ES2212944T3 - Dispositivo para enlazar moleculas o celulas. - Google Patents
Dispositivo para enlazar moleculas o celulas.Info
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Abstract
Dispositivo para enlazar moléculas, grupos de moléculas, partes de moléculas y/o células en un líquido (62) a estructuras dianas (12), compuesto de por lo menos un portaobjetos (10) con por lo menos una estructura diana (12) fijada, que está en contacto con por lo menos un conducto (14), formado de por lo menos un material, teniendo el conducto (14) en una primera abertura (16) del conducto una entrada de líquido y en una segunda abertura (18) del conducto una salida de líquido, provisto de por lo menos un termostato (26) del portaobjetos para poder refrigerar el portaobjetos (10) correspondiente, caracterizado porque el conducto (14) está formado por el portaobjetos (10) y el material de película parafinoso (20, 22) aplicado en este.
Description
Dispositivo para enlazar moléculas o células.
La invención se refiere a un dispositivo para
enlazar moléculas, grupos de moléculas, partes de moléculas y/o
células en un líquido a estructuras dianas, compuesto de por lo
menos un portaobjetos con por lo menos una estructura diana fijada,
que está en contacto con por lo menos un conducto, formado de por lo
menos un material, teniendo el conducto en una primera abertura del
conducto una entrada de líquido y en una segunda abertura del
conducto una salida de líquido; provisto de por lo menos un
termostato del portaobjetos para poder refrigerar el portaobjetos
correspondiente.
Un tal dispositivo está conocido de la WO 96
30124 A.
Hasta ahora, está conocido solamente un método
según "Stamper and Woodruff (1976) J. Exp. Med. 144,
828-833" para enlazar moléculas, grupos de
moléculas, partes de moléculas y/o células en un líquido a
estructuras dianas. Según este método, las estructuras dianas se
fijan en una superficie y se rehidratan. Sigue el recubrimiento de
las estructuras dianas con 100 hasta 200 \mul del líquidio, que
contiene moléculas, grupos de moléculas, partes de moléculas y/o
células. Después de una incubación (p.ej. 30 min., 7ºC) en un
sacudidor o una mesa rotativa se efectúa un paso de lavado para
quitar los materiales no enlazantes.
Una desventaja del método radica, sobre todo, en
su realización manual. Otra desventaja es el hecho de que, para el
ajuste del equilibrio del enlace, están previstos dispositivos de
movimiento que simulan mal las circunstancias en ciertos sistemas
naturales. Otra desventaja es el hecho de que, en el paso de lavado,
puede romperse el enlace, muchas veces muy débil, entre los
componentes del líquido y las estructuras dianas. Además, es
desventajoso que no pueden impedirse procesos metabólicos.
Por consiguiente, el objetivo de la invención
consiste en poner a disposición un dispositivo para simular
interacciones momentáneas entre moléculas, grupos de moléculas,
partes de moléculas y/o células en un líquido con las estructuras
dianas, asegurando, en cualquier momento, el impedimiento de
procesos metabólicos, y simulando al mismo tiempo la situación en un
lecho capilar natural.
Este objetivo se consigue con un dispositivo
teniendo las características según la reivindicación independiente
1.
Configuraciones ventajosas se describen en las
reivindicaciones secundarias.
Un dispositivo según la invención para enlazar
moléculas, grupos de moléculas, partes de moléculas y/o células en
un líquido a estructuras dianas tiene un conducto, formado por un
portaobjetos sobre el cual se ha aplicado una película de aparencia
parafinosa. De esta manera se permite la expansión del conducto, lo
que evita una presión demasiado alta dentro del conducto, simulando
además la situación en un lecho capilar natural. Esto se basa en el
conocimiento de que el flujo de un líquido, que contiene moléculas,
grupos de moléculas, partes de moléculas y/o células, por un
conducto en contacto con una estructura diana, conduce al enlace de
las moléculas, grupos de moléculas, partes de moléculas y/o células
a la estructura diana. El material no enlazante puede extraerse por
la segunda abertura del conducto. Al mismo tiempo, la temperatura
del portaobjetos se controla por medio del termostato del
portaobjetos. El movimiento de flujo del líquido, que contiene
moléculas, grupos de moléculas, partes de moléculas y/o células, por
encima de la estructura diana simula sistemas naturales con
interacción momentánea mejor que lo puede hacer un sacudidor o una
mesa rotativa conocidos. Es particularmente ventajoso que los
procesos metabólicos pueden impedirse en cada momento, bajando la
temperatura del portaobjetos por medio del termostato del
portaobjetos. El portaobjetos tiene, en este caso, una temperatura
de 2 hasta 10°C, de preferencia 4ºC.
