EA032573B1

EA032573B1 - Композиция для осветления кожи, содержащая 4-гексилрезорцин и иломастат

Info

Publication number: EA032573B1
Application number: EA201791490A
Authority: EA
Inventors: Майтрейее Дутта; Вайдехи Субхаш Кале; Нирмала Сантош Наир
Original assignee: Юнилевер Н.В.
Priority date: 2014-12-30
Filing date: 2015-11-24
Publication date: 2019-06-28
Also published as: US10166412B2; CA2970968A1; CA2970968C; WO2016107697A1; MX365370B; US20170354835A1; EA201791490A1; JP6609317B2; CN107106454B; EP3240524B1; PH12017500996A1; EP3240524A1; MX2017008586A; JP2018500306A; CN107106454A

Abstract

Изобретение относится к области композиций для личной гигиены, в частности композиций для осветления кожи. Имеется потребность в более эффективном способе снижения содержания меланина в меланоцитах. Было установлено, что 4-гексилрезорцин в комбинации с ингибитором ММР галардином синергетически снижает содержание меланина в меланоцитах. Таким образом, изобретение относится к композиции, содержащей синергетическую комбинацию 4-гексилрезорцина и галардина, для применения в осветлении кожи. Таким образом, указанная композиция при местном нанесении её в течение соответствующего периода времени в условиях in vivo может применяться для осветления кожи или для уменьшения возрастных пятен или веснушек.

Description

Изобретение относится к области композиций для личной гигиены, в частности композиций для осветления кожи. Имеется потребность в более эффективном способе снижения содержания меланина в меланоцитах. Было установлено, что 4-гексилрезорцин в комбинации с ингибитором ММР галардином синергетически снижает содержание меланина в меланоцитах. Таким образом, изобретение относится к композиции, содержащей синергетическую комбинацию 4гексилрезорцина и галардина, для применения в осветлении кожи. Таким образом, указанная композиция при местном нанесении её в течение соответствующего периода времени в условиях ίη νίνο может применяться для осветления кожи или для уменьшения возрастных пятен или веснушек.

032573 Β1

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к области композиций для личной гигиены, в частности композиций для осветления кожи.

Предпосылки создания изобретения

Многих людей беспокоит степень пигментации их кожи. Например, людям с возрастными пятнами или веснушками хотелось бы, чтобы такие пигментные пятна были менее выражены. Другим хотелось бы уменьшить потемнение кожи, вызываемое воздействием солнечного света, или осветлить естественный цвет кожи. Чтобы удовлетворить эту потребность, предпринимались многочисленные попытки по созданию продуктов, снижающих выработку пигмента в меланоцитах. Однако обнаруженные к настоящему времени вещества, как правило, либо имеют низкую эффективность, либо имеют нежелательные побочные эффекты, такие как, например, токсичность или раздражение кожи. Таким образом, попрежнему сохраняется потребность в новых косметических осветляющих кожу агентах с улучшенной общей эффективностью.

Традиционные композиции для осветления кожи основаны на применении осветляющих кожу агентов, которые, как предполагается, контролируют диспергирование меланина или ингибируют тирозиназу. Эти осветляющие кожу агенты включают ниацинамид, карбоновые кислоты, такие как азелаиновая кислота и койевая кислота, растительные экстракты, гидрохинон и др. Гексилрезорцин (Йеху1те8огсто1) является одним из таких осветляющих кожу агентов, широко используемым в композициях для местного нанесения.

Способность гексилрезорцина целенаправленно влиять на пути, ведущие к гиперпигментации кожи, быстро поместила его в категорию ингредиентов, осветляющих кожу. Считается также, что гексилрезорцин имеет и другие преимущества, включая способность уменьшать появление тонких линий (мелких морщинок) и морщин, усиливать защиту от УФ-В и УФ-А лучей и улучшать защитный барьер кожи против загрязнения и солнечного воздействия.

Было показано, что гексилрезорцин снижает содержание меланина в меланоцитах благодаря своей способности напрямую ингибировать активность фермента тирозиназы, который в свою очередь, как предполагается, в значительной степени ответственен за способность гексилрезорцина обеспечивать эффективность осветления кожи.

