EP2393586B1 - Appareil de validation thermique, ensemble d'un dispositif de traitement thermique d'échantillons biologiques et d'un tel appareil, et procédé de fabrication d'un tel appareil - Google Patents

Appareil de validation thermique, ensemble d'un dispositif de traitement thermique d'échantillons biologiques et d'un tel appareil, et procédé de fabrication d'un tel appareil Download PDF

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EP2393586B1
EP2393586B1 EP09805781.3A EP09805781A EP2393586B1 EP 2393586 B1 EP2393586 B1 EP 2393586B1 EP 09805781 A EP09805781 A EP 09805781A EP 2393586 B1 EP2393586 B1 EP 2393586B1
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EP
European Patent Office
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thermal
intended
processing device
thermal processing
validation
Prior art date
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EP2393586A1 (fr
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Laurent Dilly
Martin Benjamin Klugman
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Bio Rad Innovations SAS
Original Assignee
Bio Rad Innovations SAS
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Publication date
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    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L7/00—Heating or cooling apparatus; Heat insulating devices
    • B01L7/52—Heating or cooling apparatus; Heat insulating devices with provision for submitting samples to a predetermined sequence of different temperatures, e.g. for treating nucleic acid samples
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/508—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes rigid containers not provided for above
    • B01L3/5085—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes rigid containers not provided for above for multiple samples, e.g. microtitration plates
    • B01L3/50851—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes rigid containers not provided for above for multiple samples, e.g. microtitration plates specially adapted for heating or cooling samples
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
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    • B01L2200/147—Employing temperature sensors
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
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    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
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    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/06—Auxiliary integrated devices, integrated components
    • B01L2300/0627—Sensor or part of a sensor is integrated
    • B01L2300/0663—Whole sensors

Definitions

  • Thermal treatment devices for biological samples are known in the state of the art. These are for example thermal cyclers, also called thermal cyclers or PCR machines (acronym for "Polymerase Chain Reaction”), or incubators.
  • a thermal cycler is a biological sample heater that automates the PCR reaction.
  • the device is usually provided with a heat block with heating cavities into which wells containing the reaction mixture of the PCR is to be inserted.
  • the wells are usually delimited by a plastic support, for example a "microplate” type support.
  • the jacket surrounding the temperature probe is made of metal and separated from the temperature sensor by air.
  • An object of the invention is to provide a thermal validation apparatus of an apparatus for heat treatment of biological samples, to reliably evaluate the temperature taken by the reaction mixture comprising the biological samples during the heat treatment.
  • an object of the invention is a thermal validation apparatus according to claim 1.
  • the inventors have noticed that, in the apparatus of the state of the art, the metal jacket was very quickly put to the temperature of the heating cavities, so that the temperature measured by the temperature probe corresponds in fact to that of the thermal block of the device heat treatment.
  • the inventors have further noted that, during a heat treatment of biological samples, the temperature of the reaction mixture differs substantially from the temperature of the reaction block. Thanks to the invention, the temperature probe is in conditions close to those of the reaction mixture, enabling it to measure the temperature that the reaction mixture would take, and not the temperature taken by the thermal block.
  • the invention also relates to a thermal validation system according to claim 8.
  • An optional feature of the thermal validation system is in claim 9.
  • the invention also relates to an assembly according to claim 10.
  • Optional features of the assembly are in claims 11 and 12.
  • the invention also relates to a method of manufacturing a thermal validation apparatus according to claim 13.
  • Optional features of the manufacturing method are in claims 14 and 15.
  • the thermal cycler 100 comprises a body 102 delimiting a space 104 intended to receive a microplate 106, and a cover 108 attached to the body 102 and intended to close the space 104 receiving the microplate 106.
  • the microplate 106 which is for example marketed by Bio-Rad, forms a plastic support for biological samples. More specifically, the microplate 106 comprises a rectangular main wall 110 comprising an upper face 112. The microplate 106 further comprises wells 114 for receiving biological samples.
  • each well 114 is delimited by a liner 116 carried by the main wall 110, and of a shape adapted to that of the heating cavities 120 which will be described below.
