EA046387B1

EA046387B1 - Конструкции на основе фактора дифференцировки и роста 15 (gdf15)

Info

Publication number: EA046387B1
Application number: EA202092386
Authority: EA
Inventors: Юймэй Сюн; И Чжан; Джкеи Ц. Шэн; Агнес Эва Хамбургер; Мюриэлль Вениант-Эллисон; Грант Симамото; Сяошань Минь; Чжулунь Ван; Цзе ТАН; Гунасекаран Каннан; Марисса Мок; Кеннет Уолкер
Original assignee: Эмджен Инк.
Priority date: 2013-07-31
Filing date: 2014-07-31
Publication date: 2024-03-07

Description

Область техники

Настоящее изобретение относится к мономерам и мультимерам, содержащим полипептид, который содержит область GDF15.

Уровень техники

Фактор дифференцировки и роста 15 (growth differentiation factor 15, GDF15) представляет собой нетипичный член суперсемейства TGFe. Его также называют ингибирующим макрофаги цитокином 1 (macrophage inhibitory cytokine 1, MIC1) (Bootcov MR, 1997, Proc Natl Acad Sci 94:11514-9), плацентарным костным морфогенетическим фактором (placental bone morphogenetic factor, PLAB) (Hromas R 1997, Biochim Biophys Acta. 1354:40-4), плацентарным трансформирующим фактором роста бета (placental transforming growth factor beta, PTGFB) (Lawton LN 1997, Gene. 203:17-26), фактором, полученным из предстательной железы (prostate derived factor, PDF) (Paralkar VM 1998, J Biol Chem. 273:137 60-7) и геном, активируемым нестероидными противовоспалительными лекарственными препаратами (nonsteroidal anti-inflammatory drug-activated gene, NAG-1) (Baek SJ 2001, J Biol Chem. 276: 33384-92).

Ген GDF15 человека расположен на хромосоме 19p13.2-13.1; ген GDF15 крысы расположен на хромосоме 16; и ген GDF15 мыши расположен на хромосоме 8. Открытые рамки считывания GDF15 распространяются на два экзона (Bottner M 1999, Gene. 237:105-11 и NCBI). Зрелый пептид GDF15 обладает низкой гомологией с другими членами семейства (Katoh M 2006, Int J Mol Med. 17:951-5.).

GDF15 синтезируется в виде большого белка-предшественника, который расщепляется в двухосновном сайте расщепления с высвобождением карбокситерминального зрелого пептида. Препропептиды GDF15 мыши и крысы содержат по 303 аминокислоты. Полноразмерный белок-предшественник человека содержит 308 аминокислот. Зрелые пептиды грызунов после процессинга по сайту расщепления RGRR (SEQ ID NO: 1) содержат по 115 аминокислот. Зрелый пептид человека после процессинга по сайту расщепления RGRRRAR (SEQ ID NO: 2) содержит 112 аминокислот. Сходство последовательности зрелого пептида GDF15 человека с последовательностями зрелого пептида GDF15 крысы и мыши составляет 66,1% и 68,1% (Bottner M 1999, Gene. 237:105-11; Bauskin AR 2000, EMBO J. 19:2212-20; NCBI). В зрелом пептиде GDF15 отсутствует сайт гликозилирования.

Зрелый пептид GDF15 содержит семь консервативных остатков цистеина, необходимых для образования мотива цистеиновый узел (который содержит три внутрицепочечные дисульфидные связи) и одной межцепочечной дисульфидной связи, которые типичны для членов суперсемейства TGFe. Зрелый пептид GDF15 также содержит два дополнительных остатка цистеина, образующих четвертую внутрицепочечную дисульфидную связь. Биологически активный GDF15 представляет собой гомодимер зрелого пептида молекулярной массой 25 кДа, ковалентно связанный одной межцепочечной дисульфидной связью.

Сообщалось, что уровни циркулирующего GDF15 увеличиваются при многих патологических и физиологических состояниях, в особенности при беременности (Moore AG 2000. J Clin Endocrinol Metab 85: 4781-4788), β-талассемии (Tanno T 2007, Nat Med 13:1096-101; Zimmermann MB, 2008 Am J Clin Nutr 88:1026-31) и врожденной дизэритропоэтической анемии (Tamary H 2008, Blood. 112:5241-4). В опубликованных сообщениях GDF15 также связывали с множеством биологических активностей. Исследования нокаута GDF15 и трансгенных мышей свидетельствуют, что GDF15 может защищать от повреждений сердца, вызванных ишемией/реперфузией или перегрузкой (Kempf T, 2006, Circ Res.98:351-60; Xu J, 2006, Circ Res. 98:342-50), защищать от связанной с возрастом утраты моторных и сенсорных нейронов (Strelau J, 2009, J Neurosci. 29 :13640-8), в умеренной степени защищать от метаболического ацидоза в почках, а также может вызывать истощение у пациентов, страдающих от рака (Johnen H 2007 Nat Med. 11:1333-40). Несколько групп ученых также исследовали роль GDF15 в апоптозе и пролиферации клеток, в результате чего при применении различных культур клеток и ксенотрансплантатных моделей были получены противоречивые результаты. Исследования на трансгенных мышах показали, что GDF15 защищает от новообразований в кишечнике и легком, вызванных канцерогеном или мутацией Apc (Baek SJ 2006, Gastroenterology. 131:1553-60; Cekanova M 2009, Cancer Prev Res 2:450-8).

Краткое описание изобретения

В настоящем изобретении предложены гибридные белки, содержащие полипептид GDF15 или мутантный полипептид GDF15 и Fc-домен.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения Fc-домен содержит последовательность, которая выбрана из группы, включающей SEQ ID NO: 16, 22, 28, 29, 33, 35, 38, 48, 85, 91, 106, 132, 141, 148, 155, 162, 169, 176, 183, 192, 199, 206, 213, 220, 227, 233, 236, 268, 275, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301 и 302. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения полипептид GDF15 или мутантный полипептид GDF15 содер

- 1 046387 жит последовательность, которая выбрана из группы, включающей SEQ ID NO: 4, 8, 12, 25, 52 и 55. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения гибридный белок также содержит полипептидный линкер. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения полипептидный линкер содержит последовательность, которая выбрана из группы, включающей SEQ ID NO: 18, 30, 34, 40, 58, 61, 64, 69, 72, 75, 78, 113, 116, 119, 122, 125, 128. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения гибридный белок содержит два или более Fc-доменов. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения гибридный белок содержит два или более полипептидных линкеров. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения гибридный белок содержит последовательность, которая выбрана из группы, включающей SEQ ID NO: 46, 24, 27, 32, 37, 20, 42, 50, 54, 57, 60, 63, 66, 68, 71, 74, 77, 82, 84, 88, 93, 96, 98, 100, 102, 104, 108, 134, 137, 139, 143, 146, 150, 153, 269, 272, 276, 279, 157, 160, 164, 167, 171, 174, 178, 181, 185, 188, 194, 197, 201, 204, 208, 211, 215, 218, 222, 225, 229, 232, 233, 238 и 240.

Также в настоящем изобретении предложены димеры, содержащие (i) первую полипептидную цепь, которая содержит один из вышеупомянутых гибридных белков, и (ii) вторую полипептидную цепь, которая содержит Fc-домен. Согласно еще одному варианту реализации настоящего изобретения указанная конструкция также содержит последовательность, которая выбрана из группы, включающей SEQ ID NO: 16, 22, 28, 29, 33, 35, 38, 48, 85, 91, 106, 132, 141, 148, 155, 162, 169, 176, 183, 192, 199, 206, 213, 220, 227, 233, 236, 268, 275, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301 и 302.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения первая и вторая полипептидные цепи соединены нековалентным образом. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения первая и вторая полипептидные цепи соединены ковалентным образом. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения первая и вторая полипептидные цепи являются ковалентно связанными посредством дисульфидных связей между соответствующими Fc-доменами. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения первая и вторая полипептидные цепи соединены посредством как ковалентных, так и нековалентных взаимодействий.

Согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит: (a) два гибридных белка, содержащих последовательность SEQ ID NO: 46; (b) два гибридных белка, содержащих последовательность SEQ ID NO: 24; или (c) два гибридных белка, содержащих последовательность SEQ ID NO: 27.

Согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит (a) два гибридных белка, содержащих последовательность SEQ ID NO: 32; или (b) два гибридных белка, содержащих последовательность SEQ ID NO: 37.

Согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 20, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 17.

Согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит (a) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 42, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 39; (b) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 50, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 47; (c) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 54, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 47; (d) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 57, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 47; (e) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 60, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 47; (f) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 63, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 47; (g) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 66, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 47; (h) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 68, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 47; (i) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 71, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 47; (j) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 74, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 47; (k) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 77, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 4 7; (l) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 80, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 47; (m) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 82, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 47; или (n) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 84, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 47.

Согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит (a) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 88, и вторую

- 2 046387 полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 86; (b) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 93, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 90; (c) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 96, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 90; (d) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 98, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 90; (e) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 100, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 90; (f) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 102, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 90; (g) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 104, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 90; или (h) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 108, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 105.

Согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит (a) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 112, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 12; (b) две полипептидные цепи, каждая из которых содержит последовательность SEQ ID NO: 112; (c) две полипептидные цепи, каждая из которых содержит последовательность SEQ ID NO: 115; (d) две полипептидные цепи, каждая из которых содержит последовательность SEQ ID NO: 118; (e) две полипептидные цепи, каждая из которых содержит последовательность SEQ ID NO: 121; (f) две полипептидные цепи, каждая из которых содержит последовательность SEQ ID NO: 124; (g) две полипептидные цепи, каждая из которых содержит последовательность SEQ ID NO: 127; (h) две полипептидные цепи, каждая из которых содержит последовательность SEQ ID NO: 130; или (i) две полипептидные цепи, каждая из которых содержит последовательность SEQ ID NO: 242.

Согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит: (a) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 134, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 131; (b) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 137, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 131; (c) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 139, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 131; (d) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 143, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 140; (e) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 146, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 140; (f) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 150, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 147; (g) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 153, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 147; (h) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 269, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 2 67; (i) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 272, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 267; (j) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 276, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 274; или (k) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 279, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 274.

Согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит: (a) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 157, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 154; (b) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 160, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 154; (c) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 164, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 161; (d) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 167, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 161.

Согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит: (a) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 171, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 168; или (b) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 174, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 168.

Согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит: (a) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 178, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 175; (b) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 181, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 175; (c) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 185, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 182; (d)

- 3 046387 первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 188, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 182; (e) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 194, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 191; (f) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 197, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 191; (g) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 201, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 198; или (h) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 204, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 198.

Согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит: (a) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 208, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 205; (b) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 211, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 205; (c) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 215, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 212; или (d) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 218, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 212.

Согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит: (a) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 222, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 219; (b) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 225, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 219; (c) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 229, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 226; или (d) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 232, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 226.

Согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит: (a) две полипептидные цепи, каждая из которых содержит последовательность SEQ ID NO: 235; (b) две полипептидные цепи, каждая из которых содержит последовательность SEQ ID NO: 238; или (c) две полипептидные цепи, каждая из которых содержит последовательность SEQ ID NO: 240.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит (i) первый димер, содержащий один из вышеуказанных димеров, и (ii) второй димер, содержащий один из вышеуказанных димеров. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения первая полипептидная цепь первого димера связана с первой полипептидной цепью второго димера посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой димер, выбранный из группы, включающей DhCpmFc(-)-(G₄S)₄-GDF15:DhCpmFc(+), DhCpmFc(+)-(G₄S)₄GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(-)-(G₄S)₄-GDF15(H6D):DhCpmFc(+), DhCpmFc(+)-(G₄S)₄GDF 15(H6D):DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-(G₄S)₄-GDF 15(N3Q):DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-G₄-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-(G₄S)₂-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-(G₄Q)₄-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)(L351C)-G₄-GDF15:DhCpmFc(-)(L351C),

DhCpmFc(+)(S354C)-G4-GDF15:DhCpmFc(-)(Y349C), CpmFc(-)-(G₄S)₄-GDF15:CpmFc(+), Fc-(G₄S)₈-FcGS(G4S)4-GDF15, Fc-(G4S)3-Fc-GS(G4S)4-GDF15 и Fc-(G4S)5-Fc-GS(G4S)4-GDF15.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой димер, выбранный из группы, включающей DhCpmFc(-)-(G₄S)₄-GDF15:DhCpmFc(+), DhCpmFc(+)-(G₄S)₄GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(-)-(G4S)4-GDF15(H6D):DhCpmFc(+), DhCpmFc(+)-(G4S)4GDF 15(H6D):DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-(G4S)4-GDF 15(N3Q):DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-G4-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-(G4S)2-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-(G₄Q)₄-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)(L351C)-G₄-GDF15:DhCpmFc(-)(L351C) и

DhCpmFc(+)(S354C)-G4-GDF15:DhCpmFc(-)(Y349C).

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения гибридный белок представляет собой белок, выбранный из группы, включающей Fc-(G₄S)₈-Fc-GS(G₄S)₄-GDF15, Fc-(G₄S)₃-Fc-GS(G₄S)₄GDF15 и Fc-(G₄S)₅-Fc-GS(G₄S)₄-GDF15.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой димер, выбранный из группы, включающей DhCpmFc(+)(L351C)-G₄-GDF15:DhCpmFc(-)(L351C) и DhCpmFc(+)(S354C)-G4-GDF15:DhCpmFc(-)(Y349C).

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой:DhCpmFc(-)-(G4S)4-GDF15:DhCpmFc(+), DhCpmFc(+)-(G4S)4-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(-)(G4S)4-GDF 15(H6D):DhCpmFc(+), DhCpmFc(+)-(G4S)4-GDF 15(H6D):DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-(G4S)4GDF15(N3Q):DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-G₄-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-(G₄S)₂-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-(G₄Q)₄-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)(L351C)G₄-GDF15:DhCpmFc(-)(L351C), DhCpmFc(+)(S354C)-G4-GDF15:DhCpmFc(-)(Y349C), CpmFc(-)-(G₄S)₄

- 4 046387

GDF15:CpmFc(+), Fc-(G4S)8-Fc-GS(G4S)4-GDF15, Fc-(G4S)3-Fc-GS(G4S)4—GDF15 или Fc-(G4S)s-FcGS(G4S)4-GDF15.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой DhCpmFc(-)-(G₄S)₄-GDF15:DhCpmFc(+), DhCpmFc(+)-(G₄S)₄-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(-)-(G₄S)₄GDF 15(H6D):DhCpmFc(+), DhCpmFc(+)-(G₄S)₄-GDF 15(H6D) :DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-(G₄S)₄GDF15(N3Q):DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-G₄-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-(G₄S)₂-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)-(G₄Q)₄-GDF15:DhCpmFc(-), DhCpmFc(+)(L351C)G₄-GDF15:DhCpmFc(-)(L351C) или DhCpmFc(+)(S354C)-G₄-GDF15:DhCpmFc(-)(Y349C).

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения гибридный белок не представляет собой белок, выбранный из группы, включающей Fc-(G₄S)₈-Fc-GS(G₄S)₄-GDF15, Fc-(G₄S)₃-FcGS(G4S)4-GDF15 и Fc-(G4S)5-Fc-GS(G4S)4-GDF15.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения гибридный белок не представляет собой белок, выбранный из группы, включающей DhCpmFc(+)(L351C)-G₄-GDF15:DhCpmFc(-) (L351C) и DhCpmFc(+)(S354C)-G₄-GDF15:DhCpmFc(-)(Y349C).

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой DhCpmFc(-)-(G₄S)₄-GDF15:DhCpmFc(+). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой DhCpmFc(+)-(G₄S)₄-GDF15:DhCpmFc(-). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой DhCpmFc(-)-(G₄S)₄GDF15(H6D):DhCpmFc(+). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой DhCpmFc(+)-(G₄S)₄-GDF15(H6D):DhCpmFc(-). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой DhCpmFc(+)-(G4S)4GDF15(N3Q):DhCpmFc(-). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой DhCpmFc(+)-GDF15:DhCpmFc(-). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой DhCpmFc(+)-G₄-GDF15:DhCpmFc(-). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой DhCpmFc(+)-(G4S)2GDF15:DhCpmFc(-). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой DhCpmFc(+)-(G₄Q)₄-GDF15:DhCpmFc(-). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой DhCpmFc(+)(L351C)-G₄-GDF15:DhCpmFc(-)(L351C). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой DhCpmFc(+)(S354C)-G₄-GDF15:DhCpmFc(-)(Y349C). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой CpmFc(-)-(G₄S)₄-GDF15:CpmFc(+). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой Fc-(G4S)8-Fc-GS(G4S)4GDF15. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой Fc-(G₄S)₃-Fc-GS(G₄S)₄-GDF15. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер не представляет собой Fc-(G₄S)₅-Fc-GS(G₄S)₄-GDF15.

Также в настоящем изобретении предложены гибридные белки, содержащие полипептид GDF15 или мутантный полипептид GDF15 и полипептид сывороточный альбумин человека (Human serum albumin, HSA). Согласно следующему варианту реализации настоящего изобретения последовательность полипептида HSA представляет собой последовательность SEQ ID NO: 110. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения полипептид GDF15 или мутантный полипептид GDF15 содержит последовательность, которая выбрана из группы, включающей SEQ ID NO: 4, 8, 12, 25, 52 и 55. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения гибридный белок также содержит полипептидный линкер, который соединяет полипептид GDF15 или мутантный полипептид GDF15 с полипептидом HSA. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения полипептидный линкер содержит последовательность, которая выбрана из группы, включающей SEQ ID NO: 18, 30, 34, 40, 58, 61, 64, 69, 72, 75, 78, 113, 116, 119, 122, 125, 128. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения гибридный белок содержит два или более полипептидов HSA. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения гибридный белок содержит последовательность, которая выбрана из группы, включающей SEQ ID NO: 115, 118, 121, 124, 127 и 130.

Также в настоящем изобретении предложены димеры, содержащие (i) первую полипептидную цепь, которая содержит гибридный белок, содержащий первую область GDF15 и первый полипептид HSA, и (ii) вторую полипептидную цепь, которая содержит второй полипептид HSA. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь также содержит вторую область GDF15. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер представляет собой гетеродимер (т.е. первая и вторая полипептидные цепи содержат различные последовательности). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер представляет собой гомодимер (т.е. первая и вторая полипептидные цепи содержат одинаковую последовательность). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения первая полипептидная цепь содержит последовательность, которая выбрана из группы, включающей SEQ ID NO: 115, 118, 121, 124, 127 и 130. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит последовательность, которая выбрана из группы, включающей SEQ ID NO: 115, 118, 121, 124, 127 и 130. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения первая и вторая полипептидные цепи со

- 5 046387 единены нековалентным образом. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения первая и вторая полипептидные цепи соединены ковалентным образом. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит вторую область GDF15, и первая и вторая полипептидные цепи соединены ковалентным образом посредством дисульфидных связей между соответствующими областями GDF15 данных цепей. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения первая и вторая полипептидные цепи соединены посредством как ковалентных, так и нековалентных взаимодействий.

Также в настоящем изобретении предложены димеры, содержащие (i) первую полипептидную цепь, которая содержит гибридный белок, содержащий первую область GDF15 и полипептид HSA, и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую вторую область GDF15. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения первая полипептидная цепь содержит последовательность, которая выбрана из группы, включающей SEQ ID NO: 115, 118, 121, 124, 127 и 130. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит последовательность, которая выбрана из группы, включающей SEQ ID NO: 4, 8, 12, 25, 52 и 55. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения первая и вторая полипептидные цепи соединены нековалентным образом. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения первая и вторая полипептидные цепи соединены ковалентным образом. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения первая и вторая полипептидные цепи соединены посредством как ковалентных, так и нековалентных взаимодействий.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1 представляет собой графическое изображение, представляющее конструкцию knob-hole (выступ-впадина), содержащую димер, который состоит из двух гетеродимеров DhknobFc-(G₄S)₄GDF15:DhholeFc.

Фиг. 2 представляет собой графическое изображение, представляющее конструкцию DhMonoFc, содержащую димер, который состоит из двух гибридных белков DhMonoFc-(G₄S)₄-GDF15.

Фиг. 3 представляет собой графическое изображение, представляющее конструкцию HemiFc, содержащую димер, который состоит из двух гибридных белков GGGFc-(G₄S)₄-Fc-S(G₄S)₄-GDF15.

Фиг. 4 представляет собой графическое изображение, представляющее конструкцию charged pair (заряженная пара, delHinge), содержащую димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(G₄S)₂-GDF15:DhCpmFc(+).

Фиг. 5 представляет собой графическое изображение, представляющее конструкцию charged pair (заряженная пара, delHinge) cysteine clamp (цистеиновый хомут), содержащую димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(L351C)-(G₄S)₂-GDF15:DhCpmFc(-)(L351C).

Фиг. 6 представляет собой графическое изображение, представляющее конструкцию HSA (сывороточный альбумин человека), содержащую димер, состоящий из двух гибридных белков HSA-(G4S)4GDF15.

Фиг. 7 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhknobFc-G₄-GDF15:DhholeFc на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела (МТ)) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 8 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гибридного белка Fc-(G₄S)₄-GDF15 на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 9 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гибридного белка Fc-(G₄S)₄-GDF15(H6D) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 10 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гибридного белка Fc-(G₄S)₄-Fc-(G₄S)₄-GDF15 на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 11 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гибридного белка DhFc-(G₄S)₅-DhFc-(G₄S)₄-GDF15 на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 12 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(+)-(1K)-GDF15:DhCpmFc(-) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 13 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)-GDF15:DhCpmFc(+) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 14 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 15 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами

- 6 046387 ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 16 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)-G₄-GDF15(N3D):DhCpmFc(+) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 17 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)-G₄S-GDF15:DhCpmFc(+) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 18 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)-(G₄S)₂-GDF15:DhCpmFc(+) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 19 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)-(G₄S)₂-GDF15(N3D):DhCpmFc(+) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 20 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)-(G₄Q)₂-GDF15(N3D):DhCpmFc(+) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 21 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)-G₄P-GDF15:DhCpmFc(+) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 22 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)-(G₄P)₂-GDF15:DhCpmFc(+) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 23 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)-G₄Q-GDF15:DhCpmFc(+) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 24 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)-(G₄Q)₂-GDF15(N3D):DhCpmFc(+) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 25 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)-(G₄Q)₂-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 26 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(+)(Y349C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(-)(S354C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 27 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(Y349C)-GDF15:DhCpmFc(+)(S354C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 28 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 29 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(S354C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 30 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(Y349C)-G₄-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 31 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(Y349C)-(G₄S)₂-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 32 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(Y349C)-(G₄Q)₂-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 33 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(L351C)-(G₄S)₂-GDF15:DhCpmFc(+)(L351C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 34 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гибридного белка HSA-GSAAQAAQQGS-GDF15 на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 35 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гибридного белка HSA-GSPAPAPGS-GDF15 на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 36 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гибридного

- 7 046387 белка HSA-GS(AAQAAQQ)2GS-GDF15 на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 37 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гибридного белка HSA-GS(PAPAP)2GS-GDF15 на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 38 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гибридного белка HSA-GDF15 на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 39 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гибридного белка HSA-GGNAEAAAKEAAAKEAAAKAGG-GDF15 на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 40 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гибридного белка HSA-(G4S)₆-GDF15 на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 41 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(N297G)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 42 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(N297G)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 43 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(N297G)(Y349C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(S354C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 44 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(N297G)(Y349C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(S354C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 45 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(N297G)(L351C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(L351C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 46 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(N297G)(L351C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(L351C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 47 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(L306C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 48 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера CpmFc(-)(N297G)-GDF15(Ndel3):CpmFc(+)(N297G) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 49 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(N297G) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 50 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+)(N297G) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 51 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+)(N297G)(S354C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 52 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(-)(N297G)(S354C) на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 53 представляет собой график, демонстрирующий влияние применения димера гибридного белка DhMonoFc(N297G)-GDF15 на потребление пищи (грамм пищи/грамм массы тела) мышами ob/ob в зависимости от дозы (log [грамм конструкции/кг МТ]).

Фиг. 54 представляет собой график массы тела (г) в зависимости от времени (дни после 1^ой инъекции) при введении наполнителя, 0,1 нмоль, 1 нмоль и 10 нмоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+) и 0,1 нмоль, 1 нмоль и 10 нмоль димера гетеродимера Dh3ComFc(-)GDF15(Ndel3).

Фиг. 55 представляет собой столбчатую диаграмму площади под кривой (AUC) для теста толерантности к глюкозе в неделю 2 введения (a) наполнителя (b) 10 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (c) 1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (d) 0,1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (e) 10 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+)(g) 1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)- 8 046387

GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+) или (g) 0,1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF 15(Ndel):Dh3 CpmFc(+).

Фиг. 56 представляет собой столбчатую диаграмму уровня инсулина (нг/мл)(после приема пищи) в неделю 3 введения (a) наполнителя, (b) 10 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (c) 1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (d) 0,1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (e) 10 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+), (g) 1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+) или (g) 0,1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF 15(Ndel):Dh3 CpmFc(+).

Фиг. 57 представляет собой столбчатую диаграмму уровня триглицеридов (мг/мл)(после приема пищи) в неделю 3 введения (a) наполнителя, (b) 10 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (c) 1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (d) 0,1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (e) 10 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+), (g) 1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+) или (g) 0,1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF 15(Ndel):Dh3 CpmFc(+).

Фиг. 58 представляет собой столбчатую диаграмму уровня холестерола (мг/мл)(после приема пищи) в неделю 3 введения (a) наполнителя, (b) 10 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (c) 1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (d) 0,1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (e) 10 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+), (g) 1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+) или (g) 0,1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF 15(Ndel):Dh3 CpmFc(+).

Фиг. 59 представляет собой столбчатую диаграмму площади под кривой (AUC) для теста толерантности к глюкозе в неделю 5 введения (a) наполнителя, (b) 10 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (c) 1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (d) 0,1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), (e) 10 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+), (g) 1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+) или (g) 0,1 ммоль димера гетеродимера Dh3CpmFc(-)GDF 15(Ndel):Dh3 CpmFc(+).

Фиг. 60 представляет собой столбчатую диаграмму, демонстрирующую связывание, определенное методом ППР поверхностного плазмонного резонанса (ЕО, единицы ответа), в отношении FcyRI, FcyRIIIA и FcyRIIA для (a) димера DhCpmFc(-)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+), (b) димера DhCpmFc(-) (Y349C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(S354C); (c) димера Dh3CpmFc(-)-GDF15(Ndel3); (d) димера Dh3CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3)-Dh3CpmFc(+)(S354C); (e) димера Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D); и (f) димера Dh3CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+)(S354C)(слева направо в отношении каждого рецептора).

Фиг. 61 представляет собой столбчатую диаграмму, демонстрирующую первую Tm (°C), определенную методом ДСК (дифференциальной сканирующей калориметрии), в отношении (a) (для пары столбцов, подписанных N3D) димера DhCpmFc(-)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+) и димера Dh3CpmFc(-)GDF15(N3D):DhCpmFc(+); (Ь)(для пары столбцов, подписанных Ndel3) димера DhCpmFc(-)GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+) и димера Dh3CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+); (с)(для пары столбцов, подписанных N3D+CC) димера DhCpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C) и димера Dh3CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C); и (Щ(для пары столбцов, подписанных Ndel3+CC) димера DhCpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(S354C) и димера Dh3CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(S354C).

Подробное описание изобретения

В настоящем изобретении предложены гибридные белки, содержащие полипептид GDF15 или мутантные полипептиды GDF15, и конструкции, содержащие такие гибридные белки. Также предложено получение и применения раскрытых молекул, например, при лечении метаболического нарушения, такого как диабет 2 типа, увеличение уровней глюкозы, увеличение уровней инсулина, дислипидемия или ожирение. Полипептиды GDF15, мутантные полипептиды GDF15 и определенные полипептидные конструкции, содержащие полипептиды GDF15 и мутантные полипептиды GDF15, описаны в заявках того же заявителя PCT/US2012/032415, поданной 5 апреля 2012, и PCT/2013/023465, поданной 28 января 2013, которые явным образом включены посредством ссылки в настоящую заявку для любой цели.

Способы на основе рекомбинантных полипептидов и нуклеиновой кислоты, используемые в настоящем изобретении, в том числе в примерах, в общем виде изложены в руководствах Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989) или Current Protocols in Molecular Biology (Ausubel et al., eds., Green Publishers Inc. and Wiley and Sons 1994).

- 9 046387

I. Общие определения.

Согласно концепции термины, приведенные в настоящем изобретении в единственном числе, означают один или несколько перечисленных объектов, если конкретно не указано обратное.

В настоящем изобретении термины аминокислота и остаток используются взаимозаменяемо и при использовании в контексте пептида или полипептида означают как существующие в природе, так и синтетические аминокислоты, а также аналоги аминокислот, миметики аминокислот и несуществующие в природе аминокислоты, которые с химической точки зрения являются подобными существующим в природе аминокислотам.

Термины существующая в природе аминокислота и кодируемая в природе аминокислота используются взаимозаменяемо и означают аминокислоту, которая кодируется генетическим кодом, а также аминокислоты, которые кодируются генетическим кодом, модифицированные после синтеза, например, гидроксипролин, γ-карбоксиглутамат и O-фосфосерин.

Аналог аминокислоты представляет собой соединение, которое обладает такой же основной химической структурой, что и существующая в природе аминокислота, т.е. α-углерод, который связан с водородом, карбоксильной группой, аминогруппой и R-группой, например, гомосерин, норлейцин, метионинсульфоксид, метионин-метил-сульфоний. Такие аналоги могут содержать модифицированные Rгруппы (например, норлейцин) или модифицированные пептидные скелеты, но сохраняют ту же основную химическую структуру, которой обладает существующая в природе аминокислота.

Миметик аминокислоты представляет собой химическое соединение, структура которого отличается от общей химической структуры аминокислоты, но которая функционирует способом, аналогичным способу функционирования существующей в природе аминокислоты. Примеры включают метакриолильное или акриолильное производное амида, β-, γ-, δ-иминокислоты (такие как пиперидин-4карбоновая кислота) и подобные соединения.

Термины несуществующая в природе аминокислота и некодируемая в природе аминокислота используются взаимозаменяемо и означают соединение, которое обладает той же основной химической структурой, что и существующая в природе аминокислота, но которое не встраивается в растущую полипептидную цепь комплексом трансляции. Термин несуществующая в природе аминокислота также включает, но не ограничивается ими, аминокислоты, которые образуются в результате модификации (например, пост-трансляционных модификаций) кодируемой в природе аминокислоты (включая, но не ограничиваясь ими, 20 общепринятых аминокислот), но которые в природе сами по себе не встраиваются в растущую полипептидную цепь комплексом трансляции. Неограничивающий перечень примеров несуществующих в природе аминокислот, которые могут быть включены в последовательность полипептида или на которые может быть заменен остаток дикого типа в последовательности полипептида, включает β-аминокислоты, гомоаминокислоты, циклические аминокислоты и аминокислоты с дериватизированными боковыми цепями. Примеры включают (в L-форме или D-форме; сокращенное название приведено в скобках): цитруллин (Cit), гомоцитруллин (hCit), Na-метилцитруллин (NMeCit), Naметилгомоцитруллин (Na-MeHoCit), орнитин (Orn), Na-Метилорнитин (Na-MeOrn или NMeOrn), саркозин (Sar), гомолизин (hLys или hK), гомоаргинин (hArg или hR), гомоглутамин (hQ), Na-метиларгинин (NMeR), Na-метиллейцин (Na-MeL или NMeL), N-метилгомолизин (NMeHoK), Na-метилглутамин (NMeQ), норлейцин (Nle), норвалин (Nva), 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин (Tic), октагидроиндол-2карбоновую кислоту (Oic), 3-(1-нафтил)аланин (1-Nal), 3-(2-нафтил)аланин (2-Nal), 1,2,3,4тетрагидроизохинолин (Tic), 2-инданилглицин (IgI), пара-иодфенилаланин (pI-Phe), парааминофенилаланин (4AmP или 4-Amino-Phe), 4-гуанидинофенилаланин (Guf), глициллизин (сокращенно называемый К(№-глицил) или К(глицил) или K(gly)), нитрофенилаланин (nitrophe), аминофенилаланин (aminophe или Amino-Phe), бензилфенилаланин (benzylphe), γ-карбоксиглутаминовую кислоту (γcarboxyglu), гидроксипролин (hydroxypro), п-карбоксил-фенилаланин (Cpa), α-аминоадипиновую кислоту (Aad), Na-метилвалин (NMeVal), N-a-метиллейцин (NMeLeu), Na-метилнорлейцин (NMeNle), циклопентилглицин (Cpg), циклогексилглицин (Chg), ацетиларгинин (acetylarg), α, β-диаминопропионовую кислоту (Dpr), α,γ-диаминомасляную кислоту (Dab), диаминопропионовую кислоту (Dap), циклогексилаланин (Cha), 4-метил-фенилаланин (MePhe), β,β-дифенил-аланин (BiPhA), аминомасляную кислоту (Abu), 4-фенил-фенилаланин (или бифенилаланин; 4Bip), α-амино-изомасляную кислоту (Aib), бетааланин, бета-аминопропионовую кислоту, пиперидиновую кислоту, аминокапроновую кислоту, аминогептановую кислоту, аминопимелиновую кислоту, десмозин, диаминопимелиновую кислоту, Nэтилглицин, N-этиласпарагин, гидроксилизин, аллогидроксилизин, изодесмозин, аллоизолейцин, Nметилглицин, N-метилизолейцин, N-метилвалин, 4-гидроксипролин (Hyp), γ-карбоксиглутамат, e-N,N,Nтриметиллизин, ε-N-ацетиллизин, O-фосфосерин, N-ацетилсерин, N-формилметионин, 3-метилгистидин, 5-гидроксилизин, ω-метиларгинин, 4-амино-O-фталевую кислоту (4APA), №ацетилглюкозаминил-Гсерин, №ацетилглюкозиламинил-Г-треонин, O-фосфотирозин и другие подобные аминокислоты и дериватизированные формы любой из перечисленных аминокислот.

Также в определение несуществующая в природе аминокислота включена любая аминокислота,

- 10 046387 имеющая структуру

R

[СООН] где R-группа представляет собой любой заместитель, отличный от заместителей, которые используются в двадцати природных аминокислотах.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения некодируемая в природе аминокислота содержит карбонильную группу. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения некодируемая в природе аминокислота имеет структуру:

(CH^R^OR,

RjHN COR4 где n представляет собой 0-10; R1 представляет собой алкил, арил, замещенный алкил или замещенный арил; R2 представляет собой H, алкил, арил, замещенный алкил и замещенный арил; R3 представляет собой H, аминокислоту, полипептид или группу, модифицирующую амино-конец, и R4 представляет собой H, аминокислоту, полипептид или группу, модифицирующую карбокси-конец.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения некодируемая в природе аминокислота содержит аминоокси-группу. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения некодируемая в природе аминокислота содержит группу гидразида. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения некодируемая в природе аминокислота содержит группу гидразина. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения остаток некодируемой в природе аминокислоты содержит группу семикарбазида.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения остаток некодируемой в природе аминокислоты содержит азидную группу. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения некодируемая в природе аминокислота имеет структуру:

(CH₂)„R_LX(CH₂)„N₃

R₂hn cor₃ где n представляет собой 0-10; R1 представляет собой алкил, арил, замещенный алкил, замещенный арил или отсутствует; X представляет собой O, N, S или отсутствует; m представляет собой 0-10; R2 представляет собой H, аминокислоту, полипептид или группу, модифицирующую амино-конец, и R₃представляет собой H, аминокислоту, полипептид или группу, модифицирующую карбокси-конец.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения некодируемая в природе аминокислота содержит алкинную группу. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения некодируемая в природе аминокислота имеет структуру:

(ch^r^ch^cch r₂hn cor₃ где n представляет собой 0-10; R1 представляет собой алкил, арил, замещенный алкил или замещенный арил; X представляет собой O, N, S или отсутствует; m представляет собой 0-10, R₂ представляет собой H, аминокислоту, полипептид или группу, модифицирующую амино-конец, и R₃ представляет собой H, аминокислоту, полипептид или группу, модифицирующую карбокси-конец.

Термин замещенный означает, что атом водорода в молекуле или группе заменен группой или атомом, который называют заместителем. Типичные заместители включают: галоген, C_1-8алкил, гидроксил, С_1-8алкокси, -NR^xR^x, нитро, циано, галоген- или пергалогенС1-8алкил, С2-8алкенил, С2-8алкинил, SR^x, -S(=O)2R^x, -C(=O)OR^x, -C(=O)R^x, где каждый R^x представляет собой независимо водород или C1-C₈алкил. Следует отметить, что, когда заместитель представляет собой -NR^xR^x, группы R^x могут быть объединены посредством атома азота с образованием кольца.

Термин алкил означает углеводород с неразветвленной или разветвленной цепью. Типичные примеры алкильных групп включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, вторбутил, пентил и гексил. Типичные алкильные группы представляют собой алкильные группы, содержащие от 1 до 8 атомов углерода; такие группы широко представлены Сь^килом.

- 11 046387

Термин алкокси означает алкильную группу, присоединенную к атому кислорода. Типичные примеры алкокси-групп включают метокси, этокси, трет-бутокси, пропокси и изобутокси. Распространенные алкокси-группы представляют собой Ц^алкокси.

Термин галоген означает хлор, фтор, бром или йод.

Термин алкенил означает углеводород с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащий одну или несколько двойных связей углерод-углерод. Типичные примеры алкенильных групп включают винил, пропенил, аллил, бутенил и 4-метилбутенил. Распространенные алкенильные группы представляют собой C.'2-халкенил.

Термин алкинил означает углеводород с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащий одну или несколько тройных связей углерод-углерод. Типичные примеры алкинильных групп включают этинил, пропинил (пропаргил) и бутинил. Распространенные алкинильные группы представляют собой C'2-халкинил.

Термин циклоалкил означает циклический неароматический углеводород. Примеры циклоалкильных групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил. Циклоалкильная группа может содержать одну или несколько двойных связей. Примеры циклоалкильных групп, содержащих двойные связи, включают циклопентенил, циклогексенил, циклогексадиенил и циклобутадиенил. Распространенные циклоалкильные группы представляют собой ^^циклоалкильные группы.

Термин перфторалкил означает алкильную группу, в которой все атомы водорода были замещены атомами фтора. Распространенные перфторалкильные группы представляют собой Ц^перфторалкил. Пример распространенной перфторалкильной группы представляет собой CF3.

Термин ацил означает группу, полученную из органической кислоты путем удаления гидроксильной группы (-OH). Например, ацильная группа CH₃C(=O) образована в результате удаления гидроксильной группы из CH3C(=O)OH.

Термин арил означает циклический ароматический углеводород. Примеры арильных групп включают фенил и нафтил. Распространенные арильные группы представляют собой от шести-до тринадцатичленные кольца.

Термин гетероатом в настоящем изобретении означает атом кислорода, азота или серы.

Термин гетероарил означает циклический ароматический углеводород, в котором один или несколько атомов углерода арильной группы были замещены гетероатомом. Если гетероарильная группа содержит более одного гетероатома, гетероатомы могут быть одинаковыми или различными. Примеры гетероарильных групп включают пиридил, пиримидинил, имидазолил, тиенил, фурил, пиразинил, пирролил, индолил, триазолил, пиридазинил, индазолил, пуринил, хинолизинил, изохинолил, хинолил, нафтиридинил, хиноксалинил, изотиазолил и бензо[Ъ]тиенил. Распространенные гетероарильные группы представляют собой от пяти- до тринадцатичленные кольца, содержащие 1-4 гетероатома. Гетероарильные группы, которые представляют собой пяти- или шестичленные кольца, содержащие от 1 до 3 гетероатомов, являются особенно распространенными.

Термин гетероциклоалкил означает циклоалкильную группу, в которой один или несколько атомов углерода были замещены гетероатомом. Если гетероциклоалкильная группа содержит более одного гетероатома, гетероатомы могут быть одинаковыми или различными. Примеры гетероциклоалкильных групп включают тетрагидрофурил, морфолинил, пиперазинил, пиперидинил и пирролидинил. Гетероциклоалкильная группа может также содержать одну или несколько двойных связей, но не являться ароматической. Примеры гетероциклоалкильных групп, содержащих двойные связи, включают дигидрофуран. Распространенные гетероциклоалкильные группы представляют собой от трех- до десятичленные кольца, содержащие 1-4 гетероатома. Гетероциклоалкильные группы, которые представляют собой пятиили шестичленные кольца, содержащие 1-2 гетероатома, являются особенно распространенными.

Также следует отметить, что циклические кольцевые группы, т.е. арил, гетероарил, циклоалкил и гетероциклоалкил, могут содержать более одного кольца. Например, нафтильная группа представляет собой конденсированную бициклическую кольцевую систему. Также предполагается, что настоящее изобретение включает кольцевые группы, содержащие мостиковые атомы, или кольцевые группы, имеющие спиро-ориентацию.

Типичные примеры пяти- и шестичленных ароматических колец, необязательно содержащих один или два гетероатома, представляют собой фенил, фурил, тиенил, пирролил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, пиразолил, изоксазолил, изотиазолил, пиридинил, пиридиазинил, пиримидинил и пиразинил.

Типичные примеры частично насыщенных, полностью насыщенных или полностью ненасыщенных пяти - восьмичленных колец, необязательно содержащих один-три гетероатома, представляют собой циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклоактил и фенил. Дополнительные примеры пятичленных колец представляют собой фурил, тиенил, пирролил, 2-пирролинил, 3-пирролинил, пирролидинил, 1,3диоксоланил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, 2H-имидазолил, 2-имидазолинил, имидазолидинил, пиразолил, 2-пиразолинил, пиразолидинил, изоксазолил, изотиазолил, 1,2-дитиолил, 1,3-дитиолил, 3H-1,2оксатиолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,5-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил, 1,2,3триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,3,4-тиадиазолил, 3H-1,2,3-диоксазолил, 1,2,4-диоксазолил, 1,3,2

- 12 046387 диоксазолил, 1,3,4-диоксазолил, 5Н-1,2,5-оксатиазолил и 1,3-оксатиолил.

Дополнительные примеры шестичленных колец представляют собой 2Н-пиранил, 4Н-пиранил, пиридинил, пиперидинил, 1,2-диоксинил, 1,3-диоксинил, 1,4-диоксанил, морфолинил, 1,4-дитианил, тиоморфолинил, пиндазинил, пиримидинил, пиразинил, пиперазинил, 1,3,5-триазинил, 1,2,4-триазинил, 1,2,3-триазинил, 1,3,5-тритианил, 4H-1,2-оксазинил, 2H-1,3-оксазинил, 6H-1,3-оксазинил, 6H-1,2оксазинил, 1,4-оксазинил, 2H-1,2-оксазинил, 4H-1,4-оксазинил, 1,2,5-оксатиазинил, 1,4-оксазинил, оизоксазинил, п-изоксазинил, 1,2,5-оксатиазинил, 1,2,6-(3-оксатиазинил, 1,4,2-оксадиазинил.

Дополнительные примеры семичленных колец представляют собой азепинил, оксепинил, тиепинил и 1,2,4-триазепинил.

Дополнительные примеры восьмичленных колец представляют собой циклооктил, циклооктенил и циклооктадиенил.

Примеры бициклических колец, состоящих из двух конденсированных частично насыщенных, полностью насыщенных или полностью ненасыщенных пяти-и/или шестичленных колец, необязательно содержащих от одного до четырех гетероатомов, представляют собой индолизинил, индолил, изоиндолил, индолинил, циклопента(Ь)пиридинил, пирано(3,4Ф)пирролил, бензофурил, изобензофурил, бензо(Ь)тиенил, бензо^тиенил, Ш-индазолил, индоксазинил, бензоксазолил, антранилил, бензимидазолил, бензтиазолил, пуринил, хинолинил, изохинолинил, циннолинил, фталазинил, хиназолинил, хиноксалинил, 1,8-нафтиридинил, птеридинил, инденил, изоинденил, нафтил, тетралинил, декалинил, 2H-1бензопиранил, пиридо(3,4-Ь)пиридинил, пиридо(3,2-Ь)пиридинил, пиридо(4,3-Ь)-пиридинил, 2H-1,3бензоксазинил, 2H-1,4-бензоксазинил, Ш-2,3-бензоксазинил, 4H-3,1-бензоксазинил, 2H-1,2бензоксазинил и 4H-1,4-бензоксазинил.

Циклическая кольцевая группа может быть присоединена к другой группе более чем одним способом. Если конкретное расположение связей не указано, включены все возможные расположения. Например, термин пиридил включает 2-, 3- или 4-пиридил, и термин тиенил включает 2- или 3-тиенил.

Термин выделенная молекула нуклеиновой кислоты означает одно- или двухцепочечный полимер оснований дезоксирибонуклеотидов или рибонуклеотидов, считываемых от 5'-конца к 3'-концу (например, последовательность нуклеиновой кислоты GDF15, предложенная в настоящем изобретении), или аналог указанного полимера, который был отделен от по меньшей мере приблизительно 50 процентов полипептидов, пептидов, липидов, углеводов, полинуклеотидов или других веществ, с которыми данную нуклеиновую кислоту обнаруживают в природе, когда суммарную нуклеиновую кислоту выделяют из клеток источника. Предпочтительно выделенная молекула нуклеиновой кислоты по существу свободна от любых других загрязняющих молекул нуклеиновой кислоты или других молекул, которые обнаружены в природном окружении нуклеиновой кислоты, препятствующих ее применению для получения полипептида или применению в терапии, диагностике, профилактике или исследовании.

Термин выделенный полипептид означает полипептид (например, полипептид GDF15 или мутантный полипептид GDF15, предложенные в настоящем изобретении), который был отделен от по меньшей мере приблизительно 50 процентов полипептидов, пептидов, липидов, углеводов, полинуклеотидов или других веществ, с которыми данный полипептид обнаруживают в природе, когда его выделяют из клеток источника. Предпочтительно выделенный полипептид по существу свободен от любых других загрязняющих полипептидов или других загрязняющих веществ, которые обнаружены в его природном окружении, препятствующих его применению в терапии, диагностике, профилактике или исследовании.

Термин кодирующий означает полинуклеотидную последовательность, кодирующую одну или несколько аминокислот. Данный термин не требует наличия старт- или стоп-кодона. Аминокислотная последовательность может кодироваться в любой из различных рамок считывания, которые содержит полинуклеотидная последовательность.

Термины идентичный и процент идентичности в контексте двух или более последовательностей нуклеиновых кислот или полипептидных последовательностей относятся к двум или более последовательностям или подпоследовательностям, которые являются аналогичными. Процент идентичности означает процент идентичных остатков среди аминокислот или нуклеотидов в сравниваемых молекулах; процент идентичности рассчитывают на основе размера наименьшей молекулы среди молекул, подвергаемых сравнению. Для данных расчетов с учетом пропусков (gap) в выравниваниях (в случае наличия таковых) можно прибегнуть к конкретной математической модели или компьютерной программе (т.е. алгоритму). Способы, которые можно применять для расчета идентичности выровненных нуклеиновых кислот или полипептидов, включают способы, описанные в руководствах Computational Molecular Biology, (Lesk, A. M., ed.), (1988) New York: Oxford University Press; Biocomputing Informatics and Genome Projects, (Smith, D. W., ed.), 1993, New York: Academic Press; Computer Analysis of Sequence Data, Part I, (Griffin, A. M., and Griffin, H. G., eds.), 1994, New Jersey: Humana Press; von Heinje, G., (1987) Sequence Analysis in Molecular Biology, New York: Academic Press; Sequence Analysis Primer, (Gribskov, M. and Devereux, J., eds.), 1991, New York: M. Stockton Press; и Carillo et al., (1988) SIAM J. Applied Math. 48:1073.

При расчете процента идентичности последовательности, подвергаемые сравнению, выравнивают таким способом, который обеспечивает максимальное совпадение последовательностей. Компьютерная

- 13 046387 программа, которую используют для определения процента идентичности, представляет собой пакет программ GCG, который включает GAP (Devereux et al., (1984) Nucl. Acid Res. 12:387; Genetics Computer Group, University of Wisconsin, Madison, WI). Компьютерный алгоритм GAP используют для выравнивания двух полипептидов или полинуклеотидов, для которых проводят определение процента идентичности последовательности. Последовательности выравнивают для максимального совпадения соответствующих аминокислот или нуклеотидов данных последовательностей (сходного участка, который определяется алгоритмом). Вместе с алгоритмом используют штраф за введение пропуска (gap opening penalty, который рассчитывают как умноженная на 3 средняя диагональ, где средняя диагональ представляет собой среднюю величину диагонали используемой матрицы сравнения; диагональ представляет собой балл или количественный показатель, назначаемый за каждое полное совпадение аминокислот в соответствии с конкретной матрицей сравнения) и штраф за удлинение пропуска (gap extension penalty, который обычно составляет 1/10 долю от штрафа за введение пропуска), а также матрицу сравнения, такую как PAM 250 или BLOSUM 62. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения в данном алгоритме также используется стандартная матрица сравнения (см. публикацию Dayhoff et al., (1978) Atlas of Protein Sequence and Structure 5:345-352 для матрицы сравнения PAM 250; публикацию Henikoff et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89:10915-10919 для матрицы сравнения BLOSUM 62).

Рекомендуемые параметры для определения процента идентичности полипептидной или нуклеотидной последовательности с применением программы GAP являются следующими:

Алгоритм: Needleman et al., 1970, J. Mol. Biol. 48:443-13;

Матрица сравнения: BLOSUM 62 из Henikoff et al., 1992, выше;

Штраф за пропуск в последовательности (Gap Penalty): 12 (штрафы за концевые пропуски отсутствуют);

Штраф за длину пропуска (Gap Length Penalty): 4;

Порог подобия (Threshold of Similarity): 0.

Определенные схемы выравнивания для выравнивания двух аминокислотных последовательностей могут привести к совпадению только короткого участка двух последовательностей, и данный небольшой выровненный участок может обладать очень высокой идентичностью последовательности даже при отсутствии значительной взаимосвязи между двумя полноразмерными последовательностями. Соответственно, выбранный метод выравнивания (например, программа GAP) можно при необходимости откорректировать, чтобы обеспечить выравнивание, которое охватывает по меньшей мере 50 последовательных аминокислот целевого полипептида.

Термин полипептид GDF15 означает существующий в природе GDF15 или GDF15 дикого типа, который экспрессируется у млекопитающих, включая, без ограничения, человека, кролика, обезьяну (например, яванского макака), собаку, крысу, мышь или свинью. Согласно одному аспекту настоящего изобретения полипептид GDF15 означает любой полноразмерный GDF15, например, SEQ ID NO: 4, который состоит из 308 аминокислотных остатков и который кодируется нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 3; любую форму, содержащую активный домен и продомены полипептида, например, SEQ ID NO: 8, которая состоит из 279 аминокислотных остатков и кодируется нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 7 и в которой 29 аминокислотных остатков на амино-терминальном конце полноразмерного GDF15(т.е. остатки, образующие сигнальный пептид) были удалены; и любую форму GDF15, содержащую активный домен, из которой были удалены продомен и сигнальная последовательность, например, SEQ ID NO: 12, которая состоит из 112 аминокислотных остатков и кодируется нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 11, из которой были удалены сигнальная последовательность и продомен. Полипептиды GDF15 могут содержать, но не обязательно содержат амино-концевой метионин, который может быть введен генно-инженерным способом или в результате процесса экспрессии в бактерии.

Термин мутантный полипептид GDF15 означает полипептид GDF15(наnример, согласно SEQ ID NO: 4, 8 или 12), который был модифицирован. Такие модификации включают, но не ограничены ими, замены одной или нескольких аминокислот, в том числе замены несуществующими в природе аминокислотами, несуществующими в природе аналогами аминокислот и миметиками аминокислот, делеции или добавления. Согласно одному аспекту настоящего изобретения термин мутантный полипептид GDF15 означает полипептид GDF15, в котором по меньшей мере один остаток, который в норме присутствует в данном положении существующего в природе полипептида GDF15, был удален или замещен остатком, который в норме не присутствует в данном положении существующего в природе полипептида GDF15. В некоторых случаях необходимо заменить единичный остаток, который в норме присутствует в данном положении в последовательности существующего в природе полипептида GDF15, более чем одним остатком, который в норме не присутствует в данном положении; в других случаях может быть необходимо сохранить последовательность существующего в природе полипептида GDF15 и встроить один или несколько остатков в данном положении белка; в других случаях может быть необходимо удалить данный остаток полностью; все данные конструкции охватываются термином мутантный полипептид GDF15.

- 14 046387

Согласно различным вариантам реализации настоящего изобретения мутантный полипептид GDF15 содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере приблизительно на 85 процентов идентична существующему в природе полипептиду GDF15(наnример, SEQ ID NO: 4, 8 или 12). Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения мутантный полипептид GDF15 содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере приблизительно на 90 процентов или приблизительно на 95, 96, 97, 98 или 99 процентов идентична аминокислотной последовательности существующего в природе полипептида GDF15(например, SEQ ID NO: 4, 8 или 12). Такие мутантные полипептиды GDF15 предпочтительно, но не обязательно, обладают по меньшей мере одной активностью существующего в природе полипептида GDF15, такой как способность уменьшать уровни глюкозы, инсулина, триглицеридов или холестерола в крови; способность уменьшать массу тела; способность улучшать толерантность к глюкозе, толерантность к липидам или чувствительность к инсулину; или способность уменьшать уровень глюкозы в моче и выведение белка.

Термин область GDF15 охватывает полипептиды GDF15 и мутантные полипептиды GDF15 и последовательности, определенные выше.

Полипептид GDF15 или мутантный полипептид GDF15 являются предпочтительно биологически активными. В некоторых случаях для лечения или облегчения метаболического нарушения у субъекта применяют полипептид GDF15 или мутантный полипептид GDF15 вида или происходящий из вида, отличного от вида субъекта. В некоторых случаях для лечения или облегчения метаболического нарушения у субъекта применяют полипептид GDF15 или мутантный полипептид GDF15 того же вида или происходящий из того же вида, что и субъект.

Термин нативная Fc означает молекулу или последовательность, содержащую последовательность, отличную от последовательности антиген-связывающего фрагмента, полученную в результате расщепления целого антитела, которая представлена в мономерной или мультимерной форме. Исходный иммуноглобулин - источник нативной Fc - предпочтительно получен из человека и может представлять собой любой иммуноглобулин, однако предпочтительными являются IgG1 и IgG2. Нативные Fc состоят из мономерных полипептидов, которые могут быть объединены в димерные или мультимерные формы в результате ковалентного (т.е. посредством дисульфидных связей) и нековалентного связывания. Количество внутримолекулярных дисульфидных связей между мономерными субъединицами нативных молекул Fc варьирует от 1 до 4 в зависимости от класса (например, IgG, IgA, IgE) или подкласса (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgA1, IgGA2). Примером нативной Fc является связанный дисульфидной связью димер, полученный в результате расщепления IgG папаином (см. публикацию Ellison et al. (1982), Nucleic Acids Res. 10: 4071-9). Термин нативная Fc в настоящем изобретении является общим для мономерной, димерной и мультимерной форм.

Термин вариант Fc означает молекулу или последовательность, которая является модифицированной относительно нативной Fc. Такие модификации включают, но не ограничены ими, замены одной или нескольких аминокислот, в том числе замены несуществующими в природе аминокислотами, несуществующими в природе аналогами аминокислот и миметиками аминокислот, делеции или добавления. Таким образом, термин вариант Fc включает молекулу или последовательность, которая представляет собой гуманизированную нативную Fc, отличную от Fc человека. Более того, нативная Fc содержит сайты, которые могут быть удалены, поскольку данные сайты отвечают за структурные свойства или биологическую активность, которые не требуются для гибридных молекул согласно настоящему изобретению. Таким образом, термин вариант Fc включает молекулу или последовательность, в которой отсутствуют один или несколько сайтов или остатков нативной Fc, влияющие на или вовлеченные в (1) образование дисульфидной связи, (2) несовместимость с избранной клеткой-хозяином (3) N-терминальную гетерогенность после экспрессии в избранной клетке-хозяине, (4) гликозилирование, (5) взаимодействие с комплементом, (6) связывание с Fc-рецептором, отличным от рецептора реутилизации, или (7) антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (antibody-dependent cellular cytotoxicity, ADCC). Варианты Fc описаны более подробно ниже. Согласно различным вариантам реализации настоящего изобретения вариант Fc содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере приблизительно на 85 процентов идентична нативной Fc. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения вариант Fc содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере приблизительно на 90 процентов или приблизительно на 95, 96, 97, 98 или 99 процентов идентична нативной Fc.

Термин Fc-домен охватывает молекулы и последовательности нативной Fc и варианта Fc, как определено выше. Как и в случае вариантов Fc и нативных Fc, термин Fc-домен включает молекулы в мономерной или мультимерной форме.

Термин мультимер применительно к Fc-доменам или молекулам, содержащим Fc-домены, означает молекулы, содержащие две или более полипептидных цепей, соединенных ковалентным образом, нековалентным образом или посредством как ковалентных, так и нековалентных взаимодействий. Молекулы IgG, как правило, образуют димеры; IgM - пентамеры; IgD - димеры; и IgA мономеры, димеры, тримеры или тетрамеры. Мультимеры могут быть получены путем использования последовательности и полученной в результате активности нативного Ig - источника Fc либо путем получения производных

- 15 046387 такой нативной Fc.

Термин димер применительно к Fc-доменам или молекулам, содержащим Fc-домены, означает молекулы, содержащие две полипептидные цепи, соединенные ковалентным образом, нековалентным образом или посредством как ковалентных, так и нековалентных взаимодействий.

Термин шарнир или шарнирная область в настоящем изобретении включает подвижный полипептид, содержащий аминокислоты, расположенные между первым и вторым константными доменами антитела. Шарнирная область в настоящем изобретении означает последовательность области, составляющей 6-62 аминокислоты в длину и присутствующей только в IgA, IgD и IgG, которая охватывает остатки цистеина, образующие мостики между двумя тяжелыми цепями.

Полипептидный линкер означает короткий полипептид, обычно составляющий от 1 до 30 аминокислотных остатков в длину, который ковалентным образом связывает два полипептида вместе, как правило, посредством пептидных связей.

В настоящем изобретении термин полипептид HSA охватывает существующий в природе сывороточный альбумин человека дикого типа. Данный термин также включает различные биологически активные фрагменты и варианты, гибридные белки и модифицированные формы белка HSA дикого типа. Такие биологически активные фрагменты или варианты, гибридные белки и модифицированные формы белка HSA дикого типа содержат по меньшей мере часть аминокислотной последовательности, обладающей значительной идентичностью последовательности белка HSA дикого типа. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения такие биологически активные фрагменты или варианты, гибридные белки и модифицированные формы белка HSA дикого типа содержат аминокислотную последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85 процентов идентичную последовательности дикого типа HSA. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения такие биологически активные фрагменты или варианты, гибридные белки и модифицированные формы белка HSA дикого типа содержат аминокислотную последовательность, по меньшей приблизительно на 90 процентов или приблизительно на 95, 96, 97, 98 или 99 процентов идентичную последовательности HSA дикого типа.

II. Fc-слияния, содержащие полипептиды GDF15 или мутантные полипептиды GDF15, а также полинуклеотиды.

В настоящем изобретении предложен ряд белков, гибридных с Fc, содержащих полипептид GDF15 или мутантный полипептид GDF15. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения гибридные белки содержат нативную Fc. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения гибридные белки содержат Fc-домен, который был сконструирован.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения Fc-гибридные белки, содержащие полипептид GDF15 (или мутантный полипептид GDF15), связаны с другой полипептидной цепью, состоящей из или содержащей Fc-домен, с образованием гетеродимера. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения два таких гетеродимера объединяются с образованием гетеротетрамера. Некоторые из данных полипептидных конструкций (т.е. Fc-гибридные белки, содержащие полипептид GDF15(hth мутантный полипептид GDF15), и мультимеры, содержащие один или несколько таких Fc-гибридных белков, содержащих полипептид GDF15(hth мутантный полипептид GDF15)) исследовали эмпирическим способом, как описано в примерах, представленных в настоящем изобретении ниже.

Антитела относятся к классу белков иммуноглобулинов, который включает IgG, IgA, IgE, IgM и IgD. Наиболее многочисленным классом иммуноглобулинов в сыворотке человека является IgG (Deisenhofer J 1981 Biochem 20:2361-2370; Huber R 1984 Behring Inst Mitt 76:1-14; Roux KH 1999 Int Arch Allergy Immunol 120:85-99). Структура IgG включает четыре цепи, две легкие и две тяжелые цепи; каждая легкая цепь содержит по два домена, и каждая тяжелая цепь содержит по четыре домена. Антиген-связывающий сайт расположен в Fab-домене (fragment antigen binding, антиген-связывающий фрагмент), который содержит вариабельный домен легкой (VL) и вариабельный домен тяжелой (VH) цепи, а также константный домен легкой (LC) и константный домен тяжелой (CH1) цепи. Область доменов CH2 и CH3 тяжелой цепи называют Fc (fragment crystallizable, кристаллизуемый фрагмент). Молекулу IgG можно рассматривать как гетеротетрамер, содержащий две тяжелые цепи, которые поддерживаются вместе дисульфидными связями (-S-S-) в шарнирной области, и две легкие цепи. Количество дисульфидных связей в шарнирной области среди подклассов иммуноглобулинов варьирует (Papadea C 1989 Crit Rev Clin Lab Sci 27:27-58). Сайт связывания FcRn расположен в Fc-домене антитела (Martin WL 2001 Mol Cell 7:867-877), и, таким образом, свойство увеличенного периода полужизни антитела в сыворотке обеспечивается Fcфрагментом. Fc-домен сам по себе можно рассматривать в качестве гомодимера, который состоит из тяжелых цепей, содержащих домены CH2 и CH3.

Согласно определенным предпочтительным вариантам реализации настоящего изобретения гибридные белки, описанные в настоящем изобретении, содержат Fc-домен IgG, полученный из Fc-домена IgG человека дикого типа. Под Fc IgG человека дикого типа подразумевают последовательность аминокислот, которая в природе присутствует в популяции человека. Разумеется, поскольку последовательности Fc могут незначительно варьировать среди индивидуумов, в последовательности дикого типа могут быть введены одно или несколько изменений, и данная последовательность все еще будет относиться

- 16 046387 к объему настоящего изобретения. Например, Fc-домен может содержать дополнительные изменения, не связанные с настоящим изобретением, такие как мутация в сайте гликозилирования или встраивание неприродной аминокислоты. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения полипептид, содержащий CH3-область, представляет собой молекулу IgG и также содержит CH1- и CH2домен. Примеры последовательностей IgG человека включают константные области IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4. Fc-домен также может содержаться в константной области тяжелой цепи IgA, IgD, IgE и IgM.

Некоторые Fc-гибридные белки, содержащие полипептид GDF15 или мутантный полипептид GDF15, и мультимеры, содержащие такие Fc-гибридные белки, включают описанные ниже.

II .A. Конструкции DhMonoFc.

Определения Mono- или MonoFc-домен в настоящем изобретении означают Fc-домен, который был сконструирован для уменьшения или предотвращения образования гомодимеров. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения MonoFc-домен получают посредством введения мутации тирозина на треонин (Y349T) и мутаций двух лизинов на аспарагиновую кислоту (K392D и K409D) в нативной Fc или варианте Fc.

С-терминальный лизин (K447) в MonoFc может быть необязательно удален. Данная модификация может иметь преимущество, например, когда пептид является гибридным с C-концом для уменьшения протеолиза гибридного белка.

Предложен гибридный белок, содержащий MonoFc-домен и область GDF15. Как правило, N-конец области GDF15 соединен напрямую или посредством полипептидного линкера с C-концом MonoFcдомена. Однако согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения N-конец MonoFcдомена соединен напрямую или посредством полипептидного линкера с C-концом области GDF15.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит два таких гибридных белка, соединенных посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных белков. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер представляет собой гомодимер. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения димер представляет собой гетеродимер.

Определения DhMono- или DhMonoFc-домен в настоящем изобретении означают Fc-домен, из которого была удалена шарнирная область целиком либо ее часть и который был сконструирован для уменьшения или предотвращения образования гомодимеров. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения предложен DhMonoFc-домен, в котором была введена мутация тирозина на треонин (Y349T) и мутации двух лизинов на аспарагиновую кислоту (K392D и K409D) в нативной Fc или варианте Fc, из которых была удалена шарнирная область целиком либо ее часть.

С-терминальный лизин (K447) в DhMonoFc может быть необязательно удален. Данная модификация может иметь преимущество, например, когда пептид является гибридным на C-конце, для уменьшения протеолиза гибридного белка.

Предложен гибридный белок, содержащий DhMonoFc-домен и область GDF15. Как правило, Nконец области GDF15 соединен напрямую или посредством полипептидного линкера с C-концом DhMonoFc-домена. Однако согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения N-конец DhMonoFc-домена соединен напрямую или посредством полипептидного линкера с C-концом области GDF15.

II .A.1 DhMonoFc-GDF15.

Определение MonoFc-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, N-конец которого соединен напрямую с C-концом MonoFc-домена.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, содержащий два таких гибридных белка, соединенных посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных белков.

Более конкретно, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения гомодимер содержит:

(a) два MonoFc-домена (в каждом мономере), содержащие последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVTTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE

WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE

ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:22), и (b) два полипептида GDF15(b каждом мономере), содержащие последовательность SEQ ID NO: 12.

- 17 046387

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения гибридный белок содержит аминокислотную последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVTTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVL S PREVQVTMCIGAC PS Q FRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVPAPCCVPASYN PMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:46), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccc caaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgc gtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggta cgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagc agtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccag gactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccct cccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgag aaccacaggtgaccaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaac caggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgc cgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgc ctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcacc gtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgat gcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctc cgggtgcgcgcaacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgc cgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattg ggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcc cgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctg caccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccag ctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctcc agacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:45).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 46.

II.A.2 DhMonoFc-(G₄S)₄-GDF15.

Определение DhMonoFc-(G₄S)₄-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, связанный с DhMonoFc-доменом посредством полипептидного линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 18 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом DhMonoFc-домена.

(a) два DhMonoFc-домена (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 22, (b) два полипептида GDF15 (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12, и (c) два полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность: GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO :18) , причем каждый линкер соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом DhMonoFc-домена.

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения гибридный белок содержит аминокислотную последовательность (последовательность линкера подчеркнута двойной чертой):

- 18 046387

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVTTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGgGSX^SSXSSSSXSSgSXXARNGDHCPLGPGRC CRLHTVRAS LE DLGWADWVL S PREVQVTMCIGAG P S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO :2 4) , которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: cacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaaccc aaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggt ggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacg gcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaac agcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggct gaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagccc ccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacag gtgaccaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcag cctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagt gggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtg ctggactccgacggctccttcttoctetatagcgacctcaccgtggacaa gagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgagg ctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgga ggtggtggatccggaggcggtggaagcggaggtggtggatctggaggcgg tggaagcgcgcgcaacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgct gccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgat tgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtg cccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcc tgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgcc agctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgct ccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcatatga (SEQ ID NO:23).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 24.

II.A.3 DhMonoFc-(G₄S)₄-GDF 15(H6D).

Определение DhMonoFc-(G₄S)₄-GDF15(H6D) в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, соединенный с DhMonoFc-доменом посредством полипептидного линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 18 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом DhMonoFc-домена. Вариант GDF15(H6D) представляет собой существующий в природе вариант GDF15 человека.

(a) два DhMonoFc-домена (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 22, (b) два полипептида GDF15(H6D) (в каждом мономере), содержащих последовательность: ARNGDDCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPS QFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQT

YDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:25), и (c) два полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 18, каждый из которых связывает N-конец полипептида GDF15 с C-концом DhMonoFc-домена.

- 19 046387

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVTTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTOKSLSLSPGGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSARNGDDCPLGPGRC CRLHTVRAS LE DLGWADWVL S PREVQVTMCIGAG P S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO : 2 7 ) , которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgaccaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt getggactccgacggctccttcttoctetatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggatccggaggcggtggaagcggaggtggtggatctggaggcg gtggaagcgcgcgcaacggagacgactgtccgctcgggcccgggcgttgc tgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccga ttgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgt gcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagc ctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgc cagetacaatcecatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgc tccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcatatga (SEQ ID

NO :2 6) .

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 27.

II.B. HemiFc.

Определения Hemi- или HemiFc-домен в настоящем изобретении означают полипептидную цепь, содержащую первый Fc-домен, соединенный напрямую или посредством полипептидного линкера со вторым Fc-доменом. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения первый Fc-домен и второй Fc-домен содержат одинаковую последовательность. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения первый Fc-домен и второй Fc-домен содержат различные последовательности. Как правило, первый и второй Fc-домены соединены ковалентным образом связанными посредством дисульфидных связей между соответствующими шарнирными областями данных доменов.

С-терминальный лизин (K447) может быть необязательно удален в первом Fc-домене, во втором Fcдомене или в обоих доменах. Данная модификация может иметь преимущество, например, когда пептид является гибридным на C-конце, для уменьшения протеолиза гибридного белка.

Предложен гибридный белок, содержащий HemiFc-домен и область GDF15. Как правило, N-конец области GDF15 соединен напрямую или посредством полипептидного линкера с C-концом HemiFcдомена. Однако согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения N-конец HemiFcдомена соединен напрямую или посредством полипептидного линкера с C-концом области GDF15.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен димер, который содержит два таких гибридных белка, соединенных посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных белков. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения димер представляет собой гомодимер. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения димер представляет собой гетеродимер. Графическое представление варианта реализации гомодимера, состоящего из двух гибридных белков GGG-Fc-(G₄S)₄-Fc-S(G₄S)₄-GDF15, см. на фиг. 3.

GGGFc-(G4S)4-Fc-S(G4S)4-GDF15.

Определение GGGFc-(G₄S)₄-Fc-S(G₄S)₄-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный бе

- 20 046387 лок, содержащий полипептид GDF15, соединенный с HemiFc-доменом посредством первого полипептидного линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 30 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом HemiFc-домена. HemiFc-домен содержит первый Fc-домен, соединенный со вторым Fc-доменом посредством полипептидного линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 18 и который соединяет N-конец первого Fc-домена с C-концом второго Fc-домена (который содержит три остатка глицина, присоединенные к его N-концу).

(a) два вторых Fc-домена (в каждом мономере), содержащих последовательность (часть шарнирной области включена в скобки):

GGG(ERKSSVECPPCP)APPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVW DVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTWHQDWL NGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDK SRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:28), (b) два первых Fc-домена (в каждом мономере), содержащих последовательность (часть шарнирной области включена в скобки):

(ERKSSVECPPCP)APPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVS HEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTWHQDWLNGK EYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTC LVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRW QQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO :29).

(c) два вторых полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 18, которые соединяют N-конец первого Fc-домена с C-концом второго Fc-домена, (d) два полипептида GDF15 (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12, и (e) два первых полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность: SGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO:30), которые соединяют N-конец полипептида GDF15 с C-концом первого Fc-домена.

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения гибридный белок содержит аминокислотную последовательность (часть шарнирной области включена в скобки; последовательность линкера подчеркнута двойной чертой):

GGG (ERKSSVECPPCP) APPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVW DVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTWHQDWL NGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDK S RWQQGNVFS С SVMHEALHNHYT QKS L S L SPGGGGGSGGGGSGGGGSGGG GS> (ERKSSVECPPCP) APPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWD VSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTWHQDWLN GKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSL TCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKS RWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGSGGGGSGGGGSGGGGSGGG GQARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGAC PSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSL QTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:32), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 21 046387 ggaggtggagagcgcaaatcttctgtcgagtgcccaccgtgcccagcacc acctgtggcaggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggaca ccctcatgatctcccggacccctgaggtcacgtgcgtggtggtggacgtg agccacgaagaccccgaggtccagttcaactggtacgtggacggcgtgga ggtgcataatgccaagacaaaaccacgggaggagcagttcaacagcacgt tccgtgtggtcagcgtcctcaccgttgtgcaccaggactggctgaacggc aaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaaggcctcccagcccccatcga gaaaaccatctccaaaaccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtaca ccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacc tgcctggtcaaaggcttctaccccagcgacatcgccgtggagtgggagag caatgggcagccggagaacaactacaagaccacacctcccatgctggact ccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcagg tggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgca caaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtggaggtggcg gtagcggtggcggaggttcaggtggcggcggaagcggtggaggaggttca gagcggaaatccagcgttgaatgtcctccgtgccctgctccacccgtcgc ggggcctagtgtcttccttttccctccaaaaccaaaggatacactgatga tcagccggacccccgaggttacgtgcgtcgtcgtcgatgtctcccacgag gatccagaggtccaattcaactggtacgtggacggggtcgaggtgcataa tgcaaagacaaagccacgggaagagcagtttaactctactttccgcgtgg tttctgtgctgaccgtggtgcaccaagattggctcaacggcaaggagtac aagtgcaaggtaagcaataaggggctccctgcccccattgagaagactat ctccaagacaaagggacagccacgcgagccacaagtctatacactccccc cttcccgcgaagaaatgaccaagaatcaggttagcctgacatgcttggtt aagggtttctacccctctgacatagccgtggagtgggagagcaatggaca accagagaacaactacaagaccaccccacccatgctggatagcgacggtt cattctttctgtatagtaagcttaccgtggacaagtcccggtggcaacaa ggaaatgtcttttcatgctctgtgatgcacgaggccttgcataatcacta tactcagaagagcttgagcctcagccccggatctggaggtggcggatccg ggggcggtggaagcggaggtggtggatcgggaggcggtggaagcgcgcgc aacggcgaccactgtccgctcgggcccggacgttgctgccgtctgcacac ggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgc cacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttc cgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaa gcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatccca tggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgat gacttgttagccaaagactgccactgcatatga (SEQ ID NO:31).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 32.

II.C. DhHemiFc.

Определения DhHemi- или DhHemiFc-домен в настоящем изобретении означают полипептидную цепь, содержащую первый Fc-домен, из которого была удалена шарнирная область целиком либо ее часть (домен DhFc), соединенный напрямую или посредством полипептидного линкера со вторым DhFc-доменом. Согласно конкретным вариантам реализации настоящего изобретения удаляют 12 Nтерминальных аминокислот в шарнирной области, например, ERKSSVECPPCP (SEQ ID NO: 15). Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения первый DhFc-домен и второй DhFc-домен содержат одинаковую последовательность. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения первый DhFc-домен и второй DhFc-домен содержат различные последовательности.

Предложен гибридный белок, содержащий DhHemiFc-домен и область GDF15. Как правило, Nконец области GDF15 соединен напрямую или посредством полипептидного линкера с C-концом

- 22 046387

DhHemiFc-домена. Однако согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения N-конец DhHemiFc-домена соединен напрямую или посредством полипептидного линкера с C-концом области GDF15.

GGGDhFc-(G4S)5-DhFc-S(G4S)4-GDF 15.

Определение GGGDhFc-(G₄S)₅-DhFc-S(G₄S)₄-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, соединенный с DhHemiFc-доменом посредством первого полипептидного линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 30 и который соединяет Nконец полипептида GDF15 с C-концом HemiFc-домена. HemiFc-домен содержит первый DhFc-домен, соединенный со вторым DhFc-доменом посредством полипептидного линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 34 и который соединяет N-конец первого DhFc-домена с C-концом второго DhFc-домена (который содержит три остатка глицина, присоединенные к его N-концу).

(a) два вторых DhFc-домена (в каждом мономере), содержащих последовательность:

GGGAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVQFNWY

VDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTWHQDWLNGKEYKCKVSNKGL

PAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIA

VEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVM

HEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:33), (b) два первых DhFc-домена (в каждом мономере), содержащих последовательность:

APPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVQFNWYVDG

VEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTWHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAP

IEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEW

ESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEA

LHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:35), (c) два вторых полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность: GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO:34), которые соединяют N-конец первого DhFc-домена с C-концом второго DhFc-домена, (d) два полипептида GDF15 (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12, и (e) два первых полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 30, которые соединяют N-конец полипептида GDF15 с C-концом первого DhFc-домена.

GGGAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVQFNWY

VDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGL

PAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIA

VEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVM

НЕALHNHY Т QKSLSLSP GGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAPРVAGР

SVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAK

TKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISK

TKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE

NNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQ

KSLSLSPGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSARNGDHCPLGPGRCCRLHTVR

ASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPD

TVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:37), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 23 046387 ggcggtggagctccgccggtggctggaccctcagtgttcctctttccacc gaagccgaaggacacccttatgattagccggaccccagaggtcacttgcg tcgtcgtggacgtgtcccatgaggatcccgaagtgcagtttaactggtat gtggacggagtggaggtccataacgccaagaccaagccaagggaagaaca gttcaatagcaccttccgggtggtgtccgtgctcaccgtggtgcatcaag actggctgaatggcaaagagtacaaatgtaaggtgtcaaacaaggggctc ccagcccctattgaaaagaccatctcaaagactaagggacagccacgcga acctcaagtgtataccctcccgccttcacgcgaagaaatgactaagaatc aggtcagccttacttgtctggtcaagggcttctacccgagcgacattgca gtcgaatgggagagcaatggtcagccagagaataactacaagaccactcc tcccatgcttgatagcgatggaagctttttcctttacagcaagcttactg tggataagtctcgctggcaacagggaaatgtgttcagctgttcagtgatg catgaagcactccacaatcattacacccagaagtcactcagcctctcacc cggaggaggaggcggttctggtggaggagggtctggaggtggagggagcg gcggaggcgggtctggcggtggtgggtctgagaggaagtcatcagtggaa tgcccaccatgccctgctcctcccgtggccggtccgagcgtgtttctctt cccacctaagcccaaggacactctgatgatctcacggactccggaagtga cttgtgtggtggtggacgtgtctcatgaggaccctgaagtgcagttcaac tggtacgtggacggcgtggaggtgcacaatgctaagaccaagcctagaga ggaacagttcaattccacctttcgcgtggtgagcgtcctgaccgtcgtgc accaggactggcttaacggaaaggaatacaagtgcaaggtgtccaacaaa ggccttccagctcccattgagaaaaccatctctaaaactaagggtcaacc aagggaaccccaagtctacaccctccctccgtctagagaagagatgacca aaaaccaggtgtccctgacctgtctggtgaagggattttacccctcagac atcgccgtggagtgggaaagcaacggacagcccgaaaacaactataagac tacccctcctatgctggactcagacggatctttcttcctctatagcaagc tcactgtggacaaatccagatggcaacaagggaatgtgttctcatgcagc gtgatgcacgaggctcttcacaaccactatacccagaagagcctgtctct ttcacctggttccggaggtggtgggagcggagggggtggatcaggtggtg gagggtccggaggcggaggatccgcacggaatggcgaccactgtccactg ggacccggaagatgttgtcgcctccacaccgtgagggcctctctggagga ccttggctgggccgactgggtcctgtcacctcgggaggtccaagtcaeca tgtgtatcggagcctgccccagccaattcagagcagcaaatatgcacgca садаttaagaccagcctgcatcggcttaaacctgatactgtgccggctee ttgttgcgtgccagcatcttacaacccgatggtgctgatccagaaaaccg ataccggtgtctccctccagacttacgacgacctccttgcaaaggactgc cattgcatc (SEQ ID NO:36).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два мономера, содержащие последовательность SEQ ID NO: 37.

II.D. Knob/Hole.

Определения knob- или knobFc-домен в настоящем изобретении означает Fc-домен, содержащий мутацию knob (выступ). Определения hole- или holeFc-домен в настоящем изобретении означают нативную Fc или вариант Fc, содержащий мутацию hole (впадина).

Мутации knob могут быть получены посредством замены небольших аминокислот боковых цепей большими аминокислотами, а мутации hole могут быть получены посредством замены больших аминокислот боковых цепей меньшими аминокислотами. См., например, публикации Ridgway JBB 1996, Protein Eng. 9:617-621; Merchant AM 1998, Nature Biotech. 16:677-681.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения домен knobFc получают посредством введения в последовательность Fc-домена мутации треонина на триптофан (T366W). Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения домен holeFc получают посредством введения в

- 24 046387 последовательность Fc-домена мутации треонина на серин (T366S), мутации лейцина на аланин (L368A) и мутации тирозина на валин (Y407V).

