ES2321383T3 - Procedimiento de repelencia de insectos. - Google Patents

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ES2321383T3 ES02721384T ES02721384T ES2321383T3 ES 2321383 T3 ES2321383 T3 ES 2321383T3 ES 02721384 T ES02721384 T ES 02721384T ES 02721384 T ES02721384 T ES 02721384T ES 2321383 T3 ES2321383 T3 ES 2321383T3
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Michael R. Roe
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    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N35/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having two bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. aldehyde radical
    • A01N35/02Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having two bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. aldehyde radical containing aliphatically bound aldehyde or keto groups, or thio analogues thereof; Derivatives thereof, e.g. acetals
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    • Y10T442/20Coated or impregnated woven, knit, or nonwoven fabric which is not [a] associated with another preformed layer or fiber layer or, [b] with respect to woven and knit, characterized, respectively, by a particular or differential weave or knit, wherein the coating or impregnation is neither a foamed material nor a free metal or alloy layer
    • Y10T442/2525Coating or impregnation functions biologically [e.g., insect repellent, antiseptic, insecticide, bactericide, etc.]

Abstract

Un procedimiento de repelencia de mosquitos y garrapatas de un sujeto, que comprende la aplicación a dicho sujeto, o a un artículo agregado a dicho sujeto, una cantidad eficaz de repelente que comprende 2-undecanona.

Description

Procedimiento de repelencia de insectos.
Campo de la invención
La presente invención se refiere a procedimientos para repeler mosquitos y garrapatas.
Antecedentes de la invención
Los repelentes de insectos se usan ampliamente en todos los Estados Unidos y en todo el mundo. En algunas regiones, el uso de repelentes de insectos es crítico para evitar o reducir la aparición de enfermedad llevada por insectos. Por ejemplo los Centros para Control de Enfermedad (CDC) reciben aproximadamente 10.000 informes de enfermedad de Lyme (transmitidas por garrapatas de ciervo) y 1.000 informes de encefalitis (transmitida por mosquitos) anualmente).
Actualmente, el más común de los repelentes de insectos es N,N- dietil- meta-toluamida (DEET). DEET se diseñó para que se pudiera aplicar a la piel de los sujetos, y se diseñó para repeler en lugar de matar a los insectos. Aunque en uso durante algún tiempo, ha surgido recientemente una preocupación sobre la toxicidad potencial de DEET para los niños. Recientemente la Agencia de Protección de Medio Ambiente de Estados Unidos (EPA) determinó que no permitiría por mas tiempo reivindicaciones de la seguridad infantil en etiquetas para productos que contuvieran DEET.
Las Informaciones de EPA de los Estados Unidos: Metil Nonil Cetona (julio de 1995) describe la metil nonil cetona como un repelente de perros y gatos/ayuda de entrenamiento y elemento disuasorio de taladrador de lirio, pero no sugiere su uso como repelente de insectos.
La patente de Estados Unidos Nº 2.283.471 de Swaine describe el uso de compuestos tales como metil nonil cetona y metil undecil cetona como insecticidas de contacto para áfidos e insectos chupadores taladradores (todos insectos que se alimentan de plantas primitivos) que requieren insecticidas de contacto para su control, pero no se sugiere su uso como repelentes de insecto.
R. Linderman et al., Pesticide Biochemistry y Physiology 35, 291 - 299 (1989), describe la inhibición de la estearasa de la hormona juvenil de insectos por trifluorometilcetonas \alpha,\beta- no saturadas y \alpha-acetilénicas, pero no sugiere el uso de los mismos como repelentes de insecto.
La publicación de Patente WO 98/53678 describe el uso de cetonas alifáticas (que incluye 2-undecanona) para uso como un agente de control de plagas principalmente para matar (no repeler) diversos tipos de polillas. Los mosquitos se mencionan en los datos transitorios pero no experimentales con relación a ello.
Una publicación de Don y Millar, Journal of medical Entomology, 36, 159-166 (marzo 1999) describe que las hembra de mosquitos embarazadas están interesadas por los sitios de ovoposición (puesta de huevos) mediante mezclas de compuestos químicos que incluyen 2-undecanona. A altas concentraciones estas mezclas pueden ser repelentes.
De acuerdo con lo anterior, existe una necesidad de nuevas formas para repeler mosquitos y garrapatas.
Sumario de la invención
La presente invención proporciona un procedimiento de repelencia de mosquitos y garrapatas de un sujeto, que comprende la aplicación a dicho sujeto, o un artículo agregado a dicho sujeto, una cantidad eficaz de repelente que comprende 2-undecanona.
Los aspectos adicionales de la presente invención incluyen las composiciones que comprenden 2-undecanona en combinación con vehículos u otras ingredientes para repeler los insectos.
Breve descripción de los dibujos
La Figura 1 presenta el recuento medio de picaduras y error estándar con el tiempo después de tratamiento para Culex quinquefasciatus (recuento medio de picaduras y error estándar para las tres formulaciones (5% 2-undecanona (IB1-246), 20% 2-undecanona (IB1-246), 20% de 2-tridecanona (IB1-247) contra DEET y un control no tratado durante cinco intervalos de tiempo.
La Figura 2 presenta el recuento medio de picaduras y error estándar a intervalos de tiempo después del tratamiento para Aedes albopictus (Recuento medio de picaduras y error estándar para tres formulaciones (5% 2-undecanona (IBI-246), 20% 2-undecanona (IBI-246), 20% 2-tridecanona (IBI- 247)) contra DEET y un control no tratado durante intervalos de 5 veces.
La Figura 3 proporciona porcentaje de protección/repelencia para formulaciones de 2- undecanona y 2-tridecanona y un producto comercial DEET contra Cx. quinquefasciatus.
La Figura 4 proporciona porcentaje de protección/repelencia para formulaciones de la invención y una formulación comercial de DEET contra Ae. albopictus.
La Figura 5 presenta un gráfico de repelencia como una función de tiempo durante 0 hr, 3 hr y 6 hr después de la aplicación de las formulaciones (i) 21% DEET, (ii) 20% 2-undecanona (IBI-246) y (iii) 5% 2-undecanona.
Descripción detallada de las realizaciones preferidas
Como se usa en el presente documento, el término "alquilo" (por ejemplo, alquilo, alquilcarboxi, alquilfenilo, etc.) se refiere a un hidrocarburo de cadena lineal o ramificada que tiene entre 4 y 20 átomos de carbono, dicho alquilo puede ser lineal o ramificado. El alquilo puede estar opcionalmente sustituido con sustituyentes seleccionados entre el grupo que incluye halo, alcoxi inferior, alquil sulfanilo inferior, alquilsulfenilo inferior, alquilsulfonilo inferior, oxo, hidroxi, mercapto, amino opcionalmente sustituido por alquilo, carboxi, carbamoílo opcionalmente sustituido por alquilo, aminosulfonilo opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado entre el grupo que incluye alquilo, nitro, ciano, halo y perfluoroalquilo inferior, permitiéndose grados múltiples de sustitución. Los ejemplos de "alquilo" como se usa en el presente documento incluyen, pero no se limitan a, n-butilo, n-pentilo, isobutilo, pentilo, hexilo, octilo, nonilo, undecilo, y similares.
El término "alcoxi inferior" como se usa en el presente documento significa alcoxi C1 a C4 lineal o ramificado, preferiblemente metoxi, etoxi, o propoxi.
El término "halo" como se usa en el presente documento significa halógeno, preferiblemente fluoro, cloro, bromo o yodo, lo más preferiblemente fluoro.
Los sujetos a tratar con los compuestos de la presente invención incluyen tanto sujetos humanos como animales (por ejemplo, perros, gatos, caballos, ganado). Los sujetos se pueden tratar directa o indirectamente, tal como mediante aplicación del compuesto activo a la piel del sujeto, o aplicando el compuesto activo a un artículo usado mediante o de otra manera protegiendo al sujeto.
Los substratos a tratar con los compuestos de la presente invención incluyen, pero no se limitan a, suelos, plantas, recipientes, paredes, piscinas u otros espacios abiertos de agua, etc.
Los insectos que se pueden repeler mediante los procedimientos de la presente invención incluyen garrapatas, y mosquitos.
El término "mosquito" como se usa en el presente documento se refiere a cualquier tipo de mosquito (por ejemplo, Anopheles, Aedes, y Culex), que incluye pero no se limita a mosquitos Tigre, Aedes aboriginis, Aedes Aegypti, Aedes albopictus, Aedes cantator, Aedes sierrensis, Aedes sollicitans, Aedes squamiger, Aedes sticticus, Aedes vegans, Anopheles quadrimaculatus, Culex pipiens, y Culex quinquefaxciatus.
El término "garrapata" como se usa en el presente documento incluye cualquier tipo de garrapata, que incluye pero no se limita a, garrapatas de ciervo, la garrapata de tipo Americana (Dermacentor variabilis), Ornithodoros parkeri, O. moubata, y Dermacentor andersoni.
El término "cucaracha" como se usa en el presente documento se refiere a cualquier tipo de cucaracha, que incluye pero no se limita a la cucaracha americana (Periplaneta americana), cucaracha alemana (Blattella germanica), cucaracha oriental (Blatta orientalis), cucaracha de la madera (Parcoblatta pennsylvanica), cucaracha de bandas marrones (Supella longipalpa), y cucaracha de color marrón ahumado (Periplaneta fuliginosa).
