EP2079682A2 - Complexes chelates dendritiques, leurs procedes de fabrication et compositions pharmaceutiques les contenant - Google Patents

Complexes chelates dendritiques, leurs procedes de fabrication et compositions pharmaceutiques les contenant

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EP2079682A2
EP2079682A2 EP07858413A EP07858413A EP2079682A2 EP 2079682 A2 EP2079682 A2 EP 2079682A2 EP 07858413 A EP07858413 A EP 07858413A EP 07858413 A EP07858413 A EP 07858413A EP 2079682 A2 EP2079682 A2 EP 2079682A2
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EP
European Patent Office
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product obtained
chain
reaction
dendrite
ethylene glycol
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP07858413A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Delphine Felder-Flesch
Jérôme STEIBEL
Annabelle Bertin
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Universite Louis Pasteur Strasbourg I
Original Assignee
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Universite Louis Pasteur Strasbourg I
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Centre National de la Recherche Scientifique CNRS, Universite Louis Pasteur Strasbourg I filed Critical Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
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Withdrawn legal-status Critical Current

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    • C07F9/6524—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having four or more nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
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    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G83/00—Macromolecular compounds not provided for in groups C08G2/00 - C08G81/00
    • C08G83/002—Dendritic macromolecules

Definitions

  • the invention relates to dendritic chelate complexes, methods for their manufacture, and pharmaceutical compositions containing them.
  • Magnetic resonance imaging and nuclear medicine have become indispensable tools for research in the field of life sciences because they provide non-invasive and atraumatic access to anatomical and functional information in a variety of medical fields. .
  • a major focus of current development concerns functional imaging, which constitutes a fundamental tool in understanding the mechanisms involved in neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease and multiple sclerosis (MS).
  • MS multiple sclerosis
  • contrast agents including a so-called magnetic marker.
  • Magnetic contrast agents currently existing are compounds in which the magnetic marker is gadolinium or manganese.
  • contrast agents are called scintigraphic contrast agents and include a so-called scintigraphic marker.
  • the most widely used scintigraphic marker is 99m technetium.
  • contrast agents must meet binding specifications. Thus, they must have good biocompatibility, low toxicity, high stability in the body, be effective at low concentrations and, if possible, be specific to targeted organs or tissues (vectorization provided by the grafted functions on the ligand).
  • Res. Imag. 2006, 24, 625-630 discloses a contrast agent which is a gadolinium chelate, wherein the chelating agent is diethylenetriamine pentaacetic acid (DTPA), as having a specificity for the brain.
  • DTPA diethylenetriamine pentaacetic acid
  • this product is toxic to the liver.
  • Min Liu et al. have proposed in Bioconj .chem. 2005, 16, 1126-1132 contrast agents in which the marker is 99m technetium, the chelating agent is diethylenetriamine pentaacetic acid (DTPA) and the ligand is a polyethylene glycol (PEG) -based polymer.
  • DTPA diethylenetriamine pentaacetic acid
  • PEG polyethylene glycol
  • This product usable in nuclear medicine, attaches to the liver and is eliminated by the kidneys, allowing imaging of the kidneys.
  • the complex is on the periphery of the dendrimer, which prevents the functionalization of the complex itself by a vectorization agent, all the ends of the dendrimer being occupied by the chelate.
  • These molecules are composed of a Gd 3+ ion chelating structure linked to a polyamide-type dendritic structure on which a targeting agent which is a beta-galactosyl residue is grafted.
  • Vectorization is a vectorization to target the liver. However, besides the fact that this product is specific for the liver and not the brain, it has a toxicity due to the polyamide dendrimer.
  • U.S. Patent Application No. 2006 / 0165601A1 discloses dendritic compounds for chelating metal cations, particularly Gd 3+ cations.
  • the chelating agent of Gd 3+ is diethylene triamine pentaacetic acid (DTPA) and the core of the dendritic structure is a polyol compound, the dendrites of this dendritic structure being composed of polyethylene glycol chains terminated by a hydroxyl group (OH) or amino (NH 2) or O-alkyl, Ci to Ci 0.
  • DTPA diethylene triamine pentaacetic acid
  • the core of the dendritic structure is a polyol compound, the dendrites of this dendritic structure being composed of polyethylene glycol chains terminated by a hydroxyl group (OH) or amino (NH 2) or O-alkyl, Ci to Ci 0.
  • OH hydroxyl group
  • NH 2 amino
  • Ci Ci 0.
  • these compounds have no specificity for the brain and have no particular vascular
  • the only product with a certain "specificity" for the brain is the Gd 3+ ion chelate derived from diethylenetriamine pentaacetic acid described by Masato Hito, who does not present any real vectorization towards the brain and which moreover presents a liver toxicity.
  • contrast agents are liver or kidney specific and may be toxic to the body, particularly in the case of the product proposed by Paula Baia et al. Due to the use of polyamide dendrimers.
  • the aim of the invention is to solve the problems of the prior art by proposing contrast agents possessing good biocompatibility, low toxicity, high sensitivity, low concentration efficacy, high vascular remanence, and, moreover, specificity ( vectorization), especially for the brain.
  • the invention provides contrast agents having a chelated complex structure of a marker - dendritic structure (s), each dendrite of the dendritic structure having a free end which can be functionalized.
  • the functionalization of the dendrites makes it possible to obtain a vectorization of the contrast agent towards a particular organ, and in particular the brain.
  • the dendrite functionalization agent may also be chosen to increase the lipophilicity of the contrast agent, in particular to enable it to cross the blood-brain barrier.
  • Another type of possible functionalization of dendrites is functionalization with a therapeutic agent.
  • Yet another type of functionalization makes it possible to increase the vascular remanence of the contrast agent of the invention.
  • Dendrites of the dendritic structure can either all have the same functionalization or some of the dendrites can have a first type of functionalization and the other dendrites of other types of functionalization, for example at least one dendrite of the dendritic structure is functionalized to increase the lipophilicity of the contrast agent and thus allow the passage of the blood-brain barrier and least another dendrite of the dendritic structure can be functionalized to increase the specificity of the contrast agent to the brain.
  • At least one dendrite of the contrast agent can be functionalized to obtain the vectorization of the complex of the invention to the brain, at least one other dendrite of the dendritic structure can be functionalized to allow the passage of the blood brain barrier, and at least one other dendrite of the dendritic structure can be functionalized with a therapeutic agent specific diseases of the central nervous system, to act directly and specifically on the brain.
  • Each dendritic structure of the invention also called dendron, consists of an inner part, also called the heart of the dendritic structure, and a periphery, which corresponds to the dendrites themselves.
  • the chelating agent or chelating structure of the magnetic or scintigraphic marker may be modified to increase the in vivo stability of the contrast agents.
  • each dendritic structure of the complex of the invention is non-toxic to a human organism, which means in particular that this dendritic structure can not be a structure based on polymers or polyamide dendrimers.
  • the invention will be better understood and other advantages and characteristics thereof will appear more clearly on reading the explanatory description which follows.
  • the invention relates to chelated dendritic complexes characterized in that they have the following general formula I:
  • M is a magnetic marker, preferably selected from Gd 3+ , Mn 2+ and 99mTc 3+ ions,
  • - [MC] is a chelate of the magnetic marker M
  • - E is a spacer
  • n 0 or 1
  • - [D] is a dendritic structure whose core comprises at least one group derived from benzyl alcohol or a benzylic amine, the benzyl ring of which is substituted in positions 3, 4, 5 by dendrites composed of polyethylene glycol units,
  • n is an integer of 1 or 2 or 4,
  • Xi is a group increasing the lipophilicity of the complex, for example a tert-butyl group (tBu),
  • p1 is an integer ranging from 0 to 12 inclusive
  • X 2 is a group increasing the specificity of the complex for a particular organ, preferably for the brain, such as L-dopamine,
  • p2 is an integer equal to 0, 1, 2 or 4 inclusive
  • X 3 a group having a therapeutic activity preferably for neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease and multiple sclerosis,
  • p3 is an integer equal to 0, 1, 2, or 4 inclusive
  • X 4 is a CH 3 group
  • B is a counterion, preferably Na + or K + , z is an integer of 0.1, 2, 3 or 4.
  • the chelating agent C is diethylenetriamine pentaacetic acid (DTPA), a catechol derived tripod or a tripod derived from 8-hydroxyquinoline, which are excellent chelating agents for Gd 3+ , Mn 2+ and 99mTc ions. 3+ .
  • DTPA diethylenetriamine pentaacetic acid
  • Mn 2+ and 99mTc ions. 3+ are excellent chelating agents for Gd 3+ , Mn 2+ and 99mTc ions. 3+ .
  • Each dendritic structure, or dendron, of the complexes of the invention is of the Fréchet dendron type as described in Dendrimers and other dendritic polymers, JM J Fréchet, DA Tomalia, Wiley, New York, 2001.
  • Fréchet's dendrons have the formulas following, according to the generation of these dendrons.
  • Fréchet Dendron of Generation 1 that is to say comprising a single dendritic structure whose internal part or core is a group of the benzyl alcohol type, the benzyl ring being substituted at 3, 4, 5 by polyether chains constituting the dendrites.
  • OR is a chain composed of ethylene glycol units (-OCH 2 CH 2 ) and X represents the chelate, denoted by [MC] in formula I,
  • the O-R chains are composed of ethylene glycol units and X represents the chelate denoted by [MC] in formula I,
  • Fréchet Dendron of generation 3 that is to say comprising four identical dendritic structures to the Fréchet dendron generation 1 above, linked in pairs to form two structures identical to Fréchet's generation 2 dendron above .
  • Each of the identical structures Fréchet dendrons of generation 2 are respectively linked in positions 3 and 5 of a benzyl alcohol type nucleus.
  • the polyether chains denoted OR in the formula above are, in the complexes of the invention, composed of ethylene glycol units and X represents the chelate, denoted by [MC] in the formula 1.
  • the benzyl ring bonded to the spacer is no longer a ring derived from a benzyl alcohol, but a ring derived from a benzylic amine.
  • E represents the spacer and OR represents dendrites composed of ethylene glycol units.
  • - Generation 2 dendritic structures in the case where the dendritic structures are connected via a spacer E to the chelate [MC]
  • the benzyl ring bonded to the spacer is of the benzylic amine type.
  • the dendritic structures then have the dendritic structure corresponding to the following formula:
  • E represents the spacer and the dendrites denoted O-R are chains composed of ethylene glycol units.
  • E represents the desired spacer and the OR chains are composed of ethylene glycol units.
  • the dendrites of the complexes of the invention comprise 3, more preferably 4, ethylene glycol units.
  • the dendritic structures of the complexes of the invention are linked by their free end in position 1 of the benzyl alcohol or benzyl amine ring to the chelate of the magnetic marker denoted by [MC] in formula I 1 either directly or via a spacer noted E in formula I.
  • a spacer may be used advantageously in the case where the chelating agent is a tripode derived from catechol or a tripode derived from 8-hydroxyquinoline but is not recommended in the case where the chelating agent is DTPA.
  • the chelating agent is DTPA
  • the monopolization of one of the branches of the DTPA for grafting the dendron or dendrons destabilizes the complex formed and it is necessary to mitigate this loss of stability by maintaining the bulky globular structure of the dendrons close to the chelate.
  • the chelating agent is a catechol derived tripode or a tripod derived from 8-hydroxyquinoline
  • the complexes formed are sufficiently stable not to require the protective effect of the bulky globular structure of the dendrons and the presence of a spacer E between this structure of the dendrons and the chelate makes it possible to move these two structures away from each other sufficiently to avoid the steric hindrance problems that may arise.
  • the spacer will make it possible to modify the biodistribution in the body of the complexes of the invention by ultimately promoting greater distribution to the brain.
  • the spacer E can be a cationic or anionic or neutral compound.
  • the neutral spacers used in the invention are diamine type spacers of formula
  • n preferably 1 or 2, that is to say that the preferred spacers are the ethylene diamine and butane diamine spacers.
  • ethylene glycol type spacers preferably tri- or tetraethyleneglycol:
  • the cationic spacers used in the invention are the aromatic ammonium or branched aliphatic ammonium type compounds.
  • the cationic spacers of the aromatic ammonium type are composed of the following units:
  • n 1 or 2.
  • branched chain aliphatic ammonium cationic spacers used in the invention have the following formula:
  • n 1 or 2.
  • the anionic spacers used in the invention have the following formula:
  • n is preferably 1 or 2.
  • the chelated dendritic complex of general formula I is a complex in which the chelating agent C is DTPA, the dendrites are functionalized with methyl groups, denoted by X 4 in the formula
  • An example of a complex according to the first embodiment of the invention is the compound of formula 11-1 below:
  • the complex of formula 11-1 above was tested in MRI imaging in healthy mice and found to have no detectable toxicity at a dose of 0.5 mmol per kg.
  • free gadolinium which has the same ionic radius as calcium, competes with calcium-dependent systems and blocks the reticuloendothelial system, which has an influence on myocardial contractibility.
  • coagulation, calcium-dependent enzymes, mitochondrial respiration and neurotransmission This can be manifested by a drop in blood pressure followed by cardiovascular arrest and pulmonary paralysis.
  • thermodynamic stability of the DTPA complexes is sufficient to avoid the release of toxic amounts of Gd 3+ .
  • LDH lactate dehydrogenase
  • concentrations varying between 1 and 10,000 ⁇ M it was found that the level of LDH and the proliferation of neuronal cells were identical with the complex of formula 11-1 according to the invention and the commercial product consisting solely of Gd 3+ chelate in which the chelating agent is DTPA.
  • BBB blood-brain barrier
  • the dendritic chelate complex of the invention having the following formula 11-2, in which the magnetic marker is Mn 2+, has the same advantages, which is an important advance in the field of Mn 2+ medical imaging called MEMRI (Manganese Enhanced Magnetic Resonance Imaging).
  • MEMRI Manganese Enhanced Magnetic Resonance Imaging
  • the marker Mn 2+ makes it possible to obtain a much higher contrast than the Gd 3+ marker, but in its MnCl 2 form currently used in animal experiments, it is very toxic because Mn 2+ is a high concentration neurotoxin. .
  • the manganese complexes are relatively unstable in vivo and are dissociated in a biological medium.
  • the contrast agent with the Mn 2+ label is very stable, diffuses slowly and is therefore nontoxic.
  • the magnetic marker is bound by coordination bonds to DTPA.
  • the DTPA-Gd 3+ chelate binds as follows:
  • the chelate of the marker magnetic or scintigraphic is a tripode derived from catechol, and no longer the DTPA.
  • the preferred complexes of the invention are the complexes of formula III-1 to III-3 below.
  • the label is Gd 3 + 1 in the formula III-2, the label is Mn 2+ and in the formula 111-3, the label is 99mTc 3+ .
  • the marker is Gd 3+
  • the marker is Mn 2+
  • the marker is 99mTc 3+ .
  • the generation complexes 3, as well as the generation complexes 1, 2 or 3 in which the dendrites are methylated tetraethylene glycol chains, and corresponding to these complexes in which the chelating agent is a tripode derived from catechol or a tripod derived from the 8-hydroxyquinoline are also preferred compounds of the invention.
  • the corresponding complexes in which the chelating structure is a tripode derived from catechol but in which the chelate is removed from the structure formed by the dendrons, of generation 1 or 2 or 3, by a spacer, noted E in the formula I 1 and which is one of the previously described spacers, are particularly preferred because they are more distributed to the brain.
  • Compounds having the following formulas III-4 to V-6 are particularly preferred:
  • Generation 3 complexes of the following formula, wherein OR represents an ethylene glycol chain with 3 or 4 ethylene glycol units.
  • the corresponding generation complexes 1 and 2 as well as the corresponding complexes in which the spacer is one of those described above, of generation 1, 2 or 3 are also all particularly preferred.
  • the effectiveness of the magnetic or scintigraphic contrast agents depends mainly on the stability of the complex formed because an in-vivo distribution of the tracer (destruction of the complex, radio element captured by a protein) induces a non-selective irradiation of the cells, causing irreversible damage. It is therefore important that the complexes used have excellent in-vivo stability.
  • the insertion of aromatic rings in the chelation sphere ensures a better rigidity of the structure and thus allows a preorganization of the ligand.
  • complexes according to the invention are complexes in which the chelating agent C is a tripod derived from 8-hydroxyquinoline and generation 1, 2 or 3, with or without a spacer, and dendrites with 3 or 4 motifs. ethylene glycol.
  • complexes corresponding to the complexes of formula VI-1 to VI-3 described above, of generation 1 or generation 3, and those of generation 1 or 2 or 3 comprising a spacer and / or whose dendrites are tetraethyleneglycol are also preferred compounds of the invention.
  • the complexes of generation 2 comprising a butane-diamine spacer corresponding to the complexes of formulas VI-1 to VI-3 above, have the following formulas VI-4 to VI-6:
  • these complexes have the same stability as those whose chelating agent is a tripode derived from catechol.
  • the lipophilicity of the complexes of the invention is increased by functionalizing at least one dendrite of the dendritic structure with a hydrophobic group.
  • this group is a tert-butyl group.
  • the third embodiment of the invention relates to chelated dendritic complexes having the general formula I wherein X1 is a tert-butyl group and p1 is an integer of 0 to 12 inclusive.
  • This complex has formula VII- 2 next:
  • This complex has the formula VI 1 -3 following:
  • This complex has the following formula VIII-3:
  • the complexes according to the third embodiment of the invention in which at least one dendrite is functionalized with a tert-butyl group are particularly preferred in the invention since these complexes cross the blood-brain barrier.
  • one or more dendrites of the dendritic structure of these complexes may be functionalized by an agent that binds to the dopaminergic receptors.
  • an agent that binds to the dopaminergic receptors is L-dopamine.
