EA036149B1 - Генетические локусы, связанные с повышенной фертильностью у маиса - Google Patents

Генетические локусы, связанные с повышенной фертильностью у маиса Download PDF

Info

Publication number
EA036149B1
EA036149B1 EA201691677A EA201691677A EA036149B1 EA 036149 B1 EA036149 B1 EA 036149B1 EA 201691677 A EA201691677 A EA 201691677A EA 201691677 A EA201691677 A EA 201691677A EA 036149 B1 EA036149 B1 EA 036149B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
plant
maize
alleles
maize plant
marker
Prior art date
Application number
EA201691677A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201691677A1 (ru
Inventor
Стивен Уилльям Ритчи
Сатя П. Чинтаманани
Молли ДАНН
Элхан Султан Эрсоз
Дейвид Джей Фостер
Николас Федерико Мартин
Дейвид Стьюарт Скиббе
Доминик Майкл Такер
Original Assignee
Зингента Партисипейшнс Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Зингента Партисипейшнс Аг filed Critical Зингента Партисипейшнс Аг
Publication of EA201691677A1 publication Critical patent/EA201691677A1/ru
Publication of EA036149B1 publication Critical patent/EA036149B1/ru

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H1/00Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
    • A01H1/02Methods or apparatus for hybridisation; Artificial pollination ; Fertility
    • A01H1/022Genic fertility modification, e.g. apomixis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H1/00Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
    • A01H1/02Methods or apparatus for hybridisation; Artificial pollination ; Fertility
    • A01H1/022Genic fertility modification, e.g. apomixis
    • A01H1/023Male sterility
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H1/00Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
    • A01H1/04Processes of selection involving genotypic or phenotypic markers; Methods of using phenotypic markers for selection
    • A01H1/045Processes of selection involving genotypic or phenotypic markers; Methods of using phenotypic markers for selection using molecular markers
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H5/00Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
    • A01H5/10Seeds
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H6/00Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their botanic taxonomy
    • A01H6/46Gramineae or Poaceae, e.g. ryegrass, rice, wheat or maize
    • A01H6/4684Zea mays [maize]
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8279Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
    • C12N15/8286Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for insect resistance
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813Hybridisation assays
    • C12Q1/6827Hybridisation assays for detection of mutation or polymorphism
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8279Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/13Plant traits
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/156Polymorphic or mutational markers
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/10Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
    • Y02A40/146Genetically Modified [GMO] plants, e.g. transgenic plants

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Feedback Control In General (AREA)

Abstract

Изобретение относится к способам и композициям для выявления, отбора и/или получения растения или части растения маиса, обладающего повышенной фертильностью. Также предлагается растение или часть растения маиса, которые выявляют, отбирают и/или получают с помощью любых способов по изобретению.