Otros insectos que se puede tratar incluyen, pero no se limitan a: piojo (Orden Phthiraptera), tales como los piojos de la cabeza y del cuerpo en seres humanos, Pediculus humanus capitis y P. H. humanus; Pulgas (Orden Siphonaptera), tales como pulgas de perros y gatos, pulgas humanas Ctenocephalides sp., Echidnophaga, Pulex sp. Abejas, avispas y hormigas (Orden Hymenoptera) ácaros tal como Sarcoptes scabei (ácaro de la sarna humano) la garrapata de Norte América o chinche rojo, Trombicula sp. nematodos tales como nematodos parásitos humanos, Pez de plata (Orden Thysanura), tal como Lepisma saccharina, insecto de fuego, Thermobia domestica; Termitas (Orden Isoptera) tal como Reticulitromes flavipes, Incisitermes minor, Marginitermes hubbardi, y Cryptotermes brevis; Tijeretas (Orden Dermaptera); Psócidos (Orden Psocoptera) tal como piojo de los libros; Escarabajos (Orden Coleoptera), particularmente escarabajos que comen madera; Centípedos tales como Lithobius, Geophilus, Scutigera y miriápodos tales como Jules terrestris; Escorpiones tales como excentricidades sculpturatus y Mastigoproctus gianteus; etc.
1. Compuestos repelentes
2-tridecanona (metil undecil cetona) está comercialmente disponible de Sigma-Aldrich Company, P.O. Box 2060, Milwaukee, Wisconsin 53201 Estados Unidos con número de catálogo17,283-9. (no dentro del ámbito reivindicado).
2-undecanona (metil nonil cetona) está comercialmente disponible de Sigma-Aldrich Company, P.O. Box 2060, Milwaukee, Wisconsin 53201 Estados Unidos con número de catálogo U-130-3.
2. Procedimientos y Formulaciones para la repelencia de Insectos
La presente invención proporciona el uso de compuestos repelentes y composiciones para el control de plagas, particularmente plagas de insectos tales como mosquitos.
Las formulaciones liquidas pueden ser en base acuosa o no acuosa (es decir, disolventes orgánicos), o sus combinaciones, y se pueden emplear como espumas, geles, suspensiones, emulsiones, microemulsiones o concentrados que se pueden emulsionar o similares. Los ingredientes pueden incluir agentes reológicos, tensioactivos, emulsionantes, dispersantes o polímeros.
En una realización, una composición de cera de suelo puede incluir compuestos repelentes como se describe en el presente documento, en una cantidad eficaz para repeler cucarachas que podrían de otra manera alimentarse de la composición una vez se aplique a los suelos, o simplemente para repeler cucarachas de las superficies del suelo a las que se aplican.
Como apreciarán los expertos en la técnica, la concentración repelente variará en gran medida dependiendo de la naturaleza de la formulación particular, particularmente si es un concentrado o se va a usar directamente. El compuesto repelente estará presente en la composición en una concentración de al menos aproximadamente 0.0001% en peso y puede ser 10, 50, o 100% en peso de la composición total. El vehículo repelente puede estar entre 0,1% y 99,9999% en peso de la composición total. Las formulaciones secas tendrán entre aproximadamente 0,0001 - 95% en peso del pesticida mientras que las formulaciones líquidas en general tendrán entre aproximadamente 0,0001 - 60% en peso de los sólidos en la fase líquida.
Las formulaciones se pueden aplicar a la piel del sujeto, o se pueden aplicar a prendas de vestir, cinturones, collares u otros artículos usados por el sujeto de los cuales se han de repeler los insectos. La formulación se puede aplicar para coger con red o seleccionar y proteger a un sujeto, particularmente a un sujeto que duerme. Las formulaciones se pueden aplicar a sustratos no animales de los que se han de repeler los insectos, tales como plantas. La aplicación a sujetos o sustratos se puede llevar a cabo mediante pulverización, espolvoreado, rociado o similar. Se ha de reconocer que la concentración, cantidad aplicada y frecuencia de aplicación variará con el sujeto y lugar de aplicación, por ejemplo, a la piel o pelo de un sujeto humano, piel o pelaje de un sujeto canino, etc. Para la aplicación tópica, la formulación puede tomar la forma de una formulación de pulverización o una formulación de
loción.
Los compuestos de acuerdo con la presente invención se pueden emplear solos o en mezclas con otro y/o con tal sólido y/o vehículos portadores que se pueden dispersar en líquido como se describe en el presente documento o como de otra manera se conoce en la técnica, y/o con otros agentes compatibles conocidos, incluyendo, por ejemplo, insecticidas, acaricidas, rodenticidas, fungicidas, bactericidas, nematocidas, herbicidas, fertilizantes, agentes reguladores de crecimiento, etc., si se desea, en la forma de preparaciones de dosificación particular para aplicación específica realizada a partir de ellos mismos, tales como soluciones, emulsiones, suspensiones, polvos, pastas, y gránulos como se describe en el presente documento o como de otra manera se conoce en la técnica que están así disponibles para uso.
Los compuestos repelentes se pueden administrar con otros compuestos químicos de control de insectos, por ejemplo, las composiciones de la invención pueden emplear diversos compuestos químicos que afectan al comportamiento de los insectos, tal como insecticidas, atrayentes y/o repelentes, o como de otra manera se conoce en la técnica. Los compuestos repelentes también se pueden administrar con compuestos químicos esterilizantes.
Los compuestos repelentes se aplican de manera adecuada mediante cualquier procedimiento conocido en la técnica que incluye, por ejemplo, pulverización, vertido, goteo, en la forma de líquidos concentrados, soluciones, suspensiones, pulverizaciones, polvos, gránulos, briquetas, ladrillos, y similares, formulados para distribuir una concentración eficaz de repelente del compuesto repelente. Las formulaciones repelentes se pueden aplicar en una cantidad eficaz repelente a un área de infestación de plaga o un área susceptible de infestación, un cuerpo de agua o recipiente, un establo, una alfombra, cama de mascotas, un animal, vestido, piel, y similares.
Los siguientes ejemplos se ilustran para la práctica de la invención. Todos los porcentajes están en peso y todas las proporciones de mezclas de disolventes están en volumen salvo que se indique de otra manera.
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Ejemplo 1
Repelente de Mosquitos
Un paño con queso sin tratar se envolvió alrededor de la mano derecha de un sujeto humano y se introdujo en una jaula de mosquitos tigre (aproximadamente 50 en la jaula). Los insectos fueron atraídos inmediatamente por la mano del sujeto. Los mosquitos tigre se observó que probaban y mordían la mano del sujeto a través del paño de queso en segundos. Al sujeto se le requirió que agitara la mano del sujeto violentamente para retirar los insectos del paño de queso cuando se retiró su mano de la jaula, para evitar la transferencia de los insectos desde la jaula al exterior.
Después se trató el mismo paño de queso hasta saturación con 1% en volumen de solución de 2-tridecanona/2-undecanona (aproximadamente 50% en volumen de cada uno) en etanol. Se dejó el paño secar al aire para retirar el etanol.
Después de tratamiento como se describe anteriormente el paño de queso se envolvió de nuevo alrededor de la mano del sujeto en la misma jaula. Mesos (en 1/10) mosquitos se posaron en el paño de queso. Este tratamiento se realizó dentro de cinco minutos del experimento de control descrito anteriormente. Cuando los mosquitos no se posaron sobre el paño de queso, se observó que permanecían sobre él durante aproximadamente 1 a 2 segundos y después se retiraban volando. No se observó ninguna prueba, ni se recibieron ninguna picadura durante aproximadamente 1 a 2 segundos y después se retiraron volando. No se observó ninguna prueba, ni se recibieron picaduras, y el sujeto es capaz de retirar fácilmente su mano de la jaula sin riesgo de transferir mosquitos.
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Ejemplo 2
Repelente de garrapatas
Se añadió un volumen de 800 microlitros de un 1% por volumen de solución de mezcla de 2-undecanona y 2-tridecanona (50% cada una) en etanol a una mitad de disco de papel de filtro basto de 9 centímetros colocado en una placa petri de plástico de tamaño correspondiente y se dejó secar al aire. Se trató una mitad exacta del disco de papel de filtro de control en un recipiente separado con 800 microlitros de etanol al mismo tiempo. Se dejó secar al aire el control hasta que no se pudo detector nada de etanol mediante olor a aproximadamente 2 centímetros de la superficie del papel de filtro. Después se transfirieron el tratamiento y control de etanol control a una placa petri de plástico estéril que contenía 10 garrapatas, Ornithodorus parkeri. El papel de control y de tratamiento se posicionaron de manera que cubrieron la mayoría del fondo de la placa pero no tocaban en el medio; estaban separados por una distancia de aproximadamente 0,25 cm. Se distribuyeron las garrapatas al azar alrededor de la placa cuando se introdujo el papel de filtro. Esencialmente 100% de las garrapatas se encontraron en el control de etanol durante 5 minutos a 3 horas. En tres períodos de observación, 14 minutos, 1 hora y 2 horas, se encontró una garrapata entre los dos tratamientos. El experimento se llevó a cabo a temperatura ambiente y en la oscuridad. Se realizaron las observaciones a la luz de observatorio normal y llevó solamente unos pocos segundos.
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Ejemplo 3
Repelencia de Undecanona de Mosquitos
Cuarenta mililitros de una solución al 2,5 por ciento de undecanona en etanol absoluto se añadieron a un guante de gasa (20 x 15 centímetros) en un vaso de precipitados de 250 mililitros. Después de agitar durante 1 minuto, el guante 13 minutos y y después se suspendió por un extremo del bastidor de la campana de gases durante 3 minutos. El etanol pareció estar completamente evaporado después de este tratamiento como se determinó por tacto. Tras el tacto, el guante no tenía sensación de humedad o frío. Se usó el mismo tratamiento sin undecanona como un control. Después de las mismas etapas de secado, no se detectó ningún olor a etanol por olor. El guante de control tenía las mismas dimensiones físicas y se preparó a partir del mismo lote que el material de tratamiento. Los experimentos de control que incluían humentación y secado del guante se llevaron a cabo antes del tratamiento de undecanona.
