ES2321021T3 - Recipiente par areactivos, reaccion en portaobjetos y bandeja de retencion y metodo de funcionamiento. - Google Patents
Recipiente par areactivos, reaccion en portaobjetos y bandeja de retencion y metodo de funcionamiento. Download PDFInfo
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Abstract
Una bandeja de retención de muestras (10) que define una superficie inferior (150) y que comprende: paredes internas (140); una porción de contención de un reactivo que define un hueco para reactivo (30); una porción de contención de una muestra que define una placa (50) que incluye una superficie para reactivo; una porción para flujo de fluido (40, 650) que está configurada para situar el hueco para reactivo (30) en comunicación fluida con la superficie para reactivo; y caracterizada por un depósito de mezclado (155) en comunicación fluida bidireccional con la superficie para reactivo definida por una cámara (155) formada entre dichas paredes laterales (130), paredes internas 140 y superficie inferior (150) para retener el exceso de fluido que desborda de dicha placa (501), donde dicha superficie para reactivo define un puerto de fluido de entrada (60) y un puerto de fluido de salida (70) en extremos opuestos de la placa (50) donde el puerto de fluido de entrada (60) y el puerto de fluido de salida (70) se extienden a través de la superficie para reactivo hasta un lado opuesto de la placa (50).
Description
Recipiente para reactivos, reacción en
portaobjetos y bandeja de retención y método de funcionamiento.
Se reivindica prioridad de la Solicitud
Provisional de Patente de Estados Unidos Nº de Serie 60/652.170,
titulada "Reagent Container and Slide Reaction And Retaining
Tray, And Method of Operation", presentada el 11 de febrero de
2005.
La presente invención se refiere en general a un
sistema de procesamiento de una muestra de tejido y, en particular,
a una bandeja de retención de muestras usada en dicho sistema.
Los procesadores de tejido pueden funcionar con
niveles variables de automatización para procesar muestras de
tejido humano o animal para usos histológicos o patológicos. Pueden
usarse diversos tipos de reactivos químicos en diversas etapas del
procesamiento tisular y se han desarrollado diversos sistemas para
suministrar reactivos a portaobjetos que contienen muestras. Los
ejemplos de sistemas de suministro de reactivos conocidos incluyen
dispensadores que liberan una pequeña cantidad, vertido manual en
cubetas de reactivos, o mediante recipientes a granel conectados
con un procesador mediante tubos.
Los documentos US 5068091, US 6673620 y
WO-A1-02/072264 describen
dispositivos de análisis de muestra respectivos que están diseñados
específicamente para el uso de reactivos líquidos suministrados
manual o automáticamente mediante conductos de fluido.
Existen diversas desventajas de los sistemas
conocidos. Por ejemplo, el vertido manual en, o drenaje, de cubetas
de reactivo es lento y requiere precisión de vertido, reduciendo de
este modo la eficiencia global del sistema de procesamiento de
tejido. Otra desventaja es que los reactivos vertidos manualmente y
drenados pueden estar aguados, requerir la limpieza de vertidos y
el consiguiente tiempo de parada del instrumento. Otra desventaja
es que la selección del reactivo correcto requiere atención y
precisión por parte del operador y existe una mayor posibilidad de
errores de aplicación de reactivo, dando como resultado una
reducción de la precisión y la eficacia operacional del ensayo.
Los sistemas automatizados también presentan
diversas desventajas. Es necesario seleccionar y administrar
reactivos a los portaobjetos durante el procesamiento.
Frecuentemente, es necesario suministrar los reactivos mediante
dispensado promovido por gravedad desde arriba. Dichos sistemas de
suministro requieren un equipo especializado para el suministro de
reactivo tal como sistemas dispensadores o impulsores o pipeteadores
automatizados de reactivo especializados. Dichos sistemas sufren
diversas desventajas tales como la cantidad de esfuerzo necesario
para ajustar y dispensar los reactivos, las posibilidades de
evaporación durante el procesamiento o de contaminación y las
dificultades de manejo de cantidades diminutas de gran número de
reactivos.
Una bandeja de retención de portaobjetos y
sistema para teñir tejidos, conocidos se describe en la Patente de
Estados Unidos Nº 5.338.358, que se incorpora en este documento como
referencia. Como se ilustra en esa patente, se proporciona una
placa y se proporcionan diversos elementos de montaje para montar a
un portaobjetos sobre la bandeja de portaobjetos. Se ilustra el
espacio para cinco portaobjetos. Se proporciona una cámara de
reacción entre una superficie de la placa y un portaobjetos montado
sobre la bandeja. Los reactivos se introducen en la cámara de
reacción mediante superficies de goteo y acción capilar
concomitante. Bandejas de retención de portaobjetos y sistemas
adicionales se describen en las Patentes de Estados Unidos Nº
5.695.942 y 5.965.545. Como se ilustra en esas patentes, se
proporcionan aparatos de retención de portaobjetos calentados o
enfriados individualmente. Los portaobjetos se sitúan adyacentes a
una superficie y pueden introducirse reactivos entre los
portaobjetos y sus respectivas superficies, tal como fundiendo un
gel que contiene un reactivo mediante calentamiento.
Además, el documento US 5965454 describe un
aparato automatizado para analizar muestras usando un reactivo de
matriz fluidizable. En particular dicho aparato comprende una serie
de bloques cada uno de los cuales es adecuado para sostener un
portaobjetos y un reactivo de matriz fluidizable solamente cuando el
portaobjetos se carga en el bloque. Por lo tanto, los bloques del
documento US no son adecuados para una carga previa de un reactivo
de matriz fluidizable sin un portaobjetos colocado previamente,
conectado al bloque.
La presente invención alivia en gran medida las
desventajas de los sistemas de tinción de portaobjetos automatizados
conocidos, proporcionando una bandeja de retención de muestras y
una cámara de reacción de acuerdo con la reivindicación 1, que
pueden utilizarse en un sistema de procesamiento de tejido. La
bandeja de retención de muestras proporciona una cámara de reacción
y opcionalmente retiene un reactivo o varios reactivos en uno o más
depósitos para reactivo. En una realización, la bandeja de retención
incluye una placa, una superficie de goteo y un hueco que actúa
como recipiente para reactivo. El recipiente para reactivo puede
alojar a un reactivo o una combinación de reactivos, tal como un
reactivo primario usado en el procesamiento de un sustrato. El
reactivo alojado dentro de la bandeja se denominará en este
documento "reactivo del hueco".
La placa y otros elementos estructurales de la
bandeja orientan preferiblemente a un portaobjetos situado sobre la
bandeja de modo que se forma una cámara de reacción entre toda o una
porción de la placa y la superficie del portaobjetos. La cámara de
reacción puede configurarse de modo que los reactivos puedan
suministrarse a la cámara de reacción, mientras el portaobjetos
está en posición. El sustrato puede ser cualquier artículo que se
desee procesar, tal como un tejido humano o animal que se seccionó.
La bandeja de retención es preferiblemente desechable después de un
solo uso, aunque también son posibles múltiples usos con el mismo
sistema. De acuerdo con algunas realizaciones, la bandeja de
retención puede estar provista de un identificador que proporciona
información relativa al(los) reactivo(s)
contenidos en la bandeja o al tipo de bandeja cuando pueden usarse múltiples tipos de bandejas en un sistema.
contenidos en la bandeja o al tipo de bandeja cuando pueden usarse múltiples tipos de bandejas en un sistema.
En una realización, el reactivo en el hueco para
reactivo se proporciona en una matriz fluidizable, tal como un gel
o sólido fusible. Un sistema que usa la bandeja de retención
preferiblemente incluye un sistema de control de la temperatura,
tal como incluyendo un elemento de calentamiento y/o de refrigerado
situado para proporcionar calor o frío al hueco para reactivo según
se desee para calentar el reactivo, para licuarlo lo suficiente
para que fluya según se desee a la cámara de reacción, para el hueco
para reactivo. El(los) elemento(s) de calentamiento
y/o de refrigerado se disponen sustancialmente por debajo de la
superficie inferior. Además los elementos de calentamiento y/o de
refrigerado pueden usarse para controlar la cinética de reacción y
para enfriar la matriz de reactivo en la cámara de reactivo para
mantener a la matriz de reactivo en forma sólida, de gel, o en otra
forma no fluida, para contrarrestar los niveles de calor generados
por un instrumento.
Otros reactivos para procesar el sustrato pueden
dispensarse en una superficie de goteo que está configurada para
recibir a los reactivos dispensados desde arriba y después dirigir
al(los) reactivo(s) para que fluyan según se desee,
tal como al interior de la cámara de reacción formada entre la placa
y el portaobjetos. Los reactivos externos, que se aplican desde
fuentes externas, pueden ser reactivos secundarios, reactivos
primarios o cualquier otro fluido que se desee aplicar. Los
reactivos suministrados desde fuentes externas se denominarán en
este documento "reactivos externos".
Puede usarse una barrera o sello desmontable
para tapar el hueco que contiene el reactivo. La barrera o sello
preferiblemente es relativamente impermeable al vapor y al fluido y
cubre cualesquiera porciones de otro modo abiertas del hueco, tales
como la superior y una o más superficies laterales. En una
realización alternativa, una superficie lateral del hueco se
bloquea con una barrera deslizante que puede deslizarse fuera de la
disposición de bloqueo según se desee y deslizarse de vuelta si se
desea.
En una realización el hueco que contiene
reactivo es rellenable. Por ejemplo, el hueco opcionalmente incluye
una superficie inferior que tiene una o más aberturas para
suministrar al hueco una cantidad predeterminada de una matriz que
contiene el reactivo del hueco. Cualquier otro mecanismo de llenado
que pueda llenar el hueco según se desee también puede usarse, tal
como recargar el reactivo del hueco, tal como un reactivo primario,
en el hueco desde arriba. El reactivo puede situarse en el hueco
rellenado en cualquier forma, tal como comprimidos oblongos, uno o
más gránulos, goteo, vertido o chorro desde un tubo.
