ES2253337T3 - Utilizacion de un extracto de una iridacea en una composicion destinada a estimular las defensas inmunitarias. - Google Patents
Utilizacion de un extracto de una iridacea en una composicion destinada a estimular las defensas inmunitarias.Info
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Abstract
Utilización de al menos un extracto de células desdiferenciadas de al menos una Iridácea del género Iris para preparar una composición destinada para estimular las defensas inmunitarias de la piel debilitadas por las radiaciones ultravioleta, induciendo a largo plazo un envejecimiento fotoinducido.
Description
Utilización de un extracto de una iridacea en una
composición destinada a estimular las defensas inmunitarias.
La invención se refiere a la utilización de al
menos un extracto de células desdiferenciadas de al menos una
iridácea del género Iris para preparar una composición destinada a
estimular las defensas inmunitarias de la piel debilitadas por las
radiaciones ultravioleta, que inducen a largo plazo a un
envejecimiento fotoinductivo.
El sistema inmunitario comprende un conjunto de
células especializadas sometidas a múltiples mecanismos de control
que aseguran su renovación, su activación y su diferenciación,
indispensables para un nivel normal de inmunocompetencia. El papel
del sistema inmunitario es reconocer el suyo del no suyo para
eliminar los agentes patógenos y los tumores espontáneos. Cualquier
disminución celular, cualquier disregulación inmunitaria o
cualquier déficit funcional es susceptible de favorecer la
presentación de manifestaciones patológicas caracterizadas por la
perturbación de los mecanismos de reconocimiento del suyo respecto
al no suyo, y una mayor sensibilidad respecto a agresiones
microbianas y de los procesos neoplásicos.
La piel constituye el órgano más importante del
organismo y es reconocida como un elemento activo del sistema de
defensa inmunitario. Tres tipos de células epidérmicas participan en
este sistema: los queratinocitos, los melanocitos y las células de
Langerhans. Estas células que solo se encuentran a nivel de la
epidermis, juegan un papel primordial en la respuesta inmunitaria
cutánea.
La piel sana es capaz de defenderse de las
agresiones exteriores gracias a los medios puestos a su disposición.
Sin embargo, la misma está sometida a la agresión permanente del
entorno (infecciones y contaminación particularmente), productos
químicos, radiaciones. En particular, las células de Langerhans son
el blanco privilegiado de las radiaciones ultravioleta.
Estas agresiones se traducen por un efecto
supresor sobre las defensas inmunitarias produciendo una baja de
las resistencias a los agentes patógenos y particularmente, un
aumento de la incidencia de ciertos cánceres.
Para ayudar a la piel a cumplir su función
inmune, los productos de regulación del sistema inmunitario cutáneo
son de un gran interés.
De lo que antecede, se sabe ahora que el sistema
inmunitario y más particularmente el de la piel se debilita con el
transcurso del envejecimiento cronobiológico o del envejecimiento
fotoinducido.
Un efecto inmunoregulador aplicado sobre este
sistema inmunitario puede por consiguiente restablecer las funciones
inmunitarias y más particularmente las de la epidermis lo cual
concurre en restaurar las defensas naturales de la piel y en
prevenir así algunas afecciones patógenas y la aparición de
cánceres.
Uno de los fines de la invención es por
consiguiente proponer un nuevo inmunoregulador estimulante, más
particularmente un regulador estimulante del sistema inmunitario de
la piel compatible con esta última.
La patente US 5.382.430 describe la utilización
de glicolípidos de peso molecular igual a 8000 \pm 1000,
extraídos de plantas, tales como las Monocotiledonas, Dicotiledonas
y Gimnoespermas. Estos glicolípidos son positivos al "limulus
test" y juegan un papel en el estímulo del sistema inmunitario
por activación de los macrofagos.
La Firma solicitante ha encontrado de forma
inesperada que la aplicación de una cantidad eficaz de al menos un
extracto de al menos una Iridácea permite en agresiones de este
sistema estimular las defensas inmunitarias de la piel.
La aplicación del extracto es particularmente
eficaz en el estímulo de las defensas inmunitarias de la piel
cuando estas se encuentran debilitadas por radiaciones ultravioleta,
induciendo a largo plazo un envejecimiento fotoinducido.