Description

Область техники изобретения
Изобретение относится к композициям и способам выявления, отбора и получения растений маиса, обладающих повышенной фертильностью.
Предшествующий уровень техники
Белки Vip3 успешно экспрессируются в трансгенных растениях, таких как маис и хлопок. Например, гибридные трансгенные растения маиса могут экспрессировать белки Vip3A на уровнях, которые являются инсектицидными для насекомых-вредителей и которые не оказывают отрицательного воздействия на фенотип растения. Таким образом, признак Vip3A защищает урожай и потенциальный урожай гибридного растения маиса. Однако было замечено, что Vip3 обусловливает пониженную мужскую фертильность у некоторых инбредных растений маиса в нормальных условиях роста. Данный феномен более выражен у инбредных растений маиса, которые являются гомозиготными по трансгену vip3A. Степень, до которой мужская фертильность понижена, является специфичной для инбредных растений - некоторые инбредные растения демонстрируют незначительную или отсутствие уменьшения мужской фертильности при гомозиготности по гену vip3, другие инбредные растения являются до некоторой степени чувствительными к Vip3 и демонстрируют значительное уменьшение мужской фертильности при гомозиготности по гену vip3, а другие инбредные растения являются высокочувствительными к Vip3 и проявляют чрезвычайно низкую или отсутствие мужской фертильности при гомозиготности по гену vip3. На степень, до которой мужская фертильность понижена, влияют также факторы окружающей среды, такие как доступность воды и температура. При уменьшении Vip3-индуцированной мужской фертильности условия засухи и высокой температуры усиливают уменьшение мужской фертильности; однако было показано, что более низкотемпературные условия роста смягчают отрицательные эффекты экспрессии Vip3 на мужскую фертильность.
Выявление генетических локусов, которые усиливают фертильность растений маиса, экспрессирующих трансген vip3, может приводить к более эффективному растениеводству, обеспечивая возможность выявления, отбора и получения vip3-экспрессирующих инбредных растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Краткое описание изобретения
Изобретение относится к растениям маиса, обладающим повышенной мужской фертильностью, а также к композициям и способам выявления, отбора и получения таких растений.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы выявления растения или части растения маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать обнаружение в растении или части растения маиса маркера, связанного с повышенной мужской фертильностью.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы получения растения маиса, обладающего одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать обнаружение в части растения маиса наличия маркера, связанного с повышенной мужской фертильностью, и получение растения маиса из указанной части растения маиса. Такие способы могут дополнительно включать внесение маркера в указанную часть растения маиса.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы селекции. Такие способы могут включать обнаружение в растении или части растения маиса наличия маркера, связанного с повышенной мужской фертильностью (например, в нуклеиновой кислоте, например, в продукте амплификации из образца нуклеиновой кислоты от растения или части растения), а также отбор указанного растения или части растения маиса для селекции. В вариантах осуществления способ может дополнительно включать скрещивание растения маиса (или его предка, потомка или сибса) со вторым растением маиса, у которого маркер необязательно отсутствует, с получением растения-потомка маиса, которое необязательно содержит маркер.
Более того, настоящее изобретение относится к способу получения растения, обладающего одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью, включающему отбор из разнородной популяции растений маиса растения маиса, содержащего описанный в настоящем документе маркер, связанный с повышенной мужской фертильностью; а также скрещиванию растения маиса (или его предка, потомка или сибса) с самим собой или со вторым растением маиса с получением растения-потомка, содержащего маркер, получая таким образом растение, обладающее одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. В вариантах осуществления второе растение маиса не содержит маркер. В вариантах осуществления маркер обнаруживают в нуклеиновой кислоте от первого растения и/или растения-потомка маиса (например, в продукте амплификации из образца нуклеиновой кислоты от растения маиса и/или потомства маиса).
В некоторых вариантах осуществления предложены способы уменьшения затрат, связанных с селекцией и/или получением семян. Такие способы могут включать обнаружение в растении или части растения маиса наличия маркера, связанного с повышенной мужской фертильностью, и отбор указанного растения или части растения маиса для селекции.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы прогнозирования мужской фертильности. Такие способы могут включать обнаружение у растения или части растения маиса наличия маркера,
- 1 036149 связанного с повышенной мужской фертильностью (например, в нуклеиновой кислоте от растения или части растения), где наличие маркера прогнозирует вероятность повышенной мужской фертильности.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы выявления растения или части растения маиса, содержащих по меньшей мере один аллель, связанный с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать обнаружение у растения или части растения маиса (например, в нуклеиновой кислоте от растения или части растения) маркера, связанного с повышенной мужской фертильностью.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы получения растения или части растения маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать внесение нуклеиновой кислоты, содержащей по меньшей мере один аллель, связанный с повышенной мужской фертильностью, в геном части растения маиса и получение растения маиса из указанной части растения маиса. Такие способы могут дополнительно включать обнаружение маркера, связанного с повышенной мужской фертильностью, и/или аллеля, связанного с повышенной мужской фертильностью, в нуклеиновой кислоте (например, в образце нуклеиновой кислоты) от указанного растения или части растения маиса. В вариантах осуществления маркер и/или аллель обнаруживают в продукте амплификации из образца нуклеиновой кислоты от указанного растения или части растения маиса.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы улучшения пыльцевой продуктивности. Такие способы могут включать внесение нуклеиновой кислоты, содержащей по меньшей мере один аллель, связанный с повышенной пыльцевой продуктивностью, в геном части растения маиса и получение растения маиса из указанной части растения маиса. Такие способы могут дополнительно включать обнаружение маркера, связанного с повышенной пыльцевой продуктивностью, и/или аллеля, связанного с повышенной пыльцевой продуктивностью, в нуклеиновой кислоте (например, образце нуклеиновой кислоты) от указанной части растения маиса. В вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации из образца нуклеиновой кислоты от указанного растения или части растения.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы получения растения или части растения маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать внесение геномной области, связанной с повышенной мужской фертильностью, в геном части растения маиса и получение растения маиса из указанной части растения маиса. Такие способы могут дополнительно включать обнаружение маркера, связанного с повышенной мужской фертильностью, и/или геномной области, связанной с повышенной мужской фертильностью, в нуклеиновой кислоте (например, образце нуклеиновой кислоты) из указанной части растения маиса. В вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации из образца нуклеиновой кислоты от растения или части растения маиса.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы улучшения пыльцевой продуктивности. Такие способы могут включать, фактически состоят из или состоят из внесения геномной области, связанной с повышенной пыльцевой продуктивностью, в геном части растения маиса и получение растения маиса из указанной части растения маиса. Такие способы могут дополнительно включать обнаружение маркера, связанного с повышенной пыльцевой продуктивностью, и/или геномной области, связанной с повышенной пыльцевой продуктивностью, в нуклеиновой кислоте (например, образце нуклеиновой кислоты) из указанной части растения маиса. В вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации из образца нуклеиновой кислоты от растения или части растения маиса.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы получения растения или части растения маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать внесение геномной области, содержащей один или несколько трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью, в геном растения или часть растения маиса.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы улучшения пыльцевой продуктивности. Такие способы могут включать внесение геномной области, связанной с повышенной пыльцевой продуктивностью, в геном растения или части растения маиса и получение растения маиса из указанной части растения маиса.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы получения растения или части растения маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса с получением растения-потомка или части растенияпотомка маиса, где указанное первое растение или часть растения маиса содержат в своем геноме маркер, связанный с повышенной мужской фертильностью, причем необязательно у указанного второго растения или части растения маиса указанный маркер отсутствует, и при этом указанное растение-потомок или часть растения-потомка маиса имеет указанный маркер в своем геноме. Такие способы могут дополнительно включать отбор указанного растения-потомка по наличию указанного маркера.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы получения растения или части растения маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской
- 2 036149 фертильностью. Такие способы могут включать скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса с получением растения-потомка или части растенияпотомка маиса, где указанное первое растение или часть растения маиса содержат в своем геноме аллель, связанный с повышенной мужской фертильностью, причем необязательно у указанного второго растения или части растения маиса отсутствует указанный аллель, и при этом указанное растение-потомок или часть растения-потомка маиса имеет указанный аллель в своем геноме. Такие способы могут дополнительно включать отбор указанного растения-потомка по наличию указанного аллеля и/или наличию маркера, сцепленного с указанным аллелем.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы получения растения или части растения маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса с получением растения-потомка или части растенияпотомка маиса, где указанное первое растение или часть растения маиса содержат в своем геноме геномную область, содержащую один или несколько трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью, причем необязательно у указанного второго растения или части растения маиса указанная геномная область отсутствует, и при этом указанное растение-потомок или часть растения-потомка маиса имеет в своем геноме указанную геномную область. Такие способы могут дополнительно включать отбор указанного растения-потомка по наличию указанной геномной области и/или наличию маркера, сцепленного с указанной геномной областью.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы отбора растения или части растения маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, где первое растение или часть растения маиса содержат маркер, связанный с повышенной мужской фертильностью, и причем необязательно у указанного второго растения или части растения маиса отсутствует указанный маркер, а также отбор растения-потомка или части растения-потомка, которое обладает указанным маркером.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы отбора растения или части растения маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, где первое растение или часть растения маиса содержат аллель, связанный с повышенной мужской фертильностью, и причем необязательно у указанного второго растения или части растения маиса отсутствует указанный аллель, а также отбор растения-потомка или части растения-потомка, которое обладает указанным аллелем и/или маркером, сцепленным с указанным аллелем.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы отбора растения или части растения маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, где первое растение или часть растения маиса содержат геномную область, содержащую один или несколько трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью, и причем необязательно у указанного второго растения или части растения маиса указанная геномная область отсутствует, а также отбор растения-потомка или части растения-потомка, который обладает указанной геномной областью и/или маркером, сцепленным с указанной геномной областью.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы получения растения или части растения маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать скрещивание донорского растения или части растения маиса с рекуррентным растением или частью растения маиса и возвратное скрещивание потомства с указанными рекуррентными растениями или частью растения маиса в течение одного или нескольких поколений, где указанное донорское растение или часть растения маиса содержат в своем геноме маркер, связанный с повышенной мужской фертильностью, причем у указанного рекуррентного растения или части растения маиса указанный маркер необязательно отсутствует, и при этом по меньшей мере одно поколение указанного потомства выявляют и/или отбирают для возвратного скрещивания путем обнаружения наличия указанного маркера.
В некоторых вариантах осуществления предложены способы получения растения или части растения маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать скрещивание донорского растения или части растения маиса с рекуррентным растением или частью растения маиса и возвратное скрещивание потомства с указанными рекуррентными растениями или частью растения маиса в течение одного или нескольких поколений, где указанное донорское растение или часть растения маиса содержат в своем геноме аллель, связанный с повышенной мужской фертильностью, причем у указанного рекуррентного растения или части растения маиса указанный аллель необязательно отсутствует, и при этом по меньшей мере одно поколение указанного потомства выявляют и/или отбирают для возвратного скрещивания путем обнаружения наличия указанного аллеля и/или наличия маркера, сцепленного с указанным аллелем.
- 3 036149
В некоторых вариантах осуществления предложены способы получения растения или части растения маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной мужской фертильностью. Такие способы могут включать скрещивание донорского растения или части растения маиса с рекуррентным растением или частью растения маиса и возвратное скрещивание потомства с указанным рекуррентным растением или частью растения маиса в течение одного или нескольких поколений, где указанное донорское растение или часть растения маиса содержат в своем геноме геномную область, содержащую один или несколько трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью, причем у указанного рекуррентного растения или части растения маиса указанная геномная область необязательно отсутствует, и при этом по меньшей мере одно поколение указанного потомства выявляют и/или отбирают для возвратного скрещивания путем обнаружения наличия указанной геномной области и/или наличия маркера, сцепленного с указанной геномной областью.
В вариантах осуществления настоящее изобретение также относится к способу улучшения семенной продуктивности у растения маиса. Для иллюстрации, в типичных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу улучшения семенной продуктивности у растения маиса, включающему скрещивание первого растения маиса со вторым растением маиса, где указанное первое растение маиса содержит в своем геноме описанный в настоящем документе маркер, связанный с повышенной мужской фертильностью, а у указанного второго растения маиса указанный маркер необязательно отсутствует, с получением растения-потомка маиса, содержащего указанный маркер; а также применение растения-потомка маиса, содержащего указанный маркер, в качестве опылителя для скрещивания с самим собой или вторым растением маиса, которое выступает в качестве образующего семена родителя (например, скрещивание указанного растения-потомка, содержащего указанный маркер, с самим собой, причем растение-потомок функционирует как опылитель и в качестве дающего семена родителя, или скрещивание указанного растения-потомка со вторым растением маиса, причем растение-потомок функционирует в качестве опылителя, а второе растение маиса выступает в качестве образующего семена родителя), таким образом улучшая семенную продуктивность в результате скрещивания по сравнению с соответствующим контрольным скрещиванием.
В типичных вариантах осуществления способов по настоящему изобретению маркер, аллель, гаплотип и/или геномная область включает, фактически состоит из или состоит из:
(a) одного или нескольких маркеров, локализованных в одном или нескольких хромосомных участках, описанных в табл. 1, или маркера/аллеля/гаплотипа/геномной области, который картируется на расстоянии 10 сМ или менее от них;
(b) одного или нескольких из требуемых аллелей, описанных в табл. 2, 8 и/или 10, или маркера/аллеля/гаплотипа/геномной области, который картируется на расстоянии 10 сМ или менее от них;
(c) гаплотипа, содержащего два или более требуемых аллелей, описанных в табл. 2, 8 и/или 10, или маркера/аллеля/гаплотипа/геномной области, который картируется на расстоянии 10 сМ или менее от них;
(d) аллеля или гаплотипа, который находится в неравновесном сцеплении с одним или несколькими хромосомными участками, описанными в табл. 1, или маркера/аллеля/гаплотипа/геномной области, который картируется на расстоянии 10 сМ или менее от них;
(e) аллеля или гаплотипа, который находится в неравновесном сцеплении с одним или несколькими требуемыми аллелями, описанными в табл. 2, 8 и/или 10, или маркера/аллеля/гаплотипа/геномной области, который картируется на расстоянии 10 сМ или менее от них;
(f) аллеля или гаплотипа, который находится в неравновесном сцеплении с гаплотипом, содержащим два или более требуемых аллелей, описанных в табл. 2, 8 и/или 10, или маркера/аллеля/ гаплотипа/геномной области, который картируется на расстоянии 10 сМ или менее от них; или (g) любой комбинации от (а) до (f).
В дополнительных вариантах осуществления способов по настоящему изобретению маркер/аллель/ гаплотип/геномная область локализованы в:
(a) хромосомном участке 1, как описано в табл. 1;
(b) хромосомном участке 2, как описано в табл. 1;
(c) одном или нескольких хромосомных участках от 3 до 17, как описано в табл. 1;
(d) одном или нескольких хромосомных участках от 18 до 45, как описано в табл. 1;
(e) одном или нескольких хромосомных участках от 46 до 12743, как описано в табл. 1;
(f) одном или нескольких хромосомных участках от 12744 до 12749, как описано в табл. 1;
(g) одном или нескольких хромосомных участках от 12750 до 12755, как описано в табл. 1;
(h) хромосомном участке 12756, как описано в табл. 1;
(i) одном или нескольких хромосомных участках от 12757 до 12762, как описано в табл. 1;
(j) одном или нескольких хромосомных участках от 12763 до 12768, как описано в табл. 1;
(k) одном или нескольких хромосомных участках от 6 до 9371, как описано в табл. 1;
(l) хромосомном участке 3, как описано в табл. 1;
(m) хромосомном участке 13, как описано в табл. 1;
(n) хромосомном участке 25, как описано в табл. 1; или (o) любой комбинации (a)-(n).
- 4 036149
В некоторых вариантах осуществления маркер/аллель/гаплотип/геномная область содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких из требуемых аллелей:
(а) на хромосоме 5, как описано в табл. 8;
(b) на хромосоме 3, как описано в табл. 8;
(c) на хромосоме 7, как описано в табл. 8;
(d) на хромосоме 10, как описано в табл. 8;
(e) на хромосомах 3 и 5, как описано в табл. 8;
(f) на хромосомах 5 и 7, как описано в табл. 8;
(g) на хромосомах 3, 5 и 7, как описано в табл. 8;
(h) на хромосомах 5 и 10, как описано в табл. 8;
(i) на хромосомах 3, 5 и 10, как описано в табл. 8;
(j) любой комбинации (а)-(р; или (k) маркера/аллеля/гаплотипа/геномной области, который картируется на расстоянии 10 сМ или менее от любого из (а)-(|).
В других типичных вариантах осуществления маркер/аллель/гаплотип/геномная область включает гаплотип, содержащий два или более требуемых аллелей:
(a) на хромосоме 5 (QTL 5.1 и/или QTL 5.2), как описано в табл. 8;
(b) на хромосоме 3, как описано в табл. 8;
(c) на хромосоме 7, как описано в табл. 8;
(d) на хромосоме 10, как описано в табл. 8;
(e) на хромосомах 3 и 5, как описано в табл. 8;
(f) на хромосомах 5 и 7, как описано в табл. 8;
(g) на хромосомах 3, 5 и 7, как описано в табл. 8;
(h) на хромосомах 5 и 10, как описано в табл. 8;
(i) на хромосомах 3, 5 и 10, как описано в табл. 8;
(j) любой комбинации (а)-(р или (k) маркера/аллеля/гаплотипа/геномной области, который картируется на расстоянии 10 сМ или менее от любого из (а)-(|).
В некоторых вариантах осуществления предложены не встречающиеся в природе растения и части растения маиса, содержащие один или несколько маркеров, аллелей и/или геномных областей, связанных с повышенной мужской фертильностью (например, растения и растение маиса, которые выявлены, отобраны и/или получены в соответствии со способами по настоящему изобретению).
В некоторых вариантах осуществления предложены потомство и части растения, полученные от растений и частей растений маиса, содержащих один или несколько маркеров, аллелей и/или геномных областей, связанных с повышенной мужской фертильностью (например, растения и растение маиса, которые выявлены, отобраны и/или получены в соответствии со способами по настоящему изобретению).
В некоторых вариантах осуществления предложены выделенные и/или очищенные маркеры, связанные с повышенной мужской фертильностью. Такие маркеры могут содержать, фактически состоять из или состоять из одной или нескольких нуклеотидных последовательностей, изложенных в SEQ ID NO: 1350, их обратного комплемента или их информативного или функционального фрагмента.
В некоторых вариантах осуществления предложены выделенные и/или очищенные локусы количественных признаков (QTL), связанные с повышенной мужской фертильностью. Такие QTL могут содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких хромосомных сегментов, описанных в табл. 1.
В некоторых вариантах осуществления предложены продукты амплификации, содержащие один или несколько маркеров, аллелей и/или геномных областей, связанных с повышенной мужской фертильностью. Такие продукты амплификации могут содержать, фактически состоять из или состоять из одной или нескольких нуклеотидных последовательностей, изложенных в SEQ ID NO: 1-350, их обратного комплемента или их информативного или функционального фрагмента.
В некоторых вариантах осуществления предложены зонды (например, описанные в табл. 9) для обнаружения одного или нескольких маркеров, аллелей и/или геномных областей, связанных с повышенной мужской фертильностью. Такие зонды могут содержать, фактически состоять из или состоять из одной или нескольких нуклеотидных последовательностей, изложенных в SEQ ID NO: 526-613, их обратного комплемента или их информативного или функционального фрагмента.
Вышеуказанные, а также другие объекты и аспекты настоящего изобретения подробно разъяснены в изложенных ниже графических материалах и описании.
Краткое описание таблиц
В табл. 1 описаны сегменты хромосом маиса 1, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и 10;
в табл. 2 - представляющие интерес аллели, локализованные на хромосоме 5 маиса;
в табл. 3 - представляющие интерес белки, кодируемые хромосомой 5 маиса, а также сегменты хромосомы 5, которые кодируют данные белки;
в табл. 4 - белки Vip3 и последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующие данные белки;
- 5 036149 в табл. 5 показано, что Vip3-индуцuрованные уменьшения мужской фертильности различаются для разных генетических фонов;
в табл. 6 приведены показатели LOD (логарифм вероятностей) для QTL (локус количественного признака), выявленные с использованием растений F2, полученных в результате бипарентальных скрещиваний двух родителей NP2222 (описано в патенте США № 6710233) и NP2276 (описано в патенте США № 6706955) и бипарентальных скрещиваний ID3461 (описано в международной патентной заявке № WO 2009/142752) и NP2276;
в табл. 7 показан коэффициент фертильности, применяемый для оценки растений F2, полученных в результате бипарентальных скрещиваний NP2222 и NP2276 и бипарентальных скрещиваний ID3461 и NP2276;
в табл. 8 описаны QTL, связанные с повышенным количеством пыльников и/или улучшенным качеством пыльников у растений маиса, экспрессирующих белок Vip3;
в табл. 9 - иллюстративные зонды нуклеиновых кислот и праймеры, пригодные для выявления благоприятных аллелей в QTL, описанных в табл. 8;
в табл. 10 описаны SNP, присутствующие в инбредной линии маиса NP2222, относительно линии NP2276 по связанным с мужской фертильностью участкам QTL, приведенным в табл. 8. Если аллели среди двух линий отличаются, то аллель NP2222 соответствует требуемому (благоприятному) аллелю;
в табл. 11 приведены общедоступные линии, предполагаемые как содержащие благоприятные аллели.
Краткое описание графических материалов
Фиг. 1 представляет собой схему сравнения количества пыльников у Vip3-экспрессирующих инбредных линий NP2276, выращенных в различных температурных условиях и условиях влажности;
на фиг. 2 показано, что тепловой стресс усиливает Vip3-индуцированные уменьшения мужской фертильности.
Подробное описание
Изобретение относится к растениям маиса, обладающим повышенной фертильностью, а также к композициям и способам выявления, отбора и получения растений и частей растений маиса, обладающих одной или несколькими характеристиками, связанными с повышенной фертильностью.
Хотя следующие выражения, как предполагается, понятны специалисту в данной области техники, следующие определения приведены для облегчения понимания раскрытого объекта изобретения.
Все применяемые в настоящем документе технические и научные выражения, если ниже не указано иное, предполагают такое же значение, как и обычно понятные специалисту в данной области техники. Ссылки на используемые в настоящем документе методики предназначены для обозначения методик, как правило, известных в данной области техники, включая изменения этих методик или замены на эквивалентные методики, которые будут очевидны специалистам в данной области техники.
Все патенты, патентные публикации, непатентные публикации и последовательности, на которые ссылаются в настоящем документе, включены с помощью ссылки в полном их объеме.
Если не указано иное, генетические локусы описаны в настоящем документе относительно их положений в эталонном геноме маиса Maize B73 Ref Gen_v2 (доступном на www.maizegdb.org). Если не указано иное, нуклеотиды описаны в настоящем документе с помощью следующих стандартных сокращений: аденин (A), цитозин (C), тимин (T), гуанин (G), урацил (U), аденин или гуанин (R), цитозин или тимин/урацил (Y), аденин или цитозин (M), гуанин или тимин/урацил (K), гуанин или цитозин (S), аденин или тимин/урацил (W), гуанин или цитозин, или тимин/урацил (B), аденин или гуанин, или тимин/урацил (D), аденин или цитозин, или тимин/урацил (H), аденин или гуанин, или цитозин (V) и аденин, или гуанин, или цитозин, или тимин/урацил (N).
Если не указано иное, аминокислоты описаны в настоящем документе с помощью следующих стандартных сокращений: аланин (Ala, A), аргинин (Arg, R), аспарагин (Asn, N), аспарагиновая кислота (Asp, D), цистеин (Cys; C), глутамин (Gln, Q), глутаминовая кислота (Glu; E), глицин (Gly; G), гистидин (His, H), изолейцин (Ile; I), лейцин (Leu; L), лизин (Lys; K), метионин (Met; M), фенилаланин (Phe; F), пролин (Pro; P), серин (Ser; S), треонин (Thr, T), триптофан (Trp; W), тирозин (Tyr; Y) и валин (Val; V).
Применяемые в настоящем документе формы единственного числа могут относиться к одному или нескольким объектам. Например, маркер может означать один маркер или множество маркеров.
В контексте настоящего документа выражение и/или относится к и охватывает любую и все возможные комбинации из одного или нескольких связанных перечисленных элементов, а также отсутствие комбинаций при интерпретации в качестве альтернативы (или).
В контексте настоящего документа выражение приблизительно при применении в отношении измеряемой величины, такой как количественный показатель массы, дозы, времени, температуры и т.п., предназначено для охвата отклонений на 20, 10, 5, 1, 0,5 или даже 0,1% от заданного количества.
В контексте настоящего документа выражение аллель относится к одному из двух или более различных нуклеотидов или нуклеотидных последовательностей (или их отсутствию), которые встречаются в конкретном локусе или серии смежных локусов. В некоторых вариантах осуществления термин аллель можно применять взаимозаменяемо с термином маркер.
В контексте настоящего документа выражения представляющий интерес аллель, требуемый ал
- 6 036149 лель и благоприятный аллель применяют взаимозаменяемо для обозначения аллеля, который сцеплен с целевым признаком. Представляющий интерес аллель может быть связан либо с повышением, либо с понижением данного признака или в данном признаке в зависимости от природы требуемого фенотипа и может быть связан с изменением морфологии, цвета и т.д. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения представляющий интерес аллель связан с повышенной мужской фертильностью и может таким образом применяться в качестве маркера для выявления, отбора и/или получения фертильных растений маиса; для прогнозирования, будет или нет и/или до какой степени растение маиса фертильным; для уменьшения затрат, связанных с селекционными программами и/или программами повышения семенной продуктивности; и/или для улучшения эффективности программ селекции и/или программ повышения семенной продуктивности.
В контексте настоящего документа выражения возвратное скрещивание и проведение возвратного скрещивания относятся к способу, при помощи которого растение-потомок возвратно скрещивают с одним из его родителей в течение одного или нескольких поколений (например, 2 или более, 3 или более, 4 или более, 5 или более, 6 или более или 7 или более раз и т.д.). Согласно схеме возвратного скрещивания родитель-донор относится к родительскому растению с требуемым геном или локусом, подлежащим интрогрессии. Родитель-реципиент (применяемый один или несколько раз) или рекуррентный родитель (применяемый два или более раз) относится к родительскому растению, в которое может быть интрогрессирован ген или локус. Например, см. Ragot et al. Marker-assisted Backcrossing: A Practical Example, in Techniques et Utilisations des Marqueurs Moleculaires Les Colloques, Vol. 72, pp. 45-56 (1995); и Openshaw et al., Marker-assisted Selection in Backcross Breeding, in Proceedings of the Symposium Analysis of Molecular Marker Data, pp. 41-43 (1994). Первое скрещивание дает начало поколению F1. Выражение BC1 относится ко второму применению рекуррентного родителя, BC2 относится к третьему применению рекуррентного родителя и так далее. В вариантах осуществления по меньшей мере одно или несколько поколений потомства выявляют и/или отбирают по наличию требуемого гена или локуса (например, в образце нуклеиновой кислоты от растения-потомка или части растения-потомка). В вариантах осуществления два или более поколений (или даже все поколения) потомства выявляют и/или отбирают по наличию требуемого гена или локуса.
В контексте настоящего документа выражение тесно сцепленные локусы относится к генетическим локусам, которые демонстрируют частоту рекомбинации между локусами, составляющую приблизительно 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, 0,75, 0,5, 0,25% или менее. Поскольку один сМ равен расстоянию между двумя локусами, которые проявляют 1% частоту рекомбинации, то тесно сцепленные локусы на одной хромосоме будут располагаться приблизительно на 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, 0,75, 0,5 или 0,25 сМ или менее друг от друга. О таких локусах можно сказать, что они близки один к другому.
В контексте настоящего документа выражения сантиморган и сМ относятся к единице измерения частоты рекомбинации. Один сМ равен 1% вероятности, что маркер в одном генетическом локусе будет отделен от маркера во втором локусе в результате кроссинговера в одном поколении.
В контексте настоящего документа выражение кодирующая последовательность относится к последовательности нуклеиновой кислоты, которая транскрибируется в РНК, такую как мРНК, рРНК, тРНК, малая ядерная РНК, короткая шпилечная РНК, смысловая РНК или антисмысловая РНК. РНК может транслироваться с образованием полипептида.
В контексте настоящего документа выражение полностью фертильный относится к растению, которое, по меньшей мере, фертильно настолько, насколько и контрольное растение (например, один или оба его родителя, почти изогенное растение, у которого отсутствует один или несколько маркеров/аллелей, связанных с повышенной фертильностью, почти изогенное растение, у которого отсутствует кодирующая последовательность vip3, и т.д.). В некоторых вариантах осуществления полностью фертильные растения высвобождают, по меньшей мере, такое же количество пыльцевых зерен на метелку в день в трехдневный период сразу же после выхода пыльника, как и контрольное растение. В некоторых вариантах осуществления полностью фертильные растения высвобождают больше пыльцевых зерен на метелку в день в трехдневный период сразу же после выхода пыльника, чем контрольное растение.
В контексте настоящего документа выражения скрещивать или скрещенный относится к слиянию гамет в результате опыления с образованием потомства (например, клеток, семян или растений). Выражение охватывает как генеративное скрещивание (опыление одного растения другим), так и самоопыление (гомоклинное опыление, например если пыльца и семязачаток происходят от одного растения). Термин скрещивание относится к акту слияния гамет в результате опыления с образованием потомства.
В контексте настоящего документа выражения культивар и сорт относятся к группе схожих растений, которые можно отличать от других сортов среди аналогичных видов по структурным или генетическим признакам и/или характерным свойствам.
В контексте настоящего документа выражение культивированное относится к растению, которое более не находится в диком состоянии, но было выведено и одомашнено усилиями человека для сельскохозяйственного применения и/или потребления человеком. Культивируемые растения в данном контексте исключает дикие растения, которые содержат заявляемый настоящим изобретением признак в качестве естественного признака и/или в качестве части его естественной генетики.
- 7 036149
В контексте настоящего документа выражения уменьшают, уменьшает, уменьшение и схожие выражения означают снижение по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более. В некоторых вариантах осуществления снижение приводит к тому, что активность фактически не проявляется или активность отсутствует (т.е. недостаточное или не обнаруживаемое значение активности).
В контексте настоящего документа выражения элитный и элитная линия относятся к любой линии, которая была получена в результате селекции и отбора по желаемому с точки зрения сельского хозяйства характерному свойству. Элитная линия может быть практически гомозиготной. Специалисту в данной области техники большое количество элитных линий доступны и известны.
В контексте настоящего документа выражение элитная идиоплазма относится к любой идиоплазме, которая получена от элитного растения или способна давать начало элитному растению.
В контексте настоящего документа выражение трансгенный объект относится к конкретному трансформанту. В типичной программе трансгенной селекции трансформационную конструкцию, отвечающую за признак, вносят в геном с помощью способа трансформации. Для каждой конструкции обычно получают большое количество независимых трансформантов (трансгенных объектов). Такие события оценивают для отбора с превосходными характеристиками.
В контексте настоящего документа в отношении нуклеиновых кислот выражение экзогенная относится к нуклеиновой кислоте, не являющейся частью естественного генетического фона клетки/организма, в которой(ом) она находится. В некоторых вариантах осуществления экзогенная нуклеиновая кислота содержит одну или несколько нуклеотидных последовательностей, отсутствующих в естественном генетическом фоне клетки/организма. В некоторых вариантах осуществления экзогенная нуклеиновая кислота содержит одну или несколько дополнительных копий нуклеиновой кислоты, эндогенной по отношению к клетке/организму.
В контексте настоящего документа выражение экспрессионная кассета относится к нуклеотиду, способному управлять экспрессией конкретной последовательности нуклеиновой кислоты в клеткехозяине (например, клетке маиса). В некоторых вариантах осуществления экспрессионная кассета содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких промоторных последовательностей (например, одной или нескольких последовательностей конститутивных/индуцируемых промоторов, одной или нескольких последовательностей ткане- и/или органоспецифичных промоторов и/или одной или нескольких последовательностей промоторов, специфичных для фазы роста), функционально связанных с представляющей интерес нуклеиновой кислотой, которая функционально связана с терминирующей последовательностью. Экспрессионные кассеты часто содержат последовательности, необходимые для надлежащей трансляции представляющей интерес последовательности нуклеиновой кислоты в клетке-хозяине. Экспрессионная кассета может быть химерной в том, что по меньшей мере один из ее компонентов является гетерологичным по отношению по меньшей мере к одному из остальных ее компонентов. Экспрессионная кассета может представлять собой последовательность, которая встречается в природе, но которая получена в рекомбинантной форме, пригодной для гетерологичной экспрессии. Однако, как правило, кассета экспрессии является гетерологичной по отношению к хозяину (т.е. конкретная последовательность нуклеиновой кислоты в кассете экспрессии в природе в клетке-хозяине не встречается, и ее необходимо было ввести в клетку-хозяина или предка клетки-хозяина с помощью трансформационного трансгенного объекта).
В контексте настоящего документа в отношении нуклеиновых кислот выражение фрагмент относится к нуклеиновой кислоте, укороченной по длине относительно эталонной последовательности нуклеиновой кислоты, и содержащей, фактически состоящей из и/или состоящей из нуклеотидной последовательности идущих подряд нуклеотидов, идентичной или почти идентичной (например, идентичной на 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99%) соответствующей части эталонной последовательности нуклеиновой кислоты. Такой фрагмент нуклеиновой кислоты по необходимости может быть включен в полинуклеотид большего размера, составляющей которого он является. В некоторых вариантах осуществления фрагмент нуклеиновой кислоты содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере приблизительно 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500 или более идущих подряд нуклеотидов. В некоторых вариантах осуществления фрагмент нуклеиновой кислоты содержит, фактически состоит из или состоит из менее чем приблизительно 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450 или 500 идущих подряд нуклеотидов.
В контексте настоящего документа в отношении полипептидов выражение фрагмент относится к полипептиду, укороченному по длине относительно эталонного полипептида, и который содержит, фактически состоит из и/или состоит из аминокислотной последовательности смежных аминокислот, идентичной или почти идентичной (например, идентичной на 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99%) относительно соответствующей части эталонного полипептида. Такой полипептидный фрагмент по необходимости может быть включен в полипептид большего размера, составляющей которого он является. В некоторых вариантах осуществления полипептидный фрагмент содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45,
- 8 036149
50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500 или более идущих подряд аминокислот. В некоторых вариантах осуществления полипептидный фрагмент содержит, фактически состоит из или состоит из менее чем приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450 или 500 идущих подряд аминокислот.
В контексте настоящего документа в отношении нуклеиновых кислот выражение функциональный фрагмент относится к нуклеиновой кислоте, кодирующей функциональный фрагмент полипептида.
В контексте настоящего документа в отношении полипептидов выражение функциональный фрагмент относится к полипептидному фрагменту, который сохраняет по меньшей мере приблизительно 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более по меньшей мере одного типа биологической активности полноразмерного полипептида (например, способность преобразовывать полностью-транс-в-каротин в 9-цис-в-каротин). В некоторых вариантах осуществления функциональный фрагмент фактически обладает более высоким уровнем по меньшей мере одного типа биологической активности полноразмерного полипептида.
В контексте настоящего документа выражения фертильный и функционально фертильный применяются взаимозаменяемо, и они относятся к растению, которое является достаточно фертильным для применения в программе селекции и/или программе повышения семенной продуктивности. В некоторых вариантах осуществления функционально фертильные растения являются растениями, которые высвобождают по меньшей мере приблизительно 100000; 150000; 200000; 250000, 300000, 350000, 400000 или 450000 пыльцевых зерен на метелку в день за трехдневный период сразу же после выхода пыльника.
В контексте настоящего документа выражение генный продукт относится к материалу, полученному в результате экспрессии нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления генным продуктом является молекула РНК (например, молекула иРНК или антисмысловая молекула РНК). В некоторых вариантах осуществления генным продуктом является полипептид.
В контексте настоящего документа выражение генетическая карта относится к описанию взаимосвязей генетических сцеплений между локусами на одной или нескольких хромосомах в пределах данного вида, обычно изображенных в форме диаграммы или таблицы. Для каждой генетической карты расстояния между локусами измеряют с помощью частот рекомбинации между ними. Рекомбинации между локусами можно обнаруживать с помощью ряда маркеров. Генетическая карта является продуктом картирующей популяции, типов применяемых маркеров и полиморфного потенциала каждого маркера среди различных популяций. Порядок и генетические расстояния между локусами могут отличаться от одной генетической карты к другой.
В контексте настоящего документа выражение генетический маркер относится к одному или нескольким нуклеотидам, связанным с представляющим интерес фенотипом, признаком или формой признака. В некоторых вариантах осуществления маркер может быть связан с представляющим интерес аллелем или аллелями и может указывать на наличие или отсутствие представляющего интерес аллеля или аллелей в клетке или организме. В некоторых вариантах осуществления маркер может содержать, фактически состоять из или состоять из представляющего интерес аллеля или аллелей. Маркер может представлять собой, но не ограничиваться ими, аллель, гаплотип, полиморфизм длины рестрикционных фрагментов (RFLP), повтор простой последовательности (SSR), случайную амплифицированную полиморфную ДНК (RAPD), расщепляемые амплифицированные полиморфные последовательности (CAPS) (Rafalski and Tingey, Trends in Genetics 9:275 (1993)), полиморфизм длины амплифицированных фрагментов (AFLP)(Vos et al., Nucleic Acids Res. 23:4407 (1995)), однонуклеотидный полиморфизм (SNP) (Brookes, Gene 234:177 (1993)), характеризуемая последовательностью амплифицированная область (SCAR) (Paran and Michelmore, Theor. Appl. Genet. 85:985 (1993)), ДНК-маркирующий сайт (STS) (Onozaki et al., Euphytica 138:255 (2004)), одноцепочечный конформационный полиморфизм (SSCP) (Orita et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:2766 (1989)), межмикросателлитные последовательности (ISSR) (Blair et al., Theor. Appl. Genet. 98:780 (1999)), полиморфизм амплифицированных последовательностей между двумя фрагментами ретротранспозона (IRAP), полиморфизм амплифицированных ретротранспозонмикросателлитных последовательностей (REMAP) (Kalendar et al., Theor. Appl. Genet. 98:704 (1999)) или продукт расщепления РНК (такой как метка Lynx). Маркер может присутствовать в геномных или экспрессированных нуклеиновых кислотах (например, EST). Некоторые описанные в настоящем документе маркеры называют также маркерами гибридизации, если они расположены на области вставки-делеции. Это связано с тем, что область вставки по определению является полиморфизмом по отношению к растению без вставки. Таким образом, маркер нужен лишь для указания того, присутствует или отсутствует область вставки-делеции. Можно применять любую подходящую методику обнаружения маркера для выявления такого маркера гибридизации, например в примерах, представленных в настоящем описании, применяют методику SNP. Большое количество генетических маркеров маиса известны в данной области техники и опубликованы или доступны из различных источников, таких как интернет-ресурс Maize GDB и интернет-ресурс Arizona Genomics Institute, запущенный Аризонским университетом.
Специалистам в данной области будет понятно, что генетические маркеры могут включать доминантные и/или кодоминантные маркеры. Кодоминантные маркеры показывают наличие двух или
- 9 036149 более аллелей (два на диплоидную особь). Доминантные маркеры показывают наличие только одного аллеля. Наличие фенотипа с доминантным маркером (например, бэнд ДНК) является признаком того, что один аллель присутствует либо в гомозиготном, либо гетерозиготном состоянии. В случае популяций, в которых особи являются преимущественно гомозиготными и локусы являются преимущественно диморфными, доминантные и кодоминантные маркеры могут быть в равной степени полезными. По мере того как популяции становятся более гетерозиготными и мультиаллельными, кодоминантные маркеры часто становятся более информативными о генотипе, чем доминантные маркеры.
В контексте настоящего документа выражение генотип относится к генетической конституции особи (или группы особей) в одном или нескольких генетических локусах, в отличие от наблюдаемого, и/или обнаруживаемого, и/или проявляемого признака (фенотипа). Генотип определяют с помощью аллеля(ей) одного или нескольких известных локусов, которые особь наследует от своих родителей. Термин генотип можно применять для обозначения генетической конституции особи в одном локусе, во многих локусах или, что более характерно, термин генотип можно применять для обозначения генетической конституции особи для всех генов в его геноме. Генотипы можно опосредовано характеризовать, например, с помощью маркеров и/или непосредственно характеризовать с помощью секвенирования нуклеиновых кислот.
В контексте настоящего документа выражение идиоплазма относится к генетическому материалу отдельного растения или от отдельного растения, группы растений (например, линии, сорта или семейства растений), или клона, полученного из линии, сорта, вида растения или культуры. Генетический материал может быть частью клетки, ткани или организма, или может быть выделен из клетки, ткани или организма.
В контексте настоящего документа выражение гаплотип относится к комбинации аллелей (два или более) во многих генетических локусах. Обычно генетические локусы, которые определяют гаплотип, являются физически и генетически сцепленными (т.е. аллели, которые составляют гаплотип, обычно локализованы на одном хромосомном сегменте). Таким образом, в некоторых вариантах осуществления термин гаплотип относится ко множеству аллелей в отдельном хромосомном сегменте или ко множеству аллелей в двух или более хромосомных сегментах, расположенных на одной хромосоме.
В контексте настоящего документа выражения представляющий интерес гаплотип и требуемый гаплотип применяют взаимозаменяемо для обозначения гаплотипа, который сцеплен с требуемым признаком. Представляющий интерес гаплотип может быть связан либо с повышением, либо с понижением проявления данного признака в зависимости от природы признака, и может быть связанным с изменением морфологии, цвета и т.д. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения представляющий интерес гаплотип связан с повышенной мужской фертильностью и, таким образом, может применяться в качестве маркера для выявления, отбора и/или получения фертильных растений маиса; для создания прогноза, будет или нет и/или до какой степени растение маиса фертильным; для уменьшения затрат, связанных с программами селекции и/или программами повышения семенной продуктивности; и/или для улучшения эффективности программ селекции и/или программ повышения семенной продуктивности.
В контексте настоящего документа выражение гемизиготный относится к генетическому статусу диплоидной клетки, у которой только одна копия гена вместо обычных двух копий (т.е. ген не имеет дубликата на гомологичной хромосоме). Например, у млекопитающих гены на X хромосоме являются гемизиготными у самцов. В качестве другого иллюстративного примера гетерологичный трансген может присутствовать в гемизиготном состоянии.
В контексте настоящего документа выражение гетерологичный относится к нуклеотиду/полипептиду, который происходит от чужеродного вида, или если от того же вида, то существенно модифицирован относительно его нативной формы по составу и/или геномному локусу посредством намеренного вмешательства человека.
В контексте настоящего документа выражение гетерозисная группа относится к набору генотипов, которые демонстрируют сходную гетерозисную реакцию при скрещивании с генетически отличными группами генотипов (т.е. при скрещивании с генотипами из отличной гетерозисной группы). Hallauer et al., Corn breeding, in CORN and Corn Improvement p. 463-564 (1998). В гетерозисных группах классифицируются инбредные линии, и их дополнительно подразделяют в пределах гетерозисной группе на семейства, исходя из нескольких критериев, таких как генеалогическая схема, связи по молекулярному маркеру и характеристики в гибридных комбинациях. Smith et al., Theor. Appl. Gen. 80:833 (1990). Гетерозисная группа Stiff Stalk представляет собой основную гетерозисную группу в северных регионах произрастания кукурузы в Соединенных Штатах и Канаде; иногда ее называют гетерозисной группой Iowa Stiff Stalk Synthetic или BSSS. Гетерозисная группа поп-Stiff Stalk представляет собой основную гетерозисную группу в северных регионах произрастания кукурузы в Соединенных Штатах и Канаде; иногда ее называют гетерозисной группой Lancaster или Lancaster Sure Crop.
В контексте настоящего документа выражение гетерозиготный относится к генетическому статусу, при котором в соответствующих локусах на гомологичных хромосомах расположены различные аллели.
В контексте настоящего документа выражение гомозиготный относится к генетическому статусу,
- 10 036149 при котором в соответствующих локусах на гомологичных хромосомах расположены идентичные аллели.
В контексте настоящего документа выражение гибридный относится к растению или части растения, полученному при скрещивании по меньшей мере двух генетически несхожих родителей. Примеры схем скрещивания включают без ограничений однократные скрещивания, модифицированные однократные скрещивания, двойные модифицированные однократные скрещивания, трехсторонние скрещивания, модифицированные трехсторонние скрещивания и двойные скрещивания, где по меньшей мере один родитель в модифицированном скрещивании является потомком от скрещивания между сестринскими линиями.
В контексте настоящего документа выражение инбредный относится к практически гомозиготному растению или сорту. Термин может относиться к растению или сорту, которые являются практически гомозиготными по всему геному или которые являются практически гомозиготными в отношении части генома, которая представляет особый интерес. Примеры способов селекции для получения инбредных растений включают без ограничений генеалогическую схему селекции, рекуррентный отбор, поколение одного семени, возвратное скрещивание и удвоенные гаплоиды.
В контексте настоящего документа выражения повышают, повышает, повышение и схожие выражения означают увеличение по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 175, 200, 300% или более.
В контексте настоящего документа выражение повышенная фертильность относится к улучшению одного или нескольких признаков фертильности по сравнению с одним или несколькими контролями (например, нативное растение/идиоплазма одного вида, один или оба родителя, почти изогенное растение, у которого отсутствует один или несколько маркеров/аллелей, связанных с повышенной фертильностью, почти изогенное растение, у которого отсутствует кодирующая последовательность vip3, и т.д.). Иллюстративные признаки фертильности включают, но не ограничиваются ими, количество пыльцы, морфологию пыльцы, пыльцевую продуктивность на пыльник, количество пыльников, морфологию пыльника, количество пыльников на метелку, количество метелки, морфологию метелки, количество метелок на растение, количество шелка, морфологию шелка, шелковую продуктивность на растение, количество зерновок, морфологию зерновки, продуктивность зерновки на початок, долю недоразвитых зерновок, продуктивность зерновки на растение и всхожесть зерновок. Таким образом, растение, которое демонстрирует повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную пыльцевую продуктивность на пыльник, улучшенную морфологию пыльцы, повышенную продуктивность пыльника, повышенную продуктивность пыльника на метелку, улучшенную морфологию пыльника, повышенную продуктивность метелки, улучшенную морфологию метелки, повышенную продуктивность шелка, улучшенную морфологию шелка, повышенную продуктивность шелка на растение, повышенное количество зерновок, улучшенную морфологию зерновки, повышенную продуктивность зерновки на початок, пониженную долю недоразвитых зерновок, повышенную продуктивность зерновки на растение, повышенную всхожесть зерновок, повышенную фертильность в стрессовых условиях (например, условия засухи), повышенную фертильность под действием высоких дневных температур и/или повышенную фертильность под действием высоких ночных температур по сравнению с контрольным растением (например, нативным растением/идиоплазмой одного вида, одним или обоими родителями, почти изогенным растением, у которого отсутствует один или несколько маркеров/аллелей, связанных с повышенной фертильностью, почти изогенным растением, у которого отсутствует кодирующая последовательность vip3, и т.д.) демонстрирует повышенную фертильность. При применении в отношении части растения (например, идиоплазмы), термин повышенная фертильность относится к улучшению одного или нескольких признаков фертильности у растения, которое происходит от такой части растения.
В контексте настоящего документа выражение повышенная женская фертильность относится к улучшению одного или нескольких признаков фертильности женского растения по сравнению с одним или несколькими контролями (например, нативным растением/идиоплазмой одного вида, одним или обоими родителями, почти изогенным растением, у которого отсутствует один или несколько маркеров/аллелей, связанных с повышенной фертильностью, почти изогенным растением, у которого отсутствует кодирующая последовательность vip3, и т.д.). Иллюстративные примеры признаков женской фертильности включают, но не ограничиваются ими, количество шелка, морфологию шелка, продуктивность шелка на растение, количество зерновок, морфологию зерновки, продуктивность зерновки на початок, долю недоразвитых зерновок, продуктивность зерновки на растение и всхожесть зерновок. Таким образом, растение, которое демонстрирует повышенную продуктивность шелка, улучшенную морфологию шелка, повышенную продуктивность шелка на растение, повышенное количество зерновок, улучшенную морфологию зерновки, повышенную продуктивность зерновки на початок, пониженную долю недоразвитых зерновок, повышенную продуктивность зерновки на растение, повышенную всхожесть зерновок, повышенную фертильность в стрессовых условиях (например, условия засухи), повышенную фертильность под действием высоких дневных температур и/или повышенную фертильность под действием высоких ночных температур по сравнению с контрольным растением (например, нативным растением/идиоплазмой одного вида, одним или обоими родителями, почти изогенным растением, у которого отсутствует один или несколько маркеров/аллелей, связанных с повышенной фертильностью, почти изо
- 11 036149 генным растением, у которого отсутствует кодирующая последовательность vip3, и т.д.) демонстрирует повышенную фертильность. При применении в отношении части растения (например, идиоплазмы), термин повышенная женская фертильность относится к улучшению одного или нескольких признаков фертильности женского растения у растения, которое происходит от такой части растения.
В контексте настоящего документа выражение повышенная фертильность мужского растения относится к улучшению одного или нескольких признаков фертильности мужского растения по сравнению с одним или несколькими контролями (например, нативным растением/идиоплазмой одного вида, одним или обоими родителями, почти изогенным растением, у которого отсутствует один или несколько маркеров/аллелей, связанных с повышенной фертильностью, почти изогенным растением, у которого отсутствует кодирующая последовательность vip3, и т.д.). Иллюстративные примеры признаков мужской фертильности включают, но не ограничиваются ими, количество пыльцы, морфологию пыльцы, пыльцевую продуктивность на пыльник, количество пыльников, морфологию пыльника, количество пыльников на метелку, количество метелок, морфологию метелки и количество метелок на растение. Таким образом, растение, которое демонстрирует повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную пыльцевую продуктивность на пыльник, улучшенную морфологию пыльцы, повышенную продуктивность пыльников, повышенную продуктивность пыльника на метелку, улучшенную морфологию пыльника, повышенную продуктивность метелки, улучшенную морфологию метелки, повышенную мужскую фертильность в стрессовых условиях (например, условия засухи), повышенную мужскую фертильность под действием высоких дневных температур и/или повышенную мужскую фертильность под действием высоких ночных температур по сравнению с контрольным растением (например, нативным растением/идиоплазмой одного вида, одним или обоими родителями, почти изогенным растением, у которого отсутствует один или несколько маркеров/аллелей, связанных с повышенной фертильностью, почти изогенным растением, у которого отсутствует кодирующая последовательность vip3, и т.д.) демонстрирует повышенную мужскую фертильность. При применении в отношении части растения (например, идиоплазмы) термин повышенная фертильность мужского растения относится к улучшению одного или нескольких признаков фертильности мужского растения у растения, которое происходит от такой части растения.
В контексте настоящего документа выражение вставка-делеция относится к вставке или делеции в паре нуклеотидных последовательностей, где первая последовательность может рассматриваться как имеющая вставку относительно второй последовательности или вторая последовательность может рассматриваться как имеющая делецию относительно первой последовательности.
В контексте настоящего документа выражение инфертильный относится к растению, которое является недостаточно фертильным для применения в программе селекции. В некоторых вариантах осуществления инфертильные растения представляют собой растения, которые высвобождают менее 25000, 50000, 75000 или 100000 пыльцевых зерен на метелку в день за трехдневный период сразу же после выхода пыльника. Инфертильные растения могут производить и/или высвобождать жизнеспособные пыльцевые зерна. Фактически, в некоторых вариантах осуществления инфертильные растения производят и высвобождают жизнеспособные пыльцевые зерна, но делают это с такой скоростью, которая является недостаточный для эффективного применения в программе селекции и/или повышения семенной продуктивности.
В контексте настоящего документа выражение информативный фрагмент относится к нуклеотидной последовательности, содержащей фрагмент нуклеотидной последовательности большего размера, при этом фрагмент дает возможность выявлять один или несколько аллелей в пределах нуклеотидной последовательности большего размера. Например, информативный фрагмент нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 1 содержит фрагмент нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 1 и дает возможность выявлять один или несколько представляющих интерес аллелей в пределах части нуклеотидной последовательности, соответствующей такому фрагменту SEQ ID NO: 1.
В контексте настоящего документа выражения интрогрессия интрогрессирование и интрогрессированный относится как к естественному, так и к искусственному перенесению требуемого аллеля или комбинации требуемых аллелей генетического локуса или генетических локусов из одного генетического окружения в другое. Например, требуемый аллель в определенном локусе может быть перенесен по меньшей мере в одного потомка с помощью генеративного скрещивания между двумя родителями одного вида, при котором по меньшей мере один из родителей имеет в своем геноме требуемый аллель. Например, в качестве альтернативы перенесение аллеля может происходить с помощью рекомбинации между двумя донорскими геномами, например в слитом протопласте, где по меньшей мере один из донорских протопластов имеет в своем геноме требуемый аллель. Требуемый аллель может быть отобранным аллелем маркера, QTL, трансгена или т.п. Потомство, содержащее требуемый аллель, может быть повторно подвергнуто возвратному скрещению с линией, имеющей требуемое генетическое окружение, и подвергнуто отбору по требуемому аллелю, в результате чего требуемый аллель становится встроенным в требуемое генетическое окружение. Например маркер, связанный с повышенный фертильностью, может быть интрогрессирован из донора в рекуррентного родителя, который не является функционально фертильным. Потомство, полученное в результате, затем можно повторно подвергать возвратному скрещиванию и отбору до тех пор, пока потомство не будет обладать аллелей повышенной фертильностью в
- 12 036149 окружении рекуррентного родителя.
В контексте настоящего документа в отношении нуклеотидов и полипептидов термин выделенный относится к нуклеотиду или полипептиду, который практически не содержит клеточный материал, вирусный материал, культуральную среду (в случае получения с помощью технологий рекомбинантных ДНК) или химические предшественники, или другие химические вещества (в случае химического синтеза). Выделенный фрагмент представляет собой фрагмент нуклеотида или полипептида, не встречающегося в природе в виде фрагмента, и не может быть найден в естественном состоянии. Выделенный не означает, что препарат является технически чистым (однородным), а скорее то, что он является достаточно чистым для получения нуклеотида или полипептида в том виде, в котором его можно применять для поставленной цели. В некоторых вариантах осуществления композиция, содержащая нуклеотид или полипептид, является чистой по меньшей мере на приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99%, или более.
В контексте настоящего документа в отношении клеток термин выделенный относится к клетке, которая отделена от других компонентов, с которыми она в норме связана в своем естественном состоянии. Например, выделенная растительная клетка может представлять собой растительную клетку в культуральной среде и/или растительную клетку в подходящем носителе. Выделенный не означает, что препарат является технически чистым (однородным), а скорее то, что он является достаточно чистым для получения клетки в том виде, в котором ее можно применять для поставленной цели. В некоторых вариантах осуществления композиция, содержащая клетку, является чистой по меньшей мере на приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99%, или более.
В контексте настоящего документа выражение сцепление относится к степени, с которой маркер связан с данным аллелем и/или фенотипическим признаком (например, повышенной мужской фертильностью). Чем ближе маркер сцеплен с аллелем/фенотипом, тем лучшим индикатором данный маркер становится. Степень сцепления между маркером и фенотипическим признаком можно измерять и выражать в виде статистической вероятности косегрегации маркера и фенотипического признака. Родство сцепления между маркером и аллелем/фенотипом может быть приведено как вероятность или скорректированная вероятность. Сцепление можно выражать как требуемый предел или диапазон. Например, в некоторых вариантах осуществления два генетических маркера считаются сцепленными, если они отделены менее чем приблизительно на 50, 40, 30, 25, 20, 15, 10, 5, 4, 3, 2 или 1 сМ. В типичных вариантах осуществления два генетических маркера сцеплены, если они отделены на 10 сМ или менее.
В контексте настоящего документа выражение неравновесное сцепление относится к неслучайной сегрегации генетических локусов или признаков (или обоих). Неравновесное сцепление подразумевает, что соответствующие локусы находятся на достаточном близком физическом расположении вдоль длины хромосомы, так чтобы они сегрегировали совместно с частотой большей, чем случайной (т.е. неслучайным образом). Маркеры/аллели, которые демонстрируют неравновесное сцепление, считаются сцепленными. Сцепленные маркеры/аллели сегрегируют совместно более чем в 50% случаев. Иными словами, маркеры/аллели, которые сегрегируют совместно, имеют частоту рекомбинации менее 50%. Неравновесное сцепление чаще всего оценивают с использованием показателя r2, который рассчитывают с помощью формулы, описанной в Hill and Robertson, Theor. Appl. Genet. 38:226 (1968). Если r2=1, то имеет место полное неравновесное сцепление между маркерами/аллелями, а это означает, что маркеры не были разделены в результате рекомбинации и имеют одинаковую частоту аллелей. Значения для r2 выше 1/3 обычно указывают на достаточно сильное неравновесное сцепление, являющееся пригодным для картирования. Ardlie et al., Nature Reviews Genetics 3:299 (2002). Поэтому в некоторых вариантах осуществления маркеры/аллели называют находящимися в неравновесном сцеплении, если значения r между парными локусами маркеров превышают или равны приблизительно 0,33, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9 или 1,0.
В контексте настоящего документа выражение равновесное сцепление описывает ситуацию, при которой маркеры/аллели сегрегируют независимо (т.е. распределяются среди потомства случайным образом). Маркеры, которые демонстрируют равновесное сцепление, считаются несцепленными (независимо от того, лежат ли они на одной хромосоме или нет).
В контексте настоящего документа выражение группа сцепления относится к группе генов, связанных вместе родством сцепления.
В контексте настоящего документа выражение локус относится к положению на хромосоме. Локусы могут охватывать один или несколько нуклеотидов.
Применяемые в настоящем документе термины логарифм вероятностей и показатель LOD относятся к вероятности, с которой сцеплены два генетических локуса. Показатели LOD чаще всего оценивают с использованием показателя Z, который равен логарифму соотношения вероятности, с которой сцеплены генетические локусы, а также 0,5-кратной вероятности, с которой два генетических локуса распределяются независимо. Положительные показатели LOD указывают на сцепление, в то время как отрицательные показатели LOD указывают на независимое распределение. Показатели LOD, составляющие 2,5 и выше, обычно указывают на достаточно сильное сцепление, которое пригодно для картирования. Поэтому в некоторых вариантах осуществления маркеры/аллели называют сцепленными, если показатель LOD превышает или равен приблизительно 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5, 9,
- 13 036149
9,5, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более.
В контексте настоящего документа выражение маис относится к Zea mays L. подвид mays. В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса происходит из группы Zea mays L. подтип mays Identata, иногда называемого кукурузой зубовидной. В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса происходит из группы Zea mays L. подтип mays Indurata, иногда называемой кукурузой кремнистой. В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса происходит из группы Zea mays L. подтип mays Saccharata, иногда называемой кукурузой сахарной. В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса происходит из группы Zea mays L. подтип mays Amylacea, иногда называемой мучнистой кукурузой. В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса происходит из группы Zea mays L. подтип mays Everta, иногда называемой кукурузой лопающейся. Растения маиса, которые можно выявлять, отбирать и/или получать с помощью способов и композиций по настоящему изобретению, включают гибриды, инбредные растения, частично инбредные растения, члены определенных популяций и члены неопределенных популяций.
В контексте настоящего документа выражения с мужской фертильностью и мужская фертильность относятся к способности растения производить и высвобождать жизнеспособные, функциональные пыльцевые зерна.
В контексте настоящего документа выражения с мужской стерильностью и мужская стерильность относятся к неспособности растения производить и высвобождать жизнеспособные, функциональные пыльцевые зерна. Мужская стерильность обычно случается в результате отсутствия образования и развития функциональных тычинок, микроспор или гамет. Обычно есть три типа мужской стерильности: 1) пыльцевая стерильность, при которой особи с мужской стерильностью отличаются от нормальных только по отсутствию или чрезмерному недостатку функциональных пыльцевых зерен; 2) структурная или тычиночная мужская стерильность, при которой мужские цветки или тычинка являются несформировавшимися и нефункциональными или полностью отсутствуют; а также 3) функциональная мужская стерильность, при которой идеально хорошая и жизнеспособная пыльца заключена в нераскрывающемся пыльнике, и таким образом лишена возможности выполнять свою функцию.
В контексте настоящего документа выражение маркер относится к обнаруживаемой характеристике, которую можно использовать для проведения различия между организмами. Примеры таких характеристик могут включать генетическую композицию (например, генетический маркер), уровни экспрессии генов, белковую композицию, уровни белка, масляную композицию, уровни масла, углеводородную композицию, уровни углеводорода, композицию жирных кислот, уровни жирных кислот, аминокислотную композицию, уровни аминокислот, биополимеры, фармацевтическую, крахмальную композицию, уровни крахмала, поддающийся ферментации крахмал, выход при ферментации, эффективность ферментации, выход энергии, вторичные соединения, метаболиты, морфологические характеристики и агрономические характеристики.
Маркер является связанным с признаком, когда он сцеплен с ним и когда наличие маркера является индикатором, будет ли и/или в какой степени встречаться требуемый признак или форма признака у растения/части растения, содержащего маркер. Аналогичным образом, маркер является связанным с аллелем, когда он сцеплен с ним и когда наличие маркера является индикатором присутствует ли аллель у растения/части растения, содержащего маркер. Например, маркер, связанный с повышенной мужской фертильностью, относится к маркеру, наличие или отсутствие которого можно применять для прогнозирования, будет ли и/или в какой степени растение/часть растения проявлять повышенную мужскую фертильность.
Маркеры, соответствующие генетическим полиморфизмам между членами популяции, можно обнаруживать с помощью общепризнанных в данной области техники способов. Они включают, например, секвенирование нуклеиновой кислоты, способы гибридизации, способы амплификации (например, PCRспособы специфической амплификации последовательности), обнаружение полиморфизмов длин рестрикционных фрагментов (RFLP), обнаружение изоферментых маркеров, обнаружение полинуклеотидных полиморфизмов с помощью аллельспецифической гибридизации (ASH), обнаружение амплифицированных вариабельных последовательностей генома растения, обнаружение самоподдерживающейся системы репликации последовательностей, обнаружение повторов простой последовательности (SSR), обнаружение однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) и/или обнаружение полиморфизмов длины амплифицированных фрагментов (AFLP). Также известны общепринятые способы обнаружения экспрессируемых последовательностей-меток (EST) и маркеров SSR, производных от последовательностей EST и рандомно амплифицированной полиморфной ДНК (RAPD).
В контексте настоящего документа выражения маркерный аллель и аллель маркерного локуса относятся к одному из множества полиморфных нуклеотидов или нуклеотидных последовательностей, встречающихся в маркерном локусе в популяции, которая является полиморфной по данному маркерному локусу.
В контексте настоящего документа выражение маркерный локус относится к конкретной хромосомной локализации в геноме организма, где можно найти конкретный маркер. Маркерный локус можно
- 14 036149 применять для отслеживания наличия второго сцепленного локуса, например сцепленного локуса, который кодирует или вносит свой вклад в экспрессию фенотипического признака. Например, маркерный локус можно применять для осуществления мониторинга сегрегации аллелей в локусе, таких как QTL или отдельный ген, которые генетически или физически сцеплены с маркерным локусом.
В контексте настоящего документа выражения маркерный зонд и зонд относятся к молекуле, которую можно применять для обнаружения наличия одного или нескольких отдельных представляющих интерес аллелей, гаплотипов и/или молекул. В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, которая является комплементарной всему представляющему интерес аллелю или его части. Для гибридизации нуклеиновых кислот можно применять маркерные зонды (описанные в табл. 9), содержащие 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50 или более смежных нуклеотидов. В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд содержит по меньшей мере приблизительно 7, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 175, 200 или более смежных нуклеотидов. В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд можно применять для определения (т.е. генотипа) отдельного аллеля, который присутствует в маркерном локусе.
В контексте настоящего документа выражения отбор с помощью маркера и MAS относятся к способу, с помощью которого фенотипы опосредованно отбирают на основе маркерных генотипов. MAS необязательно может быть дополнен непосредственным фенотипированием представляющего интерес признака. Например, в способе при применении MAS для селекции фенотипирование можно осуществлять по одной или нескольким точкам для подтверждения того, что у особей или их потомков экспрессируется представляющий интерес фенотип.
В контексте настоящего документа выражение противоотбор с помощью маркера относится к способу, с помощью которого маркерные генотипы применяют для выявления растений, которые не будут отобраны, обеспечивая их удаление из программы селекции или посева.
В контексте настоящего документа выражения растение MIR162 и часть растения MIR162 относятся к растениям/частям растений маиса, которые содержат трансгенный объект MIR162, описанное в патенте США № 8232456. Растение MIR162 или часть растения MIR162 может быть гемизиготным или гомозиготным по трансгенному объекту MIR162.
В контексте настоящего документа выражение молекулярный маркер можно применять в отношении генетического маркера, который определен выше, или кодируемого ним продукта (например, белка), применяемого в качестве отправной точки при выявлении сцепленного локуса. Молекулярный маркер может быть получен из геномной нуклеотидной последовательности или из экспрессированных нуклеотидных последовательностей (например, из сплайсированной РНК, кДНК и т.д.). Выражение также относится к нуклеотидным последовательностям, комплементарным к маркерным последовательностям или фланкирующим их, таким как нуклеотидные последовательности, применяемые в качестве зондов (описанные в табл. 9), и/или праймеры, способные амплифицировать маркерную последовательность. Нуклеотидные последовательности являются комплементарными, когда они специфически гибридизируются в растворе, например согласно правилам спаривания Уотсона-Крика.
В контексте настоящего документа выражения представляющая интерес молекула и требуемая молекула применяют взаимозаменяемо для обозначения гаплотипа, который является сцепленным с требуемым признаком. Представляющая интерес молекула может быть связана либо с повышением, либо с понижением проявления данного признака или в данном признаке в зависимости от природы требуемого фенотипа и может быть связана с изменением морфологии, цвета и т.д. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения представляющая интерес молекула связана с повышенной мужской фертильностью и может таким образом применяться в качестве маркера для выявления, отбора и/или получения фертильных растений маиса; для прогнозирования, будет или нет и/или до какой степени растение маиса фертильным; для уменьшения затрат, связанных с программами селекции и/или повышения семенной продуктивности; и/или для улучшения эффективности программ селекции и/или программ повышения семенной продуктивности.
В контексте настоящего документа в отношении нуклеотидов выражение нативный относится к последовательности нуклеиновой кислоты, которая естественным образом присутствует в геноме клетки или растения.
В контексте настоящего документа в отношении полипептидов выражение нативный относится к аминокислотной последовательности, которая естественным образом присутствует в протеоме клетки или растения.
В контексте настоящего документа выражения почти изогенная линия (NIL) и почти изогенное растение относятся к линиям/растениям маиса, которые являются генетически идентичными за исключением одного или нескольких генетических локусов. Такие линии/растения можно создавать с помощью скрещивания донорской линии, содержащей представляющий интерес ген или признак, с рекуррентным родителем для получения гетерозиготного F1, а затем повторного возвратного скрещивания потомства с рекуррентным родителем (BC1, BC2 и т.д.), сохраняя донорский ген или признак в каждом
- 15 036149 последующем поколении. Отбор с помощью маркера (MAS) можно применять для увеличения эффективности создания NIL с помощью скрининга особей на наличие целевого локуса (гена) в каждом поколении и отсутствия посторонней донорской ДНК по всему оставшемуся геному для ускорения возврата к рекуррентному родительскому типу.
В контексте настоящего документа выражение не встречающийся в природе относится к растению или части растения, которое в норме не существует в природе. Не встречающиеся в природе растения и части растений можно получать любым известным в настоящей области способом, в том числе без ограничений путем трансформации растения или части растения, трансфицирования растения или части растения и скрещивания встречающегося в природе растения или части растения с не встречающимся в природе растением или частью растения. В некоторых вариантах осуществления не встречающееся в природе растение или часть растения содержит одну или несколько экзогенных нуклеотидных последовательностей. В некоторых вариантах осуществления не встречающееся в природе растение или часть растения содержит одну или несколько не встречающихся в природе копий встречающейся в природе нуклеотидной последовательности (т.е. дополнительные копии гена, который встречается в природе в растениях/частях растений такого вида, которые могут, например, находиться в неприродной локализации в геноме).
В контексте настоящего документа выражения нуклеиновая кислота, последовательность нуклеиновой кислоты, нуклеотидная последовательность и полинуклеотид относятся к дезоксирибонуклеотиду, рибонуклеотиду и дезоксирибонуклеотидным-рибонуклеотидным полимерам как в одно-, так и в двуцепочечной форме, и если нет иных ограничений, охватывает аналоги, характеризующиеся основным свойством природных полинуклеотидов в том отношении, что они гибридизируются с одноцепочечными нуклеиновыми кислотами таким же образом, как и полинуклеотиды, встречающиеся в природе. Так, дезоксирибополинуклеотиды и рибополинуклеотиды, которые были химически, ферментативно или метаболически модифицированы в отношении стабильности или по другим причинам, и дезоксирибополинуклеотиды и рибополинуклеотиды, содержащие нестандартные основания (например, инозиновые и/или тритилированные основания), представляют собой такие же нуклеиновые кислоты, последовательности нуклеиновых кислот, нуклеотидные последовательности и полинуклеотиды, как и в случаях применения таких выражений в настоящем документе.
В контексте настоящего документа выражение нуклеотид относится к мономерной единице, из которой построены полимеры ДНК или РНК, и которая состоит из пуринового или пиримидинового основания, пентозы и группы фосфорной кислоты. Нуклеотиды (обычно находящиеся в форме их 5'монофосфата) называют их однобуквенным обозначением следующим образом: A в случае аденилата или дезоксиаденилата (соответственно в случае РНК или ДНК), C в случае цитидилата или дезоксицитидилата, G в случае гуанилата или дезоксигуанилата, U в случае уридилата, T в случае дезокситимидилата, R в случае пуринов (A или G), Y в случае пиримидинов (C или T), K в случае G или T, H в случае A или C или T, I в случае инозина и N в случае любого нуклеотида.
В контексте настоящего документа выражение идентичность нуклеотидной последовательности относится к наличию идентичных нуклеотидов в соответствующих положениях двух полинуклеотидов. Полинуклеотиды обладают идентичными последовательностями в случае, если последовательность нуклеотидов в двух полинуклеотидах является такой же при выравнивании с максимальным соответствием (например, в окне сравнения). Сравнение последовательности двух или более нуклеотидов обычно проводят путем сравнения частей двух последовательностей в окне сравнения для выявления и сравнения локальных областей сходства последовательности. Как правило, окно сравнения составляет от приблизительно 20 до 200 смежных нуклеотидов. Процент идентичности последовательности для полинуклеотидов, как, например, приблизительно с 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 98, 99 или 100% идентичности последовательности, можно определять с помощью сравнения двух оптимально выровненных последовательностей в окне сравнения, где часть полинуклеотидной последовательности в окне сравнения может включать дополнения или делеции (т.е. гэпы) по сравнению с эталонной последовательностью для оптимального выравнивания двух последовательностей. Процент рассчитывают с помощью: (a) определения числа положений, в которых идентичное основание нуклеиновой кислоты встречается в обеих последовательностях; (b) деления числа совпадающих положений на общее число положений в окне сравнения; а также (c) умножения результата на 100. Оптимальное выравнивание последовательностей для сравнения можно также осуществлять реализацией известных алгоритмов с помощью компьютера или путем визуальной проверки. Общедоступными алгоритмами сравнения последовательности и множественного выравнивания последовательностей являются соответственно программы Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) и ClustalW, при этом обе доступны в сети Интернет. Другие соответствующие программы включают без ограничений GAP, BestFit, Plot Similarity и FASTA, которые являются частью пакета программ Accelrys GCG Package, доступного от Accelrys, Inc. Сан-Диего, Калифорния, Соединенные Штаты Америки. В некоторых вариантах осуществления процент идентичности последовательности относится к идентичности последовательности по всей длине одной из сравниваемых последовательностей. В некоторых вариантах осуществления расчет с целью определения процента идентичности последовательности не включает в расчет положения нуклеотидов, в которых каждая из сравни
- 16 036149 ваемых нуклеиновых кислот включает в себя N (т.е. где любой нуклеотид может находиться в данном положении).
В контексте настоящего документа в отношении нуклеиновых кислот выражение функционально связанный относится к функциональной связи между двумя или более нуклеиновыми кислотами. Например, промоторная последовательность может быть описана как функционально связанная с гетерологичной последовательностью нуклеиновой кислоты, поскольку промоторные последовательности инициируют и/или опосредуют транскрипцию гетерологичной последовательности нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления функционально связанные нуклеотидные последовательности являются смежными и/или находятся в одной рамке считывания.
В контексте документа выражения фенотип, фенотипический признак или признак относятся к одному или нескольким признакам организма. Фенотип можно наблюдать невооруженным глазом или с помощью любых других средств оценки, известных в данной области техники, например микроскопии, биохимического анализа или электромеханического анализа. В некоторых случаях фенотип непосредственно контролируется одним геном или генетическим локусом, т.е. признаком, определенным одним геном. В других случаях фенотип является результатом действия нескольких генов.
В контексте настоящего документа выражение растение может относиться к любому подходящему растению, в том числе, без ограничений, семенным растениям (например, покрытосеменным и голосеменным) и высшим растениям (например, мхам, папоротниковым и плауновидным). В некоторых вариантах осуществления растение представляет собой однодольное (односемядольное) растение, такое как рис, маис, пшеница, ячмень, сорго, просо, овес, тритикале, рожь посевная, гречиха, фонио, кинва, сахарный тростник, бамбук, банан, имбирь, лук, лилия, нарцисс желтый, касатик, амариллис, орхидея, канна, пролеска, тюльпан, чеснок, рожь, полба, спельта, эммер, дурум, камут, трава (например, пастбищная трава), полевичка абессинская, майло, лен, Tripsacum sp. или растение теосинте. В некоторых вариантах осуществления растение представляет собой двудольное (двусемядольное) растение, такое как ежевика, малина, клубника, барбарис, толокнянка, черника, кофейная ягода, клюква, вороника, смородина, бузина, крыжовник, дереза, жимолость, лимон, лайм, брусника, гарциния, апельсин, перец, хурма, гранат, слива домашняя, хлопчатник, клевер, асаи, слива, персик, нектарин, вишня, гуава, миндаль, орех пекан, грецкий орех, амарант, яблоня, душистый горошек, груша, картофель, соя, сахарная свекла, подсолнечник, батат, тамаринд, чай, табак или томат.
В контексте настоящего документа выражение растительная клетка относится к клетке, существующей в растении и/или полученной от растения (например, полученной из культуры клеток/тканей растения). Таким образом, выражение растительная клетка может относиться к выделенной растительной клетке, растительной клетке в культуре, растительной клетке выделенной ткани/органа и/или растительной клетке в целом растении.
В контексте настоящего документа выражение часть растения относится, по меньшей мере, к фрагменту целого растения или клеточной культуре или тканевой культуре, полученной из растения. Таким образом, выражение часть растения может относиться к растительным клеткам, тканям растения и органам растения, а также к клеточным/тканевым культурам, полученным из растительных клеток, тканей растения и растительных культур. В вариантах осуществления настоящего изобретения могут быть включены и/или может быть применена любая часть растения, в том числе без ограничений пыльники, ветки, почки, каллюсы, группы побегов, имеющие общую корневую систему, колосья, семядоли, початки, зародыши, корневые волоски, цветы, плоды, наружные оболочки, зерна, листья, лодикулы, завязи, цветковая чешуя, метелки, плодоножки, стручки, пыльца, протопласты, корни, кончики корней, семена, пестики початки неспелой кукурузы, стебли, черешки, рыльце, пестики и кисти. В некоторых вариантах осуществления часть растения представляет собой идиоплазму.
В контексте настоящего документа выражение полиморфизм относится к вариации нуклеотидной последовательности в локусе, в котором указанная вариация слишком распространена для того, чтобы быть вызванной лишь спонтанной мутацией. Полиморфизм обычно имеет частоту в популяции по меньшей мере приблизительно 1%. Полиморфизм может быть однонуклеотидным полиморфизмом (SNP) или полиморфизмом вставка/делеция, также называемым в настоящем документе как вставка-делеция. Дополнительно, вариация может находиться в транскрипционном профиле или паттерне метилирования. Полиморфный сайт или сайты нуклеотидной последовательности можно определять с помощью сравнения нуклеотидных последовательностей в одном или нескольких локусах у двух или более элементов идиоплазмы.
В контексте настоящего документа выражения полипептид, пептид и белок относятся к полимеру из аминокислотных остатков. Выражения охватывают полимеры аминокислот, в которых один или несколько аминокислотных остатков представляет собой синтетический химический аналог соответствующей встречающейся в природе аминокислоты, а также полимеры встречающихся в природе аминокислот.
В контексте настоящего документа выражение популяция относится к генетически гетерогенной коллекции растений, имеющих общее генетическое происхождение.
В контексте настоящего документа выражение потомство относится к растениям, произошедшим
- 17 036149 путем вегетативного или генеративного размножения от одного или нескольких родительских растений. Растения-потомки можно получать с помощью клонирования или самоопыления одного родительского растения или с помощью скрещивания двух родительских растений. В некоторых вариантах осуществления растения-потомки содержат маркеры, аллели, гаплотипы и/или геномные участки по настоящему изобретению. В зависимости от контекста не всегда является преимущественным то, что потомство содержит маркер/аллель/гаплотип/геномную(ые) область(и) по настоящему изобретению, связанные с повышенной мужской фертильностью (например, при получении гибридов). Таким образом, в некоторых вариантах осуществления потомство по настоящему изобретению может не содержать маркер/аллель/гаплотип/геномную(ые) область(и) по настоящему изобретению, связанные с повышенной мужской фертильностью.
В контексте настоящего документа выражения промотор и промоторная последовательность относятся к последовательностям нуклеиновой кислоты, участвующим в регуляции инициации транскрипции. Растительный промотор представляет собой промотор, способный инициировать транскрипцию в растительных клетках. Типичные растительные промоторы включают, но не ограничиваются ими, промоторы, которые получены из растений, вирусов и бактерий растений, которые содержат гены, экспрессируемые в растительных клетках, такие как Agrobacterium или Rhizobium. Тканеспецифичный промотор представляет собой промотор, который предпочтительно инициирует транскрипцию в определенных тканях. Стресс-индуцируемый промотор представляет собой промотор, который предпочтительно инициирует транскрипцию при определенных условиях окружающей среды. Промотор, специфичный для стадии развития представляет собой промотор, который предпочтительно инициирует транскрипцию на определенных стадиях развития.
В контексте настоящего документа выражение локус количественного признака (QTL) относится к генетическому локусу, который содержит и/или связан с одним или несколькими генами, лежащими в основе количественного признака.
В контексте настоящего документа выражение рецессивный аллель относится к аллелю, чей фенотипический эффект не выражен в гетерозиготе.
В контексте настоящего документа выражение рекомбинантный относится к молекуле (например, ДНК, РНК, белка и т.д.), которая получена в результате манипуляции человека, однако опосредованной, молекулой нуклеиновой кислоты.
В контексте настоящего документа выражение эталонная последовательность относится к определенной нуклеотидной последовательности, применяемой в качестве основы для сравнения нуклеотидной последовательности. Эталонную последовательность для маркера получают например с помощью генотипирования ряда линий в представляющем интерес локусе или локусах, выравнивания нуклеотидных последовательностей в программе для выравнивания последовательностей, а затем получения консенсусной последовательности выравнивания. Тем не менее, эталонная последовательность выявляет полиморфизмы в аллелях в локусе. Эталонная последовательность может не копировать фактическую последовательность нуклеиновой кислоты из любого конкретного организма; однако она пригодна для конструирования праймеров и зондов (как описано в табл. 9) для фактических полиморфизмов в локусе или локусах.
В контексте настоящего документа выражение регуляторный элемент относится к нуклеотидной последовательности, вовлекаемой в контроль экспрессии представляющей интерес последовательности нуклеиновой кислоты. Регуляторные элементы включают промотор, функционально связанный с представляющей интерес последовательностью нуклеиновой кислоты, и сигналы терминации. Как правило, они охватывают также последовательности, необходимые для надлежащей трансляции нуклеотидной последовательности.
В контексте настоящего документа выражения избирательно гибридизируется и специфически гибридизируется относятся к гибридизации последовательности нуклеиновой кислоты с определенной целевой последовательностью нуклеиновой кислоты, при этом последовательность нуклеиновой кислоты преимущественно гибридизируется со специфической целевой последовательностью нуклеиновой кислоты (например, по меньшей мере приблизительно двукратное отличие по сравнению с ее гибридизацией с нецелевыми последовательностями нуклеиновых кислот) с по сути исключением нецелевых нуклеиновых кислот.
В контексте настоящего документа выражение жесткие условия гибридизации относится к условиям, при которых нуклеиновая кислота будет избирательно гибридизироваться с целевой последовательностью нуклеиновой кислоты. Расширенное руководство по гибридизации нуклеиновых кислот можно найти в Tijssen Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology-Hybridization with Nucleic Acid Probes часть I, глава 2 Overview of principles of hybridization and the strategy of nucleic acid probe assays Elsevier, New York (1993). В некоторых вариантах осуществления жесткие условия гибридизации предусматривают 7% додецилсульфат натрия (SDS), 0,5М NaPO4, 1 мМ EDTA при 50°С с промыванием в 0,1xSSC, 0,1% SDS при 65°С. В некоторых вариантах осуществления жесткие условия гибридизации предусматривают жесткие условия промывания, включающие в себя 50% формамид с 5х рас
- 18 036149 твором Денхардта, 0,5% SDS и 1х SSPE при 42°С. Как правило, в жестких условиях зонд будет гибридизироваться со своей целевой подпоследовательностью, но не с другими последовательностями.
В контексте настоящего документа Tm относится к температуре (при определенной ионной силе и pH), при которой 50% целевой последовательности гибридизируется с абсолютно совпадающим зондом. Для очень жестких условий выбирают температуру, равную Tm для конкретного зонда. Примером жестких условий гибридизации для гибридизации комплементарных нуклеиновых кислот, которые имеют более чем 100 комплементарных остатков на фильтре в Саузерн- или нозерн-блоте, является 50% формамид с 1 мг гепарина при 42°С, причем гибридизация проводится в течение ночи. Примером условий отмывки высокой жесткости является 0,15М NaCl при 72°С в течение приблизительно 15 мин. Примером жестких условий отмывки является отмывка с помощью 0,2х SSC при 65°С в течение 15 мин (описание буфера SSC см. в Sambrook ниже). Для удаления фонового сигнала зонда отмывке в условиях высокой жесткости зачастую предшествует отмывка в условиях низкой жесткости. Примерными условиями отмывки средней жесткости для дуплекса, например с более чем 100 нуклеотидами, являются 1х SSC при 45°С в течение 15 мин. Примерными условиями отмывки низкой жесткости для дуплекса, например с более чем 100 нуклеотидами, являются 4-6х SSC при 40°С в течение 15 мин. Для коротких зондов (например, длиной приблизительно от 10 до 50 нуклеотидов) жесткие условия обычно предусматривают концентрации солей, составляющие менее чем приблизительно 1,0М ионов Na, как правило, концентрации, составляющие приблизительно 0,01-1,0М ионов Na (или других солей) при рН 7,0-8,3, а также температуру, как правило, равную по меньшей мере приблизительно 30°С. Жесткие условия также могут быть достигнуты добавлением дестабилизирующих средств, таких как формамид. В общем, соотношение сигнал-шум в 2 раза (или более) превышающее наблюдаемое для несвязанного зонда при конкретном гибридизационном анализе указывает на обнаружение специфической гибридизации. Нуклеиновые кислоты, которые не гибридизируются друг с другом при жестких условиях, являются все еще практически идентичными, если белки, которые они кодируют, практически идентичны. Это происходит, например, когда копия нуклеиновой кислоты создается с помощью максимальной вырожденности кодона, допущенной генетическим кодом.
Ниже приведены примеры комплексов условий гибридизации/отмывки, которые можно применять для клонирования гомологичных нуклеотидных последовательностей, которые являются практически идентичными эталонным нуклеотидным последовательностям по настоящему изобретению: 7% додецилсульфат натрия (SDS), 0,5М NaPO4, 1 мМ EDTA при 50°С с отмывкой в 2X SSC, 0,1% SDS при 50°С; 7% додецилсульфат натрия (SDS), 0,5М NaPO4, 1 мМ EDTA при 50°С с отмывкой в 1X SSC, 0,1% SDS при 50°С; 7% додецилсульфат натрия (SDS), 0,5М NaPO4, 1 мМ EDTA при 50°С с отмывкой в 0,5X SSC, 0,1% SDS при 50°С; 7% додецилсульфат натрия (SDS), 0,5М NaPO4, 1 мМ EDTA при 50°С с отмывкой в 0,1X SSC, 0,1% SDS при 50°С; 7% додецилсульфат натрия (SDS), 0,5М NaPO4, 1 мМ EDTA при 50°С с отмывкой в 0,1X SSC, 0,1% SDS при 65°С.
Еще одним признаком того, что две нуклеотидные последовательности или белки являются практически идентичными, является то, что белок, кодируемый первой нуклеиновой кислотой, иммунологически перекрестно реагирует с белком, кодируемым второй нуклеиновой кислотой, или специфически связывается с ним. Таким образом, обычно белок является практически идентичным второму белку, например, когда два белка отличаются только консервативными заменами.
В контексте настоящего документа выражение практически фертильный относится к растению, которое фертильно практически настолько, насколько контрольное растение (например, один или оба его родителя, почти изогенное растение, у которого отсутствует один или несколько маркеров/аллелей, связанных с повышенной фертильностью, почти изогенное растение, у которого отсутствует кодирующая последовательность vip3, и т.д.). В некоторых вариантах осуществления практически фертильные растения являются растениями, которые высвобождают пыльцевые зерна в/на метелку в день, что составляет по меньшей мере приблизительно 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90 или 95% от такового у контроля за трехдневный период сразу же после выхода пыльника. В некоторых вариантах осуществления практически фертильные растения являются растениями, которые высвобождают по меньшей мере приблизительно 500000, 600000, 700000, 800000, 900000 или 1000000 пыльцевых зерен на метелку в день за трехдневный период сразу же после выхода пыльника.
В контексте настоящего документа фраза набор для анализа TAQMAN® относится к обнаружению последовательности в реальном времени с помощью PCR на основе набора для анализа TAQMAN®, продаваемой Applied Biosystems, Inc., Фостер-Сити, Калифорния, Соединенные Штаты Америки. Для выявленного маркера можно разработать набор для анализа TAQMAN® для применения в программе селекции.
В контексте настоящего документа выражения трансформация, трансфекция и трансдукция относятся к внесению экзогенной/гетерологичной нуклеиновой кислоты (РНК и/или ДНК) в клеткухозяина. Клетка считается трансформированной, трансфицированной или трансдуцированной экзогенной/гетерологичной нуклеиновой кислотой, если такая нуклеиновая кислота была введена или доставлена в клетку.
- 19 036149
В контексте настоящего документа выражения трансгенный и рекомбинантный относятся к организму (например, бактерии или растению), который содержит одну или несколько экзогенных нуклеиновых кислот. Как правило, экзогенная нуклеиновая кислота стабильно интегрирована в геноме таким образом, чтобы по меньшей мере часть экзогенной нуклеиновой кислоты передавалась последующим поколениям. Экзогенная нуклеиновая кислота может быть интегрирована в геном отдельно или как часть рекомбинантной экспрессионной кассеты. Выражение трансгенный может быть применено для обозначения любого растения или части растения, генотип которого был изменен в связи с наличием экзогенной нуклеиновой кислоты, в том числе тех трансгенных организмов, которые изначально изменены таким образом, а также тех, что были созданы посредством половых скрещиваний или бесполого размножения из исходного трансгенного организма. В контексте настоящего документа выражение трансгенный не охватывает изменение генома (хромосомного или внехромосомного) с помощью традиционных способов селекции растений или посредством встречающихся в природе событий, таких как случайное перекрестное опыление, нерекомбинантная вирусная инфекция, нерекомбинантная бактериальная трансформация, нерекомбинантная транспозиция или спонтанная мутация.
Трансформация клетки может быть стабильной или транзиентной. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления растительная клетка по настоящему изобретению является стабильно трансформированной нуклеотидной последовательностью, кодирующей молекулу-предшественника синтетической микроРНК по настоящему изобретению. В других вариантах осуществления растение по настоящему изобретению является транзиентно трансформированной нуклеотидной последовательностью, кодирующей молекулу-предшественника синтетической микроРНК по настоящему изобретению.
Транзиентная трансформация в контексте полинуклеотида означает, что полинуклеотид введен в клетку и не интегрирован в геном клетки.
Стабильная трансформация или стабильно трансформированный, стабильное внесение или стабильно внесенный в контексте настоящего документа означает, что нуклеиновая кислота внесена в клетку и интегрирована в геном клетки. В связи с этим интегрированная нуклеиновая кислота может наследоваться потомками, более конкретно, потомками многих последовательных поколений. В контексте настоящего документа геном включает в себя также ядерный и пластидный геном, а следовательно предусматривает интеграцию нуклеиновой кислоты, например в геном хлоропласта. Выражение стабильная трансформация в контексте настоящего документа может относиться также к трансгену, который сохраняется внехромосомно, например в виде минихромосомы.
В контексте настоящего документа выражение трансген относится к экзогенной нуклеиновой кислоте. Трансгены могут быть одно- или двухцепочечными.
В контексте настоящего документа в отношении растений и частей растений термин трансгенный относится к растению или части растения, которые содержат одну или несколько экзогенных нуклеиновых кислот.
В контексте настоящего документа выражение неблагоприятный аллель относится к маркерному аллелю, который сегрегирует с неблагоприятным фенотипом растения, обеспечивая тем самым преимущество выявления растений, которые можно удалять из программы селекции или посева.
В контексте настоящего документа выражение вектор относится к молекуле нуклеиновой кислоты для клонирования и/или переноса нуклеиновой кислоты в клетку. Вектор может представлять собой репликон, к которому может быть присоединена другая нуклеотидная последовательность для обеспечения возможности репликации присоединенной нуклеотидной последовательности. Репликон может представлять собой любой генетический элемент (например, плазмиду, фаг, космиду, хромосому, вирусный геном), который функционирует как автономная единица репликации нуклеиновой кислоты in vivo (т.е. способен к репликации под своим собственным контролем). Выражение вектор включает как вирусные, так и невирусные (например, плазмидные) молекулы нуклеиновых кислот для внесения нуклеиновой кислоты в клетку in vitro, ex vivo и/или in vivo. Большое количество известных из уровня техники векторов можно применять для манипуляций с нуклеиновыми кислотами, встраивания чувствительных элементов и промоторов в гены и т.д. Например, вставку фрагментов нуклеиновой кислоты, соответствующих чувствительным элементам и промоторам, в соответствующий вектор можно осуществлять путем лигирования соответствующих фрагментов нуклеиновой кислоты в выбранный вектор, который имеет комплементарные липкие концы. В качестве альтернативы концы молекул нуклеиновых кислот можно ферментативно модифицировать или можно получать любой сайт путем лигирования нуклеотидных последовательностей (линкеров) с концами нуклеиновой кислоты. Такие векторы можно конструировать такими, чтобы они содержали последовательности, кодирующие селектируемые маркеры, которые обеспечивают отбор клеток, содержащих вектор и/или имеют нуклеиновую кислоту вектора, встроенную в клеточный геном. Такие маркеры позволяют осуществлять выявление и/или отбор клеток, которые включают и экспрессируют белки, кодируемые маркером. Рекомбинантный вектор относится к вирусному или невирусному вектору, который содержит одну или несколько гетерологичных нуклеотидных последовательностей (т.е. трансгенов). Векторы можно вводить в клетки любым подходящим способом, известным в данной области техники, в том числе без ограничений с помощью трансфекции, электропорации, микроинъекции, трансдукции, слияния клеток, диэтиламиноэтилдекстрана, осаждения фосфатом
- 20 036149 кальция, липофекции (слияния лизосом), а также с применением генной пушки или переносчика нуклеиновых кислот в составе вектора.
В контексте настоящего документа выражение белок Vip3 относится к растительному инсектицидному белку (VIP), который является членом класса белков Vip3 и включает без ограничений белки Vip3A(a), Vip3A(b), Vip3A(c), Vip3B, Vip3C(a), Vip3C(b) и Vip3Z, а также их гомологи. Гомологи вышеуказанных членов класса Vip3 белков включают без ограничений белки, которые вступают в перекрестную реакцию с антителами, которые иммунологически распознают один или несколько из вышеуказанных членов класса Vip3 белков, белки, которые вступают в перекрестную реакцию с рецепторами (например, на нематоде-вредителе или кишке насекомого), затрагиваемыми одним или несколькими из вышеуказанных членов класса Vip3 белков, белки, имеющие аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более сходна или идентична с одной или несколькими из вышеуказанных членов класса Vip3 белков, а также белки, имеющие токсичную активную область, аминокислотная последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более сходна или идентична токсичной активной области одного или нескольких вышеуказанных членов класса Vip3 белков. Гомологи вышеуказанных членов класса Vip3 белков могут проявлять пестицидную активность (например, нематодную и/или инсектицидную) при экспрессии в трансгенном растении или части растения маиса. Примеры белков Vip3 (и соответствующие номера доступа GenBank и/или номера патентных публикаций США) описаны в табл. 4.
Маркеры можно применять в различных задачах по селекции растений. См., например, Staub et al., Hortscience 31: 729 (1996); Tanksley, Plant Molecular Biology Reporter 1: 3 (1983). Одной из основных представляющих интерес областей является повышение эффективности возвратного скрещивания и интрогрессия генов с помощью отбора посредством маркера (MAS). В целом, в MAS используются генетические маркеры, которые были выявлены как имеющие значительную вероятность совместной сегрегации с требуемым признаком. Предполагают, что такие маркеры находятся в/вблизи гена(ов), который обуславливает развитие требуемого фенотипа, и их наличие указывает на то, что растение будет обладать требуемым признаком. Предполагают, что растения, которые обладают таким маркером, передадут требуемый фенотип своему потомству.
Маркер, который демонстрирует сцепление с локусом, влияющим на требуемый фенотипический признак, обеспечивает полезный инструмент для отбора по признаку в популяции растений. Это особенно верно, если фенотип сложно проанализировать или это происходит на поздней стадии развития растения. Поскольку анализы на основе маркеров ДНК являются менее трудоемкими и занимают меньше физического пространства, чем полевое фенотипирование, можно проанализировать намного более крупные популяции, увеличивая шансы нахождения рекомбинанта с целевым сегментом из донорской линии, перенесенной в реципиентную линию. Чем более близкое сцепление, тем маркер более пригоден, так как рекомбинация является менее вероятной между маркером и геном, обусловливающим развитие признака или оказывающим на него влияние. Наличие фланкирующих маркеров снижает шансы того, что будет иметь место ложноположительный отбор. Идеальной ситуацией является наличие маркера в самом гене так, чтобы не могла происходить рекомбинация между маркером и геном. Такой маркер называют совершенным маркером.
При внесении гена с помощью MAS он является не только вводимым геном, но и фланкирующими областями. Gepts, Crop Sci. 42:1780 (2002). Это называют сцепленным грузом. В том случае, когда донорское растение имеет очень далекое родство с реципиентным растением, такие фланкирующие участки несут дополнительные гены, которые могут кодировать агрономически нежелательные признаки. Такой сцепленный груз может также приводить в результате к уменьшенному урожаю или другим отрицательным агрономическим характеристикам даже после многих циклов возвратного скрещивания в элитную линию маиса. Иногда его называют также как груз для урожая. Размер фланкирующей области можно уменьшать с помощью дополнительного возвратного скрещивания, несмотря на то, что это не всегда успешно, поскольку селекционеры не имеют контроля в отношении размера области или точечных разрывов при рекомбинации. Young et al., Genetics 120:579 (1998). При классической селекции рекомбинации, которые участвуют в уменьшении размера донорского сегмента, являются лишь случайными. Tanksley et al., Biotechnology 7: 257 (1989). Даже после 20 возвратных скрещиваний можно ожидать нахождение все еще сцепленного с геном фрагмента донорской хромосомы подходящего размера, по которому проводят отбор. Однако с помощью маркеров можно отобрать таких редких особей, у которых произошла рекомбинация вблизи представляющего интерес гена. Среди 150 растений, полученных возвратным скрещиванием, существует 95% шанс, что по меньшей мере у одного растения будет кроссинговер в пределах 1 сМ от гена, исходя из расстояния на генетической карте одного мейоза. Маркеры позволяют однозначно выявлять таких особей. При одном дополнительном возвратном скрещивании 300 растений будет 95% шанс кроссинговера в пределах 1 сМ расстояния на генетической карте одного мейоза другой стороны гена, что приведет к образованию сегмента вокруг целевого гена менее 2 сМ на, исходя из расстояния на генетической карте одного мейоза. С маркерами это можно осуществлять за два
- 21 036149 поколения, в то время как без маркеров будет необходимо в среднем 100 поколений. См. Tanksley et al., ранее. Если известно точное положение гена, для отбора рекомбинации в популяциях различных размеров можно использовать фланкирующие маркеры, окружающие ген. Например, в популяциях меньших размеров рекомбинации могут предположительно быть дальше от гена, поэтому для обнаружения рекомбинации будут необходимы более отдаленные фланкирующие маркеры.
Доступность комплексных карт сцеплений генома маиса, содержащих возрастающие плотности общих маркеров маиса, облегчает генетическое картирование и MAS маиса. См., например, карты IBM2 Neighbors, которые доступны онлайн на вебсайте MaizeGDB.
Из всех типов молекулярных маркеров SNP являются наиболее многочисленными и обладают потенциалом обеспечивать самое высокое разрешение генетической карты. Bhattramakki et al., Plant Molec. Biol. 48:539 (2002). SNP можно анализировать в так называемом режиме сверхвысокой пропускной способности, так как им не требуются большие количества нуклеиновой кислоты, а автоматизация анализа является простой. SNP также обладают преимуществом в том, что являются относительно недорогостоящими системами. Такие три фактора делают SNP весьма привлекательными для применения в MAS. Для генотипирования SNP доступны несколько способов, включая без ограничений гибридизацию, достройку праймера, лигирование олигонуклеотида, расщепление нуклеазами, минисеквенирование и кодируемые сферы. Такие способы рассмотрены в различных публикациях: Gut, Hum. Mutat. 17:475 (2001); Shi, Clin. Chem. 47:164 (2001); Kwok, Pharmacogenomics 1:95 (2000); Bhattramakki and Rafalski, Discovery and application of single nucleotide polymorphism markers in plants, in Plant Genotyping: The DNA Fingerprinting of PLANTS, CABI Publishing, Wallingford (2001). Такие и другие способы детального исследования SNP используются в широком спектре коммерчески доступных методик, включая Masscode™ (Qiagen, Джермантуан, Мэриленд), Invader® (Hologic, Мадисон, Висконсин), SnapShot® (Applied Biosystems, Фостер Сити, Калифорния), Taqman® (Applied Biosystems, Фостер Сити, Калифорния) и Beadarrays™ (Illumina, Сан-Диего, Калифорния).
Для любого конкретного генотипа при описании гаплотипа ряд SNP можно применять вместе в последовательности или в сцепленных последовательностях. Ching et al., BMC Genet. 3:19 (2002); Gupta et al., (2001), Rafalski, Plant Sci. 162:329 (2002b). Гаплотипы могут быть более информативными, чем отдельные SNP, и могут быть более иллюстративными, чем любой конкретный генотип. Например, один SNP может представлять собой аллель T для конкретной донорской линии или сорта, однако аллель T также может встречаться в популяции для селекции маиса, используемой в качестве рекуррентных родителей, у которых благоприятный аллель отсутствует. В таком случае комбинация аллелей в сцепленных SNP может быть более информативной. После привязки уникального гаплотипа к донорской хромосомной области такой гаплотип можно применять в такой популяции или любой ее субпопуляции для определения того, имеет ли особь конкретный ген. Применение известных специалистам в данной области автоматизированных платформ с высокой пропускной способностью для обнаружения маркеров делает этот способ высокоэкономичным и эффективным.
Настоящее изобретение относится к маркерам, связанным с повышенной фертильностью (например, с повышенной мужской фертильностью). Анализ таких маркеров можно применять для выявления, отбора и/или получения фертильных растений маиса для выявления инфертильных растений маиса, для прогнозирования, будет ли и/или до какой степени растение маиса фертильным, для повышения эффективности и/или понижения затрат на программы селекции и/или программы повышения семенной продуктивности и т.д.
Маркеры по настоящему изобретению могут содержать, фактически состоять из или состоять из отдельного аллеля или комбинации аллелей в одном или нескольких генетических локусах. Например, маркер может содержать маркерный аллель, локализованный в первом маркерном локусе, маркерный аллель во втором маркерном локусе, маркерный аллель в третьем маркерном локусе, четвертый маркер в четвертом маркерном локусе и т.д.
В некоторых вариантах осуществления маркер локализуется в одном или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментах, как если бы каждый участок и все его возможные комбинации были перечислены отдельно. Например, маркер может локализоваться в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, в хромосомном сегменте 7514).
В некоторых вариантах осуществления маркер содержит, фактически состоит из или состоит из представляющего интерес аллеля, локализованного в одном или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментах. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер содержит, фактически состоит из или состоит из представляющего интерес аллеля, локализованного в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, представляющий интерес аллель, локализованный в хромосомном сегменте 7514).
В некоторых вариантах осуществления маркер содержит, фактически состоит из или состоит из гаплотипа, содержащего, состоящего фактически из или состоящего из двух или более представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментах. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер содержит, фактически состоит из или состоит
- 22 036149 из гаплотипа, содержащего, состоящего фактически из или состоящего из двух или более представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, гаплотип, содержащий два или более представляющих интерес аллеля, локализованных в хромосомном сегменте 7514).
В некоторых вариантах осуществления маркер содержит, фактически состоит из или состоит из гаплотипа содержащего, состоящего фактически из или состоящего из одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в пределах первого хромосомного сегмента, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в пределах второго хромосомного сегмента, отличного от первого хромосомного сегмента, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в пределах третьего хромосомного сегмента, отличного от первого и второго хромосомных сегментов и т.д., причем каждый из хромосомных сегментов содержит один или несколько хромосомных сегментов, описанных в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер содержит, фактически состоит из или состоит из гаплотипа, содержащего, состоящего фактически из или состоящего из:
1) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 1;
2) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных на хромосоме 2;
3) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3);
4) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 18 до 45 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 25);
5) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12744 до 12749 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12747);
6) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12750 до 12755 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12753);
7) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12756;
8) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12757 до 12762 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12760 и/или хромосомном сегменте 12761);
9) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12763 до 12768 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12768);
10) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих
- 23 036149 интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 18 до 45 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 25), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12763 до 12768 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12768);
11) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 1;
12) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных на хромосоме 2;
13) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 18 до 45 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 25);
14) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12744 до 12749 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12747);
15) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12750 до 12755 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12753);
16) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12756;
17) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12757 до 12762 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12760 и/или хромосомном сегменте 12761);
18) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12763 до 12768 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12768);
19) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12750 до 12755 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12753), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12756.
В вариантах осуществления маркер содержит один или несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 8. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер содержит по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или более, или все 18 требуемых аллелей, описанных в табл. 8. В вариантах осуществления маркер содержит один или несколько из благоприятных (требуемых) аллелей:
- 24 036149 (a) на хромосоме 5 (QTL 5.1 и/или QTL 5.2), как описано в табл. 8;
(b) на хромосоме 3, как описано в табл. 8;
(c) на хромосоме 7, как описано в табл. 8;
(d) на хромосоме 10, как описано в табл. 8;
(e) на хромосомах 3 и 5, как описано в табл. 8;
(f) на хромосомах 5 и 7, как описано в табл. 8;
(g) на хромосомах 3, 5 и 7, как описано в табл. 8;
(h) на хромосомах 5 и 10, как описано в табл. 8;
(i) на хромосомах 3, 5 и 10 как описано в табл. 8; или (j) любой комбинации (;·ι)-(ί).
