ES2217977B1 - Procedimiento para la preparacion de un medicamento para la terapia antitumoral por intervencion de neutrofilos (terapia de neutrofilos). - Google Patents

Abstract

Procedimiento para la preparación de un medicamento para la terapia antitumoral por intervención de neutrófilos. (terapia de neutrófilos) El mecanismo principal responsable del crecimiento de los tumores es la difusión de las células; en el borde del tumor hasta alcanzar en el mismo una nueva posición distinta de la original en la que el número de células que la rodean sea mayor. Para anular este mecanismo es necesario que algún tipo de células pueda situarse alrededor del borde del tumor e intentar penetrar en las concavidades del borde del tumor antes de que sean ocupadas por células tumorales. Este papel está asignado a la respuesta inmunológica del organismo y específicamente a los neutrófilos. El objeto de la presente invención es el uso de un factor recombinante humano estimulador de colonias de granulocitos para la preparación de un medicamento para la terapia antitumoral por intervención de neutrófilos.

Description

Procedimiento para la preparación de un medicamento para la terapia antitumoral por intervención de neutrófilos (terapia de neutrófilos).

Introducción

En 1998, Brú et al. publicaron en Physical Review Letters [A Brú, J. M. Pastor, I. Fernaud, S. Melle, 1. Brú and C. Berenguer, Physical Rev. Lett., 81: 4008-401 (1998)] la primera descripción experimental matemática del crecimiento de un tumor in vitro de células tumorales de la línea C6 de astrocitoma. En dicho trabajo se demostró que los contornos de los tumores eran fractales. Las implicaciones de este resultado son muy grandes porque indican que dicho contorno no sólo responde a un fenómeno complejo y aleatorio sino que van a poseer una serie de invarianzas tanto espaciales como temporales. La Física Estadística ha estudiado estos últimos años varios tipos de procesos que dan lugar a contornos, interfases, complejas y fractales. A partir del carácter fractal de los mismos se es capaz de predecir determinados comportamientos de los sistemas a partir de las invariancias espaciales y temporales de los contornos. De alguna manera se puede decir que la dinámica de crecimiento de un proceso está escrita en su contorno. El desarrollo de una serie de técnicas escalas a partir de la aparición de la Geometría Fractal en 1982 por parte de Mandelbroot ["Fractal Geometry of Nature" (La Geometría Fractal de la Naturaleza), M. Mandelbrot, Freeman, San Francisco 1982] y de numerosas técnicas de análisis de escalas en la Física Estadística permiten obtener esa dinámica determinando una serie de cinco exponentes críticos que describen las invariancias que poseen los contornos. A partir de la determinación de esos exponentes se puede clasificar la dinámica en una de las clases dinámicas de universalidad conocidas, lo que nos permite conocer la fórmula que describe el proceso de crecimiento y, por tanto, cuál es su mecanismo fundamental responsable del crecimiento.

Trabajos posteriores [A. Brú, S. Albertos, J. L. Subiza, J. A. López García-Asenjo, I. Brú, "The universal dynamics of tumor growth (Dinámica universal del crecimiento de tumores)", Biophysical Journal, en prensa], han revelado el espectacular resultado de que sólo existe una única dinámica de crecimiento universal, es decir, que cualquier tipo de tumor crece de la misma forma, independientemente de si el crecimiento es in vitro o in vivo, e independientemente de cualquier otra característica fenotípica o genotípica de la línea celular, de su origen humano o animal o de su carácter tumoral o no.

La importancia de que exista una única dinámica de crecimiento para cualquier tipo de tumor es muy grande ya que eso implica que existe un único mecanismo fundamental de crecimiento, la difusión de las células en el borde del tumor, y, por tanto, puede existir un único tipo de terapia común a cualquier tipo de tumor y que consiste en anular esa difusión en el borde, es decir, impedir que el tumor crezca o hacer que muera anulando el mecanismo que le permite crecer.