  • the liner 116 is conical, or half-cup or test tube.
  • Well 114 thus corresponds to the volume extending inside the liner 116.
  • the wells 114 open through the upper face 112.
  • the wells 114 are arranged in a matrix, generally 12 per well, ie 96 wells.
  • the space 104 comprises a bottom 118 (also called thermal block), opposite the cover 108 in the closed position, in which heating cavities 120 are formed.
  • Each liner 116 is intended to be inserted into a respective heating cavity 120, so that the heating cavity 120 can heat the biological samples contained in the corresponding well 114.
  • the shirts 116 have a shape matching that of the heating cavities 120 in order to be in contact with the heat block 118.
  • the lid 108 comprises a movable plate 122, intended to bear against the upper face 112 of the microplate 106, when the latter is received in the space 104 and the lid 108 is closed.
  • a thermal validation system 300 of the thermal cycler 100 is shown on the figure 3 .
  • the validation system 300 includes an internal thermal validation apparatus 302, intended to be introduced into the space 104 of the thermal cycler 100, and an external processing module 304, intended to remain outside the thermal cycler 100.
  • the internal apparatus 302 and the external module 304 are interconnected by an information exchange web 306, intended to pass between the cover 108 in the closed position and the body 102 of the thermal cycler 100.
  • the internal thermal validation apparatus 302 comprises a microplate 308, identical to the microplate 106 of the figure 1 .
  • the microplate 308 thus comprises a main wall 310 provided with an upper face 312, and shirts 316 (visible on the figure 5 ) delimiting wells 314 opening on the upper face 312.
  • the microplate 308, and in particular the shirts 316, are made of plastic and have a thickness of less than 0.5 mm.
  • the plastic is polypropylene.
  • the microplate 308 is designed to withstand the repeated temperature variations imposed by the thermocycler thermal block 100 during a PCR reaction, in particular repeated temperature variations between 20 ° C and 100 ° C. ° C, preferably between 20 ° C and 120 ° C.
  • microplate 308 is intended to remain inert to the chemical and biological agents used for the PCR.
  • the internal thermal validation apparatus 302 further comprises a first printed circuit board 318 forming a cover for attachment to the upper face 312 of the microplate 308, in order to close the wells 314 thereof.
  • the internal thermal validation apparatus 302 further comprises a cover 320 for attachment to the microplate 308 for covering both the first printed circuit board 318 and the microplate 308.
  • the cover 320 includes an upper outer face 322, extending over the upper face 312 of the microplate 308, on which the movable plate 122 of the cover 108 of the thermal cycler 100 is intended to come to bear when the cover 108 is closed with the internal validation apparatus 302 placed in the space 104.
  • the upper surface 312 of the microplate 308 and the upper outer face 322 of the cover 320 are separated by a distance of less than 8 mm, preferably less than 4 mm, so that the apparatus internal thermal validation 302 is not too thick compared to a "simple" microplate (like that of the figure 1 ), which could prevent the closure of the lid 108 of the thermal cycler 100.
  • the external module 304 comprises a two-part housing 324 and 326, and a second printed circuit board 328 enclosed in the housing 324, 326.
  • the two printed circuit boards 318, 328 are interconnected by the sheet 306.
  • the sheet 306 extends in continuity with the conductive layers of the printed circuit boards 318, 328, so that the sheet 306 (or at least its conductive portion) and these conductive layers form a single piece. This design avoids the use of connectors and / or solder between the web 306 and the printed circuit boards 318, 328, which could introduce noise in the information exchanged.
  • the external module 304 further comprises a connector 330 for enabling connection to a computer for transferring the data collected by the internal thermal validation apparatus 302.
  • the internal thermal validation apparatus 302 is placed in the space 104 of the thermal cycler 100, and the cover 108 of the latter is closed.
  • Each liner 316 is then inserted into a respective heating cavity 120 of the thermal cycler 100. It will be noted that each liner 316 conforms to the shape of the corresponding heating cavity 120 and is thus in contact with the heat block 118.
  • At least a portion of the wells 314 are measuring wells for collecting temperature measurements.
  • the figure 5 is a sectional view of a measuring well 314.
