ES2260881T3 - Dispositivo y metodo para separar componentes de una muestra de fluido. - Google Patents

Dispositivo y metodo para separar componentes de una muestra de fluido.

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ES2260881T3
ES2260881T3 ES99124304T ES99124304T ES2260881T3 ES 2260881 T3 ES2260881 T3 ES 2260881T3 ES 99124304 T ES99124304 T ES 99124304T ES 99124304 T ES99124304 T ES 99124304T ES 2260881 T3 ES2260881 T3 ES 2260881T3
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Richmond Cohen
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Abstract

Un conjunto para separar una muestra de fluido en una fase de mayor peso específico y una fase de menor peso específico que comprende: un elemento separador (70) que comprende un cuerpo plástico de baja densidad (90) y un diafragma de obturación elastomérico de alta densidad (72); caracterizado porque dicho cuerpo plástico (90) comprende un núcleo hueco y un a cámara hueca (100) que rodea dicho núcleo hueco; un diafragma de obturación elastomérico (72) que comprende un tabique de llenado (73) y una falda anular (74); y dicho cuerpo plástico (90) está encajado en dicho diafragma de obturación elastomérico (72) por lo que dicho núcleo hueco (98) de dicho cuerpo plástico está en comunicación directa con dicho tabique de llenado de dicho diafragma de obturación elastomérico (72).

Description

Dispositivo y método para separar componentes de una muestra de fluido.
1. Campo de la invención
Esta invención se refiere a un dispositivo y método para separar fracciones más pesadas y más ligeras de una muestra de fluido. Más concretamente, esta invención se refiere a un dispositivo y método para recoger y transportar muestras de fluido mediante el cual le dispositivo y la muestra de fluido son sometidos a centrifugación para producir la separación de la fracción más pesada de la fracción más ligera de la muestra de fluido.
2. Descripción de la técnica referida
Los ensayos de diagnosis pueden requerir la separación de una muestra de sangre completa del paciente en componentes, tales como suero o plasma, el componente de fase más ligero, y los glóbulos rojos de la sangre, el componente de fase más pesado. Las muestras de sangre completa son típicamente recogidas mediante venopunción a través de una cánula o aguja unida a une jeringuilla o a un tubo de recolección vaciado. La separación de la sangre en suero o plasma y glóbulos rojos se realiza entonces por rotación de la jeringuilla o tubo en un centrifugador. Tales disposiciones utilizan una barrera para moverse dentro de un área adyacente a las dos fases de la muestra que está siendo separada para mantener los componentes separados para el posterior examen de los componentes individuales.
Se han utilizado variedad de dispositivos de recogida para dividir el área entre las fases más pesadas y más ligeras de una muestra de fluido.
Los dispositivos más ampliamente utilizados incluyen materiales de gel tixotrópicos tales como geles de poliéster en un tubo. Los tubos de separación de suero de gel de poliéster actuales requieren equipo de fabricación especial para preparar el gel y para llenar los tubos. Además, la vida de almacenamiento del producto está limitada porque a lo largo del tiempo los glóbulos se pueden liberar de la masa de gel. Los glóbulos tienen un peso específico que es menor que el suero separado y pueden flotar en el suero y pueden atascar los instrumentos de medida, tales como las sondas de instrumento utilizadas durante el examen clínico de la muestra recogida en el tubo. Tal atascamiento puede conducir a considerable tiempo inactivo del instrumento para retirar el atasco.
No existe un gel comercialmente disponible químicamente completamente inerte a todos los análisis. Si ciertos fármacos están presentes en la muestra de sangre cuando se toma. Entonces pueden tener una interacción químicamente adversa con la interfaz de gel.
