método para inhibir la actividad de la caseína quinasa I\varepsilon en un paciente que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) que produce un alargamiento del periodo del ritmo circadiano.

Otra realización de la presente invención se refiere a un método para tratar a un paciente que padece una enfermedad o trastorno mejorado por la inhibición de la actividad de la caseína quinasa I\varepsilon, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II), en el que dicha inhibición de la actividad de la caseína quinasa I\varepsilon produce un alargamiento del periodo del ritmo circadiano.

Los compuestos de la presente invención se pueden preparar mediante procedimientos análogos a los conocidos en la técnica. Los esquemas de reacción 1, 2 y 3, y el texto descriptivo correspondiente, describen la preparación de los diferentes compuestos de la invención. Los métodos y ejemplos descritos se proporcionan para fines de ilustración y no limitan el alcance de la presente invención. Reactivos y condiciones de reacción alternativos y otras combinaciones y permutaciones de las etapas descritas en la presente memoria para llegar a los compuestos individuales son fácilmente evidentes para los expertos en la materia. Las tablas 1, 2, 3 y 4 proporcionan sumarios de los compuestos de ejemplo y en la tabla 5 se resumen los datos biológicos para los compuestos de ejemplo de la invención.

Síntesis química

Esquema 1

3

El esquema 1 describe la síntesis de 4H-tieno[3,2-b]pirroles (M es S), 4H-furo[3,2-b]pirroles (M es O) y 1,4-dihidropirrolo[3,2-b]pirroles (M es NR_{8}) de fórmula (I) en la que L es CR_{7}, y la síntesis de 6H-tieno[2,3-b]pirroles (M es S), 6H-furo[2,3-b]pirroles (M es O) y 1,6-dihidropirrolo[2,3-b]pirroles (M es NR_{8}) de fórmula (II) en la que L es CR_{7}, a partir de ésteres o ácidos carboxílicos 1 y 3 conocidos o disponibles en el mercado, respectivamente, en los que R es alquilo o H.

En el esquema 1, etapa a, los ésteres iniciales 1 ó 3, en los que R es alquilo, se convierten en las amidas 2 ó 4, respectivamente, por métodos bien conocidos por los expertos en la materia. Por lo tanto, tratando una mezcla de amoniaco aproximadamente 7 M y el éster 1 ó 3 en un disolvente polar adecuado, tal como metanol o etanol, con una viruta de hidróxido de litio y calentando la mezcla resultante en un matraz a presión a aproximadamente 100ºC durante aproximadamente 16 horas se proporciona, después de la purificación cromatográfica como es bien conocido por un experto en la materia, la amida primaria 2 ó 4, respectivamente. Como alternativa, se pueden emplear otras condiciones de reacción bien conocidas por los expertos en la materia, tales como tratar una solución del éster 1 ó 3 en un disolvente polar adecuado, tal como, por ejemplo, etanol o metanol, con una solución de amoniaco aproximadamente 5 M a aproximadamente 7 M durante aproximadamente un día a aproximadamente tres días, a temperatura ambiente, o calentar la solución a aproximadamente 55ºC durante aproximadamente 10 horas, para proporcionar la amida primaria 2 ó 4, respectivamente, después de aislamiento por métodos bien conocidos por los expertos en la materia. Como alternativa, el éster 1 ó 3 puede ponerse en suspensión en una mezcla de solución de hidróxido de amonio concentrado y cloruro de litio a temperatura ambiente durante aproximadamente tres a aproximadamente cinco días hasta que el análisis por cromatografía en capa fina, u otro análisis cromatográfico como es bien conocido por los expertos en la materia, indica que la reacción ha finalizado esencialmente. Las amidas primarias 2 ó 4 se aíslan de la mezcla de reacción por métodos bien conocidos por los expertos en la materia. Si se emplean alquilaminas C_{1}-C_{6} primarias o secundarias, en lugar de amoniaco o hidróxido de amonio, se obtienen las amidas 2 ó 4 secundarias o terciarias correspondientes, en las que R_{2} es NR_{5}R_{6}, R_{5} es H o alquilo C_{1}-C_{6} y R_{6} es alquilo C_{1}-C_{6}.

Como se muestra en el esquema 1, etapa b, los ácidos carboxílicos 1 ó 3 (en los que R es H), conocidos o disponibles en el mercado, pueden convertirse en las amidas 2 ó 4, respectivamente, por métodos bien conocidos por los expertos en la materia. Si se desea, los ácidos carboxílicos 1 ó 3 (R es H) también se pueden preparar por hidrólisis de los correspondientes ésteres 1 ó 3 (R es alquilo) por métodos bien conocidos por los expertos en la materia. Por ejemplo, se añade una base adecuada, tal como, por ejemplo, hidróxido potásico, hidróxido sódico, hidróxido de litio y bases similares, a una mezcla del éster 1 ó 3 en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, una mezcla de tetrahidrofurano y agua. La mezcla se calienta de aproximadamente 90ºC a aproximadamente 110ºC durante de aproximadamente 0,5 horas a aproximadamente 2 horas. El producto se recupera en forma de una sal por filtración y el filtrado se concentra para proporcionar más material en forma de un residuo. La torta de filtro y el residuo se combinan y se acidifican por métodos bien conocidos por los expertos en la materia, tales como, por ejemplo, acidificación con un ácido adecuado, tal como ácido acético, en un disolvente adecuado, tal como metanol, etanol y disolventes similares, para proporcionar los ácidos carboxílicos 1 ó 3, respectivamente, en los que R es H. Como se muestra en el esquema 1, etapa b, por ejemplo, se trata una solución de ácido carboxílico 1 ó 3 en un disolvente adecuado, tal como dimetilformamida, con una base, tal como di-isopropiletilamina, una carbodiimida, tal como, por ejemplo, hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida, 1-hidroxibenzotriazol y cloruro de amonio. Cuando se ha completado la reacción, lo que se determina por cromatografía en capa fina, u otro análisis cromatográfico adecuado como es bien conocido por los expertos en la materia, la mezcla se diluye con un disolvente adecuado y el producto se aísla y se purifica cromatográficamente por métodos bien conocidos por los expertos en la materia, para proporcionar las amidas primarias 2 ó 4, respectivamente, en las que R_{2} es NH_{2}. Si se emplean alquilaminas C_{1}-C_{6} primarias o secundarias, en lugar de cloruro de amonio, se obtienen las amidas 2 ó 4 secundarias o terciarias correspondientes, en las que R_{2} es NR_{5}R_{6}, R_{5} es H o alquilo C_{1}-C_{6} y R_{6} es alquilo C_{1}-C_{6}.

Como se muestra en el esquema 1, etapa c, cada una de las amidas intermedias 2 ó 4 se tioarila en la posición 3 del anillo de pirrol que soporta la amida por métodos bien conocidos por los expertos en la materia. Por ejemplo, una suspensión de una amida intermedia 2 ó 4 se trata en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, dimetilformamida o NMP, con una base adecuada, tal como, por ejemplo, hidruro sódico o hidruro de litio, a temperatura ambiente, seguido de tratamiento con un diarildisulfuro o diheterociclodisulfuro adecuado, y después la mezcla se agita a una temperatura de aproximadamente 100ºC durante aproximadamente 12 horas a aproximadamente 20 horas. El transcurso de la reacción se sigue por análisis cromatográfico de capa fina u otros métodos cromatográficos bien conocidos para un experto en la materia. Cuando se completa, la reacción se trata por métodos de extracción bien conocidos por un experto en la materia. Cada uno de los 4H-tieno[3,2-b]pirroles (M es S), 4H-furo[3,2-b]pirroles (M es O) y 1,4-dihidropirrolo[3,2-b]pirroles (M es NR_{8}) adecuados de fórmula (I), en la que L es CR_{7}, X es S y R_{3} es arilo o heterociclo, y los 6H-tieno[2,3-b]pirroles (M es S), 6H-furo[2,3-b]pirroles (M es O) y 1,6-dihidropirrolo[2,3-b]pirroles (M es NR_{8}) de fórmula (II), en la que L es CR_{7}, X es S y R_{3} es arilo o heterociclo, se aísla y se purifica cromatográficamente por métodos que son bien conocidos por los expertos en la materia.

Como alternativa, una mezcla del diarildisulfuro o diheterociclodisulfuro y aproximadamente un equivalente de carbonato de cesio, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, dimetilformamida o NMP, se trata con una amida intermedia 2 ó 4, y después la mezcla se calienta de aproximadamente 80ºC a aproximadamente 120ºC durante aproximadamente una a aproximadamente seis horas. La reacción se sigue por cromatografía de capa fina u otros métodos cromatográficos bien conocidos para un experto en la materia. Cada uno de los 4H-tieno[3,2-b]pirroles (M es S), 4H-furo[3,2-b]pirroles (M es O) y 1,4-dihidropirrolo[3,2-b]pirroles (M es NR_{8}) adecuados de fórmula (I), en la que L es CR_{7}, X es S y R_{3} es arilo o heterociclo, y los 6H-tieno[2,3-b]pirroles (M es S), 6H-furo[2,3-b]pirroles (M es O) y 1,6-dihidropirrolo[2,3-b]pirroles (M es NR_{8}) de fórmula (II), en la que L es CR_{7}, X es S y R_{3} es arilo o heterociclo, se aísla y se purifica cromatográficamente por métodos bien conocidos por los expertos en la materia.

Como se muestra en el esquema 1, etapa opcional d, el nitrógeno del anillo de pirrol de un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II), en la que R_{1} es H, se N-alquila tratando una solución del compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) en la que R_{1} es H y un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidinona, con un dialquilsulfato C_{1}-C_{6} y una base adecuada, tal como, por ejemplo, carbonato de cesio, a temperatura ambiente durante aproximadamente 12 horas a aproximadamente 20 horas. El final de la reacción se determina por análisis de cromatografía en capa fina u otros métodos cromatográficos que son bien conocido para los expertos en la materia. Cuando ha finalizado, la mezcla de reacción se diluye con agua y el compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II), en la que R_{1} es alquilo C_{1}-C_{6} se aísla y se purifica por métodos bien conocidos por los expertos en la materia.

