ES2293689T3 - Sistema de suministro de cultivo iniciador lactico y uso del mismo. - Google Patents

Sistema de suministro de cultivo iniciador lactico y uso del mismo. Download PDF

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Abstract

Método de preparación de un producto lácteo en una planta lechera, el método incluyendo las etapas de (i) suministrar a la planta lechera un cultivo iniciador láctico microbiano como un concentrado de cultivo en un envase sellado (1) que está provisto de un medio de salida (2) para conectar el envase directamente a la línea de tratamiento de leche (6), (ii) combinar el cultivo iniciador microbiano con un medio acuoso para obtener una suspensión acuosa del cultivo iniciador microbiano, dicha combinación siendo precedida o sucedida por una fase comprendiendo la conexión del medio de salida del envase a la línea de tratamiento de leche. (iii) combinar dicha suspensión de cultivo iniciador con leche en la línea de tratamiento de leche (6), y (iv) opcionalmente mantener la leche inoculada de este modo bajo condiciones de fermentación del cultivo iniciador para obtener el producto lácteo.

Description

Sistema de suministro de cultivo iniciador láctico y uso del mismo.
Campo de invención
La presente invención se refiere al campo de la fabricación de productos lácteos usando cultivos iniciadores y provee un sistema seguro y conveniente para suministrar tales cultivos iniciadores directamente a la línea de tratamiento en la industria lechera.
Antecedentes técnicos y técnica anterior
Los microorganismos están implicados en la producción de la mayoría de los productos lácteos. Los cultivos bacterianos, en particular bacterias que son generalmente clasificadas como bacterias del ácido láctico son esenciales en la producción de productos lácteos fermentados, queso y mantequilla. Los cultivos de bacterias inocuas de este tipo son denominados iniciadores lácticos e imparten características específicas a varios productos lácteos mediante la realización de varias funciones.
Así, como un ejemplo, los cultivos iniciadores fermentan la lactosa a ácido láctico, y puesto que el tiempo de coagulación por enzimas de coagulación de leche disminuye con el aumento de la acidez de la leche, los cultivos iniciadores ayudan a la coagulación enzimática de la leche en la producción de queso.
Otro ejemplo es que el rápido desarrollo de ácido láctico en todo el proceso de producción provocado por los cultivos iniciadores restringe el crecimiento de microorganismos contaminantes. En la producción de queso, el cultivo iniciador promueve la exudación del lactosuero del cuajo. Las bacterias que producen ácido láctico también producen enzimas proteolíticas, que ayudan a la degradación de las proteínas del queso contribuyendo de manera importante a la maduración del queso. Adicionalmente, los cultivos bacterianos de ácido láctico fermentan la lactosa y el ácido cítrico en compuestos aromáticos, tales como el diacetilo y el acetaldheído que confiere un aroma y sabor deseado a los productos lácteos fermentados.
Los cultivos iniciadores lácticos comerciales están generalmente compuestos por bacterias del ácido láctico que producen ácido láctico y fermentan ácido cítrico. En el presente contexto, la expresión "bacteria de ácido láctico" designa un grupo de bacterias gram positivas microaerofílicas o anaeróbicas que fermentan el azúcar con la producción de ácidos incluyendo el ácido láctico como el ácido predominantemente producido, ácido acético, ácido fórmico y ácido propiónico. Las bacterias del ácido láctico industrialmente más útiles se encuentran entre la especie Lactococcus, especie Streptococcus, especie Lactobacillus, especie Leuconostoc, especie Pediococcus y especie Brevibacterium.
Las cepas para el cultivo iniciador láctico comúnmente usadas de bacterias del ácido láctico están generalmente divididas en organismos mesofílicos con una temperatura de crecimiento óptimo a aproximadamente 30ºC y organismos termofílicos que tienen una temperatura de crecimiento óptimo en la gama de aproximadamente 40 a aproximadamente 45ºC. Organismos típicos del grupo mesofílico incluyen Lactococcus lactis subesp. lactis, Lactococcus lactis subesp. cremoris, Leuconostoc cremoris, Lactobacillus delbrueckii subesp. bulgaricus, Lactococcus lactis subesp. lactis biovar. diacetilactis, Lactobacillus casei, Streptococcus durans y Streptococcus faecalis. Las especies bacterianas del ácido láctico termofílicas incluyen como ejemplos Streptococcus thermophilus, Lactobacillus lactis, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus bulgaricus y Lactobacillus acidophilus.
También las bacterias estrictas anaeróbicas pertenecientes al género de Bifidobacterium incluyendo Bifidobacterium bifidum y Bifidobacterium longum son comúnmente usadas como cultivos iniciadores lácticos y son generalmente incluidas en el grupo de bacterias del ácido láctico. Adicionalmente se usan especies de Propionibacterium como cultivos iniciadores lácticos, en particular en la producción de queso.
Otro grupo de cultivos iniciadores microbianos son cultivos fúngicos, incluyendo cultivos de levadura y cultivos de hongos filamentosos, que son particularmente usados en la producción de determinados tipos de queso. Ejemplos de cultivos habitualmente usados de hongos incluyen Penicillium roqueforti, Penicillium candidum, Geotrichum candidum, Torula kefir y Saccharomyces kefir.
Actualmente, los cultivos iniciadores comerciales son distribuidos como concentrados congelados en un medio de componentes lácteos, nutrientes y compuestos estimuladores del crecimiento. Bajo estas condiciones, la viabilidad de los cultivos se conserva durante largos períodos de tiempo, y después de la descongelación de los cultivos, éstos pueden ser inoculados directamente en la leche sin una transferencia intermedia. Los cultivos de este tipo son comúnmente denominados cultivos de adición directa (DVS del inglés direct vat set). FR 2 502 465 expone un proceso de preparación de un producto de leche fermentada donde se añade a la leche una suspensión acuosa de un cultivo iniciador que es preparado suspendiendo granulados congelados de cultivo en agua esterilizada. La introducción de los granulados congelados en agua se hace mientras se aplica una corriente de gas caliente en la abertura del embalaje del cultivo iniciador. Otra presentación de los cultivos iniciadores DVS comerciales es como cultivos deshidratados por congelación o liofilizados en forma de polvo. De esta forma, el iniciador puede ser transportado sin refrigeración, aunque se recomienda el almacenamiento bajo temperatura de congelación. Yang y Sandine (1979) describen procedimientos para preparar concentrados deshidratados por congelación estables durante su almacenamiento de bacterias iniciadoras estreptococas lácticas y se demuestra que seleccionando las condiciones de deshidratación por congelación y envasado apropiadas tales cultivos deshidratados por congelación pueden retener su actividad de producción de ácido incluso cuando son almacenados a temperatura ambiente.
Aunque los iniciadores lácticos comerciales están disponibles como cultivos que pueden ser añadidos directamente a la leche sin ninguna transferencia o propagación intermedia, no es insólito que las lecherías produzcan iniciadores indirectos propios a intervalos regulares dependiendo de la necesidad. Un iniciador indirecto es definido como un cultivo iniciador propagado en la planta lechera para su inoculación en la leche. Tales iniciadores indirectos son generalmente hechos inoculando leche tratada con calor con un volumen de un iniciador indirecto anterior o con una preparación de cultivo deshidratada por congelación o liofilizada seguido de la incubación de la leche así inoculada bajo condiciones que permiten que la(s) cepa(s) del cultivo iniciador se propaguen durante un periodo de tiempo suficiente para proporcionar un número de células deseado. El periodo de incubación se encuentra normalmente en el intervalo de 18 a 24 horas.
