EP1904045A1 - Utilisation de la 4-(3,4-dichloro-phenyl)-1,2,3,4-tetrahydro-naphtalen-1-ylamine pour le traitement du cancer - Google Patents

Utilisation de la 4-(3,4-dichloro-phenyl)-1,2,3,4-tetrahydro-naphtalen-1-ylamine pour le traitement du cancer

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Publication number
EP1904045A1
EP1904045A1 EP06777730A EP06777730A EP1904045A1 EP 1904045 A1 EP1904045 A1 EP 1904045A1 EP 06777730 A EP06777730 A EP 06777730A EP 06777730 A EP06777730 A EP 06777730A EP 1904045 A1 EP1904045 A1 EP 1904045A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
cancer
ylamine
tetrahydro
naphthalen
dichloro
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP06777730A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Marius Tuijnder
Fabrice Balavoine
Frédéric Revah
Robert Amson
Adam Telerman
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Anceris
Original Assignee
Anceris
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Filing date
Publication date
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Withdrawn legal-status Critical Current

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    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
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    • A61K31/137—Arylalkylamines, e.g. amphetamine, epinephrine, salbutamol, ephedrine or methadone
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    • A61K31/475—Quinolines; Isoquinolines having an indole ring, e.g. yohimbine, reserpine, strychnine, vinblastine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
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    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia

Definitions

  • the present invention relates to the use of 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine or one of its enantiomers or any combination thereof its enantiomers for the preparation of pharmaceutical compositions for the treatment of cancer, as well as the treatment and prevention of metastases.
  • the annual number of new cancer cases has increased significantly over the last twenty years.
  • the treatment of cancer is therefore a real public health problem. Whatever the type of cancer, treatment with chemotherapy is generally recommended, if only in adjuvant treatment. There is therefore a continuing need to develop new molecules for chemotherapy.
  • the inventors have studied 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine and its enantiomers or any combination of its enantiomers, and have shown that these compounds possess a antiproliferative activity on many types of tumor cells, and that they can be used in the prevention or treatment of cancers.
  • the present invention therefore relates to the use of 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine or one of its enantiomers selected from ((1S, 4S) 4- (3,4-Dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine, (1S, 4R) 4- (3,4-dichlorophenyl) -1, 2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine (1R, 4S) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine and (1R , 4R) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine) or any combination of its enantiomers for the preparation of a pharmaceutical composition for the treatment cancer and the treatment
  • the compounds according to the present invention possess a remarkable ability to destroy tumor cells.
  • the results were particularly spectacular with respect to the ability of these products to affect tumor cells from many different types of cancer.
  • said cancer or said metastases are derived from a cancer selected from the group consisting of prostate cancer, osteosarcomas, lung cancer, non-small cell lung cancer, breast cancer, endometrial cancer or colon cancer, chronic or acute leukemia, solid tumors of the child, lymphocytic lymphoma, pancreatic cancer, skin cancer, cutaneous or intraocular melanoma, cancer of the head and neck, uterine cancer, ovarian cancer, gynecological tumors, Hodgkin's disease, bone cancer, rectal cancer, cancer of the anal region, cancer of the uterus stomach, esophageal cancer, small bowel cancer, endocrine system cancer, soft tissue sarcomas, urethral cancer, penile cancer, bladder cancer, cancer of the kidney, cancer of the ureter, pediatric malignancies and of the central nervous system, particularly brain tumors.
  • said cancer or said metastases are derived from breast cancer.
  • said cancer or said metastases are derived from breast
  • Another aspect of the invention thus relates to the use of 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine or one of its enantiomers or any combination of its enantiomers and at least one alkaloid for the preparation of a pharmaceutical composition for the treatment of cancer, as well as for the treatment and prevention of metastases.
  • the alkaloid is a vinca alkaloid. More preferably, the vinca alkaloid is selected from the group consisting of: vinblastine, vincristine, vindesine, and vinorelbine, preferably vincristine and / or vinblastine.
  • alkaloid of vinca is intended to mean, according to the present invention, the alkaloids of the periwinkle, Vinca rosea, and their derivatives obtained by chemical modification. They target tubulin achromatic spindle mitosis which they inhibit the polymerization. This tubulin also constituting the nerve fibers, the alkaloids of vinca have a nerve toxicity, especially sensitive, and induce a depressive tendency.
  • Another aspect of the invention relates to products comprising
  • the alkaloid chosen is a vinca alkaloid. More preferably, the vinca alkaloid is selected from the group consisting of: vinblastine, vincristine, vindesine, and vinorelbine, preferably vincristine and / or vinblastine.
  • compositions and / or combination products according to the present invention can be administered orally, intravenously, enterally, parenterally, intramuscularly, intranasally, subcutaneously sublingually or topically.
  • oral or default injectables in particular for the treatment of tumors.
  • the inventors have demonstrated that the products of the present invention can be orally effective, unlike many anti-tumor products now available to patients (Goodman &Gilman's Pharmacological Basis of Therapeutics, Mc Graw HiIl Editor). ).
  • Daily dosages should take into account the condition of the patient but also the treated cancer, its stage and its progression.
  • Figure 1 Study of the synergistic effect of combinations of 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine cis and vincristine on inhibition of proliferation U937 leukemia-like cells
  • Figure 2 Study of the synergistic effect of combinations of 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine cis and vinblastine on inhibition of proliferation U937 leukemia-like cells
  • Figure 3 Study of the synergistic effect of combinations of 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine cis and vincristine on inhibition of proliferation breast cancer cells type MDA-MB231
  • Figure 4 Study of the synergistic effect of combinations of 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine cis and vinblastine on inhibition of proliferation breast cancer cells type MDA-MB231
  • Figure 5 Evolution during treatment of the median volume of implanted tumors in SCID mice after chronic administration of Cis 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1 -ylamine intraperitoneally
  • Figure 6 Evolution during treatment of the median volume of implanted tumors in SCID mice after chronic administration of (1S, 4S) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro 1-naphthalen-1-ylamine intraperitoneally
  • Cis 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine is meant the racemic mixture of the two enantiomers (1S, 4S) 4- (3, 4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine and (1R, 4R) 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro- naphthalen-1-ylamine.
  • Trans 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine means the racemic mixture of the two enantiomers (1S, 4R) 4- (3, 4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine and (1R, 4S) -4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro- naphthalen-1-ylamine.
  • the inventors unexpectedly demonstrate the antitumor effect of 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1. ylamine and its enantiomers or any combination of its enantiomers on tumor cell lines of various origin.
  • any combination of the enantiomers of 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine has the property of inhibiting the proliferation of U937 leukemia-like cells. and therefore an antitumor activity
  • Example 2 Determination of IC 50 on breast cancer cells MDA-MB231
  • Example 3 Determination of IC 50 of (1S, 4S) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine on 30 tumor cell lines
  • Table 3 groups the IC 50 values of (1S, 4S) -4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine on 30 different tumor lines from haematological and solid tumors varied.
  • the inventors unexpectedly demonstrate the synergistic antitumor effect of 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-1-ylamine and its enantiomers with alkaloids. of Vinca.
  • Example 4 Study of the synergistic effect of combinations of 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine cis and vincristine on inhibition of proliferation U937 leukemia-like cells
  • the final 6 concentrations selected for testing cis 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine were 25, 13, 6.3, 3.1 and 1.6 micromolar ( ⁇ M).
  • the final 6 concentrations chosen for testing vincristine were 4000, 1000, 250, 63, and 16 picomolar (pM).
  • the antiproliferative activity (percent inhibition of proliferation of 73%) of a combination of vincristine (250 ⁇ M) and cis 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro naphthalen-1-ylamine (3.1 ⁇ M) is clearly superior to the effect of the only active agent (21% inhibition for vincristine at 250 ⁇ M).
  • the antiproliferative effect observed with this combination is not a simple additivity of the separate effects of the two products given the positive value (+49) calculated for the excess over the additivity "Bliss".
  • Example 5 Study of the synergistic effect of combinations of 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine cis and vinblastine on inhibition of proliferation U937 leukemia-like cells
  • the final 6 concentrations selected for testing cis 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine were 25, 13, 6.3, 3.1 and 1.6 micromolar ( ⁇ M).
  • the final 6 concentrations chosen to test vinblastine were 4000, 1000, 250, 63, and 16 picomolar (pM).
  • Antiproliferative activity (percent inhibition of proliferation 54%) of a combination of vinblastine (250 ⁇ M) and cis 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro naphthalen-1-ylamine (3.1 ⁇ M) is clearly superior to the effect of the only active agent (19% inhibition for vinblastine at 250 ⁇ M). Moreover, the antiproliferative effect observed with this combination is not a mere additivity of the separate effects of the two products given the positive value (+31) calculated for the excess over the additivity "Bliss".
  • Example 7 Study of the synergistic effect of combinations of (1S, 4S) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine and vinblastine on the inhibition of U937 leukemia cell proliferation
  • Example 8 Study of the synergistic effect of combinations of 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine cis and vincristine on inhibition of proliferation breast cancer cells type MDA-MB231
  • the final 6 concentrations selected for testing cis 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine were 25, 13, 6.3, 3.1 and 1.6 micromolar ( ⁇ M).