Los fluidos y reactivos también pueden
introducirse en el sistema mediante otros medios. En una
realización, se introducen fluidos y/o reactivos y/o se evacuan
desde abajo. Un ejemplo es proporcionando uno o más puertos de
entrada de fluido en la placa y opcionalmente uno o más puertos de
evacuación de fluido también en la placa. Preferiblemente, los
puertos de entrada y de evacuación están generalmente en extremos
opuestos de la placa para crear un gradiente de flujo de fluido
desde uno a otro extremo de la placa. Con un portaobjetos situado
en la bandeja, la cámara de reacción se forma entre el portaobjetos
y la placa, con un gradiente de flujo de fluido desde uno a otro
extremo. En una realización, cada uno de los puertos de entrada y
evacuación de fluido tiene varios orificios, que son relativamente
pequeños, para que puedan actuar como tamiz. Opcionalmente, puede
situarse un tamiz en los puertos.
El tamaño del espacio entre la placa de la
bandeja y el portaobjetos puede configurarse para crear propiedades
de flujo de fluido según se desee. En una realización, la anchura de
la cámara de reacción (es decir la distancia entre la placa y el
portaobjetos) es lo suficientemente fina para promover el flujo de
fluido inducido por acción capilar desde uno a otro extremo.
Preferiblemente, el flujo de fluido es desde el extremo del hueco
para reactivo hacia el extremo opuesto. De esta manera, los
reactivos fluyen mediante acción capilar desde el hueco hacia el
extremo opuesto de la cámara de reacción. Además, a reactivos
secundarios u otros introducidos desde arriba en una superficie de
goteo también puede inducírseles para que fluyan desde uno a otro
extremo. Del mismo modo, a los fluidos introducidos desde abajo
mediante un puerto de entrada de fluido puede inducírseles para que
fluyan mediante acción capilar. De esta manera, no se requiere la
ayuda de un gradiente de presión creado a partir del puerto de
evacuación, aunque también puede usarse opcionalmente. En otra
realización, la anchura de la cámara de reacción puede
seleccionarse para evitar la acción capilar. En dicha realización,
puede conseguirse el fluido dirigido tal como por gravedad o
mediante diferenciales de presión entre los puertos de entrada y de
evacuación.
En otro aspecto de la invención, la placa se
eleva por encima de una superficie inferior de la bandeja. El
espacio formado entre las paredes laterales de la placa, las paredes
de la bandeja y el fondo de la bandeja puede retener el flujo que
desborda desde la placa y la cámara de reacción. Además, este
espacio puede usarse para mezclar reactivos antes de extraerlos a
la placa. Dichos fluidos pueden evacuarse mediante el(los)
puerto(s) de evacuación.
Otro aspecto de la presente invención implica un
sistema de procesamiento de sustrato capaz de utilizar múltiples
bandejas de retención. El sistema incluye además sistemas de manejo
de fluido, tales como un sistema de pipeteo o un ensamblaje de
dispensado que dispensa reactivos externos desde arriba en las
superficies de goteo de la bandeja según se desee. Del mismo modo,
opcionalmente se proporciona un colector de fluido para dirigir
múltiples fluidos diferentes desde abajo hasta los puertos de
entrada y para dirigir fluido(s) de desecho según se desee
desde los puertos de evacuación a uno o más recipientes de fluido de
desecho.
Un aspecto adicional de la presente invención
implica un método de uso de una bandeja para retener a un
portaobjetos que tiene un sustrato unido a éste de acuerdo con la
reivindicación 17, en el que uno o más reactivos se proporcionan en
la cámara de reacción desde un hueco para reactivo mediante flujo
desde el hueco al interior de la cámara de reacción, opcionalmente
inducido calentando el hueco. Opcionalmente, pueden dispensarse
reactivos adicionales desde arriba sobre una superficie de goteo
que está orientada para permitir que el fluido también fluya al
interior de la cámara de reacción. Adicionalmente, pueden
proporcionarse fluidos desde abajo mediante el(los)
puerto(s) de entrada y evacuarse mediante el(los)
puerto(s) de evacuación. Debe entenderse que puede
seleccionarse cualquier orden de estas opciones, y puede
seleccionarse cualquier número de reactivos - ya sean reactivos a
granel sencillos o múltiples, reactivos externos o reactivos del
hueco.
Estas y otras características y ventajas de la
presente invención se entenderán revisando la siguiente descripción
detallada de la invención, junto con las figuras adjuntas en las que
números de referencia similares se refieren a partes similares en
toda la descripción.
La figura 1 es una vista superior en perspectiva
de una bandeja de retención de portaobjetos de acuerdo con la
presente invención;
La figura 2 es una vista inferior en perspectiva
de una bandeja de retención de portaobjetos de acuerdo con la
presente invención;
La figura 3 es una vista en despiece ordenado de
una vista superior en perspectiva de una bandeja de retención de
portaobjetos y un portaobjetos situado sobre ésta de acuerdo con la
presente invención.
La figura 4 es una vista superior en perspectiva
de una bandeja de retención de portaobjetos con un hueco para
reactivos sellado, de acuerdo con la presente invención;
La figura 5 es una vista superior de una bandeja
de retención de portaobjetos de acuerdo con la presente
invención;
La figura 6 es una vista lateral de sección
transversal de la bandeja de retención de portaobjetos de la figura
5, tomada a lo largo de la línea A-A, de acuerdo con
la presente invención;
La figura 7 es una vista de sección transversal
de la bandeja de retención de portaobjetos de la figura 5, tomada a
lo largo de la línea B-B, de acuerdo con la presente
invención;
La figura 8 es una vista en detalle de una
porción de la bandeja de retención de portaobjetos de la figura 7,
indicada mediante el detalle C, de acuerdo con la presente
invención;
La figura 9 es una vista en detalle de una
porción de la bandeja de retención de portaobjetos de la figura 5,
indicada mediante el detalle D, de acuerdo con la presente
invención;
La figura 10 es una vista en detalle de una
porción de la bandeja de retención de portaobjetos de la figura 5,
indicada mediante el detalle E, de acuerdo con la presente
invención;
La figura 11 es una vista en detalle de una
porción de la bandeja de retención de portaobjetos de la figura 6,
indicada mediante el detalle F, de acuerdo con la presente
invención;
La figura 12 es una vista de sección transversal
de una bandeja de retención de portaobjetos de acuerdo con la
presente invención;
La figura 13 es una vista en perspectiva de una
bandeja de retención de portaobjetos de acuerdo con la presente
invención;
La figura 14 es una vista en perspectiva de una
bandeja de retención de portaobjetos de acuerdo con la presente
invención;
Las figuras 15-17 son vistas
superiores de bandejas de retención de portaobjetos de acuerdo con
la presente invención que ilustran ejemplos de formas y tamaños de
placas;
La figura 18 es una vista superior de un sistema
de procesamiento de tejido adecuado para uso con una o más bandejas
de retención de tejido de acuerdo con la presente invención;
La figura 19 es una vista lateral del sistema de
procesamiento de tejido de la figura 18;
La figura 20 es un diagrama de flujo que
representa un método de fabricación de una bandeja de retención de
portaobjetos de acuerdo con la presente invención; y
La figura 21 es un diagrama de flujo que
representa un método de uso de una bandeja de retención de
portaobjetos de acuerdo con la presente invención.
\vskip1.000000\baselineskip
En los siguientes párrafos, la presente
invención se describirá con detalle a modo de ejemplo en referencia
a las figuras. En toda esta descripción, las realizaciones
preferidas y ejemplos mostrados deben considerarse ejemplares, en
lugar de limitaciones de la presente invención. Como se usa en este
documento, la "presente invención" se refiere a una cualquiera
de las realizaciones de la invención descritas en este documento, y
cualesquiera equivalentes.
Una bandeja de retención de muestras o
portaobjetos 10 de acuerdo con los principios de la presente
invención se ilustra en las figuras y se describe en los siguientes
párrafos. Como se usan en este documento, las expresiones bandeja
de retención de muestras y bandeja de retención de portaobjetos se
usan de forma intercambiable para una bandeja de retención 10 que
puede retener a una muestra y/o portaobjetos. En las realizaciones
ilustradas, la bandeja de retención de muestras 10 está configurada
para ser una bandeja de retención de portaobjetos de microscopio
10, pero debe entenderse que la bandeja de retención de muestras no
se limita a esto y puede configurarse para retener cualquier
muestra o recipiente de muestra. De acuerdo con un aspecto de la
presente invención, la bandeja de retención de portaobjetos 10
funciona como recipiente para reactivo, una cámara de reacción y un
sistema de colocación y retención de portaobjetos que puede usarse
en el procesamiento de un sustrato tal como una muestra de
tejido.
En una realización, la bandeja de retención de
portaobjetos 10 es desechable después de un solo uso, aunque
también puede usarse múltiples veces y el recipiente para reactivo
puede ser rellenable. Opcionalmente, la bandeja de retención de
portaobjetos 10 puede incluir un identificador que es legible por un
ser humano o una máquina. Los ejemplos de identificadores pueden
ser legibles visualmente, legibles magnéticamente, legibles de
forma táctil, etc. Preferiblemente, el identificador identifica al
reactivo contenido en el recipiente para reactivo de la bandeja de
retención (es decir el "reactivo del hueco"), por ejemplo un
reactivo primario. El uso de bandejas desechables ayuda a asegurar
que los reactivos no sufren contaminaciones cruzadas.
La bandeja de retención de portaobjetos 10
generalmente incluye una superficie de recipiente 20 en la cual se
extiende el hueco para reactivo 30 (también llamado "recipiente
para reactivo") desde la superficie de recipiente 20. En una
realización preferida, un reactivo del hueco se deposita dentro del
hueco 30. Cualquier tipo de reactivo puede depositarse en el hueco
30, tal como un reactivo primario, reactivos secundarios, reactivos
a granel o combinaciones de los mismos. Debe entenderse que, aunque
se ilustra un único recipiente para reactivo 30, la bandeja de
portaobjetos puede contener cualquier número de recipientes para
reactivo 30, según se desee.
