ES2341841T3 - Proteccion in ovo contra la bronquitis infecciosa. - Google Patents
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Abstract
Uso de una cepa viva, no virulenta de virus de bronquitis infecciosa (VBI) para la fabricación de un medicamento para vacunación in ovo de un animal de granja avícola que se selecciona entre el grupo que está constituido por pollos, pavos, patos, gansos, gallinas enanas, codornices y palomas, en el que se usa una cantidad de VBI suficiente para conferir inmunidad con un valor dentro del intervalo de aproximadamente 10-1,0 EID50 por dosis a aproximadamente 102,0 EID50 por dosis, y en el que además dicha vacunación da como resultado un porcentaje (%) de protección en los pollitos post-eclosión que sobreviven a las 3 semanas de edad de al menos 89% frente a la exposición a infección de VBI virulenta, y en el que dicha cepa no virulenta de VBI es cepa 1263 del serotipo de Massachusetts.
Description
Protección in ovo contra la bronquitis
infecciosa.
La invención se dirige a nuevas maneras de
proporcionar protección in ovo frente a la bronquitis
infecciosa (de aquí en adelante BI) en animales hospedadores tales
como los pollos. Más particularmente, a vacunas que se derivan de
vacunas de BI tradicionales comercialmente disponibles que han
demostrado que son seguras y eficaces tras una apropiada
administración in ovo a animales hospedadores según se
divulga en este documento.
La BI es una enfermedad muy infecciosa
trasmisible por vía respiratoria que afecta a los pollos de todas
las edades. La enfermedad de BI está causada por un virus del grupo
coronavirus. Los síntomas de la enfermedad de BI varían
ampliamente; sin embargo, los efectos reseñados incluyen la muerte,
fatiga del tracto respiratorio, caída de la producción, caída del
máximo de producción de huevos, anomalías en la cáscara de los
huevos, diarrea, y síndrome de nefrosis/nefritis. La indeseada
pérdida de peso en pollos jóvenes y/o insuficiente calidad de la
producción de huevos de un conjunto de gallinas ponedoras son
impactos adversos comercialmente significativos de la enfermedad en
estas aves.
Las vacunas para BI comercialmente disponibles
no se administran in ovo. En lugar de ello, se administran
después de la eclosión en una diversidad de formatos. En pocas
palabras, las vacunas de este tipo se administran típicamente
mediante procedimientos de pulverización con mucha mano de obra (por
ejemplo pulverización manual, pulverización de mochila, o
dispositivo automatizado de pulverización) o en gotas (oculares o
nasales).
Los documentos Am. J. Vet. Res., vol. 47, 1986,
páginas 933-938, y Avian Diseases, vol. 39, 1995,
páginas 752-765, divulgan una cepa Holland, de tipo
Massachusetts, de virus de Bronquitis Infecciosa (VBI). Se divulga
la vacunación in ovo y post-eclosión. Sin
atenuación por pases seriados, el virus fue patógeno para los
embriones, siendo reducida dicha patogenicidad con la atenuación
por pases seriados.
Como se explica más detalladamente a
continuación, las vacunas in ovo, de la presente invención
proporcionan ventajas distintivas sobre las rutas de administración
post-eclosión inconvenientes y que requieren mucho
de tiempo actualmente disponibles.
En resumen, la presente invención se dirige a
vacunas in ovo (de aquí en adelante "VIO") derivadas de
vacunas de BI comercialmente disponibles. Los resultados
experimentales demuestran la seguridad y eficacia de las VIO
respecto a la administración in ovo para pollos. También se
han desarrollado los parámetros de dosificación apropiados. Además
de VIO, la invención contempla composiciones relacionadas adecuadas
para administración in ovo.
En el ámbito de la presente invención, también
están los procesos para proteger a un animal hospedador frente a
BI. Dicha administración proporciona ventajas económicas porque la
vacunación in ovo es más fácil, más rápida y utiliza una
dosis de vacuna más pequeña que las vacunas que se administran
convencionalmente.