  • a thermal grease 332 is placed at the bottom of each measuring well 314.
  • the thermal grease 332 has a temperature response identical to that of water to within 5% (that is to say that the thermal grease subjected to a temperature set point will have a temperature at each moment equal to 5% close to that which would take water subjected to the same instruction), at least for the speeds in the thermal cycler 100, in particular for heating rates between 3 ° C per second and 5 ° C per second.
  • the temperature of the thermal fat Tg is always less than 5% of the water temperature Te.
  • the water temperature stabilizes at 88.7 ° C, while that of thermal grease stabilizes at 89 ° C, less than 5% difference.
  • the thermal grease 332 Due to its viscosity, the thermal grease 332 remains at the bottom of the heat sink 314 and is unlikely to stick on the first circuit board 318, even when the device is upside down, which can happen when 'a transport.
  • a temperature probe 334 is placed in each measurement well 314, and is immersed in the thermal grease 332. Specifically, each temperature probe 334 is attached to the first printed circuit board 318. To provide the measured temperature value at the first printed circuit board 318, each electrical wire 336 of each probe is soldered directly thereto.
  • the thermal grease is intended to simulate the aqueous liquid present in the reaction mixture of a PCR. Thus, the probe is in conditions even closer to real conditions.
  • the temperature probe 334 is separated from the thermal block only by the thickness of the plastic jacket and by a thickness of thermal grease.
  • a microplate 308 is obtained, which is a micro-plate adapted to the heating device 100, that is to say adapted for use in the context of a PCR with the thermal cycler 100.
  • At least one temperature probe 334 is attached to a printed circuit board 318 for forming a cover.
  • Each well 314 for receiving a temperature probe 334 is filled with thermal grease 332.
  • the cover 318 is fixed on the upper face 312 of the main wall in order to place each temperature probe 334 in a respective well 314 filled with thermal grease 332, and in order to close at least each of these wells 314.
  • the invention is not limited to this type of thermal treatment device for biological samples.
  • the invention could in particular also apply to incubators of biological samples.

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Description

  • Des dispositifs de traitement thermique d'échantillons biologiques sont connus dans l'état de la technique. Il s'agit par exemple de thermocycleurs, aussi appelés cycleurs thermiques ou machines PCR (acronyme anglais pour « Réaction en Chaîne par Polymérase »), ou encore d'incubateurs.
  • Un thermocycleur est un dispositif de chauffage d'échantillons biologiques automatisant la réaction de PCR. Le dispositif est habituellement muni d'un bloc thermique avec des cavités chauffantes dans lesquelles des puits contenant le mélange réactionnel de la PCR est destiné à être inséré. Les puits sont délimités habituellement par un support en plastique, par exemple un support de type « microplaque ».
  • Afin de valider thermiquement le thermocycleur, par exemple pour contrôler sa dérive en température, il est connu d'utiliser un appareil de validation thermique d'un dispositif de traitement thermique d'échantillons biologiques, du type comprenant :
    • au moins une chemise, chaque chemise délimitant un puits et étant destinée à être insérée dans une cavité respective du dispositif de traitement thermique, destinée à chauffer ou refroidir des échantillons biologiques, et
    • une sonde de température respective placée dans chaque puits.
  • Dans l'état de la technique, la chemise entourant la sonde de température est en métal et séparée de la sonde de température par de l'air.
  • Un but de l'invention est de fournir un appareil de validation thermique d'un appareil de traitement thermique d'échantillons biologiques, permettant d'évaluer de manière fiable la température prise par le mélange réactionnel comprenant les échantillons biologiques au cours du traitement thermique.
  • A cet effet, un objet de l'invention est un appareil de validation thermique selon la revendication 1.
  • En effet, les inventeurs ont remarqué que, dans l'appareil de l'état de la technique, la chemise en métal se mettait très rapidement à la température des cavités chauffantes, de sorte que la température mesurée par la sonde de température correspond en fait à celle du bloc thermique du dispositif de traitement thermique. Or, les inventeurs ont en outre remarqué que, lors d'un traitement thermique d'échantillons biologiques, la température du mélange réactionnel diffère sensiblement de la température du bloc réactionnel. Grâce à l'invention, la sonde de température se trouve dans des conditions proches de celles du mélange réactionnel, lui permettant de mesurer la température que prendrait ce mélange réactionnel, et non la température prise par le bloc thermique.
