ES2269454T3 - Uso de pirazoles sustituidos para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de alergias. - Google Patents

Uso de pirazoles sustituidos para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de alergias. Download PDF

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Lars Karlsson
Haripada Khatuya
Steven P. Meduna
Barbara A. Pio
Siquan Sun
Kevin L. Tays
Robin L. Thurmond
Jianmei Wei
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Abstract

El uso de un compuesto en la fabricación de una composición farmacéutica para tratar a un sujeto con una condición alérgica, teniendo dicho compuesto la **fórmula** de más abajo, donde R1 es hidrógeno, azido, halógeno, alcoxi C1-C5, hidroxi, alquilo C1-C5, alquenilo C2-C5, ciano, nitro, R7R8N, acilo C2-C8, R9OC=O, R10R11NC=O, o R10R11NSO2; o R1 es tomado junto con W como se describe más abajo; R2 es hidrógeno, halógeno, alcoxi C1-C5, alquilo C1- C5, alquenilo C2-C5, haloalquilo C1-C5, ciano, o R48R49N; alternativamente, R1 y R2 pueden ser tomados juntos para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico de 5 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser insaturado o aromático; cada uno de R3 y R4 es independientemente hidrógeno o alquilo C1-C5; cada uno de R5 y R6 es independientemente hidrógeno, alquilo C1-C5, alquenilo C2-C5, alcoxi C1-C5, alquil(C1-C5)tio, halógeno, o carbociclilo o heterociclilo de 4 a 7 miembros; alternativamente, R5 y R6 pueden ser tomados juntos para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico de 5 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser insaturado o aromático, y puede estar sustituido opcionalmente con entre uno y tres sustituyentes seleccionados independientemente entre halo, ciano, amino, nitro, R40, R40O-, R40S-, R40O(alquileno C1-C5)-, R40O(C=O)-, R40(C=O)-, R40(C=S)-, R40(C=O)O-, R40O(C=O)(C=O)-, R40SO2, NHR62(C=NH)-, NHR62SO2-, y NHR62(C=O)-; R40 es H, alquilo C1-C5, alquenilo C2-C5, fenilo, bencilo, fenetilo, heterociclilo C1-C5; o una sal, éster, o amida farmacéuticamente aceptable de los mismos.

Description

Uso de pirazoles sustituidos para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de alergias.
Campo de la invención
Esta invención se refiere al uso de pirazoles sustituidos para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una condición alérgica.
Antecedentes de la invención
Las alergias atópicas afligen al menos al 20% de la población de los países desarrollados, y constan de una amplia gama de enfermedades mediadas por la IgE tales como la fiebre del heno, el asma, la dermatitis atópica, y las alergias alimentarias. La exposición de un sujeto alérgico a alergenos relevantes entrecruza la IgE específica del alergeno unida a los mastocitos, desencadenando la desgranulación y liberación de mediadores pro-inflamatorios, tales como la histamina y los eicosanoides, que ocasionan la respuesta de verdugón y enrojecimiento en una prueba cutánea. Característicamente, esta respuesta temprana está seguida de una reacción tardía prolongada en la que las células inflamatorias, concretamente los eosinófilos y las células T CD4 TH-2 activadas, son reclutadas al sitio de exposición al alergeno. Las citoquinas inflamatorias tales como IL-4 e IL-5, ambas producidas por las células TH-2, son importantes para la producción de IgE por las células B y para la eosinofilia, respectivamente. Se ha demostrado que las inmunoterapias que se dirigen a las células T CD4 son eficaces para la reducción de la producción de IgE, la activación de células proinflamatorias, y la liberación de mediadores inflamatorios.
Se han encontrado terapias actuales para las alergias que se dirigen a las células T CD4 con éxito variado. La des-sensibilización con extractos de alergenos o vacunas es eficaz para muchos alergenos, tales como el aguijón de los insectos Hymenoptera que puede inducir reacciones alérgicas que amenazan la vida. El mecanismo puede ser o mediante inducción de tolerancia a las células T o mediante conversión de TH-2 en TH-1. No obstante, semejante tratamiento requiere un régimen de tratamiento a largo plazo, frecuentes visitas al doctor y estabilización previa mediante otras medicaciones, y está asociado con una cierta tasa de morbidez y muertes poco frecuentes. Alternativamente, los fármacos inmunosupresores tales como los esteroides que estabilizan eficazmente las respuestas alérgicas en progreso, están asociados a menudo con efectos secundarios severos.
La activación de las células T CD4 es un factor principal en la iniciación y el mantenimiento de la respuesta alérgica. Los alergenos son recogidos por células presentadoras de antígenos especializadas (APC) tales como las células dendríticas y las células B. Los alergenos proteicos pasan a través de sistema endosómico y lisosómico donde son degradados por diferentes proteasas. Estos fragmentos peptídicos están unidos por moléculas de clase II del MHC que, en la superficie celular, son complejos heterodiméricos que constan de dos cadenas de glicoproteína transmembrana (\alpha y \beta) que forman un andamio de unión para el tercer componente, un péptido de 11-20 aminoácidos. El complejo de antígeno-molécula de clase II del MHC es reconocido por las células T CD4 y conduce a la activación de la célula T. Las células T activadas a su vez activan algunos otros componentes del sistema inmunitario, tales como las células B y los macrófagos, que son cruciales para la respuesta corporal a los patógenos, pero también conducen a los síntomas de las alergias.
Las moléculas de la clase II, al igual que otras proteínas transmembrana, experimentan translocación en el retículo endoplásmico (RE) tras la síntesis, donde se asocian con una tercera proteína, la cadena invariable (li). La molécula de la cadena invariable es un tipo de proteína transmembrana II que sirve como chaperona específica de la clase II, promoviendo la salida de los complejos de la clase II-li del RE y evitando la unión de las moléculas de la clase II a los péptidos y a las proteínas no plegadas en el RE y en la ruta secretora. Una unidad de redireccionamiento en la cola citoplásmica de Li dirige los complejos de la clase II-li de la ruta secretora al sistema endosómico.
Antes de que las moléculas de clase II del MHC puedan presentar el antígeno la li debe ser separada por una serie de proteasas que rompen li. Los fragmentos peptídicos de li resultantes, denominados péptidos de cadena invariable asociados a la clase II (CLIP), ocupan la ranura de unión al péptido de la molécula de clase II, y en la mayoría de los casos no son liberados espontáneamente. El CLIP protege la cavidad de unión de la clase II del fracaso tanto durante el transporte intracelular como después de la degradación de li en el sistema endosómico. La unión de los péptidos antigénicos generados a partir de las proteínas sometidas a endocitosis requiere un sito de unión vacío, y todavía abierto. Los CLIP por lo tanto deben ser liberados mientras el sitio de unión abierto es estabilizado para permitir la unión de otros péptidos. El Antígeno Leucocítico Humano - DM (“HLA-DM”) media ambas funciones, promoviendo así la unión de los péptidos antigénicos. Tras adquirir los péptidos, las moléculas de clase II son transportadas a la superficie celular a través de rutas en gran parte desconocidas.
En vista de lo anterior, la inhibición de la proteolisis de la cadena invariable evitará la eliminación de li de la cavidad de unión de la clase II, lo que a su vez bloqueará específicamente la unión del antígeno a la molécula de clase II del MHC.
La catepsina S (“CatS”) es una cisteína proteasa expresada en tejidos linfáticos. La CatS media la proteolisis de la cadena invariable, que es un prerrequisito para la carga peptídica de las moléculas de clase II del MHC (Riese et al. (1996) Immunity 4:357). La CatS tiene una homología del 50-60% con las catepsinas L y K, pero difiere de ellas en que tiene un amplio pH óptimo que se extiende hasta el pH alcalino. La CatS modula la presentación de antígenos en modelos animales, y los inhibidores son eficaces en un modelo de asma (Riese et al. (1998) J. Clin. Invest. 101:2351). Los ratones carentes de catepsina S tienen deteriorada la capacidad para presentar proteínas exógenas por las células presentadoras de antígenos profesionales (Nakagawa y col. (1999) Immunity 10:207; Shi et al. (1999) Immunity 10:197).
Se espera que los compuestos que inhiben la actividad proteolítica de la catepsina S humana encuentren utilidad en el tratamiento de las enfermedades autoinmunitarias crónicas incluyendo, pero no limitadas a, el lupus y la artritis reumatoide; y que tengan utilidad potencial para modular la respuesta inmunitaria al trasplante de tejidos. Los métodos para modular la autoinmunidad con un agente que module la actividad de la catepsina S, v.g. la proteolisis de la cadena li, así como los métodos para tratar a un sujeto que tenga un trastorno autoinmunitario, los métodos para evaluar un tratamiento en cuanto a su capacidad para modular una respuesta autoinmunitaria son descritos en WO 99/58153.
Compuestos algo similares a los de la presente invención son descritos en las siguientes referencias.
Winters, et al. (Winters, G.; Sala, A.; Barone, D.; Baldoli, E. J. Med. Chem. 1985, 28, 934-940; Singh, P.; Sharma, R.C. Quant. Struct. -Act. Relat. 1990, 9, 29-32; Winters, G.; Sala, A.; Barone, D. en US-4500525 (1985)) han descrito pirazoles bicíclicos del tipo mostrado más abajo. R nunca contiene un anillo heterocíclico y no se atribuye actividad inhibidora de proteasas a estas moléculas; estas son descritas como moduladores del receptor adrenérgico \alpha-1.
1 
\vskip1.000000\baselineskip
Shutske, et al. reivindican los pirazoles bicíclicos de más abajo. El anillo de piridina es aromático en su sistema (Shutske, G.M.; Kapples, K.J.; Tomer, J.D. US-5264576 (1993)). Si bien se hace referencia a que R es un conector a un heterociclo, las reivindicaciones especifican únicamente R = hidrógeno. Los compuestos son referidos como inhibidores de la reabsorción de serotonina.
2 
\vskip1.000000\baselineskip
El compuesto 2-[4-[4-(3-metil-5-fenil-1H-pirazol-1-il)butil]-1-piperazinil]-pirimidina es conocido de EP-382637, que describe pirimidinas que tienen propiedades ansiolíticas. Este compuesto y análogos son descritos adicionalmente en EP-502786 como agentes del sistema nervioso cardiovascular y central. Las formulaciones farmacéuticas con tales compuestos son descritas en EP-655248 para su uso en el tratamiento de la secreción gástrica y como agentes antiúlcera. En WO-9721439 se describen medicamentos con semejantes compuestos para tratar los trastornos obsesivo-compulsivos, la apnea del sueño, las disfunciones sexuales, la emesis y las enfermedades del movimiento.
Los compuestos 5-metil-3-fenil-1-[4-(4-fenil-1-piperazinil)butil]-1H-indazol y 5-bromo-3-(2-clorofenil)-1-[4-(4-fenil-1-piperazinil)butil]-1H-indazol, en concreto las sales hidrocloruro de los mismos, son conocidos de WO-9853940 y CA 122:314528, donde estos y compuestos similares son descrito como inhibidores de quinasas en la primera referencia y por poseer afinidad por los receptores de benzodiazepina en la siguiente referencia.
Compendio de la invención
La presente invención da importancia al uso de inhibidores de la catepsina S para la fabricación de un medicamento para tratar las condiciones alérgicas, incluyendo las alergias atópicas. Entre los ejemplos de las condiciones alérgicas se incluyen la fiebre del heno, el asma, la dermatitis atópica y las alergias alimentarias. Entre los alergenos se incluyen el polvo, el polen, el moho, la caspa de mascotas y el pelo de mascotas.
En un aspecto, la invención proporciona el uso de una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición farmacéutica que comprende un inhibidor de la catepsina S para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un sujeto que padece una condición alérgica, en concreto una condición alérgica atópica.
En otro aspecto, la invención proporcionar el uso de una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición farmacéutica que comprende un inhibidor de la catepsina S para la fabricación de un medicamento para tratar a un sujeto que padezca una condición alérgica mediada por IgE, en concreto una condición alérgica atópica.
Un tercer aspecto de la invención proporciona el uso para la fabricación de un medicamento, de un inhibidor de la catepsina S para tratar una condición alérgica, más concretamente para tratar las condiciones alérgicas mediadas por IgE, aún más concretamente para tratar la fiebre del heno, el asma, la dermatitis atópica o las alergias alimentarias. La invención también da importancia a las composiciones farmacéuticas antialérgicas que comprenden como ingrediente activo una cantidad efectiva de un inhibidor de la catepsina S, y un portador farmacéuticamente aceptable. El ingrediente activo puede ser formulado de una manera adecuada para la condición alérgica concreta, incluyendo aerosoles, formulaciones orales y tópicas y formulaciones de liberación con el tiempo.
La presente invención tiene que ver con el tratamiento de una condición alérgica utilizando uno o más compuestos que pueden estar representados por la fórmula (I):
3
donde:
R^{1}
es hidrógeno, azido, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, hidroxi, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, ciano, nitro, R^{7}R^{8}N, acilo C_{2}-C_{8}, R^{9}OC=O, R^{10}R^{11}NC=O, o R^{10}R^{11}NSO_{2}; o R^{1} es tomado junto con W como se describe más abajo;
R^{2}
es hidrógeno, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, haloalquilo C_{1}-C_{5}, ciano, o R^{48}R^{49}N; alternativamente, R^{1} y R^{2} pueden ser tomados juntos para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico de 5 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser insaturado o aromático;
cada uno de R^{3} y R^{4} es independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{5};
cada uno de R^{5} y R^{6} es independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquil(C_{1}-C_{5})tio, halógeno, o carbociclilo o heterociclilo de 4 a 7 miembros;
alternativamente, R^{5} y R^{6} pueden ser tomados juntos para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico de 5 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser insaturado o aromático, y puede estar sustituido opcionalmente con entre uno y tres sustituyentes seleccionados independientemente entre halo, ciano, amino, nitro, R^{40}, R^{40}O-, R^{40}S-, R^{40}O(alquileno C_{1}-C_{5})-, R^{40}O(C=O)-, R^{40}(C=O)-, R^{40}(C=S)-, R^{40}(C=O)O-, R^{40}O(C=O)(C=O)-, R^{40}SO_{2}, NHR^{62}(C=NH)-, NHR^{62}SO_{2}-, y NHR^{62}(C=O)-;
R^{40}
es H, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, fenilo, bencilo, fenetilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, (heterociclil C_{1}-C_{5})-alquileno C_{1}-C_{5}, amino, o mono- o di-(alquil C_{1}-C_{5})amino, o R^{58}OR^{59}-, donde R^{58} es H, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, fenilo, bencilo, fenetilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, o (heterociclil C_{1}-C_{5})-alquileno C_{1}-C_{6} y R^{59} es alquileno C_{1}-C_{5}, fenileno, o heterociclilo C_{1}-C_{5} divalente; y
R^{62}
puede ser H además de los valores para R^{40};
R^{7}
es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, naftilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, acilo C_{2}-C_{8}, aroilo, R^{27}OC=O, R^{28}R^{29}NC=O, R^{27}SO, R^{27}SO_{2}, o R^{28}R^{29}NSO_{2};
R^{8}
es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{7} y R^{8} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
R^{9}
es alquilo C_{1}-C_{5}, fenilo, naftilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5};
R^{21}
es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, naftilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, acilo C_{2}-C_{8}, aroilo, R^{30}OC=O, R^{31}R^{32}NC=O, R^{30}SO, R^{30}SO_{2}, o R^{31}R^{32}NSO_{2};
R^{22}
es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{21} y R^{22} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
cada uno de R^{23}, R^{26}, R^{27}, R^{30}, R^{33}, R^{44}, R^{45}, y R^{50} es alquilo C_{1}-C_{5}, fenilo, naftilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5};
R^{24}
es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, naftilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, acilo C_{2}-C_{8}, aroilo, R^{33}OC=O, R^{34}R^{35}NC=O, R^{33}SO, R^{33}SO_{2}, o R^{34}R^{35}NSO_{2};
R^{25}
es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{24} y R^{25} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
cada uno de R^{10} y R^{11} es independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{10} y R^{11} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
cada uno de R^{28}, R^{29}, R^{31}, R^{32}, R^{34}, R^{35}, R^{46}, R^{47}, R^{51} y R^{52} es independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente R^{28} y R^{29}, R^{31} y R^{32}, R^{34} y R^{35}, R^{46} y R^{47}, o R^{51} y R^{52}, independientemente, pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
n
es 1 o 2;
G
representa alquenodiilo C_{3}-C_{6} o alcanodiilo C_{3}-C_{6} sustituido opcionalmente con hidroxi, halógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alcoxi C_{1}-C_{5}, oxo, hidroxiimino, CO_{2}R^{60}, R^{60}R^{61}NCO_{2}, (L)-alquileno C_{1}-C_{4}-, (L)-alcoxi C_{1}-C_{5}, N_{3}, o [(L)-alquileno C_{1}-C_{5}]amino;
cada uno de R^{60} y R^{61} es independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, bencilo, fenetilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{60} y R^{61} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
L
es amino, mono- o di-alquil(C_{1}-C_{5})amino, pirrolidinilo, morfolinilo, piperidinilo, homopiperidinilo, o piperazinilo, donde los nitrógenos anulares disponibles pueden estar sustituidos opcionalmente con alquilo C_{1}-C_{5}, bencilo, acilo C_{2}-C_{5}, alquil(C_{1}-C_{5})sulfonilo o alcoxi(C_{1}-C_{5})carbonilo;
X
es nitrógeno o R^{12}C;
Y
es nitrógeno o R^{13}C;
Z
es nitrógeno o R^{4}C;
R^{12}
es hidrógeno, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, ciano, nitro, R^{21}R^{22}N, acilo C_{2}-C_{8}, haloalquilo C_{1}-C_{5}, heterociclilo C_{1}-C_{5}, (heterociclilo C_{1}-C_{5})alquileno C_{1}-C_{5}, R^{23}OC=O, R^{23}O(C=O)NH-, R^{23}SO, R^{22}NHCO-, R^{22}NH(C=O)NH-, R^{23}(alquileno C_{1}-C_{4})NHCO-, R^{23}SO_{2}, o R^{23}SO_{2}NH-;
R^{13}
es hidrógeno, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, ciano, nitro, R^{42}R^{43}N, acilo C_{2}-C_{8}, haloalquilo C_{1}-C_{5}, heterociclilo C_{1}-C_{5}, (heterociclilo C_{1}-C_{5})alquileno C_{1}-C_{5}, R^{44}OC=O, R^{44}O(C=O)NH-, R^{44}SO, R^{43}NHCO-, R^{43}NH(C=O)NH-, R^{44}(alquileno C_{1}-C_{4})NHCO-, R^{44}SO_{2}, o R^{44}SO_{2}NH-;
R^{14}
es hidrógeno, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, ciano, nitro, R^{24}R^{25}N, acilo C_{2}-C_{8}, haloalquilo C_{1}-C_{5}, heterociclilo C_{1}-C_{5}, (heterociclilo C_{1}-C_{5})alquileno C_{1}-C_{5}, R^{26}OC=O, R^{26}O(C=O)NH-, R^{26}SO, R^{25}NHCO-, R^{25}NH(C=O)NH-, R^{26}(alquileno C_{1}-C_{4})NHCO-, R^{26}SO_{2}, o R^{26}SO_{2}NH-; alternativamente, R^{12} y R^{13} o R^{12} y R^{2} o R^{13} y R^{14} pueden ser tomados juntos para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser insaturado o aromático;
Ar
representa un anillo arílico o heteroarílico monocíclico o bicíclico, sustituido opcionalmente con entre 1 y 3 sustituyentes seleccionados entre halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, ciano, azido, nitro, R^{15}R^{16}N, R^{17}SO_{2}, R^{17}S R^{17}SO, R^{17}OC=O, R^{15}R^{16}NC=O, haloalquilo C_{1}-C_{5}, haloalcoxi C_{1}-C_{5}, haloalquil(C_{1}-C_{5})tio, y alquil(C_{1}-C_{5})tio;
R^{15}
es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, bencilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, acilo C_{2}-C_{8}, aroilo, R^{53}OC=O, R^{54}R^{55}NC=O, R^{53}S, R^{53}SO, R^{53}SO_{2}, o R^{54}R^{55}NSO_{2};
R^{16}
es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, bencilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{15} y R^{16} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
cada uno de R^{17} y R^{53} es alquilo C_{1}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5};
cada uno de R^{54} y R^{55} es independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, fenilo, bencilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{54} y R^{55} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
W
representa SO_{2}, C=O, CHR^{20}, o un enlace covalente; o W y R^{1}, tomados junto con el anillo de 6 miembros al cual pueden estar anclados ambos, forman una de las siguientes dos fórmulas:
4
\quad
donde X_{a} es O, S, o N; y X_{b} es O, S o SO_{2}
R^{20}
es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, fenilo, bencilo, naftilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5};
R^{42}
es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, naftilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, acilo C_{2}-C_{8}, aroilo, R^{45}OC=O, R^{46}R^{47}NC=O, R^{45}SO, R^{45}SO_{2}, o R^{46}R^{47}NSO_{2};
R^{43}
es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{42} y R^{43} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
R^{44}
es alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, fenilo, naftilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5};
R^{48}
es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, naftilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, acilo C_{2}-C_{8}, aroilo, R^{50}OC=O, R^{51}R^{52}NC=O, R^{50}SO, R^{50}SO_{2}, o R^{51}R^{52}NSO_{2};
R^{49}
es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{48} y R^{49} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático; y
cada uno de los grupos hidrocarbilo o heterocarbilo anteriores, a no ser que se indique de otro modo, y además de los sustituyentes especificados, están sustituidos opcionalmente e independientemente con entre 1 y 3 sustituyentes seleccionados entre metilo, halometilo, hidroximetilo, halo, hidroxi, amino, nitro, ciano, alquilo C_{1}-C_{5}, alcoxi C_{1}-C_{5}, -COOH, acilo C_{2}-C_{6}, [di(alquil C_{1}-C_{4})amino]alquileno C_{2}-C_{5}, [di(alquil C_{1}-C_{4})amino]alquilo C_{2}-C_{5}-NH-CO-, y haloalcoxi C_{1}-C_{5};
o una sal, éster, o amida farmacéuticamente aceptable de los mismos, incluyendo una forma diastereoisomérica de los mismos.
Los compuestos descritos son inhibidores de alta afinidad de la actividad proteolítica de la catepsina S humana. Para su uso en medicina, puede ser deseable la preparación de sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula (I).
Algunos de los compuestos de la presente invención pueden tener un átomo estereogénico y pueden existir en forma de dos enantiómeros. Algunos de los compuestos de la presente invención pueden tener dos o más átomos estereogénicos y pueden existir adicionalmente en forma de diastereómeros. Los expertos en la técnica deben entender que todos estos estereoisómeros y mezclas de los mismos en cualquier proporción están incluidos dentro del alcance de la presente invención.
Otro aspecto de la invención proporciona composiciones antialérgicas farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula (I) y un portador farmacéuticamente aceptable. Una realización adicional de la invención es un procedimiento para elaborar una composición farmacéutica antialérgica que comprende mezclar un compuesto expuesto como se ha descrito antes, con un portador farmacéuticamente aceptable adecuado.
La invención también contempla las composiciones farmacéuticas que comprenden más de un compuesto de fórmula (I) y las composiciones que comprenden un compuesto de fórmula (I) y otro agente farmacéuticamente activo.
La invención da importancia a un método para tratar trastornos o condiciones alérgicas mediados por la enzima catepsina S, en un sujeto que lo necesite, que comprende la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente efectiva de cualquiera de los compuestos o composiciones farmacéuticas descritos antes. Si se administra más de un agente activo, la cantidad terapéuticamente efectiva puede ser una cantidad efectiva en conjunto. Los compuestos descritos aquí inhiben la actividad proteasa de la catepsina S humana, una enzima implicada en la respuesta inmunitaria. En realizaciones preferidas, la inhibición de la catepsina S es selectiva. Como tales, los compuestos y las composiciones descritos son útiles en la prevención, la inhibición, o el tratamiento de las condiciones alérgicas, concretamente las condiciones alérgicas atópicas.
Las características y ventajas adicionales de la invención resultarán evidentes a partir de la descripción detallada y los ejemplos siguientes, y de las reivindicaciones adjuntas.
Breve descripción de las figuras
La Fig. 1 muestra la inhibición de las respuestas proliferativas de las células T humanas a dos especies de ácaros del polvo, Der p y Der f. Panel superior, Fig. 1A: Curva de dilución para PBMC purificadas de donante con alergia cultivadas con dosis tituladas de extractos de alergeno preparados a partir de Der p y Der f durante siete días. La proliferación de células T fue puntuada midiendo la incorporación de timidina-H^{3} durante 18 horas al final del cultivo. Panel inferior, Fig. 1B: Efecto de dosis tituladas de LHVS sobre las respuestas proliferativas de las células T a extractos de ácaro del polvo.
La Fig. 2 muestra la inhibición de las respuestas proliferativas de las células T humanas a las ambrosías pero no de ConA mediante LHVS. Panel superior, Fig. 2A: Curva de dilución para PBMC purificadas de donante con alergia cultivadas con dosis tituladas de extractos de alergeno preparados a partir de Ambrosía pequeña y Ambrosía gigante durante siete días. La proliferación de células T fue puntuada midiendo la incorporación de timidina-H^{3} durante 18 horas al final del cultivo. Panel inferior, Fig. 2B: Efecto de dosis tituladas de LHVS sobre las respuestas proliferativas de las células T a extractos de ambrosía.
La Fig. 3 muestra la inhibición de las respuestas proliferativas de las células T humanas a Der f pero no de ConA mediante dos inhibidores de la Catepsina S, Ejemplo 11 (Fig. 3A) y Ejemplo 36 (Fig. 3B). Las PBMC purificadas de un donador con alergia fueron cultivadas con extractos de alergeno preparados a partir de Der f en presencia de dosis tituladas de los compuestos del ejemplo indicado durante siete días. La proliferación de células T fue puntuada midiendo la incorporación de timidina-H^{3} durante 18 horas al final del cultivo.
Descripción detallada de la invención
Un objetivo de la presente invención fue determinar si la presentación de antígenos concretos en un sistema humano resultaba afectada por la inhibición de la catepsina S. Según la invención, se ha encontrado ahora que los inhibidores de la catepsina S bloquean la presentación de algunos extractos de alergeno brutos en un análisis ex vivo en humanos, manteniéndose de ese modo el uso de inhibidores de la catepsina S para el tratamiento de semejantes condiciones alérgicas.
El bloqueo de la degradación de li disminuirá la presentación de antígeno a las células T CD4 e interrumpirá la respuesta inmunitaria normal. Un inhibidor de la catepsina S afectará específicamente a la actividad de las células T CD4, limitando de ese modo el alcance de la inmunosupresión concomitante, un efecto secundario no deseable de la terapia con corticosteroides.
