EA029002B1 - Съедобная композиция - Google Patents
Съедобная композиция Download PDFInfo
- Publication number
- EA029002B1 EA029002B1 EA201391803A EA201391803A EA029002B1 EA 029002 B1 EA029002 B1 EA 029002B1 EA 201391803 A EA201391803 A EA 201391803A EA 201391803 A EA201391803 A EA 201391803A EA 029002 B1 EA029002 B1 EA 029002B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- glucose
- glucoside
- flavonoid
- composition according
- inhibitor
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 45
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 104
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 62
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 49
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 claims abstract description 47
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 claims abstract description 47
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 claims abstract description 41
- TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N Aglycone of yadanzioside D Natural products COC(=O)C12OCC34C(CC5C(=CC(O)C(O)C5(C)C3C(O)C1O)C)OC(=O)C(OC(=O)C)C24 TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N Astrantiagenin E-methylester Natural products CC12CCC(O)C(C)(CO)C1CCC1(C)C2CC=C2C3CC(C)(C)CCC3(C(=O)OC)CCC21C PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims abstract description 13
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 13
- 230000000291 postprandial effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- -1 flavonoid glucoside Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 10
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 10
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 230000002641 glycemic effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- OVSQVDMCBVZWGM-IDRAQACASA-N Hirsutrin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)C1=C(c2cc(O)c(O)cc2)Oc2c(c(O)cc(O)c2)C1=O OVSQVDMCBVZWGM-IDRAQACASA-N 0.000 claims description 11
- FVQOMEDMFUMIMO-UHFFFAOYSA-N Hyperosid Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2OC1C1=CC=C(O)C(O)=C1 FVQOMEDMFUMIMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- GXMWXESSGGEWEM-UHFFFAOYSA-N isoquercitrin Natural products OCC(O)C1OC(OC2C(Oc3cc(O)cc(O)c3C2=O)c4ccc(O)c(O)c4)C(O)C1O GXMWXESSGGEWEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- OVSQVDMCBVZWGM-QSOFNFLRSA-N quercetin 3-O-beta-D-glucopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C(C=2C=C(O)C(O)=CC=2)OC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O OVSQVDMCBVZWGM-QSOFNFLRSA-N 0.000 claims description 11
- HDDDNIUXSFCGMB-UHFFFAOYSA-N quercetin 3-galactoside Natural products OCC1OC(OC2=C(Oc3ccc(O)c(O)c3C2=O)c4ccc(O)c(O)c4)C(O)C(O)C1O HDDDNIUXSFCGMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- PEFNSGRTCBGNAN-QNDFHXLGSA-N luteolin 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C=C(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)OC2=C1 PEFNSGRTCBGNAN-QNDFHXLGSA-N 0.000 claims description 10
- MOZJVOCOKZLBQB-UHFFFAOYSA-N Vitexin Natural products OCC1OC(Oc2c(O)c(O)cc3C(=O)C=C(Oc23)c4ccc(O)cc4)C(O)C(O)C1O MOZJVOCOKZLBQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 9
- 235000006539 genistein Nutrition 0.000 claims description 9
- 229940045109 genistein Drugs 0.000 claims description 9
- TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N genistein Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N genistein 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N 0.000 claims description 9
- SGEWCQFRYRRZDC-VPRICQMDSA-N vitexin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1=C(O)C=C(O)C2=C1OC(C=1C=CC(O)=CC=1)=CC2=O SGEWCQFRYRRZDC-VPRICQMDSA-N 0.000 claims description 9
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 8
- 229930003949 flavanone Natural products 0.000 claims description 8
- 235000011981 flavanones Nutrition 0.000 claims description 8
- SUTSVCLKBLJSPQ-UHFFFAOYSA-N luteolin 7-glucoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1C1=CC(O)=C2C(=O)C=C(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)OC2=C1 SUTSVCLKBLJSPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- ZONYXWQDUYMKFB-UHFFFAOYSA-N SJ000286395 Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)CC1C1=CC=CC=C1 ZONYXWQDUYMKFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 claims description 7
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 claims description 7
- CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N isoflavone Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC(OC)=C1C1=COC2=C(C=CC(C)(C)O3)C3=C(OC)C=C2C1=O CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 235000008696 isoflavones Nutrition 0.000 claims description 7
- IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N kaempferol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 235000009498 luteolin Nutrition 0.000 claims description 7
- IQPNAANSBPBGFQ-UHFFFAOYSA-N luteolin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 IQPNAANSBPBGFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- LRDGATPGVJTWLJ-UHFFFAOYSA-N luteolin Natural products OC1=CC(O)=CC(C=2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C=2)=C1 LRDGATPGVJTWLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000001100 (2S)-5,7-dihydroxy-2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)chroman-4-one Substances 0.000 claims description 6
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 claims description 6
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 claims description 6
- AIONOLUJZLIMTK-AWEZNQCLSA-N hesperetin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1[C@H]1OC2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)C1 AIONOLUJZLIMTK-AWEZNQCLSA-N 0.000 claims description 6
- AIONOLUJZLIMTK-UHFFFAOYSA-N hesperetin Natural products C1=C(O)C(OC)=CC=C1C1OC2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)C1 AIONOLUJZLIMTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000010209 hesperetin Nutrition 0.000 claims description 6
- 229960001587 hesperetin Drugs 0.000 claims description 6
- FTODBIPDTXRIGS-UHFFFAOYSA-N homoeriodictyol Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2)=C1 FTODBIPDTXRIGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- GOMNOOKGLZYEJT-UHFFFAOYSA-N isoflavone Chemical compound C=1OC2=CC=CC=C2C(=O)C=1C1=CC=CC=C1 GOMNOOKGLZYEJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 6
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- FTVWIRXFELQLPI-ZDUSSCGKSA-N (S)-naringenin Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1[C@H]1OC2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)C1 FTVWIRXFELQLPI-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims description 5
- XENHPQQLDPAYIJ-PEVLUNPASA-O delphinidin 3-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC2=C(O)C=C(O)C=C2[O+]=C1C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 XENHPQQLDPAYIJ-PEVLUNPASA-O 0.000 claims description 5
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims description 5
- WGEYAGZBLYNDFV-UHFFFAOYSA-N naringenin Natural products C1(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2OC(C1)C1=CC=C(CC1)O WGEYAGZBLYNDFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000007625 naringenin Nutrition 0.000 claims description 5
- 229940117954 naringenin Drugs 0.000 claims description 5
- CITFYDYEWQIEPX-UHFFFAOYSA-N Flavanol Natural products O1C2=CC(OCC=C(C)C)=CC(O)=C2C(=O)C(O)C1C1=CC=C(O)C=C1 CITFYDYEWQIEPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 108091052347 Glucose transporter family Proteins 0.000 claims description 4
- KZNIFHPLKGYRTM-UHFFFAOYSA-N apigenin Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=CC(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 KZNIFHPLKGYRTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XADJWCRESPGUTB-UHFFFAOYSA-N apigenin Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1=CC(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 XADJWCRESPGUTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000008714 apigenin Nutrition 0.000 claims description 4
- 229940117893 apigenin Drugs 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 235000011987 flavanols Nutrition 0.000 claims description 4
- RTIXKCRFFJGDFG-UHFFFAOYSA-N Chrysin Natural products C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=CC=C1 RTIXKCRFFJGDFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 102000018711 Facilitative Glucose Transport Proteins Human genes 0.000 claims description 3
- OEIJRRGCTVHYTH-UHFFFAOYSA-N Favan-3-ol Chemical compound OC1CC2=CC=CC=C2OC1C1=CC=CC=C1 OEIJRRGCTVHYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- FGUBFGWYEYFGRK-HNNXBMFYSA-N Pinocembrin Natural products Cc1cc(C)c2C(=O)C[C@H](Oc2c1)c3ccccc3 FGUBFGWYEYFGRK-HNNXBMFYSA-N 0.000 claims description 3
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 3
- KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N dihydrochrysin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2)=C1 KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 claims description 3