  • the complexes that are particularly preferred in the invention for use as a contrast agent having a specificity for the brain are the complexes of general formula I, the dendrites of each structure. dendritic [D] are functionalized by L-dopamine and a lipophilic enhancing group such as a tert-butyl group.
  • the preferred complexes according to the fourth embodiment of the invention are the following complexes:
  • This complex has the following formula IX-1:
  • This complex has the following formula IX-2:
  • This complex has the following formula IX-3:
  • This complex has the following formula X-2:
  • This complex has the following formula X-3:
  • the complexes corresponding to those of formula IX-1 to X-3 above but in which the dendrites are tetraethyleneglycol and / or generation 3 chains and / or comprising a spacer according to the invention are also preferred complexes of the invention.
  • the complexes of the invention have a high stability in the body, cross the blood-brain barrier, have a vectorization to the brain and have a therapeutic activity for them. neurodegenerative diseases, making them compounds with therapeutic activity particularly interesting.
  • the complexes of the invention have a chelate structure derived from diethylenetriamine pentaacetic acid (DTPA), or catechol type tripod, or tripod type 8-hydroxyquinoline.
  • DTPA diethylenetriamine pentaacetic acid
  • Their dendritic structure has at least four dendrites functionalized with a tert-butyl lipophilic group (tBu), and at least one other dendrite functionalized with a group conferring on them a specificity for the brain and at least one other dendrite functionalized by a therapeutic agent of the diseases. neurodegenerative.
  • All complexes of the invention can be synthesized by a process comprising from 6 to 19 steps from triethylene glycol using methyl 3,4,5-trihydroxybenzoate or hydroxybenzyl alcohol.
  • other objects of the invention are the methods for synthesizing the complexes of formula I.
  • Yet another subject of the invention is a process for the synthesis of the complexes of formula IV-1 to IV-3, which comprises the following steps: a) allylation of 8-hydroxyquinoline-7-methyl-methyl ester carboxylic acid with allyl bromide, b) saponification of the product obtained in step a) to obtain the corresponding acid, c) fluorination of the product obtained in step b) in order to obtain the acid fluoride corresponding, a ') reduction of the trinitrile tripod to obtain the tripod triamine, b') coupling reaction between the tripode obtained in step a ') with the product obtained in step c), c') deprotection of the alcohol function with TBAF of the product obtained in the Swern oxidation of the product obtained in (c) to give the corresponding carboxylic acid, and the coupling reaction between the product obtained in (d) and the following steps: a) allylation of 8-hydroxyquinoline-7-methyl-methyl ester carboxylic acid with allyl bro
  • Another subject of the invention is the process for the synthesis of the compounds of the invention of formula VI-1 to VI-3, which comprises the following steps: a) allylation of the methyl ester of 8-hydroxyquinoline acid -7-carboxylic acid with allyl bromide, b) saponification of the product obtained in step a) to obtain the corresponding acid, c) fluorination of the product obtained in step b) in order to obtain fluoride corresponding acid, a ') reduction of the trinitrile tripod to obtain the triamine tripod, b') coupling reaction between the tripode obtained in step a ') with the product obtained in step c), c ') deprotection of the alcohol function with TBAF of the product obtained in b'), of) Swern oxidation of the product obtained in c 1 ) in order to obtain the corresponding carboxylic acid, e ') coupling reaction between the product obtained in d ') and the following steps: a) allylation of the methyl este
  • step a) synthesis of tertbutoxy triethylene glycol from tertiobutanol, b) reaction of the product obtained in step a) with tosyl chloride, c) reaction of tosylate obtained in step b) with 3,4,5 - methyl trihydroxybenzoate, d) reduction of the product obtained in step c), preferably with LiAlH 4 , to obtain the corresponding alcohol, e) bromination of the product obtained in step d), f) reaction of the product obtained in step e) with methyl 3,5-dihydroxybenzoate, g) reduction of the product obtained in step f), preferably with LiAlH 4 , to obtain the corresponding alcohol, h) reaction of the product obtained in step g with diethylenetriamine pentaacetic dianhydride, i) reaction of the product obtained with step h) with chloride of
  • step k reaction of the product obtained in step k") with Gd (III) chloride, Mn (II) or pertechnetate.
  • Another subject of the invention is the process for synthesizing the complexes according to the invention (of formula A) in which the chelate is either the
  • the invention also relates to a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising at least one complex according to the invention or at least one complex obtained by a process according to the invention, in a pharmaceutically acceptable excipient.
  • This pharmaceutical composition may be used as a contrast agent for the detection, and understanding of the mechanism, of neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease and multiple sclerosis.
  • this pharmaceutical composition may also be used for the treatment or amelioration of a neurodegenerative disease such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease or multiple sclerosis, when the dendrites of the dendritic structure of the complexes according to US Pat.
  • the invention will be functionalized with a therapeutic agent such as memantine (1,3-dimethyl-5-amino-adamantane).
  • memantine (1,3-dimethyl-5-amino-adamantane.
  • the invention also comprises other arrangements, which will become apparent from the description which follows, and which refer to examples of methods for synthesizing the complexes of the invention.
  • Step b) reaction of the tosylate obtained in step a) with methyl 3,4,5-trihydroxybenzoate
  • Product 5 is obtained with a yield of 90% (17.65 g, 0.026 me).
  • TMSBr (2.67 g, 2.3 ml, 0.017 mol) is added dropwise with a syringe to a solution of product 7 (8.30 g, 0.014 mol) in 10 ml of anhydrous CHCl 3 maintained under an inert atmosphere ( Argon) and at 0 ° C. using an ice bath. After 48 hours of stirring, the solvent is evaporated and the product 9 is obtained in a yield of 99% (9.20 g, 0.014 mol). No further purification is necessary.
  • Product 11 is obtained with a yield of 75% (5.00 g, 3.4 mmol). Yellowish oil.
  • the product is obtained in 96% yield (284 mg, 0.17 mmol). Yellowish oil.
  • the ligand (350 mg, 0.209 mmol) and Gd (CIO 4 ) 3 (191 mg of a 50% solution in water, 0.209 mmol) are dissolved in 10 mL of distilled water and the solution is stirred at room temperature for 12 hours while maintaining the pH constant at 7 by addition of a 1M solution of NaOH.
  • the reaction medium is then treated with Chelex resin for 1 hour in order to remove free Gd 3+ ions, then filtered and lyophilized.
  • the complex 17 is obtained with a yield of 91% (351 mg, 0.19 mmol). Yellowish oil.
  • the complex 19 is obtained with a yield of 90% (300 mg, 0.168 mmol).
  • the marking is always greater than 98%.
  • reaction medium After stopping the heating, the reaction medium is cooled to room temperature and then filtered through Celite. After evaporation of the solvent, the residue of the filtrate is taken up in 300 ml of CH 2 Cl 2 .
  • the organic phase thus obtained was washed with 3x300ml_ of water saturated with NaCl, dried over anhydrous MgSO 4, then filtered and evaporated to dryness to afford 4.60 g of crude product to be purified.
  • the diethylenetriamine pentaacetic dianhydride (1.23 g, 3.46 mmol) and the product 6 (2.50 g, 3.46 mmol) are dissolved in 50 ml of anhydrous methylene chloride and the resulting suspension is stirred at 50 ° C. for 30 minutes.
  • Triethylamine (4.82 mL, 34.6 mmol) is then added and the reaction medium is stirred at 50 ° C. for 12 hours before being cooled to ambient temperature, concentrated to 5 mL. 30 ml of hexane are then added thereto, and the solution obtained is placed in the fridge (+ 4 ° C.) overnight.
  • the precipitated product is washed with hexane, dried under vacuum and then purified by flash chromatography column.
  • Ligand 8 (1.00 g, 0.91 mmol) and Gd (CIO 4 ) 3 (838 mg of a 50% solution in water, 0.91 mmol) are dissolved in 5 ml of distilled water and the solution is stirred. at room temperature for 12 hours while maintaining the pH constant at 7 by adding a 1M solution of NaOH. The reaction medium is then treated with Chelex resin for 1 hour in order to remove free Gd 3+ ions, then filtered and lyophilized.
  • the impure complex (presence of inorganic impurities of NaCl type) is freeze-dried. Purification can be conducted to remove sodium salts.
  • the marking is always greater than 98%.
  • reaction medium After stopping the heating, the reaction medium is cooled to room temperature and then filtered through Celite. After evaporation of the solvent, the residue of the filtrate is taken up in 300 mL of CH 2 Cl 2 . The organic phase thus obtained is washed with 3 ⁇ 300 mL of water saturated with NaCl, dried over anhydrous MgSO 4 , then filtered and evaporated to dryness to give 4.60 g of crude product to be purified.
  • TMSBr (0.58 mL, 4.44 mmol) is added dropwise with a syringe to a solution of product 6 (2.56 g, 3.55 mmol) in 3 mL of anhydrous CHCl 3 maintained under an inert atmosphere (Argon) and at 0 0 C with an ice bath. After 48 hours of stirring, the solvent is evaporated and the product 8 is obtained in a yield of 90% (2.51 g, 3.19 mmol). No further purification is necessary.
  • Step h) reaction of product obtained in step g) with diethylenetriamine pentaacetic dianhydride
  • Ligand 14 200 mg, 0.10 mmol
  • Gd (CIO 4 ) 3 95 mg of a 50% solution in water, 0.10 mmol
  • the reaction medium is then treated with Chelex resin for 1 hour in order to remove free Gd 3+ ions, then filtered and lyophilized.
  • the marking is always greater than 98%.
  • Example 10 the synthesis of the globular dendritic structure formed by the dendrons of the functionalized generation 1 complexes of the invention as well as the globular dendritic structure of the generation dendrons 2 has been shown.
  • Example 11 the synthesis of the globular dendritic structure of generation 3. It is after the formation of these dendrons that, if desired, a spacer according to the invention is introduced.
  • dendritic structures have been described in the foregoing as having three or four ethylene glycol units, but it will be apparent to those skilled in the art that the use of dendrites comprising more than four ethylene glycol units are quite possible, particularly in the case of bulky functionalization groups.
  • the therapeutic agent used is a therapeutic agent for neurodegenerative diseases
  • any other therapeutic agent may be used, in combination with the adapted targeting agent, to obtain a pharmaceutical composition having a targeted action. on an organ and a particular disease of this organ.

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Abstract

L'invention concerne des complexes chélatés dendritiques, leurs procédés de fabrication et les compositions pharmaceutiques les contenant. Les complexes chélatés dendritiques selon l'invention ont la formule I suivante : [[MC]-En-[D]m-X1p1X2p2X3p3 X4p4]z- z B+ (I), dans laquelle M est un marqueur magnétique ou scintigraphique, C est un agent chélatant du marqueur magnétique M, E est un espaceur, n = 0 ou 1, D est un composé apte à former une structure dendritique, m est un entier valant 1 ou 2 ou 4, X1 est un groupement augmentant la lipophilie du complexe, p1 est un entier valant de 0 à 12 inclus, X2 est un groupement augmentant la spécificité du complexe pour un organe particulier, p2 est un entier valant 0, 1, 2, ou 4 inclus, X3 est un groupement ayant une activité thérapeutique, p3 est un entier valant 0, 1, 2, ou 4 inclus, X4 est un groupement CH3, p4 est un entier valant de 0 à 12 inclus, B est un contre ion, z est un entier valant 0, 1, 2, 3 ou 4. L'invention trouve application dans le domaine pharmaceutique, plus particulièrement dans le domaine de l'imagerie médicale.

Description

COMPLEXES CHÉLATÉS DENDRITIQUES, LEURS PROCÉDÉS DE FABRICATION ET COMPOSITIONS PHARMACEUTIQUES LES CONTENANT
L'invention concerne des complexes chélatés dendritiques, leurs procédés de fabrication, et des compositions pharmaceutiques les contenant.
L'imagerie par résonance magnétique et la médecine nucléaire sont devenues des outils indispensables pour la recherche dans le domaine des sciences de la vie car elles donnent accès de façon non-invasive et atraumatique à des informations aussi bien anatomiques que fonctionnelles dans des domaines médicaux variés.
Un axe principal du développement actuel concerne l'imagerie fonctionnelle qui constitue notamment un outil fondamental dans la compréhension des mécanismes impliqués dans les maladies neurodégénératives telles que les maladies d'Alzheimer, de Parkinson, la sclérose en plaque (SEP).
Les produits utilisés en imagerie par résonance magnétique sont des agents de contraste appelés agents de contraste magnétiques, incluant un marqueur dit marqueur magnétique.
Les agents de contraste magnétiques existant actuellement sont des composés dans lesquels le marqueur magnétique est le gadolinium ou le manganèse.
En médecine nucléaire, les agents de contraste sont appelés agents de contraste scintigraphiques et incluent un marqueur dit marqueur scintigraphique. Le marqueur scintigraphique le plus utilisé actuellement est le 99m technétium.
Tous ces agents de contraste doivent répondre à un cahier des charges contraignant. Ainsi, ils doivent posséder une bonne biocompatibilité, une faible toxicité, une grande stabilité dans l'organisme, être efficaces à faible concentration et de plus, si possible, être spécifiques des organes ou tissus ciblés (vectorisation apportée par les fonctions greffées sur le ligand).
Or, les produits actuellement mis sur le marché et décrits dans la littérature, outre le fait qu'ils peuvent présenter une toxicité, en particulier hépatique, ont une stabilité faible dans l'organisme et ne sont pas spécifiques des organes ou tissus ciblés.
Ainsi, Masato Hito et al., dans leur article publié dans Magnet.
Res. Imag. 2006, 24, 625-630, décrivent un agent de contraste qui est un chélate de gadolinium, dans lequel l'agent chélatant est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique (DTPA), comme ayant une spécificité pour le cerveau.
Mais il ne s'agit pas d'une vectorisation réelle du chélate vers le cerveau.
En effet, 4% des agents de contraste injectés vont toujours vers le cerveau. Or, dans la molécule proposée par Masato Hito, Ie nombre d'atomes de gadolinium par molécule est de trois alors que dans les agents de contraste antérieurs, il n' y a qu'un seul atome de gadolinium par molécule d'agent de contraste. Il s'agit donc en réalité, avec la molécule proposée par
Masato Hito, d'une augmentation de la concentration en gadolinium arrivant au cerveau et non d'une réelle vectorisation du chélate vers le cerveau.
De plus, ce produit présente une toxicité pour le foie.
Min Liu et al. ont proposé dans Bioconj .chem. 2005, 16, 1126- 1132 des agents de contraste dans lesquels le marqueur est le 99m technétium, l'agent chélatant est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique (DTPA) et le ligand est un polymère à base de polyéthylèneglycol (PEG).
Ce produit, utilisable en médecine nucléaire, se fixe sur le foie et est éliminé par les reins, ce qui permet l'imagerie des reins.
Ce produit, une fois encore, n'est pas spécifique d'un organe particulier au sens de vectorisation de l'agent de contraste. De plus, dans cette approche polymérique à base de polyéthylèneglycol un problème de reproductibilité de la synthèse du radiopharmaceutique, ainsi que de pureté suffisante et connue du produit obtenu, se pose comme dans toute synthèse polymérique.
Jakub Rudovsky et al. dans Chem. Commun., 2005, 2390- 2392 ont proposé un complexe dendritique de gadolinium (3+) d'un analogue d'acide DOTA (2,2', 2",2"'-(1 ,4,7,10-tétraazacyclotétradécane - 1 ,4,7,10- tétrayl) tétraacétique) de formule :
Cependant, dans ce cas, le complexe est à la périphérie du dendrimère, ce qui empêche la fonctionnalisation du complexe lui-même par un agent de vectorisation, toutes les extrémités du dendrimère étant occupées par le chélate.
Paula Baia et al., dans Eur. J. Inorg. Chem. 2005, 2110-2119, ont décrit des chélates de lanthanides (III) de glycoconjugués d'acide diéthylènetriamine pentaacétique bis amides.
Ces molécules sont composées d'une structure chélatrice d'ions Gd3+ liée à une structure dendritique de type polyamide sur laquelle on greffe un agent de vectorisation qui est un résidu béta-galactosyle.
La vectorisation est une vectorisation pour cibler le foie. Cependant, outre le fait que ce produit est spécifique du foie et non du cerveau, il présente une toxicité due au dendrimère polyamide.
La demande de brevet US n° 2006/0165601A1 décrit des composés dendritiques pour chélater des cations de métaux, en particulier des cations Gd3+. Dans ces composés, l'agent chélatant du Gd3+ est l'acide diéthylène triamine pentaacétique (DTPA) et le cœur de la structure dendritique est un composé polyol, les dendrites de cette structure dendritique étant composés de chaînes polyéthylèneglycol terminées par un groupe hydroxyle (OH) ou aminé (NH2) ou O-alkyle en Ci à Ci0. Cependant ces composés n'ont pas de spécificité pour le cerveau et n'ont pas de rémanence vasculaire particulière par rapport aux produits d'imagerie connus.
Ainsi, parmi tous les agents de contraste existants et décrits, à ce jour, le seul produit présentant une certaine « spécificité » pour le cerveau est le chélate d'ion Gd3+ dérivé de l'acide diéthylènetriamine pentaacétique décrit par Masato Hito, qui ne présente pas de vectorisation réelle vers le cerveau et qui de plus présente une toxicité hépatique.
Tous les autres agents de contraste sont spécifiques du foie ou des reins et peuvent présenter une toxicité pour l'organisme, en particulier dans le cas du produit proposé par Paula Baia et al., en raison de l'utilisation de dendrimères polyamides.
L'invention vise à résoudre les problèmes de l'art antérieur en proposant des agents de contraste possédant une bonne biocompatibilité, une faible toxicité, une grande sensibilité, une efficacité à faible concentration, une rémanence vasculaire élevée, et de plus, une spécificité (vectorisation) réelle en particulier pour le cerveau.
