EP0832150A1 - Kaskadenpolymere mit iodaromaten - Google Patents

Abstract

Iodhaltige dendrimere Polymere sind wertvolle Röntgen-Diagnostika.

Description

Kaskadenpolymere mit lodaromaten

Die Erfindung betrifft die in den Patentansprüchen gekennzeichneten

Gegenstände, das heißt neue jodhaltige dendrimere Polymere, diese Verbindungen enthaltende Mittel, die Verwendung der polymeren Verbindungen als Kontrastmittel sowie Verfahren zur Hersteilung dieser Verbindungen und Mittel.

Röntgenkontrastmittel sind unentbehrliche Hilfsmittel bei der Diagnose

zahlreicher Erkrankungen wie z.B. von atheroskierotischen Gefäßprozessen, Tumoren, Infarkten, Erkrankungen der Nieren und ableitenden Harnwege und Perfusionsstörungen, z.B. am Herzen (Ischämie, sowie Entzündungen).

Die Anforderungen, die an derartige Kontrastmittel zu stellen sind, betreffen vor allem: a) eine ausreichend hohe lodkonzentration

der verwendeten Lösung. Von ihr hängt - solange das Mittel nicht verdünnt wird - die Röntgendichte eines Kontrastmittels als einzigem Parameter ab. Das ist insbesondere in der Angiographie der Fall, wenn das Kontrastmittel mit hoher Geschwindigkeit über Katheter in Blutgefäße injiziert wird und damit das Blut verdrängt.

Bei einer Reihe von anderen Untersuchungen sind hochkonzentrierte

Kontrastmitte! ebenfalls erwünscht, z.B. wenn die Verdünnung im Körper sonst zu stark wird (Injektion in die Herzkammern, die Aorta oder bei der Intravenösen Digitalen Subtraktionsangiographie) oder bei ungünstigen

Aufnahmebedingungen (so kann der Strahlengang durch den Körper eines schweren Patienten sehr lang werden); b) die Chemotoxizität,

eine inhärente Eigenschaft der Kontrastmittel-Lösungen, die unter anderem verknüpft ist mit der Lipophilie der Moleküle, deren Protein-Affinität und

Elektronendichte. Sie äußert sich in der klinischen Anwendung durch das Auftreten von Nebenwirkungen wie Übelkeit, Erbrechen, von bestimmten

Kreislaufreaktionen, Urticaria, Bronchospasmus und anderen Symptomen bis hin zum Schock und Tod. Pharmakologisch sind chemotoxische Effekte z.B. als LD₅₀ nach intravenöser Injektion meßbar; c) die Viskosität.

eine Größe, die für den Prozeß der Applikation der Kontrastmittel wichtig ist, z.B. wenn größere Volumina (30 - 100 ml) hochkonzentrierter und damit höher viskoser Lösungen rasch injiziert werden sollen. Außer der schlechten

Injizierbarkeit haben höher viskose Kontrastmittel auch den Nachteil schlechter Mischbarkeit mit Blut (Schlierenbildung statt homogener Füllung der Herzhöhle oder Blutgefäße) und der Behinderung der Passage durch Kapillaren, z.B. der Lunge; d) die Osmolalität

der Kontrastmittel-Lösungen. Im Falle der Applikation von gegenüber dem Blut und Gewebe stark hypertonen Lösungen (der physiologische Wert beträgt 310 m osm/kg) wird Wasser aus den Zellen getrieben, wodurch u.a. Zellmembranen zerstört und der Gesamtelektrolyt-Haushalt gestört wird.

Hierdurch wird eine große Zahl von zum Teil schwerwiegenden

Nebenwirkungen, wie z.B. Blutdruckabfall, Bradykardie bis hin zum

Herzstillstand, Störungen der Blut-Him-Schranke, Gefäßschmerzen usw.

verursacht; e) eine Löslichkeit.

die für die praktische Anwendung der Kontrastmittel bei physiologischen pH- Werten in Wasser ausreichend hoch sein muß, ohne dabei jedoch

gleichzeitig Verträglichkeit und lodgehalt des Moleküls zu stark zu

beeinträchtigen; f) eine chemische Stabilität

der Kontrastmittel-Lösungen, die eine Hitzesterilisierung erlaubt, sowie eine Lagerfähigkeit von mindestens 24 Monaten ergibt.

Für die Darstellung von Gefäßen wären Röntgenkontrastmittel wünschenswert, die sich ausschließlich im vasalen Raum verteilen, d.h. das Verteilungsvolumen des Kontrastmittels sollte dem Intravasalraum entsprechen. Die bisher für die Angiographie verwendeten Kontrastmittel sind mit dem Nachteil behaftet, daß sie den Vasalraum sehr schnell verlassen, weil sie zu klein und hydrophil sind und sich im Extrazellulärraum verteilen können. Darüberhinaus erfolgt ihre Ausscheidung so schnell, daß in der Regel eine lokale Applikation mittels

Katheter (z.B. im cranialen Bereich) durchgeführt werden muß, die mit vielen Unannehmlichkeiten für den Patienten behaftet ist. Wünschenswert wären demnach blood pool agents (Perfusionsagentien), die es ermöglichen, nach systemischer Applikation mit Hilfe der Röntgenstrahltechnik gut durchblutetes von schlecht durchblutetem Gewebe abzugrenzen, um eine Ischämie zu

diagnostizieren. Auch infarziertes Gewebe ließe sich aufgrund seiner Anämie vom umliegenden gesunden oder ischämischen Gewebe abgrenzen, wenn ein vasales Kontrastmittel angewandt wird. Dies ist von besonderer Bedeutung, wenn es z.B. darum geht, einen Herzinfarkt von einer Ischämie zu unterscheiden.

Eine weitere Anwendungsmöglichkeit besteht in der Diagnose von

Gefäßbereichen mit verringerter oder erhöhter Permeabilität, die z.B. durch Entzündungen oder Tumore hervorgerufen sein kann, sowie in der

Lymphographie und in der Mammographie. Es besteht daher ein Bedarf an Röntgen-Kontrastmitteln, die den vasalen Raum markieren können (blood-pool-agent). Diese Verbindungen sollen sich durch eine gute Verträglichkeit sowie durch eine hohe Wirksamkeit (hohe Steigerung der Signalintensität bzw. Senkung der Dosis) und durch den Verbleib der Moleküle im vasalen Raum (keine Extravasation) sowie durch eine längere Halbwertszeit im Vergleich zu den für die Angiographie verwendeten Kontrastmitteln auszeichnen.

Der Ansatz, zumindest einen Teil dieser Probleme durch Verwendung von iodierten makromolekularen Kontrastmitteln zu lösen, war bisher nur sehr begrenzt erfolgreich.

So weisen die in der Internationalen Patentanmeldung WO 88/06162

beschriebenen Dextranderivate eine breite Molmassenverteiiung und verbunden damit eine unvollständige Ausscheidung sowie eine unzureichende Verträglichkeit auf.

Die in der Internationalen Patentanmeldung WO 93/10824 offenbarten Jodhaltigen Polyamine sind in Wasser nicht sehr gut löslich und zudem relativ schlecht verträglich.

Es bestand daher die Aufgabe, neue Röntgenkontrastmittel vor allem zur

Erkennung und Lokalisierung von Gefäßkrankheiten, die die genannten Nachteile nicht besitzen, zur Verfügung zu stellen. Diese Aufgabe wird durch die vorliegende Erfindung gelöst.

Es wurde gefunden, daß sich jodhaltige dendrimere Polymere, die einen stickstoffhaltigen Kern und Triiodaromaten enthaltende und aliphatische Carboxy-, Sulfo- oder Phosphonogruppen tragende bildgebende Reste aufweisen, überraschenderweise hervorragend zur Herstellung von Röntgen- Diagnostika eignen, ohne die genannten Nachteile aufzuweisen.

Unter Dendrimeren versteht man verästelte polymere Moleküle, wie sie z.B. in Angew. Chem. Vol. 104, 1609 (1992) beschrieben sind.

Die erfindungsgemäßen jodhaltigen Dendrimere (Kaskaden-Polymere) lassen sich durch die allgemeine Formel I beschreiben A-{X-[Y-(Z-< W-D_w >_z)_y]_x}_a (I), worin

A für einen stickstoffhaltigen Kaskadenkern der Basismultiplizität a,

X, Y unabhängig voneinander für eine direkte Bindung oder eine Kaskadenreproduktionseinheit der Reproduktionsmultiplizität x bzw. y,

Z, W unabhängig voneinander für eine Kaskadenreproduktionseinheit der

Reproduktionsmultiplizität z bzw. w,

D für eine Gruppe T-B, worin

B für einen Benzolring der allgemeinen Formel II steht,

oder für eine Gruppe der Formel -(CO)_q-U-COOH steht, worin R¹ und R² jeweils unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom, eine -CONR³R⁴- oder -NR⁶COR⁵-Gruppe bedeuten, wobei

R³, R⁴ entweder unabhängig voneinander für ein Wasserstoffatom oder eine geradkettige, verzweigte oder cyclische Alkylgruppe mit bis zu 12 C-Atomen, die gegebenenfalls durch 1-5 Hydroxy- und/oder 1-3 C₁-

C₃-Alkoxy- und/oder 1-3 Carboxy-, Sulfo- oder Phosphonogruppe(n) substituiert ist oder

R³ und R⁴ gemeinsam mit dem Stickstoffatom für einen heterocyclischen 5- oder

6-Ring steht, der gegebenenfalls ein Sauerstoffatom, eine SO₂-Gruppe oder einen N-CO-R⁷-Rest enthält,

R⁷ für eine Carboxygruppe oder einer Alkylgruppe mit bis zu

12 C-Atomen steht, die gegebenenfalls 1-5 Hydroxy-, 1-3 C₁-C₃- Alkoxy- oder 1-3 Carboxy-, Sulfo- oder Phosphonogruppe(n) enthält,

R⁵ für eine Carboxygruppe oder eine geradkettige oder verzweigte

C₁-C₁₂-Alkylgruppe steht, die gegebenenfalls durch ein Sauerstoffatom unterbrochen ist, die weiterhin gegebenenfalls eine

Carbonylgruppe enthält und/oder gegebenenfalls durch 1-3 Carboxy-, Sulfo- oder Phosphono- und/oder 1-5 Hydroxy- und/oder 1-3 C₁-C₃-Alkoxygruppe(n) und/oder eine gegebenenfalls

carboxymethylsubstituierte Iminogruppe substituiert ist,

R⁶ für ein Wasserstoffatom, oder eine geradkettige oder verzweigte

Alkylgruppe mit bis zu 12 C-Atomen steht, die gegebenenfalls durch 1-3 Carboxy-, Sulfo- oder Phosphonogruppe(n) und/oder gegebenenfalls durch 1-3 Hydroxygruppe(n) und/oder 1-3 C₁-C₃- Alkoxygruppe(n) substituiert ist

T für eine Gruppe -CO-, -CS-, -CONH-, -CSNH-, COCH₂N(R⁶)CO, -

h

a für die Ziffern 2 bis 12 steht, x, y, z unabhängig voneinander für die Ziffern 1 bis 4 stehen und w für die Ziffern 1 bis 8 steht, mit der Maßgabe, daß mindestens zwei Reproduktionseinheiten unterschiedlich sind und daß für das Produkt der Multiplizitäten gilt

16≤a · x · y · z - w≤ 128,

U für eine Gruppe (CH₂)_u q für die Ziffern 0 oder 1 und u für die Ziffern 1-4 steht sowie deren Salze mit physiologisch unbedenklichen organischen und/oder anorganischen Basen, Aminosäuren oder Aminosäureamiden.

Als Kaskadenkern A sind geeignet:

Stickstoffatom,

worin

m, n unabhängig voneinander für die Ziffern 1 bis 10,

P für die Ziffern 0 bis 10,

U¹ für Q¹ oder E,

U² für Q² oder E mit in der Bedeutung der Gruppe

worin

o für die Ziffern 1 bis 6,

Q¹ für ein Wasserstoffatom oder Q² und

Q² für eine direkte Bindung

M für eine C₁-C₁₀-Alkylenkette, die gegebenenfalls durch 1 bis 3

Sauerstoffatome unterbrochen ist und/oder gegebenenfalls mit 1 bis 2

Oxogruppen substituiert ist,

R° für einen verzweigten oder unverzweigten C₁-C₁₀-Alkylrest, eine Nitro-,

Amino-, Carbonsäuregruppe oder für die Gruppe stehen,

wobei die Anzahl Q² der Basismultiplizität a entspricht. Den einfachsten Fall eines Kaskadenkerns stellt das Stickstoffatom dar, dessen drei Bindungen (Basismultiplizität a = 3) in einer ersten "inneren Schicht"

(Generation 1 ) von drei Reproduktionseinheiten X bzw. Y (wenn X für eine direkte Bindung steht) bzw. Z (wenn X und Y jeweils für eine direkte Bindung stehen) besetzt sind; anders formuliert:

die drei Wasserstoffatome des zugrundeliegenden Kaskadenstarters Ammoniak A(H)_a = NH₃ sind durch drei Reproduktionseinheiten X bzw. Y bzw. Z substituiert worden. Die im Kaskadenkern A enthaltene Anzahl Q² gibt dabei die

Basismultiplizität a wieder.

Die Reproduktionseinheiten X, Y, Z und W enthalten -NQ¹Q²-Gruppen, worin Q¹ ein Wasserstoffatom oder Q² eine direkte Bindung bedeuten. Die in der jeweiligen Reproduktionseinheit (z.B. X) enthaltene Anzahl Q² entspricht der Reproduktionsmultiplizität dieser Einheit (z.B. x im Falle von X). Das Produkt aller Multiplizitäten (a.x.y.z.w) gibt die Anzahl der im Kaskadenpolymeren gebundenen triiodierten Benzolreste B an. Die erfindungsgemäßen Polymere enthalten mindestens 16 und höchstens 128 Reste B im Molekül.

Die Reproduktionseinheiten können endständig sowohl über NHQ²-Gruppen (z.B. durch Acylierungsreaktionen) als auch über NQ²Q²-Gruppen (z.B. durch

Alkylierungsreaktionen) an die nächste Generation geknüpft sein. Auch die letzte Generation, kann über NHQ² oder NQ²Q²-Gruppen an die Bindeglieder T gebunden sein, welche ihrerseits mit den triiodierten Aromaten verbunden sind. Die erfindungsgemäßen Kaskaden-Polymer-Komplexe weisen maximal 10

Generationen auf (d.h. es können auch mehr als jeweils nur eine der

Reproduktionseinheiten X, Y und Z im Molekül vorhanden sein), vorzugsweise jedoch 2 bis 4 Generationen, wobei mindestens zwei der Reproduktionseinheiten im Molekül unterschiedlich sind.

Als bevorzugte Kaskadenkerne A seien diejenigen angeführt, die unter die oben genannten allgemeinen Formeln fallen, wenn

m für die Ziffern 1 - 3, besonders bevorzugt für die Ziffer 1 ,

n für die Ziffern 1 - 3, besonders bevorzugt für die Ziffer 1 ,

p für die Ziffern 0 - 3, besonders bevorzugt für die Ziffer 1 ,

o für die Ziffer 1 ,

M für eine -CH₂-, -CO- oder -CH₂CO-Gruppe und R^O für eine -CH₂NU¹U²-, CH₃- oder NO₂-Gruppe

steht.

Als weitere bevorzugte Kaskadenstarter A(H)_a seien z.B. aufgeführt:

(In der Klammer wird die Basismultiplizität a angegeben für den Fall der zum Aufbau der nächsten Generation dienenden nachfolgenden Mono- bzw.

Disubstitution)

Es sei darauf hingewiesen, daß die Definition als Kaskadenkem A und damit die Trennung von Kaskadenkern und erster Reproduktionseinheit rein formal und damit unabhängig von dem tatsächlichen synthetischen Aufbau der gewünschten Kaskaden-Polymer-Komplexe gewählt werden kann. So kann man z.B.

Tris(aminoethyl)-amin sowohl selbst als Kaskadenkern A (vergleiche die erste für A angegebene allgemeine Formel mit m = n = p = 1 , U¹ = E mit o in der Bedeutung der Ziffer 1 und U¹ = U² = Q²) aber auch als Stickstoffatom (= Kaskadenkern A), das als erste Generation drei Reproduktionseinheiten

(vergleiche die Definition von E) aufweist, ansehen.

Die Kaskadenreproduktionseinheiten X, Y, Z und Q werden unabhängig voneinander durch

worin

U¹ für Q¹ oder E,

U² für Q² oder E mit

E in der Bedeutung der Gruppe

wobei

o für die Ziffern 1 bis 6,

Q¹ für ein Wasserstoffatom oder Q² ,

Q² für eine direkte Bindung,

U³ für eine C₁-C₂₀-Alkylenkette, die gegebenenfalls durch 1 bis 10

Sauerstoffatome und/oder 1 bis 2 -N(CO)_q-R²-, 1 bis 2 Phenylen- und/oder 1 bis 2 Phenylenoxyreste unterbrochen ist und/oder gegebenenfalls durch 1 bis 2 Oxo-, Thioxo-, Carboxy-, C₁-C₅- Alkylcarboxy-, C₁-C₅-Alkoxy-, Hydroxy-, C₁-C₅-alkylgruppen substituiert ist, wobei

q für die Ziffern 0 oder 1 und

R² für ein Wasserstoffatom, einen Methyl- oder einen Ethylrest steht, der gegebenenfalls mit 1 - 2 Hydroxy- oder 1 Carboxygruppe(n) substituiert ist,

L für ein Wasserstoffatom oder die Gruppe steht, V für die Methingruppe steht wenn gleichzeitig U⁴ eine direkte

Bindung oder die Gruppe M bedeutet und U⁵ eine der Bedeutungen von

U³ besitzt oder

für die Gruppe teht, wenn gleichzeitig U⁴ und U⁵

identisch sind und die direkte Bindung oder die Gruppe M bedeuten. Bevorzugte Kaskadenreproduktionseinheiten X, Y, Z und W sind diejenigen, bei denen in den oben genannten allgemeinen Formeln

der Rest U³ für -CO-, -COCH₂OCH₂CO-, -COCH₂-, -CH₂CH₂-,

-CONHC₆H₄-, -COCH₂CH₂CO-, -COCH₂-CH₂CH₂CO-oder

-COCH₂CH₂CH₂CH₂CO- steht,

der Rest U⁴ für eine direkte Bindung oder für -CH₂CO- steht,

der Rest U⁵ für eine direkte Bindung oder für -(CH₂)₄-, -CH₂CO-, -CH(COOH)-,

CH₂OCH₂CH₂-, -CH₂C₆H₄-, CH₂-C₆H₄OCH₂CH₂- steht oder

der Rest E für eine Gruppe

Als Kaskadenreproduktionseinheiten X, Y, Z und W seien beispielhaft angeführt:

-CH₂CH₂NH-; -CH₂CH₂N< ;

-COCH(NH-)(CH₂)₄NH-; -COCH(N< )(CH₂)₄N< ;

-COCH₂OCH₂CON(CH₂CH₂NH-)₂; -COCH₂OCH₂CON(CH₂CH₂N< )₂ ;

-COCH₂N(CH₂CH₂NH-)₂; -COCH₂N(CH₂CH₂N< )₂;

-COCH₂NH-; -COCH₂N< ;

-COCH₂CH₂CON(CH₂CH₂NH-)₂; -COCH₂CH₂CON(CH₂CH₂N< )₂ ;

-COCH₂OCH₂CONH-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂NH-)₂]₂;

-COCH₂OCH₂CONH-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂N< )₂]₂ ;

-COCH₂CH₂CO-NH-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂NH-)₂]₂ ;

-COCH₂CH₂CO-NH-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂N<)₂]₂ ;

-CONH-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂NH-)₂]₂ ;

-CONH-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂N<)₂]₂ ;

-COCH(NH-)CH(COOH)NH-;

-COCH(N< )CH(COOO)N< ;

Als im R¹- bzw. R²-Substituenten des Triiodaromaten B enthaltene Alkylgruppen R³, R⁴ und R⁷ kommen gerad- oder verzweigtkettige oder cyclische

Kohlenwasserstoffe mit bis zu 12, vorzugsweise bis zu 10, besonders bevorzugt bis zu 6 C-Atomen in Betracht, die durch 1 - 5, vorzugsweise 1 - 3 Hydroxy- und/oder 1 - 3 C ₁-C₃-Alkoxy- und/oder 1 - 3, vorzugsweise eine, Carboxy-, Sulfo- oder Phosphonogruppe(n) substituiert ist. Namentlich genannt seien beispielsweise die Methyl-, Hydroxymethyl-, Ethyl-, 2-Hydroxyethyl-, 2-Hydroxy-1-(hydroxymethyl)-ethyl-, 1-(Hydroxymethyl)-ethyl-, Propyl-, Isopropyl-, 2-Hydroxypropyl-, 3-Hydroxypropyl-, 2,3-Dihydroxypropyl-, 1,2,3-Trihydroxypropyl-, Butyl-, Isobutyl-, 2-Hydroxybutyl-, 3-Hydroxybutyl-, 4-Hydroxybutyl-, 2-, 3- und 4-Hydroxy-2-methylbutyl-, 2- und 3-Hydroxyisobutyl-, 2,3,4-Trihydroxybutyl-, 1 ,2,4-Trihydroxybutyl-, Pentyl-, Cyclopentyl-, Cyclohexyl-, 2,3,4,5,6-Pentahydroxyhexyl-, 2-Methoxyethyl-, Carboxymethyl-, 2-Sulfoethyl-, Phosphonomethyl-, 2-Carboxyethyl-, 10-Hydroxydecyl-, Carboxy-, 3-Sulfopropyl-, 2-Phosphonoethyl-Gruppe.

