ES2211122T3 - Dispositivo de filtracion y de extraccion, y metodo de utilizacion asociado. - Google Patents
Dispositivo de filtracion y de extraccion, y metodo de utilizacion asociado.Info
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Abstract
Un dispositivo de filtración y de extracción, que comprende: un cuerpo flexible (12) que tiene un extremo superior abierto (26), y una pared interna (22) que define una cámara interior (24); un mecanismo de sellado (14) adaptado para sellar el extremo superior abierto (26) del cuerpo (12); un conjunto de filtro de gradiente (18) que incluye al menos un filtro (84); y un conjunto de soporte (16) llevado por el cuerpo (12), el conjunto de filtro de gradiente (18) soportado por el conjunto de soporte (16), por lo que el cuerpo flexible (12) que es adaptado para ser apretado por el dedo de un usuario para impartir una presión positiva en dicha cámara (24) suficiente para provocar que un fluido en dicha cámara fluya a través de dicho conjunto de filtro (18).
Description
Dispositivo de filtración y de extracción, y
método de utilización asociado.
La presente invención se refiere a dispositivos y
a métodos para filtración de un fluido biológico y/o para la
extracción de un analito específico a partir de un material en
partículas suspendidas.
Es deseable con frecuencia analizar un componente
específico, compuesto o analito dentro de un fluido biológico, tal
como orina. Frecuentemente, esto implica analizar un líquido o un
material en partículas de un fluido biológico. La centrifugación es
utilizada comúnmente para separar una solución líquida a partir de
un material en partículas suspendidas dentro de la solución de
líquido. Una vez separado por centrifugación el fluido está
disponible fácilmente para análisis. Si, no obstante, una analito
de interés está en el material en partículas depositada, se
requiere un proceso más complicado. El material en partículas debe
ser suspendido de nuevo y transferido desde un tubo centrífugo a un
tubo de análisis. Si el material en partículas debe extraerse antes
del análisis, uno o más reactivos pueden ser introducidos
directamente dentro del tubo centrífugo o pueden introducirse a la
muestra transferida, re-suspendida en el tubo de
análisis. Si, después de la extracción, el analito debe separarse
de otras partículas más grandes, la muestra puede tener que
centrifugarse de nuevo o filtrarse antes del análisis.
Existen un número de inconvenientes para el uso
de centrifugación. El equipo de centrifugación es costoso y
requiere una cantidad de espacio substancial. La centrifugación es
una labor de peso y un tiempo de peso para el operador debido a que
la centrífuga tiene que cargarse y descargarse. El error del
operador también puede ocurrir con centrifugación. Está disponible
un equipo de centrifugación más pequeño, menos costoso, pero esto
no elimina el tiempo requerido para procesar una muestra, y puede
incrementar el tiempo de procesamiento para proporcionar separación
adecuada.
Se han designado sistemas de filtración de
presión en contenedor en forma de émbolo para separar partículas de
muestras de líquido que son sometidas a ensayo en un esfuerzo por
eliminar la necesidad de centrifugación. Un número de estos
sistemas implica un tubo tal como un tubo de ensayo y un mecanismo
de émbolo que se mueve alternativamente axialmente dentro del tubo.
El mecanismo de émbolo incluye una unidad de filtro en un extremo
distante del mecanismo de émbolo. El movimiento axial descendente
de la unidad de filtro a través del mecanismo de émbolo compacta
partículas en la muestra de líquido en el fondo del tubo. Cualquier
material mayor que el tamaño de los poros del filtro es atrapado
bajo el conjunto de filtro. La solución de líquido puede decantarse
o aspirarse.
Un problema con estos dispositivos en forma de
émbolo y dispositivos similares es que no permiten recuperación
fácil del material en partículas para procesamiento posterior.
Además, la unidad de filtro es someter a presión suficiente durante
el proceso de émbolo, que puede provocar que el filtro se agriete o
desgarre. Con frecuencia tales dispositivos son utilizados con un
tubo estrechado cónicamente. Después del movimiento axial
descendente del mecanismo de émbolo, el diámetro del mecanismo de
émbolo y la unidad de filtro puede ser igual que el diámetro
interior del tubo estrechado cónicamente. Esto puede prevenir que
la unidad de filtro sea forzada a través de la solución. Si no se
ha filtrado todo el líquido a través del dispositivo, entonces el
líquido residual puede contaminar el material en partículas. El
volumen de líquido puede no ser fácilmente detectable o aparente,
pero la contaminación puede ser substancial. Forzando el mecanismo
de émbolo además dentro del tubo puede provocar que el tubo se
agriete o rompa. Si el mecanismo de émbolo no está designado para
la retirada, el procesamiento adicional tal como extracción del
sólido dentro del mismo dispositivo puede ser imposible. El
documento US-A-3463322 describe un
dispositivo de filtración para un fluido biológico, comprendiendo
un cuerpo flexible adaptado para ser aplastado por un dedo del
usuario para impartir una presión positiva 2 al fluido que debe
tratarse. Puede requerirse una unidad múltiple más completa o
dispositivo de módulo múltiple que incluye un módulo separable
designado para capturar el sólido.
Para este fin, un primer aspecto de la presente
invención implica una facilidad para usar dispositivo de extracción
y filtración de fluido biológico que proporciona una muestra
directamente a un método analítico. El dispositivo es capaz de
proporcionar un líquido aclarado preparado para análisis o
disposición como apropiado para el analito específico de interés, y
es capaz de capturar materiales de partícula y permitir
procesamiento adicional, es decir, extracción, de aquellas
partículas directamente con el dispositivo. Una vez extraído, el
dispositivo liberará un líquido que contiene el analito de interés
a un método analítico. El dispositivo incluye un cuerpo flexible que
tiene un extremo superior abierto y una pared interna que define
una cámara interior. Un mecanismo de sellado está adaptado para
sellar el extremo superior abierto del cuerpo. Un conjunto de
filtro de gradiente que incluye al menos un filtro es soportado
dentro del cuerpo por un conjunto de soporte. El cuerpo flexible
está adaptado para ser apretado por un dedo del usuario para
impartir una presión positiva en la cámara suficiente para provocar
un fluido en la cámara para fluir a través del conjunto de
filtro.