- PXUQTDZNOHRWLI-OXUVVOBNSA-O malvidin 3-O-beta-D-glucoside Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC(C=2C(=CC=3C(O)=CC(O)=CC=3[O+]=2)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)=C1 PXUQTDZNOHRWLI-OXUVVOBNSA-O 0.000 claims description 3
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 claims description 3
- URFCJEUYXNAHFI-ZDUSSCGKSA-N pinocembrin Chemical compound C1([C@@H]2CC(=O)C3=C(O)C=C(C=C3O2)O)=CC=CC=C1 URFCJEUYXNAHFI-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims description 3
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 claims description 3
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 claims description 3
- UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N Demethoxycapillarisin Natural products C1=CC(O)=CC=C1OC1=CC(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- YTMNONATNXDQJF-UBNZBFALSA-N chrysanthemin Chemical compound [Cl-].O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC2=C(O)C=C(O)C=C2[O+]=C1C1=CC=C(O)C(O)=C1 YTMNONATNXDQJF-UBNZBFALSA-N 0.000 claims description 2
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000002208 flavanones Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 2
- 235000008777 kaempferol Nutrition 0.000 claims description 2
- UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N morin Natural products OC1=CC(O)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 2
- 229940121793 Sodium/glucose cotransporter 1 inhibitor Drugs 0.000 claims 1
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 abstract description 21
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 20
- IOUVKUPGCMBWBT-DARKYYSBSA-N Phloridzin Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 IOUVKUPGCMBWBT-DARKYYSBSA-N 0.000 abstract description 5
- 108091006299 SLC2A2 Proteins 0.000 abstract description 5
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 abstract description 5
- IOUVKUPGCMBWBT-UHFFFAOYSA-N phloridzosid Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 IOUVKUPGCMBWBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- 235000019139 phlorizin Nutrition 0.000 abstract description 5
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 abstract description 4
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 abstract description 3
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 abstract description 2
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 abstract description 2
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 abstract description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 2
- 102000058058 Glucose Transporter Type 2 Human genes 0.000 abstract 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 abstract 1
- 108010059881 Lactase Proteins 0.000 abstract 1
- 102000000070 Sodium-Glucose Transport Proteins Human genes 0.000 abstract 1
- 108010080361 Sodium-Glucose Transport Proteins Proteins 0.000 abstract 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 abstract 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 abstract 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 abstract 1
- 102000003673 Symporters Human genes 0.000 abstract 1
- 108090000088 Symporters Proteins 0.000 abstract 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000004190 glucose uptake Effects 0.000 abstract 1
- 229940116108 lactase Drugs 0.000 abstract 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 abstract 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 abstract 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 abstract 1
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 93
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 32
- 230000006377 glucose transport Effects 0.000 description 24
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 14
- 150000008131 glucosides Chemical class 0.000 description 13
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 12
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 10
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 10
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 10
- 210000001842 enterocyte Anatomy 0.000 description 9
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 9
- VGEREEWJJVICBM-UHFFFAOYSA-N phloretin Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1CCC(=O)C1=C(O)C=C(O)C=C1O VGEREEWJJVICBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 150000002207 flavanone derivatives Chemical class 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- IOUVKUPGCMBWBT-QNDFHXLGSA-N phlorizin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 IOUVKUPGCMBWBT-QNDFHXLGSA-N 0.000 description 6