Como alternativa, el nitrógeno del anillo de pirrol de un compuesto del esquema 1 de fórmula (I) o de fórmula (II) se alquila tratando una solución en piridina de un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) en la que R_{1} es H, con un haluro de alquilo C_{1}-C_{6} en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, carbonato de cesio con calentamiento durante aproximadamente 0,25 horas a aproximadamente 3 horas. La mezcla de reacción se enfría, se diluye con agua o se concentra a sequedad, y se extrae con acetato de etilo. La concentración y subsiguiente purificación por métodos cromatográficos como es bien conocido por los expertos en la materia, proporciona el compuesto del esquema 1 de fórmula (I) o de fórmula (II) en la que R_{1} es alquilo C_{1}-C_{6}.

Adicionalmente, la N-alquilación del nitrógeno del anillo de pirrol de un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) en la que R_{1} es H se obtiene por otros métodos que son bien conocidos por los expertos en la materia, por ejemplo por tratamiento de un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) en la que R_{1} es H en un disolvente polar adecuado, tal como, por ejemplo, dimetilformamida o NMP, con una base adecuada, tal como, por ejemplo, hidruro sódico o t-butóxido potásico, y luego se añade un haluro de alquilo C_{1}-C_{6}, tal como, por ejemplo, yoduro de propilo. El final de la reacción se determina por análisis de cromatografía en capa fina u otros métodos cromatográficos bien conocidos para los expertos en la materia. Cuando ha finalizado, la mezcla de reacción se diluye con agua y el compuesto del esquema 1 de fórmula (I) o de fórmula (II) en la que R_{1} es alquilo C_{1}-C_{6} se aísla y se purifica por métodos bien conocidos por los expertos en la materia.

Como es bien conocido por los expertos en la materia, cuando M es NR_{8} y R_{8} es H, en las condiciones descritas anteriormente, la N-alquilación puede producirse también en el nitrógeno del NR_{8} citado anteriormente para proporcionar compuestos del esquema 1 de fórmula (I) o de fórmula (II) en la que cada uno de R_{1} y R_{8} es el mismo grupo alquilo C_{1}-C_{6}. Se conoce la preparación de los ésteres iniciales 1 en los que R es etilo, cada uno de R_{4} y R_{7} es H, M es NR_{8} y R_{8} es metilo por termolisis de 2-azidoacrilatos (también conocidos como ésteres del ácido 2-azidopropenoico) como también se describe en el esquema 2 a continuación (H. Hemetsberger y D. Knittel, Monatsh. Chem. (1972) 103 (1), 194-204). El éster inicial 1 en el que M es NR_{8} y R_{8} es alquilo C_{1}-C_{6} se prepara como se ha descrito y luego se convierte como se ha descrito en el esquema 1 en un compuesto de fórmula (I) en la que M es NR_{8}, R_{8} es alquilo C_{1}-C_{6} y R_{1} es H o alquilo C_{1}-C_{6}, y en la que dichos grupos alquilo C_{1}-C_{6} de R_{1} y R_{8} pueden ser iguales o diferentes. Esta metodología también se emplea para proporcionar ésteres análogamente sustituidos 3 que se convierten, como se ha descrito en el esquema 1, en un compuesto de fórmula (II) en la que R_{8} es alquilo C_{1}-C_{6} y R_{1} es H o alquilo C_{1}-C_{6} y en la que dichos grupos alquilo C_{1}-C_{6} de R_{1} y R_{8} pueden ser iguales o diferentes.

Adicionalmente, un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) del esquema 1 en la que R_{1} es H o alquilo C_{1}-C_{6} y X es S, se oxida opcionalmente para dar una sulfona o un sulfóxido en los que X es S(O)_{n} y n es 1 ó 2, respectivamente, por métodos bien conocidos por los expertos en la materia, tales como, por ejemplo, tratando una solución de dicho compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) con H_{2}O_{2} y Na_{2}CO_{3}. Como alternativa, el compuesto 2 ó 4 del esquema 1 se trata con un cloruro de arilsulfonilo, un cloruro de arilsulfinilo, un cloruro de heterociclosufonilo o un cloruro de heterociclosulfinilo (utilizado en lugar del diarildisulfuro o diheterociclodisulfuro) como se ha descrito en la etapa c anterior, para proporcionar un compuesto del esquema 1 de fórmula (I) o de fórmula (II) en la que X es S(O)_{n}, n es 1 ó 2 y R_{3} es arilo o heterociclo.

El esquema 2, como se muestra a continuación, describe la síntesis de 4H-pirrolo[2,3-d]tiazoles (M es S), 4H-pirrolo[2,3-d]oxazoles, (M es O) y 1,4-dihidro-pirrolo[2,3-d]imidazoles (M es NR_{8}) de fórmula (I) en la que L es N, y la síntesis de 6H-pirrolo[3,2-d]tiazoles (M es S), 6H-pirrolo[3,2-d]oxazoles (M es O) y 3,4-dihidro-pirrolo[2,3-d]imidazoles (M es NR_{8}) de fórmula (II) en la que L es N, a partir de materiales de partida conocidos o disponibles en el mercado. Un experto en la materia comprende fácilmente que cuando L es N, M es NR_{8} y R_{8} es H el anillo de imidazol puede existir en formas tautoméricas. En el esquema 2, etapa a, se condensa un carboxialdehído 5 ó 7 con un éster de 2-azidoacetato 6 en el que R es alquilo, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, hidróxido potásico, hidróxido sódico o bases similares, para proporcionar el éster de ácido 2-azidopropenoico 8 u 11 correspondiente, respectivamente, en el que R es alquilo.

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(Esquema pasa a página siguiente)

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Esquema 2

4

Como se muestra en el esquema 2, etapa b, la termolisis del éster del ácido 2-azidopropenoico 8 u 11 se realiza calentando una mezcla de éster del ácido 2-azidopropenoico 8 u 11 en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, xileno, de aproximadamente 120ºC a aproximadamente 140ºC durante aproximadamente 30 a 90 minutos, para proporcionar, después de purificación cromatográfica por métodos bien conocidos por los expertos en la materia, el éster 9 ó 12 correspondiente, respectivamente, en el que R es alquilo.

Como se muestra en el esquema 2, etapa opcional c, el éster 9 ó 12 obtenido en la etapa b puede hidrolizarse por métodos bien conocidos por los expertos en la materia para proporcionar el ácido carboxílico 9 ó 12 correspondiente, respectivamente, en el que R es H. Por ejemplo, se añade una base adecuada, tal como, por ejemplo, hidróxido potásico, hidróxido sódico, hidróxido de litio y bases similares, a una mezcla del éster 9 ó 12 y un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, una mezcla de tetrahidrofurano y agua. La mezcla se calienta de aproximadamente 90ºC a aproximadamente 110ºC durante de aproximadamente 0,5 horas a 2 horas. El producto se recupera en forma de una sal por filtración y el filtrado se concentra para proporcionar más material en forma de un residuo. La torta de filtro y el residuo se combinan y se acidifican por métodos bien conocidos por los expertos en la materia, tales como, por ejemplo, acidificación con un ácido adecuado, tal como ácido acético, en un disolvente adecuado, tal como metanol y disolventes similares, para proporcionar el ácido carboxílico 9 ó 12, respectivamente, en el que R es H.

Como se muestra en el esquema 2, etapa d, el éster 9 ó 12, en el que R es alquilo, se convierte en la amida 10 ó 13, respectivamente, como se ha descrito anteriormente para el esquema 1, etapa a. Como alternativa, el ácido carboxílico 9 ó 12, en el que R es H, se convierte en la amida 10 ó 13 correspondiente, respectivamente, por métodos que son bien conocidos por un experto en la materia y que se han descrito en el esquema 1, etapa b. Por ejemplo, una solución del ácido carboxílico 9 ó 12 en un disolvente adecuado, tal como dimetilformamida, se trata con una base, tal como diisopropiletilamina, y una carbodiimida, tal como, por ejemplo, hidrocloruro de (1-(3-dimetilamino-propil)-3-etilcarbodiimida, 1-hidroxibenzotriazol y cloruro de amonio. Cuando la reacción ha finalizado, la mezcla se diluye con un disolvente adecuado, y el producto se aísla y se purifica cromatográficamente por métodos bien conocidos por los expertos en la materia para proporcionar el correspondiente 4H-pirrolo[2,3-d]tiazol (M es S), 4H-pirrolo[2,3-d]oxazol, (M es O) o 1,4-dihidro-pirrolo[2,3-d]imidazol (M es NR_{8}), amida primaria 10, o 6H-pirrolo[3,2-d]tiazol (M es S), 6H-pirrolo[3,2-d]oxazol (M es O), o 3,4-dihidro-pirrolo[2,3-d]imidazol (M es NR_{8}), amida primaria 13, respectivamente, en las que R_{2} es NH_{2}. Si se emplea una alquilamina C_{1}-C_{6} primaria o secundaria, en lugar de cloruro de amonio, se obtiene la amida secundaria o terciaria 10 ó 13 correspondiente, en la que R_{2} es NR_{5}R_{6}, R_{5} es H o alquilo C_{1}-C_{6} y R_{6} es alquilo C_{1}-C_{6}.

Como se muestra en el esquema 2, etapa e, la amida intermedia 10 ó 13 se tioarila en la posición 3 del anillo de pirrol que soporta la amida por métodos análogos a los métodos descritos anteriormente para el esquema 1, etapa c, para proporcionar 4H-pirrolo[2,3-d]tiazol (M es S), 4H-pirrolo[2,3-d]oxazol, (M es O) o 1,4-dihidro-pirrolo[2,3-d]imidazol (M es NR_{8}), amidas de fórmula (I), o 6H-pirrolo[3,2-d]tiazol (M es S), 6H-pirrolo[3,2-d]oxazol (M es O) o 3,4-dihidro-pirrolo[2,3-d]imidazol (M es NR_{8}), amidas de fórmula (II), respectivamente, en las que X es S y R_{3} es arilo o heterociclo.