A cet effet, l'invention propose des agents de contraste ayant une structure du type complexe chélaté d'un marqueur - structure(s) dendritique(s), chaque dendrite de la structure dendritique ayant une extrémité libre qui peut être fonctionnalisée.
La fonctionnalisation des dendrites permet d'obtenir une vectorisation de l'agent de contraste vers un organe particulier, et en particulier le cerveau. L'agent de fonctionnalisation des dendrites peut être également choisi pour augmenter la lipophilie de l'agent de contraste, en particulier pour lui permettre de franchir la barrière hémato-encéphalique. Un autre type de fonctionnalisation possible des dendrites est la fonctionnalisation avec un agent thérapeutique.
Encore un autre type de fonctionnalisation permet d'augmenter la rémanence vasculaire de l'agent de contraste de l'invention.
Les dendrites de la structure dendritique peuvent soit tous avoir la même fonctionnalisation soit certains des dendrites peuvent avoir un premier type de fonctionnalisation et les autres dendrites d'autres types de fonctionnalisation, par exemple au moins un dendrite de la structure dendritique est fonctionnalisé pour augmenter la lipophilie de l'agent de contraste et ainsi permettre le passage de la barrière hémato-encéphalique et au moins un autre dendrite de la structure dendritique peut être fonctionnalisé pour augmenter la spécificité de l'agent de contraste vers le cerveau.
Ceci permet d'obtenir de nouveaux agents de contraste permettant non seulement le diagnostic de pathologies du système nerveux central, telles que les maladies d'Alzheimer et de Parkinson, mais également la compréhension des mécanismes impliqués dans ces maladies.
Mais, dans un autre mode de réalisation, au moins un dendrite de l'agent de contraste peut être fonctionnalisé pour obtenir la vectorisation du complexe de l'invention vers le cerveau, au moins un autre dendrite de la structure dendritique peut être fonctionnalisé pour permettre le passage de la barrière hémato encéphalique, et encore au moins un autre dendrite de la structure dendritique peut être fonctionnalisé avec un agent thérapeutique spécifique des maladies du système nerveux central, pour agir directement et spécifiquement sur le cerveau.
Chaque structure dendritique de l'invention, également appelée dendron, se compose d'une partie interne, appelée également cœur de la structure dendritique, et d'une périphérie, qui correspond aux dendrites eux-mêmes.
Quant à l'agent chélatant ou structure chélatrice du marqueur magnétique ou scintigraphique, il pourra être modifié pour augmenter la stabilité in vivo des agents de contraste.
Chaque structure dendritique du complexe de l'invention est non toxique pour un organisme humain, ce qui signifie en particulier que cette structure dendritique ne peut pas être une structure à base de polymères ou de dendrimères polyamides. L'invention sera mieux comprise et d'autres avantages et caractéristique de celle-ci apparaîtront plus clairement à la lecture de la description explicative qui suit. Dans un mode de réalisation général, l'invention concerne des complexes chélatés dendritiques caractérisés en ce qu'ils ont la formule générale I suivante :
[[MC]-En-[D]m-X1p1 X2p2 X3P3 X4P4]2- . z B+ Formule I dans laquelle :
- M est un marqueur magnétique, de préférence choisi parmi les ions Gd3+, Mn2+ et 99mTc3+,
- C est un agent chélatant du marqueur magnétique M,
- [MC] est un chélate du marqueur magnétique M, - E est un espaceur,
- n = 0 ou 1,
- [D] est une structure dendritique dont le cœur comprend au moins un groupe dérivé d'alcool benzylique ou d'une aminé benzylique, dont le cycle benzyle est substitué en positions 3, 4, 5 par des dendrites composés de motifs polyéthylèneglycol,
- m est un entier valant 1 ou 2 ou 4,
- Xi est un groupement augmentant la lipophilie du complexe, par exemple un groupement tertiobutyle (tBu),
- p1 est un entier valant 0 à 12 inclus, - X2 est un groupement augmentant la spécificité du complexe pour un organe particulier, de préférence pour le cerveau, tel que la L-dopamine,
- p2 est un entier valant 0, 1, 2, ou 4 inclus,
- X3 un groupement ayant une activité thérapeutique, de préférence pour les maladies neurodégénératives telles que la maladie d'Alzheimer, la maladie de Parkinson et la sclérose en plaque,
- p3 est un entier valant 0, 1, 2, ou 4 inclus,
- X4 est un groupement CH3,
- p4 est un entier valant de 0 à 12 inclus - p1 + p2 + p3 + p4 = 3 lorsque m = 1 ou p1 + p2 + p3 + p4 =
6 lorsque m = 2 ou p1 + p2 + p3 + p4 = 12 lorsque m = 4,
- B est un contre ion, de préférence Na+ ou K+, - z est un entier valant 0,1 , 2, 3 ou 4.
De préférence, l'agent chélatant C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique (DTPA), un tripode dérivé de catéchol ou un tripode dérivé de 8-hydroxyquinoline, qui sont d'excellents agents chélatants des ions Gd3+, Mn2+ et 99mTc3+.
Chaque structure dendritique, ou dendron, des complexes de l'invention est du type dendrons de Fréchet tels que décrits dans Dendrimers and other dendritic polymers, J. M. J Fréchet, D.A. Tomalia, Wiley, New York, 2001. Les dendrons de Fréchet ont les formules suivantes, selon la génération de ces dendrons.
- Dendron de Fréchet de génération 1, c'est-à-dire comprenant une seule structure dendritique dont la partie interne ou cœur est un groupe du type alcool benzylique, le cycle benzyle étant substitué en 3, 4, 5 par des chaînes polyéther constituant les dendrites.
Dans les complexes de l'invention, et en référence à la formule qui précède, O-R est une chaîne composée de motifs éthylèneglycol (-OCH2CH2) et X représente le chélate, noté [MC] dans la formule I,
- Dendron de Fréchet de génération 2, c'est-à-dire comprenant deux structures dendritiques identiques aux dendrons de Fréchet de génération 1 décrits ci-dessus.
Dans les complexes de l'invention, et en référence à la formule qui précède, les chaînes O-R sont composées de motifs éthylèneglycol et X représente le chélate noté [MC] dans la formule I,
- Dendron de Fréchet de génération 3, c'est-à-dire comprenant quatre structures dendritiques identiques au dendron de Fréchet de génération 1 ci-dessus, liées deux à deux pour former deux structures identiques au dendron de Fréchet de génération 2 ci-dessus.
Chacune des structures identiques aux dendrons de Fréchet de génération 2 sont liées respectivement en positions 3 et 5 d'un noyau de type alcool benzylique.
Comme pour les dendrons de Fréchet de génération 1 et 2, les chaînes polyéther notées O-R dans la formule ci-dessus sont, dans les complexes de l'invention, composées de motifs éthylèneglycol et X représente le chélate, noté [MC] dans la formule 1. Les dendrons de Fréchet décrits ci-dessus sont utilisés lorsque les structures dendritiques sont reliées directement à la structure [MC]1 c'est-à-dire lorsque n = 0 dans Ia formule I ou lorsque les structures dendritiques sont reliées au chélate [MC] par un espaceur de type polyéthylèneglycol. Les espaceurs préférés utilisés dans l'invention sont décrits dans la suite.
Lorsque les structures dendritiques ne sont pas reliées directement au chélate [MC], mais par l'intermédiaire d'un espaceur différent d'une chaîne polyéthylèneglycol, noté E dans la formule I, c'est-à-dire dans le cas où n = 1 dans la formule I1 les structures dendritiques de l'invention ont les formules suivantes selon leur génération.
On notera que dans ce cas le cycle benzylique lié à l'espaceur n'est plus un cycle dérivé d'un alcool benzylique, mais un cycle dérivé d'une aminé benzylique. - Dendron de génération 1 utilisé lorsque la structure dendritique est liée par l'intermédiaire de l'espaceur E au chélate [MC] :
Dans cette formule, E représente l'espaceur et O-R représente des dendrites composées de motifs éthylèneglycol. - Structures dendritiques de génération 2 dans le cas où les structures dendritiques sont reliées par l'intermédiaire d'un espaceur E au chélate [MC] Dans ce cas, \e cycle benzylique lié à l'espaceur est du type aminé benzylique. Les structures dendritiques ont alors la structure dendritique correspondant à la formule suivante :
Comme dans les cas précédents, E représente l'espaceur et les dendrites notés O-R sont des chaînes composées de motifs éthylèneglycol.
- Structures dendritiques de génération 3 dans le cas où elles sont liées par l'intermédiaire d'un espaceur au chélate [MC];
Là encore, le cycle benzylique lié à l'espaceur est un cycle du type aminé benzylique. Les structures dendritiques de génération 3 ont la formule suivante :
Dans cette formule, E représente l'espaceur voulu et les chaînes O-R sont composées de motifs éthylèneglycol.
La non toxicité in vivo du polyéthylèneglycol a été démontrée de longue date. De préférence, les dendrites des complexes de l'invention comprennent 3, plus préférablement 4, motifs éthylèneglycol.
Les structures dendritiques des complexes de l'invention sont liées par leur extrémité libre en position 1 du cycle alcool benzylique ou aminé benzylique, au chélate du marqueur magnétique noté [MC] dans la formule I1 soit directement soit par l'intermédiaire d'un espaceur noté E dans la formule I.
Un espaceur peut être utilisé avantageusement dans la cas ou l'agent chélatant est un tripode dérivé du catéchol ou un tripode dérivé de la 8- hydroxyquinoline mais n'est pas conseillé dans le cas où l'agent chélatant est le DTPA. En effet, lorsque l'agent chélatant est le DTPA, la monopolisation de l'une des branches du DTPA pour greffer le ou les dendrons déstabilise le complexe formé et il est nécessaire de pallier cette perte de stabilité en maintenant la structure globulaire volumineuse des dendrons proche du chélate. Mais lorsque l'agent chélatant est un tripode dérivé de catéchol ou un tripode dérivé de la 8-hydroxyquinoline, les complexes formés sont suffisamment stables pour ne pas avoir besoin de l'effet protecteur de la structure globulaire volumineuse des dendrons et la présence d'un espaceur E entre cette structure des dendrons et le chélate permet d'éloigner suffisamment ces deux structures l'une de l'autre pour éviter les problèmes d'encombrement stérique qui pourraient se présenter.
De plus, l'espaceur va permettre de modifier la biodistribution dans le corps des complexes de l'invention en favorisant au final une plus grande distribution au cerveau. Ainsi, l'espaceur E peut être un composé cationique ou anionique ou encore neutre. Les espaceurs neutres utilisés dans l'invention sont des espaceurs de type diamine, de formule
avec n de préférence égal à 1 ou 2, c'est-à-dire que les espaceurs préférés sont les espaceurs éthylène diamine et butane diamine.
D'autres espaceurs neutres préférés sont des espaceurs de type éthylèneglycol, de préférence tri- ou tétra-éthylèneglycol:
Les espaceurs cationiques utilisés dans l'invention sont les composés de type ammonium aromatique ou ammonium à chaîne aliphatique ramifiée.
Les espaceurs cationiques de type ammonium aromatique sont composés des motifs suivants :
De préférence n = 1 ou 2.
Les espaceurs cationiques de type ammonium aliphatique à chaîne ramifiée utilisés dans l'invention ont la formule suivante :
De préférence, dans cette formule, n = 1 ou 2.
Les espaceurs anioniques utilisés dans l'invention ont la formule suivante :
Dans cette formule, n est de préférence 1 ou 2.
Selon les groupements présents aux extrémités des dendrites des complexes de l'invention, différentes propriétés sont obtenues. C'est ce qu'on appelle la fonctionnalisation des dendrites.
Ainsi, dans un premier mode de réalisation de l'invention, le complexe dendritique chélaté de formule générale I est un complexe dans lequel l'agent chélatant C est le DTPA, les dendrites sont fonctionnalisés avec des groupements méthyle, notés X4 dans la formule 1. Un exemple d'un complexe selon le premier mode de réalisation de l'invention est le composé de formule 11-1 suivante :
Formule 11-1
Le complexe de formule 11-1 ci-dessus a été testé en imagerie IRM sur des souris saines et on a constaté qu'il ne présente pas de toxicité détectable à une dose de 0,5 mmol par kg.
En effet, in vivo, le gadolinium libre, qui a le même rayon ionique que le calcium, entre en compétition avec les systèmes calcium- dépendants et bloque le système réticulo-endothélial, ce qui a une influence au niveau de la contractibilité myocardique, la coagulation, les enzymes calcium-dépendants, la respiration mitochondriale et la neurotransmission. Cela peut se manifester par une chute de la pression du sang suivie d'un arrêt cardiovasculaire et d'une paralysie pulmonaire.
Mais avec les complexes de l'invention, la stabilité thermodynamique des complexes de DTPA est suffisante pour éviter le relargage de quantités toxiques de Gd3+. Cela a été vérifié sur des cellules neuronales impliquant le taux de lactate déshydrogénase (LDH). Pour des concentrations variant entre 1 et 10000 μM, on a constaté que le taux de LDH ainsi que la prolifération des cellules neuronales étaient identiques avec le complexe de formule 11-1 selon l'invention et le produit commercial constitué uniquement du chélate de Gd3+ dans lequel l'agent chélatant est le DTPA.
Les études menées sur ce composé ont montré l'incapacité du produit à franchir la barrière hémato-encéphalique (BHE), mais elles ont, en revanche, mis en évidence une rémanence vasculaire élevée : l'agent de contraste reste stable et en circulation dans le sang pendant au moins 72h, ce qui permet des examens longs et donc plus complets, sans risque de toxicité, ce qui est un avantage sur le produit commercial de l'art antérieur.
Le complexe chélaté dendritique de l'invention ayant la formule 11-2 suivante, dans laquelle le marqueur magnétique est Mn2+ présente les mêmes avantages, ce qui est une avancée importante dans le domaine de l'imagerie médicale au Mn2+ appelée MEMRI (Manganèse Enhanced Magnetic Résonance Imaging).
Formule 11-2
En effet, le marqueur Mn2+ permet d'obtenir un contraste beaucoup plus élevé que le marqueur Gd3+ mais dans sa forme MnCI2 actuellement utilisée en expérimentation animale, il est très toxique, car Mn2+ est une neurotoxine à fortes concentrations.
De plus, les complexes de manganèse sont relativement instables in vivo et sont dissociés en milieu biologique. Or, avec les complexes chélatés dendritiques de l'invention, l'agent de contraste avec le marqueur Mn2+ est très stable, diffuse lentement et est donc non toxique.
En effet, des études de toxicité menées sur des souris saines vivantes ont montré que le complexe n'est pas plus toxique que le complexe de formule 11-1 ci-dessus, dans lequel le marqueur est Gd3+.
Ces produits dont les dendrites sont terminés par des groupement CH3, non seulement restent dans l'organisme pendant trois jours mais restent stables pendant ces trois jours. C'est cette stabilité qui explique la non toxicité de ces produits. En effet, étant stables, ils ne libèrent pas rapidement le marqueur magnétique dans l'organisme et sont éliminés par l'organisme alors que le marqueur est toujours sous forme de chélate.
Les mêmes avantages, en terme de toxicité, se retrouvent en Médecine Nucléaire avec le complexe chélaté dendritique, ayant la formule II- 3 suivante, où le marqueur scintigraphique est 99mTc3+.
Ils se retrouvent également, en terme de stabilité, mais limitée, bien entendu, à la demie-vie du 99mTc3+ qui est de 6 heures et demie.
Formule 11-3
Les complexes correspondants à ceux des formules 11-1 à (1-3 ci-dessus mais de génération 1 et 3, ainsi que ceux dans lesquels les dendrites sont des chaînes tétra-éthylèneglycol, et non plus tri-éthylèneglycol présentent les mêmes avantages.
Dans tous ces complexes, le marqueur magnétique est lié par des liaisons de coordination au DTPA. Par exemple, pour Gd3+, le chélate DTPA-Gd3+ se lie de la façon suivante :
R = structure dendritique
Pour augmenter la stabilité des complexes de l'invention, dans un second mode de réalisation de l'invention, le chélate du marqueur magnétique ou scintigraphique est un tripode dérivé du catéchol, et non plus le DTPA.
Dans ce cas, les complexes préférés de l'invention sont les complexes de formule 111-1 à III-3 ci-dessous.
Formule 111-1
Formule HI-2
Formule 111-3 Dans ces formules, et en référence à la formule générale I, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol méthylée à 3 motifs éthylèneglycol, m = 1 , l'agent chélatant C est un tripode dérivé du catéchol, n = p1 = p2 = p3 = 0, B est Na+ et z = 3 ou 4.
Dans la formule, 111-1 , le marqueur est Gd3+1 dans la formule III- 2, le marqueur est Mn2+ et dans la formule 111-3, le marqueur est 99mTc3+.
D'autres complexes préférés, selon le deuxième mode de réalisation de l'invention ayant une stabilité augmentée, ont les formules IV-1 à IV-3 suivantes :
Formule IV-1
Formule IV-2
Formule IV-3
Dans ces formules, en se référant à la formule générale I, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol méthylée ayant 3 motifs éthylèneglycol, m=1 , C est un tripode dérivé de la 8-hydroxyquinoline, p1 = p2 = p3 = 0, B est Na+ et z = 0 ou 1.
Dans la formule IV-1 , le marqueur est Gd3+, dans la formule IV-2, Ie marqueur est Mn2+ et dans la formule IV-3, le marqueur est 99mTc3+.
Mais d'autres complexes préférés selon le deuxième mode de réalisation de l'invention ayant une stabilité augmentée sont des complexes ayant une structure dendritique de génération G2, c'est-à-dire dans lesquelles chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol méthylée ayant 3 motifs éthylèneglycol, m = 2, C est un tripode dérivé du catéchol, p1 = p2 = p3 = 0, B est Na+.
