ES2313841B1 - Composiciones para tratamiento anti-fibrinolitico. - Google Patents
Composiciones para tratamiento anti-fibrinolitico. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2313841B1 ES2313841B1 ES200701786A ES200701786A ES2313841B1 ES 2313841 B1 ES2313841 B1 ES 2313841B1 ES 200701786 A ES200701786 A ES 200701786A ES 200701786 A ES200701786 A ES 200701786A ES 2313841 B1 ES2313841 B1 ES 2313841B1
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- mmp
- antibody
- treatment
- antibodies
- fibrin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 34
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title abstract description 13
- 102100028848 Stromelysin-2 Human genes 0.000 claims abstract description 89
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 claims abstract description 32
- 230000001567 anti-fibrinolytic effect Effects 0.000 claims abstract description 19
- 229940082620 antifibrinolytics Drugs 0.000 claims abstract description 18
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims abstract description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 15
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 claims description 22
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 claims description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 claims description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 7
- 230000000988 hyperfibrinolytic effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 claims description 5
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 claims description 5
- 230000004075 alteration Effects 0.000 claims description 3
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 claims description 3
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 claims description 2
- 101710108792 Stromelysin-2 Proteins 0.000 abstract description 86
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 abstract description 10
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 41
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 38
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 38
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 38
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 30
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 description 29
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 description 29
- 229960000187 tissue plasminogen activator Drugs 0.000 description 28
- VKUYLANQOAKALN-UHFFFAOYSA-N 2-[benzyl-(4-methoxyphenyl)sulfonylamino]-n-hydroxy-4-methylpentanamide Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1S(=O)(=O)N(C(CC(C)C)C(=O)NO)CC1=CC=CC=C1 VKUYLANQOAKALN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 102100030416 Stromelysin-1 Human genes 0.000 description 18
- 101710108790 Stromelysin-1 Proteins 0.000 description 18
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 17
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 13
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 11
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 11
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 11
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 11
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 11
- 230000020764 fibrinolysis Effects 0.000 description 10
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 102000001938 Plasminogen Activators Human genes 0.000 description 9
- 108010001014 Plasminogen Activators Proteins 0.000 description 9
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 9
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 229940127126 plasminogen activator Drugs 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 7
- 239000000504 antifibrinolytic agent Substances 0.000 description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 6
- 230000003480 fibrinolytic effect Effects 0.000 description 6
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 5
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 5
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 5
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 5
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 5
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 5
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010008111 Cerebral haemorrhage Diseases 0.000 description 4
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 4
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 4
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108091007196 stromelysin Proteins 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 description 4
- 238000004879 turbidimetry Methods 0.000 description 4
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 description 4
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 4
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 3
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 102100026735 Coagulation factor VIII Human genes 0.000 description 3
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 3
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 3
- 201000003542 Factor VIII deficiency Diseases 0.000 description 3
- 108010054265 Factor VIIa Proteins 0.000 description 3
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 3
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010018985 Haemorrhage intracranial Diseases 0.000 description 3
- 101000911390 Homo sapiens Coagulation factor VIII Proteins 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 208000008574 Intracranial Hemorrhages Diseases 0.000 description 3
- 102000000380 Matrix Metalloproteinase 1 Human genes 0.000 description 3
- 108010016113 Matrix Metalloproteinase 1 Proteins 0.000 description 3
- 102000000422 Matrix Metalloproteinase 3 Human genes 0.000 description 3
- 208000002847 Surgical Wound Diseases 0.000 description 3
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 description 3
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 3
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 208000009190 disseminated intravascular coagulation Diseases 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 3
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 3
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 3
- FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 5,5-diethylbarbituric acid Chemical compound CCC1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 2
- 206010063563 Congenital coagulopathy Diseases 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940124761 MMP inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 108010076497 Matrix Metalloproteinase 10 Proteins 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- GYDJEQRTZSCIOI-UHFFFAOYSA-N Tranexamic acid Chemical compound NCC1CCC(C(O)=O)CC1 GYDJEQRTZSCIOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 229940030225 antihemorrhagics Drugs 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 230000009852 coagulant defect Effects 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- SFNALCNOMXIBKG-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol monododecyl ether Chemical compound CCCCCCCCCCCCOCCO SFNALCNOMXIBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 125000001475 halogen functional group Chemical group 0.000 description 2
- 208000031169 hemorrhagic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 2
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 208000020658 intracerebral hemorrhage Diseases 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 208000007106 menorrhagia Diseases 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- UPSFMJHZUCSEHU-JYGUBCOQSA-N n-[(2s,3r,4r,5s,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6s)-5-acetamido-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-(4-methyl-2-oxochromen-7-yl)oxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]acetamide Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](NC(C)=O)[C@H](OC=2C=C3OC(=O)C=C(C)C3=CC=2)O[C@@H]1CO UPSFMJHZUCSEHU-JYGUBCOQSA-N 0.000 description 2
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 2
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 2
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 2
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-anilino-5-sulfonaphthalen-1-yl)diazenyl]-5-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonic acid Chemical compound C=12C(O)=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=1N=NC(C1=CC=CC(=C11)S(O)(=O)=O)=CC=C1NC1=CC=CC=C1 QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LKDMKWNDBAVNQZ-UHFFFAOYSA-N 4-[[1-[[1-[2-[[1-(4-nitroanilino)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(=O)NC(C)C(=O)NC(C)C(=O)N1CCCC1C(=O)NC(C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 LKDMKWNDBAVNQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 4-aminofolic acid Chemical compound C1=NC2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 208000036762 Acute promyelocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 108010067219 Aggrecans Proteins 0.000 description 1
- 102000016284 Aggrecans Human genes 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108090000617 Cathepsin G Proteins 0.000 description 1
- 102000004173 Cathepsin G Human genes 0.000 description 1
- 102100023804 Coagulation factor VII Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 1
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 1
- 208000027205 Congenital disease Diseases 0.000 description 1
- 208000029767 Congenital, Hereditary, and Neonatal Diseases and Abnormalities Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 108010000437 Deamino Arginine Vasopressin Proteins 0.000 description 1
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010023321 Factor VII Proteins 0.000 description 1
- 108010088842 Fibrinolysin Proteins 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108060003393 Granulin Proteins 0.000 description 1
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 1
- 208000032382 Ischaemic stroke Diseases 0.000 description 1
- 108060005987 Kallikrein Proteins 0.000 description 1
- 102000001399 Kallikrein Human genes 0.000 description 1
- 108010085895 Laminin Proteins 0.000 description 1
- 102000007547 Laminin Human genes 0.000 description 1
- 108010076557 Matrix Metalloproteinase 14 Proteins 0.000 description 1
- 102100030216 Matrix metalloproteinase-14 Human genes 0.000 description 1
- 102100030412 Matrix metalloproteinase-9 Human genes 0.000 description 1
- 108010015302 Matrix metalloproteinase-9 Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010022233 Plasminogen Activator Inhibitor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100039418 Plasminogen activator inhibitor 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010051077 Post procedural haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 102100033237 Pro-epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- 208000033826 Promyelocytic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 229940124639 Selective inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 108010008125 Tenascin Proteins 0.000 description 1
- 102000007000 Tenascin Human genes 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 102000001400 Tryptase Human genes 0.000 description 1
- 108060005989 Tryptase Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 description 1
- 102100035140 Vitronectin Human genes 0.000 description 1
- 208000027276 Von Willebrand disease Diseases 0.000 description 1
- RXSUFCOOZSGWSW-UHFFFAOYSA-M acetyloxy-(4-aminophenyl)mercury Chemical compound CC(=O)O[Hg]C1=CC=C(N)C=C1 RXSUFCOOZSGWSW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000016571 aggressive behavior Effects 0.000 description 1
- 102000003801 alpha-2-Antiplasmin Human genes 0.000 description 1
- 108090000183 alpha-2-Antiplasmin Proteins 0.000 description 1
- 229960003896 aminopterin Drugs 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960002319 barbital Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 239000010836 blood and blood product Substances 0.000 description 1
- 229940125691 blood product Drugs 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000008468 bone growth Effects 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 238000007675 cardiac surgery Methods 0.000 description 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000012411 cloning technique Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001945 cysteines Chemical class 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 229960004281 desmopressin Drugs 0.000 description 1
- NFLWUMRGJYTJIN-NXBWRCJVSA-N desmopressin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSCCC(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(N)=O)=O)CCC(=O)N)C1=CC=CC=C1 NFLWUMRGJYTJIN-NXBWRCJVSA-N 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 229940012413 factor vii Drugs 0.000 description 1
- 229940012414 factor viia Drugs 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000002874 hemostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 1
- 229940106780 human fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000003365 immunocytochemistry Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000010874 in vitro model Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 230000029774 keratinocyte migration Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 208000019420 lymphoid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000003771 matrix metalloproteinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940121386 matrix metalloproteinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000002175 menstrual effect Effects 0.000 description 1
- 239000003475 metalloproteinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- GUAQVFRUPZBRJQ-UHFFFAOYSA-N n-(3-aminopropyl)-2-methylprop-2-enamide Chemical compound CC(=C)C(=O)NCCCN GUAQVFRUPZBRJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 230000018341 negative regulation of fibrinolysis Effects 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 description 1
- 229940021317 other blood product in atc Drugs 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 230000031915 positive regulation of coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 108010013773 recombinant FVIIa Proteins 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 230000008521 reorganization Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 238000002702 ribosome display Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- XQTLDIFVVHJORV-UHFFFAOYSA-N tecnazene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=C(Cl)C(Cl)=CC(Cl)=C1Cl XQTLDIFVVHJORV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 229960000103 thrombolytic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- GYDJEQRTZSCIOI-LJGSYFOKSA-N tranexamic acid Chemical compound NC[C@H]1CC[C@H](C(O)=O)CC1 GYDJEQRTZSCIOI-LJGSYFOKSA-N 0.000 description 1
- 229960000401 tranexamic acid Drugs 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 208000012137 von Willebrand disease (hereditary or acquired) Diseases 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/81—Protease inhibitors
- C07K14/8107—Endopeptidase (E.C. 3.4.21-99) inhibitors
- C07K14/8146—Metalloprotease (E.C. 3.4.24) inhibitors, e.g. tissue inhibitor of metallo proteinase, TIMP
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
- A61K31/351—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom not condensed with another ring
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6489—Metalloendopeptidases (3.4.24)
- C12N9/6491—Matrix metalloproteases [MMP's], e.g. interstitial collagenase (3.4.24.7); Stromelysins (3.4.24.17; 3.2.1.22); Matrilysin (3.4.24.23)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
Composiciones para tratamiento
anti-fibrinolítico.