Por lo tanto, existe una necesidad de un dispositivo separador que (i) sea fácilmente utilizable para separar una muestra de sangre; (ii) sea independiente de la temperatura durante el almacenamiento y transporte (iii) sea estable a la esterilización por radiación; (iv) emplee los beneficios de una barrera de gel tixotrópico aunque evita la mayoría de las desventajas de colocar un gel en contacto con los componentes de sangre separados; (v) reduzca al mínimo la contaminación transversal de las fases más pesadas y más ligeras de la muestra durante la centrifugación; (vi) reduzca al mínimo la adhesión de los materiales de densidad menos y mayor contra el dispositivo separados; (vii) se pueda utilizar con un equipo de muestreo estándar; (viii) sea capaz de moverse a una posición para formar una barrera en menos tiempo que los dispositivos y métodos convencionales; y (ix) sea capaz de proporcionar una muestra más limpia con menos contaminación de células que los dispositivos y métodos convencionales. El documento US-A-4.152.270 describe un conjunto para separar una muestra de fluido en una fase de peso específico mayor y una fase de peso específico menor, que generalmente corresponde a la primera parte de la reivindicación 1. El conjunto comprende un elemento separador que se puede mover dentro de un tubo. El elemento separador constituye un dispositivo de partición que tiene un peso específico intermedio entre los de la fase ligera y la fase pesada de la sangre. El elemento separador tiene un miembro de obturación elástico que es de configuración cónica o de "paraguas", y un elemento plástico de diferente peso específico conectado al miembro de obturación y que tiene miembros de estabilización para mantener el miembro de obturación adecuadamente orientado dentro del tubo. El elemento separador tiene un núcleo no hueco y el diafragma de obturación elastómero no tiene un tabique de llenado.
Sumario de la invención
Es un objeto de la invención proporcionar un conjunto que satisfaga los requisitos anteriormente mencionados.
El conjunto de la presente invención está definido por la reivindicación 1.
La invención se refiere también a un método para separar una muestra de fluido en una fase de mayor peso específico y una fase de menor peso específico. Este método está definido por la reivindicación 4.
De forma deseable, el conjunto de la presente invención comprende una pluralidad de constituyentes. Preferiblemente, el conjunto comprende un recipiente y un elemento compuesto.
Más preferiblemente, el recipiente es un tubo y el elemento compuesto es un separador dispuesto para moverse en el tubo bajo la acción de la fuerza centrífuga con el fin de separar las partes de una muestra de fluido. Preferiblemente, el separador es un tapón de obturación radialmente deformable.
Más preferiblemente, el separador se utiliza dentro de un recipiente tal como un tubo. El tubo está compuesto de un extremo abierto, un extremo cerrado y una pared lateral que se extiende entre el extremo abierto y el extremo cerrado. La pared lateral comprende una superficie exterior y una superficie interior. El tubo comprende además un cierre dispuesto para fijar el extremo abierto del tubo con un tabique liberable. Preferiblemente, el elemento separador está liberablemente colocado en el extremo abierto del tubo con el área inferior del cierre.
Más preferiblemente, el separador consta de dos componentes. Preferiblemente, el elemento compuesto comprende un peso específico total en un peso específico objetivo de \sigma_{1}. El peso específico de objetivo es aquel necesario para separar una muestra de fluido en al menos dos fases. Preferiblemente, el separador comprende al menos dos o más regiones de pesos específicos diferentes. Preferiblemente al menos una de las regiones es mayor que el peso específico de objetivo y al menos una de las regiones es menor que el peso específico de objetivo.
De manera deseable, el separador comprende un cuerpo plástico de baja densidad y un diafragma de obturación elastómero de lata densidad. El separador como un todo está dimensionado para fijarse de manera liberable dentro del tubo con una fijación de interferencia contra la superficie interior de la pared lateral del tubo.
Preferiblemente, el cuerpo plástico tiene un núcleo hueco o un paso central y una cámara hueca que rodea el núcleo hueco. El cuerpo plástico tiene un peso específico comprendido entre aproximadamente 1,1 y aproximadamente 7,9.
De manera deseable, el cuerpo plástico es sustancialmente un material termoplástico moldeable, rígido, tal como poliestireno, polietileno, polipropileno, y mezclas de los mismos, que es inerte a la muestra de fluido de interés.
De manera deseable, el diafragma de obturación elastomérico comprende un tabique de llenado para facilitar la penetración de la aguja durante el ciclo de llenado de sangre y una falda anular que es capaz de deformarse durante el proceso de centrifugación y reducir el diámetro total del separador.
De manera deseable, el cuerpo plástico está encajado dentro del diafragma de obturación elastomérico, por lo que el canal del cuerpo plástico no está en comunicación directa con el tabique de llenado del diafragma de obturación elastómero.
De manera deseable, el diafragma de obturación elastomérico puede estar compuesto de cualquier elastómero sintético o mezcla del mismo, que sea inerte a la muestra de fluido de interés. Preferiblemente, el diafragma de obturación elastomérico está fabricado a partir de un elastómero que tiene un módulo de tracción de 50% comprendido entre aproximadamente 0,1 MPa y aproximadamente 1,4 MPa.