С-терминальный лизин (K447) может быть необязательно удален в knobFc-домене, holeFc-домене или в обоих доменах. Данная модификация может иметь преимущество, например, когда пептид является гибридным на C-конце, для уменьшения протеолиза гибридного белка.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения домен DhknobFc получают посредством введения введения в последовательность Fc-домена, из которого была удалена шарнирная область целиком либо ее часть, мутации треонина на триптофан (T366W). Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения домен DhholeFc получают посредством введения в последовательность Fc-домена, из которого была удалена шарнирная область целиком либо ее часть, мутации треонина на серии (T366S), мутации лейцина на аланин (L368A) и мутации тирозина на валин (Y407V).

С-терминальный лизин (K447) может быть необязательно удален в DhknobFc, DhholeFc, или в обоих доменах. Данная модификация может иметь преимущество, например, когда пептид является гибридным на C-конце, для уменьшения протеолиза гибридного белка.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложен гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую область GDF15, соединенную с holeFcдоменом напрямую или посредством полипептидного линкера, и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую knobFc-домен. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложен гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую область GDF15, соединенную с knobFc-доменом напрямую или посредством полипептидного линкера, и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую holeFc-домен.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложен гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую область GDF15, соединенную с DhholeFcдоменом напрямую или посредством полипептидного линкера, и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую DhknobFc-домен. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложен гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую область GDF15, соединенную с DhknobFc-доменом напрямую или посредством полипептидного линкера, и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую DhholeFc-домен.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, содержащий два таких гетеродимера, в которых гетеродимеры соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между областями GDF15 соответствующих первых полипептидных цепей данных гетеродимеров. Графическое представление варианта реализации гетеротетрамера, содержащего два гетеродимера, в котором каждый гетеродимер содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, который соединен с DhknobFc-доменом посредством полипептидного линкера, и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую DhholeFc-домен, см. на фиг. 1.

DhknobFc-(G₄S)₄-GDF15:DhholeFc.

Определение DhknobFc-(G₄S)₄-GDF15:DhholeFc в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, соединенный с DhknobFc-доменом посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 18 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом DhknobFc-домена, и (ii) полипептидную цепь, содержащую DhholeFc-домен.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, содержащий димер двух гетеродимеров DhknobFc-(G₄S)₄-GDF15:DhholeFc, в котором первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

Более конкретно, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения тетрамер содержит:

(a) два DhknobFc-домена (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVE

WESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE

ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:16), (b) два DhholeFc-домена (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVE

WESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE

ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:281),

- 25 046387 (c) два полипептида GDF15 (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 18, каждый из которых связывает N-конец полипептида GDF15 с C-концом DhknobFc-домена посредством пептидных связей.

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность (последовательность линкера подчеркнута двойной чертой):

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHY Т QKSLSLSP GGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSARNGDHCPLGРGRC CRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTS LHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:2 0) , которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggatgagctgaccaagaaccaggtca gcctgtggtgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggatccggaggcggtggaagcggaggtggtggatctggaggcg gtggaagcgcgcgcaacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgc tgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccga ttgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgt gcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagc ctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgc cagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgc tccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcatatga (SEQ ID NO:19) .

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:17), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 26 046387 gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggatgagctgaccaagaaccaggtca gcctgagctgcgcggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctcgtcagcaagctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaa atga (SEQ ID NO:21)

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 20, и два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 17.

II.E. Charged pair (заряженная пара, delHinge).

Определение CpmFc(+) домен в настоящем изобретении означает Fc-домен, содержащий положительно заряженную пару мутаций. Определение CpmFc(-) домен в настоящем изобретении означает Fc-домен, содержащий отрицательно заряженную пару мутаций. Следует отметить, что использование терминов положительный и отрицательный предназначено для удобства описания (т.е. для описания природы заряженной пары мутаций в Fc-доменах) и не означает, что последовательность или конструкция в целом обязательно имеет положительный или отрицательный заряд.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения положительно заряженную пару мутаций получают посредством введения в последовательность Fc-домена мутации глутаминовой кислоты на лизин (E356K) и мутации аспарагиновой кислоты на лизин (D399K). Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения отрицательно заряженную пару мутаций получают посредством введения в последовательность Fc-домена мутаций двух лизинов на аспарагиновую кислоту (K392D, K409D).

При инкубации вместе остатки аспартата связываются с остатками лизина посредством электростатического взаимодействия, что облегчает образование гетеродимеров между доменами CpmFc(+) и доменами CpmFc(-) и уменьшает или предотвращает образование гетеродимеров между последовательностями CpmFc(+) или между последовательностями CpmFc(-).

С-терминальный лизин (K447) может быть необязательно удален в домене CpmFc(+),домене CpmFc(-) или в обоих доменах. Данная модификация может иметь преимущество, например, когда пептид является гибридным на C-конце, для уменьшения протеолиза гибридного белка.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения домен DhCpmFc(+) получают посредством введения в последовательность Fc-домена, из которого была удалена шарнирная область целиком либо ее часть, мутации глутаминовой кислоты на лизин (E356K) и мутации аспарагиновой кислоты на лизин (D399K). Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения домен DhCpmFc() получают посредством введения в последовательность Fc-домена, из которого была удалена шарнирная область целиком либо ее часть, мутаций двух лизинов на аспарагиновую кислоту (K392D, K409D).

При инкубации вместе остатки аспартата связываются с остатками лизина посредством электростатического взаимодействия, что облегчает образование гетеродимеров между доменами DhCpmFc(+) и доменами DhCpmFc(-) и уменьшает или предотвращает образование гомодимеров между последовательностями DhCpmFc(+) или между последовательностями DhCpmFc(-).

С-терминальный лизин (K447) может быть необязательно удален в DhCpmFc(+), DhCpmFc(-) или в обоих доменах. Данная модификация может иметь преимущество, например, когда пептид является гибридным на C-конце, для уменьшения протеолиза гибридного белка.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложен гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую область GDF15, соединенную с доменом CpmFc(+), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен CpmFc(-). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения N-конец области GDF15 соединен с C-концом домена CpmFc(+) напрямую или посредством полипептидного линкера. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения N-конец домена CpmFc(+) соединен с C-концом области GDF15 напрямую или посредством полипептидного линкера.

Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложен гетеродимер, который

- 27 046387 содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую область GDF15, соединенную с доменом CpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен CpmFc(+). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения N-конец области GDF15 соединен с C-концом домена CpmFc(-) напрямую или посредством полипептидного линкера. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения N-конец домена CpmFc(-) соединен с C-концом области GDF15 напрямую или посредством полипептидного линкера.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложен гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую область GDF15, соединенную с доменом DhCpmFc(+), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(-). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения N-конец области GDF15 соединен с C-концом домена DhCpmFc(+) напрямую или посредством полипептидного линкера. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения N-конец домена DhCpmFc(+) соединен с C-концом области GDF15 напрямую или посредством полипептидного линкера.

Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложен гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую область GDF15, соединенную с доменом DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения N-конец области GDF15 соединен с C-концом домена DhCpmFc(-) напрямую или посредством полипептидного линкера. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения N-конец домена DhCpmFc(-) соединен с C-концом области GDF15 напрямую или посредством полипептидного линкера.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, содержащий димер, состоящий из двух таких гетеродимеров, в котором две первые полипептидные цепи гетеродимеров соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей. Графическое представление варианта реализации тетрамера, содержащего два гетеродимера, в котором каждый гетеродимер содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, соединенную посредством полипептидного линкера с доменом DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+), см. на фиг. 4.

II.E.1 DhCpmFc(+)-(1K)-GDF15:DhCpmFc(-).

Определение DhCpmFc(+)-(1K)-GDF15:DhCpmFc(-) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, который соединен с доменом DhCpmFc(+) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 40 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(+), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(-).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, содержащий димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(+)-(1K)-GDF15:DhCpmFc(-), в которых две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE

WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE

ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:38), (b) два домена DhCpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE

WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE

ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:282), (c) два полипептида GDF15 (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: GSGSATGGSGSVASSGSGSATHL (SEQ ID NO:40), каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(+) посредством пептидной связи.

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность (последовательность линкера подчеркнута двойной

- 28 046387 чертой):

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGGSGSATGGSGSVASSGSGSATHLARNGDHCPLGP GRCCRLHTVRAS LE DLGWADWVL S PREVQVTMCIGAG P S Q FRAANMHAQI KTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHC I (SEQ ID NO:42), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gccccagagctgcttggtggaccatccgtgttcctgtttcctccaaagcc gaaggacaccctgatgatctcaagaactccggaagtgacttgcgtcgtcg tggacgtgtcacatgaggatccagaggtcaagttcaattggtatgtggac ggagtggaagtgcataacgccaagaccaaaccccgcgaagaacagtacaa tagcacctaccgcgtggtgagcgtccttactgtgctccaccaggactggc ttaatgggaaggaatacaagtgtaaggtgtccaacaaggccctccccgct cccatcgaaaagaccatctcaaaggcaaaggggcaaccaagggaacctca agtgtacaccctgcctccgagcaggaaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacttgtctcgtgaagggcttctatcccagcgatattgctgtggaa tgggagtcaaatggccagcccgagaataactacaaaactaccccacccgt gctgaaatctgatgggtccttcttcctttactccaagctgaccgtggaca agagccgctggcaacaaggcaatgtctttagctgctcagtgatgcatgag gctctccataatcactacactcagaagtcactgtccctgtcacctggcgg atccggttctgctactggtggttccggctccgtcgcaagctctggttcag gcagtgcgactcatctggcacggaacggggaccattgtcccctgggacct ggtcggtgctgccggcttcacaccgtcagagcctctctggaggaccttgg atgggctgattgggtgctgagccctcgggaggtgcaagtcaccatgtgca tcggggcctgccctagccagttccgcgcagccaacatgcacgctcagatc aaaacctctcttcacagactgaagcccgacaccgtgccagcaccttgctg tgtgccggcctcttataaccccatggtcctcattcagaaaaccgacaccg gagtgtcacttcagacttacgatgacctcctggccaaggactgccactgc ata (SEQ ID NO:41).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:39), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcgccggaactgctgggcggcccgagcgtgtttctgtttccgccgaaacc gaaagataccctgatgattagccgcaccccggaagtgacctgcgtggtgg tggatgtgagccatgaagatccggaagtgaaatttaactggtatgtggat ggcgtggaagtgcataacgcgaaaaccaaaccgcgcgaagaacagtataa cagcacctatcgcgtggtgagcgtgctgaccgtgctgcatcaggattggc tgaacggcaaagaatataaatgcaaagtgagcaacaaagcgctgccggcg ccgattgaaaaaaccattagcaaagcgaaaggccagccgcgcgaaccgca

- 29 046387 ggtgtataccctgccgccgagccgcgaagaaatgaccaaaaaccaggtga gcctgacctgcctggtgaaaggcttttatccgagcgatattgcggtggaa tgggaaagcaacggccagccggaaaacaactatgataccaccccgccggt gctggatagcgatggcagcttttttctgtatagcgatctgaccgtggata aaagccgctggcagcagggcaacgtgtttagctgcagcgtgatgcatgaa gcgctgcataaccattatacccagaaaagcctgagcctgagcccgggcaa a (SEQ ID NO:43).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 42, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 39.

II.E.2 DhCpmFc(-)-GDF15:DhCpmFc(+).

Определение DhCpmFc(-)-GDF15:DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, содержащий димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)-GDF15:DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

Более конкретно, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения тетрамер со держит:

(a) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих аминокислотную последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG(SEQ ID NO:283), (b) два домена DhCpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих аминокислотную последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG(SEQ ID NO :48), и (c) два полипептида GDF15 (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12.

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVL S PREVQVTMCIGAG Р S Q FRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVPAPCCVPAS YN PMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:50), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 30 046387 gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgc gcgcaacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgc acacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctg tcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagcca gttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcc tgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaat cccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagaccta tgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:49).

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:47), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccggaaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgt getgaagtccgacggctccttcttoctetatagcaagctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaa atga (SEQ ID NO:51).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 50, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 47.

II.E.3 DhCpmFc(-)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+).

Определение DhCpmFc(-)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую существующий в природе вариант GDF15, который содержит мутацию аспарагина на аспарагиновую кислоту (N3D) (GDF15(N3D)) и

- 31 046387

N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+). Мутация N3D может уменьшать гетерогенность, вызванную деамидированием.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, содержащий димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 283, (b) два домена DhCpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 48, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: ARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPS QFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQT

YDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:52).

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVL S PREVQVTMCIGAC Р S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKPDTVPAPCCVPAS YN PMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:54), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgc gcgcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgc acacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctg tcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagcca gttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcc tgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaat cccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagaccta tgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:53).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 51.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые со

- 32 046387 держат последовательность SEQ ID NO: 54, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 47.

II.E.4 DhCpmFc(-)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+).

Определение DhCpmFc(-)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую вариант GDF15, в котором первые три аминокислоты удалены (GDF15(Ndel3) и N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+). Вариант Ndel3 может уменьшать деамидирование N3 и гетерогенность, вызванную изомеризацией D3.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 283, (b) два домена DhCpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 48, и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: GDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFR AANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDD

LLAKDCHCI (SEQ ID NO:55).

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPR EVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMV LIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:57), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg agaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtcc gcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgg gaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggc ggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccg acacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtg ctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgactt gttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:56).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная

- 33 046387 цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 51.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 57, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 47.

II.E.5 DhCpmFc(-)-G₄-GDF15(N3D):DhCpmFc(+).

Определение DhCpmFc(-)-G₄-GDF15(N3D):DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), соединенный с доменом DhCpmFc(-) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 58 и который соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)-G₄-GDF15(N3D):DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 283, (b) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 48, (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc(-) посредством пептидных связей.

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения первый полипептид содержит аминокислотную последовательность (последовательность линкера подчеркнута двойной чертой):

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG^^ARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWA DWVL S PREVQVTMCIGAC P S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKP DTVPAP С CVP ASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:60), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca

- 34 046387 agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggagcgcgcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgtt gctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggcc gattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgc gtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacga gcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgccc gccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtc gctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:59).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 60, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 47.

II.E.6 DhCpmFc(-)-G₄S-GDF15:DhCpmFc(+).

Определение DhCpmFc(-)-G₄S-GDF15:DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, который соединен с доменом DhCpmFc(-) посредством полипептидного линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 61 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)-G₄S-GDF15:DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 283, (b) два домена DhCpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 48, (c) два полипептида GDF15 (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

GGGGS (SEQ ID NO:61), каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(-) посредством пептидных связей.

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения первый полипептид содержит аминокислотную последовательность (линкер подчеркнут двойной чертой): APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG^^^ARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGW ADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCV PASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:63), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 35 046387 gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggatccgcgcgcaacggagaccactgtccgctcgggcccgggc gttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgg gccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcgg cgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaaga cgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtg cccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggt gtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcatat ga (SEQ ID NO:62).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения второй полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 51.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 63, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 47.

II.E.7 DhCpmFc(-)-(G₄S)₂-GDF15:DhCpmFc(+).

Определение DhCpmFc(-)-(G₄S)₂-GDF15:DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, который соединен с доменом DhCpmFc(-) посредством полипептидного линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 64 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)-(G₄S)₂-GDF15:DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 283, (b) два домена DhCpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 48, (c) два полипептида GDF15 (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: GGGGSGGGGS (SEQ ID NO:64), каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом последовательности DhCpmFc(-) посредством пептидной связи.

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность (линкер подчеркнут двойной чертой):

- 36 046387

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASL EDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVP APCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:66), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggatccggaggcggtggaagcgcgcgcaacggagaccactgtc cgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctg gaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagt gaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgc acgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgcca gcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaa gaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaag actgccactgcata (SEQ ID NO:65).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 66, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 47.

II.E.8 DhCpmFc(-)-(G4S)2-GDF15(N3D):DhCpmFc(+).

Определение DhCpmFc(-)-(G₄S)₂-GDF15(N3D):DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), соединенный с доменом DhCpmFc(-) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 64 и который соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)-(G₄S)₂-GDF15(N3D):DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 283, (b) два домена DhCpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 48, (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 64, каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc(

- 37 046387 ) посредством пептидной связи.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTOKSLSLSPGGGGGSGGGGSARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASL EDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVP APCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:68), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacacccteatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt getggactccgacggctcottettoctetatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggatccggaggcggtggaagcgcgcgcgacggagaccactgtc cgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctg gaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagt gaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgc acgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgcca gcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaa gaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaag actgccactgcata (SEQ ID NO:67).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 68, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 47.

II.E.9 DhCpmFc(-)-G₄P-GDF15:DhCpmFc(+).

Определение DhCpmFc(-)-(G₄P)-GDF15:DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, который соединен с доменом DhCpmFc(-) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 69 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)-(G₄P)-GDF15:DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 283, (b) два домена DhCpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO:

- 38 046387

48, (c) два полипептида GDF15 (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: GGGGP (SEQ ID NO:69), каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(-) посредством пептидной связи.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG^QGQPARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGW ADWVL S P REVQVTMCIGAG P S Q FRAANMHAQIKTSLHRLKPD TVPAPССV PASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO :71) , которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggacccgcgcgcaacggagaccactgtccgctcgggcccgggc gttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgg gccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcgg cgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaaga cgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtg cccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggt gtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:7 0) .

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 71, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 47.

II.E.10 DhCpmFc(-)-(G4P)2-GDF 15:DhCpmFc(+).

Определение DhCpmFc(-)-(G₄P)₂-GDF15:DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, который соединен с доменом DhCpmFc(-) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 72 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(-), и (ii) вторую v, содержащую последовательность DhCpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)-(G₄P)₂-GDF15:DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

- 39 046387

(а) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 283, (b) два домена DhCpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 48, (c) два полипептида GDF15 (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: GGGGPGGGGP(SEQ ID NO:72), каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(-) посредством пептидной связи.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGGGGGPGGGGPARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASL EDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVP APCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:74), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggacctggaggcggtggaccagcgcgcaacggagaccactgtc cgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctg gaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagt gaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgc acgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgcca gcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaa gaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaag actgccactgcatatga (SEQ ID NO:73).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 74, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 47.

II.E.11 DhCpmFc(-)-G₄Q-GDF 15:DhCpmFc(+).

Определение DhCpmFc(-)-G₄Q-GDF15:DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетероди

- 40 046387 мер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, который соединен с доменом DhCpmFc(-) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 75 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)-G4Q-GDF15:DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) две цепи DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 283, (b) две цепи DhCpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 48, (c) два полипептида GDF15 (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: GGGGQ (SEQ ID NO:75), каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(-) посредством пептидной связи.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGGGGGQARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGW ADWVL S PREVQVTMCIGAO Р S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKP DTVPAPCCV PASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:77), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcactgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggacaggcgcgcaacggagaccactgtccgctcgggcccgggc gttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgg gccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcgg cgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaaga cgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtg cccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggt gtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcatat ga (SEQ ID NO:76).

- 41 046387 цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 51.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 77, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 47.

II.E. 12 DhCpmFc(-)-(G₄Q)₂-GDF15:DhCpmFc(+).

Определение DhCpmFc(-)-(G₄Q)₂-GDF15:DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, который соединен с доменом DhCpmFc(-) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 78 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)-(G₄Q)₂-GDF15:DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 283, (b) два домена DhCpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 48, (c) два полипептида GDF15 (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: GGGGQGGGGQ (SEQ ID NO :78), каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(-) посредством пептидной связи.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE

WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE

ALHNHYTOKSLSLSPGGGGGQGGGGQARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASL

EDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVP

APCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:80), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 42 046387 gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggacagggaggcggtggacaggcgcgcaacggagaccactgtc cgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctg gaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagt gaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgc acgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgcca gcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaa gaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaag actgccactgcatatga (SEQ ID NO:79).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 80, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 47.

II.E. 13 DhCpmFc(-)-(G₄Q)₂-GDF15(N3D):DhCpmFc(+).

Определение DhCpmFc(-)-(G₄Q)2-GDF15(N3D):DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), соединенный с доменом DhCpmFc(-) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 78 и который соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)-(G₄Q)2-GDF15(N3D):DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 283, (b) два домена DhCpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 48, (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 78, каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc(-) посредством пептидной связи.

- 43 046387

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGGGGGQGGGGQARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASL E DLGWADWVL S PREVQVTMCIGAG P S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKPD TVP APCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:82), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt getggactccgacggctccttcttoctetatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggacagggaggcggtggacaggcgcgcgacggagaccactgtc cgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctg gaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagt gaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgc acgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgcca gcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaa gaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaag actgccactgcata (SEQ ID NO:81).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 82, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 47.

II.E. 14 DhCpmFc(-)-(G₄Q)₂-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+).

Определение DhCpmFc(-)-(G₄Q)₂-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), соединенный с доменом DhCpmFc(-) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 78 и который соединяет N-конец полипептида GDF15(Ndel3) с C-концом домена DhCpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)-(G₄Q)₂-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 283, (b) два домена DhCpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 48, (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID

- 44 046387

NO: 78, каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15(Ndel3) с C-концом домена DhCpmFc(-) посредством пептидной связи.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTOKSLSLSPGGGGGQGGGGQGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDL GWADWVL S PREVQVTMCIGAC Р S Q FRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVPAPC CVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:84), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt getggactccgacggctccttcttoctetatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggacagggaggcggtggacagggagaccactgtccgctcgggc ccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctg ggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtg catcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcaga tcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgc tgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacac cggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccact gcata (SEQ ID NO:83).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 84, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 47.

II.F. Charged pair (заряженная пара, delHinge) cysteine clamp (цистеиновый хомут).

Мутацию cysteine clamp (цистеиновый хомут) можно ввести в Fc-домен, такой как домен CpmFc(+), домен CpmFc(-), домен DhCpmFc(+) или домен DhCpmFc(-). Мутация cysteine clamp, как правило, включает введение цистеина в CH3-домен Fc-домена в конкретном положении посредством мутации так, что при инкубации с другим Fc-доменом, также содержащим цистеин, введенный в CH3домен в конкретном положении посредством мутации, между двумя Fc-доменами (например, между доменом CpmFc(+), содержащим мутацию cysteine clamp, и доменом CpmFc(-), содержащим мутацию cysteine clamp, или между доменом DhCpmFc(+), содержащим мутацию cysteine clamp, и доменом DhCpmFc(-), содержащим мутацию cysteine clamp) может образоваться дисульфидная связь (цистеиновый хомут). Fc-домен может содержать одну или несколько таких мутаций cysteine clamp.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения cysteine clamp получают посредством введения мутации серина на цистеин (S354C) в первом Fc-домене и мутации тирозина на цистеин

- 45 046387 (Y349C) во втором Fc-домене.

Определение домен DhCpmFc(-)(S354C) в настоящем изобретении означает домен DhCpmFc(-), содержащий мутацию серина на цистеин (S354C). Определение домен DhCpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает домен DhCpmFc(+), содержащий мутацию серина на цистеин (S354C). Определение домен DhCpmFc(-)(Y349C) в настоящем изобретении означает домен DhCpmFc(-), содержащий мутацию серина на цистеин (Y349C). Определение домен DhCpmFc(+)(Y349C) в настоящем изобретении означает домен DhCpmFc(+), содержащий мутацию серина на цистеин (Y349C).

Определение домен CpmFc(-)(S354C) в настоящем изобретении означает домен CpmFc(-), содержащий мутацию серина на цистеин (S354C). Определение домен CpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает домен CpmFc(+), содержащий мутацию серина на цистеин (S354C). Определение домен CpmFc(-)(Y349C) в настоящем изобретении означает домен CpmFc(-), содержащий мутацию серина на цистеин (Y349C). Определение домен CpmFc(+)(Y349C) в настоящем изобретении означает домен CpmFc(+), содержащий мутацию серина на цистеин (Y349C).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения cysteine clamp получают посредством введения мутации лейцина на цистеин (L351C) в первом и Fc-домене.

Определение домен DhCpmFc(-)(L351C) в настоящем изобретении означает домен DhCpmFc(-), содержащий мутацию серина на цистеин (L351C). Определение домен DhCpmFc(+)(L351C) в настоящем изобретении означает домен DhCpmFc(+), содержащий мутацию серина на цистеин (L351C).

Определение домен CpmFc(-)(L351C) в настоящем изобретении означает домен CpmFc(-), содержащий мутацию серина на цистеин (L351C). Определение домен CpmFc(+)(L351C) в настоящем изобретении означает домен CpmFc(+), содержащий мутацию серина на цистеин (L351C).

С-терминальный лизин (K447) может быть необязательно удален в домене CpmFc(+), домене CpmFc(-) или в обоих доменах. Данная модификация может иметь преимущество, например, когда пептид является гибридным на C-конце, для уменьшения протеолиза гибридного белка.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложен гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую область GDF15, соединенную с доменом CpmFc(+), содержащим мутацию cysteine clamp, и (ii) вторую полипептидную цепь, которая содержит домен CpmFc(-), содержащий мутацию cysteine clamp. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения N-конец области GDF15 соединен с C-концом домена CpmFc(+), содержащего мутацию cysteine clamp, напрямую или посредством полипептидного линкера. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения N-конец домена CpmFc(+), содержащего мутацию cysteine clamp, соединен с C-концом области GDF15 напрямую или посредством полипептидного линкера.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложен гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую область GDF15, соединенную с доменом CpmFc(-), содержащим мутацию cysteine clamp, и (ii) вторую полипептидную цепь, которая содержит домен CpmFc(+), содержащий мутацию cysteine clamp. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения N-конец области GDF15 соединен с C-концом домена CpmFc(-), содержащего мутацию cysteine clamp, напрямую или посредством полипептидного линкера. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения N-конец домена CpmFc(-), содержащего мутацию cysteine clamp, соединен с C-концом области GDF15 напрямую или посредством полипептидного линкера.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложен гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую область GDF15, соединенную с доменом DhCpmFc(+), содержащим мутацию cysteine clamp, и (ii) вторую полипептидную цепь, которая содержит домен DhCpmFc(-), содержащий мутацию cysteine clamp. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения N-конец области GDF15 соединен с C-концом домена DhCpmFc(+), содержащего мутацию cysteine clamp, напрямую или посредством полипептидного линкера. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения N-конец домена DhCpmFc(+), содержащего мутацию cysteine clamp, соединен с C-концом области GDF15 напрямую или посредством полипептидного линкера.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложен гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую область GDF15, соединенную с доменом DhCpmFc(-), содержащим мутацию cysteine clamp, и (ii) вторую полипептидную цепь, которая содержит домен DhCpmFc(+), содержащий мутацию cysteine clamp. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения N-конец области GDF15 соединен с C-концом домена DhCpmFc(-), содержащего мутацию cysteine clamp, напрямую или посредством полипептидного линкера. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения N-конец домена DhCpmFc(-), содержащего мутацию cysteine clamp, соединен с C-концом области GDF15 напрямую или посредством полипептидного линкера.

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, содержащий димер, состоящий из двух таких гетеродимеров, в котором две первые полипептидные цепи гетеродимеров соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей. Графическое представление варианта реализации тетрамера, содержащего

- 46 046387 два гетеродимера, в котором каждый гетеродимер содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, соединенный посредством полипептидного линкера с доменом DhCpmFc(+)(L351C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(-)(L351C), см. на фиг. 5.

II.F. 1 DhCpmFc(+)(S354C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(-)(Y349C).

Определение DhCpmFc(+)(S354C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(-)(Y349C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc(+)(S354C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(-)(Y349C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C354 первой полипептидной цепи и C349 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(+)(S354C)-GDF15(N3D):DhCpmFc()(Y349C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE

WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE

ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:85), (b) два домена DhCpmFc(-)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:284), и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVL S PREVQVTMCIGAO Р S Q FRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVPAPCCVPAS YN PMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:88), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gccccagagctgcttggtggaccatccgtgttcctgtttcctccaaagcc gaaggacaccctgatgatctcaagaactccggaagtgacttgcgtcgtcg tggacgtgtcacatgaggatccagaggtcaagttcaattggtatgtggac ggagtggaagtgcataacgccaagaccaaaccccgcgaagaacagtacaa tagcacctaccgcgtggtgagcgtccttactgtgctccaccaggactggc ttaatgggaaggaatacaagtgtaaggtgtccaacaaggccctccccgct cccatcgaaaagaccatctcaaaggcaaaggggcaaccaagggaacctca

- 47 046387 agtgtacaccctgcctccgtgcaggaaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacttgtctcgtgaagggcttctatcccagcgatattgctgtggaa tgggagtcaaatggccagcccgagaataactacaaaactaccccacccgt gctgaaatctgatgggtccttcttcctttactccaagctgaccgtggaca agagccgctggcaacaaggcaatgtctttagctgctcagtgatgcatgag gctctccataatcactacactcagaagtcactgtccctgtcacctggcgc gcgcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgc acacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctg tcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagcca gttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcc tgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaat cccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagaccta tgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:87).

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:86), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaa a (SEQ ID NO:89) .

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 88, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 86.

II.F.2 DhCpmFc(-)(Y349C)-GDF15:DhCpmFc(+)(S354C).

Определение DhCpmFc(-)(Y349C)-GDF15:DhCpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, Nконец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc(-)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первой полипептидной цепи и C354 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(Y349C)GDF15:DhCpmFc(+)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

- 48 046387 (a) два домена DhCpmFc(+)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:285), (b) два домена DhCpmFc(-)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:91), и (c) два полипептида GDF15 (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVL S PREVQVTMCIGAG P S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKPDTVPAPCCVPAS YN PMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:93), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgc gcgcaacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgc acacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctg tcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagcca gttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcc tgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaat cccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagaccta tgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:92).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит последовательность:

- 49 046387

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:90), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gccccagagctgcttggtggaccatccgtgttcctgtttcctccaaagcc gaaggacaccctgatgatctcaagaactccggaagtgacttgcgtcgtcg tggacgtgtcacatgaggatccagaggtcaagttcaattggtatgtggac ggagtggaagtgcataacgccaagaccaaaccccgcgaagaacagtacaa tagcacctaccgcgtggtgagcgtccttactgtgctccaccaggactggc ttaatgggaaggaatacaagtgtaaggtgtccaacaaggccctccccgct cccatcgaaaagaccatctcaaaggcaaaggggcaaccaagggaacctca agtgtacaccctgcctccgtgcaggaaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacttgtctcgtgaagggcttctatcccagcgatattgctgtggaa tgggagtcaaatggccagcccgagaataactacaaaactaccccacccgt gctgaaatctgatgggtccttcttcctttactccaagctgaccgtggaca agagccgctggcaacaaggcaatgtctttagctgctcagtgatgcatgag gctctccataatcactacactcagaagtcactgtccctgtctccgggtaa a (SEQ ID NO:94).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 93, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 90.

II.F.3 DhCpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C).

Определение DhCpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc(-)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первого полипептида и C354 второго полипептида.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(Y349C)GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей. Мутация N3D может быть введена в последовательность GDF15, например, для устранения гетерогенности, вызванной N-деамидированием.

(a) два домена DhCpmFc(+)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 285, (b) два домена DhCpmFc(-)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 91, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVL SPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYN PMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:96), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 50 046387 gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgc gcgcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgc acacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctg tcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagcca gttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcc tgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaat cccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagaccta tgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:95).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 90, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 94.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 96, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 90.

II.F.4 DhCpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(S354C).

Определение DhCpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc(-)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первой полипептидной цепи и C354 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(Y349C)GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей. Удаление 3 N-терминальных аминокислот (Ndel3) в последовательности GDF15 можно применять, например, для устранения гетерогенности, вызванной деамидированием аспарагинов или изомеризацией аспарагиновой кислоты.

(a) два домена DhCpmFc(+)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 285, (b) два домена DhCpmFc(-)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 91, и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

- 51 046387

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPR EVQVTMCIGAG P S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKPDTVPAPC CVPAS YNPMV LIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:98), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacacccteatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt getggactccgacggctccttcttoctetatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg agaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtcc gegegtegetggaagacctgggctgggccgattgggtgetgtcgccacgg gaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggc ggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccg acacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtg ctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgactt gttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:97).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 98, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 90.

II.F.5 DhCpmFc(-)(Y349C)-G4-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C).

Определение DhCpmFc(-)(Y349C)-G4-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), соединенный с доменом DhCpmFc(-)(Y349C) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 58 и который соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc(-)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первой полипептидной цепи и C354 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(Y349C)-G4GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 285,

- 52 046387 (b) два домена DhCpmFc(-)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 91, (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 58, каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc()(Y349C) посредством пептидной связи.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGXGXXARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWA DWVL S PREVQVTMCIGAG P S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKPD TVPAP CCVP ASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:100), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg tggaggtggtgcgcgcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgtt gctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggcc gattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgc gtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacga gcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgccc gccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtc gctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:99).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гетеротетрамер, который содержит два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 100, и два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 90.

II.F.6 DhCpmFc(-)(Y349C)-(G4S)2-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C).

Определение DhCpmFc(-)(Y349C)-(G₄S)₂-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), соединенный с доменом DhCpmFc(-)(Y349C) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 64 и который соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc(-)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен

- 53 046387

DhCpmFc(+)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первой полипептидной цепи и C354 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(Y349C)-(G₄S)₂GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

Более конкретно, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения тетрамер:

(a) два домена DhCpmFc(+)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 285, (b) два домена DhCpmFc(-)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 91, (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 64, каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc()(Y349C) посредством пептидной связи.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTOKSLSL5PGGGGGSGGGGSARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASL Е DLGWADWVL S PREVQVTMCIGAC Р S Q FRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVP APCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:102), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggatccggaggcggtggaagcgcgcgcgacggagaccactgtc cgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctg gaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagt gaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgc acgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgcca gcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaa gaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaag actgccactgcata (SEQ ID NO:101).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 90, которая кодируется после дователь

- 54 046387 ностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 94.

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гетеротетрамер, который содержит два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 102, и два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 90.

II.F.7 DhCpmFc(-)(Y349C)-(G₄Q)₂-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C).

Определение DhCpmFc(-)(Y349C)-(G₄Q)₂-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), соединенный с доменом DhCpmFc(-)(Y349C) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 78 и который соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc(-)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первой полипептидной цепи и C354 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(Y349C)-(G₄Q)₂GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 285, (b) два домена DhCpmFc(-)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 91, (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 78, каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc(-) (Y349C) посредством пептидной связи.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE

WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE

ALHNHYTOKSLSLSPGGGGGQGGGGQARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASL

EDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVP APCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:104), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 55 046387 gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggacagggaggcggtggacaggcgcgcgacggagaccactgtc cgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctg gaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagt gaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgc acgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgcca gcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaa gaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaag actgccactgcata (SEQ ID NO:103).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гетеротетрамер, который содержит два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 104, и два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 90.

II.F.8. DhCpmFc(-)(L3 51 C)-(G₄S)2-GDF 15: DhCpmFc(+)(L3 51C).

Определение DhCpmFc(-)(L351C)-(G₄S)2-GDF15:DhCpmFc(+)(L351C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, который соединен с доменом DhCpmFc(-)(L351C) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 64 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(-)(L351C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(L351C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C351 первой полипептидной цепи и C351 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(L351C)-(G₄S)2GDF15:DhCpmFc(+)(L351C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(L351C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTCPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:286), (b) два домена DhCpmFc(-)(L351C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

- 56 046387

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTCPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:106), (c) две цепи полипептида GDF15 (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ

ID NO: 12, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 64, каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhCpmFc(-)(L351C) посредством пептидной связи.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTCPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTOKSLSLSPGGGGGSGGGGSARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASL EDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVP

APCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:108) которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gcgccggaactgctgggcggcccgagcgtgtttctgtttccgccgaaacc gaaagataccctgatgattagccgcaccccggaagtgacctgcgtggtgg tggatgtgagccatgaagatccggaagtgaaatttaactggtatgtggat ggcgtggaagtgcataacgcgaaaaccaaaccgcgcgaagaacagtataa cagcacctatcgcgtggtgagcgtgctgaccgtgctgcatcaggattggc tgaacggcaaagaatataaatgcaaagtgagcaacaaagcgctgccggcg ccgattgaaaaaaccattagcaaagcgaaaggccagccgcgcgaaccgca ggtgtatacctgcccgccgagccgcgaagaaatgaccaaaaaccaggtga gcctgacctgcctggtgaaaggcttttatccgagcgatattgcggtggaa tgggaaagcaacggccagccggaaaacaactatgataccaccccgccggt gctggatagcgatggcagcttttttctgtatagcgatctgaccgtggata aaagccgctggcagcagggcaacgtgtttagctgcagcgtgatgcatgaa gcgctgcataaccattatacccagaaaagcctgagcctgagcccgggcgg cggcggcggcagcggcggcggcggcagcgcgcgcaacggcgatcattgcc cgctgggcccgggccgctgctgccgcctgcataccgtgcgcgcgagcctg gaagatctgggctgggcggattgggtgctgagcccgcgcgaagtgcaggt gaccatgtgcattggcgcgtgcccgagccagtttcgcgcggcgaacatgc atgcgcagattaaaaccagcctgcatcgcctgaaaccggataccgtgccg gcgccgtgctgcgtgccggcgagctataacccgatggtgctgattcagaa aaccgataccggcgtgagcctgcagacctatgatgatctgctggcgaaag attgccattgcatt (SEQ ID NO:107).

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTCPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:105), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 57 046387 gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaa cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacacctgtcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaa a (SEQ ID NO:109).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гетеротетрамер, который содержит два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 108, и два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 105.

IIG. HSA.

Определения HSA или сывороточный альбумин человека в настоящем изобретении означают гибридный белок, содержащий область GDF15, соединенную напрямую или посредством полипептидного линкера с полипептидом сывороточным альбумином человека (HSA). Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения гибридный белок содержит два или более полипептидов HSA.

Как правило, N-конец области GDF15 соединен напрямую или посредством полипептидного линкера с C-концом полипептида HSA. Однако согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения N-конец полипептида HSA соединен напрямую или посредством полипептидного линкера с Cконцом области GDF15.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, содержащий два таких гибридных белка, соединенных посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных белков. Графическое представление варианта реализации такого гомодимера см. на фиг. 6. В качестве альтернативы, предложен гетеродимер, который содержит один такой гибридный белок и полипептид GDF15 или мутантный полипептид GDF, соединенные посредством межцепочечной дисульфидной связи между областью GDF15 гибридного белка и полипептидом GDF15 или мутантным полипептидом.

II.G.1 Гетеродимер HSA-(G4S)4-GDF15:GDF15.

Определение HSA-(G4S)4-GDF15:GDF15 в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15, соединенный с полипептидом HSA посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 18 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом полипептида HSA, и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15.

Как правило, первая и вторая полипептидные цепи соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

Более конкретно, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения гетеродимер содержит:

(a) один полипептид HSA (в первом мономере), содержащий последовательность:

DAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFA KTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNE CFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFY

- 58 046387

APELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKC

ASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDL

LECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPA

DLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSWLLLRLA

KTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGE YKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAE DYLSWLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPK E FNAE TFT FHADICTLSEKERQIKKQTALVE LVKHKPKATKE QLKAVMDD FAAFVEKCCKADDKETCFAEEGKKLVAASQAALGL(SEQ ID NO:110), и (b) два полипептида GDF15 (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12, и (c) один полипептидный линкер (в первом мономере), содержащий последовательность SEQ ID NO: 18, который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом полипептида HSA посредством пептидной связи.

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения первый полипептид содержит аминокислотную последовательность (линкер подчеркнут двойной чертой):

DAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFA KTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNE CFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFY APELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKC ASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDL LECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPA DLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSWLLLRLA KTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGE YKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAE DYLSWLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPK Е FNAE TFT FHADICTLSEKERQIKKQTALVE LVKHKPKATKE QLKAVMDD FAAFVEKCCKADDKE TC FAEEGKKLVAAS QAALGLGGGGSGGGGSGGGGS GGGGSARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCI GACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTG VSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:112), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 59 046387 gatgcacacaagagtgaggttgctcatcgatttaaagatttgggagaaga aaatttcaaagccttggtgttgattgcctttgctcagtatcttcagcagt gtccatttgaagatcatgtaaaattagtgaatgaagtaactgaatttgca aaaacatgtgttgctgatgagtcagctgaaaattgtgacaaatcacttca taccctttttggagacaaattatgcacagttgcaactcttcgtgaaacct atggtgaaatggctgactgctgtgcaaaacaagaacctgagagaaatgaa tgcttcttgcaacacaaagatgacaacccaaacctcccccgattggtgag accagaggttgatgtgatgtgcactgcttttcatgacaatgaagagacat ttttgaaaaaatacttatatgaaattgccagaagacatccttacttttat gccccggaactccttttctttgctaaaaggtataaagctgcttttacaga atgttgccaagctgctgataaagctgcctgcctgttgccaaagctcgatg aacttcgggatgaagggaaggcttcgtctgccaaacagagactcaagtgt gccagtctccaaaaatttggagaaagagctttcaaagcatgggcagtagc tcgcctgagccagagatttcccaaagctgagtttgcagaagtttccaagt tagtgacagatcttaccaaagtccacacggaatgctgccatggagatctg cttgaatgtgctgatgacagggcggaccttgccaagtatatctgtgaaaa tcaagattcgatctccagtaaactgaaggaatgctgtgaaaaacctctgt tggaaaaatcccactgcattgccgaagtggaaaatgatgagatgcctget gacttgccttcattagctgctgattttgttgaaagtaaggatgtttgcaa aaactatgctgaggcaaaggatgtcttcctgggcatgtttttgtatgaat atgcaagaaggcatcctgattactctgtcgtgctgctgctgagacttgcc aagacatatgaaaccactctagagaagtgctgtgccgctgcagatcctca tgaatgctatgccaaagtgttcgatgaatttaaacctcttgtggaagagc ctcagaatttaatcaaacaaaattgtgagctttttgagcagcttggagag tacaaattccagaatgcgctattagttcgttacaccaagaaagtacccca agtgtcaactccaactcttgtagaggtctcaagaaacctaggaaaagtgg gcagcaaatgttgtaaacatcctgaagcaaaaagaatgccctgtgcagaa gactatctatccgtggtcctgaaccagttatgtgtgttgcatgagaaaac gccagtaagtgacagagtcaccaaatgctgcacagaatccttggtgaaca ggcgaccatgcttttcagctctggaagtcgatgaaacatacgttcccaaa gagtttaatgctgaaacattcaccttccatgcagatatatgcacactttc tgagaaggagagacaaatcaagaaacaaactgcacttgttgagctcgtga aacacaagcccaaggcaacaaaagagcaactgaaagctgttatggatgat ttcgcagcttttgtagagaagtgctgcaaggctgacgataaggagacctg ctttgccgaggagggtaaaaaacttgttgcggccagtcaggccgccttag gcttaggaggtggtggatccggaggcggtggaagcggaggtggtggatct ggaggcggtggaagcgcgcgcaacggagaccactgtccgctcgggcccgg gcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggct gggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatc ggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaa gacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcg tgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggg gtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcat atga (SEQ ID NO:111).

- 60 046387 цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 11.

Как обсуждалось выше, предложен гетеродимер, который содержит первую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 112, и вторую полипептидную цепь, содержащую последовательность SEQ ID NO: 12.

II.G.2 HSA-(G4S)4-GDF15.

Определение HSA-(G4S)4-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, соединенный с полипептидом HSA посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 18 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом полипептида HSA.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, содержащий два гибридных белка HSA-(G4S)4-GDF15, соединенных посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных белков.

(a) два полипептида HSA (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 110;

(b) два полипептида GDF15 (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12, и (c) два полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 18, каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом полипептида HAS посредством пептидной связи.

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения гибридный белок содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 112, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 111.

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два гибридных белка, содержащих последовательность SEQ ID NO: 112.

II.G.3 HSA-GSPAPAPGS-GDF15.

Определение HSA-(GSPAPAPGS)-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, соединенный с полипептидом HSA посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 113 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с Cконцом полипептида HSA.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, содержащий два гибридных белка HSA-(GSPAPAPGS)-GDF15, соединенных посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных белков.

(b) два полипептида GDF15 (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12; и (c) два полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность: GSPAPAPGS (SEQ ID NO:113), каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF-15 с C-концом полипептида HSA посредством пептидной связи.

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения гибридный белок содержит аминокислотную последовательность (линкер подчеркнут двойной чертой):

DAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFA

KTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNE

- 61 046387

CFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFY APELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKC ASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDL LECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPA DLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSVVLLLRLA KTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGE YKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAE DYLSWLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPK E FNAE TFT FHADICTLSEKERQIKKQTALVE LVKHKPKATKE QLKAVMDD FAAFVEKCCKADDKE TC FAEEGKKLVAAS QAALGLGS PAPAPGSARNGDH CPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAAN MHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLA KDCHCI (SEQ ID NO:115), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gatgcacacaagagtgaggttgctcatcgatttaaagatttgggagaaga aaatttcaaagccttggtgttgattgcctttgctcagtatcttcagcagt gtccatttgaagatcatgtaaaattagtgaatgaagtaactgaatttgca aaaacatgtgttgetgatgagtcagetgaaaattgtgacaaatcacttca taccctttttggagacaaattatgcacagttgcaactcttcgtgaaacct atggtgaaatggctgactgctgtgcaaaacaagaacctgagagaaatgaa tgcttcttgcaacacaaagatgacaacccaaacctcccccgattggtgag accagaggttgatgtgatgtgcactgcttttcatgacaatgaagagacat ttttgaaaaaatacttatatgaaattgccagaagacatccttacttttat gccccggaactccttttctttgctaaaaggtataaagctgcttttacaga atgttgccaagctgctgataaagctgcctgcctgttgccaaagctcgatg aacttcgggatgaagggaaggcttcgtctgccaaacagagactcaagtgt gccagtctccaaaaatttggagaaagagctttcaaagcatgggcagtagc tcgcctgagccagagatttcccaaagctgagtttgcagaagtttccaagt tagtgacagatcttaccaaagtccacacggaatgctgccatggagatctg cttgaatgtgctgatgacagggcggaccttgccaagtatatctgtgaaaa tcaagattcgatctccagtaaactgaaggaatgctgtgaaaaacctctgt tggaaaaatcccactgcattgeegaagtggaaaatgatgagatgeetget gacttgccttcattagctgctgattttgttgaaagtaaggatgtttgcaa aaactatgctgaggcaaaggatgtcttcctgggcatgtttttgtatgaat atgcaagaaggcatcctgattactctgtcgtgctgctgctgagacttgcc

- 62 046387 aagacatatgaaaccactctagagaagtgctgtgccgctgcagatcctca tgaatgctatgccaaagtgttcgatgaatttaaacctcttgtggaagagc ctcagaatttaatcaaacaaaattgtgagctttttgagcagcttggagag tacaaattccagaatgcgctattagttcgttacaccaagaaagtacccca agtgtcaactccaactcttgtagaggtctcaagaaacctaggaaaagtgg gcagcaaatgttgtaaacatcctgaagcaaaaagaatgccctgtgcagaa gactatctatccgtggtcctgaaccagttatgtgtgttgcatgagaaaac gccagtaagtgacagagtcaccaaatgctgcacagaatccttggtgaaca ggcgaccatgcttttcagctctggaagtcgatgaaacatacgttcccaaa gagtttaatgctgaaacattcaccttccatgcagatatatgcacactttc tgagaaggagagacaaatcaagaaacaaactgcacttgttgagctcgtga aacacaagcccaaggcaacaaaagagcaactgaaagctgttatggatgat ttcgcagcttttgtagagaagtgctgcaaggctgacgataaggagacctg ctttgccgaggagggtaaaaaacttgttgcggccagtcaggccgccttag gcttaggatccccagctccagctccaggaagcgcgcgcaacggagaccac tgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtc gctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgc aagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaac atgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggt gccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattc aaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagcc aaagactgccactgcatatga (SEQ ID NO:114).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два гибридных белка, содержащих последовательность SEQ ID NO: 115.

II.G.4 HSA-GS(PAPAP)2GS-GDF15.

Определение HSA-GS(PAPAP)2GS-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, соединенный с полипептидом HSA посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 116 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с Cконцом полипептида HSA.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, содержащий два гибридных белка HSA-GS(PAPAP)2GS-GDF15, соединенных посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных белков.

(b) два полипептида GDF15 (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12; и (c) два полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность: GSPAPAPPAPAPGS (SEQ ID NO:116), каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF-15 с C-концом полипептида HSA посредством пептидной связи.

- 63 046387

DAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFA KTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNE CFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFY APELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKC ASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDL LECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPA DLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSWLLLRLA KTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGE YKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAE DYLSWLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPK EFNAETFTFHADICTLSEKERQIKKQTALVELVKHKPKATKEQLKAVMDD FAAFVEKCCKADDKE TC FAEE GKKLVAAS QAALGLGSPAPAPPAPAPGSA RNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQ FRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTY DDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:118), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gatgcacacaagagtgaggttgctcatcgatttaaagatttgggagaaga aaatttcaaagccttggtgttgattgcctttgctcagtatcttcagcagt gtccatttgaagatcatgtaaaattagtgaatgaagtaactgaatttgca aaaacatgtgttgctgatgagtcagctgaaaattgtgacaaatcacttca taccctttttggagacaaattatgcacagttgcaactcttcgtgaaacct atggtgaaatggctgactgctgtgcaaaacaagaacctgagagaaatgaa tgcttcttgcaacacaaagatgacaacccaaacctcccccgattggtgag accagaggttgatgtgatgtgcactgcttttcatgacaatgaagagacat ttttgaaaaaatacttatatgaaattgccagaagacatccttacttttat gccccggaactccttttctttgctaaaaggtataaagctgcttttacaga atgttgccaagctgctgataaagctgcctgcctgttgccaaagctcgatg aacttcgggatgaagggaaggcttcgtctgccaaacagagactcaagtgt gccagtctccaaaaatttggagaaagagctttcaaagcatgggcagtagc tcgcctgagccagagatttcccaaagctgagtttgcagaagtttccaagt tagtgacagatcttaccaaagtccacacggaatgctgccatggagatctg cttgaatgtgctgatgacagggcggaccttgccaagtatatctgtgaaaa tcaagattcgatctccagtaaactgaaggaatgctgtgaaaaacctctgt tggaaaaatcccactgcattgccgaagtggaaaatgatgagatgcctget gacttgccttcattagctgctgattttgttgaaagtaaggatgtttgcaa aaactatgctgaggcaaaggatgtcttcctgggcatgtttttgtatgaat atgcaagaaggcatcctgattactctgtcgtgctgctgctgagacttgcc aagacatatgaaaccactctagagaagtgctgtgccgctgcagatcctca tgaatgctatgccaaagtgttcgatgaatttaaacctcttgtggaagagc ctcagaatttaatcaaacaaaattgtgagctttttgagcagcttggagag tacaaattccagaatgcgctattagttcgttacaccaagaaagtacccca agtgtcaactccaactcttgtagaggtctcaagaaacctaggaaaagtgg gcagcaaatgttgtaaacatcctgaagcaaaaagaatgccctgtgcagaa gactatctatccgtggtcctgaaccagttatgtgtgttgcatgagaaaac gccagtaagtgacagagtcaccaaatgctgcacagaatccttggtgaaca ggcgaccatgcttttcagctctggaagtcgatgaaacatacgttcccaaa

- 64 046387 gagtttaatgctgaaacattcaccttccatgcagatatatgcacactttc tgagaaggagagacaaatcaagaaacaaactgcacttgttgagctcgtga aacacaagcccaaggcaacaaaagagcaactgaaagctgttatggatgat ttcgcagcttttgtagagaagtgctgcaaggctgacgataaggagacctg ctttgccgaggagggtaaaaaacttgttgcggccagtcaggccgccttag gcttaggatccccagctccagctccacccgcacctgcccctggaagcgcg cgcaacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgca cacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgt cgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccag ttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcct gaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatc ccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctat gatgacttgttagccaaagactgccactgcatatga (SEQ ID NO:117).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два гибридных белка, содержащих последовательность SEQ ID NO: 118.

II.G.5 HSA-GSAAQAAQQGS-GDF15.

Определение HSA-GSAAQAAQQGS-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, соединенный с полипептидом HSA посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 119 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с Cконцом полипептида HSA.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, содержащий два гибридных белка HSA-GSAAQAAQQGS-GDF15, соединенных посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных белков.

(b) два полипептида GDF15 (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12; и (c) два полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность: GSAAQAAQQGS (SEQ ID NO:119), каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом полипептида HSA посредством пептидной связи.

DAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFA KTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNE CFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFY APELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKC ASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDL LECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPA DLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSWLLLRLA KTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGE YKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAE DYLSVVLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPK Е FNAE TFT FHADICTLSEKERQIKKQTALVE LVKHKPKATKE QLKAVMDD FAAFVEKCCKADDKETC FAEEGKKLVAASQAALGLGSAAQAAQQGSARNG DHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRA ANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDL LAKDCHCI (SEQ ID NO :121), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 65 046387 gatgcacacaagagtgaggttgctcatcgatttaaagatttgggagaaga aaatttcaaagccttggtgttgattgcctttgctcagtatcttcagcagt gtccatttgaagatcatgtaaaattagtgaatgaagtaactgaatttgca aaaacatgtgttgctgatgagtcagetgaaaattgtgacaaatcacttea taccctttttggagacaaattatgcacagttgcaactcttcgtgaaacct atggtgaaatggctgactgctgtgcaaaacaagaacctgagagaaatgaa tgcttcttgcaacacaaagatgacaacccaaacctcccccgattggtgag accagaggttgatgtgatgtgcactgcttttcatgacaatgaagagacat ttttgaaaaaatacttatatgaaattgccagaagacatccttacttttat gccccggaactccttttctttgctaaaaggtataaagctgcttttacaga atgttgccaagctgctgataaagctgcctgcctgttgccaaagctcgatg aacttcgggatgaagggaaggcttcgtctgccaaacagagactcaagtgt gccagtctccaaaaatttggagaaagagctttcaaagcatgggcagtagc tcgcctgagccagagatttcccaaagctgagtttgcagaagtttccaagt tagtgacagatcttaccaaagtccacacggaatgctgccatggagatctg cttgaatgtgctgatgacagggcggaccttgccaagtatatctgtgaaaa tcaagattcgatctccagtaaactgaaggaatgctgtgaaaaacctctgt tggaaaaatcccactgcattgeegaagtggaaaatgatgagatgeetget gacttgccttcattagctgctgattttgttgaaagtaaggatgtttgcaa aaactatgctgaggcaaaggatgtcttcctgggcatgtttttgtatgaat atgcaagaaggcatcctgattactctgtcgtgctgctgctgagacttgcc aagacatatgaaaccactctagagaagtgctgtgccgctgcagatcctca tgaatgctatgccaaagtgttcgatgaatttaaacctcttgtggaagagc ctcagaatttaatcaaacaaaattgtgagctttttgagcagcttggagag tacaaattccagaatgcgctattagttcgttacaccaagaaagtacccca agtgtcaactccaactcttgtagaggtctcaagaaacctaggaaaagtgg gcagcaaatgttgtaaacatcctgaagcaaaaagaatgccctgtgcagaa gactatctatccgtggtcctgaaccagttatgtgtgttgcatgagaaaac gccagtaagtgacagagtcaccaaatgctgcacagaatccttggtgaaca ggcgaccatgcttttcagctctggaagtcgatgaaacatacgttcccaaa gagtttaatgctgaaacattcaccttccatgcagatatatgcacactttc tgagaaggagagacaaatcaagaaacaaactgcacttgttgagctcgtga aacacaagcccaaggcaacaaaagagcaactgaaagctgttatggatgat ttcgcagcttttgtagagaagtgctgcaaggctgacgataaggagacctg ctttgccgaggagggtaaaaaacttgttgcggccagtcaggccgccttag gcttaggatccgccgctcaggctgcacagcaaggaagcgcgcgcaacgga gaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccg cgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacggg aggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcg gcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccga cacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgc tcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttg ttagccaaagactgccactgcatatga (SEQ ID NO:120).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два гибридных белка, содержащих последовательность SEQ ID NO: 121.

II.G.6 HSA-GS(AAQAAQQ)₂GS-GDF15.

Определение HSA-GS(AAQAAQQ) 2GS-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, соединенный с полипептидом HSA посредством линкера, кото

- 66 046387 рый содержит последовательность SEQ ID NO: 122 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом полипептида HSA.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, содержащий два гибридных белка HSA-GS(AAQAAQQ)₂GS-GDF15, соединенных посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных белков.

(b) два полипептида GDF15 (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12; и (c) два полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность: GSAAQAAQQAAQAAQQGS (SEQ ID NO:122), каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF-15 с C-концом полипептида HSA посредством пептидной связи.

DAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFA KTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNE CFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFY APELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKC ASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDL LECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPA DLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSWLLLRLA KTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGE YK FQNAL LVRY Т KKVP QVS Т Р Т LVEVS RNL GKVG S КС СКН РЕAKRMP САЕ DYLSWLNQLCVLHEKT PVS DRVTKCC ТЕ S LVNRRPC FSALEVDE ТYVPK Е FNAE Т FT FHADICTLSEKERQIKKQTALVELVKHKPKATKE QLKAVMDD FААFVEКССKADDКЕТСFАЕЕGККLVAASQAALGLGSAAQAAQQAAQAAQ QGZARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGA CPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVS LQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:124), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gatgcacacaagagtgaggttgctcatcgatttaaagatttgggagaaga aaatttcaaagccttggtgttgattgcctttgctcagtatcttcagcagt gtccatttgaagatcatgtaaaattagtgaatgaagtaactgaatttgca aaaacatgtgttgctgatgagtcagctgaaaattgtgacaaatcacttca taccctttttggagacaaattatgcacagttgcaactcttcgtgaaacct atggtgaaatggctgactgctgtgcaaaacaagaacctgagagaaatgaa

- 67 046387 tgcttcttgcaacacaaagatgacaacccaaacctcccccgattggtgag accagaggttgatgtgatgtgcactgcttttcatgacaatgaagagacat ttttgaaaaaatacttatatgaaattgccagaagacatccttacttttat gccccggaactccttttctttgctaaaaggtataaagctgcttttacaga atgttgccaagctgctgataaagctgcctgcctgttgccaaagctcgatg aacttcgggatgaagggaaggcttcgtctgccaaacagagactcaagtgt gccagtctccaaaaatttggagaaagagctttcaaagcatgggcagtagc tcgcctgagccagagatttcccaaagctgagtttgcagaagtttccaagt tagtgacagatcttaccaaagtccacacggaatgctgccatggagatctg cttgaatgtgctgatgacagggcggaccttgccaagtatatctgtgaaaa tcaagattcgatctccagtaaactgaaggaatgctgtgaaaaacctctgt tggaaaaatcccactgcattgccgaagtggaaaatgatgagatgcctget gacttgccttcattagctgctgattttgttgaaagtaaggatgtttgcaa aaactatgctgaggcaaaggatgtcttcctgggcatgtttttgtatgaat atgcaagaaggcatcctgattactctgtcgtgctgctgctgagacttgcc aagacatatgaaaccactctagagaagtgctgtgccgctgcagatcctca tgaatgctatgccaaagtgttcgatgaatttaaacctcttgtggaagagc ctcagaatttaatcaaacaaaattgtgagctttttgagcagcttggagag tacaaattccagaatgcgctattagttcgttacaccaagaaagtacccca agtgtcaactccaactcttgtagaggtctcaagaaacctaggaaaagtgg gcagcaaatgttgtaaacatcctgaagcaaaaagaatgccctgtgcagaa gactatctatccgtggtcctgaaccagttatgtgtgttgcatgagaaaac gccagtaagtgacagagtcaccaaatgctgcacagaatccttggtgaaca ggcgaccatgcttttcagctctggaagtcgatgaaacatacgttcccaaa gagtttaatgctgaaacattcaccttccatgcagatatatgcacactttc tgagaaggagagacaaatcaagaaacaaactgcacttgttgagctcgtga aacacaagcccaaggcaacaaaagagcaactgaaagctgttatggatgat ttcgcagcttttgtagagaagtgctgcaaggctgacgataaggagacctg ctttgccgaggagggtaaaaaacttgttgcggccagtcaggccgccttag gcttaggatccgccgctcaggctgcacagcaagcagcccaagcagctcag cagggaagcgcgcgcaacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttg ctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccg attgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcg tgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgag cctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccg ccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcg ctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcatatga (SEQ ID NO:123).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два гибридных белка, содержащих последовательность SEQ ID NO: 124.

II.G.7 HSA-GGNAEAAAKEAAAKEAAAKAGG-GDF15.

Определение HSA-GGNAEAAAKEAAAKEAAAKAGG-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, соединенный с полипептидом HSA посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 125 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом полипептида HSA.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, содержащий два гибридных белка HSA-GGNAEAAAKEAAAKEAAAKAGG-GDF15, соединенных посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных белков.

(b) два полипептида GDF15 (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12; и

- 68 046387 (c) два полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность: GGNAEAAAKEAAAKEAAAKAGG (SEQ ID NO :125), каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF-15 с C-концом полипептида HSA посредством пептидной связи.

DAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFA KTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNE CFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFY APELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKC ASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDL LECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPA DLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSWLLLRLA KTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGE YKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAE DYLSWLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPK EFNAETFTFHADICTLSEKERQIKKQTALVELVKHKPKATKEQLKAVMDD FAAFVEKCCKADDKETC FAEEGKKLVAAS QAALGLGGNAEAAAKEAAAKE AAAKEAAAKAGGARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPRE VQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVL IQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:127), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gatgcacacaagagtgaggttgctcatcgatttaaagatttgggagaaga aaatttcaaagccttggtgttgattgcctttgctcagtatcttcagcagt gtccatttgaagateatgtaaaattagtgaatgaagtaactgaatttgca aaaacatgtgttgctgatgagtcagctgaaaattgtgacaaatcacttca taccctttttggagacaaattatgcacagttgcaactcttcgtgaaacct atggtgaaatggctgactgctgtgcaaaacaagaacctgagagaaatgaa tgcttcttgcaacacaaagatgacaacccaaacctcccccgattggtgag accagaggttgatgtgatgtgcactgcttttcatgacaatgaagagacat ttttgaaaaaatacttatatgaaattgccagaagacatccttacttttat gccccggaactccttttctttgctaaaaggtataaagctgcttttacaga atgttgccaagctgctgataaagctgcctgcctgttgccaaagctcgatg aacttcgggatgaagggaaggcttcgtctgccaaacagagactcaagtgt gccagtctccaaaaatttggagaaagagctttcaaagcatgggcagtagc tcgcctgagccagagatttcccaaagctgagtttgcagaagtttccaagt tagtgacagatcttaccaaagtccacacggaatgctgccatggagatctg cttgaatgtgctgatgacagggcggaccttgccaagtatatctgtgaaaa tcaagattcgatctccagtaaactgaaggaatgctgtgaaaaacctctgt tggaaaaatcccactgcattgccgaagtggaaaatgatgagatgcctget gacttgccttcattagctgctgattttgttgaaagtaaggatgtttgcaa aaactatgctgaggcaaaggatgtcttcctgggcatgtttttgtatgaat atgcaagaaggcatcctgattactctgtcgtgctgctgctgagacttgcc aagacatatgaaaccactctagagaagtgctgtgccgctgcagatcctca tgaatgctatgccaaagtgttcgatgaatttaaacctcttgtggaagagc ctcagaatttaatcaaacaaaattgtgagctttttgagcagcttggagag

- 69 046387 tacaaattccagaatgcgctattagttcgttacaccaagaaagtacccca agtgtcaactccaactcttgtagaggtctcaagaaacctaggaaaagtgg gcagcaaatgttgtaaacatcctgaagcaaaaagaatgccctgtgcagaa gactatctatccgtggtcctgaaccagttatgtgtgttgcatgagaaaac gccagtaagtgacagagtcaccaaatgctgcacagaatccttggtgaaca ggcgaccatgcttttcagctctggaagtcgatgaaacatacgttcccaaa gagtttaatgctgaaacattcaccttccatgcagatatatgcacactttc tgagaaggagagacaaatcaagaaacaaactgcacttgttgagctcgtga aacacaagcccaaggcaacaaaagagcaactgaaagctgttatggatgat ttcgcagcttttgtagagaagtgctgcaaggctgacgataaggagacctg ctttgccgaggagggtaaaaaacttgttgcggccagtcaggccgccttag gcttaggaggcaacgccgaggctgccgctaaggaagccgctgccaaggag gccgcagcaaaagaggctgcagctaaggccggaggagcgcgcaacggaga ccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcg cgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggag gtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggc aaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgaca cggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctc attcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgtt agccaaagactgccactgcatatga (SEQ ID NO:126).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два гибридных белка, содержащих последовательность SEQ ID NO: 127.

II.G.8 HSA-(G4S)₆-GDF15.

Определение HSA-(G4S)₆-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, соединенный с полипептидом HSA посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 128 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом полипептида HSA.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, содержащий два гибридных белка HSA-(G4S)₆-GDF15, соединенных посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных белков.

(b) два полипептида GDF15 (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12; и (c) два полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность: GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO:128), каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF-15 с C-концом полипептида HSA посредством пептидной связи.

- 70 046387

DAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFA DAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFA KTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNE CFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFY APELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKC ASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDL LECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPA DLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSWLLLRLA KTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGE YKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAE DYLSWLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPK E FNAE TFT FHADICTLSEKERQIKKQTALVE LVKHKPKATKE QLKAVMDD FAAFVE КС CKADDKE T C FAE E GKKLVAAS OAALGLGGGGSGGGGSGGGGS GGGGSGGGGSGGGGSARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRAS LE DLGWADWVL S PREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNP MVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:130), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gatgcacacaagagtgaggttgctcatcgatttaaagatttgggagaaga aaatttcaaagccttggtgttgattgcctttgctcagtatcttcagcagt gtccatttgaagatcatgtaaaattagtgaatgaagtaactgaatttgca aaaacatgtgttgctgatgagtcagctgaaaattgtgacaaatcacttca taccctttttggagacaaattatgcacagttgcaactcttcgtgaaacct

- 71 046387 atggtgaaatggctgactgctgtgcaaaacaagaacctgagagaaatgaa tgcttcttgcaacacaaagatgacaacccaaacctcccccgattggtgag accagaggttgatgtgatgtgcactgcttttcatgacaatgaagagacat ttttgaaaaaatacttatatgaaattgccagaagacatccttacttttat gccccggaactccttttctttgctaaaaggtataaagctgcttttacaga atgttgccaagctgctgataaagctgcctgcctgttgccaaagctcgatg aacttcgggatgaagggaaggcttcgtctgccaaacagagactcaagtgt gccagtctccaaaaatttggagaaagagctttcaaagcatgggcagtagc tcgcctgagccagagatttcccaaagctgagtttgcagaagtttccaagt tagtgacagatcttaccaaagtccacacggaatgctgccatggagatctg cttgaatgtgctgatgacagggcggaccttgccaagtatatctgtgaaaa tcaagattcgatctccagtaaactgaaggaatgctgtgaaaaacctctgt tggaaaaatcccactgcattgccgaagtggaaaatgatgagatgcctget gacttgccttcattagctgctgattttgttgaaagtaaggatgtttgcaa aaactatgctgaggcaaaggatgtcttcctgggcatgtttttgtatgaat atgcaagaaggcatcctgattactctgtcgtgctgctgctgagacttgcc aagacatatgaaaccactctagagaagtgctgtgccgctgcagatcctca tgaatgctatgccaaagtgttcgatgaatttaaacctcttgtggaagagc ctcagaatttaatcaaacaaaattgtgagctttttgagcagcttggagag tacaaattccagaatgcgctattagttcgttacaccaagaaagtacccca agtgtcaactccaactcttgtagaggtctcaagaaacctaggaaaagtgg gcagcaaatgttgtaaacatcctgaagcaaaaagaatgccctgtgcagaa gactatctatccgtggtcctgaaccagttatgtgtgttgcatgagaaaac gccagtaagtgacagagtcaccaaatgctgcacagaatccttggtgaaca ggcgaccatgcttttcagctctggaagtcgatgaaacatacgttcccaaa gagtttaatgctgaaacattcaccttccatgcagatatatgcacactttc tgagaaggagagacaaatcaagaaacaaactgcacttgttgagctcgtga aacacaagcccaaggcaacaaaagagcaactgaaagctgttatggatgat ttcgcagcttttgtagagaagtgctgcaaggctgacgataaggagacctg ctttgccgaggagggtaaaaaacttgttgcggccagtcaggccgccttag gcttaggaggtggtggctctggaggcggtggaagcggaggcggtggatcc ggaggcggtggaagcggaggtggtggatctggaggcggtggaagcgcgcg caacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcaca cggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcg ccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagtt ccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctga agcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatccc atggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatga tgacttgttagccaaagactgccactgcatatga (SEQ ID NO:129).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два гибридных белка, содержащих последовательность SEQ ID NO: 130.

II.G.9 HSA-GS(AAQAAQQ)2GS-GDF15(N3D).

Определение HSA-GS(AAQAAQQ)2GS-GDF15(N3D) в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15(N3D), соединенный с полипептидом HSA посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 122 и который соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом полипептида HSA.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, содержащий два гибридных белка HSA-GS(AAQAAQQ)₂GS-GDF15(N3D), соединенных посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных белков.

- 72 046387

(b) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52; и (c) два полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 122, каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом полипептида HSA посредством пептидной связи.

DAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFA KTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNE CFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFY APELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKC ASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDL LECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPA DLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSWLLLRLA KTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGE YKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAE DYLSWLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPK EFNAETFTFHADICTLSEKERQIKKQTALVELVKHKPKATKEQLKAVMDD FAAFVEKCCKADDKE ТС FAEEGKKLVAAS QAALGLGSAAQAAQQAAQAAQ YG^ardgdhcplgpgrccrlhtvrasledlgwadwvlsprevqvtmciga CPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVS LQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:242), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gatgcacacaagagtgaggttgctcatcgatttaaagatttgg gagaagaaaatttcaaagccttggtgttgattgcctttgctcagtatctt cagcagtgtccatttgaagatcatgtaaaattagtgaatgaagtaactga atttgcaaaaacatgtgttgctgatgagtcagctgaaaattgtgacaaat cacttcataccctttttggagacaaattatgcacagttgcaactcttcgt gaaacctatggtgaaatggctgactgctgtgcaaaacaagaacctgagag aaatgaatgcttcttgcaacacaaagatgacaacccaaacctcccccgat tggtgagaccagaggttgatgtgatgtgcactgcttttcatgacaatgaa gagacatttttgaaaaaatacttatatgaaattgccagaagacatcctta cttttatgccccggaactccttttctttgctaaaaggtataaagctgctt ttacagaatgttgccaagctgctgataaagctgcctgcctgttgccaaag ctcgatgaacttcgggatgaagggaaggcttcgtctgccaaacagagact caagtgtgccagtctccaaaaatttggagaaagagctttcaaagcatggg cagtagctcgcctgagccagagatttcccaaagctgagtttgcagaagtt tccaagttagtgacagatcttaccaaagtccacacggaatgctgccatgg agatctgcttgaatgtgctgatgacagggcggaccttgccaagtatatct gtgaaaatcaagattcgatctccagtaaactgaaggaatgctgtgaaaaa cctctgttggaaaaatcccactgcattgccgaagtggaaaatgatgagat gcctgctgacttgccttcattagctgctgattttgttgaaagtaaggatg tttgcaaaaactatgctgaggcaaaggatgtcttcctgggcatgtttttg tatgaatatgcaagaaggcatcctgattactctgtcgtgctgctgctgag acttgccaagacatatgaaaccactctagagaagtgctgtgccgctgcag atcctcatgaatgctatgccaaagtgttcgatgaatttaaacctcttgtg

- 73 046387 gaagagcctcagaatttaatcaaacaaaattgtgagctttttgagcagct tggagagtacaaattccagaatgcgctattagttcgttacaccaagaaag taccccaagtgtcaactccaactcttgtagaggtctcaagaaacctagga aaagtgggcagcaaatgttgtaaacatcctgaagcaaaaagaatgccctg tgcagaagactatctatccgtggtcctgaaccagttatgtgtgttgcatg agaaaacgccagtaagtgacagagtcaccaaatgctgcacagaatccttg gtgaacaggcgaccatgcttttcagctctggaagtcgatgaaacatacgt tcccaaagagtttaatgctgaaacattcaccttccatgcagatatatgca cactttctgagaaggagagacaaatcaagaaacaaactgcacttgttgag ctcgtgaaacacaagcccaaggcaacaaaagagcaactgaaagctgttat ggatgatttcgcagcttttgtagagaagtgctgcaaggctgacgataagg agacctgctttgccgaggagggtaaaaaacttgttgcggccagtcaggcc gccttaggcttaggatccgccgctcaggctgcacagcaagcagcccaagc agctcagcagggaagcgcgcgcgacggagaccactgtccgctcgggcccg ggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggc tgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcat cggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatca agacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgc gtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccgg ggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgca ta (SEQ ID NO:241).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два гибридных белка, содержащих последовательность SEQ ID NO: 242.

II.H. Конструкции с мутациями для корректирования аффинности связывания с FcyR.

Было обнаружено, что определенные мультимеры с мутацией charged pair (delHinge) демонстрируют связывание с рецептором Fcy (FcyR), в частности, с FcyRI и FcyRIII. См., например, пример 7. В некоторых случаях аффинность связывания с FcyR была сравнима с аффинностью, наблюдаемой для мультимеров, содержащих шарнирную область. Данный факт стал неожиданностью, поскольку рецептор Fcy взаимодействует с шарнирной областью, а данные мультимеры представляют собой мультимеры delHinge, как описано выше, в которых отсутствует шарнирная область целиком или ее часть. Мутационный анализ остатков Fc, вовлеченных в связывание с FcyR, позволил предположить, что основной сайт взаимодействия расположен в шарнирной области и CH2-домене (Tamm A, 1997, Int. Rev. Immunol. 16:57-85). См. также публикации Radaev S, et al., J. Biol. Chem. 276:16469-16477; Sondermann, P, et al., 2000, Nature 406:267-273.

Антитело-зависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность (ADCC), иммунный ответ, опосредованный преимущественно клетками естественными киллерами (natural killer, NK), у человека зависит от взаимодействия FcyR, в особенности FcyRIIIA человека, с Fc-доменом антитела или Fc-содержащего белка. При ADCC связывание Fc с FcyRIII на поверхности клетки NK активирует клетку NK, которая высвобождает перфорины и гранзимы.

Соответственно, предложены конструкции, содержащие дополнительные модификации для модулирования взаимодействия конструкции с FcyR. Согласно одному ряду вариантов реализации настоящего изобретения мутацию аспарагина на глицин (N297G) вводят в нативную Fc или вариант Fc, в том числе в различные Fc-домены, описанные выше. В результате мутации N297G удаляют консервативный сайт N-гликозилирования в CH2-домене.

Согласно другому ряду вариантов реализации настоящего изобретения дополнительные Nтерминальные аминокислотные остатки удаляют из Fc-домена, из которого была удалена шарнирная область целиком или ее часть. Например, аминокислотную последовательность:

GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH NAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNH YTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:303)

- 74 046387 получают посредством делеции аминокислотных остатков, N-терминальных относительно G236 Fcдомена IgG1 дикого типа. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения Cтерминальный лизин (K447) в данном варианте Fc может быть необязательно удален. Аминокислотную последовательность:

GPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN

AKTKPREEQYNS ТYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKAL PAPIЕКТI

SKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQ

PENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHY

TQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:304) получают посредством делеции аминокислотных остатков, N-терминальных относительно G237 Fcдомена IgG1 дикого типа. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения Cтерминальный лизин (K447) в данном варианте Fc может быть необязательно удален. Аминокислотную последовательность:

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA

KTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS

KAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP

ENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGK (SEQ ID NO:305) получают посредством делеции аминокислотных остатков, N-терминальных относительно P238 Fcдомена IgG1 дикого типа. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения Cтерминальный лизин (K447) в данном варианте Fc может быть необязательно удален.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(-), в который была введена мутация аспарагина на глицин (N297G) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(-)(N297G)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(+), в который была введена мутация аспарагина на глицин (N297G) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(+)(N297G)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc()(Y349C), в который была введена мутация аспарагина на глицин (N297G) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(-)(N297G)(Y349C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(+)(S354C), в который была введена мутация аспарагина на глицин (N297G) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(+)(N297G)(S354C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(+)(Y349C), в который была введена мутация аспарагина на глицин (N297G) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(+)(N297G)(Y349C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(-)(S354C), в который была введена мутация аспарагина на глицин (N297G) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc()(N297G)(S354C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(+)(L351C), в который была введена мутация аспарагина на глицин (N297G) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(+)(N297G)(L351C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(-)(L351C), в который была введена мутация аспарагина на глицин (N297G) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc()(N297G)(L351C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(-), в который была введена мутация аланина на цистеин (A287C) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(-)(A287C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(+), в который была введена мутация аланина на цистеин (A287C) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(+)(A287C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(-), в который была введена мутация лейцина на цистеин (L306C) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(-)(L306C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(+), в который была введена мутация лейцина на цистеин (L306C) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(+)(L306C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc()(A287C), в который была введена мутация тирозина на цистеин (Y349C) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(-)(A287C)(Y349C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(+)(A287C), в который была введена мутация тирозина на

- 75 046387 цистеин (Y349C) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(+)(A287C)(Y349C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc()(A287C), в который была введена мутация серина на цистеин (S354C) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(-)(A287C)(S354C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(+)(A287C), в который была введена мутация серина на цистеин (S354C) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(+)(A287C)(S354C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc()(L306C), в который была введена мутация тирозина на цистеин (Y349C) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(-)(L306C)(Y349C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(+)(L306C), в который была введена мутация тирозина на цистеин (Y349C) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(+)(L306C)(Y349C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc()(L306C), в который была введена мутация серина на цистеин (S354C) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(-)(L306C)(S354C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(+)(L306C), в который была введена мутация серина на цистеин (S354C) (в настоящем изобретении данный домен называют DhCpmFc(+)(A287C)(L306C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(-), в котором были удалены 7 N-терминальных аминокислот (в настоящем изобретении данный домен называют Dh2CpmFc(-)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(+), в котором были удалены 7 N-терминальных аминокислот (в настоящем изобретении данный домен называют Dh2CpmFc(+)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc()(Y349C), в котором были удалены 7 N-терминальных аминокислот (в настоящем изобретении данный домен называют Dh2CpmFc(-)(Y349C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(+)(S354C), в котором были удалены 7 N-терминальных аминокислот (в настоящем изобретении данный домен называют Dh2CpmFc(+)(S354C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(+)(Y349C), в котором были удалены 7 N-терминальных аминокислот (в настоящем изобретении данный домен называют Dh2CpmFc(+)(Y349C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен DhCpmFc(-)(S354C), в котором были удалены 7 N-терминальных аминокислот (в настоящем изобретении данный домен называют Dh2CpmFc(-)(S354C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен CpmFc(+), в который была введена мутация аспарагина на глицин (N297G) (в настоящем изобретении данный домен называют CpmFc(+)(N297G)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен CpmFc(-), в который была введена мутация аспарагина на глицин (N297G) (в настоящем изобретении данный домен называют CpmFc(-)(N297G)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен Dh2CpmFc(+), в который была введена мутация аспарагина на глицин (N297G) (в настоящем изобретении данный домен называют Dh2CpmFc(+)(N297G)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен Dh2CpmFc(-), в который была введена мутация аспарагина на глицин (N297G) (в настоящем изобретении данный домен называют Dh2CpmFc(-)(N297G)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен Dh2CpmFc()(N297G), в который была введена мутация аланина на цистеин (A287C) (в настоящем изобретении данный домен называют Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен Dh2CpmFc(+)(N297G), в который была введена мутация лейцина на цистеин (L306C) (в настоящем изобретении данный домен называют Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен Dh2CpmFc()(N297G)(A287C), в который была введена мутация тирозина на цистеин (Y349C) (в настоящем изобретении данный домен называют Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C), в который была введена мутация серина на цистеин (S354C) (в настоящем изобретении данный домен называют Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен Dh2CpmFc(-), в котором к N-концу были добавлены два глицина (в настоящем изобретении данный домен называют GG-Dh2CpmFc(-)(N297G)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен Dh2CpmFc(+), в котором к N-концу были добавлены два глицина (в настоящем изобретении данный домен называют GG-Dh2CpmFc(+)(N297G)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен GG-Dh2CpmFc(), в который была введена мутация тирозина на цистеин (Y349C) (в настоящем изобретении данный домен называют GG-Dh2CpmFc(-)(Y349C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен GG-Dh2CpmFc(+), в который была введена мутация серина на цистеин (S354C) (в настоящем изобретении данный домен называют GG-Dh2CpmFc(+)(S354C)).

