EA039781B1

EA039781B1 - Гетероарильные соединения в качестве позитивных аллостерических модуляторов мускаринового рецептора m1

Info

Publication number: EA039781B1
Application number: EA202090925A
Authority: EA
Inventors: Рамакришна Нироджи; Абдул Рашид Мохаммед; Анил Карбхари Схинде; Сринивас Равелла; Ванаджа Миддекади; Винод Кумар Гоял; Прадип Джаяраджан; Саивишал Дарипелли; Венкатесварлу Джасти
Original assignee: Сувен Лайф Сайенсиз Лимитед
Priority date: 2017-10-18
Filing date: 2018-10-17
Publication date: 2022-03-14
Also published as: ZA202002034B; SG11202003284RA; BR112020007606A2; WO2019077517A1; EA202090925A1; MA50402A; KR20200069330A; KR102438588B1; AU2018353544A1; CN111212840B; CA3076757A1; CN111212840A; EP3697790A1; IL273748A; EP3697790B1; IL273748B; US20200237761A1; CA3076757C; MX2020003832A; JP2021500323A

Abstract

Изобретение относится к соединениям формулы (I) или их изотопным формам, стереоизомерам, таутомерам или фармацевтически приемлемой соли (солям) в качестве позитивных аллостерических модуляторов мускаринового рецептора M1 (M1 PAMs). В настоящем изобретении описаны получение, фармацевтическая композиция и применение соединения формулы (I).

Description

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I), или их изотопным формам, стереоизомерам или фармацевтически приемлемым солям в качестве позитивных аллостерических модуляторов мускаринового рецептора M1 (M1 PAMs). В настоящем изобретении также описан способ получения таких соединений, фармацевтические композиции, содержащие такие соединения, и их применение.

Уровень техники

Мускариновые ацетилхолиновые рецепторы (mAChRs), которые относятся к классу А семейства связанных с белком G рецепторов (GPCRs), широко экспрессируются во всем организме. К настоящему времени идентифицированы пять подтипов под названием М1-М5, которые реагируют на эндогенный нейромедиатор ацетилхолин (ACh). Они играют ключевую роль в регуляции активности многих важных функций центральной и периферической нервной системы, включая когнитивную функцию. M1, M3 и М5 связываются с Gq, а М2 и М4 посредством Gi/o связываются с путями передачи сигналов в прямом направлении и ассоциированными эффекторными системами (Critical Reviews in Neurobiology, 1996, 10, 69-99; Pharmacology & Therapeutics, 2008, 117, 232-243). M2 и М3 сильно экспрессируются на периферии и известно, что они участвуют в двигательной функции желудочно-кишечного тракта (GI) и реакциях парасимпатической нервной системы, таких как слюноотделение (Life Sciencmes, 1993, 52, 441-448). Мускариновый рецептор M1 в основном экспрессируется в отделах головного мозга, таких как кора, гиппокамп и миндалевидное тело, которые участвуют в познавательной деятельности, и поэтому можно полагать, что селективная активация рецептора M1 улучшит познавательную способность (Annals of Neurology, 2003, 54, 144-146).

Ксаномелин, агонист мускаринового ацетилхолинового рецептора, обладающий умеренной селективностью по отношению к подтипам M1 и М4, оказывает значительное влияние на познавательную способность по данным клинического исследования болезни Альцгеймера (AD) (Alzheimer Disease and Associated Disorders, 1998, 12(4), 304-312), хотя при клинических исследованиях желудочно-кишечные побочные эффекты приводили к исключению значительного количества пациентов. Имеется высокая степень консерватизма между подтипами мускаринового рецептора на сайтах связывания ортостерического ацетилхолинового лиганда, что делает затруднительным идентификацию селективного агониста M1.

Альтернативный подход для преодоления этих затруднений, связанных с селективностью и безопасностью, заключается в разработке M1 PAMs, которые действуют на менее консервативный аллостерический сайт связывания. Фирма Merck сообщила о разработке M1 РАМ, PQCA (1-{[4-циано-4(пиридин-2-ил)пиперидин-1-ил]метил}-4-оксо-4Н-хинолизин-3-карбоновая кислота). Это соединение более высоко селективно по отношению к M1, чем в другим подтипам мускаринового рецептора и является эффективным по данным некоторых доклинических моделей познавательной способности (Psychopharmacology, 2013, 225(1), 21-30) при отсутствии желудочно-кишечных побочных эффектов в случае использования в дозах, равных или меньших, чем пятикратное пороговое значение минимальной эффективной дозы, необходимой для улучшения познавательной способности. В доклинических исследованиях показано, что активация M1 повышает концентрацию нейромедиатора ацетилхолина в головном мозге. Кроме того, активация M1 перспективна в качестве изменяющего течение заболевания лечения AD путем смещения процессинга АРР к пути неамилоидогенной а-секретазы и путем уменьшения гиперфосфорилирования белка tau. Установлено, что позитивные аллостерические модуляторы рецептора M1 увеличивают выработку sAPPa in vitro (The Journal of Neuroscience, 2009, 29, 14271-14286). Поэтому M1 PAMs предоставляют путь для проведения и симптоматического, и изменяющего течение заболевания лечения нарушения познавательной способности при AD и шизофрении.

WO 2016172547, WO 2015028483, WO 2011062853 и US 2015094328 раскрыты некоторые M1 РАМ соединения. Хотя к настоящему времени в литературе раскрыты разные M1 PAMs, на рынке отсутствует лекарственное средство, действующее, как M1 РАМ.

Хотя в предшествующем уровне техники раскрыты соединения M1 РАМ, которые применимы для лечения связанных с ЦНС заболеваний, имеется затруднение, связанное с плохим проникновением в головной мозг и холинергическими побочными эффектами, такими как гиперсаливация, диарея и рвота. Поэтому, сохраняется необходимость в выявлении и разработке новых M1 PAMs, характеризующихся хорошим проникновением в головной мозг и не приводящим к холинергическим побочным эффектам при лечении нарушения, связанного с ЦНС.

Сущность изобретения

Первым объектом настоящего изобретения является M1 PAMs соединение формулы (I)

- 1 039781 или его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, в которой

R¹ означает фенил, дигидробензофуранил или пиридинил; каждый из которых является незамещенным или замещен одним или большим количеством заместителей, выбранных из галогена,

-О-(С_1-6)алкила, -(С_1-6)алкила и R^1a;

R^1a означает пиразолил или тиазолил; каждый из которых является незамещенным или замещен -(С_1-6)алкилом;

А¹ означает СН2;

R2 означает водород или ОН;

кольцо А представляет собой

обозначает положение присоединения;

W¹ независимо выбран из группы, включающей C-F или N;

W2 независимо выбран из группы, включающей C-F или N;

W³ независимо выбран из группы, включающей C-F или N;

R^a означает водород;

R^b означает водород;

R^c означает водород;

X означает СН2 или О и

Y означает СН2 или О.

Другим объектом настоящего изобретения являются способы получения соединения формулы (I) или его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли.

Еще одним объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество по меньшей мере одного соединения формулы (I) или его стереоизомера, или фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемые эксципиенты или носители.

Еще одним объектом настоящего изобретения является соединение формулы (I) или его стереоизомер, или фармацевтически приемлемая соль в комбинации с донепезилом или его фармацевтически приемлемой солью.

Еще одним объектом настоящего изобретения является соединение формулы (I) или его стереоизомер, или фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве позитивных аллостерических модуляторов мускаринового рецептора M1.

Еще одним объектом настоящего изобретения является соединение формулы (I) или его стереоизомер, или фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения заболеваний или нарушений, выбранных из группы, включающей нарушения познавательной способности, боль или нарушения сна.

Еще одним объектом настоящего изобретения является соединение формулы (I) или его стереоизомер, или фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения заболеваний или нарушений, выбранных из группы, включающей болезнь Альцгеймера, шизофрению или инсомния.

Другим объектом настоящего изобретения является способ лечения заболеваний или нарушений, связанных с мускариновым рецептором M1, включающий введение нуждающемуся в нем пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его стереоизомера, или фармацевтически приемлемой соли.

Еще одним объектом настоящего изобретения является применение соединения формулы (I) или его стереоизомера, или фармацевтически приемлемой соли для приготовления лекарственного средства для лечения заболеваний или нарушений, связанных с мускариновыми рецепторами M1.

Еще одним объектом настоящего изобретения является соединение формулы (I) или его стереоизомер, или фармацевтически приемлемая соль для применения в позитивной аллостерической модуляции мускаринового рецептора M1.

Краткое описание чертежей

На чертеже представлено влияние исследуемого соединения (пример 32) в комбинации с донепезилом на тета-осцилляции гиппокампа.

Подробное описание изобретения

Если не указано иное, приведенные ниже термины, использующиеся в описании и формуле изобретения, обладают указанными ниже значениями:

Термин (С_1-6)-алкил при использовании в настоящем изобретении означает обладающий разветвленной или линейной цепью алифатический углеводород, содержащий от 1 до 6 атомов углерода. Примеры (С_1-6)-алкила включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил и третбутил. Предпочтительно, если (С_1-6)-алкил представляет собой метил, этил или изопропил.

- 2 039781

Термин галоген при использовании в настоящем изобретении означает фтор, хлор, бром или йод.

Предпочтительно, если галоген означает фтор, хлор или бром.

Термин галоген(С_1-6)-алкил при использовании в настоящем изобретении означает (С_1-6)-алкил, определенный выше, в котором один или большее количество атомов водорода у одинаковых или разных атомов углерода замещены одинаковыми или разными галогенами. Примеры галоген(С_1-6)-алкила включают фторметил, хлорметил, фторэтил, дифторметил, дихлорметил, трифторметил, дифторэтил и т. п.

Термин (С_3-6)-циклоалкил при использовании в настоящем изобретении означает насыщенное моноциклическое углеводородное кольцо, содержащее от 3 до 6 атомов углерода. Примеры (С_3-6)циклоалкильной группы включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил.

Термин (С_6-10)-арил при использовании в настоящем изобретении означает ароматические углеводородные кольца, содержащие от 6 до 10 атомов углерода. Примеры (С_6-10)-арильной группы включают фенил или нафтил.

Термин (С_5-10)-гетероарил при использовании в настоящем изобретении означает ароматические моноциклические или ароматические бициклические гетероциклильные кольцевые системы, содержащие от 5 до 10 атомов. Примеры (С_5-10)-гетероарильной группы включают 1,2,4-оксадиазолил, 1,3,4оксадиазолил, 1,2,4-тиадиазолил, 1,3,4-тиадиазолил, триазолил, тетразолил, триазинил, фурил, имидазолил, изоксазолил, изотиазолил, оксазолил, пирролил, пиразолил, тиазолил, тиенил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, бензодиоксолил, бензофуранил, бензофуразанил, бензимидазолил, бензопиразолил, бензотиазолил, бензотриазолил, бензотиофенил, бензоксаазепинил, бензооксаазинонил, бензооксаазазолонил, бензоксазолил, имидазопиридинил, тиенолопиридинил, фуропиридинил, пирролопиридинил, пиразолопиридинил, оксазолопиридинил, тиазолопиридинил, имдазопиразинил, имидазопиримидинил, тиенопиримидинил, фуропиримидинил, пирролопиримидинил, пиразолопиримидинил, оксазолопиримидинил, тиазолопиримидинил, пиразолотриазинил, изохинолил, хинолил, фталазинил, нафтиридинил, хиноксалинил, хиназолинил и их N-оксиды.

Термин (С_5-10)-гетероциклил при использовании в настоящем изобретении означает неароматические моноциклические или неароматические бициклические гетероциклильные кольцевые системы, содержащие от 5 до 10 атомов. Примеры (С_5-10)-гетероциклильной группы включают, но не ограничиваются только ими, пиперидинил, пиперазинил, дигидробензофуран, дигидробензотиофен, дигидроиндол, тетрагидрохинолин и тетрагидроизохинолин.

Выражение терапевтически эффективное количество определено, как количество соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, которое (i) лечит конкретное заболевание, патологическое состояние или нарушение, (ii) устраняет один или большее количество симптомов конкретного заболевания, патологического состояния или нарушения, (iii) задерживает начало одного или большего количества симптомов конкретного заболевания, патологического состояния или нарушения, описанного в настоящем изобретении.

Термин изотопная форма при использовании в настоящем изобретении означает соединение формулы (I), где один или большее количество атомов соединения формулы (I) заменены на соответствующие их изотопы. Например, изотопы водорода включают ²Н (дейтерий) и ³Н (тритий).

Термин стереоизомеры при использовании в настоящем изобретении означает изомеры соединения формулы (I), которые различаются по расположению их атомов в пространстве. Соединения, раскрытые в настоящем изобретении, могут существовать в виде одного стереоизомера, рацематов и/или смесей энантиомеров и/или диастереоизомеров. Все такие одиночные стереоизомеры, рацематы и их смеси входят в объем настоящего изобретения.

Термин фармацевтически приемлемая соль при использовании в настоящем изобретении означает соль активного соединения, т. е. соединения формулы (I), и ее получают по реакции подходящей кислотой или производным кислоты в зависимости от конкретных заместителей, находящихся в соединениях, описанных в настоящем изобретении.

Термин нарушение познавательной способности при использовании в настоящем изобретении означает группу нарушений психического здоровья, которые влияют преимущественно на обучение, память, восприятие и решение задачи включают амнезию, слабоумие и бред. Нарушения познавательной способности могут быть следствием заболевания, нарушения, недомогания или токсического воздействия. Предпочтительно, если нарушением познавательной способности является слабоумие. Примеры слабоумия включают, но не ограничиваются только ими, слабоумие при болезни Альцгеймера, слабоумие при болезни Паркинсона, слабоумие при болезни Гентингтона, слабоумие, связанное с синдромом Дауна, слабоумие, связанное с синдромом Туретта, слабоумие, связанное с постменопаузой, Лобновисочное слабоумие, слабоумие с тельцами Леви, мультиинфарктное слабоумие, слабоумие при HIV, слабоумие при болезни Крейтцфельда-Якоба, вызванное химическими веществами персистирующее слабоумие, слабоумие при болезни Пика, слабоумие при шизофрении, старческое слабоумие и слабоумие при соматических заболеваниях.

Термин пациент при использовании в настоящем изобретении означает животное. Предпочтительно, если термин пациент означает млекопитающее. Термин млекопитающее включает животных, таких как мыши, крысы, собаки, кролики, свиньи, обезьяны, лошади, голуби, гладкая шпорцевая лягуш- 3 039781 ка, рыбы данио-рерио, морские свинки и люди. Более предпочтительно, если пациентом является человек.

Варианты осуществления

В объем настоящего изобретения входят все соединения, описываемые формулой (I), без какоголибо ограничения, однако предпочтительные объекты и элементы настоящего изобретения рассмотрены в настоящем изобретении в форме следующих вариантов осуществления.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в котором кольцо А имеет вид

в котором W¹, W², W³, R^a, R^b и R^c являются такими, как определено в первом объекте; или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в котором кольцо А представляет собой

R^a·

в котором W¹ и R^a являются такими, как определено в первом объекте; или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в котором кольцо А представляет собой

в котором W² и R^b являются такими, как определено в первом объекте; или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.

в котором W³ и R^c являются такими, как определено в первом объекте; или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в котором R¹ означает фенил или дигидробензофуранил; каждый из которых необязательно замещен одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, -О-(С_1-6)алкил и -(С_1-6)-алкил, или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в котором R¹ означает фенил или дигидробензофуранил; каждый из которых замещен одним или большим количеством R^1a и необязательно замещен одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, -O-(C_1-6)-алкил и -(С_1-6)-алкил, или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли;

в котором R^1a является таким, как определено в первом объекте; или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в котором R¹ означает фенил, который необязательно замещен одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, -O-(C_1-6)-алкил, -(С₁.₆)-алкил, или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в котором R¹ означает дигидробензофуранил, который необязательно замещен одним или большим количеством заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, -О-(С_1-6)-алкил и -(С_1-6)-алкил, или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в котором R¹ означает пиридинил, который необязательно замещен одним или большим количеством за- 4 039781 местителей, выбранных из группы, включающей галоген, -О-(С_1-6)-алкил и -(С_1-6)-алкил, или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в котором R¹ означает фенил, замещенный одним или большим количеством R^1a;

где R^1a является таким, как определено в первом объекте; или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в котором R¹ означает дигидробензофуранил, замещенный одним или большим количеством R^la;

где R^la является таким, как определено в первом объекте; или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли.

В другом варианте осуществления предпочтительное соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, выбрано из группы, включающей

N-(ijhc-1 8,28-2-Гидроксициклогексил)-5-(4-бромбензил)-пирроло[1,2-Ь]пиридазин7-карбоксамид;

^(цис-18,28-2-Гидроксициклогексил)-5-(5-бром-2-фторбензил)-пирроло[1,2-

Ь] пирид аз ин-7-карбоксамид;

^(цис-18,28-2-Гидроксициклогексил)-5-(4-бром-3-фторбензил)-пирроло[1,2-

Ь] пирид аз ин-7-карбоксамид;

N-(цис-1 S,2 S-2-Γ идроксициклогексил)-5 -(2,3 -дигидробензофуран-5 -илметил)пирроло[ 1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамид;

N-(циc-lS,2S-2-Γидpoκcициκлoгeκcил)-5-(2-бpoмπиpидин-5-илмeτил)-πиppoлo[l,2-

Ь] пирид аз ин-7-карбоксамид;

N-(nnc-1 S,2S-2-T идроксициклогексил)-5-(3-метоксибензил)-пирроло[ 1,2-

b] пирид аз ин-7-карбоксамид;

N-(unc-l 8,28-2-Гидроксициклогексил)-5-(2,4-дифторбензил)-пирроло[1,2-

Ь] пирид аз ин-7-карбоксамид;

N-(циc-lS,2S-2-Γидpoκcициκлoгeκcил)-5-(4-φτopбeнзил)-πиppoлo[l,2-b]πиpидaзин7-карбоксамид;

N-(unc-l 8,28-2-Гидроксициклогексил)-5-(2,3-дифторбензил)-пирроло[1,2-

Ь] пирид аз ин-7-карбоксамид;

N-(unc-l 8,28-2-Гидроксициклогексил)-5-(3-фтор-4-метоксибензил)-пирроло[1,2-

Ь] пирид аз ин-7-карбоксамид;

ЬТфцис-18,28-2-Г идроксициклогексил)-5-(2-хлорпиридин-4-илметил)-пирроло[ 1,2-

Ь] пирид аз ин-7-карбоксамид;

N-(unc-l 8,28-2-Гидроксициклогексил)-5-(4-фтор-3-метоксибензил)-пирроло[1,2-

Ь] пирид аз ин-7-карбоксамид;

N-(циc-lS,2S-2-Γидpoκcициκлoгeκcил)-5-(2-φτopбeнзил)-πиppoлo[l,2-b]πиpидaзин7-карбоксамид;

- 5 039781

N-(ijhc- 1 S,2S-2-T идроксициклогексил)-5-(2-фтор-4-метоксибензил)-пирроло[ 1,2b] пир ид азин-7-карбоксамид;

N-(hhc- 1 S,2S-2-T идроксициклогексил)-5-(3,4-дифторбензил)-пирроло[ 1,2b] пирид аз ин-7-карбоксамид;

N-(циc-lS,2S-2-Γидpoκcициκлoгeκcил)-5-(2-xлopπиpидин-5-илмeτил)-πиppoлo[l,2b] пирид аз ин-7-карбоксамид;

N-(Teτpaгидpoπиpaн-4-ил)-5-(2-xлopπиpидин-5-илмeτил)-πиppoлo[l,2-b]πиpидaзин 7-карбоксамид;

N-(ijnc-1 S,2S-2-T идроксициклогексил)-5-(2-фтор-3-метоксибензил)-пирроло[ 1,2b] пирид аз ин-7-карбоксамид;

N-(nnc-l 8,28-2-Гидроксициклогексил)-5-(3-фторбензил)-пирроло[1,2-Ь]пиридазин7-карбоксамид;

N-(ijnc-1 S,2S-2-T идроксициклогексил)-5-(4-метоксибензил)-пирроло[ 1,2b] пирид аз ин-7-карбоксамид;

N-(ijnc-1 S,2S-2-T идроксициклогексил)-5-(4-пиразол-1 -илбензил)-пирроло[1,2b] пирид аз ин-7-карбоксамид;

N-(Teτpaгидpoπиpaн-4-ил)-5-(4-πиpaзoл-l-илбeнзил)-πиppoлo[l,2-b]πиpидaзин-7карбоксамид;

N-(ijnc-1 S,2S-2-T идроксициклогексил)-5-(4-тиазол-4-илбензил)-пирроло[ 1,2-

b] пирид аз ин-7-карбоксамид

N-(nnc-l 8,28-2-Гидроксициклогексил)-5-(2-бром-4-фторбензил)-пирроло[1,2-

Ь] пирид аз ин-7-карбоксамид

N-(nnc-l 8,28-2-Гидроксициклогексил)-5-(2,3-дифтор-4-бромбензил)-пирроло[1,2-

Ь] пирид аз ин-7-карбоксамид

N-(hhc- 1 S,2S-2-T идроксициклогексил)-5-(3-бром-4-фторбензил)-пирроло[ 1,2b] пирид аз ин-7-карбоксамид

N-(nnc-l 8,28-2-Гидроксициклогексил)-5-(3-бромбензил)-пирроло[1,2-Ь]пиридазин7-карбоксамид

N-(ijnc-1 S,2S-2-T идроксициклогексил)-5-(2-хлорпиридин-3-илметил)-пирроло[ 1,2b] пирид аз ин-7-карбоксамид

N-(циc-lS,2S-2-Γидpoκcициκлoгeκcил)-5-(2-бpoмπиpидин-4-илмeτил)-πиppoлo[l,2Ь] пирид аз ин-7-карбоксамид

N-(3-Γидpoκcиτeτpaгидpoπиpaн-4-ил)-5-(3-φτopбeнзил)-πиppoлo[l,2-b]πиpидaзин7-карбоксамид

N-(3-Γидpoκcиτeτpaгидpoπиpaн-4-ил)-5-(4-бpoмбeнзил)-πиppoлo[l,2-b]πиpидaзин7-карбоксамид

N-(цис-1 S,2 S-2-Γ идроксициклогексил)-5 - [4-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-бензил] пирроло[ 1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамид;

N-(цис-1 S,2 S-2-Γ идроксициклогексил)-5 - [3 -фтор-4-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)бензил]-пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамид;

- 6 039781

N-(цис-1 S,2 S-2-Γ идроксициклогексил)-5 - [2-фтор-4-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)бензил]-пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамид;

N-(цис-18,2 S-2-Γ идроксициклогексил)-5 - [6-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-пир идин-3 илметил]-пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамид;

Названия IUPAC соединений примеров 36-40;

N-(цис-1 S,2 S-2-Γ идроксициклогексил)-5 - [2,3 -д ифтор-4-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)бензил]-пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамид

N-(цис-18,2 S-2-Γ идроксициклогексил)-5 - [4-фтор-З -(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)бензил]-пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамид

N-(цис-1 S,2 S-2-Γ идроксициклогексил)-5 - [3 -(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-бензил] пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамид

N-(3 -Г идрокситетрагидропиран-4-ил)-5 - [4-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-бензил] пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамид

N-(цис-1 S,2 S-2-Γ идроксициклогексил)-5 - [2-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-пиридин-4илметил]-пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамид

Х-(цис-18,28-2-Гидроксициклогексил)-3-(4-бромбензил)-8-фториндолизин-1карбоксамид;

Х-(цис-18,28-2-Гидроксициклогексил)-3-бензил-8-фториндолизин-1-карбоксамид;

Х-(цис-18,28-2-Гидроксициклогексил)-3-(2-хлорпиридин-4-илметил)-8фторинд олизин-1 -карбоксамид

Х-(цис-1 S,2S-2-T идроксициклогексил)-3 -(4-метоксибензил)-8-фторинд олизин-1 карбоксамид

Х-(цис-18,28-2-Гидроксициклогексил)-3-(4-тиазол-4-илбензил)-8-фториндолизин1-карбоксамид

Х-(3-Гидрокситетрагидропиран-4-ил)-3-(2-хлорпиридин-4-илметил)-8фтор инд олизин-1 -карбоксамид

Х-(3-Гидрокситетрагидропиран-4-ил)-3-(4-метоксибензил)-8-фториндолизин-1карбоксамид

Х-(цис-18,28-2-Гидроксициклогексил)-5-[4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-бензил]-8фтор инд олизин-1 -карбоксамид;

Х-(цис-18,28-2-Гидроксициклогексил)-3-(4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-бензил)-8фтор инд олизин-1 -карбоксамид

Х-(3-Гидрокситетрагидропиран-4-ил)-3-(4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-бензил)-8фтор инд олизин-1 -карбоксамид;

N-(Т етрагидропиран-4-ил)-3 -(4-(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-бензил)-8фториндолизин-1 -карбоксамид; и

Х-(4-Гидрокситетрагидропиран-3-ил)-3-(4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-бензил)-8фтор инд олизин-1 -карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения соединения формулы (I), описанному в настоящем изобретении.

Экспериментальные методики:

На схеме 1 представлены общие методики получения соединения формулы (I), в котором

Т означает -(С1.₆)-алкил, А¹ означает СН₂;

кольцо A, R¹, R^la, X и Y являются такими, как определено выше.

-7 039781

Схема 1

Стадия 1: Получение соединения формулы 2

Соединение формулы 1 восстанавливают с использованием восстановительных реагентов, таких как борогидрид натрия в растворителе, таком как метанол, этанол, при температуре в диапазоне от 25 до 30°С в течение от 1 до 2 ч и получают соединение формулы 2.

Стадия 2: Получение соединения формулы 3

Соединение формулы 2 восстанавливают с использованием восстановительных реагентов, таких как триэтилсилан, в присутствии трифторуксусной кислоты при температуре в диапазоне от -5 до 5°С в течение от 1 до 2 ч и получают соединение формулы 3.

Стадия 3: Получение соединения формулы 4

Соединение формулы 3 гидролизуют в соединение формулы 4 в смеси растворителей, таких как вода и метанол, с использованием гидроксида натрия при кипячении с обратным холодильником в течение от 2 до 4 ч.

Стадия 4: Получение соединения формулы (I)

Соединение формулы 4 вводят в реакцию сочетания с амином, соединением формулы 10 х^

ЛД HCl

R² в присутствии реагента сочетания, HATU, DCC или EDC и основания, DIPEA в растворителе, выбранном из группы, включающей DMF, THF, дихлорметан или 1,4-диоксан, при КТ в течение ночи и получают соединение формулы (I) (в которой R1 означает (С_6-10)-арил).

Стадия 5: Получение соединения формулы (I) (в которой R¹ замещен с помощью R^1a)

Соединение формулы (I), полученное на стадии 4, вводят в реакцию с R^1a-B(OH)2 в присутствии комплекса 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладий(II)дихлорида с дихлорметаном в растворителе, таком как 1,4-диоксан, и основания - карбоната калия при температуре в диапазоне от 90°С до 110°С в течение от 2 до 4 ч и получают соединение формулы (I) (в которой R¹ замещен с помощью R^1a).

Стадия 6: Получение соединения формулы 3 (в которой R¹ замещен с помощью R^1a)

Соединение формулы 3, полученное на стадии 2, вводят в реакцию с R^1a-B(OH)2 в присутствии комплекса 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладий(II)дихлорида с дихлорметаном в растворителе, таком как 1,4-диоксан, и основания - карбоната калия при температуре в диапазоне от 90 до 110°С в течение от 2 до 4 ч и получают соединение формулы 3 (в которой R¹ замещен с помощью R^1a).

Стадия 7: Получение соединения формулы 4

Соединение формулы 3, полученное на указанной выше стадии 6, гидролизуют в соединение фор- 8 039781 мулы 4 в смеси растворителей, таких как вода и метанол, с использованием гидроксида натрия при кипячении с обратным холодильником в течение от 2 до 4 ч.

Стадия 8: Получение соединения формулы (I)

Соединение формулы 4, полученное на стадии 7, вводят в реакцию сочетания с амином, соединением формулы 10

в присутствии реагента сочетания, HATU, DCC или EDC и основания, DIPEA в растворителе, выбранном из группы, включающей DMF, THF, дихлорметан или 1,4-диоксан, при КТ в течение ночи и получают соединение формулы (I) (в которой R1 означает (С_6-10)-арил).

Получение фармацевтически приемлемой соли соединения формулы (I)

Соединение формулы (I) необязательно можно превратить в его фармацевтически приемлемую соль по реакции с подходящей кислотой или производным кислоты. Подходящие фармацевтически приемлемые соли очевидны для специалиста в данной области техники. Соли получают с неорганическими кислотами, например хлористоводородной, бромистоводородной, серной, азотной и фосфорной кислотой, или органическими кислотами, например щавелевой, янтарной, малеиновой, уксусной, фумаровой, лимонной, яблочной, винной, бензойной, п-толуиловой, п-толуолсульфоновой, бензолсульфоновой кислотой, метансульфоновой или нафталинсульфоновой кислотой.

На схеме 2 представлены альтернативные общие методики получения соединения формулы (I), в которой: Т означает -(С_1-6)-алкил, А¹ означает СН₂; W², кольцо A, R¹, R1^a, R², X и Y являются такими, как определено выше.

Схема 2

Стадия 1: Получение соединения формулы 6

Соединение формулы 6 получают по реакции соединения формулы 5 с соединением формулы А (в которой R¹ является таким, как определено выше)

в растворителе, выбранном из группы, включающей этилацетат, при температуре в диапазоне от 25 до 30°С в течение от 14 до 18 ч.

Стадия 2: Получение соединения формулы 1

Соединение формулы 6 вводят в реакцию с соединением формулы 7 в присутствии основания, выбранного из группы, включающей карбонат калия, в растворителе, выбранном из группы, включающей THF, DCM и этилацетат, при температуре в диапазоне от 25 до 30°С в течение от 14 до 18 ч и получают соединение формулы 1.

Стадия 3: Получение соединения формулы 9

Соединение формулы 1 гидролизуют в соединение формулы 9 в смеси растворителей, таких как вода и метанол, с использованием гидроксида натрия при кипячении с обратным холодильником в течение

- 9 039781 от 2 до 4 ч.

Стадия 4: Получение соединения формулы 11

Соединение формулы 9, полученное на стадии 3, вводят в реакцию сочетания с амином, предпочтительное соединение формулы 10

в присутствии реагента сочетания, HATU, DCC или EDC и основания, DIPEA в растворителе, выбранном из группы, включающей DMF, THF, дихлорметан или 1,4-диоксан, при КТ в течение ночи и получают соединение формулы 11.

Стадия 5: Получение соединения формулы 12

Соединение формулы 11 восстанавливают с использованием восстановительных реагентов, таких как борогидрид натрия, в растворителе, таком как метанол, этанол, при температуре в диапазоне от 25 до 30°С в течение от 1 до 2 ч и получают соединение формулы 12.

Стадия 6: Получение соединения формулы (I) (в которой А¹ означает СН₂)

Соединение формулы 12 восстанавливают с использованием восстановительных реагентов, таких как триэтилсилан, в присутствии трифторуксусной кислоты при температуре в диапазоне от -5 до 5°С в течение от 1 до 2 ч и получают соединение формулы (I) (в которой А¹ означает СН₂).