В вариантах осуществления маркер содержит один или несколько из благоприятных (требуемых) аллелей, описанных в табл. 10.
В некоторых вариантах осуществления маркер содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких маркерных аллелей, сцепленных с одним или несколькими из описанных в настоящем документе маркеров, хромосомных сегментов, аллелей и/или гаплотипов. В некоторых вариантах осуществления описанные в настоящем документе маркерный аллель и маркер(ы), сегмент(ы), аллель(и) и/или гаплотип(ы) разделены на менее чем приблизительно 50, 40, 30, 25, 20, 15, 10, 5, 4, 3, 2 или 1 сМ. В некоторых вариантах осуществления парное(ые) значение(ия) r2 маркерного аллеля и маркера(ов)/сегмента(ов)/аллеля(ей)/гаплотипа(ов), описанных в настоящем документе, превышает(ют) или равен(ны) приблизительно 0,33, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9 или 1,0. В некоторых вариантах осуществления показатель LOD для маркерного аллеля и маркера(ов)/сегмента(ов)/аллеля(ей)/гаплотипа(ов), описанных в настоящем документе, превышает или равен приблизительно 0,5, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5, 9, 9,5, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более. Сцепленные маркеры можно определять, например, с помощью ресурсов, доступных на веб-сайте MaizeGDB (www.maizegdb.org).
В некоторых вариантах осуществления маркер содержит, фактически состоит из или состоит из маркерного аллеля, локализованного в пределах приблизительно 25, 20, 15, 10, 5 или 1 сМ или менее (при этом термин в пределах включает конечную точку указанной области) от любого одного из маркеров, хромосомных сегментов, аллелей и/или гаплотипов, описанных в настоящем документе. Например, в некоторых вариантах осуществления маркерный аллель содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких маркеров, локализованных в пределах приблизительно 25, 10, 5, 1сМ или менее от хромосомного сегмента 7514.
В некоторых вариантах осуществления маркер не находится в природном генетическом окружении растения маиса (например, в норме не встречается в линии или сорте маиса, и был внесен туда с помощью вмешательства человека).
Маркеры по настоящему изобретению могут быть связаны с любым соответствующим признаком, включая без ограничений повышенную пыльцевую продуктивность на растение, повышенную пыльцевую продуктивность на метелку, повышенную пыльцевую продуктивность на пыльник, улучшенную морфологию пыльцы, повышенную продуктивность пыльника на растение, повышенную продуктивность пыльника на метелку, улучшенную морфологию пыльника, повышенную продуктивность метелки на растение, улучшенную морфологию метелки, повышенную фертильность (например, повышенную мужскую фертильность) в стрессовых условиях (например, условиях засухи), повышенную фертильность (например, повышенную мужскую фертильность) под действием высоких дневных температур, повышенную фертильность (например, повышенную мужскую фертильность) под действием высоких ночных температур и/или повышенную фертильность (например, повышенную мужскую фертильность) под действием условий, предусматривающих большое различие между дневными температурами и ночными температурами.
Маркеры по настоящему изобретению можно анализировать с помощью любого подходящего маркерного зонда, включая без ограничений описанные в настоящем документе маркерные зонды.
Маркеры по настоящему изобретению можно обнаруживать в любом подходящем продукте амплификации, включая без ограничений описанные в настоящем документе продукты амплификации.
Маркеры по настоящему изобретению можно анализировать с помощью любой подходящей методики(ик), включая без ограничений PCR-способы обнаружения (например, анализ TAQMAN®), методики обнаружения полиморфизма (см., например, патенты США № 5468613, 5217863; 5210015; 5876930; 6030787; 6004744; 6013431; 5595890; 5762876; 5945283; 5468613; 6090558; 5800944; 5616464; 7312039; 7238476; 7297485; 7282355; 7270981 и 7250252), методики лигирования зонда (см., например, патент США № 5800944), методики биочипов (см., например, патенты США № 6799122; 6913879 и 6996476; см. также Borevitz et al., Genome Res. 13:513-523 (2003); Cui et al., Bioinformatics 21:3852-3858 (2005)), способы по связыванию зонда (например, патент США № 5616464), способы достройки по одному основанию (см., например, патенты США № 6004744; 6013431; 5595890; 5762876 и 5945283), способы флуоресцентных меток (например, патенты США № 5210015; 5876930 и 6030787) и прямое секвенирование (см. например Service, Science 2006 311:1544-1546(2006)).
Настоящее изобретение также относится к не встречающимся в природе растениям и частям расте
- 25 036149 ний, содержащим один или несколько маркеров, связанных с повышенной фертильностью (например, повышенной мужской фертильностью).
Настоящее изобретение распространяется на продукты, собранные с не встречающихся в природе растений по настоящему изобретению, включая без ограничений клетки растений и пригодные для сбора части растений, включая без ограничений семена, листья, плоды, цветки, стебли, корневища, клубни и луковицы.
В некоторых вариантах осуществления собранный продукт может представлять собой клетку растения или часть растения, способную производить растение, обладающее повышенной фертильностью (например, повышенную мужскую фертильность).
Настоящее изобретение также распространяется на продукты, полученные из не встречающихся в природе растений по настоящему изобретению, в том числе без ограничений сухие пеллеты и порошки, масла, жиры, жирные кислоты, крахмалы и белки.
Маркеры и не встречающееся в природе растения и части растений по настоящему изобретению могут содержать любой соответствующий представляющий интерес аллель(и), гаплотип(ы) и/или молекулу(ы).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса NP2222. Например, представляющие интерес аллели могут содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментов, причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса NP2222. В некоторых таких вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов от 3 до 12768 (например, хромосомных сегментов 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768) идиоплазмы маиса NP2222.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса NP2660. Например, представляющие интерес аллели могут содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментов, причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса NP2660. В некоторых таких вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов от 3 до 12743 и/или одного или нескольких хромосомных сегментов от 12757 до 12768 (например, хромосомных сегментов 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768) идиоплазмы маиса NP2660.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса NP2276. Например, представляющие интерес аллели могут содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментов, причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса NP2276. В некоторых таких вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из хромосомного сегмента 1, одного или нескольких хромосомных сегментов от 46 до 12743 и/или одного или нескольких хромосомных сегментов от 12757 до 12768 (например, хромосомных сегментов 13, 506, 7514, 7546 и/или 12760-12761) идиоплазмы маиса NP2276.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса ID3461.
Например, представляющие интерес аллели могут содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментов, причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса ID3461. В некоторых таких вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов от 1 до 17 (например, хромосомных сегментов 1 и/или 13) идиоплазмы маиса ID3461.
В вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из линии в табл. 11.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной из SEQ ID NO: 1-350 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или несколь
- 26 036149 ким из SEQ ID NO: 1-350 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности, которая специфически гибридизируется с нуклеотидной последовательностью из одной или нескольких из SEQ ID NO: 1350 (как описано в табл. 3) в жестких условиях гибридизации.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности, которая кодирует аминокислотную последовательность, изложенную в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности, которая кодирует аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична аминокислотной последовательности, изложенной в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной из SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким из SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности, которая специфически гибридизируется с нуклеотидной последовательностью из одной или нескольких из SEQ ID NO: 526613 (как описано в табл. 9) в жестких условиях гибридизации.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких из требуемых аллелей, описанных в табл. 2. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140 или более требуемых аллелей, описанных в табл. 2.
В вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит один или несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 8. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер содержит по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или более, или все 18 требуемых аллелей, описанных в табл. 8.
В вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит один или несколько из требуемых аллелей:
(a) на хромосоме 5 (QTL 5.1 и/или QTL 5.2), как описано в табл. 8;
(b) на хромосоме 3, как описано в табл. 8;
(c) на хромосоме 7, как описано в табл. 8;
(d) на хромосоме 10, как описано в табл. 8;
(e) на хромосомах 3 и 5, как описано в табл. 8;
(f) на хромосомах 5 и 7, как описано в табл. 8;
(g) на хромосомах 3, 5 и 7, как описано в табл. 8;
(h) на хромосомах 5 и 10, как описано в табл. 8;
(i) на хромосомах 3, 5 и 10 как описано в табл. 8; или (j) любой комбинации (а)-(Ц
В вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит один или несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 10. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер содержит по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25 или более требуемых аллелей, описанных в табл. 10.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из обратного комплемента одного из представляющих интерес аллелей, описанных в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель содержит, фактически состоит из или состоит из информативного фрагмента одного из представляющих интерес аллелей, описанных в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления аллель содержит, фактически состоит из или состоит из информативного фрагмента обратного комплемента одного из представляющих интерес аллелей, описанных в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель не находится в природном генетическом окружении растения маиса (например, в норме не встречается в линии или сорте маиса, и был внесен туда с помощью вмешательства человека).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит, фактически
- 27 036149 состоит из или состоит из последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса NP2222. Например, представляющий интерес гаплотип может содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких (или двух или более) описанных в табл. 1 хромосомных сегментов, причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5 или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса NP2222. В некоторых таких вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит одну или несколько последовательностей нуклеиновой кислоты, по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичных одному или нескольким хромосомным сегментам от 3 до 12768 (например, хромосомным сегментам 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768) идиоплазмы маиса NP2222.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит, фактически состоит из или состоит из последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса NP2660. Например, представляющий интерес гаплотип может содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких (или двух или более) описанных в табл. 1 хромосомных сегментов, причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса NP2660. В некоторых таких вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит одну или несколько последовательностей нуклеиновой кислоты, по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичных одному или нескольким хромосомным сегментам от 3 до 12743 и/или одному или нескольким хромосомным сегментам от 12757 до 12768 (например, хромосомным сегментам 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768) идиоплазмы маиса NP2660.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит, фактически состоит из или состоит из последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса NP2276. Например, представляющий интерес гаплотип может содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких (или двух или более) описанных в табл. 1 хромосомных сегментов, причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса NP2276. В некоторых таких вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит одну или несколько последовательностей нуклеиновой кислоты, по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичных хромосомному сегменту 1, одному или нескольким хромосомным сегментам от 46 до 12743 и/или одному или нескольким хромосомным сегментам от 12757 до 12768 (например, хромосомным сегментам 13, 506, 7514, 7546 и/или 12760-12761) идиоплазмы маиса NP2276.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит, фактически состоит из или состоит из последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса ID3461. Например, представляющий интерес гаплотип может содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких (или двух или более) описанных в табл. 1 хромосомных сегментов, причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса ID3461. В некоторых таких вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит одну или несколько последовательностей нуклеиновой кислоты, по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичных одному или нескольким хромосомным сегментам от 1 до 17 (например, хромосомным сегментам 1 и/или 13) идиоплазмы маиса ID3461.
В вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из линии в табл. 11.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит одну или несколько последовательностей нуклеиновой кислоты, изложенных в SEQ ID NO: 1-350 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит одну или несколько (или две или более) нуклеотидных последовательностей, которые по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичны одной или нескольким из SEQ ID NO: 1-350 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит одну или несколько (или две или более) нуклеотидных последовательностей, которые специфически гибридизируются с нуклеотидной последовательностью одной или нескольких из SEQ ID NO: 1-350 (как описано в табл. 3) в жестких условиях гибридизации.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит одну или несколько (или две или более) нуклеотидных последовательностей, кодирующих аминокислотную последовательность, изложенную в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит одну или несколько (или две или более) нуклеотидных последовательностей, кодирующих аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или
- 28 036149 более идентична аминокислотной последовательности, изложенной в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит одну или несколько (или две или более) последовательностей нуклеиновой кислоты изложенных в SEQ ID NO: 526613 (как описано в табл. 9).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит одну или несколько (или две или более) нуклеотидных последовательностей, которые по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичны одной или нескольким из SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит одну или несколько (или две или более) нуклеотидных последовательностей, которые специфически гибридизируются с нуклеотидной последовательностью одной или нескольких из SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9) в жестких условиях гибридизации.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит один или несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 2. Например, в некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140 или более из требуемых аллелей, описанных в табл. 2.
В вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит один или несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 8. Например, в некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или более, или все 18 требуемых аллелей, описанных в табл. 8.
В вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит один или несколько (или два или более) требуемых аллелей:
(a) на хромосоме 5 (QTL 5.1 и/или QTL 5.2), как описано в табл. 8;
(b) на хромосоме 3, как описано в табл. 8;
(c) на хромосоме 7, как описано в табл. 8;
(d) на хромосоме 10, как описано в табл. 8;
(e) на хромосомах 3 и 5, как описано в табл. 8;
(f) на хромосомах 5 и 7, как описано в табл. 8;
(g) на хромосомах 3, 5 и 7, как описано в табл. 8;
(h) на хромосомах 5 и 10, как описано в табл. 8;
(i) на хромосомах 3, 5 и 10 как описано в табл. 8; или (j) любой комбинации (а)-(р.
В вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит один или несколько (или два или более) требуемых аллелей, описанных в табл. 10. Например, в некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25 или более требуемых аллелей, описанных в табл. 10.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит обратную комплементарную последовательность одного или нескольких (или двух или более) представляющих интерес аллелей, описанных в настоящем документе. Например, в некоторых вариантах осуществления по меньшей мере один представляющий интерес аллель присутствует в представляющем интерес гаплотипе, как описано в настоящем документе, в то время как по меньшей мере один другой представляющий интерес аллель в представляющем интерес гаплотипе присутствует в виде обратного комплемента аллеля(ей), описываемого(ых) в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит информативный фрагмент одного или нескольких (или двух или более) представляющих интерес аллелей, описанных в настоящем документе. Например, в некоторых вариантах осуществления по меньшей мере один представляющий интерес аллель присутствует в представляющем интерес гаплотипе, как описано в настоящем документе, в то время как по меньшей мере один другой представляющий интерес аллель в представляющем интерес гаплотипе присутствует в виде информативного фрагмента аллеля(ей), описываемого(ых) в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес гаплотип содержит информативный фрагмент обратного комплемента одного или нескольких (или двух или более) представляющих интерес аллелей, описанных в настоящем документе. Например, в некоторых вариантах осуществления по меньшей мере один представляющий интерес аллель присутствует в представляющем интерес гаплотипе, как описано в настоящем документе, в то время как по меньшей мере один другой представляющий интерес аллель в представляющем интерес гаплотипе присутствует в виде информативного фрагмента обратного комплемента аллеля(ей), описываемого(ых) в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления представляющая интерес молекула содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления представляющая интерес молекула содержит, фактически
- 29 036149 состоит из или состоит из по меньшей мере одной аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления представляющая интерес молекула не находится в природном протеоме растения маиса (например, не встречается в природе в линии или сорте маиса и была внесена туда с помощью вмешательства человека).
В некоторых вариантах осуществления представляющий интерес аллель/гаплотип/молекула связаны с повышенной пыльцевой продуктивностью на растение, повышенной пыльцевой продуктивностью на метелку, повышенной пыльцевой продуктивностью на пыльник, улучшенной морфологией пыльцы, повышенной продуктивностью пыльника на растение, повышенной продуктивностью пыльника на метелку, улучшенной морфологией пыльника, повышенной продуктивностью метелки на растение, улучшенной морфологией метелки, повышенной фертильностью (например, повышенной мужской фертильностью) в стрессовых условиях (например, условиях засухи), повышенной фертильностью (например, повышенной мужской фертильностью) под действием высоких дневных температур, повышенной фертильностью (например, повышенной мужской фертильностью) под действием высоких ночных температур и/или повышенной фертильностью (например, повышенной мужской фертильностью) под действием условий, предусматривающих большое различие между дневными температурами и ночными температурами.
Маркеры и не встречающиеся в природе растения и части растений по настоящему изобретению могут содержать любое подходящее число представляющих интерес аллелей, гаплотипов и/или молекул, описанных в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления маркер/не встречающееся в природе растение или часть растения содержит по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140 или более представляющих интерес аллелей, гаплотипов и/или молекул, связанных с повышенной фертильностью (например, повышенной мужской фертильностью), описанных в настоящем документе. Например, в некоторых таких вариантах осуществления маркер/не встречающееся в природе растение или часть растения содержит по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140 или более представляющих интерес аллелей, гаплотипов, молекул (как описано в настоящем документе), связанных с повышенной пыльцевой продуктивностью, повышенной пыльцевой продуктивностью на метелку, повышенной пыльцевой продуктивностью на пыльник, улучшенной морфологией пыльцы, повышенной продуктивностью пыльника на растение, повышенной продуктивностью пыльника на метелку, улучшенной морфологией пыльника, повышенной продуктивностью метелки на растение, улучшенной морфологией метелки, повышенной фертильностью (например, повышенной мужской фертильностью) в стрессовых условиях (например, условиях засухи), повышенной фертильностью (например, повышенной мужской фертильностью) под действием высоких дневных температур, повышенной фертильностью (например, повышенной мужской фертильностью) под действием высоких ночных температур и/или повышенной фертильностью (например, повышенной мужской фертильностью) под действием условий, предусматривающих большое различие между дневными температурами и ночными температурами.
Не встречающиеся в природе растения по настоящему изобретению могут содержать любой соответствующий инсектицидный белок, включая без ограничений белки Vip3.
В некоторых вариантах осуществления не встречающееся в природе растение или часть растения содержат одну или несколько нуклеиновых кислот, кодирующих белок Vip3. Например, в некоторых вариантах осуществления не встречающееся в природе растение или часть растения содержат трансгенный объект маиса MIR162, необязательно в гемизиготном или гомозиготном состоянии. В вариантах осуществления не встречающееся в природе растение или часть растения представляют собой инбредную линию (например, мужскую инбредную линию) или двойную гаплоидную линию. В вариантах осуществления не встречающееся в природе растение или часть растения происходят от элитной линии маиса. В вариантах осуществления не встречающееся в природе растение или часть растения происходят от культивируемого растения или части растения. В некоторых вариантах осуществления не встречающееся в природе растение или часть растения содержат один или несколько нуклеотидных последовательностей Vip, изложенных под номерами доступа, представленными в табл. 4.
- 30 036149
Таблица 4. Примеры белков Vip3 № доступа № доступа
Название____Gen Bank_______Gen Bank_______Публикация(-ии)_____________
Vip3Aal L48811 AAC37036 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa2 L48812 AAC37037 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa3 Vip3Aa4 AAR81079 патент США № 6137033; международная патентная публикация № WO2013015993 патент США № 6 656 908; международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa5 AAR81080 патент США № 6 656 908; международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa6 AAR81081 патент США № 6 656 908; международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa7 AY044227 AAK95326 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa8 AF399667 AAK97481 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa9 Y17158 CAA76665 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3AalO AF373030 AAN60738 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aall AY489126 AAR36859 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aal2 AF500478 AAM22456 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aal3 AY074706 AAL69542 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aal4 AF548629 AAQ12340 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aal5 AY295778 AAP51131 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aal6 AY739665 AAW65132 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aal7 Vip3Aal8 AY945939 AAX49395 Патент США № 6603063 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aal9 DQ241674 ABB72459 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aal9 DQ539887 ABG20428 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa20 DQ539888 ABG20429 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa21 DQ426899 ABD84410 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa22 DQO16968 AAY41427 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa23 DQO16969 AAY41428 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa24 EF432794 ABO20895 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa25 EF608501 ABR22260 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa26 EU294496 ABX90027 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa27 EU332167 ABY51679 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa28 FJ494817 ACR15110 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa29 FJ626674 ACV04598 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa30 FJ626675 ACV04599 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa31 FJ626676 ACV04600 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa32 FJ626677 ACV04601 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa33 GU073128 ACY38212 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa34 GU073129 ACY38213 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa35 GU733921 ADE06071 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa36 GU95151O ADF43020 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa37 HM132041 ADJ18213 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa38 HM117632 AEH31411 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa39 HM117631 AEH31410 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa40 HM132042 ADJ18214 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa41 HM132043 ADJ18215 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa42 HQ587048 ADQ73634 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa43 HQ594534 ADY76643 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Aa44 HQ650163 ADW66453 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Abl AAR40284 патент США № 6603063; международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Ab2 DQ054848 AAY88247 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Acl Vip3Adl Vip3Ad2 AJ872071 CAI43276 Международная патентная публикация № WO2013015993 Патентная публикация США№ 2004/0128716; международная патентная публикация № WO2013015993 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Ael AJ872072 CAI43277 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Afl AJ872070 CAI43275 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Af2 ADN08753 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3A13 HM117634 AEH31413 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Af4 Vip3Af5 Vip3Agl ADN08758 Международная патентная публикация № WO2013015993 Международная патентная публикация № WO2013015993 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Ag2 FJ556803 ACL97352 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Ag3 HM117633 AEH31412 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Ag4 HQ414237 ADZ46177 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Ag5 HQ542193 ADY76642 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Ahl DQ832323 ABH10614 Международная патентная публикация № WO2013015993
Vip3Bal AY823271 AAV70653
Vip3Bbl Vip3Bb2 EF439819 ADN08760 AB030520
Vip3B-
подобный HM016910 AD 148120
В некоторых вариантах осуществления не встречающееся в природе растение или часть растения содержит по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на при
- 31 036149 близительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким из нуклеотидных последовательностей Vip, изложенных под номерами доступа, представленными в табл. 4.
В некоторых вариантах осуществления не встречающееся в природе растение или часть растения содержит по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, которая специфически гибридизируется с нуклеотидной последовательностью одной или нескольких нуклеотидных последовательностей Vip, изложенных под номерами доступа, представленными в табл. 4, в жестких условиях гибридизации.
В некоторых вариантах осуществления не встречающееся в природе растение или часть растения содержит по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, которая кодирует аминокислотную последовательность, изложенную в одной или нескольких из нуклеиновых последовательностей Vip, изложенных под номерами доступа, представленными в табл. 4.
В некоторых вариантах осуществления не встречающееся в природе растение или часть растения содержит по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, которая кодирует аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична аминокислотной последовательности, изложенной в одной или нескольких из нуклеиновых последовательностей Vip, изложенных под номерами доступа, представленными в табл. 4.
Настоящее изобретение также относится к не встречающимся в природе нуклеиновым кислотам. В контексте настоящего документа в отношении нуклеиновых кислот выражение не встречающиеся в природе относится к нуклеиновым кислотам, которые в норме не существуют в природе. В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота в норме не существует в природе, так как она не находится в генетическом окружении клетки/организма, в которой она в норме расположена. Говоря иными словами, не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота, по сути, является модифицированной с помощью преднамеренного вмешательства человека из ее нативной формы в композицию (например, включенной в гетерологичную/рекомбинантную экспрессионную кассету с одной или несколькими гетерологичными промоторными последовательностями, интронными последовательностями и/или последовательностями терминации) и/или локализована в ненативном геномном локусе. Таким образом, не встречающиеся в природе растения и части растения по настоящему изобретению могут включать одну или несколько экзогенных или гетерологичных нуклеотидных последовательностей и/или одну или несколько не встречающихся в природе копий встречающейся в природе нуклеотидной последовательности (т.е. чужеродных копий гена, который встречается у данного вида в природе). В некоторых вариантах осуществления молекулы не встречающихся в природе нуклеиновых кислот по настоящему изобретению могут содержать любое подходящее изменение(я) от их наиболее близких встречающихся в природе аналогов. Например, не встречающиеся в природе молекулы нуклеиновых кислот по настоящему изобретению могут включать другую, встречающуюся в природе нуклеотидную последовательность с одной или несколькими точечными мутациями, вставками или делециями по сравнению со встречающейся в природе нуклеотидной последовательностью.
Не встречающиеся в природе нуклеиновые кислоты по настоящему изобретению могут содержать любой соответствующий представляющий интерес маркер/аллель, включая без ограничений описанные в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов, описанных в табл. 1. Например, не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота может содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких хромосомных сегментов от 46 до 12473 (например, в хромосомном сегменте 7514).
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса NP2222. Например, не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота может содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментов, причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса NP2222. В некоторых таких вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов от 3 до 12768 (например, хромосомных сегментов 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768) идиоплазмы маиса NP2222, его обратного комплемента, его информативного фрагмента или информативного фрагмента его обратного комплемента.
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса NP2660. Например, не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота может содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментов, причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса NP2660. В некоторых таких вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов
- 32 036149 от 3 до 12743, и/или одного или нескольких хромосомных сегментов от 12757 до 12768 (например, хромосомных сегментов 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768) идиоплазмы маиса NP2660, его обратного комплемента, его информативного фрагмента или информативного фрагмента его обратного комплемента.
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса NP2276. Например, не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота может содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментов, причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса NP2276. В некоторых таких вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит, фактически состоит из или состоит из хромосомного сегмента 1, одного или нескольких хромосомных сегментов от 46 до 12743 и/или одного или нескольких хромосомных сегментов от 12757 до 12768 (например, хромосомных сегментов 13, 506, 7514, 7546 и/или 12760-12761) идиоплазмы маиса NP2276, его обратного комплемента, его информативного фрагмента или информативного фрагмента его обратного комплемента.
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса ID3461. Например, не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота может содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментов, причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса ID3461. В некоторых таких вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов от 1 до 17 (например, хромосомных сегментов 1 и/или 13) идиоплазмы маиса ID3461, его обратного комплемента, его информативного фрагмента или информативного фрагмента его обратного комплемента.
В вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из линии в табл. 11.
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких нуклеотидных последовательностей, которые по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичны одной или нескольким из нуклеотидных последовательностей, изложенных в SEQ ID NO: 1-350, и полипептидам Vip (описанных в табл. 3 и 4), ее обратному комплементу, ее информативному фрагменту или информативному фрагменту ее обратного комплемента.
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности, кодирующей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична аминокислотной последовательности, изложенной в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит один или несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 2. Например, в некоторых вариантах осуществления выделенная последовательность нуклеиновой кислоты содержит 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140 или более требуемых аллелей, описанных в табл. 2.
В вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит один или несколько из требуемых аллелей, как описано в табл. 8. Например, в некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или более, или все 18 требуемых аллелей, как описано в табл. 8.
В вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит один или несколько из требуемых аллелей:
(a) на хромосоме 5 (QTL 5.1 и/или QTL 5.2), как описано в табл. 8;
(b) на хромосоме 3, как описано в табл. 8;
(c) на хромосоме 7, как описано в табл. 8;
(d) на хромосоме 10, как описано в табл. 8;
(e) на хромосомах 3 и 5, как описано в табл. 8;
(f) на хромосомах 5 и 7, как описано в табл. 8;
(g) на хромосомах 3, 5 и 7, как описано в табл. 8;
(h) на хромосомах 5 и 10, как описано в табл. 8;
(i) на хромосомах 3, 5 и 10 как описано в табл. 8; или (j) любой комбинации (а)-(Ц
В вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит один или
- 33 036149 несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 10. Например, в некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25 или более требуемых аллелей, описанных в табл. 10.
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит кодоны, специфичные для экспрессии в растениях.
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота является выделенной нуклеиновой кислотой.
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит один или несколько обнаруживаемых фрагментов, таких как дигоксигенин, флуоресцеин, сложный эфир акридина, биотин, щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена, β-глюкуронидаза, β-галактозидаза, люциферазаза, ферритин или радиоактивный изотоп. См., например, Prober et al. SCIENCE 238:336-340 (1987); европейские патенты № 144914 и 119448; а также патенты США № 4582789 и 4563417.
Не встречающиеся в природе нуклеиновые кислоты по настоящему изобретению могут содержать любой соответствующий трансген(ы), включая без ограничений трансгены, которые кодируют генные продукты, обеспечивающие гербицидную устойчивость, устойчивость к вредителям (например, трансген vip3) и/или устойчивость к заболеваниям.
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит один или несколько трансгенов, кодирующих генный продукт, который обеспечивает устойчивость к одному или нескольким гербицидам. Например, не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота может содержать трансген, который кодирует генный продукт, обеспечивающий устойчивость к глифосату, сульфонилмочевине, имидазолиниону, дикамбе, глюфосинату, феноксипропионовой кислоте, циклошексому, триазину, бензонитрилу и/или броксинилу.
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит один или несколько трансгенов, кодирующих генный продукт, который обеспечивает устойчивость к одному или нескольким вредителям. Например, не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота может содержать трансген, кодирующий генный продукт, который обеспечивает устойчивость к бактериям, грибам, гастроподам, насекомым, нематодам, оомицетам, фитоплазмам, простейшим и/или вирусам.
В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота содержит один или несколько трансгенов, кодирующих генный продукт, который обеспечивает устойчивость к одному или нескольким заболеваниям.
Не встречающиеся в природе нуклеиновые кислоты по настоящему изобретению могут содержать любое подходящее число нуклеиновых кислот. В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота составляет 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 450, 500 или более нуклеотидов в длину. В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота составляет менее чем приблизительно 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 450 или 500 нуклеотидов в длину. В некоторых вариантах осуществления не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота составляет приблизительно 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 450 или 500 нуклеотидов в длину.
Настоящее изобретение относится также к экспрессионным кассетам, содержащим одну или несколько не встречающихся в природе нуклеиновых кислот по настоящему изобретению. В некоторых вариантах осуществления экспрессионная кассета содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую полипептид, который придает по меньшей мере одно свойство (например, устойчивость к средству отбора), которое можно применять для обнаружения, выявления или отбора трансформированных растительных клеток и тканей.
Настоящее изобретение относится также к векторам, содержащим одну или несколько не встречающихся в природе нуклеиновых кислот и/или экспрессионных кассет по настоящему изобретению.
Настоящее изобретение распространяется также на композиции, содержащие не встречающиеся в природе нуклеиновые кислоты, экспрессионные кассеты и/или векторы по настоящему изобретению.
Настоящее изобретение распространяется на применения не встречающихся в природе нуклеиновых кислот, экспрессионных кассет и векторов по настоящему изобретению, включая без ограничений способы выявления, отбора и/или получения фертильных растений маиса; прогнозирование, будет ли и/или до какой степени растение маиса фертильным; уменьшение затрат, связанных с программами селекции и/или программами повышения семенной продуктивности; и/или программ повышения эффективности селекции и/или программ повышения семенной продуктивности.
Настоящее изобретение относится также к праймерам для амплификации последовательностей нуклеиновой кислоты, содержащих один или несколько маркеров, связанных с повышенной фертильностью (например, один или несколько маркеров по настоящему изобретению).
Праймеры по настоящему изобретению могут содержать любую последовательность нуклеиновой
- 34 036149 кислоты, подходящую для амплификации одного или нескольких маркеров, связанных с повышенной фертильностью (например, один или несколько маркеров по настоящему изобретению).
В некоторых вариантах осуществления праймер содержит последовательности нуклеиновой кислоты, пригодные для амплификации одного или нескольких хромосомных сегментов, описанных в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления пара праймеров содержит нуклеотидные последовательности, пригодные для амплификации одного или нескольких хромосомных сегментов от 46 до 12473 (например, хромосомного сегмента 7514).
Настоящее изобретение распространяется на композиции, содержащие праймеры по настоящему изобретению. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит пару праймеров, причем каждый из праймеров является праймером по настоящему изобретению.
Настоящее изобретение относится также к продуктам амплификации, содержащим один или несколько маркеров/аллелей, связанных с повышенной фертильностью (например, один или несколько маркеров/аллелей, связанных с повышенной мужской фертильностью).
Продукты амплификации по настоящему изобретению могут быть производными от любого подходящего хромосомного сегмента(ов).
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации является производным от одного или нескольких хромосомных сегментов, описанных в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления продукт амплификации является производным от одного или нескольких хромосомных сегментов от 46 до 12473 (например, хромосомного сегмента 7514).
Продукты амплификации по настоящему изобретению могут содержать любой представляющий интерес аллель(и).
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса NP2222. Например, продукт амплификации может содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментов (например, хромосомных сегментов 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768), причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса NP2222.
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса NP2660. Например, продукт амплификации может содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментов (например, хромосомных сегментов 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768), причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса NP2660.
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса NP2276. Например, продукт амплификации может содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментов (например, хромосомных сегментов 1, 182, 184, 10230, 10259 и/или 10276-10277), причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса NP2276.
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из идиоплазмы маиса ID3461. Например, продукт амплификации может содержать, фактически состоять из или состоять из одного или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных сегментов от 1 до 17 (например, хромосомных сегментов 1 и/или 13), причем хромосомный сегмент по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен соответствующему сегменту(ам) идиоплазмы маиса ID3461.
В вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из одной или нескольких последовательностей нуклеиновой кислоты, полученных из линии в табл. 11.
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности из SEQ ID NO: 1-350, ее обратного комплемента, ее информативного фрагмента или информативного фрагмента ее обратного комплемента.
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким из SEQ ID NO: 1-350, ее обратного комплемента, ее информативного фрагмента или информативного фрагмента ее обратного комплемента.
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности, которая специфически гибри- 35 036149 дизируется с нуклеотидной последовательностью из одной или нескольких из SEQ ID NO: 1-350, ее обратного комплемента, ее информативного фрагмента или информативного фрагмента ее обратного комплемента в жестких условиях гибридизации.
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности, которая кодирует аминокислотную последовательность, изложенную в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности, которая кодирует аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична аминокислотной последовательности, изложенной в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной из SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9), ее обратного комплемента, ее информативного фрагмента или информативного фрагмента ее обратного комплемента.
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким из SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9), ее обратного комплемента, ее информативного фрагмента или информативного фрагмента ее обратного комплемента.
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из по меньшей мере одной нуклеотидной последовательности, которая специфически гибридизируется с нуклеотидной последовательностью из одной или нескольких из SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9), ее информативного фрагмента или информативного фрагмента ее обратного комплемента в жестких условиях гибридизации.
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких из требуемых аллелей, описанных в табл. 2, или его обратного комплемента. Например, в некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит, фактически состоит из или состоит по меньшей мере из приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140 или более требуемых аллелей, описанных в табл. 2.
В вариантах осуществления продукт амплификации содержит один или несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 8. Например, в некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или более, или все 18 требуемых аллелей, описанных в табл. 8.
В вариантах осуществления продукт амплификации содержит один или несколько из требуемых аллелей:
(a) на хромосоме 5 (QTL 5.1 и/или QTL 5.2), как описано в табл. 8;
(b) на хромосоме 3, как описано в табл. 8;
(c) на хромосоме 7, как описано в табл. 8;
(d) на хромосоме 10, как описано в табл. 8;
(e) на хромосомах 3 и 5, как описано в табл. 8;
(f) на хромосомах 5 и 7, как описано в табл. 8;
(g) на хромосомах 3, 5 и 7, как описано в табл. 8;
(h) на хромосомах 5 и 10, как описано в табл. 8;
(i) на хромосомах 3, 5 и 10 как описано в табл. 8; или (j) любой комбинации (а)-(Ц.
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит один или несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 10. Например, в некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25 или более требуемых аллелей, описанных в табл. 10.
В некоторых вариантах осуществления продукт амплификации содержит один или несколько обнаруживаемых фрагментов, таких как дигоксигенин, флуоресцеин, сложный эфир акридина, биотин, щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена, β-глюкуронидаза, β-галактозидаза, люциферазаза, ферритин или радиоактивный изотоп. См., например, Prober et al. SCIENCE 238:336-340 (1987); европейские патенты № 144914 и 119448; а также патенты США № 4582789 и 4563417.
Продукты амплификации по настоящему изобретению могут быть получены с помощью любых подходящих праймеров.
Продукты амплификации по настоящему изобретению можно получать с помощью любой подходящей методики(ик), включая без ограничений полимеразную цепную реакцию (PCR) (например, Mullis et al. COLD SPRING HARBOR SYMP. QUANT. BIOL. 51:263-273 (1986); европейские патенты № 50424; 84796; 258017; 237362 и 201184; патенты США № 4683202; 4582788 и 4683194).
- 36 036149
Настоящее изобретение относится также к выделенным и очищенным маркерным зондам (как описано в табл. 9).
Маркерные зонды (как описано в табл. 9) по настоящему изобретению могут быть направлены на любой соответствующий представляющий интерес аллель(и), гаплотип(ы) и/или молекулу(ы).
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд направлен на хромосомный сегмент идиоплазмы маиса NP2222. Например, маркерный зонд может быть направлен на один или несколько хромосомных сегментов от 3 до 12768, как описано в табл. 1 (например, хромосомные сегменты 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768), идиоплазмы маиса NP2222, его обратный комплемент, его информативный фрагмент или информативный фрагмент его обратного комплемента.
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд направлен на хромосомный сегмент идиоплазмы маиса NP2660. Например, маркерный зонд может быть направлен на один или несколько хромосомных сегментов от 3 до 12743 и/или один или несколько хромосомных сегментов от 12757 до 12768 (как описано в табл. 1, например, хромосомные сегменты 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 1276012761 и/или 12767-12768) идиоплазмы маиса NP2660, его обратный комплемент, его информативный фрагмент или информативный фрагмент его обратного комплемента.
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд направлен на хромосомный сегмент идиоплазмы маиса NP2276. Например, маркерный зонд может быть направлен на хромосомный сегмент 1, как описано в табл. 1, один или несколько хромосомных сегментов от 46 до 12743 и/или один или несколько хромосомных сегментов от 12757 до 12768 (например, хромосомные сегменты 13, 506, 7514, 7546 и/или 12760-12761) идиоплазмы маиса NP2276, его обратный комплемент, его информативный фрагмент или информативный фрагмент его обратного комплемента. В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд направлен на хромосомный сегмент идиоплазмы маиса ID3461. Например, маркерный зонд может быть направлен на один или несколько хромосомных сегментов от 1 до 17 из табл. 1 (например, хромосомные сегменты 1 и/или 13) идиоплазмы маиса ID3461, его обратный комплемент, его информативный фрагмент или информативный фрагмент его обратного комплемента.
В вариантах осуществления маркерный зонд направлен на хромосомный сегмент из линии в табл. 11, например, маркерный зонд может быть направлен на один или несколько описанных в табл. 1 хромосомных сегментов, его обратный комплемент, его информативный фрагмент или информативный фрагмент его обратного комплемента.
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд направлен на нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким нуклеотидным последовательностям, перечисленным в SEQ ID NO: 1350, как описано в табл. 3 и под номерами доступа VIP, описанными в табл. 4, ее обратный комплемент или ее информативный фрагмент.
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд направлен на одну или несколько нуклеотидных последовательностей, которые кодируют аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким аминокислотным последовательностям, перечисленным в SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3), ее обратному комплементу или ее информативному фрагменту.
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд направлен на нуклеотидную последовательность, которая содержит один или несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 2. Например, в некоторых вариантах осуществления маркерный зонд направлен на нуклеотидную последовательность, которая содержит 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140 или более требуемых аллелей, описанных в табл. 2.
В вариантах осуществления маркерный зонд направлен на нуклеотидную последовательность, которая содержит один или несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 8. Например, в некоторых вариантах осуществления маркерный зонд направлен на нуклеотидную последовательность, которая содержит по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или более, или все 18 из требуемых аллелей, как описано в табл. 8 (см. например иллюстративные зонды, описанные в табл. 9).
В вариантах осуществления маркерный зонд направлен на нуклеотидную последовательность, которая содержит один или несколько из требуемых аллелей:
(a) на хромосоме 5 (QTL 5.1 и/или QTL 5.2), как описано в табл. 8;
(b) на хромосоме 3, как описано в табл. 8;
(c) на хромосоме 7, как описано в табл. 8;
(d) на хромосоме 10, как описано в табл. 8;
(e) на хромосомах 3 и 5, как описано в табл. 8;
(f) на хромосомах 5 и 7, как описано в табл. 8;
(g) на хромосомах 3, 5 и 7, как описано в табл. 8;
(h) на хромосомах 5 и 10, как описано в табл. 8;
(i) на хромосомах 3, 5 и 10 как описано в табл. 8; или (j) любой комбинации (а)-(й.
- 37 036149
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд направлен на нуклеотидную последовательность, которая содержит один или несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 10. Например, в некоторых вариантах осуществления маркерный зонд направлен на нуклеотидную последовательность, которая содержит 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25 или более из требуемых аллелей, описанных в табл. 10.
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд направлен на аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким аминокислотным последовательностям, перечисленным в SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3), или ее информативному фрагменту.
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд содержит, фактически состоит из или состоит из аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична хромосомному сегменту NP2222, его обратному комплементу, его информативному фрагменту или информативному фрагменту его обратного комплемента. В некоторых таких вариантах осуществления хромосомный сегмент содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов от 3 до 12768, как описано в табл. 1 (например, хромосомных сегментов 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 1276712768).
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд содержит, фактически состоит из или состоит из аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична хромосомному сегменту NP2660, его обратному комплементу, его информативному фрагменту или информативному фрагменту его обратного комплемента. В некоторых таких вариантах осуществления хромосомный сегмент содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов от 3 до 12743 и/или одного или нескольких хромосомных сегментов от 12757 до 12768, как описано в табл. 1 (например, хромосомных сегментов 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768).
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд содержит, фактически состоит из или состоит из аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична хромосомному сегменту NP2276, его обратному комплементу, его информативному фрагменту или информативному фрагменту его обратного комплемента. В некоторых таких вариантах осуществления хромосомный сегмент содержит, фактически состоит из или состоит из хромосомного сегмента 1, одного или нескольких хромосомных сегментов от 46 до 12743 и/или одного или нескольких хромосомных сегментов от 12757 до 12768, как описано в табл. 1 (например, хромосомных сегментов 13, 506, 7514, 7546 и/или 12760-12761).
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд содержит, фактически состоит из или состоит из аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична хромосомному сегменту ID3461, его обратному комплементу, его информативному фрагменту или информативному фрагменту его обратного комплемента. В некоторых таких вариантах осуществления хромосомный сегмент содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов от 1 до 17, как описано в табл. 1 (например, хромосомных сегментов 1 и/или 13).
Например, маркерный зонд может быть направлен на один или несколько хромосомных сегментов от 1 до 17, как описано в табл. 1 (например, хромосомные сегменты 1 и/или 13), идиоплазмы маиса ID3461, его обратный комплемент, его информативный фрагмент или информативный фрагмент его обратного комплемента.
В вариантах осуществления маркерный зонд направлен на один или несколько хромосомных сегментов из линии в табл. 11.
В некоторых вариантах осуществления маркерная проба содержит, фактически состоит из или состоит из аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким из SEQ ID NO: 1-350, ее обратного комплемента, ее информативного фрагмента или информативного фрагмента ее обратного комплемента.
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд содержит, фактически состоит из или состоит из нуклеотидной последовательности, которая кодирует аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична аминокислотной последовательности, изложенной в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления маркерная проба содержит, фактически состоит из или состоит из аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким из SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9), ее обратному комплементу, ее обратного комплемента, ее информативного фрагмента или информативного фрагмента ее обратного комплемента.
В некоторых вариантах осуществления маркерный зонд содержит один или несколько обнаруживаемых фрагментов, таких как дигоксигенин, флуоресцеин, сложный эфир акридина, биотин, щелочная
- 38 036149 фосфатаза, пероксидаза хрена, β-глюкуронидаза, β-галактозидаза, люциферазаза, ферритин или радиоактивный изотоп. См., например, Prober et al. SCIENCE 238:336-340 (1987); европейские патенты № 144914 и № 119448; а также патенты США № 4582789 и 4563417.
Настоящее изобретение относится также к способам выявления, отбора и/или получения растений и частей растений маиса, имеющих повышенную фертильность или одну или несколько характеристик, связанных с повышенной фертильностью (например, одну или несколько характеристик, связанных с повышенной мужской фертильностью); способам прогнозирования фертильности (например, мужской фертильности) у растений и частей растений маиса; способам селекции; способам уменьшения затрат, связанных с связанных с программой селекции и/или программой повышения семенной продуктивности; а также способам улучшения семенной или пыльцевой продуктивности у растений маиса (например, повышения количества пыльцы на пыльник, метелку и/или растение).
Способы по настоящему изобретению можно осуществлять на практике с применением одного или нескольких из представляющих интерес маркеров, аллелей, гаплотипов, молекул и/или не встречающихся в природе нуклеиновых кислот, описанных в настоящем документе.
Способы выявления растений и частей растений маиса, имеющих повышенную фертильность или одну или несколько характеристик, связанных с повышенной фертильностью, могут включать, фактически состоять из или состоять из обнаружения одного или нескольких маркеров, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких маркеров по настоящему изобретению, описанных в настоящем документе) в растении или части растения маиса (например, идиоплазме маиса или продукте амплификации из идиоплазмы маиса).
Способы отбора растений и частей растений маиса, имеющих повышенную фертильность или одну или несколько характеристик, связанных с повышенной фертильностью, могут включать, фактически состоять из или состоять из обнаружения одного или нескольких маркеров, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких маркеров по настоящему изобретению, описанных в настоящем документе) в растении или части растения маиса (например, идиоплазме маиса или продукте амплификации из идиоплазмы маиса), а также отбора указанного растения маиса или части растения маиса, исходя из наличия указанного маркера(ов).
Способы прогнозирования фертильности (например, мужской фертильности) у растений и частей растений маиса могут включать, фактически состоять из или состоять из обнаружения наличия одного или нескольких маркеров, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких маркеров по настоящему изобретению) в растении или части растения маиса (например, идиоплазме маиса или продукте амплификации из идиоплазмы маиса). В некоторых вариантах осуществления наличие указанного маркера(ов) в геноме указанного растения или части растения маиса связано с повышением по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 225, 250, 275, 300% или более соотношения функционально фертильных растений к инфертильным растениям. Например, в некоторых вариантах осуществления наличие указанного маркера(ов) в геноме растения или части растения маиса указывает на то, что указанные растение или часть растения маиса вероятно будут демонстрировать повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную пыльцевую продуктивность на пыльник, улучшенную морфологию пыльцы, повышенную продуктивность пыльника, повышенную продуктивность пыльника на метелку, улучшенную морфологию пыльника, повышенную продуктивность метелки, улучшенную морфологию метелки, повышенную продуктивность шелка, улучшенную морфологию шелка, повышенную продуктивность шелка на растение, повышенное количество зерновок, улучшенную морфологию зерновки, повышенную продуктивность зерновки на початок, пониженную долю недоразвитых зерновок, повышенную продуктивность зерновки на растение, повышенную всхожесть зерновок, повышенную фертильность в стрессовых условиях (например, условиях засухи), повышенную фертильность под действием высоких дневных температур и/или повышенную фертильность под действием высоких ночных температур по сравнению с контрольным растением (например, одним или обоими его родителями, почти изогенной линией, у которой отсутствует последовательность, кодирующая белок Vip3, и т.д.).
В вариантах осуществления описанных в настоящем документе способов растение или его часть (или растение-предок, или растение-потомок или его часть) фенотипируют для подтверждения статуса фертильности (например, статуса мужской фертильности) или наличия характеристик, связанных с фертильностью.
Способы селекции по настоящему изобретению могут включать, фактически состоять из или состоять из:
(а) обнаружения одного или нескольких маркеров, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких маркеров по настоящему изобретению), у растения или части растения маиса (например, в идиоплазме маиса или продукте амплификации от идиоплазмы маиса) и отбора указанного растения или части растения маиса для включения в программу селекции на основании наличия указанного маркера(ов); и/или (b) обнаружения отсутствия одного или нескольких маркеров, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких маркеров по настоящему изобретению), у растения или части
- 39 036149 растения маиса (например, в идиоплазме маиса или продукте амплификации от идиоплазмы маиса) и исключения указанного растения или части растения маиса из программы селекции на основании отсутствия указанного маркера(ов). В вариантах осуществления способа (а) способ дополнительно включает скрещивание растения маиса (или предка, потомка или его сибса) со вторым растением маиса, у которого необязательно отсутствует маркер, с получением растения-потомка маиса, которое необязательно содержит маркер. Специалисты в настоящей области поймут, что в случае инбредной линии выражение скрещивание растения маиса или скрещивание отобранного растения маиса может относиться к идентичному или фактически (например, по меньшей мере 95%) генетически идентичному родителю, сибсу или растению-потомку.
Необязательно способ дополнительно включает фенотипирование растения или части растения маиса (или растения-предка, или растения-потомка или его части) для подтверждения статуса фертильности (например, статуса мужской фертильности) или наличия характеристик, связанных с фертильностью.
Растения и части растений маиса, отобранные для включения в программу селекции, можно применять для получения одного или нескольких поколений фертильного потомства. В некоторых вариантах осуществления каждое поколение растений-потомков содержит практически и/или полностью фертильные растения и части растений маиса.
Настоящее изобретение также охватывает способы получения растения, имеющего одну или несколько характеристик, связанных с повышенной мужской фертильностью. В вариантах осуществления способ включает отбор из разнородной популяции растений маиса растения маиса, содержащего маркер, аллель, гаплотип, геномную область и т.п., связанные с повышенной мужской фертильностью, как описано в настоящем документе; а также скрещивание растения маиса (или его предка, потомка или сибса) с самим собой или со вторым растением маиса с получением растения-потомка, содержащего маркер/аллель/гаплотип/геномную область, получая таким образом растение, имеющее одну или несколько характеристик, связанных с повышенной мужской фертильностью. В вариантах осуществления второе растение маиса не содержит маркер/аллель/гаплотип/геномную область. В вариантах осуществления маркер/аллель/гаплотип/геномная область обнаруживают в нуклеиновой кислоте от первого растения и/или растения-потомка маиса (например, в продукте амплификации из образца нуклеиновой кислоты от растения и/или потомства маиса). Необязательно способ дополнительно включает фенотипирование растения или части растения маиса (или растения-предка, или растения-потомка или его части) для подтверждения статуса фертильности (например, статуса мужской фертильности) или наличия характеристик, связанных с фертильностью.
В вариантах осуществления способы повышения семенной продуктивности или уменьшения затрат, связанных с программой селекции и/или программой повышения семенной продуктивности, включают, состоят фактически из или состоят из:
(a) обнаружения одного или нескольких маркеров, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких маркеров по настоящему изобретению), у растения или части растения маиса (например, идиоплазме маиса или продукте амплификации от идиоплазмы маиса) и отбора указанного растения или части растения маиса для включения в программу селекции и/или программу повышения семенной продуктивности на основании наличия указанного маркера(ов); и/или (b) обнаружения отсутствия одного или нескольких маркеров, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких маркеров по настоящему изобретению), у растения или части растения маиса (например, в идиоплазме маиса или продукте амплификации от идиоплазмы маиса) и исключения указанного растения или части растения маиса из программы селекции и/или программы повышения семенной продуктивности на основании отсутствия указанного маркера(ов).
Необязательно способ дополнительно включает фенотипирование растения или части растения маиса (или растения-предка, или растения-потомка или его части) для подтверждения статуса фертильности (например, статуса мужской фертильности) или наличия характеристик, связанных с фертильностью.
Растения и части растений маиса, отобранные для включения в программу селекции и/или программу повышения семенной продуктивности, можно применять для получения одного или нескольких поколений фертильного потомства. В некоторых вариантах осуществления каждое поколение растенийпотомков содержит практически и/или полностью фертильные растения и части растений маиса.
Способы получения растений и частей растений маиса, имеющих повышенную фертильность или одну или несколько характеристик, связанных с повышенной фертильностью, могут включать, фактически состоять из или состоять из:
(a) обнаружения одного или нескольких маркеров, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких маркеров по настоящему изобретению) у растения или части растения маиса (например, в идиоплазме маиса или продукте амплификации от идиоплазмы маиса) и получения растения маиса из указанного растения или части растения маиса;
(b) внесения нуклеиновой кислоты, содержащей один или несколько аллелей, связанных с повышенной фертильностью (например, один или несколько аллелей, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном растения или части растения маиса и получения растения маиса из указанного растения или части растения маиса;
- 40 036149 (c) внесения нуклеиновой кислоты, содержащей один или несколько аллелей, связанных с повышенный фертильностью (например, один или несколько аллелей, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном растения или части растения маиса, обнаружения указанного аллеля(ей) в указанном растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного аллеля(ей) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса) и получения растения маиса из указанного растения или части растения маиса;
(d) внесения нуклеиновой кислоты, содержащей один или несколько аллелей, связанных с повышенный фертильностью (например, один или несколько аллелей, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном растения или части растения маиса, обнаружения одного или нескольких маркеров, сцепленных с указанным аллелем(ями), в указанном растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного маркера(ов) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса) и получения растения маиса из указанного растения или части растения маиса;
(e) внесения геномной области, содержащей один или несколько трансгенов, связанных с повышенной фертильностью (например, один или несколько трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном растения или части растения маиса и получения растения маиса из указанного растения или части растения маиса;
(f) внесения геномной области, содержащей один или несколько трансгенов, связанных с повышенной фертильностью (например, один или несколько трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном растения или части растения маиса, обнаружения указанной геномной области в указанном растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного трансгена(ов) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса) и получения растения маиса из указанного растения или части растения маиса; и/или (g) внесения геномной области, содержащей один или несколько трансгенов, связанных с повышенный фертильностью (например, один или несколько трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном части растения или части растения маиса, обнаружения одного или нескольких маркеров, сцепленных с указанной геномной областью, в указанном растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного маркера(ов) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса) и получения растения маиса из указанного растения или части растения маиса.
Необязательно способ дополнительно включает фенотипирование растения или части растения маиса (или растения-предка, или растения-потомка или его части) для подтверждения статуса фертильности (например, статуса мужской фертильности) или наличия характеристик, связанных с фертильностью.
Способы улучшения пыльцевой продуктивности у растения маиса (например, повышения количества пыльцы на пыльник, метелку и/или растение) могут включать, фактически состоять из или состоять из:
(а) внесения нуклеиновой кислоты, содержащей один или несколько аллелей, связанных с повышенный фертильностью (например, один или несколько аллелей, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном растения маиса и необязательно обнаружения указанного аллеля(ей) в указанном растении маиса (например, с помощью обнаружения указанного аллеля(ей) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения маиса).
(b) внесения нуклеиновой кислоты, содержащей один или несколько аллелей, связанных с повышенный фертильностью (например, один или несколько аллелей, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном растения маиса и необязательно обнаружения одного или нескольких маркеров, сцепленных с указанным аллелем(ями), в указанном растении маиса (например, с помощью обнаружения указанного маркера(ов) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанной части растения маиса);
(c) внесения нуклеиновой кислоты, содержащей один или несколько аллелей, связанных с повышенной фертильностью (например, один или несколько аллелей, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном части растения маиса и получения растения маиса из указанной части растения маиса;
(d) внесения нуклеиновой кислоты, содержащей один или несколько аллелей, связанных с повышенный фертильностью (например, один или несколько аллелей, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном растения или части растения маиса, обнаружения указанного аллеля(ей) в указанном растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного аллеля(ей) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса) и получения растения маиса из указанного растения или части растения маиса;
(e) внесения нуклеиновой кислоты, содержащей один или несколько аллелей, связанных с повышенный фертильностью (например, один или несколько аллелей, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном растения или части растения маиса, обнаружения одного или нескольких маркеров, сцепленных с указанным аллелем(ями), в указанном растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного маркера(ов) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса) и получения растения маиса из указан
- 41 036149 ного растения или части растения маиса;
(f) внесения геномной области, содержащей один или несколько трансгенов, связанных с повышенной фертильностью (например, один или несколько трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном растения или части растения маиса и получения растения маиса из указанного растения или части растения маиса;
(g) внесения геномной области, содержащей один или несколько трансгенов, связанных с повышенной фертильностью (например, один или несколько трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном растения или части растения маиса, обнаружения указанной геномной области в указанном растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного трансгена(ов) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса) и получения растения маиса из указанного растения или части растения маиса; и/или (h) внесения геномной области, содержащей один или несколько трансгенов, связанных с повышенный фертильностью (например, один или несколько трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью), в геном растения или части растения маиса, обнаружения одного или нескольких маркеров, сцепленных с указанной геномной областью, в указанной части растения или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного маркера(ов) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса) и получения растения маиса из указанного растения или части растения маиса. Необязательно способ дополнительно включает фенотипирование растения или части растения маиса (или растения-предка, или растения-потомка или его части) для подтверждения статуса фертильности (например, статуса мужской фертильности) или наличия характеристик, связанных с фертильностью.
Настоящее изобретение дополнительно относится к способу улучшения семенной продуктивности растения маиса, включающему скрещивание первого растения маиса со вторым растением маиса, причем первое растение маиса содержит в своем геноме маркер, связанный с повышенной мужской фертильностью, и причем указанный маркер локализован в одном или нескольких описанных в табл. 1 хромосомных участках с получением растения-потомка маиса, содержащего указанный маркер; а также применение растения-потомка маиса, содержащего указанный маркер, в качестве опылителя (мужского пола) для скрещивания с самим собой или со вторым растением маиса, которое выступает в качестве образующего семена родителя (женского пола), улучшая таким образом семенную продуктивность в результате скрещивания по сравнению с соответствующим контрольным скрещиванием (например, самоопылением или скрещиванием с растением-потомком, у которого отсутствует маркер, связанный с повышенной фертильностью). В вариантах осуществления у второго растения маиса маркер отсутствует. В иллюстративных вариантах осуществления с помощью способа уменьшают соотношения родительского растенияопылителя к дающему семена родительскому растению маиса, требуемого для семенной продуктивности, по меньшей мере на приблизительно 25% по сравнению с соответствующим контрольным скрещиванием. В вариантах осуществления с помощью способа повышают число семян, полученных на родительское растение-опылитель и/или дающее семена родительское растение, по меньшей мере на приблизительно 25%.
Необязательно способ дополнительно включает фенотипирование первого растения маиса и/или растения-потомка (или растения-предка, или растения-потомка или его части) для подтверждения статуса фертильности (например, статуса мужской фертильности) или наличия характеристик, связанных с фертильностью.
Маркеры для применения в способах по настоящему изобретению могут включать любой один или несколько подходящих маркеров, описанных в настоящем документе.
Маркеры, связанные с повышенной фертильностью (например, мужской фертильностью), можно обнаруживать с помощью любого подходящего маркерного зонда, описанного в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения представляющего интерес аллеля, локализованного в одном или нескольких хромосомных сегментах, описанных в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения представляющего интерес аллеля, локализованного в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, представляющего интерес аллеля, локализованного в хромосомном сегменте 7514).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения двух или более аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах, описанных в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения двух или более аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, гаплотипа, содержащего два или более представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения аллелей, локализованных в разных хромосомных сегментах, причем каждый из разных хромосомных сегментов содержит один или несколько хромосомных сегментов, описанных в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зондов,
- 42 036149 сконструированных для обнаружения:
1) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 1;
2) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных на хромосоме 2;
3) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3);
4) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 18 до 45 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 25);
5) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12744 до 12749 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12747);
6) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12750 до 12755 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12753);
7) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12756;
8) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12757 до 12762 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12760 и/или хромосомном сегменте 12761);
9) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12763 до 12768 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12768);
10) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 18 до 45 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 25), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12763 до 12768 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12768);
11) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 1;
- 43 036149
12) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных на хромосоме 2;
13) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 18 до 45 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 25);
14) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12744 до 12749 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12747);
15) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12750 до 12755 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12753);
16) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12756;
17) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12757 до 12762 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12760 и/или хромосомном сегменте 12761);
18) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12763 до 12768 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12768);
19) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных на хромосоме 2, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 10266 до 10271 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 10269), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12756.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения одного или нескольких хромосомных сегментов, полученных из идиоплазмы маиса NP2222 (например, идиоплазмы маиса NP2222AC), причем указанный один или несколько хромосомных сегментов содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов, описанных в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения одного или нескольких хромосомных сегментов от 3 до 12768 (например, хромосомных сегментов 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768), полученных из идиоплазмы маиса NP2222.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения одного или нескольких хромосомных сегментов, полученных из идиоплазмы маиса NP2660 (например, идиоплазмы маиса NP2660AC NIL-2343, NP2660AC NIL-3338 или NP2660AC NIL3367), причем указанный один или несколько хромосомных сегментов содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов, как описано в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения одного или нескольких хромосомных сегментов от 3 до 12743 и/или одного или нескольких хромосомных сегментов от 12757 до 12768 (например, хромосомных сегментов 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768), полученных из идиоплазмы маиса NP2660.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструирован
- 44 036149 ного для обнаружения одного или нескольких хромосомных сегментов, полученных из идиоплазмы маиса NP2276 (например, идиоплазмы маиса NP2276AC NIL), причем указанный один или несколько хромосомных сегментов содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов, как описано в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения хромосомного сегмента 1, одного или нескольких хромосомных сегментов от 46 до 12743 и/или одного или нескольких хромосомных сегментов от 12757 до 12768 (например, хромосомных сегментов 13, 506, 7514, 7546 и/или 12760-12761), полученных из идиоплазмы маиса NP2276.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения одного или нескольких хромосомных сегментов, полученных из идиоплазмы маиса ID3461, причем указанный один или несколько хромосомных сегментов содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов, как описано в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения одного или нескольких хромосомных сегментов от 1 до 17 (например, хромосомных сегментов 1 и/или 13), полученных из идиоплазмы маиса ID3461.
В вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения одного или нескольких хромосомных сегментов, полученных из линии в табл. 11.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения по меньшей мере одной из SEQ ID NO: 1-350 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения любой нуклеотидной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким из SEQ ID NO: 1-350 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения любой нуклеотидной последовательности, которая специфически гибридизируется с нуклеотидной последовательностью из одной или нескольких из SEQ ID NO: 1-350 (как описано в табл. 3) в жестких условиях гибридизации. В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения любой нуклеотидной последовательности, которая кодирует аминокислотную последовательность, изложенную в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения любой нуклеотидной последовательности, которая кодирует аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична аминокислотной последовательности, изложенной в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения по меньшей мере одной из SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения любой нуклеотидной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким из SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения любой нуклеотидной последовательности, которая специфически гибридизируется с нуклеотидной последовательностью из одной или нескольких из SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9) в жестких условиях гибридизации.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения одного или нескольких из требуемых аллелей, описанных в табл. 2. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140 или более из требуемых аллелей, описанных в табл. 2.
В вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения одного или нескольких из требуемых аллелей, описанных в табл. 8. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или более или всех 18 из требуемых аллелей, описанных в табл. 8 (см., например, иллюстративные зонды, описанные в табл. 9).
В вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения одного или нескольких из требуемых аллелей:
(a) на хромосоме 5 (QTL 5.1 и/или QTL 5.2), как описано в табл. 8;
(b) на хромосоме 3, как описано в табл. 8;
(c) на хромосоме 7, как описано в табл. 8;
(d) на хромосоме 10, как описано в табл. 8;
(e) на хромосомах 3 и 5, как описано в табл. 8;
- 45 036149 (f) на хромосомах 5 и 7, как описано в табл. 8;
(g) на хромосомах 3, 5 и 7, как описано в табл. 8;
(h) на хромосомах 5 и 10, как описано в табл. 8;
(i) на хромосомах 3, 5 и 10 как описано в табл. 8; или (j) любой комбинации (а)-(Ц.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения одного или нескольких из требуемых аллелей, описанных в табл. 10. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25 или более из требуемых аллелей, описанных в табл. 10.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения обратного комплемента одного из маркеров, как описано в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения информативного фрагмента одного из маркеров, как описано в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения маркера, сцепленного с одним или несколькими из маркеров, описанных в настоящем документе. Иными словами, маркер можно обнаруживать с помощью зонда, сконструированного для обнаружения маркера, который находится в неравновесном сцеплении с любыми из маркеров, описанными в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения маркера, локализованного в пределах приблизительно 20, 15, 10, 5 или 1 сМ или менее от любого одного из маркеров, описанных в настоящем документе. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения одного или нескольких маркеров, локализованных в пределах приблизительно 5, 1 сМ или менее от хромосомного сегмента 7514.
Маркеры, связанные с повышенной фертильностью, можно обнаруживать в любой подходящей части растения, включая без ограничений продукты амплификации, полученные из идиоплазмы маиса.
Маркеры, связанные с повышенной фертильностью, можно обнаруживать в любом подходящем продукте амплификации, например продукте амплификации, как описано в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем, фактически состоящем из или состоящем из одного или нескольких хромосомных сегментов, описанном в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер можно обнаруживать в продукте амплификации, содержащем, фактически состоящем из или состоящем из:
(a) хромосомного сегмента 1;
(b) одного или нескольких хромосомных сегментов от 3 до 17 (например, в хромосомном сегменте 3);
(c) одного или нескольких хромосомных сегментов от 18 до 45 (например, в хромосомном сегменте 25);
(d) одного или нескольких хромосомных сегментов от 46 до 12473 (например, в хромосомном сегменте 7514);
(e) одного или нескольких хромосомных сегментов от 12744 до 12749 (например, в хромосомном сегменте 12747);
(f) одного или нескольких хромосомных сегментов от 12750 до 12755 (например, в хромосомном сегменте 12753);
(g) одного или нескольких из хромосомного сегмента 12756;
(h) одного или нескольких хромосомных сегментов от 12757 до 12762 (например, в хромосомном сегменте 12760 и/или хромосомном сегменте 12761); или (i) одного или нескольких хромосомных сегментов от 12763 до 12768 (например, в хромосомном сегменте 12768);
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем, фактически состоящем из или состоящем по меньшей мере из одной из SEQ ID NO: 1-350 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем, фактически состоящем из или состоящем из нуклеотидной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким их SEQ ID NO: 1-350 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем, фактически состоящем из или состоящем из нуклеотидной последовательности, которая специфически гибридизируется с нуклеотидной последовательностью из одной или нескольких из SEQ ID NO: 1350 (как описано в табл. 3) в жестких условиях гибридизации.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем, фактически состоящем из или состоящем из нуклеотидной последовательности, которая кодирует
- 46 036149 аминокислотную последовательность, изложенную в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем, фактически состоящем из или состоящем из нуклеотидной последовательности, которая кодирует аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична аминокислотной последовательности, изложенной в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают с помощью зонда, сконструированного для обнаружения по меньшей мере одной из SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем, фактически состоящем из или состоящем из нуклеотидной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким их SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем, фактически состоящем из или состоящем из нуклеотидной последовательности, которая специфически гибридизируется с нуклеотидной последовательностью из одной или нескольких из SEQ ID NO: 526-613 (как описано в табл. 9) в жестких условиях гибридизации.
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем один или несколько из требуемых аллелей, описанном в табл. 2. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140 или более из требуемых аллелей, описанных в табл. 2.
В вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем один или несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 8. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем по меньшей мере приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или более, или все 18 из требуемых аллелей, описанных в табл. 8 (см., например, иллюстративные праймеры для амплификации и зонды, описанные в табл. 9).
В вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем один или несколько из требуемых аллелей:
(a) на хромосоме 5 (QTL 5.1 и/или QTL 5.2), как описано в табл. 8;
(b) на хромосоме 3, как описано в табл. 8;
(c) на хромосоме 7, как описано в табл. 8;
(d) на хромосоме 10, как описано в табл. 8;
(e) на хромосомах 3 и 5, как описано в табл. 8;
(f) на хромосомах 5 и 7, как описано в табл. 8;
(g) на хромосомах 3, 5 и 7, как описано в табл. 8;
(h) на хромосомах 5 и 10, как описано в табл. 8;
(i) на хромосомах 3, 5 и 10 как описано в табл. 8; или (j) любой комбинации (;·ι)-(ί).
В некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем один или несколько из требуемых аллелей, описанных в табл. 10. Например, в некоторых вариантах осуществления маркер обнаруживают в продукте амплификации, содержащем 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25 или более из требуемых аллелей, описанных в табл. 10.
Аллели можно вносить в растения и части растений маиса с помощью любого подходящего способа, включая без ограничений скрещивание, трансфекцию, трансдукцию, трансформацию или слияние протопластов, методику двойных гаплоидов, эмбриональное спасение или с помощью любой другой системы переноса нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления один или несколько аллелей, связанных с повышенной фертильностью, вносят в геном растения или части растения маиса с помощью программы селекции, включающей MAS с одним или несколькими из маркеров, описанных в настоящем документе.
Таким образом, в некоторых вариантах осуществления способы получения растений и частей растений маиса, имеющих повышенную фертильность (например, повышенную мужскую фертильность) или одну или несколько характеристик, связанных с повышенной фертильностью, и/или растений маиса и частей растений, содержащих один или несколько аллелей, связанных с повышенной фертильностью, а также способы улучшения пыльцевой продуктивности могут включать:
(a) скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, причем первое растение или часть растения маиса содержат в своем геноме один или несколько аллелей, связанных с повышенный фертильностью (например, один или несколько аллелей, связанных с повышенной мужской фертильностью);
(b) скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, причем первое растение или часть растения маиса содержат в своем геноме один или несколько гаплотипов, связанных с повышенный фертильностью (например, один или несколько аллелей,
- 47 036149 связанных с повышенной мужской фертильностью);
(c) обнаружение наличия одного или нескольких аллелей, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких аллелей, связанных с повышенной мужской фертильностью), в первом растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного аллеля(ей) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса) и скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, у которого отсутствует указанный аллель(и);
(d) обнаружение наличия одного или нескольких гаплотипов, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких гаплотипов, связанных с повышенной мужской фертильностью), в первом растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного гаплотипа(ов) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса) и скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, у которого отсутствует указанный аллель(и);
(e) обнаружение наличия одного или нескольких трансгенов, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью), в первом растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного трансгена(ов) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса) и скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, у которого отсутствует указанный маркер(ы);
(f) обнаружение наличия геномной области, содержащей один или несколько трансгенов, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью), в первом растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанной геномной области или ее информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса) и скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, у которого отсутствует указанная геномная область;
(g) обнаружение наличия одного или нескольких маркеров, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких маркеров, связанных с повышенной мужской фертильностью), в первом растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного маркера(ов) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса) и скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, у которого отсутствует указанный маркер(ы);
(h) скрещивание первого растения или части растения маиса, содержащего один или несколько аллелей, связанных с повышенной фертильностью (например, один или несколько аллелей, связанных с повышенной мужской фертильностью), со вторым растением или частью растения маиса, у которого отсутствует указанный аллель(и), и возвратное скрещивание на протяжении одного или нескольких поколений потомства, содержащего указанный аллель(и), с указанным вторым растением или частью растения маиса;
(i) обнаружение наличия одного или нескольких аллелей, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких аллелей, связанных с повышенной мужской фертильностью), в первом растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного аллеля(ей) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса), скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, у которого отсутствует указанный аллель(и), и возвратное скрещивание на протяжении одного или нескольких поколений потомства, содержащего указанный аллель(и), с указанным вторым растением или частью растения маиса;
(j) обнаружение наличия одного или нескольких гаплотипов, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких гаплотипов, связанных с повышенной мужской фертильностью), в первом растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного гаплотипа(ов) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса), скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, у которого отсутствует указанный гаплотип(ы), и возвратное скрещивание на протяжении одного или нескольких поколений потомства, содержащих указанный гаплотип(ы), с указанным вторым растением или частью растения маиса;
(k) обнаружение наличия одного или нескольких трансгенов, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью), в первом растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного трансгена(ов) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса), скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, у которого отсутствует указанный трансген(ы), и возвратное скрещивание на протяжении одного или нескольких поколений потомства, содержащих указанный трансген(ы), с указанным вторым растением или частью растения маиса; и/или (l) обнаружение наличия геномной области, содержащей один или несколько трансгенов, связанных
- 48 036149 с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких трансгенов, связанных с повышенной мужской фертильностью), в первом растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанной геномной области или ее информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса), скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, у которого отсутствует указанная геномная область, и возвратное скрещивание на протяжении одного или нескольких поколений потомства, содержащих указанную геномную область, с указанным вторым растением или частью растения маиса; и/или (m) обнаружение наличия одного или нескольких маркеров, связанных с повышенной фертильностью (например, одного или нескольких маркеров, связанных с повышенной мужской фертильностью), в первом растении или части растения маиса (например, с помощью обнаружения указанного маркера(ов) или его информативного фрагмента в продукте амплификации из указанного растения или части растения маиса), скрещивание первого растения или части растения маиса со вторым растением или частью растения маиса, у которого отсутствует указанный маркер(ы), и возвратное скрещивание на протяжении одного или нескольких поколений потомства, содержащих указанный маркер(ы), с указанным вторым растением или частью растения маиса.
Необязательно способ дополнительно включает фенотипирование растения или части растения маиса (или растения-предка, или растения-потомка или его части) для подтверждения статуса фертильности (например, статуса мужской фертильности) или наличия характеристик, связанных с фертильностью.
В растение или часть растения маиса можно вносить любой соответствующий аллель(и), включая без ограничений любой один или несколько из описанных аллелей.
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую из одного или нескольких хромосомных сегментов, описанных в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят один или несколько хромосомных сегментов от 46 до 12473 (например, хромосомный сегмент 7514).
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят один или несколько гаплотипов, связанных с повышенной фертильностью (например, повышенной мужской фертильностью). Гаплотип может включать в себя любой один или несколько гаплотипов, описанных в настоящем документе. В некоторых таких вариантах осуществления гаплотип содержит, фактически состоит из или состоит из двух или более представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах, описанных в табл. 1 (например, гаплотип, содержащий два или более представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514). В некоторых таких вариантах осуществления гаплотип содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в первом хромосомном сегменте, и один или несколько представляющих интерес аллелей, локализованных во втором хромосомном сегменте, отличном от первого хромосомного сегмента, причем каждый из первого и второго хромосомных сегментов содержит один или несколько хромосомных сегментов, описанных в табл. 1. Например, гаплотип может содержать, фактически состоять из или состоять из:
1) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 1;
2) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных на хромосоме 2;
3) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3);
4) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 18 до 45 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 25);
5) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12744 до 12749 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12747);
- 49 036149
6) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12750 до 12755 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12753);
7) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12756;
8) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12757 до 12762 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12760 и/или хромосомном сегменте 12761);
9) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12763 до 12768 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12768);
10) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 46 до 12473 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 7514), одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 18 до 45 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 25), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12763 до 12768 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12768);
11) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 1;
12) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных на хромосоме 2;
13) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 18 до 45 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 25);
14) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12744 до 12749 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12747);
15) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12750 до 12755 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12753);
16) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12756;
- 50 036149
17) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12757 до 12762 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12760 и/или хромосомном сегменте 12761);
18) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 12763 до 12768 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12768);
19) одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных на хромосоме 2, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 3 до 17 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 3), одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в одном или нескольких хромосомных сегментах от 10266 до 10271 (например, одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 10269), и одного или нескольких представляющих интерес аллелей, локализованных в хромосомном сегменте 12756.
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую из одного или нескольких хромосомных сегментов, полученных из идиоплазмы маиса NP2222, причем указанный один или несколько хромосомных сегментов содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов, описанных в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят один или несколько хромосомных сегментов от 3 до 12768 (например, хромосомные сегменты 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768), полученных из идиоплазмы маиса NP2222.
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую из одного или нескольких хромосомных сегментов, полученных из идиоплазмы маиса NP2660, причем указанный один или несколько хромосомных сегментов содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких хромосомных сегментов, описанных в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят один или несколько хромосомных сегментов от 3 до 12743 и/или один или несколько хромосомных сегментов от 12757 до 12768 (например, хромосомные сегменты 3, 13, 25, 506, 7514, 7546, 12747, 12753, 12760-12761 и/или 12767-12768), полученных из идиоплазмы маиса NP2660.
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую из одного или нескольких хромосомных сегментов, полученных из идиоплазмы маиса NP2276, причем указанные один или несколько хромосомных сегментов содержат, фактически состоят из или состоят из одного или нескольких хромосомных сегментов, описанных в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят хромосомный сегмент 1, один или несколько хромосомных сегментов от 46 до 12743 и/или один или несколько хромосомных сегментов от 12757 до 12768 (например, хромосомные сегменты 13, 506, 7514, 7546 и/или 12760-12761), полученных из идиоплазмы маиса NP2276.
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую из одного или нескольких хромосомных сегментов, полученных из идиоплазмы маиса ID3461, причем указанные один или несколько хромосомных сегментов содержат, фактически состоят из или состоят из одного или нескольких хромосомных сегментов, описанных в табл. 1. Например, в некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят один или несколько хромосомных сегментов от 1 до 17 (например, хромосомные сегменты 1 и/или 13), полученных из идиоплазмы маиса ID3461.
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую из одного или нескольких хромосомных сегментов, полученных из линии маиса из табл. 11, причем указанные один или несколько хромосомных сегментов содержат, фактически состоят из или состоят из одного или нескольких хромосомных сегментов, как описано в табл. 1.
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят один или несколько генов, связанных с повышенной фертильностью (например, повышенной мужской фертильностью).
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую по меньшей мере из одной из нуклеотидных последовательностей из SEQ ID NO: 1-350 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую
- 51 036149 кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую по меньшей мере из одной нуклеотидной последовательности, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким из SEQ ID NO: 1-350 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую по меньшей мере из одной нуклеотидной последовательности, которая специфически гибридизируется с нуклеотидной последовательностью из одной или нескольких из SEQ ID NO: 1-350 (как описано в табл. 3) в жестких условиях гибридизации.
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую по меньшей мере из одной нуклеотидной последовательности, которая кодирует аминокислотную последовательность, изложенную в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую по меньшей мере из одной нуклеотидной последовательности, которая кодирует аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична аминокислотной последовательности, изложенной в одной или нескольких из SEQ ID NO: 351-525 (как описано в табл. 3).
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую из одного или нескольких требуемых аллелей, как описано в табл. 2.
В вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую из одного или нескольких требуемых аллелей, как описано в табл. 8.
В вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, при этом нуклеиновая кислота содержит, фактически состоит из или состоит из одного или нескольких из требуемых аллелей:
(a) на хромосоме 5 (QTL 5.1 и/или QTL 5.2), как описано в табл. 8;
(b) на хромосоме 3, как описано в табл. 8;
(c) на хромосоме 7, как описано в табл. 8;
(d) на хромосоме 10, как описано в табл. 8;
(e) на хромосомах 3 и 5, как описано в табл. 8;
(f) на хромосомах 5 и 7, как описано в табл. 8;
(g) на хромосомах 3, 5 и 7, как описано в табл. 8;
(h) на хромосомах 5 и 10, как описано в табл. 8;
(i) на хромосомах 3, 5 и 10 как описано в табл. 8; или (j) любой комбинации (а)-(Ц
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую один или несколько из требуемых аллелей, как описано в табл. 10.
В некоторых вариантах осуществления в растение или часть растения маиса вносят нуклеиновую кислоту, содержащую, фактически состоящую из или состоящую из обратного комплемента одной из нуклеиновых кислот, описанных в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления нуклеиновая кислота, вносимая в растение, или часть растения маиса, не находится в природном генетическом окружении растения маиса (например, не встречается в природе в линии или сорте маиса и была внесена туда с помощью вмешательства человека).
В способах по настоящему изобретению, описанных в данном документе, маркер, аллель и/или гаплотип и т.п. обнаруживают в нуклеиновой кислоте (например, образце нуклеиновой кислоты) из растения или части растения. В вариантах осуществления маркер, аллель и/или гаплотип и т.п. обнаруживают в продукте амплификации из образца нуклеиновой кислоты из указанного растения или части растения.
Способы по настоящему изобретению можно применять для прямой селекции или для интрогрессии одного или нескольких генетических локусов, связанных с повышенной фертильностью, в новое генетическое окружение (например, для интрогрессии признака в элитную инбредную линию маиса).
Способы по настоящему изобретению можно применять для повышения эффективности программы селекции и/или программы повышения семенной продуктивности (например, семенной продуктивности из двойной гаплоидной или инбредной линии) с помощью уменьшения числа мужских растений, требуемых для селекции и/или семенной продуктивности, уменьшения соотношения мужских растений к женским растениям, требуемого для селекции и/или семенной продуктивности, уменьшения затрат, связанных с селекцией и/или продуктивностью семян (например, затрат по подготовке почвы и семенного ложа, посеву, внесению удобрений, борьбе с сорняками, сбору урожая и/или тестированию), повышения пыльцевой продуктивности (например, пыльцевой продуктивности на пыльник/метелку/растение), улучшения морфологии пыльцы, повышения жизнеспособности пыльцы, повышения продуктивности пыльника (например, продуктивности пыльника на метелку/растение), улучшения морфологии пыльника, улучшения жизнеспособности пыльника, повышения продуктивности метелки (например, продуктивности метелки на растение), улучшения морфологии метелки, повышения жизнеспособности метелки,
- 52 036149 повышения продуктивности шелка (например, продуктивности шелка на початок/растение), улучшения морфологии шелка, повышения жизнеспособности шелка, повышения семенной продуктивности (например, семенной продуктивности на початок/растение), улучшения морфологии семян, понижения доли недоразвитых зерновок, повышения жизнеспособности семян, повышения мужской фертильности в стрессовых условиях (например, условиях засухи), повышения фертильности (например, мужской фертильности) под действием высоких дневных температур и/или повышения фертильности (например, мужской фертильности) под действием высоких ночных температур.
В некоторых вариантах осуществления с помощью способов по настоящему изобретению повышают эффективность программы селекции и/или программы по увеличению семенной продуктивности по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 225, 250, 275 300% или более по сравнению с контрольной программой селекции/программой повышения семенной продуктивности (например, программой селекции/программой повышения семенной продуктивности с применением тех же сортов маиса при отсутствии отбора с помощью маркеров по настоящему изобретению).
В некоторых вариантах осуществления с помощью способов по настоящему изобретению уменьшают число мужских растений, требуемых для программы селекции и/или программы повышения семенной продуктивности, по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более по сравнению с контрольной программой селекции (например, программой селекции с применением тех же сортов маиса при отсутствии отбора с помощью маркеров по настоящему изобретению).
В некоторых вариантах осуществления с помощью способов по настоящему изобретению уменьшают соотношение мужских растений к женским растениям, требуемое для программы селекции и/или программы повышения семенной продуктивности, по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более по сравнению с контрольной программой селекции (например, программой селекции с применением тех же сортов маиса при отсутствии отбора с помощью маркеров по настоящему изобретению).
В некоторых вариантах осуществления с помощью способов по настоящему изобретению уменьшают одну или несколько затрат, связанных с программой селекции и/или программой повышения семенной продуктивности (например, затрат по подготовке почвы и семенного ложа, посеву, внесению удобрений, борьбе с сорняками, сбору урожая и/или тестированию), по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более по сравнению с контрольной программой селекции/программой повышения семенной продуктивности (например, программой селекции/программой повышения семенной продуктивности с применением тех же сортов маиса при отсутствии отбора с помощью маркеров по настоящему изобретению). В вариантах осуществления с помощью программы повышения семенной продуктивности получают семена от двойной гаплоидной или инбредной линии).
В некоторых вариантах осуществления с помощью способов по настоящему изобретению уменьшают общие затраты, связанные с программой селекции и/или программой повышения семенной продуктивности по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более по сравнению с контрольной программой селекции/программой повышения семенной продуктивности (например, программой селекции/программой повышения семенной продуктивности с применением тех же сортов маиса при отсутствии отбора с помощью маркеров по настоящему изобретению). В вариантах осуществления с помощью программы повышения семенной продуктивности получают семена от двойной гаплоидной или инбредной линии).
В некоторых вариантах осуществления с помощью способов по настоящему изобретению повышают число производимых пыльцевых зерен на растение в программе селекции и/или программе повышения семенной продуктивности по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 225, 250, 275, 300% или более по сравнению с контрольной программой селекции/программой повышения семенной продуктивности (например, программой селекции/программой повышения семенной продуктивности с применением тех же сортов маиса при отсутствии отбора с помощью маркеров по настоящему изобретению).
В некоторых вариантах осуществления с помощью способов по настоящему изобретению повышают число производимых пыльников на растение в программе селекции и/или программе повышения семенной продуктивности по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 225, 250, 275, 300% или более по сравнению с контрольной программой селекции/программой повышения семенной продуктивности (например, программой селекции/программой повышения семенной продуктивности с применением тех же сортов маиса при отсутствии отбора с помощью маркеров по настоящему изобретению).
В некоторых вариантах осуществления с помощью способов по настоящему изобретению повышают число производимых метелок на растение в программе селекции и/или программе повышения семенной продуктивности по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 225, 250, 275, 300% или более по
- 53 036149 сравнению с контрольной программой селекции/программой повышения семенной продуктивности (например, программой селекции/программой повышения семенной продуктивности с применением тех же сортов маиса при отсутствии отбора с помощью маркеров по настоящему изобретению).
В некоторых вариантах осуществления с помощью способов по настоящему изобретению повышают число семян, производимых на растение, в программе селекции и/или программе повышения семенной продуктивности по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 225, 250, 275, 300% или более по сравнению с контрольной программой селекции/программой повышения семенной продуктивности (например, программой селекции/программой повышения семенной продуктивности с применением тех же сортов маиса при отсутствии отбора с помощью маркеров по настоящему изобретению).
В некоторых вариантах осуществления с помощью способов по настоящему изобретению повышают число семян, производимых на мужское растение, в программе селекции и/или программе повышения семенной продуктивности по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 225, 250, 275, 300% или более по сравнению с контрольной программой селекции/программой повышения семенной продуктивности (например, программой селекции/программой повышения семенной продуктивности с применением тех же сортов маиса при отсутствии отбора с помощью маркеров по настоящему изобретению).
В некоторых вариантах осуществления с помощью способов по настоящему изобретению повышают число семян, производимых на женское растение, в программе селекции и/или программе повышения семенной продуктивности по меньшей мере на приблизительно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 225, 250, 275, 300% или более по сравнению с контрольной программой селекции/программой повышения семенной продуктивности (например, программой селекции/программой повышения семенной продуктивности с применением тех же сортов маиса при отсутствии отбора с помощью маркеров по настоящему изобретению).
Способы по настоящему изобретению можно осуществлять на практике с помощью и/или применять для выявления, селекции, отбора и/или получения любого подходящего растения или части растения маиса.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) является членом гетерозисной группы Stiff Stalk.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) является членом гетерозисной группы, не относящейся к Stiff Stalk.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) является членом гетерозисной группы lodent.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) является растением или частью растения маиса B14, B37, B73, OH43 или lodent. В вариантах осуществления донорское растение или часть растения происходит из группы B14. В вариантах осуществления реципиентное растение или часть растения происходит из группы B37 или B73.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) является растением или частью растения маиса NP2391, NP2460, NP2222, NP2660, NP2276 или ID3461.
В некоторых вариантах осуществления растение или частью растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) происходит из линии, описанной в табл. 11.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) получено от растения или части растения маиса B14, B37, B73, OH43 или lodent.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) получено от растения или части растения маиса NP2391, NP2460, NP2222, NP2660, NP2276 или ID3461.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) получено из линии в табл. 11.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) происходит от не встречающихся в природе линии или сорта маиса. В типичных вариантах осуществления не встречающееся в природе растение или часть растения (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) происходит от культивированного растения или части растения.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) является инбредным растением или частью растения маиса.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) является двойным гаплоидным растением или частью
- 54 036149 растения маиса.
В некоторых вариантах осуществления инбредное, или двойное гаплоидное, или инбредное растение или часть растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) является мужским инбредным или двойным гаплоидным растением или частью растения (например, его применяют в качестве опылителя при скрещивании или самоопылении).
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса (например, донорское и/или реципиентное растение или часть растения) происходит от элитного сорта маиса. Например, в некоторых вариантах осуществления растением или частью растения маиса является NP2222, NP2660, NP2276, NP2391 или NP2460.
В вариантах осуществления растение или часть растения маиса (например, реципиентное растение или часть растения) имеет пониженную мужскую фертильность в случае гемизиготы и/или гомозиготы по гену vip3 (например, гену vip3a, что проиллюстрировано на примере трансгенного объекта MIR162 маиса). В вариантах осуществления растение или часть растения маиса не является функционально фертильным или даже является стерильным по мужской линии в гемизиготе и/или гомозиготе по гену vip3.