Lorsque le marqueur est Gd3+, z = 3 et le complexe a la formule V- 1 suivante :
Formule V- 1 Lorsque le marqueur est Mn ,2^+, z = 4 et le complexe a la formule V-2 suivante :
4 Na+
Lorsque le marqueur est 99mTc3+, z = 3 et le complexe a la formule V-3 suivante :
Formule V-3
Les complexes de génération 3, ainsi que les complexes de génération 1, 2 ou 3 dans lesquels les dendrites sont des chaînes tétraéthylèneglycol méthylées, et correspondants à ces complexes dans lesquels l'agent chélatant est un tripode dérivé du catéchol ou un tripode dérivé de la 8-hydroxyquinoline, sont également des composés préférés de l'invention.
Cependant, les complexes correspondants dans lesquels la structure chélatante est un tripode dérivé du catéchol mais dans lesquels le chélate est éloigné de la structure formée par les dendrons, de génération 1 ou 2 ou 3, par un espaceur, noté E dans la formule I1 et qui est l'un des espaceurs précédemment décrits, sont tout particulièrement préférés car ils sont plus distribués au cerveau. On préfère tout particulièrement les composés ayant les formules 111-4 à V-6 suivantes :
Formule 111-4
Formule IV-4
Formule 1V-5
30
Formule V-4
Formule V-5
Formule V-6
Aussi, les complexes de génération 3 de la formule suivante, dans laquelle O-R représente une chaîne éthylèneglycoi à 3 ou 4 motifs éthylènegiycol.
sont particulièrement préférés.
Les complexes de génération 1 et 2 correspondants, ainsi que les complexes correspondants dans lesquels l'espaceur est l'un de ceux décrits précédemment, de génération 1, 2 ou 3 sont également tous particulièrement préférés.
En effet, l'efficacité des agents de contraste magnétique ou scintigraphique dépend principalement de la stabilité du complexe formé car une distribution in-vivo du traceur (destruction du complexe, radio élément capté, par une protéine) induit une irradiation non sélective des cellules, causant des dégâts irréversibles. Il est donc important que les complexes utilisés possèdent une excellente stabilité in-vivo. Or, l'insertion de cycles aromatiques dans la sphère de chélation assure une meilleure rigidité de la structure et permet ainsi une pré organisation du ligand.
On a vérifié, par un suivi cinétique comparatif entre un complexe de formule V-6 selon l'invention dans lequel l'agent chélatant est un tripode dérivé du catéchol et M est 99mTc3+, l'agent chélatant est le DTPA, et le complexe correspondant de formule 11-3, tous deux greffés à un dendrimère hydrosoluble de terminaison méthylée, que le complexe dans lequel l'agent chélatant est un tripode dérivé du catéchol est plus stable. En effet, plus de 80% du complexe de formule V-6 est stable au bout de 90 minutes alors que 50% du complexe de formule 11-3 s'est dissocié dans le même temps.
Mais d'autres complexes préférés selon l'invention sont des complexes dans lesquels l'agent chélatant C est un tripode dérivé de 8- hydroxyquinoline et de génération 1, 2 ou 3, avec ou sans espaceur, et des dendrites à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol.
Ainsi, dans ces complexes avec une stabilité augmentée également préférés de l'invention et en référence à la formule générale I, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol méthylée ayant 3 motifs éthylèneglycol, m = 2, C est un tripode dérivé de 8-hydroxyquinoline, p1 = p2 = p3 = 0, et le contre ion B est Na+.
Lorsque le marqueur M est Gd3+, z = 0 et le complexe a la formule VI-1 suivante :
Formule VI-1
Lorsque le marqueur M est Mn2+, z = 1 et le complexe a la formule VI-2 suivante :
Formule VI-2
Lorsque le marqueur M est 99mTc3+, z = 0 et le complexe a la formule VI-3 suivante :
Formule VI-3
Les complexes correspondants aux complexes de formule Vl- 1 à VI-3 décrits ci-dessus, de génération 1 ou de génération 3, et ceux de génération 1 ou 2 ou 3 comportant un espaceur et/ou dont les dendrites sont des tétra-éthylèneglycol sont également des composés préférés de l'invention.
Par exemple, les complexes de génération 2 comportant un espaceur butane diamine correspondants aux complexes de formules VI-1 à VI-3 ci-dessus, ont les formules VI-4 à VI-6 suivantes :
Formule VI-4
Formule Vl-5
Formule VI-6
D'autre part, ces complexes présentent la même stabilité que ceux dont l'agent chélatant est un tripode dérivé du catéchol.
Les complexes décrits dans ce qui précède, bien que présentant des avantages importants, ne sont pas spécifiques d'un organe particulier.
Pour leur permettre de franchir la barrière hématoencéphalique, dans un troisième mode de réalisation de l'invention, on augmente la lipophilie des complexes de l'invention en fonctionnalisant au moins un dendrite de la structure dendritique avec un groupement hydrophobe. De préférence, ce groupement est un groupement tertiobutyle. Ainsi, le troisième mode de réalisation de l'invention concerne des complexes chélatés dendritiques ayant la formule générale I dans laquelle Xi est un groupement tertiobutyle et p1 est un entier valant 0 à 12 inclus.
Plus particulièrement, dans ce troisième mode de réalisation de l'invention, un complexe préféré est un complexe de formule générale I dans laquelle n = p2 = p3 = p4 =0, le marqueur M est Gd3+, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol, m = 1 , C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, Xi est un groupe tertiobutyle (tBu), p1 = 3, B est Na+ et z = 1. Ce complexe a la formule VII-1 suivante :
Formule VII-1
Un autre complexe préféré selon le troisième mode de réalisation de l'invention est un complexe de formule générale I dans laquelle n = p2 = p3 = p4 = 0, le marqueur M est Mn2+, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol, m = 1, C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, Xi est un groupe tertiobutyle (tBu), p1 = 3, B est Na+ et z = 2. Ce complexe a la formule VII-2 suivante :
Formule VII-2
Un autre complexe préféré selon le troisième mode de réalisation de l'invention est un complexe de formule générale I dans laquelle n = p2 = p3 = p4 = 0, le marqueur M est 99mTc3+, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol, m = 1, C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, Xi est un groupe tertiobutyle (tBu), p1 = 3, B est Na+ et z = 1. Ce complexe a la formule Vl 1-3 suivante :
Formule Vl 1-3 Bien entendu, les complexes de l'invention comportant une structure dendritique de génération 2 (G2), soit m = 2 font également partie des complexes préférés selon le troisième mode de réalisation de l'invention.
Ces complexes sont :
- le complexe de formule générale I dans laquelle n = p2 = p3 = p4 = 0, le marqueur M est Gd3+, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol, m = 2, C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, Xi est un groupement tertiobutyle (tBu), p1 = 6, B est Na+ et z = 1. Ce complexe a la formule VIII-1 suivante :
Formule VIII-1 ,
- le complexe de formule générale I dans laquelle n = p2 = p3 = p4 = 0, M est Mn2+, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol, m = 2, C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, X1 est un groupement tertiobutyle (tBu), p1 = 6, B est Na+ et z = 2. Ce complexe a la formule VIII-2 suivante.
Formule Vill-2,
- le complexe ayant la formule générale I dans laquelle n = p2 = p3 = p4 = 0, M est 99mTc3+, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol, m = 2, C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, X1 est un groupement tertiobutyle (tBu), p1 = 6, B est Na+ et z = 1. Ce complexe a la formule VIII-3 suivante :
Formule VIII-3. Bien entendu, les complexes correspondants à ceux de formule VIII-1 à VIII-3, de génération 3, c'est-à-dire dans lesquels m = 4, et/ou dans lesquels les dendrites sont des chaînes tétra-éthylèneglycol et les complexes correspondants à ceux des formules IX-1 à IX-3, de génération 1 ou 2 ou 3 comprenant un espaceur sont aussi des composés préférés selon le troisième mode de réalisation de l'invention. Les complexes selon le troisième mode de réalisation de l'invention dans lesquels au moins un dendrite est fonctionnalisé avec un groupement tertiobutyle sont particulièrement préférés dans l'invention car ces complexes traversent la barrière hémato-encéphalique. Des études ont été menées sur des souris saines en utilisant les complexes à dendrites à terminaison tertiobutylées selon l'invention dans lesquels le marqueur est 99mTc3+ par des techniques de médecine nucléaire où des concentrations micromolaires sont utilisées en routine. Ces expérimentations ont montré un passage de la barrière hémato-encéphalique de ces complexes, comme montré par le comptage de la radioactivité dans le cerveau de souris saines ainsi qu'un profil plus sélectif que celui obtenu avec le produit commercial utilisé en routine, le pentétate de calcium trisodique, commercialisé par Cis-Bio International, sous la forme du kit référencé TCK-6.
Des complexes de l'invention selon le troisième mode de réalisation dans lequel les dendrites sont des chaînes tertiobutylées tétraéthylène glycol et le marqueur est Gd3+ ou Mn2+ ont également été testés par IRM. Dans ces complexes, la diminution importante de l'hydrosolubilité amenée par les groupements tertiobutyle est compensée en partie par la longueur de la chaîne des dendrites, ce qui permet à ces complexes d'avoir une hydrosolubilité suffisante pour une application en IRM où des concentrations millimolaires sont nécessaires.
On a constaté que ces complexes franchissaient également Ia barrière hémato-encéphalique.
Pour obtenir la vectorisation des complexes selon l'invention vers le cerveau, un ou plusieurs dendrites de la structure dendritique de ces complexes peuvent être fonctionnalisés par un agent se fixant sur les récepteurs dopaminergiques. Un tel agent préféré dans l'invention est la L- dopamine.
Ainsi, selon un quatrième mode de réalisation de l'invention, les complexes particulièrement préférés dans l'invention pour une utilisation en tant qu'agent de contraste ayant une spécificité pour le cerveau sont les complexes de formule générale I dont les dendrites de chaque structure dendritique [D] sont fonctionnalisés par la L-dopamine et un groupement augmentant la lipophilie tel qu'un groupement tertiobutyle. Ainsi, les complexes préférés selon le quatrième mode de réalisation de l'invention sont les complexes suivants :
- le complexe de formule générale I dans laquelle n = p3 = p4 = 0, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol, C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, M est Gd3+, m = 1, Xi est un groupement tertiobutyle (tBu), p1 = 2, X2 est la L-dopamine, p2 = 1 , B est Na+ et z = 1. Ce complexe a Ia formule IX-1 suivante :
Formule IX-1 ,
- le complexe de formule générale I dans laquelle n = p3 = p4 = 0, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol, C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, M est Mn2+, m = 1 , Xi est un groupement tertiobutyle (tBu), p1 = 2, X2 est la L-dopamine, p2 = 1, B est Na+ et z = 2. Ce complexe a la formule IX-2 suivante :
Formule IX-2,
- le complexe de formule I dans laquelle n = p3 = p4 = 0, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol, C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, M est 99mTc3+, m = 1, Xi est un groupement tertiobutyle (tBu), p1 = 2, X2 est la L-dopamine, p2 = 1 , B est Na+ et z = 1. Ce complexe a la formule IX-3 suivante :
Formule 1X-3, - le complexe de formule générale I dans laquelle n = p3 = p4 = 0, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol, C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, M est Gd3+, m = 2, Xi est un groupement tertiobutyle (tBu), p1 = 4, X2 est la L-dopamine, p2 = 2, B est Na+ et z = 1. Ce complexe a la formule X-1 suivante :
H2O
Formule X-1 ,
- le complexe de formule générale I dans laquelle n = p3 = p4 = 0, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne pσlyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol, C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, M est Mn2+, m = 2, Xi est un groupement tertiobutyle (tBu), p1 = 4, X2 est la L-dopamine, p2 = 2, B est Na+ et z = 2. Ce complexe a la formule X-2 suivante :
Formule X-2,
- le complexe de formule générale I dans laquelle n = p3 = p4 = 0, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol, C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, M est 99mTc3+, m = 2, Xi est un groupement tertiobutyle (tBu), p1 = 4, X2 est la L-dopamine, p2 = 2, B est Na+ et z = 1. Ce complexe a la formule X-3 suivante :
Formule X-3.
Les complexes correspondants à ceux de formule IX-1 à X-3 ci-dessus mais dans lesquels les dendrites sont des chaînes tétra- éthylèneglycol et/ou de génération 3 et/ou comprenant un espaceur selon l'invention sont également des complexes préférés du quatrième mode de réalisation de l'invention.
Selon un cinquième mode de réalisation particulièrement préféré de l'invention, les complexes de l'invention ont une grande stabilité dans l'organisme, franchissent la barrière hémato-encéphalique, ont une vectorisation vers le cerveau et ont une activité thérapeutique pour les maladies neurodégénératives, ce qui en fait des composés à activité thérapeutique particulièrement intéressants.
Dans ce cinquième mode de réalisation, les complexes de l'invention ont une structure chélate dérivée de l'acide diéthylènetriamine pentaacétique (DTPA), ou tripode de type catéchol, ou encore tripode de type 8-hydroxyquinoline. Leur structure dendritique possède au moins quatre dendrites fonctionnalisé par un groupement lipophile de type tertiobutyle (tBu), et au moins un autre dendrite fonctionnalisé par un groupement leur conférant une spécificité pour le cerveau et au moins un autre dendrite fonctionnalisé par un agent thérapeutique des maladies neurodégénératives.
Ainsi, les complexes préférés selon le cinquième mode de réalisation de l'invention sont les complexes de formule générale I dans laquelle chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol, l'agent chélatant C est soit l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, soit un tripode dérivé du catéchol, soit un tripode dérivé de 8-hydroxyquinoline, m = 2, le marqueur M est soit Gd3+, soit Mn2+, soit 99mTc3+, X1 est un groupement tertiobutyle, p1 = 4, X2 est la L-dopamine, p2 = 1, X3 est un agent thérapeutique des maladies neurodégénératives telles que la mémantine, p3 = 1, p4 = O1 n = 0, B est Na+ et z = 0, 1 , 2, 3, ou 4, de formule A suivante :
Formule A Les complexes correspondants à ceux de Ia formule A ci- dessus dans lesquels les dendrites sont des chaînes tétra-thylèneglycol et/ou comprenant un espaceur selon l'invention et/ou de génération 3 ou 1 sont également des composés préférés de l'invention selon le cinquième mode de réalisation de l'invention.
Tous les complexes de l'invention peuvent être synthétisés par un procédé comportant de 6 à 19 étapes à partir de tri-éthylèneglycol en utilisant du 3,4,5-trihydroxybenzoate de méthyle ou de l'alcool hydroxybenzylique. Ainsi, d'autres objets de l'invention sont les procédés de synthèse des complexes de formule I.
Le procédé de synthèse des complexes chélatés dendritiques selon le premier mode de réalisation de l'invention, dans lequel le chélate est le DTPA, les dendrites ne sont pas fonctionnalisés et comportant une structure dendritique [D] de génération 2 (G2, m = 2), de formule 11-1 à II-3 comprend les étapes suivantes : a) réaction de tri-éthylèneglycol monométhyl éther avec du chlorure de tosyle, b) réaction du tosylate obtenu à l'étape a) avec du 3,4,5- trihydroxybenzoate de méthyle, c) réduction du produit obtenu à l'étape b), de préférence avec LiAIH4, pour obtenir l'alcool correspondant, d) bromation du produit obtenu à l'étape c), e) réaction du produit obtenu à l'étape d) avec du 3,5- dihydroxybenzoate de méthyle, f) réduction du produit obtenu à l'étape e), de préférence avec LiAIH4, g) réaction du produit obtenu à l'étape f) avec du dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique, h) réaction du produit obtenu à l'étape g) avec du chlorure de
Gd ou de Mn ou du pertechnétate. Un autre objet de l'invention est le procédé de synthèse des complexes selon le second mode de réalisation de l'invention dans lequel les dendrites du complexe ne sont pas fonctionnalisés mais le chélate DTPA est remplacé par un tripode dérivé du catéchol ou de 8-hydroxyquinoline, pour augmenter la stabilité de ces complexes, et comportant une structure dendritique [D] de génération 1 (G1 , m = 1), de formule 111-1 à III-3, IV-1 à IV-3, comprenant les étapes suivantes : Formule 111-1 à III-3 : a) allylation de l'acide 2,3-dihydroxybenzoique avec du bromure d'allyle, b) saponification du produit obtenu à l'étape a) afin d'obtenir l'acide correspondant, c) fluorination du produit obtenu à l'étape b) afin d'obtenir le fluorure d'acide correspondant, a') réduction du tripode trinitrile afin d'obtenir le tripode triamine, b') réaction de couplage entre le tripode obtenu à l'étape a') avec le produit obtenu à l'étape c), c') déprotection de la fonction alcool avec du fluorure de tétrabutyl ammonium, TBAF, du produit obtenu en b'), d') oxydation de Swern du produit obtenu en c') afin d'obtenir l'acide carboxylique correspondant, e') réaction de couplage entre le produit obtenu en d') et la 1 ,4-butanediamine, monoprotégée avec une fonction tertiobutylcarboxyle, Boc, f) déprotection de la fonction aminé du produit obtenu en e'), a") synthèse du triéthylène glycol monométhyl éther, b") réaction du triéthylène glycol monométhyl éther avec du chlorure de tosyle, c") réaction du tosylate obtenu à l'étape b") avec du 3,4,5- trihydroxybenzoate de méthyle, d") saponification du produit obtenu à l'étape c") afin d'obtenir l'acide correspondant, a'") réaction de couplage entre le produit obtenu en f) et celui obtenu en d"), b'") désallylation des fonctions catéchol, c'") réaction du produit obtenu à l'étape b'") avec du chlorure de Gd ou de Mn ou du pertechnétate.
