EA029436B1 - Комбинированная фармацевтическая композиция для лечения рассеянного склероза и инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способы лечения указанных заболеваний - Google Patents

Комбинированная фармацевтическая композиция для лечения рассеянного склероза и инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способы лечения указанных заболеваний Download PDF

Info

Publication number
EA029436B1
EA029436B1 EA201300137A EA201300137A EA029436B1 EA 029436 B1 EA029436 B1 EA 029436B1 EA 201300137 A EA201300137 A EA 201300137A EA 201300137 A EA201300137 A EA 201300137A EA 029436 B1 EA029436 B1 EA 029436B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
buz
azr
pharmaceutical composition
antibody
bei
Prior art date
Application number
EA201300137A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201300137A1 (ru
Inventor
Олег Ильич ЭПШТЕЙН
Original Assignee
Олег Ильич ЭПШТЕЙН
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from RU2010129297/10A external-priority patent/RU2446821C2/ru
Priority claimed from RU2010129296/10A external-priority patent/RU2441023C1/ru
Priority claimed from RU2010131386/15A external-priority patent/RU2522499C2/ru
Priority claimed from RU2010131387/15A external-priority patent/RU2509573C2/ru
Priority claimed from RU2011127056/15A external-priority patent/RU2519196C2/ru
Application filed by Олег Ильич ЭПШТЕЙН filed Critical Олег Ильич ЭПШТЕЙН
Publication of EA201300137A1 publication Critical patent/EA201300137A1/ru
Publication of EA029436B1 publication Critical patent/EA029436B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0004—Homeopathy; Vitalisation; Resonance; Dynamisation, e.g. esoteric applications; Oxygenation of blood
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/249—Interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding

Abstract

Изобретение относится к комбинированной фармацевтической композиции, содержащей активированную потенцированную форму антител к гамма-интерферону и активированную потенцированную форму антител к белку S-100, а также способу лечения рассеянного склероза и других нейродегенеративных заболеваний, в том числе инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями.