La presente invención se sitúa en el campo de
las inoculaciones de animales in ovo, en particular de las
aves de granja. Según se usa esta expresión en este documento, ave
de granja se refiere a cualquier ave o pájaro que se cría para uso
comercial y por lo tanto incluye pollos, pavos, patos, gansos,
gallinas enanas, codornices, palomas y similares. De particular
interés son los pollos.
La invención, se refiere a una vacuna contra la
bronquitis infecciosa, o BI. Las vacunas se pueden obtener de
cualquier fuente que esté disponible en la industria. La vacuna con
la que está implicada la invención es una vacuna de BI
comercializada con la marca registrada POULVAC®, que está disponible
de Fort Dodge Animal Health, Iowa o Weesp, The Netherlands. Las
vacunas de la invención contienen cepas vivas, no virulentas del
agente infeccioso. Las vacunas deberían inducir una respuesta
inmunógena en el hospedador, que genera la producción de
anticuerpos suficiente para conferir inmunidad.
La cantidad de agente patógeno que se ha de
incluir en la vacuna que se va a administrar al huevo hospedador
puede variar, dependiendo del agente patógeno particular, y también
del tamaño del animal (los animales más grandes puede que requieran
cantidades más grandes de agente). Una cantidad deseada se sitúa
dentro del intervalo de aproximadamente 10^{-1,0} EID_{50} a
aproximadamente 10^{2,0} EID_{50} de agente patógeno, por
ejemplo virus (en particular de BI), por dosis de vacuna. Una
cantidad dentro del intervalo de aproximadamente 10^{0,0}
EID_{50} a aproximadamente 10^{1,0} EID_{50} de agente
patógeno por dosis de vacuna también es útil en este documento. A
lo largo de esta solicitud, "EID_{50}" se refiere a la dosis
infecciosa del 50% de los huevos.
Además de lo anterior, las vacunas también se
pueden formular con aditivos conocidos, que incluyen adyuvantes.
Ejemplos de adyuvantes deseables incluyen polímeros y copolímeros de
ácido acrílico, así como los que se derivan de otros ésteres de
alquilo. Otros constituyentes incluyen medios tales como agua,
disolución salina, o emulsiones de agua en aceite en cantidades
suficientes para completar la dosis. El agente patógeno se puede
disolver o suspender en el medio que se acaba de describir. En una
realización preferida de la invención, la vacuna se formula
sustancialmente sin factor de neutralización de virus.
Una dosis de vacuna se sitúa típicamente dentro
del intervalo de aproximadamente 0,001 ml a aproximadamente 1,0 ml,
y más preferiblemente dentro del intervalo de aproximadamente 0,01
ml a 0,1 ml, siendo incluso más preferida aproximadamente 0,05
ml.
El régimen de dosificación para la vacuna
incluye administración in ovo a un pollito que se desarrolla
en un huevo fertilizado que todavía no ha eclosionado. Típicamente,
se prefiere una administración de la dosis, pero más de una está
dentro del alcance de la invención. El esquema de dosificación
elegido deberá garantizar tanto la seguridad del animal que se
desarrolla, como la eficacia de la inmunización.
Se puede administrar in ovo una dosis de
vacuna durante un período de tiempo que esté dentro del intervalo
de aproximadamente el día 1 hasta incluso aproximadamente unos pocos
minutos antes de la eclosión. Más preferiblemente, se suministra
una dosis in ovo dentro del período de tiempo de
aproximadamente el día 5 hasta aproximadamente el día 25. Incluso
más deseablemente, la dosis se administra durante el período de
aproximadamente el día 10 hasta el día 20. Una dosis
aproximadamente en el día 18 puede ser particularmente deseable.
La administración de la vacuna se puede hacer a
mano, pero se administra más típica y económicamente usando un
dispositivo de inyección en huevos comercialmente disponible, tal
como el disponible de Embrex, Inc. de Carolina del Norte.
Una ventaja de la vacuna in ovo según la
invención es que la vacuna se aplica a cada ave individual (huevo).