Un ejemplo de la preparación y uso de tal iniciador indirecto para la inoculación en línea se describe en Rasic, 1978, donde se describe la preparación de una suspensión de un cultivo iniciador en un medio acuoso, que permite que el cultivo iniciador se propague. Se describe otro ejemplo en DE 1 792 264 donde la leche para el queso es acidificada mediante un iniciador indirecto que es continuamente alimentado a la leche desde un contenedor separado.
Hay varios ejemplos en la técnica anterior de dispositivos mecánicos para el suministro de un cultivo iniciador a la línea de tratamiento. Lelieveld (1976) describe un ejemplo de un proceso de fermentación continua para la producción de yogur donde un cultivo iniciador es inicialmente alimentado al recipiente de fermentación desde un recipiente de inóculo. FR 2 301 004 expone un dispositivo para transferir asépticamente un cultivo iniciador líquido contenido en una caja/bote herméticamente cerrado a un recipiente de fermentación. EP 0 611 820 también expone un dispositivo mecánico adaptado para abrir un contenedor convencional para cultivo iniciador bajo condiciones asépticas con transferencia posterior del cultivo iniciador del contenedor abierto a la línea de tratamiento. WO 9 427 645 expone un cartucho o bolsa conteniendo un medio biológico usado en cultivos celulares tisulares, el medio estando en una forma estéril y en polvo. El cartucho o bolsa es suministrada al usuario final que reconstituye el medio bombeando agua estéril a través del cartucho o bolsa que está provista de un medio de salida para permitir la transferencia del medio así reconstituido a un recipiente esterilizado. FR 2 710 073 describe un método para transferir asépticamente bacterias en forma de polvo de un contenedor cerrado a un recipiente de rehidratación mediante una corriente de gas.
No obstante, estos métodos habitualmente usados de aplicar iniciadores lácticos implican varios problemas en las plantas lecheras modernas donde las líneas de proceso incluyen cisternas, recipientes, contenedores, tinas, centrífugas, equipamiento de tratamiento térmico, equipamiento de llenado y tuberías que conectan los elementos de la línea de tratamiento son sistemas esencialmente completamente cerrados. Cualquier fase del proceso que implique que el sistema cerrado sea abierto al entorno evidentemente implica un riesgo serio de contaminación de la línea de tratamiento con organismos indeseados tales como bacterias que deterioren la leche, por ej. especies de Bacillus o bacterias gram negativas o bacteriófagos que atacan los organismos del cultivo iniciador dando como resultado fallos en la fermentación.
Además del riesgo de contaminar la línea de tratamiento, el uso de iniciadores indirectos propagados en la lechería implica los problemas siguientes:
(i) la preparación del iniciador indirecto es muy ardua y ocupa mucho espacio y equipamiento, (ii) hay un riesgo considerable de contaminación con bacterias y/o fagos degradantes durante la fase de propagación y (iii) al pasar una población mezclada de bacterias de iniciador de un iniciador indirecto al siguiente, se producirá una selección de cepas en el tiempo con lo cual las características iniciales deseadas del cultivo se pueden deteriorar. Al igual que el uso de iniciadores indirectos, el uso de cultivos iniciadores DVS también implica un riesgo de contaminación e implica un alto grado de manipulación manual.
En la industria lechera hay una tendencia clara hacia la producción en aumento de unidades de producción mayores. Es en consecuencia evidente que los problemas mencionados arriba en relación con el uso actual de cultivos iniciadores han llegado a ser más prominentes y mayores.
Es en consecuencia un objetivo importante de la presente invención proveer un método mejorado para suministrar cultivos iniciadores lácticos a la línea de tratamiento cuyo método no sólo se adapte a la demanda en aumento de un control estricto de la contaminación de las líneas de tratamiento de leche cerradas, sino que también implique que los problemas mencionados arriba asociados con la propagación del iniciador indirecto a la planta pueda ser reducida o eliminada. Adicionalmente, el sistema de suministro del cultivo iniciador que se provee aquí implica un alto grado de conveniencia para el usuario.
Resumen de la invención
Por consiguiente, los objetivos principales de la invención son proveer un método por el cual la leche que es procesada en una línea de tratamiento de leche cerrada puede ser inoculada con el cultivo iniciador apropiado directamente en la línea de tratamiento, y un sistema de suministro del cultivo iniciador que es útil en tal método.
Así, en un primer aspecto, la invención se refiere a un método según la reivindicación 1.
Cuando una leche inoculada y fermentada es procesada adicionalmente en queso, se debe añadir una enzima de coagulación de la leche para proporcionar el cuajo. Es un objeto específico de la invención proveer un método de preparación de queso por el cual el envase sellado contenga la enzima de coagulación de leche además del cultivo iniciador.
Es, no obstante, concebible que un envase como se describe en este caso pueda contener la enzima de coagulación de leche sin un cultivo iniciador y que el proceso de preparación de un queso incluya el uso de envases separados según la invención conteniendo cultivo iniciador o enzima de coagulación de leche que es por este medio introducida en la línea de tratamiento separadamente, p. ej. con una diferencia de tiempo.
Es otro aspecto de la invención proveer sistemas de suministro según las reivindicaciones 19 y 22.
Descripción detallada de la invención
Es una característica esencial del método que está provisto aquí para preparar un producto lácteo que el cultivo iniciador usado para la inoculación de la leche sea suministrado a la planta lechera como un concentrado de cultivo tal como p. ej., un concentrado de cultivo congelado, deshidratado o líquido contenido en un envase sellado que está provisto de un medio de salida para conectar el envase directamente a la línea de tratamiento.
El método según la invención se basa en el descubrimiento sorprendente de que un cultivo iniciador en estado congelado, deshidratado o líquido, como se ha descrito anteriormente, pueden mantener su viabilidad y actividad de fermentación durante un periodo de tiempo considerable después de haber sido suspendido en un medio acuoso. El medio acuoso puede ser agua incluyendo agua corriente, agua destilada o agua desionizada, o puede ser cualquier medio acuoso que sea conveniente para suspender un cultivo iniciador láctico tal como leche, suspensiones de sólidos de leche, lactosuero o soluciones conteniendo una sal. El medio acuoso puede comprender además agentes tampones y/o nutrientes microbianos.
Así, en una forma de realización actualmente preferida el método según la invención comprende las fases de suministrar a la planta lechera un cultivo iniciador microbiano como un concentrado de cultivo como se ha mencionado anteriormente en un envase sellado que está provisto de un medio de salida para conectar el envase a un contenedor de suspensión. El contenedor de suspensión está provisto de medios para enganchar el envase al contenedor de suspensión y medios de salida para conectar el contenedor de suspensión a otras unidades de la línea de tratamiento. La introducción del cultivo iniciador en el contenedor de suspensión se hace conectando, bajo condiciones esencialmente asépticas, el medio de salida del envase al medio de enganche del contenedor de suspensión, y combinando el cultivo iniciador introducido con un medio acuoso para obtener una suspensión estable del cultivo en el contenedor de suspensión, dicha suspensión de cultivo iniciador siendo estable respecto a la viabilidad y actividad metabólica durante 24 horas o más tiempo. Posteriormente, la suspensión de cultivo iniciador estable es introducida en la línea de tratamiento, bajo condiciones esencialmente asépticas, a través de la conexión entre el medio de salida del contenedor de suspensión y una o más unidades de la línea de tratamiento, por lo cual la suspensión de cultivo iniciador es combinada con la leche.
Se entenderá que el contenedor de suspensión usado en el método arriba, si se desea, puede ser provisto de medios adicionales tales como medios de entrada de aire (admisión de aire), medios de agitación, medios de entrada de agua, medios de enfriamiento, medios para suspender el contenido sellado, medios para controlar la temperatura, medios para aplicar un gas, tal como una atmósfera modificada, y medios para medir el pH. El tamaño del contenedor de suspensión depende entre otras cosas de la escala de producción de la planta lechera. Así, en una forma de realización específica, el contenedor de suspensión tiene un contenido cúbico de al menos 100 litros, p. ej. al menos 500 litros incluso al menos 1000 litros.