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 5
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 5
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 5
- ZWTDXYUDJYDHJR-UHFFFAOYSA-N (E)-1-(2,4-dihydroxyphenyl)-3-(2,4-dihydroxyphenyl)-2-propen-1-one Natural products OC1=CC(O)=CC=C1C=CC(=O)C1=CC=C(O)C=C1O ZWTDXYUDJYDHJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- YQHMWTPYORBCMF-UHFFFAOYSA-N Naringenin chalcone Natural products C1=CC(O)=CC=C1C=CC(=O)C1=C(O)C=C(O)C=C1O YQHMWTPYORBCMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- KMOUJOKENFFTPU-UHFFFAOYSA-N cosmosiin Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC(O)=C2C(=O)C=C(C=3C=CC(O)=CC=3)OC2=C1 KMOUJOKENFFTPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- KZMACGJDUUWFCH-UHFFFAOYSA-O malvidin Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC(C=2C(=CC=3C(O)=CC(O)=CC=3[O+]=2)O)=C1 KZMACGJDUUWFCH-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 4
- DLIKSSGEMUFQOK-SFTVRKLSSA-N naringenin 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=C(C(=O)C[C@H](O2)C=3C=CC(O)=CC=3)C2=C1 DLIKSSGEMUFQOK-SFTVRKLSSA-N 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- RXVLWCCRHSJBJV-UHFFFAOYSA-N prunin Natural products OCC1OC(O)C(Oc2cc(O)c3C(=O)CC(Oc3c2)c4ccc(O)cc4)C(O)C1O RXVLWCCRHSJBJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- CAHGSEFWVUVGGL-UBNZBFALSA-N pelargonidin 3-O-beta-D-glucoside chloride Chemical compound [Cl-].O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC2=C(O)C=C(O)C=C2[O+]=C1C1=CC=C(O)C=C1 CAHGSEFWVUVGGL-UBNZBFALSA-N 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 3
- DKVBOUDTNWVDEP-NJCHZNEYSA-N teicoplanin aglycone Chemical compound N([C@H](C(N[C@@H](C1=CC(O)=CC(O)=C1C=1C(O)=CC=C2C=1)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)OC=1C=C3C=C(C=1O)OC1=CC=C(C=C1Cl)C[C@H](C(=O)N1)NC([C@H](N)C=4C=C(O5)C(O)=CC=4)=O)C(=O)[C@@H]2NC(=O)[C@@H]3NC(=O)[C@@H]1C1=CC5=CC(O)=C1 DKVBOUDTNWVDEP-NJCHZNEYSA-N 0.000 description 3
- DOUMFZQKYFQNTF-WUTVXBCWSA-N (R)-rosmarinic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)O)OC(=O)\C=C\C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 DOUMFZQKYFQNTF-WUTVXBCWSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 206010052360 Colorectal adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- ACBOFPQSBWBAQR-UHFFFAOYSA-N Cosmosiin Natural products OCC1OC(Oc2cc(O)c3C(=O)C=C(Oc3c2)c4cccc(O)c4)C(O)C(O)C1O ACBOFPQSBWBAQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- RPVIQWDFJPYNJM-UHFFFAOYSA-N Ganodermic acid Ja Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C=C1O RPVIQWDFJPYNJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N Hydroquinone Chemical compound OC1=CC=C(O)C=C1 QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100040402 Phlorizin hydrolase Human genes 0.000 description 2
- RPVIQWDFJPYNJM-MPPJEPTCSA-N Quercetin 3,4'-di-O-beta-D-glucopyranoside Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)c1c(O)cc(C2=C(O[C@H]3[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)C(=O)c3c(O)cc(O)cc3O2)cc1 RPVIQWDFJPYNJM-MPPJEPTCSA-N 0.000 description 2
- 108091006277 SLC5A1 Proteins 0.000 description 2
- 102000058090 Sodium-Glucose Transporter 1 Human genes 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 229930014669 anthocyanidin Natural products 0.000 description 2
- 235000008758 anthocyanidins Nutrition 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- VEVZSMAEJFVWIL-UHFFFAOYSA-O cyanidin cation Chemical compound [O+]=1C2=CC(O)=CC(O)=C2C=C(O)C=1C1=CC=C(O)C(O)=C1 VEVZSMAEJFVWIL-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- KYQZWONCHDNPDP-QNDFHXLGSA-N daidzein 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 KYQZWONCHDNPDP-QNDFHXLGSA-N 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- HVQAJTFOCKOKIN-UHFFFAOYSA-N flavonol Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C(O)=C1C1=CC=CC=C1 HVQAJTFOCKOKIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011957 flavonols Nutrition 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- NWKFECICNXDNOQ-UHFFFAOYSA-N flavylium Chemical compound C1=CC=CC=C1C1=CC=C(C=CC=C2)C2=[O+]1 NWKFECICNXDNOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N hydroquinone O-beta-D-glucopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N 0.000 description 2