Preferiblemente, el reactivo contenido en
el(los) hueco(s) 30 está en una matriz que está en
forma sólida o de gel a temperaturas ambiente típicas (tales como
entre 50 y 90 grados Fahrenheit), pero fluida a temperaturas
elevadas. En un ejemplo, un reactivo primario o mezcla de reactivos
está contenida con una base de gel licuable a una temperatura de
180 grados Fahrenheit. Otras temperaturas de cambio de fase pueden
seleccionarse según se desee, tales como entre 75 y 211 grados
Fahrenheit. Como alternativa, una solución de reactivo puede estar
contenida en una solución líquida dentro de una capucha de gel u
otro recipiente dentro del hueco 30. Preferiblemente, la forma de
contención del reactivo también puede liberarse con calor a elevadas
temperaturas. Otros elementos de la bandeja de retención de
portaobjetos que se describirán con más detalle a continuación
incluyen, por ejemplo, una superficie de flujo y goteo 40, placa
50, puerto de entrada 60, puerto de evacuación 70, nervadura 80 y
ejemplos de lengüetas de orientación de portaobjetos 90, 100. Debe
entenderse que pueden proporcionarse múltiples placas 50 y
múltiples cámaras de reacción 120, tal como se ilustra en la Patente
de Estados Unidos Nº 5.338.358.
La bandeja de retención de portaobjetos 10 puede
estar formada de cualquier material que tenga la suficiente
resistencia de la estructura y propiedades neutras para el proceso
para soportar un portaobjetos, retenerlo y ser compatible con
reactivos y las temperaturas empleadas durante el uso. Los ejemplos
incluyen materiales poliméricos tales como materiales plásticos o
celulósicos (es decir, basados en o que comprenden celulosa),
metales, vidrios, etc. Un material ejemplar es polioximetileno
termoplástico tal como DELRIN (una marca registrada de E.I. DuPont
de Nemours y Co. De Wilmintong, DE). La bandeja 10 puede formarse
mediante cualquier proceso conocido en la técnica tal como moldeo
por inyección, fresado o cualquier otro proceso de fabricación
adecuado para generar las características deseadas de la bandeja.
Además, debe entenderse que la bandeja puede estar constituida por
múltiples materiales, tal como por ejemplo, la región del hueco
hecha de un material y la región de la placa de otro.
El(los) hueco(s) para reactivo 30
puede(n) tener cualquier forma, profundidad u orientación,
según se desee de modo que el(los) reactivo(s)
contenido(s) en su interior se dirijan al interior de la
cámara de reacción 120 según se desee durante el procesamiento, y
una matriz de reactivo puede estar contenida dentro del hueco 30.
En la realización ilustrada, el hueco se forma a un nivel
generalmente más bajo por debajo de la superficie del recipiente
20. El hueco 30 incluye superficies laterales 610 que se ilustran
como una única superficie curva y una superficie inferior 620. Para
facilitar la descripción, la superficie inferior interna se ilustra
con el número de referencia 620 y la superficie opuesta
correspondiente en el fondo/lado externo de la bandeja 10 se
ilustra con el número de referencia 630. Como se ilustra, en una
realización, la pared lateral del hueco 610 rodea sólo parcialmente
al hueco 30 y existe un hueco 640 definido entre los extremos de la
pared lateral 610. Cuando la matriz de reactivo se fluidiza, el
reactivo puede fluir a través del hueco y a lo largo de la rampa de
flujo de fluido 650. Además, la superficie inferior 620 es
generalmente plana, aunque ésta también puede estar inclinada para
promover el flujo de fluido en cualquier dirección deseada. También
pueden seleccionarse otros perfiles cualesquiera según se desee,
tales como una superficie escalonada o curva.
La superficie inferior externa 630
preferiblemente tiene una forma y un tamaño para coincidir con un
elemento de calentamiento correspondiente en un sistema de
procesamiento, para promover mejor la transferencia de calor desde
el elemento de calentamiento a la superficie inferior 630. La
transferencia de calor eficaz entre un elemento de calentamiento y
la superficie inferior 630 se desea, de modo que el calor pueda
transferirse eficazmente al interior del hueco 30 para fluidizar
reactivos que se almacenan en su interior en forma fluidizable
mediante temperatura, tales como geles. De este modo, la superficie
inferior externa 630 tiene una forma preferiblemente de modo que
promueven dicha disposición de transferencia de calor y puede ser
relativamente plana como se ilustra o como alternativa curva,
inclinada o de cualquier otra forma.
Debe entenderse que el término
"fluidizable" o "fluidizar" como se usa en este documento
puede abarcar cualquier transición de un estado a otro, tal como de
una forma no fluida a una fluida, tal como una forma líquida o
viscosa o a una forma gaseosa, tal como cuando una cámara de
reacción puede tener un control de la humedad. En una realización,
un material en gel se vuelve fluido cuando se calienta para sufrir
una transición a una forma sustancialmente líquida. También debe
observarse que "licuar" o "licuable" como se usa en este
documento abarca cualesquiera propiedades de transición de estado
que abarcan una transición de un estado relativamente no fluido a
uno fluido como los términos "fluidizar" o
"fluidizable".
En referencia a la figura 4, se proporciona un
sello opcional 660 (preferiblemente desmontable) que tapa y
preferiblemente sella el hueco 30, incluyendo tapar y sellar el
hueco opcional 640 y opcionalmente también y preferiblemente
también tapar la rampa 650. El sello 660 opcionalmente incluye una
lengüeta con asa 665 para facilitar la colocación y agarre manual
del sello de modo que un operador pueda tirar de y retirar el sello
de la bandeja de retención 10. En otra realización, se proporciona
un sello ensanchado 660 que tapa todo o una porción de la placa 50
y opcionalmente los puertos de entrada y/o evacuación 60, 70, como
se muestra en la figura 13.
El sello 660 es preferiblemente manualmente
desmontable de la bandeja de retención de portaobjetos antes del
procesamiento de tejido. Por ejemplo, un usuario puede retirar el
sello agarrando la lengüeta 665 y retirando el sello 660 de la
bandeja 10. Aunque la lengüeta 665 se ilustra situada en un extremo
del sello 660 adyacente al hueco 30, debe entenderse que la
lengüeta 665 puede situarse en cualquier ubicación en el sello 660
de modo que un operador pueda agarrarla. En una realización, las
porciones 667 del sello 660 pueden seguir fijadas a la bandeja de
retención de portaobjetos 10 una vez que la mayor parte del sello se
ha retirado. En una realización alternativa, se proporciona una
barrera deslizante para tapar el hueco 640 y/o la parte superior del
hueco 30, donde la barrera deslizante puede deslizarse fuera de la
disposición de bloqueo según se desee y después deslizarse de
vuelta, si se desea el cierre.
El sello 660 puede estar construido a partir de
cualquier material que sirva para tapar el hueco 30 y retener al
material contenido en su interior. Preferiblemente el sello es
sustancialmente impermeable al vapor para inhibir la evaporación
del material contenido dentro del hueco 30. En un ejemplo, el sello
660 es un compuesto de múltiples capas que incluye una capa externa
de papel de aluminio y otras capas de uno o más materiales
poliméricos o celulósicos (tal como un papel con recubrimiento),
que, a su vez, está recubierto con un adhesivo. El adhesivo puede
ser un adhesivo de contacto para mantenerlo en su lugar, o cualquier
otra forma de fijador, tal como otros adhesivos, sellos térmicos o
sellos mecánicos, tales como engarce. Como alternativa, puede
aplicarse un sello químico dispensado un producto químico entre el
material en el hueco 30 y el agujero 640 y/o el entorno en el que
el producto químico inhibe el flujo de fluido o vaporización.
Cualquier número o tipo de reactivos puede
depositarse en el(los) hueco(s) 30. Por ejemplo,
pueden proporcionarse reactivos adecuados para una variedad
potencialmente ilimitada de procedimientos en la matriz incluida
dentro de uno o más huecos, incluyendo procedimientos de
inmunohistoquímica, procedimientos de tinción, procedimientos de
hibridación in situ, otros procedimientos histoquímicos,
etc.
Ejemplos de reactivos primarios (también
llamados sondas, marcadores o controles) que pueden situarse en
solitario o en combinación en el hueco 30 incluyen, sin limitación,
cualquier tipo de anticuerpos, sondas, ácidos nucleicos, (ARN, ADN
u oligonucleótidos), ligandos, receptores de ligando, enzimas o
sustratos enzimáticos o cualesquiera otras moléculas adecuadas para
un uso deseado. Los reactivos pueden estar en forma natural,
purificada, concentrada, diluida u acondicionados de otro modo. En
una realización, la adición de moléculas señal tales como tintes
fluorescentes, enzimas, biotina, avidita, estreptavidina, metales
(tales como partículas de plata u oro), tintes, colorantes,
moléculas marcadas radiactivamente o cualesquiera otras sustancias
tales como moléculas señalizadoras o informadoras.
Opcionalmente, pueden incluirse uno o más
reactivos en el(los) hueco(s) 30. En una realización
preferida, se dispensan reactivos secundarios desde arriba en una
superficie de goteo y de flujo de la bandeja 10, mediante un
sistema de dispensado o sistema de pipeteo en el recipiente, como se
describe con más detalle a continuación. Los ejemplos de reactivos
secundarios que pueden situarse en solitario o en combinación con
otros reactivos secundarios o en combinación con uno o más
reactivos primarios o reactivos a granel en el(los)
hueco(s) incluyen, sin limitación, cualquier tipo de
anticuerpos, sondas, ácidos nucleicos (ARN, ADN u oligonucleótidos),
ligandos, receptores de ligando, enzimas o sustratos enzimáticos o
cualesquiera otras moléculas adecuadas para un uso deseado. Los
reactivos pueden estar en forma natural, purificada, concentrada,
diluida u acondicionados de otro modo. Además, también pueden
incluirse moléculas señal tales como tintes fluorescentes, enzimas,
biotina, avidita, estreptavidina, metales (tales como partículas de
plata u oro), tintes, colorantes, moléculas marcadas
radiactivamente o cualesquiera otras sustancias tales como moléculas
señalizadoras o informadoras.