Como se ha mencionado anteriormente, el concentrado de cultivo iniciador es combinado con el medio acuoso en el contenedor de suspensión. Adicionalmente, al menos otra sustancia tal como p. ej. una enzima de coagulación de leche, un nutriente bacteriano, un agente estabilizante de la enzima de coagulación de leche, un agente neutralizante del cloro, un agente aromatizante, un agente colorante, un espesante de leche fermentada y un agente estabilizante de leche fermentada puede ser añadido al contenedor de suspensión.
En una forma de realización útil del método según la invención, el envase sellado conteniendo el concentrado de cultivo iniciador como se ha mencionado anteriormente está provisto de un medio de entrada y un medio de salida para conectar el envase a la línea de tratamiento. El medio de entrada sirve para permitir la introducción de un medio acuoso en el envase que contiene el concentrado de cultivo iniciador, sin el riesgo de contaminar el cultivo iniciador, para obtener una suspensión estable acuosa del cultivo en el envase. Cuando se ha obtenido una suspensión estable del cultivo iniciador en el envase, la suspensión estable es introducida en la línea de tratamiento de leche que contiene leche. Esta introducción del cultivo iniciador suspendido, que produce la inoculación de la materia prima de leche, es realizada mediante la conexión, bajo condiciones esencialmente asépticas, del medio de salida del envase a una o más unidades de la línea de tratamiento, por lo cual la suspensión de cultivo iniciador es combinada con la leche.
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Los medios de conexión pueden estar provistos por sí mismos de accesorios que pueden ser directamente fijados a partes de conexión correspondientes en o sobre la línea de tratamiento o la conexión puede ser establecida a través de una tubería adecuada, tal como p. ej. una tubería provista de un sistema de encaje rápido, o conducto. Para asegurar la conexión aséptica del envase se puede tomar cualquier medida conocida cautelosa tal como la esterilización del medio de conexión por calor o agentes biocidas químicos incluyendo un alcohol.
Como ya se mencionó antes, se puede usar agua corriente común para suministrar la suspensión del cultivo iniciador en el envase o en el contenedor de suspensión mencionado arriba. Para ello, el medio de entrada del envase y/o el medio de entrada de agua del contenedor de suspensión puede ser provisto de un medio de filtración que es preferiblemente provisto de un elemento de filtro de membrana que tiene un tamaño de poro que impide al menos que pase las bacterias, p. ej. un tamaño de poro de 0,45 \muM o menos tal como 0,20 \muM. Adicionalmente, el medio de filtración puede estar provisto de medios de filtración previos colocados delante del filtro estéril para retener materia granulosa tales como las partículas minerales que hay en el agua corriente o puede contener un agente que neutralice o absorba el cloro y otros agentes biocidas activos que pueda haber en los sistemas de agua. En formas de realización adecuadas, el medio de filtración también está provisto de medios para conectar el medio de filtración a la salida del medio acuoso tal como un grifo de agua.
En muchos países se añaden agentes biocidas tales como el cloro a la red de aguas pública. Como se sabe en la industria lechera, incluso trazas de agentes de este tipo pueden inhibir la actividad de los cultivos iniciadores o incluso tener un efecto destructor en los cultivos. Para prevenir efectos de este tipo, el medio de filtración puede estar provisto de sustancias que pueden neutralizar tales agentes biocidas. Como un ejemplo, se puede incorporar tiosulfato de sodio que neutraliza el cloro, o carbono.
Como se ha mencionado anteriormente, cuando el concentrado de cultivo iniciador es combinado con el medio acuoso, se obtiene una suspensión de cultivo iniciador. Cuando el concentrado de cultivo es combinado con el medio acuoso en el envase sellado puede ser necesario sacudir o agitar el envase llenado para hacer que los organismos de cultivo se suspendan homogéneamente. Opcionalmente, el envase tal como se suministra puede contener partículas sólidas insolubles p. ej. de polímeros, vidrio o metal para facilitar la suspensión del cultivo. Asimismo se pueden usar medios para agitar o cualquier otro método conocido para obtener una distribución homogénea del cultivo en el contenedor de suspensión indicado arriba.
Si el envase contiene partículas sólidas como se ha mencionado anteriormente, el medio de conexión del embalaje puede ser provisto de manera adecuada de medios para retener tales partículas o se pueden incorporar medios de este tipo a la línea de tratamiento.
La introducción de la suspensión de cultivo iniciador en la línea de tratamiento puede ocurrir por gravedad o se puede realizar la introducción mediante medios de bombeo.
Después de la introducción del cultivo iniciador en la materia prima de leche, la leche inoculada puede ser procesada adicionalmente para obtener un producto lácteo final tal como queso, yogur, mantequilla, leche dulce inoculada o un producto lácteo líquido fermentado, tal como p. ej. suero de leche o yogur para beber. Tales etapas de tratamiento adicionales son realizadas por etapas de tratamiento convencionales.
Así, en la fabricación de productos lácteos fermentados la leche inoculada es mantenida bajo condiciones de fermentación del cultivo iniciador para obtener el producto lácteo fermentado. Estas condiciones incluyen el establecimiento de una temperatura que sea conveniente para las cepas de cultivo iniciador particulares. Así, cuando el cultivo iniciador comprende bacterias mesofílicas lácticas, la temperatura es aproximadamente 30ºC y si el cultivo comprende cepas bacterianas de ácido láctico termofílicas, la temperatura es mantenida en el rango de 35 a 50ºC tal como 40 a 45ºC.
También se incluye en el objeto de la invención proveer un método para producir productos lácteos los cuales contienen bacterias de ácido láctico pero no son sometidos a condiciones de fermentación después de añadir el cultivo iniciador. Un ejemplo típico de tal producto lácteo "dulce" inoculado con un cultivo iniciador es "leche acidófila dulce", a la que se le llama también comúnmente producto probióticamente activo.
En una forma de realización ventajosa y muy conveniente, el envase sellado es hecho de un material flexible como se describe con detalle a continuación. El uso de un material flexible implica que el envase, después de ser cargado con el cultivo iniciador, puede ser evacuado antes de ser sellado herméticamente al aire por lo cual el embalaje se llenará lo menos posible. Evidentemente, esto facilita la distribución y reduce la necesidad de espacio de almacenamiento significativamente. El envase también puede ser llenado con un gas no atmosférico antes de ser sellado. Se entenderá que la expresión "gas no atmosférico" se refiere a un gas inerte o a una atmósfera modificada tal como p. ej. N_{2}
y CO_{2}.
El tamaño del embalaje dependerá entre otras cosas de la escala de producción de la planta lechera. Como se explica a continuación, una característica altamente ventajosa de la invención es que el sistema de suministro del cultivo iniciador puede ser adaptado para adaptarse a las necesidades particulares de los usuarios individuales. Esto se aplica tanto a la cantidad y composición del cultivo iniciador, el tipo y cantidad de componentes adicionales activos y aditivos y el contenido cúbico del envase. Así, en una forma de realización específica, el envase tiene un contenido cúbico de al menos 10 litros, p. ej. al menos 20 litros tal como al menos 100, p. ej. al menos 250 litros incluso al menos 500 litros, p. ej. al menos 750 litros o al menos 1000 litros.