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 2
- 235000009584 malvidin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 2
- HKEAFJYKMMKDOR-VPRICQMDSA-N puerarin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1=C(O)C=CC(C2=O)=C1OC=C2C1=CC=C(O)C=C1 HKEAFJYKMMKDOR-VPRICQMDSA-N 0.000 description 2
- RPVIQWDFJPYNJM-DEFKTLOSSA-N quercetin 3,4'-di-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)C=C1O RPVIQWDFJPYNJM-DEFKTLOSSA-N 0.000 description 2
- OIUBYZLTFSLSBY-HMGRVEAOSA-N quercetin 4'-O-beta-D-glucopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)C=C1O OIUBYZLTFSLSBY-HMGRVEAOSA-N 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N trans-caffeic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N (E)-3,4,5-trihydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 description 1
- DLIKSSGEMUFQOK-UHFFFAOYSA-N 5-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-7-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-2,3-dihydrochromen-4-one Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC(O)=C(C(=O)CC(O2)C=3C=CC(O)=CC=3)C2=C1 DLIKSSGEMUFQOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 240000003291 Armoracia rusticana Species 0.000 description 1
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102100035959 Cationic amino acid transporter 2 Human genes 0.000 description 1
- 241001292396 Cirrhitidae Species 0.000 description 1
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 1
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 1
- USNPULRDBDVJAO-YRBSALHSSA-O Cyanidin 3-rutinoside Natural products O(C[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](Oc2c(-c3cc(O)c(O)cc3)[o+]c3c(c(O)cc(O)c3)c2)O1)[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O1 USNPULRDBDVJAO-YRBSALHSSA-O 0.000 description 1
- GCPYCNBGGPHOBD-UHFFFAOYSA-N Delphinidin Natural products OC1=Cc2c(O)cc(O)cc2OC1=C3C=C(O)C(=O)C(=C3)O GCPYCNBGGPHOBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000042092 Glucose transporter family Human genes 0.000 description 1
- 102000004366 Glucosidases Human genes 0.000 description 1
- 108010056771 Glucosidases Proteins 0.000 description 1
- 101000765010 Homo sapiens Beta-galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 101001038051 Homo sapiens Phlorizin hydrolase Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 201000010538 Lactose Intolerance Diseases 0.000 description 1
- 229910007960 Li-Fe Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910006564 Li—Fe Inorganic materials 0.000 description 1
- YDIKCZBMBPOGFT-PWUSVEHZSA-N Malvidin 3-galactoside Chemical compound [Cl-].COC1=C(O)C(OC)=CC(C=2C(=CC=3C(O)=CC(O)=CC=3[O+]=2)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)=C1 YDIKCZBMBPOGFT-PWUSVEHZSA-N 0.000 description 1
- 102000007474 Multiprotein Complexes Human genes 0.000 description 1
- 108010085220 Multiprotein Complexes Proteins 0.000 description 1
- IKMDFBPHZNJCSN-UHFFFAOYSA-N Myricetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 IKMDFBPHZNJCSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- ZZAFFYPNLYCDEP-HNNXBMFYSA-N Rosmarinsaeure Natural products OC(=O)[C@H](Cc1cccc(O)c1O)OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2 ZZAFFYPNLYCDEP-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- 101150021208 SIT2 gene Proteins 0.000 description 1
- 108091006231 SLC7A2 Proteins 0.000 description 1
- 240000003186 Stachytarpheta cayennensis Species 0.000 description 1
- 235000009233 Stachytarpheta cayennensis Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 description 1
- 229930002877 anthocyanin Natural products 0.000 description 1
- 235000010208 anthocyanin Nutrition 0.000 description 1
- 239000004410 anthocyanin Substances 0.000 description 1
- 150000004636 anthocyanins Chemical class 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 229960000271 arbutin Drugs 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 235000012206 bottled water Nutrition 0.000 description 1
- 235000004883 caffeic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940074360 caffeic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 description 1
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 description 1
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 description 1
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 description 1
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150006280 clt2 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 235000007336 cyanidin Nutrition 0.000 description 1