En una forma de realización preferida, del
dispositivo de la filtración y extracción, el dispositivo incluye
un número de características. Una primera característica es que el
cuerpo es tubular y fabricado de cloruro de polivinilo. Una segunda
característica es que el cuerpo incluye un anillo rígido en el
extremo superior. Una tercera característica es que el cuerpo
incluye un extremo inferior abierto y el conjunto de soporte es
llevado por el cuerpo cerca del extremo inferior abierto. Una cuarta
característica es que el mecanismo de sellado es un cloruro de
polivinilo que sella la tapa. Una quinta característica es que el
conjunto de soporte incluye una tobera adaptada para distribuir el
fluido desde el dispositivo. Una sexta característica es que el
conjunto de soporte incluye un soporte cóncavo circular, que
soporta el conjunto de filtro, y el soporte incluye una pluralidad
de nervaduras de soporte radiales que soportan el conjunto de
filtro. Una séptima característica es que el conjunto de soporte
incluye una superficie inferior plana para colocar el dispositivo en
una posición vertical en una superficie plana. Una octava
característica es que el conjunto de soporte está hecho de un
material rígido. Una novena característica es que el conjunto de
filtro incluye un tamaño de los poros que oscila desde 0,5 a 4
micras. Una décima característica es que al menos un filtro está
hecho de polisulfona, nylon, polipropileno, celulosa, o acetato de
celulosa. Una undécima característica es que el filtro es hidrófilo.
Una duodécima característica es que el conjunto de filtro incluye
un filtro de gradiente individual y el tamaño de los poros efectivo
del filtro está en el intervalo de 0,69 a 0,87 micras. Una
decimotercera característica es que el conjunto de filtro incluye
múltiples filtros homogéneos con al menos dos de los filtros que
tienen un tamaño de los poros diferente, los múltiples filtros
apilados de manera que un filtro con un tamaño de los poros menor se
localiza por debajo de un filtro con un tamaño de los poros más
grande, y una membrana de nylon tejida se localiza entre filtros.
Una décimocuarta característica es que la periferia del conjunto de
filtro está al mismo nivel que la pared interna del cuerpo.
Un segundo aspecto de la invención implica un
dispositivo de filtración que incluye un cuerpo tubular flexible
que tiene un extremo abierto y una cámara interna, medios para
sellar el extremo abierto, un conjunto de filtro de gradiente que
incluye al menos un filtro, y medios para soportar el conjunto de
filtro dentro del cuerpo tubular, por lo tanto el cuerpo tubular
flexible está adaptado para ser aplastado por el dedo de un usuario
para impartir una presión positiva en la cámara suficiente para
provocar que un fluido fluya en la cámara a través del conjunto de
filtro.
Un tercer aspecto de la invención incluye un kit
para filtrar un fluido biológico que tiene materia en partículas y
líquido, y que extrae un analito a partir de la materia en
partículas. El kit incluye una filtración y un dispositivo de
extracción que incluye un cuerpo tubular flexible que tiene un
extremo superior abierto, un extremo inferior abierto, y una pared
interna que define una cámara interior. El dispositivo incluye,
además, un conjunto de tapa fijado al cuerpo cerca del extremo
superior abierto. El conjunto de tapa incluye una tapa adaptada para
sellar el extremo superior abierto. El dispositivo incluye también
un conjunto de soporte fijado al cuerpo cerca del extremo inferior
abierto, incluyendo el conjunto de soporte un soporte circular
localizado dentro del cuerpo tubular y una tobera adaptada para
distribuir el fluido desde el dispositivo. Un conjunto de filtro de
gradiente circular que incluye al menos un filtro se fija al
soporte. El cuerpo flexible está adaptado para ser apretado por un
dedo del usuario para impartir una presión positiva en la cama
suficiente para provocar que un fluido en la cámara fluya a través
del conjunto de filtro. El kit incluye también al menos un reactivo
para extraer los analitos desde la materia en partículas y un
reactivo de neutralización para neutralizar al menos un
reactivo.
En una forma de realización preferida del aspecto
de la invención descrita inmediatamente antes, al menos un reactivo
es un reactivo de extracción de proteasa y/o un reactivo de
extracción de detergente alcalino.
Un cuarto aspecto de la invención implica un
método para filtrar un fluido biológico que tiene materia en
partículas y líquido y que extrae uno o más analitos desde la
materia en partículas un dispositivo tal como el descrito en el
primer aspecto de la invención. El método incluye añadir el fluido
biológico a la cámara a través del extremo superior abierto con el
mecanismo de sellado, apretando el cuerpo flexible de manera que se
imparte una presión positiva a la cámara suficiente de para
provocar que el fluido biológico fluya a través del conjunto de
filtro de manera que la materia en partícula se retiene por el
conjunto de filtro y el líquido es expresado desde el dispositivo,
dejando sin sellar el extremo superior abierto del cuerpo,
añadiendo al menos un reactivo a la cámara a través del extremo
superior abierto, y apretando el cuerpo flexible de manera que se
imparte una presión positiva a la cámara suficiente para provocar
que al menos un reactivo fluya a través del conjunto de filtro de
manera que uno o más analitos desde la materia en partículas se
extraen por al menos un reactivo y expresado con el desde el
dispositivo para un método de ensayo
diagnóstico.
diagnóstico.
Una forma de realización preferida del aspecto de
la invención descrita inmediatamente antes incluye un número de
características. Las características una a cuarta fueron
identificadas ya en el primer aspecto de la invención descrito
anteriormente. Una quinta característica es que el fluido biológico
es orina. Una sexta característica es que uno o más analitos es un
lipopolisacárido, obtenido desde Chlamydia y una proteína desde la
pared de célula exterior de Neisseria gonorrhea. Una séptima
característica es que la materia en partículas incluye un virus o
una bacteria que uno o más analitos es extraído. Una octava
característica es distribuir al menos un reactivo dentro de
contenedores de ensayo múltiples para someter a ensayo diferentes
analitos. Una novena característica es utilizar el líquido
expresado en un método diagnóstico para determinar la presencia de
un analito. Una duodécima característica incluye detectar la
presencia de un analito expresado desde el dispositivo utilizando un
procedimiento diagnóstico tal como
radio-inmunoensayo, inmunoensayo óptico,
inmunoensayo enzimático, amplificación con ácido nucleico,
quimioluminiscencia, y resonancia de plasma de superficie.
Un quinto aspecto de la invención implica un
método para filtrar un fluido biológico que utiliza un dispositivo
tal como se describe en el primer aspecto de la invención. El
método incluye añadir el fluido biológico a la cámara a través del
extremo superior abierto, sellando el extremo superior abierto con
el mecanismo de sellado, y apretando el cuerpo flexible de manera
que se imparte una presión positiva a la cámara suficiente para
provocar que el fluido biológico fluya a través del conjunto de
filtro de manera que la materia de partícula es retenida por el
conjunto de filtro y un líquido aclarado es expresado desde el
dispositivo.