La invención tiene por consiguiente por objeto la
utilización de al menos un extracto de células desdiferenciadas de
al menos una Iridácea del género Iris para preparar una composición
destinada para estimular las defensas inmunitarias de la piel
debilitadas por las radiaciones ultravioleta, induciendo a largo
plazo a un envejecimiento fotoinducido.
La familia de las Iridáceas cuenta
aproximadamente con 750 especies.
Las plantas de la familia de las Iridáceas se
utilizan sobre todo por sus propiedades aromáticas y
ornamentales.
Según la invención, se utiliza material vegetal
procedente del género Iris y preferentemente del material vegetal
procedente de las especies Iris pallida, Iris
germánica e Iris florentina.
El extracto de al menos una Iridácea puede ser
cualquier extracto preparado a partir de cualquier material vegetal
procedente de la familia de las Iridáceas.
El material vegetal puede proceder de plantas
enteras cultivadas in vivo o procedentes de cultivo in
vitro.
La presión de selección impuesta por las
condiciones físico-químicas durante el crecimiento
de las células vegetales in vitro permite obtener un
material vegetal estandarizado y disponible a todo lo largo del año
contrariamente a las plantas cultivadas in vivo.
Por cultivo in vitro, se entiende el
conjunto de técnicas conocidas del experto en la materia que permite
de forma artificial la obtención de un vegetal o de una parte de un
vegetal.
De preferencia según la invención, se utiliza un
extracto obtenido a partir de material vegetal cultivado in
vitro.
El material vegetal utilizable según la invención
procede de las células vegetales desdiferenciadas.
Por células vegetales desdiferenciadas, se
entiende toda célula vegetal que no presenta ninguno de los
caracteres de una especialización particular y capaz de vivir por
sí misma y no en dependencia con otras células. Estas células
vegetales diferenciadas son eventualmente aptas, bajo el efecto de
una inducción, a cualquier diferenciación conforme a su genoma.
Las células vegetales diferenciadas pueden ser
obtenidas a partir de material vegetal procedente de planta entera
o de parte de planta como las hojas, los tallos, las flores, los
pétalos, las raíces, los frutos, las semillas, las anteras, que la
planta o la parte de planta haya sido obtenida por cultivo in
vivo o cultivo in vitro.
Preferentemente, las células vegetales
diferenciadas se obtienen a partir de hojas o de rizomas.
Preferentemente según la invención, se utilizan
células vegetales desdiferenciadas procedentes de cultivo in
vitro.
De una manera muy preferencial, se utilizan según
la invención células vegetales diferenciadas procedentes de cultivo
in vitro obtenidas a partir de hojas o de rizomas de un
vegetal de las especies Iris pallida, Iris germanica e
Iris florentina.
Las células vegetales desdiferenciadas
utilizables según la invención pueden ser obtenidas por cualquier
método conocido de la técnica anterior. A este respecto se pueden
citar los métodos descritos por E.F. George y P.D. Sherrington en
Plant Propagation by tissue culture, handbook and directory of
commercial laboratories (Exegetics Ltd. 1984).
Los medios de cultivo utilizables según la
invención son los generalmente conocidos del experto en la materia.
Se pueden citar a título de ejemplos los medios de Gamborg,
Murashige y Skoog, Heller, White, etc... Se encontrará en "Plant
Culture Media: formulations and uses" de E.F. George, DJM Puttock
y H.J. George (Exegetics Ltd. 1987, tomo 1 & 2) descripciones
completas de estos medios.
Preferentemente según la invención se preparan
las células vegetales diferenciadas cultivadas en medio de Murashige
y Skoog.
Cualquier método de extracción conocido del
experto en la materia puede ser utilizado para preparar el extracto
de Iridácea utilizable según la invención.
Se pueden, en particular, citar los extractos
alcohólicos, particularmente etanólicos o también
hidroalcohólicos.
