ES2308455T3 - Dispositivo de refrigeracion para muestras biologicas. - Google Patents

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ES2308455T3 ES05716364T ES05716364T ES2308455T3 ES 2308455 T3 ES2308455 T3 ES 2308455T3 ES 05716364 T ES05716364 T ES 05716364T ES 05716364 T ES05716364 T ES 05716364T ES 2308455 T3 ES2308455 T3 ES 2308455T3
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Uwe Schon
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Abstract

Dispositivo de refrigeración (1) para la refrigeración de un material refrigerado, en particular para el análisis, la manipulación y/o el procesado de muestras crioconservadas, con - una cámara de refrigeración (3) para el alojamiento del material refrigerado, - una pared interior (14) que limita la cámara de refrigeración (3), siendo la pared interior (14) permeable al agente refrigerante, - una pared exterior (15), - un intersticio formado entre la pared exterior (15) y la pared interior (14), así como - un conducto de alimentación (11, 13) de agente refrigerante para la alimentación de un agente refrigerante, desembocando el conducto de alimentación (11, 13) de agente refrigerante en el intersticio formado por la pared interior (14) y la pared exterior (15) y alimentando éste el agente refrigerante en el intersticio, caracterizado porque - en el intersticio está dispuesto un material amortiguador (16) que aloja temporalmente el agente refrigerante alimentado en el intersticio y lo libera de modo continuo a la cámara de refrigeración (3) a través de la pared interior (14) y - el material amortiguador (16) es poroso.

Description

Dispositivo de refrigeración para muestras biológicas.
La invención se refiere a un dispositivo de refrigeración para muestras biológicas, especialmente para el análisis, la manipulación y el procesado de muestras crioconservadas, de acuerdo con el preámbulo de la reivindicación 1.
En los campos de la biología, la farmacología, la medicina y la biotecnología es conocido la congelación de muestras de material biológico a las temperaturas de nitrógeno líquido de manera que se conserve la vitalidad del material de muestra. Las muestras de este tipo también se denominan muestras crioconservadas, realizándose el almacenamiento conservador de la vitalidad de estas muestras crioconservadas en los denominados tanques criogénicos en los que se encuentra nitrógeno líquido. Para la manipulación, el procesado o el análisis de las muestras crioconservadas, éstas se extraen del tanque criogénico y se introducen en un dispositivo de refrigeración, que puede ser, por ejemplo, una cuba en cuyo fondo se encuentra nitrógeno líquido, denominado también lecho de nitrógeno, que se evapora lentamente de manera que la muestra crioconservada que se encuentra en la cuba sigue suficientemente refrigerada. Para evitar el desprendimiento de nitrógeno líquido al aire ambiental se puede colocar sobre la cuba una campana protectora transparente, pudiéndose encontrar en la pared de la campana protectora unos guantes a través de los cuales un operador puede manipular la muestra crioconservada que se encuentra en la cuba.
El inconveniente del dispositivo de refrigeración conocido antes descrito para la manipulación, el procesado o el análisis de muestras crioconservadas reside en la constancia y distribución insatisfactorias de la temperatura dentro de la cuba.
Otro inconveniente del dispositivo de refrigeración conocido reside en el hecho de que la campana protectora puede empañarse a causa del nitrógeno que se desprende del lecho de nitrógeno, lo que dificulta considerablemente el control visual.
Además, en el dispositivo de refrigeración conocido resulta imposible o muy difícil ajustar la temperatura dentro de la cuba mediante una modificación de la cantidad de nitrógeno líquido introducida en la misma.
Por la patente US 2003/066639 A1 se da a conocer un dispositivo de refrigeración con una cámara de refrigeración que presenta una pared exterior y una pared interior con una reja metálica, en el que para enfriar las muestras se alimenta nitrógeno líquido como medio refrigerante en el intersticio formado por la pared exterior y la pared interior. En esta solicitud de patente se da a conocer asimismo una extensa regulación de la temperatura, entre otras cosas con un dispositivo de calentamiento con ventiladores y pasos para la circulación de gas.
Por la patente EP 0301168 A se conoce asimismo un dispositivo de refrigeración con una pared exterior y una pared interior en el que el líquido refrigerante se alimenta en el intersticio de, por ejemplo, las paredes laterales y la pared interior es permeable al líquido refrigerante y a su vapor. Esta solicitud de patente da a conocer asimismo dispositivos de distribución para distribuir el líquido refrigerante homogéneamente en el referido intersticio.