Cuando R_{4} es halógeno, tal como, por ejemplo, Br, en la amida intermedia 10 ó 13, la tioarilación en la posición 3 del anillo de pirrol que soporta la amida y el desplazamiento del halógeno mencionado anteriormente pueden ocurrir ambos en las condiciones descritas. El desplazamiento concomitante del halógeno mencionado anteriormente de la amida intermedia 10 ó 13 en las condiciones descritas para la etapa e anterior empleando un diarildisulfuro o diheterociclodisulfuro se utiliza, por lo tanto, ventajosamente, para proporcionar un compuesto del esquema 2 de fórmula (I) o de fórmula (II) en la que R_{4} es un resto ariltio o heterociclotio (es decir, XR_{3}) que es idéntico al resto XR_{3} del anillo de pirrol, en el que X es S y R_{3} es arilo o heterociclo. Adicionalmente, el desplazamiento del átomo de halógeno mencionado anteriormente de la amida intermedia 10 ó 13, o a partir de un intermedio tal como, por ejemplo, un éster intermedio 9 ó 12, con un anión preparado tratando un ariltiol o heterociclotiol con una base adecuada, también proporciona ventajosamente un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) en la que R_{4} es un resto ariltio o heterociclo que puede ser igual o diferente del resto XR_{3} introducido por tioarilación como se ha descrito anteriormente para el esquema 2, etapa e. Adicionalmente, el desplazamiento del átomo de halógeno mencionado anteriormente del éster intermedio 9 ó 12 o de la amida intermedia 10 ó 13, con un anión preparado por métodos bien conocidos por los expertos en la materia a partir de un alquil C_{1}-C_{6}-OH, un aril-(alquil C_{1}-C_{6})-OH, un heterociclo-(alquil C_{1}-C_{6})-OH, un alquil C_{1}-C_{6}-SH, un aril(alquil C_{1}-C_{6})-SH, un heterociclo-(alquil C_{1}-C_{6})-SH, un alquil C_{1}-C_{6}-NH_{2}, un (alquil C_{1}-C_{6})_{2}NH, o una aril-(alquil C_{1}-C_{6})-amina o una heterociclo-(alquil C_{1}-C_{6})amina en la que dicho átomo de nitrógeno de la amina está opcionalmente sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}, proporciona, después de la tioarilación, un compuesto del esquema 2 de fórmula (I) o de fórmula (II) en la que R_{4} es alcoxi C_{1}-C_{6}, aril-(alcoxi C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alcoxi C_{1}-C_{6}), alquiltio C_{1-6}, aril-(alquiltio C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquiltio C_{1}-C_{6}), NR_{5}R_{6} donde R_{5} es H o alquilo C_{1}-C_{6} y R_{6} es alquilo C_{1}-C_{6} o aril(alquil C_{1}-C_{6})amino o heterociclo-(alquil C_{1}-C_{6})amino, en el que dicho nitrógeno de la amina está opcionalmente sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}.

Como se muestra en el esquema 2, etapa adicional f, el nitrógeno del anillo de pirrol de un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II), en el que R_{1} es H, se N-alquila por métodos como los descritos anteriormente para el esquema 2, etapa adicional d, para proporcionar un compuesto del esquema 2 de fórmula (I) o de fórmula (II) en el que R_{1} es alquilo C_{1}-C_{6}.

Adicionalmente, un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) del esquema 2 en el que R_{1} es H o alquilo C_{1}-C_{6} y X es S, se oxida opcionalmente para dar una sulfona o un sulfóxido en el que X es S(O)_{n} y n es 1 ó 2, respectivamente, por métodos bien conocidos por los expertos en la materia, tales como por ejemplo tratando una solución de dicho compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) en el que X es S con H_{2}O_{2} y Na_{2}CO_{3}. Como alternativa, el compuesto 10 ó 13 del esquema 2 se trata con un cloruro de arilsulfonilo, un cloruro de arilsulfinilo, un cloruro de heterociclosufonilo o un cloruro de heterociclosulfinilo (utilizado en lugar del diarildisulfuro o diheterociclodisulfuro) como se ha descrito en la etapa e anterior, para proporcionar un compuesto del esquema 2 de fórmula (I) o de fórmula (II) en el que X es S(O)_{n}, n es 1 ó 2 y R_{3} es arilo o heterociclo.

Esquema 3

5

Como se muestra en el esquema 3, los diarildisulfuros se preparan tratando una solución de un arilsulfuro en un disolvente orgánico adecuado, tal como, por ejemplo, metanol, con una solución acuosa de perborato sódico y permitiendo que la mezcla repose durante aproximadamente 13 horas a aproximadamente 24 horas a temperatura ambiente. El diarildisulfuro se puede aislar y purificar por métodos bien conocidos para los expertos en la materia. Los diheterociclodisulfuros, tales como, por ejemplo, el bis(2-piridinil)disulfuro, se preparan de forma similar. Cada uno del arilsulfuro y el heterociclosulfuro está opcionalmente sustituido como se ha definido anteriormente para "arilo" y "heterociclo".

Todas las realizaciones de los compuestos de esta invención como se describen en la presente memoria se pueden utilizar en el método para tratar varias enfermedades y trastornos como se describe en la presente memoria. Como se indica en la presente memoria, los compuestos usados en el método de esta descripción son capaces de inhibir los efectos de la caseína quinasa I\varepsilon.

Una realización de esta descripción proporciona un método para tratar un trastorno del ánimo o un trastorno del sueño. Otra realización de la presente descripción proporciona un método para tratar un trastorno del ánimo en el que el trastorno del ánimo es un trastorno depresivo o un trastorno bipolar. Una realización adicional de la presente descripción proporciona un método para tratar un trastorno depresivo en el que el trastorno depresivo es un trastorno depresivo mayor. Otra realización de la presente descripción proporciona un método para tratar un trastorno del ánimo en el que el trastorno del ánimo es un trastorno bipolar y el trastorno bipolar se selecciona entre el grupo que consiste en trastorno bipolar I y II. Otra realización de la presente descripción proporciona un método para tratar un trastorno del sueño. Una realización adicional de la presente descripción proporciona un método para tratar un trastorno del sueño en el que el trastorno del sueño es un trastorno del ritmo circadiano del sueño. Otra realización de la presente descripción proporciona un método para tratar un trastorno del sueño del ritmo circadiano en el que el trastorno del sueño del ritmo circadiano se selecciona entre el grupo que consiste en trastorno del sueño por trabajo en turnos, síndrome de desfase horario, síndrome de fase del sueño avanzada y síndrome de fase del sueño retardada. Un experto en la materia apreciará fácilmente que las enfermedades y trastornos indicados expresamente en la presente memoria no pretenden ser limitantes, sino más bien ilustrar la eficacia de los compuestos de la presente invención. De esta manera, debe entenderse que los compuestos de la invención pueden usarse para tratar cualquier enfermedad o trastorno que mejore por la inhibición de la caseína quinasa I\varepsilon.

En otra realización de la presente invención, se preparan composiciones farmacéuticas que comprenden un vehículo farmacéuticamente aceptable y un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II), o un estereoisómero, un enantiómero, un racemato o un tautómero de dicho compuesto; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, de una manera bien conocida para un experto en las técnicas farmacéuticas. El vehículo o excipiente puede ser un material sólido, semisólido o líquido que puede servir como vehículo o medio para el ingrediente activo. Los vehículos o excipientes adecuados son bien conocidos en la técnica. La composición farmacéutica puede adaptarse para uso oral, por inhalación, parenteral o tópico, y puede administrarse al paciente en forma de comprimidos, cápsulas, suspensiones, jarabes, aerosoles, inhaladores, supositorios, pomadas, polvos, soluciones y similares. Como se usa en la presente memoria, la expresión "vehículo farmacéutico" significa uno o más excipientes. Como se describe en la presente memoria, las composiciones farmacéuticas de la invención proporcionan la inhibición de la caseína quinasa I\varepsilon y, de esta manera, son útiles para el tratamiento de enfermedades o trastornos que mejoran por medio de la inhibición de la caseína quinasa I\varepsilon

Al preparar composiciones o formulaciones farmacéuticas de los compuestos de la presente invención, se debe tener cuidado de asegurar la biodisponibilidad de una cantidad terapéutica eficaz del compuesto o compuestos activos por la vía de administración seleccionada, incluyendo las vías oral, parenteral y subcutánea. Por ejemplo, las vías de administración eficaces pueden incluir las vías subcutánea, intravenosa, intranasal, rectal y similares, incluyendo la liberación del ingrediente activo y/o la composición directamente en el tejido.

Para la administración oral, los compuestos de la presente invención pueden formularse en preparaciones sólidas o líquidas, con o sin diluyentes inertes o vehículos digeribles, tales como cápsulas, píldoras, comprimidos, pastillas para chupar, polvos, soluciones, suspensiones o emulsiones. Las cápsulas, píldoras, comprimidos, trociscos y similares también pueden contener uno o más de los siguientes adyuvantes: aglutinantes tales como celulosa microcristalina o goma de tragacanto; excipientes tales como almidón o lactosa, agentes disgregantes tales como ácido algínico, almidón de maíz y similares; lubricantes, tales como ácido esteárico, estearato de magnesio, o Sterotex®, (Stokely-Van Camp Inc., Indinapolis, Indiana); emolientes, tales como dióxido de silicio coloidal; agentes edulcorantes, tales como sacarosa o sacarina; y agentes saporíferos, tales como menta, salicilato de metilo o saporíferos de fruta. Cuando la forma de dosificación unitaria es una cápsula, también puede contener un vehículo líquido, tal como polietilenglicol o un aceite graso. Los materiales usados deben ser farmacéuticamente puros y no tóxicos en las cantidades utilizadas. Como alternativa, las composiciones farmacéuticas pueden prepararse en una forma adecuada para prolongar la liberación para proporcionar una cantidad terapéutica de un compuesto de fórmula (I) de la invención en una forma adecuada para dosis única diaria, dosis única semanal o dosis única mensual usando métodos que son bien conocidos por los expertos en la materia. Por ejemplo, puede considerarse un polímero erosionable que contiene el principio activo.