Encore un autre objet de l'invention est un procédé de synthèse des complexes de formule IV-1 à IV-3 qui comprend les étapes suivantes: a) allylation de l'ester méthylique de l'acide 8-Hydroxy- quinoline-7-carboxylique avec du bromure d'allyle, b) saponification du produit obtenu à l'étape a) afin d'obtenir l'acide correspondant, c) fluorination du produit obtenu à l'étape b) afin d'obtenir le fluorure d'acide correspondant, a') réduction du tripode trinitrile afin d'obtenir le tripode triamine, b') réaction de couplage entre le tripode obtenu à l'étape a') avec le produit obtenu à l'étape c), c') déprotection de la fonction alcool avec TBAF du produit obtenu en b'), d') oxydation de Swern du produit obtenu en c') afin de donner l'acide carboxylique correspondant, e') réaction de couplage entre le produit obtenu en d') et la
1 ,4-butanediamine, monoprotégée avec une fonction Boc, f) déprotection de la fonction aminé du produit obtenu en e'), a") synthèse du triéthylène glycol monométhyl éther, b") réaction du triéthylène glycol monométhyl éther avec du chlorure de tosyle, c") réaction du tosylate obtenu à l'étape b") avec du 3,4,5- trihydroxybenzoate de méthyle, d") saponification du produit obtenu à l'étape c") afin d'obtenir l'acide correspondant, a'")réaction de couplage entre le produit obtenu en f) et celui obtenu en d"), b'") désallylation des fonctions alcool , c'") réaction du produit obtenu à l'étape b'") avec du chlorure de Gd ou de Mn ou du pertechnétate.
De la même façon, un autre objet de l'invention est Ie procédé de synthèse des complexes selon l'invention dans lesquels le chélate DTPA est remplacé par un tripode dérivé du catéchol ou de 8-hydroxyquinoline, pour augmenter la stabilité de ces complexes, et comportant une structure dendritique [D] de génération 2 (G2, m = 2), de formule V-1 à V-3, VI-1 à VI-3, comprenant les étapes suivantes : Formule V-1 à V-3 : a) allylation de l'acide 2,3-dihydroxybenzoique avec du bromure d'allyle, b) saponification du produit obtenu à l'étape a) afin d'obtenir l'acide correspondant, c) fluorination du produit obtenu à l'étape b) afin d'obtenir le fluorure d'acide correspondant, a') réduction du tripode trinitrile afin d'obtenir le tripode triamine, b') réaction de couplage entre le tripode obtenu à l'étape a') avec le produit obtenu à l'étape c), c') déprotection de la fonction alcool avec TBAF du produit obtenu en b'), d') oxydation de Swern du produit obtenu en c') afin de donner l'acide carboxylique correspondant, e') réaction de couplage entre le produit obtenu en d') et la
1,4-butanediamine, monoprotégée avec une fonction Boc, f) déprotection de la fonction aminé du produit obtenu en e'), a") synthèse du tri-éthylèneglycol monométhyl éther, b") réaction du tri-éthylèneglycol monométhyl éther avec du chlorure de tosyle, c") réaction du tosylate obtenu à l'étape b") avec le 3,4,5- trihydroxybenzoate de méthyle, d") réduction du produit obtenu à l'étape c"), de préférence avec du LiAIH4 pour obtenir l'alcool correspondant, e") bromation du produit obtenu à l'étape d") f") réaction du produit obtenu à l'étape e") avec du 3,5- dihydroxybenzoate de méthyle, g") saponification du produit obtenu à l'étape f") afin d'obtenir l'acide correspondant, a'") réaction de couplage entre le produit obtenu en f ) et celui obtenu en g"), b'") désallylation des fonctions catéchol , c'") réaction du produit obtenu à l'étape b'") avec du chlorure de Gd ou de Mn ou du pertechnétate.
Un autre objet de l'invention est le procédé de synthèse des composés de l'invention de formule Vl-1 à VI-3 qui comprend les étapes suivantes: a) allylation de l'ester méthylique de l'acide 8-Hydroxy- quinoline-7-carboxylique avec du bromure d'allyle, b) saponification du produit obtenu à l'étape a) afin d'obtenir l'acide correspondant, c) fluorination du produit obtenu à l'étape b) afin d'obtenir le fluorure d'acide correspondant, a') réduction du tripode trinitrile afin d'obtenir le tripode triamine, b') réaction de couplage entre le tripode obtenu à l'étape a') avec le produit obtenu à l'étape c), c') déprotection de la fonction alcool avec TBAF du produit obtenu en b'), d') oxydation de Swern du produit obtenu en c1) afin d'obtenir l'acide carboxylique correspondant, e') réaction de couplage entre le produit obtenu en d') et la
1 ,4-butanediamine, monoprotégée avec une fonction Boc, f) déprotection de la fonction aminé du produit obtenu en e'), a") synthèse du tri-éthylèneglycol monométhyl éther, b") réaction du tri-éthylèneglycol monométhyl éther avec du chlorure de tosyle, c") réaction du tosylate obtenu à l'étape b") avec 3,4,5- trihydroxybenzoate de méthyle, d") réduction du produit obtenu à l'étape c"), de préférence avec du LiAIH4, pour obtenir l'alcool correspondant, e") bromation du produit obtenu à l'étape d"), f) réaction du produit obtenu à l'étape e") avec du 3,5- dihydroxybenzoate de méthyle, g") saponification du produit obtenu à l'étape f") afin d'obtenir l'acide correspondant, a'") réaction de couplage entre le produit obtenu en f) et celui obtenu en g"), b'") désallylation des fonctions alcool , c'") réaction du produit obtenu à l'étape b'") avec du chlorure de Gd ou de Mn ou du pertechnétate.
Un autre objet de l'invention est le procédé de synthèse des complexes de l'invention de formule VII-1 à VII-3, dans lesquels le chélate est le DTPA et les dendrites du complexe sont fonctionalisés par des groupements tertiobutyle, pour augmenter la lipophilie de ces complexes, et comportant une structure dendritique [D] de génération 1 (G 1, m = 1), est un procédé comprenant les étapes suivantes : a) synthèse du terbutoxy tri-éthylèneglycol à partir du tertiobutanol, b) réaction du produit obtenu à l'étape a) avec du chlorure de tosyle, c) réaction du tosylate obtenu à l'étape b) avec du 3,4,5- trihydroxybenzoate de méthyle, d) réduction du produit obtenu à l'étape c), de préférence avec LiAIH4, pour obtenir l'alcool correspondant, e) réaction du produit obtenu à l'étape d) avec du dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique, f) réaction du produit obtenu à l'étape e) avec du chlorure de
Gd ou de Mn ou du pertechnétate.
De la même façon, un autre objet de l'invention est le procédé de synthèse des complexes selon l'invention dans lequel le chélate est le DTPA et les dendrites du complexe sont de formule VIII-1 à VIII-3 fonctionnalisés par des groupements tertiobutyle, pour augmenter la lipophilie de ces complexes, et comportant une structure dendritique [D] de génération 2 (G2, m = 2), comprenant les étapes suivantes :
a) synthèse du terbutoxy tri-éthylèneglycol à partir du tertiobutanol, b) réaction du produit obtenu à l'étape a) avec du chlorure de tosyle, c) réaction du tosylate obtenu à l'étape b) avec du 3,4,5- trihydroxybenzoate de méthyle, d) réduction du produit obtenu à l'étape c), de préférence avec LiAIH4, pour obtenir l'alcool correspondant, e) bromation du produit obtenu à l'étape d), f) réaction du produit obtenu à l'étape e) avec du 3,5- dihydroxybenzoate de méthyle, g) réduction du produit obtenu à l'étape f), de préférence avec LiAIH4, pour obtenir l'alcool correspondant, h) réaction du produit obtenu à l'étape g avec du dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique, i) réaction du produit obtenu à l'étape h) avec du chlorure de
Gd (III) ou de Mn (II) ou du pertechnétate.
Un autre objet de l'invention est le procédé de synthèse des complexes selon l'invention (de formule IX-1 à IX-3) dans lesquels le chélate est le DTPA et les dendrites du complexe sont fonctionalisés par la L- dopamine et un groupement augmentant la lipophilie tel qu'un groupement tertiobutyle, et comportant une structure dendritique [D] de génération 1 (G1, m = 1), comprenant les étapes suivantes : a) synthèse du terbutoxy tri-éthylèneglycol à partir du tertiobutanol, b) réaction du produit obtenu à l'étape a) avec du chlorure de tosyle, a') réaction du 3,4,5-trihydroxybenzoate de méthyle avec de l'anhydride acétique, b') réaction du produit obtenu à l'étape a') avec du bromure d'allyle, c') hydrolyse basique du produit obtenu à l'étape b') avec du carbonate de potassium, d') réaction du produit obtenu à l'étape c') avec le tosylate obtenu à l'étape b), e') déprotection de la fonction alcool du produit obtenu à l'étape d'), a") protection de la L-dopamine avec du chlorure de fluorénylméthoxycarbonyle, Fmoc, b") réaction du produit obtenu à l'étape a") avec du bromure d'allyle, c") réaction du produit obtenu à l'étape b") avec de la morpholine, d") estérification du produit obtenu à l'étape c"), e") saponification du produit obtenu à l'étape d"), f") estérification du produit obtenu à l'étape e") avec le produit obtenu à l'étape e'), g") réduction du produit obtenu à l'étape f") pour obtenir l'alcool correspondant, h") réaction du produit obtenu à l'étape g") avec le dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique, i") réaction du produit obtenu à l'étape h") avec du chlorure de Gd (III), de Mn (II) ou du pertechnétate.
De la même façon, un autre objet de l'invention est le procédé de synthèse des complexes selon l'invention (de formule X-1 à X-3) dans lesquels le chélate est le DTPA et les dendrites du complexe sont fonctionalisés par la L-dopamine et un groupement augmentant la lipophilie tel qu'un groupement tertiobutyle, et comportant une structure dendritique [D] de génération 2 (G2, m = 2), comprenant les étapes suivantes : a) synthèse du terbutoxy tri-éthylèneglycol à partir du tertiobutanol, b) réaction du produit obtenu à l'étape a) avec du chlorure de tosyle, a') réaction du 3,4,5-trihydroxybenzoate de méthyle avec de l'anhydride acétique, b') réaction du produit obtenu à l'étape a') avec du bromure d'allyle, c') hydrolyse basique du produit obtenu à l'étape b'), de préférence avec du carbonate de potassium, d') réaction du produit obtenu à l'étape c') avec le tosylate obtenu à l'étape b), e') déprotection de la fonction alcool du produit obtenu à l'étape d'), a") protection de la L-dopamine avec du chlorure de Fmoc, b") réaction du produit obtenu à l'étape a") avec du bromure d'allyle, c") réaction du produit obtenu à l'étape b") avec de la morpholine, d") estérification du produit obtenu à l'étape c"), e") saponification du produit obtenu à l'étape d"), f") estérification du produit obtenu à l'étape e") avec le produit obtenu à l'étape e'), g") réduction du produit obtenu à l'étape f"), de préférence avec LiAIH4, pour obtenir l'alcool correspondant, h") bromation du produit obtenu à l'étape g"), i") réaction du produit obtenu à l'étape h") avec du 3,5- dihydroxybenzoate de méthyle, j") réduction du produit obtenu à l'étape i"), de préférence avec LiAIH4, pour obtenir l'alcool correspondant, k") réaction du produit obtenu à l'étape j") avec le dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique,
I") réaction du produit obtenu à l'étape k") avec du chlorure de Gd (III), de Mn (II) ou du pertechnétate.
Un autre objet de l'invention est le procédé de synthèse des complexes selon l'invention (de formule A) dans lesquels le chélate est soit le
DTPA1 soit un tripode dérivé du catéchol, soit un tripode dérivé de 8- hydroxyquinoline, et les dendrites du complexe sont fonctionalisés par la L- dopamine, par la mémantine et par un groupement augmentant la lipophilie tel qu'un groupement tertiobutyle, et comportant une structure dendritique [D] de génération 2 (G2, m = 2), comprenant les étapes suivantes : a) réaction du 3,5-dihydroxybenzoate de méthyle avec du bromure d'allyle, a') synthèse du terbutoxy tri-éthylèneglycol à partir du tertiobutanol, b') réaction du produit obtenu à l'étape a') avec du chlorure de tosyle, a") réaction du 3,4,5-trihydroxybenzoate de méthyle avec de l'anhydride acétique, b") réaction du produit obtenu à l'étape a") avec du bromure d'allyle, c") hydrolyse basique du produit obtenu à l'étape b"), de préférence avec du carbonate de potassium, d") réaction du produit obtenu à l'étape c") avec le tosylate obtenu à l'étape b'), e") déprotection de la fonction alcool du produit obtenu à l'étape d"), a'") protection de la L-dopamine avec du chlorure de Fmoc, b'") réaction du produit obtenu à l'étape a"') avec du bromure d'allyle, c'") réaction du produit obtenu à l'étape b'") avec de la morpholine, d'") estérification du produit obtenu à l'étape c'"), e'") saponification du produit obtenu à l'étape d'"), f") estérification du produit obtenu à l'étape e'") avec le produit obtenu à l'étape e"), g'") réduction du produit obtenu à l'étape f ") pour obtenir l'alcool correspondant, h'") bromation du produit obtenu à l'étape g'"), i'") déprotection de la fonction alcool du produit obtenu à l'étape h'"), a'v) estérification de la mémantine, b'v) saponification du produit obtenu à l'étape a'v), c'v) estérification du produit obtenu à l'étape b'v), d'v) réduction du produit obtenu à l'étape c'v), de préférence avec LiAIH4, e'v) bromation du produit obtenu à l'étape d'v), fv) etherification du produit obtenu à l'étape e'v) avec le produit obtenu à l'étape a), g'v) déprotection de la fonction alcool du produit obtenu à l'étape f v), hv) etherification du produit obtenu à l'étape g'v) avec le produit obtenu à l'étape i'"), i'v) réduction du produit obtenu à l'étape h'v), de préférence avec LiAIH4, j'v) réaction du produit obtenu à l'étape i'v) avec soit le dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique, soit avec le tripode catéchol, soit avec le tripode 8-hydroxyquinoline.
L'invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant au moins un complexe selon l'invention ou au moins un complexe obtenu par un procédé selon l'invention, dans un excipient pharmaceutiquement acceptable. Cette composition pharmaceutique pourra être utilisée en tant qu'agent de contraste pour la détection, et la compréhension du mécanisme, des maladies neurodégénératives telles que la maladie d'Alzheimer, la maladie de Parkinson et la sclérose en plaque.
Mais cette composition pharmaceutique pourra être également utilisée pour le traitement ou l'amélioration d'une maladie neurodégénérative telle que la maladie d'Alzheimer, la maladie de Parkinson ou la sclérose en plaque, lorsque les dendrites de la structure dendritique des complexes selon l'invention seront fonctionnalisés avec un agent thérapeutique tel que la mémantine (1 ,3-diméthyl-5-amino-adamantane). Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions, qui ressortiront de la description qui va suivre, et qui se réfèrent à des exemples de procédés de synthèse des complexes de l'invention.
Il doit être bien entendu, toutefois, que ces exemples sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'invention, dont ils ne constituent en aucune manière une limitation.
Matériels et méthodes d'analyse utilisés
Les spectres RMN 1H et 13C ont été enregistrés sur un spectromètre Brucker AM300 (300 MHz). La référence interne des spectres correspond au pic du solvant non deutéré (CDCI3 : 7.27 ppm, CD2CI2 : 5.32 ppm).
Tous les produits et réactifs commerciaux ont été utilisés sans traitement préalable et proviennent des compagnies SIGMA-AIdrich, ACROS et STREM Chemicals.
EXEMPLE 1 : SYNTHÈSE DES COMPLEXES DE FORMULE DE 11-1 À II-3
Étape a) : réaction du tri-éthylèneglycol monométhy! éther avec du chlorure de tosyle
Triéthylèneglycol monométhyl éther
Dans un ballon de 50OmL, le triéthylèneglycol monométhyl éther (20.00 g, 0.122 mol) est ajouté à une solution de soude (7.33 g, 0.183 mol) dans un mélange eau distillée/THF (20 mL/140 mL). La solution est refroidie à 00C à l'aide d'un bain de glace. Une solution de chlorure de tosyle
(25.50 g, 0.134 mol) dans 40 mL de THF est alors ajoutée au goutte à goutte à l'aide d'une ampoule de coulée sur environ 30 minutes. Le milieu réactionnel ainsi obtenu est agité à température ambiante pendant 24 heures puis versé dans un bêcher de 800 mL contenant 200 mL d'eau saturée en NaCI refroidie à 0σC. Deux phases sont alors observées. La phase supérieure jaunâtre, correspondant à la phase organique, est extraite à l'aide d'une ampoule à décanter. Elle est ensuite lavée avec 50OmL d'eau saturée en NaCI. La phase aqueuse d'origine est ensuite traitée avec 20OmL de CH2Cb et la nouvelle phase organique obtenue, la phase inférieure cette fois (d20cH2ci2=1,325) est récupérée. Les 2 phases organiques ainsi obtenues sont rassemblées, lavées à l'eau saturée en NaCI (500 mL), séchées sur MgSO4 anhydre, filtrées puis évaporées à l'aide d'un évaporateur rotatif. Le produit 3 est obtenu avec un rendement de 94% (36.30 g, 0.113 mol). Huile incolore.
Étape b) : Réaction du tosylate obtenu à l'étape a) avec du 3,4,5-trihydroxybenzoate de méthyle
3, 4, 5 Une solution de tosylate 3 (33.75 g, 0.106 mol) et de 3, 4, 5- trihydroxybenzoate de méthyle (5.95 g, 0.032 mol) et de K2CO3 (44.4 g, mol) dans le diméthylformamide (DMF) (100 mL) est agitée et chauffée à 800C à l'aide d'un bain d'huile pendant 72 heures.