Description

Изобретение относится к комбинированной фармацевтической композиции, содержащей активированную потенцированную форму антител к гамма-интерферону и активированную потенцированную форму антител к белку 8-100, а также способу лечения рассеянного склероза и других нейродегенеративных заболеваний, в том числе инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями.
029436 Β1
029436 Β1
029436
Область техники
Данное изобретение относится к комбинированной фармацевтической композиции и способу лечения рассеянного склероза и других нейродегенеративных заболеваний, а также заболеваний и состояний, вызванных инфекциями, сопровождающимися нейротоксическими нарушениями.
Предшествующий уровень техники
Рассеянный склероз или РС является хроническим заболеванием, которое негативно влияет на функционирование головного и спинного мозга, приводя к потере мышечного контроля, баланса и чувствительности (например, онемению). В настоящее время точная причина возникновения РС остается неизвестной, однако исследователи полагают, что данное заболевания может быть следствием воздействия ряда факторов. Считается, что РС появляется у генетически предрасположенных лиц, возможно при наличии определенных внешних факторов, которые приводят к развитию рассеянного склероза. В настоящее время принято считать, что РС подразумевает действие аутоиммунного процесса, который являет собой атипичную реакцию иммунной системы организма, которая направлена против миелина (жирной оболочки, которая окружает и изолирует нервные волокна) в центральной нервной системе (ЦНС головного мозга, спинного мозга и зрительных нервов). РС приводит к истончению или полной потере миелина и, в зависимости от темпов прогрессирования заболевания, к урезанию (перерезке) удлиняющих сегментов или аксонов нервных клеток. При потере миелина нервные клетки не способны эффективно проводить электрические сигналы. Процесс восстановления, называемый ремиелинизацией, происходит на ранней стадии заболевания, однако полностью восстановить миелиновую оболочку клетки невозможно. При повторном заболевании эффективность ремиелинизации значительно понижается, что приводит к шрамоподобным образованиям в области поврежденных аксонов.
Кроме демиелинизации, другим патологическим признаком РС является воспаление. Согласно сугубо иммунологическому пояснению, воспалительный процесс вызывается Т-клетками, своего рода лимфоцитами. Лимфоциты - это клетки, которые играют важную роль в защите организма. При РС Тклетки проникают в мозг через гематоэнцефалический барьер. Считается, что Т-клетки распознают миелин как чужеродное тело и, противодействуя ему, вызывают воспалительный процесс, стимулирующий действие других клеток иммунной системы, включая растворимые факторы, такие как цитокины и антитела.
В дополнение к аутоиммунным заболеваниям, некоторые исследователи считают, что инфекция может как-то спровоцировать иммунную систему на атаку нервных клеток. В принципе, считается, что вирус (или бактерия), который вызывает первоначальное заражение, "выглядит" как нервная клетка. Иммунная система вырабатывает Т-клетки для борьбы с вирусом. Эти Т-клетки остаются в организме после устранения заражения, и, когда они "встречаются" с нервными клетками, ошибочно принимают их за возбудителей инфекции. В результате, ваша иммунная система атакует нервную систему.
Существуют четыре основных типа течения РС.
1. Ремитирующий рецидивирующий (РРРС): характеризуется рецидивами, в течение которых могут появиться новые симптомы, а старые возродиться или ухудшиться.
2. Вторично-прогрессирующий (ВПРС): характеризуется постепенным ухудшением заболевания между рецидивами.
3. Прогрессирующий РС с обострениями (ПРСО): эта форма РС следует за прогрессирующей формой с момента возникновения заболевания с развитием явных обострений.
4. Первично-прогрессирующий (ППРС): этот тип РС характеризуется постепенным прогрессированием заболевания с момента его начала, без периодов ремиссии.
На сегодняшний день не существует известного средства лечения РС. Тем не менее, существуют методы лечения, которые могут замедлить развитие болезни. Лечение заключается в контроле симптомов. Для лечения РС использовались медикаменты, которые изменяют иммунную систему, например интерфероны. Интерфероны - это белковые мессенджеры, которые вырабатывают клетки иммунной системы для взаимодействия друг с другом. Существуют различные типы интерферонов, такие как альфа, бета и гамма. Все интерфероны обладают способностью регулировать иммунную систему и играют важную роль в защите от возбудителей, включая вирусы. Каждый интерферон действует по-разному, но их функции пересекаются. Было установлено, что бета-интерфероны могут быть полезными в контроле рассеянного склероза.
Таким образом, потребность в новых лекарственных средствах, которые обладали бы желаемым терапевтическим эффектом, при лечении РС, все еще существует.
Терапевтическое действие сильно разбавленной (или сверхнизкой) формы антител, потенцированной гомеопатической технологией (активированная потенцированная форма) было открыто изобретателем по настоящему изобретению, доктором О.И. Эпштейном. Патент США № 7582294 на лекарственное средство для лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы или простатита путем введения активированной гомеопатической формы антител к простатоспецифическому антигену (ПСА).
Белок 8-100 - это цитоплазматический кислый кальций-связывающий белок, который встречается преимущественно в сером веществе головного мозга, в первую очередь в глии и шванновских клетках. Белок существует в нескольких гомо- или гетеродимерных изоформах, состоящий из двух альфа и бета
- 1 029436
иммуноопределяемых субъединиц. Белок 8-100, ранее, уже использовался в качестве вспомогательного средства диагностики и оценки степени поражения головного мозга и неврологических повреждений, являющихся следствием черепно-мозговой травмы, такой, например, как удар по голове. Ярдан (Уатбап) и соавт., "Полезность Белка 8100В в Лечении Неврологических Расстройств", Журнал Медицинской Ассоциации "Пак" (Рак), Том 61, № 3, март 2011 г., который указывается в настоящем изобретении в качестве ссылки.
Введение сверхмалых доз антител к белкам 8-100 имело успокаивающее, противоастеническое, противоагрессивное, стрессозащитное, противогипоксическое, противоишемическое, нейропротекторное и ноотропное действие. См. В. Кастанье (СаЛадпс V) и соавт., "Успокаивающее действие сверхмалых доз антител к белкам 8-100 у взрослых крыс", журнал Фармация. Фармакология 2008 г., 60 (3):309-16; А.И. Эпштейн, "Антитела к кальций-связывающему белку 8100В, блокирующие возникновение длительной повышенной чувствительности у наземных улиток", Фармакология. Биохимия. Изучение поведения, 2009 г., 94(1): 37-42; Т.А. Воронина и соавт., Глава 8. Действие антител к 8-100 белкам при тревожнодепрессивных расстройствах в экспериментальных и клинических условиях. "Животные модели в биологической психиатрии", под ред. А.В. Калефф (Ка1ие£Т Α.ν.), Нью-Йорк, компания "Нью Саэнс Паблишерс, Инк." (Νρ» 8с1епсе РиЬйзЬетв, 1пс.), 2006 г. с. 137-152. Данные материалы указываются в настоящем изобретении в качестве ссылки.
Было показано, что сверхмалые дозы антител к гамма-интерферону эффективны в лечении и профилактике заболеваний вирусного происхождения. См. патент США № 7572441, который указывается в данном документе в качестве ссылки.
Раскрытие изобретения
Согласно одному аспекту изобретение относится к комбинированной фармацевтической композиции, содержащей а) активированную потенцированную форму антитела к гамма-интерферону и Ь) активированную потенцированную форму антитела к белку 8100.
В одном варианте данное изобретение представляет собой комбинированную фармацевтическую композицию, содержащую а) активированную потенцированную форму антитела к гамма-интерферону и Ь) активированную потенцированную форму антитела к белку 8100, где антитело получено к цельной молекуле гамма-интерферона или ее фрагменту.
В одном варианте данное изобретение представляет собой комбинированную фармацевтическую композицию, содержащую а) активированную потенцированную форму антитела к гамма-интерферону и Ь) активированную потенцированную форму антитела к белку 8100, где антитело к белку 8100 получено к цельной молекуле белка 8100 или его фрагменту.
В одном варианте в состав заявляемой комбинированной фармацевтической композиции входит активированная потенцированная форма антитела к гамма-интерферону, которая представлена в виде смеси гомеопатических разведений (С12, С30 и С50) или (С12, С30 и С200), нанесенных на твердый носитель. Активированная потенцированная форма антитела к белку 8100 представлена в виде смеси гомеопатических разведений (С12, С30 и С50) или (С12, С30 и С200), которые, в дальнейшем, могут быть нанесены на твердый носитель.
В другом варианте в состав заявляемой комбинированной фармацевтической композиции входит активированная потенцированная форма антитела к белку 8100, которая представлена в виде смеси гомеопатических разведений (С12, С30 и С50) или (С12, С30 и С200), нанесенных на твердый носитель. Активированная потенцированная форма антитела к гамма-интерферону представлена в виде смеси гомеопатических разведений (С12, С30 и С50) или (С12, С30 и С200), которые, в дальнейшем, могут быть нанесены на твердый носитель.
Активированная потенцированная форма антитела к гамма-интерферону, преимущественно, является моноклональным, поликлональным или естественным антителом, предпочтительной является поликлональная форма антитела. В одном варианте данного аспекта изобретения активированная потенцированная форма антитела к гамма-интерферону готовится путем осуществления последовательных сотенных разведений в сочетании с встряхиванием каждого раствора.
Активированная потенцированная форма антитела к белку 8100, является моноклональным, поликлональным или естественным антителом, предпочтительной является поликлональная форма антитела. В одном варианте данного аспекта изобретения активированная потенцированная форма антитела к белку 8100 готовится путем осуществления последовательных сотенных разведений в сочетании с встряхиванием каждого раствора. А именно, встряхиванием в вертикальном положении.
Согласно другому аспекту изобретение относится к способу лечения пациентов, страдающих от рассеянного склероза. Указанный способ предусматривает введение комбинированной фармацевтической композиции, содержащей а) активированную потенцированную форму антитела к гаммаинтерферону и Ь) активированную потенцированную форму антитела к белку 8100. Как правило, данные формы антител вводятся в виде комбинированного лекарственного средства.
Согласно другому аспекту изобретение относится к способу лечения РС, который позволяет существенно задержать проявление симптомов данного заболевания у пациентов путем введения комбинированной фармацевтической композиции, содержащей а) активированную потенцированную форму анти- 2 029436
тела к гамма-интерферону и Ь) активированную потенцированную форму антитела к белку §100.
Согласно другому аспекту, данное изобретение относится к способу сокращения частоты рецидивов у пациентов, страдающих от рассеянного склероза, путем введения комбинированной фармацевтической композиции, содержащей а) активированную потенцированную форму антитела к гаммаинтерферону и Ь) активированную потенцированную форму антитела к белку §100.
В одном варианте изобретения предусмотрено введение от одной до двух лекарственных форм активированной потенцированной формы антитела к гамма-интерферону и от одной до двух лекарственных форм активированной потенцированной формы антитела к белку §100, каждая из которых вводится от одного до четырех раз в день. Как правило, от одной до двух лекарственных форм каждой активированной потенцированной формы антител вводится ежедневно два раза в день.
В предпочтительном варианте данного аспекта изобретения предусмотрено введение от одной до двух лекарственных форм комплексного препарата, состоящего из а) активированной потенцированной формы антитела к гамма-интерферону и Ь) активированной потенцированной формы антитела к белку §100, каждая из которых вводится от одного до четырех раз в день. Как правило, вводится от одной до двух лекарственных форм ежедневно два раза в день.
В другом варианте данного аспекта изобретения, который является предпочтительным, комбинированная фармацевтическая композиция вводится в объеме одной лекарственной формы, состоящей из а) активированной потенцированной формы антитела к гамма-интерферону и Ь) активированной потенцированной формы антитела к белку §100, как правило, два раза в день.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 иллюстрирует иммунный ответ в патогенезе рассеянного склероза.
Фиг. 2 иллюстрирует средний срок проявления клинических симптомов.
Фиг. 3 иллюстрирует тяжесть заболевания (точки).
Фиг. 4 иллюстрирует степень тяжести болезни на разных стадиях (токах).
Фиг. 5 иллюстрирует частоту появления рецидивов.
Варианты осуществления изобретения
Изобретение определено с учетом прилагаемых пунктов формулы. С учетом пунктов формулы был составлен нижеследующий терминологический список, включающий соответствующие определения.
Термин "антитело", в том значении, в котором он используется в этом патенте, означает иммуноглобулин, который специфически связывается с определенной пространственной и полярной организацией другой молекулы, и таким образом, определяется как комплементарный. Как указано в формуле изобретения, антитела могут включать в себя цельный иммуноглобулин или его фрагмент, могут быть естественными, поликлональными или моноклональными, и могут включать в себя различные классы и изотипы, такие как 1§Л, Ι§Ό, 1дЕ, 1дС1, 1дС2а, 1дС2Ь и 1дС3, 1дМ. Тогда как их фрагменты могут включать в себя РаЬ, Εν и Р(аЬ')2, РаЬ' и т.д. Форма единственного числа "антитело" означает также форму множественного числа этого слова - "антитела".
Термин "активированная потенцированная форма" или "потенцированные формы" соответственно, используется в настоящем изобретении в отношении антител и означает продукт гомеопатического потенцирования любого базового раствора антител. "Гомеопатическое потенцирование" означает использование метода гомеопатии для наделения соответствующей субстанции базового раствора терапевтическим действием гомеопатического препарата. "Гомеопатическое потенцирование" может включать в себя осуществление последовательно повторяющихся разведений, сопровождающихся внешними методами обработки, такими, например, как (механическое) встряхивание. Иными словами, согласно технологии изготовления гомеопатических препаратов, базовый раствор антитела подвергают осуществлению последовательных повторяющихся разведений и многократному вертикальному встряхиванию каждого полученного раствора. Желаемая концентрация базового раствора антител в растворителе, который, как правило, состоит из воды или смеси воды и этилового спирта, составляет примерно от 0,5 до 5,0 мг/мл. Процедура подготовки каждого компонента, т.е. раствора антитела, предусматривает использование смеси трех водных или водно-спиртовых разведений базового матричного раствора (матричной настойки) антител разведенных в 100 ,100 и 100 раз соответственно, что эквивалентно сотенным гомеопатическим разведениям (С12, С30 и С200) или трех водных или водно-спиртовых разведений базового матричного раствора антител, разведенных в 100 , 100 и 100 раз соответственно, что эквивалентно сотенным гомеопатическим разведениям (С12, С30 и С50). Примеры гомеопатического потенцирования описаны в патентах США № 7572441 и 7582294, которые в полной форме и с определенной этим документом целью указываются в этом изобретении в качестве ссылок. В то время как термин "активированная потенцированная форма" используется в формуле изобретения, термин "сверхмалые дозы (СМД)" используется в примерах. Термин "сверхмалые дозы" стал профессиональным термином в данной области в процессе исследования и использования гомеопатически разведенных и потенцированных форм вещества. Термин "сверхмалая доза" или "сверхмалые дозы" являются взаимозаменяемыми и, в первую очередь, являются синонимами термина "активированная потенцированная форма", используемого в формуле изобретения.
Иными словами, антитело считается представленным в "активированной потенцированной форме"
- 3 029436
или "потенцированной форме" при наличии трех факторов. Во-первых, "активированная потенцированная" форма антитела является продуктом процесса приготовления, принятого в сфере изготовления гомеопатических препаратов. Во-вторых, "активированная потенцированная" форма антитела должна иметь биологическую активность, определенную методами, принятыми в современной фармакологии. И, в-третьих, биологическая активность, продемонстрированная "активированной потенцированной формой антитела" не может быть обусловлена наличием молекулярной формы антител в конечном продукте гомеопатического процесса.
Например, активированную потенцированную форму антитела можно получить путем подвержения базовых, изолированных антител в молекулярной форме, ряду последовательных разведений в сочетании с внешними воздействием, таким, как механическое встряхивание. При уменьшении концентрации внешняя обработка может также сопровождаться такими процессами, как воздействие ультразвуковых, электромагнитных или других физических факторов. В. Швабе (V. 8ск\уаЪе) "Гомеопатические препараты", М., 1967 г., патенты США № 7229648 и № 4311897, которые в полной форме и с определенной настоящим изобретением целью, указываются в нем в качестве ссылок, описывают те процессы, которые являются приемлемыми методами гомеопатического потенцирования в области изготовления гомеопатических препаратов. Результатом этой процедуры является равномерное уменьшение концентрации молекул базовой молекулярной формы антител. Процедура повторяется до тех пор, пока не будет получена желаемая гомеопатическая потенция. Требуемая гомеопатическая потенция отдельных антител может быть определена путем биологического анализа на желаемой фармакологической модели. Являясь довольно многочисленными, способы "гомеопатического потенцирования" могут, к примеру, включать повторное последовательное разведение исходного вещества в сочетании с внешним воздействием, главным образом (механическим) встряхиванием. Другими словами, исходный раствор антител подвергается последовательному повторному разведению при множественном вертикальном встряхивании каждого полученного разведения, в соответствии с гомеопатической методикой. Оптимальная концентрация антител в растворителе (предпочтительно воде или смеси воды и этилового спирта) варьируется от 0,5 до 5,0 мг/мл. Для процедуры получения каждого последующего компонента (раствора антител) рекомендуется использовать смесь трех водных или водно-спиртовых разведений первичного (матричного) раствора (матричной настойки) антител с кратностью дилюции 100 , 100 и 100 соответственно, что эквивалентно сотенным гомеопатическим разведениям С12, С30 и С200, или смеси трех водных или водноспиртовых разведений исходного матричного раствора (матричной настойки) антител с кратностью ди12 30 50
люции 100 , 100 и 100 соответственно, что эквивалентно сотенным гомеопатическим разведениям С12, С30 и С50. Примеры получения желаемой потенции также приведены в патентах США № 7229648 и 4311897, которые в полной форме и с определенной настоящим изобретением целью, указываются здесь в качестве ссылок. Процедура, применяемая по отношению к "активированной потенцированной" форме антител и описываемая в настоящем изобретении, более подробно представлена далее.