В некоторых вариантах осуществления геном растения или части растения маиса по меньшей мере на приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99.5% или более идентичен элитному сорту маиса. Например, в некоторых вариантах осуществления геном растения или части растения маиса по меньшей мере на 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентичен геному NP2222, NP2660, NP2276, NP2391 и/или NP2460.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса является потомством от скрещивания между элитным сортом маиса и сортом маиса, который содержит аллель, связанный с повышенной фертильностью. Например, в некоторых вариантах осуществления геном элитного сорта маиса по меньшей мере на приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97, 99 или 100% идентичен геному NP2222, NP2660, NP2276, NP2391 и/или NP2460, или элитной линии, описанной в табл. 11; а геном сорта, содержащего аллель, связанный с повышенной фертильностью, по меньшей мере на приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97, 99 или 100% идентичен геному NP2222, NP2660, NP2276, ID3461 или линии, описанной в табл. 11.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса является потомством интрогрессии, причем рекуррентный родитель является представителем элитного сорта маиса, а донор содержит аллель, связанный с повышенной фертильностью. Например, в некоторых вариантах осуществления геном рекуррентного родителя по меньшей мере на приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97, 99 или 100% идентичен геному NP2222, NP2660, NP2276, NP2391 и/или NP2460, или линии, описанной в табл. 11; а геном донорского растения по меньшей мере на приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97, 99 или 100% идентичен геному NP2222, NP2660, NP2276, ID3461 или линии, описанной в табл. 11.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса является потомством от скрещивания первого элитного сорта маиса (например, контрольной линии) и потомства от скрещивания второго элитного сорта маиса (например, рекуррентного родителя), а также сорта маиса, который содержит аллель, связанный с повышенной фертильностью (например, донора). Например, в некоторых вариантах осуществления геном первого элитного сорта маиса по меньшей мере на приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97, 99 или 100% идентичен геному NP2222, NP2660, NP2276, NP2391 и/или NP2460, или линии, описанной в табл. 11; геном второго элитного сорта маиса по меньшей мере на приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97, 99 или 100% идентичен геному NP2222, NP2660, NP2276, NP2391 и/или NP2460, или линии, описанной в табл. 11; а геном сорта, содержащего аллель, связанный с повышенной фертильностью, по меньшей мере на приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97, 99 или 100% идентичен геному NP2222, NP2660, NP2276, ID3461 или линии, описанной в табл. 11.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса является потомством от скрещивания первого элитного сорта маиса и потомства интрогрессии, причем рекуррентный родитель является вторым элитным сортом маиса, а донор содержит аллель, связанный с повышенной фертильностью. Например, в некоторых вариантах осуществления геном первого элитного сорта маиса по меньшей мере на приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97, 99 или 100% идентичен геному NP2222, NP2660, NP2276, NP2391 и/или NP2460, или линии, описанной в табл. 11; геном рекуррентного родителя по меньшей мере на приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97, 99 или 100% идентичен геному NP2222, NP2660, NP2276, NP2391 и/или NP2460, или линии, описанной в табл. 11; а геном донора по меньшей мере на приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97, 99 или 100% идентичен геному NP2222, NP2660, NP2276 или ID3461, или линии, описанной в табл. 11.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса содержат один или несколько трансгенов, кодирующих генный продукт, который обеспечивает устойчивость к одному или нескольким гербицидам (например, глифосату, сульфонилмочевине, имидазолиниону, дикамбе, глюфосинату, феноксипропионовой кислоте, циклошексому, триазину, бензонитрилу и/или броксинилу).
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса содержат один или не
- 55 036149 сколько трансгенов, которые кодируют генный продукт, который обеспечивает устойчивость к одному или нескольким вредителям (например, одной или нескольким бактериям, одному или нескольким грибам, одной или нескольким гастроподам, одному или нескольким насекомым, одной или нескольким нематодам, одному или нескольким оомицетам, одной или нескольким фитоплазмам, одному или нескольким простейшим и/или одному или нескольким вирусам).
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса содержат один или несколько трансгенов, которые кодируют генный продукт, обеспечивающий устойчивость к одному или нескольким заболеваниям.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса экспрессируют один или несколько белков Vip3, например содержит трансген vip3 в гемизиготном или гомозиготном состоянии.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса экспрессируют одну или несколько нуклеиновых кислот, кодирующих белок Vip3 (например, белок Vip3 А). Кроме того, растение или часть растения маиса может быть гемизиготным или гомозиготным по нуклеиновой кислоте(ам), кодирующей белок(ки) Vip3. Например, в вариантах осуществления растение или часть растения является гемизиготным или гомозиготным по событию MIR162 маиса. В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса содержат одну или несколько нуклеотидных последовательностей Vip, изложенных под номерами доступа, представленными в табл. 4.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса экспрессируют по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким из нуклеотидных последовательностей Vip, изложенных под номерами доступа, представленными в табл. 4.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса экспрессируют по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, которая специфически гибридизируется с нуклеотидной последовательностью из одной или нескольких из SEQ ID NO: 536-601 (как описано в табл. 4) в жестких условиях гибридизации.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса экспрессируют по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, которая кодирует одну или несколько аминокислотных последовательностей Vip, изложенных под номерами доступа, представленными в табл. 4.
В некоторых вариантах осуществления растение или часть растения маиса экспрессируют по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5% или более идентична одной или нескольким из аминокислотных последовательностей Vip, изложенных под номерами доступа, представленными в табл. 4.
Настоящее изобретение распространяется на растения, выявленные, отобранные и/или полученные согласно способам по настоящему изобретению.
Настоящее изобретение также распространяется на продукты, собранные с растений, выявленных, отобранных и/или полученных согласно способам по настоящему изобретению, включая без ограничений клетки растений и пригодные для сбора части растений, включая без ограничений семена, листья, плоды, цветки, стебли.
В некоторых вариантах осуществления собранный продукт представляет собой клетку растения или часть растения, способную производить растение, характеризующееся повышенной фертильностью (например, повышенной мужской фертильностью).
Настоящее изобретение распространяется также на продукты, полученные из растений, которые получены в соответствии со способами согласно настоящему изобретению, в том числе без ограничений сухие пеллеты и порошки, масла, жиры, жирные кислоты, крахмалы и белки.
Примеры
Следующие примеры не подразумеваются как подробный перечень всех различных способов, которыми может быть реализовано настоящее изобретение, или всех признаков, которые можно добавить к настоящему изобретению. Для специалистов в данной области будет очевидно, что многочисленные вариации и дополнения к различным вариантам осуществления можно осуществлять без отступления от настоящего изобретения. Следовательно, следующие описания предназначены для иллюстрации некоторых конкретных вариантов осуществления настоящего изобретения, а не исчерпывающего определения всех их преобразований, комбинаций и вариаций.
Пример 1. Разработка картирующих популяций.
После изначального нахождения генетической вариации в Vip3-индуцированных уменьшениях мужской фертильности осуществляли испытания для того, чтобы охарактеризовать, какая из инбредных линий маиса наиболее затрагивалась и какая из инбредных линий маиса наименее затрагивалась Vip3индуцированным уменьшением мужской фертильности.
Оценивали ряд инбредных линий маиса, гомозиготных по Vip3A (трансгенный объект MIR162). Наблюдали, что мужская фертильность уменьшалась в каждой из тестируемых гомозиготных по Vip3A инбредных линий, хотя и в разной степени. См. табл. 9 ниже. При нормальных условиях роста некоторые инбредные линии (например, линия NP2222) демонстрировали минимальное уменьшение мужской фер
- 56 036149 тильности, в то время как другие (например, некоторые линии ID3461) демонстрировали значительное уменьшение мужской фертильности. Фактически, несколько гомозиготных по Vip3A инбредных линий (например, некоторые линии NP2660 и NP2276) оказались инфертильными. Среднее уменьшение мужской фертильности составляло приблизительно 50%.
Таблица 5. Vip3A-индуцированные уменьшения мужской фертильности различались среди различных генетических окружений
Инбредная линия Количество пыльцы донорского родителя, применяемого для внесения Vip3 А в инбредную линию Мужская фертильность?
В14 линия 1 хорошо да
В37 линия 1 очень слабо нет
В37 линия 2 очень хорошо нет
В73 линия 1 минимально нет
В73 линия 2 слабо нет
ОН43 линия 1 очень хорошо да
lodent линия 1 приемлемо нет
lodent линия 2 приемлемо да
lodent линия 3 очень слабо да
Наблюдали, что влияние экспрессии Vip3A было смягчено у гемизиготных по Vip3A инбредных линий. Инбредные линии, которые имели мужскую инфертильность в гомозиготе по Vip3A, были фертильными в гемизиготе по Vip3A. Аналогичным образом фертильные инбредные линии, которые демонстрировали значительное уменьшение мужской фертильности в гомозиготе по Vip3A, имели практически полную или полную мужскую фертильность в гемизиготе по Vip3 А.
Наблюдали, что повышение стресса от окружающей среды усиливало Vip3A-индуцированные уменьшения мужской фертильности. Так, в частности, наблюдали, что Vip3A-индуцированные уменьшения мужской фертильности были более выражены у инбредных линий, выращиваемых в условиях засухи и/или высокой температуры (например, высоких дневных температур и/или высоких ночных температур). См. фиг. 1. Vip3A-индуцированные уменьшения мужской фертильности были выражены также у инбредных линий, выращенных в условиях с большой разницей между дневными и ночными температурами. См. фиг. 2.
На основании вышеупомянутых наблюдений были разработаны картирующие популяции с двумя родителями F2 путем реципрокного скрещивания Vip3A-экспрессирующих инбредных линий с мужской фертильностью (NP2222 и ID3461) с Vip3A-эксnрессирующей инбредной линией с мужской инфертильностью (NP2276). Из за того что инфертильную линию нельзя было применять в качестве мужской особи при гомозиготе по Vip3A, то скрещивания F1 в таких случаях осуществляли с помощью скрещивания пыльцы от соответствующей гемизиготной по Vip3A линии на шелк от инбредной линии с мужской фертильностью, которая была гомозиготной по Vip3 А, с получением растений F1, а затем отбора гомозиготных растений F1 для получения семян F2. Все растения F1, полученные в результате исходных скрещиваний, имели достаточную мужскую фертильность для самоопыления с получением семян F2.
Пример 2. Анализ и выявление с помощью молекулярного маркера QTL, связанных с повышенной мужской фертильностью.
С использованием генетики NP2276, скрещенной с NP2222 или ID3461, как описано в примере 1, выявляли QTL, связанные с мужской фертильностью. Цитоплазматический эффект не наблюдали.
Растения F2, полученные из семян F2, описанных в примере 1, выращивали в поле на участках зимнего выращивания Syngenta® в Пуэрто-Рико. Каждая популяция F2 состояла из ~500 растений. Каждое растение фенотипировали и/или оценивали на мужскую фертильность, как описано в примере 3. Каждое растение исследовали на зиготность трансгена vip3A (нуль, гемизиготный, гомозиготный) и подтверждали экспрессию трансгена vip3A на подходящем уровне. Каждое растение F2 также генотипировали, используя ~200 маркеров SNP, которые представляли собой полиморфизмы среди родителей, и при этом такие маркеры располагались по всему геному. Программное обеспечение QTL Cartographer применяли для анализа для выявления QTL, восприимчивых к представляющему интерес фенотипу (повышенной мужской фертильности).
Показатели LOD для четырех из QTL, которые были выявлены в данном исследовании, приведены в табл. 6 ниже. Как в ней показано, QTL, выявленные на хромосоме 5, демонстрировали сильную связь с повышенной мужской фертильностью.
- 57 036149
Таблица 6. Показатели LOD у QTL, выявленных с помощью растений F2 от скрещивания с двумя родителями NP2222 и NP2276 и скрещивания с двумя родителями ID3461 HNP2276
Хром NP2276/ NP2222 NP2222/ NP2276 NP2222/ NP2276 комб NP2276/ ID3461 ID3461/ NP2276 Комб XO/ID
3 NS 5,8 8,2 7,9 NS 6,2
4 NS 7,4 7,7 (3,6) NS (3,6)
5 11,1 8,3 19,9 14,3 13,0 23,1
10 NS 10,9 8,9 6,2 12,3 26,8
Порог значимости LOD=2,5.
Пример 3. Фенотипирование для повышения мужской фертильности.
Для фенотипирования для повышения мужской фертильности каждую метелку растения F2 оценивали в полевых условиях на качество/количество пыльника и количество пыльцы. Такие показатели объединяли в отдельный показатель коэффициента фертильности от 1 до 9 (см. табл. 7 ниже; показатель 1 отражает наилучшую фертильность, а 9 отражает инфертильность). Из-за того что количество пыльцы было более релевантным показателем мужской фертильности; он был более весомым при получении коэффициента фертильности. Показатели коэффициента фертильности определяли ежедневно, начиная через день после того, как растение начинало выпускать пыльники. По первому признаку выхода пыльника метелки собирали в мешок для оценки в следующие два подряд идущих дня. Наивысший показатель фертильности применяли в конечном анализе данных. Неблагоприятные погодные условия иногда вынуждали пропустить день, но данные за два дня для каждого растения собирали всегда. Качество пыльника оценивали по шкале от 1 до 3, при этом 1 означало нормальный паттерн выхода пыльника, 2 означало беспорядочный и/или уменьшенный выход пыльника, а 3 означало отсутствие выхода пыльника (полная мужская стерильность растения). Количество пыльцы оценивали по относительной шкале от 1 до 4, при этом 1 означало высокую пыльцевую продуктивность, а 4 означало нулевую пыльцевую продуктивность за 24-часовой период. Сегрегацию родительских растений Υϊρ3Α, выращиваемых на одном поле, применяли в качестве контролей, чтобы точно определить поправочный коэффициент результатов определения количества пыльцы.
Таблица 7. Коэффициент фертильности, применяемый для оценки растений F2, полученных в результате бипарентальных скрещиваний NP2222 и NP2276 и бипарентальных скрещиваний ID3461 и NP2276
Пример 4. Детальное картирование QTL на хромосоме 5.
Инбредная линия NP2276 в норме имеет высокую мужскую фертильность, однако имеет мужскую инфертильность при гомозиготности по Vip3 А. С учетом такого большого Vip3A-индуцированного уменьшения мужской фертильности было принято решение детально картировать QTL, для которых было обнаружено, что они оказывали наибольшее влияние в ходе исследования для картирования F2 (QTL на хромосоме 5) с целью определения меньшего участка, который можно было бы использовать для преобразования другой генетики с помощью данной QTL фертильности.
Почти изогенные линии (NIL), содержащие ИР2222-гомозиготный QTL на хромосоме 3 в генетическом окружении NP2276, применяли для детального картирования QTL на хромосоме 5.
Материалы F1 от скрещиваний NP2276 х NP2222, описанных в примере 1, три раза возвратно скрещивали с NP2276 и многократно самоопыляли с отбором на сохранение генетики NP2222 в QTL на хромосоме 3 и сохранение генетики как NP2222, так и NP2276 в QTL на хромосоме 5. Остаток генома вне таких двух QTL отбирали по генетике NP2276, насколько это было возможно. QTL на хромосомах 4 и 10 позволяли сегрегировать обратно в генетику NP2276 наряду с остальным геномом.
- 58 036149
Окончательные NIL выращивали в нормальных полевых условиях на участках зимнего выращивания Syngenta® в Пуэрто-Рико. NIL, содержавшие генетику NP2222 в QTL на хромосоме 3 и QTL на хромосоме 5, демонстрировали относительно высокую мужскую фертильность, сходную с нуль-сегрегатами из NP2276. NIL, содержавшие генетику NP2222 в QTL на хромосоме 3 и генетику NP2276 в QTL на хромосоме 5, представляли собой инфертильные мужские особи. После множества раундов детального картирования QTL на хромосоме 5 итерационно уменьшали до области 12,13 MB, ограниченной положениями 72696160 и 84824203 и включающей их (хромосомный сегмент 190, как описано в табл. 1).
В тепличных исследованиях, в которых пыльцевую продуктивность оценивали количественно, NIL, содержавшие генетику NP2222 в QTL на хромосоме 3 и данный более мелкий QTL на хромосоме 5, демонстрировали мужскую фертильность в ~80% случаев, измеренных для сегрегатов дикого типа или нуль-сегрегатов из NP2276.
Пример 5. Выявление и детальное картирование QTL, связанных с повышенной мужской фертиль ностью.
QTL, связанные с повышенной мужской фертильностью, выявляли и картировали с помощью методик, описанных выше для примеров 1-4. Примеры выявленных QTL представлены в табл. 8.
Таблица 8. QTL, связанные с повышенным количеством пыльников и/или улучшенным качеством пыльников
QTL Хр. сМ Левый маркер Положение Благоприятный аллель Правый маркер Положение Благоприятный аллель Фенотип Показатель LOD % объясненной фенотипической изменчивости
3 3 151,6 1 174825991 G 2 195514453 А Качество пыльников 3,2 7,1
4-1 4 92,5 3 25326309 G 4 26400247 G Качество/количество пыльников 2,61 7,06
4-2 4 216,3 5 233629032 А 6 232968070 А Качество/количество пыльников Качество-20,8 Количество20,3 Качество-32,1 Количество-32,8
5-1 5 94,9 7 181522829 А 8 77920728 G Качество/количество пыльников Качество-90,1 Количество 84,85 Качество-5 6,9 Количество-55,7
5-2 5 147,6 9 84824103 Т 10 169454950 Т Качество/количество пыльников Качество-24,3 Количество 23,3 Качество-48,3 Количество-47,9
6 6 189,3 11 165317744 Т 12 165632140 G Качество пыльников Качество-5,2 Количество-6,1 Качество-7,8 Количество-8,8
7 7 92,2 13 33157904 G 14 52027945 А Качество/количество пыльников Качество-21,0 Количество 20,2 Качество-32,6 Количество-20,2
9 9 176,8 15 128947590 А 16 147896266 С Качество/количество пыльников Качество-9,9 Количество-9,6 Качество-14,4 Количество-14,7
10 10 192,5 17 142092409 G 18 145273700 G Качество пыльников 3,25 6,85
Порог значимости LOD=2,5.
Таблица 9. Структура последовательностей, зондов и праймеров, пригодных для выявления благоприятных аллелей в QTL, описанных в табл. 8
Хр. QTL Маркер Благоприятный аллель Структура (SEQ ID) Зонд (SEQ ID) Зонд (SEQ ID) Праймер (SEQ ID) Праймер (SEQ ID)
3 3 1 G 536 537 538 539 540
3 3 2 А 526 528 530 527 529
4 4-1 3 G 541 542 543 544 545
4 4-1 4 G 546 547 548 549 550
4 4-2 5 А 551 552 553 554 555
4 4-2 6 А 556 557 558 559 560
5 5-1 7 А 561 562 563 564 565
5 5-1 8 G 566 567 568 569 570
5 5-2 9 Т 531 532 534 535 533
5 5-2 10 Т 571 572 573 574 575
6 6 11 т 576 577 578 579 580
6 6 12 G 581 582 583
7 7 13 G 584 585 586 587 588
7 7 14 А 589 590 591 592 593
9 9 15 А 594 595 596 597 598
9 9 16 С 599 600 601 602 603
10 10 17 G 604 605 606 607 608
10 10 18 G 609 610 611 612 613
Наблюдали, что инбредная линия 1 линии B14 (см. табл. 8) содержала аллели, связанные с повышенной мужской фертильностью в QTL на хромосомах 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9 и 10.
Наблюдали, что инбредные линии 2 линии B37 и 2 линия B73 (см. табл. 8 выше) содержали аллели,
- 59 036149 связанные с повышенной мужской фертильностью в QTL на хромосомах 5, 7 и 9.
Выявленный в данном исследовании предоминантный QTL, который был сосредоточен возле положения 81265937 на хромосоме 5, в итоге картировали с помощью ряда маркеров и методик. После множества раундов детального картирования, QTL итерационно уменьшали до области 1,431 MB, ограниченной положениями 80804587 и 82325587 и включающей их (хромосомный сегмент 7514, как описано в табл. 1). Как показано в табл. 3, данный хромосомный сегмент кодирует ряд белков.
Пример 6. Аллели, связанные с QTL-участками.
Проводили сравнение SNP, присутствующих в инбредной линии маиса NP2222, относительно линии NP2276 по QTL-участкам, ассоциированным с мужской фертильностью, которые приведены в табл. 8 выше. Результаты показаны в табл. 10. Если аллели отличаются среди двух линий, то аллель NP2222 соответствует благоприятному аллелю.
Структура способов анализа, включая структуру подходящих праймеров и зондов, для обнаружения наличия или отсутствия указанных в табл. 10 благоприятных аллелей в других растениях и частях растений маиса будет вполне очевидна специалистам в данной области техники. Например, специалист может оценить последовательность, проходящую 5' и/или 3' от указанного положения каждого SNP (например, 25, 50, 100, 150, 200, 250 нуклеотидов или более в 5' и/или 3' направлении) и применить любой из множества видов программного обеспечения для создания соответствующих праймеров для амплификации и зондов для обнаружения наличия или отсутствия в амплификационном анализе благоприятного аллеля, присутствующего в NP2222.
Таблица 10. Дополнительные полиморфизмы в фертильности QTL
QTL Хромосома Нуклеотидное положение Благоприятный
3 СйгЗ 176,322,027 С
3 СйгЗ 184,155,559 С
3 Chr3 184,215,519 А
3 Chr3 184,672,762 G
3 СйгЗ 185,229,529 А
3 СйгЗ 186,563,317 А
3 СйгЗ 187,045,835 А
3 СйгЗ 188,335,251 А
3 СйгЗ 189,901,375 G
3 СйгЗ 191,195,919 А
3 СйгЗ 193,847,182 А
4 1 Chr4 25,639,678 G
4 1 Chr4 25,988,159 А
4 1 Chr4 26,373,200 А
4 2 Chr4 232,928,019 G
4 2 Chr4 232,940,724 G
4 2 Chr4 233,005,187 G
4 2 Chr4 233,204,685 А
4 2 Chr4 233,268,189 С
5 1 Chr5 78,301,966 А
5 1 Chr5 81,454,989 А
5 1 Chr5 82,952,810 А
5 1 Chr5 83,278,003 А
5 1И5 2 Chr5 86,074,618 С
5 1И5 2 Chr5 92,369,931 А
5 1И5 2 Chr5 99,818,185 А
5 1И5 2 Chr5 107,477,545 G
5 1И5 2 Chr5 113,579,713 А
5 1И5 2 Chr5 120,984,518 А
5 1И5 2 Chr5 131,435,275 G
5 1И5 2 Chr5 141,169,239 G
5 1И5 2 Chr5 149,998,432 А
51 И 52 Chr5 163,409,720 G
- 60 036149
5 1 И5 2 Chr5 168,858,119 A
5 1 Chr5 170,069,183 A
5 1 Chr5 175,459,402 G
5 1 Chr5 178,321,558 A
6 Chr6 165,353,049 C
6 Chr6 165,632,314 C
6 Chr6 165,348,117 c
7 Chr7 34,171,694 c
7 Chr7 33,520,778 A
7 Chr7 34,141,494 G
9 Chr9 129,905,275 A
9 Chr9 131,727,013 A
9 Chr9 138,019,524 A
9 Chr9 138,312,159 C
9 Chr9 138,685,900 G
9 Chr9 141,476,864 G
9 Chr9 142,462,911 A
9 Chr9 135,855,445 A
9 Chr9 144,740,620 G
10 ChrlO 142,596,522 A
10 ChrlO 143,063,299 G
10 ChrlO 143,394,664 G
10 ChrlO 143,663,216 C
10 ChrlO 144,109,193 A
10 ChrlO 144,314,228 C
10 ChrlO 144,741,863 G
Пример 7. Другие общедоступные источники благоприятных аллелей.
Применяя линейнорегрессионный анализ и попарные генетические расстояния, прогнозировали, что следующие общедоступные линии в табл. 11 из коллекции Ames Germplasm содержат благоприятные аллели, указанные в табл. 8 выше.
Таблица 11. Общедоступные линии, прогнозируемые как содержащие благоприятные аллели
QTL Общедоступные линии, прогнозируемые как имеющие благоприятный аллель Вероятность наличия благоприятного аллеля Другие линии с общей схожестью
3 А659 65% А73, А660, ЕР29, W22
4-1 V102 86,8% W8304, W8555
4-2 В103 99,8% ОС4, PHG50, РНР76
5-1 NC372, N192, А680 99,7% РВ80, ТХ714, NC372, В73, GEMS-0101, W8304
5-2 NC372, N192, А680 99,7% РВ80, ТХ714, NC372, В73, GEMS-0101, W8304
6 В104, NC268, NC306, NC310, NC372 99,8% В121, В НО, NC306, NC268A, NC312, NC308, NC326, РВ80, ТХ714
7 ND253, LH52 99,8%, 99,2% ND264, S117, МО17, МО17Т, SeagullSeventeen
9 Ра762 97% R218, R219, VEN981, SAN349a1, ОН43Т, ОН43
10 DE1 96,2% DE2, РНР02, MS81, MS75
Пример 8. Получение Vip3A-экспрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Хромосомный сегмент 13 (описанный в табл. 1) интрогрессировали из NP2222 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родителем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
Пример 9.
Получение Vip3A-экспрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Хромосомный сегмент 13 (как описано в табл. 1) интрогрессировали из NP2660 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родите- 61 036149 лем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
Пример 10. Получение Vip3A-экспрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Хромосомный сегмент 43 (как описано в табл. 1) интрогрессировали из NP2222 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родителем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
Пример 11. Получение Vip3A-экспрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Хромосомный сегмент 43 (как описано в табл. 1) интрогрессировали из NP2660 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родителем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
Пример 12. Получение Vip3A-экспрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Хромосомный сегмент 7514 (как описано в табл. 1) интрогрессировали из NP2222 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родителем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
Пример 13. Получение Vip3A-экспрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Хромосомный сегмент 7514 (как описано в табл. 1) интрогрессировали из NP2660 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родителем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
Пример 14. Получение Vip3A-экспрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Хромосомный сегмент 7514 (как описано в табл. 1) интрогрессировали из NP2276 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родителем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
Пример 15. Получение Vip3A-экспрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертиль
- 62 036149 ностью.
Хромосомный сегмент 12747 (как описано в табл. 1) интрогрессировали из NP2222 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родителем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
Пример 16. Получение Vip3A-экспрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Хромосомный сегмент 12747 (как описано в табл. 1) интрогрессировали из NP2660 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родителем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
Пример 17. Получение Vip3A-экспрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Хромосомный сегмент 12753 (как описано в табл. 1) интрогрессировали из NP2222 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родителем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
Пример 18. Получение Vip3A-экспрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Хромосомный сегмент 12753 (как описано в табл. 1) интрогрессировали из NP2660 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родителем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
Пример 19. Получение Vip3A-экспрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Хромосомный сегмент 12760 (как описано в табл. 1) интрогрессировали из NP2222 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родителем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
Пример 20. Получение Vip3A-экспрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Хромосомный сегмент 12760 (как описано в табл. 1) интрогрессировали из NP2660 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родителем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях
- 63 036149 засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
Пример 21. Получение Vip3A-эксnрессирующих растений маиса с повышенной мужской фертильностью.
Хромосомный сегмент 12760 (как описано в табл. 1) интрогрессировали из NP2276 в гомозиготную по Vip3A инбредную линию (например, инбредную линию MIR162). Подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную мужскую фертильность по сравнению с ее рекуррентным родителем. В частности, подвергнутая интрогрессии линия маиса демонстрировала повышенную пыльцевую продуктивность, повышенную продуктивность пыльника и улучшенную морфологию пыльника в нормальных условиях роста или стрессовых условиях окружающей среды (например, стрессовых условиях засухи и/или высокой температуры). Благоприятные эффекты интрогрессированного хромосомного сегмента были более четко выражены у растений, выращиваемых в условиях высоких температур (например, высоких дневных и/или ночных температур).
- 64 036149
Таблица 1. Примеры хромосомных сегментов, связанных с повышенной фертильностью у маиса
Хромосомный Хромосомный сегмент Хр, Граница! Граница 2 сегмент Хр, Граница 1 Граница 2
1 1 39248635 198733255 45 4 233629032 238991842
2 2 46 5 72696160 73132763
3 3 7411453 168481421 47 5 72696160 74614332
4 3 7411453 174825991 48 5 72696160 78022476
5 3 7411453 184816495 49 5 72696160 78023096
6 3 7411453 195514453 50 5 72696160 78131652
7 3 7411453 213804184 51 5 72696160 78131784
8 3 168481421 174825991 52 5 72696160 78310499
9 3 168481421 184816495 53 5 72696160 78381593
10 3 168481421 195514453 54 5 72696160 78389884
11 3 168481421 213804184 55 5 72696160 78520683
12 3 174825991 184816495 56 5 72696160 78765635
13 3 174825991 195514453 57 5 72696160 78780292
14 3 174825991 213804184 58 5 72696160 78813114
15 3 184816495 195514453 59 5 72696160 78814710
16 3 184816495 213804184 60 5 72696160 78814976
17 3 195514453 213804184 61 5 72696160 78815306
18 4 9852206 25326309 62 5 72696160 78821393
19 4 9852206 26400247 63 5 72696160 78826528
20 4 9852206 182010511 64 5 72696160 78826538
21 4 9852206 216707012 65 5 72696160 78826612
22 4 9852206 232968070 66 5 72696160 78918620
23 4 9852206 233629032 67 5 72696160 78918850
24 4 9852206 238991842 68 5 72696160 79056960
25 4 25326309 26400247 69 5 72696160 79163631
26 4 25326309 182010511 70 5 72696160 79176557
27 4 25326309 216707012 71 5 72696160 79188028
28 4 25326309 232968070 72 5 72696160 79201760
29 4 25326309 233629032 73 5 72696160 79230005
30 4 25326309 238991842 74 5 72696160 79230318
31 4 26400247 182010511 75 5 72696160 79505592
32 4 26400247 216707012 76 5 72696160 79510072
33 4 26400247 232968070 77 5 72696160 79538012
34 4 26400247 233629032 78 5 72696160 79538048
35 4 26400247 238991842 79 5 72696160 79538367
36 4 182010511 216707012 80 5 72696160 79669824
37 4 182010511 232968070 81 5 72696160 79682242
38 4 182010511 233629032 82 5 72696160 79699261
39 4 182010511 238991842 83 5 72696160 79710673
40 4 216707012 232968070 84 5 72696160 79861902
41 4 216707012 233629032 85 5 72696160 79867710
42 4 216707012 238991842 86 5 72696160 79867868
43 4 232968070 233629032 87 5 72696160 79867873
44 4 232968070 238991842 88 5 72696160 79961961
- 65 036149
89 5 72696160 80086268 133 5 72696160 82143124
90 5 72696160 80190673 134 5 72696160 82236318
91 5 72696160 80190777 135 5 72696160 82325587
92 5 72696160 80192546 136 5 72696160 82427210
93 5 72696160 80195395 137 5 72696160 82431853
94 5 72696160 80199923 138 5 72696160 82446714
95 5 72696160 80241911 139 5 72696160 82446794
96 5 72696160 80282785 140 5 72696160 82551111
97 5 72696160 80345337 141 5 72696160 82552090
98 5 72696160 80389787 142 5 72696160 82555641
99 5 72696160 80411639 143 5 72696160 82555670
100 5 72696160 80446855 144 5 72696160 82556511
101 5 72696160 80492790 145 5 72696160 82559047
102 5 72696160 80670554 146 5 72696160 82561535
103 5 72696160 80674679 147 5 72696160 82610100
104 5 72696160 80720509 148 5 72696160 82676822
105 5 72696160 80800856 149 5 72696160 82676901
106 5 72696160 80804587 150 5 72696160 82883691
107 5 72696160 80807409 151 5 72696160 82954942
108 5 72696160 80835734 152 5 72696160 82971688
109 5 72696160 80835734 153 5 72696160 83023965
ПО 5 72696160 80971764 154 5 72696160 83094205
111 5 72696160 80972258 155 5 72696160 83146355
112 5 72696160 80974450 156 5 72696160 83280630
113 5 72696160 81047638 157 5 72696160 83281412
114 5 72696160 81082921 158 5 72696160 83400242
115 5 72696160 81157909 159 5 72696160 83405797
116 5 72696160 81265937 160 5 72696160 83437132
117 5 72696160 81267485 161 5 72696160 83522252
118 5 72696160 81267499 162 5 72696160 83560095
119 5 72696160 81274512 163 5 72696160 83560204
120 5 72696160 81763618 164 5 72696160 83572400
121 5 72696160 81797217 165 5 72696160 83607661
122 5 72696160 81800186 166 5 72696160 83745342
123 5 72696160 81806213 167 5 72696160 83861275
124 5 72696160 81854583 168 5 72696160 83861633
125 5 72696160 81859374 169 5 72696160 83865653
126 5 72696160 81861368 170 5 72696160 83865914
127 5 72696160 81863686 171 5 72696160 83865920
128 5 72696160 81916850 172 5 72696160 83868010
129 5 72696160 81954891 173 5 72696160 84019752
130 5 72696160 81985250 174 5 72696160 84065912
131 5 72696160 82083752 175 5 72696160 84086632
132 5 72696160 82101253 176 5 72696160 84089603
- 66 036149
177 5 72696160 84104814 221 5 74614332 78918620
178 5 72696160 84105175 222 5 74614332 78918850
179 5 72696160 84251635 223 5 74614332 79056960
180 5 72696160 84252180 224 5 74614332 79163631
181 5 72696160 84253030 225 5 74614332 79176557
182 5 72696160 84254208 226 5 74614332 79188028
183 5 72696160 84314930 227 5 74614332 79201760
184 5 72696160 84340523 228 5 74614332 79230005
185 5 72696160 84516340 229 5 74614332 79230318
186 5 72696160 84706916 230 5 74614332 79505592
187 5 72696160 84799488 231 5 74614332 79510072
188 5 72696160 84801081 232 5 74614332 79538012
189 5 72696160 84824103 233 5 74614332 79538048
190 5 72696160 84824203 234 5 74614332 79538367
191 5 72696160 84824816 235 5 74614332 79669824
192 5 72696160 84825422 236 5 74614332 79682242
193 5 72696160 84825763 237 5 74614332 79699261
194 5 72696160 84825942 238 5 74614332 79710673
195 5 72696160 84936441 239 5 74614332 79861902
196 5 72696160 84936493 240 5 74614332 79867710
197 5 72696160 84943705 241 5 74614332 79867868
198 5 72696160 169454950 242 5 74614332 79867873
199 5 72696160 181522829 243 5 74614332 79961961
200 5 72696160 204759879 244 5 74614332 80086268
201 5 72696160 209874191 245 5 74614332 80190673
202 5 73132763 74614332 246 5 74614332 80190777
203 5 74614332 78022476 247 5 74614332 80192546
204 5 74614332 78023096 248 5 74614332 80195395
205 5 74614332 78131652 249 5 74614332 80199923
206 5 74614332 78131784 250 5 74614332 80241911
207 5 74614332 78310499 251 5 74614332 80282785
208 5 74614332 78381593 252 5 74614332 80345337
209 5 74614332 78389884 253 5 74614332 80389787
210 5 74614332 78520683 254 5 74614332 80411639
211 5 74614332 78765635 255 5 74614332 80446855
212 5 74614332 78780292 256 5 74614332 80492790
213 5 74614332 78813114 257 5 74614332 80670554
214 5 74614332 78814710 258 5 74614332 80674679
215 5 74614332 78814976 259 5 74614332 80720509
216 5 74614332 78815306 260 5 74614332 80800856
217 5 74614332 78821393 261 5 74614332 80804587
218 5 74614332 78826528 262 5 74614332 80807409
219 5 74614332 78826538 263 5 74614332 80835734
220 5 74614332 78826612 264 5 74614332 80835734
- 67 036149
265 5 74614332 80971764 309 5 74614332 83094205
266 5 74614332 80972258 310 5 74614332 83146355
267 5 74614332 80974450 311 5 74614332 83280630
268 5 74614332 81047638 312 5 74614332 83281412
269 5 74614332 81082921 313 5 74614332 83400242
270 5 74614332 81157909 314 5 74614332 83405797
271 5 74614332 81265937 315 5 74614332 83437132
272 5 74614332 81267485 316 5 74614332 83522252
273 5 74614332 81267499 317 5 74614332 83560095
274 5 74614332 81274512 318 5 74614332 83560204
275 5 74614332 81763618 319 5 74614332 83572400
276 5 74614332 81797217 320 5 74614332 83607661
277 5 74614332 81800186 321 5 74614332 83745342
278 5 74614332 81806213 322 5 74614332 83861275
279 5 74614332 81854583 323 5 74614332 83861633
280 5 74614332 81859374 324 5 74614332 83865653
281 5 74614332 81861368 325 5 74614332 83865914
282 5 74614332 81863686 326 5 74614332 83865920
283 5 74614332 81916850 327 5 74614332 83868010
284 5 74614332 81954891 328 5 74614332 84019752
285 5 74614332 81985250 329 5 74614332 84065912
286 5 74614332 82083752 330 5 74614332 84086632
287 5 74614332 82101253 331 5 74614332 84089603
288 5 74614332 82143124 332 5 74614332 84104814
289 5 74614332 82236318 333 5 74614332 84105175
290 5 74614332 82325587 334 5 74614332 84251635
291 5 74614332 82427210 335 5 74614332 84252180
292 5 74614332 82431853 336 5 74614332 84253030
293 5 74614332 82446714 337 5 74614332 84254208
294 5 74614332 82446794 338 5 74614332 84314930
295 5 74614332 82551111 339 5 74614332 84340523
296 5 74614332 82552090 340 5 74614332 84516340
297 5 74614332 82555641 341 5 74614332 84706916
298 5 74614332 82555670 342 5 74614332 84799488
299 5 74614332 82556511 343 5 74614332 84801081
300 5 74614332 82559047 344 5 74614332 84824103
301 5 74614332 82561535 345 5 74614332 84824203
302 5 74614332 82610100 346 5 74614332 84824816
303 5 74614332 82676822 347 5 74614332 84825422
304 5 74614332 82676901 348 5 74614332 84825763
305 5 74614332 82883691 349 5 74614332 84825942
306 5 74614332 82954942 350 5 74614332 84936441
307 5 74614332 82971688 351 5 74614332 84936493
308 5 74614332 83023965 352 5 74614332 84943705
- 68 036149
353 5 74614332 169454950 397 5 74614332 79961961
354 5 74614332 181522829 398 5 74614332 80086268
355 5 74614332 204759879 399 5 74614332 80190673
356 5 74614332 209874191 400 5 74614332 80190777
357 5 74614332 78022476 401 5 74614332 80192546
358 5 74614332 78023096 402 5 74614332 80195395
359 5 74614332 78131652 403 5 74614332 80199923
360 5 74614332 78131784 404 5 74614332 80241911
361 5 74614332 78310499 405 5 74614332 80282785
362 5 74614332 78381593 406 5 74614332 80345337
363 5 74614332 78389884 407 5 74614332 80389787
364 5 74614332 78520683 408 5 74614332 80411639
365 5 74614332 78765635 409 5 74614332 80446855
366 5 74614332 78780292 410 5 74614332 80492790
367 5 74614332 78813114 411 5 74614332 80670554
368 5 74614332 78814710 412 5 74614332 80674679
369 5 74614332 78814976 413 5 74614332 80720509
370 5 74614332 78815306 414 5 74614332 80800856
371 5 74614332 78821393 415 5 74614332 80804587
372 5 74614332 78826528 416 5 74614332 80807409
373 5 74614332 78826538 417 5 74614332 80835734
374 5 74614332 78826612 418 5 74614332 80835734
375 5 74614332 78918620 419 5 74614332 80971764
376 5 74614332 78918850 420 5 74614332 80972258
377 5 74614332 79056960 421 5 74614332 80974450
378 5 74614332 79163631 422 5 74614332 81047638
379 5 74614332 79176557 423 5 74614332 81082921
380 5 74614332 79188028 424 5 74614332 81157909
381 5 74614332 79201760 425 5 74614332 81265937
382 5 74614332 79230005 426 5 74614332 81267485
383 5 74614332 79230318 427 5 74614332 81267499
384 5 74614332 79505592 428 5 74614332 81274512
385 5 74614332 79510072 429 5 74614332 81763618
386 5 74614332 79538012 430 5 74614332 81797217
387 5 74614332 79538048 431 5 74614332 81800186
388 5 74614332 79538367 432 5 74614332 81806213
389 5 74614332 79669824 433 5 74614332 81854583
390 5 74614332 79682242 434 5 74614332 81859374
391 5 74614332 79699261 435 5 74614332 81861368
392 5 74614332 79710673 436 5 74614332 81863686
393 5 74614332 79861902 437 5 74614332 81916850
394 5 74614332 79867710 438 5 74614332 81954891
395 5 74614332 79867868 439 5 74614332 81985250
396 5 74614332 79867873 440 5 74614332 82083752
- 69 036149
441 5 74614332 82101253 485 5 74614332 84089603
442 5 74614332 82143124 486 5 74614332 84104814
443 5 74614332 82236318 487 5 74614332 84105175
444 5 74614332 82325587 488 5 74614332 84251635
445 5 74614332 82427210 489 5 74614332 84252180
446 5 74614332 82431853 490 5 74614332 84253030
447 5 74614332 82446714 491 5 74614332 84254208
448 5 74614332 82446794 492 5 74614332 84314930
449 5 74614332 82551111 493 5 74614332 84340523
450 5 74614332 82552090 494 5 74614332 84516340
451 5 74614332 82555641 495 5 74614332 84706916
452 5 74614332 82555670 496 5 74614332 84799488
453 5 74614332 82556511 497 5 74614332 84801081
454 5 74614332 82559047 498 5 74614332 84824103
455 5 74614332 82561535 499 5 74614332 84824203
456 5 74614332 82610100 500 5 74614332 84824816
457 5 74614332 82676822 501 5 74614332 84825422
458 5 74614332 82676901 502 5 74614332 84825763
459 5 74614332 82883691 503 5 74614332 84825942
460 5 74614332 82954942 504 5 74614332 84936441
461 5 74614332 82971688 505 5 74614332 84936493
462 5 74614332 83023965 506 5 74614332 84943705
463 5 74614332 83094205 507 5 74614332 169454950
464 5 74614332 83146355 508 5 74614332 181522829
465 5 74614332 83280630 509 5 74614332 204759879
466 5 74614332 83281412 510 5 74614332 209874191
467 5 74614332 83400242 511 5 77920728 78022476
468 5 74614332 83405797 512 5 77920728 78023096
469 5 74614332 83437132 513 5 77920728 78131652
470 5 74614332 83522252 514 5 77920728 78131784
471 5 74614332 83560095 515 5 77920728 78310499
472 5 74614332 83560204 516 5 77920728 78381593
473 5 74614332 83572400 517 5 77920728 78389884
474 5 74614332 83607661 518 5 77920728 78520683
475 5 74614332 83745342 519 5 77920728 78765635
476 5 74614332 83861275 520 5 77920728 78780292
477 5 74614332 83861633 521 5 77920728 78813114
478 5 74614332 83865653 522 5 77920728 78814710
479 5 74614332 83865914 523 5 77920728 78814976
480 5 74614332 83865920 524 5 77920728 78815306
481 5 74614332 83868010 525 5 77920728 78821393
482 5 74614332 84019752 526 5 77920728 78826528
483 5 74614332 84065912 527 5 77920728 78826538
484 5 74614332 84086632 528 5 77920728 78826612
- 70 036149
529 5 77920728 78918620 573 5 77920728 80971764
530 5 77920728 78918850 574 5 77920728 80972258
531 5 77920728 79056960 575 5 77920728 80974450
532 5 77920728 79163631 576 5 77920728 81047638
533 5 77920728 79176557 577 5 77920728 81082921
534 5 77920728 79188028 578 5 77920728 81157909
535 5 77920728 79201760 579 5 77920728 81265937
536 5 77920728 79230005 580 5 77920728 81265937
537 5 77920728 79230318 581 5 77920728 81267485
538 5 77920728 79505592 582 5 77920728 81267499
539 5 77920728 79510072 583 5 77920728 81274512
540 5 77920728 79538012 584 5 77920728 81763618
541 5 77920728 79538048 585 5 77920728 81797217
542 5 77920728 79538367 586 5 77920728 81800186
543 5 77920728 79669824 587 5 77920728 81806213
544 5 77920728 79682242 588 5 77920728 81854583
545 5 77920728 79699261 589 5 77920728 81859374
546 5 77920728 79710673 590 5 77920728 81861368
547 5 77920728 79861902 591 5 77920728 81863686
548 5 77920728 79867710 592 5 77920728 81916850
549 5 77920728 79867868 593 5 77920728 81954891
550 5 77920728 79867873 594 5 77920728 81985250
551 5 77920728 79961961 595 5 77920728 82083752
552 5 77920728 80086268 596 5 77920728 82101253
553 5 77920728 80190673 597 5 77920728 82143124
554 5 77920728 80190777 598 5 77920728 82236318
555 5 77920728 80192546 599 5 77920728 82325587
556 5 77920728 80195395 600 5 77920728 82427210
557 5 77920728 80199923 601 5 77920728 82431853
558 5 77920728 80241911 602 5 77920728 82446714
559 5 77920728 80282785 603 5 77920728 82446794
560 5 77920728 80345337 604 5 77920728 82551111
561 5 77920728 80389787 605 5 77920728 82552090
562 5 77920728 80411639 606 5 77920728 82555641
563 5 77920728 80446855 607 5 77920728 82555670
564 5 77920728 80492790 608 5 77920728 82556511
565 5 77920728 80670554 609 5 77920728 82559047
566 5 77920728 80674679 610 5 77920728 82561535
567 5 77920728 80720509 611 5 77920728 82610100
568 5 77920728 80800856 612 5 77920728 82676822
569 5 77920728 80804587 613 5 77920728 82676901
570 5 77920728 80807409 614 5 77920728 82883691
571 5 77920728 80835734 615 5 77920728 82954942
572 5 77920728 80835734 616 5 77920728 82971688
- 71 036149
617 5 77920728 83023965 661 5 77920728 84936493
618 5 77920728 83094205 662 5 77920728 84943705
619 5 77920728 83146355 663 5 77920728 169454950
620 5 77920728 83280630 664 5 77920728 181522829
621 5 77920728 83281412 665 5 77920728 204759879
622 5 77920728 83400242 666 5 77920728 209874191
623 5 77920728 83405797 667 5 78022476 78023096
624 5 77920728 83437132 668 5 78022476 78131652
625 5 77920728 83522252 669 5 78022476 78131784
626 5 77920728 83560095 670 5 78022476 78310499
627 5 77920728 83560204 671 5 78022476 78381593
628 5 77920728 83572400 672 5 78022476 78389884
629 5 77920728 83607661 673 5 78022476 78520683
630 5 77920728 83745342 674 5 78022476 78765635
631 5 77920728 83861275 675 5 78022476 78780292
632 5 77920728 83861633 676 5 78022476 78813114
633 5 77920728 83865653 677 5 78022476 78814710
634 5 77920728 83865914 678 5 78022476 78814976
635 5 77920728 83865920 679 5 78022476 78815306
636 5 77920728 83868010 680 5 78022476 78821393
637 5 77920728 84019752 681 5 78022476 78826528
638 5 77920728 84065912 682 5 78022476 78826538
639 5 77920728 84086632 683 5 78022476 78826612
640 5 77920728 84089603 684 5 78022476 78918620
641 5 77920728 84104814 685 5 78022476 78918850
642 5 77920728 84105175 686 5 78022476 79056960
643 5 77920728 84251635 687 5 78022476 79163631
644 5 77920728 84252180 688 5 78022476 79176557
645 5 77920728 84253030 689 5 78022476 79188028
646 5 77920728 84254208 690 5 78022476 79201760
647 5 77920728 84314930 691 5 78022476 79230005
648 5 77920728 84340523 692 5 78022476 79230318
649 5 77920728 84516340 693 5 78022476 79505592
650 5 77920728 84706916 694 5 78022476 79510072
651 5 77920728 84799488 695 5 78022476 79538012
652 5 77920728 84801081 696 5 78022476 79538048
653 5 77920728 84824103 697 5 78022476 79538367
654 5 77920728 84824103 698 5 78022476 79669824
655 5 77920728 84824203 699 5 78022476 79682242
656 5 77920728 84824816 700 5 78022476 79699261
657 5 77920728 84825422 701 5 78022476 79710673
658 5 77920728 84825763 702 5 78022476 79861902
659 5 77920728 84825942 703 5 78022476 79867710
660 5 77920728 84936441 704 5 78022476 79867868
- 72 036149
705 5 78022476 79867873 749 5 78022476 81985250
706 5 78022476 79961961 750 5 78022476 82083752
707 5 78022476 80086268 751 5 78022476 82101253
708 5 78022476 80190673 752 5 78022476 82143124
709 5 78022476 80190777 753 5 78022476 82236318
710 5 78022476 80192546 754 5 78022476 82325587
711 5 78022476 80195395 755 5 78022476 82427210
712 5 78022476 80199923 756 5 78022476 82431853
713 5 78022476 80241911 757 5 78022476 82446714
714 5 78022476 80282785 758 5 78022476 82446794
715 5 78022476 80345337 759 5 78022476 82551111
716 5 78022476 80389787 760 5 78022476 82552090
717 5 78022476 80411639 761 5 78022476 82555641
718 5 78022476 80446855 762 5 78022476 82555670
719 5 78022476 80492790 763 5 78022476 82556511
720 5 78022476 80670554 764 5 78022476 82559047
721 5 78022476 80674679 765 5 78022476 82561535
722 5 78022476 80720509 766 5 78022476 82610100
723 5 78022476 80800856 767 5 78022476 82676822
724 5 78022476 80804587 768 5 78022476 82676901
725 5 78022476 80807409 769 5 78022476 82883691
726 5 78022476 80835734 770 5 78022476 82954942
727 5 78022476 80835734 771 5 78022476 82971688
728 5 78022476 80971764 772 5 78022476 83023965
729 5 78022476 80972258 773 5 78022476 83094205
730 5 78022476 80974450 774 5 78022476 83146355
731 5 78022476 81047638 775 5 78022476 83280630
732 5 78022476 81082921 776 5 78022476 83281412
733 5 78022476 81157909 777 5 78022476 83400242
734 5 78022476 81265937 778 5 78022476 83405797
735 5 78022476 81265937 779 5 78022476 83437132
736 5 78022476 81267485 780 5 78022476 83522252
737 5 78022476 81267499 781 5 78022476 83560095
738 5 78022476 81274512 782 5 78022476 83560204
739 5 78022476 81763618 783 5 78022476 83572400
740 5 78022476 81797217 784 5 78022476 83607661
741 5 78022476 81800186 785 5 78022476 83745342
742 5 78022476 81806213 786 5 78022476 83861275
743 5 78022476 81854583 787 5 78022476 83861633
744 5 78022476 81859374 788 5 78022476 83865653
745 5 78022476 81861368 789 5 78022476 83865914
746 5 78022476 81863686 790 5 78022476 83865920
747 5 78022476 81916850 791 5 78022476 83868010
748 5 78022476 81954891 792 5 78022476 84019752
- 73 036149
793 5 78022476 84065912 837 5 78129898 78918620
794 5 78022476 84086632 838 5 78129898 78918850
795 5 78022476 84089603 839 5 78129898 79056960
796 5 78022476 84104814 840 5 78129898 79163631
797 5 78022476 84105175 841 5 78129898 79176557
798 5 78022476 84251635 842 5 78129898 79188028
799 5 78022476 84252180 843 5 78129898 79201760
800 5 78022476 84253030 844 5 78129898 79230005
801 5 78022476 84254208 845 5 78129898 79230318
802 5 78022476 84314930 846 5 78129898 79505592
803 5 78022476 84340523 847 5 78129898 79510072
804 5 78022476 84516340 848 5 78129898 79538012
805 5 78022476 84706916 849 5 78129898 79538048
806 5 78022476 84799488 850 5 78129898 79538367
807 5 78022476 84801081 851 5 78129898 79669824
808 5 78022476 84824103 852 5 78129898 79682242
809 5 78022476 84824203 853 5 78129898 79699261
810 5 78022476 84824816 854 5 78129898 79710673
811 5 78022476 84825422 855 5 78129898 79861902
812 5 78022476 84825763 856 5 78129898 79867710
813 5 78022476 84825942 857 5 78129898 79867868
814 5 78022476 84936441 858 5 78129898 79867873
815 5 78022476 84936493 859 5 78129898 79961961
816 5 78022476 84943705 860 5 78129898 80086268
817 5 78022476 169454950 861 5 78129898 80190673
818 5 78022476 181522829 862 5 78129898 80190777
819 5 78022476 204759879 863 5 78129898 80192546
820 5 78022476 209874191 864 5 78129898 80195395
821 5 78129898 78131652 865 5 78129898 80199923
822 5 78129898 78131784 866 5 78129898 80241911
823 5 78129898 78310499 867 5 78129898 80282785
824 5 78129898 78381593 868 5 78129898 80345337
825 5 78129898 78389884 869 5 78129898 80389787
826 5 78129898 78520683 870 5 78129898 80411639
827 5 78129898 78765635 871 5 78129898 80446855
828 5 78129898 78780292 872 5 78129898 80492790
829 5 78129898 78813114 873 5 78129898 80670554
830 5 78129898 78814710 874 5 78129898 80674679
831 5 78129898 78814976 875 5 78129898 80720509
832 5 78129898 78815306 876 5 78129898 80800856
833 5 78129898 78821393 877 5 78129898 80804587
834 5 78129898 78826528 878 5 78129898 80807409
835 5 78129898 78826538 879 5 78129898 80835734
836 5 78129898 78826612 880 5 78129898 80971764
- 74 036149
881 5 78129898 80972258 925 5 78129898 83094205
882 5 78129898 80974450 926 5 78129898 83146355
883 5 78129898 81047638 927 5 78129898 83280630
884 5 78129898 81082921 928 5 78129898 83281412
885 5 78129898 81157909 929 5 78129898 83400242
886 5 78129898 81265937 930 5 78129898 83405797
887 5 78129898 81265937 931 5 78129898 83437132
888 5 78129898 81267485 932 5 78129898 83522252
889 5 78129898 81267499 933 5 78129898 83560095
890 5 78129898 81274512 934 5 78129898 83560204
891 5 78129898 81763618 935 5 78129898 83572400
892 5 78129898 81797217 936 5 78129898 83607661
893 5 78129898 81800186 937 5 78129898 83745342
894 5 78129898 81806213 938 5 78129898 83861275
895 5 78129898 81854583 939 5 78129898 83861633
896 5 78129898 81859374 940 5 78129898 83865653
897 5 78129898 81861368 941 5 78129898 83865914
898 5 78129898 81863686 942 5 78129898 83865920
899 5 78129898 81916850 943 5 78129898 83868010
900 5 78129898 81954891 944 5 78129898 84019752
901 5 78129898 81985250 945 5 78129898 84065912
902 5 78129898 82083752 946 5 78129898 84086632
903 5 78129898 82101253 947 5 78129898 84089603
904 5 78129898 82143124 948 5 78129898 84104814
905 5 78129898 82236318 949 5 78129898 84105175
906 5 78129898 82325587 950 5 78129898 84251635
907 5 78129898 82427210 951 5 78129898 84252180
908 5 78129898 82431853 952 5 78129898 84253030
909 5 78129898 82446714 953 5 78129898 84254208
910 5 78129898 82446794 954 5 78129898 84314930
911 5 78129898 82551111 955 5 78129898 84340523
912 5 78129898 82552090 956 5 78129898 84516340
913 5 78129898 82555670 957 5 78129898 84706916
914 5 78129898 82555670 958 5 78129898 84799488
915 5 78129898 82556511 959 5 78129898 84801081
916 5 78129898 82559047 960 5 78129898 84824103
917 5 78129898 82561535 961 5 78129898 84824203
918 5 78129898 82610100 962 5 78129898 84824816
919 5 78129898 82676822 963 5 78129898 84825422
920 5 78129898 82676901 964 5 78129898 84825763
921 5 78129898 82883691 965 5 78129898 84825942
922 5 78129898 82954942 966 5 78129898 84843411
923 5 78129898 82971688 967 5 78129898 84936441
924 5 78129898 83023965 968 5 78129898 84936493
- 75 036149
969 5 78129898 84943705 1013 5 78255163 80190777
970 5 78129898 169454950 1014 5 78255163 80192546
971 5 78129898 181522829 1015 5 78255163 80195395
972 5 78129898 204759879 1016 5 78255163 80199923
973 5 78129898 209874191 1017 5 78255163 80241911
974 5 78255163 78310499 1018 5 78255163 80282785
975 5 78255163 78381593 1019 5 78255163 80345337
976 5 78255163 78389884 1020 5 78255163 80389787
977 5 78255163 78520683 1021 5 78255163 80411639
978 5 78255163 78765635 1022 5 78255163 80446855
979 5 78255163 78780292 1023 5 78255163 80492790
980 5 78255163 78813114 1024 5 78255163 80670554
981 5 78255163 78814710 1025 5 78255163 80674679
982 5 78255163 78814976 1026 5 78255163 80720509
983 5 78255163 78815306 1027 5 78255163 80800856
984 5 78255163 78821393 1028 5 78255163 80804587
985 5 78255163 78826528 1029 5 78255163 80807409
986 5 78255163 78826538 1030 5 78255163 80835734
987 5 78255163 78826612 1031 5 78255163 80971764
988 5 78255163 78918620 1032 5 78255163 80972258
989 5 78255163 78918850 1033 5 78255163 80974450
990 5 78255163 79056960 1034 5 78255163 81047638
991 5 78255163 79163631 1035 5 78255163 81082921
992 5 78255163 79176557 1036 5 78255163 81157909
993 5 78255163 79188028 1037 5 78255163 81265937
994 5 78255163 79201760 1038 5 78255163 81265937
995 5 78255163 79230005 1039 5 78255163 81267485
996 5 78255163 79230318 1040 5 78255163 81267499
997 5 78255163 79505592 1041 5 78255163 81274512
998 5 78255163 79510072 1042 5 78255163 81763618
999 5 78255163 79538012 1043 5 78255163 81797217
1000 5 78255163 79538048 1044 5 78255163 81800186
1001 5 78255163 79538367 1045 5 78255163 81806213
1002 5 78255163 79669824 1046 5 78255163 81854583
1003 5 78255163 79682242 1047 5 78255163 81859374
1004 5 78255163 79699261 1048 5 78255163 81861368
1005 5 78255163 79710673 1049 5 78255163 81863686
1006 5 78255163 79861902 1050 5 78255163 81916850
1007 5 78255163 79867710 1051 5 78255163 81954891
1008 5 78255163 79867868 1052 5 78255163 81985250
1009 5 78255163 79867873 1053 5 78255163 82083752
1010 5 78255163 79961961 1054 5 78255163 82101253
1011 5 78255163 80086268 1055 5 78255163 82143124
1012 5 78255163 80190673 1056 5 78255163 82236318
- 76 036149
1057 5 78255163 82325587 1101 5 78255163 84251635
1058 5 78255163 82427210 1102 5 78255163 84252180
1059 5 78255163 82431853 1103 5 78255163 84253030
1060 5 78255163 82446714 1104 5 78255163 84254208
1061 5 78255163 82446794 1105 5 78255163 84314930
1062 5 78255163 82551111 1106 5 78255163 84340523
1063 5 78255163 82552090 1107 5 78255163 84516340
1064 5 78255163 82555641 1108 5 78255163 84706916
1065 5 78255163 82555670 1109 5 78255163 84799488
1066 5 78255163 82556511 1110 5 78255163 84801081
1067 5 78255163 82559047 1111 5 78255163 84824103
1068 5 78255163 82561535 1112 5 78255163 84824203
1069 5 78255163 82610100 1113 5 78255163 84824816
1070 5 78255163 82676822 1114 5 78255163 84825422
1071 5 78255163 82676901 1115 5 78255163 84825763
1072 5 78255163 82883691 1116 5 78255163 84825942
1073 5 78255163 82954942 1117 5 78255163 84843411
1074 5 78255163 82971688 1118 5 78255163 84936441
1075 5 78255163 83023965 1119 5 78255163 84936493
1076 5 78255163 83094205 1120 5 78255163 84943705
1077 5 78255163 83146355 1121 5 78255163 169454950
1078 5 78255163 83280630 1122 5 78255163 181522829
1079 5 78255163 83281412 1123 5 78255163 204759879
1080 5 78255163 83400242 1124 5 78255163 209874191
1081 5 78255163 83405797 1125 5 78380304 78381593
1082 5 78255163 83437132 1126 5 78380304 78389884
1083 5 78255163 83522252 1127 5 78380304 78520683
1084 5 78255163 83560095 1128 5 78380304 78765635
1085 5 78255163 83560204 1129 5 78380304 78780292
1086 5 78255163 83572400 ИЗО 5 78380304 78813114
1087 5 78255163 83607661 1131 5 78380304 78814710
1088 5 78255163 83745342 1132 5 78380304 78814976
1089 5 78255163 83861275 1133 5 78380304 78815306
1090 5 78255163 83861633 1134 5 78380304 78821393
1091 5 78255163 83865653 1135 5 78380304 78826528
1092 5 78255163 83865914 1136 5 78380304 78826538
1093 5 78255163 83865920 1137 5 78380304 78826612
1094 5 78255163 83868010 1138 5 78380304 78918620
1095 5 78255163 84019752 1139 5 78380304 78918850
1096 5 78255163 84065912 1140 5 78380304 79056960
1097 5 78255163 84086632 1141 5 78380304 79163631
1098 5 78255163 84089603 1142 5 78380304 79176557
1099 5 78255163 84104814 1143 5 78380304 79188028
1100 5 78255163 84105175 1144 5 78380304 79201760
- 77 036149
1145 5 78380304 79230005 1189 5 78380304 81265937
1146 5 78380304 79230318 1190 5 78380304 81267485
1147 5 78380304 79505592 1191 5 78380304 81267499
1148 5 78380304 79510072 1192 5 78380304 81274512
1149 5 78380304 79538012 1193 5 78380304 81763618
1150 5 78380304 79538048 1194 5 78380304 81797217
1151 5 78380304 79538048 1195 5 78380304 81800186
1152 5 78380304 79538367 1196 5 78380304 81806213
1153 5 78380304 79669824 1197 5 78380304 81854583
1154 5 78380304 79682242 1198 5 78380304 81859374
1155 5 78380304 79699261 1199 5 78380304 81861368
1156 5 78380304 79710673 1200 5 78380304 81863686
1157 5 78380304 79861902 1201 5 78380304 81916850
1158 5 78380304 79867710 1202 5 78380304 81954891
1159 5 78380304 79867868 1203 5 78380304 81985250
1160 5 78380304 79867873 1204 5 78380304 82083752
1161 5 78380304 79961961 1205 5 78380304 82101253
1162 5 78380304 80086268 1206 5 78380304 82143124
1163 5 78380304 80190673 1207 5 78380304 82236318
1164 5 78380304 80190777 1208 5 78380304 82325587
1165 5 78380304 80192546 1209 5 78380304 82427210
1166 5 78380304 80195395 1210 5 78380304 82431853
1167 5 78380304 80199923 1211 5 78380304 82446714
1168 5 78380304 80241911 1212 5 78380304 82446794
1169 5 78380304 80282785 1213 5 78380304 82551111
1170 5 78380304 80345337 1214 5 78380304 82552090
1171 5 78380304 80389787 1215 5 78380304 82555641
1172 5 78380304 80411639 1216 5 78380304 82555670
1173 5 78380304 80446855 1217 5 78380304 82556511
1174 5 78380304 80492790 1218 5 78380304 82559047
1175 5 78380304 80670554 1219 5 78380304 82561535
1176 5 78380304 80674679 1220 5 78380304 82610100
1177 5 78380304 80720509 1221 5 78380304 82676822
1178 5 78380304 80800856 1222 5 78380304 82676901
1179 5 78380304 80804587 1223 5 78380304 82883691
1180 5 78380304 80807409 1224 5 78380304 82954942
1181 5 78380304 80835734 1225 5 78380304 82971688
1182 5 78380304 80971764 1226 5 78380304 83023965
1183 5 78380304 80972258 1227 5 78380304 83094205
1184 5 78380304 80974450 1228 5 78380304 83146355
1185 5 78380304 81047638 1229 5 78380304 83280630
1186 5 78380304 81082921 1230 5 78380304 83281412
1187 5 78380304 81157909 1231 5 78380304 83400242
1188 5 78380304 81265937 1232 5 78380304 83405797
- 78 036149
1233 5 78380304 83437132 1277 5 78381834 78520683
1234 5 78380304 83522252 1278 5 78381834 78765635
1235 5 78380304 83560095 1279 5 78381834 78780292
1236 5 78380304 83560204 1280 5 78381834 78813114
1237 5 78380304 83572400 1281 5 78381834 78814710
1238 5 78380304 83607661 1282 5 78381834 78814976
1239 5 78380304 83745342 1283 5 78381834 78815306
1240 5 78380304 83861275 1284 5 78381834 78821393
1241 5 78380304 83861633 1285 5 78381834 78826528
1242 5 78380304 83865653 1286 5 78381834 78826538
1243 5 78380304 83865914 1287 5 78381834 78826612
1244 5 78380304 83865920 1288 5 78381834 78918620
1245 5 78380304 83868010 1289 5 78381834 78918850
1246 5 78380304 84019752 1290 5 78381834 79056960
1247 5 78380304 84065912 1291 5 78381834 79163631
1248 5 78380304 84086632 1292 5 78381834 79176557
1249 5 78380304 84089603 1293 5 78381834 79188028
1250 5 78380304 84104814 1294 5 78381834 79201760
1251 5 78380304 84105175 1295 5 78381834 79230005
1252 5 78380304 84251635 1296 5 78381834 79230318
1253 5 78380304 84252180 1297 5 78381834 79505592
1254 5 78380304 84253030 1298 5 78381834 79510072
1255 5 78380304 84254208 1299 5 78381834 79538012
1256 5 78380304 84314930 1300 5 78381834 79538048
1257 5 78380304 84340523 1301 5 78381834 79538367
1258 5 78380304 84516340 1302 5 78381834 79669824
1259 5 78380304 84706916 1303 5 78381834 79682242
1260 5 78380304 84799488 1304 5 78381834 79699261
1261 5 78380304 84801081 1305 5 78381834 79710673
1262 5 78380304 84824103 1306 5 78381834 79861902
1263 5 78380304 84824203 1307 5 78381834 79867710
1264 5 78380304 84824816 1308 5 78381834 79867868
1265 5 78380304 84825422 1309 5 78381834 79867873
1266 5 78380304 84825763 1310 5 78381834 79961961
1267 5 78380304 84825942 1311 5 78381834 80086268
1268 5 78380304 84843411 1312 5 78381834 80190673
1269 5 78380304 84936441 1313 5 78381834 80190777
1270 5 78380304 84936493 1314 5 78381834 80192546
1271 5 78380304 84943705 1315 5 78381834 80195395
1272 5 78380304 169454950 1316 5 78381834 80199923
1273 5 78380304 181522829 1317 5 78381834 80241911
1274 5 78380304 204759879 1318 5 78381834 80282785
1275 5 78380304 209874191 1319 5 78381834 80345337
1276 5 78381834 78389884 1320 5 78381834 80389787
- 79 036149
1321 5 78381834 80411639 1365 5 78381834 82555670
1322 5 78381834 80446855 1366 5 78381834 82556511
1323 5 78381834 80492790 1367 5 78381834 82559047
1324 5 78381834 80670554 1368 5 78381834 82561535
1325 5 78381834 80674679 1369 5 78381834 82610100
1326 5 78381834 80720509 1370 5 78381834 82676822
1327 5 78381834 80800856 1371 5 78381834 82676901
1328 5 78381834 80804587 1372 5 78381834 82883691
1329 5 78381834 80807409 1373 5 78381834 82954942
1330 5 78381834 80835734 1374 5 78381834 82971688
1331 5 78381834 80971764 1375 5 78381834 83023965
1332 5 78381834 80972258 1376 5 78381834 83094205
1333 5 78381834 80974450 1377 5 78381834 83146355
1334 5 78381834 81047638 1378 5 78381834 83280630
1335 5 78381834 81082921 1379 5 78381834 83281412
1336 5 78381834 81157909 1380 5 78381834 83400242
1337 5 78381834 81265937 1381 5 78381834 83405797
1338 5 78381834 81265937 1382 5 78381834 83437132
1339 5 78381834 81267485 1383 5 78381834 83522252
1340 5 78381834 81267499 1384 5 78381834 83560095
1341 5 78381834 81274512 1385 5 78381834 83560204
1342 5 78381834 81763618 1386 5 78381834 83572400
1343 5 78381834 81797217 1387 5 78381834 83607661
1344 5 78381834 81800186 1388 5 78381834 83745342
1345 5 78381834 81806213 1389 5 78381834 83861275
1346 5 78381834 81854583 1390 5 78381834 83861633
1347 5 78381834 81859374 1391 5 78381834 83865653
1348 5 78381834 81861368 1392 5 78381834 83865914
1349 5 78381834 81863686 1393 5 78381834 83865920
1350 5 78381834 81916850 1394 5 78381834 83868010
1351 5 78381834 81954891 1395 5 78381834 84019752
1352 5 78381834 81985250 1396 5 78381834 84065912
1353 5 78381834 82083752 1397 5 78381834 84086632
1354 5 78381834 82101253 1398 5 78381834 84089603
1355 5 78381834 82143124 1399 5 78381834 84104814
1356 5 78381834 82236318 1400 5 78381834 84105175
1357 5 78381834 82325587 1401 5 78381834 84251635
1358 5 78381834 82427210 1402 5 78381834 84252180
1359 5 78381834 82431853 1403 5 78381834 84253030
1360 5 78381834 82446714 1404 5 78381834 84254208
1361 5 78381834 82446794 1405 5 78381834 84314930
1362 5 78381834 82551111 1406 5 78381834 84340523
1363 5 78381834 82552090 1407 5 78381834 84516340
1364 5 78381834 82555641 1408 5 78381834 84706916
- 80 036149
1409 5 78381834 84799488 1453 5 78519893 79710673
1410 5 78381834 84801081 1454 5 78519893 79861902
1411 5 78381834 84824103 1455 5 78519893 79867710
1412 5 78381834 84824203 1456 5 78519893 79867868
1413 5 78381834 84824816 1457 5 78519893 79867873
1414 5 78381834 84825422 1458 5 78519893 79961961
1415 5 78381834 84825763 1459 5 78519893 80086268
1416 5 78381834 84825942 1460 5 78519893 80190673
1417 5 78381834 84843411 1461 5 78519893 80190777
1418 5 78381834 84936441 1462 5 78519893 80192546
1419 5 78381834 84936493 1463 5 78519893 80195395
1420 5 78381834 84943705 1464 5 78519893 80199923
1421 5 78381834 169454950 1465 5 78519893 80241911
1422 5 78381834 181522829 1466 5 78519893 80282785
1423 5 78381834 204759879 1467 5 78519893 80345337
1424 5 78381834 209874191 1468 5 78519893 80389787
1425 5 78519893 78520683 1469 5 78519893 80411639
1426 5 78519893 78765635 1470 5 78519893 80446855
1427 5 78519893 78780292 1471 5 78519893 80492790
1428 5 78519893 78813114 1472 5 78519893 80670554
1429 5 78519893 78814710 1473 5 78519893 80674679
1430 5 78519893 78814976 1474 5 78519893 80720509
1431 5 78519893 78815306 1475 5 78519893 80800856
1432 5 78519893 78821393 1476 5 78519893 80804587
1433 5 78519893 78826528 1477 5 78519893 80807409
1434 5 78519893 78826538 1478 5 78519893 80835734
1435 5 78519893 78826612 1479 5 78519893 80971764
1436 5 78519893 78918620 1480 5 78519893 80972258
1437 5 78519893 78918850 1481 5 78519893 80974450
1438 5 78519893 79056960 1482 5 78519893 81047638
1439 5 78519893 79163631 1483 5 78519893 81082921
1440 5 78519893 79176557 1484 5 78519893 81157909
1441 5 78519893 79188028 1485 5 78519893 81265937
1442 5 78519893 79201760 1486 5 78519893 81265937
1443 5 78519893 79230005 1487 5 78519893 81267485
1444 5 78519893 79230318 1488 5 78519893 81267499
1445 5 78519893 79505592 1489 5 78519893 81274512
1446 5 78519893 79510072 1490 5 78519893 81763618
1447 5 78519893 79538012 1491 5 78519893 81797217
1448 5 78519893 79538048 1492 5 78519893 81800186
1449 5 78519893 79538367 1493 5 78519893 81806213
1450 5 78519893 79669824 1494 5 78519893 81854583
1451 5 78519893 79682242 1495 5 78519893 81859374
1452 5 78519893 79699261 1496 5 78519893 81861368
- 81 036149
1497 5 78519893 81863686 1541 5 78519893 83865920
1498 5 78519893 81916850 1542 5 78519893 83868010
1499 5 78519893 81954891 1543 5 78519893 84019752
1500 5 78519893 81985250 1544 5 78519893 84065912
1501 5 78519893 82083752 1545 5 78519893 84086632
1502 5 78519893 82101253 1546 5 78519893 84089603
1503 5 78519893 82143124 1547 5 78519893 84104814
1504 5 78519893 82236318 1548 5 78519893 84105175
1505 5 78519893 82325587 1549 5 78519893 84251635
1506 5 78519893 82427210 1550 5 78519893 84252180
1507 5 78519893 82431853 1551 5 78519893 84253030
1508 5 78519893 82446714 1552 5 78519893 84254208
1509 5 78519893 82446794 1553 5 78519893 84314930
1510 5 78519893 82551111 1554 5 78519893 84340523
1511 5 78519893 82552090 1555 5 78519893 84516340
1512 5 78519893 82555641 1556 5 78519893 84706916
1513 5 78519893 82555670 1557 5 78519893 84799488
1514 5 78519893 82556511 1558 5 78519893 84801081
1515 5 78519893 82559047 1559 5 78519893 84824103
1516 5 78519893 82561535 1560 5 78519893 84824203
1517 5 78519893 82610100 1561 5 78519893 84824816
1518 5 78519893 82676822 1562 5 78519893 84825422
1519 5 78519893 82676901 1563 5 78519893 84825763
1520 5 78519893 82883691 1564 5 78519893 84825942
1521 5 78519893 82954942 1565 5 78519893 84843411
1522 5 78519893 82971688 1566 5 78519893 84936441
1523 5 78519893 83023965 1567 5 78519893 84936493
1524 5 78519893 83094205 1568 5 78519893 84943705
1525 5 78519893 83146355 1569 5 78519893 169454950
1526 5 78519893 83280630 1570 5 78519893 181522829
1527 5 78519893 83281412 1571 5 78519893 204759879
1528 5 78519893 83400242 1572 5 78519893 209874191
1529 5 78519893 83405797 1573 5 78758856 78765635
1530 5 78519893 83437132 1574 5 78758856 78780292
1531 5 78519893 83522252 1575 5 78758856 78813114
1532 5 78519893 83560095 1576 5 78758856 78814710
1533 5 78519893 83560204 1577 5 78758856 78814976
1534 5 78519893 83572400 1578 5 78758856 78815306
1535 5 78519893 83607661 1579 5 78758856 78821393
1536 5 78519893 83745342 1580 5 78758856 78826528
1537 5 78519893 83861275 1581 5 78758856 78826538
1538 5 78519893 83861633 1582 5 78758856 78826612
1539 5 78519893 83865653 1583 5 78758856 78918620
1540 5 78519893 83865914 1584 5 78758856 78918850
- 82 036149
1585 5 78758856 79056960 1629 5 78758856 81047638
1586 5 78758856 79163631 1630 5 78758856 81082921
1587 5 78758856 79176557 1631 5 78758856 81157909
1588 5 78758856 79188028 1632 5 78758856 81265937
1589 5 78758856 79201760 1633 5 78758856 81265937
1590 5 78758856 79230005 1634 5 78758856 81267485
1591 5 78758856 79230318 1635 5 78758856 81267499
1592 5 78758856 79505592 1636 5 78758856 81274512
1593 5 78758856 79510072 1637 5 78758856 81763618
1594 5 78758856 79538012 1638 5 78758856 81797217
1595 5 78758856 79538048 1639 5 78758856 81800186
1596 5 78758856 79538367 1640 5 78758856 81806213
1597 5 78758856 79669824 1641 5 78758856 81854583
1598 5 78758856 79682242 1642 5 78758856 81859374
1599 5 78758856 79699261 1643 5 78758856 81861368
1600 5 78758856 79710673 1644 5 78758856 81863686
1601 5 78758856 79861902 1645 5 78758856 81916850
1602 5 78758856 79867710 1646 5 78758856 81954891
1603 5 78758856 79867868 1647 5 78758856 81985250
1604 5 78758856 79867873 1648 5 78758856 82083752
1605 5 78758856 79961961 1649 5 78758856 82101253
1606 5 78758856 80086268 1650 5 78758856 82143124
1607 5 78758856 80190673 1651 5 78758856 82236318
1608 5 78758856 80190777 1652 5 78758856 82325587
1609 5 78758856 80192546 1653 5 78758856 82427210
1610 5 78758856 80195395 1654 5 78758856 82431853
1611 5 78758856 80199923 1655 5 78758856 82446714
1612 5 78758856 80241911 1656 5 78758856 82446794
1613 5 78758856 80282785 1657 5 78758856 82551111
1614 5 78758856 80345337 1658 5 78758856 82552090
1615 5 78758856 80389787 1659 5 78758856 82555641
1616 5 78758856 80411639 1660 5 78758856 82555670
1617 5 78758856 80446855 1661 5 78758856 82556511
1618 5 78758856 80492790 1662 5 78758856 82559047
1619 5 78758856 80670554 1663 5 78758856 82561535
1620 5 78758856 80674679 1664 5 78758856 82610100
1621 5 78758856 80720509 1665 5 78758856 82676822
1622 5 78758856 80800856 1666 5 78758856 82676901
1623 5 78758856 80804587 1667 5 78758856 82883691
1624 5 78758856 80807409 1668 5 78758856 82954942
1625 5 78758856 80835734 1669 5 78758856 82971688
1626 5 78758856 80971764 1670 5 78758856 83023965
1627 5 78758856 80972258 1671 5 78758856 83094205
1628 5 78758856 80974450 1672 5 78758856 83146355
- 83 036149
1673 5 78758856 83280630 1717 5 78758856 181522829
1674 5 78758856 83281412 1718 5 78758856 204759879
1675 5 78758856 83400242 1719 5 78758856 209874191
1676 5 78758856 83405797 1720 5 78772058 78780292
1677 5 78758856 83437132 1721 5 78772058 78813114
1678 5 78758856 83522252 1722 5 78772058 78814710
1679 5 78758856 83560095 1723 5 78772058 78814976
1680 5 78758856 83560204 1724 5 78772058 78815306
1681 5 78758856 83572400 1725 5 78772058 78821393
1682 5 78758856 83607661 1726 5 78772058 78826528
1683 5 78758856 83745342 1727 5 78772058 78826538
1684 5 78758856 83861275 1728 5 78772058 78826612
1685 5 78758856 83861633 1729 5 78772058 78918620
1686 5 78758856 83865653 1730 5 78772058 78918850
1687 5 78758856 83865914 1731 5 78772058 79056960
1688 5 78758856 83865920 1732 5 78772058 79163631
1689 5 78758856 83868010 1733 5 78772058 79176557
1690 5 78758856 84019752 1734 5 78772058 79188028
1691 5 78758856 84065912 1735 5 78772058 79201760
1692 5 78758856 84086632 1736 5 78772058 79230005
1693 5 78758856 84089603 1737 5 78772058 79230318
1694 5 78758856 84104814 1738 5 78772058 79505592
1695 5 78758856 84105175 1739 5 78772058 79510072
1696 5 78758856 84251635 1740 5 78772058 79538012
1697 5 78758856 84252180 1741 5 78772058 79538048
1698 5 78758856 84253030 1742 5 78772058 79538367
1699 5 78758856 84254208 1743 5 78772058 79669824
1700 5 78758856 84314930 1744 5 78772058 79682242
1701 5 78758856 84340523 1745 5 78772058 79699261
1702 5 78758856 84516340 1746 5 78772058 79710673
1703 5 78758856 84706916 1747 5 78772058 79861902
1704 5 78758856 84799488 1748 5 78772058 79867710
1705 5 78758856 84801081 1749 5 78772058 79867868
1706 5 78758856 84824103 1750 5 78772058 79867873
1707 5 78758856 84824203 1751 5 78772058 79961961
1708 5 78758856 84824816 1752 5 78772058 80086268
1709 5 78758856 84825422 1753 5 78772058 80190673
1710 5 78758856 84825763 1754 5 78772058 80190777
1711 5 78758856 84825942 1755 5 78772058 80192546
1712 5 78758856 84843411 1756 5 78772058 80195395
1713 5 78758856 84936441 1757 5 78772058 80199923
1714 5 78758856 84936493 1758 5 78772058 80241911
1715 5 78758856 84943705 1759 5 78772058 80282785
1716 5 78758856 169454950 1760 5 78772058 80345337
- 84 036149
1761 5 78772058 80389787 1805 5 78772058 82555641
1762 5 78772058 80411639 1806 5 78772058 82555670
1763 5 78772058 80446855 1807 5 78772058 82556511
1764 5 78772058 80492790 1808 5 78772058 82559047
1765 5 78772058 80670554 1809 5 78772058 82561535
1766 5 78772058 80674679 1810 5 78772058 82610100
1767 5 78772058 80720509 1811 5 78772058 82676822
1768 5 78772058 80800856 1812 5 78772058 82676901
1769 5 78772058 80804587 1813 5 78772058 82883691
1770 5 78772058 80807409 1814 5 78772058 82954942
1771 5 78772058 80835734 1815 5 78772058 82971688
1772 5 78772058 80971764 1816 5 78772058 83023965
1773 5 78772058 80972258 1817 5 78772058 83094205
1774 5 78772058 80974450 1818 5 78772058 83146355
1775 5 78772058 81047638 1819 5 78772058 83280630
1776 5 78772058 81082921 1820 5 78772058 83281412
1777 5 78772058 81157909 1821 5 78772058 83400242
1778 5 78772058 81265937 1822 5 78772058 83405797
1779 5 78772058 81265937 1823 5 78772058 83437132
1780 5 78772058 81267485 1824 5 78772058 83522252
1781 5 78772058 81267499 1825 5 78772058 83560095
1782 5 78772058 81274512 1826 5 78772058 83560204
1783 5 78772058 81763618 1827 5 78772058 83572400
1784 5 78772058 81797217 1828 5 78772058 83607661
1785 5 78772058 81800186 1829 5 78772058 83745342
1786 5 78772058 81806213 1830 5 78772058 83861275
1787 5 78772058 81854583 1831 5 78772058 83861633
1788 5 78772058 81859374 1832 5 78772058 83865653
1789 5 78772058 81861368 1833 5 78772058 83865914
1790 5 78772058 81863686 1834 5 78772058 83865920
1791 5 78772058 81916850 1835 5 78772058 83868010
1792 5 78772058 81954891 1836 5 78772058 84019752
1793 5 78772058 81985250 1837 5 78772058 84065912
1794 5 78772058 82083752 1838 5 78772058 84086632
1795 5 78772058 82101253 1839 5 78772058 84089603
1796 5 78772058 82143124 1840 5 78772058 84104814
1797 5 78772058 82236318 1841 5 78772058 84105175
1798 5 78772058 82325587 1842 5 78772058 84251635
1799 5 78772058 82427210 1843 5 78772058 84252180
1800 5 78772058 82431853 1844 5 78772058 84253030
1801 5 78772058 82446714 1845 5 78772058 84254208
1802 5 78772058 82446794 1846 5 78772058 84314930
1803 5 78772058 82551111 1847 5 78772058 84340523
1804 5 78772058 82552090 1848 5 78772058 84516340
- 85 036149
1849 5 78772058 84706916 1893 5 78804756 79867710
1850 5 78772058 84799488 1894 5 78804756 79867868
1851 5 78772058 84801081 1895 5 78804756 79867873
1852 5 78772058 84824103 1896 5 78804756 79961961
1853 5 78772058 84824203 1897 5 78804756 80086268
1854 5 78772058 84824816 1898 5 78804756 80190673
1855 5 78772058 84825422 1899 5 78804756 80190777
1856 5 78772058 84825763 1900 5 78804756 80192546
1857 5 78772058 84825942 1901 5 78804756 80195395
1858 5 78772058 84843411 1902 5 78804756 80199923
1859 5 78772058 84936441 1903 5 78804756 80241911
1860 5 78772058 84936493 1904 5 78804756 80282785
1861 5 78772058 84943705 1905 5 78804756 80345337
1862 5 78772058 169454950 1906 5 78804756 80389787
1863 5 78772058 181522829 1907 5 78804756 80411639
1864 5 78772058 204759879 1908 5 78804756 80446855
1865 5 78772058 209874191 1909 5 78804756 80492790
1866 5 78804756 78813114 1910 5 78804756 80670554
1867 5 78804756 78814710 1911 5 78804756 80674679
1868 5 78804756 78814976 1912 5 78804756 80720509
1869 5 78804756 78815306 1913 5 78804756 80800856
1870 5 78804756 78821393 1914 5 78804756 80804587
1871 5 78804756 78826528 1915 5 78804756 80807409
1872 5 78804756 78826538 1916 5 78804756 80835734
1873 5 78804756 78826612 1917 5 78804756 80971764
1874 5 78804756 78918620 1918 5 78804756 80972258
1875 5 78804756 78918850 1919 5 78804756 80974450
1876 5 78804756 79056960 1920 5 78804756 81047638
1877 5 78804756 79163631 1921 5 78804756 81082921
1878 5 78804756 79176557 1922 5 78804756 81157909
1879 5 78804756 79188028 1923 5 78804756 81265937
1880 5 78804756 79201760 1924 5 78804756 81265937
1881 5 78804756 79230005 1925 5 78804756 81267485
1882 5 78804756 79230318 1926 5 78804756 81267499
1883 5 78804756 79505592 1927 5 78804756 81274512
1884 5 78804756 79510072 1928 5 78804756 81763618
1885 5 78804756 79538012 1929 5 78804756 81797217
1886 5 78804756 79538048 1930 5 78804756 81800186
1887 5 78804756 79538367 1931 5 78804756 81806213
1888 5 78804756 79669824 1932 5 78804756 81854583
1889 5 78804756 79682242 1933 5 78804756 81859374
1890 5 78804756 79699261 1934 5 78804756 81861368
1891 5 78804756 79710673 1935 5 78804756 81863686
1892 5 78804756 79861902 1936 5 78804756 81916850
- 86 036149
1937 5 78804756 81954891 1981 5 78804756 84019752
1938 5 78804756 81985250 1982 5 78804756 84065912
1939 5 78804756 82083752 1983 5 78804756 84086632
1940 5 78804756 82101253 1984 5 78804756 84089603
1941 5 78804756 82143124 1985 5 78804756 84104814
1942 5 78804756 82236318 1986 5 78804756 84105175
1943 5 78804756 82325587 1987 5 78804756 84251635
1944 5 78804756 82427210 1988 5 78804756 84252180
1945 5 78804756 82431853 1989 5 78804756 84253030
1946 5 78804756 82446714 1990 5 78804756 84254208
1947 5 78804756 82446794 1991 5 78804756 84314930
1948 5 78804756 82551111 1992 5 78804756 84340523
1949 5 78804756 82552090 1993 5 78804756 84516340
1950 5 78804756 82555641 1994 5 78804756 84706916
1951 5 78804756 82555670 1995 5 78804756 84799488
1952 5 78804756 82556511 1996 5 78804756 84801081
1953 5 78804756 82559047 1997 5 78804756 84824103
1954 5 78804756 82561535 1998 5 78804756 84824203
1955 5 78804756 82610100 1999 5 78804756 84824816
1956 5 78804756 82676822 2000 5 78804756 84825422
1957 5 78804756 82676901 2001 5 78804756 84825763
1958 5 78804756 82883691 2002 5 78804756 84825942
1959 5 78804756 82954942 2003 5 78804756 84843411
1960 5 78804756 82971688 2004 5 78804756 84936441
1961 5 78804756 83023965 2005 5 78804756 84936493
1962 5 78804756 83094205 2006 5 78804756 84943705
1963 5 78804756 83146355 2007 5 78804756 169454950
1964 5 78804756 83280630 2008 5 78804756 181522829
1965 5 78804756 83281412 2009 5 78804756 204759879
1966 5 78804756 83400242 2010 5 78804756 209874191
1967 5 78804756 83405797 2011 5 78805059 78813114
1968 5 78804756 83437132 2012 5 78805059 78814710
1969 5 78804756 83522252 2013 5 78805059 78814976
1970 5 78804756 83560095 2014 5 78805059 78815306
1971 5 78804756 83560204 2015 5 78805059 78821393
1972 5 78804756 83572400 2016 5 78805059 78826528
1973 5 78804756 83607661 2017 5 78805059 78826538
1974 5 78804756 83745342 2018 5 78805059 78826612
1975 5 78804756 83861275 2019 5 78805059 78918620
1976 5 78804756 83861633 2020 5 78805059 78918850
1977 5 78804756 83865653 2021 5 78805059 79056960
1978 5 78804756 83865914 2022 5 78805059 79163631
1979 5 78804756 83865920 2023 5 78805059 79176557
1980 5 78804756 83868010 2024 5 78805059 79188028
- 87 036149
2025 5 78805059 79201760 2069 5 78805059 81265937
2026 5 78805059 79230005 2070 5 78805059 81267485
2027 5 78805059 79230318 2071 5 78805059 81267499
2028 5 78805059 79505592 2072 5 78805059 81274512
2029 5 78805059 79510072 2073 5 78805059 81763618
2030 5 78805059 79538012 2074 5 78805059 81797217
2031 5 78805059 79538048 2075 5 78805059 81800186
2032 5 78805059 79538367 2076 5 78805059 81806213
2033 5 78805059 79669824 2077 5 78805059 81854583
2034 5 78805059 79682242 2078 5 78805059 81859374
2035 5 78805059 79699261 2079 5 78805059 81861368
2036 5 78805059 79710673 2080 5 78805059 81863686
2037 5 78805059 79861902 2081 5 78805059 81916850
2038 5 78805059 79867710 2082 5 78805059 81954891
2039 5 78805059 79867868 2083 5 78805059 81985250
2040 5 78805059 79867873 2084 5 78805059 82083752
2041 5 78805059 79961961 2085 5 78805059 82101253
2042 5 78805059 80086268 2086 5 78805059 82143124
2043 5 78805059 80190673 2087 5 78805059 82236318
2044 5 78805059 80190777 2088 5 78805059 82325587
2045 5 78805059 80192546 2089 5 78805059 82427210
2046 5 78805059 80195395 2090 5 78805059 82431853
2047 5 78805059 80199923 2091 5 78805059 82446714
2048 5 78805059 80241911 2092 5 78805059 82446794
2049 5 78805059 80282785 2093 5 78805059 82551111
2050 5 78805059 80345337 2094 5 78805059 82552090
2051 5 78805059 80389787 2095 5 78805059 82555641
2052 5 78805059 80411639 2096 5 78805059 82555670
2053 5 78805059 80446855 2097 5 78805059 82556511
2054 5 78805059 80492790 2098 5 78805059 82559047
2055 5 78805059 80670554 2099 5 78805059 82561535
2056 5 78805059 80674679 2100 5 78805059 82610100
2057 5 78805059 80720509 2101 5 78805059 82676822
2058 5 78805059 80800856 2102 5 78805059 82676901
2059 5 78805059 80804587 2103 5 78805059 82883691
2060 5 78805059 80807409 2104 5 78805059 82954942
2061 5 78805059 80835734 2105 5 78805059 82971688
2062 5 78805059 80971764 2106 5 78805059 83023965
2063 5 78805059 80972258 2107 5 78805059 83094205
2064 5 78805059 80974450 2108 5 78805059 83146355
2065 5 78805059 81047638 2109 5 78805059 83280630
2066 5 78805059 81082921 2110 5 78805059 83281412
2067 5 78805059 81157909 2111 5 78805059 83400242
2068 5 78805059 81265937 2112 5 78805059 83405797
- 88 036149
2113 5 78805059 83437132 2157 5 78814424 78814976
2114 5 78805059 83522252 2158 5 78814424 78815306
2115 5 78805059 83560095 2159 5 78814424 78821393
2116 5 78805059 83560204 2160 5 78814424 78826528
2117 5 78805059 83572400 2161 5 78814424 78826538
2118 5 78805059 83607661 2162 5 78814424 78826612
2119 5 78805059 83745342 2163 5 78814424 78918620
2120 5 78805059 83861275 2164 5 78814424 78918850
2121 5 78805059 83861633 2165 5 78814424 79056960
2122 5 78805059 83865653 2166 5 78814424 79163631
2123 5 78805059 83865914 2167 5 78814424 79176557
2124 5 78805059 83865920 2168 5 78814424 79188028
2125 5 78805059 83868010 2169 5 78814424 79201760
2126 5 78805059 84019752 2170 5 78814424 79230005
2127 5 78805059 84065912 2171 5 78814424 79230318
2128 5 78805059 84086632 2172 5 78814424 79505592
2129 5 78805059 84089603 2173 5 78814424 79510072
2130 5 78805059 84104814 2174 5 78814424 79538012
2131 5 78805059 84105175 2175 5 78814424 79538048
2132 5 78805059 84251635 2176 5 78814424 79538367
2133 5 78805059 84252180 2177 5 78814424 79669824
2134 5 78805059 84253030 2178 5 78814424 79682242
2135 5 78805059 84254208 2179 5 78814424 79699261
2136 5 78805059 84314930 2180 5 78814424 79710673
2137 5 78805059 84340523 2181 5 78814424 79861902
2138 5 78805059 84516340 2182 5 78814424 79867710
2139 5 78805059 84706916 2183 5 78814424 79867868
2140 5 78805059 84799488 2184 5 78814424 79867873
2141 5 78805059 84801081 2185 5 78814424 79961961
2142 5 78805059 84824103 2186 5 78814424 80086268
2143 5 78805059 84824203 2187 5 78814424 80190673
2144 5 78805059 84824816 2188 5 78814424 80190777
2145 5 78805059 84825422 2189 5 78814424 80192546
2146 5 78805059 84825763 2190 5 78814424 80195395
2147 5 78805059 84825942 2191 5 78814424 80199923
2148 5 78805059 84843411 2192 5 78814424 80241911
2149 5 78805059 84936441 2193 5 78814424 80282785
2150 5 78805059 84936493 2194 5 78814424 80345337
2151 5 78805059 84943705 2195 5 78814424 80389787
2152 5 78805059 169454950 2196 5 78814424 80411639
2153 5 78805059 181522829 2197 5 78814424 80446855
2154 5 78805059 204759879 2198 5 78814424 80492790
2155 5 78805059 209874191 2199 5 78814424 80670554
2156 5 78814424 78814710 2200 5 78814424 80674679
- 89 036149
2201 5 78814424 80720509 2245 5 78814424 82676822
2202 5 78814424 80800856 2246 5 78814424 82676901
2203 5 78814424 80804587 2247 5 78814424 82883691
2204 5 78814424 80807409 2248 5 78814424 82954942
2205 5 78814424 80835734 2249 5 78814424 82971688
2206 5 78814424 80971764 2250 5 78814424 83023965
2207 5 78814424 80972258 2251 5 78814424 83094205
2208 5 78814424 80974450 2252 5 78814424 83146355
2209 5 78814424 81047638 2253 5 78814424 83280630
2210 5 78814424 81082921 2254 5 78814424 83281412
2211 5 78814424 81157909 2255 5 78814424 83400242
2212 5 78814424 81265937 2256 5 78814424 83405797
2213 5 78814424 81265937 2257 5 78814424 83437132
2214 5 78814424 81267485 2258 5 78814424 83522252
2215 5 78814424 81267499 2259 5 78814424 83560095
2216 5 78814424 81274512 2260 5 78814424 83560204
2217 5 78814424 81763618 2261 5 78814424 83572400
2218 5 78814424 81797217 2262 5 78814424 83607661
2219 5 78814424 81800186 2263 5 78814424 83745342
2220 5 78814424 81806213 2264 5 78814424 83861275
2221 5 78814424 81854583 2265 5 78814424 83861633
2222 5 78814424 81859374 2266 5 78814424 83865653
2223 5 78814424 81861368 2267 5 78814424 83865914
2224 5 78814424 81863686 2268 5 78814424 83865920
2225 5 78814424 81916850 2269 5 78814424 83868010
2226 5 78814424 81954891 2270 5 78814424 84019752
2227 5 78814424 81985250 2271 5 78814424 84065912
2228 5 78814424 82083752 2272 5 78814424 84086632
2229 5 78814424 82101253 2273 5 78814424 84089603
2230 5 78814424 82143124 2274 5 78814424 84104814
2231 5 78814424 82236318 2275 5 78814424 84105175
2232 5 78814424 82325587 2276 5 78814424 84251635
2233 5 78814424 82427210 2277 5 78814424 84252180
2234 5 78814424 82431853 2278 5 78814424 84253030
2235 5 78814424 82446714 2279 5 78814424 84254208
2236 5 78814424 82446794 2280 5 78814424 84314930
2237 5 78814424 82551111 2281 5 78814424 84340523
2238 5 78814424 82552090 2282 5 78814424 84516340
2239 5 78814424 82555641 2283 5 78814424 84706916
2240 5 78814424 82555670 2284 5 78814424 84799488
2241 5 78814424 82556511 2285 5 78814424 84801081
2242 5 78814424 82559047 2286 5 78814424 84824103
2243 5 78814424 82561535 2287 5 78814424 84824203
2244 5 78814424 82610100 2288 5 78814424 84824816
- 90 036149
2289 5 78814424 84825422 2333 5 78819803 80241911
2290 5 78814424 84825763 2334 5 78819803 80282785
2291 5 78814424 84825942 2335 5 78819803 80345337
2292 5 78814424 84843411 2336 5 78819803 80389787
2293 5 78814424 84936441 2337 5 78819803 80411639
2294 5 78814424 84936493 2338 5 78819803 80446855
2295 5 78814424 84943705 2339 5 78819803 80492790
2296 5 78814424 169454950 2340 5 78819803 80670554
2297 5 78814424 181522829 2341 5 78819803 80674679
2298 5 78814424 204759879 2342 5 78819803 80720509
2299 5 78814424 209874191 2343 5 78819803 80800856
2300 5 78819803 78821393 2344 5 78819803 80804587
2301 5 78819803 78826528 2345 5 78819803 80807409
2302 5 78819803 78826538 2346 5 78819803 80835734
2303 5 78819803 78826612 2347 5 78819803 80971764
2304 5 78819803 78918620 2348 5 78819803 80972258
2305 5 78819803 78918850 2349 5 78819803 80974450
2306 5 78819803 79056960 2350 5 78819803 81047638
2307 5 78819803 79163631 2351 5 78819803 81082921
2308 5 78819803 79176557 2352 5 78819803 81157909
2309 5 78819803 79188028 2353 5 78819803 81265937
2310 5 78819803 79201760 2354 5 78819803 81265937
2311 5 78819803 79230005 2355 5 78819803 81267485
2312 5 78819803 79230318 2356 5 78819803 81267499
2313 5 78819803 79505592 2357 5 78819803 81274512
2314 5 78819803 79510072 2358 5 78819803 81763618
2315 5 78819803 79538012 2359 5 78819803 81797217
2316 5 78819803 79538048 2360 5 78819803 81800186
2317 5 78819803 79538367 2361 5 78819803 81806213
2318 5 78819803 79669824 2362 5 78819803 81854583
2319 5 78819803 79682242 2363 5 78819803 81859374
2320 5 78819803 79699261 2364 5 78819803 81861368
2321 5 78819803 79710673 2365 5 78819803 81863686
2322 5 78819803 79861902 2366 5 78819803 81916850
2323 5 78819803 79867710 2367 5 78819803 81954891
2324 5 78819803 79867868 2368 5 78819803 81985250
2325 5 78819803 79867873 2369 5 78819803 82083752
2326 5 78819803 79961961 2370 5 78819803 82101253
2327 5 78819803 80086268 2371 5 78819803 82143124
2328 5 78819803 80190673 2372 5 78819803 82236318
2329 5 78819803 80190777 2373 5 78819803 82325587
2330 5 78819803 80192546 2374 5 78819803 82427210
2331 5 78819803 80195395 2375 5 78819803 82431853
2332 5 78819803 80199923 2376 5 78819803 82446714
- 91 036149
2377 5 78819803 82446794 2421 5 78819803 84314930
2378 5 78819803 82551111 2422 5 78819803 84340523
2379 5 78819803 82552090 2423 5 78819803 84516340
2380 5 78819803 82555641 2424 5 78819803 84706916
2381 5 78819803 82555670 2425 5 78819803 84799488
2382 5 78819803 82556511 2426 5 78819803 84801081
2383 5 78819803 82559047 2427 5 78819803 84824103
2384 5 78819803 82561535 2428 5 78819803 84824203
2385 5 78819803 82610100 2429 5 78819803 84824816
2386 5 78819803 82676822 2430 5 78819803 84825422
2387 5 78819803 82676901 2431 5 78819803 84825763
2388 5 78819803 82883691 2432 5 78819803 84825942
2389 5 78819803 82954942 2433 5 78819803 84843411
2390 5 78819803 82971688 2434 5 78819803 84936441
2391 5 78819803 83023965 2435 5 78819803 84936493
2392 5 78819803 83094205 2436 5 78819803 84943705
2393 5 78819803 83146355 2437 5 78819803 169454950
2394 5 78819803 83280630 2438 5 78819803 181522829
2395 5 78819803 83281412 2439 5 78819803 204759879
2396 5 78819803 83400242 2440 5 78819803 209874191
2397 5 78819803 83405797 2441 5 78820119 78821393
2398 5 78819803 83437132 2442 5 78820119 78826528
2399 5 78819803 83522252 2443 5 78820119 78826538
2400 5 78819803 83560095 2444 5 78820119 78826612
2401 5 78819803 83560204 2445 5 78820119 78918620
2402 5 78819803 83572400 2446 5 78820119 78918850
2403 5 78819803 83607661 2447 5 78820119 79056960
2404 5 78819803 83745342 2448 5 78820119 79163631
2405 5 78819803 83861275 2449 5 78820119 79176557
2406 5 78819803 83861633 2450 5 78820119 79188028
2407 5 78819803 83865653 2451 5 78820119 79201760
2408 5 78819803 83865914 2452 5 78820119 79230005
2409 5 78819803 83865920 2453 5 78820119 79230318
2410 5 78819803 83868010 2454 5 78820119 79505592
2411 5 78819803 84019752 2455 5 78820119 79510072
2412 5 78819803 84065912 2456 5 78820119 79538012
2413 5 78819803 84086632 2457 5 78820119 79538048
2414 5 78819803 84089603 2458 5 78820119 79538367
2415 5 78819803 84104814 2459 5 78820119 79669824
2416 5 78819803 84105175 2460 5 78820119 79682242
2417 5 78819803 84251635 2461 5 78820119 79699261
2418 5 78819803 84252180 2462 5 78820119 79710673
2419 5 78819803 84253030 2463 5 78820119 79861902
2420 5 78819803 84254208 2464 5 78820119 79867710
- 92 036149
2465 5 78820119 79867868 2509 5 78820119 81985250
2466 5 78820119 79867873 2510 5 78820119 82083752
2467 5 78820119 79961961 2511 5 78820119 82101253
2468 5 78820119 80086268 2512 5 78820119 82143124
2469 5 78820119 80190673 2513 5 78820119 82236318
2470 5 78820119 80190777 2514 5 78820119 82325587
2471 5 78820119 80192546 2515 5 78820119 82427210
2472 5 78820119 80195395 2516 5 78820119 82431853
2473 5 78820119 80199923 2517 5 78820119 82446714
2474 5 78820119 80241911 2518 5 78820119 82446794
2475 5 78820119 80282785 2519 5 78820119 82551111
2476 5 78820119 80345337 2520 5 78820119 82552090
2477 5 78820119 80389787 2521 5 78820119 82555641
2478 5 78820119 80411639 2522 5 78820119 82555670
2479 5 78820119 80446855 2523 5 78820119 82556511
2480 5 78820119 80492790 2524 5 78820119 82559047
2481 5 78820119 80670554 2525 5 78820119 82561535
2482 5 78820119 80674679 2526 5 78820119 82610100
2483 5 78820119 80720509 2527 5 78820119 82676822
2484 5 78820119 80800856 2528 5 78820119 82676901
2485 5 78820119 80804587 2529 5 78820119 82883691
2486 5 78820119 80807409 2530 5 78820119 82954942
2487 5 78820119 80835734 2531 5 78820119 82971688
2488 5 78820119 80971764 2532 5 78820119 83023965
2489 5 78820119 80972258 2533 5 78820119 83094205
2490 5 78820119 80974450 2534 5 78820119 83146355
2491 5 78820119 81047638 2535 5 78820119 83280630
2492 5 78820119 81082921 2536 5 78820119 83281412
2493 5 78820119 81157909 2537 5 78820119 83400242
2494 5 78820119 81265937 2538 5 78820119 83405797
2495 5 78820119 81265937 2539 5 78820119 83437132
2496 5 78820119 81267485 2540 5 78820119 83522252
2497 5 78820119 81267499 2541 5 78820119 83560095
2498 5 78820119 81274512 2542 5 78820119 83560204
2499 5 78820119 81763618 2543 5 78820119 83572400
2500 5 78820119 81797217 2544 5 78820119 83607661
2501 5 78820119 81800186 2545 5 78820119 83745342
2502 5 78820119 81806213 2546 5 78820119 83861275
2503 5 78820119 81854583 2547 5 78820119 83861633
2504 5 78820119 81859374 2548 5 78820119 83865653
2505 5 78820119 81861368 2549 5 78820119 83865914
2506 5 78820119 81863686 2550 5 78820119 83865920
2507 5 78820119 81916850 2551 5 78820119 83868010
2508 5 78820119 81954891 2552 5 78820119 84019752
- 93 036149
2553 5 78820119 84065912 2597 5 78904639 79682242
2554 5 78820119 84086632 2598 5 78904639 79699261
2555 5 78820119 84089603 2599 5 78904639 79710673
2556 5 78820119 84104814 2600 5 78904639 79861902
2557 5 78820119 84105175 2601 5 78904639 79867710
2558 5 78820119 84251635 2602 5 78904639 79867868
2559 5 78820119 84252180 2603 5 78904639 79867873
2560 5 78820119 84253030 2604 5 78904639 79961961
2561 5 78820119 84254208 2605 5 78904639 80086268
2562 5 78820119 84314930 2606 5 78904639 80190673
2563 5 78820119 84340523 2607 5 78904639 80190777
2564 5 78820119 84516340 2608 5 78904639 80192546
2565 5 78820119 84706916 2609 5 78904639 80195395
2566 5 78820119 84799488 2610 5 78904639 80199923
2567 5 78820119 84801081 2611 5 78904639 80241911
2568 5 78820119 84824103 2612 5 78904639 80282785
2569 5 78820119 84824203 2613 5 78904639 80345337
2570 5 78820119 84824816 2614 5 78904639 80389787
2571 5 78820119 84825422 2615 5 78904639 80411639
2572 5 78820119 84825763 2616 5 78904639 80446855
2573 5 78820119 84825942 2617 5 78904639 80492790
2574 5 78820119 84843411 2618 5 78904639 80670554
2575 5 78820119 84936441 2619 5 78904639 80674679
2576 5 78820119 84936493 2620 5 78904639 80720509
2577 5 78820119 84943705 2621 5 78904639 80800856
2578 5 78820119 169454950 2622 5 78904639 80804587
2579 5 78820119 181522829 2623 5 78904639 80807409
2580 5 78820119 204759879 2624 5 78904639 80835734
2581 5 78820119 209874191 2625 5 78904639 80971764
2582 5 78904639 78918620 2626 5 78904639 80972258
2583 5 78904639 78918850 2627 5 78904639 80974450
2584 5 78904639 79056960 2628 5 78904639 81047638
2585 5 78904639 79163631 2629 5 78904639 81082921
2586 5 78904639 79176557 2630 5 78904639 81157909
2587 5 78904639 79188028 2631 5 78904639 81265937
2588 5 78904639 79201760 2632 5 78904639 81265937
2589 5 78904639 79230005 2633 5 78904639 81267485
2590 5 78904639 79230318 2634 5 78904639 81267499
2591 5 78904639 79505592 2635 5 78904639 81274512
2592 5 78904639 79510072 2636 5 78904639 81763618
2593 5 78904639 79538012 2637 5 78904639 81797217
2594 5 78904639 79538048 2638 5 78904639 81800186
2595 5 78904639 79538367 2639 5 78904639 81806213
2596 5 78904639 79669824 2640 5 78904639 81854583
- 94 036149
2641 5 78904639 81859374 2685 5 78904639 83865653
2642 5 78904639 81861368 2686 5 78904639 83865914
2643 5 78904639 81863686 2687 5 78904639 83865920
2644 5 78904639 81916850 2688 5 78904639 83868010
2645 5 78904639 81954891 2689 5 78904639 84019752
2646 5 78904639 81985250 2690 5 78904639 84065912
2647 5 78904639 82083752 2691 5 78904639 84086632
2648 5 78904639 82101253 2692 5 78904639 84089603
2649 5 78904639 82143124 2693 5 78904639 84104814
2650 5 78904639 82236318 2694 5 78904639 84105175
2651 5 78904639 82325587 2695 5 78904639 84251635
2652 5 78904639 82427210 2696 5 78904639 84252180
2653 5 78904639 82431853 2697 5 78904639 84253030
2654 5 78904639 82446714 2698 5 78904639 84254208
2655 5 78904639 82446794 2699 5 78904639 84314930
2656 5 78904639 82551111 2700 5 78904639 84340523
2657 5 78904639 82552090 2701 5 78904639 84516340
2658 5 78904639 82555641 2702 5 78904639 84706916
2659 5 78904639 82555670 2703 5 78904639 84799488
2660 5 78904639 82556511 2704 5 78904639 84801081
2661 5 78904639 82559047 2705 5 78904639 84824103
2662 5 78904639 82561535 2706 5 78904639 84824203
2663 5 78904639 82610100 2707 5 78904639 84824816
2664 5 78904639 82676822 2708 5 78904639 84825422
2665 5 78904639 82676901 2709 5 78904639 84825763
2666 5 78904639 82883691 2710 5 78904639 84825942
2667 5 78904639 82954942 2711 5 78904639 84843411
2668 5 78904639 82971688 2712 5 78904639 84936441
2669 5 78904639 83023965 2713 5 78904639 84936493
2670 5 78904639 83094205 2714 5 78904639 84943705
2671 5 78904639 83146355 2715 5 78904639 169454950
2672 5 78904639 83280630 2716 5 78904639 181522829
2673 5 78904639 83281412 2717 5 78904639 204759879
2674 5 78904639 83400242 2718 5 78904639 209874191
2675 5 78904639 83405797 2719 5 78918620 78918850
2676 5 78904639 83437132 2720 5 78918620 79056960
2677 5 78904639 83522252 2721 5 78918620 79163631
2678 5 78904639 83560095 2722 5 78918620 79176557
2679 5 78904639 83560204 2723 5 78918620 79188028
2680 5 78904639 83572400 2724 5 78918620 79201760
2681 5 78904639 83607661 2725 5 78918620 79230005
2682 5 78904639 83745342 2726 5 78918620 79230318
2683 5 78904639 83861275 2727 5 78918620 79505592
2684 5 78904639 83861633 2728 5 78918620 79510072
- 95 036149
2729 5 78918620 79538012 2773 5 78918620 81797217
2730 5 78918620 79538048 2774 5 78918620 81800186
2731 5 78918620 79538367 2775 5 78918620 81806213
2732 5 78918620 79669824 2776 5 78918620 81854583
2733 5 78918620 79682242 2777 5 78918620 81859374
2734 5 78918620 79699261 2778 5 78918620 81861368
2735 5 78918620 79710673 2779 5 78918620 81863686
2736 5 78918620 79861902 2780 5 78918620 81916850
2737 5 78918620 79867710 2781 5 78918620 81954891
2738 5 78918620 79867868 2782 5 78918620 81985250
2739 5 78918620 79867873 2783 5 78918620 82083752
2740 5 78918620 79961961 2784 5 78918620 82101253
2741 5 78918620 80086268 2785 5 78918620 82143124
2742 5 78918620 80190673 2786 5 78918620 82236318
2743 5 78918620 80190777 2787 5 78918620 82325587
2744 5 78918620 80192546 2788 5 78918620 82427210
2745 5 78918620 80195395 2789 5 78918620 82431853
2746 5 78918620 80199923 2790 5 78918620 82446714
2747 5 78918620 80241911 2791 5 78918620 82446794
2748 5 78918620 80282785 2792 5 78918620 82551111
2749 5 78918620 80345337 2793 5 78918620 82552090
2750 5 78918620 80389787 2794 5 78918620 82555641
2751 5 78918620 80411639 2795 5 78918620 82555670
2752 5 78918620 80446855 2796 5 78918620 82556511
2753 5 78918620 80492790 2797 5 78918620 82559047
2754 5 78918620 80670554 2798 5 78918620 82561535
2755 5 78918620 80674679 2799 5 78918620 82610100
2756 5 78918620 80720509 2800 5 78918620 82676822
2757 5 78918620 80800856 2801 5 78918620 82676901
2758 5 78918620 80804587 2802 5 78918620 82883691
2759 5 78918620 80807409 2803 5 78918620 82954942
2760 5 78918620 80835734 2804 5 78918620 82971688
2761 5 78918620 80971764 2805 5 78918620 83023965
2762 5 78918620 80972258 2806 5 78918620 83094205
2763 5 78918620 80974450 2807 5 78918620 83146355
2764 5 78918620 81047638 2808 5 78918620 83280630
2765 5 78918620 81082921 2809 5 78918620 83281412
2766 5 78918620 81157909 2810 5 78918620 83400242
2767 5 78918620 81265937 2811 5 78918620 83405797
2768 5 78918620 81265937 2812 5 78918620 83437132
2769 5 78918620 81267485 2813 5 78918620 83522252
2770 5 78918620 81267499 2814 5 78918620 83560095
2771 5 78918620 81274512 2815 5 78918620 83560204
2772 5 78918620 81763618 2816 5 78918620 83572400
- 96 036149
2817 5 78918620 83607661 2861 5 79055654 79230005
2818 5 78918620 83745342 2862 5 79055654 79230318
2819 5 78918620 83861275 2863 5 79055654 79505592
2820 5 78918620 83861633 2864 5 79055654 79510072
2821 5 78918620 83865653 2865 5 79055654 79538012
2822 5 78918620 83865914 2866 5 79055654 79538048
2823 5 78918620 83865920 2867 5 79055654 79538367
2824 5 78918620 83868010 2868 5 79055654 79669824
2825 5 78918620 84019752 2869 5 79055654 79682242
2826 5 78918620 84065912 2870 5 79055654 79699261
2827 5 78918620 84086632 2871 5 79055654 79710673
2828 5 78918620 84089603 2872 5 79055654 79861902
2829 5 78918620 84104814 2873 5 79055654 79867710
2830 5 78918620 84105175 2874 5 79055654 79867868
2831 5 78918620 84251635 2875 5 79055654 79867873
2832 5 78918620 84252180 2876 5 79055654 79961961
2833 5 78918620 84253030 2877 5 79055654 80086268
2834 5 78918620 84254208 2878 5 79055654 80190673
2835 5 78918620 84314930 2879 5 79055654 80190777
2836 5 78918620 84340523 2880 5 79055654 80192546
2837 5 78918620 84516340 2881 5 79055654 80195395
2838 5 78918620 84706916 2882 5 79055654 80199923
2839 5 78918620 84799488 2883 5 79055654 80241911
2840 5 78918620 84801081 2884 5 79055654 80282785
2841 5 78918620 84824103 2885 5 79055654 80345337
2842 5 78918620 84824203 2886 5 79055654 80389787
2843 5 78918620 84824816 2887 5 79055654 80411639
2844 5 78918620 84825422 2888 5 79055654 80446855
2845 5 78918620 84825763 2889 5 79055654 80492790
2846 5 78918620 84825942 2890 5 79055654 80670554
2847 5 78918620 84843411 2891 5 79055654 80674679
2848 5 78918620 84936441 2892 5 79055654 80720509
2849 5 78918620 84936493 2893 5 79055654 80800856
2850 5 78918620 84943705 2894 5 79055654 80804587
2851 5 78918620 169454950 2895 5 79055654 80807409
2852 5 78918620 181522829 2896 5 79055654 80835734
2853 5 78918620 204759879 2897 5 79055654 80971764
2854 5 78918620 209874191 2898 5 79055654 80972258
2855 5 79055654 78918620 2899 5 79055654 80974450
2856 5 79055654 79056960 2900 5 79055654 81047638
2857 5 79055654 79163631 2901 5 79055654 81082921
2858 5 79055654 79176557 2902 5 79055654 81157909
2859 5 79055654 79188028 2903 5 79055654 81265937
2860 5 79055654 79201760 2904 5 79055654 81265937
- 97 036149
2905 5 79055654 81267485 2949 5 79055654 83522252
2906 5 79055654 81267499 2950 5 79055654 83560095
2907 5 79055654 81274512 2951 5 79055654 83560204
2908 5 79055654 81763618 2952 5 79055654 83572400
2909 5 79055654 81797217 2953 5 79055654 83607661
2910 5 79055654 81800186 2954 5 79055654 83745342
2911 5 79055654 81806213 2955 5 79055654 83861275
2912 5 79055654 81854583 2956 5 79055654 83861633
2913 5 79055654 81859374 2957 5 79055654 83865653
2914 5 79055654 81861368 2958 5 79055654 83865914
2915 5 79055654 81863686 2959 5 79055654 83865920
2916 5 79055654 81916850 2960 5 79055654 83868010
2917 5 79055654 81954891 2961 5 79055654 84019752
2918 5 79055654 81985250 2962 5 79055654 84065912
2919 5 79055654 82083752 2963 5 79055654 84086632
2920 5 79055654 82101253 2964 5 79055654 84089603
2921 5 79055654 82143124 2965 5 79055654 84104814
2922 5 79055654 82236318 2966 5 79055654 84105175
2923 5 79055654 82325587 2967 5 79055654 84251635
2924 5 79055654 82427210 2968 5 79055654 84252180
2925 5 79055654 82431853 2969 5 79055654 84253030
2926 5 79055654 82446714 2970 5 79055654 84254208
2927 5 79055654 82446794 2971 5 79055654 84314930
2928 5 79055654 82551111 2972 5 79055654 84340523
2929 5 79055654 82552090 2973 5 79055654 84516340
2930 5 79055654 82555641 2974 5 79055654 84706916
2931 5 79055654 82555670 2975 5 79055654 84799488
2932 5 79055654 82556511 2976 5 79055654 84801081
2933 5 79055654 82559047 2977 5 79055654 84824103
2934 5 79055654 82561535 2978 5 79055654 84824203
2935 5 79055654 82610100 2979 5 79055654 84824816
2936 5 79055654 82676822 2980 5 79055654 84825422
2937 5 79055654 82676901 2981 5 79055654 84825763
2938 5 79055654 82883691 2982 5 79055654 84825942
2939 5 79055654 82954942 2983 5 79055654 84843411
2940 5 79055654 82971688 2984 5 79055654 84936441
2941 5 79055654 83023965 2985 5 79055654 84936493
2942 5 79055654 83094205 2986 5 79055654 84943705
2943 5 79055654 83146355 2987 5 79055654 169454950
2944 5 79055654 83280630 2988 5 79055654 181522829
2945 5 79055654 83281412 2989 5 79055654 204759879
2946 5 79055654 83400242 2990 5 79055654 209874191
2947 5 79055654 83405797 2991 5 79162381 79163631
2948 5 79055654 83437132 2992 5 79162381 79176557
- 98 036149
2993 5 79162381 79188028 3037 5 79162381 81265937
2994 5 79162381 79201760 3038 5 79162381 81265937
2995 5 79162381 79230005 3039 5 79162381 81267485
2996 5 79162381 79230318 3040 5 79162381 81267499
2997 5 79162381 79505592 3041 5 79162381 81274512
2998 5 79162381 79510072 3042 5 79162381 81763618
2999 5 79162381 79538012 3043 5 79162381 81797217
3000 5 79162381 79538048 3044 5 79162381 81800186
3001 5 79162381 79538367 3045 5 79162381 81806213
3002 5 79162381 79669824 3046 5 79162381 81854583
3003 5 79162381 79682242 3047 5 79162381 81859374
3004 5 79162381 79699261 3048 5 79162381 81861368
3005 5 79162381 79710673 3049 5 79162381 81863686
3006 5 79162381 79861902 3050 5 79162381 81916850
3007 5 79162381 79867710 3051 5 79162381 81954891
3008 5 79162381 79867868 3052 5 79162381 81985250
3009 5 79162381 79867873 3053 5 79162381 82083752
ЗОЮ 5 79162381 79961961 3054 5 79162381 82101253
ЗОН 5 79162381 80086268 3055 5 79162381 82143124
3012 5 79162381 80190673 3056 5 79162381 82236318
3013 5 79162381 80190777 3057 5 79162381 82325587
3014 5 79162381 80192546 3058 5 79162381 82427210
3015 5 79162381 80195395 3059 5 79162381 82431853
3016 5 79162381 80199923 3060 5 79162381 82446714
3017 5 79162381 80241911 3061 5 79162381 82446794
3018 5 79162381 80282785 3062 5 79162381 82551111
3019 5 79162381 80345337 3063 5 79162381 82552090
3020 5 79162381 80389787 3064 5 79162381 82555641
3021 5 79162381 80411639 3065 5 79162381 82555670
3022 5 79162381 80446855 3066 5 79162381 82556511
3023 5 79162381 80492790 3067 5 79162381 82559047
3024 5 79162381 80670554 3068 5 79162381 82561535
3025 5 79162381 80674679 3069 5 79162381 82610100
3026 5 79162381 80720509 3070 5 79162381 82676822
3027 5 79162381 80800856 3071 5 79162381 82676901
3028 5 79162381 80804587 3072 5 79162381 82883691
3029 5 79162381 80807409 3073 5 79162381 82954942
3030 5 79162381 80835734 3074 5 79162381 82971688
3031 5 79162381 80971764 3075 5 79162381 83023965
3032 5 79162381 80972258 3076 5 79162381 83094205
3033 5 79162381 80974450 3077 5 79162381 83146355
3034 5 79162381 81047638 3078 5 79162381 83280630
3035 5 79162381 81082921 3079 5 79162381 83281412
3036 5 79162381 81157909 3080 5 79162381 83400242
- 99 036149
3081 5 79162381 83405797 3125 5 79175814 79176557
3082 5 79162381 83437132 3126 5 79175814 79188028
3083 5 79162381 83522252 3127 5 79175814 79201760
3084 5 79162381 83560095 3128 5 79175814 79230005
3085 5 79162381 83560204 3129 5 79175814 79230318
3086 5 79162381 83572400 3130 5 79175814 79505592
3087 5 79162381 83607661 3131 5 79175814 79510072
3088 5 79162381 83745342 3132 5 79175814 79538012
3089 5 79162381 83861275 3133 5 79175814 79538048
3090 5 79162381 83861633 3134 5 79175814 79538367
3091 5 79162381 83865653 3135 5 79175814 79669824
3092 5 79162381 83865914 3136 5 79175814 79682242
3093 5 79162381 83865920 3137 5 79175814 79699261
3094 5 79162381 83868010 3138 5 79175814 79710673
3095 5 79162381 84019752 3139 5 79175814 79861902
3096 5 79162381 84065912 3140 5 79175814 79867710
3097 5 79162381 84086632 3141 5 79175814 79867868
3098 5 79162381 84089603 3142 5 79175814 79867873
3099 5 79162381 84104814 3143 5 79175814 79961961
3100 5 79162381 84105175 3144 5 79175814 80086268
3101 5 79162381 84251635 3145 5 79175814 80190673
3102 5 79162381 84252180 3146 5 79175814 80190777
3103 5 79162381 84253030 3147 5 79175814 80192546
3104 5 79162381 84254208 3148 5 79175814 80195395
3105 5 79162381 84314930 3149 5 79175814 80199923
3106 5 79162381 84340523 3150 5 79175814 80241911
3107 5 79162381 84516340 3151 5 79175814 80282785
3108 5 79162381 84706916 3152 5 79175814 80345337
3109 5 79162381 84799488 3153 5 79175814 80389787
3110 5 79162381 84801081 3154 5 79175814 80411639
3111 5 79162381 84824103 3155 5 79175814 80446855
3112 5 79162381 84824203 3156 5 79175814 80492790
3113 5 79162381 84824816 3157 5 79175814 80670554
3114 5 79162381 84825422 3158 5 79175814 80674679
3115 5 79162381 84825763 3159 5 79175814 80720509
3116 5 79162381 84825942 3160 5 79175814 80800856
3117 5 79162381 84843411 3161 5 79175814 80804587
3118 5 79162381 84936441 3162 5 79175814 80807409
3119 5 79162381 84936493 3163 5 79175814 80835734
3120 5 79162381 84943705 3164 5 79175814 80971764
3121 5 79162381 169454950 3165 5 79175814 80972258
3122 5 79162381 181522829 3166 5 79175814 80974450
3123 5 79162381 204759879 3167 5 79175814 81047638
3124 5 79162381 209874191 3168 5 79175814 81082921
- 100 036149
3169 5 79175814 81157909 3213 5 79175814 83400242
3170 5 79175814 81265937 3214 5 79175814 83405797
3171 5 79175814 81265937 3215 5 79175814 83437132
3172 5 79175814 81267485 3216 5 79175814 83522252
3173 5 79175814 81267499 3217 5 79175814 83560095
3174 5 79175814 81274512 3218 5 79175814 83560204
3175 5 79175814 81763618 3219 5 79175814 83572400
3176 5 79175814 81797217 3220 5 79175814 83607661
3177 5 79175814 81800186 3221 5 79175814 83745342
3178 5 79175814 81806213 3222 5 79175814 83861275
3179 5 79175814 81854583 3223 5 79175814 83861633
3180 5 79175814 81859374 3224 5 79175814 83865653
3181 5 79175814 81861368 3225 5 79175814 83865914
3182 5 79175814 81863686 3226 5 79175814 83865920
3183 5 79175814 81916850 3227 5 79175814 83868010
3184 5 79175814 81954891 3228 5 79175814 84019752
3185 5 79175814 81985250 3229 5 79175814 84065912
3186 5 79175814 82083752 3230 5 79175814 84086632
3187 5 79175814 82101253 3231 5 79175814 84089603
3188 5 79175814 82143124 3232 5 79175814 84104814
3189 5 79175814 82236318 3233 5 79175814 84105175
3190 5 79175814 82325587 3234 5 79175814 84251635
3191 5 79175814 82427210 3235 5 79175814 84252180
3192 5 79175814 82431853 3236 5 79175814 84253030
3193 5 79175814 82446714 3237 5 79175814 84254208
3194 5 79175814 82446794 3238 5 79175814 84314930
3195 5 79175814 82551111 3239 5 79175814 84340523
3196 5 79175814 82552090 3240 5 79175814 84516340
3197 5 79175814 82555641 3241 5 79175814 84706916
3198 5 79175814 82555670 3242 5 79175814 84799488
3199 5 79175814 82556511 3243 5 79175814 84801081
3200 5 79175814 82559047 3244 5 79175814 84824103
3201 5 79175814 82561535 3245 5 79175814 84824203
3202 5 79175814 82610100 3246 5 79175814 84824816
3203 5 79175814 82676822 3247 5 79175814 84825422
3204 5 79175814 82676901 3248 5 79175814 84825763
3205 5 79175814 82883691 3249 5 79175814 84825942
3206 5 79175814 82954942 3250 5 79175814 84843411
3207 5 79175814 82971688 3251 5 79175814 84936441
3208 5 79175814 83023965 3252 5 79175814 84936493
3209 5 79175814 83094205 3253 5 79175814 84943705
3210 5 79175814 83146355 3254 5 79175814 169454950
3211 5 79175814 83280630 3255 5 79175814 181522829
3212 5 79175814 83281412 3256 5 79175814 204759879
- 101 036149
3257 5 79175814 209874191 3301 5 79183135 81157909
3258 5 79183135 79188028 3302 5 79183135 81265937
3259 5 79183135 79201760 3303 5 79183135 81265937
3260 5 79183135 79230005 3304 5 79183135 81267485
3261 5 79183135 79230318 3305 5 79183135 81267499
3262 5 79183135 79505592 3306 5 79183135 81274512
3263 5 79183135 79510072 3307 5 79183135 81763618
3264 5 79183135 79538012 3308 5 79183135 81797217
3265 5 79183135 79538048 3309 5 79183135 81800186
3266 5 79183135 79538367 3310 5 79183135 81806213
3267 5 79183135 79669824 3311 5 79183135 81854583
3268 5 79183135 79682242 3312 5 79183135 81859374
3269 5 79183135 79699261 3313 5 79183135 81861368
3270 5 79183135 79710673 3314 5 79183135 81863686
3271 5 79183135 79861902 3315 5 79183135 81916850
3272 5 79183135 79867710 3316 5 79183135 81954891
3273 5 79183135 79867868 3317 5 79183135 81985250
3274 5 79183135 79867873 3318 5 79183135 82083752
3275 5 79183135 79961961 3319 5 79183135 82101253
3276 5 79183135 80086268 3320 5 79183135 82143124
3277 5 79183135 80190673 3321 5 79183135 82236318
3278 5 79183135 80190777 3322 5 79183135 82325587
3279 5 79183135 80192546 3323 5 79183135 82427210
3280 5 79183135 80195395 3324 5 79183135 82431853
3281 5 79183135 80199923 3325 5 79183135 82446714
3282 5 79183135 80241911 3326 5 79183135 82446794
3283 5 79183135 80282785 3327 5 79183135 82551111
3284 5 79183135 80345337 3328 5 79183135 82552090
3285 5 79183135 80389787 3329 5 79183135 82555641
3286 5 79183135 80411639 3330 5 79183135 82555670
3287 5 79183135 80446855 3331 5 79183135 82556511
3288 5 79183135 80492790 3332 5 79183135 82559047
3289 5 79183135 80670554 3333 5 79183135 82561535
3290 5 79183135 80674679 3334 5 79183135 82610100
3291 5 79183135 80720509 3335 5 79183135 82676822
3292 5 79183135 80800856 3336 5 79183135 82676901
3293 5 79183135 80804587 3337 5 79183135 82883691
3294 5 79183135 80807409 3338 5 79183135 82954942
3295 5 79183135 80835734 3339 5 79183135 82971688
3296 5 79183135 80971764 3340 5 79183135 83023965
3297 5 79183135 80972258 3341 5 79183135 83094205
3298 5 79183135 80974450 3342 5 79183135 83146355
3299 5 79183135 81047638 3343 5 79183135 83280630
3300 5 79183135 81082921 3344 5 79183135 83281412
- 102 036149
3345 5 79183135 83400242 3389 5 79183135 209874191
3346 5 79183135 83405797 3390 5 79200056 79201760
3347 5 79183135 83437132 3391 5 79200056 79230005
3348 5 79183135 83522252 3392 5 79200056 79230318
3349 5 79183135 83560095 3393 5 79200056 79505592
3350 5 79183135 83560204 3394 5 79200056 79510072
3351 5 79183135 83572400 3395 5 79200056 79538012
3352 5 79183135 83607661 3396 5 79200056 79538048
3353 5 79183135 83745342 3397 5 79200056 79538367
3354 5 79183135 83861275 3398 5 79200056 79669824
3355 5 79183135 83861633 3399 5 79200056 79682242
3356 5 79183135 83865653 3400 5 79200056 79699261
3357 5 79183135 83865914 3401 5 79200056 79710673
3358 5 79183135 83865920 3402 5 79200056 79861902
3359 5 79183135 83868010 3403 5 79200056 79867710
3360 5 79183135 84019752 3404 5 79200056 79867868
3361 5 79183135 84065912 3405 5 79200056 79867873
3362 5 79183135 84086632 3406 5 79200056 79961961
3363 5 79183135 84089603 3407 5 79200056 80086268
3364 5 79183135 84104814 3408 5 79200056 80190673
3365 5 79183135 84105175 3409 5 79200056 80190777
3366 5 79183135 84251635 3410 5 79200056 80192546
3367 5 79183135 84252180 3411 5 79200056 80195395
3368 5 79183135 84253030 3412 5 79200056 80199923
3369 5 79183135 84254208 3413 5 79200056 80241911
3370 5 79183135 84314930 3414 5 79200056 80282785
3371 5 79183135 84340523 3415 5 79200056 80345337
3372 5 79183135 84516340 3416 5 79200056 80389787
3373 5 79183135 84706916 3417 5 79200056 80411639
3374 5 79183135 84799488 3418 5 79200056 80446855
3375 5 79183135 84801081 3419 5 79200056 80492790
3376 5 79183135 84824103 3420 5 79200056 80670554
3377 5 79183135 84824203 3421 5 79200056 80674679
3378 5 79183135 84824816 3422 5 79200056 80720509
3379 5 79183135 84825422 3423 5 79200056 80800856
3380 5 79183135 84825763 3424 5 79200056 80804587
3381 5 79183135 84825942 3425 5 79200056 80807409
3382 5 79183135 84843411 3426 5 79200056 80835734
3383 5 79183135 84936441 3427 5 79200056 80971764
3384 5 79183135 84936493 3428 5 79200056 80972258
3385 5 79183135 84943705 3429 5 79200056 80974450
3386 5 79183135 169454950 3430 5 79200056 81047638
3387 5 79183135 181522829 3431 5 79200056 81082921
3388 5 79183135 204759879 3432 5 79200056 81157909
- 103 036149
3433 5 79200056 81265937 3477 5 79200056 83405797
3434 5 79200056 81265937 3478 5 79200056 83437132
3435 5 79200056 81267485 3479 5 79200056 83522252
3436 5 79200056 81267499 3480 5 79200056 83560095
3437 5 79200056 81274512 3481 5 79200056 83560204
3438 5 79200056 81763618 3482 5 79200056 83572400
3439 5 79200056 81797217 3483 5 79200056 83607661
3440 5 79200056 81800186 3484 5 79200056 83745342
3441 5 79200056 81806213 3485 5 79200056 83861275
3442 5 79200056 81854583 3486 5 79200056 83861633
3443 5 79200056 81859374 3487 5 79200056 83865653
3444 5 79200056 81861368 3488 5 79200056 83865914
3445 5 79200056 81863686 3489 5 79200056 83865920
3446 5 79200056 81916850 3490 5 79200056 83868010
3447 5 79200056 81954891 3491 5 79200056 84019752
3448 5 79200056 81985250 3492 5 79200056 84065912
3449 5 79200056 82083752 3493 5 79200056 84086632
3450 5 79200056 82101253 3494 5 79200056 84089603
3451 5 79200056 82143124 3495 5 79200056 84104814
3452 5 79200056 82236318 3496 5 79200056 84105175
3453 5 79200056 82325587 3497 5 79200056 84251635
3454 5 79200056 82427210 3498 5 79200056 84252180
3455 5 79200056 82431853 3499 5 79200056 84253030
3456 5 79200056 82446714 3500 5 79200056 84254208
3457 5 79200056 82446794 3501 5 79200056 84314930
3458 5 79200056 82551111 3502 5 79200056 84340523
3459 5 79200056 82552090 3503 5 79200056 84516340
3460 5 79200056 82555641 3504 5 79200056 84706916
3461 5 79200056 82555670 3505 5 79200056 84799488
3462 5 79200056 82556511 3506 5 79200056 84801081
3463 5 79200056 82559047 3507 5 79200056 84824103
3464 5 79200056 82561535 3508 5 79200056 84824203
3465 5 79200056 82610100 3509 5 79200056 84824816
3466 5 79200056 82676822 3510 5 79200056 84825422
3467 5 79200056 82676901 3511 5 79200056 84825763
3468 5 79200056 82883691 3512 5 79200056 84825942
3469 5 79200056 82954942 3513 5 79200056 84843411
3470 5 79200056 82971688 3514 5 79200056 84936441
3471 5 79200056 83023965 3515 5 79200056 84936493
3472 5 79200056 83094205 3516 5 79200056 84943705
3473 5 79200056 83146355 3517 5 79200056 169454950
3474 5 79200056 83280630 3518 5 79200056 181522829
3475 5 79200056 83281412 3519 5 79200056 204759879
3476 5 79200056 83400242 3520 5 79200056 209874191
- 104 036149
3521 5 79229010 79230005 3565 5 79229010 81267485
3522 5 79229010 79230318 3566 5 79229010 81267499
3523 5 79229010 79505592 3567 5 79229010 81274512
3524 5 79229010 79510072 3568 5 79229010 81763618
3525 5 79229010 79538012 3569 5 79229010 81797217
3526 5 79229010 79538048 3570 5 79229010 81800186
3527 5 79229010 79538367 3571 5 79229010 81806213
3528 5 79229010 79669824 3572 5 79229010 81854583
3529 5 79229010 79682242 3573 5 79229010 81859374
3530 5 79229010 79699261 3574 5 79229010 81861368
3531 5 79229010 79710673 3575 5 79229010 81863686
3532 5 79229010 79861902 3576 5 79229010 81916850
3533 5 79229010 79867710 3577 5 79229010 81954891
3534 5 79229010 79867868 3578 5 79229010 81985250
3535 5 79229010 79867873 3579 5 79229010 82083752
3536 5 79229010 79961961 3580 5 79229010 82101253
3537 5 79229010 80086268 3581 5 79229010 82143124
3538 5 79229010 80190673 3582 5 79229010 82236318
3539 5 79229010 80190777 3583 5 79229010 82325587
3540 5 79229010 80192546 3584 5 79229010 82427210
3541 5 79229010 80195395 3585 5 79229010 82431853
3542 5 79229010 80199923 3586 5 79229010 82446714
3543 5 79229010 80241911 3587 5 79229010 82446794
3544 5 79229010 80282785 3588 5 79229010 82551111
3545 5 79229010 80345337 3589 5 79229010 82552090
3546 5 79229010 80389787 3590 5 79229010 82555641
3547 5 79229010 80411639 3591 5 79229010 82555670
3548 5 79229010 80446855 3592 5 79229010 82556511
3549 5 79229010 80492790 3593 5 79229010 82559047
3550 5 79229010 80670554 3594 5 79229010 82561535
3551 5 79229010 80674679 3595 5 79229010 82610100
3552 5 79229010 80720509 3596 5 79229010 82676822
3553 5 79229010 80800856 3597 5 79229010 82676901
3554 5 79229010 80804587 3598 5 79229010 82883691
3555 5 79229010 80807409 3599 5 79229010 82954942
3556 5 79229010 80835734 3600 5 79229010 82971688
3557 5 79229010 80971764 3601 5 79229010 83023965
3558 5 79229010 80972258 3602 5 79229010 83094205
3559 5 79229010 80974450 3603 5 79229010 83146355
3560 5 79229010 81047638 3604 5 79229010 83280630
3561 5 79229010 81082921 3605 5 79229010 83281412
3562 5 79229010 81157909 3606 5 79229010 83400242
3563 5 79229010 81265937 3607 5 79229010 83405797
3564 5 79229010 81265937 3608 5 79229010 83437132
- 105 036149
3609 5 79229010 83522252 3653 5 79229019 79505592
3610 5 79229010 83560095 3654 5 79229019 79510072
3611 5 79229010 83560204 3655 5 79229019 79538012
3612 5 79229010 83572400 3656 5 79229019 79538048
3613 5 79229010 83607661 3657 5 79229019 79538367
3614 5 79229010 83745342 3658 5 79229019 79669824
3615 5 79229010 83861275 3659 5 79229019 79682242
3616 5 79229010 83861633 3660 5 79229019 79699261
3617 5 79229010 83865653 3661 5 79229019 79710673
3618 5 79229010 83865914 3662 5 79229019 79861902
3619 5 79229010 83865920 3663 5 79229019 79867710
3620 5 79229010 83868010 3664 5 79229019 79867868
3621 5 79229010 84019752 3665 5 79229019 79867873
3622 5 79229010 84065912 3666 5 79229019 79961961
3623 5 79229010 84086632 3667 5 79229019 80086268
3624 5 79229010 84089603 3668 5 79229019 80190673
3625 5 79229010 84104814 3669 5 79229019 80190777
3626 5 79229010 84105175 3670 5 79229019 80192546
3627 5 79229010 84251635 3671 5 79229019 80195395
3628 5 79229010 84252180 3672 5 79229019 80199923
3629 5 79229010 84253030 3673 5 79229019 80241911
3630 5 79229010 84254208 3674 5 79229019 80282785
3631 5 79229010 84314930 3675 5 79229019 80345337
3632 5 79229010 84340523 3676 5 79229019 80389787
3633 5 79229010 84516340 3677 5 79229019 80411639
3634 5 79229010 84706916 3678 5 79229019 80446855
3635 5 79229010 84799488 3679 5 79229019 80492790
3636 5 79229010 84801081 3680 5 79229019 80670554
3637 5 79229010 84824103 3681 5 79229019 80674679
3638 5 79229010 84824203 3682 5 79229019 80720509
3639 5 79229010 84824816 3683 5 79229019 80800856
3640 5 79229010 84825422 3684 5 79229019 80804587
3641 5 79229010 84825763 3685 5 79229019 80807409
3642 5 79229010 84825942 3686 5 79229019 80835734
3643 5 79229010 84843411 3687 5 79229019 80971764
3644 5 79229010 84936441 3688 5 79229019 80972258
3645 5 79229010 84936493 3689 5 79229019 80974450
3646 5 79229010 84943705 3690 5 79229019 81047638
3647 5 79229010 169454950 3691 5 79229019 81082921
3648 5 79229010 181522829 3692 5 79229019 81157909
3649 5 79229010 204759879 3693 5 79229019 81265937
3650 5 79229010 209874191 3694 5 79229019 81265937
3651 5 79229019 79230005 3695 5 79229019 81267485
3652 5 79229019 79230318 3696 5 79229019 81267499
- 106 036149
3697 5 79229019 81274512 3741 5 79229019 83560204
3698 5 79229019 81763618 3742 5 79229019 83572400
3699 5 79229019 81797217 3743 5 79229019 83607661
3700 5 79229019 81800186 3744 5 79229019 83745342
3701 5 79229019 81806213 3745 5 79229019 83861275
3702 5 79229019 81854583 3746 5 79229019 83861633
3703 5 79229019 81859374 3747 5 79229019 83865653
3704 5 79229019 81861368 3748 5 79229019 83865914
3705 5 79229019 81863686 3749 5 79229019 83865920
3706 5 79229019 81916850 3750 5 79229019 83868010
3707 5 79229019 81954891 3751 5 79229019 84019752
3708 5 79229019 81985250 3752 5 79229019 84065912
3709 5 79229019 82083752 3753 5 79229019 84086632
3710 5 79229019 82101253 3754 5 79229019 84089603