- 76 046387

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен GGDh2CpmFc(+), в который была введена мутация тирозина на цистеин (Y349C) (в настоящем изобретении данный домен называют GG-Dh2CpmFc(+)(Y349C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен GG-Dh2CpmFc(-), в который была введена мутация серина на цистеин (S354C) (в настоящем изобретении данный домен называют GG-Dh2CpmFc(-)(S354C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен Dh2CpmFc(-), в котором к N-концу был добавлен глицин (в настоящем изобретении данный домен называют Dh3CpmFc(-)(N297G)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен Dh2CpmFc(+), в котором к N-концу был добавлен глицин (в настоящем изобретении данный домен называют Dh3CpmFc(+)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен Dh3CpmFc(-), в который была введена мутация тирозина на цистеин (Y349C) (в настоящем изобретении данный домен называют Dh3CpmFc(-)(Y349C)). Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложен домен Dh3CpmFc(+), в который была введена мутация серина на цистеин (S354C) (в настоящем изобретении данный домен называют Dh3CpmFc(+)(S354C)).

Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения в DhMonoFc-домен введена мутация аспарагина на глицин (N297G) (в настоящем изобретении называют DhMonoFc(N297G)).

II.H. 1 DhCpmFc(-)(N297G)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G).

Определение DhCpmFc(-)(N297G)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc(-)(N297G), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(N297G).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(N297G)GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG(SEQ ID NO:287), (b) два домена DhCpmFc(-)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG(SEQ ID NO:132), и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPR ЕVQVTMCIGAG Р S Q FRAANMHAQIКТ S LHRLКРDТVPAPССVPAS YNPMV LIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:134), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 77 046387 gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacacccteatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacgg gagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg agaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtcc gcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgg gaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggc ggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccg acacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtg ctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgactt gttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:133).

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:131), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacgg gagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccggaaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgt getgaagtccgacggctccttcttoctetatagcaagctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaa atga (SEQ ID NO:135).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 134, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 131.

II.H.2 DhCpmFc(-)(N297G)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G).

Определение DhCpmFc(-)(N297G)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую последовательность GDF15(N3D), N-конец которой соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc(-)(N297G), и (ii)

- 78 046387 вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(N297G).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(N297G)GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 287, (b) два домена DhCpmFc(-)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 132, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVL S PREVQVTMCIGAG Р S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKPDTVPAPCCVPAS YN PMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:137), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacgg gagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt getggactccgacggctccttcttoctetatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgc gcgcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgc acacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctg tcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagcca gttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcc tgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaat cccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagaccta tgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:136).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 131, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 135.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 137, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 131.

II.H.3 DhCpmFc(-)(N297G)-G4-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G).

Определение DhCpmFc(-)(N297G)-G₄-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид

- 79 046387

GDF15(N3D), соединенный с доменом DhCpmFc(-)(N297G) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 58 и который соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc(-)(N297G), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(N297G).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(N297G)-G4GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 287, (b) два домена DhCpmFc(-)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 132, (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52, и (d) два полипептидных линкера (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 58, каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15(N3D) с C-концом домена DhCpmFc()(N297G) посредством пептидной связи.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGQGGGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWA DWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVP ASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:139), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacgg gagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt getggactccgacggctccttcttoctetatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg aggtggtggagcgcgcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgtt gctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggcc gattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgc gtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacga gcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgccc gccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtc gctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:138).

- 80 046387 держат последовательность SEQ ID NO: 139, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 131.

II.H.4 DhCpmFc(-)(N297G)(Y349C)-GDF 15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(S354C).

Определение DhCpmFc(-)(N297G)(Y349C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc()(N297G)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(N297G)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первой полипептидной цепи и C354 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(N297G)(Y349C)GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(N297G)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последователь ность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:288), (b) два домена DhCpmFc(-)(N297G)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:141), и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPR ЕVQVTMCIGAC Р S Q FRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVPAPC CVPAS YNPMV LIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:143), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 81 046387 gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacgg cagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt getggactccgacggctccttcttoctetatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgg agaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtcc gcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgg gaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggc ggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccg acacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtg ctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgactt gttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:142).

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:140), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gccccagagctgcttggtggaccatccgtgttcctgtttcctccaaagcc gaaggacaccctgatgatctcaagaactccggaagtgacttgcgtcgtcg tggacgtgtcacatgaggatccagaggtcaagttcaattggtatgtggac ggagtggaagtgcataacgccaagaccaaaccccgcgaagaacagtacgg gagcacctaccgcgtggtgagcgtccttactgtgctccaccaggactggc ttaatgggaaggaatacaagtgtaaggtgtccaacaaggccctccccgct cccatcgaaaagaccatctcaaaggcaaaggggcaaccaagggaacctca agtgtacaccctgcctccgtgcaggaaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacttgtctcgtgaagggcttctatcccagcgatattgctgtggaa tgggagtcaaatggccagcccgagaataactacaaaactaccccacccgt gctgaaatctgatgggtccttcttcctttactccaagctgaccgtggaca agagccgctggcaacaaggcaatgtctttagctgctcagtgatgcatgag gctctccataatcactacactcagaagtcactgtccctgtctccgggtaa a (SEQ ID NO:144).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 143, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 140.

II.H.5 DhCpmFc(-)(N297G)(Y349C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(S354C).

Определение DhCpmFc(-)(N297G)(Y349C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc()(N297G)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(N297G)(S345C).

- 82 046387

Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первой полипептидной цепи и C354 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(N297G)(Y349C)GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(N297G)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 288, (b) два домена DhCpmFc(-)(N297G)(Y349C), содержащих последовательность SEQ ID NO: 141, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVL S PREVQVTMCIGAG Р S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKPD TVPAPCCVPAS YN PMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:146), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacgg gagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgc gcgcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgc acacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctg tcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagcca gttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcc tgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaat cccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagaccta tgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:145).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 140, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 144.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 146, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 140.

II.H.6 DhCpmFc(-)(N297G)(L351C) -GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(L351C).

Определение DhCpmFc(-)(N297G)(L351C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(L351C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc(

- 83 046387 )(N297G)(L351C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(N297G)(L351C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C351 первой полипептидной цепи и C351 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(N297G)(L351C)GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(L351C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(N297G)(L351C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMI SRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVYTCPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE

WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE

ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:289), (b) два домена DhCpmFc(-)(N297G)(L351C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVYTCPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE

WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE

ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:148), и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVYTCPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE

WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE

ALHNHYTQKSLSLSPGARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVL

S PREVQVTMCIGAG P S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKPDTVPAPCCVPAS YN

PMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:150), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 84 046387 gcgccggaactgctgggcggcccgagcgtgtttctgtttccgccgaaacc gaaagataccctgatgattagccgcaccccggaagtgacctgcgtggtgg tggatgtgagccatgaagatccggaagtgaaatttaactggtatgtggat ggcgtggaagtgcataacgcgaaaaccaaaccgcgcgaagaacagtatgg cagcacctatcgcgtggtgagcgtgctgaccgtgctgcatcaggattggc tgaacggcaaagaatataaatgcaaagtgagcaacaaagcgctgccggcg ccgattgaaaaaaccattagcaaagcgaaaggccagccgcgcgaaccgca ggtgtatacctgcccgccgagccgcaaagaaatgaccaaaaaccaggtga gcctgacctgcctggtgaaaggcttttatccgagcgatattgcggtggaa tgggaaagcaacggccagccggaaaacaactataaaaccaccccgccggt gctgaaaagcgatggcagcttttttctgtatagcaaactgaccgtggata aaagccgctggcagcagggcaacgtgtttagctgcagcgtgatgcatgaa gcgctgcataaccattatacccagaaaagcctgagcctgagcccgggcgc gcgcaacggcgatcattgcccgctgggcccgggccgctgctgccgcctgc ataccgtgcgcgcgagcctggaagatctgggctgggcggattgggtgctg agcccgcgcgaagtgcaggtgaccatgtgcattggcgcgtgcccgagcca gtttcgcgcggcgaacatgcatgcgcagattaaaaccagcctgcatcgcc tgaaaccggataccgtgccggcgccgtgctgcgtgccggcgagctataac ccgatggtgctgattcagaaaaccgataccggcgtgagcctgcagaccta tgatgatctgctggcgaaagattgccattgcatt (SEQ ID NO:149).

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTCPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:147), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacc caaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtgg tggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggac ggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacgg gagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggc tgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcc cccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccaca ggtgtacacctgtcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtca gcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggag tgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgt gctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggaca agagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgag gctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaa a (SEQ ID NO:151).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 150, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 147.

II.H.7 DhCpmFc(-)(N297G)(L351C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(L351C).

Определение DhCpmFc(-)(N297G)(L351C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(L351C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc()(N297G)(L351C) посредством пептидной связи, и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен

- 85 046387

DhCpmFc(+)(N297G)(L351C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C351 первой полипептидной цепи и C351 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(N297G)(L351C)GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(L351C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(N297G)(L351C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 289, (b) два домена DhCpmFc(-)(N297G)(L351C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 148, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTCPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVL SPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYN PMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:153), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gcgccggaactgctgggcggcccgagcgtgtttctgtttccgccgaaacc gaaagataccctgatgattagccgcaccccggaagtgacctgcgtggtgg tggatgtgagccatgaagatccggaagtgaaatttaactggtatgtggat ggcgtggaagtgcataacgcgaaaaccaaaccgcgcgaagaacagtatgg cagcacctatcgcgtggtgagcgtgctgaccgtgctgcatcaggattggc tgaacggcaaagaatataaatgcaaagtgagcaacaaagcgctgccggcg ccgattgaaaaaaccattagcaaagcgaaaggccagccgcgcgaaccgca ggtgtatacctgcccgccgagccgcaaagaaatgaccaaaaaccaggtga gcctgacctgcctggtgaaaggcttttatccgagcgatattgcggtggaa tgggaaagcaacggccagccggaaaacaactataaaaccaccccgccggt gctgaaaagcgatggcagcttttttctgtatagcaaactgaccgtggata aaagccgctggcagcagggcaacgtgtttagctgcagcgtgatgcatgaa gcgctgcataaccattatacccagaaaagcctgagcctgagcccgggcgc gcgcgatggcgatcattgcccgctgggcccgggccgctgctgccgcctgc ataccgtgcgcgcgagcctggaagatctgggctgggcggattgggtgctg agcccgcgcgaagtgcaggtgaccatgtgcattggcgcgtgcccgagcca gtttcgcgcggcgaacatgcatgcgcagattaaaaccagcctgcatcgcc tgaaaccggataccgtgccggcgccgtgctgcgtgccggcgagctataac ccgatggtgctgattcagaaaaccgataccggcgtgagcctgcagaccta tgatgatctgctggcgaaagattgccattgcatt (SEQ ID NO:152).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 147, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 151.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 153, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 147.

- 86 046387

II.H.8 DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(L306C).

Определение DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(L306C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc()(N297G)(A287C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(N297G)(L306C).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(L306C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(N297G)(L306C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNCKTKPREEQYGSTYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:290), (b) два домена DhCpmFc(-)(N297G)(A287C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNCKTKPREEQYGSTYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:268), и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNCKTKPREEQYGSTYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPR ЕVQVTMCIGAC Р S Q FRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVPAPCCVPAS YNPMV LIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:269), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 87 046387 gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccc caaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgc gtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggta cgtggacggcgtggaggtgcataattgcaagacaaagccgcgggaggagc agtacggcagcacgtaccgtgtggtcagcgtctgcaccgtcctgcaccag gactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccct cccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgag aaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaac caggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgc cgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgc ctcccgtgetggactccgacggctccttcttoctetatagcgacctcacc gtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgat gcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctc cgggtggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcac acggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtc gccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagt tccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctg aagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcc catggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatg atgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:270).

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNCKTKPREEQYGSTYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:267), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccc caaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgc gtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggta Icgtggacggcgtggaggtgcataattgcaagacaaagccgcgggaggagc agtacggcagcacgtaccgtgtggtcagcgtctgcaccgtcctgcaccag gactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccct cccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgag aaccacaggtgtacaccctgcccccatcccggaaggagatgaccaagaac caggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgc cgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgc ctcccgtgctgaagtccgacggctccttcttcctctatagcaagctcacc gtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgat gcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctc cgggtaaa (SEQ ID NO:271).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 269, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 267.

II.H.9 DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(L306C).

Определение DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(L306C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc(

- 88 046387 )(N297G)(A287C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(N297G)(L306C).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(L306C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(N297G)(L306C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 290, (b) два домена DhCpmFc(-)(N297G)(A287C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 268, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNCKTKPREEQYGSTYRVVSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVL S PREVQVTMCIGAC Р S Q FRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVPAPCCVPAS YN PMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:272), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttессее caaaacccaaggacacccteatgatctcccggacccctgaggtcacatgc gtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggta cgtggacggcgtggaggtgcataattgcaagacaaagccgcgggaggagc agtacggcagcacgtaccgtgtggtcagcgtctgcaccgtcctgcaccag gactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccct cccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgag aaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaac caggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgc cgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgc ctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcacc gtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgat gcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctc cgggtgcgcgcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgc cgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattg ggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcc cgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctg caccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccag ctacaatcecatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctec agacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:273).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 267, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 271.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 272, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 267.

II.H.10 DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C).

Определение DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(L306C) (S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена

- 89 046387

DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C)GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(N297G)(L306C)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNCKTKPREEQYGSTYRVVSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE

WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE

ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:291), (b) два домена DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNCKTKPREEQYGSTYRVVSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA

PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE

WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE

ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:275), и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNCKTKPREEQYGSTYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPR EVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMV LIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:276), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccc caaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgc gtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggta cgtggacggcgtggaggtgcataattgcaagacaaagccgcgggaggagc agtacggcagcacgtaccgtgtggtcagcgtctgcaccgtcctgcaccag gactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccct cccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgag aaccacaggtgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaac caggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgc cgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgc ctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcacc gtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgat gcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctc cgggtggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcac acggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtc gccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagt tccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctg

- 90 046387 aagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcc catggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatg atgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:277).

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNCKTKPREEQYGSTYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:274), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccc caaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgc gtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggta cgtggacggcgtggaggtgcataattgcaagacaaagccgcgggaggagc agtacggcagcacgtaccgtgtggtcagcgtctgcaccgtgctccaccag gactggcttaatgggaaggaatacaagtgtaaggtgtccaacaaggccct ccccgctcccatcgaaaagaccatctcaaaggcaaaggggcaaccaaggg aacctcaagtgtacaccctgcctccgtgcaggaaggagatgaccaagaac caggtcagcctgacttgtctcgtgaagggcttctatcccagcgatattgc tgtggaatgggagtcaaatggccagcccgagaataactacaaaactaccc cacccgtgctgaaatctgatgggtccttcttcctttactccaagctgacc gtggacaagagccgctggcaacaaggcaatgtctttagctgctcagtgat gcatgaggctctccataatcactacactcagaagtcactgtccctgtctc cgggtaaa (SEQ ID NO:278).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 276, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 274.

II.H. 11 DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C).

Определение DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C)GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен DhCpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C)GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена DhCpmFc(+)(N297G)(L306C)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 291, (b) два домена DhCpmFc(-)(N297G)(A287C)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 275, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

- 91 046387

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNCKTKPREEQYGSTYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVL S PREVQVTMCIGAG PS QFRAANMHAQIKT S LHRLKPDTVPAPCCVPAS YN PMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:279), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccc caaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgc gtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggta cgtggacggcgtggaggtgcataattgcaagacaaagccgcgggaggagc agtacggcagcacgtaccgtgtggtcagcgtctgcaccgtcctgcaccag gactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccct cccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgag aaccacaggtgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaac caggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgc cgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgc ctcccgtgetggactccgacggctccttcttoctetatagcgacctcacc gtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgat gcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctc cgggtgcgcgcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgc cgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattg ggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcc cgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctg caccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccag ctacaatcecatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctec agacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:280)

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 274, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 278.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 279, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 274.

П.Н.12 Dh2CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+).

Определение Dh2CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), Nконец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh2CpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh2CpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh2CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh2CpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPG(SEQ ID NO:292), (b) два домена Dh2CpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

- 92 046387

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPG(SEQ ID NO:155), (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMC IGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDT GVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:157), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctc ccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagacc ctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgcc aagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcag cgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagt gcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctcc aaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatc ccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaag gcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccg gagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgacggctcctt cttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggcagcagggga acgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacg cagaagagcctctccctgtctccgggtggagaccactgtccgctcgggcc cgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgg gctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgc atcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagat caagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgct gcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacacc ggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactg cata (SEQ ID NO:156).

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGK(SEQ ID NO:154), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 93 046387 ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctc ccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagacc ctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgcc aagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcag cgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagt gcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctcc aaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatc ccggaaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaag gcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccg gagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctgaagtccgacggctcctt cttoctetatagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcagggga acgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacg cagaagagcctctccctgtctccgggtaaatga (SEQ ID NO:158)

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 157, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 154.

И.Н.13 Dh2CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+).

Определение Dh2CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), Nконец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh2CpmFc(-) посредством пептидной связи, и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh2CpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh2CpmFc(-)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh2CpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 292, (b) два домена Dh2CpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 155, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQV TMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQK TDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:160), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 94 046387 ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctc ccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagacc ctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgcc aagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcag cgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagt gcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctcc aaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatc ccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaag gcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccg gagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgacggctcctt cttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggcagcagggga acgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacg cagaagagcctctccctgtctccgggtgcgcgcgacggagaccactgtcc gctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctgg aagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtg accatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgca cgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccag cgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaag accgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaaga ctgccactgcata (SEQ ID NO:159).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 154, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 158.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 160, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 154.

II.H.14 Dh2CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(S354C).

Определение Dh2CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh2CpmFc(-)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh2CpmFc(+)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первой полипептидной цепи и C354 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh2CpmFc(-)(Y349C)GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh2CpmFc(+)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA

KTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPG (SEQ ID NO:293), (b) два домена Dh2CpmFc(-)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA

KTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT

QKSLSLSPG (SEQ ID NO:162), и

- 95 046387 (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA

KTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMC IGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDT GVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:164), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctc ccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagacc ctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgcc aagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcag cgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagt gcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctcc aaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtgcaccctgcccccatc ccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaag gcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccg gagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgacggctcctt cttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggcagcagggga acgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacg cagaagagcctctccctgtctccgggtggagaccactgtccgctcgggcc cgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgg gctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgc atcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagat caagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgct gcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacacc ggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactg cata (SEQ ID NO:163).

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGK (SEQ ID NO:161), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 96 046387 ccatccgtgttcctgtttcctccaaagccgaaggacaccctgatgatctc aagaactccggaagtgacttgcgtcgtcgtggacgtgtcacatgaggatc cagaggtcaagttcaattggtatgtggacggagtggaagtgcataacgcc aagaccaaaccccgcgaagaacagtacaatagcacctaccgcgtggtgag cgtccttactgtgctccaccaggactggcttaatgggaaggaatacaagt gtaaggtgtccaacaaggccctccccgctcccatcgaaaagaccatctca aaggcaaaggggcaaccaagggaacctcaagtgtacaccctgcctccgtg caggaaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacttgtctcgtgaagg gcttctatcccagcgatattgctgtggaatgggagtcaaatggccagccc gagaataactacaaaactaccccacccgtgctgaaatctgatgggtcctt cttcctttactccaagctgaccgtggacaagagccgctggcaacaaggca atgtctttagctgctcagtgatgcatgaggctctccataatcactacact cagaagtcactgtccctgtctccgggtaaa (SEQ ID NO:165).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 164, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 161.

II.H.15 Dh2CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(S354C).

Определение Dh2CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh2CpmFc(-)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh2CpmFc(+)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первой полипептидной цепи и C354 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh2CpmFc(-)(Y349C)GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh2CpmFc(+)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 293, (b) два домена Dh2CpmFc(-)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 162, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA

KTKPREEQYNS ТYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQV ТМСIGAO Р S Q FRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVPAPCCVPAS YNPMVLIQK TDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:167), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 97 046387 ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctc ccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagacc ctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgcc aagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcag cgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagt gcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctcc aaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtgcaccctgcccccatc ccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaag gcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccg gagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgacggctcctt cttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggcagcagggga acgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacg cagaagagcctctccctgtctccgggtgcgcgcgacggagaccactgtcc gctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctgg aagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtg accatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgca cgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccag cgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaag accgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaaga ctgccactgcata (SEQ ID NO:166).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения второй мономер содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 161, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 165.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 167, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 161.

II.H.16 CpmFc(-)(N297G)-GDF15(Ndel3): CpmFc(+)(N297G).

Определение CpmFc(-)(N297G)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(N297G) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена CpmFc(-)(N297G), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен CpmFc(+)(N297G).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров CpmFc(-)(N297G)GDF15(Ndel3):CpmFc(+)(N297G), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена CpmFc(+)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность (часть шарнирной области включена в скобки):

(DKTHTCPPCP)APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSH EDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKE YKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCL VKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQ QGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:294), (b) два домена CpmFc(-)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность (часть шарнирной области включена в скобки):

- 98 046387 (DKTHTCPPCP) APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSH EDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKE YKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCL VKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQ QGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:169), _и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

(DKTHTCPPCP)APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSH EDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKE YKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCL VKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQ QGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLE DLGWADWVL S PREVQVTMCIGAC P S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKPDTVPA PCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:171), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcc tggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctc atgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagcca cgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgc ataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacggcagcacgtaccgt gtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaagga gtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaa ccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctg cccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcct ggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatg ggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgac ggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggca gcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaacc actacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtggagaccactgtccg ctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctgga agacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtga ccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcac gcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagc gccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaaga ccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagac tgccactgcata (SEQ ID NO:170).

(DKTHTCPPCP) APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSH EDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKE YKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCL VKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQ QGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:168), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 99 046387 gacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcc tggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctc atgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagcca cgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgc ataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacggcagcacgtaccgt gtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaagga gtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaa ccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctg cccccatcccggaaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcct ggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatg ggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctgaagtccgac ggctccttcttcctctatagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggca gcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaacc actacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa (SEQ ID NO:172).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 171, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 168.

И.Н.17 CpmFc(-)(N297G)-GDF15(N3D):CpmFc(+)(N297G).

Определение CpmFc(-)(N297G)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена CpmFc(-)(N297G), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен CpmFc(+)(N297G).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров CpmFc(-)(N297G)GDF15(N3D):CpmFc(+)(N297G), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена CpmFc(+)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 294, (b) два домена CpmFc(-)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 169, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

(DKTHTCPPCP) APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSH EDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKE YKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCL VKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQ QGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRA SLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDT VPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ IDNO:174), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 100 046387 gacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcc tggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctc atgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagcca cgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgc ataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacggcagcacgtaccgt gtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaagga gtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaa ccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctg cccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcct ggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatg ggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgac ggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggca gcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaacc actacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgcgcgcgacggagac cactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgc gtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggagg tgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggca aacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacac ggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctca ttcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgtta gccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:173).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 168, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность SEQ ID NO: 172.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 174, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 168.

II.H.18 Dh2CpmFc(-)(N297G)-GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(N297G).

Определение Dh2CpmFc(-)(N297G)-GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(N297G) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh2CpmFc(-)(N297G), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh2CpmFc(+)(N297G).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh2CpmFc(-)(N297G)GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(N297G), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh2CpmFc(+)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA

KTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPG(SEQ ID NO:295), (b) два домена Dh2CpmFc(-)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA

KTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS

KAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP

ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT

QKSLSLSPG(SEQ ID NO:176), и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

- 101 046387

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQYGSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMC IGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDT GVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:178), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacacccteatgatetc ccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagacc ctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgcc aagacaaagccgcgggaggagcagtacgggagcacgtaccgtgtggtcag cgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagt gcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctcc aaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatc ccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaag gcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccg gagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgacggctcctt cttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggcagcagggga acgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacg cagaagagcctctccctgtctccgggtggagaccactgtccgctegggee cgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgg gctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgc atcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagat caagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgct gcgtgcccgccagetacaatcecatggtgctcattcaaaagaccgacacc ggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactg cata (SEQ ID NO:177).

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQYGSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGK(SEQ ID NO:175), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 102 046387 ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctc ccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagacc ctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgcc aagacaaagccgcgggaggagcagtacgggagcacgtaccgtgtggtcag cgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagt gcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctcc aaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatc ccggaaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaag gcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccg gagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctgaagtccgacggctcctt cttcctctatagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcagggga acgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacg cagaagagcctctccctgtctccgggtaaatga (SEQ ID NO:179).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 178, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 175.

II.H.19 Dh2CpmFc(-)(N297G)-GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(N297G).

Определение Dh2CpmFc(-)(N297G)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(N297G) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh2CpmFc(-)(N297G), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh2CpmFc(+)(N297G).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh2CpmFc(-)(N297G)GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(N297G), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh2CpmFc(+)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 295, (b) два домена Dh2CpmFc(-)(N297G) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 176, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQYGSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQV ТМСIGAG Р S Q FRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVPAPCCVPAS YNPMVLIQK TDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:181), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 103 046387 ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctc ccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagacc ctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgcc aagacaaagccgcgggaggagcagtacgggagcacgtaccgtgtggtcag cgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagt gcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctcc aaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatc ccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaag gcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccg gagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgacggctcctt cttoctetatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggcagcagggga acgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacg cagaagagcctctccctgtctccgggtgcgcgcgacggagaccactgtcc gctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctgg aagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtg accatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgca cgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccag cgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaag accgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaaga ctgccactgcata (SEQ ID NO:180).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 175, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 179.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 181, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 175.

II.H.20 Dh2CpmFc(-)(N297G)(Y349C)-GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(N297G)(S354C).

Определение Dh2CpmFc(-)(N297G)(Y349C)-GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(N297G)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом полипептида Dh2CpmFc(-)(N297G)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh2CpmFc(+)(N297G)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первой полипептидной цепи и C354 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh2CpmFc(-)(N297G)(Y349C)GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(N297G)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh2CpmFc(+)(N297G)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPG (SEQ ID NO:296), (b) два домена Dh2CpmFc(-)(N297G)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

- 104 046387

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPG (SEQ ID NO:183), (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMC IGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDT GVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:185), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctc ccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagacc ctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgcc aagacaaagccgcgggaggagcagtacggcagcacgtaccgtgtggtcag cgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagt gcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctcc aaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtgcaccctgcccccatc ccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaag gcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccg gagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgacggctcctt cttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggcagcagggga acgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacg cagaagagcctctccctgtctccgggtggagaccactgtccgctcgggcc cgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgg gctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgc atcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagat caagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgct gcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacacc ggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactg cata (SEQ ID NO:184).

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQYGSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGK (SEQ ID NO:182), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 105 046387 ccatccgtgttcctgtttcctccaaagccgaaggacaccctgatgatctc aagaactccggaagtgacttgcgtcgtcgtggacgtgtcacatgaggatc cagaggtcaagttcaattggtatgtggacggagtggaagtgcataacgcc aagaccaaaccccgcgaagaacagtacgggagcacctaccgcgtggtgag cgtccttactgtgctccaccaggactggcttaatgggaaggaatacaagt gtaaggtgtccaacaaggccctccccgctcccatcgaaaagaccatctca aaggcaaaggggcaaccaagggaacctcaagtgtacaccctgcctccgtg caggaaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacttgtctcgtgaagg gcttctatcccagcgatattgctgtggaatgggagtcaaatggccagccc gagaataactacaaaactaccccacccgtgctgaaatctgatgggtcctt cttcctttactccaagctgaccgtggacaagagccgctggcaacaaggca atgtctttagctgctcagtgatgcatgaggctctccataatcactacact cagaagtcactgtccctgtctccgggtaaa (SEQ ID NO:186).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 185, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 182.

II.H.21 Dh2CpmFc(-)(N297G)(Y349C)-GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(N297G)(S354C).

Определение Dh2CpmFc(-)(N297G)(Y349C)-GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(N297G)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh2CpmFc()(N297G)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh2CpmFc(+)(N297G)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первого полипептида и C354 второго полипептида.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh2CpmFc(-)(N297G)(Y349C)GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(N297G)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh2CpmFc(+)(N297G)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 296, (b) два домена Dh2CpmFc(-)(N297G)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 183, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNA

KTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQV TMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQK TDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:188), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctc

- 106 046387 ccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagacc ctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgcc aagacaaagccgcgggaggagcagtacgggagcacgtaccgtgtggtcag cgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagt gcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctcc aaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtgcaccctgcccccatc ccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaag gcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccg gagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgacggctcctt cttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggcagcagggga acgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacg cagaagagcctctccctgtctccgggtgcgcgcgacggagaccactgtcc gctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctgg aagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtg accatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgca cgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccag cgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaag accgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaaga ctgccactgcata (SEQ ID NO:187).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 182, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 186.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 188, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 182.

II.H.22 Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C) -GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C).

Определение Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)-GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C287 первого мономера и C306 второго мономера.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

Более конкретно, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит:

(a) два домена Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNC

KTKPREEQYGS ТYRVVSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIЕКТIS KAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPG (SEQ ID NO:297), (b) два Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNC

KTKPREEQYGSTYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPG (SEQ ID NO:192), и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ

- 107 046387

ID NO: 55.

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNC KTKPREEQYGSTYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMC IGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDT

GVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:194), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctca tgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccac gaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgca taattgcaagacaaagccgcgggaggagcagtacggcagcacgtaccgtg tggtcagcgtctgcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggag tacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaac catctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgc ccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctg gtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgg gcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgacg gctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggcag caggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaacca ctacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtggagaccactgtccgc tcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaa gacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgac catgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacg cgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcg ccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagac cgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagact gccactgcata(SEQ ID NO:193).

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNC

KTKPREEQYGSTYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT

QKSLSLSPGK (SEQ ID NO:191), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctca

- 108 046387 tgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccac gaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgca taattgcaagacaaagccgcgggaggagcagtacggcagcacgtaccgtg tggtcagcgtctgcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggag tacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaac catctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgc ccccatcccggaaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctg gtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgg gcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctgaagtccgacg getccttcttoctetatagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcag caggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaacca ctacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa (SEQ ID NO:195).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 194, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 191.

II.H.23 Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C) -GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C).

Определение Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)-GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh2CpmFc()(N297G)(A287C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C287 первой полипептидной цепи и C306 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 297, (b) два домена Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 192, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNC KTKPREEQYGSTYRVVSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQV ТМСIGACPS QFRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQK TDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:197), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 109 046387 ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctca tgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccac gaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgca taattgcaagacaaagccgcgggaggagcagtacggcagcacgtaccgtg tggtcagcgtctgcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggag tacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaac catctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgc ccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctg gtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgg gcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgacg gctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggcag caggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaacca ctacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgcgcgcgacggagacc actgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcg tcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggt gcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaa acatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacg gtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcat tcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttag ccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:196).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 195.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 197, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 191.

II.H.24 Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C)-GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C).

Определение Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C)GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C287 первой полипептидной цепи и C306 второй полипептидной цепи и между C349 первой полипептидной цепи и C349 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C)GDF15(Ndel3):Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNC KTKPREEQYGSTYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPG (SEQ ID NO:298), (b) два домена Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

- 110 046387

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNC KTKPREEQYGSTYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPG (SEQ ID NO:199), (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

PSVFLFPPKPKDTLMISRT РЕ VT CVWDVS НЕ DPE VKFNW YVDGVE VHNC KTKPREEQYGS ТYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMC IGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDT GVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:201), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctca tgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccac gaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgca taattgcaagacaaagccgcgggaggagcagtacggcagcacgtaccgtg tggtcagcgtctgcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggag tacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaac catctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtgcaccctgc ccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctg gtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgg gcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgacg gctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggcag caggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaacca ctacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtggagaccactgtccgc tcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaa gacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgac catgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacg cgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcg ccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagac cgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagact gccactgcata (SEQ ID NO:200).

PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNW YVDGVE VHNC KTKPREEQYGSTYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGK (SEQ ID NO:198), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 111 046387 ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctca tgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccac gaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgca taattgcaagacaaagccgcgggaggagcagtacggcagcacgtaccgtg tggtcagcgtctgcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggag tacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaac catctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgc ccccatgccggaaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctg gtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgg gcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctgaagtccgacg getccttcttoctetatagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcag caggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaacca ctacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa (SEQ ID NO:202).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 201, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 198.

II.H.25 Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C)-GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C).

Определение Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C)GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первый мономер, содержащий полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с С-концом домена Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C287 первой полипептидной цепи и C306 второй полипептидной цепи и между C349 первой полипептидной цепи и C349 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C)GDF15(N3D):Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh2CpmFc(+)(N297G)(L306C)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 298, (b) два домена Dh2CpmFc(-)(N297G)(A287C)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 199, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность (SEQ ID NO: 52).

Р SVFL FP PKPKD Т LMIS RT РЕVT CWVDVS НЕ D РЕ VKFNW YVDGVE VHNC

KTKPREEQYGS ТYRWSVCTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQV ТМСIGACPS QFRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVPAPCCVPAS YNPMVLIQK TDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:204), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 112 046387 ccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctca tgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccac gaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgca taattgcaagacaaagccgcgggaggagcagtacggcagcacgtaccgtg tggtcagcgtctgcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggag tacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaac catctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtgcaccctgc ccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctg gtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgg gcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggactccgacg gctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcaggtggcag caggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaacca ctacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgcgcgcgacggagacc actgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcg tcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggt gcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaa acatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacg gtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcat tcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttag ccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:203).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 198, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 202.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 204, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 198.

II.H.26 GG-Dh2CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):GG-Dh2CpmFc(+).

Определение GG-Dh2CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):GG-Dh2CpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена GG-Dh2CpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен GG-Dh2CpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров GG-Dh2CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):GGDh2CpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена GG-Dh2CpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH

NAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNH

YTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:299), (b) два домена GG-Dh2CpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH NAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNH

YTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:206), и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения первая полипептидная

- 113 046387 цепь содержит аминокислотную последовательность:

GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH NAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNH YTQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVT MCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKT DTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:208), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: ggtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggaca ccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtg agccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtgga ggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgt accgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggc aaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcga gaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtaca ccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacc tgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagag caatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggact ccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcagg tggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgca caaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtggagaccact gtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcg ctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgca agtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaaca tgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtg ccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattca aaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagcca aagactgccactgcata (SEQ ID NQ:207).

Согласно варианту реализации настоящего изобретения, в котором применяется сигнальная последовательность VH21, согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность (сигнальная последовательность подчеркнута):

MEWSWVFLFFLSVTTGVHSGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDV SHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNG KEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLT CLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSR WQQGNVFSCSI/MHEALHNHYTQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRAS LEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTV PAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:243), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты (сигнальная последовательность подчеркнута):

- 114 046387 atggaatggagctgggtctttctcttcttcctgtcagtaacgactggtgt ccactccggtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggaca ccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtg agccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtgga ggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgt accgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggc aaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcga gaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtaca ccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacc tgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagag caatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggact ccgacggctccttcttoctetatagcgacctcaccgtggacaagagcagg tggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgca caaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtggagaccact gtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcg ctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgca agtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaaca tgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtg ccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattca aaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagcca aagactgccactgcata (SEQ ID NO:244).

GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH NAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNH YTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:205), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: ggtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggaca ccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtg agccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtgga ggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgt accgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggc aaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcga gaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtaca ccctgcccccatcccggaaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacc tgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagag caatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctgaagt ccgacggctccttcttoctetatagcaagctcaccgtggacaagagcagg tggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgca caaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa (SEQ ID NO:209).

Согласно варианту реализации настоящего изобретения, в котором применяется сигнальная последовательность VH21, согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность (сигнальная последовательность подчеркнута):

- 115 046387

MEWSWVFLFFLSVTTGVHSGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDV SHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNG KEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLT CLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSR WQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:245), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты (сигнальная последовательность подчеркнута): atggaatggagctgggtctttctcttcttcctgtcagtaacgactggtgt ccactccggtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggaca ccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtg agccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtgga ggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgt accgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggc aaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcga gaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtaca ccctgcccccatcccggaaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacc tgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagag caatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctgaagt ccgacggctccttcttoctetatagcaagctcaccgtggacaagagcagg tggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgca caaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa (SEQ ID NO:246).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 208, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 205.

II.H.27 GG-Dh2CpmFc(-)-GDF15(N3D):GG-Dh2CpmFc(+).

Определение GG-Dh2CpmFc(-)-GDF15(N3D):GG-DhCpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена GG-Dh2CpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен GG-DhCpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров GG-Dh2CpmFc(-)-GDF15(N3D):GGDh2CpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена GG-Dh2CpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 299, (b) два домена GG-Dh2CpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 206, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH NAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNH YTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREV QVTMCIGAC Р S Q FRAANMHAQIKTSLHRLKPD ТVPAPC CVPAS YNPMVLI QKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO :211) , которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 116 046387 ggtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggaca ccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtg agccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtgga ggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgt accgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggc aaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcga gaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtaca ccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacc tgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagag caatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggact ccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcagg tggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgca caaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgcgcgcgacg gagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtc cgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacg ggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccggg cggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagccc gacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggt gctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgact tgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NQ:210).

MEWSWVFLFFLSVTTGVHSGGPSVFL FPPKPKDTLMISRT РЕ VT CVWDV SHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNG KEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLT CLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSR WQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTV RAS LE DLGWADWVL S PREVQVTMCIGAG Р S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKP DTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:247), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты (сигнальная последовательность подчеркнута):

- 117 046387 atggaatggagctgggtctttctcttcttcctgtcagtaacgactggtgt ccactccggtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggaca ccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtg agccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtgga ggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgt accgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggc aaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcga gaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtaca ccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacc tgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagag caatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggact ccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcagg tggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgca caaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgcgcgcgacg gagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtc cgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacg ggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccggg cggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagccc gacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggt gctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgact tgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:248).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 205, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 209.

Согласно варианту реализации настоящего изобретения, в котором применяется сигнальная последовательность VH21, согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 245, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 246.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 211, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 205.

II.H.28 GG-Dh2CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3):GG-Dh2CpmFc(+)(S354C).

Определение GG-Dh2CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3):GG-Dh2CpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена GG-Dh2CpmFc()(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен GG-Dh2CpmFc(+)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первой полипептидной цепи и C354 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров GG-Dh2CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3):GGDh2CpmFc(+)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два GG-Dh2CpmFc(+)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH

NAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNH YTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:300), (b) две цепи GG-Dh2CpmFc(-)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

- 118 046387

GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH NAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNH

YTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:213), и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH

NAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNH YTQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVT МСIGAG Р S Q FRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVPAPC CVPAS YNPMVLIQKT DTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:215), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: ggtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggaca ccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtg agccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtgga ggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgt accgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggc aaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcga gaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtgca ccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacc tgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagag caatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggact ccgacggctccttcttoctetatagcgacctcaccgtggacaagagcagg tggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgca caaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtggagaccact gtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcg ctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgca agtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaaca tgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtg ccagcgccctgctgegtgcccgccagctacaatcecatggtgetcattea aaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagcca aagactgccactgcata (SEQ ID NO:214).

MEWSWVFLFFLSVTTGVHSGGPSVFL FPPKPKDTLMISRT РЕ VT CVWDV SHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNG KEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLT CLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSR WQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRAS LEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTV PAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI(SEQ ID NO:249),

- 119 046387 которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты (сигнальная последовательность подчеркнута):

atggaatggagctgggtctttctcttcttcctgtcagtaacgactggtgt ccactccggtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggaca ccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtg agccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtgga ggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgt accgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggc aaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcga gaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtgca ccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacc tgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagag caatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggact ccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcagg tggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgca caaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtggagaccact gtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcg ctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgca agtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaaca tgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtg ccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattca aaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagcca aagactgccactgcata (SEQ ID NO:250).

GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH NAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNH YTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:212), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: ggtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggaca ccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtg agccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtgga ggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgt accgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggc aaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcga gaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtaca ccctgcccccatgccggaaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacc tgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagag caatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctgaagt ccgacggctccttcttoctetatagcaagctcaccgtggacaagagcagg tggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgca caaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa (SEQ ID NO:216) .

- 120 046387

MEWSWVFLFFLSVTTGVHSGGP SVFLFPPKPKDTLMIS RT PE VT CVWDV SHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNG KEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLT CLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSR WQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:251), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты (сигнальная последовательность подчеркнута): atggaatggagctgggtctttctcttcttcctgtcagtaacgactggtgt ccactccggtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggaca ccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtg agccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtgga ggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgt accgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggc aaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcga gaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtaca ccctgcccccatgccggaaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacc tgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagag caatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctgaagt ccgacggctccttcttoctetatagcaagctcaccgtggacaagagcagg tggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgca caaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa (SEQ ID

NO:252).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 215, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 212.

И.Н.29 GG-Dh2CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):GG-Dh2CpmFc(+)(S354C).

Определение GG-Dh2CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):GG-Dh2CpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена GG-Dh2CpmFc()(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен GG-Dh2CpmFc(+)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первой полипептидной цепи и C354 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров GG-Dh2CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):GGDh2CpmFc(+)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена GG-Dh2CpmFc(+)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 300, (b) два домена GG-Dh2CpmFc(-)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 213, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

- 121 046387

GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH NAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKT ISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNH YTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREV QVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLI QKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO :218) , которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

ggtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggaca ccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtg agccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtgga ggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgt accgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggc aaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcga gaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtgca ccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacc tgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagag caatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggact ccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaagagcagg tggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgca caaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgcgcgcgacg gagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtc cgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacg ggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccggg cggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagccc gacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggt gctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgact tgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:217).

MEWSWVFLFFLSVTTGVHS GGP S VFL ЕР PKPKDT LMIS RT РЕ VT CVWDV SHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNG KEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLT CLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSR WQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTV RASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKP

DTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI(SEQ ID NO:253), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты (сигнальная последовательность подчеркнута):

- 122 046387 atggaatggagctgggtctttctcttcttcctgtcagtaacgactggtgt ccactccggtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggaca cccteatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtg agccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtgga ggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgt accgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggc aaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcga gaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtgca ccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacc tgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagag caatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgctggact ccgacggctccttcttoctetatagcgacctcaccgtggacaagagcagg tggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgca caaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgcgcgcgacg gagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtc cgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacg ggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccggg cggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagccc gacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggt gctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgact tgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:254).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 212, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 218.

Согласно варианту реализации настоящего изобретения, в котором применяется сигнальная последовательность VH21, согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 251, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 252.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 218, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 212.

И.Н.30 Dh3CpmFc(-)-GDF 15(Ndel3):Dh3CpmFc(+).

Определение Dh3CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), Nконец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh3CpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh3CpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh3CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh3CpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: GPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN

AKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTI SKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQ PENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHY TQKSLSLSPG (SEQ ID NO:301), (b) два домена Dh3CpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

- 123 046387

GPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN

AKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTI

SKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQ

PENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHY

TQKSLSLSPG (SEQ ID NO:220), _и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

GPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN

AKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTI SKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQ PENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHY TQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTM CIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTD TGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:222), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: ggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaaccca aggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtg gacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacgg cgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaaca gcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctg aatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccc catcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacagg tgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagc ctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtg ggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgc tggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaag agcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggc tctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtggag accactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgc gcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacggga ggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcgg caaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgac acggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgct cattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgt tagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:221).

Согласно варианту реализации настоящего изобретения, в котором применяется сигнальная последовательность VK1, согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность (сигнальная последовательность подчеркнута):

- 124 046387

MDMRVPAQLLGLLLLWLRGARCGP S VFL FPPKPKDTLMISRT PE VT СШ DVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWL NGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDK SRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVR ASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPD

TVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:255), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты (сигнальная последовательность подчеркнута):

atggacatgagggtgcccgctcagctcctggggctcctgctgctgtggct gagaggtgcgcgctgtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaaccca aggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtg gacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacgg cgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaaca gcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctg aatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccc catcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacagg tgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagc ctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtg ggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgc tggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaag agcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggc tctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtggag accactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgc gcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacggga ggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcgg caaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgac acggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgct cattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgt tagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:256).

GPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN AKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTI SKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQ PENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHY TQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:219), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 125 046387 ggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaaccca aggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtg gacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacgg cgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaaca gcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctg aatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccc catcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacagg tgtacaccctgcccccatcccggaaggagatgaccaagaaccaggtcagc ctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtg ggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgc tgaagtccgacggctccttcttoctetatagcaagctcaccgtggacaag agcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggc tctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa (SEQ ID NO:223).

Согласно варианту реализации настоящего изобретения, в котором применяется сигнальная последовательность VK1, согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность (сигнальная последовательность подчеркнута):

MDMRVPAQLLGLLLLWLRGARCGPSVFLFP PKPKDTLMISRT PEVT CVW DVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWL NGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRKEMTKNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDK SRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:257), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты (сигнальная последовательность подчеркнута):

atggacatgagggtgcccgctcagctcctggggctcctgctgctgtggct gagaggtgcgcgctgtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaaccca aggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtg gacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacgg cgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaaca gcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctg aatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccc catcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacagg tgtacaccctgcccccatcccggaaggagatgaccaagaaccaggtcagc ctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtg ggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgc tgaagtccgacggctccttcttcctctatagcaagctcaccgtggacaag agcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggc tctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa (SEQ ID NO:258).

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 222, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 219.

П.Н.31 Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+).

Определение Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), Nконец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh3CpmFc(-), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh3CpmFc(+).

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, кото

- 126 046387 рый содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh3CpmFc(+) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 301, (b) два Dh3CpmFc(-) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 220, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

GPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN AKTKPREEQYNS ТYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIЕКТI SKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQ PENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHY TQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQ VTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQ KTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:225), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: atggacatgagggtgcccgctcagctcctggggctcctgctgctgtggct gagaggtgcgcgctgtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaaccca aggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtg gacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacgg cgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaaca gcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctg aatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccc catcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacagg tgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagc ctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtg ggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgc tggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaag agcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggc tctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgcgc gcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcac acggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtc gccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagt tccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctg aagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcc catggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatg atgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:224).

- 127 046387

MDMRVPAQLLGLLLLWLRGARCGPSVFLFPPKPKDTLMISRT PEVT CVW DVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWL NGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDK SRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLH TVRAS LE DLGWADWVL S PREVQVTMCIGAG P S Q FRAANMHAQIKT S LHRL KPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI(SEQ ID

NO:259), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты (сигнальная последовательность подчеркнута): atggacatgagggtgcccgctcagctcctggggctcctgctgctgtggct gagaggtgcgcgctgtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaaccca aggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtg gacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacgg cgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaaca gcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctg aatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccc catcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacagg tgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagc ctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtg ggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgc tggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaag agcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggc tctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgcgc gcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcac acggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtc gccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagt tccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctg aagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcc catggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatg atgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:260).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 219, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 223.

Согласно варианту реализации настоящего изобретения, в котором применяется сигнальная последовательность VK1, согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 257, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 258.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 225, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 219.

II.H.32 Dh3CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+)(S354C).

Определение Dh3CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(Ndel3), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh3CpmFc(-)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh3CpmFc(+)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первого полипептида и C354 второго полипептида.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh3CpmFc(-)(Y349C)GDF15(Ndel3):Dh3CpmFc(+)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями

- 128 046387

GDF15 данных цепей.

(а) два домена Dh3CpmFc(+)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность: GPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN

IAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTI SKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQ PENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHY TQKSLSLSPG (SEQ ID NO:302), (b) два домена Dh3CpmFc(-)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность:

GPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN

AKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTI

SKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQ

PENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHY

TQKSLSLSPG (SEQ ID NO:227), и (c) два полипептида GDF15(Ndel3) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 55.

GPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN

AKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTI SKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQ PENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHY TQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTM CIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTD TGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:229), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

atggacatgagggtgcccgctcagctcctggggctcctgctgctgtggct gagaggtgcgcgctgtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaaccca aggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtg gacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacgg cgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaaca gcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctg aatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccc catcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacagg tgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagc ctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtg ggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgc tggactccgacggctccttcttoctetatagcgacctcaccgtggacaag agcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggc tctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtggag

- 129 046387 accactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgc gcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacggga ggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcgg caaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgac acggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgct cattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgt tagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:228).

MDMRVPAQLLGLLLLWLRGARCGР SVFL FP PKPKD Т LMIS RT РЕVT СWV DVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWL NGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDK SRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGDHCPLGPGRCCRLHTVR ASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPD TVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ IDNO:261), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты (сигнальная последовательность подчеркнута):

atggacatgagggtgcccgctcagctcctggggctcctgctgctgtggct gagaggtgcgcgctgtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaaccca aggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtg gacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacgg cgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaaca gcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctg aatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccc catcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacagg tgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagc ctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtg ggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgc tggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaag agcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggc tctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtggag accactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccgc gcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacggga ggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcgg caaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccgac acggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgct cattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttgt tagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:262).

- 130 046387

GPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN AKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTI SKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQ PENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHY TQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:226), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: ggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaaccca aggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtg gacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacgg cgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaaca gcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctg aatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccc catcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacagg tgtacaccctgcccccatgccggaaggagatgaccaagaaccaggtcagc ctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtg ggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgc tgaagtccgacggctccttcttcctctatagcaagctcaccgtggacaag agcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggc tctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa (SEQ ID NO: 230).

MpMRVPAQLLGLLLLWLRGARCGP SVFL FPPKPKDTLMISRT РЕVT CVW DVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWL NGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRKEMTKNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLKSDGSFFLYSKLTVDK SRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:263), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты (сигнальная последовательность подчеркнута):

atggacatgagggtgcccgctcagctcctggggctcctgctgctgtggct gagaggtgcgcgctgtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaaccca aggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtg gacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacgg cgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaaca gcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctg aatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccc catcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacagg tgtacaccctgcccccatgccggaaggagatgaccaagaaccaggtcagc ctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtg

- 131 046387 ggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgc tgaagtccgacggctccttcttoctetatagcaagctcaccgtggacaag agcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggc tctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa (SEQ ID NO:264) .

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 229, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 226.

II.H.33 Dh3 CpmFc(-)(Y3 49C)-GDF 15(N3D):Dh3 CpmFc(+)(S354C).

Определение Dh3CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+)(S354C) в настоящем изобретении означает гетеродимер, который содержит (i) первую полипептидную цепь, содержащую полипептид GDF15(N3D), N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена Dh3CpmFc(-)(Y349C), и (ii) вторую полипептидную цепь, содержащую домен Dh3CpmFc(+)(S345C). Мутации cysteine clamp позволяют соединить первую и вторую полипептидные цепи посредством межцепочечной дисульфидной связи между C349 первой полипептидной цепи и C354 второй полипептидной цепи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен тетрамер, который содержит димер, состоящий из двух гетеродимеров Dh3CpmFc(-)(Y349C)GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+)(S354C), в котором две первые полипептидные цепи каждого гетеродимера соединены посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими областями GDF15 данных цепей.

(a) два домена Dh3CpmFc(+)(S354C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 302, (b) два домена Dh3CpmFc(-)(Y349C) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 227, и (c) два полипептида GDF15(N3D) (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 52.

GPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN

AKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTI

SKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQ

PENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHY

TQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQ

VTMCIGACPS QFRAANMHAQIКТ S LHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQ

KTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO: 232), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

- 132 046387 ggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaaccca aggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtg gacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacgg cgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaaca gcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctg aatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccc catcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacagg tgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagc ctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtg ggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgc tggactccgacggctccttcttoctetatagcgacctcaccgtggacaag agcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggc tctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgcgc gcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcac acggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtc gccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagt tccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctg aagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcc catggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatg atgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:231).

MDMRVPAQLLGLLLLWLRGARCGPSVFL FPPKPKDTLMISRT РЕ VT CVW DVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWL NGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDK SRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGARDGDHCPLGPGRCCRLH ТVRAS LE DLGWADWVL S PREVQVTMCIGAG Р S Q FRAANMHAQIKT S LHRL KPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:265) , которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты (сигнальная последовательность подчеркнута):

- 133 046387 atggacatgagggtgcccgctcagctcctggggctcctgctgctgtggct gagaggtgcgcgctgtggcccgtcagtcttcctcttccccccaaaaccca aggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtg gacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacgg cgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaaca gcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctg aatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccc catcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacagg tgtgcaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagc ctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtg ggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgcctcccgtgc tggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcaccgtggacaag agcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggc tctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtgcgc gcgacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcac acggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtc gccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagt tccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctg aagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcc catggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatg atgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:266).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 226, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 230.

Согласно варианту реализации настоящего изобретения, в котором применяется сигнальная последовательность VK1, согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 263, которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 264.

Как обсуждалось выше, предложен тетрамер, содержащий две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 232, и две полипептидные цепи, которые содержат последовательность SEQ ID NO: 226.

II.H.34 DhMonoFc(N297G)-GDF15.

Определение DhMonoFc(N297G)-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, N-конец которого соединен напрямую с C-концом домена DhMonoFc(N297G) посредством пептидной связи.

Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, содержащий два таких гибридных белка, связанных посредством межцепочечной дисульфидной связи между соответствующими полипептидами GDF15 данных белков.

(a) два домена DhMonoFc(N297G) (в каждом мономере), содержащих последовательность: APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD

GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVTTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:233); и (b) два полипептида GDF15 (в каждом гетеродимере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12.

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения гибридный белок со

- 134 046387 держит аминокислотную последовательность:

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMI SRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVTTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVL S PREVQVTMCIGAC P S Q FRAANMHAQIKT S LHRLKPDTVPAPC CVPAS YN PMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:235), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccc caaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgc gtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggta cgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagc agtacggcagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccag gactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccct cccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgag aaccacaggtgaccaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaac caggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgc cgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgc ctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcacc gtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgat gcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctc cgggtgcgcgcaacggagaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgc cgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattg ggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcc cgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctg caccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccag ctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctcc agacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:234).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 235.

П.Н.35 DhMonoFc(N297G)-(G₄S)₄-GDF 15.

Определение DhMonoFc(N297G)-(G₄S)₄-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, соединенный с доменом DhMonoFc(N297G) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 18 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhMonoFc(N297G) посредством пептидной связи.

(a) два домена DhMonoFc(N297G) (в каждом мономере), содержащих последовательность: APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVTTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO:236);

(b) два полипептида GDF15 (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12;

- 135 046387 и

(c) два полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 18, каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhMonoFc(N297G) посредством пептидных связей.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVTTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE AL HNHY Т QKSLSLSP GGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSARNGDHCPLGРGRC CRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTS LHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:238), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccc caaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgc gtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggta cgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagc agtacggcagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccag gactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccct cccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgag aaccacaggtgaccaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaac caggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgc cgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgc ctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctatagcgacctcacc gtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgat gcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctc cgggtggaggtggtggatccggaggcggtggaagcggaggtggtggatct ggaggcggtggaagcgcgcgcaacggagaccactgtccgctcgggcccgg gcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggct gggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatc ggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaa gacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcg tgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggg gtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcata (SEQ ID NO:237).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 238.

II.H.36 DhMonoFc(N297G)-G₄-GDF15.

Определение DhMonoFc(N297G)-G₄-GDF15 в настоящем изобретении означает гибридный белок, содержащий полипептид GDF15, соединенный с доменом DhMonoFc(N297G) посредством линкера, который содержит последовательность SEQ ID NO: 58 и который соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhMonoFc(N297G) посредством пептидной связи.

(a) два домена DhMonoFc(N297G) (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID

- 136 046387

NO: 236;

(b) два полипептида GDF15 (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 12; и (c) два полипептидных линкера (в каждом мономере), содержащих последовательность SEQ ID NO: 58, каждый из которых соединяет N-конец полипептида GDF15 с C-концом домена DhMonoFc(N297G) посредством пептидных связей.

APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQYGSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPA PIEKTISKAKGQPREPQVTTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESNGQPENNYDTTPPVLDSDGSFFLYSDLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHE ALHNHYTQKSLSLSPGgGQGARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWA DWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVP ASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:240), которая кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты: gcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccc caaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgc gtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggta cgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagc agtacggcagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccag gactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccct cccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgag aaccacaggtgaccaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaac caggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgc cgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacgacaccacgc ctcccgtgetggactccgacggctccttcttoctetatagcgacctcacc gtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgat gcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctc cgggtggaggtggtggagcgcgcaacggagaccactgtccgctcgggccc gggcgttgctgccgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctggg ctgggccgattgggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgca tcggcgcgtgcccgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatc aagacgagcctgcaccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctg cgtgcccgccagctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccg gggtgtcgctccagacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgc ata (SEQ ID NO:239).

Как обсуждалось выше, согласно конкретному варианту реализации настоящего изобретения предложен гомодимер, который содержит два мономера, содержащих последовательность SEQ ID NO: 240.

III. Полипептиды GDF15 и конструкции, содержащие GDF15, в том числе мутантные формы GDF15.

Как раскрыто в настоящем изобретении, полипептиды GDF15 (в том числе полноразмерная и зрелая формы GDF15 человека) и конструкции, содержащие GDF15, описанные в настоящем изобретении, можно сконструировать и/или получить с применением стандартных молекулярно-биологических методик образования мутантной формы полипептидов GDF15 и конструкций, предложенных в настоящем изобретении. В различных примерах последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую мутантную форму полипептидов GDF15 и конструкции, предложенные в настоящем изобретении, которые могут содержать все последовательности SEQ ID NO: 4, 8 или 12 или их часть, можно выделить и/или амплифицировать из геномной ДНК или кДНК с применением соответствующих олигонуклеотидных праймеров. Праймеры могут быть сконструированы на основе последовательности нуклеиновой кислоты и аминокислотной последовательности, предложенных в настоящем изобретении, согласно стандартным методикам амплификации методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Затем амплифицированную нуклеиновую кислоту мутантного полипептида GDF15 можно клонировать в подходящий вектор и охарактеризовать посредством анализа последовательности ДНК.

Олигонуклеотиды для применения в качестве зондов при выделении или амплификации всех или части мутантных форм полипептидов GDF15 и конструкций, предложенных в настоящем изобретении,

- 137 046387 могут быть сконструированы и получены с применением стандартных методик синтеза, например, приборов для автоматического синтеза ДНК, или могут быть выделены из более протяженной последовательности ДНК.

III.A. Полипептидная и полинуклеотидная последовательности GDF15.

GDF15 экспрессируется in vivo в виде непрерывной аминокислотной последовательности, содержащий сигнальную последовательность, продомен и активный домен.

Аминокислотная последовательность полноразмерного GDF15 человека длиной 308 аминокислот представляет собой:

MPGQELRTVNGSQMLLVLLVLSWLPHGGALSLAEASRASFPGPSELHSED SRFRELRKRYEDLLTRLRANQSWEDSNTDLVPAPAVRILTPEVRLGSGGH LHLRISRAALPEGLPEASRLHRALFRLSPTASRSWDVTRPLRRQLSLARP QAPALHLRLSPPPSQSDQLLAESSSARPQLELHLRPQAARGRRRARARNG DHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRA ANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDL LAKDCHCI (SEQ ID NO:4) и кодируется последовательностью ДНК: atgcccgggcaagaactcaggacggtgaatggctctcagatgctcctggt gttgctggtgctctcgtggctgccgcatgggggcgccctgtctctggccg aggcgagccgcgcaagtttcccgggaccctcagagttgcactccgaagac tccagattccgagagttgcggaaacgctacgaggacctgctaaccaggct gcgggccaaccagagctgggaagattcgaacaccgacctcgtcccggccc ctgcagtccggatactcacgccagaagtgcggctgggatccggcggccac ctgcacctgcgtatctctcgggccgcccttcccgaggggctccccgaggc ctcccgccttcaccgggctctgttccggctgtccccgacggcgtcaaggt cgtgggacgtgacacgaccgctgcggcgtcagctcagccttgcaagaccc caggcgcccgcgctgcacctgcgactgtcgccgccgccgtcgcagtcgga ccaactgctggcagaatcttcgtccgcacggccccagctggagttgcact tgcggccgcaagccgccagggggcgccgcagagcgcgtgcgcgcaacggg gaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtctgcacacggtccg cgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgctgtcgccacggg aggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagccagttccgggcg gcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccgcctgaagcccga cacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctacaatcccatggtgc tcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacctatgatgacttg ttagccaaagactgccactgcatatga (SEQ ID NO:3).

Аминокислотная последовательность полноразмерного GDF15 мыши длиной 303 аминокислоты представляет собой:

MAPPALQAQPPGGSQLRFLLFLLLLLLLLSWPSQGDALAMPEQRPSGPES QLNADELRGRFQDLLSRLHANQSREDSNSEPSPDPAVRILSPEVRLGSHG QLLLRVNRASLSQGLPEAYRVHRALLLLTPTARPWDITRPLKRALSLRGP RAPALRLRLTPPPDLAMLPSGGTQLELRLRVAAGRGRRSAHAHPRDSCPL GPGRCCHLETVQATLEDLGWSDWVLSPRQLQLSMCVGECPHLYRSANTHA QIKARLHGLQPDKVPAPCCVPSSYTPWLMHRTDSGVSLQTYDDLVARGC НСА (SEQ ID NO:6) и кодируется последовательностью ДНК:

- 138 046387 atggccccgcccgcgctccaggcccagcctccaggcggctctcaactgag gttcctgctgttcctgctgctgttgctgctgctgctgtcatggccatcgc agggggacgccctggcaatgcctgaacagcgaccctccggccctgagtcc caactcaacgccgacgagctacggggtcgcttccaggacctgctgagccg gctgcatgccaaccagagccgagaggactcgaactcagaaccaagtcctg acccagctgtccggatactcagtccagaggtgagattggggtcccacggc cagctgctactccgcgtcaaccgggcgtcgctgagtcagggtctccccga agcctaccgcgtgcaccgagcgctgctcctgctgacgccgacggcccgcc cctgggacatcactaggcccctgaagcgtgcgctcagcctccggggaccc cgtgctcccgcattacgcctgcgcctgacgccgcctccggacctggctat gctgccctctggcggcacgcagctggaactgcgcttacgggtagccgccg gcagggggcgccgaagcgcgcatgcgcacccaagagactcgtgcccactg ggtccggggcgctgctgtcacttggagactgtgcaggcaactcttgaaga cttgggctggagcgactgggtgctgtccccgcgccagctgcagctgagca tgtgcgtgggcgagtgtccccacctgtatcgctccgcgaacacgcatgcg cagatcaaagcacgcctgcatggcctgcagcctgacaaggtgcctgcccc gtgctgtgtcccctccagctacaccccggtggttcttatgcacaggacag acagtggtgtgtcactgcagacttatgatgacctggtggcccggggctgc cactgcgcttga (SEQ ID NO:5).

Аминокислотная последовательность GDF15 человека после отщепления сигнальной последовательности длиной 29 остатков представляет собой:

LSLAEASRASFPGPSELHSEDSRFRELRKRYEDLLTRLRANQSWEDSNTD LVPAPAVRILTPEVRLGSGGHLHLRISRAALPEGLPEASRLHRALFRLSP TASRSWDVTRPLRRQLSLARPQAPALHLRLSPPPSQSDQLLAESSSARPQ LELHLRPQAARGRRRARARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWV LSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASY NPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:8) и кодируется последовательностью ДНК: ctgtctctggccgaggcgagccgcgcaagtttcccgggaccctcagagtt gcactccgaagactccagattccgagagttgcggaaacgctacgaggacc tgctaaccaggctgcgggccaaccagagctgggaagattcgaacaccgac ctcgtcccggcccctgcagtccggatactcacgccagaagtgcggctggg atccggcggccacctgcacctgcgtatctctcgggccgcccttcccgagg ggctccccgaggcctcccgccttcaccgggctctgttccggctgtccccg acggcgtcaaggtcgtgggacgtgacacgaccgctgcggcgtcagctcag ccttgcaagaccccaggcgcccgcgctgcacctgcgactgtcgccgccgc cgtcgcagtcggaccaactgctggcagaatcttcgtccgcacggccccag ctggagttgcacttgcggccgcaagccgccagggggcgccgcagagcgcg tgcgcgcaacggggaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtc tgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtg ctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgag ccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcacc gcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctac aatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagac ctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcatatga (SEQ ID NO:7) Аминокислотная последовательность GDF15 мыши после отщепления сигнальной последовательности длиной 32 остатка представляет собой:

- 139 046387

SQGDALAMPEQRPSGPESQLNADELRGRFQDLLSRLHANQSREDSNSEPS PDPAVRILSPEVRLGSHGQLLLRVNRASLSQGLPEAYRVHRALLLLTPTA RPWDITRPLKRALSLRGPRAPALRLRLTPPPDLAMLPSGGTQLELRLRVA AGRGRRSAHAHPRDSCPLGPGRCCHLETVQATLEDLGWSDWVLSPRQLQL SMCVGECPHLYRSANTHAQIKARLHGLQPDKVPAPCCVPSSYTPWLMHR TDSGVSLQTYDDLVARGCHCA (SEQ ID NO:10) и кодируется последовательностью ДНК: tcgcagggggacgccctggcaatgcctgaacagcgaccctccggccctga gtcccaactcaacgccgacgagctacggggtcgcttccaggacctgctga gccggctgcatgccaaccagagccgagaggactcgaactcagaaccaagt cctgacccagctgtccggatactcagtccagaggtgagattggggtccca cggccagctgctactccgcgtcaaccgggcgtcgctgagtcagggtctcc ccgaagcctaccgcgtgcaccgagcgctgctcctgctgacgccgacggcc cgcccctgggacatcactaggcccctgaagcgtgcgctcagcctccgggg accccgtgctcccgcattacgcctgcgcctgacgccgcctccggacctgg ctatgctgccctctggcggcacgcagctggaactgcgcttacgggtagcc gccggcagggggcgccgaagcgcgcatgcgcacccaagagactcgtgccc actgggtccggggcgctgctgtcacttggagactgtgcaggcaactcttg aagacttgggctggagcgactgggtgctgtccccgcgccagctgcagctg agcatgtgcgtgggcgagtgtccccacctgtatcgctccgcgaacacgca tgcgcagatcaaagcacgcctgcatggcctgcagcctgacaaggtgcctg ccccgtgctgtgtcccctccagctacaccccggtggttcttatgcacagg acagacagtggtgtgtcactgcagacttatgatgacctggtggcccgggg ctgccactgcgcttga (SEQ ID NO:9)

Биологически активная форма GDF15 содержит гомодимер, содержащий два зрелых мономера GDF15, каждый из которых содержит SEQ ID NO: 12. Мономер, который подвергается гомодимеризации с образованием димера нативного зрелого GDF15 человека, кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты:

gcgcgcaacggggaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgccgtct gcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattgggtgc tgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcccgagc cagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctgcaccg cctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccagctaca atcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctccagacc tatgatgacttgttagccaaagactgccactgcatatga (SEQ ID NO:11) и содержит аминокислотную последовательность:

ARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPS QFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQT YDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:12).

Таким образом, димер нативного зрелого GDF15 человека содержит два ковалентно связанных мономера, содержащих SEQ ID NO: 12.

Аминокислотная последовательность рекомбинантной активной формы GDF15 человека, который содержит гомодимер, содержащий в каждом мономере девять цистеинов для образования одной межцепочечной дисульфидной связи и четырех внутрицепочечных дисульфидных связей, представляет собой (последовательность показана с необязательным N-терминальным остатком метионина в скобках):

(М)ARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGA CPSQERAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVS LQTYDDLLAKDCHCI (SEQ ID NO:189) и кодируется последовательностью ДНК (показана с необязательным кодоном N-терминального метионина в скобках):

- 140 046387 (atg)gcgcgcaacggggaccactgtccgctcgggcccgggcgttgctgc cgtctgcacacggtccgcgcgtcgctggaagacctgggctgggccgattg ggtgctgtcgccacgggaggtgcaagtgaccatgtgcatcggcgcgtgcc cgagccagttccgggcggcaaacatgcacgcgcagatcaagacgagcctg caccgcctgaagcccgacacggtgccagcgccctgctgcgtgcccgccag ctacaatcccatggtgctcattcaaaagaccgacaccggggtgtcgctcc agacctatgatgacttgttagccaaagactgccactgcatataa (SEQ ID NO:190).

Аминокислотная последовательность рекомбинантной активной формы GDF15 мыши, который содержит гомодимер, содержащий в каждом мономере девять цистеинов для образования одной межцепочечной дисульфидной связи и четырех внутрицепочечных дисульфидных связей, представляет собой:

(М)SAHAHPRDSCPLGPGRCCHLETVQATLEDLGWSDWVLSPRQLQLSMC

VGECPHLYRSANTHAQIKARLHGLQPDKVPAPCCVPSSYTPWLMHRTDS

GVSLQTYDDLVARGCHCA (SEQ ID NO:14) и кодируется последовательностью ДНК:

(atg)agcgcgcatgcgcacccaagagactcgtgcccactgggtccgggg cgctgctgtcacctggagactgtgcaggcaactcttgaagacttgggctg gagcgactgggtgttgtccccgcgccagctgcagctgagcatgtgcgtgg gcgagtgtccccacctgtatcgctccgcgaacacgcatgcgcagatcaaa gcacgcctgcatggcctgcagcctgacaaggtgcctgccccgtgctgtgt cccctccagctacaccccggtggttcttatgcacaggacagacagtggtg tgtcactgcagacttatgatgacctggtggcccggggctgccactgcgct tga (SEQ ID NO:13).

Как указано в настоящем изобретении, термин полипептид GDF15 означает полипептид GDF, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 8 и 12 человека. Термин мутантный полипептид GDF15, однако, включает полипептиды, содержащие аминокислотную последовательность, которая отличается от аминокислотной последовательности существующих в природе последовательностей полипептида GDF, например, SEQ ID NO: 4, 8 и 12, одной или несколькими аминокислотами, вследствие чего данная последовательность по меньшей мере на 85% идентична SEQ ID NO: 4, 8 и 12. Полипептиды GDF15 могут быть получены посредством введения одной или нескольких аминокислотных замен, консервативных или неконсервативных, а также с применением природных или несуществующих в природе аминокислот в конкретных положениях полипептида GDF15, или посредством удаления конкретных остатков или совокупностей остатков.

Консервативная аминокислотная замена может включать замену нативного остатка аминокислоты (т.е. остатка, обнаруженного в данном положении последовательности полипептида GDF15 дикого типа) ненативным остатком (т.е. остатком, который не обнаруживается в данном положении последовательности полипептида GDF15 дикого типа), вследствие чего наблюдается незначительное влияние либо отсутствие влияния на полярность или заряд аминокислотного остатка в данном положении. Консервативные аминокислотные замены также включают несуществующие в природе аминокислотные остатки (как определено в настоящем изобретении), которые, как правило, встраивают посредством химического синтеза пептидов, а не синтеза в биологических системах. Данные остатки включают пептидомиметики и другие обратимые или инвертированные формы групп аминокислот.

Существующие в природе остатки можно разделить на классы на основании общих свойств боковых цепей:

(1) гидрофобные: норлейцин, Met, Ala, Val, Leu, Ile;

(2) нейтральные гидрофильные: Cys, Ser, Thr;

(3) кислые: Asp, Glu;

(4) основные: Asn, Gln, His, Lys, Arg;

(5) остатки, влияющие на ориентацию цепи: Gly, Pro; и (6) ароматические: Trp, Tyr, Phe.

Дополнительные группы аминокислот могут также быть получены с применением принципов, описанных, например, в руководстве Creighton (1984) PROTEINS: STRUCTURE AND MOLECULAR PROPERTIES (2d Ed. 1993), W.H. Freeman and Company. В некоторых случаях может быть полезна дополнительная характеризация замен на основе двух или более из таких свойств (например, замена небольшим полярным остатком, таким как остаток Thr, может представлять собой высококонсервативную замену в соответствующем контексте).

Консервативные замены могут включать замену члена одного из данных классов другим членом то

- 141 046387 го же класса. Неконсервативные замены могут включать замену члена одного из данных классов членом другого класса.

Синтетические, редкие или модифицированные аминокислотные остатки, обладающие известными аналогичными физиологическими свойствами с остатками из вышеописанных групп, можно использовать в качестве консервативной замены для конкретного остатка аминокислоты в последовательности. Например, остаток D-Arg может выступать в качестве замены для типичного остатка L-Arg. Также возможен случай, при котором конкретную замену можно описать в контексте двух или нескольких из вышеописанных классов (например, замена небольшим и гидрофобным остатком означает замену одной аминокислоты остатком (остатками), которые обнаружены в обоих вышеописанных классах или другими синтетическими, редкими или модифицированными остатками, о которых в данной области техники известно, что они обладают аналогичными физиологическими свойствами с такими остатками, удовлетворяющими обоим определениям).

Последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей мутантный полипептид GDF15, предложенный в настоящем изобретении, в том числе последовательности, которые являются вырожденными SEQ ID NO: 3, 7, 11 и 15, и последовательности, которые кодируют варианты полипептида согласно SEQ ID NO: 4, 8 и 12, составляют другие аспекты настоящего изобретения.

III.B. Векторы, пригодные для экспрессии полипептидов GDF15 и конструкций, содержащих GDF15, в том числе мутантные формы GDF15.

Для экспрессии последовательностей нуклеиновой кислоты, кодирующих полипептид, содержащий область GDF15, соответствующие кодирующие последовательности, например, SEQ ID NO: 3, 7 и 11, можно клонировать в подходящий вектор, а после введения в подходящий хозяин последовательность можно экспрессировать для получения кодируемого полипептида согласно стандартным методикам клонирования и экспрессии, известным в данной области техники (например, которые описаны в руководстве Sambrook, J., Fritsh, E. F., and Maniatis, T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual 2nd, ed., Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 1989). Настоящее изобретение также относится к таким векторам, содержащим последовательность нуклеиновой кислоты согласно настоящему изобретению.

Вектор означает переносчик для доставки, который (a) способствует экспрессии последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид; (b) способствует получению полипептида из нуклеиновой кислоты; (c) способствует трансфекции/трансформации целевых клеток нуклеиновой кислотой; (d) способствует репликации последовательности нуклеиновой кислоты; (e) способствует стабильности нуклеиновой кислоты; (f) способствует обнаружению нуклеиновой кислоты и/или трансформированных/трансфицированных клеток; и/или (g) иным образом наделяет нуклеиновую кислоту, кодирующую полипептид, предпочтительной биологической и/или физико-химической функцией. Вектор может представлять собой любой подходящий вектор, в том числе хромосомные, нехромосомные векторы и векторы на основе синтетической нуклеиновой кислоты (последовательность нуклеиновой кислоты, содержащая подходящий набор контрольных элементов экспрессии). Примеры таких векторов включают производные SV40, бактериальные плазмиды, ДНК фага, бакуловируса, плазмиды дрожжей, векторы, полученные из комбинаций плазмид и ДНК фага, и векторы на основе вирусной нуклеиновой кислоты (РНК или ДНК).

Можно получить рекомбинантный вектор экспрессии для экспрессии полипептида, содержащего область GDF15, в прокариотических (например, E. coli) или эукариотических клетках (например, клетки насекомых, применение бакуловирусных векторов экспрессии, клеток дрожжей или клеток млекопитающих). Типичные клетки-хозяева включают хозяев, которых, как правило, используют для клонирования и экспрессии, в том числе штаммы Escherichia coli TOP10F', TOP10, DH10B, DH5a, HB101, W3110, BL21(DE3) и BL21 (DE3)pLysS, BLUESCRIPT (Stratagene), векторы линий клеток млекопитающих CHO, CHO-K1, HEK293, 293-EBNA pIN (Van Heeke & Schuster, J. Biol. Chem. 264: 5503-5509 (1989); векторы pET (Novagen, Madison Wis.). В качестве альтернативы, рекомбинантный вектор экспрессии можно транскрибировать и транслировать in vitro, например, с применением регуляторной последовательности промотора T7 и полимеразы T7, а также системы трансляции in vitro. Вектор предпочтительно содержит промотор, расположенный выше сайта клонирования, содержащего последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид. К примерам промоторов, которые можно включать и выключать, относятся lac-промотор, Т7-промотор, trc-промотор, tac-промотор и trp-промотор.

Таким образом, в настоящем изобретении предложены векторы, содержащие последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид, содержащий область GDF15, которые облегчают экспрессию полипептида или конструкции, представляющей интерес. Согласно различным вариантам реализации настоящего изобретения векторы содержат функционально связанную нуклеотидную последовательность, регулирующую экспрессию полипептида, содержащего область GDF15. Вектор может содержать или быть связанным с любым подходящим промотором, энхансером и другими элементами, облегчающими экспрессию. Примеры таких элементов включают сильные промоторы экспрессии (например, промотор/энхансер CMV IE человека, промотор RSV, промотор SV40, промотор SL3-3, промотор MMTV или промотор HIV LTR, промотор EF1alpha, промотор CAG), эффективные поли (A) термини

- 142 046387 рующие последовательности, точка начала репликации (origin) плазмидного продукта в E. coli, ген устойчивости к антибиотикам в качестве селектируемого маркера и/или соответствующий сайт клонирования (например, полилинкер). Векторы также могут содержать индуцибельный промотор, а не конститутивный промотор, такой как CMV IE. Согласно одному аспекту настоящего изобретения нуклеиновая кислота, содержащая последовательность, кодирующую полипептид, содержащий область GDF15, функционально связана с тканеспецифичным промотором, который стимулирует экспрессию последовательности в соответствующей с метаболической точки зрения ткани, такой как ткань печени или поджелудочной железы.

III. C. Клетки-хозяева.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложены клетки-хозяева, содержащие нуклеиновые кислоты и векторы, раскрытые в настоящем изобретении. Согласно различным вариантам реализации настоящего изобретения вектор или нуклеиновая кислота встроены в геном клетки-хозяина, тогда как согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения вектор или нуклеиновая кислота являются внехромосомными.

Предложены рекомбинантные клетки, такие как клетки дрожжей, бактерий (например, E. coli) и млекопитающих (например, иммортализованные клетки млекопитающих), содержащие такую нуклеиновую кислоту, вектор или комбинации какого-либо одного или всех перечисленных компонентов. Согласно различным вариантам реализации настоящего изобретения клетки содержат не встроенную нуклеиновую кислоту, например, плазмиду, космиду, фагемиду или линейный элемент экспрессии, которые содержат кодирующую последовательность для экспрессии полипептида, содержащего область GDF15.

Вектор, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид, содержащий область GDF15, можно ввести в клетку-хозяин посредством трансформации или трансфекции. Способы трансформации клетки вектором экспрессии хорошо известны.

Нуклеиновая кислота, которая кодирует полипептид, содержащий область GDF15, может быть расположена в клетке-хозяине или животном-хозяине и/или доставлена в клетку-хозяин или животноехозяин посредством вирусного вектора. В качестве вектора можно применять любой подходящий вирусный вектор. Вирусный вектор может содержать любое количество вирусных полинуклеотидов самих по себе или в комбинации с одним или несколькими вирусными белками, которые облегчают доставку, репликацию и/или экспрессию нуклеиновой кислоты согласно настоящему изобретению в желаемой клеткехозяине. Вирусный вектор может представлять собой полинуклеотид, содержащий вирусный геном целиком или его часть, конъюгат вирусного белка/нуклеиновой кислоты, вирусоподобную частицу (ВПЧ) или интактную вирусную частицу, содержащую нуклеиновые кислоты вируса и нуклеиновую кислоту, которая кодирует полипептид, содержащий область GDF15. Вирусный вектор на основе вирусной частицы может содержать вирусную частицу дикого типа или модифицированную вирусную частицу. Вирусный вектор может представлять собой вектор, который требует присутствия другого вектора или вируса дикого типа для репликации и/или экспрессии (например, вирусный вектор может представлять собой хелпер-зависимый вирус), такой как ампликон аденовирусного вектора. Как правило, такие вирусные векторы состоят из вирусной частицы дикого типа либо вирусная частица модифицирована по содержанию в ней белка и/или нуклеиновой кислоты для увеличения трансгенной мощности или способствования трансфекции и/или экспрессии нуклеиновой кислоты (примеры таких векторов включают ампликоны герпесвируса/ампликоны AAB, аденоассоциированного вируса). Как правило, вирусный вектор аналогичен вирусу и/или получен из вируса, который в норме инфицирует человека. Подходящие в этом отношении частицы вирусных векторов включают, например, частицы аденовирусного вектора (в том числе любой вирус семейства Adenoviridae или вирус, полученный из вируса семейства Adenoviridae), векторные частицы на основе аденоассоциированного вируса (AAB вектор) или другие парвовирусы и частицы парвовирусных векторов, папилломавирусные векторные частицы, флавивирусные векторы, альфавирусные векторы, герпесвирусные векторы, поксвирусные векторы, ретровирусные векторы, включая лентивирусные векторы.

