ES2218661T3 - Formononetinato de metal alcalino y procedimiento de estimulacion micorrizial. - Google Patents

Formononetinato de metal alcalino y procedimiento de estimulacion micorrizial.

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ES2218661T3 ES97903816T ES97903816T ES2218661T3 ES 2218661 T3 ES2218661 T3 ES 2218661T3 ES 97903816 T ES97903816 T ES 97903816T ES 97903816 T ES97903816 T ES 97903816T ES 2218661 T3 ES2218661 T3 ES 2218661T3
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Muraleedharan G. Nair
Gene R. Safir
Robert E. Schutzki
Brendan A. Niemira
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Abstract

SE DESCRIBEN COMPOSICIONES DE UN FORMONONETINATO DE UN METAL ALCALINO, EN PARTICULAR POTASIO Y SODIO, PARA ESTIMULAR EL CRECIMIENTO DE HONGOS MICRORRIZAS QUE COLONIZAN LA PLANTA Y A SU VEZ ESTIMULAN EL CRECIMIENTO DE LA PLANTA. LOS RESULTADOS ESTAN MEJORADOS RESPECTO A FORMONONETINA.

Description

Formononetinato de metal alcalino y procedimiento de estimulación micorrizial.
La presente invención se refiere a un procedimiento y a las composiciones para uso en la estimulación de hongos micorrizas (Mycorrhizae) usando un formononetinato de metal alcalino. En particular, la presente invención se refiere a un procedimiento que proporciona resultados mejorados sobre la formononetina.
Las Patentes de los Estados Unidos. Nº 5,002.603, 5.085.682 y 5.125.955 describen el uso de formononetina, un isoflavonoide, como un estimulante para el crecimiento de hongos micorrizas vesículo arbusculares. Este compuesto es insoluble en agua y por lo tanto está difícilmente disponible para el hongo. La formulación de formononetina con metanol y agua no es comercialmente viable debido a los grandes volúmenes de agua necesarios para solubilizar ésta. Existe una necesidad de una formulación de un derivado de formononetina que se pueda usar comercialmente.
El objeto de la presente invención es, por tanto, proporcionar un compuesto soluble en agua derivado de la formononetina que se pueda aplicar fácilmente a los hongos y/o las plantas, y proporcionar un procedimiento que reduzca la cantidad de agua necesaria para aplicar un compuesto soluble en agua y que sea comercialmente económico.
El objeto se consigue mediante una composición útil para estimular el crecimiento del hongo micorriza vesículo arbuscular (VAM) en presencia de una planta, que comprende
(a) un formononetinato de metal alcalino; y
(b) un material de planta como una semilla o propágulo que contenga el compuesto como un aditivo en una cantidad que estimule el crecimiento del hongo VAM, que a su vez estimule el crecimiento del material de la planta a una planta madura cuando el material de la planta se hace crecer en un suelo o un material para cultivo en presencia del hongo VAM.
La Figura 1 es una gráfica que muestra la colonización del trébol después de cuatro (4) semanas de crecimiento en presencia de formononetina (O) y formononetina de potasio (\Box).
Las barras indican el error estándar.
Las Figuras 2 y 3 son gráficas que muestran la colonización de Taxus x densiformis y Taxus hicksii en tres medios de crecimiento como una función de la concentración de la formononetina de potasio. Las barras verticales indican el error estándar.
La presente invención también se refiere a una composición agrícola útil para la estimulación del crecimiento del material de la planta en presencia del hongo micorriza vesículo arbuscular (VAM), que comprende un formononetinato de metal alcalino; y un vehículo agrícola que contiene un tensioactivo que ayuda en la dispersión del formononetinato de metal alcalino en el suelo o el material de cultivo, en el que el formononetinato de metal alcalino está presente en una cantidad entre 0,1 y 400 partes por millón en peso del vehículo, y en el que la composición estimula el crecimiento del hongo VAM que a su vez estimula el crecimiento del material de la planta.
Además, la presente invención se refiere a un procedimiento para el crecimiento del hongo micorriza vesículo arbuscular (VAM) que incluye las esporas del hongo útil para la estimulación del crecimiento de la planta que comprende: crecimiento del hongo VAM en presencia de una cantidad de un formononetinato de metal alcalino añadido al hongo de manera que el hongo producido sea útil para la estimulación del crecimiento de la planta, siendo proporcionado en el suelo con la planta durante el crecimiento.