Esto se traduce en una mejor precisión en comparación con los
programas de vacunación más tradicionales (no in ovo). Esto
se refleja en unos altos porcentajes de protección frente a la
exposición a la infección en las aves vacunadas. Además, como las
aves in ovo se vacunan a una edad considerablemente más
temprana que la de aquellas que reciben la inoculación post in
ovo, hay más tiempo para que las aves desarrollen su inmunidad
antes de la exposición a las condiciones del ambiente exterior en el
que pueden estar presentes cepas activas de los virus. Este
resultado ha sido inesperado. Normalmente, se habría esperado que la
introducción de virus vivos en embriones generara resultados
bastante letales. Un embrión que se está desarrollando es un
organismo muy frágil, y la presencia de virus vivos tales como los
de BI normalmente habría matado al animal que se estaba
desarrollando. En el mejor caso, la mayoría de las técnicas ha
exigido el uso de un factor de neutralización de virus para
prevenir un suceso de este tipo cuando los pollitos son inoculados
in ovo. Recíprocamente, la introducción de lo que se habrían
considerado cantidades mínimas en exceso de virus vivos, aun cuando
no mataran al embrión, se habría esperado que no impartiría
propiedades inmunógenas satisfactorias al organismo.
Los siguientes ejemplos se proporcionan a manera
de ilustración, y no se deberían considerar como limitantes del
alcance de la invención.
Las VIO se prepararon usando una vacuna de BI
comercialmente disponible (Poulvac® BI MM) de Fort Dodge Animal
Health en Fort Dodge, Iowa o Weesp, The Netherlands mediante
reconstitución con disolución salina a unas concentraciones de
10^{2,0}, 10^{1,0}, 10^{0,0} y 10^{-1,0} de vacuna de
BI/virus por dosis (0,05 ml). Poulvac® BI MM contiene la cepa 1263
del virus de bronquitis infecciosa del serotipo de Massachusetts.
Esta vacuna de BI comercialmente disponible no ha sido aprobada ni
indicada para administración in ovo.
(B.) Ejemplo
1
Se obtuvieron comercialmente huevos de gallina
exentos de agentes patógenos específicos (de aquí en adelante
"SPF") de Charles River SPA-FAS, Inc. [190
Route 165, Preston, Connecticut 06365]. En pocas palabras, se
incubaron los huevos SPF de SPAFAS en las instalaciones apropiadas.
A los 18 días de incubación, se administraron vacunaciones in
ovo a 4 grupos de 25 huevos usando dosis escalonadas de la VIO
derivada de Poulvac® BI MM.
Las VIO de la presente invención se prepararon
como sigue. Se obtuvo una vacuna de BI comercialmente disponible
(Poulvac® BI MM) de Fort Dodge Animal Health en Fort Dodge, Iowa o
Weesp, The Netherlands. Esta vacuna contiene virus de BI vivos,
atenuados en un medio secado por congelación. Antes de su uso según
este procedimiento, la vacuna tenía un título de 10^{6,4}
EID_{50} de virus de BI por vial. A continuación, esta vacuna fue
reconstituida en disolución salina y luego se mezcló también con
disolución salina hasta que se obtuvieron las siguientes
concentraciones: se prepararon disoluciones que tenían,
respectivamente, títulos de 10^{2,0}, 10^{1,0}, 10^{0,0}, y
10^{-1,0} de virus/vacuna de BI por dosis (tamaño: 0,05 ml).
A los 18 días de incubación, se inyectaron in
ovo a los grupos 1-4 (que estaba constituido
cada uno por 25 huevos) dosis de 0,05 ml por huevo de las vacunas
de la presente invención que tenían, respectivamente, los
siguientes títulos de virus de BI: títulos de 10^{2,0},
10^{1,0}, 10^{0,0}, y 10^{-1,0} de virus/vacuna de BI por
dosis. Como control, el grupo 5 (que también estaba constituido por
25 huevos) no recibió ninguna inyección in ovo el día 18 de
la incubación. Para administrar las inyecciones, se usó instrumental
comercialmente disponible (máquina de inyección de huevos
Inovoject®) de Embrex Inc. [POB 13989, Research Triangle Park,
Carolina del Norte 27709-3989] según las
instrucciones del fabricante.