Preferiblemente, el separador tiene una densidad comprendida entre aproximadamente 1,028 y aproximadamente 1,09 g/cc de manera que el separador volverá a reposar después de la fuerza centrífuga, en sustancialmente en el límite entre las fases más ligera y más pesada de la muestra de fluido en cuestión, y más preferiblemente entre la más pesada y más ligera fases de una muestra de sangre. Preferiblemente, el separador funcionará bajo una carga creada por una aceleración aplicada comprendida entre aproximadamente 300 g y 3000 g.
Preferiblemente, el separador está inicialmente asegurado al área inferior del cierre. De manera deseable, el área inferior del cierre incluye unos medios de agarre integralmente moldeados para sujetar, de manera liberable, el diafragma de obturación elastomérico del separador con el cierre hasta que el conjunto esté sometido a la centrifugación momento en el cual el separador es liberado de los medios de agarre del cierre. El separador está además fijado con el tubo, por lo que la falda anular del diafragma de obturación elastomérico, que proporciona el diámetro mayor del separador es este estado no deformador, tiene una fijación de interferencia con la superficie interior de la pared lateral del tubo.
En uso, una muestra fluido se introduce en el conjunto mediante una aguja. La aguja penetra en el cierre y en el diafragma de obturación elastomérico del separador. La muestra entra en el conjunto a través de la aguja y a través del canal del cuerpo plástico y dentro del cuerpo del tubo. La aguja es extraída del conjunto y el tabique del cierre y el diafragma de obturación elastomérico se vuelve a obturar.
El conjunto se somete entonces a centrifugación. Bajo la centrifugación, el separador es liberado del cierre. El separador migra axialmente hacia abajo del tubo hacia el extremo cerrado. La migración se facilita por la densidad del cuerpo plástico contra la densidad del diafragma de obturación elastomérico del separador. La falda anular del diafragma de obturación elastomérico se deforma temporalmente bajo la centrifugación, por lo que se reduce el diámetro eliminando esa fijación de interferencia con la pared interior de la superficie del tubo. Por lo tanto, se forma una trayectoria entre la pared interna del tubo y el separador que permite que el flujo del componente de baja densidad rebase el separador a medida que migra hacia abajo del tubo. La migración del separador termina cuando alcanza la posición entre el componente líquido de menor densidad y los componentes celulares/sólidos de más alta densidad, igual a su densidad total. Tras la terminación de la centrifugación, la falda anular del diafragma de obturación elastomérico recupera su forma no deformada, obturando contra la pared interior del tubo, creando por tanto una barrera entre los componentes de fluido de alta y baja densidad.
La posición del separador en la parte superior del tubo es combinación con el cierre y el área penetrable del diafragma de obturación elastomérico en el paso a través del separador, proporciona una carga directa fácil de la muestra de fluido en el tubo sin ninguna obstrucción. De este modo, la muestra de fluido es enviada fácilmente al tubo sin exponer la muestra de fluido no centrifugada al área de superficie exterior del separador.
Sin embargo, está dentro de la previsión de la invención que el separador puede ser colocado en la parte inferior del tubo también.
De este modo, cuando la recipiente es sometido a centrifugación, el separador se mueve alejándose de la mandíbula del cierre y hacia una posición entre las fases de peso específico menor y mayor de la muestra de fluido.
Cuando la muestra de fluido es sangre, la parte de mayor peso específico que contiene los componentes celulares entre el separador y la parte inferior del recipiente después de la centrifugación. La parte de peso específico menor que contiene la fracción de suero libre de células o plasma está entre la superficie superior del separador y la superficie superior del recipiente después de la centrifugación.
Por lo tanto, en la posición final del separador después de la centrifugación, el separador es capaz de eliminar sustancialmente la presencia de células de sangre en la parte de peso específico menor y la parte de peso específico menor queda sustancialmente libre de contaminación celular.
El conjunto de la presente invención es ventajoso respecto a los productos de separación existentes que utilizan gel. En particular, el conjunto de la presente invención no interfiere con el analito en comparación con los geles que pueden interferir con ciertos analitos.
Otro atributo de la presente invención es que el conjunto de la presente invención no interferirá con los analitos que controlan fármacos terapéuticos.
De manera más notable, el tiempo para separar una muestra de fluido de densidades separadas se consigue en sustancialmente menos tiempo con el conjunto de la presente invención en comparación con los conjuntos que utilizan gel.
Otra ventaja notable de la presente invención es que las muestras de fluido no están sometidas a residuos de gel de baja densidad que a veces están presentes en productos que utilizan gel.
Un atributo más de la presente invención es que no hay interferencia con las sondas de los instrumentos.
Otro atributo de la presente invención es que las muestras para ensayos de banco de sangre son más aceptables que cuando se utiliza un separador de gel.
Otro atributo de la presente invención es que sólo la fracción de suero sustancialmente libre de células de una muestra de sangre es expuesta a la superficie superior del separador, de este modo proporcionando a los practicantes una muestra limpia.
Además, el conjunto de la presente invención no requiere ningún tratamiento o etapa adicional por parte del médico practicante, por lo que se extrae una muestra de sangre o fluido de la manera estándar, utilizando un equipo de extracción de muestras estándar.
Descripción de los dibujos
La Fig. 1 es una vista en perspectiva del conjunto de la presente invención.
la Fig. 2 es una vista en sección longitudinal del conjunto de la figura 1, tomada a lo largo de la línea 2-2 de la misma.
La Fig. 3 es una vista en sección longitudinal del conjunto de la Fig. 1 tomada a lo largo de la línea 2-2 de la misma ilustrando el envío del fluido al conjunto mediante una aguja.
La Fig. 4 ilustra en conjunto bajo centrifugación y la liberación del separador de los medios de agarre del cierre.
La Fig. 5 ilustra el conjunto después de la centrifugación y la separación de la muestra de fluido en pesos específicos mayor y menor.
la Fig. 6 es una vista en perspectiva del separador de la Fig. 6 tomada a lo largo de la línea 7-7 de la misma.
Descripción detallada
La presente invención se puede aplicar a otras formas específicas y no se limita a las realizaciones específicas descritas con detalle, que meramente constituyen un ejemplo. Otras diversas modificaciones se harán evidentes y se podrán fabricar fácilmente por los expertos en la técnica sin que se salgan d el campo y filosofía de la invención. El campo de la invención será determinado por las reivindicaciones adjuntas y sus equivalentes.
El aparato preferido de la presente invención se ilustra en las Figs. 1 a 5, en donde el conjunto 20 comprende un tubo 30, un cierre 50 y un separador 70.
El tubo 30 tiene un extremo abierto 32 que incluye un borde superior 33, un extremo cerrado 34 y una pared exterior 36 que se extiende entre el extremo abierto y el extremo cerrado. La pared lateral 36 tiene una superficie exterior 38 y una superficie interior 40. el tubo 30 define un receptáculo con eje central "A".
El tubo 30 está preferiblemente hecho de un material sustancialmente transparente y rígido. Materiales adecuado para el tubo incluyen vidrio, poliestireno, polietilenetereptalato, policarbonato y similares.
El cierre 50 está dispuesto para fijarse sobre el extremo abierto 23 del tubo 30. el cierre 50 comprende una parte superior anular 52 que se extiende sobre el borde superior 33 de la pared lateral 36 y una parte anular inferior o falda 54 de menor diámetro que la parte anular superior 52 que se extiende en y forma parte de una fijación de interferencia con la superficie interior 40 de la pared lateral 36 para mantener el tope 50 en su sitio en el extremo abierto 32.
La parte superior anular 52 incluye un área de superficie 56, una pared lateral 58 que converge desde el área de superficie 56 hacia el área de pozo superior 60. El área de pozo 60 es más preferiblemente un diafragma delgado o tabique autoobturador para dirigir y recibir la punta de una aguja que va a ser insertada en y a través del tope. El material de tabique autoobturador permite la penetración mediante un elemento de perforación tal como una aguja y después de vuelve a obturar cuando el elemento de perforación ha sido extraído.
Un reborde anular o apoyo 57 separa la parte superior anular 52 y la parte inferior anular 54. Situado en la parte inferior 68 de la parte anular 54 existente medios de agarre 69 que son utilizados para alinear inicialmente y sujetar el separador del conjunto.
Preferiblemente, el cierre puede estar hecho de un elastómero de caucho natural, sintético, termoplástico y materiales elastoméricos termoendurecibles. Preferiblemente, el cierre está hecho de un material elastomérico elástico por lo que el tabique es autoobturante.
Como se muestra en las Figs. 6 y 7, el separador 70 es un conjunto separador dual que incluye un cuerpo de obturación moldeado 90 y un diafragma de obturación flexible con forma de sombrero 72. El diafragma de obturación flexible 72 incluye una superficie superior 73, una falda anular 74 que se extiende hacia abajo desde la superficie superior hasta una junta 76 y una falda anular 78 con pestaña que se extiende hacia fuera y hacia abajo desde la junta hasta la superficie de tope 79 con una extremo redondeado 80. La superficie superior 73 es más preferiblemente un tabique de autoobturación.