Après arrêt du chauffage, le milieu réactionnel est refroidi à température ambiante puis filtré sur Celite. Après évaporation du solvant, le résidu du filtrat est repris dans 300 mL de CH2CI2. La phase organique ainsi obtenue est lavée avec 3x300mL d'eau saturée en NaCI, séchée sur MgSO4 anhydre, puis filtrée et évaporée à sec pour fournir 32,60 g de produit brut à purifier. Purification : colonne de chromatographie de 4,5cm de diamètre, VSjiiCe=500mL, éluant : CH2CI2/acétone 1/1.
Le produit 5 est obtenu avec un rendement de 90 % (17.65 g, 0.026 moi).
Étape c) : réduction du produit obtenu à l 'étape b), de préférence avec UAIH4, pour obtenir l'alcool correspondant
Une solution 1M de LiAIH4 dans le THF (34 mL, 0.034 mol) est ajoutée au goutte à goutte très précautionneusement à une solution de produit
5 (15.00 g, 0.024 mol) dans 20 mL de THF anhydre maintenue sous argon et refroidi à 00C par un bain de glace. Après 20 heures d'agitation à température ambiante, Ie milieu réactionnel est refroidi à 00C par un bain de glace et la réaction stoppée par ajout de 20 mL d'acétate d'éthyle (AcOEt), puis 20 mL de méthanol (MeOH) et enfin 20 mL d'eau. L'ajout d'acétate d'éthyle conduit à une réaction violente s'il n'est pas introduit lentement, l'ajout d'eau fait précipiter les sels. Le milieu réactionnel est alors filtré sur Célite puis évaporé à sec. Le résidu obtenu est repris dans 200 ml de CH2CI2, lavé avec 3x 200 mL d'eau saturée en NaCI. La phase organique obtenue est séchée sur MgSO4 anhydre, filtrée, et évaporée à sec.
Le produit 7 est obtenu avec un rendement de 79 % (11.18 g, 0.0188 mol). Étape d) : bromation du produit obtenu à l'étape c)
TMSBr (2.67 g, 2.3 ml_, 0.017 mol) est ajouté au goutte à goutte à l'aide d'une seringue à une solution de produit 7 (8.30 g, 0.014 mol) dans 10 mL de CHCI3 anhydre maintenue sous atmosphère inerte (Argon) et à 00C à l'aide d'un bain de glace . Après 48 heures d'agitation, le solvant est évaporé et le produit 9 est obtenu avec un rendement de 99% (9.20 g, 0.014 mol). Aucune purification supplémentaire n'est nécessaire.
Étape e) : réaction du produit obtenu à l'étape d) avec du 3,5- dihydroxybenzoate de méthyle
Une solution de produit 9 (3.00 g, 4.56 mmol), de méthyl 3,5- dihydroxybenzoate (348 mg, 2.07 mmol), de K2CO3 (1.43 g, 10.37 mmol) et de Kl (15 mg, 0.93 mmol) dans 50 mL d'acétone est chauffée à 600C pendant 72 heures. Le milieu réactionnel est alors refroidi à température ambiante, filtré sur Célite et le filtrat ainsi obtenu est évaporé à sec.
Le résidu est repris dans mL de CH2CI2, et la phase organique obtenu est lavée avec 3x OmL d'eau saturée en NaCI, séchée sur MgSO4 anhydre, filtrée puis évaporée à sec pour obtenir g de produit brut à purifier.
Purification : colonne de chromatographie de 4.5 cm de diamètre, VSiijCe=500mL, éluant : CH2CI2 : Acétone 1 :2
Le produit 11 est obtenu avec un rendement de 75 % (5.00g, 3.4 mmol). Huile jaunâtre.
Étape f) : réduction du produit obtenu à l'étape e), avec LiAIHU
Une solution 1M de LiAIH4 dans le THF (6.35 mL, 6.35 mmol) est ajoutée au goutte à goutte très précautionneusement à une solution de produit 11 (6.00 g, 4.54 mmol) dans 100 mL de THF anhydre maintenue sous argon et refroidi à 0°C par un bain de glace. Après 20 heures d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est refroidi à 00C par un bain de glace et la réaction stoppée par ajout de 20 mL d'acétate d'éthyle (AcOEt), puis 20 mL de méthanol (MeOH) et enfin 20 mL d'eau. L'ajout d'acétate d'éthyle conduit à une réaction violente s'il n'est pas introduit lentement, l'ajout d'eau fait précipiter les sels. Le milieu réactionnel est alors filtré sur Célite puis évaporé à sec. Le résidu obtenu est repris dans 50 ml de CH2CI2, lavé avec 3x
50 mL d'eau saturée en NaCl. La phase organique obtenue est séchée sur MgSO4 anhydre, filtrée, et évaporée à sec.
Le produit 13 est obtenu avec un rendement de 78% (4.58 g, 3.54 mmol). Étape g) : réaction du produit obtenu à l'étape f) avec du dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique
Le dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique (63 mg, 0.177 mmol) et le produit 13 (230 mg, 0.177 mmol) sont mis en solution dans 17 mL de chlorure de méthylène anhydre et la suspension obtenue est agitée à 500C pendant 30 minutes. La triéthylamine (0.247 mL, 1.77 mmol) est alors ajoutée et le milieu réactionnel agité à 500C pendant 12 heures avant d'être refroidi à température ambiante, concentré à 5 mL. 30 mL d'hexane y sont alors ajoutés, et la solution obtenue est mise au frigo (+4°C) pendant une nuit. Le produit ayant précipité est lavé à l'hexane, séché sous vide puis purifié par colonne de chromatographie flash. Purification : colonne de chromatographie de 1cm de diamètre, Vsfflcθ=20mL, éluant : CH2CI2/50% MeOH
Le produit 15 est obtenu avec un rendement de 96 % (284 mg, 0.17 mmol). Huile jaunâtre.
Étape h) réaction du produit obtenu à l'étape g) avec du chlorure de Gd ou de Mn ou du pertechnétate
- 1. réaction du produit obtenu à l'étape g) avec du chlorure de Gd :
Le ligand 15 (350 mg, 0.209 mmol) et Gd(CIO4)3 (191 mg d'une solution à 50% dans l'eau, 0.209 mmol) sont mis en solution dans 10 mL d'eau distillée et la solution est agitée à température ambiante pendant 12 heures tout en maintenant le pH constant à 7 par ajout d'une solution 1M de NaOH. Le milieu réactionnel est alors traité par de la résine Chelex pendant 1 heure afin d'éliminer les ions Gd3+ libres, puis filtré et lyophilisé. Le complexe 17 est obtenu avec un rendement de 91 % (351 mg, 0.19 mmol). Huile jaunâtre.
On obtient le complexe de formule 11-1.
2. réaction du produit obtenu à l'étape g) avec du chlorure Mn:
MnCl2. 4HbO (37 mg, 0.185 mmol) est ajouté à une solution de produit 15 (310 mg, 0.185 mmol) dans l'eau (5 mL) agitée à température ambiante. Après 30 minutes d'agitation, le complexe 19 impur (présences d'impuretés inorganiques de type NaCl) est lyophilisé. Une purification peut être menée pour éliminer les sels de sodium.
Purification : après lyophilisation, Ie résidu sec est repris dans un minimum de dichlorométhane et la phase organique obtenue est lavée à l'eau quasi-saturée en NaCI avant d'être séchée sur MgSO4 anhydre, filtrée puis évaporée à sec.
Le complexe 19 est obtenu avec un rendement de 90 % (300 mg, 0.168 mmol).
On obtient le complexe de formule II-2.
3. réaction du produit obtenu à l'étape g) avec du pertechnétate :
Manipulation effectuée dans une hotte blindée de médecine nucléaire équipée d'un activimètre :
185 MBq (5mCi) de pertechnétate 99mTc3+O4 " (2 à 4 ml) sortant du générateur en solution dans du sérum physiologique stérile et apyrogène sont ajoutés à un flacon contenant 18 μmoles de complexe 15- CaNa3 et 2 μmoles de chlorure stanneux (Sn2+) lyophilisés à partir d'une solution mère.
Agiter doucement et laisser réagir pendant 2 minutes à température ambiante.
La qualité du marquage est contrôlée par chromatographie sur papier wathmann (3MM CHR ) avec de la méthyl éthyl cétone comme phase mobile : le complexe marqué ne migre pas (Rf=O) et le pertechnétate libre migre avec le front du solvant (Rf =1).
Dans ces conditions, le marquage est toujours supérieur à 98%.
On obtient le complexe de formule II-3. EXEMPLE 2 : SYNTHÈSE DES COMPOSÉS DE FORMULE DE III-1 À III-3
EXEMPLE 3 : SYNTHÈSE DES COMPOSÉS DE FORMULE DE IV-1 À IV-3
Complexe de Formule IV-2 EXEMPLE 4 : SYNTHÈSE DES COMPOSÉS DE FORMULE DE V- 1 À V-3
EXEMPLE 5 : SYNTHÈSE DES COMPOSÉS DE FORMULE DE VM À VI-3
+ 3 Sn4" VI-3
EXEMPLE 6 : SYNTHÈSE DES COMPOSÉS DE FORMULE DE VIH À VII-3
Complexe de Formule Vll-3
Étape a) : synthèse du terbutoxy tri-éthylèneglyco! à partir du tertiobutanol
Une solution de MgSO4 (55.00 g, 0.45 mol) dans 150 mL de dichlorométhane est introduite dans un ballon bicol muni d'un condensateur à boules et agitée à température ambiante. Le montage doit impérativement être hermétiquement clos et sous argon. Sont alors introduit respectivement l'acide sulfurique H2SO4 (6.42 mL, 0.111 mol), le triéthylèneglyco! (15.00 mL,
0.111 mol) puis très lentement le tertiobutanol (52.80 mL, 0.556 mol). Le milieu réactionnel est alors agité à température ambiante pendant 19 heures puis 2 heures à reflux. Il est ensuite filtré et la phase organique est lavée à l'eau (300 ml_) puis à l'eau saturée en NaCI (2x300 ml_) avant d'être séchée sur MgSθ4 anhydre, filtrée puis évaporée à sec.
Purification : colonne de chromatographie de 3,5cm de diamètre, VSiiice=400mL, éluant : CH2CI2ZMeOH 95/5
Le produit 1 est obtenu avec un rendement de 23 % (5.29 g, 0.026 mol).
Étape b) : réaction du produit obtenu à l'étape a) avec du chlorure de tosyle
Du chlorure de tosyle (1.85 g, 9.70 mmol) dissout dans 4 mL de THF est ajouté goutte à goutte à une solution de NaOH (0.53 g, 13.23 mmol) et d'alcool 1 (1.82 g, 8.82 mmol) dans un mélange eau/THF (2/14 mL) refroidi à 00C. Après 68 heures d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est versé dans 50 mL d'eau saturée en NaCI refroidie à 00C. La phase organique obtenue est lavée à l'eau saturée en NaCI (100 mL), séchée sur MgSO4 anhydre, filtrée et évaporée à sec.
Purification : colonne de chromatographie de 3.5cm de diamètre, VsiiiCe=400mL, éluant : CH2CI2/MeOH 98 :2
Le produit 2 est obtenu avec un rendement de 67 % (0.87 g, 5.89 mmol). Étape c) : réaction du tosylate obtenu à l'étape b) avec du 3,4,5-trihydroxbenzoate de méthyle
3, 4, 5-tri
Une solution de tosylate 2 (5.89 g, 16.28 mmol), de 3, 4, 5- trihydroxybenzoate de méthyle (0.91 g, 4.93 mmol), de K2CO3 (6.82 g, 0.163 mol) et de Kl (0.37 g, 2.22 mmol) dans le diméthylformamide (DMF) (20 ml_) est agitée et chauffée à 800C à l'aide d'un bain d'huile pendant 72 heures.
Après arrêt du chauffage, le milieu réaction nel est refroidi à température ambiante puis filtré sur Celite. Après évaporation du solvant, le résidu du filtrat est repris dans 300 ml_ de CH2CI2. La phase organique ainsi obtenue est lavée avec 3x300ml_ d'eau saturée en NaCI, séchée sur MgSO4 anhydre, puis filtrée et évaporée à sec pour fournir 4.60 g de produit brut à purifier.
Purification : colonne de chromatographie de 4.0cm de diamètre, VSiiice=400mL, éluant : CH2CI2/MeOH 98/2
Le produit 4 est obtenu avec un rendement de 82 % (2.96 g, 4.03 mmol). Étape d) : réduction du produit obtenu à l'étape c), de préférence avec LiAIH4, pour obtenir l'alcool correspondant
Une solution 1M de LiAIH4 dans le THF (6.64 mL, 6.64 mmol) est ajoutée au goutte à goutte très précautionneusement à une solution de produit 4 (2.96 g, 4.03 mmol) dans 4 mL de THF anhydre maintenue sous argon et refroidi à 00C par un bain de glace. Après 20 heures d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est refroidi à 00C par un bain de glace et la réaction stoppée par ajout de 4 mL d'acétate d'éthyle (AcOEt), puis 4 mL de méthanol (MeOH) et enfin 4 mL d'eau. L'ajout d'acétate d'éthyle conduit à une réaction violente s'il n'est pas introduit lentement, l'ajout d'eau fait précipiter les sels. Le milieu réactionnel est alors filtré sur Célite puis évaporé à sec. Le résidu obtenu est repris dans 35 ml de CH2Cb, lavé avec 3x 35 mL d'eau saturée en NaCI. La phase organique obtenue est séchée sur MgSO4 anhydre, filtrée, et évaporée à sec.
Le produit 6 est obtenu avec un rendement de 88 % (2.56 g, 3.55 mmol). Étape e) : réaction du produit obtenu à l'étape d) avec du dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique
Le dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique (1.23 g, 3.46 mmol) et le produit 6 (2.50 g, 3.46 mmol) sont mis en solution dans 50 mL de chlorure de méthylène anhydre et la suspension obtenue est agitée à 500C pendant 30 minutes. La triéthylamine (4.82 mL, 34.6 mmol) est alors ajoutée et le milieu réactionnel agité à 500C pendant 12 heures avant d'être refroidi à température ambiante, concentré à 5 mL. 30 mL d'hexane y sont alors ajoutés, et la solution obtenue est mise au frigo (+4°C) pendant une nuit. Le produit ayant précipité est lavé à l'hexane, séché sous vide puis purifié par colonne de chromatographie flash.
Purification : colonne de chromatographie de 1cm de diamètre, Vsatee=20mL1 éluant : CH2CI2/50% MeOH
Le produit 8 est obtenu avec un rendement de 95% (3.59 g, 3.28 mmol). Huile jaunâtre. Étape f) : réaction du produit obtenu à l'étape e) avec du chlorure de Gd ou de Mn ou du pertechnétate
- 1. réaction avec du chlorure du Gd
Le ligand 8 (1.00 g, 0.91 mmol) et Gd(CIO4)3 (838 mg d'une solution à 50% dans l'eau, 0.91 mmol) sont mis en solution dans 5mL d'eau distillée et la solution est agitée à température ambiante pendant 12 heures tout en maintenant le pH constant à 7 par ajout d'une solution 1M de NaOH. Le milieu réactionnel est alors traité par de la résine Chelex pendant 1 heure afin d'éliminer les ions Gd3+ libres, puis filtré et lyophilisé.
Le complexe 12 est obtenu avec un rendement de 92% (1.07 g, 0.83 mmol). Huile jaunâtre.
On obtient le complexe de formule Vl 1-1.
- 2. réaction avec du chlorure de Mn
MnCI2. 4H2O (182 mg, 0.91 mmol) est ajouté à une solution de ligand 8 (1.00 g, 0.91 mmol) dans l'eau (25mL) agitée à température ambiante.
Après 30 minutes d'agitation, le complexe impur (présences d'impuretés inorganiques de type NaCI) est lyophilisé. Une purification peut être menée pour éliminer les sels de sodium.
Purification : après lyophilisation, le résidu sec est repris dans un minimum de dichlorométhane et la phase organique obtenue est lavée à l'eau quasi-saturée en NaCI avant d'être séchée sur MgSO4 anhydre, filtrée puis évaporée à sec.
Le composé 14 est obtenu avec un rendement de 90% (978 mg, 0.82 mmol).
On obtient le complexe de formule VII-2.
3. réaction avec du pertechnétate
PEG-tBu] ". Na+
2 "171TcO2 + 4H2O + 3 Sn4+
Manipulation effectuée dans une hotte blindée de médecine nucléaire équipée d'un activimètre :
185 MBq (5mCi) de pertechnétate 99mTc3+O4 " (2 à 4 ml) sortant du générateur en solution dans du sérum physiologique stérile et apyrogène sont ajoutés à un flacon contenant 18 μmoles de ligand 8-CaNa3 et 2 μmoles de chlorure stanneux (Sn2+) lyophilisés à partir d'une solution mère. Agiter doucement et laisser réagir pendant 2 minutes à température ambiante.
La qualité du marquage est contrôlée par chromatographie sur papier wathmann (3MM CHR ) avec de la méthyl éthyl cétone comme phase mobile : le complexe marqué ne migre pas (Rf=O) et le pertechnétate libre migre avec le front du solvant (Rf =1).
Dans ces conditions, le marquage est toujours supérieur à 98%.
On obtient le complexe de formule VII-3.