Der durch R³ und R⁴ unter Einschluß des Amid-Stickstoffs gegebenenfalls gebildete heterocyclische 5- oder 6-Ring kann gegebenenfalls ein

Sauerstoffatom, eine SO₂-Gruppe oder einen N-CO-R⁷-Rest enthalten. Als geeignete Heterocyclen seien beispielsweise genannt:

der Piperidyl-, Pyrazolidyl-, Morpholinyl-, N-substituierte Piperazinyl- und der S,S- Dioxothio-morpholinyl-Ring.

Als im R¹- bzw. R²-Substituenten des Triiodaromaten B enthaltene Reste R⁵ und R⁶ seien zusätzlich zu den entsprechenden für R³, R⁴, R⁷ aufgeführten Reste die folgenden beispielhaft genannt:

Carboxymethoxymethyl-, 5-Carboxy-1 ,5-dihydroxy-3-oxapentyl-, 2-Carboxy-1- hydroxyethyl-, 3-Carboxy-2-oxapropyl-Gruppe. Der für R⁸ und R⁹ bzw. V stehende Alkyl-, Aryl- oder Aralkylrest bzw. Alkylen-, Arylen- oder Aralkylenrest kann geradkettig oder verzweigt sein und bis zu 20, vorzugs-weise bis zu 12 C-Atome enthalten. Der R⁸- und R⁹-Substituent kann durch 1 - 4, vor-zugsweise 1 - 2 Hydroxygruppe(n) substituiert, die für V stehende Kette (gegebenenfalls zusätzlich) durch 1 - 4, vorzugsweise 1 - 2 Sauerstoffatome unterbrochen sein. Beispielhaft genannt seien folgende Gruppen:

Ethylen, Butylen, 1-Methylpropylen, Propylen, 3,6-Dioxaoctylen, Xylylen,

2-Hydroxypropylen, 3-Oxapentylen.

Die für U stehende Alkylenkette kann bis zu 6, vorzugsweise bis zu 2 C-Atome aufweisen und gegebenenfalls durch 1 - 2 Sauerstoffatome unterbrochen und/oder gegebenenfalls durch 1 - 4, vorzugsweise 1 - 2 Hydroxygruppen und/oder 1 - 2 Carboxy-gruppe(n) substituiert sein. Als beispielhaft für die Reste - (CO)_q-U-COOH seien aufgeführt:

-CO(CH₂)₂COOH; -COCOOH; -CO(CHOH)₂COOH; -COCH₂OCH₂COOH;

-COCH₂COOH; -COCH(OCH₃)COOH, -CH₂CH₂COOH, -CH(CH₃)CH₂COOH, -CH₂CH(CH₃)COOH, -CH(CH₃)CH(CH₃)COOH, wobei die Reste

-CO(CH₂)₂COOH,

-COCH₂OCH₂COOH, -CH₂CH₂COOH bevorzugt sind.

Die aciden Wasserstoffatome der im Polymeren enthaltenen Säuregruppen können ganz oder teilweise durch Kationen von anorganischen und/oder organischen Basen, Aminosäuren oder Aminosäureamiden ersetzt sein.

Geeignete Kationen anorganischer Basen sind beispielsweise das Lithium-, das Kalium-, das Calcium-, das Magnesium-, das Zink- und insbesondere das

Natriumion. Geeignete Kationen organischer Basen sind unter anderem solche von primären, sekundären oder tertiären Aminen, wie z.B. Ethanolamin,

Diethanolamin, Morpholin, Glucamin, N,N-Dimethyl-glucamin und insbesondere N-Methylglucamin. Geeignete Kationen von Aminosäuren sind beispielsweise die des Lysins, des Arginins und des Ornithins sowie die Amide ansonsten saurer oder neutraler Aminosäuren.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen weisen die eingangs geschilderten gewünschten Eigenschaften auf. Sie enthalten die für ihre Verwendung als Röntgenkontrastmittel benötigte Anzahl von Triiodaromaten. Sie verteilen sich nur im vasalen Raum und können daher diesen mit Hilfe der Röntgendiagnostik markieren.

Der lodgehalt der erfindungsgemäßen Verbindungen übersteigt mit

durchschnittlich 45 % den lodgehalt anderer lodaromaten enthaltenden

Makromolekülen - wie den in der WO 88/06162 beschriebenen Dextranderivaten (ca. 2 bis 35 %) - zum Teil um ein Mehrfaches. Die erfindungsgemäßen

Verbindungen lassen sich überraschenderweise im Gegensatz zu den in der WO 88/06162 beschriebenen Dextranderivaten in jedem Verhältnis mit Wasser mischen, was zu einer höheren Kontrastmittelkonzentration in den Blutgefäßen kurz nach Injektion führt und sich damit günstig auf die Abgrenzung der

Blutgefäße auswirkt. Der für Nebenwirkungen wie Schmerzen, Schädigungen der Blutgefäße und Herz-Kreislauf-Störungen verantwortliche Wert der Osmolalität ist deutlich verringert und nicht mehr hyperosmolar wie sonst bei Röntgenkontrastmitteln häufig beobachtet.

(Beispiel 18: 190 [mosmol/kg] bei 37 °C, 130 mg lod/ml). Die Osmolalität der erfindungsgemäßen Verbindungen ist auch deutlich geringer als die der in der WO 88/06162 beschriebenen Dextranverbindungen (440 mosmol/kg bei 90 mg lod/ml).

Die für die akute Verträglichkeit verantwortliche Chemotoxizität der

erfindungsgemäßen Verbindungen (Beispiel 18: i.v.-LD₅₀ Maus >5 g lod/kg) ist sowohl im Vergleich zu den makromolekularen Kontrastmitteln auf der Basis von Kohlenhydraten (WO 88/06162) als auch zu den in der WO 93/10824

beschriebenen Beispielen auf der Basis von Polyaminen deutlich verbessert. Im Vergleich zu den Makromolekülen auf Dextranbasis ist auch die Viskosität der erfindungsgemäßen Verbindungen deutlich geringer, was eine Bolusinjektion und damit deutlich bessere Abgrenzung der Blutgefäße gegenüber dem umliegenden Gewebe erlaubt (Beispiel 18: 2.8 mPas bei 37 °C und 100 mg lod/ml; Beispiel 10 der WO 88/06162: 26 mPas bei 37 °C und 90 mg lod/ml).

Mit den erfindungsgemäßen Verbindungen ist es gelungen, Makromoleküle mit exakt definiertem Molekulargewicht herzustellen. Solche, in ihrer Molekülgröße exakt definierten makromolekularen Kontrastmittel mit lodaromaten wiesen bislang wesentlich schlechtere Eigenschaften als die erfindungsgemäßen

Verbindungen auf. So weist zum Beispiel die im Beispiel 12 der WO 94/21600 genannte Verbindung eine wesentlich geringere Löslichkeit bei gleichzeitig wesentlich höherer Viskosität auf als die erfindungsgemäßen Verbindungen.

Bei den Makromolekülen auf Dextranbasis, z.B. Dextran 40 000

(Rheomacrodex ^®), handelt es sich um ein Gemisch von Makromolekülen verschiedener Größe, deren mittleres Molekulargewicht z.B. bei 40 000 Dalton liegt. In dieser Mischung liegen jedoch auch Dextranmoleküle vor, die größer als 50 000 bzw. 60 000 Dalton sind. Dieser Anteil an hochmolekularen

Dextranverbindungen mag zwischen 5 und 10 % der Gesamtmenge liegen. Wie aus der Literatur bekannt (G. Arturson and G. Wallenius, The renal clearance of dextran of different molecular sizes in normal humans, Scandinav. J. Clin. & Lab. Investigation 1 : 81 - 86, 1964), werden Dextranmoleküle dieser Größe nicht mehr glomerulär filtriert, und die renale Clearance dieser Moleküle ist daher nahezu null. Auch die in den Patentschriften EP 0206551 , EP 0436316 und die in den Beispielen 1, 2 und 3 der WO 93/10824 beschriebenen Verbindungen können aufgrund ihrer hochmolekularen Anteile nach i.v.-Gabe nicht vollständig

ausgeschieden werden. Von einem Diagnostikum erwartet man aber, daß es nach intravenöser Injektion in einem kurzen Zeitraum vollständig aus dem Körper eliminiert wird. Die übrigen in der WO 93/10824 beschriebenen Verbindungen verlassen dagegen den Intravasalraum zu rasch und sind somit nicht als

Perfusionsagentien geeignet. Mit den erfindungsgemäßen Verbindungen ist es überraschenderweise gelungen, jodhaltige Polymere zur Verfügung zu stellen, die den vasalen Raum nur langsam verlassen, aber gleichzeitig die Kapillaren der Niere noch passieren und damit vollständig ausgeschieden werden.

Gegenstand der Erfindung sind daher die durch die Formel I beschriebenen Verbindungen.

Aufgrund der Molekülstruktur zeigen die erfindungsgemäßen Verbindungen in den ersten 10 Minuten nach intravenöser Applikation eine Blutkonzentration, die etwa vierfach höher ist als bei den extrazellulären Röntgenkontrastmitteln wie z.B. Ultravist®. Dabei befinden sich die Kaskadenpolymere im Körper nur im

Vasalraum, d.h. das Verteilungsvolumen beträgt ca. 0,05 l/kg. Damit ist es möglich, makromolekulare Kontrastmittel mit Triiodaromaten körpergerecht herzustellen.

Die erfindungsgemäßen Kaskadenpolymere dienen als Kontrastmittel zur

Darstellung der Gefäße mittels der Röntgendiagnostik. Es ist damit möglich, ischämisches Gewebe von normalem Gewebe zu unterscheiden. Aber auch andere Schädigungen der Blut-Gewebe-Schranke sind mit diesen Verbindungen zu erkennen. Bei Entzündungen und Tumoren im Gehirn ist die Blut-Hirn- Schranke so geschädigt, daß das Kontrastmittel das kranke Gewebe infiltrieren kann und somit das kranke Gewebe mit der Röntgendiagnostik erkennbar wird. Aufgrund der Undurchlässigkeit der intakten Blut-Hirn-Schranke auch für kleine, aber hydrophile Moleküle konnte man Entzündungen und Tumore auch schon mit dem niedermolekularen Ultravist® erkennen. Wendet man in diesen Fällen aber die erfindungsgemäßen Kaskadenpolymere an, kann man die Dosis um das Vierfache reduzieren; denn die Makromoleküle verteilen sich in einem vierfach kleineren Raum, nämlich nur im Vasalraum, d.h. um gleiche Konzentrationen im Blut zu erreichen, genügt ein Viertel der Dosis. Gleichzeitig kann man mit den erfindungsgemäßen Verbindungen Perfusionsmessungen z.B. am Myokard durchführen, was mit den niedermolekularen Verbindungen wie Ultravist® nur begrenzt möglich war, da diese Moleküle rasch in den interstitiellen Raum "auslaufen". Das "Auslaufen" in das Interstitium führte bei den niedermolekularen Verbindungen auch oft zu einer Unscharfe des Bildes, welches sich durch die erfindungsgemäßen Verbindungen vermeiden läßt.

Gleichzeitig kann die Meßzeit gegenüber den niedermolekularen Verbindungen stark verlängert werden.

Ein weiterer Vorteil der vorliegenden Erfindung liegt darin, daß nunmehr

Makromoleküle mit unterschiedlich lipophilen oder hydrophilen Triiodarylresten zugänglich geworden sind. Dadurch ist die Möglichkeit gegeben, Verträglichkeit und Pharmakokinetik dieser Kaskadenpolymere durch verschieden substituierte Triiodarylreste zu steuern.

Gegenstand der Erfindung ist daher auch die Verwendung der

erfindungsgemäßen Verbindungen zur Herstellung von Röntgenkontrastmitteln.

Der Herstellung der erfindungsgemäßen iodhaltigen dendrimeren Polymere erfolgt dadurch, daß man dendrimere Polymere der allgemeinen Formel I'

A-{X-[Y-(Z-( w-ß_w )_z)_y]x} _a (I'), worin

A für einen stickstoffhaltigen Kaskadenkern der Basismultiplizität a,

X, Y unabhängig voneinander für eine direkte Bindung oder eine

Kaskadenreproduktionseinheit der Reproduktionsmultiplizität x bzw. y, Z, W unabhängig voneinander für eine Kaskadenreproduktionseinheit der

Reproduktionsmultiplizität z bzw. w,

a für die Ziffern 2 bis 12 und

x, y, z unabhängig voneinander für die Ziffern 1 bis 4 stehen,

w für die Ziffern 1 bis 8 steht und

ß für die Bindungsstelle der terminalen Amino-Gruppen der letzten

Generation der Reproduktionseinheit W stehen mit der Maßgabe, daß mindestens zwei Reproduktionseinheiten unterschiedlich sind und daß für das Produkt der Multiplizitäten gilt

16≤a ·x · y · z · w≤ 128, mit Verbindungen der allgemeinen Formel II'

T'-B' (II'),

worin

T für einen eine Carbonyl-, Thiocarbonyl-, aktivierte Carbonyl- oder eine

CHR=CR-Gruppe enthaltenden Rest steht, der durch die Reaktion in

T umgewandelt wird, wobei

R die Bedeutung eines Wasserstoffatoms oder einer Methylgruppe hat und

B' die für B angegebene Bedeutung eines Triiodaromaten hat, wobei in B enthaltene Carboxy- und Hydroxygruppen jedoch in geschützter

Form vorliegen,

umsetzt und anschließend die gegebenenfalls nicht durch die Reste Z besetzten Positionen ß mit einem den Rest -(CO)_q-U-COOH einführenden Reagenz acyliert oder alkyliert, worin

U für eine Gruppe (CH₂)_u steht

q für die Ziffern 0 oder 1 und

u für die Ziffern 1-4 steht. Als Beispiel für eine aktivierte Carbonylgruppe in den Resten T der Edukte der allgemeinen Formel II seien Anhydrid, p-Nitrophenylester, Lacton und

Säurechlorid genannt. Beispielhaft genannt für T seien die Reste COCI, NCO, NCS, NHCO-CR=CHR,

Als Säureschutzgruppen kommen niedere Alkyl-, Aryl- und Aralkylgruppen, beispielsweise die Methyl-, Ethyl-, Propyl-, n-Butyl-, t-Butyl-, Phenyl-, Benzyl-, Diphenylmethyl-, Triphenylmethyl-, bis(p-Nitrophenyi)-methylgruppe, sowie Trialkylsilylgruppen in Frage. Die Abspaltung der Schutzgruppen erfolgt nach den dem Fachmann bekannten

Verfahren

[siehe z.B. E. Wünsch, Methoden der Org. Chemie (Houben Weyl), Bd. XV / 1 , 4.

Auf-Iage 1974, S. 315 ff], beispielsweise durch Hydrolyse, Hydrogenolyse, alkalische Verseifung der Ester mit Alkali in wäßrig-alkoholischer Lösung bei Temperaturen von 0 bis 50 °C, saure Verseifung mit Mineralsäuren oder im Fall von z.B. tert.-Butylestern mit Hilfe von Trifluoressigsäure.

Als Hydroxyschutzgruppen kommen z.B. die Benzyl-, 4-Methoxybenzyl-, 4-Nitro- benzyl-, Trityl-, Diphenylmethyl-, Trimethylsilyl-, Dimethyl-t-butyl-silyl-,

Diphenyl-t-butylsilylgruppe in Frage.

Die Hydroxygruppen können auch z.B. als THP-Ether, α-Alkoxyethylether, MEM- Ether oder als Ester mit aromatischen oder aliphatischen Carbonsäuren, wie z.B. Essigsäure oder Benzoesäure, vorliegen. Im Falle von Polyolen können die Hydroxygruppen auch in Form von Ketalen mit z.B. Aceton, Acetaldehyd, Cyclohexanon oder Benzaldehyd geschützt sein. Bei gleichzeitigem Vorliegen von Carboxylgruppen können Hydroxygruppen auch durch intramolekulare Veresterung zu den entsprechenden Lactonen geschützt vorliegen.

Die Hydroxyschutzgruppen können nach den dem Fachmann bekannten Literaturmethoden, z.B. durch Hydrogenolyse, reduktive Spaltung mit Lithium/Ammoniak, Säure-behandlung der Ether und Ketaie oder Alkalibehandlung der Ester freigesetzt werden

(siehe z.B. "Protective Groups in Organic Synthesis", T.W. Greene, John Wiley and Sons 1981 ).

Die verschiedenen Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Polymere sowie die dafür benötigten Ausgangsverbindungen sind dem Fachmann prinzipiell bekannt. Sie beruhen auf der Umsetzung der endständigen Aminogruppen der jeweils gewünschten Generation der dendrimeren Polymere der allgemeinen Formel I' mit den zur Generierung der an die Triiodaromaten B gebundenen Verknüpfungsglieder T geeigneten Verbindungen der allgemeinen Formel II'. So erfolgt die Umsetzung von in Anhydridform vorliegenden N,N-bis-

(carboxymethyl)-amin- bzw. -amid-substituierten Triiodaromaten in flüssigen Reaktionsmedien wie beispielsweise Wasser, dipolaren aprotischen Lösungsmitteln wie Diethylether, Tetrahydrofuran, Dioxan, Acetonitril, N-Methylpyrrolidon, Dimethylformamid, Dimethylacetamid und dergleichen oder Gemische derselben unter Zusatz von Aminen, wie z.B. Triethylamin, N-Ethyldiisopropylamin,

N,N-Dimethyl-4-aminopyridin. Die Reaktionstemperaturen liegen zwischen ca. -80 °C und 160 °C, wobei Temperaturen von 20 °C bis 80 °C bevorzugt sind. Die Reaktionszeiten liegen zwischen 0,5 Stunden und 7 Tagen, vorzugsweise zwischen 1 Stunde und 48 Stunden.