Однако по-прежнему сохраняется потребность в более эффективном способе снижения содержания меланина в меланоцитах.

Документ И8 2002120225 (МсЭаше1) раскрывает способ ускорения транспорта активного агента через кожу млекопитающего, предусматривающий воздействие на кожу ультразвука и нанесение на нее активного агента, в котором стадия нанесения активного агента на кожу включает введение активного агента в кожу и в котором активный агент включает по меньшей мере одно из витамина С, витамина Е, витамина А, витамина К, витамина Е, ретина А (третиноин), адапалена, ретинола, гидрохинона, койевой кислоты, фактора роста, эхинацеи, антибиотика, противогрибкового средства, противовирусного средства, отбеливающего агента, альфа-гидроксикислоты, бета-гидроксикислоты, салициловой кислоты, антиоксидантного триадного соединения, производного морских водорослей, производного морской воды, антиоксиданта, фитоантоцианина, фитонутриента, продукта из растительного сырья, продукта из травянистого растения, гормона, фермента, минерального вещества; вещества, полученного генной инженерией; кофактора, катализатора, антивозрастного вещества, инсулина, микроэлементов, минералов, препарата Кодаше (миноксидил); вещества, стимулирующего рост волос; вещества, подавляющего рост волос; красителя, природного или синтетического меланина, ингибитора металлопротеиназы, пролина, гидроксипролина, вещества-анестетика.

Установлено, что 4-гексилрезорцин в комбинации с ММР-ингибитором галардином синергетически снижает содержание меланина в меланоцитах. Поэтому настоящее изобретение относится к композиции, содержащей синергетическую комбинацию 4-гексилрезорцина и галардина, для применения в осветлении кожи. Соответственно композиция при местном нанесении в условиях ίη νίνο в течение соответствующего периода времени может использоваться для осветления кожи или для уменьшения возрастных пятен или веснушек.

Краткое описание сущности изобретения

Таким образом, в первом аспекте настоящее изобретение раскрывает композицию для осветления кожи, содержащую эффективное количество 4-гексилрезорцина и эффективное количество галардина.

Во втором аспекте изобретение раскрывает применение композиции по изобретению для осветления кожи.

В третьем аспекте изобретение раскрывает способ осветления кожи человека, включающий стадию нанесения композиции по изобретению на кожу.

Эти и другие аспекты, отличительные признаки и преимущества станут понятны специалистам в данной области техники после прочтения нижеследующего подробного описания и прилагаемой формулы изобретения. Во избежание каких-либо разночтений любой признак одного аспекта настоящего изобретения может быть использован в любом другом аспекте изобретения. Слово содержащий означает включающий, но необязательно состоящий из или составленный из. Иными словами, перечислен

- 1 032573 ные стадии или варианты не следует рассматривать как исчерпывающие. Следует отметить, что примеры, приведенные в описании ниже, предназначены для разъяснения изобретения и не предназначены для ограничения изобретения этими примерами рег 8е. Аналогичным образом, все процентные количества выражены в процентах мас./мас., если не указано иное. За исключением рабочих и сравнительных примеров или тех случаев, когда прямо указано иное, все численные данные в настоящем описании, обозначающие количество материала или условия реакции, физические свойства материалов и/или их применение, следует читать как предваряемые словом примерно. Численные диапазоны, выраженные в формате от х до у, следует понимать как включающие х и у. Если для какого-либо конкретного признака приведено несколько предпочтительных диапазонов в формате от х до у, следует понимать, что в этом случае подразумеваются также все диапазоны, объединяющие различные граничные значения.

Подробное описание изобретения

В первом аспекте изобретения раскрывается композиция для осветления кожи, содержащая 4гексилрезорцин и галардин.

4-Г ексилрезорцин.

