EP0602026A1 - New organic derivative of a metal with a phospholipid structure, use of this derivative as a biomediator, process for isolating this derivative and pharmaceutical compositions containing it - Google Patents

New organic derivative of a metal with a phospholipid structure, use of this derivative as a biomediator, process for isolating this derivative and pharmaceutical compositions containing it

Info

Publication number
EP0602026A1
EP0602026A1 EP90917273A EP90917273A EP0602026A1 EP 0602026 A1 EP0602026 A1 EP 0602026A1 EP 90917273 A EP90917273 A EP 90917273A EP 90917273 A EP90917273 A EP 90917273A EP 0602026 A1 EP0602026 A1 EP 0602026A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
derivative
organic
metal
linked
acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
EP90917273A
Other languages
German (de)
French (fr)
Inventor
Jean-Claude Maurel
Jean-Pierre Masse
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Ir2m
Original Assignee
Ir2m
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ir2m filed Critical Ir2m
Publication of EP0602026A1 publication Critical patent/EP0602026A1/en
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09—Esters of phosphoric acids
    • C07F9/10—Phosphatides, e.g. lecithin
    • C07F9/106—Adducts, complexes, salts of phosphatides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders

Definitions

  • New organic derivative of a metal with a phospholipid structure use of this derivative as a biomediation agent, process for the isolation of this derivative and pharmaceutical compositions containing it.
  • the invention essentially relates to a new organic derivative of a metal with a phospholipid structure, the use of this derivative as a biomediating agent, a process for isolating this derivative and pharmaceutical compositions containing it.
  • this new formulation must be simple to prepare and be sufficiently stable over time to allow therapeutic use under the best conditions.
  • the present invention solves the technical problems stated above in an extremely simple manner, by providing the formulation of a metal, preferably a metal of valence at least equal to 3, which exhibits remarkable bioavailability, as well as very low toxicity and excellent stability over time.
  • the present invention provides a new organic derivative of a metal, characterized in that it consists of a derivative of a metal, preferably of valence at least equal to 3, with an organic compound comprising at least one phospholipid which confers water-solubility or hydromiscibility on the organic derivative of said metal.
  • the aforementioned metal is linked to the phosphate function of the phospholipid.
  • the aforementioned metal is linked to a porphyrin group.
  • the phospholipid comprises at least one unsaturated fatty acid, preferably in the ⁇ or ⁇ position relative to the phosphoric acid.
  • this unsaturated fatty acid is a polyunsaturated fatty acid, preferably without conjugation of the ethylenic bonds.
  • this polyunsaturated fatty acid without conjugation of the ethylenic bonds has a C 18 to C 20 chain and is chosen from 9, 12-linoleic acid, 9, 12, 15-linolenic acid, 5 acid. , 8, 11, 14-arachidonic.
  • the above-mentioned phopholipid comprises at least one phosphoric acid function, preferably combined with an unsaturation of the phospholipid chain.
  • This acid function can be either in free form or in form linked to an unsubstituted or substituted quaternary ammonium group, or an alkylamine in which the alkyl group is a lower C 1 -C 5 , preferably C 1 -C 3, alkyl group. .
  • the alkylamine substituent is linked by its amino function to a phenol or a phenolic acid, preferably from the series of caffeic acids.
  • caffeic acid mention will be made of caffeic, ferulic, chlorogenic, salicylic acid as well as its derivatives such as cyclic salt aldehyde, lower C 1 -C 5 alkyl salicylate, in particular methyl salicylate, monotropitoside, spireoside, hyperoside, salicoside or salicine.
  • the alkylamine substituent can be linked to a phenol or a phenolic acid itself linked to a C 5 or C 6 sugar, in particular mannitol or mannose.
  • the phospholipid chain is preferably at most 60 carbon atoms.
  • the aforementioned metal preferably of valence at least equal to 3, is advantageously attached to a phosphate function or to a porphyrin group.
  • the metals M of valence at least equal to 3 are preferably chosen from Se, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Ga, Ge, Sb, Sn, In, Pd, Rh, Ru, Tc , Mo, Nb, Zr, Y, Hf, Ta, W, Re, Os, Ir, Pt, Au, Tl, Pb, Bi, Po.
  • a second acid function of phosphoric acid can be salified by an ion with a valence of less than 3 lighter than the preceding metals and chosen, for example, from Ca, Sr, Li, Cd, Zn, Mg and Ag.
  • the organic derivative of a metal is characterized in that it has the following chemical formula: in which :
  • R 1 - either a C 16 to C 20 fatty acid advantageously having a low degree of unsaturation, in particular a double bond
  • R 2 either an unsaturated fatty acid of C 16 to C 20 preferably having at least 2 degrees of unsaturation
  • R 3 either an unsaturated C 16 to C 20 fatty acid as defined for R 1 or R 2 ,
  • R 4 either H, or a quaternary ammonium group (unsubstituted or substituted, in particular with a positive ionic group itself linked to R 5 , in which R 5 equals a minimum C 5 organic compound preferably chosen from a sugar , phenolic acid); or a C 1 -C 5 alkyl group free or linked to R 5 ;
  • a free acid function of the phosphate group of R 2 or R 3 can be salified with a metal M 3 of valence less than or equal to 2, in particular chosen from Ca, Sr, Li, Cd, Zn, Mg and Ag; M 2 being hydrogen or a metal similar to M 1 .
  • a 1 , A 2 , A 3 , A 4 , A 5 , A 6 , A 7 , A 8 are independently chosen from the usual substituents of chlorophylls, in particular hydrogen, lower C 1 -C 5 alkyl straight chain, branched or cyclic, a vinyl radical, formyl and its esters, acetyl and its esters, propionyl and its esters, acrylyl and its esters, and cyclopentanoyles,
  • M 1 being a metal of valence at least equal to 3, as previously defined,
  • a 1 to A 8 being necessarily a phospholipid substituent as defined above.
  • the valence of at least one metal M 1 or M 2 is equal to 3.
  • the new organic metal derivative according to the invention as defined above is isolated from a plant, preferably from the following families:
  • - Legumes in particular soybeans, broad beans, peas, chickpeas, alfalfa, oats;
  • Urticaceae in particular nettle dioica, urens and parietaries;
  • the present invention relates to a process for isolating the new organic derivative of a metal, as previously defined, characterized in that it includes:
  • the crude pulverulent product obtained is redissolved in a minimum of non-ionized water, or distilled, then subjected to precipitation with an organic solvent, preferably chosen from solvents miscible with water, and selected according to the hydrophilicity of the metal compound sought;
  • the precipitate obtained containing the organic derivative of metal sought in the pure state is subjected to a metal exchange to obtain the salt of a new metal different from that initially contained in the plant.
  • the crude pulverulent product is subjected to precipitation using '' a saturated solution of cadmium chloride to obtain a precipitate which is separated by centrifugation, then redissolved in a carbonated solution, for example of ammonium carbonate, then reprecipitated with an organic solvent miscible with water, preferably an alcohol or a ketone, in particular a lower alcohol such as methanol, ethanol or propanol.
  • M 3 second metal
  • the last precipitate contains the organic derivative of the metal according to the invention, sought, in the pure state, optionally mixed with small proportions of other metals.
  • the precipitated product obtained is redissolved in an aqueous solution containing the metal which it is desired to incorporate, then a new precipitation is carried out with organic solvent miscible with the aforementioned water, which makes it possible to obtain the organic derivative of the desired metal, according to the invention.
  • the extraction solvent used to obtain the crude extract of the plant is advantageously chosen from water / alcohol mixtures lower in C 1 -C 6 , preferably chosen from methanol, ethanol, propanol, isopropanol, n-butanol or iso-butanol.
  • the water / alcohol proportion is advantageously between 75 and 99% water / 1 to 25% alcohol, by weight.
  • organic metal derivative according to the invention can be identified by a silica gel thin layer chromatography technique which is well known to those skilled in the art, in particular using the three solvents mentioned below. below:
  • the chromatogram is then revealed to ninhydrin. There is normally only one task.
  • the organic derivative of purified metal is first dissolved, as obtained according to the process described above, in an aqueous solution which is then added separately. equal with a 2N hydrochloric acid solution and then in an oven at 80 ° C for several hours, in particular about 8 h.
  • fatty acids are identified by gas chromatography
  • the sugars and the glycerides are identified by HPLC and detection by an apparatus capable of measuring a number of particles after elimination of the solvent by vaporization, for example a device marketed by TOUZART and MATIGNON, having the trade name SEDEX 45;
  • Porphyrin is identified by thin layer chromatography according to conventional techniques for identifying porphyrin,
  • the metal is identified by atomic absorption spectroscopy and plasma torch, the device being naturally adjusted according to the metal to be identified, for example device from Applied Research Laboratories, USA, model 3 580 OES.
  • the new organic metal derivative according to the invention described above can naturally be prepared synthetically from the corresponding constituents which are reacted under operating conditions known to those skilled in the art.
  • sources easily accessible for the preparation of this new organic metal derivative according to the invention are constituted not only by plants mentioned above, but also by parts derived from biotechnologies such as the in vitro culture of plants, or so-called callus cultures, that is to say differentiated cell blocks, multiplied from cells rich in complex or fraction of complex , or parts of animal organs. These various parts of organs or cellular organisms are subjected to specific extraction treatments.
  • the invention also covers a use of the organic metal derivative according to the invention, preferably having a valence at least equal to 3, as a biomedical agent or as an active principle for the manufacture of a product for therapeutic use.
  • the organic metal derivatives according to the invention have an immunomodulatory activity and can in this context be usefully used to treat all immune deficiencies, including AIDS, or a neuromodulatory activity, or an anti-inflammatory activity or else anti rheumatic activity, in particular to fight against rheumatoid arthritis.
  • the present invention also covers a pharmaceutical composition, characterized in that it comprises, as active ingredient, at least one organic derivative of a metal according to the invention as defined above.
  • this pharmaceutical composition is characterized in that it is a pharmaceutical composition with immunomodulatory or neuromodulatory activity, or anti-inflammatory or anti-rheumatic activity, in particular anti-rheumatoid arthritis or with activity hypoglycemic or anti-multiple sclerosis.
  • Particularly preferred compounds are an organic derivative of a metal according to the invention in which a gold atom is linked to a phospholipid having anti rheumatoid activity, in particular against rheumatoid arthritis.
  • Another particularly preferred derivative is a derivative of a metal according to the invention in which the metal is aluminum linked to a phospholipid, whose fatty acid is ⁇ -linolenic acid while a ferrulic group choline is linked at the top of the phosphoric or phospholipid chain, this compound being extracted from Reseda phyteuma and having a marked anti-inflammatory activity.
  • Another preferred compound according to the invention is a compound whose metal is Sb or an Sb / Sn pair preferably obtained from the species Angelica, in particular Angelica archangelica, and Angelica sinensis having a particularly effective immunomodulating activity in particular against the HIV virus.
  • Still a particularly preferred compound of the invention is a compound whose metal is vanadium, obtained from urtica dioica, having a persistent hypoglycemic activity.
  • the doses of use of the new organic derivative of a metal according to the invention are from 100 to 300 mg of a final lyophilisate containing at most 5% of the organic derivative of metal according to the invention, for a gastro-resistant capsule.
  • a dose of 200 mg of purified pulverulent product, for example in the form of lyophilisate has a metal content of less than 1 mg.
  • This pulverulent, purified product for example in the form of lyophilisate can be dissolved in an aqueous solvent at a dose of 5% so as to produce injectable galenical forms, or instillable or allowing for example an aerosol use.
  • One of the preferred routes of administration is that of the mucous routes (perlingual, pernasal, suppository, eye drops).
  • the Angelica archangelica plant is picked whole at the maturity of the seeds then dried in the rules of the art and coarsely crushed then agitated mechanically for 4 to 6 days in a mixture at 60oC of ten times its weight of water and once its weight 95% by volume ethanol.
  • tangential filtration is carried out in a filter having a pore diameter of 0.2 ⁇ m, then concentrated on average ten times by reverse osmosis.
  • hydroalcoholic solvent is removed completely by lyophilization, thereby obtaining a crude extract in the form of lyophilisate.
  • the crude extract is redissolved in a minimum of distilled water, at a rate of 5 g per 10 ml.
  • the aqueous solution obtained is subjected to ethanol or methanol precipitation. And we separate the precipitate. Three times are repeated and the last precipitate constitutes the organic derivative of Sb according to the invention.
  • This organic derivative in practice comprises a mixture of
  • this purified product thus obtained are the following: blackish oily product, miscible with water in which the metal can be identified after nitric digestion, either by the reaction with Rhodamine B well known to the analyst chemist, or by spectrography atomic emission.
  • This precipitate constitutes the organic derivative of aluminum according to the invention, having mainly aluminum fixed by a phosphate bond to a phosphatidylcholine structure, itself linked to ferrulic acid.
  • This organic aluminum derivative according to the invention has the following physicochemical characteristics: fatty product of green color, miscible with water and having the reactions of choline, of aluminum and in which the phospholipid by thin layer chromatography.
  • the physicochemical characteristics of this organic derivative of vanadium according to the invention are as follows: brown crystalline powder, soluble in water, the solution of which has a hypoglycemic activity, the powder does not have a melting point but decomposes .
  • This oorganic gold derivative has the following characteristics: Au 3+ form, green brown powder, soluble in water, no melting point but decomposes.
  • Example 5
  • the organic metal derivative according to the purified invention obtained at the end of the procedure of any one of Examples 1 to 4, is dissolved in a weakly acidic solution of mineral acid such as 2N hydrochloric acid and then precipitated by an organic solvent. having allowed its extraction, for example ethanol or methanol.
  • the oily precipitate is isolated by centrifugation, washed with pure acetone, taken up in a volume of distilled water, then lyophilized in the presence of 10% maltodextrin (weight / volume).
  • an organic metal derivative according to the invention comprising an alkylamine function linked to a phenolic acid 'chosen from ferrulic, caffeic or chlorogenic acids.
  • the amino function can be linked to a phenolic acid in the following manner.
  • the lyophilisate obtained from Spirea ulmaria is redissolved in 2 parts of distilled water, then reprecipitated with acetone in sufficient quantity.
  • the precipitate separated by centrifugation is solubility in a solution of 2N hydrochloric acid, then reprecipitated again with a solution of ethanol at 95% by volume in sufficient quantity. After centrifugation, a sample of the mass obtained is taken up in distilled water, then cold titration with an ethanolic solution of 0.1% ferrulic acid in sufficient quantity until a cloudiness appears, or at using a potentiograph, checking the inflection point.
  • the concentration of ferrulic acid to be added to the rest of the precipitate is deduced from the above dosage.
  • Example 9 The procedure is the same as in Example 7, an amorphous product, yellowish white, soluble in water with a very characteristic odor, is obtained.
  • Example 9 An amorphous product, yellowish white, soluble in water with a very characteristic odor, is obtained.
  • a biomediation agent according to the invention is formed by the product obtained directly in the raw state in any one of Examples 1 to 9.
  • the crude extract obtained in any one of Examples 1 to 9, in the form of a dry product is mixed with 5% of its weight of maltodextrin until perfect homogeneity, then stored.
  • This mixture constitutes the active principle of a pharmaceutical composition according to the invention as formulated for example in the following examples.
  • the product obtained according to any one of Examples 1 to 9, is added with its weight of magnesium stearate and ten times its weight with microcrystalline cellulose then intimately homogenized, the mixture obtained is distributed using suitable distribution equipment in gelatin capsule module 2 at a rate of 240 mg per unit.
  • the capsules thus dosed with 25 mg of extract are coated using an apparatus of gum arabic, cellulose ester and titanium oxide. After drying, the capsules obtained are gastro-resistant and packaged in a blister in blister packs of 15 grouped in cases of 2.
  • the product obtained in any one of Examples 1 to 9 is dissolved in a proportion of 5 mg per ml in an excipient for use as a nasal nebulization based on physiological saline, glycerin monoethyl ether of diethyleneglycol.
  • the preparation is packaged in a 30 ml polyethylene bottle fitted with a nasal spray cannula delivering 0.1 ml by pressure. Free on 12
  • Example 1 A - Search for an immunomodulatory activity
  • the organic derivative of an Sb / Sn metal obtained in Example 1 is subjected to tests to demonstrate immunomodulatory activity, according to the following procedure.
  • lymphocytes - monocytes and macrophages The desired effects will be tested in vitro on the cells involved in the immune response (lymphocytes - monocytes and macrophages).
  • membrane antigens will be studied in a flow cytometer in the presence and absence of each of the products.
  • lymphocyte population From the peripheral blood taken from EDTA or heparin, separation of the lymphocyte population.
  • markers are identified by the corresponding monoclonal antibodies which, after fixation, are visualized by an anti-human IgG antibody conjugated to a fluochrome (GAM-FITC).
  • lymphocyte markers
  • Human lymphocytes are collected from peripheral blood by centrifugation on a Ficoll gradient.
  • the cells are: - on the one hand put in the presence of the 2 doses of each product for 24 h and then tested by comparison with untreated cells,
  • Activated lymphocytes may or may not proliferate under the influence of certain drugs.
  • the protocol is the same as above.
  • the activation of macrophage monocytes stimulates their oxidative metabolism which can easily be studied by flow cytometry by taking advantage of the oxidation of dichlorofluorescein, of which only the oxidized form is fluorescent, therefore only the activated cells become fluorescent and are identified by the cytometer. flow.
  • Leukocytes separated from peripheral blood are first contacted with DCF and then:
  • the contacts are made in a thermostatic water bath with continuous stirring and the readings are made with a flow cytometer every 5 min and up to 1 h 30, the oxidative burst not exceeding this duration.
  • Example 1 The product of Example 1 (500 ⁇ g), incubated with the lymphocytes separated by Ficoll gradient and activated by PHA (Phytohemagglutinin) for 24 h, shows an inhibitory effect on the appearance of IL2 receptors.
  • PHA Physicalhemagglutinin
  • Example 2 The product of Example 1, in solution at 5 g per 100 ml, brought into contact with the lymphocytes separated by Ficoll gradient and cultured with the PHA lectin for 72 h, shows a significant inhibition of lymphocyte proliferation.
  • Example 1 (500 ⁇ g) incubated for 1 h with the lymphocytes separated by Ficoll gradient, does not give any significant change in the expression of the lymphocytic Ag of the 2 subjects studied.
  • Anti-inflammatory activity is sought with the organic aluminum derivative according to the invention obtained in Example 2, according to the following procedure based on edema with kaolin.
  • mice Male Wistar layer rats (12 per batch) from the Jardin breeding center were used in this study. The animals are kept under observation for 4 days before the start of the tests. At the start of the test, the animals weigh an average of 90 g. During the observation period, the animals, divided into cages of 5, receive food and drinking water ad libitum and are subjected to a temperature between 21 and 23 C and to a day / dark cycle of 12 h.
  • the animals are fasted the day before.
  • the rats are anesthetized with ether.
  • An incision is made in the upper abdomen and the nebulisate injected into the duodenal loop using a syringe.
  • the muscle wall is then saturated and the skin closed with 2 staples.
  • the kaolin suspension is injected 1/2 h after (0.1 ml - 10g% solution in physiological saline) into the plantar pad of the right hind paw.
  • a batch of control animals serves as a control and receives the excipient.
  • the concentrations of the suspensions used are adjusted so as to administer exactly 1 ml per 100 g of body weight.
  • the swelling percentages are analyzed by the F tests of SNEDECOR and Student t (3).
  • the anti-inflammatory activity is expressed by the percentage reduction in edema in the treated rats compared to the controls according to the following formula:
  • the aluminum derivative Given its activity and its low toxicity, the aluminum derivative therefore presents a real therapeutic interest.
  • mice Male rats of Wistar strain (12 per batch), coming from the Jardin breeding center were used in this study. The animals are kept under observation for 4 days before the start of the tests. At the start of the test, the animals weigh an average of 140 g. During the observation period, the animals, distributed in cages of 5, receive food and drinking water ad libitum and are subjected to a temperature between 21 and 23 ° C and to a day / dark cycle of 12 h.
  • the daily glycemic control did not allow us to demonstrate any hypoglycemic effect during the first 2 days of treatment.
  • a significant and significant drop in blood sugar compared to that of control rats appears from the third day and is maintained on the following days. This is accompanied by an equally significant reduction in weight gain, polyphagia and polydipsia, food and water consumption recovering values tending to approximate that of non-diabetic control rats
  • Figures 1 to 4 report changes in weight (Figure 1), changes in blood sugar (Figure 2), food consumption (Figure 3) and water consumption (Figure 4), based on the indications The above clearly show the effects indicated below.
  • Joint impotence results in a limitation of active movements, or even a fixation of the joint in its relaxed position.
  • Certain anti-inflammatory substances can stop the worsening of arthritis, or even lead to a return to normal joint morphology.
  • mice Male rats of Wistar strain (12 per batch), coming from the Jardin breeding center were used in this study. The animals are kept under observation for 4 days before the start of the tests. At the start of the test, the animals weigh on average 180 g. During the observation period, the animals, divided into cages of 5, receive food and drinking water ad libitum and are subjected to a temperature between 21 and 23 ° C and to a day / dark cycle of 12 h.
  • a suspension in the paraffin of bacteria of the mycobacterium tuberculosis strain is injected into the lower third of the rat tail.
  • the 21 th day after the injection the rats are sorted by morphological signs of arthritic damage they present. Only animals with unilateral or bilateral swelling of the hind legs are retained.
  • a measurement of the volumes of the right and left hind legs is carried out using a piethismometer on the rats previously selected. Homogeneous batches in weight and in% increase in volumes of the right and left hind legs are then formed.
  • Treatment starts on 21 th day after the formation of lots and continues for 13 days at a daily administration.
  • the last measurement (D14) is carried out 24 hours after the last administration.
  • the volume of the hind legs is evaluated before and throughout the duration of the paral treatment in conjunction with a morphological examination; this examination makes it possible to assess and quantify:
  • Ankylosis reflects the limitation or disappearance of the articular movement of the hind legs is credited with an index of 0 to 2 for each of the legs.
  • the basic volume is the volume of the hind legs measured on day 0, before treatment.
  • the protection percentage is determined relative to the volume of the hind legs of the control animals.
  • the effectiveness of the treatment is evaluated as a percentage of swelling of the hind legs of the treated lots (patho animals logic treated) in relation to the volume of the hind legs of the absolute control group in which the arthritis was not carried out (healthy animals).
  • the fractions indicate the nomore of animals affected by swelling of the front legs on the total nomore of animals in each crack.
  • ex. 4 - 400 mg / kg - intraperitoneal route we note a significant regression of the edema; the volume of the hind legs goes from 78 to 59 mm Hg (ie - 25% compared to the initial volume); the% of swelling compared to the absolute control animals is only 19.93% at the end of treatment. Impotence (2.11 to 1.44), ankylosis (1.41 to 0.99) regressed significantly. The number of animals with an attack on the forelegs is reduced (7/9 to 4/9). The% of swelling compared to the absolute control lot goes from 61.9 (D0) to 19.9 (D14). Finally, the% of protection compared to the arthritic control group is 34.65% (D14).
  • Indomethacin - 3 then 1.5 mg / kg - intragastric route the results obtained are quantitatively similar to those of the previous batch; significant decrease from D4 on the volume of the hind legs (76 to 56 mm Hg) or - 26%.
  • The% swelling compared to the absolute test animals is 14.28% at the end of treatment. Impotence (2.00 to 1.30), ankylosis (1.44 to 0.99) and edema of the forelegs (4/9 to 1/5) decrease significantly.
  • The% of swelling compared to the absolute control batch goes from 57.35 (D0) to 14.28 (D14).
  • The% protection compared to the arthritic control group is 37.73% (D14).
  • the gold derivative of the invention in our experimental conditions, did not present any apparent sign of toxicity except for a slight abdominal bloating at the end of treatment: although the statistical analysis did not reveal no significant difference, the indomethacin batch presents a more favorable weight development.
  • the limited weight gain in animals treated with the gold derivative can be interpreted by the intraperitoneal administration of a large quantity of substance, the absorption of which may be problematic and explain the bloating mentioned above.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