EXEMPLE 7 : SYNTHÈSE DES COMPOSÉS DE FORMULE DE Vlll-1 À VIII-3
Étape a) : synthèse du terbutoxy tri-éthyièneglycol à partir du tertiobutanol
Une solution de MgSO4 (55.00 g, 0.45 mol) dans 150 mL de dichlorométhane est introduite dans un ballon bicol muni d'un condensateur à boules et agitée à température ambiante. Le montage doit impérativement être hermétiquement clos et sous argon. Sont alors introduit respectivement l'acide sulfurique H2SO4 (6.42 mL, 0.111 mol), le triéthylèneglycol (15.00 mL, 0.111 mol) puis très lentement le tertiobutanol (52.80 mL, 0.556 mol). Le milieu réactionnel est alors agité à température ambiante pendant 19 heures puis 2 heures à reflux. Il est ensuite filtré et la phase organique est lavée à l'eau (300 ml_) puis à l'eau saturée en NaCI (2x300 ml_) avant d'être séchée sur MgSO4 anhydre, filtrée puis évaporée à sec.
Purification : colonne de chromatographie de 3,5cm de diamètre, VSiiice=400mL, éluant : CH2CI2/Me0H 95/5
Le produit 1 est obtenu avec un rendement de 23 % (5.29 g, 0.026 mol).
Étape b) : réaction du produit obtenu à l'étape a) avec du chlorure de tosyle
Du chlorure de tosyle (1.85 g, 9.70 mmol) dissout dans 4 mL de THF est ajouté goutte à goutte à une solution de NaOH (0.53 g, 13.23 mmol) et d'alcool 1 (1.82 g, 8.82 mmol) dans un mélange eau/THF (2/14 ml_) refroidi à 00C. Après 68 heures d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est versé dans 50 mL d'eau saturée en NaCI refroidie à 00C. La phase organique obtenue est lavée à l'eau saturée en NaCI (100 mL), séchée sur MgSO4 anhydre, filtrée et évaporée à sec.
Purification : colonne de chromatographie de 3.5 cm de diamètre, VSiiiCe=400mL, éluant : CH2CI2/MeOH 98 :2
Le produit 2 est obtenu avec un rendement de 67 % (0.87 g, 5.89 mmol). Étape c) : réaction du tosylate obtenu à l'étape c) avec du 3,4,5-trihydroxybenzoate de méthyle
3, 4, 5
Une solution de tosylate 2 (5.89 g, 16.28 mmol), de 3, 4, 5- trihydroxybenzoate de méthyle (0.91 g, 4.93 mmol), de K2CO3 (6.82 g, 0.163 mol) et de Kl (0.37 g, 2.22 mmol) dans le diméthylformamide (DMF) (20 mL) est agitée et chauffée à 8O0C à l'aide d'un bain d'huile pendant 72 heures.
Après arrêt du chauffage, le milieu réactionnel est refroidi à température ambiante puis filtré sur Celite. Après évaporation du solvant, le résidu du filtrat est repris dans 300 mL de CH2CI2. La phase organique ainsi obtenue est lavée avec 3x300mL d'eau saturée en NaCI, séchée sur MgSO4 anhydre, puis filtrée et évaporée à sec pour fournir 4.60 g de produit brut à purifier.
Purification : colonne de chromatographie de 4.0cm de diamètre, Vsiiice=400mL, éluant : CH2CI2/MeOH 98/2
Le produit 4 est obtenu avec un rendement de 82 % (2.96 g, 4.03 mmol). Étape d) : réduction du produit obtenu à l'étape G), de préférence avec UAIH4, pour obtenir l'alcool correspondant
Une solution 1M de LiAIH4 dans le THF (6.64 mL, 6.64 mmol) est ajoutée au goutte à goutte très précautionneusement à une solution de produit 4 (2.96 g, 4.03 mmol) dans 4 mL de THF anhydre maintenue sous argon et refroidi à 00C par un bain de glace. Après 20 heures d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est refroidi à 00C par un bain de glace et la réaction stoppée par ajout de 4 mL d'acétate d'éthyle (AcOEt), puis 4 mL de méthanol (MeOH) et enfin 4 mL d'eau. L'ajout d'acétate d'éthyle conduit à une réaction violente s'il n'est pas introduit lentement, l'ajout d'eau fait précipiter les sels. Le milieu réactionnel est alors filtré sur Célite puis évaporé à sec. Le résidu obtenu est repris dans 35 ml de CH2CI2, lavé avec 3x 35 mL d'eau saturée en NaCI. La phase organique obtenue est séchée sur MgSO4 anhydre, filtrée, et évaporée à sec.
Le produit 6 est obtenu avec un rendement de 88 % (2.56 g, 3.55 mmol).
Étape e) : bromation du produit obtenu à l'étape d)
TMSBr (0.58 mL, 4.44 mmol) est ajouté au goutte à goutte à l'aide d'une seringue à une solution de produit 6 (2.56 g, 3.55 mmol) dans 3 mL de CHCI3 anhydre maintenue sous atmosphère inerte (Argon) et à 00C à l'aide d'un bain de glace. Après 48 heures d'agitation, le solvant est évaporé et le produit 8 est obtenu avec un rendement de 90% (2.51g, 3.19 mmol). Aucune purification supplémentaire n'est nécessaire.
Étape f) : réaction du produit obtenu à l'étape e) avec du 3,5- dihydroxybenzoate de méthyle
Une solution de produit 8 (2.51 g, 3.20 mmol), d'alcool 3,5- dihydroxybenzylique (0.25 g, 1.46 mmol), de K2CO3 (1.01 g, 7.28 mmol) et de Kl (7 mg, 0.44 mmol) dans 15 mL d'acétone est chauffée à 600C pendant 72 heures. Le milieu réactionnel est alors refroidi à température ambiante, filtré sur Célite et le filtrat ainsi obtenu est évaporé à sec. Le résidu est repris dans 5OmL de CH2CI2, et la phase organique obtenu est lavée avec 3x 5OmL d'eau saturée en NaCI. séchée sur MgSO4 anhydre, filtrée puis évaporée à sec pour obtenir 2.50 g de produit brut à purifier.
Purification : colonne de chromatographie de 4cm de diamètre, VSiiiCe=450mL, éluant : Acétone
Le produit 10 est obtenu avec un rendement de 88% (1.98 g, 1.28 mmol). Huile jaunâtre. Étape g) : réduction du produit obtenu à l'étape f) avec LÎAIH4
Une solution 1M de LiAIH4 dans le THF (1.73 mL, 1.73 mmol) est ajoutée au goutte à goutte très précautionneusement à une solution de produit 10 (1.95 g, 1.23 mmol) dans 50 mL de THF anhydre maintenue sous argon et refroidi à O0C par un bain de glace. Après 20 heures d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est refroidi à 00C par un bain de glace et la réaction stoppée par ajout de 10 mL d'acétate d'éthyle (AcOEt), puis 10 mL de méthanol (MeOH) et enfin 10 mL d'eau. L'ajout d'acétate d'éthyle conduit à une réaction violente s'il n'est pas introduit lentement, l'ajout d'eau fait précipiter les sels. Le milieu réactionnel est alors filtré sur Célite puis évaporé à sec. Le résidu obtenu est repris dans 50 ml de CH2CI2, lavé avec 3x 50 mL d'eau saturée en NaCI. La phase organique obtenue est séchée sur MgSO4 anhydre, filtrée, et évaporée à sec. Le produit 12 est obtenu avec un rendement de 92 % (1.76 g,
1.13 mmol).
Étape h) : Réaction de produit obtenu à l'étape g ) avec du dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique
Le dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique (115 mg,
0.32 mmol) et le produit 12 (500 mg, 0.32 mmol) sont mis en solution dans 35 ml_ de chlorure de méthylène anhydre et la suspension obtenue est agitée à
5O0C pendant 30 minutes. La triéthylamine (0.45 mL, 3.2 mmol) est alors ajoutée et le milieu réactionnel agité à 500C pendant 12 heures avant d'être refroidi à température ambiante, concentré à 5 mL. 30 mL d'hexane y sont alors ajoutés, et la solution obtenue est mise au frigo (+40C) pendant une nuit. Le produit ayant précipité est lavé à l'hexane, séché sous vide puis purifié par colonne de chromatographie flash.
Purification : colonne de chromatographie de 1cm de diamètre, Vsi|lce=20mL, éluant : CH2CI2/50% MeOH
Le produit 14 est obtenu avec un rendement de 89% (553 mg, 0.28 mmol). Huile jaunâtre.
Étape i ) : réaction du produit obtenu à l'étape h ) avec du chlorure de Gd (III) ou de Mn (II) ou du pertechnétate - 1. réaction avec du chlorure du Gd
Le ligand 14 (200 mg, 0.10 mmol) et Gd(CIO4)3 (95 mg d'une solution à 50% dans l'eau, 0.10 mmol) sont mis en solution dans 5mL d'eau distillée et la solution est agitée à température ambiante pendant 12 heures tout en maintenant le pH constant à 7 par ajout d'une solution 1M de NaOH. Le milieu réactionnel est alors traité par de la résine Chelex pendant 1 heure afin d'éliminer les ions Gd3+ libres, puis filtré et lyophilisé.
Le complexe 16 est obtenu avec un rendement de 87% (189 mg, 0.087 mmol). Huile jaunâtre.
On obtient le complexe de formule VIII-1.
2. réaction avec du chlorure de Mn
MnCI2. 4H2O (21 mg, 0.10 mmol) est ajouté à une solution de produit 14 (200 mg, 0.10 mmol) dans l'eau (5mL) agitée à température ambiante. Après 30 minutes d'agitation, le complexe 18 impur (présences d'impuretés inorganiques de type NaCI) est lyophilisé. Une purification peut être menée pour éliminer les sels de sodium.
Purification : après lyophilisation, le résidu sec est repris dans un minimum de dichlorométhane et la phase organique obtenue est lavée à l'eau quasi-saturée en NaCI avant d'être séchée sur MgSO4 anhydre, filtrée puis évaporée à sec.
Le complexe 18 est obtenu avec un rendement de 88 % (189 mg, 0.088 mmol).
On obtient le complexe de formule Vlll-2. - 3. réaction avec du pertechnétate
Na+
Manipulation effectuée dans une hotte blindée de médecine nucléaire équipée d'un activimètre :
185 MBq (5mCi) de pertechnétate 99mTc3+O4 " (2 à 4 ml) sortant du générateur en solution dans du sérum physiologique stérile et apyrogène sont ajoutés à un flacon contenant 18 μmoles de complexe 14-
CaNa3 et 2 μmoles de chlorure stanneux (Sn2+) lyophilisés à partir d'une solution mère.
Agiter doucement et laisser réagir pendant 2 minutes à température ambiante.
La qualité du marquage est contrôlée par chromatographie sur papier wathmann (3MM CHR ) avec de la méthyl éthyl cétone comme phase mobile : le complexe marqué ne migre pas (Rf=O) et le pertechnétate libre migre avec le front du solvant (Rf =1).
Dans ces conditions, le marquage est toujours supérieur à 98%.
On obtient le complexe de formule VIII-3. EXEMPLE 8 : SYNTHÈSE DES COMPOSÉS DE FORMULE DE IX-1 À IX-3
'OH
OH
Produit IX-3 EXEMPLE 9 : SYNTHÈSE DES COMPOSÉS DE FORMULE DE X-1 À X-3
EXEMPLE 10 : SYNTHÈSE DES COMPOSÉS DE FORMULE A DE GENERATION 1 ET 2
EXEMPLE 11 : SYNTHÈSE DES COMPOSÉS DE FORMULE A DE GENERATION 3
EXEMPLE 12 : SYNTHÈSE DES COMPOSÉS DE FORMULE A DE GENERATION 1 , 2 OU 3 COMPRENANT UN ESPACEUR BUTANE DIAMINE.
On a montré à l'exemple 10 la synthèse de la structure dendritique globulaire formée par les dendrons des complexes de l'invention de génération 1 fonctionnalisés, ainsi que de la structure dendritique globulaire des dendrons de génération 2. On a montré de la même façon à l'exemple 11 la synthèse de la structure dendritique globulaire de génération 3. C'est après la formation de ces dendrons que l'on introduit, si cela est souhaité, un espaceur selon l'invention.
Dans le cas où cet espaceur est la 1 ,4-butanediamine, la synthèse se déroule selon le schéma suivant, pour le complexe de génération 1 : 1, 4fautanediamine
Puis, comme montré aux exemples 10 et 11 , on introduit le chélate pour obtenir les produits voulus. Bien que l'invention ait été décrite dans les exemples qui précèdent comme concernant les marqueurs Gd3+, Mn2+ et 99mTc3+, il apparaîtra clairement à l'homme de l'art que tout autre marqueur d'intérêt pourra être complexé de la même façon.
Également, bien que l'invention ait été décrite dans les exemples qui précèdent avec des fonctionnalisations de la structure dendritique impartissant une vectorisation vers le cerveau aux complexes de l'invention, il apparaîtra clairement à l'homme de l'art que la fonctionnaiisation des dendrites avec des groupements se liant spécifiquement à des récepteurs d'autres organes pourront être utilisés pour obtenir des agents de contraste spécifiques d'autres organes.
Mais aussi, bien que l'invention ait été décrite avec des structures dendritiques de génération 1, 2 ou 3, il apparaîtra clairement à l'homme de l'art que des complexes comprenant des structures dendritiques de générations supérieures sont tout à fait envisageables. De la même façon, les dendrites ont été décrits dans ce qui précède comme comportant trois ou quatre motifs éthylèneglycol, mais il apparaîtra clairement à l'homme de l'art que l'utilisation de dendrites comportant plus de quatre motifs éthylèneglycol sont tout à fait envisageables, en particulier dans le cas de groupements de fonctionnalisation volumineux.
De la même façon, bien que les procédés de synthèse aient été décrits en utilisant des agents réducteurs, des groupes protecteurs et autres composés particuliers, il apparaîtra clairement à l'homme de l'art que d'autres tels agents réducteurs, groupes protecteurs et composés ayant la même fonction que décrite dans les exemples, pourront être utilisés.
Mais encore, bien que dans les exemples qui précèdent l'agent thérapeutique utilisé soit un agent thérapeutique des maladies neurodégénératives, tout autre agent thérapeutique pourra être utilisé, en combinaison avec l'agent de vectorisation adapté, pour obtenir une composition pharmaceutique ayant une action ciblée sur un organe et une maladie particulière de cet organe.

Claims

REVENDICATIONS
1. Complexes chélatés dendritiques caractérisés en ce qu'ils ont la formule I suivante :
[[MC]-En-[D]1n-X1P1 X2p2 X3p3 X4P4] z z B+ Formule I
dans laquelle :
- M est un marqueur magnétique ou scintigraphique, de préférence choisi parmi les ions Gd3+, Mn2+ et 99mTc3+,
- C est un agent chélatant du marqueur magnétique M, - [MC] est un chélate du marqueur magnétique M,
- E est un espaceur,
- n = 0 ou 1 ,
- [D] est une structure dendritique dont le coeur comprend au moins un groupement de type alcool benzylique ou aminé benzylique dont le cycle benzyle est substitué aux positions 3, 4, 5 par des chaînes composées de motifs éthylèneglycol,
- m est un entier valant 1 ou 2 ou 4,
- Xi est un groupement augmentant la lipophilie du complexe, de préférence un groupement tertiobutyle (tBu), - p1 est un entier valant de 0 à 12 inclus,
- X2 est un groupement augmentant la spécificité du complexe pour un organe particulier, de préférence pour le cerveau, tel que la L-dopamine,
- p2 est un entier valant 0, 1, 2 ou 4 inclus, - X3 un groupement ayant une activité thérapeutique, de préférence pour les maladies neurodégénératives telles que la maladie d'Alzheimer, la maladie de Parkinson et la sclérose en plaque,
- p3 est un entier valant 0, 1 , 2 ou 4 inclus,
- X4 est un groupement CH3, - p1+ p2+ p3+ p4 = 3 lorsque m = 1 ou p1+ p2+ p3+ p4 = 6 lorsque m = 2 ou p1+ p2+ p3+ p4 = 12 lorsque m = 4,
- p4 est un entier valant de 0 à 12 inclus, - B est un contre ion, de préférence Na+ou K+
- z est un entier valant 0, 1 , 2, 3 ou 4
2. Complexes selon la revendication 1 caractérisés en ce que l'agent chélatant C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique (DTPA), un tripode dérivé de catéchol ou un tripode dérivé de 8-hydroxyquinoline .
3. Complexes selon la revendication 1 ou 2 caractérisés en ce que chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol comportant 3 ou 4 motifs éthylèneglycol.
4. Complexes selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisés en ce que m=1.
5. Complexes selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisés en ce que m=2 ou 4.
6. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 5 caractérisé en ce que : - n = p1 = p2 = p3 = 0,
- X4 est CH3, . p4 = 6,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne comportant 3 motifs éthylèneglycol, - m=2,
- C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique,
- M est Gd3+,
- B est Na+, et
- z = 1 de formule 11-1 suivante :
Formule 11-1
7. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 5 caractérisé en ce que :
- n = p1 = p2 = p3 = O,
- X4 est CH3,
- p4 = 6,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol,
- m=2,
- C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique,
- M est Mn2+,
- B est Na+, et
- z = 2 de formule II-2 suivante :
Formule 11-2
8. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 5 caractérisé en ce que :
- n = p1 = p2 = p3 = O1
- X4 est CH3,
- p4 = 6,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne polyéthylèneglycol ayant 3 motifs éthylèneglycol,
- m=2,
- C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique,
- M est 99mTc3+,
- B est Na+, et
- z = 1, de formule II-3 suivante :
Formule 11-3
9. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 et 4 caractérisé en ce que : - C est un tripode dérivé du catéchol,
- n = 1,
- E est une chaîne éthylène diamine ou butane diamine,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne ayant 3 ou 4 motifs éthylèneglycol, - m = 1
- M est Gd3+,
- p1 = p2 = p3 = 0,
- X4 est CH3,
- P4 = 3, - B eSt Na +, et
- z = 3.