Una forma de realización preferida del aspecto de
la invención descrito inmediatamente antes incluye un número de
características. Una primera característica implica utilizar el
líquido expresado en un método diagnóstico para determinar la
presencia de un analito.
Un sexto aspecto de la invención implica un
método para filtrar orina y extraer uno o más analitos de
lipopolisacárido a partir de uno o más microorganismos Chlamydia
utilizando un dispositivo tal como se describe en el primer aspecto
de la invención. El método incluye añadir una muestra de orina a la
cámara a través del extremo superior abierto, sellando el extremo
superior abierto con el mecanismo de sellado, apretando el cuerpo
flexible de manera que una presión positiva es impartida a la
cámara suficiente para provocar que la orina fluya a través del
conjunto de filtro de manera que uno o más microorganismos Chlamydia
son retenidos por el conjunto de filtro y un líquido aclarado es
expresado desde el dispositivo, dejando sin sellar el extremo
superior abierto del cuerpo, añadiendo reactivo de extracción de
proteasa a la cámara a través del extremo superior abierto,
añadiendo un reactivo de extracción de detergente alcalino a la
cámara a través del extremo superior abierto, y apretando el cuerpo
flexible de manera que una presión positiva es impartida a la
cámara suficiente para provocar que los reactivos fluyan a través
del conjunto de filtro de manera que uno o más analitos de
lipopolisacárido desde uno o más microorganismos Chlamydia
retenidos son extraídos por al menos uno de los reactivos y
expresados con el mismo desde el dispositivo para un método de
ensayo diagnóstico adicional.
En una forma de realización preferida del aspecto
de la invención descrito inmediatamente antes, el método incluye
detectar la presencia de uno o más analitos de lipopolisacáridos
utilizando un procedimiento diagnóstico de inmunoensayo óptico.
Un séptimo aspecto de la invención implica un
método para filtrar orina y extraer uno o más analitos a partir de
uno o más microorganismos Chlamydia y/o uno o más analitos a partir
de uno o más microorganismos Neisseria gonorrhoeae que
utilizan un dispositivo tal como el descrito en el primer aspecto de
la invención. El método incluye añadir una muestra de orina a la
cámara a través del extremo superior abierto, sellando el extremo
superior abierto con el mecanismo de sellado, apretando el cuerpo
flexible de manera que una presión positiva es impartida a la
cámara suficiente para provocar que la orina fluya a través del
conjunto de filtro de manera que uno o más microorganismos Chlamydia
y/o uno o más microorganismos Neisseria gonorrhoeae son
retenidos por el conjunto de filtro y un líquido aclarado es
expresado desde el dispositivo, dejando sin sellar el extremo
superior abierto del cuerpo, añadiendo un reactivo de extracción de
detergente alcalino a la cámara aun así el extremo superior
abierto, y apretando el cuerpo flexible de manera que se imparte una
presión positiva a la cámara suficiente para provocar que el
reactivo fluya a través del conjunto de filtro de manera que uno o
más analitos a partir de uno o más microorganismos Chlamydia y/o
uno o más analitos a partir de uno o más microorganismos
Neisseria gonorrhoeae son extraídos por el reactivo de
extracción y expresados con el mismo desde el dispositivo dentro de
dos o más contenedores de extracción para intentar extracción
adicional.
En una forma de realización preferida del aspecto
de la invención descrito inmediatamente antes, el método incluye un
número de características. Una primera característica es que los
reactivos de extracción y analitos son expresados dentro de un
primer contenedor de extracción y un segundo contenedor de
extracción y el método incluye adicionalmente añadir un reactivo de
extracción de proteasa al primer contenedor de extracción para
extraer uno o más analitos y un reactivo de neutralización al
primer contenedor de extracción, y añadir un reactivo de
neutralización al segundo contenedor de extracción. Una segunda
característica incluye detectar la presencia de uno o más analitos
en los contenedores de extracción respectivos utilizando
procedimientos de diagnóstico de inmunoensayo óptico
respectivos.
Otras características y ventajas de las
invenciones son indicadas en la descripción y dibujos detallados a
continuación, que están destinados a ilustrar, pero no limitar, la
invención.
La figura 1 es una vista en perspectiva
despiezada de un dispositivo de filtro y extracción de acuerdo con
una forma de realización preferida de la invención.
La figura 2 es una vista en perspectiva del
dispositivo de filtro y extracción ilustrado en la figura 1 en un
estado montado; y
La figura 3 es una vista en sección transversal
del dispositivo de filtro y extracción ilustrado en la figura
1.
Con referencia a las figuras 1-3,
se describirá ahora un dispositivo de filtración y de extracción 10
construido de acuerdo con una forma de realización preferida de la
invención. El dispositivo de filtración y extracción 10 incluye un
cuerpo tubular flexible 12, un conjunto de tapa 14, un conjunto de
soporte 16, y un conjunto de filtro 18. El dispositivo de
filtración y de extracción 10 es un aparato manual, simple de una
pieza que proporciona una muestra directamente a un método de
ensayo analítico y elimina la etapa de centrifugación mencionada
anteriormente.
En uso, un usuario añade un fluido biológico al
cuerpo tubular 12, sella el cuerpo tubular 12 con el conjunto de
tapa 14, y aprieta el cuerpo tubular 12 con uno de los dedos,
provocando que el fluido pase a través del conjunto de filtro 18. La
materia en partículas en el fluido biológico es retenida por el
conjunto de filtro 18 para procesamiento adicional, si se desea, y
el líquido aclarado es sacado del dispositivo 10 para procesamiento
adicional y/o análisis si se desea. Si se desea la extracción de un
analito de interés a partir de materia en partículas, el
dispositivo es destapado, uno o más reactivos se añaden al cuerpo
tubular 12, el cuerpo tubular 12 es tapado 14, la presión es
aplicada al cuerpo tubular 12, provocando que uno o más reactivos
contacten la materia en partículas retenida por el conjunto de
filtro 18 y el analito debe sacarse del dispositivo 10, si está
presente.
El cuerpo tubular 12 incluye una pared exterior
20 y una pared interior 22. El cuerpo tubular 12 incluye además un
extremo superior 26, cerca de donde se localiza el conjunto de tapa
14, y un extremo inferior 28, cerca de donde se localiza el conjunto
de soporte 16. Una cámara interior principal 24 está definida por
la pared interior 22, una parte superior del conjunto de filtro 18,
y una parte inferior del conjunto de tapa 14. La cámara interior 24
tiene un volumen que está dimensionado para permitir que se importe
presión suficiente a la cámara 24 por los dedos de un usuario de
manera que el líquido biológico fluye a través del conjunto de
filtro 18 sin dañar el conjunto de filtro. El cuerpo tubular 12 está
hecho de un entubado (cloruro de polivinilo) de PVC flexible suave.