Mediante la utilización de inhibidores de la catepsina S según los métodos de la presente invención, el componente inmunológico de la reacción alérgica puede resultar bloqueado hasta grados diversos, con la ventaja sobre las terapias actuales de ser más selectivos, tener menos efectos secundarios o reducidos, o ambos. La presente invención está basada, en parte, en el descubrimiento de que los inhibidores de la catepsina S pueden bloquear la presentación de extractos de alergeno brutos en un análisis ex vivo en humanos. Este sistema ex vivo imita íntimamente el procedimiento que se produce en todo el organismo cuando los antígenos entran en la corriente sanguínea, y son presentados por las células presentadoras de antígenos, que a su vez activan las células T CD4. En caso de tratar a un sujeto, el inhibidor o un metabolito del mismo podrían estar presentes también en la sangre como en el análisis ex vivo.
La invención da importancia al tratamiento de una condición alérgica utilizando compuestos de pirazol de fórmula (I).
A. Términos
Los siguientes términos son definidos más abajo y mediante su uso a lo largo de esta descripción.
En "alquilo" se incluyen hidrocarburos de cadena lineal y ramificada sustituidos opcionalmente eliminando al menos un hidrógeno para formar un grupo radical. Entre los grupos alquilo se incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, t-butilo, 1-metilpropilo, pentilo, isopentilo, sec-pentilo, hexilo, heptilo, octilo, etcétera. Alquilo incluye cicloalquilo, tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, y ciclohexilo.
En "alquenilo" se incluyen radicales hidrocarbonados de cadena lineal y ramificada sustituidos opcionalmente como antes con al menos un enlace doble carbono-carbono (sp^{2}). Entre los grupos alquenilo se incluyen etenilo (o vinilo), prop-1-enilo, prop-2-enilo (o alilo), isopropenilo (o 1-metilvinilo), but-1-enilo, but-2-enilo, butadienilos, pentenilos, hexa-2,4-dienilo, etcétera. Los radicales hidrocarbonados que tienen una mezcla de enlaces dobles y enlaces triples, tales como 2-penten-4-inilo, están agrupados aquí como alquinilos. Entre los grupos alquenilo se incluye cicloalquenilo. Las formas cis y trans o (E) y (Z) están incluidas en la invención.
En "alquinilo" se incluyen radicales hidrocarbonados de cadena lineal y ramificada sustituidos opcionalmente como antes con al menos un enlace triple carbono-carbono (sp). Entre los grupos alquinilo se incluyen etinilo, propinilos, butinilos, y pentinilos. Los radicales hidrocarbonados que tienen una mezcla de enlaces dobles y enlaces triples, tales como 2-penten-4-inilo, están agrupados aquí como alquinilos. Entre los grupos alquenilo no se incluye cicloalquinilo.
En "alcoxi" se incluye un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada sustituido opcionalmente con un oxígeno terminal que conecta el grupo alquilo al resto de la molécula. En alcoxi se incluyen metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, t-butoxi, pentoxi, etcétera. "Aminoalquilo", "tioalquilo", y "sulfonilalquilo" son análogos a alcoxi, reemplazando el átomo de oxígeno terminal de alcoxi, respectivamente, con NH (o NR), S, y SO_{2}. En heteroalquilo se incluyen alcoxi, aminoalquilo, tioalquilo, etcétera.
En "arilo" se incluyen fenilo, naftilo, bifenililo, tetrahidronaftilo, etcétera, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido. En arilo también se incluyen grupos aralquilo tales como bencilo, fenetilo, y fenilpropilo. En arilo se incluye un sistema anular que contiene un anillo aromático carbocíclico de 6 miembros sustituido opcionalmente, dicho sistema puede ser bicíclico, puente, y/o fusionado. En el sistema se pueden incluir anillos que sean aromáticos, o parcialmente o completamente saturados. Entre los ejemplos de los sistemas anulares se incluyen indenilo, pentalenilo, 1-4-dihidronaftilo, indanilo, benzimidazolilo, benzo-tiofenilo, indolilo, benzofuranilo, isoquinolinilo, etcétera.
En "heterociclilo" se incluyen anillos aromáticos y no aromáticos opcionalmente sustituidos que tienen átomos de carbono y al menos un heteroátomo (O, S, N) o un radical heteroátomo (SO_{2}, CO, CONH, COO) en el anillo. A no ser que se indique de otro modo, un radical heterocíclico puede tener una valencia que lo conecte al resto de la molécula a través de un átomo de carbono, tal como 3-furilo o 2-imidazolilo, o a través de un heteroátomo, tal como N-piperidilo o 1-pirazolilo. Preferiblemente un heterociclilo monocíclico tiene entre 4 y 7 átomos anulares, o entre 5 y 6 átomos anulares; puede haber entre 1 y 5 heteroátomos o radicales heteroátomo en el anillo, y preferiblemente entre 1 y 3. Un heterociclilo puede ser saturado, insaturado, aromático (v.g. heteroarilo), no aromático, o fusionado.
En heterociclilo también se incluyen anillos fusionados, v.g. bicíclicos, tales como aquellos condensados opcionalmente con un anillo aromático de cinco o seis miembros carbocíclico o heterocíclico sustituido opcionalmente. Por ejemplo, en "heteroarilo" se incluye un anillo heteroaromático de seis miembros sustituido opcionalmente que contiene 1, 2 o 3 átomos de nitrógeno condensado con un anillo aromático carbocíclico o heterocíclico de cinco o seis miembros sustituido opcionalmente. Dicho anillo aromático de cinco o seis miembros heterocíclico condensado con dicho anillo aromático de cinco o seis miembros puede contener 1, 2 o 3 átomos de nitrógeno cuando es un anillo de seis miembros, o 1, 2 o 3 heteroátomos seleccionados entre oxígeno, nitrógeno o azufre cuando es un anillo de cinco miembros.
Entre los ejemplos de los heterociclilos se incluyen tiazolilo, furilo, piranilo, isobenzofuranilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, isotiazolilo, isoxazolilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, indolizinilo, isoindolilo, indolilo, indazolilo, purinilo, quinolilo, furazanilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, piperidilo, piperazinilo, indolinilo, y morfolinilo. Por ejemplo, entre los heterociclilos o los radicales heterocíclicos preferidos se incluyen morfolinilo, piperazinilo, pirrolidinilo, piridilo, ciclohexilimino, cicloheptilimino, y más preferiblemente, piperidilo.
Los ejemplos que ilustran heteroarilo son tienilo, furanilo, pirrolilo, imidazolilo, oxazolilo, tiazolilo, benzotienilo, benzofuranilo, benzimidazolilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo.
"Acilo" hace referencia a un radical carbonilo anclado un átomo de hidrógeno (es decir, un grupo formilo) o a una cadena alquílica o alquenílica sustituida opcionalmente, o heterociclilo.
En "halo" o "halógeno" se incluyen flúor, cloro, bromo, y yodo, y preferiblemente cloro o bromo como sustituyente.
"Alcanodiilo" o "alquileno" representan radicales alcano divalentes sustituidos opcionalmente de cadena lineal o ramificada tales como, por ejemplo, metileno, etileno, propileno, butileno, pentileno o hexileno.
"Alquenodiilo" representa, de manera análoga a lo anterior, radicales alcano divalentes sustituidos opcionalmente de cadena lineal o ramificada tales como, por ejemplo, propenileno, butinileno, pentenileno o hexenileno. En tales radicales, el átomo de carbono que se conecta a un nitrógeno preferiblemente no debe ser insaturado.
"Aroilo" hace referencia a un radical carbonilo anclado a un grupo arilo o heteroarilo sustituido opcionalmente, donde arilo y heteroarilo tienen las definiciones proporcionadas antes. En concreto, benzoilo es fenilcarbonilo.
Según se define aquí, dos radicales, junto con el átomo o los átomos a los que están anclados pueden formar un anillo carbocíclico o heterocíclico de 4 a 7, 5 a 7, o 5 a 6 miembros anulares sustituido opcionalmente, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático. Dichos anillos pueden ser definidos como antes en la sección del Compendio de la Invención. Los ejemplos concretos de semejantes anillos son los que vienen después en la sección siguiente.
Entre las "sales, ésteres, y amidas farmacéuticamente aceptables" se incluyen sales, ésteres, y amiduros de adición de aminoácido de sales carboxilato (v.g., alquilo C_{1}-C_{8}, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, o heterocíclico no aromático) que son dentro de una razón beneficio/riesgo razonable, farmacológicamente efectivas y adecuadas para el contacto con los tejidos de pacientes sin toxicidad, irritación, o respuesta alérgica indebida. Entre las sales representativas se incluyen hidrobromuro, hidrocloruro, sulfato, bisulfato, nitrato, acetato, oxalato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, borato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartrato, naftilato, mesilato, glucoheptonato, lactobionato, y laurilsulfato. Estas pueden incluir cationes metálicos alcalinos y alcalinotérreos tales como sodio, potasio, calcio, y magnesio, así como cationes amonio, amonio cuaternario, y amina no tóxicos tales como tetrametilamonio, metilamina, trimetilamina, y etilamina. Ver, por ejemplo, S.M. Berge, y col., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci., 1977, 66:1-19. Entre las amidas farmacéuticamente aceptables representativas de la invención se incluyen aquellas derivadas de amoníaco, alquil(C_{1}-C_{6})aminas primarias y dialquil(C_{1}-C_{6})aminas secundarias. Entre las aminas secundarias se incluyen radicales anulares heterocíclicos o heteroaromáticos de 5 o 6 miembros que contienen al menos un átomo de nitrógeno y opcionalmente entre 1 y 2 heteroátomos adicionales. Las amidas preferidas están derivadas de amoníaco, alquil(C_{1}-C_{3})aminas primarias y dialquil(C_{1}-C_{2})aminas. Entre los ésteres farmacéuticamente aceptables representativos de la invención se incluyen los ésteres alquílicos C_{1}-C_{7}, cicloalquílicos C_{5}-C_{7}, fenílicos, y fenilalquílicos C_{1}-C_{6}. Entre los ésteres preferidos se incluyen los ésteres metílicos.
En "paciente" o "sujeto" se incluyen mamíferos tales como humanos y animales (perros, gatos, caballos, ratas, conejos, ratones, primates no humanos) que necesiten observación, experimentación, tratamiento o prevención en relación con la enfermedad o condición relevante. Preferiblemente, el paciente o sujeto es un humano.
En "composición" se incluye un producto que comprende los ingredientes especificados en las cantidades especificadas así como cualquier producto originado directa o indirectamente de combinaciones de los ingredientes especificados en las cantidades especificadas.
"Cantidad terapéuticamente efectiva" o "cantidad efectiva" significa la cantidad de compuesto activo o agente farmacéutico que logra la respuesta biológica o medicinal en un sistema de tejidos, animal o humano que está siendo buscada por un investigador, veterinario, doctor en medicina u otro clínico, que incluye el alivio de los síntomas de la enfermedad o trastorno que esté siendo tratado.
Concerniente a los diferentes radicales de esta descripción y de las reivindicaciones, se hacen tres observaciones generales. La primera observación tiene que ver con la valencia. Como con todos los radicales hidrocarbonados, ya sean saturados, insaturados o aromáticos, y ya sean o no cíclicos, de cadena lineal, o ramificados, y también de un modo similar con todos los radicales heterocíclicos, en cada radical se incluyen radicales sustituidos de ese tipo y radicales monovalentes, divalentes, y multivalentes según se indica por el contexto de las reivindicaciones. El contexto indicará que el sustituyente es un radical alquileno o hidrocarbonado con al menos dos átomos de hidrógeno eliminados (bivalente) o más átomos de hidrógeno eliminados (multivalente). Un ejemplo de un radical bivalente que conecta dos partes de la molécula es G en la fórmula (I) que conecta dos anillos.
Segundo, se entiende que los radicales o fragmentos de la estructura definidos aquí incluyen radicales o fragmentos de la estructura sustituidos. Entre los radicales hidrocarbilo se incluyen radicales monovalentes que contienen carbono e hidrógeno tales como alquilo, alquenilo, cicloalquilo, y cicloalquenilo (ya sean aromáticos o insaturados), así como los radicales divalentes correspondientes tales como alquileno, alquenileno, fenileno, etcétera. Entre los radicales heterocarbilo se incluyen radicales monovalentes y divalentes que contienen carbono, hidrógeno, y al menos un heteroátomo. Entre los ejemplos de los radicales heterocarbilo monovalentes se incluyen acilo, aciloxi, alcoxiacilo, heterociclilo, heteroarilo, aroilo, benzoilo, dialquilamino, hidroxialquilo, etcétera. Utilizando "alquilo" como ejemplo, se debe entender que en "alquilo" se incluyen grupos alquilo sustituidos que tienen una o más sustituciones, por ejemplo entre 1 y 5, 1 y 3, o 2 y 4 sustituyentes. Los sustituyentes pueden ser los mismos (dihidroxi, dimetilo), similares (clorofluoro), o diferentes (sustituido con clorobencilo o aminometilo). Entre los ejemplos de alquilo sustituido se incluyen haloalquilo (tales como fluorometilo, clorometilo, difluorometilo, perclorometilo, 2-bromoetilo, perfluorometilo, y 3-yodociclopentilo), hidroxialquilo (tales como hidroximetilo, hidroxietilo, 2-hidroxipropilo, aminoalquilo (tales como aminometilo, 2-aminoetilo, 3-aminopropilo, y 2-aminopropilo), nitroalquilo, alquilalquilo, etcétera. En un grupo dialquil(C_{1}-C_{6})amino se incluyen grupos alquilo seleccionados independientemente, para formar, por ejemplo, metilpropilamino e isopropilmetilamino, además de grupos dialquilamino que tiene dos de los mismos grupos alquilo que dimetilamino o dietilamino.
Tercero, sólo se desean compuestos estables. Por ejemplo, cuando hay un grupo NR'R'', y R puede ser un grupo alquenilo, el enlace doble es al menos un carbono eliminado del nitrógeno para evitar la formación de enaminas. De un modo similar, cuando la línea discontinua es un enlace sp^{2} opcional, si está ausente, está o están incluidos el átomo o los átomos de hidrógeno apropiados.
Entre las sustituciones preferidas para Ar se incluyen metilo, metoxi, fluorometilo, difluorometilo, perfluorometilo (trifluorometilo), 1-fluoroetilo, 2-fluoroetilo, etoxi, flúor, cloro, y bromo, y concretamente metilo, bromo, cloro, perfluorometilo, prefluorometoxi, metoxi, y flúor. Los patrones de sustitución preferidos para Ar o Ar_{1} son fenilo sustituido en la posición 4 o disustituido en las posiciones 3,4.
Los compuestos de la invención se describen adicionalmente en la siguiente sección.
B. Compuestos
La invención da importancia al uso de compuestos de fórmula (I) como se ha descrito en la sección del Compendio para el tratamiento de una condición alérgica.
Entre los compuestos preferidos se incluyen aquellos en los que:
(a)
R^{1} es hidrógeno, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, hidroxi, alquilo C_{1}-C_{5}, ciano, nitro, R^{7}R^{8}N, acilo C_{2}-C_{8}, o R^{10}R^{11}NSO_{2};
(b)
R^{1} es halógeno, ciano, nitro, R^{7}R^{8}N, o R^{10}R^{11}NSO_{2};
(c)
R^{2} es hidrógeno;
(d)
cada uno de R^{3} y R^{4} es independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{3};
(e)
uno de R^{3} y R^{4} es hidrógeno;
(f)
cada uno de R^{3} y R^{4} es hidrógeno;
(g)
uno de R^{5} y R^{6} es hidrógeno y el otro es un radical carbociclilo o heterociclilo de 5-7 miembros, opcionalmente sustituido;
(h)
R^{5} y R^{6} son tomados juntos para formar un heterociclilo de seis miembros;
(i)
R^{5} y R^{6} tomados juntos forman piridinilo, pirimidinilo, o piperazinilo, opcionalmente sustituido en N con R^{40}O(C=O)(C=O)-, R^{40}SO_{2}, R^{40}NHCO_{2}, R^{40}(C=O)- o R^{40}N(C=O)-;
(j)
cada uno de R^{7}, R^{8}, R^{21}, R^{22}, R^{24}, R^{25} es independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{5}; o, independientemente, cada uno de R^{7} y R^{8}, R^{21} y R^{22}, y R^{24} y R^{25} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros sustituido opcionalmente, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
(k)
al menos uno de R^{7} y R^{8}, R^{21} y R^{22}, y R^{24} y R^{25}, tomados juntos, es morfolinilo, piperidinilo, o pirrolidinilo;
(l)
R^{9}, R^{23}, R^{26}, y R^{27} son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{5};
(m)
G es alcanodiilo C_{3}-C_{4}, sustituido opcionalmente con hidroxi, (L)-alquil(C_{1}-C_{5})oxi, o [(L)-alquilen C_{1}-C_{5}]amino-;
(n)
G es alcanodiilo C_{3}, sustituido opcionalmente con hidroxi, (L)-alquil(C_{1}-C_{5})oxi, o [(L)-alquilen C_{1}-C_{5}]amino-;
(o)
X es nitrógeno;
(p)
Y es CR^{13};
(q)
Z es CR^{14};
(r)
X es CH;
(s)
R^{12} es hidrógeno, R^{22}O(C=O)NH-, R^{22}NH(C=O)NH-, R^{22}SO_{2}NH, R^{23}SO, o R^{23}SO_{2}, y R^{13} es hidrógeno, R^{43}O(C=O)NH-, R^{43}NH(C=O)NH-, R^{43}SO_{2}NH, R^{44}SO, o R^{44}SO_{2};
(t)
R^{14} es hidrógeno, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, ciano, nitro, R^{25}O(C=O)NH, R^{25}NH(C=O)NH-, R^{25}SO_{2}NH, R^{24}R^{25}N;
(u)
R^{14} es halógeno, R^{25}O(C=O)NH-, R^{25}NH(C=O)NH-, R^{25}SO_{2}NH, R^{24}R^{25}N; Ar representa un anillo monocíclico, sustituido opcionalmente con entre 1 y 2 sustituyentes seleccionados independientemente entre halógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, ciano, nitro, R^{15}R^{16}N, CF_{3} y OCF_{3};
(v)
Ar es un anillo de seis miembros sustituido con entre 1 y 2 sustituyentes seleccionados entre halo, CF_{3}, OCF_{3}, estando dicho sustituyente o dichos sustituyentes en la posición 4 o en las posiciones 3 y 4, respectivamente;
(w)
W es SO_{2}, C=O, o CHR^{20};
(x)
W es un enlace covalente;
(y)
W y R^{1} tomados juntos son la fórmula (I)(a);
(z)
W y R^{1} tomados juntos son la fórmula (I)(b);
(aa)
uno de R^{3} y R^{4} es hidrógeno; Ar representa un anillo monocíclico, opcionalmente sustituido con entre 1 y 2 sustituyentes seleccionados entre halógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, ciano, nitro, R^{15}R^{16}N, CF_{3} y OCF_{3}; R^{12} es hidrógeno R^{23}SO, o R^{23}SO_{2}; R^{13} es hidrógeno, R^{44}SO, o R^{44}SO_{2}; R^{14} es hidrógeno, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, ciano, nitro, o R^{24}R^{25}N; y G es alcanodiilo C_{3}-C_{4}, sustituido opcionalmente con hidroxi, alquilo C_{1}-C_{3}, (L)-alquil(C_{1}-C_{5})oxi, o [(L)-alquilen C_{1}-C_{5}]amino-;
(bb)
cada uno de R^{3} y R^{4} es hidrógeno; Ar representa un anillo de seis miembros, sustituido opcionalmente con entre 1 y 2 sustituyentes seleccionados entre halógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, ciano, nitro, R^{15}R^{16}N, CF_{3} y OCF_{3}; R^{12} es hidrógeno, R^{23}SO, o R^{23}SO_{2}; R^{13} es hidrógeno, R^{44}SO, o R^{44}SO_{2}; R^{14} es hidrógeno, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, ciano, nitro, o R^{24}R^{25}N; y G es alcanodiilo C_{3}, sustituido opcionalmente con hidroxi, (L)-alquil(C_{1}-C_{5})oxi, o (L)-alquil(C_{1}-C_{5})amino-;
(cc)
Ar es fenilo; y
(dd)
combinaciones de los anteriores.
Entre los compuestos preferidos específicos se incluyen los presentes ejemplos, tales como: 1-[4-(2-Amino-6-cloro-fenil)-piperazin-1-il]-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propan-2-ol; 1-[3-Cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-3-metil-urea; 1-[3-Cloro-2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometilfenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-3-metil-urea; Éster metílico de ácido 3-amino-2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-benzoico; 3-Cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenilamina; 1-[2-(4-{3-[3-(4-Bromo-fenil)-5-metanosulfonil-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxipropil}-piperazin-1-il)-3-cloro-fenil]-3-metil-urea; Amiduro de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometilfenil)-1,4,6,7-tetrahidropirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico; Éster metílico de ácido [3-cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-carbámico; Amiduro de ácido 1-[3-(4-benzo[d]isotiazol-3-il-piperazin-1-il)-propil]-3-(4-bromo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico; Éster metílico de ácido 2-(4-{3-[5-acetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxipropil}-piperazin-1-il)-3-nitro-benzoico; 1-[4-(2-Cloro-6-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propan-2-ol; 2-(4-{2-Hidroxi-3-[3-(4-yodo-fenil)-5-metanosulfonil-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil)-piperazin-1-il)-benzonitrilo; Amiduro de ácido 3-(4-bromo-fenil)-1-{3-[4-(2-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico; 2-(4-{3-[5-Acetil-3-(4-yodo-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo; 2-(4-{3-[3-(4-Cloro-3-metil-fenil)-5-metanosulfonil-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo; 1-(3-(4-Cloro-3-metil-fenil)-1-{3-[4-(2,4-dimetil-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-etanona; 1-{3-[4-(3,5-Dicloro-piridin-4-il)-piperazin-1-il]-propil)-5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina; 2-(4-{3-[5-Metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo; N-[3-Cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-metanosulfonamida; Amiduro de ácido 3-(3,4-dicloro-fenil)-1-{3-[4-(2-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico; y Amiduro de ácido 3-(4-cloro-3-metil-fenil)-1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico.
Además, entre los compuestos preferidos se incluyen aquellos en los que Ar se selecciona entre 4-trifluorometilfenilo, 4-bromofenilo, 4-clorofenilo, 4-cloro-3-metilfenilo y 3,4-diclorofenilo.
Entre los compuestos más preferidos se incluyen los compuestos de los Ejemplos 19, 27, y 33.
Compuestos Relacionados
La invención proporciona los compuestos descritos e íntimamente relacionados, las formas farmacéuticamente aceptables de los compuestos descritos, tales como las formas de sales, ésteres, amidas, ácidos, hidratos o solvatos de los mismos; las formas enmascaradas o protegidas; y las mezclas racémicas, o las formas enantioméricamente u ópticamente puras. Entre los compuestos relacionados se incluyen los compuestos de la invención que han sido modificados para ser detectables, v.g., marcados isotópicamente con F^{18} para su uso como sonda en la tomografía de emisión de positrones (PET) o la tomografía computarizada de emisión de un solo protón (SPECT).
En la invención también se incluyen los compuestos descritos que tienen uno o más grupos funcionales (v.g. hidroxilo, amino, o carboxilo) enmascarados con un grupo protector. Ver, v.g. Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3^{a} ed. (1999) John Wiley & Sons, NY. Algunos de estos compuestos protegidos enmascarados son farmacéuticamente aceptables; otros serán útiles como intermedios. Los intermedios sintéticos y los procedimientos descritos aquí, y modificaciones mínimas de los mismos, también se encuentran dentro del alcance de la invención.
Grupos protectores de hidroxilo
En la protección para el grupo hidroxilo se incluyen éteres metílicos, éteres metílicos sustituidos, éteres etílicos sustituidos, éteres bencílicos sustituidos, y éteres silílicos.
Éteres Metílicos Sustituidos
Entre los ejemplos de los éteres metílicos sustituidos se incluyen metoximetilo, metiltiometilo, t-butiltiometilo, (fenildimetilsilil)metoximetilo, benciloximetilo, p-metoxibenciloximetilo, (4-metoxifenoxi)-metilo, guayacolmetilo, t-butoximetilo, 4-penteniloximetilo, siloximetilo, 2-metoxietoximetilo, 2,2,2-tricloroetoximetilo, bis(2-cloroetoxi)metilo, 2-(trimetilsilil)etoximetilo, tetrahidropiranilo, 3-bromotetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, 1-metoxiciclohexilo, 4-metoxitetrahidropiranilo, 4-metoxitetrahidrotiopiranilo, S,S-dióxido de 4-metoxitetrahidrotiopiranilo, 1-[(2-cloro-4-metil)fenil]-4-metoxipiperidin-4-ilo, 1,4-dioxan-2-ilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofuranilo y 2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahidro-7,8,8-trimetil-4,7-metanobenzofuran-2-ilo.
Éteres Etílicos Sustituidos
Entre los ejemplos de los éteres etílicos sustituidos se incluyen 1-etoxietilo, 1-(2-cloroetoxi)etilo, 1-metil-1-metoxietilo, 1-metil-1-benciloxietilo, 1-metil-1-benciloxi-2-fluoroetilo, 2,2,2-tricloroetilo, 2-trimetilsililetilo, 2-(fenilselenil)-etilo, t-butilo, alilo, p-clorofenilo, p-metoxifenilo, 2,4-dinitrofenilo, y bencilo.
Éteres Bencílicos Sustituidos
Entre los ejemplos de los éteres bencílicos sustituidos se incluyen p-metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, o-nitrobencilo, p-nitrobencilo, p-halobencilo, 2,6-diclorobencilo, p-cianobencilo, p-fenilbencilo, 2- y 4-picolilo, N-oxido de 3-metil-2-picolilo, difenilmetilo, p,p'-dinitrobenzhidrilo, 5-dibenzosuberilo, trifenilmetilo, \alpha-naftildifenilmetilo, p-metoxifenildifenilmetilo, di(p-metoxifenil)fenilmetilo, tri(p-metoxifenil)metilo, 4-(4'-bromofenaciloxi)-fenildifenilmetilo, 4,4',4''-tris(4,5-dicloroftalimido-fenil)metilo, 4,4',4''-tris(levulinoiloxifenil)metilo, 4,4',4''-tris(benzoiloxifenil)metilo, 3-(imidazol-1-ilmetil)bis(4',4''-dimetoxifenil)metilo, 1,1-bis(4-metoxifenil)-1'-pirenilmetilo, 9-antrilo, 9-(9-fenil)-xantenilo, 9-(9-fenil-10-oxo)antrilo, 1,3-benzoditiolan-2-ilo y S,S-dióxido de benzisotiazolilo.