Opcionalmente uno o más tipos a granel de
reactivo pueden incluirse en el(los) hueco(s) 30,
aunque esto no se prefiere. En una realización preferida, los
reactivos a granel se almacenan en recipientes y se dispensan en la
cámara de reacción 120 de la bandeja de retención de portaobjetos 10
mediante un sistema colector que dirige los fluidos al interior de
un puerto de entrada (descrito con más detalle a continuación) de la
bandeja de portaobjetos 10. Los ejemplos de reactivos a granel que
pueden situarse en solitario o en combinación con otros reactivos a
granel o en combinación con uno o más reactivos primarios o
reactivos secundarios en el(los) hueco(s) incluyen,
sin limitación, los siguientes:
Solución Salina Tamponada con Tris (TBS) de
Tween
TBS
Agua Destilada
Solución Desencerante
El una realización, el(los)
hueco(s) 30 incluye(n) una o más aberturas 670 que
pasan a través de la superficie inferior 620/630. Las aberturas 670
opcionalmente pueden usarse para llenar o rellenar el hueco 30 con
una cantidad deseada de una matriz 680 que contiene un reactivo.
Después de llenar el hueco con la matriz de reactivo, las aberturas
670 pueden cerrarse de cualquier forma deseada, tal como aplicando
una cinta u otro tipo de cubierta. Puede usarse cualquier otro
método o aparato de llenado para llenar el hueco según se desee. Un
ejemplo es cargar (o recargar) la matriz de reactivo desde arriba,
en el hueco 30. Dicha técnica tiene la ventaja de hacer
innecesaria(s) la(s) abertura(s) 670 en la
superficie inferior del hueco 30. El reactivo puede situarse en el
hueco de cualquier forma, tal como cápsulas oblongas, uno o más
gránulos, líquido que cae por goteo en el hueco 30 y solidifica
reduciendo la temperatura (o gelifica), o gel o líquido que se
vierte o cae a chorro desde un tubo.
La matriz de reactivo 680 opcionalmente puede
formarse proporcionando un soporte sólido macroscópico formado por
un material de matriz solidificada y que encapsula uno o más
reactivos en su interior. El soporte sólido macroscópico puede
disgregarse para liberar el reactivo de su interior según se desee.
El material de la matriz puede estar hecho de un material que puede
disolverse o descomponerse mediante cualquier proceso físico o
químico, con lo que el reactivo puede liberarse, tal como perforando
una estructura, aplicando electricidad, aplicando presión o vacío o
exponiendo a calor, radiación electromagnética (EM) o disolventes.
Por ejemplo, la disgregación de una matriz de gel puede conseguirse
licuando el gel usando calor o disolviendo el gel usando un
disolvente.
A modo de ejemplo, el material de la matriz
puede ser sacarosa o almidón que contiene anticuerpos y la
descomposición puede conseguirse exponiendo la matriz a soluciones
acuosas o soluciones tamponadas acuosas de modo que la matriz no
necesita calentarse si se desea. Sin embargo, la aplicación calor
puede reducir el tiempo necesario para la descomposición de la
matriz y por lo tanto puede ser deseable. Cuando se selecciona un
material de la matriz para un reactivo dado, es deseable que el
reactivo y el material de la matriz no se unan de forma
irreversible. Además, cuando se usan matrices sólidas o
semi-sólidas, el material de soporte preferiblemente
es miscible con el disolvente empleado para el procedimiento de
reacción.
De acuerdo con la presente invención, el
suministro de reactivos a la cámara de reacción 120 puede
conseguirse de varias maneras. En un ejemplo, se proporcionan uno o
más huecos para reactivo en el hueco para reactivo 30 dentro de una
matriz de gel 680. Los reactivos pueden suministrarse a la cámara de
reacción tal como fundiendo o licuando o disolviendo de otro modo
el gel 680 que hace que el reactivo licuado fluya en el hueco 640 y
hacia la cámara de reacción 120.
En la realización ilustrada, el pasaje para el
flujo de fluido incluye una rampa de flujo de fluido 650 y una
superficie de goteo 40 situada entre el hueco para reactivo 30 y la
cámara de reacción 120. Preferiblemente uno o ambos de la
superficie de goteo 40 y la rampa 650 están inclinadas hacia la
cámara de reacción 120 para promover el flujo de fluido inducido
por la fuerza gravitatoria hacia la cámara de reacción 120.
Otros reactivos también pueden suministrarse
mediante el(los) hueco(s) para reactivo 30 u otros
dispositivos. Del mismo modo, los reactivos pueden suministrarse
mediante otros dispositivos. En un ejemplo, se suministran
reactivos externos mediante aplicación gota a gota de soluciones en
la superficie de goteo 40 desde arriba. Como se explica con más
detalle a continuación, la aplicación gota a gota de reactivos puede
conseguirse usando un aparato de dispensado de fluido automatizado,
tal como a partir de sistemas de pipeteo o recipientes de
dispensado de reactivos controlados automáticamente. Como
alternativa, la aplicación gota a gota de reactivos puede
realizarse manualmente. Como alternativa adicional, pueden
proporcionarse reactivos (u otras soluciones, tales como soluciones
de lavado o tamponantes) mediante el puerto 60. En dicha
realización, un colector de suministro de fluido que incluye
pasajes y válvulas puede proporcionar los fluidos al puerto 60.
Al fluido que se ha introducido dese el hueco
30, se le hace fluir a la cámara de reacción 120 gracias a uno o a
una combinación de capilaridad (es decir acción capilar) (tal como
cuando el fluido entra en una sección en la que un portaobjetos 110
está situado adyacente a la placa 50), diferencial de presión
aplicado mediante uno o ambos de (de los) puerto(s) de
entrada 60 y puerto(s) de evacuación 70, pulsación de vacío,
tales como los aplicados mediante el(los) puerto(s)
de evacuación 70 y gravedad. La gravedad puede usarse para inducir
flujo de fluido en solitario, tal como cuando las fuerzas generadas
por la matriz fundente 680 inducen flujo desde el hueco para
reactivo a través del agujero 640 y al interior de la cámara de
reacción 120. Las moléculas de fluido en la parte superior de la
matriz 680 pueden estar sometidas a momento mediante la gravedad. En
una realización en la cual la superficie inferior 620 se eleva con
respecto a la placa 50, se proporciona una rampa 650, que puede ser
recta, curva o escalonada, entre la superficie inferior 620 del
hueco 30 y la superficie de goteo y/o placa 50 (en realizaciones
sin una superficie de goteo 40) con lo que el fluido fluye hacia
abajo por la rampa 650 desde el hueco para reactivo 30 y hacia la
cámara de reacción 120. En otra realización, la superficie inferior
620 del hueco 30 se alinea con la superficie de la placa 50. El
fluido que se ha introducido mediante la superficie de goteo 40
también puede hacerse fluir a la cámara de reacción 120 gracias a
capilaridad y/o gravedad. Además, el fluido introducido mediante el
puerto de entrada 60 puede fluir a través de la cámara de reacción
120 gracias a la capilaridad. Además, un diferencial de presión
entre el puerto de entrada 60 y la cámara de reacción también puede
inducir el flujo de fluido a través de la cámara de reacción 120.
Pueden generarse diferenciales de presión adicionales
proporcionando una presión negativa (o vacío) en el puerto de
evacuación 70, que induce el flujo en dirección al puerto de
evacuación 70. Además, pueden añadirse elementos a la superficie
superior de la placa, tales como una nervadura 80, para potenciar
más las propiedades del flujo de fluido de la cámara de reacción
tal como manteniendo la cámara de reacción 120 en un tamaño
deseado.
Una vez que el(los) fluido(s)
introducidos en la cámara de reacción 120 han estado dentro de la
cámara una cantidad de tiempo deseada, el(los)
fluido(s) que queda(n) puede(n) descargarse
mediante el puerto de evacuación 70 de manera similar, en la que un
diferencial de presión negativa o vacío se introduce mediante el
puerto 70. Opcionalmente, se introducen fluidos de lavado en la
cámara de reacción 120, por ejemplo bombeándolos a través del
puerto de entrada 60, para lavar la cámara de reacción 120 según se
desee. El puerto de evacuación 70 opcionalmente incluye un filtro
(o varias aberturas pequeñas) para tamizar o filtrar restos.
La placa 50 incluye una superficie generalmente
plana que es la placa y está elevada por encima de una superficie
inferior de la bandeja 10. El puerto de entrada de fluido 60 se
dispone en un extremo de la placa 50 y el(los)
puerto(s)
de evacuación 70 se disponen preferiblemente en un extremo opuesto de la placa 50. Al separar espacialmente estos puertos en la placa 50, puede introducirse un gradiente de presión en la cámara de reacción 120 que promueve el flujo de fluido entre los puertos de entrada y de evacuación 60, 70. Como se ilustra en la figura 1, el(los) puerto(s) de entrada 60 se sitúa(n) en el extremo de la placa 50 que es adyacente a la superficie de goteo 40 y el(los) puerto(s)
de evacuación 70 están en el extremo opuesto. Al situar el puerto de entrada 60 adyacente a la superficie de goteo 40, todos los fluidos introducidos en la cámara de reacción 120 pueden introducirse desde el mismo extremo (es decir desde la superficie de goteo 40 o hueco para reactivo 340 o puerto(s) de entrada 60) promoviendo de este modo el flujo de fluido en una única dirección si se desea. Además, el flujo de fluido puede promoverse en esta dirección colocando el portaobjetos 110 en posición ligeramente inclinada cuando se sitúa adyacente a la placa 50 para formar la cámara de reacción 120, promoviendo el flujo inducido por capilaridad dirigido por el ángulo del portaobjetos con respecto a la placa.
de evacuación 70 se disponen preferiblemente en un extremo opuesto de la placa 50. Al separar espacialmente estos puertos en la placa 50, puede introducirse un gradiente de presión en la cámara de reacción 120 que promueve el flujo de fluido entre los puertos de entrada y de evacuación 60, 70. Como se ilustra en la figura 1, el(los) puerto(s) de entrada 60 se sitúa(n) en el extremo de la placa 50 que es adyacente a la superficie de goteo 40 y el(los) puerto(s)
de evacuación 70 están en el extremo opuesto. Al situar el puerto de entrada 60 adyacente a la superficie de goteo 40, todos los fluidos introducidos en la cámara de reacción 120 pueden introducirse desde el mismo extremo (es decir desde la superficie de goteo 40 o hueco para reactivo 340 o puerto(s) de entrada 60) promoviendo de este modo el flujo de fluido en una única dirección si se desea. Además, el flujo de fluido puede promoverse en esta dirección colocando el portaobjetos 110 en posición ligeramente inclinada cuando se sitúa adyacente a la placa 50 para formar la cámara de reacción 120, promoviendo el flujo inducido por capilaridad dirigido por el ángulo del portaobjetos con respecto a la placa.