  • the final 6 concentrations chosen for testing vincristine were 4000, 1000, 250, 63, and 16 picomolar (pM).
  • Incubation of MDA-MB231 cells with different combinations of concentrations of 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine cis and vincristine reveals the existence of a synergy between the antiproliferative effects of two compounds.
  • Example 9 Study of the synergistic effect of combinations of 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine cis and vinblastine on inhibition of proliferation
  • the method described below for evaluating a synergistic effect of combinations of two products on the inhibition of the proliferation of leukemic U937-type cells has been applied with the following compounds:
  • Vinblastine The final 6 concentrations chosen to test cis 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine were 25, 13, 6.3, 3, 1 and 1.6 micromolar ( ⁇ M). The final 6 concentrations chosen to test vinblastine were 4000, 1000, 250, 63, and 16 picomolar (pM).
  • the inventors unexpectedly demonstrate the antitumor effect of 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine and its enantiomers administered in the animal carrying a tumor.
  • Example 10 Study of the antitumor effect in the mice of 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine after chronic administration by intrapertemal route
  • the inventors tested the antitumor effect in mice of Cis 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine, by applying the method described below.
  • the inventors administered Cis 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-1-ylamine to mice which had previously been grafted with tumor cells. . They compared tumor growth in animals treated with Cis 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine with that of tumors in non-controlled animals.
  • Cis 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine significantly slows tumor growth in the mice thus treated.
  • the inventors analyzed the average tumor size in subcutaneous tumor-bearing mice treated with Cis 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine and compared it to that of the "control" mice bearing these tumors and treated with the vehicle of the test substance only.
  • Figure 5 represents the average volume of subcutaneous tumors carried by mice (in mm3) treated with Cis 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine as a function of time elapsed (in days) since the first day of treatment (50 mg / kg intraperitoneally), compared to the average volume of tumors carried by vehicle-treated mice.
  • the tumor volume of the mice treated with the compound of the invention is much lower than that of the untreated mice, which reveals a clear anti-tumor effect of Cis 4- (3,4-dichlorophenyl) -1, 2,3,4-Tetrahydronaphthalen-1-ylamine.
  • Example 11 Study of the anti-tumor effect in mice of (1S, 4S) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine after chronic administration intraperitoneally
  • the inventors tested the anti-tumor effect in mice of (1S, 4S) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalene-1 ylamine, using the method described below.
  • the inventors administered (1S, 4S) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine to mice which had previously been grafted tumor cells.
  • the inventors analyzed the average tumor size in subcutaneous tumor-bearing mice and treated with (1S, 4S) 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalene. l-ylamine and compared it to that of "control" mice bearing these tumors and treated with the vehicle of the test substance only.
  • Figure 6 shows the average volume of subcutaneous tumors carried by mice (in mm3) treated with (1S, 4S) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalene.
  • -l-ylamine as a function of the time elapsed (in days) since the first day of treatment (15 mg / kg twice daily intraperitoneally), compared to the average volume of tumors carried by vehicle-treated mice.
  • Example 12 Study of pharmacokinetic parameters (half-life, bioavailability) of (1S, 4S) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-1-ylamine in mice Pharmacokinetic studies were performed with (1S, 4S) -4-
  • Pathway Rate Tl / 2 Cl AUCAU AUC (mg / kg) (min) (inL / inin / kg) (min * ng / mL) (min * ng / mL)
  • the inventors tested the anti-tumor effect in mice of (1S, 4S) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine. By applying the method described below. In order to test this effect, the inventors administered (1S, 4S) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine to mice which had previously been grafted tumor cells.
  • Table 5 reports the median volumes (in mm 3 ) of subcutaneous tumors carried by SCID mice treated with (1S-4S) -4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4- tetrahydro-naphthalen-1-ylamine as a function of elapsed time (in days) since the first day of treatment (80 mg / kg daily and oral) and median volumes of tumors carried by vehicle-treated mice on the same days. Days 5 and 18 correspond respectively to day after the first day of treatment.
  • Table 5 shows the median volumes of tumors implanted in SCID mice after chronic administration of (1S, 4S) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro- naphthalen-l-ylamine orally Table 5
  • the median volume of tumors carried by the mice treated with the compound of the invention is significantly less (by almost half) the median volume of tumors carried by the vehicle-treated mice.
  • (1S, 4S) -4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-1-ylamine administered orally has an anti-tumor effect in animal.
  • Example 14 Study of the cerebral penetration of (1S, 4S) 4- (3,4-dichlorophenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine in mice
  • 1,2,3,4-Tetrahydro-naphthalen-1-ylamine is active in vitro on tumor lines derived from glioblastomas.
  • the experiments reported below demonstrate that (1S, 4S) -4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine possesses the ability to cross the blood-brain barrier significantly, which is a major advantage of this compound for the treatment of brain tumors.
  • (1S, 4S) -4- (3,4-Dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine was injected intravenously into a group of CD1 mice, at a rate of 1 mg / kg.
  • mice (1S, 4S) 4- (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine brain penetration are reported in the literature. Table 6 below.
  • (3,4-dichloro-phenyl) -1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-1-ylamine in the brain are more important than in plasma and the ratio of concentration of this compound between brain and blood increases with time (over the interval analyzed) thus showing the brain's capacity for accumulation.
  • test compound is dissolved in DMSO (100%) at a concentration of 1.10 -2 M (stock solution) and then 8 samples of 8 different concentrations are prepared by successive dilution with the complete cell culture medium (RPMI 1640 Cambrex + 10% FBS + 1% L-Glutamine + 40 ⁇ g / ml Gentamycin) For each sample, the dilution volume is adjusted to obtain an equal concentration at twice the final selected concentration C x.
  • complete cell culture medium RPMI 1640 Cambrex + 10% FBS + 1% L-Glutamine + 40 ⁇ g / ml Gentamycin
  • a 96-well white non-transparent plate (fluoronunc 96F Nunclon Delta)
  • 100 ⁇ l of a suspension of U937 cells at a concentration of 2.5 ⁇ 10 4 cells / ml in RPMI1640 Cambrex medium + 10% FBS + 1% L-Glutamine + 40 ⁇ g / ml of Gentamycin are deposited in each well, ie 2500 cells per well.
  • 100 ⁇ L of a 2 x C x sample are added (one sample per well) and the medium is homogenized.
  • the quantification of the viability of the cells in culture is carried out by measuring the levels of ATP using the test.
  • Control C x average luminescence measurements of three wells of the corresponding control sample • Lum.
  • (white) average luminescence measurements of eight wells comprising only 200 ⁇ l of cell culture medium (RPMI 1640 Cambrex + 10% FBS + 1% L-Glutamine + 40 ⁇ g / ml Gentamycin)
  • IC 50 is the concentration of the compound required to achieve 50% inhibition of cell proliferation; these values are calculated with XLfit 3 software (ID Business Solutions Ltd., UK) from semi-logarithmic curves.
  • test compound is dissolved in DMSO (100%) at a concentration of 1.10 -2 M (stock solution) and then 8 samples of 8 different concentrations are prepared by successive dilution with the complete cell culture medium (E-MEM Cambrex + 10% FBS, + 1% non-essential amino acids + 1% Napyruvate + 1% L-Glutamine + 40 ⁇ g / ml Gentamycin)
  • the dilution volume is adjusted to obtain a concentration equal to twice the final concentration C x chosen, for example 1.1 O ⁇ M, 5.10 " 5M, 2.5.10 ⁇ 5M, 1.3.10 " 5M, 6.3.10 " 6M, 3.1.10 " 6M, 1, 6.10 ⁇ 6M and 7.8.10 ⁇ 7M is a standard range of 8 final concentrations.
  • control samples are prepared by diluting a solution of DMSO (100%) with even the cell culture medium (E-MEM Cambrex + 10% FBS, + 1% non-essential amino acids + 1% Napyruvate + 1% L-Glutamine + 40 ⁇ g / ml Gentamycin), the dilution volumes chosen being strictly identical to those used for the preparation of the samples of the test compound.
  • E-MEM Cambrex + 10% FBS, + 1% non-essential amino acids + 1% Napyruvate + 1% L-Glutamine + 40 ⁇ g / ml Gentamycin the dilution volumes chosen being strictly identical to those used for the preparation of the samples of the test compound.
  • a 96-well white non-transparent plate (fluoronunc 96F Nunclon Delta)
  • 100 ⁇ l of a suspension of MDA-MB231 cells at a concentration of 1.25 ⁇ 10 4 cells / ml in an E-MEM Cambrex medium + 10% FBS, + 1% of non-essential amino acids + 1% Napyruvate + 1% L-Glutamine + 40 ⁇ g / ml of Gentamycin are deposited in each well, ie 2500 cells per well.
  • 100 ⁇ L of a 2 x C x sample are added (one sample per well) and the medium is homogenized. After 144h of incubation at 37 ° C.
  • the quantification of the viability of the cells in culture is carried out by measuring the levels of ATP using the test.
  • CellTiter-Glo TM Luminescent Assay System supplied by Promega Corporation according to the supplier's instructions. The luminescence in each well is measured using a counter, VICTOR 2 1420 (Wallac, PerkinElmer, Courtaboeuf, France).