L'invention concerne un nouveau dérivé organique d'un métal. Ce dérivé organique de métal est caractérisé en ce qu'il est constitué par un dérivé d'un métal de préférence de valence au moins égale à 3, avec un composé organique comprenant un phospholipide conférant une hydrosolubilité ou hydromiscibilité au dérivé organique dudit métal. Avantageusement, ce phospholipide comprenant au moins un acide gras insaturé du type acide alpha-linolénique ou gamma-linolénique. Les dérivés organiques de métal selon l'invention constituent des agents biomédiateurs précieux et à ce titre constituent des principes actifs de compositions pharmaceutiques ayant diverses activités et notamment une activité immunomodulatrice.The invention relates to a new organic derivative of a metal. This organic metal derivative is characterized in that it consists of a metal derivative preferably of valence at least equal to 3, with an organic compound comprising a phospholipid conferring a water-solubility or hydromiscibility on the organic derivative of said metal. Advantageously, this phospholipid comprising at least one unsaturated fatty acid of the alpha-linolenic or gamma-linolenic acid type. The organic metal derivatives according to the invention constitute precious biomediating agents and as such constitute active principles of pharmaceutical compositions having various activities and in particular an immunomodulatory activity.

Description

Nouveau dérivé organique d'un métal à structure phospholipidique, utilisation de ce dérivé comme agent biomédiateur, procédé d'isolement de ce dérivé et compositions pharmaceutiques le contenant. New organic derivative of a metal with a phospholipid structure, use of this derivative as a biomediation agent, process for the isolation of this derivative and pharmaceutical compositions containing it.
L'invention concerne essentiellement un nouveau dérivé organique d'un métal à structure phospholipidique, l'utilisation de ce dérivé comme agent biomédiateur, un procédé d'isolement de ce dérivé et des compositions pharmaceutiques le contenant. The invention essentially relates to a new organic derivative of a metal with a phospholipid structure, the use of this derivative as a biomediating agent, a process for isolating this derivative and pharmaceutical compositions containing it.
Dans l'état actuel de la technique, on a réalisé diverses formulations du vanadium en vue de le rendre biodisponible dans le cadre du traitement de l'hyperglycémie. Les formulations réalisées jusqu'à présent sont encore très insuffisantes par le fait que leur biodisponibilité est très faible, voire inexistante.  In the current state of the art, various formulations of vanadium have been produced with a view to making it bioavailable in the context of the treatment of hyperglycemia. The formulations produced so far are still very insufficient by the fact that their bioavailability is very low, or even non-existent.
Par ailleurs, il est connu d'utiliser divers extraits de plantes comme agents thérapeutiques. Par exemple, dans le document EP-A-0 266 468 (Natura Médica), il est décrit une composition thérapeutique comportant un extrait organique de plante de la famille des résédacées utile comme agent anti-inflammatoire. De même, dans le document FR-A-2 611 502 (Natura Médica), il est décrit un extrait de racine d'ombellifère obtenu par extraction hydro-alcoolique et son utilisation comme agent thérapeutique ayant une activité diurétique, cardio-vasculai re, antalgique ou antiinflammatoire. Egalement, il est décrit dans le document FR-A-2 624 737 (Natura Médica), un extrait de feuille de cassis obtenu par extraction hydro-alcoolique et son utilisation comme agent thérapeutique ayant une activité antalgique et anti- inflammatoire.  Furthermore, it is known to use various plant extracts as therapeutic agents. For example, in document EP-A-0 266 468 (Natura Médica), there is described a therapeutic composition comprising an organic extract of plant from the family of resedaceae useful as an anti-inflammatory agent. Likewise, in document FR-A-2 611 502 (Natura Médica), an extract of umbelliferous root obtained by hydro-alcoholic extraction and its use as a therapeutic agent having a diuretic, cardiovascular activity, is described, analgesic or anti-inflammatory. Also, it is described in document FR-A-2 624 737 (Natura Médica), an extract of blackcurrant leaf obtained by hydro-alcoholic extraction and its use as a therapeutic agent having analgesic and anti-inflammatory activity.
Ces extraits de plantes décrits dans ces documents sont t rès i ntéressant s mai s i ls ne pe rmettent pas de t ra i te r eff i ca- cernent des affections qui nécessitent l'emploi de métaux possédant une valence au moins égale à 3. Or, dans l'état actuel de la technique, les propositions de formulation de métaux possédant une valence au moins égale à 3 en vue de les rendre biodisponibles ont échoué car leur biodisponibilité est faible et leur toxicité élevée. La présente invention a donc pour but de résoudre le nouveau problème technique consistant en la fourniture d'une nouvelle formulation de métaux, de préférence de métaux possédant une valence au moins égale à 3, présentant une excellente biodisponibilité ainsi qu'une très faible toxicité. These plant extracts described in these documents are very interesting if they do not allow you to treat any affections which require the use of metals having a valence at least equal to 3. However, in the current state of the art, the proposals for formulating metals having a valence at least equal to 3 in order to make them bioavailable have failed because their bioavailability is low and their toxicity high. The present invention therefore aims to solve the new technical problem of providing a new formulation of metals, preferably metals having a valence at least equal to 3, having excellent bioavailability and very low toxicity.
De préférence, cette nouvelle formulation doit être simple à préparer et être suffisamment stable dans le temps pour permettre l'utilisation thérapeutique dans les meilleures conditions.  Preferably, this new formulation must be simple to prepare and be sufficiently stable over time to allow therapeutic use under the best conditions.
La présente invention résoud les problèmes techniques énoncés ci-dessus d'une manière extrêmement simple, en fournissant la formulation d'un métal, de préférence d'un métal de valence au moins égale à 3, qui présente une biodisponibilité remarquable, ainsi qu'une très faible toxicité et une excellente stabilité dans le temps.  The present invention solves the technical problems stated above in an extremely simple manner, by providing the formulation of a metal, preferably a metal of valence at least equal to 3, which exhibits remarkable bioavailability, as well as very low toxicity and excellent stability over time.
Ainsi, selon un premier aspect, la présente invention fournit un nouveau dérivé organique d'un métal, caractérisé en ce qu'il est constitué par un dérivé d'un métal, de préférence de valence au moins égale à 3, avec un composé organique comprenant au moins un phospholipide conférant une hydrosolubilité ou hydromiscibi lité au dérivé organique dudit métal.  Thus, according to a first aspect, the present invention provides a new organic derivative of a metal, characterized in that it consists of a derivative of a metal, preferably of valence at least equal to 3, with an organic compound comprising at least one phospholipid which confers water-solubility or hydromiscibility on the organic derivative of said metal.
Selon une variante de réalisation avantageuse, le métal précité est lié à la fonction phosphate du phospholipide.  According to an advantageous alternative embodiment, the aforementioned metal is linked to the phosphate function of the phospholipid.
Selon une autre variante de réalisation, le métal précité est lié à un groupe porphyrine.  According to another alternative embodiment, the aforementioned metal is linked to a porphyrin group.
Selon un mode de réalisation avantageux, le phospholipide comprend au moins un acide gras insaturé, de préférence en position α ou β par rapport à l'acide phosphorique.  According to an advantageous embodiment, the phospholipid comprises at least one unsaturated fatty acid, preferably in the α or β position relative to the phosphoric acid.
Selon un mode de réalisation avantageux, cet acide gras insaturé est un acide gras poly-insaturé, de préférence sans conjugaison des liaisons éthyléniques. Avantageusement, cet acide gras poly-insaturé sans conjugaison des liaisons éthyléniques a une chaîne en C18 à C20 et est choisi parmi l'acide 9, 12-linoléique, l'acide 9, 12, 15-linolénique, l'acide 5, 8, 11, 14-arachidonique. According to an advantageous embodiment, this unsaturated fatty acid is a polyunsaturated fatty acid, preferably without conjugation of the ethylenic bonds. Advantageously, this polyunsaturated fatty acid without conjugation of the ethylenic bonds has a C 18 to C 20 chain and is chosen from 9, 12-linoleic acid, 9, 12, 15-linolenic acid, 5 acid. , 8, 11, 14-arachidonic.
Encore de préférence, il s'agit de l'acide α-linolénique ou γ-linolénique. Selon un autre mode de réalisation particulièrement avantageux de l'invention, le phopholipide précité comprend au moins une fonction acide phosphorique, de préférence conjuguée avec une insaturation de la chaîne phospholipidique. Cette fonction acide peut être soit sous forme libre, soit sous forme liée à un groupement ammonium quaternaire non substitué ou substitué, oualkylamine dans lequel le groupe alkyle est un groupe alkyle inférieur en C1-C5, de préférence en C1-C3. More preferably, it is α-linolenic or γ-linolenic acid. According to another particularly advantageous embodiment of the invention, the above-mentioned phopholipid comprises at least one phosphoric acid function, preferably combined with an unsaturation of the phospholipid chain. This acid function can be either in free form or in form linked to an unsubstituted or substituted quaternary ammonium group, or an alkylamine in which the alkyl group is a lower C 1 -C 5 , preferably C 1 -C 3, alkyl group. .
Selon une autre variante de réalisation particulièrement avantageuse, le substituant alkylamine est lié par sa fonction aminé à un phénol ou un acide phénolique de préférence de la série des acides caféiques. Comme acide caféique particulièrement préféré, on citera l'acide caféique, férulique, chlorogénique, salicylique ainsi que ses dérivés tels que l'aldéhyde sali cylique, le salicylate d'alkyle inférieur en C1-C5, en particulier le salicylate de méthyle, le monotropitoside, le spiréoside, l'hyperoside, le salicoside ou le salicine. According to another particularly advantageous alternative embodiment, the alkylamine substituent is linked by its amino function to a phenol or a phenolic acid, preferably from the series of caffeic acids. As particularly preferred caffeic acid, mention will be made of caffeic, ferulic, chlorogenic, salicylic acid as well as its derivatives such as cyclic salt aldehyde, lower C 1 -C 5 alkyl salicylate, in particular methyl salicylate, monotropitoside, spireoside, hyperoside, salicoside or salicine.
Selon un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le substituant alkylamine peut être lié à un phénol ou un acide phénolique lui-même lié à un sucre en C5 ou C6, en particulier le mannitol ou le mannose. According to another particularly advantageous embodiment, the alkylamine substituent can be linked to a phenol or a phenolic acid itself linked to a C 5 or C 6 sugar, in particular mannitol or mannose.
La chaîne phospholipidique est de préférence au maximum de 60 atomes de carbone.  The phospholipid chain is preferably at most 60 carbon atoms.
Le métal précité, de préférence de valence au moins égale à 3 est avantageusement fixé à une fonction phosphate ou à un groupe porphyrine. Les métaux M de valence au moins égale à 3 sont de préférence choisis parmi Se, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Ga, Ge, Sb, Sn, In, Pd, Rh, Ru, Tc, Mo, Nb, Zr, Y, Hf, Ta, W, Re, Os, Ir, Pt, Au, Tl, Pb, Bi, Po.  The aforementioned metal, preferably of valence at least equal to 3, is advantageously attached to a phosphate function or to a porphyrin group. The metals M of valence at least equal to 3 are preferably chosen from Se, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Ga, Ge, Sb, Sn, In, Pd, Rh, Ru, Tc , Mo, Nb, Zr, Y, Hf, Ta, W, Re, Os, Ir, Pt, Au, Tl, Pb, Bi, Po.
Selon un autre mode de réalisation particulier de l'invention, une deuxième fonction acide de l'acide phosphorique peut être salifiée par un ion de valence inférieure à 3 plus léger que les métaux précédents et choisis, par exemple, parmi le Ca, Sr, Li, Cd, Zn, Mg et Ag.  According to another particular embodiment of the invention, a second acid function of phosphoric acid can be salified by an ion with a valence of less than 3 lighter than the preceding metals and chosen, for example, from Ca, Sr, Li, Cd, Zn, Mg and Ag.
Selon un autre mode de réalisation particulièrement avantageux de l'invention, le dérivé organique d'un métal est caractéri sé en ce qu' i l présente la formule chimi que généra le suivante : dans laquelle : According to another particularly advantageous embodiment of the invention, the organic derivative of a metal is characterized in that it has the following chemical formula: in which :
R1- = soit un acide gras en C16 à C 20 ayant avantageusement un faible degré d' insaturation, en particulier une double liaison), R 1 - = either a C 16 to C 20 fatty acid advantageously having a low degree of unsaturation, in particular a double bond),
= soit un noyau porphyrine lié à un métal M1 ayant une valence supérieure ou égale à 3 telle que précédemment définie, = either a porphyrin nucleus linked to a metal M 1 having a valence greater than or equal to 3 as defined above,
= soit un groupe X-OH dans lequel X = (CH2)n, n étant égal à 0, 1 ou 2. = either an X-OH group in which X = (CH 2 ) n , n being equal to 0, 1 or 2.
R2 = soit un acide gras insaturé de C16 à C20 de préférence ayant au moins 2 degrés d' insaturation, R 2 = either an unsaturated fatty acid of C 16 to C 20 preferably having at least 2 degrees of unsaturation,
= soit une fonction phosphate de formule :  = either a phosphate function of formula:
- -
R3 = soit un acide gras insaturé en C16 à C20 tel que défini pour R1 ou R2, R 3 = either an unsaturated C 16 to C 20 fatty acid as defined for R 1 or R 2 ,
= soit un groupe phosphate de formule :  = either a phosphate group of formula:
à la condition que R2 et R3 ne peuvent pas être simultanément un groupe phosphate. R4 = soit H, soit un groupe ammonium quaternaire (non substitué ou substitué, en particulier avec un groupe ionique positif lui-même lié à R5, dans lequel R5 égale un composé organique en C5 minimum de préférence choisi parmi un sucre, un acide phénolique) ; soit un groupe alkyl en C1-C5-amino libre ou lié à R5 ; provided that R 2 and R 3 cannot simultaneously be a phosphate group. R 4 = either H, or a quaternary ammonium group (unsubstituted or substituted, in particular with a positive ionic group itself linked to R 5 , in which R 5 equals a minimum C 5 organic compound preferably chosen from a sugar , phenolic acid); or a C 1 -C 5 alkyl group free or linked to R 5 ;
dans la formule précédente, une fonction acide libre du groupe phosphate de R2 ou R3 peut être salifiée par un métal M3 de valence inférieure ou égale à 2, en particulier choisi parmi le Ca, Sr, Li, Cd, Zn, Mg et Ag ; M2 étant l'hydrogène ou un métal similaire à M1. in the above formula, a free acid function of the phosphate group of R 2 or R 3 can be salified with a metal M 3 of valence less than or equal to 2, in particular chosen from Ca, Sr, Li, Cd, Zn, Mg and Ag; M 2 being hydrogen or a metal similar to M 1 .
Dans le cas d'une substitution en R1 par un noyau porphyrine, ce cycle est caractérisé par la formule générale suivante : In the case of a substitution in R 1 with a porphyrin ring, this cycle is characterized by the following general formula:
dans laquelle A1, A2, A3, A4, A5, A6, A7, A8 sont choisis indépendamment parmi les substituants usuels des chlorophylles, en particulier l'hydrogène, un alkyle inférieur en C1-C5 à chaîne droite, ramifiée ou cyclique, un radical vinyle, formyle et ses esters, acétyle et ses esters, propionyle et ses esters, acrylyle et ses esters, et cyclopentanoyles, in which A 1 , A 2 , A 3 , A 4 , A 5 , A 6 , A 7 , A 8 are independently chosen from the usual substituents of chlorophylls, in particular hydrogen, lower C 1 -C 5 alkyl straight chain, branched or cyclic, a vinyl radical, formyl and its esters, acetyl and its esters, propionyl and its esters, acrylyl and its esters, and cyclopentanoyles,
M1 étant un métal de valence au moins égale à 3, tel que précédemment défini, M 1 being a metal of valence at least equal to 3, as previously defined,
et l'un au moins parmi A1 à A8 étant obligatoirement un substituant phospholipidique tel que précédemment défini. and at least one of A 1 to A 8 being necessarily a phospholipid substituent as defined above.