Pero se entenderá fácilmente por aquellos técnicos en la materia
que pueden usarse materiales similares. El entubado de PVC es
coextruído y cortado en longitudes suficientes para permitir las
características de presión mencionadas anteriormente en la cámara
24.
PVC es utilizado preferiblemente como el material
para el cuerpo tubular 12 porque es económico, disponible
fácilmente, claro, químicamente inerte, biocompatible, y estable.
Químicamente inerte significa que el material es estable a
deformación, decoloración, fisuración, separación, etc. después de
la exposición a calor, fluido biológico, reactivos de extracción,
diluyentes u otras soluciones químicas. Biocompatible significa que
el material no adherirá materiales biológicos de una solución,
afectará la estabilidad, funcionalidad, o conformación de un
material biológico después de contacto con ese material, o de
cualquier forma contaminará la solución biológica con componentes
que lixivian desde el material en la solución biológica. Estable
significa que el material retiene todas las características
anteriores durante años a temperatura ambiente. La inercia y
biocompatibilidad del cuerpo tubular 12 permite que se procese un
intervalo amplio de fluidos biológicos que deben procesarse en el
dispositivo 10.
El conjunto de tapa 14 incluye una tapa de
sellado flexible 32 fijada a una tapa de soporte anular 34 por una
bisagra 36. La tapa de sellado 32, la tapa de soporte anular 34, y
la bisagra 36 están moldeadas por inyección de un material de
PVC.
La tapa de sellado 32 incluye un reborde anular
38 que rodea una porción hundida frustocónica 40. Una lengüeta 42
se extiende desde el reborde anular 38.
La tapa de soporte anular 34 incluye un reborde
anular 44 con una apertura central 45, un saliente exterior 46 que
tiene una pared interior 48, y un saliente interior 50 que tiene
una pared exterior 52 y una pared interior 53.
Un anillo rígido 54 rodea circunferencialmente el
extremo superior 26 del cuerpo tubular 12 y se suelda químicamente
al mismo. El anillo 54 es moldeado por inyección de un material
acrílico. El anillo acrílico rígido 54 proporciona rigidez y
soporte en el extremo superior 26 del cuerpo tubular 12, y mejora el
sellado de la tapa 34.
La tapa de soporte anular 34 reside sobre el
extremo superior 26 del cuerpo tubular 12 y el anillo 54. La parte
interior 48 del saliente exterior 46 apoya el anillo rígido 54, y
la pared exterior 52 del saliente interior 50 apoya la pared
interior 22 del cuerpo tubular 12. El anillo acrílico 54 está
soldado preferiblemente de forma química a la pared exterior 20 del
cuerpo tubular 12 por un proceso de ciclohexanona, pero pueden
utilizarse procesos similares. No se permite arrastre por
destilación del agente químico dentro del dispositivo 10. El
producto químico no debe alterar los componentes del dispositivo 10,
es decir, alterar la inercia o biocompatibilidad química, o
provocar defectos cosméticos. Un proceso de apilamiento de calor
puede ser posible también para fundir el anillo acrílico 54 al
exterior 20. La pared exterior 52 del saliente interior 50 se funde
a la pared interior 22 del cuerpo tubular 12 y la pared interior 48
del saliente exterior 46 puede soldarse químicamente al anillo
acrílico 54 de la manera mencionada
anteriormente.
anteriormente.
Cuando se cierra, las partes inferiores de la
porción hundida frustocónica 40 y el reborde anular 38 de la tapa
de sellado flexible 32 forman un mecanismo de sellado con la pared
interior 53 del saliente interior 50. Esto asegura una junta
completa en el conjunto de tapa 14 en la apertura 45 y el extremo
superior 26 del cuerpo tubular 12 de manera que puede importarse
presión positiva suficiente a la cámara 24.
En la forma de realización preferida de la
invención, el conjunto de soporte 16 es un conjunto de una pieza
hecho de un material rígido, acrílico. El conjunto de soporte 16
incluye una base anular 56 que tiene una superficie inferior plana
58 y una superficie superior 59, un saliente exterior 60 que tiene
una pared interior 62, y un saliente interior 64 que tiene una
pared interior 66 y una pared exterior 68. El saliente interior 64
termina en su parte superior dentro de un soporte 72. El soporte 72
tiene una superficie superior cóncava 74 y una superficie inferior
76. La superficie inferior 76 del soporte 72 y la pared interior 66
del saliente interior 64 define un receso anular 77. El soporte 72
incluye adicionalmente una pluralidad de nervaduras de soporte
radiales 78 en la superficie superior cóncava 74 y una tobera que se
extiende hacia abajo 80. La tobera 80 termina en el receso anular
77 e incluye un orificio de salida 82.
El conjunto de soporte de una sola pieza 16 está
hecho de un material acrílico y se une preferiblemente al cuerpo
tubular 12 por el proceso de ciclohexanona mencionado
anteriormente. Esta unión puede producirse entre la pared exterior
68 del saliente interior 64 y la pared interior 22 del cuerpo
tubular 12. Esta unión puede producirse también entre el extremo
inferior 28 del cuerpo tubular 12 y la superficie superior 59 de la
base anular 56, entre el saliente exterior 60 y el saliente
interior 64. La rigidez del conjunto de soporte 16 da el extremo
inferior 28 de la estabilidad y soporte del cuerpo tubular 12. La
superficie inferior plana 58 de la base anular 56 permite que el
dispositivo 10 se coloque vertical sin asistencia de usuario en una
superficie de soporte plana.