  • Lum. (white) average luminescence measurements of eight wells comprising only 200 ⁇ L of cell culture medium (E-MEM Cambrex + 10% FBS, + 1% non-essential amino acids + 1%
  • IC 50 is the concentration of the compound required to achieve 50% inhibition of cell proliferation; these values are calculated with XLfit 3 software (ID Business Solutions Ltd., UK) from semi-logarithmic curves.
  • each product is dissolved in DMSO (100%) at a concentration of 1.10 -2 M (stock solution) then, for each product, 6 samples of 6 different concentrations are prepared by successive dilution with the complete cell culture medium (RPMI 1640 Cambrex + 10% FBS + 1% L-Glutamine + 40 ⁇ g / ml Gentamycin) For each sample, the dilution volume is adjusted to obtain a concentration equal to four times the final concentration chosen.
  • the complete cell culture medium RPMI 1640 Cambrex + 10% FBS + 1% L-Glutamine + 40 ⁇ g / ml Gentamycin
  • a cell suspension at 2.5 ⁇ 10 4 cells / ml is prepared in complete medium, and 36 ⁇ 100 ⁇ l of this solution (ie 2500 cells / well) are distributed in 36 wells of a 96-well plate, white and non-transparent (fluoronunc 96F Nunclon). Delta).
  • 36 ⁇ 100 ⁇ l of this solution ie 2500 cells / well
  • 50 ⁇ l of a sample of product A concentrated four times and 50 ⁇ l of a sample of product B concentrated four times to obtain a final volume of 200 ⁇ l.
  • Each sample of product A (6 concentrations Al, A2, A3, A4, A5, A6) is combined with each sample of product B (6 concentrations B1, B2, B3, B4, B5, B6).
  • Concentrations A6 and B6 correspond to a zero concentration of product A and product B respectively.
  • the A6 / B6 combination therefore corresponds to a drug-free well and DMSO, which serves as a cell growth reference.
  • the quantification of the viability of the cells in culture is carried out by measuring the levels of ATP using the test.
  • CellTiter-Glo TM Luminescent Assay System supplied by Promega Corporation according to the supplier's instructions. The luminescence in each well is measured using a counter, VICTOR 2 1420 (Wallac, PerkinElmer, Courtaboeuf, France).
  • Lum. (white) average of 6-well luminescence measurements comprising only 200 ⁇ l of cell culture medium (RPMI 1640 Cambrex + 10% FBS + 1% L-Glutamine + 40 ⁇ g / ml of
  • the method used for MDA-MB231 breast cancer cells is similar to that used for U937 leukemia-type cells with the exception of the concentration of the cell suspension (1.25 ⁇ 10 4 cells / ml for MDA-MB231 instead 2.5 ⁇ 10 4 cells / ml for U937).
  • the composition of the complete medium is also modified: E-MEM Cambrex + 10% FBS, + 1% non-essential amino acids + 1% Napyruvate + 1% L-Glutamine + 40 ⁇ g / ml Gentamycin.
  • the cells were incubated in a final volume of 200 ⁇ l of a culture medium supplemented with 10% fetal bovine serum containing the test compound at 37 ° C. under an atmosphere containing 5% CO 2 .
  • Tumor cells were incubated for 96 hours with final concentrations of the test compound (range of 1 x 10-4 to 4 x 10- 10 M). Each final concentration was assayed in quadriplicate.
  • the vehicle of the tested compound At the end of the treatment period, the antiproliferative activity was evaluated by a colorimetric test using the tetrazolium salt MTS (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -5- (3-carboxymethoxy phenyl) -2- (4-sulfophenyl) -2H-tetrazolium, Baltrop JA et al., Bioorg Med Chem, Lett, 1991, 1: 611-614).
  • IC 50 is the concentration of the compound required to achieve 50% inhibition of cell proliferation; these values are calculated with XLfit 3 software (ID Business Solutions Ltd., UK) from semi-logarithmic curves.
  • U937 viable cells in a volume of 200 .mu.l of RPMI culture medium are injected subcutaneously into the right flank of a SCID mouse.
  • the injection of the cells is carried out 24 hours after the complete irradiation of the body with a ⁇ source (1.8 Gy, Co 60 , INRA BRETENIERE, Dijon,
  • Treatment plan Treatment is initiated when the tumors have reached an average volume of about 50 mm 3 .
  • the mice are randomly assigned to groups of 10 mice so that the mean tumor volume of each group is not statistically different from the other groups (variance analysis).
  • Tween-20 (Ref P7949, Sigma). The suspensions are then diluted in water to achieve the desired concentration of the test compound and a final Tween-20 concentration of 1% (v / v).
  • IP intraperitoneal
  • the mice received repeated intraperitoneal (IP) injections of the vehicle (Tween-1% (v / v) or the test compound at the dose and according to the chosen treatment plan (once daily or twice daily for 30 minutes).
  • IP intraperitoneal
  • the products and the vehicle are administered by gavage.
  • tumor volume (width 2 x length) / 2.

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Abstract

Utilisation de la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-1-ylamine ou de toute combinaison de ses énantiomères ou d'un de ses énantiomères pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée au traitement du cancer, ainsi qu'au traitement et à la prévention des métastases.

Description

UTILISATIONDE LA 4-(3,4-DICHLORO-PHENYL)-l,2,3,4-TETRAHYDRO- NAPHTALEN-1-YLAMINE POUR LE TRAITEMENT DU CANCER
La présente invention est relative à l'utilisation de la 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine ou de l'un de ses énantiomères ou de toute combinaison de ses énantiomères pour la préparation de compositions pharmaceutiques destinées au traitement du cancer, ainsi qu'au traitement et à la prévention des métastases. Le nombre annuel de nouveaux cas de cancers a considérablement augmenté au cours des vingt dernières années. Le traitement des cancers est donc de fait un véritable problème de santé publique. Quel que soit le type de cancer, un traitement par chimiothérapie est généralement préconisé, ne serait-ce qu'en traitement adjuvant. Il existe donc un besoin permanent de développer de nouvelles molécules pour la chimiothérapie.
Les inventeurs ont étudié la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4- tétrahydro-naphtalèn-1-ylamine et ses énantiomères ou toute combinaison de ses énantiomères, et ont montré que ces composés possèdent une activité antiproliférative sur de nombreux types de cellules tumorales, et qu'ils peuvent être utilisés dans la prévention ou le traitement des cancers.
La présente invention concerne donc l'utilisation de la 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine ou d'un de ses énantiomères choisi parmi ((1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine, ( 1 S,4R) 4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine, (1R,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine, et (1R,4R) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine) ou de toute combinaison de ses énantiomères, pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée au traitement du cancer, ainsi qu'au traitement et à la prévention des métastases Par traitement du cancer ou des métastases, on entend selon la présente invention essentiellement la capacité pour un composé de détruire sélectivement les cellules tumorales sans atteindre sensiblement les cellules saines, étant entendu que cette sélectivité peut être variable en fonction de la condition du patient et du type de cancer traité.
Comme on le constatera dans les exemples ci-après, les composés selon la présente invention possèdent une remarquable capacité de destruction des cellules tumorales. Les résultats se sont révélés particulièrement impressionnants quant à la capacité de ces produits à affecter des cellules tumorales issues d'un grand nombre de type de cancers différents..
Selon la présente invention, ledit cancer ou lesdites métastases sont issues d'un cancer choisi dans le groupe constitué par le cancer de la prostate, les ostéosarcomes, le cancer du poumon, le cancer du poumon non à petites cellules, le cancer du sein, le cancer de l'endomètre ou le cancer du côlon, la leucémie chronique ou aiguë, les tumeurs solides de l'enfant, les lymphomes lymphocitaires, le cancer du pancréas, le cancer de la peau, le mélanome cutané ou intraoculaire, le cancer de la tête et du cou, le cancer de l'utérus, le cancer de l'ovaire, les tumeurs gynécologiques, la maladie de Hodgkin, le cancer des os, le cancer du rectum, le cancer de la région anale, le cancer de l'estomac, le cancer de l'œsophage, le cancer de l'intestin grêle, le cancer du système endocrinien, les sarcomes des parties molles, le cancer de l'urètre, le cancer du pénis, le cancer de la vessie, le cancer du rein, le cancer de l'uretère, les tumeurs malignes pédiatriques et les tumeurs du système nerveux central, en particulier les tumeurs cérébrales. De manière préférée, ledit cancer ou lesdites métastases sont issues d'un cancer du sein. D'une autre manière préférée, ledit cancer est une leucémie.
En outre, les inventeurs ont montré que la 4-(3,4-dichloro-phényl)- 1,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine ou l'un de ses énantiomères ou de toute combinaison de ses énantiomères, administré(e) en combinaison avec au moins un alcaloïde, préférentiellement un alcaloïde de vinca, par exemple la vincristine ou la vinblastine, présente une synergie de l'activité cytotoxique spécifique à rencontre des cellules tumorales.
Un autre aspect de l'invention concerne donc l'utilisation de la 4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine ou de l'un de ses énantiomères ou de toute combinaison de ses énantiomères et d'au moins un alcaloïde pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée au traitement du cancer, ainsi qu'au traitement et à la prévention des métastases. De manière préférée, l'alcaloïde est un alcaloïde de vinca. De manière plus préférée, l'alcaloïde de vinca est choisi dans le groupe constitué par : la vinblastine, la vincristine, la vindésine, et la vinorelbine, de préférence la vincristine et/ou la vinblastine.
