ES2254136T3

ES2254136T3 - Region ltr del msrv-1 y proteinas que esta codifica, y sondas y metodos para la deteccion de retrovirus msrv-1.

Info

Publication number: ES2254136T3
Application number: ES00902825T
Authority: ES
Inventors: Glaucia Paranhos-Baccala; Herve Perron; Florence Komurian-Pradel
Original assignee: Biomerieux SA
Current assignee: Biomerieux SA
Priority date: 1999-02-15
Filing date: 2000-02-15
Publication date: 2006-06-16
Anticipated expiration: 2020-02-15
Also published as: EP1151108A1; WO2000047745A1; US20040043381A1; AU2456600A; DE60024409D1; US7381817B2; EP1029917A1; ATE311459T1; CA2362524A1; EP1151108B1; DE60024409T2; JP2002536019A

Abstract

Fragmento nucleótido de una región LTR-RU5 seleccionado de entre: fragmentos que comprenden una secuencia nucleótida que codifica la expresión de una proteína, en la que dicha proteína comprende una secuencia peptídica seleccionada de entre SEC ID nº 2 y SEC ID nº 4 y sus fragmentos complementarios, y una secuencia nucleótida que codifica la expresión de una proteína constituida por SEC ID nº: 3 y sus secuencias nucleótidas complementarias.

Description

Región LTR del MSRV-1 y proteínas que ésta codifica, y sondas y métodos para la detección del retrovirus MSRV-1.

La esclerosis múltiple (MS) es una enfermedad desmielinizante del sistema nervioso central (CNS), cuya causa permanece todavía desconocida.

Muchos estudios han sustentado la hipótesis de una etiología viral de la enfermedad, pero ninguno de los virus conocidos que se han ensayado han demostrado ser el agente causante que se busca: E. Norrby y R.T. Johnson han compilado un resumen de los virus que se han buscado durante varios años en la MS.

Recientemente, en pacientes que padecen MS, se ha aislado un retrovirus distinto de los retrovirus humanos conocidos. Los autores pudieron mostrar asimismo que este retrovirus podría transmitirse in vitro, que los pacientes que padecen la MS produjeron anticuerpos capaces de reconocer las proteínas asociadas con la infección de las células leptomeníngeas por este retrovirus, y que la expresión de dichas proteínas podría ser estimulada intensamente por los genes tempranos inmediatos de algunos herpesvirus.

Todos estos resultados señalan al papel en la MS de por lo menos un retrovirus desconocido o de un virus que pose actividad transcriptasa inversa que es detectable según el método publicado por H. Perron y calificado como actividad "RT de tipo LM7".

Los estudios de los solicitantes han permitido dos progenies celulares continuas infectadas con aislamientos naturales originados de dos pacientes distintos que padecían la MS, obtenidas mediante un método de cultivo tal como se describe en el documento de patente WO-A-93/20188, el contenido del cual se incorpora como referencia en esta descripción. Estas dos progenies, derivadas de células del plexo coroide humano y denominadas LM7PC y PLI-2, se depositaron en el ECACC el 22 de julio de 1992 y el 8 de enero de 1993, respectivamente, con los números (de registro) 92072201 y 93010817, según las previsiones del tratado de Budapest. Además, los aislamientos virales que presentaban la actividad RT de tipo LM7 se depositaron asimismo en el ECACC bajo la denominación global de "cepas". La "cepa" o aislamiento albergado por la progenie PLI-2 denominada POL-2, se depositó en ECACC el 22 de julio de 1992 con el nº V92072202. La "cepa" o aislamiento albergado por la progenie LM7PC, denominada MS7PG, se depositó en ECACC el 8 de enero de 1993 con el nº V93010816.

Partiendo de los cultivos y aislamientos mencionados anteriormente, caracterizados por criterios biológicos y morfológicos, la próxima etapa fue intentar la caracterización del material de ácido nucleico asociado con las partículas virales producidas en estos cultivos.

Las partes del genoma que ya se han caracterizado se han utilizado para desarrollar ensayos para la detección molecular del genoma viral y los ensayos inmunoserológicos, utilizando las secuencias aminoácidas codificadas por las secuencias nucleótidas del genoma viral, para detectar la respuesta inmune dirigida contra epítopos asociados con la infección y/o la expresión viral.