Respecto al estado de la técnica también se remite a las patentes US 5601143 A, US 4680945 A y US 2003/140648 A1.
Sin embargo, ninguno de los documentos antes mencionados da a conocer la idea de usar entre la pared interior y la pared exterior del dispositivo de refrigeración un material amortiguador poroso para el alojamiento temporal del agente refrigerante, de modo que los dispositivos de refrigeración conocidos trabajan de manera insatisfactoria.
Por lo tanto, la invención tiene por objetivo el mejorar de manera correspondiente el dispositivo de refrigeración descrito al principio.
Otro objetivo puede consistir en mejorar la constancia de la temperatura en el dispositivo de refrigeración, permitir el ajuste de la temperatura, optimizar la distribución de la temperatura dentro del dispositivo de refrigeración, evitar el empañamiento de la campana protectora y minimizar la humedad en la cámara de refrigeración.
El objetivo antes mencionado se alcanza mediante un dispositivo de refrigeración de acuerdo con la reivindicación 1.
La invención se basa en el conocimiento técnico de que la insatisfactoria constancia y distribución de la temperatura dentro de la cuba de refrigeración del dispositivo de refrigeración conocido es causada porque el nitrógeno desprendido del lecho de nitrógeno se expande de manera no definida por el dispositivo de refrigeración de modo que la temperatura de trabajo deseada resulta difícil de alcanzar y prácticamente no se puede regular. El desprendimiento incontrolado de nitrógeno del lecho de nitrógeno conduce además al empañamiento de la campana protectora superpuesta.
La enseñanza técnica general que comprende la invención consiste, pues, en evitar la presencia de un lecho de nitrógeno en el dispositivo de refrigeración y alimentar en su lugar nitrógeno gaseoso de manera controlada en la cámara de refrigeración.
El dispositivo de refrigeración de acuerdo con la invención presenta así, para el alojamiento del material refrigerante, una cámara de refrigeración limitada por una pared interior y una pared exterior en la que entre la pared interior y la pared exterior se encuentra un intersticio en el que desemboca un conducto de alimentación de agente refrigerante. Por lo tanto, el agente refrigerante (por ejemplo nitrógeno líquido) no se introduce directamente en la cámara de refrigeración sino en el intersticio situado entre la pared interior y la pared exterior de la cámara de refrigeración, siendo la pared interior permeable al agente refrigerante de manera que el agente refrigerante pasa desde el intersticio situado entre la pared exterior y la pared interior a la cámara de refrigeración a través de la pared interior.
De acuerdo con la invención está dispuesto en el intersticio formado por la pared interior y la pared exterior de la cámara de refrigeración un material amortiguador que aloja temporalmente el agente refrigerante alimentado en el intersticio y lo libera de forma continua a través de la pared interior a la cámara de refrigeración.
El material amortiguador es poroso para, por ejemplo, poder almacenar temporalmente nitrógeno líquido.
Al contrario que la pared interior de la cámara de refrigeración, la pared exterior de la cámara de refrigeración es preferentemente impermeable al agente refrigerante para evitar que el agente refrigerante salga al exterior, al entorno. Además, la pared exterior es con preferencia térmicamente aislante para evitar que el entorno se enfríe y/o el dispositivo de refrigeración se caliente.
Por el contrario, la pared interior de la cámara de refrigeración preferentemente consta de un material térmicamente conductor, como, por ejemplo, un metal, para mejorar la transferencia de calor desde la cámara de refrigeración interior al agente refrigerante que se encuentra en el intersticio. Asimismo resulta ventajoso que el material de la pared interior no sólo presente una buena conductividad térmica sino también una elevada capacidad térmica específica, de manera que la pared interior, con su capacidad térmica, contrarreste como amortiguador térmico las oscilaciones de temperatura no deseadas.
En un ejemplo de realización preferido de la invención, la pared interior presenta esencialmente modo de rejilla de manera que el agente refrigerante que se encuentra en el intersticio se puede difundir casi libremente hacia la cámara de refrigeración.
En un ejemplo de realización preferido de la invención, la cámara de refrigeración tiene forma de cuba y presenta, en su parte superior, un borde circunferencial, presentando el conducto de alimentación del agente refrigerante preferentemente un distribuidor de agente refrigerante que se extiende a lo largo del borde circunferencial de la cámara de refrigeración y alimenta el agente refrigerante, distribuido a lo largo de su longitud, en el intersticio formado por la pared interior y la pared exterior de la cámara de refrigeración. El agente refrigerante se alimenta, pues, homogéneamente en el intersticio formado por la pared interior y la pared exterior de la cámara de refrigeración, lo que conduce ventajosamente a una distribución homogénea de la temperatura en la cámara de refrigeración puesto que la cámara de refrigeración se refrigera homogéneamente desde todos los lados.