Стадия 7: Получение соединения формулы (I) (в которой R¹ замещен с помощью R^1a)

Соединение формулы (I), полученное на стадии 6, вводят в реакцию с R^1a-B(OH)2 в присутствии комплекса 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладий(П)дихлорида с дихлорметаном в растворителе, таком как 1,4-диоксан и основания - карбоната калия при температуре в диапазоне от 90 до 110°С в течение от 2 до 4 ч и получают соединение формулы (I), в которой R¹ замещен с помощью R^la.

Соединение формулы (I) необязательно можно превратить в его фармацевтически приемлемую соль по реакции с подходящей кислотой или производным кислоты.

Подходящие фармацевтически приемлемые соли очевидны для специалиста в данной области техники. Соли получают с неорганическими кислотами, например хлористоводородной, бромистоводородной, серной, азотной и фосфорной кислотой, или органическими кислотами, например щавелевой, янтарной, малеиновой, уксусной, фумаровой, лимонной, яблочной, винной, бензойной, п-толуиловой, птолуолсульфоновой, бензолсульфоновой кислотой, метансульфоновой или нафталинсульфоновой кислотой.

Получение стереоизомеров соединения формулы (I)

Стереоизомеры соединений формулы (I) можно получить по одному или большему количеству обычных методик, приведенных ниже:

a) Один или большее количество реагентов можно использовать в их оптически активной форме.

b) Оптически чистый катализатор или хиральные лиганды вместе с катализатором из металла можно использовать в реакции восстановления. Катализатором из металла может быть родий, рутений, индий и т.п. Хиральными лигандами предпочтительно могут быть хиральные фосфины.

c) Смесь стереоизомеров можно разделить по обычным методикам, таким как получение солей диастереоизомеров с хиральными кислотами или хиральными аминами или хиральными аминоспиртами, или хиральными аминокислотами. Полученную смесь диастереоизомеров затем можно разделить по таким методикам, как фракционная кристаллизация, хроматография и т.п., с последующей дополнительной стадией выделения оптически активного продукта из разделенного материала/соли.

d) Смесь стереоизомеров можно разделить по обычным методикам, таким как микробиологическое разделение, разделение солей диастереоизомеров, образованных с хиральными кислотами или хиральными основаниями. Хиральными кислотами, которые можно использовать, могут быть винная кислота, миндальная кислота, молочная кислота, камфорсульфоновая кислота, аминокислоты и т.п. Хиральными основаниями, которые можно использовать, могут быть алкалоиды хинного дерева, бруцин или основная аминокислота, такая как лизин, аргинин и т. п.

В другом варианте осуществления подходящая фармацевтически приемлемая соль включает гидрохлорид, гидробромид, оксалат, фумарат, тартрат, малеат и сукцинат.

В другом объекте настоящего изобретения соединения формулы (I) являются позитивными аллостерическими модуляторами мускаринового рецептора M1.

Другим объектом настоящего изобретения является способ лечения заболевания или нарушения, выбранного из группы, включающей нарушение познавательной способности, шизофрению, боль или нарушение сна, включающий введение нуждающемуся в нем пациенту терапевтически эффективного количества соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемой соли.

- 10 039781

Другим объектом настоящего изобретения является способ лечения болезни Альцгеймера включающий введение нуждающемуся в нем пациенту терапевтически эффективного количества соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемой соли.

Другим объектом настоящего изобретения является способ лечения болезни Альцгеймера, включая легкую болезнь Альцгеймера, умеренную болезнь Альцгеймера, тяжелую болезнь Альцгеймера, умеренной болезнь Альцгеймера от мягкой до умеренной или болезнь Альцгеймера от умеренной до тяжелой, включающий введение нуждающемуся в нем пациенту терапевтически эффективного количества соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемой соли.

Еще одним объектом настоящего изобретения является соединение формулы (I) для применения для лечения заболевания или нарушения, выбранного из группы, включающей нарушение познавательной способности, шизофрению, боль или нарушение сна.

Еще одним объектом настоящего изобретения является применение соединения формулы (I) для приготовления лекарственного средства для лечения заболеваний или нарушений, выбранных из группы, включающей нарушение познавательной способности, шизофрению, боль или нарушение сна.

Еще одним объектом настоящего изобретения является применение соединения формулы (I) для приготовления лекарственного средства для лечения заболеваний или нарушений, выбранных из группы, включающей нарушение познавательной способности.

Еще одним объектом настоящего изобретения является применение соединения формулы (I) для приготовления лекарственного средства для лечения болезни Альцгеймера.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) с одним или большим количеством других терапевтических средств - ингибиторов ацетилхолинэстеразы и антагониста рецептора NMDA.

В другом варианте осуществления соединение формулы (I), предлагаемое в настоящем изобретении, можно использовать в комбинации с одним или большим количеством других терапевтических средств для лечения заболеваний или нарушений, для которых применимо соединение формулы (I), предлагаемое в настоящем изобретении. Примеры комбинаций соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, включают комбинацию с терапевтическими средствами для лечения болезни Альцгеймера, например с ингибиторами ацетилхолинэстеразы, такими как галантамин, ривастигмин, донепезил и такрин; и с антагонистом рецептора NMDA, таким как мемантин.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) по меньшей мере с одним терапевтическим средством, выбранным из группы, включающей галантамин, ривастигмин, донепезил, такрин и мемантин.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) с одним или большим количеством других терапевтических средств - ингибиторов ацетилхолинэстеразы и антагониста рецептора NMDA для применения для лечения нарушения познавательной способности, шизофрении, боли и нарушения сна.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) с одним или большим количеством других терапевтических средств - ингибиторов ацетилхолинэстеразы и антагониста рецептора NMDA для применения для лечения болезни Альцгеймера.

Еще одним объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция соединения формулы (I). Для применения соединения формулы (I) или его стереоизомеров и фармацевтически приемлемых солей в терапии их обычно готовят в виде фармацевтической композиции в соответствии со стандартной фармацевтической практикой.

Фармацевтические композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, можно приготовить обычным образом с использованием одного или большего количества фармацевтически приемлемых эксципиентов. Фармацевтически приемлемыми эксципиентами являются разбавители, разрыхлители, связующие, смазывающие вещества, агенты, придающие скользкость, полимеры, агенты для нанесения покрытия, растворители, сорастворители, консерванты, смачивающие агенты, загущающие агенты, противовспенивающие агенты, подсластители, вкусовые вещества, антиоксиданты, окрашивающие агенты, солюбилизаторы, пластификатор, диспергирующие агенты и т.п. Эксципиенты выбраны из группы, включающей микрокристаллическую целлюлозу, маннит, лактозу, предварительно желатинизированный крахмал, натриевую соль гликолята крахмала, кукурузный крахмал или его производные, повидон, кросповидон, стеарат кальция, глицерилмоностеарат, глицерилпальмитостеарат, тальк, коллоидный диоксид кремния, стеарат магния, лаурилсульфат натрия, стеарилфумарат натрия, стеарат цинка, стеариновую кислоту или гидрированное растительное масло, гуммиарабик, оксид магния, глюкозу, жиры, воска, натуральные или гидрированные масла, воду, физиологический раствор хлорида натрия или спирты, например, этанол, пропанол или глицерин, растворы сахара, такие как растворы глюкозы или растворы маннита и т.п. или смесь различных эксципиентов.

В еще одном объекте активные соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно приготовить в виде пилюль, таблеток, таблеток с покрытием, капсул, порошка, гранул, пеллет, пластырей, имплантатов, пленок, жидкостей, полужидких веществ, гелей, аэрозолей, эмульсий, эликсиров и т.п. Такие фармацевтические композиции и методики их приготовления хорошо известны в данной области техни

- 11 039781 ки.

В еще одном объекте фармацевтическая композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, содержит от 1 до 90%, от 5 до 75% и от 10 до 60 мас.% соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, их фармацевтически приемлемой соли. Количество активных соединений или их фармацевтически приемлемой соли в фармацевтической композиции (композициях) может находиться в диапазоне от примерно 1 до примерно 500 мг или от примерно 5 до примерно 400 мг или от примерно 5 до примерно 250 мг или от примерно 7 до примерно 150 мг или в любом диапазоне, входящем в более широкий диапазон, составляющий от 1 до 500 мг.

Доза активных соединений может меняться в зависимости от таких факторов, как возраст и масса тела пациента, характер и тяжесть подвергающегося лечению заболевания и других таких факторов. Поэтому любое указание на фармакологически эффективное количество соединений общей формулы (I), их стереоизомеров и фармацевтически приемлемых солей относится к указанным выше факторам.

В настоящем изобретении используются следующие аббревиатуры:

АМР	Аденозинмонофосфат
AUC	Площадь под кривой
Стах	Максимальная концентрация
CDC1₃	Дейтерированный хлороформ
DCM	Дихлорметан
DCC	N, N'-Дициклогексилкарбодиимид
DIPEA	N, N-Диизопропилэтиламин
DMF	N, N-Диметилформамид
DMSO	Диметил су л ьф оксид
ес₅₀	Полумаксимальная эффективная концентрация
EDC	Этилендихлорид
EtOAc	Этилацетат
HATU	2-(7-Аза- 1Н-бензотриазол-1 -ил)-1,1,3,3-
	тетраметилуронийгексафторфосфат
HCl	Хлористоводородная кислота
H₂O	Вода
4	час(ы)
H₂SO₄	Серная кислота
K₂co₃	Карбонат калия
LC-MS/MS	Жидкостная хроматография-масс-спектрометрия/масс-спектрометрня
NaBH₄	Борогидрид натрия
NaHCO₃	Бикарбонат натрия
NaOH	Гидроксид натрия
Na₂SO₄	Сульфат натрия
NH₄C1	Хлорид аммония
RT	Комнатная температура (25-30°С)
ROA	Путь введения
HO	Перорально
T	Температура

THF Тетрагидрофуран

Т_1/2 Период полувыведения

Примеры

Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, получали по следующим экспериментальным методикам с использованием подходящих материалов и условий. Представленные ниже примеры приведены только для иллюстрации, а не для ограничения объема настоящего изобретения.

Получение промежуточных продуктов:

Промежуточный продукт 1: 1-(4-Бромфенил)-проп-2-ин-1-он (I-1)

- 12 039781

Стадия 1: Синтез 1-(4-бромфенил)-проп-2-ин-1-ола

При перемешивании к раствору 4-бромбензальдегида (3,0 г, 16,2 ммоль) в сухом THF (32,4 мл), охлажденному до 0°С, раствор этинилмагнийбромида (0,5М, 34,0 мл) по каплям добавляли в течение 10 мин. Через 1 ч при 0°С реакцию останавливали путем добавления насыщенного водного раствора NH₄Cl. Эти два слоя разделяли и водный слой экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенный органический слой один раз промывали рассолом, сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение.

Выход: 3,7 г;

1H-NMR (400 МГц, CDCl₃): δ 7,51 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 7,42 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 5,41 (с, 1H), 2,66 (с, 1H), 2,24 (уш.с, 1Н); Масса (m/z): 211, 213 (М+Н)+.

Стадия 2: Синтез 1-(4-бромфенил)-проп-2-ин-1-она

При перемешивании к раствору 1-(4-бромфенил)-проп-2-ин-1-ола (3,6 г, 17,3 ммоль) в ацетоне (10,0 мл), охлажденному до 0°С, по каплям добавляли раствор триоксида хрома (1,15 г, 11,5 ммоля) в смеси Н₂О (3,5 мл) и H₂SO₄ (1,0 мл). После перемешивания в течение 2 ч при КТ реакционную смесь переносили в делительную воронку, содержащую воду и хлороформ. Эти два слоя разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl₃. Объединенный органический слой один раз промывали рассолом, сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение.

Выход: 3,1 г (86%);

1H-NMR (400 МГц, CDCl₃): δ 8,01 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 7,66 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 3,44 (с, 1Н);

Масса (m/z): 209, 211 (М+Н)⁺.

По двустадийной методике, указанной выше, разные замещенные арилэтинилкетоны синтезировали и использовали в последующих реакциях и получали соответствующие конечные M1 РАМ соединения.

Промежуточный продукт 2: 1-Этоксикарбонилметилпиридазин-1-ий-бромид (I-2)

При перемешивании к раствору пиридазина (1,0 г, 12,5 ммоль) в EtOAc (25,0 мл), охлажденному до 0°С, по каплям добавляли этилбромацетат (1,54 мл, 13,8 ммоль). После перемешивания в течение 16 ч при КТ летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Полученное твердое вещество растирали с растворителем эфиром, сушили в вакууме и получали искомое соединение.

Выход: 2,6 г (86%);

1H-NMR (400 МГц, DMSO-d₆): δ 10,04 (д, 5,7 Гц, 1H), 9,73 (д, J=4,4 Гц, 1H), 8,89 (дд, J=5,7, 7,8 Гц, 1H), 8,76 (дд, J=5,0, 7,8 Гц, 1H), 5,97 (с, 2Н), 4,28(кв, 2Н), 1,25 (т, J=7,1 Гц, 3Н);

Масса (m/z): 167,1 (М+Н)⁺.

Пример 1. N-(цис-1S,2S-2-Гидроксициклогексил)-5-(4-бромбензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид

Стадия 1: Синтез этил-5-(4-бромбензоил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксилата

При перемешивании к раствору 1-(4-бромфенил)-проп-2-ин-1-она (I-1) (3,1 г, 15,0 ммоль) в сухом THF (60,0 мл), охлажденному до 0°С, добавляли K₂CO₃ (3,53 г, 25,6 ммоль), затем 1этоксикарбонилметилпиридазин-1-ийбромид (I-2) (3,71 г, 15,1 ммоль). После перемешивания в течение 16 ч при КТ реакционную смесь разбавляли водой и EtOAc. Эти два слоя разделяли и водный слой экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенный органический слой один раз промывали рассолом, сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали неочищенный продукт, который очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле и получали искомое соединение.

Выход: 3,4 г (60%);

1H-NMR (400 МГц, CDCl₃): δ 8,87 (д, 9,0 Гц, 1H), 8,61 (д, J=4,4 Гц, 1H), 7,78 (с, 1H), 7,75 (д, J=8,3

- 13 039781

Гц, 2Н), 7,69 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 7,22 (дд, J=4,4, 9,0 Гц, 1H), 4,46 (кв, 2Н), 1,43 (т, J=7,1 Гц, 3Н); Масса (m/z): 373,0, 375,0 (М+Н)+.

Стадия 2: Синтез этил-5-[(4-бромфенил)гидроксиметил]пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксилата

При перемешивании к раствору этил-5-(4-бромбензоил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксилата, полученного на указанной выше стадии (3,4 г, 9,1 ммоль), в этаноле (45,0 мл), при 0°С добавляли NaBH4 (1,04 г, 27,5 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при КТ реакционную смесь разбавляли водой и CHCl₃. Эти два слоя разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl₃. Объединенный органический слой промывали рассолом, сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение.

Выход: 3,4 г (100%);

1H-NMR(400 МГц, CDCl₃): δ 8,37 (д, J=4,4 Гц, 1H), 7,92 (д, J=9,1 Гц, 1H), 7,52 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 7,35 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 7,31 (с, 1H), 6,79 (дд, J=4,4, 9,0 Гц, 1H), 6,12 (д, J=3,0 Гц, 1H), 4,42 (кв, 2Н), 2,29 (д, J=3,0 Гц, 1H), 1,4 (т, J=7,1 Гц, 3Н);

Масса (m/z): 374,9, 376,9 (М+Н)+.

Стадия 3: Синтез этил-5-(4-бромбензил)-пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксилата

При перемешивании к раствору этил-5-[(4-бромфенил)гидроксиметил]пирроло[1,2-b]пиридазин-7карбоксилата, полученного на указанной выше стадии (3,4 г, 9,1 ммоля), в трифторуксусной кислоте (7,1 мл), при -10°С добавляли триэтилсилан (3,2 мл, 20,3 ммоля). После перемешивания в течение 1 ч при 0°С реакционную смесь разбавляли 10% водным раствором NaHCO₃ и EtOAc. Эти два слоя разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl₃. Объединенный органический слой промывали рассолом, сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали неочищенный продукт, который очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле и получали искомое соединение.

Выход: 1,96 г (59%);

1H-NMR (400 МГц, CDCl₃): δ 8,34 (д, J=4,4 Гц, 1H), 7,69 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,42 (д, J=8,1 Гц, 2Н), 7,34 (с, 1H), 7,08 (д, J=8,1 Гц, 2Н), 6,74 (дд, J=4,4 Гц, 9,0 Гц, 1H), 4,43 (кв, 2Н), 4,05 (с, 2Н), 1,41 (т, 3Н); Масса (m/z): 358,8, 360,8 (М+Н)⁺.

Стадия 4: Синтез 5-(4-бромбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоновой кислоты

При перемешивании к раствору этил-5-(4-бромбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксилата, полученного на указанной выше стадии (0,029 г, 0,08 ммоля), в 2:1 смеси Н₂О и этанола (1,0 мл) при 0°С добавляли NaOH (0,0065 г, 0,16 ммоля). После перемешивания в течение 2 ч при кипячении с обратным холодильником, реакционную смесь охлаждали до RT, подкисляли с помощью 2 н. HCl и экстрагировали с помощью DCM. Объединенный органический слой промывали рассолом, сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение.

Выход: 0,034 г (100%);

1H-NMR (400 МГц, CDCI3): δ 12,0 (уш.с, 1H), 8,26 (д, J=4,4 Гц, 1H), 7,81 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,42 (д, J=8,1 Гц, 2Н), 7,08 (д, J=8,1 Гц, 2Н), 6,83 (дд, J=4,4 Гц, 9,0 Гц, 1H), 4,08 (с, 2Н); Масса (m/z): 331,2, 333,3 (М+Н)+.

Стадия 5: Синтез N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(4-бромбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин7-карбоксамида

При перемешивании к раствору 5-(4-бромбензил)-пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоновой кислоты, полученной на указанной выше стадии (34 мг, 0,1 ммоль), в DCM (1,1 мл), при 0°С последовательно добавляли DIPEA (0,05 мл, 0,3 ммоль), 1-аминоциклогексанолгидрохлорид (15,6 мг, 0,1 ммоль) и TBTU (36,0 мг, 0,11 ммоль). После перемешивания в течение 16 ч при КТ реакционную смесь разбавляли водой и DCM. Эти два слоя разделяли и водный слой экстрагировали с помощью DCM. Объединенный органический слой промывали рассолом, сушили над безводным Na2SO4 и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали неочищенный продукт, который очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле и получали искомое соединение.

Выход: 37,0 мг (86%);

1H-NMR (400 МГц, CDCl·,): δ 9,01 (д, J=6,3 Гц, 1H), 8,18 (д, J=4,1 Гц, 1H), 7,24 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,39 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 7,07 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 6,7 (дд, 4,1, 8,9 Гц, 1H), 4,11 (д, J=3,l Гц, 1H), 4,06 (с, 2Н), 3,94-3,90 (м, 1H), 3,53-3,48 (м, 1H), 2,14-2,10 (м, 2Н), 1,78-168 (м, 2Н), 1,48-1,35 (м, 4Н);

Масса (m/z): 428,2, 430,4 (М+Н)+.

Указанные ниже соединения примеров 2-31 получали по экспериментальной методике, описанной в примере 1, с небольшими некритическими изменениями с использованием замещенных арилэтинилкетонов и промежуточного продукта I-2.

- 14 039781

Пример №	Химическая структура	Характеристики по данным анализов
Пример 2	он θΛ > аЭ Br N-(4hc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(5бром-2-фторбензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,02 (д, J=6,3 Гц, 1Н) 8,20 (д, J=3,4 Гц, 1Н), 7,88 (д, >8,9Гц, 1Н), 7,54 (с, 1Н), 7,31-7,23 (т 2Н), 6,94 (т, J=9,0 Гц, 1Н), 6,76 (дд, 9,0 Гц, 4,4 Гц, 1Н), 4,07 (с, 2Н), 3,96-3,88 (м, 1Н), 3,54-3,48 (м, 1Н), 2,13-2,07 (м, 2Н), 1,78-1,75 (м, 2Н), 1,51-1,30 (м, 4Н); Масса (m/z): 446,1, 448 (М+Н)⁺.
Пример 3	он . Α’Ά O-Υ N-(4hc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(4-	Ή-NMR (400МГц, CDCI3): δ 8,99 (д, J=6,3 Гц, 1Н), 8,18 (д, J=4,2 Гц, 1Н), 7,73 (д, J=9,3 Гц, 1Н), 7,5 (с, 1Н), 7,43 (т, J=7,7 Гц, 1Н), 6,9 (д, J=9,4 Гц, 1Н), 6,86 (д, J=8,3 Гц, 1Н), 6,71 (дд, J=8,7 Гц, 4,4 Гц, 1Н), 4,04 (д, 2Н), 3,95-3,87 (м, 1Н) 3,533,46 (м, 1Н), 2,12-2,06 (м, 2Н), 1,71-1,74 (м, 2Н), 1,46-1,23 (м, 4Н); Масса (m/z): 446,0, 448,1 (М+Н)⁺.

- 15 039781

	бром-3 -фторбензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид
Пример 4	он % и Г фЪЗ кХ N-(hhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5 -(2,3 дигидробензофуран-5 илметил)-пирроло[ 1,2- Ь] пирид азин-7-карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,04 (д, J=6,3 Гц, 1Н) 8,16 (д, J=3,2 Гц, 1Н), 7,79 (д, J=9,2 Гц, 1Н), 7,54 (с, 1Н), 7,0 (с, 1Н), 6,96 (д, J=8,2 Гц, 1Н) 6,69-6,65 (м, 2Н), 4,55 (т, J=8,6Hz, 2Н), 4,21 (д, J=3,3 Гц, 1Н), 4,03 (с, 2Н), 3,95-3,89 (м, 1Н) 3,54-3,48 (м, 1Н), 3,16 (т, J=8,6 Гц, 2Н), 2,14-2,07 (м, 2Н), 1,79-1,76 (м, 2Н), 1,551,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 392,0 (М+Н)⁺.
Пример 5	он Ч н г СсХ -Br N-(uhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(2бромпиридин-5-илметил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDCI3): δ 8,99 (д, J=6,2 Гц, 1Н), 8,28 (с, 1Н), 8,21 (д, J=3,4 Гц, 1Н), 7,76 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 7,52 (с, 1Н), 7,38 (д, J=8,l Гц, 1Н), 7,35 (д, J=8,l Гц, 1Н), 6,75 (дд, J=9,0 Гц, 4,4 Гц, 1Н), 4,08 (с,2Н), 4,03 (д, J=3,4 Гц, 1Н), 3,973,89 (м, 1Н), 3,53-3,48 (м, 1Н), 2,13-2,08 (м, 2Н), 1,79-1,76 (м, 2Н), 1,51-1,27 (м, 4Н); Масса (m/z): 429, 431,1 (М+Н)⁺.
Пример 6	он % н Г г/ ό V/	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,03 (д, J=6,3 Гц, 1Н), 8,17 (д, J=4,2 Гц, 1Н), 7,78 (д, J=9,2 Гц, 1Н), 7,56 (с, 1Н), 7,21 (т, J=7,6 Гц, 1Н), 6,8 (д, J=7,5 Гц, 1Н), 6,756,72 (м, 2Н), 6,68 (дд, J=9,0Hz, 4,4 Гц, 1Н), 4,2 (д, J=3,5 Гц, 1Н), 4,09 (с, 2Н), 3,95-3,9 (м, 1Н), 3,75 (с, ЗН), 3,54-3,49 (м,

- 16 039781

	N-(uhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5 -(3 метоксибензил)-пирроло[1,2Ь] пирид азин-7-карбоксамид	1Н), 2,14-2,07 (м, 2Н), 1,79-1,76 (м, 2Н), 1,45-1,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 380,1 (М+Н)⁺.
Пример 7	ОН % и F _су0 N-(uhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(2,4дифторбензил)-пирроло[ 1,2Ь] пирид азин-7-карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,01 (д, J=4,7 Гц, 1Н), 8,19 (т, J=l,2 Гц, 1Н), 7,88 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 7,14-4,08 (м, 1Н), 6,81-6,71 (м, ЗН), 4,14 (д, J=2,8 Гц, 1Н), 4,07 (с, 2Н), 3,96-3,88 (м, 1Н), 3,53-3,47 (м, 1Н), 2,13-2,06 (м, 2Н), 1,781,75 (м, 2Н), 1,51-1,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 386,1 (М+Н)⁺.
Пример 8	он % и F νΧ N-(uhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(4фторбензил)-пирроло[ 1,2b] пирид азин-7-карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDCh): δ 9,02 (6,3 Гц, 1Н), 8,18 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,76 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 7,16-7,12 (м, 2Н), 6,97 (т, J=8,6 Гц, 2Н), 6,7 (дд, J=4,4, 9,0 Гц, 1Н), 4,14 (с, 1Н), 4,08 (с, 2Н), 3,963,89 (м, 1Н), 3,53-3,49 (м, 1Н), 2,14-2,07 (м, 2Н), 1,79-1,76 (м, 2Н), 1,48-1,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 368,3 (М+Н)⁺.
Пример 9	ОН % « F qV0 F	Ή-NMR (400 МГц, CDCI3): δ 9,01 (д, J=6,3 Гц, 1Н), 8,19 (д, J=4,4 Гц, 1Н), (7,91 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 7,5 (с, 1Н), 7,03-6,9 (м, ЗН), 6,9 (дд, J=4,4, 9,0 Гц, 1Н), 4,13 (с, ЗН), 3,96-3,88 (м, 1Н), 3,52-3,5 (м, 1Н), 2,13-2,06 (м, 2Н), 1,78-1,75 (м, 2Н),1,501,27 (м, 4Н); Масса (m/z): 386,1 (М+Н)⁺.

- 17 039781

	N-(hhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5 -(2,3 дифторбензил)-пирроло[ 1,2Ь] пирид азин-7-карбоксамид
Пример 10	ин % Г	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,0 (д, J=6,08 Гц, 1Н), 8,16 (д, J=3,l Гц, 1Н), 7,74 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 7,51 (с, 1Н), 6,88-6,81 (м, ЗН), 6,68 (дд, J=4,4 Гц, 8,9 Гц, 1Н), 4,02 (с, 2Н), 3,94-3,89 (м, 1Н), 3,83 (с, ЗН), 3,52-3,46 (м, 1Н), 2,15-2,05 (м, 2Н), 1,761,74 (м, 2Н), 1,49-1,23 (м,4Н); Масса (m/z): 398,1 (М+Н)⁺.
N-(uhc-1S,2S-2-
Г идроксициклогексил)-5 -(3 -
фтор-4-метоксибензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид
Пример И	он И 1	Ή-NMR (400 МГц, CDCh): δ 9,0 (д, J=6,4
		Гц, 1Н), 8,27-8,23 (м, 2Н), 7,76 (д, J=9,2
	1	Гц, 1Н), 7,56 (с, 1Н), 7,13 (с, 1Н), 7,05 (д, J=4,9 Гц, 1Н), 6,7(д, J=9,0 Гц, 1Н), 4,11 (с, 2Н), 3,98-3,93 (м, 2Н), 3,52 (уш.с, 1Н),
		2,15-2,1 (м, 2Н), 1,8-1,77 (м, 2Н), 1,49- 1,32 (м, 4Н); Масса (m/z): 385,1 (М+Н)⁺.
	C1
	N-(hhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(2хлорпиридин-4-илметил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид

- 18 039781

Пример 12	oil % н Г _ГгГ0 N-(hhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(4фтор-3 -метоксибензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,03 (д, J=6,3 Гц, 1Н), 8,19 (д, J=4,l Гц, 1Н), 7,52 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 6,99-6,94 (м, 1Н), 6,78 (д, J=8,04 Гц, 1Н), 6,73-6,67 (м, 2Н), 4,13 (д, J=3,6 Гц, 1Н), 4,07 (с, 2Н), 3,96-3,89 (м, 1Н) 3,81 (с, ЗН), 3,55-3,48 (м, 1Н), 2,14-2,08 (м, 2Н), 1,79-1,76 (м, 2Н), 1,49-1,28 (м, 4Н); Масса (m/z): 398,1 (М+Н)⁺.
Пример 13	он % Н F _су~0 Έ N-(hhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(2фторбензил)-пирроло[ 1,2Ь]пиридазин-7-карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDCh): δ 9,01 (с, 1Н), 8,16 (с, 1Н), 7,90 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 7,16 (м, 2Н), 7,03-7,0 (м, 2Н), 6,72 (дд, J=7,3 Гц, 2,8 Гц, 1Н), 4,17 (с, 1Н), 4,11 (с, 2Н), 3,91-3,90 (м, 1Н), 3,50 (м, 1Н), 2,13-2,06 (м, 2Н), 1,78-1,75 (м, 2Н), 1,50-1,27 (м, 4Н); Масса (m/z): 368,2 (М+Н)⁺
Пример 14	он τ N-(4hc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(2фтор-4-метоксибензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-	Ή-NMR (400 МГц, CDCI3): δ 9,02 (д, J=6,08 Гц, 1Н), 8,17 (д, J=4,24 Гц, 1Н), 7,88 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 7,07 (т, J=8,4 Гц, 1Н), 6,71 (дд, J=9,0 Гц, 4,4Hz, 1Н), 6,4 (д, J=9,5 Гц, 2Н), 4,38 (с, 1Н), 4,03 (с, 2Н), 3,98-3,87 (м, 1Н), 3,76 (с, ЗН), 3,52-3,50 (м, 1Н), 2,13-2,06 (м, 2Н), 1,781,75 (м, 2Н), 1,50-1,26 (м, 4Н); Масса (m/z): 398,1 (М+Н)⁺.

- 19 039781

	карбоксамид.
Пример 15	он к N-(uhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5 -(3,4дифторбензил)-пирроло[ 1,2Ь] пирид азин-7-карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,01 (д, J=5,l Гц, 1Н), 8,20 (д, J=3,7 Гц, 1Н), 7,75 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 7,14-7,04 (м, 1Н), 7,02-6,91 (м, 2Н), 6,72 (дд, J=9,0 Гц, 4,4 Гц, 1Н), 4,13-4,07 (м, ЗН), 3,943,89 (м, 1Н), 3,54-3,49 (м, 1Н), 2,36-2,28 (м, 2Н), 1,79-1,76 (м, 2Н), 1,51-1,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 386,1 (М+Н)⁺.
Пример 16	% ^н ^-N N-(hhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(2хлорпиридин-5-илметил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDCh): δ 9,0 (д, J=6,4 Гц, 1Н), 8,29 (д, J=l,8 Гц, 1Н), 8,22 (д, J=4,l Гц, 1Н), 7,77 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 7,43 (д, J=8,1 Гц 1Н), 7,23 (д, J=8,1 Гц, 1Н), 6,75 (дд, J=9,l Гц, 4,5 Гц, 1Н), 4,10 (с, 2Н), 4,03 (уш.с, 1Н), 3,97-3,89 (м, 1Н), 3,54-3,51 (м, 1Н), 2,14-2,08 (м, 2Н), 1,79-1,76 (м, 2Н), 1,51-1,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 385,0, 387,0 (М+Н)⁺.
Пример 17	и \ \ / —⁰ М-(Тетрагидропиран-4-ил)-5-(2хлорпиридин-5-илметил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDCI3): δ 8,91 (д, J=8,0 Гц, 1Н), 8,29 (д, J=1,92 Гц, 1Н), 8,21 (д, J=3,2 Гц, 1Н), 7,76 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 7,52 (с, 1Н), 7,44 (д, J=8,1 Гц, 1Н), 7,22 (д, J=8,2 Гц, 1Н), 6,73 (дд, J=9,0, 4,4Hz, 1Н), 4,33-4,29 (м, IH), 4,09 (с, 2Η), 4,02-3,97 (м, 2Η), 3,61-3,55 (м, 2Η), 2,06-2,03 (μ, 2Η), 1,71-1,65 (м, 2Н); Масса (m/z): 371,1, 373,1 (Μ+Η)⁺.

- 20 039781

Пример 18	Чх и ОН _______N* Г Г \ Л? f^z \ О N-(4hc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(2фтор-3 -метоксибензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,02 (д, J=7,6 Гц, 1Н), 8,17 (д, J=4,0 Гц, 1Н), 7,93 (д, J=12,0 Гц, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 6,98 (т, J=10,8 Гц, 1Н), 6,83-6,68 (м, ЗН), 4,11 (с, 2Н), 3,94-3,89 (м, 1Н), 3,86 (с, ЗН), 3,543,46 (м, 1Н), 2,14-2,06 (м, 2Н), 1,78-1,75 (м, 2Н), 1,52-1,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 398,2 (М+Н)⁺.
Пример 19	Чх н ОН у-\J -ΉΝ _/ Г \ \ \ / ЧЭ F N-(hhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5 -(3 фторбензил)-пирроло[ 1,2Ь] пирид азин-7-карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDCh): δ 9,03 (д, J=8,0 Гц, 1Н), 8,19 (д, J=5,6 Гц, 1Н), 7,78 (д, J=12,4 Гц, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 7,2-7,1 (м, 1Н), 6,99 (д, J=10,4 Гц, 1Н), 6,91-6,83 (м, 2Н), 6,72 (дд, J=12,0, 6,0 Гц, 1Н), 4,11 (с, 2Н), 3,98-3,88 (м, 1Н), 3,54 -3,47 (м, 1Н), 2,15-2,08 (м, 2Н), 1,79-1,46 (м, 2Н), 1,531,26 (м, 4Н); Масса (m/z): 368,2 (М+Н)⁺.
Пример 20	он % н I N-(₄hc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(4- метоксибензил)-пирроло[1,2-	Ή-NMR (400 МГц, CDCI3): δ 9,03 (д, J=6,l Гц, 1Н), 8,16 (d. J=4,04, Гц, 1Н), 7,76 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 7,11 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 6,82 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 6,67 (дд, J=9,0 Гц, J=4,4 Гц, 1Н), 4,2 (д, J=3,2 Гц, 1Н), 4,05 (с, 2Н), 3,96-3,88 (м, 1Н), 3,77 (с, ЗН), 3,53-3,47 (м, 1Н), 2,14 (м, 2Н), 1,78-1,75 (м, 2Н), 1,38-1,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 380,1 (М+Н)⁺.

- 21 039781

	Ь] пирид азин-7-карбоксамид
Пример 21	он . У'А ОТ/ М-(цис-18,28-2- Г идроксициклогексил)-5-(4пиразол-1 -илбензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,03 (д, J=6,3 Гц, 1Н) 8,18 (д, J=4,3 Гц, 1Н), 7,88 (д, J=2,2 Гц, 1Н), 7,76 (д, J=9,2 Гц, 1Н), 7,7 (с, 1Н), 7,6-7,58 (м, ЗН) 7,29-7,26 (м, 2Н), 6,69 (дд, J=9,l, 4,5, 1Н), 6,45 (д, J=l,6 Гц, 1Н), 4,15 (с, 2Н), 3,97-3,89 (м, 1Н), 3,55-3,48 (м, 1Н), 2,14-2,10 (м, 2Н), 1,79, 1,76 (м, 2Н), 1,48-1,27 (м, 4Н); Масса (m/z): 415,9 (М+Н)⁺.
Пример 22	Ох н У—'^N\ N. J / \ Г ч / L а__о Н-(Тетрагидропиран-4-ил)-5-(4пиразол-1 -илбензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDCI3): δ 9,96 (с, 1Н), 8,19 (с, 1Н), 7,80 (с, 1Н), 7,76-7,71 (м, 2Н), 7,61-7,59 (м, ЗН), 7,29 (с, 2Н), 6,68 (м, 1Н), 6,46 (с, 1Н), 4,31 (м, 1Н), 4,16 (с, 2Н), 4,02-4,0 (м, 2Н), 3,63-3,57 (м, 2Н), 2,082,05 (м, 2Н), 1,73-1,69 (м, 2Н); Масса (m/z): 402,1 (М+Н)⁺.
Пример 23	УД, он 7 'л\ \ ^Ν \\ ( / V—S М-(цис-18,28-2- Г идроксициклогексил)-5-(4тиазол-4-илбензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDCI3): δ 9,04 (д, J=8,0 Гц, 1Н), 8,87 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 8,17 (д, J=3,6 Гц, 1Н), 7,85 (д, J=10,8 Гц, 2Н), 7,77 (д, J=12,0 Гц, 1Н), 7,59 (с, 1Н), 7,49 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 7,28 (д, 1=10,8 Гц, 2Н), 6,69 (дд, J=6,0, 12,0 Гц, 1Н), 4,16 (с, 2Н), 4,02-3,85 (м, 1Н), 3,60-3,45 (м, 1Н), 2,202,05 (м, 2Н), 1,83-1,71 (м, 2Н), 1,55-1,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 433,1 (М+Н)⁺.

- 22 039781

Пример 24	0. Н ОН 7 ^N/' J Г\ < ( ] Br N-(uhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(2бром-4-фторбензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,01 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,19 (д, J=4,8 Гц, 1H), 7,87 (д, J=12,0 Гц, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,19 (т, J=14,0 Гц, 2H), 7,04 (т, J=10,8 Гц, 1Н), 6,75 (дд, J=6,0, 12,0 Гц, 1Н), 4,06 (с, 2Н), 4,0-3,86 (м, 1Н), 3,60-3,45 (м, 1Н), 2,202,04 (м, 2Н), 1,82-1,72 (м, 2Н), 1,54-1,23 (м, 4Н); Масса (m/z): 446,0, 448,0 (М+Н)⁺.
Пример 25	,/^н J l\ Д' ^N N \ / ^Br N-(uhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5 -(2,3 дифтор-4-бромбензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,00 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 8,21 (д, J=3,6 Гц, 1Н), 7,89 (д, J=12,0 Гц, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 7,22 (т, J=10,8 Гц, 1Н), 6,84 (т, J=9,2 Гц, 1Н), 6,77 (дд, J=6,0, 12,0 Гц, 1Н), 4,10 (с, 2Н), 4,05 (уш.с, 1Н), 4,0-3,86 (м, 1Н), 3,60-3,45 (м, 1Н), 2,20-2,04 (м, 2Н), 1,82-1,72 (м, 2Н), 1,55-1,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 464,1, 466,1 (М+Н)⁺.
Пример 26	O_x H ОН v-ή, / Д' \ / Br N-(4hc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5 -(3 бром-4-фторбензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,02 (д, J=7,2 Гц, 1Н), 8,20 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,76 (д, J=12,0 Гц, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 7,35 (д, J=8,0 Гц, 1Н), 7,15-7,05 (м, 1Н), 7,01 (т, J=10,8 Гц, 1Н), 6,74 (дд, J=6,0, 12,0 Гц, 1Н), 4,11 (уш.с, 1Н), 4,07 (с, 2Н), 4,0-3,87 (м, 1Н), 3,60-3,48 (м, 1Н), 2,20-2,05 (м, 2Н), 1,82-1,72 (м, 2Н), 1,55-1,21 (м, 4Н); Масса (m/z): 446,0, 448,0 (М+Н)⁺.

- 23 039781

Пример 27	и_ч н ОН οΑό	Ή-NMR (300 МГц, CDC1₃): δ 9,03 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 8,19 (д, J=4,0 Гц, 1Н), 7,78 (д, J=12,0 Гц, 1Н), 7,54 (с, 1Н), 7,40-7,30
	Вг N-(uhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5 -(3 бромбензил)-пирроло[ 1,2Ь]пиридазин-7-карбоксамид	(м, 2Н), 7,20-7,10 (м, 2Н), 6,73 (дд, J=6,0, 12,0 Гц, 1Н), 4,14 (уш.с, 1Н), 4,08 (с, 2Н), 4,0-3,87 (м, 1Н), 3,59-3,46 (м, 1Н), 2,202,05 (м, 2Н), 1,82-1,72 (м, 2Н), 1,55-1,24 (м, 4Н); Масса (m/z): 428,1, 430,1 (М+Н)⁺.
Пример 28	ΖΝ Cl N-(uhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(2хлорпирид ин-3 -илметил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (300 МГц, CDCh): δ 9,02 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 8,27 (д, J=4,0 Гц, 1Н), 8,22 (д, J=4,0 Гц, 1Н), 7,91 (д, J=12,0 Гц, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 7,47 (д, 1=10,0 Гц, 1Н), 7,17 (дд, J=6,4, 10,0 Гц, 1Н), 6,78 (дд, J=6,0, 12,0 Гц, 1Н), 4,21 (с, 2Н), 4,06 (уш.с, 1Н), 4,0-3,88 (м, 1Н), 3,59-3,47 (м, 1Н), 2,202,05 (м, 2Н), 1,82-1,72 (м, 2Н), 1,55-1,22 (м, 4Н); Масса (m/z): 385,0, 387,0 (М+Н)⁺.
Пример 29	э^онш о Вг N-(uhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-(2бромпиридин-4-илметил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (300 МГц, CDCI3): δ 9,0 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 8,25 (д, J=4,0 Гц, 1Н), 8,23 (с, 1Н), 7,76 (д, J=12,0 Гц, 1Н), 7,56 (с, 1Н), 7,28 (д, 1=10,0 Гц, 1Н), 7,07 (д, J=6,0 Гц, 1Н), 6,77 (дд, J=6,0, 12,0 Гц, 1Н), 4,09 (с, 2Н), 4,05-3,85 (м, 2Н), 3,60-3,48 (м, 1Н), 2,20-2,06 (м, 2Н), 1,83-1,72 (м, 2Н), 1,551,22 (м, 4Н); Масса (m/z): 429,0, 431,1 (М+Н)⁺.

- 24 039781

Г идрокситетрагидропиран-4ил)-5-(3-фторбензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид

Вг идрокситетрагидропиран-4ил)-5-(4-бромбензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7кар бокс амид

Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,14 (д, >5,6 Гц, 1Н), 8,21 (д, >3,6 Гц, 1Н), 7,79 (дд, >1,2, 8,8 Гц, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 7,287,21 (м, 1Н), 6,99 (д, >7,6 Гц, 1Н), 6,946,83 (м, 2Н), 6,74 (дд, >4,4, 9,2 Гц, 1Н), 4,90 (д, >2,8 Гц, 1Н), 4,11 (с, 2Н), 4,103,98 (м, ЗН), 3,70-3,60 (м, 1Н), 3,51 (дт, >2,8, 11,6 Гц, 1Н), 3,23 (т, >10,4 Гц, 1Н), 2,08 (дд, >2,4, 12,8 Гц, 1Н), 1,89 (ддд, >4,8, 12,0, 16,8 Гц, Ш); Масса (m/z): 370,2 (М+Н)⁺.

Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,13 (д, >5,6 Гц, Ш), 8,21 (д, >3,2 Гц, 1Н), 7,77 (дд, >1,2, 9,2 Гц, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 7,40 (д, >8,4 Гц, 2Н), 7,07 (д, >8,0 Гц, 2Н), 6,74 (дд, >4,4, 9,2 Гц, 1Н), 4,89 (д, >2,8 Гц, 1Н), 4,13-3,98 (, 5Н), 3,70-3,60 (м, 1Н), 3,48 (дт, >1,6, 11,6 Гц, 1Н), 3,23 (т, >10,8 Гц, 1Н), 2,07 (дд, >4,4, 12,8 Гц, 1Н), 1,89 (ддд, >4,8, 12,0, 16,8 Гц, 1Н); Масса (m/z): 430,1, 432,1 (М+Н)⁺.

Пример 32. N-(цис-1S,2S-2-Гидроксициклогексил)-5-[4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)бензил]пирроло

[ 1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамид

Стадия 1: Синтез этил-5-[4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-бензил]пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксилата

При перемешивании к раствору этил-5-(4-бромбензил)пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксилата, полученного на стадии 3 примера 1 (1,0 г, 2,78 ммоль), в 1,4-диоксане (27,8 мл), K₂CO₃ (0,58 г, 4,2 ммоль) при КТ последовательно добавляли 1-метилпиразол-4-бороновую кислоту (0,42 г, 3,3 ммоль) и Н₂О (5,6 мл). После дегазирования в течение 10 мин добавляли комплекс 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроценпалладий(П)дихлорида с дихлорметаном (0,22 г, 0,27 ммоль). Температуру реакционной смеси повышали до 100°С и перемешивали в течение 3 ч при этой температуре. Реакционную смесь охлаждали до RT, фильтровали через слой целита и промывали с помощью EtOAc. Объединенный фильтрат промывали водой, затем рассолом, сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали неочищенный продукт, который очищали с помощью колоночной хроматографии на си ликагеле и получали искомое соединение.

Выход: 496,0 мг (50%);

1H-NMR (400 МГц, CDCl₃): δ 8,33 (д, J=3,0 Гц, 1H), 7,73 (с, 1H), 7,73 (д, J=6,0 Гц, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,40 (д, J=7,9 Гц, 2Н), 7,39 (с, 1H), 7,20 (д, J=7,9 Гц, 2Н) 6,73 (дд, J=9,0, 4,36 Гц, 1H), 4,43 (м, 2Н), 4,1 (с, 2Н), 3,93 (с, 3Н), 1,41 (т, 3Н); Масса (m/z): 361,1 (М+Н)+.

Стадия 2: Синтез 5-[4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)бензил]пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-карбоновой кислоты

При перемешивании к раствору этил-5-[4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)бензил]пирроло[1,2Ь]пиридазин-7-карбоксилата, полученного на указанной выше стадии (0,49 г, 1,37 ммоль), в 2:1 смеси Н2О и этанола (6,0 мл) при 0°С добавляли NaOH (0,11 г, 2,75 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при кипячении с обратным холодильником реакционную смесь охлаждали до RT, подкисляли с помо- 25 039781 щью 2 н. HCl и экстрагировали с помощью DCM. Объединенный органический слой промывали рассолом, сушили над безводным Na₂SO4 и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение.

Выход: 0,49 г (100%);

1H-NMR (400 МГц, CDClg): δ 12,07 (с, 1H), 8,25 (д, J=3,5 Гц, 1H), 7,85 (д, J=9,2 Гц, 1H), 7,73 (с, 1H), 7,58 (с, 2Н), 7,42 (д, J=7,7 Гц, 2Н), 7,2 (д, J=7,9 Гц, 2Н), 6,82 (дд, J=8,9, 4,4 Гц, 1H), 4,13 (с, 2Н), 3,39 (с, 3Н); Масса (m/z): 333,1 (М+Н)+.

Стадия 3: Синтез N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-[4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)бензил]пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамида

При перемешивании к раствору 5-[4-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)бензил]пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоновой кислоты, полученной на указанной выше стадии (492 мг, 1,48 ммоль), в DCM (6,1 мл) при 0°С последовательно добавляли DIPEA (0,7 мл, 3,9 ммоль), 1-аминоциклогексанолгидрохлорид (225,0 мг, 1,48 ммоль) и TBTU (533,0 мг, 1,62 ммоль). После перемешивания в течение 16 ч при КТ реакционную смесь разбавляли водой и DCM. Эти два слоя разделяли и водный слой экстрагировали с помощью DCM. Объединенный органический слой промывали рассолом, сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали неочищенный продукт, который очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле и получали искомое соединение.

Выход: 457,0 мг (72%);

1H-NMR (400 МГц, CDCl3): δ 9,03 (д, J=6,52 Hz, 1H), 8,17 (д, J=4,32 Hz, 1H), 7,79 (д, J=8,96 Hz, 1H), 7,71 (c,1H), 7,57 (д, J=2,96 Hz, 2H), 7,38 (д, J=8 Hz, 2H),7,19 (д, J=7,96 Hz, 2H), 6,69 (дд, J=8,96 Hz, 4,4 Hz, 1H), 4,19 (д, J=3,5 Hz, 1H), 4,11 (с, 2Н), 3,93 (с, 3Н), 3,91-3,89 (м, 1H), 3,55-3,48 (м, 1H), 2,14-2,08 (м, 2Н), 1,79-1,76 (м, 2Н), 1,51-1,31 (м, 4Н); Масса (m/z): 430,3 (М+Н)+.

Указанные ниже соединения примеров 33-40 получали по экспериментальной методике, описанной в примере 32, с небольшими некритическими изменениями.

Пример №	Химическая структура	Характеристики по данным анализов
Пример 33	О. Н 9^Нy-N,, JI Ό Л Μ F \ N-(hhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5 - [3 фтор-4-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4ил)-бензил]-пирроло[ 1,2b] пиридазин-7-карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,03 (д, J=6,6 Гц, 1Н), 8,19 (д, J=4,3 Гц, 1Н), 7,80 (с, 1Н), 7,78 (дд, J=2,0, 8,9 Гц, 1Н), 7,72 (д, J=2,0 Гц, 1Н), 7,57 (с, 1Н), 7,45 (т, J=7,9 Гц, 1Н), 6,99 (д, J=7,8 Гц, 1Н), 6,92 (д, J=12,0 Гц, 1Н), 6,71 (дд, J=4,4, 9,0 Гц, 1Н), 4,14 (д, J=2,7 Гц, 1Н), 4,11 (с, 2Н), 3,94 (с, ЗН), 3,94-3,89 (м, 1Н), 3,54-3,49 (м, 1Н), 2,14-2,08 (м, 2Н), 1,79-1,76 (м, 2Н), 1,49-1,27 (м, 4Н); Масса (m/z): 448,2 (М+Н)⁺.
Пример 34	0. Η θ^Η ή. J Ιι кд ί J ХЛ-Дм F N \ N-(hhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-[2фтор-4-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4ил)-бензил]-пирроло[ 1,2b] пиридазин-7-карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,03 (д, J=6,4 Гц, 1Н), 8,18 (д, J=3,2 Гц, 1Н), 7,92 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 7,62 (с, 1Н), 7,58 (с, 1Н), 7,50 (с, 1Н), 7,26-7,21 (м, 2Н), 7,04 (т, J=9,0 Гц, 1Н), 6,99 (дд, J=4,5, 9,1 Гц, 1Н), 4,18 (д, J=3,4 Гц, 1Н), 4,12 (с, 2Н), 3,95-3,87 (м, 4Н), 3,53-3,48 (м, 1Н), 2,13-2,06 (м, 2Н), 1,78-1,75 (м, 2Н), 1,48-1,30 (м, 4Н); Масса (m/z): 448,2 (М+Н)⁺.

- 26 039781

Пример 35	0. Η θ^Ηy-N,, JL Ό Ν \\ ' Ν N-(uhc-1S,2S-2- Γ идроксициклогексил)-5 - [6-(1метил-1 Н-пиразол-4-ил)пирид ин-3 -илметил] пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,01 (д, J=6,7 Гц, 1Н), 8,45 (с, 1Н), 8,2 (д, J=4,3 Гц, 1Н), 7,90 (с, 1Н), 7,88 (с, 1Н), 7,80 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 7,56 (с, 1Н), 7,43 (д, J=2Hz, 1Н), 7,36 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 6,72 (дд, J=8,9 Гц, 4,4 Гц, 1Н), 4,11 (с, 2Н), 3,94-3,92 (м, 5Н), 3,54-3,49 (м, 1Н), 2,13-2,08 (м, 2Н), 1,79-1,76 (м, 2Н), 1,52-1,28 (м, 4Н); Масса (m/z): 431,3 (М+Н)⁺.
Пример 36	ск н V^й J II f ^N N F \ 'i-N F \ N-(uhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5 - [2,3дифтор-4-( 1 -метил-1 Н-пиразол4-ил)-бензил]-пирроло[ 1,2- Ь]пиридазин-7-карбоксамид	Ή-NMR (300 МГц, CDCI3): δ 9,02 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 8,20 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,92 (д, J=11,2 Гц, 1Н), 7,79 (с, 1Н), 7,73 (с, 1Н), 7,56 (с, 1Н), 7,16 (т, J=9,6 Гц, 1Н), 6,93 (т, J=10,0 Гц, 1Н), 6,76 (дд, J=6,0, 12,0 Гц, 1Н), 4,13 (с, 2Н), 3,95 (с, ЗН), 3,94-3,85 (м, 1Н), 3,60-3,45 (м, 1Н), 2,20-2,02 (м, 2Н), 1,83-1,72 (м, 2Н), 1,52-1,20 (м, 4Н); Масса (m/z): 466,1 (М+Н)⁺.
Пример 37	0. Н 9^Н V-Ν,,, X, J II ^Ν V Cl / N-(uhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5-[4фтор-3 -(1 -метил-1 Н-пиразол-4ил)-бензил]-пирроло[ 1,2-	Ή-NMR (300 МГц, CDCI3): δ 9,04 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 8,18 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,78 (с, 1Н), 7,76 (д, J=11,2 Гц, 1Н), 7,73 (с, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 7,35 (д, J=9,6 Гц, 1Н), 7,05-6,95 (м, 2Н), 6,71 (дд, J=6,4, 12,0 Гц, 1Н), 4,17 (уш.с, 1Н), 4,10 (с, 2Н), 3,94 (с, ЗН), 3,94-3,85 (м, 1Н), 3,60-3,45 (м, 1Н), 2,20-2,02 (м, 2Н), 1,831,72 (м, 2Н), 1,52-1,20 (м, 4Н); Масса (m/z): 448,2 (М+Н)⁺.

- 27 039781

	Ь] пиридазин-7-карбоксамид
Пример	ν» Г	Ή-NMR (300 МГц, CDC1₃): δ 9,05 (д, J=8,8
38	. У А	Гц, 1Н), 8,17 (д, J=5,2 Гц, 1Н), 7,79 (д,
	СХ/	J=12,0 Гц, 1Н), 7,70 (с, 1Н), 7,58 (с, 1Н), 7,56
	УО о nⁿ/	(с, 1Н), 7,35-7,0 (м, ЗН), 7,06 (д, J=9,6 Гц, 1Н), 6,69 (дд, J=6,4, 12,0 Гц, 1Н), 4,21 (уш.с, 1Н), 4,12 (с, 2Н), 4,0-3,85 (м, 1Н), 3,92 (с, ЗН), 3,60-3,45 (м, 1Н), 2,20-2,05 (м, 2Н), 1,83-1,72 (м, 2Н), 1,55-1,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 430,2 (М+Н)⁺.
	N-(hhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5 - [3 -(1 метил-1 Н-пиразол-4-ил)бензил]-пирроло[ 1,2- Ь] пиридазин-7-карбоксамид
Пример	„ .. ОН	Ή-NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 9,14 (д, J=5,6
39	/—о я* А 0 Αχ £	Гц, 1Н), 8,20 (д, J=1,20, 4,0 Гц, 1Н), 7,81 (дд, J=l,6, 9,2 Гц, 1Н), 7,71 (с, 1Н), 7,57 (с, 1Н), 7,56 (с, 1Н), 7,38 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 7,20 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 6,72 (дд, J=4,8, 9,2 Гц, 1Н), 4,92 (д, J=2,8 Гц, 1Н), 4,11 (с, 2Н), 4,11-3,98 (м, ЗН), 3,93 (с, ЗН), 3,68-3,60 (м, 1Н), 3,51 (дт, J=l,6, 11,6 Гц, 1Н), 3,23 (т, J=10,4 Гц,
	Г идрокситетрагидропиран-4-	1Н), 2,07 (дд, J=2,4, 12,8 Гц, 1Н), 1,86 (ддд,
	ил)-5 - [4-( 1 -метил-1 Н-пиразол4-ил)-бензил]-пирроло[ 1,2Ь] пиридазин-7-карбоксамид	J=4,8, 12,0, 16,8 Гц, 1Н); Масса (m/z): 432,2 (М+Н)⁺.
Пример	va ΐ	Ή-NMR (400 МГц, CDCI3): δ 8,99 (д, J=8,0
40	. У Ά	Гц, 1Н), 8,45 (д, J=5,2 Гц, 1Н), 8,25 (д, J=4,0
	в ^?	Гц, 1Н), 7,92 (с, 1Н), 7,76 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 7,61 (с, 1Н), 7,45-7,38 (м, 1Н), 7,30-7,25 (м,
	А	2Н), 7,13-7,05 (м, 1Н), 6,78 (дд, J=4,4, 8,8 Гц, 1Н), 4,22 (с, 2Н), 3,96 (с, ЗН), 3,96-3,88 (м, 2Н), 3,60-3,48 (м, 1Н), 2,18-2,08 (м, 2Н),
		1,83-1,75 (м, 2Н), 1,55-1,25 (м, 4Н); Масса
	/	(m/z): 431,2(М+Н)⁺.
	N-(hhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-5 - [2-( 1 метил-1 Н-пиразол-4-ил)пирид ин-4-илметил] пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7карбоксамид

- 28 039781

Пример 41. N-(цис-1S,2S-2-Гидроксициклогексил)-3-(4-бромбензил)-8-фториндолизин-1-карбоксамид

Стадия 1: Синтез 1-[2-(4-бромфенил)-2-оксоэтил]-3-фторпиридинийбромида

При перемешивании к раствору 3-фторпиридина (0,8 г, 8,2 ммоль) в EtOAc (49,2 мл), охлажденному до 0°С, добавляли 4-бромфенацил бромид (2,26 г, 8,2 ммоль). После перемешивания в течение 16 ч при КТ осадившиеся твердые вещества отфильтровывали, промывали растворителем эфиром, сушили при пониженном давлении и получали искомое соединение.

Выход: 0,85 г (35%);

1H-NMR (300 МГц, DMSO): δ 9,36 (с, 1H), 8,96 (д, J=7,8 Гц, 1H), 8,80 (м, 1H), 8,43 (м, 1H), 8,02 (д, J=8,7 Гц, 2Н), 7,93 (д, J=8,7 Гц, 2Н), 6,49 (с, 2Н);

Масса (m/z): 294,1, 395,9 (М+Н)+.

Стадия 2: Синтез этил-3-(4-бромбензоил)-8-фториндолизин-1-карбоксилата

При перемешивании к раствору 1-[2-(4-бромфенил)-2-оксоэтил]-3-фторпиридиний бромида, полученного на стадии 1 (0,85 г, 2,8 ммоль), в сухом THF (11,5 мл) при КТ, добавляли K₂CO₃ (0,58 г, 4,2 ммоль) и этилпропиолат (0,31 мл, 3,1 ммоль). После перемешивания в течение 16 ч при КТ реакционную смесь разбавляли водой и EtOAc. Эти два слоя разделяли и водный слой экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенный органический слой один раз промывали рассолом, сушили над безводным Na₂SO₄, и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали неочищенный продукт, который очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле и получали искомое соединение.

Выход: 0,38 г (35%);

1H-NMR (300 МГц, CDCl₃): δ 9,8 (д, J=6,9 Гц, 1H), 7,80 (с, 1H), 7,73-7,65 (м, 4Н), 7,20-7,11 (м, 1H); 7,08-7,0 (м, 1H), 4,4 (кв, 2Н), 1,4 (т, J=6,9 Гц, 3Н);

Масса (m/z): 390,0, 391,9 (М+Н)+.

Стадия 3: Синтез 3-(4-бромбензоил)-8-фториндолизин-1-карбоновой кислоты

При перемешивании к раствору этил-3-(4-бромбензоил)-8-фториндолизин-1-карбоксилата, полученного на стадии 2 (0,2 г, 0,51 ммоль), в 1:1 смеси Н₂О и метанола (5,0 мл), охлажденной до 0°С, добавляли NaOH (0,041 г, 1,02 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при кипячении с обратным холодильником реакционную смесь охлаждали до RT, подкисляли с помощью 2 н. HCl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенный органический слой один раз промывали рассолом, сушили над безводным Na2SO4 и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение.

Выход: 0,19 г (100%);

1H-NMR (300 МГц, DMSO): δ 12,5 (уш.с, 1H) 9,7 (д, J=6,9 Гц, 1H), 7,82 (д, J=8,1, 2Н), 7,76 (д, J=8,1, 2Н) 7,65 (с, 1H), 7,55-7,45 (m,1H), 7,36-7,25 (м, 1H);

Масса ( m/z): 360,0, 362,0 (М+Н)+.

Стадия 4: Синтез N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-3-(4-бромбензоил)-8-фториндолизин-1карбоксамида

При перемешивании к раствору 3-(4-бромбензоил)-8-фториндолизин-1-карбоновой кислоты, полученной на стадии 3 (175 мг, 0,48 ммоль), в DCM (4,8 мл), охлажденному до 0°С, последовательно добавляли DIPEA (0,12 мл, 0,72 ммоль), 1-аминоциклогексанолгидрохлорид (55,0 мг, 0,48 ммоль) и HATU (183,0 мг, 0,48 ммоль). После перемешивания в течение 16 ч при КТ реакционную смесь разбавляли водой и DCM. Эти два слоя разделяли и водный слой экстрагировали с помощью DCM. Объединенный органический слой один раз промывали рассолом, сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали неочищенный продукт, который очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле и получали искомое соединение.

Выход: 180,0 мг (85%);

1H-NMR (300 МГц, CDCl3): δ 9,84 (д, J=6,9 Гц, 1Н), 7,89 (с, 1H), 7,71 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 7,67 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 7,18-7,10 (м, 1H), 7,05-6,95 (м, 1H), 6,58 (уш.с, 1H), 3,92-3,82 (м, 1H), 3,50-3,40 (м, 1H), 2,18-2,02 (м, 2Н), 1,82-1,70 (м, 2 Н), 1,52-1,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 459,0, 461,0 (М+Н)+.

- 29 039781

Стадия 5: Синтез N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-3-[(4-бромфенил)гидроксиметил]-8фториндолизин-1 -карбоксамида

При перемешивании к раствору N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-3-(4-бромбензоил)-8фториндолизин-1-карбоксамида, полученного на стадии 4 (175,0 мг, 0,38 ммоль), в метаноле (7,6 мл), охлажденному до 0°С, добавляли NaBH₄ (21,0 мг, 0,57 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при КТ реакционную смесь разбавляли водой и EtOAc. Эти два слоя разделяли и водный слой экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенный органический слой один раз промывали рассолом, сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение.

Выход: 175,0 мг (100%);

1H-NMR (300 МГц, CDCl₃): δ 8,07 (д, J=6,9 Гц, 1H), 7,47-7,32 (м, 5Н), 7,06 (уш.с, 1H), 6,78-6,67 (м, 1H), 6,63-6,53 (м, 2Н), 6,13 (с, 1H), 4,38 (уш.с, 1H), 3,88-3,75 (м, 1H), 3,47-3,35 (м, 1H), 2,15-2,0 (м, 2Н), 1,70-1,60 (м, 2Н), 1,45-1,18 (м, 4Н);

Масса (m/z): 461,1, 463,1 (М+Н)+.

Стадия 6: Синтез N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-3-(4-бромбензил)-8-фториндолизин-1карбоксамида

При перемешивании к раствору N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-3-[(4-бромфенил)гидроксиметил]-8-фториндолизин-1-карбоксамида, полученного на стадии 5 (170,0 мг, 0,36 ммоль), в трифторуксусной кислоте (0,29 мл, 3,6 ммоля), охлажденному до -10°С, добавляли триэтилсилан (0,12 мл, 0,79 ммоля). После перемешивания в течение 1 ч при 0°С реакционную смесь разбавляли 10% водным раствором NaHCO₃ и EtOAc. Эти два слоя разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl₃. Объединенный органический слой один раз промывали рассолом, сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали неочищенный продукт, который очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле и получали искомое соединение.

Выход: 0,9 г (54%);

1H-NMR (300 МГц, CDCl3): δ 7,51 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,43 (д, J=8,1 Гц, 2Н), 7,23 (с, 1H), 7,03 (д, J=8,1 Гц, 2Н), 6,74-6,52 (м, 3Н), 4,16 (с, 2Н), 3,91-3,80 (м, 1H), 3,50-3,40 (м, 1H), 2,18-2,02 (м, 2Н), 1,82-1,72 (м, 2Н), 1,45-1,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 445,1,447,1 (М+Н)+.

Указанные ниже соединения примеров 42-47 получали по экспериментальной методике, описанной в примере 41, с небольшими некритическими изменениями.

- 30 039781

Пример №	Химическая структура	Характеристики по данным анализов
Пример 42	0. Н ОН F y~N,, Л О N-(4hc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-3 -бензил8-фториндолизин-1 -карбоксамид	Ή - NMR (300 МГц, CDC1₃): δ 7,57 (д, 7=6,6 Гц, 1Н), 7,50-7,10 (м, 6Н), 6,80-6,65 (м, 2Н), 6,60-6,50 (м, 1Н), 4,86 (уш.с, 2Н), 4,20 (с, 2Н), 3,90-3,80 (м, 1Н), 3,55-3,45 (м, 1Н), 2,20-2,02 (м, 1Н), 1,82-1,70 (м, 2Н), 1,50-1,20 (м, 4Н); Масса (m/z): 367,3 (М+Н)⁺.
Пример 43	о _ч F у-ЧН С1 N-(4hc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-3 -(2хлорпиридин-4-илметил)-8фтор индолизин-1 -карбоксамид	Ή - NMR (300 МГц, DMSO): δ 8,33 (д, 7=4,5 Гц, 1Н), 7,98 (д, 7=6,3 Гц, 1Н), 7,62 (д, 7=6,2 Гц, 1Н), 7,40 (с,1Н), 7,26 (д, 7=3,3 Гц, 1Н), 7,03 (с, 1Н), 6,75 -6,71 (м, 2Н), 4,62 (д, 7= 4,5 Гц, 1Н), 4,37 (с, 2Н), 3,60 (уш.с, 1Н), 3,14 (м, 1Н), 1,89 (м, 2Н), 1,61 (м, 2Н), 1,23 (м, 4Н); Масса (m/z): 402 (М+Н)⁺.
Пример 44	f _VR ’Vjz OCH_S N-(4hc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-3 -(4метоксибензил)-8- фтор индолизин-1 -карбоксамид	Ή - NMR (300 МГц, DMSO): δ 7,91 (д, 7=6,6 Гц, 1Н), 7,57 (д, J=6,6 Гц, 1Н), 7,18 (д, 7=8,4 Гц, 2Н), 6,92 (с, 1Н), 6,88 (д, 7=8,7 Гц, 2Н), 6,77 (д, 7=6,9 Гц, 1Н), 6,76,66 (т, 7=6,0 Гц, 1Н), 4,63 (д, 7=4,8 Гц, 1Н), 4,19 (с, 2Н), 3,71 (с, ЗН), 3,57 (уш.с, 1Н), 3,16 (м, 1Н), 2,68- 2,63 (м, 2Н), 2,ΟΙ,89 (м, 2Н), 1,70-1,64 (м, 2Н), 1,35-1,20 (м, 2Н); Масса (m/z): 397,0 (М+Н)⁺

- 31 039781

Пример 45	F °уР'^0Н чуу V—S N-(hhc-1S,2S-2- Г идроксициклогексил)-3 -(4тиазол-4-илбензил)-8фтор индолизин-1 -карбоксамид	Ή - NMR (300 МГц, CDC1₃): δ 8,8 (с, 1Н), 8,43- 8,37 (м, IH), 8,16 (с, 1Η), 7,92 (д, 7=8,1 Гц, 2Н), 7,76 (д, J=8,1 Гц, 1Н), 7,59 (с, 1Н), 7,28 (д, 7=8,1 Гц, 2Н), 6,95- 6,91 (т, 7=8,4 Гц, 1Н), 6,69 (с, 1Н), 5,76 (д, 7=5,4 Гц, 1Н), 4,21 (с, 2Н), 3,51- 3,40 (м, 1Н), 3,18 (уш.с, 1Н), 2,1-2,03 (м, 2Н), 1,77-1,71 (м, 2Н), 1,43 1,25 (м, 4Н); Масса (m/z): 450 (М+Н)⁺.
Пример 46	0 F Ч-NH °^Н Ν-(3 -Г идрокситетрагидропиран-4ил)-3 -(2-хлорпиридин-4илметил)-8-фтор индолизин-1 карбоксамид	Ή - NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 8,34 (д, 7=4,8 IH), 7,98 (д, 7=6,8 Гц, 1Н), 7,80 (д, 7=7,2 Гц, 1Н), 7,405 (с, 1Н), 7,26 (д, 7=5,2 Гц, 1Н), 7,03 (с, 1Н), 6,81 (т, 7=7,6 Гц, 1Н), 6,68 (д, 7=8,4 Гц, 1Н), 4,96 (д, 7=5,2 Гц, 1Н), 4,37 (с, 2Н), 3,85 (с, 2Н), 3,81 (т, 7=10,4 Гц, 2Н), 3,45-3,40 (м, 1Н), 3,06 (т, 7=10,4 Гц, 2Н); Масса (m/z): 403,0(М+Н)⁺
Пример 47	F Ч-NH ^0Н ^оснз N-(3 -Г идрокситетрагидропиран-4ил)-3 -(4-метоксибензил)-8фтор индолизин-1 -карбоксамид	Ή - NMR (400 МГц, CDC1₃): δ 7,59 (д, 7=6,8Hz, IH), 7,21 (с, IH), 7,08 (д, 7=8,4 Гц, 2Н), 6,84 (д, 7=8,8 Гц, 2Н), 6,72 (д, 7=4,0 Гц, 1Н), 6,66 (д, 7=8,4 Гц, 1Н), 6,57-6,54 (м, 1Н), 4,89 (д, 7=4,2 Гц, 1Н), 4,14 (с, 2Н), 4,10-3,98 (м, ЗН), 3,78 (с, ЗН), 3,71-3,70 (м, 1Н), 3,52-3,45 (м, 1Н), 3,28-3,20 (м, 1Н), 2,10-2,05 (м, 1Н), 1,901,78 (м, 1Н); Масса (m/z): 399,0 (М+Н)⁺.

Пример 48. М-(цис-1S,2S-2-Гидроксициклогексил)-5-[4-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)бензил]-8фториндолизин-1 -карбоксамид

При перемешивании к раствору N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-3-(4-бромбензил)-8фториндолизин-1-карбоксамида, полученного на стадии 6 примера 41 (30,0 мг, 0,06 ммоль), в 1,4диоксане (3,0 мл) при КТ, последовательно добавляли Na₂CO₃ (0,019 г, 0,18 ммоль), 1-метилпиразол-4бороновую кислоту (0,008 г, 0,06 ммоль) и Н₂О (0,61 мл). После дегазирования в течение 10 мин добавляли комплекс 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладий(П)дихлорида с дихлорметаном (0,003 г, 0,003 ммоля). Температуру реакционной смеси повышали до 100°С и перемешивали в течение 3 ч при этой температуре. После охлаждения реакционной смеси до RT ее фильтровали через слой целита. Для промывки слоя использовали EtOAc. Объединенный фильтрат промывали водой, затем рассолом, суши- 32 039781 ли над безводным Na2SO4 и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали неочищенный продукт, который очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле и получали искомое соединение.

Выход: 8,2 мг (26%);

1H-NMR (300 МГц, CDCl3): δ 7,72 (с, 1H), 7,57 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,42 (с, 1H), 7,40 (д, J=8,1 Гц, 2Н), 7,23 (с, 1H), 7,15 (д, J=8,1 Гц, 2Н), 6,74-6,52 (м, 3Н), 4,20 (с, 2Н), 3,93 (с, 3Н), 3,80-3,70 (м, 1H), 3,50-3,40 (м, 1H), 2,18-2,02 (м, 2Н), 1,82-1,72 (м, 2Н), 1,45-1,25 (м, 4Н);

Масса (m/z): 447,3 (М+Н)+.

Указанные ниже соединения примеров 49-51 получали по экспериментальной методике, описанной в примере 48, с небольшими некритическими изменениями.______________________________

Пример №	Химическая структура	Характеристики по данным анализов
Пример 49	0 F °N^NH ^0Н Cii# Ν-(3-Γ идрокситетрагидропиран4-ил)-3 -(4-(1 -метил-1 Н-пиразол4-ил)-бензил)-8-фториндолизин1-карбоксамид	Ή - NMR (400 МГц, CDC1₃):5 8,4 -8,37 (м, 1Н), 7,7 (с, 1Η), 7,5 -7,64 (м, 1H), 7,6 (с, 1H), 7,4 (д, 7=8,2 Гц, 2Н), 7,17 (д, 7=11,6 Гц, 2Н), 6,99-6,92 (м, 1Н), 6,7 (с, 1Н), 5,80 (д, 7=5,6 Гц, 1Н), 4,15 (с, 2Н), 4,10-4,06 (м, 1Н), 4,0-3,90 (м, 2Н), 3,703,60 (м, 1Н), 3,52-3,45 (м, 1Н), 3,28-3,19 (м, 1Н), 2,10-2,02 (м, 1Н), 1,90-1,78 (м, 1Н) ; Масса (m/z); 449,0 (М+Н)⁺.
Пример 50	р F Н-(Тетрагидропиран-4-ил)-3-(4(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)бензил)-8-фториндолизин-1 карбоксамид	Ή - NMR (400 МГц, DMSO): δ 8,29 (с, 2Н), 8,08 (с, 1Н), 7,82-7,78 (т, 7=7,6 Гц, 2Н), 7,52 (д, 7=7,2 Гц, 2Н), 7,25 (д, 7=7,2 Гц, 2Н), 7,06 (с, 1Н), 7,06 (т, 7=8,4 Гц, 1Н), 4,20-4,12 (м, 1Н), 4,19 (с, 2Н), 4,053,98 (м, 2Н), 3,85 (с, ЗН), 3,60-3,50 (м, 2Н), 2,03-1,95 (м, 2Н), 1,72-1,55 (м, 2Н); Масса (m/z): 433,0 (М+Н)⁺.
Пример 51	O^N F %-ΝΗ ^0Н Ν-(4-Γ идрокситетрагидропиран3 -ил)-3 -(4-(1 -метил-1 Н-пиразол4-ил)-бензил)-8-фториндолизин1-карбоксамид	Ή - NMR (400 МГц, DMSO-d₆): δ 8,318,25 (м, 2Η), 8,08 (с, 1Η), 7,81 (с, 1Н), 7,51 (д, 7=8,0 Гц, 2Н), 7,25 (д, 7=8,0 Гц, 2Н), 7,20 (с, 1Н), 7,06 (с, 1Н), 5,12 (уш.с, 1Н), 4,21 (с, 2Н), 4,10-3,92 (м, ЗН), 3,84 (с, ЗН), 3,56-3,50 (м, 4Н), 1,76-1,72 (м, 2Н; Масса (m/z): 449,0 (М+Н)⁺.

Пример 52. Определение значений ЕС₅₀ для аллостерической активности для мускаринового рецептора M1

Линию клеток СНО, стабильно экспрессирующих рекомбинантный мускариновый рецептор M1 человека, и репортерную систему pCRE-Luc использовали для анализа на основе клеток. Этот анализ представляет собой основанный на нерадиоактивных соединениях подход для изучения связывания соединения с GPCRs. В этом специальном анализе определяют содержание внутриклеточного циклического AMP, который модулируется активацией или ингибированием рецептора. Рекомбинантные клетки укрывают репортерный ген люциферазы под контролем элементом ответа сАМР.

Указанные выше клетки выращивали в 96-луночных белых планшетах с прозрачным дном в среде

- 33 039781

Hams F12, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS). Перед добавлением соединений или стандартного агониста клетки выдерживали в бессывороточной среде в течение ночи. К клеткам добавляли исследуемые соединения в увеличивающихся концентрациях и ЕС₂₀ ацетилхолина в среде OptiMEM. Инкубацию продолжали при 37°С в инкубаторе с СО₂ в течение 4 ч. Среду удаляли и клетки промывали забуференным фосфатом физиологическим раствором. Клетки подвергали лизису и активность люциферазы определяли с помощью люминометра. Интенсивность люминесценции для каждой концентрации исследуемого вещества нормировали на вызванный ацетилхолином максимальный ответ и данные анализировали с помощью программного обеспечения Graphpad. Значения ЕС5₀ для соединений определяли, как концентрацию, необходимую для стимулирования активности люциферазы на 50% в присутствии ЕС₂₀ацетилхолина._________________________________________________________

Пример №	ЕС₅₀ (нМ)	Пример №	ЕС₅₀ (нМ)
1	1466	27	1701
2	419	28	10000
3	653	29	1014
4	836	30	1645
5	2132	31	1034
6	3027	32	66
7	779	33	259
8	863	34	989
9	2112	35	599
10	1224	36	94
И	1301	37	1003
12	1338	38	1528
13	1762	39	291
14	1083	40	1654
15	1509	41	236
16	2765	42	1129
17	10000	43	2064
18	3715	44	1595
19	2104	45	3193
20	1338	46	463
21	179	47	1106
22	1760	48	166
23	119	49	1211
24	1183	50	2528
25	2286	51	3652
26	643

Пример 53. Фармакокинетические исследования на грызунах

В качестве экспериментальных животных использовали самцов крыс Wistar (260 ± 50 г). Животных по одному помещали в полипропиленовые клетки. За два дня до проведения исследования самцов крыс Wistar анестезировали изофлураном для операционного введения катетера в яремную вену. Крыс случайным образом распределяли в группы для перорального (3 мг/кг) и внутривенного (ВВ) (1 мг/кг) введения (n=3/группа) и до перорального (ПО) введения крысы голодали в течение ночи. Однако крысам, назначенным для внутривенного (BB) введения, в неограниченном количестве предоставляли корм и воду.

В заданный момент времени брали пробы крови из яремной вены и для пополнения вводили эквивалентный объем обычного физиологического раствора. Взятую кровь переносили в маркированную пробирку Эппендорфа, содержащую 10 мкл гепарина в качестве антикоагулянта. Обычно пробы крови брали в следующие моменты времени: через 0,08, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8 и 24 ч после введения. Кровь центрифугировали при 4000 об/мин в течение 10 мин. Плазму отделяли и до проведения анализа хранили в замороженном виде при -80°С. Концентрации исследуемых соединений в плазме количественно определяли по аттестованной методике LC-MS/MS с использованием подходящей процедуры экстракции. Концентрации исследуемых соединений в плазме определяли в калибровочном диапазоне примерно 1-1000 нг/мл. Исследуемые образцы анализировали с использованием набора калибровочных образцов и образцов для контроля качества распределенных по набору.