Hasta la eclosión, tanto los huevos inoculados
(es decir, 100 huevos en total en los grupos 1-4 a
25 huevos/grupo) como los huevos de control (es decir 25 huevos del
grupo 5) se incubaron dentro de la misma incubadora. Se registró
experimentalmente el número de huevos eclosionados por grupo en los
días 20, 21 y 22 de la incubación.
Las Tablas 1 y 2 presentan los resultados
obtenidos.
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La tasa de eclosión de los huevos inoculados
osciló desde 72% hasta 84% en comparación con 96% para los huevos
del control negativo del grupo 5. Todos estos porcentajes observados
de tasa de eclosión están dentro de los límites habituales. No se
observaron efectos sistémicos entre los grupos inoculados (es decir
grupos 1-4).
Sobre la base de los resultados del Experimento
1 según se han indicado anteriormente, se concluyó que la
vacunación in ovo el día 18 de incubación usando
dosificaciones que oscilan desde un mínimo de vacuna de BI de
10^{-1,0} EID_{50} hasta un máximo de vacuna de BI de 10^{2,0}
EID_{50} fue relativamente segura para la tasa de eclosión.
\newpage
(C.) Ejemplo
2
Se obtuvieron huevos de gallina SPF de Charles
River SPAFAS, Inc. Los 200 huevos se incubaron en instalaciones
apropiadas. A los 18 días de la incubación, todos los huevos se
observaron al trasluz; 14 huevos estaban sin fertilizar y en 20
huevos los embriones habían muerto. Los huevos se dividieron en 5
grupos con 25 huevos/grupo.
Se preparó la vacuna que se había de administrar
in ovo en conformidad con los procedimientos del Ejemplo 1
anterior.
A los 18 días de la incubación, se inyectó in
ovo a los grupos 1-4 de manera similar a la del
protocolo usado en el Ejemplo 1 anterior, con los siguientes
títulos de EID_{50} de vacuna/virus de BI a una dosis de 0,05
ml/huevo: 10^{2,0}, 10^{1,0}, 10^{0,0}, y 10^{-1,0}. Como
control, a los huevos del grupo 5 no se les inyectó ninguna vacuna
el día 18 de incubación.
A continuación, los huevos inoculados y los de
control se colocaron en incubadoras compartimentadas (sin volteo)
para cada grupo de huevos y se dejaron eclosionar en la parcela de
aislamiento en la que estaban alojados. El número de huevos
eclosionados se registró experimentalmente en los días 20,21, 22 de
incubación. Al día 22 de la incubación, se retiraron de las
incubadoras todos los huevos restantes.
Los pollitos se alojaron en sus respectivas
parcelas de aislamiento con presión positiva de aire. Todos los
pollitos se mantuvieron sobre virutas de madera. Los habitáculos
estaban provistos de lámparas calefactoras para que tuvieran
temperaturas locales sustancialmente superiores a la temperatura
ambiente. Los pollitos podían elegir su temperatura preferida
ajustando su distancia a la lámpara calefactora. Los pollitos se
alimentaban según su deseo y tenían agua de bebida disponible
también según su deseo en bebederos automáticos. Dentro de una
semana después de la eclosión, todos los pollitos fueron anillados
con una marca de identificación en el ala que contenía un color y
un número. Los pollitos a los que se iba a exponer a la infección
(como se describirá a continuación) a las 4 semanas de edad se
trasladaron a un habitáculo de 1 animal que funcionaba con presión
positiva de aire justo antes de la infección. Adicionalmente, los
pollitos fueron observados experimentalmente respecto a signos
clínicos de BI a lo largo del estudio.
Las Tablas 3 y 4 presentan los resultados de
tasa de eclosión.
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La tasa de eclosión observada fue muy baja para
todos los grupos inoculados (oscilaba de 32% a 56%) y disminuía con
el aumento de dosis. En los huevos de control del grupo 5, eclosionó
un 80% de los huevos. Se concluyó que, con respecto a la tasa de
eclosión, los resultados obtenidos no eran representativos y se
atribuyeron a una calidad deficiente de los huevos más que a
efectos adversos de las vacunaciones in ovo con virus de BI.
Según se divulga con detalle en el Ejemplo 1, se obtuvieron
previamente resultados aceptables de tasa de eclosión.