Conforme a la invención se puede utilizar cualquier organismo de cultivo iniciador que se use en la industria lechera. Así, el cultivo iniciador puede ser seleccionado de una bacteria de ácido láctico, una especie Bifidobacterium, una especie Propionibacterium o una especie fúngica tal como una especie Torula y una especie Saccharomyces. Los cultivos adecuados del grupo bacteriano del ácido láctico incluyen cepas comúnmente usadas de una especie Lactococcus, una especie Streptococcus, una especie Lactobacillus incluyendo una especie Lactobacillus acidophilus y una especie Leuconostoc. Las especies Lactococcus incluyen la muy usada Lactococcus lactis, incluyendo Lactococcus lactis subesp. lactis y Lactococcus lactis subesp. cremoris que es comúnmente usado en la producción de quesos con una textura cerrada, p. ej. Cheddar, Feta y requesón.
Como es usual en la industria lechera, el cultivo iniciador puede comprender una mezcla de cepas incluyendo una mezcla de cepas de diferentes especies bacterianas del ácido láctico , tales como el p. ej. una mezcla de Streptococcus thermophilus y Lactobacillus delbrueckii subesp. bulgaricus.
La selección específica de cepas en el cultivo iniciador dependerá del tipo particular de producto lácteo fermentado que se debe fabricar. Así, para la fabricación de queso y mantequilla, se utilizan mucho los cultivos mesofílicos de Streptococcus, Leuconostoc y Lactobacillus, mientras que para yogur y otros productos lácteos fermentados se utilizan cepas termofílicas de la especie Streptococcus y de la especie Lactobacillus.
En la producción de queso, se añade a la leche una enzima de coagulación de leche o un cuajo para proporcionar un producto cuajado que es luego separado del lactosuero. Las enzimas de coagulación de leche de este tipo pueden provenir de diferentes fuentes. El producto de cuajo tradicional es cuajo que es extraído de tejido del estómago de bovinos y otros animales, en particular de estómagos de ternero. Actualmente, la enzima de coagulación de leche más activa que se encuentra en los tejidos del estómago, la quimosina, también está siendo producida por microorganismos recombinantes. Además, las enzimas de coagulación de leche comerciales incluyen los denominados coagulantes microbianos que son enzimas proteolíticas producidas naturalmente por p. ej. especies de Bacillus y hongos filamentosos.
Generalmente, las enzimas de coagulación de la leche son más activas a niveles de pH ácido y en consecuencia la leche para queso es convencionalmente acidificada añadiendo cultivos iniciadores bacterianos del ácido láctico tras lo cual se añade la enzima de coagulación de leche.
Se acaba de descubrir que es posible añadir el cultivo iniciador y la preparación enzimática de coagulación de leche simultáneamente a la leche para queso y obtener un proceso satisfactorio de fabricación de queso incluyendo una producción de queso que es comparable con aquel obtenido con el proceso convencional. También se descubrió que los cultivos iniciadores de queso pueden retener viabilidad y actividad metabólica en una fase acuosa conteniendo una enzima de coagulación de leche. Estas conclusiones inesperadas han hecho posible proveer un método según la invención donde el concentrado de cultivo iniciador es provisto en el envase sellado en combinación con una enzima de coagulación de leche como se ha mencionado anteriormente.
Es una característica ventajosa del método según la invención el hecho de que una suspensión/solución del cultivo iniciador y/o la enzima de coagulación de leche, que es preparada según la presente invención, es estable respecto a la viabilidad y actividad metabólica durante un largo periodo de tiempo, tal como hasta e incluso 24 horas o más tiempo tal como hasta e incluso 48 horas o hasta e incluso 72 horas o más tiempo. Evidentemente, esta característica implica que el método es muy flexible porque se pueden preparar simultáneamente varias suspensiones de cultivo iniciador para usarlo más de 1-3 o más días y ser usadas cuando se necesite.
La temperatura preferida en la que la suspensión de cultivo iniciador es mantenida es como máximo a 20ºC, p. ej. como máximo 15ºC, tal como máximo a 12ºC incluyendo como máximo 10ºC, p. ej. como máximo a 8ºC, tal como máximo 6ºC incluso como máximo 2ºC, tal como máximo -0.5ºC.
El concentrado de cultivo iniciador también puede ser combinado con componentes adicionales los cuales ayudan a la actividad de fermentación del cultivo iniciador y/o la enzima de coagulación de leche tal como p. ej. nutrientes bacterianos incluyendo fuentes de carbono, fuentes de nitrógeno, vitaminas y micronutrientes, agentes estabilizantes de enzimas de coagulación de leche y un agente neutralizante del cloro. Los agentes estabilizantes de las enzimas de coagulación de leche adecuados incluyen sustancias que protegen las enzimas de sustancias oxidantes tales como el cloro que puede estar presente en el suministro de agua o que son usados como agentes desinfectantes en procedimientos de limpieza de la línea de tratamiento. Ejemplos de agentes estabilizantes de este tipo incluyen aminoácidos tales como metionina, péptidos, proteínas y ácido ascórbico.
Adicionalmente, es posible añadir aditivos de producto lácteo al envase conteniendo el cultivo iniciador tal como p. ej. un agente aromatizante, un agente colorante, un espesante de leche fermentada y un agente estabilizante de leche fermentada.
En otro aspecto, la invención se refiere a un sistema de suministro que es útil en el método indicado arriba y que está diseñado para la inoculación de un cultivo iniciador láctico en la línea de tratamiento de leche. Aunque se suele preferir usar el sistema para introducir un cultivo iniciador en una línea de tratamiento cerrada, es evidente que el diseño del sistema de suministro permite usarlo también en otros sistemas de proceso convencionales como sistemas discontinuos no cerrados.
El sistema comprende, en el modo descrito anteriormente, un envase sellado que es suministrado a la planta lechera, dicho envase es hecho de un material flexible, dicho envase conteniendo un concentrado de un cultivo iniciador y/o una enzima de coagulación de leche. El envase está provisto de un medio de salida para conectarlo a la línea de tratamiento de leche, dicho medio de salida permitiendo la conexión del envase a la línea de tratamiento de leche para obtener el suministro del cultivo iniciador a la línea de tratamiento.
En una forma de realización específica el envase sellado es provisto además de un medio de entrada que permite que un medio acuoso sea introducido sustancialmente de forma aséptica en el envase.
El envase que funciona como un envase para el cultivo iniciador puede ser de cualquier diseño, configuración o forma y puede ser hecho de cualquier material que sea compatible con el uso como recipiente de cultivos iniciadores lácticos, es decir el material no debe tóxico para los organismos del cultivo y debe ser de un tipo y calidad apropiado para uso alimentario. Los recipientes o contenedores de suspensión hechos de un material no flexible puede tener cualquier forma adecuada tal como p. ej. la forma de una botella, un cilindro, un tambor, un barril, una caja o una jarra, en cualquier caso provisto de un elemento de cierre tal como una tapa o un tapón.
Aunque es concebible que se puedan utilizar materiales no flexibles tales como p. ej. cartón revestido con un polímero y/o una lámina metálica, materiales no flexibles poliméricos, vidrio y metales, se suele preferir que el envase sellado sea hecho de un material flexible, puesto que, como se ha descrito anteriormente, esto facilita que el embalaje pueda encogerse al aplicar vacío después de llenar el envase con cultivo iniciador.
En formas de realización preferidas el envase es diseñado como una bolsa con una abertura para cargar con cultivo iniciador, que está delimitada por partes precintables, y medios que permiten que el envase sea suspendido. Además, el envase sellado puede estar provisto de un medio de salida roscado para permitir la conexión roscada del envase a la línea de tratamiento o cualquier otra conexión que proporcione una introducción sustancialmente aséptica de la suspensión de cultivo iniciador en la línea de tratamiento. La conexión roscada puede ser adicionalmente protegida de cualquier daño durante el transporte con un tapón roscado que es retirado antes de la conexión del envase a la línea de tratamiento. En una forma de realización específica, el medio de salida del envase comprende una o más capas de una lámina metálica, tal como una hoja de aluminio, para evitar que entre aire atmosférico en el envase sellado. Además, el envase puede comprender un clip o cualquier otro medio para separar el concentrado de cultivo iniciador en el envase del medio de salida.