III .D. Выделение полипептида GDF15, конструкции, содержащей полипептид GDF15 или мутантную форму полипептида GDF15.

Полипептид, содержащий область GDF15, можно выделить с применением стандартных способов очистки белка. Полипептид, содержащий область GDF15, можно выделить из клетки, которая была сконструирована для экспрессии полипептида, содержащего область GDF15, например, из клетки, которая в природе не экспрессирует нативный GDF15.

Способы очистки белка, которые можно применять для выделения полипептида, содержащего область GDF15, а также необходимые вещества и реактивы, известны в данной области техники. Примеры способов очистки полипептида, содержащего область GDF15, предложены в настоящем изобретении в примерах ниже. Дополнительные способы очистки, которые можно применять для выделения полипептида, содержащего область GDF15, можно найти в публикациях, таких как Bootcov MR, 1997, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94:11514-9, Fairlie WD, 2000, Gene 254: 67-76.

IV . Фармацевтические композиции, содержащие полипептид GDF15, конструкцию, содержащую полипептид GDF15 или мутантную форму полипептида GDF15.

- 143 046387

Предложены фармацевтические композиции, содержащие мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15. Такие полипептидные фармацевтические композиции могут содержать терапевтически эффективное количество полипептида, который содержит мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, в смеси с фармацевтически или физиологически приемлемым веществом для приготовления лекарственной формы, выбранным в соответствии с путем введения. Термин фармацевтически приемлемый носитель или физиологически приемлемый носитель в настоящем изобретении означает одно или несколько веществ для приготовления лекарственной формы, подходящих для осуществления или улучшения доставки мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, в тело субъекта-человека или субъекта, отличного от человека. Данный термин включает любые и все растворители, дисперсионную среду, покрывающие вещества, антибактериальные и противогрибковые средства, изотонические вещества и вещества, отсрочивающие всасывание, а также подобные вещества, которые являются физиологически совместимыми. Примеры фармацевтически приемлемых носителей включают один или несколько носителей, которые выбраны из воды, солевого раствора, фосфатно-буферного раствора, декстрозы, глицерола, этанола и подобных растворителей, а также комбинации указанных носителей. В некоторых случаях в фармацевтическую композицию предпочтительно включать изотонические средства, например, сахара, многоатомные спирты, такие как маннитол, сорбитол, или хлорид натрия. Фармацевтически приемлемые вещества, такие как смачивающие вещества или незначительные количества вспомогательных веществ, таких как смачивающие или эмульгирующие вещества, консерванты или буферы, увеличивающие срок хранения или эффективность мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, могут также выступать в качестве носителя или могут образовывать составную часть носителя. Подходящие фармацевтически приемлемые носители являются предпочтительно нетоксичными по отношению к реципиенту в применяемых дозах и концентрациях.

Фармацевтическая композиция может содержать вещество (вещества) для приготовления лекарственной формы для модификации, поддержания или сохранения, например, pH, осмолярности, вязкости, прозрачности, цвета, изотоничности, запаха, стерильности, стабильности, степени растворения или высвобождения, всасывания или проникновения композиции. Подходящие вещества для приготовления лекарственной формы включают, но не ограничены ими, аминокислоты (такие как глицин, глутамин, аспарагин, аргинин или лизин), антимикробные средства, антиоксиданты (такие как аскорбиновая кислота, сульфит натрия или гидрогенсульфит натрия), буферы (такие как боратный, бикарбонатный, Tris-HCl, цитратный, фосфатный буферы или другие органические кислоты), наполнители (такие как маннитол или глицин), хелатирующие вещества (такие как этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA)), комплексообразующие вещества (такие как кофеин, поливинилпирролидон, бета-циклодекстрин или гидроксипропил-бета-циклодекстрин), наполнители, моносахариды, дисахариды и другие углеводы (такие как глюкоза, манноза или декстрины), белки (такие как свободный сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины), окрашивающие, вкусовые вещества и разбавители, эмульгирующие средства, гидрофильные полимеры (такие как поливинилпирролидон), полипептиды с низкой молекулярной массой, солеобразующие противоионы (такие как натрий), консерванты (такие как бензалкония хлорид, бензойная кислота, салициловая кислота, тимеросал, фенэтиловый спирт, метилпарабен, пропилпарабен, хлоргексидин, сорбиновая кислота или перекись водорода), растворители (такие как глицерин, пропиленгликоль или полиэтиленгликоль), сахароспирты (такие как маннитол или сорбитол), суспендирующие вещества, поверхностно-активные вещества или смачивающие вещества (такие как Pluronics; ПЭГ; сложные эфиры сорбитана; полисорбаты, такие как Полисорбат 20 или Полисорбат 80; Triton; трометамин; лецитин; холестерол или тилоксапол), вещества, увеличивающие стабильность (такие как сахароза или сорбитол), вещества, увеличивающие тоничность (такие как галогениды щелочных металлов - предпочтительно хлорид натрия или калия, - или маннитол, сорбитол), носители для доставки, разбавители, вспомогательные вещества и/или фармацевтические вспомогательные средства (см., например, руководство REMINGTON: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY, 19th edition, (1995); Berge et al., J. Pharm. Sci., 6661), 1-19 (1977). Дополнительные соответствующие принципы, способы и вещества описаны, например, в руководствах Lieberman et al., PHARMACEUTICAL DOSAGE FORMS-DISPERSE SYSTEMS (2nd ed., vol. 3, 1998); Ansel et al., PHARMACEUTICAL DOSAGE FORMS & DRUG DELIVERY SYSTEMS (7th ed. 2000); Martindale, THE EXTRA PHARMACOPEIA (31st edition), Remington's PHARMACEUTICAL SCIENCES (16th-20th and subsequent editions); The Pharmacological Basis Of Therapeutics, Goodman and Gilman, Eds. (9th ed.--1996); Wilson and Gisvolds' TEXTBOOK OF ORGANIC MEDICINAL AND PHARMACEUTICAL CHEMISTRY, Delgado and Remers, Eds. (10th ed., 1998). Принципы приготовления в состав фармацевтически приемлемых композиций также описаны, например, в руководствах Aulton, PHARMACEUTICS: THE SCIENCE OF DOSAGE FORM DESIGN, Churchill Livingstone (New York) (1988), EXTEMPORANEOUS ORAL LIQUID DOSAGE PREPARATIONS, CSHP (1998)).

Оптимальная фармацевтическая композиция будет определена специалистом в данной области техники в зависимости от, например, предполагаемого пути введения, формата доставки и желаемой дозы (см., например, руководство Remington's PHARMACEUTICAL SCIENCES, выше). Такие композиции могут оказывать влияние на физиологическое состояние, стабильность, скорость высвобождения in vivo,

- 144 046387 скорость клиренса in vivo полипептида GDF15, конструкции, содержащей полипептид GDF15 или мутантную форму полипептида GDF15.

Первичный наполнитель или носитель в фармацевтической композиции может иметь водную либо неводную природу. Например, подходящий наполнитель или носитель для инъекции может представлять собой воду, физиологический солевой раствор или искусственную спинномозговую жидкость, в которые можно добавлять другие вещества, общепринято используемые в композициях для парентерального введения. Нейтральный забуференный солевой раствор или солевой раствор, смешанный со свободным сывороточным альбумином, представляют собой дополнительные примеры наполнителей. Другие примеры фармацевтических композиций включают буфер Tris приблизительно pH 7,0-8,5 или ацетатный буфер приблизительно pH 4,0-5,5, которые могут дополнительно содержать сорбитол или его подходящий аналог. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения композиции, содержащие полипептид GDF15, конструкцию, содержащую полипептид GDF15 или мутантную форму полипептида GDF15, могут быть получены в форме для хранения посредством смешивания избранной композиции желаемой степени чистоты с необязательными средствами для приготовления лекарственной формы (Remington's PHARMACEUTICAL SCIENCES, выше) в форме лиофилизованной таблетки или водного раствора. Более того, продукт, содержащий мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, можно приготовить в состав в форме лиофилизата с применением соответствующих вспомогательных веществ, таких как сахароза.

Фармацевтические композиции на основе полипептида могут быть выбраны для парентеральной доставки. В качестве альтернативы, композиции могут быть выбраны для ингаляции или для доставки через желудочно-кишечный тракт, например, для пероральной доставки. Приготовление такой фармацевтически приемлемой композиции соответствует компетенции специалиста в данной области техники.

Компоненты лекарственной формы присутствуют в концентрациях, которые являются приемлемыми для участка введения. Например, буферы применяют для поддержания pH композиции на физиологическом уровне или на уровне незначительно более низкого pH, как правило, в диапазоне pH от приблизительно 5 до приблизительно 8.

Если предполагается парентеральное введение, терапевтические композиции для применения согласно настоящему изобретению могут находиться в форме апирогенного, приемлемого для парентерального введения водного раствора, содержащего желаемый полипептид GDF15, конструкцию, содержащую полипептид GDF15 или мутантную форму полипептида GDF15, в фармацевтически приемлемом наполнителе. В особенности подходящий наполнитель для парентеральной инъекции представляет собой стерильную дистиллированную воду, в которой полипептид GDF15, конструкция, содержащая мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, приготовлены в состав в виде стерильного изотоничного раствора, надлежащим образом консервированного. Получение другого препарата может включать приготовление желаемой молекулы в состав со средством, таким как инъецируемые микросферы, разлагаемые биологическим способом частицы, полимерные соединения (такие как полимолочная кислота или полигликолевая кислота), бусины или липосомы, обеспечивающие контролируемое или замедленное высвобождение продукта, который затем можно доставить посредством инъекции с замедленным всасыванием. Также можно применять гиалуроновую кислоту, которая может способствовать большей длительности циркуляции. Другие подходящие способы введения желаемой молекулы включают применение имплантируемых устройств для доставки лекарственных препаратов.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения фармацевтическую композицию можно приготовить в состав для ингаляции. Например, мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, можно приготовить в состав в виде сухого порошка для ингаляции. Растворы для ингаляции, содержащие мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, можно также приготовить в состав с распыляющим веществом для доставки в форме аэрозоля. Согласно еще одному варианту реализации настоящего изобретения растворы можно распылять. Легочное введение также описано в международной публикации № WO 94/20069, в которой описана легочная доставка белков, модифицированных химическим способом.

Также предполагают, что определенные составы можно вводить пероральным путем. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения мономер или мультимер, который содержит полипептид, содержащий область GDF15, который вводят таким способом, можно приготовить в состав с добавлением таких носителей, которые обычно применяют при составлении твердых лекарственных форм, таких как таблетки и капсулы, либо без добавления данных носителей. Например, можно разработать капсулу для высвобождения активной части состава в определенном участке желудочно-кишечного тракта, когда биологическая доступность является максимальной и пресистемная деградация является минимальной. Можно добавлять дополнительные средства для облегчения всасывания мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15. Также можно применять разбавители, ароматизирующие вещества, воски с низкой температурой плавления, растительные масла, смазывающие вещества, суспендирующие вещества, вещества для улучшения распадаемости таблеток и связывающие вещества.

Другая фармацевтическая композиция может содержать эффективное количество мономера или

- 145 046387 мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, в смеси с нетоксичными вспомогательными веществами, подходящими для производства таблеток. Посредством растворения таблеток в стерильной воде или в другом подходящем наполнителе можно получить растворы в форме одной дозы. Подходящие вспомогательные вещества включают, но не ограничены ими, инертные разбавители, такие как карбонат кальция, карбонат или бикарбонат натрия, лактоза или фосфат кальция; или связывающие вещества, такие как крахмал, желатин или аравийская камедь; или смазывающие вещества, такие как стеарат магния, стеариновая кислота или тальк.

Дополнительные фармацевтические композиции, содержащие мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, будут очевидными специалисту в данной области техники, в том числе составы с замедленной или контролируемой доставкой, содержащие мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15. Методики приготовления множества других составов с замедленной или контролируемой доставкой, таких как применение носителей на основе липосом, разлагаемых биологическим способом микрочастиц или пористых бусин и инъекций с замедленным всасыванием, также известны специалисту в данной области техники (см. например, международную публикацию № WO 93/15722, в которой описаны пористые полимерные микрочастицы с контролируемым высвобождением для доставки фармацевтических композиций, а также публикации Wischke & Schwendeman, 2008, Int. J. Pharm. 364: 298-327 и Freiberg & Zhu, 2004, Int. J. Pharm. 282: 1-18, в которых обсуждается получение и применение микросфер/микрочастиц). Как описано в настоящем изобретении, гидрогель представляет собой пример состава с замедленной или контролируемой доставкой.

Дополнительные примеры препаратов с замедленным высвобождением включают полупроницаемые полимерные матрицы в форме формованных изделий, например, пленок, или микрокапсулы. Матрицы для замедленного высвобождения могут содержать полиэфиры, гидрогели, полилактиды (патент США № 3,773,919 и европейский патент №0 058 481), сополимеры L-глутаминовой кислоты и гаммаэтил-Ь-глутамата (Sidman et al., 1983, Biopolymers 22: 547-56), поли(2-гидроксиэтил-метакрилат) (Langer et al., 1981, J. Biomed. Mater. Res. 15: 167-277 и Langer, 1982, Chem. Tech. 12: 98-105), этиленвинилацетат (Langer et al., выше) или поли-Э(-)-3-гидроксимасляную кислоту (европейский патент № 0 133 988). Композиции с замедленным высвобождением могут также содержать липосомы, которые могут быть получены любым из способов, известных в данной области техники. См. например, публикации Epstein et al., 1985, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 82: 3688-92; и европейские патенты №№ 0 036 676, 0 088 046 и 0 143 949.

Фармацевтическая композиция, содержащая мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, которую используют для введения in vivo, как правило, должна быть стерильной. Стерильность можно обеспечить посредством фильтрации через стерильные фильтрационные мембраны. Если композиция является лиофилизованной, стерилизацию с применением данного способа можно провести до или после лиофилизации и восстановления. Композицию для парентерального введения можно хранить в лиофилизованной форме или в растворе. Кроме того, парентеральные композиции, как правило, помещают в контейнер, имеющий стерильное входное отверстие, например, пакет для внутривенного раствора или флакон, имеющий пробку, поддающуюся прокалыванию с помощью иглы для подкожных инъекций.

После приготовления фармацевтической композиции в состав ее можно хранить в стерильных флаконах в виде раствора, суспензии, геля, эмульсии, твердого вещества или в виде дегидрированного или лиофилизованного порошка. Такие составы можно хранить в форме, готовой к применению, или в форме (например, лиофилизованной), требующей восстановления перед введением.

Согласно конкретному варианту реализации настоящее изобретение направлено на наборы для получения единицы для введения однократной дозы. Наборы могут содержать каждый первый контейнер, содержащий высушенный белок, и второй контейнер, содержащий водный состав. Также в объем настоящего изобретения включены наборы, содержащие однокамерные или многокамерные преднаполненные шприцы (например, шприцы с жидкостью либо шприцы с лиофилизатом).

Эффективное количество фармацевтической композиции, которая содержит мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, предназначенной для терапевтического применения, зависит, например, от терапевтического контекста и целей. Специалист в данной области техники понимает, что соответствующие уровни доз для лечения будут, таким образом, отчасти варьировать в зависимости от доставляемой молекулы, показания, по которому применяют мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, пути введения и размера (массы тела, поверхности тела или размера органа) и состояния (возраста и общего здоровья) пациента. Соответственно, врач может титровать дозу и модифицировать путь введения для достижения оптимального терапевтического эффекта. Типичная доза может варьировать от приблизительно 0,1 мкг/кг до приблизительно 100 мг/кг или более, в зависимости от факторов, упомянутых выше. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения доза может находиться в диапазоне от 0,1 мкг/кг до приблизительно 100 мг/кг; или от 1 мкг/кг до приблизительно 100 мг/кг; или составлять 5 мкг/кг, 10 мкг/кг, 15 мкг/кг, 20 мкг/кг, 25 мкг/кг, 30 мкг/кг, 35 мкг/кг, 40 мкг/кг, 45 мкг/кг, 50 мкг/кг, 55 мкг/кг, 60 мкг/кг, 65 мкг/кг, 70 мкг/кг, 75 мкг/кг, 100 мкг/кг, 200 мкг/кг или до приблизительно 10 мг/кг.

- 146 046387

Частота введения дозы зависит от параметров фармакокинетики мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, в применяемом составе. Как правило, врач вводит композицию до тех пор, пока не будет достигнута доза, которая обеспечивает желаемый эффект. Вследствие этого композицию можно вводить в виде единичной дозы, в виде двух или более доз (которые могут содержать одинаковое количество желаемой молекулы или могут не содержать одинакового количества желаемой молекулы) в течение времени или в виде непрерывной инфузии посредством имплантируемого устройства или катетера. Последующую корректировку соответствующей дозы общепринятым способом может осуществить средний специалист в данной области техники, и такая корректировка соответствует задачам, регулярно выполняемым средним специалистом в данной области техники. Соответствующие дозы могут быть установлены с применением соответствующих данных дозаответ.

Пути введения фармацевтической композиции находятся в соответствии с известными способами и включают, например, пероральный путь; введение посредством инъекции, внутривенный, интраперитонеальный, интрацеребральный (интрапаренхиматозный), интрацеребровентрикулярный, внутримышечный, внутриглазной, внутриартериальный, интрапортальный или внутриочаговый пути; введение с применением систем с замедленным высвобождением (которые можно также инъецировать); или введение с применением имплантируемых устройств. При необходимости композиции можно вводить посредством болюсной инъекции или непрерывно посредством инфузии, либо с применением имплантируемого устройства.

В качестве альтернативы или дополнительно, композицию можно вводить местно посредством имплантации мембраны, губки или другого соответствующего материала, в который была абсорбирована или инкапсулирована желаемая молекула. В случае применения имплантируемого устройства такое устройство можно имплантировать в любую подходящую ткань или орган, и доставка желаемой молекулы может осуществляться посредством диффузии, болюсного введения с высвобождением в течение времени или непрерывного введения.

Для доставки лекарственного препарата, например, мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, с предопределенной скоростью, вследствие чего концентрация лекарственного препарата может поддерживаться на желаемом терапевтически эффективном уровне в течение длительного периода, можно применять множество различных подходов. В одном примере можно применять гидрогель, содержащий полимер, такой как желатин (например, желатин быка, желатин человека или желатин из другого источника) или существующий в природе или полученный синтетическим способом полимер. В гидрогеле можно применять любое процентное содержание полимера (например, желатина), например, 5, 10, 15 или 20%. Выбор соответствующей концентрации может зависеть от множества факторов, таких как желаемый терапевтический профиль и профиль фармакокинетики терапевтической молекулы.

Примеры полимеров, которые могут содержаться в гидрогеле, включают полиэтиленгликоль (ПЭГ), полиэтиленоксид, полиэтиленоксид-со-полипропиленоксид, блок-сополимеры или случайные сополимеры со-полиэтиленоксида, поливинилалкоголь, поли(винилпирролидинон), поли(аминокислоты), декстран, гепарин, полисахариды, полиэфиры и подобные полимеры.

Другим фактором, который следует учитывать при получении составов на основе гидрогеля, является степень перекрестного сшивания гидрогеля и средства, образующего поперечные сшивки. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения перекрестного сшивания можно достичь посредством реакции метакрилирования, в которой используют метакриловый ангидрид. В некоторых случаях высокая степень образования перекрестных сшивок может быть желательной, тогда как в других предпочтительной является меньшая степень образования перекрестных сшивок. В некоторых случаях большая степень перекрестного сшивания обеспечивает более длительное замедленное высвобождение. Большая степень перекрестного сшивания может обеспечивать получение более жесткого гидрогеля и более длительный период, в течение которого осуществляется доставка лекарственного препарата.

Для получения гидрогеля с желаемыми свойствами можно применять любое соотношение полимера к средству, образующему поперечные сшивки (например, метакриловому ангидриду). Например, соотношение полимера к средству, образующему поперечные сшивки, может составлять, например, 8:1, 16:1, 24:1 или 32:1. Например, когда полимер гидрогеля представляет собой желатин, а средство, образующее поперечные сшивки, представляет собой метакрилат, для метакрилового ангидрида:желатина можно применять соотношения 8:1, 16:1, 24:1 или 32:1.

V. Терапевтические применения полипептида GDF15, конструкции, содержащей полипептид GDF15 или мутантную форму полипептида GDF15.

Мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, можно применять для лечения, диагностики или облегчения метаболического состояния или нарушения. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения метаболическое нарушение, которое подвергают лечению, представляет собой диабет, например, диабет 2 типа. Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения метаболическое состояние или нарушение представляет собой ожирение. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения метаболическое состояние или нарушение

- 147 046387 представляет собой дислипидемию, увеличение уровней глюкозы, увеличение уровней инсулина или диабетическую нефропатию. Например, метаболическое состояние или нарушение, которое можно лечить или облегчать с применением мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, включает состояние, при котором субъект-человек имеет уровень глюкозы в крови натощак 125 мг/дл или более, например, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200 или более 200 мг/дл. Уровни глюкозы в крови можно определить в состоянии после приема пищи или натощак либо случайным образом. Метаболическое состояние или нарушение может также включать состояние, при котором субъект подвержен увеличенному риску развития метаболического состояния. В случае субъекта-человека такие состояния включают уровень глюкозы в крови натощак 100 мг/дл. Состояния, которые можно лечить с применением фармацевтической композиции, содержащей мутантный полипептид GDF15, можно также найти в публикации American Diabetes Association Standards of Medical Care in Diabetes Care-2011, American Diabetes Association, Diabetes Care Vol. 34, No. Supplement 1, S11-S61, 2010.

При практическом применении метаболическое нарушение или состояние, такое как диабет 2 типа, увеличение уровней глюкозы, увеличение уровней инсулина, дислипидемия, ожирение или диабетическая нефропатия, можно лечить посредством введения пациенту, который нуждается в таком лечении, терапевтически эффективной дозы полипептида GDF15, конструкции, содержащей мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15. Введение можно осуществлять, как описано в настоящем изобретении, например, посредством внутривенной (ВВ) инъекции, интраперитонеальной (ИП) инъекции, подкожной инъекции, внутримышечной инъекции или пероральным путем в форме таблетки или жидкого состава. В некоторых случаях терапевтически эффективную или предпочтительную дозу мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, может определить врач. Терапевтически эффективная доза мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, зависит, среди прочего, от графика введения, разовой дозы вводимого средства, от того, вводят ли мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, в комбинации с другими терапевтическими средствами, иммунного статуса и здоровья реципиента. Термин терапевтически эффективная доза в настоящем изобретении означает количество мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, которое вызывает биологический или медицинский ответ в системе ткани, животном или человеке, причем указанный ответ определяет исследователь, врач лечебного дела или другой врач, и указанный ответ включает смягчение или облегчение симптомов заболевания или нарушения, которое подвергают лечению. Т.е. данный термин означает количество мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, которое поддерживает наблюдаемый уровень одного или нескольких желаемых биологических или медицинских ответов, например, уменьшения уровней глюкозы, инсулина, триглицерида или холестерола в крови; уменьшения массы тела; или улучшение толерантности к глюкозе, расхода энергии или чувствительности к инсулину.

Следует отметить, что терапевтически эффективная доза мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, может также варьировать в зависимости от желаемого результата. Таким образом, например, в случаях, при которых показано уменьшение уровня глюкозы в крови, доза мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, будет соответствующим образом выше дозы, при которой желательно относительное уменьшение уровня глюкозы в крови. И наоборот, в случаях при которых показан больший уровень глюкозы в крови, доза мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, будет соответствующим образом меньше дозы, при которой желателен относительно больший уровень глюкозы в крови.

Согласно различным вариантам реализации настоящего изобретения субъект представляет собой человека, уровень глюкозы в крови у которого составляет 100 мг/дл или больше и который может получать лечение мономером или мультимером, содержащим полипептид, который содержит область GDF15.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения способ согласно настоящему изобретению включает первый измеряемый исходный уровень одного или нескольких значимых с точки зрения метаболизма соединений, таких как глюкоза, инсулин, холестерол, липид, у субъекта. Затем фармацевтическую композицию, содержащую мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, вводят субъекту. После желаемого периода времени снова определяют уровень одного или нескольких значимых с точки зрения метаболизма соединений (например, глюкозы, инсулина, холестерола, липида в крови) у субъекта. Затем два уровня можно сравнить для определения относительного изменения значимых с точки зрения метаболизма соединений у субъекта. В зависимости от результата данного сравнения можно вводить другую дозу фармацевтической композиции, содержащей мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, для достижения желаемого уровня одного или нескольких значимых с точки зрения метаболизма соединений.

Следует отметить, что фармацевтическую композицию, содержащую мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, можно вводить совместно с другим соединением. Природа и свойства соединения, которое совместно вводят с мономером или мультимером, содер

- 148 046387 жащим полипептид, который содержит область GDF15, зависят от природы состояния, которое подвергают лечению или которое необходимо облегчить. Неограничивающий перечень примеров соединений, которые можно вводить в комбинации с фармацевтической композицией, содержащей мономер или мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, включают розиглитазон, пиоглитазон, репаглинид, натеглитинид, метформин, экзенатид, стиаглиптин, прамлинтид, глипизид, глимеприридеакарбозу и миглитол.

VI. Наборы.

Также предложены наборы для реализации раскрытых способов на практике. Такие наборы могут содержать фармацевтическую композицию, такую как композиции, описанные в настоящем изобретении, в том числе нуклеиновые кислоты, кодирующие пептиды или белки, предложенные в настоящем изобретении, векторы и клетки, содержащие такие нуклеиновые кислоты, и фармацевтические композиции, которые содержат такие соединения, содержащие нуклеиновую кислоту, которые могут быть предложены в стерильном контейнере. Необязательно в наборы могут также включаться или быть доступными пациенту или организации, оказывающей медицинские услуги, инструкции относительно того, как применять предложенную фармацевтическую композицию для лечения метаболического нарушения.

Согласно одному аспекту настоящего изобретения набор включает (a) фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество мономера или мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15; и (b) один или несколько контейнеров для фармацевтической композиции. Такой набор может также включать инструкции по его применению; инструкции могут быть приспособлены к конкретному метаболическому нарушению, которое подвергают лечению. Инструкции могут описывать процесс применения и природу материалов, предоставленных в наборе. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения наборы включают инструкции для пациента по проведению введения для лечения метаболического нарушения, такого как увеличение уровней глюкозы, увеличение уровней инсулина, ожирение, диабет 2 типа, дислипидемия или диабетическая нефропатия.

Инструкции могут быть напечатаны на носителе, таком как бумага или пластик и т.д., и могут быть представлены в наборах в виде листка-вкладыша, на этикетке контейнера набора или его компонентов (например, присоединены к упаковке) и т.д. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения инструкции предложены в виде файла с данными для электронного хранения, представленного на подходящем машиночитаемом носителе информации, например, диске CD-ROM, дискете и т.д. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения фактические инструкции в наборе отсутствуют, однако предложены способы получения инструкций из удаленного источника, например, через интернет. Пример такого варианта реализации представляет собой набор, который включает веб-адрес, по которому можно увидеть инструкции и/или с которого можно выгрузить инструкции.

Часто желательно, чтобы некоторые или все компоненты набора были упакованы в соответствующую упаковку для поддержания стерильности. Компоненты набора можно упаковать в элемент, содержащий набор, для получения отдельной простой в применении единицы, причем указанный элемент, содержащий набор, например, коробка или аналогичная структура, может представлять собой герметичный контейнер, например, для дополнительного сохранения стерильности некоторых или всех компонентов набора, либо может представлять собой негерметичный контейнер.

Примеры

Следующие примеры, в том числе проведенные эксперименты и полученные результаты, предложены исключительно с иллюстративной целью, и их не следует истолковывать как ограничивающие настоящее изобретение.

Пример 1.

Получение молекулы Fc-GDF15.

Слияния GDF15 с последовательностями knob/holeFc, HemiFc, charged pair (delHinge) Fc и charged pair (delHinge) cysteine clamp Fc стабильно экспрессировали в бессывороточной, адаптированной к росту в суспензии клеточной линии CHO-K1. Молекулы GDF15-Fc клонировали в стабильный вектор экспрессии, содержащий ген резистентности к пуромицину, тогда как Fc-цепи клонировали в вектор экспрессии, содержащий ген резистентности к гигромицину (Selexis, Inc.). Плазмиды трансфицировали в соотношении 1:1 с применением липофектамина LTX, и селекцию клеток проводили через 2 дня после трансфекции в запатентованной среде роста, содержащей 10 мкг/мл пуромицина и 600 мкг/мл гигромицина. Среду меняли 2 раза в неделю при проведении селекции. Когда жизнеспособность клеток достигала приблизительно 90%, культуру масштабировали до масштаба серийной продукции с подпиткой. Клетки высевали в концентрации 1e6Aim в запатентованной продуктивной среде и подпитку проводили в дни 3, 6 и 8. Кондиционную среду (КС), образуемую клетками, собирали в день 10 и фильтровали. Конечные показатели жизнеспособности, как правило, составляли приблизительно 90%.

Fc-GDF15 из отфильтрованной кондиционной среды выделяли с применением двухэтапной хроматографической процедуры. Приблизительно 5 л КС наносили непосредственно на колонку GE MabSelect SuRe, которую предварительно уравновешивали фосфатно-буферным раствором (ФБР) Дульбекко. Связавшийся белок подвергали трем этапам промывки: первый - 3-мя объемами колонки (ОК) ФБР; сле

- 149 046387 дующий - 1-им ОК 20 мМ Tris, 100 мМ хлорида натрия, pH 7,4; и, наконец, 3-мя ОК 500 мМ L-аргинина, pH 7,5. В результате данных этапов промывки были удалены не связавшиеся или слабо связавшиеся компоненты среды и примеси клеток-хозяев. Затем колонку повторно уравновешивали 5-тью ОК 20 мМ Tris, 100 мМ хлорида натрия при pH 7,4, в результате чего УФ-поглощение возвращалось к базовой линии. Целевой белок элюировали 100 мМ уксусной кислотой при pH 3,6 и собирали в общей массе. Общую массу белка быстро титровали в диапазоне pH от 5,0 до 5,5 1 М Tris-HCl, pH 9,2.

Затем общую массу белка с откорректированным значением pH наносили на колонку GE SP Sepharose HP, которую предварительно уравновешивали 20 мМ MES при pH 6,0. После этого связавшийся белок промывали 5-тью ОК буфера для уравновешивания, после чего элюировали 20-тью ОК с линейным градиентом 0-50% 0-400 мМ хлорида натрия в 20 мМ MES при pH 6,0. Фракции собирали во время элюирования и анализировали методом аналитической эксклюзионной хроматографии (Superdex 200) для определения соответствующих фракций для сбора гомогенного продукта. Хроматография SP HP удаляет родственные примеси продукта, такие как свободный Fc, агрегированные формы и мультимеры Fc-GDF15.

Затем посредством диализа проводили смену буфера общей массы SP HP на 10 мМ ацетат натрия, 5% пролин, pH 5,2. Продукт концентрировали до концентрации приблизительно 15 мг/мл с применением устройства для центрифугирования Sartorius Vivaspin 20 с отсечением по молекулярной массе десять килодальтон. После этого проводили стерилизующую фильтрацию продукта, и полученный в результате раствор, содержащий молекулы очищенного Fc-GDF15, хранили при температуре 5°C. Подлинность и чистоту конечных продуктов оценивали с применением масс-спектрального анализа, электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия и эксклюзионной высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Способ очистки, описанный выше, применяли для очистки гибридных белков DhMonoFc-GDF15. Однако было обнаружено, что введение в DhMonoFc-GDF15 мутации H6D вызывало образование растворимых агрегатов при элюировании SP. Вследствие этого очистка DhMonoFc-GFF15(H6D) включала дополнительный этап эксклюзионной хроматографии (Superdex 200 с применением 20 мМ фосфата, 250 мМ NaCl, pH 6,8), после которого следовало нанесение на Q-sepharose HP и элюирование градиентом от 0 до 0,6 М NaCl в 20 мМ tris, pH 8,5.

Пример 2.

Получение молекул GDF15-HSA и DhMonoFc.

Слияние GDF15 с последовательностями HSA и DhMonoFc стабильно экспрессировали в клетках CHO-S (Invitrogen). Для каждой из конструкций, образующих гомодимеры, кодирующую последовательность клонировали в стабильный вектор экспрессии, содержащий ген устойчивости к пуромицину (Selexis, Inc.). В случае гетеродимера HSA-(G₄S)₄-GDF15:GDF15 последовательность слияния HSA-(G₄S)₄GDF15 клонировали в вектор экспрессии, содержащий ген устойчивости к пуромицину, и последовательность GDF15 клонировали в вектор экспрессии, содержащий ген устойчивости к гигромицину. Родительские клетки CHO-S поддерживали в среде CD-CHO (Invitrogen) с добавлением 8 мМ L-глутамина и трансфицировали 4 мкг ДНК плазмиды с применением набора для трансфекции Lipofectamine LTX (Invitrogen) согласно инструкциям производителя. В случае гетеродимера HSA-(G₄S)₄-GDF15:GDF15 две плазмиды смешивали перед трансфекцией в соотношении 1:1. Стабильные линии клеток подвергали селекции с применением 10 мкг/мл пуромицина (гомодимеры) или 10 мкг/мл пуромицина и 400 мкг/мл гигромицина (гетеродимер). После восстановления, которое определяли по показателю жизнеспособности >90% с применением счетчика Vi-Cell (Beckman Coulter), стабильные линии клеток CHO-S размножали и высевали для периодической продукции во встряхиваемых колбах либо для продукции с подпиткой в биореакторах WAVE (GE Healthcare). Для обоих процессов клетки высевали в концентрации 1e6 жизнеспособных клеток/мл в продуктивной среде. Продукты периодического процесса собирали посредством центрифугирования в день 6, тогда как продукты процесса с подпиткой подпитывали в дни 3, 6 и 8. КС, образованную клетками, собирали посредством центрифугирования в день 10 и фильтровали.

Гибридные белки HSA-GDF15 очищали от отфильтрованной кондиционной среды с применением двух этапов хроматографии. Отфильтрованную кондиционную среду, содержащую гибридный белок HSA-GDF15, наносили на колонку Cibracon Blue Sepharose HP, уравновешенную 20 мМ фосфатом, 150 мМ NaCl, pH 7,4. Затем колонку промывали буфером для уравновешивания до получения базового уровня УФ-поглощения. Продукт и загрязняющие вещества элюировали буфером, содержащим 20 мМ фосфат, 2 М NaCl, а затем элюаты собирали и анализировали методом ПААГ-ДСН (электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия) с окрашиванием кумасси для определения того, какие фракции элюата содержат полипептид, мигрирующий с предполагаемой молекулярной массой гибридного белка HSA-GDF15. После этапа с применением Blue Sepharose объединенные фракции, содержащие продукт, диализовали против 10 мМ Tris, pH 8,0. Этап диализа позволял гибридному белку HSA-GDF15 связаться при нанесении на анион-обменную хроматографическую смолу. Итоговым этапом хроматографии являлась хроматография на Q-Sepharose HP с применением линейного градиента (от 0 до 0,6 М NaCl в 10 мМ Tris, pH 8,0) для элюирования связавшегося гибридного белка. Элюат собирали с QSepharose HP в виде фракций, а затем анализировали методом ПААГ-ДНС и аналитической эксклюзион

- 150 046387 ной хроматографии для определения соответствующих фракций для объединения. Анализ методами ЖХМС (жидкостная хроматография/масс-спектрометрия) и ПААГ-ДСН проводили для подтверждения подлинности каждого белка. Затем посредством диализа проводили смену буфера в полученной общей массе на 10 мМ ацетат натрия, 9% сахарозу, pH 4,5, продукт подвергали стерилизующей фильтрации, после чего хранили при температуре 5°C или замораживали.

Гибридные белки DhMonoFc-GDF15 очищали, как описано в примере 2 выше для других гибридных белков Fc-GDF15.

Пример 3.

Подавление потребления пищи у прожорливых мышей ob/ob с применением полипептидов Fc, гибридных с GDF15, и полипептидов HSA, гибридных с GDF15.

GDF15 уменьшает потребление пищи у прожорливых мышей ob/ob; анализ потребления пищи применяли для оценки эффективности различных форм аналогов GDF15. Поскольку период полужизни полипептида GDF15 человека у мыши, согласно наблюдениям, составляет приблизительно 3 часа, для увеличения периода полужизни белка применяли стратегию слияния с Fc. Были получены различные мультимеры, содержащие полипептид, который содержит область GDF15, и активность данных мультимеров in vivo анализировали посредством введения мультимера прожорливым мышам ob/ob, дефицитным по лептину, и измерения способности конкретного мультимера, содержащего полипептид, который содержит область GDF15, подавлять потребление пищи у данных животных. Исследуемый мультимер, содержащий полипептид, который содержит область GDF15, вводили мышам ob/ob возрастом 7-8 недель (Jackson Laboratory) посредством подкожной инъекции в день 0 в 16-17 часов. После инъекции животных переносили в клетки, количество пищи в которых было предварительно измерено, и потребление пищи измеряли на следующий день в 9-10 часов.

Результаты иллюстративных экспериментов представлены на фигурах 6-53. Данные эксперименты свидетельствуют, что описанные мультимеры, содержащие области GDF15, демонстрируют уменьшение потребления пищи мышами ob/ob с большей активностью, чем нативный зрелый гомодимер 4GDF15.

Пример 4.

Хроническая эффективность конструкций GDF15 у мышей DIO.

Определенные мультимеры, содержащие области GDF15, вводили хронически и подкожно мышам DIO один раз в неделю. Конструкции продемонстрировали эффективность улучшения различных параметров метаболизма, в том числе массы тела, уровней глюкозы в крови и толерантности к глюкозе, уровней инсулина в сыворотке, уровней холестерола в сыворотке, уровней триглицерида в сыворотке и пероральной толерантности к липидам.

Пример 5.

Активность конструкций GDF15 in vivo.

Самцов C57Bl/6 кормили рационом с высоким 60%-ным содержанием жиров в течение 15 недель и разделяли на различные группы лечения, причем до начала лечения животные каждой группы имели одинаковую массу тела и уровни глюкозы, инсулина, триглицерида и холестерола. Животным подкожно вводили белки или наполнитель (буфер) еженедельно в течение 5 недель. Использовали три различных уровня доз белков: 10, 1, 0,1 нмоль/кг, что эквивалентно 1,25, 0,125, 0,0125 мг/кг. Исследования проводили в течение 5 недель, последнюю дозу вводили в день 28.

Массу тела измеряли еженедельно в течение 5 недель лечения и вымывания лекарственного препарата. Один пероральный тест толерантности к глюкозе (ПТТГ) проводили через 2 недели после первой инъекции белка на животных, которые находились натощак в течение 4 часов. Другой пероральный тест толерантности к глюкозе (ПТТГ) проводили через 5 недель после первой инъекции белка на животных, которые находились натощак в течение 16 часов. При проведении ПТТГ животным пероральным путем вводили раствор глюкозы 2 г/кг, и уровни глюкозы измеряли во временных точках 0, 15, 30, 60, 120 мин. с применением глюкометра AlphaTRAK (Abbott). Рассчитывали площадь под кривой (area under curve, AUC) уровней глюкозы во время ПТТГ для сравнения толерантности к глюкозе различных групп лечения. Образцы сыворотки отбирали через 3 недели после первой инъекции белка и применяли для измерения уровней инсулина, триглицерида и холестерола, а также уровней исследуемых соединений. Уровни инсулина измеряли с применением набора для иммуноанализа (Alpco). Уровни триглицерида и холестерола измеряли с применением ферментативных анализов (Wako).

Результаты представлены на фиг. 54-59 (звездочки показывают статистическую значимость). Данные эксперименты продемонстрировали, что описанные мультимеры, содержащие области GDF15, уменьшают AUC уровней глюкозы во время ПТТГ (фиг. 55 и 59), уменьшают массу тела (фиг. 54) уменьшают уровни инсулина (фиг. 56), уменьшают уровни холестерола (фиг. 58) и уменьшают уровни триглицеридов (фиг. 57).

Пример 6.

Температурная стабильность конструкций GDF15.

Температурную стабильность избранных конструкций GDF15 оценивали методом дифференциальной сканирующей калориметрии на системе MicroCal Capillary VP-DSC, в которой разницу температур между эталонной ячейкой и ячейкой с образцом непрерывно измеряют и калибруют к единицам мощно

- 151 046387 сти. Канал данных называют в настоящем изобретении сигнал РМ или разница мощности (РМ) между эталонной ячейкой и ячейкой с образцом. Разворачивание молекулы белка выглядит на термограмме ДСК как эндотермический переход и может быть охарактеризовано с помощью средних точек температурного перехода (Tm). Образцы нагревали в диапазоне от 10°C до 100°C со скоростью нагревания 60°^час. Время предварительного сканирования составляло 15 минут, период фильтрации составлял 10 секунд. Концентрации, которые применяли в экспериментах методом ДСК, составляли приблизительно 1,0 мг/мл. Анализ данных для коррекции базовой линии и определения значений Tm проводили с применением программного обеспечения MicroCal Origin 7.

В частности, димер DhCpmFc(-)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+) сравнивали с димером Dh3CpmFc(-)GDF15(N3D):DhCpmFc(+); димер DhCpmFc(-)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+) сравнивали с димером Dh3CpmFc(-)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+); димер DhCpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C) сравнивали с димером Dh3CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):DhCpmFc(+)(S354C); и димер DhCpmFc()(Y349C)-GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(S354C) сравнивали с димером Dh3CpmFc(-)(Y349C)GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+)(S354C). Результаты представлены на фиг. 61. Данные эксперименты свидетельствуют, что домены Dh3CpmFc характеризуются большей стабильностью, чем соответствующие домены DhCpmFc.

Пример 7.

Анализ связывания рецептора Fcy.

Активность связывания с рецепторами Fcy избранных конструкций GDF15 анализировали на приборе BIA3000. Каждый рецептор Fcy захватывали на поверхности CM5, покрытой антителом против His (уровень удерживания захвата ~ 200 ЕО, единиц ответа). Конструкции GDF15 разводили до концентрации 250 нМ в буфере для образца (0,1 мг/мл БСА, 0,005% P20, ФБР). Каждую конструкцию GDF15 инъецировали над поверхностями с рецептором Fcy и захваченными антителами против His со скоростью 50 мкл/мин. в течение 3 минут. После 5-минутной диссоциации в приборном буфере для анализа (0,005% P20 в ФБР) поверхность каждого рецептора Fcy регенерировали инъекцией 8 мМ глицина, pH 1,5, 1 М NaCl в течение 30 секунд с последующей инъекцией 10 мМ глицина, pH 1,5 в течение 30 секунд. Полученные в результате сенсограммы анализировали с применением программного обеспечения BIAcore BIAEvaluation (v. 4.1). Ответы связывания в единицах ЕО считывали за 10 секунд до окончания инъекции.

В частности, связывание с FcyRI, FcyRIIIA и FcyRIIA определяли для димера DhCpmFc(-)GDF15(Ndel3):DhCpmFc(+), димера DhCpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3): DhCpmFc(+)(S354C); димера Dh3CpmFc(-)-GDF15(Ndel3); димера Dh3CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(Ndel3)-Dh3CpmFc(+)(S354C); димера Dh3CpmFc(-)-GDF15(N3D); и димера Dh3CpmFc(-)(Y349C)-GDF15(N3D):Dh3CpmFc(+)(S354C).

Результаты представлены на фиг. 60. Данные эксперименты свидетельствуют, что домены Dh3CpmFc по существу устраняют связывание с FcyRI, FcyRIIIA и FcyRIIA.

Несмотря на то, что настоящее изобретение было описано в отношении различных вариантов реализации, следует понимать, что различные вариации и модификации будут очевидными специалисту в данной области техники. Вследствие этого предполагают, что прилагаемая формула изобретения охватывает все такие эквивалентные вариации, которые относятся к заявленному объему настоящего изобретения. Кроме того, заголовки разделов используются в настоящем изобретении исключительно с организационной целью, и их не следует истолковывать как ограничивающие описываемый предмет изобретения.

Все публикации, ссылки на которые содержатся в настоящем изобретении, явным образом включены посредством ссылки в настоящую заявку для любой цели.

Список последовательностей <110> AMGEN INC.

<120> КОНСТРУКЦИИ НА ОСНОВЕ ФАКТОРА ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ И РОСТА 15 (GDF-15) <130> A-1850-WO-PCT <140>

<141>

<150> 61/860,723 <151> 2013-07-31 <160> 305 <170> PatentIn версия 3.5

- 152 046387 <210> 1 <211> 4 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 1

Arg Gly Arg Arg 1 <210> 2 <211> 7 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 2

Arg Gly Arg Arg Arg Ala Arg <210> 3 <211> 927 <212> ДНК <213> Homo sapiens <400> 3 atgcccgggc aagaactcag gacggtgaat ggctctcaga tgctcctggt gttgctggtg60 ctctcgtggc tgccgcatgg gggcgccctg tctctggccg aggcgagccg cgcaagtttc120 ccgggaccct cagagttgca ctccgaagac tccagattcc gagagttgcg gaaacgctac180 gaggacctgc taaccaggct gcgggccaac cagagctggg aagattcgaa caccgacctc240 gtcccggccc ctgcagtccg gatactcacg ccagaagtgc ggctgggatc cggcggccac300 ctgcacctgc gtatctctcg ggccgccctt cccgaggggc tccccgaggc ctcccgcctt360 caccgggctc tgttccggct gtccccgacg gcgtcaaggt cgtgggacgt gacacgaccg420 ctgcggcgtc agctcagcct tgcaagaccc caggcgcccg cgctgcacct gcgactgtcg480 ccgccgccgt cgcagtcgga ccaactgctg gcagaatctt cgtccgcacg gccccagctg540 gagttgcact tgcggccgca agccgccagg gggcgccgca gagcgcgtgc gcgcaacggg600 gaccactgtc cgctcgggcc cgggcgttgc tgccgtctgc acacggtccg cgcgtcgctg660 gaagacctgg gctgggccga ttgggtgctg tcgccacggg aggtgcaagt gaccatgtgc720 atcggcgcgt gcccgagcca gttccgggcg gcaaacatgc acgcgcagat caagacgagc780

- 153 046387 ctgcaccgcc tgaagcccga cacggtgcca gcgccctgct gcgtgcccgc cagctacaat cccatggtgc tcattcaaaa gaccgacacc ggggtgtcgc tccagaccta tgatgacttg ttagccaaag actgccactg catatga

840

900

927 <210>

<211>

<212>

<213>

308 PRT Homo sapiens <400>

Met

Pro

Gly

Gln

Glu 5

Leu

Arg

Thr

Val

Asn

Gly

Ser

Gln

Met

Leu

Val

Leu

Val 20

Leu

Ser

Trp

Leu

Pro 25

His

Gly

Ala

Leu

Ser

Leu

Ala

Glu

Ala 35

Ser

Arg

Ala

Ser

Phe 40

Pro

Gly

Pro

Ser

Glu 45

Leu

His

Ser

Glu

Asp 50

Ser

Arg

Phe

Arg

Glu 55

Leu

Arg

Lys

Arg

Tyr 60

Glu

Asp

Leu

Thr 65

Arg

Leu

Arg

Ala

Asn 70

Gln

Ser

Trp

Glu

Asp 75

Ser

Asn

Thr

Asp

Leu 80

Val

Pro

Ala

Pro

Ala 85

Val

Arg

Ile

Leu

Thr

Pro

Glu

Val

Arg

Leu 95

Gly

Ser

Gly

His

100

Leu

His

Leu

Arg

Ile

105

Ser

Arg

Ala

Leu

110

Pro

Glu

Gly

Leu

Pro

115

Glu

Ala

Ser

Arg

Leu

120

His

Arg

Ala

Leu

Phe

125

Arg

Leu

Ser

Pro

Thr

130

Ala

Ser

Arg

Ser

Trp 135

Asp

Val

Thr

Arg

Pro

140

Leu

Arg

Gln

Leu

145

Ser

Leu

Ala

Arg

Pro

150

Gln

Ala

Pro

Ala

Leu

155

His

Leu

Arg

Leu

Ser 160

Pro

Ser

Gln

165

Ser

Asp

Gln

Leu

170

Ala

Glu

Ser

175

Ala

Arg

Pro

Gln

Leu

180

Glu

Leu

His

Leu

Arg

185

Pro

Gln

Ala

Arg 190

Gly

Arg

Ala

195

Arg

Ala

Arg

Asn

Gly 200

Asp

His

Cys

Pro

Gly

Pro

Gly

Leu

205

- 154 046387

Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly 210 215220

Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr MetCys

225 230 235240

Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His AlaGln

245 250255

Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro 260 265270

Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr 275 280285

Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp 290 295300

Cys His Cys Ile 305 <210> 5 <211> 912 <212> ДНК <213> Mus sp. <400> 5

atggccccgc	ccgcgctcca	ggcccagcct	ccaggcggct	ctcaactgag	gttcctgctg	60
ttcctgctgc	tgttgctgct	gctgctgtca	tggccatcgc	agggggacgc	cctggcaatg	120
cctgaacagc	gaccctccgg	ccctgagtcc	caactcaacg	ccgacgagct	acggggtcgc	180
ttccaggacc	tgctgagccg	gctgcatgcc	aaccagagcc	gagaggactc	gaactcagaa	240
ccaagtcctg	acccagctgt	ccggatactc	agtccagagg	tgagattggg	gtcccacggc	300
cagctgctac	tccgcgtcaa	ccgggcgtcg	ctgagtcagg	gtctccccga	agcctaccgc	360
gtgcaccgag	cgctgctcct	gctgacgccg	acggcccgcc	cctgggacat	cactaggccc	420
ctgaagcgtg	cgctcagcct	ccggggaccc	cgtgctcccg	cattacgcct	gcgcctgacg	480
ccgcctccgg	acctggctat	gctgccctct	ggcggcacgc	agctggaact	gcgcttacgg	540
gtagccgccg	gcagggggcg	ccgaagcgcg	catgcgcacc	caagagactc	gtgcccactg	600
ggtccggggc	gctgctgtca	cttggagact	gtgcaggcaa	ctcttgaaga	cttgggctgg	660
agcgactggg	tgctgtcccc	gcgccagctg	cagctgagca	tgtgcgtggg	cgagtgtccc	720
cacctgtatc	gctccgcgaa	cacgcatgcg	cagatcaaag	cacgcctgca	tggcctgcag	780
cctgacaagg	tgcctgcccc	gtgctgtgtc	ccctccagct	acaccccggt	ggttcttatg	840

- 155 046387 cacaggacag acagtggtgt gtcactgcag acttatgatg acctggtggc ccggggctgc

900 cactgcgctt ga

912 <210>

<211>

<212>

<213>

303

PRT

Mus sp.

<400>

Met 1

Ala

Pro

Ala 5

Leu

Gln

Ala

Gln

Pro 10

Pro

Gly

Ser

Gln 15

Leu

Arg

Phe

Leu

Leu 20

Phe

Leu

Leu 25

Leu

Ser 30

Trp

Pro

Ser

Gln

Gly 35

Asp

Ala

Leu

Ala

Met 40

Pro

Glu

Gln

Arg

Pro 45

Ser

Gly

Pro

Glu

Ser 50

Gln

Leu

Asn

Ala

Asp 55

Glu

Leu

Arg

Gly

Arg 60

Phe

Gln

Asp

Leu

Leu 65

Ser

Arg

Leu

His

Ala 70

Asn

Gln

Ser

Arg

Glu 75

Asp

Ser

Asn

Ser

Glu 80

Pro

Ser

Pro

Asp

Pro 85

Ala

Val

Arg

Ile

Leu 90

Ser

Pro

Glu

Val

Arg 95

Leu

Gly

Ser

His

Gly 100

Gln

Leu

Arg 105

Val

Asn

Arg

Ala

Ser

110

Leu

Ser

Gln

Gly

Leu

115

Pro

Glu

Ala

Tyr

Arg

120

Val

His

Arg

Ala

Leu

125

Leu

Thr

Pro

130

Thr

Ala

Arg

Pro

Trp 135

Asp

Ile

Thr

Arg

Pro

140

Leu

Lys

Arg

Ala

Leu

145

Ser

Leu

Arg

Gly

Pro

150

Arg

Ala

Pro

Ala

Leu

155

Arg

Leu

Arg

Leu

Thr

160

Pro

Asp

Leu

165

Ala

Met

Leu

Pro

Ser

170

Gly

Thr

Gln

Leu

175

Glu

Leu

Arg

Leu

Arg 180

Val

Ala

Gly

Arg 185

Gly

Arg

Ser

Ala

190

His

Ala

His

Pro

Arg 195

Asp

Ser

Cys

Pro

Leu

200

Gly

Pro

Gly

Arg

Cys 205

Cys

His

Leu

- 156 046387

Glu Thr Val Gln Ala Thr Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ser Asp Trp Val

210 215220

Leu Ser Pro Arg Gln Leu Gln Leu Ser Met Cys Val Gly Glu Cys Pro

225 230 235240

His Leu Tyr Arg Ser Ala Asn Thr His Ala Gln Ile Lys Ala Arg Leu

245 250255

His Gly Leu Gln Pro Asp Lys Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ser

260 265270

Ser Tyr Thr Pro Val Val Leu Met His Arg Thr Asp Ser Gly Val Ser

275 280285

Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Val Ala Arg Gly Cys His Cys Ala

290 295300

<210> 7 <211> 840 <212> ДНК <213> Homo	sapiens
<400> 7 ctgtctctgg	ccgaggcgag	ccgcgcaagt	ttcccgggac	cctcagagtt	gcactccgaa	60
gactccagat	tccgagagtt	gcggaaacgc	tacgaggacc	tgctaaccag	gctgcgggcc	120
aaccagagct	gggaagattc	gaacaccgac	ctcgtcccgg	cccctgcagt	ccggatactc	180
acgccagaag	tgcggctggg	atccggcggc	cacctgcacc	tgcgtatctc	tcgggccgcc	240
cttcccgagg	ggctccccga	ggcctcccgc	cttcaccggg	ctctgttccg	gctgtccccg	300
acggcgtcaa	ggtcgtggga	cgtgacacga	ccgctgcggc	gtcagctcag	ccttgcaaga	360
ccccaggcgc	ccgcgctgca	cctgcgactg	tcgccgccgc	cgtcgcagtc	ggaccaactg	420
ctggcagaat	cttcgtccgc	acggccccag	ctggagttgc	acttgcggcc	gcaagccgcc	480
agggggcgcc	gcagagcgcg	tgcgcgcaac	ggggaccact	gtccgctcgg	gcccgggcgt	540
tgctgccgtc	tgcacacggt	ccgcgcgtcg	ctggaagacc	tgggctgggc	cgattgggtg	600
ctgtcgccac	gggaggtgca	agtgaccatg	tgcatcggcg	cgtgcccgag	ccagttccgg	660
gcggcaaaca	tgcacgcgca	gatcaagacg	agcctgcacc	gcctgaagcc	cgacacggtg	720
ccagcgccct	gctgcgtgcc	cgccagctac	aatcccatgg	tgctcattca	aaagaccgac	780
accggggtgt	cgctccagac	ctatgatgac	ttgttagcca	aagactgcca	ctgcatatga	840

<210> 8 <211> 279 <212> PRT

- 157 046387 <213> Homo sapiens <400> 8

Leu Ser Leu Ala Glu 1 5

Leu His Ser Glu Asp

Ala Ser Arg Ala Ser

Ser Arg Phe Arg Glu 25

Phe Pro Gly Pro Ser 15

Leu Arg Lys Arg Tyr

Asp Leu Leu Thr Arg 35

Leu Arg Ala Asn Gln 40

Ser Trp Glu Asp Ser 45

Thr Asp Leu Val Pro 50

Ala Pro Ala Val Arg 55

Ile Leu Thr Pro Glu

Arg Leu Gly Ser Gly 65

Gly His Leu His Leu 70

Arg Ile Ser Arg Ala 75

Leu Pro Glu Gly Leu

Pro Glu Ala Ser Arg

Leu His Arg Ala Leu

Arg Leu Ser Pro Thr

100

Ala Ser Arg Ser Trp

105

Asp Val Thr Arg Pro

110

Arg Arg Gln Leu Ser 115

Leu Ala Arg Pro Gln

120

Ala Pro Ala Leu His

125

Arg Leu Ser Pro Pro

130

Pro Ser Gln Ser Asp

135

Gln Leu Leu Ala Glu

140

Ser Ser Ala Arg Pro 145

Gln Leu Glu Leu His 150

Leu Arg Pro Gln Ala 155

Arg Gly Arg Arg Arg

165

Ala Arg Ala Arg Asn

170

Gly Asp His Cys Pro

175

Gly Pro Gly Arg Cys

180

Cys Arg Leu His Thr

185

Val Arg Ala Ser Leu

190

Asp Leu Gly Trp Ala 195

Asp Trp Val Leu Ser 200

Pro Arg Glu Val Gln

205

Thr Met Cys Ile Gly

210

Ala Cys Pro Ser Gln 215

Phe Arg Ala Ala Asn 220

His Ala Gln Ile Lys 225

Thr Ser Leu His Arg 230

Leu Lys Pro Asp Thr 235

Glu

Asn

Val

Ala 80

Phe

Leu

Ser

Ala 160

Leu

Glu

Val

Met

Val 240

- 158 046387

Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala

245

Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile

250

255

Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val 260

Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu

265

270

Ala Lys Asp Cys His Cys Ile 275 <210> 9 <211> 816 <212> ДНК <213> Mus sp.

<400> 9 tcgcaggggg aacgccgacg agccgagagg gaggtgagat cagggtctcc cgcccctggg cccgcattac acgcagctgg cacccaagag gcaactcttg agcatgtgcg aaagcacgcc agctacaccc gatgacctgg acgccctggc agctacgggg actcgaactc tggggtccca ccgaagccta acatcactag gcctgcgcct aactgcgctt actcgtgccc aagacttggg tgggcgagtg tgcatggcct cggtggttct tggcccgggg aatgcctgaa tcgcttccag agaaccaagt cggccagctg ccgcgtgcac gcccctgaag gacgccgcct acgggtagcc actgggtccg ctggagcgac tccccacctg gcagcctgac tatgcacagg ctgccactgc cagcgaccct gacctgctga cctgacccag ctactccgcg cgagcgctgc cgtgcgctca ccggacctgg gccggcaggg gggcgctgct tgggtgctgt tatcgctccg aaggtgcctg acagacagtg gcttga ccggccctga gccggctgca ctgtccggat tcaaccgggc tcctgctgac gcctccgggg ctatgctgcc ggcgccgaag gtcacttgga ccccgcgcca cgaacacgca ccccgtgctg gtgtgtcact gtcccaactc tgccaaccag actcagtcca gtcgctgagt gccgacggcc accccgtgct ctctggcggc cgcgcatgcg gactgtgcag gctgcagctg tgcgcagatc tgtcccctcc gcagacttat

120

180

240

300

360

420

480

540

600

660

720

780

816 <210> 10 <211> 271 <212> PRT <213> Mus sp.

<400>

Ser

Gln

Gly

Asp

Ala 5

Leu

Ala

Met

Pro

Glu

Gln

Arg

Pro

Ser

Gly

Pro

Glu

Ser

Gln

Leu 20

Asn

Ala

Asp

Glu

Leu 25

Arg

Gly

Arg

Phe

Gln 30

Asp

Leu

Ser

Arg 35

Leu

His

Ala

Asn

Gln 40

Ser

Arg

Glu

Asp

Ser 45

Asn

Ser

Glu

- 159 046387

Pro Ser Pro Asp Pro 50

Ala Val Arg Ile Leu 55

Ser Pro Glu Val Arg 60

Gly Ser His Gly Gln 65

Leu Leu Leu Arg Val 70

Asn Arg Ala Ser Leu 75

Gln Gly Leu Pro Glu

Ala Tyr Arg Val His

Arg Ala Leu Leu Leu

Thr Pro Thr Ala Arg

100

Pro Trp Asp Ile Thr

105

Arg Pro Leu Lys Arg

110

Leu Ser Leu Arg Gly 115

Pro Arg Ala Pro Ala

120

Leu Arg Leu Arg Leu 125

Pro Pro Pro Asp Leu

130

Ala Met Leu Pro Ser

135

Gly Gly Thr Gln Leu 140

Leu Arg Leu Arg Val 145

Ala Ala Gly Arg Gly 150

Arg Arg Ser Ala His 155

His Pro Arg Asp Ser

165

Cys Pro Leu Gly Pro

170

Gly Arg Cys Cys His

175

Glu Thr Val Gln Ala

180

Thr Leu Glu Asp Leu

185

Gly Trp Ser Asp Trp

190

Leu Ser Pro Arg Gln

195

Leu Gln Leu Ser Met

200

Cys Val Gly Glu Cys

205

His Leu Tyr Arg Ser 210

Ala Asn Thr His Ala

215

Gln Ile Lys Ala Arg

220

His Gly Leu Gln Pro 225

Asp Lys Val Pro Ala 230

Pro Cys Cys Val Pro 235

Ser Tyr Thr Pro Val

245

Val Leu Met His Arg

250

Thr Asp Ser Gly Val

255

Leu

Ser 80

Leu

Ala

Thr

Glu

Ala 160

Leu

Val

Pro

Leu

Ser 240

Ser

Leu Gln Thr Tyr Asp

260

Asp Leu Val Ala Arg

265

Gly Cys His Cys Ala

270 <210> 11 <211> 339 <212> ДНК <213> Homo sapiens

- 160 046387 <400> 11 gcgcgcaacg gggaccactg tccgctcggg cccgggcgtt gctgccgtct gcacacggtc60 cgcgcgtcgc tggaagacct gggctgggcc gattgggtgc tgtcgccacg ggaggtgcaa120 gtgaccatgt gcatcggcgc gtgcccgagc cagttccggg cggcaaacat gcacgcgcag180 atcaagacga gcctgcaccg cctgaagccc gacacggtgc cagcgccctg ctgcgtgccc240 gccagctaca atcccatggt gctcattcaa aagaccgaca ccggggtgtc gctccagacc300 tatgatgact tgttagccaa agactgccac tgcatatga339 <210> 12 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 12

Ala Arg Asn Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg

5 1015

Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala AspTrp

2530

Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys

4045

Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser 50 5560

Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro 65 70 7580

Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val 85 9095

Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

100 105110 <210> 13 <211> 351 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 13 atgagcgcgc atgcgcaccc aagagactcg tgcccactgg gtccggggcg ctgctgtcac 60 ctggagactg tgcaggcaac tcttgaagac ttgggctgga gcgactgggt gttgtccccg 120

- 161 046387

cgccagctgc agctgagcat	gtgcgtgggc	gagtgtcccc	acctgtatcg	ctccgcgaac	180
acgcatgcgc agatcaaagc	acgcctgcat	ggcctgcagc	ctgacaaggt	gcctgccccg	240
tgctgtgtcc cctccagcta	caccccggtg	gttcttatgc	acaggacaga	cagtggtgtg	300
tcactgcaga cttatgatga	cctggtggcc	cggggctgcc	actgcgcttg	a	351

<210> 14 <211> 116 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 14

Met Ser Ala His Ala His Pro Arg Asp Ser Cys Pro Leu Gly Pro Gly

5 1015

Arg Cys Cys His Leu Glu Thr Val Gln Ala Thr Leu Glu Asp LeuGly

2530

Trp Ser Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Gln Leu Gln Leu Ser Met Cys 35 4045

Val Gly Glu Cys Pro His Leu Tyr Arg Ser Ala Asn Thr His Ala Gln 50 5560

Ile Lys Ala Arg Leu His Gly Leu Gln Pro Asp Lys Val Pro Ala Pro 65 70 7580

Cys Cys Val Pro Ser Ser Tyr Thr Pro Val Val Leu Met His Arg Thr 85 9095

Asp Ser Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Val Ala Arg Gly

100 105110

Cys His Cys Ala

115 <210> 15 <211> 12 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 15

- 162 046387

Glu Arg Lys Ser Ser Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro 1 5 10 <210> 16 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 16

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val LeuHis

70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser AsnLys

9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu AsnAsn

145 150 155160

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe PheLeu

165 170175

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

- 163 046387

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 17 <211> 217 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 17

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

- 164 046387

Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

180

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

185 190

Phe Ser Cys

195

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

200 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

210 215 <210> 18 <211> 20 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 18

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

5 10 15

Gly Gly Gly Ser <210> 19 <211> 1047 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид

<400> 19 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggatga	gctgaccaag	aaccaggtca	gcctgtggtg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacaagacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	cagcaagctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660

- 165 046387

tccggaggcg	gtggaagcgg aggtggtgga	tctggaggcg	gtggaagcgc	gcgcaacgga	720
gaccactgtc	cgctcgggcc cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	780
gaagacctgg	gctgggccga ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	840
atcggcgcgt	gcccgagcca gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	900
ctgcaccgcc	tgaagcccga cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	960
cccatggtgc	tcattcaaaa gaccgacacc	ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	1020
ttagccaaag	actgccactg catatga				1047

<210> 20 <211> 348 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 20

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

- 166 046387

Ser 145

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly

155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr

Lys

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Asp

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Lys

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly

190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys

Ser

210

Leu

Ser

Leu

Ser

Pro

215

Gly

220

Ser

Gly

225

Ser

Gly

230

Ser

Gly

235

Ser

Ala

Arg

Asn

Gly

240

Asp

His

Cys

Pro

Leu

245

Gly

Pro

Gly

Arg

Cys 250

Cys

Arg

Leu

His

Thr

255

Val

Arg

Ala

Ser

Leu

260

Glu

Asp

Leu

Gly

Trp 265

Ala

Asp

Trp

Val

Leu

270

Ser

Pro

Arg

Glu

Val

275

Gln

Val

Thr

Met

Cys 280

Ile

Gly

Ala

Cys

Pro

285

Ser

Gln

Phe

Arg

Ala

290

Ala

Asn

Met

His

Ala

295

Gln

Ile

Lys

Thr

Ser 300

Leu

His

Arg

Leu

Lys

305

Pro

Asp

Thr

Val

Pro

310

Ala

Pro

Cys

Val

315

Pro

Ala

Ser

Tyr

Asn

320

Pro

Met

Val

Leu

Ile

325

Gln

Lys

Thr

Asp

Thr

330

Gly

Val

Ser

Leu

Gln

335

Thr

Tyr

Asp

Leu

340

Leu

Ala

Lys

Asp

Cys 345

His

Cys

Ile <210>

<211>

<212>

<213>

654

ДНК

Искусственная последовательность <220>

<221>

<223>

источник /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400>

- 167 046387

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggatga	gctgaccaag	aaccaggtca	gcctgagctg	cgcggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacaagacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcgt	cagcaagctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtaa	atga	654

<210> 22 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 22

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Thr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

- 168 046387

Thr

Lys 130

115

Asn

Gln

Val

Ser

Leu

135

120

Thr

Cys

Leu

Val

Lys 140

125

Gly

Phe

Tyr

Pro

Ser

145

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr

Asp

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Asp

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Asp

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 23 <211> 1046 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид

<400> 23 cacctgaact	cctgggggga	ccgtcagtct	tcctcttccc	cccaaaaccc	aaggacaccc	60
tcatgatctc	ccggacccct	gaggtcacat	gcgtggtggt	ggacgtgagc	cacgaagacc	120
ctgaggtcaa	gttcaactgg	tacgtggacg	gcgtggaggt	gcataatgcc	aagacaaagc	180
cgcgggagga	gcagtacaac	agcacgtacc	gtgtggtcag	cgtcctcacc	gtcctgcacc	240
aggactggct	gaatggcaag	gagtacaagt	gcaaggtctc	caacaaagcc	ctcccagccc	300
ccatcgagaa	aaccatctcc	aaagccaaag	ggcagccccg	agaaccacag	gtgaccaccc	360
tgcccccatc	ccgggaggag	atgaccaaga	accaggtcag	cctgacctgc	ctggtcaaag	420
gcttctatcc	cagcgacatc	gccgtggagt	gggagagcaa	tgggcagccg	gagaacaact	480
acgacaccac	gcctcccgtg	ctggactccg	acggctcctt	cttcctctat	agcgacctca	540
ccgtggacaa	gagcaggtgg	cagcagggga	acgtcttctc	atgctccgtg	atgcatgagg	600
ctctgcacaa	ccactacacg	cagaagagcc	tctccctgtc	tccgggtgga	ggtggtggat	660
ccggaggcgg	tggaagcgga	ggtggtggat	ctggaggcgg	tggaagcgcg	cgcaacggag	720
accactgtcc	gctcgggccc	gggcgttgct	gccgtctgca	cacggtccgc	gcgtcgctgg	780

- 169 046387

aagacctggg	ctgggccgat	tgggtgctgt	cgccacggga	ggtgcaagtg	accatgtgca	840
tcggcgcgtg	cccgagccag	ttccgggcgg	caaacatgca	cgcgcagatc	aagacgagcc	900
tgcaccgcct	gaagcccgac	acggtgccag	cgccctgctg	cgtgcccgcc	agctacaatc	960
ccatggtgct	cattcaaaag	accgacaccg	gggtgtcgct	ccagacctat	gatgacttgt	1020
tagccaaaga	ctgccactgc	atatga				1046

<210> 24 <211> 348 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 24

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Thr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

- 170 046387

Tyr

Asp

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Asp

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Asp

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys

Ser

210

Leu

Ser

Leu

Ser

Pro

215

Gly

Gly 220

Ser

Gly

Gly 225

Ser

Gly

Gly 230

Ser

Gly

Gly 235

Ser

Ala

Arg

Asn

Gly 240

Asp

His

Cys

Pro

Leu

245

Gly

Pro

Gly

Arg

Cys 250

Cys

Arg

Leu

His

Thr

255

Val

Arg

Ala

Ser

Leu

260

Glu

Asp

Leu

Gly

Trp

265

Ala

Asp

Trp

Val

Leu

270

Ser

Pro

Arg

Glu

Val

275

Gln

Val

Thr

Met

Cys 280

Ile

Gly

Ala

Cys

Pro

285

Ser

Gln

Phe

Arg

Ala

290

Ala

Asn

Met

His

Ala

295

Gln

Ile

Lys

Thr

Ser

300

Leu

His

Arg

Leu

Lys

305

Pro

Asp

Thr

Val

Pro

310

Ala

Pro

Cys

Val

315

Pro

Ala

Ser

Tyr

Asn

320

Pro

Met

Val

Leu

Ile

325

Gln

Lys

Thr

Asp

Thr

330

Gly

Val

Ser

Leu

Gln

335

Thr

Tyr

Asp

Leu

340

Leu

Ala

Lys

Asp

Cys 345

His

Cys

Ile <210> 25 <211> 112 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 25

Ala Arg Asn Gly Asp Asp Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg

5 10 15

- 171 046387

Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu

Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp 25 30

Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln

40

Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys 45

Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn

55

Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser 60

Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr 65 70

Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro

80

Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu 85

Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val

95

Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

100

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

105 110 <210> 26 <211> 1047 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 26

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgaccacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
tccggaggcg	gtggaagcgg	aggtggtgga	tctggaggcg	gtggaagcgc	gcgcaacgga	720
gacgactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	780
gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	840

- 172 046387

atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	900
ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	960
cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	1020
ttagccaaag	actgccactg	catatga				1047

<210> 27 <211> 348 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 27

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val LeuHis

70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser AsnLys

9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Thr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu AsnAsn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe PheLeu

165 170175

- 173 046387

Tyr

Ser

Asp

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys

Ser

210

Leu

Ser

Leu

Ser

Pro

215

Gly

Gly 220

Ser

Gly

Gly 225

Ser

Gly

Gly 230

Ser

Gly

235

Ser

Ala

Arg

Asn

Gly 240

Asp

Cys

Pro

Leu

245

Gly

Pro

Gly

Arg

Cys 250

Cys

Arg

Leu

His

Thr

255

Val

Arg

Ala

Ser

Leu

260

Glu

Asp

Leu

Gly

Trp 265

Ala

Asp

Trp

Val

Leu

270

Ser

Pro

Arg

Glu

Val

275

Gln

Val

Thr

Met

Cys 280

Ile

Gly

Ala

Cys

Pro

285

Ser

Gln

Phe

Arg

Ala

290

Ala

Asn

Met

His

Ala

295

Gln

Ile

Lys

Thr

Ser

300

Leu

His

Arg

Leu

Lys

305

Pro

Asp

Thr

Val

Pro

310

Ala

Pro

Cys

Val

315

Pro

Ala

Ser

Tyr

Asn

320

Pro

Met

Val

Leu

Ile

325

Gln

Lys

Thr

Asp

Thr

330

Gly

Val

Ser

Leu

Gln

335

Thr

Tyr

Asp

Leu

340

Leu

Ala

Lys

Asp

Cys 345

His

Cys

Ile <210> 28 <211> 230 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 28

Gly Gly Gly Glu Arg Lys Ser Ser Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala

5 1015

Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys ProLys

2530

- 174 046387

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

40

Pro Glu Val

Thr Cys Val Val Val

Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp

5560

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 65 70 7580

Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp 85 9095

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu

100 105110

Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg

115 120125

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys

130 135140

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

145 150 155160

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

165 170175

Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

180 185190

Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser

195 200205

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

210 215220

Leu Ser Leu Ser Pro Gly

225230 <210> 29 <211> 227 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид

- 175 046387 <400> 29

Glu Arg Lys Ser Ser 1 5

Val Glu Cys Pro Pro

Cys Pro Ala Pro Pro

Ala Gly Pro Ser Val

Phe Leu Phe Pro Pro

Lys Pro Lys Asp Thr

Met Ile Ser Arg Thr 35

Pro Glu Val Thr Cys 40

Val Val Val Asp Val 45

His Glu Asp Pro Glu 50

Val Gln Phe Asn Trp 55

Tyr Val Asp Gly Val 60

Val His Asn Ala Lys 65

Thr Lys Pro Arg Glu 70

Glu Gln Phe Asn Ser 75

Phe Arg Val Val Ser 85

Val Leu Thr Val Val

His Gln Asp Trp Leu

Gly Lys Glu Tyr Lys

100

Cys Lys Val Ser Asn

105

Lys Gly Leu Pro Ala

110

Ile Glu Lys Thr Ile 115

Ser Lys Thr Lys Gly 120

Gln Pro Arg Glu Pro 125

Val Tyr Thr Leu Pro

130

Pro Ser Arg Glu Glu 135

Met Thr Lys Asn Gln 140

Ser Leu Thr Cys Leu 145

Val Lys Gly Phe Tyr 150

Pro Ser Asp Ile Ala 155

Glu Trp Glu Ser Asn

165

Gly Gln Pro Glu Asn

170

Asn Tyr Lys Thr Thr

175

Pro Met Leu Asp Ser

180

Asp Gly Ser Phe Phe

185

Leu Tyr Ser Lys Leu

190

Val Asp Lys Ser Arg

195

Trp Gln Gln Gly Asn

200

Val Phe Ser Cys Ser 205

Met His Glu Ala Leu

210

His Asn His Tyr Thr

215

Gln Lys Ser Leu Ser 220

Val

Leu

Ser

Glu

Thr 80

Asn

Pro

Gln

Val

Val 160

Pro

Thr

Val

Leu

Ser Pro Gly 225 <210> 30 <211> 21

- 176 046387 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 30

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

5 10 15

Gly Gly Gly Gly Ser <210> 31 <211> 1833 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 31 ggaggtggag	agcgcaaatc	ttctgtcgag	tgcccaccgt	gcccagcacc	acctgtggca	60
ggaccgtcag	tcttcctctt	ccccccaaaa	cccaaggaca	ccctcatgat	ctcccggacc	120
cctgaggtca	cgtgcgtggt	ggtggacgtg	agccacgaag	accccgaggt	ccagttcaac	180
tggtacgtgg	acggcgtgga	ggtgcataat	gccaagacaa	aaccacggga	ggagcagttc	240
aacagcacgt	tccgtgtggt	cagcgtcctc	accgttgtgc	accaggactg	gctgaacggc	300
aaggagtaca	agtgcaaggt	ctccaacaaa	ggcctcccag	cccccatcga	gaaaaccatc	360
tccaaaacca	aagggcagcc	ccgagaacca	caggtgtaca	ccctgccccc	atcccgggag	420
gagatgacca	agaaccaggt	cagcctgacc	tgcctggtca	aaggcttcta	ccccagcgac	480
atcgccgtgg	agtgggagag	caatgggcag	ccggagaaca	actacaagac	cacacctccc	540
atgctggact	ccgacggctc	cttcttcctc	tacagcaagc	tcaccgtgga	caagagcagg	600
tggcagcagg	ggaacgtctt	ctcatgctcc	gtgatgcatg	aggctctgca	caaccactac	660
acgcagaaga	gcctctccct	gtctccgggt	ggaggtggcg	gtagcggtgg	cggaggttca	720
ggtggcggcg	gaagcggtgg	aggaggttca	gagcggaaat	ccagcgttga	atgtcctccg	780
tgccctgctc	cacccgtcgc	ggggcctagt	gtcttccttt	tccctccaaa	accaaaggat	840
acactgatga	tcagccggac	ccccgaggtt	acgtgcgtcg	tcgtcgatgt	ctcccacgag	900
gatccagagg	tccaattcaa	ctggtacgtg	gacggggtcg	aggtgcataa	tgcaaagaca	960
aagccacggg	aagagcagtt	taactctact	ttccgcgtgg	tttctgtgct	gaccgtggtg	1020
caccaagatt	ggctcaacgg	caaggagtac	aagtgcaagg	taagcaataa	ggggctccct	1080

- 177 046387

gcccccattg	agaagactat	ctccaagaca	aagggacagc	cacgcgagcc	acaagtctat	1140
acactccccc	cttcccgcga	agaaatgacc	aagaatcagg	ttagcctgac	atgcttggtt	1200
aagggtttct	acccctctga	catagccgtg	gagtgggaga	gcaatggaca	accagagaac	1260
aactacaaga	ccaccccacc	catgctggat	agcgacggtt	cattctttct	gtatagtaag	1320
cttaccgtgg	acaagtcccg	gtggcaacaa	ggaaatgtct	tttcatgctc	tgtgatgcac	1380
gaggccttgc	ataatcacta	tactcagaag	agcttgagcc	tcagccccgg	atctggaggt	1440
ggcggatccg	ggggcggtgg	aagcggaggt	ggtggatcgg	gaggcggtgg	aagcgcgcgc	1500
aacggcgacc	actgtccgct	cgggcccgga	cgttgctgcc	gtctgcacac	ggtccgcgcg	1560
tcgctggaag	acctgggctg	ggccgattgg	gtgctgtcgc	cacgggaggt	gcaagtgacc	1620
atgtgcatcg	gcgcgtgccc	gagccagttc	cgggcggcaa	acatgcacgc	gcagatcaag	1680
acgagcctgc	accgcctgaa	gcccgacacg	gtgccagcgc	cctgctgcgt	gcccgccagc	1740
tacaatccca	tggtgctcat	tcaaaagacc	gacaccgggg	tgtcgctcca	gacctatgat	1800
gacttgttag	ccaaagactg	ccactgcata	tga			1833

<210> 32 <211> 610 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 32

Gly Gly Gly Glu Arg Lys Ser Ser Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala

5 1015

Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 20 2530

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 35 4045

Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 50 5560

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 65 70 7580

Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp 85 9095

- 178 046387

Trp Leu Asn Gly Lys

100

Glu Tyr Lys Cys Lys

105

Val Ser Asn Lys Gly

110

Pro Ala Pro Ile Glu

115

Lys Thr Ile Ser Lys

120

Thr Lys Gly Gln Pro

125

Glu Pro Gln Val Tyr

130

Thr Leu Pro Pro Ser

135

Arg Glu Glu Met Thr 140

Asn Gln Val Ser Leu 145

Thr Cys Leu Val Lys 150

Gly Phe Tyr Pro Ser 155

Ile Ala Val Glu Trp

165

Glu Ser Asn Gly Gln

170

Pro Glu Asn Asn Tyr

175

Thr Thr Pro Pro Met

180

Leu Asp Ser Asp Gly

185

Ser Phe Phe Leu Tyr

190

Lys Leu Thr Val Asp

195

Lys Ser Arg Trp Gln

200

Gln Gly Asn Val Phe 205

Cys Ser Val Met His

210

Glu Ala Leu His Asn

215

His Tyr Thr Gln Lys

220

Leu Ser Leu Ser Pro 225

Gly Gly Gly Gly Gly 230

Ser Gly Gly Gly Gly 235

Gly Gly Gly Gly Ser

245

Gly Gly Gly Gly Ser

250

Glu Arg Lys Ser Ser

255

Glu Cys Pro Pro Cys

260

Pro Ala Pro Pro Val

265

Ala Gly Pro Ser Val

270

Leu Phe Pro Pro Lys

275

Pro Lys Asp Thr Leu 280

Met Ile Ser Arg Thr 285

Glu Val Thr Cys Val

290

Val Val Asp Val Ser

295

His Glu Asp Pro Glu

300

Gln Phe Asn Trp Tyr 305

Val Asp Gly Val Glu 310

Val His Asn Ala Lys 315

Lys Pro Arg Glu Glu

325

Gln Phe Asn Ser Thr

330

Phe Arg Val Val Ser

335

Leu Thr Val Val His

340

Gln Asp Trp Leu Asn

345

Gly Lys Glu Tyr Lys

350

Leu

Arg

Lys

Asp 160

Lys

Ser

Ser 240

Val

Phe

Pro

Val

Thr 320

Val

Cys

- 179 046387

Lys Val Ser Asn Lys

355

Gly Leu Pro Ala Pro 360

Ile Glu Lys Thr Ile

365

Lys Thr Lys Gly Gln

370

Pro Arg Glu Pro Gln 375

Val Tyr Thr Leu Pro

380

Ser Arg Glu Glu Met 385

Thr Lys Asn Gln Val 390

Ser Leu Thr Cys Leu 395

Lys Gly Phe Tyr Pro

405

Ser Asp Ile Ala Val

410

Glu Trp Glu Ser Asn

415

Gln Pro Glu Asn Asn

420

Tyr Lys Thr Thr Pro

425

Pro Met Leu Asp Ser

430

Gly Ser Phe Phe Leu 435

Tyr Ser Lys Leu Thr 440

Val Asp Lys Ser Arg

445

Gln Gln Gly Asn Val

450

Phe Ser Cys Ser Val 455

Met His Glu Ala Leu

460

Asn His Tyr Thr Gln 465

Lys Ser Leu Ser Leu 470

Ser Pro Gly Ser Gly 475

Gly Gly Ser Gly Gly

485

Gly Gly Ser Gly Gly

490

Gly Gly Ser Gly Gly

495

Gly Ser Ala Arg Asn

500

Gly Asp His Cys Pro

505

Leu Gly Pro Gly Arg

510

Cys Arg Leu His Thr 515

Val Arg Ala Ser Leu

520

Glu Asp Leu Gly Trp 525

Asp Trp Val Leu Ser

530

Pro Arg Glu Val Gln

535

Val Thr Met Cys Ile

540

Ala Cys Pro Ser Gln 545

Phe Arg Ala Ala Asn 550

Met His Ala Gln Ile 555

Thr Ser Leu His Arg

565

Leu Lys Pro Asp Thr

570

Val Pro Ala Pro Cys

575

Val Pro Ala Ser Tyr

580

Asn Pro Met Val Leu

585

Ile Gln Lys Thr Asp

590

Gly Val Ser Leu Gln

595

Thr Tyr Asp Asp Leu 600

Leu Ala Lys Asp Cys 605

Ser

Pro

Val 400

Gly

Asp

Trp

His

Gly 480

Gly

Cys

Ala

Gly

Lys 560

Cys

Thr

His

- 180 046387

Cys Ile

610 <210> 33 <211> 218 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 33

Gly Gly Gly Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro

5 1015

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 20 2530

Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn 35 4045

Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 50 5560

Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 65 70 7580

Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 85 9095

Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys

100 105110

Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu

115 120125

Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe

130 135140

Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu

145 150 155160

Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe

165 170175

Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly

180 185190

- 181 046387

Asn Val Phe Ser Cys 195

Ser Val Met

200

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr

205

Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 34 <211> 25 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 34

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

5 10 15

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 20 25 <210> 35 <211> 215 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 35

Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro

5 1015

Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 20 2530

Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val

4045

Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 50 5560

Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln 65 70 7580

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly 85 9095

- 182 046387

Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro

100 105110

Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr

115 120125

Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser

130 135140

Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr

145 150 155160

Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr

165 170175

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe

180 185190

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys

195 200205

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 210215 <210> 36 <211> 1809 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 36 ggcggtggag	ctccgccggt	ggctggaccc	tcagtgttcc	tctttccacc	gaagccgaag	60
gacaccctta	tgattagccg	gaccccagag	gtcacttgcg	tcgtcgtgga	cgtgtcccat	120
gaggatcccg	aagtgcagtt	taactggtat	gtggacggag	tggaggtcca	taacgccaag	180
accaagccaa	gggaagaaca	gttcaatagc	accttccggg	tggtgtccgt	gctcaccgtg	240
gtgcatcaag	actggctgaa	tggcaaagag	tacaaatgta	aggtgtcaaa	caaggggctc	300
ccagccccta	ttgaaaagac	catctcaaag	actaagggac	agccacgcga	acctcaagtg	360
tataccctcc	cgccttcacg	cgaagaaatg	actaagaatc	aggtcagcct	tacttgtctg	420
gtcaagggct	tctacccgag	cgacattgca	gtcgaatggg	agagcaatgg	tcagccagag	480
aataactaca	agaccactcc	tcccatgctt	gatagcgatg	gaagcttttt	cctttacagc	540
aagcttactg	tggataagtc	tcgctggcaa	cagggaaatg	tgttcagctg	ttcagtgatg	600

- 183 046387

catgaagcac	tccacaatca	ttacacccag	aagtcactca	gcctctcacc	cggaggagga	660
ggcggttctg	gtggaggagg	gtctggaggt	ggagggagcg	gcggaggcgg	gtctggcggt	720
ggtgggtctg	agaggaagtc	atcagtggaa	tgcccaccat	gccctgctcc	tcccgtggcc	780
ggtccgagcg	tgtttctctt	cccacctaag	cccaaggaca	ctctgatgat	ctcacggact	840
ccggaagtga	cttgtgtggt	ggtggacgtg	tctcatgagg	accctgaagt	gcagttcaac	900
tggtacgtgg	acggcgtgga	ggtgcacaat	gctaagacca	agcctagaga	ggaacagttc	960
aattccacct	ttcgcgtggt	gagcgtcctg	accgtcgtgc	accaggactg	gcttaacgga	1020
aaggaataca	agtgcaaggt	gtccaacaaa	ggccttccag	ctcccattga	gaaaaccatc	1080
tctaaaacta	agggtcaacc	aagggaaccc	caagtctaca	ccctccctcc	gtctagagaa	1140
gagatgacca	aaaaccaggt	gtccctgacc	tgtctggtga	agggatttta	cccctcagac	1200
atcgccgtgg	agtgggaaag	caacggacag	cccgaaaaca	actataagac	tacccctcct	1260
atgctggact	cagacggatc	tttcttcctc	tatagcaagc	tcactgtgga	caaatccaga	1320
tggcaacaag	ggaatgtgtt	ctcatgcagc	gtgatgcacg	aggctcttca	caaccactat	1380
acccagaaga	gcctgtctct	ttcacctggt	tccggaggtg	gtgggagcgg	agggggtgga	1440
tcaggtggtg	gagggtccgg	aggcggagga	tccgcacgga	atggcgacca	ctgtccactg	1500
ggacccggaa	gatgttgtcg	cctccacacc	gtgagggcct	ctctggagga	ccttggctgg	1560
gccgactggg	tcctgtcacc	tcgggaggtc	caagtcacca	tgtgtatcgg	agcctgcccc	1620
agccaattca	gagcagcaaa	tatgcacgca	cagattaaga	ccagcctgca	tcggcttaaa	1680
cctgatactg	tgccggctcc	ttgttgcgtg	ccagcatctt	acaacccgat	ggtgctgatc	1740
cagaaaaccg	ataccggtgt	ctccctccag	acttacgacg	acctccttgc	aaaggactgc	1800

1809 cattgcatc <210> 37 <211> 591 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 37

Gly Gly Gly Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro

5 10 15

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 20 25 30

- 184 046387

Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu

40

Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His

55

Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg 65 70

Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 85

Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu

100 105

Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

115 120

Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

130 135

Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

145 150

Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met

165

Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

180 185

Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

195 200

Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

210 215

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

225 230

Gly Gly Ser Ala Pro Pro Val Ala Gly

245

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

260 265

Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu

275 280

Pro Glu Val Gln Phe Asn

Ala Lys Thr Lys Pro Arg 60

Val Ser Val Leu Thr Val

80

Tyr Lys Cys Lys Val Ser 95

Thr Ile Ser Lys Thr Lys

110

Leu Pro Pro Ser Arg Glu

125

Cys Leu Val Lys Gly Phe

140

Ser Asn Gly Gln Pro Glu

155 160

Asp Ser Asp Gly Ser Phe

175

Ser Arg Trp Gln Gln Gly

190

Ala Leu His Asn His Tyr

205

Gly Gly Gly Gly Ser Gly

220

Gly Gly Gly Ser Gly Gly

235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro

255

Arg Thr Pro Glu Val Thr

270

Pro Glu Val Gln Phe Asn

285

- 185 046387

Trp

Glu 305

Val

Asn

Gly

Glu

Tyr 385

Asn

Phe

Asn

Thr

Gly 465

Arg

His

Leu

Ser

Tyr Val Asp Gly Val 290

Glu Gln Phe Asn Ser

310

His Gln Asp Trp Leu

325

Lys Gly Leu Pro Ala

340

Gln Pro Arg Glu Pro

355

Met Thr Lys Asn Gln 370

Pro Ser Asp Ile Ala

390

Asn Tyr Lys Thr Thr

405

Leu Tyr Ser Lys Leu 420

Val Phe Ser Cys Ser

435

Gln Lys Ser Leu Ser 450

Gly Gly Gly Ser Gly

470

Asn Gly Asp His Cys

485

Thr Val Arg Ala Ser 500

Ser Pro Arg Glu Val

515

Gln Phe Arg Ala Ala 530

Glu Val His Asn Ala 295

Thr Phe Arg Val Val

315

Asn Gly Lys Glu Tyr

330

Pro Ile Glu Lys Thr 345

Gln Val Tyr Thr Leu

360

Val Ser Leu Thr Cys 375

Val Glu Trp Glu Ser

395

Pro Pro Met Leu Asp

410

Thr Val Asp Lys Ser 425

Val Met His Glu Ala

440

Leu Ser Pro Gly Ser 455

Gly Gly Gly Ser Gly

475

Pro Leu Gly Pro Gly

490

Leu Glu Asp Leu Gly 505

Gln Val Thr Met Cys 520

Asn Met His Ala Gln 535

Lys Thr Lys Pro Arg 300

Ser Val Leu Thr Val

320

Lys Cys Lys Val Ser

335

Ile Ser Lys Thr Lys 350

Pro Pro Ser Arg Glu

365

Leu Val Lys Gly Phe 380

Asn Gly Gln Pro Glu

400

Ser Asp Gly Ser Phe

415

Arg Trp Gln Gln Gly

430

Leu His Asn His Tyr 445

Gly Gly Gly Gly Ser 460

Gly Gly Gly Ser Ala

480

Arg Cys Cys Arg Leu

495

Trp Ala Asp Trp Val 510

Ile Gly Ala Cys Pro

525

Ile Lys Thr Ser Leu 540

- 186 046387

His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val

545 550

Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala

555 560

Ser Tyr Asn Pro Met Val

565

Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val

570 575

Ser

Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys

580 585 590

Ile <210> 38 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 38

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val LeuHis

70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser AsnLys

9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

- 187 046387

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210215 <210> 39 <211> 217 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 39

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

- 188 046387

Ser 145

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr

Asp

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Asp

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Asp

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys

Ser

210

Leu

Ser

Leu

Ser

Pro

215

Gly

Lys <210> 40 <211> 23 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 40

Gly Ser Gly Ser Ala Thr Gly Gly Ser Gly Ser Val Ala Ser Ser Gly

5 10 15

Ser Gly Ser Ala Thr His Leu <210> 41 <211> 1053 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 41 gccccagagc	tgcttggtgg	accatccgtg	ttcctgtttc	ctccaaagcc	gaaggacacc	60
ctgatgatct	caagaactcc	ggaagtgact	tgcgtcgtcg	tggacgtgtc	acatgaggat	120
ccagaggtca	agttcaattg	gtatgtggac	ggagtggaag	tgcataacgc	caagaccaaa	180
ccccgcgaag	aacagtacaa	tagcacctac	cgcgtggtga	gcgtccttac	tgtgctccac	240
caggactggc	ttaatgggaa	ggaatacaag	tgtaaggtgt	ccaacaaggc	cctccccgct	300
cccatcgaaa	agaccatctc	aaaggcaaag	gggcaaccaa	gggaacctca	agtgtacacc	360

- 189 046387

ctgcctccga	gcaggaagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacttg	tctcgtgaag	420
ggcttctatc	ccagcgatat	tgctgtggaa	tgggagtcaa	atggccagcc	cgagaataac	480
tacaaaacta	ccccacccgt	gctgaaatct	gatgggtcct	tcttccttta	ctccaagctg	540
accgtggaca	agagccgctg	gcaacaaggc	aatgtcttta	gctgctcagt	gatgcatgag	600
gctctccata	atcactacac	tcagaagtca	ctgtccctgt	cacctggcgg	atccggttct	660
gctactggtg	gttccggctc	cgtcgcaagc	tctggttcag	gcagtgcgac	tcatctggca	720
cggaacgggg	accattgtcc	cctgggacct	ggtcggtgct	gccggcttca	caccgtcaga	780
gcctctctgg	aggaccttgg	atgggctgat	tgggtgctga	gccctcggga	ggtgcaagtc	840
accatgtgca	tcggggcctg	ccctagccag	ttccgcgcag	ccaacatgca	cgctcagatc	900
aaaacctctc	ttcacagact	gaagcccgac	accgtgccag	caccttgctg	tgtgccggcc	960
tcttataacc	ccatggtcct	cattcagaaa	accgacaccg	gagtgtcact	tcagacttac	1020
gatgacctcc	tggccaagga	ctgccactgc	ata			1053

<210> 42 <211> 351 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 42

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

- 190 046387

Pro Arg Glu

115

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu

120 125

Thr Lys Asn

130

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

135 140

Ser Asp Ile 145

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

150 155

Tyr Lys Thr

Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe

165 170 175

Tyr Ser Lys

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

180 185 190

Phe Ser Cys

195

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

200 205

Lys Ser Leu

210

Ser Leu Ser Pro Gly Gly Ser Gly Ser Ala Thr Gly

215 220

Ser Gly Ser 225

Val Ala Ser Ser Gly Ser Gly Ser Ala Thr His Leu

230 235

Arg Asn Gly

Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg

245 250 255

His Thr Val

Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp

260 265 270

Leu Ser Pro

275

Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys

280 285

Ser Gln Phe

290

Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser

295 300

His Arg Leu 305

Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro

310 315

Ser Tyr Asn

Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val

325 330 335

Met

Pro

Asn 160

Leu

Val

Gln

Gly

Ala 240

Leu

Val

Pro

Leu

Ala 320

Ser

Leu Gln Thr

Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

340 345 350 <210> 43

- 191 046387 <211> 651 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 43 gcgccggaac	tgctgggcgg	cccgagcgtg	tttctgtttc	cgccgaaacc	gaaagatacc	60
ctgatgatta	gccgcacccc	ggaagtgacc	tgcgtggtgg	tggatgtgag	ccatgaagat	120
ccggaagtga	aatttaactg	gtatgtggat	ggcgtggaag	tgcataacgc	gaaaaccaaa	180
ccgcgcgaag	aacagtataa	cagcacctat	cgcgtggtga	gcgtgctgac	cgtgctgcat	240
caggattggc	tgaacggcaa	agaatataaa	tgcaaagtga	gcaacaaagc	gctgccggcg	300
ccgattgaaa	aaaccattag	caaagcgaaa	ggccagccgc	gcgaaccgca	ggtgtatacc	360
ctgccgccga	gccgcgaaga	aatgaccaaa	aaccaggtga	gcctgacctg	cctggtgaaa	420
ggcttttatc	cgagcgatat	tgcggtggaa	tgggaaagca	acggccagcc	ggaaaacaac	480
tatgatacca	ccccgccggt	gctggatagc	gatggcagct	tttttctgta	tagcgatctg	540
accgtggata	aaagccgctg	gcagcagggc	aacgtgttta	gctgcagcgt	gatgcatgaa	600
gcgctgcata	accattatac	ccagaaaagc	ctgagcctga	gcccgggcaa	a	651

<210> 44 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 44

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His

70 7580

- 192 046387

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Thr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210215 <210> 45 <211> 984 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 45 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgaccacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480

- 193 046387

tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgc	gcgcaacgga	660
gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	720
gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	780
atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	840
ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	900
cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	960
ttagccaaag	actgccactg	cata				984

<210> 46 <211> 328 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 46

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Thr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

- 194 046387

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

130 135

Cys Leu Val

Lys Gly Phe Tyr Pro

140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

145 150

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

155 160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val

165

Leu Asp

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

170 175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185 190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ala Arg Asn Gly Asp His Cys Pro

210 215 220

Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu

225 230 235 240

Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln

245 250 255

Val Thr Met Cys

260

Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn

265 270

Met His Ala Gln

275

Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr

280 285

Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala

290 295

Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu

300

Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

305 310 315 320

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 47 <211> 217 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 47

- 195 046387

Ala Pro Glu Leu Leu

5

Gly Gly Pro Ser Val

Phe Leu Phe Pro Pro

Pro Lys Asp Thr Leu

Met Ile Ser Arg Thr

Pro Glu Val Thr Cys

Val Val Asp Val Ser 35

His Glu Asp Pro Glu 40

Val Lys Phe Asn Trp 45

Val Asp Gly Val Glu 50

Val His Asn Ala Lys 55

Thr Lys Pro Arg Glu 60

Gln Tyr Asn Ser Thr 65

Tyr Arg Val Val Ser 70

Val Leu Thr Val Leu 75

Gln Asp Trp Leu Asn

Gly Lys Glu Tyr Lys

Cys Lys Val Ser Asn 95

Ala Leu Pro Ala Pro

100

Ile Glu Lys Thr Ile

105

Ser Lys Ala Lys Gly

110

Pro Arg Glu Pro Gln 115

Val Tyr Thr Leu Pro

120

Pro Ser Arg Lys Glu 125

Thr Lys Asn Gln Val

130

Ser Leu Thr Cys Leu 135

Val Lys Gly Phe Tyr

140

Ser Asp Ile Ala Val 145

Glu Trp Glu Ser Asn 150

Gly Gln Pro Glu Asn 155

Tyr Lys Thr Thr Pro

165

Pro Val Leu Lys Ser

170

Asp Gly Ser Phe Phe

175

Tyr Ser Lys Leu Thr

180

Val Asp Lys Ser Arg

185

Trp Gln Gln Gly Asn

190

Phe Ser Cys Ser Val 195

Met His Glu Ala Leu

200

His Asn His Tyr Thr 205

Lys

Val

Tyr

Glu

His 80

Lys

Gln

Met

Pro

Asn 160

Leu

Val

Gln

Lys Ser Leu Ser Leu 210

Ser Pro Gly Lys

215 <210> 48 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник

- 196 046387 <223>

/примечание=’’описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид <400> 48

Ala Pro Glu Leu 1

Leu Gly Gly Pro 5

Ser Val Phe Leu

Phe Pro Pro Lys 15

Pro Lys Asp Thr

Leu Met Ile Ser

Arg Thr Pro Glu 25

Val Thr Cys Val 30

Val Val Asp Val

Ser His Glu Asp 40

Pro Glu Val Lys

Phe Asn Trp Tyr 45

Val Asp Gly Val 50

Glu Val His Asn

Ala Lys Thr Lys 60

Pro Arg Glu Glu

Gln Tyr Asn Ser 65

Thr Tyr Arg Val 70

Val Ser Val Leu

Thr Val Leu His

Gln Asp Trp Leu

Asn Gly Lys Glu 85

Tyr Lys Cys Lys 90

Val Ser Asn Lys

Ala Leu Pro Ala

100

Pro Ile Glu Lys

Thr Ile Ser Lys 105

Ala Lys Gly Gln 110

Pro Arg Glu Pro

115

Gln Val Tyr Thr

120

Leu Pro Pro Ser

Arg Glu Glu Met 125

Thr Lys Asn Gln 130

Val Ser Leu Thr

135

Cys Leu Val Lys

140

Gly Phe Tyr Pro

Ser Asp Ile Ala 145

Val Glu Trp Glu

150

Ser Asn Gly Gln

155

Pro Glu Asn Asn

160

Tyr Asp Thr Thr

Pro Pro Val Leu 165

Asp Ser Asp Gly

170

Ser Phe Phe Leu

175

Tyr Ser Asp Leu

180

Thr Val Asp Lys

Ser Arg Trp Gln 185

Gln Gly Asn Val

190

Phe Ser Cys Ser

195

Val Met His Glu

200

Ala Leu His Asn

His Tyr Thr Gln 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 49 <211> 984 <212> ДНК

- 197 046387 <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид” <400> 49

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgc	gcgcaacgga	660
gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	720
gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	780
atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	840
ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	900
cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	960
ttagccaaag	actgccactg	cata				984

<210> 50 <211> 328 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид” <400> 50

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 10 15

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 25 30

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

- 198 046387

40 45

Val

Gln 65

Gln

Ala

Pro

Thr

Ser 145

Tyr

Phe

Lys

Leu 225

Glu

Val

Met

Asp Gly Val Glu Val 50

His Asn Ala Lys Thr 55

Lys Pro Arg Glu Glu 60

Tyr Asn Ser Thr Tyr

Arg Val Val Ser Val 75

Leu Thr Val Leu His

Asp Trp Leu Asn Gly

Leu Pro Ala Pro Ile

100

Arg Glu Pro Gln Val 115

Lys Asn Gln Val Ser 130

Asp Ile Ala Val Glu

150

Asp Thr Thr Pro Pro

165

Ser Asp Leu Thr Val

180

Ser Cys Ser Val Met

195

Ser Leu Ser Leu Ser 210

Gly Pro Gly Arg Cys

230

Asp Leu Gly Trp Ala

245

Thr Met Cys Ile Gly 260

His Ala Gln Ile Lys

275

Lys Glu Tyr Lys Cys

Lys Val Ser Asn Lys

Glu Lys Thr Ile Ser 105

Lys Ala Lys Gly Gln

110

Tyr Thr Leu Pro Pro

120

Leu Thr Cys Leu Val 135

Trp Glu Ser Asn Gly

155

Val Leu Asp Ser Asp

170

Asp Lys Ser Arg Trp 185

His Glu Ala Leu His

200

Pro Gly Ala Arg Asn 215

Cys Arg Leu His Thr

235

Asp Trp Val Leu Ser

250

Ala Cys Pro Ser Gln 265

Thr Ser Leu His Arg

280

Ser Arg Glu Glu Met

125

Lys Gly Phe Tyr Pro 140

Gln Pro Glu Asn Asn

160

Gly Ser Phe Phe Leu

175

Gln Gln Gly Asn Val

190

Asn His Tyr Thr Gln

205

Gly Asp His Cys Pro 220

Val Arg Ala Ser Leu

240

Pro Arg Glu Val Gln

255

Phe Arg Ala Ala Asn

270

Leu Lys Pro Asp Thr

285

- 199 046387

Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro

290 295

Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu

300

Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

305 310 315 320

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 51 <211> 654 <212> ДНК <213>

Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 51 gcacctgaac tcctgggggg accgtcagtc ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc60 ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac120 cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag180 ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac240 caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc300 cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc360 ctgcccccat cccggaagga gatgaccaag aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa420 ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac480 tacaagacca cgcctcccgt gctgaagtcc gacggctcct tcttcctcta tagcaagctc540 accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag600 gctctgcaca accactacac gcagaagagc ctctccctgt ctccgggtaa atga654 <210> 52 <211> 112 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 52

Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg

5 10 15

Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp 20 25 30

- 200 046387

Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln

40

Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys 45

Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn

55

Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser 60

Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr 65 70

Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro

80

Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu 85

Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val

95

Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

100

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

105 110 <210> 53 <211> 984 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 53

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgc	gcgcgacgga	660
gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	720
gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	780
atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	840
ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	900

- 201 046387 cccatggtgc tcattcaaaa gaccgacacc ggggtgtcgc tccagaccta tgatgacttg 960 ttagccaaag actgccactg cata

984 <210> 54 <211> 328 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 54

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

- 202 046387

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His

195 200

Asn His Tyr Thr Gln

205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro

210 215 220

Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu

225 230 235 240

Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val

245

Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln

250 255

Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn

260 265 270

Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr

275 280 285

Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu

290 295 300

Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

305 310 315 320

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 55 <211> 109 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 55

Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr

5 1015

Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val LeuSer

2530

Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln 35 4045

Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg

5560

- 203 046387

Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala 65 70

Pro Cys Cys

Val Pro Ala Ser Tyr

Asn Pro Met Val

Thr Tyr Asp Asp

100

Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln

90 95

Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

105 <210> 56 <211> 975 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 56

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	agaccactgt	660
ccgctcgggc	ccgggcgttg	ctgccgtctg	cacacggtcc	gcgcgtcgct	ggaagacctg	720
ggctgggccg	attgggtgct	gtcgccacgg	gaggtgcaag	tgaccatgtg	catcggcgcg	780
tgcccgagcc	agttccgggc	ggcaaacatg	cacgcgcaga	tcaagacgag	cctgcaccgc	840
ctgaagcccg	acacggtgcc	agcgccctgc	tgcgtgcccg	ccagctacaa	tcccatggtg	900
ctcattcaaa	agaccgacac	cggggtgtcg	ctccagacct	atgatgactt	gttagccaaa	960
gactgccact	gcata					975

<210> 57 <211> 325 <212> PRT <213> Искусственная последовательность

- 204 046387 <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 57

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro

210 215220

- 205 046387

Gly 225

Arg

Cys

Arg

Leu

230

His

Thr

Val

Arg

Ala

235

Ser

Leu

Glu

Asp

Leu

240

Gly

Trp

Ala

Asp

Trp

245

Val

Leu

Ser

Pro

Arg 250

Glu

Val

Gln

Val

Thr

255

Met

Cys

Ile

Gly

Ala

260

Cys

Pro

Ser

Gln

Phe

265

Arg

Ala

Asn

Met

270

His

Ala

Gln

Ile

Lys 275

Thr

Ser

Leu

His

Arg 280

Leu

Lys

Pro

Asp

Thr

285

Val

Pro

Ala

Pro

Cys 290

Cys

Val

Pro

Ala

Ser

295

Tyr

Asn

Pro

Met

Val

300

Leu

Ile

Gln

Lys

Thr

305

Asp

Thr

Gly

Val

Ser

310

Leu

Gln

Thr

Tyr

Asp

315

Asp

Leu

Ala

Lys 320

Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 58 <211> 4 <212> PRT <213>

Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 58

Gly Gly Gly Gly <210> 59 <211> 996 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 59 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300

- 206 046387

cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
gcgcgcgacg	gagaccactg	tccgctcggg	cccgggcgtt	gctgccgtct	gcacacggtc	720
cgcgcgtcgc	tggaagacct	gggctgggcc	gattgggtgc	tgtcgccacg	ggaggtgcaa	780
gtgaccatgt	gcatcggcgc	gtgcccgagc	cagttccggg	cggcaaacat	gcacgcgcag	840
atcaagacga	gcctgcaccg	cctgaagccc	gacacggtgc	cagcgccctg	ctgcgtgccc	900
gccagctaca	atcccatggt	gctcattcaa	aagaccgaca	ccggggtgtc	gctccagacc	960
tatgatgact	tgttagccaa	agactgccac	tgcata			996

<210> 60 <211> 332 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 60

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

- 207 046387

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu

115 120 125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

130 135 140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

145 150 155

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

165 170 175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

180 185 190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

195 200 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ala Arg Asp

210 215 220

Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr

225 230 235

Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser

245 250 255

Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln

260 265 270

Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg

275 280 285

Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr

290 295 300

Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln

305 310 315

Met

Pro

Asn 160

Leu

Val

Gln

Gly

Val 240

Pro

Phe

Leu

Asn

Thr 320

Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 330 <210> 61 <211> 5 <212> PRT <213> Искусственная последовательность

- 208 046387 <220> <221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 61 Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 <210> 62 <211> 1002 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220> <221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид

<400> 62 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
tccgcgcgca	acggagacca	ctgtccgctc	gggcccgggc	gttgctgccg	tctgcacacg	720
gtccgcgcgt	cgctggaaga	cctgggctgg	gccgattggg	tgctgtcgcc	acgggaggtg	780
caagtgacca	tgtgcatcgg	cgcgtgcccg	agccagttcc	gggcggcaaa	catgcacgcg	840
cagatcaaga	cgagcctgca	ccgcctgaag	cccgacacgg	tgccagcgcc	ctgctgcgtg	900
cccgccagct	acaatcccat	ggtgctcatt	caaaagaccg	acaccggggt	gtcgctccag	960
acctatgatg	acttgttagc	caaagactgc	cactgcatat	ga		1002

<210> 63 <211> 333 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник

- 209 046387 <223>

/примечание=’’описание искусственной последовательности полипептид синтетический <400> 63

Ala Pro Glu Leu 1

Leu Gly Gly Pro 5

Ser Val Phe Leu

Phe Pro Pro Lys 15

Pro Lys Asp Thr

Leu Met Ile Ser

Arg Thr Pro Glu 25

Val Thr Cys Val 30

Val Val Asp Val

Ser His Glu Asp 40

Pro Glu Val Lys

Phe Asn Trp Tyr 45

Val Asp Gly Val 50

Glu Val His Asn

Ala Lys Thr Lys 60

Pro Arg Glu Glu

Gln Tyr Asn Ser 65

Thr Tyr Arg Val 70

Val Ser Val Leu

Thr Val Leu His

Gln Asp Trp Leu

Asn Gly Lys Glu 85

Tyr Lys Cys Lys 90

Val Ser Asn Lys

Ala Leu Pro Ala

100

Pro Ile Glu Lys

Thr Ile Ser Lys 105

Ala Lys Gly Gln 110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Ala Arg Asn

210 215220

Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr

225 230 235240

- 210 046387

Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu

245

Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser

250 255

Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met

260

Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln

265 270

Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala

275 280

Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg

285

Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala

290 295

Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr

300

Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys

305 310

Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln

315 320

Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys

325

Asp Cys His Cys Ile 330 <210> 64 <211> 10 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 64

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

5 10 <210> 65 <211> 1014 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 65

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360

- 211 046387

ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
tccggaggcg	gtggaagcgc	gcgcaacgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	720
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	780
tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	840
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	900
gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	960
ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	ttagccaaag	actgccactg	cata	1014

<210> 66 <211> 338 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 66

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

- 212 046387

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

210 215220

Gly Ser Ala Arg Asn Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys

225 230 235240

Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala

245 250255

Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly

260 265270

Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys

275 280285

Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys

290 295300

Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr

305 310 315320

Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His

325 330335

Cys Ile <210> 67 <211> 1014 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность

- 213 046387 <220>

<400> 67 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
tccggaggcg	gtggaagcgc	gcgcgacgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	720
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	780
tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	840
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	900
gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	960
ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	ttagccaaag	actgccactg	cata	1014

<210> 68 <211> 338 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 68

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

- 214 046387

Val

Gln 65

Gln

Ala

Pro

Thr

Ser 145

Tyr

Phe

Lys

Gly 225

Cys

Asp

Ala

Thr

Asp Gly Val Glu Val 50

Tyr Asn Ser Thr Tyr

Asp Trp Leu Asn Gly

Leu Pro Ala Pro Ile

100

Arg Glu Pro Gln Val 115

Lys Asn Gln Val Ser 130

Asp Ile Ala Val Glu

150

Asp Thr Thr Pro Pro

165

Ser Asp Leu Thr Val

180

Ser Cys Ser Val Met

195

Ser Leu Ser Leu Ser 210

Ser Ala Arg Asp Gly

230

Arg Leu His Thr Val

245

Trp Val Leu Ser Pro

260

Cys Pro Ser Gln Phe

275

Ser Leu His Arg Leu

His Asn Ala Lys Thr 55

Lys Pro Arg Glu Glu 60

Arg Val Val Ser Val 75

Leu Thr Val Leu His

Lys Glu Tyr Lys Cys

Lys Val Ser Asn Lys

Glu Lys Thr Ile Ser 105

Tyr Thr Leu Pro Pro 120

Leu Thr Cys Leu Val 135

Trp Glu Ser Asn Gly

155

Val Leu Asp Ser Asp

170

Asp Lys Ser Arg Trp 185

His Glu Ala Leu His

200

Pro Gly Gly Gly Gly 215

Asp His Cys Pro Leu

235

Arg Ala Ser Leu Glu

250

Arg Glu Val Gln Val

265

Arg Ala Ala Asn Met 280

Lys Pro Asp Thr Val

Lys Ala Lys Gly Gln

110

Ser Arg Glu Glu Met

125

Lys Gly Phe Tyr Pro 140

Gln Pro Glu Asn Asn

160

Gly Ser Phe Phe Leu

175

Gln Gln Gly Asn Val

190

Asn His Tyr Thr Gln

205

Gly Ser Gly Gly Gly 220

Gly Pro Gly Arg Cys

240

Asp Leu Gly Trp Ala

255

Thr Met Cys Ile Gly 270

His Ala Gln Ile Lys

285

Pro Ala Pro Cys Cys

- 215 046387

290 295300

Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr AspThr

305 310 315320

Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp CysHis

325 330335

Cys Ile <210> 69 <211> 5 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 69

Gly Gly Gly Gly Pro

5 <210> 70 <211> 999 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 70

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660

- 216 046387

cccgcgcgca	acggagacca	ctgtccgctc	gggcccgggc	gttgctgccg	tctgcacacg	720
gtccgcgcgt	cgctggaaga	cctgggctgg	gccgattggg	tgctgtcgcc	acgggaggtg	780
caagtgacca	tgtgcatcgg	cgcgtgcccg	agccagttcc	gggcggcaaa	catgcacgcg	840
cagatcaaga	cgagcctgca	ccgcctgaag	cccgacacgg	tgccagcgcc	ctgctgcgtg	900
cccgccagct	acaatcccat	ggtgctcatt	caaaagaccg	acaccggggt	gtcgctccag	960
acctatgatg	acttgttagc	caaagactgc	cactgcata			999

<210> 71 <211> 333 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 71

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

- 217 046387

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Pro Ala Arg Asn

210 215220

Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr

225 230 235240

Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser

245 250255

Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln

260 265270

Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg

275 280285

Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr

290 295300

Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln

305 310 315320

Thr Tyr Asp Asp

Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325330 <210> 72 <211> 10 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 72

Gly Gly Gly Gly Pro Gly Gly Gly Gly Pro

5 10 <210> 73 <211> 1017 <212> ДНК

- 218 046387 <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид”

<400> 73 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
cctggaggcg	gtggaccagc	gcgcaacgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	720
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	780
tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	840
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	900
gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	960
ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	ttagccaaag	actgccactg	catatga	1017

<210> 74 <211> 338 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид” <400> 74

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

- 219 046387

40 45

Val

Gln 65

Gln

Ala

Pro

Thr

Ser 145

Tyr

Phe

Lys

Gly 225

Cys

Asp

Ala

Asp Gly Val Glu Val 50

His Asn Ala Lys Thr 55

Lys Pro Arg Glu Glu 60

Tyr Asn Ser Thr Tyr

Arg Val Val Ser Val 75

Leu Thr Val Leu His

Asp Trp Leu Asn Gly

Leu Pro Ala Pro Ile

100

Arg Glu Pro Gln Val 115

Lys Asn Gln Val Ser 130

Asp Ile Ala Val Glu

150

Asp Thr Thr Pro Pro

165

Ser Asp Leu Thr Val

180

Ser Cys Ser Val Met

195

Ser Leu Ser Leu Ser 210

Pro Ala Arg Asn Gly

230

Arg Leu His Thr Val

245

Trp Val Leu Ser Pro 260

Cys Pro Ser Gln Phe

275

Lys Glu Tyr Lys Cys

Lys Val Ser Asn Lys

Glu Lys Thr Ile Ser 105

Lys Ala Lys Gly Gln

110

Tyr Thr Leu Pro Pro

120

Leu Thr Cys Leu Val 135

Trp Glu Ser Asn Gly

155

Val Leu Asp Ser Asp

170

Asp Lys Ser Arg Trp 185

His Glu Ala Leu His

200

Pro Gly Gly Gly Gly 215

Asp His Cys Pro Leu

235

Arg Ala Ser Leu Glu

250

Arg Glu Val Gln Val 265

Arg Ala Ala Asn Met

280

Ser Arg Glu Glu Met

125

Lys Gly Phe Tyr Pro 140

Gln Pro Glu Asn Asn

160

Gly Ser Phe Phe Leu

175

Gln Gln Gly Asn Val

190

Asn His Tyr Thr Gln

205

Gly Pro Gly Gly Gly 220

Gly Pro Gly Arg Cys

240

Asp Leu Gly Trp Ala

255

Thr Met Cys Ile Gly 270

His Ala Gln Ile Lys

285

- 220 046387

Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro

290 295

Asp Thr Val

Pro Ala Pro Cys Cys

300

Val

305

Pro

Ala

Ser

Tyr

Asn

310

Pro

Met

Val

Leu

Ile

315

Gln

Lys

Thr

Asp

Thr

320

Gly

Val

Ser

Leu

Gln

325

Thr

Tyr

Asp

Leu

330

Leu

Ala

Lys

Asp

Cys 335

His

Cys Ile <210> 75 <211> 5 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 75

Gly Gly Gly Gly Gln

5 <210> 76 <211> 1002 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 76 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
actgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660

- 221 046387

caggcgcgca	acggagacca	ctgtccgctc	gggcccgggc	gttgctgccg	tctgcacacg	720
gtccgcgcgt	cgctggaaga	cctgggctgg	gccgattggg	tgctgtcgcc	acgggaggtg	780
caagtgacca	tgtgcatcgg	cgcgtgcccg	agccagttcc	gggcggcaaa	catgcacgcg	840
cagatcaaga	cgagcctgca	ccgcctgaag	cccgacacgg	tgccagcgcc	ctgctgcgtg	900
cccgccagct	acaatcccat	ggtgctcatt	caaaagaccg	acaccggggt	gtcgctccag	960
acctatgatg	acttgttagc	caaagactgc	cactgcatat	ga		1002

<210> 77 <211> 333 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 77

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val LeuHis

70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser AsnLys

9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

- 222 046387

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Gln Ala Arg Asn

210 215220

Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr

225 230 235240

Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser

245 250255

Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln

260 265270

Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg

275 280285

Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr

290 295300

Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln

305 310 315320

Thr Tyr Asp Asp

Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325330 <210> 78 <211> 10 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 78

Gly Gly Gly Gly Gln Gly Gly Gly Gly Gln

5 10 <210> 79 <211> 1017

- 223 046387 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 79 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
cagggaggcg	gtggacaggc	gcgcaacgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	720
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	780
tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	840
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	900
gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	960
ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	ttagccaaag	actgccactg	catatga	1017

<210> 80 <211> 338 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид” <400> 80

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

- 224 046387

Val

Gln 65

Gln

Ala

Pro

Thr

Ser 145

Tyr

Phe

Lys

Gly 225

Cys

Asp

Ala

Val Asp Val Ser His 35

Asp Gly Val Glu Val 50

Tyr Asn Ser Thr Tyr

Asp Trp Leu Asn Gly

Leu Pro Ala Pro Ile

100

Arg Glu Pro Gln Val 115

Lys Asn Gln Val Ser 130

Asp Ile Ala Val Glu

150

Asp Thr Thr Pro Pro

165

Ser Asp Leu Thr Val

180

Ser Cys Ser Val Met

195

Ser Leu Ser Leu Ser 210

Gln Ala Arg Asn Gly

230

Arg Leu His Thr Val

245

Trp Val Leu Ser Pro 260

Cys Pro Ser Gln Phe

275

Glu Asp Pro Glu Val 40

His Asn Ala Lys Thr 55

Arg Val Val Ser Val 75

Lys Glu Tyr Lys Cys

Glu Lys Thr Ile Ser 105

Tyr Thr Leu Pro Pro 120

Leu Thr Cys Leu Val 135

Trp Glu Ser Asn Gly

155

Val Leu Asp Ser Asp

170

Asp Lys Ser Arg Trp 185

His Glu Ala Leu His

200

Pro Gly Gly Gly Gly 215

Asp His Cys Pro Leu

235

Arg Ala Ser Leu Glu

250

Arg Glu Val Gln Val 265

Arg Ala Ala Asn Met 280

Lys Phe Asn Trp Tyr 45

Lys Pro Arg Glu Glu 60

Leu Thr Val Leu His

Lys Val Ser Asn Lys

Lys Ala Lys Gly Gln

110

Ser Arg Glu Glu Met

125

Lys Gly Phe Tyr Pro 140

Gln Pro Glu Asn Asn

160

Gly Ser Phe Phe Leu

175

Gln Gln Gly Asn Val

190

Asn His Tyr Thr Gln

205

Gly Gln Gly Gly Gly 220

Gly Pro Gly Arg Cys

240

Asp Leu Gly Trp Ala

255

Thr Met Cys Ile Gly 270

His Ala Gln Ile Lys

285

- 225 046387

Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys

290 295300

Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr

305 310 315320

Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His

325 330335

Cys Ile <210> 81 <211> 1014 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 81

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
cagggaggcg	gtggacaggc	gcgcgacgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	720
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	780
tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	840
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	900
gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	960
ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	ttagccaaag	actgccactg	cata	1014

- 226 046387 <210> 82 <211> 338 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 82

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

- 227 046387

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Gln Gly Gly Gly

210 215220

Gly Gln Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys

225 230 235240

Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala

245 250255

Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly

260 265270

Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys

275 280285

Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys

290 295300

Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr

305 310 315320

Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His

325 330335

Cys Ile <210> 83 <211> 1005 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 83

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480

- 228 046387

tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
cagggaggcg	gtggacaggg	agaccactgt	ccgctcgggc	ccgggcgttg	ctgccgtctg	720
cacacggtcc	gcgcgtcgct	ggaagacctg	ggctgggccg	attgggtgct	gtcgccacgg	780
gaggtgcaag	tgaccatgtg	catcggcgcg	tgcccgagcc	agttccgggc	ggcaaacatg	840
cacgcgcaga	tcaagacgag	cctgcaccgc	ctgaagcccg	acacggtgcc	agcgccctgc	900
tgcgtgcccg	ccagctacaa	tcccatggtg	ctcattcaaa	agaccgacac	cggggtgtcg	960
ctccagacct	atgatgactt	gttagccaaa	gactgccact	gcata		1005

<210> 84 <211> 335 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 84

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val LeuHis

70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser AsnLys

9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

- 229 046387

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Gln Gly Gly Gly

210 215220

Gly Gln Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu

225 230 235240

His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val

245 250255

Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro

260 265270

Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu

275 280285

His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala

290 295300

Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser

305 310 315320

Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 330335 <210> 85 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 85

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

- 230 046387

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210215 <210> 86 <211> 217 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический

- 231 046387 полипептид” <400> 86 Ala Pro Glu Leu Leu 1 5

Gly Gly Pro Ser Val

Phe Leu Phe Pro Pro

Pro Lys Asp Thr Leu

Met Ile Ser Arg Thr 25

Pro Glu Val Thr Cys

Val Val Asp Val Ser 35

His Glu Asp Pro Glu 40

Val Lys Phe Asn Trp 45

Val Asp Gly Val Glu 50

Val His Asn Ala Lys 55

Thr Lys Pro Arg Glu 60

Gln Tyr Asn Ser Thr 65

Tyr Arg Val Val Ser 70

Val Leu Thr Val Leu 75

Gln Asp Trp Leu Asn

Gly Lys Glu Tyr Lys

Cys Lys Val Ser Asn 95

Ala Leu Pro Ala Pro

100

Ile Glu Lys Thr Ile

105

Ser Lys Ala Lys Gly

110

Pro Arg Glu Pro Gln 115

Val Cys Thr Leu Pro

120

Pro Ser Arg Glu Glu 125

Thr Lys Asn Gln Val

130

Ser Leu Thr Cys Leu 135

Val Lys Gly Phe Tyr

140

Ser Asp Ile Ala Val 145

Glu Trp Glu Ser Asn 150

Gly Gln Pro Glu Asn 155

Tyr Asp Thr Thr Pro

165

Pro Val Leu Asp Ser

170

Asp Gly Ser Phe Phe

175

Tyr Ser Asp Leu Thr

180

Val Asp Lys Ser Arg

185

Trp Gln Gln Gly Asn

190

Phe Ser Cys Ser Val 195

Met His Glu Ala Leu

200

His Asn His Tyr Thr 205

Lys

Val

Tyr

Glu

His 80

Lys

Gln

Met

Pro

Asn 160

Leu

Val

Gln

Lys Ser Leu Ser Leu 210

Ser Pro Gly Lys

215 <210> 87 <211> 984 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность

- 232 046387 <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 87

gccccagagc	tgcttggtgg	accatccgtg	ttcctgtttc	ctccaaagcc	gaaggacacc	60
ctgatgatct	caagaactcc	ggaagtgact	tgcgtcgtcg	tggacgtgtc	acatgaggat	120
ccagaggtca	agttcaattg	gtatgtggac	ggagtggaag	tgcataacgc	caagaccaaa	180
ccccgcgaag	aacagtacaa	tagcacctac	cgcgtggtga	gcgtccttac	tgtgctccac	240
caggactggc	ttaatgggaa	ggaatacaag	tgtaaggtgt	ccaacaaggc	cctccccgct	300
cccatcgaaa	agaccatctc	aaaggcaaag	gggcaaccaa	gggaacctca	agtgtacacc	360
ctgcctccgt	gcaggaagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacttg	tctcgtgaag	420
ggcttctatc	ccagcgatat	tgctgtggaa	tgggagtcaa	atggccagcc	cgagaataac	480
tacaaaacta	ccccacccgt	gctgaaatct	gatgggtcct	tcttccttta	ctccaagctg	540
accgtggaca	agagccgctg	gcaacaaggc	aatgtcttta	gctgctcagt	gatgcatgag	600
gctctccata	atcactacac	tcagaagtca	ctgtccctgt	cacctggcgc	gcgcgacgga	660
gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	720
gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	780
atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	840
ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	900
cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	960
ttagccaaag	actgccactg	cata				984

<210> 88 <211> 328 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 88

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

- 233 046387

Val

Gln 65

Gln

Ala

Pro

Thr

Ser 145

Tyr

Phe

Lys

Leu 225

Glu

Val

Met

Val

Asp Gly Val Glu Val 50

Tyr Asn Ser Thr Tyr

Asp Trp Leu Asn Gly

Leu Pro Ala Pro Ile

100

Arg Glu Pro Gln Val 115

Lys Asn Gln Val Ser 130

Asp Ile Ala Val Glu

150

Lys Thr Thr Pro Pro

165

Ser Lys Leu Thr Val

180

Ser Cys Ser Val Met

195

Ser Leu Ser Leu Ser 210

Gly Pro Gly Arg Cys

230

Asp Leu Gly Trp Ala

245

Thr Met Cys Ile Gly 260

His Ala Gln Ile Lys

275

His Asn Ala Lys Thr 55

Lys Pro Arg Glu Glu 60

Arg Val Val Ser Val 75

Leu Thr Val Leu His

Lys Glu Tyr Lys Cys

Lys Val Ser Asn Lys

Glu Lys Thr Ile Ser 105

Tyr Thr Leu Pro Pro 120

Leu Thr Cys Leu Val 135

Trp Glu Ser Asn Gly

155

Val Leu Lys Ser Asp

170

Asp Lys Ser Arg Trp 185

His Glu Ala Leu His

200

Pro Gly Ala Arg Asp 215

Cys Arg Leu His Thr

235

Asp Trp Val Leu Ser

250

Ala Cys Pro Ser Gln

265

Thr Ser Leu His Arg

280

Lys Ala Lys Gly Gln

110

Cys Arg Lys Glu Met

125

Lys Gly Phe Tyr Pro 140

Gln Pro Glu Asn Asn

160

Gly Ser Phe Phe Leu

175

Gln Gln Gly Asn Val

190

Asn His Tyr Thr Gln

205

Gly Asp His Cys Pro 220

Val Arg Ala Ser Leu

240

Pro Arg Glu Val Gln

255

Phe Arg Ala Ala Asn

270

Leu Lys Pro Asp Thr

285

Pro Ala Pro Cys Cys

Val Pro Ala Ser Tyr

Asn Pro Met Val Leu

- 234 046387

290

295

300

Ile

305

Gln Lys

Thr Asp

Thr

310

Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

315

320

Leu

Ala Lys

Asp Cys

325

His

Cys Ile <210> 89 <211> 651 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 89 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtgcacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtaa	a	651

<210> 90 <211> 217 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 90

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 10 15

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 25 30

- 235 046387

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

40

Pro Glu Val

Lys Phe Asn Trp Tyr 45

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 55 60

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 75 80

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 90 95

Ala Leu Pro Ala Pro

100

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

105 110

Pro Arg Glu Pro Gln Val

Tyr

115

Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met

120 125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

210215 <210> 91 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 91

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 10 15

- 236 046387

Pro

Lys

Asp

Thr

Leu

Met

Ile

Ser

Arg 25

Thr

Pro

Glu

Val

Thr

Cys

Val

Asp 35

Val

Ser

His

Glu

Asp 40

Pro

Glu

Val

Lys

Phe 45

Asn

Trp

Tyr

Val

Asp 50

Gly

Val

Glu

Val

His 55

Asn

Ala

Lys

Thr

Lys 60

Pro

Arg

Glu

Gln 65

Tyr

Asn

Ser

Thr

Tyr 70

Arg

Val

Ser

Val 75

Leu

Thr

Val

Leu

His 80

Gln

Asp

Trp

Leu

Asn 85

Gly

Lys

Glu

Tyr

Lys 90

Cys

Lys

Val

Ser

Asn 95

Lys

Ala

Leu

Pro

Ala

100

Pro

Ile

Glu

Lys

Thr

105

Ile

Ser

Lys

Ala

Lys 110

Gly

Gln

Pro

Arg

Glu

115

Pro

Gln

Val

Cys

Thr

120

Leu

Pro

Ser

Arg 125

Glu

Met

Thr

Lys

130

Asn

Gln

Val

Ser

Leu

135

Thr

Cys

Leu

Val

Lys

140

Gly

Phe

Tyr

Pro

Ser

145

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr

Asp

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Asp

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Asp

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 92 <211> 984 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

- 237 046387

<400> 92 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtgcacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgc	gcgcaacgga	660
gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	720
gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	780
atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	840
ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	900
cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	960
ttagccaaag	actgccactg	cata				984

<210> 93 <211> 328 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 93

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu

5560

- 238 046387

Gln 65

Gln

Ala

Pro

Thr

Ser 145

Tyr

Phe

Lys

Leu 225

Glu

Val

Met

Val

Ile 305

Tyr Asn Ser Thr Tyr

Asp Trp Leu Asn Gly

Leu Pro Ala Pro Ile

100

Arg Glu Pro Gln Val 115

Lys Asn Gln Val Ser 130

Asp Ile Ala Val Glu

150

Asp Thr Thr Pro Pro

165

Ser Asp Leu Thr Val

180

Ser Cys Ser Val Met

195

Ser Leu Ser Leu Ser 210

Gly Pro Gly Arg Cys

230

Asp Leu Gly Trp Ala

245

Thr Met Cys Ile Gly 260

His Ala Gln Ile Lys

275

Pro Ala Pro Cys Cys 290

Gln Lys Thr Asp Thr

310

Arg Val Val Ser Val 75

Lys Glu Tyr Lys Cys

Glu Lys Thr Ile Ser 105

Cys Thr Leu Pro Pro

120

Leu Thr Cys Leu Val 135

Trp Glu Ser Asn Gly

155

Val Leu Asp Ser Asp

170

Asp Lys Ser Arg Trp 185

His Glu Ala Leu His

200

Pro Gly Ala Arg Asn 215

Cys Arg Leu His Thr

235

Asp Trp Val Leu Ser

250

Ala Cys Pro Ser Gln 265

Thr Ser Leu His Arg

280

Val Pro Ala Ser Tyr 295

Gly Val Ser Leu Gln

315

Leu Thr Val Leu His

Lys Val Ser Asn Lys

Lys Ala Lys Gly Gln

110

Ser Arg Glu Glu Met

125

Lys Gly Phe Tyr Pro 140

Gln Pro Glu Asn Asn

160

Gly Ser Phe Phe Leu

175

Gln Gln Gly Asn Val

190

Asn His Tyr Thr Gln

205

Gly Asp His Cys Pro 220

Val Arg Ala Ser Leu

240

Pro Arg Glu Val Gln

255

Phe Arg Ala Ala Asn

270

Leu Lys Pro Asp Thr

285

Asn Pro Met Val Leu 300

Thr Tyr Asp Asp Leu

320

- 239 046387

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 94 <211> 651 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 94 gccccagagc	tgcttggtgg	accatccgtg	ttcctgtttc	ctccaaagcc	gaaggacacc	60
ctgatgatct	caagaactcc	ggaagtgact	tgcgtcgtcg	tggacgtgtc	acatgaggat	120
ccagaggtca	agttcaattg	gtatgtggac	ggagtggaag	tgcataacgc	caagaccaaa	180
ccccgcgaag	aacagtacaa	tagcacctac	cgcgtggtga	gcgtccttac	tgtgctccac	240
caggactggc	ttaatgggaa	ggaatacaag	tgtaaggtgt	ccaacaaggc	cctccccgct	300
cccatcgaaa	agaccatctc	aaaggcaaag	gggcaaccaa	gggaacctca	agtgtacacc	360
ctgcctccgt	gcaggaagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacttg	tctcgtgaag	420
ggcttctatc	ccagcgatat	tgctgtggaa	tgggagtcaa	atggccagcc	cgagaataac	480
tacaaaacta	ccccacccgt	gctgaaatct	gatgggtcct	tcttccttta	ctccaagctg	540
accgtggaca	agagccgctg	gcaacaaggc	aatgtcttta	gctgctcagt	gatgcatgag	600
gctctccata	atcactacac	tcagaagtca	ctgtccctgt	ctccgggtaa	a	651

<210> 95 <211> 984 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 95 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtgcacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420

- 240 046387

ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgc	gcgcgacgga	660
gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	720
gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	780
atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	840
ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	900
cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	960
ttagccaaag	actgccactg	cata				984

<210> 96 <211> 328 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 96

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

- 241 046387

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro

210 215220

Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu

225 230 235240

Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln

245 250255

Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn

260 265270

Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr

275 280285

Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu

290 295300

Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

305 310 315320

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 97 <211> 975 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

- 242 046387

<400> 97 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtgcacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	agaccactgt	660
ccgctcgggc	ccgggcgttg	ctgccgtctg	cacacggtcc	gcgcgtcgct	ggaagacctg	720
ggctgggccg	attgggtgct	gtcgccacgg	gaggtgcaag	tgaccatgtg	catcggcgcg	780
tgcccgagcc	agttccgggc	ggcaaacatg	cacgcgcaga	tcaagacgag	cctgcaccgc	840
ctgaagcccg	acacggtgcc	agcgccctgc	tgcgtgcccg	ccagctacaa	tcccatggtg	900
ctcattcaaa	agaccgacac	cggggtgtcg	ctccagacct	atgatgactt	gttagccaaa	960
gactgccact	gcata					975

<210> 98 <211> 325 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 98

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu

5560

- 243 046387

Gln 65

Gln

Ala

Pro

Thr

Ser 145

Tyr

Phe

Lys

Gly 225

Gly

Cys

Gln

Pro

Thr 305

Tyr Asn Ser Thr Tyr

Asp Trp Leu Asn Gly

Leu Pro Ala Pro Ile

100

Arg Glu Pro Gln Val 115

Lys Asn Gln Val Ser 130

Asp Ile Ala Val Glu

150

Asp Thr Thr Pro Pro

165

Ser Asp Leu Thr Val

180

Ser Cys Ser Val Met

195

Ser Leu Ser Leu Ser 210

Arg Cys Cys Arg Leu

230

Trp Ala Asp Trp Val

245

Ile Gly Ala Cys Pro

260

Ile Lys Thr Ser Leu

275

Cys Cys Val Pro Ala 290

Asp Thr Gly Val Ser

310

Arg Val Val Ser Val 75

Lys Glu Tyr Lys Cys

Glu Lys Thr Ile Ser 105

Cys Thr Leu Pro Pro

120

Leu Thr Cys Leu Val 135

Trp Glu Ser Asn Gly

155

Val Leu Asp Ser Asp

170

Asp Lys Ser Arg Trp 185

His Glu Ala Leu His

200

Pro Gly Gly Asp His 215

His Thr Val Arg Ala

235

Leu Ser Pro Arg Glu

250

Ser Gln Phe Arg Ala

265

His Arg Leu Lys Pro

280

Ser Tyr Asn Pro Met 295

Leu Gln Thr Tyr Asp

315

Leu Thr Val Leu His

Lys Val Ser Asn Lys

Lys Ala Lys Gly Gln

110

Ser Arg Glu Glu Met

125

Lys Gly Phe Tyr Pro 140

Gln Pro Glu Asn Asn

160

Gly Ser Phe Phe Leu

175

Gln Gln Gly Asn Val

190

Asn His Tyr Thr Gln

205

Cys Pro Leu Gly Pro 220

Ser Leu Glu Asp Leu

240

Val Gln Val Thr Met

255

Ala Asn Met His Ala

270

Asp Thr Val Pro Ala

285

Val Leu Ile Gln Lys 300

Asp Leu Leu Ala Lys

320

- 244 046387

Asp Cys His Cys Ile 325 <210> 99 <211> 996 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 99 gcacctgaac tcctgggggg accgtcagtc ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc60 ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac120 cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag180 ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac240 caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc300 cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa gggcagcccc gagaaccaca ggtgtgcacc360 ctgcccccat cccgggagga gatgaccaag aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa420 ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac480 tacgacacca cgcctcccgt gctggactcc gacggctcct tcttcctcta tagcgacctc540 accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag600 gctctgcaca accactacac gcagaagagc ctctccctgt ctccgggtgg tggaggtggt660 gcgcgcgacg gagaccactg tccgctcggg cccgggcgtt gctgccgtct gcacacggtc720 cgcgcgtcgc tggaagacct gggctgggcc gattgggtgc tgtcgccacg ggaggtgcaa780 gtgaccatgt gcatcggcgc gtgcccgagc cagttccggg cggcaaacat gcacgcgcag840 atcaagacga gcctgcaccg cctgaagccc gacacggtgc cagcgccctg ctgcgtgccc900 gccagctaca atcccatggt gctcattcaa aagaccgaca ccggggtgtc gctccagacc960 tatgatgact tgttagccaa agactgccac tgcata996 <210> 100 <211> 332 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 100

- 245 046387

Ala 1

Pro

Val

Gln 65

Gln

Ala

Pro

Thr

Ser 145

Tyr

Phe

Lys

Asp 225

Arg

Pro Glu Leu Leu Gly 5

Lys Asp Thr Leu Met 20

Val Asp Val Ser His 35

Asp Gly Val Glu Val 50

Tyr Asn Ser Thr Tyr

Asp Trp Leu Asn Gly

Leu Pro Ala Pro Ile

100

Arg Glu Pro Gln Val 115

Lys Asn Gln Val Ser 130

Asp Ile Ala Val Glu

150

Asp Thr Thr Pro Pro

165

Ser Asp Leu Thr Val

180

Ser Cys Ser Val Met

195

Ser Leu Ser Leu Ser 210

His Cys Pro Leu Gly

230

Ala Ser Leu Glu Asp

245

Gly Pro Ser Val Phe

Leu Phe Pro Pro Lys 15

Ile Ser Arg Thr Pro 25

Glu Val Thr Cys Val 30

Glu Asp Pro Glu Val 40

His Asn Ala Lys Thr 55

Arg Val Val Ser Val 75

Lys Glu Tyr Lys Cys 90

Glu Lys Thr Ile Ser 105

Cys Thr Leu Pro Pro

120

Leu Thr Cys Leu Val 135

Trp Glu Ser Asn Gly

155

Val Leu Asp Ser Asp

170

Asp Lys Ser Arg Trp 185

His Glu Ala Leu His

200

Pro Gly Gly Gly Gly 215

Pro Gly Arg Cys Cys

235

Leu Gly Trp Ala Asp

250

Lys Phe Asn Trp Tyr 45

Lys Pro Arg Glu Glu 60

Leu Thr Val Leu His

Lys Val Ser Asn Lys

Lys Ala Lys Gly Gln

110

Ser Arg Glu Glu Met

125

Lys Gly Phe Tyr Pro 140

Gln Pro Glu Asn Asn

160

Gly Ser Phe Phe Leu

175

Gln Gln Gly Asn Val

190

Asn His Tyr Thr Gln

205

Gly Ala Arg Asp Gly 220

Arg Leu His Thr Val

240

Trp Val Leu Ser Pro

255

- 246 046387

Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys

260

Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe

265 270

Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln

275 280

Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu

285

Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro

290 295

Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn

300

Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr

305 310

Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr

315 320

Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp

325

Cys His Cys Ile 330 <210> 101 <211> 1014 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 101 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtgcacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
tccggaggcg	gtggaagcgc	gcgcgacgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	720
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	780
tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	840
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	900
gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	960

- 247 046387 ggggtgtcgc tccagaccta tgatgacttg ttagccaaag actgccactg cata

1014 <210> 102 <211> 338 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 102

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

- 248 046387

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

210 215220

Gly Ser Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys

225 230 235240

Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala

245 250255

Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly

260 265270

Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys

275 280285

Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys

290 295300

Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr

305 310 315320

Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His

325 330335

Cys Ile <210> 103 <211> 1014 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 103

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtgcacc	360

- 249 046387

ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
cagggaggcg	gtggacaggc	gcgcgacgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	720
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	780
tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	840
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	900
gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	960
ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	ttagccaaag	actgccactg	cata	1014

<210> 104 <211> 338 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 104

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

- 250 046387

115

120

125

Thr Lys Asn Gln Val

130

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

135 140

Ser Asp Ile Ala Val 145

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 150 155

Tyr Asp Thr Thr Pro

165

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

170 175

Tyr Ser Asp Leu Thr

180

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

185 190

Phe Ser Cys Ser Val 195

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

200 205

Lys Ser Leu Ser Leu 210

Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Gln Gly Gly

215 220

Gly Gln Ala Arg Asp 225

Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg

230 235

Cys Arg Leu His Thr

245

Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp

250 255

Asp Trp Val Leu Ser

260

Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile

265 270

Ala Cys Pro Ser Gln 275

Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile

280 285

Thr Ser Leu His Arg

290

Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys

295 300

Val Pro Ala Ser Tyr 305

Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp 310 315

Gly Val Ser Leu Gln

325

Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys

330 335

Pro

Asn 160

Leu

Val

Gln

Gly

Cys 240

Ala

Gly

Lys

Cys

Thr 320

His

Cys Ile <210> 105 <211> 217 <212> PRT <213> Искусственная последовательность

- 251 046387 <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 105

Ala Pro Glu Leu 1

Leu Gly Gly Pro 5

Ser Val Phe Leu

Phe Pro Pro Lys 15

Pro Lys Asp Thr

Leu Met Ile Ser

Arg Thr Pro Glu 25

Val Thr Cys Val 30

Val Val Asp Val

Ser His Glu Asp 40

Pro Glu Val Lys

Phe Asn Trp Tyr 45

Val Asp Gly Val

Glu Val His Asn

Ala Lys Thr Lys 60

Pro Arg Glu Glu

Gln Tyr Asn Ser 65

Thr Tyr Arg Val 70

Val Ser Val Leu

Thr Val Leu His

Gln Asp Trp Leu

Asn Gly Lys Glu 85

Tyr Lys Cys Lys 90

Val Ser Asn Lys

Ala Leu Pro Ala

100

Pro Ile Glu Lys

Thr Ile Ser Lys 105

Ala Lys Gly Gln 110

Pro Arg Glu Pro

115

Gln Val Tyr Thr

120

Cys Pro Pro Ser

Arg Lys Glu Met 125

Thr Lys Asn Gln

130

Val Ser Leu Thr

135

Cys Leu Val Lys

140

Gly Phe Tyr Pro

Ser Asp Ile Ala 145

Val Glu Trp Glu

150

Ser Asn Gly Gln

155

Pro Glu Asn Asn

160

Tyr Lys Thr Thr

Pro Pro Val Leu 165

Lys Ser Asp Gly

170

Ser Phe Phe Leu

175

Tyr Ser Lys Leu

180

Thr Val Asp Lys

Ser Arg Trp Gln 185

Gln Gly Asn Val

190

Phe Ser Cys Ser

195

Val Met His Glu

200

Ala Leu His Asn

His Tyr Thr Gln 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215

Lys

- 252 046387 <210> 106 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 106

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Cys Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

- 253 046387

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210

215 <210> 107 <211> 1014 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 107 gcgccggaac	tgctgggcgg	cccgagcgtg	tttctgtttc	cgccgaaacc	gaaagatacc	60
ctgatgatta	gccgcacccc	ggaagtgacc	tgcgtggtgg	tggatgtgag	ccatgaagat	120
ccggaagtga	aatttaactg	gtatgtggat	ggcgtggaag	tgcataacgc	gaaaaccaaa	180
ccgcgcgaag	aacagtataa	cagcacctat	cgcgtggtga	gcgtgctgac	cgtgctgcat	240
caggattggc	tgaacggcaa	agaatataaa	tgcaaagtga	gcaacaaagc	gctgccggcg	300
ccgattgaaa	aaaccattag	caaagcgaaa	ggccagccgc	gcgaaccgca	ggtgtatacc	360
tgcccgccga	gccgcgaaga	aatgaccaaa	aaccaggtga	gcctgacctg	cctggtgaaa	420
ggcttttatc	cgagcgatat	tgcggtggaa	tgggaaagca	acggccagcc	ggaaaacaac	480
tatgatacca	ccccgccggt	gctggatagc	gatggcagct	tttttctgta	tagcgatctg	540
accgtggata	aaagccgctg	gcagcagggc	aacgtgttta	gctgcagcgt	gatgcatgaa	600
gcgctgcata	accattatac	ccagaaaagc	ctgagcctga	gcccgggcgg	cggcggcggc	660
agcggcggcg	gcggcagcgc	gcgcaacggc	gatcattgcc	cgctgggccc	gggccgctgc	720
tgccgcctgc	ataccgtgcg	cgcgagcctg	gaagatctgg	gctgggcgga	ttgggtgctg	780
agcccgcgcg	aagtgcaggt	gaccatgtgc	attggcgcgt	gcccgagcca	gtttcgcgcg	840
gcgaacatgc	atgcgcagat	taaaaccagc	ctgcatcgcc	tgaaaccgga	taccgtgccg	900
gcgccgtgct	gcgtgccggc	gagctataac	ccgatggtgc	tgattcagaa	aaccgatacc	960
ggcgtgagcc	tgcagaccta	tgatgatctg	ctggcgaaag	attgccattg	catt	1014

<210> 108 <211> 338 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 108

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 10 15

- 254 046387

Pro

Val

Gln 65

Gln

Ala

Pro

Thr

Ser 145

Tyr

Phe

Lys

Gly 225

Cys

Asp

Lys Asp Thr Leu Met

Ile Ser Arg Thr Pro 25

Glu Val Thr Cys Val 30

Val Asp Val Ser His 35

Asp Gly Val Glu Val 50

Tyr Asn Ser Thr Tyr

Asp Trp Leu Asn Gly

Leu Pro Ala Pro Ile

100

Arg Glu Pro Gln Val 115

Lys Asn Gln Val Ser 130

Asp Ile Ala Val Glu

150

Asp Thr Thr Pro Pro

165

Ser Asp Leu Thr Val

180

Ser Cys Ser Val Met

195

Ser Leu Ser Leu Ser 210

Ser Ala Arg Asn Gly

230

Arg Leu His Thr Val

245

Glu Asp Pro Glu Val 40

His Asn Ala Lys Thr 55

Arg Val Val Ser Val

Lys Glu Tyr Lys Cys

Glu Lys Thr Ile Ser 105

Tyr Thr Cys Pro Pro

120

Leu Thr Cys Leu Val 135

Trp Glu Ser Asn Gly

155

Val Leu Asp Ser Asp

170

Asp Lys Ser Arg Trp 185

His Glu Ala Leu His

200

Pro Gly Gly Gly Gly 215

Asp His Cys Pro Leu

235

Arg Ala Ser Leu Glu

250

Lys Phe Asn Trp Tyr 45

Lys Pro Arg Glu Glu 60

Leu Thr Val Leu His

Lys Val Ser Asn Lys

Lys Ala Lys Gly Gln

110

Ser Arg Glu Glu Met

125

Lys Gly Phe Tyr Pro 140

Gln Pro Glu Asn Asn

160

Gly Ser Phe Phe Leu

175

Gln Gln Gly Asn Val

190

Asn His Tyr Thr Gln

205

Gly Ser Gly Gly Gly 220

Gly Pro Gly Arg Cys

240

Asp Leu Gly Trp Ala

255

Trp Val Leu Ser Pro

Arg Glu Val Gln Val

Thr Met Cys Ile Gly

- 255 046387

260 265270

Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys

275 280285

Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys

290 295300

Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr AspThr

305 310 315320

Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp CysHis

325 330335

Cys Ile <210> 109 <211> 651 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 109 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacaa	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
tgtcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtaa	a	651

<210> 110 <211> 585 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

- 256 046387 <221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 110

Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu

5 1015

Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu Ile Ala Phe Ala Gln Tyr LeuGln

2530

Gln Cys Pro Phe Glu Asp His Val Lys Leu Val Asn Glu Val Thr Glu 35 4045

Phe Ala Lys Thr Cys Val Ala Asp Glu Ser Ala Glu Asn Cys Asp Lys 50 5560

Ser Leu His Thr Leu Phe Gly Asp Lys Leu Cys Thr Val Ala Thr Leu

70 7580

Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala Asp Cys Cys Ala Lys Gln Glu Pro 85 9095

Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Gln His Lys Asp Asp Asn Pro Asn Leu

100 105110

Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val Asp Val Met Cys Thr Ala Phe His

115 120125

Asp Asn Glu Glu Thr Phe Leu Lys Lys Tyr Leu Tyr Glu Ile Ala Arg

130 135140

Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys Arg

145 150 155160

Tyr Lys Ala Ala Phe Thr Glu Cys Cys Gln Ala Ala Asp Lys Ala Ala

165 170175

Cys Leu Leu Pro Lys Leu Asp Glu Leu Arg Asp Glu Gly Lys Ala Ser

180 185190

Ser Ala Lys Gln Arg Leu Lys Cys Ala Ser Leu Gln Lys Phe Gly Glu

195 200205

Arg Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val Ala Arg Leu Ser Gln Arg Phe Pro

210 215220

Lys Ala Glu Phe Ala Glu Val Ser Lys Leu Val Thr Asp Leu Thr Lys

225 230 235240

- 257 046387

Val His Thr Glu Cys Cys His Gly Asp Leu Leu Glu Cys Ala Asp

245 250 255

Arg Ala Asp Leu Ala Lys Tyr Ile Cys Glu Asn Gln Asp Ser Ile

260 265 270

Ser Lys Leu Lys Glu Cys Cys Glu Lys Pro Leu Leu Glu Lys Ser

275 280 285

Cys Ile Ala Glu Val Glu Asn Asp Glu Met Pro Ala Asp Leu Pro

290 295 300

Leu Ala Ala Asp Phe Val Glu Ser Lys Asp Val Cys Lys Asn Tyr

305 310 315

Glu Ala Lys Asp Val Phe Leu Gly Met Phe Leu Tyr Glu Tyr Ala

325 330 335

Arg His Pro Asp Tyr Ser Val Val Leu Leu Leu Arg Leu Ala Lys

340 345 350

Tyr Glu Thr Thr Leu Glu Lys Cys Cys Ala Ala Ala Asp Pro His

355 360 365

Cys Tyr Ala Lys Val Phe Asp Glu Phe Lys Pro Leu Val Glu Glu

370 375 380

Gln Asn Leu Ile Lys Gln Asn Cys Glu Leu Phe Glu Gln Leu Gly 385 390 395

Tyr Lys Phe Gln Asn Ala Leu Leu Val Arg Tyr Thr Lys Lys Val

405 410 415

Gln Val Ser Thr Pro Thr Leu Val Glu Val Ser Arg Asn Leu Gly

420 425 430

Val Gly Ser Lys Cys Cys Lys His Pro Glu Ala Lys Arg Met Pro

435 440 445

Ala Glu Asp Tyr Leu Ser Val Val Leu Asn Gln Leu Cys Val Leu

450 455 460

Glu Lys Thr Pro Val Ser Asp Arg Val Thr Lys Cys Cys Thr Glu

465 470 475

Leu Val Asn Arg Arg Pro Cys Phe Ser Ala Leu Glu Val Asp Glu

Asp

Ser

His

Ser

Ala 320

Arg

Thr

Glu

Pro

Glu 400

Pro

Lys

Cys

His

Ser 480

Thr

- 258 046387

485 490495

Tyr Val Pro Lys Glu Phe Asn Ala Glu Thr Phe Thr Phe His Ala Asp

500 505510

Ile Cys Thr Leu Ser Glu Lys Glu Arg Gln Ile Lys Lys Gln Thr Ala

515 520525

Leu Val Glu Leu Val Lys His Lys Pro Lys Ala Thr Lys Glu Gln Leu

530 535540

Lys Ala Val Met Asp Asp Phe Ala Ala Phe Val Glu Lys Cys Cys Lys

545 550 555560

Ala Asp Asp Lys Glu Thr Cys Phe Ala Glu Glu Gly Lys Lys Leu Val

565 570575

Ala Ala Ser Gln Ala Ala Leu Gly Leu

580585 <210> 111 <211> 2154 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 111 gatgcacaca	agagtgaggt	tgctcatcga	tttaaagatt	tgggagaaga	aaatttcaaa	60
gccttggtgt	tgattgcctt	tgctcagtat	cttcagcagt	gtccatttga	agatcatgta	120
aaattagtga	atgaagtaac	tgaatttgca	aaaacatgtg	ttgctgatga	gtcagctgaa	180
aattgtgaca	aatcacttca	tacccttttt	ggagacaaat	tatgcacagt	tgcaactctt	240
cgtgaaacct	atggtgaaat	ggctgactgc	tgtgcaaaac	aagaacctga	gagaaatgaa	300
tgcttcttgc	aacacaaaga	tgacaaccca	aacctccccc	gattggtgag	accagaggtt	360
gatgtgatgt	gcactgcttt	tcatgacaat	gaagagacat	ttttgaaaaa	atacttatat	420
gaaattgcca	gaagacatcc	ttacttttat	gccccggaac	tccttttctt	tgctaaaagg	480
tataaagctg	cttttacaga	atgttgccaa	gctgctgata	aagctgcctg	cctgttgcca	540
aagctcgatg	aacttcggga	tgaagggaag	gcttcgtctg	ccaaacagag	actcaagtgt	600
gccagtctcc	aaaaatttgg	agaaagagct	ttcaaagcat	gggcagtagc	tcgcctgagc	660
cagagatttc	ccaaagctga	gtttgcagaa	gtttccaagt	tagtgacaga	tcttaccaaa	720
gtccacacgg	aatgctgcca	tggagatctg	cttgaatgtg	ctgatgacag	ggcggacctt	780

- 259 046387

gccaagtata	tctgtgaaaa	tcaagattcg	atctccagta	aactgaagga	atgctgtgaa	840
aaacctctgt	tggaaaaatc	ccactgcatt	gccgaagtgg	aaaatgatga	gatgcctgct	900
gacttgcctt	cattagctgc	tgattttgtt	gaaagtaagg	atgtttgcaa	aaactatgct	960
gaggcaaagg	atgtcttcct	gggcatgttt	ttgtatgaat	atgcaagaag	gcatcctgat	1020
tactctgtcg	tgctgctgct	gagacttgcc	aagacatatg	aaaccactct	agagaagtgc	1080
tgtgccgctg	cagatcctca	tgaatgctat	gccaaagtgt	tcgatgaatt	taaacctctt	1140
gtggaagagc	ctcagaattt	aatcaaacaa	aattgtgagc	tttttgagca	gcttggagag	1200
tacaaattcc	agaatgcgct	attagttcgt	tacaccaaga	aagtacccca	agtgtcaact	1260
ccaactcttg	tagaggtctc	aagaaaccta	ggaaaagtgg	gcagcaaatg	ttgtaaacat	1320
cctgaagcaa	aaagaatgcc	ctgtgcagaa	gactatctat	ccgtggtcct	gaaccagtta	1380
tgtgtgttgc	atgagaaaac	gccagtaagt	gacagagtca	ccaaatgctg	cacagaatcc	1440
ttggtgaaca	ggcgaccatg	cttttcagct	ctggaagtcg	atgaaacata	cgttcccaaa	1500
gagtttaatg	ctgaaacatt	caccttccat	gcagatatat	gcacactttc	tgagaaggag	1560
agacaaatca	agaaacaaac	tgcacttgtt	gagctcgtga	aacacaagcc	caaggcaaca	1620
aaagagcaac	tgaaagctgt	tatggatgat	ttcgcagctt	ttgtagagaa	gtgctgcaag	1680
gctgacgata	aggagacctg	ctttgccgag	gagggtaaaa	aacttgttgc	ggccagtcag	1740
gccgccttag	gcttaggagg	tggtggatcc	ggaggcggtg	gaagcggagg	tggtggatct	1800
ggaggcggtg	gaagcgcgcg	caacggagac	cactgtccgc	tcgggcccgg	gcgttgctgc	1860
cgtctgcaca	cggtccgcgc	gtcgctggaa	gacctgggct	gggccgattg	ggtgctgtcg	1920
ccacgggagg	tgcaagtgac	catgtgcatc	ggcgcgtgcc	cgagccagtt	ccgggcggca	1980
aacatgcacg	cgcagatcaa	gacgagcctg	caccgcctga	agcccgacac	ggtgccagcg	2040
ccctgctgcg	tgcccgccag	ctacaatccc	atggtgctca	ttcaaaagac	cgacaccggg	2100
gtgtcgctcc	agacctatga	tgacttgtta	gccaaagact	gccactgcat	atga	2154

<210> 112 <211> 717 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 112

Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu

5 10 15

- 260 046387

Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu 20

Ile Ala Phe Ala Gln Tyr Leu

30

Gln Cys Pro Phe Glu Asp His Val

40

Lys Leu Val Asn Glu Val Thr

Phe Ala Lys Thr Cys Val Ala Asp Glu Ser Ala Glu Asn Cys Asp 50 55 60

Ser Leu His Thr Leu Phe Gly Asp Lys Leu Cys Thr Val Ala Thr 65 70 75

Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala Asp Cys Cys Ala Lys Gln Glu 85 90 95

Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Gln His

100 105

Lys Asp Asp Asn Pro Asn

110

Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val Asp Val Met Cys Thr Ala Phe

115 120 125

Asp Asn Glu Glu

130

Thr Phe Leu Lys Lys Tyr Leu Tyr Glu Ile Ala

135 140

Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys

145 150 155

Tyr

Lys Ala Ala

Phe Thr Glu Cys Cys Gln Ala Ala Asp Lys Ala

165 170 175

Cys Leu Leu Pro Lys Leu Asp Glu Leu Arg Asp Glu Gly Lys Ala

180 185 190

Ser Ala Lys Gln Arg Leu Lys Cys Ala Ser Leu Gln Lys Phe Gly

195 200 205

Arg Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val Ala Arg Leu Ser Gln Arg Phe