Según otro desarrollo ventajoso de la invención,
el líquido extraído puede coleccionarse en un recipiente,
evitandose así la pérdida del líquido que ya pasó por el conducto y
que exige probablemente un tratamiento laborioso y/o costoso.
Según otro desarrollo ventajoso de la invención,
la temperatura del recipiente puede refrigerarse por medio de un
termostato de recipiente, prohibiéndose de esta manera procesos
metabólicos dentro del recipiente lo que permite otro empleo del
líquido o de sus componentes.
El dispositivo según la invención es aplicable,
entre otros, en un procedimiento automatizado para la determinación
de clases de moléculas, grupos de moléculas, partes de moléculas en
un objeto sólido o líquido según la DE 197 09 348 C2. Con esto, es
posible una identificación y caracterización de los ligandos. De
esta manera, al mismo tiempo, se pueden identificar y caracterizar
las clases de moléculas, los grupos de moléculas y/o las partes de
moléculas necesarios para el enlace. Esta aplicación está ventajosa
para numerosos ámbitos de la química, biología, bioquímica y, sobre
todo, de la medicina. Se abren no sólo nuevas posibilidades
diagnósticas sino también se pone a disposición un sistema de prueba
para enfoques terapéuticos moleculares.
Mas detalles, características y ventajas de la
invención pueden desprenderse de la siguiente descripción gráfica de
un ejemplo de ejecución. Muestran:
figura 1a una vista en planta sobre un
portaobjetos del dispositivo según la invención;
figura 1b una vista transversal del portaobjetos
según figura 1a;
figura 2a una vista lateral esquemática del
dispositivo según la invención; y
figura 2b una representación detallada de un
elemento del dispositivo según la invención.
Figura 1a muestra una vista en planta sobre un
portaobjetos 1b del dispositivo para enlazar moléculas, gupos de
moléculas, partes de moléculas y/o células, mientras que figura lb
muestra la vista transversal del portaobjetos 10.
Se reconoce que el portaobjetos 10 lleva fijada
de manera desmontable una estructura diana 12, que está en contacto
con un conducto 14, encerrado por el portaobjetos 10, dos cintas de
parafilm 20 y una película continua de parafilm 22. La película de
parafilm 22 está provista de dos 2 perfiles de aluminio 24 cuya
superficie es comparable a la de las cintas de parafilm inferiores.
Además, se ve que el conducto 14 dispone de una primera y segunda
abertura, 16, 18, para la indroducción y extracción del líquido 62.
El líquido 62 es introducible por medio de un mecanismo de punzón
58, una bomba (sin representación) o por efecto de gravedad, y
extraíble por medio de una bomba (sin representación) o por efecto
de gravedad.
Figura 2a muestra una vista lateral esquemática
del dispositivo para enlazar moléculas, grupos de moléculas, partes
de moléculas y/o células, estando además representado en detalle, en
la figura 2b, el portaobjetos 10 con cintas de parafilm 20, película
de parafilm 22, perfiles de aluminio 24, una cánula 60 y el líquido
62.
Se ve que, además de los elementos arriba
mencionados, el dispositivo dispone de un termostato 26 del
portaobjetos, compuesto por una placa refrigeradora de aluminio 28,
un primer elemento Peletier 30, un primer cuerpo refrigerador 32 y
un primer ventilador 34, estando montado el dispositivo en un
montante 52 con sujeción articulada 54, de manera que el
portaobjetos 10 sujetado y una placa de base 64 encierran un ángulo
de más o menos 20 hasta 70°. El portaobjetos 10 se aprieta, por
medio de una placa de apriete con abertura central 36, apoyada sobre
los perfiles de aluminio 24, sobre el termostato 26 del
portaobjetos. Los resortes 38 aseguran una presión suficiente.