Cuando es cargado con el cultivo iniciador, el envase es sellado para evitar que el aire entre en él. El modo de sellado dependerá del material. Así, cuando el material es un material termoplástico, el sellado es convenientemente proporcionado aplicando calor a las partes del material que forman la abertura mientras se comprimen las partes opuestas. Otras formas de sellado incluyen el uso de adhesivos.
Tal envase flexible cuando sea cargado, evacuado y sellado tendrá normalmente la apariencia de una "bolsa plana". Así, en una forma de realización específica, el envase es llenado con gas atmosférico después de la evacuación.
El material flexible puede comprender una o más capas de un material polimérico que sea compatible con el uso en un método de producción de alimentos y los polímeros de este tipo pueden ser seleccionados de una poliolefina, una olefina sustituida, un copolímero de etileno, un poliéster, un policarbonato, una poliamida, un acrilonitrilo y un derivado de celulosa, o una mezcla de éstos. En formas de realización útiles el material puede ser hecho de al menos dos estratos de polímeros tales como al menos tres estratos.
Adicionalmente, el material de envase flexible puede comprender una lámina metálica o al menos un estrato de papel, opcionalmente en combinación con una o más capas de polímero en forma de materiales compuestos.
En la tabla abajo se da un ejemplo de la composición del material de envase flexible comprendiendo tres estratos de un material polimérico y un estrato de una hoja de aluminio.
1
El diseño general y la función de los distintos elementos del envase y peculiaridades con respecto al cultivo iniciador y otro componente que puede ser incluido en el envase ha sido anteriormente descrito. También se ha mencionado que el contenido cúbico del envase puede ser elegido para cumplir los requisitos del usuario final particular.
El cumplimiento de tales requisitos específicos puede incluir que la capacidad de contención del medio acuoso del envase sea seleccionado de tal modo que provea una cantidad de cultivo iniciador y/o enzima de coagulación de leche que es requerida para la producción de un lote de producto lácteo o una pluralidad de lotes.
Es así una característica significante del sistema de suministro según la invención el hecho de que éste provee la posibilidad de suministrar envases "personalizados" o hechos a medida de cultivo iniciador y/o enzima de coagulación de leche, no sólo respecto a las cantidades de componentes activos sino también respecto a la selección de cepas del cultivo iniciador y la composición de cultivos iniciadores de múltiples cepas.
De la descripción anterior del uso del sistema de suministro en el método según la invención se deduce que una ventaja importante asociada con el sistema de suministro es el hecho de que hace posible inocular la leche en una línea de tratamiento de leche cerrada con el cultivo iniciador sin abrir el sistema cerrado al entorno.
La cantidad del cultivo iniciador que es envasado en el sistema según la invención depende de la concentración de células viables (cfu/g de cultivo) y el grado de dilución que se desee. Normalmente, la cantidad de cultivo será una cantidad que, cuando el envase sea llenado completamente con el medio acuoso, se obtenga una proporción de cultivo en el rango de 1 a 50% (p/v), tal como un rango de 1 a 33,3% incluyendo el rango de 1 a 25%, p. ej. 1 a 10%.
La invención es ilustrada con más detalle en los siguientes ejemplos y dibujos donde:
La Fig. 1 ilustra un envase (1) comprendiendo un medio de salida (2) roscado para permitir la conexión roscada. El medio de salida es sellado con una lámina metálica (3) y protegida con un tapón roscado (4).
La Fig. 2 ilustra un envase (1) comprendiendo un medio de salida (2) roscado para permitir la conexión roscada y está provisto de un clip (5) para separar el cultivo iniciador del medio de salida (2). El medio de salida está sellado con una lámina metálica (3) y protegido con un tapón roscado (4).
La Fig. 3 ilustra la conexión entre el envase (1) y la línea de tratamiento (6). El medio de salida (2) del envase es acoplado a una tubería (7) conectada al medio de entrada (8) de la línea de tratamiento (6).
La Fig. 4 ilustra la conexión entre el envase (1) y la línea de tratamiento (6). El medio de salida (2) del envase es acoplado a un extremo de una tubería (7). El otro extremo de la tubería está provista de un sistema de acoplamiento de encaje rápido (9) y la tubería es conectada al medio de entrada (8) de la línea de tratamiento (6).
La Fig. 5 ilustra la aplicación del sistema de suministro en una planta lechera donde un envase (1) es conectado a un contenedor de suspensión (10) provisto de un agitador (12) y conectado a tanques de inoculación (13). La introducción de la solución de cultivo iniciador desde el contenedor de suspensión (10) se hace mediante un medio de bombeo (14) y se controla mediante un transmisor de flujo (15).
Ejemplo 1 Estabilidad de cultivos iniciadores en suspensiones acuosas conteniendo una enzima de coagulación de leche
El objetivo del experimento era probar la estabilidad de los cultivos iniciadores bacterianos del ácido láctico mesofílicos y termofílicos comerciales en una suspensión acuosa conteniendo una enzima de coagulación de leche.
1.1 Materiales y métodos. Cultivos de prueba
(i)
Cultivo DVS congelado, cultivo LD CH-N 11^{TM} (Chr. Hansen A/S, H\diameterrsholm, Dinamarca);
(ii)
Cultivo DVS congelado, cultivo O R-604^{TM} (Chr. Hansen A/S, H\diameterrsholm, Dinamarca);
(iii)
Cultivo DVS congelado, S. thermophilus TH-4^{TM} (Chr. Hansen, H\diameterrsholm, Dinamarca).
El cultivo CH-N 11 es un cultivo de múltiples cepas mezcladas conteniendo Lactococcus lactis subesp. cremoris, Lactococcus lactis subesp. lactis, Leuconostoc mesenteroides subesp. cremoris y Lactococcus lactis subesp. diacetilactis. El cultivo produce aroma y CO_{2}. La concentración de células es al menos 1 x 10^{10} cfu/g.
El cultivo tiene una actividad indicada en términos de acidificación de una suspensión de leche desnatada acuosa con un contenido de sustancia en seco del 9,5% en peso con un índice de inoculación del 0,01% en peso e incubación a 30ºC durante 6 horas, que es pH 5,00 a 5,50 y se usa en la producción de leche fermentada, mantequilla y variedades de queso con agujeros tales como Gouda y Edam.
El cultivo R-604 es un cultivo de cepa definida con resistencia mejorada a los bacteriófagos. El cultivo contiene Lactococcus lactis subesp. cremoris y Lactococcus lactis subesp. lactis y no produce CO_{2}. La concentración de células es al menos 1 x 10^{10} cfu/g y la actividad de acidificación del cultivo en las condiciones indicadas arriba es 4,95 a
5,40.
Este cultivo se usa principalmente en la producción de quesos con una textura cerrada, p. ej. Cheddar, Feta y requesón. El cultivo puede ser usado en otro producto lácteo fermentado, normalmente en combinación con otros cultivos bacterianos de ácido láctico.
El cultivo TH-4 es un cultivo de cepa definida con resistencia mejorada a los bacteriófagos. El cultivo contiene Streptococcus thermophilus. El cultivo es principalmente usado en la producción de quesos tales como variedades de queso italiano y queso duro. El cultivo puede ser usado solo o en combinación con otros cultivos bacterianos de ácido láctico p. ej. Lactobacillus delbrueckii subesp. bulgaricus y Lactobacillus helveticus.
La concentración de células es al menos 1 x 10^{10} cfu/g y la actividad de acidificación del cultivo evaluado en la suspensión de leche desnatada arriba con un índice de inoculación del 0,01% e incubación a 37ºC durante 4 horas es 4,90 a 5,30.