En el marco de la invención existe además la posibilidad de disponer en la cámara de refrigeración un elemento calentador para calentar la cámara de refrigeración o para descongelar el material refrigerado que se encuentra en la cámara de refrigeración. Este elemento calentador preferentemente está dispuesto debajo o dentro de una placa calentadora, presentando dicha placa calentadora preferentemente varios pasos que permiten la circulación de gas.
Al igual que en el dispositivo de refrigeración conocido descrito al principio, existe también en el dispositivo de refrigeración de acuerdo con la invención la posibilidad de colocar sobre la cámara de refrigeración una campana protectora desmontable para evitar la entrada de humedad en la cámara de refrigeración. Esta campana protectora, de preferencia, es al menos parcialmente transparente para permitir el control visual del material refrigerado que se encuentra en la cámara de refrigeración.
En un ejemplo de realización preferido de la invención, la campana protectora presenta una esclusa para muestras a través de la cual el material refrigerado se introduce en la cámara de refrigeración o se extrae de la cámara de refrigeración, impidiendo la esclusa para muestras prácticamente por completo un intercambio de calor con el entorno.
En la parte inferior de la campana protectora y/o en la parte superior de la cámara de refrigeración también puede estar dispuesta una salida de gas frío a través de la cual puede escaparse el agente refrigerante o a gas frío de la cámara de refrigeración. Esta salida de gas frío provoca un elevado gradiente de temperatura a la altura de la salida de gas frío, siendo la temperatura por encima de la salida de gas frío bastante más elevada que por debajo de la salida de gas frío. De este modo se evita ventajosamente que la campana protectora se empañe.
En el marco de la invención se realiza preferentemente una regulación de la temperatura en la cámara de refrigeración. Para ello, el dispositivo de refrigeración de acuerdo con la invención presenta preferentemente un sensor de temperatura dispuesto en la cámara de refrigeración para medir y/o regular la temperatura en la cámara de refrigeración. Como elemento regulador para ajustar la temperatura está prevista preferentemente una válvula controlable para el agente refrigerante que ajusta la cantidad de agente refrigerante introducido y/o la corriente de agente refrigerante. La regulación de la temperatura propiamente dicha se lleva a cabo después mediante un regulador de la temperatura que en la zona de entrada está conectado con el sensor de temperatura y en la zona de salida dirige la válvula de agente refrigerante en función del valor de temperatura teórico establecido.
El direccionamiento de la válvula de agente refrigerante mediante el regulador de la temperatura puede efectuarse, en este caso, a través de un generador de impulsos que abre y cierra alternativamente la válvula de agente refrigerante y en el que los tiempos de apertura y de cierre de la válvula de agente refrigerante son establecidos por el generador de impulsos y ajustados por el regulador de la temperatura. Por lo tanto, el suministro de agente refrigerante se realiza de una manera discontinua abriéndose y cerrándose alternativamente la válvula de agente refrigerante.
El sensor de temperatura para el registro de la temperatura en la cámara de refrigeración está dispuesto preferentemente en la posición de procesamiento de la cámara de refrigeración para medir y/o regular la temperatura de procesamiento óptima en la cámara de refrigeración.
El regulador de la temperatura preferentemente regula la temperatura en la cámara de refrigeración de tal manera que no se forme ningún lecho de agente refrigerante en el fondo de la cámara de refrigeración.
Asimismo cabe mencionar que en el caso del agente refrigerante se trata preferentemente de nitrógeno líquido, si bien la invención no está limitada al nitrógeno como agente refrigerante sino también puede realizarse con otros agentes refrigerantes líquidos o gaseosos que se puedan alimentar en el intersticio formado por la pared interior y la pared exterior de la cámara de refrigeración.
El dispositivo de refrigeración de acuerdo con la invención se puede usar a diferentes intervalos de temperatura, como, por ejemplo, a temperaturas de aproximadamente -150ºC, -130ºC, -80ºC, -40ºC, +4ºC o +37ºC, pudiendo comprender los intervalos de temperatura antes mencionados un margen de \pm10ºC, \pm5ºC o \pm2ºC. Resulta ventajosa una temperatura de 37ºC porque entonces está optimizada la temperatura de crecimiento de las células biológicas. En cambio, una temperatura de +4ºC ofrece la ventaja de que los procesos fisiológicos en las células están ralentizados. Cuando las células se manipulan a una temperatura inferior a 4ºC, se reduce el daño celular (por ejemplo con Tropsia y DMSO).
