EA042574B1

EA042574B1 - Соединение на основе хинолина или хиназолина и его применение

Info

Publication number: EA042574B1
Application number: EA202092291
Authority: EA
Inventors: Кэ Дин; Мэйюй ГЭН; Шинпань Чань; Цзянь ДИН; Ли Тань; Цзин Ай; Чжан ЧЖАН; Ся ПЭН; Сяомэй Жэнь; Иньчунь ЦЗИ; Чжэнчао Ту; Ян Дай; Сяоюнь Лу
Original assignee: Хайхэ Байофарма Ко., Лтд.; Цзинань Юниверсити; Шанхай Инститьют Оф Материа Медика; Чайниз Академи Оф Сайенсиз
Priority date: 2018-03-30
Filing date: 2019-03-29
Publication date: 2023-02-27

Description

Область техники

Настоящее изобретение относится к области технологии медицинской химии, в частности к соединению на основе хинолина или хиназолина и путям его применения.

Предпосылки изобретения

AXL является представителем класса рецепторных тирозинкиназ и принадлежит к семейству рецепторных тирозинкиназ ТАМ, которое также включает два других члена: Mer и Tyro3. Впервые представители ТАМ были обнаружены в опухолевых клетках, сверхэкспрессия и эктопическая экспрессия в которых тесно связана с иммунорегуляцией и пролиферацией опухоли, ростом и миграцией. AXL выделяли у пациентов с хроническим миелоидным лейкозом и пациентов с хроническим миелопролиферативным заболеванием в 1988. AXL широко экспрессируется в головном мозге, иммунных клетках, тромбоцитах, эндотелиальных клетках, скелетных мышцах, сердце, печени, почке и других тканях. Витамин К-зависимая протеинкиназа Gas6 (белок 6 остановки роста) представляет собой наиболее широко исследуемый лиганд AXL, обнаруженный на данный момент, и другие лиганды в семействе ТАМ включают белок S, Tubby, Tulp-1 и Galectin-3. Представители семейства ТАМ характеризуются подобной структурой белка, которая в основном состоит из трех частей: внеклеточного домена, трансмембранного домена и внутриклеточного домена. Внеклеточный домен содержит два N-концевых иммуноглобулиноподобных участка Ig и два повторяющиеся фрагмента фибронектина III (FNIII). Gas6, после объединения с внеклеточным доменом AXL, индуцирует димеризацию AXL, инициируя трансаутофосфорилирование внутриклеточного домена, тем самым активируя внутриклеточный путь передачи сигнала и регулируя ряд физиологических активностей, таких как регуляция роста и пролиферация клеток посредством пути Src/MAPK/ERK, стимуляция экспрессии антиапоптотических белков посредством пути PI3K/AKT, регуляция миграции и пролиферации клеток посредством пути PI3K/p38/MAPK. В дополнение к Gas6зависимой активации AXL может быть активирован лиганд-независимым способом. AXL вовлечен в процесс адгезии и иммунорегуляции нормальных клеток. В ходе исследований было обнаружено, что сверхэкспрессия AXL имеет место в ряде опухолевых клеток, и путь передачи сигнала, регулируемый Gas6/AXL, тесно связан с возникновением и развитием различных опухолей, таких как хронический миелоидный лейкоз, рак молочной железы, рак предстательной железы, немелкоклеточный рак легкого, рак поджелудочной железы, меланома, глиома и почечно-клеточная карцинома. Было подтверждено, что подавление экспрессии AXL может привести к уменьшению пролиферации и роста опухолевых клеток при раке поджелудочной железы и подавлению инвазии и миграции опухолевых клеток при раке молочной железы. При немелкоклеточном раке легкого сайленсинг гена AXL может подавлять рост опухоли. В то же время высокий уровень экспрессии AXL также связан с повторным появлением опухоли и переносимостью других противораковых лекарственных средств, таких как иматиниб (Gliver), эрлотиниб (Tarceva) и лапатиниб (Tyverb). Такие доказательства указывают на то, что AXL является эффективной целью терапии, направленной на опухоль.

Хотя бозутиниб (SKI606, PF5208763, Bosulif; Pfizer, 2012), кабозантиниб (XL184, Cometriq; Exelixis, 2012), сунитиниб (SU11248, Sutent; Pfizer, 2006) и другие представленные на рынке лекарственные средства имеют активность в отношении AXL, они являются многоцелевыми лекарственными средствами, но не являются специфическими. BGB324 (R428; Rigel Pharmaceuticals, BergenBio) в настоящее время известен как наиболее специфический низкомолекулярный ингибитор AXL, который находится на фазе II клинических исследований и которому FDA в декабре 2014 года присвоило название орфанное лекарственное средство для лечения AML. В настоящее время на рынке отсутствуют низкомолекулярные ингибиторы, действие которых направлено на киназы AXL.

Краткое описание изобретения

На основе этих данных в настоящем изобретении предусмотрены соединения на основе хинолина или хиназолина, которые характеризуются хорошей ингибирующей активностью в отношении киназы AXL и имеют преимущество в виде хорошей метаболической стабильности.

Конкретные технические решения являются следующими: соединение на основе хинолина или хиназолина, характеризующееся структурой, представленной формулой (I), или его фармацевтически приемлемая соль, или его стереоизомер

(О, где X выбран из СН и N;

каждый из R1 и R2 независимо выбран из -O(CR4R₅)_oR₃;

- 1 042574 где о представляет собой целое число от 0 до 6;

каждый из R₃, R4, R₅ независимо выбран из группы, состоящей из -Н, С1-С₆алкила, -OR8 и -NR₈R₉;

каждый из R8 и R₉ независимо выбран из C₁-С₆алкила, или R8 и R₉ вместе с N, соединенным с ними, образуют насыщенную или ненасыщенную 5-6-членную гетероциклическую группу, содержащую 1-4 гетероатома, выбранных из О, N и S; где насыщенная или ненасыщенная 5-6-членная гетероциклическая группа может быть независимо и необязательно замещена одним или более R₁₀; где R₁₀ выбран из группы, состоящей из С1-С₆алкила.

В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой -O(CH2)oR₃;

о представляет собой целое число от 0 до 4;

R₃ выбран из группы, состоящей из -Н, С1-С₆алкила, С1-С₃алкокси и -NR₈R₉;

каждый из R₈ и R₉ независимо выбран из группы, состоящей из С1-С₃алкила, или R₈ и R₉ вместе с N, соединенным с ними, образуют насыщенную или ненасыщенную 5-6-членную гетероциклическую группу, содержащую 1-4 гетероатома, выбранных из О, N и S; где насыщенная или ненасыщенная 5-6членная гетероциклическая группа может быть независимо и необязательно замещена одним или более R₁₀; где R₁₀ выбран из группы, состоящей из С1-С₃алкила.

В некоторых из таких вариантов осуществления R1 выбран из группы, состоящей из метоксила, этоксила, пропоксила, 2-метоксиэтоксила, 3-метоксипропоксила, 3-морфолинопропоксила, 2(пирролидин-1 -ил)этоксила, 3-(пирролидин-1 -ил)пропоксила, (пиперидин-1 -ил)этоксила, (пиперидин-1 ил)пропоксила, 4-метоксибутоксила, 2-морфолиноэтоксила, (4-метилпиперазин-1-ил)пропоксила, диметиламиноэтоксила и изопентилоксила.

В некоторых из таких вариантов осуществления R2 представляет собой -O(CH2)oR3;

о представляет собой целое число от 0 до 4;

R₃ выбран из группы, состоящей из -Н, С1-С₃алкила, С1-С₃алкокси и -NR₈R₉;

R₈ и R₉ вместе с N, соединенным с ними, образуют насыщенную 5-6-членную гетероциклическую группу, содержащую 1-4 гетероатома, выбранных из О, N и S.

В некоторых из таких вариантов осуществления R2 выбран из группы, состоящей из метоксила, этоксила, пропоксила, 2-метоксиэтоксила, 3-метоксипропоксила, 2-морфолиноэтоксила и 3морфолинопропоксила.

В некоторых из таких вариантов осуществления X представляет собой N.

В некоторых из таких вариантов осуществления соединение на основе хинолина или хиназолина выбрано из группы, состоящей из

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(4-((6,7-бис(2-метоксиэтокси)хиназолин-4-ил)окси)-3-фторфенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида,

N-(4-((6,7-диметоксихиназолин-4-ил)окси)-3-фторфенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида,

N-(3 -фтор-4-((7-метокси-6-(3 -метоксипропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(4-метоксибутокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(2-морфолиноэтокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3 -фтор-4-((6-метокси-7-(3-(пирролидин-1 -ил)пропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(2-(пиперидин-1 -ил)этокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(2-(пирролидин-1 -ил)этокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3 -метоксипропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-(пиперидин-1 -ил)пропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(4-((7-(2-(диметиламино)этокси)-6-метоксихиназолин-4-ил)окси)-3-фторфенил)-1,2-диметил-4оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((7-(изопентилокси)-6-метоксихиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-пропоксихиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(4-((7-этокси-6-метоксихиназолин-4-ил)окси)-3-фторфенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторме- 2 042574 токси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

К-(3-фтор-4-((7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида и

К-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолинопропокси)хинолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида.

В настоящем изобретении также предусмотрены пути применения вышеуказанных соединений на основе хинолина или хиназолина.

Конкретные технические решения являются следующими:

пути применения вышеуказанных соединений на основе хинолина или хиназолина или их фармацевтически приемлемых солей, их стереоизомеров, в качестве ингибиторов киназы AXL и/или ингибиторов киназы Flt3;

пути применения вышеуказанных соединений на основе хинолина или хиназолина или их фармацевтически приемлемых солей, их стереоизомеров, для получения лекарственного средства для предупреждения или лечения опухоли.

В некоторых вариантах осуществления опухоль представляет собой гематологическую опухоль, желудочно-кишечную стромальную опухоль, гистиоцитарную лимфому, немелкоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, аденокарциному легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак поджелудочной железы, рак молочной железы, рак предстательной железы, рак печени, рак кожи, карциному из эпителиальных клеток или носоглоточную карциному. Гематологическая опухоль предпочтительно представляет собой лейкоз.

В настоящем изобретении также предусмотрена фармацевтическая композиция для предупреждения или лечения опухоли.

Конкретные технические решения являются следующими: фармацевтическая композиция для предупреждения или лечения опухоли, содержащая активный ингредиент и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, где активный ингредиент предусматривает вышеуказанное соединение на основе хинолина или хиназолина или его фармацевтически приемлемую соль или его стереоизомер.

Соединения на основе хинолина или хиназолина или их фармацевтически приемлемые соли, их стереоизомеры или их фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть эффективными в подавлении действия протеинкиназы AXL и могут подавлять пролиферацию, миграцию и инвазию различных опухолевых клеток. И на основе большого числа изобретательных экспериментальных исследований авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что введение трифторметокси в 6-положение 1,4-дигидрохинолина соединений на основе хинолина или хиназолина по настоящему изобретению может существенно улучшить показатели метаболической стабильности in vivo таких соединений, таким образом обеспечивая более высокие уровни противоопухолевой активности соединений in vivo, при этом они имеют преимущества в виде меньшей токсичности и более слабых побочных эффектов, и такие соединения могут использоваться для получения лекарственных средств для предупреждения или лечения гиперпролиферативных заболеваний, таких как опухоли, у людей и других млекопитающих.

Краткое описание графических материалов

На фиг. 1 показаны спектры для результатов обнаружения метаболитов, связанных с соединением TL134, в гепатоцитах с помощью способа UPLC/Q-TOF MS; где на А представлен спектр для инактивированного гепатоцита, на В представлен спектр для гепатоцита человека, и на С представлен спектр для гепатоцита обезьяны.