Éteres Silílicos
Entre los ejemplos de los éteres silílicos se incluyen trimetilsililo, triisopropilsililo, dimetilisopropilsililo, dietilisopropilsililo, dimetilhexilsililo, t-butildimetilsililo, t-butildifenilsililo, tribencilsililo, tri-p-xililsililo, trifenilsililo, difenilmetilsililo, y t-butilmetoxifenilsililo.
Ésteres
Además de los éteres, un grupo hidroxilo puede ser protegido en forma de éster. Entre los ejemplos de los ésteres se incluyen formiato, bencilformiato, acetato, cloroacetato, dicloroacetato, tricloroacetato, trifluoroacetato, metoxiacetato, trifenilmetoxiacetato, fenoxiacetato, p-clorofenoxiacetato, p-P-fenilacetato, 3-fenilpropionato, 4-oxopentanoato (levulinato), 4,4-(etilenditio)pentanoato, pivaloato, adamantanoato, crotonato, 4-metoxicrotonato, benzoato, p-fenilbenzoato, 2,4,6-trimetilbenzoato (mesitoato).
Carbonatos
Entre los ejemplos de los carbonatos se incluyen metilo, 9-fluorenilmetilo, etilo, 2,2,2-tricloroetilo, 2-(trimetilsilil)etilo, 2-(fenilsulfonil)etilo, 2-(trifenilfosfonio)etilo, isobutilo, vinilo, alilo, p-nitrobencilo, bencilo, p-metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, o-nitrobencilo, p-nitrobencilo, tiocarbonato de S-bencilo, 4-etoxi-1-naftilo, y ditiocarbonato de metilo.
Escisión asistida
Entre los ejemplos de la escisión asistida se incluyen 2-yodobenzoato, 4-azidobutirato, 4-nitro-4-metilpentanoato, o-(dibromometil)benzoato, 2-formilbencenosulfonato, carbonato de 2-(metiltiometoxi)-etilo, 4-(metiltiometoxi)butirato, y 2-(metiltiometoximetil)benzoato.
Ésteres Diversos
Entre los ejemplos de los ésteres diversos se incluyen 2,6-dicloro-4-metilfenoxiacetato, 2,6-dicloro-4-(1,1,3,3-tetrametilbutil)fenoxiacetato, 2,4-bis(1,1-dimetilpropil)fenoxiacetato, clorodifenilacetato, isobutirato, monosuccinoato, (E)-2-metil-2-butenoato (tigloato), o-(metoxicarbonil)benzoato, p-P-benzoato, \alpha-naftoato, nitrato, N,N,N',N'-tetrametilfosforodiamidato de alquilo, N-fenilcarbamato, borato, dimetilfosfinotioilo, y 2,4-dinitrofenilsulfenato.
Sulfonatos
Entre los ejemplos de los sulfonatos se incluyen sulfato, metanosulfonato (mesilato), bencilsulfonato, y tosilato.
Grupos protectores de amino
En la protección para los grupos amino se incluyen carbamatos, amidas, y grupos protectores de -NH especiales.
Entre los ejemplos de los carbamatos se incluyen carbamatos de metilo y etilo, carbamatos de etilo sustituidos, carbamatos de escisión asistida, carbamatos de escisión fotolítica, derivados de tipo urea, y carbamatos diversos.
Carbamatos
Entre los ejemplos de los carbamatos de metilo y etilo se incluyen metilo y etilo, 9-fluorenilmetilo, 9-(2-sulfo)fluorenilmetilo, 9-(2,7-dibromo)fluorenilmetilo, 2,7-di-t-butil-[9-(10,10-dioxo-10,10,10,10-tetrahidrotioxantil)]metilo, y 4-metoxifenacilo.
Etilo Sustituido
Entre los ejemplos de los carbamatos de etilo sustituidos se incluyen 2,2,2-tricloroetilo, 2-trimetilsililetilo, 2-feniletilo, 1-(1-adamantil)-1-metiletilo, 1,1-dimetil-2-haloetilo, 1,1-dimetil-2,2-dibromoetilo, 1,1-dimetil-2,2,2-tricloroetilo, 1-metil-1-(4-bifenilil)etilo, 1-(3,5-di-t-butilfenil)-1-metiletilo, 2-(2'- y 4'-piridil)etilo, 2-(N,N-diciclohexil-carboxamido)etilo, t-butilo, 1-adamantilo, vinilo, alilo, 1-isopropilalilo, cinamilo, 4-nitrocinamilo, 8-quinolilo, N-hidroxipiperidinilo, alquilditio, bencilo, p-metoxibencilo, p-nitrobencilo, p-bromobencilo, p-clorobencilo, 2,4-diclorobencilo, 4-metilsulfinilbencilo, 9-antrilmetilo y difenilmetilo.
Escisión Asistida
Entre los ejemplos de la escisión asistida se incluyen 2-metiltioetilo, 2-metilsulfoniletilo, 2-(p-toluenosulfonil)etilo, [2-(1,3-ditianil)]metilo, 4-metiltiofenilo, 2,4-dimetiltiofenilo, 2-fosfonioetilo, 2-trifenilfosfonioisopropilo, 1,1-dimetil-2-cianoetilo, m-cloro-p-aciloxibencilo, p-(dihidroxiboril)bencilo, 5-benzisoxazolilmetilo, y 2-(trifluorometil)-6-cromonilmetilo.
Escisión Fotolítica
Entre los ejemplos de la escisión fotolítica se incluyen m-nitrofenilo, 3,5-dimetoxibencilo, o-nitrobencilo, 3,4-dimetoxi-6-nitrobencilo, y fenil(o-nitrofenil)metilo.
Derivados de Tipo Urea
Entre los ejemplos de los derivados de tipo urea se incluyen derivado de fenotiazinil-(10)-carbonilo, N'-p-toluenosulfonilaminocarbonilo, y N'-fenilaminotio-carbonilo.
Carbamatos Diversos
Entre los ejemplos de los carbamatos diversos se incluyen t-amilo, S-benciltiocarbamato, p-cianobencilo, ciclobutilo, ciclohexilo, ciclopentilo, ciclopropil-metilo, p-deciloxibencilo, diisopropilmetilo, 2,2-dimetoxicarbonilvinilo, o-(N,N-dimetilcarboxamido)-bencilo, 1,1-dimetil-3-(N,N-dimetilcarboxamido)propilo, 1,1-dimetilpropinilo, di(2-piridil)metilo, 2-furanilmetilo, 2-yodoetilo, isobornilo, isobutilo, isonicotinilo, p-(p'-metoxifenilazo)bencilo, 1-metilciclobutilo, 1-metilciclohexilo, 1-metil-1-ciclopropilmetilo, 1-metil-1-(3,5-dimetoxifenil)etilo, 1-metil-1-(p-fenilazofenil)etilo, 1-metil-1-feniletilo, 1-metil-1-(4-piridil)etilo, fenilo, p-(fenilazo)bencilo, 2,4,6-tri-t-butilfenilo, 4-(trimetilamonio)bencilo, y 2,4,6-trimetilbencilo.
Entre los ejemplos de las amidas se incluyen:
Amidas
N-formilo, N-acetilo, N-cloroacetilo, N-tricloroacetilo, N-trifluoroacetilo, N-fenilacetilo, N-3-fenilpropionilo, N-picolinilo, N-3-piridilcarboxamida, derivado de N-benzoilfenilalanilo, N-benzoilo, N-p-fenilbenzoilo.
Escisión Asistida
N-o-nitrofenilacetilo, N-o-nitrofenoxiacetilo, N-acetoacetilo, (N'-ditiobenciloxicarbonilamino)acetilo, N-3-(p-hidroxifenil)propionilo, N-3-(o-nitrofenil)-propionilo, N-2-metil-2-(o-nitrofenoxi)propionilo, N-2-metil-2-(o-fenilazofenoxi)propionilo, N-4-clorobutirilo, N-3-metil-3-nitrobutirilo, N-o-nitrocinamoílo, derivado de N-acetilmetionina, N-o-nitrobenzoilo, N-o-(benzoiloximetil)benzoilo, y 4,5-difenil-3-oxazolil-2-ona.
Derivados Imida Cíclicos
N-Ftalimida, N-ditiasuccinoilo, N-2,3-difenilmaleoilo, N-2,5-dimetilpirrolilo, aducto de N-1,1,4,4-tetrametildisilazaciclopentano, 1,3-dimetil-1,3,5-triazaciclohexan-2-ona sustituida en la posición 5, 1,3-dibencil-1,3,5-triazaciclohexan-2-ona sustituida en la posición 5, y 3,5-dinitro-4-piridonilo sustituido en la posición 1.
Grupos protectores de NH especiales
Entre los ejemplos de los grupos protectores de NH especiales se incluyen:
N-Alquil y N-Aril Aminas
N-metilo, N-alilo, N-[2-(trimetilsilil)etoxi]metilo, N-3-acetoxipropilo, N-(1-isopropil-4-nitro-2-oxo-3-pirrolin-3-ilo), sales de amonio cuaternario, N-bencilo, N-4-metoxibencilo, N-di(4-metoxifenil)metilo, N-5-dibenzosuberilo, N-trifenilmetilo, N-(4-metoxifenil)-difenilmetilo, N-9-fenilfluorenilo, N-2,7-dicloro-9-fluorenilmetileno, N-ferrocenilmetilo, y N'-oxido de N-2-picolilamina.
Derivados Imina
N-1,1-dimetiltiometileno, N-bencilideno, N-p-metoxibencilideno, N-difenilmetileno, N-[(2-piridil)-mesitil]metileno, y N-(N',N'-dimetilaminometileno).
Protección para el grupo carbonilo Acetales y Cetales Acíclicos
Entre los ejemplos de los acetales y cetales acíclicos se incluyen dimetilo, bis(2,2,2-tricloroetilo), dibencilo, bis(2-nitrobencilo) y diacetilo.
Acetales y Cetales Cíclicos
Entre los ejemplos de los acetales y cetales cíclicos se incluyen 1,3-dioxanos, 5-metilen-1,3-dioxano, 5,5-dibromo-1,3-dioxano, 5-(2-piridil)-1,3-dioxano, 1,3-dioxolanos, 4-bromometil-1,3-dioxolano, 4-(3-butenil)-1,3-dioxolano, 4-fenil-1,3-dioxolano, 4-(2-nitrofenil)-1,3-dioxolano, 4,5-dimetoximetil-1,3-dioxolano, O,O'-fenilendioxi y 1,5-dihidro-3H-2,4-benzodioxepina.
Ditio Acetales y Cetales Acíclicos
Entre los ejemplos de los ditioacetales y cetales acíclicos se incluyen S,S'-dimetilo, S,S'-dietilo, S,S'-dipropilo, S,S'-dibutilo, S,S'-dipentilo, S,S'-difenilo, S,S'-dibencilo y S,S'-diacetilo.
Ditio Acetales y Cetales Cíclicos
Entre los ejemplos de los ditio acetales y cetales cíclicos se incluyen 1,3-ditiano, 1,3-ditiolano y 1,5-dihidro-3H-2,4-benzoditiepina.
Monotio Acetales y Cetales Acíclicos
Entre los ejemplos de los monotio acetales y cetales acíclicos se incluyen O-trimetilsilil-S-alquilo, O-metil-S-alquilo o -S-fenil y O-metil-S-2-(metiltio)etilo.
Monotio Acetales y Cetales Cíclicos
Entre los ejemplos de los monotio acetales y cetales cíclicos se incluyen los 1,3-oxatiolanos.
Derivados diversos Cianhidrinas Sustituidas en O
Entre los ejemplos de las cianhidrinas sustituidas en O se incluyen O-acetilo, O-trimetilsililo, O-1-etoxietilo y O-tetrahidropiranilo.
Hidrazonas Sustituidas
Entre los ejemplos de las hidrazonas sustituidas se incluyen N,N-dimetilo y 2,4-dinitrofenilo.
Derivados Oxima
Entre los ejemplos de los derivados oxima se incluyen O-metilo, O-bencilo y O-feniltiometilo.
Iminas Derivados Sustituidos con Metileno y Derivados Cíclicos
Entre los ejemplos de los derivados sustituidos con metileno y los derivados cíclicos se incluyen oxazolidinas, 1-metil-2-(1'-hidroxialquil)imidazoles, N,N'-dimetilimidazolidinas, 2,3-dihidro-1,3-benzotiazoles, aductos de dietilamina, y complejo de metilaluminio-bis(2,6-di-t-butil-4-metilfenoxido) (MAD).
Protección para el grupo carboxilo Ésteres Ésteres Metílicos Sustituidos
Entre los ejemplos de los ésteres metílicos sustituidos se incluyen 9-fluorenilmetilo, metoximetilo, metiltiometilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrofuranilo, metoxietoximetilo, 2-(trimetilsilil)etoximetilo, benciloximetilo, fenacilo, p-bromofenacilo, \alpha-metilfenacilo, p-metoxifenacilo, carboxamidometilo, y N-ftalimidometilo.
Ésteres Etílicos Sustituidos en la Posición 2
Entre los ejemplos de los ésteres etílicos sustituidos en la posición 2 se incluyen 2,2,2-tricloroetilo, 2-haloetilo, \omega-cloroalquilo, 2-(trimetilsilil)etilo, 2-metiltioetilo, 1,3-ditianil-2-metilo, 2-(p-nitrofenilsulfenil)etilo, 2-(p-toluenosulfonil)etilo, 2-(2'-piridil)etilo, 2-(difenilfosfino)etilo, 1-metil-1-feniletilo, t-butilo, ciclopentilo, ciclohexilo, alilo, 3-buten-1-ilo, 4-(trimetilsilil)-2-buten-1-ilo, cinamilo, \alpha-metilcinamilo, fenilo, p-(metilmercapto)fenilo y bencilo.
Ésteres Bencílicos Sustituidos
Entre los ejemplos de los ésteres bencílicos sustituidos se incluyen trifenilmetilo, difenilmetilo, bis(o-nitrofenil)metilo, 9-antrilmetilo, 2-(9,10-dioxo)antrilmetilo, 5-dibenzosuberilo, 1-pirenilmetilo, 2-(trifluorometil)-6-cromilmetilo, 2,4,6-trimetilbencilo, p-bromobencilo, o-nitrobencilo, p-nitrobencilo, p-metoxibencilo, 2,6-dimetoxibencilo, 4-(metilsulfinil)-bencilo, 4-sulfobencilo, piperonilo, 4-picolilo y p-P-bencilo.
Ésteres Silílicos
Entre los ejemplos de los ésteres silílicos se incluyen trimetilsililo, trietilsililo, t-butildimetilsililo, i-propildimetilsililo, fenildimetil-sililo y di-t-butilmetilsililo.
Ésteres Activados
Entre los ejemplos de los ésteres activados se incluyen los tioles.
Derivados Diversos
Entre los ejemplos de los Derivados Diversos se incluyen oxazoles, 2-alquil-1,3-oxazolinas, 4-alquil-5-oxo-1,3-oxazolidinas, 5-alquil-4-oxo-1,3-dioxolanos, orto ésteres, grupos fenilo y complejos de pentaaminocobalto (III).
Ésteres Estannílicos
Entre los ejemplos de los ésteres estannílicos se incluyen trietilestannilo y tri-n-butilestannilo.
Amidas e hidrazidas Amidas
Entre los ejemplos de las amidas se incluyen N,N-dimetilo, pirrolidinilo, piperidinilo, 5,6-dihidrofenantridinilo, o-nitroanilidas, N-7-nitroindolilo, N-8-nitro-1,2,3,4-tetrahidroquinolilo, y p-P-bencenosulfonamidas.
Hidrazidas
Entre los ejemplos de las hidrazidas se incluyen N-fenil- y N,N'-diisopropil-hidrazidas.
C. Síntesis
Los compuestos de la presente invención pueden ser preparados mediante química orgánica sintética convencional y mediante métodos matriciales o combinatorios, como se muestra en los Esquemas 1 a 11 de más abajo, y en los Ejemplos 1 a 24 detallados representativos. Los expertos en la técnica serán capaces de modificar y adaptar la guía proporcionada aquí para elaborar los compuestos descritos.
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Esquema 1
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5 
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Esquema 2
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6 
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Esquema 3
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7 
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Esquema 4
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Esquema 5
9 
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Esquema 6
10
Esquema 7
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11 
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Esquema 8
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Esquema 9
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Esquema 10
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Esquema 11
15
D. Formulación y Administración
Los presentes compuestos inhiben la actividad proteolítica de la catepsina S humana y por lo tanto son útiles como medicamento, especialmente en los métodos para tratar a pacientes que padecen trastornos o condiciones alérgicas que están modulados o regulados por la inhibición de la actividad de la catepsina S.
La invención da importancia al uso de una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención para la fabricación de un medicamento para tratar a un sujeto con una condición alérgica mediada por la catepsina S. La invención también proporciona el uso de una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención para la fabricación de un medicamento para inhibir la actividad de la catepsina S en un sujeto.
En vista de su efecto inhibidor sobre la actividad proteolítica de la catepsina S humana, los compuestos de la presente invención pueden ser formulados en diferentes formas farmacéuticas para los fines de la administración. Para preparar estas composiciones farmacéuticas, se mezcla íntimamente una cantidad eficaz de un compuesto concreto, en forma de sal de adición de base o ácido, como ingrediente activo con un portador farmacéuticamente aceptable.
Un portador puede tomar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración. Estas composiciones farmacéuticas están deseablemente en una forma de dosificación unitaria adecuada, preferiblemente, para la administración oral o la inyección parenteral. Por ejemplo, al preparar las composiciones en una forma de dosificación oral, se puede emplear cualquiera de los medios farmacéuticos habituales. Entre estos se incluyen agua, glicoles, aceites, y alcoholes en el caso de las preparaciones líquidas orales tales como suspensiones, jarabes, elixires y soluciones; o portadores sólidos tales como almidones, azúcares, caolín, lubricantes, aglutinantes y agentes disgregantes en el caso de los polvos, píldoras, cápsulas y tabletas. En vista de su facilidad de administración, las tabletas y las cápsulas representan la forma unitaria de dosificación oral más ventajosa, en cuyo caso se emplean generalmente portadores farmacéuticos sólidos. Para las composiciones parenterales, el portador comprenderá normalmente agua estéril, al menos en gran parte, aunque se pueden incluir otros ingredientes, por ejemplo, para ayudar a la solubilidad. Por ejemplo, se pueden preparar soluciones inyectables en las cuales el portador comprende solución salina, solución de glucosa o una mezcla de solución salina y de glucosa. También se pueden preparar suspensiones inyectables en cuyo caso se pueden emplear portadores líquidos apropiados, agentes suspensores y similares. En las composiciones adecuadas para la administración percutánea, el portador comprende opcionalmente un agente potenciador de la penetración y/o un agente humectante adecuado, opcionalmente combinado con aditivos adecuados de cualquier naturaleza en proporciones mínimas, cuyos aditivos no ocasionan un efecto deletéreo significativo para la piel. Tales aditivos pueden facilitar la administración en la piel y/o pueden ser útiles para preparar las composiciones deseadas. Estas composiciones pueden ser administradas de diversas maneras, v.g. en forma de un parche transdérmico, en forma de gota de producto sobre la piel (spot-on), como una pomada. Las sales de adición de ácido de los compuestos de fórmula (I), debido a su solubilidad incrementada en agua sobre la correspondiente forma de base, son más adecuadas en la preparación de composiciones acuosas.
Resulta especialmente ventajoso formular las composiciones farmacéuticas anteriormente mencionadas en formas de dosificación unitarias para facilitar la administración y la uniformidad de la dosificación. La forma unitaria de dosificación según se utiliza en la memoria hace referencia a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de ingrediente activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado asociado con el portador farmacéutico requerido. Los ejemplos de tales formas unitarias de dosificación son las tabletas (incluyendo las tabletas rayadas o tabletas recubiertas), las cápsulas, las píldoras, los paquetes de polvo, las obleas, las soluciones o suspensiones inyectables, las cucharaditas, las cucharadas y similares, y múltiplos segregados de las mismas.
Entre las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables se incluyen las formas salinas de adición de ácido terapéuticamente activas no tóxicas que pueden formar los compuestos descritos. Las últimas pueden ser obtenidas convenientemente tratando la forma alcalina con un ácido apropiado. Los ácidos apropiados comprenden, por ejemplo, ácidos inorgánicos tales como ácidos hidrohalogenados, v.g. ácido clorhídrico o bromhídrico; ácidos sulfúrico; nítrico; fosfórico; y similares; o ácidos orgánicos tales como, por ejemplo, los ácidos acético, propanoico, hidroxiacético, láctico, pirúvico, oxálico, malónico, succínico, maleico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, metanosulfónico, etanosulfónico, bencenosulfónico, p-toluenosulfónico, ciclámico, salicílico, p-aminosalicílico, palmoico y similares. El término sal de adición también comprende los solvatos que los compuestos descritos pueden formar, así como las sales de los mismos. Tales solvatos son por ejemplo los hidratos, los alcoholatos y similares. Por el contrario la forma salina puede ser convertida mediante tratamiento con álcali en la forma de base libre.
Las formas estereoisoméricas definen todas las posibles formas isoméricas que los compuestos de fórmula (I) pueden poseer. A menos que se mencione o se indique de otro modo, la denominación química de los compuestos indica la mezcla de todas las posibles formas estereoquímicamente isoméricas, conteniendo dichas mezclas todos los diastereoisómeros y enantiómeros de la estructura molecular básica. Más concretamente, los centros estereogénicos pueden tener la configuración (R) o (S); los sustituyentes de los radicales cíclicos divalentes pueden tener la configuración cis o trans. La invención abarca las formas estereoisoméricamente isoméricas incluyendo los diastereoisómeros, así como las mezclas de los mismos en cualquier proporción de los compuestos descritos. Los compuestos descritos también pueden existir en sus formas tautoméricas. Se pretende que tales formas aunque no están explícitamente indicadas en las fórmulas anteriores y siguientes están incluidas dentro del alcance de la presente invención.
Aquellos expertos en el tratamiento de los trastornos o las afecciones mediadas por la enzima catepsina S podrían determinar fácilmente la cantidad diaria eficaz a partir de los resultados de los ensayos presentados aquí más adelante y otra información. En general se contempla que una dosis terapéuticamente eficaz sería de 0,001 mg/kg a 5 mg/kg de peso corporal, más preferiblemente de 0,01 mg/kg a 0,5 mg/kg de peso corporal. Puede resultar apropiado administrar la dosis terapéuticamente efectiva en forma de dos, tres, cuatro o más sub-dosis a intervalos apropiados a lo largo del día. Dichas sub-dosis pueden ser formuladas como formas de dosificación unitarias, conteniendo por ejemplo de 0,05 mg a 250 mg, y en particular de 0,5 a 50 mg de ingrediente activo por forma de dosificación unitaria. Entre los ejemplos se incluyen formas de dosificación de 2 mg, 4 mg, 7 mg, 10 mg, 15 mg, 25 mg, y 35 mg. Los compuestos de la invención también pueden ser preparados en formulaciones de liberación con el tiempo o subcutáneas o en parches transdérmicos. El compuesto descrito también puede ser formulado en forma de una pulverización u otras formulaciones tópicas o inhalables.
La dosis exacta y la frecuencia de la administración dependen del compuesto concreto de fórmula (I) utilizado, la condición concreta que esté siendo tratada, la gravedad de la afección que esté siendo tratada, la edad, del peso y el estado físico general del paciente concreto así como de otra medicación que esté tomando el paciente, como es bien sabido por los expertos en la técnica. Además, es evidente que dicha cantidad diaria eficaz puede ser disminuida o aumentada dependiendo de la respuesta del paciente tratado y/o dependiendo de la evaluación del médico que prescribe los compuestos de la presente invención. Los intervalos de la cantidad diaria eficaz mencionados aquí son por lo tanto meras pautas.
En la siguiente sección se incluye información detallada referente a la preparación, caracterización, y uso de los compuestos descritos.
E. Ejemplos Ejemplo 1
16
1-(3-(4-Cloro-fenil)-1-{3-[4-(2-fluoro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-etanona.
A. 1-[3-(4-Cloro-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
A una solución agitada de 50 g (0,35 mol) de N-acetil-4-piperidona y 31 g (0,35 mol) de morfolina en benceno (350 mL) se añadió una cantidad catalítica (\sim 0,25 g) de ácido p-toluenosulfónico. La mezcla se calentó a reflujo durante 10 h con una trampa Dean-Stark. El disolvente se eliminó a presión reducida para dar un aceite de color pardo. El producto bruto se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (175 mL) y se añadieron 50,0 mL (0,35 mol) de Et_{3}N. La mezcla se enfrió a 0ºC y se añadió lentamente una solución de 45,0 mL (0,35 mol) de cloruro de 4-clorobenzoilo en CH_{2}Cl_{2} (50 mL) mediante un embudo de goteo a lo largo de 1 h. Se dejó que la mezcla se templara a la temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La reacción se diluyó después con HCl 1N (150 mL) y se agitó vigorosamente durante 3 h. La capa acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 250 mL) y los extractos combinados se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida. El aceite bruto se diluyó con EtOH (350 mL) y se enfrió a 0ºC. A esta solución agitada se añadieron lentamente 33,0 mL (1,06 mol) de hidrazina y se dejó que la mezcla se templara a la temperatura ambiente y se agitó durante la noche tiempo durante el cual se formó un precipitado de color blanco. El volumen de la reacción se redujo a \sim150 mL y se añadió EtOAc (750 mL) a la mezcla. La suspensión se agitó vigorosamente durante 2 h y se filtró, después se lavó con EtOAc (2 x 200 mL) y se secó a vacío para proporcionar 41,4 g (42% a lo largo de 3 etapas) de un sólido de color amarillo pálido. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%): R_{f} = 0,3. MS (electropulverización), m/z calculado para C_{14}H_{14}ClN_{3}O [M+H]^{+} 276,08, observado 276,0. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}, una mezcla de rotámeros de amidas): 7,65 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,64 (d, J = 9,3 Hz, 2H), 7,58 (d; J = 10,5 Hz, 2H), 7,55 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 4,94 (s, 2H), 4,78 (s, 2H), 4,08 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 3,90 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,02 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,96 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,31 (s, 3H).
B. 1-[3-(4-Cloro-fenil)-1-(3-cloro-propil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
Se añadió CS_{2}CO_{3} (2,66 g, 8,2 mmoles) a una solución de 1-[3-(4-cloro-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona (1,0 g, 5,4 mmoles) en DMF (10 mL) y se agitó durante 15 min. Se añadió 1-bromo-3-cloropropano (1,28 g, 8,2 mmoles) y se agitó en N_{2} a la temperatura ambiente durante 36 h. Se añadió agua (50 mL) a la reacción y se agitó durante 5 min. El producto precipitó. La porción acuosa se decantó y se añadió agua al residuo y se decantó de nuevo. El semisólido se recogió en CH_{2}Cl_{2} y se hizo pasar a través de un tapón pequeño de SiO_{2} (MeOH/EtOAc al 5%) para obtener 1,06 g (83%) de un semisólido de color amarillo pálido. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{17}H_{19}Cl_{2}N_{3}O, 351,09; m/z encontrada, 352,0 [M+H]^{+}. RMN H^{1} (500 MHz, CDCl_{3}, una mezcla de rotámeros 1:1): 7,60 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,61 (s, 1H), 4,20 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 3,94 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 3,76 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 3,52 (c, J = 6,1 Hz, 2H), 2,84 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 2,77 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 2,37 (sextete, J = 6,1 Hz, 2H), 2,21 (s, 1,5 H), 2,16 (s, 1,5 H).