- USNPULRDBDVJAO-FXCAAIILSA-O cyanidin 3-O-rutinoside Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC=2C(=[O+]C3=CC(O)=CC(O)=C3C=2)C=2C=C(O)C(O)=CC=2)O1 USNPULRDBDVJAO-FXCAAIILSA-O 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- FFNDMZIBVDSQFI-UHFFFAOYSA-N delphinidin chloride Chemical compound [Cl-].[O+]=1C2=CC(O)=CC(O)=C2C=C(O)C=1C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 FFNDMZIBVDSQFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 238000009585 enzyme analysis Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 102000013373 fibrillar collagen Human genes 0.000 description 1
- 108060002894 fibrillar collagen Proteins 0.000 description 1
- 150000002206 flavan-3-ols Chemical class 0.000 description 1
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 1
- 229930182486 flavonoid glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000007955 flavonoid glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 150000007946 flavonol Chemical class 0.000 description 1
- 150000002216 flavonol derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 150000002515 isoflavone derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229960001331 keracyanin Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- PCOBUQBNVYZTBU-UHFFFAOYSA-N myricetin Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C=2OC3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C(=O)C=2)=C1 PCOBUQBNVYZTBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000007743 myricetin Nutrition 0.000 description 1
- 229940116852 myricetin Drugs 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N p-hydroxyphenyl beta-D-alloside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- SWUARLUWKZWEBQ-VQHVLOKHSA-N phenethyl caffeate Chemical compound C1=C(O)C(O)=CC=C1\C=C\C(=O)OCCC1=CC=CC=C1 SWUARLUWKZWEBQ-VQHVLOKHSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- DOUMFZQKYFQNTF-MRXNPFEDSA-N rosemarinic acid Natural products C([C@H](C(=O)O)OC(=O)C=CC=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 DOUMFZQKYFQNTF-MRXNPFEDSA-N 0.000 description 1
- TVHVQJFBWRLYOD-UHFFFAOYSA-N rosmarinic acid Natural products OC(=O)C(Cc1ccc(O)c(O)c1)OC(=Cc2ccc(O)c(O)c2)C=O TVHVQJFBWRLYOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 1
- 230000001839 systemic circulation Effects 0.000 description 1
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000001810 trypsinlike Effects 0.000 description 1
- 229930195727 α-lactose Natural products 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
- A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
- A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Botany (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Продукты или питание с высоким содержанием доступных углеводов, таких как сахароза или крахмал, повышают постпрандиальные концентрации глюкозы в крови. Повторяющиеся высокие постпрандиальные "всплески" глюкозы в плазме ассоциируют с повышенным риском развития диабета второго типа. Неконтролируемые колебания уровня глюкозы являются нежелательными и любое снижение или "притупление" постпрандиальной концентрации глюкозы в крови потенциально является благоприятным. Данное открытие относится к съедобной композиции для замедления поглощения глюкозы в кишечнике через синергетическое ингибирование как активного натрий-глюкозного котранспортера 1 (SGLT1), так и пассивного транспортера глюкозы 2 (GLUT2), приводя к выравниванию или притуплению постпрандиального глюкозного пика. Таким образом, в первом аспекте изобретения предоставлена съедобная композиция, при этом композиция содержит по меньшей мере 5%, в расчете на сухую массу, по меньшей мере одного флавоноидного агликона и по меньшей мере 5%, в расчете на сухую массу, по меньшей мере одного флавоноидного глюкозида, где флавоноидный глюкозид по меньшей мере на 20%, предпочтительно по меньшей мере на 40%, наиболее предпочтительно по меньшей мере на 60% более устойчив к гидролизу с помощью лактазы-флоридзингидролазы, чем кверцетин-4-глюкозид, и где флавоноидный агликон является ингибитором GLUT2 и флавоноидный глюкозид является ингибитором SGLT1.
Description
изобретение относится к съедобной композиции для замедления всасывания глюкозы в кишечнике посредством синергетического ингибирования как натрий-глюкозного котранспортера 1 (8СЬТ1), так и пассивного транспортера глюкозы 2 (СЬиТ2), приводя к выравниванию или притуплению постпрандиального пика глюкозы.