Por medio de una jeringa 58, sujetada de manera
desmontable en un soporte de jeringa 56, y por medio de una cánula,
el líquido 62 se introduce en la primera abertura 16 del conducto.
De esta manera, el líquido 62 fluye por el conducto 14 por el efecto
de gravedad y entra, por consiguiente, en contacto con la estructura
diana 12, permitiéndose así un enlace de los componentes deseados y
predeterminados del líquido a la estructura diana 12. El líquido 62
llega por fin a la segunda abertura 18 del conducto, sale del
conducto 14 y gotea en un recipiente 40, encerrado por un termostato
42 del recipiente. El termostato 42 del recipiente se compone de un
soporte del recipiente de cobre 44, un segundo elemento Peltier 46,
un segundo cuerpo refrigerador 48 y un segundo ventilador 50.
Habiendo fluido todo el líquido 62 (aprox. 1 ml)
por el conducto 14, el recipiente 40 y el portaobjetos 10 se
refrigeran por medio del termostato 26 del portaobjetos y del
termostato 42 del recipiente hasta 4°C, para interrumpir cualquiera
actividad metabólica.
El líquido 62 puede contener linfocitos. La
estructura diana 12 se compone de un corte de tejido o de una
membrana recubierta de moléculas o de una combinación de
moléculas.
Claims (11)
1. Dispositivo para enlazar moléculas, grupos de
moléculas, partes de moléculas y/o células en un líquido (62) a
estructuras dianas (12), compuesto de por lo menos un portaobjetos
(10) con por lo menos una estructura diana (12) fijada, que está en
contacto con por lo menos un conducto (14), formado de por lo menos
un material, teniendo el conducto (14) en una primera abertura (16)
del conducto una entrada de líquido y en una segunda abertura (18)
del conducto una salida de líquido, provisto de por lo menos un
termostato (26) del portaobjetos para poder refrigerar el
portaobjetos (10) correspondiente,
caracterizado porque
el conducto (14) está formado por el portaobjetos
(10) y el material de película parafinoso (20, 22) aplicado en
este.
2. Dispositivo según reivindicación 1
caracterizado porque
el líquido (62) es introducible por medio de un
mecanismo de punzón (58), una bomba o por efecto de gravedad.
3. Dispositivo según una de las reivindicaciones
antecedentes
caracterizado porque
el líquido (62) es extraíble por medio de una
bomba o por efecto de gravedad.
4. Dispositivo según una de las reivindicaciones
antecedentes
caracterizado porque
la temperatura del portaobjetos (10) puede
refrigerarse por medio del termostato (26) del portaobjetos a 2
hasta 10°C.
5. Dispositivo según una de las reivindicaciones
antecedentes
caracterizado porque
el termostato (26) del portaobjetos está provisto
de un primer elemento Peltier (30).
6. Dispositivo según una de las reivindicaciones
antecedentes
caracterizado porque
el líquido (62) extraído puede coleccionarse en
un recipiente (40).
7. Dispositivo según reivindicación 6
caracterizado porque
la temperatura del recipiente (40) puede
refrigerarse por medio de un termostato (42) del recipiente.
8. Dispositivo según reivindicación 7
caracterizado porque
la temperatura del recipiente (40) puede
refrigerarse por medio de un termostato (42) del recipiente a 2
hasta 10°C.
9. Dispositivo según reivindicación 6 ó 7
caracterizado porque
el termostato (42) del recipiente está provisto
de un segundo elemento Peltier (46).
10. Dispositivo según una de las reivindicaciones
antecedentes
caracterizado porque
el líquido (62) contiene linfocitos.
11. Dispositivo según una de las reivindicaciones
antecedentes
caracterizado porque
la estructura diana (12) se compone de un corte
de tejido o de una membrana recubierta de moléculas o de una
combinación de moléculas.
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