C. 1-(3-(4-Cloro-fenil)-1-{3-[4-2-fluoro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-etanona
Se disolvió 1-[3-(4-Cloro-fenil)-1-(3-cloro-propil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona (0,053 g, 0,15 mmoles) en CH_{3}CN (0,5 mL) y se añadió una solución de 1-(2-fluorofenil)piperazina (0,053 g, 0,30 mmoles) en CH_{3}CN (0,5 mL), seguido de K_{2}CO_{3} (0,031 g, 0,22 mmoles) y Bu_{4}NI (0,018 g, 0,05 mmoles). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 7 d. La TLC preparativa (sílice, MeOH/EtOAc al 5%) proporcionó 30 mg (41%) del compuesto del título. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{27}H_{31}ClFN_{5}O, 495,22; m/z encontrada, 496,3 [M+H]^{+}. RMN H^{1} (500 MHz, CDCl_{3}, una mezcla de rotámeros 1:1): 7,60 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,39(d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,06-6,90 (m, 4H), 4,77 (s, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,10 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,92 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 3,74 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 3,08 (s ancho, 4H), 2,83 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 2,77 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 2,58 (s ancho, 4H), 2,41-2,38 (m, 2H), 2,19 (s, 1,5H), 2,13 (s, 1,5H), 2,10-2,07 (m, 2H).
Ejemplo 2
17
1-{3-(4-Cloro-fenil)-1-[2-hidroxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-etanona.
A. 1-[3-(4-Clorofenil)-1-oxiranilmetil-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
A una solución agitada de 1,00 g (3,63 mmoles) de 1-[3-(4-cloro-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona y 2,85 mL (36,3 mmoles) de epiclorhidrina se añadieron 1,30 g (3,99 mmoles) de CS_{2}CO_{3} sólido. La reacción se agitó durante 48 h y el disolvente se eliminó a presión reducida. El residuo se diluyó después con H_{2}O (50 mL) y EtOAc (50 mL). Las capas se separaron, y la capa orgánica se lavó con H_{2}O (25 mL) y salmuera (25 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida. La purificación mediante cromatografía instantánea (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 0-15%) proporcionó 0,72 g (60%) de un sólido de color blanco. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%): R_{f} = 0,5. MS (electropulverización): m/z calculado para C_{17}H_{18}ClN_{3}O_{2} [M+H]^{+}, 332,11, observado 332,0. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}, una mezcla de rotámeros de amidas): 7,60 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,54 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,40 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,36 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,80 y 4,73 (A y B de cuartete AB, J_{ab} = 15,8 Hz, 2H), 4,60 (s, 2H), 4,47 (dd, J = 15,3, 2,5 Hz, 1H), 4,42 (dd, J = 15,0, 2,7 Hz, 1H), 4,11 (dd, J = 5,3, 2,5 Hz, 1H), 4,08 (dd, J = 5,1, 3,3 Hz, 1H), 3,99-3,85 (m, 2H), 3,73 (dt, J = 5,9, 1,8 Hz, 2H), 3,37 (m, 2H), 2,87-2,80 (m, 3H), 2,80-2,69 (m, 3H), 2,53 (dd, J = 4,7, 2,5 Hz, 1H), 2,48 (dd, J = 4,6, 2,6, 1H), 2,19 (s, 3H), 2,15 (s, 3H).
B. 1-{3-(4-Cloro-fenil)-1-[2-hidroxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-etanona
Una solución de 1-[3-(4-cloro-fenil)-1-oxiranilmetil-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona (0,8 g, 2,42 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (12 mL) se trató con triflato de iterbio (III) (0,15 g, 0,24 mmoles) y 1-(O-tolil)-piperazina (0,51 g, 2,90 mmoles) a 25ºC. La mezcla de reacción se agitó durante 24 h y se diluyó con EtOAc (100 mL) y H_{2}O (50 mL). La capa orgánica se separó, se lavó con H_{2}O (2 x 50 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. La cromatografía en columna (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%) proporcionó 1,08 g (88%) del compuesto objetivo, un polvo de color blanco. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} 0,38. MS (electropulverización): m/z 508,3 ([M+H]^{+}, C_{28}H_{34}ClN_{5}O_{2} requiere 507,2). NMR H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de dos rotámeros): 7,60 y 7,37 (patrón AB, J_{ab} = 8,8 Hz, 2H), 7,54 y 7,40 (patrón AB, J_{ab} = 8,8 Hz, 2H), 7,18-7,14 (m, 2H), 7,00-6,97 (m, 2H), 4,85 y 4,73 (patrón AB, J_{ab} = 15,5 Hz, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,20-4,11 (m, 2H), 4,06-4,01 (m, 1H), 3,88-3,70 (m, 2H), 2,97-2,87 (m, 6H), 2,85-2,75 (m, 2H), 2,65-2,55 (m, 2H), 2,51-2,48 (m, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,21 (s, 1,5H), 2,17 (s, 1,5H).
Ejemplo 3
18
1-{3-(4-Cloro-fenil)-1-[2-metoxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il}-etanona.
Una solución agitada de 1-(3-(4-cloro-fenil)-1-[2-hidroxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-1,4,6,7-tetrahidropirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-etanona (25 mg, 0,05 mmoles) en THF (0,2 mL) se trató con NaH (1,42 mg, 0,06 mmoles) a 25ºC. Al cabo de 20 mL, se añadió yoduro de metilo (3,7 mL, 0,06 mmoles) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas adicionales. La TLC preparativa (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%) proporcionó 14,6 mg (56%) de una película incolora. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,38. MS (electropulverización): m/z 522,2 ([M+H]^{+}, C_{29}H_{36}ClN_{5}O_{2} requiere 521,3). RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de dos rotámeros): 7,62 y 7,37 (patrón AB, J_{ab} = 8,8 Hz, 2H), 7,55 y 7,40 (patrón AB, J_{ab} = 8,8 Hz, 2H), 7,18-7,14 (m, 2H), 7,02-6,95 (m, 2H), 4,82 y 4,75 (patrón AB, J_{ab} = 15,5 Hz, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,30-4,25 (m, 1H), 4,09-3,73 (m, 4H), 3,29 (s, 1,5H), 3,27 (s, 1,5H), 2,93-2,55 (m, 12H), 2,30 (s, 3H), 2,21 (s, 1,5H), 2,16 (s, 1,5H).
Ejemplo 4 
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19 
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1-[1-{2-Hidroxi-3-[4-(2-hidroxi-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-yodofenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona.
A. 1-[3-(4-yodo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
Un matraz equipado con una trampa Dean-Stark se cargó con N-acetil-4-piperidona (27,29 g, 137 mmoles), piperidina (16,5 mL, 129 mmoles), ácido p-toluenosulfónico (0,5 g) y benceno (150 mL). La mezcla se calentó a 125ºC. Al cabo de 8 h la mezcla se dejó enfriando, y se concentró a vacío para dar la enamina correspondiente (35 g). Una solución de cloruro de p-yodobenzoilo (9,28 g, 34,8 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (40 mL) se añadió gota a gota a una solución a 0ºC de la enamina (11,0 g, aprox. 41 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (80 mL) a lo largo de 2 h. La mezcla se dejó después templando a la temperatura ambiente y se agitó durante 17 h adicionales. La solución se trató con HCl 1N (200 mL) y se agitó vigorosamente durante 5 h. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 150 mL). Los extractos combinados se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. El residuo se disolvió en EtOH (200 mL) y se trató con NH_{2}NH_{2} (16,0 mL, 51 mmoles). La mezcla se agitó durante 17 h y se añadió H_{2}O (300 mL). El precipitado formado se recogió mediante filtración y se secó al aire para dar 8,82 g (59%) de 1-[3-(4-yodo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona que fue adecuada para su uso sin purificación adicional. La TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%): R_{f} = 0,3. MS (electropulverización): m/z calculado para C_{14}H_{15}IN_{3}O [M+H]^{+} 368,03, encontrado 368,0. RMN H^{1} (CD_{3}OD/CDCl_{3}, 500 MHz, una mezcla de rotámeros de amidas): 7,72 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,69 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,20 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 4,69 (s, 2H), 4,56 (s, 2H), 3,83 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,69 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,79, (t, J = 5,7 Hz, 2H), 2,72, (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,13 (s, 3H), 2,08 (s, 3H).
B. 1-[3-(4-yodo-fenil)-1-oxiranilmetil-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
Se añadió Cs_{2}CO_{3} (1,30 g, 4,01 mmoles) a una solución de 1-[3-(4-yodo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona (1,34 g, 3,65 mmoles) y epiclorhidrina (2,85 mL, 36,4 mmoles) en DMF (10,0 mL). La mezcla se agitó durante 17 h después se repartió entre EtOAc (400 mL) y NaHCO_{3} saturado(150 mL). La capa de NaHCO_{3} se extrajo con EtOAc (2 x 150 mL). Los extractos combinados se lavaron con H_{2}O (2 x 150 mL), salmuera (150 mL), se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 10-25%) para dar 890 mg (58%) del compuesto del título. HPLC, t_{R} = 5,53 min. (Condiciones de fase reversa: HP 1100 LCMS, columna Phenomenex luna 2,1 x 150 mm, MeOH/H_{2}O al 60% (AcOH al 0,5%) a MeOH/H_{2}O al 90% (AcOH al 0,5%), mantenimiento a las condiciones iniciales durante 2 min después paso a las condiciones finales a lo largo de 5 min.) MS (electropulverización), m/z calculado para C_{17}H_{18}IN_{3}O_{2}Na [M+Na]^{+} 445,04, encontrado 445,95. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 500 MHz, una mezcla de rotámeros de amidas): 7,76 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,75 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,42 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,35 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 4,80 y 4,73 (A y B de cuartete AB, J_{ab} = 15,6 Hz, 2H), 4,60 (s, 2H), 4,84 (dd, J = 15,1, 2,1 Hz, 1H), 4,42 (dd, J = 15,0, 2,1 Hz, 1H), 4,11 (t, J = 5,0, Hz, 1H), 4,08 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 3,98-3,87 (m, 2H), 3,74 (m, 2H), 3,34 (m, 2H), 2,87-2,72 (m, 6H), 2,52 (dd, J = 4,6, 2,6 Hz, 1H), 2,48 (dd, J = 4,5, 2,6, 1H), 2,20 (s, 3H), 2,14 (s, 3H).
C. 1-[1-{2-Hidroxi-3-[4-(2-hidroxi-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-yodofenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo [4,3-c]piridin-5-il]-etanona
La 1-[3-(4-yodo-fenil)-1-oxiranilmetil-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona (62 mg, 0,15 mmoles) y 4-(2-hidroxifenil)-piperazina (34 mg, 0,19 mmoles) se combinaron en CH_{2}Cl_{2} (0,5 mL) y la solución se trató con Yb(OTf)_{3}\cdotH_{2}O (44 mg, 0,071 mmoles). La mezcla se sacudió durante 72 h después se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (1 mL). La purificación mediante TLC preparativa (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%) produjo 45 mg (51%) de un polvo de color blanquecino. TLC (sílice, 8% MeOH/CH_{2}Cl_{2}): R_{f} = 0,2. MS (electropulverización): m/z calculado para C_{27}H_{33}IN_{5}O_{3} [M+H]^{+} 602,15, encontrado 602,2. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 500 MHz, una mezcla de rotámeros de amidas): 7,76 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,14 (m, 1H), 7,80 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,86 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,83 y 4,72 (A y B de cuartete AB, J_{ab} = 15,6 Hz, 1H), 4,61 (s, 1H), 4,22-4,15 (m, 2H), 4,02 (m, 2H), 3,88 (m, 1H), 3,76 (m, 3H), 3,00-2,49 (m, 11 H), 2,20 (s, 1,5H), 2,15 (s, 1,5H).
Ejemplo 5
20
1-[1-[2-Hidroxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona.
A. 1-[3-(4-Trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
Una solución de N-acetil-4-piperidona (2,82 g, 20 mmoles), morfolina (1,93 mL, 22 mmoles) y ácido p-toluenosulfónico (5 mg) en benceno (8,5 mL) se sometió a reflujo durante 8 h en un aparato Dean-Stark. El disolvente se separó y el residuo se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (20 mL). Se añadió trietilamina (3,1 mL) y se añadió gota a gota cloruro de p-trifluorometilbenzoilo (3,27 mL, 22 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (4 mL) a la solución a 0ºC. La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 24 h y se diluyó con HCl acuoso (5%, 25 mL). Después de agitar durante otros 30 mL, la capa orgánica se separó, se lavó con H_{2}O (20 mL), se secó (Na_{2}SO_{4}), y se concentró. El residuo se disolvió en EtOH (95%, 18 mL) y se trató a 0ºC con hidrazina (2,9 mL, 60 mmoles). La mezcla se agitó a 25ºC durante 3 h y se añadió H_{2}O (4 mL). La mayoría de las sustancias volátiles fueron eliminadas y el residuo se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (50 mL). La capa orgánica se separó, se lavó con H_{2}O (20 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. La cromatografía en columna (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%) proporcionó 5,1 g (83%) de un polvo de color blanco. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,30. MS (electropulverización): m/z 332,0 ([M+Na]+, C_{15}H_{14}F_{3}N_{3}O requiere 309,1). RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de dos rotámeros): 7,73-7,67 (m, 4H), 4,85 (s, 1,2H), 4,68 (s, 0,8H), 3,96 (t, J = 4,5 Hz, 0,8H), 3,78 (t, J = 4,5 Hz, 1,2H), 2,89 (t, J = 4,5 Hz, 1,2H), 2,83 (t, J = 4,5 Hz, 0,8H), 2,23 (s, 1,8H), 2,18 (s, 1,2H).
B. 1-[1-Oxiranilmetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidropirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
Una solución de 1-[3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona (2,4 g, 7,77 mmoles) en DMF (15 mL) se trató con carbonato de cesio (5,05 g, 15,5 mmoles) y epiclorhidrina (6,1 mL, 77,7 mmoles) a 25ºC y se agitó durante 24 h antes de ser diluida con EtOAc (100 mL) y H_{2}O (50 mL). La capa orgánica se separó, se lavó con H_{2}O (2 x 50 mL), salmuera (50 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. La cromatografía en columna (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 10%) proporcionó 2,30 g (81%) de un polvo de color blanco. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,35. MS (electropulverización): m/z 388.O ([M+Na]+, C_{18}H_{l8}F_{3}N_{3}O_{2} requiere 365,1). RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de dos rotámeros): 7,77 y 7,63 (patrón AB, J_{ab} = 8,2 Hz, 2H), 7,71 y 7,67 (patrón AB, J_{ab} = 8,4 Hz, 2H), 4,82 y 4,76 (patrón AB, J_{ab} = 15,5 Hz, 1,2H), 4,58 (s, 0,8H), 4,45-4,35 (m, 1H), 4,08-4,02 (m, 1H), 3,92-3,80 (m, 1H), 3,70-3,63 (m, 1H), 3,30 (m, 1H), 2,80-2,67 (m, 3H), 2,48-2,42 (m, 1H), 2,13 (s, 1,3H), 2,08 (s, 1,7H).
C. 1-[1-[2-Hidroxi-3-(4-O-tolil-piperazin-1-il)-propil]-3-(4-trifluorometilfenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
Una solución de 1-[1-oxiranilmetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona (1,16 g, 3,20 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (15 mL) se trató con triflato de iterbio (III) (0,40 g, 0,64 mmoles) y 1-(O-tolil)-piperazina (0,84 g, 4,77 mmoles) a 25ºC y se agitó durante 48 h antes de ser diluida con CH_{2}Cl_{2} (100 mL) y H_{2}O (50 mL). La capa orgánica se separó, se lavó con H_{2}O (2 x 50 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. La cromatografía en columna (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%) proporcionó 1,54 g (89%) de un polvo de color blanco. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,35. MS (electropulverización): m/z 542,3 ([M+H]^{+}, C_{29}H_{34}F_{3}N_{5}O_{2} requiere 541,3). RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de dos rotámeros): 7,82 y 7,65 (patrón AB, J_{ab} = 8,2 Hz, 2H), 7,72 y 7,68 (patrón AB, J_{ab} = 8,4 Hz, 2H), 7,18-6,97 (m, 4H), 4,88 y 4,76 (patrón AB, J_{ab} = 16 Hz, 0,9H), 4,65 (s, 1,1H), 4,23-4,12 (m, 2H), 4,08-4,0O (m, 2H), 3,88-3,70 (m, 2H), 3,02-2,85 (m, 6H), 2,85-2,75 (m, 2H), 2,65-2,55 (m, 2H), 2,53-2,45 (m, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,21 (s, 1,8H), 2,17 (s, 1,2H).
Ejemplo 6
21
2-(4-{3-[5-Acetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo.
Una solución de 1-[1-oxiranilmetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona (0,84 g, 2,30 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (10 mL) se trató con triflato de iterbio (III) (0,29 g, 0,46 mmoles) y 1-(2-cianofenil)-piperazina (0,75 g, 3,5 mmoles) a 25ºC y se agitó durante 48 h antes de ser diluida con CH_{2}Cl_{2} (100 mL) y H_{2}O (50 mL). La capa orgánica se separó, se lavó con H_{2}O (2 x 50 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. La cromatografía en columna (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%) proporcionó 1,15 g (90%) de cristales de color amarillo claro. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,30. MS (electropulverización): m/z 553,3 ([M+H]^{+}, C_{21}H_{31}F_{3}N_{6}O_{2} requiere 552,3). RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de dos rotámeros): 7,82 y 7,68 (patrón AB, J_{ab} = 8,2 Hz, 2H), 7,76 y 7,72 (patrón AB, J_{ab} = 8,4 Hz, 2H), 7,60-7,48 (m, 2H), 7,05-7,00 (m, 2H), 4,90 y 4,78 (patrón AB, J_{ab} = 16 Hz, 1H), 4,69 (s, 1H), 4,30-3,71 (m, 6H), 3,25 (m, 4H), 3,02-2,75 (m, 4H), 2,70-2,65 (m, 2H), 2,60-2,53 (m, 2H), 2,23 (s, 1,5H), 2,18 (s, 1,5H).
Ejemplo 7
22
1-[3-(3,4-Dicloro-fenil)-pirazol-1-il]-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propan-2-ol.
A. 3-(3,4-Dicloro-fenil)-1-oxiranilmetil-1H-pirazol
Una solución agitada de 3-(3,4-diclorofenil)pirazol (300 mg, 1,4 m mol) en DMF (5 mL) se trató con carbonato de cesio (550 mg, 1,69 mmoles) y epiclorhidrina (1,1 mL, 14,0 mmoles) a la temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción bruta se repartió después entre EtOAc (50 mL) y agua (35 mL). La fase acuosa se extrajo adicionalmente (2 x 50 mL) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na_{2}SO_{4}), se filtraron y se concentraron a presión reducida para rendir un producto bruto. La purificación mediante cromatografía en columna (sílice, 25% EtOAc/hexanos) proporcionó 308 mg (82%) del compuesto del título. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,83 (d, J = 2 Hz, 1H), 7,54 (dd, J = 2,8 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 2 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 2 Hz, 1H), 4,45 (dd, J = 3, 9,7 Hz, 1H), 4,12 (dd, J = 6, 15 Hz, 1H), 3,31 (m, 1H), 2,81 (dd, J = 4,0, 4,6 Hz, 1H), 2,47 (dd, J = 2,6, 4,7 Hz, 1H).
B. 1-[3-(3,4-Dicloro-fenil)-pirazol-1-il]-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propan-2-ol
Una solución de 3-(3,4-dicloro-fenil)-1-oxiranilmetil-1H-pirazol (30 mg, 0,11 mmoles) y 1-(2-metilfenil)-piperazina (22 mg, 0,12 mmoles) en EtOH (1 mL) se calentó a 80ºC durante la noche. La eliminación del disolvente y la purificación mediante cromatografía en columna (sílice, 0-5% acetona/CH_{2}Cl_{2}) proporcionó 35 mg (70%) del compuesto del título. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,89 (d, J = 2 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 2, 8,7 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 2 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,16 (m, 2H), 6,99 (m, 2H), 6,54 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,31 (m, 1H), 4,18 (m, 2H), 2,93 (m, 4H), 2,60 (m, 2H), 2,47 (m, 3H), 2,88 (s, 3H).
Ejemplo 8
23
1-[1-[2-(2-Piperazin-1-il-etilamino)-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona.
A. 1-[5-Acetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propan-2-ona
Una solución de DMSO (3,55 mL, 50 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (7 mL) se trató con cloruro de oxalilo (2,90 mL, 33 mmoles) a -78ºC y se agitó durante 30 min. Una solución de 1-[1-[2-hidroxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)propil]-3-(4-trifluorometilfenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona (1,8 g, 3,3 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (7 mL) se añadió después lentamente y la mezcla de reacción se agitó durante 30 min adicionales antes de sofocarla mediante la adición de trietilamina (18,4 mL, 132 mmoles). La mezcla de reacción se templó lentamente 25ºC y se diluyó con EtOAc (50 mL) y NaHCO_{3} sat. (30 mL). La capa orgánica se separó, se lavó con H_{2}O (2 x 50 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. La cromatografía en columna (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 2-5%) proporcionó 1,50 g (83%) de un polvo de color amarillo claro. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,35. MS (electropulverización): m/z 540,3 ([M+H]^{+}, C_{29}H_{32}F_{3}N_{5}O_{2} requiere 539,3). RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de dos rotámeros): 7,78 y 7,62 (patrón AB, J_{ab} = 8,2 Hz, 2H), 7,70 y 7,64 (patrón AB, J_{ab} = 8,4 Hz, 2H), 7,18-6,95 (m, 4H), 5,10 (s, 1H), 5,07 (s, 1H), 4,84 (s, 1H), 4,68 (s, 1H), 3,96 (t, J = 4,4 Hz, 1H), 3,78 (t, J = 4,4 Hz, 1H), 3,47 (3,47 (s, 4H), 3,34 (s, 2H), 2,74-2,65 (m, 6H), 2,29 (s, 3H), 2,20 (s, 1,5H), 2,17 (s, 1,5H).
B. 1-[1-[2-(2-Piperazin-1-il-etilamino)-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
Una solución de 1-[5-acetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-3-(4-0-tolil-piperazin-1-il)-propan-2-ona (54 mg, 0,1 mmoles) en 1,2-dicloroetano (0,5 mL) se trató con 1-(2-aminoetil)piperazina (26 \muL, 0,2 mmoles) y ácido acético glacial (34 \muL, 0,6 mmoles) a 25ºC y se agitó durante 30 min. Se añadió triacetoxiborohidruro de sodio (63,6 mg, 0,3 mmoles) y la mezcla de reacción se agitó durante 4 h adicionales antes de sofocarla con CH_{2}Cl_{2} (5 mL) y NaHCO_{3} sat. (5 mL). La capa orgánica se separó, se lavó con H_{2}O (2 x 5 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. La TLC preparativa (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%) proporcionó 22 mg (35%) de una película de color amarillo claro. TLC (MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,2. MS (electropulverización): m/z 653,3 ([M+H]^{+}, C_{35}H_{47}F_{3}N_{8}O requiere 652,4). RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de dos rotámeros): 7,78-7,60 (m, 4H), 7,18-6,82 (m, 4H), 4,88-4,30 (m, 2H), 4,23-3,90 (m, 2H), 3,85-3,70 (m, 2H), 3,22-2,85 (m, 10H), 2,85-2,30 (m, 15H), 2,30 (s, 3H), 2,21 (s, 1,5H), 2,17 (s, 1,5H).
Ejemplo 9
24
Éster t-butílico de ácido 1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-3-(4-yodo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico.
A. Éster t-butílico de ácido 3-(4-yodo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico
Se añadieron ácido p-toluenosulfónico (0,055 g. 0,29 mmoles) y morfolina (4,76 mL, 54 mmoles) a una solución de 4-oxo-1-piperidinocarboxilato de t-butilo (10,3 g. 52 mmoles) en benceno (22 mL). La mezcla de reacción se calentó en un matraz equipado con un condensador y una trampa Dean-Stark a reflujo durante 20 h. La mezcla de reacción se enfrió y se concentró a vacío para dar la enamina que se utilizó sin purificación adicional. La enamina se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (60 mL) y se enfrió a 0ºC. Se añadió trietilamina (8,67 mL, 62 mmoles), seguido de la adición gota a gota de cloruro de 4-yodobenzoilo (13,8 g, 52 mmoles) disuelto en CH_{2}Cl_{2} (10 mL). La mezcla de reacción se dejó templando a la temperatura ambiente y se agitó durante 72 h. La mezcla de reacción se vertió sobre agua (200 mL) y la capa de CH_{2}Cl_{2} se separó, se secó (Na_{2}SO_{4}), y se concentró. El aceite resultante se recogió en EtOH (200 mL) y se trató con hidrazina (4,88 mL, 155 mmoles) a 0ºC. La mezcla de reacción se dejó templando a la temperatura ambiente y se agitó durante 17 h. La mezcla se concentró y la sustancia resultante se trituró con EtOAc para proporcionar 9,52 g (43%) de un sólido de color blanco. TLC (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 10%): RF 0,18. MS (electropulverización): m/z 426,0 (426,1 calculado para C_{17}H_{20}IN_{3}O_{2}, [M+H]^{+}). RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,74 (s ancho, 2H), 7,31 (d ancho, J = 8,0 Hz, 2H), 4,63 (s ancho, 2H), 3,73 (s ancho, 2H), 2,77 (s ancho, 2H), 1,49 (s, 9H).
B. Éster t-butílico de ácido 3-(4-yodo-fenil)-1-oxiranilmetil-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico
Se añadió carbonato de cesio (1,84 g, 5,65 mmoles) a una solución de epiclorhidrina (3,68 m L, 47,05 mmoles) y éster t-butílico de ácido 3-(4-yodo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico (2,0 g, 4,71 mmoles) en DMF (10 mL). La mezcla de reacción se dejó agitando durante 24 h, después se repartió entre NaHCO_{3} acuoso y EtOAc. La capa acuosa se extrajo con EtOAc y las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na_{2}SO_{4}), y se concentraron. La purificación mediante cromatografía en columna (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 0-10%) proporcionó 2,26 g (69%) de una espuma de color blanco. TLC (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,44. MS (electropulverización): m/z 482,0 (482,1 calculado para C_{20}H_{24}IN_{3}O_{3}, [M+H]^{+}). RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,60 (s ancho, 2H), 7,28 (d ancho, J = 8,2 Hz, 2H), 4,48 (s ancho, 2H), 4,32 (d ancho, J = 14,8 Hz, 1H), 3,99 (dd, J = 15,0, 5,4 Hz, 1H), 3,61 (s ancho, 1H), 3,26-3,20 (m, 1H), 2,72 (t, J = 4,4 Hz, 1H), 2,65-2,58 (m, 2H), 2,40 (s ancho, 1H), 1,36 (s, 9H).