Les substituants précités usuels de la chlorophylle sont en particulier ceux décrits par Hendry et Jones dans la revue Journal of Médical Genetics, 1980, 17, 1-14, et en particulier au tableau 1, page 5.  The abovementioned usual substituents of chlorophyll are in particular those described by Hendry and Jones in the journal Journal of Medical Genetics, 1980, 17, 1-14, and in particular in Table 1, page 5.
De préférence, la valence d'au moins un métal M1 ou M2 est égale à 3. Selon une autre caractéristique avantageuse de l'invention, le nouveau dérivé organique de métal selon l'invention tel que précédemment défini est isolé à partir d'une plante, de préférence issue des familles suivantes : Preferably, the valence of at least one metal M 1 or M 2 is equal to 3. According to another advantageous characteristic of the invention, the new organic metal derivative according to the invention as defined above is isolated from a plant, preferably from the following families:
- Légumineuses, en particulier le soja, la fève, le pois, le pois chiche, la luzerne, l'avoine ;  - Legumes, in particular soybeans, broad beans, peas, chickpeas, alfalfa, oats;
- les Plantaginées, en particulier les plantains, - Plantaginea, in particular plantains,
- les Crucifères, en particulier le colza, le chou, le cresson, - Crucifers, in particular rapeseed, cabbage, watercress,
- les Salsolacées, en particulier l'épinard,  - Salsolaceae, in particular spinach,
- les Urticacées, en particulier les orties dioica, urens et les pariétaires ;  - Urticaceae, in particular nettle dioica, urens and parietaries;
- les Oπbellifères, en particulier angelica archangelica et angelica sinensis, et foeniculum dulce ;  - Oπbellifers, in particular angelica archangelica and angelica sinensis, and foeniculum dulce;
- les Résédacées, en particulier Réséda, phyteuma, lutea, alba, luteola.  - Resedaceae, in particular Réséda, phyteuma, lutea, alba, luteola.
Selon un second aspect, la présente invention concerne un procédé d'isolement du nouveau dérivé organique d'un métal, tel que précédemment défini, caractérisé en ce qu'il comorend :  According to a second aspect, the present invention relates to a process for isolating the new organic derivative of a metal, as previously defined, characterized in that it includes:
a) l'extraction d'une plante appropriée connue pour contenir l'un des métaux Drécités, par macération dans un solvant hydro-alcoolique pendant une durée suffisante pour extraire ledit dérivé organique de méta l , en obtenant ai ns i un ext ra i t brut ;  a) the extraction of a suitable plant known to contain one of the metals mentioned, by maceration in a hydro-alcoholic solvent for a sufficient time to extract said organic derivative of meta l, obtaining ai ns i an ext ra it gross;
b) on é l i mi ne le solvant de l'extrait brut pour obtenir un produit pulvérulent brut contenant ledit dérivé organique de métal ;  b) the solvent of the crude extract is removed in order to obtain a crude pulverulent product containing said organic metal derivative;
c) le produit pulvérulent brut obtenu est redissous dans un minimum d'e.au non ionisée, ou distillée, puis soumis à une précipitation par un solvant organique, de préférence choisi parmi des solvants miscibles à l'eau, et sélectionné en fonction de l'hydrophilicite du composé métallique recherché ;  c) the crude pulverulent product obtained is redissolved in a minimum of non-ionized water, or distilled, then subjected to precipitation with an organic solvent, preferably chosen from solvents miscible with water, and selected according to the hydrophilicity of the metal compound sought;
d) et éventuellement, le précipité optenu contenant le dérivé organique de métal recherché à l'état pur, est soumis à un échange métallique pour obtenir le sel d'un nouveau métal différent de celui contenu initialement dans la plante.  d) and optionally, the precipitate obtained containing the organic derivative of metal sought in the pure state, is subjected to a metal exchange to obtain the salt of a new metal different from that initially contained in the plant.
Selon une variante de réalisation préférée, pour laquelle la fonction acide phosphorique est liée à un second métal (M3), de valence inférieure ou égale à 2, de préférence choisi parmi le groupe consistant du calcium, du strontium, du zinc, du lithium, magnésium ou argent, le produit pulvérulent brut est soumis à une précipitation à l'aide d'une solution saturée en chlorure de cadmium pour obtenir un précipité qui est séparé par centrifugation, puis redissous dans une solution carbonatée, par exemple de carbonate d'ammonium, puis reprécipité avec un solvant organique miscible à l'eau, de préférence un alcool ou une cétone, en particulier un alcool inférieur tel que le méthanol, l'éthanol ou le propanol. On peut améliorer la purification de manière classique par plusieurs étapes de précipitation au solvant organique - dissolution dans l'eau. According to a preferred embodiment, for which the phosphoric acid function is linked to a second metal (M 3 ), of valence less than or equal to 2, preferably chosen from the group consisting of calcium, strontium, zinc, lithium, magnesium or silver, the crude pulverulent product is subjected to precipitation using '' a saturated solution of cadmium chloride to obtain a precipitate which is separated by centrifugation, then redissolved in a carbonated solution, for example of ammonium carbonate, then reprecipitated with an organic solvent miscible with water, preferably an alcohol or a ketone, in particular a lower alcohol such as methanol, ethanol or propanol. The purification can be improved in a conventional manner by several stages of precipitation with organic solvent - dissolution in water.
Le dernier précipité contient le dérivé organique du métal selon l'invention, recherché, à l'état pur, éventuellement mélangé avec de faibles proportions d'autres métaux.  The last precipitate contains the organic derivative of the metal according to the invention, sought, in the pure state, optionally mixed with small proportions of other metals.
Selon un mode de réalisation particulier de ce procédé, lorsqu'on désire changer le métal lié au phospholipide, le produit précipité obtenu est redissous dans une solution aqueuse contenant le métal que l'on souhaite incorporer, puis on réalise une nouvelle précipitation au solvant organique miscible à l'eau précité, qui permet d'obtenir le dérivé organique du métal souhaité, selon l'invention.  According to a particular embodiment of this process, when it is desired to change the metal linked to the phospholipid, the precipitated product obtained is redissolved in an aqueous solution containing the metal which it is desired to incorporate, then a new precipitation is carried out with organic solvent miscible with the aforementioned water, which makes it possible to obtain the organic derivative of the desired metal, according to the invention.
Selon une autre variante de réalisation du procédé selon l'invention, le solvant d'extraction utilisé pour obtenir l'extrait brut de la plante est avantageusement choisi parmi les mélanges eau/alcool inférieurs en C1-C6, de préférence choisi parmi le méthanol, l'éthanol, le propanol, l'isopropanol, le n-butanol ou l'iso-butanol. En particulier, la proportion eau/alcool est avantageusement comprise entre 75 et 99% d'eau/1 à 25% d'alcool, en poids. According to another alternative embodiment of the method according to the invention, the extraction solvent used to obtain the crude extract of the plant is advantageously chosen from water / alcohol mixtures lower in C 1 -C 6 , preferably chosen from methanol, ethanol, propanol, isopropanol, n-butanol or iso-butanol. In particular, the water / alcohol proportion is advantageously between 75 and 99% water / 1 to 25% alcohol, by weight.
L'identification du dérivé organique du métal selon l'invention peut être réalisée par une technique de chromatographie sur couche mince de gel de silice qui est bien connue à l'homme de l'art, en particulier à l'aide des trois solvants ci-dessous :  The organic metal derivative according to the invention can be identified by a silica gel thin layer chromatography technique which is well known to those skilled in the art, in particular using the three solvents mentioned below. below:
- chloroforme/méthanol à 90/10 en volume  - chloroform / methanol 90/10 by volume
- isopropanol/eau 95/5 en volume - éther éthylique/méthanol 50/50 en volume - isopropanol / water 95/5 by volume - ethyl ether / methanol 50/50 by volume
Le chromatogramme est ensuite révélé à la ninhydrine. On observe normalement une seule tâche.  The chromatogram is then revealed to ninhydrin. There is normally only one task.
Selon une autre variante d'identification du nouveau dérivé organique de métal selon l'invention, on redissout tout d'abord le dérivé organique de métal purifié tel qu'obtenu selon le procédé précédemment décrit, dans une solution aqueuse qui est ensuite additionnée à part égale avec une solution d'acide chlorhydrique 2N puis à l'étuve à 80°C pendant plusieurs heures, en particulier environ 8 h.  According to another variant of identification of the new organic metal derivative according to the invention, the organic derivative of purified metal is first dissolved, as obtained according to the process described above, in an aqueous solution which is then added separately. equal with a 2N hydrochloric acid solution and then in an oven at 80 ° C for several hours, in particular about 8 h.
La solution obtenue est ensuite soumise à des techniques habituelles d'identification des composés recherchés.  The solution obtained is then subjected to usual techniques for identifying the desired compounds.
Par exemple, les acides gras sont identifiés par chromatographie en phase gazeuse ;  For example, fatty acids are identified by gas chromatography;
- les phénols et acides phénoliques sont identifiés par chromatographie liquide à haute performance et détection dans l'ultraviolet ;  - phenols and phenolic acids are identified by high performance liquid chromatography and detection in ultraviolet;
- les sucres et les glycérides sont identifiés par HPLC et détection par un appareillage capable de mesurer un nombre de particules après élimination du solvant par vaporisation, par exemple un appareil commercialisé par TOUZART et MATIGNON, ayant la dénomination commerciale SEDEX 45 ;  - the sugars and the glycerides are identified by HPLC and detection by an apparatus capable of measuring a number of particles after elimination of the solvent by vaporization, for example a device marketed by TOUZART and MATIGNON, having the trade name SEDEX 45;
- La porphyrine est identifiée par chromatographie sur couche mince selon les techniques classiques d'identification de la porphyrine,  - Porphyrin is identified by thin layer chromatography according to conventional techniques for identifying porphyrin,
- le métal est identifié par spectroscopie d'absorption atomique et torche à plasma, l'appareil étant naturellement réglé en fonction du métal à identifier, par exemple appareil de Applied Research Laboratories, USA, modèle 3 580 OES.  - The metal is identified by atomic absorption spectroscopy and plasma torch, the device being naturally adjusted according to the metal to be identified, for example device from Applied Research Laboratories, USA, model 3 580 OES.
Le nouveau dérivé organique de métal selon l'invention précédemment décrit, peut naturellement être préparé par voie de synthèse à partir des constituants correspondants que l'on fait réagir dans des conditions opératoires connues de l'homme de l'art.  The new organic metal derivative according to the invention described above, can naturally be prepared synthetically from the corresponding constituents which are reacted under operating conditions known to those skilled in the art.
On observera que des sources aisément accessibles à la préparation de ce nouveau dérivé organique de métal selon l'invention sont constituées non seulement par les plantes précitées, mais également par des parties issues des biotechnologies comme la culture in vitro des végétaux, ou des cultures dites de cals, c'est-à-dire des blocs de cellule différenciés, multipliés à partir de cellules riches en complexe ou fraction de complexe, ou des parties d'organes animaux. Ces diverses parties d'organes ou organismes cellulaires sont soumises à des traitements d'extraction spécifiques. Comme il résulte de la discussion précédente, dans le cadre de l'invention, seuls les extraits réalisés à partir d'un solvant présentant une polarité par rapport à la silice du même ordre que celle d'un solvant préparé à base d'eau et d'éthanol dans les proportions précédemment indiquées de 75 à 99% d'eau et de 1 à 25% d'éthanol, permet d'obtenir un dérivé organique de métal brut qui permet d'isoler directement ou indirectement le nouveau dérivé organique de métal selon l'invention. It will be observed that sources easily accessible for the preparation of this new organic metal derivative according to the invention are constituted not only by plants mentioned above, but also by parts derived from biotechnologies such as the in vitro culture of plants, or so-called callus cultures, that is to say differentiated cell blocks, multiplied from cells rich in complex or fraction of complex , or parts of animal organs. These various parts of organs or cellular organisms are subjected to specific extraction treatments. As follows from the preceding discussion, in the context of the invention, only the extracts produced from a solvent having a polarity with respect to silica of the same order as that of a solvent prepared on the basis of water and ethanol in the proportions indicated above of 75 to 99% of water and 1 to 25% of ethanol, makes it possible to obtain an organic derivative of raw metal which makes it possible to isolate directly or indirectly the new organic derivative of metal according to the invention.
Selon un troisième aspect, l'invention couvre également une utilisation du dérivé organique de métal selon l'invention, présentant de préférence une valence au moins égale à 3, comme agent biomédiateur ou comme principe actif pour la fabrication de produit à usage thérapeutique.  According to a third aspect, the invention also covers a use of the organic metal derivative according to the invention, preferably having a valence at least equal to 3, as a biomedical agent or as an active principle for the manufacture of a product for therapeutic use.
En effet, les dérivés organiques de métal selon l'invention, présentent une activité immunomodulatrice et peuvent dans ce cadre être utilement utilisés pour traiter toutes les déficiences immunitaires, y compris le sida, ou une activité neuromodulatrice, ou une activité anti-inflammatoire ou encore une activité anti rhumatismale, en particulier pour lutter contre la polyarthrite rhumatoîde.  Indeed, the organic metal derivatives according to the invention have an immunomodulatory activity and can in this context be usefully used to treat all immune deficiencies, including AIDS, or a neuromodulatory activity, or an anti-inflammatory activity or else anti rheumatic activity, in particular to fight against rheumatoid arthritis.
Ainsi, selon un quatrième aspect, la présente invention couvre encore une composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend, à titre d'ingrédient actif, au moins un dérivé organique d'un métal selon l'invention tel que précédemment défini.  Thus, according to a fourth aspect, the present invention also covers a pharmaceutical composition, characterized in that it comprises, as active ingredient, at least one organic derivative of a metal according to the invention as defined above.
Selon une caractéristique particulièrement avantageuse, cette composition pharmaceutique est caractérisée en ce qu'il s'agit d'une composition pharmaceutique à activité immunomodulatrice ou neuro-modulatrice, ou anti-inflammatoire ou anti- rhumatismale, en particulier anti-polyarthrite rhumatoîde ou à activité hypoglycémiante ou anti-sclérose en plaque. Des composés particulièrement préférés sont un dérivé organique d'un métal selon l'invention dans lequel un atome d'or est lié à un phospholipide ayant une activité anti rhumatoîde, en particulier contre 'la polyarthrite rhumatoîde. According to a particularly advantageous characteristic, this pharmaceutical composition is characterized in that it is a pharmaceutical composition with immunomodulatory or neuromodulatory activity, or anti-inflammatory or anti-rheumatic activity, in particular anti-rheumatoid arthritis or with activity hypoglycemic or anti-multiple sclerosis. Particularly preferred compounds are an organic derivative of a metal according to the invention in which a gold atom is linked to a phospholipid having anti rheumatoid activity, in particular against rheumatoid arthritis.
Un autre dérivé particulièrement préféré est un dérivé d'un métal selon l'invention dans lequel le métal est l'aluminium lié à un phospholipide, dont l'acide gras est l'acide α-linolénique tandis qu'un groupement ferrulique choline est lié en haut de chaîne phosphorique ou phospholipide, ce composé étant extrait à partir de Réséda phyteuma et ayant une activité anti-inflammatoire marquée.  Another particularly preferred derivative is a derivative of a metal according to the invention in which the metal is aluminum linked to a phospholipid, whose fatty acid is α-linolenic acid while a ferrulic group choline is linked at the top of the phosphoric or phospholipid chain, this compound being extracted from Reseda phyteuma and having a marked anti-inflammatory activity.