Enzima de coagulación de leche
Se añadió un producto coagulante microbiano líquido comercial Naturen STD 180^{TM} (Chr. Hansen A/S, H\diameterrsholm, Dinamarca) al medio de suspensión acuoso.
Protocolo experimental
Se prepararon las siguientes mezclas para cada uno de los cultivos iniciadores anteriores:
(i)
Muestra para ensayo A conteniendo 10 ml del coagulante indicado arriba, 10 g de cultivo y 10 ml de agua corriente hervida durante 0,5 hora (33,3% suspensión de cultivo (p/v));
(ii)
Muestra para ensayo B conteniendo 1 ml de coagulante; 1 g de cultivo y 98 ml de agua corriente hervida durante 0,5 hora (1% suspensión de cultivo (P/v));
(iii)
Como control se usó cultivo descongelado directamente.
Se evaluó la actividad de acidificación de las suspensiones indicadas arriba para cada una de las cepas de prueba y el cultivo de control con un índice de inoculación de 0,01% respecto al cultivo en suspensión de leche desnatada (9,5% en peso sustancia seca) a T_{0} y después del almacenamiento de las suspensiones durante 8, 24, 48 y 72 horas, respectivamente. Las condiciones de prueba de la actividad de acidificación fueron: incubación durante 6 horas a 30ºC (CH-N 11 y R-604) o 43ºC (TH-4).
Se controló el pH de las mezclas de reacción incubadas y se registró el pH después de 6 horas de incubación como actividad. Los resultados para las muestras de prueba fueron comparadas con los resultados correspondientes del control inoculado directamente en la suspensión de leche al principio de la incubación. Se calculó la diferencia entre la actividad (pH) de las suspensiones almacenadas del cultivo correspondiente y el cultivo de control (\DeltapH).
Así un \DeltapH positivo indica que la actividad de la suspensión es reducida y un \DeltapH negativo que la actividad fue más alta en comparación con el control.
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1.2 Resultados
Los resultados del experimento están resumidos en las tablas abajo:
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TABLA 1.1 Valores \DeltapH para el cultivo TH-4 después de almacenamiento en suspensión acuosa
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2
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TABLA 1.2 Valores \DeltapH para el cultivo CH-N 11 después de almacenamiento en suspensión acuosa
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TABLA 1.3 Valores \DeltapH para el cultivo R-604 después de almacenamiento en suspensión acuosa
4
1.3 Conclusión
Las conclusiones generales fueron que el almacenamiento de la suspensión de cultivo acuosa redujo ligeramente la actividad de acidificación que varió entre cultivos y dentro del cultivo individual, entre índices de dilución. Así, el cultivo termofílico TH-4 mostró sólo un cambio muy pequeño en la actividad incluso después del almacenamiento durante 72 horas, mientras que los dos otros cultivos suspendidos tuvieron una mayor pérdida de actividad, desde un punto de vista práctico, su uso como cultivos iniciadores no se ve perjudicado.
Los resultados indican así que es posible almacenar suspensiones acuosas de cultivos iniciadores durante hasta 72 horas sin reducciones prácticamente significantes en su actividad de acidificación.
Ejemplo 2 Estabilidad de cultivos iniciadores en suspensiones acuosas
El propósito del experimento era probar la estabilidad de los cultivos iniciadores bacterianos del ácido láctico comerciales y experimentales después de la suspensión en un medio acuoso bajo diferentes condiciones de almacenamiento.
2.1 Materiales y métodos
Se probó una gama de cultivos comerciales y experimentales para hacer queso Cheddar. Los cultivos evaluados incluyeron:
5
Protocolo experimental
Se evaluó la actividad de acidificación de los cultivos iniciadores con un índice de inoculación del 0,002% peso/vol para cultivos deshidratados por congelación y 0,01% peso/vol para cultivos congelados con respecto al cultivo en una suspensión acuosa.
Fase 1: en la primera fase el cultivo fue suspendido en un medio acuoso y mantenido a 10ºC durante 24 horas, donde no se indica nada más.
Fase 2: la actividad de la suspensión de cultivo obtenida en la fase 1 fue evaluada en leche pasteurizada entera usando la prueba estándar Pearce (IDF nº. 129, 1980).
Se controló el pH de la suspensión en la fase 1 y la leche inoculada de la fase 2 , y se registró el pH después de 6 y 8 horas de incubación respectivamente como actividad.
2.2 Resultados 2.2.1 Evaluación de varios medios para el uso en la fase 1
Fase 1
Evaluación de agua; 0.9% solución salina, leche entera y 2% RSM como medio de suspensión en la fase 1. El cultivo R-704 fue usado como cultivo de prueba. El cultivo fue suspendido al 4% en la fase 1.
TABLA 2.1 La acidificación de R-704 en diferentes medios acuosos
6
Fase 2
Las suspensiones acuosas de los cultivos obtenidos en la fase 1 fueron usadas para inocular leche pasteurizada entera. La actividad del cultivo suspendido fue comparado con la inoculación directa (tabla 2.2).
TABLA 2.2 La actividad de R-704, y actividad por inoculación directa con DVS
7
Como se muestra en la tabla 2.1; cuando el cultivo R-704 fue suspendido en agua o en 0,9% de solución salina el concentrado tanto deshidratado por congelación como congelado no acidificó estos medios. No obstante, en ambos medios de leche, ocurre un cambio en el pH sustancial con el cultivo iniciador tanto deshidratado por congelación como congelado.
La prueba de acidificación en la fase 2 mostró que se halló una actividad ligeramente inferior cuando se usó leche en vez de agua en la fase 1. La adición de sal (0.9%) no supuso ninguna diferencia significante con respecto a la actividad de acidificación en la fase 2 para cultivos deshidratados por congelación.
Debido a la actividad significativamente acidificante de los cultivos iniciadores en la fase 1 en medios de leche, se eligió agua como medio de dilución para cultivos deshidratados por congelación en las siguientes pruebas.
2.2.2 Evaluación de la actividad de diferentes cultivos después de la suspensión en agua
Los cultivos fueron suspendidos en agua corriente (fase 1) en tubos de 200 ml y mantenidos a 10ºC durante 24 horas sin agitación y gas en el espacio de la cabeza. Los cultivos fueron completamente rehidratados girando la botella del derecho y del revés varias veces antes de la inoculación. Después de la inoculación e incubación a 10ºC, se tomó una muestra para la prueba de actividad (fase 2). Los datos obtenidos de la prueba de actividad son mostrados en las tablas abajo.
TABLA 2.3 Actividad en leche pasteurizada entera de cultivo ST121 en comparación con la actividad por inoculación directa con cultivo ST121
8
Como se muestra en la tabla 2.3, el cultivo ST-121 fue capaz de mantener su actividad completa después de haber sido suspendido en agua durante 24 horas a 10ºC.
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TABLA 2.4 Actividad en leche pasteurizada entera de cultivo TH-4 en comparación con la actividad por inoculación directa con cultivo TH-4
9
Como se muestra en la tabla 2.4, el cultivo TH-4 es capaz de mantener su actividad completa después de haber sido suspendido como concentrado deshidratado por congelación en agua durante 24 horas a 10ºC.
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TABLA 2.5 Actividad en leche pasteurizada entera de cultivo suspendido ST-36 en comparación con la actividad por inoculación directa con cultivo ST-36 en leche pasteurizada entera
10
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El cultivo ST-36 mantiene actividad después de haber sido suspendido en agua durante 24 horas.
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TABLA 2.6 Actividad en leche pasteurizada entera de cultivo TH-3 en comparación con la actividad por inoculación directa con cultivo TH-3 en leche pasteurizada entera
11
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El cultivo TH-3 mantiene o incluso mejora la actividad cuando es suspendido en agua antes de usar.