El sistema viral descubierto por el Solicitante se refiere a un sistema retroviral complejo. Efectivamente, las secuencias que se encontraron encapsidadas en las partículas virales extracelulares producidas por los distintos cultivos de células de pacientes que padecían la MS, muestran claramente que existe coencapsidación de genomas retrovirales que están relacionados, pero que son diferentes del genoma retroviral "salvaje" que produce las partículas virales infecciosas. Este fenómeno se ha observado entre retrovirus replicantes y retrovirus endógenos que pertenecen a la misma familia, o incluso en retrovirus heterólogos. La noción de retrovirus endógenos es muy importante. En el caso del MSRV-1, se ha observado que las secuencias retrovirales endógenas que comprenden secuencias homólogas al genoma MSRV-1, existen en el ADN humano normal. La existencia de elementos retrovirales endógenos (ERV) relacionados con MSRV-1 en la totalidad o en parte de su genoma, explica el hecho de que la expresión del retrovirus MSRV-1 en las células humanas pueda interaccionar con secuencias endógenas estrechamente relacionadas.

Clones defectuosos que sólo expresan proteínas pueden estar implicados en la patología.

El solicitante ha realizado un descubrimiento inesperado, según el cual la región RU5 de un LTR retroviral que se define en la presente invención, codifica la expresión de por lo menos una proteína. Esto es inhabitual para LTRs, en particular en la región RU5.

La presente invención se refiere en primer lugar a un fragmento nucleótido de una región LTR-RU5 que comprende una secuencia nucleótida que codifica la expresión de una proteína, en la que dicha proteína comprende por lo menos seis, preferentemente ocho por lo menos, y más preferentemente doce aminoácidos, por lo menos, de una secuencia peptídica seleccionada de entre el grupo constituido por SEC ID nº:2, SEC ID nº:3 y SEC ID nº:4, y un fragmento nucleótido complementario.

Ventajosamente, un fragmento nucleótido de la invención, o el fragmento nucleótido complementario suyo, comprende una secuencia nucleótida que codifica la expresión de una proteína, en la que dicha proteína comprende una secuencia peptídica seleccionada de entre SEC ID nº:2, SEC ID nº:3 y SEC ID nº:4, y un fragmento nucleótido complementario. Preferentemente, dicha proteína está formada por SEC ID nº:3, o comprende o está formada por SEC ID nº:2 y SEC ID nº:4.

La invención se refiere asimismo a los siguientes asuntos:

-: una sonda de ácido nucleica para la detección del retrovirus MSRV-1, que comprende entre 10 y 1000 monómeros y se hibridiza especialmente con el fragmento nucleótido de la invención, en condiciones de alta restricción;

-: un cebador para la amplificación mediante polimerización de una secuencia retroviral ácido nucleica del virus MSRV-1, que comprende entre 10 y 30 monómeros y se hibridiza con el fragmento nucleótido de la invención, en condiciones de alta restricción;

-: una proteína codificada por un fragmento nucleótido de la invención; preferentemente, dicha proteína comprende una secuencia peptídica seleccionada de entre el grupo constituido por SEC ID: nº 2, SEC ID nº: 3 y SEC ID nº: 4, o está formada por una secuencia peptídica seleccionada de entre el grupo constituido por SEC ID: nº 3, SEC ID nº: 2 y SEC ID nº: 4,

-: un anticuerpo policlonal o monoclonal dirigido contra una proteína de la invención o un polipéptido de la invención;

-: un procedimiento para detectar, en una muestra biológica, la presencia del retrovirus MSRV-1, que comprende:

: poner en contacto una sonda de la invención con dicha muestra biológica,

: determinar si la sonda se une a un ácido nucleico en dicha muestra biológica, en la que la unión indica la presencia del virus MSRV-1; dicho procedimiento puede comprender una etapa de amplificación en la que dicho ácido nucleico es amplificado con un cebador de la invención;

: poner en contacto un anticuerpo de la invención con dicha muestra biológica,

: determinar si el anticuerpo se une a una proteína de la invención, en dicha muestra biológica, en la que la unión indica la presencia del virus MSRV-1;

-: un procedimiento para detectar, en una muestra biológica, la presencia del retrovirus MSRV-1, que comprende la detección de las propiedades antigénicas o biológicas de una proteína de la invención o de un fragmento suyo; ventajosamente, dicho fragmento proteico es un polipéptido de la invención.