La presente invención también se refiere a una composición fúngica que comprende en mezcla: un formononetinato de metal alcalino; y un hongo micorriza vesículo arbuscular que se estimula por el formononetinato de metal alcalino, en el que la composición fúngica se mezcla con el suelo y estimula el crecimiento de una planta.
La presente invención se refiere a un procedimiento para mitigar los daños de pesticidas o herbicidas a plantas en un suelo que contiene el hongo micorriza vesículo arbuscular, y que contiene los pesticidas o herbicidas a niveles tóxicos para las plantas, que comprende el crecimiento de la planta con el hongo en presencia de una formononetina de metal alcalino añadida al suelo.
La presente invención se refiere a un procedimiento para estimular el crecimiento de una planta en cultivo que comprende: proporcionar una planta o células de la planta en una solución de cultivo que contiene hongo micorriza vesículo arbuscular y un formononetinato de metal alcalino; y el crecimiento de la planta en la solución de cultivo.
Finalmente, la presente invención se refiere a un formononetinato de metal alcalino, particularmente formononetinato de potasio o sodio, sólo o en combinación. El compuesto tiene la fórmula estructural
1
Los formononetinatos de metal alcalino (AMF), particularmente sodio y potasio, son solubles en agua. La solubilidad es de más de un (1) gramo por ml lo que es inesperado. Otras sales de metal alcalino que se puede utilizar son sales de litio, rubidio y cesio, que no se prefieren debido a consideraciones de coste.
El material de la planta puede ser plantas con raíces o células de tejidos de la planta, órganos, semillas u otras partes de la planta y que pueden crecer en cultivo con el hongo VAM. Los materiales de planta preferidos son maíz, semilla de soja, sorgo, espárrago, puerro, cebolla, Taxus sp. y otras especies leñosa, café, trébol, cidro, avena marina, trigo, patatas y otras plantas de cultivo, particularmente aquellas plantas que tengan raíces que se puedan colonizar por el hongo VAM. El AMF se usa en una cantidad entre aproximadamente 0,1 y 400 ppm en suelo o mezclas en planta y se puede usar con fertilizantes tales como la urea. Entre las mezclas sustrato para cultivo se puede incluir vermiculita, poliestireno granulado, turba en polvo y otras cargas y factores de crecimiento. En cultivo de tejidos, el formononetinato de metal alcalino está presente con el material de la planta y el hongo VAM en una cantidad aproximada entre 0,0001 y 400 ppm.
El AMF se puede aplicar al suelo o al sustrato para cultivo bien antes o después de que se planten las plantas. Preferiblemente, el AMF se aplica en el momento de la plantación de la semilla. El hongo VAM se puede aplicar también o puede estar presente de manera natural en el suelo.
El AMF se puede aplicar al material de la planta por ejemplo, bien a la semilla o al propágulo. Preferiblemente el AMF recubre a la semilla mediante un adhesivo tal como metil celulosa, que es compatible con el crecimiento de la planta. El AMF se puede también impregnar en la semilla. Preferiblemente el hongo VAM y las semillas recubiertas con el AMF se aplican juntos. Se puede también cultivar el hongo VAM con el AMF.
Los hongos VAM preferidos son los del género Glomus, tales como G. fasciculatum, G. intraradices y G. etunicatum. Estos hongos VAM son particularmente importantes comercialmente Se prefiere que el hongo VAM crezca en presencia del AMF en una cantidad entre aproximadamente 0,0001 y 400 ppm en un medio de cultivo. El medio de cultivo contiene fuentes de carbono, nitrógeno, minerales y vitaminas para el hongo VAM, según es conocido por todas aquellas personas expertas en la técnica.
El AMF se puede aplicar en un vehículo líquido agrícola con un dispersante que mantiene el AMF en solución en una cantidad entre aproximadamente 0,1 y 400 microgramos por ml. Los dispersantes referidos son alcanoles bajos, particularmente metanol, con diversos tensioactivos que incluyen tensioactivos aniónicos y catiónicos. El AMF se puede proporcionar en una mezcla sólida que incluye el dispersante y el AMF. La composición se puede formular en vehículos sólidos que ayudan a la dispersión del AMF en el suelo o en el sustrato de cultivo. El AMF está presente en una cantidad entre aproximadamente 0,1 y 400 ppm en peso de vehículo sólido.
El AMF se puede formular como polvos humectantes, concentrados fluidos, concentrados emulsificables, formulaciones granulares y similares.
Se pueden preparar polvos humectantes por triturado junto con un 20 a 45% en peso de un vehículo finamente dividido, tal como un fertilizante (urea y mezclas NPK, nitrógeno, fósforo y potasio), caolín, bentonita, tierra de diatomeas, atapulgita, o similares, 45% a 80% en peso de compuesto activo, 2% a 5% en peso de un agente dispersante tal como lignosulfonato de sodio, y 2% a 5% en peso de un tensioactivo no iónico, tal como octilfenoxi polietoxi etanol, nonilfenoxi polietoxi etanol o similares.
Se puede preparar un líquido circulante típico por mezcla de aproximadamente un 40% en peso de ingrediente activo con aproximadamente un 2% de un agente gelificante, tal como bentonita, un 3% en peso de un agente dispersante tal como lignosulfonato de sodio, un 1% en peso de polietilén glicol y un 54% en peso de agua. Se pueden añadir fertilizantes líquidos (NPK) y/o urea.
Se puede preparar un concentrado emulsificable típico disolviendo aproximadamente 5% a 25% en peso de ingrediente activo en aproximadamente 65% a 90% en peso de N-metilpirrolidona, isoforona, butil etilglicol, metilacetato o similares y dispersando los anteriores en aproximadamente 5% a 10% en peso de un tensioactivo no iónico tal como un alquilfenoxi polietoxi alcohol. Este concentrado se dispersa en agua para aplicación como pulverizador líquido.
Cuando se usa AMF para tratamiento del suelo, los compuestos se pueden preparar y aplicar como productos granulares. La preparación del producto granular se puede conseguir disolviendo el compuesto activo en un solvente tal como agua, N-metilpirrolidona o similares, y pulverizando la solución preparada de esta manera sobre un vehículo granular tal como granos de mazorca de maíz, arena, atapulgita, caolín o similares.
El producto granular preparado de esta manera comprende generalmente aproximadamente de un 3% a un 20% en peso de ingrediente activo y aproximadamente de un 97% a un 80% en peso de vehículo granular. La composición puede contener fertilizantes tales como urea y fertilizantes NPK, por recubrimiento o mezcla.
Se puede también mezclar el AMF con un herbicida o pesticida que se aplica a las plantas, o se aplica antes o después de la aplicación del herbicida o pesticida. El hogo VAM funciona como un "asegurador" en presencia del AMF y supera los daños causados por los herbicidas o pesticidas. Se pueden superar los daños causados por los herbicidas de imidazolina, tales como imazaquín e imazetapir, y pendimetalín por el procedimiento de la presente invención. Se pueden alcanzar los mejores resultados cuando la composición se aplica el año siguiente a la aplicación del herbicida a los campos que muestran niveles residuales de herbicida suficientes para causar daños en los cultivos plantados en el campo.
En los siguientes Ejemplos 1 a 3, se inoculó una mezcla estéril 50/50 de arena/suelo en un crisol de cultivo de Glomus intraradices con una concentración homogénea de 0,5 esporas/g. Para la evaluación de la colonización del VAM, se lavaron cuidadosamente las raíces de cada experimento. Las raíces se aclararon y colorearon (Phillips, J. M. y D. S. Hayman, Trans. Brit. Mycol. Soc. 55: 158-161 (1970)), y se evaluó la colonización de AM usando el procedimiento de intersección de líneas (Kormanik, P. P. y A. C. McGraw, Quantification of vesicular arbuscular mycorrhizae in plants roots, en: N. C. Schenck (ed.) Methods and principles of mycorrizal research. APS Press, St. Paul, MN p. 37-45 (1982)).
Ejemplo 1 A. Compuesto de la técnica anterior
Se disolvió en primer lugar la formononetina en una pequeña cantidad de metanol caliente y se disolvió a continuación en agua para fabricar una solución stock de 20 ppm de formononetina. Las soluciones aplicadas se fabricaron por dilución en serie de este stock a 15, 10 y 5 ppm. Se preparó una solución control que no contenía la formononetina (0 ppm).
B. Nuevo compuesto
Se agitó la formononetina (64 mg) con hidróxido de potasio (KOH) (91 mg) y 10 ml de agua. La solución transparente resultante tiene un pH de aproximadamente 8,0. Se liofilizó esta solución dando como resultado un polvo blanco. Se disolvió en primer lugar la sal de potasio de formononetina en una pequeña cantidad de agua y a continuación se disolvió en agua para fabricar una solución stock de 20 ppm de formononetina. Se añadió metanol para igualar la cantidad usada en la disolución de la formulación convencional de formononetina. Se añadió metanol únicamente para hacer el experimento comparable y no es necesario debido a la solubilidad del formononetinato de potasio. Las soluciones aplicadas se fabricaron mediante dilución en serie de este stock a 15, 10 y 5 ppm. Se preparó una solución control que no contenía la nueva formulación de formononetina (0 ppm).
Se llenaron crisoles pequeños de plástico (50 ml) con la mezcla inoculada de arena/suelo. Se prepararon doce crisoles para cada tratamiento. Se mojó el suelo de cada crisol con 20 ml de la solución apropiada. Se colocaron aproximadamente 12 semillas de trébol blanco (Trifolium repens) en cada crisol y se introdujeron por debajo de la superficie. Se dispusieron los crisoles en un invernadero, creciendo bajo luz natural suplementada con luz de lámparas halógenas de crecimiento durante 14 horas/día. Los crisoles se regaron por el fondo durante 4 semanas. No se aplicaron nutrientes. Después de 4 semanas, se lavó el suelo de las raíces y se eliminaron las partes superiores. Se muestran los datos en la Figura 1 donde (O) es formononetina y (\Box) es formononetinato de potasio.
Ejemplo 2
Se disolvió en primer lugar una formulación de formononetina (A) en una pequeña cantidad de metanol caliente y se disolvió a continuación en agua para fabricar una solución stock de 10 ppm de formononetina (1/2 del Ejemplo 2). Se fabricaron las soluciones aplicadas mediante dilución en serie de este stock a 8, 6, 4 y 2 ppm. Se preparó una solución control que no contenía la formulación convencional de formononetina (0 ppm).
Se disolvió en primer lugar la sal potásica de formononetina del Ejemplo 1 en agua para fabricar una solución stock de 10 ppm de formononetinato de potasio. Se añadió metanol para igualar la cantidad usada en la disolución de la formulación de formononetina. Se fabricaron las soluciones aplicadas mediante dilución en serie de este stock a 8, 6, 4 y 2 ppm. Se preparó una solución control que no contenía la formulación potásica de formononetina (0 ppm).
Se llenaron crisoles pequeños (50 ml) de plástico con la mezcla inoculada de arena/suelo. Se usaron doce crisoles para cada tratamiento. Se mojó el suelo de cada crisol con 20 ml de la solución apropiada. Se colocaron aproximadamente 12 semillas de trébol blanco (Trifolium repens) en cada crisol y se introdujeron por debajo de la superficie. Se dispusieron los crisoles en un invernadero con luz natural suplementada con luz de lámparas halógenas de crecimiento durante 14 horas/día. Los crisoles se regaron por la parte inferior durante 4 semanas. No se aplicaron nutrientes. Después de 4 semanas, se lavó el suelo de las raíces y se eliminaron las partes superiores. Se muestran también los datos en la Figura 1 donde el (O) es formononetina y (\Box) es formononetina potásica.
Ejemplo 3 Compuesto de la técnica anterior
Se disolvió en primer lugar formononetina en un pequeña cantidad de metanol caliente y se disolvió a continuación en agua para fabricar una solución stock de 10 ppm de formononetina. Se fabricaron las soluciones aplicadas mediante dilución en serie de este stock a 8, 6, 4 y 2 ppm. Se preparó una solución control que no contenía la formulación de formononetina (0 ppm).
Nuevo compuesto
Se disolvió la sal potásica de formononetina en agua para fabricar una solución stock de 10 ppm de formononetinato de potasio. Se añadió metanol para igualar la cantidad usada en la disolución de la formulación convencional de formononetina. Se fabricaron la soluciones aplicadas mediante dilución en serie de este stock a 8, 6, 4 y 2 ppm. Se preparó una solución control que no contenía la nueva formulación de formononetina (0 ppm).
Se llenaron crisoles medianos (200 ml) de plástico con la mezcla inoculada de arena/suelo. Se usaron doce crisoles para cada tratamiento. Se mojó el suelo de cada crisol con 40 ml de la solución apropiada. Se pregerminaron semillas de maíz (Zea mays) durante 36 horas en la oscuridad. Se colocó una semilla en cada crisol, y se introdujo por debajo de la superficie. Se dispusieron los crisoles en un invernadero y crecieron con luz natural suplementada con luz de lámparas halógenas durante 14 horas/día. Se regaron los crisoles por la parte inferior durante 5 semanas. No se aplicaron nutrientes. Después de 5 semanas, se lavó el suelo de las raíces y se eliminaron las partes superiores. Los resultados fueron que el proceso de colonización de las raíces se incrementó significativamente (20% más que con la fomononetina).
Ejemplo 4
Se realizó un experimento con Taxus x densifomis y Taxus x hicksii para determinar la colonización de la raíz con formononetinato de potasio en tres medios separados.
Se obtuvieron cortes de raíces de Taxus x densiformis y Taxus x hicksii procedentes de Lincoln Nurseries, Grand Rapids, MI. Los cortes se plantaron individualmente en celdas de plástico (6 cm x 6 cm x 12,8 cm) conteniendo una de las tres mezclas preparadas. Se usó Metro Mix 510 (Scott Sierra Horticultural Products, Marysville, OH) como un medio de crecimiento en semillero estándar. Metro Mix 510 contiene corteza de pino compostada, vermiculita, turba en polvo esfágnea canadiense, cenizas de corteza procesada, arena lavada y agente humectante. Se obtuvo tratamiento micorríceo de Mycori Mix (Sogevex Inc., Red Hill, PA y Le Tourbières Premier Ltee., Riviere du Loup, Québec). Éste contiene turba en polvo esfágnea canadiense, perlita, vermiculita, inoculante de Glomus inraradix, cal calcítica y dolomítica, y un agente humectante. Se usó SB-Mix (Sogevex Inc., Red Hill, PA y Le Tourbi\thetares Premier Ltee., Riviere du Loup, Québec) como control para el tratamiento micorríceo. Este contiene los mismos ingredientes que Mycori Mix sin el inoculante de Glomus intraradix. Los medios de plantación fueron los siguientes: Medio # 1, 100% de Metro Mix 510; Medio # 2, 50% de Metro Mix 510 y 50% de Mycori Mix (v/v); Medio # 3, 50% de Metro Mix 510 + 50% de SB-Mix (v/v). Se colocaron las plantas en un invernadero de vidrio y se regaron hasta humedecer completamente el medio de plantación. Se aplicaron tratamientos con formononetinato de potasio a continuación del mojado inicial del medio. Se preparó la solución de formononetinato de potasio usando agua destilada. Las tasas de tratamiento consistieron en 0 ppm (sólo agua destilada), 7,5 ppm, y 15,0 ppm. Cada planta recibió 20 ml de la solución de tratamiento apropiada. Durante el curso del experimento se regaron las plantas de Taxus según sea necesario para mantener la humedad adecuada del medio y se fertilizaron semanalmente con 100 ppm de nitrógeno usando el Peters profesional Fertilizer 20-10-20 (nitrógeno-fósforo-potasio). El experimento comenzó el 7 de Junio de 1995 y se terminó el 19 de Septiembre de 1995. Se evaluaron los cultivares de Taxus en experimentos separados como sigue: 3 medios x 3 índices de aplicación del formononetinato de potasio x 5 réplicas con 3 plantas por réplica. Se usaron quince plantas por combinación de tratamiento para evaluar la colonización de las raíces por VAM. Los resultados se muestran en las Figuras 2 y 3 y en la Tabla 2.
2
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Como se puede ver, los resultados muestran que la colonización se incrementa dependiendo de la cantidad de formononetina potásica.
Se pretende que la descripción anterior sea meramente ilustrativa de la presente invención y que la presente invención esté limitada sólo por las reivindicaciones adjuntas.

Claims (29)

1. Una composición útil para la estimulación del crecimiento del hongo micorriza vesículo arbuscular (VAM) en presencia de una planta, que comprende
(a) un formononetinato de metal alcalino; y
(b) un material de la planta como una semilla o propágulo que contiene el compuesto como un aditivo en una cantidad que estimula el crecimiento del hongo VAM, que a su vez estimula el crecimiento del material de la planta hasta una planta madura, cuando el material de la planta crece en un suelo o un sustrato de cultivo en presencia del hongo VAM.
2. Una composición agrícola útil para la estimulación del crecimiento del material de la planta en presencia de un hongo micorriza vesículo arbuscular (VAM), que comprende
(a) un formononetinato de metal alcalino; y
(b) un vehículo agrícola que contiene un dispersante que ayuda a la dispersión del formononetinato de metal alcalino en el suelo o sustrato de cultivo, en el que el formononetinato de metal alcalino está presente en una cantidad entre 0,1 y 400 partes por millón en peso del vehículo, y en el que la composición estimula el crecimiento del hogo VAM, que estimula el crecimiento del material de la planta.
3. Un procedimiento para el crecimiento del hongo micorriza vesículo arbuscular (VAM) que incluye las esporas del hongo útiles para la estimulación del crecimiento de la planta, que comprende:
crecimiento del hongo VAM en presencia de una cantidad de formononetinato de metal alcalino añadida al hongo, de manera que el hongo producido sea útil para la estimulación del crecimiento de la planta, siendo proporcionado en el suelo con la planta durante el crecimiento.
4. El procedimiento de la Reivindicación 3 en el que el hongo se selecciona entre el grupo constituido por hongos que colonizan las raíces de la planta.
5. El procedimiento de la Reivindicación 3 en el que se proporciona una cantidad de formononetinato de metal alcalino de entre aproximadamente 0,1 y 400 ppm en un medio para el crecimiento del hongo.
6. El procedimiento de la Reivindicación 5 en el que el medio contiene una fuente de carbono, nitrógeno y vitaminas y minerales, que estimulan el crecimiento del hongo.
7. El procedimiento de la Reivindicación 5 en el que el medio contiene materiales de planta que estimulan el crecimiento del hongo.
8. El procedimiento de la Reivindicación 5 en el que el medio contiene una fuente de carbono, nitrógeno y vitaminas y minerales, que estimulan el crecimiento del hongo y en el que el medio contiene materiales de la planta que estimulan el crecimiento del hongo.
9. Una composición fúngica que comprende en mezcla
(a) un formononetinato de metal alcalino; y
(b) un hongo micorriza vesículo arbuscular que se estimula mediante el formononetinato de metal alcalino, en el que la composición fúngica se mezcla con el suelo y estimula el crecimiento de una planta.
10. La composición de la Reivindicación 9 en la que el hongo se mezcla con un material de planta.
11. Un procedimiento para aliviar el daño que los pesticidas y herbicidas hacen a las plantas en un suelo que contiene hongo micorriza vesículo arbuscular, y que contiene los pesticidas o herbicidas a niveles tóxicos para las plantas, que comprende el crecimiento de la planta con el hongo en presencia de un formononetinato de metal alcalino.
12. Un procedimiento para la estimulación del crecimiento de un material de planta en presencia de hogo micorriza vesículo arbuscular que comprende el crecimiento del material de planta con el hongo en presencia de un formononetinato de metal alcalino.
13. El procedimiento de la Reivindicación 12 en el que el formononetinato de metal alcalino se aplica en una cantidad entre aproximadamente 0,1 y 400 ppm en el suelo o mezcla de cultivo.
14. El procedimiento de la Reivindicación 13 en el que el hongo se aplica con el formononetinato de metal alcalino.
15. El procedimiento de la Reivindicación 12 en el que la planta se selecciona entre el grupo constituido por plantas que tienen las raíces colonizadas por este hongo.
16. El procedimiento de la Reivindicación 12 en el que se planta una semilla o un propágulo, y se aplica el formononetinato de metal alcalino en el momento aproximado de la plantación.
17. El procedimiento de la Reivindicación 16 en el que la semilla o un propágulo se recubre con el formononetinato de metal alcalino.
18. Un procedimiento para la estimulación del crecimiento de una planta en cultivo que comprende:
(a) proporcionar una planta o células de la planta en una solución de cultivo que contiene hongo micorriza vesículo arbuscular y un formononetinato de metal alcalino; y
(b) el crecimiento de la planta en la solución de cultivo.
19. El procedimiento de la Reivindicación 18 en el que la planta está colonizada por el hongo.
20. El procedimiento de la Reivindicación 18 en el que la cantidad de formononetinato de metal alcalino está entre aproximadamente 0,1 y 400 ppm en la solución.
21. La composición de la Reivindicación 1 en la que el metal alcalino es potasio.
22. la composición de la Reivindicación 2 en la que el metal alcalino es potasio.
23. La composición de la Reivindicación 9 en la que el metal alcalino es potasio.
24. El procedimiento de la Reivindicación 3 en el que el metal alcalino es potasio.
25. El procedimiento de la Reivindicación 11 en el que el metal alcalino es potasio.
26. El procedimiento de la Reivindicación 18 en el que el metal alcalino es potasio.
27. Un formononetinato de metal alcalino.
28. Formononetinato de potasio.
29. Formononetinato de sodio.
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