4-Гексилрезорцин - это органическое соединение с местными анестетическими и антисептическими свойствами. Химически он представляет собой замещённое фенольное соединение желтовато-белого цвета. Структура 4-гексилрезорцина, используемого в настоящем изобретении, приводится ниже

Композиция по настоящему изобретению содержит эффективное количество 4-гексилрезорцина, в типичных случаях в концентрации от 0,001 до 10%, предпочтительно по меньшей мере 0,01%, более предпочтительно по меньшей мере 0,1%, ещё более предпочтительно по меньшей мере 0,25%, более предпочтительно по меньшей мере 0,5%, ещё более предпочтительно по меньшей мере 1% или даже по меньшей мере 2% в расчете на массу композиции; но предпочтительно не более 8%, более предпочтительно не более 6%, ещё более предпочтительно не более 5%, даже более предпочтительно не более 4% или даже не более 3% в расчете на массу композиции.

Галардин.

Галардин, известный также как СМ6001 или иломастат, представляет собой ингибитор широкого спектра матриксных металлопротеиназ, имеющий следующую структуру:

Галардин является представителем класса обратимых ингибиторов матриксных металлопротеиназ на основе гидроксамовых кислот. Анионное состояние группы гидроксамовой кислоты способствует образованию бидентатного комплекса с цинком активного центра.

Матриксные металлопротеиназы (ММР) известны своей ролью в матриксном ремоделировании и секретируются различными клетками, в том числе клетками кожи, такими как меланоциты, кератиноциты и фибробласты. Галардин представляет собой синтетический ингибитор широкого спектра матриксных металлопротеиназ (ММР), показывающий значительную активность в отношении ММР-1, 2, 3, 7, 8, 9, 12, 14, 26. В 1990-х годах впервые появилось сообщение о том, что он имеет коллагеноподобный скелет, что облегчает его связывание с активным центром ММР, и гидроксаматную структуру (К-СО-ΝΗОН, где К - органический остаток), которая хелатирует ион цинка, расположенный в каталитическом домене ММР. Сообщалось о возможности модулирования действия ММР путём блокировки конверсии про-ММР в их активную форму.

С учётом того, что меланин представляет собой группу пигментов, образующихся в результате окисления аминокислоты тирозин и последующей полимеризации, вызывает удивление тот факт, что галардин играет также определённую роль и в снижении содержания меланина в меланоцитах в комбинации с 4-гексилрезорцином. К тому же, как представляется, галардин не оказывает влияния на ингибирование тирозиназы, которая является оксидазой для тирозина и представляет собой медьсодержащий белок, и не является металлопротеиназой, как показано в приведенных ниже примерах.

Настоящее изобретение подчёркивает роль галардина в синергетическом модулировании содержания меланина в первичных меланоцитах человека при комбинировании галардина с 4-гексилрезорцином.

Композиция по настоящему изобретению содержит эффективное количество галардина, в типичных случаях в концентрации от 0,00001 до 10%, предпочтительно по меньшей мере 0,0001%, более предпочтительно по меньшей мере 0,001%, ещё более предпочтительно по меньшей мере 0,001%, более

- 2 032573 предпочтительно по меньшей мере 0,1%, ещё более предпочтительно по меньшей мере 0,5% или даже по меньшей мере 1% в расчете на массу композиции; но предпочтительно не более 8%, более предпочтительно не более 5%, ещё более предпочтительно не более 4%, более предпочтительно не более 3%, ещё более предпочтительно не более 2% или даже не более 1,5% в расчете на массу композиции.

Другие ингредиенты.

Композиция по настоящему изобретению может дополнительно содержать косметически приемлемую несущую среду, которая может действовать как разбавитель, диспергатор и/или носитель для осветляющих кожу агентов, используемых в композиции, с тем чтобы облегчить распределение последних при нанесении композиции на кожу. Косметически приемлемая несущая среда, пригодная для использования в настоящем изобретении, может быть водной, безводной или эмульсией; водной или эмульсией, в частности эмульсией вода-в-масле или масло-в-воде, которые являются наиболее предпочтительными. Вода, если таковая присутствует, в типичных случаях добавляется в композицию до баланса (т.е. до 100%). Предпочтительно вода присутствует в концентрации от 5 до 99%, более предпочтительно от 20 до 80%, ещё более предпочтительно от 40 до 80% в расчете на массу композиции.

Помимо воды, органические растворители также могут служить в качестве носителей в композициях по настоящему изобретению.