Objeto de la presente invención

Conocido el significado de la difusión de las células tumorales en el borde del tumor, la presente invención se refiere a la utilización de un fármaco basado en factores estimulantes de crecimiento de colonias de granulocitos, G-CSF, (o alternativamente, de granulocitos y macrófagos, GM-CSF) que han demostrado la efectividad de la neutrofilia local alrededor del tumor para inhibir su crecimiento, consiguiendo la necrosis del tumor al inhibir el mecanismo fundamental del crecimiento de los tumores: la difusión de células tumorales en el borde del tumor.

Estado de la técnica

La patente española P8900605 (20/02/89) de Cetus Corporation "Un procedimiento para preparar una proteína, concretamente el factor estimulador de colonias-1 (CSF-1) conjugada con un polímetro", que parte de la de prioridad US 146275 (20/01/88) "Conjugation of polymer to colony stimulating factor-1", utiliza una proteína, concretamente el factor estimulador de colonias-1 (C SF-1), conjugada con un polímetro, para obtener un vehículo acuoso farmacéuticamente aceptable, producto que es útil para el tratamiento de tumores en mamíferos. El CSF-1 modificado se puede utilizar o bien como el único ingrediente activo o bien en combinación con otras proteínas u otros compuestos que tengan actividad complementaria. Sin embargo, esta proteína, no es Hum. Rec. (recombinante humano), objeto de la presente invención.

Las únicas proteínas de este tipo (rHuGM-CSF o rHuG-CSF), actualmente aprobadas para especialidades farmacéuticas en España son: molgramostim, filgrastim y lenograstim.

Desde principios de 1994 está autorizado un medicamento, el Leucomax®, cuyo principio activo es el molgramostim, un factor recombinante humano estimulador de colonias de granulocitos y macrófagos (rHuGM-CSF). Se trata de una proteína no glicosilada soluble en agua, con isoleucina en la posición 100, que contiene 127 aminoácidos y tiene un peso molecular de 14.477 daltons y se produce por una cepa de Escheríchia coli que posee un plásmido obtenido por ingeniería genética, el cual contiene el gen humano de GM-CSF.

En 1997 se autoriza el Neupogen®, cuyo principio activo es el filgrastim (DCI), un factor metionil-recombínante estimulador de las colonias de granulocitos humanos, rmetHuG-CSF derivado de E. coli/ K12, una glucoproteína que regula la producción y liberación de los neutrófilos funcionales de la médula ósea.

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Finalmente, en julio de 2000 se autoriza el Granulokine® y en octubre del 2001 el Granocyte® 13, que contienen como principio activo el lenograstim (DCI), una glicoproteína recombinante (rHuG-CSF) equivalente al factor humano estimulante de colonias de granulocitos aislado a partir de una línea celular humana de CHU 2. El lenograstim se expresa y se glicosila en un sistema de células huésped de mamíferos, en las células de ovario de hámster chino (CHa). Incrementa los niveles de neutrófilos circulantes.

La aplicación actual en medicina del molgramostim es estimular la producción de granulocitos, monocitos/macró-
fagos y linfocitos T e incrementar los niveles de neutrófilos circulantes en pacientes afectados por neutropenia inducida por quimioterapia, radioterapia o trasplante de médula ósea, para reducir con ello el riesgo de episodios febriles de origen infeccioso en estos pacientes.

El filgrastim, que aumenta considerablemente el recuento de neutrófilos en sangre periférica, se emplea para tratar a los pacientes sometidos a quimioterapia citotóxica o terapia mieloablativa seguida de trasplante de médula ósea, ya que reduce de forma significativa la incidencia, gravedad y duración de la neutropenia y de la neutropenia febril.

El lenograstim, al incrementar los niveles de neutrófilos circulantes se emplea para la reducción de la duración de la neotropenia en pacientes (con neoplasia maligna no mieloide) sometidos a terapia mieloablativa seguida de trasplante de médula ósea en pacientes con elevado riesgo de neutropenia grave prolongada.