Antes de describir la invención detalladamente, se definen a continuación distintos términos que se utilizan en la descripción y en las reivindicaciones:

-: el término "MSRV" que se utiliza en la presente descripción significa cualquier agente patogénico y/o infeccioso asociado con la MS, en particular una especie viral, las cepas atenuadas de dicha especie viral o las partículas defectuosas que provocan interferencias, o las partículas que contienen genomas coencapsidados alternativamente, los genomas recombinados con una parte del genoma de MSRV-1, derivado de esta especie. Los virus, especialmente los virus que contienen ARN, se conocen por tener una variabilidad que proviene, en particular, de unas tasas relativamente altas de mutación espontánea;

-: por virus humano se entiende un virus capaz de infectar, o de ser albergado por los seres humanos,

-: según la invención, un fragmento nucleótido o un oligonucleótido o polinucleótido es una disposición de monómeros, o un biopolímero, caracterizado por la secuencia informacional de los ácidos nucleicos naturales, que es capaz de hibridizarse con cualquier otro fragmento nucleótido bajo condiciones predeterminadas, siendo posible para llevar a cabo la disposición contener monómeros de distintas estructuras químicas y obtenerse a partir de una molécula de ácido nucleico natural y/o mediante recombinación genética y/o mediante síntesis química; un fragmento nucleótido puede ser idéntico a un fragmento genómico del virus MSRV-1 que se considera en la presente invención;

-: así, un monómero puede ser un nucleótido natural del ácido nucleico cuyos elementos constituyentes son un azúcar, un grupo fosfato y una base nitrogenada; en el ARN, el azúcar es la ribosa, en el ADN el azúcar es la 2-desoxiribosa; dependiendo de si el ácido nucleico es ADN o ARN, la base nitrogenada se selecciona de entre adenina, guanina, uracilo, citosina y timina; o el nucleótido puede modificarse en por lo menos uno de los tres elementos constituyentes; como ejemplo, la modificación puede llevarse a cabo en las bases, generando bases modificadas tales como la inosina, la 5-metildesoxicitidina, la desoxiuridina, la 5-(dimetilamino)desoxiuridina, la 2,6-diaminopurina, la 5-bromodesoxiuridina y cualquier otra base modificada que promueva la hibridización; en el azúcar, la modificación puede consistir en el reemplazamiento de por lo menos una desoxirribosa por una poliamida, y en el grupo fosfato, la modificación puede consistir en su reemplazamiento por ésteres escogidos, en particular, a partir de los ésteres difosfato, alquil y arilfosfonato y fosforotioato;

-: por "secuencia informacional" se entiende cualquier sucesión ordenada de monómeros, cuya naturaleza química y orden en una dirección de referencia constituyen un elemento de información funcional de la misma calidad que la de los ácidos nucleicos naturales;

-: la hibridización significa el procedimiento durante el cual, bajo condiciones de actuación apropiadas, dos fragmentos nucleótidos que tienen secuencias suficientemente complementarias se emparejan para formar una estructura compleja, en particular doble o triple, preferentemente en forma de una hélice, en particular en condiciones de alta restricción (véase Maniatis et al., Molecular Cloning, Cold Spring Harbor, 1982); en general, dependiendo de la longitud de las sondas utilizadas, estas condiciones son las siguientes: la temperatura para la reacción de hibridización está comprendida entre 20ºC y 65ºC y especialmente entre 35ºC y 65ºC en una solución salina a una concentración de aproximadamente 0,8 a 1 M;

-: una sonda comprende un fragmento nucleótido sintetizado químicamente u obtenido mediante digestión o fragmentación enzimática de un fragmento nucleótido más largo, que comprende por lo menos seis monómeros, ventajosamente entre 10 y 100 monómeros y preferentemente entre 10 y 30 monómeros, y que posee una especificidad de hibridización bajo condiciones de alta restricción; preferentemente, una sonda que posee menos de 10 monómeros no se utiliza sola, sino que se emplea en presencia de otras sondas de un tamaño igualmente corto o de otro modo; bajo ciertas condiciones especiales, puede ser útil utilizar sondas de un tamaño mayor de 100 monómeros; una sonda puede utilizarse, en particular, con fines diagnósticos, siendo dichas moléculas, por ejemplo, sondas de captura y/o de detección;

-: la sonda de captura puede ser inmovilizada sobre un soporte sólido mediante cualquier medio apropiado, es decir, directa o indirectamente, por ejemplo, mediante enlace covalente o adsorción pasiva;

-: la sonda de detección puede marcarse mediante un marcador seleccionado, en particular, de isótopos radioactivos, mediante enzimas seleccionadas, en particular, de entre la peroxidasa y la fosfatasa alcalina y de aquellos capaces de hidrolizar un substrato cromogénico, fluorogénico o luminiscente, compuestos químicos cromofóricos, compuestos cromogénicos, fluorogénicos o luminiscentes, análogos de bases nucleótidas y biotina;

-: las sondas utilizadas con propósitos diagnósticos de la invención pueden utilizarse en todas las técnicas de hibridización conocidas, y en particular en las técnicas denominadas "TRANSFERENCIA PUNTUAL", "TRANSFERENCIA SOUTHERN", "TRANSFERENCIA NORTHERN", que es una técnica idéntica a la utilizada de "TRANSFERENCIA SOUTHERN" pero que utiliza ARN como diana, y la técnica "SANDWICH"; ventajosamente, en la presente invención se utiliza la técnica SANDWICH, que comprende una sonda de captura específica y/o una sonda de detección específica, teniendo en cuenta que la sonda de captura y la de detección deben poseer por lo menos secuencias nucleótidas parcialmente diferentes;

-: un cebador es una sonda que comprende por lo menos seis monómeros, y ventajosamente entre 10 y 30 monómeros, que posee una especificidad de hibridización bajo condiciones de restricción alta para la iniciación de una polimerización enzimática, por ejemplo en una técnica de amplificación tal como la PCR (reacción en cadena de la polimerasa), en un procedimiento de alargamiento tal como la secuenciación, o en un método de transcripción inversa o similar;

En vista del hecho de que un virus que posee actividad enzimática de transcriptasa inversa puede caracterizarse genéticamente, igualmente bien, en forma de ARN y de ADN, se remitirá tanto al ADN como al ARN virales para caracterizar las secuencias relacionadas con un virus que posea dicha actividad de transcriptasa inversa, que se denomina MSRV-1 según la presente descripción.

Por detección de una sustancia o agente se entiende tanto una identificación como una cuantificación, o una separación o un aislamiento, de dicha sustancia o de dicho agente.

Se entenderá mejor la invención al leer la descripción detallada siguiente, preparada haciendo referencia a las figuras adjuntas, en las que:

La Figura 1 muestra la secuencia nucleótida de 5' que corresponde a las regiones que son abarcadas por los clones LB15 (representados en nt 1 a 623) en la región RU5, y los clones CL2 (representados en nt 624 a 1680) y CL17 (representados en nt 1681 a 2052) en gag. La traducción del aminoácido (AA) se muestra por debajo de las secuencias nucleótidas gag. El sitio de poliadenilación en R está enmarcado y la señal de poliadenilación corriente abajo en U5 está subrayada. (II) indica un cambio del marco de lectura y (.) un codon de detención. AA en negrita corresponde a la región de mayor homología (MHR) en la cápside. AA subrayado corresponde a las posiciones conservadas en la nucleocápside.

La Figura 2 muestra la región 5'env obtenida del clon C15 (nt 1 a 1479) y la región 3' env y las secuencias LTR, obtenidas del clon CL6 (nt 1480 a 2030). Las flechas verticales indican la región env y la U3, las subestructuras R. En la región env: el péptido señal y el péptido putativo inmunosupresor están subrayados, los sitios de glicosilación unidos a N están enmarcados, y los dos sitios putativos de fragmentación están indicados por flechas verticales. En la región U3R: el elemento regulador CAAT y la secuencia TATA están subrayados; el sitio en cabeza y la señal polyA están también indicados.

La Figura 3 muestra la actividad promotora de los clones U3R obtenida a partir del ARN plasmático de pacientes con MS (CL6), del ARN de la placenta normal (PH74, número de registro AFO75506) y del ADN celular humano (5M6). Las secuencias de U3R se clonaron en el vector informador potenciador pCAT3. La actividad CAT se evaluó después de 48 horas de incubación y representa la eficiencia del promotor de las secuencias correspondientes. El valor presentado corresponde a la media de 3 experimentos independientes.

Ejemplo 1 Determinación de las regiones MSRV-LTR

Se llevó a cabo una amplificación RT-PCR con un cebador 3' antisentido localizado en la región gag y con un cebador con sentido 5', definido a partir de la secuencia R obtenida previamente en el extremo 3' (clon 6, que se describe más adelante). El clon LB15 (SEC ID nº:1) que abarca las regiones R (87 pares de bases), U5 (456 pares de bases), PBS y 5'gag, se obtuvo de esta forma a partir de partículas del cultivo concentrado. Un sitio de poliadenilación es compatible con el motivo dinucleótido "CA" localizado en la unión de las regiones R y U5 y una señal putativa poly (A) corriente abajo se localiza a una distancia de 24 nucleótidos corriente abajo de la señal poly (A), con la secuencia consenso "YGTGTTYY". Se ha probado que el sitio putativo de unión-cebador (PBS), identificado corriente abajo de la región U5, está relacionado con el extremo 3' de la secuencia complementaria del tARN^{Trp} de las aves.

También es de interés que dos marcos de lectura orfs bastante cortos (SEC ID nº: 2 y SEC ID nº: 3) se encontraron en la región RU5.

La región 3' LTR U3R se identificó en el clon CL6 (Fig. 2) obtenida por amplificación en ARN tratado con DNasa extraída del plasma de pacientes con MS. Comparando con las secuencias 5'LTR obtenidas por la extensión de 5' en MSRV ARN, se han identificado una región U3 de longitud 299 pares de bases y una región R de 84 pares de bases en la región CL6 LTR, localizada corriente abajo de env orf y que finaliza con la cola poly A. El típico elemento regulador secuencia CAAT se observó en dos localizaciones en la región putativa U3, pero con la base de datos de Factores de Transcripción (Heinemeyer T, Wingender, E, Reuter, I, Hermjakob, H, Kel, AE, Kel, OV, Ignatieva, EV, Ananko, EA, Podkolodnaya, OA, Kolpakov, FA, Podkolodny, NL, y Kolchanov, NA. (1988)) se detectaron asimismo otros sitios putativos de unión para varios factores de transcripción. Databases on transcriptional regulation: TRANSFAC, TRRD, y COMPEL. Nucleic Acids Res 26, 364-370).

Se observó una secuencia TATA (TATAAA)en la región U3, tal como se ha descrito para numerosos retrovirus. Finalmente, una señal poly(A) se encontró 83 pares de bases corriente abajo de la secuencia TATA.

Para evaluar la actividad promotora de los clones LTR de distintos orígenes, se llevaron a cabo ensayos CAT con regiones U3R subclonadas de clones LTR obtenidos de ARN del plasma de pacientes con MS (CL6) y de copias HERV-W relacionadas en ADN de individuos no afectados con MS (5M6) y en ARN placentario de individuos no afectados con MS (HP74). Tal como se muestra en la Figura 3, se asoció una actividad potente con la secuencia LTR en el clon CL6 del plasma de individuos con MS, mientras que se descubrió una actividad promotora moderada y débil con los clones 5M6 y PH74 respectivamente. Resultados similares se obtuvieron con distintos tipos celulares.

Ejemplo 2 Material y métodos utilizados en el ejemplo 1

A partir del plasma de individuos afectos de MS, o de partículas purificadas, se extrajo el ARN total mediante el procedimiento estándar del tiocianato de guanidio acidificado o mediante el equipo de extracción del ARN viral (Boehringer Mannheim). Después de un tratamiento con DNasa, se transcribió inversamente el ARN (Expand^{TM} RT, Boehringer Mannheim) con cebadores hexanucleótidos al azar, con el cebador específico MSRV o con el cebador anclado oligodT, y se amplificó mediante PCR con cebadores internos o semiinternos (equipo de Long Expand PCR-Boerhinger Mannheim). Para cada ensayo, se llevó a cabo un control no RT. Se llevó a cabo una extensión de 5' y 3' a partir de la región pol de MSRV para obtener clones con los cebadores que se indican a continuación.

LB15:

Cebador con sentido

1

Cebadores antisentido

2

CL6:

Cebadores con sentido

3

Cebador antisentido

4

Los fragmentos PCR se clonaron en un pCR2.1 del equipo de clonación^{TM} TA (Invitrogen) y se secuenciaron en ambas direcciones utilizando el "equipo de secuenciación del ciclo del colorante desoxifinalizador, del equipo de reacción preparada del prisma" (Applied Biosystems), con los secuenciadores Applied Biosystem 377 y el automatizado 373A del ADN.

Las regiones U3R de los clones CL6 (tal como se muestra en la patente WO-99/02666 en nombre del Solicitante), PH74 (tal como se muestra en la patente WO-99/02696 en nombre del Solicitante) y 5M6 (tal como se muestra en la patente WO-99/02666 en nombre del Solicitante) (obtenidos respectivamente del ARN plasmático de individuos con MS, ARN placentario y ADN humano), se clonaron en pCAT3 (Promega-Biotech, Madison, WI, USA) para ensayos CAT. Se llevaron a cabo experimentos de transfección en células Hela, PG4, BeWo o Jurkat utilizando el equipo Superfect Transfection (Qiagen GmbH, Alemania) con 2 \mug de plásmido recombinante purificado. Después de 48 horas de incubación, las células se recuperaron para evaluar la actividad CAT utilizando el Sistema de Ensayo Enzimático CAT (Promega-Biotech). A este efecto, tal como había recomendado el fabricante, se siguió el protocolo de Contaje de Centelleo Líquido (LSC). Un control positivo consistía en células transfectadas por 2 \mug de pCAT3 Contol (Promega-Biotech).

<110> BIO MERIEUX

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<120> Fragmento nucleótido, proteína, sonda, cebador y procedimiento para detectar el retrovirus MSRV-1

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<130> b05b3320-SEP20-MSRV1-LTR

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<140>

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<141>

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<160> 4

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<170> PatentIn Ver. 2.1

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<210> 1

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<211> 1003

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<212> ADN

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<213> MSRV-1 retrovirus

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<400> 1

5

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<210> 2

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<211> 76

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<212> PRT

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<213> MSRV-1 retrovirus

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<400> 2

6

\newpage

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<210> 3

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<211> 64

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<212> PRT

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<213> MSRV-1 retrovirus

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<400> 3

7

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<210> 4

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<211> 140

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<212> PRT

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<213> MSRV-1 retrovirus

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<400> 4

8

Claims

1. Fragmento nucleótido de una región LTR-RU5 seleccionado de entre:

: fragmentos que comprenden una secuencia nucleótida que codifica la expresión de una proteína, en la que dicha proteína comprende una secuencia peptídica seleccionada de entre SEC ID nº 2 y SEC ID nº 4 y sus fragmentos complementarios, y

: una secuencia nucleótida que codifica la expresión de una proteína constituida por SEC ID nº: 3 y sus secuencias nucleótidas complementarias.

2. Fragmento nucleótido según la reivindicación 1, en el que dicha proteína comprende SEC ID nº 2 y SEC ID nº 4.

3. Fragmento nucleótido según la reivindicación 1, en el que dicha proteína está constituida por SEC ID nº 2 y SEC ID nº 4.

4. Sonda ácido nucleica para la detección de una región LTR-RU5 del retrovirus MSRV-1, comprendiendo dicha sonda entre 10 y 1000 monómeros, e hibridizando específicamente una secuencia nucleótida que codifica la expresión de una proteína, la cual proteína está formada por SEC ID nº 2, en condiciones de alta restricción.

5. Cebador para la amplificación mediante polimerización de un ácido nucleico, secuencia retroviral de una región LTR-RU5 del virus MSRV-1, en el que dicho cebador comprende entre 10 y 30 monómeros y se hibridiza con una secuencia nucleótida que codifica la expresión de una proteína, en la que dicha proteína está constituida por SEC ID nº 2, en condiciones de alta restricción.

6. Proteína codificada por un fragmento nucleótido, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

7. Proteína según la reivindicación 6, que comprende una secuencia peptídica seleccionada de entre el grupo constituido por SEC ID nº 2 y SEC ID nº 4.

8. Proteína según la reivindicación 6, constituida por la secuencia peptídica SEC ID nº 3.

9. Proteína según la reivindicación 6, que comprende una secuencia peptídica seleccionada de entre el grupo constituido por SEC ID nº 2 y SEC ID nº 4.

10. Proteína según la reivindicación 6, constituida por una secuencia peptídica seleccionada de entre SEC ID nº 2 y SEC ID nº 4.

11. Anticuerpo policlonal o monoclonal dirigido contra una proteína, según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 10.

12. Procedimiento para detectar, en una muestra biológica, la presencia del retrovirus MSRV-1, que comprende:

: poner en contacto una sonda según la reivindicación 4 con dicha muestra biológica,

: determinar si la sonda se une a un ácido nucleico en dicha muestra biológica, en la que la unión indica la presencia del virus MSRV-1;

13. Procedimiento para detectar, en una muestra biológica, la presencia del retrovirus MSRV-1, que comprende:

: poner en contacto un anticuerpo según la reivindicación 14 con dicha muestra biológica,

: determinar si el anticuerpo se une a una proteína en dicha muestra biológica, en la que la unión indica la presencia del virus MSRV-1;

14. Procedimiento para detectar, en una muestra biológica, la presencia del retrovirus MSRV-1, que comprende la detección de las propiedades antigénicas o biológicas de una proteína, según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 10.