Para la administración parenteral, los compuestos de la presente invención se pueden administrar como dosificaciones inyectables de una solución o suspensión del compuesto en un diluyente fisiológicamente aceptable con un vehículo farmacéutico que puede ser un líquido estéril, tal como agua-en-aceite o sin la adición de un tensioactivo y otros excipientes farmacéuticamente aceptables. Son aceites ilustrativos que pueden emplearse en las preparaciones los procedentes del petróleo, o de origen animal, vegetal o sintético tales como, por ejemplo, aceite de cacahuete, aceite de soja y aceite mineral. En general, se prefieren vehículos líquidos como agua, solución salina, soluciones acuosas de dextrosa y azúcares relacionados, etanol y glicoles, tales como propilenglicol, particularmente para las soluciones inyectables. La preparación parenteral se puede introducir en ampollas, jeringas desechables, o viales de dosis múltiples de plástico inerte o de vidrio.

Las soluciones o suspensiones descritas anteriormente también pueden incluir uno o más de los siguientes adyuvantes: diluyentes estériles, tales agua para inyección, solución salina, aceites no volátiles, polietilenglicoles, glicerina, propilenglicol u otros disolventes sintéticos; agentes antibacterianos, tales como ácido ascórbico o bisulfito de sodio; agentes quelantes, tales como ácido etilendiaminatetraacético; tampones tales como acetatos, citratos o fosfatos y agentes para ajustar la tonicidad tales como cloruro sódico o dextrosa.

Los compuestos de la presente invención se pueden administrar en forma de un parche cutáneo, una preparación para inyección de depósito o implante que se puede formular de manera que permita una liberación prolongada del ingrediente activo. El principio activo puede comprimirse en gránulos o pequeños cilindros e implantarse por vía subcutánea o por vía intramuscular como inyecciones de depósito o implantes. Los implantes pueden emplear materiales inertes, tales como polímeros biodegradables y siliconas sintéticas. Se encuentran vehículos farmacéuticos adecuados y técnicas de formulación en textos tales como Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19ª edición, Volúmenes 1 y 2, 1995, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania, Estados Unidos, que se incorpora en la presente memoria por referencia.

En el tratamiento de diversas enfermedades, trastornos y afecciones como se describen en la presente memoria, un nivel de dosificación aceptable es de aproximadamente 0,01 mg/kg por día a aproximadamente 250 mg/kg por día, preferiblemente de aproximadamente 0,05 mg/kg por día a aproximadamente 100 mg/kg por día, y especialmente aproximadamente 0,05 mg/kg por día a aproximadamente 40 mg/kg por día. Los compuestos de la presente invención se pueden administrar en un régimen de 1 a 4 veces por día y se determina por la naturaleza de la enfermedad, trastorno o afección que se va a tratar.

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Ejemplos

Los siguientes ejemplos pretenden servir para ilustración de la invención con mayor detalle, sin restringir el alcance de la invención de ninguna manera. Las tablas 1, 2, 3 y 4 proporcionan resúmenes de los compuestos de ejemplo que se preparan en la presente memoria.

A menos que se indique de otra manera, todos los materiales de partida, reactivos y disolventes se obtienen de proveedores comerciales y se utilizan sin posterior purificación. Todas las reacciones se realizaron en una atmósfera inerte con reactivos y disolventes secos. La cromatografía ultrarrápida se realizó usando gel de sílice 60 (35-70 \mum) de acuerdo con el procedimiento bibliográfico (Still, W.C.; Kahn, M; Mitra, A. J. Org. Chem. 1978 43, 2923) o una variación de este método utilizando un cartucho de gel de sílice disponible en el mercado (por ejemplo, Isco Redi Sep). La cromatografía en capa fina (TLC) se realizó sobre placas de gel de sílice con refuerzo inferior de vidrio 60F-254 (EM) revestidas hasta un grosor de 0,25 mm. Las placas se eluyeron con sistemas de disolventes (volumen/volumen) como se han descrito, y se visualizaron con vapor de yodo, luz UV o un reactivo de coloración, tal como solución de KMnO_{4}.

Los espectros de ^{1}H RMN se recogieron con espectrómetros Varian Gemini 300, Unity 300, Unity 400 o Unity 500 con desplazamientos químicos (\delta) indicados en ppm con respecto al tetrametilsilano (0,00 ppm) o cloroformo (7,26 ppm) como referencia. La cromatografía de líquidos con análisis espectral de masas (LCMS) se recogió en un espectrómetro de masas Micromass LCTAPI LC-TOF (tiempo de vuelo) y un Masslynx Data System. Modo de ionización = electropulverización (esi), se determinaron los valores para los iones moleculares protonados (M^{+}+ 1) utilizando una columna Synergi 2U HYDRO-RP 20x4, eluyendo con TFA al 0,1% en agua/acetonitrilo.

El éster etílico del ácido 4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico y el éster etílico del ácido 6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico se prepararon como se describe en Eras, J.; Galvez, C.; Garcia, F. Journal of Heterocyclic Chemistry (1984), 21 (1), 215-17. Los ésteres etílicos del ácido 4H-pirrolo[2,3-d]tiazol-5-carboxílico, ácido 6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico y el ácido 2-metil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico se prepararon de la misma manera que se describe en el documento WO9940914. Los éteres del ácido pirrolo[2,3-d]imidazol-5-carboxílico 2-alquiltio-, 2-arilalquiltio- y 2-alquil-sustituidos se pueden preparar como se describe en Shafiee, A. y Hadizadeh, F., J. of Heterocyclic Chemistry (1997), 34, 549-550 y en Shafiee, A.; Shahbazi Mojarrad, J.; Jalili, M. A.; Adhami, H. R. y Hadizadeh, F. Journal of Heterocyclic Chemistry, 39, 367-373. El 4-tiazolcarboxaldehído, 5-tiazolcarboxaldehído y 2-metil-5-tiazolcarboxaldehído se obtuvieron en el mercado. El éster etílico del ácido 1,4-dihidro-4-metilpirrolo[3,2-b]pirrol-2-carboxílico se preparó como se describe en H. Hemetsberger y D. Knittel, Monatsh. Chem. (1972) 103 (1), 194-204.

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Preparación del éster etílico del ácido 2-bromo-6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico Éster etílico del ácido 2-azido-3-(2-bromo-4-tiazolil)propenoico

6

Añadir lentamente a una solución de etóxido potásico (30 ml, al 24% p:p, 3 equiv. de EtOK) una suspensión de 2-bromo-4-tiazolilcarboxialdehído (3,87 g, 30 mol) y éster etílico de 2-azidoacetato (11.5 g, 3 equiv.) en un disolvente mixto de etanol (150 ml), DMF (5 ml) y cloruro de metileno (DCM, 20 ml) a 0ºC durante 15-20 minutos. Agitar la mezcla final durante una noche (18 horas) a temperatura ambiente, interrumpir la reacción con cloruro de amonio y retirar el etanol (\sim50 ml) en un evaporador rotatorio. Extraer la mezcla acuosa con DCM (3 porciones de 250 ml), lavar la fase orgánica con salmuera y secar sobre MgSO_{4}. Filtrar y concentrar el filtrado y purificar la mezcla en bruto (12,2 g) por cromatografía ultrarrápida [cartucho ISCO, SiO_{2}, 120 g, eluir con metanol: DCM (0-5%)] para obtener el compuesto del título (3,6 g, 45%).

LCMS: tiempo de retención = 3,68 min, (M^{+}) = 302,98

Éster etílico del ácido 2-bromo-6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico

7

Añadir gota a gota a xileno caliente (130ºC, 4 ml) una solución de éster etílico del ácido 2-azido-3-(2-bromo-4-tiazolil)propenoico (60 mg, 0,2 mmol) en DCM (1 ml). Calentar la mezcla durante una hora, luego enfriar a temperatura ambiente, depositar la mezcla sobre una almohadilla de gel de sílice y eluir con heptano:DCM (50%-100%) para proporcionar el compuesto del título (14 mg).

LCMS: tiempo de retención = 3,04 min, (M^{+}) = 274,92

Preparación del éster etílico del ácido 4H-pirrolo[2,3-d]tiazol-5-carboxílico

8

Preparar el éster etílico del ácido 4H-pirrolo[2,3-d]tiazol-5-carboxílico a partir de 4-tiazolilcarboxialdehído de forma similar a la descrita anteriormente para la preparación del éster etílico del ácido 2-bromo-6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico a partir del 2-bromo-4-tiazolilcarboxialdehído.

Preparación del ácido 2-bromo-6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico

9

Añadir KOH (1,07 g, 2 equiv.) a una mezcla de éster etílico del ácido 2-bromo-6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico (2,6 g, 9,38 mmol) en THF (15 ml) y agua (20 ml) y después calentar a 100ºC durante 1 h. Dejar en reposo durante una noche a temperatura ambiente y recoger los sólidos cristalinos por filtración (peso 1,7 g). Concentrar la solución acuosa a vacío y combinar con el sólido cristalino aislado previamente. Acidificar con ácido acético en metanol para proporcionar el compuesto del título (2,31 g).

LCMS: tiempo de retención = 2,35 min, (M^{+}) = 246,93

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Preparación del ácido 6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico

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10

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Preparar ácido 6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico por hidrólisis del éster etílico del ácido 6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico de forma similar a como se ha descrito anteriormente para la preparación del ácido 2-bromo-6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico a partir del éster etílico del ácido 2-bromo-6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico.