Un autre composé préféré selon l'invention est un composé dont le métal est Sb ou un couple Sb/Sn de préférence obtenu à partir de l'espèce Angelica, en particulier Angelica archangelica, et Angelica sinensis ayant une activité immuno-modulatrice particulièrement efficace notamment contre le virus HIV.  Another preferred compound according to the invention is a compound whose metal is Sb or an Sb / Sn pair preferably obtained from the species Angelica, in particular Angelica archangelica, and Angelica sinensis having a particularly effective immunomodulating activity in particular against the HIV virus.
Encore un composé particulièrement préféré de l'invention est un composé dont le métal est le vanadium, obtenu à partir d'urtica dioica, ayant une activité hypoglycémiante rémanente.  Still a particularly preferred compound of the invention is a compound whose metal is vanadium, obtained from urtica dioica, having a persistent hypoglycemic activity.
Les doses d'utilisation du nouveau dérivé organique d'un métal selon l'invention sont de 100 à 300 mg d'un lyophilisât final contenant au plus 5% du dérivé organique de métal selon l'invention, pour une gélule gastro-résistante. Habituellement, une dose de 200 mg de produit pulvérulent purifié, par exemple sous forme de lyophilisat, a une teneur en métal inférieure à 1 mg.  The doses of use of the new organic derivative of a metal according to the invention are from 100 to 300 mg of a final lyophilisate containing at most 5% of the organic derivative of metal according to the invention, for a gastro-resistant capsule. Usually, a dose of 200 mg of purified pulverulent product, for example in the form of lyophilisate, has a metal content of less than 1 mg.
Ce produit pulvérulent, purifié, par exemple sous forme de lyophilisât peut être dissous dans un solvant aqueux à la dose de 5% de façon à réaliser des formes galéniques injectables, ou instillable ou permettant par exemple une utilisation en aérosol. Une des voies d'administration préférée est celle des voies muqueuses (perlinguale, pernasale, suppositoire, collyre).  This pulverulent, purified product, for example in the form of lyophilisate can be dissolved in an aqueous solvent at a dose of 5% so as to produce injectable galenical forms, or instillable or allowing for example an aerosol use. One of the preferred routes of administration is that of the mucous routes (perlingual, pernasal, suppository, eye drops).
D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront clairement à la lumière de la description explicative qui va suivre faite en référence à plusieurs exemples de l'invention donnés simplement à titre d'illustration et qui ne sauraient donc en aucune façon limiter la portée de l'invention. Dans les exemples les pourcentages sont donnés en poids, sauf indication contraire. Other objects, characteristics and advantages of the invention will appear clearly in the light of the explanatory description which will follow made with reference to several examples of the invention given simply by way of illustration and which therefore cannot in any way limit the scope of the invention. In the examples the percentages are given by weight, unless otherwise indicated.
Exemple 1 Example 1
Dérivé organique de Sb à partir d'Angelica archangelica  Organic Sb derivative from Angelica archangelica
La plante Angelica archangelica est cueillie entière à la maturité des graines puis séchée dans les règles de l'art et grossièrement broyée puis agitée mécaniquement pendant 4 à 6 jours dans un mélange à 60ºC de dix fois son poids d'eau et une fois son poids d'éthanol à 95% en volume.  The Angelica archangelica plant is picked whole at the maturity of the seeds then dried in the rules of the art and coarsely crushed then agitated mechanically for 4 to 6 days in a mixture at 60ºC of ten times its weight of water and once its weight 95% by volume ethanol.
Après refroidissement à la température ambiante, on réalise une filtration tangentielle dans un filtre ayant un diamètre de pore à 0,2 μm, puis on concentre en moyenne dix fois par osmose inverse.  After cooling to room temperature, tangential filtration is carried out in a filter having a pore diameter of 0.2 μm, then concentrated on average ten times by reverse osmosis.
On procède enfin à l'enlèvement total du solvant hydroalcoolique par lyophilisation, en obtenant ainsi un extrait brut sous forme de lyophilisât.  Finally, the hydroalcoholic solvent is removed completely by lyophilization, thereby obtaining a crude extract in the form of lyophilisate.
On redissout l'extrait brut dans un minimum d'eau distillée, à raison de 5 g pour 10 ml.  The crude extract is redissolved in a minimum of distilled water, at a rate of 5 g per 10 ml.
Après dissolution complète dans l'eau, on soumet la solution aqueuse obtenue à une précipitation par l'éthanol ou le méthanol. Et on sépare le précipité. On recommence trois fois et le dernier précipité, constitue le dérivé organique de Sb selon l'invention.  After complete dissolution in water, the aqueous solution obtained is subjected to ethanol or methanol precipitation. And we separate the precipitate. Three times are repeated and the last precipitate constitutes the organic derivative of Sb according to the invention.
Ce dérivé organique comprend en pratique un mélange de This organic derivative in practice comprises a mixture of
Sb/Sn en quantité sensiblement égale. Sb / Sn in substantially equal quantity.
Les caractéristiques de ce produit purifié ainsi obtenu sont les sui vantes : produit huileux noirâtre, miscible à l'eau dans lequel on peut identifier après digestion nitrique le métal, soit par la réaction à la Rhodamine B bien connue du chimiste analyste, soit par spectrographie d'émission atomique.  The characteristics of this purified product thus obtained are the following: blackish oily product, miscible with water in which the metal can be identified after nitric digestion, either by the reaction with Rhodamine B well known to the analyst chemist, or by spectrography atomic emission.
Exemple 2 Example 2
Dérivé organique d'aluminium à partir de Réséda phyteuma  Organic aluminum derivative from Reseda phyteuma
En partant de la plante Réséda phyteuma, on procède comme décrit à l'exemple 1, mais le dernier précipité est ensuite dissous dans une solution diluée d'acide minéral tel que l'acide chlorhydrique 2N puis précipité par le solvant organique ayant permis sont extraction, par exemple l'éthanol ou l'acétone. Starting from the Reseda phyteuma plant, proceed as described in Example 1, but the last precipitate is then dissolved in a dilute solution of mineral acid such as 2N hydrochloric acid and then precipitated by the organic solvent which have enabled its extraction, for example ethanol or acetone.
Ce précipité constitue le dérivé organique de l'aluminium selon l'invention, ayant principalement l'aluminium fixé par une liaison phosphate à une structure phosphatidylcholine, elle-même liée à l'acide ferrulique.  This precipitate constitutes the organic derivative of aluminum according to the invention, having mainly aluminum fixed by a phosphate bond to a phosphatidylcholine structure, itself linked to ferrulic acid.
Ce dérivé organique d'aluminium selon l'invention présente les caractéristiques physico-chimiques suivantes : produit gras de couleur verte, miscible à l'eau et présentant les réactions de la choline, de l'aluminium et dans lequel on peut mettre en évidence le phospholipide par chromatographie sur couche mince.  This organic aluminum derivative according to the invention has the following physicochemical characteristics: fatty product of green color, miscible with water and having the reactions of choline, of aluminum and in which the phospholipid by thin layer chromatography.
Exemple 3 Example 3
Dérivé organique de vanadium à partir d'Urtica dioica  Organic vanadium derivative from Urtica dioica
On procède comme décrit à l'exemple 1 en partant de la plante Urtica dioica, jusqu'à l'obtention du dernier précipité.  The procedure is as described in Example 1, starting from the Urtica dioica plant, until the last precipitate is obtained.
Celui-ci constitue le dérivé organique de vanadium selon l'invention, dans lequel le vanadium, sous forme V3+, est inclus soit dans le cycle porphyrinique qui est lui-même substitué par un phospholipide salifié par un ion vanadyle. This constitutes the organic vanadium derivative according to the invention, in which the vanadium, in the V 3+ form, is included either in the porphyrin ring which is itself substituted by a phospholipid salified by a vanadyl ion.
Les caractéristiques physico-chimiques de ce dérivé organique de vanadium selon l'invention sont les suivantes : poudre cristalline brune, soluble à L'eau, dont la solution présente une activité hypoglycémiante, la poudre ne présente pas de poi nt de fusion mais se décompose.  The physicochemical characteristics of this organic derivative of vanadium according to the invention are as follows: brown crystalline powder, soluble in water, the solution of which has a hypoglycemic activity, the powder does not have a melting point but decomposes .
Exemple 4 Example 4
Dérivé organique d'or à partir de Ribes nigrum On procède comme décrit à l'exemple 1 en partant de la plante Ribes nigrum jusqu'au dernier précipité qui constitue le dérivé organique d'or selon l'invention qui comprend principalement de l'or s us la forme Au3+ fixé sur le phospholipide. Organic gold derivative from Ribes nigrum The procedure is as described in Example 1, starting from the Ribes nigrum plant until the last precipitate which constitutes the organic gold derivative according to the invention which mainly comprises gold. We use the Au 3+ form attached to the phospholipid.
Ce dérivé oorganique d'or présente les caractéristiques suivantes : forme Au3+, poudre brun vert, soluble à l'eau, pas de point de fusion mais se décompose. Exemp le 5 This oorganic gold derivative has the following characteristics: Au 3+ form, green brown powder, soluble in water, no melting point but decomposes. Example 5
Dérivé organique d'un métal ayant une valence au moins égale à 3 inclus dans un cycle porphyrinique  Organic derivative of a metal having a valence at least equal to 3 included in a porphyrinic cycle
On peut obtenir un dérivé organique de Se, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Ga, Ge, In, Pd, Rh, Ru, Te, Mo, Nb, Zr, Y, Hf, Ta, We can obtain an organic derivative of Se, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Ga, Ge, In, Pd, Rh, Ru, Te, Mo, Nb, Zr, Y, Hf, Ta ,
W, Re, Os, Ir, Pt, Tl, Pb, Bi, Po, en partant du dérivé organique de métal selon l'invention tel qu'obtenu à l'un quelconque des exemples 1 à 4, en procédant ensuite de la manière suivante. W, Re, Os, Ir, Pt, Tl, Pb, Bi, Po, starting from the organic metal derivative according to the invention as obtained in any one of Examples 1 to 4, then proceeding in the manner next.
Le dérivé organique de métal selon l'invention purifié obtenu en fin de procédure de l'un quelconque des exemples 1 à 4, est dissous dans une solution faiblement acide d'acide minéral tel que l'acide chlorhydrique 2N puis précipité par un solvant organique ayantpermis son extraction, par exemple l'éthanol ou le méthanol.  The organic metal derivative according to the purified invention obtained at the end of the procedure of any one of Examples 1 to 4, is dissolved in a weakly acidic solution of mineral acid such as 2N hydrochloric acid and then precipitated by an organic solvent. having allowed its extraction, for example ethanol or methanol.
Ce précipité après centrifugation est redissous dans une solution aqueuse contenant le métal que l'on souhaite incorporer à la porphyrine. Une dernière précipitation par ledit solvant organique permet d'obtenir le dérivé organique de métal selon l'invention présentant au minimum 50% de la dose théorique en métal souhaitée, possédant une valence au moins égale à 3.  This precipitate after centrifugation is redissolved in an aqueous solution containing the metal which it is desired to incorporate into the porphyrin. A final precipitation with said organic solvent makes it possible to obtain the organic metal derivative according to the invention having at least 50% of the theoretical dose of desired metal, having a valence at least equal to 3.
Exemple 6 Example 6
Préparation d'un dérivé organique de métal selon l'invention comportant une fonction alkylamine  Preparation of an organic metal derivative according to the invention comprising an alkylamine function
Le lyophilysat obtenu après extraction de Reseda Phyteuma selon la technique décrite à l'exemple 1 est repris par de l'eau distillée puis reprécipité par de l'acétone en proportion volumique The lyophilysate obtained after extraction of Reseda Phyteuma according to the technique described in Example 1 is taken up in distilled water and then reprecipitated with acetone in volume proportion
1/1. 1/1.
Le précipité huileux est isolé par centrifugation, lavé par de l'acétone pure, repris par un volume d'eau distillée, puis lyophilysé en présence de 10 % de maltodextrine (poids/volume).  The oily precipitate is isolated by centrifugation, washed with pure acetone, taken up in a volume of distilled water, then lyophilized in the presence of 10% maltodextrin (weight / volume).
Après identification et dosage du métal par absorption atomique selon la technique d'absorption atomique classique à l'aide de l'appareil commercialisé par la société Américaine Applied Research Laboratories, modèle 3 580 OES.  After identification and determination of the metal by atomic absorption according to the conventional atomic absorption technique using the apparatus marketed by the American company Applied Research Laboratories, model 3 580 OES.
La poudre liophylisée obtenue peut être utilisée directement à des fins thérapeutiques, comme décrit plus loin. Exemp le 7 The freeze-dried powder obtained can be used directly for therapeutic purposes, as described below. Example 7
Préparation d'un dérivé organique de métal selon l'invention, comportant une fonction alkylamine liée à un acide phénolique' choisi parmi les acides ferruliques, caféiques, ou chlorogéniques.  Preparation of an organic metal derivative according to the invention, comprising an alkylamine function linked to a phenolic acid 'chosen from ferrulic, caffeic or chlorogenic acids.
A partir du dérivé de l'exemple 6 précédent comportant une fonction alkylamine, la fonction aminé peut être liée à un acide phénolique de la manière suivante.  From the derivative of Example 6 above comprising an alkylamine function, the amino function can be linked to a phenolic acid in the following manner.
Le lyophilisat obtenu à partir de Spirea ulmaria est remis en solution dans 2 parties d'eau distillée, puis reprécipité au moyen d'acétone en quantité suffisante.  The lyophilisate obtained from Spirea ulmaria is redissolved in 2 parts of distilled water, then reprecipitated with acetone in sufficient quantity.
Le précipité séparé par centrifugation est solubilité dans une solution d'acide chlorhydrique 2N, puis reprécipité à nouveau par une solution d'éthanol à 95 % en volume en quantité suffisante. Après centrifugation, un échantillon de la masse obtenue est repris par de l'eau distillée, puis on titre à froid par une solution éthanolique d'acide ferrulique à 0,1 % en quantité suffisante jusqu'à apparition d'un trouble, ou à l'aide d'un potentiographe, en vérifiant le point d'inflexion.  The precipitate separated by centrifugation is solubility in a solution of 2N hydrochloric acid, then reprecipitated again with a solution of ethanol at 95% by volume in sufficient quantity. After centrifugation, a sample of the mass obtained is taken up in distilled water, then cold titration with an ethanolic solution of 0.1% ferrulic acid in sufficient quantity until a cloudiness appears, or at using a potentiograph, checking the inflection point.
La concentration en acide ferrulique à rajouter au reste du précipité est déduite du dosage ci-dessus.  The concentration of ferrulic acid to be added to the rest of the precipitate is deduced from the above dosage.
On procède de manière similaire avec l'acide caféique, ou l'acide chlorogénique.  We proceed in a similar way with caffeic acid, or chlorogenic acid.
Exemple 8 Example 8
Préparation d'un dérivé organique de métal selon l'invention lié à une fonction alkylamine elle-même liée à un dérivé de l'acide salycilique Preparation of an organic metal derivative according to the invention linked to an alkylamine function itself linked to a derivative of salycilic acid
On procède de la même manière qu'à l'exemple 7, on obtient un produit amorphe, blanc jaunâtre, soluble à l'eau à odeur très caractéristique. Exemple 9 The procedure is the same as in Example 7, an amorphous product, yellowish white, soluble in water with a very characteristic odor, is obtained. Example 9
Exemple de formulation d'agent biomédiateur selon l'invention Example of formulation of biomedicating agent according to the invention