La presente invención se refiere al uso de un
anticuerpo neutralizante de la metaloproteinasa de
matriz-10 (MMP-10) en la preparación
de un medicamento útil para el tratamiento
anti-fibrinolítico, así como de hemorragias y
complicaciones hemorrágicas de diversas etiologías.
Description
Composiciones para tratamiento
anti-fibrinolítico.
Esta invención se refiere a la preparación de
composiciones farmacéuticas para el tratamiento
anti-fibrinolítico y de las complicaciones
hemorrágicas asociadas a estados hiperfibrinolíticos o a
procedimientos quirúrgicos.
El sistema hemostático es el encargado de
mantener la fluidez circulatoria y prevenir la hemorragia en
respuesta a una agresión vascular. La hemostasia fisiológica está
controlada tanto por los mecanismos que promueven la coagulación y
la formación de fibrina, como por los que favorecen su degradación
o fibrinolisis. Una activación excesiva de la coagulación o un
defecto de la fibrinolisis desembocan en la formación de coágulos
que obstruyen los vasos sanguíneos (trombosis intravascular),
causando isquemia y necrosis. Sin embargo, una situación general de
hiperfibrinolisis favorecerá la aparición de hemorragias.
Los estados hiperfibrinolíticos causados por
alteraciones congénitas o adquiridas en el sistema de
coagulación-fibrinolisis predisponen a importantes
complicaciones hemorrágicas. Dichos estados se han asociado con el
tratamiento trombolítico, así como con cirugía en órganos ricos en
activadores del plasminógeno, como próstata, útero y pulmón. Por
otra parte, la coagulación intravascular diseminada (CID),
secundaria a numerosos procesos médicos y/o quirúrgicos constituye
el prototipo de estado hiperfibrinolítico asociado con hemorragia
masiva en diversos
órganos.
órganos.
En las enfermedades con una base fisiopatológica
hemorrágica por alteración de la coagulación o aumento de la
fibrinolisis, además de las transfusiones de hemoderivados, las
medidas farmacológicas para su tratamiento suelen ser
anti-fibrinolíticos aunque, el tratamiento fracasa
en aproximadamente el 30% de los casos.
El tratamiento
anti-fibrinolítico busca inhibir la degradación de
la fibrina. Los más utilizados en la práctica clínica son análogos
sintéticos de la lisina, como el ácido
epsilon-aminocaproico (EACA) y el ácido tranexámico
(ANCHA), que compiten con el plasminógeno por los lugares de unión
a la lisina, y la aprotinina, que es un derivado de pulmón bovino
con un amplio espectro de inhibición de proteasas.
Estos compuestos se han mostrado eficaces en
diversas situaciones clínicas médicas y quirúrgicas, como la
hemorragia intracraneal, cirugías con elevado riesgo hemorrágico y
complicaciones derivadas del tratamiento trombolítico.
A nivel quirúrgico, los
anti-fibrinolíticos además de reducir la hemorragia
postoperatoria, pueden constituir una alternativa a la transfusión
de sangre y otros hemoderivados en cirugía cardíaca, hepática y
ortopédica. Sin embargo, el uso de estos preparados no se ha
generalizado, en parte porque no existen suficientes estudios
demostrando su eficacia y además porque pueden aumentar el riesgo
de complicaciones trombóticas (Mangano DT et al. The risk
associated with aprotinin in cardiac surgery. N Engl J Med 2006;
354: 353-365).
Por ejemplo en la cirugía hepática,
fundamentalmente trasplante hepático, el empleo de
anti-fibrinolíticos como aprotinina y AMCHA consigue
una reducción de las complicaciones hemorrágicas, pero puede
asociarse con problemas trombóticos (de Boer MT et al.
Minimizing blood loss in liver transplantation: progress through
research and evolution of techniques. Dig Surg 2005;
22:265-275).
En la hemorragia intracraneal, los
anti-fibrinolíticos tampoco se han incorporado a las
guías de práctica clínica (You H et al. Hemostatic drug
therapies for acute intracerebral haemorrhage. Cochrane Database
Syst Rev 2006; CD005951). En el caso particular de la hemorragia
cerebral primaria o secundaria a tratamiento trombolítico, el uso
del factor VIIa recombinante es el único tratamiento que parece
presentar algún efecto beneficioso en términos de reducción de la
mortalidad (29% en de los pacientes que reciben placebo, frente al
18% de los pacientes que reciben factor VIIa) y de reducción de
secuelas neurológicas [Mayer S.A., Brun N.C. et al.;
"Recombinant Activated Factor VII Intracerebral Hemorrhage Trial
Investigators. Recombinant activated factor VII for acute
intracerebral hemorrhage"; N Engl J Med. 2005; 352:
777-785].
La coagulación intravascular diseminada (CID)
representa otra condición clínica que cursa con hemorragia masiva,
en la que la administración de anti-fibrinolíticos
actuales está contraindicada por favorecer la trombosis generalizada
(Paramo JA. Coagulación intravascular diseminada. Med clin (Barc)
2006; 127:785-9).
La trombolisis con activadores del plasminógeno,
tipo tPA o uroquinasa, es uno de los tratamientos de elección en
el infarto agudo de miocardio y el ictus isquémico, pero su empleo
se asocia con una elevada incidencia de hemorragia mayor que puede
alcanzar el 14% y de hemorragia intracraneal hasta en 4% de los
casos. Además del tratamiento con hemoderivados, los
anti-fibrinolíticos tipo EACA o AMCHA están
indicados cuando se produce una hemorragia excesiva, si bien su
empleo puede favorecer la recurrencia trombótica.
La hemorragia excesiva tras extracción dental es
una de las complicaciones más frecuentes en pacientes con
coagulopatías congénitas, como la hemofilia A. En estas situaciones
el empleo local de agentes anti-fibrinolíticos y
anti-hemorrágicos (ac. tranexámico, desmopresina y
Factor VII) contribuyen a la persistencia del coágulo y a la
prevención de la hemorragia (Franchini M et al. Dental
procedures in adult patients with hereditary bleeding disorders: 10
years experience in three Italian Hemophila Centers. Haemophilia
2005; 11:504-509).