210 215 220

Lys Ala Glu Phe Ala Glu Val Ser Lys Leu Val Thr Asp Leu Thr

225 230 235

Val His Thr Glu Cys Cys His Gly Asp Leu Leu Glu Cys Ala Asp

245 250 255

Arg Ala Asp Leu Ala Lys Tyr Ile Cys Glu Asn Gln Asp Ser Ile

260 265 270

Gln

Glu

Lys

Leu 80

Pro

Leu

His

Arg

Arg 160

Ala

Ser

Glu

Pro

Lys 240

Asp

Ser

- 261 046387

Ser Lys

Leu Lys Glu Cys Cys Glu

275 280

Lys Pro Leu Leu Glu Lys Ser

285

Cys Ile Ala Glu Val Glu Asn Asp Glu Met Pro Ala Asp Leu Pro

290 295 300

Leu Ala Ala Asp Phe Val Glu Ser Lys Asp Val Cys Lys Asn Tyr 305 310 315

Glu Ala Lys Asp Val Phe Leu Gly Met Phe Leu Tyr Glu Tyr Ala

325 330 335

Arg His Pro Asp Tyr Ser Val Val Leu Leu Leu Arg Leu Ala Lys

340 345 350

Tyr Glu Thr Thr Leu Glu Lys Cys Cys Ala Ala Ala Asp Pro His

355 360 365

Cys Tyr Ala Lys Val Phe Asp Glu Phe Lys Pro Leu Val Glu Glu

370 375 380

Gln Asn Leu Ile Lys Gln Asn Cys Glu Leu Phe Glu Gln Leu Gly

385 390 395

Tyr Lys Phe Gln Asn Ala Leu Leu Val Arg Tyr Thr Lys Lys Val

405 410 415

Gln Val Ser Thr Pro Thr Leu Val Glu Val Ser Arg Asn Leu Gly

420 425 430

Val Gly Ser Lys Cys Cys Lys His Pro Glu Ala Lys Arg Met Pro

435 440 445

Ala Glu Asp Tyr Leu Ser Val Val Leu Asn Gln Leu Cys Val Leu

450 455 460

Glu Lys Thr Pro Val Ser Asp Arg Val Thr Lys Cys Cys Thr Glu

465 470 475

Leu Val Asn Arg Arg Pro Cys Phe Ser Ala Leu Glu Val Asp Glu

485 490 495

Tyr Val Pro Lys Glu Phe Asn Ala Glu Thr Phe Thr Phe His Ala

500 505 510

Ile Cys Thr Leu Ser Glu Lys Glu Arg Gln Ile Lys Lys Gln Thr

515 520 525

His

Ser

Ala 320

Arg

Thr

Glu

Pro

Glu 400

Pro

Lys

Cys

His

Ser 480

Thr

Asp

Ala

- 262 046387

Leu Val Glu Leu Val Lys His Lys Pro Lys Ala Thr Lys Glu Gln Leu

530 535540

Lys Ala Val Met Asp Asp Phe Ala Ala Phe Val Glu Lys Cys Cys Lys

545 550 555560

Ala Asp Asp Lys Glu Thr Cys Phe Ala Glu Glu Gly Lys Lys Leu Val

565 570575

Ala Ala Ser Gln Ala Ala Leu Gly Leu Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

580 585590

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Arg Asn

595 600605

Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr

610 615620

Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser

625 630 635640

Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln

645 650655

Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg

660 665670

Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr

675 680685

Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln

690 695700

Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

705 710715 <210> 113 <211> 9 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 113

Gly Ser Pro Ala Pro Ala Pro Gly Ser

5

- 263 046387 <210> 114 <211> 2121 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 114 gatgcacaca agagtgaggt tgctcatcga tttaaagatt tgggagaaga aaatttcaaa60 gccttggtgt tgattgcctt tgctcagtat cttcagcagt gtccatttga agatcatgta120 aaattagtga atgaagtaac tgaatttgca aaaacatgtg ttgctgatga gtcagctgaa180 aattgtgaca aatcacttca tacccttttt ggagacaaat tatgcacagt tgcaactctt240 cgtgaaacct atggtgaaat ggctgactgc tgtgcaaaac aagaacctga gagaaatgaa300 tgcttcttgc aacacaaaga tgacaaccca aacctccccc gattggtgag accagaggtt360 gatgtgatgt gcactgcttt tcatgacaat gaagagacat ttttgaaaaa atacttatat420 gaaattgcca gaagacatcc ttacttttat gccccggaac tccttttctt tgctaaaagg480 tataaagctg cttttacaga atgttgccaa gctgctgata aagctgcctg cctgttgcca540 aagctcgatg aacttcggga tgaagggaag gcttcgtctg ccaaacagag actcaagtgt600 gccagtctcc aaaaatttgg agaaagagct ttcaaagcat gggcagtagc tcgcctgagc660 cagagatttc ccaaagctga gtttgcagaa gtttccaagt tagtgacaga tcttaccaaa720 gtccacacgg aatgctgcca tggagatctg cttgaatgtg ctgatgacag ggcggacctt780 gccaagtata tctgtgaaaa tcaagattcg atctccagta aactgaagga atgctgtgaa840 aaacctctgt tggaaaaatc ccactgcatt gccgaagtgg aaaatgatga gatgcctgct900 gacttgcctt cattagctgc tgattttgtt gaaagtaagg atgtttgcaa aaactatgct960 gaggcaaagg atgtcttcct gggcatgttt ttgtatgaat atgcaagaag gcatcctgat1020 tactctgtcg tgctgctgct gagacttgcc aagacatatg aaaccactct agagaagtgc1080 tgtgccgctg cagatcctca tgaatgctat gccaaagtgt tcgatgaatt taaacctctt1140 gtggaagagc ctcagaattt aatcaaacaa aattgtgagc tttttgagca gcttggagag1200 tacaaattcc agaatgcgct attagttcgt tacaccaaga aagtacccca agtgtcaact1260 ccaactcttg tagaggtctc aagaaaccta ggaaaagtgg gcagcaaatg ttgtaaacat1320 cctgaagcaa aaagaatgcc ctgtgcagaa gactatctat ccgtggtcct gaaccagtta1380 tgtgtgttgc atgagaaaac gccagtaagt gacagagtca ccaaatgctg cacagaatcc1440 ttggtgaaca ggcgaccatg cttttcagct ctggaagtcg atgaaacata cgttcccaaa1500

- 264 046387

gagtttaatg	ctgaaacatt	caccttccat	gcagatatat	gcacactttc	tgagaaggag	1560
agacaaatca	agaaacaaac	tgcacttgtt	gagctcgtga	aacacaagcc	caaggcaaca	1620
aaagagcaac	tgaaagctgt	tatggatgat	ttcgcagctt	ttgtagagaa	gtgctgcaag	1680
gctgacgata	aggagacctg	ctttgccgag	gagggtaaaa	aacttgttgc	ggccagtcag	1740
gccgccttag	gcttaggatc	cccagctcca	gctccaggaa	gcgcgcgcaa	cggagaccac	1800
tgtccgctcg	ggcccgggcg	ttgctgccgt	ctgcacacgg	tccgcgcgtc	gctggaagac	1860
ctgggctggg	ccgattgggt	gctgtcgcca	cgggaggtgc	aagtgaccat	gtgcatcggc	1920
gcgtgcccga	gccagttccg	ggcggcaaac	atgcacgcgc	agatcaagac	gagcctgcac	1980
cgcctgaagc	ccgacacggt	gccagcgccc	tgctgcgtgc	ccgccagcta	caatcccatg	2040
gtgctcattc	aaaagaccga	caccggggtg	tcgctccaga	cctatgatga	cttgttagcc	2100
aaagactgcc	actgcatatg	a				2121

<210> 115 <211> 706 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 115

Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu

5 1015

Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu Ile Ala Phe Ala Gln Tyr Leu Gln 20 2530

Gln Cys Pro Phe Glu Asp His Val Lys Leu Val Asn Glu Val Thr Glu 35 4045

Phe Ala Lys Thr Cys Val Ala Asp Glu Ser Ala Glu Asn Cys Asp Lys 50 5560

Ser Leu His Thr Leu Phe Gly Asp Lys Leu Cys Thr Val Ala Thr Leu

70 7580

Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala Asp Cys Cys Ala Lys Gln Glu Pro 85 9095

Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Gln His Lys Asp Asp Asn Pro Asn Leu

100 105110

Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val Asp Val Met Cys Thr Ala Phe His

- 265 046387

115 120

125

Asp Asn Glu Glu Thr Phe Leu Lys Lys

130 135

Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro Glu 145 150

Tyr Lys Ala Ala Phe Thr Glu Cys Cys

165

Cys Leu Leu Pro Lys Leu Asp Glu Leu

180 185

Ser Ala Lys Gln Arg Leu Lys Cys Ala

195 200

Arg Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val Ala

210 215

Lys Ala Glu Phe Ala Glu Val Ser Lys

225 230

Val His Thr Glu Cys Cys His Gly Asp

245

Arg Ala Asp Leu Ala Lys Tyr Ile Cys

260 265

Ser Lys Leu Lys Glu Cys Cys Glu Lys

275 280

Cys Ile Ala Glu Val Glu Asn Asp Glu

290 295

Leu Ala Ala Asp Phe Val Glu Ser Lys

305 310

Glu Ala Lys Asp Val Phe Leu Gly Met

325

Arg His Pro Asp Tyr Ser Val Val Leu

340 345

Tyr Glu Thr Thr Leu Glu Lys Cys Cys

355 360

Leu Tyr Glu Ile Ala Arg

140

Leu Phe Phe Ala Lys Arg

155 160

Ala Ala Asp Lys Ala Ala

175

Asp Glu Gly Lys Ala Ser

190

Leu Gln Lys Phe Gly Glu

205

Leu Ser Gln Arg Phe Pro

220

Val Thr Asp Leu Thr Lys

235 240

Leu Glu Cys Ala Asp Asp

255

Asn Gln Asp Ser Ile Ser

270

Leu Leu Glu Lys Ser His

285

Pro Ala Asp Leu Pro Ser

300

Val Cys Lys Asn Tyr Ala

315 320

Leu Tyr Glu Tyr Ala Arg

335

Leu Arg Leu Ala Lys Thr

350

Ala Ala Asp Pro His Glu

365

- 266 046387

Cys ^ТУ^Г Ala Lys Val Phe Asp Glu Phe

370 375

Gln Asn Leu Ile Lys Gln Asn Cys Glu 385 390

Tyr Lys Phe Gln Asn Ala Leu Leu Val 405

Gln Val Ser Thr Pro Thr Leu Val Glu

420 425

Val Gly Ser Lys Cys Cys Lys His Pro

435 440

Ala Glu Asp Tyr Leu Ser Val Val Leu

450 455

Glu Lys Thr Pro Val Ser Asp Arg Val 465 470

Leu Val Asn Arg Arg Pro Cys Phe Ser 485

Tyr Val Pro Lys Glu Phe Asn Ala Glu

500 505

Ile Cys Thr Leu Ser Glu Lys Glu Arg

515 520

Leu Val Glu Leu Val Lys His Lys Pro

530 535

Lys Ala Val Met Asp Asp Phe Ala Ala 545 550

Ala Asp Asp Lys Glu Thr Cys Phe Ala 565

Ala Ala Ser Gln Ala Ala Leu Gly Leu

580 585

Gly Ser Ala Arg Asn Gly Asp His Cys

595 600

Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser

610 615

Pro Leu Val Glu Glu Pro

380

Phe Glu Gln Leu Gly Glu

395 400

Tyr Thr Lys Lys Val Pro

415

Ser Arg Asn Leu Gly Lys

430

Ala Lys Arg Met Pro Cys 445

Gln Leu Cys Val Leu His

460

Lys Cys Cys Thr Glu Ser

475 480

Leu Glu Val Asp Glu Thr

495

Phe Thr Phe His Ala Asp

510

Ile Lys Lys Gln Thr Ala

525

Ala Thr Lys Glu Gln Leu 540

Val Glu Lys Cys Cys Lys

555 560

Glu Gly Lys Lys Leu Val

575

Ser Pro Ala Pro Ala Pro

590

Leu Gly Pro Gly Arg Cys

605

Glu Asp Leu Gly Trp Ala 620

- 267 046387

Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly

625 630 635640

Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys

645 650655

Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys

660 665670

Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr

675 680685

Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His

690 695700

Cys Ile 705 <210> 116 <211> 14 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 116

Gly Ser Pro Ala Pro Ala Pro Pro Ala Pro Ala Pro Gly Ser

5 10 <210> 117 <211> 2136 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 117

gatgcacaca	agagtgaggt	tgctcatcga	tttaaagatt	tgggagaaga	aaatttcaaa	60
gccttggtgt	tgattgcctt	tgctcagtat	cttcagcagt	gtccatttga	agatcatgta	120
aaattagtga	atgaagtaac	tgaatttgca	aaaacatgtg	ttgctgatga	gtcagctgaa	180
aattgtgaca	aatcacttca	tacccttttt	ggagacaaat	tatgcacagt	tgcaactctt	240
cgtgaaacct	atggtgaaat	ggctgactgc	tgtgcaaaac	aagaacctga	gagaaatgaa	300
tgcttcttgc	aacacaaaga	tgacaaccca	aacctccccc	gattggtgag	accagaggtt	360

- 268 046387 gatgtgatgt gcactgcttt tcatgacaat gaagagacat ttttgaaaaa atacttatat 420 gaaattgcca gaagacatcc ttacttttat gccccggaac tccttttctt tgctaaaagg 480 tataaagctg cttttacaga atgttgccaa gctgctgata aagctgcctg cctgttgcca 540 aagctcgatg aacttcggga tgaagggaag gcttcgtctg ccaaacagag actcaagtgt 600 gccagtctcc aaaaatttgg agaaagagct ttcaaagcat gggcagtagc tcgcctgagc 660 cagagatttc ccaaagctga gtttgcagaa gtttccaagt tagtgacaga tcttaccaaa 720 gtccacacgg aatgctgcca tggagatctg cttgaatgtg ctgatgacag ggcggacctt 780 gccaagtata tctgtgaaaa tcaagattcg atctccagta aactgaagga atgctgtgaa 840 aaacctctgt tggaaaaatc ccactgcatt gccgaagtgg aaaatgatga gatgcctgct 900 gacttgcctt cattagctgc tgattttgtt gaaagtaagg atgtttgcaa aaactatgct 960 gaggcaaagg atgtcttcct gggcatgttt ttgtatgaat atgcaagaag gcatcctgat 1020 tactctgtcg tgctgctgct gagacttgcc aagacatatg aaaccactct agagaagtgc 1080 tgtgccgctg cagatcctca tgaatgctat gccaaagtgt tcgatgaatt taaacctctt 1140 gtggaagagc ctcagaattt aatcaaacaa aattgtgagc tttttgagca gcttggagag 1200 tacaaattcc agaatgcgct attagttcgt tacaccaaga aagtacccca agtgtcaact 1260 ccaactcttg tagaggtctc aagaaaccta ggaaaagtgg gcagcaaatg ttgtaaacat 1320 cctgaagcaa aaagaatgcc ctgtgcagaa gactatctat ccgtggtcct gaaccagtta 1380 tgtgtgttgc atgagaaaac gccagtaagt gacagagtca ccaaatgctg cacagaatcc 1440 ttggtgaaca ggcgaccatg cttttcagct ctggaagtcg atgaaacata cgttcccaaa 1500 gagtttaatg ctgaaacatt caccttccat gcagatatat gcacactttc tgagaaggag 1560 agacaaatca agaaacaaac tgcacttgtt gagctcgtga aacacaagcc caaggcaaca 1620 aaagagcaac tgaaagctgt tatggatgat ttcgcagctt ttgtagagaa gtgctgcaag 1680 gctgacgata aggagacctg ctttgccgag gagggtaaaa aacttgttgc ggccagtcag 1740 gccgccttag gcttaggatc cccagctcca gctccacccg cacctgcccc tggaagcgcg 1800 cgcaacggag accactgtcc gctcgggccc gggcgttgct gccgtctgca cacggtccgc 1860 gcgtcgctgg aagacctggg ctgggccgat tgggtgctgt cgccacggga ggtgcaagtg 1920 accatgtgca tcggcgcgtg cccgagccag ttccgggcgg caaacatgca cgcgcagatc 1980 aagacgagcc tgcaccgcct gaagcccgac acggtgccag cgccctgctg cgtgcccgcc 2040 agctacaatc ccatggtgct cattcaaaag accgacaccg gggtgtcgct ccagacctat 2100 gatgacttgt tagccaaaga ctgccactgc atatga 2136 <210> 118 <211> 711

- 269 046387 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 118

Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu

5 1015

Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu Ile Ala Phe Ala Gln Tyr LeuGln

2530

Gln Cys Pro Phe Glu Asp His Val Lys Leu Val Asn Glu Val Thr Glu

4045

Phe Ala Lys

Thr Cys Val Ala Asp Glu Ser Ala Glu Asn Cys Asp Lys 5560

Ser Leu His Thr Leu Phe Gly Asp 65 70

Lys Leu Cys Thr Val Ala Thr Leu

80

Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala 85

Asp Cys Cys Ala Lys Gln Glu Pro

95

Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Gln

100

His Lys Asp Asp Asn Pro Asn Leu

105 110

Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val

115 120

Asp Val Met Cys Thr Ala Phe His

125

Asp Asn Glu Glu Thr Phe Leu Lys Lys Tyr Leu Tyr Glu Ile Ala Arg

130 135140

Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys Arg

145 150 155160

Tyr Lys Ala Ala Phe Thr Glu Cys Cys Gln Ala Ala Asp Lys Ala Ala

165 170175

Cys Leu Leu Pro Lys Leu Asp Glu Leu Arg Asp Glu Gly Lys Ala Ser

180 185190

Ser Ala Lys Gln Arg Leu Lys Cys Ala

195200

Ser Leu Gln Lys Phe Gly Glu

205

Arg Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val Ala Arg Leu

210215

Ser Gln Arg Phe Pro

220

- 270 046387

Lys 225

Ala

Glu

Phe

Ala

Glu

230

Val

Ser

Lys

Leu

Val

235

Thr

Asp

Leu

Thr

Lys 240

Val

His

Thr

Glu

Cys 245

Cys

His

Gly

Asp

Leu 250

Leu

Glu

Cys

Ala

Asp 255

Asp

Arg Ala Asp Leu Ala Lys Tyr Ile Cys Glu Asn Gln Asp Ser Ile Ser

260 265270

Ser Lys Leu Lys Glu Cys Cys Glu Lys Pro Leu Leu Glu Lys Ser His

275 280285

Cys Ile Ala Glu Val Glu Asn Asp Glu Met Pro Ala Asp Leu Pro Ser

290 295300

Leu Ala Ala Asp Phe Val Glu Ser Lys Asp Val Cys Lys Asn Tyr Ala

305 310 315320

Glu Ala Lys Asp Val Phe Leu Gly Met Phe Leu Tyr Glu Tyr Ala Arg

325 330335

Arg His Pro Asp Tyr Ser Val Val Leu Leu Leu Arg Leu Ala Lys Thr

340 345350

Tyr Glu Thr Thr Leu Glu Lys Cys Cys Ala Ala Ala Asp Pro His Glu

355 360365

Cys Tyr Ala Lys Val Phe Asp Glu Phe Lys Pro Leu Val Glu Glu Pro

370 375380

Gln Asn Leu Ile Lys Gln Asn Cys Glu Leu Phe Glu Gln Leu Gly Glu

385 390 395400

Tyr Lys Phe Gln Asn Ala Leu Leu Val Arg Tyr Thr Lys Lys Val Pro

405 410415

Gln Val Ser Thr Pro Thr Leu Val Glu Val Ser Arg Asn Leu Gly Lys

420 425430

Val Gly Ser Lys Cys Cys Lys His Pro Glu Ala Lys Arg Met Pro Cys

435 440445

Ala Glu Asp Tyr Leu Ser Val Val Leu Asn Gln Leu Cys Val Leu His

450 455460

Glu Lys Thr Pro Val Ser Asp Arg Val Thr Lys Cys Cys Thr Glu Ser

- 271 046387

465 470 475

Leu Val Asn Arg Arg Pro Cys Phe 485

Ser Ala Leu Glu Val Asp Glu

490 495

Tyr Val Pro Lys

500

Glu Phe Asn Ala Glu Thr Phe Thr Phe His Ala

505 510

Ile Cys Thr Leu

515

Ser Glu Lys Glu Arg Gln Ile Lys Lys Gln Thr

520 525

Leu Val Glu Leu Val

530

Lys His Lys Pro Lys Ala Thr Lys Glu Gln

535 540

Lys Ala Val Met Asp Asp Phe Ala Ala Phe Val Glu Lys Cys Cys

545 550 555

Ala Asp Asp Lys

Glu Thr Cys Phe Ala Glu Glu Gly Lys Lys Leu

565 570 575

Ala Ala

Ser Gln Ala Ala Leu Gly Leu Gly Ser Pro Ala Pro Ala

580 585 590

Pro Ala Pro Ala Pro Gly Ser Ala Arg Asn Gly Asp His Cys Pro

595 600 605

Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His

610 615

Thr Val Arg Ala Ser Leu

620

Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln

625 630 635

Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn

645 650 655

His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr

660 665 670

Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu

675 680 685

Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val

690 695

Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

700

480

Thr

Asp

Ala

Leu

Lys 560

Val

Pro

Leu

Glu

Val 640

Met

Val

Ile

Leu

Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

705 710

- 272 046387 <210> 119 <211> 11 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 119

Gly Ser Ala Ala Gln Ala Ala Gln Gln Gly Ser

5 10 <210> 120 <211> 2127 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 120 gatgcacaca	agagtgaggt	tgctcatcga	tttaaagatt	tgggagaaga	aaatttcaaa	60
gccttggtgt	tgattgcctt	tgctcagtat	cttcagcagt	gtccatttga	agatcatgta	120
aaattagtga	atgaagtaac	tgaatttgca	aaaacatgtg	ttgctgatga	gtcagctgaa	180
aattgtgaca	aatcacttca	tacccttttt	ggagacaaat	tatgcacagt	tgcaactctt	240
cgtgaaacct	atggtgaaat	ggctgactgc	tgtgcaaaac	aagaacctga	gagaaatgaa	300
tgcttcttgc	aacacaaaga	tgacaaccca	aacctccccc	gattggtgag	accagaggtt	360
gatgtgatgt	gcactgcttt	tcatgacaat	gaagagacat	ttttgaaaaa	atacttatat	420
gaaattgcca	gaagacatcc	ttacttttat	gccccggaac	tccttttctt	tgctaaaagg	480
tataaagctg	cttttacaga	atgttgccaa	gctgctgata	aagctgcctg	cctgttgcca	540
aagctcgatg	aacttcggga	tgaagggaag	gcttcgtctg	ccaaacagag	actcaagtgt	600
gccagtctcc	aaaaatttgg	agaaagagct	ttcaaagcat	gggcagtagc	tcgcctgagc	660
cagagatttc	ccaaagctga	gtttgcagaa	gtttccaagt	tagtgacaga	tcttaccaaa	720
gtccacacgg	aatgctgcca	tggagatctg	cttgaatgtg	ctgatgacag	ggcggacctt	780
gccaagtata	tctgtgaaaa	tcaagattcg	atctccagta	aactgaagga	atgctgtgaa	840
aaacctctgt	tggaaaaatc	ccactgcatt	gccgaagtgg	aaaatgatga	gatgcctgct	900
gacttgcctt	cattagctgc	tgattttgtt	gaaagtaagg	atgtttgcaa	aaactatgct	960
gaggcaaagg	atgtcttcct	gggcatgttt	ttgtatgaat	atgcaagaag	gcatcctgat	1020
tactctgtcg	tgctgctgct	gagacttgcc	aagacatatg	aaaccactct	agagaagtgc	1080
tgtgccgctg	cagatcctca	tgaatgctat	gccaaagtgt	tcgatgaatt	taaacctctt	1140

- 273 046387

gtggaagagc	ctcagaattt	aatcaaacaa	aattgtgagc	tttttgagca	gcttggagag	1200
tacaaattcc	agaatgcgct	attagttcgt	tacaccaaga	aagtacccca	agtgtcaact	1260
ccaactcttg	tagaggtctc	aagaaaccta	ggaaaagtgg	gcagcaaatg	ttgtaaacat	1320
cctgaagcaa	aaagaatgcc	ctgtgcagaa	gactatctat	ccgtggtcct	gaaccagtta	1380
tgtgtgttgc	atgagaaaac	gccagtaagt	gacagagtca	ccaaatgctg	cacagaatcc	1440
ttggtgaaca	ggcgaccatg	cttttcagct	ctggaagtcg	atgaaacata	cgttcccaaa	1500
gagtttaatg	ctgaaacatt	caccttccat	gcagatatat	gcacactttc	tgagaaggag	1560
agacaaatca	agaaacaaac	tgcacttgtt	gagctcgtga	aacacaagcc	caaggcaaca	1620
aaagagcaac	tgaaagctgt	tatggatgat	ttcgcagctt	ttgtagagaa	gtgctgcaag	1680
gctgacgata	aggagacctg	ctttgccgag	gagggtaaaa	aacttgttgc	ggccagtcag	1740
gccgccttag	gcttaggatc	cgccgctcag	gctgcacagc	aaggaagcgc	gcgcaacgga	1800
gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	1860
gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	1920
atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	1980
ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	2040
cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	2100
ttagccaaag	actgccactg	catatga				2127

<210> 121 <211> 708 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 121

Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu

5 1015

Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu Ile Ala Phe Ala Gln Tyr LeuGln

2530

Gln Cys Pro Phe Glu Asp His Val Lys Leu Val Asn Glu Val Thr Glu 35 4045

Phe Ala Lys Thr Cys Val Ala Asp Glu Ser Ala Glu Asn Cys Asp Lys

5560

- 274 046387

Ser Leu His Thr Leu Phe Gly Asp Lys 65 70

Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala Asp 85

Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Gln His

100 105

Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val Asp

115 120

Asp Asn Glu Glu Thr Phe Leu Lys Lys

130 135

Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro Glu 145 150

Tyr Lys Ala Ala Phe Thr Glu Cys Cys

165

Cys Leu Leu Pro Lys Leu Asp Glu Leu

180 185

Ser Ala Lys Gln Arg Leu Lys Cys Ala

195 200

Arg Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val Ala

210 215

Lys Ala Glu Phe Ala Glu Val Ser Lys 225 230

Val His Thr Glu Cys Cys His Gly Asp

245

Arg Ala Asp Leu Ala Lys Tyr Ile Cys

260 265

Ser Lys Leu Lys Glu Cys Cys Glu Lys

275 280

Cys Ile Ala Glu Val Glu Asn Asp Glu

290 295

Leu Ala Ala Asp Phe Val Glu Ser Lys

305 310

Cys Thr Val Ala Thr Leu 75 80

Cys Ala Lys Gln Glu Pro 95

Asp Asp Asn Pro Asn Leu

110

Met Cys Thr Ala Phe His

125

Leu Tyr Glu Ile Ala Arg 140

Leu Phe Phe Ala Lys Arg

155 160

Ala Ala Asp Lys Ala Ala

175

Asp Glu Gly Lys Ala Ser

190

Leu Gln Lys Phe Gly Glu

205

Leu Ser Gln Arg Phe Pro

220

Val Thr Asp Leu Thr Lys

235 240

Leu Glu Cys Ala Asp Asp

255

Asn Gln Asp Ser Ile Ser

270

Leu Leu Glu Lys Ser His

285

Pro Ala Asp Leu Pro Ser

300

Val Cys Lys Asn Tyr Ala

315 320

- 275 046387

Glu Ala Lys Asp Val Phe Leu Gly Met Phe Leu Tyr Glu Tyr Ala Arg

325 330335

Arg His Pro Asp Tyr Ser Val Val Leu Leu Leu Arg Leu Ala Lys Thr

340 345350

Tyr Glu Thr Thr Leu Glu Lys Cys Cys Ala Ala Ala Asp Pro His Glu

355 360365

Cys Tyr Ala Lys Val Phe Asp Glu Phe Lys Pro Leu Val Glu Glu Pro

370 375380

Gln Asn Leu Ile Lys Gln Asn Cys Glu Leu Phe Glu Gln Leu Gly Glu

385 390 395400

Tyr Lys Phe Gln Asn Ala Leu Leu Val Arg Tyr Thr Lys Lys Val Pro

405 410415

Gln Val Ser Thr Pro Thr Leu Val Glu Val Ser Arg Asn Leu Gly Lys

420 425430

Val Gly Ser Lys Cys Cys Lys His Pro Glu Ala Lys Arg Met Pro Cys

435 440445

Ala Glu Asp Tyr Leu Ser Val Val Leu Asn Gln Leu Cys Val Leu His

450 455460

Glu Lys Thr Pro Val Ser Asp Arg Val Thr Lys Cys Cys Thr Glu Ser

465 470 475480

Leu Val Asn Arg Arg Pro Cys Phe Ser Ala Leu Glu Val Asp Glu Thr

485 490495

Tyr Val Pro Lys Glu Phe Asn Ala Glu Thr Phe Thr Phe His Ala Asp

500 505510

Ile Cys Thr Leu Ser Glu Lys Glu Arg Gln Ile Lys Lys Gln Thr Ala

515 520525

Leu Val Glu Leu Val Lys His Lys Pro Lys Ala Thr Lys Glu Gln Leu

530 535540

Lys Ala Val Met Asp Asp Phe Ala Ala Phe Val Glu Lys Cys Cys Lys

545 550 555560

Ala Asp Asp Lys Glu Thr Cys Phe Ala Glu Glu Gly Lys Lys Leu Val

565 570575

- 276 046387

Ala Ala Ser Gln Ala Ala Leu Gly Leu Gly Ser Ala Ala Gln Ala Ala

580 585590

Gln Gln Gly Ser Ala Arg Asn Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly

595 600605

Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly

610 615620

Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys

625 630 635640

Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln

645 650655

Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro

660 66567 0

Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr

675 680685

Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp

690 695700

Cys His Cys Ile 705 <210> 122 <211> 18 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 122

Gly Ser Ala Ala Gln Ala Ala Gln Gln Ala Ala Gln Ala Ala Gln Gln

5 10 15

Gly Ser <210> 123 <211> 2148 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

- 277 046387 <221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 123 gatgcacaca agagtgaggt tgctcatcga tttaaagatt tgggagaaga aaatttcaaa60 gccttggtgt tgattgcctt tgctcagtat cttcagcagt gtccatttga agatcatgta120 aaattagtga atgaagtaac tgaatttgca aaaacatgtg ttgctgatga gtcagctgaa180 aattgtgaca aatcacttca tacccttttt ggagacaaat tatgcacagt tgcaactctt240 cgtgaaacct atggtgaaat ggctgactgc tgtgcaaaac aagaacctga gagaaatgaa300 tgcttcttgc aacacaaaga tgacaaccca aacctccccc gattggtgag accagaggtt360 gatgtgatgt gcactgcttt tcatgacaat gaagagacat ttttgaaaaa atacttatat420 gaaattgcca gaagacatcc ttacttttat gccccggaac tccttttctt tgctaaaagg480 tataaagctg cttttacaga atgttgccaa gctgctgata aagctgcctg cctgttgcca540 aagctcgatg aacttcggga tgaagggaag gcttcgtctg ccaaacagag actcaagtgt600 gccagtctcc aaaaatttgg agaaagagct ttcaaagcat gggcagtagc tcgcctgagc660 cagagatttc ccaaagctga gtttgcagaa gtttccaagt tagtgacaga tcttaccaaa720 gtccacacgg aatgctgcca tggagatctg cttgaatgtg ctgatgacag ggcggacctt780 gccaagtata tctgtgaaaa tcaagattcg atctccagta aactgaagga atgctgtgaa840 aaacctctgt tggaaaaatc ccactgcatt gccgaagtgg aaaatgatga gatgcctgct900 gacttgcctt cattagctgc tgattttgtt gaaagtaagg atgtttgcaa aaactatgct960 gaggcaaagg atgtcttcct gggcatgttt ttgtatgaat atgcaagaag gcatcctgat1020 tactctgtcg tgctgctgct gagacttgcc aagacatatg aaaccactct agagaagtgc1080 tgtgccgctg cagatcctca tgaatgctat gccaaagtgt tcgatgaatt taaacctctt1140 gtggaagagc ctcagaattt aatcaaacaa aattgtgagc tttttgagca gcttggagag1200 tacaaattcc agaatgcgct attagttcgt tacaccaaga aagtacccca agtgtcaact1260 ccaactcttg tagaggtctc aagaaaccta ggaaaagtgg gcagcaaatg ttgtaaacat1320 cctgaagcaa aaagaatgcc ctgtgcagaa gactatctat ccgtggtcct gaaccagtta1380 tgtgtgttgc atgagaaaac gccagtaagt gacagagtca ccaaatgctg cacagaatcc1440 ttggtgaaca ggcgaccatg cttttcagct ctggaagtcg atgaaacata cgttcccaaa1500 gagtttaatg ctgaaacatt caccttccat gcagatatat gcacactttc tgagaaggag1560 agacaaatca agaaacaaac tgcacttgtt gagctcgtga aacacaagcc caaggcaaca1620 aaagagcaac tgaaagctgt tatggatgat ttcgcagctt ttgtagagaa gtgctgcaag1680 gctgacgata aggagacctg ctttgccgag gagggtaaaa aacttgttgc ggccagtcag1740

- 278 046387

gccgccttag	gcttaggatc	cgccgctcag	gctgcacagc	aagcagccca	agcagctcag	1800
cagggaagcg	cgcgcaacgg	agaccactgt	ccgctcgggc	ccgggcgttg	ctgccgtctg	1860
cacacggtcc	gcgcgtcgct	ggaagacctg	ggctgggccg	attgggtgct	gtcgccacgg	1920
gaggtgcaag	tgaccatgtg	catcggcgcg	tgcccgagcc	agttccgggc	ggcaaacatg	1980
cacgcgcaga	tcaagacgag	cctgcaccgc	ctgaagcccg	acacggtgcc	agcgccctgc	2040
tgcgtgcccg	ccagctacaa	tcccatggtg	ctcattcaaa	agaccgacac	cggggtgtcg	2100
ctccagacct	atgatgactt	gttagccaaa	gactgccact	gcatatga		2148

<210> 124 <211> 715 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 124

Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu

5 1015

Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu Ile Ala Phe Ala Gln Tyr Leu Gln 20 2530

Gln Cys Pro Phe Glu Asp His Val Lys Leu Val Asn Glu Val Thr Glu 35 4045

Phe Ala Lys Thr Cys Val Ala Asp Glu Ser Ala Glu Asn Cys Asp Lys 50 5560

Ser Leu His Thr Leu Phe Gly Asp Lys Leu Cys Thr Val Ala Thr Leu

70 7580

Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala Asp Cys Cys Ala Lys Gln Glu Pro 85 9095

Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Gln His Lys Asp Asp Asn Pro Asn Leu

100 105110

Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val Asp Val Met Cys Thr Ala Phe His

115 120125

Asp Asn Glu Glu Thr Phe Leu Lys Lys Tyr Leu Tyr Glu Ile Ala Arg

130 135140

Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys Arg

- 279 046387

145 150 155160

Tyr Lys Ala Ala Phe Thr Glu Cys Cys Gln Ala Ala Asp Lys Ala Ala

165 170175

Cys Leu Leu Pro Lys Leu Asp Glu Leu Arg Asp Glu Gly Lys Ala Ser

180 185190

Ser Ala Lys Gln Arg Leu Lys Cys Ala Ser Leu Gln Lys Phe Gly Glu

195 200205

Arg Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val Ala Arg Leu Ser Gln Arg Phe Pro

210 215220

Lys Ala Glu Phe Ala Glu Val Ser Lys Leu Val Thr Asp Leu Thr Lys

225 230 235240

Val His Thr Glu Cys Cys His Gly Asp Leu Leu Glu Cys Ala Asp Asp

245 250255

Arg Ala Asp Leu Ala Lys Tyr Ile Cys Glu Asn Gln Asp Ser Ile Ser

260 265270

Ser Lys Leu Lys Glu Cys Cys Glu Lys Pro Leu Leu Glu Lys Ser His

275 280285

Cys Ile Ala Glu Val Glu Asn Asp Glu Met Pro Ala Asp Leu Pro Ser

290 295300

Leu Ala Ala Asp Phe Val Glu Ser Lys Asp Val Cys Lys Asn Tyr Ala

305 310 315320

Glu Ala Lys Asp Val Phe Leu Gly Met Phe Leu Tyr Glu Tyr Ala Arg

325 330335

Arg His Pro Asp Tyr Ser Val Val Leu Leu Leu Arg Leu Ala Lys Thr

340 345350

Tyr Glu Thr Thr Leu Glu Lys Cys Cys Ala Ala Ala Asp Pro His Glu

355 360365

Cys Tyr Ala Lys Val Phe Asp Glu Phe Lys Pro Leu Val Glu Glu Pro

370 375380

Gln Asn Leu Ile Lys Gln Asn Cys Glu Leu Phe Glu Gln Leu Gly Glu

385 390 395400

- 280 046387

Tyr Lys Phe Gln Asn Ala Leu Leu Val 405

Gln Val Ser Thr Pro Thr Leu Val Glu

420 425

Val Gly Ser Lys Cys Cys Lys His Pro

435 440

Ala Glu Asp Tyr Leu Ser Val Val Leu

450 455

Glu Lys Thr Pro Val Ser Asp Arg Val 465 470

Leu Val Asn Arg Arg Pro Cys Phe Ser 485

Tyr Val Pro Lys Glu Phe Asn Ala Glu

500 505

Ile Cys Thr Leu Ser Glu Lys Glu Arg

515 520

Leu Val Glu Leu Val Lys His Lys Pro

530 535

Lys Ala Val Met Asp Asp Phe Ala Ala

545 550

Ala Asp Asp Lys Glu Thr Cys Phe Ala 565

Ala Ala Ser Gln Ala Ala Leu Gly Leu

580 585

Gln Gln Ala Ala Gln Ala Ala Gln Gln

595 600

His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys

610 615

Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala

625 630

Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly 645

Tyr Thr Lys Lys Val Pro

415

Ser Arg Asn Leu Gly Lys

430

Ala Lys Arg Met Pro Cys 445

Gln Leu Cys Val Leu His

460

Lys Cys Cys Thr Glu Ser

475 480

Leu Glu Val Asp Glu Thr

495

Phe Thr Phe His Ala Asp

510

Ile Lys Lys Gln Thr Ala

525

Ala Thr Lys Glu Gln Leu 540

Val Glu Lys Cys Cys Lys

555 560

Glu Gly Lys Lys Leu Val

575

Ser Ala Ala Gln Ala Ala

590

Ser Ala Arg Asn Gly Asp

605

Arg Leu His Thr Val Arg

620

Trp Val Leu Ser Pro Arg

635 640

Cys Pro Ser Gln Phe Arg

655

- 281 046387

Ala Ala Asn Met

660

His Ala Gln Ile

Lys Thr Ser Leu 665

His Arg Leu Lys 670

Pro Asp Thr Val

675

Pro Ala Pro Cys

680

Cys Val Pro Ala

Ser Tyr Asn Pro 685

Met Val Leu Ile

690

Gln Lys Thr Asp

695

Thr Gly Val Ser

700

Leu Gln Thr Tyr

Asp Asp Leu Leu 705

Ala Lys Asp Cys 710

His Cys Ile 715 <210> 125 <211> 22 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический пептид <400> 125

Gly Gly Asn Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala

5 10 15

Ala Ala Lys Ala Gly Gly <210> 126 <211> 2175 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 126

gatgcacaca	agagtgaggt	tgctcatcga	tttaaagatt	tgggagaaga	aaatttcaaa	60
gccttggtgt	tgattgcctt	tgctcagtat	cttcagcagt	gtccatttga	agatcatgta	120
aaattagtga	atgaagtaac	tgaatttgca	aaaacatgtg	ttgctgatga	gtcagctgaa	180
aattgtgaca	aatcacttca	tacccttttt	ggagacaaat	tatgcacagt	tgcaactctt	240
cgtgaaacct	atggtgaaat	ggctgactgc	tgtgcaaaac	aagaacctga	gagaaatgaa	300
tgcttcttgc	aacacaaaga	tgacaaccca	aacctccccc	gattggtgag	accagaggtt	360
gatgtgatgt	gcactgcttt	tcatgacaat	gaagagacat	ttttgaaaaa	atacttatat	420
gaaattgcca	gaagacatcc	ttacttttat	gccccggaac	tccttttctt	tgctaaaagg	480

- 282 046387 tataaagctg cttttacaga atgttgccaa gctgctgata aagctgcctg cctgttgcca540 aagctcgatg aacttcggga tgaagggaag gcttcgtctg ccaaacagag actcaagtgt600 gccagtctcc aaaaatttgg agaaagagct ttcaaagcat gggcagtagc tcgcctgagc660 cagagatttc ccaaagctga gtttgcagaa gtttccaagt tagtgacaga tcttaccaaa720 gtccacacgg aatgctgcca tggagatctg cttgaatgtg ctgatgacag ggcggacctt780 gccaagtata tctgtgaaaa tcaagattcg atctccagta aactgaagga atgctgtgaa840 aaacctctgt tggaaaaatc ccactgcatt gccgaagtgg aaaatgatga gatgcctgct900 gacttgcctt cattagctgc tgattttgtt gaaagtaagg atgtttgcaa aaactatgct960 gaggcaaagg atgtcttcct gggcatgttt ttgtatgaat atgcaagaag gcatcctgat1020 tactctgtcg tgctgctgct gagacttgcc aagacatatg aaaccactct agagaagtgc1080 tgtgccgctg cagatcctca tgaatgctat gccaaagtgt tcgatgaatt taaacctctt1140 gtggaagagc ctcagaattt aatcaaacaa aattgtgagc tttttgagca gcttggagag1200 tacaaattcc agaatgcgct attagttcgt tacaccaaga aagtacccca agtgtcaact1260 ccaactcttg tagaggtctc aagaaaccta ggaaaagtgg gcagcaaatg ttgtaaacat1320 cctgaagcaa aaagaatgcc ctgtgcagaa gactatctat ccgtggtcct gaaccagtta1380 tgtgtgttgc atgagaaaac gccagtaagt gacagagtca ccaaatgctg cacagaatcc1440 ttggtgaaca ggcgaccatg cttttcagct ctggaagtcg atgaaacata cgttcccaaa1500 gagtttaatg ctgaaacatt caccttccat gcagatatat gcacactttc tgagaaggag1560 agacaaatca agaaacaaac tgcacttgtt gagctcgtga aacacaagcc caaggcaaca1620 aaagagcaac tgaaagctgt tatggatgat ttcgcagctt ttgtagagaa gtgctgcaag1680 gctgacgata aggagacctg ctttgccgag gagggtaaaa aacttgttgc ggccagtcag1740 gccgccttag gcttaggagg caacgccgag gctgccgcta aggaagccgc tgccaaggag1800 gccgcagcaa aagaggctgc agctaaggcc ggaggagcgc gcaacggaga ccactgtccg1860 ctcgggcccg ggcgttgctg ccgtctgcac acggtccgcg cgtcgctgga agacctgggc1920 tgggccgatt gggtgctgtc gccacgggag gtgcaagtga ccatgtgcat cggcgcgtgc1980 ccgagccagt tccgggcggc aaacatgcac gcgcagatca agacgagcct gcaccgcctg2040 aagcccgaca cggtgccagc gccctgctgc gtgcccgcca gctacaatcc catggtgctc2100 attcaaaaga ccgacaccgg ggtgtcgctc cagacctatg atgacttgtt agccaaagac 2160 tgccactgca tatga2175 <210> 127 <211> 724 <212> PRT <213> Искусственная последовательность

- 283 046387 <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 127

Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu

5 1015

Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu Ile Ala Phe Ala Gln Tyr Leu Gln 20 2530

Gln Cys Pro Phe Glu Asp His Val Lys Leu Val Asn Glu Val Thr Glu 35 4045

Phe Ala Lys Thr Cys Val Ala Asp Glu Ser Ala Glu Asn Cys Asp Lys 50 5560

Ser Leu His Thr Leu Phe Gly Asp Lys Leu Cys Thr Val Ala Thr Leu

70 7580

Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala Asp Cys Cys Ala Lys Gln Glu Pro 85 9095

Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Gln His Lys Asp Asp Asn Pro Asn Leu

100 105110

Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val Asp Val Met Cys Thr Ala Phe His

115 120125

Asp Asn Glu Glu Thr Phe Leu Lys Lys Tyr Leu Tyr Glu Ile Ala Arg

130 135140

Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys Arg

145 150 155160

Tyr Lys Ala Ala Phe Thr Glu Cys Cys Gln Ala Ala Asp Lys Ala Ala

165 170175

Cys Leu Leu Pro Lys Leu Asp Glu Leu Arg Asp Glu Gly Lys Ala Ser

180 185190

Ser Ala Lys Gln Arg Leu Lys Cys Ala Ser Leu Gln Lys Phe Gly Glu

195 200205

Arg Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val Ala Arg Leu Ser Gln Arg Phe Pro

210 215220

- 284 046387

Lys Ala Glu Phe Ala Glu Val Ser Lys Leu Val Thr Asp Leu Thr

225 230 235

Val His Thr Glu Cys Cys His Gly Asp Leu Leu Glu Cys Ala Asp

245 250 255

Arg Ala Asp Leu Ala Lys Tyr Ile Cys Glu Asn Gln Asp Ser Ile

260 265 270

Ser Lys Leu Lys Glu Cys Cys Glu Lys Pro Leu Leu Glu Lys Ser

275 280 285

Cys Ile Ala Glu Val Glu Asn Asp Glu Met Pro Ala Asp Leu Pro

290 295 300

Leu Ala Ala Asp Phe Val Glu Ser Lys Asp Val Cys Lys Asn Tyr

305 310 315

Glu Ala Lys Asp Val Phe Leu Gly Met Phe Leu Tyr Glu Tyr Ala

325 330 335

Arg His Pro Asp Tyr Ser Val Val Leu Leu Leu Arg Leu Ala Lys

340 345 350

Tyr Glu Thr Thr Leu Glu Lys Cys Cys Ala Ala Ala Asp Pro His

355 360 365

Cys Tyr Ala Lys Val Phe Asp Glu Phe Lys Pro Leu Val Glu Glu

370 375 380

Gln Asn Leu Ile Lys Gln Asn Cys Glu Leu Phe Glu Gln Leu Gly

385 390 395

Tyr Lys Phe Gln Asn Ala Leu Leu Val Arg Tyr Thr Lys Lys Val

405 410 415

Gln Val Ser Thr Pro Thr Leu Val Glu Val Ser Arg Asn Leu Gly

420 425 430

Val Gly Ser Lys Cys Cys Lys His Pro Glu Ala Lys Arg Met Pro

435 440 445

Ala Glu Asp Tyr Leu Ser Val Val Leu Asn Gln Leu Cys Val Leu

450 455 460

Glu Lys Thr Pro Val Ser Asp Arg Val Thr Lys Cys Cys Thr Glu

465 470 475

Lys 240

Asp

Ser

His

Ser

Ala 320

Arg

Thr

Glu

Pro

Glu 400

Pro

Lys

Cys

His

Ser 480

- 285 046387

Leu Val Asn Arg Arg Pro Cys Phe 485

Ser Ala Leu Glu Val Asp Glu

490 495

Tyr Val Pro Lys Glu Phe Asn Ala Glu Thr Phe Thr Phe His Ala

500 505 510

Ile Cys Thr Leu Ser Glu Lys Glu Arg Gln Ile Lys Lys Gln Thr

515 520 525

Leu Val Glu Leu Val Lys His Lys Pro Lys Ala Thr Lys Glu Gln

530 535 540

Lys Ala Val Met Asp Asp Phe Ala Ala Phe Val Glu Lys Cys Cys

545 550 555

Ala Asp Asp Lys Glu Thr Cys Phe Ala Glu Glu Gly Lys Lys Leu

565 570 575

Ala Ala Ser Gln Ala Ala Leu Gly Leu Gly Gly Asn Ala Glu Ala

580 585 590

Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala

595 600 605

Lys Ala Gly Gly Ala Arg Asn Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro

610 615 620

Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu

625 630 635

Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met

645 650 655

Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala

660 665 670

Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala

675 680 685

Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys

690 695 700

Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys

705 710 715

Thr

Asp

Ala

Leu

Lys 560

Val

Ala

Gly

Gly 640

Cys

Gln

Pro

Thr

Asp 720

Cys His Cys Ile

- 286 046387 <210> 128 <211> 30 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 128

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

5 10 15

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 20 25 30 <210> 129 <211> 2184 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 129 gatgcacaca	agagtgaggt	tgctcatcga	tttaaagatt	tgggagaaga	aaatttcaaa	60
gccttggtgt	tgattgcctt	tgctcagtat	cttcagcagt	gtccatttga	agatcatgta	120
aaattagtga	atgaagtaac	tgaatttgca	aaaacatgtg	ttgctgatga	gtcagctgaa	180
aattgtgaca	aatcacttca	tacccttttt	ggagacaaat	tatgcacagt	tgcaactctt	240
cgtgaaacct	atggtgaaat	ggctgactgc	tgtgcaaaac	aagaacctga	gagaaatgaa	300
tgcttcttgc	aacacaaaga	tgacaaccca	aacctccccc	gattggtgag	accagaggtt	360
gatgtgatgt	gcactgcttt	tcatgacaat	gaagagacat	ttttgaaaaa	atacttatat	420
gaaattgcca	gaagacatcc	ttacttttat	gccccggaac	tccttttctt	tgctaaaagg	480
tataaagctg	cttttacaga	atgttgccaa	gctgctgata	aagctgcctg	cctgttgcca	540
aagctcgatg	aacttcggga	tgaagggaag	gcttcgtctg	ccaaacagag	actcaagtgt	600
gccagtctcc	aaaaatttgg	agaaagagct	ttcaaagcat	gggcagtagc	tcgcctgagc	660
cagagatttc	ccaaagctga	gtttgcagaa	gtttccaagt	tagtgacaga	tcttaccaaa	720
gtccacacgg	aatgctgcca	tggagatctg	cttgaatgtg	ctgatgacag	ggcggacctt	780
gccaagtata	tctgtgaaaa	tcaagattcg	atctccagta	aactgaagga	atgctgtgaa	840
aaacctctgt	tggaaaaatc	ccactgcatt	gccgaagtgg	aaaatgatga	gatgcctgct	900
gacttgcctt	cattagctgc	tgattttgtt	gaaagtaagg	atgtttgcaa	aaactatgct	960

- 287 046387

gaggcaaagg	atgtcttcct	gggcatgttt	ttgtatgaat	atgcaagaag	gcatcctgat	1020
tactctgtcg	tgctgctgct	gagacttgcc	aagacatatg	aaaccactct	agagaagtgc	1080
tgtgccgctg	cagatcctca	tgaatgctat	gccaaagtgt	tcgatgaatt	taaacctctt	1140
gtggaagagc	ctcagaattt	aatcaaacaa	aattgtgagc	tttttgagca	gcttggagag	1200
tacaaattcc	agaatgcgct	attagttcgt	tacaccaaga	aagtacccca	agtgtcaact	1260
ccaactcttg	tagaggtctc	aagaaaccta	ggaaaagtgg	gcagcaaatg	ttgtaaacat	1320
cctgaagcaa	aaagaatgcc	ctgtgcagaa	gactatctat	ccgtggtcct	gaaccagtta	1380
tgtgtgttgc	atgagaaaac	gccagtaagt	gacagagtca	ccaaatgctg	cacagaatcc	1440
ttggtgaaca	ggcgaccatg	cttttcagct	ctggaagtcg	atgaaacata	cgttcccaaa	1500
gagtttaatg	ctgaaacatt	caccttccat	gcagatatat	gcacactttc	tgagaaggag	1560
agacaaatca	agaaacaaac	tgcacttgtt	gagctcgtga	aacacaagcc	caaggcaaca	1620
aaagagcaac	tgaaagctgt	tatggatgat	ttcgcagctt	ttgtagagaa	gtgctgcaag	1680
gctgacgata	aggagacctg	ctttgccgag	gagggtaaaa	aacttgttgc	ggccagtcag	1740
gccgccttag	gcttaggagg	tggtggctct	ggaggcggtg	gaagcggagg	cggtggatcc	1800
ggaggcggtg	gaagcggagg	tggtggatct	ggaggcggtg	gaagcgcgcg	caacggagac	1860
cactgtccgc	tcgggcccgg	gcgttgctgc	cgtctgcaca	cggtccgcgc	gtcgctggaa	1920
gacctgggct	gggccgattg	ggtgctgtcg	ccacgggagg	tgcaagtgac	catgtgcatc	1980
ggcgcgtgcc	cgagccagtt	ccgggcggca	aacatgcacg	cgcagatcaa	gacgagcctg	2040
caccgcctga	agcccgacac	ggtgccagcg	ccctgctgcg	tgcccgccag	ctacaatccc	2100
atggtgctca	ttcaaaagac	cgacaccggg	gtgtcgctcc	agacctatga	tgacttgtta	2160
gccaaagact	gccactgcat	atga				2184

<210> 130 <211> 777 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 130

Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu

5 10 15

Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu Ile Ala Phe Ala Gln Tyr Leu Gln 20 25 30

- 288 046387

Gln

Phe

Gly 65

Leu

Thr

Asp

Thr

Glu 145

Asn

Phe

Ala

Lys

Ala 225

Ala

Gly

Phe

Cys Pro Phe Glu Asp 35

Ala Asp Ala His Lys 50

Glu Glu Asn Phe Lys

Gln Gln Cys Pro Phe 85

Glu Phe Ala Lys Thr

100

Lys Ser Leu His Thr 115

Leu Arg Glu Thr Tyr 130

Pro Glu Arg Asn Glu

150

Leu Pro Arg Leu Val

165

His Asp Asn Glu Glu 180

Arg Arg His Pro Tyr 195

Arg Tyr Lys Ala Ala 210

Ala Cys Leu Leu Pro

230

Ser Ser Ala Lys Gln

245

Glu Arg Ala Phe Lys 260

Pro Lys Ala Glu Phe

275

His Val Lys Leu Val 40

Ser Glu Val Ala His 55

Ala Leu Val Leu Ile

Glu Asp His Val Lys

Cys Val Ala Asp Glu 105

Leu Phe Gly Asp Lys

120

Gly Glu Met Ala Asp 135

Cys Phe Leu Gln His

155

Arg Pro Glu Val Asp

170

Thr Phe Leu Lys Lys 185

Phe Tyr Ala Pro Glu

200

Phe Thr Glu Cys Cys 215

Lys Leu Asp Glu Leu

235

Arg Leu Lys Cys Ala

250

Ala Trp Ala Val Ala 265

Ala Glu Val Ser Lys 280

Asn Glu Val Thr Glu 45

Arg Phe Lys Asp Leu 60

Ala Phe Ala Gln Tyr

Leu Val Asn Glu Val

Ser Ala Glu Asn Cys

110

Leu Cys Thr Val Ala

125

Cys Cys Ala Lys Gln 140

Lys Asp Asp Asn Pro

160

Val Met Cys Thr Ala

175

Tyr Leu Tyr Glu Ile 190

Leu Leu Phe Phe Ala

205

Gln Ala Ala Asp Lys 220

Arg Asp Glu Gly Lys

240

Ser Leu Gln Lys Phe

255

Arg Leu Ser Gln Arg

270

Leu Val Thr Asp Leu

285

- 289 046387

Thr Lys Val His Thr

290

Glu Cys Cys His Gly 295

Asp Leu Leu Glu Cys 300

Asp Asp Arg Ala Asp 305

Leu Ala Lys Tyr Ile 310

Cys Glu Asn Gln Asp 315

Ile Ser Ser Lys Leu

325

Lys Glu Cys Cys Glu

330

Lys Pro Leu Leu Glu

335

Ser His Cys Ile Ala

340

Glu Val Glu Asn Asp

345

Glu Met Pro Ala Asp

350

Pro Ser Leu Ala Ala

355

Asp Phe Val Glu Ser 360

Lys Asp Val Cys Lys

365

Tyr Ala Glu Ala Lys

370

Asp Val Phe Leu Gly 375

Met Phe Leu Tyr Glu 380

Ala Arg Arg His Pro 385

Asp Tyr Ser Val Val 390

Leu Leu Leu Arg Leu 395

Lys Thr Tyr Glu Thr

405

Thr Leu Glu Lys Cys

410

Cys Ala Ala Ala Asp

415

His Glu Cys Tyr Ala

420

Lys Val Phe Asp Glu

425

Phe Lys Pro Leu Val

430

Glu Pro Gln Asn Leu

435

Ile Lys Gln Asn Cys

440

Glu Leu Phe Glu Gln

445

Gly Glu Tyr Lys Phe 450

Gln Asn Ala Leu Leu

455

Val Arg Tyr Thr Lys

460

Val Pro Gln Val Ser 465

Thr Pro Thr Leu Val 470

Glu Val Ser Arg Asn 475

Gly Lys Val Gly Ser

485

Lys Cys Cys Lys His

490

Pro Glu Ala Lys Arg

495

Pro Cys Ala Glu Asp

500

Tyr Leu Ser Val Val

505

Leu Asn Gln Leu Cys

510

Leu His Glu Lys Thr 515

Pro Val Ser Asp Arg 520

Val Thr Lys Cys Cys 525

Glu Ser Leu Val Asn

530

Arg Arg Pro Cys Phe 535

Ser Ala Leu Glu Val

540

Ala

Ser 320

Lys

Leu

Asn

Tyr

Ala 400

Pro

Glu

Leu

Lys

Leu 480

Met

Val

Thr

Asp

- 290 046387

Glu Thr Tyr 545

Val Pro Lys Glu Phe Asn Ala Glu

550 555

Thr Phe Thr Phe His

560

Ala Asp Ile

Cys Thr Leu Ser Glu Lys Glu Arg Gln Ile Lys Lys Gln

565 570 575

Thr Ala Leu

Val Glu Leu Val Lys His Lys Pro Lys Ala Thr Lys Glu

580 585 590

Gln Leu Lys

595

Ala Val Met Asp Asp Phe Ala Ala Phe Val Glu Lys Cys

600 605

Cys Lys Ala

610

Asp Asp Lys Glu Thr Cys Phe Ala Glu Glu Gly Lys Lys

615 620

Leu Val Ala 625

Ala

Ser Gln Ala Ala Leu Gly Leu Gly Gly Gly Gly Ser

630 635 640

Gly Gly Gly

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

645 650 655

Gly Gly Gly

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Arg Asn Gly Asp His Cys

660 665 670

Pro Leu Gly

675

Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser

680 685

Leu Glu Asp

690

Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val

695 700

Gln Val Thr 705

Met Cys

Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala

710 715 720

Asn Met His

Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp

725 730 735

Thr Val Pro

Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala

740 745

Ser Tyr Asn Pro Met Val

750

Leu Ile Gln

755

Lys

Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp

760 765

Leu Leu Ala

770

Lys Asp Cys His Cys Ile 775 <210> 131

- 291 046387 <211> 217 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 131

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val LeuHis

70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser AsnLys

9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu AsnAsn

145 150 155160

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe PheLeu

165 170175

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

- 292 046387

210

215 <210> 132 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 132

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

- 293 046387

195

200

205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210

215 <210> 133 <211> 975 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 133 gcacctgaac tcctgggggg accgtcagtc ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc60 ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac120 cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag180 ccgcgggagg agcagtacgg gagcacgtac cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac240 caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc300 cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc360 ctgcccccat cccgggagga gatgaccaag aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa420 ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac480 tacgacacca cgcctcccgt gctggactcc gacggctcct tcttcctcta tagcgacctc540 accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag600 gctctgcaca accactacac gcagaagagc ctctccctgt ctccgggtgg agaccactgt660 ccgctcgggc ccgggcgttg ctgccgtctg cacacggtcc gcgcgtcgct ggaagacctg720 ggctgggccg attgggtgct gtcgccacgg gaggtgcaag tgaccatgtg catcggcgcg780 tgcccgagcc agttccgggc ggcaaacatg cacgcgcaga tcaagacgag cctgcaccgc840 ctgaagcccg acacggtgcc agcgccctgc tgcgtgcccg ccagctacaa tcccatggtg900 ctcattcaaa agaccgacac cggggtgtcg ctccagacct atgatgactt gttagccaaa960 gactgccact gcata975 <210> 134 <211> 325 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид

- 294 046387 <400> 134

Ala Pro Glu Leu Leu 1 5

Gly Gly Pro Ser Val

Phe Leu Phe Pro Pro

Pro Lys Asp Thr Leu

Met Ile Ser Arg Thr 25

Pro Glu Val Thr Cys 30

Val Val Asp Val Ser 35

His Glu Asp Pro Glu 40

Val Lys Phe Asn Trp 45

Val Asp Gly Val Glu 50

Val His Asn Ala Lys 55

Thr Lys Pro Arg Glu 60

Gln Tyr Gly Ser Thr 65

Tyr Arg Val Val Ser 70

Val Leu Thr Val Leu 75

Gln Asp Trp Leu Asn

Gly Lys Glu Tyr Lys

Cys Lys Val Ser Asn 95

Ala Leu Pro Ala Pro

100

Ile Glu Lys Thr Ile

105

Ser Lys Ala Lys Gly

110

Pro Arg Glu Pro Gln 115

Val Tyr Thr Leu Pro

120

Pro Ser Arg Glu Glu 125

Thr Lys Asn Gln Val

130

Ser Leu Thr Cys Leu

135

Val Lys Gly Phe Tyr

140

Ser Asp Ile Ala Val 145

Glu Trp Glu Ser Asn 150

Gly Gln Pro Glu Asn 155

Tyr Asp Thr Thr Pro

165

Pro Val Leu Asp Ser

170

Asp Gly Ser Phe Phe

175

Tyr Ser Asp Leu Thr

180

Val Asp Lys Ser Arg

185

Trp Gln Gln Gly Asn

190

Phe Ser Cys Ser Val 195

Met His Glu Ala Leu

200

His Asn His Tyr Thr

205

Lys Ser Leu Ser Leu 210

Ser Pro Gly Gly Asp

215

His Cys Pro Leu Gly

220

Gly Arg Cys Cys Arg 225

Leu His Thr Val Arg 230

Ala Ser Leu Glu Asp 235

Gly Trp Ala Asp Trp

245

Val Leu Ser Pro Arg

250

Glu Val Gln Val Thr

255

Lys

Val

Tyr

Glu

His 80

Lys

Gln

Met

Pro

Asn 160

Leu

Val

Gln

Pro

Leu 240

Met

- 295 046387

Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala 260 265270

Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala

275 280285

Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys

290 295300

Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys

305 310 315320

Asp Cys His Cys Ile 325 <210> 135 <211> 654 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 135 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	gagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccggaagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacaagacca	cgcctcccgt	gctgaagtcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcaagctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtaa	atga	654

<210> 136 <211> 984 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник

- 296 046387 <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид

<400> 136 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	gagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgc	gcgcgacgga	660
gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	720
gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	780
atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	840
ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	900
cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	960
ttagccaaag	actgccactg	cata				984

<210> 137 <211> 328 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 137

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu

- 297 046387

55 60

Gln 65

Gln

Ala

Pro

Thr

Ser 145

Tyr

Phe

Lys

Leu 225

Glu

Val

Met

Val

Tyr Gly Ser Thr Tyr

Arg Val Val Ser Val 75

Leu Thr Val Leu His

Asp Trp Leu Asn Gly

Leu Pro Ala Pro Ile

100

Arg Glu Pro Gln Val 115

Lys Asn Gln Val Ser 130

Asp Ile Ala Val Glu

150

Asp Thr Thr Pro Pro

165

Ser Asp Leu Thr Val

180

Ser Cys Ser Val Met

195

Ser Leu Ser Leu Ser 210

Gly Pro Gly Arg Cys

230

Asp Leu Gly Trp Ala

245

Thr Met Cys Ile Gly 260

His Ala Gln Ile Lys

275

Pro Ala Pro Cys Cys 290

Lys Glu Tyr Lys Cys

Lys Val Ser Asn Lys

Glu Lys Thr Ile Ser 105

Tyr Thr Leu Pro Pro 120

Leu Thr Cys Leu Val 135

Trp Glu Ser Asn Gly

155

Val Leu Asp Ser Asp

170

Asp Lys Ser Arg Trp 185

His Glu Ala Leu His

200

Pro Gly Ala Arg Asp 215

Cys Arg Leu His Thr

235

Asp Trp Val Leu Ser

250

Ala Cys Pro Ser Gln 265

Thr Ser Leu His Arg

280

Val Pro Ala Ser Tyr 295

Lys Ala Lys Gly Gln

110

Ser Arg Glu Glu Met

125

Lys Gly Phe Tyr Pro 140

Gln Pro Glu Asn Asn

160

Gly Ser Phe Phe Leu

175

Gln Gln Gly Asn Val

190

Asn His Tyr Thr Gln

205

Gly Asp His Cys Pro 220

Val Arg Ala Ser Leu

240

Pro Arg Glu Val Gln

255

Phe Arg Ala Ala Asn

270

Leu Lys Pro Asp Thr

285

Asn Pro Met Val Leu 300

- 298 046387

Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

305 310 315 320

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 138 <211> 996 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 138 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	gagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
gcgcgcgacg	gagaccactg	tccgctcggg	cccgggcgtt	gctgccgtct	gcacacggtc	720
cgcgcgtcgc	tggaagacct	gggctgggcc	gattgggtgc	tgtcgccacg	ggaggtgcaa	780
gtgaccatgt	gcatcggcgc	gtgcccgagc	cagttccggg	cggcaaacat	gcacgcgcag	840
atcaagacga	gcctgcaccg	cctgaagccc	gacacggtgc	cagcgccctg	ctgcgtgccc	900
gccagctaca	atcccatggt	gctcattcaa	aagaccgaca	ccggggtgtc	gctccagacc	960
tatgatgact	tgttagccaa	agactgccac	tgcata			996

<210> 139 <211> 332 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

- 299 046387 <400> 139 Ala Pro Glu 1

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

10 15

Pro Lys Asp

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

25 30

Val Val Asp

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

45

Val Asp Gly

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 55 60

Gln Tyr Gly 65

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 70 75

Gln Asp Trp

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

90 95

Ala Leu Pro

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

100 105 110

Pro Arg Glu

115

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu

120 125

Thr Lys Asn

130

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

135 140

Ser Asp Ile 145

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

150 155

Tyr Asp Thr

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

165 170 175

Tyr Ser Asp

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

180 185 190

Phe Ser Cys

195

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

200 205

Lys Ser Leu

210

Ser Leu Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ala Arg Asp

215 220

Asp His Cys 225

Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr

230 235

Lys

Val

Tyr

Glu

His 80

Lys

Gln

Met

Pro

Asn 160

Leu

Val

Gln

Gly

Val 240

Pro

Arg Ala Ser

Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser

- 300 046387

245

250

255

Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys

260

Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe

265 270

Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln

275 280

Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu

285

Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro

290 295

Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn

300

Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr

305 310

Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr

315 320

Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp

325

Cys His Cys Ile 330 <210> 140 <211> 217 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 140

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met

- 301 046387

Thr

Lys 130

115

Asn

Gln

Val

Ser

Leu

135

120

Thr

Cys

Leu

Val

Lys 140

125

Gly

Phe

Tyr

Pro

Ser

145

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr

Lys

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Lys

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Lys

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys

Ser

210

Leu

Ser

Leu

Ser

Pro

215

Gly

Lys <210> 141 <211> 216 <212> PRT <213>

Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 141

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

- 302 046387

Pro

Arg

Glu

115

Thr

Lys 130

Asn

100

Pro

Gln

Val

Ser

Cys

Leu

135

105

110

Thr

120

Leu

Pro

Ser

Arg 125

Glu

Met

Thr

Cys

Leu

Val

Lys 140

Gly

Phe

Tyr

Pro

Ser

145

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr

Asp

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Asp

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Asp

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 142 <211> 975 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 142 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtgcacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	agaccactgt	660

- 303 046387

ccgctcgggc	ccgggcgttg	ctgccgtctg	cacacggtcc	gcgcgtcgct	ggaagacctg	720
ggctgggccg	attgggtgct	gtcgccacgg	gaggtgcaag	tgaccatgtg	catcggcgcg	780
tgcccgagcc	agttccgggc	ggcaaacatg	cacgcgcaga	tcaagacgag	cctgcaccgc	840
ctgaagcccg	acacggtgcc	agcgccctgc	tgcgtgcccg	ccagctacaa	tcccatggtg	900
ctcattcaaa	agaccgacac	cggggtgtcg	ctccagacct	atgatgactt	gttagccaaa	960
gactgccact	gcata					975

<210> 143 <211> 325 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 143

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val LeuHis

70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser AsnLys

9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

- 304 046387

Tyr

Asp

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Asp

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Asp

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Asp His 210 215

Cys Pro Leu Gly Pro

220

Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu

225 230 235240

Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met

245 250255

Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala

260 265270

Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala

275 280285

Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys

290 295300

Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys

305 310 315320

Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 144 <211> 651 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 144 gccccagagc tgcttggtgg accatccgtg ttcctgtttc ctccaaagcc gaaggacacc60 ctgatgatct caagaactcc ggaagtgact tgcgtcgtcg tggacgtgtc acatgaggat120 ccagaggtca agttcaattg gtatgtggac ggagtggaag tgcataacgc caagaccaaa180

- 305 046387

ccccgcgaag	aacagtacgg	gagcacctac	cgcgtggtga	gcgtccttac	tgtgctccac	240
caggactggc	ttaatgggaa	ggaatacaag	tgtaaggtgt	ccaacaaggc	cctccccgct	300
cccatcgaaa	agaccatctc	aaaggcaaag	gggcaaccaa	gggaacctca	agtgtacacc	360
ctgcctccgt	gcaggaagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacttg	tctcgtgaag	420
ggcttctatc	ccagcgatat	tgctgtggaa	tgggagtcaa	atggccagcc	cgagaataac	480
tacaaaacta	ccccacccgt	gctgaaatct	gatgggtcct	tcttccttta	ctccaagctg	540
accgtggaca	agagccgctg	gcaacaaggc	aatgtcttta	gctgctcagt	gatgcatgag	600
gctctccata	atcactacac	tcagaagtca	ctgtccctgt	ctccgggtaa	a	651

<210> 145 <211> 984 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 145

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	gagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtgcacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgc	gcgcgacgga	660
gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	720
gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	780
atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	840
ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	900
cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	960
ttagccaaag	actgccactg	cata				984

- 306 046387 <210> 146 <211> 328 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 146

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

- 307 046387

Lys

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ala Arg Asp

210 215

Gly Asp His Cys Pro

220

Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His 225 230

Thr Val Arg Ala Ser Leu

235 240

Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val

245

Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln

250 255

Val Thr Met Cys

260

Ile Gly Ala Cys

Pro Ser Gln Phe 265

Arg Ala Ala Asn 270

Met His Ala Gln

275

Ile Lys Thr Ser

280

Leu His Arg Leu

Lys Pro Asp Thr 285

Val Pro Ala Pro

290

Ile Gln Lys Thr 305

Cys Cys Val Pro 295

Asp Thr Gly Val 310

Ala Ser Tyr Asn

300

Pro Met Val Leu

Ser Leu Gln Thr

315

Tyr Asp Asp Leu

320

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 147 <211> 217 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 147

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu

5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

- 308 046387

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Cys Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

210215 <210> 148 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 148

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu

5560

- 309 046387

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Cys Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210215 <210> 149 <211> 984 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 149

gcgccggaac	tgctgggcgg	cccgagcgtg	tttctgtttc	cgccgaaacc	gaaagatacc	60
ctgatgatta	gccgcacccc	ggaagtgacc	tgcgtggtgg	tggatgtgag	ccatgaagat	120
ccggaagtga	aatttaactg	gtatgtggat	ggcgtggaag	tgcataacgc	gaaaaccaaa	180
ccgcgcgaag	aacagtatgg	cagcacctat	cgcgtggtga	gcgtgctgac	cgtgctgcat	240
caggattggc	tgaacggcaa	agaatataaa	tgcaaagtga	gcaacaaagc	gctgccggcg	300
ccgattgaaa	aaaccattag	caaagcgaaa	ggccagccgc	gcgaaccgca	ggtgtatacc	360

- 310 046387

tgcccgccga	gccgcaaaga	aatgaccaaa	aaccaggtga	gcctgacctg	cctggtgaaa	420
ggcttttatc	cgagcgatat	tgcggtggaa	tgggaaagca	acggccagcc	ggaaaacaac	480
tataaaacca	ccccgccggt	gctgaaaagc	gatggcagct	tttttctgta	tagcaaactg	540
accgtggata	aaagccgctg	gcagcagggc	aacgtgttta	gctgcagcgt	gatgcatgaa	600
gcgctgcata	accattatac	ccagaaaagc	ctgagcctga	gcccgggcgc	gcgcaacggc	660
gatcattgcc	cgctgggccc	gggccgctgc	tgccgcctgc	ataccgtgcg	cgcgagcctg	720
gaagatctgg	gctgggcgga	ttgggtgctg	agcccgcgcg	aagtgcaggt	gaccatgtgc	780
attggcgcgt	gcccgagcca	gtttcgcgcg	gcgaacatgc	atgcgcagat	taaaaccagc	840
ctgcatcgcc	tgaaaccgga	taccgtgccg	gcgccgtgct	gcgtgccggc	gagctataac	900
ccgatggtgc	tgattcagaa	aaccgatacc	ggcgtgagcc	tgcagaccta	tgatgatctg	960
ctggcgaaag	attgccattg	catt				984

<210> 150 <211> 328 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 150

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Cys Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met

- 311 046387

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ala Arg Asn Gly Asp His Cys Pro

210 215220

Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu

225 230 235240

Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln

245 250255

Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn

260 265270

Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr

275 280285

Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu

290 295300

Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

305 310 315320

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 151 <211> 651 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

- 312 046387 полинуклеотид

<400> 151 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	gagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
tgtcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtaa	a	651

<210> 152 <211> 984 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 152

gcgccggaac	tgctgggcgg	cccgagcgtg	tttctgtttc	cgccgaaacc	gaaagatacc	60
ctgatgatta	gccgcacccc	ggaagtgacc	tgcgtggtgg	tggatgtgag	ccatgaagat	120
ccggaagtga	aatttaactg	gtatgtggat	ggcgtggaag	tgcataacgc	gaaaaccaaa	180
ccgcgcgaag	aacagtatgg	cagcacctat	cgcgtggtga	gcgtgctgac	cgtgctgcat	240
caggattggc	tgaacggcaa	agaatataaa	tgcaaagtga	gcaacaaagc	gctgccggcg	300
ccgattgaaa	aaaccattag	caaagcgaaa	ggccagccgc	gcgaaccgca	ggtgtatacc	360
tgcccgccga	gccgcaaaga	aatgaccaaa	aaccaggtga	gcctgacctg	cctggtgaaa	420
ggcttttatc	cgagcgatat	tgcggtggaa	tgggaaagca	acggccagcc	ggaaaacaac	480
tataaaacca	ccccgccggt	gctgaaaagc	gatggcagct	tttttctgta	tagcaaactg	540
accgtggata	aaagccgctg	gcagcagggc	aacgtgttta	gctgcagcgt	gatgcatgaa	600
gcgctgcata	accattatac	ccagaaaagc	ctgagcctga	gcccgggcgc	gcgcgatggc	660
gatcattgcc	cgctgggccc	gggccgctgc	tgccgcctgc	ataccgtgcg	cgcgagcctg	720
gaagatctgg	gctgggcgga	ttgggtgctg	agcccgcgcg	aagtgcaggt	gaccatgtgc	780

- 313 046387

attggcgcgt	gcccgagcca	gtttcgcgcg	gcgaacatgc	atgcgcagat	taaaaccagc	840
ctgcatcgcc	tgaaaccgga	taccgtgccg	gcgccgtgct	gcgtgccggc	gagctataac	900
ccgatggtgc	tgattcagaa	aaccgatacc	ggcgtgagcc	tgcagaccta	tgatgatctg	960
ctggcgaaag	attgccattg	catt				984

<210> 153 <211> 328 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 153

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Cys Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

- 314 046387

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro

210 215220

Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu

225 230 235240

Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln

245 250255

Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn

260 265270

Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr

275 280285

Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu

290 295300

Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

305 310 315320

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 154 <211> 210 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 154

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu MetIle

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser HisGlu

2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His

4045

- 315 046387

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105110

Thr Leu Pro Pro

115

Ser Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

120125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155160

Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

165 170175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

180 185190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195 200205

Gly Lys

210 <210> 155 <211> 209 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 155

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu MetIle

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser HisGlu

2530

- 316 046387

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

40

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 45

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 50 55 60

Val Val Ser Val

Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

75 80

Glu Tyr Lys Cys

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 90 95

Lys

Thr

Ile

Ser

100

Lys

Ala

Lys

Gly

Gln

105

Pro

Arg

Glu

Pro

Gln

110

Val

Tyr

Thr Leu Pro Pro

115

Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

120125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155160

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp

165 170175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

180 185190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195 200205

Gly <210> 156 <211> 954 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 156 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 60 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 120

- 317 046387

tacgtggacg	gcgtggaggt	gcataatgcc	aagacaaagc	cgcgggagga	gcagtacaac	180
agcacgtacc	gtgtggtcag	cgtcctcacc	gtcctgcacc	aggactggct	gaatggcaag	240
gagtacaagt	gcaaggtctc	caacaaagcc	ctcccagccc	ccatcgagaa	aaccatctcc	300
aaagccaaag	ggcagccccg	agaaccacag	gtgtacaccc	tgcccccatc	ccgggaggag	360
atgaccaaga	accaggtcag	cctgacctgc	ctggtcaaag	gcttctatcc	cagcgacatc	420
gccgtggagt	gggagagcaa	tgggcagccg	gagaacaact	acgacaccac	gcctcccgtg	480
ctggactccg	acggctcctt	cttcctctat	agcgacctca	ccgtggacaa	gagcaggtgg	540
cagcagggga	acgtcttctc	atgctccgtg	atgcatgagg	ctctgcacaa	ccactacacg	600
cagaagagcc	tctccctgtc	tccgggtgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	660
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	720
tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	780
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	840
gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	900
ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	ttagccaaag	actgccactg	cata	954

<210> 157 <211> 318 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 157

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

- 318 046387

Lys Thr Ile Ser Lys

100

Ala Lys Gly Gln Pro

105

Arg Glu Pro Gln Val

110

Thr Leu Pro Pro Ser

115

Arg Glu Glu Met Thr 120

Lys Asn Gln Val Ser

125

Thr Cys Leu Val Lys

130

Gly Phe Tyr Pro Ser 135

Asp Ile Ala Val Glu

140

Glu Ser Asn Gly Gln 145

Pro Glu Asn Asn Tyr 150

Asp Thr Thr Pro Pro 155

Leu Asp Ser Asp Gly

165

Ser Phe Phe Leu Tyr

170

Ser Asp Leu Thr Val

175

Lys Ser Arg Trp Gln

180

Gln Gly Asn Val Phe

185

Ser Cys Ser Val Met

190

Glu Ala Leu His Asn

195

His Tyr Thr Gln Lys

200

Ser Leu Ser Leu Ser

205

Gly Gly Asp His Cys 210

Pro Leu Gly Pro Gly 215

Arg Cys Cys Arg Leu 220

Thr Val Arg Ala Ser 225

Leu Glu Asp Leu Gly 230

Trp Ala Asp Trp Val 235

Ser Pro Arg Glu Val

245

Gln Val Thr Met Cys

250

Ile Gly Ala Cys Pro

255

Gln Phe Arg Ala Ala

260

Asn Met His Ala Gln

265

Ile Lys Thr Ser Leu

270

Arg Leu Lys Pro Asp 275

Thr Val Pro Ala Pro

280

Cys Cys Val Pro Ala 285

Tyr Asn Pro Met Val 290

Leu Ile Gln Lys Thr

295

Asp Thr Gly Val Ser 300

Tyr

Leu

Trp

Val 160

Asp

His

Pro

His

Leu 240

Ser

His

Ser

Leu

Gln Thr Tyr Asp Asp 305

Leu Leu Ala Lys Asp 310

Cys His Cys Ile 315 <210>

<211>

<212>

<213>

158

633

ДНК

Искусственная последовательность

- 319 046387 <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 158 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct60 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg120 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac180 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag240 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc300 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccggaaggag360 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc420 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg480 ctgaagtccg acggctcctt cttcctctat agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg540 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg600 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga633 <210> 159 <211> 963 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 159 ccgtcagtct	tcctcttccc	cccaaaaccc	aaggacaccc	tcatgatctc	ccggacccct	60
gaggtcacat	gcgtggtggt	ggacgtgagc	cacgaagacc	ctgaggtcaa	gttcaactgg	120
tacgtggacg	gcgtggaggt	gcataatgcc	aagacaaagc	cgcgggagga	gcagtacaac	180
agcacgtacc	gtgtggtcag	cgtcctcacc	gtcctgcacc	aggactggct	gaatggcaag	240
gagtacaagt	gcaaggtctc	caacaaagcc	ctcccagccc	ccatcgagaa	aaccatctcc	300
aaagccaaag	ggcagccccg	agaaccacag	gtgtacaccc	tgcccccatc	ccgggaggag	360
atgaccaaga	accaggtcag	cctgacctgc	ctggtcaaag	gcttctatcc	cagcgacatc	420
gccgtggagt	gggagagcaa	tgggcagccg	gagaacaact	acgacaccac	gcctcccgtg	480
ctggactccg	acggctcctt	cttcctctat	agcgacctca	ccgtggacaa	gagcaggtgg	540
cagcagggga	acgtcttctc	atgctccgtg	atgcatgagg	ctctgcacaa	ccactacacg	600
cagaagagcc	tctccctgtc	tccgggtgcg	cgcgacggag	accactgtcc	gctcgggccc	660
gggcgttgct	gccgtctgca	cacggtccgc	gcgtcgctgg	aagacctggg	ctgggccgat	720