Par alcaloïde de vinca on entend désigner selon la présente invention les alcaloïdes de la pervenche, Vinca rosea, et leurs dérivés obtenus par modification chimique. Ils ont pour cible la tubuline du fuseau achromatique de la mitose dont ils inhibent la polymérisation. Cette tubuline constituant aussi les fibres nerveuses, les alcaloïdes de vinca ont une toxicité nerveuse, surtout sensitive, et induisent une tendance dépressive.
Un autre aspect de l'invention concerne des produits comprenant de la
4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine ou l'un de ses énantiomères ou toute combinaison de ses énantiomères et au moins un alcaloïde, en tant que produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie anti-cancéreuse.
De manière préférée, l'alcaloïde choisi est un alcaloïde de vinca. De manière plus préférée, l'alcaloïde de vinca est choisi dans le groupe constitué par : la vinblastine, la vincristine, la vindésine, et la vinorelbine, de préférence la vincristine et/ou la vinblastine.
Les compositions pharmaceutiques et/ou les produits de combinaison selon la présente invention peuvent être administrés par voie orale, intraveineuse, entérale, parentérale, intramusculaire, intranasale, sous-cutanée sublinguale ou topique. De façon générale, on préférera utiliser les voies orales ou par défaut injectables, notamment pour le traitement des tumeurs. De manière remarquable les inventeurs ont démontré que les produits de la présente invention peuvent être efficaces par voie orale, à la différence de nombreux produits anti-tumoraux aujourd'hui disponibles pour les patients (Goodman & Gilman's Pharmacological Basis of Therapeutics, Mc Graw HiIl Editor).
Les dosages journaliers devront tenir compte de l'état du malade mais également du cancer traité, de son stade et de sa progression.
Les exemples ci-dessous ne sont mentionnés qu'à titre illustratif et ne peuvent pas être considérés comme limitant l'enseignement de la présente description.
LEGENDE DES FIGURES
Figure 1 : Etude de l'effet synergique de combinaisons de cis 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vincristine sur l'inhibition de la prolifération de cellules de type leucémiques U937
Figure 2 : Etude de l'effet synergique de combinaisons de cis 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vinblastine sur l'inhibition de la prolifération de cellules de type leucémiques U937
Figure 3 : Etude de l'effet synergique de combinaisons de cis 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vincristine sur l'inhibition de la prolifération de cellules de cancer du sein de type MDA-MB231
Figure 4 : Etude de l'effet synergique de combinaisons de cis 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vinblastine sur l'inhibition de la prolifération de cellules de cancer du sein de type MDA-MB231 Figure 5 : Evolution au cours du traitement du volume médian des tumeurs implantées chez des souris SCID après une administration chronique de la Cis 4- (3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine par voie intrapéritonéale
Figure 6 : Evolution au cours du traitement du volume médian des tumeurs implantées chez des souris SCID après une administration chronique de la (1S,4S) 4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine par voie intrapéritonéale
EXEMPLES :
Par « Cis 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine », on entend le mélange racémique des deux énantiomères (1S,4S) 4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et (1R,4R) 4-(3,4- dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine.
Par «Trans 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine », on entend le mélange racémique des deux énantiomères (1S,4R) 4- (3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et (1R,4S) 4-(3,4- dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine.
Par « Cis/Trans 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine », on entend le mélange racémique des quatre susdits énantiomères.
EXEMPLES 1 à 3 :
Dans ces exemples les inventeurs démontrent de manière inattendue l'effet antitumoral de la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine et de ses énantiomères ou de toute combinaison de ses énantiomères sur des lignées cellulaires tumorales d'origine diverses.
Exemple 1 : Détermination des CI50 sur des cellules de type leucémiques U937
La méthode décrite ci-après a été appliquée pour déterminer les valeurs de CI50 des composés suivants sur les cellules U937:
• Cis/Trans 4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine
• Cis 4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine • Trans 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine
• (IS, 4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine
• (IS, 4R) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine
• (IR, 4R) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine
• (IR, 4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine
Les valeurs des CI50 sont résumées dans le tableau ci-dessous (Tableau 1)
Tableau 1
Ces résultats montrent que la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4- tétrahydro-naphtalèn-1-ylamine, des combinaisons de ses énantiomères et tous ses énantiomères possèdent la propriété d'inhiber la prolifération des cellules de type leucémiques U937 et par conséquent une activité antitumorale. Les activités antitumorales de la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine, des combinaisons de ses énantiomères et tous ses énantiomères sont équivalentes dans la mesure où les valeurs des CI50 obtenues sont toutes comprises entre 3 μM et 12 μM. En conséquence, toute combinaison des énantiomères de la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine possède la propriété d'inhiber la prolifération des cellules de type leucémiques U937 et donc une activité antitumorale Exemple 2 : Détermination des CI50 sur des cellules du cancer du sein MDA- MB231
La méthode décrite ci-après a été appliquée pour déterminer les valeurs de CI50 des composés suivants sur les cellules MDA-MB231 :
• Cis/Trans 4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine
• Cis 4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine
• Trans 4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine
Les valeurs des CI50 sont résumées dans le tableau ci-dessous (Tableau 2)
Tableau 2
Ces résultats montrent que la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4- tétrahydro-naphtalèn-1 -ylamine et des combinaisons de ses énantiomères possèdent la propriété d'inhiber la prolifération des cellules du cancer du sein de type MDA-MB231 et par conséquent une activité antitumorale. Les activités antitumorales de la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine et des combinaisons de ses énantiomères sont équivalents dans la mesure où les valeurs des CI50 obtenues sont toutes comprises entre 4 μM et 7 μM. En conséquence, tous les énantiomères de la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4- tétrahydro-naphtalèn-1-ylamine et même toute combinaison de ces énantiomères possèdent la propriété d'inhiber la prolifération des cellules du cancer du sein de type MDA-MB231 et donc une activité antitumorale
Exemple 3 : Détermination des CI50 de la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)- 1,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine sur 30 lignées cellulaires tumorales
La méthode décrite ci-après a été appliquée pour déterminer les valeurs de CI50 de la (lS,4S)-4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamin sur 30 lignées cellulaires dérivées de cancer du sein, du colon, du poumon, de l'ovaire, de la prostate, du pancréas, de la peau, du cerveau et du sang.
Le tableau 3 regroupe les valeurs de CI50 de la (lS,4S)-4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine sur 30 lignées tumorales différentes issues de tumeurs hématologiques et solides très variées.
Dans cet exemple les inventeurs démontrent de manière inattendue que la (1 S-4S)-4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine possède un large spectre d'action anti-tumorale et est capable d'inhiber la prolifération de cellules tumorales issues de l'ensemble des cancers testés
Tableau 3
EXEMPLES 4 à 9 :
Dans ces exemples les inventeurs démontrent de manière inattendue l'effet antitumoral synergique de la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro- naphtalèn-1-ylamine et de ses énantiomères avec des alcaloides de Vinca.
Exemple 4 : Etude de l'effet synergique de combinaisons de cis 4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vincristine sur l'inhibition de la prolifération de cellules de type leucémiques U937
La méthode décrite ci-après pour évaluer un effet synergique de combinaisons de deux produits sur l'inhibition de la prolifération de cellules de type leucémiques U937 a été appliquée avec les composés suivants:
• Cis 4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine
• Vincristine
Les 6 concentrations finales choisies pour tester la cis 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine ont été 25, 13, 6,3, 3,1 et 1,6 micromolaire (μM). Les 6 concentrations finales choisies pour tester la vincristine ont été 4000, 1000, 250, 63, et 16 picomolaire (pM).
L'incubation des cellules U937 avec différentes combinaisons de concentrations de cis 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine et de vincristine révèle l'existence d'une synergie entre les effets antiprolifératifs de deux composés.
Les résultats sont présentés dans la figure 1.
L'activité antiproliférative (pourcentage d'inhibition de la prolifération de 73%) d'une combinaison de vincristine (250 pM) et de cis 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine (3.1 μM) est nettement supérieure à l'effet de l'agent seul le plus actif (21% d'inhibition pour la vincristine à 250 pM). De plus, l'effet antiprolifératif observé avec cette combinaison ne relève pas d'une simple additivité des effets séparés des deux produits compte tenu de la valeur positive (+49) calculée pour l'excédent par rapport à l'additivité « Bliss ». En conclusion il existe un effet synergique de cette combinaison de cis 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vincristine.
Exemple 5 : Etude de l'effet synergique de combinaisons de cis 4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vinblastine sur l'inhibition de la prolifération de cellules de type leucémiques U937
La méthode décrite ci-après pour évaluer un effet synergique de combinaisons de deux produits sur l'inhibition de la prolifération de cellules de type leucémiques U937 a été appliquée avec les composés suivants: • Cis 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine • Vinblastine
Les 6 concentrations finales choisies pour tester la cis 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine ont été 25, 13, 6,3, 3,1 et 1,6 micromolaire (μM). Les 6 concentrations finales choisies pour tester la vinblastine ont été 4000, 1000, 250, 63, et 16 picomolaire (pM).