Смягчающие вещества (эмоленты) также могут использоваться в качестве косметически приемлемых носителей в композиции по настоящему изобретению. В большинстве случаев используются эмоленты в форме силиконовых масел и синтетических сложных эфиров. Силиконовые масла могут быть летучими и нелетучими. Летучие силиконовые масла предпочтительно выбираются из циклических или линейных полидиметилсилоксанов, содержащих от 3 до 9, предпочтительно от 4 до 5 атомов кремния. Нелетучие силиконовые масла, пригодные для использования в качестве смягчителей, включают полиалкилсилоксаны, полиалкиларилсилоксаны и полиэфирсилоксановые сополимеры. В основном нелетучие полиалкилсилоксаны, применяемые в изобретении, включают, например, полидиметилсилоксаны.

Сложноэфирными эмолентами, которые могут использоваться в изобретении, являются:

а) алкениловые или алкиловые сложные эфиры жирных кислот, содержащих от 10 до 20 атомов углерода. Примеры их включают изоарахидилнеопентаноат, изононилизонаноноат, олеилмиристат, олеилстеарат и олеилолеат;

б) эфироэфиры, такие как жирнокислотные эфиры этоксилированных жирных спиртов;

в) сложные эфиры многоатомных спиртов. Моно- и диэфиры этиленгликоля и жирных кислот, моно- и диэфиры диэтиленгликоля и жирных кислот, моно- и диэфиры полиэтиленгликоля (200-6000) и жирных кислот, моно- и диэфиры пропиленгликоля и жирных кислот, пропиленгликоль-2000-моноолеат, пропиленгликоль-2000-моностеарат, этоксилированного пропиленгликоля моностеарат, моно- и диэфиры глицерина и жирных кислот, полиэфиры полиглицерина и жирных кислот, этоксилированный глицерилмоностеарат, 1,3-бутиленгликольмоностеарат, 1,3-бутиленгликольдистеарат, сложные эфиры полиоксиэтиленполиола и жирных кислот, сложные эфиры сорбитана и жирных кислот и сложные эфиры полиоксиэтиленсорбитана и жирных кислот являются удовлетворительными сложными эфирами многоатомных спиртов;

г) сложные эфиры воска, такие как пчелиный воск, спермацет, миристилмиристат, стеарилстеарат и арахидилбегенат;

д) сложные эфиры стеринов, примерами которых являются сложные эфиры холестерина и жирных кислот.

Эмоленты могут присутствовать в композиции в количестве от 0,1 до 50%, предпочтительно от 1 до 20% в расчете на массу композиции.

Жирные кислоты, содержащие от 10 до 30 атомов углерода, также могут включаться в композицию по изобретению в качестве косметически приемлемых носителей. Иллюстративными примерами таких жирных кислот являются пеларгоновая, лауриновая, миристиновая, пальмитиновая, стеариновая, изостеариновая, гидроксистеариновая, олеиновая, линолевая, рицинолеиновая, арахидоновая, бегеновая, эруковая кислоты и их смеси.

Увлажнители типа многоатомных спиртов также могут использоваться в качестве косметически приемлемых носителей в композиции по настоящему изобретению. Увлажнитель способствует повышению эффективности эмолента, уменьшает шелушение кожи, стимулирует удаление отшелушившихся частичек кожи и создаёт приятное ощущение на коже. Типичные многоатомные спирты включают глицерин, полиалкиленгликоли, более предпочтительно алкиленполиолы и их производные, включающие пропиленгликоль, дипропиленгликоль, полипропиленгликоль, полиэтиленгликоль и их производные; сорбит, гидроксипропилсорбит, гексиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, 1,2,6-гексантриол, этоксилированный глицерин, пропоксилированный глицерин и смеси перечисленного. Для достижения лучших результатов увлажнителем предпочтительно является пропиленгликоль или гиалуронат натрия. Концентрация увлажнителя в композиции может варьироваться от 0,5 до 30%, предпочтительно от 1 до 15% в расчете на массу композиции.