Se puede igualmente utilizar un extracto de
Iridácea preparado por el método descrito en la solicitud de patente
francesa nº 95-02379 presentada por la Firma
solicitante. Así, en una primera etapa se tritura el material
vegetal en una solución acuosa en frío, en una segunda etapa las
partículas en suspensión se eliminan de la solución acuosa
procedente de la primera etapa, y en una tercera etapa se esteriliza
la solución acuosa procedente de la segunda etapa.
Esta solución acuosa corresponde al extracto.
Por otro lado, la primera etapa puede
ventajosamente ser sustituida por una operación de congelación
simple de los tejidos vegetales (por ejemplo -20ºC), seguida de una
extracción acuosa retomando las segunda y tercera etapas indicadas
anteriormente. El producto de esta extracción acuosa puede
igualmente ser liofilizado para obtener un extracto seco (por
término medio según la naturaleza de la fuente inicial, se encuentra
entre 5 y 70 g de materia seca por litro de extracto acuoso).
Un ejemplo de preparación de extracto de Iridácea
utilizable según la invención se facilita por otro lado en los
ejemplos.
La cantidad de extracto utilizable según la
invención es bien entendido función del efecto buscado y puede por
consiguiente variar en una amplia medida.
Para dar un orden de magnitud, se puede utilizar
un extracto seco tal como el definido anteriormente en una cantidad
que representa del 0,0001% al 20% del peso total de la composición y
preferentemente en una cantidad que representa del 0,001% al 10% del
peso total de la composición.
Las composiciones utilizables según la invención
son composiciones de uso dermatológico.
Las composiciones utilizables según la invención
pueden presentarse bajo cualquier forma galénica normalmente
utilizadas para una aplicación tópica u oral.
Según la invención se prefieren composiciones de
aplicación tópica.
Para una aplicación tópica, las composiciones de
la invención comprenden un medio compatible con la piel. Estas
composiciones pueden presentarse particularmente en forma de
soluciones acuosas, alcohólicas o hidroalcohólicas, de geles,
emulsiones de agua-en-aceite o de
aceite-en-agua presentando el
aspecto de una crema o de un gel, de microemulsiones, de aerosoles
o también en forma de dispersiones vesiculares que contienen lípidos
iónicos y/o no iónicos. Estas formas galénicas se preparan según
los métodos usuales de los ámbitos considerados.
Estas composiciones de aplicación tópica pueden
constituir particularmente una composición de protección, de
tratamiento o de cuidado cosmético o farmacéutico para la cara, para
el cuello, para las manos o para el cuerpo, (por ejemplo cremas de
día, cremas de noche, cremas o aceites solares, leches corporales),
una composición de maquillaje (por ejemplo maquillaje de fondo) o
una composición de bronceado artificial.
Las cantidades de los diferentes constituyentes
de las composiciones según la invención son las clásicamente
utilizadas en los ámbitos considerados y son adecuadas por su forma
galénica.
Cuando la composición es una emulsión, la
proporción de cuerpo graso que la misma contiene puede oscilar entre
el 5% y el 80% en peso, y de preferencia entre el 5% y el 50% en
peso con relación al peso total de la composición. Los cuerpos
grasos y los emulsionantes utilizados en la composición en forma de
emulsión son seleccionados entre los clásicamente utilizados en el
ámbito cosmético o farmacéutico.
Como cuerpos grasos utilizables en la invención,
se pueden citar los aceites minerales (vaselina), los aceites
vegetales (fracción líquida de manteca de Caridad) y sus derivados
hidrogenados, los aceites animales, los aceites de síntesis
(perhidroescualeno), los aceites siliconados (dimetilpolisiloxano) y
los aceites fluorados. Como otros cuerpos grasos, se pueden también
citar los alcoholes grasos (alcohol cetílico, alcohol estearilico),
los ácidos grasos (ácido esteárico) y las ceras.
Los emulsionantes pueden estar presentes, en la
composición, en una proporción que oscila entre el 0,3% y el 30% en
peso, y de preferencia entre el 0,5 y el 30% en peso con relación al
peso total de la composición.