En una forma de realización preferida, el
conjunto de filtro 18 incluye un filtro o membrana de gradiente
circular individual 84. El filtro preferido 84 es vendido bajo el
nombre BTS-16 Memtec membrane por el US Filter Co.
de San Diego, California. La membrana es una membrana de gradiente
con un tamaño de los poros efectivo de 0,69 a 0,87 micras. La
membrana tiene resistencia a tracción suficiente para resistir las
presiones positivas requeridas para filtración y procesamiento sin
desgarramiento. Un filtro de gradiente significa que el tamaño de
los poros disminuye desde la parte superior del filtro 84 al fondo
del filtro 84. En otras palabras, el tamaño de los poros en la
parte superior del filtro 84 es mayor que el tamaño de los poros en
la parte inferior del filtro 84. La naturaleza del gradiente del
filtro 84 permite el flujo de muestras a través del intervalo de
tipos, es decir, claro a turbio, asegurando así la captura de las
partículas de interés. Un número de materiales de filtro que son
efectivos para este propósito incluyen, perno por medio de
limitación, polisulfonas tales como Memtec, nylon, polipropileno, y
celulosa, particularmente acetato de celulosa. El filtro 84
debería ser hidrófilo o tratar de ser hidrófilo para reducir la
captura no específica de biológicos de interés, es decir, analitos
en el filtro 84 durante procesamiento. La naturaleza hidrófila del
filtro 84 asegura también que el filtro 84 humedece bien durante el
procesamiento. Los intervalos de los poros adecuados para el filtro
es 0,5 micras a 4 micras. El tipo de filtro 84 y el tamaño de los
poros utilizado depende de la materia en partículas que se desea
retener. El tamaño de los poros puede no ser tan pequeño que
obstruiría el filtro 84, pero el tamaño de los poros debe ser
suficientemente pequeño para capturar la materia en partículas u
organismo y prevenir flujo de fluido a través del filtro cuando no
se aplica presión por el usuario.
Antes de la unión del conjunto de soporte 16 al
cuerpo tubular 12, el conjunto de filtro 18 es soldado de manera
sónica al soporte 72. Cuando el conjunto de soporte 18 está fijado
a la parte inferior 28 del cuerpo tubular 12, la periferia del
conjunto de filtro 18 es sellada al mismo nivel con la pared
interior 22 del cuerpo tubular 12, inhibiendo la acumulación de
líquido entre la periferia del conjunto de filtro 18 y la pared
interior 22. La parte inferior del conjunto de filtro 18 es
soportada en las nervaduras de soporte radiales 78, elevadas
ligeramente por encima de la parte superior del orificio de salida
82. La superficie superior cóncava 74 del soporte 72 proporciona
soporte al filtro 84 cuando el filtro 84 se hunde debido a presión
positiva que es impartida a la cámara 24. El soporte proporcionado
por las nervaduras de soporte 78 y la superficie superior cóncava 74
es importante para inhibición de desgarramiento del filtro 84 bajo
presión.
En una forma de realización alternativa, el
conjunto de filtro 18 puede incluir un apilamiento de filtros que
imita un filtro de gradiente individual. Los filtros tienen cada
uno, un tamaño de los poros homogéneo, diferente y están dispuestos
de manera que un filtro de tamaño de los poros más pequeño se coloca
por debajo de un filtro de tamaño de los poros más grande. Este
tipo de disposición previene la obstrucción en el conjunto de
filtro 18, permitiendo así la retención de la materia en partículas
de interés. Para prevenir bloqueo de vapor entre los filtros, una
capa de material tejido de nylon vendido bajo el nombre Tetko Nylon
(3-20/14) por Tetko, Inc. de Depew, New York se
inserta entre los filtros. Esto impide flujo limitado que puede
producirse como resultado de bloqueo de vapor entre los
filtros.
En formas de realización alternativas, el
conjunto de filtro 18 puede incluir un filtro individual que tiene
un tamaño de los poros constante, un apilamiento de filtros que
tienen el mismo tamaño de los poros, o un apilamiento de filtros que
imitan generalmente un filtro de gradiente individual, por ejemplo,
filtros apilados de manera que desde la parte superior a la parte
inferior disminuyen generalmente en tamaño de los poros con filtros
adyacentes ocasionales que tienen el mismo tamaño de los poros.
El dispositivo de filtración y de extracción 10
se describirá ahora generalmente en uso. Un usuario primero asegura
que la tapa de sellado 32 es retirada de la parte superior 26 del
dispositivo 10. A continuación, el usuario añade un fluido
biológico a la cámara 24 a través de la abertura 45 en la parte
superior 26 del dispositivo 10. La abertura 45 es suficientemente
ancha para permitir que un fluido se añada fácilmente al
dispositivo 10.
Como se utiliza aquí, el término fluido biológico
está definido como un fluido que contiene células, virus,
levaduras, y moléculas de origen biológico o porciones de las
mismas, y puede incluir orina, lavados de vejiga, lavados de colon,
esputos, sangre, fluido espinal, desgarros, secreciones nasales,
secreciones vaginales, o fluido del sistema respiratorio,
alimenticio, circulatorio, reproductor u otros sistemas del
cuerpo.
Se entenderá fácilmente por aquellos técnicos en
la materia que el dispositivo 10 puede aplicarse a fluidos
distintos de fluidos biológicos para filtrar un líquido a partir de
un material sólido. El dispositivo 10 puede utilizarse también para
procesamiento adicional del material sólido.
El cuerpo tubular 12 es sellado alineando
generalmente la tapa de sellado 32 sobre la parte superior 26 del
cuerpo tubular 12 y presionando en la parte superior de la tapa de
sellado 32 con el dedo pulgar de manera que la porción hundida
frustocónica 40 de la tapa de sellado 32 encaja elásticamente dentro
de la tapa de soporte anular 34, cerca de la parte superior 26 del
cuerpo tubular 12.
Debería indicarse, que la superficie inferior
plana 58 de la base anular 56 permite que el dispositivo 10 esté
soportado convenientemente en una posición vertical en una
superficie de soporte plana sin asistencia de usuario. Esto es
deseable cuando se añade un fluido al dispositivo 10 o entre etapas
de procedimiento.
A continuación, el fluido biológico es filtrado y
sacado del dispositivo 10. Esto se consigue aplicando un dedo
pulgar y dedo adyacente en lados opuestos de la pared exterior 20
del cuerpo tubular 12 y apretando el cuerpo tubular flexible 12.
Esta acción imparte una presión positiva en la cámara interior 24
del cuerpo tubular 12 que es suficiente para provocar que el fluido
biológico fluya a través del conjunto de filtro 18, provocando que
el material en partículas sea retenido por el conjunto de filtro 18
y que el líquido aclarado resultante sea sacado fuera del
dispositivo 10 a través de la tobera 80. El flujo fuera del
dispositivo 10 está basado en la composición de fluido biológico,
el tamaño de los poros de filtro y la cantidad de presión que puede
generarse por los dedos del usuario cuando se aprieta el cuerpo
tubular 12. Se cree por los inventores que solamente unos pocos psi
son requeridos para expresar la muestra. Por lo tanto, el método de
utilizar el dispositivo es justamente delicado en sus requerimientos
de procesamiento.
La longitud del dispositivo 10 está basada en
permitir que el cuerpo tubular expuesto suficiente 12 para un dedo
del usuario agarre el dispositivo 10 entre el conjunto de tapa 14 y
el conjunto de soporte 16. Si el cuerpo tubular 12 es demasiado
largo entonces se genera presión insuficiente para expresar el
intervalo completo de tipos de fluido biológicos. La única
limitación en la longitud y configuración del cuerpo tubular 12 es
la capacidad para generar suficiente presión positiva en la cámara
interior 24 por la mano que aprieta el dispositivo 10.
Como se utiliza aquí, el término material en
partículas puede ser cualquier material sólido que es separado de
su solución líquida. Tales materiales pueden incluir materiales
absorbentes inorgánicos tales como talco carbón vegetal así como
perlas de vidrio. El material sólido puede también ser orgánico de
naturaleza tal como sefarona, celulosa microcristalina, albúmina
macroagregada y demás. Los materiales pueden contener ligandos
tales como anticuerpos, antígeno o hapteno. Otros materiales de
partícula incluyen, pero no por medio de limitación, bacterias,
virus, levaduras, células, fragmentos de células, cadenas grandes
de ácidos nucleicos, microorganismos, fragmentos de microorganismos,
y complejos biológicos grandes. El microorganismo se entiende que
incluye el microorganismo entero o varias formas o fragmentos, el
microorganismo puede someterse durante su ciclo de vida.
Si todo el fluido biológico no se retira de la
cámara interior 24, la tapa de sellado 32 puede retirarse tirando
de la lengüeta 42 con un dedo con suficiente presión para retirar
la tapa 32. Esto permite que el aire entre en la cámara 24. El
dispositivo 10 es sellado de nuevo entonces y se aplica de nuevo
presión. Esta etapa puede repetirse hasta que todo el fluido
biológico es sacado de la cámara 24.
El método de uso puede finalizar en este punto si
todo lo que se desea es filtración para producir un líquido
aclarado para análisis posterior del líquido tal como a través de
un método diagnóstico para determinación de la presencia o cantidad
de uno o más analitos en el líquido. El dispositivo puede
simplemente ser descartado en un contenedor adecuado de residuos
biopeligrosos.
Sin embargo, si la extracción de analitos a
partir de la materia en partículas se desea para uso en un método
de ensayo diagnóstico adicional, el método de uso del dispositivo
10 incluye también un procedimiento de extracción.
Como se utiliza aquí, analitos pueden ser
antígenos, anticuerpos, receptores, ligandos, quelatos, proteínas,
carbohidratos, enzimas, polisacáridos, lipopolisacáridos, ácidos
nucleicos, ADN, ARN, pesticidas, herbicidas, compuestos inorgánicos
u orgánicos o cualquier material para el que puede encontrarse un
reactivo de unión específico.
Por consiguiente, la siguiente etapa es retirar
la tapa de sellado 32 de la parte superior 26 del cuerpo tubular 12
tirando la lengüeta 42 de la tapa de sellado 32 con un dedo. Uno o
más reactivos de extracción son añadidos entonces a la cámara
interior 24 del cuerpo tubular 12. El tipo de reactivo(s) de
extracción utilizados depende de los analito(s) de interés.
Ejemplos de reactivos de extracción que podrían utilizarse, pero no
por medio de limitación, incluyen reactivos de extracción de
proteasa, reactivos de extracción de detergente alcalino, reactivos
de extracción de lipasa, reactivos de extracción ácida, reactivos
de extracción alcalina, reactivos de extracción por reducción,
reactivos de extracción por oxidación, y reactivos de extracción
orgánica. Un técnico en la materia conocería qué reactivo(s)
de extracción utilizar para extraer un analito o analitos deseados
a partir de la materia en partículas. La parte superior 26 del
dispositivo 10 es entonces tapada, y la presión positiva es
impartida a la cámara interior 24 apretando en el exterior 20 del
cuerpo tubular flexible 12. Esto provoca que uno o más reactivos
contacten la materia particular retenida en el conjunto de filtro
18, rompiendo el material en partículas, si está presente, de
manera que se retiran un analito o analitos de interés y el
material en partículas restante más grande que el tamaño de los
poros del conjunto de filtro 18 se deja detrás en el conjunto de
filtro 18. Simultáneamente, uno o más reactivos y
analito(s), si están presente, son sacados del dispositivo
10 a través de la tobera 80, en uno o más tubos de extracción para
extracción adicional o ensayo diagnóstico. El dispositivo de
filtración y extracción 10 es descartado entonces.
Ejemplos de métodos de ensayo diagnóstico
incluyen, pero no por medio de limitación,
radio-inmunoensayo (RIA), inmunoensayo enzimático
(EIA), métodos fluorescentes, quimioluminiscencia, resonancia de
plasma de superficie (SPR), inmunoensayo óptico (OIA), métodos
espectroscópicos, métodos microscópicos, y métodos de amplificación
con ácido nucleico. El número de tubos de extracción depende del
número de analitos que están siendo sometidos a ensayo y de la
cantidad de reactivos de extracción utilizados.
El dispositivo de filtración y extracción 10 de
la presente invención es un dispositivo manual de una pieza,
simple, desechable que libera un líquido biológico aclarado y/o uno
o más analitos diferentes directamente a un método analítico sin la
necesidad de centrifugación. La extracción de analitos a partir de
material en partículas retenido en el dispositivo 10 puede
conseguirse en el mismo dispositivo simple 10, sin la necesidad de
re-suspenderse y transferir material en partículas
desde un tubo centrífugo a un tubo de análisis. El dispositivo 10
separa también analitos de otras partículas más grandes, elimina la
necesidad de re-centrifugar o filtrar una solución
de analito y partícula antes del análisis. Se han desarrollado
dispositivos de filtración manual de no centrifugación tales como
dispositivos de filtración de tipo jeringa, pero sufren de los
inconvenientes mencionados antes en la sección anterior de la
invención.
Un uso ejemplar del dispositivo de filtración y
extracción 10 de la presente invención se describirá con orina como
el fluido biológico y un componente o cuerpo elemental de
tracomatis Chlamydia (lipopolisacárido (LPS)) como el analito que
debe extraerse de la materia en partículas retenida, es decir,
organismos Chlamydia. Primero, se retira un milímetro de orina de
una copa de acumulación y se transfiere al dispositivo de
filtración y extracción 10. El dispositivo 10 es tapado, y la orina
es sacada del dispositivo 10 en un contenedor adecuado de residuos
apretando el exterior 20 del cuerpo tubular flexible 12. El
dispositivo 10 es abierto entonces y dos gotas de un reactivo de
extracción de proteasa vendido bajo la marca Chlamydia OIA Reagent
1A por BioStar, Inc. o Boulder, Colorado se añaden a la cámara 24.
El dispositivo 10 puede quedarse en una posición vertical en su
superficie inferior plana 58 en una parte superior del torno
mientras los reactivos son añadidos. El reactivo 1A es seguido por
la adición de 6 gotas de un reactivo de extracción de detergente
alcalino vendido como Chlamydia Reagent 1B por BioStar, Inc.. El
dispositivo 10 es tapado y los reactivos de extracción combinados
son sacados del dispositivo 10 dentro de un tubo de extracción
apretando el exterior 20 del cuerpo tubular flexible 12. Una vez
que todo el reactivo es sacado del dispositivo 10, el dispositivo
10 puede desecharse dentro de un contenedor adecuado de residuos
biopeligrosos. Posteriormente, 6 gotas de neutralizador vendido como
Reagent 2 por BioStar, Inc. pueden añadirse a la muestra en el tubo
de extracción para neutralizar la muestra. Por "neutralizar" se
entiende la adición de un sistema compensador que consigue un
intervalo de pH final de 6,0 a 8,0. La muestra en el tubo de
extracción puede analizarse entonces para detección del analito
Chlamydia trachomatis (LPS) que utiliza un procedimiento de ensayo
tal como el procedimiento de ensayo CHLAMYDIA OIA por BioStar,
Inc.
Otro uso ejemplar del dispositivo de filtración y
extracción 10 de la presente invención se describirá ahora con
orina como el fluido biológico y dos analitos, componentes de
Neisseria gonorrhoeae (pared de célula exterior) y Chlamydia
trachomatis (LPS), como los analitos que deben extraerse de la
materia en partículas retenida. Primero, se retira un milímetro de
orina de una copa de acumulación y se transfiere al dispositivo de
filtración y extracción 10. El dispositivo 10 es tapado, y la orina
es sacada del dispositivo 10 dentro de un contenedor adecuado de
residuos apretando el exterior 20 del cuerpo tubular flexible 12.
El dispositivo 10 se abre entonces y 210 microlitros de reactivo de
extracción de detergente alcalino vendido como Chlamydia OIA Reagent
1B por BioStar, Inc. se añade a la cámara 24. El dispositivo 10 se
tapa y 50 microlitos de reactivo de extracción se sacan del
dispositivo 10 dentro de un primer tubo de extracción para la
determinación del analito Chlamydia trachomatis (LPS) y 100
microlitos de reactivo de extracción se sacan en un segundo tubo de
extracción para determinación del analito Neisseria gonorrhoeae
analyte (pared de célula exterior). Una vez todo el reactivo es
sacado del dispositivo 10, el dispositivo 10 puede desecharse en un
contenedor adecuado de residuos biopeligrosos.
En el primer tubo de extracción, 14 microlitos de
reactivo de extracción de proteasa vendidos bajo la marca Chlamydia
OIA Reagent 1A se añaden a la muestra, y se permite incubar durante
aproximadamente dos minutos. Posteriormente, se añaden 50 microlitos
de reactivo de neutralización vendido como Reagent 2 por BioStar,
Inc. se añade a la muestra, y luego la muestra resultante es
analizada en un ensayo Chlamydia, preferiblemente inmunoensayo
óptico, para la detección del analito Chlamydia trachomatis
(LPS).
En el segundo tubo de extracción, 87 microlitos
de reactivo de neutralización vendido como Reagent 2 por BioStar,
Inc. se añadieron a la muestra, y a continuación la muestra
resultante se analiza en un ensayo Neisseria gonorrhoeae,
preferiblemente un inmunoensayo óptico, para la detección del
analito Neisseria gonorrhoeae (pared de célula exterior).
Lo que sigue es una tabla que demuestra los datos
del procesamiento de 42 muestras de orina macho Chlamydia positiva.
Las muestras fueron positivas de cultivo de tejido basadas en una
muestra uretral. Un milímetro de orina se filtró en el dispositivo
de filtración y extracción 10 de la presente invención y un
milímetro de la misma muestra de orina se centrifugó para granular
los cuerpos elementales y células en la muestra. El método de
filtración y extracción fue el mismo que el descrito anteriormente
para extracción del analito Chlamydia trachomatis, y el método de
ensayo fue el procedimiento de ensayo CHLAMYDIA OIA por BioStar,
Inc. La muestra centrifugada fue resuspendida en medios de
extracción y a continuación procesada en el procedimiento de ensayo
CHLAMYDIA OIA. El cultivo de tejido se consideró el mejor medio de
identificación de la infección Chlamydia. El dispositivo de
filtración y extracción 10 (30/41=73,1%) realizado muy comparable
al método de centrifugación convencional (32/42=76.2%) en la
recuperación de Chlamydia de una muestra de orina positiva.
Aunque esta invención ha sido descrita en
términos de una forma de realización preferida, otras formas de
realización aparentes a aquellas del técnico ordinario en la
materia están también dentro del alcance de esta invención. Por
consiguiente, el alcance de la invención está destinado para ser
definido solamente por las reivindicaciones que siguen.
Claims (33)
1. Un dispositivo de filtración y de extracción,
que comprende:
un cuerpo flexible (12) que tiene un extremo
superior abierto (26), y una pared interna (22) que define una
cámara interior (24);
un mecanismo de sellado (14) adaptado para sellar
el extremo superior abierto (26) del cuerpo (12);
un conjunto de filtro de gradiente (18) que
incluye al menos un filtro (84); y
un conjunto de soporte (16) llevado por el cuerpo
(12), el conjunto de filtro de gradiente (18) soportado por el
conjunto de soporte (16),
por lo que el cuerpo flexible (12) que es
adaptado para ser apretado por el dedo de un usuario para impartir
una presión positiva en dicha cámara (24) suficiente para provocar
que un fluido en dicha cámara fluya a través de dicho conjunto de
filtro (18).
2. El dispositivo según la reivindicación 1,
donde el cuerpo (12) es tubular.
3. El dispositivo según la reivindicación 1 o la
reivindicación 2, donde el cuerpo (12) está hecho de PVC.
4. El dispositivo según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde el cuerpo (12) incluye un
anillo rígido (54) en el extremo superior.
5. El dispositivo según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde el cuerpo incluye un extremo
inferior abierto (28) y el conjunto de soporte (16) es llevado por
el cuerpo (12) cerca del extremo inferior abierto (28).