Finalmente, la invención no sólo comprende el dispositivo de refrigeración antes descrito como aparato sino también el uso de un dispositivo de refrigeración de este tipo para el análisis, el procesado y/o la manipulación de una muestra crioconservada.
Otras variantes ventajosas de la invención se caracterizan en las reivindicaciones secundarias o se explican con más detalle a continuación junto con la descripción del ejemplo de realización preferido de la invención y mediante las figuras. Muestran:
La figura 1 una vista en perspectiva de un ejemplo de realización preferido del dispositivo de refrigeración de acuerdo con la invención con una campana protectora superpuesta,
la figura 2 una vista en perspectiva de la campana protectora de la figura 1 en estado desmontado,
la figura 3 una vista de la sección transversal de la estructura de pared de la cámara de refrigeración del dispositivo de refrigeración de la figura 1,
la figura 4 una representación en perspectiva simplificada del suministro de agente refrigerante en el dispositivo de refrigeración de la figura 1, así como
la figura 5 un esquema equivalente de la técnica de regulación del dispositivo de refrigeración de la figura 1.
El ejemplo de realización de un dispositivo de refrigeración 1 de acuerdo con la invención representado en los dibujos sirve para el acondicionamiento térmico de una cámara de refrigeración utilizada para el alojamiento de muestras crioconservadas durante su análisis, manipulación y/o procesado.
Para ello, el dispositivo de refrigeración 1 presenta una cuba criogénica 2 con una cámara de refrigeración 3 en forma de cuba abierta por arriba, estando colocada sobre la cuba criogénica 2 una campana protectora 4 desmontable que impide la entrada de humedad del entorno en la cámara de refrigeración y que se representa en detalle en la figura 2.
Para la introducción de las muestras crioconservadas en la cámara de refrigeración 3 y para la extracción de las muestras crioconservadas de la cámara de refrigeración 3, la campana protectora 4 presenta una esclusa para muestras 5 montada en el lateral de la campana protectora 4, que evita prácticamente por completo el intercambio de calor con el entorno durante la introducción de las muestras crioconservadas o durante la extracción de las muestras crioconservadas y minimiza la humedad en la cámara de refrigeración 3.
La campana protectora 4 presenta asimismo, en su parte superior, una lámpara 6 para iluminar la cámara de refrigeración 3 y facilitar de este modo la manipulación de las muestras crioconservadas que se encuentran en la cámara de refrigeración 3.
La propia campana protectora 4 está fabricada, en este caso de un material transparente, lo que permite un fácil control visual por parte del operador.
En la parte anterior oblicua de dicha campana protectora 4 se encuentran dos guantes integrados 7, 8 convencionales a través de los cuales un operador puede manipular las muestras crioconservadas que se encuentran en la cámara de refrigeración 3 sin que se produzca un intercambio de gases.
En la parte posterior de la campana protectora 4 se encuentran, abajo, dos orificios 9 a través de los cuales puede salir gas frío de dicha campana protectora 4. Los dos orificios 9 tienen como consecuencia que a la altura de los dos orificios 9 se ajusta un elevado gradiente de temperatura puesto que por los dos orificios se escapa gas frío hacia el exterior. Por lo tanto, la atmósfera en la campana protectora 4 es bastante más caliente por encima de los orificios 9 que por debajo de los orificios 9, lo que contrarresta el empañamiento de las paredes interiores de la campana protectora 4.
En la parte superior de la cuba criogénica 2 también se encuentra, en la parte anterior, un panel de control e indicación 10 mediante el cual se puede señalar y ajustar la temperatura en la cámara de refrigeración.
La refrigeración de la cámara de refrigeración 3 se realiza, en este caso, mediante nitrógeno líquido que se introduce desde un tanque de nitrógeno (por ejemplo un recipiente Apollo) a través de un conducto de nitrógeno 11, en el que el conducto de nitrógeno 11 no desemboca directamente en la cámara de refrigeración 3 para evitar la formación de un lecho de nitrógeno en el fondo de la cámara de refrigeración 3. En lugar de ello el conducto de nitrógeno 11 desemboca en un conducto de alimentación 13 de agente refrigerante a través de una válvula 12 de agente refrigerante controlable eléctricamente, extendiéndose el conducto de alimentación 13 de agente refrigerante a lo largo del borde circunferencial de la cámara de refrigeración 3 en forma de cuba y distribuyendo éste el nitrógeno líquido a lo largo de su longitud.