Selon une première variante de réalisation, un agent biomédiateur selon l'invention est formé par le produit obtenu directement à l'état brut dans l'un quelconque des exemples 1 à 9. According to a first alternative embodiment, a biomediation agent according to the invention is formed by the product obtained directly in the raw state in any one of Examples 1 to 9.
Selon une autre variante de réalisation avantageuse, l'extrait brut obtenu à l'un quelconque des exemples 1 à 9, sous forme de produit sec, est mélangé avec 5% de son poids de maltodextrine jusqu'à parfaite homogénéité, puis stocké. Ce mélange constitue le principe actif d'une composition pharmaceutique selon l'invention tel que formulé par exemple dans les exemples suivants.  According to another advantageous alternative embodiment, the crude extract obtained in any one of Examples 1 to 9, in the form of a dry product, is mixed with 5% of its weight of maltodextrin until perfect homogeneity, then stored. This mixture constitutes the active principle of a pharmaceutical composition according to the invention as formulated for example in the following examples.
Exemple 10 Example 10
Composition pharmaceutique selon l'invention Exemple de spécialité de gélule gastrorésitance Pharmaceutical composition according to the invention Example of specialty of gastroresistance capsule
Le produit obtenu selon l'un quelconque des exemples 1 à 9, est additionné de son poids de stéarate de magnésium et de dix fois son poids de cellulose microcristalline puis intimement homogénéisé, le mélange obtenu est réparti au moyen d'un équipement adapté de répartition en gélule de gélatine module 2 à raison de 240 mg par unité. The product obtained according to any one of Examples 1 to 9, is added with its weight of magnesium stearate and ten times its weight with microcrystalline cellulose then intimately homogenized, the mixture obtained is distributed using suitable distribution equipment in gelatin capsule module 2 at a rate of 240 mg per unit.
Les gélules ainsi dosées à 25 mg d'extrait sont enrobées au moyen d'un appareil de gomme arabique, d'ester de cellulose et d'oxyde de titane. Après séchage, les gélules obtenues sont gastro- résistantes et conditionnées sous blister en plaquettes de 15 regroupées en étui de 2.  The capsules thus dosed with 25 mg of extract are coated using an apparatus of gum arabic, cellulose ester and titanium oxide. After drying, the capsules obtained are gastro-resistant and packaged in a blister in blister packs of 15 grouped in cases of 2.
Exemple 11 Example 11
Composition pharmaceutique selon l'invention  Pharmaceutical composition according to the invention
Spécialité de soluté nasale  Specialty nasal solution
Le produit obtenu à l'un quelconque des exemples 1 à 9 est dissous en raison de 5 mg par ml dans un excipient à usage de nébulisation nasale à base de sérum physiologique, de glycérine de monoéthyléther de diéthyleneglycol. La préparation est conditionnée en flacon polyéthylène de 30 ml équipé d'une canule de pulvérisation nasale délivrant 0,1 ml par pression. Exemp le 12 The product obtained in any one of Examples 1 to 9 is dissolved in a proportion of 5 mg per ml in an excipient for use as a nasal nebulization based on physiological saline, glycerin monoethyl ether of diethyleneglycol. The preparation is packaged in a 30 ml polyethylene bottle fitted with a nasal spray cannula delivering 0.1 ml by pressure. Free on 12
Essai pharmacologique  Pharmacological test
A - Recherche d'une activité immuno-modulatrice Le dérivé organique d'un métal Sb/Sn obtenu à l'exemple 1 est soumis à des essais de mise en évidence d'activité immuno- modulatrice, selon la procédure suivante.  A - Search for an immunomodulatory activity The organic derivative of an Sb / Sn metal obtained in Example 1 is subjected to tests to demonstrate immunomodulatory activity, according to the following procedure.
1 - Protocole 1 - Protocol
Les effets recherchés seront testés in vitro sur les cellules impliquées dans la réponse immune (lymphocytes - monocytes et macrophages).  The desired effects will be tested in vitro on the cells involved in the immune response (lymphocytes - monocytes and macrophages).
I. Cellule (cellules humaines) : I. Cell (human cells):
Paramètres et fonctions cellulaires étudiés :  Cell parameters and functions studied:
- Marqueurs membranaires, - Membrane markers,
- Activation lymphocytaire et prolifération lymphocytaire,  - Lymphocyte activation and lymphocyte proliferation,
- Métabolisme oxydatif des monocytes.  - Oxidative metabolism of monocytes.
1. Marqueurs membranaires : 1. Membrane markers:
L'expression d'antigènes membranaires sera étudiée en cytomètre de flux en présence et en absence de chacun des produits.  The expression of membrane antigens will be studied in a flow cytometer in the presence and absence of each of the products.
Protocole utilisé : Protocol used:
A partir du sang périphérique prélevé sur EDTA ou héparine, séparation de la population lymphocytaire.  From the peripheral blood taken from EDTA or heparin, separation of the lymphocyte population.
Marqueurs étudiés : Markers studied:
- CD3 - CD4 - CD8 - B4 pour les lymphocytes,  - CD3 - CD4 - CD8 - B4 for lymphocytes,
- MO2 pour les monocytes  - MO2 for monocytes
Ces marqueurs sont repérés par les anticorps monoclonaux correspondants qui, après fixation, sont visualisés par un anticorps anti-Igl humain conjugué à un fluochrome (GAM-FITC).  These markers are identified by the corresponding monoclonal antibodies which, after fixation, are visualized by an anti-human IgG antibody conjugated to a fluochrome (GAM-FITC).
L'étude de la répartition des cellules portant les marqueurs est faite au cytomètre de flux dont dispose le laboratoire (COULTER Epies profile). - les doses testées : Di lut i ons f i na les 1 /20 - 1 / 100 The study of the distribution of the cells carrying the markers is made with the flow cytometer available to the laboratory (COULTER Epies profile). - the doses tested: Di lut i ons fi na 1/20 - 1/100
* durée d ' i ncubat i on :  * duration of i ncubat i on:
. courte TO-730 mi n - T60 mi n  . short TO-730 mi n - T60 mi n
. longue TO 18 h - 24 h .  . long TO 6 p.m. - midnight.
Matéri e l nécessaire : Necessary material :
- cytof luomètrie de flux (COULTER epics profile),  - flow cytometry (COULTER epics profile),
- incubateur à CO2,  - CO2 incubator,
- réactifs :  - reagents:
. milieu RPMI  . middle RPMI
. marqueurs lymphocytai res :  . lymphocyte markers:
* anticorps monoclonaux anti CD3  * anti CD3 monoclonal antibodies
* anticorps monoclonaux anti CD4  * anti CD4 monoclonal antibodies
* anticorps monoclonaux anti CD8  * anti CD8 monoclonal antibodies
* anticorps monoclonaux anti B4  * anti-B4 monoclonal antibodies
* anticorps anti MO2  * anti MO2 antibody
* GAM FITC.  * GAM FITC.
2. Activateur et prolifération lymphocytaire 2. Activator and lymphocyte proliferation
Les lymphocytes humains sont recueillis du sang périphérique par centrifugation sur gradient de Ficoll.  Human lymphocytes are collected from peripheral blood by centrifugation on a Ficoll gradient.
2.1 Activation 2.1 Activation
L'activation est testée dans deux circonstances :  Activation is tested in two circumstances:
- effet d'activation directe du produit sur les cellules, - direct activation effect of the product on the cells,
- effet modulateur du produit vis-à-vis de l'activation par des substances activatrices = PHA - conA - PMA (phorbo myristate acétate).  - modulating effect of the product with respect to activation by activating substances = PHA - conA - PMA (phorbo myristate acetate).
Dans les deux cas, l'activation est appréciée par l'apparition des marqueurs membranaires de l'activation des lymphocites : In both cases, activation is assessed by the appearance of membrane markers for the activation of lymphocites:
- CD25 (ou récepteur de l'I12), - CD25 (or I12 receptor),
- antigène HLA-DR : 12.  - HLA-DR antigen: 12.
Ces deux marqueurs sont évalués en cytomètrie de flux. Protocole :  These two markers are evaluated in flow cytometry. Protocol:
Les cellules sont : - d'une part mises en présence des 2 doses de chaque produit pendant 24 h et testées ensuite par comparaison avec des cellules non traitées, The cells are: - on the one hand put in the presence of the 2 doses of each product for 24 h and then tested by comparison with untreated cells,
- d'autre part, cultivées en présence de PHA, de conA et PMA avec ou sans produit pendant 24 h.  - on the other hand, cultivated in the presence of PHA, conA and PMA with or without product for 24 h.
L'incubation à lieu à 37°C en atmosphère humide avec 5 % de CO2. Les résultats sont appréciés au cytomètre de flux.  Incubation takes place at 37 ° C in a humid atmosphere with 5% CO2. The results are assessed using a flow cytometer.
Matériel nécessaire : Necessary material :
- cytof luorimètre de flux, - flow cytofluorimeter,
- incubateur à CO2,  - CO2 incubator,
- milieu RPMI,  - RPMI environment,
- milieu Ficoll-hypaque, - Réactifs :  - Ficoll-hypaque medium, - Reagents:
* phytohémagglutinine  * phytohemagglutinin
* PMA  * PMA
* anticorps monoclonal anti CD25  * anti CD25 monoclonal antibody
* anticorps monoclonal anti 12  * anti 12 monoclonal antibody
2.2 Prolifération : 2.2 Proliferation:
Les lymphocytes activés peuvent, ou non, proliférer sous l'effet de certaines drogues.  Activated lymphocytes may or may not proliferate under the influence of certain drugs.
Comme l'activation, la prolifération sera testée dans les 2 circonstances :  Like activation, proliferation will be tested in 2 circumstances:
- prolifération directe sous l'effet du produit,  - direct proliferation under the effect of the product,
- modulation par chaque produit de la prolifération obtenue par les mitogέnes PHA et conA.  - modulation by each product of the proliferation obtained by the PHA and conA mitogens.
Le protoco le est le même que ci -dessus .  The protocol is the same as above.
La prolifération est évaluée au 4e jour d'incubation par incorporation dans le noyau des cellules proliférantes de précurseur radioactif du DNA (thymidine tritiée) : l'importante prolifération est indiquée par la radioactivité appréciée dans l'extrait cellulaire obtenue au 5 jour de l'incubation. Matériel nécessaire : Proliferation was assessed at day 4 of incubation by incorporation into the nucleus of the proliferating cells of radioactive DNA precursor (tritiated thymidine): the significant proliferation is indicated by the preferred radioactivity in the cell extract obtained in five days of 'incubation. Necessary material :
- incubateur à CO2,  - CO2 incubator,
- extracteur d'ADN type SKATRON,  - SKATRON type DNA extractor,
- compteur isotypique à scintillation liquide,  - isotypic liquid scintillation counter,
- Réactifs : - Reagents:
* mi lieu RPMI  * mid place RPMI
* Ficoll hypaque  * Hypaque ficoll
* sérum foetal de veau  * fetal calf serum
* PHI  * PHI
* thymidine tritiée  * tritiated thymidine
3. Métabolisme oxydatif des monocytes : 3. Oxidative metabolism of monocytes:
L'activation des monocytes macrophages stimule leur métabolisme oxydatif qui peut facilement être étudié par cytomètrie de flux en mettant à profit l'oxydation du dichlorof luorescéine dont seule la forme oxydée est fluorescente, donc seule les cellules activées deviennent fluorescentes et sont repérées par le cytomètre de flux.  The activation of macrophage monocytes stimulates their oxidative metabolism which can easily be studied by flow cytometry by taking advantage of the oxidation of dichlorofluorescein, of which only the oxidized form is fluorescent, therefore only the activated cells become fluorescent and are identified by the cytometer. flow.
Par ce moyen, il sera donc possible d'étudier : By this means, it will therefore be possible to study:
- l'activation directe des cellules par le produit, - direct activation of cells by the product,
- l'effet modulateur du produit sur leur activation par PMA.  - the modulating effect of the product on their activation by PMA.
Protocole Protocol
Les leucocytes séparés du sang périphérique sont d'abord mises en contact avec DCF puis :  Leukocytes separated from peripheral blood are first contacted with DCF and then:
- soit avec seulement le produit : à différentes concentrations des cellules non traitées par PMA de témoins positifs,  - either with only the product: at different concentrations of cells not treated with PMA of positive controls,
- soit avec le produit et PMA les contacts sont faits en bain-marie thermostaté en agitation continue et les lectures sont faites au cytomètre de flux toutes les 5 min et jusqu'à 1 h 30, le burst oxydatif n'excédant pas cette durée.  - Either with the product and PMA, the contacts are made in a thermostatic water bath with continuous stirring and the readings are made with a flow cytometer every 5 min and up to 1 h 30, the oxidative burst not exceeding this duration.
Les cinétiques d'activation sont ensuite comparées : Matériel nécessaire :  The activation kinetics are then compared: Material required:
- cytofluorimètre de flux, - bain-marie thermostaté à agitation continue, - Réactifs : - flow cytofluorimeter, - thermostatic water bath with continuous agitation, - Reagents:
* Ficoll hypaque * dichlorof luorescéine,  * Hypaque ficoll * dichlorof luorescein,
* PMA.  * PMA.
2 - Résultat2 - Result
2-1 Effet du dérivé de S /Sn de l'exemple 1 sur le marqueur d'acti- vation CD25 récepteur d'IL2 :  2-1 Effect of the S / Sn derivative of Example 1 on the IL2 receptor CD25 activation marker:
Le produit de l'exemple 1 (500 μg), incubé avec les lymphocytes séparés par gradient de Ficoll et activés par la PHA (Phyto hémagglutinine) pendant 24 h, montre un effet inhibiteur sur l'apparition des récepteurs d'IL2.  The product of Example 1 (500 μg), incubated with the lymphocytes separated by Ficoll gradient and activated by PHA (Phytohemagglutinin) for 24 h, shows an inhibitory effect on the appearance of IL2 receptors.
Résultats exprimés en % de récepteurs d'IL2 (CD25) : Results expressed in% of IL2 receptors (CD25):
2-2 Effet de Sb/Sn de l'exemple 1 sur la prolifération des lymphocytes mis en culture avec la lectine PHA pendant 72 h : 2-2 Effect of Sb / Sn of Example 1 on the proliferation of lymphocytes cultured with the PHA lectin for 72 h:
Le produit de l'exemple 1, en solution à 5 g pour 100 ml, mis en contact avec les lymphocytes séparés par gradient de Ficoll et cultivés avec la lectine PHA pendant 72 h, montre une inhibition importante de la prolifération lymphocytaire.  The product of Example 1, in solution at 5 g per 100 ml, brought into contact with the lymphocytes separated by Ficoll gradient and cultured with the PHA lectin for 72 h, shows a significant inhibition of lymphocyte proliferation.
Après incorporation de thymidine tritiée, les résultats sont exprimés en nombre de coups par minute (cpm).  After incorporation of tritiated thymidine, the results are expressed in number of strokes per minute (cpm).
2-3 Effet de Sb/Sn de l'exemple 1 sur l'expression des Ag membranaires lymphocytai res : 2-3 Effect of Sb / Sn of Example 1 on the Expression of Lymphocytic Membrane Ag:
Le produit de l'exemple 1 (500 μg) incubé pendant 1 h avec les lymphocytes séparés par gradient de Ficoll, ne donne pas de modification significative au niveau de l'expression des Ag lymphocytaires des 2 sujets étudiés.  The product of Example 1 (500 μg) incubated for 1 h with the lymphocytes separated by Ficoll gradient, does not give any significant change in the expression of the lymphocytic Ag of the 2 subjects studied.
Résultats exprimés en pourcentage : Results expressed as a percentage:
2-4 Effet de Sb/Sn de l'exemple 1 sur le métabolisme oxydatif des leucocytes humains, étudié en cytomètrie de flux : 2-4 Effect of Sb / Sn of Example 1 on the oxidative metabolism of human leukocytes, studied in flow cytometry:
L'étude cinétique des leucocytes humains, en présence de dichloro fluorescine, marqueur de l'H202 intracellulaire, et stimulés par le Phorbol myristate acétate, montre un métabolisme oxydatif diminué au cours du temps lorsque le produit de l'exemple 1 leur est ajouté, comme cela résulte des courbes de la figure 5. A la figure 5, les courbes •—•, •—•, •...• représentent la réponse immunitaire à l'action de stimulation causée par le Phorbol myristate acétate seul, respectivement pour les polynucléaires, les monocytes et les lymphocytes, tandis que les courbes The kinetic study of human leukocytes, in the presence of dichloro fluorescin, a marker of intracellular H2O2, and stimulated by Phorbol myristate acetate, shows an oxidative metabolism reduced over time when the product of Example 1 is added to them, as follows from the curves in FIG. 5. In FIG. 5, the curves • - •, • - •, • ... • represent the immune response to the stimulating action caused by Phorbol myristate acetate alone, respectively for polymorphonuclear cells, monocytes and lymphocytes, while the curves
représentent les réponses immunitaires respectivement causées represent the immune responses respectively caused
par le Phorbol myristate acétate en présence du produit de l'invention Sb/Sn de l'exemple 1.  with Phorbol myristate acetate in the presence of the product of the invention Sb / Sn of Example 1.
On constate une diminution très si gni f i cat i ve de la réponse immunitaire. B - Activité anti-inflammatoire There is a very significant decrease in the immune response. B - Anti-inflammatory activity