Como puede verse, estos tres medicamentos con principios activos cuyo denominador común es incrementar los niveles de neutrófilos por medio de factores estimulantes de colonias no se han empleado nunca para la curación del cáncer sino para evitar las secuelas que otros tipos de tratamiento dan lugar.

Descripción de la invención

Como se ha indicado en la introducción, existe una única dinámica de crecimiento para cualquier tipo de tumor, independientemente de cualquier otra característica tales como el tipo celular, el órgano de origen, cualquier otra característica fenotípica o genotípica o que el crecimiento sea in vivo o in vitro. Esta dinámica es del tipo de la llamada Molecular beam epitaxy (Epitaxia por Haz Molecular) que viene descrita por una ecuación de Langevin con una derivada de orden cuatro:

\frac{\partial h(x,t)}{\partial t}=K \frac{\partial^{4}h(x,t)}{\partial x^{4}}+F+\mu (x,t)

donde h(x,t) es el conjunto de posiciones del borde los tumores, K es el coeficiente de difusión superficial, F está relacionada con la tasa de duplicación celular y supone el "empuje" sobre el borde del tumor y \mu(x,t) es un término de ruido estocástico que describe la aleatoriedad de la duplicación celular.

El mecanismo principal responsable del crecimiento de los tumores es un nuevo comportamiento de las células: la difusión en el borde del tumor. Cuando una célula se duplica, las dos células hijas difunden por el borde del tumor hasta alcanzar en el mismo una nueva posición distinta de la original en la que el número de coordinación (número de células que la rodean) sea mayor. El resultado de este movimiento es que las células "nuevas" del tumor tienden a situarse en las concavidades del borde del tumor. Esta nueva característica de las células tiene implicaciones muy importantes, tanto biológicas como clínicas. En las convexidades de la interfase (donde el número de coordinación es menor) las células tienen un conjunto de condiciones más favorables de acuerdo con la creencia actualmente aceptada. En estas posiciones las células tienen una mayor disponibilidad de nutrientes y de oxígeno, así como el pH de las mismas es más favorable, es decir, menos ácido. Por otro lado, cuando las células se sitúan en las concavidades, la disponibilidad de oxígeno y de nutrientes es menor, además de que en estas regiones el pH es más ácido como resultados del metabolismo celular de las células cancerígenas y de tener más células que echan sus vertidos en estas zonas. Por lo tanto, considerando la existencia de este movimiento, deberá existir algún otro factor más importante que la disponibilidad de nutrientes, de oxígeno y que el pH de la región que haga que las células tiendan a ocupar estas posiciones. La única cosa que posee un tumor en las concavidades que no tenga en las posiciones convexas de su borde es que existe una menor presión ejercida por el tejido huésped del tumor y por la reacción inmunológica y que en dichas zonas tienen más espacio para duplicarse que en las regiones convexas en las que la presión del tejido huésped es mayor. Este hecho es totalmente compatible con que los bordes de los tumores sean superrugosos, que es la forma más idónea para aguantar mejor la presión. Por lo tanto, el único objetivo que tiene un tumor es tener suficiente espacio para crecer. De esta manera destruye el tejido huésped para invadirlo a continuación, en contra de la creencia general y comúnmente aceptada que el tumor primero invade el tejido huésped y después lo destruye.

Para interpretar el mecanismo responsable del crecimiento del tumor pensamos que las células competían por espacio, y no por nutrientes, difundiendo por el borde del tumor para ocupar las concavidades del mismo en las cercanías de sus sitios de generación. La pequeña interfase ácida que rodea al tumor mata a las células del tejido huésped y proporciona espacio a las células del tumor para poder duplicarse. El movimiento más típico de las células tumorales que surgen en la interfase del tumor es el de difundir por el borde del tumor, pero a veces invaden y migran por el tejido huésped si la resistencia que ofrece éste en un punto o región se lo permiten. Estas células migrarán por el tejido huésped hasta que las células del mismo se lo impidan mecánicamente o bien hasta que encuentren un vaso sanguíneo, en cuyo caso entrarán en el torrente sanguíneo, pudiendo producir metástasis en cualquier parte del organismo, donde abandonen el torrente sanguíneo.