Otros elementos directores del fluido pueden
proporcionarse en la placa 50. Por ejemplo, puede proporcionarse un
saliente 160 en el extremo de la placa 50 cerca del puerto de
evacuación 70 como se muestra en la figura 1. Además, pueden
proporcionarse múltiples bordes de guía 162 en un extremo proximal
de la placa 50. El saliente 160 proporciona un borde a lo largo del
lado distal de la placa 50. Como se ilustra, el saliente 160 se
extiende sustancialmente alrededor del puerto de evacuación 70 y
hacia el extremo proximal de la placa 50. En una realización, la
superficie superior del saliente 160 está formada a sustancialmente
la misma altura con respecto a la superficie superior de la placa
50 que la de las partes superiores de las lengüetas de orientación
de portaobjetos 90, 100 u otros elementos de orientación de
portaobjetos en el extremo de entrada de fluido (extremo proximal)
de la placa 50. Como resultado, en dicha realización, un
portaobjetos sujeto en la bandeja 10 estará generalmente en
contacto con el saliente 160 y las lengüetas de orientación del
portaobjetos 90, 100. En otra realización la superficie superior
del saliente 160 está a una altura diferente de modo que el
portaobjetos está en posición inclinada con respecto a la placa 50.
En otra realización adicional, el portaobjetos puede situarse de
modo que la cámara de reacción 120 sea más ancha en el extremo
proximal (cerca de la superficie de goteo) y más delgada en el
extremo distal. Las alturas del saliente 160 y de los elementos de
orientación del portaobjetos incluyendo lengüetas 90, 100 pueden
seleccionarse para proporcionar un volumen deseado dentro de la
cámara de reacción 120. En particular, mayores alturas del saliente
160 y lengüetas 90, 100 con respecto a la placa 50 proporcionan un
mayor volumen dentro de la cámara de reacción 120, que alturas
relativamente bajas de estos elementos con respecto a la placa 50.
Preferiblemente, el volumen de la cámara de reacción 120 se
selecciona para proporcionar o evitar la acción capilar dentro de
la cámara 120 según se desee, y/o para permitir el flujo de fluido
causado por un diferencial de presión si se desea. Puede
seleccionarse una cámara de reacción de cualquier tamaño 120
siempre que el volumen deseado de reactivo sea capaz de fluir a
través de la cámara de reacción 120.
También debe entenderse que el volumen del hueco
30 puede seleccionarse para que corresponda con el volumen
seleccionado para la cámara de reacción 120. Por ejemplo, puede
seleccionarse un mayor volumen de hueco si se usan secciones de
tejido 116 relativamente gruesas, que requieren una cámara de
reacción más grande. Debe entenderse que, como se usan en este
documento, los términos "sección" y "muestra" se usan de
forma intercambiable y el uso del término "sección" no
pretende limitar la aplicación a tejido que se ha cortado en
secciones. También debe entenderse que pueden usarse múltiples
tipos de bandejas de retención de portaobjetos 10 en un único
sistema de procesamiento 200 (descrito con más detalle a
continuación). Por ejemplo, pueden proporcionarse bandejas 10 que
tengan varios huecos 30 y cámaras de reacción de diferente tamaño,
según se desee. Por ejemplo, pueden seleccionarse secciones de
tejido de 4 a 5 micrómetros y el operador puede seleccionar una
bandeja de retención de portaobjetos adecuada para esas secciones
de tejido y diferentes bandejas adecuadas para muestras que tienen
un grosor de sección mayor o menor.
Como alternativa, el volumen de la cámara de
reacción 120 puede ajustarse alternado la forma de la placa 50. Por
ejemplo, en la figura 15 se representa una placa 50 relativamente
ancha. En la figura 16 se representa una placa 50 relativamente
estrecha. Además, en la figura 17 se representa una placa que tiene
porciones proximal y distal estrechas y una porción central ancha.
Estas formas no son exclusivas, y debe entenderse que se
proporcionan solamente como ejemplos de las muchas formas que
pueden seleccionarse. En un ejemplo, se usan portaobjetos que
tienen una anchura de 26 mm, y una bandeja de portaobjetos que tiene
una anchura entre paredes internas opuestas 140 de 28 mm) y se
selecciona una placa que tiene una anchura de 24 mm. Debe entenderse
que seleccionar una bandeja de portaobjetos que tiene una anchura
que es próxima a la anchura del portaobjetos puede ser deseable
para inhibir la evaporación de fluidos. En una realización
preferida, la bandeja de portaobjetos tiene una anchura entre 24 mm
y 28 mm para alojar a portaobjetos de microscopio típicos.
Preferiblemente, el saliente 160 sirve para
formar un sello con la superficie inferior 114 del portaobjetos 110
para formar un sello con el portaobjetos que sirve para inhibir la
rotura del vacío en esa región durante la operación de succión del
puerto de evacuación. Durante el procesamiento de tejido o el flujo
de otro fluido, el saliente 160 ayuda dirigir el flujo de fluido en
el conducto de retorno de fluido a través del puerto de fluido 70.
En el lado inferior de la bandeja, conductos de unión 65, 75 unen el
puerto de entrada y de evacuación respectivamente, a un sistema de
procesamiento de muestras que utiliza la bandeja de retención de
portaobjetos. Además, o como alternativa, para permitir la
conectividad de fluido, los conductos 65, 75 pueden servir para
ayudar en el montaje de la bandeja 10 en un sistema de procesamiento
de muestras. En una realización preferida, la conectividad de
fluido se proporciona mediante los conductos 65, 75 a los puertos
respectivos 60, 70. En una realización, un sistema colector
incluido en un sistema de procesamiento de muestras proporciona
tubos y válvulas conectados a la bandeja mediante los conductos 65,
75 como se describe adicionalmente en este documento. En una
realización, los conductos 65, 75 pueden configurarse para tener
diferentes dimensiones para facilitar el apropiado acoplamiento con
las partes correspondientes. En particular, el tamaño y/o forma de
los conductos 65 y 75 pueden diferir de modo que esa bandeja 10
solamente puede montarse en un sistema de procesamiento de muestras
en una orientación deseada. Dicha diferencia puede usarse como
protección contra la instalación no apropiada.
Una cámara de desbordamiento y de mezclado de
reactivos 155 se forma entre las paredes laterales 130 de la placa
50, las paredes internas 140 de la bandeja 10 y la superficie
inferior 150 de la bandeja 10. La cámara de desbordamiento y de
mezclado 155 está configurada para retener cualquier exceso de flujo
que se desborde de la placa 50 y la cámara de reacción 120. Durante
el funcionamiento, si se introduce más fluido en la bandeja 10 del
que pueda retenerse en la cámara de reacción 120, el exceso puede
desbordarse a la cámara de desbordamiento y mezclado 155. La cámara
de desbordamiento y mezclado puede servir como cámara de reacción
secundaria o depósito secundario, donde, a medida que se produce la
evaporación de la cámara de reacción 120 (o parte del fluido se
evacua mediante el puerto de evacuación 70), el fluido en la cámara
de desbordamiento 155 puede redirigirse a la cámara de reacción
120, tal como mediante condensación o succión proporcionada por el
puerto de evacuación 70. De esta manera, el fluido que deja el
sistema mediante evaporación o evacuación puede sustituirse por el
fluido retenido en la cámara de desbordamiento 155. Como resultado,
la cámara de desbordamiento y de mezclado 155 puede actuar de este
modo como regulador de la humedad. Además, pueden suministrarse
diferentes reactivos a la placa 50 en un exceso deliberado y
permitirle mezclarse en la cámara de desbordamiento y de mezclado
155 y después devolverlo a la cámara de reacción 120 mediante la
aplicación de un vacío al puerto de salida 70. Debe entenderse que
la cámara de desbordamiento y de mezclado 155 puede configurarse
para funcionar como una o ambas de una cámara de desbordamiento y
una cámara de mezclado según se desee. La cámara de desbordamiento
y de mezclado 155 también puede incluir un drenaje de desbordamiento
185 para drenar el exceso de fluido directamente de la cámara de
desbordamiento y de mezclado 155.
La bandeja de retención está configurada para
alojar a un portaobjetos 110 en la parte superior del saliente 160
y las lengüetas 90, 100 y/o cualesquiera otros elementos de
orientación de portaobjetos adecuados que sirvan para situar un
portaobjetos según se desee dentro de la bandeja 10, como se muestra
en las figuras 3 y 12. Preferiblemente, los elementos de
orientación del portaobjetos crean un espacio entre el portaobjetos
110 y la placa para formar la cámara de reacción 120. El
portaobjetos 110 generalmente incluye una superficie superior 112 y
una superficie inferior 114. Durante el funcionamiento, una sección
de tejido 116 se sitúa en la superficie inferior 114. Cuando el
portaobjetos 110 se sitúa sobre la bandeja de retención de
portaobjetos 10, la superficie inferior 114 se sitúa adyacente a la
placa 50 de modo que esa sección de tejido 116 se sitúa dentro de
la cámara de reacción 120, es decir entre la superficie inferior 114
del portaobjetos y la superficie superior de la placa 50. La
muestra de tejido 116 puede unirse al portaobjetos de cualquier
manera de modo que el portaobjetos y la muestra de tejido puedan
situarse sobre la bandeja de retención de portaobjetos 10 en el
espacio de la cámara de reacción 120. En un ejemplo, la muestra de
tejido puede situarse sobre el portaobjetos 110 sin adhesivo. En
una realización alternativa, puede introducirse un adhesivo o fluido
entre la sección 116 y la superficie del portaobjetos 114 para
potenciar las fuerzas de adhesión superficial.