Los anti-fibrinolíticos son,
asimismo, la primera línea de tratamiento en mujeres con menorragia
asociada a coagulopatías congénitas, en combinación con la terapia
hormonal (Demers C et al. Gynaecological and obstetric
management of women with inherited bleeding disorders. J Obstet
Gynaecol 2005; 27:707-732).
La aplicación de medidas tópicas con geles de
fibrina ha supuesto un avance para prevenir la hemorragia
relacionada con la herida quirúrgica, pero su utilidad clínica aún
no se ha establecido (Gabay M. Absorbable hemostatic agents. Am J
Health Syst Pharm. 2006; 63:1244-53).
La aplicación intravenosa o tópica de
inhibidores de MMPs podría restaurar más precozmente la hemostasia
reduciendo las complicaciones hemorrágicas locales o asociadas con
el tPA (Lapchak PA, Araujo DM. Reducing bleeding complications
after thrombolytic therapy for stroke: clinical potential of
metalloproteinase inhibitors and spin trap agents. CNS Drugs. 2001;
15:819-29), favoreciendo la persistencia del
coágulo, la reparación y la cicatrización de heridas quirúrgicas.
Aún constituyendo esta opción una estrategia prometedora, las
mayoría de los ensayos clínicos con inhibidores de MMPs han
fracasado, ya sea por las bajas dosis empleadas (eficacia vs
toxicidad) o por los efectos secundarios observados (síndrome
musculoesquelético). Sería necesario buscar inhibidores más
selectivos que bloqueen únicamente los mecanismos moleculares
asociados a una MMP específica y evitar así efectos adversos
(Peterson JT. The importance of estimating the therapeutic index in
the development of matrix metalloproteinase inhibitors. 2006;
69:677-687).
El objetivo de la presente invención es
proporcionar composiciones terapéuticas alternativas para el
tratamiento anti-fibrinolítico y de complicaciones
hemorrágicas, que inhiban la lisis de los coágulos de fibrina.
Figura 1. Ensayo de turbidimetría del plasma
recalcificado expresado como los valores de absorbancia a 405 nm
frente al tiempo que dura el experimento en minutos. A: La gráfica
recoge las diferencias en la formación del coágulo (absorbancia
máxima) del plasma sólo (control) o en presencia de
MMP-10 (200 nM) ó MMP-3 (200 nM).
B: La gráfica representa la formación y lisis del coágulo de
fibrina del plasma recalcificado en presencia de los activadores
del plasminógeno tPA (30 U/ml) y uPA (135 U/ml) solos, o combinados
con MMP-10 (200 nM) y también en presencia de una
dosis equivalente de MMP-3 (200 nM) combinada con
tPA (30 U/ml).
Figura 2. Placa de fibrina polimerizada en la
que se muestran las áreas de lisis producidas por el tPA (1 U/ml)
y la MMP-10 (200 nM) solas o añadidas
conjuntamente.
Figura 3. Ensayo de actividad de la
MMP-10 (100 nM) en plasma con un sustrato
fluorescente de las estromelisinas. La concentración de anticuerpo
monoclonal (MAb) que inhibe la actividad de la
MMP-10 en plasma se determinó mediante la reducción
en la pendiente en la formación del sustrato. Como control se
utilizó un anticuerpo control de isotipo (IgG).
Figura 4. Western blot con el anticuerpo que
inhibe la actividad de la MMP-10. Marcador de peso
molecular (calle 1), MMP-1 (calle 2),
MMP-3 (calle-3),
MMP-10 (calle 4). El anticuerpo inhibidor de la
actividad MMP-10 únicamente reconoce el proenzima
(55 kDa) y enzima activo (45 kDa) de la MMP-10, sin
mostrar reacción cruzada con otras metaloproteasas.
Figura 5. Ensayo de turbidimetría del plasma
recalcificado con MMP-10 (200 nM) en presencia o
ausencia de un anticuerpo monoclonal (MAb) que inhibe la actividad
de la MMP-10, y de un anticuerpo control de isotipo
(IgG).
Figura 6. Placa de fibrina ilustrando las
diferencias en el área de lisis producida por el tPA (1 U/ml) y la
MMP-10 (200 nM) en presencia o ausencia de un
anticuerpo monoclonal que inhibe la actividad de la
MMP-10 (MAb) y el anticuerpo control de isotipo
(IgG).
En un primer aspecto la invención se refiere al
uso de un anticuerpo neutralizante de la metaloproteinasa de
matriz-10 (MMP-10) en la preparación
de un medicamento para tratamiento
anti-fibrinolítico.
La MMP-10 (Código de Enzima
EC-Number 3.4.24.22) se denomina también como
metalopeptidasa de matriz 10, estromelisina 2 (STMY2), transina 2 o
proteoglicanasa 2. En el hombre, el gen que codifica la
MMP-10 se localiza en el cromosoma 11 (11q22.3;
HUGO Gene Nomenclature Comitee HGNC_ID: 7156;
UniProtKB/Swiss-Prot Accesion Number: P09238).
\newpage
Esta metaloproteinasa la expresan diversos tipos
celulares como las células endoteliales, monocitos y fibroblastos.
Se sabe que puede ser activada por plasmina, calicreína, triptasa,
elastasa y catepsina G y puede degradar un amplio rango de
sustratos de la matriz extracelular, como agrecano, elastina,
fibronectina, gelatina, laminina, tenascina-C,
vitronectina y colágenos tipo II, III, IV, IX, X, XI. Además, la
MMP-10 puede activar otras metaloproteinasas de
matriz, como la proMMP-1, -3, -7, -8 y -9 [Nakamura
H et al.; Eur. J. Biochem., 1998;
253:67-75].
Asimismo es conocido que la
MMP-10 participa en diversos procesos fisiológicos,
como el crecimiento óseo o la cicatrización de heridas. Además, se
halla sobreexpresada en córneas de pacientes con retinopatía
diabética y se ha relacionado con algunos tipos de carcinomas, así
como con tumores linfoides. Diversos estudios in vitro han
demostrado que, en cultivos de queratinocitos, la expresión de
MMP-10 puede inducirse tanto por factores de
crecimiento (factor de crecimiento epidérmico, de queratinocitos o
TGF-beta), como por citocinas proinflamatorias
(TNF-alfa, IL-1beta) [Rechardt O
et al.; J. Invest. Dermatol., 2000;
115:778-787]; [Li de Q et al.; Invest.
Ophthalmol. Vis. Sci. 2003; 44:2928-2936].
Igualmente en divulgaciones anteriores a esta
invención se ha descrito que la MMP-10:
- puede constituir un biomarcador inflamatorio
de riesgo vascular [Montero I et al.; J. Am. Col. Cardiol.,
2006; 47:1369-1378] [Orbe J et al.; J.
Thromb. Haemost.; 2007; 5:91-97];
- se induce en células endoteliales que están
formando capilares en matrices de colágeno 3D y participa en la
regresión de la formación de capilares mediante la activación de la
MMP-1 [Saunders WB et al.; J. Cell Sci.,
2005; 118:2325-2340]; y que
- juega un papel fundamental en el mantenimiento
de las uniones intracelulares que preservan la integridad vascular
en los procesos de remodelado y angiogénesis [Chang S et
al.; Cell, 2006; 126:321-334].
- participa en la cicatrización de heridas
incrementando la migración de queratinocitos y la reorganización de
tejidos que ocurre por la degradación proteolítica de las proteínas
de la matriz [Krampert M, et al.; Mol Biol Cell,
2004;5242-5254].
En la presente invención se ha ensayado el
efecto de la MMP-10 y de la MMP-3
en la formación y lisis de coágulos sobre plasma humano, así como
en otros modelos in vitro de degradación de fibrina
polimerizada.
Los inventores han podido comprobar que la
MMP-10 no tiene una actividad trombolítica directa
y que no es capaz de alterar por si misma la formación del coágulo
ni de degradar la fibrina. Sorprendentemente han comprobado también
que en presencia de agentes activadores de la trombolisis,
particularmente activadores del plasminógeno, la
MMP-10 favorece la disolución de los coágulos de
fibrina y reduce el tiempo de lisis. La MMP-10
actúa, por tanto, como un facilitador o adyuvante de la acción
trombolítica de otros activadores de la trombolisis.