- 320 046387

tgggtgctgt	cgccacggga	ggtgcaagtg	accatgtgca	tcggcgcgtg	cccgagccag	780
ttccgggcgg	caaacatgca	cgcgcagatc	aagacgagcc	tgcaccgcct	gaagcccgac	840
acggtgccag	cgccctgctg	cgtgcccgcc	agctacaatc	ccatggtgct	cattcaaaag	900
accgacaccg	gggtgtcgct	ccagacctat	gatgacttgt	tagccaaaga	ctgccactgc	960
ata						963

<210> 160 <211> 321 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 160

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155160

- 321 046387

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp

165 170175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

180 185190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195 200205

Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys

210 215220

Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp

225 230 235240

Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala

245 250255

Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr

260 265270

Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val

275 280285

Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly

290 295300

Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys

305 310 315320

Ile <210> 161 <211> 210 <212> PRT <213>

Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 161

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu MetIle

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser HisGlu

2530

- 322 046387

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

40

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 45

Asn Ala Lys Thr

Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 55 60

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 75 80

Glu Tyr Lys Cys

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 90 95

Lys

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105 110

Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120 125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135 140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155 160

Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

165 170 175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

180 185 190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195 200 205

Gly Lys

210 <210> 162 <211> 209 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 162

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 10 15

- 323 046387

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 20

Val Val Val Asp Val Ser His Glu 25 30

Asp Pro Glu Val

Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

45

His

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 8590

Ile Glu 95

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys

100 105110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155160

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp

165 170175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

180 185190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195 200205

Gly <210> 163 <211> 954 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 163

- 324 046387

ccgtcagtct	tcctcttccc	cccaaaaccc	aaggacaccc	tcatgatctc	ccggacccct	60
gaggtcacat	gcgtggtggt	ggacgtgagc	cacgaagacc	ctgaggtcaa	gttcaactgg	120
tacgtggacg	gcgtggaggt	gcataatgcc	aagacaaagc	cgcgggagga	gcagtacaac	180
agcacgtacc	gtgtggtcag	cgtcctcacc	gtcctgcacc	aggactggct	gaatggcaag	240
gagtacaagt	gcaaggtctc	caacaaagcc	ctcccagccc	ccatcgagaa	aaccatctcc	300
aaagccaaag	ggcagccccg	agaaccacag	gtgtgcaccc	tgcccccatc	ccgggaggag	360
atgaccaaga	accaggtcag	cctgacctgc	ctggtcaaag	gcttctatcc	cagcgacatc	420
gccgtggagt	gggagagcaa	tgggcagccg	gagaacaact	acgacaccac	gcctcccgtg	480
ctggactccg	acggctcctt	cttcctctat	agcgacctca	ccgtggacaa	gagcaggtgg	540
cagcagggga	acgtcttctc	atgctccgtg	atgcatgagg	ctctgcacaa	ccactacacg	600
cagaagagcc	tctccctgtc	tccgggtgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	660
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	720
tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	780
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	840
gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	900
ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	ttagccaaag	actgccactg	cata	954

<210> 164 <211> 318 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 164

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

- 325 046387

Glu Tyr Lys Cys Lys

Val Ser Asn Lys Ala

Leu Pro Ala Pro Ile

Lys Thr Ile Ser Lys

100

Ala Lys Gly Gln Pro

105

Arg Glu Pro Gln Val

110

Thr Leu Pro Pro Ser

115

Arg Glu Glu Met Thr 120

Lys Asn Gln Val Ser

125

Thr Cys Leu Val Lys

130

Gly Phe Tyr Pro Ser 135

Asp Ile Ala Val Glu

140

Glu Ser Asn Gly Gln 145

Pro Glu Asn Asn Tyr 150

Asp Thr Thr Pro Pro 155

Leu Asp Ser Asp Gly

165

Ser Phe Phe Leu Tyr

170

Ser Asp Leu Thr Val

175

Lys Ser Arg Trp Gln

180

Gln Gly Asn Val Phe

185

Ser Cys Ser Val Met

190

Glu Ala Leu His Asn

195

His Tyr Thr Gln Lys

200

Ser Leu Ser Leu Ser

205

Gly Gly Asp His Cys

210

Pro Leu Gly Pro Gly 215

Arg Cys Cys Arg Leu 220

Thr Val Arg Ala Ser 225

Leu Glu Asp Leu Gly 230

Trp Ala Asp Trp Val 235

Ser Pro Arg Glu Val

245

Gln Val Thr Met Cys

250

Ile Gly Ala Cys Pro

255

Gln Phe Arg Ala Ala

260

Asn Met His Ala Gln

265

Ile Lys Thr Ser Leu

270

Arg Leu Lys Pro Asp

275

Thr Val Pro Ala Pro

280

Cys Cys Val Pro Ala

285

Tyr Asn Pro Met Val 290

Leu Ile Gln Lys Thr

295

Asp Thr Gly Val Ser 300

Glu

Cys

Leu

Trp

Val 160

Asp

His

Pro

His

Leu 240

Ser

His

Ser

Leu

Gln Thr Tyr Asp Asp 305

Leu Leu Ala Lys Asp 310

Cys His Cys Ile 315 <210> 165 <211> 630

- 326 046387 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид” <400> 165

ccatccgtgt	tcctgtttcc	tccaaagccg	aaggacaccc	tgatgatctc	aagaactccg	60
gaagtgactt	gcgtcgtcgt	ggacgtgtca	catgaggatc	cagaggtcaa	gttcaattgg	120
tatgtggacg	gagtggaagt	gcataacgcc	aagaccaaac	cccgcgaaga	acagtacaat	180
agcacctacc	gcgtggtgag	cgtccttact	gtgctccacc	aggactggct	taatgggaag	240
gaatacaagt	gtaaggtgtc	caacaaggcc	ctccccgctc	ccatcgaaaa	gaccatctca	300
aaggcaaagg	ggcaaccaag	ggaacctcaa	gtgtacaccc	tgcctccgtg	caggaaggag	360
atgaccaaga	accaggtcag	cctgacttgt	ctcgtgaagg	gcttctatcc	cagcgatatt	420
gctgtggaat	gggagtcaaa	tggccagccc	gagaataact	acaaaactac	cccacccgtg	480
ctgaaatctg	atgggtcctt	cttcctttac	tccaagctga	ccgtggacaa	gagccgctgg	540
caacaaggca	atgtctttag	ctgctcagtg	atgcatgagg	ctctccataa	tcactacact	600
cagaagtcac	tgtccctgtc	tccgggtaaa				630

<210> 166 <211> 963 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид” <400> 166

ccgtcagtct	tcctcttccc	cccaaaaccc	aaggacaccc	tcatgatctc	ccggacccct	60
gaggtcacat	gcgtggtggt	ggacgtgagc	cacgaagacc	ctgaggtcaa	gttcaactgg	120
tacgtggacg	gcgtggaggt	gcataatgcc	aagacaaagc	cgcgggagga	gcagtacaac	180
agcacgtacc	gtgtggtcag	cgtcctcacc	gtcctgcacc	aggactggct	gaatggcaag	240
gagtacaagt	gcaaggtctc	caacaaagcc	ctcccagccc	ccatcgagaa	aaccatctcc	300
aaagccaaag	ggcagccccg	agaaccacag	gtgtgcaccc	tgcccccatc	ccgggaggag	360
atgaccaaga	accaggtcag	cctgacctgc	ctggtcaaag	gcttctatcc	cagcgacatc	420
gccgtggagt	gggagagcaa	tgggcagccg	gagaacaact	acgacaccac	gcctcccgtg	480
ctggactccg	acggctcctt	cttcctctat	agcgacctca	ccgtggacaa	gagcaggtgg	540
cagcagggga	acgtcttctc	atgctccgtg	atgcatgagg	ctctgcacaa	ccactacacg	600

- 327 046387 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtgcg cgcgacggag accactgtcc gctcgggccc660 gggcgttgct gccgtctgca cacggtccgc gcgtcgctgg aagacctggg ctgggccgat720 tgggtgctgt cgccacggga ggtgcaagtg accatgtgca tcggcgcgtg cccgagccag780 ttccgggcgg caaacatgca cgcgcagatc aagacgagcc tgcaccgcct gaagcccgac840 acggtgccag cgccctgctg cgtgcccgcc agctacaatc ccatggtgct cattcaaaag900 accgacaccg gggtgtcgct ccagacctat gatgacttgt tagccaaaga ctgccactgc960 ata963 <210> 167 <211> 321 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 167

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys

100 105110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val

- 328 046387

145 150 155160

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp

165 170175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

180 185190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195 200205

Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys

210 215220

Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp

225 230 235240

Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala

245 250255

Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr

260 265270

Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val

275 280285

Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly

290 295300

Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys

305 310 315320

Ile <210> 168 <211> 227 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 168

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

- 329 046387

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

40 45

Ser His

Glu Asp Pro Glu Val

Lys

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr 65 70 7580

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 85 9095

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

130 135140

Ser

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170175

Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215220

Pro Gly Lys

225 <210> 169 <211> 226 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

- 330 046387 полипептид” <400> 169

Asp Lys Thr His Thr 1 5

Cys Pro Pro Cys Pro

Ala Pro Glu Leu Leu

Gly Pro Ser Val Phe

Leu Phe Pro Pro Lys

Pro Lys Asp Thr Leu

Ile Ser Arg Thr Pro 35

Glu Val Thr Cys Val 40

Val Val Asp Val Ser 45

Glu Asp Pro Glu Val 50

Lys Phe Asn Trp Tyr 55

Val Asp Gly Val Glu 60

His Asn Ala Lys Thr 65

Lys Pro Arg Glu Glu 70

Gln Tyr Gly Ser Thr 75

Arg Val Val Ser Val 85

Leu Thr Val Leu His

Gln Asp Trp Leu Asn

Lys Glu Tyr Lys Cys

100

Lys Val Ser Asn Lys

105

Ala Leu Pro Ala Pro

110

Glu Lys Thr Ile Ser 115

Lys Ala Lys Gly Gln

120

Pro Arg Glu Pro Gln

125

Tyr Thr Leu Pro Pro

130

Ser Arg Glu Glu Met

135

Thr Lys Asn Gln Val 140

Leu Thr Cys Leu Val 145

Lys Gly Phe Tyr Pro 150

Ser Asp Ile Ala Val 155

Trp Glu Ser Asn Gly

165

Gln Pro Glu Asn Asn

170

Tyr Asp Thr Thr Pro

175

Val Leu Asp Ser Asp

180

Gly Ser Phe Phe Leu

185

Tyr Ser Asp Leu Thr

190

Asp Lys Ser Arg Trp 195

Gln Gln Gly Asn Val 200

Phe Ser Cys Ser Val 205

His Glu Ala Leu His

210

Asn His Tyr Thr Gln 215

Lys Ser Leu Ser Leu 220

Gly

Met

His

Val

Tyr 80

Gly

Ile

Val

Ser

Glu 160

Pro

Val

Met

Ser

Pro Gly 225

- 331 046387 <210> 170 <211> 1005 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 170 gacaaaactc	acacatgccc	accgtgccca	gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	60
ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	120
tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	180
ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	ccgcgggagg	agcagtacgg	cagcacgtac	240
cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	300
tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	360
gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	420
aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	480
tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	540
gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	600
aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	660
ctctccctgt	ctccgggtgg	agaccactgt	ccgctcgggc	ccgggcgttg	ctgccgtctg	720
cacacggtcc	gcgcgtcgct	ggaagacctg	ggctgggccg	attgggtgct	gtcgccacgg	780
gaggtgcaag	tgaccatgtg	catcggcgcg	tgcccgagcc	agttccgggc	ggcaaacatg	840
cacgcgcaga	tcaagacgag	cctgcaccgc	ctgaagcccg	acacggtgcc	agcgccctgc	900
tgcgtgcccg	ccagctacaa	tcccatggtg	ctcattcaaa	agaccgacac	cggggtgtcg	960
ctccagacct	atgatgactt	gttagccaaa	gactgccact	gcata		1005

<210> 171 <211> 335 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 171

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

25

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

- 332 046387

Ile Ser Arg Thr Pro 35

Glu Val Thr Cys Val 40

Val Val Asp Val Ser 45

Glu Asp Pro Glu Val 50

Lys Phe Asn Trp Tyr 55

Val Asp Gly Val Glu 60

His Asn Ala Lys Thr 65

Lys Pro Arg Glu Glu 70

Gln Tyr Gly Ser Thr 75

Arg Val Val Ser Val 85

Leu Thr Val Leu His

Gln Asp Trp Leu Asn

Lys Glu Tyr Lys Cys

100

Lys Val Ser Asn Lys

105

Ala Leu Pro Ala Pro

110

Glu Lys Thr Ile Ser 115

Lys Ala Lys Gly Gln

120

Pro Arg Glu Pro Gln 125

Tyr Thr Leu Pro Pro

130

Ser Arg Glu Glu Met

135

Thr Lys Asn Gln Val 140

Leu Thr Cys Leu Val 145

Lys Gly Phe Tyr Pro 150

Ser Asp Ile Ala Val 155

Trp Glu Ser Asn Gly

165

Gln Pro Glu Asn Asn

170

Tyr Asp Thr Thr Pro

175

Val Leu Asp Ser Asp

180

Gly Ser Phe Phe Leu

185

Tyr Ser Asp Leu Thr

190

Asp Lys Ser Arg Trp 195

Gln Gln Gly Asn Val 200

Phe Ser Cys Ser Val 205

His Glu Ala Leu His

210

Asn His Tyr Thr Gln 215

Lys Ser Leu Ser Leu 220

Pro Gly Gly Asp His 225

Cys Pro Leu Gly Pro 230

Gly Arg Cys Cys Arg 235

His Thr Val Arg Ala

245

Ser Leu Glu Asp Leu

250

Gly Trp Ala Asp Trp

255

Leu Ser Pro Arg Glu

260

Val Gln Val Thr Met

265

Cys Ile Gly Ala Cys

270

Ser Gln Phe Arg Ala

Ala Asn Met His Ala

Gln Ile Lys Thr Ser

His

Val

Tyr 80

Gly

Ile

Val

Ser

Glu 160

Pro

Val

Met

Ser

Leu 240

Val

Pro

Leu

- 333 046387

275

280

285

His Arg Leu Lys

290

Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala

295300

Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val

305 310315

Ser

320

Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys

325330

Ile

335 <210> 172 <211> 681 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 172

gacaaaactc	acacatgccc	accgtgccca	gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	60
ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	120
tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	180
ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	ccgcgggagg	agcagtacgg	cagcacgtac	240
cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	300
tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	360
gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	ctgcccccat	cccggaagga	gatgaccaag	420
aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	480
tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	tacaagacca	cgcctcccgt	gctgaagtcc	540
gacggctcct	tcttcctcta	tagcaagctc	accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	600
aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	660
ctctccctgt	ctccgggtaa	a				681

<210> 173 <211> 1014 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 173 gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gcacctgaac tcctgggggg accgtcagtc 60

- 334 046387

ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	120
tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	180
ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	ccgcgggagg	agcagtacgg	cagcacgtac	240
cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	300
tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	360
gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	420
aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	480
tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	540
gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	600
aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	660
ctctccctgt	ctccgggtgc	gcgcgacgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	720
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	780
tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	840
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	900
gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	960
ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	ttagccaaag	actgccactg	cata	1014

<210> 174 <211> 338 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 174

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

5 1015

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr LeuMet

2530

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 35 4045

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 50 5560

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr

70 7580

- 335 046387

Arg Val Val Ser Val 85

Leu Thr Val Leu His

Gln Asp Trp Leu Asn

Lys Glu Tyr Lys Cys

100

Lys Val Ser Asn Lys

105

Ala Leu Pro Ala Pro

110

Glu Lys Thr Ile Ser 115

Lys Ala Lys Gly Gln

120

Pro Arg Glu Pro Gln 125

Tyr Thr Leu Pro Pro

130

Ser Arg Glu Glu Met

135

Thr Lys Asn Gln Val

140

Leu Thr Cys Leu Val 145

Lys Gly Phe Tyr Pro 150

Ser Asp Ile Ala Val 155

Trp Glu Ser Asn Gly

165

Gln Pro Glu Asn Asn

170

Tyr Asp Thr Thr Pro

175

Val Leu Asp Ser Asp

180

Gly Ser Phe Phe Leu

185

Tyr Ser Asp Leu Thr

190

Asp Lys Ser Arg Trp 195

Gln Gln Gly Asn Val 200

Phe Ser Cys Ser Val 205

His Glu Ala Leu His

210

Asn His Tyr Thr Gln 215

Lys Ser Leu Ser Leu 220

Pro Gly Ala Arg Asp 225

Gly Asp His Cys Pro 230

Leu Gly Pro Gly Arg 235

Cys Arg Leu His Thr

245

Val Arg Ala Ser Leu

250

Glu Asp Leu Gly Trp

255

Asp Trp Val Leu Ser

260

Pro Arg Glu Val Gln

265

Val Thr Met Cys Ile

270

Ala Cys Pro Ser Gln 275

Phe Arg Ala Ala Asn 280

Met His Ala Gln Ile

285

Thr Ser Leu His Arg

290

Leu Lys Pro Asp Thr

295

Val Pro Ala Pro Cys

300

Val Pro Ala Ser Tyr 305

Asn Pro Met Val Leu 310

Ile Gln Lys Thr Asp 315

Gly Val Ser Leu Gln

Thr Tyr Asp Asp Leu

Leu Ala Lys Asp Cys

Gly

Ile

Val

Ser

Glu 160

Pro

Val

Met

Ser

Cys 240

Ala

Gly

Lys

Cys

Thr 320

His

- 336 046387

335

325

Cys Ile

330 <210> 175 <211> 210 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 175

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155160

Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

165 170175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

- 337 046387

180

185

190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195 200 205

Gly Lys

210 <210> 176 <211> 209 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 176

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155160

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp

- 338 046387

175

165

170

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185

Phe Ser Cys Ser Val Met His

190

Glu Ala Leu His Asn His

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195

200

205

Gly <210> 177 <211> 954 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 177 ccgtcagtct	tcctcttccc	cccaaaaccc	aaggacaccc	tcatgatctc	ccggacccct	60
gaggtcacat	gcgtggtggt	ggacgtgagc	cacgaagacc	ctgaggtcaa	gttcaactgg	120
tacgtggacg	gcgtggaggt	gcataatgcc	aagacaaagc	cgcgggagga	gcagtacggg	180
agcacgtacc	gtgtggtcag	cgtcctcacc	gtcctgcacc	aggactggct	gaatggcaag	240
gagtacaagt	gcaaggtctc	caacaaagcc	ctcccagccc	ccatcgagaa	aaccatctcc	300
aaagccaaag	ggcagccccg	agaaccacag	gtgtacaccc	tgcccccatc	ccgggaggag	360
atgaccaaga	accaggtcag	cctgacctgc	ctggtcaaag	gcttctatcc	cagcgacatc	420
gccgtggagt	gggagagcaa	tgggcagccg	gagaacaact	acgacaccac	gcctcccgtg	480
ctggactccg	acggctcctt	cttcctctat	agcgacctca	ccgtggacaa	gagcaggtgg	540
cagcagggga	acgtcttctc	atgctccgtg	atgcatgagg	ctctgcacaa	ccactacacg	600
cagaagagcc	tctccctgtc	tccgggtgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	660
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	720
tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	780
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	840
gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	900
ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	ttagccaaag	actgccactg	cata	954

<210> 178 <211> 318 <212> PRT <213> Искусственная последовательность

- 339 046387 <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 178

Pro Ser Val Phe 1

Leu Phe Pro Pro 5

Lys Pro Lys Asp 10

Thr Leu Met Ile

Ser Arg Thr Pro

Glu Val Thr Cys

Val Val Val Asp 25

Val Ser His Glu 30

Asp Pro Glu Val 35

Lys Phe Asn Trp 40

Tyr Val Asp Gly

Val Glu Val His 45

Asn Ala Lys Thr 50

Lys Pro Arg Glu 55

Glu Gln Tyr Gly

Ser Thr Tyr Arg

Val Val Ser Val 65

Leu Thr Val Leu

His Gln Asp Trp 75

Leu Asn Gly Lys 80

Glu Tyr Lys Cys

Lys Val Ser Asn 85

Lys Ala Leu Pro 90

Ala Pro Ile Glu

Lys Thr Ile Ser

100

Lys Ala Lys Gly

Gln Pro Arg Glu 105

Pro Gln Val Tyr 110

Thr Leu Pro Pro

115

Ser Arg Glu Glu

120

Met Thr Lys Asn

Gln Val Ser Leu 125

Thr Cys Leu Val

130

Lys Gly Phe Tyr

135

Pro Ser Asp Ile

140

Ala Val Glu Trp

Glu Ser Asn Gly 145

Gln Pro Glu Asn

150

Asn Tyr Asp Thr

155

Thr Pro Pro Val

160

Leu Asp Ser Asp

Gly Ser Phe Phe 165

Leu Tyr Ser Asp 170

Leu Thr Val Asp

175

Lys Ser Arg Trp

180

Gln Gln Gly Asn

Val Phe Ser Cys 185

Ser Val Met His

190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 195 200 205

Gly Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His

210 215 220

- 340 046387

Thr

225

Val

Arg

Ala

Ser

Leu

230

Glu

Asp

Leu

Gly

Trp

235

Ala

Asp

Trp

Val

Leu

240

Ser

Pro

Arg

Glu

Val

245

Gln

Val

Thr

Met

Cys 250

Ile

Gly

Ala

Cys

Pro

255

Ser

Gln

Phe

Arg

Ala

260

Ala

Asn

Met

His

Ala

265

Gln

Ile

Lys

Thr

Ser

270

Leu

His

Arg

Leu

Lys 275

Pro

Asp

Thr

Val

Pro

280

Ala

Pro

Cys

Val

285

Pro

Ala

Ser

Tyr

Asn

290

Pro

Met

Val

Leu

Ile

295

Gln

Lys

Thr

Asp

Thr

300

Gly

Val

Ser

Leu

Gln

305

Thr

Tyr

Asp

Leu

310

Leu

Ala

Lys

Asp

Cys 315

His

Cys

Ile <210> 179 <211> 633 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 179 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct60 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg120 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacggg180 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag240 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc300 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccggaaggag360 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc420 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg480 ctgaagtccg acggctcctt cttcctctat agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg540 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg600 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga633 <210> 180 <211> 963 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность

- 341 046387 <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 180 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 60 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 120 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacggg 180 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 240 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 300 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag 360 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 420 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acgacaccac gcctcccgtg 480 ctggactccg acggctcctt cttcctctat agcgacctca ccgtggacaa gagcaggtgg 540 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 600 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtgcg cgcgacggag accactgtcc gctcgggccc 660 gggcgttgct gccgtctgca cacggtccgc gcgtcgctgg aagacctggg ctgggccgat 720 tgggtgctgt cgccacggga ggtgcaagtg accatgtgca tcggcgcgtg cccgagccag 780 ttccgggcgg caaacatgca cgcgcagatc aagacgagcc tgcaccgcct gaagcccgac 840 acggtgccag cgccctgctg cgtgcccgcc agctacaatc ccatggtgct cattcaaaag 900 accgacaccg gggtgtcgct ccagacctat gatgacttgt tagccaaaga ctgccactgc 960 ata 963 <210> 181 <211> 321 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 181

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu MetIle

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser HisGlu

2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His

4045

- 342 046387

Asn Ala Lys Thr Lys 50

Pro Arg Glu Glu Gln 55

Tyr Gly Ser Thr Tyr 60

Val Val Ser Val Leu 65

Thr Val Leu His Gln 70

Asp Trp Leu Asn Gly 75

Glu Tyr Lys Cys Lys 85

Val Ser Asn Lys Ala

Leu Pro Ala Pro Ile

Lys Thr Ile Ser Lys

100

Ala Lys Gly Gln Pro

105

Arg Glu Pro Gln Val

110

Thr Leu Pro Pro Ser

115

Arg Glu Glu Met Thr 120

Lys Asn Gln Val Ser

125

Thr Cys Leu Val Lys

130

Gly Phe Tyr Pro Ser 135

Asp Ile Ala Val Glu

140

Glu Ser Asn Gly Gln 145

Pro Glu Asn Asn Tyr 150

Asp Thr Thr Pro Pro 155

Leu Asp Ser Asp Gly

165

Ser Phe Phe Leu Tyr

170

Ser Asp Leu Thr Val

175

Lys Ser Arg Trp Gln

180

Gln Gly Asn Val Phe

185

Ser Cys Ser Val Met

190

Glu Ala Leu His Asn

195

His Tyr Thr Gln Lys

200

Ser Leu Ser Leu Ser

205

Gly Ala Arg Asp Gly

210

Asp His Cys Pro Leu 215

Gly Pro Gly Arg Cys 220

Arg Leu His Thr Val 225

Arg Ala Ser Leu Glu 230

Asp Leu Gly Trp Ala 235

Trp Val Leu Ser Pro

245

Arg Glu Val Gln Val

250

Thr Met Cys Ile Gly

255

Cys Pro Ser Gln Phe

260

Arg Ala Ala Asn Met

265

His Ala Gln Ile Lys

270

Ser Leu His Arg Leu

275

Lys Pro Asp Thr Val 280

Pro Ala Pro Cys Cys 285

Pro Ala Ser Tyr Asn 290

Pro Met Val Leu Ile

295

Gln Lys Thr Asp Thr

300

Arg

Lys 80

Glu

Tyr

Leu

Trp

Val 160

Asp

His

Pro

Cys

Asp 240

Ala

Thr

Val

Gly

- 343 046387

Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys

305 310 315 320

Ile <210> 182 <211> 210 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 182

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105110

Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155160

Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

165 170175

- 344 046387

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser

180 185

Cys Ser Val Met His

190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

195 200

Leu Ser Leu Ser Pro

205

Gly Lys

210 <210> 183 <211> 209 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 183

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 10 15

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 25 30

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 40 45

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 50 55 60

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 75 80

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 90 95

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys

100 105 110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120 125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135 140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155 160

- 345 046387

Leu

Asp

Ser

Asp

Gly 165

Ser

Phe

Leu

Tyr 170

Ser

Asp

Leu

Thr

Val

175

Asp

Lys

Ser

Arg

Trp 180

Gln

Gly

Asn

Val

185

Phe

Ser

Cys

Ser

Val

190

Met

His

Glu

Ala

Leu

195

His

Asn

His

Tyr

Thr

200

Gln

Lys

Ser

Leu

Ser

205

Leu

Ser

Pro

Gly <210> 184 <211> 954 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 184 ccgtcagtct	tcctcttccc	cccaaaaccc	aaggacaccc	tcatgatctc	ccggacccct	60
gaggtcacat	gcgtggtggt	ggacgtgagc	cacgaagacc	ctgaggtcaa	gttcaactgg	120
tacgtggacg	gcgtggaggt	gcataatgcc	aagacaaagc	cgcgggagga	gcagtacggc	180
agcacgtacc	gtgtggtcag	cgtcctcacc	gtcctgcacc	aggactggct	gaatggcaag	240
gagtacaagt	gcaaggtctc	caacaaagcc	ctcccagccc	ccatcgagaa	aaccatctcc	300
aaagccaaag	ggcagccccg	agaaccacag	gtgtgcaccc	tgcccccatc	ccgggaggag	360
atgaccaaga	accaggtcag	cctgacctgc	ctggtcaaag	gcttctatcc	cagcgacatc	420
gccgtggagt	gggagagcaa	tgggcagccg	gagaacaact	acgacaccac	gcctcccgtg	480
ctggactccg	acggctcctt	cttcctctat	agcgacctca	ccgtggacaa	gagcaggtgg	540
cagcagggga	acgtcttctc	atgctccgtg	atgcatgagg	ctctgcacaa	ccactacacg	600
cagaagagcc	tctccctgtc	tccgggtgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	660
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	720
tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	780
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	840
gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	900
ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	ttagccaaag	actgccactg	cata	954

<210> 185

- 346 046387 <211> 318 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 185

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 10 15

Ser Arg Thr Pro Glu Val

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu

30

Asp Pro Glu Val

Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 40 45

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

55

Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 60

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

70

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

80

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 85

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu

95

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

100

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys

105 110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu

115 120

Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

130 135

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

145 150

Asn Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val

155 160

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

165

Leu Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp

170 175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

180

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

185 190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

195 200

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

205

Gly Gly Asp His Cys Pro Leu Gly

Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His

- 347 046387

210

215

220

Thr

225

Val

Arg

Ala

Ser

Leu

230

Glu

Asp

Leu

Gly

Trp 235

Ala

Asp

Trp

Val

Leu

240

Ser

Pro

Arg

Glu

Val

245

Gln

Val

Thr

Met

Cys 250

Ile

Gly

Ala

Cys

Pro

255

Ser

Gln

Phe

Arg

Ala

260

Ala

Asn

Met

His

Ala

265

Gln

Ile

Lys

Thr

Ser

270

Leu

His

Arg

Leu

Lys 275

Pro

Asp

Thr

Val

Pro

280

Ala

Pro

Cys

Val

285

Pro

Ala

Ser

Tyr

Asn

290

Pro

Met

Val

Leu

Ile

295

Gln

Lys

Thr

Asp

Thr

300

Gly

Val

Ser

Leu

Gln

305

Thr

Tyr

Asp

Leu

310

Leu

Ala

Lys

Asp

Cys 315

His

Cys

Ile <210> 186 <211> 630 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 186 ccatccgtgt	tcctgtttcc	tccaaagccg	aaggacaccc	tgatgatctc	aagaactccg	60
gaagtgactt	gcgtcgtcgt	ggacgtgtca	catgaggatc	cagaggtcaa	gttcaattgg	120
tatgtggacg	gagtggaagt	gcataacgcc	aagaccaaac	cccgcgaaga	acagtacggg	180
agcacctacc	gcgtggtgag	cgtccttact	gtgctccacc	aggactggct	taatgggaag	240
gaatacaagt	gtaaggtgtc	caacaaggcc	ctccccgctc	ccatcgaaaa	gaccatctca	300
aaggcaaagg	ggcaaccaag	ggaacctcaa	gtgtacaccc	tgcctccgtg	caggaaggag	360
atgaccaaga	accaggtcag	cctgacttgt	ctcgtgaagg	gcttctatcc	cagcgatatt	420
gctgtggaat	gggagtcaaa	tggccagccc	gagaataact	acaaaactac	cccacccgtg	480
ctgaaatctg	atgggtcctt	cttcctttac	tccaagctga	ccgtggacaa	gagccgctgg	540
caacaaggca	atgtctttag	ctgctcagtg	atgcatgagg	ctctccataa	tcactacact	600
cagaagtcac	tgtccctgtc	tccgggtaaa				630

<210> 187 <211> 963

- 348 046387 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид” <400> 187 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 60 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 120 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacggg 180 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 240 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 300 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtgcaccc tgcccccatc ccgggaggag 360 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 420 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acgacaccac gcctcccgtg 480 ctggactccg acggctcctt cttcctctat agcgacctca ccgtggacaa gagcaggtgg 540 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 600 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtgcg cgcgacggag accactgtcc gctcgggccc 660 gggcgttgct gccgtctgca cacggtccgc gcgtcgctgg aagacctggg ctgggccgat 720 tgggtgctgt cgccacggga ggtgcaagtg accatgtgca tcggcgcgtg cccgagccag 780 ttccgggcgg caaacatgca cgcgcagatc aagacgagcc tgcaccgcct gaagcccgac 840 acggtgccag cgccctgctg cgtgcccgcc agctacaatc ccatggtgct cattcaaaag 900 accgacaccg gggtgtcgct ccagacctat gatgacttgt tagccaaaga ctgccactgc 960 ata 963 <210> 188 <211> 321 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид” <400> 188

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu MetIle

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser HisGlu

2530

- 349 046387

Asp Pro Glu Val Lys 35

Phe Asn Trp Tyr Val 40

Asp Gly Val Glu Val 45

Asn Ala Lys Thr Lys 50

Pro Arg Glu Glu Gln 55

Tyr Gly Ser Thr Tyr 60

Val Val Ser Val Leu 65

Thr Val Leu His Gln 70

Asp Trp Leu Asn Gly 75

Glu Tyr Lys Cys Lys 85

Val Ser Asn Lys Ala

Leu Pro Ala Pro Ile

Lys Thr Ile Ser Lys

100

Ala Lys Gly Gln Pro

105

Arg Glu Pro Gln Val

110

Thr Leu Pro Pro Ser

115

Arg Glu Glu Met Thr 120

Lys Asn Gln Val Ser

125

Thr Cys Leu Val Lys

130

Gly Phe Tyr Pro Ser

135

Asp Ile Ala Val Glu

140

Glu Ser Asn Gly Gln 145

Pro Glu Asn Asn Tyr 150

Asp Thr Thr Pro Pro 155

Leu Asp Ser Asp Gly

165

Ser Phe Phe Leu Tyr

170

Ser Asp Leu Thr Val

175

Lys Ser Arg Trp Gln

180

Gln Gly Asn Val Phe

185

Ser Cys Ser Val Met

190

Glu Ala Leu His Asn

195

His Tyr Thr Gln Lys 200

Ser Leu Ser Leu Ser

205

Gly Ala Arg Asp Gly

210

Asp His Cys Pro Leu

215

Gly Pro Gly Arg Cys

220

Arg Leu His Thr Val 225

Arg Ala Ser Leu Glu 230

Asp Leu Gly Trp Ala 235

Trp Val Leu Ser Pro

245

Arg Glu Val Gln Val

250

Thr Met Cys Ile Gly

255

Cys Pro Ser Gln Phe

260

Arg Ala Ala Asn Met

265

His Ala Gln Ile Lys

270

Ser Leu His Arg Leu

275

Lys Pro Asp Thr Val

280

Pro Ala Pro Cys Cys 285

His

Arg

Lys 80

Glu

Cys

Leu

Trp

Val 160

Asp

His

Pro

Cys

Asp 240

Ala

Thr

Val

- 350 046387

Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val

290 295

Leu Ile Gln

Lys Thr Asp Thr Gly 300

Val Ser Leu Gln Thr 305

Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys

310 315 320

Ile <210> 189 <211> 113 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 189

Met Ala Arg Asn Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys

5 10 15

Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp 20 25 30

Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala 35 40 45

Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr 50 55 60

Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val 65 70 75 80

Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly 85 90 95

Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys

100 105 110

Ile <210> 190 <211> 342 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

<221> источник последовательность

- 351 046387 <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид

<400> 190 atggcgcgca	acggggacca	ctgtccgctc	gggcccgggc	gttgctgccg	tctgcacacg	60
gtccgcgcgt	cgctggaaga	cctgggctgg	gccgattggg	tgctgtcgcc	acgggaggtg	120
caagtgacca	tgtgcatcgg	cgcgtgcccg	agccagttcc	gggcggcaaa	catgcacgcg	180
cagatcaaga	cgagcctgca	ccgcctgaag	cccgacacgg	tgccagcgcc	ctgctgcgtg	240
cccgccagct	acaatcccat	ggtgctcatt	caaaagaccg	acaccggggt	gtcgctccag	300
acctatgatg	acttgttagc	caaagactgc	cactgcatat	aa		342

<210> 191 <211> 210 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 191

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

- 352 046387

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155160

Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

165 170175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

180 185190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195 200205

Gly Lys

210 <210> 192 <211> 209 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 192

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

- 353 046387

Thr

Cys 130

Leu

Val

Lys

Gly

Phe

135

Tyr

Pro

Ser

Asp

Ile

140

Ala

Val

Glu

Trp

Glu

145

Ser

Asn

Gly

Gln

Pro

150

Glu

Asn

Tyr

Asp

155

Thr

Pro

Val

160

Leu

Asp

Ser

Asp

Gly 165

Ser

Phe

Leu

Tyr

170

Ser

Asp

Leu

Thr

Val

175

Asp

Lys

Ser

Arg

Trp 180

Gln

Gly

Asn

Val

185

Phe

Ser

Cys

Ser

Val

190

Met

His

Glu

Ala

Leu

195

His

Asn

His

Tyr

Thr

200

Gln

Lys

Ser

Leu

Ser

205

Leu

Ser

Pro

Gly <210> 193 <211> 954 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 193 ccgtcagtct	tcctcttccc	cccaaaaccc	aaggacaccc	tcatgatctc	ccggacccct	60
gaggtcacat	gcgtggtggt	ggacgtgagc	cacgaagacc	ctgaggtcaa	gttcaactgg	120
tacgtggacg	gcgtggaggt	gcataattgc	aagacaaagc	cgcgggagga	gcagtacggc	180
agcacgtacc	gtgtggtcag	cgtctgcacc	gtcctgcacc	aggactggct	gaatggcaag	240
gagtacaagt	gcaaggtctc	caacaaagcc	ctcccagccc	ccatcgagaa	aaccatctcc	300
aaagccaaag	ggcagccccg	agaaccacag	gtgtacaccc	tgcccccatc	ccgggaggag	360
atgaccaaga	accaggtcag	cctgacctgc	ctggtcaaag	gcttctatcc	cagcgacatc	420
gccgtggagt	gggagagcaa	tgggcagccg	gagaacaact	acgacaccac	gcctcccgtg	480
ctggactccg	acggctcctt	cttcctctat	agcgacctca	ccgtggacaa	gagcaggtgg	540
cagcagggga	acgtcttctc	atgctccgtg	atgcatgagg	ctctgcacaa	ccactacacg	600
cagaagagcc	tctccctgtc	tccgggtgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	660
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	720
tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	780
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	840

- 354 046387 gcgccctgct gcgtgcccgc cagctacaat cccatggtgc tcattcaaaa gaccgacacc 900 ggggtgtcgc tccagaccta tgatgacttg ttagccaaag actgccactg cata 954 <210> 194 <211> 318 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 194

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu MetIle

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser HisGlu

2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn GlyLys

70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro IleGlu

9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro ProVal

145 150 155160

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr ValAsp

165 170175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

180 185190

- 355 046387

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195 200205

Gly Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His

210 215220

Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu

225 230 235240

Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser

245 250255

Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His

260 265270

Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser

275 280285

Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu

290 295300

Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

305 310315 <210> 195 <211> 630 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 195

ccgtcagtct	tcctcttccc	cccaaaaccc	aaggacaccc	tcatgatctc	ccggacccct	60
gaggtcacat	gcgtggtggt	ggacgtgagc	cacgaagacc	ctgaggtcaa	gttcaactgg	120
tacgtggacg	gcgtggaggt	gcataattgc	aagacaaagc	cgcgggagga	gcagtacggc	180
agcacgtacc	gtgtggtcag	cgtctgcacc	gtcctgcacc	aggactggct	gaatggcaag	240
gagtacaagt	gcaaggtctc	caacaaagcc	ctcccagccc	ccatcgagaa	aaccatctcc	300
aaagccaaag	ggcagccccg	agaaccacag	gtgtacaccc	tgcccccatc	ccggaaggag	360
atgaccaaga	accaggtcag	cctgacctgc	ctggtcaaag	gcttctatcc	cagcgacatc	420
gccgtggagt	gggagagcaa	tgggcagccg	gagaacaact	acaagaccac	gcctcccgtg	480
ctgaagtccg	acggctcctt	cttcctctat	agcaagctca	ccgtggacaa	gagcaggtgg	540

- 356 046387 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 600 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa

630 <210> 196 <211> 963 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 196 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct60 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg120 tacgtggacg gcgtggaggt gcataattgc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacggc180 agcacgtacc gtgtggtcag cgtctgcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag240 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc300 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag360 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc420 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acgacaccac gcctcccgtg480 ctggactccg acggctcctt cttcctctat agcgacctca ccgtggacaa gagcaggtgg540 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg600 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtgcg cgcgacggag accactgtcc gctcgggccc660 gggcgttgct gccgtctgca cacggtccgc gcgtcgctgg aagacctggg ctgggccgat720 tgggtgctgt cgccacggga ggtgcaagtg accatgtgca tcggcgcgtg cccgagccag780 ttccgggcgg caaacatgca cgcgcagatc aagacgagcc tgcaccgcct gaagcccgac840 acggtgccag cgccctgctg cgtgcccgcc agctacaatc ccatggtgct cattcaaaag900 accgacaccg gggtgtcgct ccagacctat gatgacttgt tagccaaaga ctgccactgc960 ata963 <210> 197 <211> 321 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 197

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

- 357 046387

Ser Arg Thr Pro Glu

Val Thr Cys Val Val

Val Asp Val Ser His

Asp Pro Glu Val Lys 35

Phe Asn Trp Tyr Val 40

Asp Gly Val Glu Val 45

Asn Cys Lys Thr Lys 50

Pro Arg Glu Glu Gln 55

Tyr Gly Ser Thr Tyr 60

Val Val Ser Val Cys 65

Thr Val Leu His Gln 70

Asp Trp Leu Asn Gly 75

Glu Tyr Lys Cys Lys 85

Val Ser Asn Lys Ala

Leu Pro Ala Pro Ile

Lys Thr Ile Ser Lys

100

Ala Lys Gly Gln Pro

105

Arg Glu Pro Gln Val

110

Thr Leu Pro Pro Ser

115

Arg Glu Glu Met Thr 120

Lys Asn Gln Val Ser

125

Thr Cys Leu Val Lys

130

Gly Phe Tyr Pro Ser 135

Asp Ile Ala Val Glu

140

Glu Ser Asn Gly Gln 145

Pro Glu Asn Asn Tyr 150

Asp Thr Thr Pro Pro 155

Leu Asp Ser Asp Gly

165

Ser Phe Phe Leu Tyr

170

Ser Asp Leu Thr Val

175

Lys Ser Arg Trp Gln

180

Gln Gly Asn Val Phe

185

Ser Cys Ser Val Met

190

Glu Ala Leu His Asn

195

His Tyr Thr Gln Lys 200

Ser Leu Ser Leu Ser

205

Gly Ala Arg Asp Gly

210

Asp His Cys Pro Leu 215

Gly Pro Gly Arg Cys 220

Arg Leu His Thr Val 225

Arg Ala Ser Leu Glu 230

Asp Leu Gly Trp Ala 235

Trp Val Leu Ser Pro

245

Arg Glu Val Gln Val

250

Thr Met Cys Ile Gly

255

Glu

His

Arg

Lys 80

Glu

Tyr

Leu

Trp

Val 160

Asp

His

Pro

Cys

Asp 240

Ala

- 358 046387

Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr

260 265270

Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val

275 280285

Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly

290 295300

Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys

305 310 315320

Ile <210> 198 <211> 210 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 198

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105110

Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

- 359 046387

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

130 135

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

145 150

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

155 160

Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe

165

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

170 175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

180

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

185 190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

195 200

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

205

Gly Lys

210 <210> 199 <211> 209 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 199

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu MetIle

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser HisGlu

2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys

100 105110

- 360 046387

Thr

Leu

Pro

115

Pro

Ser

Arg

Glu

120

Met

Thr

Lys

Asn

Gln

125

Val

Ser

Leu

Thr

Cys 130

Leu

Val

Lys

Gly

Phe

135

Tyr

Pro

Ser

Asp

Ile

140

Ala

Val

Glu

Trp

Glu

145

Ser

Asn

Gly

Gln

Pro

150

Glu

Asn

Tyr

Asp

155

Thr

Pro

Val

160

Leu

Asp

Ser

Asp

Gly 165

Ser

Phe

Leu

Tyr 170

Ser

Asp

Leu

Thr

Val

175

Asp

Lys

Ser

Arg

Trp 180

Gln

Gly

Asn

Val

185

Phe

Ser

Cys

Ser

Val

190

Met

His

Glu

Ala

Leu

195

His

Asn

His

Tyr

Thr

200

Gln

Lys

Ser

Leu

Ser

205

Leu

Ser

Pro

Gly <210> 200 <211> 954 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 200

ccgtcagtct	tcctcttccc	cccaaaaccc	aaggacaccc	tcatgatctc	ccggacccct	60
gaggtcacat	gcgtggtggt	ggacgtgagc	cacgaagacc	ctgaggtcaa	gttcaactgg	120
tacgtggacg	gcgtggaggt	gcataattgc	aagacaaagc	cgcgggagga	gcagtacggc	180
agcacgtacc	gtgtggtcag	cgtctgcacc	gtcctgcacc	aggactggct	gaatggcaag	240
gagtacaagt	gcaaggtctc	caacaaagcc	ctcccagccc	ccatcgagaa	aaccatctcc	300
aaagccaaag	ggcagccccg	agaaccacag	gtgtgcaccc	tgcccccatc	ccgggaggag	360
atgaccaaga	accaggtcag	cctgacctgc	ctggtcaaag	gcttctatcc	cagcgacatc	420
gccgtggagt	gggagagcaa	tgggcagccg	gagaacaact	acgacaccac	gcctcccgtg	480
ctggactccg	acggctcctt	cttcctctat	agcgacctca	ccgtggacaa	gagcaggtgg	540
cagcagggga	acgtcttctc	atgctccgtg	atgcatgagg	ctctgcacaa	ccactacacg	600
cagaagagcc	tctccctgtc	tccgggtgga	gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	660
tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	720

- 361 046387

tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	780
gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	840
gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	900
ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	ttagccaaag	actgccactg	cata	954

<210> 201 <211> 318 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 201

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys

100 105110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155160

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp

165 170175

- 362 046387

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser

180185

Cys Ser Val Met His

190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195 200205

Gly Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His

210 215220

Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu

225 230 235240

Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser

245 250255

Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His

260 265270

Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser

275 280285

Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu

290 295300

Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

305 310315 <210> 202 <211> 630 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 202 ccgtcagtct	tcctcttccc	cccaaaaccc	aaggacaccc	tcatgatctc	ccggacccct	60
gaggtcacat	gcgtggtggt	ggacgtgagc	cacgaagacc	ctgaggtcaa	gttcaactgg	120
tacgtggacg	gcgtggaggt	gcataattgc	aagacaaagc	cgcgggagga	gcagtacggc	180
agcacgtacc	gtgtggtcag	cgtctgcacc	gtcctgcacc	aggactggct	gaatggcaag	240
gagtacaagt	gcaaggtctc	caacaaagcc	ctcccagccc	ccatcgagaa	aaccatctcc	300
aaagccaaag	ggcagccccg	agaaccacag	gtgtacaccc	tgcccccatg	ccggaaggag	360
atgaccaaga	accaggtcag	cctgacctgc	ctggtcaaag	gcttctatcc	cagcgacatc	420
gccgtggagt	gggagagcaa	tgggcagccg	gagaacaact	acaagaccac	gcctcccgtg	480

- 363 046387

ctgaagtccg	acggctcctt	cttcctctat	agcaagctca	ccgtggacaa	gagcaggtgg	540
cagcagggga	acgtcttctc	atgctccgtg	atgcatgagg	ctctgcacaa	ccactacacg	600
cagaagagcc	tctccctgtc	tccgggtaaa				630

<210> 203 <211> 963 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 203 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct60 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg120 tacgtggacg gcgtggaggt gcataattgc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacggc180 agcacgtacc gtgtggtcag cgtctgcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag240 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc300 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtgcaccc tgcccccatc ccgggaggag360 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc420 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acgacaccac gcctcccgtg480 ctggactccg acggctcctt cttcctctat agcgacctca ccgtggacaa gagcaggtgg540 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg600 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtgcg cgcgacggag accactgtcc gctcgggccc660 gggcgttgct gccgtctgca cacggtccgc gcgtcgctgg aagacctggg ctgggccgat720 tgggtgctgt cgccacggga ggtgcaagtg accatgtgca tcggcgcgtg cccgagccag780 ttccgggcgg caaacatgca cgcgcagatc aagacgagcc tgcaccgcct gaagcccgac840 acggtgccag cgccctgctg cgtgcccgcc agctacaatc ccatggtgct cattcaaaag900 accgacaccg gggtgtcgct ccagacctat gatgacttgt tagccaaaga ctgccactgc960 ata963 <210> 204 <211> 321 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

- 364 046387 <400> 204

Pro Ser Val Phe Leu

5

Phe Pro Pro Lys Pro

Lys Asp Thr Leu Met

Ser Arg Thr Pro Glu

Val Thr Cys Val Val

Val Asp Val Ser His

Asp Pro Glu Val Lys 35

Phe Asn Trp Tyr Val 40

Asp Gly Val Glu Val 45

Asn Cys Lys Thr Lys 50

Pro Arg Glu Glu Gln 55

Tyr Gly Ser Thr Tyr 60

Val Val Ser Val Cys 65

Thr Val Leu His Gln 70

Asp Trp Leu Asn Gly 75

Glu Tyr Lys Cys Lys 85

Val Ser Asn Lys Ala

Leu Pro Ala Pro Ile

Lys Thr Ile Ser Lys

100

Ala Lys Gly Gln Pro

105

Arg Glu Pro Gln Val

110

Thr Leu Pro Pro Ser

115

Arg Glu Glu Met Thr 120

Lys Asn Gln Val Ser

125

Thr Cys Leu Val Lys

130

Gly Phe Tyr Pro Ser

135

Asp Ile Ala Val Glu

140

Glu Ser Asn Gly Gln 145

Pro Glu Asn Asn Tyr 150

Asp Thr Thr Pro Pro 155

Leu Asp Ser Asp Gly

165

Ser Phe Phe Leu Tyr

170

Ser Asp Leu Thr Val

175

Lys Ser Arg Trp Gln

180

Gln Gly Asn Val Phe

185

Ser Cys Ser Val Met

190

Glu Ala Leu His Asn

195

His Tyr Thr Gln Lys 200

Ser Leu Ser Leu Ser

205

Gly Ala Arg Asp Gly

210

Asp His Cys Pro Leu

215

Gly Pro Gly Arg Cys

220

Arg Leu His Thr Val 225

Arg Ala Ser Leu Glu 230

Asp Leu Gly Trp Ala 235

Ile

Glu

His

Arg

Lys 80

Glu

Cys

Leu

Trp

Val 160

Asp

His

Pro

Cys

Asp 240

Ala

Trp Val Leu Ser Pro

Arg Glu Val Gln Val

Thr Met Cys Ile Gly

- 365 046387

245 250255

Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr

260 265270

Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val

275 280285

Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly

290 295300

Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys

305 310 315320

Ile <210> 205 <211> 212 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 205

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

5 1015

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 20 2530

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 35 4045

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 50 5560

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 65 70 7580

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 85 9095

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

100 105110

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

- 366 046387

Ser

Leu

130

115

Thr

Cys

Leu

Val

Lys

135

120

Gly

Phe

Tyr

Pro

Ser

140

125

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

145

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 150

Gln

Pro

Glu

Asn

155

Tyr

Lys

Thr

Pro

160

Pro

Val

Leu

Lys

Ser

165

Asp

Gly

Ser

Phe

170

Leu

Tyr

Ser

Lys

Leu

175

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

180

Arg

Trp

Gln

Gly 185

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 190

Ser

Val

Met

His

Glu

195

Ala

Leu

His

Asn

His

200

Tyr

Thr

Gln

Lys

Ser

205

Leu

Ser

Leu

Ser

Pro

210

Gly

Lys <210> 206 <211> 211 <212> PRT <213>

Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 206

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

5 1015

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 20 2530

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 35 4045

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 50 5560

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 65 70 7580

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 85 9095

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

- 367 046387

Val

100

Tyr Thr Leu Pro Pro

115

105

110

Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

120 125

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

130 135140

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro

145 150 155160

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr

165 170175

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

180 185190

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

195 200205

Ser Pro Gly

210 <210> 207 <211> 960 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 207 ggtggcccgt	cagtcttcct	cttcccccca	aaacccaagg	acaccctcat	gatctcccgg	60
acccctgagg	tcacatgcgt	ggtggtggac	gtgagccacg	aagaccctga	ggtcaagttc	120
aactggtacg	tggacggcgt	ggaggtgcat	aatgccaaga	caaagccgcg	ggaggagcag	180
tacaacagca	cgtaccgtgt	ggtcagcgtc	ctcaccgtcc	tgcaccagga	ctggctgaat	240
ggcaaggagt	acaagtgcaa	ggtctccaac	aaagccctcc	cagcccccat	cgagaaaacc	300
atctccaaag	ccaaagggca	gccccgagaa	ccacaggtgt	acaccctgcc	cccatcccgg	360
gaggagatga	ccaagaacca	ggtcagcctg	acctgcctgg	tcaaaggctt	ctatcccagc	420
gacatcgccg	tggagtggga	gagcaatggg	cagccggaga	acaactacga	caccacgcct	480
cccgtgctgg	actccgacgg	ctccttcttc	ctctatagcg	acctcaccgt	ggacaagagc	540
aggtggcagc	aggggaacgt	cttctcatgc	tccgtgatgc	atgaggctct	gcacaaccac	600
tacacgcaga	agagcctctc	cctgtctccg	ggtggagacc	actgtccgct	cgggcccggg	660

- 368 046387

cgttgctgcc	gtctgcacac	ggtccgcgcg	tcgctggaag	acctgggctg	ggccgattgg	720
gtgctgtcgc	cacgggaggt	gcaagtgacc	atgtgcatcg	gcgcgtgccc	gagccagttc	780
cgggcggcaa	acatgcacgc	gcagatcaag	acgagcctgc	accgcctgaa	gcccgacacg	840
gtgccagcgc	cctgctgcgt	gcccgccagc	tacaatccca	tggtgctcat	tcaaaagacc	900
gacaccgggg	tgtcgctcca	gacctatgat	gacttgttag	ccaaagactg	ccactgcata	960

<210> 208 <211> 320 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 208

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

5 1015

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 20 2530

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 35 4045

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 50 5560

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 65 70 7580

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 85 9095

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

100 105110

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

115 120125

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

130 135140

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro

145 150 155160

- 369 046387

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165170

Tyr Ser Asp Leu Thr

175

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

180 185190

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

195 200205

Ser Pro Gly Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg

210 215220

Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp

225 230 235240

Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys

245 250255

Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser

260 265270

Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro

275 280285

Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val

290 295300

Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

305 310 315320 <210> 209 <211> 636 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 209

ggtggcccgt	cagtcttcct	cttcccccca	aaacccaagg	acaccctcat	gatctcccgg	60
acccctgagg	tcacatgcgt	ggtggtggac	gtgagccacg	aagaccctga	ggtcaagttc	120
aactggtacg	tggacggcgt	ggaggtgcat	aatgccaaga	caaagccgcg	ggaggagcag	180
tacaacagca	cgtaccgtgt	ggtcagcgtc	ctcaccgtcc	tgcaccagga	ctggctgaat	240
ggcaaggagt	acaagtgcaa	ggtctccaac	aaagccctcc	cagcccccat	cgagaaaacc	300
atctccaaag	ccaaagggca	gccccgagaa	ccacaggtgt	acaccctgcc	cccatcccgg	360

- 370 046387

aaggagatga	ccaagaacca	ggtcagcctg	acctgcctgg	tcaaaggctt	ctatcccagc	420
gacatcgccg	tggagtggga	gagcaatggg	cagccggaga	acaactacaa	gaccacgcct	480
cccgtgctga	agtccgacgg	ctccttcttc	ctctatagca	agctcaccgt	ggacaagagc	540
aggtggcagc	aggggaacgt	cttctcatgc	tccgtgatgc	atgaggctct	gcacaaccac	600
tacacgcaga	agagcctctc	cctgtctccg	ggtaaa			636

<210> 210 <211> 969 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 210 ggtggcccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg60 acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc120 aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag180 tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat240 ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc300 atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgg360 gaggagatga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc420 gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacga caccacgcct480 cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc ctctatagcg acctcaccgt ggacaagagc540 aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac600 tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg ggtgcgcgcg acggagacca ctgtccgctc660 gggcccgggc gttgctgccg tctgcacacg gtccgcgcgt cgctggaaga cctgggctgg720 gccgattggg tgctgtcgcc acgggaggtg caagtgacca tgtgcatcgg cgcgtgcccg780 agccagttcc gggcggcaaa catgcacgcg cagatcaaga cgagcctgca ccgcctgaag840 cccgacacgg tgccagcgcc ctgctgcgtg cccgccagct acaatcccat ggtgctcatt900 caaaagaccg acaccggggt gtcgctccag acctatgatg acttgttagc caaagactgc960 cactgcata969 <210> 211 <211> 323 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

- 371 046387 <221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 211

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

5 1015

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp ValSer

2530

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 35 4045

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 50 5560

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 65 70 7580

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 85 9095

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

100 105110

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

115 120125

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

130 135140

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro

145 150 155160

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr

165 170175

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

180 185190

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

195 200205

Ser Pro Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg

210 215220

Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp

225 230 235240

- 372 046387

Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile

245 250255

Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile

260 265270

Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys

275 280285

Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp

290 295300

Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys

305 310 315320

His Cys Ile <210> 212 <211> 212 <212> PRT <213>

Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 212

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

5 1015

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 20 2530

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 35 4045

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 50 5560

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 65 70 7580

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 85 9095

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

100 105110

- 373 046387

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

115 120125

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

130 135140

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

145 150 155160

Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

165 170175

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

180 185190

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

195 200205

Ser Pro Gly Lys

210 <210> 213 <211> 211 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 213

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

5 1015

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 20 2530

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 35 4045

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 50 5560

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 65 70 7580

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 85 9095

- 374 046387

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

100 105110

Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

115 120125

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

130 135140

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro

145 150 155160

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr

165 170175

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

180 185190

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

195 200205

Ser Pro Gly

210 <210> 214 <211> 960 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 214

ggtggcccgt	cagtcttcct	cttcccccca	aaacccaagg	acaccctcat	gatctcccgg	60
acccctgagg	tcacatgcgt	ggtggtggac	gtgagccacg	aagaccctga	ggtcaagttc	120
aactggtacg	tggacggcgt	ggaggtgcat	aatgccaaga	caaagccgcg	ggaggagcag	180
tacaacagca	cgtaccgtgt	ggtcagcgtc	ctcaccgtcc	tgcaccagga	ctggctgaat	240
ggcaaggagt	acaagtgcaa	ggtctccaac	aaagccctcc	cagcccccat	cgagaaaacc	300
atctccaaag	ccaaagggca	gccccgagaa	ccacaggtgt	gcaccctgcc	cccatcccgg	360
gaggagatga	ccaagaacca	ggtcagcctg	acctgcctgg	tcaaaggctt	ctatcccagc	420
gacatcgccg	tggagtggga	gagcaatggg	cagccggaga	acaactacga	caccacgcct	480
cccgtgctgg	actccgacgg	ctccttcttc	ctctatagcg	acctcaccgt	ggacaagagc	540

- 375 046387

aggtggcagc	aggggaacgt	cttctcatgc	tccgtgatgc	atgaggctct	gcacaaccac	600
tacacgcaga	agagcctctc	cctgtctccg	ggtggagacc	actgtccgct	cgggcccggg	660
cgttgctgcc	gtctgcacac	ggtccgcgcg	tcgctggaag	acctgggctg	ggccgattgg	720
gtgctgtcgc	cacgggaggt	gcaagtgacc	atgtgcatcg	gcgcgtgccc	gagccagttc	780
cgggcggcaa	acatgcacgc	gcagatcaag	acgagcctgc	accgcctgaa	gcccgacacg	840
gtgccagcgc	cctgctgcgt	gcccgccagc	tacaatccca	tggtgctcat	tcaaaagacc	900
gacaccgggg	tgtcgctcca	gacctatgat	gacttgttag	ccaaagactg	ccactgcata	960

<210> 215 <211> 320 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 215

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

5 1015

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 20 2530

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 35 4045

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 50 5560

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 65 70 7580

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 85 9095

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

100 105110

Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

115 120125

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

130 135140

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro

- 376 046387

145 150 155160

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr

165 170175

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

180 185190

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

195 200205

Ser Pro Gly Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg

210 215220

Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp

225 230 235240

Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys

245 250255

Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser

260 265270

Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro

275 280285

Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val

290 295300

Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

305 310 315320 <210> 216 <211> 636 <212> ДНК <213>

Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 216 ggtggcccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg60 acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc120 aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag180 tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat240 ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc300

- 377 046387

atctccaaag	ccaaagggca	gccccgagaa	ccacaggtgt	acaccctgcc	cccatgccgg	360
aaggagatga	ccaagaacca	ggtcagcctg	acctgcctgg	tcaaaggctt	ctatcccagc	420
gacatcgccg	tggagtggga	gagcaatggg	cagccggaga	acaactacaa	gaccacgcct	480
cccgtgctga	agtccgacgg	ctccttcttc	ctctatagca	agctcaccgt	ggacaagagc	540
aggtggcagc	aggggaacgt	cttctcatgc	tccgtgatgc	atgaggctct	gcacaaccac	600
tacacgcaga	agagcctctc	cctgtctccg	ggtaaa			636

<210> 217 <211> 969 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 217 ggtggcccgt	cagtcttcct	cttcccccca	aaacccaagg	acaccctcat	gatctcccgg	60
acccctgagg	tcacatgcgt	ggtggtggac	gtgagccacg	aagaccctga	ggtcaagttc	120
aactggtacg	tggacggcgt	ggaggtgcat	aatgccaaga	caaagccgcg	ggaggagcag	180
tacaacagca	cgtaccgtgt	ggtcagcgtc	ctcaccgtcc	tgcaccagga	ctggctgaat	240
ggcaaggagt	acaagtgcaa	ggtctccaac	aaagccctcc	cagcccccat	cgagaaaacc	300
atctccaaag	ccaaagggca	gccccgagaa	ccacaggtgt	gcaccctgcc	cccatcccgg	360
gaggagatga	ccaagaacca	ggtcagcctg	acctgcctgg	tcaaaggctt	ctatcccagc	420
gacatcgccg	tggagtggga	gagcaatggg	cagccggaga	acaactacga	caccacgcct	480
cccgtgctgg	actccgacgg	ctccttcttc	ctctatagcg	acctcaccgt	ggacaagagc	540
aggtggcagc	aggggaacgt	cttctcatgc	tccgtgatgc	atgaggctct	gcacaaccac	600
tacacgcaga	agagcctctc	cctgtctccg	ggtgcgcgcg	acggagacca	ctgtccgctc	660
gggcccgggc	gttgctgccg	tctgcacacg	gtccgcgcgt	cgctggaaga	cctgggctgg	720
gccgattggg	tgctgtcgcc	acgggaggtg	caagtgacca	tgtgcatcgg	cgcgtgcccg	780
agccagttcc	gggcggcaaa	catgcacgcg	cagatcaaga	cgagcctgca	ccgcctgaag	840
cccgacacgg	tgccagcgcc	ctgctgcgtg	cccgccagct	acaatcccat	ggtgctcatt	900
caaaagaccg	acaccggggt	gtcgctccag	acctatgatg	acttgttagc	caaagactgc	960
cactgcata						969

<210> 218 <211> 323 <212> PRT

- 378 046387 <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид” <400> 218

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

5 1015

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 20 2530

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 35 4045

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 50 5560

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 65 70 7580

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 85 9095

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

100 105110

Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

115 120125

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

130 135140

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro

145 150 155160

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr

165 170175

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

180 185190

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

195 200205

Ser Pro Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg

210 215220

- 379 046387

Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp

225 230 235240

Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile

245 250255

Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile

260 265270

Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys

275 280285

Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp

290 295300

Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys

305 310 315320

His Cys Ile <210> 219 <211> 211 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 219

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

5 1015

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val SerHis

2530

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 35 4045

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 50 5560

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu AsnGly

70 7580

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala ProIle

9095

- 380 046387

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

100 105110

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

115 120125

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

130 135140

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

145 150 155160

Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

165 170175

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

180 185190

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

195 200205

Pro Gly Lys

210 <210> 220 <211> 210 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 220

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

5 1015

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 20 2530

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 35 4045

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 50 5560

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 65 70 7580

- 381 046387

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 8590

Leu Pro Ala Pro Ile

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

100 105110

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

115 120125

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

130 135140

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro Pro

145 150 155160

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr Val

165 170175

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

180 185190

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

195 200205

Pro Gly

210 <210> 221 <211> 957 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 221 ggcccgtcag	tcttcctctt	ccccccaaaa	cccaaggaca	ccctcatgat	ctcccggacc	60
cctgaggtca	catgcgtggt	ggtggacgtg	agccacgaag	accctgaggt	caagttcaac	120
tggtacgtgg	acggcgtgga	ggtgcataat	gccaagacaa	agccgcggga	ggagcagtac	180
aacagcacgt	accgtgtggt	cagcgtcctc	accgtcctgc	accaggactg	gctgaatggc	240
aaggagtaca	agtgcaaggt	ctccaacaaa	gccctcccag	cccccatcga	gaaaaccatc	300
tccaaagcca	aagggcagcc	ccgagaacca	caggtgtaca	ccctgccccc	atcccgggag	360
gagatgacca	agaaccaggt	cagcctgacc	tgcctggtca	aaggcttcta	tcccagcgac	420
atcgccgtgg	agtgggagag	caatgggcag	ccggagaaca	actacgacac	cacgcctccc	480

- 382 046387

gtgctggact	ccgacggctc	cttcttcctc	tatagcgacc	tcaccgtgga	caagagcagg	540
tggcagcagg	ggaacgtctt	ctcatgctcc	gtgatgcatg	aggctctgca	caaccactac	600
acgcagaaga	gcctctccct	gtctccgggt	ggagaccact	gtccgctcgg	gcccgggcgt	660
tgctgccgtc	tgcacacggt	ccgcgcgtcg	ctggaagacc	tgggctgggc	cgattgggtg	720
ctgtcgccac	gggaggtgca	agtgaccatg	tgcatcggcg	cgtgcccgag	ccagttccgg	780
gcggcaaaca	tgcacgcgca	gatcaagacg	agcctgcacc	gcctgaagcc	cgacacggtg	840
ccagcgccct	gctgcgtgcc	cgccagctac	aatcccatgg	tgctcattca	aaagaccgac	900
accggggtgt	cgctccagac	ctatgatgac	ttgttagcca	aagactgcca	ctgcata	957

<210> 222 <211> 319 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 222

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

5 1015

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 20 2530

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 35 4045

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 50 5560

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 65 70 7580

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 85 9095

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

100 105110

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

115 120125

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

130 135140

- 383 046387

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu

145 150

Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro Pro

155 160

Val

Leu

Asp

Ser

Asp 165

Gly

Ser

Phe

Leu

170

Tyr

Ser

Asp

Leu

Thr

175

Val

Asp

Lys

Ser

Arg 180

Trp

Gln

Gly

Asn

185

Val

Phe

Ser

Cys

Ser

190

Val

Met

His

Glu

Ala

195

Leu

His

Asn

His

Tyr

200

Thr

Gln

Lys

Ser

Leu

205

Ser

Leu

Ser

Pro Gly Gly Asp His

Cys

210

Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu

215 220

His Thr Val Arg Ala

225

Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val

230 235 240

Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys

245 250

Ile Gly Ala Cys Pro

255

Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln

260 265

Ile Lys Thr Ser Leu

270

His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val

275 280

Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala

285

Ser Tyr Asn Pro Met Val

290

Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val

295 300

Ser

Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

305 310 315 <210> 223 <211> 633 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 223

ggcccgtcag	tcttcctctt	ccccccaaaa	cccaaggaca	ccctcatgat	ctcccggacc	60
cctgaggtca	catgcgtggt	ggtggacgtg	agccacgaag	accctgaggt	caagttcaac	120
tggtacgtgg	acggcgtgga	ggtgcataat	gccaagacaa	agccgcggga	ggagcagtac	180

- 384 046387

aacagcacgt	accgtgtggt	cagcgtcctc	accgtcctgc	accaggactg	gctgaatggc	240
aaggagtaca	agtgcaaggt	ctccaacaaa	gccctcccag	cccccatcga	gaaaaccatc	300
tccaaagcca	aagggcagcc	ccgagaacca	caggtgtaca	ccctgccccc	atcccggaag	360
gagatgacca	agaaccaggt	cagcctgacc	tgcctggtca	aaggcttcta	tcccagcgac	420
atcgccgtgg	agtgggagag	caatgggcag	ccggagaaca	actacaagac	cacgcctccc	480
gtgctgaagt	ccgacggctc	cttcttcctc	tatagcaagc	tcaccgtgga	caagagcagg	540
tggcagcagg	ggaacgtctt	ctcatgctcc	gtgatgcatg	aggctctgca	caaccactac	600
acgcagaaga	gcctctccct	gtctccgggt	aaa			633

<210> 224 <211> 1032 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 224 atggacatga	gggtgcccgc	tcagctcctg	gggctcctgc	tgctgtggct	gagaggtgcg	60
cgctgtggcc	cgtcagtctt	cctcttcccc	ccaaaaccca	aggacaccct	catgatctcc	120
cggacccctg	aggtcacatg	cgtggtggtg	gacgtgagcc	acgaagaccc	tgaggtcaag	180
ttcaactggt	acgtggacgg	cgtggaggtg	cataatgcca	agacaaagcc	gcgggaggag	240
cagtacaaca	gcacgtaccg	tgtggtcagc	gtcctcaccg	tcctgcacca	ggactggctg	300
aatggcaagg	agtacaagtg	caaggtctcc	aacaaagccc	tcccagcccc	catcgagaaa	360
accatctcca	aagccaaagg	gcagccccga	gaaccacagg	tgtacaccct	gcccccatcc	420
cgggaggaga	tgaccaagaa	ccaggtcagc	ctgacctgcc	tggtcaaagg	cttctatccc	480
agcgacatcg	ccgtggagtg	ggagagcaat	gggcagccgg	agaacaacta	cgacaccacg	540
cctcccgtgc	tggactccga	cggctccttc	ttcctctata	gcgacctcac	cgtggacaag	600
agcaggtggc	agcaggggaa	cgtcttctca	tgctccgtga	tgcatgaggc	tctgcacaac	660
cactacacgc	agaagagcct	ctccctgtct	ccgggtgcgc	gcgacggaga	ccactgtccg	720
ctcgggcccg	ggcgttgctg	ccgtctgcac	acggtccgcg	cgtcgctgga	agacctgggc	780
tgggccgatt	gggtgctgtc	gccacgggag	gtgcaagtga	ccatgtgcat	cggcgcgtgc	840
ccgagccagt	tccgggcggc	aaacatgcac	gcgcagatca	agacgagcct	gcaccgcctg	900
aagcccgaca	cggtgccagc	gccctgctgc	gtgcccgcca	gctacaatcc	catggtgctc	960
attcaaaaga	ccgacaccgg	ggtgtcgctc	cagacctatg	atgacttgtt	agccaaagac	1020
tgccactgca	ta					1032

- 385 046387 <210> 225 <211> 322 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: полипептид <400> 225

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 1 5

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

15

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr

Cys Val Val Val Asp Val Ser His 25 30

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn

40

Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 45

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg

55

Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 60

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 65 70

Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

80

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 85

Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

95

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys

100

Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

105 110

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu

115 120

Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

125

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe

130 135

Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

140

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu

145 150

Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro Pro

155 160

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe

165

Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr Val

170 175

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly

180

Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

185 190

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr

195 200

Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

205

- 386 046387

Pro Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys

210 215220

Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala

225 230 235240

Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly

245 250255

Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys

260 265270

Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys

275 280285

Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr

290 295300

Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His

305 310 315320

Cys Ile <210> 226 <211> 211 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 226

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

5 1015

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 20 2530

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 35 4045

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 50 5560

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 65 70 7580

- 387 046387

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 85 90

Leu Pro Ala Pro Ile

Glu Lys Thr Ile

Ser

100

Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

105 110

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

115 120125

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

130 135140

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

145 150 155160

Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

165 170175

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

180 185190

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

195 200205

Pro Gly Lys

210 <210> 227 <211> 210 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 227

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

5 1015

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val SerHis

2530

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 35 4045

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

5560

- 388 046387

Arg 65

Val

Ser

Val

Leu 70

Thr

Val

Leu

His

Gln 75

Asp

Trp

Leu

Asn

Gly 80

Lys

Glu

Tyr

Lys

Cys 85

Lys

Val

Ser

Asn

Lys 90

Ala

Leu

Pro

Ala

Pro 95

Ile

Glu

Lys

Thr

Ile

100

Ser

Lys

Ala

Lys

Gly 105

Gln

Pro

Arg

Glu

Pro

110

Gln

Val

Cys

Thr

Leu

115

Pro

Ser

Arg

Glu

120

Glu

Met

Thr

Lys

Asn

125

Gln

Val

Ser

Leu

Thr

130

Cys

Leu

Val

Lys

Gly 135

Phe

Tyr

Pro

Ser

Asp 140

Ile

Ala

Val

Glu

Trp 145

Glu

Ser

Asn

Gly

Gln

150

Pro

Glu

Asn

Tyr 155

Asp

Thr

Pro

160

Val

Leu

Asp

Ser

Asp 165

Gly

Ser

Phe

Leu

170

Tyr

Ser

Asp

Leu

Thr

175

Val

Asp

Lys

Ser

Arg 180

Trp

Gln

Gly

Asn

185

Val

Phe

Ser

Cys

Ser

190

Val

Met

His

Glu

Ala

195

Leu

His

Asn

His

Tyr 200

Thr

Gln

Lys

Ser

Leu

205

Ser

Leu

Ser

Pro Gly

210 <210> 228 <211> 1023 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 228

atggacatga	gggtgcccgc	tcagctcctg	gggctcctgc	tgctgtggct	gagaggtgcg	60
cgctgtggcc	cgtcagtctt	cctcttcccc	ccaaaaccca	aggacaccct	catgatctcc	120
cggacccctg	aggtcacatg	cgtggtggtg	gacgtgagcc	acgaagaccc	tgaggtcaag	180
ttcaactggt	acgtggacgg	cgtggaggtg	cataatgcca	agacaaagcc	gcgggaggag	240
cagtacaaca	gcacgtaccg	tgtggtcagc	gtcctcaccg	tcctgcacca	ggactggctg	300

- 389 046387

aatggcaagg	agtacaagtg	caaggtctcc	aacaaagccc	tcccagcccc	catcgagaaa	360
accatctcca	aagccaaagg	gcagccccga	gaaccacagg	tgtgcaccct	gcccccatcc	420
cgggaggaga	tgaccaagaa	ccaggtcagc	ctgacctgcc	tggtcaaagg	cttctatccc	480
agcgacatcg	ccgtggagtg	ggagagcaat	gggcagccgg	agaacaacta	cgacaccacg	540
cctcccgtgc	tggactccga	cggctccttc	ttcctctata	gcgacctcac	cgtggacaag	600
agcaggtggc	agcaggggaa	cgtcttctca	tgctccgtga	tgcatgaggc	tctgcacaac	660
cactacacgc	agaagagcct	ctccctgtct	ccgggtggag	accactgtcc	gctcgggccc	720
gggcgttgct	gccgtctgca	cacggtccgc	gcgtcgctgg	aagacctggg	ctgggccgat	780
tgggtgctgt	cgccacggga	ggtgcaagtg	accatgtgca	tcggcgcgtg	cccgagccag	840
ttccgggcgg	caaacatgca	cgcgcagatc	aagacgagcc	tgcaccgcct	gaagcccgac	900
acggtgccag	cgccctgctg	cgtgcccgcc	agctacaatc	ccatggtgct	cattcaaaag	960
accgacaccg ata	gggtgtcgct	ccagacctat	gatgacttgt	tagccaaaga	ctgccactgc	1020 1023

<210> 229 <211> 319 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 229

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

5 1015

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 20 2530

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 35 4045

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 50 5560

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 65 70 7580

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 85 9095

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

- 390 046387

100 105110

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

115 120125

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

130 135140

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro Pro

145 150 155160

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr Val

165 170175

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

180 185190

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

195 200205

Pro Gly Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu

210 215220

His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val

225 230 235240

Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro

245 250255

Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu

260 265270

His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala

275 280285

Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser

290 295300

Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

305 310315 <210> 230 <211> 633 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

- 391 046387 полинуклеотид

<400> 230 ggcccgtcag	tcttcctctt	ccccccaaaa	cccaaggaca	ccctcatgat	ctcccggacc	60
cctgaggtca	catgcgtggt	ggtggacgtg	agccacgaag	accctgaggt	caagttcaac	120
tggtacgtgg	acggcgtgga	ggtgcataat	gccaagacaa	agccgcggga	ggagcagtac	180
aacagcacgt	accgtgtggt	cagcgtcctc	accgtcctgc	accaggactg	gctgaatggc	240
aaggagtaca	agtgcaaggt	ctccaacaaa	gccctcccag	cccccatcga	gaaaaccatc	300
tccaaagcca	aagggcagcc	ccgagaacca	caggtgtaca	ccctgccccc	atgccggaag	360
gagatgacca	agaaccaggt	cagcctgacc	tgcctggtca	aaggcttcta	tcccagcgac	420
atcgccgtgg	agtgggagag	caatgggcag	ccggagaaca	actacaagac	cacgcctccc	480
gtgctgaagt	ccgacggctc	cttcttcctc	tatagcaagc	tcaccgtgga	caagagcagg	540
tggcagcagg	ggaacgtctt	ctcatgctcc	gtgatgcatg	aggctctgca	caaccactac	600
acgcagaaga	gcctctccct	gtctccgggt	aaa			633

<210> 231 <211> 966 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 231

ggcccgtcag	tcttcctctt	ccccccaaaa	cccaaggaca	ccctcatgat	ctcccggacc	60
cctgaggtca	catgcgtggt	ggtggacgtg	agccacgaag	accctgaggt	caagttcaac	120
tggtacgtgg	acggcgtgga	ggtgcataat	gccaagacaa	agccgcggga	ggagcagtac	180
aacagcacgt	accgtgtggt	cagcgtcctc	accgtcctgc	accaggactg	gctgaatggc	240
aaggagtaca	agtgcaaggt	ctccaacaaa	gccctcccag	cccccatcga	gaaaaccatc	300
tccaaagcca	aagggcagcc	ccgagaacca	caggtgtgca	ccctgccccc	atcccgggag	360
gagatgacca	agaaccaggt	cagcctgacc	tgcctggtca	aaggcttcta	tcccagcgac	420
atcgccgtgg	agtgggagag	caatgggcag	ccggagaaca	actacgacac	cacgcctccc	480
gtgctggact	ccgacggctc	cttcttcctc	tatagcgacc	tcaccgtgga	caagagcagg	540
tggcagcagg	ggaacgtctt	ctcatgctcc	gtgatgcatg	aggctctgca	caaccactac	600
acgcagaaga	gcctctccct	gtctccgggt	gcgcgcgacg	gagaccactg	tccgctcggg	660
cccgggcgtt	gctgccgtct	gcacacggtc	cgcgcgtcgc	tggaagacct	gggctgggcc	720
gattgggtgc	tgtcgccacg	ggaggtgcaa	gtgaccatgt	gcatcggcgc	gtgcccgagc	780

- 392 046387

cagttccggg	cggcaaacat	gcacgcgcag	atcaagacga	gcctgcaccg	cctgaagccc	840
gacacggtgc	cagcgccctg	ctgcgtgccc	gccagctaca	atcccatggt	gctcattcaa	900
aagaccgaca	ccggggtgtc	gctccagacc	tatgatgact	tgttagccaa	agactgccac	960
tgcata						966

<210> 232 <211> 322 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 232

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

5 1015

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 20 2530

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 35 4045

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 50 5560

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 65 70 7580

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 85 9095

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

100 105110

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

115 120125

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

130 135140

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp Thr Thr Pro Pro

145 150 155160

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Asp Leu Thr Val

165 170175

- 393 046387

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

180 185190

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

195 200205

Pro Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys

210 215220

Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala

225 230 235240

Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly

245 250255

Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys

260 265270

Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys

275 280285

Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr

290 295300

Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His

305 310 315320

Cys Ile <210> 233 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 233

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

- 394 046387

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr

55

Lys Pro Arg Glu Glu

Gln 65

Tyr

Gly

Ser

Thr

Tyr 70

Arg

Val

Ser

Val 75

Leu

Thr

Val

Leu

His 80

Gln

Asp

Trp

Leu

Asn 85

Gly

Lys

Glu

Tyr

Lys 90

Cys

Lys

Val

Ser

Asn 95

Lys

Ala

Leu

Pro

Ala

100

Pro

Ile

Glu

Lys

Thr

105

Ile

Ser

Lys

Ala

Lys 110

Gly

Gln

Pro

Arg

Glu

115

Pro

Gln

Val

Thr

120

Leu

Pro

Ser

Arg 125

Glu

Met

Thr

Lys 130

Asn

Gln

Val

Ser

Leu

135

Thr

Cys

Leu

Val

Lys 140

Gly

Phe

Tyr

Pro

Ser

145

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr

Asp

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Asp

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Asp

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys

195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 234 <211> 984 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 234

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240

- 395 046387

caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgaccacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgc	gcgcaacgga	660
gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	720
gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	780
atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	840
ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	900
cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	960
ttagccaaag	actgccactg	cata				984