3711 5 79229019 82143124 3755 5 79229019 84104814
3712 5 79229019 82236318 3756 5 79229019 84105175
3713 5 79229019 82325587 3757 5 79229019 84251635
3714 5 79229019 82427210 3758 5 79229019 84252180
3715 5 79229019 82431853 3759 5 79229019 84253030
3716 5 79229019 82446714 3760 5 79229019 84254208
3717 5 79229019 82446794 3761 5 79229019 84314930
3718 5 79229019 82551111 3762 5 79229019 84340523
3719 5 79229019 82552090 3763 5 79229019 84516340
3720 5 79229019 82555641 3764 5 79229019 84706916
3721 5 79229019 82555670 3765 5 79229019 84799488
3722 5 79229019 82556511 3766 5 79229019 84801081
3723 5 79229019 82559047 3767 5 79229019 84824103
3724 5 79229019 82561535 3768 5 79229019 84824203
3725 5 79229019 82610100 3769 5 79229019 84824816
3726 5 79229019 82676822 3770 5 79229019 84825422
3727 5 79229019 82676901 3771 5 79229019 84825763
3728 5 79229019 82883691 3772 5 79229019 84825942
3729 5 79229019 82954942 3773 5 79229019 84843411
3730 5 79229019 82971688 3774 5 79229019 84936441
3731 5 79229019 83023965 3775 5 79229019 84936493
3732 5 79229019 83094205 3776 5 79229019 84943705
3733 5 79229019 83146355 3777 5 79229019 169454950
3734 5 79229019 83280630 3778 5 79229019 181522829
3735 5 79229019 83281412 3779 5 79229019 204759879
3736 5 79229019 83400242 3780 5 79229019 209874191
3737 5 79229019 83405797 3781 5 79503885 79505592
3738 5 79229019 83437132 3782 5 79503885 79510072
3739 5 79229019 83522252 3783 5 79503885 79538012
3740 5 79229019 83560095 3784 5 79503885 79538048
- 107 036149
3785 5 79503885 79538367 3829 5 79503885 81806213
3786 5 79503885 79669824 3830 5 79503885 81854583
3787 5 79503885 79682242 3831 5 79503885 81859374
3788 5 79503885 79699261 3832 5 79503885 81861368
3789 5 79503885 79710673 3833 5 79503885 81863686
3790 5 79503885 79861902 3834 5 79503885 81916850
3791 5 79503885 79867710 3835 5 79503885 81954891
3792 5 79503885 79867868 3836 5 79503885 81985250
3793 5 79503885 79867873 3837 5 79503885 82083752
3794 5 79503885 79961961 3838 5 79503885 82101253
3795 5 79503885 80086268 3839 5 79503885 82143124
3796 5 79503885 80190673 3840 5 79503885 82236318
3797 5 79503885 80190777 3841 5 79503885 82325587
3798 5 79503885 80192546 3842 5 79503885 82427210
3799 5 79503885 80195395 3843 5 79503885 82431853
3800 5 79503885 80199923 3844 5 79503885 82446714
3801 5 79503885 80241911 3845 5 79503885 82446794
3802 5 79503885 80282785 3846 5 79503885 82551111
3803 5 79503885 80345337 3847 5 79503885 82552090
3804 5 79503885 80389787 3848 5 79503885 82555641
3805 5 79503885 80411639 3849 5 79503885 82555670
3806 5 79503885 80446855 3850 5 79503885 82556511
3807 5 79503885 80492790 3851 5 79503885 82559047
3808 5 79503885 80670554 3852 5 79503885 82561535
3809 5 79503885 80674679 3853 5 79503885 82610100
3810 5 79503885 80720509 3854 5 79503885 82676822
3811 5 79503885 80800856 3855 5 79503885 82676901
3812 5 79503885 80804587 3856 5 79503885 82883691
3813 5 79503885 80807409 3857 5 79503885 82954942
3814 5 79503885 80835734 3858 5 79503885 82971688
3815 5 79503885 80971764 3859 5 79503885 83023965
3816 5 79503885 80972258 3860 5 79503885 83094205
3817 5 79503885 80974450 3861 5 79503885 83146355
3818 5 79503885 81047638 3862 5 79503885 83280630
3819 5 79503885 81082921 3863 5 79503885 83281412
3820 5 79503885 81157909 3864 5 79503885 83400242
3821 5 79503885 81265937 3865 5 79503885 83405797
3822 5 79503885 81265937 3866 5 79503885 83437132
3823 5 79503885 81267485 3867 5 79503885 83522252
3824 5 79503885 81267499 3868 5 79503885 83560095
3825 5 79503885 81274512 3869 5 79503885 83560204
3826 5 79503885 81763618 3870 5 79503885 83572400
3827 5 79503885 81797217 3871 5 79503885 83607661
3828 5 79503885 81800186 3872 5 79503885 83745342
- 108 036149
3873 5 79503885 83861275 3917 5 79505757 79710673
3874 5 79503885 83861633 3918 5 79505757 79861902
3875 5 79503885 83865653 3919 5 79505757 79867710
3876 5 79503885 83865914 3920 5 79505757 79867868
3877 5 79503885 83865920 3921 5 79505757 79867873
3878 5 79503885 83868010 3922 5 79505757 79961961
3879 5 79503885 84019752 3923 5 79505757 80086268
3880 5 79503885 84065912 3924 5 79505757 80190673
3881 5 79503885 84086632 3925 5 79505757 80190777
3882 5 79503885 84089603 3926 5 79505757 80192546
3883 5 79503885 84104814 3927 5 79505757 80195395
3884 5 79503885 84105175 3928 5 79505757 80199923
3885 5 79503885 84251635 3929 5 79505757 80241911
3886 5 79503885 84252180 3930 5 79505757 80282785
3887 5 79503885 84253030 3931 5 79505757 80345337
3888 5 79503885 84254208 3932 5 79505757 80389787
3889 5 79503885 84314930 3933 5 79505757 80411639
3890 5 79503885 84340523 3934 5 79505757 80446855
3891 5 79503885 84516340 3935 5 79505757 80492790
3892 5 79503885 84706916 3936 5 79505757 80670554
3893 5 79503885 84799488 3937 5 79505757 80674679
3894 5 79503885 84801081 3938 5 79505757 80720509
3895 5 79503885 84824103 3939 5 79505757 80800856
3896 5 79503885 84824203 3940 5 79505757 80804587
3897 5 79503885 84824816 3941 5 79505757 80807409
3898 5 79503885 84825422 3942 5 79505757 80835734
3899 5 79503885 84825763 3943 5 79505757 80971764
3900 5 79503885 84825942 3944 5 79505757 80972258
3901 5 79503885 84843411 3945 5 79505757 80974450
3902 5 79503885 84936441 3946 5 79505757 81047638
3903 5 79503885 84936493 3947 5 79505757 81082921
3904 5 79503885 84943705 3948 5 79505757 81157909
3905 5 79503885 169454950 3949 5 79505757 81265937
3906 5 79503885 181522829 3950 5 79505757 81265937
3907 5 79503885 204759879 3951 5 79505757 81267485
3908 5 79503885 209874191 3952 5 79505757 81267499
3909 5 79505757 79505592 3953 5 79505757 81274512
3910 5 79505757 79510072 3954 5 79505757 81763618
3911 5 79505757 79538012 3955 5 79505757 81797217
3912 5 79505757 79538048 3956 5 79505757 81800186
3913 5 79505757 79538367 3957 5 79505757 81806213
3914 5 79505757 79669824 3958 5 79505757 81854583
3915 5 79505757 79682242 3959 5 79505757 81859374
3916 5 79505757 79699261 3960 5 79505757 81861368
- 109 036149
3961 5 79505757 81863686 4005 5 79505757 83865920
3962 5 79505757 81916850 4006 5 79505757 83868010
3963 5 79505757 81954891 4007 5 79505757 84019752
3964 5 79505757 81985250 4008 5 79505757 84065912
3965 5 79505757 82083752 4009 5 79505757 84086632
3966 5 79505757 82101253 4010 5 79505757 84089603
3967 5 79505757 82143124 4011 5 79505757 84104814
3968 5 79505757 82236318 4012 5 79505757 84105175
3969 5 79505757 82325587 4013 5 79505757 84251635
3970 5 79505757 82427210 4014 5 79505757 84252180
3971 5 79505757 82431853 4015 5 79505757 84253030
3972 5 79505757 82446714 4016 5 79505757 84254208
3973 5 79505757 82446794 4017 5 79505757 84314930
3974 5 79505757 82551111 4018 5 79505757 84340523
3975 5 79505757 82552090 4019 5 79505757 84516340
3976 5 79505757 82555641 4020 5 79505757 84706916
3977 5 79505757 82555670 4021 5 79505757 84799488
3978 5 79505757 82556511 4022 5 79505757 84801081
3979 5 79505757 82559047 4023 5 79505757 84824103
3980 5 79505757 82561535 4024 5 79505757 84824203
3981 5 79505757 82610100 4025 5 79505757 84824816
3982 5 79505757 82676822 4026 5 79505757 84825422
3983 5 79505757 82676901 4027 5 79505757 84825763
3984 5 79505757 82883691 4028 5 79505757 84825942
3985 5 79505757 82954942 4029 5 79505757 84843411
3986 5 79505757 82971688 4030 5 79505757 84936441
3987 5 79505757 83023965 4031 5 79505757 84936493
3988 5 79505757 83094205 4032 5 79505757 84943705
3989 5 79505757 83146355 4033 5 79505757 169454950
3990 5 79505757 83280630 4034 5 79505757 181522829
3991 5 79505757 83281412 4035 5 79505757 204759879
3992 5 79505757 83400242 4036 5 79505757 209874191
3993 5 79505757 83405797 4037 5 79531009 79538012
3994 5 79505757 83437132 4038 5 79531009 79538048
3995 5 79505757 83522252 4039 5 79531009 79538367
3996 5 79505757 83560095 4040 5 79531009 79669824
3997 5 79505757 83560204 4041 5 79531009 79682242
3998 5 79505757 83572400 4042 5 79531009 79699261
3999 5 79505757 83607661 4043 5 79531009 79710673
4000 5 79505757 83745342 4044 5 79531009 79861902
4001 5 79505757 83861275 4045 5 79531009 79867710
4002 5 79505757 83861633 4046 5 79531009 79867868
4003 5 79505757 83865653 4047 5 79531009 79867873
4004 5 79505757 83865914 4048 5 79531009 79961961
- 110 036149
4049 5 79531009 80086268 4093 5 79531009 82143124
4050 5 79531009 80190673 4094 5 79531009 82236318
4051 5 79531009 80190777 4095 5 79531009 82325587
4052 5 79531009 80192546 4096 5 79531009 82427210
4053 5 79531009 80195395 4097 5 79531009 82431853
4054 5 79531009 80199923 4098 5 79531009 82446714
4055 5 79531009 80241911 4099 5 79531009 82446794
4056 5 79531009 80282785 4100 5 79531009 82551111
4057 5 79531009 80345337 4101 5 79531009 82552090
4058 5 79531009 80389787 4102 5 79531009 82555641
4059 5 79531009 80411639 4103 5 79531009 82555670
4060 5 79531009 80446855 4104 5 79531009 82556511
4061 5 79531009 80492790 4105 5 79531009 82559047
4062 5 79531009 80670554 4106 5 79531009 82561535
4063 5 79531009 80674679 4107 5 79531009 82610100
4064 5 79531009 80720509 4108 5 79531009 82676822
4065 5 79531009 80800856 4109 5 79531009 82676901
4066 5 79531009 80804587 4110 5 79531009 82883691
4067 5 79531009 80807409 4111 5 79531009 82954942
4068 5 79531009 80835734 4112 5 79531009 82971688
4069 5 79531009 80971764 4113 5 79531009 83023965
4070 5 79531009 80972258 4114 5 79531009 83094205
4071 5 79531009 80974450 4115 5 79531009 83146355
4072 5 79531009 81047638 4116 5 79531009 83280630
4073 5 79531009 81082921 4117 5 79531009 83281412
4074 5 79531009 81157909 4118 5 79531009 83400242
4075 5 79531009 81265937 4119 5 79531009 83405797
4076 5 79531009 81265937 4120 5 79531009 83437132
4077 5 79531009 81267485 4121 5 79531009 83522252
4078 5 79531009 81267499 4122 5 79531009 83560095
4079 5 79531009 81274512 4123 5 79531009 83560204
4080 5 79531009 81763618 4124 5 79531009 83572400
4081 5 79531009 81797217 4125 5 79531009 83607661
4082 5 79531009 81800186 4126 5 79531009 83745342
4083 5 79531009 81806213 4127 5 79531009 83861275
4084 5 79531009 81854583 4128 5 79531009 83861633
4085 5 79531009 81859374 4129 5 79531009 83865653
4086 5 79531009 81861368 4130 5 79531009 83865914
4087 5 79531009 81863686 4131 5 79531009 83865920
4088 5 79531009 81916850 4132 5 79531009 83868010
4089 5 79531009 81954891 4133 5 79531009 84019752
4090 5 79531009 81985250 4134 5 79531009 84065912
4091 5 79531009 82083752 4135 5 79531009 84086632
4092 5 79531009 82101253 4136 5 79531009 84089603
- 111 036149
4137 5 79531009 84104814 4181 5 79531040 80241911
4138 5 79531009 84105175 4182 5 79531040 80282785
4139 5 79531009 84251635 4183 5 79531040 80345337
4140 5 79531009 84252180 4184 5 79531040 80389787
4141 5 79531009 84253030 4185 5 79531040 80411639
4142 5 79531009 84254208 4186 5 79531040 80446855
4143 5 79531009 84314930 4187 5 79531040 80492790
4144 5 79531009 84340523 4188 5 79531040 80670554
4145 5 79531009 84516340 4189 5 79531040 80674679
4146 5 79531009 84706916 4190 5 79531040 80720509
4147 5 79531009 84799488 4191 5 79531040 80800856
4148 5 79531009 84801081 4192 5 79531040 80804587
4149 5 79531009 84824103 4193 5 79531040 80807409
4150 5 79531009 84824203 4194 5 79531040 80835734
4151 5 79531009 84824816 4195 5 79531040 80971764
4152 5 79531009 84825422 4196 5 79531040 80972258
4153 5 79531009 84825763 4197 5 79531040 80974450
4154 5 79531009 84825942 4198 5 79531040 81047638
4155 5 79531009 84843411 4199 5 79531040 81082921
4156 5 79531009 84936441 4200 5 79531040 81157909
4157 5 79531009 84936493 4201 5 79531040 81265937
4158 5 79531009 84943705 4202 5 79531040 81265937
4159 5 79531009 169454950 4203 5 79531040 81267485
4160 5 79531009 181522829 4204 5 79531040 81267499
4161 5 79531009 204759879 4205 5 79531040 81274512
4162 5 79531009 209874191 4206 5 79531040 81763618
4163 5 79531040 79538012 4207 5 79531040 81797217
4164 5 79531040 79538048 4208 5 79531040 81800186
4165 5 79531040 79538367 4209 5 79531040 81806213
4166 5 79531040 79669824 4210 5 79531040 81854583
4167 5 79531040 79682242 4211 5 79531040 81859374
4168 5 79531040 79699261 4212 5 79531040 81861368
4169 5 79531040 79710673 4213 5 79531040 81863686
4170 5 79531040 79861902 4214 5 79531040 81916850
4171 5 79531040 79867710 4215 5 79531040 81954891
4172 5 79531040 79867868 4216 5 79531040 81985250
4173 5 79531040 79867873 4217 5 79531040 82083752
4174 5 79531040 79961961 4218 5 79531040 82101253
4175 5 79531040 80086268 4219 5 79531040 82143124
4176 5 79531040 80190673 4220 5 79531040 82236318
4177 5 79531040 80190777 4221 5 79531040 82325587
4178 5 79531040 80192546 4222 5 79531040 82427210
4179 5 79531040 80195395 4223 5 79531040 82431853
4180 5 79531040 80199923 4224 5 79531040 82446714
- 112 036149
4225 5 79531040 82446794 4269 5 79531040 84314930
4226 5 79531040 82551111 4270 5 79531040 84340523
4227 5 79531040 82552090 4271 5 79531040 84516340
4228 5 79531040 82555641 4272 5 79531040 84706916
4229 5 79531040 82555670 4273 5 79531040 84799488
4230 5 79531040 82556511 4274 5 79531040 84801081
4231 5 79531040 82559047 4275 5 79531040 84824103
4232 5 79531040 82561535 4276 5 79531040 84824203
4233 5 79531040 82610100 4277 5 79531040 84824816
4234 5 79531040 82676822 4278 5 79531040 84825422
4235 5 79531040 82676901 4279 5 79531040 84825763
4236 5 79531040 82883691 4280 5 79531040 84825942
4237 5 79531040 82954942 4281 5 79531040 84843411
4238 5 79531040 82971688 4282 5 79531040 84936441
4239 5 79531040 83023965 4283 5 79531040 84936493
4240 5 79531040 83094205 4284 5 79531040 84943705
4241 5 79531040 83146355 4285 5 79531040 169454950
4242 5 79531040 83280630 4286 5 79531040 181522829
4243 5 79531040 83281412 4287 5 79531040 204759879
4244 5 79531040 83400242 4288 5 79531040 209874191
4245 5 79531040 83405797 4289 5 79537564 79538012
4246 5 79531040 83437132 4290 5 79537564 79538048
4247 5 79531040 83522252 4291 5 79537564 79538367
4248 5 79531040 83560095 4292 5 79537564 79669824
4249 5 79531040 83560204 4293 5 79537564 79682242
4250 5 79531040 83572400 4294 5 79537564 79699261
4251 5 79531040 83607661 4295 5 79537564 79710673
4252 5 79531040 83745342 4296 5 79537564 79861902
4253 5 79531040 83861275 4297 5 79537564 79867710
4254 5 79531040 83861633 4298 5 79537564 79867868
4255 5 79531040 83865653 4299 5 79537564 79867873
4256 5 79531040 83865914 4300 5 79537564 79961961
4257 5 79531040 83865920 4301 5 79537564 80086268
4258 5 79531040 83868010 4302 5 79537564 80190673
4259 5 79531040 84019752 4303 5 79537564 80190777
4260 5 79531040 84065912 4304 5 79537564 80192546
4261 5 79531040 84086632 4305 5 79537564 80195395
4262 5 79531040 84089603 4306 5 79537564 80199923
4263 5 79531040 84104814 4307 5 79537564 80241911
4264 5 79531040 84105175 4308 5 79537564 80282785
4265 5 79531040 84251635 4309 5 79537564 80345337
4266 5 79531040 84252180 4310 5 79537564 80389787
4267 5 79531040 84253030 4311 5 79537564 80411639
4268 5 79531040 84254208 4312 5 79537564 80446855
- 113 036149
4313 5 79537564 80492790 4357 5 79537564 82559047
4314 5 79537564 80670554 4358 5 79537564 82561535
4315 5 79537564 80674679 4359 5 79537564 82610100
4316 5 79537564 80720509 4360 5 79537564 82676822
4317 5 79537564 80800856 4361 5 79537564 82676901
4318 5 79537564 80804587 4362 5 79537564 82883691
4319 5 79537564 80807409 4363 5 79537564 82954942
4320 5 79537564 80835734 4364 5 79537564 82971688
4321 5 79537564 80971764 4365 5 79537564 83023965
4322 5 79537564 80972258 4366 5 79537564 83094205
4323 5 79537564 80974450 4367 5 79537564 83146355
4324 5 79537564 81047638 4368 5 79537564 83280630
4325 5 79537564 81082921 4369 5 79537564 83281412
4326 5 79537564 81157909 4370 5 79537564 83400242
4327 5 79537564 81265937 4371 5 79537564 83405797
4328 5 79537564 81265937 4372 5 79537564 83437132
4329 5 79537564 81267485 4373 5 79537564 83522252
4330 5 79537564 81267499 4374 5 79537564 83560095
4331 5 79537564 81274512 4375 5 79537564 83560204
4332 5 79537564 81763618 4376 5 79537564 83572400
4333 5 79537564 81797217 4377 5 79537564 83607661
4334 5 79537564 81800186 4378 5 79537564 83745342
4335 5 79537564 81806213 4379 5 79537564 83861275
4336 5 79537564 81854583 4380 5 79537564 83861633
4337 5 79537564 81859374 4381 5 79537564 83865653
4338 5 79537564 81861368 4382 5 79537564 83865914
4339 5 79537564 81863686 4383 5 79537564 83865920
4340 5 79537564 81916850 4384 5 79537564 83868010
4341 5 79537564 81954891 4385 5 79537564 84019752
4342 5 79537564 81985250 4386 5 79537564 84065912
4343 5 79537564 82083752 4387 5 79537564 84086632
4344 5 79537564 82101253 4388 5 79537564 84089603
4345 5 79537564 82143124 4389 5 79537564 84104814
4346 5 79537564 82236318 4390 5 79537564 84105175
4347 5 79537564 82325587 4391 5 79537564 84251635
4348 5 79537564 82427210 4392 5 79537564 84252180
4349 5 79537564 82431853 4393 5 79537564 84253030
4350 5 79537564 82446714 4394 5 79537564 84254208
4351 5 79537564 82446794 4395 5 79537564 84314930
4352 5 79537564 82551111 4396 5 79537564 84340523
4353 5 79537564 82552090 4397 5 79537564 84516340
4354 5 79537564 82555641 4398 5 79537564 84706916
4355 5 79537564 82555670 4399 5 79537564 84799488
4356 5 79537564 82556511 4400 5 79537564 84801081
- 114 036149
4401 5 79537564 84824103 4445 5 79538367 80972258
4402 5 79537564 84824203 4446 5 79538367 80974450
4403 5 79537564 84824816 4447 5 79538367 81047638
4404 5 79537564 84825422 4448 5 79538367 81082921
4405 5 79537564 84825763 4449 5 79538367 81157909
4406 5 79537564 84825942 4450 5 79538367 81265937
4407 5 79537564 84843411 4451 5 79538367 81265937
4408 5 79537564 84936441 4452 5 79538367 81267485
4409 5 79537564 84936493 4453 5 79538367 81267499
4410 5 79537564 84943705 4454 5 79538367 81274512
4411 5 79537564 169454950 4455 5 79538367 81763618
4412 5 79537564 181522829 4456 5 79538367 81797217
4413 5 79537564 204759879 4457 5 79538367 81800186
4414 5 79537564 209874191 4458 5 79538367 81806213
4415 5 79538367 79669824 4459 5 79538367 81854583
4416 5 79538367 79682242 4460 5 79538367 81859374
4417 5 79538367 79699261 4461 5 79538367 81861368
4418 5 79538367 79710673 4462 5 79538367 81863686
4419 5 79538367 79861902 4463 5 79538367 81916850
4420 5 79538367 79867710 4464 5 79538367 81954891
4421 5 79538367 79867868 4465 5 79538367 81985250
4422 5 79538367 79867873 4466 5 79538367 82083752
4423 5 79538367 79961961 4467 5 79538367 82101253
4424 5 79538367 80086268 4468 5 79538367 82143124
4425 5 79538367 80190673 4469 5 79538367 82236318
4426 5 79538367 80190777 4470 5 79538367 82325587
4427 5 79538367 80192546 4471 5 79538367 82427210
4428 5 79538367 80195395 4472 5 79538367 82431853
4429 5 79538367 80199923 4473 5 79538367 82446714
4430 5 79538367 80241911 4474 5 79538367 82446794
4431 5 79538367 80282785 4475 5 79538367 82551111
4432 5 79538367 80345337 4476 5 79538367 82552090
4433 5 79538367 80389787 4477 5 79538367 82555641
4434 5 79538367 80411639 4478 5 79538367 82555670
4435 5 79538367 80446855 4479 5 79538367 82556511
4436 5 79538367 80492790 4480 5 79538367 82559047
4437 5 79538367 80670554 4481 5 79538367 82561535
4438 5 79538367 80674679 4482 5 79538367 82610100
4439 5 79538367 80720509 4483 5 79538367 82676822
4440 5 79538367 80800856 4484 5 79538367 82676901
4441 5 79538367 80804587 4485 5 79538367 82883691
4442 5 79538367 80807409 4486 5 79538367 82954942
4443 5 79538367 80835734 4487 5 79538367 82971688
4444 5 79538367 80971764 4488 5 79538367 83023965
- 115 036149
4489 5 79538367 83094205 4533 5 79538367 84943705
4490 5 79538367 83146355 4534 5 79538367 169454950
4491 5 79538367 83280630 4535 5 79538367 181522829
4492 5 79538367 83281412 4536 5 79538367 204759879
4493 5 79538367 83400242 4537 5 79538367 209874191
4494 5 79538367 83405797 4538 5 79666742 79538367
4495 5 79538367 83437132 4539 5 79666742 79669824
4496 5 79538367 83522252 4540 5 79666742 79682242
4497 5 79538367 83560095 4541 5 79666742 79699261
4498 5 79538367 83560204 4542 5 79666742 79710673
4499 5 79538367 83572400 4543 5 79666742 79861902
4500 5 79538367 83607661 4544 5 79666742 79867710
4501 5 79538367 83745342 4545 5 79666742 79867868
4502 5 79538367 83861275 4546 5 79666742 79867873
4503 5 79538367 83861633 4547 5 79666742 79961961
4504 5 79538367 83865653 4548 5 79666742 80086268
4505 5 79538367 83865914 4549 5 79666742 80190673
4506 5 79538367 83865920 4550 5 79666742 80190777
4507 5 79538367 83868010 4551 5 79666742 80192546
4508 5 79538367 84019752 4552 5 79666742 80195395
4509 5 79538367 84065912 4553 5 79666742 80199923
4510 5 79538367 84086632 4554 5 79666742 80241911
4511 5 79538367 84089603 4555 5 79666742 80282785
4512 5 79538367 84104814 4556 5 79666742 80345337
4513 5 79538367 84105175 4557 5 79666742 80389787
4514 5 79538367 84251635 4558 5 79666742 80411639
4515 5 79538367 84252180 4559 5 79666742 80446855
4516 5 79538367 84253030 4560 5 79666742 80492790
4517 5 79538367 84254208 4561 5 79666742 80670554
4518 5 79538367 84314930 4562 5 79666742 80674679
4519 5 79538367 84340523 4563 5 79666742 80720509
4520 5 79538367 84516340 4564 5 79666742 80800856
4521 5 79538367 84706916 4565 5 79666742 80804587
4522 5 79538367 84799488 4566 5 79666742 80807409
4523 5 79538367 84801081 4567 5 79666742 80835734
4524 5 79538367 84824103 4568 5 79666742 80971764
4525 5 79538367 84824203 4569 5 79666742 80972258
4526 5 79538367 84824816 4570 5 79666742 80974450
4527 5 79538367 84825422 4571 5 79666742 81047638
4528 5 79538367 84825763 4572 5 79666742 81082921
4529 5 79538367 84825942 4573 5 79666742 81157909
4530 5 79538367 84843411 4574 5 79666742 81265937
4531 5 79538367 84936441 4575 5 79666742 81265937
4532 5 79538367 84936493 4576 5 79666742 81267485
- 116 036149
4577 5 79666742 81267499 4621 5 79666742 83560095
4578 5 79666742 81274512 4622 5 79666742 83560204
4579 5 79666742 81763618 4623 5 79666742 83572400
4580 5 79666742 81797217 4624 5 79666742 83607661
4581 5 79666742 81800186 4625 5 79666742 83745342
4582 5 79666742 81806213 4626 5 79666742 83861275
4583 5 79666742 81854583 4627 5 79666742 83861633
4584 5 79666742 81859374 4628 5 79666742 83865653
4585 5 79666742 81861368 4629 5 79666742 83865914
4586 5 79666742 81863686 4630 5 79666742 83865920
4587 5 79666742 81916850 4631 5 79666742 83868010
4588 5 79666742 81954891 4632 5 79666742 84019752
4589 5 79666742 81985250 4633 5 79666742 84065912
4590 5 79666742 82083752 4634 5 79666742 84086632
4591 5 79666742 82101253 4635 5 79666742 84089603
4592 5 79666742 82143124 4636 5 79666742 84104814
4593 5 79666742 82236318 4637 5 79666742 84105175
4594 5 79666742 82325587 4638 5 79666742 84251635
4595 5 79666742 82427210 4639 5 79666742 84252180
4596 5 79666742 82431853 4640 5 79666742 84253030
4597 5 79666742 82446714 4641 5 79666742 84254208
4598 5 79666742 82446794 4642 5 79666742 84314930
4599 5 79666742 82551111 4643 5 79666742 84340523
4600 5 79666742 82552090 4644 5 79666742 84516340
4601 5 79666742 82555641 4645 5 79666742 84706916
4602 5 79666742 82555670 4646 5 79666742 84799488
4603 5 79666742 82556511 4647 5 79666742 84801081
4604 5 79666742 82559047 4648 5 79666742 84824103
4605 5 79666742 82561535 4649 5 79666742 84824203
4606 5 79666742 82610100 4650 5 79666742 84824816
4607 5 79666742 82676822 4651 5 79666742 84825422
4608 5 79666742 82676901 4652 5 79666742 84825763
4609 5 79666742 82883691 4653 5 79666742 84825942
4610 5 79666742 82954942 4654 5 79666742 84843411
4611 5 79666742 82971688 4655 5 79666742 84936441
4612 5 79666742 83023965 4656 5 79666742 84936493
4613 5 79666742 83094205 4657 5 79666742 84943705
4614 5 79666742 83146355 4658 5 79666742 169454950
4615 5 79666742 83280630 4659 5 79666742 181522829
4616 5 79666742 83281412 4660 5 79666742 204759879
4617 5 79666742 83400242 4661 5 79666742 209874191
4618 5 79666742 83405797 4662 5 79679654 79682242
4619 5 79666742 83437132 4663 5 79679654 79699261
4620 5 79666742 83522252 4664 5 79679654 79710673
- 117 036149
4665 5 79679654 79861902 4709 5 79679654 81916850
4666 5 79679654 79867710 4710 5 79679654 81954891
4667 5 79679654 79867868 4711 5 79679654 81985250
4668 5 79679654 79867873 4712 5 79679654 82083752
4669 5 79679654 79961961 4713 5 79679654 82101253
4670 5 79679654 80086268 4714 5 79679654 82143124
4671 5 79679654 80190673 4715 5 79679654 82236318
4672 5 79679654 80190777 4716 5 79679654 82325587
4673 5 79679654 80192546 4717 5 79679654 82427210
4674 5 79679654 80195395 4718 5 79679654 82431853
4675 5 79679654 80199923 4719 5 79679654 82446714
4676 5 79679654 80241911 4720 5 79679654 82446794
4677 5 79679654 80282785 4721 5 79679654 82551111
4678 5 79679654 80345337 4722 5 79679654 82552090
4679 5 79679654 80389787 4723 5 79679654 82555641
4680 5 79679654 80411639 4724 5 79679654 82555670
4681 5 79679654 80446855 4725 5 79679654 82556511
4682 5 79679654 80492790 4726 5 79679654 82559047
4683 5 79679654 80670554 4727 5 79679654 82561535
4684 5 79679654 80674679 4728 5 79679654 82610100
4685 5 79679654 80720509 4729 5 79679654 82676822
4686 5 79679654 80800856 4730 5 79679654 82676901
4687 5 79679654 80804587 4731 5 79679654 82883691
4688 5 79679654 80807409 4732 5 79679654 82954942
4689 5 79679654 80835734 4733 5 79679654 82971688
4690 5 79679654 80971764 4734 5 79679654 83023965
4691 5 79679654 80972258 4735 5 79679654 83094205
4692 5 79679654 80974450 4736 5 79679654 83146355
4693 5 79679654 81047638 4737 5 79679654 83280630
4694 5 79679654 81082921 4738 5 79679654 83281412
4695 5 79679654 81157909 4739 5 79679654 83400242
4696 5 79679654 81265937 4740 5 79679654 83405797
4697 5 79679654 81265937 4741 5 79679654 83437132
4698 5 79679654 81267485 4742 5 79679654 83522252
4699 5 79679654 81267499 4743 5 79679654 83560095
4700 5 79679654 81274512 4744 5 79679654 83560204
4701 5 79679654 81763618 4745 5 79679654 83572400
4702 5 79679654 81797217 4746 5 79679654 83607661
4703 5 79679654 81800186 4747 5 79679654 83745342
4704 5 79679654 81806213 4748 5 79679654 83861275
4705 5 79679654 81854583 4749 5 79679654 83861633
4706 5 79679654 81859374 4750 5 79679654 83865653
4707 5 79679654 81861368 4751 5 79679654 83865914
4708 5 79679654 81863686 4752 5 79679654 83865920
- 118 036149
4753 5 79679654 83868010 4797 5 79697555 80241911
4754 5 79679654 84019752 4798 5 79697555 80282785
4755 5 79679654 84065912 4799 5 79697555 80345337
4756 5 79679654 84086632 4800 5 79697555 80389787
4757 5 79679654 84089603 4801 5 79697555 80411639
4758 5 79679654 84104814 4802 5 79697555 80446855
4759 5 79679654 84105175 4803 5 79697555 80492790
4760 5 79679654 84251635 4804 5 79697555 80670554
4761 5 79679654 84252180 4805 5 79697555 80674679
4762 5 79679654 84253030 4806 5 79697555 80720509
4763 5 79679654 84254208 4807 5 79697555 80800856
4764 5 79679654 84314930 4808 5 79697555 80804587
4765 5 79679654 84340523 4809 5 79697555 80807409
4766 5 79679654 84516340 4810 5 79697555 80835734
4767 5 79679654 84706916 4811 5 79697555 80971764
4768 5 79679654 84799488 4812 5 79697555 80972258
4769 5 79679654 84801081 4813 5 79697555 80974450
4770 5 79679654 84824103 4814 5 79697555 81047638
4771 5 79679654 84824203 4815 5 79697555 81082921
4772 5 79679654 84824816 4816 5 79697555 81157909
4773 5 79679654 84825422 4817 5 79697555 81265937
4774 5 79679654 84825763 4818 5 79697555 81265937
4775 5 79679654 84825942 4819 5 79697555 81267485
4776 5 79679654 84843411 4820 5 79697555 81267499
4777 5 79679654 84936441 4821 5 79697555 81274512
4778 5 79679654 84936493 4822 5 79697555 81763618
4779 5 79679654 84943705 4823 5 79697555 81797217
4780 5 79679654 169454950 4824 5 79697555 81800186
4781 5 79679654 181522829 4825 5 79697555 81806213
4782 5 79679654 204759879 4826 5 79697555 81854583
4783 5 79679654 209874191 4827 5 79697555 81859374
4784 5 79697555 79699261 4828 5 79697555 81861368
4785 5 79697555 79710673 4829 5 79697555 81863686
4786 5 79697555 79861902 4830 5 79697555 81916850
4787 5 79697555 79867710 4831 5 79697555 81954891
4788 5 79697555 79867868 4832 5 79697555 81985250
4789 5 79697555 79867873 4833 5 79697555 82083752
4790 5 79697555 79961961 4834 5 79697555 82101253
4791 5 79697555 80086268 4835 5 79697555 82143124
4792 5 79697555 80190673 4836 5 79697555 82236318
4793 5 79697555 80190777 4837 5 79697555 82325587
4794 5 79697555 80192546 4838 5 79697555 82427210
4795 5 79697555 80195395 4839 5 79697555 82431853
4796 5 79697555 80199923 4840 5 79697555 82446714
- 119 036149
4841 5 79697555 82446794 4885 5 79697555 84314930
4842 5 79697555 82551111 4886 5 79697555 84340523
4843 5 79697555 82552090 4887 5 79697555 84516340
4844 5 79697555 82555641 4888 5 79697555 84706916
4845 5 79697555 82555670 4889 5 79697555 84799488
4846 5 79697555 82556511 4890 5 79697555 84801081
4847 5 79697555 82559047 4891 5 79697555 84824103
4848 5 79697555 82561535 4892 5 79697555 84824203
4849 5 79697555 82610100 4893 5 79697555 84824816
4850 5 79697555 82676822 4894 5 79697555 84825422
4851 5 79697555 82676901 4895 5 79697555 84825763
4852 5 79697555 82883691 4896 5 79697555 84825942
4853 5 79697555 82954942 4897 5 79697555 84843411
4854 5 79697555 82971688 4898 5 79697555 84936441
4855 5 79697555 83023965 4899 5 79697555 84936493
4856 5 79697555 83094205 4900 5 79697555 84943705
4857 5 79697555 83146355 4901 5 79697555 169454950
4858 5 79697555 83280630 4902 5 79697555 181522829
4859 5 79697555 83281412 4903 5 79697555 204759879
4860 5 79697555 83400242 4904 5 79697555 209874191
4861 5 79697555 83405797 4905 5 79857859 79861902
4862 5 79697555 83437132 4906 5 79857859 79867710
4863 5 79697555 83522252 4907 5 79857859 79867868
4864 5 79697555 83560095 4908 5 79857859 79867873
4865 5 79697555 83560204 4909 5 79857859 79961961
4866 5 79697555 83572400 4910 5 79857859 80086268
4867 5 79697555 83607661 4911 5 79857859 80190673
4868 5 79697555 83745342 4912 5 79857859 80190777
4869 5 79697555 83861275 4913 5 79857859 80192546
4870 5 79697555 83861633 4914 5 79857859 80195395
4871 5 79697555 83865653 4915 5 79857859 80199923
4872 5 79697555 83865914 4916 5 79857859 80241911
4873 5 79697555 83865920 4917 5 79857859 80282785
4874 5 79697555 83868010 4918 5 79857859 80345337
4875 5 79697555 84019752 4919 5 79857859 80389787
4876 5 79697555 84065912 4920 5 79857859 80411639
4877 5 79697555 84086632 4921 5 79857859 80446855
4878 5 79697555 84089603 4922 5 79857859 80492790
4879 5 79697555 84104814 4923 5 79857859 80670554
4880 5 79697555 84105175 4924 5 79857859 80674679
4881 5 79697555 84251635 4925 5 79857859 80720509
4882 5 79697555 84252180 4926 5 79857859 80800856
4883 5 79697555 84253030 4927 5 79857859 80804587
4884 5 79697555 84254208 4928 5 79857859 80807409
- 120 036149
4929 5 79857859 80835734 4973 5 79857859 82971688
4930 5 79857859 80971764 4974 5 79857859 83023965
4931 5 79857859 80972258 4975 5 79857859 83094205
4932 5 79857859 80974450 4976 5 79857859 83146355
4933 5 79857859 81047638 4977 5 79857859 83280630
4934 5 79857859 81082921 4978 5 79857859 83281412
4935 5 79857859 81157909 4979 5 79857859 83400242
4936 5 79857859 81265937 4980 5 79857859 83405797
4937 5 79857859 81265937 4981 5 79857859 83437132
4938 5 79857859 81267485 4982 5 79857859 83522252
4939 5 79857859 81267499 4983 5 79857859 83560095
4940 5 79857859 81274512 4984 5 79857859 83560204
4941 5 79857859 81763618 4985 5 79857859 83572400
4942 5 79857859 81797217 4986 5 79857859 83607661
4943 5 79857859 81800186 4987 5 79857859 83745342
4944 5 79857859 81806213 4988 5 79857859 83861275
4945 5 79857859 81854583 4989 5 79857859 83861633
4946 5 79857859 81859374 4990 5 79857859 83865653
4947 5 79857859 81861368 4991 5 79857859 83865914
4948 5 79857859 81863686 4992 5 79857859 83865920
4949 5 79857859 81916850 4993 5 79857859 83868010
4950 5 79857859 81954891 4994 5 79857859 84019752
4951 5 79857859 81985250 4995 5 79857859 84065912
4952 5 79857859 82083752 4996 5 79857859 84086632
4953 5 79857859 82101253 4997 5 79857859 84089603
4954 5 79857859 82143124 4998 5 79857859 84104814
4955 5 79857859 82236318 4999 5 79857859 84105175
4956 5 79857859 82325587 5000 5 79857859 84251635
4957 5 79857859 82427210 5001 5 79857859 84252180
4958 5 79857859 82431853 5002 5 79857859 84253030
4959 5 79857859 82446714 5003 5 79857859 84254208
4960 5 79857859 82446794 5004 5 79857859 84314930
4961 5 79857859 82551111 5005 5 79857859 84340523
4962 5 79857859 82552090 5006 5 79857859 84516340
4963 5 79857859 82555641 5007 5 79857859 84706916
4964 5 79857859 82555670 5008 5 79857859 84799488
4965 5 79857859 82556511 5009 5 79857859 84801081
4966 5 79857859 82559047 5010 5 79857859 84824103
4967 5 79857859 82561535 5011 5 79857859 84824203
4968 5 79857859 82610100 5012 5 79857859 84824816
4969 5 79857859 82676822 5013 5 79857859 84825422
4970 5 79857859 82676901 5014 5 79857859 84825763
4971 5 79857859 82883691 5015 5 79857859 84825942
4972 5 79857859 82954942 5016 5 79857859 84843411
- 121 036149
5017 5 79857859 84936441 5061 5 79862405 81800186
5018 5 79857859 84936493 5062 5 79862405 81806213
5019 5 79857859 84943705 5063 5 79862405 81854583
5020 5 79857859 169454950 5064 5 79862405 81859374
5021 5 79857859 181522829 5065 5 79862405 81861368
5022 5 79857859 204759879 5066 5 79862405 81863686
5023 5 79857859 209874191 5067 5 79862405 81916850
5024 5 79862405 79867710 5068 5 79862405 81954891
5025 5 79862405 79867868 5069 5 79862405 81985250
5026 5 79862405 79867873 5070 5 79862405 82083752
5027 5 79862405 79961961 5071 5 79862405 82101253
5028 5 79862405 80086268 5072 5 79862405 82143124
5029 5 79862405 80190673 5073 5 79862405 82236318
5030 5 79862405 80190777 5074 5 79862405 82325587
5031 5 79862405 80192546 5075 5 79862405 82427210
5032 5 79862405 80195395 5076 5 79862405 82431853
5033 5 79862405 80199923 5077 5 79862405 82446714
5034 5 79862405 80241911 5078 5 79862405 82446794
5035 5 79862405 80282785 5079 5 79862405 82551111
5036 5 79862405 80345337 5080 5 79862405 82552090
5037 5 79862405 80389787 5081 5 79862405 82555641
5038 5 79862405 80411639 5082 5 79862405 82555670
5039 5 79862405 80446855 5083 5 79862405 82556511
5040 5 79862405 80492790 5084 5 79862405 82559047
5041 5 79862405 80670554 5085 5 79862405 82561535
5042 5 79862405 80674679 5086 5 79862405 82610100
5043 5 79862405 80720509 5087 5 79862405 82676822
5044 5 79862405 80800856 5088 5 79862405 82676901
5045 5 79862405 80804587 5089 5 79862405 82883691
5046 5 79862405 80807409 5090 5 79862405 82954942
5047 5 79862405 80835734 5091 5 79862405 82971688
5048 5 79862405 80971764 5092 5 79862405 83023965
5049 5 79862405 80972258 5093 5 79862405 83094205
5050 5 79862405 80974450 5094 5 79862405 83146355
5051 5 79862405 81047638 5095 5 79862405 83280630
5052 5 79862405 81082921 5096 5 79862405 83281412
5053 5 79862405 81157909 5097 5 79862405 83400242
5054 5 79862405 81265937 5098 5 79862405 83405797
5055 5 79862405 81265937 5099 5 79862405 83437132
5056 5 79862405 81267485 5100 5 79862405 83522252
5057 5 79862405 81267499 5101 5 79862405 83560095
5058 5 79862405 81274512 5102 5 79862405 83560204
5059 5 79862405 81763618 5103 5 79862405 83572400
5060 5 79862405 81797217 5104 5 79862405 83607661
- 122 036149
5105 5 79862405 83745342 5149 5 79960831 80241911
5106 5 79862405 83861275 5150 5 79960831 80282785
5107 5 79862405 83861633 5151 5 79960831 80345337
5108 5 79862405 83865653 5152 5 79960831 80389787
5109 5 79862405 83865914 5153 5 79960831 80411639
5110 5 79862405 83865920 5154 5 79960831 80446855
5111 5 79862405 83868010 5155 5 79960831 80492790
5112 5 79862405 84019752 5156 5 79960831 80670554
5113 5 79862405 84065912 5157 5 79960831 80674679
5114 5 79862405 84086632 5158 5 79960831 80720509
5115 5 79862405 84089603 5159 5 79960831 80800856
5116 5 79862405 84104814 5160 5 79960831 80804587
5117 5 79862405 84105175 5161 5 79960831 80807409
5118 5 79862405 84251635 5162 5 79960831 80835734
5119 5 79862405 84252180 5163 5 79960831 80971764
5120 5 79862405 84253030 5164 5 79960831 80972258
5121 5 79862405 84254208 5165 5 79960831 80974450
5122 5 79862405 84314930 5166 5 79960831 81047638
5123 5 79862405 84340523 5167 5 79960831 81082921
5124 5 79862405 84516340 5168 5 79960831 81157909
5125 5 79862405 84706916 5169 5 79960831 81265937
5126 5 79862405 84799488 5170 5 79960831 81265937
5127 5 79862405 84801081 5171 5 79960831 81267485
5128 5 79862405 84824103 5172 5 79960831 81267499
5129 5 79862405 84824203 5173 5 79960831 81274512
5130 5 79862405 84824816 5174 5 79960831 81763618
5131 5 79862405 84825422 5175 5 79960831 81797217
5132 5 79862405 84825763 5176 5 79960831 81800186
5133 5 79862405 84825942 5177 5 79960831 81806213
5134 5 79862405 84843411 5178 5 79960831 81854583
5135 5 79862405 84936441 5179 5 79960831 81859374
5136 5 79862405 84936493 5180 5 79960831 81861368
5137 5 79862405 84943705 5181 5 79960831 81863686
5138 5 79862405 169454950 5182 5 79960831 81916850
5139 5 79862405 181522829 5183 5 79960831 81954891
5140 5 79862405 204759879 5184 5 79960831 81985250
5141 5 79862405 209874191 5185 5 79960831 82083752
5142 5 79960831 79961961 5186 5 79960831 82101253
5143 5 79960831 80086268 5187 5 79960831 82143124
5144 5 79960831 80190673 5188 5 79960831 82236318
5145 5 79960831 80190777 5189 5 79960831 82325587
5146 5 79960831 80192546 5190 5 79960831 82427210
5147 5 79960831 80195395 5191 5 79960831 82431853
5148 5 79960831 80199923 5192 5 79960831 82446714
- 123 036149
5193 5 79960831 82446794 5237 5 79960831 84314930
5194 5 79960831 82551111 5238 5 79960831 84340523
5195 5 79960831 82552090 5239 5 79960831 84516340
5196 5 79960831 82555641 5240 5 79960831 84706916
5197 5 79960831 82555670 5241 5 79960831 84799488
5198 5 79960831 82556511 5242 5 79960831 84801081
5199 5 79960831 82559047 5243 5 79960831 84824103
5200 5 79960831 82561535 5244 5 79960831 84824203
5201 5 79960831 82610100 5245 5 79960831 84824816
5202 5 79960831 82676822 5246 5 79960831 84825422
5203 5 79960831 82676901 5247 5 79960831 84825763
5204 5 79960831 82883691 5248 5 79960831 84825942
5205 5 79960831 82954942 5249 5 79960831 84843411
5206 5 79960831 82971688 5250 5 79960831 84936441
5207 5 79960831 83023965 5251 5 79960831 84936493
5208 5 79960831 83094205 5252 5 79960831 84943705
5209 5 79960831 83146355 5253 5 79960831 169454950
5210 5 79960831 83280630 5254 5 79960831 181522829
5211 5 79960831 83281412 5255 5 79960831 204759879
5212 5 79960831 83400242 5256 5 79960831 209874191
5213 5 79960831 83405797 5257 5 80084956 80086268
5214 5 79960831 83437132 5258 5 80084956 80190673
5215 5 79960831 83522252 5259 5 80084956 80190777
5216 5 79960831 83560095 5260 5 80084956 80192546
5217 5 79960831 83560204 5261 5 80084956 80195395
5218 5 79960831 83572400 5262 5 80084956 80199923
5219 5 79960831 83607661 5263 5 80084956 80241911
5220 5 79960831 83745342 5264 5 80084956 80282785
5221 5 79960831 83861275 5265 5 80084956 80345337
5222 5 79960831 83861633 5266 5 80084956 80389787
5223 5 79960831 83865653 5267 5 80084956 80411639
5224 5 79960831 83865914 5268 5 80084956 80446855
5225 5 79960831 83865920 5269 5 80084956 80492790
5226 5 79960831 83868010 5270 5 80084956 80670554
5227 5 79960831 84019752 5271 5 80084956 80674679
5228 5 79960831 84065912 5272 5 80084956 80720509
5229 5 79960831 84086632 5273 5 80084956 80800856
5230 5 79960831 84089603 5274 5 80084956 80804587
5231 5 79960831 84104814 5275 5 80084956 80807409
5232 5 79960831 84105175 5276 5 80084956 80835734
5233 5 79960831 84251635 5277 5 80084956 80971764
5234 5 79960831 84252180 5278 5 80084956 80972258
5235 5 79960831 84253030 5279 5 80084956 80974450
5236 5 79960831 84254208 5280 5 80084956 81047638
- 124 036149
5281 5 80084956 81082921 5325 5 80084956 83281412
5282 5 80084956 81157909 5326 5 80084956 83400242
5283 5 80084956 81265937 5327 5 80084956 83405797
5284 5 80084956 81265937 5328 5 80084956 83437132
5285 5 80084956 81267485 5329 5 80084956 83522252
5286 5 80084956 81267499 5330 5 80084956 83560095
5287 5 80084956 81274512 5331 5 80084956 83560204
5288 5 80084956 81763618 5332 5 80084956 83572400
5289 5 80084956 81797217 5333 5 80084956 83607661
5290 5 80084956 81800186 5334 5 80084956 83745342
5291 5 80084956 81806213 5335 5 80084956 83861275
5292 5 80084956 81854583 5336 5 80084956 83861633
5293 5 80084956 81859374 5337 5 80084956 83865653
5294 5 80084956 81861368 5338 5 80084956 83865914
5295 5 80084956 81863686 5339 5 80084956 83865920
5296 5 80084956 81916850 5340 5 80084956 83868010
5297 5 80084956 81954891 5341 5 80084956 84019752
5298 5 80084956 81985250 5342 5 80084956 84065912
5299 5 80084956 82083752 5343 5 80084956 84086632
5300 5 80084956 82101253 5344 5 80084956 84089603
5301 5 80084956 82143124 5345 5 80084956 84104814
5302 5 80084956 82236318 5346 5 80084956 84105175
5303 5 80084956 82325587 5347 5 80084956 84251635
5304 5 80084956 82427210 5348 5 80084956 84252180
5305 5 80084956 82431853 5349 5 80084956 84253030
5306 5 80084956 82446714 5350 5 80084956 84254208
5307 5 80084956 82446794 5351 5 80084956 84314930
5308 5 80084956 82551111 5352 5 80084956 84340523
5309 5 80084956 82552090 5353 5 80084956 84516340
5310 5 80084956 82555641 5354 5 80084956 84706916
5311 5 80084956 82555670 5355 5 80084956 84799488
5312 5 80084956 82556511 5356 5 80084956 84801081
5313 5 80084956 82559047 5357 5 80084956 84824103
5314 5 80084956 82561535 5358 5 80084956 84824203
5315 5 80084956 82610100 5359 5 80084956 84824816
5316 5 80084956 82676822 5360 5 80084956 84825422
5317 5 80084956 82676901 5361 5 80084956 84825763
5318 5 80084956 82883691 5362 5 80084956 84825942
5319 5 80084956 82954942 5363 5 80084956 84843411
5320 5 80084956 82971688 5364 5 80084956 84936441
5321 5 80084956 83023965 5365 5 80084956 84936493
5322 5 80084956 83094205 5366 5 80084956 84943705
5323 5 80084956 83146355 5367 5 80084956 169454950
5324 5 80084956 83280630 5368 5 80084956 181522829
- 125 036149
5369 5 80084956 204759879 5413 5 80187987 82101253
5370 5 80084956 209874191 5414 5 80187987 82143124
5371 5 80187987 80190673 5415 5 80187987 82236318
5372 5 80187987 80190777 5416 5 80187987 82325587
5373 5 80187987 80192546 5417 5 80187987 82427210
5374 5 80187987 80195395 5418 5 80187987 82431853
5375 5 80187987 80199923 5419 5 80187987 82446714
5376 5 80187987 80241911 5420 5 80187987 82446794
5377 5 80187987 80282785 5421 5 80187987 82551111
5378 5 80187987 80345337 5422 5 80187987 82552090
5379 5 80187987 80389787 5423 5 80187987 82555641
5380 5 80187987 80411639 5424 5 80187987 82555670
5381 5 80187987 80446855 5425 5 80187987 82556511
5382 5 80187987 80492790 5426 5 80187987 82559047
5383 5 80187987 80670554 5427 5 80187987 82561535
5384 5 80187987 80674679 5428 5 80187987 82610100
5385 5 80187987 80720509 5429 5 80187987 82676822
5386 5 80187987 80800856 5430 5 80187987 82676901
5387 5 80187987 80804587 5431 5 80187987 82883691
5388 5 80187987 80807409 5432 5 80187987 82954942
5389 5 80187987 80835734 5433 5 80187987 82971688
5390 5 80187987 80971764 5434 5 80187987 83023965
5391 5 80187987 80972258 5435 5 80187987 83094205
5392 5 80187987 80974450 5436 5 80187987 83146355
5393 5 80187987 81047638 5437 5 80187987 83280630
5394 5 80187987 81082921 5438 5 80187987 83281412
5395 5 80187987 81157909 5439 5 80187987 83400242
5396 5 80187987 81265937 5440 5 80187987 83405797
5397 5 80187987 81265937 5441 5 80187987 83437132
5398 5 80187987 81267485 5442 5 80187987 83522252
5399 5 80187987 81267499 5443 5 80187987 83560095
5400 5 80187987 81274512 5444 5 80187987 83560204
5401 5 80187987 81763618 5445 5 80187987 83572400
5402 5 80187987 81797217 5446 5 80187987 83607661
5403 5 80187987 81800186 5447 5 80187987 83745342
5404 5 80187987 81806213 5448 5 80187987 83861275
5405 5 80187987 81854583 5449 5 80187987 83861633
5406 5 80187987 81859374 5450 5 80187987 83865653
5407 5 80187987 81861368 5451 5 80187987 83865914
5408 5 80187987 81863686 5452 5 80187987 83865920
5409 5 80187987 81916850 5453 5 80187987 83868010
5410 5 80187987 81954891 5454 5 80187987 84019752
5411 5 80187987 81985250 5455 5 80187987 84065912
5412 5 80187987 82083752 5456 5 80187987 84086632
- 126 036149
5457 5 80187987 84089603 5501 5 80188978 80807409
5458 5 80187987 84104814 5502 5 80188978 80835734
5459 5 80187987 84105175 5503 5 80188978 80971764
5460 5 80187987 84251635 5504 5 80188978 80972258
5461 5 80187987 84252180 5505 5 80188978 80974450
5462 5 80187987 84253030 5506 5 80188978 81047638
5463 5 80187987 84254208 5507 5 80188978 81082921
5464 5 80187987 84314930 5508 5 80188978 81157909
5465 5 80187987 84340523 5509 5 80188978 81265937
5466 5 80187987 84516340 5510 5 80188978 81265937
5467 5 80187987 84706916 5511 5 80188978 81267485
5468 5 80187987 84799488 5512 5 80188978 81267499
5469 5 80187987 84801081 5513 5 80188978 81274512
5470 5 80187987 84824103 5514 5 80188978 81763618
5471 5 80187987 84824203 5515 5 80188978 81797217
5472 5 80187987 84824816 5516 5 80188978 81800186
5473 5 80187987 84825422 5517 5 80188978 81806213
5474 5 80187987 84825763 5518 5 80188978 81854583
5475 5 80187987 84825942 5519 5 80188978 81859374
5476 5 80187987 84843411 5520 5 80188978 81861368
5477 5 80187987 84936441 5521 5 80188978 81863686
5478 5 80187987 84936493 5522 5 80188978 81916850
5479 5 80187987 84943705 5523 5 80188978 81954891
5480 5 80187987 169454950 5524 5 80188978 81985250
5481 5 80187987 181522829 5525 5 80188978 82083752
5482 5 80187987 204759879 5526 5 80188978 82101253
5483 5 80187987 209874191 5527 5 80188978 82143124
5484 5 80188978 80190673 5528 5 80188978 82236318
5485 5 80188978 80190777 5529 5 80188978 82325587
5486 5 80188978 80192546 5530 5 80188978 82427210
5487 5 80188978 80195395 5531 5 80188978 82431853
5488 5 80188978 80199923 5532 5 80188978 82446714
5489 5 80188978 80241911 5533 5 80188978 82446794
5490 5 80188978 80282785 5534 5 80188978 82551111
5491 5 80188978 80345337 5535 5 80188978 82552090
5492 5 80188978 80389787 5536 5 80188978 82555641
5493 5 80188978 80411639 5537 5 80188978 82555670
5494 5 80188978 80446855 5538 5 80188978 82556511
5495 5 80188978 80492790 5539 5 80188978 82559047
5496 5 80188978 80670554 5540 5 80188978 82561535
5497 5 80188978 80674679 5541 5 80188978 82610100
5498 5 80188978 80720509 5542 5 80188978 82676822
5499 5 80188978 80800856 5543 5 80188978 82676901
5500 5 80188978 80804587 5544 5 80188978 82883691
- 127 036149
5545 5 80188978 82954942 5589 5 80188978 84843411
5546 5 80188978 82971688 5590 5 80188978 84936441
5547 5 80188978 83023965 5591 5 80188978 84936493
5548 5 80188978 83094205 5592 5 80188978 84943705
5549 5 80188978 83146355 5593 5 80188978 169454950
5550 5 80188978 83280630 5594 5 80188978 181522829
5551 5 80188978 83281412 5595 5 80188978 204759879
5552 5 80188978 83400242 5596 5 80188978 209874191
5553 5 80188978 83405797 5597 5 80191781 80192546
5554 5 80188978 83437132 5598 5 80191781 80195395
5555 5 80188978 83522252 5599 5 80191781 80199923
5556 5 80188978 83560095 5600 5 80191781 80241911
5557 5 80188978 83560204 5601 5 80191781 80282785
5558 5 80188978 83572400 5602 5 80191781 80345337
5559 5 80188978 83607661 5603 5 80191781 80389787
5560 5 80188978 83745342 5604 5 80191781 80411639
5561 5 80188978 83861275 5605 5 80191781 80446855
5562 5 80188978 83861633 5606 5 80191781 80492790
5563 5 80188978 83865653 5607 5 80191781 80670554
5564 5 80188978 83865914 5608 5 80191781 80674679
5565 5 80188978 83865920 5609 5 80191781 80720509
5566 5 80188978 83868010 5610 5 80191781 80800856
5567 5 80188978 84019752 5611 5 80191781 80804587
5568 5 80188978 84065912 5612 5 80191781 80807409
5569 5 80188978 84086632 5613 5 80191781 80835734
5570 5 80188978 84089603 5614 5 80191781 80971764
5571 5 80188978 84104814 5615 5 80191781 80972258
5572 5 80188978 84105175 5616 5 80191781 80974450
5573 5 80188978 84251635 5617 5 80191781 81047638
5574 5 80188978 84252180 5618 5 80191781 81082921
5575 5 80188978 84253030 5619 5 80191781 81157909
5576 5 80188978 84254208 5620 5 80191781 81265937
5577 5 80188978 84314930 5621 5 80191781 81265937
5578 5 80188978 84340523 5622 5 80191781 81267485
5579 5 80188978 84516340 5623 5 80191781 81267499
5580 5 80188978 84706916 5624 5 80191781 81274512
5581 5 80188978 84799488 5625 5 80191781 81763618
5582 5 80188978 84801081 5626 5 80191781 81797217
5583 5 80188978 84824103 5627 5 80191781 81800186
5584 5 80188978 84824203 5628 5 80191781 81806213
5585 5 80188978 84824816 5629 5 80191781 81854583
5586 5 80188978 84825422 5630 5 80191781 81859374
5587 5 80188978 84825763 5631 5 80191781 81861368
5588 5 80188978 84825942 5632 5 80191781 81863686
- 128 036149
5633 5 80191781 81916850 5677 5 80191781 83868010
5634 5 80191781 81954891 5678 5 80191781 84019752
5635 5 80191781 81985250 5679 5 80191781 84065912
5636 5 80191781 82083752 5680 5 80191781 84086632
5637 5 80191781 82101253 5681 5 80191781 84089603
5638 5 80191781 82143124 5682 5 80191781 84104814
5639 5 80191781 82236318 5683 5 80191781 84105175
5640 5 80191781 82325587 5684 5 80191781 84251635
5641 5 80191781 82427210 5685 5 80191781 84252180
5642 5 80191781 82431853 5686 5 80191781 84253030
5643 5 80191781 82446714 5687 5 80191781 84254208
5644 5 80191781 82446794 5688 5 80191781 84314930
5645 5 80191781 82551111 5689 5 80191781 84340523
5646 5 80191781 82552090 5690 5 80191781 84516340
5647 5 80191781 82555641 5691 5 80191781 84706916
5648 5 80191781 82555670 5692 5 80191781 84799488
5649 5 80191781 82556511 5693 5 80191781 84801081
5650 5 80191781 82559047 5694 5 80191781 84824103
5651 5 80191781 82561535 5695 5 80191781 84824203
5652 5 80191781 82610100 5696 5 80191781 84824816
5653 5 80191781 82676822 5697 5 80191781 84825422
5654 5 80191781 82676901 5698 5 80191781 84825763
5655 5 80191781 82883691 5699 5 80191781 84825942
5656 5 80191781 82954942 5700 5 80191781 84843411
5657 5 80191781 82971688 5701 5 80191781 84936441
5658 5 80191781 83023965 5702 5 80191781 84936493
5659 5 80191781 83094205 5703 5 80191781 84943705
5660 5 80191781 83146355 5704 5 80191781 169454950
5661 5 80191781 83280630 5705 5 80191781 181522829
5662 5 80191781 83281412 5706 5 80191781 204759879
5663 5 80191781 83400242 5707 5 80191781 209874191
5664 5 80191781 83405797 5708 5 80195077 80195395
5665 5 80191781 83437132 5709 5 80195077 80199923
5666 5 80191781 83522252 5710 5 80195077 80241911
5667 5 80191781 83560095 5711 5 80195077 80282785
5668 5 80191781 83560204 5712 5 80195077 80345337
5669 5 80191781 83572400 5713 5 80195077 80389787
5670 5 80191781 83607661 5714 5 80195077 80411639
5671 5 80191781 83745342 5715 5 80195077 80446855
5672 5 80191781 83861275 5716 5 80195077 80492790
5673 5 80191781 83861633 5717 5 80195077 80670554
5674 5 80191781 83865653 5718 5 80195077 80674679
5675 5 80191781 83865914 5719 5 80195077 80720509
5676 5 80191781 83865920 5720 5 80195077 80800856
- 129 036149
5721 5 80195077 80804587 5765 5 80195077 82883691
5722 5 80195077 80807409 5766 5 80195077 82954942
5723 5 80195077 80835734 5767 5 80195077 82971688
5724 5 80195077 80971764 5768 5 80195077 83023965
5725 5 80195077 80972258 5769 5 80195077 83094205
5726 5 80195077 80974450 5770 5 80195077 83146355
5727 5 80195077 81047638 5771 5 80195077 83280630
5728 5 80195077 81082921 5772 5 80195077 83281412
5729 5 80195077 81157909 5773 5 80195077 83400242
5730 5 80195077 81265937 5774 5 80195077 83405797
5731 5 80195077 81265937 5775 5 80195077 83437132
5732 5 80195077 81267485 5776 5 80195077 83522252
5733 5 80195077 81267499 5777 5 80195077 83560095
5734 5 80195077 81274512 5778 5 80195077 83560204
5735 5 80195077 81763618 5779 5 80195077 83572400
5736 5 80195077 81797217 5780 5 80195077 83607661
5737 5 80195077 81800186 5781 5 80195077 83745342
5738 5 80195077 81806213 5782 5 80195077 83861275
5739 5 80195077 81854583 5783 5 80195077 83861633
5740 5 80195077 81859374 5784 5 80195077 83865653
5741 5 80195077 81861368 5785 5 80195077 83865914
5742 5 80195077 81863686 5786 5 80195077 83865920
5743 5 80195077 81916850 5787 5 80195077 83868010
5744 5 80195077 81954891 5788 5 80195077 84019752
5745 5 80195077 81985250 5789 5 80195077 84065912
5746 5 80195077 82083752 5790 5 80195077 84086632
5747 5 80195077 82101253 5791 5 80195077 84089603
5748 5 80195077 82143124 5792 5 80195077 84104814
5749 5 80195077 82236318 5793 5 80195077 84105175
5750 5 80195077 82325587 5794 5 80195077 84251635
5751 5 80195077 82427210 5795 5 80195077 84252180
5752 5 80195077 82431853 5796 5 80195077 84253030
5753 5 80195077 82446714 5797 5 80195077 84254208
5754 5 80195077 82446794 5798 5 80195077 84314930
5755 5 80195077 82551111 5799 5 80195077 84340523
5756 5 80195077 82552090 5800 5 80195077 84516340
5757 5 80195077 82555641 5801 5 80195077 84706916
5758 5 80195077 82555670 5802 5 80195077 84799488
5759 5 80195077 82556511 5803 5 80195077 84801081
5760 5 80195077 82559047 5804 5 80195077 84824103
5761 5 80195077 82561535 5805 5 80195077 84824203
5762 5 80195077 82610100 5806 5 80195077 84824816
5763 5 80195077 82676822 5807 5 80195077 84825422
5764 5 80195077 82676901 5808 5 80195077 84825763
- 130 036149
5809 5 80195077 84825942 5853 5 80195395 81954891
5810 5 80195077 84843411 5854 5 80195395 81985250
5811 5 80195077 84936441 5855 5 80195395 82083752
5812 5 80195077 84936493 5856 5 80195395 82101253
5813 5 80195077 84943705 5857 5 80195395 82143124
5814 5 80195077 169454950 5858 5 80195395 82236318
5815 5 80195077 181522829 5859 5 80195395 82325587
5816 5 80195077 204759879 5860 5 80195395 82427210
5817 5 80195077 209874191 5861 5 80195395 82431853
5818 5 80195395 80199923 5862 5 80195395 82446714
5819 5 80195395 80241911 5863 5 80195395 82446794
5820 5 80195395 80282785 5864 5 80195395 82551111
5821 5 80195395 80345337 5865 5 80195395 82552090
5822 5 80195395 80389787 5866 5 80195395 82555641
5823 5 80195395 80411639 5867 5 80195395 82555670
5824 5 80195395 80446855 5868 5 80195395 82556511
5825 5 80195395 80492790 5869 5 80195395 82559047
5826 5 80195395 80670554 5870 5 80195395 82561535
5827 5 80195395 80674679 5871 5 80195395 82610100
5828 5 80195395 80720509 5872 5 80195395 82676822
5829 5 80195395 80800856 5873 5 80195395 82676901
5830 5 80195395 80804587 5874 5 80195395 82883691
5831 5 80195395 80807409 5875 5 80195395 82954942
5832 5 80195395 80835734 5876 5 80195395 82971688
5833 5 80195395 80971764 5877 5 80195395 83023965
5834 5 80195395 80972258 5878 5 80195395 83094205
5835 5 80195395 80974450 5879 5 80195395 83146355
5836 5 80195395 81047638 5880 5 80195395 83280630
5837 5 80195395 81082921 5881 5 80195395 83281412
5838 5 80195395 81157909 5882 5 80195395 83400242
5839 5 80195395 81265937 5883 5 80195395 83405797
5840 5 80195395 81265937 5884 5 80195395 83437132
5841 5 80195395 81267485 5885 5 80195395 83522252
5842 5 80195395 81267499 5886 5 80195395 83560095
5843 5 80195395 81274512 5887 5 80195395 83560204
5844 5 80195395 81763618 5888 5 80195395 83572400
5845 5 80195395 81797217 5889 5 80195395 83607661
5846 5 80195395 81800186 5890 5 80195395 83745342
5847 5 80195395 81806213 5891 5 80195395 83861275
5848 5 80195395 81854583 5892 5 80195395 83861633
5849 5 80195395 81859374 5893 5 80195395 83865653
5850 5 80195395 81861368 5894 5 80195395 83865914
5851 5 80195395 81863686 5895 5 80195395 83865920
5852 5 80195395 81916850 5896 5 80195395 83868010
- 131 036149
5897 5 80195395 84019752 5941 5 80195714 80835734
5898 5 80195395 84065912 5942 5 80195714 80971764
5899 5 80195395 84086632 5943 5 80195714 80972258
5900 5 80195395 84089603 5944 5 80195714 80974450
5901 5 80195395 84104814 5945 5 80195714 81047638
5902 5 80195395 84105175 5946 5 80195714 81082921
5903 5 80195395 84251635 5947 5 80195714 81157909
5904 5 80195395 84252180 5948 5 80195714 81265937
5905 5 80195395 84253030 5949 5 80195714 81265937
5906 5 80195395 84254208 5950 5 80195714 81267485
5907 5 80195395 84314930 5951 5 80195714 81267499
5908 5 80195395 84340523 5952 5 80195714 81274512
5909 5 80195395 84516340 5953 5 80195714 81763618
5910 5 80195395 84706916 5954 5 80195714 81797217
5911 5 80195395 84799488 5955 5 80195714 81800186
5912 5 80195395 84801081 5956 5 80195714 81806213
5913 5 80195395 84824103 5957 5 80195714 81854583
5914 5 80195395 84824203 5958 5 80195714 81859374
5915 5 80195395 84824816 5959 5 80195714 81861368
5916 5 80195395 84825422 5960 5 80195714 81863686
5917 5 80195395 84825763 5961 5 80195714 81916850
5918 5 80195395 84825942 5962 5 80195714 81954891
5919 5 80195395 84843411 5963 5 80195714 81985250
5920 5 80195395 84936441 5964 5 80195714 82083752
5921 5 80195395 84936493 5965 5 80195714 82101253
5922 5 80195395 84943705 5966 5 80195714 82143124
5923 5 80195395 169454950 5967 5 80195714 82236318
5924 5 80195395 181522829 5968 5 80195714 82325587
5925 5 80195395 204759879 5969 5 80195714 82427210
5926 5 80195395 209874191 5970 5 80195714 82431853
5927 5 80195714 80199923 5971 5 80195714 82446714
5928 5 80195714 80241911 5972 5 80195714 82446794
5929 5 80195714 80282785 5973 5 80195714 82551111
5930 5 80195714 80345337 5974 5 80195714 82552090
5931 5 80195714 80389787 5975 5 80195714 82555641
5932 5 80195714 80411639 5976 5 80195714 82555670
5933 5 80195714 80446855 5977 5 80195714 82556511
5934 5 80195714 80492790 5978 5 80195714 82559047
5935 5 80195714 80670554 5979 5 80195714 82561535
5936 5 80195714 80674679 5980 5 80195714 82610100
5937 5 80195714 80720509 5981 5 80195714 82676822
5938 5 80195714 80800856 5982 5 80195714 82676901
5939 5 80195714 80804587 5983 5 80195714 82883691
5940 5 80195714 80807409 5984 5 80195714 82954942
- 132 036149
5985 5 80195714 82971688 6029 5 80195714 84936441
5986 5 80195714 83023965 6030 5 80195714 84936493
5987 5 80195714 83094205 6031 5 80195714 84943705
5988 5 80195714 83146355 6032 5 80195714 169454950
5989 5 80195714 83280630 6033 5 80195714 181522829
5990 5 80195714 83281412 6034 5 80195714 204759879
5991 5 80195714 83400242 6035 5 80195714 209874191
5992 5 80195714 83405797 6036 5 80236478 80241911
5993 5 80195714 83437132 6037 5 80236478 80282785
5994 5 80195714 83522252 6038 5 80236478 80345337
5995 5 80195714 83560095 6039 5 80236478 80389787
5996 5 80195714 83560204 6040 5 80236478 80411639
5997 5 80195714 83572400 6041 5 80236478 80446855
5998 5 80195714 83607661 6042 5 80236478 80492790
5999 5 80195714 83745342 6043 5 80236478 80670554
6000 5 80195714 83861275 6044 5 80236478 80674679
6001 5 80195714 83861633 6045 5 80236478 80720509
6002 5 80195714 83865653 6046 5 80236478 80800856
6003 5 80195714 83865914 6047 5 80236478 80804587
6004 5 80195714 83865920 6048 5 80236478 80807409
6005 5 80195714 83868010 6049 5 80236478 80835734
6006 5 80195714 84019752 6050 5 80236478 80971764
6007 5 80195714 84065912 6051 5 80236478 80972258
6008 5 80195714 84086632 6052 5 80236478 80974450
6009 5 80195714 84089603 6053 5 80236478 81047638
6010 5 80195714 84104814 6054 5 80236478 81082921
6011 5 80195714 84105175 6055 5 80236478 81157909
6012 5 80195714 84251635 6056 5 80236478 81265937
6013 5 80195714 84252180 6057 5 80236478 81265937
6014 5 80195714 84253030 6058 5 80236478 81267485
6015 5 80195714 84254208 6059 5 80236478 81267499
6016 5 80195714 84314930 6060 5 80236478 81274512
6017 5 80195714 84340523 6061 5 80236478 81763618
6018 5 80195714 84516340 6062 5 80236478 81797217
6019 5 80195714 84706916 6063 5 80236478 81800186
6020 5 80195714 84799488 6064 5 80236478 81806213
6021 5 80195714 84801081 6065 5 80236478 81854583
6022 5 80195714 84824103 6066 5 80236478 81859374
6023 5 80195714 84824203 6067 5 80236478 81861368
6024 5 80195714 84824816 6068 5 80236478 81863686
6025 5 80195714 84825422 6069 5 80236478 81916850
6026 5 80195714 84825763 6070 5 80236478 81954891
6027 5 80195714 84825942 6071 5 80236478 81985250
6028 5 80195714 84843411 6072 5 80236478 82083752
- 133 036149
6073 5 80236478 82101253 6117 5 80236478 84089603
6074 5 80236478 82143124 6118 5 80236478 84104814
6075 5 80236478 82236318 6119 5 80236478 84105175
6076 5 80236478 82325587 6120 5 80236478 84251635
6077 5 80236478 82427210 6121 5 80236478 84252180
6078 5 80236478 82431853 6122 5 80236478 84253030
6079 5 80236478 82446714 6123 5 80236478 84254208
6080 5 80236478 82446794 6124 5 80236478 84314930
6081 5 80236478 82551111 6125 5 80236478 84340523
6082 5 80236478 82552090 6126 5 80236478 84516340
6083 5 80236478 82555641 6127 5 80236478 84706916
6084 5 80236478 82555670 6128 5 80236478 84799488
6085 5 80236478 82556511 6129 5 80236478 84801081
6086 5 80236478 82559047 6130 5 80236478 84824103
6087 5 80236478 82561535 6131 5 80236478 84824203
6088 5 80236478 82610100 6132 5 80236478 84824816
6089 5 80236478 82676822 6133 5 80236478 84825422
6090 5 80236478 82676901 6134 5 80236478 84825763
6091 5 80236478 82883691 6135 5 80236478 84825942
6092 5 80236478 82954942 6136 5 80236478 84843411
6093 5 80236478 82971688 6137 5 80236478 84936441
6094 5 80236478 83023965 6138 5 80236478 84936493
6095 5 80236478 83094205 6139 5 80236478 84943705
6096 5 80236478 83146355 6140 5 80236478 169454950
6097 5 80236478 83280630 6141 5 80236478 181522829
6098 5 80236478 83281412 6142 5 80236478 204759879
6099 5 80236478 83400242 6143 5 80236478 209874191
6100 5 80236478 83405797 6144 5 80238986 80241911
6101 5 80236478 83437132 6145 5 80238986 80282785
6102 5 80236478 83522252 6146 5 80238986 80345337
6103 5 80236478 83560095 6147 5 80238986 80389787
6104 5 80236478 83560204 6148 5 80238986 80411639
6105 5 80236478 83572400 6149 5 80238986 80446855
6106 5 80236478 83607661 6150 5 80238986 80492790
6107 5 80236478 83745342 6151 5 80238986 80670554
6108 5 80236478 83861275 6152 5 80238986 80674679
6109 5 80236478 83861633 6153 5 80238986 80720509
6110 5 80236478 83865653 6154 5 80238986 80800856
6111 5 80236478 83865914 6155 5 80238986 80804587
6112 5 80236478 83865920 6156 5 80238986 80807409
6113 5 80236478 83868010 6157 5 80238986 80835734
6114 5 80236478 84019752 6158 5 80238986 80971764
6115 5 80236478 84065912 6159 5 80238986 80972258
6116 5 80236478 84086632 6160 5 80238986 80974450
- 134 036149
6161 5 80238986 81047638 6205 5 80238986 83280630
6162 5 80238986 81082921 6206 5 80238986 83281412
6163 5 80238986 81157909 6207 5 80238986 83400242
6164 5 80238986 81265937 6208 5 80238986 83405797
6165 5 80238986 81265937 6209 5 80238986 83437132
6166 5 80238986 81267485 6210 5 80238986 83522252
6167 5 80238986 81267499 6211 5 80238986 83560095
6168 5 80238986 81274512 6212 5 80238986 83560204
6169 5 80238986 81763618 6213 5 80238986 83572400
6170 5 80238986 81797217 6214 5 80238986 83607661
6171 5 80238986 81800186 6215 5 80238986 83745342
6172 5 80238986 81806213 6216 5 80238986 83861275
6173 5 80238986 81854583 6217 5 80238986 83861633
6174 5 80238986 81859374 6218 5 80238986 83865653
6175 5 80238986 81861368 6219 5 80238986 83865914
6176 5 80238986 81863686 6220 5 80238986 83865920
6177 5 80238986 81916850 6221 5 80238986 83868010
6178 5 80238986 81954891 6222 5 80238986 84019752
6179 5 80238986 81985250 6223 5 80238986 84065912
6180 5 80238986 82083752 6224 5 80238986 84086632
6181 5 80238986 82101253 6225 5 80238986 84089603
6182 5 80238986 82143124 6226 5 80238986 84104814
6183 5 80238986 82236318 6227 5 80238986 84105175
6184 5 80238986 82325587 6228 5 80238986 84251635
6185 5 80238986 82427210 6229 5 80238986 84252180
6186 5 80238986 82431853 6230 5 80238986 84253030
6187 5 80238986 82446714 6231 5 80238986 84254208
6188 5 80238986 82446794 6232 5 80238986 84314930
6189 5 80238986 82551111 6233 5 80238986 84340523
6190 5 80238986 82552090 6234 5 80238986 84516340
6191 5 80238986 82555641 6235 5 80238986 84706916
6192 5 80238986 82555670 6236 5 80238986 84799488
6193 5 80238986 82556511 6237 5 80238986 84801081
6194 5 80238986 82559047 6238 5 80238986 84824103
6195 5 80238986 82561535 6239 5 80238986 84824203
6196 5 80238986 82610100 6240 5 80238986 84824816
6197 5 80238986 82676822 6241 5 80238986 84825422
6198 5 80238986 82676901 6242 5 80238986 84825763
6199 5 80238986 82883691 6243 5 80238986 84825942
6200 5 80238986 82954942 6244 5 80238986 84843411
6201 5 80238986 82971688 6245 5 80238986 84936441
6202 5 80238986 83023965 6246 5 80238986 84936493
6203 5 80238986 83094205 6247 5 80238986 84943705
6204 5 80238986 83146355 6248 5 80238986 169454950
- 135 036149
6249 5 80238986 181522829 6293 5 80239243 82427210
6250 5 80238986 204759879 6294 5 80239243 82431853
6251 5 80238986 209874191 6295 5 80239243 82446714
6252 5 80239243 80241911 6296 5 80239243 82446794
6253 5 80239243 80282785 6297 5 80239243 82551111
6254 5 80239243 80345337 6298 5 80239243 82552090
6255 5 80239243 80389787 6299 5 80239243 82555641
6256 5 80239243 80411639 6300 5 80239243 82555670
6257 5 80239243 80446855 6301 5 80239243 82556511
6258 5 80239243 80492790 6302 5 80239243 82559047
6259 5 80239243 80670554 6303 5 80239243 82561535
6260 5 80239243 80674679 6304 5 80239243 82610100
6261 5 80239243 80720509 6305 5 80239243 82676822
6262 5 80239243 80800856 6306 5 80239243 82676901
6263 5 80239243 80804587 6307 5 80239243 82883691
6264 5 80239243 80807409 6308 5 80239243 82954942
6265 5 80239243 80835734 6309 5 80239243 82971688
6266 5 80239243 80971764 6310 5 80239243 83023965
6267 5 80239243 80972258 6311 5 80239243 83094205
6268 5 80239243 80974450 6312 5 80239243 83146355
6269 5 80239243 81047638 6313 5 80239243 83280630
6270 5 80239243 81082921 6314 5 80239243 83281412
6271 5 80239243 81157909 6315 5 80239243 83400242
6272 5 80239243 81265937 6316 5 80239243 83405797
6273 5 80239243 81265937 6317 5 80239243 83437132
6274 5 80239243 81267485 6318 5 80239243 83522252
6275 5 80239243 81267499 6319 5 80239243 83560095
6276 5 80239243 81274512 6320 5 80239243 83560204
6277 5 80239243 81763618 6321 5 80239243 83572400
6278 5 80239243 81797217 6322 5 80239243 83607661
6279 5 80239243 81800186 6323 5 80239243 83745342
6280 5 80239243 81806213 6324 5 80239243 83861275
6281 5 80239243 81854583 6325 5 80239243 83861633
6282 5 80239243 81859374 6326 5 80239243 83865653
6283 5 80239243 81861368 6327 5 80239243 83865914
6284 5 80239243 81863686 6328 5 80239243 83865920
6285 5 80239243 81916850 6329 5 80239243 83868010
6286 5 80239243 81954891 6330 5 80239243 84019752
6287 5 80239243 81985250 6331 5 80239243 84065912
6288 5 80239243 82083752 6332 5 80239243 84086632
6289 5 80239243 82101253 6333 5 80239243 84089603
6290 5 80239243 82143124 6334 5 80239243 84104814
6291 5 80239243 82236318 6335 5 80239243 84105175
6292 5 80239243 82325587 6336 5 80239243 84251635
- 136 036149
6337 5 80239243 84252180 6381 5 80273499 81267485
6338 5 80239243 84253030 6382 5 80273499 81267499
6339 5 80239243 84254208 6383 5 80273499 81274512
6340 5 80239243 84314930 6384 5 80273499 81763618
6341 5 80239243 84340523 6385 5 80273499 81797217
6342 5 80239243 84516340 6386 5 80273499 81800186
6343 5 80239243 84706916 6387 5 80273499 81806213
6344 5 80239243 84799488 6388 5 80273499 81854583
6345 5 80239243 84801081 6389 5 80273499 81859374
6346 5 80239243 84824103 6390 5 80273499 81861368
6347 5 80239243 84824203 6391 5 80273499 81863686
6348 5 80239243 84824816 6392 5 80273499 81916850
6349 5 80239243 84825422 6393 5 80273499 81954891
6350 5 80239243 84825763 6394 5 80273499 81985250
6351 5 80239243 84825942 6395 5 80273499 82083752
6352 5 80239243 84843411 6396 5 80273499 82101253
6353 5 80239243 84936441 6397 5 80273499 82143124
6354 5 80239243 84936493 6398 5 80273499 82236318
6355 5 80239243 84943705 6399 5 80273499 82325587
6356 5 80239243 169454950 6400 5 80273499 82427210
6357 5 80239243 181522829 6401 5 80273499 82431853
6358 5 80239243 204759879 6402 5 80273499 82446714
6359 5 80239243 209874191 6403 5 80273499 82446794
6360 5 80273499 80282785 6404 5 80273499 82551111
6361 5 80273499 80345337 6405 5 80273499 82552090
6362 5 80273499 80389787 6406 5 80273499 82555641
6363 5 80273499 80411639 6407 5 80273499 82555670
6364 5 80273499 80446855 6408 5 80273499 82556511
6365 5 80273499 80492790 6409 5 80273499 82559047
6366 5 80273499 80670554 6410 5 80273499 82561535
6367 5 80273499 80674679 6411 5 80273499 82610100
6368 5 80273499 80720509 6412 5 80273499 82676822
6369 5 80273499 80800856 6413 5 80273499 82676901
6370 5 80273499 80804587 6414 5 80273499 82883691
6371 5 80273499 80807409 6415 5 80273499 82954942
6372 5 80273499 80835734 6416 5 80273499 82971688
6373 5 80273499 80971764 6417 5 80273499 83023965
6374 5 80273499 80972258 6418 5 80273499 83094205
6375 5 80273499 80974450 6419 5 80273499 83146355
6376 5 80273499 81047638 6420 5 80273499 83280630
6377 5 80273499 81082921 6421 5 80273499 83281412
6378 5 80273499 81157909 6422 5 80273499 83400242
6379 5 80273499 81265937 6423 5 80273499 83405797
6380 5 80273499 81265937 6424 5 80273499 83437132
- 137 036149
6425 5 80273499 83522252 6469 5 80344025 80411639
6426 5 80273499 83560095 6470 5 80344025 80446855
6427 5 80273499 83560204 6471 5 80344025 80492790
6428 5 80273499 83572400 6472 5 80344025 80670554
6429 5 80273499 83607661 6473 5 80344025 80674679
6430 5 80273499 83745342 6474 5 80344025 80720509
6431 5 80273499 83861275 6475 5 80344025 80800856
6432 5 80273499 83861633 6476 5 80344025 80804587
6433 5 80273499 83865653 6477 5 80344025 80807409
6434 5 80273499 83865914 6478 5 80344025 80835734
6435 5 80273499 83865920 6479 5 80344025 80971764
6436 5 80273499 83868010 6480 5 80344025 80972258
6437 5 80273499 84019752 6481 5 80344025 80974450
6438 5 80273499 84065912 6482 5 80344025 81047638
6439 5 80273499 84086632 6483 5 80344025 81082921
6440 5 80273499 84089603 6484 5 80344025 81157909
6441 5 80273499 84104814 6485 5 80344025 81265937
6442 5 80273499 84105175 6486 5 80344025 81265937
6443 5 80273499 84251635 6487 5 80344025 81267485
6444 5 80273499 84252180 6488 5 80344025 81267499
6445 5 80273499 84253030 6489 5 80344025 81274512
6446 5 80273499 84254208 6490 5 80344025 81763618
6447 5 80273499 84314930 6491 5 80344025 81797217
6448 5 80273499 84340523 6492 5 80344025 81800186
6449 5 80273499 84516340 6493 5 80344025 81806213
6450 5 80273499 84706916 6494 5 80344025 81854583
6451 5 80273499 84799488 6495 5 80344025 81859374
6452 5 80273499 84801081 6496 5 80344025 81861368
6453 5 80273499 84824103 6497 5 80344025 81863686
6454 5 80273499 84824203 6498 5 80344025 81916850
6455 5 80273499 84824816 6499 5 80344025 81954891
6456 5 80273499 84825422 6500 5 80344025 81985250
6457 5 80273499 84825763 6501 5 80344025 82083752
6458 5 80273499 84825942 6502 5 80344025 82101253
6459 5 80273499 84843411 6503 5 80344025 82143124
6460 5 80273499 84936441 6504 5 80344025 82236318
6461 5 80273499 84936493 6505 5 80344025 82325587
6462 5 80273499 84943705 6506 5 80344025 82427210
6463 5 80273499 169454950 6507 5 80344025 82431853
6464 5 80273499 181522829 6508 5 80344025 82446714
6465 5 80273499 204759879 6509 5 80344025 82446794
6466 5 80273499 209874191 6510 5 80344025 82551111
6467 5 80344025 80345337 6511 5 80344025 82552090
6468 5 80344025 80389787 6512 5 80344025 82555641
- 138 036149
6513 5 80344025 82555670 6557 5 80344025 84799488
6514 5 80344025 82556511 6558 5 80344025 84801081
6515 5 80344025 82559047 6559 5 80344025 84824103
6516 5 80344025 82561535 6560 5 80344025 84824203
6517 5 80344025 82610100 6561 5 80344025 84824816
6518 5 80344025 82676822 6562 5 80344025 84825422
6519 5 80344025 82676901 6563 5 80344025 84825763
6520 5 80344025 82883691 6564 5 80344025 84825942
6521 5 80344025 82954942 6565 5 80344025 84843411
6522 5 80344025 82971688 6566 5 80344025 84936441
6523 5 80344025 83023965 6567 5 80344025 84936493
6524 5 80344025 83094205 6568 5 80344025 84943705
6525 5 80344025 83146355 6569 5 80344025 169454950
6526 5 80344025 83280630 6570 5 80344025 181522829
6527 5 80344025 83281412 6571 5 80344025 204759879
6528 5 80344025 83400242 6572 5 80344025 209874191
6529 5 80344025 83405797 6573 5 80387639 80389787
6530 5 80344025 83437132 6574 5 80387639 80411639
6531 5 80344025 83522252 6575 5 80387639 80446855
6532 5 80344025 83560095 6576 5 80387639 80492790
6533 5 80344025 83560204 6577 5 80387639 80670554
6534 5 80344025 83572400 6578 5 80387639 80674679
6535 5 80344025 83607661 6579 5 80387639 80720509
6536 5 80344025 83745342 6580 5 80387639 80800856
6537 5 80344025 83861275 6581 5 80387639 80804587
6538 5 80344025 83861633 6582 5 80387639 80807409
6539 5 80344025 83865653 6583 5 80387639 80835734
6540 5 80344025 83865914 6584 5 80387639 80971764
6541 5 80344025 83865920 6585 5 80387639 80972258
6542 5 80344025 83868010 6586 5 80387639 80974450
6543 5 80344025 84019752 6587 5 80387639 81047638
6544 5 80344025 84065912 6588 5 80387639 81082921
6545 5 80344025 84086632 6589 5 80387639 81157909
6546 5 80344025 84089603 6590 5 80387639 81265937
6547 5 80344025 84104814 6591 5 80387639 81265937
6548 5 80344025 84105175 6592 5 80387639 81267485
6549 5 80344025 84251635 6593 5 80387639 81267499
6550 5 80344025 84252180 6594 5 80387639 81274512
6551 5 80344025 84253030 6595 5 80387639 81763618
6552 5 80344025 84254208 6596 5 80387639 81797217
6553 5 80344025 84314930 6597 5 80387639 81800186
6554 5 80344025 84340523 6598 5 80387639 81806213
6555 5 80344025 84516340 6599 5 80387639 81854583
6556 5 80344025 84706916 6600 5 80387639 81859374
- 139 036149
6601 5 80387639 81861368 6645 5 80387639 83865914
6602 5 80387639 81863686 6646 5 80387639 83865920
6603 5 80387639 81916850 6647 5 80387639 83868010
6604 5 80387639 81954891 6648 5 80387639 84019752
6605 5 80387639 81985250 6649 5 80387639 84065912
6606 5 80387639 82083752 6650 5 80387639 84086632
6607 5 80387639 82101253 6651 5 80387639 84089603
6608 5 80387639 82143124 6652 5 80387639 84104814
6609 5 80387639 82236318 6653 5 80387639 84105175
6610 5 80387639 82325587 6654 5 80387639 84251635
6611 5 80387639 82427210 6655 5 80387639 84252180
6612 5 80387639 82431853 6656 5 80387639 84253030
6613 5 80387639 82446714 6657 5 80387639 84254208
6614 5 80387639 82446794 6658 5 80387639 84314930
6615 5 80387639 82551111 6659 5 80387639 84340523
6616 5 80387639 82552090 6660 5 80387639 84516340
6617 5 80387639 82555641 6661 5 80387639 84706916
6618 5 80387639 82555670 6662 5 80387639 84799488
6619 5 80387639 82556511 6663 5 80387639 84801081
6620 5 80387639 82559047 6664 5 80387639 84824103
6621 5 80387639 82561535 6665 5 80387639 84824203
6622 5 80387639 82610100 6666 5 80387639 84824816
6623 5 80387639 82676822 6667 5 80387639 84825422
6624 5 80387639 82676901 6668 5 80387639 84825763
6625 5 80387639 82883691 6669 5 80387639 84825942
6626 5 80387639 82954942 6670 5 80387639 84843411
6627 5 80387639 82971688 6671 5 80387639 84936441
6628 5 80387639 83023965 6672 5 80387639 84936493
6629 5 80387639 83094205 6673 5 80387639 84943705
6630 5 80387639 83146355 6674 5 80387639 169454950
6631 5 80387639 83280630 6675 5 80387639 181522829
6632 5 80387639 83281412 6676 5 80387639 204759879
6633 5 80387639 83400242 6677 5 80387639 209874191
6634 5 80387639 83405797 6678 5 80388596 80389787
6635 5 80387639 83437132 6679 5 80388596 80411639
6636 5 80387639 83522252 6680 5 80388596 80446855
6637 5 80387639 83560095 6681 5 80388596 80492790
6638 5 80387639 83560204 6682 5 80388596 80670554
6639 5 80387639 83572400 6683 5 80388596 80674679
6640 5 80387639 83607661 6684 5 80388596 80720509
6641 5 80387639 83745342 6685 5 80388596 80800856
6642 5 80387639 83861275 6686 5 80388596 80804587
6643 5 80387639 83861633 6687 5 80388596 80807409
6644 5 80387639 83865653 6688 5 80388596 80835734
- 140 036149
6689 5 80388596 80971764 6733 5 80388596 83023965
6690 5 80388596 80972258 6734 5 80388596 83094205
6691 5 80388596 80974450 6735 5 80388596 83146355
6692 5 80388596 81047638 6736 5 80388596 83280630
6693 5 80388596 81082921 6737 5 80388596 83281412
6694 5 80388596 81157909 6738 5 80388596 83400242
6695 5 80388596 81265937 6739 5 80388596 83405797
6696 5 80388596 81265937 6740 5 80388596 83437132
6697 5 80388596 81267485 6741 5 80388596 83522252
6698 5 80388596 81267499 6742 5 80388596 83560095
6699 5 80388596 81274512 6743 5 80388596 83560204
6700 5 80388596 81763618 6744 5 80388596 83572400
6701 5 80388596 81797217 6745 5 80388596 83607661
6702 5 80388596 81800186 6746 5 80388596 83745342
6703 5 80388596 81806213 6747 5 80388596 83861275
6704 5 80388596 81854583 6748 5 80388596 83861633
6705 5 80388596 81859374 6749 5 80388596 83865653
6706 5 80388596 81861368 6750 5 80388596 83865914
6707 5 80388596 81863686 6751 5 80388596 83865920
6708 5 80388596 81916850 6752 5 80388596 83868010
6709 5 80388596 81954891 6753 5 80388596 84019752
6710 5 80388596 81985250 6754 5 80388596 84065912
6711 5 80388596 82083752 6755 5 80388596 84086632
6712 5 80388596 82101253 6756 5 80388596 84089603
6713 5 80388596 82143124 6757 5 80388596 84104814
6714 5 80388596 82236318 6758 5 80388596 84105175
6715 5 80388596 82325587 6759 5 80388596 84251635
6716 5 80388596 82427210 6760 5 80388596 84252180
6717 5 80388596 82431853 6761 5 80388596 84253030
6718 5 80388596 82446714 6762 5 80388596 84254208
6719 5 80388596 82446794 6763 5 80388596 84314930
6720 5 80388596 82551111 6764 5 80388596 84340523
6721 5 80388596 82552090 6765 5 80388596 84516340
6722 5 80388596 82555641 6766 5 80388596 84706916
6723 5 80388596 82555670 6767 5 80388596 84799488
6724 5 80388596 82556511 6768 5 80388596 84801081
6725 5 80388596 82559047 6769 5 80388596 84824103
6726 5 80388596 82561535 6770 5 80388596 84824203
6727 5 80388596 82610100 6771 5 80388596 84824816
6728 5 80388596 82676822 6772 5 80388596 84825422
6729 5 80388596 82676901 6773 5 80388596 84825763
6730 5 80388596 82883691 6774 5 80388596 84825942
6731 5 80388596 82954942 6775 5 80388596 84843411
6732 5 80388596 82971688 6776 5 80388596 84936441
- 141 036149
6777 5 80388596 84936493 6821 5 80411337 82431853
6778 5 80388596 84943705 6822 5 80411337 82446714
6779 5 80388596 169454950 6823 5 80411337 82446794
6780 5 80388596 181522829 6824 5 80411337 82551111
6781 5 80388596 204759879 6825 5 80411337 82552090
6782 5 80388596 209874191 6826 5 80411337 82555641
6783 5 80411337 80411639 6827 5 80411337 82555670
6784 5 80411337 80446855 6828 5 80411337 82556511
6785 5 80411337 80492790 6829 5 80411337 82559047
6786 5 80411337 80670554 6830 5 80411337 82561535
6787 5 80411337 80674679 6831 5 80411337 82610100
6788 5 80411337 80720509 6832 5 80411337 82676822
6789 5 80411337 80800856 6833 5 80411337 82676901
6790 5 80411337 80804587 6834 5 80411337 82883691
6791 5 80411337 80807409 6835 5 80411337 82954942
6792 5 80411337 80835734 6836 5 80411337 82971688
6793 5 80411337 80971764 6837 5 80411337 83023965
6794 5 80411337 80972258 6838 5 80411337 83094205
6795 5 80411337 80974450 6839 5 80411337 83146355
6796 5 80411337 81047638 6840 5 80411337 83280630
6797 5 80411337 81082921 6841 5 80411337 83281412
6798 5 80411337 81157909 6842 5 80411337 83400242
6799 5 80411337 81265937 6843 5 80411337 83405797
6800 5 80411337 81265937 6844 5 80411337 83437132
6801 5 80411337 81267485 6845 5 80411337 83522252
6802 5 80411337 81267499 6846 5 80411337 83560095
6803 5 80411337 81274512 6847 5 80411337 83560204
6804 5 80411337 81763618 6848 5 80411337 83572400
6805 5 80411337 81797217 6849 5 80411337 83607661
6806 5 80411337 81800186 6850 5 80411337 83745342
6807 5 80411337 81806213 6851 5 80411337 83861275
6808 5 80411337 81854583 6852 5 80411337 83861633
6809 5 80411337 81859374 6853 5 80411337 83865653
6810 5 80411337 81861368 6854 5 80411337 83865914
6811 5 80411337 81863686 6855 5 80411337 83865920
6812 5 80411337 81916850 6856 5 80411337 83868010
6813 5 80411337 81954891 6857 5 80411337 84019752
6814 5 80411337 81985250 6858 5 80411337 84065912
6815 5 80411337 82083752 6859 5 80411337 84086632
6816 5 80411337 82101253 6860 5 80411337 84089603
6817 5 80411337 82143124 6861 5 80411337 84104814
6818 5 80411337 82236318 6862 5 80411337 84105175
6819 5 80411337 82325587 6863 5 80411337 84251635
6820 5 80411337 82427210 6864 5 80411337 84252180
- 142 036149
6865 5 80411337 84253030 6909 5 80446281 81800186
6866 5 80411337 84254208 6910 5 80446281 81806213
6867 5 80411337 84314930 6911 5 80446281 81854583
6868 5 80411337 84340523 6912 5 80446281 81859374
6869 5 80411337 84516340 6913 5 80446281 81861368
6870 5 80411337 84706916 6914 5 80446281 81863686
6871 5 80411337 84799488 6915 5 80446281 81916850
6872 5 80411337 84801081 6916 5 80446281 81954891
6873 5 80411337 84824103 6917 5 80446281 81985250
6874 5 80411337 84824203 6918 5 80446281 82083752
6875 5 80411337 84824816 6919 5 80446281 82101253
6876 5 80411337 84825422 6920 5 80446281 82143124
6877 5 80411337 84825763 6921 5 80446281 82236318
6878 5 80411337 84825942 6922 5 80446281 82325587
6879 5 80411337 84843411 6923 5 80446281 82427210
6880 5 80411337 84936441 6924 5 80446281 82431853
6881 5 80411337 84936493 6925 5 80446281 82446714
6882 5 80411337 84943705 6926 5 80446281 82446794
6883 5 80411337 169454950 6927 5 80446281 82551111
6884 5 80411337 181522829 6928 5 80446281 82552090
6885 5 80411337 204759879 6929 5 80446281 82555641
6886 5 80411337 209874191 6930 5 80446281 82555670
6887 5 80446281 80446855 6931 5 80446281 82556511
6888 5 80446281 80492790 6932 5 80446281 82559047
6889 5 80446281 80670554 6933 5 80446281 82561535
6890 5 80446281 80674679 6934 5 80446281 82610100
6891 5 80446281 80720509 6935 5 80446281 82676822
6892 5 80446281 80800856 6936 5 80446281 82676901
6893 5 80446281 80804587 6937 5 80446281 82883691
6894 5 80446281 80807409 6938 5 80446281 82954942
6895 5 80446281 80835734 6939 5 80446281 82971688
6896 5 80446281 80971764 6940 5 80446281 83023965
6897 5 80446281 80972258 6941 5 80446281 83094205
6898 5 80446281 80974450 6942 5 80446281 83146355
6899 5 80446281 81047638 6943 5 80446281 83280630
6900 5 80446281 81082921 6944 5 80446281 83281412
6901 5 80446281 81157909 6945 5 80446281 83400242
6902 5 80446281 81265937 6946 5 80446281 83405797
6903 5 80446281 81265937 6947 5 80446281 83437132
6904 5 80446281 81267485 6948 5 80446281 83522252
6905 5 80446281 81267499 6949 5 80446281 83560095
6906 5 80446281 81274512 6950 5 80446281 83560204
6907 5 80446281 81763618 6951 5 80446281 83572400
6908 5 80446281 81797217 6952 5 80446281 83607661
- 143 036149
6953 5 80446281 83745342 6997 5 80491807 80835734
6954 5 80446281 83861275 6998 5 80491807 80971764
6955 5 80446281 83861633 6999 5 80491807 80972258
6956 5 80446281 83865653 7000 5 80491807 80974450
6957 5 80446281 83865914 7001 5 80491807 81047638
6958 5 80446281 83865920 7002 5 80491807 81082921
6959 5 80446281 83868010 7003 5 80491807 81157909
6960 5 80446281 84019752 7004 5 80491807 81265937
6961 5 80446281 84065912 7005 5 80491807 81265937
6962 5 80446281 84086632 7006 5 80491807 81267485
6963 5 80446281 84089603 7007 5 80491807 81267499
6964 5 80446281 84104814 7008 5 80491807 81274512
6965 5 80446281 84105175 7009 5 80491807 81763618
6966 5 80446281 84251635 7010 5 80491807 81797217
6967 5 80446281 84252180 7011 5 80491807 81800186
6968 5 80446281 84253030 7012 5 80491807 81806213
6969 5 80446281 84254208 7013 5 80491807 81854583
6970 5 80446281 84314930 7014 5 80491807 81859374
6971 5 80446281 84340523 7015 5 80491807 81861368
6972 5 80446281 84516340 7016 5 80491807 81863686
6973 5 80446281 84706916 7017 5 80491807 81916850
6974 5 80446281 84799488 7018 5 80491807 81954891
6975 5 80446281 84801081 7019 5 80491807 81985250
6976 5 80446281 84824103 7020 5 80491807 82083752
6977 5 80446281 84824203 7021 5 80491807 82101253
6978 5 80446281 84824816 7022 5 80491807 82143124
6979 5 80446281 84825422 7023 5 80491807 82236318
6980 5 80446281 84825763 7024 5 80491807 82325587
6981 5 80446281 84825942 7025 5 80491807 82427210
6982 5 80446281 84843411 7026 5 80491807 82431853
6983 5 80446281 84936441 7027 5 80491807 82446714
6984 5 80446281 84936493 7028 5 80491807 82446794
6985 5 80446281 84943705 7029 5 80491807 82551111
6986 5 80446281 169454950 7030 5 80491807 82552090
6987 5 80446281 181522829 7031 5 80491807 82555641
6988 5 80446281 204759879 7032 5 80491807 82555670
6989 5 80446281 209874191 7033 5 80491807 82556511
6990 5 80491807 80492790 7034 5 80491807 82559047
6991 5 80491807 80670554 7035 5 80491807 82561535
6992 5 80491807 80674679 7036 5 80491807 82610100
6993 5 80491807 80720509 7037 5 80491807 82676822
6994 5 80491807 80800856 7038 5 80491807 82676901
6995 5 80491807 80804587 7039 5 80491807 82883691
6996 5 80491807 80807409 7040 5 80491807 82954942
- 144 036149
7041 5 80491807 82971688 7085 5 80491807 84936441
7042 5 80491807 83023965 7086 5 80491807 84936493
7043 5 80491807 83094205 7087 5 80491807 84943705
7044 5 80491807 83146355 7088 5 80491807 169454950
7045 5 80491807 83280630 7089 5 80491807 181522829
7046 5 80491807 83281412 7090 5 80491807 204759879
7047 5 80491807 83400242 7091 5 80491807 209874191
7048 5 80491807 83405797 7092 5 80669160 80670554
7049 5 80491807 83437132 7093 5 80669160 80674679
7050 5 80491807 83522252 7094 5 80669160 80720509
7051 5 80491807 83560095 7095 5 80669160 80800856
7052 5 80491807 83560204 7096 5 80669160 80804587
7053 5 80491807 83572400 7097 5 80669160 80807409
7054 5 80491807 83607661 7098 5 80669160 80835734
7055 5 80491807 83745342 7099 5 80669160 80971764
7056 5 80491807 83861275 7100 5 80669160 80972258
7057 5 80491807 83861633 7101 5 80669160 80974450
7058 5 80491807 83865653 7102 5 80669160 81047638
7059 5 80491807 83865914 7103 5 80669160 81082921
7060 5 80491807 83865920 7104 5 80669160 81157909
7061 5 80491807 83868010 7105 5 80669160 81265937
7062 5 80491807 84019752 7106 5 80669160 81265937
7063 5 80491807 84065912 7107 5 80669160 81267485
7064 5 80491807 84086632 7108 5 80669160 81267499
7065 5 80491807 84089603 7109 5 80669160 81274512
7066 5 80491807 84104814 7110 5 80669160 81763618
7067 5 80491807 84105175 7111 5 80669160 81797217
7068 5 80491807 84251635 7112 5 80669160 81800186
7069 5 80491807 84252180 7113 5 80669160 81806213
7070 5 80491807 84253030 7114 5 80669160 81854583
7071 5 80491807 84254208 7115 5 80669160 81859374
7072 5 80491807 84314930 7116 5 80669160 81861368
7073 5 80491807 84340523 7117 5 80669160 81863686
7074 5 80491807 84516340 7118 5 80669160 81916850
7075 5 80491807 84706916 7119 5 80669160 81954891
7076 5 80491807 84799488 7120 5 80669160 81985250
7077 5 80491807 84801081 7121 5 80669160 82083752
7078 5 80491807 84824103 7122 5 80669160 82101253
7079 5 80491807 84824203 7123 5 80669160 82143124
7080 5 80491807 84824816 7124 5 80669160 82236318
7081 5 80491807 84825422 7125 5 80669160 82325587
7082 5 80491807 84825763 7126 5 80669160 82427210
7083 5 80491807 84825942 7127 5 80669160 82431853
7084 5 80491807 84843411 7128 5 80669160 82446714
- 145 036149
7129 5 80669160 82446794 7173 5 80669160 84314930
7130 5 80669160 82551111 7174 5 80669160 84340523
7131 5 80669160 82552090 7175 5 80669160 84516340
7132 5 80669160 82555641 7176 5 80669160 84706916
7133 5 80669160 82555670 7177 5 80669160 84799488
7134 5 80669160 82556511 7178 5 80669160 84801081
7135 5 80669160 82559047 7179 5 80669160 84824103
7136 5 80669160 82561535 7180 5 80669160 84824203
7137 5 80669160 82610100 7181 5 80669160 84824816
7138 5 80669160 82676822 7182 5 80669160 84825422
7139 5 80669160 82676901 7183 5 80669160 84825763
7140 5 80669160 82883691 7184 5 80669160 84825942
7141 5 80669160 82954942 7185 5 80669160 84843411
7142 5 80669160 82971688 7186 5 80669160 84936441
7143 5 80669160 83023965 7187 5 80669160 84936493
7144 5 80669160 83094205 7188 5 80669160 84943705
7145 5 80669160 83146355 7189 5 80669160 169454950
7146 5 80669160 83280630 7190 5 80669160 181522829
7147 5 80669160 83281412 7191 5 80669160 204759879
7148 5 80669160 83400242 7192 5 80669160 209874191
7149 5 80669160 83405797 7193 5 80715081 80720509
7150 5 80669160 83437132 7194 5 80715081 80800856
7151 5 80669160 83522252 7195 5 80715081 80804587
7152 5 80669160 83560095 7196 5 80715081 80807409
7153 5 80669160 83560204 7197 5 80715081 80835734
7154 5 80669160 83572400 7198 5 80715081 80971764
7155 5 80669160 83607661 7199 5 80715081 80972258
7156 5 80669160 83745342 7200 5 80715081 80974450
7157 5 80669160 83861275 7201 5 80715081 81047638
7158 5 80669160 83861633 7202 5 80715081 81082921
7159 5 80669160 83865653 7203 5 80715081 81157909
7160 5 80669160 83865914 7204 5 80715081 81265937
7161 5 80669160 83865920 7205 5 80715081 81265937
7162 5 80669160 83868010 7206 5 80715081 81267485
7163 5 80669160 84019752 7207 5 80715081 81267499
7164 5 80669160 84065912 7208 5 80715081 81274512
7165 5 80669160 84086632 7209 5 80715081 81763618
7166 5 80669160 84089603 7210 5 80715081 81797217
7167 5 80669160 84104814 7211 5 80715081 81800186
7168 5 80669160 84105175 7212 5 80715081 81806213
7169 5 80669160 84251635 7213 5 80715081 81854583
7170 5 80669160 84252180 7214 5 80715081 81859374
7171 5 80669160 84253030 7215 5 80715081 81861368
7172 5 80669160 84254208 7216 5 80715081 81863686
- 146 036149
7217 5 80715081 81916850 7261 5 80715081 83868010
7218 5 80715081 81954891 7262 5 80715081 84019752
7219 5 80715081 81985250 7263 5 80715081 84065912
7220 5 80715081 82083752 7264 5 80715081 84086632
7221 5 80715081 82101253 7265 5 80715081 84089603
7222 5 80715081 82143124 7266 5 80715081 84104814
7223 5 80715081 82236318 7267 5 80715081 84105175
7224 5 80715081 82325587 7268 5 80715081 84251635
7225 5 80715081 82427210 7269 5 80715081 84252180
7226 5 80715081 82431853 7270 5 80715081 84253030
7227 5 80715081 82446714 7271 5 80715081 84254208
7228 5 80715081 82446794 7272 5 80715081 84314930
7229 5 80715081 82551111 7273 5 80715081 84340523
7230 5 80715081 82552090 7274 5 80715081 84516340
7231 5 80715081 82555641 7275 5 80715081 84706916
7232 5 80715081 82555670 7276 5 80715081 84799488
7233 5 80715081 82556511 7277 5 80715081 84801081
7234 5 80715081 82559047 7278 5 80715081 84824103
7235 5 80715081 82561535 7279 5 80715081 84824203
7236 5 80715081 82610100 7280 5 80715081 84824816
7237 5 80715081 82676822 7281 5 80715081 84825422
7238 5 80715081 82676901 7282 5 80715081 84825763
7239 5 80715081 82883691 7283 5 80715081 84825942
7240 5 80715081 82954942 7284 5 80715081 84843411
7241 5 80715081 82971688 7285 5 80715081 84936441
7242 5 80715081 83023965 7286 5 80715081 84936493
7243 5 80715081 83094205 7287 5 80715081 84943705
7244 5 80715081 83146355 7288 5 80715081 169454950
7245 5 80715081 83280630 7289 5 80715081 181522829
7246 5 80715081 83281412 7290 5 80715081 204759879
7247 5 80715081 83400242 7291 5 80715081 209874191
7248 5 80715081 83405797 7292 5 80795990 80800856
7249 5 80715081 83437132 7293 5 80795990 80804587
7250 5 80715081 83522252 7294 5 80795990 80807409
7251 5 80715081 83560095 7295 5 80795990 80835734
7252 5 80715081 83560204 7296 5 80795990 80971764
7253 5 80715081 83572400 7297 5 80795990 80972258
7254 5 80715081 83607661 7298 5 80795990 80974450
7255 5 80715081 83745342 7299 5 80795990 81047638
7256 5 80715081 83861275 7300 5 80795990 81082921
7257 5 80715081 83861633 7301 5 80795990 81157909
7258 5 80715081 83865653 7302 5 80795990 81265937
7259 5 80715081 83865914 7303 5 80795990 81265937
7260 5 80715081 83865920 7304 5 80795990 81267485
- 147 036149
7305 5 80795990 81267499 7349 5 80795990 83560095
7306 5 80795990 81274512 7350 5 80795990 83560204
7307 5 80795990 81763618 7351 5 80795990 83572400
7308 5 80795990 81797217 7352 5 80795990 83607661
7309 5 80795990 81800186 7353 5 80795990 83745342
7310 5 80795990 81806213 7354 5 80795990 83861275
7311 5 80795990 81854583 7355 5 80795990 83861633
7312 5 80795990 81859374 7356 5 80795990 83865653
7313 5 80795990 81861368 7357 5 80795990 83865914
7314 5 80795990 81863686 7358 5 80795990 83865920
7315 5 80795990 81916850 7359 5 80795990 83868010
7316 5 80795990 81954891 7360 5 80795990 84019752
7317 5 80795990 81985250 7361 5 80795990 84065912
7318 5 80795990 82083752 7362 5 80795990 84086632
7319 5 80795990 82101253 7363 5 80795990 84089603
7320 5 80795990 82143124 7364 5 80795990 84104814
7321 5 80795990 82236318 7365 5 80795990 84105175
7322 5 80795990 82325587 7366 5 80795990 84251635
7323 5 80795990 82427210 7367 5 80795990 84252180
7324 5 80795990 82431853 7368 5 80795990 84253030
7325 5 80795990 82446714 7369 5 80795990 84254208
7326 5 80795990 82446794 7370 5 80795990 84314930
7327 5 80795990 82551111 7371 5 80795990 84340523
7328 5 80795990 82552090 7372 5 80795990 84516340
7329 5 80795990 82555641 7373 5 80795990 84706916
7330 5 80795990 82555670 7374 5 80795990 84799488
7331 5 80795990 82556511 7375 5 80795990 84801081
7332 5 80795990 82559047 7376 5 80795990 84824103
7333 5 80795990 82561535 7377 5 80795990 84824203
7334 5 80795990 82610100 7378 5 80795990 84824816
7335 5 80795990 82676822 7379 5 80795990 84825422
7336 5 80795990 82676901 7380 5 80795990 84825763
7337 5 80795990 82883691 7381 5 80795990 84825942
7338 5 80795990 82954942 7382 5 80795990 84843411
7339 5 80795990 82971688 7383 5 80795990 84936441
7340 5 80795990 83023965 7384 5 80795990 84936493
7341 5 80795990 83094205 7385 5 80795990 84943705
7342 5 80795990 83146355 7386 5 80795990 169454950
7343 5 80795990 83280630 7387 5 80795990 181522829
7344 5 80795990 83281412 7388 5 80795990 204759879
7345 5 80795990 83400242 7389 5 80795990 209874191
7346 5 80795990 83405797 7390 5 80803727 80804587
7347 5 80795990 83437132 7391 5 80803727 80807409
7348 5 80795990 83522252 7392 5 80803727 80835734
- 148 036149
7393 5 80803727 80971764 7437 5 80803727 83023965
7394 5 80803727 80972258 7438 5 80803727 83094205
7395 5 80803727 80974450 7439 5 80803727 83146355
7396 5 80803727 81047638 7440 5 80803727 83280630
7397 5 80803727 81082921 7441 5 80803727 83281412
7398 5 80803727 81157909 7442 5 80803727 83400242
7399 5 80803727 81265937 7443 5 80803727 83405797
7400 5 80803727 81265937 7444 5 80803727 83437132
7401 5 80803727 81267485 7445 5 80803727 83522252
7402 5 80803727 81267499 7446 5 80803727 83560095
7403 5 80803727 81274512 7447 5 80803727 83560204
7404 5 80803727 81763618 7448 5 80803727 83572400
7405 5 80803727 81797217 7449 5 80803727 83607661
7406 5 80803727 81800186 7450 5 80803727 83745342
7407 5 80803727 81806213 7451 5 80803727 83861275
7408 5 80803727 81854583 7452 5 80803727 83861633
7409 5 80803727 81859374 7453 5 80803727 83865653
7410 5 80803727 81861368 7454 5 80803727 83865914
7411 5 80803727 81863686 7455 5 80803727 83865920
7412 5 80803727 81916850 7456 5 80803727 83868010
7413 5 80803727 81954891 7457 5 80803727 84019752
7414 5 80803727 81985250 7458 5 80803727 84065912
7415 5 80803727 82083752 7459 5 80803727 84086632
7416 5 80803727 82101253 7460 5 80803727 84089603
7417 5 80803727 82143124 7461 5 80803727 84104814
7418 5 80803727 82236318 7462 5 80803727 84105175
7419 5 80803727 82325587 7463 5 80803727 84251635
7420 5 80803727 82427210 7464 5 80803727 84252180
7421 5 80803727 82431853 7465 5 80803727 84253030
7422 5 80803727 82446714 7466 5 80803727 84254208
7423 5 80803727 82446794 7467 5 80803727 84314930
7424 5 80803727 82551111 7468 5 80803727 84340523
7425 5 80803727 82552090 7469 5 80803727 84516340
7426 5 80803727 82555641 7470 5 80803727 84706916
7427 5 80803727 82555670 7471 5 80803727 84799488
7428 5 80803727 82556511 7472 5 80803727 84801081
7429 5 80803727 82559047 7473 5 80803727 84824103
7430 5 80803727 82561535 7474 5 80803727 84824203
7431 5 80803727 82610100 7475 5 80803727 84824816
7432 5 80803727 82676822 7476 5 80803727 84825422
7433 5 80803727 82676901 7477 5 80803727 84825763
7434 5 80803727 82883691 7478 5 80803727 84825942
7435 5 80803727 82954942 7479 5 80803727 84843411
7436 5 80803727 82971688 7480 5 80803727 84936441
- 149 036149
7481 5 80803727 84936493 7525 5 80804587 82561535
7482 5 80803727 84943705 7526 5 80804587 82610100
7483 5 80803727 169454950 7527 5 80804587 82676822
7484 5 80803727 181522829 7528 5 80804587 82676901
7485 5 80803727 204759879 7529 5 80804587 82883691
7486 5 80803727 209874191 7530 5 80804587 82954942
7487 5 80804587 80835734 7531 5 80804587 82971688
7488 5 80804587 80971764 7532 5 80804587 83023965
7489 5 80804587 80972258 7533 5 80804587 83094205
7490 5 80804587 80974450 7534 5 80804587 83146355
7491 5 80804587 81047638 7535 5 80804587 83280630
7492 5 80804587 81082921 7536 5 80804587 83281412
7493 5 80804587 81157909 7537 5 80804587 83400242
7494 5 80804587 81265937 7538 5 80804587 83405797
7495 5 80804587 81265937 7539 5 80804587 83437132
7496 5 80804587 81267485 7540 5 80804587 83522252
7497 5 80804587 81267499 7541 5 80804587 83560095
7498 5 80804587 81274512 7542 5 80804587 83560204
7499 5 80804587 81763618 7543 5 80804587 83572400
7500 5 80804587 81797217 7544 5 80804587 83607661
7501 5 80804587 81800186 7545 5 80804587 83745342
7502 5 80804587 81806213 7546 5 80804587 83861275
7503 5 80804587 81854583 7547 5 80804587 83861633
7504 5 80804587 81859374 7548 5 80804587 83865653
7505 5 80804587 81861368 7549 5 80804587 83865914
7506 5 80804587 81863686 7550 5 80804587 83865920
7507 5 80804587 81916850 7551 5 80804587 83868010
7508 5 80804587 81954891 7552 5 80804587 84019752
7509 5 80804587 81985250 7553 5 80804587 84065912
7510 5 80804587 82083752 7554 5 80804587 84086632
7511 5 80804587 82101253 7555 5 80804587 84089603
7512 5 80804587 82143124 7556 5 80804587 84104814
7513 5 80804587 82236318 7557 5 80804587 84105175
7514 5 80804587 82325587 7558 5 80804587 84251635
7515 5 80804587 82427210 7559 5 80804587 84252180
7516 5 80804587 82431853 7560 5 80804587 84253030
7517 5 80804587 82446714 7561 5 80804587 84254208
7518 5 80804587 82446794 7562 5 80804587 84314930
7519 5 80804587 82551111 7563 5 80804587 84340523
7520 5 80804587 82552090 7564 5 80804587 84516340
7521 5 80804587 82555641 7565 5 80804587 84706916
7522 5 80804587 82555670 7566 5 80804587 84799488
7523 5 80804587 82556511 7567 5 80804587 84801081
7524 5 80804587 82559047 7568 5 80804587 84824103
- 150 036149
7569 5 80804587 84824203 7613 5 80828457 82446794
7570 5 80804587 84824816 7614 5 80828457 82551111
7571 5 80804587 84825422 7615 5 80828457 82552090
7572 5 80804587 84825763 7616 5 80828457 82555641
7573 5 80804587 84825942 7617 5 80828457 82555670
7574 5 80804587 84843411 7618 5 80828457 82556511
7575 5 80804587 84936441 7619 5 80828457 82559047
7576 5 80804587 84936493 7620 5 80828457 82561535
7577 5 80804587 84943705 7621 5 80828457 82610100
7578 5 80804587 169454950 7622 5 80828457 82676822
7579 5 80804587 181522829 7623 5 80828457 82676901
7580 5 80804587 204759879 7624 5 80828457 82883691
7581 5 80804587 209874191 7625 5 80828457 82954942
7582 5 80828457 80835734 7626 5 80828457 82971688
7583 5 80828457 80971764 7627 5 80828457 83023965
7584 5 80828457 80972258 7628 5 80828457 83094205
7585 5 80828457 80974450 7629 5 80828457 83146355
7586 5 80828457 81047638 7630 5 80828457 83280630
7587 5 80828457 81082921 7631 5 80828457 83281412
7588 5 80828457 81157909 7632 5 80828457 83400242
7589 5 80828457 81265937 7633 5 80828457 83405797
7590 5 80828457 81265937 7634 5 80828457 83437132
7591 5 80828457 81267485 7635 5 80828457 83522252
7592 5 80828457 81267499 7636 5 80828457 83560095
7593 5 80828457 81274512 7637 5 80828457 83560204
7594 5 80828457 81763618 7638 5 80828457 83572400
7595 5 80828457 81797217 7639 5 80828457 83607661
7596 5 80828457 81800186 7640 5 80828457 83745342
7597 5 80828457 81806213 7641 5 80828457 83861275
7598 5 80828457 81854583 7642 5 80828457 83861633
7599 5 80828457 81859374 7643 5 80828457 83865653
7600 5 80828457 81861368 7644 5 80828457 83865914
7601 5 80828457 81863686 7645 5 80828457 83865920
7602 5 80828457 81916850 7646 5 80828457 83868010
7603 5 80828457 81954891 7647 5 80828457 84019752
7604 5 80828457 81985250 7648 5 80828457 84065912
7605 5 80828457 82083752 7649 5 80828457 84086632
7606 5 80828457 82101253 7650 5 80828457 84089603
7607 5 80828457 82143124 7651 5 80828457 84104814
7608 5 80828457 82236318 7652 5 80828457 84105175
7609 5 80828457 82325587 7653 5 80828457 84251635
7610 5 80828457 82427210 7654 5 80828457 84252180
7611 5 80828457 82431853 7655 5 80828457 84253030
7612 5 80828457 82446714 7656 5 80828457 84254208
- 151 036149
7657 5 80828457 84314930 7701 5 80828945 82101253
7658 5 80828457 84340523 7702 5 80828945 82143124
7659 5 80828457 84516340 7703 5 80828945 82236318
7660 5 80828457 84706916 7704 5 80828945 82325587
7661 5 80828457 84799488 7705 5 80828945 82427210
7662 5 80828457 84801081 7706 5 80828945 82431853
7663 5 80828457 84824103 7707 5 80828945 82446714
7664 5 80828457 84824203 7708 5 80828945 82446794
7665 5 80828457 84824816 7709 5 80828945 82551111
7666 5 80828457 84825422 7710 5 80828945 82552090
7667 5 80828457 84825763 7711 5 80828945 82555641
7668 5 80828457 84825942 7712 5 80828945 82555670
7669 5 80828457 84843411 7713 5 80828945 82556511
7670 5 80828457 84936441 7714 5 80828945 82559047
7671 5 80828457 84936493 7715 5 80828945 82561535
7672 5 80828457 84943705 7716 5 80828945 82610100
7673 5 80828457 169454950 7717 5 80828945 82676822
7674 5 80828457 181522829 7718 5 80828945 82676901
7675 5 80828457 204759879 7719 5 80828945 82883691
7676 5 80828457 209874191 7720 5 80828945 82954942
7677 5 80828945 80835734 7721 5 80828945 82971688
7678 5 80828945 80971764 7722 5 80828945 83023965
7679 5 80828945 80972258 7723 5 80828945 83094205
7680 5 80828945 80974450 7724 5 80828945 83146355
7681 5 80828945 81047638 7725 5 80828945 83280630
7682 5 80828945 81082921 7726 5 80828945 83281412
7683 5 80828945 81157909 7727 5 80828945 83400242
7684 5 80828945 81265937 7728 5 80828945 83405797
7685 5 80828945 81265937 7729 5 80828945 83437132
7686 5 80828945 81267485 7730 5 80828945 83522252
7687 5 80828945 81267499 7731 5 80828945 83560095
7688 5 80828945 81274512 7732 5 80828945 83560204
7689 5 80828945 81763618 7733 5 80828945 83572400
7690 5 80828945 81797217 7734 5 80828945 83607661
7691 5 80828945 81800186 7735 5 80828945 83745342
7692 5 80828945 81806213 7736 5 80828945 83861275
7693 5 80828945 81854583 7737 5 80828945 83861633
7694 5 80828945 81859374 7738 5 80828945 83865653
7695 5 80828945 81861368 7739 5 80828945 83865914
7696 5 80828945 81863686 7740 5 80828945 83865920
7697 5 80828945 81916850 7741 5 80828945 83868010
7698 5 80828945 81954891 7742 5 80828945 84019752
7699 5 80828945 81985250 7743 5 80828945 84065912
7700 5 80828945 82083752 7744 5 80828945 84086632
- 152 036149
7745 5 80828945 84089603 7789 5 80969412 81861368
7746 5 80828945 84104814 7790 5 80969412 81863686
7747 5 80828945 84105175 7791 5 80969412 81916850
7748 5 80828945 84251635 7792 5 80969412 81954891
7749 5 80828945 84252180 7793 5 80969412 81985250
7750 5 80828945 84253030 7794 5 80969412 82083752
7751 5 80828945 84254208 7795 5 80969412 82101253
7752 5 80828945 84314930 7796 5 80969412 82143124
7753 5 80828945 84340523 7797 5 80969412 82236318
7754 5 80828945 84516340 7798 5 80969412 82325587
7755 5 80828945 84706916 7799 5 80969412 82427210
7756 5 80828945 84799488 7800 5 80969412 82431853
7757 5 80828945 84801081 7801 5 80969412 82446714
7758 5 80828945 84824103 7802 5 80969412 82446794
7759 5 80828945 84824203 7803 5 80969412 82551111
7760 5 80828945 84824816 7804 5 80969412 82552090
7761 5 80828945 84825422 7805 5 80969412 82555641
7762 5 80828945 84825763 7806 5 80969412 82555670
7763 5 80828945 84825942 7807 5 80969412 82556511
7764 5 80828945 84843411 7808 5 80969412 82559047
7765 5 80828945 84936441 7809 5 80969412 82561535
7766 5 80828945 84936493 7810 5 80969412 82610100
7767 5 80828945 84943705 7811 5 80969412 82676822
7768 5 80828945 169454950 7812 5 80969412 82676901
7769 5 80828945 181522829 7813 5 80969412 82883691
7770 5 80828945 204759879 7814 5 80969412 82954942
7771 5 80828945 209874191 7815 5 80969412 82971688
7772 5 80969412 80971764 7816 5 80969412 83023965
7773 5 80969412 80972258 7817 5 80969412 83094205
7774 5 80969412 80974450 7818 5 80969412 83146355
7775 5 80969412 81047638 7819 5 80969412 83280630
7776 5 80969412 81082921 7820 5 80969412 83281412
7777 5 80969412 81157909 7821 5 80969412 83400242
7778 5 80969412 81265937 7822 5 80969412 83405797
7779 5 80969412 81265937 7823 5 80969412 83437132
7780 5 80969412 81267485 7824 5 80969412 83522252
7781 5 80969412 81267499 7825 5 80969412 83560095
7782 5 80969412 81274512 7826 5 80969412 83560204
7783 5 80969412 81763618 7827 5 80969412 83572400
7784 5 80969412 81797217 7828 5 80969412 83607661
7785 5 80969412 81800186 7829 5 80969412 83745342
7786 5 80969412 81806213 7830 5 80969412 83861275
7787 5 80969412 81854583 7831 5 80969412 83861633
7788 5 80969412 81859374 7832 5 80969412 83865653
- 153 036149
7833 5 80969412 83865914 7877 5 80970381 81800186
7834 5 80969412 83865920 7878 5 80970381 81806213
7835 5 80969412 83868010 7879 5 80970381 81854583
7836 5 80969412 84019752 7880 5 80970381 81859374
7837 5 80969412 84065912 7881 5 80970381 81861368
7838 5 80969412 84086632 7882 5 80970381 81863686
7839 5 80969412 84089603 7883 5 80970381 81916850
7840 5 80969412 84104814 7884 5 80970381 81954891
7841 5 80969412 84105175 7885 5 80970381 81985250
7842 5 80969412 84251635 7886 5 80970381 82083752
7843 5 80969412 84252180 7887 5 80970381 82101253
7844 5 80969412 84253030 7888 5 80970381 82143124
7845 5 80969412 84254208 7889 5 80970381 82236318
7846 5 80969412 84314930 7890 5 80970381 82325587
7847 5 80969412 84340523 7891 5 80970381 82427210
7848 5 80969412 84516340 7892 5 80970381 82431853
7849 5 80969412 84706916 7893 5 80970381 82446714
7850 5 80969412 84799488 7894 5 80970381 82446794
7851 5 80969412 84801081 7895 5 80970381 82551111
7852 5 80969412 84824103 7896 5 80970381 82552090
7853 5 80969412 84824203 7897 5 80970381 82555641
7854 5 80969412 84824816 7898 5 80970381 82555670
7855 5 80969412 84825422 7899 5 80970381 82556511
7856 5 80969412 84825763 7900 5 80970381 82559047
7857 5 80969412 84825942 7901 5 80970381 82561535
7858 5 80969412 84843411 7902 5 80970381 82610100
7859 5 80969412 84936441 7903 5 80970381 82676822
7860 5 80969412 84936493 7904 5 80970381 82676901
7861 5 80969412 84943705 7905 5 80970381 82883691
7862 5 80969412 169454950 7906 5 80970381 82954942
7863 5 80969412 181522829 7907 5 80970381 82971688
7864 5 80969412 204759879 7908 5 80970381 83023965
7865 5 80969412 209874191 7909 5 80970381 83094205
7866 5 80970381 80974450 7910 5 80970381 83146355
7867 5 80970381 81047638 7911 5 80970381 83280630
7868 5 80970381 81082921 7912 5 80970381 83281412
7869 5 80970381 81157909 7913 5 80970381 83400242
7870 5 80970381 81265937 7914 5 80970381 83405797
7871 5 80970381 81265937 7915 5 80970381 83437132
7872 5 80970381 81267485 7916 5 80970381 83522252
7873 5 80970381 81267499 7917 5 80970381 83560095
7874 5 80970381 81274512 7918 5 80970381 83560204
7875 5 80970381 81763618 7919 5 80970381 83572400
7876 5 80970381 81797217 7920 5 80970381 83607661
- 154 036149
7921 5 80970381 83745342 7965 5 80971764 81274512
7922 5 80970381 83861275 7966 5 80971764 81763618
7923 5 80970381 83861633 7967 5 80971764 81797217
7924 5 80970381 83865653 7968 5 80971764 81800186
7925 5 80970381 83865914 7969 5 80971764 81806213
7926 5 80970381 83865920 7970 5 80971764 81854583
7927 5 80970381 83868010 7971 5 80971764 81859374
7928 5 80970381 84019752 7972 5 80971764 81861368
7929 5 80970381 84065912 7973 5 80971764 81863686
7930 5 80970381 84086632 7974 5 80971764 81916850
7931 5 80970381 84089603 7975 5 80971764 81954891
7932 5 80970381 84104814 7976 5 80971764 81985250
7933 5 80970381 84105175 7977 5 80971764 82083752
7934 5 80970381 84251635 7978 5 80971764 82101253
7935 5 80970381 84252180 7979 5 80971764 82143124
7936 5 80970381 84253030 7980 5 80971764 82236318
7937 5 80970381 84254208 7981 5 80971764 82325587
7938 5 80970381 84314930 7982 5 80971764 82427210
7939 5 80970381 84340523 7983 5 80971764 82431853
7940 5 80970381 84516340 7984 5 80971764 82446714
7941 5 80970381 84706916 7985 5 80971764 82446794
7942 5 80970381 84799488 7986 5 80971764 82551111
7943 5 80970381 84801081 7987 5 80971764 82552090
7944 5 80970381 84824103 7988 5 80971764 82555641
7945 5 80970381 84824203 7989 5 80971764 82555670
7946 5 80970381 84824816 7990 5 80971764 82556511
7947 5 80970381 84825422 7991 5 80971764 82559047
7948 5 80970381 84825763 7992 5 80971764 82561535
7949 5 80970381 84825942 7993 5 80971764 82610100
7950 5 80970381 84843411 7994 5 80971764 82676822
7951 5 80970381 84936441 7995 5 80971764 82676901
7952 5 80970381 84936493 7996 5 80971764 82883691
7953 5 80970381 84943705 7997 5 80971764 82954942
7954 5 80970381 169454950 7998 5 80971764 82971688
7955 5 80970381 181522829 7999 5 80971764 83023965
7956 5 80970381 204759879 8000 5 80971764 83094205
7957 5 80970381 209874191 8001 5 80971764 83146355
7958 5 80971764 81047638 8002 5 80971764 83280630
7959 5 80971764 81082921 8003 5 80971764 83281412
7960 5 80971764 81157909 8004 5 80971764 83400242
7961 5 80971764 81265937 8005 5 80971764 83405797
7962 5 80971764 81265937 8006 5 80971764 83437132
7963 5 80971764 81267485 8007 5 80971764 83522252
7964 5 80971764 81267499 8008 5 80971764 83560095
- 155 036149
8009 5 80971764 83560204 8053 5 81031951 81265937
8010 5 80971764 83572400 8054 5 81031951 81267485
8011 5 80971764 83607661 8055 5 81031951 81267499
8012 5 80971764 83745342 8056 5 81031951 81274512
8013 5 80971764 83861275 8057 5 81031951 81763618
8014 5 80971764 83861633 8058 5 81031951 81797217
8015 5 80971764 83865653 8059 5 81031951 81800186
8016 5 80971764 83865914 8060 5 81031951 81806213
8017 5 80971764 83865920 8061 5 81031951 81854583
8018 5 80971764 83868010 8062 5 81031951 81859374
8019 5 80971764 84019752 8063 5 81031951 81861368
8020 5 80971764 84065912 8064 5 81031951 81863686
8021 5 80971764 84086632 8065 5 81031951 81916850
8022 5 80971764 84089603 8066 5 81031951 81954891
8023 5 80971764 84104814 8067 5 81031951 81985250
8024 5 80971764 84105175 8068 5 81031951 82083752
8025 5 80971764 84251635 8069 5 81031951 82101253
8026 5 80971764 84252180 8070 5 81031951 82143124
8027 5 80971764 84253030 8071 5 81031951 82236318
8028 5 80971764 84254208 8072 5 81031951 82325587
8029 5 80971764 84314930 8073 5 81031951 82427210
8030 5 80971764 84340523 8074 5 81031951 82431853
8031 5 80971764 84516340 8075 5 81031951 82446714
8032 5 80971764 84706916 8076 5 81031951 82446794
8033 5 80971764 84799488 8077 5 81031951 82551111
8034 5 80971764 84801081 8078 5 81031951 82552090
8035 5 80971764 84824103 8079 5 81031951 82555641
8036 5 80971764 84824203 8080 5 81031951 82555670
8037 5 80971764 84824816 8081 5 81031951 82556511
8038 5 80971764 84825422 8082 5 81031951 82559047
8039 5 80971764 84825763 8083 5 81031951 82561535
8040 5 80971764 84825942 8084 5 81031951 82610100
8041 5 80971764 84843411 8085 5 81031951 82676822
8042 5 80971764 84936441 8086 5 81031951 82676901
8043 5 80971764 84936493 8087 5 81031951 82883691
8044 5 80971764 84943705 8088 5 81031951 82954942
8045 5 80971764 169454950 8089 5 81031951 82971688
8046 5 80971764 181522829 8090 5 81031951 83023965
8047 5 80971764 204759879 8091 5 81031951 83094205
8048 5 80971764 209874191 8092 5 81031951 83146355
8049 5 81031951 81047638 8093 5 81031951 83280630
8050 5 81031951 81082921 8094 5 81031951 83281412
8051 5 81031951 81157909 8095 5 81031951 83400242
8052 5 81031951 81265937 8096 5 81031951 83405797
- 156 036149
8097 5 81031951 83437132 8141 5 81076870 81157909
8098 5 81031951 83522252 8142 5 81076870 81265937
8099 5 81031951 83560095 8143 5 81076870 81265937
8100 5 81031951 83560204 8144 5 81076870 81267485
8101 5 81031951 83572400 8145 5 81076870 81267499
8102 5 81031951 83607661 8146 5 81076870 81274512
8103 5 81031951 83745342 8147 5 81076870 81763618
8104 5 81031951 83861275 8148 5 81076870 81797217
8105 5 81031951 83861633 8149 5 81076870 81800186
8106 5 81031951 83865653 8150 5 81076870 81806213
8107 5 81031951 83865914 8151 5 81076870 81854583
8108 5 81031951 83865920 8152 5 81076870 81859374
8109 5 81031951 83868010 8153 5 81076870 81861368
8110 5 81031951 84019752 8154 5 81076870 81863686
8111 5 81031951 84065912 8155 5 81076870 81916850
8112 5 81031951 84086632 8156 5 81076870 81954891
8113 5 81031951 84089603 8157 5 81076870 81985250
8114 5 81031951 84104814 8158 5 81076870 82083752
8115 5 81031951 84105175 8159 5 81076870 82101253
8116 5 81031951 84251635 8160 5 81076870 82143124
8117 5 81031951 84252180 8161 5 81076870 82236318
8118 5 81031951 84253030 8162 5 81076870 82325587
8119 5 81031951 84254208 8163 5 81076870 82427210
8120 5 81031951 84314930 8164 5 81076870 82431853
8121 5 81031951 84340523 8165 5 81076870 82446714
8122 5 81031951 84516340 8166 5 81076870 82446794
8123 5 81031951 84706916 8167 5 81076870 82551111
8124 5 81031951 84799488 8168 5 81076870 82552090
8125 5 81031951 84801081 8169 5 81076870 82555641
8126 5 81031951 84824103 8170 5 81076870 82555670
8127 5 81031951 84824203 8171 5 81076870 82556511
8128 5 81031951 84824816 8172 5 81076870 82559047
8129 5 81031951 84825422 8173 5 81076870 82561535
8130 5 81031951 84825763 8174 5 81076870 82610100
8131 5 81031951 84825942 8175 5 81076870 82676822
8132 5 81031951 84843411 8176 5 81076870 82676901
8133 5 81031951 84936441 8177 5 81076870 82883691
8134 5 81031951 84936493 8178 5 81076870 82954942
8135 5 81031951 84943705 8179 5 81076870 82971688
8136 5 81031951 169454950 8180 5 81076870 83023965
8137 5 81031951 181522829 8181 5 81076870 83094205
8138 5 81031951 204759879 8182 5 81076870 83146355
8139 5 81031951 209874191 8183 5 81076870 83280630
8140 5 81076870 81082921 8184 5 81076870 83281412
- 157 036149
8185 5 81076870 83400242 8229 5 81076870 209874191
8186 5 81076870 83405797 8230 5 81155197 81157909
8187 5 81076870 83437132 8231 5 81155197 81265937
8188 5 81076870 83522252 8232 5 81155197 81265937
8189 5 81076870 83560095 8233 5 81155197 81267485
8190 5 81076870 83560204 8234 5 81155197 81267499
8191 5 81076870 83572400 8235 5 81155197 81274512
8192 5 81076870 83607661 8236 5 81155197 81763618
8193 5 81076870 83745342 8237 5 81155197 81797217
8194 5 81076870 83861275 8238 5 81155197 81800186
8195 5 81076870 83861633 8239 5 81155197 81806213
8196 5 81076870 83865653 8240 5 81155197 81854583
8197 5 81076870 83865914 8241 5 81155197 81859374
8198 5 81076870 83865920 8242 5 81155197 81861368
8199 5 81076870 83868010 8243 5 81155197 81863686
8200 5 81076870 84019752 8244 5 81155197 81916850
8201 5 81076870 84065912 8245 5 81155197 81954891
8202 5 81076870 84086632 8246 5 81155197 81985250
8203 5 81076870 84089603 8247 5 81155197 82083752
8204 5 81076870 84104814 8248 5 81155197 82101253
8205 5 81076870 84105175 8249 5 81155197 82143124
8206 5 81076870 84251635 8250 5 81155197 82236318
8207 5 81076870 84252180 8251 5 81155197 82325587
8208 5 81076870 84253030 8252 5 81155197 82427210
8209 5 81076870 84254208 8253 5 81155197 82431853
8210 5 81076870 84314930 8254 5 81155197 82446714
8211 5 81076870 84340523 8255 5 81155197 82446794
8212 5 81076870 84516340 8256 5 81155197 82551111
8213 5 81076870 84706916 8257 5 81155197 82552090
8214 5 81076870 84799488 8258 5 81155197 82555641
8215 5 81076870 84801081 8259 5 81155197 82555670
8216 5 81076870 84824103 8260 5 81155197 82556511
8217 5 81076870 84824203 8261 5 81155197 82559047
8218 5 81076870 84824816 8262 5 81155197 82561535
8219 5 81076870 84825422 8263 5 81155197 82610100
8220 5 81076870 84825763 8264 5 81155197 82676822
8221 5 81076870 84825942 8265 5 81155197 82676901
8222 5 81076870 84843411 8266 5 81155197 82883691
8223 5 81076870 84936441 8267 5 81155197 82954942
8224 5 81076870 84936493 8268 5 81155197 82971688
8225 5 81076870 84943705 8269 5 81155197 83023965
8226 5 81076870 169454950 8270 5 81155197 83094205
8227 5 81076870 181522829 8271 5 81155197 83146355
8228 5 81076870 204759879 8272 5 81155197 83280630
- 158 036149
8273 5 81155197 83281412 8317 5 81155197 204759879
8274 5 81155197 83400242 8318 5 81155197 209874191
8275 5 81155197 83405797 8319 5 81155255 81157909
8276 5 81155197 83437132 8320 5 81155255 81265937
8277 5 81155197 83522252 8321 5 81155255 81265937
8278 5 81155197 83560095 8322 5 81155255 81267485
8279 5 81155197 83560204 8323 5 81155255 81267499
8280 5 81155197 83572400 8324 5 81155255 81274512
8281 5 81155197 83607661 8325 5 81155255 81763618
8282 5 81155197 83745342 8326 5 81155255 81797217
8283 5 81155197 83861275 8327 5 81155255 81800186
8284 5 81155197 83861633 8328 5 81155255 81806213
8285 5 81155197 83865653 8329 5 81155255 81854583
8286 5 81155197 83865914 8330 5 81155255 81859374
8287 5 81155197 83865920 8331 5 81155255 81861368
8288 5 81155197 83868010 8332 5 81155255 81863686
8289 5 81155197 84019752 8333 5 81155255 81916850
8290 5 81155197 84065912 8334 5 81155255 81954891
8291 5 81155197 84086632 8335 5 81155255 81985250
8292 5 81155197 84089603 8336 5 81155255 82083752
8293 5 81155197 84104814 8337 5 81155255 82101253
8294 5 81155197 84105175 8338 5 81155255 82143124
8295 5 81155197 84251635 8339 5 81155255 82236318
8296 5 81155197 84252180 8340 5 81155255 82325587
8297 5 81155197 84253030 8341 5 81155255 82427210
8298 5 81155197 84254208 8342 5 81155255 82431853
8299 5 81155197 84314930 8343 5 81155255 82446714
8300 5 81155197 84340523 8344 5 81155255 82446794
8301 5 81155197 84516340 8345 5 81155255 82551111
8302 5 81155197 84706916 8346 5 81155255 82552090
8303 5 81155197 84799488 8347 5 81155255 82555641
8304 5 81155197 84801081 8348 5 81155255 82555670
8305 5 81155197 84824103 8349 5 81155255 82556511
8306 5 81155197 84824203 8350 5 81155255 82559047
8307 5 81155197 84824816 8351 5 81155255 82561535
8308 5 81155197 84825422 8352 5 81155255 82610100
8309 5 81155197 84825763 8353 5 81155255 82676822
8310 5 81155197 84825942 8354 5 81155255 82676901
8311 5 81155197 84843411 8355 5 81155255 82883691
8312 5 81155197 84936441 8356 5 81155255 82954942
8313 5 81155197 84936493 8357 5 81155255 82971688
8314 5 81155197 84943705 8358 5 81155255 83023965
8315 5 81155197 169454950 8359 5 81155255 83094205
8316 5 81155197 181522829 8360 5 81155255 83146355
- 159 036149
8361 5 81155255 83280630 8405 5 81155255 181522829
8362 5 81155255 83281412 8406 5 81155255 204759879
8363 5 81155255 83400242 8407 5 81155255 209874191
8364 5 81155255 83405797 8408 5 81155675 81157909
8365 5 81155255 83437132 8409 5 81155675 81265937
8366 5 81155255 83522252 8410 5 81155675 81265937
8367 5 81155255 83560095 8411 5 81155675 81267485
8368 5 81155255 83560204 8412 5 81155675 81267499
8369 5 81155255 83572400 8413 5 81155675 81274512
8370 5 81155255 83607661 8414 5 81155675 81763618
8371 5 81155255 83745342 8415 5 81155675 81797217
8372 5 81155255 83861275 8416 5 81155675 81800186
8373 5 81155255 83861633 8417 5 81155675 81806213
8374 5 81155255 83865653 8418 5 81155675 81854583
8375 5 81155255 83865914 8419 5 81155675 81859374
8376 5 81155255 83865920 8420 5 81155675 81861368
8377 5 81155255 83868010 8421 5 81155675 81863686
8378 5 81155255 84019752 8422 5 81155675 81916850
8379 5 81155255 84065912 8423 5 81155675 81954891
8380 5 81155255 84086632 8424 5 81155675 81985250
8381 5 81155255 84089603 8425 5 81155675 82083752
8382 5 81155255 84104814 8426 5 81155675 82101253
8383 5 81155255 84105175 8427 5 81155675 82143124
8384 5 81155255 84251635 8428 5 81155675 82236318
8385 5 81155255 84252180 8429 5 81155675 82325587
8386 5 81155255 84253030 8430 5 81155675 82427210
8387 5 81155255 84254208 8431 5 81155675 82431853
8388 5 81155255 84314930 8432 5 81155675 82446714
8389 5 81155255 84340523 8433 5 81155675 82446794
8390 5 81155255 84516340 8434 5 81155675 82551111
8391 5 81155255 84706916 8435 5 81155675 82552090
8392 5 81155255 84799488 8436 5 81155675 82555641
8393 5 81155255 84801081 8437 5 81155675 82555670
8394 5 81155255 84824103 8438 5 81155675 82556511
8395 5 81155255 84824203 8439 5 81155675 82559047
8396 5 81155255 84824816 8440 5 81155675 82561535
8397 5 81155255 84825422 8441 5 81155675 82610100
8398 5 81155255 84825763 8442 5 81155675 82676822
8399 5 81155255 84825942 8443 5 81155675 82676901
8400 5 81155255 84843411 8444 5 81155675 82883691
8401 5 81155255 84936441 8445 5 81155675 82954942
8402 5 81155255 84936493 8446 5 81155675 82971688
8403 5 81155255 84943705 8447 5 81155675 83023965
8404 5 81155255 169454950 8448 5 81155675 83094205
- 160 036149
8449 5 81155675 83146355 8493 5 81155675 169454950
8450 5 81155675 83280630 8494 5 81155675 181522829
8451 5 81155675 83281412 8495 5 81155675 204759879
8452 5 81155675 83400242 8496 5 81155675 209874191
8453 5 81155675 83405797 8497 5 81156713 81157909
8454 5 81155675 83437132 8498 5 81156713 81265937
8455 5 81155675 83522252 8499 5 81156713 81265937
8456 5 81155675 83560095 8500 5 81156713 81267485
8457 5 81155675 83560204 8501 5 81156713 81267499
8458 5 81155675 83572400 8502 5 81156713 81274512
8459 5 81155675 83607661 8503 5 81156713 81763618
8460 5 81155675 83745342 8504 5 81156713 81797217
8461 5 81155675 83861275 8505 5 81156713 81800186
8462 5 81155675 83861633 8506 5 81156713 81806213
8463 5 81155675 83865653 8507 5 81156713 81854583
8464 5 81155675 83865914 8508 5 81156713 81859374
8465 5 81155675 83865920 8509 5 81156713 81861368
8466 5 81155675 83868010 8510 5 81156713 81863686
8467 5 81155675 84019752 8511 5 81156713 81916850
8468 5 81155675 84065912 8512 5 81156713 81954891
8469 5 81155675 84086632 8513 5 81156713 81985250
8470 5 81155675 84089603 8514 5 81156713 82083752
8471 5 81155675 84104814 8515 5 81156713 82101253
8472 5 81155675 84105175 8516 5 81156713 82143124
8473 5 81155675 84251635 8517 5 81156713 82236318
8474 5 81155675 84252180 8518 5 81156713 82325587
8475 5 81155675 84253030 8519 5 81156713 82427210
8476 5 81155675 84254208 8520 5 81156713 82431853
8477 5 81155675 84314930 8521 5 81156713 82446714
8478 5 81155675 84340523 8522 5 81156713 82446794
8479 5 81155675 84516340 8523 5 81156713 82551111
8480 5 81155675 84706916 8524 5 81156713 82552090
8481 5 81155675 84799488 8525 5 81156713 82555641
8482 5 81155675 84801081 8526 5 81156713 82555670
8483 5 81155675 84824103 8527 5 81156713 82556511
8484 5 81155675 84824203 8528 5 81156713 82559047
8485 5 81155675 84824816 8529 5 81156713 82561535
8486 5 81155675 84825422 8530 5 81156713 82610100
8487 5 81155675 84825763 8531 5 81156713 82676822
8488 5 81155675 84825942 8532 5 81156713 82676901
8489 5 81155675 84843411 8533 5 81156713 82883691
8490 5 81155675 84936441 8534 5 81156713 82954942
8491 5 81155675 84936493 8535 5 81156713 82971688
8492 5 81155675 84943705 8536 5 81156713 83023965
- 161 036149
8537 5 81156713 83094205 8581 5 81156713 84943705
8538 5 81156713 83146355 8582 5 81156713 169454950
8539 5 81156713 83280630 8583 5 81156713 181522829