C. Éster t-butílico de ácido 1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-3-(4-yodofenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico
Se disolvieron hidrato de trifluorometanosulfonato de iterbio (III) (0,193 g, 0,311 mmoles) y 1-(2-cianofenil)-piperazina (0,292 g, 1,56 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (2 mL) y se añadieron a una solución de éster t-butilico de ácido 3-(4-yodo-fenil)-1-oxiranilmetil1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico en CH_{2}Cl_{2} (5 mL). La mezcla de reacción se dejó agitando durante 48 h a 25ºC. La purificación mediante cromatografía instantánea (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 0-15%) proporcionó 392 mg (56%) de una espuma de color blanco. TLC (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,41. MS (electropulverización): m/z 669,2 (669,2 calculado para C_{31}H_{37}IN_{6}O_{3}, [M+H]^{+}). RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,73 (s ancho, 2H), 7,58-7,56 (m, 1H), 7,52-7,48 (m, 1H), 7,39 (d ancho, J = 7,1 Hz, 2H), 7,04-7,00 (m, 2H), 4,60 (s ancho, 2H), 4,06-4,04 (m, 2H), 4,06-4,04 (m, 1H), 3,76-3,70 (m, 2H), 3,26 (s ancho, 4H), 2,84-2,38 (m, 7H), 1,56-1,53 (m, 2H), 1,48 (s, 9H).
Ejemplo 10
25
Amiduro de ácido 1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-3-(4-yodo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico.
A. 2-4-{2-Hidroxi-3-[3-(4-yodo-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo
Se añadió ácido trifluoroacético (3 mL) a una solución de éster t-butílico de ácido 1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-3-(4-yodo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico (0,402 g, 0,601 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (3 mL) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 h. La mezcla se concentró, después se diluyó con EtOAc. La capa orgánica se lavó con NaHCO_{3} acuoso y salmuera, se secó (Na_{2}SO_{4}), y se concentró para proporcionar la amina (0,342 g, 100%) en forma de una espuma de color amarillento. TLC (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,14. MS (electropulverización): m/z 569,2 (569,1, calculado para C_{26}H_{21}IN_{6}O, [M+H]^{+}). RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}:CD_{3}OD (6:1)): 7,73 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,56 (dd, J = 7,6, 1,8 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,09 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,02 (dd, J = 8,4 Hz, 1H), 4,43-4,36 (m, 1H), 4,31 (s, 2H), 4,21 (dd, J = 14,1, 4,5 Hz, 1H), 4,11 (dd, J = 14,5, 6,3 Hz, 1H), 3,54-3,49 (m, 2H), 3,40-3,24 (m, 8H), 3,18-3,06 (m, 3H), 3,03-2,95 (m, 3H).
B. Amiduro de ácido 1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-3-(4-yodofenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piperidino-5-carboxílico
Se añadieron diisopropiletilamina (0,531 mL, 3,05 mmoles), DMAP (5 mg), e isocianato de trimetilsililo (0,413 mL, 3,05 mmoles) a una solución de 2-(4-{2-hidroxi-3-[3-(4-yodo-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo en piridina (3 mL) y CH_{2}Cl_{2} (6 mL). La mezcla de reacción se agitó durante 20 h, después se repartió entre NaHCO_{3} acuoso y CH_{2}Cl_{2}. La capa de CH_{2}Cl_{2} se lavó con salmuera, se secó (Na_{2}SO_{4}), y se concentró. El producto resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (5 mL) y se trató con etóxido de sodio al 21% en peso en EtOH (0,5 mL) durante 3 h. La mezcla de reacción se lavó con salmuera, se secó (Na_{2}SO_{4}), y se concentró. La purificación mediante cromatografía en columna (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 0-10%) proporcionó 290 mg (78%) del compuesto del título. HPLC (condiciones de fase reversa), t_{R} = 4,21 min. MS (electropulverización): m/z 612,2 (612,5, calculado para C_{27}H_{30}IN_{7}O_{2}, M^{+}+H). RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,73 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,57 (dd, J = 7,6, 1,6 Hz, 1H), 7,50 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,05 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,64 (s ancho, 2H), 4,57 (s ancho, 2H), 4,30 (s ancho, 1H), 4,20 (dd, J = 14,1, 3,3 Hz, 1H), 4,06 (dd, J = 14,1, 6,3 Hz, 1H), 3,82-3,65 (m, 2H), 3,29-3,20 (m, 4H), 3,04-2,80 (m, 6H), 2,68 (s ancho, 2H).
Ejemplo 11
26
Éster etílico de ácido 1-[5-carbamoil-3-(4-yodo-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-ilmetil]-2-[4-(2-cianofenil)-piperazin-1-il]-carbámico.
El compuesto del título (13 mg, 3%) fue obtenido junto con el ácido 1-{3-[4-(2-cianofenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxipropil}-3-(4-yodo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico como se ha descrito en el Ejemplo 10. MS (electropulverización): m/z 655,2 (655,2, calculado para C_{28}H_{31}IN_{8}O_{3}, [M+H]^{+}), HPLC (condiciones de fase reversa): t_{R} = 6,29 min. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,69 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,50 (d, J = 7,52, 1H), 7,43 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 6,96 (t, J = 9,0 Hz, 2H), 4,64 (s ancho, 2H), 4,08 (d, J = 16,8 Hz, 2H), 3,96 (dd, J = 14,0, 6,6 Hz, 1H), 3,80-3,69 (m, 2H), 3,10-2,80 (m, 4H), 2,66 (s ancho, 2H), 2,50 (s ancho, 2H).
Ejemplo 12
27
1-{3-(3-Amino-4-cloro-fenil)-1-[2-hidroxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il}-etanona.
A. 1-[3-(4-Cloro-3-nitro-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
Un matraz equipado con una trampa Dean-Stark se cargó con N-acetil-4-piperidona (27,29g, 137 mmoles), piperidina (16,5 mL, 129 mmoles), ácido p-toluenosulfónico (0,5 g) y benceno (150 mL). La mezcla se calentó a 125ºC. Al cabo de 8 h la mezcla se dejó enfriando, y se concentró a vacío para dar la enamina correspondiente (35 g). Una solución de la enamina (3,87 g, 20,0 mmoles) en diclorometano (24 mL) se trató con trietilamina (3,07 mL, 22,0 mmoles) y cloruro de 4-cloro-3-nitrobenzoilo (4,84 g, 22,0 mmoles). La mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 1 h y después a la temperatura ambiente durante 16 h. Se añadió hidrazina (1,88 mL, 60 mmoles) a la mezcla de reacción. Esta solución se agitó a la temperatura ambiente durante 16 h adicionales. Los disolventes se eliminaron a presión reducida. Se añadió acetato de etilo (100 mL) al residuo para formar una suspensión. Esta suspensión se filtró y se secó para proporcionar 6,4 g (100%) de un sólido de color amarillo. MS (electropulverización): m/z 321,0 (321,0, calculado para C_{14}H_{13}ClN_{4}O_{3}, [M+H]^{+}). RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de dos rotámeros): 8,10-8,00 (m, 3H), 4,90 (s, 0,8H), 4,85 (s, 1,2H), 3,96 (m, 2H), 2,95 (m, 2H), 2,20 (s, 3H).
B. 1-(3-(4-Cloro-3-nitro-fenil)-1-oxiranilmetil-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il-etanona
Una solución de 1-[3-(4-cloro-3-nitro-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona (6,4 g, 20,0 mmoles) en DMF (60 mL) se trató con carbonato de cesio (13,0 g, 40 mmoles) y epiclorhidrina (15,6 mL, 200,0 mmoles) a la temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 24 h adicionales antes de ser diluida con acetato de etilo (350 mL) y agua (50 mL). La capa orgánica se separó, se lavó con agua (2 x 50 mL), salmuera (50 mL), se secó sobre sulfato de sodio, y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 10%) para proporcionar 7,5 g (83%) de un polvo de color amarillo claro. MS (electropulverización): m/z 377,0 (377,0, calculado para C_{17}H_{17}ClN_{4}O_{4}, [M+H]^{+}). RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de dos rotámeros): 8,15-8,05 (m, 1H), 7,75-7,65 (m, 1H), 7,55-7,45 (m, 1H), 4,80-4,65 (m, 1,2H), 4,60 (s, 0,8H), 4,45-4,35 (m, 1H), 4,08-4,02 (m, 1H), 3,92-3,80 (m, 1H), 3,70-3,63 (m, 1H), 3,30-3,20 (m, 1H), 2,90-2,67 (m, 3H), 2,55-2,48 (m, 1H), 2,15 (s, 1,7H), 2,10 (s, 1,3H).
C. 1-{3-(4-Cloro-3-nitro-fenil)-1-[2-hidroxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il}-etanona
Una solución de 1-[3-(4-cloro-3-nitro-fenil)-1-oxiranilmetil-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona (0,754 g, 2,0 mmoles) en diclorometano (10 mL) se trató con triflato de iterbio (III) (0,25 g, 0,40 mmoles) y 1-(2-metilfenil)-piperazina (0,705 g, 4,0 mmoles) a la temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 16 h y se diluyó con diclorometano (100 mL) y agua (50 mL). La capa orgánica se separó, se lavó con agua (2 x 50 mL), se secó sobre sulfato de sodio y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%) para proporcionar 0,98 g (90%) del producto deseado en forma de un sólido de color amarillo claro. MS (electropulverización): m/z 553,2 (553,2, calculado para C_{28}H_{33}ClN_{6}O_{4}, [M+H]^{+}). RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de dos rotámeros): 8,25-8,15 (m, 1H), 7,75-7,70 (m, 1H), 7,63-7,55 (m, 1H) 7,20-7,10 (m, 2H), 7,05-6,95 (m, 2H), 4,90-4,70 (m, 1H), 4,65 (s, 1H), 4,30-4,15 (m, 2H), 4,10-3,70 (m, 4H), 3,00-2,40 (m, 12H), 2,20 (s, 3H), 2,15 (s, 1,5H), 2,10 (s, 1,5H).
D. 1-{3-(3-amino-4-cloro-fenil)-1-[2-hidroxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il}-etanona
A una solución de hidrosulfito de sodio (1,28 g, 7,3 mmoles) en 30 mL se añadió agua 1-{3-(4-cloro-3-nitro-fenil)-1-[2-hidroxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il}-etanona (810 mg, 1,5 mmoles) en 15 mL de THF. La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 5 min. El color de la solución cambió de amarillo claro a incoloro. Se añadió una solución de hidrocloruro (1 N, 10 mL) a la mezcla de reacción. Esta solución se agitó a la temperatura ambiente durante 30 min, y se trató con bicarbonato de sodio saturado hasta que el pH de la solución fue de 7 a 8. El producto se extrajo con diclorometano (3 x 80 mL). Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, y se concentraron a presión reducida hasta un residuo. Este residuo se purificó mediante cromatografía en columna (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} 5-20%) para proporcionar 644 mg (84,1%) del compuesto del título. MS (electropulverización): m/z 523,3 (523,3, calculado para C_{28}H_{35}ClN_{6}O_{2}, [M+H]^{+}). RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de dos rotámeros): 7,30-6,70 (m, 7H), 4,80-4,60 (m, 1H), 4,55 (s, 1H), 4,20-4,05 (m, 4H), 3,95-3,90 (m, 2H), 3,80-3,60 (m, 2H), 2,90-2,30 (m, 9H), 2,20 (s, 3H), 2,15 (s, 1,5H), 2,10 (s, 1,5H).
Ejemplo 13
28
(R)-1-{3-(4-Bromo-fenil)-1-{3-[4-(5-cloro-2-metil-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7-tetrahidropirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-etanona.
A. (2S)-1-t-Butildimetilsililglicidol
Se añadió t-butilclorodimetilsilano (9,41 g, 62,4 mmoles) seguido de Et_{3}N (13,5 mL, 96,8 mmoles) a una solución a 0ºC de R-(+)-glicidol (3,88 g, 52,4 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (100 mL). La solución se dejó templando a 23ºC agitando a lo largo de 17h. La solución de color rosa resultante se diluyó con Et_{2}O (250 mL) y se agitó durante 30 min adicionales. La solución se repartió entre Et_{2}O (800 mL) y NaHCO_{3} acuoso saturado (200 mL). La capa de Et_{2}O se lavó con NaHCO_{3} acuoso saturado (250 mL), H_{2}O (3 x 200 mL), salmuera (100 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. La purificación del residuo mediante cromatografía en columna (sílice, Et_{2}O/hexanos al 5-10%) proporcionó 8,21 g (84%) del compuesto del título. TLC (sílice, Et_{2}O/hexanos al 10%): R_{f} = 0,5. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz): 3,85 (dd, J = 11,9, 3,2 Hz, 1H), 3,66 (dd, J = 11,9, 4,8 Hz, 1H), 3,09 (m, 1H), 2,77 (dd, J = 5,0, 4,2 Hz, 1H), 2,64 (dd, J = 5,2, 2,7 Hz, 1H), 0,90 (s, 9H), 0,08 (s, 3H), 0,07 (s, 3H).
B. 1-[3-(4-Bromo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
Un matraz equipado con una trampa Dean-Stark se cargó con N-acetil-4-piperidona (100,1 g, 709 mmoles), piperidina (68 mL, 779 mmoles), pTsOH (3,7 g) y benceno (500 mL). La mezcla se calentó a 125ºC. Al cabo de 17 h la mezcla se dejó enfriando y se dividió en dos porciones. Se añadió gota a gota una solución de cloruro de p-bromobenzoilo (70,0 g, 319 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (400 mL) a una solución a 0ºC de la enamina (aprox. 355 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (320 mL) a lo largo de 15 h. La mezcla se dejó después templando a 23ºC y se agitó durante 5 h adicionales. La solución se trató con HCl 1N (500 mL) y se agitó vigorosamente durante 1,5 h. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2 x 300 mL). Los extractos combinados se lavaron con NaHCO_{3} acuoso saturado (300 mL), H_{2}O (300 mL), salmuera (300 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo se disolvió en MeOH (300 mL) y se trató con NH_{2}NH_{2} (50,0 mL, 1,59 mol). La mezcla se agitó durante 17 h antes de recoger el precipitado formado mediante filtración y se secó al aire para dar 52 g (50%) del compuesto del título que fue adecuado para su uso sin purificación adicional. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%): R_{f} = 0,3. MS (electropulverización): m/z calculado para C_{14}H_{15}Br^{79}N_{3}O [M+H]^{+}, 320,04, encontrado 320. RMN H^{1} (CD_{3}OD/CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de rotámeros de amidas): 7,53 y 7,35 (A y B de AA'BB', J = 8,5 Hz, 2H), 7,51 y 7,39 (A y B de AA'BB', J = 8,6 Hz, 2H), 4,72 (s, 2H), 4,58 (s, 2H), 3,85 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 3,71 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,81, (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,74, (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,16 (s, 3H), 2,11 (s, 3H).
C. (S)-1-[3-(4-Bromo-fenil)-1-oxiranilmetil-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
Una solución de KHMDS en tolueno (0,5 M, 3,7 mL, 1,85 mmoles) se añadió a una solución a 0ºC de 1-[3-(4-bromofenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona (492 mg, 1,54 mmoles) en DMF (4,0 mL). La mezcla se agitó durante 1 h antes de añadir (2S)-1-t-butildimetilsililglicidol (870 mg, 4,62 mmoles) puro a través de una jeringa. La mezcla se agitó durante 48 h adicionales y repartió entre EtOAc (300 mL) y acuoso saturado NaHCO_{3} (100 mL). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 100 mL). Los extractos combinados se lavaron con H_{2}O (2 x 100 mL), salmuera (100 mL), se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. El residuo se disolvió en MeOH (50 mL) y se trató con CSA (97 mg). La mezcla se agitó durante 17 h y se concentró hasta sequedad. El residuo se suspendió en MeC(OMe)_{3} (50 mL) y se agitó durante 17 h adicionales. La mezcla se diluyó con EtOAc (400 mL) y se lavó con NaHCO_{3} acuoso saturado (50 mL), H_{2}O (2 x 50 mL), salmuera (50 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El ortoéster bruto se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (5 mL), se enfrió a 0ºC, y se trató con AcBr (0,18 mL, 2,4 mmoles). Se dejó que la mezcla se templara agitando durante 4 h antes de elaborarla como se ha descrito antes. El bromuro de acetilo bruto obtenido se disolvió en MeOH (50 mL), se trató con K_{2}CO_{3} (207 mg, 1,50 mmoles) y se agitó durante 4 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (400 mL) y se lavó con NH_{4}Cl acuoso saturado (100 mL). La capa de EtOAc se lavó con H_{2}O (2 x 100 mL), salmuera (100 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 10-40%) para proporcionar 158 mg (27%) del compuesto del título. El análisis mediante HPLC quiral (Daicel OD, Et_{2}NH/MeOH al 0,5%) indicó >95% de pureza óptica. HPLC (condiciones de fase reversa): t_{R} = 4,90 min. MS (electropulverización): m/z calculado para C_{17}H_{19}Br^{79}N_{3}O_{2} [M^{+}+H], 376,07, encontrado 376,0. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de rotámeros de amidas): 7,47 (d con pequeñas separaciones (parcialmente oscurecida), J = 8,5, Hz, 2H), 7,44 (m, 4H), 7,38 (d con pequeñas separaciones, J = 8,5, Hz, 2H), 4,71 y 4,64 (A y B de cuartete AB, J_{ab} = 15,7 Hz, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,39 (dd, J = 15,1, 2,5 Hz, 1H), 4,34 (dd, J = 15,0, 2,9 Hz, 1H), 4,02 (dd, J = 5,2, 3,9 Hz, 1H), 3,98 (dd, J = 5,3, 3,7 Hz, 1H), 3,83 (m, 2H), 3,64 (m, 2H), 3,25 (m ancho, 2H), 2,80-2,60 (m, 6H), 2,46 (dd, J = 4,6, 2,6 Hz, 1H), 2,38 (dd, J = 4,6, 2,6 Hz, 1H), 2,10 (s, 3H), 2,06 (s, 3H).
D. (R)-1-(3-(4-Bromo-fenil)-1-{3-[4-(5-cloro-2-metil-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7-tetrahidropirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-etanona
Se combinaron (S)-1-[3-(4-bromo-fenil)-1-oxiranilmetil-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona (37 mg, 0,98 mmoles) y 4-(2-metil-5-clorofenil)piperazina (36 mg, 0,17 mmoles) en EtOH (0,4 mL) y se calentaron a 70ºC. Al cabo de 18 h la mezcla se dejó enfriando, se diluyó con CH_{2}Cl_{2} y se purificó mediante TLC preparativa (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 8%) para dar 35 mg (61 %) del compuesto del título. HPLC (condiciones de fase reversa): t_{R} = 4,41 min. MS (electropulverización): m/z calculado para C_{28}H_{34}Cl^{35}Br^{79}N_{5}O_{2} [M^{+}+H], 586,16, encontrado 586,2. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de rotámeros de amidas): 7,56 (d (parcialmente oscurecido), J = 8,5, Hz, 2H), 7,53 (s, 4H), 7,48 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,08 (d ancho, J = 8,5 Hz, 1H), 6,95 (m, 2H), 4,85 y 4,73 (A y B de cuartete AB, J_{ab} = 15,6 Hz, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,20 (m, 2H), 4,04 (m, 2H), 3,90-3,71 (m, 2H), 2,92-2,53 (m, 11H), 2,21 (s, 1,5H), 2,16 (s, 1,5H).
Ejemplo 14
29
2-(4-{3-[5-Acetil-3-(4-tritluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-fluoro-propil}piperazin-1-il)-benzonitrilo.
Una solución de 2-(4-{3-[5-acetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo (150 mg, 0,27 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (1 mL) se trató con DAST (Et_{2}NSF_{3}, 7 \muL, 0,60 mmoles) a -78ºC. La mezcla de reacción se templó lentamente a 25ºC durante 1 h y después a 60ºC durante 2 horas adicionales. La TLC preparativa (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%) proporcionó 75 mg (50%) del compuesto del título en forma de un polvo de color amarillo claro. TLC (MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%): R_{f} = 0,28. MS (electropulverización): m/z 555,2 ([M+H]^{+}, C_{29}H_{30}F_{4}N_{6}O requiere 554,2). RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de dos rotámeros): 7,71 y 7,59 (patrón AB, J_{ab} = 8,2 Hz, 2H), 7,66 y 7,62 (patrón AB, J_{ab} = 8,4 Hz, 2H), 7,50-7,38 (m, 2H), 6,96-6,92 (m, 2H), 5,01 (dp, J = 49,0, 3,0 Hz, 1H), 4,77 y 4,73 (patrón AB, J_{ab} = 15,7 Hz, 1,1 H), 4,59 (s, 0,9H), 4,41-4,18 (m, 2H), 3,95-3,80 (m, 1H), 3,69 (dd, J = 5,5, 5,5 Hz, 1H), 3,18 (m, 4H), 2,83-2,65 (m, 8H), 2,14 (s, 1,6H), 2,10 (s, 1,4H).
Ejemplo 15
30
Éster metílico de ácido (3-(4-cloro-3-metil-fenil)-1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-oxo-acético.
A. Cloruro de 4-cloro-3-metil-benzoilo
A una suspensión de 52,55 g (0,31 mol) de ácido 4-cloro-3-metil-benzoico en CH_{2}Cl_{2} (1,2 L) con DMF (1 mL) a 0ºC en N_{2} con un tubo rociador de salida a través de hidróxido de sodio 2,5 N se añadieron 29,56 mL (0,339 mol) de cloruro de oxalilo. Se dejó que la mezcla se templara a la temperatura ambiente a lo largo de un período de 3 h. La mezcla de reacción se concentró y se hizo seguir en forma bruta.
B. Éster t-butílico de ácido 3-(4-cloro-3-metil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico
A una solución agitada de 55,8 g (0,28 mol) de éster t-butílico de ácido 4-oxo-piperidino-1-carboxílico y 25,7 g (0,29 mol) de morfolina en benceno (125 mL) se añadió una cantidad catalítica (\sim0,25 g) de ácido p-toluenosulfónico. La mezcla se calentó a reflujo durante 10 h en una trampa Dean-Stark. El disolvente se eliminó a presión reducida para dar un aceite de color pardo. El producto bruto se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (400 mL), y se añadieron 46,83 mL (0,34 mol) de Et_{3}N. La mezcla se enfrió a 0ºC, y se añadió lentamente una solución de cloruro de 4-cloro-3-metil-benzoilo (0,35 mol) en CH_{2}Cl_{2} (200 mL) mediante un embudo de goteo a lo largo de 2 h. La mezcla de reacción se vertió sobre agua (400 mL) y la capa de CH_{2}Cl_{2} se separó, se secó (Na_{2}SO_{4}), y se concentró. El aceite resultante se recogió en EtOH (400 mL) y se trató con 35 mL de hidrazina a 0ºC. La mezcla de reacción se dejó templando a la temperatura ambiente y se agitó durante 17 h, tiempo durante el cual se formó un precipitado de color blanco. El volumen de la mezcla de reacción se redujo a \sim150 mL, y se añadió Et_{2}O (750 mL). La suspensión se agitó vigorosamente durante 2 h y se filtró, después se lavó con Et_{2}O (2 x 200 mL) y se secó a vacío para proporcionar 50,74 g (52% a lo largo de 3 etapas) de éster t-butílico de ácido 3-(4-cloro-3-metil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico en forma de un sólido de color naranja pálido. MS (electropulverización): masa exacta calculada para Cl_{8}H_{22}ClN_{3}O_{2}, 347,1; m/z encontrada, 348,1 [M+H]^{+}, RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,26-7,43 (m, 4H), 4,65 (s ancho, 2H), 3,73 (s ancho, 2H), 2,77 (s ancho, 2H), 2,34 (s, 3H), 1,49 (s, 9H).
C. Éster t-butílico de ácido 3-4-cloro-3-metil-fenil)-1-oxiranilmetil-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico
A una solución de éster t-butílico de ácido 3-(4-cloro-3-metil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico (18,26 g, 53 mmoles) y -epiclorhidrina (41,12 mL, 526 mmoles) en DMF (100 mL) se añadió carbonato de cesio (20,56 g, 63 mmoles). La mezcla de reacción se dejó agitando durante 72 h, se diluyó con EtOAc (200 mL) y se lavó con NaHCO_{3} saturado y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 20%) para proporcionar éster t-butílico de ácido 3-(4-cloro-3-metilfenil)-1-oxiranilmetil-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico (12,0 g, 57%). TLC (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 20%): R_{f} = 0,68. MS (electropulverización) m/z 491,2 (491,2, calculado para C_{27}H_{31}ClN_{6}O, [M+H]^{+}). RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}) 7,55 (s, 1H), 7,36 (m, 2H), 4,61 (m, 2H), 4,38-4,47 (m, 1H), 4,11 (dd, J = 14,3, 5,7 Hz, 1H), 3,67-3,79 (m, 2H), 3,34 (m, 1H), 2,83 (t, J = 4,5 Hz, 1H), 2,75 (m, 2H), 2,51 (m, 1H), 2,41 (s, 3H), 1,48 (s, 9H).
D. Éster t-butílico de ácido 3-(4-cloro-3-metil-fenil)-1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico
Se disolvieron parcialmente éster t-butílico de ácido 3-(4-cloro-3-metil-fenil)-1-oxiranilmetil-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico (5,33 g, 13,2 mmoles) y 1-(2-cianofenil)-piperazina (2,97 g, 15,86 mmoles) en EtOH (50 mL) y trietilamina (2 mL). La mezcla de reacción se calentó a 80ºC durante 18 h. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 20%) para dar éster t-butílico de ácido 3-(4-cloro-3-metilfenil)-1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico (6,51 g, 83%) en forma de un sólido de color amarillo. TLC (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 20%): R_{f} = 0,35. MS (electropulverización): m/z 591,3 (591,3, calculado para C_{32}H_{39}ClN_{6}O_{3}, [M+H]^{+}).