Opcionalmente puede proporcionarse un balancín
de portaobjetos 170. En la realización ilustrada, el balancín de
portaobjetos 170 se sitúa adyacente al extremo distal de la placa
50. El balancín de portaobjetos 170 puede usarse para ayudar a
colocar o retirar el portaobjetos de la bandeja 10. Por ejemplo, un
portaobjetos colocado en la bandeja de retención de portaobjetos 10
puede retirarse mediante un operador empujando sobre un extremo del
portaobjetos 110 adyacente al balancín. Cuando se presiona el
portaobjetos, el placa 50, o el saliente opcional 160, situado en
el extremo distal de la placa 50 actúa como un punto de apoyo sobre
el cual el portaobjetos pivota haciendo que el extremo del
portaobjetos 110 adyacente al hueco 30 se levante alejándose de la
bandeja de retención de portaobjetos 10 permitiendo al operador
asir el extremo elevado. El balancín 170 puede tener un tamaño tal
que el movimiento de elevación del portaobjetos esté limitado según
se desee. El balancín preferiblemente incluye una superficie
superior relativamente alargada que se acopla al portaobjetos de
modo que durante la retirada del portaobjetos 110 de la bandeja 10,
se limita la inclinación lateral del portaobjetos.
La bandeja de retención de portaobjetos 10 puede
incluir opcionalmente un identificador legible por una máquina 175,
mostrado en la figura 1, que pueda identificar el reactivo del hueco
contenido dentro del hueco 30. Además, cualquier otra información
puede incluirse en el identificador 175 tal como información
relativa al tipo de tejido de procesamiento, el paciente y/o el
médico. Puede usarse cualquier forma de identificador legible por
una máquina, incluyendo identificadores físicos, identificadores
magnéticos, identificadores de radiofrecuencia (RFID), códigos de
barras, etc. En una realización, el identificador 175 se sitúa en
una superficie superior de una superficie lateral de la bandeja de
retención de portaobjetos y se lee ópticamente. En otra realización,
el identificador se sitúa en un lado inferior de la bandeja 10.
El portaobjetos 110 opcionalmente incluye un
identificador legible por una máquina tal como un código de barras
que puede introducirse automáticamente en un sistema de
procesamiento durante cualquier etapa del procesamiento o mediante
introducción manual. En una realización, un identificador de
portaobjetos se sitúa en la superficie superior del portaobjetos y
puede leerse mientras un operador aplica una muestra de tejido 116
al portaobjetos. En dicha realización, cuando el portaobjetos 110
se sitúa bocabajo en la bandeja de retención de portaobjetos 10, el
identificador de portaobjetos puede estar orientado hacia abajo y
ser ilegible. Pueden unirse identificadores legibles por una
máquina a la bandeja y/o al portaobjetos de cualquier manera
convencional, por ejemplo usando un adhesivo. Como alternativa, los
identificadores legibles por una máquina pueden imprimirse
directamente en la bandeja y/o portaobjetos, o aplicarse mediante
impresión por calor.
Cuando el portaobjetos 110 se ha colocado sobre
la bandeja de portaobjetos 10, tal como orientado por el saliente
160 y/o lengüetas 90, 100, se forma un hueco entre la superficie
inferior 114 del portaobjetos 110 y la placa 50, que es la cámara
de reacción 120 descrita en este documento. La sección de tejido 116
se dispone dentro del hueco 120. Líquidos de lavado tales como agua
destilada u otros enjuagues se bombean dentro a través del conducto
de entrada 65 y el puerto de entrada 60, tal como mediante un
colector de suministro de fluido o cualquier otro sistema de
suministro de fluido. Cuando estos líquidos de lavado entran en la
cámara de reacción 120, se extienden como se ha descrito
anteriormente (tal como por ejemplo mediante capilaridad) y lavan el
área para posteriores etapas de procesamiento de tejido. El fluido
de desecho y en exceso se extrae a través del puerto de evacuación
70 y el conducto 75 y finalmente pueden depositarse en un depósito
de desechos.
La bandeja de portaobjetos 10 puede montarse en
una superficie de montaje provista en un sistema de procesamiento
de muestras más grande mediante lengüetas de montaje 180. Como se
muestra, las lengüetas de montaje 180 incluyen ganchos de
acoplamiento inclinados 182 que están configurados para alojarse en
aberturas de recepción correspondientes provistas en la superficie
de montaje y que sirven para bloquear la bandeja 10 en su sitio.
Pueden proporcionarse superficies de agarre 184 para facilitar el
agarre de las lengüetas 180 y la bandeja 10, por parte del operador.
Las lengüetas de montaje 180 pueden ser deformables de modo que un
operador que empuje la lengüeta pueda desplazarla hacia la porción
principal de la bandeja de retención de portaobjetos 10. De esta
manera, un operador puede desbloquear los ganchos inclinados 182 de
las aberturas de recepción. Preferiblemente, las lengüetas de
montaje 180 son elásticas de modo que después de que un operador
las deforma, recuperan de forma natural una posición no
deformada.
Los bordes superiores 186 de las lengüetas de
montaje 180 pueden elevarse por encima del nivel de la superficie
superior 188 de la pared adyacente de la bandeja de modo que la
superficie de agarre pueda agrandarse. Además, esto puede servir
para aumentar la distancia entre las superficies de agarre 184 y el
punto de pivote, reduciendo de este modo la resistencia elástica de
las lengüetas de montaje 180 y haciendo más fácil para un operador
desacoplar la bandeja de retención de portaobjetos 10 de las
aberturas de alojamiento. Como alternativa, los bordes superiores
186 de las lengüetas de montaje 180 pueden lavarse con o por debajo
de las superficies superiores 188 de las paredes adyacentes de la
bandeja.
El lado inferior de la bandeja puede esculpirse
de cualquier forma. Tiene una forma que coincide con el(los)
elemento(s) de calentamiento correspondientes 340, 342 y/o
344 (descritos a continuación) para promover el acoplamiento del
calentamiento y refrigeración. Como alternativa, los elementos de
calentamiento 340, 342 y/o 344 pueden seleccionarse para coincidir
con el lado inferior de la bandeja (tal como el lado inferior de la
placa y/o el lado inferior del hueco para reactivo. Del mismo modo,
pueden proporcionarse lengüetas de apilamiento 190. Las lengüetas
de apilamiento promueven el registro de las bandejas de portaobjetos
10 para almacenamiento o transporte. En una realización ilustrada,
cada una de las lengüetas de apilamiento 190 define un hueco 192,
que coincide con un borde superior correspondiente 194 de una
bandeja 10 cuando ésta se sitúa por debajo.
El perímetro superior de la bandeja de retención
de portaobjetos 10 puede incluir superficies inclinadas 196 o
biseles, como se ilustra. Las superficies inclinadas 196 pueden
añadir rigidez estructural y puede promover el registro de bandejas
apiladas en solitario o junto con las lengüetas de apilamiento 190.
En una realización, el identificador 175 se sitúa sobre una o más
de las superficies inclinadas 196.
En referencia a las figuras 18 y 19, un sistema
de procesamiento de tejido 200 que puede usarse con una o más
bandejas de retención de portaobjetos 10, se describirá a
continuación. El sistema 200 incluye un aparato de dispensado de
fluido 210 que tiene una pluralidad de estaciones 220 en las que
pueden montarse cartuchos de dispensado de fluido 230. Un aparato
de dispensado de fluido que incluye múltiples cartuchos de
dispensado de fluido 230 se describe en la Solicitud de patente de
Estados Unidos Nº de serie 10/639.021. Como alternativa, un sistema
de dispensado de fluido que usa tubos o pipetas también puede
usarse, tal como se describe por ejemplo en la Patente de Estados
Unidos Nº 5.338.358. Las estaciones 220 incluyen aberturas de
montaje 240 para montar selectivamente una pluralidad de cartuchos
de dispensado de fluido 230. El aparato de dispensado puede girar
para situar de forma selectiva una pluralidad de cartuchos de
dispensado de fluido 230 adyacente a un ensamblaje accionador 250,
que se usa para activar la expulsión de una cantidad deseada de
fluido, tal como un reactivo secundario o un fluido desencerante,
de un dispensador de reactivos 260.
Las bandejas de retención de portaobjetos 10 se
sitúan generalmente bajo el aparato de dispensado de fluido 210,
aprovechando la gravedad para dispensar fluido desde un cartucho
230, en la superficie de goteo 40 de una bandeja de retención de
portaobjetos deseada 10. Preferiblemente, el aparato de dispensado
de fluido 210 y las bandejas de retención de portaobjetos 10 son
móviles uno con respecto a la otra de modo que varios cartuchos 230
puedan situarse para dispensar fluidos en cualquier bandeja 10
deseada. Cualquier combinación de movilidad del aparato de
dispensado de fluido 210 y las bandejas de retención de portaobjetos
10 puede seleccionarse. Por ejemplo, ambos pueden ser móviles o
solamente uno puede ser móvil y el otro estacionario. Las bandejas
de retención 10 pueden soportar todas el mismo tipo de elemento, tal
como portaobjetos, o pueden estar configuradas para soportar tipos
alternativos de elementos tales como portaobjetos y recipientes.
En un ejemplo de funcionamiento del sistema de
procesamiento de tejido 200, el aparato de dispensado de fluido 210
gira de modo que los cartuchos individuales 230 se sitúan de forma
selectiva adyacentes al ensamblaje accionador 250. Como
alternativa, un ensamblaje accionador puede situarse adyacente a
cada cartucho 230 de modo que la rotación del aparato de dispensado
de fluido 210 no sea necesaria. El ensamblaje accionador 250 puede
ser cualquier dispositivo de activación que activa al cartucho 230
para que expulse una cantidad controlada de fluido.
Preferiblemente, el aparato de dispensado de fluido puede
trasladarse y girar con respecto a las bandejas de retención de
portaobjetos 10 de modo que un cartucho individual 230 pueda
situarse de forma selectiva sobre cualquier bandeja 10. Una vez que
el cartucho 230 está situado sobre una bandeja de retención de
portaobjetos 10, el ensamblaje accionador 250 activa el cartucho
230 para que expulse una cantidad controlada de fluido en la
bandeja 10.
El ensamblaje accionador 250 opcionalmente
incluye tres accionadores 270, 280, 290 que pueden usarse para
dispensar fluido en tres hileras 300, 310, 320 de miembros de
recepción, respectivamente. Durante el funcionamiento, el
accionador 270 está adaptado para dispensar fluidos en bandejas de
retención de portaobjetos 10 dispuestas en la hilera 300, el
accionador 280 está adaptado para dispensar fluidos en bandejas de
retención de portaobjetos 10 dispuestas en la hilera 310 y el
accionador 290 está adaptado para dispensar fluidos en bandejas de
retención de portaobjetos 10 dispuestas en la hilera 320. Por
supuesto, como entenderán los especialistas en la técnica, puede
emplearse cualquier número de accionadores y/o bandejas de retención
de portaobjetos, sin alejarse del alcance de la presente
invención.
