ES2251977T3 - Diagnostico de riesgo de una persona de desarrollar retinopatia diabetica. - Google Patents
Diagnostico de riesgo de una persona de desarrollar retinopatia diabetica.Info
- Publication number
- ES2251977T3 ES2251977T3 ES00914228T ES00914228T ES2251977T3 ES 2251977 T3 ES2251977 T3 ES 2251977T3 ES 00914228 T ES00914228 T ES 00914228T ES 00914228 T ES00914228 T ES 00914228T ES 2251977 T3 ES2251977 T3 ES 2251977T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- npy
- diabetic
- baselineskip
- diabetic retinopathy
- prepronpy
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 title claims abstract description 29
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title description 5
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims abstract description 56
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 30
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 claims abstract description 25
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims abstract description 22
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 102100028427 Pro-neuropeptide Y Human genes 0.000 claims description 91
- 101710151321 Melanostatin Proteins 0.000 claims description 52
- URPYMXQQVHTUDU-OFGSCBOVSA-N nucleopeptide y Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 URPYMXQQVHTUDU-OFGSCBOVSA-N 0.000 claims description 49
- 108010087344 preproneuropeptide Y Proteins 0.000 claims description 42
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 17
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims description 17
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 11
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 10
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 10
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 8
- 238000010171 animal model Methods 0.000 claims description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 7
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims description 7
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 6
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 claims description 6
- 101500025020 Mus musculus Neuropeptide Y Proteins 0.000 claims description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 5
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 5
- 101500025005 Homo sapiens Neuropeptide Y Proteins 0.000 claims description 4
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 claims description 4
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 claims description 3
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 17
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 101150035703 NPY gene Proteins 0.000 description 15
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 15
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 13
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 11
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 description 9
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 8
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 8
- 206010054805 Macroangiopathy Diseases 0.000 description 8
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 8
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 8
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 8
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 8
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 8
- 101710095342 Apolipoprotein B Proteins 0.000 description 7
- 102100040202 Apolipoprotein B-100 Human genes 0.000 description 7
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 7
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 6
- 102200150571 rs16139 Human genes 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N (-)-norepinephrine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 4
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 4
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 229960002748 norepinephrine Drugs 0.000 description 4
- SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N norepinephrine Natural products NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 4
- 230000035488 systolic blood pressure Effects 0.000 description 4
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000014882 Carotid artery disease Diseases 0.000 description 3
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 3
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 3
- 210000000467 autonomic pathway Anatomy 0.000 description 3
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 208000037876 carotid Atherosclerosis Diseases 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 238000007894 restriction fragment length polymorphism technique Methods 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 3
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 3
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 208000002705 Glucose Intolerance Diseases 0.000 description 2
- 101100080344 Homo sapiens NPY gene Proteins 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000035487 diastolic blood pressure Effects 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 2
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 230000002267 hypothalamic effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- -1 methoxy, propoxy Chemical group 0.000 description 2
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 2
- BPGXUIVWLQTVLZ-OFGSCBOVSA-N neuropeptide y(npy) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 BPGXUIVWLQTVLZ-OFGSCBOVSA-N 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 2
- 201000009104 prediabetes syndrome Diseases 0.000 description 2
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000002889 sympathetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 1
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 1
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020710 Hyperphagia Diseases 0.000 description 1
- 101000829171 Hypocrea virens (strain Gv29-8 / FGSC 10586) Effector TSP1 Proteins 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 101710203526 Integrase Proteins 0.000 description 1
- 206010022562 Intermittent claudication Diseases 0.000 description 1
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 1
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 1
- 101800003845 Neuropeptide Y Proteins 0.000 description 1
- 102400000064 Neuropeptide Y Human genes 0.000 description 1
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000003797 Neuropeptides Human genes 0.000 description 1
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000018886 Pancreatic Polypeptide Human genes 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 101000983124 Sus scrofa Pancreatic prohormone precursor Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 238000007844 allele-specific PCR Methods 0.000 description 1
- 239000003282 amino acid receptor affecting agent Substances 0.000 description 1
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 1
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 description 1
- 239000002948 appetite stimulant Substances 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000003305 autocrine Effects 0.000 description 1
- 210000003403 autonomic nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 description 1
- 229940097320 beta blocking agent Drugs 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 230000002802 cardiorespiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000007211 cardiovascular event Effects 0.000 description 1
- 230000009084 cardiovascular function Effects 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 210000004004 carotid artery internal Anatomy 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000000546 chi-square test Methods 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 230000009989 contractile response Effects 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000003935 denaturing gradient gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- BOKOVLFWCAFYHP-UHFFFAOYSA-N dihydroxy-methoxy-sulfanylidene-$l^{5}-phosphane Chemical compound COP(O)(O)=S BOKOVLFWCAFYHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 229940030606 diuretics Drugs 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 230000002608 insulinlike Effects 0.000 description 1
- 208000021156 intermittent vascular claudication Diseases 0.000 description 1
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 1
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 208000018769 loss of vision Diseases 0.000 description 1
- 231100000864 loss of vision Toxicity 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-L methylphosphonate(2-) Chemical compound CP([O-])([O-])=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 210000001640 nerve ending Anatomy 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 238000007410 oral glucose tolerance test Methods 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N pentofuranose Chemical group OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 1
- 230000036186 satiety Effects 0.000 description 1
- 235000019627 satiety Nutrition 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000012301 transgenic model Methods 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000006459 vascular development Effects 0.000 description 1
- 239000005526 vasoconstrictor agent Substances 0.000 description 1
- 230000004393 visual impairment Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
Abstract
Un método para diagnosticar la susceptibilidad de una persona diabética a tener un riesgo aumentado de desarrollo de retinopatía diabética, método que comprende determinar si dicho sujeto presenta un polimorfismo en la parte peptídica señal del preproNPY humano, polimorfismo que comprende la sustitución de la leucina de la posición 7 por prolina en la parte peptídica señal de dicho preproNPY, polimorfismo que es indicativo de un riesgo aumentado de desarrollo de retinopatía diabética.
Description
Diagnóstico del riesgo de una persona de
desarrollar retinopatía diabética.
Este invento se refiere a métodos para
diagnosticar la susceptibilidad de una persona diabética a tener un
riesgo aumentado de desarrollo de una retinopatía diabética. El
invento se refiere además a métodos para el tratamiento de personas
a las que se ha diagnosticado un riesgo aumentado de desarrollo de
dicha enfermedad, con objeto de prevenir el desarrollo de dicha
enfermedad. El invento concierne también a métodos para investigar o
explorar productos farmacéuticos u objetos genéticos útiles en el
tratamiento de dicha enfermedad, usando un modelo animal que incluye
un animal transgénico.
El neuropéptido Y (NPY) es un miembro de la
familia de los polipéptidos pancreáticos y un neuromodulador que es
considerablemente secretado por neuronas de los sistemas nerviosos
central y periférico, y es el péptido más abundante en el cerebro y
el corazón (1-4). El NPY es el neuropéptido
orexígeno más potente y puede ejercer una acción inhibidora tónica
sobre la señal de saciedad mediada por leptina
(2-3,5). El NPY estimula la secreción de insulina
(6) y la absorción de glucosa provocada por insulina en ratas
normales (7). Por contraste, la insulina y el factor II de
crecimiento similar a la insulina suprimen la liberación
hipotalámica de NPY (8). En modelos animales de obesidad y diabetes
de tipo 2, una actividad potenciada de neuronas NPY debida a una
resistencia hipotalámica de la inhibición de insulina puede
contribuir a hiperfagia, gasto energético reducido y obesidad (9).
Además, el NPY participa en el control sobre el eje
hipotalámico-hipofisario-suprarrenal
(100). En el sistema cardiovascular, el NPY es un vasoconstrictor,
inhibe la liberación de norepinefrina y potencia la respuesta a
norepinefrina (11). Es interesante que, en la diabetes experimental,
se ha mostrado que las respuestas cardiorrespiratorias al NPY están
alteradas (12-13). Además, el NPY puede tener
propiedades angiogénicas (4) que podrían potenciar el desarrollo de
aterosclerosis. Los muy difundidos efectos del NPY son mediados por
diversos subtipos diferentes de receptores de NPY (14). Los
inventores identificaron muy recientemente un polimorfismo de
leucina7 a prolina7 (Leu7/Pro) bastante común (15). Se halló que
este polimorfismo estaba asociado con niveles séricos
significativamente mayores de colesterol LDL y total,
particularmente en sujetos obesos, en dos poblaciones de estudio
finesas y una holandesa independientes. Además, en una de estas
poblaciones, los niveles de apolipoproteína B estaban elevados en
sujetos no diabéticos con polimorfismo Leu7/Pro (15). Aunque no se
conoce actualmente la ligazón bioquímica y fisiológica entre el
metabolismo del colesterol y el NPY, el polimorfismo Leu7/Pro del
gen NPY debería ser considerado como un nuevo marcador genético de
los niveles elevados de colesterol en sujetos obesos.