De forma conocida, las composiciones pueden
contener igualmente adyuvantes habituales en los ámbitos
correspondientes, tales como los gelificantes hidrófilos o
lipófilos, los conservantes, los antioxidantes, los disolventes,
los perfumes, las cargas, los filtros y las materias colorantes. Por
otro lado, estas composiciones pueden contener agentes activos
hidrófilos o lipófilos. Las cantidades de estos diferentes
adyuvantes o agentes activos son las clásicamente utilizadas en el
ámbito cosmético o farmacéutico, y por ejemplo del 0,01% al 20% del
peso total de la composición. Estos adyuvantes o estos agentes
activos, según su naturaleza, pueden ser introducidos en la fase
grasa, en la fase acuosa y/o en vesículas lipídicas.
Entre los agentes activos que pueden contener las
composiciones , se pueden particularmente citar los agentes activos
con un efecto sobre el tratamiento de las arrugas o de las pequeñas
arrugas, y en particular los agentes activos queratolíticos. Por
queratolítico, se entiende un agente activo que tiene propiedades
desescamantes, exfoliantes o gomantes o un agente activo capaz de
disminuir la cohesión de la capa córnea.
Entre los agentes activos con un efecto sobre el
tratamiento de las arrugas o de las pequeñas arrugas que pueden
contener las composiciones se pueden en particular citar los
hidroxiácidos y los retinoides.
Los hidroxiácidos pueden ser por ejemplo los
\alpha-hidroxi-ácidos o los
\beta-hidroxi-ácidos, que pueden ser lineales,
ramificados o cíclicos, saturados o insaturados. Los átomos de
hidrógeno de la cadena carbonada pueden ,además, ser sustituidos
por halógenos, radicales halogenados, alquilados, acilados,
aciloxilados, alcoxi carbonilados o alcoxilados que tienen de 2 a
18 átomos de carbono.
Los hidroxiácidos que pueden ser utilizados son
particularmente los ácidos glicólico, láctico, málico, tártrico,
cítrico, 2-hidroxi, alcanóico, mandélico,
salicílico, así como sus derivados alquilados como el ácido
n-octanoil-5-salicílico,
el ácido
n-dodecanoil-5-salicílico,
el ácido
n-decanoil-5-salicílico,
el ácido
n-octil-5-salicílico,
el ácido n-heptiloxi-5 ó
-4-salicílico, el ácido
2-hidroxi-3-metil-benzóico
o también sus derivados alcoxilados como el ácido
2-hidroxi-3-metoxibenzóico.
Los retinoides pueden ser particularmente el
ácido retinóico (all-trans o 13-cis)
y sus derivados, el retinol (vitamina A) y sus ésteres tales como
el palmitato de retinol, el acetato de retinol y el propionato de
retinol, así como sus sales.
Entre los agentes activos que pueden contener las
composiciones se pueden particularmente citar los agentes activos
que participarán en la protección del sistema inmunitario.
Entre los agentes activos capaces de participar
en la protección del sistema inmunitario, se pueden particularmente
citar los agentes activos anti-radicales libres,
como por ejemplo los carotenoides provitamínicos A, como el
Beta-Caroteno, los carotenoides no provitamínicos A,
como el Licopeno, la vitamina E y sus derivados la vitamina C y sus
derivados, los filtros solares minerales y orgánicos.
Ente los agentes activos que pueden igualmente
contener las composiciones se pueden particularmente citar los
filtros solares, los agentes activos que protegen las proteínas de
la matriz extracelular de los daños UV inducidos, como los
inhibidores de proteasas UV inducidos, particularmente los
inhibidores de metaloproteinasas 1, esta inhibición enzimática
puede expresarse sobre la actividad enzimática pero igualmente sobre
la síntesis del enzima propiamente dicha. Se citará particularmente
los anti-AP1 tales como se ha descrito en la patente
US 5837224 de J. Voorhees y col.
Estos agentes activos pueden ser utilizados en
particular a concentraciones que van del 0,0001% al 5% en peso con
relación al peso total de la composición.
Cuando las composiciones están destinadas para
una aplicación por vía oral, las mismas pueden presentarse bajo las
formas galénicas habituales en este ámbito, tales como los
comprimidos, las cápsulas, los productos bebibles, particularmente
constituidos extemporáneamente, los granulados, los polvos, en los
excipientes habituales para una aplicación de este tipo.
Los ejemplos y composiciones siguientes ilustran
la invención. En las composiciones las proporciones indicadas son
porcentajes en peso, salvo mención contraria.
Células desdiferenciadas de Iris pallida
cultivadas in vitro en condiciones axénicas se recuperaron
después del cultivo en Erlenmeyer o en fermentador por filtración
sobre tamiz de 50 \mum. A 55 g de materia fresca así obtenida, se
añadieron 27,5 ml de agua desmineralizada. El conjunto se trituró en
Turax a 24000 R/min durante 1 minuto a 4ºC (baño de hielo). El
triturado se centrifugó de 15 a 10000 G a 4ºC. El sobrenadante se
filtró a 0,22 \mum (filtración esterilizadora).
El extracto así preparado se conservó a 4ºC.
Incluye aproximadamente 15 g de materia seca por litro y puede
liofilizarse para obtener un extracto seco.
Si el material vegetal es de la planta completa,
se lleva la materia fresca a tratar en función del peso seco para
ponerse en las mismas condiciones de extracción que para in
vitro. Las diferentes partes de la planta se extractaron en
función del peso relativo de cada parte de esta. El tratamiento en
frío permitió congelar las actividades enzimáticas, la filtración
esterilizante evita la degradación de los agentes activos por los
micro-organismos del entorno. Por último, el
vehículo de agua es compatible con los receptores ex vivo y
facilita las formulaciones cosméticas o farmacéuticas. El extracto
puede igualmente ser utilizado en forma de extracto seco.
El extracto de Iris pallida se aplicó en
el ratón hairless SKh/hr1 después de una irradiación por un
simulador solar (Xenon 1000 W (Oriel) equipado con filtros (Oriel
81017 + 81019)) a una dosis conocida como provocante de una
inhibición de la hipersensibilidad de contacto (HSC). La
irradiación, medida con un radiómetro ARCC 1600/OSRAM, fue de 2,0
mW/cm^{2} en UVB y de 9,4 mW/cm^{2} en UVA. Se realizaron
seguidamente biopsias cutáneas 14 días después de la
irradiación.
Los productos aplicados se formularon en un
soporte simple:
\bullet Vehículo testigo: gel
AMPS-604518, vendido por la Sociedad CLAIRIANT
(FRANCIA) bajo la denominación HOSTACERIN AMPS®.
\bulletIris pallida al 5% (extracto
seco) en un gel AMPS-604518.
Los resultados obtenidos muestran que en el
sistema utilizado (cepa murina hairless Sjk/hr1, estimulador solar
(irradiación aguda a una dosis de 2,5 MED), HSC sistémica con DNFB,
la aplicación de un extracto seco de Iris pallida formulado
al 5% en un gel AMPS atenúa significativamente los efectos
inmunosupresores producidos por los UVs medidos por una reacción de
HSC con dinitrofluorobenceno (DNCB).
En efecto, los productos sin tener actividad
estimuladora sobre la reacción de HSC, reducen la
fotoinmunosupresión.
Paralelamente a este examen clínico, se realizó
una medición histológica/bioquímica (número, morfología) de las
células de Langerhans.
En los testigos no protegidos por Iris
pallida aproximadamente un 50% del número de células de
Langerhans desaparecen después de la irradiación UV con para
aquellas que quedan, alteraciones importantes a nivel de la
superficie celular y de la morfología.
El tratamiento por el extracto de Iris
pallida protege la piel de la alteración de las células de
Langerhans inducida por la irradiación ya que el número y el
aspecto morfológico de estas células es idéntico al control (véanse
Documentos fotográficos adjuntos y tabla dada a continuación).
Cuantificación de las células de Langerhans en el
transcurso del tratamiento dado en número de las de Langerhans por
mm^{2}:
| Testigos no irradiados | Testigos irradiados | Tratados no irradiados | Tratados irradiados |
| 1406 \pm 82 | 720 \pm 36 | 1334 \pm 97 | 1515 \pm 112 |
En los testigos irradiados, aproximadamente un
50% de las células de Langerhans desaparecen. Esta desaparición es
inhibida por la aplicación de un gel que contiene un 5% de un
extracto seco de Iris pallida. Por otro lado, la aplicación
del gel de Iris pallida al 5% no tiene influencia sobre el
sistema inmunitario cutáneo cuando este último es alterado por los
UVs.
Ejemplos de formulaciones que ilustran la
invención. Estas composiciones han sido obtenidas por simple
mezclado de los diferentes componentes.
Composición
1
| - Aceite de vaselina | 7,0% | |
| - Extracto del ejemplo 1 (extracto liofilizado) | 5,0% | |
| - Monoestearato de glicerilo, estearato de polietilenglicol (100 OE) | 3,0% | |
| - Polímero carboxivinílico | 0,4% | |
| - Alcohol estearílico | 0,7% | |
| - Proteínas de soja | 3,0% | |
| - NaOH | 0,4% | |
| - Conservante | cs | |
| - Agua | csp | 100,0% |
Esta composición se presenta en forma de una
leche para la cara, con buenas propiedades cosméticas, suave y
cómoda de utilizar.
El pH de la composición es de aproximadamente
5,5.
Composición
2
| - Extracto del ejemplo 1 (extracto liofilizado) | 2,0% | |
| - Palmitato de 2-etil hexilo | 10,0% | |
| - Ciclopentadimetilsiloxano | 20,0% | |
| - Butilenglicol | 5,0% | |
| - Conservante | cs | |
| - Agua | csp | 100,0% |
Esta loción, que no contiene agente tensioactivo,
favorece la desescamación de la piel.
\newpage
Composición
3
| - Palmitato de octilo | 35,0% | |
| - Glicerina | 2,0% | |
| - Extracto del ejemplo 1 (extracto liofilizado) | 3,0% | |
| - Polímero reticulado acrilatos C10-C30/alquilacrilatos | 0,1% | |
| - Trietanolamina | 0,1% | |
| - Acidos aminados de trigo | 1,0% | |
| - Conservante | cs | |
| - Agua | csp | 100,0% |
La leche obtenida, que no contiene agente
tensioactivo, tiene buenas propiedades cosméticas.
Composición
4
| - Glicerina | 10,0% | |
| - Extracto del ejemplo 1 (extracto liofilizado) | 5,0% | |
| - Cocoanfodiacetato disódico | 1,0% | |
| - Conservante | cs | |
| - Agua | csp | 100,0% |
El gel obtenido presenta buenas propiedades
cosméticas.
Composición
5
| - butilenglicol | 7,0% | |
| - Sarcosinato de lauroilo sódico | 4,0% | |
| - Extracto del ejemplo 1 (extracto liofilizado) | 1,5% | |
| - Trietanolamina | 0,8% | |
| - Carbomero | 0,5% | |
| - Conservante | cs | |
| - Agua | csp | 100,0% |
El gel obtenido presenta buenas propiedades
cosméticas.
Claims (6)
1. Utilización de al menos un extracto de células
desdiferenciadas de al menos una Iridácea del género Iris para
preparar una composición destinada para estimular las defensas
inmunitarias de la piel debilitadas por las radiaciones
ultravioleta, induciendo a largo plazo un envejecimiento
fotoinducido.
2. Utilización según la reivindicación
precedente, caracterizada porque el extracto se obtiene por
cultivo in vitro.
3. Utilización según una cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el indicado
extracto es un extracto de un vegetal de una especie seleccionada
entre Iris pallida, Iris florentina o Iris germanica.
4. Utilización según una cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, caracterizada porque en la
composición el indicado extracto de Iridácea se utiliza en su forma
liofilizada en una cantidad que representa de un 0,0001% al 20% del
peso total de la composición.
5. Utilización según la reivindicación anterior,
caracterizada porque en la composición el indicado extracto
de Iridácea se utiliza en una cantidad que representa del 0,001% al
10% del peso total de la composición.
6. Utilización según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 5, caracterizada porque la composición
puede aplicarse por vía tópica u oral.
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|---|---|---|---|
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| EP (1) | EP1174120B1 (es) |
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