<210> 235 <211> 328 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 235

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

- 396 046387

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

100 105

Pro Arg Glu Pro Gln Val Thr Thr Leu

115 120

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

130 135

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

145 150

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

165

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser

180 185

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

195 200

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ala

210 215

Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu

225 230

Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val

245

Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro

260 265

Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu

275 280

Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala

290 295

Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser

305 310

Ser Lys Ala Lys Gly Gln

110

Pro Ser Arg Glu Glu Met

125

Val Lys Gly Phe Tyr Pro

140

Gly Gln Pro Glu Asn Asn

155 160

Asp Gly Ser Phe Phe Leu

175

Trp Gln Gln Gly Asn Val

190

His Asn His Tyr Thr Gln

205

Asn Gly Asp His Cys Pro

220

Thr Val Arg Ala Ser Leu

235 240

Ser Pro Arg Glu Val Gln

255

Gln Phe Arg Ala Ala Asn

270

Arg Leu Lys Pro Asp Thr

285

Tyr Asn Pro Met Val Leu

300

Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

315 320

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 236 <211> 216 <212> PRT

- 397 046387 <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид” <400> 236

Ala Pro Glu Leu 1

Leu Gly Gly Pro 5

Ser Val Phe Leu

Phe Pro Pro Lys 15

Pro Lys Asp Thr

Leu Met Ile Ser

Arg Thr Pro Glu 25

Val Thr Cys Val 30

Val Val Asp Val

Ser His Glu Asp 40

Pro Glu Val Lys

Phe Asn Trp Tyr 45

Val Asp Gly Val 50

Glu Val His Asn

Ala Lys Thr Lys 60

Pro Arg Glu Glu

Gln Tyr Gly Ser 65

Thr Tyr Arg Val 70

Val Ser Val Leu

Thr Val Leu His

Gln Asp Trp Leu

Asn Gly Lys Glu 85

Tyr Lys Cys Lys 90

Val Ser Asn Lys

Ala Leu Pro Ala

100

Pro Ile Glu Lys

Thr Ile Ser Lys 105

Ala Lys Gly Gln 110

Pro Arg Glu Pro

115

Gln Val Thr Thr

120

Leu Pro Pro Ser

Arg Glu Glu Met 125

Thr Lys Asn Gln 130

Val Ser Leu Thr

135

Cys Leu Val Lys

140

Gly Phe Tyr Pro

Ser Asp Ile Ala 145

Val Glu Trp Glu

150

Ser Asn Gly Gln

155

Pro Glu Asn Asn

160

Tyr Asp Thr Thr

Pro Pro Val Leu 165

Asp Ser Asp Gly 170

Ser Phe Phe Leu

175

Tyr Ser Asp Leu

180

Thr Val Asp Lys

Ser Arg Trp Gln 185

Gln Gly Asn Val

190

Phe Ser Cys Ser

195

Val Met His Glu

200

Ala Leu His Asn

His Tyr Thr Gln 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215

- 398 046387 <210> 237 <211> 1044 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 237

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgaccacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
tccggaggcg	gtggaagcgg	aggtggtgga	tctggaggcg	gtggaagcgc	gcgcaacgga	720
gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	780
gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	840
atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	900
ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	960
cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	1020
ttagccaaag	actgccactg	cata				1044

<210> 238 <211> 348 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 238

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 10 15

- 399 046387

Pro

Val

Gln 65

Gln

Ala

Pro

Thr

Ser 145

Tyr

Phe

Lys

Gly 225

Asp

Arg

Lys Asp Thr Leu Met

Ile Ser Arg Thr Pro 25

Glu Val Thr Cys Val 30

Val Asp Val Ser His 35

Asp Gly Val Glu Val 50

Tyr Gly Ser Thr Tyr

Asp Trp Leu Asn Gly

Leu Pro Ala Pro Ile

100

Arg Glu Pro Gln Val 115

Lys Asn Gln Val Ser 130

Asp Ile Ala Val Glu

150

Asp Thr Thr Pro Pro

165

Ser Asp Leu Thr Val

180

Ser Cys Ser Val Met

195

Ser Leu Ser Leu Ser 210

Ser Gly Gly Gly Gly

230

His Cys Pro Leu Gly

245

Ala Ser Leu Glu Asp 260

Glu Asp Pro Glu Val 40

His Asn Ala Lys Thr 55

Arg Val Val Ser Val 75

Lys Glu Tyr Lys Cys

Glu Lys Thr Ile Ser 105

Thr Thr Leu Pro Pro

120

Leu Thr Cys Leu Val 135

Trp Glu Ser Asn Gly

155

Val Leu Asp Ser Asp

170

Asp Lys Ser Arg Trp 185

His Glu Ala Leu His

200

Pro Gly Gly Gly Gly 215

Ser Gly Gly Gly Gly

235

Pro Gly Arg Cys Cys

250

Leu Gly Trp Ala Asp 265

Lys Phe Asn Trp Tyr 45

Lys Pro Arg Glu Glu 60

Leu Thr Val Leu His

Lys Val Ser Asn Lys

Lys Ala Lys Gly Gln

110

Ser Arg Glu Glu Met

125

Lys Gly Phe Tyr Pro 140

Gln Pro Glu Asn Asn

160

Gly Ser Phe Phe Leu

175

Gln Gln Gly Asn Val

190

Asn His Tyr Thr Gln

205

Gly Ser Gly Gly Gly 220

Ser Ala Arg Asn Gly

240

Arg Leu His Thr Val

255

Trp Val Leu Ser Pro 270

- 400 046387

Arg

Glu

Val

275

Gln

Val

Thr

Met

Cys 280

Ile

Gly

Ala

Cys

Pro

285

Ser

Gln

Phe

Arg

Ala

290

Ala

Asn

Met

His

Ala

295

Gln

Ile

Lys

Thr

Ser

300

Leu

His

Arg

Leu

Lys

305

Pro

Asp

Thr

Val

Pro

310

Ala

Pro

Cys

Val

315

Pro

Ala

Ser

Tyr

Asn

320

Pro

Met

Val

Leu

Ile

325

Gln

Lys

Thr

Asp

Thr

330

Gly

Val

Ser

Leu

Gln

335

Thr

Tyr

Asp

Leu

340

Leu

Ala

Lys

Asp

Cys 345

His

Cys

Ile <210> 239 <211> 996 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 239

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataatgc	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtcctcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgaccacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	aggtggtgga	660
gcgcgcaacg	gagaccactg	tccgctcggg	cccgggcgtt	gctgccgtct	gcacacggtc	720
cgcgcgtcgc	tggaagacct	gggctgggcc	gattgggtgc	tgtcgccacg	ggaggtgcaa	780
gtgaccatgt	gcatcggcgc	gtgcccgagc	cagttccggg	cggcaaacat	gcacgcgcag	840
atcaagacga	gcctgcaccg	cctgaagccc	gacacggtgc	cagcgccctg	ctgcgtgccc	900

- 401 046387 gccagctaca atcccatggt gctcattcaa aagaccgaca ccggggtgtc gctccagacc 960 tatgatgact tgttagccaa agactgccac tgcata

996 <210> 240 <211> 332 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 240

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Thr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

- 402 046387

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ala Arg Asn Gly

210 215220

Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val

225 230 235240

Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro

245 250255

Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe

260 265270

Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu

275 280285

Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn

290 295300

Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr

305 310 315320

Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325330 <210> 241 <211> 2145 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 241 gatgcacaca	agagtgaggt	tgctcatcga	tttaaagatt	tgggagaaga	aaatttcaaa	60
gccttggtgt	tgattgcctt	tgctcagtat	cttcagcagt	gtccatttga	agatcatgta	120
aaattagtga	atgaagtaac	tgaatttgca	aaaacatgtg	ttgctgatga	gtcagctgaa	180
aattgtgaca	aatcacttca	tacccttttt	ggagacaaat	tatgcacagt	tgcaactctt	240
cgtgaaacct	atggtgaaat	ggctgactgc	tgtgcaaaac	aagaacctga	gagaaatgaa	300
tgcttcttgc	aacacaaaga	tgacaaccca	aacctccccc	gattggtgag	accagaggtt	360
gatgtgatgt	gcactgcttt	tcatgacaat	gaagagacat	ttttgaaaaa	atacttatat	420
gaaattgcca	gaagacatcc	ttacttttat	gccccggaac	tccttttctt	tgctaaaagg	480

- 403 046387 tataaagctg cttttacaga atgttgccaa gctgctgata aagctgcctg cctgttgcca540 aagctcgatg aacttcggga tgaagggaag gcttcgtctg ccaaacagag actcaagtgt600 gccagtctcc aaaaatttgg agaaagagct ttcaaagcat gggcagtagc tcgcctgagc660 cagagatttc ccaaagctga gtttgcagaa gtttccaagt tagtgacaga tcttaccaaa720 gtccacacgg aatgctgcca tggagatctg cttgaatgtg ctgatgacag ggcggacctt780 gccaagtata tctgtgaaaa tcaagattcg atctccagta aactgaagga atgctgtgaa840 aaacctctgt tggaaaaatc ccactgcatt gccgaagtgg aaaatgatga gatgcctgct900 gacttgcctt cattagctgc tgattttgtt gaaagtaagg atgtttgcaa aaactatgct960 gaggcaaagg atgtcttcct gggcatgttt ttgtatgaat atgcaagaag gcatcctgat1020 tactctgtcg tgctgctgct gagacttgcc aagacatatg aaaccactct agagaagtgc1080 tgtgccgctg cagatcctca tgaatgctat gccaaagtgt tcgatgaatt taaacctctt1140 gtggaagagc ctcagaattt aatcaaacaa aattgtgagc tttttgagca gcttggagag1200 tacaaattcc agaatgcgct attagttcgt tacaccaaga aagtacccca agtgtcaact1260 ccaactcttg tagaggtctc aagaaaccta ggaaaagtgg gcagcaaatg ttgtaaacat1320 cctgaagcaa aaagaatgcc ctgtgcagaa gactatctat ccgtggtcct gaaccagtta1380 tgtgtgttgc atgagaaaac gccagtaagt gacagagtca ccaaatgctg cacagaatcc1440 ttggtgaaca ggcgaccatg cttttcagct ctggaagtcg atgaaacata cgttcccaaa1500 gagtttaatg ctgaaacatt caccttccat gcagatatat gcacactttc tgagaaggag1560 agacaaatca agaaacaaac tgcacttgtt gagctcgtga aacacaagcc caaggcaaca1620 aaagagcaac tgaaagctgt tatggatgat ttcgcagctt ttgtagagaa gtgctgcaag1680 gctgacgata aggagacctg ctttgccgag gagggtaaaa aacttgttgc ggccagtcag1740 gccgccttag gcttaggatc cgccgctcag gctgcacagc aagcagccca agcagctcag1800 cagggaagcg cgcgcgacgg agaccactgt ccgctcgggc ccgggcgttg ctgccgtctg1860 cacacggtcc gcgcgtcgct ggaagacctg ggctgggccg attgggtgct gtcgccacgg1920 gaggtgcaag tgaccatgtg catcggcgcg tgcccgagcc agttccgggc ggcaaacatg1980 cacgcgcaga tcaagacgag cctgcaccgc ctgaagcccg acacggtgcc agcgccctgc2040 tgcgtgcccg ccagctacaa tcccatggtg ctcattcaaa agaccgacac cggggtgtcg2100 ctccagacct atgatgactt gttagccaaa gactgccact gcata2145 <210> 242 <211> 715 <212> PRT <213> Искусственная последовательность

- 404 046387 <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 242

Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu

5 10 15

Glu Asn Phe Lys

Ala Leu Val Leu

Ile Ala Phe Ala 25

Gln Tyr Leu Gln 30

Gln Cys Pro Phe 35

Glu Asp His Val 40

Lys Leu Val Asn

Glu Val Thr Glu 45

Phe Ala Lys Thr 50

Cys Val Ala Asp 55

Glu Ser Ala Glu

Asn Cys Asp Lys

Ser Leu His Thr 65

Leu Phe Gly Asp 70

Lys Leu Cys Thr 75

Val Ala Thr Leu

Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala Asp Cys Cys Ala Lys Gln Glu Pro 85 9095

Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Gln His Lys Asp Asp Asn Pro Asn Leu

100 105110

Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val Asp Val Met Cys Thr Ala Phe His

115 120125

Asp Asn Glu Glu Thr Phe Leu Lys Lys Tyr Leu Tyr Glu Ile Ala Arg

130 135140

Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys Arg

145 150 155160

Tyr Lys Ala Ala Phe Thr Glu Cys Cys Gln Ala Ala Asp Lys Ala Ala

165 170175

Cys Leu Leu Pro Lys Leu Asp Glu Leu Arg Asp Glu Gly Lys Ala Ser

180 185190

Ser Ala Lys Gln Arg Leu Lys Cys Ala Ser Leu Gln Lys Phe Gly Glu

195 200205

Arg Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val Ala Arg Leu Ser Gln Arg Phe Pro

210 215220

Lys Ala Glu Phe Ala Glu Val Ser Lys Leu Val Thr Asp Leu Thr Lys

- 405 046387

225 230 235240

Val His Thr Glu Cys Cys His Gly Asp Leu Leu Glu Cys Ala Asp Asp

245 250255

Arg Ala Asp Leu Ala Lys Tyr Ile Cys Glu Asn Gln Asp Ser Ile Ser

260 265270

Ser Lys Leu Lys Glu Cys Cys Glu Lys Pro Leu Leu Glu Lys Ser His

275 280285

Cys Ile Ala Glu Val Glu Asn Asp Glu Met Pro Ala Asp Leu Pro Ser

290 295300

Leu Ala Ala Asp Phe Val Glu Ser Lys Asp Val Cys Lys Asn Tyr Ala

305 310 315320

Glu Ala Lys Asp Val Phe Leu Gly Met Phe Leu Tyr Glu Tyr Ala Arg

325 330335

Arg His Pro Asp Tyr Ser Val Val Leu Leu Leu Arg Leu Ala Lys Thr

340 345350

Tyr Glu Thr Thr Leu Glu Lys Cys Cys Ala Ala Ala Asp Pro His Glu

355 360365

Cys Tyr Ala Lys Val Phe Asp Glu Phe Lys Pro Leu Val Glu Glu Pro

370 375380

Gln Asn Leu Ile Lys Gln Asn Cys Glu Leu Phe Glu Gln Leu Gly Glu

385 390 395400

Tyr Lys Phe Gln Asn Ala Leu Leu Val Arg Tyr Thr Lys Lys Val Pro

405 410415

Gln Val Ser Thr Pro Thr Leu Val Glu Val Ser Arg Asn Leu Gly Lys

420 425430

Val Gly Ser Lys Cys Cys Lys His Pro Glu Ala Lys Arg Met Pro Cys

435 440445

Ala Glu Asp Tyr Leu Ser Val Val Leu Asn Gln Leu Cys Val Leu His

450 455460

Glu Lys Thr Pro Val Ser Asp Arg Val Thr Lys Cys Cys Thr Glu Ser

465 470 475480

- 406 046387

Leu Val Asn Arg Arg Pro Cys Phe Ser 485

Tyr Val Pro Lys Glu Phe Asn Ala Glu

500 505

Ile Cys Thr Leu Ser Glu Lys Glu Arg

515 520

Leu Val Glu Leu Val Lys His Lys Pro

530 535

Lys Ala Val Met Asp Asp Phe Ala Ala

545 550

Ala Asp Asp Lys Glu Thr Cys Phe Ala 565

Ala Ala Ser Gln Ala Ala Leu Gly Leu

580 585

Gln Gln Ala Ala Gln Ala Ala Gln Gln

595 600

His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg Cys

610 615

Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp Ala

625 630

Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile Gly 645

Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile Lys

660 665

Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys Cys

675 680

Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp Thr

690 695

Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys His 705 710

Leu Glu Val Asp Glu Thr

495

Phe Thr Phe His Ala Asp

510

Ile Lys Lys Gln Thr Ala

525

Ala Thr Lys Glu Gln Leu 540

Val Glu Lys Cys Cys Lys

555 560

Glu Gly Lys Lys Leu Val

575

Ser Ala Ala Gln Ala Ala

590

Ser Ala Arg Asp Gly Asp

605

Arg Leu His Thr Val Arg 620

Trp Val Leu Ser Pro Arg

635 640

Cys Pro Ser Gln Phe Arg

655

Ser Leu His Arg Leu Lys

670

Pro Ala Ser Tyr Asn Pro

685

Val Ser Leu Gln Thr Tyr 700

Ile

715 <210> 243 <211> 339 <212> PRT

- 407 046387 <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид” <400> 243

Met Glu Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Phe Leu Ser Val Thr Thr Gly

5 1015

Val His Ser Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 20 2530

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 35 4045

Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 50 5560

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 65 70 7580

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 85 9095

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu

100 105110

Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

115 120125

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys

130 135140

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

145 150 155160

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp

165 170175

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

180 185190

Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser

195 200205

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

210 215220

- 408 046387

Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg

225 230 235240

Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp

245 250255

Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile

260 265270

Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile

275 280285

Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys

290 295300

Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp

305 310 315320

Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys

325 330335

His Cys Ile <210> 244 <211> 1017 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 244 atggaatgga	gctgggtctt	tctcttcttc	ctgtcagtaa	cgactggtgt	ccactccggt	60
ggcccgtcag	tcttcctctt	ccccccaaaa	cccaaggaca	ccctcatgat	ctcccggacc	120
cctgaggtca	catgcgtggt	ggtggacgtg	agccacgaag	accctgaggt	caagttcaac	180
tggtacgtgg	acggcgtgga	ggtgcataat	gccaagacaa	agccgcggga	ggagcagtac	240
aacagcacgt	accgtgtggt	cagcgtcctc	accgtcctgc	accaggactg	gctgaatggc	300
aaggagtaca	agtgcaaggt	ctccaacaaa	gccctcccag	cccccatcga	gaaaaccatc	360
tccaaagcca	aagggcagcc	ccgagaacca	caggtgtaca	ccctgccccc	atcccgggag	420
gagatgacca	agaaccaggt	cagcctgacc	tgcctggtca	aaggcttcta	tcccagcgac	480
atcgccgtgg	agtgggagag	caatgggcag	ccggagaaca	actacgacac	cacgcctccc	540
gtgctggact	ccgacggctc	cttcttcctc	tatagcgacc	tcaccgtgga	caagagcagg	600

- 409 046387

tggcagcagg	ggaacgtctt	ctcatgctcc	gtgatgcatg	aggctctgca	caaccactac	660
acgcagaaga	gcctctccct	gtctccgggt	ggagaccact	gtccgctcgg	gcccgggcgt	720
tgctgccgtc	tgcacacggt	ccgcgcgtcg	ctggaagacc	tgggctgggc	cgattgggtg	780
ctgtcgccac	gggaggtgca	agtgaccatg	tgcatcggcg	cgtgcccgag	ccagttccgg	840
gcggcaaaca	tgcacgcgca	gatcaagacg	agcctgcacc	gcctgaagcc	cgacacggtg	900
ccagcgccct	gctgcgtgcc	cgccagctac	aatcccatgg	tgctcattca	aaagaccgac	960
accggggtgt	cgctccagac	ctatgatgac	ttgttagcca	aagactgcca	ctgcata	1017

<210> 245 <211> 231 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 245

Met Glu Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Phe Leu Ser Val Thr Thr Gly

5 1015

Val His Ser Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 20 2530

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 35 4045

Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 50 5560

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 65 70 7580

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 85 9095

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu

100 105110

Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

115 120125

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met Thr Lys

130 135140

- 410 046387

Asn

145

Gln

Val

Ser

Leu

Thr

150

Cys

Leu

Val

Lys

Gly 155

Phe

Tyr

Pro

Ser

Asp 160

Ile

Ala

Val

Glu

Trp 165

Glu

Ser

Asn

Gly

Gln

170

Pro

Glu

Asn

Tyr

175

Lys

Thr

Pro

180

Val

Leu

Lys

Ser

Asp 185

Gly

Ser

Phe

Leu

190

Tyr

Ser

Lys

Leu

Thr

195

Val

Asp

Lys

Ser

Arg 200

Trp

Gln

Gly

Asn

205

Val

Phe

Ser

Cys

Ser

210

Val

Met

His

Glu

Ala

215

Leu

His

Asn

His

Tyr 220

Thr

Gln

Lys

Ser

Leu

225

Ser

Leu

Ser

Pro

Gly 230

Lys <210> 246 <211> 693 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 246 atggaatgga	gctgggtctt	tctcttcttc	ctgtcagtaa	cgactggtgt	ccactccggt	60
ggcccgtcag	tcttcctctt	ccccccaaaa	cccaaggaca	ccctcatgat	ctcccggacc	120
cctgaggtca	catgcgtggt	ggtggacgtg	agccacgaag	accctgaggt	caagttcaac	180
tggtacgtgg	acggcgtgga	ggtgcataat	gccaagacaa	agccgcggga	ggagcagtac	240
aacagcacgt	accgtgtggt	cagcgtcctc	accgtcctgc	accaggactg	gctgaatggc	300
aaggagtaca	agtgcaaggt	ctccaacaaa	gccctcccag	cccccatcga	gaaaaccatc	360
tccaaagcca	aagggcagcc	ccgagaacca	caggtgtaca	ccctgccccc	atcccggaag	420
gagatgacca	agaaccaggt	cagcctgacc	tgcctggtca	aaggcttcta	tcccagcgac	480
atcgccgtgg	agtgggagag	caatgggcag	ccggagaaca	actacaagac	cacgcctccc	540
gtgctgaagt	ccgacggctc	cttcttcctc	tatagcaagc	tcaccgtgga	caagagcagg	600
tggcagcagg	ggaacgtctt	ctcatgctcc	gtgatgcatg	aggctctgca	caaccactac	660
acgcagaaga	gcctctccct	gtctccgggt	aaa			693

<210> 247 <211> 342 <212> PRT

- 411 046387 <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид” <400> 247

Met Glu Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Phe Leu Ser Val Thr Thr Gly

5 1015

Val His Ser Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 20 2530

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 35 4045

Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 50 5560

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 65 70 7580

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 85 9095

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu

100 105110

Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

115 120125

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys

130 135140

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

145 150 155160

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp

165 170175

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

180 185190

Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser

195 200205

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

210 215220

- 412 046387

Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro Leu Gly

225 230 235240

Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp

245 250255

Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr

260 265270

Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His

275 280285

Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro

290 295300

Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln

305 310 315320

Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala

325 330335

Lys Asp Cys His Cys Ile

340 <210> 248 <211> 1026 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 248 atggaatgga	gctgggtctt	tctcttcttc	ctgtcagtaa	cgactggtgt	ccactccggt	60
ggcccgtcag	tcttcctctt	ccccccaaaa	cccaaggaca	ccctcatgat	ctcccggacc	120
cctgaggtca	catgcgtggt	ggtggacgtg	agccacgaag	accctgaggt	caagttcaac	180
tggtacgtgg	acggcgtgga	ggtgcataat	gccaagacaa	agccgcggga	ggagcagtac	240
aacagcacgt	accgtgtggt	cagcgtcctc	accgtcctgc	accaggactg	gctgaatggc	300
aaggagtaca	agtgcaaggt	ctccaacaaa	gccctcccag	cccccatcga	gaaaaccatc	360
tccaaagcca	aagggcagcc	ccgagaacca	caggtgtaca	ccctgccccc	atcccgggag	420
gagatgacca	agaaccaggt	cagcctgacc	tgcctggtca	aaggcttcta	tcccagcgac	480
atcgccgtgg	agtgggagag	caatgggcag	ccggagaaca	actacgacac	cacgcctccc	540
gtgctggact	ccgacggctc	cttcttcctc	tatagcgacc	tcaccgtgga	caagagcagg	600

- 413 046387

tggcagcagg	ggaacgtctt	ctcatgctcc	gtgatgcatg	aggctctgca	caaccactac	660
acgcagaaga	gcctctccct	gtctccgggt	gcgcgcgacg	gagaccactg	tccgctcggg	720
cccgggcgtt	gctgccgtct	gcacacggtc	cgcgcgtcgc	tggaagacct	gggctgggcc	780
gattgggtgc	tgtcgccacg	ggaggtgcaa	gtgaccatgt	gcatcggcgc	gtgcccgagc	840
cagttccggg	cggcaaacat	gcacgcgcag	atcaagacga	gcctgcaccg	cctgaagccc	900
gacacggtgc	cagcgccctg	ctgcgtgccc	gccagctaca	atcccatggt	gctcattcaa	960
aagaccgaca	ccggggtgtc	gctccagacc	tatgatgact	tgttagccaa	agactgccac	1020
tgcata						1026

<210> 249 <211> 339 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 249

Met Glu Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Phe Leu Ser Val Thr Thr Gly

5 1015

Val His Ser Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 20 2530

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 35 4045

Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 50 5560

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 65 70 7580

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 85 9095

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu

100 105110

Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

115 120125

Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys

130 135140

- 414 046387

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

145 150 155

Phe Tyr Pro Ser Asp

160

Ile Ala Val Glu

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp

165 170 175

Thr Thr Pro Pro Val

180

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

185 190

Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser

195 200 205

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

210 215 220

Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro Gly Arg

225 230 235 240

Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu Gly Trp

245 250 255

Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met Cys Ile

260 265 270

Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala Gln Ile

275 280 285

Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala Pro Cys

290 295 300

Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys Thr Asp

305 310 315 320

Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys Asp Cys

325 330 335

His Cys Ile <210> 250 <211> 1017 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

- 415 046387

<400> 250 atggaatgga	gctgggtctt	tctcttcttc	ctgtcagtaa	cgactggtgt	ccactccggt	60
ggcccgtcag	tcttcctctt	ccccccaaaa	cccaaggaca	ccctcatgat	ctcccggacc	120
cctgaggtca	catgcgtggt	ggtggacgtg	agccacgaag	accctgaggt	caagttcaac	180
tggtacgtgg	acggcgtgga	ggtgcataat	gccaagacaa	agccgcggga	ggagcagtac	240
aacagcacgt	accgtgtggt	cagcgtcctc	accgtcctgc	accaggactg	gctgaatggc	300
aaggagtaca	agtgcaaggt	ctccaacaaa	gccctcccag	cccccatcga	gaaaaccatc	360
tccaaagcca	aagggcagcc	ccgagaacca	caggtgtgca	ccctgccccc	atcccgggag	420
gagatgacca	agaaccaggt	cagcctgacc	tgcctggtca	aaggcttcta	tcccagcgac	480
atcgccgtgg	agtgggagag	caatgggcag	ccggagaaca	actacgacac	cacgcctccc	540
gtgctggact	ccgacggctc	cttcttcctc	tatagcgacc	tcaccgtgga	caagagcagg	600
tggcagcagg	ggaacgtctt	ctcatgctcc	gtgatgcatg	aggctctgca	caaccactac	660
acgcagaaga	gcctctccct	gtctccgggt	ggagaccact	gtccgctcgg	gcccgggcgt	720
tgctgccgtc	tgcacacggt	ccgcgcgtcg	ctggaagacc	tgggctgggc	cgattgggtg	780
ctgtcgccac	gggaggtgca	agtgaccatg	tgcatcggcg	cgtgcccgag	ccagttccgg	840
gcggcaaaca	tgcacgcgca	gatcaagacg	agcctgcacc	gcctgaagcc	cgacacggtg	900
ccagcgccct	gctgcgtgcc	cgccagctac	aatcccatgg	tgctcattca	aaagaccgac	960
accggggtgt	cgctccagac	ctatgatgac	ttgttagcca	aagactgcca	ctgcata	1017

<210> 251 <211> 231 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 251

Met Glu Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Phe Leu Ser Val Thr Thr Gly

5 1015

Val His Ser Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys ProLys

2530

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 35 4045

Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp

5560

- 416 046387

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 65 70

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr

80

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 85 9095

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu

100 105110

Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

115 120125

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met Thr Lys

130 135140

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

145 150 155160

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

165 170175

Thr Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

180 185190

Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser

195 200205

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

210 215220

Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

225230 <210> 252 <211> 693 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 252 atggaatgga gctgggtctt tctcttcttc ctgtcagtaa cgactggtgt ccactccggt60 ggcccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc120 cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac180 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac240

- 417 046387

aacagcacgt	accgtgtggt	cagcgtcctc	accgtcctgc	accaggactg	gctgaatggc	300
aaggagtaca	agtgcaaggt	ctccaacaaa	gccctcccag	cccccatcga	gaaaaccatc	360
tccaaagcca	aagggcagcc	ccgagaacca	caggtgtaca	ccctgccccc	atgccggaag	420
gagatgacca	agaaccaggt	cagcctgacc	tgcctggtca	aaggcttcta	tcccagcgac	480
atcgccgtgg	agtgggagag	caatgggcag	ccggagaaca	actacaagac	cacgcctccc	540
gtgctgaagt	ccgacggctc	cttcttcctc	tatagcaagc	tcaccgtgga	caagagcagg	600
tggcagcagg	ggaacgtctt	ctcatgctcc	gtgatgcatg	aggctctgca	caaccactac	660
acgcagaaga	gcctctccct	gtctccgggt	aaa			693

<210> 253 <211> 342 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 253

Met Glu Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Phe Leu Ser Val Thr Thr Gly

5 1015

Val His Ser Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 20 2530

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 35 4045

Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 50 5560

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 65 70 7580

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 85 9095

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu

100 105110

Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

115 120125

Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys

130 135140

- 418 046387

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

145 150 155

Phe Tyr Pro Ser Asp

160

Ile Ala Val Glu

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asp

165 170 175

Thr Thr Pro Pro Val

180

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

185 190

Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser

195 200 205

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

210 215 220

Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro Leu Gly

225 230 235 240

Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp

245 250 255

Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr

260 265 270

Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His

275 280 285

Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro

290 295 300

Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln

305 310 315 320

Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala

325 330 335

Lys Asp Cys His Cys Ile

340 <210> 254 <211> 1026 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

- 419 046387 <400> 254 atggaatgga gctgggtctt tctcttcttc ctgtcagtaa cgactggtgt ccactccggt60 ggcccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc120 cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac180 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac240 aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc300 aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc360 tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtgca ccctgccccc atcccgggag420 gagatgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac480 atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacgacac cacgcctccc540 gtgctggact ccgacggctc cttcttcctc tatagcgacc tcaccgtgga caagagcagg600 tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac660 acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt gcgcgcgacg gagaccactg tccgctcggg720 cccgggcgtt gctgccgtct gcacacggtc cgcgcgtcgc tggaagacct gggctgggcc780 gattgggtgc tgtcgccacg ggaggtgcaa gtgaccatgt gcatcggcgc gtgcccgagc840 cagttccggg cggcaaacat gcacgcgcag atcaagacga gcctgcaccg cctgaagccc900 gacacggtgc cagcgccctg ctgcgtgccc gccagctaca atcccatggt gctcattcaa960 aagaccgaca ccggggtgtc gctccagacc tatgatgact tgttagccaa agactgccac1020 tgcata1026 <210> 255 <211> 341 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 255

Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp

5 1015

Leu Arg Gly Ala Arg Cys Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 20 2530

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 35 4045

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

- 420 046387

Val 65

Gln

Ala

Pro

Thr 145

Ser

Tyr

Phe

Lys 225

Gly

Cys

Gln

Asp Gly Val Glu Val

His Asn Ala Lys Thr

Lys Pro Arg Glu Glu

Tyr Asn Ser Thr Tyr

Arg Val Val Ser Val

Leu Thr Val Leu His

Asp Trp Leu Asn Gly

100

Leu Pro Ala Pro Ile

115

Arg Glu Pro Gln Val 130

Lys Asn Gln Val Ser

150

Asp Ile Ala Val Glu

165

Asp Thr Thr Pro Pro 180

Ser Asp Leu Thr Val

195

Ser Cys Ser Val Met 210

Ser Leu Ser Leu Ser

230

Arg Cys Cys Arg Leu

245

Trp Ala Asp Trp Val 260

Ile Gly Ala Cys Pro

275

Ile Lys Thr Ser Leu 290

Lys Glu Tyr Lys Cys

105

Lys Val Ser Asn Lys

110

Glu Lys Thr Ile Ser 120

Tyr Thr Leu Pro Pro 135

Leu Thr Cys Leu Val

155

Trp Glu Ser Asn Gly

170

Val Leu Asp Ser Asp

185

Asp Lys Ser Arg Trp

200

His Glu Ala Leu His 215

Pro Gly Gly Asp His

235

His Thr Val Arg Ala

250

Leu Ser Pro Arg Glu

265

Ser Gln Phe Arg Ala

280

His Arg Leu Lys Pro 295

Lys Ala Lys Gly Gln

125

Ser Arg Glu Glu Met 140

Lys Gly Phe Tyr Pro

160

Gln Pro Glu Asn Asn

175

Gly Ser Phe Phe Leu

190

Gln Gln Gly Asn Val 205

Asn His Tyr Thr Gln 220

Cys Pro Leu Gly Pro

240

Ser Leu Glu Asp Leu

255

Val Gln Val Thr Met

270

Ala Asn Met His Ala

285

Asp Thr Val Pro Ala 300

- 421 046387

Pro Cys Cys Val

Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys

305

310 315 320

Thr Asp Thr Gly Val

325

Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys

330 335

Asp Cys His Cys Ile

340 <210> 256 <211> 1023 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 256 atggacatga	gggtgcccgc	tcagctcctg	gggctcctgc	tgctgtggct	gagaggtgcg	60
cgctgtggcc	cgtcagtctt	cctcttcccc	ccaaaaccca	aggacaccct	catgatctcc	120
cggacccctg	aggtcacatg	cgtggtggtg	gacgtgagcc	acgaagaccc	tgaggtcaag	180
ttcaactggt	acgtggacgg	cgtggaggtg	cataatgcca	agacaaagcc	gcgggaggag	240
cagtacaaca	gcacgtaccg	tgtggtcagc	gtcctcaccg	tcctgcacca	ggactggctg	300
aatggcaagg	agtacaagtg	caaggtctcc	aacaaagccc	tcccagcccc	catcgagaaa	360
accatctcca	aagccaaagg	gcagccccga	gaaccacagg	tgtacaccct	gcccccatcc	420
cgggaggaga	tgaccaagaa	ccaggtcagc	ctgacctgcc	tggtcaaagg	cttctatccc	480
agcgacatcg	ccgtggagtg	ggagagcaat	gggcagccgg	agaacaacta	cgacaccacg	540
cctcccgtgc	tggactccga	cggctccttc	ttcctctata	gcgacctcac	cgtggacaag	600
agcaggtggc	agcaggggaa	cgtcttctca	tgctccgtga	tgcatgaggc	tctgcacaac	660
cactacacgc	agaagagcct	ctccctgtct	ccgggtggag	accactgtcc	gctcgggccc	720
gggcgttgct	gccgtctgca	cacggtccgc	gcgtcgctgg	aagacctggg	ctgggccgat	780
tgggtgctgt	cgccacggga	ggtgcaagtg	accatgtgca	tcggcgcgtg	cccgagccag	840
ttccgggcgg	caaacatgca	cgcgcagatc	aagacgagcc	tgcaccgcct	gaagcccgac	900
acggtgccag	cgccctgctg	cgtgcccgcc	agctacaatc	ccatggtgct	cattcaaaag	960
accgacaccg	gggtgtcgct	ccagacctat	gatgacttgt	tagccaaaga	ctgccactgc	1020
ata						1023

<210> 257 <211> 233 <212> PRT

- 422 046387 <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид” <400> 257

Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp

5 1015

Leu Arg Gly Ala Arg Cys Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

2530

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val

4045

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 50 5560

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 65 70 7580

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 85 9095

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

100 105110

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

115 120125

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met

130 135140

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

145 150 155160

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

165 170175

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

180 185190

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

195 200205

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

210 215220

- 423 046387

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

225 230 <210> 258 <211> 699 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 258 atggacatga	gggtgcccgc	tcagctcctg	gggctcctgc	tgctgtggct	gagaggtgcg	60
cgctgtggcc	cgtcagtctt	cctcttcccc	ccaaaaccca	aggacaccct	catgatctcc	120
cggacccctg	aggtcacatg	cgtggtggtg	gacgtgagcc	acgaagaccc	tgaggtcaag	180
ttcaactggt	acgtggacgg	cgtggaggtg	cataatgcca	agacaaagcc	gcgggaggag	240
cagtacaaca	gcacgtaccg	tgtggtcagc	gtcctcaccg	tcctgcacca	ggactggctg	300
aatggcaagg	agtacaagtg	caaggtctcc	aacaaagccc	tcccagcccc	catcgagaaa	360
accatctcca	aagccaaagg	gcagccccga	gaaccacagg	tgtacaccct	gcccccatcc	420
cggaaggaga	tgaccaagaa	ccaggtcagc	ctgacctgcc	tggtcaaagg	cttctatccc	480
agcgacatcg	ccgtggagtg	ggagagcaat	gggcagccgg	agaacaacta	caagaccacg	540
cctcccgtgc	tgaagtccga	cggctccttc	ttcctctata	gcaagctcac	cgtggacaag	600
agcaggtggc	agcaggggaa	cgtcttctca	tgctccgtga	tgcatgaggc	tctgcacaac	660
cactacacgc	agaagagcct	ctccctgtct	ccgggtaaa			699

<210> 259 <211> 344 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 259

Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp

5 1015

Leu Arg Gly Ala Arg Cys Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 20 2530

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 35 4045

- 424 046387

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val

55

Lys Phe Asn Trp Tyr

Val Asp Gly Val

Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu

75 80

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 85

Ser Val Leu Thr Val Leu His

95

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys

100 105

Lys Val Ser Asn Lys

110

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

115 120 125

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

130 135 140

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

145 150 155 160

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

165 170 175

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

180 185 190

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

195 200 205

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

210 215 220

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro

225 230 235 240

Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu

245 250 255

Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln

260 265 270

Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn

275 280 285

Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr

290 295 300

- 425 046387

Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala 305 310

Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu

315

320

Ile Gln Lys

Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

325 330 335

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

340 <210> 260 <211> 1032 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 260 atggacatga	gggtgcccgc	tcagctcctg	gggctcctgc	tgctgtggct	gagaggtgcg	60
cgctgtggcc	cgtcagtctt	cctcttcccc	ccaaaaccca	aggacaccct	catgatctcc	120
cggacccctg	aggtcacatg	cgtggtggtg	gacgtgagcc	acgaagaccc	tgaggtcaag	180
ttcaactggt	acgtggacgg	cgtggaggtg	cataatgcca	agacaaagcc	gcgggaggag	240
cagtacaaca	gcacgtaccg	tgtggtcagc	gtcctcaccg	tcctgcacca	ggactggctg	300
aatggcaagg	agtacaagtg	caaggtctcc	aacaaagccc	tcccagcccc	catcgagaaa	360
accatctcca	aagccaaagg	gcagccccga	gaaccacagg	tgtacaccct	gcccccatcc	420
cgggaggaga	tgaccaagaa	ccaggtcagc	ctgacctgcc	tggtcaaagg	cttctatccc	480
agcgacatcg	ccgtggagtg	ggagagcaat	gggcagccgg	agaacaacta	cgacaccacg	540
cctcccgtgc	tggactccga	cggctccttc	ttcctctata	gcgacctcac	cgtggacaag	600
agcaggtggc	agcaggggaa	cgtcttctca	tgctccgtga	tgcatgaggc	tctgcacaac	660
cactacacgc	agaagagcct	ctccctgtct	ccgggtgcgc	gcgacggaga	ccactgtccg	720
ctcgggcccg	ggcgttgctg	ccgtctgcac	acggtccgcg	cgtcgctgga	agacctgggc	780
tgggccgatt	gggtgctgtc	gccacgggag	gtgcaagtga	ccatgtgcat	cggcgcgtgc	840
ccgagccagt	tccgggcggc	aaacatgcac	gcgcagatca	agacgagcct	gcaccgcctg	900
aagcccgaca	cggtgccagc	gccctgctgc	gtgcccgcca	gctacaatcc	catggtgctc	960
attcaaaaga	ccgacaccgg	ggtgtcgctc	cagacctatg	atgacttgtt	agccaaagac	1020
tgccactgca	ta					1032

<210> 261

- 426 046387 <211> 341 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 261

Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp

5 1015

Leu Arg Gly Ala Arg Cys Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 20 2530

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 35 4045

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 50 5560

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 65 70 7580

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 85 9095

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

100 105110

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

115 120125

Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

130 135140

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

145 150 155160

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

165 170175

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

180 185190

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

195 200205

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

- 427 046387

210

215

220

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro

225 230 235240

Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu

245 250255

Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met

260 265270

Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala

275 280285

Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala

290 295300

Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys

305 310 315320

Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys

325 330335

Asp Cys His Cys Ile

340 <210> 262 <211> 1023 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 262 atggacatga	gggtgcccgc	tcagctcctg	gggctcctgc	tgctgtggct	gagaggtgcg	60
cgctgtggcc	cgtcagtctt	cctcttcccc	ccaaaaccca	aggacaccct	catgatctcc	120
cggacccctg	aggtcacatg	cgtggtggtg	gacgtgagcc	acgaagaccc	tgaggtcaag	180
ttcaactggt	acgtggacgg	cgtggaggtg	cataatgcca	agacaaagcc	gcgggaggag	240
cagtacaaca	gcacgtaccg	tgtggtcagc	gtcctcaccg	tcctgcacca	ggactggctg	300
aatggcaagg	agtacaagtg	caaggtctcc	aacaaagccc	tcccagcccc	catcgagaaa	360
accatctcca	aagccaaagg	gcagccccga	gaaccacagg	tgtgcaccct	gcccccatcc	420
cgggaggaga	tgaccaagaa	ccaggtcagc	ctgacctgcc	tggtcaaagg	cttctatccc	480
agcgacatcg	ccgtggagtg	ggagagcaat	gggcagccgg	agaacaacta	cgacaccacg	540

- 428 046387

cctcccgtgc	tggactccga	cggctccttc	ttcctctata	gcgacctcac	cgtggacaag	600
agcaggtggc	agcaggggaa	cgtcttctca	tgctccgtga	tgcatgaggc	tctgcacaac	660
cactacacgc	agaagagcct	ctccctgtct	ccgggtggag	accactgtcc	gctcgggccc	720
gggcgttgct	gccgtctgca	cacggtccgc	gcgtcgctgg	aagacctggg	ctgggccgat	780
tgggtgctgt	cgccacggga	ggtgcaagtg	accatgtgca	tcggcgcgtg	cccgagccag	840
ttccgggcgg	caaacatgca	cgcgcagatc	aagacgagcc	tgcaccgcct	gaagcccgac	900
acggtgccag	cgccctgctg	cgtgcccgcc	agctacaatc	ccatggtgct	cattcaaaag	960
accgacaccg ata	gggtgtcgct	ccagacctat	gatgacttgt	tagccaaaga	ctgccactgc	1020 1023

<210> 263 <211> 233 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 263

Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp

5 1015

Leu Arg Gly Ala Arg Cys Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 20 2530

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 35 4045

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 50 5560

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 65 70 7580

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 85 9095

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

100 105110

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

115 120125

- 429 046387

Pro

Arg 130

Glu

Pro

Gln

Val

Tyr 135

Thr

Leu

Pro

Cys 140

Arg

Lys

Glu

Met

Thr

145

Lys

Asn

Gln

Val

Ser

150

Leu

Thr

Cys

Leu

Val

155

Lys

Gly

Phe

Tyr

Pro

160

Ser

Asp

Ile

Ala

Val

165

Glu

Trp

Glu

Ser

Asn

170

Gly

Gln

Pro

Glu

Asn

175

Asn

Tyr

Lys

Thr

180

Pro

Val

Leu

Lys 185

Ser

Asp

Gly

Ser

Phe

190

Phe

Leu

Tyr

Ser

Lys 195

Leu

Thr

Val

Asp

Lys 200

Ser

Arg

Trp

Gln

205

Gly

Asn

Val

Phe

Ser

210

Cys

Ser

Val

Met

His

215

Glu

Ala

Leu

His

Asn

220

His

Tyr

Thr

Gln

Lys 225

Ser

Leu

Ser

Leu

Ser

230

Pro

Gly

Lys <210> 264 <211> 699 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 264

atggacatga	gggtgcccgc	tcagctcctg	gggctcctgc	tgctgtggct	gagaggtgcg	60
cgctgtggcc	cgtcagtctt	cctcttcccc	ccaaaaccca	aggacaccct	catgatctcc	120
cggacccctg	aggtcacatg	cgtggtggtg	gacgtgagcc	acgaagaccc	tgaggtcaag	180
ttcaactggt	acgtggacgg	cgtggaggtg	cataatgcca	agacaaagcc	gcgggaggag	240
cagtacaaca	gcacgtaccg	tgtggtcagc	gtcctcaccg	tcctgcacca	ggactggctg	300
aatggcaagg	agtacaagtg	caaggtctcc	aacaaagccc	tcccagcccc	catcgagaaa	360
accatctcca	aagccaaagg	gcagccccga	gaaccacagg	tgtacaccct	gcccccatgc	420
cggaaggaga	tgaccaagaa	ccaggtcagc	ctgacctgcc	tggtcaaagg	cttctatccc	480
agcgacatcg	ccgtggagtg	ggagagcaat	gggcagccgg	agaacaacta	caagaccacg	540
cctcccgtgc	tgaagtccga	cggctccttc	ttcctctata	gcaagctcac	cgtggacaag	600
agcaggtggc	agcaggggaa	cgtcttctca	tgctccgtga	tgcatgaggc	tctgcacaac	660
cactacacgc	agaagagcct	ctccctgtct	ccgggtaaa			699

- 430 046387 <210> 265 <211> 344 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 265

Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp

5 1015

Leu Arg Gly Ala Arg Cys Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 20 2530

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 35 4045

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 50 5560

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 65 70 7580

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 85 9095

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

100 105110

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

115 120125

Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

130 135140

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

145 150 155160

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

165 170175

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

180 185190

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

195 200205

- 431 046387

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

210 215

Ala Leu His

Asn His Tyr Thr Gln

220

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro

225 230 235240

Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu

245 250255

Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln

260 265270

Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn

275 280285

Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr

290 295300

Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu

305 310 315320

Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

325 330335

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

340 <210> 266 <211> 1032 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 266 atggacatga	gggtgcccgc	tcagctcctg	gggctcctgc	tgctgtggct	gagaggtgcg	60
cgctgtggcc	cgtcagtctt	cctcttcccc	ccaaaaccca	aggacaccct	catgatctcc	120
cggacccctg	aggtcacatg	cgtggtggtg	gacgtgagcc	acgaagaccc	tgaggtcaag	180
ttcaactggt	acgtggacgg	cgtggaggtg	cataatgcca	agacaaagcc	gcgggaggag	240
cagtacaaca	gcacgtaccg	tgtggtcagc	gtcctcaccg	tcctgcacca	ggactggctg	300
aatggcaagg	agtacaagtg	caaggtctcc	aacaaagccc	tcccagcccc	catcgagaaa	360
accatctcca	aagccaaagg	gcagccccga	gaaccacagg	tgtgcaccct	gcccccatcc	420
cgggaggaga	tgaccaagaa	ccaggtcagc	ctgacctgcc	tggtcaaagg	cttctatccc	480

- 432 046387

agcgacatcg	ccgtggagtg	ggagagcaat	gggcagccgg	agaacaacta	cgacaccacg	540
cctcccgtgc	tggactccga	cggctccttc	ttcctctata	gcgacctcac	cgtggacaag	600
agcaggtggc	agcaggggaa	cgtcttctca	tgctccgtga	tgcatgaggc	tctgcacaac	660
cactacacgc	agaagagcct	ctccctgtct	ccgggtgcgc	gcgacggaga	ccactgtccg	720
ctcgggcccg	ggcgttgctg	ccgtctgcac	acggtccgcg	cgtcgctgga	agacctgggc	780
tgggccgatt	gggtgctgtc	gccacgggag	gtgcaagtga	ccatgtgcat	cggcgcgtgc	840
ccgagccagt	tccgggcggc	aaacatgcac	gcgcagatca	agacgagcct	gcaccgcctg	900
aagcccgaca	cggtgccagc	gccctgctgc	gtgcccgcca	gctacaatcc	catggtgctc	960
attcaaaaga	ccgacaccgg	ggtgtcgctc	cagacctatg	atgacttgtt	agccaaagac	1020
tgccactgca	ta					1032

<210> 267 <211> 217 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 267

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met

115 120125

- 433 046387

Thr

Lys 130

Asn

Gln

Val

Ser

Leu

135

Thr

Cys

Leu

Val

Lys 140

Gly

Phe

Tyr

Pro

Ser

145

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr

Lys

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Lys

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Lys

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

210 215 <210> 268 <211> 216 <212> PRT <213>

Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 268

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

- 434 046387

Pro

Arg

Glu

115

Pro

Gln

Val

Tyr

Thr

120

Leu

Pro

Ser

Arg 125

Glu

Met

Thr

Lys 130

Asn

Gln

Val

Ser

Leu

135

Thr

Cys

Leu

Val

Lys 140

Gly

Phe

Tyr

Pro

Ser

145

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr

Asp

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Asp

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Asp

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 269 <211> 325 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 269

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

- 435 046387

Ala Leu Pro

Ala

100

Pro

Ile

Glu

Lys

Thr

105

Ile

Ser

Lys

Ala

Lys 110

Gly

Gln

Pro Arg Glu

115

Pro

Gln

Val

Tyr

Thr

120

Leu

Pro

Ser

Arg 125

Glu

Met

Thr Lys Asn

130

Gln

Val

Ser

Leu

135

Thr

Cys

Leu

Val

Lys 140

Gly

Phe

Tyr

Pro

Ser Asp Ile 145

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr Asp Thr

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Asp

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr Ser Asp

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe Ser Cys

195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys Ser Leu

210

Ser

Leu

Ser

Pro

215

Gly

Asp

His

Cys 220

Pro

Leu

Gly

Pro

Gly Arg Cys 225

Cys

Arg

Leu

230

His

Thr

Val

Arg

Ala

235

Ser

Leu

Glu

Asp

Leu

240

Gly Trp Ala

Asp

Trp 245

Val

Leu

Ser

Pro

Arg 250

Glu

Val

Gln

Val

Thr

255

Met

Cys Ile Gly

Ala

260

Cys

Pro

Ser

Gln

Phe

265

Arg

Ala

Asn

Met

270

His

Ala

Gln Ile Lys

275

Thr

Ser

Leu

His

Arg 280

Leu

Lys

Pro

Asp

Thr

285

Val

Pro

Ala

Pro Cys Cys

290

Val

Pro

Ala

Ser

295

Tyr

Asn

Pro

Met

Val

300

Leu

Ile

Gln

Lys

Thr Asp Thr 305

Gly

Val

Ser

310

Leu

Gln

Thr

Tyr

Asp 315

Asp

Leu

Ala

Lys

320

Asp Cys His

Cys

Ile

325 <210> 270

- 436 046387 <211> 975 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 270

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataattg	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtctgcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	agaccactgt	660
ccgctcgggc	ccgggcgttg	ctgccgtctg	cacacggtcc	gcgcgtcgct	ggaagacctg	720
ggctgggccg	attgggtgct	gtcgccacgg	gaggtgcaag	tgaccatgtg	catcggcgcg	780
tgcccgagcc	agttccgggc	ggcaaacatg	cacgcgcaga	tcaagacgag	cctgcaccgc	840
ctgaagcccg	acacggtgcc	agcgccctgc	tgcgtgcccg	ccagctacaa	tcccatggtg	900
ctcattcaaa	agaccgacac	cggggtgtcg	ctccagacct	atgatgactt	gttagccaaa	960
gactgccact	gcata					975

<210> 271 <211> 651 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<400> 271 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataattg	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtctgcac	cgtcctgcac	240

- 437 046387

caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccggaagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacaagacca	cgcctcccgt	gctgaagtcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcaagctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtaa	a	651

<210> 272 <211> 328 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 272

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

- 438 046387

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys Pro

210 215220

Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu

225 230 235240

Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln

245 250255

Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn

260 265270

Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr

275 280285

Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu

290 295300

Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu

305 310 315320

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 273 <211> 984 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 273 gcacctgaac tcctgggggg accgtcagtc ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc 60 ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac 120

- 439 046387

cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataattg	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtctgcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtacacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgc	gcgcgacgga	660
gaccactgtc	cgctcgggcc	cgggcgttgc	tgccgtctgc	acacggtccg	cgcgtcgctg	720
gaagacctgg	gctgggccga	ttgggtgctg	tcgccacggg	aggtgcaagt	gaccatgtgc	780
atcggcgcgt	gcccgagcca	gttccgggcg	gcaaacatgc	acgcgcagat	caagacgagc	840
ctgcaccgcc	tgaagcccga	cacggtgcca	gcgccctgct	gcgtgcccgc	cagctacaat	900
cccatggtgc	tcattcaaaa	gaccgacacc	ggggtgtcgc	tccagaccta	tgatgacttg	960
ttagccaaag	actgccactg	cata				984

<210> 274 <211> 217 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 274

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

- 440 046387

9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

210215 <210> 275 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 275

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu

5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His

- 441 046387

70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210215 <210> 276 <211> 325 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 276

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu

- 442 046387

55 60

Gln 65

Gln

Ala

Pro

Thr

Ser 145

Tyr

Phe

Lys

Gly 225

Gly

Cys

Gln

Pro

Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val 70

Ser Val Cys Thr Val Leu His

80

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 90 95

Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105 110

Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120 125

Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 130 135 140

Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

150 155 160

Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170 175

Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185 190

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200 205

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Gly Asp His Cys Pro Leu Gly Pro

210 215 220

Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser Leu Glu Asp Leu

230 235 240

Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val Gln Val Thr Met

245 250 255

Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala Asn Met His Ala

260 265 270

Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp Thr Val Pro Ala

275 280 285

Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val Leu Ile Gln Lys 290 295 300

- 443 046387

Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Leu Ala Lys

305 310 315 320

Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 277 <211> 975 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 277

gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataattg	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtctgcac	cgtcctgcac	240
caggactggc	tgaatggcaa	ggagtacaag	tgcaaggtct	ccaacaaagc	cctcccagcc	300
cccatcgaga	aaaccatctc	caaagccaaa	gggcagcccc	gagaaccaca	ggtgtgcacc	360
ctgcccccat	cccgggagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacctg	cctggtcaaa	420
ggcttctatc	ccagcgacat	cgccgtggag	tgggagagca	atgggcagcc	ggagaacaac	480
tacgacacca	cgcctcccgt	gctggactcc	gacggctcct	tcttcctcta	tagcgacctc	540
accgtggaca	agagcaggtg	gcagcagggg	aacgtcttct	catgctccgt	gatgcatgag	600
gctctgcaca	accactacac	gcagaagagc	ctctccctgt	ctccgggtgg	agaccactgt	660
ccgctcgggc	ccgggcgttg	ctgccgtctg	cacacggtcc	gcgcgtcgct	ggaagacctg	720
ggctgggccg	attgggtgct	gtcgccacgg	gaggtgcaag	tgaccatgtg	catcggcgcg	780
tgcccgagcc	agttccgggc	ggcaaacatg	cacgcgcaga	tcaagacgag	cctgcaccgc	840
ctgaagcccg	acacggtgcc	agcgccctgc	tgcgtgcccg	ccagctacaa	tcccatggtg	900
ctcattcaaa	agaccgacac	cggggtgtcg	ctccagacct	atgatgactt	gttagccaaa	960
gactgccact	gcata					975

<210> 278 <211> 651 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

- 444 046387

<400> 278 gcacctgaac	tcctgggggg	accgtcagtc	ttcctcttcc	ccccaaaacc	caaggacacc	60
ctcatgatct	cccggacccc	tgaggtcaca	tgcgtggtgg	tggacgtgag	ccacgaagac	120
cctgaggtca	agttcaactg	gtacgtggac	ggcgtggagg	tgcataattg	caagacaaag	180
ccgcgggagg	agcagtacgg	cagcacgtac	cgtgtggtca	gcgtctgcac	cgtgctccac	240
caggactggc	ttaatgggaa	ggaatacaag	tgtaaggtgt	ccaacaaggc	cctccccgct	300
cccatcgaaa	agaccatctc	aaaggcaaag	gggcaaccaa	gggaacctca	agtgtacacc	360
ctgcctccgt	gcaggaagga	gatgaccaag	aaccaggtca	gcctgacttg	tctcgtgaag	420
ggcttctatc	ccagcgatat	tgctgtggaa	tgggagtcaa	atggccagcc	cgagaataac	480
tacaaaacta	ccccacccgt	gctgaaatct	gatgggtcct	tcttccttta	ctccaagctg	540
accgtggaca	agagccgctg	gcaacaaggc	aatgtcttta	gctgctcagt	gatgcatgag	600
gctctccata	atcactacac	tcagaagtca	ctgtccctgt	ctccgggtaa	a	651

<210> 279 <211> 328 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 279

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

- 445 046387

Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu

115 120 125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

130 135 140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

145 150 155

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

165 170 175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

180 185 190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

195 200 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ala Arg Asp Gly Asp His Cys

210 215 220

Leu Gly Pro Gly Arg Cys Cys Arg Leu His Thr Val Arg Ala Ser

225 230 235

Glu Asp Leu Gly Trp Ala Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Glu Val

245 250 255

Val Thr Met Cys Ile Gly Ala Cys Pro Ser Gln Phe Arg Ala Ala

260 265 270

Met His Ala Gln Ile Lys Thr Ser Leu His Arg Leu Lys Pro Asp

275 280 285

Val Pro Ala Pro Cys Cys Val Pro Ala Ser Tyr Asn Pro Met Val

290 295 300

Ile Gln Lys Thr Asp Thr Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp

305 310 315

Met

Pro

Asn 160

Leu

Val

Gln

Pro

Leu 240

Gln

Asn

Thr

Leu

Leu 320

Leu Ala Lys Asp Cys His Cys Ile

325 <210> 280 <211> 984 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>

- 446 046387 <221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид <400> 280 gcacctgaac tcctgggggg accgtcagtc ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc60 ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac120 cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac ggcgtggagg tgcataattg caagacaaag180 ccgcgggagg agcagtacgg cagcacgtac cgtgtggtca gcgtctgcac cgtcctgcac240 caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc300 cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa gggcagcccc gagaaccaca ggtgtgcacc360 ctgcccccat cccgggagga gatgaccaag aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa420 ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac480 tacgacacca cgcctcccgt gctggactcc gacggctcct tcttcctcta tagcgacctc540 accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag600 gctctgcaca accactacac gcagaagagc ctctccctgt ctccgggtgc gcgcgacgga660 gaccactgtc cgctcgggcc cgggcgttgc tgccgtctgc acacggtccg cgcgtcgctg720 gaagacctgg gctgggccga ttgggtgctg tcgccacggg aggtgcaagt gaccatgtgc780 atcggcgcgt gcccgagcca gttccgggcg gcaaacatgc acgcgcagat caagacgagc840 ctgcaccgcc tgaagcccga cacggtgcca gcgccctgct gcgtgcccgc cagctacaat900 cccatggtgc tcattcaaaa gaccgacacc ggggtgtcgc tccagaccta tgatgacttg960 ttagccaaag actgccactg cata984 <210> 281 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 281

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

- 447 046387

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr

55

Lys Pro Arg Glu Glu

Gln 65

Tyr

Asn

Ser

Thr

Tyr 70

Arg

Val

Ser

Val 75

Leu

Thr

Val

Leu

His 80

Gln

Asp

Trp

Leu

Asn 85

Gly

Lys

Glu

Tyr

Lys 90

Cys

Lys

Val

Ser

Asn 95

Lys

Ala

Leu

Pro

Ala

100

Pro

Ile

Glu

Lys

Thr

105

Ile

Ser

Lys

Ala

Lys 110

Gly

Gln

Pro

Arg

Glu

115

Pro

Gln

Val

Tyr

Thr

120

Leu

Pro

Ser

Arg 125

Asp

Glu

Leu

Thr

Lys 130

Asn

Gln

Val

Ser

Leu

135

Ser

Cys

Ala

Val

Lys 140

Gly

Phe

Tyr

Pro

Ser

145

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr

Lys

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Asp

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Val

Ser

Lys

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys

195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 282 <211> 216 <212> PRT <213>

Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 282

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

- 448 046387

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val

40

Lys Phe Asn Trp Tyr

Val Asp Gly Val

Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 55 60

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 75 80

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 85 90

Lys Val Ser Asn Lys

Ala Leu Pro Ala Pro

100

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

105 110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120 125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135 140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155 160

Tyr Asp Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170 175

Tyr Ser Asp Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185 190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 283 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 283

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 10 15

- 449 046387

Pro

Lys

Asp

Thr 20

Leu

Met

Ile

Ser

Arg 25

Thr

Pro

Glu

Val

Thr

Cys

Val

Asp 35

Val

Ser

His

Glu

Asp 40

Pro

Glu

Val

Lys

Phe 45

Asn

Trp

Tyr

Val

Asp 50

Gly

Val

Glu

Val

His 55

Asn

Ala

Lys

Thr

Lys 60

Pro

Arg

Glu

Gln 65

Tyr

Asn

Ser

Thr

Tyr 70

Arg

Val

Ser

Val 75

Leu

Thr

Val

Leu

His 80

Gln

Asp

Trp

Leu

Asn 85

Gly

Lys

Glu

Tyr

Lys 90

Cys

Lys

Val

Ser

Asn 95

Lys

Ala

Leu

Pro

Ala

100

Pro

Ile

Glu

Lys

Thr

105

Ile

Ser

Lys

Ala

Lys

110

Gly

Gln

Pro

Arg

Glu

115

Pro

Gln

Val

Tyr

Thr

120

Leu

Pro

Ser

Arg

125

Lys

Glu

Met

Thr

Lys 130

Asn

Gln

Val

Ser

Leu

135

Thr

Cys

Leu

Val

Lys 140

Gly

Phe

Tyr

Pro

Ser

145

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr

Lys

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Lys

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Lys

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser 185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys

Ser

210

Leu

Ser

Leu

Ser

Pro

215

Gly <210>

<211>

<212>

<213>

284

216

PRT

Искусственная последовательность <220>

<221>

<223>

источник /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400>

284

- 450 046387

Ala 1

Pro

Glu

Leu

Leu 5

Gly

Pro

Ser

Val 10

Phe

Leu

Phe

Pro

Pro 15

Lys

Pro

Lys

Asp

Thr

Leu

Met

Ile

Ser

Arg 25

Thr

Pro

Glu

Val

Thr

Cys

Val

Asp 35

Val

Ser

His

Glu

Asp 40

Pro

Glu

Val

Lys

Phe 45

Asn

Trp

Tyr

Val

Asp 50

Gly

Val

Glu

Val

His 55

Asn

Ala

Lys

Thr

Lys 60

Pro

Arg

Glu

Gln 65

Tyr

Asn

Ser

Thr

Tyr 70

Arg

Val

Ser

Val 75

Leu

Thr

Val

Leu

His 80

Gln

Asp

Trp

Leu

Asn 85

Gly

Lys

Glu

Tyr

Lys 90

Cys

Lys

Val

Ser

Asn 95

Lys

Ala

Leu

Pro

Ala

100

Pro

Ile

Glu

Lys

Thr

105

Ile

Ser

Lys

Ala

Lys

110

Gly

Gln

Pro

Arg

Glu

115

Pro

Gln

Val

Cys

Thr

120

Leu

Pro

Ser

Arg 125

Glu

Met

Thr

Lys

130

Asn

Gln

Val

Ser

Leu

135

Thr

Cys

Leu

Val

Lys 140

Gly

Phe

Tyr

Pro

Ser

145

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr

Asp

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Asp

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Asp

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 285 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная <220>

<221> источник последовательность

- 451 046387 <223> /примечание=’’описание полипептид искусственной последовательности:

синтетический <400> 285

Ala Pro Glu Leu 1

Leu Gly Gly Pro 5

Ser Val Phe Leu

Phe Pro Pro Lys 15

Pro Lys Asp Thr

Leu Met Ile Ser

Arg Thr Pro Glu 25

Val Thr Cys Val 30

Val Val Asp Val

Ser His Glu Asp 40

Pro Glu Val Lys

Phe Asn Trp Tyr 45

Val Asp Gly Val 50

Glu Val His Asn

Ala Lys Thr Lys 60

Pro Arg Glu Glu

Gln Tyr Asn Ser 65

Thr Tyr Arg Val 70

Val Ser Val Leu

Thr Val Leu His

Gln Asp Trp Leu

Asn Gly Lys Glu 85

Tyr Lys Cys Lys 90

Val Ser Asn Lys

Ala Leu Pro Ala

100

Pro Ile Glu Lys

Thr Ile Ser Lys 105

Ala Lys Gly Gln 110

Pro Arg Glu Pro

115

Gln Val Tyr Thr

120

Leu Pro Pro Cys

Arg Lys Glu Met 125

Thr Lys Asn Gln 130

Val Ser Leu Thr

135

Cys Leu Val Lys

140

Gly Phe Tyr Pro

Ser Asp Ile Ala 145

Val Glu Trp Glu

150

Ser Asn Gly Gln

155

Pro Glu Asn Asn

160

Tyr Lys Thr Thr

Pro Pro Val Leu 165

Lys Ser Asp Gly

170

Ser Phe Phe Leu

175

Tyr Ser Lys Leu

180

Thr Val Asp Lys

Ser Arg Trp Gln 185

Gln Gly Asn Val

190

Phe Ser Cys Ser

195

Val Met His Glu

200

Ala Leu His Asn

His Tyr Thr Gln 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 286 <211> 216 <212> PRT

- 452 046387 <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=описание искусственной последовательности: синтетический полипептид” <400> 286

Ala Pro Glu Leu 1

Leu Gly Gly Pro 5

Ser Val Phe Leu

Phe Pro Pro Lys 15

Pro Lys Asp Thr

Leu Met Ile Ser

Arg Thr Pro Glu 25

Val Thr Cys Val 30

Val Val Asp Val

Ser His Glu Asp 40

Pro Glu Val Lys

Phe Asn Trp Tyr 45

Val Asp Gly Val 50

Glu Val His Asn

Ala Lys Thr Lys 60

Pro Arg Glu Glu

Gln Tyr Asn Ser 65

Thr Tyr Arg Val 70

Val Ser Val Leu

Thr Val Leu His

Gln Asp Trp Leu

Asn Gly Lys Glu 85

Tyr Lys Cys Lys 90

Val Ser Asn Lys

Ala Leu Pro Ala

100

Pro Ile Glu Lys

Thr Ile Ser Lys 105

Ala Lys Gly Gln 110

Pro Arg Glu Pro

115

Gln Val Tyr Thr

120

Cys Pro Pro Ser

Arg Lys Glu Met 125

Thr Lys Asn Gln 130

Val Ser Leu Thr

135

Cys Leu Val Lys

140

Gly Phe Tyr Pro

Ser Asp Ile Ala 145

Val Glu Trp Glu

150

Ser Asn Gly Gln

155

Pro Glu Asn Asn

160

Tyr Lys Thr Thr

Pro Pro Val Leu 165

Lys Ser Asp Gly

170

Ser Phe Phe Leu

175

Tyr Ser Lys Leu

180

Thr Val Asp Lys

Ser Arg Trp Gln 185

Gln Gly Asn Val

190

Phe Ser Cys Ser

195

Val Met His Glu

200

Ala Leu His Asn

His Tyr Thr Gln 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215

- 453 046387 <210> 287 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 287

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200205

- 454 046387

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 288 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 288

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 35 4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

180 185190

- 455 046387

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

195 200 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 289 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 289

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro ProLys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr CysVal

2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Cys Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155160

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

165 170175

- 456 046387

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

180

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

185 190

Phe Ser Cys

195

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

200 205

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 290 <211> 216 <212> PRT <213>

Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 290

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 10 15

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 25 30

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

40 45

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 55 60

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His 65 70 75 80

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 90 95

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105 110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met

115 120 125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135 140

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

145 150 155 160

- 457 046387

Tyr

Lys

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Lys

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Lys

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 291 <211> 216 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 291

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

5 1015

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 2530

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

4045

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 5560

Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His 65 70 7580

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 85 9095

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

100 105110

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met

115 120125

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

130 135140

- 458 046387

Ser

145

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

150

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 155

Gln

Pro

Glu

Asn

160

Tyr

Lys

Thr

Pro

165

Pro

Val

Leu

Lys

Ser

170

Asp

Gly

Ser

Phe

175

Leu

Tyr

Ser

Lys

Leu

180

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

185

Arg

Trp

Gln

Gly 190

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 195

Ser

Val

Met

His

Glu

200

Ala

Leu

His

Asn

His

205

Tyr

Thr

Gln

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

210 215 <210> 292 <211> 209 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 292

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

- 459 046387

Thr

Cys 130

Leu

Val

Lys

Gly

Phe

135

Tyr

Pro

Ser

Asp

Ile

140

Ala

Val

Glu

Trp

Glu

145

Ser

Asn

Gly

Gln

Pro

150

Glu

Asn

Tyr

Lys

155

Thr

Pro

Val

160

Leu

Lys

Ser

Asp

Gly 165

Ser

Phe

Leu

Tyr

170

Ser

Lys

Leu

Thr

Val

175

Asp

Lys

Ser

Arg

Trp 180

Gln

Gly

Asn

Val

185

Phe

Ser

Cys

Ser

Val

190

Met

His

Glu

Ala

Leu

195

His

Asn

His

Tyr

Thr

200

Gln

Lys

Ser

Leu

Ser

205

Leu

Ser

Pro

Gly <210> 293 <211> 209 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 293

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105110

- 460 046387

Thr

Leu

Pro

115

Pro

Cys

Arg

Lys

Glu

120

Met

Thr

Lys

Asn

Gln

125

Val

Ser

Leu

Thr

Cys 130

Leu

Val

Lys

Gly

Phe

135

Tyr

Pro

Ser

Asp

Ile 140

Ala

Val

Glu

Trp

Glu

145

Ser

Asn

Gly

Gln

Pro

150

Glu

Asn

Tyr

Lys

155

Thr

Pro

Val

160

Leu

Lys

Ser

Asp

Gly 165

Ser

Phe

Leu

Tyr 170

Ser

Lys

Leu

Thr

Val

175

Asp

Lys

Ser

Arg

Trp

180

Gln

Gly

Asn

Val

185

Phe

Ser

Cys

Ser

Val

190

Met

His

Glu

Ala

Leu

195

His

Asn

His

Tyr

Thr

200

Gln

Lys

Ser

Leu

Ser

205

Leu

Ser

Pro

Gly <210> 294 <211> 226 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 294

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

5 1015

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr LeuMet

2530

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 35 4045

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 50 5560

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser ThrTyr

70 7580

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu AsnGly

9095

- 461 046387

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala

100105

Leu Pro Ala Pro Ile

110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135140

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170175

Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215220

Pro Gly 225 <210> 295 <211> 209 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 295

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu MetIle

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser HisGlu

2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg

5560

- 462 046387

Val 65

Val

Ser

Val

Leu

Thr

Val

Leu

His

Gln

Asp 75

Trp

Leu

Asn

Gly

Lys 80

Glu

Tyr

Lys

Cys

Lys 85

Val

Ser

Asn

Lys

Ala 90

Leu

Pro

Ala

Pro

Ile 95

Glu

Lys

Thr

Ile

Ser

100

Lys

Ala

Lys

Gly

Gln

105

Pro

Arg

Glu

Pro

Gln

110

Val

Tyr

Thr

Leu

Pro

115

Pro

Ser

Arg

Lys

Glu

120

Met

Thr

Lys

Asn

Gln

125

Val

Ser

Leu

Thr

Cys 130

Leu

Val

Lys

Gly

Phe

135

Tyr

Pro

Ser

Asp

Ile

140

Ala

Val

Glu

Trp

Glu

145

Ser

Asn

Gly

Gln

Pro

150

Glu

Asn

Tyr

Lys

155

Thr

Pro

Val

160

Leu

Lys

Ser

Asp

Gly 165

Ser

Phe

Leu

Tyr 170

Ser

Lys

Leu

Thr

Val

175

Asp

Lys

Ser

Arg

Trp 180

Gln

Gly

Asn

Val

185

Phe

Ser

Cys

Ser

Val

190

Met

His

Glu

Ala

Leu

195

His

Asn

His

Tyr

Thr

200

Gln

Lys

Ser

Leu

Ser

205

Leu

Ser

Pro

Gly <210> 296 <211> 209 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 296

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu MetIle

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser HisGlu

2530

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His

4045

- 463 046387

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105110

Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

115 120125

Ser Leu

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155160

Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

165 170175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

180 185190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195 200205

Gly <210> 297 <211> 209 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 297

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu MetIle

5 1015

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser HisGlu

2530

- 464 046387

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155160

Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

165 170175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

180 185190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195 200205

Gly <210> 298 <211> 209 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 298

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 10 15

- 465 046387

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 20

Val Val Val Asp Val Ser His Glu 25 30

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 4045

Asn Cys Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg 50 5560

Val Val Ser Val Cys Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 7580

Glu Tyr Lys Cys

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 9095

Lys

Thr

Ile

Ser

100

Lys

Ala

Lys

Gly

Gln

105

Pro

Arg

Glu

Pro

Gln

110

Val

Tyr

Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155160

Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

165 170175

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

180 185190

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

195 200205

Gly <210> 299 <211> 211 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

- 466 046387 <400> 299

Gly 1

Gly

Pro

Ser

Val 5

Phe

Leu

Phe

Pro

Pro 10

Lys

Pro

Lys

Asp

Thr 15

Leu

Met

Ile

Ser

Arg 20

Thr

Pro

Glu

Val

Thr

Cys

Val

Asp 30

Val

Ser

His

Glu

Asp 35

Pro

Glu

Val

Lys

Phe 40

Asn

Trp

Tyr

Val

Asp 45

Gly

Val

Glu

Val

His 50

Asn

Ala

Lys

Thr

Lys 55

Pro

Arg

Glu

Gln 60

Tyr

Asn

Ser

Thr

Tyr 65

Arg

Val

Ser

Val 70

Leu

Thr

Val

Leu

His 75

Gln

Asp

Trp

Leu

Asn 80

Gly

Lys

Glu

Tyr

Lys 85

Cys

Lys

Val

Ser

Asn 90

Lys

Ala

Leu

Pro

Ala 95

Pro

Ile

Glu

Lys

Thr

100

Ile

Ser

Lys

Ala

Lys 105

Gly

Gln

Pro

Arg

Glu

110

Pro

Gln

Val

Tyr

Thr

115

Leu

Pro

Ser

Arg

120

Lys

Glu

Met

Thr

Lys 125

Asn

Gln

Val

Ser

Leu

130

Thr

Cys

Leu

Val

Lys 135

Gly

Phe

Tyr

Pro

Ser

140

Asp

Ile

Ala

Val

Glu

145

Trp

Glu

Ser

Asn

Gly 150

Gln

Pro

Glu

Asn

155

Tyr

Lys

Thr

Pro

160

Pro

Val

Leu

Lys

Ser

165

Asp

Gly

Ser

Phe

170

Leu

Tyr

Ser

Lys

Leu

175

Thr

Val

Asp

Lys

Ser

180

Arg

Trp

Gln

Gly 185

Asn

Val

Phe

Ser

Cys 190

Ser

Val

Met

His

Glu

195

Ala

Leu

His

Asn

His

200

Tyr

Thr

Gln

Lys

Ser

205

Leu

Ser

Leu

Ser Pro Gly

210 <210> 300 <211> 211 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

- 467 046387 <221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 300

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

5 1015

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp ValSer

2530

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 35 4045

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 50 5560

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp LeuAsn

70 7580

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro AlaPro

9095

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 100 105110

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

115 120125

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

130 135140

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr ThrPro

145 150 155160

Pro Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys LeuThr

165 170175

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 180 185190

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 195 200205

Ser Pro Gly

210 <210> 301 <211> 210

- 468 046387 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 301

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

5 1015

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 20 2530

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 35 4045

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 50 5560

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 65 70 7580

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 85 9095

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

100 105110

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

115 120125

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

130 135140

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

145 150 155160

Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

165 170175

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

180 185190

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

195 200205

Pro Gly

210

- 469 046387 <210> 302 <211> 210 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 302

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

5 1015

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 20 2530

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 35 4045

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 50 5560

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 65 70 7580

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 85 9095

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

100 105110

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

115 120125

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

130 135140

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

145 150 155160

Val Leu Lys Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

165 170175

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

180 185190

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

195 200205

- 470 046387

Pro Gly

210 <210> 303 <211> 212 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 303

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

5 1015

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 20 2530

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 35 4045

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 50 5560

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 65 70 7580

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 85 9095

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

100 105110

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

115 120125

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

130 135140

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

145 150 155160

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

165 170175

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

180 185190

- 471 046387

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

195 200 205

Ser Pro Gly Lys

210 <210> 304 <211> 211 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 304

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

5 1015

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 20 2530

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 35 4045

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 50 5560

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 65 70 7580

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 85 9095

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

100 105110

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

115 120125

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

130 135140

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

145 150 155160

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

165 170175

- 472 046387

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe

180 185

Ser Cys Ser Val Met

190

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys

195 200

Ser Leu Ser Leu Ser

205

Pro Gly Lys

210 <210> 305 <211> 210 <212> PRT <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=’’описание искусственной последовательности: синтетический полипептид <400> 305

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

5 10 15

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 20 25 30

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 35 40 45

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 50 55 60

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 65 70 75 80

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 85 90 95

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

100 105 110

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

115 120 125

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

130 135 140

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

145 150 155 160

- 473 046387

Leu Asp

Ser Asp

Lys Ser

Arg Trp

180

Glu Ala

Leu His 195

Gly Ser 165

Gln Gln

Asn His

Phe Phe

Gly Asn

Tyr Thr

200

Leu Tyr

170

Val Phe 185

Gln Lys

Ser Lys

Ser Cys

Ser Leu

Leu Thr

Ser Val

190

Ser Leu 205

Val Asp 175

Met His

Ser Pro

Gly Lys

210

Claims

1. Гибридный белок, содержащий область фактора дифференцировки и роста 15 (GDF15), соединенную с полипептидом альбумина человека (HSA), где область GDF15 содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 85% идентичность последовательности SEQ ID NO: 4, 8 или 12;

HSA полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 110; и область GDF15 соединена с HSA полипептидом посредством полипептидного линкера, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 113, 116, 119, 122 или 125.

2. Гибридный белок по п.1, где область GDF15 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, 8, 12, 25, 52 или 55.

3. Гибридный белок по п.1, где GDF15 область содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 90% идентичность SEQ ID NO: 12, и содержит мутацию аспартата или глутамина в положении 3.

4. Гибридный белок по п.3, где мутация в положении 3 представляет собой N3Q мутацию.

5. Гибридный белок по п.1, где гибридный белок содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 115, 118, 121, 124 или 127.

6. Гибридный белок по любому из пп.1-5, дополнительно содержащий второй HSA полипептид, где второй HSA полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 110.

7. Конструкция, содержащая (i) первый белок, содержащий гибридный белок, содержащий область фактора дифференцировки и роста 15 (GDF15), соединенную с полипептидом альбумина человека (HSA), где область GDF15 содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 85% идентичность последовательности SEQ ID NO: 4, 8 или 12;

HSA полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 110; и область GDF15 соединена с HSA полипептидом через полипептидный линкер, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 113, 116, 119, 122 или 125, и (ii) второй белок, содержащий область GDF15, где область GDF15 содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 85% идентичность последовательности SEQ ID NO: 4, 8 или 12.

8. Конструкция по п.7, где область GDF15 второго белка содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, 8, 12, 25, 52 или 55.

9. Конструкция по п.8, где область GDF15 второго белка содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 90% идентичность последовательности SEQ ID NO: 12, и содержит мутацию аспартата или глутамина в положении 3.

10. Конструкция по п.9, где мутация области GDF15 второго белка в положении 3 представляет собой N3Q мутацию.

11. Конструкция по любому из пп.7-10, где второй белок дополнительно содержит полипептид альбумина человека (HSA), где HSA полипептид второго белка содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 110.

- 474 046387

12. Конструкция по п.11, где область GDF15 второго белка соединена с HSA полипептидом посредством полипептидного линкера.

13. Конструкция по п.12, где полипептидный линкер второго белка содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, 30, 34, 40, 58, 61, 64, 69, 72, 75, 78, 113, 116, 119, 122, 125 или 128.

14. Конструкция по п.12 или 13, где полипептидный линкер второго белка содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, 113, 116, 119, 122, 125 или 128.

15. Конструкция по п.14, где второй белок содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 112, 115, 118, 121, 124, 127 или 130.

16. Конструкция по любому из пп.11-15, где второй белок дополнительно содержит второй HSA полипептид, где второй HSA полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 110.

17. Конструкция по любому из пп.7-16, где первый белок и второй белок связаны посредством дисульфидной связи.

18. Фармацевтическая композиция, содержащая гибридный белок по любому из пп.1-6 или конструкцию по любому из пп.7-17, для лечения метаболического нарушения.

19. Фармацевтическая композиция по п.18, где метаболическое нарушение представляет собой диабет, ожирение, дислипидемию или диабетическую нефропатию.

20. Фармацевтическая композиция, содержащая гибридный белок по любому из пп.1-6 или конструкцию по любому из пп.7-17, для снижения потребления пищи, веса тела, уровней инсулина, уровней триглицерида, уровней холестерина или уровней глюкозы у субъекта.