Aproximadamente 100 mosquitos machos y hembras adultos (Aedes taeniorhynchynchus) (relación exacta de sexo no determinada) se colocaron en una jaula de rejilla de acero inoxidable de 12 x 12 x 14,5 pulgadas (30,48 x 30,48 x 36,36 cm). La jaula se equipó con un paño de malla de media sobre el lado para permitir que el material se añada y se retire de la jaula con la mano sin dejar que los mosquitos se escapen. Los mosquitos se añadieron a la jaula aproximadamente 12 antes del ensayo. Dos copas de plástico de 1 onza (28,3 g) que contenían 2-3 tiras de papel de la marca KIM WIPES^{TM} humedecidos con sacarosa al 20% en agua se colocaron en la jaula como una segunda fuente de alimento y agua. Los insectos se mantuvieron durante una noche para aclimatación a 27 grados centígrados, ciclo 14:10 DL y 50% de humedad relativa. La siguiente mañana, se observó que unos pocos mosquitos quedaban sobre las estaciones de alimentación de sacarosa.
Los siguientes datos son las respuestas de control cuando la mano del probador cubierta con el guante (seco) tratado con etanol se colocó en la jaula de mosquitos (a temperatura ambiente) durante 20 segundos aa los tiempos indicados: 0 minutos, 10 aterrizajes y 1 picadura; 10 minutos, 9 - 12 aterrizajes y 1 picadura; 20 minutos, aproximadamente 13 aterrizajes y ninguna picadura; y 40 minutos, aproximadamente 13 aterrizajes y ninguna picadura. Tan pronto como la mano del probador entraba en la jaula, los mosquitos demostraron comportamiento de búsqueda del huésped obvio que incluye volar alrededor de la jaula y en la región próxima de la mano del probador. Sin embargo, solamente se registraron aterrizajes sostenidos de 5 segundos como una respuesta positiva junto con las picaduras reales. Después de la finalización de los experimentos de control, la mano del probador cubierta por el guante (seco) tratado con undecanona se colocó en la jaula de mosquitos (a temperatura ambiente) durante 20 segundos a los tiempos indicados: 0 minutos, 15 minutos, 25 minutos, 50 minutos, 1 hora y 40 minutos, 2 horas y 40 minutos, 3 horas y 40 minutos, y 4 horas y 40 minutos. No se observó ningún aterrizaje y ninguna picadura en ninguno de estos momentos. Durante las primeras 3 a 4 horas, los mosquitos no demostraron comportamiento de búsqueda de huésped, tal como incluso intentaban volar hacia la mano del probador.
En conclusión, bajo las condiciones de tratamiento descritas anteriormente, la undecanona era eficaz como un repelente de mosquitos durante más de 4 horas y 40 minutos.
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Ejemplo 4
Repelencia de 2-Undecanona de Cucaracha
Una cera de suelo de pasta comercialmente disponible se combina con un porcentaje en peso de 2-undecanona y los dos ingredientes se mezclan completamente conjuntamente. La cera de suelo de pasta se aplica después a una región de duelo y se da brillo. La misma cera de suelo de pasta, sin 2- undecanona, se aplica a una región adyacente suelo en la misma cantidad y también se da brillo. Cuando se libera en cada región de suelo, se encuentra que las cucarachas están menos tiempo en la región que contiene 2- undecanona que en la región control que no contiene 2-undecanona.
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Ejemplo 5
Repelencia de 2-Undecanona de Mosquitos
Dos jaulas de mosquitos se construyeron usan un armazón de madera y rejilla de alambre de malla fina. Las dimensiones de esta jaula eran 59 cm de alto x 55 cm de ancho x 59 cm de profundo. Se instaló una puerta de acceso con bisagra en frente de cada cámara para la inserción de los recipientes llenos de agua llenos con pupas de mosquito. También estaba presente en frente de cada cámara un tubo de plástico de 9 cm de diámetro (d. i) para la inserción del brazo del investigador. El tubo de inserción del brazo se selló con un tapón de caucho cuando no estaba en
uso.
Los Mosquitos (Culex spp.) se obtuvieron (en forma de pupas) de Carolina Biological Supply Co., Burlington, NC, Estados Unidos. Después de su llegada, los mosquitos se dividieron en números aproximadamente iguales en dos recipientes llenos de agua y se colocaron en dos jaulas como se ha descrito anteriormente. Alguno de los mosquitos había eclosionado después de la llegada.
Se realizó el ensayo con 2-undecanona para determinar la actividad repelente mediante tratamiento de un brazo del investigados con aproximadamente 1 ml de la solución de ensayo. Después de varios minutos para la evaporación del disolvente, el brazo tratado se insertó a través del tubo de inserción durante 5 minutos. El otro bazo se trató con etanol (control) o una concentración diferente de 2-undecanona, y y se insertó en el tubo de inserción de la cámara adyacente. A continuación, se observó el comportamiento de los mosquitos en respuesta a la presencia de los brazos del investigador. Se registró el comportamiento de los mosquitos como 1) aterrizaje o intento de aterrizaje sobre el brazo del investigador, contra 2) dispersión lejos del brazo tratado hacia los extremos opuestos de la jaula. Se observó el número aproximado de mosquitos presentes al comienzo de las observaciones. Se repitieron las observaciones (sin volver a tratar la mano y brazo del investigador) después de 3 horas y de nuevo 6 horas. Se alternaron los tratamientos entre las diferentes jaulas. Cada observación se repitió 3 veces. Se realizaron los ensayos 20%, 5%, 2%, 0,5% de 2-undecanona, 20% de DEET, y el control de etanol.
Los resultados se resumen en la Tabla 1. Con una excepción, ninguno de los mosquitos lograron picar, aunque los mosquitos que aterrizaron sobre el brazo del investigador se apartaron mediante golpeteo ligero del brazo o de la mano En la mayoría de los casos, cualquier movimiento físico del brazo o mano inducirá al mosquito a abandonar. De este modo, se esperaban pocas si no alguna picadura. Los aterrizajes sobre el brazo se consideraron como evidencia de atracción, con intento de picar. Los mosquitos que vuelan cerca del brazo no se registraron, aunque tal actividad se observaron en los comentarios en la Tabla 1.
A la concentración de 0,5% de 2-undecanona, no se observaron diferencias entre el brazo tratado y los controles de etanol, aunque el número de aterrizajes sobre el brazo tratado era menor que con el control de etanol.
Después de la inserción del brazo tratado con la concentración de 2%, muchos de los mosquitos se dispersaron a los lados y extremo opuesto de la jaula. Sin embargo, otros estaban volando cerca y hubo 2 aterrizajes. Cuando se repitió a las tres horas después del tratamiento, no existía efecto.
Después de la inserción del brazo tratado con la concentración de 5%, existió un comportamiento repelente inmediato y obvio. Todos los mosquitos se dispersaron al lado opuesto y extreme de la jaula. No existían aterrizajes y ninguno volaba cerca del brazo tratado. El efecto fue similar a las 3 horas después de tratamiento. De nuevo, no existían aterrizajes, aunque algunos mosquitos permanecieron activos. No existía efecto después de 6 horas.
Después de la inserción del brazo tratado con la concentración de 20%, todos los mosquitos se dispersaron inmediatamente al lado opuesto y extremo de la jaula y permanecieron contra la rejilla de alambre. No volaba ninguno y no hubo aterrizajes. El efecto era similar a las 3 horas después de tratamiento, es decir, no había actividad de mosquitos y ningún aterrizaje. Sin embargo, el efecto se perdió después de 6 horas.
Después de la inserción del brazo tratado con DEET, la mayoría de los mosquitos se dispersaron rápidamente lejos del brazo, aunque alguno continuó volando. No todos permanecieron sobre la rejilla de alambre. Sin embargo, no existía ningún aterrizaje y no permanecía ninguno en la vecindad del brazo tratado. El efecto persistió después de 3 horas, pero se perdió en gran medida después de 6 horas.
Los resultados muestran que 2-undecanona es repelente para los mosquitos, con el efecto más fuerte a las concentraciones de 5% y 20%. La evidencia más impresionante de este efecto repelente fue la observación de que los mosquitos se dispersaron lejos del brazo tratado y detuvieron realmente el vuelo, en lugar de disponerse sobre la malla de alambre de la jaula. Que los mosquitos están todavía vivos se indica por la observación de que reanudan el vuelo horas más tarde.
La población de mosquitos adultos en las jaulas disminuyó durante el curso del experimento, incluso aunque los recipientes llenos de agua con numerosas larvas en estado de larva tardía y pupas estaban presentes para generar adultos recientes. Por consiguiente, los números de adultos voladores no eran exactamente los mismos para todos los tratamientos.
TABLA 1 Resumen de las observaciones de ensayo para la actividad de repelencia de la 2-undecanona contra mosquitos
1.1 Control de etanol
Horas después de tratamiento
1
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1.2 Undecanona al 0,5%
Horas después de tratamiento
2
Comentarios: La mayoría de los mosquitos eran muy activos, volando indiscriminadamente por toda la jaula. Sin evasión obvia, sin dispersión lejos del brazo tratado.
