EA032021B1 - Фармацевтическая композиция и способ лечения и профилактики заболеваний, вызванных и/или ассоциированных с вич - Google Patents

Abstract

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей активировано-потенцированную форму антител к CD4 рецептору в виде смеси водных или водно-спиртовых гомеопатических разведений, и способу лечения и профилактики заболеваний, вызванных и/или ассоциированных с ВИЧ-инфекцией, включая СПИД.

Description

Предлагаемое изобретение относится к фармацевтической композиции и способу лечения и профилактики заболеваний, вызванных или связанных с ВИЧ.

Предшествующий уровень техники

Изобретение относится к области медицины и может использоваться для лечения и профилактики заболеваний, вызванных или связанных с ВИЧ, включая СПИД.

Лечение вирусных заболеваний на основе сверхмалых доз антител к интерферону давно известно в медицине (RU 2192888 C1, A61K 39/395, 11/20/2002). Однако известная фармацевтическая композиция может не проявлять достаточной эффективности в отношении заболеваний, связанных с ВИЧ.

Терапевтический эффект многократно разбавленных форм (или сверхмалых форм) антител, потенцированных по гомеопатической технологии (активированная-потенцированная форма) был обнаружен заявителем по настоящей заявке, доктором О.И. Эпштейном. Например, Патент США № 7582294 раскрывает фармацевтическую композицию для лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы и простатита путем введения гомеопатически активированной формы антител к простатоспецифическому антигену (ПСА). Было доказано, что сверхмалые дозы антител к γ-интерферону являются эффективными в лечении и профилактике лечения заболеваний вирусной этиологии. См. патент США № 7572441, включенный в настоящую заявку посредством ссылки.

CD4 (кластер дифференциации 4), или CD4 рецептор иммунных клеток, представляет собой гликопротеин, который экспрессируется на поверхности иммунных клеток, таких как лейкоциты, клетки Тхелперы, регуляторные Т-клетки, моноциты, макрофаги и дендритные клетки. Как и большинство рецепторов/маркеров клеточной поверхности, CD4 является членом семейства иммуноглобулинов. CD4 является одним из рецепторов, которые помогают рецептору Т-клетки (РТК) с антиген-представляющей клеткой. Используя фракцию, которая находится внутри Т-клетки, CD4 усиливает сигнал, генерируемый РТК, привлекая фермент, известный как лимфоцит-специфический протеин тирозинкиназы, который необходим для активации многих молекул, участвующих в сигнальном каскаде активированной Тклетки. CD4 также непосредственно взаимодействует с молекулами МНС (главный комплекс гистосовместимости) класса II на поверхности антиген-представляющих клеток с использованием своего внеклеточного домена. ВИЧ-1 использует CD4 для проникновения в Т-клетку-хозяин и достигает этого путем связывания протеина вирусной оболочки, известного как gp120, с CD4. Связывание с CD4 создает сдвиг в конформации gp120, что позволяет ВИЧ-1 связываться с корецептором, который экспрессируется на клетке-хозяине. Эти корецепторы являются хемокиновыми рецепторами CCR5 или CXCR4; какой из этих корецепторов используется во время инфицирования зависит от того, заражает вирус макрофаг или клетку Т-хелпер. После структурных изменений в других вирусных белках (gp41) ВИЧ вводит пептид слияния в клетку-хозяин, что позволяет внешней оболочке вируса сливаться с клеточной мембраной. См. Мицели М.С., Парнс Дж.Р. (1993). Роль CD4 и CD8 в активации и дифференциации Т-клеток. Adv. Immunol. 53: 59-122.

Настоящее изобретение включает фармацевтическую композицию и способы ее использования в лечении и профилактике заболеваний, вызванных или связанных с ВИЧ, включая СПИД.

Целью настоящего изобретения является создание комбинированной фармацевтической композиции без выраженного побочного действия, обеспечивающей эффективные профилактические меры в отношении ВИЧ-инфекции, профилактику и лечение заболеваний, вызванных или связанных с ВИЧ, включая заболевания, возникшие в связи с заразными и/или паразитарными болезнями, злокачественные опухоли и СПИД среди лиц, инфицированных ВИЧ.

Решение существующей проблемы представлено в виде фармацевтической композиции, которая включает в себя активированную-потенцированную форму антител к CD4 рецептору, для лечения и профилактики (предупреждения) заболеваний или состояний, вызванных или связанных с ВИЧ.

Раскрытие изобретения

С одной точки зрения, изобретение представляет собой фармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к CD4 рецептору. В этом варианте фармацевтическая композиция дополнительно содержит твердый носитель, в котором указанная активированнаяпотенцированная форма антител к CD4 рецептору насыщает указанный твердый носитель. Фармацевтическая композиция как вариант выполнена в форме таблеток.

Фармацевтическая композиция, содержащая указанную активированную-потенцированную форму антител к CD4 рецептору, находится в виде смеси гомеопатических разведений C12, C30 и C200. Особо предусмотрено, что указанная смесь гомеопатических разведений C12, C30 и C200 насыщает твердый носитель.

Активированная-потенцированная форма антител к рецептору CD4 может быть моноклональным, поликлональным или естественным антителом. Предпочтительным является вариант, при котором активированная-потенцированная форма антител к рецептору CD4 является поликлональным антителом.

Изобретение относится к активировано- потенцированным формам антител к антигену(ам), содержащему последовательности, указанные в спецификации и заявленные в формуле изобретения.

Фармацевтическая композиция включает в себя активированную-потенцированную форму антител

- 1 032021 к рецептору CD4, приготовленную путем последовательных сотенных разведений в сочетании со встряхиванием каждого разведения, предпочтительно вертикальное встряхивание.

Изобретение относится к методу лечения и профилактики заболеваний, вызванных ВИЧ-инфекцией или связанных с ВИЧ, включая СПИД, причем указанный метод включает приём нуждающимся пациентом активированной-потенцированной формы антител к рецептору CD4. Активированнаяпотенцированная форма антител к рецептору CD4 принимается в виде фармацевтической композиции.

Фармацевтическая композиция вводится в виде твердой лекарственной формы для перорального применения, которая содержит фармацевтически приемлемый носитель и указанную активированнуюпотенцированную форму антител к рецептору CD4, насыщающую указанный носитель. Указанная твердая лекарственная форма для перорального применения представляет собой таблетку. Рассматриваются разные варианты и методы.

В соответствии с формулой изобретения фармацевтическая композиция может приниматься в виде одной или двух единичных лекарственных форм, каждая из которых может приниматься от одного до четырех раз в день.

Согласно формуле изобретения фармацевтическая композиция принимается два раза в день; каждый приём состоит из двух лекарственных форм для перорального применения.

Согласно формуле изобретения фармацевтическая композиция принимается в виде одной или двух единичных лекарственных форм, каждая из которых принимается два раза в день.

Все варианты и методы, которые описываются в отношении фармацевтической композиции, могут использоваться в отношении формулы изобретения.

Варианты осуществления изобретения

Изобретение определено с учетом прилагаемых пунктов формулы. С учетом пунктов формулы был составлен нижеследующий терминологический список, включающий соответствующие определения. Приведенный термин антитела служит для обозначения иммуноглобулина, который специфически связывается с другой молекулой, имеющей особую пространственную и полярную организацию, вследствие чего определяется как комплементарный. Антитела, упоминаемые в пунктах формулы изобретения, могут быть представлены цельной молекулой иммуноглобулина или ее фрагментом, могут относиться к естественным, поликлональным или моноклональным антителам, а также включать различные классы и изотипы, такие как IgA, IgD, IgE, IgG1, IgG2a, IgG2b и IgG3, Igm и др. Антитела, представленные фрагментами молекул, могут включать Fab, Fv и F(ab')₂, Fab' и пр.