En ``Archives of Ophthalmology'', 1.996, volumen
114, páginas 1079-1084, se sugiere que el nivel
elevado de colesterol sérico está asociado con el riesgo de exudados
duros, los cuales, a su vez, están asociados con la pérdida de
visión de los pacientes diabéticos con retinopatía diabética. No se
indica correlación alguna entre el polimorfismo del gen NPY y la
retinopatía diabética.
De acuerdo con un aspecto, el invento trata de un
método para diagnosticar la susceptibilidad de una persona diabética
a tener un riesgo aumentado del desarrollo de una retinopatía
diabética, método que comprende determinar si dicho sujeto presenta
un polimorfismo en la parte peptídica señal del preproNPY humano,
polimorfismo que comprende la sustitución de la leucina de la
posición 7 por prolina en la parte peptídica señal de dicho
preproNPY, polimorfismo que es indicativo de un riesgo aumentado del
desarrollo de una retinopatía diabética.
De acuerdo con otro aspecto, el invento se
refiere al uso de un agente destinado a modular la síntesis, la
liberación o el metabolismo del NPY endógeno, o a interaccionar de
un modo específico en sitios diana de NPY modulando los efectos de
NPY con proteínas receptoras de NPY específicas, en la fabricación
de una preparación farmacéutica para tratar a una persona diabética
a la que se ha diagnosticado un riesgo aumentado del desarrollo de
retinopatía diabética de acuerdo con la reivindicación 1, para la
prevención del desarrollo de la retinopatía diabética, agente que es
una molécula medicinal que interacciona específicamente con un
receptor Y1-Y5, o un oligonucleótido antisentido
complementario del mRNA del NPY mutado.
De acuerdo con un tercer aspecto, el invento se
refiere al uso de un agente adecuado para uso en una específica
terapia génica destinada a reparar la secuencia de NPY mutada, en
que la mutación comprende la sustitución de la leucina de la
posición 7 por prolina en la parte peptídica señal del preproNPY, en
la fabricación de una preparación farmacéutica para tratar a una
persona diabética a la que se ha diagnosticado un riesgo aumentado
del desarrollo de retinopatía diabética de acuerdo con la
reivindicación 1, para la prevención del desarrollo de la
retinopatía diabé-
tica.
tica.
De acuerdo con un cuarto aspecto, el invento se
refiere a un método para investigar o explorar productos
farmacéuticos útiles en el tratamiento de la retinopatía diabética
usando un modelo animal que incluye un animal transgénico, en el que
el animal es un animal no humano, que lleva una secuencia de DNA
humana que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un
prepro-neuropéptido Y (preproNPY) o una parte de la
misma que codifica un péptido NPY humano maduro, en el que el
aminoácido leucina de la posición 7 de la parte peptídica señal de
dicho preproNPY i) está inalterado o ii) ha sido sustituido por
prolina.
De acuerdo con un quinto aspecto, el invento se
refiere a un método para investigar o explorar productos
farmacéuticos útiles en el tratamiento de la retinopatía diabética
usando un modelo animal que incluye un animal transgénico, en el que
el animal es un animal no humano que lleva una secuencia de DNA que
comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una secuencia de
NPY de ratón por lo demás normal o una parte de la misma que
codifica un péptido NPY maduro de ratón, pero en que la secuencia de
nucleótidos que codifica el péptido señal de ratón está sustituida
por una secuencia peptídica señal humana que codifica el péptido
señal humano normal o mutado.
La Figura 1a ilustra esquemáticamente la
estructura molecular del gen NPY humano, el péptido preproNPY y el
péptido NPY maduro;
La Figura 1b muestra la secuencia de nucleótidos
del gen NPY humano. Las letras de caja alta indican secuencias
exónicas y las letras de caja baja secuencias intrónicas. Entre
paréntesis se indican los números de acceso del Genbank. La flecha
muestra la posición en que la timidina (T) del gen normal está
sustituida por citosina (C) para originar el gen mutante. La
secuencia subrayada del exón 2 es la secuencia que codifica el
péptido señal de 28 aminoácidos (el exón 1 es la ID. SEC. nº 1, el
exón 2 es la ID. SEC. nº 2, el exón 3 es la ID. SEC. nº 3, y el exón
4 es la ID. SEC. nº 4); y
La Figura 1c muestra la secuencia de nucleótidos
del mRNA de preproNPY humano (ID. SEC. nº 5, con la secuencia
proteica expuesta en la ID. SEC. nº 6). La flecha muestra la
posición en que la timidina (t) del mRNA normal está sustituida por
citosina (c) para originar el mRNA mutante.
El neuropéptido Y (NPY) es un neurotransmisor de
36 aminoácidos muy presente en los sistemas nerviosos central y
periférico. El NPY ejerce múltiples acciones, las cuales controlan
el equilibrio energético corporal y la función cardiovascular. Los
inventores han demostrado recientemente que los sujetos que tienen
Pro7 en el péptido señal de NPY presentan mayores niveles séricos de
colesterol y apolipoproteína B en comparación con los individuos que
tienen la secuencia peptídica señal de tipo silvestre (Leu7/Leu7).
El presente invento se basa en un estudio sobre la asociación del
polimorfismo de Leu7 a Pro del gen NPY con el grosor de la
íntima-media (IMT; del inglés,
intima-media-thickness) de la carótida común,
evaluado por ultrasonografía transversal procedente del estudio de
seguimiento de 10 años de pacientes a quienes se había diagnosticado
recientemente diabetes de Tipo 2 (81 pacientes, 41 varones, 67,1
años de edad media) y de sujetos no diabéticos (105 sujetos, 48
varones, 65,5 años de edad media), a quienes se había determinado el
genotipo relativo al polimorfismo Leu7Pro en el gen preproNPY. La
frecuencia portadora de la sustitución Pro7 era 9,9% en los
pacientes diabéticos y 14,3% en los sujetos testigo (p = 0,360). El
IMT medio de la carótida común era 1,04 \pm 0,02 en los sujetos
no diabéticos sin polimorfismo Leu7Pro y 1,14 \pm 0,04 mm en
aquellos con él (p = 0,156), y 1,18 \pm 0,03 y 1,58 \pm 0,21 mm
(p = 0,004), respectivamente, en los pacientes diabéticos. En el
análisis de la covarianza del grupo entero, el IMT medio de la
carótida común estaba independientemente asociado con el
polimorfismo Leu7Pro (F = 5,165, p = 0,024). El modelo incluía edad,
sexo, diabetes, enfermedad macrovascular clínica, hábito de fumar,
presión sanguínea sistólica y colesterol-LDL.
Además, los pacientes diabéticos que tenían Pro7 en preproNPY
presentaban retinopatía diabética significativamente más a menudo (p
= 0,04) en comparación con los pacientes con el genotipo Leu7/Leu7.
El presente estudio indica que la presencia de sustitución Pro7 en
el preproNPY está acusadamente asociada con una ateroesclerosis
aumentada de carótida en sujetos diabéticos y no diabéticos, incluso
después del ajuste relativo a factores de riesgo conocidos. Además,
ésta es la primera evidencia de que Pro7 en el preproNPY aumenta el
riesgo de que pacientes diabéticos de tipo 2 desarrollen una
retinopatía diabética.
La secuencia de DNA o el péptido señal mutante o
dicho péptido asociado con cualquier otro producto de escisión de
preproNPY puede ser usado para la exploración de un sujeto con
objeto de determinar si dicho sujeto es un portador de un gen NPY
mutante.
La determinación puede ser llevada a cabo como un
análisis de DNA de acuerdo con métodos bien conocidos, los cuales
incluyen la secuenciación directa de DNA de los genes NPY normal y
mutado, la multiplicación específica de alelo usando la reacción en
cadena de la polimerasa (PCR; del inglés, polymerase
chain reaction), que permite la detección de la
secuencia de NPY normal o mutada, y la detección indirecta del gen
NPY normal o mutado mediante diversos métodos de biología molecular
que incluyen, por ejemplo, el método del polimorfismo de la
conformación de las cadenas sencillas (SSCP; del inglés,
single stranded conformation
polymorphism)-PCR y la electroforesis en gel
con gradiente desnaturalizante (DGGE; del inglés, denaturing
gradient gel electrophoresis). La determinación
del gen NPY normal o mutado puede ser también realizada usando el
método del polimorfismo de la longitud de los fragmentos de
restricción (RFLP; del inglés, restriction fragment
length polymorphism), el cual es particularmente
adecuado para determinar el genotipo de un gran número de
muestras.