En referencia a la figura 19, en una realización
preferida el aparato de dispensado de fluido 210 está unido de
forma giratoria a un miembro de soporte 330 de modo que los
cartuchos 230 puedan girar con respecto al ensamblaje accionador
250. El ensamblaje accionador 250 está unido de forma fija al
miembro de soporte 330, opcionalmente bajo el aparato de dispensado
de fluido 210. Preferiblemente, el miembro de soporte 330 está
configurado de modo que los cartuchos 230 puedan girar ambos y
trasladarse con respecto a las bandejas 10. De esta manera,
cualquier cartucho 230 puede situarse selectivamente por encima de
la bandeja de retención de portaobjetos 10.
Las bandejas de retención de portaobjetos 10 se
montan preferiblemente en placas de calentamiento/refrigeración con
resorte 340, proporcionando de este modo calentamiento y/o
refrigeración selectiva y/o independiente de los portaobjetos.
Adicionalmente, las placas de calentamiento/refrigeración 340, 342,
344 son capaces de calentar independientemente la región de la
plataforma o placa y la región del hueco. En una realización, cada
bandeja tiene un elemento de calentamiento y/o refrigeración 340
correspondiente, que mantiene a la bandeja a una temperatura
deseada particular. En una realización alternativa, hay dos o más
elementos de calentamiento y/o refrigeración para cada bandeja. En
una realización, se proporciona un elemento de calentamiento y/o
refrigeración 342 adyacente a la superficie inferior externa 630
del hueco para reactivo 30 y se proporciona otro elemento de
calentamiento y/o refrigeración 344 adyacente a la superficie
inferior externa de la placa 50. En dicha realización, el hueco y
la placa pueden mantenerse a diferentes temperaturas. Durante el
funcionamiento, el elemento del hueco 342 puede elevar la
temperatura del hueco 30 a una temperatura deseada particular a la
cual una matriz que contiene reactivo 680 dentro del hueco 30 está a
una temperatura por encima de la temperatura de flujo y el material
comienza a fluir según se desee hacia la placa 50. Una vez que el
reactivo fluye, si un segundo reactivo está contenido en una
segunda matriz 680 en el hueco, que tiene una temperatura de flujo
diferente (tal como más alta) o, si un segundo reactivo está
contenido en otro hueco 30, el elemento de calentamiento 342 puede
accionarse para elevar la temperatura al nivel deseado para licuar
la segunda matriz. Debe entenderse que pueden proporcionarse
múltiples elementos de calentamiento 342 simultánea o
secuencialmente, o de otro modo, proporcionar diferentes
propiedades de calentamiento/refrigeración y regular la cinética de
reacción del reactivo(s) según se desee. El(los)
elemento(s) de calentamiento 342 también puede hacerse
funcionar para enfriar el hueco 30, para contrarrestar el calor
generado por el instrumento durante el funcionamiento. En un
ejemplo, el instrumento genera el suficiente calor para fluidizar el
reactivo en el hueco 30 en ausencia de refrigeración mediante
el(los) elemento(s) 342. También durante el
funcionamiento la placa puede calentarse según se desee, usando un
único elemento o uno o más elemento de calentamiento y/o
refrigeración 344 de la placa especializados. De esta manera, la
temperatura de la cámara de reacción 120 puede controlarse según se
desee. Por ejemplo, las reacciones pueden acelerarse o ralentizarse
dependiendo de la temperatura mantenida. En términos generales, la
cinética de reacción se regula de esta manera. Otros elementos de
calentamiento/refrigeración pueden proporcionarse para proporcionar
calentamiento localizado a la bandeja 10, también según se
desee.
Preferiblemente, se proporciona un sistema de
control de la temperatura que controla los elementos de
calentamiento y/o refrigeración 340, 342, 344 según se desee. En
una alternativa, se proporciona un control de retroalimentación con
lo que sensor(es) de temperatura detectan la temperatura en
puntos deseados y proporcionan información de retroalimentación al
controlador, que a su vez usa esta información para controlar el
funcionamiento de los elementos de calentamiento y/o refrigeración.
Por ejemplo, el sensor puede situarse para detectar temperaturas en
o cerca de cualquiera de la placa 50, hueco 50 superficie inferiores
externas del hueco o placa, el agujero 640, rampa de flujo de
fluido 650, etc. De acuerdo con algunas realizaciones, la matriz que
contiene reactivo 680 se enfría inicialmente en el hueco 30, y
después se calienta para licuar la matriz 680 y formar un flujo.
El sistema de procesamiento de tejido 200
opcionalmente incluye recipientes de suministro 350, recipientes de
drenaje 360 y un colector de suministro de fluido 370. Los
recipientes de suministro 350 pueden usarse para contener líquidos
tales como agua para aclarar o lavar el hueco entre los portaobjetos
y la placa. El colector de suministro de fluido 370 incluye
preferiblemente válvulas y conmutadores para dirigir el flujo de
fluidos suministrados a través del puerto de entrada de fluido 60 y
el conducto 65. Además, el colector de suministro de fluido incluye
válvulas y conmutadores para dirigir el flujo de fluidos en exceso y
el material de desecho desde los puertos de evacuación de fluido 70
y conductos 75 al interior de recipientes de drenaje 360.
Un método de fabricación de una bandeja de
retención de portaobjetos 10 de acuerdo con un ejemplo que no forma
parte de la presente invención se describirá a continuación en
referencia a la figura 20. Como se ilustra esquemáticamente en el
recuadro 380, la etapa inicial implica fabricar la bandeja de
retención de portaobjetos 10. De acuerdo con una realización
preferida, la bandeja de portaobjetos 10 se fabrica a partir de un
material polimérico que se moldea por inyección para formar la
forma estructural deseada. Sin embargo, como entenderían los
especialistas en la técnica, puede usarse cualquier proceso de
fabricación o seleccionarse cualquier material que pueda
proporcionar las características estructurales deseadas, sin
alejarse del alcance de la presente invención.
En referencia al recuadro 390, la siguiente
etapa implica dispensar una cantidad deseada de gel en las áreas de
retención de gel, tales como el hueco 30. Por ejemplo una cantidad
predeterminada de gel 680 puede insertarse a través de las
aberturas 670 en la superficie inferior 620 del hueco 30 o, como
alternativa puede insertarse gel 680 desde arriba. Después de
llenar el hueco 30, las aberturas opcionales 670 pueden sellarse
aplicando una cinta u otro tipo de cubierta. Como se ilustra
esquemáticamente en el recuadro 400, la siguiente etapa implica
sellar el hueco 30. Puede seleccionarse cualquier forma de sello que
retenga al gel en su sitio y reduzca la vaporización y/o la pérdida
de flujo de fluido. Por ejemplo, puede aplicarse un sello mecánico
(tal como un sello 660) como se ha descrito anteriormente. En
referencia al recuadro 410, la siguiente etapa implica
opcionalmente aplicar identificadores 175 a la bandeja de retención
de portaobjetos 10.
Un ejemplo de un método de uso de una bandeja de
retención de portaobjetos 10 de acuerdo con los principios de la
presente invención se describirá a continuación con respecto a la
figura 21. Como se ilustra esquemáticamente en el recuadro 420, la
etapa inicial implica seleccionar una bandeja de retención de
portaobjetos 10 en base al tipo de gel o de reactivo(s)
contenido(s) en su interior. Por supuesto, el tipo de gel (es
decir reactivo) contenido dentro de una bandeja individual 10
depende del tipo de ensayo a realizar en la muestra de tejido 116.
En otras palabras, la etapa inicial de seleccionar una bandeja de
retención de portaobjetos 10 puede incluir la etapa de
determinación del tipo de ensayo a realizar sobre la muestra de
tejido 116.
Como se ilustra esquemáticamente en el recuadro
430, la siguiente etapa implica opcionalmente introducir datos
relativos al reactivo, bandeja, etc. Por ejemplo, opcionalmente se
lee un identificador en la bandeja, tal como por ejemplo un código
de barras "de paso". También pueden usarse otras maneras de
identificar la bandeja, tales como elementos de la bandeja
identificables por una máquina tales como patrones o tamaños o
formas sobresalientes, etc. El identificador de la bandeja
opcionalmente identifica el(los) reactivo(s)
contenidos en la bandeja. Como alternativa, la información de
identificación puede introducirse en una memoria asociada con el
sistema de procesamiento tal como mediante introducción manual a
través de un teclado o introducción oral tal como a través de un
software de reconocimiento de voz. En una realización opcional,
también puede introducirse información sobre el portaobjetos, tal
como mediante introducción por un teclado, introducción por
reconocimiento de voz, identificador por máquina o forma. Como se
ha descrito anteriormente, el portaobjetos puede situarse boca
abajo sobre la bandeja 10, y por consiguiente, un identificador
preferiblemente no se lee cuando el portaobjetos se sitúa en la
bandeja o en un instrumento de procesamiento. En una realización
alternativa, el identificador de portaobjetos puede leerse después
de que el portaobjetos se sitúe en la bandeja.
Como se ilustra esquemáticamente en el recuadro
450, la siguiente etapa implica retirar el sello 190 de la bandeja
10 en realizaciones en las que pueda usarse un sello, exponiendo de
este modo el hueco 30. En referencia al recuadro 460, la siguiente
etapa implica colocar un portaobjetos 110 sobre la bandeja 10.
Preferiblemente, el portaobjetos 110 se sitúa de modo que la
muestra de tejido 126 se dispone entre el portaobjetos 110 y la
placa 50 (es decir plataforma 50). Como se ilustra esquemáticamente
en el recuadro 470, la siguiente etapa implica opcionalmente
colocar la bandeja de retención de portaobjetos 10 sobre una placa
de calentamiento/refrigeración con resorte 340, 342, 344.