L'incubation des cellules U937 avec différentes combinaisons de concentrations de cis 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine et de vinblastine révèle l'existence d'une synergie entre les effets antiprolifératifs de deux composés. Les résultats sont présentés dans la figure 2.
L'activité antiproliférative (pourcentage d'inhibition de la prolifération de 54%) d'une combinaison de vinblastine (250 pM) et de cis 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine (3.1 μM) est nettement supérieure à l'effet de l'agent seul le plus actif (19% d'inhibition pour la vinblastine à 250 pM). De plus, l'effet antiprolifératif observé avec cette combinaison ne relève pas d'une simple additivité des effets séparés des deux produits compte tenu de la valeur positive (+31) calculée pour l'excédent par rapport à l'additivité « Bliss ». En conclusion il existe un effet synergique de cette combinaison de cis 4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vinblastine. Exemple 6 : Etude de l'effet synergique de combinaisons de (1S,4S) 4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vincristine sur l'inhibition de la prolifération de cellules de type leucémiques U937 La méthode décrite ci-après pour évaluer un effet synergique de combinaisons de deux produits sur l'inhibition de la prolifération de cellules de type leucémiques U937 a été appliquée avec les composés suivants:
• ( 1 S,4S) 4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine
• Vincristine L'incubation des cellules U937 avec différentes combinaisons de concentrations de (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine et de vincristine révèle l'existence d'une synergie entre les effets antiprolifératifs de deux composés. L'effet antiprolifératif observé d'une combinaison de (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine (3.1 μM) et de vincristine ne relève pas d'une simple additivité des effets séparés des deux produits compte tenu de la valeur positive (+8) calculée pour l'excédent par rapport à l'additivité « Bliss ». En conclusion il existe un effet synergique de cette combinaison de (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4- tétrahydro-naphtalèn-1 -ylamine et de vincristine.
Exemple 7 : Etude de l'effet synergique de combinaisons de (1S,4S) 4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vinblastine sur l'inhibition de la prolifération de cellules de type leucémiques U937
La méthode décrite ci-après pour évaluer un effet synergique de combinaisons de deux produits sur l'inhibition de la prolifération de cellules de type leucémiques U937 a été appliquée avec les composés suivants:
• ( 1 S,4S) 4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine
• Vinblastine L'incubation des cellules U937 avec différentes combinaisons de concentrations de (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine et de vinblastine révèle l'existence d'une synergie entre les effets antiprolifératifs de deux composés. L'effet antiprolifératif observé d'une combinaison de (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine (3.1 μM) et de vinblastine ne relève pas d'une simple additivité des effets séparés des deux produits compte tenu de la valeur positive (+5) calculée pour l'excédent par rapport à l'additivité « Bliss ». En conclusion il existe un effet synergique de cette combinaison de (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4- tétrahydro-naphtalèn-1-ylamine et de vinblastine.
Exemple 8 : Etude de l'effet synergique de combinaisons de cis 4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vincristine sur l'inhibition de la prolifération de cellules du cancer du sein de type MDA- MB231
La méthode décrite ci-après pour évaluer un effet synergique de combinaisons de deux produits sur l'inhibition de la prolifération de cellules du cancer du sein de type MDA-MB231 a été appliquée avec les composés suivants: • Cis 4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine • Vincristine
Les 6 concentrations finales choisies pour tester la cis 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine ont été 25, 13, 6,3, 3,1 et 1,6 micromolaire (μM). Les 6 concentrations finales choisies pour tester la vincristine ont été 4000, 1000, 250, 63, et 16 picomolaire (pM). L'incubation des cellules MDA-MB231 avec différentes combinaisons de concentrations de cis 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine et de vincristine révèle l'existence d'une synergie entre les effets antiprolifératifs de deux composés.
Les résultats sont présentés dans la figure 3. L'activité antiproliférative (pourcentage d'inhibition de la prolifération de 59%) d'une combinaison de vincristine (1000 pM) et de cis 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine (3.1 μM) est nettement supérieure à l'effet de l'agent seul le plus actif (25% d'inhibition pour la vincristine à 1000 pM). De plus, l'effet antiprolifératif observé avec cette combinaison ne relève pas d'une simple additivité des effets séparés des deux produits compte tenu de la valeur positive (+28) calculée pour l'excédent par rapport à l'additivité « Bliss ». En conclusion il existe un effet synergique de cette combinaison de cis 4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vincristine.
Exemple 9 : Etude de l'effet synergique de combinaisons de cis 4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vinblastine sur l'inhibition de la prolifération de cellules du cancer du sein de type MDA- MB231 La méthode décrite ci-après pour évaluer un effet synergique de combinaisons de deux produits sur l'inhibition de la prolifération de cellules de type leucémiques U937 a été appliquée avec les composés suivants:
• Cis 4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine
• Vinblastine Les 6 concentrations finales choisies pour tester la cis 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine ont été 25, 13, 6,3, 3,1 et 1,6 micromolaire (μM). Les 6 concentrations finales choisies pour tester la vinblastine ont été 4000, 1000, 250, 63, et 16 picomolaire (pM).
L'incubation des cellules MDA-MB231 avec différentes combinaisons de concentrations de cis 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine et de vinblastine révèle l'existence d'une synergie entre les effets antiprolifératifs de deux composés.
Les résultats sont présentés dans la figure 4. L'activité antiproliférative (pourcentage d'inhibition de la prolifération de 61%) d'une combinaison de vinblastine (1000 pM) et de cis 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine (1,6 μM) est nettement supérieure à l'effet de l'agent seul le plus actif (33% d'inhibition pour la vinblastine à 1000 pM). De plus, l'effet antiprolifératif observé avec cette combinaison ne relève pas d'une simple additivité des effets séparés des deux produits compte tenu de la valeur positive (+27) calculée pour l'excédent par rapport à l'additivité « Bliss ». En conclusion il existe un effet synergique de cette combinaison de cis 4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et de vinblastine. De même, l'activité antiproliférative (pourcentage d'inhibition de la prolifération de 87%) d'une combinaison de vinblastine (1000 pM) et de cis 4- (3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine (3.1 μM) est nettement supérieure à l'effet de l'agent seul le plus actif (33% d'inhibition pour la vinblastine à 1000 pM). De plus, l'effet antiprolifératif observé avec cette combinaison ne relève pas d'une simple additivité des effets séparés des deux produits compte tenu de la valeur positive (+47) calculée pour l'excédent par rapport à l'additivité « Bliss ». En conclusion il existe un effet synergique de cette combinaison de cis 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine et de vinblastine.
EXEMPLES 10 et 11:
Dans ces exemples les inventeurs démontrent de manière inattendue l'effet antitumoral de la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine et de ses énantiomères administré chez l'animal portant une tumeur.
Exemple 10 : Etude de l'effet antitumoral chez la souris de la cis 4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine après une administration chronique par voie intrapέritonέale
Dans cet exemple les inventeurs ont testé l'effet antitumoral chez la souris de la Cis 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine, en appliquant la méthode décrite ci-après. De manière à tester cet effet les inventeurs ont administré la Cis 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro- naphtalèn-1-ylamine à des souris auxquelles avaient été préalablement greffées des cellules tumorales. Ils ont comparé la croissance des tumeurs chez des animaux traités avec la Cis 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn- 1-ylamine avec celle de tumeurs chez des animaux contrôles non traités ou traités uniquement avec le véhicule de la substance test. De manière remarquable les inventeurs ont pu montrer que l'administration par voie intrapéritonéale de Cis 4- (3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine ralentissait significativement la croissance tumorale chez les souris ainsi traitées.
Les inventeurs ont analysé la taille moyenne des tumeurs dans des souris portant une tumeur sous cutanée et traitées avec la Cis 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et l'ont comparée à celle des souris « contrôle » portant ces tumeurs et traitées avec le véhicule de la substance test uniquement.
La figure 5 représente le volume moyen des tumeurs sous cutanées portées par des souris (en mm3) traitées par la Cis 4-(3,4-dichloro-phényl)- 1, 2,3, 4-tétrahydro-naphtalèn-l -ylamine en fonction du temps écoulé (en jours) depuis le premier jour de traitement (50 mg/kg par voie intrapéritonéale), comparé au volume moyen des tumeurs portées par des souris traitées par du véhicule.
Le volume des tumeurs des souris traitées avec le composé de l'invention est nettement inférieur à celui des souris non traitées, ce qui révèle un effet anti-tumoral manifeste de la Cis 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro- naphtalèn- 1 -ylamine.
Exemple 11 : Etude de l'effet antitumoral chez la souris de la (1S,4S) 4-(3,4- dichloro-phcnyl)-l,2,3,4-tctrahydro-naphtalcn-l -ylamine après une administration chronique par voie intrapéritonéale
Dans cet exemple les inventeurs ont testé l'effet antitumoral chez la souris de la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine, en appliquant la méthode décrite ci-après. De manière à tester cet effet les inventeurs ont administré la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4- tétrahydro-naphtalèn-1 -ylamine à des souris auxquelles avaient été préalablement greffées des cellules tumorales. Ils ont comparé la croissance des tumeurs chez des animaux traités avec la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro- naphtalèn-1 -ylamine avec celle de tumeurs chez des animaux contrôles non traités ou traités uniquement avec le véhicule de la substance test. De manière remarquable les inventeurs ont pu montrer que l'administration par voie intrapéritonéale de (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine ralentissait significativement la croissance tumorale chez les souris ainsi traitées.