E. 2-(4-{3-(3-(4-Cloro-3-metil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin1-il)-benzonitrilo
El éster t-butílico de ácido 3-(4-cloro-3-metil-fenil)-1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7-tetrahidropirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico (1,26 g, 2,13 mmoles) se disolvió en ácido trifluoroacético (3 mL) y CH_{2}Cl_{2} (3 mL) y se dejó agitando durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró, se recogió en EtOAc (50 mL) y se lavó con NaHCO_{3} acuoso (2 X 25 mL). La capa de EtOAc se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró para dar 2-(4-{3-[3-(4-cloro-3-metil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo (1,05 g, 99%) en forma de una espuma de color amarillo. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,27. MS (electropulverización): m/z 491,2 (491,2, calculado para C_{27}H_{31}ClN_{6}O, [M+H]^{+}). RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 9,8 (s ancho, 1H), 7,55 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,50 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,31 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,11 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,56 (s ancho, 1H), 4,12-4,32 (m, 4H), 2,98-3,51 (m, 13 H), 2,35 (s, 3H).
F. Éster metílico de ácido (3-(4-cloro-3-metil-fenil)-1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-i])-oxo-acético
El 2-(4-{3-[3-(4-cloro-3-metil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo (58 mg, 0,118 mmoles) se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (0,59 mL) y se trató con clorooxoacetato de metilo (16 mg, 0,129 mmoles). La mezcla de reacción se dejó agitando durante 18 h a la temperatura ambiente. La cromatografía en columna (sílice, 2-MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%) produjo éster metílico de ácido (3-(4-cloro-3-metil-fenil)-1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxipropil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-oxo-acético (54 mg, 79%) en forma de un sólido de color blanco. MS (electropulverización): m/z 577,3 (577,2, calculado para C_{30}H_{33}ClN_{6}O_{4}, [M+H]^{+}), RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,32-7,62 (m, 5H), 7,14 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,59-4,80 (m, 3H), 4,12-4,28 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,78-3,86 (m, 2H), 3,44-3,60 (m, 5H), 3,15-3,40 (m, 4H), 2,83-3,05 (m, 2H), 2,41 (s, 3H).
Ejemplo 16
31
5-Metanosulfonil-1-{3-[4-(2-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina.
A. 1-Metanosulfonil-piperidin-4-ona
Se añadió carbonato de potasio (324 g, 2340 mmoles) a una solución de hidrocloruro de monohidrato de 4-piperidona (90 g, 586 mmoles) en cloroformo (300 mL) y agua (300 mL). La suspensión se enfrió a 0ºC y se trató con cloruro de metilsulfonilo (136 mL, 1760 mmoles) mediante la adición gota a gota a lo largo de un período de 1 h (se observó evolución de gas). La mezcla de reacción se dejó agitando durante 72 h y se repartió entre CH_{2}Cl_{2} (500 mL) y NaHCO_{3} acuoso saturado (500 mL). La capa acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 X 200 mL). La capa orgánica se lavó con KHSO_{4} al 1% (250 mL), se secó (Na_{2}SO_{4}), y se concentró para proporcionar 90,5 g (87%) de un sólido de color blanco. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{6}H_{11}NO_{3}S, 177,1; m/z encontrada, 178,1 [M+H]^{+}. HPLC (condiciones de fase reversa): t_{R} = 2,19 min. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 3,60 (t, J = 6,5 Hz, 4H), 2,89 (s, 3H), 2,59 (t, J = 6,3 Hz, 4H).
B. 5-Metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina
Se añadieron ácido p-toluenosulfónico (1,34 g, 7,0 mmoles) y morfolina (25,83 mL, 296 mmoles) a una solución de 1-metanosulfonil-piperidin-4-ona (50,0 g, 282 mmoles) en benceno (282 mL). La mezcla de reacción se calentó en un matraz equipado con un condensador y una trampa Dean-Stark a reflujo durante 15 h. La mezcla de reacción se enfrió y se concentró a vacío para dar la enamina que se utilizó sin purificación adicional. La enamina se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (200 mL) y se enfrió a 0ºC. A esto se la añadió trietilamina (47,2 mL, 339 mmoles) seguido de la adición gota a gota de cloruro de 4-trifluorometilbenzoilo (42,3 mL, 285 mmoles) disuelto en CH_{2}Cl_{2} (82 mL). La mezcla de reacción se dejó templando a la temperatura ambiente y se agitó durante 20 h. La mezcla de reacción se lavó con HCl 1 N acuoso (250 mL) y la capa de CH_{2}Cl_{2} se separó, se secó (Na_{2}SO_{4}), y se concentró. El aceite resultante se recogió en EtOH (300 mL) y se trató con hidrazina (44,3 mL, 1,41 mol) a 0ºC. La mezcla de reacción se dejó templando a la temperatura ambiente y se agitó durante 24 h. La mezcla se concentró y el sólido resultante se filtró con EtOH, se lavó y se secó a vacío para proporcionar 70 g (72%) de 5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina en forma de un sólido de color blanco. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{14}H_{14}F_{3}N_{3}O_{2}S, 345,0; m/z encontrada, 346,0 [M+H]^{+}. HPLC (condiciones de fase reversa): t_{R} = 6,33 min. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,72 (s, 4H), 4,58 (s, 2H), 3,69 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 2,99 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 2,92 (s, 3H).
C. 3-[5-Metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propan-1-ol
Se añadió Cs_{2}CO_{3} (33,74 g, 103,5 mmoles) a una solución de 5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina (29,8 g, 86,3 mmoles) en DMF anhidra (70 mL) y se agitó durante 25 min. Se añadió 3-bromo-1-propanol (8,6 mL, 13,2 g, 94,9 mmoles) y se agitó en N_{2} a la temperatura ambiente durante 18 h. Se añadió agua (500 mL) a la reacción y se agitó durante 5 min. La sustancia precipitada material se separó mediante filtración y se lavó con agua (4 X 100 mL) y se secó en un Sistema de Liofilización. La sustancia bruta (31,0 g) se recogió en DMF anhidra (65 mL) y se añadió Cs_{2}CO_{3} (33,74 g, 103,5 mmoles), y se agitó durante 10 min. Se añadieron 3-bromo-1-propanol (8,6 mL, 13,2 g, 94,9 mmoles) y MeOH (6,0 mL, 4,75 g, 148 mmoles) y se continuó agitando en N_{2} a la temperatura ambiente durante 15 h. Se añadió agua (500 mL) a la reacción y se agitó durante 10 min. La sustancia precipitada se filtró y se lavó con agua (3 X 100 mL). a torta del filtro se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (200 mL) y se lavó con salmuera (50 mL), se secó (Na_{2}SO_{4}), y se concentró. El sólido se trituró con Et_{2}O (200 mL), se filtró, se lavó con Et_{2}O, y se secó para proporcionar 16,0 g del compuesto deseado. Las aguas madre se sometieron a cromatografía (sílice, acetona/EtOAc al 0-10%) para obtener 3,0 g adicionales del compuesto del título. El rendimiento combinado fue del 54,6%. MS (electropulverización): calculado para C_{17}H_{20}F_{3}N_{3}O_{3}S, 403,12; m/z encontrada, 404,0 [M+H]^{+}, 426,0 [M+Na]^{+}. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,71 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,23 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 3,70-3,63 (m, 4H), 2,90 (s, 3H), 2,90 (t, J = 5,1 Hz, 2H), 2,62 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 2,06 (c, J = 6,1 Hz, 2H).
D. 3-[5-Metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propionaldehído
Se añadió peryodinano Dess-Martin (3,45 g, 8,2 mmoles) a una solución de 3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propan-1-ol (3,0 g, 7,4 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (20 mL) a 0ºC en N_{2}. Al cabo de 15 mL, la reacción se dejó templando a la temperatura ambiente y se agitó durante otras 1,5 h. La reacción se diluyó con Et_{2}O (60 mL) y se añadió lentamente NaHCO_{3} acuoso al 20% (35 mL). Después se añadió Na_{2}S_{2}O_{3} y se agitó a la temperatura ambiente durante 30 min. Las capas se separaron y la porción acuosa se extrajo con Et_{2}O (2 x 30 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se concentraron. la MPLC (MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 1-10%) proporcionó 2,53 g del aldehído deseado con un rendimiento del 85%. MS (electropulverización): calculado para C_{17}H_{18}F_{3}N_{3}O_{3}S, 401,11; m/z encontrada, 402,1 [M+H], 434,1 [M+MeOH+H]. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 9,82 (s, 1H), 7,63 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,58 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,68 (s, 2H), 4,25 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 3,63 (t, J = 5,8 Hz, 4H), 3,14 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,92 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,81 (s, 3H).
E. 5-Metanosulfonil-1-{3-[4-(2-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina
A una solución agitada de 3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propionaldehído (0,060 g, 0,15 mmoles) y 1-(2-nitro-fenil)-piperazina (0,032 g, 0,157 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (0,5 mL), se le añadió AcOH glacial (8,5 \muL, 0,15 mmoles) y se agitó durante 15 min a la temperatura ambiente. Se añadió NaBH(OAc)_{3} (0,041 g, 0,19 mmoles) y se agitó en nitrógeno durante la noche. Después se añadió NaHCO_{3} saturado (0,5 mL) y se agitó durante 15 min. Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (0,5 mL). La purificación mediante MPLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 2-15%) proporcionó el producto deseado en forma de un sólido de color blanco (0,063 g, 71%). TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 12%): R_{f} = 0,67. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{27}H_{31}F_{3}N_{6}O_{4}S, 592,21; m/z encontrada, 593,2 [M+H]^{+}. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,80 (dd, J = 1,6, 8,2 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,52 (ddd, J = 1,6, 7,3, 8,3 Hz, 1H), 7,19 (dd, J = 1,2, 8,3 Hz, 1H), 7,09 (m, 1H), 4,59 (s, 2H), 4,17 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 3,71 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,13 (t ancho, J = 4,8 Hz, 4H), 2,96 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,66 (t ancho, J = 4,4 Hz, 4H), 2,51 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,17 (c, J = 6,9 Hz, 2H).
Ejemplo 17
32
1-[3-Cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-urea.
A. Éster t-butílico de ácido 4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico
A una solución agitada de 1,2-dicloro-3-nitrobenceno (0,96 g, 5,0 mmoles) y éster t-butílico de ácido piperazino-1-carboxílico (0,93 g, 5,0 mmoles) en acetonitrilo (5 mL) se le añadió K_{2}CO_{3} (1,38 g, 10 mmoles). La mezcla se calentó a reflujo durante 48 h. El disolvente se eliminó a presión reducida. La sustancia bruta se repartió entre EtOAc (100 mL) y H_{2}O (20 mL). La capa orgánica se lavó con H_{2}O (2 x 20 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. La cromatografía en columna (sílice, EtOAc/hexanos al 10-20%) proporcionó éster t-butílico de ácido 4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico (1,2 g, 70%). TLC (sílice, 20% EtOAc/hexanos): R_{f} = 0,45. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{15}H_{20}ClN_{3}O_{4}, 341,1; m/z encontrada, 364,1 [M+Na]^{+}. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}) 7,56 (dd, J = 8,2, 1,4 Hz, 1H), 7,50 (dd, J = 8,2, 1,4 Hz, 1H), 7,13 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 3,38-3,56 (m, 4H), 3,06 (m, 4H), 1,48 (s, 9H).
B. 1-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazina
Se disolvió éster t-butílico de ácido 4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico (1,87 g, 5,47 mmoles) en ácido trifluoroacético (5,0 mL) y CH_{2}Cl_{2} (5,0 mL) y se dejó agitando durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró, se diluyó con EtOAc, y se lavó con NaHCO_{3} acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna (sílice, CH_{2}Cl_{2} al 100%) para proporcionar 1-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazina (1,26 g, 95%). MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{10}H_{12}ClN_{3}O_{2}, 241,1; m/z encontrada, 242,1 [M+H]^{+}, RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,54 (dd, J = 8,2, 1,6 Hz, 1H), 7,49 (dd, J = 8,2, 1,6 Hz, 1H), 7,10 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 3,08 (s ancho, 4H), 2,99 (s ancho, 4H), 2,07-2,12 (m, 1H).
C. 1-{3-[4-(2-Cloro-6-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina
A una solución agitada de 3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propionaldehído (0,5 g, 1,25 mmoles) y 1-(2-cloro-6-nitrofenil)-piperazina (0,301 g, 1,25 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (6 mL) se le añadieron sulfato de sodio (0,354 g, 2,50 mmoles) y triacetoxiborohidruro de sodio (0,396 g, 1,87 mmoles). La mezcla se dejó agitando a la temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se diluyó con CH_{2}Cl_{2} y se lavó con agua. La capa de CH_{2}Cl_{2} se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y el disolvente se eliminó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 10%) para proporcionar de 1-{3-[4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometilfenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina (0,380 g, 49%). MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{27}H_{30}ClF_{3}N_{6}O_{4}S, 626,2; m/z encontrada, 627,2 [M+H]^{+}. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,73 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,54 (dd, J = 8,2, 1,2 Hz, 1H), 7,49 (dd, J = 8,2,1,2 Hz, 1H), 7,10 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 4,58 (s, 2H), 4,13 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 3,71 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 3,01-3,11 (m, 4H), 2,95 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,42-2,53 (m, 4H), 2,40 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 2,12 (c, J = 6,5 Hz, 2H).
D. 3-Cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenilamina
A una solución agitada de 1-{3-[4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina (0,153 g, 0,244 mmoles) en EtOH (2,44 mL) se le añadió polvo de cinc (0,80 mg, 1,22 mmoles) y se le añadió lentamente acético acid (0,70 mL). Al cabo de 15 min la solución de color amarillo se volvió incolora y el polvo de cinc en exceso se filtró a través de un tapón de celite. El producto filtrado se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 0-10%) para proporcionar 3-cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenilamina (0,146 g, 100%). MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{27}H_{32}ClF_{3}N_{6}O_{2}S, 596,2; m/z encontrada, 597,2 [M+H]'. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,73 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,88 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 6,63 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,36 (s, 2H), 4,15 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 3,60-3,70 (m, 4H), 2,97 (t, J = 5,3 Hz, 2H), 2,90 (s, 3H), 2,83 (d, J = 10,8 Hz, 2H), 2,74 (d, J = 11,5 Hz, 2H), 2,37 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 2,11-2,20 (m, 4H).
E. 1-[3-Cloro-2-(4-{3-(5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-urea
A una solución agitada de 3-cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometilfenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenilamina (0,062 g, 0,104 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (0,52 mL) se le añadió isocianato de trimetilsililo (0,017 mL, 0,125 mmoles). La mezcla de reacción se dejó agitando durante 48 h a la temperatura ambiente. La reacción no llegó a completarse, de manera que se le añadieron 0,017 mL (0,125 mmoles) adicionales de isocianato de trimetilsililo y la reacción se calentó a 45ºC durante 10 h. La cromatografía en columna (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 3-10%) proporcionó 1-[3-cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-urea (0,015 g, 22%). MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{28}H_{33}ClF_{3}N_{7}O_{3}S, 639,2; m/z encontrada, 640,2 [M+H]^{+}. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 8,26 (s ancho, 1H), 8,05 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,09 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,65 (s, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,15 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,65-3,73 (m, 4H), 2,96 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 2,87-2,92 (m, 2H), 2,91 (s, 3H), 2,70 (d, J = 11,4 Hz, 2H), 2,40 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,09-2,22 (m, 4H).
Ejemplo 18
33
Amiduro de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazin-1-ii]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-sulfónico.
A. Éster t-butílico de ácido 3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico acid
A una solución agitada de 500 g (2,51 mol) de 1-t-butoxicarbonil-4-piperidona y 87,1 g (2,76 mol) de morfolina en benceno (1,25 L) se le añadió una cantidad catalítica (\sim0,25 g) de p-TsOH. La mezcla se calentó a reflujo durante 36 h con una trampa Dean-Stark. Una parte del disolvente se eliminó a presión reducida y la solución resultante se enfrió y se filtró. El producto filtrado se concentró después para rendir 630 g (94%) de un aceite de color rojo anaranjado. Se dividió la enamina y 320 g (1,19 mol) se diluyeron con CH_{2}Cl_{2} (1,0 L) y se añadieron 165,0 mL (1,19 mol) de Et_{3}N. La mezcla se enfrió a 0ºC y se le añadió lentamente una solución de 225 g (1,08 mol) de cloruro de 4-trifluorometilbenzoilo en CH_{2}Cl_{2} (0,5 L) mediante un embudo de goteo a lo largo de 1 h. Se dejó que la mezcla se templara a la temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La reacción se diluyó después con HCl 1N (450 mL) y se agitó vigorosamente durante 3 h. La capa acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 500 mL) y los extractos combinados se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida. El aceite bruto se diluyó con EtOH (1 L) y se enfrió a 0ºC. A esta solución agitada se le añadieron lentamente 115 g (3,57 mol) de hidrazina y se dejó que la mezcla se templara a la temperatura ambiente y se agitó durante la noche, tiempo durante el cual se formó un precipitado de color blanco. El volumen de la reacción se redujo a \sim500 mL y se enfrió. El precipitado se recogió para proporcionar 285 g (72% a partir de la enamina) de un sólido de color blanco. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,63-7,55 (m, 4H), 4,58 (s ancho, 2H), 3,69-3,62 (m ancho, 2H), 2,74-2,68 (m ancho, 2H), 1,47 (s, 9H).
B. Éster t-butílico de ácido 1-(2-metoxicarbonil-etil)-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico
El éster t-butílico de ácido 3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico (1,85g, 5,04 mmoles) y acrilato de metilo (0,50 mL, 5,6 mmoles) se combinaron en tolueno (30 mL) y se calentaron a 75ºC. La mezcla resultante se trató con t-BuONa (100 mg), y se continuó calentando durante 48 h. La mezcla se dejó enfriando y se repartió entre EtOAc (300 mL) y NaHCO_{3} (75 mL). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 75 mL). Los extractos combinados se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La cromatografía en columna (sílice, EtOAc/hexanos al 30-60%) proporcionó 343 mg (15%) del compuesto del título. TLC (sílice, EtOAc/hexanos al 50%): R_{f} = 0,4. MS (electropulverización): m/z calculado para C_{22}H_{27}F_{3}N_{3}O_{4} [M^{+}+H] 454,20, encontrado 454,1. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz): 7,75 (d ancho, J = 8,1 Hz, 2H), 7,64 (s ancho, 2H), 4,63 (s ancho, 2H), 4,30 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,75 (s ancho, 2H), 3,68 (s, 3H), 2,98 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 2,79 (t ancho, J = 5,6 Hz, 2H), 1,48 (s, 9H).
C. Éster t-butílico de ácido 1-(3-hidroxi-propil-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico
Una solución de LiBH_{4} (26 mg, 1,2 mmoles) en THF (0,5 mL) se añadió a una solución a 0ºC de éster t-butílico de ácido 1-(2-metoxicarboniletil)-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico (317 mg, 0,70 mmoles) en THF (4,0 mL). La mezcla se agitó durante 5 min, después se añadió LiBH_{4} adicional (15 mg) y se continuó agitando durante 17 h. La mezcla se repartió entre EtOAc (80 mL) y NaHCO_{3} acuoso saturado (20 mL). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 mL). Los extractos combinados se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La cromatografía en columna (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 0-8%) proporcionó 268 mg (95%) del compuesto del título. HPLC (condiciones de fase reversa), t_{R} = 6,82 min. MS (electropulverización): m/z calculado para C_{21}H_{26}F_{3}N_{3}O_{3} [M^{+}+Na] 448,18, encontrado 448,10. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz): 7,73 (d ancho, J = 8,2 Hz, 2H), 7,65 (s ancho, 2H), 4,64 (s ancho, 2H), 4,21 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,76 (s ancho, 2H), 3,66 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 2,73 (t ancho, J = 5,4 Hz, 2H), 2,04 (c, J = 6,1, 2H), 1,48 (s, 9H).
D. Éster t-butílico de ácido 1-(3-oxo-propil)-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico
Se añadió peryodinano Dess-Martin (1,43 g, 3,36 mmoles) en porciones a una solución agitada de éster t-butílico de ácido 1-(3-hidroxipropil)-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidropirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico (1,30 g, 3,05 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (15 mL) a 0ºC en N_{2}. Después la reacción se agitó a 0ºC durante 15 min y se dejó templando a la temperatura ambiente. Después de agitar a la temperatura ambiente durante 1,5 h la reacción se diluyó con Et_{2}O (50 mL) y se añadió lentamente NaHCO_{3} saturado (15 mL) (¡precaución! evolución de gas). Después se añadió Na_{2}S_{2}O_{3,5}H_{2}O (5,31 g, 21,4 mmoles) y se agitó durante 30 min. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con Et_{2}O (2 x 30 mL). Los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se concentraron. la MPLC (MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 1-10%) proporcionó el aldehído con un rendimiento del 79% (1,02 g). TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,67. MS (electropulverización) calculado para C_{21}H_{24}F_{3}N_{3}O_{3}, 424,2 ([M+H]^{+}), m/z encontrada, 424,2. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 9,82 (s, 1H), 7,65 (d ancho, J = 8,0 Hz, 2H), 7,54 (s ancho, 2H), 4,53 (s, 2H), 4,21 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 3,68 (s ancho, 2H), 3,04 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 2,70 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 1,39 (s, 9H).
E. Éster t-butílico de ácido 4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico
A una solución agitada de 0,96 g (5,0 mmoles) de 1,2-dicloro-3-nitrobenceno y 0,93 g (5,0 mmol, 1 eq.) de 1-t-butiloxicarbonilpiperazina en acetonitrilo (5 mL) se añadieron1,38 g (10 mmol, 2 eq.) de K_{2}CO_{3}. La mezcla se calentó a reflujo durante 48 h. El disolvente se eliminó a presión reducida. El producto bruto se repartió entre EtOAc (100 mL) y 20 mL de H_{2}O. La capa orgánica se lavó con H_{2}O (2 x 20 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. La cromatografía en columna (sílice, EtOAc/hexanos al 10-20%) proporcionó 1,2 g (70%) de éster t-butílico de ácido 4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico. TLC (sílice, EtOAc/hexanos al 20%): R_{f} 0,45. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,56 (dd, J = 8,2, 1,4 Hz, 1H), 7,50 (dd, J = 8,2, 1,4 Hz, 1H), 7,13 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 3,56-3,38 (m, 4H), 3,10-3,00 (m, 4H), 1,48 (s, 9H).
F. Éster t-butílico de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometilfenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico
El éster t-butílico de ácido 4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico (940 mg, 2,75 mmoles) en 10 mL de CH_{2}Cl_{2} se trató con 5 mL de ácido trifluoroacético y se agitó a 25ºC durante 1 h. Después se eliminaron las sustancias volátiles. El residuo se recogió en CH_{2}Cl_{2} (60 mL) y KOH (4 N, 20 mL). La capa orgánica se separó, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. El aceite de color amarillo se disolvió en CH_{2}Cl_{2} y se añadió a los 996 mg (2,35 mmoles) de éste t-butílico de ácido 1-(3-oxo-propil)-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico. La solución de color amarillo se trató con ácido acético glacial (0,8 mL, 6 eq.) y se agitó a 25ºC durante 1 h. Se añadió NaBH(OAC)_{3} (1,5 g, 7,05 mmoles) y se agitó en nitrógeno durante 2 h. Después se añadió NaHCO_{3} saturado (20 mL) y se agitó durante 30 min, y las capas se separaron. El extracto orgánico se lavó con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró a presión reducida. La cromatografía en columna (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 2-5%) proporcionó éster t-butílico de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico en forma de un sólido de color blanco (1,40 g, 92%). TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%): R_{f} = 0,3. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{31}H_{36}ClF_{3}N_{6}O_{4}, 648,24; m/z encontrado 649,3 [M+H]^{+}, RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,69 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,60-7,50 (m, 1H), 7,45-7,37 (m, 4H), 7,02 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 4,58 (s ancho, 2H), 4,04 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,73-3,65 (m, 2H), 3,05-2,95 (m, 4H), 2,71 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 2,50-2,35 (m, 4H), 2,30 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,05-1,95 (m, 2H), 1,41 (s, 9H).
G. Éster t-butílico de ácido 1-{3-[4-(2-amino-6-cloro-fenil-piperazin-1-il]-propil)-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico
Una solución de 360 mg (0,56 mmoles) de éster t-butílico de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico en 4 mL de MeOH se trató con 182 mg (5 eq.) de polvo de cinc y ácido acético glacial (1,57 mL, 50 eq.) a 25ºC. La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 1 h. La mezcla de reacción se filtró después a través de un lecho de celite y se concentró para obtener un aceite espeso. El residuo se recogió en CH_{2}Cl_{2} (50 mL) y NaHCO_{3} sat. (20 mL). La capa orgánica se separó, se lavó con H_{2}O (2 x 10 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró para proporcionar éster t-butílico de ácido 1-{3-[4-(2-amino-6-cloro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,3. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{31}H_{38}ClF_{3}N_{6}O_{2}, 618,27; m/z encontrada, 619,3 [M+H]^{+}.
H. Éster t-butílico de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico
Una solución de éster t-butílico de ácido 1-{3-[4-(2-amino-6-cloro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico (257 mg, 0,42 mmoles) en 4 mL de CH_{2}Cl_{2} se trató con 32 L (0,42 mmol, 1,0 eq) de cloruro de metanosulfonilo y 116 L (0,83 mmol, 2 eq) de trietilamina y la mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 1 h. Se añadieron EtOAc (40 mL) y sat. NaHCO_{3} (20 mL). La capa orgánica se separó y se lavó con H_{2}O (20 mL), salmuera (20 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró para proporcionar el éster t-butílico de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico bruto. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,3. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{32}H_{40}ClF_{3}N_{6}O_{4}S, 696,25; m/z encontrada, 697,2 [M+H]^{+}.
I. Amiduro de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-t-butoxicarbonil-sulfónico
Una solución de 97 mg (0,14 mmoles) de éster t-butílico de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico en 3 mL de CH_{2}Cl_{2} se trató con 1,5 mL de ácido trifluoroacético. La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 1 h después de eliminar todas las sustancias volátiles. A esta sustancia bruta en 0,5 mL de CH_{2}Cl_{2} se le añadió gota a gota una solución mezclada previamente de isocianato de clorosulfonilo (18 \muL, 0,209 mmoles) y 2-metil-2-propanol (20 \muL, 0,209 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (0,150 mL). La mezcla de reacción se dejó agitando a 25ºC durante la noche. La TLC preparativa (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 2-10%) proporcionó del compuesto del título (84 mg, 78%). TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,3. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{32}H_{41}ClF_{3}N_{7}O_{6}S_{2}, 775,22; m/z encontrada, 776,2 [M+H]^{+}.