Die Herstellung der Säureanhydride kann nach bekannten Verfahren erfolgen, z.B. nach dem im US 3,660,388 bzw. in DE 16 95 050 beschriebenen Verfahren mit Acetanhydrid in Pyridin. In bestimmten Fällen ist es jedoch vorteilhaft, die Wasserabspaltung mit Carbodiimiden in einem geeigneten Lösungsmittel, wie z.B. Dimethylformamid oder Dimethyl-acetamid, schonend vorzunehmen. Die Umsetzungen der isocyanat- bzw. isothiocyanat-substituierten Triiodaromaten erfolgt nach literaturbekannten Methoden (DOS 26 10 500, EP 0 431 838), beispielsweise in aprotischen Lösungsmitteln wie beispielsweise DMSO, DMF, DMA oder auch in Wasser bzw. wasserhaltigen Lösungsmittelgemischen bei Temperaturen von 0 - 120 °C, vorzugs-weise 20 - 75 °C. Die Reaktionszeiten liegen in der Regel zwischen 1 - 48 Stunden, vorzugsweise 3 - 24 Stunden.

Die Umsetzung von Lactonstrukturen enthaltenden Triiodaromaten mit

entsprechenden dendrimeren Polyaminen gelingt z.B. analog dem von

T. Sheradsky, Y. Knobler und M. Frankel in J. Org. Chem., 26, 2710 (1961 ) beschriebenen Verfahren zur Aminolyse von 2-Acylamino-4-butyrolactonen.

Additionsreaktionen von einen olefinischen Substituenten CHR = CR-CONH aufweisenden Triiodaromaten werden z.B. nach der in Org. Synth. Coll. Vol. VI, S. 75 (1988) angegebenen Vorschrift durchgeführt, indem man ein triiodiertes Acrylamid in polaren Lösungsmitteln wie DMF, DMA, Pyridin, Ethanol mit dem gewünschten Polyamin umsetzt.

Die Acylierungen der terminalen Aminogruppen der Polymere der allgemeinen Formel I' mit Triiodaromaten, die einen Säurechlorid-Substituenten enthalten, werden nach den dem Fachmann bekannten Verfahren, z.B. analog der Vorschrift in EP 0015867 vorgenommen. Die Umsetzung wird im allgemeinen in polaren aprotischen Lösungsmitteln wie z.B. DMF, DMA, bzw. in Gemischen von polaren aprotischen Lösungsmitteln mit Wasser, in Gegenwart eines Säurefängers, wie z.B. tertiäres Amin (z.B. Triethylamin, Trimethylamin, N,N-Dimethylaminopyridin, 1 ,5-Diazabicyclo[4.3.0]nonen-5 (DBN), 1,5-Diazabicyclo[5.4.0]undecen-5 (DBU), Alkali- oder Erdalkalicarbonat-, hydrogencarbonat oder -hydroxid (z.B.

Kaliumcarbonat, Natriumcarbonat, Lithiumhydroxid, Kalium-hydroxid) bei

Temperaturen zwischen 0 - 120 °C, vorzugsweise 20 - 80 °C, und

Reaktionszeiten von 1 - 36 Stunden durchgeführt.

Die anschließende Acylierung bzw. Alkylierung der gegebenenfalls nicht an bildgebende Reste T-B gebundenen terminalen Aminogruppen erfolgt analog literaturbekannten Vorschriften, siehe z.B. Org. Syn. Coll. Vol. 4, 5 (1963).

Die Neutralisation der Säuregruppen kann mit Hilfe anorganischer Basen (z.B. Hydroxiden, Carbonaten oder Bicarbonaten) von zum Beispiel Natrium, Kalium, Lithium, Magnesium oder Calcium und/oder organischer Basen wie unter anderem primärer, sekundärer und tertiärer Amine, wie zum Beispiel Ethanolamin, Morpholin, Glucamin, N-Methyl- und N,N-Dimethylglucamin, sowie basischer Aminosäuren, wie zum Beispiel Lysin, Arginin und Ornithin oder von Amiden ursprünglich neutraler oder saurer Aminosäuren durchgeführt werden.

Die Herstellung der für die Kopplung an die aktivierten Triiodaromaten T-B' benötigten terminale Aminogruppen tragenden Kaskaden-Polymere geht im allgemeinen aus von käuflichen bzw. nach oder analog literaturbekannten

Methoden herstellbaren stickstoffhaltigen Kaskadenstartern A(H)_a. Die

Einführung der Generationen X, Y, Z und W erfolgt nach literaturbekannten Methoden [z.B. J. March, Advanced Organic Chemistry, 3^rd ed.; John Wiley & Sons, (1985), 364 - 381] durch Acylierungs- bzw. Alkyl ierungsreaktionen mit die gewünschten Strukturen aufweisenden geschützten Aminen, die zur Bindung an den Kaskadenkern befähigte funktioneile Gruppen wie z.B. Carbonsäuren, Isocyanate, Isothiocyanate oder aktivierte Carbonsäuren (wie z.B. Anhydride, Aktivester, Säurechloride) bzw. Halogenide (wie z.B. Chloride, Bromide, lodide), Aziridin, Mesylate, Tosylate oder andere dem Fachmann bekannte Fluchtgruppen enthalten.

Es sei jedoch hier nochmals betont, daß die Unterscheidung zwischen Kaskadenkern A und Reproduktionseinheiten rein formal ist. Es kann synthetisch von Vorteil sein, daß man nicht den formalen Kaskadenstarter A(H)_a verwendet, sondern die per Definition zum Kaskadenkern gehörigen Stickstoffatome erst zusammen mit der ersten Generation einführt. So ist es z.B. zur Synthese der in Beispiel 1b) beschriebenen Verbindung vorteilhafter, nicht den formalen

Kaskadenkern Trimesinsäuretriamid mit z.B. Benzyloxycarbonylaziridin

(sechsfach) zu alkylieren, sondern Trimesinsäuretrichlorid mit Bis[2-(benzyloxy- carbonylamino)-ethyl]-amin (dreifach) umzusetzen.

Als Aminschutzgruppen seien die dem Fachmann geläufigen Benzyloxycarbonyl-, tertiär-Butoxycarbonyl-, Trifluoracetyl-, Fluorenylmethoxycarbonyl-, Benzyl- und Formylgruppe [Th. W. Greene, P.G.M Wuts, Protective Groups in Organic

Syntheses, 2nd ed, John Wiley and Sons (1991), S. 309-385] genannt. Nach Abspaltung dieser Schutz-gruppen, die ebenfalls nach literaturbekannten

Methoden erfolgt, kann die nächste gewünschte Generation in das Molekül eingeführt werden. Neben diesem aus jeweils zwei Reaktionsstufen (Alkylierung bzw. Acylierung und Schutzgruppenabspaltung) bestehenden Aufbau einer Generation ist auch mit ebenfalls nur zwei Reaktionsstufen die gleichzeitige Einführung von zwei, z.B. X-[Y]_x, oder mehrerer Generationen, z.B. X-[Y-(Z)_y]_x, möglich. Der Aufbau dieser Mehrgenerationen-Einheiten erfolgt durch Alkylierung bzw. Acylierung von die Strukturen der gewünschten Reproduktionseinheiten aufweisenden ungeschützten Aminen ("Reproduktionsamin") mit einem zweiten Reproduktionsamin, dessen Amingruppen in geschützter Form vorliegen. Die als Kaskadenstarter benötigten Verbindungen der allgemeinen Formel A(H)_a sind käuflich zu erwerben oder nach bzw. analog literaturbekannten Methoden [z.B. Houben-Weyl, Methoden der Org. Chemie, Georg-Thieme-Veriag, Stuttgart (1957), Bd. 11/1 ;

M. Micheloni et al., Inorg. Chem. (1985), 24, 3702; T.J. Atkins et al., Org. Synth., Vol. 58

(1978), 86 - 98; The Chemistry of Heterocyclic Compounds: J.S. Bradshaw et al., Aza-Crown-Macrocycles, John Wiley & Sons, N.Y. (1993)] herstellbar.

Beispielhaft angeführt seien: Tris(aminoethyl)amin [z.B. Fluka Chemie AG, Schweiz; Aldrich-Chemie,

Deutschland];

Tris(aminopropyl)amin [z.B. C. Woerner et al., Angew. Chem. Int. Ed. Engl.

(1993), 32, 1306];

Diethylentriamin [z.B. Fluka; Aldrich];

Triethylentetramin [z.B. Fluka; Aldrich];

Tetraethylenpentamin [z.B. Fluka; Aldrich];

1,3,5-Tris(aminomethyl)benzol [z.B. T.M. Garrett et al., J. Am. Chem. Soc.

(1991 ), 113, 2965];

Trimesinsäuretriamid [z.B. H. Kurihara; Jpn. Kokai Tokkyo Koho JP 04077481 ; CA 117, 162453];

1 ,4,7-Triazacyclononan [z.B. Fluka; Aldrich];

1,4,7,10,13-Pentaazacyclopentadecan [z.B. K.W. Aston, Eur. Pat. Appl. 0 524

161 ,

CA 120, 44580];

1 ,4,8,11-Tetraazacyclotetradecan [z.B. Fluka; Aldrich];

1 ,4,7,10,13,16,19,22,25,28-Decaazacyclotriacontan [z.B. A. Andres et al., J.

Chem. Soc. Dalton Trans. (1993), 3507]; 1,1,1-Tris(aminomethyl)ethan [z.B. R.J. Geue et al., Aust. J. Chem. (1983), 36, 927];

Tris(aminopropyl)-nitromethan [z.B. G.R. Newkome et al., Angew. Chem. 103. 1205 (1991) analog zu R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers,

N.Y. (1989), 419 - 420]

1,3,5,7-Adamantantetracarbonsäureamid [z.B. H. Stetter et al., Tetr. Lett. 1967. 1841];

1,2-Bis[Phenoxyethan]-3^,,3",5',5"-tetracarbonsäureamid [z.B. J.P. Collman et al.; J. Am. Chem. Soc. (1988), 110, 3477 - 86 analog zur Vorschrift für das Beispiel 1b)];

1,4,7, 10, 13,16,21, 24-Octaazabicyclo[8.8.8.]hexacosan [z.B. P.H. Smith et al., J. Org. Chem. (1993), 58, 7939]. Die Herstellung der für den Aufbau der Generationen benötigten die oben genannten funktioneilen Gruppen enthaltenden Reproduktionsamine erfolgt nach bzw. analog den im experimentellen Teil beschriebenen Vorschriften bzw. nach literaturbekannten Verfahren. Beispielhaft genannt seien:

N^α,N^ε-Di-CO-O-CH₂C₆H₅-Lysin-p-nitrophenylester [s. Vorschrift für Beispiel 1c)];

HOOC-CH₂OCH₂CO-N(CH₂CH₂NH-CO-O-CH₂C₆H₅)₂ [s. Vorschrift für Beispiel

7a)];

HOOC-CH₂N(CH₂CH₂NH-CO-O-CH₂C₆H₅)₂ [s. Vorschrift für Beispiel 9e)];

HOOC-CH₂CH₂CO-N(CH₂CH₂NH-COCF₃)₂ [herzustellen nach Vorschrift für das

Beispiel 7a), indem man anstelle von Bis(benzyloxycarbonylaminoethyl)amin von

Bis(trifluoracetylaminoethyl)amin und anstelle von Diglycolsäureanhydrid von

Bernsteinsäureanhydrid ausgeht];

HOOC-CH₂OCH₂CONH-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂NH-CO-O-CH₂C₆H₅)₂]₂

[herzustellen nach Vorschrift für Beispiel 7a), indem man anstelle von

Bis(benzyloxycarbonylaminoethyl)amin von dem in Beispiel 9b) beschriebenen

Amin ausgeht];

O=C=N-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂NH-CO-O-CH₂C₆H₅)₂]₂ [s. Vorschrift für Beispiel 9c)]

herzustellen nach Vorschrift für Beispiel 15c), indem man anstelle von Diglycolsäureanhydrid mit Triphosgen analog der Vorschrift für Beispiel 9c) umsetzt

N-Benzyloxycarbonyl-aziridin siehe Vorschrift für Beispiel 13a) N-Benzyloxycarbonyl-glycin käuflich bei z.B. Bachern California herzustellen nach C.J. Cavallito et al., J. Amer. Chem. Soc. 1943, 65, 2140, indem man anstelle von Benzylchlorid von N-CO-O-CH₂C₆H₅-(2-Bromethyl)amin [A.R. Jacobson et al., J. Med. Chem. (1991), 34, 2816] ausgeht.

Die bei den verschiedenen Verfahren eingesetzten iodierten Aromaten sind bekannt bzw. leicht aus bekannten generierbar.

So werden z.B. in den Deutschen Offenlegungsschriften DE 2928417 und

DE 29 09439 iodierte Aromaten beschrieben, die leicht mit z.B. Thionylchlorid zu den entsprechenden Säurechloridgruppen-haltigen Aromaten umgesetzt werden.

Isocyanat- bzw. isothiocyanat-substituierte Triiodaromaten können durch

Umsetzung der entsprechenden Anilinderivate mit Phosgen bzw. Thiophosgen in aprotischen Lösungsmitteln wie z.B. 1 ,2-Dichlorethan, Dichlormethan, Pyridin, Dimethylsulfoxid, Tetrahydrofuran, Dioxan, Diethylether, Essigsäureethylester (Literatur: DOS 2541 491) hergestellt werden.

Zu einem Lactonrest enthaltenden Triiodaromaten gelangt man zum Beispiel durch Umsetzung eines Triiodbenzoylchlorid-Derivats mit 2-Amino-4-butyrolacton- Hydrochlorid. Eine Umsetzung dieser Art wird z.B. von J. Brennan und

P.J. Murphy in Tetrahedron Lett., 29 (17), 2063 (1988) beschrieben.

Triiodaromaten mit einem olefinischen Substituenten CHR=CR-CONH können analog den Angaben in WO 85/01727 erhalten werden. Weitere aromatische Reste sind wie in M. Sovak; Radiocontrast Agents,

Handbook of Experimental Pharmacology Vol. 73 (1984), Springer-Verlag, Berlin - Heidelberg - New York - Tokyo oder in der Europäischen Patentschrift

EP 0 015 867, beschrieben, herstellbar.

Ein weiterer Gegenstand der Erfindung sind pharmazeutische Mittel, die mindestens eine der erfindungsgemäßen Verbindungen enthalten.

Die Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Herstellung dieser Mittel, das dadurch gekennzeichnet ist, daß die schattengebende Substanz mit den in der Galenik üblichen Zusätzen und Stabilisatoren in eine für die enterale bzw.

parenterale Applikation geeignete Form gebracht wird. Die pharmazeutische Zubereitung kann im allgemeinen beliebig den spezifischen Bedürfnissen des Verwenders angepaßt werden. Die Konzentration der neuen

Röntgenkontrastmittel im wäßrigen Medium richtet sich ganz nach der röntgendiagnostischen Methode. Der lodgehalt der Lösungen liegt üblicherweise im Bereich zwischen 50 bis 450 mg/ml, vorzugsweise 70 bis 200 mg/ml.

Die resultierenden Mittel werden anschließend gewünschtenfalls hitzesterilisiert. Sie werden in Abhängigkeit des lodgehalts und der verwendeten

röntgendiagnostischen Methode bzw. Fragestellung in der Regel in einer Dosis von 30 mg lod/kg bis 2000 mg lod/kg appliziert.

Die Applikation der wäßrigen Röntgenkontrastmittel-Lösung kann enteral oder parenteral, so oral, rektal, intravenös, intraarteriell, intravasal, intracutan, subcutan (Lymphographie), subarachnoidal (Myelographie) erfolgen.

Geeignete Zusätze sind beispielsweise physiologisch unbedenkliche Puffer (wie z.B. Tromethamin, Bicarbonat, Phosphat, Citrat), Stabilisatoren (wie z.B. DTPA, Natrium-edetat, Calcium-dinatriumedetat), oder - falls erforderlich - Elektrolyte (wie z.B. Natriumchlorid) oder - falls erforderlich - Antioxidantien (wie z.B.

Ascorbinsäure) oder auch Substanzen zur Anpassung der Osmolalität (wie z.B. Mannit, Glucose).

Sind für die enterale Verabreichung oder andere Zwecke Suspensionen oder Lösungen der erfindungsgemäßen Mittel in Wasser oder physiologischer Salzlösung erwünscht, werden sie mit einem oder mehreren in der Galenik üblichen Hilfsstoffen (z.B. Methylcellulose, Lactose, Mannit) und/oder Tensiden (z.B. Lecithine, Tweens®, Myrj® und/oder Aroma-stoffen zur Geschmackskorrektur (z.B. ätherischen Ölen) gemischt.

Die nachfolgenden Beispiele dienen der näheren Erläuterung der Erfindungsgegenstände, ohne sie auf diese beschränken zu wollen.

Beispiele

Beispiel 1

Tetracosakis-{3-(3-natriumcarboxylatopropionylamino)-5-(2,3- dihydoxypropylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des N,N,N',N',N",N"- Hexakis-[2-(trilysyl-amino)-ethyl]-trimesinsäuretriamids a) Bis[2-(benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-amin

51 ,5 g (500 mmol) Diethylentriamin und 139 ml (1 mol) Triethylamin werden in Dichlormethan gelöst und bei -20°C mit 161 g Benzylcyanformiat (Fluka) in Dichlormethan versetzt und anschließend über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wird im Abzug eingedampft, der

Rückstand in Diethylether aufgenommen, die organische Phase mit

Natriumcarbonatlösung gewaschen und mit Natriumsulfat getrocknet. Das Filtrat wird mit Hexan versetzt, der Niederschlag abfiltriert und getrocknet.

Ausbeute: 163,4 g (88 % d. Th.)

b) N,N,N',N',N",N"-Hexakis[2-(benzyloxycarbonylamino)-ethyl]- trimesinsäuretriamid

13,27 g (50 mmol) Trimesinsäure-trichlorid (Aldrich) und 34,7 ml (250 mmol) Triethylamin werden in Dimethylformamid (DMF) gelöst und bei 0°C mit 65,0 g (175 mmol) des in Beispiel 1a beschriebenen Amins versetzt und anschließend über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Ethylacetat an Kieselgel chromatographiert.

Ausbeute: 39,4 g (62 % d. Th.)

c) N^α, N^ε-Bis-(N,N'-dibenzyloxycarbonyl-lysyl)-lysin, geschütztes 'Tri-Lysin"

3,6 g (20 mmol) Lysin-Hydrochlorid und 6,95 ml (50 mmol) Triethylamin werden in DMF gelöst, mit 26,8 g (50 mmol) N^α, N^ε-Dibenzyloxycarbonyl-Lysin-p- nitrophenylester (Bachern) versetzt und 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wird im Vakuum eingedampft, der Rückstand in Ethylacetat aufgenommen und mit verdünnter Salzsäure ausgeschüttelt. Die organische Phase wird mit Natriumsulfat getrocknet, das Lösungsmittel eingedampft und der Rückstand mit Ethylacetat/Ethanol in einem Stufengradienten chromatographiert.