Les inventeurs ont analysé la taille moyenne des tumeurs dans des souris portant une tumeur sous cutanée et traitées avec la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et l'ont comparée à celle des souris « contrôle » portant ces tumeurs et traitées avec le véhicule de la substance test uniquement.
La figure 6 représente le volume moyen des tumeurs sous cutanées portées par des souris (en mm3) traitées par la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)- 1, 2,3, 4-tétrahydro-naphtalèn-l -ylamine en fonction du temps écoulé (en jours) depuis le premier jour de traitement (15 mg/kg deux fois par jour par voie intrapéritonéale), comparé au volume moyen des tumeurs portées par des souris traitées par du véhicule.
Le volume des tumeurs des souris traitées avec le composé de l'invention est nettement inférieur à celui des souris non traitées, ce qui révèle un effet anti-tumoral manifeste de la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4- tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine. EXEMPLES 12 et 13:
Dans ces exemples les inventeurs démontrent de manière remarquable que la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine et ses énantiomères possèdent les propriétés propres à leur utilisation thérapeutique par voie orale.
Exemple 12 : Etude des paramètres de pharmacocinέtique (demi-vie, biodisponibilitέ) de la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro- naphtalèn-1-ylamine chez la souris Des études de pharmacocinétique ont été réalisées avec la (lS,4S)-4-
(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine chez le rongeur (souris CDl). Ce composé a été administré aux animaux par voie intraveineuse à la dose de 1 mg/kg et par voie orale aux doses 5, 10 et 20 mg/kg. Les taux circulants de (1 S,4S)-4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 - ylamine dans le sang des souris ont été mesurés par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse, à différents temps compris entre 5 et 480 minutes après l'administration par voie intraveineuse et entre 15 et 1440 minutes après l'administration par voie orale. Ces mesures ont permis de montrer des doses circulantes significatives de (lS,4S)-4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4- tétrahydro-naphtalèn-1 -ylamine chez es animaux traités.
Les résultats des paramètres de pharmacocinétiques de la (1S,4S) 4- (3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine chez la souris sont rapportés dans les Tableau 4a et 4b ci-dessous.
Tableau 4a
Voie Sujet Dose Tl/2 Cl AUCaU AUCEVG d'administration (mg/kg) (min) (inL/inin/kg) (min*ng/mL) (min*ng/mL)
L V. Souris 1 161 35 25057 28302 Tableau 4b
Voie Sujet Dose Tmax Cmax Tl/2 AUCaU AUCEVG d'administration (mg/kg) (min) (ng/mL) (min) (min*ng/mL) (min*ng/mL) per os Souris 5 120 49 379 30070 32255 per os Souris 10 120 131 275 65769 67755 per os Souris 20 120 254 316 151002 157847
Avec :
• T 1/2 = élimination à la demi- vie
• AUCaIl = aire sous la courbe à partir de l'instant de l'administration (1=0) jusqu'au au temps de la dernière observation
• AUCESfF = zone sous la courbe à partir l'instant de l'administration (1=0) extrapolé à l'infini.
• Tmax = Temps de la concentration observée maximum
• Cmax = Concentration correspondant au Tmax
• Cl = Clairance totale
De plus, le rapport des aires sous la courbe (AUC) obtenues lors de l'administration par voie orale et par voie intraveineuse de (lS,4S)-4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine permet de mesure un facteur de biodisponibilité, dont la valeur selon les concentrations est comprise entre 24 % et 30 %. Ces expériences démontrent que lorsque la (lS,4S)-4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine est administrée par voie orale, des doses importantes de ce composé sont retrouvées dans la circulation, avec un facteur de biodisponibilité significatif, ce qui démontre qu'il est donc bien adapté à un traitement par voie orale. Exemple 13 : Etude de l'effet antitumoral chez la souris de la (1S,4S) 4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine après une administration chronique par voie orale
Dans cet exemple les inventeurs ont testé l'effet antitumoral chez la souris de la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine. En appliquant la méthode décrite ci-après. De manière à tester cet effet les inventeurs ont administré la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4- tétrahydro-naphtalèn-1-ylamine à des souris auxquelles avaient été préalablement greffées des cellules tumorales. Ils ont comparé la croissance des tumeurs chez des animaux traités avec la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro- naphtalèn-1-ylamine avec celle de tumeurs chez des animaux contrôles non traités ou traités uniquement avec le véhicule de la substance test. De manière remarquable les inventeurs ont pu montrer que l'administration par voie orale de ( 1 S,4S) 4-(3 ,4-dichloro-phényl)- 1 ,2,3 ,4-tétrahydro-naphtalèn- 1 -ylamine ralentissait significativement la croissance tumorale chez les souris ainsi traitées.
Le tableau 5 rapporte les volumes médians (en mm3) des tumeurs sous cutanées portées par les souris SCID traitées par la (lS-4S)-4-(3,4-dichloro- phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine en fonction du temps écoulé (en jours) depuis le premier jour du traitement (administration de 80 mg/kg par jour et par voie orale) et les volumes médians des tumeurs portées par les souris traitée par du véhicule aux mêmes jours. Les jours Jl 5 et Jl 8 correspondent respectivement aux jour après le premier jour de traitement.
Le tableau 5 ci-dessous présente les volumes médians des tumeurs implantées chez des souris SCID après une administration chronique de la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine par voie orale Tableau 5
Le volume médian des tumeurs portées par les souris traitées avec le composé de l'invention est significativement inférieur (de près de la moitié) au volume médian des tumeurs portées par les souris traitées par du véhicule.
Par conséquent, la (lS,4S)-4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro- naphtalèn-1 -ylamine administrée par voie orale possède un effet anti-tumoral chez l'animal.
Exemple 14 : Etude de la pénétration cérébrale de la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro- phcnyl)-l,2,3,4-tctrahydro-naphtalcn-l -ylamine chez la souris
L'activité des anti-tumoraux sur les tumeurs du système nerveux est souvent limitée par leur incapacité à traverser la barrière hématoencéphalique et donc à pénétrer dans le cerveau. Comme indiqué dans le Tableau 3, la (lS,4S)-4-(3,4-dichloro-phényl)-
1, 2,3, 4-tétrahydro-naphtalèn-l -ylamine est active in vitro sur des lignées tumorales dérivées de glioblastomes. De manière intéressante, les expérimentations rapportées ci-dessous démontrent que la (lS,4S)-4-(3,4- dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine possède une capacité à traverser la barrière hématoencéphalique de manière significative, ce qui représente un avantage important de ce composé pour le traitement des tumeurs cérébrales. La (lS,4S)-4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l- ylamine a été injectée par voie intraveineuse à un groupe de souris CDl, à raison de 1 mg/kg. Les niveaux de (lS,4S)-4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro- naphtalèn-1-ylamine dans le sang et le cerveau ont été analysés par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse.
Les résultats de cette étude chez la souris de la pénétration cérébrale de la (1S,4S) 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine sont rapportés dans le Tableau 6 ci-dessous.
Tableau 6
TEMPS (minutes) CERVEAU PLASMA RAPPORT
CONCENTRATION CONCENTRATION CERVEAU/PLASMA (ng/g cerveau) (ng/mL)
21 96 47 2
34 217 67 3
50 275 34 8
65 149 32 5
120 486 37 13
360 295 15 20
480 155 7 23
600 209 11 19
Ces expérimentations montrent que les concentrations de (lS,4S)-4-
(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro-naphtalèn-l-ylamine dans le cerveau sont plus importantes que dans le plasma et que le rapport de concentration de ce composé entre le cerveau et le sang augmente avec le temps (sur l'intervalle analysé) montrant ainsi la capacité d'accumulation cérébrale de ce composé.
Par conséquent, la (lS,4S)-4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro- naphtalèn-1-ylamine présente un intérêt majeur pour le traitement des tumeurs cérébrales. MATERIELS ET METHODES
I. Procédure pour déterminer une CI^n sur des cellules de type leucémiques U937 Le composé à tester est mis en solution dans du DMSO (100%) à la concentration 1.10"2 M (solution mère) puis 8 échantillons de 8 concentrations différentes sont préparés par dilution successive avec le milieu complet de culture cellulaire (RPMI 1640 Cambrex + 10% FBS + 1% L-Glutamine + 40μg/ml de Gentamycine). Pour chaque échantillon, le volume de dilution est ajusté de façon à obtenir une concentration égale à deux fois la concentration finale Cx choisie. A titre d'exemple, 1.10^ M, 5.10"5 M, 2,5.10"5 M, 1,3.10"5 M, 6,3.10"6 M, 3,1.10"6 M, 1,6.10"6 M et 7,8.10"7 M est une gamme standard de 8 concentrations finales. Parallèlement, 8 échantillons contrôles sont préparés par dilution successive d'une solution de DMSO (100 %) avec le même milieu de culture cellulaire (RPMI1640 Cambrex + 10% FBS + 1% L-Glutamine + 40μg/ml de Gentamycine), les volumes de dilution choisis étant strictement identiques à ceux utilisés pour la préparation des échantillons du composé à tester.