La cámara de refrigeración 3 está limitada por una pared interior 14 metálica en forma de rejilla rodeada por una pared exterior 15, formando la pared interior 14 y la pared exterior 15 un intersticio en el que está dispuesto un material amortiguador 16. El conducto de alimentación 13 de agente refrigerante está dispuesto lateralmente entre la pared interior 14 y la pared exterior 15, encima del material amortiguador 16, y presenta orificios de salida dirigidos hacia abajo a través de los cuales se libera nitrógeno líquido desde el interior del conducto de alimentación 13 de agente refrigerante al material amortiguador 16. El material amortiguador 16 aloja el nitrógeno líquido y lo libera de forma continua a la cámara de refrigeración 3 a través de la pared interior 14 en forma de rejilla.
La válvula 12 de agente refrigerante trabaja, en este modo, de manera discontinua cerrándose o abriéndose la válvula 12 de agente refrigerante.
El direccionamiento de la válvula 12 de agente refrigerante se lleva a cabo mediante un generador de impulsos 17 en el que el tiempo de apertura T_{ABIERTO} y el tiempo de cierre T_{CERRADO} para la válvula 12 de agente refrigerante son establecidos por un regulador 18 para dosificar el agente refrigerante.
La regulación se lleva a cabo en función de la temperatura que reina en la cámara de refrigeración 3 y que se mide con un sensor de temperatura 19, estando dispuesto el sensor de temperatura 19 en la posición de procesamiento de la cámara de refrigeración 3.
El sensor de temperatura 19 mide así una temperatura T_{REAL} y la transmite a un sustractor 20 que como magnitud de entrada adicional recibe un valor teórico T_{TEÓRICO} para la temperatura de la cámara de refrigeración 3 y calcula la variación teórico/real \DeltaT.
El regulador 18 ajusta entonces el tiempo de apertura T_{ABIERTO} y el tiempo de cierre T_{CERRADO} para la válvula 12 de agente refrigerante de tal manera que en la cámara de refrigeración 3 reine la temperatura deseada (por ejemplo -130ºC) sin que en el fondo de la cámara de refrigeración 3 se forme un lecho de nitrógeno.
En el fondo de la cámara de refrigeración 3 está dispuesta además una placa calentadora 21 que permite calentar la muestra crioconservada y la cámara de refrigeración 3.
En la placa calentadora 21 están dispuestos múltiples pasos 22 continuos verticales que permiten la circulación del gas.
La invención no está limitada al ejemplo de realización antes descrito. Al contrario, son posibles numerosas variantes y modificaciones que igualmente se basan en la idea de la invención y, por lo tanto, se incluyen en el alcance de protección.
Lista de símbolos de referencia
1
Dispositivo de refrigeración
2
Cuba criogénica
3
Cámara de refrigeración
4
Campana protectora
5
Esclusa para muestras
6
Lámpara
7, 8
Guantes integrados
9
Orificios
10
Panel de control e indicación
11
Conducto de nitrógeno
12
Válvula de agente refrigerante
13
Conducto de alimentación de agente refrigerante
14
Pared interior
15
Pared exterior
16
Material amortiguador
17
Generador de impulsos
18
Regulador
19
Sensor de temperatura
20
Sustractor
21
Placa calentadora
22
Pasos
\vskip1.000000\baselineskip
Documentos indicados en la descripción
En la lista de documentos indicados por el solicitante se ha recogido exclusivamente para información del lector, y no es parte constituyente del documento de patente europeo. Ha sido recopilada con el mayor cuidado; sin embargo, la EPA no asume ninguna responsabilidad por posibles errores u omisiones.
Documentos de patente indicados en la descripción
\bullet US 2003066639 A1 [0006]
\bullet US 4680945 A [0008]
\bullet EP 0301168 A [0007]
\bullet US 2003140648 A1 [0008]
\bullet US 5601143 A [0008].