  • Des caractéristiques optionnelles de l'appareil de validation thermique figurent aux revendications 2 à 7.
  • L'invention a également pour objet un système de validation thermique selon la revendication 8. Une caractéristique optionnelle du système de validation thermique figure en revendication 9.
  • L'invention a également pour objet un ensemble selon la revendication 10. Des caractéristiques optionnelles de l'ensemble figurent aux revendications 11 et 12.
  • L'invention a également pour objet un procédé de fabrication d'un appareil de validation thermique selon la revendication 13. Des caractéristiques optionnelles du procédé de fabrication figurent aux revendications 14 et 15.
  • Les caractéristiques et avantages de l'invention, ainsi que d'autres, apparaîtront à la lecture de la description qui va suivre d'un exemple de réalisation de l'invention dans le cadre d'un thermocycleur. La description fait référence aux dessins annexés, parmi lesquels :
    • la figure 1 est une vue tridimensionnelle d'un thermocycleur et d'une microplaque destinée à être disposée dans le thermocycleur,
    • la figure 2 est une vue tridimensionnelle, de dessous, de la microplaque de la figure 1,
    • la figure 3 est une vue tridimensionnelle d'un système de validation thermique du thermocycleur de la figure 1,
    • la figure 4 est une vue tridimensionnelle éclatée du système de validation thermique de la figure 3,
    • la figure 5 est une vue en coupe d'un appareil de validation thermique du système des figures 3 et 4, et
    • la figure 6 est un graphe montrant l'évolution de la température de l'eau et de la température d'une graisse thermique en réponse à une consigne de température.
  • Un thermocycleur 100 est représenté sur la figure 1. Le thermocycleur 100 comprend un corps 102 délimitant un espace 104 destiné à recevoir une microplaque 106, et un couvercle 108 attaché au corps 102 et destiné à fermer l'espace 104 recevant la microplaque 106.
  • La microplaque 106, qui est par exemple commercialisée par la société Bio-Rad, forme un support en plastique d'échantillons biologiques. Plus précisément, la microplaque 106 comprend une paroi principale 110 rectangulaire comprenant une face supérieure 112. La microplaque 106 comprend en outre des puits 114 de réception d'échantillons biologiques.
  • En référence à la figure 2, chaque puits 114 est délimité par une chemise 116 portée par la paroi principale 110, et de forme adaptée à celle des cavités chauffantes 120 qui seront décrites plus loin. Généralement la chemise 116 est en forme conique, ou de demi-coupelle ou de tube à essai. Le puits 114 correspond ainsi au volume s'étendant à l'intérieur de la chemise 116.
  • De retour à la figure 1, les puits 114 débouchent par la face supérieure 112. Les puits 114 sont disposés en matrice, généralement de 12 par 8 puits, soit 96 puits.
  • L'espace 104 comprend un fond 118 (aussi appelé bloc thermique), opposé au couvercle 108 en position fermée, dans lequel des cavités chauffantes 120 sont ménagées. Chaque chemise 116 est destinée à être insérée dans une cavité chauffante 120 respective, afin que la cavité chauffante 120 puisse chauffer les échantillons biologiques contenus dans le puits 114 correspondant. Les chemises 116 ont une forme épousant celle des cavités chauffantes 120 afin d'être au contact du bloc thermique 118.
  • Le couvercle 108 comprend une plaque mobile 122, destinée à venir appuyer contre la face supérieure 112 de la microplaque 106, lorsque cette dernière est reçue dans l'espace 104 et que le couvercle 108 est fermé.
  • Un système de validation thermique 300 du thermocycleur 100 est représenté sur la figure 3.
  • Le système de validation 300 comprend un appareil interne de validation thermique 302, destiné à être introduit dans l'espace 104 du thermocycleur 100, et un module de traitement externe 304, destiné à rester à l'extérieur du thermocycleur 100. L'appareil interne 302 et le module externe 304 sont reliés entre eux par une nappe 306 d'échange d'informations, destinée à passer entre le couvercle 108 en position fermée et le corps 102 du thermocycleur 100.