El cuerpo de obturación 90 incluye una superficie superior 86, una superficie inferior 88, una parte superior anular 90 que se extiende desde la superficie superior hasta una junta dentada 91, una pared lateral exterior 92 con pestaña que se extiende hacia abajo y hacia fuera y se acuña hacia la junta 93, y una segunda pared lateral exterior 96 que se extiende desde la junta 93 hacia abajo hasta la superficie inferior 88. dentro del cuerpo de obturación 84 hay un paso 98 y una cavidad 100. El paso 98 se extiende desde la superficie superior 86 hasta la superficie inferior 88. el paso 98 se acopla con la superficie superior 73 de la falda anular 74 del diafragma de obturación 72 por lo que cuando un elemento de perforación atraviesa la superficie superior 73 se extenderá directamente hasta el paso 98 sin ninguna interferencia.
Como se muestra en la Fig. 7, la parte superior anular 90 del cuerpo de obturación 84 está encajada en la falda anular 74 del diafragma de obturación 72. la fijación de fricción, un adhesivo o similar puede ser utilizado para mantener el encaje de los dos componentes. El separador es entonces mantenido en el extremo superior del tubo mediante los medios de agarre 69 del cierre. Como se muestra en la Fig. 2, el extremo redondeado 80 del diafragma de obturación flexible 72 y la pared interior del tubo forman una fijación de interferencias. El cuerpo de obturación no interfiere con la pared interior del tubo como se muestra en la Fig. 2, debido a que el diámetro de la falda anular 78 con pestaña del diafragma de obturación flexible 72 es mayor que el diámetro del cuerpo de obturación 90.
Como se muestra en la Fig. 3, una muestra de fluido A es enviada al tubo mediante una aguja que penetra en el cierre 50 en el área de pozo superior 60 y después la superficie superior 73 del diafragma de obturación 72. Sólo para fines de ilustración, la muestra de fluido es sangre. La muestra de fluido es enviada al paso axial del separador de manera que la muestra de fluido es introducida entre el extremo cerrado 34 del tubo y el separador por lo que la superficie exterior de todos los componentes del separador quedan sustancialmente libres de cualquier contacto con la muestra de fluido.
Como se muestra en la Fig. 4, cuando el conjunto 20 está sometido a centrifugación o fuerza de centrifugación axial, el separador 70 se libera de los medios de agarre 69 del cierre 50 y desciende hacia el extremo cerrado 34 del tubo 30. A medida que el separador desciende, la fracción de peso específico inferior B de la muestra de fluido A se mueve hacia abajo pasador el separador.
Como se muestra en la Fig. 4, a medida que el separador desciende, la falda anular 78 con pestaña de la obturación elastomérica se deforma, reduciendo en diámetro y eliminando su interferencia con la pared interior del tubo. Esto abre una trayectoria entre el tubo y el separador, permitiendo que el flujo del fluido rebase el separador cuando el separador migra hacia abajo del tubo. El componente de densidad inferior residual dentro del paso 98 del separador migrará hacia abajo y hacia arriba pasado el separador.
Como se ilustra en la Fig. 5, después de que se haya completado la centrifugación, la centrifugación finaliza, el diafragma de obturación elastomérico vuelve a su forma no deformada, obturando contra la pared interior del tubo, por lo que el separador 70 sirve como elemento divisor entre la parte de peso específico inferior B y la parte de peso específico superior C de la muestra de fluido.
El tubo 30 es compatible con la mayoría de los numerosos aditivos utilizados en los tubos de recogida de muestras tales como citratos, silicatos, EDTA y similares que se utilizan para acondicionar la muestra o para facilitar o retardar la coagulación o preservar la muestra para un análisis particular. Esta dentro de la previsión de esta invención que uno o más aditivos se puedan utilizar en la presente invención para aplicaciones particulares.

Claims (4)

1. Un conjunto para separar una muestra de fluido en una fase de mayor peso específico y una fase de menor peso específico que comprende:
un elemento separador (70) que comprende un cuerpo plástico de baja densidad (90) y un diafragma de obturación elastomérico de alta densidad (72);
caracterizado porque
dicho cuerpo plástico (90) comprende un núcleo hueco y un a cámara hueca (100) que rodea dicho núcleo hueco;
un diafragma de obturación elastomérico (72) que comprende un tabique de llenado (73) y una falda anular (74); y
dicho cuerpo plástico (90) está encajado en dicho diafragma de obturación elastomérico (72) por lo que dicho núcleo hueco (98) de dicho cuerpo plástico está en comunicación directa con dicho tabique de llenado de dicho diafragma de obturación elastomérico (72).
2. El conjunto de la reivindicación 1, que además comprende:
un tubo (30) que comprende un extremo abierto (32), un extremo cerrado (34), un diámetro interior, un diámetro exterior y una pared lateral (36) que se extiende entre dicho extremo abierto y dicho extremo cerrado;
comprendiendo dicha pared lateral (36) una superficie exterior (38) y una superficie interior (40);
un cierre (50) dispuesto en dicho extremo abierto de dicho tubo;
siendo dicho elemento separador movible axialmente en dicho tubo (30) bajo la acción de la fuerza centrífuga;
proporcionando dicho elemento separador (70) selectivamente una obturación anular y un paso abierto (100) allí alrededor en respuesta a las diferencias de presión en dicho tubo por encima de por debajo de dicho separador;
comprendiendo dicho diafragma de obturación elastomérico (72) una falda anular (78) que proporciona una fijación de interferencia con dicha superficie (40) de dicha pared lateral (36) de dicho tubo (30) como respuesta de alternar igual y diferente presiones encima y debajo de dicho separador.
3. El conjunto de la reivindicación 2, en el que dicho separador (70) está situado en dicho extremo abierto de dicho tubo (30) mediante una fijación de interferencias entre dicho diafragma de obturación elastomérico (72) y dicho diámetro interior de dicho tubo (30).
4. Un método para separar una muestra de fluido en una fase de peso específico mayor y una fase de peso específico menor, que comprende las etapas de:
(a) proporcionar un tubo (30) que comprende un extremo abierto (32), un extremo cerrado (34), un diámetro interior, un diámetro exterior y una pared lateral que se extiende entre dicho extremo abierto y dicho extremo cerrado y que comprende una superficie exterior (38) y una superficie interior (40);
(b) proporcionar un cierre (50) en dicho extremo abierto de dicho tubo que comprende un tabique liberable;
(c) proporcionar un elemento separador (70) que comprende un diafragma de obturación elastomérico (72) y un cuerpo plástico (90) por lo que dicho diafragma de obturación elastomérico (72) comprende un tabique de llenado (73) y una falda anular (78) que proporciona selectivamente una fijación de interferencia y un paso abierto con una superficie interior (40) de dicha pared lateral (36) de dicho tubo (30) en respuesta a la alternancia de igual y diferentes presiones encima y debajo de dicho separador, y un núcleo hueco que se extiende a través de dicho cuerpo plástico; dicho cuerpo plástico (90) está encajado con dicho diafragma de obturación elastomérico (72) por lo que dicho núcleo hueco de dicho cuerpo plástico está en comunicación directa con dicho tabique de llenado de dicho diafragma de obturación elastomérico;
(d) proporcionar dicho elemento separador (70) en dicho tubo por lo que dicho diafragma de obturación elastomérico (72) comprende una fijación de interferencia con dicha pared interior (40);
proporcionar una aguja que penetra en dicho cierre (50) y dicho tabique (73) de dicho diafragma de obturación elastomérico (72);
(f) enviar una muestra de fluido a dicho tubo (30) por lo que dicha muestra entra a través de dicha aguja y a través de dicho tabique (73) y dicho núcleo hueco de dicho cuerpo plástico y después en dicho cuerpo de dicho tubo (30);
(g) retirar dicha aguja de dicho conjunto por lo que dicho tabique de dicho cierre (50) y dicho diafragma de obturación elastomérico (72) se vuelven a obturar;
(h) someter dicho tubo (30) con dicho elemento separador (70) a centrifugación por lo que dicho diafragma de obturación elastomérico (72) se separa de dicha pared interior de dicho tubo y dicho separador migra axialmente en dicho tubo por lo que dicho componentes de baja densidad (B) de la muestra migra debajo del tubo; y
(i) terminar dicha centrifugación por lo que dicho diafragma de obturación elastomérico (72) se expande hasta recuperar su forma no deformada, obturando contra dicha pared interior (40) de dicho tubo (30), creando por tanto una barrera entre dichos componentes de alta y baja densidad de dicha muestra de fluido.
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