Claims (17)

  1. \global\parskip0.950000\baselineskip
    1. Dispositivo de refrigeración (1) para la refrigeración de un material refrigerado, en particular para el análisis, la manipulación y/o el procesado de muestras crioconservadas, con
    -
    una cámara de refrigeración (3) para el alojamiento del material refrigerado,
    -
    una pared interior (14) que limita la cámara de refrigeración (3), siendo la pared interior (14) permeable al agente refrigerante,
    -
    una pared exterior (15),
    -
    un intersticio formado entre la pared exterior (15) y la pared interior (14), así como
    -
    un conducto de alimentación (11, 13) de agente refrigerante para la alimentación de un agente refrigerante, desembocando el conducto de alimentación (11, 13) de agente refrigerante en el intersticio formado por la pared interior (14) y la pared exterior (15) y alimentando éste el agente refrigerante en el intersticio,
    caracterizado porque
    -
    en el intersticio está dispuesto un material amortiguador (16) que aloja temporalmente el agente refrigerante alimentado en el intersticio y lo libera de modo continuo a la cámara de refrigeración (3) a través de la pared interior (14) y
    -
    el material amortiguador (16) es poroso.
  2. 2. Dispositivo de refrigeración (1) según la reivindicación 1, caracterizado porque la pared interior (14) tiene esencialmente forma de rejilla.
  3. 3. Dispositivo de refrigeración (1) según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque la pared interior (14) está fabricada de un material térmicamente conductor.
  4. 4. Dispositivo de refrigeración (1) según la reivindicación 3, caracterizado porque la pared interior (14) está fabricada esencialmente de metal.
  5. 5. Dispositivo de refrigeración (1) según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque la cámara de refrigeración (3) tiene forma de cuba y presenta, en su parte superior, un borde circunferencial.
  6. 6. Dispositivo de refrigeración (1) según la reivindicación 5, caracterizado porque el conducto de alimentación (11, 13) de agente refrigerante presenta un distribuidor (13) de agente refrigerante el cual se extiende a lo largo del borde circunferencial de la cámara de refrigeración (3) y alimenta el agente refrigerante, distribuido a lo largo de su longitud, en el intersticio.
  7. 7. Dispositivo de refrigeración (1) según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque en la cámara de refrigeración (3) está dispuesto un elemento calentador (21).
  8. 8. Dispositivo de refrigeración (1) según la reivindicación 7, caracterizado porque el elemento calentador está dispuesto debajo de una placa calentadora (21), presentando la placa calentadora (21) varios pasos (22) que permiten una circulación de gas.
  9. 9. Dispositivo de refrigeración (1) según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque sobre la cámara de refrigeración (3) está colocada una campana protectora (4) desmontable.
  10. 10. Dispositivo de refrigeración (1) según la reivindicación 9, caracterizado porque la campana protectora (4) es al menos parcialmente transparente.
  11. 11. Dispositivo de refrigeración (1) según la reivindicación 9 ó 10, caracterizado porque la campana protectora (4) presenta una esclusa para muestras (5).
  12. 12. Dispositivo de refrigeración (1) según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque en la parte inferior de la campana protectora (4) y/o en la parte superior de la cámara de refrigeración (3) está dispuesta una salida de gas frío (9) a través de la cual puede escaparse el agente refrigerante y/o gas frío de la cámara de refrigeración (3).
  13. 13. Dispositivo de refrigeración (1) según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado por
    -
    un sensor de temperatura (19) dispuesto en la cámara de refrigeración (3) para la medición de la temperatura en la cámara de refrigeración (3),
    \global\parskip1.000000\baselineskip
    -
    una válvula (12) controlable del agente refrigerante para ajustar la cantidad de agente refrigerante introducido,
    -
    un regulador de la temperatura (18) para la regulación de la temperatura en la cámara de refrigeración (3), estando conectado el regulador de la temperatura (18) en la zona de entrada con el sensor de temperatura (19) y en la zona de salida con la válvula (12) del agente refrigerante.
  14. 14. Dispositivo de refrigeración (1) según la reivindicación 13, caracterizado porque el regulador de la temperatura (18) está conectado con la válvula (12) del agente refrigerante a través de un generador de impulsos (17), abriendo y cerrando el generador de impulsos (17) alternativamente la válvula (12) del agente refrigerante.
  15. 15. Dispositivo refrigerante (1) según la reivindicación 13 ó 14, caracterizado porque el sensor de temperatura (19) está dispuesto en una posición de procesado en la cámara de refrigeración (3).
  16. 16. Dispositivo de refrigeración (1) según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el agente refrigerante es nitrógeno líquido.
  17. 17. Uso del dispositivo de refrigeración (1) según una de las reivindicaciones precedentes para el análisis, el procesado y/o la manipulación de una muestra crioconservada.
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