Вопрос о применение гомеопатических средств в лечении человеческих заболеваний вызывает множество споров. Хотя настоящее изобретение основывается на широко применяемых в гомеопатии процессах получения активированной (потенцированной) формы антител, доказательство его активности не сводится к лишь гомеопатическим методам, применяемым по отношению к человеку. Автором заявленного изобретения было сделано любопытное открытие, в полной мере доказанное на распространенных фармакологических моделях и свидетельствующее о том, что растворитель, полученный в результате серии последовательных разведений антител в своей исходной молекулярной форме, обладает определенной активностью, которая не может быть отнесена к присутствию следов молекул исходной субстанции в целевом растворе. "Активированная (потенцированная) форма" антител, представленная в настоящем изобретении, протестирована на наличие биологической активности на широко применяемых фармакологических моделях для исследования активности, как в соответствующих экспериментах ίη νίΐτο, так и в ίη νΐνο испытаниях на животных. Результаты нижеописанных экспериментов, проведенных с использованных данных моделей, служат доказательством наличия заявленной биологической активности. Результаты клинических испытания на человеке, которые также приведены ниже, среди прочего, указывают на то, что активность, наблюдаемая в экспериментах на животных, может быть успешно перенесена на лечение человеческих заболеваний. Результаты клинических исследований также свидетельствуют о том, что "активированные-потенцированные формы", описываемые в настоящем изобретении также пригодны для лечения указанных выше заболеваний и расстройств, которые в медицинской практике относятся к патологическим состояниям человеческого организма.
Кроме того, заявленная "активированная потенцированная" форма антитела включает только те растворы или твердые лекарственные формы, биологическую активность которых нельзя объяснить наличием молекулярной формы антител, оставшихся от базового раствора. Иными словами, хотя и предполагается, что "активированная потенцированная" форма антител может содержать следы базовой молекулярной формы антитела, квалифицированный специалист в этой области, с любой долей вероятности, не может записать обнаруженную в фармакологических моделях биологическую активность на остатки молекулярной формы антител, поскольку концентрация молекулярной формы антител, которая остается после осуществления последовательных разведений, крайне низка. Поскольку изобретение не ограниче- 4 029436
но какой-либо конкретной теорией, биологическую активность "активированной потенцированной" формы антител по настоящему изобретению нельзя отнести на счет базовой молекулярной формы антитела. Предпочтительно, чтобы содержание молекул первичной субстанции (антител) в конечном продукте разведения, представленном жидкой или твердой "активированной (потенцированной)" формой антител, была ниже определяемого уровня основных применяемых методов анализа, таких как капиллярный электрофорез и высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Особое предпочтение отдается "активированной потенцированной форме антитела" в жидкой или твердой форме, в которых концентрация молекулярной формы антитела ниже числа Авогадро. В фармакологии молекулярных форм терапевтических веществ обычной практикой является создание кривой "доза-реакция", на которую наносятся данные, отражающие уровень фармакологической реакции в отношении к концентрации активного препарата, вводимого испытуемым или исследуемого ίη νίΐτο. Минимальный объем лекарственного препарата, проявляющий сколько-нибудь определяемую реакцию, называют "пороговой дозой". Особый акцент делается на то, что предпочтительная концентрация антител, сохранивших свою молекулярную форму, (если таковые присутствуют) в "активированной (потенцированной)" форме вещества должна быть ниже значения пороговой дозы молекул исходных антител для данной биологической модели. При описании конкретных лекарственных композиции в прилагаемых примерах применяется термин "сверхмалые дозы" (СМД), который не фигурирует в пунктах формулы изобретения.
В практике известны исследования моделей рассеянного склероза на животных. Например, экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит, иногда его называют экспериментальный аллергический энцефаломиелит (ЭАЭ) является животной моделью воспалительных демиелинизирующих заболеваний центральной нервной системы. Даная модель, в основном, применяется на грызунах и мышах с "выбитым" геном. Данная экспериментальная модель широко изучается как животная модель демиелинизирующего заболевания человеческой центральной нервной системы, а именно рассеянного склероза. У чувствительных животных ЭАЭ можно спровоцировать гомогенатом гомологичной или гетерологичной мозговой ткани, очищенным миелином или белками, которые используется в композиции для животных (Рейн (Каш) и соавт., журнал Нью-Йоркской Академии Наук "Хроники" ("АппаЛ"), 1984 г., 436: 33-51, МакКомб (МсСошЬе) и соавт., журнал по Нейроиммунологии 1994 г.; 51 (2): 153-167).
В настоящее время описано более 20 видов миелинового белка, которые обладают иммуногенными свойствами и наиболее часто используются для индукции ЭАЭ (Бауманн (Ваитапп) и соавт., "Физиологический обзор" (РЬу8ю1 Ксу.) 2001 г., 81 (2):871-927). Примерами указанных выше видов являются следующие: основной миелиновый белок ("ОМБ") (Хашим (НакЫт), "Иммунологический обзор" (1ттипо1. Ρην.), 1978 г., 39:60-107); протеолипидный белок ("ПЛБ") (Бредл (Вта41) и соавт., "Патологии Мозга", 1996 г., 6 (3): 303-311; Туохи (Тиойу), "Нейрохимические исследования", 1994 г., 19 (8): 935-944); гликопротеины: миелин-ассоциированный гликопротеин ("МАГ") (Веерт (\Уссг1Н) и соавт., 1999 г.); миелинолигодендроцитарный гликопротеин ("МОГ") и олигодендроцитарный специфический белок ("ОСБ") (Стивенс (δΐеνеη5) и соавт., журнал "Иммунология", 1999 г., 162 (12): 7501-7509). Было доказано, что не только целые белки, но и определенные их фрагменты, способных вызвать ЭАЭ при введении животным. У грызунов наиболее часто используемыми антигенами являются гомогенат спинного мозга (ГСМ), очищенный миелин, миелиновые белки, такие как ОМБ, ПЛБ и МОГ или их пептиды. В разных моделях все эти антигены проявляют различные признаки заболевания как в области иммунологии, так и в области патологии.
Наиболее адекватная модель РС, строится на моделях ЭАЭ путем введения гомогената спинного мозга (Гилерович и соавт., 2010 г.; Жаботинский, Иоффе, 1975 г.; Житнухин и соавт., 2008 г.; Синха (81пЪа) и соавт., 2009 г.). В этой модели, как и при начальной стадии заболевания, иммунная реакция происходит со всеми компонентами миелина: вызывается воспаление с последующей демиелинизацией, дегенерацией аксонов, а затем и самих нервных клеток (Гилерович и соавт., 2010 г.; Синха (81пЪа) и соавт., 2009 г.). Цепь патологических событий проявляется развитием полупаралича, паралича и других симптомов болезни.
Развитие ЭАЭ можно поделить на четыре этапа.
1. Сенсибилизация Т-лимфоцитов на периферии под влиянием мозгового антигена с полным адъювантом Фрейда и увеличением проницаемости ОЕВ.
2. Миграция активированных Т-клеток в ЦНС и активация антиген-представляющих клеток (астроцитов и микроглии) непосредственно в мозгу. Эти два этапа соответствуют латентному (индукционному) периоду, когда клинические симптомы заболевания не наблюдаются.
3. Развитие аутоиммунных и воспалительных реакций в головном мозге, что приводит к демиелинизации нервных волокон (клинический период).
4. Подавление патологических процессов и восстановление поврежденных тканей (фаза восстановления).
В течение этого периода у большинства животных сглаживаются неврологические и двигательные расстройства, и наступает частичное или полное выздоровление, после чего животные становятся устойчивыми к повторной индукции ЭАЭ. Средняя продолжительность ЭАЭ составляет 30 дней: латентная стадия, клиническая стадия и стадия восстановления. Продолжительность каждой стадии, как правило,
- 5 029436
составляет 7-10 дней.
Аналогичные фазы развития патологического процесса в центральной нервной системе наблюдаются также и с рассеянным склерозом. См. фиг. 1 - иммунный ответ в патогенезе рассеянного склероза (Виндел и Кизае (Ш1епб1 и К1е8е1е), 2003 г.).
Данное изобретение представляет собой комбинированную фармацевтическую композицию, содержащую а) активированную потенцированную форму антитела к гамма-интерферону и Ь) активированную потенцированную форму антитела к белку 8100. Как уже было сказано, каждый из компонентов указанной фармацевтической композиции индивидуально используется в медицинской практике. Тем не менее, автор настоящего изобретения неожиданно обнаружил, что использование комбинации, существенно задерживает проявление симптомов и сокращает возможность рецидивов у пациентов, страдающих рассеянным склерозом.
Как предполагается данным изобретением, представленный препарат может быть как в твердой, так и в жидкой форме. Каждая из активированных потенцированных форм антител, входящих в состав фармацевтической композиции, готовится на основе базовой молекулярной формы антитела с применением принятых в гомеопатической практике процедур. Базовыми антителами могут быть моноклональные или поликлональные антитела, полученные в результате известных и используемых процессов таких, например, как те, что описаны в Имунотехнологиях, Г. Фримель (С. Рпте1), М., "Медицина" (Мебйзупа), 1987 г. с. 9-33, "Человеческие антитела" "Моноклональные и гибридные антитела, 30 лет спустя". Э. Лаффли (Ьай1у Е.), Р. Содойер (8обоует К.) - 2005 г. - Том 14. - № 1-2, с. 33-55, упомянутых в настоящем документе в качестве ссылки.
Моноклональные антитела можно, например, получить с помощью технологии гибридомы (моноклонирования). Начальная стадия процесса включает иммунизацию, основанную на принципах, уже разработанных при изготовлении поликлональных антисывороток. На последующих этапах работы осуществляется продуцирование гибридных клеток, генерирующих клоны антител одинаковой структуры. Их индивидуальное выделение осуществляется с использованием тех же методов, что и в случае подготовки поликлональной сыворотки.
Поликлональные антитела можно получить с помощью активной иммунизации животных. С этой целью, пригодным для этого животным (например, кроликам) проводят серию инъекций соответствующего антигена: либо белка 8-100, либо гамма-интерферона. Иммунная система животных генерирует соответствующие антитела, которые собираются с животных всем известным способом. Эта процедура позволяет изготовить моноспецифическую сыворотку богатую на антитела.
По желанию, сыворотку, содержащую антитела можно очистить, например, с помощью аффинной хроматографии, фракционирования путем осаждения солей или ионно-обменной хроматографии. В результате, очищенная, обогащенная антителами сыворотка, может быть использована в качестве базового материала для изготовления активированной потенцированной формы антител. Желаемая концентрация базового раствора антител в растворителе, который, как правило, состоит из воды или смеси воды и этилового спирта, составляет примерно от 0,5 до 5,0 мг/мл.
Согласно данному изобретению, процедура подготовки каждого компонента комбинированной
фармацевтической композиции предусматривает использование смеси трех водных или водно-спиртовых
12 30 50
разведений базового матричного раствора антител разведенных в 100 , 100 и 100 , что эквивалентно гомеопатическим разведениям С12, С30 и С50 или в 100 , 100 и 100 раз соответственно, что эквивалентно гомеопатическим разведениям С12, С30 и С200. Для подготовки твердой лекарственной формы, твердый носитель обрабатывается необходимым разведением, полученным с помощью соответствующего гомеопатического процесса. Для получения единого блока лекарственного средства, состоящего из комбинации изобретения, массу носителя насыщают каждым отдельным разведением. Для подготовки желаемой комбинации лекарственного средства, подходят оба способа импрегнации.
По выбранной модификации базовым материалом, который используется для изготовления активированной потенцированной формы, в состав которой входит комбинация данного изобретения, являются поликлональные антитела, полученные из животных к соответствующему антигену, а именно гаммаинтерферону или белку 8100. Для получения активированной потенцированной формы поликлональных антител к гамма-интерферону необходимый антиген может быть введен в качестве иммуногена лабораторным животным, как правило кроликам. Поликлональные антитела к гамма-интерферону можно получить, используя целостную молекулу гамма-интерферона следующей последовательности:
- 6 029436
8Ες> № 1,
Мее Ьуз Туг ТЬг Зег Туг 11е Ьеи А1а РЬе С1п Ьеи Суз 11е Уа1
1 5 10 15
Ьеи С1у Зег Ьеи С1у Суз Туг Суз С1п Азр Рго Туг Уа1 Ьуз С1и
16 20 25 30
А1а С1и Азп Ьеи Ьуз Ьуз Туг РЬе Азп А1а С1у Нхз Зег Азр Уа1
31 35 40 45
А1а Азр Азп С1у ТЬг Ьеи РЬе Ьеи С1у Не Ьеи Ьуз Азп Тгр Ьуз
46 50 55 60
С1и б1и Зег Азр Агд Ьуз 11е Мее С1п Зег С1п 11е Уа1 Зег РЬе
61 65 70 75
Туг РЬе Ьуз Ьеи РЬе Ьуз Азп РЬе Ьуз Азр Азр С1п Зег 11е С1п
76 30 85 90
Ьуз Зег Уа1 С1и ТЬг Не Ьуз С1и Азр МеТ Азп Уа1 Ьуз РЬе РЬе
91 95 100 105
Азп Зег Азп Ьуз Ьуз Ьуз Агд АЗр Азр РЬе С1и Ьуз Ьеи ТЬг Азп
106 но 115 120
Туг Зег Уа1 ТЬг Азр Ьеи Азп Уа1 С1П Агд Ьуз А1а 11е Нхз С1и
121 125 130 135
Ьеи Не С1п Уа1 Мее А1а С1и Ьеи Зег Рго А1а А1а Ьуз ТЬг С1у
136 140 145 150
Ьуз Агд Ьуз Агд Зег <31п Мее Ьеи РЬе Агд С1у Агд Агд А1а Зег
151 155 160 165
С1п
166
Поликлональные антитела к гамма-интерферону можно получить, используя цельную молекулу гамма-интерферона следующей последовательности:
5Е<2 № 2.
Мее Ьуз Туг ТЬг Зег Туг Не Ьеи А1а РЬе С1п Ьеи Суз Не Уа1
1 5 10 15
Ьеи <31у Зег Ьеи С1у Суз Туг Суз С1п Азр Рго Туг Уа1 Ьуз С1и
16 20 25 30
А1а С1и Азп Ьеи Ьуз Ьуз Туг РЬе Азп А1а С1у Нхз Зег Азр Уа1
31 35 40 45
А1а Азр Азп С1у ТЬг Ьеи РЬе Ьеи С1у Не Ьеи Ьуз Азп Тгр Ьуз
46 50 55 60
С1и С1и Зег Азр Агд Ьуз 11е Мее С1п Зег С1п Не Уа1 Зег РЬе
61 65 70 75
Туг РЬе Ьуз Ьеи РЬе Ьуз Азп РЬе Ьуз Азр Азр С1п Зег Не С1п
76 80 85 90
Ьуз Зег Уа1 С1и ТЬг 11е Ьуз С1и Азр Мее Азп Уа1 Ьуз РЬе РЬе
91 95 100 105
Азп Зег Азп Ьуз Ьуз Ьуз Агд Азр Азр РЬе С1и Ьуз Ьеи ТЬг Азп
106 110 115 120
Туг Зег Уа1 ТЬг Азр Ьеи Азп Уа1 61п Агд Ьуз А1а Не Нхз С1и
121 125 130 135
Ьеи 11е С1п Уа1 Мее А1а С1и Ьеи Зег Рго А1а А1а Ьуз ТЬг С1у
136 140 145 150
Ьуз Агд Ьуз Агд Зег С1п Мее Ьеи РЬе ι С1п С1у Агд Агд А1а Зег
151 155 160 165
С1п
166
Также предполагается использование фрагмента гамма-интерферона в качестве антигена, выбранного из следующих последовательностей:
- 7 029436
8Е<3 № 3.
Не Ьеи А1а 7 РЬе С1п Ьеи Суз 11е Уа1
10 15
Ьеи С1у Зег Ьеи С1у Суз Туг Суз С1п А5р Рго Туг Уа1 Ьуз С1и
16 20 25 30
А1а С1и Азп Ьеи Ьуз Ьуз Туг РЬе Азп А1а С1у ΗΪ3 Зег Азр Уа1
31 35 40 45
А1а Азр Азп С1у ТЬг Ьеи РЬе Ьеи С1у Не
46 50 55
8Ε<2 № 4.
<31 п Азр Рго Туг Уа1 Ьуз С1и
24 30
А1а С1и Азп Ьеи Ьуз Ьуз Туг РЬе Азп А1а С1у ΗΪ3 Зег Азр Уа1
31 35 40 45
А1а Азр Азп С1у ТЬг Ьеи РЬе Ьеи С1у Не Ьеи Ьуз Азп Тгр Ьуз
46 50 55 60
С1и С1и Зег Азр Агд Ьуз 11е МеЬ С1п Зег С1п Не Уа1 Зег РЬе
61 65 70 75
Туг РЬе Ьуз Ьеи РЬе Ьуз Азп РЬе Ьуз Азр Азр С1п Зег 11е С1п
76 80 85 90
Ьуз Зег Уа1 С1и ты Не Ьуз б1и Азр Меь Азп Уа1 Ьуз РЬе РЬе
91 95 100 105
Азп Зег Азп Ьуз Ьуз Ьуз Агд Азр Азр РЬе С1и Ьуз Ьеи ТЬг Азп
106 110 115 120
Туг Зег Уа1 ТЬг Азр Ьеи Азп Уа1 С1п Агд Ьуз А1а Не ΗΪ3 б1и
121 125 130 135
Ьеи 11е С1п Уа1 МеЬ А1а С1и Ьеи Зег Рго А1а А1а Ьуз ТЬг С1у
136 140 145 150
Ьуз Агд Ьуз Агд Зег С1п МеЬ Ьеи РЬе Агд С1у Агд Агд А1а Зег
151 155 160 165
С1п
166
8Ε<2 № 5.
С1п Азр Рго Туг Уа1 Ьуз С1и
24 30
А1а С1и Азп Ьеи Ьуз Ьуз Туг РЬе Азп А1а С1у ΗΪ3 Зег Азр Уа1
31 35 40 45
А1а Азр Азп С1у ТЬг Ьеи РЬе Ьеи С1у Не Ьеи Ьуз Азп Тгр Ьуз
46 50 55 60
С1и С1и Зег Азр Агд Ьуз Не МеЬ С1п Зег С1п Не Уа1 Зег РЬе
61 65 70 75
Туг РЬе Ьуз Ьеи РЬе Ьуз Азп РЬе Ьуз Азр Азр С1п Зег Х1е <31п
76 80 85 90
Ьуз Зег Уа1 С1и ТЬг Х1е Ьуз С1и Азр МеЬ Азп Уа1 Ьуз РЬе РЬе
91 95 100 105
Азп Зег Азп Ьуз Ьуз Ьуз Агд Азр Азр РЬе С1и Ьуз Ьеи ТЬг Азп
106 110 115 120
Туг Зег Уа1 ТЬг Азр Ьеи Азп Уа1 С1п Агд Ьуз А1а Не ΗΪ5 С1и
121 125 130 135
- 8 029436
Ьеи 11е С1п Уа1 МеЬ А1а С1и Ьеи Зег Рго А1а А1а Ьуз ТЬг С1у
136 140 145 150
ЬуЗ Агд Ьуз Агд Зег С1п МеЬ Ьеи РЬе С1п С1у Агд Агд А1а Зег
151 155 160 165
Οίη
166
8ЕЦ № 6. 01 п Не Уа1 Зег РЬе 75
61п 69 Зег
Туг РЬе Ьуз Ьеи РЬе Ьуз Азп РНе Ьуз Азр Азр С1п Зег 11е 61п
76 80 85 90
Ьуз Зег Уа1 С1и ТЬг Не Ьуз 61и Азр МеЬ Азп Уа1 Ьуз РЬе РЬе
91 95 100 105
Азп Зег Азп Ьуз Ьуз Ьуз Агд Азр Азр РЬе С1и Ьуз Ьеи ТЬг Азп
106 110 115 120
Туг Зег Уа1
121 123
8ЕЦ № 7. Мен Азп Уа1 Ьуз РЬе РЬе
Азп Зег Азп Ьуз Ьуз Ьуз Агд Азр Азр 100 РЬе С1и Ьуз Ьеи ТЬг 105 Азп
106 Туг Зег Уа1 ТЬг 110 Азр Ьеи Азп Уа1 С1п 115 Агд Ьуз А1а 11е ΗΪ8 120 С1 и
121 Ьеи 11е С1п νβΐ 125 МеЬ А1а С1и Ьеи Зег 130 Рго 135
136 140 145
- 9 029436
8ЕЦ № 8.
Зег Уа1 С1и ТЬг 11е Ьуз С1и Азр Ме! Азп Уа1 Ьуз РЬе РЬе
92 95 100 105
Азп Зег Азп Ьуз Ьуз Ьуз Агд Азр Азр РЬе С1и Ьуз Ьеи ТЬг Азп
106 но 115 120
Туг Зег Уа1 ТЬг Азр Ьеи Азп Уа1 С1п Агд
121 125 130
8ЕЦ № 9,
Уа1 ТЬг Азр Ьеи Азп Уа1 С1п Агд Ьуэ А1а Не Нхз 61и
123 125 130 135
Ьеи 11е С1п Уа1 Ме! А1а С1и Ьеи Зег Рго А1а А1а
136 140 145 147
8ЕЦ № 10.
Зег Туг Не Ьеи А1а РЬе С1п Ьеи Суз 11е \7а1
5 10
15
Ьеи С1у Зег Ьеи О1у Суз Туг Суз С1п Азр Рго Туг Уа1 Ьуз С1и
16 20 25 30
А1а С1и Азп Ьеи Ьуз Ьуз Туг РЬе Азп А1а С1у Нхз Зег Азр Уа1
31 35 40 45
8ЕЦ№11
С1и 94 ТЬг 11е Ьуз С1и Азр Ме! Азп Уа1 Ьуз РЬе РЬе 100
105
Азп Зег Азп Ьуз Ьуз Ьуз Агд Азр Азр 44
106 но 114
Поликлональные антитела к гамма-интерферону можно получить путем использования молекулы рекомбинантного гамма-интерферона одной из следующих последовательностей:
8ЕЦ № 12.
Ме! С1п Азр Рго Туг Уа1 Ьуз С1и
24 30
А1а С1и Азп Ьеи Ьуз Ьуз Туг РЬе АЗП А1а С1у Нхз Зег Азр Уа1
31 35 40 45
А1а Азр Азп С1у ТЬг Ьеи РЬе Ьеи С1у Не Ьеи Ьуз Азп Тгр Ьуз
46 50 55 60
С1и С1и Зег Азр Агд Ьуз 11е Ме! С1п Зег С1п 11е Уа1 Зег РЬе
61 65 70 75
Туг РЬе Ьуз Ьеи РЬе Ьуз Азп РЬе Ьуз Азр Азр С1п Зег 11е С1п
76 80 85 90
Ьуз Зег Уа1 С1и ТЬг Не Ьуз б1и Азр Ме! Азп Уа1 Ьуз РЬе РЬе
91 95 100 105
АЗП Зег Азп Ьуз Ьуз Ьуз Агд Азр Азр РЬе С1и Ьуз Ьеи ТЬг Азп
106 но 115 120
Туг Зег Уа1 ТЬг Азр Ьеи Азп Уа1 С1п Агд Ьуз А1а Не Шз С1и
121 125 130 135
Ьеи 11е С1п ναΐ Ме! А1а С1и Ьеи Зег Рго А1а А1а Ьуз ТЬг С1у
136 140 145 150
Ьуз Агд Ьуз Агд Зег С1п Ме! Ьеи РЬе С1п С1у Агд Агд А1а Зег
151 155 160 165
С1п
166
- 10 029436
8Е<2 № 13.
МеЕ 61п Азр Рго Туг Уа1 Ьуз С1и
24 30
А1а 61и Азп Ьеи Ьуз Ьуз Туг РЬе Азп А1а 61у ΗΪ3 Зег Азр Уа1
31 35 40 45
А1а Азр Азп С1у ТЬг Ьеи РЬе Ьеи С1у Не Ьеи Ьуз Азп Тгр Ьуз
46 50 55 60
61и О1и Зег Азр Агд Ьуз Не МеЕ 61п Зег 61 п Не Уа1 Зег РЬе
61 65 70 75
Туг РЬе Ьуз Ьеи РЬе Ьуз Азп РЬе Ьуз Азр Азр 61п Зег Не 61п
76 80 85 90
Ьуз Зег Уа1 С1и ТЬг Не Ьуз С1и Азр МеЕ Азп Уа1 Ьуз РЬе РЬе
91 95 100 105
Азп Зег Азп Ьуз Ьуз Ьуз Агд Азр Азр РЬе 61 и Ьуз Ьеи ТЬг Азп
106 110 115 120
Туг Зег Уа1 ТЬг Азр Ьеи Азп Уа1 61п Агд Ьуз А1а Не ΗΪ3 С1и
121 125 130 135
Ьеи Не 61η Уа1 МеЕ А1а 61и Ьеи Зег Рго А1а А1а Ьуз ТЬг б1у
136 140 145 150
Ьуз Агд Ьуз Агд Зег 61п МеЕ Ьеи РЬе Агд 61 у Агд Агд А1а Зег
151 155 160 165
61η
166