Загустители также могут использоваться как часть косметически приемлемого носителя композиций по настоящему изобретению. Типичные загустители включают сшитые акрилаты (например, Саг

- 3 032573

Ьоро1 982®), гидрофобно-модифицированные акрилаты (например, СагЬоро1 1382®), производные целлюлозы и натуральные камеди. Среди полезных производных целлюлозы предпочтительны натрийкарбоксиметилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, этилцеллюлоза и гидроксиметилцеллюлоза. Натуральные камеди, пригодные для настоящего изобретения, включают гуаровую камедь, ксантан, склероций, каррагинан, пектин и комбинации этих камедей. Концентрация загустителя в композиции может колебаться от 0,0001 до 5%, обычно от 0,001 до 1%, оптимально от 0,01 до 0,5% в расчете на массу композиции.

Вода, растворители, силиконы, сложные эфиры, жирные кислоты, увлажнители и/или загустители вместе составляют косметически приемлемый носитель в количестве от 1 до 99,9%, предпочтительно от 80 до 99% в расчете на массу композиции.

Поверхностно-активные вещества также могут присутствовать в композиции по настоящему изобретению. Общая концентрация поверхностно-активного вещества находится в диапазоне от 0,1 до 40%, предпочтительно от 1 до 20%, оптимально от 1 до 5% в расчете на массу композиции. Поверхностноактивное вещество может выбираться из группы, состоящей из анионных, неионогенных, катионных и амфотерных активных веществ. В частности, предпочтительными неионогенными поверхностноактивными веществами являются вещества с С1₀-С₂₀-жирным спиртом или кислотным гидрофобом, сконденсированным с от 2 до 100 моль этиленоксида или пропиленоксида в расчёте на моль гидрофоба; С₂-Сю-алкилфенолами, сконденсированными с от 2 до 20 моль алкиленоксида; моно- и диэфиры жирных кислот и этиленгликоля; моноглицериды жирных кислот; сорбитан, моно- и ди-С₈-С₂₀-жирные кислоты; блок-сополимеры (этиленоксид/пропиленоксид) и полиоксиэтиленсорбитан, а также комбинации перечисленного. Алкилполигликозиды и жирные амиды сахаридов (например, метилглюконамиды) также являются подходящими неионогенными поверхностно-активными веществами.

Предпочтительные анионные поверхностно-активные вещества включают мыло, алкилэфирсульфат и сульфонаты, алкилсульфаты и сульфонаты, алкилбензолсульфонаты, алкил- и диалкилсульфосукцинаты, С8-С20-ацилизетионаты, ацилглутаматы, С8-С20-алкилэфирфосфаты и комбинации перечисленного.

Солнцезащитные вещества включают такие материалы, которые обычно используются для блокирования ультрафиолетового света. Примерами таких соединений являются производные РАВА (парааминобензойная кислота), циннаматы и салицилаты. Например, могут использоваться авобензофенон (Раг8о1 1789®), октилметоксициннамат и 2-гидрокси-4-метоксибензофенон (также известный как оксибензон). Октилметоксициннамат и 2-гидрокси-4-метоксибензофенон коммерчески доступны под товарными знаками Рагко1 МСХ и Вепхорйепопе-З соответственно. Точное количество солнцезащитного вещества, используемого в композиции, может варьироваться в зависимости от желаемой степени защиты от УФ-радиации солнца. Могут также использоваться добавки, которые отражают или рассеивают солнечные лучи. Эти добавки включают оксиды, такие как оксид цинка и диоксид титана.

Композиции по настоящему изобретению могут содержать широкий спектр других необязательных компонентов. Выпущенный СТЕА (Ассоциация производителей косметических средств, туалетных принадлежностей и парфюмерии) Справочник косметических ингредиентов [СЕТА Сокшейс [пдгсШсп! НаибЬоок], издание второе, 1992, который включён в полном объёме в данное описание посредством ссылки, описывает широкий перечень неограничивающих косметических и фармацевтических ингредиентов, традиционно используемых в индустрии ухода за кожей, которые являются подходящими для применения в композициях по настоящему изобретению. Примеры включают: антиоксиданты, связующие вещества, биологические добавки, буферные агенты, красители, полимеры, вяжущие вещества, отдушки, матирующие агенты, кондиционеры, отшелушивающие агенты, регуляторы рН, консерванты, натуральные экстракты, эфирные масла; вещества, создающие приятное ощущение на коже; агенты, оказывающие успокаивающее действие, и агенты, оказывающие заживляющее действие.