On recherche une activité anti-inflammatoire avec le dérivé organique d'aluminium selon l'invention obtenu à l'exemple 2, selon la procédure suivante basée sur l'oedème au kaolin.  Anti-inflammatory activity is sought with the organic aluminum derivative according to the invention obtained in Example 2, according to the following procedure based on edema with kaolin.
Oedème au kaolin - technique de Winter modifiée (1) Introduction Kaolin edema - modified Winter technique (1) Introduction
L'injection de kaolin sous L'aponévrose plantaire de la patte postérieure du rat provoque une réaction inflammatoire aigue qui peut être réduite par les substances anti-inflammatoires. Cette réaction inflammatoire se traduit par un oedème d'installation rapide et persistant 48 h ce qui permet d'obtenir une cinétique d'activité des anti-inflammatoires. Matériel et méthodes  The injection of kaolin under the plantar fascia of the hind leg of the rat causes an acute inflammatory reaction which can be reduced by anti-inflammatory substances. This inflammatory reaction results in a rapid and persistent edema that lasts 48 hours, which makes it possible to obtain kinetics of activity of anti-inflammatory drugs. Material and methods
1 - Animaux  1 - Animals
Des rats mâles de couche Wistar (12 par lot) provenant du centre d'élevage de Montpellier ont été utilisés dans cette étude. Les animaux sont maintenus en observation pendant 4 jours avant le début des essais. En début d'essai les animaux pèsent en moyenne 90 g. Pendant la période d'observation les animaux, répartis par cage de 5, reçoivent nourriture et eau de boisson ad libitum et sont soumis à une température comprise entre 21 et 23 C et a un cycle jour/obscurité de 12 h.  Male Wistar layer rats (12 per batch) from the Montpellier breeding center were used in this study. The animals are kept under observation for 4 days before the start of the tests. At the start of the test, the animals weigh an average of 90 g. During the observation period, the animals, divided into cages of 5, receive food and drinking water ad libitum and are subjected to a temperature between 21 and 23 C and to a day / dark cycle of 12 h.
2 - Produits 2 - Products
- Dérivé organique d'aluminium de l'exemple 2,  - Organic aluminum derivative of Example 2,
- Indometacine (INDOCID® 250), - Indometacin (INDOCID ® 250),
- Kaolin tamisé,  - sieved kaolin,
- Excipients, - Excipients,
- sérum physiologique.  - physiological serum.
3 - Protocole 3 - Protocol
Les animaux sont mis à jeun de nourriture la veille. Le jour du test les rats sont anesthésiés à l'éther. Une incision est pratiquée dans la partie supérieure de l'abdomen et le nebulisat injecté dans l'anse duodénale à l'aide d'une seringue. la paroi musculaire est ensuite saturée et la peau refermée a l'aide de 2 agrafes. La suspension de kaolin est injectée 1/2 h après (0,1 ml - solution 10g% dans du sérum physiologique) dans le coussinet plantaire de la patte postérieure droite. Un lot d'animaux témoins sert de contrôle et reçoit l'excipient. Pour chaque dose de substance, les concentrations des suspensions utilisées sont aj ustées de mani è re à admi ni st rer exactement 1 m l pa r 100 g de poids corporel. The animals are fasted the day before. On the day of the test, the rats are anesthetized with ether. An incision is made in the upper abdomen and the nebulisate injected into the duodenal loop using a syringe. the muscle wall is then saturated and the skin closed with 2 staples. The kaolin suspension is injected 1/2 h after (0.1 ml - 10g% solution in physiological saline) into the plantar pad of the right hind paw. A batch of control animals serves as a control and receives the excipient. For each dose of substance, the concentrations of the suspensions used are adjusted so as to administer exactly 1 ml per 100 g of body weight.
Les mesures pléthysmographiques (2) sont faites avant Plethysmographic measurements (2) are made before
1 h, 2 h, 3 h, 4 h, 5 h, 6 h après l'administration de la suspension de kaolin. 1 h, 2 h, 3 h, 4 h, 5 h, 6 h after administration of the kaolin suspension.
4 - Doses utilisées 4 - Doses used
Du dérivé organique de l'aluminium de l'exemple 2,  The organic aluminum derivative of Example 2,
- 100 mg/kg voie intra-duodéna le.  - 100 mg / kg intra-duodena route.
Indométacine  Indomethacin
- 5 mg/kg voie intra-duodénale. 5 - Expression ces résultats  - 5 mg / kg intra-duodenal route. 5 - Expression of these results
Le pourcentage d'augmentation du volume de la patte est obtenu pour chaque animal selon la formule suivante :  The percentage increase in paw volume is obtained for each animal according to the following formula:
Volume mesuré - Volume initial Measured volume - Initial volume
% =__________________________x 100  % = __________________________ x 100
Volume initial  Initial volume
Les pourcentages d'enflure sont analysés par les tests F de SNEDECOR et t de Student (3). The swelling percentages are analyzed by the F tests of SNEDECOR and Student t (3).
L'activité anti-inflammatoire est exprimée par le pourcentage de réduction de l'oedème chez les rats traités par rapport aux témoins selon la formule suivante :  The anti-inflammatory activity is expressed by the percentage reduction in edema in the treated rats compared to the controls according to the following formula:
% Enflure témoins - % Enflure traités % Control swelling -% Swelling treated
% =________________________________x 100  % = ________________________________ x 100
Enflure témoins Résultats Witness swelling Results
Les résu ltats sont consignés dans le tableau II et la figure 2.  The results are shown in Table II and Figure 2.
Conclusion Conclusion
L'examen des résultats montre dans nos conditions expérimentales, que le dérivé d'aluminium de l'exemple 2 à la dose de 100 mg/kg présente une activité anti-inflammatoire marquée. Cette activité est maximale dès la deuxième heure et reste significative durant 5 h. L'efficacité du dérivé d'aluminium est , d'autre part comparable à celle obtenue avec 5 mg/kg d'indométacine.  Examination of the results shows, under our experimental conditions, that the aluminum derivative of Example 2 at the dose of 100 mg / kg has marked anti-inflammatory activity. This activity is maximum from the second hour and remains significant for 5 h. The efficiency of the aluminum derivative is, on the other hand comparable to that obtained with 5 mg / kg of indomethacin.
Compte tenu de son activité et de sa faible toxicité le dérivé d'aluminium présente donc un réel intérêt thérapeutique.  Given its activity and its low toxicity, the aluminum derivative therefore presents a real therapeutic interest.
Bibliographie Bibliography
(1) WINTER C.A. RISLEY. E.A. et NUSS. G.W. 1962 (1) WINTER C.A. RISLEY. E.A. and NUSS. G.W. 1962
Carrageenin induced oedema in hind paw of the rat as an assay for anti-inf lammatory drugs. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1 : 1 : S44-547 Carrageenin induced oedema in hind paw of the rat as an assay for anti-inf lammatory drugs. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1: 1: S44-547
(2) LENCE. P. 1962 A new device for plethysmographic measuring of small objects. Arch. Int. Pharmacodyn. 36 : 237-241  (2) LENCE. P. 1962 A new device for plethysmographic measuring of small objects. Arch. Int. Pharmacodyn. 36: 237-241
(3) SCHARTZ. D. Méthodes statistics à l'usage des médecin et biologiste. Edition Flammarion. C - Détermination d'un effet hypoglycémiant (3) SCHARTZ. D. Statistical methods for use by physicians and biologists. Flammarion Edition. C - Determination of a hypoglycemic effect
A L'aide du dérivé organique de vanadium obtenu à l'exemple 3 on détermine la présence d'une activité hypoglycémiante, selon la procédure suivante : 1 - Animaux  Using the organic vanadium derivative obtained in Example 3, the presence of a hypoglycemic activity is determined, according to the following procedure: 1 - Animals
Des rats mâles de souche Wistar (12 par lot), provenant du centre d'élevage de Montpellier ont été utilisés dans cette étude. Les animaux sont maintenus en observation pendant 4 j avant le début des essais. En début d'essai, les animaux pèsent en moyenne 140 g. Pendant la période d'observation les animaux, répartis par cage de 5, reçoivent nourriture et eau de boisson ad libitum et sont soumis à une température comprise entre 21 et 23°C et à un cycle jour/obscurité de 12 h.  Male rats of Wistar strain (12 per batch), coming from the Montpellier breeding center were used in this study. The animals are kept under observation for 4 days before the start of the tests. At the start of the test, the animals weigh an average of 140 g. During the observation period, the animals, distributed in cages of 5, receive food and drinking water ad libitum and are subjected to a temperature between 21 and 23 ° C and to a day / dark cycle of 12 h.
2 - Produits 2 - Products
- Dérivé porphyrinométallique (Va) selon l'exemple n° 3 - Porphyrinometallic derivative (Va) according to Example 3
- Streptozotocine - Streptozotocin
- Excipients - tampon citrate pH 4,5  - Excipients - citrate buffer pH 4.5
- sérum physiologique  - physiological serum
3 - Protocole 3 - Protocol
20 animaux d'un poids moyen de 190 g sont anesthésiés à L'éther. Une injection intraveineuse de streptozotocine est pratiquée au niveau de la veine du pénis ; une glycémie de contröle est effectuée 48 h après l'administration de la streptozotocine.  20 animals with an average weight of 190 g are anesthetized with Ether. An intravenous injection of streptozotocin is performed in the vein of the penis; a control glycemia is carried out 48 h after the administration of streptozotocin.
Seuls les animaux présentant une glycémie supérieure ou égale à 2 g sont sélectionnés et soumis au traitement par la substance testée. L'administration du dérivé selon l'exemple 3 a été biquotidienne (8-18 h) pendant 3 j, puis quotidienne (18 h). Le contrôle de la glycémie est effectué le matin à 9 h, moment de la journée où la glycémie des rats diabétiques témoins ou traités, soumise à de grandes variations durant la journée, est la plus élevée. Des rats diabétiques ne reçoivent que l'excipient (sérum physiologique) et servent de témoins diabétiques. Enfin, des rats "témoins blancs" de même poids, n'ayant par reçu d'injection de streptozotocine sont conservés à fin de comparaison des consommations d'eau et de nourriture. Résultats Only animals with a blood sugar level greater than or equal to 2 g are selected and subjected to treatment with the test substance. The administration of the derivative according to Example 3 was twice daily (8-18 h) for 3 days, then daily (18 h). The glycemia control is carried out in the morning at 9 a.m., the time of the day when the glycemia of the diabetic control or treated rats, subjected to large variations during the day, is the highest. Diabetic rats receive only the excipient (physiological saline) and serve as diabetic controls. Finally, "white control" rats of the same weight, having received no injection of streptozotocin, are kept at the end of the comparison of consumption of water and food. Results
Le contrôle quotidien de la glycémie ne nous a pas permis de mettre en évidence d'effet hypoglycemiant durant les 2 premiers jours du traitement. Une chute importante et significative de la glycémie par rapport à celle des rats témoins apparaît dès le troisième jour et se maintient les jours suivants. Celle-ci est accompagnée d'une réduction également significative de la prise de poids, de la polyphagie et de la polydipsie, les consommarions de nourriture et d'eau recouvrant des valeurs tendant à se raoprocher de celle des rats témoins non diabétiques  The daily glycemic control did not allow us to demonstrate any hypoglycemic effect during the first 2 days of treatment. A significant and significant drop in blood sugar compared to that of control rats appears from the third day and is maintained on the following days. This is accompanied by an equally significant reduction in weight gain, polyphagia and polydipsia, food and water consumption recovering values tending to approximate that of non-diabetic control rats
- 1/ Evolution du poids des animaux témoins, diabétiques et des animaux truites durant les 12 jours de traitement (en g).  - 1 / Evolution of the weight of control animals, diabetics and trout animals during the 12 days of treatment (in g).
JOURS J00 J03 J05 J07 J10 J12DAYS D00 D03 D05 D07 D10 D12
TEMOINS 189 215 225 233 255 271WITNESSES 189 215 225 233 255 271
DIABETIQUES 191 199 218 226 232 246DIABETICS 191 199 218 226 232 246
TRAITES ex. 3 171 194 198 215 220 227 TREATIES ex. 3,171 194 198 215 220 227
- 2/Evolution de la glycémie des animaux témoins, diabétiques et des animaux traités durant les 12 j de traitement (mg/100 nl). - 2 / Evolution of the glycemia of control animals, diabetics and animals treated during the 12 days of treatment (mg / 100 nl).
JOURS J00 J03 J05 J07 J10 J12DAYS D00 D03 D05 D07 D10 D12
TEMOINS 104 106 104 98 100 96WITNESSES 104 106 104 98 100 96
DIABETIQUES 368 460 437 474 560 610DIABETICS 368 460 437 474 560 610
TRAITES 330 366 256 272 267 250 TREATIES 330 366 256 272 267 250
- 3/Consommation moyenne de nourriture (g). - 3 / Average food consumption (g).
JOURS J00 J03 J05 J07 J10 J12DAYS D00 D03 D05 D07 D10 D12
TEMOINS 20,8 19,7 20,1 24,1 20 25WITNESSES 20.8 19.7 20.1 24.1 20 25
DIABETIQUES 21,9 30 34,2 38,2 34,2 32,6DIABETICS 21.9 30 34.2 38.2 34.2 32.6
TRAITES ex. 3 18,9 14 25 26 20,3 20,5 - 4/Consommation moyenne d'eau de boisson (ml). JOURS J00 J03 J05 J07 J10 J12 TEMOINS 40 40 43,3 46,6 41 ,7 41 ,7 DIABETIQUES 88,6 128 141 164 136 150TREATIES ex. 3 18.9 14 25 26 20.3 20.5 - 4 / Average consumption of drinking water (ml). DAYS D00 D03 D05 D07 D10 D12 WITNESSES 40 40 43.3 46.6 41, 7 41, 7 DIABETICS 88.6 128 141 164 136 150
TRAITES ex. 3 75 55 87,5 75 66 43 TREATIES ex. 3 75 55 87.5 75 66 43
Les figures 1 à 4 rapportent l'évolution pondérale (figure 1), l'évolution de la glycémie (figure 2), la consommation de nourriture (figure 3) et la consommation d'eau (figure 4), sur la base des indications précédentes émettent clairement en évidence les effets indiqués ci-dessous. Figures 1 to 4 report changes in weight (Figure 1), changes in blood sugar (Figure 2), food consumption (Figure 3) and water consumption (Figure 4), based on the indications The above clearly show the effects indicated below.
En regard des quatres paramètres objectifs ci-dessus, ainsi qu'en regard des pa ramèt res subjectifs, tels l'aspect et le comportement des animaux, il apparaît que le traitement, dans les conditions opératoires retenues, a eu un effet hypoglycémiant, et que celui-ci est majeur. Il a pu également être observé un effet thérapeutique rémanent même après l'arrêt du traitement. D - Activité anti-polyarthrite  With regard to the four objective parameters above, as well as with regard to the subjective parameters, such as the appearance and behavior of the animals, it appears that the treatment, under the operating conditions adopted, had a hypoglycemic effect, and that this one is major. A residual therapeutic effect could also be observed even after the treatment was stopped. D - Anti-arthritis activity
Par le test à l'adjuvant de Freund  By Freund's adjuvant test
On détermine la présence d'une activité anti-polyarthrite avec le dérivé organique d'or obtenu à l'exemple 4, de la manière suivante :  The presence of anti-polyarthritis activity is determined with the organic gold derivative obtained in Example 4, in the following manner:
Introduction Introduction
L'injection d'une suspension de mycobactérium butyricum chez le rat, entraîne le développement d'une polyarthrite chronique expérimentale d'origine antigénique dont les caractéristiques sont proches de la pathologie de la polyarthrite rhumatoide chez l'homme. Elle évolue de façon chronique avec des poussées au cours desquelles se constitue des destructions articulaires génératrices de déformations ; la destruction articulaire est la conséquence d'une synovite proliférante, siège d'une inflammation chronique d'origine immunologique. En l'absence de traitement, l'évolution est irréversible et se traduit par une tuméfaction diffuse. régulière, effaçant les reliefs articulaires et localisées aux pattes postérieures ; l'atteinte des pattes antérieures est également pssible. The injection of a suspension of mycobacterium butyricum in rats, leads to the development of experimental chronic polyarthritis of antigenic origin, the characteristics of which are close to the pathology of rheumatoid arthritis in humans. It evolves chronically with relapses during which joint destructions generate deformations; joint destruction is the consequence of proliferative synovitis, the site of chronic inflammation of immunological origin. In the absence of treatment, the course is irreversible and results in a diffuse swelling. regular, erasing the articular reliefs and localized on the hind legs; damage to the forelegs is also possible.
L'impotence articulaire se traduit par une limitation des mouvements actifs, voire une fixation de la jointure dans sa position de relâchement.  Joint impotence results in a limitation of active movements, or even a fixation of the joint in its relaxed position.