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2.2.3. Evaluación de la estabilidad del cultivo R-703 después de la suspensión a diferentes temperaturas
Se evaluó la actividad en leche pasteurizada entera del cultivo R-703 después de la suspensión (fase 1) a diferentes temperaturas. Las suspensiones se hicieron bien como cultivos deshidratados por congelación al 10% peso/vol o bien al 25% peso/vol en agua corriente:
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TABLA 2.7 Actividad de acidificación del cultivo R-703 después de la suspensión en agua como concentrado deshidratado por congelación en una concentración al 10% o 25% a diferentes temperaturas (fase 1)
12
Parece que la actividad de R-704 se reduce o sube cuando la temperatura del medio de suspensión se aproxima a los 22ºC, o si la concentración de cultivo en la suspensión se aproxima al 25%.
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TABLA 2.8 Actividad de acidificación del cultivo RST-743 después de la suspensión en agua como un concentrado deshidratado por congelación en una concentración al 10% a diferentes temperaturas (fase 1)
13
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La actividad del cultivo RST-743 es relativamente estable en el intervalo de temperatura evaluada. Hay una tendencia hacia una actividad inferior a 12ºC que a 6ºC o a 8ºC. No obstante, la actividad es aún mayor con la inoculación directa del cultivo RST-743 deshidratado por congelación.
2.2.4 Evaluación del efecto del almacenamiento a largo plazo de una suspensión de RST 743
Se determinó el efecto de RST 743 después de la suspensión en agua durante 1, 2, 3, 4 y 7 días, respectivamente. La suspensión del cultivo iniciador fue hecho en un fermentador de 15 litros mantenido a 10ºC. La suspensión fue agitada en todo momento.
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TABLA 2.9 Actividad del cultivo RST 743 después del almacenamiento a largo plazo como una suspensión al 1% en agua a 10ºC
14
La acidificación ocurrió incluso después de 168 horas de la suspensión en agua corriente, y se podría hacer queso con el cultivo después de este período de incubación prolongado, aunque se tuviera que aplicar índices de inoculación sustancialmente aumentados.
2.2.5 El efecto de sedimentación y agitación de la suspensión del cultivo
El cultivo R-704 fue suspendido en agua en un cilindro de vidrio. La suspensión fue hecha al 4%. El cultivo fue suspendido homogéneamente y dejado reposar durante 24 horas. Se observó la sedimentación tanto visualmente como determinando la actividad de acidificación de las muestras de la parte superior y del fondo del cilindro de vidrio.
Se observó una fase clara en la parte superior del cilindro de vidrio y sedimentos pesados en el fondo. Se hicieron pruebas de actividad de las fases de la parte superior y de las fases del fondo. Finalmente, se hizo una muestra de la fase de la parte superior y del fondo mezclando estas fases homogéneamente y se midió la actividad.
TABLA 2.10 Actividad de acidificación del cultivo R-704 en fases diferentes después de 22 horas de sedimentación
15
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Se encontró una actividad más alta en la muestra del fondo respecto a aquella de la muestra de la parte superior.
Se determinó el efecto de agitación para los cultivos RST-776; RST-743 y R-704. No hubo efecto de agitación durante todo el periodo de suspensión de la fase 1 en comparación con la mezcla antes de tomar las muestras. (Datos mostrados sólo para cultivo RST-776)
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TABLA 2.11 Efecto de agitación en la fase 1 en la actividad del cultivo RST 776
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2.2.6 Evaluación del efecto de aireación de la suspensión del cultivo
Se seleccionaron dos cultivos para determinar su capacidad para mantener la actividad de acidificación cuando se aplica una sobrepresión de aire atmosférico al contenedor de suspensión. Se utilizó un fermentador de 15 litros con agitación.
TABLA 2.12 Efecto de aireación en el contenedor de suspensión (fase 1) en el cultivo RST743 y en ST121
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La actividad se mantuvo cuando se usó gas nitrógeno para el espacio de cabeza. La pérdida de actividad fue significante cuando se aplicó un flujo de aire atmosférico sobre la superficie.
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2.2.7 Evaluación del efecto del cloro en el agua de suspensión
Puesto que el agua clorurada se usa en muchos entornos de lechería, se investigó el efecto de la adición de cloro al agua de suspensión (fase 1). El cultivo fue suspendido en agua durante 24 horas a 10ºC con cloro añadido a diferentes concentraciones. Se evaluó la actividad del cultivo iniciador (fase 2).
TABLA 2.13 Efecto del cloro en el agua de suspensión en el cultivo RST-743.
18
El cloro no inhibió la actividad de acidificación del cultivo.
Referencias
1. Rasic, J. 1978. Yoghurt. págs. 314-319.
2. Lelieveld; 1976. Proceso Bioquímico, vol. 11, págs. 39-40.
3. Yang, N.L. y Sandine, W.E.; 1979. J. Dairy Sci. 62:908-915.
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Documentos relacionados en la descripción
Esta lista de documentos relacionados por el solicitante fue recopilada exclusivamente para la información del lector y no forma parte del documento de patente europea. La misma ha sido confeccionada con la mayor diligencia; la OEP sin embargo no asume responsabilidad alguna por eventuales errores u omisiones.
Documentos de patente relacionados en la descripción
\bullet FR 2502465 [0009]
\bullet EP 0611820 A [0012]
\bullet DE 1792264 [0011]
\bullet WO 9427645 A [0012]
\bullet FR 2301004 [0012]
\bullet FR 2710073 [0012]
Literatura no relacionada con patentes indicada en la descripción
\bulletRasic, J. 1978. Yoghurt. págs. 314-319. [0109]
\bulletLelieveld; 1976. Proceso Bioquímico, vol. 11, págs. 39-40. [0109]
\bulletYang, N.L. y Sandine, W.E.; 1979. J. Dairy Sci. 62:908-915. [0109]

Claims (32)

1. Método de preparación de un producto lácteo en una planta lechera, el método incluyendo las etapas de
(i)
suministrar a la planta lechera un cultivo iniciador láctico microbiano como un concentrado de cultivo en un envase sellado (1) que está provisto de un medio de salida (2) para conectar el envase directamente a la línea de tratamiento de leche (6),
(ii)
combinar el cultivo iniciador microbiano con un medio acuoso para obtener una suspensión acuosa del cultivo iniciador microbiano, dicha combinación siendo precedida o sucedida por una fase comprendiendo la conexión del medio de salida del envase a la línea de tratamiento de leche.
(iii)
combinar dicha suspensión de cultivo iniciador con leche en la línea de tratamiento de leche (6), y
(iv)
opcionalmente mantener la leche inoculada de este modo bajo condiciones de fermentación del cultivo iniciador para obtener el producto lácteo.
2. Método según la reivindicación 1, incluyendo las etapas de
(i)
suministrar a la planta lechera un cultivo iniciador láctico microbiano como un concentrado de cultivo en un envase sellado (1) que está provisto de un medio de salida (2) para conectar el envase (1) directamente a un contenedor de suspensión (10), dicho contenedor de suspensión (10) está provisto de medios para enganchar el envase (1) al contenedor de suspensión (10) y un medio de salida para conectar el contenedor de suspensión a otras unidades de la línea de tratamiento (6),
(ii)
introducir el cultivo iniciador en el contenedor de suspensión (10) conectando, bajo condiciones esencialmente asépticas, el medio de salida (2) del envase al medio de enganche del contenedor de suspensión y combinar el cultivo iniciador introducido con un medio acuoso para obtener una suspensión del cultivo allí dentro,
(iii)
introducir dicha suspensión de cultivo iniciador en la línea de tratamiento, la introducción siendo realizada bajo condiciones esencialmente asépticas, a través de la conexión entre el medio de salida del contenedor de suspensión y una o más unidades de la línea de tratamiento por lo cual la suspensión de cultivo iniciador es combinada con la leche.