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Preparación de las amidas del ácido intermedias Amida del ácido 4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico

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Añadir una viruta de hidróxido de litio (0,1 g) al éster etílico del ácido 4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico (1,74 g, 8,9 mmol) y amoniaco 7 M en metanol (100 ml) en una bomba de acero. Cerrar herméticamente la bomba y calentar a 100ºC durante 16 horas. Enfriar a temperatura ambiente y concentrar para retirar los volátiles. Purificar el producto en bruto por cromatografía ultrarrápida (ISCO, cartucho de sílice, 40 g, eluir con metanol al 0-5% en cloruro de metileno) para proporcionar el compuesto del título (560 mg, 38%) como un sólido blanquecino.

LCMS: tiempo de retención = 2,08 min, (M^{+}) = 166,02

1H RMN (300 MHz, DMSO-D6) \delta ppm 6,95 (d, J = 5,25 Hz, 1 H) 7,05 - 7,08 (m, 1 H) 7,11 (s a, 1 H) 7,37 (d, J = 5,25 Hz, 1 H) 7,68 (s a, 1 H) 11,64 (s, 1 H)

Las siguientes amidas también se prepararon por el procedimiento anterior:

Amida del ácido 6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico (LCMS: tiempo de retención = 1,63 min, (M^{+} + H) = 168,00)

12

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Amida del ácido 2-metil-6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico (LCMS: tiempo de retención = 1,28 min, (M^{+}+H) = 182)

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Amida del ácido 2-bromo-6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico

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Añadir a una solución del ácido 2-bromo-6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico (2,53 g, 10 mmol) en DMF (45 ml), DIEA (diisopropiletilamina, 10 ml, 6 equiv.), EDC (1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida HCl, 5,0 g, 3,5 equiv.); HOBT (1-hidroxibenzotriazol, 1,91 g, 14 mmol, 1,4 equiv.) y NH_{4}Cl (2,25 g, 42 mmol). Agitar la mezcla a temperatura ambiente durante 6 horas y controlar por LCMS. Cuando ha finalizado, diluir la mezcla con acetato de etilo y lavar con agua y salmuera. Recoger el sólido por filtración (2,21 g) y purificar por cromatografía sobre gel de sílice (ISCO, cartucho de sílice, 4 g, eluir con metanol (10-40%) en cloruro de metileno) para proporcionar el compuesto del título (550 mg).

LCMS: tiempo de retención = 2,11 min, (M^{+}) = 245,98

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Amida del ácido 6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico

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Preparar amida del ácido 6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico por aminación del ácido 6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico de forma similar a como se ha descrito anteriormente para la preparación de la amida del ácido 2-bromo-6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico a partir del ácido 2-bromo-6H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico.

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Preparación general de los diarildisulfuros y diheterociclodisulfuros

Añadir a una solución del ariltiol sin sustituir o sustituido adecuadamente (17,2 milimol, 1,0 equivalentes) y MeOH (30 ml), una solución de perborato sódico (22 milimol) y agua (20 ml) con agitación y después dejar la reacción en reposo durante una noche. Recoger el sólido por filtración y lavar con metanol para dar el disulfuro de diarilo deseado. Otros disulfuros, incluyendo los disulfuros de diheterociclo (por ejemplo, disulfuro de bis(2-tienilo)) se pueden preparar de forma similar a la descrita para la preparación de los disulfuros de diarilo deseados.

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Métodos para la preparación del resto pirrol

Método 1

Amida del ácido 6-fenilsulfanil-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico (Ia)

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Tratar amida del ácido 4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico (75 mg, 0,45 mmol) con NaH (45 mg, al 60% en aceite, 1,12 mmol, 2,5 equiv.) en N,N-dimetilformamida (1.3 ml) a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante 35 minutos. Añadir disulfuro de difenilo (137 mg, 1,4 equiv.) y calentar la mezcla a 70ºC durante una noche. Diluir la mezcla con salmuera (2 ml) y extraer con acetato de etilo. Concentrar la solución de acetato de etilo para dar un aceite y purificar por cromatografía sobre gel de sílice (ISCO, cartucho de sílice, 4 g, eluir con metanol 0-10% en cloruro de metileno) para proporcionar el compuesto del título (55 mg).

LCMS: tiempo de retención = 3,03 min, (M^{+}+H) = 275,01

1H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 5,94 (s, 1 H) 7,03 (d, J = 5,25 Hz, 1 H) 7,14 - 7,27 (m, 6 H) 7,79 (s a, 1 H) 10,79 (s a, 1 H)

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Método 2

Amida del ácido 6-(3-fluorofenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico (Ib)

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17

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Añadir amida del ácido 4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico (60 mg, 0,36 mmol) a una mezcla de bis(3-fluorofenil)disulfuro (150 mg, 0,51 mmol) y carbonato de cesio (120 mg, 1 equiv.) en DMF (2,5 ml), y después calentar a 95ºC durante 3 h. Seguir la reacción por TLC. Cuando ha finalizado, diluir la mezcla de reacción con acetato de etilo (15 ml) y lavar con salmuera (25 ml). Secar la solución orgánica, concentrar para proporcionar un aceite bruto y purificar el aceite por cromatografía sobre gel de sílice (cartucho de sílice ISCO, 4 g, eluir con metanol 0-10% en cloruro de metileno) para proporcionar el compuesto del título (81 mg).

LCMS: tiempo de retención = 3,47 min, (M^{+}+H) = 293

1H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 5,67 (s, 1 H), 6,82 - 6,90 (m, 2 H), 6,96 (ddd, J = 7,87, 1,50, 1,37 Hz, 1 H), 7,03 (d, J = 5,25 Hz, 1 H), 7,17 - 7,24 (m, 1 H), 7,31 (d, J = 5,25 Hz, 1 H), 7,70 (s, 1 H), 9,96 (s, 1 H)

\newpage

Método 3

Amida del ácido 4-(piridin-2-ilsulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico, (IIa)

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18

\vskip1.000000\baselineskip

Tratar la amida del ácido 6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico (57 mg, 0,34 mmol) con NaH (19 mg, 0,78 mmol, 2,3 equiv.) en N,N-dimetilformamida (1 ml) a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante 45 minutos. Añadir 2,2'-dipiridildisulfuro (106 mg, 1,4 equiv.) y agitar la mezcla durante una noche a temperatura ambiente. Diluir la mezcla con agua y extraer con acetato de etilo. Concentrar la solución de acetato de etilo para dar un residuo que se purifica por cromatografía ultrarrápida (ISCO, cartucho de sílice, eluir con metanol al 5% en cloruro de metileno (+1% de amoniaco 7 N en metanol) para proporcionar el compuesto del título (32 mg, 32%).

LCMS: tiempo de retención = 2,53 min, (M^{+}+H) = 276,022

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Método 4

Amida del ácido 4-(fenilsulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico (IIb)

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19

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Tratar la amida del ácido 6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico (50 mg, 0,30 mmol) en N,N-dimetilformamida (0,5 ml) con NaH (29 mg, 60% en aceite, 0,75 mmol, 2,5 equiv.) a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante 45 minutos. Añadir disulfuro de difenilo (92 mg, 0,4 mmol 1,4 equiv.) y agitar la mezcla a 60ºC durante una noche. Aumentar la temperatura hasta 100ºC durante 5 horas y enfriar a temperatura ambiente. Diluir al reacción con agua y acetato de etilo* después de lo cual el compuesto del título cristaliza de la solución. Recoger el producto por filtración y secar a vacío para proporcionar el compuesto del título (28 mg).

LCMS: tiempo de retención = 3,068 min, (M^{+}+H) = 275,024

\text{*}En algunos casos (véanse las tablas 1 y 2, columna de método de síntesis) en los que se empleó el método 4, los compuestos no cristalizaron. En esta situación, separar la fracción de acetato de etilo, concentrar para dar un residuo en bruto y purificar el residuo por cromatografía ultrarrápida (ISCO, cartucho de sílice, eluir con metanol al 10% en cloruro de metileno (+1% de amoniaco 7 N en metanol) para proporcionar el compuesto deseado.

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Método 5

Amida del ácido 2,6-bis-fenilsulfanil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico (IIq)

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20

\vskip1.000000\baselineskip

Añadir disulfuro de difenilo (93 mg, 0,43 mmol, 1,25 equiv.) a una mezcla de amida del ácido 2-bromo-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico (85 mg, 0,34 mmol) y carbonato de cesio (140 mg, 1,25 equiv.) en DMF (4 ml). Calentar la mezcla a 100ºC durante 16 horas. Eliminar la DMF a presión reducida y repartir el residuo entre agua y acetato de etilo. Lavar la fase orgánica con salmuera y luego secar y filtrar la fase orgánica. Añadir el filtrado a un matraz que contiene una pequeña cantidad de gel de sílice (aproximadamente 0,5 g) y evaporar el disolvente para proporcionar el producto en bruto adsorbido sobre el gel de sílice. Colocar el gel de sílice en la parte superior de una columna pequeña que contenga aproximadamente 4 g de gel de sílice y eluir con 0-10% de MeOH en DCM para proporcionar 8 mg (6,5%) del compuesto del título.

LCMS: tiempo de retención = 3,30 min, (M^{+}) = 383,02

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(Tabla pasa a página siguiente)

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TABLA 1 Compuestos de Fórmula (I) (M es S)

21

22

TABLA 2 Compuestos de Fórmula (II) (M es S)

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23

24

TABLA 3 Datos espectrales de los compuestos de Fórmula (I) (M es S)

25

26

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TABLA 4 Datos espectrales de los compuestos de Fórmula (II) (M es S)

27

28

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Ejemplos biológicos Ensayo en placa de filtro de ^{33}P-ATP de caseína quinasa épsilon con respecto a la selección de inhibidores CK1\varepsilon

Propósito: Este ensayo mide la capacidad de los compuestos de inhibir la fosforilación del sustrato caseína por la enzima caseína quinasa 1\varepsilon usando un ensayo de filtración ^{33}P-ATP in vitro. Los compuestos se ensayan con cinco concentraciones por duplicado con el fin de obtener los valores de CI_{50} o del porcentaje de inhibición a una concentración 10 micromolar que se resumen en la tabla 4.