Por el contrario, una metaloproteinasa de matriz
fibrinolítica como la MMP-3, con actividad
proteolítica directa sobre la fibrina y el fibrinógeno, no reduce
los tiempos de lisis del coágulo que por sí solos proporcionan los
activadores de la trombolisis.
Todavía más sorprendentemente, los inventores
han comprobado que la adición de anticuerpos específicos frente a
la MMP-10 es capaz de inhibir el efecto de la
MMP-10, pudiendo llegar a bloquear completamente la
disolución del coágulo, incluso en presencia de activadores de la
fibrinolisis.
En consecuencia, un agente inhibidor de la
MMP-10, p.ej. un anticuerpo, podría suponer un
avance importante en el control de las hemorragias en el ámbito
médico y quirúrgico, así como una alternativa a la transfusión de
sangre en pacientes con hemorragia excesiva causada por una
alteración de la fibrinolisis,
1.- por su capacidad de reducir y bloquear la
lisis del coágulo de fibrina incluso en presencia de activadores
del plasminógeno
2.- por ser una molécula que no altera la
formación del coágulo de fibrina.
La MMP-10 al ser una proteína
que actúa por un mecanismo independiente del sistema hemostático,
no presentaría las complicaciones trombóticas de los
anti-fibrinolíticos convencionales.
Además el bloqueo selectivo de la
MMP-10 no causará los efectos secundarios asociados
a una inhibición de MMPs no-selectiva, como el
síndrome musculoesquelético, en el se han implicado otras MMPs como
la MMP-9 y MMP-14.
En el contexto de la invención el término
"anticuerpo" incluye en primer lugar anticuerpos policlonales,
anticuerpos monoclonales, anticuerpos recombinantes, anticuerpos
quiméricos, anticuerpos humanizados y anticuerpos totalmente
humanos.
Los anticuerpos policlonales son originalmente
mezclas heterogéneas de moléculas de anticuerpos producidas en el
suero de animales que han sido inmunizados con un antígeno.
Incluyen también anticuerpos policlonales monoespecíficos obtenidos
a partir de las mezclas heterogéneas, por ejemplo mediante
cromatografía en una columna con péptidos de un único epítopo del
antígeno de interés.
Un anticuerpo monoclonal es una población
homogénea de anticuerpos específicos para un único epítopo del
antígeno. Estos anticuerpos monoclonales pueden prepararse mediante
técnicas convencionales ya descritas, p. ej. en Köhler and Milstein
[Nature, 1975; 256:495-397] o Harlow and Lane
["Using Antibodies. A Laboratory Manual" de E. Harlow y D.
Lane, Publisher: Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring
Harbor, New York; 1998 (ISBN 978-0879695439)].
Un anticuerpo quimérico es un anticuerpo
monoclonal construido mediante clonación o recombinación de
anticuerpos procedentes de distintas especies animales. En una
configuración típica pero no limitativa de la invención, el
anticuerpo quimérico incluye una parte de un anticuerpo monoclonal,
generalmente la región variable (Fv) que incluye los sitios para
reconocimiento y unión al antígeno, y la otra parte correspondiente
a un anticuerpo humano, generalmente la parte que incluye la
región constante y la constante adyacente.
Un anticuerpo humanizado es un anticuerpo
monoclonal construido mediante clonación e injerto de las regiones
hipervariables determinantes de complementariedad (CDR) de un
anticuerpo monoclonal murino en un anticuerpo humano en sustitución
de sus propias regiones hipervariables CDR.
Un anticuerpo totalmente humano es un anticuerpo
o anticuerpos que han sido producidos en animales transgénicos con
sistema inmune humano o por immunización in vitro de células
inmunes humanas (incluyendo tanto inmunización genética como
tradicional con o sin adyuvantes y antígeno puro o no; o mediante
cualquier método de exposición del antígeno al sistema inmune) o
mediante bibliotecas nativas/sintéticas producidas desde células
inmunes humanas. Estos anticuerpos pueden obtenerse y seleccionarse
desde animales transgénicos (p. ej. ratones) en los que se han
clonado genes de las inmunoglobulinas humanas y que son inmunizados
con el antígeno objetivo. Igualmente estos anticuerpos pueden
obtenerse por selección de regiones variables de cadena simple
(scFv) o de unión al antígeno (Fab) humanas presentadas en
bibliotecas de fagos (phage display) y posterior clonación e
injerto en un anticuerpo humano o mediante cualquier otro método de
producción y presentación (display), de las librerías generadas por
clonación de las regiones variables de ambas cadenas y posterior
combinación/mutación de estas para generar librerías de
anticuerpos.
anticuerpos.
Por otra parte, el anticuerpo o anticuerpos de
la invención pueden ser de cualquier clase o subclase de
inmunoglobulinas, y particularmente IgG, IgM, IgA, IgD e IgE.
En una realización particular, los anticuerpos
son anticuerpos completos, que incluyen todas las regiones
funcionales típicas de una inmunoglobulina natural, en particular
las regiones para el reconocimiento y unión específica con el
antígeno.
En segundo lugar el término "anticuerpo"
incluye también un fragmento de anticuerpo, obtenido desde la
proteína o mediante tecnología recombinante, que expresado en
procariotas, levaduras o eucariotas, glicosilado o deglicosilado, y
que puede consistir en las zonas variables de los anticuerpos
unidas entre sí por un péptido de unión (scFv), o la zona variable
junto a la constante CH1 de la cadena pesada (Fd) unida a la
cadena ligera mediante cisteinas o mediante péptidos de unión y
puente disulfuro (scFab), o nuevas variantes, como cadenas pesadas
solas, o cualquier modificación que se haga de estos con el fin de
hacerlos más afines, menos immunogénicos (humanizados) o más
estables en fluidos biológicos y que tengan capacidad de inhibir la
MMP-10 por unión a su centro activo o a cualquier
otro dominio de la proteína que disminuya su actividad.
En el contexto de la invención los términos
anticuerpo "neutralizante" o "antagonista" de la
MMP-10 se refieren indistintamente a un anticuerpo,
definido en los términos ya indicados, que es capaz de reconocer y
unirse específicamente a la MMP-10 con una afinidad
en el rango nanomolar o picomolar. Además, dicho anticuerpo es
capaz de inhibir o bloquear, total o parcialmente, la actividad de
la MMP-10. En particular dicho anticuerpo es capaz
de inhibir o bloquear la acción que ejerce la
MMP-10 como facilitadora de la disolución de los
coágulos de fibrina, reduciendo los tiempos de lisis (actividad
fibrinolítica-trombolítica). En una realización
particular, el anticuerpo neutralizante inhibe la acción adyuvante
que la MMP-10 ejerce sobre los activadores del
plasminógeno (tPA, uPA,
etc).
etc).
\vskip1.000000\baselineskip
Los anticuerpos neutralizantes de la invención
pueden producirse mediante métodos convencionales ya conocidos para
la producción de anticuerpos. Sin que esto suponga limitación
alguna, pueden utilizarse entre otras: técnicas de inmunización en
animales, incluidos animales transgénicos para genes de
inmunoglobulinas humanas, producción de monoclonales mediante
hibridomas, producción mediante librerías de anticuerpos, que
pueden ser nativas, sintéticas o derivadas de organismos
inmunizados frente al antígeno de interés y que podrían ser
seleccionadas mediante muy diferentes métodos de presentación o
"display" (phage display, ribosome display, etc.) y
posteriormente, mediante técnicas de ingeniería genética podrían ser
rediseñadas y expresadas en vectores diseñados para la producción
de anticuerpos recombinantes de diferentes tamaños, composición y
estructura. Una revisión de los principales métodos para la
producción y purificación de los anticuerpos puede encontrarse, por
ejemplo, en:
"Handbook of Therapeutic
Antibodies", de S. Dübel, Publisher:
Wiley-VCH, 2007, Vols: I a III (ISBN
978-3527314539);
"Antibodies: Volume 1: Production and
Purification" de G. Subramanian Ed., Publisher: Springer, 1st
Ed, 2004 (ISBN 978-0306482458);
"Antibodies: Volume 2: Novel Technologies
and Therapeutic Use", de G. Subramanian Ed., Publisher:
Springer, 1st ed, 2004 (ISBN
978-0306483158);
"Molecular Cloning: a Laboratory
manual", de J. Sambrook y D. W. Russel Eds., Publisher: Cold
Spring Harbor Laboratory Press, 3th edition, 2001 (ISBN
978-0879695774);
En una realización particular, no limitativa de
la invención, un procedimiento para la obtención y producción de
un anticuerpo monoclonal neutralizante de la MMP-10
puede constar de las siguientes etapas:
1.- inmunizar ratones con una solución de
MMP-10 o un fragmento inmunogénico de
MMP-10 o plásmido conteniendo
MMP-10 o derivados.