Un análisis de los signos clínicos (por ejemplo,
mortalidad) en pollitos no expuestos a la infección reforzó
adicionalmente la conclusión anterior de que los resultados de tasa
de eclosión no eran representativos. La Tabla 5, a continuación,
presenta los datos de mortalidad para eclosiones/pollitos de los 4
grupos vacunados (es decir grupos 1-4) y del grupo
único de control negativo (es decir el grupo 5). En la Tabla 5, PH
es la abreviatura de post-eclosión. Los signos
clínicos observados incluyeron los siguientes resultados. Debido a
la diarrea, varios pollitos en todos los grupos estuvieron en mal
estado. Algunos pollitos presentaron problemas respiratorios o
hernia umbilical. Un total de 5 pollitos murieron
(post-eclosión) por inflamación de la vesícula
vitelina como sigue: En el grupo 1, murió 1 pollito; en el grupo 2,
murieron 3 pollitos; y en el grupo 4 murió 1 pollito. Los
resultados de mortalidad post-eclosión (incluyendo
las muertes atribuidas a inflamación de la vesícula vitelina) se
presentan en la Tabla 5. Para el grupo 1, no se observó 1 pollito
que estaba muerto (lo que explica que se encontrara en el día 21 PH
que 4 pollitos en el grupo 1 estaban vivos). En el grupo 5,
murieron 30% (es decir 6 eclosiones/pollitos) poco después de la
eclosión. En la observación al trasluz antes de la vacunación in
ovo, habían muerto los embriones en un 10% de los huevos. Estas
muertes pre-inoculación, en combinación con las
características de mortalidad descritas en este estudio, demostraron
que la inferior calidad de los huevos (más que los efectos adversos
atribuibles a las vacunaciones in ovo) era responsable tanto
de los resultados de tasa de eclosión como de los signos clínicos
observados antes de la exposición a la infección.
Se realizó un estudio de exposición a infección
como sigue. En pocas palabras, se obtuvo comercialmente de Poultry
Health Institute, Doorn, The Netherlands virus activo M41 de BI.
Este virus de exposición a infección tenía un título de 10^{5,9}
EID_{50} por vial. Se preparó una disolución final que contenía
10^{4,5} EID_{50} por ml de virus de exposición a infección
mediante reconstitución apropiada con agua desmineralizada y
dilución con caldo nutritivo de 1 vial del virus de exposición a
infección.
A las 4 semanas de edad, todos los pollitos
vacunados y de control fueron expuestos a infección mediante
administración de 10^{3,5} EID_{50} en 0,1 ml (0,05 ocular y
0,05 intranasal) de virus activo M41 de BI por pollito. Se
evaluaron los pollitos usando la prueba de parada de ciliar (de aquí
en adelante, "CST"). En pocas palabras, 6 días después de la
exposición a la infección (de aquí en adelante, "PC"), los
pollitos fueron sacrificados y se extrajeron sus tráqueas. Se
recogió una porción de cada tráquea para examen microscópico y se
evaluó la actividad ciliar. Esta evaluación usó la siguiente
escala: + = movimiento completo; \pm = movimiento dificultado; y
- = sin movimiento. En los casos de movimiento dificultado, se
tomaron porciones adicionales de tráquea para confirmar esta
observación. Se calculó el porcentaje de protección frente a la
exposición a la infección con esta cepa virulenta de BI usando la
siguiente
fórmula: % de protección = (A+1/2 B)(100)/C en la que A = # de pollitos evaluados como +; B = # de pollitos evaluados como \pm; y C = # total de pollitos.
fórmula: % de protección = (A+1/2 B)(100)/C en la que A = # de pollitos evaluados como +; B = # de pollitos evaluados como \pm; y C = # total de pollitos.
Las Tablas 6 y 7 presentan los resultados del
estudio de exposición a la infección.
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Según se determina mediante la metodología de
CST, la protección proporcionada por la vacunación in ovo el
día 18 de la incubación, con virus/vacuna de BI derivada de Poulvac®
MM de BI frente a la exposición a infección con un virus activo de
BI a las 3 semanas de edad, fue excelente. Los porcentajes de
protección oscilaron desde un mínimo de 92% hasta un máximo de
100%.