Ausbeute: 10,7 g (57 % d. Th.)

Analyse:

ber.: C 63,95 H 6,65 N 8,95

gef.: C 63,63 H 6,69 N 8,93

d) Vollgeschütztes Benzyloxycarbonyl-24-Polyamin auf der Basis des

N,N,N^,,N^,,N",N"-Hexakis[2-(trilysyl-amino)-ethyl]-trimesinsäuretriamids

1,27 g (1 mmol) des im Beispiel 1b beschriebenen Hexa-Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 60 Minuten wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene Hexa-amin-hydrobromid mit Diethylether gewaschen, im Vakuum getrocknet und ohne weitere Reinigung in die unten beschriebene Reaktion eingesetzt.

Ausbeute: 0,95 g (quantitativ)

7,0 g (7,5 mmol) des in Beispiel 1c beschriebenen geschützten 'Tri-Lysins", 1 ,2 g (7,5 mmol) 1-Hydroxybenzotriazol und 2,4 g (7,5 mmol) 2-(1 H-Benzotriazol-1-yl)- 1,1,3,3-tetramethyluronium tetrafluorborat (TBTU; Peboc Limited, UK) werden in DMF gelöst und 15 Minuten gerührt. Diese Lösung wird anschließend mit 5,16 ml (30 mmol) N-Ethyldiisopropylamin und mit 0,95 g (1 mmol) des oben

beschriebenen Hexa-amin-hydrobromids versetzt und über Nacht bei

Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Ethylacetat/Ethanol (2:1 ) an Kieselgel chromatographiert. e) 5-(3-Ethoxycarbonylpropionylamino)-2,4,6-triiodisophthalsäure-N-(2,3- diacetoxypropyl)-amid-chlorid

Zu einer unter Feuchtigkeitsausschluß gerührten Suspension von 73,4 g (100 mmol) 5-Amino-2,4,6-triiodisophthalsäure-N-(2,3-diacetoxypropyl)-amid-chlorid (EP 0308364) in 500 ml wasserfreiem Dioxan werden 24,7 g (150 mmol)

Bemsteinsäurechlorid-monoethylester bei Raumtemperatur zugegeben. Der. Ansatz wird mehrere Stunden am Rückfluß gekocht, bis laut

Dünnschichtchromatographie kein Edukt mehr nachweisbar ist; dann wird eingedampft, der Rückstand in Dichlormethan aufgenommen und mit gesättigter wäßriger Natriumhydrogencarbonatlösung ausgeschüttelt. Die organische Phase wird nach Trocknen über wasserfreiem Magnesiumsulfat eingedampft und der Rückstand aus Essigsäureethylester/tert.-Butylmethylether umkristallisiert.

Ausbeute: 74,8 g (86,7 % d. Th.) farblose Kristalle

f) Tetracosakis-{3-(3-natriumcarboxylatopropionylamino)-5-(2,3- dihydoxypropylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des N,N,N',N',N",N"- Hexakis-[2-(trilysyl-amino)-ethyl]-trimesinsäuretriamids

4,20 g (0,7 mmol) des in Beispiel 1d beschriebenen Poly-Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 24-Amin-hydrobromid mit Diethylether gewaschen und im Vakuum getrocknet. Der Rückstand wird anschließend in Wasser aufgenommen und durch Zugabe von 1 N Natronlauge auf pH 9,5 eingestellt. Diese Lösung wird zu einer bei Raumtemperatur mechanisch gerührten Lösung von 21,8 g (25,2 mmol) des unter Beispiel 1e hergestellten Säurechlorids und 4,2 ml (30 mmol) Triethylamin in 200 ml N,N-Dimethylformamid langsam zugetropft. Der Ansatz wird 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 100 ml 2 n Natronlauge versetzt und zwei Stunden bei 50°C gerührt. Der Ansatz wird nach Abkühlen auf Raumtemperatur mit 2 n Salzsäure neutralisiert, dann am Vakuum vollständig eingedampft, in Wasser aufgenommen, filtriert und anschließend einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose- Membranfilter (Porengröße 0,45 μm, Sartorius) filtriert und gefriergetrocknet. Ausbeute: 12,5 g (87,2 % d. Th.) farbloses Lyophilisat

Beispiel 2

Tetracosakis-{3.5-di-(natriumcarboxylatomethylcarbamoyl)-2,4,6- triiodphenylcarbamoyl}-Derivat des 24-Amins N,N,N-Tris-[2-(N^α,N^ε-bis-{trilysyl}- lysylamino)-ethyl]-amins a) N, N, N-Tris-[2-(N^α, N^ε-dibenzyloxycarbonyl-lysylamino)-ethyl]-amin

1,46 g (10 mmol) Tris-(2-aminoethyl)-amin und 21,4 g (40 mmol) N^α,N^ε- Dibenzyloxycarbonyl-Lysin-p-nitrophenylester werden in DMF gelöst und über

Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wird im

Vakuum eingedampft, der Rückstand mit Diethylether verrührt, der Niederschlag abgesaugt und aus Ethylacetat umkristallisiert.

Ausbeute: 12,55 g (94 % d. Th.)

b) Vollgeschütztes Benzyloxycarbonyl-24-Polyamin auf der Basis des N,N,N-Tris- [2-(N^α, N^ε-bis-{trilysyl}-lysylamino)-ethyl]-amins

1,33 g (1 mmol) des in Beispiel 2a beschriebenen Hexa-Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 60 Minuten wird mit Diethylether die begonnene

Fällung vervollständigt, das entstandene Hexamin-hydrobromid mit Diethylether gewaschen, im Vakuum getrocknet und ohne weitere Reinigung in die weiter unten beschriebene Reaktion eingesetzt.

Ausbeute: 1 ,02 g (quantitativ)

7,0 g (7,5 mmol) des in Beispiel 1 c beschriebenen N^α,N^ε-Bis-(N,N'- dibenzyloxycarbonyl-lysyl)-lysins (geschütztes "Tri-Lysin") werden analog zu Beispiel 1d mit TBTU und N-Hydroxybenzotriazol aktiviert und in analoger Weise mit 1 ,02 g (1 mmol) des oben beschriebenen N,N,N-Tris[2-(lysylamino)ethyl]- amin-hexahydrobromids und 5,16 ml (30 mmol) N-Ethyldiisopropylamin umgesetzt und in gleicher Weise, wie dort beschrieben, aufgearbeitet.

Ausbeute: 4,42 g (73 % d. Th.) c) 5-Amino-2,4,6-triiodisophthalsäure-N,N'-bis-(methoxycarbonylmethyl)-diamid (EP 0129932) Eine Lösung von 59,6 g (100 mmol) 5-Amino-2,4,6-triiodisophthalsäuredichlorid in 300 ml N.N-Dimethylformamid wird mit 27,6 g (220 mmol) Glycinmethylester- Hydrochlorid und 61 ,0 ml (440 mmol) Triethylamin versetzt. Es entsteht eine Suspension, die über Nacht bei Raumtemperatur unter Argon gerührt wird. Nach Eindampfen der Suspension am Vakuum wird der Rückstand aus Methanol umkristallisiert.

Ausbeute: 66,3 g (94,6 % d. Th.)

d) 5-lsocyanato-2,4,6-triiodisophthalsäure-N,N^,-bis-(methoxycarbonylmethyl)- diamid

Zu einer bei 60°C Ölbadtemperatur unter Argonatmosphäre gerührten

Suspension von 20,7 g (29,5 mmol) des unter Beispiel 2c hergestellten

Anilinderivates in 200 ml 1 ,2 -Dichlorethan werden 147 ml (73,8 mmol) einer zweinormalen toluolischen Phosgenlösung und 2 ml N,N-Dimethylformamid zugegeben. Nach vollständiger Umsetzung des Anilinderivates wird der Ansatz am Vakuum eingedampft, der Rückstand mit wasserfreiem Essigsäureethylester ausgerührt unter Stickstoffatmosphäre abgesaugt und am Ölpumpenvakuum getrocknet.

Ausbeute: 21 ,5 g (100 % d. Th.) hellbeiger Feststoff e) Tetracosakis-{3.5-di-(natriumcarboxylatomethylcarbamoyl)-2,4 ,6- triiodphenylcarbamoyl}-Derivat des 24-Amins N,N,N-Tris-[2-(N^α,N^ε-bis-{trilysyl}- lysylamino)-ethyl]-amins

4,00 g (0,66 mmol) des in Beispiel 2b beschriebenen 24-Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 24-Amin-hydrobromid mit Diethylether

gewaschen und im Vakuum getrocknet. Der Feststoff wird in eine bei

Raumtemperatur unter Argonatmosphäre gerührte Lösung von 17,3 g (23,8 mmol) des unter Beispiel 2d hergestellten Isocyanats in 200 ml wasserfreiem

Dimethylsulfoxid und 3,3 ml (24 mmol) Triethylamin eingerührt. Der Ansatz wird 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 25 ml 2 n Natronlauge versetzt und 2 Stunden bei 50ºC gerührt. Die Lösung wird nach Abkühlen auf Raumtemperatur mit 2 n Salzsäure neutralisiert und am Vakuum weitgehend eingedampft; der Rückstand wird in Wasser aufgenommen, filtriert und dann einer Ultrafiitration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose-Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und

gefriergetrocknet.

Ausbeute: 10,9 g (80,0 % d. Th.) gelbliches Lyophilisat

Beispiel 3

Tetracosakis-{3,5-bis-[N,N-bis-(natriumcarboxylatomethyl)-carbamoyl]-2,4,6- triiodphenylcarbamoyl}-Derivat des N,N,N^,,N',N",N"-Hexakis-[2-(trilysyl-amino)- ethyl]-trimesinsäuretriamids a) 5-Amino-2,4,6-triiodisophthalsäure-N,N,N',N'-tetrakis- (methoxycarbonylmethyl)-diamid Eine Lösung von 47,2 g (79,2 mmol) 5-Amino-2,4,6-triiodisophthalsäuredichlorid in 250 ml N,N-Dimethylformamid wird mit 34,4 g (174 mmol)

Iminodiessigsäuredimethylester-Hydrochlorid (Synthese nach Dubsky,

Graenacher, Chem. Ber. 50, 1693(1917)) und 48,2 ml (348 mmol) Triethylamin versetzt. Es entsteht eine Suspension, die über Nacht bei Raumtemperatur unter Argon gerührt wird. Nach Eindampfen der Suspension am Vakuum wird der Rückstand in Dichlormethan aufgenommen und mit wäßriger

Natriumhydrogencarbonatlösung ausgeschüttelt. Die organische Phase wird mit wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und nach Einengen an

Kieselgel 60 (Merck, Darmstadt) chromatographiert (Fließmittel:

Dichlormethan/Methanol). Die Produktfraktionen werden im Vakuum zur Trockne eingedampft.

Ausbeute: 57,1 g (85, 3 % d. Th.) farbloser Feststoff

b) 5-lsocyanato-2,4,6-triiodisophthalsäure-N,N,N',N'-tetrakis- (methoxycarbonylmethyl)-diamid

Zu einer bei 60°C Ölbadtemperatur unter Argonatmosphäre gerührten Lösung von 30,6 g (36,2 mmol) des unter Beispiel 3a) hergestellten Anilinderivates in 300 ml 1 ,2-Dichlorethan werden 45,3 ml (90,5 mmol) einer zweinormalen toluolischen Phosgenlösung und 3 ml N,N-Dimethylformamid zugegeben. Nach vollständiger Umsetzung des Anilinderivates wird der Ansatz am Vakuum eingedampft, der Rückstand mit tert.-Butylmethylether ausgerührt, unter Stickstoffatmosphäre abgesaugt und am Ölpumpenvakuum getrocknet.

Ausbeute: 30,3 g (96,2 % d. Th.) rötlicher Feststoff

c) Tetracosakis-{3,5-bis-[N,N-bis-(natriumcarboxylatomethyl)-carbamoyl]-2,4,6- triiodphenylcarbamoyl}-Derivat des N,N,N^,,N',N",N"-Hexakis-[2-(trilysyl-amino)- ethyl]-trimesinsäuretriamids

5,50 g (0,92 mmol) des nach Beispiel 1d hergestellten Poly- Benzyloxycarbonylamins werden wie in Beispiel 1f beschrieben in das

entsprechende Polyamin-Hydrobromid überführt. Dieses gibt man zu einer bei Raumtemperatur unter Argonatmosphäre gerührten Lösung von 28,8 g (33,1 mmol) des unter Beispiel 3b hergestellten Isocyanats und 6,93 ml (50 mmol) Triethylamin in 250 ml wasserfreiem Dimethylsulfoxid zu. Der Ansatz wird 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 70 ml 2 n Natronlauge versetzt und zwei Stunden bei 50°C gerührt. Die Lösung wird nach Abkühlen auf Raumtemperatur mit 2 n Salzsäure neutralisiert und dann einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose- Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und gefriergetrocknet. Ausbeute: 19,2 g (85,7 % d. Th.) gelbliches Lyophilisat

Beispiel 4

Tetracosakis-{3-natriumcarboxylatoformylamino-5-(2,3- dihydroxypropylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des N,N,N',N',N",N"- Hexakis-[2-(trilysyl-amino)-ethyl]-trimesinsäuretriamids a) 5-(Ethoxycarbonylformylamino)-2,4,6-triiodisophthalsäure-N-(2,3- diacetoxypropyl)-amid-chlorid Zu einer unter Feuchtigkeitsausschluß gerührten Suspension von 73,4 g (100 mmol) 5-Amino-2,4,6-triiodisophthalsäure-N-(2,3-diacetoxypropyl)-amid-chlorid (EP 0308364) in 300 ml wasserfreiem Dioxan werden 20,5 g (150 mmol)

Oxalsäurechlorid-monoethylester bei Raumtemperatur zugegeben. Der Ansatz wird mehrere Stunden am Rückfluß gekocht bis laut Dünnschichtchromatographie kein Edukt mehr nachweisbar ist, dann wird eingedampft, der Rückstand in Dichlormethan aufgenommen und mit gesättigter wäßriger

Natriumhydrogencarbonatlösung ausgeschüttelt. Die organische Phase wird nach Trocknen über wasserfreiem Magnesiumsulfat eingedampft und der Rückstand aus Essigsäureethylester/tert.-Butylmethylether umkristallisiert.

Ausbeute: 73,9 g (88,6 % d. Th.) farblose Kristalle

b) Tetracosakis-{3-natriumcarboxylatoformylamino-5-(2,3- dihydroxypropylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des N,N,N',N',N",N" Hexakis-[2-(trilysyl-amino)-ethyl]-trimesinsäuretriamids

5,99 g (1 ,00 mmol) des nach Beispiel 1d hergestellten Poly- Benzyloxycarbonylamins werden wie in Beispiel 1f beschrieben in das

entsprechende Polyamin-Hydrobromid überführt. Dieses gibt man in 40 ml Wasser zu einer bei Raumtemperatur mechanisch gerührten Lösung von 30,0 g (36,0 mmol) des unter Beispiel 4a hergestellten Säurechlorids und 10,4 ml (75 mmol) Triethylamin in 200 ml N,N-Dimethylformamid zu. Der Ansatz wird 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 70 ml 2 n Natronlauge versetzt und zwei Stunden bei 50°C gerührt. Die Lösung wird nach Abkühlen auf Raumtemperatur mit 2 n Salzsäure neutralisiert und im Vakuum eingedampft; der Rückstand wird in Wasser aufgenommen, filtriert und einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose- Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und gefriergetrocknet. Ausbeute: 17,5 g (88,4 % d.Th.) farbloses Lyophilisat

Beispiel 5

Tetracosakis-{3-(4-natriumcarboxylatomethoxyacetylamino)-5-(2,3- dihydroxy-propylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des

N,N,N',N',N",N"-Hexakis-[2-(trilysyl-amino)-ethyl]-trimesinsäuretriamids a) Diglykolsäurechlorid-monoisopropylester

Zu 24,0 g (400 mmol) wasserfreiem Isopropanol werden unter

Feuchtigkeitsausschluß 46,4 g (400 mmol) Diglykolsäureanhydrid gegeben. Die Temperatur der exothermen Reaktion wird mit einem Wasserbad auf 90 - 100°C moderiert. Nach 1 Stunde läßt man das Reaktionsgemisch abkühlen und versetzt es mit 32,0 ml (440 mmol) Thionylchlorid und 0,1 ml N,N-Dimethylformamid und läßt es 15 Stunden bei Raumtemperatur und 1 Stunde bei 50°C rühren. Die Titelverbindung wird durch Destillation bei 0,01 Torr und einer Siedetemperatur 100 - 101 °C gewonnen.

Ausbeute: 67,6 g (86,8 % d.Th.) farblose Flüssigkeit

Gaschromatographie (100 %-Methode): Gehalt 96,4 %

b) 5-[4-(2-Methylethyioxycarbonyl)-3-oxabutyrylamino]-2,4,6-triiodisophthalsäure- N-(2,3-diacetoxypropyl)-amid-chlorid

Zu einer unter Feuchtigkeitsausschluß gerührten Suspension von 73,4 g (100 mmol) 5-Amino-2,4,6-triiodisophthalsäure-N-(2,3-diacetoxypropyl)-amid-chlorid (EP 0308364) in 500 ml wasserfreiem Dioxan werden 29,2 g (150 mmol) das nach Beispiel 5a) hergestellten Säurechlorids bei Raumtemperatur zugegeben. Der Ansatz wird mehrere Stunden am Rückfluß gekocht, bis laut

Dünnschichtchromatographie kein Edukt mehr nachweisbar ist, dann wird eingedampft, der Rückstand in Dichlormethan aufgenommen und mit gesättigter, wäßriger Natriumhydrogencarbonatlösung ausgeschüttelt. Die organische Phase wird nach Trocknen über wasserfreiem Magnesiumsulfat eingedampft und der Rückstand aus Essigsäureethylester/tert.-Butylmethylether umkristallisiert.