2.- Seleccionar los animales con respuesta
policlonal frente al antígeno mediante western blot, ELISA o
inmunocitoquímica.
3.- Realizar la fusión de esplenocitos del
animal con células de mieloma (SP2/O-Ag14;
P3X63-Ag8.6.5.3;
P3-NS-1-Ag4-1;
etc.), de modo que se generarán híbridos entre los diversos tipos
celulares: y se seleccionará con medio HAT (de hipoxantina,
aminopterina y timidina) aquellos híbridos de linfocito B del
animal y células de mieloma que producirán anticuerpo y además
serán inmortales en cultivo.
4.- Seleccionar los hibridomas que secreten
anticuerpos que nos interesen, es decir anticuerpos que inhiban la
actividad de MMP-10. Para ello se tomarán muestras
de sobrenadante de todos los pocillos que contengan hibridomas para
someterlos a un inmunoensayo: se realizarán ensayos de ELISA con
placas tapizadas con ng o ug de MMP-10; tras una
incubación de 15 horas a 4ºC y el bloqueo correspondiente con una
proteína adecuada, se añadirán los sobrenadantes de los cultivos,
se realizaran los lavados correspondientes y a continuación se
añadirá un anticuerpo secundario
anti-inmunoglobulina de ratón. De este modo, tras
lavar y revelar con una reacción enzimática, los pocillos en los
que se detecte color o un aumento en la absorbancia podrán contener
clones de hibridomas secretores de anticuerpos frente a
MMP-10.
5.- Seleccionar aquellos hibridomas capaces de
inhibir la actividad de MMP-10 para lo que se
realizará un ensayo con sustrato fluorogénico. Se utilizará una
microplaca tapizada con distintas concentraciones de un anticuerpo
anti-MMP-10 (R&D systems,
Clon110343) y el sustrato fluorogénico de estromelisinas
(MCA-Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nval-Trp-Arg-Lys-[DNP]-NH_{2})
(R&D systems; ES002, Abingdon, UK). La fluorescencia (320 nm
excitación y 405 nM emisión) se medirá en un espectrofluorímetro
(SpectraMAX GeminiXS, Molecular Devices, CA, USA) durante 2 h con
lecturas cada 5 min. En relación a una concentración constante de
MMP-10 activa se seleccionarán aquellos hibridomas
que a menor concentración y preincubados con la proteína 30 min a
37ºC, reducen la actividad de la MMP-10 al menos un
50% (IC50).
Las células productoras de anticuerpos del
pocillo del que proviene el sobrenadante seleccionado se crecerán
y se congelarán en nitrógeno líquido.
6.- Asegurar que cada cultivo de células que
secreta un anticuerpo anti-MMP-10 es
monoclonal. Se aplicarán técnicas de clonaje o dilución límite y se
harán crecer células aisladas en nuevas microplacas de cultivo a
partir del cultivo original o células madre que dieron positivo en
el primer ensayo de ELISA y ensayo de actividad. Una vez que las
nuevas colonias surgidas a partir de una o más células hayan
adquirido el tamaño suficiente, se tomarán de nuevo sobrenadantes
de estas para someterlos a un nuevo ELISA y ensayo de actividad. Se
repetirá el proceso hasta que el 100% de los sobrenadantes
analizados contengan anticuerpos frente a la actividad de la
MMP-10.
7.- Purificar los anticuerpos de los
sobrenadantes mediante cromatografía de líquidos (cromatografía de
inmunoafinidad, de afinidad, de intercambio catiónico, de
hidroxiapatita, de interacción hidrofóbica, de filtración en gel,
etc.) en un equipo ÄKTA FPLC, GE Healthcare
Bio-Science.
8.- Por último, analizar la pureza, la
especificidad, afinidad y actividad fibrinolítica de aquellos que
se han seleccionado.
La pureza del anticuerpo puede determinarse, por
ejemplo, mediante gel de poliacrilamida (SDS-PAGE)
que se teñirá con azul de Coomassie para corroborar la presencia
de banda única.
\newpage
La especificidad del anticuerpo puede
determinarse mediante western blot frente a otras metaloproteasas
(especialmente la MMP-3 con la que comparte mayor
homología) a concentraciones de ng a g y revelando por
quimioluminiscencia.
La constante de afinidad de los anticuerpos
puede calcularse a partir de la constante de disociación (Kd)
definida como la pendiente que se obtiene al representar los
valores de absorbancia del ELISA tapizado con MMP-10
frente a concentraciones crecientes del anticuerpo analizado.
La capacidad neutralizante de la actividad
fibrinolítica que dicho anticuerpo posee puede analizarse mediante
ensayo de turbidimetría de formación y lisis de coágulos de fibrina
y en ensayo de fibrina polimerizada, por ejemplo mediante los
ensayos descritos en los ejemplos 1 y 2.
Por otra parte, el ácido nucleico que codifica
para el anticuerpo neutralizante de la MMP-10,
podría servir como producto intermedio para la obtención de un
anticuerpo quimérico o humanizado también neutralizante de la
MMP-10.
No obstante lo anterior, el método para la
producción del anticuerpo neutralizante de la MMP-10
no es un aspecto crítico, y por tanto el técnico o experto en la
materia podría fácilmente producir los anticuerpos de la invención
mediante cualquier otro método convencional para la producción de
anticuerpos.
\vskip1.000000\baselineskip
En general el anticuerpo neutralizante de
MMP-10 (o el medicamento que lo contiene) es útil
para el tratamiento anti-fibrinolítico.
En una realización particular, el anticuerpo de
la invención es útil para el tratamiento, preventivo o
terapéutico, de hemorragias o complicaciones hemorrágicas.
En unos casos, las complicaciones hemorrágicas a
tratar se pueden producir en pacientes con estados
hiperfibrinolíticos y defectos en la coagulación, que pueden estar
causados por alteraciones congénitas (hemofilia A, enfermedad de
von Willebrand, deficiencia de PAI-1 o
alfa2-antiplasmina), o también por complicaciones
adquiridas, p. ej. derivadas del tratamiento con agentes
anti-coagulantes, o en pacientes con coagulación
intravascular diseminada CID, algunas cirugías o tumores de tejidos
y órganos ricos en activadores de la fibrinolisis, o en situaciones
de fallo de aclaramiento de los activadores del plasminógeno como
en enfermedad hepática severa, o en leucemia promielocítica aguda
asociada a CID.
Entre estas complicaciones hemorrágicas se
incluyen, entre otras, hemorragia menstrual excesiva (menorragia),
hemorragias gastrointestinales, urinarias, dentales y
particularmente hemorragias en pacientes con defectos en la
coagulación por algunas de las causas ya mencionadas (hemofilia A,
enfermedad de von Willebrand, con tratamiento
anti-coagulante, CID, etc).
En otros casos, las hemorragias y complicaciones
hemorrágicas a tratar pueden producirse en procedimientos
quirúrgicos (cirugías en general, incluidos trasplantes y biopsias),
particularmente cirugía de órganos ricos en activadores del
plasminógeno (próstata, pulmón, útero) y en cirugía sobre pacientes
en estados hiperfibrinolíticos o con defectos en la coagulación
como los ya señalados. En estos casos el objetivo será reducir las
hemorragias derivadas de la cirugía, mediante un tratamiento
(previo, durante y/o posterior a la cirugía) con un medicamento que
comprenda un anticuerpo neutralizante de la
MMP-10.
Asimismo, la aplicación tópica de anticuerpos
anti-MMP-10 podría ser de utilidad
para restablecer la comunicación vascular tras la realización de un
injerto vascular, incluyendo el inhibidor en una formulación tipo
gel de fibrina, para prevenir la hemorragia relacionada con la
herida quirúrgica.
En el contexto de la invención el término
"tratamiento" incluye la administración del medicamento que
contiene el anticuerpo neutralizante de la MMP-10
para prevenir o reducir la aparición de los síntomas,
complicaciones o indicios bioquímicos de un estado
hiperfibrinolítico, y muy particularmente prevenir la aparición de
eventos hemorrágicos. El tratamiento puede ser un tratamiento
profiláctico para prevenir la manifestación de sus síntomas
clínicos o subclínicos. Puede ser también un tratamiento
terapéutico para suprimir o aliviar los síntomas después de que ya
se hayan manifestado y puede constituir una alternativa a la
transfusión de sangre en el caso en el que ésta fuera
necesaria.
necesaria.
