EA038532B1 - Способ лечения наследственного ангионевротического отека (hae) - Google Patents
Способ лечения наследственного ангионевротического отека (hae) Download PDFInfo
- Publication number
- EA038532B1 EA038532B1 EA201691470A EA201691470A EA038532B1 EA 038532 B1 EA038532 B1 EA 038532B1 EA 201691470 A EA201691470 A EA 201691470A EA 201691470 A EA201691470 A EA 201691470A EA 038532 B1 EA038532 B1 EA 038532B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- antibody
- plasma kallikrein
- binding
- hae
- plasma
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 96
- 206010019860 Hereditary angioedema Diseases 0.000 title claims abstract description 94
- 108090000113 Plasma Kallikrein Proteins 0.000 claims abstract description 135
- 102000003827 Plasma Kallikrein Human genes 0.000 claims abstract description 129
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 70
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 66
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 49
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 21
- 102100035792 Kininogen-1 Human genes 0.000 claims description 18
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 claims description 18
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 16
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 claims description 14
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 claims description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 14
- 101800004538 Bradykinin Proteins 0.000 claims description 11
- QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH Natural products NC(N)=NCCCC(N)C(=O)N1CCCC1C(=O)N1C(C(=O)NCC(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CO)C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N bradykinin Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N 0.000 claims description 11
- 108010071241 Factor XIIa Proteins 0.000 claims description 5
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 5
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 claims description 2
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 106
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 104
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 54
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 47
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 47
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 46
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 44
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 43
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 43
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 40
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 40
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 39
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 39
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 39
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 35
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 35
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 34
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 33
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 33
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 28
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 28
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 28
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 27
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 26
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 22
- 108700040183 Complement C1 Inhibitor Proteins 0.000 description 20
- 102000055157 Complement C1 Inhibitor Human genes 0.000 description 20
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 20
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 19
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 18
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 17
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 17
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 15
- 101001091365 Homo sapiens Plasma kallikrein Proteins 0.000 description 14
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 14
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 14
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 13
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 13
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 12
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 12
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 12
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 11
- 102000001399 Kallikrein Human genes 0.000 description 11
- 108060005987 Kallikrein Proteins 0.000 description 11
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 11
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 11
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 11
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 11
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 10
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 10
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 10
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 9
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 9
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 9
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 8
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 8
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 8
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 8
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 8
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 7
- 108010080865 Factor XII Proteins 0.000 description 7
- 102000000429 Factor XII Human genes 0.000 description 7
- 108010000487 High-Molecular-Weight Kininogen Proteins 0.000 description 7
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- 108010011867 ecallantide Proteins 0.000 description 7
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 7
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 7
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 7
- VBGWSQKGUZHFPS-VGMMZINCSA-N kalbitor Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]2C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC=CC=3)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]3CSSC[C@H](NC(=O)[C@@H]4CCCN4C(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=4NC=NC=4)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC3=O)CSSC2)C(=O)N[C@@H]([C@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=2NC=NC=2)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N1)[C@@H](C)CC)[C@H](C)O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 VBGWSQKGUZHFPS-VGMMZINCSA-N 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 7
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 7
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 6
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 6
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 6
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 6
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 6
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 6
- 208000028185 Angioedema Diseases 0.000 description 5
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 5
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- 229960001174 ecallantide Drugs 0.000 description 5
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 5
- -1 for example Proteins 0.000 description 5
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 5
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 5
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 5
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 4
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 4
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 4
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 4
- 102100038297 Kallikrein-1 Human genes 0.000 description 4
- 101710176219 Kallikrein-1 Proteins 0.000 description 4
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 4
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 4
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 4
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 4
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 4
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 4
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 4
- QURWXBZNHXJZBE-SKXRKSCCSA-N icatibant Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=2SC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N2[C@H](CC3=CC=CC=C3C2)C(=O)N2[C@@H](C[C@@H]3CCCC[C@@H]32)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C[C@@H](O)C1 QURWXBZNHXJZBE-SKXRKSCCSA-N 0.000 description 4
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 4
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 4
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 4
- 101150074155 DHFR gene Proteins 0.000 description 3
- 101150072419 F12 gene Proteins 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 3
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 3
- 229940127379 Kallikrein Inhibitors Drugs 0.000 description 3
- 108010077861 Kininogens Proteins 0.000 description 3
- 102000010631 Kininogens Human genes 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 3
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 3
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 3
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 3
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 3
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 125000003147 glycosyl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 3
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 3
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 3
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 229930182837 (R)-adrenaline Natural products 0.000 description 2
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 2
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 2
- 101710085045 B2 bradykinin receptor Proteins 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 241001429719 Daubentonia madagascariensis Species 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282575 Gorilla Species 0.000 description 2
- 101001081555 Homo sapiens Plasma protease C1 inhibitor Proteins 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- 241000282576 Pan paniscus Species 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 101150097162 SERPING1 gene Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003070 absorption delaying agent Substances 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 230000000288 anti-kallikrein effect Effects 0.000 description 2
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- 229940088949 cinryze Drugs 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 2
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 2
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N creatine Chemical compound NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 231100000371 dose-limiting toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 239000003596 drug target Substances 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 229960005139 epinephrine Drugs 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940050762 firazyr Drugs 0.000 description 2
- 239000004023 fresh frozen plasma Substances 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000044507 human SERPING1 Human genes 0.000 description 2
- 108700023918 icatibant Proteins 0.000 description 2
- 229960001062 icatibant Drugs 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 238000000302 molecular modelling Methods 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 2
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 2
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 2
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 2
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 2
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 206010000060 Abdominal distension Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 201000007120 C1 inhibitor deficiency Diseases 0.000 description 1
- 229940123362 C1Q inhibitor Drugs 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 102000014447 Complement C1q Human genes 0.000 description 1
- 108010078043 Complement C1q Proteins 0.000 description 1
- 102000000989 Complement System Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010069112 Complement System Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 1
- 208000005156 Dehydration Diseases 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 206010013952 Dysphonia Diseases 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010008177 Fd immunoglobulins Proteins 0.000 description 1
- 206010058061 Gastrointestinal oedema Diseases 0.000 description 1
- 241000237858 Gastropoda Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 description 1
- 208000000998 Hereditary Angioedema Type III Diseases 0.000 description 1
- 208000010473 Hoarseness Diseases 0.000 description 1
- 101000690301 Homo sapiens Aldo-keto reductase family 1 member C4 Proteins 0.000 description 1
- 101001116548 Homo sapiens Protein CBFA2T1 Proteins 0.000 description 1
- 241000282596 Hylobatidae Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 241000288903 Lemuridae Species 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 102100033320 Lysosomal Pro-X carboxypeptidase Human genes 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000763311 Mus musculus Thrombomodulin Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001045988 Neogene Species 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 1
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 206010034829 Pharyngeal oedema Diseases 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032236 Predisposition to disease Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010026552 Proteome Proteins 0.000 description 1
- 206010037884 Rash pruritic Diseases 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 206010070774 Respiratory tract oedema Diseases 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 241000288942 Tarsiidae Species 0.000 description 1
- 108010034949 Thyroglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000009843 Thyroglobulin Human genes 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 206010046306 Upper respiratory tract infection Diseases 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001548 androgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 229940125715 antihistaminic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-MPSLMFKFSA-N aprotinin Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]1NC(=O)[C@@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H]2CSSC[C@H]3NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](Cc4ccc(O)cc4)NC(=O)[C@H](NC(=O)[C@H](Cc4ccccc4)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](CSSC[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](Cc4ccccc4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC3=O)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](CSSC[C@@H](NC(=O)[C@H](Cc3ccccc3)NC(=O)[C@@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]3CCCN3C(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N3CCC[C@@H]3C(=O)N3CCC[C@H]3C(=O)N[C@H](Cc3ccc(O)cc3)C(=O)N[C@H]([C@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N3CCC[C@H]3C(=O)N2)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](Cc2ccc(O)cc2)NC(=O)[C@H](Cc2ccccc2)NC(=O)[C@@H](Cc2ccc(O)cc2)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](NC1=O)[C@H](C)CC)[C@@H](C)O)C(C)C ZPNFWUPYTFPOJU-MPSLMFKFSA-N 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 159000000032 aromatic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001508 asparagines Chemical class 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N benzathine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNCCNCC1=CC=CC=C1 JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940075791 berinert Drugs 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940009550 c1 esterase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 125000001314 canonical amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 1
- VDANGULDQQJODZ-UHFFFAOYSA-N chloroprocaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1Cl VDANGULDQQJODZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002023 chloroprocaine Drugs 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 238000003271 compound fluorescence assay Methods 0.000 description 1
- 108700005721 conestat alfa Proteins 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 229960003624 creatine Drugs 0.000 description 1
- 239000006046 creatine Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000005564 crystal structure determination Methods 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- POZRVZJJTULAOH-LHZXLZLDSA-N danazol Chemical compound C1[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=CC2=C1C=NO2 POZRVZJJTULAOH-LHZXLZLDSA-N 0.000 description 1
- 229960000766 danazol Drugs 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 150000001991 dicarboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical compound OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940043237 diethanolamine Drugs 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 229940012017 ethylenediamine Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000007478 fluorogenic assay Methods 0.000 description 1
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 1
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 102000054751 human RUNX1T1 Human genes 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N hydridophosphorus(.) (triplet) Chemical compound [PH] BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002433 hydrophilic molecules Chemical class 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 238000005462 in vivo assay Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 229940126602 investigational medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 229940018902 kalbitor Drugs 0.000 description 1
- 229940039088 kininogenase Drugs 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 108010057284 lysosomal Pro-X carboxypeptidase Proteins 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 238000009115 maintenance therapy Methods 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 1
- UPSFMJHZUCSEHU-JYGUBCOQSA-N n-[(2s,3r,4r,5s,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6s)-5-acetamido-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-(4-methyl-2-oxochromen-7-yl)oxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]acetamide Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](NC(C)=O)[C@H](OC=2C=C3OC(=O)C=C(C)C3=CC=2)O[C@@H]1CO UPSFMJHZUCSEHU-JYGUBCOQSA-N 0.000 description 1
- 238000001728 nano-filtration Methods 0.000 description 1
- 239000006225 natural substrate Substances 0.000 description 1
- 101150091879 neo gene Proteins 0.000 description 1
- 238000001151 non-parametric statistical test Methods 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 210000001322 periplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000002732 pharmacokinetic assay Methods 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000008299 semisolid dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 229960002175 thyroglobulin Drugs 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 229940108519 trasylol Drugs 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 1
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003462 zymogenic effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y207/00—Transferases transferring phosphorus-containing groups (2.7)
- C12Y207/03—Phosphotransferases with a nitrogenous group as acceptor (2.7.3)
- C12Y207/03002—Creatine kinase (2.7.3.2)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21034—Plasma kallikrein (3.4.21.34)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к способу лечения наследственного ангионевротического отека (HAE), где способ включает введение индивидууму, нуждающемуся в этом, антитела в дозе приблизительно 300 мг каждые две недели или каждые четыре недели, где антитело включает CDR1 тяжелой цепи (HC) с последовательностью SEQ ID NO: 5, CDR2 HC с последовательностью SEQ ID NO: 6, CDR3 HC с последовательностью SEQ ID NO: 7; и CDR1 легкой цепи (LC) с последовательностью SEQ ID NO: 8, CDR2 LC с последовательностью SEQ ID NO: 9 и CDR3 LC с последовательностью SEQ ID NO: 10; и где антитело ингибирует калликреин плазмы и представляет собой полноразмерное антитело.
Description
Перекрестная ссылка на родственные заявки
Данная заявка испрашивает приоритет на основании даты подачи предварительной заявки США №
61/929716, поданной 21 января 2014 года, предварительной заявки США № 61/944361, поданной 25 февраля 2014 года, и предварительной заявки США № 62/021397, поданной 7 июля 2014 года. Полное содержание каждой из указанных заявок включено в настоящий документ в качестве ссылки.
Уровень техники изобретения
Калликреин плазмы является компонентом контактной системы серин-протеазы и потенциальной мишенью для лекарственных средств, направленных против разных воспалительных, сердечнососудистых, инфекционных (сепсис) и онкологических заболеваний (Sainz I.M. et al., Thromb. Haemost. 98, 77-83, 2007). Контактная система активируется либо фактором XIIa после воздействия на него внешних или отрицательно заряженных поверхностей, либо на поверхностях эндотелиальных клеток пролилкарбоксипептидазами (Sainz I.M. et al., Thromb. Haemost. 98, 77-83, 2007). Активация калликреина плазмы повышает внутреннюю коагуляцию посредством активации по принципу обратной связи фактора XII и усиливает воспаление в результате продукции провоспалительного нонапептида брадикинина. Калликреин плазмы, являющийся основной кининогеназой в кровотоке, играет важную роль в образовании брадикинина в сосудистой сети. Генетический дефицит С1-ингибиторного белка (C1-INH), основного природного ингибитора калликреина плазмы, приводит к развитию наследственного ангионевротического отека (НАЕ). Пациенты с НАЕ страдают от острых приступов болезненного отека, часто запускаемых неизвестными механизмами (Zuraw B.L. et al., N. Engl. J. Med. 359, 1027-1036, 2008).
Сущность изобретения
Изобретение отчасти основано на неожиданных результатах фармакокинетических исследований и фармакокинетического моделирования, демонстрирующих, что дозы (например, от 100 до 300 мг) антитела, связывающегося с активной формой человеческого плазматического калликреина, которые поддерживают концентрацию антитела в плазме выше 80 нМ, являются достаточными для проявления полезного (например, профилактического) эффекта при лечении наследственного ангионевротического отека. Кроме того, введение DX-2930 в количестве 100 мг каждые 2 недели, или в количестве 300 мг каждые 4 недели обеспечивает стабильную концентрацию лекарственного средства в плазме выше 80 нм, а введение DX-2930 в количестве 300 мг каждые 2 недели обеспечивает стабильную концентрацию лекарственного средства в плазме выше 200 нМ.
Настоящее изобретение также отчасти основано на неожиданном открытии, заключающемся в том, что антитела, связывающиеся с активной формой человеческого плазматического калликреина, оказывают превосходные терапевтические эффекты при лечении наследственного ангионевротического отека (НАЕ) в разных дозах (0,1, 0,3, 1 или 3 мг/кг) без проявления дозо-ограничивающей токсичности при однократных дозах до 3,0 мг/кг. Фармакокинетические результаты демонстрируют, что эффекты DX2930 характеризуются линейной зависимостью от дозы, а средний период полувыведения составляет от 17 до 20 дней во всех группах, получающих лекарственное средство, после однократного введения здоровым индивидуумам. Фармакодинамические результаты двух разных исследовательских анализов с использованием биомаркеров подтверждают ингибирование плазматического калликреина ex vivo в дозо- и времязависимой манере.
Соответственно, в одном аспекте настоящее изобретение предлагает способ лечения НАЕ (например, типа I, II или III), включающий в себя введение нуждающемуся в этом индивидууму антитела, способного связываться с активной формой pKal, в эффективном количестве (например, от 100 до 400 мг, или от 100 до 300 мг), так чтобы концентрация антитела в плазме индивидуума составляла более чем примерно 80 нМ. В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело (например, DX-2930) вводят в дозе 100 мг каждые две недели. В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело (например, DX-2930) вводят в количестве 300 мг каждые 2 недели или каждые 4 недели.
В другом аспекте настоящее изобретение предлагает способ лечения НАЕ (например, типа I, II или III), включающий в себя:
(а) введение нуждающемуся в этом индивидууму первой дозы антитела (например, полноразмерного антитела или его антиген-связывающего фрагмента), способного связывать активный калликреин плазмы;
(b) измерение концентрации антитела в плазме индивидуума; и (с) введение индивидууму второй дозы антитела, если концентрация антитела в плазме ниже, чем примерно 80 нМ. В некоторых вариантах осуществления первая доза, вторая доза, или обе указанные дозы находятся в диапазоне от 100 до 400 мг или от 100 до 300 мг (например, 100 или 300 мг DX-2930). В некоторых вариантах осуществления вторая доза выше, чем первая доза.
Соответственно, в одном аспекте настоящее изобретение предлагает способ лечения НАЕ (например, типа I, II или III), включающий в себя введение однократной дозы выделенного антитела индивидууму, нуждающемуся в этом, где антитело (например, полноразмерное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент) связывает активный калликреин плазмы (например, не связывает прекалликреин). Необязательно способ дополнительно включает в себя определение уровня креатинфосфокиназы у индивидуума до и после лечения. В некоторых вариантах осуществления однократная доза любого из
- 1 038532 антител, описанных в настоящем документе, находится в диапазоне 0,1-3 мг/кг (например, она может составлять 0,1, 0,3, 1 или 3 мг/кг).
В другом аспекте настоящее изобретение предлагает способ лечения наследственного НАЕ, причем указанный способ включает в себя введение индивидууму, нуждающемуся в этом, нескольких доз выделенного антитела (например, полноразмерного антитела или его антиген-связывающего фрагмента), которое связывает активный калликреин плазмы (например, антитело, которое связывает активный человеческий плазматический калликреин, но не человеческий прекалликреин), где каждые две последовательные дозы вводят с интервалом, составляющим по меньшей мере 2 недели (например, 3, 4, 5 или 6 недель). В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз находится в диапазоне 0,1-3 мг/кг. Например, каждая из нескольких доз составляет 3 мг/кг. В некоторых примерах антитело вводят ежемесячно (например, каждые 28 дней), например в течение 6 месяцев.
В следующем аспекте настоящее изобретение предлагает способ лечения НАЕ, включающий в себя: (i) введение индивидууму, нуждающемуся в этом, одной или нескольких доз выделенного антитела (например, полноразмерного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента), которое связывает активный калликреин плазмы (например, антитела, которое связывает активный человеческий плазматический калликреин, но не человеческий прекалликреин); (ii) измерение уровня ингибирования калликреина плазмы под действием антитела у индивидуума после введения последней дозы; и (iii) введение индивидууму дополнительной дозы антитела, если уровень ингибирования ниже минимального терапевтического уровня. В некоторых вариантах осуществления одна или несколько доз находятся в диапазоне 0,1-3 мг/кг (например, каждая из доз может составлять 0,1, 0,3, 1 или 3 мг/кг). В одном примере минимальный терапевтический уровень представляет собой концентрацию антитела в сыворотке или плазме, которая составляет менее чем примерно 80 нМ.
В любом из способов, описанных в настоящем документе, антитело против калликреина может представлять собой полноразмерное антитело или его антиген-связывающий фрагмент. В некоторых вариантах осуществления антитело связывает активный калликреин плазмы и не связывает прекалликреин.
В некоторых вариантах осуществления любого из способов, описанных в настоящем документе, антитело связывается с тем же эпитопом, что и DX-2930, или конкурирует с DX-2930 за связывание с активным калликреином плазмы. В некоторых вариантах осуществления антитело содержит такие же CDR тяжелой цепи, что и DX-2930, такие же CDR легкой цепи, что и DX-2930, или и те и другие. В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело представляет собой DX-2930, которое является полноразмерным антителом IgG, как описано в данном документе, или его антиген-связывающий фрагмент.
В некоторых вариантах осуществления любого из способов, описанных в настоящем документе, антитело можно вводить подкожно. В некоторых вариантах осуществления индивидуум представляет собой человека-пациента, страдающего от НАЕ, предрасположенного к НАЕ, или имеющего риск приступа НАЕ. Например, описанный здесь способ можно использовать для профилактики НАЕ.
В некоторых вариантах осуществления любой из описанных здесь способов может дополнительно включать в себя определение уровня креатинфосфокиназы у индивидуума до и после лечения, или на протяжении курса лечения. Если наблюдается повышение уровня креатинфосфокиназы, можно уменьшить дозу антитела (например, DX-2930) или прекратить лечение.
В следующем аспекте настоящее изобретение предлагает способ определения оптимальной дозы (например, оптимальной профилактической дозы) для лечения наследственного ангионевротического отека (НАЕ) у индивидуума, где способ включает в себя: (а) введение (например, подкожное) индивидууму, нуждающемуся в этом, любого из антител, описанных в настоящем документе, способного связывать активный калликреин плазмы (например, DX-2930 или его антиген-связывающего фрагмента), в начальной дозе; (b) измерение концентрации антитела в плазме индивидуума; и (с) увеличение дозы антитела, если концентрация антитела в плазме ниже, чем примерно 80 нМ; где дозу, обеспечивающую концентрацию антитела в плазме выше, чем примерно 80 нМ, выбирают в качестве дозы, оптимальной для профилактики индивидуума. В некоторых вариантах осуществления индивидуум представляет собой пациента-человека, у которого отсутствуют симптомы НАЕ во время введения антитела. В некоторых вариантах осуществления начальная доза находится в диапазоне примерно от 100 до 400 мг, или от 100 до 300 мг (например, она может составлять 100 или 300 мг DX-2930).
Описанный выше способ может дополнительно включать в себя определение уровня креатинфосфокиназы у индивидуума до и после лечения, или на протяжении курса лечения. Кроме того, способ может дополнительно включать в себя уменьшение дозы антитела или прекращение лечения, если наблюдается повышение уровня креатинфосфокиназы.
В любом из описанных здесь способов концентрацию антитела в плазме можно измерить с помощью анализа активности калликреина в плазме или иммунного анализа.
Настоящее изобретение также предлагает:
(а) фармацевтическую композицию, которую можно использовать для лечения НАЕ или определения оптимальной дозы лекарственого средства для лечения НАЕ, где фармацевтическая композиция содержит одно из описанных здесь антител против калликреина, и фармацевтически приемлемый носитель; и (b) применение фармацевтической композиции в способе промышленного получения лекарственно-
- 2 038532 го средства для лечения НАЕ. Применение антител в определенных целях можно осуществлять в описанных здесь условиях дозирования.
Детали одного или нескольких вариантов осуществления настоящего изобретения изложены в приведенном ниже описании. Другие признаки и преимущества настоящего изобретения будут очевидны из приведенных ниже чертежей и подробного описания некоторых вариантов осуществления, а также из прилагаемой формулы изобретения.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 приведен график, демонстрирующий среднюю концентрацию DX-2930 после подкожного (п.к.) введения здоровым индивидуумам. Графики зависимости концентрации от времени для каждой группы, получающей лекарственное средство, отображаются на логарифмической шкале. Отрезки, отражающие величину ошибки, соответствуют стандартному отклонению. Профили демонстрируют линейную зависимость от дозы. Параллельные фазы выведения во всех группах, получающих лекарственное средство, согласуются с данными, полученными для хорошо изученного антитела с дозо-независимой кинетикой, поскольку для всех доз получают одинаковые результаты;
на фиг. 2 - график, изображающий прогнозируемые концентрации в плазме здоровых индивидуумов после повторного подкожного введения 3 мг/кг DX-2930 через каждые 28 дней;
на фиг. 3 - график, изображающий общие принципы применения лекарственного средства для профилактики болезненного состояния;
на фиг. 4 - график, изображающий общие принципы применения DX-2930 для профилактики НАЕ;
на фиг. 5 - график, иллюстрирующий сравнительную ингибиторную активность DX-2930 и экаллантида в отношении pKal in vitro;
на фиг. 6 - график, иллюстрирующий альтернативные гипотезы, касающиеся требования постоянно поддерживать концентрацию DX-2930 в плазме на уровне 80 нМ или выше для лечения и/или профилактики НАЕ. Альтернативно для лечения и/или профилактики НАЕ может потребоваться концентрация DX-2930 в плазме, величина которой ниже или выше 80 нМ;
на фиг. 7 - график, демонстрирующий, что уровень лекарственного средства в плазме, равный или превышающий 80 нМ, достигается после введения разовой дозы 3 мг/кг DX-2930;
на фиг. 8 - график, изображающий фармакокинетическое (РК) моделирование периодического подкожного введения здоровым индивидуумам DX-2930 в дозе 3 мг/кг каждые 28 дней;
на фиг. 9 - график, изображающий фармакодинамический (PD) эффект DX-2930, вводимого здоровым индивидуумам подкожно в дозе 3 мг/кг каждые 28 дней;
на фиг. 10 - график, изображающий результаты фармакодинамического (PD) и фармакокинетического (PK) анализа после введения однократной дозы (3 мг/кг) DX-2930. Результаты PD приводят в виде графика зависимости относительного % ингибирования активности pKal от времени. Результаты РК приводят в виде графика зависимости концентрации (нМ) DX-2930 в плазме от времени. *: значение Р<0,05 для дозы 3 мг/кг на 5-й день по сравнению с плацебо;
на фиг. 11 - график, изображающий результаты фармакодинамического (PD) анализа активности DX-2930 в отношении природного биологического субстрата (расщепление HMWK измеряют по образованию 2-цепочечного HMWK);
на фиг. 12 - график, демонстрирующий устойчивую биоактивность DX-2930 в течение длительного времени после однократного введения 3 мг/кг DX-2930. *: значение Р<0,05 для 3 мг/кг на 28-й день по сравнению с результатами, полученными до введения дозы.
Подробное описание изобретения
Определения.
Для удобства перед нижеследующим описанием настоящего изобретения приводятся определения некоторых терминов, используемых в описании, примерах и прилагаемой формуле изобретения. Определения других терминов приводятся при их упоминании в описании.
Если контекст однозначно не указывает иначе, термины, используемые в единственном числе, включают в себя ссылки на множественное число.
Термин антитело относится к белку, который содержит по меньшей мере один вариабельный домен (вариабельный участок) иммуноглобулина или последовательность вариабельного домена (вариабельного участка) иммуноглобулина. Например, антитело может содержать вариабельный участок тяжелой цепи (Н) (сокращенно обозначаемый здесь VH или HV) и вариабельный участок легкой цепи (L) (сокращенно обозначаемый здесь VL или LV). В другом примере антитело содержит два вариабельных участка тяжелой цепи (Н) и два вариабельных участка легкой цепи (L). Термин антитело охватывает антиген-связывающие фрагменты антител (например, одноцепочечные антитела, фрагменты Fab и sFab, F(ab')2, Fd-фрагменты, Fv-фрагменты, ScFv и фрагменты доменных антител (dAb) (de Wildt et al., Eur. J. Immunol. 1996; 26(3):629-39)), а также полноразмерные антитела. Антитело может иметь структурные признаки IgA, IgG, IgE, IgD, IgM (а также их подтипов). Антитела могут быть получены из любого источника, однако предпочтительными являются антитела приматов (включающих в себя человека и отличных от человека приматов) и приматизированные антитела.
Домены VH и VL можно дополнительно подразделить на участки гипервариабельности, называе- 3 038532 мые участки, определяющие комплементарность (CDR), перемежающиеся более консервативными участками, называемыми каркасные участки (FR). Границы каркасных участков и CDR установлены (см. Rabat E.A. et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242, and Chothia С. et al. (1987) J. Mol. Biol. 196:901917). В настоящем описании используют определения Rabat. Каждый VH и VL, как правило, состоит из трех CDR и четырех FR, расположенных в направлении от амино-конца к карбокси-концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
В настоящем описании термин последовательность вариабельного домена иммуноглобулина относится к аминокислотной последовательности, которая может образовывать структуру вариабельного домена иммуноглобулина таким образом, что один или несколько участков CDR располагаются в конформации, обеспечивающей формирование антиген-связывающего участка. Например, последовательность может включать в себя всю аминокислотную последовательность природного вариабельного домена или ее часть. Например, в последовательности могут отсутствовать одна, две или более N- или Сконцевых аминокислот или внутренних аминокислот, последовательность может содержать одну или несколько вставок или дополнительных концевых аминокислот, или последовательность может содержать другие изменения. В одном варианте осуществления полипептид, который включает в себя последовательность вариабельного домена, может быть связан с другой последовательностью вариабельного домена иммуноглобулина, образуя антиген-связывающий участок, например структуру, которая предпочтительно взаимодействует с калликреином, присутствующим в плазме.
VH- или VL-цепь антитела также может содержать весь константный участок тяжелой или легкой цепи, или его часть, образуя таким образом тяжелую или легкую цепь иммуноглобулина, соответственно. В одном варианте осуществления изобретения антитело представляет собой тетрамер, состоящий из двух тяжелых цепей иммуноглобулина и двух легких цепей иммуноглобулина, где тяжелые и легкие цепи иммуноглобулинов соединяются посредством, например, дисульфидных связей. Константный участок тяжелой цепи IgG включает в себя три домена иммуноглобулина, CH1, CH2 и CH3. Константный участок легкой цепи включает в себя домен CL. Вариабельный участок тяжелой или легкой цепи содержит связывающий домен, который взаимодействует с антигеном. Константные участки антител обычно опосредуют связывание антитела с тканями или факторами хозяина, в том числе с разными клетками иммунной системы (например, с эффекторными клетками) и первым компонентом (C1q) классической системы комплемента. Легкие цепи иммуноглобулинов можно подразделить на типы каппа или лямбда. В одном варианте осуществления антитело является гликозилированным. Антитело может участвовать в антитело-зависимой цитотоксичности и/или комплемент-опосредованной цитотоксичности.
Один или несколько участков антитела могут быть человеческими или фактически человеческими. Например, один или несколько из вариабельных участков могут быть человеческими или фактически человеческими. Например, один или несколько CDR могут быть человеческими, например НС CDR1, НС CDR2, НС CDR3, LC CDR1, LC CDR2 и/или LC CDR3. Каждый из CDR легкой цепи (LC) и/или тяжелой цепи (НС) может быть человеческим. НС CDR3 может быть человеческим. Один или несколько каркасных участков могут быть человеческими, например FR1, FR2, FR3 и/или FR4 из НС и/или LC. Например, Fc-участок может быть человеческим. В одном варианте осуществления все каркасные участки являются человеческими, например они могут быть получены из человеческой соматической клетки, такой как кроветворная клетка, которая продуцирует иммуноглобулины, или не кроветворная клетка. В одном из вариантов осуществления человеческие последовательности представляют собой зародышевые последовательности, например кодируемые зародышевой нуклеиновой кислотой. В одном из вариантов осуществления каркасные (FR) остатки выбранного Fab могут быть преобразованы в аминокислотные остатки, соответствующие остаткам, кодируемым наиболее близким геном зародышевой линии приматов, особенно геном зародышевой линии человека. Один или несколько из константных участков могут быть человеческими или фактически человеческими. Например, по меньшей мере, 70, 75, 80, 85, 90, 92, 95, 98 или 100% вариабельного домена, константного участка, константных доменов (CH1, CH2, CH3, и/или CL1) иммуноглобулина, или полноразмерного антитела, могут быть человеческими или фактически человеческими.
Полноразмерное антитело, или его часть, могут кодироваться геном иммуноглобулина, или его сегментом. Примеры генов человеческих иммуноглобулинов включают в себя гены константных участков каппа, лямбда, альфа (IgA1 и IgA2), гамма (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4), дельта, эпсилон и мю, а также множество генов вариабельных участков иммуноглобулинов. Легкие цепи полноразмерного иммуноглобулина (примерно 25 кДа, или примерно 214 аминокислот) кодируются геном вариабельного участка на NH2-конце (примерно 110 аминокислот) и геном константного участка каппа или лямбда на СООНконце. Аналогичным образом тяжелые цепи полноразмерного иммуноглобулина (примерно 50 кДа, или примерно 446 аминокислот) кодируются геном вариабельного участка (примерно 116 аминокислот) и одним из других указанных выше генов константного участка, например гамма (кодирующим примерно 330 аминокислот). Длина человеческого НС значительно варьирует, поскольку CDR3 НС может содержать примерно от 3 аминокислотных остатков до более 35 аминокислотных остатков.
Термин антиген-связывающий фрагмент полноразмерного антитела относится к одному или не- 4 038532 скольким фрагментам полноразмерного антитела, которые сохраняют способность специфически связываться с представляющей интерес мишенью. Примеры связывающих фрагментов, охватываемые термином антиген-связывающий фрагмент полноразмерного антитела и сохраняющие функциональные характеристики, включают в себя:
(i) фрагмент Fab, одновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, VH, CL и СН1;
(ii) фрагмент F(ab')2, двухвалентный фрагмент, содержащий два фрагмента Fab, связанных дисульфидным мостиком в шарнирном участке;
(iii) фрагмент Fd, состоящий из доменов VH и CH1;
(iv) фрагмент Fv, состоящий из доменов VL и VH одного плеча антитела;
(v) фрагмент dAb (Ward et al. (1989) Nature 341:544-546), который состоит из домена VH; и (vi) выделенный участок, определяющей комплементарность (CDR).
Кроме того, хотя два домена фрагмента Fv, VL и VH, кодируются разными генами, их можно соединить с помощью рекомбинантных методов, используя синтетический линкер, который обеспечивает образование одной белковой цепи, в которой участки VL и VH спариваются, образуя одновалентную молекулу, известную как одноцепочечный Fv (scFv). См., например, патенты США № 5260203, 4946778 и 4881175, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; и Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:58795883.
Фрагменты антитела можно получить с помощью любого подходящего способа, включающего в себя стандартные методы, известные специалистам в данной области техники. Термин моноспецифическое антитело относится к антителу, которое обладает специфичностью и аффинностью связывания в отношении одной конкретной мишени, например одного эпитопа. Данный термин включает в себя термины моноклональное антитело или композиция моноклонального антитела, которые в настоящем описании относятся к препаратам антител или их фрагментов одного молекулярного состава, независимо от способа получения антитела.
Антитела делают зародышевыми путем замены одной или нескольких незародышевых аминокислот в каркасных участках на соответствующие аминокислоты зародышевого антитела, при условии, что связывающие свойства в основном сохраняется.
Константа ингибирования (Ki) является показателем ингибиторной активности; она представляет собой концентрацию ингибитора, необходимую для снижения активности фермента в два раза и не зависит от концентрации фермента или субстрата. Кажущуюся Ki (Ki,app) определяют при разных концентрациях субстрата путем измерения ингибиторного эффекта, оказываемого разными концентрациями ингибитора (например, ингибиторного связывающего белка) на протекание реакции (например, на активность фермента); путем подгонки изменения константы скорости псевдо-первого порядка в зависимости от концентрации ингибитора к уравнению Моррисона (уравнение 1) можно определить значение кажущейся Ki. Ki соответствует точке пересечения с осью y, определенной путем линейного регрессионного анализа кривой зависимости Ki;app от концентрации субстрата +1 + е)-+ '
V = V — V ----------------'-----------------------° ° 2-Е
Уравнение 1
В данном уравнении v - измеренная скорость; v0 - скорость в отсутствии ингибитора; Ki,app - кажущаяся константа ингибирования; I - общая концентрация ингибитора; и E - общая концентрация фермента.
В настоящем описании термин сродство связывания относится к кажущейся константе ассоциации или KA. KA представляет собой величину, обратную константе диссоциации (KD). Например, сродство связывающего антитела к конкретной молекуле-мишени, такой как калликреин плазмы, может составлять по меньшей мере 105, 106, 107, 108, 109, 1010 и 1011 М-1. Связывающее антитело обладает более высоким сродством к первой мишени, чем ко второй мишени, если связывание антитела с первой мишенью характеризуется более высоким значением KA (или меньшим числовым значением KD), чем связывание антитела со второй мишенью. В таких случаях связывающее антитело является специфичным к первой мишени (такой как белок в первой конформации, или его миметик) по сравнению со второй мишенью (такой как тот же самый белок во второй конформации, или его миметик; или второй белок). Различия в сродстве связывания (используемые, например, для определения специфичности, или для других сравнений) могут составлять, по меньшей мере, 1,5, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 37,5, 50, 70, 80, 91, 100, 500, 1000, 10000 или 105 раз.
Сродство связывания можно определить с помощью разных методов, включающих в себя равновесный диализ, равновесное связывание, гель-фильтрацию, ELISA, поверхностный плазмонный резонанс или спектроскопию (например, с использованием флуоресцентного анализа). Как правило, определение сродства связывания проводят в буфере HBS-P (10 мМ HEPES, рН 7,4, 150 мМ NaCl, 0,005% (об./об.) поверхностно-активного вещества Р20). Указанные методы можно использовать для измерения концентрации связанного и свободного связывающего белка как функции от концентрации связывающего белка
- 5 038532 (или мишени). Зависимость концентрации связанного связывающего белка ([связанный]) от концентрации свободного связывающего белка ([свободный]) и концентрации на мишени участков связывания связывающего белка, где (N) обозначает число участков связывания на молекуле мишени, описывается следующим уравнением:
[связанный] =N х [сво6одный]/((1/Ка)+[свободный]).
Не всегда требуется точное определение KA, иногда достаточно провести количественное измерение сродства, например, с помощью такого метода, как ELISA или FACS, которое пропорционально KA и, следовательно, может использоваться для сравнения, например, так можно определить, что сродство является, например, в 2 раза выше, или провести качественное определение сродства, или получить данные о сродстве, например на основании активности, определенной в функциональном анализе, таком как анализ in vitro или in vivo.
Термин связывающее антитело (или связывающий белок, используемый в настоящем описании как равнозначный термин) относится к антителу, которое может взаимодействовать с молекулоймишенью. Данный термин используется как синоним термина лиганд. Термин антитело, связывающее калликреин плазмы, относится к антителу, способному взаимодействовать с калликреином плазмы (например, связывать калликреин плазмы), и включает в себя, в частности, антитела, которые способные предпочтительно или специфически взаимодействовать с калликреином плазмы, и/или ингибировать калликреин плазмы. Антитело ингибирует калликреин плазмы, если оно вызывает уменьшение активности калликреина плазмы по сравнению с активностью калликреина плазмы в отсутствии антитела в тех же условиях.
Консервативная аминокислотная замена представляет собой замену одного аминокислотного остатка на другой аминокислотный остаток, имеющий подобную боковую цепь. В данной области существует определение семейств аминокислотных остатков, имеющих подобные боковые цепи. Указанные семейства включают в себя аминокислоты, содержащие основные боковые цепи (такие как лизин, аргинин, гистидин), кислые боковые цепи (такие как аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота), незаряженные полярные боковые цепи (такие как глицин, аспарагин, глутамин, серин, треонин, тирозин, цистеин), неполярные боковые цепи (такие как аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разветвленные боковые цепи (такие как треонин, валин, изолейцин) и ароматические боковые цепи (такие как тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин).
Один или несколько из аминокислотных остатков каркасного участка и/или CDR связывающего белка могут быть изменены (например, связывающий белок может содержать одну или несколько мутаций (таких как замены (например, консервативные замены или замены на неэссенциальные аминокислоты), вставки или делеции) по сравнению с описанным здесь связывающим белком. Белок, связывающий калликреин плазмы может содержать мутации (например, замены (такие как консервативные замены или замены на неэссенциальные аминокислоты), инсерции или делеции) (например, он может содержать по меньшей мере одну, две, три или четыре мутации, и/или не более чем 15, 12, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3 или 2 мутации) по сравнению со связывающим белком, описанным в настоящем документе, например, мутации, которые не оказывают существенного влияния на функционирование белка. Указанные мутации могут присутствовать в каркасных участках, CDR и/или константных участках. В некоторых вариантах осуществления мутации присутствуют в каркасном участке. В некоторых вариантах осуществления мутации присутствуют в CDR. В некоторых вариантах осуществления мутации присутствуют в константном участке. Является ли конкретная замена допустимой, т.е. не оказывающей неблагоприятного влияния на биологические свойства, такие как связывающая активность, можно предсказать, например, путем определения, является ли мутация консервативной, или с помощью метода Bowie et al. (1990) Science 247:1306-1310.
Фактически человеческий вариабельный участок иммуноглобулина представляет собой вариабельный участок иммуноглобулина, который в достаточном числе положений содержит аминокислоты человеческого каркасного участка, благодаря чему вариабельный участок иммуноглобулина не вызывает иммунный ответ у здорового человека. Фактически человеческое антитело представляет собой антитело, которое в достаточном числе положений содержит человеческие аминокислоты, благодаря чему антитело не вызывает иммунный ответ у здорового человека.
Эпитоп представляет собой участок на соединении-мишени, с которым связывается связывающий белок (например, антитело, такое как Fab или полноразмерное антитело). Если соединение-мишень представляет собой белок, указанный участок может состоять только из аминокислотных компонентов, только из химически модифицированных аминокислот белка (таких как гликозильные фрагменты), или из их сочетаний. Перекрывающиеся эпитопы содержат по меньшей мере один общий аминокислотный остаток, одну общую гликозильную группу, фосфатную группу, сульфатную группу, или другой общий фрагмент молекулы.
Первое связывающее антитело связывается с тем же эпитопом, что и второе связывающее антитело, если первое связывающее антитело связывается с тем же участком на соединении-мишени, что и второе связывающее антитело, или с участком, который перекрывается (например, на 50, 60, 70, 80, 90 или 100%, например, в случае аминокислотной последовательности или другого фрагмента молекулы (такого
- 6 038532 как гликозильная группа, фосфатная группа или сульфатная группа)) с участком, с которым связывается второе связывающее антитело.
Первое связывающее антитело конкурирует за связывание со вторым связывающим антителом, если при связывании первого связывающего антитела с эпитопом уменьшается (например, на 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100% или более) количество второго связывающего антитела, связанного с эпитопом. Конкуренция может быть непосредственной (например, если первое и второе связывающие антитела связываются с одним и тем же эпитопом, или с перекрывающимися эпитопами), или косвенной (например, если связывание первого связывающего антитела с его эпитопом вызывает стерическое изменение соединения-мишени, которое снижает способность второго связывающего антитела связываться с его эпитопом).
Расчеты гомологии или идентичности двух последовательностей (данные термины используются здесь как взаимозаменяемые) выполняют следующим образом.
Последовательности выравнивают с целью оптимального сравнения (например, для оптимального выравнивания можно ввести пробелы в одну или обе из первой и второй аминокислотных или нуклеотидных последовательностей, причем не гомологичные последовательности можно не учитывать при сравнении). Оптимальное выравнивание определяют как наилучший результат, полученный с помощью программы GAP, входящей в пакет программ GCG, при использовании матрицы оценок Blossum 62, где штраф за открытие пробела равен 12, штраф за продолжение пробела равен 4, а штраф за сдвиг рамки пробела равен 5. Затем сравнивают аминокислотные остатки или нуклеотиды в соответствующих аминокислотных или нуклеотидных положениях. Если определенное положение первой последовательности занято таким же аминокислотным остатком или нуклеотидом, что и соответствующее положение второй последовательности, то молекулы являются идентичными по данному положению (в соответствии с данным описанием термин идентичность аминокислот или нуклеиновых кислот эквивалентен термину гомология аминокислот или нуклеиновых кислот). Процент идентичности двух последовательностей является функцией от числа идентичных положений в указанных последовательностях.
В предпочтительном варианте осуществления длина стандартной последовательности, выравниваемой с целью сравнения, составляет по меньшей мере 30%, предпочтительно по меньшей мере 40%, более предпочтительно по меньшей мере 50%, еще более предпочтительно по меньшей мере 60% и еще более предпочтительно по меньшей мере 70, 80, 90, 92, 95, 97, 98 или 100% от длины стандартной последовательности. Например, длина стандартной последовательности может быть равна длине последовательности вариабельного домена иммуноглобулина.
Гуманизированный вариабельный участок иммуноглобулина представляет собой модифицированный вариабельный участок иммуноглобулина, который содержит достаточное число положений, в которых находятся аминокислотные остатки человеческого каркасного участка, благодаря чему вариабельный участок иммуноглобулина не вызывает иммунный ответ у здорового человека. Описания гуманизированных иммуноглобулинов можно найти, например, в патенте США 6407213 и в патенте США 5693762.
Выделенное антитело представляет собой антитело, которое отделено по меньшей мере от 90% по меньшей мере одного из компонентов природного образца, из которого может быть получено выделенное антитело. Антитела могут иметь по меньшей мере определенную степень чистоты, если чистота образцов, или популяции представляющих интерес образцов, составляет по меньшей мере 5, 10, 25, 50, 75, 80, 90, 92, 95, 98 или 99 мас.%.
Пациент, индивидуум или хозяин (данные термины используются как взаимозаменяемые), подлежащий лечению с помощью описанного здесь способа, может представлять собой человека или отличного от человека животного.
Термины прекалликреин и преплазматический калликреин используются в настоящем описании как взаимозаменяемые и относятся к зимогенной форме активного плазматического калликреина, который также известен как прекалликреин.
В настоящем описании термин по существу идентичный (или по существу гомологичный) используют для обозначения первой аминокислотной или нуклеотидной последовательности, содержащей достаточное число аминокислотных остатков или нуклеотидов, идентичных или эквивалентных (например, содержащих подобную боковую цепь, например, аминокислотных остатков, введенных в результате консервативной замены) соответствующим аминокислотным остаткам или нуклеотидам второй аминокислотной или нуклеотидной последовательности, так, что первая и вторая аминокислотные или нуклеотидные последовательности обладают подобными активностями (или кодируют белки, обладающие подобными активностями), включающими в себя связывающую активность, специфичность связывания или биологическую активность. В случае антител второе антитело имеет такую же специфичность, как и первое антитело, и сродство, составляющее по меньшей мере 50% по меньшей мере 25%, или по меньшей мере 10% от сродства первого антитела в отношении того же антигена.
Последовательности, подобные или гомологичные (например, по меньшей мере примерно на 85% идентичные) раскрытым здесь последовательностям, также являются частью данной заявки. В некоторых вариантах осуществления идентичность последовательностей может составлять примерно 85, 90, 91, 92,
- 7 038532
93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или выше. В некоторых вариантах осуществления последовательность антитела, связывающего калликреин плазмы, может быть идентична последовательности антитела, описанного в данном документе, примерно на 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более. В некоторых вариантах осуществления последовательность антитела, связывающего калликреин плазмы, может быть идентична последовательности каркасного участка НС и/или LC (например, FR 1, 2, 3 и/или 4 НС и/или LC) описанного здесь антитела (например, DX-2930) примерно на 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более. В некоторых вариантах осуществления последовательность антитела, связывающего калликреин плазмы, может быть идентична последовательности CDR НС и/или LC (например, CDR 1, 2 и/или 3 НС и/или LC) описанного здесь антитела (например, DX-2930) примерно на 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более. В некоторых вариантах осуществления последовательность антитела, связывающего калликреин плазмы, может быть идентична последовательности константного участка (например, CH1, CH2, CH3 и/или CL1) описанного здесь антитела (например, DX-2930) примерно на 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более.
Кроме того, значительная степень идентичности существует, если сегменты нуклеиновых кислот гибридизуются в выбранных условиях (например, в условиях высокой жесткости) с комплементарной цепью. Нуклеиновые кислоты могут присутствовать в целых клетках, в клеточном лизате или в частично очищенной или по существу чистой форме.
Статистическую значимость можно определить с помощью любого способа, известного в данной области. Примеры статистических анализов включают в себя: Т-тест Стьюдента, непараметрический Uтест Манна-Уитни и непараметрический статистический тест Уилкоксона. Некоторые статистически значимые зависимости характеризуются значением P меньше 0,05 или 0,02. Различия в специфичности или связывающей способности отдельных связывающих белков могут являются статистически значимыми (например, значение P<0,05 или 0,02). Термины индуцирует, ингибирует, потенциирует, повышает, увеличивает, уменьшает и т.п., например, означающие различимые качественные или количественные различия между двумя состояниями, могут относиться к различию, например к статистически значимому различию между этими двумя состояниями.
Терапевтически эффективная доза предпочтительно изменяет измеряемый параметр, например активность калликреина плазмы, в статистически значимой степени, или по меньшей мере примерно на 20%, более предпочтительно по меньшей мере примерно на 40%, еще более предпочтительно по меньшей мере примерно на 60% и еще более предпочтительно по меньшей мере примерно на 80% по сравнению с индивидуумами, не подвергавшимися лечению. Способность соединения модулировать измеряемый параметр, например параметр, связанный с заболеванием, можно оценить с помощью системы животной модели, позволяющей прогнозировать эффективность в отношении человеческих расстройств и состояний. Альтернативно данное свойство композиции можно оценить путем анализа способности соединения модулировать параметр in vitro.
Термин лечение, используемый в данном описании, относится к применению или введению композиции, содержащей одно или несколько активных средств, индивидууму, который имеет аллергическое заболевание, симптом аллергического заболевания или предрасположенность к аллергическому заболеванию с целью излечения, исцеления, облегчения, ослабления, изменения, восстановления, улучшения, оздоровления, или влияния на заболевание, симптомы заболевания или предрасположенность к заболеванию. Термин профилактическое лечение, также известный как превентивное лечение относится к лечению, которое направлено на защиту человека от заболевания, или на снижение риска заболевания, к которому он или она предрасположен, или может быть предрасположен.
Термин предотвращение заболевания у индивидуума относится к фармацевтической обработке индивидуума, например, путем введения лекарственного средства, в результате чего предотвращается появление по меньшей мере одного симптома заболевания, т.е. лекарственное средство вводят до клинического проявления нежелательного состояния (например, заболевания или другого нежелательного состояния животного-хозяина) так, чтобы оно защищало хозяина от развития нежелательного состояния. Термин предотвращение заболевания также может упоминаться как профилактика или профилактическое лечение.
Термин профилактически эффективное количество относится к количеству, эффективному в дозах и в течение периодов времени, необходимых для достижения желаемого профилактического результата. Как правило, поскольку профилактическую дозу используют у индивидуумов до появления заболевания, или на ранней стадии заболевания, профилактически эффективное количество меньше, чем терапевтически эффективное количество.
Антитела, связывающие калликреин плазмы.
Антитела, связывающие калликреин плазмы, предназначенные для применения в описанных здесь способах, могут быть полноразмерными (такими как IgG (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4), IgM, IgA (например, IgA1, IgA2), IgD и IgE), или они могут содержать только антиген-связывающий фрагмент (например, фрагмент Fab, F(ab')2 или ScFv). Связывающее антитело может содержать две тяжелые цепи иммуноглобулинов и две легкие цепи иммуноглобулинов, или оно может представлять собой одноцепочечное антитело. Антитела, связывающие калликреин плазмы, могут представлять собой рекомбинант- 8 038532 ные белки, такие как гуманизированные, CDR-привитые, химерные, деиммунизированные, или полученные in vitro антитела, и необязательно могут содержать константные участки, полученные из последовательностей человеческих зародышевых иммуноглобулинов. В одном из вариантов осуществления антитело, связывающее калликреин плазмы, представляет собой моноклональное антитело.
В одном аспекте изобретение предлагает антитело (например, выделенное антитело), которое связывается с калликреином плазмы (например, с человеческим калликреином плазмы и/или с мышиным калликреином) и содержит по меньшей мере один вариабельный участок иммуноглобулина. Например, антитело содержит последовательность вариабельного домена тяжелой цепи (НС) иммуноглобулина и/или последовательность вариабельного домена легкой цепи (LC) иммуноглобулина. В одном варианте осуществления антитело связывается с калликреином плазмы, например с человеческим плазматическим калликреином и/или мышиным калликреином, и ингибирует его.
Антитело может характеризоваться наличием одного или нескольких из следующих признаков:
(а) присутствие человеческого CDR, или человеческого каркасного участка;
(b) последовательность вариабельного домена НС иммуноглобулина содержит один или несколько (например, 1, 2 или 3) CDR, которые по меньшей мере на 85, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% идентичны CDR описанного здесь вариабельного домена НС;
(с) последовательность вариабельного домена LC иммуноглобулина содержит один или несколько (например, 1, 2 или 3) CDR, которые по меньшей мере на 85, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% идентичны CDR описанного здесь вариабельного домена LC;
(d) последовательность вариабельного домена LC иммуноглобулина по меньшей мере на 85, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% идентична последовательности описанного здесь вариабельного домена LC (например, полноразмерного или его каркасных участков или CDR);
(е) последовательность вариабельного домена НС иммуноглобулина по меньшей мере на 85, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% идентична последовательности описанного здесь вариабельного домена НС (например, полноразмерного или его каркасных участков или CDR);
(f) антитело связывает эпитоп, с которым связывается описанное здесь антитело, или конкурирует за связывание с описанным здесь антителом;
(g) присутствие CDR приматов или каркасного участка приматов;
(h) последовательность вариабельного домена НС иммуноглобулина содержит CDR1, отличающийся по меньшей мере на одну аминокислоту, но не более чем на 2 или 3 аминокислоты от CDR1 описанного здесь вариабельного домена НС;
(i) последовательность вариабельного домена НС иммуноглобулина содержит CDR2, отличающийся по меньшей мере на одну аминокислоту, но не более чем на 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 аминокислот от CDR2 описанного здесь вариабельного домена НС;
(j) последовательность вариабельного домена НС иммуноглобулина содержит CDR3, отличающийся по меньшей мере на одну аминокислоту, но не более чем на 2, 3, 4, 5 или 6 аминокислот от CDR3 описанного здесь вариабельного домена НС;
(k) последовательность вариабельного домена LC иммуноглобулина содержит CDR1, отличающийся по меньшей мере на одну аминокислоту, но не более чем на 2, 3, 4 или 5 аминокислот от CDR1 описанного здесь вариабельного домена LC;
(l) последовательность вариабельного домена LC иммуноглобулина содержит CDR2, отличающийся по меньшей мере на одну аминокислоту, но не более чем на 2, 3 или 4 аминокислоты от CDR2 описанного здесь вариабельного домена LC;
(m) последовательность вариабельного домена LC иммуноглобулина содержит CDR3, отличающийся по меньшей мере на одну аминокислоту, но не более чем на 2, 3, 4 или 5 аминокислот от CDR3 описанного здесь вариабельного домена LC;
(n) последовательность вариабельного домена LC иммуноглобулина отличается по меньшей мере на одну аминокислоту, но не более чем на 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 аминокислот от описанного здесь вариабельного домена LC (например, полноразмерного или его каркасных участков или CDR); и (o) последовательность вариабельного домена НС иммуноглобулина отличается по меньшей мере на одну аминокислоту, но не более чем на 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 аминокислот от описанного здесь вариабельного домена НС (например, полноразмерного или его каркасных участков или CDR).
Белок, связывающий калликреин плазмы, может представлять собой выделенное антитело (например, очищенное по меньшей мере от 70, 80, 90, 95 или 99% других белков). В некоторых вариантах осуществления антитело, связывающее калликреин плазмы, или его композиция, отделены от фрагментов, образовавшихся в результате расщепления антитела (например, DX-2930), которые являются неактивными или частично активными (например, связывающими калликреина плазмы с Ki, составляющей примерно 5000 нМ или больше) по сравнению с антителом, связывающим калликреин плазмы. Так, например, антитело, связывающее калликреин плазмы, очищено по меньшей мере от 70% таких фрагментов, образовавшихся в результате расщепления антитела; в других вариантах осуществления связывающее антитело очищено по меньшей мере от 80% по меньшей мере 90% по меньшей мере 95% по меньшей мере 99% или даже 100% фрагментов, образовавшихся в результате расщепления антитела, которые яв- 9 038532 ляются неактивными или частично активными.
Антитело, связывающее калликреин плазмы, может дополнительно ингибировать калликреин плазмы, например, человеческий плазматический калликреин.
В некоторых вариантах осуществления антитело, связывающее калликреин плазмы, не связывает прекалликреин (например, человеческий прекалликреин и/или мышиный прекалликреин), но связывает активную форму плазматического калликреина (например, человеческого плазматического калликреина и/или мышиного калликреина).
В некоторых вариантах осуществления антитело связывается с активным участком, или находящимся рядом с ним участком каталитического домена калликреина плазмы, или с его фрагментом, или оно связывается с эпитопом, который перекрывается с активным участком калликреина плазмы.
В некоторых аспектах антитело связывается с тем же эпитопом, что и описанное здесь антитело, или конкурирует с ним за связывание.
Антитело может связываться с калликреином плазмы, например, с человеческим плазматическим калликреином, со сродством, составляющим по меньшей мере 105, 106, 107, 108, 109, 1010 и 1011 М-1. В одном из вариантов осуществления антитело связывается с человеческим плазматическим калликреином с Koff ниже, чем 1х10-3, 5х10-4 s-1 или 1х10-4 s'1. В одном из вариантов осуществления антитело связывается с человеческим плазматическим калликреином Kon, превышающим 1х102, 1х103 или 5х103 M-1s-1. В одном варианте осуществления изобретения антитело связывается с плазматическим калликреином, но не связывается с тканевым калликреином и/или плазматическим прекалликреином (например, антитело связывается с тканевым калликреином и/или плазматическим прекалликреином менее эффективно (например, в 5, 10, 50, 100 или 1000 раз менее эффективно, или вообще не связывается, например, по сравнению с отрицательным контролем), по сравнению с калликреином плазмы.
В одном из вариантов осуществления антитело ингибирует активность человеческого плазматического калликреина, например, с Ki менее 10-5, 10-6, 10-7, 10-8, 10-9 и 10-10 М. IC50 антитела может составлять, например, менее 100, 10, 1, 0,5 или 0,2 нМ. Например, антитело может модулировать активность калликреина плазмы, а также продукцию фактора XIIa (например, образующегося из фактора XII) и/или брадикинина (например, образующегося из высокомолекулярного кининогена (HMWK)). Антитело может ингибировать активность калликреина плазмы, и/или продукцию фактора XIIa (например, образующегося из фактора XII) и/или брадикинина (например, образующегося из высокомолекулярного кининогена (HMWK)). Сродство антитела к человеческому плазматическому калликреину может характеризоваться KD менее 100 нм, менее 10 нм, менее 5 нм, менее 1 нм, менее 0,5 нМ. В одном варианте осуществления антитело ингибирует плазматический калликреин, но не ингибирует тканевый калликреин (например, антитело менее эффективно ингибирует тканевый калликреин (например, в 5, 10, 50, 100 или 1000 раз менее эффективно, или вообще не ингибирует, например, по сравнению с отрицательным контролем), по сравнению с калликреином плазмы.
В некоторых вариантах осуществления антитело имеет кажущуюся константу ингибирования (Ki,app) менее 1000, 500, 100, 5, 1, 0,5 или 0,2 нМ.
Последовательности вариабельных доменов НС и LC антител, связывающих калликреин плазмы, могут входить в состав одного полипептида (например, ScFv), или разных полипептидов (например, IgG или Fab).
В одном варианте осуществления последовательности вариабельных доменов НС и LC являются компонентами одной полипептидной цепи. В другом варианте осуществления последовательности вариабельных доменов НС и LC являются компонентами разных полипептидных цепей. Например, антитело представляет собой IgG, такой как IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4. Антитело может представлять собой растворимый Fab. В других вариантах осуществления антитело включает в себя Fab2', ScFv, минитело, гибрид ScFv::Fc, гибрид Fab::HSA, гибрид HSA::Fab, гибрид Fab::HSA::Fab или другие молекулы, которые содержат антиген-связывающий участок одного из связывающих белков настоящего изобретения. Участки VH и VL указанных Fab могут находиться в виде IgG, Fab, Fab2, Fab2', ScFv, пегилированного Fab, пегилированного ScFv, пегилированного Fab2, VH::CH1::HSA+LC, HSA::VH::CH1+LC, LC::HSA+VH::CH1, HSA::LC+VH::CH1, или другой подходящей конструкции.
В одном варианте осуществления антитело представляет собой человеческое или гуманизированное антитело, или является неиммуногенным в организме человека. Например, антитело может содержать один или несколько человеческих каркасных участков антитела, например, все каркасные участки могут быть человеческими, или каркасные участки по меньшей мере на 85, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% идентичные человеческим каркасным участкам. В одном варианте осуществления антитело содержит человеческий домен Fc, или домен Fc, который по меньшей мере на 95, 96, 97, 98 или 99% идентичен человеческому домену Fc.
В одном варианте осуществления антитело представляет собой антитело примата или приматизированное антитело, или является неиммуногенным в организме человека. Например, антитело содержит один или несколько каркасных участков антитела примата, например, все каркасные участки примата, или каркасные участки по меньшей мере на 85, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% идентичные
- 10 038532 каркасным участкам примата. В одном варианте осуществления антитело содержит домен Fc примата, или домен Fc, который по меньшей мере на 95, 96, 97, 98 или 99% идентичен домену Fc примата. Термин примат включает в себя людей (Homo Sapiens), шимпанзе (Pan troglodytes и Pan paniscus (бонобо)), горилл (Gorilla gorilla), гиббонов, обезьян, лемуров, айе-айе (Daubentonia madagascariensis) и долгопятов.
В некоторых вариантах осуществления сродство антитела примата к человеческому плазматическому калликреину характеризуется значением KD менее 1000, 500, 100, 10, 5, 1, 0,5 нМ, например менее 10 нМ, менее 1 нМ, или менее 0,5 нМ.
В некоторых вариантах осуществления антитело не содержит мышиных или кроличьих последовательностей (например, оно не является мышиным или кроличьим антителом).
В некоторых вариантах осуществления антитело, используемое в описанных здесь способах, может представлять собой DX-2930, как описано в данном документе, или его функциональный вариант, или антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и DX-2930, или конкурирует с DX-2930 за связывание с активным калликреином плазмы.
В одном примере функциональный вариант DX-2930 содержит такие же гипервариабельные участки (CDR), как и DX-2930. В другом примере функциональные варианты DX-2930 могут содержать одну или несколько мутаций (таких как консервативные замены) в FR VH или VL по сравнению с FR VH и VL DX-2930. Предпочтительно такие мутации не затрагивают остатки, предположительно взаимодействующие с одним или несколькими CDR, которые можно определить с помощью рутинных методов. В других вариантах осуществления описанные здесь функциональные варианты содержат одну или несколько (например, 1, 2 или 3) мутаций в одном или нескольких участках CDR DX-2930. Предпочтительно такие функциональные варианты сохраняют участки/остатки, отвечающие за связывание антигена, присутствующие в исходной последовательности. В других вариантах осуществления функциональный вариант DX-2930 может содержать цепь VH, аминокислотная последовательность которой по меньшей мере на 85% (например, на 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98 или 99%) идентична последовательности VH DX-2930, и/или цепь VL, аминокислотная последовательность которой по меньшей мере на 85% (например, на 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98 или 99%) идентична последовательности VL DX-2930. Указанные варианты способны связываться с активной формой калликреина плазмы и предпочтительно не связываются с прекалликреином.
Процент идентичности двух аминокислотных последовательностей определяют с помощью алгоритма Karlin and Altschul Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2264-68, 1990, модифицированного, как описано в Karlin and Altschul Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-77, 1993. Такой алгоритм входит в состав программ NBLAST и XBLAST (версия 2.0), Altschul, et al., J. Mol. Biol. 215:403-10, 1990. Поиск белков в BLAST можно проводить с помощью программы XBLAST, оценка=50, длина слова=3, с получением аминокислотных последовательностей, гомологичных молекулам представляющих интерес белков. Если среди двух последовательностей существуют пробелы, можно использовать Gapped BLAST, описанный в Altschul et al., Nucleic. Acids. Res. 25 (17):3389-3402, 1997. При выполнении программ BLAST и Gapped BLAST можно использовать параметры по умолчанию соответствующих программ (например, XBLAST и NBLAST).
Получение антител.
Описанные здесь антитела, способные связывать PKal, можно получить с помощью любого способа, известного в данной области. См., например, Harlow and Lane, (1988) Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, New York.
В некоторых вариантах осуществления антитела, специфичные к целевому антигену (такому как человеческий PKal или его каталитический домен), можно получить с помощью традиционного гибридомного метода. Полноразмерный целевой антиген, или его фрагмент, необязательно связанный с белком-носителем, таким как KLH, можно использовать для иммунизации животного-хозяина с целью получения антител, способных связываться с указанным антигеном. Способ и схема иммунизации животного-хозяина, как правило, соответствуют широко известным и общепринятым методам стимуляции и продукции антител, как описано ниже. Общие способы получения мышиных, гуманизированных и человеческих антител известны в данной области техники и описаны в настоящем документе. Предполагается, что любое млекопитающее, включающее в себя человека, или полученные из него антителопродуцирующие клетки, можно использовать в качестве основы для получения гибридомных клеточных линий млекопитающих, в том числе человеческих. Как правило, животному-хозяину внутрибрюшинно, внутримышечно, перорально, подкожно, интраплантарно и/или внутрикожно вводят определенное количество иммуногена, в том числе, как описано в настоящем документе.
Гибридомы можно получить из лимфоцитов и иммортализованных клеток миеломы с помощью общего метода гибридизации соматических клеток, описанного Kohler В. and Milstein С. (1975) Nature 256:495-497, или его модификакции, описанной Buck D.W. et al., In Vitro, 18:377-381 (1982). Для гибридизации можно использовать имеющиеся в продаже миеломные линии, включающие в себя, без ограничения, X63-Ag8.653, а также линии, которые можно получить из Института Солка, Центр распределения клеток, Сан-Диего, Калифорния, США. Как правило, указанный метод включает в себя гибридизацию клеток миеломы и лимфоидных клеток с использованием, например, вещества, способствующего слиянию клеток, такого как полиэтиленгликоль, или с использованием электрических средств, хорошо из- 11 038532 вестных специалистам в данной области техники. После слияния клетки отделяют от среды, используемой для гибридизации, и выращивают в среде для селективного роста, такой как среда, содержащая гипоксантин-аминоптерин-тимидин (HAT), чтобы удалить негибридизированные исходные клетки. Для культивирования гибридом, которые секретируют моноклональные антитела, можно использовать любую из сред, описанных в данном документе, содержащих, или не содержащих сыворотку. В качестве альтернативы методу гибридизации клеток для получения описанных здесь моноклональных антител против PKal можно использовать EBV-иммортализованные В-клетки. Гибридомы размножают и, если это необходимо, подвергают субклонированию, после чего супернатанты анализируют на активность против иммуногена с помощью традиционных методов иммуноанализа (таких как радиоиммуноанализ, ферментный иммуноанализ или флуоресцентный иммуноанализ).
Гибридомы, которые можно использовать в качестве источника антител, включают в себя все варианты, дочерние клетки исходных гибридом, которые продуцируют моноклональные антитела, способные препятствовать активности PKal. Гибридомы, которые продуцируют такие антитела, можно выращивать in vitro или in vivo с помощью известных методов. Моноклональные антитела, если это необходимо, можно выделить из культуральной среды или из жидкостей организма, с помощью обычных методов очистки иммуноглобулинов, таких как осаждение сульфатом аммония, гель-электрофорез, диализ, хроматография и ультрафильтрация. Нежелательную активность, если она присутствует, можно удалить, например, путем пропускания препарата над адсорбентами, содержащими иммуноген, присоединенный к твердой фазе, с последующим элюированием или отделением целевых антител от иммуногена. В результате иммунизации животного-хозяина целевым антигеном, или фрагментом, содержащим целевую аминокислотную последовательность, конъюгированную с белком, который является иммуногенным для видов, подлежащих иммунизации, таким как гемоцианин лимфы улитки, сывороточный альбумин, бычий тироглобулин или ингибитор соевого трипсина, с использованием бифункционального или дериватизирующего средства, такого как сложный эфир малеимидобензоилсульфосукцинимид (присоединение через остатки цистеина), N-гидроксисукцинимид (через остатки лизина), глутаровый альдегид, янтарный ангидрид, SOCl или R1N=C=NR, где R и R1 обозначают разные алкильные группы, получают популяцию антител (например, моноклональных антител).
При необходимости представляющие интерес (например, продуцируемые гибридомой) антитела (моноклональные или поликлональные) можно секвенировать и затем полинуклеотидную последовательность можно клонировать в векторе, обеспечивающем экспрессию или размножение. Последовательность, кодирующую представляющее интерес антитело, можно сохранить в векторе, введенном в клетку-хозяина, после чего клетку-хозяина можно размножить и заморозить для дальнейшего использования. Альтернативно полинуклеотидную последовательность можно подвергнуть генетическим манипуляциям, чтобы получить гуманизированное антитело или улучшить сродство (аффинное созревание) или другие характеристики антитела. Например, можно сконструировать константный участок, более похожий на константный участок человека, чтобы избежать иммунного ответа, если антитело используют для клинических испытаний и лечения людей. Иногда желательно подвергнуть последовательность антитела генетическим манипуляциям, чтобы достичь более высокого сродства к целевому антигену и более высокой эффективности ингибирования активности PKal. Для специалиста в данной области очевидно, что можно осуществить одно или несколько изменений в полинуклеотидной последовательности, кодирующей антитело, и при этом сохранить специфичность антитела в отношении целевого антигена.
В других вариантах осуществления полностью человеческие антитела можно получить с использованием коммерчески доступных рекомбинантных мышей, которые экспрессируют специфические человеческие иммуноглобулиновые белки. Для получения гуманизированных или человеческих антител также можно использовать трансгенных животных, предназначенных для достижения более желательного (например, для продукции полностью человеческих антител) или более интенсивного иммунного ответа. Примеры таких животных включают в себя XenomouseR™ от Amgen, Inc. (Fremont, Calif.) и HuMAbMouseR™ и ТС Mouse™ от Medarex, Inc. (Princeton N.J.). В альтернативном варианте антитела можно получить рекомбинантным способом с использованием технологии фаговых дисплеев или дрожжевой технологии. См., например, патенты США № 5565332; 5580717; 5733743; и 6265150; и Winter et al. (1994) Annu. Rev. Immunol. 12:433-455. Альтернативно технологию фаговых дисплеев (McCafferty et al. (1990) Nature 348:552-553) можно использовать для получения человеческих антител и фрагментов антител in vitro с использованием репертуаров генов вариабельных (V) доменов, полученных от неиммунизированных доноров.
Антиген-связывающие фрагменты интактного антитела (полноразмерного антитела) можно получить с помощью традиционных методов. Например, фрагменты F(ab')2 можно получить путем расщепления молекулы антитела пепсином, а фрагменты Fab можно получить путем восстановления дисульфидных мостиков фрагментов F(ab')2.
Рекомбинантные антитела, такие как гуманизированные антитела, химерные антитела, одноцепочечные антитела и биспецифические антитела, можно получить с помощью, например, обычной рекомбинантной технологии. В одном примере ДНК, кодирующую моноклональные антитела, специфичные к
- 12 038532 целевому антигену, можно легко выделить и секвенировать с помощью традиционных методов (например, с использованием олигонуклеотидных зондов, способных специфически связываться с генами, кодирующими тяжелые и легкие цепи моноклональных антител). В качестве источника такой ДНК предпочтительно используют гибридомные клетки. После выделения ДНК можно поместить в один или несколько векторов экспрессии, которые затем трансфицируют в клетки-хозяева, такие как клетки E.coli, обезьяньи клетки COS, клетки яичника китайского хомячка (СНО) или клетки миеломы, которые изначально не продуцируют иммуноглобулиновые белки, с достижением синтеза моноклональных антител в рекомбинантных клетках-хозяевах. См., например, публикацию РСТ WO 87/04462. Затем ДНК можно модифицировать, например, путем введения последовательности, кодирующей человеческие константные домены тяжелой и легкой цепей, вместо гомологичной мышиной последовательности, Morrison et al., (1984) Proc. Nat. Acad. Sci. 81:6851, или путем ковалентного присоединения к последовательности, кодирующей иммуноглобулин, полноразмерной последовательности, кодирующей отличный от иммуноглобулина полипептид, или ее фрагмента. С помощью такого способа можно получить рекомбинантные антитела, такие как химерные или гибридные антитела, способные специфически связываться с целевым антигеном.
Способы получения химерных антител хорошо известны в данной области. См., например, Morrison et al. (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81, 6851; Neuberger et al. (1984) Nature 312, 604; и Takeda et al. (1984) Nature 314:452.
Способы конструирования гуманизированных антител также хорошо известны в данной области техники. См., например, Queen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86:10029-10033 (1989). В одном примере вариабельные участки VH и VL исходного нечеловеческого антитела подвергают анализу путем трехмерного молекулярного моделирования с помощью известных в данной области методов. Затем, используя тот же метод молекулярного моделирования, идентифицируют аминокислотные остатки каркасного участка, которые по теоретическим оценкам играют важную роль в формировании правильных структур CDR. Одновременно в любой базе данных генов антител идентифицируют цепи человеческих VH и VL, аминокислотные последовательности которых гомологичны последовательности исходного нечеловеческого антитела, используя исходные последовательности VH и VL для поисковых запросов. Затем выбирают гены акцепторных человеческих VH и VL.
Участки CDR в выбранных человеческих акцепторных генах можно заменить на участки CDR исходного нечеловеческого антитела, или его функциональных вариантов. При необходимости остатки каркасных участков исходной цепи, по теоретическим оценкам участвующие во взаимодействии с участками CDR (см. выше описание), можно использовать для замены соответствующих остатков в акцепторных человеческих генах.
Одноцепочечное антитело можно получить с помощью рекомбинантных методов путем соединения нуклеотидной последовательности, кодирующей вариабельный участок тяжелой цепи, с нуклеотидной последовательностью, кодирующей вариабельный участок легкой цепи. Предпочтительно между двумя вариабельными участками встраивают гибкий линкер. Альтернативно способы получения одноцепочечных антител (описанные в патентах США № 4946778 и 4704692) можно адаптировать для получения фаговой или дрожжевой библиотеки ScFv и затем с помощью традиционных методов из библиотеки можно выбрать клоны ScFv, специфичные к PKal. Положительные клоны можно подвергнуть дальнейшему скринингу, чтобы идентифицировать клоны, которые ингибируют активность PKal.
Антитела, полученные с помощью способа, известного в данной области и описанного в настоящем документе, можно охарактеризовать с использованием методов, хорошо известных в данной области техники. Например, один из таких методов включает в себя идентификацию эпитопа, с которым связывается антиген, или эпитопное картирование. В данной области известно много методов картирования и характеристики местоположения эпитопов на белках, включающих в себя определение кристаллической структуры комплекса антитело-антиген, конкурентные анализы, анализы экспрессии фрагментов гена, и анализы с использованием синтетических пептидов, описанные, например, в главе 11 Harlow and Lane, Using Antibodies, a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 1999. В другом примере эпитопное картирование можно использовать для определения последовательности, с которой связывается антитело. Эпитоп может представлять собой линейный эпитоп, т.е. состоящий из одной цепи аминокислот, или конформационный эпитоп, образованный в результате трехмерного взаимодействия аминокислот, которые необязательно находятся в одной цепи (линейной последовательности первичной структуры). Можно выделить или синтезировать (например, рекомбинантным способом) пептиды разной длины (например, содержащие по меньшей мере 4-6 аминокислот в длину) и использовать их для анализов связывания с антителом. В другом примере эпитоп, с которым связывается антитело, можно определить путем систематического скрининга с использованием перекрывающихся пептидов, полученных из последовательности целевого антигена, и определения их связывания с антителом. В анализах экспрессии фрагментов гена открытую рамку считывания, кодирующую целевой антиген, делят на фрагменты либо случайным образом, либо в соответствии с конкретными генными конструкциями, и определяют способность экспрессированных фрагментов антигена взаимодействовать с тестируемым антителом. Фрагменты гена можно получить, например, методом ПЦР, затем их можно транс
- 13 038532 крибировать и транслировать в белок in vitro в присутствии радиоактивных аминокислот. Затем определяют связывание антитела с радиоактивно меченными фрагментами антигена, используя методы иммунопреципитации и гель-электрофореза. Некоторые эпитопы также можно идентифицировать с использованием больших библиотек случайных пептидных последовательностей, презентированных на поверхности фаговых частиц (фаговые библиотеки). Альтернативно определенную библиотеку перекрывающихся пептидных фрагментов можно тестировать на связывание с тестируемым антителом с помощью простых анализов связывания. В другом примере идентификацию остатков, требуемых, достаточных и/или необходимых для связывания эпитопа, можно осуществить с использованием мутагенеза антигенсвязывающего домена, экспериментов с перестановкой доменов и аланин-сканирующего мутагенеза. Например, эксперименты с перестановкой доменов можно проводить с использованием мутантной формы целевого антигена, в которой разные фрагменты полипептида PKal заменены (перестановлены с) последовательностями из близкородственного, но антигенно отличного белка (такого как другой член семейства белков-нейротрофинов). Путем оценки связывания антитела с мутантным PKal (например, с мутантами, описанными ниже в примере 2), можно определить значение конкретного фрагмента антигена для связывания антитела.
Альтернативно можно провести конкурентные анализы с использованием других антител, заведомо способных связываться с тем же антигеном, чтобы определить, связывается ли антитело с тем же эпитопом, что и другие антитела. Конкурентные анализы хорошо известны специалистам в данной области.
Любой из подходящих методов, известных в данной области, таких как методы эпитопного картирования, описанные в настоящем документе, можно использовать для того, чтобы определить, связывается ли антитело против PKal с одним или несколькими из описанных здесь конкретных остатков/сегментов PKal. Кроме того, способность антитела взаимодействовать с одним или несколькими из указанных определенных остатков PKal можно оценить с помощью рутинных методов. Например, с помощью способа, описанного ниже в примере 1, можно определить кристаллическую структуру и, соответственно, расстояния между остатками PKal и одним или несколькими остатками антитела. Указанные расстояния могут свидетельствовать о наличии или отсутствии взаимодействия конкретного остатка PKal с одним или несколькими остатками антитела. Кроме того, с помощью подходящих способов, таких как конкурентные анализы и направленный мутагенез, можно определить специфичность связывания антитела-кандидата против PKal в отношении PKal по сравнению с другой мишенью, такой как мутантный PKal.
Альтернативно антитела против PKal можно выделить из библиотеки антител, такой как библиотека дисплеев с помощью способов, известных в данной области.
После идентификации антитела против PKal с помощью любого известного в данной области способа и подтверждения того, что данное антитело можно использовать в описанном здесь способе лечения, такое антитело можно продуцировать, используя стандартные рекомбинантные методы.
Обычно нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, клонируют в векторе, обеспечивающем экспрессию нуклеиновой кислоты. Само собой разумеется, если белок содержит несколько полипептидных цепей, эти цепи можно клонировать в одном векторе, или в разных векторах, которые могут экспрессироваться в одной клетке, или в разных клетках.
Некоторые антитела, например Fab, можно продуцировать в бактериальных клетках, таких как клетки E.coli (см., например, Nadkarni A. et al., 2007 Protein Expr. Purif. 52 (1):219-29). Например, если Fab кодируется последовательностями, входящими в состав вектора фагового дисплея, который содержит подавляемый стоп-кодон между объектом дисплея и белком бактериофага (или его фрагментом), векторную нуклеиновую кислоту можно трансфицировать в бактериальную клетку, которая не может подавлять стоп-кодон. В данном случае Fab не гибридизуется с белком гена III и секретируется в периплазму и/или среду.
Антитела также могут продуцироваться в эукариотических клетках. В одном варианте осуществления антитела (например, ScFv-x) экспрессируются в дрожжевой клетке, такой как Pichia (см., например, Powers et al., 2001, J. Immunol. Methods. 251:123-35; Schoonooghe S. et al., 2009 BMC Biotechnol. 9:70; Abdel-Salam H.A. et al., 2001 Appl. Microbiol. Biotechnol. 56(1-2):157-64; Takahashi K. et al., 2000 Biosci. Biotechnol. Biochem. 64 (10) :2138-44; Edqvist J. et al., 1991 J. Biotechnol. 20(3):291-300), Hanseula или Saccharomyces. Специалист в данной области может оптимизировать продукцию антитела в дрожжах путем оптимизации, например содержания кислорода (см., например, Baumann K., et al. 2010 ВМС Syst. Biol. 4:141), осмолярности (см., например, Dragosits M. et al., 2010 ВМС Genomics 11:207), температуры (см., например, Dragosits M. et al., 2009 J. Proteome Res. 8(3): 1380-92), условий ферментации (см., например, Ning D. et al. 2005 J. Biochem. and Mol. Biol. 38(3): 294-299), штамма дрожжей (см., например, Kozyr A.V. et al., 2004 Mol. Biol. (Mosk) 38 (6) : 1067-75; Horwitz A.H. et al., 1988 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85 (22): 8678-82; Bowdish K. et al., 1991 J. Biol. Chem. 266(18):11901-8), избыточной экспрессии белков с целью увеличения продукции антитела (см., например, Gasser В. et al., 2006 Biotechol. Bioeng. 94(2):353-61), уровня кислотности культуры (см., например, Kobayashi H. et al., 1997 FEMS Microbiol. Lett. 152 (2):23542), концентрации субстратов и/или ионов (см., например, Ko J.H. et al., 2996 Appl. Biochem. Biotechnol. 60(1):41-8). Кроме того, дрожжевые системы можно использовать для получения антител с более дли- 14 038532 тельным периодом полужизни (см., например, Smith B.J. et al., 2001 Bioconjug. Chem. 12 (5):750-756).
В одном предпочтительном варианте осуществления антитела получают в клетках млекопитающих. Клетки-хозяева млекопитающих, предпочтительно используемые для экспрессии клона антител или их антиген-связывающих фрагментов, включают в себя клетки яичника китайского хомячка (клетки СНО) (в том числе клетки СНО dhfr-, описанные в Urlaub and Chasm, 1980, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:42164220, используемые с селектируемым маркером DHFR, например, как описано в Kaufman and Sharp, 1982, Mol. Biol. 159:601 621), лимфоцитарные клеточные линии, например клетки миеломы NS0 и клетки SP2, клетки COS, клетки HEK293T (J. Immunol. Methods (2004) 289(1-2):65-80) и клетки трансгенного животного, например трансгенного млекопитающего. Например, клетка представляет собой клетку эпителия молочной железы.
В некоторых вариантах осуществления антитела, связывающие калликреин плазмы, продуцируют в растении или в бесклеточной системе (см., например, Galeffi P. et al., 2006 J. Transl. Med. 4:39).
Помимо нуклеотидной последовательности, кодирующей диверсифицированный домен иммуноглобулина, рекомбинантные векторы экспрессии могут содержать другие последовательности, такие как последовательности, которые регулируют репликацию вектора в клетках-хозяевах (например, точки начала репликации), и селектируемые маркерные гены. Селектируемый маркерный ген облегчает отбор клеток-хозяев, содержащих вектор (см., например, патенты США № 4399216, 4634665 и 5179017). Например, селектируемый маркерный ген, как правило, придает клетке-хозяину, в которую введен вектор, устойчивость к лекарственным средствам, таким как G418, гигромицину или метотрексату. Предпочтительные селектируемые маркерные гены включают в себя ген дигидрофолатредуктазы (DHFR) (для отбора/амплификации клеток-хозяев dhfr- в присутствии метотрексата) и ген neo (для отбора по G418).
В типичной системе рекомбинантной экспрессии антитела или его антиген-связывающего фрагмента рекомбинантный вектор экспрессии, кодирующий как тяжелую цепь антитела, так и легкую цепь антитела, вводят в клетки СНО dhfr- путем трансфекции, опосредованной фосфатом кальция. В рекомбинантном векторе экспрессии каждый из генов тяжелой и легкой цепей антитела функционально связан с энхансерными/промоторными регуляторными элементами (например, полученными из SV40, CMV, аденовируса и т.п., такими как регуляторный элемент энхансер CMV/промотор AdMLP или регуляторный элемент энхансер SV40/промотор AdMLP), обеспечивающими высокие уровни транскрипции генов.
Рекомбинантный вектор экспрессии также несет ген DHFR, который позволяет проводить отбор клеток СНО, трансфицированных вектором, путем отбора/амплификации в присутствии метотрексата. Выбранные трансформированные клетки-хозяева культивируют, обеспечивая экспрессию тяжелой и легкой цепей антитела, после чего из культуральной среды выделяют интактное антитело. Для получения рекомбинантного вектора экспрессии, трансфекции клеток-хозяев, отбора трансформантов, культивирования клеток-хозяев и извлечения антитела из культуральной среды используют стандартные методы молекулярной биологии. Например, некоторые антитела можно выделить методом аффинной хроматографии с использованием носителя, конъюгированного с белком А или белком G.
Если антитела содержат домен Fc, система продукции антитела может вырабатывать антитела, в которых участок Fc является гликозилированным. Например, домен Fc молекул IgG может быть гликозилированным по аспарагину 297 в домене СН2. Этот аспарагин является участком для модификации олигосахаридами двухантенарного типа. Показано, что данное гликозилирование необходимо для осуществления эффекторных функций, опосредованных рецепторами Fcg и комплементом C1q (Burton and Woof, 1992, Adv. Immunol. 51:1-84; Jefferis et al., 1998, Immunol. Rev. 163:59-76). В одном варианте осуществления домен Fc продуцируется в системе экспрессии млекопитающих, которая обеспечивает надлежащее гликозилирование остатка, соответствующего аспарагину 297. Домен Fc также может содержать другие эукариотические пост-трансляционные модификации.
Антитела также могут продуцироваться трансгенным животным. Например, в патенте США № 5849992 описан способ экспрессии антитела в молочной железе трансгенного млекопитающего. Конструируют трансген, который содержит молоко-специфичный промотор и нуклеиновые кислоты, кодирующие представляющее интерес антитело и сигнальную последовательность, обеспечивающую секрецию. Молоко, вырабатываемое самками таких трансгенных млекопитающих, содержит секретируемое в него представляющее интерес антитело. Антитело можно выделить из молока, или, в некоторых способах применения, можно использовать непосредственно молоко.
Фармацевтические композиции.
Одно или несколько из описанных здесь антител могут входить в состав композиции, например фармацевтически приемлемой композиции или фармацевтической композиции. Антитело, связывающее калликреин плазмы, может ввести в состав композиции вместе с фармацевтически приемлемым носителем. В некоторых вариантах осуществления композиция, например фармацевтически приемлемая композиция или фармацевтическая композиция, может содержать от 100 до 300 мг описанного здесь антитела (например, DX-2930 в дозе 100 или 300 мг), необязательно, вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
Фармацевтически приемлемый носитель включает в себя любые и все физиологически совместимые растворители, диспергирующие среды, покрытия, противобактериальные и противогрибковые сред- 15 038532 ства, изотонические средства, средства, замедляющие абсорбцию и т.п. Предпочтительно выбирают носитель, подходящий для внутривенного, внутримышечного, подкожного, парентерального, спинномозгового или эпидермального введения (например, путем инъекции или инфузии), хотя можно использовать и носители, подходящие для ингаляции и интраназального введения.
Фармацевтически приемлемая соль представляет собой соль, которая сохраняет желательную биологическую активность соединения, не оказывая при этом никаких нежелательных токсических эффектов (см., например, Berge S.M. et al., 1977, J. Pharm. Sci. 66:1-19). Примеры таких солей включают в себя кислотно-аддитивные соли и основно-аддитивные соли. Кислотно-аддитивные соли включают в себя соли, образованные нетоксичными неорганическими кислотами, такими как соляная, азотная, фосфорная, серная, бромистоводородная, иодистоводородная, фосфористая кислота и т.п., а также нетоксичными органическими кислотами, такими как алифатические моно- и дикарбоновые кислоты, фенилзамещенные алкановые кислоты, гидроксильные алкановые кислоты, ароматические кислоты, алифатические и ароматические сульфоновые кислоты и т.п. Основно-аддитивные соли включают в себя соли, образованные щелочно-земельными металлами, такими как натрий, калий, магний, кальций и тому подобное, а также нетоксичными органическими аминами, такими как N,N'-дибензилэтилендиамин, Nметилглюкамин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, этилендиамин, прокаин и т.п.
Композиции могут находиться в виде разных форм. К ним относятся, например, жидкие, полутвердые и твердые лекарственные формы, такие как жидкие растворы (например, растворы для инъекций и инфузий), дисперсии или суспензии, таблетки, пилюли, порошки, липосомы и суппозитории. Форма может зависеть от предполагаемого способа введения и терапевтического применения. Многие композиции представляют собой растворы для инъекций или инфузий, такие как композиции, подобные используемым для введения антител человеку. Типичным способом введения является парентеральный способ (включающий в себя внутривенное, подкожное, внутрибрюшинное, внутримышечное введение). В одном варианте осуществления белок, связывающий калликреин плазмы, вводят путем внутривенной инфузий или инъекции. В другом предпочтительном варианте осуществления белок, связывающий калликреин плазмы, вводят путем внутримышечной или подкожной инъекции. В следующем предпочтительном варианте осуществления белок, связывающий калликреин плазмы, вводят путем внутрибрюшинной инъекции.
Фразы парентеральное введение и вводить парентерально, используемые в данном описании для обозначения способов введения, отличных от кишечного и местного введения, как правило, осуществляемых путем инъекции, включают в себя, без ограничения, внутривенные, внутримышечные, внутриартериальные, интратекальные, интракапсулярные, интраорбитальные, внутрисердечные, внутрикожные, внутрибрюшинные, транстрахеальные, подкожные, подэпидермисные, внутрисуставные, подкапсульные, субарахноидальные, интраспинальные, эпидуральные и внутригрудинные инъекции и инфузий.
Композиция может находиться в виде раствора, микроэмульсии, дисперсии, липосомы или другой упорядоченной структуры, которая может содержать высокую концентрацию лекарственного средства. Стерильные растворы для инъекций можно получить путем введения связывающего белка в требуемом количестве в подходящий растворитель, наряду с одним или несколькими из перечисленных выше ингредиентов, в зависимости от необходимости, с последующей стерилизацией фильтрованием. Дисперсии обычно получают путем введения активного соединения в стерильный носитель, который содержит основную диспергирующую среду и другие необходимые ингредиенты из перечисленных выше. Предпочтительные способы получения стерильных порошков, предназначенных для приготовления стерильных растворов для инъекций, включают в себя вакуумную сушку и сушку из замороженного состояния, которые позволяют получать порошок, содержащий активный ингредиент и любые другие желательные ингредиенты, входящие в состав стерилизованного фильтрацией раствора. Надлежащую текучесть раствора можно достичь, например, путем применения покрытия, такого как лецитин, поддержания нужного размера частиц в дисперсии и использования поверхностно-активных веществ. Пролонгированную абсорбцию композиций для инъекций можно достичь путем включения в композицию средства, замедляющего абсорбцию, такого как соль моностеарат и желатин.
Антитело, связывающее калликреин плазмы, можно вводить разными способами, включающими в себя внутривенную инъекцию или инфузию. Например, при некоторых терапевтических применениях белок, связывающий калликреин плазмы, можно вводить путем внутривенной инфузии со скоростью менее 30, 20, 10, 5 или 1 мг/мин с достижением дозы примерно от 1 до 100 мг/м2 или от 7 до 25 мг/м2. Способ и/или режим введения варьирует в зависимости от желаемых результатов. В некоторых вариантах осуществления активное соединение можно объединить с носителем, который может защищать соединение от быстрого высвобождения, с получением, например, композиции с контролируемым высвобождением, включающей в себя имплантаты и микроинкапсулированные системы доставки. Можно использовать биоразлагаемые, биосовместимые полимеры, такие как этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, коллаген, полиортоэфиры и полимолочная кислота. Разработано много способов получения таких композиций. См., например, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., 1978, Marcel Dekker, Inc., New York.
Фармацевтические композиции можно вводить с помощью медицинских устройств. Например, в одном варианте осуществления описанную здесь фармацевтическую композицию можно вводить с по- 16 038532 мощью такого устройства, как безыгольное устройство для подкожных инъекций, насос или имплантат.
В некоторых вариантах осуществления белок, связывающий калликреин плазмы, может входить в состав композиции, обеспечивающей надлежащее распределение in vivo. Например, гематоэнцефалический барьер (ГЭБ) не пропускает многие высокогидрофильные соединения. Чтобы гарантировать проникновение описанных здесь терапевтических соединений через ГЭБ (если это необходимо), их можно заключить, например, в липосомы. Способы промышленного получения липосом описаны, например, в патентах США № 4522811; 5374548; и 5399331. Липосомы могут содержать один или несколько фрагментов, обеспечивающих избирательную транспортировку в конкретные клетки или органы, повышая таким образом направленность доставки лекарственного средства (см., например, V.V. Ranade, 1989, J. Clin. Pharmacol. 29:685).
Схемы приема лекарственных средств можно корректировать с целью достижения оптимального желаемого ответа (например, терапевтического ответа). Например, лекарственное средство можно вводить в виде одного болюса или нескольких разделенных доз в течение длительного времени, или дозу лекарственного средства можно пропорционально уменьшить или увеличить в зависимости от остроты терапевтической ситуации. Особенно предпочтительно парентеральные композиции получают в виде единичной дозированной формы, обеспечивающей простоту введения и однородность дозирования. Термин единичная дозированная форма в данном описании относится к физически дискретным единицам, которые можно использовать в качестве однократных доз для введения индивидуумам, подлежащим лечению; причем каждая единица содержит заданное количество активного соединения, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с подходящим фармацевтическим носителем. Параметры единичных дозированных форм могут обуславливаться и непосредственно зависеть от: (а) индивидуальных характеристик активного соединения и конкретного терапевтического эффекта, который нужно достичь; и (b) ограничений, существующих в области получения композиций на основе такого активного соединения, в отношении лечения чувствительности у индивидуумов.
Иллюстративный, не ограничивающий диапазон терапевтически или профилактически эффективного количества описанного здесь антитела составляет 0,1-20 мг/кг, более предпочтительно 1-10 мг/кг. Антитело против калликреина плазмы можно вводить, например, путем внутривенной инфузии, например, со скоростью менее 30, 20, 10, 5 или 1 мг/мин с достижением дозы примерно от 1 до 100 мг/м2 или примерно от 5 до 30 мг/м2. Величина дозы может варьировать в зависимости от типа и тяжести состояния, подлежащего облегчению. Для конкретного индивидуума конкретные режимы дозирования можно корректировать с течением времени в соответствии с индивидуальной потребностью и профессиональной оценкой лица, назначающего введение композиции или наблюдающего за введением композиции.
В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество описанного здесь антитела (такого как DX-2930) составляет от 30 до 400 мг, от 30 до 300 мг, от 30 до 250 мг, от 30 до 200 мг, от 30 до 150 мг, от 30 до 100 мг, от 30 до 50 мг, от 50 до 400 мг, от 50 до 300 мг, от 50 до 250 мг, от 50 до 200 мг, от 50 до 150 мг, от 50 до 100 мг, от 100 до 400 мг, от 100 до 300 мг, от 100 до 250 мг, от 100 до 200 мг, от 100 до 150 мг, от 150 до 400 мг, от 150 до 300 мг, от 150 до 250 мг, от 150 до 200 мг, от 200 до 400 мг, от 200 до 300 мг, от 200 до 250 мг, от 250 до 400 мг, от 250 до 300 мг, или от 300 до 400 мг, или оно может быть равно любому целому числу, входящему в указанные диапазоны. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения терапевтически или профилактически эффективное количество составляет от 30 до 300 мг. В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество составляет 300 мг или более. В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество составляет 400 мг или более. В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество составляет от 100 до 300 мг (100, 150, 200, 250 или 300 мг).
В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество описанного здесь антитела (например, DX-2930) составляет 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390 или 400 мг. В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество составляет 30, 100 или 300 мг. В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество составляет 100 или 300 мг. В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество составляет 100 мг. В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество составляет 300 мг.
В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество вводят по меньшей мере два раза по меньшей мере три раза по меньшей мере четыре раза по меньшей мере пять раз по меньшей мере шесть раз по меньшей мере семь раз по меньшей мере восемь раз по меньшей мере девять раз по меньшей мере десять раз или больше. В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество вводят ежедневно, через день, каждый третий день, каждый четвертый день, каждый пятый день, каждый шестой день, каждую неделю, каждую вторую неделю, каждые три недели, каждые четыре недели, каждые пять недель, каждые шесть недель, каждые семь недель, каждые восемь недель или больше. В некоторых вариантах осуществления
- 17 038532 терапевтически или профилактически эффективное количество, которое составляет 100 или 300 мг, вводят раз в две недели или раз в четыре недели. В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество антитела, которое составляет 100 мг, вводят один раз в две недели. В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество антитела, которое составляет 300 мг, вводят один раз в две недели, или один раз в четыре недели. В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество антитела, которое составляет 300 мг, вводят один раз в две недели. В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество, которое составляет 300 мг, вводят один раз в четыре недели.
В некоторых вариантах осуществления терапевтически или профилактически эффективное количество представляет собой количество, которое поддерживает концентрацию антитела в плазме или сыворотке выше, чем примерно 80 нМ (например, выше 100 нм, выше 150 нм или 200 нм). В некоторых вариантах осуществления количество антитела является эффективным для поддержания концентрации антитела в плазме или сыворотке в диапазоне примерно 80-300 нМ, например 80-100, 80-120, 80-150, 100-150, 100-200, 150-200 или 200-300 нМ. Концентрацию в плазме или сыворотке можно измерить с помощью подходящего анализа, такого как анализ активности калликреина плазмы, например, описанный в настоящем документе, иммунологический анализ, например анализ с использованием метода ELISA или вестерн-блоттинга, с помощью которого можно определять расщепленный кининоген, как описано в данном документе, или по масс-спектрометрический анализ.
Описанные здесь фармацевтические композиции могут содержать терапевтически эффективное количество или профилактически эффективное количество описанного здесь белка, связывающего калликреин плазмы.
Наборы.
Одно или несколько из описанных здесь антител, связывающих калликреин плазмы, могут предоставляться в составе набора, например в качестве компонента набора. Например, набор может содержать: (а) антитело, связывающее калликреин плазмы, например композицию (такую как фармацевтическая композиция), которая содержит антитело, связывающее калликреин плазмы, и, необязательно, (b) информационную документацию. Информационная документация может представлять собой описательную, обучающую, маркетинговую или другую документацию, относящуюся к описанному здесь способу и/или к применению антитела, связывающего калликреин плазмы, например, в описанном здесь способе. В некоторых вариантах осуществления набор содержит одну или несколько доз антитела, связывающего калликреин плазмы, например, DX-2930. В некоторых вариантах осуществления одна или несколько доз составляют 100 или 300 мг.
Информационная документация набора не ограничивается по форме. В одном варианте осуществления информационная документация может содержать информацию о получении соединения, молекулярной массе соединения, концентрации, дате истечения срока действия, партии или месте производства, и др. В одном варианте осуществления информационная документация относится к применению антитела для лечения, профилактики или диагностики нарушений и состояний, например заболевания или состояния, связанного с калликреином плазмы.
В одном варианте осуществления информационная документация может содержать инструкции по введению антитела, связывающего калликреин плазмы, например могут быть указаны подходящие для осуществления описанных здесь способов дозы, лекарственные формы, способы введения или схемы дозирования (например, дозы, лекарственные формы, схемы дозирования или способы введения, описанные в данном документе). В другом варианте осуществления информационная документация может содержать инструкции по введению антитела, связывающего калликреин плазмы, подходящему индивидууму, например человеку, например человеку, страдающему от заболевания или состояния, или имеющему риск заболевания или состояния, связанного с калликреином плазмы. Например, документация может содержать инструкции по введению белка, связывающего калликреин плазмы, пациенту, страдающему от расстройства или состояния, описанного в данном документе, например заболевания, связанного с калликреином плазмы, например, в соответствии со схемой дозирования, описанной в настоящем документе. Информационная документация наборов не ограничивается по форме. Во многих случаях информационная документация, например инструкции, может предоставляться в печатном виде, однако она может находиться и в других форматах, таких как машиночитаемый материал.
Антитело, связывающее калликреин плазмы, может быть получено в виде любой формы, например в виде жидкой, высушенной или лиофилизированной формы. Предпочтительно антитело, связывающее калликреин плазмы, является практически чистым и/или стерильным. Если антитело, связывающее калликреин плазмы, находится в виде жидкого раствора, жидкий раствор предпочтительно представляет собой водный раствор, более предпочтительно стерильный водный раствор. Если антитело, связывающее калликреин плазмы, находится в виде высушенной формы, перерастворение, как правило, проводят путем добавления подходящего растворителя. Растворитель, такой как стерильная вода или буфер, может входить в состав набора.
Набор может включать в себя один или несколько контейнеров с композицией, содержащей антите
- 18 038532 ло, связывающее калликреин плазмы. В некоторых вариантах осуществления набор содержит отдельные контейнеры, разделители или отсеки для композиции и информационной документации. Например, композиция может содержаться в бутылке, флаконе или шприце, а информационная документация может быть прикреплена к контейнеру. В других вариантах осуществления отдельные элементы набора содержатся в одном, неразделенном контейнере. Например, композиция содержится в бутылке, флаконе или шприце, а информационная документация прикреплена к нему в виде этикетки. В некоторых вариантах осуществления набор содержит несколько (например, упаковку) отдельных контейнеров, каждый из которых содержит одну или несколько единичных дозированных форм (например, лекарственной формы, описанной в данном документе) антитела, связывающего калликреин плазмы. Например, набор может включать в себя несколько шприцев, ампул, пакетов из фольги, или блистерных упаковок, каждая из которых содержит однократную дозу антитела, связывающего калликреин плазмы. Контейнеры, входящие в состав набора, могут быть герметичными, водонепроницаемыми (например, непроницаемыми при изменении влажности или испарении), и/или светонепроницаемыми.
Набор необязательно содержит устройство, подходящее для введения композиции, например, шприц или любое подобное устройство для доставки. В одном варианте осуществления устройство представляет собой имплантируемое устройство, которое обеспечивает высвобождение отмеренных доз антитела. Настоящее изобретение также охватывает способ получения набора, например, путем объединения компонентов, описанных в данном документе.
Лечение.
В некоторых аспектах изобретение предлагает применение антител, способных связываться с активным калликреином плазмы (например, человеческим активным калликреином плазмы), для лечения НАЕ. Антитела, подходящие для применения в описанном здесь способе лечения, включают в себя DX2930 или его функциональный вариант, описанный в данном документе, антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и DX-2930, или антитело, которое конкурирует с DX-2930 за связывание с человеческим активным калликреином плазмы.
Наследственный ангионевротический отек.
Наследственный ангионевротический отек (РВВ) также известен как Квинке отек, дефицит ингибитора эстеразы С1, дефицит ингибитора С1 и наследственный острый ограниченный отек (HANE). НАЕ характеризуется рецидивирующими эпизодами тяжелого опухания (ангионевротический отек), которое может поражать, например, конечности, лицо, половые органы, желудочно-кишечный тракт и дыхательные пути. Симптомы НАЕ включают в себя, например, опухание рук, ног, губ, глаз, языка и/или горла; блокаду дыхательных путей, которая может включать в себя отек горла и внезапную хрипоту; повторяющиеся эпизоды спастической боли в животе без видимой причины; и/или отек кишечника, который может быть тяжелым и может привести к спастическим болям в животе, рвоте, обезвоживанию, диарее, боли и/или шоку. Примерно у одной трети индивидуумов, страдающих от НАЕ, во время приступа появляется не зудящая сыпь, называемая ревматоидная эритема.
Отек дыхательных путей может быть опасным для жизни и является причиной смерти некоторых пациентов. Процент смертности находится в диапзоне 15-33%. НАЕ является причиной примерно 1500030000 посещений отделения неотложной помощи в год.
Травма или стресс, обусловленные стоматологическими процедурами, болезнями (например, вирусными заболеваниями, такими как простуда и грипп), менструацией и хирургическим вмешательством, могут инициировать приступ ангионевротического отека. Чтобы предотвратить острые приступы НАЕ, пациенты могут попытаться избежать воздействия конкретных стимулов, которые ранее вызывали приступы. Однако зачастую приступы возникают в отсутствии известных инициирующих факторов. Как правило, симптомы НАЕ впервые появляются в детском возрасте и усиливаются в период полового созревания. В среднем у людей, не принимающих лечение, приступы возникают раз в неделю или в 2 недели, а большинство эпизодов длятся примерно от 3 до 4 дней (ghr.nlm.nih.gov/condition/hereditaryangioedema). Частота и продолжительность приступов сильно варьируют среди людей с наследственным ангионевротическим отеком, даже среди людей, относящихся к одной семье.
Существуют три типа НАЕ, известных как типы I, II и III, причем все указанные типы можно лечить с помощью способов, описанных в настоящем документе. Установлено, что НАЕ поражает 1 из 50000 человек, при этом тип I встречается примерно в 85% случаев, тип II встречается примерно в 15% случаев, а тип III встречается крайне редко. Тип III описан совсем недавно, причем вначале считалось, что он встречается только у женщин, однако были обнаружены семьи, в которых от данного заболевания страдали мужчины.
НАЕ наследуется по аутосомно-доминантному типу, таким образом, что пораженный данным заболеванием индивидуум может наследовать мутацию от одного из пораженных родителей. В гене также могут возникать новые мутации, и, следовательно, НАЕ может также встречаться у людей, у которых в семье отсутствуют случаи данного заболевания. По оценкам, 20-25% случаев являются результатом новой спонтанной мутации.
Мутации в гене SERPING1 вызывают наследственный ангионевротический отек типа I и типа II. Ген SERPING1 отвечает за продукцию белка-ингибитора С1, который играет важную роль в регуляции
- 19 038532 воспаления. Ингибитор С1 блокирует активность некоторых белков, которые инициируют воспаление. Мутации, которые вызывают наследственный ангионевротический отек типа I, приводят к снижению уровня ингибитора С1 в крови. И наоборот, мутации, обуславливающие тип II, приводят к продукции аномально функционирующего ингибитора С1. В отсутствии нужных уровней функционального ингибитора С1 образуются избыточные количества брадикинина. Брадикинин инициирует воспаление путем повышения истечения жидкости через стенки кровеносных сосудов в ткани организма. Избыточное накопление жидкостей в тканях организма вызывает случаи опухания у людей с наследственным ангионевротическим отеком типа I и типа II.
Мутации в гене F12 связаны с некоторыми случаями наследственного ангионевротического отека типа III. Ген F12 отвечает за продукцию фактора свертывания крови XII. Помимо того, что он играет ключевую роль в процессе свертывания (коагуляции) крови, фактор XII также является важным стимулятором воспаления и участвует в продукции брадикинина. Некоторые мутации в гене F12 обуславливают продукцию фактора XII, обладающего повышенной активностью. В результате образуется больше брадикинина, и стенки кровеносных сосудов становятся более проницаемыми, что приводит к эпизодам опухания. Причины других случаев наследственных ангионевротических отеков типа III остаются неизвестными. В таких случаях за развитие заболевания могут отвечать мутации в одном или нескольких из пока неидентифицированных генов.
НАЕ может проявляться подобно другим формам ангионевротического отека, возникающим в результате аллергии или других заболеваний, но он существенно отличается по причине и способам лечения. Если наследственный ангионевротический отек ошибочно диагностируют как аллергию, его обычно лечат антигистаминными средствами, стероидами и/или эпинефрином, которые, как правило, неэффективны при НАЕ, хотя эпинефрин можно использовать в случае угрожающих жизни реакций. Кроме того, при ошибочной диагностике иногда проводят ненужное эксплораторное хирургическое вмешательство у пациентов с вздутием живота, а у некоторых пациентов с НАЕ боли в животе неправильно диагностируют как психосоматические.
Способы лечения с использованием ингибитора С1, а также другие способы лечения НАЕ, описаны в Kaplan A.P., J. Allergy Clin. Immunol., 2010, 126 (5):918-925.
Экстренное лечение приступов НАЕ проводят, чтобы как можно быстрее остановить развитие отека. Один из способов экстренного лечения включает в себя внутривенное ведение концентрата ингибитора С1, полученного из донорской крови; однако такое лечение не доступно во многих странах. В чрезвычайных ситуациях, если концентрат ингибитора С1 отсутствует, в качестве альтернативы можно использовать свежезамороженную плазму (FFP), так как она также содержит ингибитор С1.
Очищенный ингибитор С1, полученный из человеческой крови, используют в Европе с 1979 года. В настоящее время в США существуют несколько способов лечения с использованием ингибитора С1, а в Канаде доступны два продукта на основе ингибитора C1. Berinert P (CSL Behring), который представляет собой пастеризованный препарат, утвержден FDA в 2009 году для применения при острых приступах. Cinryze (ViroPharma), который получают путем нанофильтрации, утвержден FDA в 2008 году для профилактики. Rhucin (Pharming) представляет собой рекомбинантный ингибитор С1 на стадии разработки, который не несет риска передачи инфекционных заболеваний, обусловленных патогенными микроорганизмами, присутствующими в человеческой крови.
Лечение острого приступа НАЕ также может включать в себя применение лекарств для облегчения боли и/или в.в. введение жидкостей.
Другие способы лечения могут включать в себя стимуляцию синтеза ингибитора С1 или уменьшение потребления ингибитора С1. Андрогенные препараты, такие как даназол, могут уменьшать частоту и тяжесть приступов, стимулируя продукцию ингибитора С1.
Helicobacter pylori может инициировать абдоминальные приступы. Антибиотики, используемые для лечения h.Pylori, уменьшают абдоминальные приступы.
Новые способы лечения направлены на контактный каскад. Экаллантид (KALBITOR®, DX-88, Dyax), ингибирующий калликреин плазмы, разрешен для применения в США. Икатибант (Firazyr®, Shire), ингибирующий рецептор брадикинина В2, разрешен для применения в Европе и США.
Диагноз НАЕ может быть установлен, например, на основе семейной истории болезни и/или анализов крови. Лабораторные показатели, связанные с НАЕ типов I, II и III, описаны, например, в Kaplan A.P., J. Allergy Clin. Immunol., 2010, 126(5):918-925. При НАЕ типа I уровень ингибитора С1 снижается, как и уровень С4, тогда как уровень C1q остается в норме. При НАЕ типа II уровень ингибитора С1 остается нормальным или увеличивается; однако функционирование ингибитора С1 является аномальным. Уровень С4 уменьшается, а уровень C1q остается в норме. При НАЕ типа III уровни ингибитора C1, C4 и C1q могут быть нормальными.
Симптомы НАЕ можно оценить, например, с помощью опросных листов, таких как опросные листы, которые заполняются пациентами, врачами или членами семьи. Такие опросные листы известны в данной области и включают в себя, например, визуальные аналоговые шкалы. См., например, McMillan, C.V. et al., Patient. 2012;5 (2) :113-26.
- 20 038532
Лечение НАЕ антителами против PKal.
Настоящее изобретение предлагает способы лечения (например, уменьшения интенсивности, стабилизации или устранения одного или нескольких симптомов) наследственного ангионевротического отека (НАЕ) путем введения описанного здесь антитела (например, терапевтически эффективного количества описанного здесь антитела) индивидууму, страдающему от НАЕ, или предрасположенному к НАЕ, например, в соответствии с описанной здесь схемой дозирования. Изобретение также предлагает способы лечения НАЕ путем введения описанного здесь антитела (например, терапевтически эффективного количества описанного здесь антитела), например, в соответствии с описанной здесь схемой дозирования, или в сочетании со вторым способом лечения, например, с другим лекарственным средством, например, описанным в данном документе. Настоящее изобретение также предлагает способы профилактики НАЕ или его симптома путем введения описанного здесь антитела (например, профилактически эффективного количества описанного здесь антитела) индивидууму, имеющему риск развития НАЕ (например, индивидууму, член семьи которого страдает от НАЕ, или имеет генетическую предрасположенность к нему), например, в соответствии с описанным здесь графиком дозирования. В некоторых примерах индивидуум может представлять собой пациента-человека, у которого отсутствуют симптомы НАЕ во время лечения.
Антитела, которые связываются с калликреином плазмы, например, как описано в настоящем документе, можно использовать в терапевтических или профилактических целях, в частности, в применении к человеку. Указанные антитела можно вводить индивидууму с целью лечения, профилактики и/или диагностики ряда заболеваний и состояний, включающих в себя, например, заболевания, связанные с калликреином плазмы, или даже в клетки, находящиеся в культуре, например, in vitro или ex vivo. Например, указанные связывающие белки можно использовать для модификации эффектов калликреина плазмы, высвобождаемого из клеток, находящихся в культуре (Lilla et al., J. Biol. Chem. 284 (20):13792-13803 (2009)). Лечение включает в себя введение количества, эффективного для смягчения, облегчения, изменения, излечения, ослабления, улучшения или влияния на заболевание, симптомы заболевания или предрасположенность к заболеванию. Лечение может также отсрочить появление, например, предотвратить появление, или предотвратить ухудшение заболевания или состояния.
Способы введения антител, связывающих калликреин, а также других средств описаны в разделе Фармацевтические композиции. Подходящие дозы используемых молекул могут зависеть от возраста и массы индивидуума, а также от конкретного используемого лекарственного средства. Антитело можно использовать в качестве конкурирующего средства для ингибирования, уменьшения нежелательного взаимодействия, например, между калликреином плазмы и его субстратом (таким как фактор XII или HMWK). Доза антитела может представлять собой количество, достаточное для того, чтобы блокировать 90, 95, 99 или 99,9% активности калликреина плазмы у пациента, особенно в участке проявления заболевания. Для этого может потребоваться доза 0,1, 1,0, 3,0, 6,0 или 10,0 мг/кг. В случае IgG, имеющего молекулярную массу 150000 г/моль (два участка связывания), указанные дозы соответствуют примерно 18, 180, 540 нМ, 1,08, и 1,8 мкМ участков связывания на объем крови 5 л.
В одном варианте осуществления антитела используют для ингибирования активности (например, для ингибирования по меньшей мере одной активности калликреина плазмы, например, для уменьшения продукции фактора XIIa и/или брадикинина) калликреина плазмы, например, in vivo. Связывающие белки можно использовать сами по себе или в сочетании с другим средством, таким как цитотоксическое средство, фермент цитотоксин или радиоизотоп.
Антитела могут быть использованы непосредственно in vivo для устранения антигенэкспрессирующих клеток посредством природной комплементзависимой цитотоксичности (CDC) или антителозависимой клеточноопосредованной цитотоксичности (ADCC). Описанные здесь антитела могут содержать комплемент-связывающий эффекторный домен, такой как фрагмент Fc IgG1, IgG2 или IgG3, или соответствующий фрагмент IgM, который связывает комплемент. В одном варианте осуществления популяцию клеток-мишеней обрабатывают ex vivo описанным здесь антителом и соответствующими эффекторными клетками. Лечение можно дополнить добавлением комплемента или сыворотки, содержащей комплемент. Кроме того, фагоцитоз клеток-мишеней, покрытых описанным здесь антителом, можно повысить путем связывания белков комплемента. В другом варианте осуществления клеткимишени, покрытые антителом, которое содержит комплемент-связывающий эффекторный домен, лизируют комплементом.
Способы введения антител, связывающих калликреин плазмы, описаны в разделе Фармацевтические композиции. Подходящие дозы используемых молекул зависят от возраста и массы индивидуума и конкретного используемого лекарственного средства. Антитела можно использовать в качестве конкурирующих средств для ингибирования или уменьшения нежелательного взаимодействия, например, между природным или патологическим агентом и калликреином плазмы.
Терапевтически эффективное количество описанного здесь антитела можно ввести индивидууму, страдающему от НАЕ, предрасположенному к НАЕ, или имеющему риск НАЕ, осуществляя тем самым лечение (например, облегчение или улучшение симптома или признака расстройства, замедляя, стабилизацию и/или прекращение развития заболевания) расстройства.
- 21 038532
Описанное здесь антитело можно вводить в терапевтически эффективном количестве. Терапевтически эффективное количество антитела представляет собой количество, которое, после однократного или многократного введения дозы, является эффективным для лечения индивидуума, например, обеспечивает излечение, ослабление, облегчение или улучшение по меньшей мере одного симптома заболевания у индивидуума в степени, превышающей ожидаемую в отсутствии такого лечения.
Режимы введения лекарственных средств можно корректировать с целью обеспечения оптимального желаемого ответа (например, терапевтического ответа). Например, лекарственное средство можно вводить в виде одного болюса или нескольких разделенных доз в течение длительного времени, или дозу лекарственного средства можно пропорционально уменьшить или увеличить, в зависимости от остроты терапевтической ситуации. Особенно предпочтительно парентеральные композиции получают в виде единичной дозированной формы, обеспечивающей простоту введения и однородность дозирования. Термин единичная дозированная форма в данном описании относится к физически дискретным единицам, которые можно использовать в качестве однократных доз для введения индивидуумам, подлежащим лечению; причем каждая единица содержит заданное количество активного соединения, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с подходящим фармацевтическим носителем.
В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело (например, DX-2930) вводят в виде однократной дозы, например в количестве от 0,1 до 3 мг/кг. В других вариантах осуществления антитело вводят в виде нескольких доз, например один раз каждые 1-4 недели, например раз в две недели или раз в месяц (например, каждые 28 дней). Каждая из нескольких доз может находиться в диапазоне от 0,1 до 3 мг/кг. В некоторых случаях пациент может получать несколько доз один раз каждые 1-4 недели, например один раз в две недели или один раз в месяц, в течение подходящего периода времени, после чего введение осуществляют один раз или два раза в месяц в качестве поддерживающей терапии в той же или более низкой дозе.
В некоторых вариантах осуществления пациент может регистрировать побочные эффекты (такие как повышение уровня креатинфосфатазы) и/или ингибирование уровней pKal антителом (например, концентрацию антитела в сыворотке или плазме, или уровень активности pKal) до и после лечения, или на протяжении курса лечения. Если наблюдается неблагоприятный эффект, можно уменьшить дозу антитела или прекратить лечение. Если уровень ингибирования ниже минимального терапевтического уровня, пациенту можно ввести дополнительные дозы антитела.
В некоторых вариантах осуществления для оценки эффективности в процессе лечения (например, после введения первоначальной дозы) измеряют концентрацию антитела (например, DX-2930) в плазме или сыворотке. Если в плазме или сыворотке концентрация антитела составляет менее чем примерно 80 нМ, может потребоваться введение следующей дозы, которая может быть такой же, как первоначальная доза, или выше ее. Концентрацию антитела в плазме или сыворотке можно измерить путем определения белкового уровня антитела в образце сыворотки или плазмы, полученном от индивидуума, например, с помощью иммунного анализа или МС анализа. Концентрацию антитела в плазме или сыворотке также можно измерить путем определения ингибиторного уровня pKal в образце сыворотки или плазмы, полученном от индивидуума, получающего антитело. Такие анализы могут включать в себя анализ с использованием синтетического субстрата или анализ методом вестерн-блоттинга с целью измерения расщепленного кининогена, как описано в настоящем документе.
В качестве альтернативы, или в дополнение, в процессе лечения можно регистрировать уровень креатинкиназы в плазме или сыворотке. Если обнаружено, что во время лечения уровень креатинкиназы в плазме или сыворотке повышается, можно уменьшить дозу антитела, или можно прекратить лечение.
В некоторых вариантах осуществления оптимальную дозу (например, оптимальную профилактическую дозу или оптимальную терапевтическую дозу) описанного здесь антитела против pKal (например, DX-2930 или его антиген-связывающего фрагмента), можно определить следующим образом. Антитело вводят индивидууму, нуждающемуся в лечении, в начальной дозе. Измеряют концентрацию антитела в плазме индивидуума. Если концентрация в плазме ниже 80 нМ, при последующем введении дозу антитела увеличивают. Дозу антитела, поддерживающую концентрацию антитела в плазме выше, чем примерно 80 нМ, можно выбрать в качестве дозы, оптимальной для индивидуума. Уровень креатинфосфокиназы у индивидуума можно регистрировать на протяжении курса лечения и дозу, оптимальную для данного индивидуума, можно также корректировать по уровню креатинфосфокиназы, например, дозу антитела можно уменьшить, если во время лечения наблюдается повышение уровня креатинфосфокиназы.
Сочетанные способы лечения.
Описанное здесь антитело против калликреина плазмы можно вводить в сочетании с одним или несколькими другими терапевтическими средствами для лечения заболевания или состояния, связанного с активностью калликреина плазмы, например заболевания или состояния, описанного в настоящем документе. Например, антитело связывающее калликреин плазмы, можно использовать в терапевтических или профилактических целях в сочетании с хирургическим вмешательством, другим Fab или IgG против калликреина плазмы (например, Fab или IgG, отличным от описанных здесь), другим ингибитором калликреина плазмы, пептидным ингибитором или низкомолекулярным ингибитором. Примеры ингибито- 22 038532 ров калликреина плазмы, которые можно использовать в сочетанной терапии вместе с описанными здесь антителами, связывающими калликреин плазмы, включают в себя ингибиторы калликреина плазмы, описанные, например, в WO 95/21601 или WO 2003/103475.
Один или несколько ингибиторов калликреина плазмы можно использовать в сочетании с одним или несколькими из описанных здесь антител, связывающих калликреин плазмы. Например, применение сочетания позволяет снизить дозу требуемого ингибитора и в результате уменьшить побочные эффекты.
Описанное здесь антитело, связывающее плазматический калликреин, можно вводить в сочетании с одним или несколькими терапевтическими средствами, используемыми в настоящее время для лечения НАЕ. Например, антитело DX-2930, или его функциональный вариант, описанный в данном документе, можно использовать вместе со вторым терапевтическим средством против НАЕ, таким как экаллантид, ингибитор С1-эстеразы (например, CINRYZE™), апротинин (TRASYLOL®) и/или ингибитор рецептора брадикинина В2 (например, икатибант (FIRAZYR®)).
Термин сочетание относится к применению двух или более средств или способов для лечения одного пациента, где применение или действие средств или способов лечения перекрывается во времени. Терапевтические средства можно вводить одновременно (например, в составе одной композиции, которую вводят пациенту, или в составе двух отдельных композиций, вводимых одновременно) или последовательно в любом порядке. Последовательное введение включает в себя введения, которые осуществляются в разное время. Время между введением одного средства и другого средства может составлять несколько минут, часов, дней или недель. Описанное здесь антитело, связывающее калликреин плазмы, также можно использовать для уменьшения дозы другого терапевтического средства, например, с целью уменьшения побочных эффектов, связанных с другим вводимым средством. Соответственно, сочетание может включать в себя введение второго средства в дозе, которая по меньшей мере на 10, 20, 30 или 50% ниже, чем доза, используемая в отсутствии антитела, связывающего калликреин плазмы.
Сочетанная терапия может включать в себя введение средства, которое уменьшает побочные эффекты других терапевтических средств. Указанное средство может представлять собой средство, которое уменьшает побочные эффекты лечения заболевания, связанного с калликреином плазмы.
Авторы настоящего изобретения полагают, что специалист в данной области может осуществить настоящее изобретение в полном объеме на основании приведенного выше описания, не проводя дополнительные исследования. Следовательно, нижеследующие конкретные варианты осуществления следует рассматривать только как иллюстративные, но не ограничивающие никаким образом остальные части описания. Все цитируемые здесь публикации включены в данный документ в качестве ссылки для разъяснения целей или предметов обсуждения, упомянутых в настоящем описании.
Примеры
Пример 1. Исследование с использованием однократных возрастающих доз DX-2930 на здоровых добровольцах.
Исследование с использованием однократных возрастающих доз проводят на здоровых добровольцах, используя следующие дозы DX-2930: 0,1, 0,3, 1 и 3 мг/кг. Результаты, полученные для каждого добровольца, анализируют, чтобы определить безопасность каждой дозы. Полноразмерные и вариабельные последовательности тяжелых и легких цепей DX-2930 приведены ниже, причем сигнальные последовательности выделены курсивом. CDR выделены жирным шрифтом и подчеркиванием.
Аминокислотная последовательность тяжелой цепи DX-2930 (451 аминокислота, 49439,02 Да)
MG^SCJDFDVATATGAHSEVOLLESGGGLVOPGGSLRLSCAASGFTFSHYIMMWVROAP
GKGLEWVSGIYSSGGITVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLOMNSLRAEDTAVYYCAYRRIGVPR
RDEFDIWGOGTMVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALT SGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPP CPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPR EEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRE EMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQG NVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID NO: 1)
Аминокислотная последовательность легкой цепи DX-2930 (213 аминокислот, 23419,08 Да)
MGWSCILFLVAТАTGAHSOIQMTQSPSTL SASVGDRVTIТ CRASQSISSWLAWYQQKPG
KAPKLLIYKASTLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLOPDDFATYYCOQYNTYWTFGOGTKVEI
KRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKD
STYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 2)
Аминокислотная последовательность вариабельного домена тяжелой цепи DX-2930
- 23 038532
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSHYIWWVRQAPGKGLEWVSGIYSSGGITV
YADSVKGRFTISRDNSKNTLYLOMNSLRAEDTAVYYCAYRRIGV'PRRDEFDIWGOGTMVTVSS (SEQ ID NO: 3)
Аминокислотная последовательность вариабельного домена легкой цепи DX-2930
DIQMT QS Р S Т L SASVGDRVTIТCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASTLESGVP
SRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCOQYNTYWTFGOGTKVEIK (SEQ ID NO: 4)
Таблица 1. CDR DX-2930
CDR | Аминокислотная последовательность |
CDR1 тяжелой цепи | HYIMM (SEQ ID NO: 5) |
CDR2 тяжелой цепи | GIYSSGGITVYADSVKG (SEQ ID NO: 6) |
CDR3 тяжелой цепи | RRIGVPRRDEFDI (SEQ ID NO: 7) |
CDR1 легкой цепи | RASQSISSWLA (SEQ ID NO: 8) |
CDR2 легкой цепи | KASTLES (SEQ ID NO: 9) |
CDR3 легкой цепи | QQYNTYWT (SEQ ID NO: 10) |
Фаза 1а схемы исследования.
Данное исследование представляет собой рандомизированное, двойное слепое и плацебоконтролируемое исследование.
Однократные и возрастающие дозы DX-2930 вводят подкожно здоровым индивидуумам. Участников исследования случайным образом распределяют в одну из четырех опытных групп, каждая из которых соответствует определенной однократной дозе (0,1, 0,3, 1 или 3 мг/кг). Каждая группа состоит из шести активных индивидуумов, получающих лекарственное средство, и двух индивидуумов, получающих плацебо. За всеми индивидуумами наблюдают в течение 16 недель после завершения графика введения лекарственного средства.
Результаты исследования безопасности.
DX-2930 хорошо переносится в однократных дозах до 3,0 мг/кг без признаков ограничивающей дозу токсичности. Таким образом, в данном исследовании не обнаружено никаких клинически значимых тревожных сигналов, связанных с DX-2930.
Результаты клинических лабораторных исследований свидетельствуют об отсутствии клинически значимых различий по каким-либо неблагоприятным явлениям среди индивидуумов, получающих DX2930, и индивидуумов, получающих плацебо. Среди неблагоприятных явлений наиболее часто встречается головная боль (у 25% индивидуумов, получающих DX-2930, и у 25% индивидуумов, получающих плацебо). Тяжелые неблагоприятные явления отсутствуют, а все присутствующие неблагоприятные явления легко устраняются.
Результаты измерения показателей жизненно важных функций, физических обследований и регистрации электрокардиограмм (ЭКГ) демонстрируют наличие инфекции верхних дыхательных путей у одного индивидуума, который получал дозу 0,1 мг/кг, однако исследователь сообщает, что инфекция была легкой и не имела отношения к лечению. У остальных исследуемых индивидуумов изменения в показателях жизненно важных функций, результатах физических обследований и электрокардиограммах (ЭКГ) отсутствуют.
Результаты тестирования антител против лекарственных средств свидетельствуют об отсутствии сероконверсии.
Исследователь, проводящий испытание вслепую, обнаружил признаки тяжелых АЕ, связанных с лечением, только у двух индивидуумов. Повышение уровня креатинфосфокиназы до 902 ед./л [нормальный диапазон: 21-215 ед./л] наблюдалось у одного индивидуума, получавшего 0,1 мг/кг DX-2930 (4,2% от всех индивидуумов, получавших DX-2930). Повышение уровня креатинфосфокиназы до 1967 ед./л [нормальный диапазон: 32-294 ед./л] наблюдалось у одного индивидуума, получавшего плацебо (12,5% всех пациентов, получавших плацебо). Результаты свидетельствуют об отсутствии в лабораторных анализах изменений, связанных с какими-либо другими АЕ или показателями, которые могут иметь клиническое значение. У всех индивидуумов отсутствуют реакции в участке инъекции.
- 24 038532
Таблица 2. Результаты фазы 1а исследования безопасности
0, 1 мг/ кг (п=б) | 0,3 мг/ кг (п=б) | 1, 0 мг/кг (п=6) | 3, 0 мг/ кг (п=6) | Все индивидуумы, получающие DX-2930 (п=24) | Плацебо (п=8) | |
Число индивидуумов с АЕ | 5 | 3 | 4 | 4 | 16 (66,7%) | 6 (75,0%) |
Число смертей | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Число SAE | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Прекращение исследования вследствие АЕ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Число индивидуумов с АЕ, связанными с лечением* | 2 | 1 | 1 | 2 | 6 (25,0%) | 4 (50,0%) |
* Связанные с лечением АЕ: связь АЕ с исследуемым лекарственным средством оценивается исследователем, проводящим испытание вслепую.
Примечание: термин неблагоприятное явление (АЕ) в данном описании относят конкретно к неблагоприятному событию, возникающему в результате лечения. Считают, что неблагоприятное явление возникает в результате лечения, если его появление регистрируют в течение 112 дней после окончания введения исследуемого препарата во время визита последующего наблюдения, или, в случае появления АЕ до введения исследуемого лекарственного средства, если его тяжесть возрастает в течение 112 дней периода наблюдения после завершения введения лекарственного средства.
Результаты фармакодинамических (PD) и фармакокинетических (РК) исследований.
В табл. 3 приведены значения фармакокинетических параметров для каждой исследуемой группы. Средние значения Cmax и AUClast находятся в строгой линейной зависимости от дозы, как и у антител с известными характеристиками. Препараты с длительным периодом полужизни позволяют использовать схемы с редким введением для достижения стабильных устойчивых уровней в крови. Во всех исследуемых группах DX-2930 демонстрирует наличие постоянного продолжительного периода полужизни, составляющего почти три недели.
Испытуемое терапевтическое средство для профилактики НАЕ должно иметь длительный период полужизни и предсказуемый фармакокинетический профиль, позволяющий осуществлять введение средства с большими интервалами времени и обеспечивающий логическое, техническое обоснование дозирования. DX-2930 имеет соответствующий фармакокинетический профиль, позволяющий использовать режим дозирования, который обеспечивает терапевтически значимое улучшение состояния пациентов с НАЕ.
Таблица 3
Группа, получающая соответствующую дозу лекарственного средства (мг/кг) | Стах (НГ/МЛ) | Ттах (ДНИ) | AUClast (день*нг/мл) | Vz/F (мл/кг) | CL/F (мл/день/кг) | Т1/2 (дни) |
0, 1 | 555+124 | 7+3,85 | 15506+5088 | 154+22 | 5,5+1,8 | 2 0,5+4,4 |
0,3 | 1452+664 | 8,4+3,1 | 39070+13528 | 182+70 | 7,7+3,4 | 16, 7+2,0 |
1, 0 | 5612+2422 | 8,5+6, 25 | 167570+55562 | 170+73 | 6, 5+2,5 | 18,9+6, 3 |
3, 0 | 14548+5224 | 6,67+0,82 | 512746+208384 | 187+79 | 6,6+2,7 | 20,4+4,6 |
Фармакокинетические (PK) параметры DX-2930 измеряют после введения однократной дозы здоровым индивидуумам. После введения однократной дозы 3 мг/кг достигается концентрация лекарствен- 25 038532 ного средства в плазме, превышающая целевой уровень 80 нМ. Уровень лекарственного средства, примерно равный или превышающий 80 нМ, поддерживаются в течение примерно 10 дней (фиг. 7). Уровень лекарственного средства продолжает накапливаться после повторного введения препарата до достижения постоянной величины. Даже после введения только одной дозы DX-2930 достигается уровень лекарственного средства, превышающий целевое значение 80 нМ, который поддерживается в течение длительного периода времени. Результаты данного РК исследования подтверждают целесообразность стратегии дозирования, обеспечивающей достижение концентрации лекарственного средства в плазме выше целевого уровня 80 нМ с последующим постоянным поддерживанием достигнутого уровня. Кроме того, уровни лекарственного средства, превышающие 80 нМ, можно использовать при необходимости достижения достаточного уровня ингибирования калликреина плазмы, связанного с профилактикой НАЕ.
Проводят фармакодинамический (PD) анализ DX-2930. Для дополнительной характеристики DX2930 проводят диагностические анализы с использованием биомаркеров ex vivo на образцах плазмы индивидуумов, чтобы оценить фармакодинамический профиль молекулы. Проводят два независимых анализа - анализ активности калликреина плазмы с использованием искусственного флуорогенного субстрата и анализ методом вестерн-блоттинга, с помощью которого измеряют расщепление кининогена, природного субстрата калликреина плазмы, из которого образуется брадикинин.
Указанные анализы являются полуколичественными. Следовательно, экспериментальные точки нужно интерпретировать относительно других экспериментальных точек, определенных в данном эксперименте, и не сравнивать их с результатами, полученными в других анализах или в других аналитических системах. Указанные анализы проводят на плазме нормальных индивидуумов, содержащей нормальный уровень ингибитора С1. Следовательно, у здоровых индивидуумов, участвующих в указанных анализах с использованием биомаркеров, не развиваются приступы НАЕ. Целью указанных анализов с использованием биомаркеров является подтверждение того, что DX-2930 в плазме индивидуумов, получающих лекарственное средство, обладает ингибиторной активностью в отношении калликреина плазмы. Не менее важной целью данных анализов является определение, действительно ли результаты фармакодинамических исследований подтверждают наблюдаемый РК профиль.
На фиг. 9 изображены фармакодинамические эффекты DX-2930. Плазму, полученную от индивидуумов, получающих исследуемое лекарственное средство, активируют ex vivo, чтобы индуцировать путь контактной системы и тем самым стимулировать образование и активность плазматического калликреина. Активность pKal измеряют с помощью флюорогенного анализа. Изображены результаты анализов, проведенных в группах, получающих от 1 до 3 мг/кг. Отчетливо видно ингибирование калликреина плазмы, в частности, в группах, получающих дозы 1 и 3 мг/кг. В группах, получающих 0,1 мг/кг или плацебо, заметное ингибирование отсутствует. Наблюдаемое ингибирование зависит как от дозы, так и от времени и подтверждает ингибиторную активность DX-2930. PD эффект DX-2930 подтверждает РК параметры DX-2930.
Терапевтическое применение DX-2930.
В случае профилактики необходимое условие для достижения эффективности заключается в том, что соответствующая мишень лекарственного средства должна ингибироваться на уровне, превышающем минимальное требуемое количество на постоянной основе. Пробелы в охвате ингибирования должны быть сведены к минимуму или вообще устранены. Если уровень ингибирования снижается ниже минимального требуемого уровня, человек становится биологически чувствительным к активации патологического процесса и может быть отнесен к группе клинического риска в отношении случаев заболевания.
НАЕ не исключает применения широко используемых принципов профилактики.
При НАЕ калликреин плазмы представляет собой проверенную мишень для лекарственного средства, играющую важную роль в патогенезе приступов ангионевротического отека. Для предотвращения приступов НАЕ нужно, чтобы ингибирование калликреина плазмы непрерывно поддерживалось выше минимального терапевтического уровня. Пробелы в охвате с течением времени должны быть сведены к минимуму, чтобы избежать периодов чувствительности. Данное требование дополнительно усиливается наличием положительной обратной связи, которая предположительно играет важную роль в приступах НАЕ. После инициации данного каскада активация калликреина плазмы приводит к активации фактора XII, который, в свою очередь, увеличивает образование калликреина плазмы.
Ингибирование калликреина плазмы под действием DX-2930 и экаллантида, известного терапевтического средства, принятого в США для неотложного лечения приступов НАЕ, сравнивают с помощью анализа in vitro. В данной системе человеческую плазму подвергают воздействию средства, инициирующего контактную систему и превращающего прекалликреин в активный плазматический калликреин.
Максимальная концентрация экаллантида в плазме после введения дозы пациентам, составляющая 80 нМ, вызывает только частичное ингибирование активности калликреина плазмы. Результаты данного анализа демонстрируют, что при концентрации, примерно равной 80 нМ, DX-2930 оказывает эффект, сравнимый с эффектом экаллантида (фиг. 5). С учетом того, что уровень калликреина плазмы, необходимый для развития приступов НАЕ, составляет 80 нМ, и что сравнимая активность DX-2930 и экаллантида в отношении ингибирования калликреина плазмы проявляется при концентрации, примерно равной указанному значению, выдвинуто предположение, что непрерывное поддержание концентрации DX- 26 038532
2930 выше концентрации лекарственного средства в плазме 80 нМ позволяет предотвратить приступы
НАЕ (фиг. 6). На основании имеющихся в настоящее время данных и понимания биологии болезни можно сделать вывод, что лекарственное средство DX-2930 является активным в целевой концентрации в плазме 80 нмоль. Хотя концентрация 80 нМ является исходной целью, для достижения терапевтической дозы могут потребоваться более низкие или более высокие уровни лекарственного средства DX-2930.
Пример 2. Исследование с использованием нескольких возрастающих доз DX-2930 у пациентов с НАЕ.
Пациентам с НАЕ вводят DX-2930 в несколько приемов в следующих дозах: 0,1, 0,3, 1 или 3 мг/кг. На фиг. 2 приведены ожидаемые концентрации DX-2930 в плазме, которые могут быть достигнуты после повторного введения DX-2930 в дозе 3 мг/кг. Исходный профиль концентрации соответствует профилю, наблюдаемому при однократном введении дозы здоровым индивидуумам. Для прогнозирования фармакодинамических и фармакокинетических характеристик DX-2930 после многократного введения можно использовать РК моделирование. На фиг. 8 приведена гипотетическая схема, в которой DX-2930 вводят в дозе 3 мг/кг каждые 28 дней здоровым индивидуумам. Результаты такого моделирования позволяют предположить, что после достижения стационарного состояния повторные введения непрерывно поддерживают концентрацию лекарственного средства, примерно равную исходному целевому уровню 80 нМ, или превышающую его (обсуждение указанного порогового значения можно найти в примере 2).
Безопасность и эффективность DX-2930 определяют у пациентов с НАЕ после двух введений DX2930 с интервалом в одну неделю. На основе результатов анализов с применением биомаркеров (наряду с результатами фармакокинетических анализов) определяют, какую дозу (дозы) можно использовать в последующем исследовании для оценки эффективности предотвращения приступов НАЕ под действием DX-2930 (в разных дозах).
Пример 3. Фармакологическое моделирование режима дозирования при исследовании долговременной профилактики наследственного ангионевротического отека.
Методы.
Ингибирование pKal под действием экаллантида и DX-2930 оценивают in vitro с помощью анализа, в котором используют синтетический субстрат. Моделирование проводят, используя фармакокинетические (РК) параметры, определенные в исследовании, в котором однократные возрастающие дозы DX2930 вводят подкожно здоровым индивидуумам.
Результаты.
В анализе pKal, проводимом in vitro, DX-2930 и экаллантид имеют сопоставимые фармакодинамические (PD) характеристики в концентрации 80 нМ. Концентрация ингибитора pKal в плазме ниже 80 нМ может обеспечить лишь частичный профилактический эффект, свидетельствуя о том, что гипотеза средних и высоких доз является более правдоподобной, чем гипотеза низких доз.
Таким образом, непрерывно поддерживая уровень препарата DX-2930 выше 80 нМ, можно достичь уровня ингибирования pKal, предлагаемого гипотезой средних доз. РК моделирование свидетельствует о том, что многократное введение DX-2930 обеспечивает устойчивые концентрации лекарственного средства в плазме выше 80 нМ при использовании дозы 100 мг каждые 2 недели (или 300 мг каждые 4 недели) и выше 200 нм при использовании дозы 300 мг каждые 2 недели.
Другие варианты осуществления изобретения
Все признаки, раскрытые в данном описании, можно объединять в любом сочетании. Каждый признак, раскрытый в данном описании, может быть заменен альтернативным признаком, который служит для такой же эквивалентной или аналогичной цели. Таким образом, если не указано иное, каждый раскрытый признак является только примером общего ряда эквивалентных или аналогичных признаков.
Из приведенного выше описания специалист в данной области может легко определить основные характеристики настоящего изобретения и, не отступая от сущности и объема изобретения, может осуществить разные изменения и модификации изобретения, чтобы приспособить его к разным способам применения и условиям. Таким образом, другие варианты осуществления также входят в объем формулы изобретения.
Claims (13)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Способ лечения наследственного ангионевротического отека (НАЕ), включающий введение индивидууму, нуждающемуся в этом, антитела в дозе приблизительно 300 мг каждые две недели или каждые четыре недели, где антитело включает CDR1 тяжелой цепи (НС) с последовательностью SEQ ID NO: 5, CDR2 НС с последовательностью SEQ ID NO: 6, CDR3 НС с последовательностью SEQ ID NO: 7; и CDR1 легкой цепи (LC) с последовательностью SEQ ID NO: 8, CDR2 LC с последовательностью SEQ ID NO: 9 и CDR3 LC с последовательностью SEQ ID NO: 10; и где антитело ингибирует калликреин плазмы и представляет собой полноразмерное антитело.
- 2. Способ по п.1, где антитело представляет собой DX-2930, которое содержит вариабельную область тяжелой цепи с последовательностью SEQ ID NO: 3, и вариабельную область легкой цепи с последовательностью SEQ ID NO: 4.- 27 038532
- 3. Способ по п.1 или 2, где антитело вводят подкожно.
- 4. Способ по любому из пп.1-3, где индивидуум представляет собой пациента-человека, страдающего от НАЕ, предрасположенного к НАЕ, или имеющего риск НАЕ.
- 5. Способ по любому одному из пп.1-4, где антитело вводят с целью профилактического лечения.
- 6. Способ по любому из пп.1-5, дополнительно включающий определение уровня креатинфосфокиназы у индивидуума до и после лечения или на протяжении курса лечения.
- 7. Способ по п.6, дополнительно включающий уменьшение дозы антитела или прекращение лечения при повышении уровня креатинфосфокиназы.
- 8. Способ по любому из пп.1-7, где количество антитела является эффективным для поддержания концентрации антитела в плазме или сыворотке в диапазоне приблизительно 80-300 нМ.
- 9. Способ по любому из пп.1-8, дополнительно включающий измерение концентрации антитела в плазме с помощью анализа активности калликреина в плазме, иммунного анализа или масс-спектрометрии.
- 10. Способ по п.9, где концентрацию антитела в плазме измеряют с помощью анализа активности калликреина в плазме или иммунного анализа.
- 11. Способ по любому из пп.1-10, где антитело имеет IC50 менее 100 нМ.
- 12. Способ по любому из пп.1-11, где антитело модулирует активность калликреина в плазме и продукцию фактора XIIa и/или брадикинина.
- 13. Способ по любому из пп.1-12, где антитело представляет собой IgG.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201461929716P | 2014-01-21 | 2014-01-21 | |
US201461944361P | 2014-02-25 | 2014-02-25 | |
US201462021397P | 2014-07-07 | 2014-07-07 | |
PCT/US2015/012212 WO2015112578A1 (en) | 2014-01-21 | 2015-01-21 | Plasma kallikrein binding proteins and uses thereof in treating hereditary angioedema |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA201691470A1 EA201691470A1 (ru) | 2016-12-30 |
EA038532B1 true EA038532B1 (ru) | 2021-09-10 |
Family
ID=53681890
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
EA201691470A EA038532B1 (ru) | 2014-01-21 | 2015-01-21 | Способ лечения наследственного ангионевротического отека (hae) |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11084884B2 (ru) |
EP (2) | EP3848057A1 (ru) |
JP (3) | JP6845012B2 (ru) |
KR (4) | KR20220107077A (ru) |
CN (2) | CN106132442B (ru) |
AU (3) | AU2015209481C1 (ru) |
BR (1) | BR112016016916B1 (ru) |
CA (1) | CA2937329C (ru) |
DK (1) | DK3096798T3 (ru) |
EA (1) | EA038532B1 (ru) |
ES (1) | ES2856076T3 (ru) |
IL (3) | IL246864B (ru) |
MX (2) | MX2016009428A (ru) |
NZ (2) | NZ723369A (ru) |
PL (1) | PL3096798T3 (ru) |
PT (1) | PT3096798T (ru) |
WO (1) | WO2015112578A1 (ru) |
ZA (2) | ZA201605342B (ru) |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
LT3459564T (lt) | 2010-01-06 | 2022-03-10 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Plazmos kalikreiną surišantys baltymai |
IL310186A (en) | 2011-01-06 | 2024-03-01 | Takeda Pharmaceuticals Co | KALLIKREIN PLASMA BINDING PROTEINS |
RS57890B1 (sr) | 2013-01-20 | 2019-01-31 | Dyax Corp | Procena i tretman poremećaja posredovanih bradikininom |
IL292121B2 (en) | 2013-03-15 | 2024-02-01 | Takeda Pharmaceuticals Co | Anti-plasma kallikrein antibodies |
KR20230054745A (ko) | 2013-10-21 | 2023-04-25 | 다케다 파머수티컬 컴패니 리미티드 | 혈장 칼리크레인 시스템 바이오마커를 결정하기 위한 검정법 |
EA038532B1 (ru) | 2014-01-21 | 2021-09-10 | Такеда Фармасьютикал Компани Лимитед | Способ лечения наследственного ангионевротического отека (hae) |
AU2015235967B2 (en) | 2014-03-27 | 2020-10-22 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Compositions and methods for treatment of diabetic macular edema |
IL305207A (en) * | 2015-03-30 | 2023-10-01 | Takeda Pharmaceuticals Co | Plasma kallikrein inhibitors and their uses to prevent the outbreak of hereditary angioedema |
WO2017035263A1 (en) * | 2015-08-24 | 2017-03-02 | Biocryst Pharmaceuticals, Inc. | Compositions comprising a plasma kallikrein inhibitor |
KR20180093897A (ko) * | 2015-10-19 | 2018-08-22 | 다이액스 코포레이션 | 절단된 고분자량 키니노겐의 검출을 위한 면역검정법 |
CO2018007151A2 (es) | 2015-12-11 | 2018-09-20 | Dyax Corp | Inhibidores de calicreína plasmática y usos de los mismos para tratar ataque de angioedema hereditario |
CA3036979A1 (en) | 2016-09-16 | 2018-03-22 | Dyax Corp. | Rna biomarkers for hereditary angioedema |
BR112019005179A2 (pt) | 2016-09-16 | 2019-07-02 | Dyax Corp | método e kit para analisar uma amostra |
AU2018350992A1 (en) * | 2017-10-18 | 2020-05-21 | Regenxbio Inc. | Fully-human post-translationally modified antibody therapeutics |
US11660347B2 (en) | 2017-12-01 | 2023-05-30 | Suzhou Ribo Life Science Co., Ltd. | Nucleic acid, composition and conjugate containing same, preparation method, and use thereof |
JP2021504415A (ja) | 2017-12-01 | 2021-02-15 | スーチョウ リボ ライフ サイエンス カンパニー、リミテッドSuzhou Ribo Life Science Co., Ltd. | 二本鎖オリゴヌクレオチド、二本鎖オリゴヌクレオチドを含む組成物および複合体ならびに調製方法と使用 |
CN110959011B (zh) | 2017-12-29 | 2023-03-28 | 苏州瑞博生物技术股份有限公司 | 缀合物及其制备方法和用途 |
US11918600B2 (en) | 2018-08-21 | 2024-03-05 | Suzhou Ribo Life Science Co., Ltd. | Nucleic acid, pharmaceutical composition and conjugate containing nucleic acid, and use thereof |
US11896674B2 (en) | 2018-09-30 | 2024-02-13 | Suzhou Ribo Life Science Co., Ltd. | SiRNA conjugate, preparation method therefor and use thereof |
CN113891939B (zh) * | 2019-05-24 | 2024-04-02 | 苏州瑞博生物技术股份有限公司 | 核酸、药物组合物与缀合物及制备方法和用途 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5444156A (en) * | 1985-07-12 | 1995-08-22 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Monoclonal antibodies to human plasma prekallikrein |
US20120201756A1 (en) * | 2011-01-06 | 2012-08-09 | Dyax Corp. | Plasma kallikrein binding proteins |
Family Cites Families (43)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4399216A (en) | 1980-02-25 | 1983-08-16 | The Trustees Of Columbia University | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US5179017A (en) | 1980-02-25 | 1993-01-12 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US4634665A (en) | 1980-02-25 | 1987-01-06 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US4522811A (en) | 1982-07-08 | 1985-06-11 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides |
US5374548A (en) | 1986-05-02 | 1994-12-20 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for the attachment of proteins to liposomes using a glycophospholipid anchor |
MX9203291A (es) | 1985-06-26 | 1992-08-01 | Liposome Co Inc | Metodo para acoplamiento de liposomas. |
GB8601597D0 (en) | 1986-01-23 | 1986-02-26 | Wilson R H | Nucleotide sequences |
EP0296171A4 (en) | 1986-03-03 | 1989-11-07 | Brigham & Womens Hospital | METHOD FOR EVALUATING NEPHROTOXICITY. |
US4704692A (en) | 1986-09-02 | 1987-11-03 | Ladner Robert C | Computer based system and method for determining and displaying possible chemical structures for converting double- or multiple-chain polypeptides to single-chain polypeptides |
US4946778A (en) | 1987-09-21 | 1990-08-07 | Genex Corporation | Single polypeptide chain binding molecules |
US5260203A (en) | 1986-09-02 | 1993-11-09 | Enzon, Inc. | Single polypeptide chain binding molecules |
US4881175A (en) | 1986-09-02 | 1989-11-14 | Genex Corporation | Computer based system and method for determining and displaying possible chemical structures for converting double- or multiple-chain polypeptides to single-chain polypeptides |
US5045452A (en) | 1988-09-02 | 1991-09-03 | Brigham And Women's Hospital | Method for evaluating nephrotoxicity |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US5427908A (en) | 1990-05-01 | 1995-06-27 | Affymax Technologies N.V. | Recombinant library screening methods |
EP0940468A1 (en) | 1991-06-14 | 1999-09-08 | Genentech, Inc. | Humanized antibody variable domain |
US5565332A (en) | 1991-09-23 | 1996-10-15 | Medical Research Council | Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach |
US5733743A (en) | 1992-03-24 | 1998-03-31 | Cambridge Antibody Technology Limited | Methods for producing members of specific binding pairs |
US5827690A (en) | 1993-12-20 | 1998-10-27 | Genzyme Transgenics Corporatiion | Transgenic production of antibodies in milk |
JP3805785B2 (ja) | 1994-01-11 | 2006-08-09 | ダイアックス コープ. | カリクレイン阻害クニッツドメイン蛋白質およびその相同体 |
US6265150B1 (en) | 1995-06-07 | 2001-07-24 | Becton Dickinson & Company | Phage antibodies |
DE19632772A1 (de) | 1996-08-14 | 1998-02-19 | Basf Ag | Neue Benzamidine |
EP1441589B1 (en) | 2001-11-08 | 2012-05-09 | Abbott Biotherapeutics Corp. | Stable liquid pharmaceutical formulation of igg antibodies |
DK1531791T3 (da) | 2002-06-07 | 2010-11-01 | Dyax Corp | Forebyggelse og begrænsning af iskæmi |
US20070253949A1 (en) | 2004-02-03 | 2007-11-01 | Stefan Golz | Diagnostics and Therapeutics for Diseases Associated with Plasma Kallikrein (KLKB1) |
US7235530B2 (en) | 2004-09-27 | 2007-06-26 | Dyax Corporation | Kallikrein inhibitors and anti-thrombolytic agents and uses thereof |
DK1854477T3 (en) | 2006-03-16 | 2016-11-28 | Dyax Corp | Peptide inhibitors of plasma kallikrein for use in the treatment of eye disorders |
CN101495468A (zh) * | 2006-07-31 | 2009-07-29 | 艾克提弗赛特制药股份有限公司 | 血浆激肽释放酶抑制剂 |
KR100846354B1 (ko) | 2007-03-21 | 2008-07-15 | (주) 프로탄바이오 | 혈청 당단백질부터 분리한 폐암 진단용 마커 |
AU2008280782B2 (en) * | 2007-07-20 | 2014-01-23 | Diamedica Inc. | Tissue kallikrein for the treatment of diseases associated with amyloid protein |
CA2695012A1 (en) | 2007-08-23 | 2009-02-26 | Genzyme Corporation | Treatment with kallikrein inhibitors |
WO2010080833A1 (en) * | 2009-01-06 | 2010-07-15 | Dyax Corp. | Treatment of mucositis with kallikrein inhibitors |
CN101928346B (zh) | 2009-07-31 | 2013-01-16 | 华中科技大学同济医学院附属同济医院 | 一种抗人组织激肽释放酶单克隆抗体及其制备 |
LT3459564T (lt) | 2010-01-06 | 2022-03-10 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Plazmos kalikreiną surišantys baltymai |
US8691861B2 (en) | 2011-04-13 | 2014-04-08 | Activesite Pharmaceuticals, Inc. | Prodrugs of inhibitors of plasma kallikrein |
RS57890B1 (sr) | 2013-01-20 | 2019-01-31 | Dyax Corp | Procena i tretman poremećaja posredovanih bradikininom |
ES2718347T3 (es) | 2013-01-20 | 2019-07-01 | Dyax Corp | Evaluación, ensayos y tratamiento de trastornos mediados por pKal |
IL292121B2 (en) | 2013-03-15 | 2024-02-01 | Takeda Pharmaceuticals Co | Anti-plasma kallikrein antibodies |
EA038532B1 (ru) | 2014-01-21 | 2021-09-10 | Такеда Фармасьютикал Компани Лимитед | Способ лечения наследственного ангионевротического отека (hae) |
AU2015235967B2 (en) * | 2014-03-27 | 2020-10-22 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Compositions and methods for treatment of diabetic macular edema |
IL305207A (en) | 2015-03-30 | 2023-10-01 | Takeda Pharmaceuticals Co | Plasma kallikrein inhibitors and their uses to prevent the outbreak of hereditary angioedema |
CO2018007151A2 (es) | 2015-12-11 | 2018-09-20 | Dyax Corp | Inhibidores de calicreína plasmática y usos de los mismos para tratar ataque de angioedema hereditario |
BR112019005167A2 (pt) * | 2016-09-16 | 2019-07-02 | Dyax Corp | método e kit para analisar uma amostra |
-
2015
- 2015-01-21 EA EA201691470A patent/EA038532B1/ru unknown
- 2015-01-21 KR KR1020227025028A patent/KR20220107077A/ko not_active IP Right Cessation
- 2015-01-21 KR KR1020167022785A patent/KR102424183B1/ko active IP Right Grant
- 2015-01-21 US US15/113,297 patent/US11084884B2/en active Active
- 2015-01-21 EP EP20209536.0A patent/EP3848057A1/en active Pending
- 2015-01-21 CN CN201580010172.XA patent/CN106132442B/zh active Active
- 2015-01-21 JP JP2016547570A patent/JP6845012B2/ja active Active
- 2015-01-21 PL PL15740774T patent/PL3096798T3/pl unknown
- 2015-01-21 PT PT157407743T patent/PT3096798T/pt unknown
- 2015-01-21 MX MX2016009428A patent/MX2016009428A/es unknown
- 2015-01-21 NZ NZ723369A patent/NZ723369A/en unknown
- 2015-01-21 ES ES15740774T patent/ES2856076T3/es active Active
- 2015-01-21 BR BR112016016916-6A patent/BR112016016916B1/pt active IP Right Grant
- 2015-01-21 CA CA2937329A patent/CA2937329C/en active Active
- 2015-01-21 WO PCT/US2015/012212 patent/WO2015112578A1/en active Application Filing
- 2015-01-21 CN CN202310760869.5A patent/CN116585468A/zh active Pending
- 2015-01-21 NZ NZ761006A patent/NZ761006A/en unknown
- 2015-01-21 DK DK15740774.3T patent/DK3096798T3/da active
- 2015-01-21 KR KR1020247010766A patent/KR20240049627A/ko active Search and Examination
- 2015-01-21 EP EP15740774.3A patent/EP3096798B1/en active Active
- 2015-01-21 KR KR1020247006911A patent/KR20240033156A/ko active Application Filing
- 2015-01-21 AU AU2015209481A patent/AU2015209481C1/en active Active
-
2016
- 2016-07-20 MX MX2021013665A patent/MX2021013665A/es unknown
- 2016-07-20 IL IL246864A patent/IL246864B/en active IP Right Grant
- 2016-08-02 ZA ZA201605342A patent/ZA201605342B/en unknown
-
2018
- 2018-12-12 IL IL263669A patent/IL263669B/en active IP Right Grant
-
2019
- 2019-09-12 JP JP2019166361A patent/JP7164502B2/ja active Active
-
2020
- 2020-07-28 ZA ZA2020/04653A patent/ZA202004653B/en unknown
- 2020-09-02 US US17/010,354 patent/US20210087293A1/en active Pending
- 2020-09-28 AU AU2020244370A patent/AU2020244370B2/en active Active
- 2020-10-14 IL IL278062A patent/IL278062B/en unknown
-
2022
- 2022-10-20 JP JP2022168140A patent/JP2023015087A/ja active Pending
-
2024
- 2024-05-23 AU AU2024203436A patent/AU2024203436A1/en active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5444156A (en) * | 1985-07-12 | 1995-08-22 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Monoclonal antibodies to human plasma prekallikrein |
US20120201756A1 (en) * | 2011-01-06 | 2012-08-09 | Dyax Corp. | Plasma kallikrein binding proteins |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
CHYUNG et al. A phase 1 study investigating DX-2930 in healthy subjects. Ann. Allergy Asthma Immunol., ePub 26 June 2014, Vol 113, № 4, Pages 460-466, Especially abstract, entire document. * |
KENNISTON et al. Inhibition of plasma kallikrein by a highly specific active site blocking antibody, J. Biol. Chem., ePub 26 June 2014, Vol 289, № 34, Pages 23596-23608, pg 23604, fig 5A, Table 3, pg 23605, fig 6. * |
SCHNEIDER et al. Critical role of kallikrein in hereditary angioedema pathogenesis: a clinical trial of ecallantide, a novel kallikrein inhibitor. J. Allergy Clin. Immunol., August 2007, Vol 120, № 2, Pages 416-422, Especially abstract. * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2020244370B2 (en) | Plasma kallikrein binding proteins and uses thereof in treating hereditary angioedema | |
JP7008920B2 (ja) | 血漿カリクレイン阻害剤および遺伝性血管浮腫発作を予防するためのその使用 | |
JP7317891B2 (ja) | 第XIIa因子のモノクローナル抗体阻害剤 | |
CA3110689A1 (en) | Plasma kallikrein inhibitors and uses thereof for treating hereditary angioedema attack | |
AU2021200144B2 (en) | Anti-plasma kallikrein antibodies | |
EA045920B1 (ru) | Ингибиторы калликреина плазмы и их применение для лечения обострения наследственного ангионевротического отека | |
NZ735659B2 (en) | Plasma kallikrein inhibitors and uses thereof for preventing hereditary angioedema attack |