- 34 039781

Фармакокинетические параметры Cmax, AUCt, Т_1/2, клиренс и биологическую доступность (F) рассчитывали с помощью некомпартментной модели с использованием стандартной некомпартментной модели с помощью программного обеспечения Phoenix WinNonlin версии 6.0.2 или 6.0.3.

Приме р №	ROA	Стах (нг/мл)	AUCo._t(нг.ч/мл)	Т_1/2 (ч)	Клиренс (мл/мин/кг)	F%
3	Перорально	132 ± 31	1390 ±780	3,6 ±0,2	-	49 ±27
ВВ	-	951 ±213	3,5 ± 1,1	17 ± 3
4	Перорально	105 ±3	457 ± 73	3,9 ± 1,4	-	25 ±4
ВВ	-	599 ±58	2,4 ±0,9	27 ± 3,4
20	Перорально	402 ± 98	1610 ±139	3,4 ±0,7	-	39 ±3
ВВ	-	1380 ±390	2,7 ±0,8	12,2 ±3,1
21	Перорально	687± 169	5470±1366	3,4 ± 1,01	-	49 ± 12
ВВ	-	3703 ±768	2,5 ± 0,7	4,6 ±0,9
32	Перорально	650 ± 224	4900± 1640	3,2 ±0,4	-	50 ± 17
ВВ		3257 ±802	3,2 ± 1,2	5,2 ± 1,4
33	Перорально	414 ± 21	2820 ±20	2,7 ±0,1	-	103 ±
	ВВ	-	908 ±164	1,3 ±0,2	19 ±3,8	0,7
34	Перорально	793 ± 86	6393 ±312	4,4 ±2,3	-	66 ±3
ВВ	-	3227 ±625	3,7 ±0,3	5,0 ±0,7

Пример 54. Исследование проникновения в головной мозг грызунов

В качестве экспериментальных животных использовали самцов крыс Wistar (260 ± 50 г). В течение эксперимента животным в неограниченном количестве предоставляли воду и корм и их держали в цикле 12 ч освещение/затемнение.

Проникновение в головной мозг определяли для крыс по отдельности. За день до введения самцов крыс Wistar акклиматизировали и случайным образом распределяли в группы по их массе. В каждый момент времени (0,5, 1 и 2 ч) использовали n=3 животных.

Исследуемые соединения, приготовленные надлежащим образом, вводили перорально (в количестве, эквивалентном свободному основанию) по 3 мг/кг. Пробы крови брали путем прокалывания сердца с использованием анестезии изофлураном. Для сбора ткани головного мозга животных умерщвляли. Отделяли плазму и образцы головного мозга гомогенизировали и до проведения анализа хранили в замороженном виде при -80°С. Концентрации исследуемых соединений в плазме и головном мозге определяли по методике LC-MS/MS.

Концентрации исследуемых соединений в плазме и головном мозге количественно определяли по аттестованной методике LC-MS/MS с использованием подходящей процедуры экстракции. Концентрации исследуемых соединений в плазме и гомогенизате головного мозга определяли в калибровочном диапазоне 1-500 нг/мл. Исследуемые образцы анализировали с использованием набора калибровочных образцов и образцов для контроля качества распределенных по набору. Рассчитывали отношение значений головной мозг/плазма (Cb/Ср) и результаты приведены ниже в таблице.

Пример №	Проникновение в головной мозг крыс (Cb/Ср) после введения однократной дозы по 3 мг/кг, ПО за 1,0 ч
3	1,90 ± 0,27
4	1,31 ±0,11
20	1,52 ±0,15
21	0,24 ± 0,02
32	0,15 ±0,02
33	0,20 ± 0,001
34	0,13 ±0,02

Пример 55. Модель теста на распознавание объекта

С помощью этой модели исследовали способность соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, улучшать познавательную способность.

В качестве экспериментальных животных использовали самцов крыс Wistar (в возрасте 8-10 недель). В каждую клетку помещали по 4 животных. За день до эксперимента животные получали 20% корма. В течение эксперимента животным в неограниченном количестве предоставляли воду. Животных держали в цикле 12 ч освещение/затемнение в помещении с регулированием температуры и влажности. Эксперимент проводили в круглых или квадратных лотках, изготовленных из акриловой смолы. В день 1

- 35 039781 крыс для привыкания выдерживали в течение до 1 ч в индивидуальных лотках при отсутствии какихлибо объектов.

Крысы одной группы из 12 особей получали разбавитель, а животные другой группы получали соединение формулы (I) до проведения исследований по ознакомлению (T1) и выбору (Т₂). Во время фазы ознакомления (T1) крыс по отдельности на 3 мин помещали в лоток, в котором 2 одинаковых объекта (a1 и а₂) располагались на расстоянии 10 см от стенки. Через 24 ч после T1 проводили исследование долговременной памяти. Тех же крыс помещали в тот же лоток, в которых их помещали при исследовании Т1. Во время фазы выбора (Т₂) крысам предоставляли возможность обследовать лоток в течение 3 мин в присутствии копии знакомого объекта (а₃) и одного нового объекта (b). Во время исследований T1 и Т₂обследование каждого объекта (определенное, как обнюхивание, облизывание, жевание или движение вибрисс при приближении носа к объекту на расстояние менее 1 см) регистрировали секундомером.

T1 полное время обследования знакомых объектов (a1+a₂).

Т₂ полное время обследования знакомого объекта нового объекта (а₃ +b).

Исследование распознавания объекта проводили, как описано в публикации Ennaceur, A., Delacour, J., 1988, A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats - Behavioural data, Behav. Brain Res., 31, 47-59.

Пример №	Доза	Среднее время обследования объекта+S.E.M (с)	Заключение
Знакомый объект	Новый объект
20	1 мг/кг, ПО	10,31 ± 1,07	14,92 ± 1,11	Активны
32	3 мг/кг, ПО	11,64 ± 2,16	19,81 ±2,96	Активны
34	0,3 мг/кг, ПО	10,35 ± 1,75	15,63 ±3,23	Активны

Пример 56. Исследование влияния тета-модуляции в дорсальном отделе гиппокампа анестезированных самцов крыс Wistar в комбинации с ингибитором ацетилхолинэстеразы донепезилом

Исследовано влияние соединения M1 РАМ (пример 32) в комбинации с донепезилом на активность головного мозга в качестве фармакодинамической конечной точки.

Самцов крыс Wistar (240-320 г) анестезировали путем внутрибрюшинного введения уретана (от 1,2 до 1,5 г/кг) для имплантации катетера в левую бедренную вену. Животного помещали в стереотаксическую рамку для имплантации электрода (проволока из нержавеющей стали, Plastics One) в дорсальный отдел гиппокампа (АР: -3,8 мм; ML: +2,2 мм; DV: -2,5 мм; Paxinos and Watson, 2004). Биполярный стимулирующий электрод (нескрученные проволоки из нержавеющей стали с расстоянием межу концами, равным 0,75-1,0 мм, Plastics One) имплантировали в оральное ядро моста (NPO; АР: -7,8 мм; МЛ: 1,8 мм; DV: -6,0 мм; Paxinos and Watson, 2004). Кроме того, один электрод имплантировали в мозжечок и он служил для сравнения. Гиппокампальный 9-й ритм индуцировали с помощью пакета электростимуляции продолжительностью 6 с (20-160 мкА, длительность импульса 0,3 мс, 250 Гц), действующего на NPO со скоростью 0,01 пакетов/с с помощью стимулятора Grass S88 и блока выделения стимулов PSIU6 (Grass Medical Instruments, Quincy, MA). EEG регистрировали при 1000 Гц с использованием программного обеспечения Ponemah (Version 5.2) и сохраняли для анализа в автономном режиме с помощью NeuroScore (Version 3.0). Исходная амплитуда устанавливалась с применением тока, необходимого для обеспечения 9-ритма, равной до 50% от максимальной амплитуды при контрольных условиях. После периода стабилизации продолжительностью в 1 ч базовую регистрацию проводили в течение 30 мин с последующим лечением разбавителем или соединением примера 32 (1 мг/кг, ВВ). Донепезил (0,3 мг/кг, ВВ) вводили через 30 мин после лечения соединением примера 32 и регистрацию продолжали в течение еще 1 ч.

Статистический анализ:

Рассчитывали показатель мощности для данной частоты 9-ритма в период стимуляции во время базового 30-минутного периода и рассчитывали изменение в % этих характеристик после лечения. Изменение в % относительного показателя мощности 9-ритма после объединения соединения примера 32 и донепезила сопоставляли с данными для донепезила с использованием двухфакторного дисперсионного анализа (время и лечение) затем пост-теста Бонферрони. Статистическую значимость рассматривали при р менее 0,05.

Литература:

1) Paxinos G. and Watson С. (2004) Rat brain in stereotaxic coordinates. Academic Press, New York.

Результаты

Лечение донепезилом приводило к умеренному увеличению показателя мощности 9 для гиппокампа. Соединение примера 32 в комбинации с донепезилом приводило к значительному увеличению показателей мощности 9. Установлено, что при лечении воздействие комбинации было значительно сильнее, чем при использовании только донепезила (фиг. 1).

Значения средней площади под кривой (AUC), рассчитанные после лечения соединением примера

- 36 039781 вместе с донепезилом, были значительно больше, чем полученные в случае лечения только донепезилом (фиг. 1).

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы (I)

R¹ (I) или его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, в котором

R¹ означает фенил, дигидробензофуранил или пиридинил; каждый из которых является незамещенным или замещен одним или большим количеством заместителей, выбранных из галогена, -О-(С_1-6)алкила, -(С_1-6)алкила и R^1a;

R^1a означает пиразолил или тиазолил; каждый из которых является незамещенным или замещен -(С_1-6)алкилом;

А¹ означает СН₂;

R² означает водород или ОН;

кольцо А представляет собой

обозначает положение присоединения;

W¹ представляет собой C-F или N;

W² представляет собой C-F или N;

W³ представляет собой C-F или N;

R^a означает водород;

R^b означает водород;

R^c означает водород;

X означает СН₂ или О и

Y означает СН₂ или О.
2. Соединение по п.1, где соединение выбрано из

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(4-бромбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(5-бром-2-фторбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(4-бром-3-фторбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(2,3-дигидробензофуран-5-илметил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(2-бромпиридин-5-илметил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(3-метоксибензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(2,4-дифторбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамидα;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(4-фторбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(2,3-дифторбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамидα;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(3-фтор-4-метоксибензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(2-хлорпиридин-4-илметил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(4-фтор-3-метоксибензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(2-фторбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(2-фтор-4-метоксибензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(3,4-дифторбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамидα;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(2-хлорпиридин-5-илметил)nирроло[1,2-b]nиридазин-7- 37 039781 карбоксамида;

N-(тетрагидропиран-4-ил)-5-(2-хлорпиридин-5-илметил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(2-фтор-3-метоксибензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(3-фторбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(4-метоксибензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(4-пиразол-1-илбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(тетрагидропиран-4-ил)-5-(4-пиразол-1-илбензил)пирроло[ 1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(4-тиазол-4-илбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(2-бром-4-фторбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(2,3-дифтор-4-бромбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(3-бром-4-фторбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(3-бромбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(2-хлорпиридин-3-илметил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-(2-бромпиридин-4-илметил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7карбоксамида;

N-(3-гидрокситетрагидропиран-4-ил)-5-(3-фторбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(3-гидрокситетрагидропиран-4-ил)-5-(4-бромбензил)пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-[4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)бензил]пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-[3-фтор-4-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)бензил]пирроло[1,2Ь]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-[2-фтор-4-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)бензил]пирроло[1,2Ь]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-[6-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)пиридин-3-илметил]пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7 -карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-[2,3-дифтор-4-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)бензил]пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7 -карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-[4-фтор-3-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)бензил]пирроло[1,2Ь]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-[3-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)бензил]пирроло[1,2-b]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(3-гидрокситетрагидропиран-4-ил)-5-[4-( 1 -метил- 1Н-пиразол-4-ил)бензил] пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-[2-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)пиридин-4-илметил]пирроло[1,2-Ь]пиридазин-7 -карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-3-(4-бромбензил)-8-фториндолизин-1-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-3-бензил-8-фториндолизин-1-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-3-(2-хлорпuридин-4-uлметuл)-8-фториндолизин-1-кαрбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-3-(4-метоксибензил)-8-фториндолизин-1-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-3-(4-тиазол-4-илбензил)-8-фториндолизин-1-карбоксамида;

N-(3-гидрокситетрагидропиран-4-uл)-3-(2-хлорпuридин-4-илметил)-8-фториндолизин-1-кαрбоксамида;

N-(3-гидрокситетрагидропиран-4-ил)-3-(4-метоксибензил)-8-фториндолизин-1-карбоксамида;

N-(цис-1S,2S-2-гидроксициклогексил)-5-[4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)бензил]-8-фториндолизин-1карбоксамида;

N-(3-гидрокситетрагидропиран-4-ил)-3-(4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)бензил)-8-фториндолизин-1карбоксамида;

N-(тетрагидропuран-4-ил)-3-(4-(1-метuл-1H-пuразол-4-uл)бензил)-8-фториндолизин-1-кαрбоксамида;

N-(4-гидрокситетрагидропиран-3-ил)-3-(4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)бензил)-8-фториндолизин-1карбоксамида;

или его фармацевтически приемлемой соли.
3. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания или нарушения, опосредуемого мускариновым рецептором M1, содержащая терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-2 и фармацевтически приемлемые эксципиенты.

- 38 039781
4. Фармацевтическая композиция по п.3, где указанное заболевание или нарушение выбрано из группы, состоящей из нарушений познавательной способности, болезни Альцгеймера или шизофрении.
5. Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1 и 2 для лечения заболевания или нарушения, опосредуемого мускариновым рецептором Ml, где заболевание или нарушение выбрано из нарушений познавательной способности, болезни Альцгеймера или шизофрении.
6. Применение по п.5, в котором нарушение познавательной способности выбрано из группы, состоящей из слабоумия при болезни Альцгеймера, слабоумия при болезни Паркинсона, слабоумия при болезни Гентингтона, слабоумия, связанного с синдромом Дауна, слабоумия, связанного с синдромом Туретта, слабоумия, связанного с постменопаузой, лобно-височного слабоумия, слабоумия с тельцами Леви, мультиинфарктного слабоумия, слабоумия при вирусе иммунодефицита человека (HIV), слабоумия при болезни Крейтцфельда-Якоба, вызванного химическими веществами персистирующего слабоумия, слабоумия при болезни Пика, слабоумия при шизофрении, старческого слабоумия и слабоумия при соматических заболеваниях.
7. Применение фармацевтической композиции по п.З для приготовления лекарственного средства для лечения заболевания или нарушения, выбранного из нарушений познавательной способности, болезни Альцгеймера или шизофрении.
8. Применение соединения формулы (I) по любому из пп.1 и 2 для приготовления лекарственного средства для лечения заболевания или нарушения, опосредуемого мускариновым рецептором Ml, где заболевание или нарушение, опосредуемое мускариновым рецептором Ml, выбрано из нарушений познавательной способности, болезни Альцгеймера или шизофрении.
9. Комбинация для лечения заболевания или нарушения, опосредуемого мускариновым рецептором Ml, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пи. 1-2 с донепезилом или его фармацевтически приемлемой солью.
10. Комбинация по п.9, где указанное заболевание или нарушение выбрано из нарушений познавательной способности, болезни Альцгеймера или шизофрении.