1.3 Undecanona al 2%
Horas después de tratamiento
3
Comentarios: A esta concentración, muchos de los mosquitos se dispersaron al lado opuesto de la jaula, otros estaban volando alrededor de la vecindad del brazo tratado, y otros permanecían inactivos. Después de 3 horas, no fue evidente ningún comportamiento repelente. Todos los mosquitos estaban volando alrededor indiscriminadamente.
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1.4 Undecanona al 5%
Horas después de tratamiento
5
Comentarios: La formulación era altamente repelente. Los mosquitos se dispersaron inmediatamente a los lados más lejanos de la jaula, lejos del brazo tratado. No se observaron vuelos cerca o hacia la mano y brazo tratado. La mayoría de los mosquitos permaneció sobre la rejilla de alambre. Este efecto persistía incluso después de 3 horas, con solamente un ligero incremento en
\hbox{la actividad de los mosquitos, pero el
efecto no era más  evidente después de 6 horas.}
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1.5 Undecanona al 20%
Horas después de tratamiento
6
Comentarios: La formulación era altamente repelente. Los mosquitos se dispersaron inmediatamente a los lados más lejanos de la jaula, lejos del brazo tratado. El efecto era extremadamente rápido. No se observaron vuelos cerca o hacia la mano y brazo tratado. Todos los mosquitos permanecieron sobre la rejilla de alambre. Este efecto persistía incluso después de 3 horas sin cambio. En 6 horas, era evidente alguna actividad de los mosquitos, pero no se produjeron aterrizajes.
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1.6 Control de DEET
Horas después de tratamiento
7
Comentarios: DEET era altamente repelente. Los mosquitos tendían a dispersarse a los lados más lejanos de la jaula, lejos del brazo tratado. No se observaron vuelos cerca o hacia la mano y brazo tratado. Sin embargo, algunos todavía estaban volando. Este efecto era similar a las 3 horas. En 6 horas, la mayoría de los mosquitos estaban volando activamente, incluso aunque pocos se aproximaban al brazo tratado o aterrizaban.
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Ejemplo 6
Repelencia de 2-Undecanona y 2-Tridecanona de Mosquitos
Jaula. Las mismas dos jaulas de mosquitos descritas en el Ejemplo 5 se usaron para este ejemplo. Se construyeron las jaulas usando un armazón de madera y rejilla de alambre de malla fina. Las dimensiones de cada jaula eran 59 cm de alto x 55 cm de ancho por 59 cm de profundidad. Se instaló una puerta de acceso con bisagra en frente de cada cámara para la inserción de los recipientes llenos de agua llenos con pupas de mosquito. También estaba presente en frente de cada cámara un tubo de plástico de 9 cm de diámetro (d. i) para la inserción del brazo del investigador. El tubo de inserción del brazo se selló con un tapón de caucho cuando no estaba en uso.
Mosquitos y Crías de Mosquito. Los Mosquitos (Culex spp.) se obtuvieron (en forma de pupas) de Carolina Biological Supply Co., Burlington, NC, Estados Unidos, en dos envíos sucesivos, de manera que proporcionaron un suministro a largo plazo continuado. Después de su llegada, los mosquitos se dividieron en números aproximadamente iguales en los múltiples recipientes llenos de agua y se colocaron en dos jaulas como se ha descrito anteriormente. Los cultivos de larvas y pupas se alimentaron con compuesto de cría de insectos. Además, se cambió el agua de manera regular mediante filtración para minimizar la contaminación y prevenir el exceso de población. El cultivo continuo hizo posible incrementar el número de mosquitos hasta más de 100 insectos por jaula.
Compuestos de ensayo y Programa de ensayo. Se realizó el ensayo con dos compuestos, 2-undecanona, y 2-tridecanona, para determinar la actividad repelente tratando un brazo del investigador con aproximadamente 1 ml de la solución de ensayo. Después de varios minutos para la evaporación del disolvente, el brazo tratado se insertó a través del tubo de inserción durante 5 minutos. El otro brazo se trató con isopropanol (control) o una concentración diferente del compuesto, y se insertó en el tubo de inserción de la cámara adyacente. A continuación, se observó el comportamiento de los mosquitos en respuesta a la presencia de los brazo del investigador. El comportamiento de los mosquitos se registró como 1) aterrizaje o intento de aterrizaje sobre el brazo del investigador, o que llega a posarse sobre la rejilla de alambre inmediatamente adyacente al bazo o mano del investigador, contra 2) dispersión lejos del brazo tratado hacia los extremos opuestos de la jaula. Se indicó el número aproximado de mosquitos presentes al comienzo de las observaciones. Para los tratamientos con 2-undecanona, se realizaron las observaciones inicialmente para confirmar la actividad repelente del 100% del compuesto inmediatamente después de tratamiento pero no se registraron las observaciones. Se retrasó el registro de la eficacia hasta 6 horas después del tratamiento, y después se repitió a las 12 y 24 horas después del tratamiento. Para el tratamiento con 2-tridecanona, las observaciones comenzaron inmediatamente después de secarse el disolvente; después, se repitieron las observaciones (sin repetición del tratamiento de la mano y brazo del investigador) después de 6 horas, 12 horas y 24 horas. Se alternaron los tratamientos entre las diferentes jaulas. Cada observación se repitió 3 veces.
Se obtuvo 2-tridecanona en forma de un sólido. Para preparar este compuesto para ensayo, se sugirió calentar cuidadosamente en un baño de agua a 37ºC para licuarlo, y las alícuotas de la solución madre se diluyeron por volumen; volumen con isopropanol hasta concentración del 50% y concentración del 20%. Se retuvo suficiente compuesto puro para la aplicación directa (sin diluir).
Se realizaron los ensayos a concentraciones de 100%, 50%, y 20% para cada uno de los dos compuestos, así como 20% de DEET, y el control de isopropanol.
Observaciones. Mosquitos se registraron como 1) repelidos si se dispersaban lejos de la mano/el brazo tratado, cambiaban de curso mientras estaban en vuelo después de aproximarse a la mano/el brazo tratado, o no aterrizaban sobre la rejilla de alambre adyacente a la mano/el brazo tratado; 2) no repelidos si intentaban aterrizar sobre la mano/el brazo tratado, sin cambio de curso de vuelo y/o llegan a descansar sobre la rejilla de alambre de la jaula adyacente a la mano/el brazo tratado.
Resultados. El ensayo comenzó inmediatamente después de la llegada de los mosquitos, y se continuó durante un período de observación de tres semanas con mosquitos incubados recientemente emergidos de las pupas mantenidas en recipientes de agua en las jaulas. De este modo las jaulas servían como recipientes de emergencia, permitiendo por lo tanto un incremento gradual en el número de mosquitos para ensayar. Como resultado, se realizaron algunos ensayos con números más pequeños de los mosquitos presentes que en otros ensayos.
Los resultados se tabulan en la Tabla 2. Los controles de isopropanol establecieron las medias de la línea base para uso en la comparación de la actividad del repelente, con medias de 12,0, 14,7, 18,2 y 14,3 mosquitos, respectivamente, aterrizando cerca o sobre la mano/el brazo tratado a cuatro intervalos diferentes de tiempo. En base a un porcentaje, esto representó 12,0, 13,3, 16,7 y 13,1%, o una media total de 14,3%.
La tabla 3 presenta la eficacia encontrada a diferentes intervalos de tiempo para cada uno de los compuestos a tres concentraciones diferentes y para DEET. Se calculó la eficacia según la fórmula:
[(n^{o}\ de\ aterrizajes/n^{o}\ presente\ en\ control) - (n^{o}\ aterrizajes/n^{o}\ presente\ en\ experimental) dividido\ por\ (n^{o}\ aterrizajes/n^{o}\ presente\ en\ control)]\ x\ 100.
2-undecanona. En el momento 0 después de tratamiento, las tres concentraciones mostraron 100% de actividad repelente, es decir, no existían aterrizajes sobre o adyacentes a la mano/el brazo tratado. Por consiguiente, el tiempo cero se omite de esta parte de la tabla 2.
Para la concentración al 100%, se observó actividad residual repelente a las 6 horas después de tratamiento. No existían aterrizajes o mosquitos sobre la rejilla de alambre cerca de la mano/el brazo tratado. De este modo, la actividad repelente era del 100% a las 6 horas después del tratamiento para este compuesto. El comportamiento nulo/repelente era mucho más débil después de 12 horas (8,6%) y no existía después de 24 horas después de tratamien-
to.
Para la concentración de 50%, se observó una fuerte actividad residual repelente a las 6 horas (1,1%), y se observó considerablemente más débil a las 12 horas (5.8%) o 24 horas (5,7%).
Para la concentración de 20%, existía una actividad repelente a las 6 horas (2,5%) pero sin actividad residual a las 12 horas (17,1%) y 24 horas (13,4%).
La tabla 2 muestra la eficacia de la actividad repelente para la 2- undecanona derivada de estos datos. Para la concentración de 100%, la actividad residual era 100% a las 6 horas y era todavía evidente la actividad repelente después de 12 horas. Esto era más eficaz que DEET durante períodos comparables. A la concentración del 50%, la actividad residual era todavía más fuerte a las 6 horas y de nuevo a las 12 horas e incluso a las 24 horas. En todos los casos, la actividad residual era mayor que la observada con DEET. A la concentración de 20%, incluso era evidente alguna actividad residual a las 6 horas pero ninguna después.
Después de la inserción de la mano/el brazo tratado con cualquiera de las teas concentraciones, todos los mosquitos se dispersaron a los lados y extremo opuesto de la jaula y se recogieron sobre la rejilla de alambre. Cundo se turbaron golpeando los lados de la jaula, algunos mosquitos volaron pero rápidamente volaron desde el sujeto tratado y y se acumularon sobre las rejillas de alambre. Ninguno volaría más de unos pocos segundos. Este efecto persistió durante 6 horas en las tres concentraciones, pero disminuyó o no existía después de 12 horas.
2-tridecanona. Las observaciones con este compuesto se registraron durante el período de tiempo cero, así como 6, 12 y 24 horas después del tratamiento.
Para la concentración al 100%, existía una fuerte actividad repelente inmediatamente después de tratamiento (0 horas) aterrizando en las proximidades solamente el 1,8% de los mosquitos, pro poca o ninguna actividad residual repelente a las 6 horas y 12 horas, y ninguna después de 24 horas. Para la concentración de 50%, de nuevo una muy fuerte actividad residual repelente, con solamente 0,7% aterrizajes. Después, se observó alguna actividad residual repelente a las 6 horas con 4,3% de contactos de mosquito o aterrizajes, pero sin actividad residual a las 12 o 24 horas. Para la concentración de 20%, no se observó actividad repelente.
La tabla 3 muestra la eficacia de la actividad repelente para la 2- tridecanona derivada de estos datos. Para la concentración del 100% existía una fuerte actividad repelente inmediatamente después de tratamiento (87,7%), pero la actividad residual era muy débil o no existía a las 6 horas. El incremento calculado a las 12 horas es una anomalía que puede reflejar diferencias en las medias para los controles (13,3 a las 6 horas contra 16,7 a las 12 horas). Para la concentración del 50%, la eficacia era fuerte inmediatamente después de tratamiento y existía alguna actividad residual después de 6 horas, comparable con la observada con DEET. Sin embargo, no existía actividad residual después de 12 y 24 horas. Para la concentración del 20%, no se observó actividad repelente.
DEET. Este compuesto, aplicado como una pulverización de 20%, mostró una fuerte actividad inmediata y actividad residual durante hasta 6 horas, actividad débil a las 12 horas y ninguna después.
Descripción. Los resultados indican que la 2-undecanona y 2-tridecanona son repelentes para los mosquitos. De los dos compuestos diferentes, 2- undecanona mostró la mayor actividad global. Después de la inserción de la mano/el brazo tratado con este compuesto, los mosquitos inmediatamente se dispersaron hacia los lados opuestos de la jaula y realmente detuvieron el vuelo, en lugar de disponerse sobre la rejilla de alambre de la jaula. 2-undecanona también mostró una fuerte actividad residual a las 6 horas y débil pero evidente actividad repelente a las 12 horas después de tratamiento cuando se aplica a las concentraciones de 100% y 50%. L 50%, la actividad se observó incluso a las 24 horas. A estas concentraciones, la actividad era mayor que para el 20% de DEET. Cuando se aplica a la concentración de 20%, 2- undecanona mostró actividad repelente residual a las 6 horas, aunque menos que la que se encontró con 20% de DEET. Sin embargo, no existía ninguna actividad residual después de 12 y 24 horas.
Los resultados para la 2-tridecanona muestran que este compuesto es menos eficaz como repelente contra los mosquitos que 2-undecanona. Aunque es eficaz cuando se aplica a concentraciones de 50% o 100% inmediatamente después de tratamiento, existía actividad residual limitada. No se observó actividad para la concentración del 20%.
Se dispersó fácilmente sobre la piel 2-undecanona y tenía un olor agradable. Al 100%, aparecieron depósitos de color blanco después del secado, pero se separaron escamas en unas pocas horas. 2-tridecanona es un sólido a temperatura ambiente y, por consiguiente, era más difícil aplicar. Quedó un olor ligeramente picante, con un olor suavemente desagradable, que se dispersó en 6 horas.
La población de mosquitos adultos en las jaulas se incrementó en gran medida durante el período de estudio de 2 semanas y media. Por consiguiente, se repitieron algunas observaciones con el fin de aprovecharse de los mayores números presentes. Esto se reflejó en el número creciente de réplicas para la 2- undecanona a concentración de 50% y en los controles de isopropanol.
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TABLA 2 Resumen de las observaciones de ensayo para la actividad de repelencia de la 2-undecanona y 2-tridecanona contra mosquitos
2.1 Control de isopropanol
Horas después de tratamiento
8
2.2 2-Undecanona al 100%
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Horas después de tratamiento
9
10
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Comentarios: Fue todavía evidente una fuerte falta de respuesta a las 6 horas. La evitación era mucho más débil después de 12 horas y no se observó evitación obvia, ni dispersión lejos del brazo tratado a las 24 horas.
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2.3 IBI-246 al 50%
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Horas después de tratamiento
11
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Comentarios: A esta concentración, virtualmente todos los mosquitos dispersados en los lados opuestos de la jaula lejos del brazo/la mano tratado, y no volaba ninguno alrededor de la vecindad de brazo tratado incluso después de 6 horas después de tratamiento. Sin embargo, después de 12 horas, no era evidente ningún comportamiento repelente. Todos los mosquitos volaban alrededor indiscriminadamente.
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2.4 Undecanona al 20%
Horas después de tratamiento
12
Comentarios: Se observó una fuerte actividad repelente incluso después de 6 horas, de manera similar a la observada con el 50% de tratamiento. Sin embargo, después de 12 horas, no se evidenció ningún comportamiento repelente. Todos los mosquitos volaban alrededor indiscriminadamente.
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2.5 2-tridecanona al 100%
Horas después de tratamiento
14
Comentarios: El compuesto era altamente repelente. Una nube descomunal de mosquitos se retiró rápidamente de los lados lejanos de la jaula, lejos del brazo tratado. No se observaron vuelos cerca o hacia la mano o brazo tratado. La mayoría de los mosquitos permanecía sobre la rejilla de alambre. Sin embargo, no se observó ninguna actividad residual. El efecto repelente se perdió en 6 horas. El compuesto era medianamente irritante cuando se aplicaba con la intensidad total, y dejaron depósitos de color blanco sobre la piel.
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2.6 2-Tridecanona al 50%
Horas después de tratamiento
15
Comentarios: El compuesto mostró una fuerte actividad repelente residual después de 6 horas, pero la actividad disminuyó en gran medida o no existía después de 12 y 24 horas.
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2.7 2-Tridecanona al 20%
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Horas después de tratamiento
16
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Comentarios: No se observó actividad repelente residual.
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2.8 Control de DEET
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17
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Comentarios: DEET era altamente eficaz persistiendo una fuerte actividad residual 6 horas después de tratamiento de 6 horas, pero no se observó actividad residual a las 12 ó 24 horas después de tratamiento.
TABLA 3 Eficacia repelente de la 2-undecanona y 2-tridecanona a tres concentraciones diferentes y 20% de DEET contra mosquitos. Eficacia de tratamiento después de tratamiento
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18
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Ejemplo 7
Repelencia de 2-Undecanona y 2-Tridecanona de Mosquitos
Este experimento se realizó para evaluar la repelencia comparativa de 5% y 20% de 2-undecanona en etanol, 20% de 2-tridecanona en isopropanol y Off! ^{TM} 14,25% Aerosol repelente de insectos de DEET contra Aedes albopictus (Mosquitos tigre asiáticos) y Culex quinquefasciatus (mosquitos domésticos del sur).
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Materiales y Procedimientos
Hembras criadas en laboratorio de tres a cuatro días de edad de Ae. albopictus y Cx. quinquefasciatus se transfirieron mediante aspiración a ocho jaulas que medían 10 pulgadas (25,4 cm) de alto x 10 pulgadas (25,4 cm) de ancho x 13 pulgadas (33,020 cm) de profundidad a una velocidad de almacenamiento de 100 y 200, respectivamente. Cuatro jaulas que contenían Ae. albopictus y cuatro que contenían Cx. quinquefasciatus. Un mayor número de Cx. quinquefasciatus se usó para compensar la menor actividad de picadura anticipada para estas especies. El número de muertes, huidas y recuperación al final del estudio se presentan en la Tabla 4. El número real de hembras por jaula era menor que la velocidad de almacenamiento diana debido al mayor número de machos que se introdujeron inadvertidamente en las jaulas. Cada jaula contenía una pared negra de rejilla, la parte de arriba de Plexiglás transparente, una manga de entrada de tejido elástico de punto y suelo y paredes laterales de aluminio sólido. Los mosquitos se alimentaron con agua y agua con azúcar antes de y entre ensayos. Los ensayos se llevaron a cabo durante cuatro días, 7 - 10 de agosto de 2001, participando cuatro hombres como probadores. Todos los probadores se lavaron ambos brazos con jabón sin fragancia, se enjuagaron y se limpiaron con etanol al 25% antes de aplicar los tratamientos. Se aplicaron los tratamientos al antebrazo en una región que se extiende entre la muñeca hasta un punto medido 12'' (30,48 cm) detrás de desde la punta del dedo índice sobre ambos brazos. La 2-tridecanona al 20% no se aplicó tan uniforme como los otros repelentes debido a que no estaba disponible cantidad suficiente. Se usaron guantes de látex sobre las manos y se reemplazaron antes de cada recuento de picaduras. El control consistía de un lavado con jabón, enjuagado y lavado con etanol al 25% y se llevó a cabo por la misma persona a lo largo de este estudio. se registraron los recuentos de picadura de un minuto a intervalos de tiempo de 0, 1, 2, 4 y 6 horas después de tratamiento. Todos los tratamientos se asignaron al azar a cada probador, dos tratamientos por probador. La ubicación de la jaula también se distribuyó al azar al comienzo de cada día de ensayo. Los probadores se rotaron cada día de manera que al final del estudio habían ocupado cada lugar en la jaula. Cada repelente se ensayó dos veces por tres probadores de manera que los recuentos medios de picaduras se basaron en seis observaciones. Se uso un Hobo datalogger para controlar la temperatura y humedad a lo largo del estudio.
Se empleó un diseño de bloque incompleto equilibrado siguiendo los patrones de la Sociedad Americana de Ensayos y Materiales E 939-94. Se normalizaron los datos mediante la transformación de raíz cuadrada y se sometió a análisis de varianza y procedimientos de separación de media mediante SS PC. Se usaron tablas de punto central Microsoft Excel 2000 y funciones de diagramas para representar gráficamente los recuentos medios de picaduras y errores estándar por especie e intervalo de tiempo para cada tratamiento y control. Los recuentos medios de picaduras se transformaron en porcentaje de protección o repelencia mediante la siguiente fórmula:
Control - Tratamiento/Control\ X\ 100.
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TABLA 4 Recuento de mosquitos en las jaulas después de tratamiento
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20
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Resultados y Descripción
Las condiciones ambientales dentro del laboratorio donde se llevó a cabo el laboratorio permanecieron relativamente constantes a lo largo del período de ensayo de 4 días. (Tabla 5).
TABLA 5 Temperatura y humedad durante el estudio
22
El Análisis de varianza de raíz cuadrada x+1 de los recuentos de picaduras transformados indicaron diferencias altamente significativas entre las especies. El análisis de varianza realizado por especies mostró diferencias altamente significativas (p < 0,001) por fecha, tiempo, probador, fecha * probador, tratamiento y fecha * tratamiento para ambas especies. Los ensayos de separación media mostraron recuentos significativamente mayores (p = 0,05) en el control y recuentos significativamente menores (p = 0,05) con el 14% de OFF! ^{TM} comparado con la 2-undecanona y 2-tridecanona repelentes para Cx. quinquefasciatus. Lo mismo se mantuvo cierto para Ae. albopictus, excepto que existía una diferencia significativa adicional entre las formulaciones al 20% (es decir, 2-undecanona y 2-tridecanona) y la formulación al 5%. La formulación al 5% de 2-undecanona dio como resultado recuento de picaduras significativamente menor (p = 0,05) que las otras dos formulaciones. Como se anticipó, el probador que realiza el tratamiento de control tenía más picaduras significativamente (p + 0,05) que los probadores de repelente independiente de las especies. No existía diferencia significativa en picaduras entre los tres probadores de repelente para Cx. quinquefasciatus. El probador nº 3 (Tom) se encontró que tenía significativamente menos picaduras (p = 0,05) que otros probadores para Ae. albopictus. También se encontraron diferencias significativas (p = 0,05) entre días e intervalos de tiempo para ambas especies. Esto se esperaba, ya que los mosquitos envejecieron.
El recuento medio de picaduras y error estándar por intervalo de tiempo después de tratamiento se presenta para Cx. Quinquefasciatus en la Figura 1 (Recuento medio de picaduras y error estándar para las tres formulaciones (5% de 2-undecanona (IBI-246), 20% de 2-undecanona (IBI-246), 20% de 2- tridecanona (IBI-247)) contra DEET y un control no tratado durante cinco intervalos de tiempo: Culex quinquefasciatus), y para Ae. albopictus en la Figura 2 (Recuento medio de picaduras y error estándar para tres formulaciones (5% de 2-undecanona (IBI-246), 20% de 2-undecanona (IBI- 246), 20% de 2-tridecanona (IBI-247)) contra DEET y un control no tratado durante cinco intervalos de tiempo: Aedes albopictus). La actividad de picadura para Cx. quinquefasciatus aumentó en los tratamientos y controles con en incremento de las horas después de tratamiento (Figura 1). Esto se atribuyó al tiempo transcurrido desde la última alimentación con agua con azúcar. Algo similar tendía a ocurrir con Ae. albopictus aunque no era tan pronunciado, particularmente en los recuentos de picaduras tempranas (Figura 2). Los controles excedían los tratamientos en todos los intervalos de tiempo de recuento de picaduras para ambas especies. La actividad de picadura era consistentemente mayor para Cx. quinquefasciatus que Ae. albopictus debido a que la velocidad de almacenamiento para las especies anteriores. Cx. quinquefasciatus mordía a una velocidad mucho mayor que la
esperada.
Todos los repelentes inicialmente se comportaron bien para Cx. quinquefasciatus durante 0 horas después de tratamiento el recuento de picaduras llevó aproximadamente 15 minutos después de application (Figura 3; (Percentage de protección/repelencia para las formulaciones de 2- undecanona y 2-tridecanona y Off! ^{TM} contra Cx. quinquefasciatus). Solamente off! ^{TM} y 5% de 2-undecanona funcionó bien durante el primer recuento de picaduras para Ae. albopictus (Figura 4; Porcentaje de protección/repelencia par alas formulaciones IBI y Off!^{TM} contra Ae. albopictus). Ya que horas después de tratamiento incrementó existía un incremento notable en la actividad de la picadura para ambas especies para los repelentes 2-undecanona y 2- tridecanona comparado con Off! ^{TM} comparado con los controles, Off! ^{TM} proporcionó un 100% de protección durante 2 horas después del tratamiento para ambas especies y > 90% y > 95% de repelencia hasta 6 horas para Ae. albopictus y Cx. quinquefasciatus, respectivamente (Figuras 3 y 4). Los repelentes 2-undecanona y 2-tridecanona disminuyeron gradualmente en la eficacia desde > 95% de repelencia durante 0 hora de recuento de picaduras hasta 60 - 74% de repelencia a las 6 horas después de tratamiento para Cx. quinquefasciatus. Para Ae. albopictus, la repelencia disminuyó desde 100% hasta el porcentil 60 para la formulación de 5% de 2-undecanona. Las otras dos formulaciones de 2-undecanona y 2-tridecanona flucuaron considerablemente y proporcionó una baja repelencia a intervalos de tiempo después de tratamiento para Ae. albopictus. Se esperó para el repelente de 20% de 2-tridecanona ya que se usó la formulación antes hasta de completar el experimento.
La protección proporcionada por los repelentes 2-undecanona y 2- tridecanona no era tan completa como se encontró con el producto comercial DEET Off! ^{TM}. Esto era probablemente atribuible a las diferencias de las formulaciones. Los repelentes 2-undecanona y 2-tridecanona se mezclaron en etanol y probablemente se evaporó más rápidamente de la piel que Off! ^{TM}. El repelente de 5% de 2-undecanona proporcionó una excelente repelencia inicial, rivalizando o sobrepasando la mayoría de las otras alternativas de DEET ensayadas.
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Ejemplo 8
Repelencia de 2-Undecanona de Mosquitos frente DEET contra Culex spp.
2-undecanona se disolvió en alcohol etílico (v/v al 5% y 20%) y aproximadamente 1 ml se pulverizó sobre un paño que después se envolvió alrededor del antebrazo del investigador antes de la inserción en una jaula de mosquitos de 59 cm x 55 cm x 59 cm que contenía aproximadamente 100 mosquitos adultos Culex spp.. Se formuló DEET, producto comercial (Cutter). Se registró el número de aterrizajes de mosquitos en 5 minutos así como la respuesta del comportamiento global de los mosquitos. Los resultados evidencia repelencia de 2-undecanona para, con el efecto más fuerte a las concentraciones de 20% y 5%. La evidencia más impresionante para este efecto repelente era la observación de que los mosquitos inmediatamente se dispersan lejos del brazo tratado y realmente paran de volar, en lugar de posarse sobre la rejilla de alambre de la jaula.
Los resultados se muestran en la Figura 5 en forma de un gráfico de repelencia en función del tiempo para 0 hr, 3 hr y 6 hr después de la aplicación de las formulaciones (i) 21% DEET, (ii) 20% de 2-undecanona (IBI-246) y (iii) 5% de 2-undecanona (IBI-246), donde la repelencia = {[nº de aterrizajes de mosquitos en los ensayos de Control/nº de mosquitos presentes en Control) - (nº de aterrizajes de mosquitos en Experimento/nº de mosquitos presentes en Experimento)] dividido por nº de aterrizajes de mosquitos en en ensayo de control/nº de mosquitos presentes en el Control)} x 100.
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Ejemplo 9
Repelencia de 2-Undecanona de Mosquitos Frente a DEET y Citronella contra Aedes aegypti
Se realizaron los ensayos con formulaciones de 2-undecanona y dos repelentes comerciales, DEET y Citronella, para evaluar la eficacia residual e inmediata contra los mosquitos, Aedes aegypti, durante hasta 24 horas. La formulación de 2-undecanona consta del compuesto disuelto en aceite mineral. Otra formulación se realizó en la forma de una loción, y el compuesto mostró un buen comportamiento de formulación para la preparación en loción.
La formulación basada en aceite mineral de 2-undecanona de ensayó después contra las formulaciones de DEET y Citronella.
Los tratamientos se aplicaron directamente a la mano y el brazo del investigador antes de la exposición a los mosquitos en una jaula de emergencia. Los controles se realizaron con el vehículo solamente. 2-undecanona mostró una excelente eficacia inmediata y fuerte durante hasta 12 horas cuando se aplica a una concentración de 20% en aceite mineral, excediendo la eficacia de DEET (20%) y Citronella. Sin embargo, se redujo la actividad residual, persistiendo hasta 12 horas al nivel del 5% pero ninguna después de 3 horas a la concentración del 1%. La eficacia de Citronella era mucho menor que o bien 2-undecanona o DEET.