8540 5 81156713 83281412 8584 5 81156713 204759879
8541 5 81156713 83400242 8585 5 81156713 209874191
8542 5 81156713 83405797 8586 5 81265211 81265937
8543 5 81156713 83437132 8587 5 81265211 81265937
8544 5 81156713 83522252 8588 5 81265211 81267485
8545 5 81156713 83560095 8589 5 81265211 81267499
8546 5 81156713 83560204 8590 5 81265211 81274512
8547 5 81156713 83572400 8591 5 81265211 81763618
8548 5 81156713 83607661 8592 5 81265211 81797217
8549 5 81156713 83745342 8593 5 81265211 81800186
8550 5 81156713 83861275 8594 5 81265211 81806213
8551 5 81156713 83861633 8595 5 81265211 81854583
8552 5 81156713 83865653 8596 5 81265211 81859374
8553 5 81156713 83865914 8597 5 81265211 81861368
8554 5 81156713 83865920 8598 5 81265211 81863686
8555 5 81156713 83868010 8599 5 81265211 81916850
8556 5 81156713 84019752 8600 5 81265211 81954891
8557 5 81156713 84065912 8601 5 81265211 81985250
8558 5 81156713 84086632 8602 5 81265211 82083752
8559 5 81156713 84089603 8603 5 81265211 82101253
8560 5 81156713 84104814 8604 5 81265211 82143124
8561 5 81156713 84105175 8605 5 81265211 82236318
8562 5 81156713 84251635 8606 5 81265211 82325587
8563 5 81156713 84252180 8607 5 81265211 82427210
8564 5 81156713 84253030 8608 5 81265211 82431853
8565 5 81156713 84254208 8609 5 81265211 82446714
8566 5 81156713 84314930 8610 5 81265211 82446794
8567 5 81156713 84340523 8611 5 81265211 82551111
8568 5 81156713 84516340 8612 5 81265211 82552090
8569 5 81156713 84706916 8613 5 81265211 82555641
8570 5 81156713 84799488 8614 5 81265211 82555670
8571 5 81156713 84801081 8615 5 81265211 82556511
8572 5 81156713 84824103 8616 5 81265211 82559047
8573 5 81156713 84824203 8617 5 81265211 82561535
8574 5 81156713 84824816 8618 5 81265211 82610100
8575 5 81156713 84825422 8619 5 81265211 82676822
8576 5 81156713 84825763 8620 5 81265211 82676901
8577 5 81156713 84825942 8621 5 81265211 82883691
8578 5 81156713 84843411 8622 5 81265211 82954942
8579 5 81156713 84936441 8623 5 81265211 82971688
8580 5 81156713 84936493 8624 5 81265211 83023965
- 162 036149
8625 5 81265211 83094205 8669 5 81265211 84943705
8626 5 81265211 83146355 8670 5 81265211 169454950
8627 5 81265211 83280630 8671 5 81265211 181522829
8628 5 81265211 83281412 8672 5 81265211 204759879
8629 5 81265211 83400242 8673 5 81265211 209874191
8630 5 81265211 83405797 8674 5 81265354 81265937
8631 5 81265211 83437132 8675 5 81265354 81265937
8632 5 81265211 83522252 8676 5 81265354 81267485
8633 5 81265211 83560095 8677 5 81265354 81274512
8634 5 81265211 83560204 8678 5 81265354 81763618
8635 5 81265211 83572400 8679 5 81265354 81797217
8636 5 81265211 83607661 8680 5 81265354 81800186
8637 5 81265211 83745342 8681 5 81265354 81806213
8638 5 81265211 83861275 8682 5 81265354 81854583
8639 5 81265211 83861633 8683 5 81265354 81859374
8640 5 81265211 83865653 8684 5 81265354 81861368
8641 5 81265211 83865914 8685 5 81265354 81863686
8642 5 81265211 83865920 8686 5 81265354 81916850
8643 5 81265211 83868010 8687 5 81265354 81954891
8644 5 81265211 84019752 8688 5 81265354 81985250
8645 5 81265211 84065912 8689 5 81265354 82083752
8646 5 81265211 84086632 8690 5 81265354 82101253
8647 5 81265211 84089603 8691 5 81265354 82143124
8648 5 81265211 84104814 8692 5 81265354 82236318
8649 5 81265211 84105175 8693 5 81265354 82325587
8650 5 81265211 84251635 8694 5 81265354 82427210
8651 5 81265211 84252180 8695 5 81265354 82431853
8652 5 81265211 84253030 8696 5 81265354 82446714
8653 5 81265211 84254208 8697 5 81265354 82446794
8654 5 81265211 84314930 8698 5 81265354 82551111
8655 5 81265211 84340523 8699 5 81265354 82552090
8656 5 81265211 84516340 8700 5 81265354 82555641
8657 5 81265211 84706916 8701 5 81265354 82555670
8658 5 81265211 84799488 8702 5 81265354 82556511
8659 5 81265211 84801081 8703 5 81265354 82559047
8660 5 81265211 84824103 8704 5 81265354 82561535
8661 5 81265211 84824203 8705 5 81265354 82610100
8662 5 81265211 84824816 8706 5 81265354 82676822
8663 5 81265211 84825422 8707 5 81265354 82676901
8664 5 81265211 84825763 8708 5 81265354 82883691
8665 5 81265211 84825942 8709 5 81265354 82954942
8666 5 81265211 84843411 8710 5 81265354 82971688
8667 5 81265211 84936441 8711 5 81265354 83023965
8668 5 81265211 84936493 8712 5 81265354 83094205
- 163 036149
8713 5 81265354 83146355 8757 5 81265354 169454950
8714 5 81265354 83280630 8758 5 81265354 181522829
8715 5 81265354 83281412 8759 5 81265354 204759879
8716 5 81265354 83400242 8760 5 81265354 209874191
8717 5 81265354 83405797 8761 5 81265937 81274512
8718 5 81265354 83437132 8762 5 81265937 81763618
8719 5 81265354 83522252 8763 5 81265937 81797217
8720 5 81265354 83560095 8764 5 81265937 81800186
8721 5 81265354 83560204 8765 5 81265937 81806213
8722 5 81265354 83572400 8766 5 81265937 81854583
8723 5 81265354 83607661 8767 5 81265937 81859374
8724 5 81265354 83745342 8768 5 81265937 81861368
8725 5 81265354 83861275 8769 5 81265937 81863686
8726 5 81265354 83861633 8770 5 81265937 81916850
8727 5 81265354 83865653 8771 5 81265937 81954891
8728 5 81265354 83865914 8772 5 81265937 81985250
8729 5 81265354 83865920 8773 5 81265937 82083752
8730 5 81265354 83868010 8774 5 81265937 82101253
8731 5 81265354 84019752 8775 5 81265937 82143124
8732 5 81265354 84065912 8776 5 81265937 82236318
8733 5 81265354 84086632 8777 5 81265937 82325587
8734 5 81265354 84089603 8778 5 81265937 82427210
8735 5 81265354 84104814 8779 5 81265937 82431853
8736 5 81265354 84105175 8780 5 81265937 82446714
8737 5 81265354 84251635 8781 5 81265937 82446794
8738 5 81265354 84252180 8782 5 81265937 82551111
8739 5 81265354 84253030 8783 5 81265937 82552090
8740 5 81265354 84254208 8784 5 81265937 82555641
8741 5 81265354 84314930 8785 5 81265937 82555670
8742 5 81265354 84340523 8786 5 81265937 82556511
8743 5 81265354 84516340 8787 5 81265937 82559047
8744 5 81265354 84706916 8788 5 81265937 82561535
8745 5 81265354 84799488 8789 5 81265937 82610100
8746 5 81265354 84801081 8790 5 81265937 82676822
8747 5 81265354 84824103 8791 5 81265937 82676901
8748 5 81265354 84824203 8792 5 81265937 82883691
8749 5 81265354 84824816 8793 5 81265937 82954942
8750 5 81265354 84825422 8794 5 81265937 82971688
8751 5 81265354 84825763 8795 5 81265937 83023965
8752 5 81265354 84825942 8796 5 81265937 83094205
8753 5 81265354 84843411 8797 5 81265937 83146355
8754 5 81265354 84936441 8798 5 81265937 83280630
8755 5 81265354 84936493 8799 5 81265937 83281412
8756 5 81265354 84943705 8800 5 81265937 83400242
- 164 036149
8801 5 81265937 83405797 8845 5 81273796 81265937
8802 5 81265937 83437132 8846 5 81273796 81274512
8803 5 81265937 83522252 8847 5 81273796 81763618
8804 5 81265937 83560095 8848 5 81273796 81797217
8805 5 81265937 83560204 8849 5 81273796 81800186
8806 5 81265937 83572400 8850 5 81273796 81806213
8807 5 81265937 83607661 8851 5 81273796 81854583
8808 5 81265937 83745342 8852 5 81273796 81859374
8809 5 81265937 83861275 8853 5 81273796 81861368
8810 5 81265937 83861633 8854 5 81273796 81863686
8811 5 81265937 83865653 8855 5 81273796 81916850
8812 5 81265937 83865914 8856 5 81273796 81954891
8813 5 81265937 83865920 8857 5 81273796 81985250
8814 5 81265937 83868010 8858 5 81273796 82083752
8815 5 81265937 84019752 8859 5 81273796 82101253
8816 5 81265937 84065912 8860 5 81273796 82143124
8817 5 81265937 84086632 8861 5 81273796 82236318
8818 5 81265937 84089603 8862 5 81273796 82325587
8819 5 81265937 84104814 8863 5 81273796 82427210
8820 5 81265937 84105175 8864 5 81273796 82431853
8821 5 81265937 84251635 8865 5 81273796 82446714
8822 5 81265937 84252180 8866 5 81273796 82446794
8823 5 81265937 84253030 8867 5 81273796 82551111
8824 5 81265937 84254208 8868 5 81273796 82552090
8825 5 81265937 84314930 8869 5 81273796 82555641
8826 5 81265937 84340523 8870 5 81273796 82555670
8827 5 81265937 84516340 8871 5 81273796 82556511
8828 5 81265937 84706916 8872 5 81273796 82559047
8829 5 81265937 84799488 8873 5 81273796 82561535
8830 5 81265937 84801081 8874 5 81273796 82610100
8831 5 81265937 84824103 8875 5 81273796 82676822
8832 5 81265937 84824203 8876 5 81273796 82676901
8833 5 81265937 84824816 8877 5 81273796 82883691
8834 5 81265937 84825422 8878 5 81273796 82954942
8835 5 81265937 84825763 8879 5 81273796 82971688
8836 5 81265937 84825942 8880 5 81273796 83023965
8837 5 81265937 84843411 8881 5 81273796 83094205
8838 5 81265937 84936441 8882 5 81273796 83146355
8839 5 81265937 84936493 8883 5 81273796 83280630
8840 5 81265937 84943705 8884 5 81273796 83281412
8841 5 81265937 169454950 8885 5 81273796 83400242
8842 5 81265937 181522829 8886 5 81273796 83405797
8843 5 81265937 204759879 8887 5 81273796 83437132
8844 5 81265937 209874191 8888 5 81273796 83522252
- 165 036149
8889 5 81273796 83560095 8933 5 81761119 81267499
8890 5 81273796 83560204 8934 5 81761119 81274512
8891 5 81273796 83572400 8935 5 81761119 81763618
8892 5 81273796 83607661 8936 5 81761119 81797217
8893 5 81273796 83745342 8937 5 81761119 81800186
8894 5 81273796 83861275 8938 5 81761119 81806213
8895 5 81273796 83861633 8939 5 81761119 81854583
8896 5 81273796 83865653 8940 5 81761119 81859374
8897 5 81273796 83865914 8941 5 81761119 81861368
8898 5 81273796 83865920 8942 5 81761119 81863686
8899 5 81273796 83868010 8943 5 81761119 81916850
8900 5 81273796 84019752 8944 5 81761119 81954891
8901 5 81273796 84065912 8945 5 81761119 81985250
8902 5 81273796 84086632 8946 5 81761119 82083752
8903 5 81273796 84089603 8947 5 81761119 82101253
8904 5 81273796 84104814 8948 5 81761119 82143124
8905 5 81273796 84105175 8949 5 81761119 82236318
8906 5 81273796 84251635 8950 5 81761119 82325587
8907 5 81273796 84252180 8951 5 81761119 82427210
8908 5 81273796 84253030 8952 5 81761119 82431853
8909 5 81273796 84254208 8953 5 81761119 82446714
8910 5 81273796 84314930 8954 5 81761119 82446794
8911 5 81273796 84340523 8955 5 81761119 82551111
8912 5 81273796 84516340 8956 5 81761119 82552090
8913 5 81273796 84706916 8957 5 81761119 82555641
8914 5 81273796 84799488 8958 5 81761119 82555670
8915 5 81273796 84801081 8959 5 81761119 82556511
8916 5 81273796 84824103 8960 5 81761119 82559047
8917 5 81273796 84824203 8961 5 81761119 82561535
8918 5 81273796 84824816 8962 5 81761119 82610100
8919 5 81273796 84825422 8963 5 81761119 82676822
8920 5 81273796 84825763 8964 5 81761119 82676901
8921 5 81273796 84825942 8965 5 81761119 82883691
8922 5 81273796 84843411 8966 5 81761119 82954942
8923 5 81273796 84936441 8967 5 81761119 82971688
8924 5 81273796 84936493 8968 5 81761119 83023965
8925 5 81273796 84943705 8969 5 81761119 83094205
8926 5 81273796 169454950 8970 5 81761119 83146355
8927 5 81273796 181522829 8971 5 81761119 83280630
8928 5 81273796 204759879 8972 5 81761119 83281412
8929 5 81273796 209874191 8973 5 81761119 83400242
8930 5 81761119 81265937 8974 5 81761119 83405797
8931 5 81761119 81265937 8975 5 81761119 83437132
8932 5 81761119 81267485 8976 5 81761119 83522252
- 166 036149
8977 5 81761119 83560095 9021 5 81793777 81806213
8978 5 81761119 83560204 9022 5 81793777 81854583
8979 5 81761119 83572400 9023 5 81793777 81859374
8980 5 81761119 83607661 9024 5 81793777 81861368
8981 5 81761119 83745342 9025 5 81793777 81863686
8982 5 81761119 83861275 9026 5 81793777 81916850
8983 5 81761119 83861633 9027 5 81793777 81954891
8984 5 81761119 83865653 9028 5 81793777 81985250
8985 5 81761119 83865914 9029 5 81793777 82083752
8986 5 81761119 83865920 9030 5 81793777 82101253
8987 5 81761119 83868010 9031 5 81793777 82143124
8988 5 81761119 84019752 9032 5 81793777 82236318
8989 5 81761119 84065912 9033 5 81793777 82325587
8990 5 81761119 84086632 9034 5 81793777 82427210
8991 5 81761119 84089603 9035 5 81793777 82431853
8992 5 81761119 84104814 9036 5 81793777 82446714
8993 5 81761119 84105175 9037 5 81793777 82446794
8994 5 81761119 84251635 9038 5 81793777 82551111
8995 5 81761119 84252180 9039 5 81793777 82552090
8996 5 81761119 84253030 9040 5 81793777 82555641
8997 5 81761119 84254208 9041 5 81793777 82555670
8998 5 81761119 84314930 9042 5 81793777 82556511
8999 5 81761119 84340523 9043 5 81793777 82559047
9000 5 81761119 84516340 9044 5 81793777 82561535
9001 5 81761119 84706916 9045 5 81793777 82610100
9002 5 81761119 84799488 9046 5 81793777 82676822
9003 5 81761119 84801081 9047 5 81793777 82676901
9004 5 81761119 84824103 9048 5 81793777 82883691
9005 5 81761119 84824203 9049 5 81793777 82954942
9006 5 81761119 84824816 9050 5 81793777 82971688
9007 5 81761119 84825422 9051 5 81793777 83023965
9008 5 81761119 84825763 9052 5 81793777 83094205
9009 5 81761119 84825942 9053 5 81793777 83146355
9010 5 81761119 84843411 9054 5 81793777 83280630
9011 5 81761119 84936441 9055 5 81793777 83281412
9012 5 81761119 84936493 9056 5 81793777 83400242
9013 5 81761119 84943705 9057 5 81793777 83405797
9014 5 81761119 169454950 9058 5 81793777 83437132
9015 5 81761119 181522829 9059 5 81793777 83522252
9016 5 81761119 204759879 9060 5 81793777 83560095
9017 5 81761119 209874191 9061 5 81793777 83560204
9018 5 81793777 81265937 9062 5 81793777 83572400
9019 5 81793777 81797217 9063 5 81793777 83607661
9020 5 81793777 81800186 9064 5 81793777 83745342
- 167 036149
9065 5 81793777 83861275 9109 5 81798893 81954891
9066 5 81793777 83861633 9110 5 81798893 81985250
9067 5 81793777 83865653 9111 5 81798893 82083752
9068 5 81793777 83865914 9112 5 81798893 82101253
9069 5 81793777 83865920 9113 5 81798893 82143124
9070 5 81793777 83868010 9114 5 81798893 82236318
9071 5 81793777 84019752 9115 5 81798893 82325587
9072 5 81793777 84065912 9116 5 81798893 82427210
9073 5 81793777 84086632 9117 5 81798893 82431853
9074 5 81793777 84089603 9118 5 81798893 82446714
9075 5 81793777 84104814 9119 5 81798893 82446794
9076 5 81793777 84105175 9120 5 81798893 82551111
9077 5 81793777 84251635 9121 5 81798893 82552090
9078 5 81793777 84252180 9122 5 81798893 82555641
9079 5 81793777 84253030 9123 5 81798893 82555670
9080 5 81793777 84254208 9124 5 81798893 82556511
9081 5 81793777 84314930 9125 5 81798893 82559047
9082 5 81793777 84340523 9126 5 81798893 82561535
9083 5 81793777 84516340 9127 5 81798893 82610100
9084 5 81793777 84706916 9128 5 81798893 82676822
9085 5 81793777 84799488 9129 5 81798893 82676901
9086 5 81793777 84801081 9130 5 81798893 82883691
9087 5 81793777 84824103 9131 5 81798893 82954942
9088 5 81793777 84824203 9132 5 81798893 82971688
9089 5 81793777 84824816 9133 5 81798893 83023965
9090 5 81793777 84825422 9134 5 81798893 83094205
9091 5 81793777 84825763 9135 5 81798893 83146355
9092 5 81793777 84825942 9136 5 81798893 83280630
9093 5 81793777 84843411 9137 5 81798893 83281412
9094 5 81793777 84936441 9138 5 81798893 83400242
9095 5 81793777 84936493 9139 5 81798893 83405797
9096 5 81793777 84943705 9140 5 81798893 83437132
9097 5 81793777 169454950 9141 5 81798893 83522252
9098 5 81793777 181522829 9142 5 81798893 83560095
9099 5 81793777 204759879 9143 5 81798893 83560204
9100 5 81793777 209874191 9144 5 81798893 83572400
9101 5 81798893 81265937 9145 5 81798893 83607661
9102 5 81798893 81800186 9146 5 81798893 83745342
9103 5 81798893 81806213 9147 5 81798893 83861275
9104 5 81798893 81854583 9148 5 81798893 83861633
9105 5 81798893 81859374 9149 5 81798893 83865653
9106 5 81798893 81861368 9150 5 81798893 83865914
9107 5 81798893 81863686 9151 5 81798893 83865920
9108 5 81798893 81916850 9152 5 81798893 83868010
- 168 036149
9153 5 81798893 84019752 9197 5 81801973 82427210
9154 5 81798893 84065912 9198 5 81801973 82431853
9155 5 81798893 84086632 9199 5 81801973 82446714
9156 5 81798893 84089603 9200 5 81801973 82446794
9157 5 81798893 84104814 9201 5 81801973 82551111
9158 5 81798893 84105175 9202 5 81801973 82552090
9159 5 81798893 84251635 9203 5 81801973 82555641
9160 5 81798893 84252180 9204 5 81801973 82555670
9161 5 81798893 84253030 9205 5 81801973 82556511
9162 5 81798893 84254208 9206 5 81801973 82559047
9163 5 81798893 84314930 9207 5 81801973 82561535
9164 5 81798893 84340523 9208 5 81801973 82610100
9165 5 81798893 84516340 9209 5 81801973 82676822
9166 5 81798893 84706916 9210 5 81801973 82676901
9167 5 81798893 84799488 9211 5 81801973 82883691
9168 5 81798893 84801081 9212 5 81801973 82954942
9169 5 81798893 84824103 9213 5 81801973 82971688
9170 5 81798893 84824203 9214 5 81801973 83023965
9171 5 81798893 84824816 9215 5 81801973 83094205
9172 5 81798893 84825422 9216 5 81801973 83146355
9173 5 81798893 84825763 9217 5 81801973 83280630
9174 5 81798893 84825942 9218 5 81801973 83281412
9175 5 81798893 84843411 9219 5 81801973 83400242
9176 5 81798893 84936441 9220 5 81801973 83405797
9177 5 81798893 84936493 9221 5 81801973 83437132
9178 5 81798893 84943705 9222 5 81801973 83522252
9179 5 81798893 169454950 9223 5 81801973 83560095
9180 5 81798893 181522829 9224 5 81801973 83560204
9181 5 81798893 204759879 9225 5 81801973 83572400
9182 5 81798893 209874191 9226 5 81801973 83607661
9183 5 81801973 81265937 9227 5 81801973 83745342
9184 5 81801973 81806213 9228 5 81801973 83861275
9185 5 81801973 81854583 9229 5 81801973 83861633
9186 5 81801973 81859374 9230 5 81801973 83865653
9187 5 81801973 81861368 9231 5 81801973 83865914
9188 5 81801973 81863686 9232 5 81801973 83865920
9189 5 81801973 81916850 9233 5 81801973 83868010
9190 5 81801973 81954891 9234 5 81801973 84019752
9191 5 81801973 81985250 9235 5 81801973 84065912
9192 5 81801973 82083752 9236 5 81801973 84086632
9193 5 81801973 82101253 9237 5 81801973 84089603
9194 5 81801973 82143124 9238 5 81801973 84104814
9195 5 81801973 82236318 9239 5 81801973 84105175
9196 5 81801973 82325587 9240 5 81801973 84251635
- 169 036149
9241 5 81801973 84252180 9285 5 81854583 82561535
9242 5 81801973 84253030 9286 5 81854583 82610100
9243 5 81801973 84254208 9287 5 81854583 82676822
9244 5 81801973 84314930 9288 5 81854583 82676901
9245 5 81801973 84340523 9289 5 81854583 82883691
9246 5 81801973 84516340 9290 5 81854583 82954942
9247 5 81801973 84706916 9291 5 81854583 82971688
9248 5 81801973 84799488 9292 5 81854583 83023965
9249 5 81801973 84801081 9293 5 81854583 83094205
9250 5 81801973 84824103 9294 5 81854583 83146355
9251 5 81801973 84824203 9295 5 81854583 83280630
9252 5 81801973 84824816 9296 5 81854583 83281412
9253 5 81801973 84825422 9297 5 81854583 83400242
9254 5 81801973 84825763 9298 5 81854583 83405797
9255 5 81801973 84825942 9299 5 81854583 83437132
9256 5 81801973 84843411 9300 5 81854583 83522252
9257 5 81801973 84936441 9301 5 81854583 83560095
9258 5 81801973 84936493 9302 5 81854583 83560204
9259 5 81801973 84943705 9303 5 81854583 83572400
9260 5 81801973 169454950 9304 5 81854583 83607661
9261 5 81801973 181522829 9305 5 81854583 83745342
9262 5 81801973 204759879 9306 5 81854583 83861275
9263 5 81801973 209874191 9307 5 81854583 83861633
9264 5 81854583 81859374 9308 5 81854583 83865653
9265 5 81854583 81861368 9309 5 81854583 83865914
9266 5 81854583 81863686 9310 5 81854583 83865920
9267 5 81854583 81916850 9311 5 81854583 83868010
9268 5 81854583 81954891 9312 5 81854583 84019752
9269 5 81854583 81985250 9313 5 81854583 84065912
9270 5 81854583 82083752 9314 5 81854583 84086632
9271 5 81854583 82101253 9315 5 81854583 84089603
9272 5 81854583 82143124 9316 5 81854583 84104814
9273 5 81854583 82236318 9317 5 81854583 84105175
9274 5 81854583 82325587 9318 5 81854583 84251635
9275 5 81854583 82427210 9319 5 81854583 84252180
9276 5 81854583 82431853 9320 5 81854583 84253030
9277 5 81854583 82446714 9321 5 81854583 84254208
9278 5 81854583 82446794 9322 5 81854583 84314930
9279 5 81854583 82551111 9323 5 81854583 84340523
9280 5 81854583 82552090 9324 5 81854583 84516340
9281 5 81854583 82555641 9325 5 81854583 84706916
9282 5 81854583 82555670 9326 5 81854583 84799488
9283 5 81854583 82556511 9327 5 81854583 84801081
9284 5 81854583 82559047 9328 5 81854583 84824103
- 170 036149
9329 5 81854583 84824203 9373 5 81858527 83280630
9330 5 81854583 84824816 9374 5 81858527 83281412
9331 5 81854583 84825422 9375 5 81858527 83400242
9332 5 81854583 84825763 9376 5 81858527 83405797
9333 5 81854583 84825942 9377 5 81858527 83437132
9334 5 81854583 84843411 9378 5 81858527 83522252
9335 5 81854583 84936441 9379 5 81858527 83560095
9336 5 81854583 84936493 9380 5 81858527 83560204
9337 5 81854583 84943705 9381 5 81858527 83572400
9338 5 81854583 169454950 9382 5 81858527 83607661
9339 5 81854583 181522829 9383 5 81858527 83745342
9340 5 81854583 204759879 9384 5 81858527 83861275
9341 5 81854583 209874191 9385 5 81858527 83861633
9342 5 81858527 81859374 9386 5 81858527 83865653
9343 5 81858527 81861368 9387 5 81858527 83865914
9344 5 81858527 81863686 9388 5 81858527 83865920
9345 5 81858527 81916850 9389 5 81858527 83868010
9346 5 81858527 81954891 9390 5 81858527 84019752
9347 5 81858527 81985250 9391 5 81858527 84065912
9348 5 81858527 82083752 9392 5 81858527 84086632
9349 5 81858527 82101253 9393 5 81858527 84089603
9350 5 81858527 82143124 9394 5 81858527 84104814
9351 5 81858527 82236318 9395 5 81858527 84105175
9352 5 81858527 82325587 9396 5 81858527 84251635
9353 5 81858527 82427210 9397 5 81858527 84252180
9354 5 81858527 82431853 9398 5 81858527 84253030
9355 5 81858527 82446714 9399 5 81858527 84254208
9356 5 81858527 82446794 9400 5 81858527 84314930
9357 5 81858527 82551111 9401 5 81858527 84340523
9358 5 81858527 82552090 9402 5 81858527 84516340
9359 5 81858527 82555641 9403 5 81858527 84706916
9360 5 81858527 82555670 9404 5 81858527 84799488
9361 5 81858527 82556511 9405 5 81858527 84801081
9362 5 81858527 82559047 9406 5 81858527 84824103
9363 5 81858527 82561535 9407 5 81858527 84824203
9364 5 81858527 82610100 9408 5 81858527 84824816
9365 5 81858527 82676822 9409 5 81858527 84825422
9366 5 81858527 82676901 9410 5 81858527 84825763
9367 5 81858527 82883691 9411 5 81858527 84825942
9368 5 81858527 82954942 9412 5 81858527 84843411
9369 5 81858527 82971688 9413 5 81858527 84936441
9370 5 81858527 83023965 9414 5 81858527 84936493
9371 5 81858527 83094205 9415 5 81858527 84943705
9372 5 81858527 83146355 9416 5 81858527 169454950
- 171 036149
9417 5 81858527 181522829 9461 5 81859618 83745342
9418 5 81858527 204759879 9462 5 81859618 83861275
9419 5 81858527 209874191 9463 5 81859618 83861633
9420 5 81859618 81265937 9464 5 81859618 83865653
9421 5 81859618 81861368 9465 5 81859618 83865914
9422 5 81859618 81863686 9466 5 81859618 83865920
9423 5 81859618 81916850 9467 5 81859618 83868010
9424 5 81859618 81954891 9468 5 81859618 84019752
9425 5 81859618 81985250 9469 5 81859618 84065912
9426 5 81859618 82083752 9470 5 81859618 84086632
9427 5 81859618 82101253 9471 5 81859618 84089603
9428 5 81859618 82143124 9472 5 81859618 84104814
9429 5 81859618 82236318 9473 5 81859618 84105175
9430 5 81859618 82325587 9474 5 81859618 84251635
9431 5 81859618 82427210 9475 5 81859618 84252180
9432 5 81859618 82431853 9476 5 81859618 84253030
9433 5 81859618 82446714 9477 5 81859618 84254208
9434 5 81859618 82446794 9478 5 81859618 84314930
9435 5 81859618 82551111 9479 5 81859618 84340523
9436 5 81859618 82552090 9480 5 81859618 84516340
9437 5 81859618 82555641 9481 5 81859618 84706916
9438 5 81859618 82555670 9482 5 81859618 84799488
9439 5 81859618 82556511 9483 5 81859618 84801081
9440 5 81859618 82559047 9484 5 81859618 84824103
9441 5 81859618 82561535 9485 5 81859618 84824203
9442 5 81859618 82610100 9486 5 81859618 84824816
9443 5 81859618 82676822 9487 5 81859618 84825422
9444 5 81859618 82676901 9488 5 81859618 84825763
9445 5 81859618 82883691 9489 5 81859618 84825942
9446 5 81859618 82954942 9490 5 81859618 84843411
9447 5 81859618 82971688 9491 5 81859618 84936441
9448 5 81859618 83023965 9492 5 81859618 84936493
9449 5 81859618 83094205 9493 5 81859618 84943705
9450 5 81859618 83146355 9494 5 81859618 169454950
9451 5 81859618 83280630 9495 5 81859618 181522829
9452 5 81859618 83281412 9496 5 81859618 204759879
9453 5 81859618 83400242 9497 5 81859618 209874191
9454 5 81859618 83405797 9498 5 81863099 81265937
9455 5 81859618 83437132 9499 5 81863099 81863686
9456 5 81859618 83522252 9500 5 81863099 81916850
9457 5 81859618 83560095 9501 5 81863099 81954891
9458 5 81859618 83560204 9502 5 81863099 81985250
9459 5 81859618 83572400 9503 5 81863099 82083752
9460 5 81859618 83607661 9504 5 81863099 82101253
- 172 036149
9505 5 81863099 82143124 9549 5 81863099 84104814
9506 5 81863099 82236318 9550 5 81863099 84105175
9507 5 81863099 82325587 9551 5 81863099 84251635
9508 5 81863099 82427210 9552 5 81863099 84252180
9509 5 81863099 82431853 9553 5 81863099 84253030
9510 5 81863099 82446714 9554 5 81863099 84254208
9511 5 81863099 82446794 9555 5 81863099 84314930
9512 5 81863099 82551111 9556 5 81863099 84340523
9513 5 81863099 82552090 9557 5 81863099 84516340
9514 5 81863099 82555641 9558 5 81863099 84706916
9515 5 81863099 82555670 9559 5 81863099 84799488
9516 5 81863099 82556511 9560 5 81863099 84801081
9517 5 81863099 82559047 9561 5 81863099 84824103
9518 5 81863099 82561535 9562 5 81863099 84824203
9519 5 81863099 82610100 9563 5 81863099 84824816
9520 5 81863099 82676822 9564 5 81863099 84825422
9521 5 81863099 82676901 9565 5 81863099 84825763
9522 5 81863099 82883691 9566 5 81863099 84825942
9523 5 81863099 82954942 9567 5 81863099 84843411
9524 5 81863099 82971688 9568 5 81863099 84936441
9525 5 81863099 83023965 9569 5 81863099 84936493
9526 5 81863099 83094205 9570 5 81863099 84943705
9527 5 81863099 83146355 9571 5 81863099 169454950
9528 5 81863099 83280630 9572 5 81863099 181522829
9529 5 81863099 83281412 9573 5 81863099 204759879
9530 5 81863099 83400242 9574 5 81863099 209874191
9531 5 81863099 83405797 9575 5 81914498 81265937
9532 5 81863099 83437132 9576 5 81914498 81916850
9533 5 81863099 83522252 9577 5 81914498 81954891
9534 5 81863099 83560095 9578 5 81914498 81985250
9535 5 81863099 83560204 9579 5 81914498 82083752
9536 5 81863099 83572400 9580 5 81914498 82101253
9537 5 81863099 83607661 9581 5 81914498 82143124
9538 5 81863099 83745342 9582 5 81914498 82236318
9539 5 81863099 83861275 9583 5 81914498 82325587
9540 5 81863099 83861633 9584 5 81914498 82427210
9541 5 81863099 83865653 9585 5 81914498 82431853
9542 5 81863099 83865914 9586 5 81914498 82446714
9543 5 81863099 83865920 9587 5 81914498 82446794
9544 5 81863099 83868010 9588 5 81914498 82551111
9545 5 81863099 84019752 9589 5 81914498 82552090
9546 5 81863099 84065912 9590 5 81914498 82555641
9547 5 81863099 84086632 9591 5 81914498 82555670
9548 5 81863099 84089603 9592 5 81914498 82556511
- 173 036149
9593 5 81914498 82559047 9637 5 81914498 84824103
9594 5 81914498 82561535 9638 5 81914498 84824203
9595 5 81914498 82610100 9639 5 81914498 84824816
9596 5 81914498 82676822 9640 5 81914498 84825422
9597 5 81914498 82676901 9641 5 81914498 84825763
9598 5 81914498 82883691 9642 5 81914498 84825942
9599 5 81914498 82954942 9643 5 81914498 84843411
9600 5 81914498 82971688 9644 5 81914498 84936441
9601 5 81914498 83023965 9645 5 81914498 84936493
9602 5 81914498 83094205 9646 5 81914498 84943705
9603 5 81914498 83146355 9647 5 81914498 169454950
9604 5 81914498 83280630 9648 5 81914498 181522829
9605 5 81914498 83281412 9649 5 81914498 204759879
9606 5 81914498 83400242 9650 5 81914498 209874191
9607 5 81914498 83405797 9651 5 81950191 81265937
9608 5 81914498 83437132 9652 5 81950191 81954891
9609 5 81914498 83522252 9653 5 81950191 81985250
9610 5 81914498 83560095 9654 5 81950191 82083752
9611 5 81914498 83560204 9655 5 81950191 82101253
9612 5 81914498 83572400 9656 5 81950191 82143124
9613 5 81914498 83607661 9657 5 81950191 82236318
9614 5 81914498 83745342 9658 5 81950191 82325587
9615 5 81914498 83861275 9659 5 81950191 82427210
9616 5 81914498 83861633 9660 5 81950191 82431853
9617 5 81914498 83865653 9661 5 81950191 82446714
9618 5 81914498 83865914 9662 5 81950191 82446794
9619 5 81914498 83865920 9663 5 81950191 82551111
9620 5 81914498 83868010 9664 5 81950191 82552090
9621 5 81914498 84019752 9665 5 81950191 82555641
9622 5 81914498 84065912 9666 5 81950191 82555670
9623 5 81914498 84086632 9667 5 81950191 82556511
9624 5 81914498 84089603 9668 5 81950191 82559047
9625 5 81914498 84104814 9669 5 81950191 82561535
9626 5 81914498 84105175 9670 5 81950191 82610100
9627 5 81914498 84251635 9671 5 81950191 82676822
9628 5 81914498 84252180 9672 5 81950191 82676901
9629 5 81914498 84253030 9673 5 81950191 82883691
9630 5 81914498 84254208 9674 5 81950191 82954942
9631 5 81914498 84314930 9675 5 81950191 82971688
9632 5 81914498 84340523 9676 5 81950191 83023965
9633 5 81914498 84516340 9677 5 81950191 83094205
9634 5 81914498 84706916 9678 5 81950191 83146355
9635 5 81914498 84799488 9679 5 81950191 83280630
9636 5 81914498 84801081 9680 5 81950191 83281412
- 174 036149
9681 5 81950191 83400242 9725 5 81950191 209874191
9682 5 81950191 83405797 9726 5 81951639 81265937
9683 5 81950191 83437132 9727 5 81951639 81954891
9684 5 81950191 83522252 9728 5 81951639 81985250
9685 5 81950191 83560095 9729 5 81951639 82083752
9686 5 81950191 83560204 9730 5 81951639 82101253
9687 5 81950191 83572400 9731 5 81951639 82143124
9688 5 81950191 83607661 9732 5 81951639 82236318
9689 5 81950191 83745342 9733 5 81951639 82325587
9690 5 81950191 83861275 9734 5 81951639 82427210
9691 5 81950191 83861633 9735 5 81951639 82431853
9692 5 81950191 83865653 9736 5 81951639 82446714
9693 5 81950191 83865914 9737 5 81951639 82446794
9694 5 81950191 83865920 9738 5 81951639 82551111
9695 5 81950191 83868010 9739 5 81951639 82552090
9696 5 81950191 84019752 9740 5 81951639 82555641
9697 5 81950191 84065912 9741 5 81951639 82555670
9698 5 81950191 84086632 9742 5 81951639 82556511
9699 5 81950191 84089603 9743 5 81951639 82559047
9700 5 81950191 84104814 9744 5 81951639 82561535
9701 5 81950191 84105175 9745 5 81951639 82610100
9702 5 81950191 84251635 9746 5 81951639 82676822
9703 5 81950191 84252180 9747 5 81951639 82676901
9704 5 81950191 84253030 9748 5 81951639 82883691
9705 5 81950191 84254208 9749 5 81951639 82954942
9706 5 81950191 84314930 9750 5 81951639 82971688
9707 5 81950191 84340523 9751 5 81951639 83023965
9708 5 81950191 84516340 9752 5 81951639 83094205
9709 5 81950191 84706916 9753 5 81951639 83146355
9710 5 81950191 84799488 9754 5 81951639 83280630
9711 5 81950191 84801081 9755 5 81951639 83281412
9712 5 81950191 84824103 9756 5 81951639 83400242
9713 5 81950191 84824203 9757 5 81951639 83405797
9714 5 81950191 84824816 9758 5 81951639 83437132
9715 5 81950191 84825422 9759 5 81951639 83522252
9716 5 81950191 84825763 9760 5 81951639 83560095
9717 5 81950191 84825942 9761 5 81951639 83560204
9718 5 81950191 84843411 9762 5 81951639 83572400
9719 5 81950191 84936441 9763 5 81951639 83607661
9720 5 81950191 84936493 9764 5 81951639 83745342
9721 5 81950191 84943705 9765 5 81951639 83861275
9722 5 81950191 169454950 9766 5 81951639 83861633
9723 5 81950191 181522829 9767 5 81951639 83865653
9724 5 81950191 204759879 9768 5 81951639 83865914
- 175 036149
9769 5 81951639 83865920 9813 5 81984901 82552090
9770 5 81951639 83868010 9814 5 81984901 82555641
9771 5 81951639 84019752 9815 5 81984901 82555670
9772 5 81951639 84065912 9816 5 81984901 82556511
9773 5 81951639 84086632 9817 5 81984901 82559047
9774 5 81951639 84089603 9818 5 81984901 82561535
9775 5 81951639 84104814 9819 5 81984901 82610100
9776 5 81951639 84105175 9820 5 81984901 82676822
9777 5 81951639 84251635 9821 5 81984901 82676901
9778 5 81951639 84252180 9822 5 81984901 82883691
9779 5 81951639 84253030 9823 5 81984901 82954942
9780 5 81951639 84254208 9824 5 81984901 82971688
9781 5 81951639 84314930 9825 5 81984901 83023965
9782 5 81951639 84340523 9826 5 81984901 83094205
9783 5 81951639 84516340 9827 5 81984901 83146355
9784 5 81951639 84706916 9828 5 81984901 83280630
9785 5 81951639 84799488 9829 5 81984901 83281412
9786 5 81951639 84801081 9830 5 81984901 83400242
9787 5 81951639 84824103 9831 5 81984901 83405797
9788 5 81951639 84824203 9832 5 81984901 83437132
9789 5 81951639 84824816 9833 5 81984901 83522252
9790 5 81951639 84825422 9834 5 81984901 83560095
9791 5 81951639 84825763 9835 5 81984901 83560204
9792 5 81951639 84825942 9836 5 81984901 83572400
9793 5 81951639 84843411 9837 5 81984901 83607661
9794 5 81951639 84936441 9838 5 81984901 83745342
9795 5 81951639 84936493 9839 5 81984901 83861275
9796 5 81951639 84943705 9840 5 81984901 83861633
9797 5 81951639 169454950 9841 5 81984901 83865653
9798 5 81951639 181522829 9842 5 81984901 83865914
9799 5 81951639 204759879 9843 5 81984901 83865920
9800 5 81951639 209874191 9844 5 81984901 83868010
9801 5 81984901 81265937 9845 5 81984901 84019752
9802 5 81984901 81985250 9846 5 81984901 84065912
9803 5 81984901 82083752 9847 5 81984901 84086632
9804 5 81984901 82101253 9848 5 81984901 84089603
9805 5 81984901 82143124 9849 5 81984901 84104814
9806 5 81984901 82236318 9850 5 81984901 84105175
9807 5 81984901 82325587 9851 5 81984901 84251635
9808 5 81984901 82427210 9852 5 81984901 84252180
9809 5 81984901 82431853 9853 5 81984901 84253030
9810 5 81984901 82446714 9854 5 81984901 84254208
9811 5 81984901 82446794 9855 5 81984901 84314930
9812 5 81984901 82551111 9856 5 81984901 84340523
- 176 036149
9857 5 81984901 84516340 9901 5 82083639 83280630
9858 5 81984901 84706916 9902 5 82083639 83281412
9859 5 81984901 84799488 9903 5 82083639 83400242
9860 5 81984901 84801081 9904 5 82083639 83405797
9861 5 81984901 84824103 9905 5 82083639 83437132
9862 5 81984901 84824203 9906 5 82083639 83522252
9863 5 81984901 84824816 9907 5 82083639 83560095
9864 5 81984901 84825422 9908 5 82083639 83560204
9865 5 81984901 84825763 9909 5 82083639 83572400
9866 5 81984901 84825942 9910 5 82083639 83607661
9867 5 81984901 84843411 9911 5 82083639 83745342
9868 5 81984901 84936441 9912 5 82083639 83861275
9869 5 81984901 84936493 9913 5 82083639 83861633
9870 5 81984901 84943705 9914 5 82083639 83865653
9871 5 81984901 169454950 9915 5 82083639 83865914
9872 5 81984901 181522829 9916 5 82083639 83865920
9873 5 81984901 204759879 9917 5 82083639 83868010
9874 5 81984901 209874191 9918 5 82083639 84019752
9875 5 82083639 81265937 9919 5 82083639 84065912
9876 5 82083639 82083752 9920 5 82083639 84086632
9877 5 82083639 82101253 9921 5 82083639 84089603
9878 5 82083639 82143124 9922 5 82083639 84104814
9879 5 82083639 82236318 9923 5 82083639 84105175
9880 5 82083639 82325587 9924 5 82083639 84251635
9881 5 82083639 82427210 9925 5 82083639 84252180
9882 5 82083639 82431853 9926 5 82083639 84253030
9883 5 82083639 82446714 9927 5 82083639 84254208
9884 5 82083639 82446794 9928 5 82083639 84314930
9885 5 82083639 82551111 9929 5 82083639 84340523
9886 5 82083639 82552090 9930 5 82083639 84516340
9887 5 82083639 82555641 9931 5 82083639 84706916
9888 5 82083639 82555670 9932 5 82083639 84799488
9889 5 82083639 82556511 9933 5 82083639 84801081
9890 5 82083639 82559047 9934 5 82083639 84824103
9891 5 82083639 82561535 9935 5 82083639 84824203
9892 5 82083639 82610100 9936 5 82083639 84824816
9893 5 82083639 82676822 9937 5 82083639 84825422
9894 5 82083639 82676901 9938 5 82083639 84825763
9895 5 82083639 82883691 9939 5 82083639 84825942
9896 5 82083639 82954942 9940 5 82083639 84843411
9897 5 82083639 82971688 9941 5 82083639 84936441
9898 5 82083639 83023965 9942 5 82083639 84936493
9899 5 82083639 83094205 9943 5 82083639 84943705
9900 5 82083639 83146355 9944 5 82083639 169454950
- 177 036149
9945 5 82083639 181522829 9989 5 82083752 83868010
9946 5 82083639 204759879 9990 5 82083752 84019752
9947 5 82083639 209874191 9991 5 82083752 84065912
9948 5 82083752 81265937 9992 5 82083752 84086632
9949 5 82083752 82137780 9993 5 82083752 84089603
9950 5 82083752 82143124 9994 5 82083752 84104814
9951 5 82083752 82236318 9995 5 82083752 84105175
9952 5 82083752 82325587 9996 5 82083752 84251635
9953 5 82083752 82427210 9997 5 82083752 84252180
9954 5 82083752 82431853 9998 5 82083752 84253030
9955 5 82083752 82446714 9999 5 82083752 84254208
9956 5 82083752 82446794 10000 5 82083752 84314930
9957 5 82083752 82551111 10001 5 82083752 84340523
9958 5 82083752 82552090 10002 5 82083752 84516340
9959 5 82083752 82555641 10003 5 82083752 84706916
9960 5 82083752 82555670 10004 5 82083752 84799488
9961 5 82083752 82556511 10005 5 82083752 84801081
9962 5 82083752 82559047 10006 5 82083752 84824103
9963 5 82083752 82561535 10007 5 82083752 84824203
9964 5 82083752 82610100 10008 5 82083752 84824816
9965 5 82083752 82676822 10009 5 82083752 84825422
9966 5 82083752 82676901 10010 5 82083752 84825763
9967 5 82083752 82883691 10011 5 82083752 84825942
9968 5 82083752 82954942 10012 5 82083752 84843411
9969 5 82083752 82971688 10013 5 82083752 84936441
9970 5 82083752 83023965 10014 5 82083752 84936493
9971 5 82083752 83094205 10015 5 82083752 84943705
9972 5 82083752 83146355 10016 5 82083752 169454950
9973 5 82083752 83280630 10017 5 82083752 181522829
9974 5 82083752 83281412 10018 5 82083752 204759879
9975 5 82083752 83400242 10019 5 82083752 209874191
9976 5 82083752 83405797 10020 5 82137780 81265937
9977 5 82083752 83437132 10021 5 82137780 82143124
9978 5 82083752 83522252 10022 5 82137780 82236318
9979 5 82083752 83560095 10023 5 82137780 82325587
9980 5 82083752 83560204 10024 5 82137780 82427210
9981 5 82083752 83572400 10025 5 82137780 82431853
9982 5 82083752 83607661 10026 5 82137780 82446714
9983 5 82083752 83745342 10027 5 82137780 82446794
9984 5 82083752 83861275 10028 5 82137780 82551111
9985 5 82083752 83861633 10029 5 82137780 82552090
9986 5 82083752 83865653 10030 5 82137780 82555641
9987 5 82083752 83865914 10031 5 82137780 82555670
9988 5 82083752 83865920 10032 5 82137780 82556511
- 178 036149
10033 5 82137780 82559047 10077 5 82137780 84824103
10034 5 82137780 82561535 10078 5 82137780 84824203
10035 5 82137780 82610100 10079 5 82137780 84824816
10036 5 82137780 82676822 10080 5 82137780 84825422
10037 5 82137780 82676901 10081 5 82137780 84825763
10038 5 82137780 82883691 10082 5 82137780 84825942
10039 5 82137780 82954942 10083 5 82137780 84843411
10040 5 82137780 82971688 10084 5 82137780 84936441
10041 5 82137780 83023965 10085 5 82137780 84936493
10042 5 82137780 83094205 10086 5 82137780 84943705
10043 5 82137780 83146355 10087 5 82137780 169454950
10044 5 82137780 83280630 10088 5 82137780 181522829
10045 5 82137780 83281412 10089 5 82137780 204759879
10046 5 82137780 83400242 10090 5 82137780 209874191
10047 5 82137780 83405797 10091 5 82139338 81265937
10048 5 82137780 83437132 10092 5 82139338 82143124
10049 5 82137780 83522252 10093 5 82139338 82236318
10050 5 82137780 83560095 10094 5 82139338 82325587
10051 5 82137780 83560204 10095 5 82139338 82427210
10052 5 82137780 83572400 10096 5 82139338 82431853
10053 5 82137780 83607661 10097 5 82139338 82446714
10054 5 82137780 83745342 10098 5 82139338 82446794
10055 5 82137780 83861275 10099 5 82139338 82551111
10056 5 82137780 83861633 10100 5 82139338 82552090
10057 5 82137780 83865653 10101 5 82139338 82555641
10058 5 82137780 83865914 10102 5 82139338 82555670
10059 5 82137780 83865920 10103 5 82139338 82556511
10060 5 82137780 83868010 10104 5 82139338 82559047
10061 5 82137780 84019752 10105 5 82139338 82561535
10062 5 82137780 84065912 10106 5 82139338 82610100
10063 5 82137780 84086632 10107 5 82139338 82676822
10064 5 82137780 84089603 10108 5 82139338 82676901
10065 5 82137780 84104814 10109 5 82139338 82883691
10066 5 82137780 84105175 10110 5 82139338 82954942
10067 5 82137780 84251635 10111 5 82139338 82971688
10068 5 82137780 84252180 10112 5 82139338 83023965
10069 5 82137780 84253030 10113 5 82139338 83094205
10070 5 82137780 84254208 10114 5 82139338 83146355
10071 5 82137780 84314930 10115 5 82139338 83280630
10072 5 82137780 84340523 10116 5 82139338 83281412
10073 5 82137780 84516340 10117 5 82139338 83400242
10074 5 82137780 84706916 10118 5 82139338 83405797
10075 5 82137780 84799488 10119 5 82139338 83437132
10076 5 82137780 84801081 10120 5 82139338 83522252
- 179 036149
10121 5 82139338 83560095 10165 5 82234311 82427210
10122 5 82139338 83560204 10166 5 82234311 82431853
10123 5 82139338 83572400 10167 5 82234311 82446714
10124 5 82139338 83607661 10168 5 82234311 82446794
10125 5 82139338 83745342 10169 5 82234311 82551111
10126 5 82139338 83861275 10170 5 82234311 82552090
10127 5 82139338 83861633 10171 5 82234311 82555641
10128 5 82139338 83865653 10172 5 82234311 82555670
10129 5 82139338 83865914 10173 5 82234311 82556511
10130 5 82139338 83865920 10174 5 82234311 82559047
10131 5 82139338 83868010 10175 5 82234311 82561535
10132 5 82139338 84019752 10176 5 82234311 82610100
10133 5 82139338 84065912 10177 5 82234311 82676822
10134 5 82139338 84086632 10178 5 82234311 82676901
10135 5 82139338 84089603 10179 5 82234311 82883691
10136 5 82139338 84104814 10180 5 82234311 82954942
10137 5 82139338 84105175 10181 5 82234311 82971688
10138 5 82139338 84251635 10182 5 82234311 83023965
10139 5 82139338 84252180 10183 5 82234311 83094205
10140 5 82139338 84253030 10184 5 82234311 83146355
10141 5 82139338 84254208 10185 5 82234311 83280630
10142 5 82139338 84314930 10186 5 82234311 83281412
10143 5 82139338 84340523 10187 5 82234311 83400242
10144 5 82139338 84516340 10188 5 82234311 83405797
10145 5 82139338 84706916 10189 5 82234311 83437132
10146 5 82139338 84799488 10190 5 82234311 83522252
10147 5 82139338 84801081 10191 5 82234311 83560095
10148 5 82139338 84824103 10192 5 82234311 83560204
10149 5 82139338 84824203 10193 5 82234311 83572400
10150 5 82139338 84824816 10194 5 82234311 83607661
10151 5 82139338 84825422 10195 5 82234311 83745342
10152 5 82139338 84825763 10196 5 82234311 83861275
10153 5 82139338 84825942 10197 5 82234311 83861633
10154 5 82139338 84843411 10198 5 82234311 83865653
10155 5 82139338 84936441 10199 5 82234311 83865914
10156 5 82139338 84936493 10200 5 82234311 83865920
10157 5 82139338 84943705 10201 5 82234311 83868010
10158 5 82139338 169454950 10202 5 82234311 84019752
10159 5 82139338 181522829 10203 5 82234311 84065912
10160 5 82139338 204759879 10204 5 82234311 84086632
10161 5 82139338 209874191 10205 5 82234311 84089603
10162 5 82234311 81265937 10206 5 82234311 84104814
10163 5 82234311 82236318 10207 5 82234311 84105175
10164 5 82234311 82325587 10208 5 82234311 84251635
- 180 036149
10209 5 82234311 84252180 10253 5 82325587 83146355
10210 5 82234311 84253030 10254 5 82325587 83280630
10211 5 82234311 84254208 10255 5 82325587 83281412
10212 5 82234311 84314930 10256 5 82325587 83400242
10213 5 82234311 84340523 10257 5 82325587 83405797
10214 5 82234311 84516340 10258 5 82325587 83437132
10215 5 82234311 84706916 10259 5 82325587 83522252
10216 5 82234311 84799488 10260 5 82325587 83560095
10217 5 82234311 84801081 10261 5 82325587 83560204
10218 5 82234311 84824103 10262 5 82325587 83572400
10219 5 82234311 84824203 10263 5 82325587 83607661
10220 5 82234311 84824816 10264 5 82325587 83745342
10221 5 82234311 84825422 10265 5 82325587 83861275
10222 5 82234311 84825763 10266 5 82325587 83861633
10223 5 82234311 84825942 10267 5 82325587 83865653
10224 5 82234311 84843411 10268 5 82325587 83865914
10225 5 82234311 84936441 10269 5 82325587 83865920
10226 5 82234311 84936493 10270 5 82325587 83868010
10227 5 82234311 84943705 10271 5 82325587 84019752
10228 5 82234311 169454950 10272 5 82325587 84065912
10229 5 82234311 181522829 10273 5 82325587 84086632
10230 5 82234311 204759879 10274 5 82325587 84089603
10231 5 82234311 209874191 10275 5 82325587 84104814
10232 5 82236318 81265937 10276 5 82325587 84105175
10233 5 82325587 82423451 10277 5 82325587 84251635
10234 5 82325587 82427210 10278 5 82325587 84252180
10235 5 82325587 82431853 10279 5 82325587 84253030
10236 5 82325587 82446714 10280 5 82325587 84254208
10237 5 82325587 82446794 10281 5 82325587 84314930
10238 5 82325587 82551111 10282 5 82325587 84340523
10239 5 82325587 82552090 10283 5 82325587 84516340
10240 5 82325587 82555641 10284 5 82325587 84706916
10241 5 82325587 82555670 10285 5 82325587 84799488
10242 5 82325587 82556511 10286 5 82325587 84801081
10243 5 82325587 82559047 10287 5 82325587 84824103
10244 5 82325587 82561535 10288 5 82325587 84824203
10245 5 82325587 82610100 10289 5 82325587 84824816
10246 5 82325587 82676822 10290 5 82325587 84825422
10247 5 82325587 82676901 10291 5 82325587 84825763
10248 5 82325587 82883691 10292 5 82325587 84825942
10249 5 82325587 82954942 10293 5 82325587 84843411
10250 5 82325587 82971688 10294 5 82325587 84936441
10251 5 82325587 83023965 10295 5 82325587 84936493
10252 5 82325587 83094205 10296 5 82325587 84943705
- 181 036149
10297 5 82325587 169454950 10341 5 82423451 84089603
10298 5 82325587 181522829 10342 5 82423451 84104814
10299 5 82325587 204759879 10343 5 82423451 84105175
10300 5 82325587 209874191 10344 5 82423451 84251635
10301 5 82423451 82427210 10345 5 82423451 84252180
10302 5 82423451 82431853 10346 5 82423451 84253030
10303 5 82423451 82446714 10347 5 82423451 84254208
10304 5 82423451 82446794 10348 5 82423451 84314930
10305 5 82423451 82551111 10349 5 82423451 84340523
10306 5 82423451 82552090 10350 5 82423451 84516340
10307 5 82423451 82555641 10351 5 82423451 84706916
10308 5 82423451 82555670 10352 5 82423451 84799488
10309 5 82423451 82556511 10353 5 82423451 84801081
10310 5 82423451 82559047 10354 5 82423451 84824103
10311 5 82423451 82561535 10355 5 82423451 84824203
10312 5 82423451 82610100 10356 5 82423451 84824816
10313 5 82423451 82676822 10357 5 82423451 84825422
10314 5 82423451 82676901 10358 5 82423451 84825763
10315 5 82423451 82883691 10359 5 82423451 84825942
10316 5 82423451 82954942 10360 5 82423451 84843411
10317 5 82423451 82971688 10361 5 82423451 84936441
10318 5 82423451 83023965 10362 5 82423451 84936493
10319 5 82423451 83094205 10363 5 82423451 84943705
10320 5 82423451 83146355 10364 5 82423451 169454950
10321 5 82423451 83280630 10365 5 82423451 181522829
10322 5 82423451 83281412 10366 5 82423451 204759879
10323 5 82423451 83400242 10367 5 82423451 209874191
10324 5 82423451 83405797 10368 5 82427780 82431853
10325 5 82423451 83437132 10369 5 82427780 82446714
10326 5 82423451 83522252 10370 5 82427780 82446794
10327 5 82423451 83560095 10371 5 82427780 82551111
10328 5 82423451 83560204 10372 5 82427780 82552090
10329 5 82423451 83572400 10373 5 82427780 82555641
10330 5 82423451 83607661 10374 5 82427780 82555670
10331 5 82423451 83745342 10375 5 82427780 82556511
10332 5 82423451 83861275 10376 5 82427780 82559047
10333 5 82423451 83861633 10377 5 82427780 82561535
10334 5 82423451 83865653 10378 5 82427780 82610100
10335 5 82423451 83865914 10379 5 82427780 82676822
10336 5 82423451 83865920 10380 5 82427780 82676901
10337 5 82423451 83868010 10381 5 82427780 82883691
10338 5 82423451 84019752 10382 5 82427780 82954942
10339 5 82423451 84065912 10383 5 82427780 82971688
10340 5 82423451 84086632 10384 5 82427780 83023965
- 182 036149
10385 5 82427780 83094205 10429 5 82427780 84943705
10386 5 82427780 83146355 10430 5 82427780 169454950
10387 5 82427780 83280630 10431 5 82427780 181522829
10388 5 82427780 83281412 10432 5 82427780 204759879
10389 5 82427780 83400242 10433 5 82427780 209874191
10390 5 82427780 83405797 10434 5 82443403 82446714
10391 5 82427780 83437132 10435 5 82443403 82446794
10392 5 82427780 83522252 10436 5 82443403 82551111
10393 5 82427780 83560095 10437 5 82443403 82552090
10394 5 82427780 83560204 10438 5 82443403 82555641
10395 5 82427780 83572400 10439 5 82443403 82555670
10396 5 82427780 83607661 10440 5 82443403 82556511
10397 5 82427780 83745342 10441 5 82443403 82559047
10398 5 82427780 83861275 10442 5 82443403 82561535
10399 5 82427780 83861633 10443 5 82443403 82610100
10400 5 82427780 83865653 10444 5 82443403 82676822
10401 5 82427780 83865914 10445 5 82443403 82676901
10402 5 82427780 83865920 10446 5 82443403 82883691
10403 5 82427780 83868010 10447 5 82443403 82954942
10404 5 82427780 84019752 10448 5 82443403 82971688
10405 5 82427780 84065912 10449 5 82443403 83023965
10406 5 82427780 84086632 10450 5 82443403 83094205
10407 5 82427780 84089603 10451 5 82443403 83146355
10408 5 82427780 84104814 10452 5 82443403 83280630
10409 5 82427780 84105175 10453 5 82443403 83281412
10410 5 82427780 84251635 10454 5 82443403 83400242
10411 5 82427780 84252180 10455 5 82443403 83405797
10412 5 82427780 84253030 10456 5 82443403 83437132
10413 5 82427780 84254208 10457 5 82443403 83522252
10414 5 82427780 84314930 10458 5 82443403 83560095
10415 5 82427780 84340523 10459 5 82443403 83560204
10416 5 82427780 84516340 10460 5 82443403 83572400
10417 5 82427780 84706916 10461 5 82443403 83607661
10418 5 82427780 84799488 10462 5 82443403 83745342
10419 5 82427780 84801081 10463 5 82443403 83861275
10420 5 82427780 84824103 10464 5 82443403 83861633
10421 5 82427780 84824203 10465 5 82443403 83865653
10422 5 82427780 84824816 10466 5 82443403 83865914
10423 5 82427780 84825422 10467 5 82443403 83865920
10424 5 82427780 84825763 10468 5 82443403 83868010
10425 5 82427780 84825942 10469 5 82443403 84019752
10426 5 82427780 84843411 10470 5 82443403 84065912
10427 5 82427780 84936441 10471 5 82443403 84086632
10428 5 82427780 84936493 10472 5 82443403 84089603
- 183 036149
10473 5 82443403 84104814 10517 5 82443815 83280630
10474 5 82443403 84105175 10518 5 82443815 83281412
10475 5 82443403 84251635 10519 5 82443815 83400242
10476 5 82443403 84252180 10520 5 82443815 83405797
10477 5 82443403 84253030 10521 5 82443815 83437132
10478 5 82443403 84254208 10522 5 82443815 83522252
10479 5 82443403 84314930 10523 5 82443815 83560095
10480 5 82443403 84340523 10524 5 82443815 83560204
10481 5 82443403 84516340 10525 5 82443815 83572400
10482 5 82443403 84706916 10526 5 82443815 83607661
10483 5 82443403 84799488 10527 5 82443815 83745342
10484 5 82443403 84801081 10528 5 82443815 83861275
10485 5 82443403 84824103 10529 5 82443815 83861633
10486 5 82443403 84824203 10530 5 82443815 83865653
10487 5 82443403 84824816 10531 5 82443815 83865914
10488 5 82443403 84825422 10532 5 82443815 83865920
10489 5 82443403 84825763 10533 5 82443815 83868010
10490 5 82443403 84825942 10534 5 82443815 84019752
10491 5 82443403 84843411 10535 5 82443815 84065912
10492 5 82443403 84936441 10536 5 82443815 84086632
10493 5 82443403 84936493 10537 5 82443815 84089603
10494 5 82443403 84943705 10538 5 82443815 84104814
10495 5 82443403 169454950 10539 5 82443815 84105175
10496 5 82443403 181522829 10540 5 82443815 84251635
10497 5 82443403 204759879 10541 5 82443815 84252180
10498 5 82443403 209874191 10542 5 82443815 84253030
10499 5 82443815 82446714 10543 5 82443815 84254208
10500 5 82443815 82446794 10544 5 82443815 84314930
10501 5 82443815 82551111 10545 5 82443815 84340523
10502 5 82443815 82552090 10546 5 82443815 84516340
10503 5 82443815 82555641 10547 5 82443815 84706916
10504 5 82443815 82555670 10548 5 82443815 84799488
10505 5 82443815 82556511 10549 5 82443815 84801081
10506 5 82443815 82559047 10550 5 82443815 84824103
10507 5 82443815 82561535 10551 5 82443815 84824203
10508 5 82443815 82610100 10552 5 82443815 84824816
10509 5 82443815 82676822 10553 5 82443815 84825422
10510 5 82443815 82676901 10554 5 82443815 84825763
10511 5 82443815 82883691 10555 5 82443815 84825942
10512 5 82443815 82954942 10556 5 82443815 84843411
10513 5 82443815 82971688 10557 5 82443815 84936441
10514 5 82443815 83023965 10558 5 82443815 84936493
10515 5 82443815 83094205 10559 5 82443815 84943705
10516 5 82443815 83146355 10560 5 82443815 169454950
- 184 036149
10561 5 82443815 181522829 10605 5 82443856 84251635
10562 5 82443815 204759879 10606 5 82443856 84252180
10563 5 82443815 209874191 10607 5 82443856 84253030
10564 5 82443856 82446714 10608 5 82443856 84254208
10565 5 82443856 82446794 10609 5 82443856 84314930
10566 5 82443856 82551111 10610 5 82443856 84340523
10567 5 82443856 82552090 10611 5 82443856 84516340
10568 5 82443856 82555641 10612 5 82443856 84706916
10569 5 82443856 82555670 10613 5 82443856 84799488
10570 5 82443856 82556511 10614 5 82443856 84801081
10571 5 82443856 82559047 10615 5 82443856 84824103
10572 5 82443856 82561535 10616 5 82443856 84824203
10573 5 82443856 82610100 10617 5 82443856 84824816
10574 5 82443856 82676822 10618 5 82443856 84825422
10575 5 82443856 82676901 10619 5 82443856 84825763
10576 5 82443856 82883691 10620 5 82443856 84825942
10577 5 82443856 82954942 10621 5 82443856 84843411
10578 5 82443856 82971688 10622 5 82443856 84936441
10579 5 82443856 83023965 10623 5 82443856 84936493
10580 5 82443856 83094205 10624 5 82443856 84943705
10581 5 82443856 83146355 10625 5 82443856 169454950
10582 5 82443856 83280630 10626 5 82443856 181522829
10583 5 82443856 83281412 10627 5 82443856 204759879
10584 5 82443856 83400242 10628 5 82443856 209874191
10585 5 82443856 83405797 10629 5 82549227 82551111
10586 5 82443856 83437132 10630 5 82549227 82552090
10587 5 82443856 83522252 10631 5 82549227 82555641
10588 5 82443856 83560095 10632 5 82549227 82555670
10589 5 82443856 83560204 10633 5 82549227 82556511
10590 5 82443856 83572400 10634 5 82549227 82559047
10591 5 82443856 83607661 10635 5 82549227 82561535
10592 5 82443856 83745342 10636 5 82549227 82610100
10593 5 82443856 83861275 10637 5 82549227 82676822
10594 5 82443856 83861633 10638 5 82549227 82676901
10595 5 82443856 83865653 10639 5 82549227 82883691
10596 5 82443856 83865914 10640 5 82549227 82954942
10597 5 82443856 83865920 10641 5 82549227 82971688
10598 5 82443856 83868010 10642 5 82549227 83023965
10599 5 82443856 84019752 10643 5 82549227 83094205
10600 5 82443856 84065912 10644 5 82549227 83146355
10601 5 82443856 84086632 10645 5 82549227 83280630
10602 5 82443856 84089603 10646 5 82549227 83281412
10603 5 82443856 84104814 10647 5 82549227 83400242
10604 5 82443856 84105175 10648 5 82549227 83405797
- 185 036149
10649 5 82549227 83437132 10693 5 82549246 82552090
10650 5 82549227 83522252 10694 5 82549246 82555641
10651 5 82549227 83560095 10695 5 82549246 82555670
10652 5 82549227 83560204 10696 5 82549246 82556511
10653 5 82549227 83572400 10697 5 82549246 82559047
10654 5 82549227 83607661 10698 5 82549246 82561535
10655 5 82549227 83745342 10699 5 82549246 82610100
10656 5 82549227 83861275 10700 5 82549246 82676822
10657 5 82549227 83861633 10701 5 82549246 82676901
10658 5 82549227 83865653 10702 5 82549246 82883691
10659 5 82549227 83865914 10703 5 82549246 82954942
10660 5 82549227 83865920 10704 5 82549246 82971688
10661 5 82549227 83868010 10705 5 82549246 83023965
10662 5 82549227 84019752 10706 5 82549246 83094205
10663 5 82549227 84065912 10707 5 82549246 83146355
10664 5 82549227 84086632 10708 5 82549246 83280630
10665 5 82549227 84089603 10709 5 82549246 83281412
10666 5 82549227 84104814 10710 5 82549246 83400242
10667 5 82549227 84105175 10711 5 82549246 83405797
10668 5 82549227 84251635 10712 5 82549246 83437132
10669 5 82549227 84252180 10713 5 82549246 83522252
10670 5 82549227 84253030 10714 5 82549246 83560095
10671 5 82549227 84254208 10715 5 82549246 83560204
10672 5 82549227 84314930 10716 5 82549246 83572400
10673 5 82549227 84340523 10717 5 82549246 83607661
10674 5 82549227 84516340 10718 5 82549246 83745342
10675 5 82549227 84706916 10719 5 82549246 83861275
10676 5 82549227 84799488 10720 5 82549246 83861633
10677 5 82549227 84801081 10721 5 82549246 83865653
10678 5 82549227 84824103 10722 5 82549246 83865914
10679 5 82549227 84824203 10723 5 82549246 83865920
10680 5 82549227 84824816 10724 5 82549246 83868010
10681 5 82549227 84825422 10725 5 82549246 84019752
10682 5 82549227 84825763 10726 5 82549246 84065912
10683 5 82549227 84825942 10727 5 82549246 84086632
10684 5 82549227 84843411 10728 5 82549246 84089603
10685 5 82549227 84936441 10729 5 82549246 84104814
10686 5 82549227 84936493 10730 5 82549246 84105175
10687 5 82549227 84943705 10731 5 82549246 84251635
10688 5 82549227 169454950 10732 5 82549246 84252180
10689 5 82549227 181522829 10733 5 82549246 84253030
10690 5 82549227 204759879 10734 5 82549246 84254208
10691 5 82549227 209874191 10735 5 82549246 84314930
10692 5 82549246 82551111 10736 5 82549246 84340523
- 186 036149
10737 5 82549246 84516340 10781 5 82549299 83861275
10738 5 82549246 84706916 10782 5 82549299 83861633
10739 5 82549246 84799488 10783 5 82549299 83865653
10740 5 82549246 84801081 10784 5 82549299 83865914
10741 5 82549246 84824103 10785 5 82549299 83865920
10742 5 82549246 84824203 10786 5 82549299 83868010
10743 5 82549246 84824816 10787 5 82549299 84019752
10744 5 82549246 84825422 10788 5 82549299 84065912
10745 5 82549246 84825763 10789 5 82549299 84086632
10746 5 82549246 84825942 10790 5 82549299 84089603
10747 5 82549246 84843411 10791 5 82549299 84104814
10748 5 82549246 84936441 10792 5 82549299 84105175
10749 5 82549246 84936493 10793 5 82549299 84251635
10750 5 82549246 84943705 10794 5 82549299 84252180
10751 5 82549246 169454950 10795 5 82549299 84253030
10752 5 82549246 181522829 10796 5 82549299 84254208
10753 5 82549246 204759879 10797 5 82549299 84314930
10754 5 82549246 209874191 10798 5 82549299 84340523
10755 5 82549299 82551111 10799 5 82549299 84516340
10756 5 82549299 82552090 10800 5 82549299 84706916
10757 5 82549299 82555670 10801 5 82549299 84799488
10758 5 82549299 82556511 10802 5 82549299 84801081
10759 5 82549299 82559047 10803 5 82549299 84824103
10760 5 82549299 82561535 10804 5 82549299 84824203
10761 5 82549299 82610100 10805 5 82549299 84824816
10762 5 82549299 82676822 10806 5 82549299 84825422
10763 5 82549299 82676901 10807 5 82549299 84825763
10764 5 82549299 82883691 10808 5 82549299 84825942
10765 5 82549299 82954942 10809 5 82549299 84843411
10766 5 82549299 82971688 10810 5 82549299 84936441
10767 5 82549299 83023965 10811 5 82549299 84936493
10768 5 82549299 83094205 10812 5 82549299 84943705
10769 5 82549299 83146355 10813 5 82549299 169454950
10770 5 82549299 83280630 10814 5 82549299 181522829
10771 5 82549299 83281412 10815 5 82549299 204759879
10772 5 82549299 83400242 10816 5 82549299 209874191
10773 5 82549299 83405797 10817 5 82554608 82555670
10774 5 82549299 83437132 10818 5 82554608 82556511
10775 5 82549299 83522252 10819 5 82554608 82559047
10776 5 82549299 83560095 10820 5 82554608 82561535
10777 5 82549299 83560204 10821 5 82554608 82610100
10778 5 82549299 83572400 10822 5 82554608 82676822
10779 5 82549299 83607661 10823 5 82554608 82676901
10780 5 82549299 83745342 10824 5 82554608 82883691
- 187 036149
10825 5 82554608 82954942 10869 5 82554608 84843411
10826 5 82554608 82971688 10870 5 82554608 84936441
10827 5 82554608 83023965 10871 5 82554608 84936493
10828 5 82554608 83094205 10872 5 82554608 84943705
10829 5 82554608 83146355 10873 5 82554608 169454950
10830 5 82554608 83280630 10874 5 82554608 181522829
10831 5 82554608 83281412 10875 5 82554608 204759879
10832 5 82554608 83400242 10876 5 82554608 209874191
10833 5 82554608 83405797 10877 5 82554971 82555670
10834 5 82554608 83437132 10878 5 82554971 82556511
10835 5 82554608 83522252 10879 5 82554971 82559047
10836 5 82554608 83560095 10880 5 82554971 82561535
10837 5 82554608 83560204 10881 5 82554971 82610100
10838 5 82554608 83572400 10882 5 82554971 82676822
10839 5 82554608 83607661 10883 5 82554971 82676901
10840 5 82554608 83745342 10884 5 82554971 82883691
10841 5 82554608 83861275 10885 5 82554971 82954942
10842 5 82554608 83861633 10886 5 82554971 82971688
10843 5 82554608 83865653 10887 5 82554971 83023965
10844 5 82554608 83865914 10888 5 82554971 83094205
10845 5 82554608 83865920 10889 5 82554971 83146355
10846 5 82554608 83868010 10890 5 82554971 83280630
10847 5 82554608 84019752 10891 5 82554971 83281412
10848 5 82554608 84065912 10892 5 82554971 83400242
10849 5 82554608 84086632 10893 5 82554971 83405797
10850 5 82554608 84089603 10894 5 82554971 83437132
10851 5 82554608 84104814 10895 5 82554971 83522252
10852 5 82554608 84105175 10896 5 82554971 83560095
10853 5 82554608 84251635 10897 5 82554971 83560204
10854 5 82554608 84252180 10898 5 82554971 83572400
10855 5 82554608 84253030 10899 5 82554971 83607661
10856 5 82554608 84254208 10900 5 82554971 83745342
10857 5 82554608 84314930 10901 5 82554971 83861275
10858 5 82554608 84340523 10902 5 82554971 83861633
10859 5 82554608 84516340 10903 5 82554971 83865653
10860 5 82554608 84706916 10904 5 82554971 83865914
10861 5 82554608 84799488 10905 5 82554971 83865920
10862 5 82554608 84801081 10906 5 82554971 83868010
10863 5 82554608 84824103 10907 5 82554971 84019752
10864 5 82554608 84824203 10908 5 82554971 84065912
10865 5 82554608 84824816 10909 5 82554971 84086632
10866 5 82554608 84825422 10910 5 82554971 84089603
10867 5 82554608 84825763 10911 5 82554971 84104814
10868 5 82554608 84825942 10912 5 82554971 84105175
- 188 036149
10913 5 82554971 84251635 10957 5 82556313 83572400
10914 5 82554971 84252180 10958 5 82556313 83607661
10915 5 82554971 84253030 10959 5 82556313 83745342
10916 5 82554971 84254208 10960 5 82556313 83861275
10917 5 82554971 84314930 10961 5 82556313 83861633
10918 5 82554971 84340523 10962 5 82556313 83865653
10919 5 82554971 84516340 10963 5 82556313 83865914
10920 5 82554971 84706916 10964 5 82556313 83865920
10921 5 82554971 84799488 10965 5 82556313 83868010
10922 5 82554971 84801081 10966 5 82556313 84019752
10923 5 82554971 84824103 10967 5 82556313 84065912
10924 5 82554971 84824203 10968 5 82556313 84086632
10925 5 82554971 84824816 10969 5 82556313 84089603
10926 5 82554971 84825422 10970 5 82556313 84104814
10927 5 82554971 84825763 10971 5 82556313 84105175
10928 5 82554971 84825942 10972 5 82556313 84251635
10929 5 82554971 84843411 10973 5 82556313 84252180
10930 5 82554971 84936441 10974 5 82556313 84253030
10931 5 82554971 84936493 10975 5 82556313 84254208
10932 5 82554971 84943705 10976 5 82556313 84314930
10933 5 82554971 169454950 10977 5 82556313 84340523
10934 5 82554971 181522829 10978 5 82556313 84516340
10935 5 82554971 204759879 10979 5 82556313 84706916
10936 5 82554971 209874191 10980 5 82556313 84799488
10937 5 82556313 82556511 10981 5 82556313 84801081
10938 5 82556313 82559047 10982 5 82556313 84824103
10939 5 82556313 82561535 10983 5 82556313 84824203
10940 5 82556313 82610100 10984 5 82556313 84824816
10941 5 82556313 82676822 10985 5 82556313 84825422
10942 5 82556313 82676901 10986 5 82556313 84825763
10943 5 82556313 82883691 10987 5 82556313 84825942
10944 5 82556313 82954942 10988 5 82556313 84843411
10945 5 82556313 82971688 10989 5 82556313 84936441
10946 5 82556313 83023965 10990 5 82556313 84936493
10947 5 82556313 83094205 10991 5 82556313 84943705
10948 5 82556313 83146355 10992 5 82556313 169454950
10949 5 82556313 83280630 10993 5 82556313 181522829
10950 5 82556313 83281412 10994 5 82556313 204759879
10951 5 82556313 83400242 10995 5 82556313 209874191
10952 5 82556313 83405797 10996 5 82556337 82556511
10953 5 82556313 83437132 10997 5 82556337 82559047
10954 5 82556313 83522252 10998 5 82556337 82561535
10955 5 82556313 83560095 10999 5 82556337 82610100
10956 5 82556313 83560204 11000 5 82556337 82676822
- 189 036149
11001 5 82556337 82676901 11045 5 82556337 84825763
11002 5 82556337 82883691 11046 5 82556337 84825942
11003 5 82556337 82954942 11047 5 82556337 84843411
11004 5 82556337 82971688 11048 5 82556337 84936441
11005 5 82556337 83023965 11049 5 82556337 84936493
11006 5 82556337 83094205 11050 5 82556337 84943705
11007 5 82556337 83146355 11051 5 82556337 169454950
11008 5 82556337 83280630 11052 5 82556337 181522829
11009 5 82556337 83281412 11053 5 82556337 204759879
ПОЮ 5 82556337 83400242 11054 5 82556337 209874191
ПОП 5 82556337 83405797 11055 5 82556511 82609175
11012 5 82556337 83437132 11056 5 82556511 82610100
11013 5 82556337 83522252 11057 5 82556511 82676822
11014 5 82556337 83560095 11058 5 82556511 82676901
11015 5 82556337 83560204 11059 5 82556511 82883691
11016 5 82556337 83572400 11060 5 82556511 82954942
11017 5 82556337 83607661 11061 5 82556511 82971688
11018 5 82556337 83745342 11062 5 82556511 83023965
11019 5 82556337 83861275 11063 5 82556511 83094205
11020 5 82556337 83861633 11064 5 82556511 83146355
11021 5 82556337 83865653 11065 5 82556511 83280630
11022 5 82556337 83865914 11066 5 82556511 83281412
11023 5 82556337 83865920 11067 5 82556511 83400242
11024 5 82556337 83868010 11068 5 82556511 83405797
11025 5 82556337 84019752 11069 5 82556511 83437132
11026 5 82556337 84065912 11070 5 82556511 83522252
11027 5 82556337 84086632 11071 5 82556511 83560095
11028 5 82556337 84089603 11072 5 82556511 83560204
11029 5 82556337 84104814 11073 5 82556511 83572400
11030 5 82556337 84105175 11074 5 82556511 83607661
11031 5 82556337 84251635 11075 5 82556511 83745342
11032 5 82556337 84252180 11076 5 82556511 83861275
11033 5 82556337 84253030 11077 5 82556511 83861633
11034 5 82556337 84254208 11078 5 82556511 83865653
11035 5 82556337 84314930 11079 5 82556511 83865914
11036 5 82556337 84340523 11080 5 82556511 83865920
11037 5 82556337 84516340 11081 5 82556511 83868010
11038 5 82556337 84706916 11082 5 82556511 84019752
11039 5 82556337 84799488 11083 5 82556511 84065912
11040 5 82556337 84801081 11084 5 82556511 84086632
11041 5 82556337 84824103 11085 5 82556511 84089603
11042 5 82556337 84824203 11086 5 82556511 84104814
11043 5 82556337 84824816 11087 5 82556511 84105175
11044 5 82556337 84825422 11088 5 82556511 84251635
- 190 036149
11089 5 82556511 84252180 11133 5 82609175 83861633
11090 5 82556511 84253030 11134 5 82609175 83865653
11091 5 82556511 84254208 11135 5 82609175 83865914
11092 5 82556511 84314930 11136 5 82609175 83865920
11093 5 82556511 84340523 11137 5 82609175 83868010
11094 5 82556511 84516340 11138 5 82609175 84019752
11095 5 82556511 84706916 11139 5 82609175 84065912
11096 5 82556511 84799488 11140 5 82609175 84086632
11097 5 82556511 84801081 11141 5 82609175 84089603
11098 5 82556511 84824103 11142 5 82609175 84104814
11099 5 82556511 84824203 11143 5 82609175 84105175
11100 5 82556511 84824816 11144 5 82609175 84251635
11101 5 82556511 84825422 11145 5 82609175 84252180
11102 5 82556511 84825763 11146 5 82609175 84253030
11103 5 82556511 84825942 11147 5 82609175 84254208
11104 5 82556511 84843411 11148 5 82609175 84314930
11105 5 82556511 84936441 11149 5 82609175 84340523
11106 5 82556511 84936493 11150 5 82609175 84516340
11107 5 82556511 84943705 11151 5 82609175 84706916
11108 5 82556511 169454950 11152 5 82609175 84799488
11109 5 82556511 181522829 11153 5 82609175 84801081
11110 5 82556511 204759879 11154 5 82609175 84824103
11111 5 82556511 209874191 11155 5 82609175 84824203
11112 5 82609175 82610100 11156 5 82609175 84824816
11113 5 82609175 82676822 11157 5 82609175 84825422
11114 5 82609175 82676901 11158 5 82609175 84825763
11115 5 82609175 82883691 11159 5 82609175 84825942
11116 5 82609175 82954942 11160 5 82609175 84843411
11117 5 82609175 82971688 11161 5 82609175 84936441
11118 5 82609175 83023965 11162 5 82609175 84936493
11119 5 82609175 83094205 11163 5 82609175 84943705
11120 5 82609175 83146355 11164 5 82609175 169454950
11121 5 82609175 83280630 11165 5 82609175 181522829
11122 5 82609175 83281412 11166 5 82609175 204759879
11123 5 82609175 83400242 11167 5 82609175 209874191
11124 5 82609175 83405797 11168 5 82675654 82676822
11125 5 82609175 83437132 11169 5 82675654 82676901
11126 5 82609175 83522252 11170 5 82675654 82883691
11127 5 82609175 83560095 11171 5 82675654 82954942
11128 5 82609175 83560204 11172 5 82675654 82971688
11129 5 82609175 83572400 11173 5 82675654 83023965
11130 5 82609175 83607661 11174 5 82675654 83094205
11131 5 82609175 83745342 11175 5 82675654 83146355
11132 5 82609175 83861275 11176 5 82675654 83280630
- 191 036149
11177 5 82675654 83281412 11221 5 82675654 204759879
11178 5 82675654 83400242 11222 5 82675654 209874191
11179 5 82675654 83405797 11223 5 82675825 82676822
11180 5 82675654 83437132 11224 5 82675825 82676901
11181 5 82675654 83522252 11225 5 82675825 82883691
11182 5 82675654 83560095 11226 5 82675825 82954942
11183 5 82675654 83560204 11227 5 82675825 82971688
11184 5 82675654 83572400 11228 5 82675825 83023965
11185 5 82675654 83607661 11229 5 82675825 83094205
11186 5 82675654 83745342 11230 5 82675825 83146355
11187 5 82675654 83861275 11231 5 82675825 83280630
11188 5 82675654 83861633 11232 5 82675825 83281412
11189 5 82675654 83865653 11233 5 82675825 83400242
11190 5 82675654 83865914 11234 5 82675825 83405797
11191 5 82675654 83865920 11235 5 82675825 83437132
11192 5 82675654 83868010 11236 5 82675825 83522252
11193 5 82675654 84019752 11237 5 82675825 83560095
11194 5 82675654 84065912 11238 5 82675825 83560204
11195 5 82675654 84086632 11239 5 82675825 83572400
11196 5 82675654 84089603 11240 5 82675825 83607661
11197 5 82675654 84104814 11241 5 82675825 83745342
11198 5 82675654 84105175 11242 5 82675825 83861275
11199 5 82675654 84251635 11243 5 82675825 83861633
11200 5 82675654 84252180 11244 5 82675825 83865653
11201 5 82675654 84253030 11245 5 82675825 83865914
11202 5 82675654 84254208 11246 5 82675825 83865920
11203 5 82675654 84314930 11247 5 82675825 83868010
11204 5 82675654 84340523 11248 5 82675825 84019752
11205 5 82675654 84516340 11249 5 82675825 84065912
11206 5 82675654 84706916 11250 5 82675825 84086632
11207 5 82675654 84799488 11251 5 82675825 84089603
11208 5 82675654 84801081 11252 5 82675825 84104814
11209 5 82675654 84824103 11253 5 82675825 84105175
11210 5 82675654 84824203 11254 5 82675825 84251635
11211 5 82675654 84824816 11255 5 82675825 84252180
11212 5 82675654 84825422 11256 5 82675825 84253030
11213 5 82675654 84825763 11257 5 82675825 84254208
11214 5 82675654 84825942 11258 5 82675825 84314930
11215 5 82675654 84843411 11259 5 82675825 84340523
11216 5 82675654 84936441 11260 5 82675825 84516340
11217 5 82675654 84936493 11261 5 82675825 84706916
11218 5 82675654 84943705 11262 5 82675825 84799488
11219 5 82675654 169454950 11263 5 82675825 84801081
11220 5 82675654 181522829 11264 5 82675825 84824103
- 192 036149
11265 5 82675825 84824203 11309 5 82882273 84253030
11266 5 82675825 84824816 11310 5 82882273 84254208
11267 5 82675825 84825422 11311 5 82882273 84314930
11268 5 82675825 84825763 11312 5 82882273 84340523
11269 5 82675825 84825942 11313 5 82882273 84516340
11270 5 82675825 84843411 11314 5 82882273 84706916
11271 5 82675825 84936441 11315 5 82882273 84799488
11272 5 82675825 84936493 11316 5 82882273 84801081
11273 5 82675825 84943705 11317 5 82882273 84824103
11274 5 82675825 169454950 11318 5 82882273 84824203
11275 5 82675825 181522829 11319 5 82882273 84824816
11276 5 82675825 204759879 11320 5 82882273 84825422
11277 5 82675825 209874191 11321 5 82882273 84825763
11278 5 82882273 82883691 11322 5 82882273 84825942
11279 5 82882273 82954942 11323 5 82882273 84843411
11280 5 82882273 82971688 11324 5 82882273 84936441
11281 5 82882273 83023965 11325 5 82882273 84936493
11282 5 82882273 83094205 11326 5 82882273 84943705
11283 5 82882273 83146355 11327 5 82882273 169454950
11284 5 82882273 83280630 11328 5 82882273 181522829
11285 5 82882273 83281412 11329 5 82882273 204759879
11286 5 82882273 83400242 11330 5 82882273 209874191
11287 5 82882273 83405797 11331 5 82953053 82954942
11288 5 82882273 83437132 11332 5 82953053 82971688
11289 5 82882273 83522252 11333 5 82953053 83023965
11290 5 82882273 83560095 11334 5 82953053 83094205
11291 5 82882273 83560204 11335 5 82953053 83146355
11292 5 82882273 83572400 11336 5 82953053 83280630
11293 5 82882273 83607661 11337 5 82953053 83281412
11294 5 82882273 83745342 11338 5 82953053 83400242
11295 5 82882273 83861275 11339 5 82953053 83405797
11296 5 82882273 83861633 11340 5 82953053 83437132
11297 5 82882273 83865653 11341 5 82953053 83522252
11298 5 82882273 83865914 11342 5 82953053 83560095
11299 5 82882273 83865920 11343 5 82953053 83560204
11300 5 82882273 83868010 11344 5 82953053 83572400
11301 5 82882273 84019752 11345 5 82953053 83607661
11302 5 82882273 84065912 11346 5 82953053 83745342
11303 5 82882273 84086632 11347 5 82953053 83861275
11304 5 82882273 84089603 11348 5 82953053 83861633
11305 5 82882273 84104814 11349 5 82953053 83865653
11306 5 82882273 84105175 11350 5 82953053 83865914
11307 5 82882273 84251635 11351 5 82953053 83865920
11308 5 82882273 84252180 11352 5 82953053 83868010
- 193 036149
11353 5 82953053 84019752 11397 5 82971168 83745342
11354 5 82953053 84065912 11398 5 82971168 83861275
11355 5 82953053 84086632 11399 5 82971168 83861633
11356 5 82953053 84089603 11400 5 82971168 83865653
11357 5 82953053 84104814 11401 5 82971168 83865914
11358 5 82953053 84105175 11402 5 82971168 83865920
11359 5 82953053 84251635 11403 5 82971168 83868010
11360 5 82953053 84252180 11404 5 82971168 84019752
11361 5 82953053 84253030 11405 5 82971168 84065912
11362 5 82953053 84254208 11406 5 82971168 84086632
11363 5 82953053 84314930 11407 5 82971168 84089603
11364 5 82953053 84340523 11408 5 82971168 84104814
11365 5 82953053 84516340 11409 5 82971168 84105175
11366 5 82953053 84706916 11410 5 82971168 84251635
11367 5 82953053 84799488 11411 5 82971168 84252180
11368 5 82953053 84801081 11412 5 82971168 84253030
11369 5 82953053 84824103 11413 5 82971168 84254208
11370 5 82953053 84824203 11414 5 82971168 84314930
11371 5 82953053 84824816 11415 5 82971168 84340523
11372 5 82953053 84825422 11416 5 82971168 84516340
11373 5 82953053 84825763 11417 5 82971168 84706916
11374 5 82953053 84825942 11418 5 82971168 84799488
11375 5 82953053 84843411 11419 5 82971168 84801081
11376 5 82953053 84936441 11420 5 82971168 84824103
11377 5 82953053 84936493 11421 5 82971168 84824203
11378 5 82953053 84943705 11422 5 82971168 84824816
11379 5 82953053 169454950 11423 5 82971168 84825422
11380 5 82953053 181522829 11424 5 82971168 84825763
11381 5 82953053 204759879 11425 5 82971168 84825942
11382 5 82953053 209874191 11426 5 82971168 84843411
11383 5 82971168 82971688 11427 5 82971168 84936441
11384 5 82971168 83023965 11428 5 82971168 84936493
11385 5 82971168 83094205 11429 5 82971168 84943705
11386 5 82971168 83146355 11430 5 82971168 169454950
11387 5 82971168 83280630 11431 5 82971168 181522829
11388 5 82971168 83281412 11432 5 82971168 204759879
11389 5 82971168 83400242 11433 5 82971168 209874191
11390 5 82971168 83405797 11434 5 83023500 83023965
11391 5 82971168 83437132 11435 5 83023500 83094205
11392 5 82971168 83522252 11436 5 83023500 83146355
11393 5 82971168 83560095 11437 5 83023500 83280630
11394 5 82971168 83560204 11438 5 83023500 83281412
11395 5 82971168 83572400 11439 5 83023500 83400242
11396 5 82971168 83607661 11440 5 83023500 83405797
- 194 036149
11441 5 83023500 83437132 11485 5 83093332 83146355
11442 5 83023500 83522252 11486 5 83093332 83280630
11443 5 83023500 83560095 11487 5 83093332 83281412
11444 5 83023500 83560204 11488 5 83093332 83400242
11445 5 83023500 83572400 11489 5 83093332 83405797
11446 5 83023500 83607661 11490 5 83093332 83437132
11447 5 83023500 83745342 11491 5 83093332 83522252
11448 5 83023500 83861275 11492 5 83093332 83560095
11449 5 83023500 83861633 11493 5 83093332 83560204
11450 5 83023500 83865653 11494 5 83093332 83572400
11451 5 83023500 83865914 11495 5 83093332 83607661
11452 5 83023500 83865920 11496 5 83093332 83745342
11453 5 83023500 83868010 11497 5 83093332 83861275
11454 5 83023500 84019752 11498 5 83093332 83861633
11455 5 83023500 84065912 11499 5 83093332 83865653
11456 5 83023500 84086632 11500 5 83093332 83865914
11457 5 83023500 84089603 11501 5 83093332 83865920
11458 5 83023500 84104814 11502 5 83093332 83868010
11459 5 83023500 84105175 11503 5 83093332 84019752
11460 5 83023500 84251635 11504 5 83093332 84065912
11461 5 83023500 84252180 11505 5 83093332 84086632
11462 5 83023500 84253030 11506 5 83093332 84089603
11463 5 83023500 84254208 11507 5 83093332 84104814
11464 5 83023500 84314930 11508 5 83093332 84105175
11465 5 83023500 84340523 11509 5 83093332 84251635
11466 5 83023500 84516340 11510 5 83093332 84252180
11467 5 83023500 84706916 11511 5 83093332 84253030
11468 5 83023500 84799488 11512 5 83093332 84254208
11469 5 83023500 84801081 11513 5 83093332 84314930
11470 5 83023500 84824103 11514 5 83093332 84340523
11471 5 83023500 84824203 11515 5 83093332 84516340
11472 5 83023500 84824816 11516 5 83093332 84706916
11473 5 83023500 84825422 11517 5 83093332 84799488
11474 5 83023500 84825763 11518 5 83093332 84801081
11475 5 83023500 84825942 11519 5 83093332 84824103
11476 5 83023500 84843411 11520 5 83093332 84824203
11477 5 83023500 84936441 11521 5 83093332 84824816
11478 5 83023500 84936493 11522 5 83093332 84825422
11479 5 83023500 84943705 11523 5 83093332 84825763
11480 5 83023500 169454950 11524 5 83093332 84825942
11481 5 83023500 181522829 11525 5 83093332 84843411
11482 5 83023500 204759879 11526 5 83093332 84936441
11483 5 83023500 209874191 11527 5 83093332 84936493
11484 5 83093332 83094205 11528 5 83093332 84943705
- 195 036149
11529 5 83093332 169454950 11573 5 83145879 84843411
11530 5 83093332 181522829 11574 5 83145879 84936441
11531 5 83093332 204759879 11575 5 83145879 84936493
11532 5 83093332 209874191 11576 5 83145879 84943705
11533 5 83145879 83146355 11577 5 83145879 169454950
11534 5 83145879 83280630 11578 5 83145879 181522829
11535 5 83145879 83281412 11579 5 83145879 204759879
11536 5 83145879 83400242 11580 5 83145879 209874191
11537 5 83145879 83405797 11581 5 83277783 83280630
11538 5 83145879 83437132 11582 5 83277783 83281412
11539 5 83145879 83522252 11583 5 83277783 83400242
11540 5 83145879 83560095 11584 5 83277783 83405797
11541 5 83145879 83560204 11585 5 83277783 83437132
11542 5 83145879 83572400 11586 5 83277783 83522252
11543 5 83145879 83607661 11587 5 83277783 83560095
11544 5 83145879 83745342 11588 5 83277783 83560204
11545 5 83145879 83861275 11589 5 83277783 83572400
11546 5 83145879 83861633 11590 5 83277783 83607661
11547 5 83145879 83865653 11591 5 83277783 83745342
11548 5 83145879 83865914 11592 5 83277783 83861275
11549 5 83145879 83865920 11593 5 83277783 83861633
11550 5 83145879 83868010 11594 5 83277783 83865653
11551 5 83145879 84019752 11595 5 83277783 83865914
11552 5 83145879 84065912 11596 5 83277783 83865920
11553 5 83145879 84086632 11597 5 83277783 83868010
11554 5 83145879 84089603 11598 5 83277783 84019752
11555 5 83145879 84104814 11599 5 83277783 84065912
11556 5 83145879 84105175 11600 5 83277783 84086632
11557 5 83145879 84251635 11601 5 83277783 84089603
11558 5 83145879 84252180 11602 5 83277783 84104814
11559 5 83145879 84253030 11603 5 83277783 84105175
11560 5 83145879 84254208 11604 5 83277783 84251635
11561 5 83145879 84314930 11605 5 83277783 84252180
11562 5 83145879 84340523 11606 5 83277783 84253030
11563 5 83145879 84516340 11607 5 83277783 84254208
11564 5 83145879 84706916 11608 5 83277783 84314930
11565 5 83145879 84799488 11609 5 83277783 84340523
11566 5 83145879 84801081 11610 5 83277783 84516340
11567 5 83145879 84824103 11611 5 83277783 84706916
11568 5 83145879 84824203 11612 5 83277783 84799488
11569 5 83145879 84824816 11613 5 83277783 84801081
11570 5 83145879 84825422 11614 5 83277783 84824103
11571 5 83145879 84825763 11615 5 83277783 84824203
11572 5 83145879 84825942 11616 5 83277783 84824816
- 196 036149
11617 5 83277783 84825422 11661 5 83277785 84824103
11618 5 83277783 84825763 11662 5 83277785 84824203
11619 5 83277783 84825942 11663 5 83277785 84824816
11620 5 83277783 84843411 11664 5 83277785 84825422
11621 5 83277783 84936441 11665 5 83277785 84825763
11622 5 83277783 84936493 11666 5 83277785 84825942
11623 5 83277783 84943705 11667 5 83277785 84843411
11624 5 83277783 169454950 11668 5 83277785 84936441
11625 5 83277783 181522829 11669 5 83277785 84936493
11626 5 83277783 204759879 11670 5 83277785 84943705
11627 5 83277783 209874191 11671 5 83277785 169454950
11628 5 83277785 83280630 11672 5 83277785 181522829
11629 5 83277785 83281412 11673 5 83277785 204759879
11630 5 83277785 83400242 11674 5 83277785 209874191
11631 5 83277785 83405797 11675 5 83279034 83280630
11632 5 83277785 83437132 11676 5 83279034 83281412
11633 5 83277785 83522252 11677 5 83279034 83400242
11634 5 83277785 83560095 11678 5 83279034 83405797
11635 5 83277785 83560204 11679 5 83279034 83437132
11636 5 83277785 83572400 11680 5 83279034 83522252
11637 5 83277785 83607661 11681 5 83279034 83560095
11638 5 83277785 83745342 11682 5 83279034 83560204
11639 5 83277785 83861275 11683 5 83279034 83572400
11640 5 83277785 83861633 11684 5 83279034 83607661
11641 5 83277785 83865653 11685 5 83279034 83745342
11642 5 83277785 83865914 11686 5 83279034 83861275
11643 5 83277785 83865920 11687 5 83279034 83861633
11644 5 83277785 83868010 11688 5 83279034 83865653
11645 5 83277785 84019752 11689 5 83279034 83865914
11646 5 83277785 84065912 11690 5 83279034 83865920
11647 5 83277785 84086632 11691 5 83279034 83868010
11648 5 83277785 84089603 11692 5 83279034 84019752
11649 5 83277785 84104814 11693 5 83279034 84065912
11650 5 83277785 84105175 11694 5 83279034 84086632
11651 5 83277785 84251635 11695 5 83279034 84089603
11652 5 83277785 84252180 11696 5 83279034 84104814
11653 5 83277785 84253030 11697 5 83279034 84105175
11654 5 83277785 84254208 11698 5 83279034 84251635
11655 5 83277785 84314930 11699 5 83279034 84252180
11656 5 83277785 84340523 11700 5 83279034 84253030
11657 5 83277785 84516340 11701 5 83279034 84254208
11658 5 83277785 84706916 11702 5 83279034 84314930
11659 5 83277785 84799488 11703 5 83279034 84340523
11660 5 83277785 84801081 11704 5 83279034 84516340
- 197 036149
11705 5 83279034 84706916 11749 5 83397014 84516340
11706 5 83279034 84799488 11750 5 83397014 84706916
11707 5 83279034 84801081 11751 5 83397014 84799488
11708 5 83279034 84824103 11752 5 83397014 84801081
11709 5 83279034 84824203 11753 5 83397014 84824103
11710 5 83279034 84824816 11754 5 83397014 84824203
11711 5 83279034 84825422 11755 5 83397014 84824816
11712 5 83279034 84825763 11756 5 83397014 84825422
11713 5 83279034 84825942 11757 5 83397014 84825763
11714 5 83279034 84843411 11758 5 83397014 84825942
11715 5 83279034 84936441 11759 5 83397014 84843411
11716 5 83279034 84936493 11760 5 83397014 84936441
11717 5 83279034 84943705 11761 5 83397014 84936493
11718 5 83279034 169454950 11762 5 83397014 84943705
11719 5 83279034 181522829 11763 5 83397014 169454950
11720 5 83279034 204759879 11764 5 83397014 181522829
11721 5 83279034 209874191 11765 5 83397014 204759879
11722 5 83397014 83400242 11766 5 83397014 209874191
11723 5 83397014 83405797 11767 5 83402967 83405797
11724 5 83397014 83437132 11768 5 83402967 83437132
11725 5 83397014 83522252 11769 5 83402967 83522252
11726 5 83397014 83560095 11770 5 83402967 83560095
11727 5 83397014 83560204 11771 5 83402967 83560204
11728 5 83397014 83572400 11772 5 83402967 83572400
11729 5 83397014 83607661 11773 5 83402967 83607661
11730 5 83397014 83745342 11774 5 83402967 83745342
11731 5 83397014 83861275 11775 5 83402967 83861275
11732 5 83397014 83861633 11776 5 83402967 83861633
11733 5 83397014 83865653 11777 5 83402967 83865653
11734 5 83397014 83865914 11778 5 83402967 83865914
11735 5 83397014 83865920 11779 5 83402967 83865920
11736 5 83397014 83868010 11780 5 83402967 83868010
11737 5 83397014 84019752 11781 5 83402967 84019752
11738 5 83397014 84065912 11782 5 83402967 84065912
11739 5 83397014 84086632 11783 5 83402967 84086632
11740 5 83397014 84089603 11784 5 83402967 84089603
11741 5 83397014 84104814 11785 5 83402967 84104814
11742 5 83397014 84105175 11786 5 83402967 84105175
11743 5 83397014 84251635 11787 5 83402967 84251635
11744 5 83397014 84252180 11788 5 83402967 84252180
11745 5 83397014 84253030 11789 5 83402967 84253030
11746 5 83397014 84254208 11790 5 83402967 84254208
11747 5 83397014 84314930 11791 5 83402967 84314930
11748 5 83397014 84340523 11792 5 83402967 84340523
- 198 036149
11793 5 83402967 84516340 11837 5 83435480 84706916
11794 5 83402967 84706916 11838 5 83435480 84799488
11795 5 83402967 84799488 11839 5 83435480 84801081
11796 5 83402967 84801081 11840 5 83435480 84824103
11797 5 83402967 84824103 11841 5 83435480 84824203
11798 5 83402967 84824203 11842 5 83435480 84824816
11799 5 83402967 84824816 11843 5 83435480 84825422
11800 5 83402967 84825422 11844 5 83435480 84825763
11801 5 83402967 84825763 11845 5 83435480 84825942
11802 5 83402967 84825942 11846 5 83435480 84843411
11803 5 83402967 84843411 11847 5 83435480 84936441
11804 5 83402967 84936441 11848 5 83435480 84936493
11805 5 83402967 84936493 11849 5 83435480 84943705
11806 5 83402967 84943705 11850 5 83435480 169454950
11807 5 83402967 169454950 11851 5 83435480 181522829
11808 5 83402967 181522829 11852 5 83435480 204759879
11809 5 83402967 204759879 11853 5 83435480 209874191
11810 5 83402967 209874191 11854 5 83521923 83522252
11811 5 83435480 83437132 11855 5 83521923 83560095
11812 5 83435480 83522252 11856 5 83521923 83560204
11813 5 83435480 83560095 11857 5 83521923 83572400
11814 5 83435480 83560204 11858 5 83521923 83607661
11815 5 83435480 83572400 11859 5 83521923 83745342
11816 5 83435480 83607661 11860 5 83521923 83861275
11817 5 83435480 83745342 11861 5 83521923 83861633
11818 5 83435480 83861275 11862 5 83521923 83865653
11819 5 83435480 83861633 11863 5 83521923 83865914
11820 5 83435480 83865653 11864 5 83521923 83865920
11821 5 83435480 83865914 11865 5 83521923 83868010
11822 5 83435480 83865920 11866 5 83521923 84019752
11823 5 83435480 83868010 11867 5 83521923 84065912
11824 5 83435480 84019752 11868 5 83521923 84086632
11825 5 83435480 84065912 11869 5 83521923 84089603
11826 5 83435480 84086632 11870 5 83521923 84104814
11827 5 83435480 84089603 11871 5 83521923 84105175
11828 5 83435480 84104814 11872 5 83521923 84251635
11829 5 83435480 84105175 11873 5 83521923 84252180
11830 5 83435480 84251635 11874 5 83521923 84253030
11831 5 83435480 84252180 11875 5 83521923 84254208
11832 5 83435480 84253030 11876 5 83521923 84314930
11833 5 83435480 84254208 11877 5 83521923 84340523
11834 5 83435480 84314930 11878 5 83521923 84516340
11835 5 83435480 84340523 11879 5 83521923 84706916
11836 5 83435480 84516340 11880 5 83521923 84799488
- 199 036149
11881 5 83521923 84801081 11925 5 83557023 84824816
11882 5 83521923 84824103 11926 5 83557023 84825422
11883 5 83521923 84824203 11927 5 83557023 84825763
11884 5 83521923 84824816 11928 5 83557023 84825942
11885 5 83521923 84825422 11929 5 83557023 84843411
11886 5 83521923 84825763 11930 5 83557023 84936441
11887 5 83521923 84825942 11931 5 83557023 84936493
11888 5 83521923 84843411 11932 5 83557023 84943705
11889 5 83521923 84936441 11933 5 83557023 169454950
11890 5 83521923 84936493 11934 5 83557023 181522829
11891 5 83521923 84943705 11935 5 83557023 204759879
11892 5 83521923 169454950 11936 5 83557023 209874191
11893 5 83521923 181522829 11937 5 83560204 83567769
11894 5 83521923 204759879 11938 5 83560204 83572400
11895 5 83521923 209874191 11939 5 83560204 83607661
11896 5 83557023 83560095 11940 5 83560204 83745342
11897 5 83557023 83560204 11941 5 83560204 83861275
11898 5 83557023 83572400 11942 5 83560204 83861633
11899 5 83557023 83607661 11943 5 83560204 83865653
11900 5 83557023 83745342 11944 5 83560204 83865914
11901 5 83557023 83861275 11945 5 83560204 83865920
11902 5 83557023 83861633 11946 5 83560204 83868010
11903 5 83557023 83865653 11947 5 83560204 84019752
11904 5 83557023 83865914 11948 5 83560204 84065912
11905 5 83557023 83865920 11949 5 83560204 84086632
11906 5 83557023 83868010 11950 5 83560204 84089603
11907 5 83557023 84019752 11951 5 83560204 84104814
11908 5 83557023 84065912 11952 5 83560204 84105175
11909 5 83557023 84086632 11953 5 83560204 84251635
11910 5 83557023 84089603 11954 5 83560204 84252180
11911 5 83557023 84104814 11955 5 83560204 84253030
11912 5 83557023 84105175 11956 5 83560204 84254208
11913 5 83557023 84251635 11957 5 83560204 84314930
11914 5 83557023 84252180 11958 5 83560204 84340523
11915 5 83557023 84253030 11959 5 83560204 84516340
11916 5 83557023 84254208 11960 5 83560204 84706916
11917 5 83557023 84314930 11961 5 83560204 84799488
11918 5 83557023 84340523 11962 5 83560204 84801081
11919 5 83557023 84516340 11963 5 83560204 84824103
11920 5 83557023 84706916 11964 5 83560204 84824203
11921 5 83557023 84799488 11965 5 83560204 84824816
11922 5 83557023 84801081 11966 5 83560204 84825422
11923 5 83557023 84824103 11967 5 83560204 84825763
11924 5 83557023 84824203 11968 5 83560204 84825942
- 200 036149
11969 5 83560204 84843411 12013 5 83567769 181522829
11970 5 83560204 84936441 12014 5 83567769 204759879
11971 5 83560204 84936493 12015 5 83567769 209874191
11972 5 83560204 84943705 12016 5 83606990 83607661
11973 5 83560204 169454950 12017 5 83606990 83745342
11974 5 83560204 181522829 12018 5 83606990 83861275
11975 5 83560204 204759879 12019 5 83606990 83861633
11976 5 83560204 209874191 12020 5 83606990 83865653
11977 5 83567769 83572400 12021 5 83606990 83865914
11978 5 83567769 83607661 12022 5 83606990 83865920
11979 5 83567769 83745342 12023 5 83606990 83868010
11980 5 83567769 83861275 12024 5 83606990 84019752
11981 5 83567769 83861633 12025 5 83606990 84065912
11982 5 83567769 83865653 12026 5 83606990 84086632
11983 5 83567769 83865914 12027 5 83606990 84089603
11984 5 83567769 83865920 12028 5 83606990 84104814
11985 5 83567769 83868010 12029 5 83606990 84105175
11986 5 83567769 84019752 12030 5 83606990 84251635
11987 5 83567769 84065912 12031 5 83606990 84252180
11988 5 83567769 84086632 12032 5 83606990 84253030
11989 5 83567769 84089603 12033 5 83606990 84254208
11990 5 83567769 84104814 12034 5 83606990 84314930
11991 5 83567769 84105175 12035 5 83606990 84340523
11992 5 83567769 84251635 12036 5 83606990 84516340
11993 5 83567769 84252180 12037 5 83606990 84706916
11994 5 83567769 84253030 12038 5 83606990 84799488
11995 5 83567769 84254208 12039 5 83606990 84801081
11996 5 83567769 84314930 12040 5 83606990 84824103
11997 5 83567769 84340523 12041 5 83606990 84824203
11998 5 83567769 84516340 12042 5 83606990 84824816
11999 5 83567769 84706916 12043 5 83606990 84825422
12000 5 83567769 84799488 12044 5 83606990 84825763
12001 5 83567769 84801081 12045 5 83606990 84825942
12002 5 83567769 84824103 12046 5 83606990 84843411
12003 5 83567769 84824203 12047 5 83606990 84936441
12004 5 83567769 84824816 12048 5 83606990 84936493
12005 5 83567769 84825422 12049 5 83606990 84943705
12006 5 83567769 84825763 12050 5 83606990 169454950
12007 5 83567769 84825942 12051 5 83606990 181522829
12008 5 83567769 84843411 12052 5 83606990 204759879
12009 5 83567769 84936441 12053 5 83606990 209874191
12010 5 83567769 84936493 12054 5 83743980 83745342
12011 5 83567769 84943705 12055 5 83743980 83861275
12012 5 83567769 169454950 12056 5 83743980 83861633
- 201 036149
12057 5 83743980 83865653 12101 5 83859479 84104814
12058 5 83743980 83865914 12102 5 83859479 84105175
12059 5 83743980 83865920 12103 5 83859479 84251635
12060 5 83743980 83868010 12104 5 83859479 84252180
12061 5 83743980 84019752 12105 5 83859479 84253030
12062 5 83743980 84065912 12106 5 83859479 84254208
12063 5 83743980 84086632 12107 5 83859479 84314930
12064 5 83743980 84089603 12108 5 83859479 84340523
12065 5 83743980 84104814 12109 5 83859479 84516340
12066 5 83743980 84105175 12110 5 83859479 84706916
12067 5 83743980 84251635 12111 5 83859479 84799488
12068 5 83743980 84252180 12112 5 83859479 84801081
12069 5 83743980 84253030 12113 5 83859479 84824103
12070 5 83743980 84254208 12114 5 83859479 84824203
12071 5 83743980 84314930 12115 5 83859479 84824816
12072 5 83743980 84340523 12116 5 83859479 84825422
12073 5 83743980 84516340 12117 5 83859479 84825763
12074 5 83743980 84706916 12118 5 83859479 84825942
12075 5 83743980 84799488 12119 5 83859479 84843411
12076 5 83743980 84801081 12120 5 83859479 84936441
12077 5 83743980 84824103 12121 5 83859479 84936493
12078 5 83743980 84824203 12122 5 83859479 84943705
12079 5 83743980 84824816 12123 5 83859479 169454950
12080 5 83743980 84825422 12124 5 83859479 181522829
12081 5 83743980 84825763 12125 5 83859479 204759879
12082 5 83743980 84825942 12126 5 83859479 209874191
12083 5 83743980 84843411 12127 5 83860797 83865653
12084 5 83743980 84936441 12128 5 83860797 83865914
12085 5 83743980 84936493 12129 5 83860797 83865920
12086 5 83743980 84943705 12130 5 83860797 83868010
12087 5 83743980 169454950 12131 5 83860797 84019752
12088 5 83743980 181522829 12132 5 83860797 84065912
12089 5 83743980 204759879 12133 5 83860797 84086632
12090 5 83743980 209874191 12134 5 83860797 84089603
12091 5 83859479 83861275 12135 5 83860797 84104814
12092 5 83859479 83861633 12136 5 83860797 84105175
12093 5 83859479 83865653 12137 5 83860797 84251635
12094 5 83859479 83865914 12138 5 83860797 84252180
12095 5 83859479 83865920 12139 5 83860797 84253030
12096 5 83859479 83868010 12140 5 83860797 84254208
12097 5 83859479 84019752 12141 5 83860797 84314930
12098 5 83859479 84065912 12142 5 83860797 84340523
12099 5 83859479 84086632 12143 5 83860797 84516340
12100 5 83859479 84089603 12144 5 83860797 84706916
- 202 036149
12145 5 83860797 84799488 12189 5 83861275 84936441
12146 5 83860797 84801081 12190 5 83861275 84936493
12147 5 83860797 84824103 12191 5 83861275 84943705
12148 5 83860797 84824203 12192 5 83861275 169454950
12149 5 83860797 84824816 12193 5 83861275 181522829
12150 5 83860797 84825422 12194 5 83861275 204759879
12151 5 83860797 84825763 12195 5 83861275 209874191
12152 5 83860797 84825942 12196 5 83861394 83865653
12153 5 83860797 84843411 12197 5 83861394 83865914
12154 5 83860797 84936441 12198 5 83861394 83865920
12155 5 83860797 84936493 12199 5 83861394 83868010
12156 5 83860797 84943705 12200 5 83861394 84019752
12157 5 83860797 169454950 12201 5 83861394 84065912
12158 5 83860797 181522829 12202 5 83861394 84086632
12159 5 83860797 204759879 12203 5 83861394 84089603
12160 5 83860797 209874191 12204 5 83861394 84104814
12161 5 83861275 83861394 12205 5 83861394 84105175
12162 5 83861275 83865653 12206 5 83861394 84251635
12163 5 83861275 83865914 12207 5 83861394 84252180
12164 5 83861275 83865920 12208 5 83861394 84253030
12165 5 83861275 83868010 12209 5 83861394 84254208
12166 5 83861275 84019752 12210 5 83861394 84314930
12167 5 83861275 84065912 12211 5 83861394 84340523
12168 5 83861275 84086632 12212 5 83861394 84516340
12169 5 83861275 84089603 12213 5 83861394 84706916
12170 5 83861275 84104814 12214 5 83861394 84799488
12171 5 83861275 84105175 12215 5 83861394 84801081
12172 5 83861275 84251635 12216 5 83861394 84824103
12173 5 83861275 84252180 12217 5 83861394 84824203
12174 5 83861275 84253030 12218 5 83861394 84824816
12175 5 83861275 84254208 12219 5 83861394 84825422
12176 5 83861275 84314930 12220 5 83861394 84825763
12177 5 83861275 84340523 12221 5 83861394 84825942
12178 5 83861275 84516340 12222 5 83861394 84843411
12179 5 83861275 84706916 12223 5 83861394 84936441
12180 5 83861275 84799488 12224 5 83861394 84936493
12181 5 83861275 84801081 12225 5 83861394 84943705
12182 5 83861275 84824103 12226 5 83861394 169454950
12183 5 83861275 84824203 12227 5 83861394 181522829
12184 5 83861275 84824816 12228 5 83861394 204759879
12185 5 83861275 84825422 12229 5 83861394 209874191
12186 5 83861275 84825763 12230 5 83864692 83865653
12187 5 83861275 84825942 12231 5 83864692 83865914
12188 5 83861275 84843411 12232 5 83864692 83865920
- 203 036149
12233 5 83864692 83868010 12277 5 83867332 84516340
12234 5 83864692 84019752 12278 5 83867332 84706916
12235 5 83864692 84065912 12279 5 83867332 84799488
12236 5 83864692 84086632 12280 5 83867332 84801081
12237 5 83864692 84089603 12281 5 83867332 84824103
12238 5 83864692 84104814 12282 5 83867332 84824203
12239 5 83864692 84105175 12283 5 83867332 84824816
12240 5 83864692 84251635 12284 5 83867332 84825422
12241 5 83864692 84252180 12285 5 83867332 84825763
12242 5 83864692 84253030 12286 5 83867332 84825942
12243 5 83864692 84254208 12287 5 83867332 84843411
12244 5 83864692 84314930 12288 5 83867332 84936441
12245 5 83864692 84340523 12289 5 83867332 84936493
12246 5 83864692 84516340 12290 5 83867332 84943705
12247 5 83864692 84706916 12291 5 83867332 169454950
12248 5 83864692 84799488 12292 5 83867332 181522829
12249 5 83864692 84801081 12293 5 83867332 204759879
12250 5 83864692 84824103 12294 5 83867332 209874191
12251 5 83864692 84824203 12295 5 84018779 84019752
12252 5 83864692 84824816 12296 5 84018779 84065912
12253 5 83864692 84825422 12297 5 84018779 84086632
12254 5 83864692 84825763 12298 5 84018779 84089603
12255 5 83864692 84825942 12299 5 84018779 84104814
12256 5 83864692 84843411 12300 5 84018779 84105175
12257 5 83864692 84936441 12301 5 84018779 84251635
12258 5 83864692 84936493 12302 5 84018779 84252180
12259 5 83864692 84943705 12303 5 84018779 84253030
12260 5 83864692 169454950 12304 5 84018779 84254208
12261 5 83864692 181522829 12305 5 84018779 84314930
12262 5 83864692 204759879 12306 5 84018779 84340523
12263 5 83864692 209874191 12307 5 84018779 84516340
12264 5 83867332 83868010 12308 5 84018779 84706916
12265 5 83867332 84019752 12309 5 84018779 84799488
12266 5 83867332 84065912 12310 5 84018779 84801081
12267 5 83867332 84086632 12311 5 84018779 84824103
12268 5 83867332 84089603 12312 5 84018779 84824203
12269 5 83867332 84104814 12313 5 84018779 84824816
12270 5 83867332 84105175 12314 5 84018779 84825422
12271 5 83867332 84251635 12315 5 84018779 84825763
12272 5 83867332 84252180 12316 5 84018779 84825942
12273 5 83867332 84253030 12317 5 84018779 84843411
12274 5 83867332 84254208 12318 5 84018779 84936441
12275 5 83867332 84314930 12319 5 84018779 84936493
12276 5 83867332 84340523 12320 5 84018779 84943705
- 204 036149
12321 5 84018779 169454950 12365 5 84083388 84706916
12322 5 84018779 181522829 12366 5 84083388 84799488
12323 5 84018779 204759879 12367 5 84083388 84801081
12324 5 84018779 209874191 12368 5 84083388 84824103
12325 5 84061561 84065912 12369 5 84083388 84824203
12326 5 84061561 84086632 12370 5 84083388 84824816
12327 5 84061561 84089603 12371 5 84083388 84825422
12328 5 84061561 84104814 12372 5 84083388 84825763
12329 5 84061561 84105175 12373 5 84083388 84825942
12330 5 84061561 84251635 12374 5 84083388 84843411
12331 5 84061561 84252180 12375 5 84083388 84936441
12332 5 84061561 84253030 12376 5 84083388 84936493
12333 5 84061561 84254208 12377 5 84083388 84943705
12334 5 84061561 84314930 12378 5 84083388 169454950
12335 5 84061561 84340523 12379 5 84083388 181522829
12336 5 84061561 84516340 12380 5 84083388 204759879
12337 5 84061561 84706916 12381 5 84083388 209874191
12338 5 84061561 84799488 12382 5 84088707 84089603
12339 5 84061561 84801081 12383 5 84088707 84104814
12340 5 84061561 84824103 12384 5 84088707 84105175
12341 5 84061561 84824203 12385 5 84088707 84251635
12342 5 84061561 84824816 12386 5 84088707 84252180
12343 5 84061561 84825422 12387 5 84088707 84253030
12344 5 84061561 84825763 12388 5 84088707 84254208
12345 5 84061561 84825942 12389 5 84088707 84314930
12346 5 84061561 84843411 12390 5 84088707 84340523
12347 5 84061561 84936441 12391 5 84088707 84516340
12348 5 84061561 84936493 12392 5 84088707 84706916
12349 5 84061561 84943705 12393 5 84088707 84799488
12350 5 84061561 169454950 12394 5 84088707 84801081
12351 5 84061561 181522829 12395 5 84088707 84824103
12352 5 84061561 204759879 12396 5 84088707 84824203
12353 5 84061561 209874191 12397 5 84088707 84824816
12354 5 84083388 84086632 12398 5 84088707 84825422
12355 5 84083388 84089603 12399 5 84088707 84825763
12356 5 84083388 84104814 12400 5 84088707 84825942
12357 5 84083388 84105175 12401 5 84088707 84843411
12358 5 84083388 84251635 12402 5 84088707 84936441
12359 5 84083388 84252180 12403 5 84088707 84936493
12360 5 84083388 84253030 12404 5 84088707 84943705
12361 5 84083388 84254208 12405 5 84088707 169454950
12362 5 84083388 84314930 12406 5 84088707 181522829
12363 5 84083388 84340523 12407 5 84088707 204759879
12364 5 84083388 84516340 12408 5 84088707 209874191
- 205 036149
12409 5 84101452 84104814 12453 5 84103364 84843411
12410 5 84101452 84105175 12454 5 84103364 84936441
12411 5 84101452 84251635 12455 5 84103364 84936493
12412 5 84101452 84252180 12456 5 84103364 84943705
12413 5 84101452 84253030 12457 5 84103364 169454950
12414 5 84101452 84254208 12458 5 84103364 181522829
12415 5 84101452 84314930 12459 5 84103364 204759879
12416 5 84101452 84340523 12460 5 84103364 209874191
12417 5 84101452 84516340 12461 5 84248220 84251635
12418 5 84101452 84706916 12462 5 84248220 84252180
12419 5 84101452 84799488 12463 5 84248220 84253030
12420 5 84101452 84801081 12464 5 84248220 84254208
12421 5 84101452 84824103 12465 5 84248220 84314930
12422 5 84101452 84824203 12466 5 84248220 84340523
12423 5 84101452 84824816 12467 5 84248220 84516340
12424 5 84101452 84825422 12468 5 84248220 84706916
12425 5 84101452 84825763 12469 5 84248220 84799488
12426 5 84101452 84825942 12470 5 84248220 84801081
12427 5 84101452 84843411 12471 5 84248220 84824103
12428 5 84101452 84936441 12472 5 84248220 84824203
12429 5 84101452 84936493 12473 5 84248220 84824816
12430 5 84101452 84943705 12474 5 84248220 84825422
12431 5 84101452 169454950 12475 5 84248220 84825763
12432 5 84101452 181522829 12476 5 84248220 84825942
12433 5 84101452 204759879 12477 5 84248220 84843411
12434 5 84101452 209874191 12478 5 84248220 84936441
12435 5 84103364 84104814 12479 5 84248220 84936493
12436 5 84103364 84105175 12480 5 84248220 84943705
12437 5 84103364 84251635 12481 5 84248220 169454950
12438 5 84103364 84252180 12482 5 84248220 181522829
12439 5 84103364 84253030 12483 5 84248220 204759879
12440 5 84103364 84254208 12484 5 84248220 209874191
12441 5 84103364 84314930 12485 5 84248224 84251635
12442 5 84103364 84340523 12486 5 84248224 84252180
12443 5 84103364 84516340 12487 5 84248224 84253030
12444 5 84103364 84706916 12488 5 84248224 84254208
12445 5 84103364 84799488 12489 5 84248224 84314930
12446 5 84103364 84801081 12490 5 84248224 84340523
12447 5 84103364 84824103 12491 5 84248224 84516340
12448 5 84103364 84824203 12492 5 84248224 84706916
12449 5 84103364 84824816 12493 5 84248224 84799488
12450 5 84103364 84825422 12494 5 84248224 84801081
12451 5 84103364 84825763 12495 5 84248224 84824103
12452 5 84103364 84825942 12496 5 84248224 84824203
- 206 036149
12497 5 84248224 84824816 12541 5 84253581 84824816
12498 5 84248224 84825422 12542 5 84253581 84825422
12499 5 84248224 84825763 12543 5 84253581 84825763
12500 5 84248224 84825942 12544 5 84253581 84825942
12501 5 84248224 84843411 12545 5 84253581 84843411
12502 5 84248224 84936441 12546 5 84253581 84936441
12503 5 84248224 84936493 12547 5 84253581 84936493
12504 5 84248224 84943705 12548 5 84253581 84943705
12505 5 84248224 169454950 12549 5 84253581 169454950
12506 5 84248224 181522829 12550 5 84253581 181522829
12507 5 84248224 204759879 12551 5 84253581 204759879
12508 5 84248224 209874191 12552 5 84253581 209874191
12509 5 84252053 84252180 12553 5 84314151 84314930
12510 5 84252053 84253030 12554 5 84314151 84340523
12511 5 84252053 84254208 12555 5 84314151 84516340
12512 5 84252053 84314930 12556 5 84314151 84706916
12513 5 84252053 84340523 12557 5 84314151 84799488
12514 5 84252053 84516340 12558 5 84314151 84801081
12515 5 84252053 84706916 12559 5 84314151 84824103
12516 5 84252053 84799488 12560 5 84314151 84824203
12517 5 84252053 84801081 12561 5 84314151 84824816
12518 5 84252053 84824103 12562 5 84314151 84825422
12519 5 84252053 84824203 12563 5 84314151 84825763
12520 5 84252053 84824816 12564 5 84314151 84825942
12521 5 84252053 84825422 12565 5 84314151 84843411
12522 5 84252053 84825763 12566 5 84314151 84936441
12523 5 84252053 84825942 12567 5 84314151 84936493
12524 5 84252053 84843411 12568 5 84314151 84943705
12525 5 84252053 84936441 12569 5 84314151 169454950
12526 5 84252053 84936493 12570 5 84314151 181522829
12527 5 84252053 84943705 12571 5 84314151 204759879
12528 5 84252053 169454950 12572 5 84314151 209874191
12529 5 84252053 181522829 12573 5 84338664 84340523
12530 5 84252053 204759879 12574 5 84338664 84516340
12531 5 84252053 209874191 12575 5 84338664 84706916
12532 5 84253581 84254208 12576 5 84338664 84799488
12533 5 84253581 84314930 12577 5 84338664 84801081
12534 5 84253581 84340523 12578 5 84338664 84824103
12535 5 84253581 84516340 12579 5 84338664 84824203
12536 5 84253581 84706916 12580 5 84338664 84824816
12537 5 84253581 84799488 12581 5 84338664 84825422
12538 5 84253581 84801081 12582 5 84338664 84825763
12539 5 84253581 84824103 12583 5 84338664 84825942
12540 5 84253581 84824203 12584 5 84338664 84843411
- 207 036149
12585 5 84338664 84936441 12629 5 84796405 84824103
12586 5 84338664 84936493 12630 5 84796405 84824203
12587 5 84338664 84943705 12631 5 84796405 84824816
12588 5 84338664 169454950 12632 5 84796405 84825422
12589 5 84338664 181522829 12633 5 84796405 84825763
12590 5 84338664 204759879 12634 5 84796405 84825942
12591 5 84338664 209874191 12635 5 84796405 84843411
12592 5 84516113 84516340 12636 5 84796405 84936441
12593 5 84516113 84706916 12637 5 84796405 84936493
12594 5 84516113 84799488 12638 5 84796405 84943705
12595 5 84516113 84801081 12639 5 84796405 169454950
12596 5 84516113 84824103 12640 5 84796405 181522829
12597 5 84516113 84824203 12641 5 84796405 204759879
12598 5 84516113 84824816 12642 5 84796405 209874191
12599 5 84516113 84825422 12643 5 84799805 84801081
12600 5 84516113 84825763 12644 5 84799805 84824103
12601 5 84516113 84825942 12645 5 84799805 84824203
12602 5 84516113 84843411 12646 5 84799805 84824816
12603 5 84516113 84936441 12647 5 84799805 84825422
12604 5 84516113 84936493 12648 5 84799805 84825763
12605 5 84516113 84943705 12649 5 84799805 84825942
12606 5 84516113 169454950 12650 5 84799805 84843411
12607 5 84516113 181522829 12651 5 84799805 84936441
12608 5 84516113 204759879 12652 5 84799805 84936493
12609 5 84516113 209874191 12653 5 84799805 84943705
12610 5 84706267 84706916 12654 5 84799805 169454950
12611 5 84706267 84799488 12655 5 84799805 181522829
12612 5 84706267 84801081 12656 5 84799805 204759879
12613 5 84706267 84824103 12657 5 84799805 209874191
12614 5 84706267 84824203 12658 5 84821810 84824103
12615 5 84706267 84824816 12659 5 84821810 84824203
12616 5 84706267 84825422 12660 5 84821810 84824816
12617 5 84706267 84825763 12661 5 84821810 84825422
12618 5 84706267 84825942 12662 5 84821810 84825763
12619 5 84706267 84843411 12663 5 84821810 84825942
12620 5 84706267 84936441 12664 5 84821810 84843411
12621 5 84706267 84936493 12665 5 84821810 84936441
12622 5 84706267 84943705 12666 5 84821810 84936493
12623 5 84706267 169454950 12667 5 84821810 84943705
12624 5 84706267 181522829 12668 5 84821810 169454950
12625 5 84706267 204759879 12669 5 84821810 181522829
12626 5 84706267 209874191 12670 5 84821810 204759879
12627 5 84796405 84799488 12671 5 84821810 209874191
12628 5 84796405 84801081 12672 5 84822183 84824103
- 208 036149
12673 5 84822183 84824203 12717 5 84824203 209874191
12674 5 84822183 84824816 12718 5 84840183 84843411
12675 5 84822183 84825422 12719 5 84840183 84936441
12676 5 84822183 84825763 12720 5 84840183 84936493
12677 5 84822183 84825942 12721 5 84840183 84943705
12678 5 84822183 84843411 12722 5 84840183 169454950
12679 5 84822183 84936441 12723 5 84840183 181522829
12680 5 84822183 84936493 12724 5 84840183 204759879
12681 5 84822183 84943705 12725 5 84840183 209874191
12682 5 84822183 169454950 12726 5 84934242 84936441
12683 5 84822183 181522829 12727 5 84934242 84936493
12684 5 84822183 204759879 12728 5 84934242 84943705
12685 5 84822183 209874191 12729 5 84934242 169454950
12686 5 84822215 84824103 12730 5 84934242 181522829
12687 5 84822215 84824203 12731 5 84934242 204759879
12688 5 84822215 84824816 12732 5 84934242 209874191
12689 5 84822215 84825422 12733 5 84938287 84943705
12690 5 84822215 84825763 12734 5 84938287 169454950
12691 5 84822215 84825942 12735 5 84938287 181522829
12692 5 84822215 84843411 12736 5 84938287 204759879
12693 5 84822215 84936493 12737 5 84938287 209874191
12694 5 84822215 84943705 12738 5 169454950 181522829
12695 5 84822215 169454950 12739 5 169454950 204759879
12696 5 84822215 181522829 12740 5 169454950 209874191
12697 5 84822215 204759879 12741 5 181522829 204759879
12698 5 84822215 209874191 12742 5 181522829 209874191
12699 5 84824103 84824203 12743 5 204759879 209874191
12700 5 84824103 84824816 12744 6 121671402 165317744
12701 5 84824103 84840183 12745 6 121671402 165632140
12702 5 84824103 84843411 12746 6 121671402 167541488
12703 5 84824103 84936441 12747 6 165317744 165632140
12704 5 84824103 84936493 12748 6 165317744 167541488
12705 5 84824103 84943705 12749 6 165632140 167541488
12706 5 84824103 169454950 12750 7 17293606 33157904
12707 5 84824103 181522829 12751 7 17293606 52027945
12708 5 84824103 204759879 12752 7 17293606 134050244
12709 5 84824103 209874191 12753 7 33157904 52027945
12710 5 84824203 84934242 12754 7 33157904 134050244
12711 5 84824203 84936441 12755 7 52027945 134050244
12712 5 84824203 84936493 12756 8 120061025 173714727
12713 5 84824203 84943705 12757 9 23258800 128947590
12714 5 84824203 169454950 12758 9 23258800 145336391
12715 5 84824203 181522829 12759 9 23258800 147896266
12716 5 84824203 204759879 12760 9 128947590 145336391
- 209 036149
12761 9 128947590 147896266
12762 9 145336391 147896266
12763 10 5873450 140850928
12764 10 5873450 142092409
12765 10 5873450 145273700
12766 10 140850928 142092409
12767 10 140850928 145273700
12768 10 142092409 145273700
Таблица 2. Примеры аллелей, связанных с повышенной фертильностью, у маиса
Положен Требуем ый Положен Требуем ый Положен Требуем ый
Хр. не аллель Хр. не аллель Хр. не аллель
5 77990414 А 5 81802220 А 5 82549554 С
5 77990442 С 5 81802574 С 5 82549629 С
5 77990478 т 5 81950558 т 5 82549650 С
5 77990499 А 5 81950582 т 5 82549724 С
5 77990523 G 5 82085147 с 5 82549867 С
5 77990545 А 5 82087667 А 5 82549995 G
5 77991998 G 5 82235558 А 5 82550364 С
5 77995135 С 5 82236085 Т 5 82550459 G
5 77995150 А 5 82236162 А 5 82550498 G
5 77996710 Т 5 82325775 С 5 82550853 Т
5 78310107 А 5 82325977 С 5 82550983 т
5 78310132 Т 5 82326020 G 5 82551025 с
5 78918620 G 5 82326037 G 5 82552120 т
5 79531947 А 5 82326164 С 5 82552368 G
5 79537908 G 5 82326170 Т 5 82553234 G
5 79707038 С 5 82326175 т 5 82555338 А
5 79707074 А 5 82423926 А 5 83560144 Т
5 79859447 А 5 82424010 G 5 83560192 А
5 79862605 G 5 82424392 А 5 83860601 Т
5 79862609 А 5 82424461 С 5 83860682 Т
5 79865888 Т 5 82424629 G 5 83861161 G
5 79867527 А 5 82424695 С 5 83861215 А
5 80236641 G 5 82424706 С 5 83861266 А
5 80236734 Т 5 82424752 G 5 83861344 Т
5 80236789 Т 5 82424773 G 5 83861361 Т
5 80236810 т 5 82424791 А 5 84086015 Т
5 80236933 т 5 82425070 С 5 84796702 G
5 80271911 А 5 82425098 С 5 84822534 G
5 80279798 С 5 82425358 G 5 84822543 Т
5 80387964 с 5 82443847 Т 5 84823992 А
5 80388968 т 5 82443957 т 5 84823998 С
5 80389273 А 5 82443978 A/G 5 84824103 т
5 80389290 С 5 82444245 Т 5 84824205 т
5 80389380 с 5 82444266 Т 5 84824447 с
5 80389419 с 5 82444716 А 5 84824473 с
5 80389432 А 5 82445340 А 5 84824495 G
5 80389533 С 5 82445493 А 5 84824561 G
5 80804587 G 5 82446188 С 5 84824603 С
5 80828757 С 5 82446660 G 5 84824951 i
5 80829669 т 5 82446684 Т 5 84825014 С
5 81267278 G 5 82446704 А 5 84825020 А
5 81267320 Т 5 82549380 С 5 84825024 G
5 81763802 G 5 82549409 А 5 84825087 С
5 81763824 С 5 82549517 А 5 84825264 Т
- 210 036149
84825276 T
84825303 С
84825469 G
84825471 A
84825480 C
84825497 G
84825510 C
84825512 A
84825527 C
84825551 G
84825588 G
84825642 C
84841805 T
84842085 A
84843056 A
84938414 T
84938476 T
84938528 T
- 211 036149
Таблица 3. Примеры представляющих интерес белков, кодируемых хромосомой 5 маиса
Белковый SEQID SEQID SEQID
идентификатор Хр. Положения Цепь NO: NO: NO:
GRMZM2G43 5796 Р01 5 78022476 - 78023096 - 1 176 351
GRMZM5G832780 P01 5 78129898-78131652 - 2 177 352
GRMZM2G425559 P01 5 78129898-78131784 + 3 178 353
GRMZM2G006937 P01 5 78255163 -78310499 + 4 179 354
GRMZM2G102912 Р01 5 78380304-78381593 + 5 180 355
GRMZM2G102845 P01 5 78381834-78389884 - 6 181 356
GRMZM5G865367 P01 5 78519893 -78520683 + 7 182 357
GRMZM2G322493 P01 5 78758856 - 78765635 + 8 183 358
GRMZM2G167741_Р01 5 78772058 - 78780292 + 9 184 359
GRMZM2G4103 57 Р02 5 78804756-78813114 + 10 185 360
GRMZM2G4103 57 Р01 5 78804756-78814710 + 11 186 361
GRMZM2G4103 57Р04 5 78805059-78815306 + 12 187 362
GRMZM2G4103 57 Р03 5 78805059-78815306 + 13 188 363
GRMZM2G4103 57 Р05 5 78805059-78815306 + 14 189 364
GRMZM2G4103 57Р06 5 78814424-78814976 + 15 190 365
GRMZM2G4103 93 Р03 5 78819803 -78826528 + 16 191 366
GRMZM2G4103 93 Р04 5 78819803 -78826528 + 17 192 367
GRMZM2G4103 93 Р05 5 78819803 -78826528 + 18 193 368
GRMZM2G4103 93 Р02 5 78819803 -78826538 + 19 194 369
GRMZM2G4103 93 Р01 5 78819803 -78826612 + 20 195 370
AC197118.3FGP005 5 78820119-78821393 - 21 196 371
GRMZM2G133048 P01 5 78904639-78918850 + 22 197 372
GRMZM2G018686 Р01 5 79055654 - 79056960 - 23 198 373
AC212103.3FGP002 5 79162381 -79163631 + 24 199 374
AC193606.2 FGP001 5 79175814-79176557 - 25 200 375
GRMZM2G3 32749 Р01 5 79183135 -79188028 + 26 201 376
GRMZM2G068176 Р01 5 79200056-79201760 - 27 202 377
GRMZM2G3693 91_Р01 5 79229010-79230318 + 28 203 378
GRMZM2G3693 96 Р01 5 79229019-79230005 - 29 204 379
GRMZM2G314233 Р01 5 79503885 - 79505592 + 30 205 380
GRMZM5G816609 Р01 5 79505757-79510072 + 31 206 381
GRMZM2G063 942 Р06 5 79531009-79538012 + 32 207 382
GRMZM2G063 942 Р03 5 79531009-79538048 + 33 208 383
GRMZM2G063 942 Р02 5 79531009-79538048 + 34 209 384
GRMZM2G063 942 Р01 5 79531009-79538048 + 35 210 385
GRMZM2G063 942 Р08 5 79531040-79538012 + 36 211 386
GRMZM2G063 942 Р07 5 79531040-79538012 + 37 212 387
GRMZM2G063 942 Р04 5 79531040-79538048 + 38 213 388
GRMZM2G063 942 Р05 5 79537564 - 79538048 + 39 214 389
GRMZM5G853950 Р01 5 79666742 - 79669824 + 40 215 390
- 212 036149
GRMZM2G472708 P01 5 79679654 - 79682242 - 41 216 391
GRMZM2G03 313 8_P04 5 79697555-79699261 + 42 217 392
GRMZM2G03 313 8 P03 5 79697555-79710673 + 43 218 393
GRMZM2G03 313 8_P01 5 79697555-79710673 + 44 219 394
GRMZM2G03 313 8 P02 5 79697555-79710673 + 45 220 395
GRMZM2G062885 P01 5 79857859-79861902 + 46 221 396
GRMZM2G062914 P03 5 79862405 - 79867710 - 47 222 397
GRMZM2G062914 P02 5 79862405 - 79867868 - 48 223 398
GRMZM2G062914 P01 5 79862405 - 79867873 - 49 224 399
GRMZM5G865405 P01 5 79960831-79961961 - 50 225 400
GRMZM2G353478 P01 5 80084956 - 80086268 - 51 226 401
GRMZM2G067313_P01 5 80187987 -80190673 + 52 227 402
GRMZM2G067313 P02 5 80188978 -80190777 + 53 228 403
GRMZM2G36743 IPO 1 5 80191781-80192546 + 54 229 404
GRMZM2G0673 50 P01 5 80195077 -80199923 - 55 230 405
GRMZM2G0673 50 P02 5 80195714 -80199923 - 56 231 406
GRMZM2G031850P01 5 80236478 -80241911 - 57 232 407
GRMZM2G031850 P02 5 80238986 -80241911 - 58 233 408
GRMZM2G031850 P03 5 80239243 -80241911 - 59 234 409
GRMZM2G024612 P01 5 80273499 - 80282785 - 60 235 410
GRMZM5G852229 P01 5 80344025 - 80345337 + 61 236 411
GRMZM5G829894 P01 5 80387639 - 80389787 + 62 237 412
GRMZM5G829894 P02 5 80387639 - 80389787 + 63 238 413
GRMZM5G829894 P03 5 80388596 - 80389787 + 64 239 414
AC233959.1 FGP003 5 80411337 -80411639 - 65 240 415
GRMZM2G701675 P01 5 80446281 - 80446855 + 66 241 416
AC233959.1 FGP006 5 80491807 - 80492790 - 67 242 417
GRMZM2G392320 P02 5 80669160 -80670554 + 68 243 418
GRMZM2G3 92320 P01 5 80669160 -80674679 + 69 244 419
GRMZM2G147800 P01 5 80715081-80720509 + 70 245 420
GRMZM2G093490 P01 5 80795990 - 80800856 - 71 246 421
GRMZM2G482256 P01 5 80803727 - 80807409 - 72 247 422
GRMZM2G425774 P01 5 80828457 - 80835734 - 73 248 423
GRMZM2G425774 P02 5 80828945 - 80835734 - 74 249 424
GRMZM2G165945 P02 5 80969412 -80972258 + 75 250 425
GRMZM2G165945 P01 5 80969412 -80974450 + 76 251 426
GRMZM2G165945 P03 5 80970381 - 80974450 + 77 252 427
GRMZM2G400197 P01 5 81031951-81047638 + 78 253 428
GRMZM2G104425 P01 5 81076870 -81082921 - 79 254 429
GRMZM5G887054 P01 5 81155197 -81157909 - 80 255 430
GRMZM5G887054 P02 5 81155255 -81157909 - 81 256 431
GRMZM5G887054 P03 5 81155675-81157909 - 82 257 432
GRMZM5G887054 P04 5 81156713 -81157909 - 83 258 433
GRMZM2G088880 P01 5 81265211-81267499 + 84 259 434
- 213 036149
GRMZM2G088880 P02 5 81265211 -81267499 + 85 260 435
GRMZM2G088880 P03 5 81265354 -81267485 + 86 261 436
AC207104.3 FGP001 5 81273796 -81274512 + 87 262 437
GRMZM2G322672 P01 5 81761119 -81763618 + 88 263 438
GRMZM2G011888 P01 5 81793777 -81797217 + 89 264 439
GRMZM2G085513_P01 5 81798893 -81800186 - 90 265 440
GRMZM2G085469 P01 5 81801973 -81806213 - 91 266 441
GRMZM5G817948 Р01 5 81858527 -81859374 + 92 267 442
GRMZM5G897067 P01 5 81859618 -81861368 + 93 268 443
AC199577.4 FGP004 5 81863099 -81863686 - 94 269 444
GRMZM5G823733 P01 5 81914498 -81916850 + 95 270 445
GRMZM5G812923 Р02 5 81950191 -81954891 - 96 271 446
GRMZM5G812923 P03 5 81950191-81954891 - 97 272 447
GRMZM5G812923 Р01 5 81951639 -81954891 - 98 273 448
GRMZM2G464846 P01 5 81984901 -81985250 + 99 274 449
GRMZM2G024882 P01 5 82083639 -82101253 - 100 275 450
GRMZM5G868120 Р02 5 82137780 -82143124 - 101 276 451
GRMZM5G868120 Р01 5 82139338 -82143124 - 102 277 452
GRMZM5G867030 P01 5 82234311 -82236318 + 103 278 453
GRMZM2G409658 P01 5 82423451 -82427210 - 104 279 454
GRMZM2G111201P01 5 82427780 -82431853 + 105 280 455
GRMZM2G409726 P01 5 82443403 - 82446794 - 106 281 456
GRMZM2G409726 P02 5 82443815 -82446714 - 107 282 457
GRMZM2G409726 P03 5 82443856 - 82446714 - 108 283 458
GRMZM2G005562 P01 5 82549227 - 82555670 - 109 284 459
GRMZM2G005562 P04 5 82549246 - 82552090 - НО 285 460
GRMZM2G005562 P03 5 82549246 -82555641 - 111 286 461
GRMZM2G005562 P02 5 82549246 -82555641 - 112 287 462
GRMZM2G005562 P05 5 82549299 -82551111 - 113 288 463
GRMZM2G005562 P06 5 82554608 - 82555670 - 114 289 464
GRMZM2G005562 P07 5 82554971 - 82555670 - 115 290 465
GRMZM2G006144 Р01 5 82556313 -82561535 - 116 291 466
GRMZM2G006144 Р02 5 82556337 - 82559047 - 117 292 467
GRMZM2G443 3 32 Р01 5 82609175 -82610100 - 118 293 468
GRMZM2G167578 P01 5 82675654 -82676901 - 119 294 469
GRMZM5G844909 P01 5 82675825 - 82676822 + 120 295 470
GRMZM2G3 903 50_Р01 5 82882273 -82883691 - 121 296 471
GRMZM2G158520 P01 5 82953053 - 82954942 + 122 297 472
GRMZM2G459142 Р01 5 82971168 -82971688 + 123 298 473
GRMZM5G844046 P01 5 83023500 - 83023965 - 124 299 474
GRMZM2G564932 P01 5 83093332 - 83094205 + 125 300 475
AC197265.3 FGP005 5 83145879 -83146355 + 126 301 476
GRMZM2G087267 P01 5 83277783 -83281412 + 127 302 477
GRMZM2G087267 Р02 5 83277785 -83281412 + 128 303 478
- 214 036149
GRMZM2G087267 P03 5 83279034 - 83280630 + 129 304 479
GRMZM2G032280 P01 5 83397014 -83400242 + 130 305 480
GRMZM2G087495 P01 5 83402967 - 83405797 - 131 306 481
GRMZM2G387127 Р01 5 83435480 -83437132 - 132 307 482
GRMZM5G889792 P01 5 83521923 - 83522252 - 133 308 483
AC234515.1 FGP003 5 83557023 - 83560095 + 134 309 484
AC234515.1 FGP002 5 83567769 - 83572400 + 135 310 485
GRMZM5G894416 Р01 5 83606990 -83607661 + 136 311 486
GRMZM2G050080 P01 5 83743980 - 83745342 - 137 312 487
GRMZM2G0883 96 Р01 5 83859479 -83861633 + 138 313 488
GRMZM2G08823 5_Р03 5 83860797 - 83865914 - 139 314 489
GRMZM2G08823 5_Р02 5 83860797 - 83865920 - 140 315 490
GRMZM2G08823 5_Р01 5 83860797 - 83865920 - 141 316 491
GRMZM2G08823 5_Р04 5 83861394 -83865914 - 142 317 492
GRMZM2G08823 5_Р05 5 83864692 - 83865653 - 143 318 493
GRMZM2G3 87123 Р01 5 83867332 - 83868010 - 144 319 494
GRMZM2G449843 P01 5 84018779 -84019752 + 145 320 495
GRMZM2G322129 Р01 5 84061561 - 84065912 + 146 321 496
GRMZM2G017741_Р01 5 84083388 - 84086632 + 147 322 497
GRMZM2G017802 Р01 5 84088707 - 84089603 - 148 323 498
GRMZM2G074634 P05 5 84101452 -84104814 - 149 324 499
GRMZM2G074634 P01 5 84101452 -84105175 - 150 325 500
GRMZM2G074634 P02 5 84101452 -84105175 - 151 326 501
GRMZM2G074634 P04 5 84101452 -84105175 - 152 327 502
GRMZM2G074634 P03 5 84101452 -84105175 - 153 328 503
GRMZM2G074634 P06 5 84103364 -84105175 - 154 329 504
GRMZM2G026117 Р02 5 84248220 -84251635 + 155 330 505
GRMZM2G026117 Р01 5 84248220 -84252180 + 156 331 506
GRMZM2G026117 Р03 5 84248224 -84252180 + 157 332 507
GRMZM2G005998 P02 5 84252053 - 84253030 - 158 333 508
GRMZM2G005998 P03 5 84252053 - 84254208 - 159 334 509
GRMZM2G005998 P01 5 84253581 - 84254208 - 160 335 510
GRMZM2G107026 P01 5 84314151 -84314930 - 161 336 511
AC211514.2FGP003 5 84338664 - 84340523 - 162 337 512
AC208217.3 FGP001 5 84516113 -84516340 - 163 338 513
GRMZM2G127999 P01 5 84706267 - 84706916 + 164 339 514
GRMZM2G128012 Р01 5 84796405 - 84799488 - 165 340 515
GRMZM2G427468 P01 5 84799805 -84801081 - 166 341 516
GRMZM2G3 82914 Р05 5 84821810 -84824816 + 167 342 517
GRMZM2G3 82914 Р04 5 84821810 -84825422 + 168 343 518
GRMZM2G3 82914 Р02 5 84822183 -84825763 + 169 344 519
GRMZM2G3 82914 Р03 5 84822215 -84825763 + 170 345 520
GRMZM2G3 82914 Р01 5 84822215 -84825942 + 171 346 521
GRMZM2G007372 P01 5 84840183 -84843411 + 172 347 522
GRMZM2G010321 Р02 5 84934242 -84936441 + 173 348 523
GRMZM2G010321 P01 5 84934242 - 84936493 + 174 349 524
GRMZM2G010754 Р01 5 84938287 - 84943705 - 175 350 525
Примеры, представленные выше, явно иллюстрируют преимущества изобретения. Несмотря на то что изобретение было описано на основании конкретных деталей некоторых его вариантов осуществления, не имеется в виду, что такие детали следует считать ограничениями объема заявленного изобретения, за исключением и до такой степени, с которой они включены в прилагаемую формулу данного изобретения.