На фиг. 2 показаны спектры для результатов обнаружения метаболитов, связанных с соединением TL134, в гепатоцитах с помощью способа UPLC/Q-TOF MS; где на D представлен спектр для гепатоцита псовых, на Е представлен спектр для гепатоцита крысы, и на F представлен спектр для гепатоцита мыши.

На фиг. 3 показаны спектры для результатов обнаружения метаболитов, связанных с TL134, в гепатоцитах с помощью способа UPLC-UV (254 нм); где на А представлен спектр для инактивированного гепатоцита, на В представлен спектр для гепатоцита человека и на С представлен спектр для гепатоцита обезьяны.

На фиг. 4 показаны спектры для результатов обнаружения метаболитов, связанных с TL134, в гепатоцитах с помощью способа UPLC-UV (254 нм); где на D представлен спектр для гепатоцита псовых, на Е представлен спектр для гепатоцита крысы и на F представлен спектр для гепатоцита мыши.

Подробное описание вариантов осуществления

Настоящее изобретение будет более подробно описано ниже со ссылкой на примеры и графические материалы, но варианты осуществления настоящего изобретения не ограничены ими.

В соединениях, указанных в настоящем изобретении, в случае если любые переменные (например, R1, R и т.д.) появляются более одного раза в любом компоненте, определение для каждого появления является независимым от определения для каждого другого появления. Также допускаются комбинации заместителей и переменных при условии, что такие комбинации обеспечивают стабильное соединение. Проведенная линия, входящая в кольцевую систему от заместителя, означает, что указанная связь может быть присоединена к любому атому кольца, который может быть замещен. Если кольцевая система явля- 3 042574 ется полициклической, это означает, что такая связь присоединена только к любым подходящим атомам углерода смежных колец. Следует понимать, что специалисты в данной области техники могут выбрать заместители и замещенные формы соединений по настоящему изобретению для обеспечения химически стабильных соединений, которые можно легко синтезировать из общедоступных исходных материалов с помощью методик из уровня техники и способов, изложенных ниже. Если сам заместитель замещен более чем одной группой, следует понимать, что такие группы могут быть присоединены к одному и тому же атому углерода или к разным атомам углерода при условии, что структура является стабильной.

Термин алкил, применяемый в данном документе, подразумевает включение насыщенных алифатических углеводородных групп как с разветвленной, так и с прямой цепью, содержащих указанное число атомов углерода. Например, определение С1-С₅ в С1-С₅алкиле включает группы, содержащие 1, 2, 3, 4 или 5 атомов углерода, расположенных в прямой или разветвленной цепи. Например C₁-С₅алкил конкретно включает метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, изобутил и пентил. Термин циклоалкил относится к моноциклической насыщенной алифатической углеводородной группе, содержащей указанное число атомов углерода. Например циклоалкил включает циклопропил, метилциклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и т.п.

Термин гетероцикл или гетероциклил/гетероциклическая группа, применяемый в данном документе, относится к 5-6-членному ароматическому или неароматическому гетероциклическому кольцу, содержащему 1-4 гетероатома, выбранные из О, N и S, и может включать бициклические группы. Следовательно, термин гетероциклил включает гетероарильные группы, указанные выше, а также их дигидрогенизированные и тетрагидрогенизированные аналоги. Дополнительные примеры гетероциклила включают без ограничения имидазолил, тиазолил, изоксазолил, оксадиазолил, оксазолил, оксетанил, пиранил, пиразинил, пиразолил, пиридазинил, пиридил, пиримидинил, пирролил, хиноксалинил, тетразолил, тиадиазолил, тиазолил, тиенил и азолил. Соединение гетероциклических заместителей может быть обеспечено посредством атомов углерода или посредством гетероатомов.

Как будет понятно специалистам в данной области техники, галоген или атом галогена, применяемые в данном документе, подразумевают включение хлора, фтора, брома и йода.

Алкильные, циклоалкильные, арильные, гетероарильные и гетероциклильные заместители могут быть незамещенными или замещенными, если не указано иное. Например (С1-С₆)алкил может быть замещен одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из группы, состоящей из ОН, галогена, нитрила, цианогруппы, алкоксила, диалкиламиногруппы и гетероциклической группы, такой как морфолинил, пиперидинил и т.п.

В настоящем изобретении предусмотрена свободная форма соединения формулы I, а также его фармацевтически приемлемые соли и стереоизомеры. Некоторые конкретные иллюстративные соединения в данном документе представляют собой протонированные соли аминосоединений. Термин свободная форма относится к аминосоединениям в несолевой форме. Включенные фармацевтически приемлемые соли включают не только иллюстративные соли конкретных соединений, описанных в данном документе, но также типичные фармацевтически приемлемые соли всех соединений формулы I в свободной форме. Свободная форма конкретной соли соединения может быть отделена с применением методик, известных из уровня техники. Например, свободная форма может быть восстановлена посредством обработки соли подходящим разбавленным основным водным раствором, таким как разбавленный водный раствор NaOH, разбавленный водный раствор карбоната калия, разбавленный раствор аммиака и разбавленный водный раствор бикарбоната натрия. Свободная форма частично отличается от ее соответствующей солевой формы некоторыми физическими свойствами, такими как растворимость в полярных растворителях, но для целей настоящего изобретения такие кислотные соли и основные соли являются сопоставимыми с их соответствующими свободными формами в других фармацевтических аспектах.

Фармацевтически приемлемые соли по настоящему изобретению могут быть синтезированы из соединений по настоящему изобретению, содержащих основный или кислотный фрагмент, с помощью традиционных химических способов. В целом соли щелочных соединений получают посредством ионообменной хроматографии или посредством проведения реакции свободного основания и неорганических или органических кислот необходимых солевых форм в стехиометрическом количестве или избытке в подходящем растворителе или комбинации нескольких растворителей. Подобным образом соли кислотных соединений образуют посредством проведения реакции с подходящими неорганическими или органическими основаниями.

Следовательно, фармацевтически приемлемые соли соединений по настоящему изобретению включают традиционные нетоксические соли соединений по настоящему изобретению, образованные посредством проведения реакции щелочных соединений по настоящему изобретению с неорганическими или органическими кислотами. Например, традиционные нетоксические соли включают соли, полученные из неорганических кислот, таких как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, сульфаминовая кислота, фосфорная кислота, азотная кислота и т.д., а также соли, полученные из органических кислот, таких как уксусная кислота, пропионовая кислота, янтарная кислота, гликолевая кислота, стеариновая кислота, молочная кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота, аскорбиновая кислота, памоевая кислота, малеиновая кислота, гидроксималеиновая кислота, фенилук- 4 042574 сусная кислота, глутаминовая кислота, бензойная кислота, салициловая кислота, паминобензолсульфоновая кислота, 2-ацетоксибензойная кислота, фумаровая кислота, толуолсульфоновая кислота, метансульфоновая кислота, этандисульфоновая кислота, щавелевая кислота, изэтионовая кислота, трифторуксусная кислота и т.п.

Если соединение по настоящему изобретению является кислотным, соответствующая фармацевтически приемлемая соль относится к соли, полученной с помощью фармацевтически приемлемых нетоксичных оснований, включающих неорганические основания и органические основания. Соли, полученные из неорганических оснований, включают соли алюминия, соли аммония, соли кальция, соли меди, соли железа, соли двухвалентного железа, соли лития, соли магния, соли марганца, соли двухвалентного марганца, соли калия, соли натрия, соли цинка и т.п. Соли аммония, соли кальция, соли магния, соли калия и соли натрия являются особенно предпочтительными. Что касается солей, полученных из фармацевтически приемлемых органических нетоксических оснований, указанные основания предусматривают соли первичных аминов, вторичных аминов и третичных аминов, при этом замещенные амины предусматривают встречающиеся в природе замещенные амины, циклические амины и основные ионообменные смолы, такие как аргинин, глицинбетаин, кофеин, холин, N,N'-дибензилэтилендиамин, диэтиламин, 2-диэтиламиноэтанол, 2-диметиламиноэтанол, аминоэтанол, этаноламин, этандиамин, N-этилморфолин, N-этилпиперидин, глюкозамин, аминоглюкоза, гистидин, гидроксокобаламин, изопропиламин, лизин, метилглюкозамин, морфолин, пиперазин, пиперидин, полиаминная смола, прокаин, пурин, теобромин, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин, трометамин и т.д.

Способы получения вышеуказанных фармацевтически приемлемых солей и других типичных фармацевтически приемлемых солей более подробно описаны в Berg et al., Pharmaceutical Salts, J. Pharm. Sci. 1977: 66: 1-19.

Так как депротонированный кислотный фрагмент соединения, такой как карбоксильная группа, может быть анионным в физиологических условиях, и данный заряд затем может быть уравновешен протонированным или алкилированным основным фрагментом с катионом внутри, таким как тетравалентный атом азота, следовательно, следует отметить, что соединения по настоящему изобретению являются потенциальными внутренними солями или цвиттер-ионами.

В дополнение к стандартным способам, известным из литературных источников, или способам, представленным в экспериментальных процедурах, соединения по настоящему изобретению можно получить с применением реакций, показанных на следующих схемах. Следовательно, следующие иллюстративные схемы представлены с целью иллюстрации и не ограничены перечисленными соединениями или любыми конкретными заместителями. Число заместителей, показанных на схемах, не обязательно согласовывается с числом, применяемым в формуле изобретения, и для ясности показано, что один заместитель присоединен к соединению, которое допускает наличие нескольких заместителей в соответствии с определением формулы (I) выше.

Схемы синтеза

Как показано на схеме А, соединение формулы (I) можно синтезировать из 7-бензилокси-4-хлор-6метоксихиназолина в качестве исходного материала посредством 4-стадийной реакции.

Схема А

Соединения формулы (I), предусмотренные в настоящем изобретении, или их фармацевтически приемлемые соли или их стереоизомеры можно применять для лечения гиперпролиферативных заболеваний или симптомов, таких как опухоли, у людей или других млекопитающих. В частности их применяют в получении лекарственных средств для лечения или контроля гиперпролиферативных заболеваний, таких как желудочно-кишечная стромальная опухоль, гистиоцитарная лимфома, немелкоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, аденокарцинома легкого, плоскоклеточная карцинома легкого, рак поджелудочной железы, рак молочной железы, рак предстательной железы, рак печени, рак кожи, карцинома из эпителиальных клеток, рак предстательной железы, носоглоточная карцинома, лейкоз и т.п.

- 5 042574

Соединения, разработанные в настоящем изобретении, или их фармацевтически приемлемые соли или их стереоизомеры можно применять в комбинации с лекарственными препаратами, применяющимися в настоящее время или находящимися на стадии разработки, для усиления их клинических эффектов, такими лекарственными препаратами как модуляторы рецептора эстрогена, модуляторы рецептора андрогена, модуляторы рецепторов сетчатки, цитотоксины/цитостатики, антипролиферативные средства, ингибиторы протеинтрансферазы, ингибиторы HMG-CoA-редуктазы, ингибиторы протеинкиназы HIV, ингибиторы обратной транскриптазы, ингибиторы ангиогенеза, ингибиторы пролиферации клеток и сигнала выживания, лекарственные средства, которые препятствуют контрольным точкам клеточного цикла и действию индуктора апоптоза, цитотоксические лекарственные средства, ингибиторы тирозиновых протеинкиназ, ингибиторы EGFR, ингибиторы VEGFR, ингибиторы серин-треониновых протеинкиназ, ингибиторы Bcr-Abl, ингибиторы c-Kit, ингибиторы Met, ингибиторы Raf, ингибиторы MEK, ингибиторы ММР, ингибиторы топоизомеразы, ингибиторы гистидиндеацетилазы, ингибиторы протеасомы, ингибиторы CDK, ингибиторы белков семейства Bcl-2, ингибиторы белков семейства MDM2, ингибиторы белков семейства IAP, ингибиторы белков семейства STAT, ингибиторы PI3K, ингибиторы AKT, блокаторы интегрина, интерферона-α, интерлейкина-12, ингибиторы СОХ-2, активаторы р53, антитела к VEGF, антитела к EGF и т.д.

Соединения формулы (I), или их фармацевтически приемлемые соли, или их стереоизомеры, или фармацевтические композиции на их основе в соответствии с настоящим изобретением можно применять для получения лекарственных средств для предупреждения или лечения следующих заболеваний и других заболеваний, не перечисленных ниже:

(1) виды рака молочной железы у людей или других млекопитающих, включая без ограничения инвазивную протоковую карциному, инвазивную лобулярную карциному, протоковую карциному in situ и лобулярную карциному in situ;

(2) виды рака дыхательных путей у людей или других млекопитающих, включая без ограничения мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого и бронхиальную аденому, и плевролегочную бластому;

(3) виды рака головного мозга у людей или других млекопитающих, включая без ограничения глиому ствола головного мозга и глиому зрительного нерва, астроцитому мозжечка и астроцитому головного мозга, эпендимому и нейроэктодермальную опухоль и опухоль шишковидной железы;

(4) опухоли мужских и женских репродуктивных органов людей или других млекопитающих, опухоли мужских репродуктивных органов, включая без ограничения рак предстательной железы и рак яичек; опухоли женских репродуктивных органов, включая без ограничения рак эндометрия, рак шейки матки, рак яичников, рак влагалища, и рак вульвы, и внутриматочная опухоль;

(5) опухоли в пищеварительном тракте людей или других млекопитающих, включая без ограничения рак анального канала, рак толстой кишки, колоректальный рак, рак пищевода, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак прямой кишки, рак тонкой кишки или рак слюнных желез;

(6) опухоли в мочеиспускательном канале людей или других млекопитающих, включая без ограничения рак мочевого пузыря, рак полового члена, рак почки, рак почечной лоханки, рак мочеточников или рак уретры;

(7) виды рака глаза у людей или других млекопитающих, включая без ограничения интраокулярную меланому и ретиноцитому;

(8) виды рака печени у людей или других млекопитающих, включая без ограничения гепатоцеллюлярную карциному (карцинома стволовых клеток с изменениями фибробластов или без них), холангиокарциному (внутрипеченочную холангиокарциному) и смешанную гепатоцеллюлярную холангиокарциному;

(9) виды рака кожи у людей или других млекопитающих, включая без ограничения плоскоклеточную карциному, саркому Капоши, злокачественную меланому, рак кожи из клеток Меркеля и немеланомный рак кожи;

(10) виды рака головы и шеи у людей или других млекопитающих, включая без ограничения виды рака гортани, гипофаринкса, носоглотки, мезофаринкса, рак губы и рак полости рта;

(11) виды лимфомы у человека или других млекопитающих, включая без ограничения связанную со СПИДом лимфому, неходжкинскую лимфому, кожную Т-клеточную лимфому, лимфому Ходжкина и лимфому центральной нервной системы;

(12) виды саркомы у людей или других млекопитающих, включая без ограничения саркому мягких тканей, остеосаркому, злокачественную фиброзную гистиоцитому, лимфосаркому и рабдомиосаркому;

(13) виды лейкоза у людей или других млекопитающих, включая без ограничения острый миелоидный лейкоз, острый лимфоцитарный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз и лейкоз ворсистых клеток.

Способ введения и диапазон дозировки

В соответствии со стандартными фармацевтическими методиками соединения по настоящему изобретению можно вводить млекопитающему, предпочтительно человеку, отдельно или в комбинации с фармацевтически приемлемыми рецепторами, вспомогательными веществами или разбавителями в фар- 6 042574 мацевтических композициях. Соединения можно вводить перорально или подкожно, внутримышечно, внутрибрюшинно, внутривенно, ректально и местно, в глаза, легкие, носовые полости и парентерально.

В одном варианте осуществления диапазон дозировки составляет от 0,1 до 500 мг/день/кг веса тела перорально, в случае если соединения формулы (I) применяют для получения лекарственных средств для лечения или контроля состояния пациентов с раком и т.п. Подходящий способ введения представляет собой ежедневное введение одной дозы или ежедневное введение двух, трех или четырех доз или введение с применением методик медленного высвобождения. Для ряда больших млекопитающих предпочтительный диапазон дозировки для них составляет от 0,1 до 1500 мг/день/кг веса тела, предпочтительно от 0,5 до 100 мг/день/кг веса тела. Для пациентов со средним весом 70 кг для них ежедневная дозировка составляет от 1 до 500 мг. Для некоторых соединений с особенно высокой активностью суточная дозировка для взрослых пациентов может составлять всего лишь 0,1 мг/сутки.

Метаболиты лекарственных средств и пролекарства

Метаболиты соединений по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей и пролекарства, которые можно in vivo превратить в структуры соединений по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей, также включены в формулу настоящего изобретения.

Комбинированное введение

Соединения формулы (I) можно применять в комбинации с известными лекарственными средствами для лечения или облегчения подобных симптомов. При комбинированном введении способ введения и дозировка известных лекарственных средства остались такими же, при этом соединение формулы (I) вводят одновременно или последовательно. Если соединение формулы (I) применяют одновременно с одним или несколькими другими лекарственными средствами, предпочтительно применяют фармацевтическую композицию, содержащую один или более других известных лекарственных средств и соединение формулы (I). Комбинированная терапия лекарственными средствами также предусматривает введение соединения формулы (I) с одним или более другими известными лекарственными средствами в перекрывающиеся периоды времени. Если соединение формулы (I) применяют в комбинации с одним или более другими лекарственными средствами, соединение формулы (I) и другие известные лекарственные средства можно применять в более низкой дозировке, чем при применении их отдельно.

Лекарственные средства или активные ингредиенты, которые можно использовать в комбинации с соединениями формулы (I), включают без ограничения модуляторы рецептора эстрогена, модуляторы рецептора андрогена, модуляторы рецепторов сетчатки, цитотоксины/цитостатики, антипролиферативные средства, ингибиторы протеинтрансферазы, ингибиторы HMG-CoA-редуктазы, ингибиторы протеинкиназы HIV, ингибиторы обратной транскриптазы, ингибиторы ангиогенеза, ингибиторы пролиферации клеток и сигнала выживания, лекарственные средства, которые препятствуют контрольным точкам клеточного цикла и действию индуктора апоптоза, цитотоксические лекарственные средства, ингибиторы тирозиновых протеинкиназ, ингибиторы EGFR, ингибиторы VEGFR, ингибиторы серин-треониновых протеинкиназ, ингибиторы Bcr-Abl, ингибиторы c-Kit, ингибиторы Met, ингибиторы Raf, ингибиторы MEK, ингибиторы ММР, ингибиторы топоизомеразы, ингибиторы гистидиндеацетилазы, ингибиторы протеасомы, ингибиторы CDK, ингибиторы белков семейства Bcl-2, ингибиторы белков семейства MDM2, ингибиторы белков семейства IAP, ингибиторы белков семейства STAT, ингибиторы PI3K, ингибиторы AKT, блокаторы интегрина, интерферона-α, интерлейкина-12, ингибиторы СОХ-2, р53, активаторы р53, антитела к VEGF, антитела к EGF и т.п.

В одном варианте осуществления лекарственные средства или активные ингредиенты, которые можно использовать в комбинации с соединениями формулы (I), включают без ограничения альдеслейкин, алендроновую кислоту, интерферон, алитретиноин, аллопуринол, аллопуринол натрия, палоносетрона гидрохлорид, алтретамин, аминоглутетимид, амифостин, амрубицин, амсакрин, анастрозол, доласетрон, аранесп, арглабин, триоксид мышьяка, аромазин, 5-азацитидин, азатиоприн, бациллу КальметаГерена (BCG) или TICE BCG, бестатин, бетаметазона ацетат, препарат бетаметазона натрия фосфата, бексаротен, блеомицина сульфат, бромуридин, бортезомиб, бусульфан, кальцитонин, инъекцию алемтузумаба, капецитабин, карбоплатин, касодекс, цефекон, целмолейкин, даунорубицин, хлорамбуцил, цисплатин, кладрибин, клодроновую кислоту, циклофосфамид, цитарабин, дакарбазин, актиномицин D, липосомальный даунорубицин, дексаметазон, дексаметазона фосфат, эстрадиола валерат, денилейкиндифтитокс 2, депо-медрол, деслорелин, дексразоксан, стилбестрол, дифлюкан, доцетаксел, доксифлуридин, адриамицин, дронабинол, комплекс Но-166-хитозан, элигард, расбуриказу, эпирубицина гидрохлорид, апрепитант, эпирубицин, эпоэтин альфа, эритропоэтин, эптаплатин, таблетки левамизола, препараты эстрадиола, 17-в-эстрадиол, эстрамустина натрия фосфат, этинилэстрадиол, амифостин, гидроксифосфорную кислоту, этопозида фосфат, этопозид, фадрозол, препараты тамоксифена, филграстим, финастерид, филграстим, флоксуридин, флуконазол, флударабин, 5-фтор-2-дезоксиуридина монофосфат, 5фторурацил, флуоксиместерон, флутамид, форместан, 1-в-О-арабинофуранозилцитозин-5'стеарилфосфат, фотемустин, фулвестрант, гамма-глобулин, гемцитабин, гемтузумаб, иматиниба мезилат, капсулы из клейкой рисовой бумаги с кармустином, гозерелин, гранисетрона гидрохлорид, гистрелин, гикамтин, гидрокортизон, эритрогидроксинониладенин, гидроксимочевину, ибритумомаб тиуксетан,