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Materiales y Procedimientos
Jaulas. Se usaron dos jaulas de mosquitos para este experimento. Las jaulas se construyeron usando un armazón de madera y la rejilla de alambre de malla. Las dimensiones de cada jaula eran 59 cm de alto x 55 cm de ancho por 59 cm de profundo. Se instaló una puerta de acceso con bisagra en frente de cada cámara para la inserción de los recipientes llenados con agua llenos con larvas de mosquitos. También estaba presente en frente de cada cámara un tubo de plástico de 9 cm de diámetro (d. i) para la inserción del brazo del investigador. El tubo de inserción del brazo se selló con un tapón de caucho cuando no estaba en uso.
Mosquitos y Crías de Mosquito. Los Mosquitos (Aedes aegypti.) se obtuvieron en forma de huevos del Dr gary Benzon (Benzon Research, Inc., Carlisle, PA 17013, Estados Unidos) y después se dejaron incubar en tres intervalos sucesivos de manera que proporcionaron un suministro a largo plazo continuado. Después de su llegada, las plataformas de huevos se dividieron en números aproximadamente iguales en los múltiples recipientes llenos de agua dentro de las cámaras de ensayo, que también servían como jaulas de emergencia. Después de la incubación, los cultivos de larvas se alimentaron con compuesto de cría de insectos suministrados por El Departamento de Estados Unidos de Agricultura, Gainesville, FL, Estados unidos, cortes Sr. James Thomas. Se cambió el agua de manera regular en las cámaras de cría a intervalos de dos o tres días mediante filtración para minimizar la contaminación y prevenir el exceso de población. Los cultivos se criaron durante el período de estudio de tres semanas con el fin de mantener un suministro continuo de insectos recientes (véase más adelante) y el crecimiento de la población, que usualmente excedía 100 insectos por jaula.
Compuestos de ensayo y Programa de ensayo. Se realizó el ensayo con la formulación en aceite mineral de 2-undecanona para determinar la actividad repelente tratando un brazo del investigador con aproximadamente 1 ml de la solución de ensayo. Para evitar las picaduras y desarrollo excesivo de graves reacciones alérgicas de las múltiples picaduras de mosquitos, los tratamientos se aplicaron a tiras separables de paño de algodón que tapaban todas las partes de de la mano y del brazo del investigador. Se aplicaron los tratamientos en una habitación separada, lejos de las jaulas de mosquitos. Después de varios minutos para que el aceite humedeciera en el lugar, las tiras de paño saturadas con la solución de tratamiento se unieron a la muñeca del investigador. Después el brazo tratado se insertó a través del tubo de inserción durante 5 minutos. El otro brazo se trató con aceite mineral (control) o un compuesto diferente y se insertó en el tubo de inserción de la cámara adyacente. A continuación, se observó el comportamiento de los mosquitos en respuesta a la presencia de los brazo del investigador. El comportamiento de los mosquitos se registró como 1) aterrizaje o intento de aterrizaje sobre el brazo del investigador, o que llega a posarse sobre la rejilla de alambre inmediatamente adyacente al bazo o mano del investigador, contra 2) picadura y succión de sangre; o 3) dispersión lejos del brazo tratado hacia los extremos opuestos de la jaula. Se indicó el número aproximado de mosquitos presentes al comienzo de las observaciones. Se alternaron los tratamientos entre las diferentes jaulas. Cada observación se repitió tres veces.
La 2-tridecanona, DEET y Citronella llegaron en forma de líquidos mezclados en aceite mineral o en viales de plástico sellados. Para preparar los compuestos para ensayo, las soluciones madre se agitaron vigorosamente hasta mezclar completamente los compuestos en el vehículo de aceite mineral, se abrieron los viales y se aplicaron muestras de 1 ml directamente como se ha descrito anteriormente.
Observaciones. Mosquitos se registraron como 1) repelidos si se dispersaban lejos de la mano/el brazo tratado, cambiaban de curso mientras estaban en vuelo después de aproximarse a la mano/el brazo tratado, o no aterrizaban sobre la rejilla de alambre adyacente a la mano/el brazo tratado; tocaban la mano/el brazo tratado y rápidamente se alejaban contra 2) no repelidos si aterrizaban sobre la mano/el brazo tratado y permanecían sobre el paño o piel del investigador, o picaban al investigador y succionaban sangre. También se registró el número de picaduras durante el período de exposición.
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Resultados
El ensayo comenzó inmediatamente después de la incubación de los mosquitos a partir de los huevos, y se continuó durante un período de observación de 2 semanas y media como insectos emergidos de las pupas mantenidas en recipientes de agua en las jaulas. Por lo tanto las jaulas servían como recipientes de emergencia, permitiendo un suministro continuo de grandes números de mosquitos para ensayar. Para proporcionar un suministro constante de insectos recientes, las plataformas de huevos se sumergieron en agua a diferentes intervalos durante un período de 10 días. Sin embargo, los números variaban también considerablemente debido a las muertes periódicas antes de que emergieran los mosquitos. Inicialmente, los números variaban desde por debajo de 50 mosquitos por jaula. De manera gradual, esto se incrementó y en el máximo existían casi 200 mosquitos por jaula. Como resultado, se realizaron algunos ensayos con números más pequeños de mosquitos presentes en otros ensayos. Para incrementar la supervivencia, las jaulas se envolvieron en plástico transparente de manera que se elevara la humedad relativa, que se comprobó de manera periódica con un medidor de humedad.
La tabla 6 presenta las observaciones reales y calcula el porcentaje de mosquitos que responden. Los controles de aceite mineral establecieron los promedios de línea base para uso en la comparación de la actividad repelente Durante los cinco períodos de observación. Para los controles, el porcentaje medio se aterrizajes sobre la mano/el brazo tratado eran 57,0, 50,1, 68,4, 63,9 y 56,4% para los períodos de observación de 0, 3, 6, 9 y 12 horas. Los mosquitos que mordieron la mano/el brazo se indicaron con un asterisco. La aparición de picaduras frecuentes se designó con un doble asterisco. Algunos mosquitos mordieron la mano/el brazo del investigador en cada uno de los 5 períodos de observación y en muchos casos los números eran demasiado numerosos para contar. Muchos extrajeron sangre. Los mosquitos aparecían extremadamente excitados y existían un zumbido que se extendía, fácilmente detectable cuando se aproximan a la jaula.
Las observaciones con 2-undecanona mostraron una fuerte actividad repelente. A las cero horas, se aproximaron pocos mosquitos y los que tocaban la mano o brazo rápidamente lo dejaban. Sin intención de alimentarse. Posteriormente, a las 3, 6 y 9 horas, se incremento el número de mosquitos que se aproximó y aterrizó, pero de nuevo el efecto era el mismo, es decir, tocaban la piel pero rápidamente se apartaban sin intento de alimentarse. A las 12 horas, sin embargo, algunos mosquitos comenzaron a picar, extrajeron sangre y uno se alimentó hasta la finalización.
Las observaciones con DEET mostraron una fuerte actividad repelente, similar a la observada para 2-undecanona. Las cero horas, virtualmente ningún mosquito intentó aterrizar y solamente se registró una picadura. Sin embargo, al contrario que las observaciones con 2-undecanona, el número de mosquitos que intentó aterrizar se aceleró más rápidamente dentro de tan poco como 3 horas, y aumentó en 6 y 9 horas. Existió una picadura a las 6 horas y 2 picaduras a las 9 horas después de que se aplicó el compuesto a la piel. A las 12 horas, aumentaron los aterrizajes y el número de picaduras o
\hbox{intento de picaduras aumentó en
gran medida. Se registró  un total de 22 picaduras a las 12
horas.}
Las observaciones con Citronella mostraron una actividad repelente muy débil a las cero horas, con numerosos aterrizajes y muchas picaduras. Los mosquitos revoloteaban en una verdadera nube de zumbidos alrededor de la mano y del brazo. El mosquito ataca de una manera acelerada en los intervalos posteriores, incluso con más picaduras. Se registró un total de 27 picaduras a las 3 horas. Las picaduras o intento de picaduras eran demasiado numerosas para contar en los intervalos posteriores, indicando una actividad repelente muy débil.
La tabla 7 calcula la eficacia encontrada en los cinco intervalos de tiempo diferentes para cada uno de los compuestos a las tres concentraciones diferentes, 10%, 5% y 1% y para DEET. Se calculó la eficacia de acuerdo con la fórmula:
Eficacia = [(n^{o}\ de\ aterrizajes/n^{o}\ presente\ en\ el\ control) - (n^{o}\ de\ aterrizajes/n^{o}\ presente\ en\ los\ experimentos) dividido\ por\ (n^{o}\ de\ aterrizajes/n^{o}\ presente\ en\ control)]\ x\ 100.
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TABLA 6 Sumario de las observaciones para la actividad repelente de los compuestos de ensayo contra mosquitos
6.1 Control de aceite mineral
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Horas después de tratamiento
23
Comentarios: Asterisco indica picaduras o intento de picaduras. Doble asterisco indica múltiples picaduras durante el mismo período de observación. Numerosos mosquitos revolotearon alrededor de la mano/brazo, típicamente
15 - 20, ocasionalmente incluso volaban números mayores con frecuentes visitas al brazo/mano. Los mosquitos estaban extremadamente excitados y se escuchó un sonido de zumbido distinto en la jaula cuando el número de los mosquitos eran mayor.