Примером процедуры подготовки базовых поликлональных антител к человеческому гаммаинтерферону может служить процедура, описанная далее. За 7-9 дней до забора крови кроликам проводят от 1 до 3-х инъекций нужного антигена, чтобы увеличить уровень поликлональных антител в системе кровообращения. При иммунизации берутся образцы крови для проверки уровня антител. Как правило, максимальный уровень иммунной реакции растворимого антигена достигается в течение 40-60 дней после первой инъекции антигена. По окончании первого цикла иммунизации у кроликов начинается 30дневный реабилитационный период, после которого проводится повторная иммунизация еще 1-3 внутривенными инъекциями.
Для получения антисыворотки, содержащей нужные антитела, кровь иммунизированных кроликов собирают и помещают в 50 мл центрифужные пробирки. Сгустки продукта, которые образуются на стенках пробирок, удаляются деревянным шпателем, а по центру пробирки помещают стержень. Затем, кровь на одну ночь помещают в холодильную камеру при температуре около 40°С. На следующий день сгусток на шпателе удаляют, а оставшуюся жидкость центрифугируют в течение 10 мин при 13000 об/мин. Надосадочная жидкость является целевой антисывороткой. Полученная антисыворотка, как правило, желтого цвета. 20% ΝαΝ3 (весовая концентрация) добавляется к антисыворотке до конечной концентрации 0,02% и до использования хранится в замороженном состоянии при температуре -20°С или без ΝαΝ3 - при температуре -70°С. Для сепарации целевых антител к гамма-интерферону из антисыворотки используется следующая последовательность твердофазной абсорбции:
10 мл антисыворотки кроликов дважды разбавляют 0,15 М ИаС1, после чего добавляют 6,26 г Иа28О4, перемешивают и выдерживают в течение 12-16 ч при температуре 4°С. Осадок удаляют центрифугированием, разводят в 10 мл фосфатного буферного раствора и диализируют в том же растворе в течение ночи при комнатной температуре. После удаления осадка раствор наносится на колонку ДЭАЭцеллюлозы, уравновешенную фосфатным буферным раствором. Фракция антитела определяется путем измерения оптической плотности элюата при 280 нм.
Выделенные неочищенные антитела очищают с помощью аффинной хроматографии, добавляя полученные антитела к гамма-интерферону, который находится в нерастворимой матрице хроматографического носителя, с последующим высвобождением концентрированными водными растворами солей.
Полученный в результате буферный раствор используется в качестве стартового раствора для процесса гомеопатических разведений, который используется для подготовки активированныхпотенцированных форм антител. Подавляющая концентрация стартового матричного раствора антигеночищенных поликлональных антител кролика к гамма-интерферону составляет 0,5-5,0 мг/мл, предпочтительно 2,0-3,0 мг/мл.
Мозгоспецифический белок 8100, экспрессируется нейронами и глиальными клетками (астроцитами и олигодендроцитами) непосредственно или через взаимодействие с другими белками, и выполняет в ЦНС ряд функций, направленных на поддержание нормального функционирования мозга, в частности это касается процессов обучения и запоминания, роста и жизнеспособности нейронов, регуляции метаболических нейронных процессов в тканях и т.д. Для получения активированной потенцированной формы антител, антисыворотка мозгоспецифического белка 8-100 выделяется из мозговой ткани быка и об- 11 029436
рабатывается по следующей методике:
с помощью специальных измельчителей мозговая ткань быка, замороженная в жидком азоте, превращается в порошок;
белки выделяются в соотношении 1:3 (вес./об.) с использованием буфера для извлечения с гомогенизацией;
гомогенат нагревают в течение 10 мин при температуре 60°С, а затем охлаждают до 4°С в ледяной
бане;
неустойчивые к тепловому воздействию (термолабильные) белки удаляются с помощью центрифугирования;
фракционирование сульфатом аммония осуществляется в несколько этапов с последующим удалением осадочных белков;
фракция, которая содержит белок 8-100, осаждается с использованием 100% насыщенного сульфата аммония, что осуществляется снижением рН до отметки 4,0; нужные фракции собираются центрифугированием;
осадок растворяют в минимальном количестве буферного раствора, содержащего ЭДТА и меркаптоэтанол, диализируют деионизированной водой и лиофилизируют;
после фракционирования кислых белков происходит хроматография на ионообменных носителях ДЭАЭ-целлюлозы ΌΕ-52, а затем ДЭАЭ-сефадексе А-50;
собранные и диализированные фракции, содержащие белок 8-100, делятся по молекулярной массе путем гель-фильтрации на сефадексе 0-100;
очищенный белок 8-100 диализируют и лиофилизируют.
Молекулярная масса мозгоспецифического очищенного белка 8-100 составляет 21000 Да.
Поликлональные антитела к белку 8-100 можно получить методом, аналогичным тому, что описывается для получения антител к гамма-интерферону, используя адъюванты. Вся молекула белка 8-100 может быть использована в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов:
- 12 029436
8ЕЦ № 14 - Бычий белок 8100В
МеЬ Зег С1и Ьеи С1и Ьуз А1а Уа1 Уа1 А1а Ьеи 11е Азр Уа1 РЬе
1 5 10 15
ΗΪ3 С1п Туг Зег С1у Агд С1и С1у Азр Ьуз ΗΪ3 Ьуз Ьеи Ьуз Ьуз
16 20 25 30
Зег С1и Ьеи Ьуз С1и Ьеи 11е Азп Азп С1и Ьеи Зег ΗΪ5 РЬе Ьеи
31 35 40 45
С1и С1и Не Ьуз С1и С1п С1и Уа1 Уа1 Азр Ьуз Уа1 МеЬ С1и ТЬг
46 50 55 60
Ьеи Азр Зег Азр С1у Азр С1у 61и Суз Азр РЬе С1п С1и РЬе МеЬ
61 65 70 75
А1а РЬе Уа1 А1а МеЬ 11е ТЬг ТЬг А1а Суз ΗΪ3 С1и РЬе РЬе С1и
76 80 85 90
Нгз С1и
91 92
8ЕО № 15 Человеческий бело» :8100В
МеЬ Зег С1и Ьеи С1и Ьуз А1а МеЬ Уа1 А1а Ьеи 11е Азр Уа1 РЬе
1 5 10 15
Нгз С1п Туг Зег С1у Агд С1и С1у Азр Ьуз Нхз Ьуз Ьеи Ьуз Ьуз
16 20 25 ' 30
Зег С1и Ьеи Ьуз С1и Ьеи 11е Азп Азп С1и Ьеи Зег Нгз РЬе Ьеи
31 35 40 45
С1и С1и 11е Ьуз С1и С1п С1и Уа1 Уа1 Азр Ьуз Уа1 МеЬ С1и ТЬг
46 50 55 60
Ьеи Азр Азп Азр С1у Азр С1у С1и Суз Азр РЬе С1п О1и РЬе МеЬ
61 65 70 75
А1а РЬе Уа1 А1а МеЬ Уа1 ТЬг ТЬг А1а Суз Нгз С1и РЬе РЬе С1и
76 80 85 90
Ηίδ С1и
91 92
8Е<2 № 16 - • Человеческий белок 8100А1
МеЬ С1у Зег С1и Ьеи С1и ТЬг А1а МеЬ 61и ТЬг Ьеи 11е Азп Уа1
1 5 10 15
РЬе Нгз А1а Нгз Зег С1у Ьуз С1и С1у Азр Ьуз Туг Ьуз Ьеи Зег
16 20 25 30
Ьуз Ьуз С1и Ьеи Ьуз С1и Ьеи Ьеи С1п ТЬг С1и Ьеи Зег С1у РЬе
31 35 40 45
Ьеи Азр А1а С1п Ьуз Азр νβΐ Азр А1а Уа1 Азр Ьуз Уа1 МеЬ Ьуз
46 50 55 60
С1и Ьеи Азр С1и Абп С1у Азр С1у С1и \7а1 Азр РЬе С1п С1и Туг
61 65 70 75
Уа1 Уа1 Ьеи Уа1 А1а А1а Ьеи ТЬг Уа1 А1а Суз Азп Азп РЬе РЬе 76 80 85 90
Тгр С1и Азп Зег 91 94
8Е<2 № 17 - Бычий белок 8100А1
МеЬ С1у Зег С1и Ьеи С1и ТЬг А1а МеЬ 61и ТЬг Ьеи 11е АЗП Уа1
1 5 10 15
РЬе Нгз А1а Нгз Зег С1у Ьуз С1и С1у Азр Ьуз Туг Ьуз Ьеи Зег
16 20 25 30
Ьуз Ьуз 61и Ьеи Ьуз 61и Ьеи Ьеи С1п ТЬг 61и Ьеи Зег С1у РЬе
31 35 40 45
Ьеи Азр А1а С1п Ьуз Азр А1а Азр А1а Уа1 Азр Ьуз Уа1 МеЬ Ьуз
46 50 55 60
С1и Ьеи Азр С1и Азп С1у Азр С1у С1и Уа1 Азр РЬе С1п С1и Туг
61 65 70 75
Уа1 Уа1 Ьеи Уа1 А1а А1а Ьеи ТЬг Уа1 А1а Суз Азп АЗП РЬе РЬе
76 80 85 90
Тгр С1и Азп 5ег
91 94
Для получения антисыворотки готовят мозгоспецифический белок 8-100 или смесь очищенного белка 8-100 (антигенов) в комплексе с метилированным сывороточным альбумином быка в качестве теплоносителя с полным адъювантом Фрейда, который вводится подкожно лабораторным животным - кроликам, в область спинного мозга в количестве 1-2 мл. Полученный титр антисыворотки составляет 1:500- 13 029436
1:1000.
Активированную потенцированную форму каждого компонента комбинации можно получить путем гомеопатического потенцирования используя базовый раствор. Как правило, применяется метод пропорционального последовательного понижения концентрации, который предусматривает серийное разведение 1 части каждого предыдущего раствора (начиная с базового) в 9 частях (для десятичного разведения), или в 99 частях (для сотенного разведения), или в 999 частях (для тысячных разведений) нейтрального растворителя, начиная с концентрации базового раствора антител в растворителе, преимущественно, водной или водно-спиртовой смеси, в объеме от 0,5 до примерно 5,0 мг/мл, в сочетании с внешним воздействием. Как правило, под внешним воздействием понимают многократное вертикальное встряхивание (динамизацию) каждого разведения. Для каждого последующего разведения до момента достижения необходимого уровня активности или фактора разведения, используются отдельные емкости. Этот метод является общепринятым в гомеопатической практике. Например, смотрите, материал В. Швабе (V. 8сН\уаЬс) "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967, с. 14-29, который указывается в настоящем изобретении в качестве ссылки.
Например, для приготовления 12-сотенного разведения (обозначается С12), одну часть базового матричного раствора антител к гамма-интерферону концентрацией 3,0 мг/мл разбавляют в 99 частях нейтрального водного или водно-спиртового раствора (преимущественно, 15% этилового спирта), а затем многократно (10 и более раз) встряхивают в вертикальном положении, чтобы создать первое сотенное разведение (обозначается как С1). Второе сотенное разведение (С2) получают из 1-го сотенного разведения С1. Для подготовки 12-го сотенного разведения (С12) эта процедура повторяется 11 раз. Таким образом, 12-е сотенное разведение (С12) - это раствор, полученный в результате 12 серийных разведений одной части базового матричного раствора антител к гамма-интерферону концентрацией 3,0 мг/мл в 99 частях нейтрального растворителя в различных емкостях, эквивалентного сотенному гомеопатическому разведению С12. Аналогичные процедуры с соответствующим коэффициентом разведения проводятся для получения разведений С30, С50 и С200. Для проверки активности промежуточные разведения можно проверить, используя любую подходящую биологическую модель. Предпочтительными активированными-потенцированными формами для антител, входящих в состав комбинации изобретения, являются смеси разведений С12, С30 и С50 или смеси разведений С12, С30 и С200. При использовании смеси различных гомеопатических разведений (в основном сотенных) активного вещества в качестве биологически активных жидких компонентов, каждый компонент фармацевтической композиции (например, С12, С30, С50, С200) готовится отдельно в соответствии с вышеупомянутой процедурой до момента получения, от следующего до последнего разведения (например, до момента получения С11, С29, и С199 соответственно), а затем, по одной части каждого компонента, добавляют в одну емкость, соблюдая состав смеси, и смешивают с необходимым количеством растворителя (например, с 97 частями для сотенного разведения).
Также допускается использование активного вещества в форме смеси других разведений, приготовленных по гомеопатической технологии, например, десятичных и/или сотенных (Ό20. С30, С100 или С12, С30, С50 или С12, С30, С200 и т.д.). Эффективность использования данных растворов проверяется экспериментальным методом путем тестирования раствора на подходящей биологической модели, например, в моделях, описанных в разделе "Примеры" данной заявки.
При снижении концентрации и потенцировании, вертикальное встряхивание может быть заменено внешним воздействием ультразвука, электромагнитных полей или любого аналогичного внешнего фактора, применяемого в гомеопатической практике.
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть как в жидкой, так и в твердой форме. Жидкая форма фармацевтической композиции содержит смесь из двух антител, преимущественно, в соотношении 1:1 активированной потенцированной формы антител к гамма-интерферону и активированной потенцированной формы антител к белку 8-100. Предпочтительным жидким носителем является вода или водно-спиртовая смесь.
Твердая форма фармацевтической композиции по настоящему изобретению может быть получена путем насыщения твердой формы смесью активированной потенцированной формы водного или водноспиртового раствора активных компонентов, которые смешаны в соотношении 1:1. Как альтернатива, носитель может быть последовательно насыщен каждым необходимым разведением. Оба способа насыщения являются приемлемыми.
Как правило, фармацевтическая композиция в твердой форме готовится из гранул фармацевтически приемлемого носителя, который предварительно был насыщен водным или водно-спиртовым разведением активированной потенцированной формы антител к гамма-интерферону или активированной потенцированной формы антител к белку 8-100. Твердая лекарственная форма может быть в любой форме известной в фармацевтической отрасли, а именно, в форме таблеток, капсул, пастилок и т.д. В качестве неактивных фармацевтических ингредиентов можно использовать глюкозу, сахарозу, мальтозу, крахмал, изомальтозу, изомальт и другие моно-, олиго- и полисахариды, используемые при производстве фармацевтических препаратов, а также технологические смеси, указанных выше неактивных фармацевтических ингредиентов с другими фармацевтически приемлемыми наполнителями, такими, например, как
- 14 029436
изомальт, кросповидон, цикламат натрия, сахарин, безводная лимонная кислота и т.д., в том числе смазочные материалы, разрыхлители, связующие вещества и красители. Предпочтительными носителями являются лактоза и изомальт. В состав фармацевтической лекарственной формы могут дополнительно входить стандартные фармацевтические наполнители такие, например, как микрокристаллическая целлюлоза и стеарат магния.
Для подготовки твердой формы для перорального применения 100-300 мкм гранулы лактозы насыщают водными или водно-спиртовыми растворами активированной потенцированной формы антител к гистамину, активированной потенцированной формы антител к гамма-интерферону и активированной потенцированной формы к белку 8-100 в соотношении 1 кг раствора антител на 5 или 10 кг лактозы (от 1:5 до 1:10). Для нанесения гранулы лактозы подвергают насыщению орошением в псевдоожиженном кипящем слое на специальной установке (например, "Ηϋΐΐΐίη РбобаЪ", производства компании Ηϋΐΐΐίη СтЬН) с последующей сушкой с помощью нагретого потока воздуха при температуре ниже 40°С. Расчитанное количество высушенных гранул (от 10 до 34 весовых частей), насыщенных активированной потенцированной формой антител, помещают в смеситель и смешивают с 25-45 вес.ч. "ненасыщенной" чистой лактозы (используется в целях сокращения расходов, упрощения и ускорения технологического процесса без снижения эффективности лечения), вместе с 0,1-1 вес.ч. стеарат магния, и от 3 до 10 вес.ч. микрокристаллической целлюлозы. Полученную таблетированную массу равномерно смешивают и таблетируют методом прямого полусухого прессования (например, прессом для таблетирования Корша - ХЬ 400), чтобы сформировать от 150 до 500 мг таблетки круглой формы, предпочтительно массой 300 мг. После таблетирования получают 300 мг таблетки, насыщенные водно-спиртовым раствором (3,0-6,0 мг/таблетка) активированной потенцированной формы антител к гамма-интерферону и активированной потенцированной формой антител к белку 8100. Каждый компонент комбинации, который используется для импрегнирования носителя, представлен в форме смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30 и С50 или в форме смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30 и С200.
Так как данное изобретение не ограничивается какой-либо теорией, предполагается, что активированная потенцированная форма антител по настоящей заявке не содержит молекулярную форму антител в объеме, достаточном для проявления биологической активности, присущей такой молекулярной форме. Биологическая активность комбинированной фармацевтической композиции по настоящему изобретению наглядно демонстрируется в приведенных в настоящем изобретении примерах.
Данное изобретение также включает способ, который позволяет существенно задержать проявление симптомов рассеянного склероза. Данный способ предусматривает введение комбинированной фармацевтической композиции, содержащей а) активированную потенцированную форму антитела к гаммаинтерферону и Ъ) активированную потенцированную форму антитела к белку 8100.
Данное изобретение также включает способ сокращения частоты рецидивов у пациентов, страдающих от рассеянного склероза, путем введения комбинированной фармацевтической композиции, содержащей а) активированную потенцированную форму антитела к гамма-интерферону и Ъ) активированную потенцированную форму антитела к белку 8100.
Как правило, в терапевтических целях, комплексный препарат, представленный данным изобретением, вводят от одного до двух раз в день, как правило, два раза в день, где каждое введение включает одну или две лекарственные формы комплексного препарата.
Далее изобретение иллюстрируется примерами, не ограничивающими изобретение по настоящей заявке.
Примеры
Пример 1.
В этом исследовании были использованы крысы-самки линии Уистар (200-220 г). Крысам индуцировали ЭАЭ посредствам прививки энцефалитогенной смеси, состоящей из 100 мГн гомогената гомологичного спинного мозга, 0,2 мл ПАФ (содержание: ослабленные микобактерии в объеме 5 мг/мл) и 0,2 мл физиологического раствора на одно животное. ЭГС вводили подкожно (у основания хвоста вдоль хвостовой вены) под легкой анестезией эфиром в объеме 0,4 мл (0,2 мл справа и слева) (И.Н. Абдурасулова и соавт., 2004 г.; Я.Л. Житнухин и соавт., 2008 г.; Н.Б. Серебряная и соавт., 2010 г.). Затем, начиная с момента прививания ЭАЭ, крысам, в течение 30 дней, 2 раза в день, с 7-часовым интервалом, внутрижелудочно вводили следующие препараты: (а) Сверхмалые дозы антител к белку 8-100 белков (далее по тексту, "СМД анти-8-100") (η=10, 2,5 мл/кг/день); (Ъ) Сверхмалые дозы антител к гамма-интерферону (далее по тексту, "СМД анти-у-ИФН") (η=10, 2,5 мл/кг/день); (с) комплексный препарат СМД анти-8-100 и СМД анти-у-ИФН (далее по тексту "комплексный препарат") (η= 10, 5 мл/кг/день) и (б) дистиллированную воду (контрольная группа; η=10,5 мл/кг/день). В качестве эталонного препарата использовался иммуномодулятор Сорахонс® (производства компании Теуа, Израиль), который вводили внутримышечно в дозе 4 мг/кг, со 2-го по 25-й день после индукции ЭАЭ. Результаты показаны на фиг. 2-5.
Клинические симптомы экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (ЭАЭ) оценивались в течение 30 дней, начиная со дня его индукции. Обследование каждой крысы проводилось непосредственно перед введением исследуемых препаратов. В случае быстрого прогрессирования болезни клиниче- 15 029436
ские симптомы оценивались два раза в день.
Тяжесть неврологических нарушений оценивали в баллах: наличие мышечной слабости, тремора (0,5 балов); устойчивого полупаралича (1 балл); паралича (1,5 балла). Клинический Индекс (КИ) рассчитывался как сумма симптомов, проявившихся на 4 конечностях. Кроме того, КИ был обозначен как 0, если видимых клинических признаков неврологических нарушений не было, и как 6 в случае гибели животных. Максимальное значение КИ учитывалось за все дни проведенных наблюдений. Совокупный индекс для каждой крысы рассчитывался как сумма отдельных КИ за весь контролируемый период болезни (30 дней). 30-дневный период болезни был разделен на следующие фазы: латентную фазу (1-10 дней); фаза клинических проявлений (11-18 дней), и фаза выздоровления (19-30 дней).
Для оценки эффективности исследуемых препаратов, используемых для лечения ЭАЭ, в каждой исследуемой группе были оценены следующие параметры: 1) время начала заболевания (дни); 2) изменение средней тяжести заболевания с течением времени (КИ, критические точки), 3) средняя тяжесть заболевания на различных этапах (КИ, критические точки); 4) общее число рецидивов, повторение симптомов заболевания (%).
Введение СМД анти-§-100 значительно затормозило проявления клинических симптомов заболевания, как в сравнении с отрицательным контролем (р<0,05), так и в сравнении с Сорахопе (р>0,05). Картина начала заболевания в двух группах, которые получали СМД анти-у-ИФН и в группе, которая получала Сорахопе, не отличалась от контрольной группы (фиг. 2). В то же время у животных, которым был введен комплексный препарат, наблюдалась тенденция к сокращению срока появления клинических симптомов рассеянного склероза по сравнению с контролем. Следует отметить, что статистически значимые различия были выявлены в период начала развития заболевания между группой, получавшей СМД анти-§-100 и группой, получавшей комплексный препарат.
Доля животных с тяжелым течением заболевания (>3 очка) также была ниже в группе, получавшей СМД анти-§-100. В группах, которые получали комплексный препарат, процент животных с тяжелым течением болезни был выше, чем в других исследуемых группах за все периоды болезни (фиг. 3).
В связи с тем, что на различных этапах развития рассеянного склероза активировались разные механизмы патогенеза ЭАЭ, был проведен анализ воздействия препаратов на тяжесть заболевания в латентный период, в период развития клинических симптомов и в период выздоровления. Введение СМД анти-§-100 способствовало значительному снижению средних показателей проявления клинических симптомов заболевания в стадии клинических проявлений и в стадии выздоровления, в то время как Сорахопе и СМД анти-у-ИФН существенно облегчали тяжесть клинических симптомов только в последней фазе. Комплексный препарат, по сравнению с контрольной группой и группами, получавшими только СМД анти-у-ИФН или только СМД анти-§-100 со статистической точки зрения значительно увеличил средние показатели поражения животных на стадии проявлении клинических симптомов и на стадии выздоровления (фиг. 4).
Следует отметить, что у определенной части животных, после полного исчезновения клинических симптомов заболевания, было отмечено некое подобие рецидива, то есть, повторное проявление клинических симптомов ЭАЭ. В группе СМД анти-§-100, несмотря на его благоприятное воздействие на клиническое течение ЭАЭ (поздний период начала заболевания, меньшая тяжесть проявления клинических признаков), было отмечено наибольшее количество животных (25%) с рецидивами. В то же время, в группе, получавшей комплексный препарат, которая характеризуется ранним началом заболевания и большим проявлением патологического процесса, ни одно из животных не показало развития рецидивов (фиг. 5).
Выводы.
В модели экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (ЭАЭ), СМД анти-§-100 оказывали положительное влияние на течение болезни. СМД анти-§-100 сокращали клинические симптомы заболевания в эпизодических случаях и смягчали тяжесть симптомов. Сравнительные препараты СМД анти-у-ИФН и Сорахопе не оказывали влияния на ход болезни в выбранной экспериментальной модели рассеянного склероза, т.е. для этих веществ сила клинических признаков в периоды заболевания и тяжесть симптомов не отличались от контрольной группы (группа, получавшая дистиллированную воду).
Проявление эффективности препаратов зависит от стадии развития ЭАЭ (латентная фаза, фаза клинических признаков, фаза выздоровления).
Эффект комплексного препарата отличался от эффекта его отдельных компонентов, а именно, СМД анти-§-100 или СМД анти-у-ИФН. Использование комплексного препарата привело к усилению иммунного ответа. Комплексный препарат способствовал раннему началу заболевания, увеличению доли больных животных и тяжести болезни.
В течение периода исследования (30 дней) у 25% животных группы СМД анти-§-100 и 15% животных группы СМД анти-у-ИФН был зафиксирован рецидив. В то же время рецидивов не было зарегистрировано ни у одного животного в группе, принимавшей комплексный препарат.
Наиболее распространенной формой течения рассеянного склероза является ремитирующая рецидивирующая форма, которая характеризуется непредсказуемыми приступами (рецидивами), сменяющи- 16 029436
мися периодами относительной ремиссии без новых признаков активности заболевания.
Основными целями лечения рассеянного склероза являются: минимизация нейронального повреждения во время острого приступа и восстановление функций после приступа, а также предотвращение новых приступов, ведущих к инвалидности.
Только СМД анти-8-100 удалось улучшить клинические симптомы ЭАЭ на всех этапах экспериментальной болезни, что делает его потенциально полезным в лечении приступов рассеянного склероза. Сочетание СМД анти-8-100 + СМД анти-у-ИФН полностью предотвратило повторение клинических симптомов ЭАЭ, и, таким образом, может быть использовано в лечении рассеянного склероза у людей в качестве средства профилактики рецидивов. Таким образом, сочетание СМД анти-8-100 + СМД анти-γИФН является перспективным препаратом для лечения рассеянного склероза, который, как считается, путем усиления иммунного ответа на пике развития заболевания, может способствовать более эффективной реабилитации и профилактики рецидивов.
Пример 2.
Рецептор сигма-1 - внутриклеточный рецептор, локализованный в клетках центральной нервной системе, клетках большинства периферических тканей и иммунокомпетентных клетках. Этот рецептор посредством контроля гомеостаза внутриклеточного кальция, регулирует внутриклеточные сигнальные каскады, приводящие к активации соответствующих транскрипционных факторов и транскрипции целого семейства генов. Сигма-1 рецептор вовлечен в патогенез различных заболеваний, в том числе инфекционных и нейродегенеративных. В связи с этим препараты оказывающие влияние на данный рецептор и эффективность взаимодействия с ним лигандов могут рассматриваться, как эффективные лекарственные средства для лечения нейроинфекционных, нейродегенеративных и других заболеваний.
Эффективность комбинированной фармацевтической композиции, содержащей СМД антител к белку 8100 (смесь гомеопатических разведений С12 + С30 + С50) и СМД антител к гамма-интерферону (смесь гомеопатических разведений С12 + С30 + С50) в соотношении 1:1, а также компонентов композиции (сверхмалых доз антител к белку 8-100 (смесь гомеопатических разведений С12 + С30 + С50) (СМД анти-8-100) и сверхмалых доз антител к гамма-интерферону (смесь гомеопатических разведений С12 + С30 + С50) (СМД анти-'.'-ИФН), была исследована в лабораторных условиях путем связывания стандартных лигандов [3Н] пентазоцина с рекомбинантным человеческим рецептором Сигма-1 и оценена радиолигандным методом. В качестве контроля использовалась потенцированная дистиллированная вода (смесь гомеопатических разведений С12 + С30 + С50) (потенцированная вода).
В инкубационную среду поместили 20 мкл комплексного препарата или 10 мкл СМД анти-8-100 или СМД анти-'.'-ИФН. Таким образом, количество СМД анти-8-100 и СМД анти-'.'-ИФН, которые были помещены в экспериментальную лунку во время исследования комплексного препарата, было идентично количеству СМД анти-8-100 и СМД анти-'.'-ИФН, исследуемых как монопрепараты, что позволяет сравнить эффективность комплексного препарата с эффективностью отельных его компонентов. Объем потенцированной воды, заселенной в инкубационную среду, составлял 20 и 10 мкл.
Затем, было внесено 160 мкл (около 200 мкг белка) гомогената мембран клеточной линии 1игка1 (линии лейкемических Т-лимфоцитов человека), и, наконец, 20 мкл меченных тритием радиолиганд [3Н] пентазоцина (15 нм).
Для измерения неспецифического связывания вместо препаратов или потенцированной воды в инкубационную среду внедрили 20 мкл немеченого лиганда галоперидола (10 мкМ).
Радиоактивность измеряли с помощью сцинтиллометра (ТорсоиШ, Раскатб) и сцинтилляционной смеси (МюгохсиИ 0, Раскатб) после инкубации в течение 120 мин при 22°С в 50 мМ буферном растворе ТГ18-НС1 (рН 7,4) и фильтрации с использованием стекловолоконных фильтров (ОР/В, Раскатб). Специфическое связывание (во время испытаний или контроля) рассчитывается как разница между ковалентным (в ходе испытаний или контроля) и неспецифическим связыванием.
Результаты (при измерении ковалентного связывания) представлены как процентное значение ингибирования специфического связывания в контроле (в качестве контроля использовалась потенцированная вода) (см. таблицу).
- 17 029436
Действие исследуемых препаратов и потенцированной воды на связывание стандартного радиолиганда [3Н] пентазоцина с рекомбинантным человеческим рецептором Сигма-1
Тестовая группа К-во, вносимое в экспериментал ьную лунку % от специфического связывания радиолиганда в контроле % ингибирования связывания радиолиганда в 1?ПНТПАГ1Р
1й замер 2й замер Среднее значение
Комплексный препарат 20 мкл 44.2 46.2 45.2 54.8
СМД анти-8100 10 мкл 70.9 62.9 66.9 33.1
СМД анти-сЭОА 10 мкл 158.9 149.8 154.3 -54.3
Потенцированная вода 20 мкл 98.1 75.8 86.9 13.1
Потенцированная вода 10 мкл 140.1 106.2 123.2 -23.2
% специфического связывания в контроле = (специфическое связывание в эксперименте/специфическое связывания в контроле)х100%;
% ингибирования специфического связывания в контроле = 100% - (специфическое связывание в эксперименте/специфическое связывания в контроле)х100%).
Ингибирование выше 50% говорит о сильном воздействии на связывание. Ингибирование от 25 до 50% говорит о слабом - среднем связывании. Ингибирование менее 25% говорит о слабом действии тестируемых препаратов и находится в пределах базового уровня.
Выводы.
Комплексный препарат более эффективно ингибирует связывание стандартного радиолиганда [3Н] пентазоцина с рекомбинантным человеческим рецептором Сигма-1, чем его отдельные компоненты (СМД анти-8-100 и СМД анти-у-ИФН).
СМД анти-8-100, введенный в экспериментальную среду в объеме 10 мкл, также ингибирует связывание стандартного радиолиганда [3Н] пентазоцина с рекомбинантным человеческим рецептором Сигма1, но выраженность эффекта данного компонента уступает выраженности эффекта комплексного препарата. СМД анти-у-ИФН, введенный в экспериментальную среду в объеме 10 мкл, не оказывала воздействия на связывание стандартного радиолиганда [3Н] пентазоцина с рекомбинантным человеческим рецептором Сигма-1.
Потенцированная вода, введенная в экспериментальную среду в объеме 10 или 20 мкл, оказывала воздействия на связывание стандартного радиолиганда [3Н] пентазоцина с рекомбинантным человеческим рецептором Сигма-1.
- 18 029436
Перечень последовательностей
<110> Эпштейн Олег Ильич
<120> КОМБИНИРОВАННАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАССЕЯННОГО СКЛЕРОЗА И ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ, СОПРОВОЖДАЮЩИХСЯ НЕЙРОТОКСИЧЕСКИМИ НАРУШЕНИЯМИ, И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ УКАЗАННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
<140> ЕА2О13ОО137
<141> 2013-02-14
<150> ΚΙΙ2010131387
<151> 2010-07-27
<150> КЫ2011127056
<151> 2011-07-01
<150> КЫ2010131386
<151> 2010-07-27
<150> КЫ2010129296
<151> 2010-07-15
<150> КЫ2010129297
<151> 2010-07-15
<160> 17
<170> Вт'ББАР 1.0
<210> 1
<211> 166
<212> РКТ
<213> ното зартепз
<400> 1
мет ьуз туг ТЬг Бег туг Пе ьеи А1а РЬе С1п ьеи суз Пе Уа1 ьеи
1 5 10 15
С1у Бег ьеи е1у Суз туг Суз б1п Азр Рго Туг Уа1 ьуз б1и А1а б1и
20 25 30
АЗП ьеи ьуз Ьуз Туг РЬе АЗП А1а б1у нт'з Бег А5р Уа1 А1а Азр Азп
35 40 45
С1у тЬг Ьеи РЬе Ьеи б1у Пе ьеи ьуз АЗП тгр ьуз С1и 61 и Бег Азр
50 55 60
Агд 1_уз Пе мет 61 п Бег б!п Пе Уа! Бег РЬе Туг РЬе ьуз Ьеи РЬе
65 70 75 80
Ьуз АЗП РЬе ьуз Азр Азр б!п Бег 11 е с1п ьуз Бег Уа1 61 и ТЬг Пе
85 90 95
ьуз б1и Азр мег АЗП Уа1 ьуз РЬе РЬе АЗП Бег АЗП ьуз ьуз ьуз Агд
100 105 110
АЗр Азр РЬе С1и Ьуз ьеи ТЬг АЗП туг Бег Уа1 ТЬг Азр Ьеи АЗП Уа1
115 120 125
С1п Агд Ьуз А1а 11 е нтз С1и ьеи Пе б!п Уа1 мет А1а 61 и ьеи Бег
130 135 140
Рго А1а А1а ьуз ТЬг С1у ьуз Агд ьуз Агд Бег б!п мет Ьеи РЬе Агд
145 150 155 161
С1у Агд Агд А1а Бег С1п 165
<210> 2
<211> 166
<212> РКТ
19 029436
<213> ното зартепз
<400> 2
мег ьуз 1 туг тНг 5ег 5 туг ΐΐе ьеи А1а РНе С1п ьеи суз Пе 10 Уа1 15 ьеи
С1у 5ег Ьеи С1у суз туг Суз С1п Азр РГО туг Уа1 ЬУЗ С1и А1а С1и
20 25 30
АЗП Ьеи ьуз 35 Ьеи ьуз туг РНе АЗП А1а 40 ьеи С1у нтз Бег Азр Уа1 45 С1и А1а Азр Азп
с1у ТНг РНе Ьеи С1у Пе ЬУЗ А5П тгр ЬУЗ С1и Бег Азр
50 55 60
Агд ьуз 11 е ме! с1п 5ег С1п Пе Уа1 Бег РНе туг РНе ЬУЗ Ьеи РНе
65 70 75 80
ЬУ5 АЗП РНе ьуз Азр Азр С1п 5ег Пе с!п ЬУЗ Бег Уа1 С1и тНг Пе
85 90 95
ЬУЗ С1и Азр ме! АЗП Уа1 ьуз РНе РНе АЗП Бег Азп ьуз ьуз ЬУЗ Агд
100 105 110
Азр Азр РНе С1и ЬУЗ ьеи ТНг АЗП туг ) 5ег Уа1 ТНг Азр ьеи АЗП Уа1
115 12( 125
е1п Агд ьуз А1а Пе нтз с!и ьеи Пе б1п Уа1 ме! А1а с1и ьеи 5ег
130 135 140
Рго А1а А1а ЬУЗ тНг с!у Ьуз Агд ьуз Агд Бег С1п ме! ьеи РНе С1п
145 150 155 160
С1у Агд Агд А1а 5ег с!п
165
<210> 3
<211> 49 <212> РКТ
<213> Ното зартепз
<400> 3
Пе Ьеи А1а РНе С1п ьеи суз Пе Уа1 ьеи с1у Бег ьеи С1у Суз Туг
7 10 15 20
суз С1п Азр РГО Туг Уа1 ьуз с1и А1а с1и АЗП ьеи ьуз ЬУЗ Туг РНе
25 30 35
АЗП а! а С1у нт'з 5ег Азр Уа1 А1а Азр АЗП С1у тНг ьеи РНе ьеи с1у
40 45 50
II е 60
<210> 4
<211> 143 <212> РКТ
<213> Ното зартепз
<400> 4
С1п Азр Рго туг Уа1 ЬУЗ С1и А1а С1и АЗП Ьеи ьуз ЬУЗ туг РНе АЗП
24 25 30 35
А1а С1у НТЗ Бег Азр Уа1 А1а Азр А5П С1у тНг ьеи РНе ьеи С1у 11 е
40 45 50 55
ьеи ьуз АЗП тгр ЬУЗ С1и С1и Бег Азр Агд ьуз Пе ме! с1п Бег С1п
60 65 70
11 е Уа1 Бег РНе Туг РНе ьуз ьеи РНе ЬУЗ АЗП РНе ьуз А5р Азр С1п
75 80 85
5ег Пе С1п ЬУЗ 5ег Уа1 С1и тНг 04 Пе ьуз с1и Азр ме! 1 ПП АЗП Уа1 ьуз
РНе РНе АЗП 5ег АЗП ьуз ЬУЗ 273 ьуз Агд Азр Азр РНе 1ии с1и ьуз Ьеи тНг
105 110 115
Азп туг 5ег Уа1 ТНг Азр ьеи АЗП Уа1 С1п Агд ЬУЗ А1а Пе Нтз С1и
120 125 135 140
ьеи 11 е с1п Уа1 ме! А1а С1и Ьеи Бег РГО А1а А1а ьуз тНг с1у ьуз
145 150 155
Агд ьуз Агд Бег С1п ме! ьеи РНе Агд С1у Агд Агд А1а 5ег с1п
160 165 170
<210> 5
- 20 029436
<211> 143 <212> РКТ
<213> Ното зартепз
<400> 5
С1п Азр РГО Туг Уа! ьуз с1и А1а с1и АЗП Ьеи Ьуз ьуз туг РКе АЗП
24 30 35
А1а С1у НТ 5 5ег Азр Уа1 А1а Азр АЗП е1у ТКг Ьеи РКе ьеи С1у 11 е
40 45 50 55
Ьеи Ьуз АЗП тгр ьуз С1и С1и 5ег Азр Агд Ьуз Пе Μβΐ С1п 5ег С1п
60 65 70
Пе Уа1 5ег РКе 7ς туг РКе ьуз Ьеи РКе ЯП ьуз АЗП рКе ьуз Азр ос Азр С1п
5ег 11 е С1п / Э ьуз 5ег Уа1 С1и ТКг ои Пе ьуз С1и Азр мет 03 АЗП Уа1 Ьуз
90 95 100
рКе РКе АЗП 5ег АЗП 1-У5 ьуз ьуз Агд А5р А5р РКе С1и ьуз ьеи ТКг
105 110 115
АЗП туг 5ег Уа1 тКг АЗр Ьеи АЗП Уа1 С1п Агд ьуз А1а 11 е нт'з С1и
120 125 130 135
Ьеи Пе с1п Уа1 ме! А1а с1 и Ьеи 5ег Рго А1а А1а ьуз тКг С1у ьуз
140 145 150
Агд ьуз Агд 5ег С1п Ме1 ьеи РКе с!п С1у Агд Агд А1а 5ег С1п
155 170 175
<210> б
<211> 55
<212> РКТ
<213> Ното зартепз
<400> б
С1п 5ег с1п IIе \/а1 5ег РКе Туг РКе ьуз ьеи РКе Ьуз азп РКе ьуз 69 70 75 80
Азр Азр С1п 5ег IIе С1п ьуз 5ег Уа1 С1и ТКг 11е Ьуз С1и Азр мег
85 90 95 100
азп Уа1 ьуз РКе РКе Азп 5ег Азп ьуз ьуз ьуз Агд Азр Азр РКе е1и
105 110 115
ьуз ьеи тКг Азп туг 5ег Уа1
120
<210> 7
<211> 46
<212> РКТ
<213> ното зартепз
<400> 7
мет Азп Уа1 ьуз РКе РКе Азп 5ег Азп ьуз ьуз ьуз Агд Азр Азр РКе
100 105 110 115
С1и Ьуз ьеи ТКг Азп Туг 5ег Уа1 ТКг Азр Ьеи Азп Уа1 С1п Агд ьуз
120 125 130
А1а Не Нт'з С1и ьеи 11е С1п Уа1 ме! А1а с1и ьеи 5ег Рго
135 140 145
<210> 8
<211> 39
<212> РКТ
<213> ното зартепз
<400> 8
5ег Уа1 С1и тКг 11е ьуз с1и Азр Мег Азп Уа1 ьуз РКе РКе Азп 5ег
92 95 100 105
Азп Ьуз Ьуз Ьуз Агд Азр Азр РКе С1и ьуз ьеи ТКг Азп туг 5ег Уа1
110 115 120
тКг Азр ьеи Азп Уа1 С1п Агд
125 130
<210> 9 <211> 25
- 21 029436
<212> РКТ
<213> ното зартепз <400> 9
Уа1 тНг Азр ьеи Азп Уа1 С1п Агд ьуз АТа 11 е нтз С1и ьеи 11е с1п
123 125 110 115
УаТ ме! АТа сТи Ьеи 5ег РГО АТ а АТа
120 125 128
<210> 10
<211> 41
<212> РКТ
<213> Ното зартепз
<400> 10
Зег туг Пе ьеи АТа РНе сТп ьеи Суз Пе Уа1 ьеи с1у Зег ьеи СТу
5 10 15 20
Суз туг суз СТп Азр зс РГО туг Уа1 ьуз СТи АТа СТи Азп ьеи 41 Ьуз
туг РНе АЗП А1а 4 3 СТу нтз Зег Азр УаТ эи
40 45
<210> 11
<211> 21
<212> РКТ
<213> ното зартепз
<220>
<221> ИСТОЧНИК
<222> 1..21
<223> /мол.тип= "белок"
/организм ="ното зартепз"
<400> 11
С1и тНг ΐΐе 1_уз СТи Азр ме! азп Уа1 ьуз РНе РНе Азп Зег Азп ьуз 94 95 100 105
Ьуз Ьу5 Агд Азр Азр
110 114
<210> 12
<211> 144
<212> РКТ
<213> искусственная последовательность
<400> 12
ме! С1п 34 Азр РГО Туг УаТ ьуз б1и зл АТа СТи АЗП Ьеи ьуз эг ьуз туг РНе
АЗП Ζ4· АТа 40 С1у нтз Зег Азр УаТ 45 3 ν АТа Азр АЗП сТу тНг э 3 ьеи РНе ьеи С1у
Пе ьеи Ьуз АЗП тгр ьуз С1и сТи 5ег Азр Агд эи ьуз Пе ме! СТп Зег
55 60 65 70
СТп 11 е УаТ Зег РНе туг РНе ьуз ьеи РНе Ьуз АЗП РНе Ьуз Азр Азр
75 80 85
С1п зег ΐΐе СТп ьуз Зег УаТ СТи тНг 11е ьуз СТи Азр Ме! Азп УаТ 90 95 100
ьуз РНе РНе Азп зег Азп ьуз ьуз ьуз Агд Азр Азр РНе С1и ьуз ьеи 105 110 115
тНг А5п Туг зег Уа1 тНг Азр ьеи Азп Уа1 сТп Агд ьуз А1а 1Те нт'з 120 125 130
СТи ьеи 11е С1п Уа1 ме! А1а С1и ьеи Зег Рго А1а А1а Ьуз тНг с!у
135 140 145 150
ьуз Агд Ьуз Агд зег СТп ме! ьеи РНе СТп СТу Агд Агд А1а Зег сТп
155 160 165
<210> 13 <211> 144
- 22 029436
<212> ΡΚΤ
<213> искусственная последовательность
<400> 13
МеБ сТп 24 Азр РГО туг УаТ ьуз с!и А1а с!и Азп ьеи ьуз ьуз туг РЬе
30 35
Α5Π А1а СТу НТ 5 Зег Азр УаТ АТа Азр АЗП С1у тЬг ьеи РЬе ьеи С1у
40 45 50
Пе Ьеи ьуз АЗП тгр ьуз сТи сТи зег АЗР Агд Ьуз Пе меБ СТп Зег
55 60 65 70
СТп Пе УаТ зег РЬе туг РЬе ьуз ьеи РЬе ьуз Азп РЬе ьуз Азр А5р
75 80 85
сТп Зег Пе сТп ьуз Зег УаТ сТи тЬг Пе ьуз сТи Азр мег АЗП УаТ
90 95 100
ЬУ5 РЬе РЬе АЗП Зег АЗП ьуз ьуз Ьуз Агд Азр Азр РЬе сТи Ьуз ьеи
105 110 115
тпг АЗП туг 5ег УаТ тЬг АЗР ьеи Азп УаТ СТп Агд Ьуз АТа Пе нтз
120 125 130
сТи ьеи Пе СТп УаТ МеБ А1а сТи ьеи 5ег РГО АТа А1а ьуз тЬг С1у
135 140 145 150
1_у5 Агд ьуз Агд Зег СТп МеБ Ьеи РЬе Агд СТу Агд Агд АТа Зег СТп
155 160 165
<210> 14 <211> 92 <212> ΡΚΤ <213> воз Баигиз
<400> 14
меБ зег сТи Ьеи сТи ьуз АТа УаТ УаТ АТа ьеи Пе А5р УаТ РЬе Нт'з
1 5 10 15
СТп туг 5ег С1у Агд СТ и СТу Азр ьуз Нт'з ьуз Ьеи ьуз ьуз Зег сТи
20 25 30
Ьеи ьуз с1и ьеи Пе АЗП АЗП сТи ьеи Зег нтз РЬе ьеи сТи сТи Пе
35 40 45
ьуз с1и СТп с1и УаТ УаТ Азр Ьуз УаТ мег сТи тЬг Ьеи Азр Зег Азр
50 55 60
с1у Азр сТу СТи суз Азр РЬе СТп сТи РЬе МеБ АТа РЬе УаТ АТа МеБ
65 70 75 80
Пе ТЬг тЬг АТа Суз нт'з СТ и РЬе РЬе сТи Нтз сТи
85 90
<210> 15
<211> 92
<212> ΡΚΤ
<213> ното зартепз
<400> 15
меБ зег СТ и Ьеи СТи ьуз АТа меБ УаТ АТа ьеи Пе Азр УаТ РЬе Нт'з
1 5 10 15
СТп туг Зег СТу Агд сТи СТу Азр ьуз нт'з ьуз ьеи ьуз ьуз 5ег СТ и
20 25 30
ьеи ьуз СТ и ьеи Пе АЗП Азп СТи Ьеи зег нтз РЬе ьеи сТи сТи Пе
35 40 45
ьуз сТи СТп сТи УаТ УаТ Азр ьуз УаТ мег сТи тЬг Ьеи Азр Азп Азр
50 55 60
СТу Азр СТу сТи суз Азр РЬе СТп сТи РЬе меБ АТа РЬе УаТ АТа меБ
65 70 75 80
УаТ тЬг ТЬг АТа Суз Нтз СТ и РЬе РЬе сТи Нтз СТ и
85 90
<210> 16 <211> 94 <212> ΡΚΤ
- 23 029436
<213> Ното зартепз <400> 16
мег с!у Зег С1и Ьеи с!и тЬг а! а мег С1и ТЬг ьеи 11е Азп Уа! РЬе
1 5 10 15
нтз А1а нтз Зег С1у ьуз с!и С1у Азр ьуз Туг ьуз ьеи Зег ьуз ьуз
20 25 30
С1и ьеи ьуз С1 и Ьеи ьеи С1п ТЬг С1и ьеи зег с1у РЬе ьеи Азр а! а
35 40 45
С1п ьуз Азр Уа! Азр А1а Уа1 Азр ьуз Уа! мег ьуз С1и ьеи Азр С1и
50 55 60
АЗП е1у Азр е!у с! и Уа! Азр РЬе е1п е1и туг Уа1 Уа1 ьеи Уа! а! а
65 70 75 80
а! а ьеи тЬг Уа! А1а Суз АЗП Азп РЬе РЬе тгр с! и А5П зег
85 90
<210> 17 <211> 94 <212> РКТ <213> ВО5 Таигиз
<400> 17
ме! С1у Зег е!и Ьеи С1и тЬг А1а Μβΐ с!и ТЬг ьеи Ιΐβ Азп Уа1 РЬе 15 10 15
Нтз А1а Нтз зег С1у Ьуз С1и С1у Азр ьуз туг Ьуз ьеи 5ег Ьуз ьуз
20 25 30
е!и Ьеи ьуз с1и ьеи ьеи е1п тЬг е1и ьеи 5ег е!у РНе ьеи Азр А!а
35 40 45
С1п ьуз Азр А1а А5р А1а Уа1 Азр Ьуз Уа1 мег Ьуз С1и ьеи Азр С1и
50 55 60
Азп С1у Азр С1у с1и Уа1 Азр РНе С1п С1и туг Уа! Уа1 ьеи Уа1 А1а 65 70 75 80
А1а Ьеи тЬг Уа1 А1а Суз Азп Азп РЬе РЬе тгр с1и Азп зег
85 90