- 7 042574 идарубицин, ифосфамид, интерферон α, интерферон-а2, интерферон а-2А, интерферон а-2В, интерферон a-n1, интерферон α-η3, интерферон β, интерферон γ-la, интерлейкин-2, интрон А, прессу, иринотекан, китрил, лентинана сульфат, летрозол, формилтетрагидрофолат, лейпрорелин, лейпрорелина ацетат, левамизол, кальция левофолинат, левотироксин натрия, препараты левотироксина натрия, ломустин, лонидамин, дронабинол, хлорметин, метилкобаламин, медроксипрогестерона ацетат, мегестрола ацетат, мелфалан, этерифицированный эстроген, 6-меркаптопурин, месну, аметоптерин, метиламинолевулинат, милтефозин, миноциклин, митомицин С, митотан, митоксантрон, трилостан, липосомальный адриамицина цитрат, недаплатин, пегилированный филграстим, опрелвекин, нейпоген, нилутамид, тамоксифен, NSC-631570, рекомбинантный интерлейкин 1-β человека, октреотид, ондансетрона гидрохлорид, растворы дегидрокортизона для перорального применения, оксалиплатин, паклитаксел, препараты преднизолона натрия фосфата, пэгаспаргазу, пегасис, пентостатин, пицибанил, пилокарпина гидрохлорид, пирарубицин, пликамицин, порфимер натрия, преднимустин, преднизолона стеаглат, преднизон, премарин, прокарбазин, рекомбинантный эритропоэтин человека, ралтитрексед, ребиф, этидронат, меченный рением-186, мабтеру, редоксон-А, ромуртид, таблетки пилокарпина гидрохлорида, октреотид, сарграмостим, семустин, сизофиран, собузоксан, метилпреднизолон натрия, спарфлоксацин, средство терапии на основе стволовых клеток, стрептозоцин, хлорид стронция-89, левотироксин натрия, тамоксифен, тамсулозин, тасонермин, тастолактон, таксотер, тецелейкин, темозоломид, тенипозид, пропионат тестостерона, метилтестостерон, тиогуанин, тиотепу, тиреостимулирующий гормон, тилудроновую кислоту, топотекан, торемифен, тозитумомаб, трастузумаб, треосульфан, третиноин, таблетки метотрексата, триметилмеламин, триметрексат, трипторелина ацетат, трипторелина памоат, UFT, уридин, валрубицин, веснаринон, винбластин, винкристин, виндезин, винорелбин, вирулизин, дексразоксан, циностатин стималамер, зофран, стабилизированный с помощью белка паклитаксел, аколбифен, интерферон r-1b, аффинитак, аминоптерин, арзоксифен, азоприснил, атаместан, атрасентан, BAY 43-9006, авастин, CCI-779, CDC-501, целебрекс, цетуксимаб, криснатол, ципротерона ацетат, децитабин, DN-101, адриамицин-МТС, dSLIM, дутастерид, эдотекарин, эфлорнитин, экзатекан, фенретинид, гистамина дигидрохлорид, гистрелингидрогелевый имплантат, меченный гольмием-166 DOTMP, ибандроновую кислоту, интерферон γ, PEGIntron, иксабепилон, гемоцианин лимфы улитки, L-651582, ланреотид, лазофоксифен, либру, лонафарниб, мипроксифен, миноколат, MS-209, липосомальный МТР-РЕ, МХ-6, нафарелин, неморубицин, неовастат, нолатрексед, облимерсен, онко-TCS, озидем, паклитаксела полиглутамат, памидронат натрия, PN-401, QS-21, квазепам, R-1549, ралоксифен, онконазу, 13-цис-ретиноевую кислоту, сатраплатин, сеокальцитол, Т-138067, тарцеву, конъюгат докозагексаеновая кислота-паклитаксел, тимозин α1, галазолин, типифарниб, тирапазамин, TLK-286, торемифен, транс-MID-lo7R, вальсподар, вапреотид, ваталаниб, вертепорфин, винфлунин, Z-100 и золедроновую кислоту или их комбинацию.

Далее представлены конкретные примеры и все исходные материалы в виде реагентов, применяемые в следующих примерах, являются коммерчески доступными.

Пример 1. Получение N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида (названого TL134)

а) р-МеСаЩБОзН.НгО пентан, нагревание с обратным холодильником, в течение ночи

NaOH,THF,H₂O

Mel,K₂CO₃,DMF

ХОЛОДИЛЬНИКОМ в течение ночи

Стадия a1. Получение диэтил-2-(1-((4-(трифторметокси)фенил)амино)этилиден)малоната п-Трифторметоксианилин (2,42 г, 20 ммоль) и диэтилацетилмалонат (2,02 г, 10 ммоль) растворяли в 50 мл н-пентана, затем добавляли каталитическое количество п-толуолсульфоновой кислоты (20 мг) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли небольшое количество насыщенного раствора NaHCO₃, затем смесь дважды экстрагировали с помощью ЕА. Органические фазы объединяли, промывали один раз насыщенным солевым раствором и высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали, и высушивали посредством ротационного выпаривания, и затем подвергали колоночной хроматографии с получением 2,68 г (87,8%) твердого вещества.

Стадия а2. Получение этил-2-метил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксилата

Диэтил-2-(1-((4-(трифторметокси)фенил)амино)этилиден)малонат (2,5 г, 8,2 ммоль) растворяли в 25 мл дифенилового эфира, нагревали до 200°С и подвергали реакции при перемешивании в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и твердое вещество осаждали, затем смесь фильтровали, промывали с помощью РЕ и затем высушивали с отсасыванием с получением 2 г (94,3%) белого твердого вещества.

- 8 042574

Стадия а3. Получение этил-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксилата

Этил-2-метил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксилат (2 г, 7,7 ммоль) и K₂CO₃ (3,18 г, 23,1 ммоль) растворяли в 50 мл DMF, затем добавляли MeI (0,72 мл, 11,55 ммоль) при перемешивании и смесь подвергали реакции при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, гасили водой, затем осаждали твердое вещество. Смесь несколько раз промывали водой и твердое вещество несколько раз экстрагировали с помощью DCM. Органические фазы объединяли и высушивали посредством ротационного выпаривания и затем подвергали колоночной хроматографии с получением 1,52 г (72,4%) белого твердого вещества.

Стадия а4. Получение 1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты

Этил-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксилата (1,5 г, 5,5 ммоль) и NaOH (880 мг, 22 ммоль) растворяли в смешанном растворителе, содержащем 30 мл этанола и 15 мл воды, затем смесь подвергали реакции в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем большую часть органического растворителя высушивали посредством ротационного выпаривания, добавляли воду, регулировали рН до 7-8 с помощью разбавленной HCl на ледяной бане, затем осаждали твердое вещество, смесь фильтровали и затем высушивали с отсасыванием с получением 1,25 г (93,3%) белого твердого вещества.

b)

-BuOK, DMF, 80

К₂СО₃, DMF, 80

HATU, DIPEA, DMF

Стадия b1. Получение 4-((7-(бензилокси)-6-метоксихиназолин-4-ил)окси)-3-фторанилина

В реакционную колбу добавляли 7-бензилокси-4-хлор-6-метоксихиназолин (4,5 г, 15 ммоль), 4амино-2-фторфенол (2,3 г, 18 ммоль), трет-бутоксид калия (2,4 г, 21 ммоль) и DMF (250 мл) и смесь нагревали до 80°С для протекания реакции в течение 2 ч. После того, как реакция завершалась и растворитель удаляли при пониженном давлении, смесь подвергали хроматографии на сухих колонках с получением 3,6 г (62%) 4-((7-(бензилокси)-6-метоксихиназолин-4-ил)окси)-3-фторанилина.

1Н ЯМР (400 МГц, 06-DMSO) δ 8,53 (s, 1H), 7,55 (s, 1Н), 7,52 (m, 2Н), 7,49 (s, 1Н), 7,44 (t, J=7,2 Гц, 2Н), 7,37 (t, J=7,2 Гц, 1Н), 7,04 (t, J=8,8 Гц, 1Н), 6,50 (dd, J=2,4, 13,2 Гц, 1Н), 6,42 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1Н), 5,39 (s, 2Н), 5,35 (s, 2Н), 3,97 (s, 3Н). MS (ESI), масса/заряд: 391 [М+Н]+.

Стадия b2. Получение 4-(4-амино-2-фторфенокси)-6-метоксихиназолин-7-ола

4-((7-(Бензилокси)-6-метоксихиназолин-4-ил)окси)-3-фторанилин (5,2 г, 13,3 ммоль), Pd/C (0,4 г) и метанол (250 мл) подвергали реакции при 0°С в атмосфере водорода в течение ночи, затем Pd/C удаляли посредством фильтрации и фильтрат концентрировали и пропускали через колонку с получением 2,4 г (60%) 4-(4-амино-2-фторфенокси)-6-метоксихиназолин-7-ола.

1H ЯМР (400 МГц, d6-DMSO) δ 10,72 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,22 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,02 (t, J=8,8 Гц, 1Н), 6,49 (dd, J=2,4, 12,8 Гц, 1Н), 6,41 (dd, J=2,0, 8,8 Гц, 1Н), 5,37 (s, 2Н), 3,97 (s, 3Н). MS (ESI), масса/заряд: 301 [М+Н]+.

Стадия b3. Получение 3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-ил)окси)ани лина

4-(4-Амино-2-фторфенокси)-6-метоксихиназолин-7-ол (400 мг, 1,3 ммоль), 4-(3-хлорпропил)морфолин (3-5а) (640 мг, 3,9 ммоль) и карбонат калия (540 мг, 3,9 ммоль) добавляли к DMF (50 мл), смесь нагревали до 80°С и подвергали реакции в течение двух часов, затем три раза экстрагировали этилацетатом. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором и высушивали посредством ротационного выпаривания и затем пропускали через колонку с получением 380 мг (67%) 3фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-ил)окси)анилина.

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,60 (s, 1Н), 7,53 (s, 1Н), 7,31 (s, 1Н), 7,05 (t, J=8,8 Гц, 1Н), 6,49 (dd, J=2,4, 12,0 Гц, 1H), 6,41 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 4,26 (t, J=6,4 Гц, 2Н), 4,02 (s, 3Н), 3,71 (t, J=4,4 Гц, 4Н), 2,56 (t, J=7,2 Гц, 2Н), 2,47 (s, 4Н), 2,11 (m, 2Н). MS (ESI), масса/заряд: 428 [М+Н]+.

- 9 042574

Стадия b4. Получение N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида (названого

TL134)

3-Фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-ил)окси)анилин (450 мг, 1 ммоль), 1,2диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновую кислоту (277 мг, 1,2 ммоль), HATU (570 мг, 1,5 ммоль) и DIEA (0,5 мл, 3 ммоль) растворяли в 30 мл DMF, затем смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. В реакционный раствор добавляли ледяную воду, затем осаждали твердое вещество. Смесь фильтровали и твердое вещество дважды экстрагировали дихлорметаном. Органические фазы объединяли и один раз промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄, затем фильтровали, и высушивали посредством ротационного выпаривания, и затем подвергали колоночной хроматографии с получением 478 мг (72%) белого твердого вещества.

Пример 2. Получение N-(4-((6,7-бис(2-метоксиэтокси)хиназолин-4-ил)окси)-3-фторфенил)-1,2диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого TL197)

Способ синтеза упомянут в примере 1.

1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,78 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,12-8,04 (m, 2H), 7,94 (dd, J=12,8, 2,3 Гц, 1H), 7,82 (dd, J=9,3, 3,0 Гц, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,53-7,39 (m, 3Н), 4,35 (ddd, J=9,1, 4,4, 2,7 Гц, 4Н), 3,88 (s, 3Н), 3,77 (q, J=4,9 Гц, 4Н), 3,36 (s, 5H), 2,63 (s, 3Н).

Пример 3. Получение N-(4-((6,7-диметоксихиназолин-4-ил)окси)-3-фторфенил)-1,2-диметил-4-оксо6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида (названого TL198)

Способ синтеза упомянут в примере 1.

' Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,78 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,07 (d, J=12,0 Гц, 2Н), 7,94 (d, J=12,7 Гц, 1H), 7,83 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,59 (s, 1Н), 7,54-7,34 (m, 3Н), 4,00 (s, 6H), 3,88 (s, 3Н), 2,63 (s, 3Н).

Пример 4. Получение N-(3-фтор-4-((7-метокси-6-(3-метоксипропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида (названого TL199)

Способ синтеза упомянут в примере 1.

1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 12,32 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,38 (dd, J=2,7, 1,3 Гц, 1H), 7,98 (dd, J=12,4, 2,5 Гц, 1H), 7,68 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,64-7,57 (m, 2Н), 7,47-7,41 (m, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,28 (d, J=8,6 Гц, 1H), 4,32 (t, J=6,5 Гц, 2Н), 4,05 (s, 3Н), 3,95 (s, 3Н), 3,62 (t, J=6,1 Гц, 2Н), 3,38 (s, 3Н), 3,11 (s, 3Н), 2,22 (р, J=6,3 Гц, 2Н).

Пример 5. Получение N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(4-метоксибутокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого TL204)

Способ синтеза упомянут в примере 1.

1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 12,32 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,37 (dd, J=2,9, 1,4 Гц, 1H), 7,98 (dd, J=12,4, 2,4 Гц, 1H), 7,67 (d, J=9,4 Гц, 1H), 7,63-7,58 (m, 1Н), 7,56 (s, 1H), 7,43 (ddd, J=8,7, 2,4, 1,2 Гц, 1H), 7,30 (d, J=13,5 Гц, 2Н), 4,24 (t, J=6,6 Гц, 2H), 4,05 (s, 3H), 3,95 (s, 3H), 3,48 (t, J=6,4 Гц, 2H), 3,36 (s, 3H), 3,11 (s, 3H), 2,10-1,98 (m, 2H), 1,88-1,76 (m, 2H).

Пример 6. Получение N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(2-морфолиноэтокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого TL209)

- 10 042574

Способ синтеза упомянут в примере 1.

1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 12,34 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,39 (dd, J=2,9, 1,3 Гц, 1H), 7,99 (dd, J=12,4, 2,4 Гц, 1H), 7,68 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,64-7,55 (m, 2Н), 7,44 (ddd, J=8,8, 2,5, 1,3 Гц, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,30 (d, J=8,6 Гц, 1H), 4,36 (s, 2Н), 4,06 (s, 3Н), 3,96 (s, 3Н), 3,78 (d, J=5,2 Гц, 4Н), 3,12 (s, 3H), 2,97 (s, 2H), 2,66 (s, 4H).

Пример 7. Получение N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-(пирролидин-1-ил)пропокси)хиназолин-4ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого TL212)

I н II 11 Ί _OAJ О о Гб /^Ν Ο Ν

Способ синтеза упомянут в примере 1.

1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 12,33 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,99 (dd, J=12,3, 2,4 Гц, 1H), 7,68 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,64-7,58 (m, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,44 (d, J=8,9 Гц, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 4,29 (t, J=6,7 Гц, 2Н), 4,06 (s, 3Н), 3,96 (s, 3Н), 3,11 (s, 2H), 2,69 (t, J=7,5 Гц, 2H), 2,56 (s, 4H), 2,24-2,11 (m, 2H), 2,05 (s, 1H), 1,80 (t, J=4,8 Гц, 4H), 1,25 (q, J=6,9, 6,4 Гц, 2Н).

Пример 8. Получение К-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(2-(пиперидин-1-ил)этокси)хиназолин-4ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого TL213) ₀AJ о о

A ⁿ AA- /

Способ синтеза упомянут в примере 1.

1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 12,32 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,38 (d, J=2,7 Гц, 1H), 7,99 (dd, J=12,3, 2,4 Гц, 1H), 7,68 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,63-7,54 (m, 2H), 7,44 (dd, J=8,8, 2,0 Гц, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,29 (d, J=8,8 Гц, 1H), 4,39 (t, J=6,1 Гц, 2Н), 4,05 (s, 3Н), 3,96 (s, 3Н), 3,11 (s, 3Н), 3,02 (s, 2H), 2,67 (s, 4H), 1,78-1,62 (m, 6Н).

Пример 9. Получение N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропокси)хиназолин-4ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого TL238)

Способ синтеза упомянут в примере 1.

1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,80 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,13-8,03 (m, 2H), 7,94 (dd, J=12,8, 2,4 Гц, 1H), 7,82 (dd, J=9,3, 3,1 Гц, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,50 (dd, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 7,44 (t, J=8,6 Гц, 1H), 7,40 (s, 1H), 4,24 (t, J=6,4 Гц, 2Н), 3,99 (s, 3Н), 3,88 (s, 3Н), 2,63 (s, 3Н), 2,45 (t, J=7,0 Гц, 3Н), 2,33 (s, 6H), 2,15 (s, 3Н), 1,98 (q, J=6,9, 6,4 Гц, 3Н), 1,55 (s, 1H).

Пример 10. Получение N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)хиназолин-4ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого TL231)

- 11 042574

Способ синтеза упомянут в примере 1.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 12,30 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,35 (dd, J=2,8, 1,4 Гц, 1H), 7,97 (dd, J=12,4, 2,4 Гц, 1H), 7,66 (d, J=9,4 Гц, 1H), 7,58 (d, J=13,6 Гц, 2Н), 7,42 (ddd, J=8,8, 2,5, 1,2 Гц, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,28 (d, J=8,5 Гц, 1H), 4,35 (t, J=6,1 Гц, 2Н), 4,05 (s, 3Н), 3,93 (s, 3Н), 3,10 (d, J=6,0 Гц, 2Н), 3,09 (s, 3Н), 2,73 (d, J=6,0 Гц, 4Н), 1,85 (р, J=3,3 Гц, 5Н).

Пример 11. Получение №(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-метоксипропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида TL226) (названого

Способ синтеза упомянут в примере 1.

¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 12,27 (s, 1Н), 8,61 (s, 1Н), 8,35-8,29 (m, 1Н), 7,97 (dd, J=12,3, 2,4 Гц, 1Н), 7,64 (d, J=9,3 Гц, 1Н), 7,58 (d, J=3,1 Гц, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,41 (dt, J=8,8, 1,7 Гц, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,30-7,24 (m, 1H), 4,31 (t, J=6,5 Гц, 2Н), 4,05 (s, 3Н), 3,92 (s, 3Н), 3,61 (t, J=6,1 Гц, 2Н), 3,38 (s, 3H), 3,07 (s, 3Н), 2,21 (р, J=6,3 Гц, 2Н).

Пример 12. Получение N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-(пиперидин-1-ил)пропокси)хиназолин-4ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого TL216)

Способ синтеза упомянут в примере 1.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,78 (s, 1Н), 8,55 (s, 1H), 8,12-8,04 (m, 2H), 7,94 (dd, J=12,9, 2,3 Гц, 1H), 7,82 (dd, J=9,3, 3,0 Гц, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,53-7,37 (m, 3H), 4,24 (t, J=6,5 Гц, 2Н), 4,00 (d, J=2,5 Гц, 3Н), 3,88 (s, 3Н), 3,33 (s, 3Н), 2,63 (s, 3Н), 2,42 (t, J=7,1 Гц, 2H), 2,35 (s, 4H), 2,02-1,90 (m, 2H), 1,51 (p, J=5,5 Гц, 4H), 1,39 (q, J=6,7, 6,2 Гц, 2Н).

Пример 13. Получение К-(4-((7-(2-(диметиламино)этокси)-6-метоксихиназолин-4-ил)окси)-3фторфенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого TL233)

Способ синтеза упомянут в примере 1.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 12,30 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,35 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,98 (dd, J=12,3, 2,4 Гц, 1H), 7,66 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,63-7,54 (m, 2H), 7,46-7,39 (m, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,29 (d, J=8,5 Гц, 1H), 4,31 (t, J=5,9 Гц, 2Н), 4,04 (s, 3Н), 3,94 (s, 3Н), 3,09 (s, 3Н), 2,92 (t, J=5,8 Гц, 2Н), 2,41 (s, 6H).

Пример 14. Получение N-(3-фтор-4-((7-(изопентилокси)-6-метоксихиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого TL230)

Способ синтеза упомянут в примере 1.

¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 12,28 (s, 1H), 8,61 (s, 1H), 8,37-8,31 (m, 1H), 7,97 (dd, J=12,4, 2,5

- 12 042574

Гц, 1H), 7,65 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,58 (d, J=12,1 Гц, 2Н), 7,42 (ddd, J=8,8, 2,5, 1,2 Гц, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,307,24 (m, 1H), 4,24 (t, J=6,7 Гц, 2Н), 4,05 (s, 3Н), 3,93 (s, 3Н), 3,08 (s, 3Н), 1,94-1,81 (m, 2H), 1,66 (s, 1H),

1,01 (s, 3H), 1,00 (s, 3H).

Пример 15. Получение К-(3-фтор-4-((6-метокси-7-пропоксихиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого TL240)

Способ синтеза упомянут в примере 1.

¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 12,26 (s, 1H), 8,61 (s, 1H), 8,31 (t, J=1,8 Гц, 1H), 7,97 (dd, J=12,4, 2,4 Гц, 1H), 7,63 (d, J=9,4 Гц, 1H), 7,57 (d, J=6,2 Гц, 2Н), 7,41 (ddd, J=8,8, 2,5, 1,2 Гц, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,29-7,23 (m, 1H), 4,17 (t, J=6,8 Гц, 2Н), 4,05 (s, 3Н), 3,91 (s, 3Н), 3,06 (s, 3Н), 1,98 (h, J=7,2 Гц, 2Н), 1,10 (t, J=7,4 Гц, 3Н).

Пример 16. Получение К-(4-((7-этокси-6-метоксихиназолин-4-ил)окси)-3-фторфенил)-1,2-диметил4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого TL241)

Способ синтеза упомянут в примере 1.

Ή ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,78 (s, 1Н), 8,55 (s, 1H), 8,12-8,03 (m, 2H), 7,94 (dd, J=12,9, 2,3 Гц, 1H), 7,82 (dd, J=9,3, 3,0 Гц, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,50 (dd, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 7,45 (t, J=8,6 Гц, 1H), 7,39 (s, 1H), 4,27 (q, J=6,9 Гц, 2Н), 4,00 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 3,32 (s, 2H), 2,63 (s, 3H), 1,44 (t, J=6,9 Гц, 3Н).

Пример 17. Получение К-(3-фтор-4-((7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого TL236)

Способ синтеза упомянут в примере 1.

¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 12,33 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,41-8,34 (m, 1H), 7,99 (dd, J=12,4, 2,4 Гц, 1H), 7,67 (d, J=9,4 Гц, 1H), 7,60 (d, J=8,6 Гц, 2Н), 7,47-7,39 (m, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,29 (d, J=8,5 Гц, 1H), 4,29 (t, J=6,6 Гц, 2Н), 4,04 (s, 3Н), 3,95 (s, 3Н), 3,73 (t, J=4,7 Гц, 5Н), 3,10 (s, 3H), 2,59 (t, J=7,1 Гц, 2Н), 2,50 (t, J=4,6 Гц, 4Н), 2,14 (р, J=6,8 Гц, 2Н).

Пример 18. Получение К-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолинопропокси)хинолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого ССВ-310)

с)

Стадия c1. Получение 7-(бензилокси)-4-(2-фтор-4-нитрофенокси)-6-метоксихинолина

В реакционную колбу добавляли 7-бензилокси-4-хлор-6-метоксихинолин (4,5 г, 15 ммоль), 2-фтор4-нитрофенол (2,4 г, 15 ммоль), DIEA (18 мл) и ксилол (9 мл), смесь нагревали до 140°С и подвергали реакции в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры. Твердое вещество осаждали, затем

- 13 042574 смесь фильтровали, промывали этанолом и затем высушивали с отсасыванием с получением 3,7 г (81,0%) белого твердого вещества.

1H ЯМР (300 МГц, d6-DMSO) δ 8,56 (d, J=5,1 Гц, 1H), 8,45 (dd, J=10,5, 2,5 Гц, 1H), 8,20 (m, 1H), 7,61 (dd, J=8,8, 8,8 Гц, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,53 (m, 2H), 7,48 (s, 1H), 7,32-7,47 (m, 3Н), 6,78 (d, J=5,1 Гц, 1H), 5,33 (s, 2H), 3,93 (s, 3Н). MS (ESI), масса/заряд: 421 [М+Н]+.

Стадия с2. Получение 4-(4-амино-2-фторфенокси)-6-метоксихинолин-7-ола

7-(Бензилокси)-4-(2-фтор-4-нитрофенокси)-6-метоксихинолин (3,0 г, 10 ммоль) растворяли в 10 мл DMF, затем добавляли 10% Pd/C (0,5 г) и 10 мл этанола и смесь подвергали реакции при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение ночи. Pd/C удаляли посредством фильтрации и фильтрат концентрировали и пропускали через колонку с получением 1,8 г (60%) 4-(4-амино-2-фторфенокси)-6метоксихинолин-7-ола.

1H ЯМР (400 МГц, d6-DMSO) δ 10,11 (s, 1H), 8,39 (d, J=2,2 Гц, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,06 (s, 1H), 6,68-6,40 (m, 2H), 6,32 (s, 1H), 5,49 (s, 2H), 3,95 (s, 3Н). MS (ESI), масса/заряд: 301 [М+Н]⁺.

Стадия с3. Получение 3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолинопропокси)хинолин-4-ил)окси)анилина

4-(4-Амино-2-фторфенокси)-6-метоксихинолин-7-ол (600 мг, 2 ммоль), 4-(3-хлорпропил)морфолин (3-5а) (982 мг, 6 ммоль) и карбонат калия (828 мг, 6 ммоль) добавляли к DMF (20 мл), смесь нагревали до 80°С и подвергали реакции в течение двух часов и затем три раза экстрагировали этилацетатом. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором и высушивали посредством ротационного выпаривания и затем пропускали через колонку с получением 615 мг (72%) 3-фтор-4-((6метокси-7-(3-морфолинопропокси)хинолин-4-ил)окси)анилина.

1H ЯМР (300 МГц, d6-DMSO) δ 8,44 (d, J=5,2 Гц, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,06 (dd, J=9,2, 8,8 Гц, 1H), 6,55 (dd, J=13,2, 2,4 Гц, 1H), 6,47 (m, 1H), 6,38 (dd, J=5,2, 1,0 Гц, 1H), 5,46 (s, 2Н), 4,19 (t, J=6,4 Гц, 2Н), 3,94 (s, 3Н), 3,59 (m, 4Н), 2,47 (t, J=7,1 Гц, S48 2Н), 2,39 (m, 4H), 1,97 (m, 2H). MS (ESI), масса/заряд: 428 [М+Н]⁺.

Стадия с4. Получение N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолиноnропокси)хинолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого ССВ-310)

3-Фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолинопропокси)хинолин-4-ил)окси)анилин (428 мг, 1 ммоль), 1,2диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновую кислоту (277 мг, 1,2 ммоль), HATU (570 мг, 1,5 ммоль) и DIEA (0,5 мл, 3 ммоль) растворяли в 5 мл DMF и затем смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. В реакционный раствор добавляли ледяную воду, затем осаждали твердое вещество. Смесь фильтровали и твердое вещество дважды экстрагировали дихлорметаном. Органические фазы объединяли и один раз промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄, затем фильтровали, и высушивали посредством ротационного выпаривания, и затем подвергали колоночной хроматографии с получением 533 мг (75%) белого твердого вещества.

1H ЯМР (400 МГц, d6-DMSO) δ 10,82 (s, 1Н), 8,47 (d, J=5,2 Гц, 1H), 8,08 (t, J=6,2 Гц, 2Н), 8,01 (dd, J=13,1, 2,3 Гц, 1H), 7,83 (dd, J=9,3, 2,8 Гц, 1H), 7,54 (d, J=4,2 Гц, 2Н), 7,45 (m, 2Н), 6,49 (d, J=5,0 Гц, 1H), 4,21 (t, J=6,4 Гц, 2Н), 3,96 (s, 3Н), 3,88 (s, 3Н), 3,69-3,50 (m, 4H), 2,63 (s, 3H), 2,47 (s, 2H), 2,41 (s, 4H), 2,05-1,91 (m, 2H). MS (ESI), масса/заряд: 711 [М+Н]⁺.

Сравнительный пример 1. Получение 6-этил-N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолuнопропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (названого GDL5000123)

Способ синтеза упомянут в примере 1.

1H ЯМР (500 МГц, d6-DMSO) δ 11,01 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,08 (d, J=1,5 Гц, 1Н), 7,97-7,94 (dd, J=2,0, 13,0 Гц, 1Н), 7,81 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 7,67-7,65 (dd, J=2,0, 8,5 Гц, 1Н), 7,58 (s, 1Н), 7,50 (m, 1Н), 7,44 (t, J=9,0 Гц, 1Н), 7,40 (s, 1Н), 4,26 (t, J=6,0 Гц, 2Н), 3,99 (s, 3Н), 3,83 (s, 3Н), 3,60 (s, 4Н), 2,77 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 2,65 (s, 3Н), 2,50 (m, 2Н), 2,41 (s, 4Н), 1,99 (t, J=6,5 Гц, 2Н), 1,25 (t, J=7,5 Гц, 2Н). MS (ESI), масса/заряд: 656 [М+Н]⁺.

Пример 19. Тестирования IC₅₀ для соединений на основе хинолина и хиназолина в отношении киназы AXL

Обнаружение активности киназы

Технологию твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) применяли для обнаружения ингибирующей активности соединений в отношении киназы. Субстрат для ферментативной реакции Poly (Glu, Туг) 4:1 разбавляли до 20 мкг/мл с помощью PBS, не содержащего калия (10 мМ натрий-фосфатный буфер, 150 мМ NaCl, pH 7,2-7,4), и планшет с ферментными метками покрывали 125 мкл/лунка, затем

- 14 042574 инкубировали при 37°С в течение 12-16 ч. После того, как жидкость в лунке удаляли, планшет три раза промывали T-PBS (содержащий 0,1% Tween-20 PBS), 200 мкл T-PBS на лунку, каждый раз в течение 5 мин. Планшет с ферментными метками высушивали в печи при 37°С в течение 1-2 часов. В каждую лунку добавляли 50 мкл раствора АТР, разбавленного реакционным буфером (50 мМ HEPES, рН 7,4, 50 мМ MgCl₂, 0,5 мМ MnCl₂, 0,2 мМ Na₃VO₄, 1 мМ DTT), с конечной концентрацией 5 мкМ. Тестовые соединения разбавляли с помощью DMSO до подходящей концентрации, такой как 1 мкл/лунка, или до содержания соответствующей концентрации DMSO (лунка отрицательного контроля), и затем для инициации реакции добавляли рекомбинантный белок киназу AXL (eurofins, 14-512), разбавленный с помощью 49 мкл реакционного буфера. Для каждого эксперимента необходимы две лунки без фермента для контроля. Планшет инкубировали на шейкере (100 об./мин.) при 37°С и подвергали реакции в течение 1 ч. Планшет три раза промывали T-PBS. Добавляли 100 мкл/лунка разбавленного первичного антитела PY99 и содержимое планшета подвергали реакции на шейкере при 37°С в течение 0,5 ч. Планшет три раза промывали T-PBS. Добавляли 100 мкл/лунка разбавленного вторичного антитела козы к IgG мыши, меченного пероксидазой хрена, и содержимое планшета подвергали реакции на шейкере при 37°С в течение 0,5 ч. Планшет три раза промывали T-PBS. 2 мг/мл раствора OPD для обеспечения цвета добавляли в количестве 100 мкл/лунка (разбавленного 0,1 М буфером лимонная кислота-цитрат натрия (рН=5,4), содержащим 0,03% Н₂О₂) и содержимое планшета подвергали реакции при 25°С в темноте в течение 1-10 минут. (Для растворения OPD необходимо воздействие ультразвуком и раствор для обеспечения цвета необходимо получать для немедленного применения). Добавляли 50 мкл/лунка 2 М H₂SO₄ для остановки реакции, и микропланшет-ридер для считывания активности после мечения ферментом SPECTRA MAX 190 с возможностью регулирования длины волны применяли для считывания данных при длине волны 490 нм.

Степень подавления для образца получали с помощью следующей формулы.

Степень подавления (%) для образца = значение OD соединения - значение OD контрольной лунки без фермента значение OD лунки отрицательного контроля - значение OD контрольной лунки без фермента⁷

Значения IC₅₀ получали с помощью регрессии с четырех-параметрическим методом с применением программного обеспечения, входящего в комплект с микропланшет-ридером для считывания активности после мечения ферментом.

В конкурентных экспериментах с соединениями на основе хинолина и хиназолина с АТР все соединения демонстрировали показатели сильной ингибирующей активности в отношении киназы AXL (результаты показаны в табл. 1). Что касается модификации заместителей R₁ и R2 в общей формуле (I), было обнаружено, что если R1 и R2 представляют собой гидрофильные заместители, соединения имеют лучшие показатели ингибирующей активности и могут выдерживать более существенные модификации заместителей.

Таблица 1. Номера соединений и соответствующие результаты в виде показателей ингибирующей активности в отношении киназы

Соед.	IC50 в отношении AXL (нМ)
TL-209	2,0
TL-212	1,5
TL-199	1,8
TL-213	2,2
TL-197	4,2
TL-198	2,1
TL-204	1,6
TL-134	1,1
ССВ-310	1,8
GDL5000123	1,2
R428	4,2

Пример 20. Тестирования IC₅₀ для соединений на основе хинолина и хиназолина в отношении киназы AXL (технология Z'-LYTE™)

Обнаружение активности в отношении киназы

Показатели ингибирующей активности соединений в отношении киназы AXL (eurofins, 14-500) определяли посредством реакции второго порядка с помощью технологии Z'-LYTE™ (обнаружение посредством флуоресценции, ферментативное связывание, основываясь на разнице чувствительности фосфорилированных и нефосфорилированных полипептидов к протеолитическому расщеплению), основываясь на принципе резонансного переноса энергии флуоресценции (FRET), с применением пептидного субстрата для FRET Z'-LYTE™ (пептидный субстрат тирозин 6 для Z'-LYTE™, Invitrogen, PV4122).

Ферментативная реакция.

В 384-луночный планшет добавляли 5 мкл системы фермент-субстрат (50 мМ HEPES, рН 6,5, 0,01% BRIJ-35, 10 мМ MgCl₂, 1 мМ EGTA, 0,02% NaN₃) и в него переносили 5 нл соединения (градиент концен- 15 042574 трации) с применением устройства для манипуляций с ультрамикрообъемами жидкостей echo520. После встряхивания планшета при комнатной температуре в течение 10-20 мин в него переносили 25 нл АТР (конечная концентрация 50 мкМ) с применением устройства для манипуляций с ультрамикрообъемами жидкостей echo520. После встряхивания и тщательного смешивания смесь центрифугировали и подвергали реакции при 30°С в темноте в течение 1,5 ч.

Реакция обнаружения.

В каждую лунку добавляли 2,5 мкл проявляющего раствора (разбавление 1:128) и планшет инкубировали при 37°С в темноте в течение 1 ч, затем добавляли 5 мкл стоп реагента.

Считывание данных с планшета.

Флуоресцентные сигналы детектировали с применением многорежимного планшет-ридера Perkin Elmer EnVision (длина волны возбуждения составляет 400 нм, значения длины волны излучения составляют 460 нм, 535 нм).

Расчет.

Степень подавления для каждой лунки рассчитывали по лункам с полной активностью и лункам с контрольным сигналом.

Способ анализа данных является следующим.

Степень фосфорилирования=1-{(степень излучения х F100%-С100%)/[С0%-С100%+степень излучения х (F100%-F0%)]} х 100;

Степень подавления = 100 х (1-степень фосфорилирования для соединения/степень фосфорилирования для отрицательного контроля).

Значения IC₅₀ рассчитывали с помощью программного обеспечения GraphPad Prism.

В конкурентных экспериментах с соединениями на основе хинолина и хиназолина с АТР все соединения демонстрировали показатели сильной ингибирующей активности в отношении киназы AXL (результаты показаны в табл. 2). Что касается модификации заместителей R₁ и R2 в общей формуле (I), было обнаружено, что если R1 и R2 представляют собой гидрофильные заместители, соединения имеют лучшие показатели ингибирующей активности и могут выдерживать более существенные модификации заместителей.

Таблица 2. Номера соединений и соответствующие результаты в виде показателей ингибирующей активности в отношении киназы

Соед.	IC50 в отношении AXL (нМ)
TL-216	1,5
TL-226	4,7
TL-230	59,4
TL-231	2,3
TL-233	1,9
TL-236	2,4
TL-238	1,2
TL-240	6,1
TL-241	2,6
TL-242	167,0
R428	5,5

Пример 21. Тестирования IC50 для соединений на основе хинолина и хиназолина в отношении киназы Flt3

Обнаружение активности в отношении киназы.

Показатели ингибирующей активности соединений в отношении киназы Flt3 (life, PV6253) определяли посредством реакции второго порядка с помощью технологии Z'-LYTE™ (обнаружение посредством флуоресценции, ферментативное связывание, основываясь на разнице чувствительности фосфорилированных и нефосфорилированных полипептидов к протеолитическому расщеплению), основываясь на принципе резонансного переноса энергии флуоресценции (FRET), с применением пептидного субстрата для FRET Z'-LYTE™ (пептидный субстрат тирозин 2 для Z'-LYTE™, Invitrogen, PV3191).

Ферментативная реакция.

В 384-луночный планшет добавляли 5 мкл системы фермент-субстрат (50 мМ HEPES, рН 7,5, 0,01% BRIJ-35, 10 мМ MgCl₂, 1 мМ EGTA), 2,5 мкл соединения (градиент концентрации) и 2,5 мкл смешанного раствора АТР (конечная концентрация субстрата, представляющего собой пептидный субстрат тирозин 2 для FRET Z'-LYTE™, составляла 2 мкМ и конечная концентрация АТР составляла 500 мкМ), и затем планшет инкубировали при 37°С в темноте в течение 1 ч.

Реакция обнаружения.

В каждую лунку добавляли 5 мкл проявляющего раствора (разбавление 1:64) и планшет инкубировали при 37°С в темноте в течение 1 ч, затем добавляли 5 мкл стоп-реагента.

Считывание данных с планшета.

Флуоресцентные сигналы детектировали с применением микропланшет-ридера Synergy H1 (длина волны возбуждения составляет 400 нм, значения длины волны излучения составляют 445, 535 нм).

- 16 042574

Расчет.

Степень подавления для каждой лунки рассчитывали по лункам с полной активностью и лункам с контрольным сигналом. Способ анализа данных является следующим.

Степень подавления=100 х (1-степень фосфорилирования для соединения/степень фосфорилирования для отрицательного контроля).

В конкурентных экспериментах с соединениями на основе хинолина и хиназолина с АТР все соединения демонстрировали показатели сильной ингибирующей активности в отношении киназы Flt3 (результаты показаны в табл. 3). Что касается модификации заместителей R1 и R2 в общей формуле (I), было обнаружено, что если R1 и R2 представляют собой гидрофильные заместители, соединения имеют лучшие показатели ингибирующей активности и могут выдерживать более существенные модификации заместителей.

Таблица 3. Номера соединений и соответствующие результаты в виде показателей ингибирующей активности в отношении киназы

Соед.	IC50 в отношении Flt3 (нМ)
TL-209	9,2
TL-212	5,2
TL-199	25,8
TL-213	6,4
TL-197	4,7
TL-198	2,3
TL-204	И,2
TL-134	1,9
ССВ-310	9,5
GDL5000123	10,0
АС220	10,3

Пример 22. Эффекты соединений на основе хинолина и хиназолина на пролиферацию клеток MV4-11

Ингибирующие эффекты соединений на пролиферацию клеток MV4-11 определяли с помощью набора для подсчета клеток CCK-8 (Dojindo). Конкретные стадий являются следующими. Клетки MV4-11 в фазе логарифмического роста высевали в 96-луночный кулыуральный планшет при подходящей плотности в количестве 90 мкл на лунку. После культивирования в течение ночи добавляли соединения в разных концентрациях для реакции в течение 72 ч и устанавливали контрольную группу с растворителем (отрицательный контроль). Через 72 ч воздействия соединений на клетки эффекты соединений на пролиферацию клеток определяли с применением набора для подсчета клеток CCK-8 (Dojindo). В каждую лунку добавляли 10 мкл реагента CCK-8 и планшет помещали в инкубатор при 37°С на 2-4 ч. После этого для считывания применяли микропланшет-ридер для считывания активности после мечения ферментом с полным набором длин волн SpectraMax 190 с длиной волны при измерении 450 нм.

Степень подавления (%) для соединения в отношении роста опухолевых клеток рассчитывали с помощью следующей формулы.

Степень подавления (%)=(OD контрольной лунки - OD лунки после введения)/OD контрольной лунки х 100%

Значения IC50 получали с помощью регрессии с четырех-параметрическим методом с применением программного обеспечения, входящего в комплект с микропланшет-ридером для считывания активности после мечения ферментом.

Соединения на основе хинолина и хиназолина демонстрировали показатели сильной ингибирующей активности в отношении лейкозных клеток MV4-11 (результаты показаны в табл. 4).

Таблица 4. Значения IC50 для соединений касательно показателей подавления пролиферации клеток MV4-11

Соед.	1С₅₀ (нМ)
TL-134	<0,4
АС220	<4

Пример 23. Сравнительное исследование видов метаболизма соединений на основе хинолина и хиназолина в гепатоцитах

В данном примере метод UPLC-UV/Q-TOF MS применяли для оценки различий в метаболических процессах в отношении TL134 в гепатоцитах пяти видов, таких как человек, обезьяна, псовые, крыса и мышь. Он предоставляет основание для отбора на основе доклинических фармакокинетических параметров и исследований оценки безопасности для видов животных.

- 17 042574

Материалы и способы являются следующими. 1. Лекарственные препараты и реагенты

TL134	Получение описано в примере 1
Смешанные первичные гепатоциты человека (номер серии 1410266)	Компания Xenotech, США
Смешанные первичные гепатоциты Масаса fascicularis (номер серии IXCH)	Компания RILD
Смешанные первичные гепатоциты кобеля породы бигль (номер серии 1410275)	Компания Xenotech, США
Смешанные первичные гепатоциты самца крыс SD (номер серии 1210260)	Компания Xenotech, США
Смешанные первичные гепатоциты самца мыши CD-1 (номер серии 1510134)	Компания Xenotech, США
Ацетат аммония (хроматографически чистый)	Компания ROE, США
Ацетонитрил (хроматографически чистый)	Компания Merck, Германия
Муравьиная кислота (хроматографически чистая)	Компания Fluka, Германия

2. Системы инкубации для исследований метаболизма In Vitro

Общий объем каждого образца для инкубации составлял 100 мкл, среда представляла собой среду WME (рН 7,4) и образец для инкубации включал гепатоциты с плотностью клеток 1,0x106 клеток/мл и TL134 с конечной концентраций 3,0 мкМ; образец отрицательного контроля инкубировали с термически инактивированными смешанными гепатоцитами (без подсчета клеток) пяти видов животных и TL134, и образец с контрольным буфером инкубировали со средой WME и TL134. Все образцы инкубировали при 37°С в течение 180 мин и затем добавляли 100 мкл ледяного ацетонитрила для остановки реакции. Образцы хранили при -70°С готовыми для тестирования, и все образцы для инкубации представляли собой образцы в двух повторностях.

3. Инструменты и условия

Квадрупольный времяпролетный тандемный масс-спектрометр Triple TOF 5600+ (Q-TOF MS), оснащенный источником ионизации с электрораспылением (источник ESI) и системой автоматической калибровки CDS, компания АВ SCIEX, США; система для жидкостной хроматографии UPLC Acquity, включающая двойную инфузионную помпу, автодозатор, колоночный термостат, дегазатор и датчик ультрафиолетового излучения TUV, компания Waters, США.

Условия для хроматографии: хроматографическая колонка представляла собой колонку HSS Т3 С18 ACQUITYTM (100 x 2,1 мм I.D., размер частиц 1,8 мкм), компания Waters, США; температура колонки составляла 40°С; расход составлял 0,4 мл/мин; длина волны при УФ-детектировании составляла 254 нм; градиент подвижной фазы показан в таблице ниже.

Время (мин.)	А (5 мМ ацетат аммония, содержащий 0,1% муравьиной кислоты, %)	в (ацетонитрил, %)
0	90	10
1	90	10
8,5	46	54
9,5	5	95
10,5	5	95
И,5	90	10
15	90	10

Условия для масс-спектрометрия: источник ионизации с электрораспылением (ESI), выявление с помощью способа сканирования в режиме положительных ионов (режим с высокой чувствительностью), газ 1: 55 фунтов/кв.дюйм, газ 2: 50 фунтов/кв.дюйм, газовая завеса: 40 фунтов/кв.дюйм, температура источника составляла 500°С, напряжение при ионораспылении (ISVF) составляло 5500 В с напряжением декластеризации 80 В, энергия соударений составляла 10 эВ во время полного сканирования первого уровня, и энергия соударений составляла 20±10 эВ во время сканирования продукта в режиме положительных ионов, диапазон сканирования составлял 80-1000 масса/заряд, для корректировки массового числа применяли систему автоматической калибровки (CDS) с методом внешнего стандарта.

4. Предварительная обработка образца

Образцы в двух повторностях раствора для инкубации гепатоцитов каждого из видов брали в полном объеме и объединяли, перемешивали на вортексе в течение 1 мин. и центрифугировали в течение 5 мин. (14000 об./мин), затем брали все количество надосадочной жидкости, переносили в тестовую пробирку объемом 10 мл и высушивали в потоке азота при 40°С. Затем остаток растворяли в 150 мкл смеси ацетонитрил-вода (10: 90, об./об.), центрифугировали в течение 5 мин. (14000 об./мин) и 5,0 мкл надосадочной жидкости брали для анализа с помощью UPLC-UV/Q-TOF MS. Образцы отрицательного контроля и образцы с контрольным буфером обрабатывали так же, как и образцы раствора для инкубации гепатоцитов.

5. Анализ данных

Виды программного обеспечения, которые применяли для получения данных, представляли собой

- 18 042574

Analyst ®TF V1.6 от компании АВ Sciex и Masslynx V4.1 от компании Waters, и виды программного обеспечения, которые применяли для анализа данных, представляли собой PeakView ® V1.2 и MetabolitePilot V1.5 от компании АВ Sciex.

6. Результаты эксперимента

Данные для жидкости TL134 в отношении инкубации гепатоцитов человека, обезьяны, псовых, крысы и мыши обрабатывали с применением программного обеспечения MetabolitePilot с получением относящихся к ним спектров метаболитов (фиг. 1 и 2), и при этом хроматограммы, полученные посредством детекции в ультрафиолетовой области, показаны на фиг. 3 и 4. Метаболиты названы в порядке их соотношения массы к заряду от малого до большого, и метаболиты с одинаковым соотношением массы к заряду названы в порядке значений хроматографического времени удерживания от меньшего значения к большему, информация согласно UPLC-UV/Q-TOF MS в отношении TL134 и метаболитов в системах инкубации гепатоцитов показана в табл. 5.

Уровни метаболизма соединения GDL5000123 в гепатоцитах как видов обезьян, так и видов псовых оценивали с помощью таких же способа и условий, как описано выше.

Результаты показаны в табл. 6.