Ausbeute: 68,2 g (76,4 % d. Th.) farblose Kristalle c) Tetracosakis-{3-(4-natriumcarboxylatomethoxyacetylamino)-5-(2,3- dihydroxy-propylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des N,N,N',N',N",N" Hexakis-[2-(trilysyl-amino)-ethyl]-trimesinsäuretriamids

8,32 g (1 ,39 mmol) des nach Beispiel 1d hergestellten Poly- Benzyloxycarbonylamins werden wie in Beispiel 1f beschrieben in das

entsprechende Polyamin-Hydrobromid überführt. Dieses gibt man in 50 ml Wasser zu einer bei Raumtemperatur mechanisch gerührten Lösung von 44,6 g (50,0 mmol) des unter Beispiel 5b hergestellten Säurechlorids und 13,9 ml (100 mmol) Triethylamin in 200 ml N,N-Dimethylformamid zu. Der Ansatz wird 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 100 ml 2 n Natronlauge versetzt und zwei Stunden bei 50°C gerührt. Die Lösung wird nach Abkühlen auf Raumtemperatur mit 2 n Salzsäure neutralisiert und am Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird in Wasser aufgenommen, filtriert und einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose- Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und gefriergetrocknet. Ausbeute: 25,3 g (87,5 % d.Th.) farbloses Lyophilisat

Beispiel 6

Tetracosakis-{3-[N,N-bis-(natriumcarboxylatomethyl)-carbamoyl)]-5- methoxyacetylamino-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des N,N,N',N',N",N"-Hexakis-[2- (trilysyl-amino)-ethyl]-trimesinsäuretriamids a) 5-Methoxyacetylamino-2,4,6-triiodisophthalsäure-N,N-bis- (methoxycarbonylmethyl)-amid-chlorid

Eine Lösung von 66,8 g (100 mmol) 5-Methoxyacetylamino-2,4,6- triiodisophthalsäuredichlorid (EP 0015867) in 300 ml wasserfreiem N,N- Dimethylformamid wird mit 21 ,75 g (110 mmol) Iminodiessigsäuredimethylester- Hydrochlorid (Synthese nach Dubsky, Graenacher, Chem. Ber. 50, 1693(1917)) und 30,5 ml (220 mmol) Triethylamin versetzt. Es entsteht eine Suspension, die 14 Stunden bei Raumtemperatur unter Argon gerührt wird. Der Ansatz wird in Dichlormethan aufgenommen, einmal mit Wasser, zweimal mit zweinormaler wäßriger Zitronensäure und einmal mit wäßriger Natriumhydrogencarbonatlösung ausgeschüttelt. Die organische Phase wird über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Durch Zutropfen von tert.-Butylether in die konzentrierte Lösung läßt sich die Titelverbindung als kristalliner Feststoff fällen, der abgesaugt und im Vakuum getrocknet wird.

Ausbeute: 57,4 g (72,4 % d.Th.)

b) Tetracosakis-{3-[N,N-bis-(natriumcarboxylatomethyl)-carbamoyl)]-5- methoxyacetylamino-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des N,N,N',N',N",N"-Hexakis-[2- (trilysyl-amino)-ethyl]-trimesinsäuretriamids

3,00 g (0,50 mmol) des nach Beispiel 1d hergestellten Poly- Benzyloxycarbonylamins werden wie in Beispiel 1f beschrieben in das

entsprechende Polyamin-Hydrobromid überführt. Dieses gibt man in 20 ml Wasser zu einer bei Raumtemperatur mechanisch gerührten Lösung von 15,0 g (18,0 mmol) des unter Beispiel 6a hergestellten Säurechlorids und 6,9 ml (50 mmol) Triethylamin in 100 ml ml N,N-Dimethylformamid zu. Der Ansatz wird 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 20 ml 2 n Natronlauge versetzt und zwei Stunden bei 50°C gerührt. Die Lösung wird nach Abkühlen auf

Raumtemperatur mit 2 n Salzsäure neutralisiert und am Vakuum engedampft. Der Rückstand wird in Wasser aufgenommen und einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden.

Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose-Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und gefriergetrocknet.

Ausbeute: 9,12 g (85,6 % d.Th.) farbloses Lyophilisat

Beispiel 7

Dotriakontacontakis-{N-[3,5-di-facetylamino)-2,4,6-triiodbenzoyl]-N- (natriumcarboxylato-methyl)-glycyl}-Derivat des deblockierten 32-Amins aus Beispiel 7c

a) N, N'-Bis-(benzyloxycarbonyl)-3-[carboxymethoxyacetyl]-3-azapentan-1,5- diamin

37,14 g (100 mmol) des in Beispiel 1a beschriebenen Bis-(benzyloxycarbonyl- aminoethyl) amins werden in DMF gelöst, im Eisbad mit 17,4 g (150 mmol) Diglykolsäureanhydrid (Janssen Chimica) und 21 ml (150 mmol) Triethylamin versetzt und anschließend über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird im Vakuum eingedampft, der Rückstand in Ethylacetat aufgenommen und mit verdünnter Salzsäure ausgeschüttelt. Die organische Phase wird mit

Natriumsulfat getrocknet und nach Filtration vom Trocknungsmittel durch Zugabe von Hexan kristallisiert.

Ausbeute: 41 ,4 g (85 % d. Th.)

b) N,N',N",N"'-Tetrakis-{8-(Benzyloxycarbonylamino)-6-[2- (benzyloxycarbonylamino)ethyl]-5-oxo-3-oxaoctanoyl}-cyclen

345 mg (2 mmol) 1 ,4,7,10-Tetraazacyclododecan (Cyclen; Fluka) werden mit Toluol azeotrop entwässert. Zu der abgekühlten Lösung von Cyclen in Toluol wird bei Raumtemperatur eine Lösung von 4,88 g (10 mmol) N,N'-Bis- (benzyioxycarbonyl)-3-[carboxymethoxyacetyl]-3-azapentan-1 ,5-diamin (Beispiel 7a) in Tetrahydrofuran (THF) sowie 2,47 g (10 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl- 1 ,2-dihydrochinolin (EEDQ; Fluka) zugegeben und über Nacht gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wird das Produkt durch Zugabe von Hexan ausgefällt, vom Lösungsmittel abdekantiert und noch einmal aus THF/Hexan und anschließend aus THF/Toluol umgefällt. Man erhält nach Trocknung im Vakuum 2,78 g (68 % d. Th.) eines blaßgelben Feststoffs.

c) Vollgeschütztes Benzyloxycarbonyl-32-Polyamin auf der Basis des aus

N,N^,,N",N'"-Tetrakis-{8-Benzyloxycarbonylamino)-6-[2-

(benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-5-oxo-3-oxaoctanoyl}-cyclen mit N^α, N^ε-Bis- (lysyl)-Lysin-('Tri-Lysin") kondensierten 32-Amins

2,05 g (1 mmol) des im Beispiel 7b beschriebenen Okta-Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 90 Minuten wird mit Diethylether die begonnende Fällung vervollständigt, das entstandene Okta-amin-hydrobromid mit Diethylether gewaschen, im Vakuum getrocknet und ohne weitere Reinigung in die weiter unten beschriebene Reaktion eingesetzt.

Ausbeute: 1 ,6 g (quantitativ)

9,4 g (10 mmol) des in Beispiel 1c beschriebenen geschützten "Tri-Lysins", 1 ,5 g (10 mmol) 1-Hydroxybenzotriazol und 3,2 g (10 mmol) 2-(1 H-Benzotriazol-1-yl)- 1,1,3,3-tetramethyluronium tetrafluorborat (TBTU; Peboc Limited, UK) werden in DMF gelöst und 15 Minuten gerührt. Diese Lösung wird anschließend mit 5,16 ml (30 mmol) N-Ethyldiisopropylamin und mit 1 ,6 g (1 mmol) des oben

beschriebenen Okta-amin-hydrobromids versetzt und über Nacht bei

Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Dichlormethan/Methanol (10:1 ) an Kieselgel chromatographiert.

Ausbeute: 6,0 g (72 % d. Th.) d) 3,5-Dinitrobenzoyl-N,N-bis-(carboxymethyl)-amid 133,1 g (1 ,00 mol) Iminodiessigsäure werden in 1,50 I zweinormaler Natronlauge gelöst und unter mechanischem Rühren mit 230,6 g (1 ,00 mol) 3,5- Dinitrobenzoylchlorid versetzt. Es entsteht eine dunkelrote Lösung, aus der die Titelverbindung durch Ansäuern mit halbkonzentrierter Salzsäure gefällt wird. Der Niederschlag wird abgesaugt, mit Wasser gewaschen und im Vakuum getrocknet. Ausbeute: 260,5 g (79,6 % d. Th.) farblose Kristalle

e) 3,5-Diaminobenzoyl-N,N-bis-(carboxymethyl)-amid 32,7 g (100 mmol) der unter Beispiel 7d beschriebenen Dinitroverbindung werden in 500 ml Methanol vorgelegt, mit 1 ,6 g Palladium-Katalysator (10 % Palladium auf Aktivkohle) versetzt und unter Schütteln mit Wasserstoff hydriert. Nach Aufnahme der theoretischen Menge Wasserstoff wird vom Katalysator abfiltriert und zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird ohne Reinigung weiter umgesetzt.

Ausbeute: 26,7 g (100 % d. Th.) farbloser Feststoff

f) 3,5-Diamino-2,4,6-triiodbenzoyl-N,N-bis-(carboxymethyl)-amid 24,7 g (92,4 mmol) der unter Beispiel 7e hergestellten Verbindung werden in 200 ml Wasser und mit 150 ml einer zweinormalen lodmonochlorid-Lösung innerhalb von 30 Minuten versetzt. Das Gemisch wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und der gebildete Niederschlag abgesaugt. Der Feststoff wird in Wasser aufgeschlämmt, mit 10 g Natriumhydrogensulfit behandelt und erneut isoliert. Das Material wird in 300 ml Wasser durch Zugabe von 30 %-iger Natronlauge bei pH 8 gelöst, mit 2 g Aktivkohle versetzt, 5 Stunden gerührt und filtriert. Durch Ansäuern des Filtrats mit konzentrierter Salzsäure bildete sich ein Niederschlag, der abgesaugt und im Vakuum getrocknet wird.

Ausbeute: 40,1 g (67,3 % d. Th.) farbloser Feststoff

g) 3,5-Bis-(acetylamino)-2,4,6-triiodbenzoyl-N,N-bis-(carboxymethyl)-amid

38,6 g (59,9 mmol) der unter Beispiel 7f hergestellten Verbindung werden in ein Gemisch aus 180 ml Essigsäureanhydrid und 0,5 ml konzentrierter Schwefelsäure eingetragen. Nach Rühren über Nacht bei Raumtemperatur wird Diethylether zugegeben und der gebildete Feststoff abfiltriert. Der Feststoff wird in 300 ml . Wasser durch Zugabe von 30 %-iger Natronlauge bei pH 9 gelöst und

anschließend durch Ansäuern mit konzentrierter Salzsäure bei pH 1 wieder ausgefällt. Der Niederschlag wird abgesaugt und im Vakuum getrocknet

Ausbeute: 29,9 g (68,6 % d.Th.) farbloser Feststoff.

h) N-[3,5-Bis-(acetylamino)-2,4,6-triiodbenzoyl]-2,6-dioxomorpholin

28,1 g (38,5 mmol) der unter Beispiel 7g dargestellten Verbindung werden in 56 ml wasserfreiem Pyridin gelöst, mit 7,3 ml (77 mmol) Essigsäureanhydrid versetzt und unter Feuchtigkeitsausschluß 10 Stunden bei Raumtemperatur gerührt.

Durch Zutropfen von wasserfreiem Diethylether wird das gebildete Anhydrid gefällt, abfiltriert und im Vakuum getrocknet.

Ausbeute: 27,4 g (100 % d.Th.) hellbeiger Feststoff

i) Dotriakontacontakis-{N-[3,5-di-(acetylamino)-2,4,6-triiodbenzoyl]-N- (natriumcarboxylato-methyl)-glycyl}-Derivat des deblockierten 32-Amins aus Beispiel 7c

4,17 g (0,5 mmol) des in Beispiel 7c beschriebenen Poly-Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 32-Amin-hydrobromid mit Diethylether gewaschen und im Vakuum getrocknet.

Der Feststoff wird zu einer bei Raumtemperatur mechanisch gerührten Lösung von 17,1 g (24 mmol) des unter Beispiel 7h hergestellten Anhydrids und 5,5 ml (40 mmol) Triethylamin in 100 ml N,N-Dimethylformamid zugegeben. Der Ansatz wird 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt und am Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird mit 2n Natronlauge neutralisiert, filtriert und einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose-Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und

gefriergetrocknet.

Ausbeute: 11 ,3 g (82,3 % d. Th.)

Beispiel 8

Dotriakontacontakis-{3-[(N-natriumcarboxylatomethyl)-methoxyacetylamino-5- (2,3-dihydroxypropylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des deblockierten 32- Amins aus Beispiel 7c a) 5-Methoxyacetylamino-2,4,6-triiodisophthalsäure-N-(2,3-diacetoxypropyl)-amid- chlorid Zu einer unter Feuchtigkeitsanschluß gerührten Suspension von 73,4 g (100 mmol) 5-Amino-2,4,6-triiodisophthalsäure-N-(2,3-diacetoxypropyl)-amid-chlorid (EP 0308364) in 500 ml wasserfreiem Dioxan werden 24,7 g (150 mmol)

Methoxyacetylchlorid bei Raumtemperatur zugegeben. Der Ansatz wird mehrere Stunden am Rückfluß gekocht, bis It. Dünnschichtchromatographie kein Edukt mehr nachweisbar ist, dann wird eingedampft, der Rückstand in Dichlormethan aufgenommen und mit gesättigter wäßriger Natriumhydrogencarbonatlösung ausgeschüttelt. Die organische Phase wird nach Trocknen über wasserfreiem Magnesiumsulfat eingedampft und der Rückstand aus Essigsäureethylester/tert.- Butylmethylether umkristallisiert.

Ausbeute: 73,2 g (90,7 % d.Th.) farblose Kristalle

b) 5-Methoxyacetylaminö-2,4,6-triiodisophthalsäure-N-(2,3-dihydroxypropyl)- monoamid 60,6 g (75,1 mmol) des unter Beispiel 8a hergestellten Säurechlorids werden in 376 ml in einnormaler Natronlauge eingetragen und unter Stickstoffatmosphäre etwa 45 min. kräftig gerührt. Die Vollständigkeit des Umsatzes wird über

Dünnschichtchrcmatographie überprüft und die Produktlösung ohne Aufarbeitung für die nächste Stufe verwendet. c) N-Carboxymethyl-5-methoxyacetylamino-2,4,6-triiodisophthalsäure-N'-(2,3- dihydroxypropyl)-monoamid

Die nach Beispiel 8b hergestellte Lösung des Eduktes (75,1 mmol) wird unter Stickstoffatmosphäre mit 17,5 g (150,2 mmol) des Natriumsalzes der

Chloressigsäure versetzt und ca. 18 Stunden bei 90°C gerührt. Die Lösung wird mit 2 normaler Salzsäure auf pH 1 eingestellt und vollständig eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel 60 (Merck) (Fließmittel

Dichlormethan/Methanol/Essigsäure (2:2:1) chromatographiert. Die

Produktfraktionen werden im Vakuum zur Trockne eingedampft und der

Rückstand aus Methanol/Isopropanol umkristallisiert.

Ausbeute: 47,7 g (83,3 % d. Th.) farblose Kristalle

d) N-Methoxycarbonylmethyl-5-methoxyacetylamino-2,4,6-triiodisophthalsäure- N'-(2,3-dihydroxypropyl)-monoamid

45,8 g (60,1 mmol) der unter Beispiel 8c dargestellten Verbindung wird in 150 ml wasserfreiem Methanol eingetragen und unter Stickstoffatmosphäre gerührt. Unter Rühren werden 5,6 ml (6,6 mmol) Dimethylsulfit zugetropft. Der Ansatz wird 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und 1 Stunde unter Rückfluß gekocht. Anschließend wird eingedampft, der Rückstand mit Isopropanol ausgerührt, abfiltriert und im Vakuum getrocknet.

Ausbeute: 41 ,2 g (88,4 % d. Th.) farblose Kristalle

e) N-Methoxycarbonylmethyl-5-methoxyacetylamino-2,4,6-triiodisophthalsäure- N'-(2,3-diacetoxypropyl)-monoamid

38,2 g (49,2 mmol) der unter Beispiel 8d dargestellten Verbindung werden in ein Gemisch aus 16,3 ml (172 mmol) Essigsäureanhydrid und 150 ml Dioxan unter Feuchtigkeitsausschluß eingerührt. Es werden 0,60 g (4,9 mmol) 4-N.N- Dimethylaminopyridin zugegeben und 2 Stunden bei 50° C gerührt. Anschließend wird der Ansatz eingedampft, der Rückstand mit Essigsäureethylester/tert.- Butylmethylether ausgerührt, abfiltriert und im Vakuum getrocknet.

Ausbeute: 37,0 g (87,4 % d. Th.) farbloser Feststoff

f) N-Methoxycarbonylmethyl-5-methoxyacetylamino-2,4,6-triiodisophthalsäure- N'-(2,3-diacetoxypropyl)-amid-chlorid

35,6 g (41 ,4 mmol) der unter Beispiel 8e beschriebenen Verbindung werden in 150 ml 1 ,2 -Dichlorethan eingetragen. Zu der unter Feuchtigkeitsausschluß bei Raumtemperatur gerührten Suspension werden 0,1 ml N,N-Dimethylformamid und 4,50 ml (62,1 mmol) Thionylchlorid gegeben. Der Ansatz wird unter Rückfluß gekocht, bis keine Gasentwicklung mehr zu beobachten ist. Die nun vorliegende Lösung wird am Vakuum eingedampft, der Rückstand in Dichlormethan

aufgenommen und mit gesättigter, wäßriger Natriumhydrogencarbonatlösung ausgeschüttelt. Die organische Phase wird über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Durch Zutropfen von tert.-Butyimethylether zum

eingeengten Filtrat erhält man einen farblosen Niederschlag der abgesaugt und im Vakuum getrocknet wird.

Ausbeute: 30,6 g (84,1 % d. Th.) farbloser Feststoff

g) Dotriakontacontakis-{3-[(N-natriumcarboxylatomethyl)-methoxyacetylamino- 5-(2,3-dihydroxypropylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des deblockierten 32-Amins aus Beispiel 7c 4,17 g (0,5 mmol) des in Beispiel 7c beschriebenen Poly-Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 32-Amin-hydrobromid mit Diethylether gewaschen und im Vakuum getrocknet.

Der Feststoff wird in 30 ml Wasser gelöst und zu einer bei Raumtemperatur mechanisch gerührten Lösung von 21 ,1 g (24,0 mmol) des unter Beispiel 8f hergestellten Säurechlorids und 5,5 ml (40 mmol) Triethylamin in 100 ml N,N- Dimethylformamid zugetropft. Der Ansatz wird 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 60 ml 2 n Natronlauge versetzt und zwei Stunden bei 50°C gerührt. Die Lösung wird nach Abkühlen auf Raumtemperatur mit 2 n Salzsäure neutralisiert und am Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird in Wasser aufgenommen und einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose-Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und gefriergetrocknet.

Ausbeute: 12,9 g (90,0 % d. Th.) farbloses Lyophilisat

Beispiel 9

Dotriacontakis-{3,5-[N,N-Bis-(natriumcarboxylatomethyl)-carbamoyl)]-2,4,6- triiodphenylthiocarbamoyl}-Derivat des deblockierten 32-Amins aus Beispiel 9f a) 1 ,11-Bis-(benzyloxycarbonylamino)-3,9-bis[-2-(benzyloxycarbonylamino)-ethyl]- 4,8-dioxo-6-(4-nitrophenyl)-3,9-diazaundecan

6,33 g (25 mmol) 3-(4-Nitrophenyl)-glutarsäure (J. Org. Chem., 26, 3856 (1961)), 6,33 g (55 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 20,43 g (55 mmol) des in Beispiel 1a beschriebenen Bis(benzyloxycarbonyl-aminoethyl)amins werden in DMF gelöst und nach Zugabe von 11 ,35 g (55 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid 3 Tage bei Raumtemperatur gerührt. Dann wird vom ausgefallenen Dicyclohexylharnstoff abfiltriert, das Filtrat im Vakuum zur Trockene eingedampft und an Kieselgel mit Ethylacetat als Laufmittel chromatographisch gereinigt.