Claims (20)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Комбинированная фармацевтическая композиция для лечения рассеянного склероза, содержащая а) активированную потенцированную форму антитела к гамма-интерферону человека и Ь) активированную потенцированную форму антитела к мозгоспецифическому белку 8-100.
  2. 2. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, где гамма-интерферон представляет собой полноразмерную молекулу гамма-интерферона, имеющую аминокислотную последовательность 8Ер № 1 или 8Ер № 2.
  3. 3. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, где гамма-интерферон представляет собой фрагмент полноразмерной молекулы гамма-интерферона, последовательность которого выбрана из группы, включающей 8Ер № 3, 8Ер № 4, 8Ер № 5, 8Ер № 6, 8Ер № 7, 8Ер № 8, 8Ер № 9, 8Ер № 10, 8Ер № 11, 8Ер № 12 и 8Ер № 13.
  4. 4. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, где мозгоспецифический белок 8-100 представляет собой полноразмерную молекулу бычьего белка 8-100.
  5. 5. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.4, где мозгоспецифический белок 8-100 имеет аминокислотную последовательность 8ЕО № 14.
  6. 6. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.4, где мозгоспецифический белок 8-100 имеет аминокислотную последовательность 8ЕО № 17.
  7. 7. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, где активированная потенцированная форма антитела к гамма интерферону представляет собой смесь гомеопатических разведений С12, С30 и С50 в соотношении 1:1:1, нанесенных на твердый носитель, а активированная потенцированная форма антитела к мозгоспецифическому белку 8-100 представляет собой смесь гомеопатических разведений С12, С30 и С50 в соотношении 1:1:1, нанесенных на твердый носитель.
  8. 8. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, где активированная потенцированная форма антитела к гамма-интерферону представляет собой смесь гомеопатических разведений С12, С30 и С200 в соотношении 1:1:1, нанесенных на твердый носитель, и активированная потенцированная форма антитела к белку 8-100 представляет собой смесь гомеопатических разведений С12, С30 и С200 в соотношении 1:1:1, нанесенных на твердый носитель.
  9. 9. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, где антитело к гамма-интерферону представляет собой моноклональное, поликлональное или природное антитело.
  10. 10. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.9, где антитело к гамма-интерферону представляет собой поликлональное антитело.
  11. 11. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, где антитело к белку 8-100 представляет собой моноклональное, поликлональное или природное антитело.
  12. 12. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.11, где антитело к белку 8-100 представляет собой поликлональное антитело.
  13. 13. Способ лечения нейродегенеративных заболеваний, включающий введение пациенту комбинированной фармацевтической композиции по пп.1-12.
  14. 14. Способ лечения по п.13, где указанное заболевание представляет собой рассеянный склероз.
    - 24 029436
  15. 15. Способ уменьшения частоты рецидивов у пациентов, страдающих от рассеянного склероза, посредством введения комбинированной фармацевтической композиции по п.1.
  16. 16. Способ по п.15, где осуществляют введение от одной до двух дозированных форм указанной композиции, при этом каждую из дозированных форм вводят два раза в день.
  17. 17. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.1-12 для лечения рассеянного склероза.
  18. 18. Способ лечения рассеянного склероза, отличающийся тем, что пациенту вводят комбинированную фармацевтическую композицию по пп.1-12.
  19. 19. Способ смягчения симптомов рассеянного склероза, отличающийся тем, что пациенту вводят комбинированную фармацевтическую композицию по пп.1-12.
  20. 20. Способ лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, отличающийся тем, что пациенту вводят комбинированную фармацевтическую композицию по пп.1-12.
    1. Представление антигена и активация Т-клеток
    3. Хемокины, адгезия и миграция
    2. Активация В-клеток и образование антител
    ММР
EA201300137A 2010-07-15 2011-07-15 Комбинированная фармацевтическая композиция для лечения рассеянного склероза и инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способы лечения указанных заболеваний EA029436B1 (ru)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2010129297/10A RU2446821C2 (ru) 2010-07-15 2010-07-15 Лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способ лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями
RU2010129296/10A RU2441023C1 (ru) 2010-07-15 2010-07-15 Лекарственное средство для лечения рассеянного склероза и способ лечения рассеянного склероза
RU2010131386/15A RU2522499C2 (ru) 2010-07-27 2010-07-27 Лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способ лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями
RU2010131387/15A RU2509573C2 (ru) 2010-07-27 2010-07-27 Лекарственное средство для лечения рассеянного склероза и способ лечения рассеянного склероза
RU2011127056/15A RU2519196C2 (ru) 2011-07-01 2011-07-01 Лекарственное средство для лечения патологического синдрома и способ лечения рассеянного склероза
PCT/IB2011/002375 WO2012017324A2 (en) 2010-07-15 2011-07-15 Combination pharmaceutical composition and methods of treating diseases or conditions associated with neurodegenerative diseases