Materiales:

Equipo:

Robot de Manipulación de Líquidos Beckman Biomek 2000

Pipeteador de 96 Canales Automático Beckman Multimek 96

Kit Básico de Colector de Vacío nº MAVM0960R Millipore

Dosificador de Líquidos Titertek Multidrop

Contador de Centelleo de Líquidos Packard TopCount NXT

Placas:

Placa nº 9018 Costar EIA/RIA

Placa de Poliestireno de fondo en U de 96 pocillos Falcon nº 353910

Placas de Filtración de 96 pocillos Millipore Multiscreen nº MAPHNOB50

Placas Adaptadoras Millipore Multiscreen TopCount nº SE3M203V6

Productos químicos:

EGTA de SIGMA nº E-3889

Caseína (desfosforilada) de SIGMA nº C-4032

ATP de SIGMA nº A-7699

DTT de Fisher Biotech nº BP1725

Ácido tricloroacético de SIGMA nº T-6399

\gamma-^{33}P-ATP 1 mCi/37 MBq de Perkin Elmer Life Sciences nº NEG-602H

Enzima:

Caseína quinasa 1\varepsilon a una concentración final de 0,58 mg/ml obtenida por procedimientos de fermentación y purificación como es bien conocido por los expertos en la materia. Se almacena en forma de alícuotas de 100 \mul a menos 80ºC.

Compuestos:

Los compuestos para el ensayo se suministran como una solución madre de compuesto 10 mM congelada disuelta en DMSO al 100%.

Condiciones de Ensayo:

El volumen total final de ensayo por pocillo es igual a 50 \mul que se prepara como se indica a continuación:

5 \mul de solución madre del compuesto diluida (10, 1, 0,1, 0,01 ó 0,001 \muM),

5 \mul de caseína desfosforilada a una concentración final de 0,2 \mug/\mul,

20 \mul de CK1\varepsilon a una concentración final de 3 ng/\mul, y

20 \mul de \gamma-^{33}P-ATP de concentración final 0,02 \muCi/\mul mezclado con ATP frío (concentración final 10 \muM).

Metodología:

1.

Preparar 500 ml de tampón de ensayo reciente: Tris 50 mM pH 7,5, MgCl_{2} 10 mM, DTT 2 mM y EGTA 1 mM

2.

Obtener compuestos para evaluarlos como 10 \mul de provisión 10 mM disueltos en DMSO al 100%. Usar un robot de manipulación de líquidos Biomek 2000, realizar diluciones en serie para producir concentraciones finales de 10, 1, 0,1, 0,01 y 0,001 \muM y añadir las diluciones finales de compuesto como adiciones de 5 \mul a placas Falcon de fondo en U. Típicamente, ensayar 8 compuestos por placa de 96 pocillos, sirviendo las columnas 1 y 12 como pocillos de control. Un ensayo de selección de rutina constará de 32 compuestos, es decir 4 placas de ensayo.

3.

Los mapas de las placas de ensayo se establecen de acuerdo con el siguiente patrón \underbar{CKIePlateMap.xls}

29

4.

Añadir 5 \mul del compuesto como se ha indicado y después añadir 5 \mul de caseína desfosforilada (disuelta en H_{2}O destilada) (0,2 \mug/\mul) y 20 \mul de CK1\varepsilon (3 ng/\mul) a los pocillos adecuados.

5.

Finalmente, añadir 20 \mul de \gamma-^{33}P-ATP (0,02 \muCi/\mul)/ATP 10 \muM frío (aproximadamente iguales a 2x10^{6} CPM por pocillo).

6.

Centrifugar la placa de ensayo Falcon de fondo en U que contiene el volumen de reacción de 50 \mul anterior y después incubar a temperatura ambiente durante 2 horas.

7.

Al cabo de 2 horas, detener la reacción mediante la adición de 65 \mul de ATP 2 mM frío enfriado en hielo (elaborado en tampón de ensayo) a las placas de ensayo utilizando un Beckman Multimek.

8.

Al mismo tiempo, añadir 25 \mul de TCA enfriado con hielo al 100% preparado en H_{2}O destilada a un número correspondiente de placas de filtro Millipore MAPH.

9.

Usando una pipeta manual de 8 canales, transferir 100 \mul de la mezcla de reacción desde la placa Falcon de fondo en U a las placas de filtro Millipore MAPH prehumedecidas con TCA.

10.

Mezclar las placas de filtro Millipore MAPH suavemente y dejar reposar a temperatura ambiente durante al menos 30 minutos para precipitar las proteínas.

11.

Después de 30 minutos, colocar las placas de filtración en un colector de distribución de vacío Millipore y filtrar a menos de 8 mm de Hg, ya que los filtros MAPH tienden a formar burbujas de aire a valores de vacío superiores.

12.

Lavar las placas de filtro secuencialmente y filtrarlas con 2x150 \mul de TCA al 20%, 2x150 \mul de TCA al 10% y 2x150 \mul de TCA al 5% (total de 6 lavados por placa/900 \mul por pocillo).

13.

Dejar que las placas se sequen durante una noche a temperatura ambiente. Al día siguiente, añadir 40 \mul de líquido de centelleo Packard Microscint-20 por pocillo usando un dosificador Titertek Multidrop; cerrar herméticamente las placas y contar durante 2 minutos/pocillo en un contador de centelleo Packard Topcount NXT (para proporcionar valores de CPM/pocillo).

Cálculos:

1.

Introducir los datos de Recuentos Por Minuto (CPM) en un calculo de datos patentado y archivar la base de datos (Activity Base de IDBS versión 5.0).

2.

Para cada placa, la columna 1 refleja una actividad de fosforilación total de la enzima en ausencia de cualquier compuesto inhibidor y, de esta manera, representa 100%. La columna 12 refleja cualquier actividad de fosforilación no específica/radiactividad retenida en ausencia de compuesto inhibidor y enzima. Típicamente, se observa aproximadamente 1% de CPM en total que son "no específicas".

3.

Determinando las CPM "totales" y "no específicas" para cada placa, se puede determinar el porcentaje de inhibición de la capacidad de la enzima para fosforilar el sustrato para cada concentración de compuesto de ensayo. Usar estos datos de % de inhibición para calcular un valor de CI_{50} (concentración a la que un compuesto puede inhibir la actividad enzimática en 50%) para un compuesto usando un programa de ajuste de curvas no lineal incluido en el protocolo de cálculo Activitybase (DG0027-CK1-D-BL).

4.

En este sistema de ensayo, los estudios cinéticos han determinado un valor de K_{m} para ATP de 21 \muM.

Ensayo en Placa con Membrana de Afinidad de Estreptavidina de la Caseína Quinasa 1\delta con respecto a Inhibidores CK1\delta

Propósito: Evaluar la actividad CK1\delta de los compuestos de ensayo en Placas de Captura de Biotina con Membrana de Afinidad de Estreptavidina (Promega V7542)

Suministros y reactivos

HEPES Sigma nº H3375 PM = 238,3; fosfato de \beta-glicerol Sigma nº G-9891 PM = 216,0; EDTA 0,5 M, pH 8,0 GibcoBRL; Ortovanadato sódico ACROS nº 205330500 PM = 183,9; DTT (DL-ditiotreitol) Sigma nº D-5545
PM = 154,2; cloruro de magnesio ACROS nº 41341-5000 PM = 203,3; ATP Sigma nº A-7699 PM = 551,1; \gamma^{33}P ATP NEN nº NEG602H; caseína quinasa 1\delta Sigma nº C4455; sustrato de caseína quinasa 1 New England Peptide Biotin-RRKDLHDDEEDEAMSITA PM = 2470

La solución tampón de quinasa (KB, 100 ml) se prepara como sigue:

30

La mezcla principal de ATP se prepara como sigue:

Preparar 1 ml de la solución de ATP 1M en agua (solución madre de ATP 1 M).

Para 12 ml de KB:

Añadir 12 \mul de solución de ATP 1 M, después

añadir 12 \mul de ^{33}P-ATP (10 \muCi/\mul), NEG602H, Perkin Elmer.

Preparar la placa de reacción y realizar el ensayo como sigue:

1.

Añadir 10 \mul de KB por pocillo con o sin el compuesto de ensayo inhibidor a los pocillos de la placa de reacción.

2.

Añadir 60 \mul de KB por pocillo.

3.

Añadir 10 \mul de sustrato peptídico 500 \muM por pocillo

4.

Llevar la placa hasta 37ºC

5.

Añadir 10 \mul de dilución 1:10 de CK1\delta por pocillo = 0,42 \mug o 0,68 unidades

6.

Iniciar la reacción con 10 \mul de mezcla principal de ATP por pocillo

7.

Poner la placa de reacción en un incubador a 37ºC durante 10 minutos.

8.

Parar la reacción con 10 \mul de ATP 1 M. Transferir 20 \mul a la placa SAM y dejar reposar durante 10 minutos a temperatura ambiente.

9.

Lavar tres veces con 100 \mul de solución de NaCl 2 M, después tres veces con 100 \mul de soluciones de NaCl 2 M y H_{3}PO_{4} al 1% y después tres veces con 100 \mul de agua en un colector de distribución de vacío.

10.

Secar la placa de filtro bajo una lámpara durante 30 minutos.

11.

Cerrar herméticamente el fondo de la placa y añadir 20 \mul de MicroScint 20.

12.

Realizar la lectura en un TOPCOUNT.