Además de la tasa de eclosión, signos clínicos,
y análisis de CST anteriormente discutidos, también se realizó un
estudio serológico. En pocas palabras, se recogieron muestras de
sangre de las venas de las alas de todos los pollitos hasta un
número máximo de 24 pollitos por grupo a las 3 semanas de edad. Se
recogió fluido lacrimal después de depositar 1 gota de glicerina en
cada ojo de un número máximo de 5 pollitos por grupo a las 3 semanas
de edad. Se midieron los títulos de anticuerpos frente a antígeno
M41 de BI en fluido sérico y lacrimal usando la prueba de IHA. El
límite de detección de la prueba IHA corresponde con ^{2}log
título IHA = 3,0. Se calculó la media geométrica de los títulos (de
aquí en adelante, "GMT") a partir de las pruebas IHA
realizadas. Las Tablas 8 y 9 presentan los resultados
serológicos.
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En casi todos los pollitos, los niveles de
anticuerpos en el suero no estuvieron por encima del límite de
detección de ^{2}log título IHA = 3,0. Los títulos de anticuerpos
en los fluidos lacrimales fueron altos, tanto en los pollitos
inoculados como en los pollitos de control. Por consiguiente, se
postula que: (a) en los fluidos lacrimales los títulos de
anticuerpos determinados experimentalmente fueron
no-específicos, y (b) la glicerina usada para
recoger los fluidos lacrimales podría haber sido responsable de este
efecto observado. No se pueden extraer conclusiones claras sobre la
base de esos resultados serológicos anteriormente discutidos.
Sobre la base del conjunto de este Ejemplo 2
anteriormente descrito, se concluyó que la vacunación in ovo
el día 18 de incubación de huevos de gallina SPF con virus/vacuna de
BI a dosificaciones que oscilan desde una mínima de 10^{-1,0}
EID_{50} por huevo hasta una máxima de 10^{2,0} EID_{50} por
huevo fue eficaz para proteger a los pollitos frente la exposición
a infección a las 3 semanas de edad con virus activo M41 de BI.
\newpage
(D.) Ejemplo
3
Se obtuvieron huevos de gallina comerciales para
pollos de carne de Pronx, Meppel, The Netherlands. Se incubaron
estos huevos en instalaciones apropiadas. Después de 18 días de
incubación, se observaron todos los huevos al trasluz, y se
inocularon 4 grupos de 28-30 huevos con dosis
escalonadas de vacuna in ovo. Las vacunas in ovo
administradas, las condiciones de eclosión y/o crianza, la manera de
inyección a los huevos, la preparación del virus para exponer a
infección, los análisis serológicos, y la determinación de la
protección usando la metodología de CST, se realizaron todas ellas
según se ha descrito previamente arriba en los Ejemplos 1 y 2. Las
Tablas 10-16 a continuación presentan los resultados
de este estudio de vacunación in ovo con virus de BI de
huevos de gallina comerciales.
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Según se ha indicado anteriormente en las Tablas
10 y 11, la tasa de eclosión fue buena en los grupos inoculados (es
decir grupos 1-4), dentro de los límites habituales,
y oscilaba de 86% a 93%. La tasa de eclosión en el grupo de control
(es decir, el grupo 5) fue de 86%.
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La Tabla 12 anterior indica el estado y
mortalidad de los pollitos de los grupos 1-5 antes
de exposición a infección con una cepa activa de virus de BI. En la
Tabla, se usa "BC" como abreviatura de mal estado. Para
resumir los resultados: 2 pollitos en el grupo 1 murieron (1 de
inflamación de la vesícula vitelina); y 2 pollitos de control del
grupo 5 estuvieron en mal estado (1 murió el día 9 después de
eclosión y el otro pollito fue sacrificado el día 9 después de la
eclosión porque no podía tenerse en pie. La Tabla 12 no presenta
signos clínicos respiratorios. Varios pollitos en los grupos a los
que se habían dado dosificaciones de 10^{0,0} o mayores (es decir
grupos 1-3) mostraron signos respiratorios suaves
probablemente debidos a replicación de virus de BI desde los 6 días
de edad hasta la exposición a la infección a las 3 semanas de edad
(grupos 1 y 2) o hasta los 12 días de edad (grupo 3). Los signos
respiratorios observados fueron suaves y no se vio daño a los 6
días post-eclosión según se determinó mediante la
metodología CST (que se presenta a continuación).