Для приготовления композиции по настоящему изобретению желательные ингредиенты смешивают в произвольном порядке обычно при температурах примерно от 70 до 80°С и при атмосферном давлении.

Упаковка для композиции по настоящему изобретению может представлять собой патч (пластырь), флакон, тюбик, роликовый-шариковый аппликатор, аэрозольную упаковку для распыления средства под давлением, создаваемым газом-вытеснителем; легко сжимаемый контейнер или баночку с крышкой.

Во втором аспекте изобретение относится к применению композиции по изобретению для осветления кожи.

В третьем аспекте изобретение относится к способу осветления кожи человека, включающему стадию нанесения композиции по изобретению на кожу.

Далее изобретение иллюстрируется следующими ниже неограничивающими примерами.

Примеры

Пример. Исследования ш-уйго по изучению влияния 4-гексилрезорцина и галардина на ингибирование меланина.

Материалы.

(ί) Первичные культуры меланоцитов из крайней плоти новорождённых детей, культуральная среда

- 4 032573

Мейшш 254 + ростовая добавка-2 для меланоцитов человека (Ьйе ТееЬпо1од1е§).

(ΐΐ) Галардин (К.)-№-гидрокси-М-[(8)-2-(1Н-индол-3-ил)-1-метилкарбамоил-этил]-2-изобутилсукцинамид (8щта-Лк1пс11).

(ίίϊ) Никотинамид (8щта-Лк1пс11).

(ΐν) Гексилрезорцин (8щта-Лк1пс11).

(ν) Кальцеин-АМ - ацетоксиметиловый эфир кальцеина (8щта-Лк1пс11).

(νΐ) ΌΜ8Ο - диметилсульфоксид (8щта-Лк1пс11).

(νΐΐ) Гидроксид натрия (Мегск 8рес1а11йе§ Ρνί. кй!.).

(νΐΐΐ) ΗΕΡΕ8 - (4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-этансульфоновая кислота, №(2-гидроксиэтил)пиперазин-№-(2-этансульфоновая кислота) (8щта-Лк1пс11).

(ΐχ) ХаС1 - хлорид натрия (Е1§Еег 8с1еп11йс).

(χ) ΝΡ40 - Хо11к1е1 Ρ 40 (детергент Нонидет Р40) (ϋ8Β Согрогайоп).

(χΐ) ΡΜ8Ε - фенилметансульфонилфторид (8щта-Лк1пс11).

(χΐΐ) Смесь ингибиторов протеаз (8щта-Лк1пс11).

(χΐΐΐ) Б-тирозин (8щша-АИпсЕ).

Методы.

(ΐ) Клеточные культуры.

Первичные культуры меланоцитов из крайней плоти новорождённых детей были закуплены у Ше Тесйпо1о§1е8, США. Клетки выращивали на среде Мескит 254, дополненной ростовой добавкой-2 для меланоцитов человека, и выдерживали при 37°С в инкубаторе в увлажнённой атмосфере с 5% СО₂. Выдерживание и субкультивирование клеток проводили в соответствии с инструкциями производителя. Для экспериментальных исследований использовали клетки между пересевами 3-6.

(ΐΐ) Добавление активных агентов.

Клетки высевали на 24-луночный планшет при плотности посева 5 х 10⁴/лунку в специальную среду для роста меланоцитов (МСМ) и инкубировали в течение 24 ч при 37°С/5% СО₂. Добавляли активные агенты вместе с релевантным контролем. Спустя 72 ч обработки активными агентами определяли жизнеспособность клеток методом с кальцеином с последующим измерением содержания клеточного меланина (описано ниже).

(ίίϊ) Анализ жизнеспособности клеток.