La determinación puede ser llevada también a cabo
a nivel del RNA analizando el RNA expresado a nivel tisular usando
diversos métodos. Pueden diseñarse sondas específicas de alelo para
la hibridación. La hibridación puede realizarse, por ejemplo, usando
la transferencia Northern, el ensayo de protección frente a la RNasa
o métodos de hibridación in situ. El RNA procedente del gen
NPY normal o mutado puede ser también analizado convirtiendo primero
el RNA tisular en cDNA y multiplicando luego el cDNA mediante un
método de PCR específica de alelo y llevando a cabo el análisis como
para DNA genómico, como se mencionó anteriormente.
Alternativamente, la determinación puede ser
llevada a cabo como un inmunoensayo en que una muestra es puesta en
contacto con un anticuerpo capaz de unirse al péptido señal o a
dicho péptido asociado con cualquier otro producto de escisión de
preproNPY.
Los anticuerpos pueden ser generados contra
preproNPY normal o mutado o, más específicamente, contra la parte
peptídica señal normal o mutada del NPY. La producción de
anticuerpos puede realizarse in vivo en animales
experimentales para obtener anticuerpos policlonales, o in
vitro usando líneas celulares para obtener anticuerpos
monoclonales.
Una persona diabética a la que se ha
diagnosticado un riesgo aumentado del desarrollo de retinopatía
diabética puede ser tratada para la prevención del desarrollo de
dicha enfermedad al administrar a dicho sujeto una cantidad eficaz
de un agente que contrarresta la influencia del gen NPY mutado. Esto
puede realizarse mediante una específica terapia génica destinada a
reparar la secuencia de NPY mutada, o mediante la administración de
farmacoterapias que están destinadas a modular la síntesis, la
liberación o el metabolismo del NPY endógeno, o a interaccionar de
un modo específico en sitios diana de NPY modulando los efectos de
NPY con proteínas receptoras de NPY específicas. Actualmente se han
clonado y caracterizado cinco subtipos diferentes de receptores de
NPY (receptores Y1-Y5) y se han sintetizado
moléculas medicinales que interaccionan específicamente con estos
receptores de NPY [L. Ny y L. Grundemar, Neuroscience Letters
(1.997), 221 (2,3), 113-116]. La farmacoterapia
descrita no sólo se limita a estos receptores o mecanismos
mencionados, sino que abarca también otros receptores de NPY y
mecanismos relacionados por descubrir que incluyan la secreción de
NPY.
Contrarrestar la influencia del gen NPY mutado en
un paciente usando una terapia antisentido o un cambio o reemplazo
génico incluye la corrección específica de la mutación relacionada
con la enfermedad o la inactivación, dirigida al sitio, del alelo
mutante por recombinación homóloga.
La terapia antisentido se refiere a métodos
destinados a alterar la traducción por medio de interacciones
directas con RNA mensajero (mRNA) diana. Esto puede ser llevado a
cabo aplicando un oligonucleótido específico, que forma pares de
bases de Watson-Crick con el RNA mensajero cuya
función se va a impedir. La inhibición de la expresión génica
mediante un oligonucleótido antisentido depende de la capacidad del
oligonucleótido antisentido para unirse a una secuencia de mRNA
complementaria y evitar la traducción del mRNA. Utilizando una
estrategia basada en oligonucleótidos (Giles et al., 1.995;
Schwab et al., 1.994; Yoon et al., 1.996), es posible
corregir una sola base mutante de un gen. Basta un oligonucleótido
corto, de 7 u 8 bases, para obtener una actividad y una
especificidad antisentido, las cuales dependen en gran medida de las
secuencias flanqueadoras del RNA diana. Debería bastar la unión para
activar una unión estable y una escisión mediada por RNasa H.
Los presentes inventores están contrarrestando la
influencia del gen NPY mutado usando un pequeño oligonucleótido
específico de alelo, el cual incluye la secuencia de la parte
mutada: ...cga ct/cg ggg... (base mutada marcada en letra negrita).
Esto puede ser llevado a cabo usando oligonucleótidos de diferentes
longitudes, pero todos los cuales reconocen la secuencia de la base
mutada. De acuerdo con la prevista estructura secundaria de los
mRNAs de preproNPY (Figuras 1 y 2), la mejor secuencia diana es
entre -9 y +2 bases a un lado y otro de la mutación, es decir, la
secuencia que se dirige a 3'-ac aag cga ctg
g-5'. Esta secuencia contiene "bulbos", los
cuales son conocidos por potenciar la unión del oligonucleótido al
mRNA diana.
Es posible usar oligonucleótidos no modificados,
pero, para aumentar su estabilidad, resistencia a nucleasas y
penetración en el núcleo, pueden usarse diversas modificaciones del
oligonucleótido. Se ha sintetizado un número relativamente grande de
pirimidinas modificadas, principalmente en puntos
C-2, C-4, C-5 y
C-6, pirimidinas que se han incorporado a
nucleótidos. También pueden sintetizarse compuestos análogos de
purina e incorporarse a oligonucleótidos. La posición 2' del resto
de azúcar, el anillo de pentofuranosa, es sustituida con grupos
metoxilo, propoxilo, O-alcoxilo o metoxietoxilo. Se
ha construido un nueva cadena principal para oligonucleótidos en
que que se sustituye el fosfato o la unidad de
azúcar-fosfato, tales como
oligonucleótidos-fosfotioato modificados con
C-5 propinilpirimidina. También pueden usarse
oligonucleótidos quiméricos con extremos 5' y 3' modificados con
enlaces internucleótidos, tal como metilfosforotioato, fosfodiéster
o metilfosfonato. Una técnica relativamente nueva se basa en
oligonucleótidos LNA (ácido nucleico bloqueado; del inglés,
locked nucleic acid) conformacionalmente
restringidos y ácidos nucleicos peptídicos. Las ribozimas
biodiseñadas son estructuralmente diferentes, pero su especificidad
también depende del reconocimiento de la secuencia de mRNA
específica.
Mediante las técnicas de reemplazo génico o
cambio génico se inactiva la secuencia génica mutada y se introduce
una corregida. Esto puede ser llevado a cabo transfectando un gen
exógeno con la secuencia de codificación normal y bloqueando la
secuencia de codificación mutante con un oligonucleótido
antisentido. También podría usarse una técnica consistente sólo en
introducir una secuencia normal corregida sin alterar la secuencia
mutada. Esto podría usarse en células heterocigotas, es decir,
células que llevan un alelo normal y un alelo mutado, para dar lugar
a una sobrexpresión de alelos normales. También podrían tratarse
células mutantes homocigotas para dar lugar a un efecto positivo
dominante, es decir, el alelo normal se expresa en mayor grado que
el alelo mutante.
La influencia de la secuencia de NPY mutada sobre
la función del gen NPY puede ser investigada en animales
transgénicos. Puede generarse un animal transgénico usando una
metodología de recombinación homóloga específica. Tanto la secuencia
normal como la mutada del péptido señal de NPY humano [o cualquier
secuencia de DNA que comprenda una secuencia de nucleótidos que
codifica un prepro-neuropéptido Y (preproNPY) o una
parte de la misma que codifica la secuencia de aminoácidos del
péptido NPY maduro humano o maduro de ratón, en el que i) el
aminoácido leucina de la posición 7 de la parte peptídica señal de
dicho preproNPY ha sido sustituido por prolina o ii) el aminoácido
leucina de la posición 7 de la parte peptídica señal de dicho
preproNPY está inalterado] se introducirán en la secuencia del gen
NPY para reemplazar la secuencia peptídica señal endógena. Bajo
estas condiciones, el gen NPY endógeno actúa por lo demás
normalmente, pero la síntesis del preproNPY es regulada por la
secuencia normal o mutada del péptido señal del NPY humano. Este
modelo transgénico puede ser utilizado para investigar de una manera
muy específica la importancia fisiológica del gen NPY mutado. Además
proporcionará un modelo preclínico ideal para investigar y explorar
nuevas moléculas medicinales, las cuales se crean para modificar la
influencia del gen NPY mutado.
El invento se describe con mayor detalle mediante
los experimentos siguientes.