\vskip1.000000\baselineskip
Conforme a la invención, los anticuerpos
neutralizantes se emplean en la preparación de una composición
farmacéutica como medicamento para tratamiento
anti-fibrinolítico.
\newpage
Dicha composición farmacéutica comprende al
menos un anticuerpo neutralizante de MMP-10 en un
vehículo farmacéuticamente aceptable.
El anticuerpo o composición farmacéutica de la
invención son particularmente útiles para administración
parenteral, por ejemplo, para administración subcutánea,
intramuscular o intravenosa.
En una realización concreta pero no limitativa
de la invención, la composición farmacéutica contiene una solución
del anticuerpo o anticuerpos neutralizantes de
MMP-10, disuelto en un vehículo aceptable, p. ej. un
vehículo acuoso como agua, agua tamponada, suero salino, glicina u
otro similar. Estas soluciones son estériles y generalmente libres
de partículas. La composición farmacéutica puede contener otros
ingredientes adicionales, como agentes para ajustar el pH,
conservantes, etc.
En otra realización, la composición farmacéutica
sería adecuada para administración local, en forma de gel o pasta
e incluso en forma de ampolla bebible con la que hacer enjuagues en
caso de hemorragias por extracción dental.
Una revisión de las distintas composiciones y
formas farmacéuticas de administración de medicamentos y de los
excipientes necesarios para la obtención de las mismas puede
encontrarse, por ejemplo, en: "Tecnología farmacéutica", de
J.L. Vila Jato, 1997 Vols I y II, Ed. Síntesis, Madrid; o en
"Handbook of pharmaceutical manufacturing formulations", de
S.K. Niazi, 2004 Vols I a VI, CRC Press, Boca Raton.
La cantidad de ingrediente activo (anticuerpos)
que puede combinarse con el material vehiculizante para producir
una única forma de dosificación será generalmente la cantidad que
produce un efecto terapéutico. La preparación de una composición
farmacéutica parenteral en forma de unidades de dosis facilita la
administración y la uniformidad de las dosis, por lo que resulta
muy ventajosa. Estas unidades de dosificación pueden ser preparadas
por el experto en la materia de acuerdo a las técnicas
convencionales, y teniendo en cuenta el efecto terapéutico concreto
que se quiere lograr y la indicación terapéutica concreta.
Las dosis efectivas de la composición
farmacéutica de la invención dependerán de múltiples factores,
incluidos los medios y vías de administración, lugar de acción
objetivo, estado fisiológico del paciente, otra medicación
administrada al paciente, o si se trata de un tratamiento
profiláctico o terapéutico. No obstante, en una realización
particular la unidad de dosis a administrar del anticuerpo
neutralizante de la invención estará comprendida entre 1,0 y 10,0
mg/Kg. Típicamente el régimen de administración incluirá la
administración repetida de la composición con los anticuerpos de la
invención, con intervalos entre cada administración que pueden ser
diarias semanales, mensuales, bimensuales, o cualquier otro que el
farmacólogo establezca atendiendo a las necesidades del paciente
(indicación particular, severidad, etc), y conforme a los
protocolos farmacológicos normalizados habituales.
\vskip1.000000\baselineskip
Los ejemplos que ilustran los efectos sobre la
actividad fibrinolítica y trombolítica de las metaloproteinasas de
matriz MMP-10 y MMP-3, bien sea
directamente o en combinación con algunos activadores del
plasminógeno: uroquinasa (uPA) y activador tisular del plasminógeno
(tPA).
Para los ejemplos se ha empleado:
- -
- MMP-10 recombinante, obtenida como pro-enzima de 58 kDa con un 20-30% de enzima maduro de 48 kDa (R&D Systems, 910-MP, Abingdon, UK), que fue reconstituida con tampón TCNB (50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 10 mM CaCl_{2}, 150 mM NaCl, 0,05% Brij35).
- -
- MMP-3 recombinante, obtenida como proenzima de 52 kDa (R&D Systems, 513-MP, Abingdon, UK), suministrada en una solución con 12,5 mM Tris, 5 mM CaCl_{2}, 0,025% Brij35 y 50% de glicerol.
- -
- Uroquinasa (uPA) (Vedim Pharma SA; 628602, Barcelona, España).
- -
- Activador tisular del plasminógeno (tPA) recombinante (Boerhinger Ingelheim; 985937 Actilyse®, Ingelheim, Alemania).
Para la evaluación de la actividad trombolítica
se utilizó un método turbidimétrico para monitorizar la formación
y lisis del coágulo de fibrina sobre muestras de plasma, de acuerdo
con el protocolo descrito previamente por von dern Borne y
colaboradores [Blood, 1995; 86:3035-3042].
Por otra parte, para evaluar la actividad sobre
la lisis de fibrina, realizaron ensayos en placas de fibrina,
siguiendo el procedimiento descrito por Edward [J. Clin. Path.,
1972; 25: 335-337].
\newpage
Ejemplo
1
Como se ha mencionado anteriormente, mediante el
procedimiento descrito por von dern Borne y colaboradores, se
evaluó el efecto de la MMP-10 y de la
MMP-3 sobre el sistema hemostático. En este método
se valoran los cambios de turbidez/absorbancia durante la
formación y lisis de coágulos como indicador en el tiempo de ambos
procesos. La medida de la turbidez se realiza por lectura de la
absorbancia a 405 nm durante las fases de formación y lisis de
coágulos, utilizando un lector fotométrico, en nuestro caso un
lector de ELISA (Fluostar Optima, BMG Labtech). El incremento de
turbidez/absorbancia indica la formación del coágulo de fibrina
mientras que el descenso de este parámetro indica la lisis del
coágulo.
Para la formación del coágulo se mezclaron en un
pocillo de microplaca 75 \mul de plasma citratado, 75 \mul de
tampón HEPES (25 mM HEPES, 137 mM NaCl, 3.5 mM KCl, 6 mM
CaCl_{2}, 1.2 mM MgCl_{2}, y 0.1% BSA, pH=7.5) y 10 \mul de
CaCl_{2} 150 mM. La placa se incubó a 37ºC y se midió la
absorbancia a 405 nm durante 2 h, con lecturas cada 30
segundos.
Para estudiar el efecto de la
MMP-10 en la formación del coágulo, se añadió
MMP-10 activada (50, 100 y 200 nM) a la mezcla
inicial de plasma y tampón HEPES. Antes de su utilización en los
experimentos, la MMP-10 se activó mediante
tratamiento térmico a 37ºC durante 1 h.
En ensayos paralelos, se analizó también el
efecto sobre la formación del coágulo con la MMP-3
(200 nM). En este caso la MMP-3 se activó
previamente con 1 mM de acetato
p-aminofenilmercurio (APMA, 164610, EMD
Biosciences, La Jolla, USA) a 37ºC durante 24 h.
Como se observa en la Figura 1A, la
MMP-10 no indujo cambios ni en la velocidad de
formación del coágulo ni en el máximo de turbidez alcanzada con
ninguna de las dosis empleadas (Tabla 1). Sin embargo, la
MMP-3 indujo un descenso del 50% en el máximo de
absorbancia/turbidez del coágulo formado, probablemente por su
acción proteolitica directa sobre el fibrinógeno.
Estos resultados demuestran que la
MMP-10, a diferencia de lo descrito para la
MMP-3, no altera la tasa de formación del coágulo
por no presentar actividad frente al fibrinógeno.
Posteriormente se estudió la tasa de lisis de
coágulo de fibrina y para ello, como en el apartado anterior, se
empleó plasma recalcificado en tampón HEPES al que simultáneamente
con la MMP-10 (o MMP-3 en su caso)
se añadió un activador del plasminógeno a elegir entre 30 U/ml de
activador tisular del plasminógeno (tPA), o 135 U/ml de uroquinasa
(uPA) al comienzo de la turbidimetría.
Las concentraciones de tPA y uPA a utilizar se
determinaron en estudios previos de dosis-respuesta,
donde la dosis de elección fue aquella que lisaba completamente el
coágulo de fibrina en el plazo de 2 h.