J. Amiduro de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-sulfónico
El amiduro de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-t-butoxicarbonil-sulfónico (84 mg, 0,11 mmoles) se disolvió en ácido trifluoroacético (0,75 mL) y CH_{2}Cl_{2} (0,75 mL). La mezcla de reacción se dejó agitando a 25ºC durante 2 h. La eliminación de las sustancias volátiles en una corriente de nitrógeno proporcionó amiduro de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-sulfónico con un rendimiento cuantitativo en forma de la sal de ácido trifluoroacético. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{27}H_{33}ClF_{3}N_{7}O_{4}S_{2}, 675,17; m/z encontrada, 676,2 [M+H]^{+}, RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,73 y 7,63 (patrón AB, J = 8,2 Hz, 4H), 7,37 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,13 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,32 (s, 2H), 4,20 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 3,87-3,80 (m, 2H), 3,80-3,75 (m, 4H), 3,70-3,25 (m, 7H), 3,00-2,75 (m, 4H), 2,25-2,15 (m, 2H).
Ejemplo 19
34
N-[3-Cloro-2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-metanosulfonamida.
A. 5-Metanosulfonil-1-oxiranilmetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina
La 5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina (10,0 g, 29,0 mmoles) y epiclorhidrina (24 mL, 307 mmoles) se dejaron agitando en DMF (150 mL) conteniendo Cs_{2}CO_{3} (10,4 g, 31,9 mmoles). Después de agitar a la temperatura ambiente durante 4 días la mezcla se evaporó, se llevó a EtOAc y se lavó con agua. Las sustancias orgánicas se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron para dar un sólido de color amarillo claro. La cromatografía en columna (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 5%) produjo 4,1 g (35%) de un sólido de color blanco. TLC (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 5%): R_{f} = 0,28. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{17}H_{18}F_{3}N_{3}O_{3}S, 401,10; m/z encontrada, 402,1 [M+H]^{+}, RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,84 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,79 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 4,70-4,62 (m, 3H), 4,25 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 3,90-3,70 (m, 2H), 3,47 (m, 1H), 3,10-2,9 (m, 6H), 2,65-2,60 (m, 1H).
B. Éster t-butílico de ácido 4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico
A una solución agitada de 0,96 g (5,0 mmoles) de 1,2-dicloro-3-nitrobenceno y 0,93 g (5,0 mmol, 1 eq) de 1-t-butiloxicarbonilpiperazina en acetonitrilo (5 mL) se añadieron 1,38 g (10 mmol, 2 eq.) de K_{2}CO_{3}. La mezcla se calentó a reflujo durante 48 h. El disolvente se eliminó a presión reducida. El producto bruto se repartió entre EtOAc (100 mL) y 20 mL de H_{2}O. La capa orgánica se lavó con H_{2}O (2 x 20 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. La cromatografía en columna (sílice, EtOAc/hexanos al 10-20%) proporcionó 1,2 g (70%) de éste t-butílico de ácido 4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico. TLC (sílice, EtOAc/hexanos al 20%): R_{f} = 0,45. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,56 (dd, J = 8,2, 1,4 Hz, 1H), 7,50 (dd, J = 8,2, 1,4 Hz, 1H), 7,13 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 3,56-3,38 (m, 4H), 3,10-3,00 (m, 4H), 1,48 (s, 9H).
C. Éster t-butílico de ácido 4-(2-amino-6-cloro-fenil)-piperazino-1-carboxílico
Una solución de 342 mg (1 mmoles) de éster t-butílico de ácido 4-(2-cloro-6-nitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico en 5,0 mL de MeOH se trató con 630 mg (10 mmol, 10 eq.) de formiato de amonio y una cantidad catalítica de Pd-C al 10% (34 mg). La mezcla de reacción se agitó a 65ºC durante 30 min. La mezcla de reacción se filtró después a través de un lecho de celite y se concentró para obtener un sólido de color amarillo. TLC (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 5%): R_{f} = 0,40. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{15}H_{22}ClN_{3}O_{2}, 311,14; m/z encontrada, 312,1 [M+H]^{+}.
D. Éster t-butílico de ácido 4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazino-1-carboxílico
El éster t-butílico de ácido 4-(2-amino-6-cloro-fenil)-piperazino-1-carboxílico (163 mg, 0,53 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} se trató con 62 L (0,80 mmol, 1,5 eq) de cloruro de metanosulfonilo y 148 L (1,06 mmol, 2 eq.) de trietilamina y la mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 1 h. Se añadieron EtOAc (40 mL) y NaHCO_{3} sat. (20 mL). La capa orgánica se separó y se lavó con H_{2}O (20 mL), salmuera (20 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. La cromatografía en columna (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 0-5%) proporcionó 145 mg (70%) de éster t-butílico de ácido 4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazino-1-carboxílico. TLC (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 5%): R_{f} = 0,35. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{16}H_{24}ClN_{3}O_{4}S, 389,12; m/z encontrada, 388,1 (negativa). RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,41 (dd, J = 8,2, 1,6 Hz, 1H), 7,11 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 6,99 (dd, J = 8,2, 1,6 Hz, 1H), 4,25-3,91 (m, 2H), 3,66-3,52 (m, 2H), 3,01 (s, 3H), 3,01-2,84 (m, 2H), 2,70-2,56 (m, 2H), 2,55-2,43 (m, 2H), 1,44 (s, 9H).
E. N-[3-Cloro-2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometilfenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-metanosulfonamida
El éster t-butílico de ácido 4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazino-1-carboxílico (145 mg, 0,37 mmoles) se disolvió en 3 mL de CH_{2}Cl_{2} y se trató con 1,5 mL de ácido trifluoroacético. La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 1 h después de eliminar todas las sustancias volátiles. El sólido se trató con CH_{2}Cl_{2} (20 mL) y KOH acuoso (4 N, 10 mL). La capa orgánica se separó, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. El aceite bruto (90 mg) se disolvió en EtOH absoluto (1,0 mL) y se trató con 96 mg (0,24 mmoles) de 5-metanosulfonil-1-oxiranilmetil-3-(4-trifluorometil-fenil)4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina. La mezcla de reacción se sometió a reflujo a 85ºC durante 3 h y después el disolvente se separó. La cromatografía en columna (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 0-5%) proporcionó 138 mg (20% a lo largo de 4 etapas) de N-[3-cloro-2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-metanosulfonamida. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%): R_{f} = 0,45. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{28}H_{34}ClF_{3}N_{6}O_{5}S_{2}, 690,17; m/z encontrada, 691,2 [M+H]^{+}, RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 8,28 (s, 1H), 7,65 y 7,59 (patrón AB, J = 8,4 Hz, 4H), 7,36 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,54-4,44 (m, 2H), 4,21-3,94 (m, 3H), 3,77-3,52 (m, 4H), 3,41 (m, 2H), 2,96 (s, 3H), 2,81 (s, 3H), 3,05-2,73 (m, 4H), 2,66-2,20 (m, 4H).
Ejemplo 20
35
1-[4-(2,6-Dinitro-fenil)-piperazin-1-il]-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propan-2-ol.
A. Éster t-butílico de ácido 4-(2,6-dinitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico
A una solución agitada de 1,01 g (5,0 mmoles) de 1-cloro-2,6-dinitrobenceno y 0,93 g (5,0 mmoles) de 1-t-butiloxicarbonilpiperazina en acetonitrilo (5 mL) se le añadieron 1,38 g (10 mmoles) de K_{2}CO_{3}. La mezcla se calentó a reflujo durante 48 h. El disolvente se eliminó a presión reducida. El producto bruto se repartió entre EtOAc (100 mL) y 20 mL de H_{2}O. La capa orgánica se lavó con H_{2}O (2 x 20 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. La cromatografía en columna (sílice, EtOAc/hexanos al 10-20%) proporcionó 1,31 g (85%) de éster t-butílico de ácido 4-(2,6-dinitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico. TLC (sílice, EtOAc/hexanos al 20%): R_{f} = 0,35. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,75 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,25 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 3,30 (m, 4H), 2,95 (m, 2H), 1,44 (s, 9H).
B. 1-[4-(2,6-Dinitro-fenil)-piperazin-1-il]-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propan-2-ol
El éster t-butílico de ácido 4-(2,6-dinitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico (220 mg, 0,63 mmoles) se disolvió en 5,0 mL de CH_{2}Cl_{2} y se trató con 3,0 mL de ácido trifluoroacético. La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 1 h después de eliminar todas las sustancias volátiles. El sólido se trató con CH_{2}Cl_{2} (20 mL) y KOH acuoso (4 N, 10 mL). La capa orgánica se separó, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. El aceite bruto (67 mg) se disolvió en EtOH absoluto (1,2 mL) y se trató con 141 mg (0,35 mmol, 1,3 eq) de 5-metanosulfonil-1-oxiranilmetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina. La mezcla de reacción se sometió a reflujo a 85ºC durante 3 h y después el disolvente se separó. La purificación mediante cromatografía en columna (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 10-20%) proporcionó 150 mg (85%) de 1-[4-(2,6-dinitro-fenil)-piperazin-1-il]-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometilfenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propan-2-ol. TLC (sílice, acetona/CH_{2}Cl_{2} al 10%): R_{f} = 0,3. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{27}H_{30}F_{3}N_{7}O_{7}S, 653,19; m/z encontrada, 654,2 [M+H]^{+}, RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,71 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,64 y 7,58 (patrón AB, J = 8,4 Hz, 4H), 7,20 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 4,54 (s, 2H), 4,29-4,12 (m, 2H), 3,66 (t, J = 5,3 Hz, 2H), 3,70-2,95 (m, 9H), 2,91 (s, 3H), 2,67-2,32 (m, 4H).
Ejemplo 21
36
Éster metílico de ácido 2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-3-metanosulfonilamino-benzoico.
A. Éster t-butílico de ácido 4-(2-metoxicarbonil-6-nitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico
A una solución agitada de 736 mg (2,83 mmoles) de 2-bromo-3-nitrobenzoato de etilo y 579 mg (3,1 mmol, 1,1 eq.) de 1-t-butiloxicarbonilpiperazina en n-butanol (6 mL) se le añadieron 330 mg (3,1 mmol, 1,1 eq) de Na_{2}CO_{3}. La mezcla se calentó a reflujo durante 4 h. El disolvente se eliminó a presión reducida. El producto bruto se repartió entre EtOAc (100 mL) y 20 mL de H_{2}O. La capa orgánica se lavó con H_{2}O (2 x 20 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. La cromatografía en columna (sílice, EtOAc/hexanos al 10-20%) proporcionó 744 mg (72%) de éster t-butílico de ácido 4-(2-metoxicarbonil-6-nitrofenil)-piperazino-1-carboxílico. TLC (sílice, EtOAc/hexanos al 20%): R_{f} = 0,5. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,67 (dd, J = 8,2, 1,4 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,2, 1,4 Hz, 1H), 7,16 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,44-3,36 (m, 4H), 3,03-2,95 (m, 4H), 1,48 (s, 9H).
B. Éster metílico de ácido 2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-3-metanosulfonilamino-benzoico
Una solución de 1,0 g (2,73 mmoles) de éster t-butílico de ácido 4-(2-metoxicarbonil-6-nitro-fenil)-piperazino-1-carboxílico en 18 mL de MeOH se trató con 893 mg (13,7 mmol, 5 eq) de polvo de cinc y ácido acético glacial (8 mL). La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 1 h. La mezcla de reacción se filtró después a través de un lecho de celite y se concentró para obtener un aceite espeso. El residuo se recogió en EtOAc (200 mL) y NaHCO_{3} sat. (100 mL). La capa orgánica se separó, se lavó con H_{2}O (2 x 50 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. La cromatografía en columna (sílice, EtOAc/hexanos al 10-30%) proporcionó la amina deseada (844 mg, 92%). La amina (42 mg, 0,13 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (0,5 mL) se trató con 9,7 \muL (0,13 mmol, 1,0 eq.) de cloruro de metanosulfonilo y 34,9 \muL (0,25 mmol, 2 eq.) de trietilamina y la mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 1 h. Se añadieron EtOAc (20 mL) y NaHCO_{3} sat. (10 mL). La capa orgánica se separó y se lavó con H_{2}O (10 mL), salmuera (20 mL), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. El aceite bruto se disolvió en 2 mL de CH_{2}Cl_{2} y se trató con 0,5 mL de ácido trifluoroacético. La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 1 h después de eliminar todas las sustancias volátiles. El aceite bruto se disolvió en EtOH absoluto (1,0 mL) y se trató con 40 mg (0,1 mmoles) de 5-metanosulfonil-1-oxiranilmetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina y 200 \muL de trietilamina. La mezcla de reacción se sometió a reflujo a 85ºC durante 4 h y después el disolvente se separó. La TLC preparativa (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 7%) proporcionó 35 mg (49% a lo largo de 3 etapas) del compuesto del título. TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5%): R_{f} = 0,30. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{30}H_{37}F_{3}N_{6}O_{7}S_{2}, 714,21; m/z encontrada, 715,2 [M+H]^{+}.
RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 8,11 (s, 1H), 7,74-7,59 (m, 5H), 7,30 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 4,62-4,49 (m, 2H), 4,25-3,99 (m, 3H), 3,90 (s, 3H), 3,80-3,57 (m, 3H), 3,53-3,27 (m, 2H), 3,14-2,78 (m, 4H), 3,05 (s, 3H), 2,86 (s, 3H), 2,76-2,65 (m, 2H), 2,61-2,20 (m, 4H).
Ejemplo 22
37
1-{3-[4-(1,1-Dioxo-1H-116-benzo[d]isotiazol-3-il)-piperazin-1-il]-propil}-5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina.
A. 1,1-Dioxido de 3-piperazin-1-il-benzo[d]isotiazol
Se añadió POCl_{3} (10,2 mL, 109,2 mmoles) a sacarina (5,0 g, 27,3 mmoles) y se calentó a 120ºC durante 20 h. El reactivo en exceso se separó en un evaporador rotatorio y se añadió agua (50 mL) al residuo para formar un precipitado. El sólido se filtró, se lavó con agua (2 x 20 mL), y se secó. Una porción de la sustancia bruta anterior (2,0 g, 9,95 mmoles) y piperazina (4,28 g, 49,75 mmoles) se recogieron en dioxano (10 mL), y se calentaron a 100ºC durante 24 h. La reacción se dejó enfriando a la temperatura ambiente y se vertió en agua helada (50 g), y se neutralizó mediante la adición de NaOH acuoso al 10%. La mezcla se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 25 mL) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se concentraron. La MPLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 5-20%) proporcionó el derivado de piperazinilo (0,07 g, 4,2%). MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{11}H_{13}N_{3}O_{2}S, 251,07; m/z encontrada, 252,1 [M+H]^{+}. RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,72 (dd, J = 0,8, 7,4 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,49 (dt, J = 0,8, 7,4 Hz, 1H), 7,43 (dt, J = 1,2, 7,8 Hz, 1H), 3,80 (s, 4H), 2,85 (t ancho, J = 5,0
Hz, 4H), 2,07 (s ancho, 1H). RMN C^{13} (100 MHz, CDCl_{3}): 160,8, 145,3, 133,3, 133,0, 128,5, 125,9, 123,2, 49,8, 46,3.
B. 1-{3-[4-(1,1-Dioxo-1H-116-benzo[d]isotiazol-3-il)-piperazin-1-il]-propil}-5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometilfenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina
A una solución agitada de 3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propionaldehído (0,040 g, 0,13 mmoles) y 1,1-dioxido de 3-piperazin-1-il-benzo[d]isotiazol (0,050 g, 0,21 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (0,5 mL), se le añadió AcOH glacial (12 \muL, 0,21 mmoles) y se agitó durante 15 min a la temperatura ambiente. Se añadió NaBH(OAc)_{3} (0,058 g, 0,27 mmoles) y se agitó en nitrógeno durante la noche. Después se añadió NaHCO_{3} saturado (0,5 mL) y se agitó durante 15 min. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (0,5 mL). La MPLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 2-15%) proporcionó el producto deseado en forma de un sólido de color blanco (0,048 g, 76%). TLC (sílice, MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 12%): R_{f} = 0,50. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{28}H_{31}F_{3}N_{6}O_{4}S_{2}, 636,18; m/z encontrada, 637,2 [M+H]^{+}, RMN H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): 7,94 (dd, J = 0,8, 7,6 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,73-7,63 (m, 2H), 7,68 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 4,57 (s, 2H), 4,17 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 4,04 (s ancho, 4H), 3,69 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 2,94 (s, 3H), 2,92 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 2,62 (t, J = 5,0 Hz, 4H), 2,44 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 2,13 (c, J = 6,6 Hz, 2H).
Ejemplo 23
38
1-[1-{3-[4-(6-Cloro-benzotiazol-2-il)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona.
A. 6-Cloro-2-piperazin-1-il-benzotiazol
A una solución agitada de 1,07 g (5,24 mmoles) de 2,6-diclorobenzotiazol en DMF seca (25 mL) se le añadieron 2,4 g de carbonato de potasio (15,7 mmoles) y 0,5 g de piperazina (5,8 mmoles). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 4 h. Una vez completa la reacción se repartió entre EtOAc (150 mL) y agua (50 mL) y se separó. La capa acuosa se extrajo con EtOAC (2 x 100 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron después con agua (2 x 25 mL), salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, y el disolvente se eliminó a presión reducida para dar 1,33 g (100%) del producto deseado en forma de un sólido de color blanco. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{11}H_{12}ClN_{3}S, 253,04; m/z encontrada, 254,0 [M+H]^{+}.
B. 1-[1-{3-[4-(6-Cloro-benzotiazol-2-il)-piperazin-1-il)-2-hidroxi-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
A una solución agitada de 144 mg (0,39 mmoles) de 1-[1-oxiranilmetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona en 4 mL de EtOH se le añadieron 100 mg (0,39 mmoles) de 6-cloro-2-piperazin-1-il-benzotiazol. La solución se calentó a 60ºC durante la noche. El disolvente se eliminó después mediante evaporación rotatoria y el producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (sílice, MeOH/EtOAc al 0-10%) para proporcionar 220 mg (90%) de un sólido de color blanco. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{29}H_{30}ClF_{3}N_{6}O_{2}S: 618,18; m/z encontrada, 619,2 [M+H]^{+}. HPLC (condiciones de fase reversa 40-90%): t_{R} = 8,27 min. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de rotámeros de amidas): 7,70 (d, J = 8,34 Hz, 1H), 7,62 (m, 2H), 7,57 (d, J = 8,59 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 2,53 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 8,59 Hz, 1H), 7,16 (dd, J = 8,59, 2,53 Hz, 1H), 4,80 y 4,68 (A y B de cuartete AB, J = 15,92 Hz, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,18-4,08 (m, 2H), 4,01-3,89 (m, 2H), 3,85-3,60 (m, 2H), 3,59-3,47 (m, 4H), 2,94-2,75 (m, 2H), 2,72-2,62 (m, 2H), 2,55-2,47 (m, 2H), 2,46-2,39 (m, 2H), 2,13 (s, 1,5H), 2,08 (s, 1,5H).
Ejemplo 24
39
1-[1-[3-(4-Benzo[d]isoxazol-3-il-piperazin-1-il)-2-hidroxi-propil]-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona.
A. Éster t-butílico de 4-benzo[d]isoxazol-3-il-piperazino-1-carboxílico
A una solución agitada de 100 mg (0,65 mmoles) de 3-cloro-1,2-benzisoxazol en piridina (1 mL) se le añadieron 145 mg de éster t-butílico de ácido piperazino-1-carboxílico acid (0,78 mmoles) y 0,18 mL de DBU (0,78 mmoles). La mezcla se agitó a 100ºC durante la noche y después se repartió entre EtOAC (50 mL) y agua (20 mL) y se separó. La capa acuosa se extrajo con EtOAC (2 x 30 mL). Las capas orgánicas combinadas después se lavaron después con agua (25 mL), salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, y el disolvente se eliminó a presión reducida para dar un producto bruto. La purificación mediante cromatografía en columna (sílice, CH_{2}Cl_{2}/hexanos al 60-100%) produjo 82 mg (42%) del producto deseado en forma de un sólido de color amarillo claro. MS (electropulverización): masa exacta calculada para C_{16}H_{2}1N_{3}O_{3}, 303,16; m/z encontrada, 326,1 [M+Na]^{+}. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz): 7,68 (dt, J = 8,02, 0,98 Hz, 1H), 7,52-7,44 (m, 2H), 7,24 (ddd, J = 8,42, 6,46, 1,57 Hz, 1H), 3,66-3,61 (m, 4H), 3,56-3,49 (m, 4H), 1,49 (s, 9H).
B. 1-[1-[3-(4-Benzo[d]isoxazol-3-il-piperazin-1-il)-2-hidroxi-propil]-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidropirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona
Una solución de 82 mg (0,27 mmoles) de éster t-butílico de ácido 4-benzo[d]isoxazol-3-il-piperazino-1-carboxílico en 2 mL de CH_{2}Cl_{2} se trató con ácido trifluoroacético (0,5 mL) a la temperatura ambiente durante la noche. El disolvente se eliminó después y el producto bruto se disolvió en EtOH y se agitó sobre 100 mg de bicarbonato de sodio durante 1 h, el sólido se separó después mediante filtración y el producto filtrado se concentró. La piperazina bruta se disolvió después en 4 mL de EtOH y se trató con 100 mg (0,27 mmoles) de 1-[1-oxiranilmetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona. La solución se calentó a 60ºC durante la noche. El disolvente se eliminó después mediante evaporación rotatoria y el producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (sílice, MeOH/EtOAc al 0-10%) para proporcionar 105 mg (68%) de un sólido de color blanco. MS (electropulverización), masa exacta calculada para C_{29}H_{3}1F_{3}N_{6}O_{3}, 568,24; m/z encontrada, 569,2 [M+H]^{+}. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 400 MHz, una mezcla de rotámeros de amidas): 7,77 (d, J = 8,41 Hz, 1H), 7,69 (m, 2H), 7,67-7,62 (m, 2H), 7,50-7,44 (m, 1H), 7,45-7,42 (m, 1H), 7,23-7,18 (m, 1H), 4,93 (m ancho, 1H), 4,87 y 4,75 (A y B de cuartete AB, J = 15,65 Hz, 1H), 4,65 (s ancho, 1H), 4,27-4,15 (m, 2,3H), 4,09-3,95 (m, 1,7H), 3,91-3,82 (m, 0,7H), 3,81-3,66 (m, 1,3H), 3,62-3,49 (m, 4H), 3,01-2,85 (m, 1,5H), 2,85-2,74 (m, 2,5H), 2,71-2,60 (m, 2H), 2,58-2,45 (m, 2H), 2,20 (s, 1,5H), 2,15 (s, 1,5H).
Ejemplo 25
40
1-[4-(2-Amino-6-cloro-fenil)piperazin-1-il]-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propan-2-ol.
Ejemplo 26
41
1-[3-Cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-3-metil-urea.
Ejemplo 27 
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42 
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1-[3-Cloro-2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-3-metil-urea.
Ejemplo 28 
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43 
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Éster metílico de ácido 3-amino-2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-benzoico.
Ejemplo 29 
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44 
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3-Cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenilamina.
Ejemplo 30 
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45 
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1-[2-(4-{3-(4-Bromo-fenil)-5-metanosulfonil-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-3-cloro-fenil]-3-metil-urea.
Ejemplo 31 
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46 
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Amiduro de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico.
Ejemplo 32 
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47 
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Éster metílico de ácido [3-cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-carbámico.
Ejemplo 33 
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48 
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Amiduro de ácido 1-[3-(4-benzo[d]isotiazol-3-il-piperazin-1-il)-propil]-3-(4-bromo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico.
Ejemplo 34 
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49 
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Éster metílico de ácido 2-(4-{3-[5-Acetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-3-nitro-benzoico.
Ejemplo 35 
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50 
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1-[4-(2-Cloro-6-nitro-fenil)piperazin-1-il]-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propan-2-ol.
Ejemplo 36 
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51 
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2-(4-{2-Hidroxi-3-[3-(4-yodo-fenil)-5-metanosulfonil-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo.
Ejemplo 37 
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52 
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Amiduro de ácido 3-(4-bromo-fenil)-1-{3-[4-(2-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico.
Ejemplo 38 
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53 
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2-(4-{3-[5-Acetil-3-(4-yodo-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo.
Ejemplo 39 
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54 
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2-(4-{3-[3-(4-Cloro-3-metil-fenil)-5-metanosulfonil-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]—2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo.
Ejemplo 40 
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55 
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1-(3-(4-Cloro-3-metil-fenil)-1-{3-[4-(2,4-dimetil-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-etanona.
Ejemplo 41 
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56 
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1-{3-[4-(3,5-Dicloro-piridin-4-il)-piperazin-1-il]-propil}-5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina.
Ejemplo 42 
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57 
\vskip1.000000\baselineskip
2-(4-{3-[5-Metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo.
Ejemplo 43 
\vskip1.000000\baselineskip
58 
\vskip1.000000\baselineskip
N-[3-Cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-metanosulfonamida.
Ejemplo 44 
\vskip1.000000\baselineskip
59 
\vskip1.000000\baselineskip
Amiduro de ácido 3-(3,4-dicloro-fenil)-1-{3-[4-(2-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-1,4,6,7,-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico.
Ejemplo 45
60
Amiduro de ácido 3-(4-cloro-3-metil-fenil)-1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7,-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico.
Ejemplo 46 Análisis de Inhibición de la Catepsina S
La catepsina S (CatS) humana recombinante fue expresada en el sistema de baculovirus y purificada en una etapa con una columna de tiopropil-sefarosa. Diez litros produjeron 700 mg de CatS y la secuenciación del N-terminal confirmó la identidad. El análisis se desarrolla en acetato de sodio 100 mM de pH 5,0 conteniendo DTT 1 mM y NaCl 100 mM. El sustrato para el análisis es (Aedens)EKARVLAEAA(Dabcyl)K-amide.
La K_{m} para el sustrato se encuentra en torno de 5 \muM pero la presencia de inhibición de sustrato dificulta el análisis cinético. Con sustrato 20 \muM la velocidad del análisis es lineal a lo largo del intervalo de 1-8 ng de CatS en 100 \mul de reacción. Utilizando 2 ng/pocillo de CatS, la formación de producto es lineal y rinde una señal de \sim7 veces al cabo de 20 minutos sólo con una pérdida de sustrato del 20%. Los análisis primarios se desarrollan sofocando la reacción al cabo de 20 minutos con SDS al 0,1% y midiendo después la fluorescencia. Para otros análisis, las mediciones se toman cada minuto durante 20 minutos. La velocidad es calculada a partir de la pendiente del incremento y el porcentaje de inhibición es calculado a partir de esto (Ver las Tablas 1 y 2 de más abajo).