Dans une plaque de 96 puits blanche, non transparente (fluoronunc 96F Nunclon Delta), 100 μL d'une suspension de cellules U937 à la concentration de 2,5 104 cellules/ml dans un milieu RPMI1640 Cambrex + 10% FBS + 1% L- Glutamine + 40μg/ml de Gentamycine sont déposés dans chaque puits soit 2500 cellules par puits. 100 μL d'un échantillon à la concentration 2 fois Cx sont ajoutés (un échantillon par puits) et le milieu est homogénéisé. Après 144h d'incubation à 37°C sous une atmosphère (CO2 5%, humidité 90-95%), la quantification de la viabilité des cellules en culture s'effectue par mesure des niveaux d'ATP à l'aide du test d'analyse luminescente CellTiter-Glo™ fourni par Promega Corporation en suivant les instructions du fournisseur. La luminescence dans chaque puits est mesurée en utilisant un compteur, VICTOR2 1420 (Wallac, PerkinElmer, Courtaboeuf, France). Pour chaque concentration finale Cx du composé à tester, le pourcentage d'inhibition de la prolifération cellulaire (%Inh. (Cx)) est obtenu en appliquant la formule suivante :
[Lum. (éch. Composé Cx) - Lum. (Blanc)]
% lnh.(Cx) = 100 x [ 1 ]
[Lum. (éch. Contrôle Cx) - Lum. (Blanc)] dans laquelle
• Lum. (éch. Composé Cx) = moyenne des mesures de luminescence de trois puits de l'échantillon à tester à la concentration finale Cx.
• Lum. (éch. Contrôle Cx) = moyenne des mesures de luminescence de trois puits de l'échantillon contrôle correspondant • Lum. (blanc) = moyenne des mesures de luminescence de huit puits comprenant uniquement 200 μL de milieu de culture cellulaire (RPMI 1640 Cambrex + 10% FBS + 1% L-Glutamine + 40μg/ml de Gentamycine)
La CI50 est la concentration du composé nécessaire pour obtenir une inhibition de 50 % de la prolifération cellulaire ; ces valeurs sont calculées avec le logiciel XLfit 3 (ID Business Solutions Ltd., UK) à partir de courbes semi- logarithmiques.
II. Procédure pour déterminer une CI^n sur des cellules du cancer du sein MDA-MB231
Le composé à tester est mis en solution dans du DMSO (100%) à la concentration 1.10"2 M (solution mère) puis 8 échantillons de 8 concentrations différentes sont préparés par dilution successive avec le milieu complet de culture cellulaire (E-MEM Cambrex + 10% FBS, + 1% d'acides aminés non essentiels + 1% Napyruvate + 1% L-Glutamine + 40μg/ml de Gentamycine). Pour chaque échantillon, le volume de dilution est ajusté de façon à obtenir une concentration égale à deux fois la concentration finale Cx choisie. A titre d'exemple, 1.1 O^ M, 5.10"5 M, 2,5.10~5 M, 1,3.10"5 M, 6,3.10"6 M, 3,1.10"6 M, l,6.10~6 M et 7,8.10~7 M est une gamme standard de 8 concentrations finales. Parallèlement, 8 échantillons contrôles sont préparés par dilution d'une solution de DMSO (100 %) avec même le milieu de culture cellulaire (E-MEM Cambrex + 10% FBS, + 1% d'acides aminés non essentiels + 1% Napyruvate + 1% L-Glutamine + 40μg/ml de Gentamycine), les volumes de dilution choisis étant strictement identiques à ceux utilisés pour la préparation des échantillons du composé à tester.
Dans une plaque de 96 puits blanche, non transparente (fluoronunc 96F Nunclon Delta), 100 μL d'une suspension de cellules MDA-MB231 à la concentration de 1.25 104 cellules/ml dans un milieu E-MEM Cambrex + 10% FBS, + 1% d'acides aminés non essentiels + 1% Napyruvate + 1% L-Glutamine + 40μg/ml de Gentamycine sont déposés dans chaque puits soit 2500 cellules par puits. 100 μL d'un échantillon à la concentration 2 fois Cx sont ajoutés (un échantillon par puits) et le milieu est homogénéisé. Après 144h d'incubation à 37°C sous une atmosphère (CO2 5%, humidité 90-95%), la quantification de la viabilité des cellules en culture s'effectue par mesure des niveaux d'ATP à l'aide du test d'analyse luminescente CellTiter-Glo™ fourni par Promega Corporation en suivant les instructions du fournisseur. La luminescence dans chaque puits est mesurée utilisant un compteur, VICTOR2 1420 (Wallac, PerkinElmer, Courtaboeuf, France).
Pour chaque concentration finale Cx du composé à tester, le pourcentage d'inhibition de la prolifération cellulaire (%Inh. (Cx)) est obtenu en appliquant la formule suivante :
[Lum. (éch. Composé Cx) - Lum. (Blanc)]
% lnh.(Cx) = 100 x [ 1 ]
[Lum. (éch. Contrôle Cx) - Lum. (Blanc)] dans laquelle
• Lum. (éch. Composé Cx) = moyenne des mesures de luminescence de trois puits de l'échantillon à tester à la concentration finale Cx. • Lum. (éch. Contrôle Cx) = moyenne des mesures de luminescence de trois puits de l'échantillon contrôle correspondant
• Lum. (blanc) = moyenne des mesures de luminescence de huit puits comprenant uniquement 200 μL de milieu de culture cellulaire (E-MEM Cambrex + 10% FBS, + 1% d'acides aminés non essentiels + 1%
Napyruvate + 1% L-Glutamine + 40μg/ml de Gentamycine)
La CI50 est la concentration du composé nécessaire pour obtenir une inhibition de 50 % de la prolifération cellulaire ; ces valeurs sont calculées avec le logiciel XLfit 3 (ID Business Solutions Ltd., UK) à partir de courbes semi- logarithmiques.
III. Méthode pour évaluer un effet synergique de combinaisons de deux produits A et B sur l'inhibition de la prolifération de cellules de type leucémiques U937
Chaque produit est mis en solution dans du DMSO (100%) à la concentration 1.10"2 M (solution mère) puis, pour chaque produit, 6 échantillons de 6 concentrations différentes sont préparés par dilution successive avec le milieu complet de culture cellulaire (RPMI 1640 Cambrex + 10% FBS + 1% L- Glutamine + 40μg/ml de Gentamycine). Pour chaque échantillon, le volume de dilution est ajusté de façon à obtenir une concentration égale à quatre fois la concentration finale choisie.
Une suspension cellulaire à 2,5.104 cellules/ml est préparée dans du milieu complet, et 36xl00μl de cette solution (soit 2500 cellules/puits) sont distribués dans 36 puits d'une plaque 96 puits, blanche et non transparente (fluoronunc 96F Nunclon Delta). Dans chaque puits contenant lOOμl de suspension cellulaire, sont ajoutés 50 μL d'un échantillon de produit A concentrée 4 fois et 50 μL d'un échantillon de produit B concentrée 4 fois pour obtenir un volume final de 200 μL. Chaque échantillon du produit A (6 concentrations Al, A2, A3, A4, A5, A6) est combiné avec chaque échantillon de produit B (6 concentrations Bl, B2, B3, B4, B5, B6). Les concentrations A6 et B6 correspondent à une concentration nulle de produit A et de produit B respectivement.
La combinaison A6/B6 correspond donc à un puits sans drogue ni DMSO, qui sert de référence de croissance cellulaire.
Le contenu des 36 puits peut être schématiquement représenté de la façon suivante :
Après 144h d'incubation à 37°C sous une atmosphère (CO2 5%, humidité 90-95%), la quantification de la viabilité des cellules en culture s'effectue par mesure des niveaux d'ATP à l'aide du test d'analyse luminescente CellTiter-Glo™ fourni par Promega Corporation en suivant les instructions du fournisseur. La luminescence dans chaque puits est mesurée en utilisant un compteur, VICTOR2 1420 (Wallac, PerkinElmer, Courtaboeuf, France).
Pour chaque combinaison An/Bm, le pourcentage d'inhibition de la prolifération cellulaire (%Inh. (An/Bm)) est obtenu en appliquant la formule suivante :
[Lum. M(An/Bm) - Lum.M(Blanc)]
% lnh.(An/Bm) = 100 x [ "l -
[Lum. M(A6/B6) - Lum. M(Blanc)] dans laquelle
• Lum.M (An/Bm) = moyenne des mesures de luminescence de deux puits comprenant la combinaison des échantillons An et Bm • Lum.M (A6/B6) = moyenne des mesures de luminescence de deux puits comprenant la combinaison des échantillons A6 et B6
• Lum. (blanc) = moyenne des mesures de luminescence de 6 puits comprenant uniquement 200 μL de milieu de culture cellulaire (RPMI 1640 Cambrex + 10% FBS + 1% L-Glutamine + 40μg/ml de
Gentamycine)
Pour chaque combinaison An/Bm, l'excédent par rapport à l'agent seul le plus actif (Easlpa (An/Bm)) est calculé en appliquant les formules suivantes :
• Si %lnh. (An/B6) > %lnh. (A6/Bm) alors Eas,pa (An/Bm) = %lnh. (An/Bm)- %lnh. (An/B6)
• Si %lnh. (An/B6) < %lnh. (A6/Bm) alors Eas,pa (An/Bm) = %lnh. (An/Bm)- %lnh. (A6/Bm)
Enfin pour différencier l'addition des effets de la synergie, le pourcentage d'inhibition pour chaque combinaison An/Bm est exprimé comme un excès par rapport à l'additivité « Bliss ». Le modèle « Bliss » prédit une réponse combinée C pour deux agents actifs ayant un effet donné A et B selon la formule : C = A + B - AB avec A et B exprimés en fraction entre 0 et 1.