Кратко: отработанные среды удаляли и клетки промывали один раз 0,2 мл раствора 1 хИВВ-Са-Мр. В каждую лунку добавляли свежий раствор 1 мкМ кальцеина-АМ в буфере ΡΒ8. Планшеты инкубировали в течение 30 мин при 37°С в СО₂-инкубаторе. Затем измеряли флуоресценцию кальцеина (возбуждение при 490 нм и испускание при 520 нм) в планшетном ридере ТΕСАN М1000.

(ΐν) Анализ содержания меланина.

После измерений с кальцеином культуры ополаскивали буфером ΡΒ8 (1х) и лизировали в течение 1 ч при 60°С в инкубаторе со встряхивающим механизмом с использованием смеси №ОН/ИМ8О. Содержание меланина измеряли в планшетном ридере Тесап (фильтр 405 нм) с поправкой на количество клеток и выражали как% ингибирования.

(ν) Анализ активности человеческой тирозиназы ΐη νίΐΐΌ.

В качестве источника фермента тирозиназы использовали лизат первичных меланоцитов человека. Лизат человеческих меланоцитов и тестируемые активные агенты (в различных концентрациях) инкубировали совместно в течение 15 мин перед добавлением смеси субстратов - тирозина-ПОГЛ. Затем планшет инкубировали при 37°С в течение 14-16 ч. Измеряли оптическую плотность при 405 нм и рассчитывали % ингибирования активности тирозиназы.

Результаты.

ТаблицаI

Обработка	Средний % ингибирования клеточного меланина	8Е
ΌΜ8Ο 0,1 %	0	0
1 мкМ галардина (Οϋ)	7	3
10 мкМ галардина	17	4
1 мкМ 4-НК *’	И	3
ЮмкМ 4-НК	38	2
ΌΜ8Ο 0,2 %	0	0
1 мкМ 4-НК + 1 мкМ СИ)	24	5
1 мкМ4-НК+ ΙΟμκΜΟΌ	30	3
10 мкМ 4-НК + 1 мкМ СИ)	50	3

*) 4-гексилрезорцин.

- 5 032573

Т аблица II

Обработка	Средний % ингибирования активности фермента тирозиназы	8Е
Без контроля фермента	100	0
50 мкМ ΟΌ	-20	И
10 μκΜΟΌ	-2	14
5 мкМ СО	-3	15
1 мкМ СИ)	-1	10
50 мкМ 4-НК	78	И
10 мкМ 4-НК	78	8
5 мкМ 4-НК	55	15
1 мкМ 4-НК	28	4

Выводы.

В вышеприведенной таблице (табл. I) иллюстрируется синергетическое снижение содержания меланина, достигнутое при комбинировании галардина с 4-гексилрезорцином. Данные в табл. I показывают, что галардин как таковой либо вообще не давал снижения (в концентрации 1 мкМ), либо давал лишь умеренное снижение (10 мкМ) содержания меланина в первичных меланоцитах человека, в то время как 4-гексилрезорцин показал значительное снижение содержания меланина. Однако, когда галардин и 4гексилрезорцин комбинировались друг с другом в различных соотношениях, то при определённых тестируемых концентрациях каждого из этих активных агентов достигалось синергетическое снижение содержания меланина, которое было выше, чем суммарный эффект обеспечиваемого каждым из них по отдельности снижения.

Табл. II дополнительно показывает, что в случае галардина снижение содержания меланина происходило не вследствие прямой модуляции активности фермента тирозиназы, а в случае 4-гексилрезорцина оно достигалось именно благодаря прямой модуляции активности фермента тирозиназы.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Композиция для осветления кожи, содержащая:

(а) эффективное количество 4-гексилрезорцина и (б) эффективное количество галардина.
2. Композиция для осветления кожи по п.1, содержащая от 0,00001 до 10 мас.% галардина.
3. Композиция для осветления кожи по п.1 или 2, содержащая от 0,001 до 10 мас.% гексилрезорцина.
4. Композиция для осветления кожи по любому из пп.1-3, дополнительно содержащая агент, осветляющий кожу.
5. Композиция для осветления кожи по любому из пп.1-4, являющаяся композицией для местного нанесения.
6. Применение композиции по любому из пп.1-5 для осветления кожи.
7. Способ осветления кожи человека, включающий стадию, на которой композицию по любому из пп.1-5 наносят на кожу.

О