10. Complexe selon l'une des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que :
- C est un tripode dérivé du catéchol, - n = 1,
- E est une chaîne éthylène diamine ou butane diamine, - chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne ayant 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- m = 1,
- M est Mn2+, - p1 = p2 = p3 = 0,
- X4 est CH3,
- p4 = 3,
- B est Na +, et
- z = 4,
11. Complexe selon l'une des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que :
- C est un tripode dérivé du catéchol, - n = 1 ,
- E est une chaîne éthylène diamine ou butane diamine, - chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- m = 1 ,
- M est 99mTc3+,
- p1 = p2 =p3 = 0 - X4 est CH3,
- P4 = 3,
- B est Na3+, et
- z = 3.
12. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que :
- C est un tripode dérivé de 8-hydroxyquinoline,
- n = 1 ,
- E est une chaîne éthylène diamine ou butane diamine,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- m = 1 ,
- M est Gd3+, - p1 = p2 = p3 = 0,
- X4 est CH3, . p4 = 3,
- B est Na3+, et - z = 0.
13. Complexe selon l'une des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que :
- C est un tripode dérivé de 8-hydroxyquinoline,
- n = 1 , - E est une chaîne éthylène diamine ou butane diamine,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4motifs éthylèneglycol,
- m = 1 ,
- M est Mn2+, - p1 = p2 = p3 = 0,
- X4 est CH3, . p4 = 3,
- B est Na3+, et
- z = 1.
14. Complexe selon l'une des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que :
- C est un tripode dérivé de 8-hydroxyquinoline,
- n = 1 ,
- E est une chaîne éthylène diamine ou butane diamine, - chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- m = 1 ,
- M est 99mTc3+,
- p1 = p2 = p3 = 0, - X4 est CH3,
- p4 = 3,
- B est Na3+, et - z = 0.
15. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1, 3 et 5 caractérisé en ce que :
- C est un tripode dérivé du catéchol, - n = 1 ,
- E est une chaîne éthylènediamine ou butanediamine,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- m = 2 ou 4, - M est Gd3+,
- p1 = p2 = p3 = 0,
- X4 est CH3,
. p4 = 6 lorsque m = 2 ou p4= 12 lorsque m = 4,
- B est Na3+, et - z = 3.
16. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 5 caractérisé en ce que :
- C est un tripode dérivé du catéchol,
- n = 1, - E est une chaîne éthylène diamine ou butane diamine, chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- m = 2 ou 4,
- M est Mn2+, - p1 = p2 = p3 = 0,
- X4 est CH3,
. p4 = 6 lorsque m = 2 ou p4= 12 lorsque m = 4,
- B est Na3+, et
- z = 4.
17. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à
3 et 5 caractérisé en ce que :
- C est un tripode dérivé du catéchol, - n = 1 ,
- E est une chaîne éthylène diamine ou butane diamine,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol, - m = 2 ou 4,
- M est 99mTc3+,
- p1 = p2 = p3 = 0, - X4 est CH3,
. p4 = 6 lorsque m = 2 ou p4= 12 lorsque m = 4, - B est Na3+, et
- z = 3.
18. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 5 caractérisé en ce que :
- C est un tripode dérivé de 8-hydroxyquinoline, - n = 1,
E est une chaîne éthylène diamine ou butane diamine,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- m = 2 ou 4, - M est Gd3+,
- p1 = p2 = p3 = 0,
- X4 est CH3,
- p4 = 6 lorsque m = 2 ou p4= 12 lorsque m = 4,
- B est Na3+, et - z = 0.
19. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 5 caractérisé en ce que :
- C est un tripode dérivé de 8-hydroxyquinoline,
- n = 1 , E est une chaîne éthylène diamine ou butane diaminechaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol, - m = 2 ou 4,
- M est Mn2+,
- p1 = p2 = p3 = 0,
- X4 est CH3, . p4 = 6 lorsque m = 2 ou p4= 12 lorsque m = 4,
- B est Na3+, et
- z = 1.
20. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à
3 et 5 caractérisé en ce que : - C est un tripode dérivé de 8-hydroxyquinoline,
- n = 1 ,
- E est une chaîne éthylène diamine ou butane diamine,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol, - m = 2 ou 4,
- M est 99mTc3+,
- p1 = p2 = p3 = 0,
- X4 est CH3,
- p4 = 6 lorsque m = 2 ou p4= 12 lorsque m = 4, - B est Na \ et
- z = 0.
21. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à
4 caractérisé en ce que :
- n = p2 = p3 = p4 = 0, - M est Gd3+,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- m = 1 ,
- C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, - Xi est un groupement tertiobutyle (tBu),
- p1 = 3,
- B est Na+, et 01645
114
- z = 1.
22. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que :
- n = p2 = p3 ≈ p4 = O1 - M est Mn2+,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- m = 1,
- C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, - Xi est un groupement tertiobutyle (tBu),
- p1 = 3,
- B est Na+, et
- z = 2.
23. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que :
- n = p2 = p3 = p4 = 0,
- M est 99mTc3+,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol, - m = 1 ,
- C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique,
- X1 est un groupement tertiobutyle (tBu),
- p1 = 3,
- B est Na+, et - z = 1.
24. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 5 caractérisé en ce que :
- n = p2 = p3 = p4 = 0,
- M est Gd3+, - chaque dendrite de Ia structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- m = 2 ou 4, - C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique,
- Xi est un groupement tertiobutyle (tBu),
- p1 = 6 lorsque m = 2 ou p1 = 12 lorsque m = 4,
- B est Na+, et - z = 1.
25. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 5 caractérisé en ce que :
- n = p2 = p3 = p4 = 0,
- M est Mn2+, - chaque dendrite de la structure dendrittque [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- m = 2 ou 4,
- C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique,
- X1 est un groupement tertiobutyle (tBu), - p1 = 6 lorsque m = 2 et p 1 = 12 lorsque m = 4,
- B est Na+, et
- z = 2.
26. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à
3 et 5, caractérisé en ce que : - n = p2 = p3 = p4 = 0,
- M est 99mTc3+,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- m = 2 ou 4, - C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique,
- X-i est un groupement tertiobutyle (tBu),
- p1 = 6 lorsque m = 2 ou p1 = 12 lorsque m = 4,
- B est Na+, et
- z = 1.
27. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à
4 caractérisé en ce que :
- n = p3 = p4 = 0, - chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique,
- M est Gd3+, - m = 1,
- X-i est un groupement tertiobutyle (tBu)
- p1 = 2
- X2 est la L-dopamine,
- p2 = 1 - B est Na+, et
- z = 1.
28. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que :
- n = p3 = p4 = 0, - chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique,
- M est Mn2+,
- m = 1, - X1 est un groupement tertiobutyle (tBu)
- p1 = 2
- X2 est la L-dopamine,
- p2 = 1
- B est Na+, et - z = 2.
29. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que :
- n = p3 = p4 = 0,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique,
- M est 99mTc3+, - m = 1 ,
- Xi est un groupement tertiobutyle (tBu)
- p1 = 2
- X2 est la L-dopamine, - p2 = 1
- B est Na+, et
- z = 1.
30. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 5 caractérisé en ce que : - n = p3 = p4 = 0,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique,
- M est Gd3+, - m = 2,
- Xi est un groupement tertiobutyle (tBu)
- p1 = 4
- X2 est la L-dopamine,
- p2 = 2 - B est Na+, et
- z = 1.
31. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 5 caractérisé en ce que :
- n = p3 = p4 = 0, - chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique,
- M est Mn2+,
- m = 2, - Xi est un groupement tertiobutyle (tBu)
- p1 = 4
- X2 est la L-dopamine, - p2 = 2,
- B est Na+, et
- z = 2.
32. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 5 caractérisé en ce que :
- n = p3 = ρ4 = 0,
- chaque dendrite de la structure dendritique [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- C est l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, - M est 99mTc3+,
- m = 2,
- X1 est un groupement tertiobutyle (tBu)
- p1 = 4,
- X2 est la L-dopamine, - P2 = 2,
- B est Na+, et
- z = 1.
33. Complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 5 caractérisé en ce que : - C est soit l'acide diéthylènetriamine pentaacétique, soit un tripode dérivé de catéchol ou de 8-hydroxyquinoline
- n = 0 ou 1,
E est une chaîne éthylène diamine ou butane diamine lorsque n = 1, - chaque dendrite de la structure [D] est une chaîne à 3 ou 4 motifs éthylèneglycol,
- m = 1 ou 2 ou 4,
- M est Gd3+, ou Mn2+, ou 99mTc3+,
- Xi est un groupement tertiobutyle (tBu), - p1 est un entier valant entre 0 et 12 inclus,
- X2 est la L-dopamine,
- p2 est un entier valant 0, 1, 2, ou 4 inclus, - X3 est un agent thérapeutique,
- p3 est un entier valant entre 0, 1 , 2, ou 4 inclus,
- p4 = 0,
- B est Na+, et - z = 0,1 , 2, 3 ou 4.
34. Procédé de synthèse du complexe selon l'une quelconque des revendications 6 à 8 caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes: a) réaction du tri-éthylèneglycol monométhyl éther avec du chlorure de tosyle, b) réaction du tosylate obtenu à l'étape a) avec du 3,4,5- trihydroxybenzoate de méthyle, c) réduction du produit obtenu à l'étape b), de préférence avec LiAIH4, pour obtenir l'alcool correspondant, d) bromation du produit obtenu à l'étape c), e) réaction du produit obtenu à l'étape d) avec du 3,5- dihydroxybenzoate de méthyle, f) réaction du produit obtenu à l'étape e), de préférence avec LiAIH4, g) réaction du produit obtenu à l'étape f) avec du dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique, h) réaction du produit obtenu à l'étape g) avec du chlorure de Gd ou de Mn ou du pertechnétate.
35. Procédé de synthèse du complexe selon l'une quelconque des revendications 21 à 23 caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : 45
120 a) synthèse du terbutoxy tri-éthylèneglycol à partir du tertiobutanol, b) réaction du produit obtenu à l'étape a) avec du chlorure de tosyle, c) réaction du tosylate obtenu à l'étape b) avec du 3,4,5- trihydroxybenzoate de méthyle, d) réduction du produit obtenu à l'étape c), de préférence avec LiAIH4, pour obtenir l'alcool correspondant, e) réaction du produit obtenu à l'étape d) avec du dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique, f) réaction du produit obtenu à l'étape e) avec du chlorure de Gd ou de Mn ou du pertechnétate.
36. Procédé de synthèse du complexe selon l'une quelconque des revendications 27 à 29 caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : a) synthèse du terbutoxy tri-éthylèneglycol à partir du tertiobutanol, b) réaction du produit obtenu à l'étape a) avec du chlorure de tosyle, a') réaction du 3,4,5-trihydroxybenzoate de méthyle avec de l'anhydride acétique, b') réaction du produit obtenu à l'étape a') avec du bromure d'allyle, c') hydrolyse basique du produit obtenu à l'étape b'), de préférence avec du carbonate de potassium, d1) réaction du produit obtenu à l'étape c') avec le tosylate obtenu à l'étape b), e1) déprotection de la fonction alcool du produit obtenu à l'étape d'), a") protection de la L-dopamine avec du chlorure de Fmoc, b") réaction du produit obtenu à l'étape a") avec du bromure d'allyle, 7 001645
121 c") réaction du produit obtenu à l'étape b") avec de la morpholine, d") estérification du produit obtenu à l'étape c"), e") saponification du produit obtenu à l'étape d"), f") estérification du produit obtenu à l'étape e") avec le produit obtenu à l'étape e'), g") réduction du produit obtenu à l'étape f") pour obtenir l'alcool correspondant, h") réaction du produit obtenu à l'étape g") avec le dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique, i") réaction du produit obtenu à l'étape h") avec du chlorure de Gd (Hl), de Mn (11) ou du pertechnétate.
37. Procédé de synthèse du complexe selon l'une quelconque des revendications 30 à 32 caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : a) synthèse du terbutoxy tri-éthylèneglycol à partir du tertiobutanol, b) réaction du produit obtenu à l'étape a) avec du chlorure de tosyle, a') réaction du 3,4,5-trihydroxybenzoate de méthyle avec de l'anhydride acétique, b') réaction du produit obtenu à l'étape a') avec du bromure d'allyle, c') hydrolyse basique du produit obtenu à l'étape b') avec du carbonate de potassium, d') réaction du produit obtenu à l'étape c') avec le tosylate obtenu à l'étape b), e') déprotection de la fonction alcool du produit obtenu à l'étape d'), a") protection de la L-dopamine avec du chlorure de Fmoc, b") réaction du produit obtenu à l'étape a") avec du bromure d'allyle, 45
122 c") réaction du produit obtenu à l'étape b") avec de la morpholine, d") estérification du produit obtenu à l'étape c"), e") saponification du produit obtenu à l'étape d"), f") estérification du produit obtenu à l'étape e") avec le produit obtenu à l'étape e'), g") réduction du produit obtenu à l'étape f"), de préférence avec LiAIH4, pour obtenir l'alcool correspondant, h") bromation du produit obtenu à l'étape g"), i") réaction du produit obtenu à l'étape h") avec du 3,5- dihydroxybenzoate de méthyle, j") réduction du produit obtenu à l'étape i"), de préférence avec LiAlH4, pour obtenir l'alcool correspondant, k") réaction du produit obtenu à l'étape j") avec le dianhydride diéthylènetriamine pentaacétique,
1") réaction du produit obtenu à l'étape k") avec du chlorure de Gd (UI)1 de Mn (II) ou du pertechnétate.
38. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un complexe selon l'une quelconque des revendications 1 à 33, ou obtenue par le procédé selon l'une quelconque des revendications 34 à 37, dans un excipient pharmaceutiquement acceptable.
39. Utilisation de la composition pharmaceutique selon la revendication 38 pour la détection des maladies neurodégénératives telles que la maladie d'Alzheimer, la maladie de Parkinson, et la sclérose en plaque.
40. Utilisation de la composition pharmaceutique selon la revendication 38 pour le traitement ou l'amélioration d'une maladie neurodégénérative telle que la maladie d'Alzheimer, la maladie de Parkinson ou la sclérose en plaque.
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Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8227628B2 (en) 2008-07-09 2012-07-24 Northwestern University Method of synthesizing acetonide-protected catechol-containing compounds and intermediates produced therein
KR101171483B1 (ko) * 2010-02-16 2012-08-07 대림산업 주식회사 글리콜 모노-터셔리-부틸에테르 화합물의 제조 방법 및 이에 의해 제조된 글리콜 모노-터셔리-부틸에테르 화합물
FR2959227B1 (fr) * 2010-04-23 2012-06-22 Centre Nat Rech Scient Nano-objets magneto-optiques pour la detection des cancers
EP2428503B1 (fr) * 2010-09-10 2014-12-10 Justus-Liebig-Universität Gießen Synthèse de dérivés de catéchol tripodaux flexibles pour la fonctionnalisation de surfaces
US9623127B2 (en) * 2011-11-18 2017-04-18 Centre National De La Recherche Scientifique Multimodal contrast and radiopharmaceutical agent for an imaging and a targeted therapy guided by imaging
FR2995902B1 (fr) * 2012-09-26 2014-11-21 Centre Nat Rech Scient Nouveaux composes comportant des groupements dendrimeriques iodes ou fluores, leurs procedes de preparation et leurs utilisations
EP2996726A1 (fr) * 2013-05-16 2016-03-23 Université de Strasbourg Composés dendritiques comprenant un agent chélatant, fluorochrome ou agent de reconnaissance, compositions les comprenant et leurs utilisations
FR3005954A1 (fr) * 2013-05-23 2014-11-28 Univ Strasbourg Composes dendritiques comprenant un agent chelatant, fluorochrome ou agent de reconnaissance, compositions les comprenant et leurs utilisations
CA2954555A1 (fr) * 2014-07-11 2016-01-14 The University Of Akron Composition et procedes de fixation de peptides biologiquement actifs sur des surfaces d'oxydes metalliques
KR101625656B1 (ko) * 2015-10-16 2016-05-30 최경석 자기공명영상용 조영제의 제조방법
GB201613166D0 (en) * 2016-07-29 2016-09-14 Vectura Ltd Polymer
CN106883252B (zh) * 2017-03-21 2021-12-17 江汉大学 一种具有高磁熵变的环形钆配合物及其制备方法

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5527524A (en) * 1986-08-18 1996-06-18 The Dow Chemical Company Dense star polymer conjugates
US5756726A (en) * 1995-06-02 1998-05-26 Pharmacyclics, Inc. Methods of producing singlet oxygen using compounds having improved functionalization
US6982324B1 (en) * 2001-11-13 2006-01-03 University Of Utah Research Foundation Degradable macromolecular magnetic resonance imaging contrast agents and methods thereof
FR2867473B1 (fr) * 2004-03-12 2006-06-23 Guerbet Sa Compose de porphyrines et utilisation a haut champ en irm
US20060018835A1 (en) * 2004-04-02 2006-01-26 General Electric Company Nanoparticles with inorganic core and methods of using them
JP2008510829A (ja) * 2004-08-25 2008-04-10 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミシガン デンドリマーに基づく組成物およびそれらの使用法
TWI278475B (en) * 2004-12-30 2007-04-11 Ind Tech Res Inst A dendrite compound and its use
US20080112891A1 (en) * 2005-02-15 2008-05-15 Dendritic Nanotechnologies, Inc. Encapsulated (Chelate or Ligand) Dendritic Polymers
FR2883562B1 (fr) * 2005-03-24 2009-02-27 Guerbet Sa Chelates lipophiles et leur utilisation en imagerie
WO2007006700A1 (fr) * 2005-07-08 2007-01-18 Janssen Pharmaceutica N.V. Dendrimeres de poly(propylene-imine) modifies et leur utilisation en tant qu'agents de transfection de facteurs bioactifs anioniques

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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