3. Método según la reivindicación 2 donde el contenedor de suspensión (10) está provisto de medios adicionales seleccionados del grupo que consiste en medios de entrada de aire (admisión de aire), medios de agitación (12), medios de entrada del agua, medios de enfriamiento, medios para suspender el envase sellado, medios para controlar la temperatura y medios para medir el pH.
4. Método según la reivindicación 2 donde al menos otra sustancia seleccionada del grupo que consiste en una enzima de coagulación de leche, un nutriente bacteriano, un agente estabilizante de enzima de coagulación de leche, un agente neutralizante del cloro, un agente aromatizante, un agente colorante, un espesante de leche fermentada y un agente estabilizante de leche fermentada es introducido en el contenedor de suspensión.
5. Método según la reivindicación 1, incluyendo las etapas de
(i)
suministrar a la planta lechera un cultivo iniciador láctico microbiano como un concentrado de cultivo en un envase sellado (1) que está provisto de un medio de entrada y un medio de salida (2) para conectar el envase directamente a la línea de tratamiento (6),
(ii)
introducir, bajo condiciones esencialmente asépticas, un medio acuoso en el envase (1) a través del medio de entrada para obtener una suspensión acuosa del cultivo allí dentro,
(iii)
introducir dicha suspensión de cultivo iniciador en la línea de tratamiento de leche (6) conteniendo leche, la introducción siendo realizada conectando, bajo condiciones esencialmente asépticas, el medio de salida (2) del envase (1) a la línea de tratamiento de leche (6) por lo cual la suspensión de cultivo iniciador es combinada con la leche.
6. Método según la reivindicación 5 donde el medio de entrada comprende medios para conectar el envase a una salida de agua.
7. Método según la reivindicación 5 donde el medio de entrada es provista de medios de filtración.
8. Método según la reivindicación 1 donde el concentrado de cultivo es seleccionado del grupo que consiste en un concentrado seco, un concentrado congelado y un concentrado líquido.
9. Método según la reivindicación 1 donde el envase sellado es hecho de un material flexible.
10. Método según la reivindicación 1 donde el cultivo iniciador es seleccionado del grupo que consiste en una bacteria de ácido láctico, una especie Bifidobacterium, una especie Propionibacterium, una especie fúngica y una especie de levadura.
11. Método según la reivindicación 10 donde el cultivo iniciador comprende una mezcla de cepas.
12. Método según la reivindicación 1 donde la leche inoculada es procesada adicionalmente para obtener un producto lácteo que es seleccionado del grupo que consiste en queso, yogur, mantequilla, leche dulce inoculada y un producto lácteo fermentado líquido.
13. Método según la reivindicación 1 donde el concentrado de cultivo está provisto en el envase sellado en combinación con al menos un componente seleccionado del grupo que consiste en una enzima de coagulación de leche, un nutriente bacteriano, un agente estabilizante de la enzima de coagulación de leche, un agente neutralizante del cloro, un agente aromatizante, un agente colorante, un espesante de leche fermentada y un agente estabilizante de leche fermentada.
14. Método según la reivindicación 13 ó 4 donde la enzima de coagulación de leche es seleccionada del grupo que consiste en un coagulante microbiano, una quimosina animal natural y una quimosina producida por recombinación.
15. Método según la reivindicación 1 donde el envase sellado tiene un contenido cúbico de al menos 10 litros.
16. Método según la reivindicación 1 donde la suspensión acuosa obtenida en la fase (ii) es almacenada durante hasta e inclusive 24 horas o más antes de ser combinada con la leche mientras mantiene sustancialmente la actividad del cultivo.
17. Método según la reivindicación 1 donde la suspensión acuosa obtenida en la fase (ii) es almacenada hasta e inclusive 48 o más horas antes de ser combinada con la leche mientras mantiene sustancialmente la actividad del cultivo.
18. Método según la reivindicación 1 donde la leche inoculada es mantenida bajo condiciones de fermentación del cultivo iniciador para obtener un producto lácteo fermentado.
19. Sistema de suministro para la inoculación de un cultivo iniciador láctico en una línea de tratamiento (6) de una planta lechera, el sistema comprendiendo un envase sellado (1), dicho envase (1) conteniendo un concentrado de un cultivo iniciador y/o una enzima de coagulación de leche, dicho envase (1) estando provisto de un medio de salida (2) para conectarlo a la línea de tratamiento de leche (6), dicho medio de salida (2) permitiendo la conexión del envase (1) a la línea de tratamiento de leche (6) para obtener el suministro del cultivo iniciador en la línea de tratamiento (6), y dicho envase (1) siendo conectado a un contenedor de suspensión (10).
20. Sistema de suministro según la reivindicación 19 donde el medio de salida (2) está roscado para permitir la conexión roscada del envase sellado a la línea de tratamiento.
21. Sistema de suministro según la reivindicación 19 que está provisto de medios que permiten que el envase sea suspendido.
22. Sistema de suministro para la inoculación de un cultivo iniciador láctico en una línea de tratamiento (6) de una planta lechera, el sistema comprendiendo un envase sellado (1), dicho envase (1) conteniendo un concentrado de un cultivo iniciador y/o una enzima de coagulación de leche, dicho envase (1) estando provisto de un medio de entrada y un medio de salida (2) para conectar el envase (1) a la línea de tratamiento de leche (6), dicho medio de entrada permitiendo que un medio acuoso sea introducido sustancialmente de forma aséptica en el envase (1) y el medio de salida (2) permitiendo la conexión del envase a la línea de tratamiento de leche (6) para obtener el suministro del cultivo iniciador en la línea de tratamiento (6).
23. Sistema de suministro según la reivindicación 22 donde el medio de entrada comprende medios que permiten que el medio de entrada sea conectado a una salida de medio acuoso.
24. Sistema de suministro según la reivindicación 22 donde el medio de entrada comprende medios de filtración incluyendo una membrana de filtro que tiene un tamaño de poro de como máximo 0,45 \mum.
25. Sistema de suministro según cualquiera de las reivindicaciones 19 ó 22, donde el envase sellado (1) es hecho de un material flexible.
26. Sistema de suministro según la reivindicación 25 donde el material flexible comprende un polímero seleccionado del grupo que consiste en una poliolefina, una olefina sustituida, un copolímero de etileno, un poliéster, un policarbonato, una poliamida, un acrilonitrilo y un derivado de celulosa.
27. Sistema de suministro según la reivindicación 25 donde el material flexible comprende una lámina metálica.
28. Sistema de suministro según cualquiera de las reivindicaciones 19 ó 22 donde se añade un gas no atmosférico antes de sellar.
29. Sistema de suministro según cualquiera de las reivindicaciones 19 ó 22 donde el cultivo iniciador comprende organismos seleccionados del grupo que consiste en una bacteria de ácido láctico, una especie Bifidobacterium, una especie Propionibacterium, una especie fúngica y una especie de levadura.
30. Sistema de suministro según cualquiera de las reivindicaciones 19 ó 22 donde el concentrado de cultivo está provisto en el envase sellado (1) en combinación con al menos un componente seleccionado del grupo que consiste en una enzima de coagulación de leche, un nutriente bacteriano, un agente estabilizante de enzima de coagulación de leche, un agente neutralizante del cloro, un agente aromatizante, un agente colorante, un espesante de leche fermentada y un agente estabilizante de leche fermentada.
31. Sistema de suministro según la reivindicación 30 donde la enzima de coagulación de leche es seleccionada del grupo que consiste en un coagulante microbiano, una quimosina animal natural y una quimosina animal producida por recombinación.
32. Sistema de suministro según cualquiera de las reivindicaciones 19 o 22 donde el envase sellado (1) tiene un contenido cúbico de al menos 10 litros.
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