Enfin, d'autres signes comme la présence de nodules sur la queue et les oreilles, un érythème localisé sur les zones tuméfiées en particulier les articulations, une conjonctivite ou une atteinte génitale sont autant de signes révélateurs de l'évolution de l'arthrite vers laa chronicité.  Finally, other signs such as the presence of nodules on the tail and ears, localized erythema on swollen areas, in particular the joints, conjunctivitis or genital involvement are all indicative of the evolution of arthritis towards laa chronicity.
Certaines substances anti-inflammatoires peuvenr enrayer l'aggravation de l'arthrite, voire même entraîner le retour à une morphologie articulaire normale.  Certain anti-inflammatory substances can stop the worsening of arthritis, or even lead to a return to normal joint morphology.
Matériel et méthodes Material and methods
1 - Animaux  1 - Animals
Des rats mâles de souche Wistar (12 par lot), provenant du centre d'élevage de Montpellier ont été utilisés dans cette étude. Les animaux sont maintenus en observation pencant 4 j avant le début des essais. En début d'essai les animaux pèsent en moyenne 180 g. Pendant la période d'observation les animaux, répartis par cage de 5, reçoivent nourriture et eau de boisson ad libitum et sont soumis à une température comprise entre 21 et 23°C et a un cycle jour/obscurité de 12 h.  Male rats of Wistar strain (12 per batch), coming from the Montpellier breeding center were used in this study. The animals are kept under observation for 4 days before the start of the tests. At the start of the test, the animals weigh on average 180 g. During the observation period, the animals, divided into cages of 5, receive food and drinking water ad libitum and are subjected to a temperature between 21 and 23 ° C and to a day / dark cycle of 12 h.
2 - Produits -2 - Products -
- Dérivé d'or de l'exemple 4, - Gold derivative of Example 4,
- Indométacine sous forme de gélules (INDOCID® 250), - Indomethacin in the form of capsules (INDOCID ® 250),
- Suspension de mycobactérium butyrique DIFCO® , - Suspension of mycobacterial butyric DIFCO ® ,
- Excipients,  - Excipients,
- sérum physiologique,  - physiological serum,
- eau gommeuse à 3%,  - 3% gummy water,
- eau pour préparation injectable,  - water for injection,
- huile de paraffine. 3 - Protocole - paraffin oil. 3 - Protocol
Induction de l'arthrite  Induction of arthritis
Une suspension dans la paraffine de bactéries de la souche mycobactérium tuberculosis est injectée dans le tiers inférieur de la queue de rat. Le 21éme jour suivant l'injection, les rats sont triés en fonction des signes morphologiques de l'atteinte arthritique qu'ils présentent. Seul les animaux présentant une tuméfaction unilatérale ou bilatérale des pattes postérieures sont retenus. A suspension in the paraffin of bacteria of the mycobacterium tuberculosis strain is injected into the lower third of the rat tail. The 21 th day after the injection, the rats are sorted by morphological signs of arthritic damage they present. Only animals with unilateral or bilateral swelling of the hind legs are retained.
Constitution des lots Constitution of lots
Une mesure des voLumes des pattes postérieures droite et gauche est réalisée à l'aide d'un piethismométre sur les rats précédemment sélectionnés. Des lots homogènes en poids et en % d'augmentation des volumes des pattes postérieures droite et gauche sont ensuite constitués.  A measurement of the volumes of the right and left hind legs is carried out using a piethismometer on the rats previously selected. Homogeneous batches in weight and in% increase in volumes of the right and left hind legs are then formed.
Traitement Treatment
Le traitement débute le 21éme jour après la constitution des lots et se poursuit durant 13 jours à raison d'une administration quotidienne. La dernière mesure (J14) est effectuée 24 h après la dernière administration. Treatment starts on 21 th day after the formation of lots and continues for 13 days at a daily administration. The last measurement (D14) is carried out 24 hours after the last administration.
Nature des lots Nature of lots
Cinq lots de 9 animaux chacun ont été constitués selon l'ordre suivant :  Five batches of 9 animals each were made up in the following order:
- un lot arthritique témoin  - an arthritis control batch
- un lot arthritique traité indométacine 3 mg/kg - an arthritic batch treated with indomethacin 3 mg / kg
- un lot arthritique traité 803 200 mg/kg - an arthritic batch treated 803 200 mg / kg
- un lot arthritique traité 803 400 mg/kg  - an arthritic batch treated 803 400 mg / kg
- un lot non arthritique ne recevant aucun traitement.  - a non-arthritic batch receiving no treatment.
Evaluation de l'arthrite Arthritis assessment
Le volume des pattes postérieures fait l'objet d'une évaluation avant et pendant toute la durée du traitement paral lèlement à un examen morphologique ; cet examen permet d'évaluer et de quantifier : The volume of the hind legs is evaluated before and throughout the duration of the paral treatment in conjunction with a morphological examination; this examination makes it possible to assess and quantify:
- L'impotence qui traduit une limitation voire la disparition des déplacements de l'animal lorsqu'il est placé sur une surface plane est créditée d'un indice de 0 à 3.  - The impotence which reflects a limitation or even the disappearance of the animal's movements when it is placed on a flat surface is credited with an index of 0 to 3.
. 0 pas d'impotence  . 0 no helplessness
. 1 impotence moyenne  . 1 medium helplessness
. 2 impotence forte  . 2 strong helplessness
. 3 impotence totale.  . 3 total helplessness.
- L'ankylose traduit la limitation ou la disparition du mouvement articulaire des pattes postérieures est créditée d'un indice de 0 à 2 pour chacune des pattes. - Ankylosis reflects the limitation or disappearance of the articular movement of the hind legs is credited with an index of 0 to 2 for each of the legs.
. 0 pas d'ankylose  . 0 no ankylosis
. 1 ankylose moyenne  . 1 medium ankylosis
. 2 ankylose totale.  . 2 total ankylosis.
- L'oedème des pattes antérieures qui traduit une extension de l'arthrite est crédité des indices 0 et 1. - The edema of the forelegs which indicates an extension of arthritis is credited with the indices 0 and 1.
. 0 absence d'oedème  . 0 no edema
. 1 présence d'un oedème.  . 1 presence of edema.
- Présence éventuelle de nodules sur les oreilles. - Possible presence of nodules on the ears.
. 0 absence  . 0 absence
. 1 présence  . 1 presence
- Présence de nodule sur la queue localisé au point initial d'injection de l'adjuvant. - Presence of nodule on the tail located at the initial point of injection of the adjuvant.
. 0 absence  . 0 absence
. 1 présence  . 1 presence
- Atteinte génitale. - Genital involvement.
. 0 absence  . 0 absence
. 1 présente. - Atteinte oculaire se traduisant par la présence d'une conjonctivite unilatérale ou bilatérale. . 1 present. - Eye damage resulting in the presence of unilateral or bilateral conjunctivitis.
. 0 absence  . 0 absence
. 1 présence.  . 1 presence.
Résultats  Results
1 - Homogénéité des lots avant traitements  1 - Homogeneity of the batches before treatments
Tableau III Table III
Volume des pattes postérieures Volume of hind legs
* Dérivé d'or de l'exemple 4  * Gold derivative of example 4
Tableau IV Table IV
% d'enflure par rapport au lot témoin absolu  % swelling compared to the absolute control lot
Une analyse de variance du volume des pattes postérieures ainsi que du poids des animaux des différents lots ne met en évidence aucune différence significative avant traitement. 2 - Evolution pondérale An analysis of variance in the volume of the hind legs as well as the weight of the animals in the different batches did not reveal any significant difference before treatment. 2 - Weight change
3-1-2 Evolution du volume de la patte en % du volume de base. 3-1-2 Evolution of the volume of the leg in% of the basic volume.
Le volume de base est le volume des pattes postérieures mesuré au jour 0, avant traitement.  The basic volume is the volume of the hind legs measured on day 0, before treatment.
3-1-3 Pourcentage de protection. 3-1-3 Percentage of protection.
Le pourecntage de protection est déterminé par rapport au volume des pattes posrérieures des animaux témoins.  The protection percentage is determined relative to the volume of the hind legs of the control animals.
3-1-4 Evaluation de l'efficacité du traitement. 3-1-4 Evaluation of the effectiveness of the treatment.
L'efficacité du traitement est évalué en pourcentage d'enflure des pattes postérieures des lots traités (animaux patho logiques traités) par rapport au volume des pattes postérieures du lot témoins absolus chez lesquelles l'arthrite n'a pas été conduite (animaux sains). The effectiveness of the treatment is evaluated as a percentage of swelling of the hind legs of the treated lots (patho animals logic treated) in relation to the volume of the hind legs of the absolute control group in which the arthritis was not carried out (healthy animals).
3-2 Evolution de l'impotence et de l'ankylose.  3-2 Evolution of impotence and ankylosis.
3-3 Evolution des facteurs secondaires : 3-3 Evolution of secondary factors:
présence d'oedème sur les pattes avant, de nodule sur la queue et les oreilles, atteinte génitale et conjonctivite.  presence of edema on the front legs, nodule on the tail and ears, genital involvement and conjunctivitis.
A l'exception de la présence ou de l'absence d'oedème sur les pattes antérieures, l'exploitation des autres facteurs n'a pas donné d'indications significatives quant à l'efficacité des traitements.  With the exception of the presence or absence of edema on the forelegs, the use of the other factors did not give significant indications as to the effectiveness of the treatments.
Evolution de l'oedème des pattes avant durant le traitement :  Evolution of edema of the front legs during treatment:
Les fractions indiquent le nomore d'animaux atteint d'cedéme des pattes avant sur le nomore total d'aninaux dans craque lot.  The fractions indicate the nomore of animals affected by swelling of the front legs on the total nomore of animals in each crack.
Analyse des résultats - discussion  Analysis of results - discussion
Témoins arthritiques : le volume des pattes postérieures passe de 76 à 90 mm de Hg de qui reorésente une aggravation de 18%. D'autre part, le % d'enflure par rapport aux animaux témoins absolus évolue de 58,23 (JO) à 83,55 (J14) ; il y a donc, en l'absence du traitement, aggravation de l'arthrite. Cette constation se trouve confirmé par la progression de l'impotence (2,25 à 2,40), de l'ankylose (1,05 à 1,39) et de l'extension de l'arthrite aux membres antérieurs (5/9 à 7/9) traduisant dans l'ensemble une évolution en phase chronique. Or, ex 4, - 200 mg/kg - voie intrapéritonéale : nous constatons une stabilisation de l'évolution de l'arthrite ; le volume des pattes postérieures reste aux environs de 72 mm de Hg ; le % d'enflure par rapport animaux témoins absolus reste également stable (48%). Enfin, l'impotence (2,33 à 2,00), l'ankylose (1,35 à 1,44) et l'atteinte des membres antérieures (4/9 à 4/9) confirment également cette stabilité. Arthritis witnesses: the volume of the hind legs goes from 76 to 90 mm Hg, which represents an aggravation of 18%. On the other hand, the% of swelling compared to the absolute control animals evolves from 58.23 (JO) to 83.55 (J14); there is therefore, in the absence of treatment, worsening of arthritis. This finding is confirmed by the progression of impotence (2.25 to 2.40), ankylosis (1.05 to 1.39) and the extension of arthritis to the forelimbs (5 / 9 to 7/9) overall reflecting an evolution in the chronic phase. However, ex 4, - 200 mg / kg - intraperitoneal route: we note a stabilization of the evolution of arthritis; the volume of the hind legs remains around 72 mm Hg; the% swelling compared to absolute control animals also remains stable (48%). Finally, impotence (2.33 to 2.00), ankylosis (1.35 to 1.44) and involvement of the forelimbs (4/9 to 4/9) also confirm this stability.
A cette dose le dérivé de l'invention de l'ex. 4 présente donc une efficacité comparable à celle d'un traitement de fond. Or, ex. 4 - 400 mg/kg - voie intrapéritonéale : nous notons une régression significative de l'oedème ; le volume des pattes postérieures passe de 78 à 59 mm de Hg (soit - 25% par rapport au volume initial) ; le % d'enflure par rapport aux animaux témoins absolus n'est plus que de 19,93% en fin de traitement. L'impotence (2,11 à 1,44), l'ankylose (1,41 à 0,99) régresse de façon significative. Le nombre d'animaux présentant une atteinte des pattes antérieures est réduit (7/9 à 4/9). Le % d'enflure par rapport au lot témoin absolu passe de 61,9 (J0) à 19,9 (J14). Enfin le % de protection par rapport au lot témoin arthritique est de 34,65% (J14).  At this dose the derivative of the invention of ex. 4 therefore has an effectiveness comparable to that of a background treatment. However, ex. 4 - 400 mg / kg - intraperitoneal route: we note a significant regression of the edema; the volume of the hind legs goes from 78 to 59 mm Hg (ie - 25% compared to the initial volume); the% of swelling compared to the absolute control animals is only 19.93% at the end of treatment. Impotence (2.11 to 1.44), ankylosis (1.41 to 0.99) regressed significantly. The number of animals with an attack on the forelegs is reduced (7/9 to 4/9). The% of swelling compared to the absolute control lot goes from 61.9 (D0) to 19.9 (D14). Finally, the% of protection compared to the arthritic control group is 34.65% (D14).
Indométacine - 3 puis 1,5 mg/kg - voie intragastrique : les résultats obtenus sont quantitativement similaires à ceux du lot précédent ; diminution significative dès J4 du volume des pattes postérieures (76 à 56 mm de Hg) soit - 26%. Le % d'enflure par rapport aux animaux témoi ns absolus est de 14,28% en fin de traitement. L'impotence (2,00 à 1,30), l'ankylose (1,44 à 0,99) et l'oedème des pattes antérieures (4/9 à 1/5) diminuent de façon significative. Le % d'enflure par rapport au lot témoin absolu passe de 57,35 (J0) à 14,28 (J14). Le % de protection par rapport au lot témoin arthritique est de 37,73% (J14). Indomethacin - 3 then 1.5 mg / kg - intragastric route: the results obtained are quantitatively similar to those of the previous batch; significant decrease from D4 on the volume of the hind legs (76 to 56 mm Hg) or - 26%. The% swelling compared to the absolute test animals is 14.28% at the end of treatment. Impotence (2.00 to 1.30), ankylosis (1.44 to 0.99) and edema of the forelegs (4/9 to 1/5) decrease significantly. The% of swelling compared to the absolute control batch goes from 57.35 (D0) to 14.28 (D14). The% protection compared to the arthritic control group is 37.73% (D14).
L'activité du dérivé d'or est donc, sur deux semaines d'observations, globalement similaire à celle de l'indométacine. Si les doses, 3 mg pour l'indométacine contre 400 mg/kg pour le 803, sont sans communes mesures, il est à souligner que l'indométacine a provoquée la mort par perforation gastrique de 4 animaux dès le quatrième jour de traitement nous contraignant à ramener la dose à 1,5 mg/kg. The activity of the gold derivative is therefore, over two weeks of observations, globally similar to that of indomethacin. If the doses, 3 mg for indomethacin against 400 mg / kg for 803, are without common measures, it should be emphasized that indomethacin caused the death by gastric perforation of 4 animals from the fourth day of treatment forcing us to reduce the dose to 1.5 mg / kg.
Le dérivé d'or de l'invention, dans nos conditions expérimentales, n'a pas présenté de signe apparent de toxicité si ce n'est un léger ballonnement abdominal en fin de traitement : bien que l'analyse statistique n'ait laissé apparaître aucune différence significative, le lot indométacine présente une évolution pondérale plus favorable. La progression pondérale limitée des animaux traités par le dérivé d'or peut s'interpréter par l'administration intra-péritonéale d'une quantité importante de substance dont la résorption peut présenter problème et expliquer le ballonnement signalé plus haut.  The gold derivative of the invention, in our experimental conditions, did not present any apparent sign of toxicity except for a slight abdominal bloating at the end of treatment: although the statistical analysis did not reveal no significant difference, the indomethacin batch presents a more favorable weight development. The limited weight gain in animals treated with the gold derivative can be interpreted by the intraperitoneal administration of a large quantity of substance, the absorption of which may be problematic and explain the bloating mentioned above.
Conclusion Conclusion
L'analyse des résultats montre que, dans nos conditions expérimentales, le dérivé d'or selon l'invention présente une efficacité significative dans le modèle de l'arthrite à l'adjuvant de FREUND. Aux doses utilisées son activité est comparable à celle de l'indométacine.  Analysis of the results shows that, under our experimental conditions, the gold derivative according to the invention has significant efficacy in the model of arthritis with FREUND's adjuvant. At the doses used, its activity is comparable to that of indomethacin.