Термин активированная-потенцированная форма или потенцированная форма, соответственно, используется по отношению к антителам, указанным в этом документе, для обозначения продуктов гомеопатического потенцирования любого исходного раствора антител. Гомеопатическое потенцирование обозначает использование методов гомеопатии для предоставления гомеопатической потенции исходному раствору соответствующего вещества. Не ограничиваясь этим, гомеопатическое потенцирование может включать в себя, например, многократные последовательные разведения в сочетании с внешним воздействием, в частности в сочетании с вертикальным (механическим) встряхиванием. Другими словами, исходный раствор антител подвергается многократному последовательному разбавлению и многочисленным вертикальным встряхиваниям каждого полученного раствора в соответствии с гомеопатической технологией. Оптимальная концентрация антител в растворителе (предпочтительно воде или смеси воды и этилового спирта) варьируется от 0,5 до 5,0 мг/мл. В процедуре получения каждого повторного компонента (раствора антител) рекомендуется использовать смесь трех водных или водноспиртовых разведений первичного (матричного) раствора (матричной настойки) антител с кратностью разведения в 100 , 100 , 100 раз соответственно, что эквивалентно сотенным гомеопатическим разведениям C12, C30 и C200. Примеры гомеопатического потенцирования представлены в описаниях патентов США №№ 7572441 и 7582294, которые в совокупности включены сюда путем ссылки в соответствии с указанной целью. Если в пунктах формулы изобретения применяется термин активированная (потенцированная) форма, то в приведенных ниже примерах употребляется формулировка сверхмалая доза или сверхмалые дозы. Термина сверхмалые дозы имеет узкоограниченное употребление и применяться исключительно в рамках области исследования, для которой он был изначально предложен, а именно изучение и использование гомеопатически разведенных и потенцированных форм вещества. Термин сверхмалая доза или сверхмалые дозы приводится в качестве полного заместителя и исходного аналога понятия активированная (потенцированная) форма, упоминаемого в пунктах описания формулы. Иными словами, антитела находятся в активированной-потенцированной или потенцированной форме при наличии трех факторов. Во-первых, активированная-потенцированная форма антител является продуктом процесса приготовления, широко известного в гомеопатической практике. Вовторых, активированная-потенцированная форма антитела должна иметь биологическую активность, которая определяется методами, хорошо известными в современной фармакологии. И, в-третьих, биологическая активность, которая проявляется активированной-потенцированной формой антитела, не может объясняться наличием молекулярной формы антитела в конечном продукте гомеопатического процесса.

Так, активированную (потенцированную) форму антител можно приготовить, подвергнув исходные

- 2 032021 антитела, выделенные в молекулярной форме, серии последовательных разведений в сочетании с внешним воздействием, например встряхиванием. В качестве внешнего воздействия в процессе снижения концентрации вещества может использоваться обработка ультразвуком, электромагнитным полем или другими физическими способами. В работе В. Швабе Гомеопатические лекарственные средства, М., 1967, патенты США №№ 7229648 и 4311897, которые в совокупности включены сюда путем ссылки в соответствии с указанной целью, описаны процессы, которые представляют собой способы потенцирования, широко применяемые в гомеопатии. В результате данной процедуры происходит равномерное снижение концентрации исходных молекул антител. Процедуру повторяют до тех пор, пока не будет получена желаемая гомеопатическая потенция. Требуемая гомеопатическая потенция отдельных антител может быть определена путем биологического анализа на желаемой фармакологической модели. Являясь довольно многочисленными способы гомеопатического потенцирования могут, к примеру, включать повторное последовательное разведение исходного вещества в сочетании с внешним воздействием, главным образом (механическим) встряхиванием. Другими словами, исходный раствор антител подвергается последовательному повторному разведению при множественном вертикальном встряхивании каждого полученного разведения в соответствии с гомеопатической методикой. Оптимальная концентрация антител в исходном растворителе (предпочтительно воде или смеси воды и этилового спирта) варьируется от 0,5 до 5,0 мг/мл. Для процедуры получения каждого последующего компонента (раствора антител) рекомендуется использовать смесь трех водных или водно-спиртовых разведений первичного (матричного) раствора (матричной настойки) антител с кратностью разведения в 100 , 100 , 100 раз соответственно, что эквивалентно сотенным гомеопатическим разведениям C12, C30 и C200, или смеси трех водных или водно-спиртовых разведений исходного матричного раствора (матричной настойки) антител с крат12 30 50 ностью разведения в 100 , 100 , 100 раз соответственно, что эквивалентно сотенным гомеопатическим разведениям C12, C30 и C50. Примеры получения желаемых потенций также представлены в настоящей заявке и, в частности, могут быть найдены в патентах США №№ 7229648 и 4311897, которые в совокупности включены сюда путем ссылки в соответствии с указанной целью. Подробное описание процедуры, применимой к описываемой активированной (потенцированной) форме антител, приводится ниже.

Вопрос о применении гомеопатических средств в лечении человеческих заболеваний вызывает множество споров. Хотя настоящее изобретение основывается на широко применяемых в гомеопатии процессах получения активированной (потенцированной) формы антител, доказательство его активности не сводится к лишь гомеопатическим методам, применяемым по отношению к человеку. Автором заявленного изобретения было сделано любопытное открытие, в полной мере доказанное на распространенных фармакологических моделях и свидетельствующее о том, что растворитель, полученный в результате серии последовательных разведений антител в своей исходной молекулярной форме, обладает определенной активностью, которая не может быть отнесена к присутствию следов молекул исходной субстанции в целевом растворе. Активированная (потенцированная) форма антител, представленная в настоящей заявке, протестирована на наличие биологической активности на широко применяемых фармакологических моделях для исследования активности как в соответствующих экспериментах in vitro, так и в in vivo испытаниях на животных. Результаты нижеописанных экспериментов, проведенных с использованных данных моделей, служат доказательством наличия заявленной биологической активности. Результаты клинических испытаний на человеке, которые также приведены ниже, среди прочего, указывают на то, что активность, наблюдаемая в экспериментах на животных, может быть успешно перенесена на лечение человеческих заболеваний. Проведенные испытания, результаты которых приведены далее, свидетельствуют о биологической активности в таких моделях; это связано с большим антивирусным и, возможно, иммунотропным действием, интенсификацией активации CD4-лимфоцитов и увеличением количества рецепторов на поверхности ОЭ4-клеток.

Таким образом, потеря вирусной нагрузки наблюдается в результате репрессии ВИЧ, проникающего в клетки (проявляется в изменении функциональной активности CD4 рецепторов, через которые ВИЧ проникает в клетки); подавления репликации ВИЧ внутри клеток, активации процесса транскрипции мРНК противовирусного белка (протеинкиназы ПКР, олигоаденилатсинтетазы, аденозим дезаминазы), Мх, МНС I и II белка и т.д.). Таким образом, заявленное лекарственное средство обладает высокой профилактической эффективностью в отношении ВИЧ-инфекции, предотвращая заражение клеток ВИЧ и его внутриклеточную репликацию. Препарат может использоваться как для эффективного лечения, так и для профилактики хронических вирусных заболеваний, в том числе вторичной профилактики ВИЧинфекции.

Кроме того, заявленная активированная (потенцированная) форма антител включает только те растворы и твердые формы препаратов, биологическая активность которых не может быть приписана присутствию антител, сохранившихся в своей исходной молекулярной форме после разведения матричного раствора. Иначе говоря, несмотря на предположение о том, что активированная (потенцированная) форма антител может содержать остатки первичных антител в своей молекулярной форме, наличие должного опыта в соответствующей области науки не позволяет с какой-либо степенью достоверности соотнести наличие биологической активность, наблюдаемой на распространенных фармакологических моделях, с присутствием антител, сохранивших свою молекулярную форму, в связи с предельно низким

- 3 032021 содержанием таковых в растворе после его последовательного разведения. Хотя изобретение не ограничено ни одной из конкретных теорий, биологическая активность активированной (потенцированной) формы антител, составляющей основу данного изобретения, не может быть приписана их исходной молекулярной форме. Предпочтительно, чтобы содержание молекул первичной субстанции (антител) в конечном продукте разведения, представленном жидкой или твердой активированной (потенцированной) формой антител, была ниже определяемого уровня основных применяемых методов анализа, таких как капиллярный электрофорез или высокоэффективная жидкостная хроматография. Особенно предпочтительной является такая жидкая или твердая активированная (потенцированная) форма, концентрация молекул исходного вещества в которой ниже числа Авогадро. В фармакологии молекулярных форм терапевтических веществ одним из распространенных методов анализа является построение кривой дозаэффект, на которую наносятся данные, отражающие уровень фармакологической реакции в отношении к концентрации активного препарата, вводимого испытуемым или исследуемого in vitro. Минимальный объем лекарственного препарата, проявляющий сколько-нибудь определяемую реакцию, называют пороговой дозой. Особый акцент делается на то, что предпочтительная концентрация антител, сохранивших свою молекулярную форму (если таковые присутствуют) в активированной (потенцированной) форме вещества, должна быть ниже значения пороговой дозы молекул исходных антител для данной биологической модели. При описании конкретных лекарственных композиций в прилагаемых примерах применяется термин сверхмалые дозы (СМД), который не фигурирует в пунктах формулы изобретения настоящей заявки. Настоящее изобретение представляет собой фармацевтическую композицию, которая включает в себя активированную-потенцированную форму антител к рецептору CD4, приготовленную в соответствии с гомеопатической технологией потенцирования путем многократного, последовательного разведения и промежуточного внешнего действия встряхивания, о чем более подробно говорится ниже. Согласно изобретению фармацевтическая композиция особенно полезна для лечения и профилактики заболеваний, вызванных ВИЧ-инфекцией или связанных с ВИЧ, включая СПИД. Как показано на примерах согласно изобретению, фармацевтическая композиция обладает неожиданным синергетическим терапевтическим действием, которое проявляется, в частности, в терапевтической эффективности при лечении заболеваний, вызванных ВИЧ-инфекцией или связанных с ВИЧ.

Согласно изобретению фармацевтическая композиция расширяет арсенал препаратов для лечения и профилактики заболеваний, вызванных ВИЧ-инфекцией или связанных с ВИЧ, включая СПИД.

В соответствии с этим аспектом изобретения фармацевтическая композиция может быть в жидком или в твердом виде. Активированная-потенцированная форма антител, входящая в состав фармацевтической композиции, готовится из начальной молекулярной формы антитела с помощью процесса, принятого в гомеопатической медицине. Начальные антитела могут быть моноклональными или поликлональными, приготовленными в соответствии с известными методами, например описанными в Иммунологических методах Г. Фримеля, М., Медицина, 1987, с. 9-33; Антитела человека. Моноклональные и рекомбинантные антитела, 30 лет спустя, Лаффли Е., Содоер Р. 2005. Т. 14. № 1-2. С. 33-55, ссылки на который указываются в документе.

Моноклональные антитела можно получить, например, с помощью технологии гибридомы. Начальная стадия процесса включает иммунизацию, основанную на уже разработанных в ходе подготовки поликлональных антисывороток принципах. Дальнейшие стадии работы связаны с производством гибридных клеток, генерирующих клонов антител с одинаковой специфичностью. Их выделение осуществляется с использованием тех же методов, что и в случае приготовления поликлональной антисыворотки.

Поликлональные антитела можно получить с помощью активной иммунизации животных. С этой целью подходящим животным (например, кроликам) вводят серию инъекций с соответствующим антигеном (CD4 рецептор). Иммунная система животных генерирует соответствующие антитела, которые собираются с животных известным способом. Эта процедура позволяет приготовить моноспецифическую, богатую антителами сыворотку.

При желании, сыворотку, содержащую антитела, можно очистить, например, с помощью аффинной хроматографии, фракционирования путем осаждения солей или ионно-обменной хроматографии. Очищенная, богатая антителами сыворотка, полученная в результате этого процесса, может использоваться в качестве исходного материала для приготовления активированной-потенцированной формы антител. Предпочтительная концентрация полученного исходного раствора антител в растворителе, водной или водно-спиртовой смеси составляет примерно от 0,5 до 5,0 мг/мл.

В соответствии с настоящим изобретением предпочтительный порядок приготовления каждого из компонентов комбинированного препарата включает использование смеси трех водно-спиртовых разве12 30 50 дений первичного матричного раствора антител, разбавленных в 100 , 100 и 100 раз соответственно, что эквивалентно сотенным гомеопатическим разведениям C12, C30 и C50, или разбавленных в 100¹², 30 200

100 и 100 раз соответственно, что эквивалентно сотенным гомеопатическим разведениям C12, C30 и C200. Для приготовления твердой лекарственной формы твердый носитель насыщают желаемым разведением, полученным в результате гомеопатического процесса. Для получения единичной твердой лекарственной формы комбинированного препарата изобретения масса носителя пропитывается каждым из разведений. Обе процедуры пропитывания предназначены для приготовления требуемой лекарственной

- 4 032021 формы комбинированного препарата.

В предпочтительном варианте изобретения исходным материалом для приготовления активированной-потенцированной формы, которая составляет фармацевтическую композицию изобретения, является поликлональное антитело животного происхождения к соответствующему антигену, а именно рецептору CD4. Для получения активированной-потенцированной формы поликлональных антител к рецептору CD4 желаемый антиген вводится в качестве иммуногена в лабораторное животное, предпочтительно в кроликов. Поликлональные антитела к рецептору CD4 можно получить, используя полную молекулу рецептора CD4 человека следующей последовательности:

SEQ № 1

Met Asn Arg Gly Vai Pro Phe Arg His Leu Leu Leu Vai Leu Gin

1015

Leu Ala Leu Leu Pro Ala Ala Thr Gin Gly Lys Lys Vai Vai Leu

20 2530

Gly Lys Lys Gly Asp Thr Vai Glu Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gin

35 4045

Lys Lys Ser He Gin Phe His Trp Lys Asn Ser Asn Gin He Lys

50 5560

He Leu Gly Asn Gin Gly Ser Phe Leu Thr Lys Gly Pro Ser Lys

65 7075

Leu Asn Asp Arg Ala Asp Ser Arg Arg Ser Leu Trp Asp Gin Gly

80 8590

Asn Phe Pro Leu He lie Lys Asn Leu Lys lie Glu Asp Ser Asp

95 100105

Thr Tyr lie Cys Glu Vai Glu Asp Gin Lys Glu Glu Vai Gin Leu

106 110 115120

Leu Vai Phe Gly Leu Thr Ala Asn Ser Asp Thr His Leu Leu Gin

121 125 130135

Gly Gin Ser Leu Thr Leu Thr Leu Glu Ser Pro Pro Gly Ser Ser

136 140 145150

Pro Ser Vai Gin Cys Arg Ser Pro Arg Gly Lys Asn He Gin Gly

151 155 160165

Gly Lys Thr Leu Ser Vai Ser Gin Leu Glu Leu Gin Asp Ser Gly

166 170 175180

Thr Trp Thr Cys Thr Vai Leu Gin Asn Gin Lys Lys Vai Glu Phe

181 185 190195

Lys He Asp lie Vai Vai Leu Ala Phe Gin Lys Ala Ser Ser lie

196 200 205210

Vai Tyr Lys Lys GluGly Glu Gin Vai Glu Phe Ser Phe Pro Leu

211 215 220225

Ala Phe Thr Vai Glu Lys Leu Thr Gly Ser Gly Glu Leu Trp Trp

226 230 235240

Gin Ala Glu Arg Ala Ser Ser Ser Lys Ser Trp He Thr Phe Asp

241 245 250255

Leu Lys Asn Lys Glu Vai Ser Vai Lys Arg Vai Thr Gin Asp Pro

256 260 265270

Lys Leu Gin Met Gly Lys Lys Leu Pro Leu His Leu Thr Leu Pro

271 275 280285

Gin Ala Leu Pro Gin Tyr Ala Gly Ser Gly Asn Leu Thr Leu Ala

286 290 295300

Leu Glu Ala Lys Thr Gly Lys Leu His Gin Glu Vai Asn Leu Vai

301 305 310315

Vai Met Arg Ala Thr Gin Leu Gin Lys Asn Leu Thr Cys Glu Vai

- 5 032021

316 320 325330

Trp Gly Pro Thr Ser Pro Lys Leu Met Leu Ser Leu Lys Leu Glu

331 335 340345

Asn Lys Glu Ala Lys Vai Ser Lys Arg Glu Lys Ala Vai Trp Vai

346 350 355360

Leu Asn Pro Glu Ala Gly Met Trp Gin Cys Leu Leu Ser Asp Ser

361 365 370375

Gly Gin Vai Leu Leu Glu Ser Asn He Lys Vai Leu Pro Thr Trp

376 380 385390

Ser Thr Pro Vai Gin Pro Met Ala Leu He Vai Leu Gly Gly Vai

391 395 400405

Ala Gly Leu Leu Leu Phe He Gly Leu Gly He Phe Phe Cys Vai

406 410 415420

Arg Cys Arg His Arg Arg Arg Gin Ala Glu Arg Met Ser Gin He

421 425 430435

Lys Arg Leu Leu Ser Glu Lys Lys Thr Cys Gin Cys Pro His Arg

436 440 445450

Phe Gin Lys Thr Cys Ser Pro He

451 445458

Поликлональные антитела к рецептору CD4 можно получить, используя полипептидный фрагмент рецептора CD4, выбранный, например, из следующих аминокислотных последовательностей:

SEQ № 2

Gly Lys Lys Vai Vai Leu

2630

Gly Lys Lys Gly Asp Thr Vai Glu Leu Thr Cys

3540

Lys Lys Ser He Gin Phe His Trp Lys Asn Ser

5055

He Leu Gly Asn Gin Gly Ser Phe Leu Thr Lys

6570

Leu Asn Asp Arg Ala Asp Ser Arg Arg Ser Leu

8085

Asn Phe Pro Leu lie lie Lys Asn Leu Lys lie

Thr Ala Ser Gin

Asn Gin He Lys

Gly Pro Ser Lys

Trp Asp Gin Gly

Glu Asp Ser Asp

- 6 032021

95100

Thr Туг He Cys Glu Vai Glu Asp Gin Lys Glu

106 110115

Leu Vai Phe Gly Leu Thr Ala Asn Ser Asp Thr

121 125130

Gly Gin Ser Leu Thr Leu Thr Leu Glu Ser Pro

136 140145

Pro Ser Vai Gin Cys Arg Ser Pro Arg Gly Lys

151 155160

Gly Lys Thr Leu Ser Vai Ser Gin Leu Glu Leu

166 170175

Thr Trp Thr Cys Thr Vai Leu Gin Asn Gin Lys

181 185190

Lys He Asp lie Vai Vai Leu Ala Phe Gin Lys

196 200205

Vai Tyr Lys Lys Glu Gly Glu Gin Vai Glu Phe

211 215 220 225

105

Glu Vai Gin Leu

120

His Leu Leu Gin

135

Pro Gly Ser Ser

150

Asn He Gin Gly

165

Gin Asp Ser Gly

180

Lys Vai Glu Phe

195

Ala Ser Ser lie

210

Ser Phe Pro Leu

Ala Phe Thr Vai Glu Lys Leu Thr Gly Ser Gly Glu Leu Trp Trp

226 230 235240

Gin Ala Glu Arg Ala Ser Ser Ser Lys Ser Trp lie Thr Phe Asp 241 245 250255

Leu Lys Asn Lys Glu Vai Ser Vai Lys Arg Vai Thr Gin Asp Pro 256 260 265270

Lys Leu Gin Met Gly Lys Lys Leu Pro Leu His Leu Thr Leu Pro 271 275 280285

Gin Ala Leu Pro Gin Tyr AlaGly Ser Gly Asn Leu Thr Leu Ala 286 290 295300

Leu Glu Ala Lys Thr Gly Lys Leu His Gin Glu Vai Asn Leu Vai 301 305 310315

Vai Met Arg Ala Thr Gin Leu Gin Lys Asn Leu Thr Cys Glu Vai 316 320 325330

Trp Gly Pro Thr Ser Pro Lys Leu Met Leu Ser Leu Lys Leu Glu 331 335 340345

Asn Lys Glu Ala Lys Vai Ser Lys Arg Glu Lys Ala Vai Trp Vai

346 350 355360

Leu Asn Pro Glu Ala Gly Met Trp Gin Cys Leu Leu Ser Asp Ser 361 365 370375

Gly Gin Vai Leu Leu Glu Ser Asn lie Lys Vai Leu Pro Thr Trp 376 380 385390

Ser Thr Pro Vai Gin Pro Met Ala Leu He Vai Leu Gly Gly Vai 391 395 400405

Ala Gly Leu Leu Leu Phe lie Gly Leu Gly He Phe Phe Cys Vai

406 410 415420

Arg Cys Arg His Arg Arg Arg Gin Ala Glu Arg Met Ser Gin lie

421 425 430435

Lys Arg Leu Leu Ser Glu Lys Lys Thr Cys Gin Cys Pro His Arg

436 440 445450

Phe Gin Lys Thr Cys Ser Pro He

451 445458

- 7 032021

SEQ № 3

He Gly Leu Gly He Phe Phe Cys Vai

412 415420

Arg Cys Arg His Arg Arg Arg Gin Ala Glu Arg Met Ser Gin He

421 425 430435

Lys Arg Leu Leu Ser Glu Lys Lys Thr Cys Gin Cys Pro His Arg

436 440 445450

Phe Gin Lys Thr Cys Ser Pro He

451 445458

SEQ № 4

Gly Lys Lys Vai Vai Leu

2630

Gly Lys Lys Gly Asp Thr Vai Glu Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gin

35 4045

Lys Lys Ser He Gin Phe His Trp Lys Asn Ser Asn Gin lie Lys

50 5560

SEQ № 5

Asp

95 100 105

Thr	Туг Не Gin	Cys Glu Vai	Glu Asp Gin Lys Glu Glu Vai
106		НО	115
	119

SEQ № 6

Lys Glu Glu Vai Gin Leu

115120

Leu Vai Phe Gly Leu Thr Ala Asn Ser Asp Thr His Leu Leu Gin

121 125 130135

Gly Gin Ser Leu

136139

Примерный порядок подготовки исходных поликлональных антител к CD4 рецептору выглядит следующим образом. За 7-9 дней до забора крови для повышения уровня поликлональных антител в потоке крови кроликов им внутривенно вводят 1-3 инъекций желаемого антигена. После иммунизации образцы крови используются для тестирования уровня антител. Как правило, максимальный уровень иммунной реакции растворимого антигена достигается в течение 40-60 дней после первой инъекции антигена. В завершение первого цикла иммунизации кроликам отводится 30-дневный реабилитационный период, после чего с помощью 1-3 внутривенных инъекций проводится повторная иммунизация.

Для получения антисыворотки с содержанием нужных антител кровь иммунизированных кроликов собирается и помещается в 50 мл центрифужную пробирку. Сгустки, сформированные на краях пробирки, снимаются с помощью деревянного шпателя, а стержень помещается в сгусток посередине пробирки. После этого кровь помещают в холодильник при температуре около 40°C на одну ночь. На следующий день сгусток на шпателе удаляется, а оставшаяся жидкость центрифугируется в течение 10 мин при 13000 об/мин. Супернатант и является целевой антисывороткой. Обычно полученная антисыворотка имеет желтый цвет. 20% NaN₃ (весовая концентрация) добавляют в антисыворотку для получения окончательной концентрации в 0,02%, после чего до использования ее хранят в замороженном состоянии при температуре -20°C или при температуре -70°C без добавления NaN₃. Для выделения целевых антител к CD4 рецептору из антисыворотки подходит следующая последовательность твердофазовой абсорбции.

мл антисыворотки кролика дважды разбавляют с 0,15М NaCl, после чего добавляют 6,26 г Na₂SO₄, перемешивают и выдерживают в течение 12-16 ч при температуре 4°C. Осадок удаляют центрифугированием, разводят в 10 мл фосфатного буфера и диализируют в том же буфере в течение одной ночи при комнатной температуре. После удаления осадка раствор наносят на ДЭАЭ-целлюлозную колонку, уравновешенную фосфатным буфером. Доля антитела определяется путем измерения оптической плотности элюата при 280 нм.

Выделенные неочищенные антитела очищаются с помощью аффинной хроматографии путем присоединения полученных антител к CD4 рецептору, который находится на нерастворимом матриксе хроматографической среды, с последующим элюированием концентрированными водными растворами солей.

- 8 032021

Буферный раствор, полученный в результате, используется в качестве исходного раствора для процесса гомеопатического разведения для получения активированной-потенцированной формы антител. Желаемая концентрация исходного матричного раствора с очищенными от антигена поликлональными антителами кролика к CD4 рецептору составляет 0,5-5,0 мг/мл, преимущественно 2,0-3,0 мг/мл.

Активированную-потенцированную форму антитела к CD4 рецептору можно приготовить из исходного раствора путем гомеопатического потенцирования, используя метод пропорционального уменьшения концентрации последовательным разведением 1 части каждого предыдущего раствора (начиная с исходного раствора) в 9 частях (для десятичных разведений), или в 99 частях (для сотенных разведений), или в 999 частях (для тысячных разведений) нейтрального растворителя, начиная с концентрации исходного раствора антитела в растворителе (как правило, это водная или водно-спиртовая смесь) диапазоном от 0,5 до 5,0 мг/мл в сочетании с внешним воздействием. Как правило, под внешним воздействием подразумевается многократное вертикальное встряхивание (динамизация) каждого разведения. Как правило, для каждого последующего разведения для получения необходимого уровня активности, или фактора разведения, используются отдельные контейнеры. Этот метод считается общепринятым в гомеопатии. См., например, работу В. Швабе Гомеопатические лекарственные средства, М., 1967, с. 1429, ссылка на которую содержится в настоящей заявке.

Например, для приготовления 12-сотенного разведения (обозначается как C12), одну часть исходного матричного раствора антител к CD4 рецептору с концентрацией 3,0 мг/мл растворяют в 99 частях нейтрального водного или водно-спиртового растворителя (преимущественно 15%-этиловый спирт), а затем многократно вертикально встряхивают (10 и более раз) для получения первого сотенного разведения (обозначается как C1). 2-е сотенное разведение (C2) получают из 1-го сотенного разведения C1. Для приготовления 12-го сотенного разведения C12 эта процедура повторяется 11 раз. Таким образом, 12-е сотенное разведение C12 представляет собой раствор, полученный с помощью 12 последовательных разведений одной части исходного матричного раствора антител к γ-интерферону с концентрацией 3,0 мг/мл в 99 частях нейтрального растворителя в различных емкостях, что эквивалентно сотенному гомеопатическому разведению C12. Аналогичные процедуры с соответствующим коэффициентом разбавления выполняются для получения разведений C30, C50 и C200. Промежуточные разведения могут тестироваться на желаемой биологической модели для проверки активности. Предпочтительными активированнымипотенцированными формами препарата изобретения считается смесь разведений C12, C30 и C50, или C12, C30 и C200. При использовании смеси различных гомеопатических разведений (в основном сотенных) активного вещества в качестве компонентов биологически активной жидкости, каждый компонент композиции препарата (например, C12, C30, C50, C200) готовится отдельно согласно описанной выше процедуре до получения предпоследнего разведения (например, до получения С11, C29 и C199 соответственно), а потом одна часть каждого компонента помещается в одну емкость, согласно составу смеси, и смешивается с необходимым количеством растворителя (например, с 97 частями для получения сотенного разведения).

Активное вещество может использоваться как смесь различных гомеопатических разведений, например десятичных и/или сотенных (D20, C30, C100, или C12, C30, C50, или C12, C30, C200 и т.д.), эффективность которой определяется экспериментально путем тестирования разведений на соответствующих биологических моделях, например на моделях, приведенных в настоящей заявке в примерах.

В процессе снижения потенцирования и концентрации вертикальные встряхивания могут заменяться внешним воздействием ультразвука, электромагнитных полей или любыми другими процессами внешнего воздействия, которые используются в гомеопатии.

Как правило, фармацевтическая композиция изобретения находится в виде жидкой или твердой единичной лекарственной формы. Соответствующим жидким носителем является вода или водно- спиртовая смесь.

Твердую единичную лекарственную форму препарата изобретения можно получить путем насыщения твердого, фармацевтически приемлемого носителя смесью активированной- потенцированной формы водных или водно-спиртовых растворов активных компонентов. Кроме того, носитель можно насыщать последовательно в каждом соответствующем разведении. Оба метода импрегнирования считаются приемлемыми.

Как правило, фармацевтическая композиция в твердой единичной лекарственной форме готовится из гранул фармацевтически приемлемого носителя, предварительно насыщенного водными или водноспиртовыми разведениями активированной-потенцированной формы антител к CD4 рецептору. Твердая лекарственная форма может быть выполнена в любой форме, принятой в фармацевтической сфере, в том числе в виде таблеток, капсул, пастилок для рассасывания и в другой форме. В качестве неактивных фармацевтических ингредиентов можно использовать глюкозу, сахарозу, мальтозу, крахмал, изомальтозу, изомальт и другие моно-, олиго- и полисахариды, которые применяются в производстве фармацевтических препаратов, а также технологические смеси вышеуказанных неактивных фармацевтических ингредиентов с другими фармацевтически приемлемыми наполнителями, например с изомальтом, кросповидоном, цикламатом натрия, сахарином, безводной лимонной кислотой и т.д.), включая смазывающие вещества, разрыхлители, связывающие вещества и красители. Предпочтительными носителями являются

- 9 032021 лактоза и изомальт. Фармацевтическая лекарственная форма может дополнительно включать стандартные фармацевтические наполнители, например микрокристаллическую целлюлозу, стеарат магния и лимонную кислоту.

Для приготовления твердых лекарственных форм для перорального применения 100-300 мкм гранул лактозы насыщают водными или водно-спиртовыми растворами активированной- потенцированной формы антител к CD4 рецептору в соотношении 1 кг раствора антител к 5 или 10 кг лактозы (1:5-1:10). Для осуществления насыщения гранулы лактозы подвергаются насыщению и орошению в псевдоожиженном кипящем слое соответствующего оборудования (например, Huttlin Pilotlab производства Huttlin GmbH) с последующей сушкой в потоке воздуха, нагретом при температуре ниже 40°C. Рассчитанное количество высушенных гранул (от 10 до 34 вес.ч.), насыщенных активированной-потенцированной формой антител, помещают в смеситель и смешивают с 25-45 вес.ч. ненасыщенной чистой лактозы (используется в целях сокращения расходов, упрощения и ускорения технологического процесса без снижения эффективности лечения), вместе с 0,1-1 вес.ч. стеарата магния и от 3 до 10 вес.ч. микрокристаллической целлюлозы. Полученная таблетмасса равномерно смешивается и таблетируется путем прямого сухого прессования (например, в таблеточном прессе Korsch - XL 400) для получения круглых таблеток массой от 150 до 500 мг, преимущественно 300 мг. После таблетирования полученные 300 мг таблетки насыщаются водно-спиртовым раствором (3,0-6,0 мг/таблетку) активированной-потенцированной формы антител к CD4 рецептору в форме смеси сотенных гомеопатических разведений C12, C30 и C50 или смеси сотенных гомеопатических разведений C12, C30 и C200.

Хотя изобретение не ограничивается какой-либо конкретной теорией, однако считается, что активированная-потенцированная форма антител, описанная в этом документе, не содержит молекулярной формы антител в том количестве, которое необходимо для выявления биологической активности такой молекулярной формой. Биологическая активность комбинированного препарата (фармацевтической композиции) изобретения полностью проиллюстрирована в приведенных примерах.

Как правило, в лечении комбинация по настоящему изобретению применяется от одного до четырех раз в день или дважды в день, причем одна или две единичные лекарственные формы композиции используются за прием.

Далее изобретение проиллюстрировано с использованием ссылок на указанные примеры.

Примеры

Пример 1.

Оценка антиретровирусной активности сверхмалых доз поликлональных антител к CD4 рецептору (смесь гомеопатических разведений C12 + C30 + C50) (СМДАТ CD4), была проведена с использованием мононуклеарных клеток периферической крови человека, инфицированных штаммом HIV-1-LAI в экспериментальных условиях.

Мононуклеары периферической крови человека выделялись из крови серонегативного здорового донора путем центрифугирования на градиенте плотности фиколла-гипака. Клетки активировали в течение 3 дней с использованием 1 мкг/мл фитогемагглютинина Р и 5 МЕ/мл рекомбинантного интерлейкина-2 человека.

Для оценки антиретровирусной активности продукты были помещены в лунку, содержащую 100 мкл активированных мононуклеаров за 24 ч до или 15 мин после инфицирования клеток штаммом HIV1-LAI в дозе 100 TCID50 (50 мкл инокулята штамма HIV-1-LAI). Перед размещением в лунку СМД Ат CD4 (сверхмалые дозы антител к CD4 рецептору) (12,5 мкл) или исходный азидотимидин смешивались со средой RPMI1640 (DIFCO) для получения конечного объема образца 50 мкл.

Супернатант собирался на 7-й день после заражения клеток. Активность продуктов измеряли путем ингибирования репликации ВИЧ, которую оценивали, учитывая уровень основного нуклеокапсидного белка р24 в супернатанте мононуклеарных клеток периферической крови человека, используя набор Retrotek для ИФА.

Было показано, что СМД Ат CD4 ингибируют репликацию ВИЧ на 86±10% в случае их добавления в лунку за 24 ч до заражения и на 51±3% в случае добавления через 15 мин после заражения клеток штаммом HIV-1-LAI. Азидотимидин в дозе 1000 нМ ингибирует репликацию ВИЧ на 99±0 и 99±1% при добавлении в лунку за 24 ч до и через 15 мин после заражения клеток штаммом HIV-1-LAI соответственно.

Таким образом, эта экспериментальная модель продемонстрировала антиретровирусную активность сверхмалых доз поликлональных антител кролика к CD4 (смесь гомеопатических разведений C12+C30+C50).

Пример 2.

Оценка антиретровирусной активности сверхмалых доз поликлональных антител кролика к CD4 рецептору (смесь гомеопатических разведений C12 + C30 + C50) (СМД Ат CD4) была проведена с использованием мононуклеарных клеток периферической крови человека, инфицированных штаммом HIV1-LAI в экспериментальных условиях. Азидотимидин (Sigma - AZ169-100 мг, лот 107 K1578) использовался в качестве препарата сравнения.

Мононуклеары периферической крови человека выделялись из крови серонегативного здорового

- 10 032021 донора путем центрифугирования на градиенте плотности Ficoll-Hypaque. Клетки стимулировались в течение 3 дней с использованием 1 мкг/мл фитогемагглютинина Р и 5 МЕ/мл рекомбинантного интерлейкина-2 человека в среде RPMI1640 (DIFCO) с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки (комплемент удалялся путем нагревания в течение 45 мин при 56°C), 1% раствора антибиотика (PSN Gibco, содержащий 50 мкг/мл пенициллина, 50 мкг/мл стрептомицина и 100 мкг/мл неомицина).

Для оценки антиретровирусной активности продукты были помещены в лунку через 15-30 мин после инфицирования клеток штаммом HIV-1-LAI в дозе 100 TCID50 (50 мкл инокулята штамма HIV-1LAI). Супернатант, который использовался для оценки влияния продуктов на ингибирование репликации ВИЧ, собирался на 7 день после инфицирования клеток.

Перед размещением в лунку, в которой содержалось 150 мкл клеточной культуры, сверхмалые дозы антител к CD4 разводились RPMI1640 (DIFCO) при 4-кратном разведении (при 1/4 разведении) до получения конечного объема 50 мкл. Азидотимидин разбавлялся с RPMI1640 (DIFCO) с получением концентрации 8 нМ.

Эффективность продуктов устанавливалась путем ингибирования репликации ВИЧ, которая оценивалась по активности ВИЧ-ревертазы в супернатанте мононуклеаров периферической крови человека с использованием набора RT RetroSys, изготовленного INNOVAGEN (Лот 10-059С). Супернатант клеток, которые не были инокулированы продуктами тестирования или азидотимидином, использовался в качестве контрольного препарата для расчета процента ингибирования репликации ВИЧ (см. таблицу).

Антиретровирусная активность сверхмалых доз антител к CD4 с использованием мононуклеарных клеток периферической крови человека, инфицированных штаммом HIV-1-LAI в экспериментальных условиях

Продукт	Коэффициент разведения среды RPMI1640 (DIFCO)	Ингибирование активности ВИЧ-ревертазы (% контрольного препарата)
7 день
СМД Ат CD4	1/4	78±6
Азидотимидин	-	58±7

Таким образом, экспериментальная модель продемонстрировала антиретровирусную активность сверхмалых доз поликлональных антител кролика к CD4 рецептору (смесь гомеопатических разведений C12 + C30 + C50).

- 11 032021

Перечень последовательностей ЕА201300134 Перечень последовательностей <110> Эпштейн Олег Ильич <120> ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ВЫЗВАННЫХ И/ИЛИ АССОЦИИРОВАННЫХ С ВИЧ <140> ЕА201300134 <141> 2013-02-14 <150> RU2010133049 <151> 2010-08-06 <160> 6 <170> BiSSAP 1.0 <210> 1 <211> 458 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1