Como se observa en la Figura 1B y tabla 1, la
MMP-10 en ausencia de tPA y uPA no produjo la lisis
del coágulo de fibrina, mientras que en presencia de los
activadores tPA o uPA indujo un aumento significativo en la tasa de
lisis del coágulo de fibrina. Con la máxima dosis de
MMP-10 ensayada (200 nM) el acortamiento del tiempo
de lisis (tiempo al cual se lisa la mitad del coágulo) fue de 15
min (52,9 min vs 68,3 min, p<0.01) en presencia de tPA y
de 5 min en presencia de uPA (42 min vs 47.5 min,
p<0,05). Esta reducción del tiempo de lisis supone un porcentaje
de acortamiento de un 20% en presencia del tPA y de un 10% con el
uPA.
Por el contrario, la MMP-3 no
modificó la tasa de lisis del coágulo en presencia de tPA.
Estos resultados indican que la
MMP-10, a diferencia de la MMP-3,
no es capaz de digerir la fibrina, pero aumenta el efecto
fibrinolítico de los activadores del plasminógeno y de la
fibrinolisis (tPA o uPA). La MMP-10, al no poseer
capacidad para actuar sobre la fibrinolisis endógena, evitaría o
atenuaría la aparición de hemorragias, lo que le convierte en un
buen candidato para su utilización como coadyuvante de la terapia
trombolítica.
Ejemplo
2
De acuerdo con el procedimiento de Edward
mencionado anteriormente, se estudió el efecto sobre la lisis de
fibrina midiendo el halo o área de lisis que se produce en una
placa de fibrina polimerizada.
Las placas de fibrina se preparan a partir de
una solución 6 mg/ml de fibrinógeno humano (Sigma, F3879, Sant
Louis, MO, USA) en tampón veronal (BioWhittaker,
12-624E, Cambrex, MD, USA) a 37ºC, que se filtra y a
la que se añade un volumen igual de CaCl_{2} (50 mM). Esta
solución (6 ml) se mezcla con 1 unidad internacional (NIH units) de
trombina (Enzyme Research Lab; HT1200a, Swansea, UK) y se deja
polimerizar durante 6 h.
Para valorar la capacidad fibrinolítica, sobre
distintas placas de fibrina se añadió: tPA (1 U/ml),
MMP-10 (200 nM), o una combinación de ambos.
Como se observa en la Figura 2, la
MMP-10 sola no produjo lisis sobre la fibrina
polimerizada, mientras que el tPA produjo una marcado halo. Sin
embargo, la combinación de tPA con MMP-10 aumentó
significativamente el área de lisis de fibrina polimerizada
(188,6%), hecho que confirma el efecto facilitador de la
fibrinolisis de la MMP-10 en combinación con
activadores del plasminógeno como agentes fibrinolíticos.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
3
De acuerdo con los resultados de los Ejemplos 1
y 2, se analizó la especificidad del efecto de la
MMP-10 sobre la lisis de fibrina en el coágulo
inducida por tPA añadiendo simultáneamente diferentes dosis de
MMP-10 activa, en presencia (relación 1:2) y
ausencia de un anticuerpo monoclonal que bloquea su actividad
(R&D Systems, MAB9101, Abingdon, UK), o de anticuerpo control
de isotipo murino IgG2B (eBioscience, 16-4732, San
Diego, CA, USA) a la misma concentración.
La relación de enzima:anticuerpo que bloquea la
actividad del enzima se analizó previamente en un ensayo de
actividad para la MMP-10 en una microplaca tapizada
con un anticuerpo anti-MMP-10
(R&D systems, Clon110343) y utilizando el sustrato fluorogénico
de estromelisinas
(MCA-Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nval-Trp-Arg-Lys-[DNP]-NH_{2})
(R&D systems; ES002, Abingdon, UK) [Lombard et al.;
Biochimie, 2005; 87:265-272]. La fluorescencia (320
nm excitación y 405 nM emisión) se midió en un espectrofluorímetro
(SpectraMAX GeminiXS, Molecular Devices, CA, USA) durante 1 h
estableciéndose que la relación 1:2 inhibe completamente la
concentración de enzima activo (Figura 3).
La especificidad del anticuerpo se estudió
mediante western blot para descartar la existencia de reacción
cruzada con otras metaloproteasas (Figura 4). El anticuerpo
inhibidor de la MMP-10 únicamente reconoce ésta
metaloproteasa, por lo que ejerce una inhibición específica de la
misma, pese a la gran homología existente en la familia de las
metaloproteasas y, en particular, con la otra estromelisina
MMP-3.
Los resultados muestran que el efecto
coadyuvante sobre la fibrinolisis es específico de la
MMP-10, ya que se revierte en presencia del
anticuerpo anti-MMP-10. Este efecto
resulta muy destacable cuando dicho anticuerpo es añadido para
bloquear la actividad endógena de la MMP-10
plasmática (Figura 5). Los resultados establecen que la ausencia de
MMP-10 en el plasma impide la lisis del coágulo de
fibrina incluso en presencia de tPA o uPA (Tabla 1).
Estos resultados se corroboraron en los ensayos
sobre placa de fibrina polimerizada. Como se muestra en la Figura
6, en presencia del anticuerpo
anti-MMP-10 se reduce el área de
lisis producido por la combinación tPA:MMP-10
(91,2% vs 188,6%), mientras que el anticuerpo control no
tiene ningún efecto (184,6%). Estos datos confirman que el empleo
de un anticuerpo específico para la MMP-10
neutraliza y bloquea la disolución farmacológica de coágulos de
fibrina.
Claims (7)
1. Uso de un anticuerpo neutralizante de la
metaloproteinasa de matriz-10 MMP-10
en la preparación de un medicamento útil para tratamiento
anti-fibrinolítico.
2. Uso según la reivindicación 1 en la
preparación de un medicamento útil para tratamiento de hemorragias
y complicaciones hemorrágicas.
3. Uso según la reivindicación 2 en la
preparación de un medicamento para tratamiento de hemorragias y
complicaciones hemorrágicas en pacientes con estados
hiperfibrinolíticos causados por alteraciones congénitas.
4. Uso según la reivindicación 2 en la
preparación de un medicamento para tratamiento de hemorragias y
complicaciones hemorrágicas en pacientes que reciben tratamiento
anticoagulante.
5. Uso según la reivindicación 2 en la
preparación de un medicamento para tratamiento de hemorragias y
complicaciones hemorrágicas producidas en pacientes con coagulación
intravascular diseminada.
6. Uso según la reivindicación 2 en la
preparación de un medicamento para tratamiento de hemorragias y
complicaciones hemorrágicas producidas por procedimientos
quirúrgicos.
7. Uso según la reivindicación 2 en la
preparación de un medicamento como alternativa a la transfusión de
sangre en hemorragia aguda.