FV. Méthode pour évaluer un effet synergique de deux produits sur l'inhibition de la prolifération de cellules du cancer du sein MDA-MB231
La méthode utilisée pour les cellules du cancer du sein MDA-MB231 est similaire à celle utilisée pour les cellules de type leucémiques U937 à l'exception de la concentration de la suspension cellulaire (1,25.104 cellules/ml pour MDA-MB231 au lieu de 2,5.104 cellules/ml pour U937). La composition du milieu complet est également modifiée : E-MEM Cambrex + 10% FBS, + 1% d'acides aminés non essentiels + 1% Napyruvate + 1% L-Glutamine + 40μg/ml de Gentamycine. V. Procédure pour déterminer une CI^n sur des lignées cellulaires issues de cancer de type différent
Les cellules ont été mises à incuber dans un volume final de 200 μl d'un milieu de culture supplémenté avec 10 % de sérum bovin foetal contenant le composé testé à 37°C sous atmosphère contenant 5 % de CO2.
Les cellules tumorales ont été mises à incuber pendant 96 heures avec 10 concentrations finales du composé testé (gamme de 1 x 10^ à 4 x 10"10 M). Chaque concentration finale a été testée en quadriplicate. Des cellules contrôles ont été traitées avec le véhicule du composé testé. A l'issue de la période de traitement, l'activité antiproliférative a été évaluée par un test colorimétrique utilisant le sel de tetrazolium MTS (3-(4,5- dimethylthiazol-2-yl)-5-(3- carboxymethoxy phenyl) - 2 - ( 4 - sulfophenyl)-2H- tetrazolium, Baltrop J.A. et al, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1991, 1:611-614).
A la fin du traitement des cellules, 40 μl d'une solution fraîchement filtrée à 0,22 μm de MTS (20 ml à 2 mg/ml, Réf Gl 111 , Promega, Charbonnières,
France) et de PMS (1 ml à 0,92 mg/ml, Réf P9625, Sigma) dans une solution saline tamponnée au phosphate de Dulbecco (DPBS, Réf 17-513F, Cambrex) ont été ajoutés dans chaque puits. Les plaques de culture ont été incubées pendant 2 heures à 37°C. L'absorbance de chaque puits a été mesurée à 490 nm en utilisant un compteur multimarqué, VICTOR3™ 1420 (Wallac, PerkinElmer, Courtaboeuf,
France). Les valeurs d'absorbance correspondent à la moyenne de 4 mesures expérimentales
Pour chaque concentration finale Cx du composé à tester, le pourcentage d'inhibition de la prolifération cellulaire (%Inh. (Cx)) est obtenu en appliquant la formule suivante :
[Abs. Composé (Cx) ] % lnh.(Cx) = 100 x [ 1 ]
[Abs. Contrôle] dans laquelle • Abs. Composé (Cx) = moyenne des mesures d'absorbance des quatre puits de l'échantillon à tester à la concentration finale Cx.
• Abs. Contrôle = moyenne des mesures d'absorbance des quatre puits contrôle (absence de composé)
La CI50 est la concentration du composé nécessaire pour obtenir une inhibition de 50 % de la prolifération cellulaire ; ces valeurs sont calculées avec le logiciel XLfit 3 (ID Business Solutions Ltd., UK) à partir de courbes semi- logarithmiques.
VI. Procédure pour déterminer l'effet antitumoral in vivo des produits testés Induction tumorale
Des cellules U937 viables dans un volume de 200 μl de milieu de culture RPMI sont injectées de manière sous cutanée dans le flanc droit d'une souris SCID. L'injection des cellules est réalisée 24 heures après l'irradiation complète du corps avec une source γ (1,8 Gy, Co60, INRA BRETENIERE, Dijon,
France).
Plan du traitement Le traitement est initié quand les tumeurs ont atteint un volume moyen d'environ 50 mm3. Les souris sont réparties au hasard dans des groupes de 10 souris de façon à ce que la moyenne du volume tumoral de chaque groupe ne soit pas différente statistiquement des autres groupes (analyse de la variance).
Pour chaque dose de composé test, une quantité appropriée de produit est mis en suspension dans du Tween-20 (Ref P7949, Sigma). Les suspensions sont ensuite diluées dans de l'eau de façon à atteindre la concentration désirée du compose test et une concentration finale de Tween-20 de 1% (v/v). Les souris reçoivent des injections intrapéritonéales (IP) répétées du véhicule (Tween-20 1% (v/v) ou du composé du test à la dose et conformément au plan de traitement chois (1 fois par jour ou 2 fois par jour pendant 30 jours). Pour les traitements par voie orale les produits et le véhicule sont administrés par gavage.
Détermination du volume tumoral
La longueur et la largeur de la tumeur sont mesurées deux fois par semaine à l'aide d'un pied à coulisse et le volume de la tumeur est estimé par la formule : volume tumoral = (largeur2 x longueur)/2.

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation de la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4-tétrahydro- naphtalèn-1-ylamine, ou de toute combinaison de ses énantiomères ou d'un de ses énantiomères pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée au traitement du cancer, ainsi qu'au traitement et à la prévention des métastases.
2. Utilisation selon la revendication 1 caractérisée en ce que la composition pharmaceutique contient en outre au moins un alcaloïde.
3. Utilisation selon la revendication 2 caractérisée en ce que l'alcaloïde est un alcaloïde de vinca.
4. Utilisation selon la revendication 3 caractérisée en ce que l'alcaloïde de vinca est choisi dans le groupe constitué par : la vinblastine, la vincristine, la vindésine, la vinorelbine, ou leurs mélanges, de préférence la vincristine et/ou la vinblastine.
5. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que ledit cancer est, ou lesdites métastases sont issues d'un cancer choisi dans le groupe constitué par le cancer de la prostate, les ostéosarcomes, le cancer du poumon, le cancer du poumon non à petites cellules, le cancer du sein, le cancer de l'endomètre ou le cancer du côlon, la leucémie chronique ou aiguë, les tumeurs solides de l'enfant, les lymphomes lymphocytaires, le cancer du pancréas, le cancer de la peau, le mélanome cutané ou intraoculaire, le cancer de la tête et du cou, le cancer de l'utérus, le cancer de l'ovaire, les tumeurs gynécologiques, la maladie de Hodgkin, le cancer des os, le cancer du rectum, le cancer de la région anale, le cancer de l'estomac, le cancer de l'œsophage, le cancer de l'intestin grêle, le cancer du système endocrinien, les sarcomes des parties molles, le cancer de l'urètre, le cancer du pénis, le cancer de la vessie, le cancer du rein, le cancer de l'uretère, les tumeurs malignes pédiatriques,et les tumeurs du système nerveux central.
6. Utilisation selon la revendication 5 caractérisée en ce que ledit cancer est le cancer du sein, ou lesdites métastases sont issues d'un cancer du sein.
7. Utilisation selon la revendication 5 caractérisée en ce que ledit cancer est une leucémie.
8. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 7 caractérisée en ce que la composition pharmaceutique est administrée par voie orale, intraveineuse, entérale, parentérale, intramusculaire, intranasale, sous-cutanée ou sublinguale.
9. Produit comprenant de la 4-(3,4-dichloro-phényl)-l,2,3,4- tétrahydro-naphtalèn-1-ylamine ou au moins un de ses énantiomères ou toute combinaison de ses énantiomères et au moins un alcaloïde, en tant que produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie anti-cancéreuse.
10. Produit selon la revendication 9 caractérisés en ce que l'alcaloïde est un alcaloïde de vinca.
11. Produit selon la revendication 10 caractérisés en ce que l'alcaloïde de vinca est choisi dans le groupe constitué par : la vinblastine, la vincristine, la vindésine, la vinorelbine, ou leurs mélanges, de préférence la vincristine et/ou la vinblastine.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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FR2909283A1 (fr) * 2006-11-30 2008-06-06 Cerep Sa Produit de combinaison contenant de la n-desmethylsertraline, ou un de ses sels, et un agent antineoplasique pour le traitement du cancer
FR3071726B1 (fr) * 2017-09-29 2020-09-04 Univ Paris Sud Agents inhibant la proteine tctp pour le traitement de maladies proliferatives et de maladies infectieuses

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2265695A (en) * 1995-01-17 1996-08-07 Pfizer Inc. The use of sertraline to treat cancer patients
US20050013853A1 (en) * 2000-11-29 2005-01-20 Irit Gil-Ad Anti-proliferative drugs
JP2007503396A (ja) * 2003-08-22 2007-02-22 ファルマシア コーポレイション 新形成の治療のためのシクロオキシゲナーゼ−２選択的阻害剤及びセロトニン−調節剤の組成物

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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