  • En référence à la figure 4, l'appareil interne de validation thermique 302 comprend une microplaque 308, identique à la microplaque 106 de la figure 1. La microplaque 308 comprend ainsi une paroi principale 310 munie d'une face supérieure 312, et des chemises 316 (visibles sur la figure 5) délimitant des puits 314 débouchant sur la face supérieure 312.
  • La microplaque 308, et en particulier les chemises 316, sont en plastique et ont une épaisseur inférieure à 0,5mm. Dans l'exemple décrit, le plastique est du polypropylène. De même que pour la microplaque 106, la microplaque 308 est destinée résister aux variations répétées de température imposées par le bloc thermique du thermocycleur 100 lors d'une réaction de PCR, en particulier à des variations répétées de la température entre 20°C et 100°C, de préférence entre 20°C et 120°C.
  • En outre, la microplaque 308 est destinée à rester inerte aux agents chimiques et biologiques utilisés pour la PCR.
  • L'appareil interne de validation thermique 302 comprend en outre une première carte de circuit imprimé 318 formant un capot destiné à être fixé sur la face supérieure 312 de la microplaque 308, afin de fermer les puits 314 de cette dernière.
  • L'appareil interne de validation thermique 302 comprend en outre un couvercle 320 destiné à être fixé sur la microplaque 308 pour recouvrir à la fois la première carte de circuit imprimé 318 et la microplaque 308. Le couvercle 320 comprend une face externe supérieure 322, s'étendant au-dessus de la face supérieure 312 de la microplaque 308, sur laquelle la plaque mobile 122 du couvercle 108 du thermocycleur 100 est destinée à venir appuyer lorsque le couvercle 108 est refermé avec l'appareil interne de validation 302 placé dans l'espace 104.
  • De préférence, lorsque l'appareil est fermé, la surface supérieure 312 de la microplaque 308 et la face externe supérieure 322 du couvercle 320 sont séparées d'une distance inférieure à 8 mm, de préférence inférieure à 4 mm, afin que l'appareil interne de validation thermique 302 n'ait pas une épaisseur trop grande par rapport à une microplaque « simple » (comme celle de la figure 1 ), ce qui risquerait d'empêcher la fermeture du couvercle 108 du thermocycleur 100.
  • Le module externe 304 comprend un boîtier en deux parties 324 et 326, ainsi qu'une seconde carte de circuit imprimé 328 enfermée dans le boîtier 324, 326.
  • Les deux cartes de circuit imprimé 318, 328 sont connectées entre elles par la nappe 306. De préférence, la nappe 306 s'étend dans la continuité des couches conductrices des cartes de circuit imprimé 318, 328, de sorte que la nappe 306 (ou du moins sa partie conductrice) et ces couches conductrices ne forment qu'une seule pièce. Cette conception permet d'éviter l'utilisation de connecteurs et/ou de soudures entre la nappe 306 et les cartes de circuit imprimé 318, 328, qui risqueraient d'introduire du bruit dans les informations échangées.
  • Le module externe 304 comprend en outre un connecteur 330 destiné à permettre de le connecter à un ordinateur, pour y transférer les données recueillies par l'appareil interne de validation thermique 302.
  • En référence à la figure 5, l'appareil interne de validation thermique 302 est placé dans l'espace 104 du thermocycleur 100, et le couvercle 108 de ce dernier est refermé. Chaque chemise 316 est alors insérée dans une cavité chauffante 120 respective du thermocycleur 100. On remarquera que chaque chemise 316 épouse la forme de la cavité chauffante 120 correspondante et est ainsi en contact avec le bloc thermique 118.
  • Au moins une partie des puits 314 sont des puits de mesure, destinés à recueillir des mesures de température. La figure 5 est une vue en coupe d'un puits 314 de mesure.