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201300137A1 EA201300137A1 (ru) 2014-05-30
EA029436B1 true EA029436B1 (ru) 2018-03-30

Family

ID=45419662

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201300137A EA029436B1 (ru) 2010-07-15 2011-07-15 Комбинированная фармацевтическая композиция для лечения рассеянного склероза и инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способы лечения указанных заболеваний

Country Status (11)

Country Link
US (5) US8637034B2 (ru)
EP (1) EP2593474A2 (ru)
JP (1) JP2013532182A (ru)
CN (1) CN103154028A (ru)
AU (1) AU2011287288A1 (ru)
CA (1) CA2804967A1 (ru)
DE (1) DE112011102362T5 (ru)
EA (1) EA029436B1 (ru)
FR (1) FR2962652A1 (ru)
GB (1) GB2496337A (ru)
WO (1) WO2012017324A2 (ru)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2181297C2 (ru) 2000-06-20 2002-04-20 Эпштейн Олег Ильич Способ лечения патологического синдрома и лекарственное средство
UA76638C2 (en) 2002-08-02 2006-08-15 Oleh Illich Epshtein Homeopathic medication based on anti-interferon antibodies and method for treating a pathological syndrome associated with interferon
RU2309732C1 (ru) * 2006-03-13 2007-11-10 Олег Ильич Эпштейн Спрессованная твердая оральная форма лекарственного препарата и способ получения твердой оральной формы лекарственного препарата
CZ2013104A3 (cs) 2010-07-15 2013-05-29 Iliich Epshtein@Oleg Farmaceutické prípravky a metody lécby
CA2804967A1 (en) 2010-07-15 2012-02-09 Oleg Iliich Epshtein Combination pharmaceutical composition and methods of treating diseases or conditions associated with neurodegenerative diseases
US9308275B2 (en) 2010-07-15 2016-04-12 Oleg Iliich Epshtein Method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody
US8987206B2 (en) 2010-07-21 2015-03-24 Oleg Iliich Epshtein Method of treating attention deficit hyperactivity disorder
SG10201505676RA (en) * 2010-07-21 2015-08-28 Oleg Iliich Epshtein Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia
CA2805978C (en) 2010-07-21 2016-06-28 Oleg Iliich Epshtein Combination pharmaceutical composition and methods of treating diseases or conditions associated with respiratory disease or condition
PE20130815A1 (es) * 2010-07-21 2013-07-18 Oleg Iliich Epshtein Una composicion de combinacion farmaceutica y metodos para tratar la diabetes y los trastornos metabolicos
US20130045237A1 (en) * 2010-08-06 2013-02-21 Oleg Iliich Epshtein Combination pharmaceutical composition and methods of treating and preventing the infectious diseases
RU2013111961A (ru) 2013-03-18 2014-09-27 Олег Ильич Эпштейн Способ определения выраженности модифицирующей активности, ассоциированной с носителем
RU2013111962A (ru) 2013-03-18 2014-09-27 Олег Ильич Эпштейн Способ определения выраженности модифицирующей активности, ассоциированной с носителем
WO2016138135A1 (en) * 2015-02-25 2016-09-01 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Sigma-1 receptor modulators for treating huntington's disease
RU2018118695A (ru) 2018-05-22 2019-11-22 Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Производственная Фирма "Материа Медика Холдинг" Лекарственное средство для лечения нарушений функций органа или ткани, а также заболеваний, сопровождающихся данными нарушениями, и способ его получения
RU2768221C1 (ru) 2021-06-10 2022-03-23 Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Производственная Фирма "Материа Медика Холдинг" Модификатор и способ изменения электрофизических и магнитных свойств керамики