Como se ilustra esquemáticamente en el recuadro
480, la siguiente etapa implica licuar la matriz de reactivo 680
(es decir el gel). Esta etapa puede incluir la etapa de calentar
para formar una sustancia fundida. Como alternativa, la matriz 680
puede ser soluble en un disolvente, que se añade al hueco 30 para
disolverlo. De este modo, la etapa de licuado de la matriz 680 como
alternativa puede incluir la etapa de disolver el gel 680 usando un
disolvente. Se entenderá que la bandeja puede calentarse antes de
licuar la matriz de reactivo 680 a temperaturas por debajo de la
temperatura de fusión de la matriz. En una realización, la bandeja
10 puede calentarse a aproximadamente 100ºC antes de licuar la
matriz de reactivo 680.
En referencia al recuadro 490, la siguiente
etapa implica hacer fluir a la matriz que contiene reactivo licuada
sobre la superficie de goteo 40 en el hueco 120 entre la placa 50 y
el portaobjetos 110. Esta etapa puede realizarse con ayuda de la
gravedad. En referencia al recuadro 500, la siguiente etapa implica
opcionalmente lavar el hueco 120 con fluidos de lavado para
preparar la muestra de tejido para posteriores etapas de
procesamiento de tejido. Se entenderá que los fluidos de lavado
pueden extraerse a un depósito de desecho como se muestra en la
etapa 520 antes de realizar la siguiente etapa de dispensado de
reactivos no primarios. Como se ilustra esquemáticamente en el
recuadro 510, la siguiente etapa implica opcionalmente dispensar
reactivos desde un aparato de dispensado de fluido 210 en la
superficie de goteo 40. En referencia al recuadro 520, la siguiente
etapa implica extraer fluido de desecho y en exceso a través del
conducto de retorno de fluido (es decir puerto de evacuación 70 y
conducto 75) a un depósito de desecho. Se entenderá que los fluidos
de desecho pueden extraerse a través del conducto de retorno de
fluido y a un depósito de desecho después de cada etapa de llenado
de la cámara de reacción. En referencia adicional a la figura 21,
las etapas ilustradas mediante los recuadros 430, 450, 460, 470
pueden realizarse en cualquier orden sin alejarse del alcance de la
presente invención. Adicionalmente, la etapa de introducir
información sobre la bandeja 430 puede realizarse opcionalmente
después de la etapa de colocación del portaobjetos 110 en la
bandeja 10 (recuadro 460). Además, la etapa de retirada del sello
190 de la bandeja 10 (recuadro 450) puede realizarse en cualquier
momento después de la etapa inicial de selección de una bandeja 10
en base al tipo de gel contenido en su interior. Adicionalmente, las
etapas 480, 490, 500, 510 y 520 pueden realizarse en cualquier
orden. En particular, se entenderá que puede dispensarse un
reactivo no primario antes de licuar el gel, y una etapa de lavado
del hueco y/o extracción de los desechos a un depósito de desechos
puede realizarse después de cualquier etapa de introducción de un
material en el hueco.
De este modo, se observa que se proporciona una
bandeja de retención de portaobjetos para procesar un sustrato. Un
especialista en la técnica entenderá que la presente invención puede
ponerse en práctica mediante realizaciones diferentes a las
realizaciones diversas y preferidas, que se presentan en esta
descripción para fines de ilustración y no de limitación, y la
presente invención está limitada solamente por las siguientes
reivindicaciones. Se observa que realizaciones equivalentes a las
realizaciones particulares descritas en esta descripción también
pueden poner en práctica la invención.
Claims (25)
-
\global\parskip0.900000\baselineskip
1. Una bandeja de retención de muestras (10) que define una superficie inferior (150) y que comprende:- paredes internas (140);
- una porción de contención de un reactivo que define un hueco para reactivo (30);
- una porción de contención de una muestra que define una placa (50) que incluye una superficie para reactivo;
- una porción para flujo de fluido (40, 650) que está configurada para situar el hueco para reactivo (30) en comunicación fluida con la superficie para reactivo; y caracterizada por
- un depósito de mezclado (155) en comunicación fluida bidireccional con la superficie para reactivo definida por una cámara (155) formada entre dichas paredes laterales (130), paredes internas 140 y superficie inferior (150) para retener el exceso de fluido que desborda de dicha placa (501), donde dicha superficie para reactivo define un puerto de fluido de entrada (60) y un puerto de fluido de salida (70) en extremos opuestos de la placa (50) donde el puerto de fluido de entrada (60) y el puerto de fluido de salida (70) se extienden a través de la superficie para reactivo hasta un lado opuesto de la placa (50).
- 2. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 1, que comprende además el reactivo dentro del hueco de retención de reactivo, en la que el reactivo primario dentro del hueco de retención de reactivo está contenido dentro de una matriz fluidizable.
- 3. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 1, en la que la porción de fluido (40, 650) incluye una superficie de goteo (40) que está en comunicación fluida con la superficie para reactivo que está configurada para recibir a un fluido dispensado desde arriba.
- 4. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 3, en la que la superficie de goteo (40) se sitúa entre el hueco de retención de reactivo (30) y la placa (50).
- 5. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 1, que comprende además un elemento de colocación de portaobjetos configurado para colocar un portaobjetos de microscopio (110) dentro de la bandeja de retención de muestras de modo que el portaobjetos de microscopio (110) esté separado por encima de la superficie para reactivo formado de este modo una cámara de reacción (120) entre el portaobjetos (110) y la placa (50).
- 6. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 5, en la que el elemento de colocación de portaobjetos está configurado para retener a un portaobjetos (110) de modo que una superficie inferior (114) del portaobjetos (110) esté inclinada con respecto a la superficie para reactivo de la placa (50).
- 7. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 5, que comprende además una sección de tejido (116) situada dentro de la cámara de reacción (120).
- 8. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 1, que comprende además una pared lateral que tiene una superficie superior inclinada (196) y un identificador legible por una máquina (175) situado en la superficie superior inclinada (196), el identificador legible por una máquina (175) configurado para proporcionar información relativa al reactivo contenido dentro del hueco para reactivo (30).
- 9. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 2, que comprende además un sello (660) situado sobre el hueco para reactivo (30).
- 10. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 1, en la que además el puerto de entrada (60) está en un extremo proximal de la placa y el puerto de salida (70) está en un extremo distal de la placa (50).
- 11. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 1, en la que el puerto de salida (70) incluye un tamiz.
- 12. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 1, en la que la placa (50) incluye un saliente (160) que se extiende hacia arriba desde la superficie para reactivo de la placa (50) en un extremo distal de la placa (50).
- 13. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 12, que comprende además un balancín (170) situado adyacente al extremo distal de la placa (50), incluyendo el balancín (170) una superficie superior a un nivel más bajo con respecto al saliente (160).
- 14. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 1, en la que la porción de contención de muestras se define mediante paredes (140) de la bandeja y una parte inferior (150) de la bandeja, en la que dicho depósito de mezclado (155) se define mediante un perímetro (130) de la placa (50) y las paredes (140) y una parte inferior (150) de la bandeja.
\global\parskip1.000000\baselineskip
- 15. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 14, en la que el depósito de mezclado (155) está en comunicación fluida con una cámara de reacción (120) formada entre un portaobjetos (110) y la placa (50) formando de este modo un sistema de control de la humedad con un portaobjetos (110) colocado en la bandeja de retención de portaobjetos (10).
- 16. Un sistema de procesamiento de muestras (200), que comprende:
- una pluralidad de bandejas de retención de muestras (10) de acuerdo con cualquier reivindicación 1 a 15;
- un colector (370) en comunicación fluida con la bandeja de retención de muestras (10);
- un sistema de calentamiento y/o refrigeración en comunicación térmica con las bandejas de retención de muestras (10); y
- un sistema de dispensado de reactivo externo (270) en comunicación fluida con las bandejas de retención de muestras.
- 17. Un método de procesamiento de muestras de tejido, que comprende:
- seleccionar una bandeja de retención de muestras (10) de acuerdo con cualquier reivindicación de 1 a 15 y que contiene un reactivo en el hueco para reactivo (30); y
- colocar un portaobjetos de microscopio (110) en la bandeja de retención de muestras (10) para formar una cámara de reacción (120) entre el portaobjetos (110) y una placa (50) de la bandeja de retención de muestras (10),
- donde el portaobjetos (110) incluye una muestra de tejido (116) colocada en una superficie (114) del mismo, y el portaobjetos (110) se coloca en la bandeja de retención de muestras (10) de modo que la muestra de tejido (116) se sitúe entre el portaobjetos (110) y la placa (50).
- 18. El método de procesamiento de muestras de tejido de la reivindicación 17, que comprende además liberar el reactivo del hueco para reactivo (30) en forma fluida, con lo que el reactivo fluye al interior de la cámara de reacción (120) desde el hueco para reactivo (30).
- 19. El método de procesamiento de muestras de tejido de la reivindicación 17, que comprende además:
- introducir un fluido en la cámara de reacción (120) desde el puerto de entrada (60) en la placa (50); e
- introducir el reactivo desde el hueco para reactivo (30) en la cámara de reacción (120) liberándolo en forma fluida desde el hueco para reactivo (30).
- 20. El método de procesamiento de muestras de tejido de la reivindicación 17, que comprende además introducir el reactivo desde el hueco para reactivo (30) en la cámara de reacción (120) liberándolo en forma fluida desde el hueco para reactivo (30).
- 21. El método de procesamiento de muestras de tejido de la reivindicación 17, que comprende además introducir un reactivo externo en la cámara de reacción (120) mediante goteo en una superficie de goteo (40) de la bandeja de retención de muestras (10).
- 22. El método de procesamiento de muestras de tejido de la reivindicación 17, que comprende además introducir un fluido en la cámara de reacción (120) desde el puerto de entrada (60) en la placa (50).
- 23. El método de procesamiento de muestras de tejido de la reivindicación 17, que comprende además evacuar el fluido de la cámara de reacción (120) mediante el puerto de salida (70) en la placa (50).
- 24. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 1, que comprende además un mecanismo de montaje (180, 182, 184, 186) para fijar de forma desmontable la bandeja de retención de muestras (10) a una superficie de montaje.
- 25. La bandeja de retención de muestras de la reivindicación 24, en la que el mecanismo de montaje (180, 182, 184, 186) comprende una lengüeta de montaje (180) que se extiende desde una superficie de la bandeja de retención de muestras (10) y un gancho de acoplamiento (182) con un tamaño para alojarse en una abertura de recepción correspondiente de la superficie de montaje.
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