  • Une graisse thermique 332 est placée au fond de chaque puits 314 de mesure. La graisse thermique 332 a une réponse en température identique à celle de l'eau à 5% près (c'est-à-dire que la graisse thermique soumise à une consigne de température aura une température à chaque instant égale à 5% près à celle que prendrait de l'eau soumise à la même consigne), au moins pour les vitesses de chauffage utilisées dans le thermocycleur 100, en particulier, pour des vitesses de chauffage comprises entre 3°C par seconde et 5°C par seconde. Par exemple, on a représenté sur la figure 6 la variation de température d'eau Te et la variation de la température de la graisse thermique Tg au cours d'une consigne de température comprenant une montée en température de 25°C à 90°C, un maintien à 90°C pallier et une descente de 90°C à 30°C (la courbe Tg pour la graisse thermique est décalée de 10°C vers le bas afin de la distinguer de la courbe Te pour l'eau). Comme le montre cette figure, la température de la graisse thermique Tg reste toujours à moins de 5% de la température d'eau Te. En particulier, le long du palier à 90°C, la température de l'eau se stabilise à 88.7°C, tandis que celle de la graisse thermique se stabilise à 89°C, soit moins de 5% de différence.
  • Grâce à sa viscosité, la graisse thermique 332 reste au fond du puits thermique 314 et a peu de chance de venir se coller sur la première carte de circuit imprimée 318, même lorsque le dispositif est à l'envers, ce qui peut arriver lors d'un transport.
  • Une sonde de température 334 est placée dans chaque puits 314 de mesure, et baigne dans la graisse thermique 332. Plus précisément, chaque sonde de température 334 est fixée à la première carte de circuit imprimée 318. Afin de fournir la valeur de la température mesurée à la première carte de circuit imprimé 318, chaque fil électrique 336 de chaque sonde est soudé directement à celle-ci.
  • La graisse thermique a pour but de simuler le liquide aqueux présent dans le mélange réactionnel d'une PCR. Ainsi, la sonde se trouve dans des conditions encore plus proches des conditions réelles.
  • D'après ce qui précède, la sonde de température 334 n'est séparée du bloc thermique que par l'épaisseur de la chemise en plastique et par une épaisseur de graisse thermique.
  • Pour fabriquer l'appareil interne de validation thermique 302, les étapes suivantes sont réalisées.
  • Il est obtenu une microplaque 308, qui est une micro-plaque adaptée au dispositif de chauffage 100, c'est-à-dire adaptée pour être utilisée dans le cadre d'une PCR avec le thermocycleur 100.
  • Au moins une sonde de température 334 est fixée sur une carte de circuits imprimée 318 destinée à former un capot.
  • Chaque puits 314 destiné à recevoir une sonde de température 334 est rempli avec la graisse thermique 332.
  • Le capot 318 est fixé sur la face supérieure 312 de la paroi principale afin de placer chaque sonde de température 334 dans un puits respectif 314 rempli de graisse thermique 332, et afin de fermer au moins chacun de ces puits 314.
  • Bien que le mode de réalisation décrit précédemment concerne un thermocycleur, l'invention n'est pas limitée à ce type de dispositif de traitement thermique d'échantillons biologiques. L'invention pourrait en particulier également s'appliquer aux incubateurs d'échantillons biologiques.

Claims (15)

  1. Appareil de validation thermique (302) d'un dispositif de traitement thermique (100) d'échantillons biologiques, le dispositif de traitement thermique (100) comprend un corps (102) délimitant un espace (104) destiné à recevoir une microplaque (106), et un couvercle (108) attaché au corps (102) et destiné à fermer l'espace (104), l'appareil de validation thermique étant destiné à être introduit dans l'espace (104) du dispositif de traitement thermique (100) et comprenant :
    - une microplaque (308) comprenant :
    - une paroi principale (310), et
    - une pluralités de chemises (316) en matière plastique, chaque chemise (316) délimitant un puits (314) et étant destinée à être insérée dans une cavité (120) respective du dispositif de traitement thermique (100), destinée à chauffer ou refroidir des échantillons biologiques,
    - une sonde de température (334) respective placée au moins dans un des puits (314), et
    - un capot (318) fixé sur la face supérieure (312) de la paroi principale (310) et fermant au moins chaque puits (314) dans lequel une sonde de température (334) est placée, chaque sonde de température (334) étant fixée sur le capot (318).