Family Cites Families (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3134718A (en) 1963-12-12 1964-05-26 Schering Corp Pregna-1,4-dienes and compositions containing same
US3901967A (en) 1973-09-10 1975-08-26 Union Corp Sustained release of atropine
US4311897A (en) 1979-08-28 1982-01-19 Union Carbide Corporation Plasma arc torch and nozzle assembly
US4963367A (en) 1984-04-27 1990-10-16 Medaphore, Inc. Drug delivery compositions and methods
RU2007989C1 (ru) 1991-11-12 1994-02-28 Акционерное общество "Трейдис" Способ габович подбора гомеопатических препаратов и их разовой дозы
DK140992D0 (da) 1992-11-24 1992-11-24 Ole Buchardt Fremgangsmaade til frembringelse af antistoffer mod haptener og andre b-celle-antigener, antistoffer opnaaet ved fremgangsmaaden og anvendelse af disse antistoffer til fremstilling af vacciner, isaer til veterinaermedicinsk brug
IT1261849B (it) 1993-09-02 1996-06-03 Avantgarde Spa Dispositivo medico per la somministrazione di principi attivi o farmaci a bassissimo dosaggio, in particolare di farmaci omeopatici.
JP3696884B2 (ja) 1994-03-25 2005-09-21 アイソテクニカ、インコーポレーテッド ジュウテリウム化による薬物の効能の増強
UA32457C2 (ru) 1996-02-12 2000-12-15 Олєг Ільіч Епштейн Лекарственное средство (варианты) и способ медикаментозного воздействия на организм
US6150500A (en) 1996-07-12 2000-11-21 Salerno; John C. Activators of endothelial nitric oxide synthase
RU2104032C1 (ru) 1997-03-11 1998-02-10 Общество с ограниченной ответственностью "Снежный барс" Способ усиления лечебного эффекта лекарственных средств
US5849528A (en) 1997-08-21 1998-12-15 Incyte Pharmaceuticals, Inc.. Polynucleotides encoding a human S100 protein
RU2187334C2 (ru) 1998-05-22 2002-08-20 Эпштейн Олег Ильич Способ коррекции нарушенного иммунного гомеостаза и лекарственное средство
RU2156621C1 (ru) 1999-03-04 2000-09-27 Эпштейн Олег Ильич Нейротропное лекарственное средство
RU2181297C2 (ru) 2000-06-20 2002-04-20 Эпштейн Олег Ильич Способ лечения патологического синдрома и лекарственное средство
RU2201255C1 (ru) 2001-12-26 2003-03-27 Эпштейн Олег Ильич Лекарственное средство и способ регуляции сосудистого тонуса
UA76639C2 (ru) 2002-08-02 2006-08-15 Олєг Ільіч Епштєйн Гомеопатическое лекарственное средство и способ лечения эректильных дисфункций
UA76641C2 (ru) 2002-08-02 2006-08-15 Олєг Ільіч Епштєйн Гомеопатическое лекарственное средство и способ лечения заболеваний предстательной железы
UA76638C2 (en) 2002-08-02 2006-08-15 Oleh Illich Epshtein Homeopathic medication based on anti-interferon antibodies and method for treating a pathological syndrome associated with interferon
UA76640C2 (ru) 2002-08-02 2006-08-15 Олєг Ільіч Епштєйн Способ коррекции патологических иммунных реакций и гомеопатическое лекарственное средство
CA2518965C (en) 2003-03-14 2018-10-30 Nutrition Research Inc. Homeopathic formulations useful for treating pain and/or inflammmation
RU2253478C1 (ru) 2003-10-01 2005-06-10 Эпштейн Олег Ильич Средство для потенцирования лечебных эффектов - усиления действия лекарственного вещества
RU2281784C1 (ru) 2005-04-20 2006-08-20 Научно-исследовательский институт детских инфекций (НИИДИ) Способ предупреждения клещевого энцефалита у детей
RU2309732C1 (ru) 2006-03-13 2007-11-10 Олег Ильич Эпштейн Спрессованная твердая оральная форма лекарственного препарата и способ получения твердой оральной формы лекарственного препарата
AU2007261782A1 (en) 2006-06-06 2007-12-27 Oleg Iliich Epshtein Medicinal agent for treating fatness, diabetes, and diseases associated with impaired glucose tolerance
RU2332236C1 (ru) 2007-02-02 2008-08-27 Олег Ильич Эпштейн Лекарственное средство для лечения гриппа у птиц
US20130189707A1 (en) 2010-01-26 2013-07-25 Svetlana Alexandrovna Sergeeva Method of determination of autoantibody level by means of enzyme immunoassay
KR20140009110A (ko) 2010-07-15 2014-01-22 올레그 일리치 엡쉬테인 심혈관계와 연관된 질환 또는 장애를 치료하기 위한 복합 제약학적 조성물과 방법
CN103096927A (zh) 2010-07-15 2013-05-08 奥列格·伊里奇·爱泼斯坦 复合药物组合物以及治疗胃肠道功能性疾病或病症的方法
MY165267A (en) 2010-07-15 2018-03-15 Oleg Lliich Epshtein Combination pharmaceutical composition and methods of treating genitourinary system disorders
CZ2013104A3 (cs) 2010-07-15 2013-05-29 Iliich Epshtein@Oleg Farmaceutické prípravky a metody lécby
CA2804967A1 (en) 2010-07-15 2012-02-09 Oleg Iliich Epshtein Combination pharmaceutical composition and methods of treating diseases or conditions associated with neurodegenerative diseases
CA2805978C (en) 2010-07-21 2016-06-28 Oleg Iliich Epshtein Combination pharmaceutical composition and methods of treating diseases or conditions associated with respiratory disease or condition
SG10201505676RA (en) 2010-07-21 2015-08-28 Oleg Iliich Epshtein Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia
US8987206B2 (en) 2010-07-21 2015-03-24 Oleg Iliich Epshtein Method of treating attention deficit hyperactivity disorder
ITTO20110634A1 (it) 2010-07-21 2012-01-22 Oleg Iliich Epshtein Metodo per trattare patologie organiche del sistema nervoso, la sindrome psicoorganica e l'encefalopatia
PE20130815A1 (es) 2010-07-21 2013-07-18 Oleg Iliich Epshtein Una composicion de combinacion farmaceutica y metodos para tratar la diabetes y los trastornos metabolicos
AU2011281252A1 (en) 2010-07-21 2013-03-07 Oleg Iliich Epshtein A method of treating Alzheimer's disease
US20120263725A1 (en) 2010-08-06 2012-10-18 Epshtein Oleg Iiiich Pharmaceutical composition and methods of treating and preventing the diseases caused by HIV or associated with HIV
RU2535033C2 (ru) 2010-08-06 2014-12-10 Олег Ильич Эпштейн Лекарственное средство и способ профилактики инфицирования вич, профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вич или ассоциированных с вич, в том числе спида
RU2535034C2 (ru) 2010-08-06 2014-12-10 Олег Ильич Эпштейн Лекарственное средство и способ профилактики инфицирования вич, профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вич или ассоциированных с вич, в том числе спида
RU2517084C2 (ru) 2010-08-06 2014-05-27 Олег Ильич Эпштейн Способ и средство для ингибирования продукции или усиления элиминации белка р24
US20130045237A1 (en) 2010-08-06 2013-02-21 Oleg Iliich Epshtein Combination pharmaceutical composition and methods of treating and preventing the infectious diseases
US20130171161A1 (en) 2010-12-23 2013-07-04 Oleg Iliich Epshtein Method and composition for the treatment of diseases caused by or associated with hiv

Non-Patent Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
EPSTEIN O I, SHERSTOBOEV E YU, MARTYUSHEV-POKLAD A V, ET AL: "Dose-dependent effects and specificity of action of antibodies to endogenous regulators in ultralow doses.", BULLETIN OF EXPERIMENTAL BIOLOGY AND MEDICINE, SPRINGER NEW YORK LLC, US, vol. 137, no. 5, 1 May 2004 (2004-05-01), US, pages 460 - 462, XP002668535, ISSN: 0007-4888, DOI: 10.1023/B:BEBM.0000038153.60142.84 *
EPSTEIN O I: "Regulatory activity of ultralow doses.", BULLETIN OF EXPERIMENTAL BIOLOGY AND MEDICINE, SPRINGER NEW YORK LLC, US, vol. 135, no. Suppl 1, 1 January 2003 (2003-01-01), US, pages 8 - 13, XP002668541, ISSN: 0007-4888, DOI: 10.1023/A:1024715204972 *
I. F. PAVLOV: "Effects of antibodies against S-100 antigen in ultralow doses (Proproten-100) on acquisition of avoidance response in rats", BULLETIN OF EXPERIMENTAL BIOLOGY AND MEDICINE, KLUWER ACADEMIC PUBLISHERS-PLENUM PUBLISHERS, NE, vol. 138, no. 6, 1 December 2004 (2004-12-01), Ne, pages 556 - 558, XP019217889, ISSN: 1573-8221, DOI: 10.1007/s10517-005-0125-5 *
JONAS WAYNE B ET AL: "A critical overview of homeopathy.", ANNALS OF INTERNAL MEDICINE, AMERICAN COLLEGE OF PHYSICIANS, NEW YORK, NY; US, vol. 138, no. 5, 4 March 2003 (2003-03-04), NEW YORK, NY; US, pages 393 - 399, XP002355318, ISSN: 0003-4819 *
O. I. EPSTEIN, I. F. PAVLOV, AND M. B. SHTARK: "Improvement of Memory by Means of Ultra-Low Doses of Antibodies to S-100B Antigen.", EVIDENCE-BASED COMPLEMENTARY AND ALTERNATIVE MEDICINE, HINDAWI PUBLISHING CORPORATION, vol. 3, no. 4, 1 December 2006 (2006-12-01), pages 541 - 545, XP002668537, ISSN: 1741-427X, DOI: 10.1093/ECAM/NEL073 *
ROBERT P. FRANKLIN, ROBERT J. MACKAY, , , KAREN D. GILLIS, SUSAN M. TANHAUSER, PAMELA E. GINN, THOMAS J. KENNEDY: "Effect of a single dose of ponazuril on neural infection and clinical disease in Sarcocystis neurona-challenged interferon-gamma knockout mice.", VETERINARY PARASITOLOGY., ELSEVIER SCIENCE, AMSTERDAM., NL, vol. 114, no. 2, 30 May 2003 (2003-05-30), NL, pages 123 - 130, XP002668539, ISSN: 0304-4017, DOI: 10.1016/S0304-4017(03)00127-4 *
SHANG, A. HUWILER-MUNTENER, K. NARTEY, L. JUNI, P. DORIG, S. STERNE, J.A. PEWSNER, D. EGGER, M.: "Are the clinical effects of homoeopathy placebo effects? Comparative study of placebo-controlled trials of homoeopathy and allopathy", THE LANCET (LETTERS TO THE EDITOR), THE LANCET PUBLISHING GROUP, GB, vol. 366, no. 9487, 27 August 2005 (2005-08-27), GB, pages 726 - 732, XP005066831, ISSN: 0140-6736, DOI: 10.1016/S0140-6736(05)67177-2 *
SIMON SKURKOVICH, BORIS SKURKOVICH: "Anticytokine therapy, especially anti-interferon-gamma, as a pathogenetic treatment in TH-1 autoimmune diseases.", ANNALS OF THE NEW YORK ACADEMY OF SCIENCES, NEW YORK ACADEMY OF SCIENCES., US, vol. 1051, 1 June 2005 (2005-06-01), US, pages 684 - 700, XP002668538, ISSN: 0077-8923 *
TARASOV, KACHANOVA, ZHAVBERT, YU DUGINA, EPSHTEIN, SERGEEVA: "Application of ultralow doses of antibodies to interferon-gamma in complex therapy of bacterial infections and prophylaxis of bacterial complications.", BULLETIN OF EXPERIMENTAL BIOLOGY AND MEDICINE, CONSULTANTS BUREAU., vol. 148, no. 2, 1 August 2009 (2009-08-01), pages 295 - 296, XP055016707, ISSN: 00074888, DOI: 10.1007/s10517-009-0699-4 *
VICKERS A J: "CLINICAL TRIALS OF HOMEOPATHY AND PLACEBO: ANALYSIS OF A SCIENTIFIC DEBATE", JOURNAL OF ALTERNATIVE AND COMPLEMENTARY MEDICINE, MARY ANN LIEBERT, NEW YORK, NY,, US, vol. 06, no. 01, 1 February 2000 (2000-02-01), US, pages 49 - 56, XP008055722, ISSN: 1075-5535 *
VINCENT CASTAGNE, MARTINE LEMAIRE, IRINA KHEYFETS, JULIA L. DUGINA, SVETLANA A. SERGEEVA, OLEG I. EPSTEIN: "Antibodies to S100 proteins have anxiolytic-like activity at ultra-low doses in the adult rat.", JOURNAL OF PHARMACY AND PHARMACOLOGY, JOHN WILEY & SONS LTD, LONDON; GB, vol. 60, no. 3, 1 March 2008 (2008-03-01), LONDON; GB, pages 309 - 316, XP002668540, ISSN: 0022-3573, DOI: 10.1211/JPP.60.3.0005 *
VORONOVA O L, ET AL: "Cytogenetic effects of antibodies to gamma-interferon in ultralow doses.", BULLETIN OF EXPERIMENTAL BIOLOGY AND MEDICINE, SPRINGER NEW YORK LLC, US, vol. 135, no. Suppl 1, 1 January 2003 (2003-01-01), US, pages 65 - 66, XP002668536, ISSN: 0007-4888, DOI: 10.1023/A:1024730829988 *

Also Published As

Publication number Publication date
US9566332B2 (en) 2017-02-14
JP2013532182A (ja) 2013-08-15
GB201302652D0 (en) 2013-04-03
EP2593474A2 (en) 2013-05-22
US20140112934A1 (en) 2014-04-24
FR2962652A1 (fr) 2012-01-20
CA2804967A1 (en) 2012-02-09
US8637034B2 (en) 2014-01-28
GB2496337A (en) 2013-05-08
DE112011102362T5 (de) 2013-04-25
EA201300137A1 (ru) 2014-05-30
WO2012017324A3 (en) 2012-05-03
AU2011287288A1 (en) 2013-03-07
US9561273B2 (en) 2017-02-07
US20170121400A1 (en) 2017-05-04
CN103154028A (zh) 2013-06-12
US20140079710A1 (en) 2014-03-20
US20170119879A1 (en) 2017-05-04
WO2012017324A2 (en) 2012-02-09
US20120219556A1 (en) 2012-08-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA029436B1 (ru) Комбинированная фармацевтическая композиция для лечения рассеянного склероза и инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способы лечения указанных заболеваний
AU2011287292B2 (en) Combination pharmaceutical composition and methods of treating and preventing the infectious diseases
RU2535034C2 (ru) Лекарственное средство и способ профилактики инфицирования вич, профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вич или ассоциированных с вич, в том числе спида
RU2535033C2 (ru) Лекарственное средство и способ профилактики инфицирования вич, профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вич или ассоциированных с вич, в том числе спида
US20120263725A1 (en) Pharmaceutical composition and methods of treating and preventing the diseases caused by HIV or associated with HIV
EA029791B1 (ru) Фармацевтическая композиция и способ ингибирования продукции или усиления элиминации белка p24 вич
RU2500427C2 (ru) Лекарственное средство для лечения функциональных нарушений желудочно-кишечного тракта и способ лечения функциональных нарушений желудочно-кишечного тракта
RU2526153C2 (ru) Способ повышения фармакологической активности действующего вещества лекарственного средства и фармацевтическая композиция
RU2519196C2 (ru) Лекарственное средство для лечения патологического синдрома и способ лечения рассеянного склероза
RU2509573C2 (ru) Лекарственное средство для лечения рассеянного склероза и способ лечения рассеянного склероза
RU2522499C2 (ru) Лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способ лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями
RU2446821C2 (ru) Лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способ лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями
RU2441023C1 (ru) Лекарственное средство для лечения рассеянного склероза и способ лечения рассеянного склероза
RU2595809C2 (ru) Лекарственное средство
RU2533224C2 (ru) Способ лечения зависимости от психоактивных веществ, алкоголизма и табакокурения и лекарственное средство для лечения зависимости от психоактивных веществ, алкоголизма и табакокурения
RU2517085C2 (ru) Комплексное лекарственное средство и способ профилактики инфицирования вич, профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вич или ассоциированных с вич, в том числе спида
RU2542414C2 (ru) Лекарственное средство для лечения эректильных дисфункций и способ лечения эректильных дисфункций
EA032021B1 (ru) Фармацевтическая композиция и способ лечения и профилактики заболеваний, вызванных и/или ассоциированных с вич

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): BY KZ RU