Claims (24)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Способ выявления экспрессирующего Vip3 растения маиса или его части, имеющих улучшенное качество пыльников и/или увеличенное количество пыльников или пыльцы, включающий обнаружение в геноме Ref Gen_v2 указанного экспрессирующего Vip3 растения маиса или его части локуса количественных признаков (QTL), связанных с улучшенным качеством пыльников и/или увеличенным количест-
    - 215 036149 вом пыльников или пыльцы, причем указанный QTL локализован на хромосоме 5, включает положения пар оснований (bp) от 77,920,728 до 181,522,829 в указанном геноме и дополнительно включает гаплотип, содержащий: i) G полиморфизм в положении пар оснований 77,920,728; и ii) A полиморфизм в положении пар оснований 181,522,829, причем указанное растение маиса имеет улучшенное качество пыльников и/или увеличенное количество пыльников или пыльцы по сравнению с экспрессирующим Vip3 растением маиса, не содержащим указанный QTL.
  2. 2. Способ по п.1, где указанный QTL обнаруживают в продукте амплификации из образца нуклеиновой кислоты полученного от указанного растения или части растения маиса.
  3. 3. Способ селекции растений маиса, включающий обнаружение в геноме Ref Gen_v2 экспрессирующего Vip3 растения маиса или его части QTL, связанного с улучшенным качеством пыльников и/или увеличенным количеством пыльников или пыльцы, причем указанный QTL локализован на хромосоме 5, включает положения пар оснований от 77,920,728 до 181,522,829 в указанном геноме и дополнительно включает гаплотип, содержащий: i) G полиморфизм в положении пар оснований 77,920,728; и ii) A полиморфизм в положении пар оснований 181,522,829, отбор указанного экспрессирующего Vip3 растения маиса для селекции; и скрещивание указанного выбранного экспрессирующего Vip3 растения маиса со вторым растением маиса, у которого отсутствует указанный QTL, с образованием растения-потомка маиса, содержащего указанный QTL.
  4. 4. Способ по п.3, где указанный QTL обнаруживают в продукте амплификации из образца нуклеиновой кислоты, полученного от указанных экспрессирующих Vip3 растений или части растения маиса.
  5. 5. Способ по любому из пп.1-4, где указанные экспрессирующие Vip3 растения или часть растения маиса являются гемизиготными по кодирующей последовательности vip3.
  6. 6. Способ по любому из пп.1-4, где указанные экспрессирующие Vip3 растения или часть растения маиса являются гомозиготными по кодирующей последовательности vip3.
  7. 7. Способ по п.5 или 6, где указанные экспрессирующие Vip3 растение или часть растения маиса содержат трансгенный объект MIR162 маиса.
  8. 8. Способ по любому из пп.1-7, где указанные экспрессирующие Vip3 растение или часть растения маиса представляют собой инбредное растение маиса или его часть.
  9. 9. Способ по любому из пп.1-8, где геном указанных растения или части растения маиса по меньшей мере на 95% идентичен геному элитной линии растения маиса, выбранного из растений NP2222 ATCC № PTA-3967, NP2276 ATCC № PTA-4002, NP2391 ATCC № PTA-5710, NP2460 ATCC № PTA7485 или ID3461 ATCC № PTA-2886.
  10. 10. Способ по п.9, где указанные растение или часть растения представляет собой растение маиса NP2222 ATCC № PTA-3967, NP2276 ATCC № PTA-4002, NP2391 ATCC № PTA-5710, NP2460 ATCC № PTA-7485 или ID3461 ATCC № PTA-2886.
  11. 11. Способ получения экспрессирующего Vip3 растения маиса, обладающего улучшенным качеством пыльников и/или увеличенным количеством пыльников или пыльцы, включающий отбор из разнородной популяции растений маиса растения маиса, содержащего в геноме Ref Gen_v2 QTL, связанный с улучшенным качеством пыльников и/или увеличенным количеством пыльников или пыльцы маиса, причем указанный QTL локализован на хромосоме 5, включает положения пар оснований от 77,920,728 до 181,522,829 в указанном геноме и дополнительно включает гаплотип, содержащий: i) G полиморфизм в положении пар оснований 77,920,728; и ii) A полиморфизм в положении пар оснований 181,522,829; и скрещивание растения маиса с самим собой или со вторым растением маиса с получением экспрессирующего Vip3 растения-потомка, содержащего QTL и обладающего улучшенным качеством пыльников и/или увеличенным количеством пыльников или пыльцы по сравнению с экспрессирующим Vip3 растением маиса, не содержащим указанный QTL.
  12. 12. Способ улучшения семенной продуктивности экспрессирующего Vip3 растения маиса, включающий скрещивание первого растения маиса со вторым растением маиса, где указанное первое растение маиса содержит в своем геноме QTL, связанный с улучшенным качеством пыльников и/или увеличенным количеством пыльников или пыльцы у экспрессирующих Vip3 растений маиса, а у второго указанного растения маиса указанный QTL отсутствует, с получением экспрессирующего Vip3 растения потомка маиса, содержащего указанный QTL, причем указанное первое или второе растение маиса представляет собой экспрессирующее Vip3 растение маиса, и где указанный QTL локализован на хромосоме 5 маиса, включает положения пар оснований от 77,920,728 до 181,522,829 в геноме маиса Ref Gen_v2 и дополнительно включает гаплотип, содержащий: i) G полиморфизм в положении пар оснований 77,920,728; и ii) A полиморфизм в положении пар оснований 181,522,8, и использование указанного растения-потомка маиса в качестве опылителя при скрещивании с самим собой или со вторым растением маиса, которое выступает в качестве образующего семена родителя, улучшая таким образом семенную продуктивность в результате скрещивания по сравнению с соответствующим контрольным скрещиванием.
  13. 13. Способ по п.12, где с помощью указанного способа уменьшают отношение родительских растений-опылителей к образующим семена родительским растениям маиса, необходимое для семенной продуктивности, по меньшей мере на приблизительно 25% по сравнению с контрольным скрещиванием.
  14. 14. Способ по п.13, где с помощью указанного способа повышают число семян, получаемых на ро-
    - 216 036149 дительское растение-опылитель и/или образующее семена родительское растение, по меньшей мере на приблизительно 25% по сравнению с контрольным скрещиванием.
  15. 15. Способ интрогрессии QTL, связанного с улучшенным качеством пыльников и/или увеличенным количеством пыльников или пыльцы у экспрессирующего Vip3 растения маиса, в инбредное экспрессирующее Vip3 растение маиса, в котором указанный QTL отсутствует, включающий скрещивание первого донорского растения маиса, содержащего QTL, связанный улучшенным качеством пыльников и/или увеличенным количеством пыльников или пыльцы у экспрессирующего Vip3 растения маиса, со вторым рекуррентным растением маиса, у которого указанный QTL отсутствует; и возвратное скрещивание одного или нескольких поколений потомства, содержащего указанный QTL, с рекуррентным растением маиса с получением интрогрессивного растения маиса, содержащего указанный QTL в генетическом окружении рекуррентного родителя, причем указанный QTL локализован на хромосоме 5 маиса, включает положения пар оснований от 77,920,728 до 181,522,829 в геноме маиса Ref Gen_v2 и дополнительно включает гаплотип, содержащий: i) G полиморфизм в положении пар оснований 77,920,728; и ii) A полиморфизм в положении пар оснований 181,522,829.
  16. 16. Способ по п.11 или 15, где указанное первое растение маиса и/или указанное второе растение маиса является гемизиготным по кодирующей последовательности vip3.
  17. 17. Способ по п.11 или 15, где указанное первое растение маиса и/или указанное второе растение маиса является гомозиготным по кодирующей последовательности vip3.
  18. 18. Способ по п.16 или 17, где указанное первое растение маиса и/или указанное второе растение маиса содержит трансгенный объект MIR162 маиса.
  19. 19. Способ по любому из пп.16-18, где указанное экспрессирующее Vip3 растение-потомок маиса является гемизиготным по кодирующей последовательности vip3.
  20. 20. Способ по любому из пп.16-18, где указанное экспрессирующее Vip3 растение-потомок маиса является гомозиготным по кодирующей последовательности vip3.
  21. 21. Способ по п.19 или 20, где указанное экспрессирующее Vip3 растение-потомок маиса содержит трансгенный объект MIR162 маиса.
  22. 22. Способ по любому из пп.11-21, где указанное первое растение маиса и/или указанное второе растение маиса представляет собой инбредное растение маиса или его часть.
  23. 23. Способ по п.22, где геном указанного первого растения маиса и/или указанного второго растения маиса по меньшей мере на 95% идентичен геному элитной линии растения маиса, выбранного из растений NP2222 ATCC № PTA-3967, NP2276, ATCC № PTA-4002, NP2391 ATCC № PTA-5710, NP2460 ATCC № PTA-7485 или ID3461 ATCC № PTA-2886.
  24. 24. Способ по п.23, где указанное первое растение маиса и/или указанное второе растение представляет собой растение маиса NP2222 ATCC № PTA-3967, NP2276 ATCC № PTA-4002, NP2391 ATCC № PTA-5710, NP2460 ATCC № PTA-7485 или ID3461 ATCC № PTA-2886.
EA201691677A 2014-02-21 2015-02-20 Генетические локусы, связанные с повышенной фертильностью у маиса EA036149B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201461942720P 2014-02-21 2014-02-21
PCT/US2015/016877 WO2015127248A1 (en) 2014-02-21 2015-02-20 Genetic loci associated with increased fertility in maize