  2. Appareil (302) selon la revendication 1, caractérisé en outre en ce que chaque chemise (316) est en polypropylène.
  3. Appareil (302) selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en outre en ce que chaque chemise (316) est destinée à résister à des variations répétées de la température entre 20°C et 100°C, de préférence entre 20°C et 120°C.
  4. Appareil (302) selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en outre en ce que chaque chemise (316) a une épaisseur inférieure à 0.7 mm, de préférence inférieure à 0.5 mm.
  5. Appareil selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en outre en ce qu'il comprend une matière thermique remplissant chaque puits, dans laquelle la sonde de température (334) baigne, et en ce que la matière thermique a une réponse en température identique à celle de l'eau à 5% près, au moins pour des vitesses de chauffage comprises entre 3°C par seconde et 5°C par seconde.
  6. Appareil selon la revendication 5, caractérisé en outre en ce que la matière thermique est une graisse thermique (332).
  7. Appareil (302) selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en outre en ce qu'il comprend une surface externe supérieure (322), séparée de la paroi principale (310) d'une distance inférieure à 8 mm, de préférence inférieure à 4 mm.
  8. Système de validation thermique d'un dispositif de traitement thermique, le système de validation thermique comprenant un appareil de validation thermique selon l'une quelconque des revendications précédentes, destiné à être introduit dans l'espace de réception (104) du dispositif de traitement thermique, et un module de traitement externe (304), destiné à rester à l'extérieur du dispositif de traitement thermique.
  9. Système de validation thermique selon la revendication 8, dans lequel l'appareil de validation thermique (302) et le module externe (304) sont reliés entre eux par une nappe (306) d'échange d'informations, destinée à passer entre un couvercle (108) en position fermée et un (corps 102) du dispositif de traitement thermique (100).
  10. Ensemble d'un dispositif (100) de traitement thermique d'échantillons biologiques et d'un appareil de validation thermique (302) de ce dispositif de traitement thermique (100) selon l'une quelconque des revendications 1 à 7.
  11. Ensemble selon la revendication 10, caractérisé en ce que le dispositif de traitement thermique (100) est un thermocycleur.
  12. Ensemble selon la revendication 10, caractérisé en ce que le dispositif de traitement thermique est un incubateur.
  13. Procédé de fabrication d'un appareil (302) de validation thermique selon l'une quelconque des revendications 1 à 7 d'un dispositif de traitement thermique (100) destiné au chauffage ou au refroidissement d'échantillons biologiques contenus dans une microplaque (106), le dispositif de traitement thermique (100) comprenant un corps (102) délimitant un espace (104) destiné à recevoir une microplaque (106), et un couvercle (108) attaché au corps (102) et destiné à fermer l'espace (104), l'appareil de validation thermique étant destiné à être introduit dans l'espace (104) du dispositif de traitement thermique (100), caractérisé en ce qu'il comprend :
    - l'obtention d'une microplaque (308) adaptée au dispositif de traitement thermique (100), et comprenant :
    + une paroi principale (310), et
    + une pluralité de chemises (310) en matière plastique portées par la paroi principale (310) et délimitant une pluralité de puits (314) de réception d'échantillons biologiques débouchant sur une face supérieure (312) de la paroi principale (310),
    - la fixation d'au moins une sonde de température (334) sur un capot (318),
    - la fixation du capot (318) sur la face supérieure (312) de la paroi principale afin de placer chaque sonde de température (334) dans un puits respectif (314), et afin de fermer au moins chacun de ces puits (314).
  14. Procédé de fabrication selon la revendication 13, caractérisé en outre en ce qu'il comprend, avant la fixation du capot (318) :
    - le remplissage de chaque puits (314) destiné à recevoir une sonde de température (334) avec une matière thermique ayant une réponse en température identique à celle de l'eau à 5% près, au moins pour des vitesses de chauffage comprises entre 3°C par seconde et 5°C par seconde.
  15. Procédé de fabrication selon la revendication 14, caractérisé en outre en ce que la matière thermique est une graisse thermique (332).
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