Parte
experimental
Este estudio era una análisis transversal del
examen de 10 años de una cohorte de pacientes con diabetes de Tipo 2
y sujetos testigo no diabéticos, seguido desde el momento del
diagnóstico, como se describió previamente con detalle
(16-22). En resumen, el estudio original comprendía
133 pacientes con diabetes de Tipo 2 recién diagnosticada, con una
edad de 45 a 64 años, y 144 sujetos testigo no diabéticos
aleatoriamente seleccionados del registro de la población. El
estudio de referencia se llevó a cabo durante los años
1.979-81, y todos los sujetos fueron recogidos de
una zona definida de Finlandia Oriental (16). Todos los sujetos
fueron invitados a los exámenes de seguimiento de 5 y 10 años
durante los años 1.985-86 (17) y
1.991-92 (18-19), respectivamente.
Durante el seguimiento de 10 años murieron 36 (27%) pacientes
diabéticos y ocho (6%) sujetos no diabéticos, principalmente a causa
de enfermedades cardiovasculares (18). En el examen de 10 años, se
llevaron a cabo exámenes ultrasonográficos de carótida
(20-21) a 84 individuos (63%) de la población
diabética original y 119 individuos (83%) de la población no
diabética y se realizó un análisis genotípico a todos estos salvo a
tres sujetos diabéticos y un sujeto no diabético. El estudio fue
aprobado por el Comité de Ética de la Universidad de Kuopio.
Previamente (18-22) se han
descrito con detalle la evaluación del historial médico y las
enfermedades cardiovasculares, el uso de medicación, el hábito de
fumar, la presión sanguínea, el índice de masa corporal (BMI; del
inglés, body-mass index) y la relación entre
las circunferencias de la cintura y la cadera. El grupo
"enfermedad macrovascular" se refiere a sujetos con cualquier
evidencia previamente definida de infarto de miocardio, accidente
cerebrovascular o claudicación intermitente. Se llevó a cabo una
prueba de tolerancia oral a la glucosa usando una dosis de glucosa
de 75 g. La tolerancia alterada a la glucosa en los sujetos testigo
fue clasificada de acuerdo con los criterios de la OMS (23). También
se han presentado previamente (19-22) la recogida de
muestras de sangre y la medición de lípidos y lipoproteínas séricas
por métodos de ultracentrifugación y precipitación, apolipoproteína
B, glucosa plasmática e insulina plasmática.
El genotipo de preproNPY fue determinado por un
investigador desconocedor del fenotipo, mediante un análisis del
polimorfismo de la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP)
a partir de DNA extraído de la sangre periférica de los sujetos. En
resumen, el polimorfismo aparece como una sustitución de timidina
(1.128) a citosina (1.128) generando un sitio de restricción Bsi EI,
el cual fue usado para determinar el genotipo de los sujetos en
cuanto al polimorfismo Leu7Pro, como se describió previamente (15).
Los productos de PCR fueron sometidos a digestión con Bsi EI (New
England Biolabs, Inc., Beverley, Massachusetts, EE.UU.), y los
productos de digestión fueron analizados por electroforesis en un
gel de agarosa al 2%.
El protocolo para formación de imágenes
ultrasonográficas de alta resolución y modo B fue creado para
asegurar la identificación válida y fiable de referencias de la
arteria carótida y la definición de interfases de pared cercana y
pared lejana, como se describió previamente con mayor detalle
(20-21, 24). En resumen, la arteria carótida fue
dividida en dos segmentos basándose en la anatomía y la geometría
arteriales. Las características anatómicas esenciales que definían
estos segmentos fueron el origen proximal del bulbo (bifurcación de
la carótida) y la punta del divisor de flujo, el cual separa las
arterias carótidas internas de las externas. En las imágenes
arteriales longitudinales, las interfases
media-adventicia y lumen-íntima sobre la pared
lejana eran los límites anatómicos específicos que definían el IMT.
Dos sonógrafos diplomados llevaron a cabo los exámenes ultrasónicos
de carótida. Se usó un dispositivo ultrasónico Biosound Phase Two
provisto de una sonda de matriz anular de 10 MHz. Los exámenes
videograbados fueron cuantitativamente analizados en un laboratorio
central usando un procedimiento de lectura asistido por ordenador
(24-25). El máximo medio de la pared lejana fue
usado bilateralmente como medición del IMT de la carótida común.
A priori, la hipótesis de los inventores
era que los sujetos que tienen sustitución Pro7 en preproNPY tienen
un mayor IMT medio en comparación con los sujetos que tienen
preproNPY de tipo silvestre (Leu7/Leu7). Las asociaciones del
polimorfismo Leu7Pro con variables continuas fueron calculadas
usando la prueba t de Student y, para variables categorizadas,
mediante la prueba de Chi cuadrado. La asociación del IMT de la
carótida común con el polimorfismo Leu7Pro fue adicionalmente
analizada mediante un análisis de la covarianza (ANCOVA) que
controla los efectos de covariables seleccionadas. Las variables con
distribución sesgada (por ejemplo, IMT de la carótida, insulina)
fueron analizadas después de una transformación logarítmica. Un
valor de p igual o menor que 0,05 fue considerado estadísticamente
significativo. Todos los análisis estadísticos se llevaron a cabo
con procedimientos de SPSS-Unix.
La frecuencia de las frecuencias de alelo C1128
no era significativamente diferente entre los grupos no diabético
(14,3%) y diabético (9,9%, p = 0,36). En las Tablas
1a-b se presentan las características de los sujetos
no diabéticos y diabéticos para los grupos Leu7/Leu7 y Pro7/-. No se
hallaron diferencias de edad, sexo, índice de masa corporal,
relación de cintura a cadera, nivel de presión sanguínea ni
frecuencia de enfermedad macrovascular entre los grupos genotípicos
de los grupos no diabético y diabético. El nivel de
colesterol-LDL era mayor en los sujetos no
diabéticos con polimorfismo Leu7/Pro que en aquellos sin él (p =
0,05), como los inventores han comunicado previamente (15). Aunque
los niveles de apolipoproteína B tendían a ser mayores en el grupo
Pro7/- que en el grupo Leu7/Leu7, las diferencias no eran
estadísticamente significativas. El estudio previo de los inventores
incluía sólo sujetos delgados sin ninguna medicación de la que se
supiera que afectaba al metabolismo del colesterol (como
bloqueadores beta o diuréticos), del presente grupo no diabético
(15). No se hallaron diferencias evidentes en otras lipoproteínas y
resulta interesante que, en los pacientes diabéticos, no hubiera
asociación con el colesterol sérico, ni siquiera cuando los sujetos
fueron analizados de acuerdo con el índice de masa corporal mediano
(datos no mostrados).
El IMT medio de la carótida común era
aproximadamente 25% mayor en los pacientes diabéticos con alelo Pro7
que en aquellos sin él (p = 0,004), y el respectivo aumento de IMT
era 9% en los sujetos no diabéticos (p = 0,156). En el análisis de
la covarianza de ambos grupos combinados (Tabla 2), los elementos
pronosticadores independientes del IMT de la carótida común eran la
edad, el alelo Pro7, la diabetes, la presión sanguínea sistólica y
la enfermedad macrovascular. Además, aquellos pacientes diabéticos
que tenían la sustitución Pro7 en el preproNPY presentaban una
frecuencia significativamente aumentada de retinopatía diabética (p
= 0,04) cuando se comparaban con diabéticos con el genotipo
Leu7/Leu7.
Los presentes hallazgos basados en sujetos
fineses no diabéticos y diabéticos de edad indican que el alelo Pro7
de preproNPY está intensamente asociado con aterosclerosis aumentada
de carótida, y aún más acusadamente en pacientes diabéticos. Este
hallazgo tiene importancia porque un aumento del grosor del IMT de
las arterias carótidas aumenta de forma lineal el riesgo de procesos
cardiovasculares incluso antes de manifestaciones clínicas de
enfermedades cardiovasculares (26). Además, la presencia de
polimorfismo Pro7 en el preproNPY estaba significativamente asociada
con el índice de retinopatía diabética. El alelo Pro7 también estaba
asociado con elevados niveles séricos de
colesterol-LDL y apolipoproteína B en sujetos no
diabéticos delgados (15), pero esto no se halló en pacientes
diabéticos independientemente de su peso corporal.
La diabetes de Tipo 2 es un estado caracterizado
por un riesgo notablemente aumentado de aterosclerosis, y, aunque
factores de riesgo conocidos contribuyen en gran medida a la
aparición de enfermedades macrovasculares diabéticas (27), queda sin
explicar una gran proporción de esta carga vascular y está
justificada la búsqueda de otros posibles contribuyentes
ambientales, metabólicos y genéticos. En este estudio, los
inventores muestran por vez primera que pacientes diabéticos con el
alelo Pro7 tienen un mayor IMT de carótida que aquellos con el
genotipo Leu7/Leu7. Aunque este hallazgo se basaba en un número
limitado de sujetos, la falta de asociación del alelo Pro7 con otros
factores de riesgo medidos en pacientes diabéticos hace el hallazgo
más intrigante. Puesto que el grupo testigo no diabético incluía
sujetos con tolerancia alterada a la glucosa, como se hace en
cualquier estudio basado en poblaciones, y, por lo tanto, la
tolerancia a la glucosa es de algún modo una variable continua en
esta población de estudio, se combinaron los grupos con objeto de
aumentar la potencia estadística del estudio para el análisis de la
covarianza. En este análisis, la edad, la diabetes, la presión
sanguínea sistólica y la enfermedad macrovascular clínica eran, como
se comunicó previamente (21), poderosas variables explicativas del
IMT de carótida. Es interesante resaltar que el efecto del genotipo
de NPY permaneció estadísticamente significativo en este análisis.
Otros factores de riesgo cardiovascular, salvo la insulina en ayunas
en sujetos no diabéticos, no estaban asociados con el genotipo de
NPY en ningún grupo. La mortalidad selectiva puede causar un sesgo
en la interpretación, como en cualquier análisis transversal. Sin
embargo, puesto que los niveles de colesterol-LDL
fueron constantemente mayores durante el siguimiento completo de 10
años en los sujetos testigo no diabéticos delgados con el alelo Pro7
y, por otra parte, el efecto genotípico sobre el IMT de carótida era
más acusado en pacientes diabéticos que presentaban una elevada
mortalidad cardiovascular desde el momento del diagnóstico (18), es
probable que este estudio subestime esta asociación.
¿Por qué podría entonces el NPY potenciar el
desarrollo de aterosclerosis? En primer lugar, este efecto puede ser
mediado por los efectos del genotipo de preproNPY sobre el
metabolismo del colesterol-LDL (15). Sin embargo,
este efecto es modulado por el peso corporal (15) y, como se dedujo
del presente estudio, no se vio efecto alguno en los pacientes
diabéticos de Tipo 2 a este respecto (un análisis más detallado de
lipoproteínas evaluado transversal o longitudinalmente no
proporcionó más ideas a este respecto). En segundo lugar, el NPY
puede tener propiedades angiogénicas que podrían estar implicadas en
el desarrollo de aterosclerosis. Se ha mostrado que el NPY actúa
como un mitógeno del músculo liso (28) para estimular la fijación,
la migración, la síntesis de DNA (29) y la formación de tubos
capilares por células endoteliales humanas (4). Una proporción menor
del nivel de NPY circulante procede de células endoteliales, y este
NPY endotelialmente derivado puede actuar como un factor angiogénico
autocrino incluso en concentraciones bajísimas (4). Por lo tanto,
los sujetos con sustitución Pro7 en preproNPY pueden estar
predispuestos a un engrosamiento aumentado de la pared arterial,
visto como un engrosamiento aumentado de la
íntima-media de las arterias carótidas, a causa de
la función alterada del NPY endotelial. En tercer lugar, el NPY es
un importante modulador del sistema nervioso autónomo. La mayoría
del NPY circulante procede de las terminaciones de nervios
simpáticos perivasculares, y el nivel de NPY está correlacionado con
los de norepinefrina (30). Una disfunción nerviosa autónoma es un
elemento pronosticador independiente de mortalidad cardiovascular en
pacientes con diabetes de Tipo 2, como se demostró a partir de esta
población de estudio (22). Los mecanismos presentes tras las
enfermedades cardiovasculares y la disfunción nerviosa autónoma son
especulativos, pero observaciones no publicadas de los inventores
sugieren que la regulación autónoma cardiaca está alterada en los
sujetos con dicha sustitución Pro7 en el preproNPY. Por lo tanto,
los inventores sugieren que la aterosclerosis puede estar asociada
con un gen o genes implicados en el desarrollo vascular, el
metabolismo lipídico y la función nerviosa autónoma, y la variante
génica de NPY recientemente hallada (15) es, a este respecto, la
primera en que se ha mostrado una relación con la aterosclerosis
acelerada.
En conclusión, estos resultados indican que la
presencia de sustitución Pro7 en el preproNPY está asociada con
aterosclerosis de carótida ultrasonográficamente evaluada, en
sujetos fineses diabéticos y no diabéticos. Además, este estudio
proporciona la primera evidencia de que la Pro7 en el preproNPY está
también asociada con un índice aumentado de retinopatía diabética en
pacientes con diabetes mellitus no dependiente de insulina (diabetes
de Tipo 2), la cual podría ser una posible diana para el desarrollo
de fármacos.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Esquema pasa a página
siguiente)
\newpage
Esquema
1
Estructura secundaria prevista del mRNA de
preproNPY. El esquema muestra la estructura prevista del extremo 5'
(bases 1 a 138) de la secuencia completa del mRNA de preproNPY,
publicada en el Acceso nº K01911 de GenBank. La estructura
secundaria fue prevista usando el programa MFOLD del Grupo
Informático de Genética de la Universidad de Wisconsin.
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
Esquema
2
Estructura secundaria prevista del mRNA de
preproNPY. El esquema muestra la estructura prevista del extremo 5'
(bases 1 a 138) de la secuencia completa del mRNA de preproNPY,
publicada en el Acceso nº K01911 de GenBank. La estructura
secundaria fue prevista usando el programa MFOLD del Grupo
Informático de Genética de la Universidad de Wisconsin. La base
mutada T a C es la base número 106.
\vskip1.000000\baselineskip
| Característica | Leu7/Leu7 n = 90 | Pro7/- n = 15 | Valor de p |
| Edad (años) | 65,5 \pm 0,6 | 65,5 \pm 1,1 | 0,982 |
| Sexo masculino (n, %) | 43 (48) | 5 (33) | 0,298 |
| Índice de masa corporal (kg/m^{2}) | 27,8 \pm 0,5 | 28,4 \pm 1,2 | 0,611 |
| Enfermedad macrovascular (n, %) | 11 (12) | 4 (27) | 0,139 |
| Historial de fumador (n, %) | 23 (26) | 5 (33) | 0,528 |
| Tratamiento para hipertensión (n, %) | 26 (29) | 6 (40) | 0,387 |
| Presión sanguínea sistólica (mm de Hg) | 149 \pm 2 | 148 \pm 3 | 0,863 |
| Presión sanguínea diastólica (mm de Hg) | 85 \pm 1,1 | 85 \pm 3 | 0,847 |
| Insulina sérica en ayunas (mU/l) | 11,0 \pm 0,6 | 14,8 \pm 2,2 | 0,056 |
| Tolerancia alterada a la glucosa (n, %) | 11 (12) | 1 (7) | 0,531 |
| Media del IMT de la carótida común (mm) | 1,04 \pm 0,02 | 1,14 \pm 0,4 | 0,156 |
| Apolipoproteína B sérica (mg/l) | 1,04 \pm 0,03 | 1,12 \pm 0,08 | 0,285 |
| Colesterol-HDL sérico (milimoles/l) | 1,34 \pm 0,03 | 1,27 \pm 0,08 | 0,403 |
| Colesterol-LDL sérico (milimoles/l) | 4,11 \pm 0,09 | 4,61 \pm 0,30 | 0,05 |
| Colesterol total sérico (milimoles/l) | 6,29 \pm 0,11 | 6,72 \pm 0,37 | 0,153 |
| Triglicéridos séricos (milimoles/l) | 1,81 \pm 0,12 | 1,65 \pm 0,18 | 0,811 |
| Relación de cintura a cadera | 0,91 \pm 0,01 | 0,91 \pm 0,03 | 0,926 |
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
| Característica | Leu7/Leu7 n = 73 | Pro7/- n = 8 | Valor de p |
| Edad (años) | 67,1 \pm 0,7 | 66,5 \pm 1,2 | 0,765 |
| Sexo masculino (n, %) | 36 (49) | 5 (63) | 0,479 |
| Índice de masa corporal (kg/m^{2}) | 29,4 \pm 0,6 | 27,6 \pm 4,1 | 0,344 |
| Enfermedad macrovascular (n, %) | 28 (38) | 5 (63) | 0,187 |
| Historial de fumador (n, %) | 25 (34) | 2 (25) | 0,598 |
| Tratamiento para hipertensión (n, %) | 40 (55) | 5 (63) | 0,677 |
| Presión sanguínea sistólica (mm de Hg) | 154 \pm 2,8 | 150 \pm 10,3 | 0,637 |
| Presión sanguínea diastólica (mm de Hg) | 84 \pm 2 | 87 \pm 4 | 0,482 |
| Insulina sérica en ayunas (mU/l) | 15,0 \pm 0,9 | 15,7 \pm 3,7 | 0,823 |
| Media del IMT de la carótida común (mm) | 1,18 \pm 0,03 | 1,58 \pm 0,21 | 0,004 |
| Apolipoproteína B sérica (mg/l) | 1,17 \pm 0,03 | 1,00 \pm 0,09 | 0,10 |
| Colesterol-HDL sérico (milimoles/l) | 1,11 \pm 0,03 | 1,27 \pm 0,12 | 0,142 |
| Colesterol-LDL sérico (milimoles/l) | 4,09 \pm 0,10 | 3,66 \pm 0,27 | 0,204 |
| Colesterol total sérico (milimoles/l) | 6,44 \pm 0,16 | 5,95 \pm 0,36 | 0,325 |
| Triglicéridos séricos (milimoles/l) | 2,62 \pm 0,22 | 2,09 \pm 0,34 | 0,455 |
| Relación de cintura a cadera | 0,94 \pm 0,01 | 0,98 \pm 0,03 | 0,222 |
| Factor de riesgo | Valor de F | Significación |
| Edad | 7,744 | 0,006 |
| Sexo | 2,866 | 0,092 |
| Diabetes | 3,960 | 0,048 |
| Leu7/Pro en NPY | 5,165 | 0,024 |
| Enfermedad macrovascular | 4,278 | 0,040 |
| Historial de fumador | 2,225 | 0,138 |
| Presión sanguínea sistólica | 5,754 | 0,018 |
| Colesterol-LDL | 0,142 | 0,707 |
| Interacción doble: diabetes X NPY Leu7/Pro, F = 0,174, p = 0,677 |
\vskip1.000000\baselineskip
1. E. E. Benarroch: Neuropeptides in the
sympathetic system: presence, plasticity, modulation, and
implications. Ann. Neurol. 36: 6-13,
1.994.
2. A. Tomaszuk, C. Simpson, G.
Williams: Neuropeptide Y, the hypothalamus and the regulation
of energy homeostasis. Horm. Res. 46: 53-8,
1.996.
3. R. D. Palmiter, J. C. Erickson,
G. Hollopeter, S. C. Baraban, M. W. Schwatrz:
Life without neuropeptide Y. Recent Prog. Horm. Res. 53:
163-99, 1.998.
4. Z. Zukowska-Grojec, E.
Karwatowska-Prokopczuk, W. Rose, J.
Rone, S. Movafagh, H. Ji, Y. Yeh, W. T.
Chen, H. K. Kleinman, E. Grouzmann, D. S.
Grant: Neuropeptide Y: a novel angiogenic factor from the
sympathetic nerves and endothelium. Circ. Res. 83:
187-95, 1.998.
5. A. Sahu, S. P. Kalra:
Neuropeptide regulation of feeding behaviour: Neuropeptide Y: TEM 4:
217-224, 1.993.
6. J. H. Moltz, J. K. McDonald:
Neuropeptide Y: direct and indirect action on insulin secretion in
the rat. Peptides 6: 1.155-1.159,
1.985.
7. R. Vettor, C. Pagano, M.
Granzotto, P. Englaro, P. Angeli, W. F.
Blum, G. Federspil, F.
Rohner-Jeanrenaud, B. Jeanrenaud:
Effects of intravenous neuropeptide Y on insulin secretion and
insulin sensitivity on skeletal muscle in normal rats.
Diabetologia 41: 1.361-7, 1.998.
8. A. Sahu, M. G. Dube, C. P.
Phelps, C. A. Sninsky, P. S. Kalra, S. P.
Kalra: Insulin and insulin-like growth factor
II suppress neuropeptide Y release from the nerve terminals in the
paraventricular nucleus: a putative hypothalamic site for energy
homeostasis. Endocrinology 136: 5.718-24,
1.995.
9. H. M. Prankish, S. Dryden, D.
Hopkins, Q. Wang, G. Williams: Neuropeptide Y,
the hypothalamus, and diabetes: insights into the central control of
metabolism. Peptides 16: 757-71,
1.995.
10. C. Wahlestedt, G. Skagerberg,
R. Ekman, M. Heilig, F. Sundler, R.
Hakanson: Neuropeptide Y (NPY) in the area of the
hypothalamic paraventricular nucleus activates the
pituitary-adrenocortical axis in the rat. Brain
Res. 417: 33-38, 1.987.
11. J. Shine, E. K. Potter, T.
Biden, L. A. Selbie, H. Herzog: Neuropeptide Y and
regulation of the cardiovascular system. J. Hypertens.
(Supl.) 12: S41-S45, 1.994.
12. J. C. Dunbar, E. Ergene, G. F.
Anderson, R. A. Barraco: Decreased cardiorespiratory
effects of neuropeptide Y in the nucleus tractus solitarius in
diabetes. Am. J. Physiol. 262: R865-71,
1.992.
13. H. Lind, D. Erlinge, J.
Brunkwall, L. Edvinsson: Selective attenuation of
neuropeptide-Y-mediated contractile
responses in blood vessels from patients with diabetes mellitus.
Clin. Auton. Res. 5: 191-7, 1.995.
14. D. Larhammar, C. Söderberg, I.
Lundell: Evolution of the neuropeptide Y family and its
receptors. Ann. NY Acad. Sci. 839: 35-40,
1.998.
15. M. K. Karvonen, U. Pesonen, M.
Koulu, L. Niskanen, M. Laakso, A.
Rissanen, J. M. Dekker, L. M. Hart, R. Valve,
M. I. J. Uusitupa: Association of a
leucine(7)-to-proline(7)
polymorphism in the signal peptide of neuropeptide Y with high serum
cholesterol and LDL cholesterol levels. Nat. Med. 4:
1.434-1.437, 1.998.
16. M. Uusitupa, O. Siitonen, A.
Aro, K. Pyörälä: Prevalence of coronary heart disease,
left ventricular failure and hypertension in
middle-aged, newly diagnosed type 2
(non-insulin-dependent) diabetic
subjects. Diabetologia 28: 22-27,
1.985.
17. L. K. Niskanen, M. I. Uusitupa,
H. Sarlund, O. Siitonen, K. Pyörälä:
Five-year follow-up study on plasma
insulin levels in newly diagnosed NIDDM patients and
non-diabetic subjects. Diabetes Care 13:
41-48, 1.990.
18. M. I. J. Uusitupa, L. K.
Niskanen, O. Siitonen, E. Voutilainen, K.
Pyörälä: Ten-year cardiovascular mortality in
relation to risk factors and abnormalities in lipoprotein
composition in type 2
(non-insulin-dependent) diabetic and
non-diabetic subjects. Diabetologia 36:
1.175-1.184, 1.993.
19. L. Niskanen, M. Uusitupa, J.
Karjalainen, O. Siitonen: Metabolic evolution of Type
2 diabetes - 10-year follow-up
study. J. Intern. Med. 236: 263-270,
1.994.
20. M. Uusitupa, L. Niskanen, J.
Luoma, M. Mercouri, R. Rauramaa, S.
Ylä-Herttuala: Autoantibodies against oxidized LDL as
predictors of atherosclerotic vascular disease in
non-insulin-dependent diabetes
mellitus. Arterioscl. & Thromb. & Vasc. Biol. 16:
1.236-1.242, 1.996.
21. L. Niskanen, R. Rauramaa, H.
Miettinen, S. M. Haffner, M. Mercuri, M.
Uusitupa: Carotid artery intima-media
thickness in elderly patients with NIDDM and in nondiabetic
subjects. Stroke 27: 1.986-1.992,
1.996.
22. J. Töyry, L. Niskanen, M.
Mäntysaari, E. Länsimies, M. Uusitupa:
Occurrence, predictors, and clinical significance of autonomic
neuropathy in NIDDM: 10-year
follow-up from the diagnosis. Diabetes 45:
308-315, 1.996.
23. Organización Mundial de la Salud. Diabetes
mellitus: report of a WHO Study Group. Geneva: World Health Org.,
Tech. Rep. Ser., nº 727, 1.985.
24. M. Mercuri, M. G. Bond, F. T.
Nichols, A. A. Carr, J. M. Flack, R.
Byington, J. Raines, para el Grupo MIDAS. Baseline
reproducibility of B-mode ultrasound imaging
measurements of carotid intimal media thickness: the Multicenter
Isradipine Diuretic Atherosclerosis Study (MIDAS). J. Cardiovasc.
Diagnosis Procedures 11: 241-252,
1.993.
25. R. Rauramaa, S. Väisänen, M.
Mercuri, T. Rankinen, I. Penttilä, M. G.
Bond: Association of risk factors and body iron status to
carotid atherosclerosis in middle-aged Eastern
Finnish men. Eur. Heart J. 15: 1.020-1.027,
1.994.
26. D. H. O'Leary, J. F. Polak, R.
A. Kronmal, T. A. Manolio, G. L. Burke, S. K.
J. Wolfon. Carotid-artery intima and media
thickness as a risk factor for myocardial infarction and stroke in
older adults. Cardiovascular Health Study Collaborative Research
Group. N. Engl. J. Med. 1.999; 340:
14-22.
27. J. Stamler, O. Vaccaro, J. D.
Neaton, D. Wentworth para el Multiple Risk Factor
Intervention Trial Research Group: Diabetes, other risk factors and
12-years cardiovascular mortality for men screened
in the Multiple Risk Factor Intervention Trial. Diabetes Care
16: 434-444, 1.993.
28. Z. Zukowska-Grojec, P.
Pruszczyk, C. Colton, J. Yao, G. H.
Shen, A. K. Myers, C. Wahlestedt: Mitogenic
effect of neuropeptide Y in rat vascular smooth muscle cells.
Peptides 1.993; 14: 263-268.
29. Y. Shigeri, M. Fujimoto:
Neuropeptide Y stimulates DNA synthesis in vascular smooth muscle
cells. Neurosci. Lett. 1.993; 149:
19-22.
30. J. M. Lundberg, A.
Franco-Cereceda, A. Hemsen, J. S.
Lacroix, J. Pemow: Pharmacology of noradrenaline and
neuropeptide tyrosine (NPY)-mediated sympathetic
cotransmission. Fundam. Clin. Pharmacol. 4:
373-391, 1.990.
<110> Hormos Medical Oy Ltd
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<120> Diagnóstico del riesgo de una persona
en cuanto a desarrollar aterosclerosis o retinoptía diabética
basándose en el polimorfismo de Leucina 7 a Prolina 7 en el gen del
prepro-neuropéptido Y
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<130> AP2617
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<140>
\vskip0.400000\baselineskip
<141>
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<150> US 09/291.994
\vskip0.400000\baselineskip
<151>
15-04-1.999
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 6
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<170> PatentIn Ver. 2.0
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 325
\vskip0.400000\baselineskip
<212> DNa
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400>1
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 2
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 247
\vskip0.400000\baselineskip
<212> DNA
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 2
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 3
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 142
\vskip0.400000\baselineskip
<212> DNA
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 3
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 4
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 300
\vskip0.400000\baselineskip
<212> DNA
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 4
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 5
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 551
\vskip0.400000\baselineskip
<212> DNA
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (87)..(377)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> Péptido señal
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (87)..(170)
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 5
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 6
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 97
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 6
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Claims (5)
1. Un método para diagnosticar la susceptibilidad
de una persona diabética a tener un riesgo aumentado de desarrollo
de retinopatía diabética, método que comprende determinar si dicho
sujeto presenta un polimorfismo en la parte peptídica señal del
preproNPY humano, polimorfismo que comprende la sustitución de la
leucina de la posición 7 por prolina en la parte peptídica señal de
dicho preproNPY, polimorfismo que es indicativo de un riesgo
aumentado de desarrollo de retinopatía diabética.
2. Uso de un agente destinado a modular la
síntesis, la liberación o el metabolismo del NPY endógeno, o a
interaccionar de un modo específico en sitios diana de NPY modulando
los efectos de NPY con proteínas receptoras de NPY específicas, en
la fabricación de una preparación farmacéutica para tratar a una
persona diabética a la que se ha diagnosticado un riesgo aumentado
de desarrollo de retinopatía diabética de acuerdo con la
reivindicación 1, para la prevención del desarrollo de la
retinopatía diabética, agente que es una molécula medicinal que
interacciona específicamente con un receptor Y1-Y5,
o un oligonucleótido antisentido complementario del mRNA del NPY
mutado.
3. Uso de un agente adecuado para uso en una
específica terapia génica destinada a reparar la secuencia de NPY
mutada, en que la mutación comprende la sustitución de la leucina de
la posición 7 por prolina en la parte peptídica señal del preproNPY,
en la fabricación de una preparación farmacéutica para tratar a una
persona diabética a la que se ha diagnosticado un riesgo aumentado
de desarrollo de retinopatía diabética de acuerdo con la
reivindicación 1, para la prevención del desarrollo de la
retinopatía diabética.
4. Un método para investigar o explorar productos
farmacéuticos útiles en el tratamiento de la retinopatía diabética
usando un modelo animal que incluye un animal transgénico, en el que
el animal es un animal no humano, que lleva una secuencia de DNA
humana que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un
prepro-neuropéptido Y (preproNPY) o una parte de la
misma que codifica un péptido NPY humano maduro, en el que el
aminoácido leucina de la posición 7 de la parte peptídica señal de
dicho preproNPY i) está inalterado o ii) ha sido sustituido por
prolina.
5. Un método para investigar o explorar productos
farmacéuticos útiles en el tratamiento de la retinopatía diabética
usando un modelo animal que incluye un animal transgénico, en el que
el animal es un animal no humano, que lleva una secuencia de DNA que
comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una secuencia de
NPY de ratón por lo demás normal o una parte de la misma que
codifica un péptido NPY maduro de ratón, pero en que la secuencia de
nucleótidos que codifica el péptido señal de ratón está sustituida
por una secuencia peptídica señal humana que codifica el péptido
señal humano normal o mutado.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US291994 | 1999-04-15 | ||
| US09/291,994 US6312898B1 (en) | 1999-04-15 | 1999-04-15 | Diagnosis of a person's risk of developing atherosclerosis or diabetic retinopathy based on leucine 7 to proline 7 polymorphism in the prepro-neuropeptide Y gene |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2251977T3 true ES2251977T3 (es) | 2006-05-16 |
Family
ID=23122742
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES00914228T Expired - Lifetime ES2251977T3 (es) | 1999-04-15 | 2000-03-29 | Diagnostico de riesgo de una persona de desarrollar retinopatia diabetica. |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6312898B1 (es) |
| EP (1) | EP1169475B1 (es) |
| JP (1) | JP2003521473A (es) |
| AT (1) | ATE316153T1 (es) |
| AU (1) | AU777917B2 (es) |
| CA (1) | CA2363994A1 (es) |
| CZ (1) | CZ20013549A3 (es) |
| DE (1) | DE60025595T2 (es) |
| EE (1) | EE200100533A (es) |
| ES (1) | ES2251977T3 (es) |
| HU (1) | HUP0200719A3 (es) |
| NO (1) | NO20014969D0 (es) |
| NZ (1) | NZ513189A (es) |
| PL (1) | PL350620A1 (es) |
| RU (1) | RU2238107C2 (es) |
| WO (1) | WO2000063430A1 (es) |
| ZA (1) | ZA200104775B (es) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009040461A2 (es) * | 2007-09-26 | 2009-04-02 | Universidade De Santiago De Compostela | Método para la detección del riesgo de desarrollar vitreorretinopatía proliferante (vrp). |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050107327A1 (en) * | 1997-12-19 | 2005-05-19 | Hormos Medical Corporation | Method for reducing overproduction of neuropeptide Y in an individual |
| US20030224362A1 (en) * | 2000-03-21 | 2003-12-04 | Jussi Kauhanen | Diagnosis of a person's risk of developing alcoholism |
| US20040254131A1 (en) * | 2003-06-16 | 2004-12-16 | Markku Koulu | Method for prevention or treatment of diseases or disorders related to excessive formation of vascular tissue or blood vessels |
| US6979294B1 (en) * | 2002-12-13 | 2005-12-27 | California Institute Of Technology | Split-screen display system and standardized methods for ultrasound image acquisition and processing for improved measurements of vascular structures |
| WO2005052593A1 (en) * | 2003-10-29 | 2005-06-09 | The University Of Leicester | Detection |
| KR100961926B1 (ko) * | 2007-08-30 | 2010-06-10 | 서울대학교산학협력단 | 당뇨병성 망막병증 검출용 바이오 마커 조성물 및 진단키트 |
| US20100225239A1 (en) * | 2009-03-04 | 2010-09-09 | Purespectrum, Inc. | Methods and apparatus for a high power factor, high efficiency, dimmable, rapid starting cold cathode lighting ballast |
| RU2465598C1 (ru) * | 2011-09-07 | 2012-10-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" | Способ прогнозирования риска развития диабетической ретинопатии при сахарном диабете типа 2 у якутов |
| RU2461005C1 (ru) * | 2011-09-07 | 2012-09-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" | Способ прогнозирования риска развития диабетической ретинопатии при сахарном диабете типа 2 у якуток |
| RU2533836C1 (ru) * | 2013-09-25 | 2014-11-20 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Воронежская государственная медицинская академия имени Н.Н. Бурденко Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО ВГМА им. Н.Н. Бурденко Минздрава России) | Способ мониторинга лиц с риском раннего развития атеросклероза и наличием сахарного диабета 2 типа |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5455164A (en) | 1989-11-03 | 1995-10-03 | Mcgill University | Ruminant immortalized mammary epithelial cell lines |
| US5714497A (en) * | 1993-02-15 | 1998-02-03 | Sanofi | Compounds bearing sulphamoyl and amidino radicals, their preparation process and pharmaceutical compositions containing them |
| GB9406974D0 (en) | 1994-04-08 | 1994-06-01 | Pharmaceutical Proteins Ltd | Transgenic production |
| GB9708918D0 (en) | 1997-05-01 | 1997-06-25 | Ppl Therapeutics Scotland Ltd | Methods |
| SE9703414D0 (sv) * | 1997-09-23 | 1997-09-23 | Astra Ab | New compounds |
-
1999
- 1999-04-15 US US09/291,994 patent/US6312898B1/en not_active Expired - Fee Related
-
2000
- 2000-03-29 CZ CZ20013549A patent/CZ20013549A3/cs unknown
- 2000-03-29 EE EEP200100533A patent/EE200100533A/xx unknown
- 2000-03-29 AT AT00914228T patent/ATE316153T1/de not_active IP Right Cessation
- 2000-03-29 NZ NZ513189A patent/NZ513189A/en unknown
- 2000-03-29 AU AU35632/00A patent/AU777917B2/en not_active Ceased
- 2000-03-29 HU HU0200719A patent/HUP0200719A3/hu unknown
- 2000-03-29 RU RU2001130755A patent/RU2238107C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-03-29 PL PL00350620A patent/PL350620A1/xx unknown
- 2000-03-29 EP EP00914228A patent/EP1169475B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-29 ES ES00914228T patent/ES2251977T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-29 DE DE60025595T patent/DE60025595T2/de not_active Expired - Fee Related
- 2000-03-29 WO PCT/FI2000/000260 patent/WO2000063430A1/en active IP Right Grant
- 2000-03-29 JP JP2000612507A patent/JP2003521473A/ja active Pending
- 2000-03-29 CA CA002363994A patent/CA2363994A1/en not_active Abandoned
-
2001
- 2001-06-12 ZA ZA200104775A patent/ZA200104775B/en unknown
- 2001-10-12 NO NO20014969A patent/NO20014969D0/no not_active Application Discontinuation
-
2005
- 2005-06-14 US US11/151,453 patent/US20050234008A1/en not_active Abandoned
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009040461A2 (es) * | 2007-09-26 | 2009-04-02 | Universidade De Santiago De Compostela | Método para la detección del riesgo de desarrollar vitreorretinopatía proliferante (vrp). |
| WO2009040461A3 (es) * | 2007-09-26 | 2009-06-11 | Univ Santiago Compostela | Método para la detección del riesgo de desarrollar vitreorretinopatía proliferante (vrp). |
| ES2337115A1 (es) * | 2007-09-26 | 2010-04-20 | Universidade De Santiago De Compostela | Metodo para la deteccion del riesgo de desarrollar vitreorretinopatia proliferante (vrp). |
| ES2337115B2 (es) * | 2007-09-26 | 2011-01-24 | Universidade De Santiago De Compostela | Metodo para la deteccion del riesgo de desarrollar vitreorretinopatiaproliferante (vrp). |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP1169475A1 (en) | 2002-01-09 |
| PL350620A1 (en) | 2003-01-27 |
| CA2363994A1 (en) | 2000-10-26 |
| ATE316153T1 (de) | 2006-02-15 |
| CZ20013549A3 (cs) | 2002-04-17 |
| NO20014969L (no) | 2001-10-12 |
| JP2003521473A (ja) | 2003-07-15 |
| AU777917B2 (en) | 2004-11-04 |
| WO2000063430A1 (en) | 2000-10-26 |
| HUP0200719A3 (en) | 2004-11-29 |
| EP1169475B1 (en) | 2006-01-18 |
| ZA200104775B (en) | 2002-06-12 |
| US20050234008A1 (en) | 2005-10-20 |
| DE60025595D1 (de) | 2006-04-06 |
| RU2238107C2 (ru) | 2004-10-20 |
| US6312898B1 (en) | 2001-11-06 |
| NZ513189A (en) | 2003-05-30 |
| HUP0200719A2 (en) | 2002-06-29 |
| NO20014969D0 (no) | 2001-10-12 |
| AU3563200A (en) | 2000-11-02 |
| DE60025595T2 (de) | 2006-11-16 |
| EE200100533A (et) | 2002-12-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Karvonen et al. | Leucine7 to proline7 polymorphism in the preproneuropeptide Y is associated with the progression of carotid atherosclerosis, blood pressure and serum lipids in Finnish men | |
| Karasik et al. | Disentangling the genetic determinants of human aging: biological age as an alternative to the use of survival measures | |
| Wargon et al. | Long-term follow-up of patients with congenital myasthenic syndrome caused by COLQ mutations | |
| US20050234008A1 (en) | Diagnosis of a person's risk of developing atherosclerosis or diabetic retinopathy based on leucine 7 to proline 7 polymorphism in the prepro-neuropeptide Y gene | |
| Beydoun et al. | Vitamin D receptor and megalin gene polymorphisms and their associations with longitudinal cognitive change in US adults | |
| Stephen et al. | Mutations in patients with osteogenesis imperfecta from consanguineous Indian families | |
| Tabur et al. | Role of the transient receptor potential (TRP) channel gene expressions and TRP melastatin (TRPM) channel gene polymorphisms in obesity-related metabolic syndrome | |
| Ryan et al. | GWAS-identified risk variants for major depressive disorder: Preliminary support for an association with late-life depressive symptoms and brain structural alterations | |
| Irving et al. | Comparison of 5-HT4 and 5-HT7 receptor expression and function in the circular muscle of the human colon | |
| Jaouadi et al. | H syndrome: clinical, histological and genetic investigation in Tunisian patients | |
| Zhang et al. | Analyses of IGFBP2 DNA methylation and mRNA expression in visceral and subcutaneous adipose tissues of obese subjects | |
| Kaur et al. | Further Update on the Management of Obesity with Em-phasis on Genetic Perspective | |
| Intusoma et al. | Mutation screening of the CDKL5 gene in cryptogenic infantile intractable epilepsy and review of clinical sensitivity | |
| Darwish et al. | PPARG expression patterns and correlations in obesity | |
| Cicekliyurt et al. | Relationship between oxytocin receptor gene polymorphism and hypertension in Turkish population | |
| Matsunaga et al. | Association of polymorphism in the human μ-opioid receptor OPRM1 gene with proinflammatory cytokine levels and health perception | |
| Gui-Yan et al. | Associations between RAS gene polymorphisms, environmental factors and hypertension in Mongolian people | |
| Rutanen et al. | The Val103Ile polymorphism of melanocortin‐4 receptor regulates energy expenditure and weight gain | |
| JP4174203B2 (ja) | 骨損傷の受け易さを判定する方法 | |
| Powell et al. | Apolipoprotein E genotype, islet amyloid deposition and severity of Type 2 diabetes | |
| Koszycki et al. | CCK-B receptor gene and response to cholecystokinin-tetrapeptide in healthy volunteers | |
| Wang et al. | A new mouse model of metabolic syndrome and associated complications | |
| Frisso et al. | Novel deletion at the M and P promoters of the human dystrophin gene associated with a Duchenne muscular dystrophy | |
| Jeffries et al. | Biallelic CRELD1 variants cause a multisystem syndrome, including neurodevelopmental phenotypes, cardiac dysrhythmias, and frequent infections | |
| Taylor et al. | Variant sequences of the Hexokinase II gene in familial NIDDM |