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201691677A1 EA201691677A1 (ru) 2017-02-28
EA036149B1 true EA036149B1 (ru) 2020-10-05

Family

ID=53879041

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201691677A EA036149B1 (ru) 2014-02-21 2015-02-20 Генетические локусы, связанные с повышенной фертильностью у маиса
EA202091497A EA202091497A3 (ru) 2014-02-21 2015-02-20 Генетические локусы, связанные с повышенной фертильностью у маиса

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA202091497A EA202091497A3 (ru) 2014-02-21 2015-02-20 Генетические локусы, связанные с повышенной фертильностью у маиса

Country Status (14)

Country Link
US (3) US10214784B2 (ru)
EP (2) EP3107373A4 (ru)
CN (2) CN106231893B (ru)
BR (1) BR112016019007B1 (ru)
CA (2) CA3080638C (ru)
CL (3) CL2016002071A1 (ru)
EA (2) EA036149B1 (ru)
ES (1) ES2927871T3 (ru)
MX (1) MX369780B (ru)
PH (2) PH12016501655A1 (ru)
PT (1) PT3632202T (ru)
UA (1) UA122122C2 (ru)
WO (1) WO2015127248A1 (ru)
ZA (1) ZA201606476B (ru)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10045493B2 (en) 2014-08-19 2018-08-14 Monsanto Technology Llc Stabilization of pollen production in maize
CN108130378B (zh) * 2016-12-01 2021-08-20 北京市农林科学院 一种与桃果实甜酸风味性状相关的snp标记及其应用
CN108411020B (zh) * 2018-02-06 2021-10-01 北京市农林科学院 适于毛细管电泳检测平台的一套玉米叶绿体InDel分子标记
JP7103419B2 (ja) * 2018-07-31 2022-07-20 日本電気株式会社 受信器、火災検知システム及び火災検知方法
CN111961752B (zh) * 2020-09-15 2022-06-24 四川农业大学 一种鉴定中国樱桃种质的ssr标记、应用及鉴定方法
CN116875633B (zh) * 2023-09-06 2023-11-24 北京首佳利华科技有限公司 雄性不育基因ZmSWEET6及其在创制玉米雄性不育系中的应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5981833A (en) * 1994-11-29 1999-11-09 Iowa State University Research Foundation, Inc. Nuclear restorer genes for hybrid seed production
US20030140367A1 (en) * 2002-01-23 2003-07-24 Robert Miller Inbred maize line NP2276
WO2005083096A1 (en) * 2004-02-23 2005-09-09 Chromatin, Inc. Plants modified with mini-chromosomes
US20100212041A1 (en) * 2005-01-27 2010-08-19 Valerie Frankard Plants Having Increased Yield And A Method For Making The Same

Family Cites Families (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS57501692A (ru) 1980-09-24 1982-09-16
DE3381518D1 (de) 1982-01-22 1990-06-07 Cetus Corp Verfahren zur charakterisierung von hla und die darin benutzten cdns-testmittel.
US4582788A (en) 1982-01-22 1986-04-15 Cetus Corporation HLA typing method and cDNA probes used therein
US4605735A (en) 1983-02-14 1986-08-12 Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha Oligonucleotide derivatives
EP0144914A3 (en) 1983-12-12 1986-08-13 Miles Inc. Hybridization assay employing labeled pairs of hybrid binding reagents
US4582789A (en) 1984-03-21 1986-04-15 Cetus Corporation Process for labeling nucleic acids using psoralen derivatives
US4683194A (en) 1984-05-29 1987-07-28 Cetus Corporation Method for detection of polymorphic restriction sites and nucleic acid sequences
US4563417A (en) 1984-08-31 1986-01-07 Miles Laboratories, Inc. Nucleic acid hybridization assay employing antibodies to intercalation complexes
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
CA1284931C (en) 1986-03-13 1991-06-18 Henry A. Erlich Process for detecting specific nucleotide variations and genetic polymorphisms present in nucleic acids
CA1338457C (en) 1986-08-22 1996-07-16 Henry A. Erlich Purified thermostable enzyme
US5217863A (en) 1988-02-04 1993-06-08 Medical Research Council Detection of mutations in nucleic acids
IE61148B1 (en) 1988-03-10 1994-10-05 Ici Plc Method of detecting nucleotide sequences
US6013431A (en) 1990-02-16 2000-01-11 Molecular Tool, Inc. Method for determining specific nucleotide variations by primer extension in the presence of mixture of labeled nucleotides and terminators
US5210015A (en) 1990-08-06 1993-05-11 Hoffman-La Roche Inc. Homogeneous assay system using the nuclease activity of a nucleic acid polymerase
US6004744A (en) 1991-03-05 1999-12-21 Molecular Tool, Inc. Method for determining nucleotide identity through extension of immobilized primer
US5762876A (en) 1991-03-05 1998-06-09 Molecular Tool, Inc. Automatic genotype determination
US5877012A (en) * 1993-03-25 1999-03-02 Novartis Finance Corporation Class of proteins for the control of plant pests
US5616464A (en) 1994-12-27 1997-04-01 Naxcor Nucleic acid sequence detection employing amplification probes
US5538848A (en) 1994-11-16 1996-07-23 Applied Biosystems Division, Perkin-Elmer Corp. Method for detecting nucleic acid amplification using self-quenching fluorescence probe
US5547781A (en) 1994-03-02 1996-08-20 Micron Communications, Inc. Button-type battery with improved separator and gasket construction
JP3439221B2 (ja) 1995-12-18 2003-08-25 ワシントン ユニヴァーシティ 蛍光共鳴エネルギー移動を利用する核酸分析方法
CA2255774C (en) 1996-05-29 2008-03-18 Cornell Research Foundation, Inc. Detection of nucleic acid sequence differences using coupled ligase detection and polymerase chain reactions
US6090558A (en) 1997-09-19 2000-07-18 Genetrace Systems, Inc. DNA typing by mass spectrometry with polymorphic DNA repeat markers
US7250252B2 (en) 1999-12-30 2007-07-31 David Aaron Katz Amplification based polymorphism detection
US6913879B1 (en) 2000-07-10 2005-07-05 Telechem International Inc. Microarray method of genotyping multiple samples at multiple LOCI
US7517975B2 (en) * 2000-09-26 2009-04-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Nucleotide sequences mediating male fertility and method of using same
US6799122B2 (en) 2001-08-31 2004-09-28 Conagra Grocery Products Company Method for identifying polymorphic markers in a population
US7297485B2 (en) 2001-10-15 2007-11-20 Qiagen Gmbh Method for nucleic acid amplification that results in low amplification bias
US6710233B2 (en) * 2002-01-23 2004-03-23 Syngenta Participations Ag Inbred maize line NP2222
US7270981B2 (en) 2002-02-21 2007-09-18 Asm Scientific, Inc. Recombinase polymerase amplification
AU2003220254B2 (en) 2002-03-13 2008-09-18 Syngenta Participations, Ag. Nucleic acid detection method
JP2006517385A (ja) 2002-08-02 2006-07-27 オーキッド セルマーク インコーポレイテッド 遺伝子型特定のための方法および組成物
US6996476B2 (en) 2003-11-07 2006-02-07 University Of North Carolina At Charlotte Methods and systems for gene expression array analysis
US20060141495A1 (en) * 2004-09-01 2006-06-29 Kunsheng Wu Polymorphic markers and methods of genotyping corn
KR20130020849A (ko) 2006-06-03 2013-02-28 신젠타 파티서페이션즈 아게 옥수수 이벤트 mir162
US20080083042A1 (en) * 2006-08-14 2008-04-03 David Butruille Maize polymorphisms and methods of genotyping
UY30621A1 (es) * 2006-10-03 2008-05-31 Monsanto Technology Llc Método para la produccion de semilla de maiz hibrido y composiciones producidas a partir del mismo
CN101084736A (zh) * 2007-06-25 2007-12-12 堵纯信 一种玉米恢复型雄花不育胞质杂交种的制种方法
BRPI0908242A2 (pt) 2008-05-23 2015-07-21 Syngenta Participations Ag Método e aparelho para extração de embriões de plantas
US20100167403A1 (en) * 2008-12-30 2010-07-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Identification and selection of commercial-quality transgenic plant events
US8946514B2 (en) 2009-12-28 2015-02-03 E.I. Du Pont De Nemours And Company Sorghum fertility restorer genotypes and methods of marker-assisted selection
US10117411B2 (en) * 2010-10-06 2018-11-06 Dow Agrosciences Llc Maize cytoplasmic male sterility (CMS) C-type restorer RF4 gene, molecular markers and their use

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5981833A (en) * 1994-11-29 1999-11-09 Iowa State University Research Foundation, Inc. Nuclear restorer genes for hybrid seed production
US20030140367A1 (en) * 2002-01-23 2003-07-24 Robert Miller Inbred maize line NP2276
WO2005083096A1 (en) * 2004-02-23 2005-09-09 Chromatin, Inc. Plants modified with mini-chromosomes
US20100212041A1 (en) * 2005-01-27 2010-08-19 Valerie Frankard Plants Having Increased Yield And A Method For Making The Same

Also Published As

Publication number Publication date
MX2016010629A (es) 2016-10-26
EP3632202A1 (en) 2020-04-08
EP3107373A1 (en) 2016-12-28
US10214784B2 (en) 2019-02-26
ES2927871T3 (es) 2022-11-11
CN106231893A (zh) 2016-12-14
PH12016501655B1 (en) 2016-11-07
EP3107373A4 (en) 2017-11-08
ZA201606476B (en) 2018-05-30
CA2939580A1 (en) 2015-08-27
CA2939580C (en) 2020-07-21
PT3632202T (pt) 2022-10-03
US20190185947A1 (en) 2019-06-20
US10900095B2 (en) 2021-01-26
CL2016002071A1 (es) 2017-06-23
MX369780B (es) 2019-11-21
CL2018003026A1 (es) 2019-01-11
EP3632202B1 (en) 2022-07-20
PH12016501655A1 (en) 2016-11-07
PH12020551663A1 (en) 2021-07-05
WO2015127248A1 (en) 2015-08-27
EA202091497A2 (ru) 2020-10-30
CN106231893B (zh) 2019-10-18
BR112016019007B1 (pt) 2022-05-17
EA202091497A3 (ru) 2020-12-30
CA3080638A1 (en) 2015-08-27
CA3080638C (en) 2023-07-11
CN110607321A (zh) 2019-12-24
US20210108278A1 (en) 2021-04-15
EA201691677A1 (ru) 2017-02-28
CL2018003028A1 (es) 2019-01-11
US20170166983A1 (en) 2017-06-15
BR112016019007A2 (pt) 2017-10-10
UA122122C2 (uk) 2020-09-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10900095B2 (en) Genetic loci associated with increased fertility in maize
US20240093223A1 (en) Methods of identifying, selecting, and producing southern corn rust resistant crops
WO2021143587A1 (en) Methods of identifying, selecting, and producing disease resistant crops
EP2480065B1 (en) Brassica oleracea plants resistant to Albugo candida
US11473101B2 (en) Methods of identifying, selecting, and producing southern corn rust resistant crops
US20140130211A1 (en) Methods of creating drought tolerant corn plants and compositions thereof
KR102587723B1 (ko) 다량 개화 수박
WO2022218158A1 (en) Plant pathogen effector and disease resistance gene identification, compositions, and methods of use
US20220282338A1 (en) Methods of identifying, selecting, and producing anthracnose stalk rot resistant crops
JP2023532747A (ja) ブレミアラクツカエ(Bremia lactucae)耐性SG01
CN113631722B (zh) 鉴定、选择和生产南方玉米锈病抗性作物的方法
EA042948B1 (ru) Генетические локусы, связанные с повышенной фертильностью у маиса
US20230151382A1 (en) Plant pathogen effector and disease resistance gene identification, compositions, and methods of use
RU2792674C2 (ru) Растение арбуза, характеризующееся продуктивным цветением
US20210214743A1 (en) Methods of identifying, selecting, and producing disease resistant crops
US20210222189A1 (en) Methods of identifying, selecting, and producing southern corn rust resistant crops
CN117812999A (zh) 鉴定、选择和产生炭疽茎腐病抗性作物的方法

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM