ES2281425T3 - Uso de una alomelanina para el tratamiento de la inflamacion o irritacion provocada por dha y/o un tensioactivo. - Google Patents

Abstract

Uso de una alomelanina, en el que la alomelanina se produce mediante oxidación enzimática de al menos un fenol de la fórmula II: en el que R2 y R6 se seleccionan independientemente de H, OH y OMe y X es H o un grupo alquilo C1-6, en la fabricación de una composición para el tratamiento de la inflamación provocada por dihidroxiacetona y/o un tensioactivo.

Description

Uso de una alomelanina para el tratamiento de la inflamación o irritación provocada por DHA y/o un tensioactivo.

Campo técnico

La presente invención se refiere a composiciones que contienen pigmentos de melanina, particularmente composiciones cosméticas.

Antecedentes de la técnica

La solicitud anterior WO97/20944 describe un método para producir una melanina oxidando un compuesto fenólico usando una enzima oxidorreductasa. El compuesto fenólico puede ser de la fórmula (I):

1

en la que R^{1} es H o OH, R^{2} es H, OH o OCH_{3}, R^{3} es H o OH (siempre que al menos uno de R^{1} y R^{3} sea OH); R^{4} se selecciona de H, R, -COOX y R^{7}-COOX, en los que R es un grupo alquilo saturado o insaturado opcionalmente sustituido que tiene de 1 a 12 átomos de carbono; R7 es un grupo alquileno saturado o insaturado opcionalmente sustituido que tiene de 1 a 12 átomos de carbono y X se selecciona de H y grupos que forman ésteres aromáticos y alifáticos; y R^{5} y R^{6} se seleccionan cada uno independientemente de H, OH, NH_{2}, OCH_{3}, CH_{3}, SH, NHCO_{2}, NHCH_{3} COOH y grupos alquilo saturados o insaturados que tienen hasta 8 átomos de carbono.

Las enzimas adecuadas incluyen tirosinasas, lacasas y peroxidasas

Las melaninas derivadas de ácido cafeico (I, R_{1}=R_{2}=OH; R_{3}=R_{5}=R_{6}=H; R_{4}=CO_{2}H) y ácido ferúlico (I, R_{1}=OH, R_{2}=OMe, R_{3}=R_{5}=R_{6}=H, R_{4}=CO_{2}H) y sus derivados son de la clase conocida como alomelaninas que no contienen azufre o nitrógeno. Son de un color relativamente claro, mientras que las melaninas convencionales son negras (a menos que se blanqueen, lo que no es ventajoso en diversas formas).

La solicitud WO95/33706 describe la preparación de ácido cafeico mediante tratamiento enzimático de materiales derivados de plantas, por ejemplo girasoles.

Descripción de la invención

La presente invención se refiere principalmente a alomelaninas, particularmente las derivadas de ácidos cafeico y ferúlico y sus derivados, y especialmente las derivadas de ácido cafeico y derivados ("materiales de melanina cafeica").

Se ha descubierto ahora que estas alomelaninas, particularmente los materiales de melanina cafeica, pueden ser extremadamente solubles en agua, por ejemplo 150 g/l a temperatura ambiente. Por el contrario, las melaninas convencionales son virtualmente insolubles. Esta melanina derivada de ácido cafeico tiene una solubilidad de aproximadamente 220 g/l. Puesto que el ácido cafeico tiene una solubilidad inferior a 1 g/l, y la polimerización conduce generalmente a una reducción en solubilidad, esto es bastante notable.

El documento WO97/20944 declara que proporciona melaninas que son "generalmente más solubles es otros ingredientes usados convencionalmente en la preparación de formulaciones para cosméticos y otras aplicaciones que las melaninas preparadas industrialmente en la técnica anterior". Esto no se explica adicionalmente o se ejemplifica. La única prueba evidente de la solubilidad de la melanina es que los espectros de UV se determinan para soluciones acuosas al 0,005% p/v. Claramente, no hay nada que sugerir para materiales cuyas solubilidades son órdenes de magnitud mayores que las de melaninas convencionales. El descubrimiento de esto ha hecho posible la producción de cosméticos haciendo nuevos usos de melaninas, que dependen de sus altas solubilidades para la preparación de las formulaciones cosméticas y/o sus modos de acción. Por tanto, las soluciones de estas melaninas pueden ser eficaces como antioxidantes y absorbentes de UV (A y B). Pueden formularse de modo que se adhieren al cabello y a la piel, y pueden servir como colorantes del cabello y la piel.

Los inventores descubrieron también que estas alomelaninas pueden conducir a composiciones de mayor estabilidad de la que puede lograrse con melaninas convencionales. Por ejemplo, una composición que contiene dihidroxiacetona y una melanina forma rápidamente un precipitado si la melanina es convencional, mientras que el uso de estas alomelaninas proporciona una composición que es estable durante muchas semanas.

Estas alomelaninas tienen buenas propiedades de absorción de UV y actividad antioxidante. Estas propiedades, junto con las coloraciones moderadas y la alta solubilidad, las hacen adecuadas para un amplio intervalo de composiciones cosméticas.

Las pruebas sobre las propiedades de absorción de UV de estas melaninas derivadas de ácido cafeico mostraron que una formulación al 0,5% p/p proporciona una crema con un factor de protección solar de aproximadamente 2 y una clasificación de estrellas de 3, que se categoriza como excelente. La primera es principalmente una medida de la absorción de radiación UV B y es una buena estimación de la protección frente a quemaduras solares. La última es una estimación de la absorción de UV A y de la eficacia antienvejecimiento de la crema.

Se proporciona una composición cosmética que contiene una alomelanina que tiene una solubilidad en agua de al menos 20 g/l y/o que es sustancialmente estable en presencia de dihidroxiacetona de manera que sustancialmente no se forma precipitado cuando una composición que contiene la alomelanina y dihidroxiacetona se almacena a temperatura ambiente durante 2 semanas. Preferiblemente, la composición es estable durante un exceso de un mes, por ejemplo, durante 3 meses o más.

La solubilidad en agua es preferiblemente de al menos 50 g/l, más preferiblemente de al menos 100 g/l. La composición puede comprender una solución acuosa que contiene al menos 20 g/l de alomelanina y/o puede producirse usando tal solución.

Un tipo preferido de composición contiene tanto alomelanina como dihidroxiacetona.

La alomelanina es preferiblemente una producida mediante la oxidación enzimática de un fenol o una mezcla de fenoles de la fórmula (I) anterior, en la que R^{1} es OH; R^{2} y R^{6} se seleccionan independientemente de H, OH y OMe; R^{3} y R^{5} son H; y R^{4} es CO_{2}X, particularmente ácido cafeico y/o ácido ferúlico y/o un éster o mezcla de ésteres de los mismos. Cuando -CO_{2}X es un grupo éster, X es preferiblemente alquilo C_{1-6}, por ejemplo metilo o etilo. Se prefieren enzimas peroxidasas, por ejemplo, peroxidasas de rábano, de soja y microbianas.

Los inventores descubrieron también que estas alomelaninas tienen propiedades antiinflamatorias o antiirritantes. Por tanto, pueden incorporarse en composiciones, particularmente composiciones cosméticas, para reducir la irritación potencial asociada con otros componentes presentes en la composición y otros agentes que pueden afectar a la piel, tales como componentes de otras composiciones que pueden aplicarse a la piel. Por ejemplo, algunas personas son propensas a la irritación por dihidroxiacetona y/o tensioactivos.

Por tanto, la invención proporciona el uso de una alomelanina para reducir la inflamación o irritación o irritación potencial, provocada por dihidroxiacetona y/o tensioactivo, generalmente para aplicación tópica.

Se esbozarán ahora algunos tipos de realizaciones preferidas.

1.

Uso de una alomelanina en una composición cosmética como un agente antiinflamatorio o antiirritante, por ejemplo para contrarrestar efectos potenciales de uno o más de otros componentes de la composición, siendo dicha alomelanina un material producido mediante oxidación enzimática de al menos un fenol de la fórmula II:

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en que R^{2} y R^{6} se seleccionan independientemente de H, OH y OMe y X es H o un grupo alquilo C_{1-6}. Preferiblemente, la alomelanina tiene una solubilidad de al menos 50 g/l a temperatura ambiente. Preferiblemente, la cantidad de la melanina es suficiente para reducir sustancialmente el efecto irritante para la piel de la composición.

2.

Uso según (1) como un colorante para el cabello o la piel.

3.

Uso según (1) ó (2) en el que la composición cosmética contiene también dihidroxiacetona.

Las composiciones cosméticas incluyen filtros solares, cremas hidratantes, champúes, acondicionadores, composiciones bronceadoras sin sol (tales como lociones y cremas), fragancias, y barras de labios y bálsamos labiales.

En composiciones de fragancia la melanina puede servir (a) para proteger otros ingredientes de la oxidación; (b) para actuar como un absorbente de UV para proteger frente a la degradación fotoquímica; (c) para proporcionar un color bronceado atractivo; y (d) como un antiirritante. Los componentes de fragancia comúnmente tienen propiedades irritantes.

En bálsamos labiales y similares, además de las propiedades mencionadas en otras partes, la melanina puede proporcionar actividad antiviral frente el virus Herpes simplex responsable de los herpes labiales. Puesto que la aparición de herpes labiales puede desencadenarse por la exposición a UV (sol excesivo), tales bálsamos labiales pueden proporcionar una doble protección.

En un filtro solar, la melanina sirve como un absorbente de UV, y también como un antioxidante (protegiendo los otros ingredientes) y como un colorante o pigmento. Puede reducir irritación.

Las composiciones de tinción para el cabello (champúes, acondicionadores, lociones, etc) incorporan deseablemente esta melanina y un potenciador de la penetración en el cabello, por ejemplo etoxidiglicol. La melanina puede proporcionar tanto pigmentación como acción antiinflamatoria. Preferiblemente, las composiciones se formulan para usarse a un pH ligeramente básico, por ejemplo en el intervalo de pH 7-9, preferiblemente aproximadamente pH 8,0 (comparado con el pH ácido = s, 3,5-4,0, usado comúnmente para acondicionadores). Esto abre las cutículas del eje del cabello de modo que se facilita la deposición de la melanina. Puede usarse un compuesto de fijación, por ejemplo un compuesto de amonio cuaternario, para fijar la melanina sobre el cabello. Puede usarse a continuación un acondicionador de pH bajo para cerrar los folículos del cabello de nuevo.

Una composición bronceadora sin sol puede incluir dihidroxiacetona ("DHA") como un agente bronceador de la piel. Una composición típica emplea, en peso: melanina al 0,05-0,5% (preferiblemente al 0,1-0,3%) y DHA al 0,4-10% (preferiblemente al 2-5%) y tiene un pH en el intervalo de 2-7 (preferiblemente 4-6). Preferiblemente, también incluye eritrulosa. Cuando se usa eritrulosa, la piel está menos seca y escamosa después del uso de la DHA, conduciendo a un mejor bronceado artificial en términos de profundidad, uniformidad (no homogéneo) y longitud del bronceado.

Las lociones bronceadoras y otras cremas cutáneas pueden contener un material formador de película (por ejemplo Antarron V220) y/o un compuesto cuaternario (por ejemplo Stepanquat ML) para ayudar en la fijación de la melanina a la piel.

Las composiciones incluyen generalmente componentes adicionales tales como uno o más vehículos. La elección particular del vehículo dependerá del método elegido para la administración así como el sitio sobre el que se aplica la composición.

Los vehículos pueden incluir agua o sustancias tales como emolientes líquidos o sólidos, disolventes, humectantes, espesantes y polvos. Los ejemplos de cada uno de estos tipos de vehículo, que pueden usarse por separado o como mezclas de uno o más vehículos, son como sigue:

Emolientes, tales como alcohol estearílico, monoricinoleato de glicerilo, monoestearato de glicerilo, aceite de visón, alcohol cetílico, isoestearato de isopropilo, ácido esteárico, palmitato de isobutilo, estearato de isocetilo, alcohol oleílico, laurato de isopropilo, laurato de hexilo, oleato de decilo, octadecan-2-ol, alcohol isocetílico, alcohol eicosanílico, alcohol behenílico, palmitato de cetilo, aceites de silicona tales como dimetilpolisiloxano, sebacato de di-n-butilo, miristato de isopropilo, palmitato de isopropilo, estearato de isopropilo, estearato de butilo, polietilenglicol, tietilenglicol, lanolina, manteca de cacao, aceite de maíz, aceite de semilla de algodón, sebo, grasa de cerdo, aceite de oliva, aceite de grano de palma, aceite de semilla de colza, aceite de semilla de cártamo, aceite de onagra, aceite de soja, aceite de semilla de girasol, aceite de aguacate, aceite de semilla de sésamo, aceite de coco, aceite de cacahuete, aceite de ricino, alcoholes de lanolina acetilados, vaselina, aceite mineral, miristato de butilo, ácido isosteárico, ácido palmítico, linoleato de isopropilo, lactato de laurilo, lactato de miristilo, oleato de decilo, miristato de miristilo;

Propelentes, tales como triclorofluorometano, diclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, monoclorodifluorometano, triclorotrifluoroetano, propano, butano, isobutano, dimetil éter, dióxido de carbono, óxido nitroso;

Disolventes, tales como alcohol etílico, cloruro de metileno, isopropanol, acetona, etilenglicol monoetil éter, dietilenglicol monobutil éter, dietilenglicol monoetil éter, dimetilsulfóxido, dimetilformamida, tetrahidrofurano;

Humectantes, tales como glicerina, sorbitol, 2-pirrolidona-5-carboxilato de sodio, colágeno soluble, ftalato de dibutilo y gelatina;

Polvos, tales como yeso, talco, tierra de batán, caolín, almidón, gomas, sílice coloidal, poliacrilato de sodio, tetraalquil y/o esmectitas de trialquil aril amonio, silicato de aluminio y magnesio modificado químicamente, arcilla montmorilonita modificada orgánicamente, silicato de aluminio hidratado, silice ahumado, polímero de carboxivinilo, carboximetilcelulosa de sodio, monoestearato de etilenglicol.

El vehículo cosméticamente aceptable formará normalmente desde el 10 hasta el 99,9%, preferiblemente desde el 50 hasta el 99% en peso de la composición, y puede, en ausencia de otros complementos cosméticos, formar el equilibrio de la composición.

La composición puede comprender también otros materiales que son útiles de manera convencional en productos cosméticos o terapéuticos para aplicación tópica a la piel y al cabello. Los ejemplos incluyen tensioactivos, especialmente tensioactivos aniónicos, no iónicos y anfóteros, polímeros tales como polímero JR y gomas Jaguar, conservantes, perfumes, cremas hidratantes, antioxidantes, etc.

Las composiciones pueden formularse como líquidos, por ejemplo como una loción, champú, leche o crema para usar junto con un aplicador tal como un aplicador de bola rodante, o un dispositivo de pulverización tal como un aerosol que puede contener un propelente, o un depósito equipado con una bomba para dispensar el producto líquido.

Alternativamente, las composiciones son sólidas o semisólidas, por ejemplo barras, cremas o geles, para usar junto con un aplicador adecuado o simplemente un tubo, botella o bote con tapa, o una tela impregnada con líquido, tal como una toallita de tejido.

Modos para llevar a cabo la invención

Algunas realizaciones de la invención se describirán ahora en más detalle a modo de ejemplo.

A) Preparación de alomelanina

Pueden prepararse alomelaninas adecuadas a partir de ácido cafeico, mezclado opcionalmente con ácido ferúlico, tal como se describe en ejemplos del documento WO97/20944. Los ejemplos 4 y 11 del mismo se reproducen a continuación como ejemplos Ai y Aii.

Ai) Producción de una melanina de ácido cafeico/ácido ferúlico mediante peroxidasa de rábano más peróxido de hidrógeno

Se disolvieron ácido cafeico (500 mg) y ácido ferúlico (500 mg) en etanol (200 ml) más tampón citrato (100 ml, 100 mM, pH 5,5) en un matraz Erlenmeyer de 500 ml. Se añadieron peroxidasa de rábano (500 unidades, Sigma) y peróxido de hidrógeno (5 ml, 27,5%) y se incubó la solución durante 2 horas a 30ºC, agitada a 200 rpm. Se controló la utilización de ácido cafeico y ácido ferúlico mediante HPLC (columna C18, 2 ml/min, agua:acetonitrilo (80:20) + ácido acético (1%), 290 nm). Se terminó la reacción mediante la adición de ácido clorhídrico concentrado (10 ml) a la solución enfriada en hielo. Se recogió un precipitado rojo/marrón mediante centrifugación (4000 rpm, 15 min). La pasta roja/marrón se secó al aire. Rendimiento: 126,3 mg (12,63%).

Aii) Producción de una alomelanina derivada de ácido cafeico mediante tirosinasa usando evaporación

Se disolvió ácido cafeico (5 g) en agua (21) y se ajustó a pH 7,0 usando hidróxido de sodio (5 N). Se añadió tisosinasa (17 mg, 4400 unidades/mg, Sigma) y se dividió la solución de igual manera entre dos matraces Erlenmeyer 51. Se incubó la reacción durante toda la noche a 30ºC y se agitó a 200 rpm. Se recuperó el producto por evaporación a presión reducida usando un evaporador rotatorio y se secó en horno a 50ºC para producir un polvo coloreado marrón. Rendimiento: 5,5 g (100%).

Aiii) (a) Producción de ácido cafeico a partir de harina de girasol

Se suspendieron 13 kg de harina de girasol no sedimentada en 37 l de agua a temperatura ambiente y se mezclaron a mano. Se controló la fase acuosa mediante HPLC para detectar la liberación de ácido clorogénico hasta que no se produjo aumento adicional.

Se prensó la suspensión de harina de girasol para liberar la fase acuosa usando una prensa de vino Vigo (capacidad de 36 l). Se lavaron los sólidos obtenidos con un volumen de agua equivalente al volumen inicial menos el volumen obtenido del primer prensado. Se prensó de nuevo esta suspensión, y se combinaron las fases acuosas de ambos prensados.

Se ajustó el pH de la fase acuosa y se mantuvo a pH 7,5 con NaOH 400 gl^{-1}, y se calentó hasta 40ºC, con mezcla en un vaso de acero inoxidable de 50 l. Se añadió enzima Biofeed Plus L 4 ml^{-1} (Novo Nordisk), y se controló la conversión de ácido clorogénico a ácido cafeico hasta que la concentración de ácido cafeico alcanzó una meseta.

Se bajó el pH acuoso hasta pH 3,0 usando ácido fosfórico 750 gL^{-1}. Se eliminó el precipitado formado mediante centrifugación usando el aparato Westfalia SC-6.

Se transfirió la solución clarificada a un vaso de acero inoxidable a prueba de llamas, y se cubrió con 10 l de acetato de etilo. Se agitaron suavemente las dos fases durante toda la noche para permitir la extracción del ácido cafeico en el disolvente como un sistema de dos fases. Se decantó la capa de acetato de etilo.

Se realizaron 20 lotes de extracción de harina de girasol usando el método descrito anteriormente, y las capas de acetato de etilo obtenidas se agruparon y concentraron mediante evaporación al vacío, usando un aparato de destilación QVF seguido por un evaporador rotatorio Buchi.

Se lavaron los sólidos obtenidos con un volumen pequeño de n-hexano, y se recuperaron los sólidos lavados mediante filtración a través de papel de filtro Whatman nº 1 en vacío y después se secaron en un horno de vacío.

Esto proporcionó 504 g de extracto de harina de girasol que contenía 306 g de ácido cafeico (por lo tanto, el extracto tiene el 61% p/p de ácido cafeico). El rendimiento promedio por lote es por lo tanto 25 g de extracto, que contienen 15 g de ácido cafeico, y el rendimiento global para el ácido cafeico a partir de harina de girasol usando este proceso en esta harina es del 0,11% p/p.

Aiii) (b) Producción de melanina a partir de extracto que contiene ácido cafeico

Se disolvieron 450 g del extracto de harina de girasol descrito (que contenía 273 g de ácido cafeico) en 45 l de agua destilada en un vaso de acero inoxidable. Se ajustó el pH de esta solución y se mantuvo a pH 7,5 usando NaOH 400 gl^{-1}. Se añadieron a esta solución 2 g de enzima peroxidasa de soja (Organic Technologies Ltd.). Se inició la reacción de producción de melanina mediante la adición, gota a gota durante un periodo de 30 minutos, de 211 ml de una solución de peróxido de hidrógeno al 27% p/v.

Después de 2 horas, se enfrió la reacción hasta 20ºC y se agitó durante toda la noche. Se concentró después la solución de melanina generada mediante evaporación al vacío, usando el aparato de destilación QVF seguido por un evaporador rotatorio Buchi. Se transfirió la solución de melanina concentrada a placas de secado y se llevaron a sequedad final usando un horno de vacío.

Se desechó el sólido de melanina seca producido de las placas de secado y se molió en un polvo marrón oscuro fino usando una mano de mortero y un mortero.

La cantidad final de melanina era de 522g, que contenían el 0,27% p/p de ácido cafeico.

Se usó la melanina derivada de ácido cafeico tal como se produce en el ejemplo preparativo (Aii) en las siguientes formulaciones.

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(Tabla pasa a página siguiente)

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B) Formulaciones

Nota: los componentes de cada "fase" se mezclan juntos y después las "fases" se combinan.

B(i) Filtro solar que contiene melanina

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En esta formulación, se usa dióxido de titanio (dispersor de UV) en combinación con Parsol 1789 (absorbente de UV) y la alomelanina. La melanina contribuía a las propiedades antioxidantes, antiirritantes y de absorción de UV (UV-A y B) así como transmitía una tonalidad carne atractiva a la crema.

B(ii) Crema hidratante teñida con melanina

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La melanina contribuía a las propiedades antioxidantes, antiirritantes y de absorción de UV (UV-A y B) así como transmitía una tonalidad carne atractiva a la crema hidratante.

B(iii) Champú de melanina zylepsis

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Aquí la alomelanina se usa junto con un agente de perlización para crear una apariencia de "oro líquido", sin tener que usar sales de hierro que se usan convencionalmente para lograr una apariencia de oro, pero que pueden actuar como prooxidantes. Por el contrario, la melanina sirve como antioxidante, así como un absorbente de UV (A yB), un agente antiirritante y un colorante.

El pantenol facilita la penetración de la melanina en el cabello (posibilitada por la solubilidad de la melanina). Esto transmite fundamento a las propiedades antioxidantes y de absorción de UV y posibilita también que la melanina tiña cualquier cabello gris.

B(iv) Acondicionador del cabello

Fase A
Dehydquat ACA	5,000 g
Stepanquat ML	2,500 g
Disolución de hidróxido de sodio al 5%	1,550 g
Trivallin SF	10,000 g
Nipagin M	0,200 g
Agua pura	66,100 g
Fase B
Nipasol M	0,150 g
Waglinol 6016	5,000 g
Alconol estearílico	3,000 g
Alcohol cetílico	5,000 g
Fase C
Melanina	0,500 g
Fase D
Silicona DC 345	1,000 g
Tamaño de lote	100,000 g

Se mezclan las fases A, B, C y D para producir el acondicionador. Opcionalmente, pueden añadirse o bien 0,5 g de mica/100 g de crema o bien 0,20 g de dióxido de titanio/100 g de crema para proporcionar una apariencia perlescente o más blanca.

B(v) Crema de dihidroxiacetona con melanina

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La alomelanina y la dihidroxiacetona cooperan para proporcionar una coloración bronceada mejorada a la piel, proporcionando la melanina también propiedades antioxidantes, antiirritantes y de absorción de UV.

B(vi) Loción autobronceadora con melanina

Agua	75,800%
Parafina líquida	6,500%
Estearato de octilo	5,700%
Dihidroxiacetona	5,000%
Glicerina	3,000%
Diestearato de poligliceril-3 metilglucosa	2,000%
Estearato de octilo	0,800%
Hidróxido de sodio	0,300%
Melanina	0,250%
Carbómero	0,200%
Metilparabeno	0,200%
Propilparabeno	0,100%
Perfume	0,100%
Butilparabeno	0,050%
	100,000%

La melanina da una coloración bronceada mejorada a la piel y proporciona propiedades antioxidantes, antiirritantes y de absorción de UV.

C Programa de prueba de estabilización de la fragancia

Para someter a prueba la estabilidad de una fragancia en forma de una colonia (eau de toilette, "EDT"), se usan alícuotas de la EDT a las que se añaden dos o más concentraciones de esta melanina ("EDT") y, tal como se hace referencia en los ejemplos, dos concentraciones de BHT (hidroxitolueno butirado, un antioxidante conocido usado en cosméticos). Se usa una alícuota adicional de la colonia original como control. Las muestras de prueba se preparan en botellas de vidrio transparente que se llenan a la mitad con las muestras de prueba. Esto es para permitir algo de penetración de luz UV y gas suficiente en el espacio superior para permitir que se produzca el deterioro oxidativo de la fragancia.

Las muestras se almacenan a 37ºC durante toda la noche, se enfrían después hasta 4ºC y después se dejan reposar a la luz solar directa, durante el resto del día, retornando a 37ºC. Además, se abren las botellas antes y después de la incubación a 37ºC. Se repite este ciclo diario durante 7 días y se evalúan los aromas de cada uno.

Las pruebas han mostrado que esta melanina es notablemente superior a BHT, que es notablemente superior al control. La prueba también puede adaptarse a mostrar si una composición de fragancia dada es notablemente susceptible a la degradación y si ésta se inhibe significativamente por la melanina.

D Antiirritación D(i) Sensibilidad a DHA

Se investigó la eficacia de esta melanina en la reducción de la irritación provocada por la dihidroxiacetona ("DHA") es un sujeto que se sabe que es sensible a ella.

Materiales

Crema A: Crema cutánea (aceite en agua) que contiene DHA al 5,0%.

Crema B: Crema cutánea (aceite en agua) que contiene melanina al 0,3% y DHA al 5,0%

Método

Se midió el color de dos áreas de piel en el antebrazo inferior interno del sujeto por triplicado usando el aparato Minolta Chroma Meter. Se registraron los valores para el grado de luminosidad, "L" el grado de enrojecimiento, "a" y el grado de amarilleamiento, "b". Se aplicaron después muestras (0,7 gramos) de cada crema en orden aleatorio a las dos áreas de piel previamente medidas y se esparcieron sobre un área circular de piel de 4 cm de diámetro. El color de la piel se volvió a medir por triplicado 30 y 60 minutos después de la aplicación de las cremas. Se muestran a continuación los valores medios de los conjuntos de 3 lecturas.

Resultados

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Conclusión

Ambas cremas provocaron un aumento en el enrojecimiento (es decir, aumento en el valor "a") así como aumento de la oscuridad y tonos amarillos.

Después de 30 minutos, la crema A había provocado un aumento sustancial en el enrojecimiento, y un pequeño descenso en el amarilleamiento. Por tanto, la apariencia de la piel era mucho más roja. Después de 60 minutos, el grado de enrojecimiento había disminuido ligeramente. El amarilleamiento había aumentado.

La crema B (con melanina) dio origen a un valor significativamente inferior de enrojecimiento después de 30 minutos, y éste desciende más considerablemente durante los siguientes 30 minutos. El amarilleamiento era superior a los 30 minutos (posiblemente debido al color de la melanina) y su aumento posterior era muy similar al observado con la crema A. Está claro que la melanina tiene el efecto de reducir la intensidad inicial de la irritación (enrojecimiento), y proporcionar una acción calmante a más largo plazo.

D(ii) Sensibilidad al tensioactivo

Se investigó la eficacia de esta melanina en la reducción de la irritación de la piel debida a un tensioactivo.

Se usaron dos sujetos humanos. Se comparó el efecto de aplicar a la piel durante 24 horas un parche que contenía una solución al 70% de lauril éter sulfato de sodio ("SLES") con el efecto de aplicar un parche idéntico que contenía también el 0,3% de esta melanina ("M"). Se controló el color de la piel tratada durante varios días usando un aparato Chroma Meter. Los cambios en los grados de enrojecimiento están tabulados a continuación.

Sujeto 1

12

Sujeto 2

13

Estos resultados muestran que una pequeña concentración de esta melanina puede reducir sustancialmente la irritación/inflamación provocadas por una cantidad mucho más grande de tensioactivo. Claramente, la melanina no puede bloquear el tensioactivo de ninguna forma. Probablemente, está actuando en la superficie de la piel, formando una capa de barrera y/o teniendo un efecto antiinflamatorio directo sobre las células de la piel.

Los resultados presentados en la sección D demuestran la acción antiinflamatoria frente a dos irritantes bastante diferentes, y por lo tanto es razonable plantear un efecto antiinflamatorio general que debe reducir la irritación debida a otras causas incluyendo irritación inducida por el sol. Por tanto, esta melanina puede incluirse en cremas solares y otros cosméticos por una pluralidad de razones. La melanina puede aplicarse en un pretratamiento antes de que se encuentren irritantes potenciales, y/o en una crema posterior calmante para contrarrestar la irritación ya inducida.

Claims (16)

1. Uso de una alomelanina, en el que la alomelanina se produce mediante oxidación enzimática de al menos un fenol de la fórmula II:

14

en el que R^{2} y R^{6} se seleccionan independientemente de H, OH y OMe y X es H o un grupo alquilo C_{1-6}, en la fabricación de una composición para el tratamiento de la inflamación provocada por dihidroxiacetona y/o un tensioactivo.

2. Uso de una alomelanina, en el que la alomelanina se produce mediante oxidación enzimática de al menos un fenol de la fórmula II:

15

en el que R^{2} y R^{6} se seleccionan independientemente de H, OH y OMe y S es H o un grupo alquilo C_{1-6}, en la fabricación de una composición para el tratamiento de la irritación provocada por la dihidroxiacetona y/o un tensioactivo.

3. Uso de una alomelanina según la reivindicación 1 ó 2, en el que la dihidroxiacetona y/o tensioactivo están presentes en la composición.

4. Uso de una alomelanina según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que la dihidroxiacetona y/o tensioactivo están presentes en otras composiciones que pueden aplicarse a la piel.

5. Uso de una alomelanina, según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que la composición es una composición cosmética.

6. Uso de una alomelanina según la reivindicación 5, en el que la dihidroxiacetona y/o tensioactivo están presentes en la composición.

7. Uso de una alomelanina según la reivindicación 5 ó 6, en el que la dihidroxiacetona y/o tensioactivo está presente en las otras composiciones que pueden aplicarse a la piel.

8. Uso según cualquier reivindicación anterior, en el que la alomelanina tiene una solubilidad en agua de al menos 50 g/l a temperatura ambiente.

9. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, en el que la composición cosmética es una composición autobronceadora.

10. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, en el que la composición cosmética contiene el 0,4-10% en peso de dihidroxiacetona.

11. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, en el que la composición cosmética contiene el 2-5% en peso de dihidroxiacetona.

12. Uso según cualquier reivindicación anterior, en el que la composición contiene el 0,05-0,5% en peso de dicha alomelanina.

13. Uso según cualquier reivindicación anterior, en el que la composición contiene el 0,1-0,3% en peso de dicha alomelanina.

14. Uso según cualquier reivindicación anterior, en el que la alomelanina se produce mediante oxidación enzimática de ácido cafeico y/o ácido ferúlico.

15. Uso según cualquier reivindicación anterior, en el que la enzima se selecciona de peroxidasas, tirosinasas y lacasas.

16. Uso según cualquier reivindicación anterior, en el que la composición es una composición tópica.