Los mecanismos que intervienen en el proceso de difusión en la interfase son desconocidos por el momento a pesar de que puedan estar involucrados en el mismo ciertos aspectos de la adhesión celular. De hecho, la adhesión celular es un factor crítico no sólo para la migración celular sino para el desarrollo y el mantenimiento de la arquitectura del tejido huésped. En este sentido, parece que las células tumorales intentan moverse a una posición en la que la adhesión con otras células del tumor sea máxima.

Además, estos lugares cóncavos poseen el espacio requerido para las nuevas células del tumor que se formen, ya que las células del parénquima son destruidas más efectivamente en estos lugares, debido al bajo pH del metabolismo de las células del tumor. Las implicaciones de este movimiento de las células tumorales son totalmente desconocidas por el momento, pero pueden tener una gran importancia y relevancia en el desarrollo del tumor. Por lo tanto, el potencial del tumor disminuye drásticamente si se rellenaran esas concavidades, por ejemplo con células inflamatorias resistentes al medio ácido.

Una vez identificado el mecanismo responsable del crecimiento de los tumores, el primer requisito que hay que exigirle a cualquier terapia antitumoral es que tienda a anular dicho mecanismo. Para ello, algún tipo de células debe situarse alrededor del borde del tumor para incrementar la presión ejercida sobre él e intentar penetrar en las concavidades del borde del tumor antes de que sean ocupadas por células tumorales y de este modo impedir que difundan las células tumorales. Este papel está asignado a la respuesta inmunológica del organismo y específicamente a los neutrófilos, que constituyen una parte de ella. El efecto antitumoral se consigue por medio del reclutamiento de neutrófilos que constituyen la barrera mecánica del tumor. El papel del reclutamiento lo realizan diversas quimioquinas y citoquinas, dependiendo de la naturaleza de las células transformadas. Cada citoquina produce una reacción distinta y la inhibición del tumor se produce como consecuencia de un complejo mecanismo en el cual los neutrófilos desempeñan el papel principal. La inhibición del crecimiento del tumor no depende del potencial de una citoquina segregada de inhibir autocrínamente la proliferación celular sino de su capacidad de producir una reacción inmune lo suficientemente fuerte como para reducir drásticamente la progresión de un tumor y producir su erradicación
completa.

Hasta la fecha no se ha investigado el efecto mecánico de la presencia de los neutrófilos. En particular, resulta muy interesante la presencia de neutrófilos como un refortalecimiento de la resistencia de la matriz extracelular al crecimiento del tumor. Cuando un tumor está creciendo, las células tumorales liberan una serie de proteínas (metaloproteínas) para degradar la matriz extracelular, es decir, el tejido huésped alrededor del tumor. El resultado de la acción de las metaloproteínas es la degradación de la matriz extracelular y por lo tanto la posibilidad de que el tumor tenga el espacio necesario para ir creciendo sin ninguna restricción de espacio ni nada que se le oponga. Cuando un tumor no es capaz de procurarse espacio necesario para crecer, existe un incremento de presión en el interior del tumor que produce la inhibición de la proliferación de sus células, las cuales, después de estar un determinado tiempo inhibidas, se mueren y producen por lo tanto una necrosis del tumor.

La respuesta inmunológica constituye la primera barrera del organismo frente a cualquier tipo de agresión, tanto por virus como por bacterias, células tumorales o cualquier cuerpo extraño. Está constituida por diferentes tipos de células, enzimas, proteínas,... Los leucocitos son su principal constituyente. Los leucocitos los componen cinco tipos de células diferentes. De todas ellas, la más importante en la respuesta del organismo a la presencia del tumor son los neutrófilos, que participan en todas las fases de la respuesta inmunológica. Los neutrófilos son las primeras células del organismo en llegar a un área afectada por una agresión externa, constituyendo la primera línea de emergencia y barrera del cuerpo. Los neutrófilos se forman en la médula ósea, entran al torrente sanguíneo y de aquí a los tejidos, llegando así a las áreas afectadas. Los neutrófilos poseen relativamente una gran masa y son capaces de aguantar el pH ácido de alrededor y del interior de los tumores, siendo por lo tanto capaces de estar en contacto con células tumorales sin resultar dañados o eliminados, pudiendo incluso introducirse en el interior de los tumores.

Los neutrófilos se sitúan en las concavidades del borde de los tumores, que son los lugares a los que difundirían las nuevas células tumorales. De esta manera los neutrófilos compiten por estos lugares con las células tumorales, impidiendo el mecanismo fundamental en el crecimiento del tumor: la difusión en la interfase o borde del tumor.

Por un lado, es sabido que la progresión de un tumor sólido necesita espacio, generalmente conseguido por la destrucción del tejido sano circundante. La muerte de las células adyacentes al tumor se debe fundamentalmente al bajo pH creado en el área peritumoral, por la producción de ácido láctico debido al metabolismo anaerobio de las células neoplásicas. Es más, se ha podido establecer una relación entre el grado de progresión del tumor y el pH de la interfase. Estos trabajos indican, por tanto, que existe una relación directa entre crecimiento tumoral y la liberación de espacio peritumoral. Este espacio es crítico para que la difusión en la interfase de las células tumorales pueda realizarse.

Por otro lado, la transducción de células tumorales con genes de citoquinas puede inhibir su tumorigenicidad. Ello no es debido a una acción directa sobre el crecimiento de estas células, sino a la respuesta del organismo portador del tumor. Aunque se han demostrado diferentes mecanismos implicados en esta respuesta, que dependen de la citoquina estudiada, no se ha aclarado todavía cual es la razón última que evita la progresión tumoral. Ello es debido a que, en la mayoría de los casos, las células que infiltran el sitio de inoculación del tumor transfectado son células inflamatorias (p. e., neutrófilos), con escaso o nulo poder citotóxico/citostásico para las células tumorales al menos in vitro. Es digno de destacar que estas células inflamatorias llegan masivamente al área peritumoral en aquellos modelos donde la transfección resulta en una pérdida de tumorigenicidad, mientras que están ausentes en los que la tumorigenicidad no se modifica. Teniendo en cuenta, que los neutrófilos están preparados para resistir condiciones de pH ácido (de hecho son las únicas células no tumorales capaces de hacerlo), que pueden ser repuestos continuamente y que son numéricamente abundantes, es posible que puedan ocupar fisicamente el espacio dejado por las células parenquimatosas destruidas antes de que las células tumorales divididas puedan ocuparlo.

Estudios experimentales

Para evaluar la eficiencia de incrementar la respuesta inmunológica para detener el crecimiento del tumor anulando disminuyendo su principal mecanismo de crecimiento, la difusión en el borde del tumor de las células tumorales, se diseño el siguiente experimento: a 20 ratones C57BL/6 se les inoculó a cada uno de ellos 500.000 células de la línea celular fibroehrlich (fibroblastos tumorales) en el muslo derecho. Cuando los tumores de los ratones fueron palpables, se les empezó a administrar el tratamiento clínico para aumentar su respuesta inmunológica.

La experimentación se diseñó para detectar una diferencia absoluta en la muerte de ratones en el grupo tratado con GM-CSF. Los análisis de eficacia incluyeron a todos los ratones que recibieron el tratamiento. Su efecto directo en la supervivencia y en la eficacia se estimó al final del tratamiento. Los análisis estadísticos consistieron en estudiar la distribución de sucesos en el tiempo (por medio del test de Breslow) y de estimar el riesgo de muerte por medio del modelo de Cox de los riesgos proporcionales (hazard ratio) e intervalo de confianza (IC) al 95%.

El tratamiento se administraba diariamente durante dos meses (o hasta la muerte de los ratones) y consistía en una inyección subcutánea de molgramostim con una dosis de 10 pg/kg/día. La dosis de molgramostim no se modificó durante todo el tratamiento.

Una característica muy atractiva de la terapia con molgramostim es la ausencia prácticamente total de efectos secundarios, tanto en humanos como en animales Es más, de existir, estos efectos secundarios son moderados y reversibles por medio de medidas paliatitivas y reducción y/o eliminación de la administración de la citoquina. Los efectos secundarios incluyen hipotensión, erupciones cutáneas y dolor de huesos. Para el filgrastim y el lenograstim los efectos secundarios son similares y igualmente de moderados y reversibles que en el caso del molgramostim.

Para el análisis histológico de las secciones de los tumores, las muestras de tejido se fijaron en formalina al 10% y fueron embutidas en parafina. Posteriormente se seccionaron cada 5 \mum. Se tomaron imágenes que fueron escaneadas para su digitalización y en las que se trazaron los contornos de los tumores. Analizando los perfiles de los tumores se calculó el exponente crítico de rugosidad global obteniendo un valor de \alpha_{glob} =1,25, indicando un cambio dinámico, siendo la nueva dinámica compatible con la clase de universalidad denominada Quenched Edwards-Wilkinson (QEW), la cual describe el movimiento de una interfase elástica propagándose en un medio desordenado.

Desde un punto de vista fisico, el resultado de esta acción es que los neutrófilos producen "anclajes" (pinnings) locales de la interfase, es decir, del borde del tumor. Analizando las interfases de los tumores inoculado en los ratones con y sin administración del tratamiento después del sacrificio de los mismos y analizando también las secciones histológicas, podemos calcular los exponentes críticos de rugosidad tanto local como global. La diferencia entre los ratones tratados y los no tratados es muy clara. En el primer caso tenemos \alpha_{glob} = 1,25 mientras que para los ratones sin tratamiento tenemos \alpha_{glob} =1,5 que es el característico de la dinámica universal de cualquier tumor sin ningún tipo de tratamiento.

Análisis de los resultados

El valor del exponente para los ratones tratados \alpha_{glob} = 1,25 nos indica que el tratamiento ha producido un cambio dinámico del tumor siendo la nueva dinámica solamente compatible con la clase de universalidad QEW. Esta universalidad corresponde a la descripción de una interfase elástica en un medio bidimensional desordenado. Esta dinámica viene descrita por la ecuación:

\frac{\partial h(x,t)}{\partial t}=D\frac{\partial^{2}h(x,t)}{\partial x^{2}}+F+\mu (h(x,t),x)

donde h(x,t) es el conjunto de posiciones del borde los tumores, D es el coeficiente de difusión superficial, F está relacionada con la tasa de duplicación celular y supone el "empuje" sobre el borde del tumor y \mu(h(x,t),x) es un término de ruido estocástico congelado que representa las inhomogeneidades aleatorias estáticas del entorno del tumor.

El primer término del miembro de la derecha representa la tensión superficial que favorece el suavizado de la interfase, el segundo término es un campo aleatorio que representa el ruido congelado y F es la fuerza que hace crecer la interfase, es decir, el borde del tumor y, por consiguiente, el tumor. El último término es un ruido y tiene valor medio cero y correlaciones de corto alcance. Para este tipo de procesos existe una fuerza crítica Fe, de modo que para valores de la fuerza que hace crecer la interfase menores que este valor crítico la interfase se parará siempre.