Met

Asn

Arg

Gly

val

pro

Phe

Arg

His

Leu

Leu

Leu

val

Leu

Gin

Leu

1

5

10

15

Ala

Leu

Leu

Pro

Ala

Ala

Thr

Gin

Gly

Lys

Lys

val

val

Leu

Gly

Lys

20

25

30

Lys

Gly

Asp

Thr

val

Glu

Leu

Thr

Cys

Thr

Ala

Ser

Gin

Lys

Lys

ser

35

40

45

lie

Gin ΓΛ

Phe

His

Trp

Lys

Asn Ct

ser

ASn

Gin

lie

Lys

lie

Leu

Gly

Asn

Gin

jU Gly

ser

Phe

Leu

Thr

J J Lys

Gly

Pro

ser

Lys

OU Leu

Asn

Asp

Arg

Ala

65

70

75

80

Asp

Ser

Arg

Arg

Ser RS

Leu

Trp

Asp

Gin

Gly on

Asn

Phe

Pro

Leu

He Q 4

He

Lys

Asn

Leu

Lys

О J He

Glu

Asp

Ser

Asp

JU Thr

Tyr

lie

Cys

Glu

j j val

Glu

100

105

110

ASP

Gin

Lys

Glu

Glu

val

Gin

Leu

Leu

val

Phe

Gly

Leu

Thr

Ala

Asn

115

120

125

Ser

Asp

Thr

His

Leu

Leu

Gin

Gly

Gin

Ser

Leu

Thr

Leu

Thr

Leu

Glu

130

135

140

ser 145

Pro

Pro

Gly

Ser

Ser Pro 150

ser

val

Gin

Arg

Ser

Pro

Arg

Gly 160

Lys

Asn

He

Gin

Gly icq

Gly

Lys

Thr

Leu

Ser val 1 7П

Ser

Gin

Leu

Glu 1 7C

Leu

Gin

Asp

ser

Gly

IDj Thr

Trp

Thr

cys

Thr

X/ U val Leu

Gin

Asn

Gin

X/ Э Lys

Lys

180

185

190

val

Glu

Phe

Lys

lie

Asp

He

val

val

Leu

Ala

Phe

Gin

Lys

Ala

Ser

195

200

205

Ser

lie τι л

val

Tyr

Lys

Lys

Glu 71 E

Gly

Glu

Gin

val

Glu ίολ

Phe

Ser

Phe

Pro

Leu

zxv Ala

Phe

Thr

val

Glu

LVS

> Leu

Thr

Gly

ser

zzu Gly

Glu

Leu

тгр

Trp

225

230

235

240

Gin

Ala

Glu

Arg

Ala

Ser

ser

Ser

Lys

Ser

Trp

lie

Thr

Phe

Asp

Leu

245

250

255

Lys

Asn

Lys

Glu

val

ser

val

Lys

Arg

val

Thr

Gin

Asp

Pro

Lys

Leu

260

265

270

Gin

Met

Gly

Lys

Lys

Leu

Pro

Leu

His

Leu

Thr

Leu

Pro

Gin

Ala

Leu

275

280

285

Pro

Gin

Tyr

Ala

Gly

Ser

Gly

ASn

Leu

Thr

Leu

Ala

Leu

Glu

Ala

Lys

290

295

300

Thr

Gly

Lys

Leu

His

Gin

Glu

val

Asn

Leu

val

val

Met

Arg

Ala

Thr

305

310

315

320

Gin

Leu

Gin

Lys

Asn

Leu

Thr

Cys

Glu

Val

Trp

Gly

Pro

Thr

Ser

Pro

325

330

335

Lys

Leu

Met

Leu

ser

Leu

Lys

Leu

Glu

Asn

Lys

Glu

Ala

Lys

val

ser

- 12 032021

340

345

350

Lys

Arg

Glu

Lys

Ala

val

Trp val

Leu

Asn

Pro

Glu

Ala

Gly

Met

Trp

355

360

365

Gin

Cys

Leu

Leu

Ser

Asp

Ser Gly

Gin

val

Leu

Leu

Glu

Ser

Asn

lie

370

375

380

Lys

Vai

Leu

Pro

Thr

Trp

Ser

Thr

Pro

val

Gin

Pro

Met

Ala

Leu

lie

385

390

395

400

Vai

Leu

Gly

Gly

val

Ala

Gly

Leu

Leu

Leu

Phe

lie

Gly

Leu

Gly

lie

405

410

415

Phe

Phe

Cys

val

Arg

cys

Arg

His

Arg

Arg

Arg

Gin

Ala

Glu

Arg

Met

420

425

430

Ser

Gin

He

Lys

Arg

Leu

Leu

Ser

Glu

Lys

Lys

Thr

cys

Gin

cys

Pro

435

440

445

Hi s

Arg

Phe

Gin

Lys

Thr

cys

Ser

Pro

lie

450 455 <210> 2 <211> 434 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2

Gly

Lys

Lys

val

val

Leu

Gly

Lys

Lys

Gly

Asp

Thr

val

Glu

Leu

Thr

1

5

10

15

Cys

Thr

Ala

Ser

Gin

Lys

Lys

Ser

lie

Gin

Phe

His

Trp

Lys

Asn

Ser

20

25

30

Asn

Gin

lie

Lys

lie

Leu

Gly

Asn

Gin

Gly

Ser

Phe

Leu

Thr

Lys

Gly

35

40

45

Pro

Ser

Lys

Leu

Asn

Asp

Arg

Ala

Asp

Ser

Arg

Arg

Ser

Leu

Trp

Asp

50

55

60

Gin

Gly

Asn

Phe

Pro

Leu

lie

lie

Lys

Asn

Leu

Lys

lie

Glu

Asp

Ser

65

70

75

80

ASP

Thr

туг

lie

Cys

Glu

Val

Glu

Asp

Gin

Lys

Glu

Glu

val

Gin

Leu

85

90

95

Leu

val

Phe

Gly

Leu

Thr

Ala

Asn

Ser

ASP

Thr

Hi s

Leu

Leu

Gin

Gly

100

105

110

Gin

Ser

Leu

Thr

Leu

Thr

Leu

Glu

Ser

Pro

Pro

Gly

Ser

Ser

Pro

Ser

115

120

125

Val

Gin

Cys

Arg

Ser

Pro

Arg

Gly

Lys

Asn

lie

Gin

Gly

Gly

Lys

Thr

130

135

140

Leu

Ser

val

Ser

Gin

Leu

Glu

Leu

Gin

Asp

Ser

Gly

Thr

Trp

Thr

Cys

145

150

155

160

Thr

val

Leu

Gin

Asn

Gin

Lys

Lys

val

Glu

Phe

Lys

lie

Asp

lie

val

165

170

175

val

Leu

Ala

Phe

Gin

Lys

Ala

Ser

Ser

He

Val

Tyr

Lys

Lys

Glu

Gly

180

185

190

Glu

Gin

val

Glu

Phe

Ser

Phe

Pro

Leu

Ala

Phe

Thr

val

Glu

Lys

Leu

195

200

205

Thr

Gly

Ser

Gly

Glu

Leu

Trp

Trp

Gin

Ala

Glu

Arg

Ala

Ser

Ser

Ser

210

215

220

Lys

Ser

Trp

lie

Thr

Phe

Asp

Leu

Lys

Asn

Lys

Glu

val

Ser

val

Lys

225

230

235

240

Arg

val

Thr

Gin

Asp

Pro

Lys

Leu

Gin

Met

Gly

Lys

Lys

Leu

Pro

Leu

245

250

255

His

Leu

Thr

Leu

Pro

Gin

Ala

Leu

Pro

Gin

Tyr

Ala

Gly

Ser

Gly

Asn

260

265

270

Leu

Thr

Leu

Ala

Leu

Glu

Ala

Lys

Thr

Gly

Lys

Leu

His

Gin

Glu

val

275

280

285

Asn

Leu

Val

Val

Met

Arg

Ala

Thr

Gin

Leu

Gin

Lys

Asn

Leu

Thr

cys

290

295

300

Glu

val

Trp

Gly

Pro

Thr

Ser

Pro

Lys

Leu

Met

Leu

Ser

Leu

Lys

Leu

305

310

315

320

Glu

Asn

Lys

Glu

Ala

Lys

val

Ser

Lys

Arg

Glu

Lys

Ala

val

Trp

Val

325

330

335

Leu

Asn

Pro

Glu

Ala

Gly

Met

Trp

Gin

Cys

Leu

Leu

Ser

Asp

Ser

Gly

340

345

350

Gin

val

Leu

Leu

Glu

Ser

Asn

lie

Lys

val

Leu

Pro

Thr

Trp

Ser

Thr

- 13 032021

355

360

365

РГО

val

Gin

Pro

Met

Ala Leu

lie

val

Leu

Gly

Gly

val

Ala

Gly

Leu

370

375

380

Leu

Leu

Phe

lie

Gly

Leu Gly

lie

Phe

Phe

cys

val

Arg

Cys

Arg

His

385

390

395

400

Arg

Arg

Arg

Gin

Ala

Glu Arg

Met

Ser

Gin

ile

Lys

Arg

Leu

Leu

Ser

405

410

415

Glu

Lys

Lys

Thr

Cys

Gin Cys

Pro

Hi s

Arg

Phe

Gin

Lys

Thr

Cys

Ser

420

425

430

pro lie <210> 3 <211> 47 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3

Ile

Gly

Leu

Gly

lie

Phe

Phe

Cys

val

Arg

cys

Arg

His

Arg

Arg

Arg

412

415

420

425

Gin

Ala

Glu

Arg

Met

Ser

Gin

Ile

Lys

Arg

Leu

Leu

Ser

Glu

Lys

Lys

430

435

440

Thr

Cys

Gin

Cys

Pro

Hi s

Arg

Phe

Gin

Lys

Thr

Cys

Ser

Pro

ile

445

450

455

458

<210> 4 <211> 36 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4

Gly

Lys

Lys

val

val

Leu

Gly

Lys

Lys

Gly

Asp

Thr

val

Glu

Leu

Thr

25

30

35

40

Cys

Thr

Ala

Ser

Gin

Lys

Lys

Ser

lie

Gin

Phe

His

Trp

Lys

Asn

Ser

45

50

55

Asn

Gin

Ile

Lys

<210> 5 <211> 15 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 5

Asp Thr туг	ile Cys Glu val Glu Asp Gin Lys Glu Glu val Gin
1	5	10	15

<210> 6 <211> 25 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 6

Lys	Glu	Glu	val	Gin	Leu	Leu	val	Phe Gly	Leu Thr Ala Asn	Ser Asp
115					120				125	130
Thr	Hi s	Leu	Leu	Gin	Gly	Gin	Ser	Leu
				135				139

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims (13)

1. Фармацевтическая композиция, содержащая активированную-потенцированную форму антитела к CD4 рецептору.

2. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что активированная-потенцированная форма антитела к CD4 рецептору получена к цельной молекуле CD4 рецептора, имеющей последовательность SEQ ID NO: 1.

3. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что активированная-потенцированная форма антитела к CD4 рецептору получена к фрагменту молекулы CD4 рецептора, имеющему последовательность, выбранную из группы, стоящей из SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6.

4. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что активированнуюпотенцированную форму антитела к CD4 рецептору используют в виде смеси гомеопатических разведений C12, C30 и C50, нанесенных на твердый носитель.

5. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что активированнуюпотенцированную форму антитела к CD4 рецептору используют в виде смеси гомеопатических разведений C12, C30 и C200, нанесенных на твердый носитель.

- 14 032021

6. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что активированной-потенцированной формой антитела к CD4 рецептору является моноклональное, поликлональное или естественное антитело.

7. Фармацевтическая композиция по п.6, отличающаяся тем, что активированной-потенцированной формой антитела к CD4 рецептору является поликлональное антитело.

8. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что активированная-потенцированная форма антитела к CD4 рецептору приготовлена путем многократного последовательного разведения со встряхиванием каждого разведения.

9. Способ лечения и профилактики заболеваний, вызванных ВИЧ или ассоциированных с ВИЧ, отличающийся тем, что нуждающемуся в этом пациенту вводят активированную-потенцированную форму антитела к CD4 рецептору.

10. Способ по п.9, отличающийся тем, что заболеванием, вызванным ВИЧ или ассоциированным с ВИЧ, является СПИД.

11. Способ по п.9 или 10, отличающийся тем, что указанная комбинированная фармацевтическая композиция вводится в виде от одной до двух дозированных форм, при этом каждая из дозированных форм вводится от одного до четырех раз в день.

12. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанная комбинированная фармацевтическая композиция вводится в виде от одной до двух дозированных форм два раза в день.

13. Фармацевтическая композиция для использования в лечении пациента, страдающего от заболевания, вызванного ВИЧ или ассоциированного с ВИЧ, включая СПИД, отличающаяся тем, что указанная композиция получена путем представления активированной-потенцированной формы антитела к CD4 рецептору, полученной многократным последовательным разведением и многократным встряхиванием каждого полученного разведения в соответствии с гомеопатической технологией и их дальнейшим объединением путем смешивания разведений или, альтернативно, орошением твердого носителя указанной комбинацией разведений или разведениями раздельно.

Евразийская патентная организация, ЕАПВ

Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2