Procedimientos experimentales de ensayo circadiano celular

Cultivo de células: Repartir cultivos celulares de fibroblastos (P2C4) Mper1-luc Rat-1 cada 3-4 días (\sim10-20% de confluencia) en matraces de cultivo de tejido de poliestireno con ventilación de 150 cm^{2} para cultivo de tejidos (Falcon nº 35-5001) y mantenerlos en medio de crecimiento [EMEM (Cellgro nº 10-010-C); suero bovino fetal al 10% (FBS; Gibco nº 16000-044); y 50 U.I./ml de penicilina-estreptomicina (Cellgro nº 30-001-C1)] a 37ºC y CO_{2} al 5%.

Transfección estable: Co-transfectar cultivos de fibroblastos Rat-1 a una confluencia de 30-50% con vectores que contienen el marcador selectivo de resistencia a Zeocina para la transfección estable y un gen indicador de luciferasa dirigido por el promotor mPer-1. Después de 24-48 horas, repartir los cultivos en placas de 96 pozos y mantenerlos en medio de crecimiento complementado con 50-100 \mug/ml de zeocina (Invitrogen nº 45-0430) durante 10-14 días. Evaluar la expresión del indicador en los transfectantes estables resistentes a la zeocina complementando el medio con luciferina 100 \muM (Promega nº E1603) y ensayar la actividad de la luciferasa en un contador de centelleo TopCount (Packard Model nº C384V00). Sincronizar los clones de Rat-1 que expresan tanto resistencia a Zeocin como actividad luciferasa dirigida por mPer1 por choque de suero con suero de caballo al 50% [HS (Gibco nº 16050-122)] y evaluar la actividad circadiana del indicador. Seleccionar los clones de fibroblastos Mper1-luc Rat-1 P2C4 para ensayar los compuestos.

Protocolo de sincronización: Sembrar en placas los fibroblastos (P2C4) Mper1-luc Rat-1 (40-50% de confluencia) en placas de cultivo de tejido de 96 pocillos opacos (PerkinElmer nº 6005680) y mantenerlos en medio de crecimiento complementado con 100 \mug/ml de zeocina (Invitrogen nº 45-0430) hasta que los cultivos alcancen el 100% de confluencia (48-72 horas). Sincronizar los cultivos con 100 \mul de medio de sincronización [EMEM (Cellgro nº 10-010-C); 100 U.I./ml de penicilina-estreptomicina (Cellgro nº 30-001-C1); HS al 50% (Gibco nº 16050-122)] durante 2 horas a 37ºC y con CO2 al 5%. Después de la sincronización, aclarar los cultivos con 100 \mul de EMEM (Cellgro nº 10-010-C) durante 10 minutos a temperatura ambiente. Después de aclarar, sustituir el medio con 300 \mul de medio independiente de CO2 [CO2I (Gibco nº 18045-088); L-glutamina 2 mM (Cellgro nº 25-005-C1); 100 U.I./ml de penicilina-estreptomicina (Cellgro nº 30-001-C1); luciferina 100 \muM (Promega nº E1603)]. Añadir los compuestos de los que se desean ensayar los efectos circadianos al medio independiente de CO_{2} en DMSO al 0,3% (concentración final). Cerrar herméticamente los cultivos inmediatamente con película TopSeal-A (Packard nº 6005185) y transferirlos para medir la actividad luciferasa.

Medición Automática del Indicador Circadiano: Después de la sincronización, mantener las placas de ensayo a 37ºC en un incubador de cultivos de tejidos (Forma Scientific Modelo nº 3914). Estimar la actividad luciferasa in vivo midiendo la producción relativa de luz en un contador de centelleo TopCount (Packard Modelo nº C384V00). Transferir las placas de la incubadora al lector usando un brazo robotizado ORCA (Beckman Instruments) y un programa de programación automática (Versión 3.3; SAGIAN/Beckman Instruments).

Análisis de los Datos: Se usan Microsoft Excel y XLfit (Versión 2.0.9; IDBS) para importar, manipular y representar los datos. Realizar análisis de periodos determinando el intervalo entre la producción de luz mínima relativa durante varios días o por la transformada de Fourier. Los dos métodos producen una estimación de periodos casi idéntica en un intervalo de periodos circadianos. Presentar la potencia como CE_{\Delta t+1h}, que es la concentración micromolar eficaz que induce un alargamiento del periodo de 1 hora. Analizar los datos ajustando una curva hiperbólica a los datos expresados como cambio de periodo (eje y) frente a la concentración de compuesto de ensayo (eje x) en XLfit e interpolar la CE_{\Delta t+1h} a partir de esta curva.

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Ensayo del Ciclo Circadiano en Rata

Este ensayo proporciona un medio para evaluar el efecto de un compuesto de ensayo sobre el ciclo circadiano in vivo. Usar ratas Wistar macho (Charles River) con una masa corporal de partida de 200-250 g. Encerrar cada animal individualmente antes del ensayo en un medio controlado y mantener una temperatura ambiente termoneutra de 24-28ºC con un ciclo de luz/oscuridad de 12/12 horas (h) (la luz se enciende a las 06:00 h), y proporcionar pienso de laboratorio convencional y agua a discreción. Implantar en cada rata un transmisor de biotelemetría intra-abdominal (Minnimitter-VMFH, serie 4000, Sunriver, OR) para controlar la temperatura corporal central y la actividad general. Implantar cada transmisor de acuerdo con las recomendaciones del fabricante con anestesia general con ketamina/xilazina (78/13 mg kg^{-1}, ip) y dejar que los animales se recuperen durante 7-10 días. Después del periodo de recuperación, establecer el ciclo circadiano interno de cada animal, poner los animales en un ciclo de oscuridad constante (ciclo de luz/oscuridad de 0/24 h) y dejar que los animales se muevan libremente durante 7-10 días antes de administrar los compuestos de ensayo. Durante el régimen de dosificación, los animales reciben vehículo o compuesto (ip, sc, o po) a CT (Tiempos Circadianos) específicos durante un periodo de 48 horas. Controlar a los animales durante 5 a 7 días en un ciclo de oscuridad constante (ciclo de luz/oscuridad de 0/24 h) después de finalizar el régimen de dosificación. Para cada experimento, muestrear los datos de temperatura abdominal y actividad general a intervalos de 5 minutos. Para el análisis, usar el software VitalView y Actiview suministrado por Minimitter. Representar en un gráfico las temperaturas abdominales observadas obtenidas para cada rata el primer día en una línea horizontal. Alinear la línea de temperaturas abdominales observadas por debajo de la línea de las abscisas con el tiempo circadiano (eje x). Representar en un gráfico las temperaturas abdominales observadas para cada día sucesivo como líneas individuales de una manera similar para proporcionar la ordenada (eje y, en días). Conectar la elevación inicial de la temperatura corporal central que se produce cada día con una línea recta, lo cual permite el uso de múltiples días para estimar la fase circadiana en cualquier día determinado para cada rata individual. Determinar el efecto del tratamiento sobre la fase usando la estimación de línea recta de múltiples días de la fase antes y después de la dosificación. El tratamiento con compuesto activo producirá un mayor desplazamiento entre la línea recta que conecta la elevación inicial diaria de la temperatura corporal central antes del tratamiento con compuesto y la línea recta que conecta la elevación inicial de la temperatura corporal central después del tratamiento con compuesto frente al control con vehículo antes y después de las líneas de tratamiento. Calcular la diferencia entre las fases proyectadas en el día previo a la dosificación para los animales tratados. Usar ANOVA, junto con el ensayo t de Student, para comparar los desplazamientos circadianos de la temperatura media corporal en minutos entre grupos.

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TABLA 5 Datos Biológicos

31

32

Claims (23)

1. \global\parskip0.900000\baselineskip

   1. Un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II):

   33

   en la que

   X es S o S(O)_{n};

   R_{1} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

   R_{2} es NR_{5}R_{6};

   R_{3} es arilo o heterociclo;

   R_{4} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, aril-(alquilo C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquilo C_{1}-C_{6}), alcoxi C_{1}-C_{6}, aril-(alcoxi C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alcoxi C_{1}-C_{6}), CF_{3}, halógeno, SH, alquiltio C_{1-6}, aril-(alquiltio C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquiltio C_{1}-C_{6}), NO_{2}, NH_{2}, NR_{5}R_{6}, aril-(alquilamino C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquilamino C_{1}-C_{6}), o XR_{3}, en el que X y R_{3} son como se han definido anteriormente;

   R_{5} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

   R_{6} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

   L es N o CR_{7} en el que R_{7} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

   M es S, O o NR_{8} en el que R_{8} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, aril-(alquilo C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquilo C_{1}-C_{6}) o acilo;

   n es 1 ó 2;

   donde arilo significa cualquier anillo de carbono monocíclico, bicíclico o tricíclico, de hasta siete miembros en cada anillo, en el que al menos un anillo es aromático y está sin sustituir o sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados entre el grupo que consiste en metilendioxi, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{6}, halógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1}-C_{6}), -N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2}, -NH-acilo y -N(alquil C_{1}-C_{6})acilo.