TABLA 1
Ejemplo CI_{50} (\muM)
1 0,89
2 1,22
3 0,84
4 0,51
5 0,36
6 0,30
7 6,60
8 0,89
9 1,14
10 0,05
11 0,03
12 0,98
13 0,77
14 0,25
15 0,12
16 0,06
17 0,08
18 0,14
19 0,06
20 0,17
21 0,07
TABLA 1 (continuación)
Ejemplo CI_{50} (\muM)
22 2,15
23 1,10
24 0,47
25 0,04
26 0,04
27 0,04
28 0,07
29 0,07
30 0,08
31 0,10
32 0,10
33 0,10
34 0,11
35 0,12
36 0,12
37 0,12
38 0,12
39 0,13
40 0,13
41 0,13
42 0,13
43 0,13
44 0,13
45 0,13 
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Ejemplo 47 Inhibición Ex vivo mediante inhibidores de la catepsina S de la respuesta alergénica
En el siguiente análisis se demuestra que los inhibidores de la catepsina S bloquean la respuesta de las células T humanas a extractos de alergeno brutos.
Materiales y Métodos
Reactivos. Los extractos de alergeno brutos con glicerina añadida de ácaros del polvo doméstico (Dermataphagoides pteronyssinus, Dermataphagoides farinae) y de ambrosía [Ambrosia trifida (gigante), Ambrosia artemisiifolia (pequeña)] fueron adquiridos de Hollister-Stier Laboratories (Minneapolis, MN). La Concanavalina A (ConA) fue adquirida de Calbiochem (La Jolla, CA).
Donantes. Todos los donantes alérgicos fueron preseleccionados por sus alergias específicas utilizando ensayos RAST. Los haplotipos de la clase II de HLA de estos donantes fueron determinados utilizando PCR.
Cultivo celular. Las células mononucleares de sangre periférica humana (PBMC) fueron purificadas a partir de sangre de donantes alérgicos utilizando un gradiente Ficoll-Hypaque seguido de lavados con solución salina tamponada con fosfato (PBS). Las PBMC fueron cultivadas por triplicado o por duplicado a 0,5-1,0 x 10^{6} células/pocillo con dosis tituladas de extractos de alergeno, en presencia o ausencia de un inhibidor de la catepsina S conocido, LHVS (morfolinurea-leucina-homo-fenilalanina-vinilsulfonofenilo) (Palmer et al. (1995), J. Med. Chem. 38:3193 y Riese et al. (1996), Immunity 4:357). Se elaboraron primero soluciones de partida diluidas seriadamente de LHVS en DMSO al 100% y después se diluyeron 1:15 en Hidroxipropinilciclodextrina (HPCD) al 40%. Se añadieron 3 \muL de LHVS en HPCD a los cultivos de PBMC (200 \mul/pocillo). Al cabo de 6 días de cultivo, se añadió 1 \muCi/pocillo de timidina-H^{3} (TdR). Dieciocho horas después, las células fueron cosechadas utilizando un Filtermate Harvester (Packard) y contadas en cuanto a la incorporación de TdR-H^{3} en un Topcount (Packard).
Inhibición de las respuestas proliferativas de las células T a los ácaros del polvo doméstico
Alrededor del 10% de la mayoría de las poblaciones son alérgicas a los ácaros del polvo doméstico (HDM) del género Dermataphagoides siendo Dermataphagoides pteronyssinus (Der p) y D. farinae (Der F) las dos especies principales presentes en proporciones variables en la mayoría de los países. Las manifestaciones clínicas principales son el asma y la rinitis crónica.
El efecto de la inhibición de la catepsina S sobre la activación de las células T CD4 específicas del alergeno de los HDM fue sometido a ensayo en un análisis de proliferación de células T humanas ex vivo.
El cultivo de PBMC con extractos brutos de Der p o Der f, produjo una fuerte proliferación (Figura 1A). Esta proliferación constaba principalmente de células T CD4 específicas del alergeno. Cuando la actividad de la catepsina S era bloqueada por un inhibidor de catepsina S específico, LHVS (véase Riese et al. (1996) Immunity 4:357) la proliferación resultaba fuertemente inhibida (Figura 1B). La inhibición mediante LHVS era específica para las respuestas inducidas por extractos de HDM puesto que las respuestas proliferativas de las células T inducidas por ConA, un mitógeno para todas las células T, no resultaban afectadas. Además, esta inhibición fue observada en los cuatro donantes alérgicos a HDM sometidos a ensayo con independencia de los diferentes haplotipos de la clase II de HLA (DR4; DR7, 15; DR11, 15; y DR4, 11).
Este sistema es muy similar a una situación in vivo. El sujeto alérgico sería expuesto a una mezcla bruta de alergenos, lo que podría conducir a la proliferación de las células T y a una respuesta alérgica. La observación de la inhibición de la activación de las células T CD4 mediante un inhibidor de la catepsina muestra que tales inhibidores son eficaces para tratar una población generalizada de pacientes alérgicos a los ácaros del polvo doméstico.
Inhibición de las respuestas proliferativas de las células T a la ambrosía
Alrededor del 10% de la población de los Estados Unidos es alérgica al polen de la ambrosía, haciéndolo uno de los alergenos más importantes en términos de enfermedades clínicas. Los alergenos de los pólenes son precipitantes comunes de la rinitis y el asma en esta población.
El efecto de la inhibición de la catepsina S sobre la activación de las células T CD4 específicas del alergeno de la ambrosía fue sometido a ensayo en un análisis de proliferación de células T humanas ex vivo. El cultivo de PBMC con extractos brutos de ambrosía pequeña y gigante produjo una fuerte proliferación (Figura 2A). Esta proliferación consistía principalmente de células T CD4 específicas para el alergeno. Cuando la actividad de la catepsina S era bloqueada por un inhibidor de la catepsina S específico, LHVS (véase Riese y col. (1996) Immunity 4:357) la proliferación resultaba fuertemente inhibida (Figura 2B). La inhibición mediante LHVS era específica para las respuestas inducidas por la ambrosía puesto que las respuestas proliferativas inducidas por ConA, un mitógeno para todas las células T, no resultaban afectadas. Adicionalmente, esta inhibición fue observada para dos donantes alérgicos a la ambrosía sometidos a ensayo prescindiendo de los diferentes haplotipos de clase II de HLA (DR7, 15 y DR4, 11).
Se desarrolló un experimento similar utilizando inhibidores de CatS adicionales, los compuestos del Ejemplo 11 y del Ejemplo 36 anteriores, mostrándose los resultados en las FIGS. 3A y 3B, respectivamente.
Este sistema es muy similar a una situación in vivo. El sujeto alérgico podría ser expuesto a una mezcla bruta de alergenos lo que podría conducir a la proliferación de las células T y a una respuesta alérgica. La observación de la inhibición de la activación de las células T CD4 por un inhibidor de la catepsina S muestra que semejantes inhibidores pueden ser eficaces para tratar una población generalizada de pacientes alérgicos a la ambrosía.
Ejemplo 48 Verificación de la inhibición de la catepsina S en sangre humana
El efecto de la administración in vivo de inhibidores de la catepsina S, en el marco de una prueba clínica, puede ser verificado midiendo la acumulación de un producto de degradación intermedio de cadena invariable (li), es decir, el fragmento P10li, en sangre de sujetos a los que se había administrado una dosis. Tras la administración de un inhibidor de la catepsina durante un cierto período de tiempo, por ejemplo, entre 0,01 y 50 mg/kg/día, para producir una concentración de entre 1 nM y 10 \muM, durante 16-30 horas, se extrae la sangre y los glóbulos blancos se purifican, v.g. mediante lisis de los glóbulos rojos o mediante centrifugación en un gradiente Ficoll-Hypaque. Después se elaboran los productos lisados celulares completos de GB y se analizan mediante un análisis de transferencia Western o un análisis ELISA. Para el análisis de transferencia Western, los productos lisados celulares son resueltos primero sobre geles de SDS-PAGE. Tras la transferencia a membranas de nitrocelulosa, li y sus productos de degradación intermedios, incluyendo p10li, pueden ser detectados utilizando un mAB de ratón contra li, v.g. Pin1,1, o anticuerpos policlonales de conejo específicos para el extremo C del fragmento P10li o contra el fragmento p10li completo. Para el análisis ELISA, se pueden utilizar un par de anticuerpos contra li, incluyendo Pin1,1, y un anticuerpo policlonal de conejo o un anticuerpo monoclonal de ratón específico para p10li. El mismo análisis puede ser aplicado para verificar el efecto de los inhibidores de la catepsina S in vivo en estudios animales, por ejemplo en monos, perros, cerdos, conejos, cobayas, y roedores.
En el presente ejemplo las PBMC de sangre humana fueron incubadas con el inhibidor de la catepsina S, LHVS (morfolinurea-leucina-homo-fenilalanina-vinilsulfonofenilo), también referido como 4-morfolinocarboxamida, N-[(1S)-3-metil-1-[[[(1S,2E)-1-(2-feniletil-3-(3-fenilsulfonil)-2-propenil]amino]carbonil]-butil]-. Este compuesto ha sido descrito en la Patente de los Estados Unidos Núm. 5.976.658 y por Palmer et al. (1995) J. Med. Chem. 38:3193 y Riese et al., (1996) Immunity 4:357. Tras la incubación durante 24 horas, las muestras fueron desarrolladas utilizando protocolos de SDS-PAGE normalizados, transferidas a membranas de nitrocelulosa y sondeadas con un anticuerpo que reconoce la cadena invariable incluyendo el fragmento p10li. En presencia de LHVS se observó el fragmento p10li, representando un bloque en la degradación de li debida a la inhibición de la catepsina S.
Ejemplo 49 Verificación de la inhibición in vivo de la respuesta alergénica mediante inhibidores de la catepsina S
Para demostrar la eficacia de los inhibidores de la catepsina S para suprimir respuestas alérgicas in vivo, a los voluntarios alérgicos se les administraron dosis con inhibidores de catepsina S a niveles a los que resulta inhibida la degradación de la cadena invariable. Los alergenos son depositados subcutáneamente, y el tamaño de las reacciones cutáneas es determinado a los 15 min., 6 h y 24 h. Se realizaron biopsias de la piel a las 24 horas. La respuesta inmediata de verdugón y enrojecimiento no está mediada por la respuesta de las células T y no se espera que resulta influida por los inhibidores de la catepsina S, mientras que el endurecimiento de la fase tardía (perceptible a las 6 horas, más pronunciado a las 24 horas) está caracterizado por la activación e infiltración de células T CD4 (así como de eosinófilos) y debe ser inhibido mediante la administración de inhibidores de la catepsina S. Las biopsias de piel son utilizadas para determinar la composición celular en el endurecimiento, y se espera que los sujetos tratados con catepsina S tengan menos células T CD4 presentes que los sujetos tratados con placebo.
Las referencias para estos procedimientos son proporcionadas por Eberlein-Konig et al. (1999), Clin. Exp. Allergy 29:1641-1647 y por Gaga et al. (1991) J. Immunol. 147:816-822.
Como controles para el experimento, se utilizarán prednisona y ciclosporina A. La prednisona inhibirá las repuestas inmediata y de la fase tardía, mientras que la ciclosporina A inhibirá sólo la respuesta de la fase tardía.

Claims (8)

1. El uso de un compuesto en la fabricación de una composición farmacéutica para tratar a un sujeto con una condición alérgica, teniendo dicho compuesto la fórmula (I) de más abajo:
61
donde:
R^{1} es hidrógeno, azido, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, hidroxi, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, ciano, nitro, R^{7}R^{8}N, acilo C_{2}-C_{8}, R^{9}OC=O, R^{10}R^{11}NC=O, o R^{10}R^{11}NSO_{2}; o R^{1} es tomado junto con W como se describe más abajo;
R^{2} es hidrógeno, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, haloalquilo C_{1}-C_{5}, ciano, o R^{48}R^{49}N; alternativamente, R^{1} y R^{2} pueden ser tomados juntos para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico de 5 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser insaturado o aromático;
cada uno de R^{3} y R^{4} es independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{5};
cada uno de R^{5} y R^{6} es independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquil(C_{1}-C_{5})tio, halógeno, o carbociclilo o heterociclilo de 4 a 7 miembros;
alternativamente, R^{5} y R^{6} pueden ser tomados juntos para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico de 5 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser insaturado o aromático, y puede estar sustituido opcionalmente con entre uno y tres sustituyentes seleccionados independientemente entre halo, ciano, amino, nitro, R^{40}, R^{40}O-, R^{40}S-, R^{40}O(alquileno C_{1}-C_{5})-, R^{40}O(C=O)-, R^{40}(C=O)-, R^{40}(C=S)-, R^{40}(C=O)O-, R^{40}O(C=O)(C=O)-, R^{40}SO_{2}, NHR^{62}(C=NH)-, NHR^{62}SO_{2}-, y NHR^{62}(C=O)-;
R^{40} es H, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, fenilo, bencilo, fenetilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, (heterociclil C_{1}-C_{5})-alquileno C_{1}-C_{5}, amino, o mono- o di-(alquil C_{1}-C_{5})amino, o R^{58}OR^{59}-, donde R^{58} es H, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, fenilo, bencilo, fenetilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, o (heterociclil C_{1}-C_{5})-alquileno C_{1}-C_{6} y R^{59} es alquileno C_{1}-C_{5}, fenileno, o heterociclilo C_{1}-C_{5} divalente; y
R^{62} puede ser H además de los valores para R^{40};
R^{7} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, naftilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, acilo C_{2}-C_{8}, aroilo, R^{27}OC=O, R^{28}R^{29}NC=O, R^{27}SO, R^{27}SO_{2}, o R^{28}R^{29}NSO_{2};
R^{8} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{7} y R^{8} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
R^{9} es alquilo C_{1}-C_{5}, fenilo, naftilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5};
R^{21} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, naftilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, acilo C_{2}-C_{8}, aroilo, R^{30}OC=O, R^{31}R^{32}NC=O, R^{30}SO, R^{30}SO_{2}, o R^{31}R^{32}NSO_{2};
R^{22} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{21} y R^{22} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
cada uno de R^{23}, R^{26}, R^{27}, R^{30}, R^{33}, R^{44}, R^{45}, y R^{50} es alquilo C_{1}-C_{5}, fenilo, naftilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5};
R^{24} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, naftilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, acilo C_{2}-C_{8}, aroilo, R^{33}OC=O, R^{34}R^{35}NC=O, R^{33}SO, R^{33}SO_{2}, o R^{34}R^{35}NSO_{2};
R^{25} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{24} y R^{25} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
cada uno de R^{10} y R^{11} es independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{10} y R^{11} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
cada uno de R^{28}, R^{29}, R^{31}, R^{32}, R^{34}, R^{35}, R^{46}, R^{47}, R^{51} y R^{52} es independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente R^{28} y R^{29}, R^{31} y R^{32}, R^{34} y R^{35}, R^{46} y R^{47}, o R^{51} y R^{52}, independientemente, pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
n es 1 o 2;
G representa alquenodiilo C_{3}-C_{6} o alcanodiilo C_{3}-C_{6} sustituido opcionalmente con hidroxi, halógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alcoxi C_{1}-C_{5}, oxo, hidroxiimino, CO_{2}R^{60}, R^{60}R^{61}NCO_{2}, (L)-alquileno C_{1}-C_{4}-, (L)-alcoxi C_{1}-C_{5}, N_{3}, o [(L)-alquileno C_{1}-C_{5}]amino;
cada uno de R^{60} y R^{61} es independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, bencilo, fenetilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{60} y R^{61} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
L es amino, mono- o di-alquil(C_{1}-C_{5})amino, pirrolidinilo, morfolinilo, piperidinilo, homopiperidinilo, o piperazinilo, donde los nitrógenos anulares disponibles pueden estar sustituidos opcionalmente con alquilo C_{1}-C_{5}, bencilo, acilo C_{2}-C_{5}, alquil(C_{1}-C_{5})sulfonilo o alcoxi(C_{1}-C_{5})carbonilo;
X es nitrógeno o R^{12}C;
Y es nitrógeno o R^{13}C;
Z es nitrógeno o R^{4}C;
R^{12} es hidrógeno, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, ciano, nitro, R^{21}R^{22}N, acilo C_{2}-C_{8}, haloalquilo C_{1}-C_{5}, heterociclilo C_{1}-C_{5}, (heterociclilo C_{1}-C_{5})alquileno C_{1}-C_{5}, R^{23}OC=O, R^{23}O(C=O)NH-, R^{23}SO, R^{22}
NHCO-, R^{22}NH(C=O)NH-, R^{23}(alquileno C_{1}-C_{4})NHCO-, R^{23}SO_{2}, o R^{23}SO_{2}NH-;
R^{13} es hidrógeno, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, ciano, nitro, R^{42}R^{43}N, acilo C_{2}-C_{8}, haloalquilo C_{1}-C_{5}, heterociclilo C_{1}-C_{5}, (heterociclilo C_{1}-C_{5})alquileno C_{1}-C_{5}, R^{44}OC=O, R^{44}O(C=O)NH-, R^{44}SO,
R^{43}NHCO-, R^{43}NH(C=O)NH-, R^{44}(alquileno C_{1}-C_{4})NHCO-, R^{44}SO_{2}, o R^{44}SO_{2}NH-;
R^{14} es hidrógeno, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, ciano, nitro, R^{24}R^{25}N, acilo C_{2}-C_{8}, haloalquilo C_{1}-C_{5}, heterociclilo C_{1}-C_{5}, (heterociclilo C_{1}-C_{5})alquileno C_{1}-C_{5}, R^{26}OC=O, R^{26}O(C=O)NH-, R^{26}SO, R^{25}
NHCO-, R^{25}NH(C=O)NH-, R^{26}(alquileno C_{1}-C_{4})NHCO-, R^{26}SO_{2}, o R^{26}SO_{2}NH-; alternativamente, R^{12} y R^{13} o R^{12} y R^{2} o R^{13} y R^{14} pueden ser tomados juntos para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser insaturado o aromático;
Ar representa un anillo arílico o heteroarílico monocíclico o bicíclico, sustituido opcionalmente con entre 1 y 3 sustituyentes seleccionados entre halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, ciano, azido, nitro, R^{15}R^{16}N, R^{17}SO_{2}, R^{17}S R^{17}SO, R^{17}OC=O, R^{15}R^{16}NC=O, haloalquilo C_{1}-C_{5}, haloalcoxi C_{1}-C_{5}, haloalquil(C_{1}-C_{5})tio, y alquil(C_{1}-C_{5})tio;
R^{15} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, bencilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, acilo C_{2}-C_{8}, aroilo, R^{53}OC=O, R^{54}R^{55}NC=O, R^{53}S, R^{53}SO, R^{53}SO_{2}, o R^{54}R^{55}NSO_{2};
R^{16} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, bencilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{15} y R^{16} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
cada uno de R^{17} y R^{53} es alquilo C_{1}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5};
cada uno de R^{54} y R^{55} es independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, fenilo, bencilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{54} y R^{55} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
W representa SO_{2}, C=O, CHR^{20}, o un enlace covalente; o W y R^{1}, tomados junto con el anillo de 6 miembros al cual pueden estar anclados ambos, forman una de las siguientes dos fórmulas:
62
donde X_{a} es O, S, o N; y X_{b} es O, S o SO_{2};
R^{20} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, fenilo, bencilo, naftilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5};
R^{42} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, naftilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, acilo C_{2}-C_{8}, aroilo, R^{45}OC=O, R^{46}R^{47}NC=O, R^{45}SO, R^{45}SO_{2}, o R^{46}R^{47}NSO_{2};
R^{43} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{42} y R^{43} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático;
R^{44} es alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{5}, fenilo, naftilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5};
R^{48} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, naftilo, heterociclilo C_{1}-C_{5}, acilo C_{2}-C_{8}, aroilo, R^{50}OC=O, R^{51}R^{52}NC=O, R^{50}SO, R^{50}SO_{2}, o R^{51}R^{52}NSO_{2};
R^{49} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{5}, alquenilo C_{3}-C_{5}, fenilo, o heterociclilo C_{1}-C_{5}; alternativamente, R^{48} y R^{49} pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido, cuyo anillo puede ser saturado, insaturado o aromático; y
donde cada uno de los grupos hidrocarbilo o heterocarbilo anteriores, a no ser que se indique de otro modo, y además de cualquiera de los sustituyentes especificados, está sustituido opcionalmente e independientemente con entre 1 y 3 sustituyentes seleccionados entre metilo, halometilo, hidroximetilo, halo, hidroxi, amino, nitro, ciano, alquilo C_{1}-C_{5}, alcoxi C_{1}-C_{5}, -COOH, acilo C_{2}-C_{6}, [di(alquil C_{1}-C_{4})amino]alquileno C_{2}-C_{5}, [di(alquil C_{1}-C_{4})amino]alquilo C_{2}-C_{5}-NH-CO-, y haloalcoxi C_{1}-C_{5};
o una sal, éster, o amida farmacéuticamente aceptable de los mismos.
2. El uso de la reivindicación 1, donde cada uno R^{3} y R^{4} es hidrógeno; Ar representa un anillo de seis miembros, sustituido opcionalmente con entre 1 y 2 sustituyentes seleccionados entre halógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, ciano, nitro, R^{15}R^{16}N, CF_{3} y OCF_{3}; R^{12} es hidrógeno R^{23}SO, o R^{23}SO_{2}; R^{13} es hidrógeno, R^{44}SO, o R^{44}SO_{2}; R^{14} es hidrógeno, halógeno, alcoxi C_{1}-C_{5}, alquilo C_{1}-C_{5}, ciano, nitro, o R^{24}R^{25}N; y G es alcanodiilo C_{3}, sustituido opcionalmente con hidroxi, (L)-alquil(C_{1}-C_{5})oxi, o (L)-alquil(C_{1}-C_{5})amino-.
3. El uso de la reivindicación 2, donde Ar es fenilo.
4. El uso de la reivindicación 2, donde dicho compuesto se selecciona entre:
1-[4-(2-Amino-6-cloro-fenil)-piperazin-1-il]-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propan-2-ol;
1-[3-Cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-3-metil-urea;
1-[3-Cloro-2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometilfenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-3-metil-urea;
Éster metílico de ácido 3-amino-2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometilfenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-benzoico;
3-Cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenilamina;
1-[2-(4-{3-[3-(4-Bromo-fenil)-5-metanosulfonil-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxipropil}-piperazin-1-il)-3-cloro-fenil]-3-metil-urea; y
Amiduro de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico.
5. El uso de la reivindicación 1, donde dicho compuesto se selecciona entre:
Éster metílico de ácido [3-cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-carbámico;
Amiduro de ácido 1-[3-(4-Benzo[d]isotiazol-3-il-piperazin-1-il)-propil]-3-(4-bromofenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo [4,3-c]piridino-5-carboxílico;
Éster metílico de ácido 2-(4-{3-[5-acetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo [4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-3-nitro-benzoico;
1-[4-(2-Cloro-6-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-9-il]-propan-2-ol;
2-(4-{2-Hidroxi-3-[3-(4-yodo-fenil)-5-metanosulfonil-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo;
Amiduro de ácido 3-(4-bromo-fenil)-1-{3-[4-(2-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico;
2-(4-{3-[5-Acetil-3-(4-yodo-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo;
2-(4-{3-[3-(4-Cloro-3-metil-fenil)-5-metanosulfonil-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo;
1-(3-(4-Cloro-3-metil-fenil)-1-{3-[4-(2,4-dimetil-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-etanona;
1-{3-[4-(3,5-Dicloro-piridin-4-il)-piperazin-1-il]-propil}-5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina;
2-(4-{3-[5-Metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo;
N-[3-Cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-metanosulfonamida;
Amiduro de ácido 3-(3,4-Dicloro-fenil)-1-{3-[4-(2-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico; y
Amiduro de ácido 3-(4-cloro-3-metil-fenil)-1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico.
6. El uso de la reivindicación 1, donde dicho compuesto se selecciona entre:
1-(3-(4-Cloro-fenil)-1-{3-[4-(2-fluoro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-etanona;
1-{3-(4-Cloro-fenil)-1-[2-hidroxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il}-etanona;
1-{3-(4-Cloro-fenil)-1-[2-metoxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il}-etanona;
1-[1-{2-Hidroxi-3-[4-(2-hidroxi-fenil)-piperazin-1-i]]-propil}-3-(4-yodofenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona;
1-[1-[2-Hidroxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona;
2-(4-{3-[5-Acetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-hidroxi-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo;
1-[3-(3,4-Dicloro-fenil)-pirazol-1-il]-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propan-2-ol;
1-[1-[2-(2-Piperazin-1-il-etilamino)-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona;
Éster t-butílico de ácido 1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-3-(4-yodo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico;
Amiduro de ácido 1-{3-[4-(2-Ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-3-(4-yodo-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-carboxílico;
Éster etílico de ácido 1-[5-carbamoil-3-(4-yodo-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-ilmetil]-2-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-carbámico;
1-{3-(3-Amino-4-cloro-fenil)-1-[2-hidroxi-3-(4-o-tolil-piperazin-1-il)-propil]-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il}-etanona;
(R)-1-(3-(4-Bromo-fenil)-1-{3-[4-(5-cloro-2-metil-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-etanona;
2-(4-{3-[5-Acetil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-2-fluoro-propil}-piperazin-1-il)-benzonitrilo;
Éster metílico de ácido (3-(4-cloro-3-metil-fenil)-1-{3-[4-(2-ciano-fenil)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-1,4,6,7-tetrahidropirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-oxo-acético;
5-Metanosulfonil-1-{3-[4-(2-nitro-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina;
1-[3-Cloro-2-(4-{3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-urea;
Amiduro de ácido 1-{3-[4-(2-cloro-6-metanosulfonilamino-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridino-5-sulfónico;
N-[3-Cloro-2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-metanosulfonamida;
1-[4-(2,6-Dinitro-fenil)-piperazin-1-il]-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propan-2-ol;
Éster metílico de ácido 2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-3-metanosulfonilamino-benzoico;
1-{3-[4-(1,1-Dioxo-1H-116-benzo[d]isotiazol-3-il)-piperazin-1-il]-propil}-5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina;
1-[1-{3-[4-(6-Cloro-benzotiazol-2-il)-piperazin-1-il]-2-hidroxi-propil}-3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona; y
1-[1-[3-(4-Benzo[d]isoxazol-3-il-piperazin-1-il)-2-hidroxi-propil]3-(4-trifluorometil-fenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il]-etanona.
7. El uso de la reivindicación 1, donde dicho compuesto se selecciona entre: N-[3-Cloro-2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometil-fenil)-4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-metanosulfonamida;
Amiduro de ácido 1-[3-(4-benzo[d]isotiazol-3-il-piperazin-1-il)-propil]-3-(4-bromofenil)-1,4,6,7-tetrahidro-pirazolo [4,3-c]piridino-5-carboxílico; y
1-[3-Cloro-2-(4-{2-hidroxi-3-[5-metanosulfonil-3-(4-trifluorometilfenil)-4,5,6,7 tetrahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-1-il]-propil}-piperazin-1-il)-fenil]-3-metil-urea.
8. El uso de la reivindicación 1, donde dicha composición farmacéutica es formulada en una cantidad para la dosificación apropiada para el tratamiento de una condición alérgica.
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