Ausbeute: 17,3 g (72 % d. Th.)

b) 1 ,11-Bis-(benzyloxycarbonylamino)-3,9-bis-[2-(benzyloxycarbonylamino)-ethyl]- 4,8-dioxo-6-(4-aminophenyl)-3,9-diazaundecan 15,57 g (56 mmol) FeSO₄ x 7 H₂O werden in Wasser gelöst und mit 7,68 g (8 mmol) der in Beispiel 9a beschriebenen Nitroverbindung im gleichen Volumen Ethanol vereinigt und zum Sieden erhitzt. Bei dieser Temperatur werden langsam 24 ml konz. Ammoniak zugetropft, wobei sich ein schwarzer Niederschlag bildet. Man läßt die Suspension unter Rühren langsam abkühlen, dann wird filtriert, der Niederschlag mit Ethylacetat nachgewaschen und die vereinigten Filtrate im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird mit Ethylacetat/Ethanol (98:2) an Kieselgel chromatographiert.

Ausbeute: 4,84 g (65 % d. Th.) c) N,N',N",N^,"-Cyclen-Tetra-Ureido-Konjugat aus 1,4,7,10-Tetraazacyclododecan mit 1 , 11 -Bis-(benzyloxycarbonylamino)-3,9-bis[2-(benzyloxycarbonylamino)- ethyl]-4,8-dioxo-6-(4-isocyanatophenyl)-3,9-diazaundecan

4,65 g (5 mmol) des in Beispiel 9b beschriebenen Phenylamins werden in Toluol gelöst, zur Entwässerung zweimal zur Trockene eingedampft und mit jeweils frischem Toluol wieder aufgenommen. Die auf diese Weise getrocknete Lösung des Amins in Toluol wird bei 10°C mit 0,54 g (1,8 mmol) Triphosgen versetzt, eine Stunde bei 10°C und über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Zu dieser

Suspension werden 0,17 g (1 mmol) wasserfreies 1 ,4,7,10-Tetraazacyclododecan (Cyclen) (Aldrich) in Toluol/Pyridin (10:1) zugegeben und über Nacht bei

Raumtemperatur gerührt. Dann wird im Vakuum zur Trockene eingedampft und der Rückstand in Ethylacetat an Kieselgel chromatographiert.

Ausbeute: 3,55 g (89 % d. Th.)

d) N,N-Bis-[2-(benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-glycin-tert.-butylester

18,6 g (50 mmol) des in Beispiel 1a beschriebenen Bis[2- (benzyloxycarbonylamino)-ethyi]-amins in Tetrahydrofuran/Wasser (25:1 ) werden mit 4,2 g (30 mmol) Kaliumcarbonat versetzt. Bei Raumtemperatur werden zu dieser Suspension 11 ,7 g (60 mmol) tert.-Butylbromacetat zugetropft und anschließend bei dieser Temperatur über Nacht gerührt. Es wird vom Ungelösten abfiltriert, das Filtrat zur Trockne eingedampft und an Kieselgel chromatographiert (Diethylether/Diisopropylether 1:1).

Ausbeute: 20,4 g (84 % d. Th.)

e) N,N-Bis[2-(benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-glycin

19,4 g (40 mmol) des in Beispiel 9d beschriebenen t-Butylesters werden mit 150 ml Trifluoressigsäure versetzt und 20 Minuten bei Raumtemperatur gerührt.

Anschließend wird das Produkt durch Zugabe von Diethylether ausgefällt und noch je einmal mit Ether und schließlich mit Wasser ausgerührt. Der Niederschlag wird abfiltriert und getrocknet.

Ausbeute: 13,4 g (78 % d. Th.)

f) Vollgeschütztes Benzyloxycarbonyl-32-Polyamin aus dem mit N,N-Bis-[2- (benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-glycin kondensierten N,N',N",N'"-Cyclen-

Tetra-Ureido-Konjugat aus Beispiel 9c

3,99 g (1 mmol) des im Beispiel 9c beschriebenen Hexadeca- Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 90 Minuten wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene Hexadecaamin-hydrobromid mit Ether gewaschen, im Vakuum getrocknet und ohne weitere Reinigung in die weiter unten beschriebene Reaktion eingesetzt.

Ausbeute: 3,2 g (quantitativ)

8,6 g (20 mmol) des in Beispiel 9e beschriebenen N,N-Bis[2- (benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-glycins, 3,2 g (20 mmol) 1-Hydroxybenzotriazol und 6,4 g (20 mmol) 2-(1 H-Benzotriazol-1-yl)-1 ,1 ,3,3-tetramethyluronium tetrafluorborat (TBTU; Peboc Limited, UK) werden in DMF gelöst und 15 Minuten gerührt. Diese Lösung wird anschließend mit 13,76 ml (80 mmol) N-

Ethyldiisopropylamin und mit 3,2 g (1 mmol) des oben beschriebenen Hexadecaamin-hydrobromids versetzt und über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Di- chlormethan/Methanol (9:1) an Kieselgel chromatographiert.

Ausbeute: 7,3 g (87 % d. Th.)

g) 5-lsothiocyanato-2,4,6-triiodisophthalsäure-N,N'-bis-(methoxycarbonylmethyl)- diamid

Zu einer bei Raumtemperatur gerührten Suspension von 17,3 g (24,7 mmol) des unter Beispiel 2c beschriebenen Anilinderivates in 170 ml 1 ,2-Dichlorethan werden 20 ml Polyvinylpyndin (Reillex), 50 ml Wasser und 3,66 ml (49,4 mmol) Thiophosgen in 30 ml 1 ,2-Dichlorethan zugegeben. Nach dreistündigem Rühren bei 50°C wird der Ansatz in Dichlormethan aufgenommen, die organische Phase wird abgetrennt, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Das Filtrat wird am Vakuum eingedampft, der Rückstand mit Essigsäureethylester ausgerührt, abgesaugt und am Vakuum getrocknet.

Ausbeute: 16,6 g (90,7 % d. Th.) hellbeiger Feststoff

h) Dotriacontakis-{3,5-[N,N-Bis-(natriumcarboxylatomethyl)-carbamoyl)]-2,4,6- triiodphenylthiocarbamoyl}-Derivat des deblockierten 32-Amins aus Beispiel 9f

4,23 g (0,5 mmol) des in Beispiel 9f beschriebenen Poly-Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 32-Amin-hydrobromid mit Ether gewaschen und im Vakuum getrocknet.

Der Feststoff wird zu einer bei Raumtemperatur mechanisch gerührten Lösung von 17,8 g (24,0 mmol) des in Beispiel 9g beschriebenen Isothiocyanats und 2,0 (14 mmol) Triethylamin in 120 ml Dimethylsulfoxid zugetropft. Der Ansatz wird 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 30 ml 2 n Natronlauge versetzt und zwei Stunden bei 50°C gerührt. Die Lösung wird nach Abkühlen auf

Raumtemperatur mit 2 n Salzsäure neutralisiert und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird in Wasser aufgenommen und einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose- Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und gefriergetrocknet. Ausbeute: 11 ,9 g (83,6 % d. Th.) farbloses Lyophilisat

Beispiel 10

Dotriacontakis-{3-natriumcarboxylatomethylcarbamoyl-5-[(N-methoxyacetyl)- methylamino]-2,4,6-triiodbenzoyl-Derivat des deblockierten 32-Amins aus Beispiel 9f a) N-Methoxyacetyl-5-methylamino-2,4,6-triiodisophthalsäure-N'- ethoxycarbonylmethyl-amid-chlorid Eine Lösung von 68,2 g (100 mmol) N-Methoxyacetyl-5-methylamino-2,4,6-triiod- isophthalsäuredichlorid (EP 0015867) in 500 ml N,N-Dimethylformamid wird mit 14,0 g (100 mmol) Glycinethylester-Hydrochlorid (Darstellung nach D.A.

Hoogwäter, M. Peereboom, Tetrahedron, 46, 5325-5332 (1990)) und 10,1 g (100 mmol) Triethylamin versetzt. Es entsteht eine Suspension, die über Nacht unter Argon bei Raumtemperatur gerührt wird. Anschließend wird eingedampft und der Rückstand an Kieselgel 60 (Merck) mit

Dichlormethan/Essigsäureethylester chromatographiert. Nach Eindampfen der Produktfraktionen erhält man einen farblosen Feststoff, der im Vakuum getrocknet wird.

Ausbeute: 53,4 g (71 ,49 % d. Th.)

b) Dotriacontakis-{3-natriumcarboxylatomethylcarbamoyl-5-[(N-methoxyacetyl)- methylamino]-2,4,6-triiodbenzoyl-Derivat des deblockierten 32-Amins aus Beispiel 9f

4,23 g (0,5 mmol) des in Beispiel 9f beschriebenen Poly-Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 32-Amin-hydrobromid mit Ether gewaschen und im Vakuum getrocknet.

Der Feststoff wird, gelöst in 30 ml Wasser, zu einer bei Raumtemperatur unter Argonatmosphäre mechanisch gerührten Lösung von 18,0 g (24,0 mmol) des unter Beispiel 10a hergestellten Säurechlorids und 6,9 ml (50,0 mmol)

Triethylamin in 120 ml N,N-Dimethylformamid zugegeben. Der Ansatz wird 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 50 ml 2 N Natronlauge versetzt und 1,5 Stunden bei 50°C gerührt . Die Lösung wird nach dem Abkühlen auf

Raumtemperatur mit 2 N Salzsäure neutralisiert und im vWakuum Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird in Wasser aufgenommen und einer

Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige

Produktlösung wird über ein Cellulose-Membranfilter (Porengröße 0,45 μm, Sartorius) filtriert und gefriergetrocknet.

Ausbeute: 11,9 g (88,8 % d. Th.) farbloses Lyophilisat

Beispiel 11

Dotriacontakis-{N-methoxyacetyl-3-methylamino-5-(2- natriumsulfonatoethylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des deblockierten 32-Amins aus Beispiel 11b a) N,N',N",N"'-Tetrakis-{N,N-Bis-[2-(benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-glycyl}- cyclen 345 mg (2 mmol) 1 ,4,7,10-Tetraazacyclododecan (Cyclen; Fluka) werden mit

Toluol azeotrop entwässert. Zu der abgekühlten Lösung von Cyclen in Toluol wird bei Raumtemperatur eine Lösung von 4,29 g (10 mmol) des in Beispiel 9e beschriebenen N,N-Bis[2-(benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-glycins in

Tetrahydrofuran (THF) sowie 2,47 g (10 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2- dihydrochinolin (EEDQ; Fluka) zugegeben und über Nacht gerührt. Die Lösung wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und in Ethylacetat/ Methanol (10:1) an Kieselgel chromatographiert.

Ausbeute: 2,69 g (74 % d.Th.)

b) Vollgeschütztes Benzyloxycarbonyl-32-Polyamin auf der Basis des N,N',N",N'"- Tetrakis-[N,N-Bis-[2-(trilysylamino)-ethyl]-glycyl}-cyclens

1 ,82 g (1 mmol) des im Beispiel 11a beschriebenen Okta- Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 90 Minuten wird mit

Diethylether die begonnende Fällung vervollständigt, das entstandene Okta-amin- hydrobromid mit Ether gewaschen, im Vakuum getrocknet und ohne weitere Reinigung in die weiter unten beschriebene Reaktion eingesetzt.

Ausbeute: 1 ,39 g (quantitativ)

9,4 g (10 mmol) des in Beispiel 1 c beschriebenen geschützten "Tri-Lysins", 1 ,5 g (10 mmol) 1-Hydroxybenzotriazol und 3,2 g (10 mmol) 2-(1 H-Benzotriazol-1-yl)- 1 ,1,3,3-tetramethyluronium tetrafluorborat (TBTU; Peboc Limited, UK) werden in DMF gelöst und 15 Minuten gerührt. Diese Lösung wird anschließend mit 5,16 ml (30 mmol) N-Ethyldiisopropylamin und mit 1,39 g (1 mmol) des oben

beschriebenen Okta-amin-hydrobromids versetzt und über Nacht bei

Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Dichlormethan/Methanol (10:1) an Kieselgel chromatographiert.

Ausbeute: 6,0 g (74 % d. Th.)

c) N-Methoxyacetyl-5-methylamino-2,4,6-triiodisophthalsäure-N'-(2-bromethyl)- amid-chlorid

Eine Lösung von 68,2 g (100 mmol) N-Methoxyacetyl-5-methylamino-2,4,6-triiod- isophthalsäuredichlorid (EP 0015867) in 500 ml N,N-Dimethylformamid wird mit 20,5 g (100 mmol) 2-Bromethylamin-Hydrobromid und 20,2 g (200 mmol)

Triethylamin versetzt. Es entsteht eine Suspension, die über Nacht unter Argon bei Raumtemperatur gerührt wird. Anschließend wird eingedampft und der Rückstand an Kieselgel 60 (Merck) mit Dichlormethan/Essigsäureethylester chromatographiert. Nach Eindampfen der Produktfraktionen erhält man einen farblosen Feststoff, der im Vakuum getrocknet wird.

Ausbeute: 55,3 g (71 ,88 % d. Th.)

d) Dotriacontakis-{N-methoxyacetyl-3-methylamino-5-(2- natriumsulfonatoethylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des deblockierten 32-Amins aus Beispiel 11b

4,06 g (0,5 mmol) des in Beispiel 11b beschriebenen Poly- Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 32-Amin- hydrobromid mit Ether gewaschen und im Vakuum getrocknet.

Der Rückstand wird anschließend in Wasser aufgenommen und zu einer bei Raumtemperatur unter Argonatmosphäre mechanisch gerührten Lösung von 18,5 g (24,0 mmol) des unter Beispiel 11c hergestellten Säurechlorids und 8,3 ml (60 mmol) Triethylamin in 100 ml N,N-Dimethylformamid zugetropft. Der Ansatz wird 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt und nach Zugabe von 30,2g (0,24 mmol) Natriumsulfit in 100 ml Wasser 72 h weitergerührt. Anschließend wird filtriert und das Filtrat einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose-Membranfilter (Porengröße 0,45 μm, Sartorius) filtriert und gefriergetrocknet.

Ausbeute: 8,9 g (63,7 % d. Th.) farbloses Lyophilisat

Beispiel 12

Dotriacontakis-{3,5-bis-(dinatriumphosphonatomethylcarbamoyl)-2,4,6- triiodarylcarbamoyl}-Derivat des deblockierten 32-Amins aus Beispiel 11b a) 5-Amino-2,4,6-triiodisophtalsäure-N,N'-bis-(diethylphosphonomethyl)-diamid

Eine Lösung von 59,6 g (100 mmol) 5-Amino-2,4,6-triiodisophthalsäuredichlorid (DOS 2926428) in 300 ml N,N-Dimethylformamid wird mit 36,8 g (220 mmol) Aminomethanphosphonsäurediethylester und 61,0 ml (440 mmol) Triethylamin versetzt. Es entsteht eine Suspension, die über Nacht bei Raumtemperatur unter Argon gerührt wird. Nach dem Eindampfen der Suspension im Vakuum wird der Rückstand aus Methanol umkristallisiert.

Ausbeute: 59,8 g (69,8 % d. Th.)

b) 5-lsocyanato-2,4,6-triiodisophthalsäure-N,N'-bis-(diethylphosphonomethyl)- diamid

Zu einer bei 65°C Ölbadtemperatur unter Argonatmosphäre gerührten

Suspension von 25,7 g (30 mmol) des unter Beispiel 12a hergestellten

Anilinderivates in 200 ml 1 ,2 -Dichlorethan werden 147 ml (73,8 mmol) einer zweinormalen toluolischen Phosgenlösung und 2 ml N,N-Dimethylformamid zugegeben. Nach vollständiger Umsetzung des Anilinderivates wird der Ansatz im Vakuum eingedampft, der Rückstand mit wasserfreiem Essigsäureethylester ausgerührt, unter Stickstoffatmosphäre abgesaugt und im Olpumpenvakuum getrocknet.

Ausbeute: 25,6 g (96,7 % d. Th.) hellbeiger Feststoff

c) Dotriacontakis-{3,5-bis-(dinatriumphosphonatomethylcarbamoyl)-2,4,6- triiodarylcarbamoyl}-Derivat des deblockierten 32-Amins aus Beispiel 11b

4,06 g (0,5 mmol) des in Beispiel 11b beschriebenen Poly- Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 32-Amin- hydrobromid mit Ether gewaschen und im Vakuum getrocknet.

Der Rückstand wird anschließend zu einer bei Raumtemperatur unter

Argonatmosphäre gerührten Lösung von 21,2 g (24,0 mmol) des unter Beispiel 12b hergestellten Isocyanats und 2,35 ml (17,0 mmol) Triethylamin in 200 ml wasserfreiem Dimethylsulfoxid zugegeben. Der Ansatz wird 3 Tage bei

Raumtemperatur gerührt, dann im Hochvakuum eingedampft, mit 13,8 ml (108 mmol) Bromtrimethylsilan versetzt und für 24 Stunden bei 50°C gerührt. Das Rohprodukt wird tropfenweise mit 150 ml Wasser versetzt und vier Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach Neutralisation mit Natronlauge wird filtriert und das Filtrat einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose-Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und gefriergetrocknet.

Ausbeute: 11 ,1 g (71 ,1 % d. Th.) gelbliches Lyophilisat.

Beispiel 13

Octatetracontakis-{3-(4-natriumcarboxylatomethoxyacetylamino)-5-(2,3-dihydroxy- propylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des deblockierten 48-Amins aus Beispiel 13d a) N,N,N',N^,,N",N"-Hexakis-{2-[N,N-bis-(2-benzyloxycarbonylamino-ethyl)-amino]- ethyl}-trimesinsäuretriamid 1,27 g (1 mmol) des in Beispiel 1b beschriebenen Hexa-Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 60 Minuten wird mit Diethylether die begonnene

Fällung vervollständigt, das entstandene Hexamin-hydrobromid mit Ether gewaschen, im Vakuum getrocknet und ohne weitere Reinigung in die weiter unten beschriebene Reaktion eingesetzt.

Ausbeute: 0,95 g (quantitativ)

0,95 g (1 mmol) des so hergestellten Hydrobromids werden in 50 ml Acetonitril suspendiert und 3 ml Triethylamin zugegeben. Dann werden 3,54 g (20 mmol) N- Benzyloxycarbonylaziridin (hergestellt nach J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 , 21-26, 1993) zugegeben und 5 Tage unter Stickstoff unter Rückfluß erhitzt. Man dampft zur Trockne ein, nimmt mit 100 ml Methylenchlorid auf und wäscht 2 mal mit je 100 ml 5 prozentiger Kaliumcarbonat-Lösung. Die Methylenchloridphase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/ Methanol/Triethylamin 20:1:0,1).

Ausbeute: 2,31 g (89 % d. Th.) eines blaßgelben zähen Öls

b) N,N,N',N^,,N",N"-Hexakis-{2-[N,N-bis-(2-aminoethyl)-amino]-ethyl}- trimesinsäuretriamid

2,2 g (0,85 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 13a werden in 100 ml

Methanol gelöst und 3 g Peariman-Katalysator (Palladiumhydroxid auf Aktivkohle; Fluka) zugegeben. Man hydriert 10 Stunden bei 5 bar (Raumtemperatur). Es wird vom Katalysator abfiltriert und das Filtrat zur Trockne eingedampft.