Таблица 5. Информация согласно UPLC-UV/Q-TOF MS в отношении метаболитов TL134 в гепатоцитах пяти видов, таких как человек, обезьяна, псовые, крыса и мышь

Метабол ический путь „ Откло

Соотно а . нение шение Молекулярная массы к формула массе (ppm)

Площадь пика согласно LC-MS (х10³)

Время Термическ

УДСрЖ И тт гт тг

Чело Обез Псо Крыс , , ивания инактивиро Мышь _{z ч} век ьяна вые а (мин.) ванные смешанные

гепатоциты
Прогоги
^П 712 240
МО лекарств C₃₅H₃₃N₅O₇F₄ 2,8 7,37	1750 708 920 832 ИЗО 1970
енного
средства
Гидролиз
амидной
Ml связи 302,0639 Ci₃H₁₀NO₄F₃ 1,3 7,53	19,2 8,32 7,95 13,1 10,4
(кислые
условия)
О-
М2 деалкили 411,0965 Ci9Hi₄N2O₄F₄ 0,6 7,19	16,9 6,71 5,16 12,3 16,2
рование
Гидролиз
амидной
М3 связи 429,1937 C₂2H₂₅N₄O₄F 1,0 4,38	7,93 2,80 2,34 3,70 6,25
(кислые
условия)
О-
депропил
М4 585,1398 C2₈H₂oN₄0₆F₄ 1,1 8,73 морфоли	33,2 10,5 18,5 20,6 9,03
нового
кольца
Окислит
ельное
удаление
М5 ^М°РФ°^ЛИ 657,1592 C₃₁H₂₄N₄O₈F₄ -1,7 8,74	0,06 3,64 21,7 1,91 0,03
нового
кольца
(кислые
условия)
V-
_М6 деметил _{2249 с}	1,23
ировани
е
Однокра
тная
М7 ^{окислиге} 726,2188 C₃₅H₃₁N₅O₈F₄ 0,9 8,98 льная	2,11 2,57
дегидрог
енизация
Однокра
М8 ™°^е 728,2345 C₃₅H₃₃N₅O₈F₄ 1,0 7,49	198 19,1 99,7 235 35,5
окислени
е
	Площадь пика, полученная посредством
	хроматографии с УФ-дегектированием
	Термически Чело Обез Псо Крыс Мышь

- 19 042574 инактивиро век ьяна вые а ванные смешанные _________________________________________________гепатоциты___________________________

МО Прототип лекарственного средства 7,32 467 406 270 236 315 577

М4 О-депропилирование морфолиновое кольцо/окислительное удаление^ * * * * морфолинового кольца (кислые ’ условия)

М8 Однократное окисление 7,43 88 13 43 78 18 *: Детектировали родственные метаболиты, но площади пиков, полученные посредством УФдетектирования, не могут быть точно интегрированы из-за матричных помех

Таблица 6. Информация согласно UPLC/Q-TOF MS в отношении метаболитов GDL5000123 в гепатоцитах как видов обезьян, так и видов псовых

Соогноше Отклоне Время Площадь пика согласно

Метаболический Молекулярная ниепо удержива LC-MS (^х10³) путь формула массе ния Инактивир Обезья Псовы ^J кзаряду т г j г ______________________ _________________(ppm) (мин.) рванный на е Прототип

МО	лекарственного средства Окислительное	656,2889	СзбН^ОбР	1,5	8,07	166	264	218
Ml	удаление морфолинового	601,2078	C32H29N4O7F	-2,4	9,43		2,57	5,84
	кольца
М2	Ml Однократное окисление	617,2042	C32H29N4O8F	0	7,33		1,19	3,42
М3	Дегидрогенизация	654,2721	СзбНзг№О₆Р	-0,2	7,74		1,35	1,01
	Однократная
М4	окислительная	670,2673	C36H36N₅O7F	0,2	6,41		1,76	0,92
	дегидрогенизация
М5-1	Однократное окисление	672,2835	СзбНзАбОЧ	1,0	5,96		25,8
М5-2	Однократное окисление	672,2839	C36H38N5O7F	1,6	6,03		22,4	23,3
М6-1	Двукратное окисление	688,2780	C36H38N5O8F	0,5	5,20		1,41
М6-2	Двукратное окисление Двукратная	688,2778	C36H38N5O8F	0,2	6,19			2,26
М8	окислительная	686,2623	СзбНзбКОД	о,з	6,57			0,88

дегидрогенизация
	Площадь пика, полученная посредством УФ-детектирования Инакти вирова Обезьяна Псовые нный
МО	Прототип лекарственного	129	191	144
М5-1 М5-2	средства Однократное окисление Однократное окисление		102 32,3	53,7

Анализ экспериментальных данных

Исходя из площади пика, полученной посредством хроматографии с УФ-детектированием, после инкубирования соединения GDL5000123 с гепатоцитами обезьяны и псовых в течение 180 мин. соответственно примерно 41,3 и 27,2% прототипа лекарственного средства в каждой системе инкубации были метаболизированы, соответственно; исходя из площади пика, полученной посредством хроматографии с УФ-детектированием, после инкубирования соединения TL134 с гепатоцитами человека, обезьяны, псовых, крысы и мыши в течение 180 мин примерно 17,8, 4,6, 15,4, 19,8 и 3,0% прототипа лекарственного средства в каждой системе инкубации были метаболизированы, соответственно. Можно увидеть, что введение трифторметокси вместо этила в молекулярный фрагмент хинолона может в значительной степени улучшить стабильность соединения, улучшить метаболическую стабильность соединения и увеличить уровень влияния, таким образом, оно может обеспечить увеличение эффективности лекарственного средства in vivo соединения и может обеспечить уменьшение дозировки с таким же эффектом лекарст венного средства.

Каждый из технических признаков вышеприведенных примеров можно объединять произвольно. Для упрощения описания описаны не все возможные комбинации каждого из технических признаков в вышеприведенных примерах. Однако все комбинации таких технических признаков должны рассматриваться как входящие в объем данного изобретения, если такие комбинации не находятся в противоречии друг с другом.

Вышеуказанные примеры всего лишь иллюстрируют несколько вариантов осуществления настоящего изобретения, которые описаны конкретно и подробно, но их не следует считать ограничивающими объем настоящего изобретения. Следует отметить, что специалистами в данной области техники несколько вариаций и улучшений могут быть выполнены без отступления от идеи настоящего изобретения,

-

Claims

и все они находятся в пределах объема правовой охраны настоящего изобретения. Следовательно, объем правовой охраны настоящего изобретения будет определяться прилагаемой формулой изобретения.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение на основе хинолина или хиназолина, характеризующееся структурой, представленной формулой (I), или его фармацевтически приемлемая соль или его стереоизомер:

I

(I), где X выбран из СН и N;

каждый из R₁ и R2 независимо выбран из -O(CR4R₅)_oR₃;

где о представляет собой целое число от 0 до 6;

каждый из R₃, R4 и R₅ независимо выбран из группы, состоящей из -Н, C₁-С₆алкила, -OR₈ и -NR₈R9;

каждый из R₈ и R₉ независимо выбран из C₁-С₆алкила, или R₈ и R9 вместе с N, соединенным с ними, образуют насыщенную или ненасыщенную 5-6-членную гетероциклическую группу, содержащую 1-4 гетероатома, выбранных из О, N и S; где насыщенная или ненасыщенная 5-6-членная гетероциклическая группа может быть независимо и необязательно замещена одним или более R₁₀; где

R₁₀ выбран из группы, состоящей из C₁-С₆алкила.
2. Соединение на основе хинолина или хиназолина по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль или его стереоизомер, где R1 представляет собой -O(CH₂)_oR₃;

o представляет собой целое число от 0 до 4;

R3 выбран из группы, состоящей из -Н, C₁-С₆алкила, C₁-С₃алкокси и -NR8R9;

каждый из R₈ и R9 независимо выбран из группы, состоящей из C₁-С₃алкила, или R₈ и R9 вместе с N, соединенным с ними, образуют насыщенную или ненасыщенную 5-6-членную гетероциклическую группу, содержащую 1-4 гетероатома, выбранных из О, N и S; где насыщенная или ненасыщенная 5-6членная гетероциклическая группа может быть независимо и необязательно замещена одним или более R10; где

R₁₀ выбран из группы, состоящей из C₁-С₃алкила.
3. Соединение на основе хинолина или хиназолина по п.2 или его фармацевтически приемлемая соль или его стереоизомер, где R₁ выбран из группы, состоящей из метоксила, этоксила, пропоксила, 2метоксиэтоксила, 3-метоксипропоксила, 3-морфолинопропоксила, 2-(пирролидин-1-ил)этоксила, 3(пирролидин-1-ил)пропоксила, (пиперидин-1-ил)этоксила, (пиперидин-1-ил)пропоксила, 4-метоксибутоксила, 2-морфолиноэтоксила, (4-метилпиперазин-1-ил)пропоксила, диметиламиноэтоксила и изопентилоксила.
4. Соединение на основе хинолина или хиназолина по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль или его стереоизомер, где R2 представляет собой -O(CH₂)_oR₃;

o представляет собой целое число от 0 до 4;

R₃ выбран из группы, состоящей из -Н, C₁-С₃алкила, C₁-С₃алкокси и -NR8R9;

R₈ и R9 вместе с N, соединенным с ними, образуют насыщенную 5-6-членную гетероциклическую группу, содержащую 1-4 гетероатома, выбранных из О, N и S.
5. Соединение на основе хинолина или хиназолина по п.4 или его фармацевтически приемлемая соль или его стереоизомер, где R₂ выбран из группы, состоящей из метоксила, этоксила, пропоксила, 2метоксиэтоксила, 3-метоксипропоксила, 2-морфолиноэтоксила и 3-морфолинопропоксила.
6. Соединение на основе хинолина или хиназолина по любому из пп.1-5 или его фармацевтически приемлемая соль или его стереоизомер, где X представляет собой N.
7. Соединение на основе хинолина или хиназолина по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль или его стереоизомер, где соединение на основе хинолина или хиназолина выбрано из группы, состоящей из

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида,

N-(4-((6,7-бис(2-метоксиэтокси)хиназолин-4-ил)окси)-3-фторфенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида,

N-(4-((6,7-диметоксихиназолин-4-ил)окси)-3-фторфенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((7-метокси-6-(3-метоксипропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(4-метоксибутокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида,

- 21 042574

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(2-морфолиноэтокси)хинαзолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-(пирролидин-1 -ил)пропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(2-(пиперидин-1 -ил)этокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(2-(пирролидин-1 -ил)этокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3 -метоксипропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-(пиперидин-1 -ил)пропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(4-((7-(2-(диметиламино)этокси)-6-метоксихиназолин-4-ил)окси)-3-фторфенил)-1,2-диметил-4оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((7-(изопентилокси)-6-метоксихиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3 -карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-пропоксихиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(4-((7-этокси-6-метоксихиназолин-4-ил)окси)-3-фторфенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида,

N-(3-фтор-4-((7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо-6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида и

N-(3-фтор-4-((6-метокси-7-(3-морфолинопропокси)хинолин-4-ил)окси)фенил)-1,2-диметил-4-оксо6-(трифторметокси)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида.
8. Применение соединения на основе хинолина или хиназолина по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли или его стереоизомера в качестве ингибитора киназы AXL.
9. Применение соединения на основе хинолина или хиназолина по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли или его стереоизомера в качестве ингибитора киназы Flt3.
10. Применение соединения на основе хинолина или хиназолина по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли или его стереоизомера для получения лекарственного средства для предупреждения или лечения опухоли.
11. Применение по п.10, где опухоль представляет собой гематологическую опухоль, желудочнокишечную стромальную опухоль, гистиоцитарную лимфому, немелкоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, аденокарциному легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак поджелудочной железы, рак молочной железы, рак предстательной железы, рак печени, рак кожи, карциному из эпителиальных клеток или носоглоточную карциному.
12. Фармацевтическая композиция для предупреждения или лечения опухоли, содержащая активный ингредиент и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, где активный ингредиент предусматривает соединение на основе хинолина или хиназолина по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемую соль или его стереоизомер.

-