6. El dispositivo según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde el mecanismo de sellado (14) es
una tapa de sellado.
7. El dispositivo según la reivindicación 6,
donde la tapa de sellado está hecha de PVC y se fija al cuerpo
(12).
8. El dispositivo según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde el conjunto de soporte (16)
incluye una tobera (80) adaptada para distribuir dicho fluido desde
dicho dispositivo.
9. El dispositivo según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde el conjunto de soporte (16)
incluye un soporte cóncavo, circular (72) que soporta dicho
conjunto de filtro (18).
10. El dispositivo según la reivindicación 9,
donde el soporte (72) incluye una pluralidad de nervaduras de
soporte radial (78) que soportan dicho conjunto de filtro (18).
11. El dispositivo según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde el conjunto de soporte (16)
incluye una superficie inferior plana (58) para colocar el
dispositivo en una posición vertical en una superficie plana.
12. El dispositivo según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde el conjunto de soporte (16)
está hecho de un material rígido.
13. El dispositivo según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde el conjunto de filtro (18)
incluye un tamaño de los poros que oscila desde 0,5 a 4 micras.
14. El dispositivo según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde al menos un filtro (84) está
hecho de un material seleccionado del grupo que consta de
polisulfona, nylon, polipropileno, celulosa, y acetato de
celulosa.
15. El dispositivo según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde el filtro (84) es
hidrófilo.
16. El dispositivo según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde el conjunto de filtro (18)
incluye un filtro de gradiente individual.
17. El dispositivo según la reivindicación 16,
donde el tamaño de los poros efectivo del filtro está en el
intervalo de 0,69 a 0,87 micras.
18. El dispositivo según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 15, donde el conjunto de filtro (18) incluye
filtros homogéneos múltiples con al menos dos de los filtros que
tienen un tamaño de los poros diferente, y los filtros múltiples
apilados de manera que un filtro con un tamaño de los poros más
pequeño es localizado por debajo de un filtro con un tamaño de los
poros más grande.
19. El dispositivo según la reivindicación 18,
donde una membrana de nylon tejida es localizada entre filtros.
20. El dispositivo según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, donde el conjunto de filtro incluye
una periferia que está a nivel con la pared interna del cuerpo.
21. Un método para filtrar un fluido biológico
que tiene materia en partículas y líquido y que extrae uno o más
analitos a partir de la materia en partículas, comprendiendo el
método:
proporcionar un dispositivo de filtración y de
extracción que tiene la construcción indicada en cualquiera de las
reivindicaciones precedentes;
añadir el fluido biológico a la cámara a través
del extremo superior abierto;
cerrar y sellar el extremo superior con el
mecanismo de sellado;
apretar el cuerpo flexible de manera que se
imparte una presión positiva a la cámara suficiente para provocar
que el fluido biológico fluya a través del conjunto de filtro de
manera que la materia en partículas es retenida por el conjunto de
filtro y el líquido es sacado del dispositivo;
dejar sin sellar y abrir el extremo superior del
cuerpo;
añadir al menos un reactivo a la cámara a través
aun así el extremo superior abierto; y
apretar el cuerpo flexible de manera que se
imparte una presión positiva a la cámara suficiente para provocar
que al menos un reactivo fluya a través de dicho conjunto de filtro
de manera que uno o más analitos a partir de la materia en
partículas se extraen por al menos un reactivo y se sacan de
dispositivo para un método de ensayo de diagnóstico adicional.
22. El método según la reivindicación 21, donde
el fluido biológico es orina.
23. El método según la reivindicación 21 o la
reivindicación 22, donde uno o más analitos es un lipopolisacárido
obtenido de Chlamydia.
24. El método según la reivindicación 21 o la
reivindicación 22, donde uno o más analitos es una proteína de la
pared de célula exterior de Neisseria gonorrhea.
25. El método según la reivindicación 21, donde
la materia en partículas incluye un virus del que es extraído uno o
más analitos.
26. El método según la reivindicación 21, donde
la materia en partículas incluye bacteria de la que es extraída uno
o más analitos.
27. El método según la reivindicación 21, que
incluye adicionalmente distribuir al menos un reactivo dentro de
contenedores de ensayo múltiples para someter a ensayo analitos
diferentes.
28. El método según la reivindicación 21, que
incluye adicionalmente detecta la presencia de un analito sacado
del dispositivo utilizando un procedimiento diagnóstico
seleccionado del grupo que consta de
radio-inmunoensayo, inmunoensayo óptico,
inmunoensayo enzimático, amplificación con ácido nucleico,
quimioluminiscencia, y resonancia de plasma de superficie.
29. El método según la reivindicación 21, que
incluye adicionalmente utilizar el líquido expresado en un método
diagnóstico para determinar la presencia de un analito.
30. El método según la reivindicación 23, donde
la etapa de añadir al menos un reactivo a la cámara a través del
extremo superior abierto comprende añadir un reactivo de extracción
de proteasa a la cámara a través del extremo superior abierto, y
añadir un reactivo de extracción de detergente alcalino a la cámara
a través del extremo superior abierto, y
donde apretando el cuerpo flexible de manera que
se imparte una presión positiva a la cámara suficiente para
provocar que los reactivos fluyan a través de dicho conjunto de
filtro resulta en la extracción de uno o más analitos de
lipopolisacáridos a partir de uno o más microorganismos Chlamydia y
retirada de los mismos desde el dispositivo.
31. El método según la reivindicación 24, donde
la etapa de añadir al menos un reactivo a la cámara a través del
extremo superior abierto comprende añadir un reactivo de extracción
de detergente alcalino a la cámara a través del extremo superior
abierto, y
donde apretando el cuerpo flexible de manera que
se imparte una presión positiva a la cámara suficiente para
provocar que los reactivos fluyan a través de dicho conjunto de
filtro resulta en extracción de uno o más analitos desde uno o más
microorganismos Neisseria gonorrhoeae retenidos y la retirada
de ellos del dispositivo.
32. El método según la reivindicación 21, donde
los reactivos de extracción y analitos son enviados en un primer
contenedor de extracción y un segundo contenedor de extracción,
incluyendo el método adicionalmente añadir un reactivo de extracción
de proteasa al primer contenedor de extracción para extraer uno o
más analitos y un reactivo de neutralización al primer contenedor
de extracción, y añadiendo un reactivo de neutralización al segundo
contenedor de extracción.
33. El método según la reivindicación 32, que
incluye adicionalmente detectar la presencia de uno o más analitos
en los contenedores de extracción respectivos utilizando
procedimientos de diagnóstico de inmunoensayo óptico
respectivos.
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