   donde acilo se refiere a un grupo H-(C=O)-, alquil C_{1}-C_{6}-(C=O)-, aril-(C=O)-, aril(alquil C_{1}-C_{6})-(C=O)-, heteroci-
   clo-(C=O)- o heterociclo(alquil C_{1}-C_{6})-(C=O)-;

   donde heterociclo significa un anillo monocíclico estable de 5 a 7 miembros o bicíclico estable de 8 a 11 miembros que está saturado o insaturado, y que consiste en átomos de carbono y de uno a tres heteroátomos seleccionados entre el grupo que consiste en N, O y S, y donde los heteroátomos nitrógeno y azufre pueden estar opcionalmente oxidados, y el heteroátomo nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado, e incluyendo cualquier grupo bicíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos definidos anteriormente está condensado con un anillo de benceno, estando el heterociclo sin sustituir o sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados entre el grupo que consiste en alcoxi C_{1}-C_{6}, hidroxi, halógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2},-NH(alquilo C_{1}-C_{6}), -N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2}, -NH-acilo y -N(alquil C_{1}-C_{6})acilo;

   o un estereoisómero, enantiómero, racemato o tautómero del mismo; o

   una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
2. 2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de fórmula (I) o de fórmula (II), en el que cada uno de M y X es S.
3. 3. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 de fórmula (I), en el que L es CR_{7}.
4. 4. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en el que R_{7} es H.
5. 5. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4, seleccionado entre el grupo que consiste en:

   amida del ácido 6-fenilsulfanil-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(3-fluorofenil-sulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(4-clorofenil-sulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(2-aminofenil-sulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(piridin-2-ilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-p-tolilsulfanil-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(tiofen-2-il-sulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(3,5-dicloro-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(piridin-4-ilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-m-tolilsulfanil-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-o-tolilsulfanil-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(2,3-dicloro-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(2,5-dicloro-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(2-etil-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(3-bromo-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(3,5-dimetil-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(3-metoxi-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(2-metoxi-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(2-trifluorometil-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(2-fluoro-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico, y

   amida del ácido 6-(3-trifluorometoxi-fenilsulfanil)-4H-tieno[3,2-b]pirrol-5-carboxílico.
6. 6. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 de fórmula (I) en el que L es N.
7. 7. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 6, seleccionado entre el grupo que consiste en:

   amida del ácido 6-fenilsulfanil-4H-pirrolo[2,3-d]tiazol-5-carboxílico,

   amida del ácido 6-(3-fluoro-fenilsulfanil)-4H-pirrolo[2,3-d]tiazol-5-carboxílico, y

   amida del ácido 6-(piridin-2-ilsulfanil-4H-pirrolo[2,3-d]tiazol-5-carboxílico.
8. 8. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 de fórmula (II), en el que L es CR_{7}.
9. 9. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 8, en el que R_{7} es H.
10. 10. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 9, seleccionado entre el grupo que consiste en:

    amida del ácido 4-(piridin-2-ilsulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

    amida del ácido 4-(fenilsulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

    amida del ácido 6-(3-fluorofenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

    amida del ácido 4-(piridin-4-ilsulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

    amida del ácido 4-(3,5-diclorofenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

    amida del ácido 4-(tiofen-2-il-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

    amida del ácido 4-(3-bromofenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

    amida del ácido 4-(3-metoxifenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

    amida del ácido 4-(2-metoxifenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico,

    amida del ácido 4-(3-clorofenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico, y

    amida del ácido 4-(3-metilfenil-sulfanil)-6H-tieno[2,3-b]pirrol-5-carboxílico.
11. 11. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 de fórmula (II), en el que L es N.
12. 12. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, seleccionado entre el grupo que consiste en:

    amida del ácido 2-metil-6-fenil-sulfanil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

    amida del ácido 6-(3-metoxifenil-sulfanil)-2-metil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

    amida del ácido 6-(3-fluorofenil-sulfanil)-2-metil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

    amida del ácido 6-(3-clorofenil-sulfanil)-2-metil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

    amida del ácido 6-(3-trifluorometoxi-fenilsulfanil)-2-metil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

    amida del ácido 2,6-bis-fenilsulfanil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

    amida del ácido 2,6-bis-(3-metoxi-fenilsulfanil)-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico,

    amida del ácido 6-fenilsulfanil-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico, y

    amida del ácido 6-(3-metoxifenil-sulfanil)-4H-pirrolo[3,2-d]tiazol-5-carboxílico.
13. 13. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable y un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) de acuerdo con la reivindicación 1, o un estereoisómero, un enantiómero, un racemato o un tautómero de dicho compuesto; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
14. 14. Compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II),

    34

    en la que

    X es S o S(O)_{n};

    R_{1} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

    R_{2} es NR_{5}R_{6};

    R_{3} es arilo o heterociclo;

    R_{4} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, aril-(alquilo C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquilo C_{1}-C_{6}), alcoxi C_{1}-C_{6}, aril-(alcoxi C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alcoxi C_{1}-C_{6}), CF_{3}, halógeno, SH, alquiltio C_{1-6}, aril-(alquiltio C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquiltio C_{1}-C_{6}), NO_{2}, NH_{2}, NR_{5}R_{6}, aril-(alquilamino C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquilamino C_{1}-C_{6}), o XR_{3}, en el que X y R_{3} son como se han definido anteriormente;

    R_{5} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

    R_{6} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

    L es N o CR_{7} en el que R_{7} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

    M es S, O o NR_{8} en el que R_{8} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, aril-(alquilo C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquilo C_{1}-C_{6}) o acilo;

    n es 1 ó 2;

    donde arilo significa cualquier anillo de carbono monocíclico, bicíclico o tricíclico, de hasta siete miembros en cada anillo, en el que al menos un anillo es aromático y está sin sustituir o sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados entre el grupo que consiste en metilendioxi, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{6}, halógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1}-C_{6}), -N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2}, -NH-acilo y -N(alquil C_{1}-C_{6})acilo.

    donde acilo se refiere a un grupo H-(C=O)-, alquil C_{1}-C_{6}-(C=O)-, aril-(C=O)-, aril(alquil C_{1}-C_{6})-(C=O)-, heteroci-
    clo-(C=O)- o heterociclo(alquil C_{1}-C_{6})-(C=O)-;

    donde heterociclo significa un anillo monocíclico estable de 5 a 7 miembros o bicíclico estable de 8 a 11 miembros que está saturado o insaturado, y que consiste en átomos de carbono y de uno a tres heteroátomos seleccionados entre el grupo que consiste en N, O y S, y donde los heteroátomos nitrógeno y azufre pueden estar opcionalmente oxidados, y el heteroátomo nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado, e incluyendo cualquier grupo bicíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos definidos anteriormente está condensado con un anillo de benceno, estando el heterociclo sin sustituir o sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados entre el grupo que consiste en alcoxi C_{1}-C_{6}, hidroxi, halógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2},-NH(alquilo C_{1}-C_{6}), -N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2}, -NH-acilo y -N(alquil C_{1}-C_{6})acilo;

    o un estereoisómero, enantiómero, racemato o tautómero del mismo; o

    una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

    para su uso como un medicamento en el tratamiento de un trastorno seleccionado entre un trastorno del estado de ánimo o de un trastorno del sueño.
15. 15. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 14 en el que el trastorno es un trastorno del estado de ánimo.
16. 16. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 15 en el que el trastorno del estado de ánimo se selecciona entre un trastorno depresivo o un trastorno bipolar.
17. 17. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 16 en el que el trastorno depresivo es trastorno depresivo mayor.
18. 18. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 16 en el que el trastorno bipolar se selecciona entre el grupo que consiste en trastorno bipolar I y trastorno bipolar II.
19. 19. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 14 en el que el trastorno es un trastorno del sueño.
20. 20. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 19 en el que el trastorno del sueño es un trastorno del sueño del ritmo circadiano.
21. 21. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 20, en el que el trastorno del sueño del ritmo circadiano se selecciona entre el grupo compuesto por trastorno del sueño por trabajo en turnos, síndrome de desfase horario, síndrome de fase del sueño avanzada y síndrome de fase del sueño retardada.

    \global\parskip1.000000\baselineskip

22. 22. Un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II):

    35

    \newpage

    en la que:

    X es S;

    R_{1} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

    R_{2} es NR_{5}R_{6};

    R_{3} es arilo o heterociclo;

    R_{4} es XR_{3} en el que X y R_{3} son como se han definido anteriormente;

    R_{5} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

    R_{6} es H o alquilo C_{1}-C_{6};

    L es N;

    M es S, O o NR_{8} en el que R_{8} es alquilo C_{1}-C_{6}, aril-(alquilo C_{1}-C_{6}), heterociclo-(alquilo C_{1}-C_{6}) o acilo;

    donde arilo significa cualquier anillo de carbono monocíclico, bicíclico o tricíclico, de hasta siete miembros en cada anillo, en el que al menos un anillo es aromático y está sin sustituir o sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados entre el grupo que consiste en metilendioxi, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{6}, halógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2}, -NH(alquilo C_{1}-C_{6}), -N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2}, -NH-acilo y -N(alquil C_{1}-C_{6})acilo.

    donde acilo se refiere a un grupo H-(C=O)-, alquil C_{1}-C_{6}-(C=O)-, aril-(C=O)-, aril(alquil C_{1}-C_{6})-(C=O)-, heteroci-
    clo-(C=O)- o heterociclo(alquil C_{1}-C_{6})-(C=O)-;

    donde heterociclo significa un anillo heterocíclico monocíclico estable de 5 a 7 miembros o bicíclico estable de 8 a 11 miembros, que está saturado o insaturado, y que consiste en átomos de carbono y de uno a tres heteroátomos seleccionados entre el grupo que consiste en N, O y S, y en el que los heteroátomos nitrógeno y azufre pueden estar opcionalmente oxidados, y el heteroátomo nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado, incluyendo cualquier grupo bicíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos definidos anteriormente está condensado con un anillo de benceno, estando el heterociclo sin sustituir o sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados entre el grupo que consiste en alcoxi C_{1}-C_{6}, hidroxi, halógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, trifluorometilo, trifluorometoxi, -NO_{2}, -NH_{2},-NH(alquilo C_{1}-C_{6}), -N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2}, -NH-acilo y -N(alquil C_{1}-C_{6})acilo;

    que comprende:

    hacer reaccionar un compuesto de fórmula 10 o de fórmula 13 en la que R_{4} es halógeno y R_{2} es como se ha definido anteriormente,

    36

    con un diarildisulfuro o un diheterociclodisulfuro en presencia de una base adecuada en un disolvente polar adecuado, y

    aislar el compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) como se han definido anteriormente en la que R_{4} es XR_{3}.
23. 23. El proceso de acuerdo con la reivindicación 22 en el que R_{4} del compuesto de fórmula 10 o de fórmula 13 es bromo, la base es carbonato de cesio, el disolvente polar es dimetilformamida, y dicha reacción se realiza a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 80ºC a aproximadamente 120ºC durante un periodo de tiempo de aproximadamente una hora a aproximadamente 6 horas.