La principal característica de las interfaces correspondientes a la clase dinámica de universalidad QEW por debajo de la fuerza crítica en donde siempre se paran es que tienen grandes pendientes. Estas pendientes son las concavidades del borde del tumor donde los neutrófilos se sitúan para ocuparlas antes que las células tumorales recién generadas, produciendo anclajes locales de la interfase. En este tipo de dinámica, las regiones ancladas localmente dominan en el comportamiento dinámico de los procesos de crecimiento produciendo el anclaje de toda la interfase. Parece ser que el efecto de los neutrófilos sobre la matriz extracelular es aumentar las impurezas, y por lo tanto el desorden.

Los neutrófilos aumentan la resistencia de la matriz extracelular y anulan la difusión en la interfase. Esto descubre una nueva función de los neutrófilos: su efecto mecánico. En cierto modo, el organismo actúa ante la presencia de un tumor del mismo modo que cuando se produce una herida, donde el efecto mecánico lo desarrollan las plaquetas de la sangre. En otras palabras, los neutrófilos reducen el valor de la fuerza que hace crecer el tumor hasta valores menores que el de la fuerza crítica, produciendo el anclaje de la de la interfase. Como una consecuencia directa de este ralentizamiento o anclaje de la interfase, la disponibilidad de espacio para las células del interior del tumor disminuye drásticamente y las obliga a inhibir su proliferación. Después de un cierto tiempo de estar inhibidas las células se mueren produciendo la necrosis del interior del tumor o de todo el tumor. En los casos estudiados y a las dosis estudiadas esa necrosis es del orden de entre el 80% y el 90% del tumor (p = 0,004).

Tratamiento terapéutico

Considerando estos resultados, inmediatamente surge la terapia antitumoral que consiste en utilizar tratamientos con GM-CSF durante 15-90 días antes o en lugar de la quimioterapia. El tratamiento debe administrarse diariamente durante dicho plazo y consiste en una inyección subcutánea de molgramostim con una dosis mínima de 5 \mug/kg/día. Considerando que la mayor parte del tumor se necrosa y que las células proliferativas que quedan están agrupadas en pequeñas "islitas", y considerando que cuando los tumores o las colonias son de células aisladas o de pequeños grupos de células, no existe ninguna presión interna y por lo tanto todas están en proliferación, y que la quimioterapia sólo actúa contra las células que están proliferando, los efectos que se lograrían con la quimioterapia, incluso con menos ciclos y dosis menores, serian totalmente efectivos.

El medicamento se preparará en forma de una solución inyectable del principio activo.

La dosis de administración recomendada estará comprendida entre 5 y 30 \mug/kg/día, preferentemente 20 \mug/kg/día. A criterio médico esta dosis podría aumentarse.

Claims (5)

1. Uso de un factor recombinante humano estimulador de colonias de granulocitos (rHuGM-CSF o rHuG-CSF) para la preparación de un medicamento para la terapia antitumoral por intervención de neutrófilos.

2. Uso de un factor recombinante humano estimulador de colonias de granulocitos y macrófagos (rHuGM-CSF) para la preparación de un medicamento para la terapia antitumoral por intervención de neutrófilos según la reivindicación 1 en el que este factor es el principio activo molgramostim.

3. Uso de un factor recombinante humano estimulador de colonias de granulocitos (rHuG-CSF) para la preparación de un medicamento para la terapia antitumoral por intervención de neutrófilos según la reivindicación 1 en el que este factor es el principio activo filgrastim.

4. Uso de un factor recombinante humano estimulador de colonias de granulocitos (rHuG-CSF) para la preparación de un medicamento para la terapia antitumoral por intervención de neutrófilos según la reivindicación 1 en el que este factor es el principio activo lenograstim.

5. Uso de acuerdo con la reivindicación 1 en la que el medicamento es una solución inyectable subcutánea del principio activo según la reivindicación 2, 3 ó 4.