Las Tablas 13 y 14 presentan los resultados del
estudio de exposición a infección.
\vskip1.000000\baselineskip
En las Tablas 13 y 14, 1 pollito en el grupo 2
estuvo en mal estado desde el día siguiente a la exposición a la
infección hasta su muerte a los 5 días después de la infección. Esta
muerte no se atribuyó ni a la vacunación in ovo ni a la
infección posterior. Según se determinó mediante la metodología de
CST, la protección proporcionada a huevos comerciales para pollos
de carne mediante vacunación in ovo el día 18 de incubación,
con virus/vacuna de BI derivada de Poulvac® MM de BI frente a la
exposición a infección por virus activo de BI a las 3 semanas de
edad, fue excelente. Los porcentajes de protección oscilaron desde
un mínimo de 89% hasta un máximo de 100%. Los pollitos de control
(grupo 5) no tuvieron protección frente a exposición a infección con
un virus activo de BI a las 3 semanas de edad.
Los análisis serológicos dieron los resultados
que se indican a continuación en las Tablas 15 y 16.
Según se ha indicado anteriormente en las Tablas
15 y 16, los análisis serológicos de muestras de suero revelaron
que los títulos medios de anticuerpos en todos los grupos inoculados
solamente eran ligeramente más altos que los de pollitos de control
(es decir, del grupo 5). Sin embargo, en los grupos inoculados, el
título medio de anticuerpo más alto se midió en los pollitos del
grupo 1; es decir los pollitos que habían recibido la dosis más
fuerte de las vacunas in ovo. Adicionalmente, en los pollitos
vacunados, un número considerable mostró títulos anticuerpo iguales
o superiores a los del nivel de detección.
En base a este Ejemplo 3 según se ha descrito
anteriormente, se concluyó que la vacunación in ovo el día
18 de incubación de huevos de gallina comerciales para pollos de
carne, con virus/vacuna de BI a dosificaciones que oscilan desde
una mínima de 10^{-1,0} EID_{50} por huevo a una máxima de
10^{2,0} EID_{50} por huevo, fue eficaz para proteger a los
pollitos frente a la exposición a infección a las 3 semanas de edad
con virus activo M41 de BI.
Claims (5)
1. Uso de una cepa viva, no virulenta de virus
de bronquitis infecciosa (VBI) para la fabricación de un medicamento
para vacunación in ovo de un animal de granja avícola que se
selecciona entre el grupo que está constituido por pollos, pavos,
patos, gansos, gallinas enanas, codornices y palomas, en el que se
usa una cantidad de VBI suficiente para conferir inmunidad con un
valor dentro del intervalo de aproximadamente 10^{-1,0} EID_{50}
por dosis a aproximadamente 10^{2,0} EID_{50} por dosis, y en
el que además dicha vacunación da como resultado un porcentaje (%)
de protección en los pollitos post-eclosión que
sobreviven a las 3 semanas de edad de al menos 89% frente a la
exposición a infección de VBI virulenta, y en el que dicha cepa no
virulenta de VBI es cepa 1263 del serotipo de Massachusetts.
2. El uso según la reivindicación 1, en el que
dicha vacuna contiene de aproximadamente 10^{0,0} EID_{50} por
dosis a aproximadamente 10^{2,0} EID_{50} por dosis.
3. El uso según la reivindicación 2, en el que
dicha vacuna contiene de aproximadamente 10^{0,0} EID_{50} por
dosis a aproximadamente 10^{1,0} EID_{50} por dosis.
4. El uso según cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, en el que dicha vacuna se reconstituye
antes de la administración.
5. El uso según cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, en el que dicha vacuna no ha sido
aprobada ni indicada para la administración in ovo.
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