Ausbeute: 825 mg (99 % d. Th.)

c) Vollgeschütztes Benzyloxycarbonyl-24-Polyamin auf der Basis des

N,N,N',N',N",N"-Hexakis-{2-[N,N-bis-(2-(N,N-bis-aminoethyl)-amino)-ethyl]- aminoethyl}-trimesinsäuretriamids

800 mg (0,814 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 13b werden in 150 ml Acetonitril gelöst und 5,77 g (32,56 mmol) N-Benzyloxycarbonylaziridin

(hergestellt nach J. Chem. Soc, Perkin Trans., 1, 21-26, 1993) zugegeben und 5 Tage (unter Stickstoff) unter Rückfluß erhitzt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein und chromatographiert an Kieselgel (Laufmittel:

Methylenchiorid/Methanol/Triethyiamin 20: 1 :0, 1 ).

Ausbeute: 3,62 g (85 % d. Th.) eines glasigen Feststoffs

d) Vollgeschütztes Benzyloxycarbonyl-48-Polyamin auf der Basis des 24-Lysyl- Derivats von Beispiel 13c

1 ,05 g (0,2 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 13c werden in 30 ml Methanol gelöst und 1 g Peariman-Katalysator (Palladiumhydroxid auf Aktivkohle) zugegeben. Man hydriert 10 Stunden bei 5 bar (Raumtemperatur). Es wird vom Katalysator abfiltriert, das Filtrat zur Trockne eingedampft und in die weiter unten beschriebene Reaktion eingesetzt.

Ausbeute: 0,40 g (quantitativ).

3,11 g (7,5 mmol) N_a,N_e-Bis-(benzyloxycarbonyl)-Lysin (Bachern, Schweiz), 1 ,2 g (7,5 mmol) 1 -Hydroxybenzotriazol und 2,4 g (7,5 mmol) 2-(1H-Benzotriazol-1-yl)- 1 ,1,3,3-tetramethyluronium tetrafluorborat (TBTU; Peboc Limited, UK) werden in DMF gelöst und 15 Minuten gerührt. Diese Lösung wird anschließend mit 5,16 ml (30 mmol) N-Ethyldiisopropylamin und mit 0,40 g (0,2 mmol) des oben

beschriebenen 24-Polyamins versetzt und über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Ethylacetat/Ethanol/Triethylamin (2:1:0,2) an Kieselgel chroma- tographiert.

Ausbeute: 1,36 g (59 % d. Th.)

e) Octatetracontakis-{3-(4-natriumcarboxylatomethoxyacetylamino)-5-(2,3- dihydroxypropylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des deblockierten 48- Amins aus Beispiel 13d

1 ,15 g (0,10 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 13d werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 48-Amin-hydrobromid mit Ether gewaschen und im Vakuum getrocknet.

Der Rückstand wird anschließend in Wasser aufgenommen und zu einer bei Raumtemperatur unter Argonatmosphäre gerührten Lösung von 6,4 g (7,2 mmol) des unter Beispiel 5b hergestellten Säurechlorids und 2,1 ml (15 mmol)

Triethylamin in 25 ml wasserfreiem N,N-Dimethylformamid zugegeben. Der Ansatz wird 3 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 14 ml 2n Natronlauge versetzt und 2 Stunden bei 50°C gerührt. Nach Eindampfen im Vakuum erhält man ein gelbliches Öl, das in Wasser gelöst wird. Die wässrige Lösung wird auf ph 7,3 eingestellt, filtriert und das Filtrat einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose- Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und gefriergetrocknet. Ausbeute: 3,79 g (92,2 % d. Th.) gelbliches Lyophilisat.

Beispiel 14

Tetracosakis-{3-(4-natriumcarboxylatomethoxyacetylamino)-5-(2,3-dihydroxy- propylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des 1 ,4,7,10,13,16-Hexakis-[2- (trilysylamino)-ethyl]-hexacyclens a) 1 ,4,7,10,13,16-Hexakis-[2-(Benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-1 ,4,7,10,13,16- Hexaazacyclooctadecan 1 ,29 g (5 mmol) 1 ,4,7,10,13,16-Hexaazacyclooctadecan (Hexacyden; Fluka) werden mit Toluol azeotrop entwässert. Zu der auf Raumtemperatur abgekühlten Lösung von Hexacyden in Toluol wird eine Lösung von 10,63 g (60 mmol) N- Benzyloxycarbonylaziridin (J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1, 21-26, 1993) in Acetonitril zugegeben und 3 Tage unter Stickstoff unter Rückfluß erhitzt. Man dampft zur Trockne ein und chromatographiert den Rückstand in

Ethylacetat/Methanol/Triethylamin (8:2:0,5) an Kieselgel.

Ausbeute: 5,68 g (86 % d. Th.) blaßgelbes, zähes Öl

b) Vollgeschütztes Benzyloxycarbonyl-24-Polyamin auf der Basis des

1 ,4,7, 10, 13, 16-Hexakis-[2-(triiysylamino)-ethyl]-hexacyciens

1,32 g (1 mmol) des in Beispiel 14a beschriebenen Hexa- Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 60 Minuten wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene Hexaamin- hydrobromid mit Ether gewaschen, im Vakuum getrocknet und ohne weitere Reinigung in die weiter unten beschriebene Reaktion eingesetzt.

Ausbeute: 1 ,48 g (quantitativ) 7,0 g (7,5 mmol) des in Beispiel 1 c beschriebenen geschützten "Tri-Lysins", 1 ,2 g (7,5 mmol) 1-Hydroxybenzotriazol und 2,4 g (7,5 mmol) 2-(1 H-Benzotriazol-1-yl)- 1 ,1 ,3,3-tetramethyluronium tetrafluorborat (TBTU; Peboc Limited, UK) werden in DMF gelöst und 15 Minuten gerührt. Diese Lösung wird anschließend mit 5,16 ml (30 mmol) N-Ethyldiisopropylamin und mit 1,48 g (1 mmol) des oben

beschriebenen Hexa-amin-hydrobromids versetzt und über Nacht bei

Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Dichlormethan/Methanol (10:1) an Kieselgel chromatographiert.

Ausbeute: 5,02 g (83 % d. Th.)

c) Tetracosakis-{3-(4-natriumcarboxylatomethoxyacetylamino)-5-(2,3-dihydroxy- propylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des 1 ,4,7,10,13,16-Hexakis-[2-

(trilysylamino)-ethyl]-hexacyclens

3,02 g (0,5 mmol) des in Beispiel 14b beschriebenen Poly- Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 24-Amin- hydrobromid mit Ether gewaschen und im Vakuum getrocknet.

Der Rückstand wird anschließend in Wasser aufgenommen und zu einer bei Raumtemperatur unter Argonatmosphäre gerührten Lösung von 16,1 g

(18,0 mmol) des unter Beispiel 5b hergestellten Säurechlorids und 5,5 ml (40 mmol) Triethylamin in 100 ml wasserfreiem N,N-Dimethylformamid zugegeben. Der Ansatz wird 3 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 36 ml 2n

Natronlauge versetzt und 2 Stunden bei 50°C gerührt. Nach Eindampfen im Vakuum erhält man ein gelbliches Öl, das in Wasser gelöst wird. Die wässrige Lösung wird auf ph 7,3 eingestellt, filtriert und das Filtrat einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose-Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und

gefriergetrocknet.

Ausbeute: 8,80 g (84,4 % d. Th.) gelbliches Lyophilisat.

Beispiel 15

Tetrahexacontakis-{3-(4-natriumcarboxylatomethoxyacetylamino)-5-(2,3- dihydroxypropylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des debiockierten 64- Polyamins aus Beispiel 15e

a) N,N,N',N'-Tetrakis-[2-(benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-5-nitro- isophthalsäure-diamid

14,86 g (40 mmol) des in Beispiel 1a beschriebenen Bis[2- (benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-amins und 20,24 g (200 mmol) Triethylamin werden in Dimethylformamid gelöst und mit 4,96 g (20 mmol) 5-Nitro- isophthalsäuredichlorid (J. Chem. Soc. 1957, 1172-1175) versetzt und über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Ethylacetat an Kieselgel chromatographiert.

Ausbeute: 11 ,5 g (62,6 %) eines zähen Öls

b) N,N,N',N'-Tetrakis-[2-(benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-5-amino- isophthalsäure-diamid

9,18 g (10 mmol) der im vorstehenden Beispiel beschriebenen Nitroverbindung in 200 ml Ethanol werden zu einer Lösung von 27,8 g (100 mmol) FeSO₄ x 7 H₂O in 200 ml Wasser zugegeben und zum Sieden erhitzt. Nach Zugabe von 50 ml konz. Ammoniak wird weitere 90 Minuten unter Rückfluß gerührt. Man läßt die

Suspension abkühlen, dann wird das Ethanol im Vakuum eingeengt und die wässrige Phase mit Ethylacetat ausgeschüttelt. Man erhält nach Trocknung über Natriumsulfat 8,61 g (97 % d. Th.) eines fast farblosen zähen Öls. c) N,N,N',N'-Tetrakis-[2-(benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-5-(carboxymethoxy- acetylamino)-isophthalsäure-diamid

4,44 g (5 mmol) der im vorstehenden Beispiel beschriebenen Aminoverbindung in Dimethylformamid werden im Eisbad mit 5,05 g (50 mmol) Triethylamin und 2,9 g

(25 mmol) Diglycolsäureanhydrid (Fluka) versetzt und 2 Stunden bei 0°C gerührt.

Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft, der Rückstand wird zwischen

Ethylacetat und 1 M Zitronensäure verteilt, mit Wasser neutral gewaschen und die organische Phase getrocknet.

Ausbeute: 4,62 g (92 % d. Th.) eines zähen Öls d) Vollgeschütztes Benzyloxycarbonyl-Hexadeca-amin auf der Basis des

N,N',N",N'"-Tetrakis-(triiysylaminomethylj-methans

3,0 g (22,69 mmol) Tetrakis-(aminomethyl)-methan (hergestellt nach US

4,485,237 A, 1984), 127,85 g (136,15 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 1c und 15,67 g (136,15 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden in 300 ml

Dimethylformamid gelöst. Bei 0°C gibt man 28,09 g (136,15 mmol)

Dicyclohexylcarbodiimid hinzu und rührt 1 Stunde bei 0°C, dann 2 Tage bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml Ethylacetat zu, filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab und engt das Filtrat im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/Isopropanol 20:1 ) Ausbeute: 58,02 g (67 % d. Th.) eines farblosen zähen Öls

e) Vollgeschütztes Benzyloxycarbonyl-64-Amin aus dem mit der Tetraamin- monocarbonsäure 17f kondensierten 16-Amin N,N^,,N",N"^,-Tetrakis- (trilysylaminomethyl)-methan

1.91 g (0,5 mmol) des in Beispiel 17d beschriebenen 16-Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 16-Amin-hydrobromid mit Ether gewaschen, im Vakuum getrocknet und ohne weitere Reinigung in die folgende Reaktion eingesetzt.

Ausbeute: 1 ,48 g (quantitativ)

12,05 g (12 mmol) der in Beispiel 17f beschriebenen Tetraamin- monocarbonsäure, 1,92 g (12 mmol) 1-Hydroxybenzotriazol (HOBt) und 3,84 g (12 mmol) 2-(1H-Benzotriazol-1-yl)-1 ,1,3,3-tetramethyl-uronium tetrafluorborat. (TBTU; Peboc Limited, UK) werden in DMF gelöst und 15 Minuten gerührt. Diese Lösung wird anschließend mit 6,20 ml (36 mmol) N-Ethyldiisopropylamin und mit 1,48 g (0,5 mmol) des oben beschriebenen 16-Amin-hydrobromids versetzt und über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Ethylacetat/Ethanol (2:1) an

Kieselgel chromatographiert.

Ausbeute: 4,54 g (52 % d. Th.) eines hellgelben Öls

f) Tetrahexacontakis-{3-(4-natriumcarboxylatomethoxyacetylamino)-5-(2,3- dihydroxypropylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des deblockierten 64-

Polyamins aus Beispiel 15e

4,36 g (0,25 mmol) des in Beispiel 17e beschriebenen 64- Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 64-Amin- hydrobromid mit Ether gewaschen und im Vakuum getrocknet. Der Rückstand wird anschließend in Wasser aufgenommen und zu einer bei Raumtemperatur unter Argonatmosphäre gerührten Lösung von 21,4 g

(24,0 mmol) des unter Beispiel 5b hergestellten Säurechlorids und 6,9 ml (50 mmol) Triethylamin in 180 ml wasserfreiem N,N-Dimethylformamid zugegeben. Der Ansatz wird 3 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 48 ml 2n

Natronlauge versetzt und 2 Stunden bei 50°C gerührt. Nach Eindampfen im Vakuum erhält man ein gelbliches öl, das in Wasser gelöst wird. Die wässrige Lösung wird auf ph 7,3 eingestellt, filtriert und das Filtrat einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose-Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und

gefriergetrocknet.

Ausbeute: 12,4 g (87,3 % d. Th.) gelbliches Lyophilisat.

Beispiel 16 a) meso-2,3-Bis-(benzyloxycarbonylamino)-bemsteinsäure 14,81 g (100 mmol) Diaminobernsteinsäure (meso-Form) werden in 300 ml Tetrahydrofuran suspendiert und mit 2 N Natronlauge auf pH 9 gestellt. Bei 0°C tropft man unter starkem Rühren 42,65 g (250 mmol)

Chlorameisensäurebenzylester, gelöst in 50 ml Tetrahydrofuran zu und hält unter gleichzeitiger Zugabe von 2 N Natronlauge den pH-Wert bei 9. Anschließend läßt man 5 Stunden bei pH 9 und Raumtemperatur nachrühren. Man stellt mit 10 %iger Salzsäure auf pH 2 und gibt 300 ml gesättigte Kochsalzlösung zu. Die organische Phase wird abgetrennt, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/Methanol 10:1 (2 % Essigsäure).

Ausbeute: 27,07 g (65 % d. Th.) eines farblosen Feststoffs b) 2,3 Bis-(benzyloxycarbonylamino)-bemsteinsäureanhydrid

25 g (60,04 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 16a werden in 200 ml Acetanhydrid 12 Stunden bei 50°C gerührt. Man kühlt im Eisbad auf 0°C und tropft langsam 600 ml Diethylether zu. Man filtriert die Kristalle ab, wäscht 2 mal mit je 100 ml Ether nach und trocknet über Nacht im Vakuum (50°C).

Ausbeute: 23,44 g (98 % d. Th.) farblose Blättchen

c) Vollgeschütztes Benzyloxycarbonyl-32-Amin auf der Basis des (diamino)- succinylierten N,N',N",N"'-Tetrakis-[trilysyl-aminoethyl]-methans

10 g (2,62 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 15a werden in 100 ml Eisessig gelöst und unter Rühren 33 % Bromwasserstoff in Eisessig zugegeben (100 ml). Nach 2 Stunden wird die begonnene Fällung mit Diethylether vervollständigt, das entstandene Hexadeca-Bromid abfiltriert und mit Diethylether gewaschen und ohne weitere Aufreinigung in die weitere Reaktion eingesetzt (quantitative

Ausbeute). Das so erhaltene Hydrobromid wird in 200 ml Pyridin und 20 ml Triethylamin gelöst und 1 g (8,18 mmol) 4-Dimethylaminopyridin zugegeben. Bei 0°C tropft man 33,40 g (83,84 mmol) der Titelverbindung 16b gelöst in 100 ml Dimethylformamid hinzu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 300 ml

Methylenchlorid auf und wäscht 3 mal mit je 100 ml 5 %iger Kaliumcarbonat- Lösung. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert

(Laufmittel: Methylenchiorid/Methanol 20:1)

Ausbeute: 17,07 g (81 % d. Th.) eines farblosen Feststoffs

d) Dotriacontakis-{3-(4-natriumcarboxylatomethoxyacetylamino)-5-(2,3-dihydroxy- propylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des deblockierten 32-Amins aus Beispiel 21c

4,02 g (0,5 mmol) des in Beispiel 21c beschriebenen 32-Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 32-Amin-hydrobromid mit Ether gewaschen und im Vakuum getrocknet.

Der Rückstand wird anschließend in Wasser aufgenommen und zu einer bei Raumtemperatur unter Argonatmosphäre gerührten Lösung von 21 ,4 g

(24,0 mmol) des unter Beispiel 5b hergestellten Säurechlorids und 6,9 ml (50 mmol) Triethylamin in 180 ml wasserfreiem N,N-Dimethylformamid zugegeben. Der Ansatz wird 3 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 48 ml 2n

Natronlauge versetzt und 2 Stunden bei 50°C gerührt. Nach Eindampfen im Vakuum erhält man ein gelbliches Öl, das in Wasser gelöst wird. Die wässrige Lösung wird auf ph 7,3 eingestellt, filtriert und das Filtrat einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose-Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und

gefriergetrocknet.

Ausbeute: 12,5 g (90,2 % d. Th.) gelbliches Lyophilisat.

Beispiel 17 a) 1,4,7,10,13,16-Hexakis-[benzyloxycarbonylglycyl]-1 ,4,7,10,13,16- hexaazacyclooctadecan

516 mg (2 mmol) 1 ,4,7,10,13,16-Hexaazacyclooctadecan (Hexacyden; Fluka) werden mit Toluol azeotrop entwässert. Zu der abgekühlten Lösung von

Hexacyden in Toluol wird bei Raumtemperatur eine Lösung von 3,14 g (15 mmol) Benzyloxycarbonyl-glycin (Fluka) in Tetrahydrofuran (THF) sowie 3,71 g (15 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1 ,2-dihydrochinolin (EEDQ; Fluka) zugegeben und über Nacht gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wird das Produkt durch Zugabe von Hexan ausgefällt und der Niederschlag mit Dichlor- methan/Hexan/lsopropanol (20:10:1) an Kieselgei chromatographiert.

Ausbeute: 1,83 g (65 %)

b) 1 ,4,7,10,13,16-Hexakis-[N,N-bis-(benzyloxycarbonylaminoethyI)-glycyI]- 1 ,4,7,10,13,16-hexaazacyclooctadecan

1 ,41 g (1 mmol) des im vorstehenden Beispiel beschriebenen Hexa- Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 60 Minuten wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene Hexamin- hydrobromid mit Ether gewaschen, im Vakuum getrocknet und ohne weitere Reinigung in die weiter unten beschriebene Reaktion eingesetzt.

Ausbeute: 1,09 g (quantitativ)

1 ,09 g (1 mmol) des so hergestellten Hydrobromids werden in 50 ml Acetonitril suspendiert und 3 ml Triethylamin zugegeben. Dann werden 3,54 g (20 mmol) N- Benzyloxycarbonylaziridin ((hergestellt nach J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 , 21- 26, 1993) zugegeben und 5 Tage unter Stickstoff unter Rückfluß erhitzt. Man dampft zur Trockne ein, nimmt mit 100 ml Methylenchlorid auf und wäscht 2 mal mit je 100 ml 5 prozentiger KaliumcarbonatLösung. Die Methylenchloridphase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wird an

Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/Methanol/Triethylamin

20:1 :0,1 ).

Ausbeute: 2,29 g (84 % d. Th.) eines blaßgelben zähen Öls c) Vollgeschütztes Benzyloxycarbonyl-24-Polyamin aus dem mit

Benzyloxycarbonyl-aziridin alkylierten 12-Amin 1 ,4,7, 10,13, 16-Hexakis-[N,N- bis-(aminoethyl)-glycyl]-1 ,4,7,10,13,16-hexaazacyclooctadecan

1,36 g (0,5 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 17b werden in 100 ml

Methanol gelöst und 3 g Peariman-Katalysator (Palladiumhydroxid auf Aktivkohle;

Fluka) zugegeben. Man hydriert 10 Stunden bei 5 bar (Raumtemperatur). Es wird vom Katalysator abfiltriert, das Filtrat zur Trockne eingedampft und ohne weitere

Reinigung in die folgende Reaktion eingesetzt.