Priority Applications (12)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ES200701786A ES2313841B1 (es) | 2007-06-26 | 2007-06-26 | Composiciones para tratamiento anti-fibrinolitico. |
| AU2008269686A AU2008269686B8 (en) | 2007-06-26 | 2008-06-26 | Compositions for anti-fibrinolytic treatment |
| DK08787634.8T DK2174956T3 (da) | 2007-06-26 | 2008-06-26 | Sammensætninger til anti-fibrinolytisk behandling |
| RU2010102090/15A RU2453337C2 (ru) | 2007-06-26 | 2008-06-26 | Композиции для антифибринолитического лечения |
| EP08787634A EP2174956B1 (en) | 2007-06-26 | 2008-06-26 | Compositions for anti-fibrinolitic treatment |
| CN2008801045159A CN101918441B (zh) | 2007-06-26 | 2008-06-26 | 用于抗血纤蛋白溶解治疗的组合物 |
| BRPI0813222-4A2A BRPI0813222A2 (pt) | 2007-06-26 | 2008-06-26 | Uso de um anticorpo de neutralização |
| PCT/ES2008/000453 WO2009000957A1 (es) | 2007-06-26 | 2008-06-26 | Composiciones para tratamiento anti-fibrinolitico |
| CA 2692986 CA2692986A1 (en) | 2007-06-26 | 2008-06-26 | Compositions for anti-fibrinolytic treatment |
| ES08787634T ES2390391T3 (es) | 2007-06-26 | 2008-06-26 | Composiciones para tratamiento anti-fibrinolítico |
| JP2010514020A JP2010531341A (ja) | 2007-06-26 | 2008-06-26 | 抗線維素溶解処置のための組成物 |
| US12/452,280 US8257701B2 (en) | 2007-06-26 | 2008-06-26 | Methods for anti-fibrinolytic treatment using MMP-10 neutralizing antibody |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ES200701786A ES2313841B1 (es) | 2007-06-26 | 2007-06-26 | Composiciones para tratamiento anti-fibrinolitico. |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2313841A1 ES2313841A1 (es) | 2009-03-01 |
| ES2313841B1 true ES2313841B1 (es) | 2010-01-12 |
Family
ID=40185221
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES200701786A Expired - Fee Related ES2313841B1 (es) | 2007-06-26 | 2007-06-26 | Composiciones para tratamiento anti-fibrinolitico. |
| ES08787634T Active ES2390391T3 (es) | 2007-06-26 | 2008-06-26 | Composiciones para tratamiento anti-fibrinolítico |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES08787634T Active ES2390391T3 (es) | 2007-06-26 | 2008-06-26 | Composiciones para tratamiento anti-fibrinolítico |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US8257701B2 (es) |
| EP (1) | EP2174956B1 (es) |
| JP (1) | JP2010531341A (es) |
| CN (1) | CN101918441B (es) |
| AU (1) | AU2008269686B8 (es) |
| BR (1) | BRPI0813222A2 (es) |
| CA (1) | CA2692986A1 (es) |
| DK (1) | DK2174956T3 (es) |
| ES (2) | ES2313841B1 (es) |
| RU (1) | RU2453337C2 (es) |
| WO (1) | WO2009000957A1 (es) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009118660A2 (en) | 2008-03-24 | 2009-10-01 | Salman Rahman | Adam-15 antibodies and immunogenic peptides |
| EP2621956A2 (en) | 2010-10-01 | 2013-08-07 | Salman Rahman | Methods for the development of metzincin-selective catalytic cleft directed antibodies for therapeutic and diagnostic applications |
| WO2015107139A1 (en) * | 2014-01-17 | 2015-07-23 | Proyecto De Biomedicina Cima, S.L. | Compounds for use as antifibrinolytic agents |
| RU2657756C2 (ru) * | 2016-08-30 | 2018-06-15 | Общество с ограниченной ответственностью "ПРОФИТ ФАРМ" | Способ лечения кровотечений из верхних отделов желудочно-кишечного тракта |
| US11654057B2 (en) | 2020-04-09 | 2023-05-23 | Bio 54, Llc | Devices for bleeding reduction and methods of making and using the same |
| US11642324B1 (en) | 2022-03-01 | 2023-05-09 | Bio 54, Llc | Topical tranexamic acid compositions and methods of use thereof |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5830468A (en) * | 1995-05-17 | 1998-11-03 | The New York Blood Center, Inc. | Fibrin(ogen) degradation by fibrinolytic matrix metalloproteinase |
| CA2306460A1 (en) * | 1997-11-14 | 1999-05-27 | G.D. Searle & Co. | Aromatic sulfone hydroxamic acid metalloprotease inhibitor |
| JPH11318449A (ja) * | 1998-03-10 | 1999-11-24 | Fuji Chem Ind Ltd | ストロメライシン―２（ｍｍｐ―１０）に対する抗体 |
| EP1060747A3 (en) | 1999-06-16 | 2001-12-05 | New York Blood Center, Inc. | Fibrin(ogen) degradation and clot lysis by fibrinolytic metalloproteinase |
| IL132558A0 (en) * | 1999-10-25 | 2001-03-19 | Compugen Ltd | Variants of alterntive splicing |
| SE0100903D0 (sv) * | 2001-03-15 | 2001-03-15 | Astrazeneca Ab | Compounds |
-
2007
- 2007-06-26 ES ES200701786A patent/ES2313841B1/es not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-06-26 AU AU2008269686A patent/AU2008269686B8/en not_active Ceased
- 2008-06-26 RU RU2010102090/15A patent/RU2453337C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-06-26 BR BRPI0813222-4A2A patent/BRPI0813222A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2008-06-26 ES ES08787634T patent/ES2390391T3/es active Active
- 2008-06-26 CA CA 2692986 patent/CA2692986A1/en not_active Abandoned
- 2008-06-26 WO PCT/ES2008/000453 patent/WO2009000957A1/es active Application Filing
- 2008-06-26 CN CN2008801045159A patent/CN101918441B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2008-06-26 EP EP08787634A patent/EP2174956B1/en active Active
- 2008-06-26 JP JP2010514020A patent/JP2010531341A/ja not_active Ceased
- 2008-06-26 US US12/452,280 patent/US8257701B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-06-26 DK DK08787634.8T patent/DK2174956T3/da active
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| LAPCHAK PAUL A et al."{}Metalloproteinase inhibition reduces thrombolytic (tissue plasminogen activator)-induced hemorrhage after thromboembolic stroke"{} Stroke, vol. 31, n$^{o}$ 12, páginas 3034-3040, 2000, todo el documento. * |
| LAPCHAK PAUL A et al."{}Reducing bleeding complications after thrombolytic therapy for stroke: Clinical potential of metalloproteinase inhibitors and spin trap agents"{}. CNS Drugs, vol. 15, n$^{o}$ 11, páginas 819-829, 2001, todo el documento. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2010531341A (ja) | 2010-09-24 |
| ES2390391T3 (es) | 2012-11-12 |
| DK2174956T3 (da) | 2012-10-01 |
| US20100135986A1 (en) | 2010-06-03 |
| WO2009000957A1 (es) | 2008-12-31 |
| CN101918441A (zh) | 2010-12-15 |
| AU2008269686B8 (en) | 2013-02-14 |
| AU2008269686B2 (en) | 2013-01-10 |
| CA2692986A1 (en) | 2008-12-31 |
| EP2174956B1 (en) | 2012-06-27 |
| BRPI0813222A2 (pt) | 2014-12-23 |
| RU2453337C2 (ru) | 2012-06-20 |
| US8257701B2 (en) | 2012-09-04 |
| RU2010102090A (ru) | 2011-08-10 |
| EP2174956A4 (en) | 2011-05-25 |
| CN101918441B (zh) | 2013-06-19 |
| ES2313841A1 (es) | 2009-03-01 |
| AU2008269686A1 (en) | 2008-12-31 |
| EP2174956A1 (en) | 2010-04-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2313841B1 (es) | Composiciones para tratamiento anti-fibrinolitico. | |
| ES2267131T3 (es) | Anticuerpos anticoagulantes humanizados contra el factor ix, para uso en el tratamiento de la trombosis. | |
| US20200129600A1 (en) | Combination therapy using a factor xii inhibitor and a c-1 inhibitor | |
| KR20160122169A (ko) | 혈장 칼리크레인 결합 단백질 및 유전성 혈관부종을 치료하는 데 있어서의 이의 용도 | |
| ES2689776T3 (es) | Compuestos para el uso para potenciar la coagulación | |
| US7935341B2 (en) | Antibodies to complementary peptides of thrombin or portions thereof | |
| EP1282444B1 (en) | Antithrombotic agents | |
| AU2000278584A1 (en) | Antithrombotic agents | |
| JP6971946B2 (ja) | 反応抑制的抗体による特異的プラスミン不活性化 | |
| ES2346189T3 (es) | Metodo y composicion farmaceutica para prevenir y/o tratar el sindrome de respuesta inflamatoria generalizada. | |
| KR100972943B1 (ko) | 혈액 응고 인자 ⅶ-활성화 프로테아제에 대한 억제모노클로날 항체 | |
| US20070190059A1 (en) | Antithrombotic agents | |
| WO2004041296A2 (en) | Pharmaceutical composition comprising a tissue factor antagonist and protein c polypeptides | |
| ES2434955T3 (es) | Uso de la metaloproteinasa de matriz-10 (mmp-10) para tratamientos trombolíticos | |
| Bachmann | Disorders of fibrinolysis and use of antifibrinolytic agents | |
| JP6826980B2 (ja) | 血栓症の予防法 | |
| Wu | Characterization of TAFI activation by the thrombin-thrombomodulin complex | |
| Charpie | Monoclonal antibodies specific for single-chain urokinase: applications in targeted thrombolysis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EC2A | Search report published |
Date of ref document: 20090301 Kind code of ref document: A1 |
|
| FG2A | Definitive protection |
Ref document number: 2313841B1 Country of ref document: ES |
|
| FD2A | Announcement of lapse in spain |
Effective date: 20180912 |