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6.2 20% de 2-undecanona en aceite mineral
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Horas después de tratamiento
24
Comentarios: La formulación de 2-undecanona era altamente repelente. A las cero horas, todos los mosquitos se dispersaron a los lados opuestos de la jaula lejos del brazo/mano tratado, y casi todos pararon de volar en menos de 1 - 2 minutos. Los aterrizajes observados eran muy breves, la mayoría en las puntas de los o en la superficie inferior de la mano donde no estaba concentrado el repelente. Los mosquitos aterrizaron, se pasearon alrededor sobre la piel durante 1 - 2 segundos, y se retiraron volando. No se observaron picaduras hasta las 12 horas. Existieron 4 picaduras a las 12 horas, una de las cuales se llenó con sangre hasta la finalización. La respuesta de evitación fuerte esa todavía evidente durante 12 horas. El olor era muy fuerte hasta las 6 horas, y más débil pero todavía detectable a las 12
horas.
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6.3 20% de DEET en aceite mineral
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Horas después de tratamiento
26
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Comentarios: La formulación de DEET era altamente repelente. Cuando se aplica a la hora cero, casi todos los mosquitos se dispersaron a los lados opuestos de la jaula lejos del brazo/mano tratado, y casi todos pararon de volar en menos de 1 - 2 minutos. Se observaron pocos aterrizajes todos fueron muy breves, solo un toque y se retiraron volando. El efecto repelente parecía disminuir después de 6 horas, con un incremento de aterrizajes de u unas pocas picaduras. Existía 1 picadura a las 6 horas, 2 picaduras a las 9 horas, 22 picaduras a las 12 horas. El efecto repelente disminuyó considerablemente a las 12 horas con un gran incremento en el número de picaduras.
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6.4 20% de Citronella en aceite mineral
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Horas después de tratamiento
27
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Comentarios: Se observó una muy débil actividad repelente. Existieron numerosos aterrizajes y 5 picaduras a la hora cero. En 9 horas, existís una nube virtual de mosquitos que revoloteaban sobre la mano/brazo tratado, picando o intentando picar. Las picaduras eran demasiado numerosas para contar.
TABLA 7 Eficacia repelente de 2-undecanona en aceite mineral (20%) contra DEET y Citronella contra los mosquitos Aedes aegypti
28
Se calculó la eficacia de acuerdo con la siguiente fórmula:
Eficacia = [(n^{o}\ de\ aterrizajes/n^{o}\ presente\ en\ el\ control) - (n^{o}\ de\ aterrizajes/n^{o}\ presente\ en\ los\ experimentos) dividido\ por\ (n^{o}\ de\ aterrizajes/n^{o}\ presente\ en\ control)]\ x\ 100.
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Aplicabilidad industrial
El procedimiento de la presente invención es útil para repeler mosquitos y garrapatas de un sujeto o sustrato. Por ejemplo, sus compuestos y formulaciones se pueden aplicar a un sujeto humano o animal, o un artículo que pertenece a tal sujeto, por ejemplo, una prenda o accesorio en el ambiente del sujeto, para repeler mosquitos y/o garrapatas. El sujeto animal puede ser un sujeto mamífero, tal como caballos, vacas, ovejas, perros y gatos, u otro ganado o mascotas del hogar. El procedimiento de la invención produce una alternativa eficaz de repelentes de N,N-dietil-meta-toluamida (DEET).

Claims (46)

1. Un procedimiento de repelencia de mosquitos y garrapatas de un sujeto, que comprende la aplicación a dicho sujeto, o a un artículo agregado a dicho sujeto, una cantidad eficaz de repelente que comprende 2-undecanona.
2. Un procedimiento de repelencia de mosquitos de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende aplicar a un sujeto una cantidad eficaz de un repelente que comprende 2-undecanona.
3. El procedimiento de la reivindicación 2, en el que dichos mosquitos comprenden al menos una especie de mosquito seleccionada entre el grupo constituido por mosquitos Anopheles, mosquitos Aedes y mosquitos Culex.
4. El procedimiento de la reivindicación 2, en el que dichos mosquitos comprenden mosquitos Anopheles.
5. El procedimiento de la reivindicación 2, en el que dichos mosquitos comprenden mosquitos Aedes.
6. El procedimiento de la reivindicación 2, en el que dichos mosquitos comprenden mosquitos Culex.
7. El procedimiento de la reivindicación 2, en el que dichos mosquitos comprenden al menos una especie de mosquito seleccionada entre el grupo constituido por Mosquitos tigre, Aedes aboriginis, Aedes Aegypti, Aedes, albopictus, Aedes cantator, Aedes sierrensis, Aedes sollicitans, Aedes squamiger, Aedes sticticus, Aedes vexans, Anopheles quadrimaculatus, Culex pipiens, y Culex quinquefaxciatus.
8. El procedimiento de la reivindicación 2, en el que dicho sujeto es un sujeto mamífero.
9. El procedimiento de la reivindicación 2, en el que dicho sujeto es un sujeto humano.
10. El procedimiento de la reivindicación 9, en el que dicha etapa de aplicación comprende aplicar dicho repelente a la piel de dicho sujeto humano.
11. El procedimiento de la reivindicación 9, en el que dicha etapa de aplicación comprende la aplicación de dicho repelente a un artículo, dicho artículo se usa por dicho sujeto humano.
12. El procedimiento de la reivindicación 9, en el que dicho repelente comprende además un vehículo.
13. El procedimiento de la reivindicación 12, en el que dicho repelente comprende además al menos un agente adicional seleccionado entre el grupo constituido por insecticidas, acaricidas, rodenticidas, fungicidas, bactericidas, nematocidas, herbicidas, fertilizantes y agentes reguladores del crecimiento.
14. El procedimiento de la reivindicación 12, en el que el vehículo comprende etanol.
15. El procedimiento de la reivindicación 12, en el que la concentración de undecanona en dicho repelente está entre aproximadamente 0,001% en peso y 10% en peso del repelente.
16. El procedimiento de la reivindicación 12, en el que dicho repelente comprende una formulación que comprende entre aproximadamente 0,001% y 60% en peso de 2-undecanona.
17. Un procedimiento de repelencia de mosquitos a partir de un lugar susceptible a la presencia de mosquitos, que comprende aplicar a dicho lugar una cantidad eficaz de un repelente que comprende 2-undecanona.
18. El procedimiento de la reivindicación 17, en el que dicho lugar está adaptado para uso o presencia de seres humanos y/o animales.
19. El procedimiento de la reivindicación 18, en el que dicho lugar comprende un artículo usado por, o dispuesto para proteger a, seres humanos y/o animales.
20. El procedimiento de la reivindicación 18, en el que dicho lugar comprende una estructura de vivienda.
21. El procedimiento de la reivindicación 18, en el que dicho lugar comprende un cuerpo de agua.
22. Un procedimiento de repelencia de garrapatas de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende aplicar a un sujeto, o a un lugar susceptible a la presencia de garrapatas, una cantidad eficaz de un repelente que comprende 2-undecanona.
23. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que dichas garrapatas comprenden al menos una especie de garrapatas seleccionada entre el grupo constituido por garrapatas de ciervo, garrapatas de perro americano, garrapatas Dermacentor variabilis, garrapatas Ornithodoros parkeri, garrapatas O. moubata, y garrapatas Dermacentor andersoni.
24. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que dichas garrapatas comprenden garrapatas de ciervo.
25. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que dichas garrapatas comprenden garrapatas de perro americano.
26. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que dichas garrapatas comprenden garrapatas Dermacentor variabilis.
27. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que dichas garrapatas comprenden garrapatas Ornithodoros parkeri.
28. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que dichas garrapatas comprenden garrapatas O. moubata.
29. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que dichas garrapatas comprenden garrapatas Dermacentor andersoni.
30. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que dicho sujeto es un sujeto mamífero.
31. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que dicho sujeto es un sujeto humano.
32. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que dicha etapa de aplicación comprende aplicar dicho repelente a la piel de dicho sujeto.
33. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que dicha etapa de aplicación comprende aplicar dicho repelente a un artículo, dicho artículo está usado por dicho sujeto.
34. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que dicho repelente además comprende un vehículo.
35. El procedimiento de la reivindicación 34, en el que dicho repelente además comprende al menos un agente adicional seleccionado entre el grupo constituido por insecticidas, acaricidas, rodenticidas, fungicidas, bactericidas, nematocidas, herbicidas, fertilizantes y agentes reguladores del crecimiento.
36. El procedimiento de la reivindicación 34, en el que el vehículo comprende etanol.
37. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que la concentración de 2- undecanona en dicho repelente está entre aproximadamente 0,001% en peso a 10% en peso del repelente.
38. El procedimiento de la reivindicación 22, en el que dicho repelente comprende una formulación líquida que comprende entre aproximadamente 0,001% y 60% en peso de 2-undecanona.
39. El procedimiento de la reivindicación 2, en el que dicho repelente comprende entre aproximadamente 0,001% y 100% en peso de 2-undecanona.
40. El procedimiento de la reivindicación 2, en el que dicho repelente además comprende al menos un componente adicional que afecta al comportamiento de dichos mosquitos.
41. El procedimiento de la reivindicación 40, en el que dicho al menos un componente adicional comprende un componente adicional repelente.
42. Un procedimiento de repelencia de mosquitos de un sujeto animal de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende la aplicación a dicho sujeto animal, o a un artículo perteneciente a dicho sujeto animal, una cantidad eficaz de un repelente que comprende 2-undecanona.
43. El procedimiento de la reivindicación 42, en el que el sujeto animal es un animal de ganadería.
44. El procedimiento de la reivindicación 42, en el que el sujeto animal es una mascota de hogar.
45. El procedimiento de la reivindicación 42, en el que el sujeto animal es un mamífero.
46. El procedimiento de la reivindicación 42, en el que el sujeto animal se selecciona entre el grupo constituido por caballos, vacas, ovejas, perros y gatos.
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