Ausbeute: 0,56 g (quantitativ)

Zu 0,56 g (0,5 mmol) des so hergestellten freien 12-Amins in 50 ml Acetonitril werden 3,54 g (20 mmol) N-Benzyloxycarbonylaziridin (hergestellt nach J. Chem.

Soc, Perkin Trans. 1, 21-26, 1993) zugegeben und 5 Tage unter Stickstoff unter

Rückfluß erhitzt. Man dampft zur Trockne ein, nimmt mit 100 ml Methylenchlorid auf und wäscht 2 mal mit je 100 ml 5 prozentiger Kaliumcarbonat-Lösung. Die

Methylenchloridphase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft.

Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel:

Methylenchlorid/Methanol/Triethylamin 20:1 :0,1 ).

Ausbeute: 2,23 g (83 % d. Th.) eines blaßgelben zähen Öls

d) Tetracosakis-{3-(4-natriumcarboxylatomethoxyacetylamino)-5-(2,3-dihydroxy- propylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-Derivat des deblockierten 24-Amins aus Beispiel 17c 2,69 g (0,50 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 17c werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 24-Amin-hydrobromid mit Ether gewaschen und im Vakuum

getrocknet.

Der Rückstand wird anschließend in Wasser aufgenommen und zu einer bei Raumtemperatur unter Argonatmosphäre gerührten Lösung von 16,1 g

(18,0 mmol) des unter Beispiel 5b hergestellten Säurechlorids und 5,5 ml (40 mmol) Triethylamin in 100 ml wasserfreiem N,N-Dimethylformamid zugegeben. Der Ansatz wird 3 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 36 ml 2n

Natronlauge versetzt und 2 Stunden bei 50°C gerührt. Nach Eindampfen im Vakuum erhält man ein gelbliches Öl, das in Wasser gelöst wird. Die wässrige Lösung wird auf ph 7,3 eingestellt, filtriert und das Filtrat einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose-Membranfilter (Porengröße 0,45 mm, Sartorius) filtriert und

gefriergetrocknet.

Ausbeute: 8,85 g (87,6 % d. Th.) gelbliches Lyophilisat.

Beispiel 18

Tetracosakis-{3-(4-natriumcarboxylatomethoxyacetylamino)-5-(2,3-dihydroxy- propylcarbamoyl)-2,4,6-triiodbenzoyl}-octakis-(4-natriumcarboxylatomethoxy- acetylamino)-Derivat des deblockierten 32-Amins aus Beispiel 7c

4,17 g (0,5 mmol) des in Beispiel 7c beschriebenen Poly-Benzyloxycarbonylamins werden in Eisessig gelöst und unter Rühren mit 33 prozentigem Bromwasserstoff in Eisessig versetzt. Nach 3 Stunden wird mit Diethylether die begonnene Fällung vervollständigt, das entstandene 32-Amin-hydrobromid mit Diethylether gewaschen und im Vakuum getrocknet.

Der Rückstand wird anschließend in Wasser aufgenommen und zu einer bei Raumtemperatur unter Argonatmosphäre gerührten Lösung von 16,1 g

(18,0 mmol) des unter Beispiel 5b hergestellten Säurechlorids und 5,5 ml (40 mmol) Triethylamin in 100 ml wasserfreiem N,N-Dimethylformamid zugegeben. Der Ansatz wird 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 1,16 g (10,0 mmol) Diglykolsäureanhydrid versetzt und weitere 24 Stunden gerührt. Anschließend gibt man 50 ml 2 N Natronlauge zu und rührt 1 ,5 Stunden bei 50ºC. Die Lösung wird nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur mit 2 N Salzsäure neutralisiert und filtriert. Der Rückstand wird in Wasser aufgenommen und einer Ultrafiltration unterzogen, wobei niedermolekulare Bestandteile durch eine Hohlfasermembran (H1 P3-20, Amicon) abgetrennt werden. Die wäßrige Produktlösung wird über ein Cellulose-Membranfilter (Porengröße 0,45 μm, Sartorius) filtriert und gefriergetrocknet.

Ausbeute: 41,1 g (87,3 % d. Th.) farbloses Lyophilisat

Blutspiegel an Ratten (Figur 1)

Konzentrations-Zeit Verlauf (Blutspiegel) im Blut der Ratte nach einmaliger intravenöser Gabe von 400 mg lod/kg der makromolekularen Substanz nach Beispiel Nr. 18 im Vergleich zu dem monomeren nichtionischen lopromid. Die Daten sind an jeweils drei Tieren erhoben worden und repräsentieren den Mittelwert.

In den ersten zehn Minuten nach Applikation zeigt sich - trotzt gleicher Dosis - ein deutlich höherer Blutspiegel für das makromolekulare

Kontrastmittel nach Beispiel Nr. 18 im Vergleich zu lopromid. Die höhere Konzentration im Blut ist darauf zurückzuführen, daß sich die Verteilung der Substanz nach Beispiel Nr. 18 vorwiegend auf den Gefäßraum beschränkt, wohingegen lopromid in den gesamten extrazellulären Raum verteilt wird, was zu einer geringeren

Konzentration im Blutraum führt.

Gefäßraum beschränkt, wohingegen lopromid in den gesamten extrazellulären Raum verteilt wird, was zu einer geringeren Konzentration im Blutraum führt.

Claims

Patentansprüche

1.) lodhaltige dendrimere Polymere der allgemeinen Formel I

A-{X-[Y-(Z-< W-D_w >_z)_y]_x}_a (I), worin

A für einen stickstoffhaltigen Kaskadenkern der Basismultiplizität a, X, Y unabhängig voneinander für eine direkte Bindung oder eine Kaskadenreproduktionseinheit der Reproduktionsmultiplizität x bzw y,

Z, W unabhängig voneinander für eine Kaskadenreproduktionseinheit der Reproduktionsmultiplizität z bzw. w,

D für eine Gruppe T-B, worin B für einen Benzolring der allgemeinen Formel II steht,

oder für eine Gruppe der Formel -(CO)_q-U-COOH steht, worin

R¹ und R² jeweils unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom,

eine -CONR³R⁴- oder -NR⁶COR⁵-Gruppe bedeuten, wobei

R³, R⁴ entweder unabhängig voneinander für ein Wasserstoffatom oder eine geradkettige, verzweigte oder cyclische Alkylgruppe mit bis zu 12 C-Atomen, die gegebenenfalls durch 1-5 Hydroxy- und/oder 1-3 C₁- C₃-Alkoxy- und/oder 1-3 Carboxy-, Sulfo- oder Phosphonogruppe(n) substituiert ist oder R³ und R⁴ gemeinsam mit dem Stickstoffatom für einen heterocyclischen 5- oder 6-Ring steht, der gegebenenfalls ein Sauerstoffatom, eine SO₂-Gruppe oder einen N-CO-R⁷-Rest enthält,

R⁷ für eine Carboxygruppe oder einer Alkylgruppe mit bis zu

12 C-Atomen steht, die gegebenenfalls 1-5 Hydroxy-, 1-3 C₁-C₃-

Alkoxy- oder 1-3 Carboxy-, Sulfo- oder Phosphonogruppe(n) enthält,

R⁵ für eine Carboxygruppe oder eine geradkettige oder verzweigte

C₁-C₁₂-Alkylgruppe steht, die gegebenenfalls durch ein Sauerstoffatom unterbrochen ist, die weiterhin gegebenenfalls eine

Carbonylgruppe enthält und/oder gegebenenfalls durch 1-3 Carboxy-,

Sulfo- oder Phosphono- und/oder 1-5 Hydroxy- und/oder 1-3 C₁-C₃-Alkoxygruppe(n) und/oder eine gegebenenfalls

carboxymethylsubstituierte Iminogruppe substituiert ist,

R⁶ für ein Wasserstoffatom, oder eine geradkettige oder verzweigte

Alkylgruppe mit bis zu 12 C-Atomen steht, die gegebenenfalls durch

1 -3 Carboxy-, Sulfo- oder Phosphonogruppe(n) und/oder gegebenenfalls durch 1-3 Hydroxygruppe(n) und/oder 1-3 C₁-C₃- Alkoxygruppe(n) substituiert ist

T für eine Gruppe -CO-, -CS-, -CONH-, -CSNH-, COCH₂N(R⁶)CO, - CHR-CHR-CONH-,

a für die Ziffern 2 bis 12 steht, x, y, z unabhängig voneinander für die Ziffern 1 bis 4 stehen und w für die Ziffern 1 bis 8 steht, mit der Maßgabe, daß mindestens zwei Reproduktionseinheiten unterschiedlich sind und daß für das Produkt der Multiplizitäten gilt

16≤a · x · y · z · w≤ 128,

U für eine Gruppe (CH₂)_u q für die Ziffern 0 oder 1 und u für die Ziffern 1-4 steht sowie deren Salze mit physiologisch unbedenklichen organischen und/oder anorganischer! Basen, Aminosäuren oder Aminosäureamiden. 2.) Kaskaden-Polymer-Komplexe gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß A

ein Stickstoffatom,

U¹ für Q¹ oder E,

U² für Q² oder E mit

E in der Bedeutung der Gruppe

worin

o für die Ziffern 1 bis 6,

Q¹ für ein Wasserstoffatom oder Q² und

Q² für eine direkte Bindung

M für eine C₁-C₁₀-Alkylenkette, die gegebenenfalls durch 1 bis 3

Sauerstoffatome unterbrochen ist und/oder gegebenenfalls mit 1 bis 2 Oxogruppen substituiert ist,

R° für einen verzweigten oder unverzweigten C₁-C₁₀-Alkylrest, eine Nitro-,

Amino-, Carbonsäuregruppe oder für die Gruppe stehen,

wobei die Anzahl Q² der Basismultiplizität a entspricht.

3.) Kaskaden-Polymer-Komplexe gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die

Kaskadenreproduktionseinheiten X, Y, Z und W unabhängig voneinander für

bestimmt,

worin

U¹ für Q¹ oder E,

U² für Q² oder E mit

E in der Bedeutung der Gruppe

wobei

o für die Ziffern 1 bis 6,

Q¹ für ein Wasserstoffatom oder Q² ,

Q² für eine direkte Bindung,

U³ für eine C₁-C₂₀-Alkylenkette, die gegebenenfalls durch 1 bis 10

Sauerstoffatome und/oder 1 bis 2 -N(CO)_q-R²-, 1 bis 2 Phenylen- und/oder 1 bis 2 Phenylenoxyreste unterbrochen ist und/oder gegebenenfalls durch 1 bis 2 Oxo-, Thioxo-, Carboxy-, C₁-C₅- Alkylcarboxy-, C ₁-C₅-Alkoxy-, Hydroxy-, C₁-C₅-alkylgruppen substituiert ist, wobei q für die Ziffern 0 oder 1 und

R² für ein Wasserstoffatom, einen Methyl- oder einen Ethylrest steht, der gegebenenfalls mit 1 - 2 Hydroxy- oder 1 Carboxygruppe(n) substituiert ist,

L für ein Wasserstoffatom oder die Gruppe V für die Methingruppe steht wenn gleichzeitig U⁴ eine direkte

Bindung oder die Gruppe M bedeutet und U⁵ eine der Bedeutungen von

U³ besitzt oder

V für die Gruppe stent' wenn gleichzeitig U⁴ und U⁵

identisch sind und die direkte Bindung oder die Gruppe M bedeuten.

4.) lodhaltige dendrimere Polymere gemäß Anspruch 1, dadurch

gekennzeichnet, daß der an die terminalen Stickstoffatome der letzten Generation der Reproduktionseinheit W gebundene triiodierte Benzolrest B für einen Rest der allgemeinen Formel II

steht, worin

R¹ und R² unabhängig voneinander für einen Rest der Formel

-CONHCH₂CH(OH)CH₂(OH),

-NHCOCH₂CH₂COOH, -NHCOCH₂CH₂COONa,

-CONHCH₂CO₂H,

-CONHCH₂CO₂Na,

-CON(CH₂CO₂Na)₂ ,

-CON(CH₂CO₂H)₂ ,

-NHCOCOOH,

-NHCOCOONa,

-NHCOCH₂OCH₂COOH,

-NHCOCH₂OCH₂COONa,

-NHCOCH₂OCH₃ ,

-NHCOCH₃ ,

-N(CH₂COOH)-COCH₂OCH₃ ,

-N(CH₃)COCH₂OCH₃ ,

-CONHCH₂CH₂SO₂Na,

-CONHCH₂PO₃Na₂ oder

-NHCH₂OCH₂COONa steht.

5.) lodhaltige dendrimere Polymere gemäß Anspruch 4, dadurch

gekennzeichnet, daß die

für U⁶ stehende C₁-C₂₀-Alkylenkette die Gruppen

-CH₂-, -CH₂NHCO-, -NHCOCH₂O-, -NHCOCH₂OC₆H₄-, -N(CH₂CO₂H)-, -NHCOCH₂C₆H₄-, -NHCSNHC₆H₄-, -CH₂OC₆H₄-, -CH₂CH₂O-, enthält und/oder durch die Gruppen -COOH, -CH₂COOH

substituiert ist.

6.) lodhaltige dendrimere Polymere gemäß Anspruch 4, dadurch

gekennzeichnet, daß

U⁶ für eine

-CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -C₆H₄-, -C₆H₁₀-, -CH₂C₆H₅-, -CH₂NHCOCH₂CH(CH₂CO₂H)-C₆H₄-,

-CH₂NHCOCH₂OCH₂-,

-CH₂NHCOCH₂C₆H₄-,

-CH₂NHCSNH-C₆H₄-CH(CH₂COOH)CH₂-,

-CH₂OC₆H₄-N(CH₂COOH)CH₂-,

-CH₂NHCOCH₂O(CH₂CH₂O)4-C₆H₄-,

-CH₂O-C₆H₄-,

-CH₂CH₂-O-CH₂CH₂-, -CH₂CH₂-O-CH₂CH₂-O-CH₂CH₂-,

7.) lodhaltige dendrimere Polymere gemäß Anspruch 3, dadurch

gekennzeichnet, daß der in den Kaskadenreproduktionseinheiten X, Y, Z und W enthaltene Rest U³ für -CO-, -COCH₂OCH₂CO-, -COCH₂-, -CH₂CH₂-, -CONHC₆H₄-, -COCH₂CH₂CO-, -COCH₂-CH₂CH₂CO-oder

-COCH₂CH₂CH₂CH₂CO- steht,

der Rest U⁴ für eine direkte Bindung oder für -CH₂CO- steht,

der Rest U⁵ für eine direkte Bindung oder für -(CH₂)₄-, -CH₂CO-, -CH(COOH)-,

CH₂OCH₂CH₂-, -CH₂C₆H₄-, CH₂-C₆H₄OCH₂CH₂- steht oder

der Rest E für eine Gruppe

8.) lodhaltige dendrimere Polymere gemäß Anspruch 3, dadurch

gekennzeichnet, daß die Kaskadenreproduktionseinheiten X, Y, Z und W unabhängig voneinander für

-CH₂CH₂NH-; -CH₂CH₂N< ;

-COCH(NH-)(CH₂)₄NH-; -COCH(N< )(CH₂)₄N< ;

-COCH₂OCH₂CON(CH₂CH₂NH-)₂; -COCH₂OCH₂CON(CH₂CH₂N< )₂ ;

-COCH₂N(CH₂CH₂NH-)₂; -COCH₂N(CH₂CH₂N< )₂;

-COCH₂NH-; -COCH₂N< ; -COCH₂CH₂CON(CH₂CH₂NH-)₂; -COCH₂CH₂CON(CH₂CH₂N< )₂ ;

-COCH₂OCH₂CONH-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂NH-)₂]₂;

-COCH₂OCH₂CONH-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂N< )₂]₂ ;

-COCH₂CH₂CO-NH-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂NH-)₂]₂ ;

-COCH₂CH₂CO-NH-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂N<)₂]₂ ;

-CONH-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂NH-)₂]₂ ;

-CONH-C₆H₄-CH[CH₂CON(CH₂CH₂N<)2]₂ ;

-COCH(NH-)CH(COOH)NH-; -COCH(N< )CH(COOH)N< ;

9.) lodhaltige dendrimere Polymere gemäß Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß

stehen.

10.) Pharmazeutische Mittel enthaltend mindestens ein jodhaltiges

dendrimeres Polymer nach Anspruch 1, gegebenenfalls mit den in der Galenik üblichen Zusätzen.

11.) Verwendung von mindestens einem iodhaltigen dendrimeren Polymer nach Anspruch 1 für die Herstellung von Mitteln für die Röntgendiagnostik.

12) Verwendung von mindestens einem iodhaltigen dendrimeren Polymeren nach Anspruch 1 für die Herstellung von Mitteln für die Röntgen-Diagnostik von Gefäßerkrankungen.

13) Verfahren zur Herstellung der iodhaltigen dendrimeren Polymere gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man dendrimere Polymere der allgemeinen Formel I'

A-{X-[Y-(Z-( W-ß_w )₂)_y]_x}_a (I'), worin

A für einen stickstoffhaltigen Kaskadenkern der Basismultiplizität a,

X, Y unabhängig voneinander für eine direkte Bindung oder eine

Kaskadenreproduktionseinheit der Reproduktionsmultiplizität x bzw. y,

Z, W unabhängig voneinander für eine Kaskadenreproduktionseinheit der

Reproduktionsmultiplizität z bzw. w,

a für die Ziffern 2 bis 12 und

x, y, z unabhängig voneinander für die Ziffern 1 bis 4 stehen, w für die Ziffern 1 bis 8 steht und

ß für die Bindungsstelle der terminalen Amino-Gruppen der letzten

Generation der Reproduktionseinheit W stehen mit der Maßgabe, daß mindestens zwei Reproduktionseinheiten unterschiedlich sind und daß für das Produkt der Multiplizitäten gilt

16≤a · x y · z · w≤ 128, mit Verbindungen der allgemeine Formel II'

T-B' (II),

worin

T für einen eine Carbonyl-, Thiocarbonyl-, aktivierte Carbonyl- oder eine

CHR=CR-Gruppe enthaltenden Rest steht, der durch die Reaktion in T umgewandelt wird, wobei

R die Bedeutung eines Wasserstoffatoms oder einer Methylgruppe hat und

B' die für B angegebene Bedeutung eines Triiodaromaten hat, wobei in

B enthaltene Carboxy- und Hydroxygruppen jedoch in geschützter Form vorliegen,

umsetzt und anschließend die gegebenenfalls nicht durch die Reste Z besetzten Positionen ß mit einem den Rest -(CO)q-U-COOH einführenden Reagenz acyliert oder alkyliert, worin

U für eine Gruppe (CH₂)_u steht

q für die Ziffern 0 oder 1 und

u für die Ziffern 1 -4 steht.

14.) Verfahren zur Herstellung der pharmazeutischen Mittel gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man das in Wasser oder physiologischer Salzlösung gelöste oder suspendierte Jodhaltige dendrimere Polymer,

gegebenenfalls mit den in der Galenik üblichen Zusätzen, in eine für die enterale oder parenterale Applikation geeignete Form bringt.