Claims

REVENDICATIONS
1. Dérivé organique d'un métal, caractérisé en ce qu'il est constitué par un dérivé d'un métal, de préférence de valence au moins égale à 3, avec un composé organique comprenant au moins un phospholipide conférant une hydrosolubilité ou hydromiscibilité au dérivé organique dudit métal. 1. Organic derivative of a metal, characterized in that it consists of a derivative of a metal, preferably of valence at least equal to 3, with an organic compound comprising at least one phospholipid conferring water-solubility or hydromiscibility on organic derivative of said metal.
2. Dérivé organique selon la revendication 1, caractérisé en de que le métal précité est lié à la fonction phosphate du phospholipide.  2. Organic derivative according to claim 1, characterized in that the aforementioned metal is linked to the phosphate function of the phospholipid.
3. Dérivé organique selon la revendication 2, caractérisé en de que le phospholipide comprend au moins un acide gras insaturé, de préférence en position α ou β par rapport à la fonction phospnate.  3. Organic derivative according to claim 2, characterized in that the phospholipid comprises at least one unsaturated fatty acid, preferably in the α or β position relative to the phospnate function.
4. Dérivé organique selon la revendication 3, caractérisé en de que l'acide gras insaturé précité est un acide gras polyinsaturé, de préférence sans conjugaison des liaisons éthyléniques, encore ce préférence à au moins deux doubles liaisons.  4. Organic derivative according to claim 3, characterized in that the aforementioned unsaturated fatty acid is a polyunsaturated fatty acid, preferably without conjugation of the ethylenic bonds, again this preference to at least two double bonds.
5. Dérivé organique selon la revendication 4, caractérisé en de que l'acide gras insaturé précité a au moins trois doubles liaisons, de type acide α- l i no léni que ou α-linolénique.  5. Organic derivative according to claim 4, characterized in that the aforementioned unsaturated fatty acid has at least three double bonds, of the α-l i no léni que or α-linolenic acid type.
6. Dérivé organiαue selon la revendication 4, caractérisé en de qu'il est choisi parmi le groupe consistant de l'acide 9, 12-linoléique, l'acide 9, 12, 15-linolénique et l'acide 5, 8, 11, 14-arachidonique.  6. organoαue derivative according to claim 4, characterized in that it is chosen from the group consisting of 9, 12-linoleic acid, 9, 12, 15-linolenic acid and acid 5, 8, 11 , 14-arachidonic.
7. Dérivé organique selon l'une des revendications 2 à 6, caractérisé en ce que le phospholipide comprend au moins une fonction acide phosphorique de préférence conjuguée avec une insaturation de la chaîne phospholipidique, cette fonction acide étant soit libre, soit liée à un groupement ammonium non substitué ou substitué, ou alkylamine dans lequelle groupe alkyle est un alkyle inférieur en C1-C5, de préférence en C1-C3. 7. Organic derivative according to one of claims 2 to 6, characterized in that the phospholipid comprises at least one phosphoric acid function preferably conjugated with an unsaturation of the phospholipid chain, this acid function being either free or linked to a group unsubstituted or substituted ammonium, or alkylamine in which the alkyl group is a lower C 1 -C 5 , preferably C 1 -C 3, alkyl.
8. Dérivé organique selon l'une des revendications 2 à 7, caractérisé en ce que le métal ayant une valence au moins égale à 3 est choisi parmi le groupe consistant de Se, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Ga, Ge, Sb, In, Pd, Rh, Ru, Te, Mo, Nb, Zr, Y, Hf, Ta, W, Re, Os, Ir, Pt, Au, Tl, Pb, Bi, Po. 8. Organic derivative according to one of claims 2 to 7, characterized in that the metal having a valence at least equal to 3 is chosen from the group consisting of Se, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Ga, Ge, Sb, In, Pd, Rh, Ru, Te, Mo, Nb, Zr, Y, Hf, Ta, W, Re, Os, Ir, Pt, Au, Tl, Pb, Bi, Po.
9. Dérivé organique selon la revendication 7 ou 8, caractérisé en de que la fonction aminé précitée est liée à un phénol ou un acide phénolique, de préférence choisi parmi l'acide caféique, ferrulique, chlorogénique, salycilique ou les dérivés de l'acide salycilique, en particulier la salicine, un salycoside, un hyperosice, un spyréoside, un mono-tropitoside, l'adéhyde salycilique ou un salycilate d'alkyle inférieur en C1-C5, de préférence en C1-C3, en particulier le salycilate de méthyle. 9. Organic derivative according to claim 7 or 8, characterized in that the above-mentioned amino function is linked to a phenol or a phenolic acid, preferably chosen from caffeic, ferrulic, chlorogenic, salycilic acid or the acid derivatives. salycilic, in particular salicin, a salycoside, a hyperosice, a spyreoside, a mono-tropitoside, salycilic adhyde or a lower alkyl salycilate in C 1 -C 5 , preferably in C 1 -C 3 , in particular methyl salycilate.
10. Dérivé organique selon la revendication 8 ou 9, caractérisé en de que l'acide phénolique est lui-même lié à un sucre en C5 cu C6, en particulier le mannitol ou le mannose. 10. Organic derivative according to claim 8 or 9, characterized in that the phenolic acid is itself linked to a C 5 or C 6 sugar, in particular mannitol or mannose.
11. Dérivé organique selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisé en ce que le composé organique présente la formule chimicue générale suivante : 11. Organic derivative according to one of claims 1 to 10, characterized in that the organic compound has the following general chemical formula:
dans laquelle :  in which :
R1 = soit un acide gras en C16 à C2 0 ayant avantaaeusement un faiple degré d'fnsaturation, en particulier une double liaison , R 1 = either a C 16 to C 2 0 fatty acid advantageously having a large degree of unsaturation, in particular a double bond,
= soit un noyau porpnyrine lié à un métal M1 ayant une valence supérieure ou égale à 3 telle que précédemment définie, = either a porpnyrin nucleus linked to a metal M 1 having a valence greater than or equal to 3 as defined above,
= soit un groupe X-OH dans lequel X = (CH2)n, n étant égal à 0, 1 ou 2. = either an X-OH group in which X = (CH 2 ) n , n being equal to 0, 1 or 2.
R2 = soit un acide gras insaturé de C1 6 à C20 de préférence ayant au moins 2 degrés d' insaturation, R 2 = either an unsaturated fatty acid of C 1 6 to C 20 preferably having at least 2 degrees of unsaturation,
= soit une fonction phosphate de formule :  = either a phosphate function of formula:
R3 = soit un acide gras insaturé en C1 6 à C20 tel que défini pour R 3 = either an unsaturated C 1 6 to C 20 fatty acid as defined for
R1 ou R2, R 1 or R 2 ,
= soit un groupe phosphate de formule :  = either a phosphate group of formula:
- à la condition que R2 et R3 ne peuvent pas être simultanément un groupe phosphate. - provided that R 2 and R 3 cannot simultaneously be a phosphate group.
R4 = soit H, soit un groupe ammonium quaternaire (non substitué ou substitué, en particulier avec un groupe ionique positif lui-même lié à R5 dans lequel R5 égale un ccrnposé organique en C5 minimum de préférence choisi parmi un sucre, un acide phénolique) ; soit un groupe alkyle en C1-C5-amino libre ou lié à R5 ; R 4 = either H or a quaternary ammonium group (unsubstituted or substituted, in particular with a positive ionic group itself linked to R 5 in which R 5 equals a minimum organic C 5 compound preferably chosen from a sugar, phenolic acid); either a C 1 -C 5 alkyl group -amino free or linked to R 5 ;
dans la formule précédente, une fonction acide libre du groupe phosphate de R2 ou R3 peut être salifiée par un métal M3 de valence inférieure ou égale à 2, en partidulier dnoisie parmi le Ca, Sr, Li, Cd, Zn, Mg et Ag ; M2 étant l'hydrogène ou un métal similaire à M1. in the preceding formula, a free acid function of the phosphate group of R 2 or R 3 can be salified with a metal M 3 of valence less than or equal to 2, in particular dnoisie among Ca, Sr, Li, Cd, Zn, Mg and Ag; M 2 being hydrogen or a metal similar to M 1 .
12. Dérive erganique selon l'une des revendications 1 à 11, daractérisé en de que le phospnolipide précité est lié à un groupe porphyrine.  12. Erganic derivative according to one of claims 1 to 11, characterized in that the aforementioned phospnolipid is linked to a porphyrin group.
13. Dérivé organique selon l'une quelconque des revendications 1 à 12, caractérisé en de qu'il présente la formule chimique générale suivante :  13. Organic derivative according to any one of claims 1 to 12, characterized in that it has the following general chemical formula:
dans laquelle A1, A2, A3, A4, A5, A6, A7, A8 sont choisis indépendamment parmi les substituants usuels des chlorophylles, en particulier l'hydrogène, un alkyle inférieur en C1-C5 à chaîne droite, ramifiée ou cyclique, un radical vinyle, formyle et ses esters, acétyle et ses esters, propionyle et ses esters, acrylyle et ses esters, et cyclopentanoyles ; in which A 1 , A 2 , A 3 , A 4 , A 5 , A 6 , A 7 , A 8 are independently selected from the usual substituents of chlorophylls, in particular hydrogen, lower C 1 -C 5 alkyl straight chain, branched or cyclic, a vinyl radical, formyl and its esters, acetyl and its esters, propionyl and its esters, acrylyl and its esters, and cyclopentanoyles;
M1 étant un métal de valence au moins égale à 3, tel que précédemment défini. M 1 being a metal of valence at least equal to 3, as previously defined.
Et l'un au moins parmi A1 à A8 est obligatoirement un substituant phospholipidique tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 12. And at least one of A 1 to A 8 is necessarily a phospholipid substituent as defined in any one of Claims 1 to 12.
14. Dérivé organique selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, daractérisé en de que la fonction phospnorique du phospholipide est liée à un cation d'un second métal de valende inférieure à 3, de préférende le calcium, le strontium, le zinc, le cacmium, le lithium, le magnésium et l'argent.  14. Organic derivative according to any one of claims 1 to 13, characterized in that the phospnoric function of the phospholipid is linked to a cation of a second metal with a valende less than 3, preferably calcium, strontium, zinc , cacmium, lithium, magnesium and silver.
15. Dérivé organique de métal, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un dérivé organique d'or lié à un phospholipide tel que défini a l'une quelconque des revendications 1 à 13, en particulier cptenυ a cartir de la plante Rybes nigrum.  15. Organic metal derivative, characterized in that it is an organic gold derivative linked to a phospholipid as defined in any one of claims 1 to 13, in particular cptenυ a cartir of the plant Rybes nigrum.
16. Dérivé organique de métal, caractérisé en ce qu'il s'agit du dérivé organique de Sb lié à un phospholipide tel que défini à l'une duelconque des revendications 1 à 13, en particulier obtenu à partir de la plante Angelica archangelica.  16. Organic metal derivative, characterized in that it is the organic derivative of Sb linked to a phospholipid as defined in one of the claims 1 to 13, in particular obtained from the plant Angelica archangelica.
17. Dérivé organique de métal, caractérisé en de qu'il s'agit du dérivé organique de vanadium lié à un phoscholipide tel que défini à l'une cuelconque des revendications 1 à 13, en particulier obtenu à partir de la plante Urtica dioica.  17. Organic metal derivative, characterized in that it is the organic derivative of vanadium linked to a phoscholipid as defined in any of claims 1 to 13, in particular obtained from the plant Urtica dioica.
18. Dérivé crganique de métal, caractérisé en ce qu'il s'agit du dérivé organique d'aluminium lié à un phospholipide de préférence la phosohatidylcholine tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 13, en particulier obtenu à partir de la plante Reseda phyteuma.  18. Crganic metal derivative, characterized in that it is the organic aluminum derivative linked to a phospholipid, preferably phosohatidylcholine as defined in any one of claims 1 to 13, in particular obtained from the Reseda phyteuma plant.
19. Agent biomédiateur à activité immunomodulatrice, à activité anti- inflammatoire, à activité hypoglycémiante, à activité anti-rhumatismale en particulier à activité anti-polyarthrite et rhumatoide, caractérisé en ce qu' il comprend au moins un dérivé organique de métal tel que défini à l 'une quete des revendications 1 à 18. 19. Biomediating agent with immunomodulatory activity, with anti-inflammatory activity, with hypoglycemic activity, with anti-rheumatic activity in particular with anti-polyarthritis and rheumatoid activity, characterized in that it comprises at least one organic metal derivative as defined to a quest of claims 1 to 18.
20. Composition pharmaceutique, caractérisée en de qu'elle comprend à titre de principe actif un dérivé organique de métal tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 18. 20. Pharmaceutical composition, characterized in that it comprises, as active principle, an organic metal derivative as defined in any one of claims 1 to 18.
21. Composition pharmaceutique à activité immunomodulatrice, caractérisée en ce qu'elle comprend un dérivé organique de métal tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 18, éventuellement dans un excipient, support ou véhicule pharmaceutiquement acceptable.  21. Pharmaceutical composition with immunomodulatory activity, characterized in that it comprises an organic metal derivative as defined in any one of claims 1 to 18, optionally in a pharmaceutically acceptable excipient, support or vehicle.
22. Composition pharmaceutique à activité immuno- modulatrice,, caractérisée en de qu'elle comprend une quantité pharmaceutiquement efficace d'au moins un dérivé de Sb ou Sb/Sn, de préférence extrait de l'espèce Angelica, en particulier Angelica archangelica, et Angelica sinensis, éventuellement dans un excipient, support ou véhicule pharmaceutiquement acceptable.  22. Pharmaceutical composition with immunomodulatory activity, characterized in that it comprises a pharmaceutically effective amount of at least one derivative of Sb or Sb / Sn, preferably extracted from the species Angelica, in particular Angelica archangelica, and Angelica sinensis, optionally in a pharmaceutically acceptable excipient, support or vehicle.
23. Composition pharmaceutique à activité antiinflammatoire, caractérisée en ce qu'elle comprend à titre de principe actif un dérivé organique de métal tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 18, dans un véhicule, excipient ou support pharmaceutiquement acceptable.  23. Pharmaceutical composition with anti-inflammatory activity, characterized in that it comprises, as active principle, an organic metal derivative as defined in any one of claims 1 to 18, in a pharmaceutically acceptable vehicle, excipient or support.
24. Composition pharmaceutique à activité hypoglycémi ante, caractéri sée en ce qu ' e l l e comprend à t i t re de pri nc i pe actif un dérivé organique de métal tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 18, éventuellement dans un véhicule, excipient ou support pharmaceutiquement acceptable.  24. Pharmaceutical composition with hypoglycemic activity, characterized in that it comprises, as active ingredient, an organic metal derivative as defined in any one of claims 1 to 18, optionally in a vehicle, pharmaceutically acceptable excipient or carrier.
25. Composition pharmaceutique à activité antirhumatismale, en particulier à activité anti-polyarthrite rhumatoîde, caractérisé en ce qu'elle comprend un dérivé organique d'un métal tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 18, à titre de principe actif, éventuellement dans un excipient, véhicule ou support pharmaceutiquement acceptable.  25. Pharmaceutical composition with antirheumatic activity, in particular with anti-rheumatoid arthritis activity, characterized in that it comprises an organic derivative of a metal as defined in any one of claims 1 to 18, as active principle , optionally in a pharmaceutically acceptable excipient, vehicle or support.
26. Procédé de préparation d'une composition pharmaceutique, caractérisé en ce qu'il comprend l'incorporation d'au moins un dérivé organique de métal tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 18, dans un excipient, véhicule ou support pharmaceutiquement acceptable.  26. A method of preparing a pharmaceutical composition, characterized in that it comprises the incorporation of at least one organic metal derivative as defined in any one of claims 1 to 18, in an excipient, vehicle or pharmaceutically acceptable carrier.
EP90917273A 1990-03-09 1990-11-16 New organic derivative of a metal with a phospholipid structure, use of this derivative as a biomediator, process for isolating this derivative and pharmaceutical compositions containing it Withdrawn EP0602026A1 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9003059 1990-03-09
FR9003059A FR2659333B1 (en) 1990-03-09 1990-03-09 NOVEL ORGANIC DERIVATIVE OF A METAL WITH A PHOSPHOLIPID STRUCTURE, USE OF THIS DERIVATIVE AS A BIOMEDIATING AGENT, METHOD FOR ISOLATING THIS DERIVATIVE AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING THE SAME.
PCT/FR1990/000820 WO1991013892A1 (en) 1990-03-09 1990-11-16 New organic derivative of a metal with a phospholipid structure, use of this derivative as a biomediator, process for isolating this derivative and pharmaceutical compositions containing it

Publications (1)

Publication Number Publication Date
EP0602026A1 true EP0602026A1 (en) 1994-06-22

Family

ID=9394591

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EP90917273A Withdrawn EP0602026A1 (en) 1990-03-09 1990-11-16 New organic derivative of a metal with a phospholipid structure, use of this derivative as a biomediator, process for isolating this derivative and pharmaceutical compositions containing it

Country Status (6)

Country Link
EP (1) EP0602026A1 (en)
JP (1) JPH05505175A (en)
AU (1) AU6756490A (en)
CA (1) CA2077645A1 (en)
FR (1) FR2659333B1 (en)
WO (1) WO1991013892A1 (en)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0495510A3 (en) * 1991-01-18 1993-03-31 Kao Corporation Phospholipid composition, fat and oil composition containing the same and process for producing phosphatidic acids

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2465733A (en) * 1943-12-31 1949-03-29 Levis Irene Becker Lecithin-metal compound
FR2343481A1 (en) * 1976-03-11 1977-10-07 Gerlich Norbert Preventing damage to and repairing biomembranes - by adding lipid mixtures contg. phosphatidyl-choline,-serine-and-ethanolamine, and unsaturated fatty acids
JPS59715B2 (en) * 1976-06-19 1984-01-07 トキコ株式会社 reciprocating compressor
US4530794A (en) * 1982-12-01 1985-07-23 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Iron-tetraphenylporphine complex having phosphocholine group
JPH07121549B2 (en) * 1986-10-28 1995-12-25 株式会社吉野工業所 Double structure container molding method

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See references of WO9113892A1 *

Also Published As

Publication number Publication date
WO1991013892A1 (en) 1991-09-19
CA2077645A1 (en) 1991-09-10
AU6756490A (en) 1991-10-10
FR2659333A1 (en) 1991-09-13
JPH05505175A (en) 1993-08-05
FR2659333B1 (en) 1993-03-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0074251B1 (en) Novel lipid fraction, its preparation and pharmaceutical compositions containing same
IL82459A (en) Stabilized pharmaceutical formulations containing poly-unsaturated fatty acids and stimulators for the syntheses of prostaglandins and hydroxy-fatty acids in biological systems
LU87949A1 (en) PREPARATION AND USE OF PORPHYRINS
FR2460669A1 (en) PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS BASED ON RIFAMYCIN SV AND ITS SALTS ADAPTED FOR THE TREATMENT OF ARTICULAR RUMATISM AND PROCESS FOR THEIR PREPARATION
JPH06501680A (en) Autobiotics and their use to eliminate non-self cells in vivo
FR2614790A1 (en) NOVEL OPHTHALMIC COMPOSITION BASED ON EICOSAPEUTAENOIC ACID
JP2003012520A (en) Antioxidant and food and drink containing the same
CN108289863B (en) Composition comprising triterpenes
WO2005105074A2 (en) Composition for treating or preventing cell degeneration using at least one molecule capable of maintaining adhesion molecule expression reversibility and vascular endothelium actin fibre polymerisation
FR2849598A1 (en) USE OF KYNURENINE-3-HYDROXYLASE INHIBITORS FOR THE TREATMENT OF DIABETES BY INCREASING THE NUMBER OF CELLS OF THE LANGERHANS ISLANDS
US5260067A (en) Cytotropic heterogeneous molecular lipids (CHML) and process for preparing the same
WO1991013892A1 (en) New organic derivative of a metal with a phospholipid structure, use of this derivative as a biomediator, process for isolating this derivative and pharmaceutical compositions containing it
EP0381823B1 (en) Cytotropic heterogenous molecular lipids (CHML) and process for preparing the same
JPS58206524A (en) Antitumor agent
FR2791981A1 (en) COMPOUNDS SELECTIVELY INHIBITING TGAMMA9DELTA2 LYMPHOCYTES, AND THEIR APPLICATIONS
FR3049866B1 (en) EXTRACT OF TOBACCO LEAVES AND USE FOR TREATMENT OF TOBACCO ADDICTION
FR2459658A1 (en) PROCESS FOR THE PREPARATION OF AN ORAL-ADMINISTRATIVE METHOXSALEN-BASED PHARMACEUTICAL COMPOSITION
FR2649322A1 (en) Bioavailable complexes of alpha -linolenic acid, plant extracts containing them and pharmaceutical compositions incorporating them
JPH06211713A (en) Antiallergic agent
LU85976A1 (en) COMPOSITION FOR INHIBITING TUMOR DEVELOPMENT BASED ON A PEROXYDIPHOSPHORIC ACID DERIVATIVE
CA2184699A1 (en) Immunomodulating composition for use especially in the treatment of hiv infections
EP3197458A1 (en) Dermocosmetic or pharmaceutical use of a composition containing at least one inhibitor of certain chemoattractant cytokines
EP0308349B1 (en) Choline derivative, process for its preparation and medicaments containing it
FR2634123A1 (en) USE OF ACETOGENINS IN THERAPEUTICS AS PEST CONTROL SUBSTANCES
WO1990009977A1 (en) Calcium ion complex with at least one unsaturated acid and pharmaceutical composition incorporating it

Legal Events

Date Code Title Description
PUAI Public reference made under article 153(3) epc to a published international application that has entered the european phase

Free format text: ORIGINAL CODE: 0009012

17P Request for examination filed

Effective date: 19920903

AK Designated contracting states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AT BE CH DE DK ES FR GB GR IT LI LU NL SE

STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: THE APPLICATION IS DEEMED TO BE WITHDRAWN

18D Application deemed to be withdrawn

Effective date: 19960601