Сущность изобретения
В первом аспекте изобретения предоставлена съедобная композиция, при этом композиция содержит по меньшей мере 5%, в расчете на сухую массу, по меньшей мере одного флавоноидного агликона и по меньшей мере 5%, в расчете на сухую массу, по меньшей мере одного флавоноидного моноглюкозида, где флавоноидный моноглюкозид по меньшей мере на 20%, предпочтительно по меньшей мере на 40%, наиболее предпочтительно по меньшей мере на 60% более устойчив к гидролизу с помощью лактазы-флоридзингидролазы, чем кверцетин-4-глюкозид, и где флавоноидный агликон является ингибитором СЬиТ2 и флавоноидный моноглюкозид является ингибитором §СЬТ 1.
Лактаза-флоридзингидролаза (ЬРН), бета-галактозидаза, является ферментом, обнаруженным в тонком кишечнике, вовлеченным в гидролиз дисахарида лактозы на составляющие его мономеры - галактозу и глюкозу. В частности, фермент гидролизирует бета-гликозидную связь в Ό-лактозе. Нехватка этого фермента вызывает непереносимость лактозы. ЬРН также обладает глюкозидазной активностью. Таким образом, важным является то, что глюкозид проявляет степень устойчивости к гидролизу ЬРН в тонком кишечнике, где происходит абсорбция глюкозы посредством транспортеров глюкозы.
Под термином "по меньшей мере на 20% более устойчив к гидролизу посредством ЬРН, чем кверцетин-4-глюкозид" подразумевается, что скорость гидролиза посредством ЬРН на по меньшей мере 20% ниже, чем скорость для кверцетин-4'-глюкозида. Таким образом, скорость равнялась бы нулю, если бы имела место на 100% большая устойчивость к гидролизу ЬРН, чем для кверцетин-4-глюкозида.
Под термином "флавоноидный агликон" подразумевается негликозилированный флавоноид. Под термином "флавоноидный моноглюкозид" подразумевается флавоноид, присоединенный к одиночному глюкозному звену. Под термином "ингибитор ОЬиТ2" подразумевается соединение, которое ингибирует трансмембранный белок-переносчик, известный как пассивный транспортер глюкозы 2. Под термином "ингибитор §СЬТ1" подразумевается соединение, которое ингибирует трансмембранный белокпереносчик, известный как натриевый котранспортер глюкозы 1.
Флавоноидный агликон может быть выбран из группы, состоящей из флавоновых агликонов, флаваноловых агликонов, флаваноновых агликонов, изофлавоновых агликонов и их смеси. Таким образом, под терминами "флавоновый агликон", "флаваноловый агликон", "флаваноновый агликон" и "изофлавоновые агликоны" подразумеваются негликозилированный флавон, флаванол, флаванон и изофлавон соответственно. В частности, флавоноидный агликон может быть выбран из группы, состоящей из апигенина, лютеолина, кверцетина, кемпферола, мирицетина, нарингенина, пиноцембрина, гесперетина, генистеина и их смеси.
Флавоноидный моноглюкозид может быть выбран из группы, состоящей из лютеолин-7-глюкозида, апигенин-8-С-глюкозида, кемпферол-7-О-глюкозида, кемпферол-3-О-глюкозида, нарингеноин-7-Οглюкозида, даидзеин-8-глюкозида, цианидин-3-глюкозида, кверцетин-3-глюкозида, пелагонидин-3глюкозида, мальвидин-3-глюкозида, дельфинидин-3-глюкозида и их смеси.
Молярное отношение флавоноидного агликона к флавоноидному моноглюкозиду может быть в диапазоне от 4:1 до 1:4, предпочтительно от 3:1 до 1:3, наиболее предпочтительно от 2:1 до 1:2.
Композиция может содержать не более чем 50%, предпочтительно не более чем 10%, наиболее предпочтительно не более чем 2% по массе флавоноидного агликона и отдельно не более чем 50%, предпочтительно не более чем 10%, наиболее предпочтительно не более чем 2% по массе флавоноидного моноглюкозида. Таким образом, при концентрации не более чем 2% по массе флавоноидного агликона, композиция должна содержать воду для того, чтобы композиция содержала по меньшей мере 5%, в расчете на сухую массу, по меньшей мере одного флавоноидного агликона.
Композиция предпочтительно представлена в форме суточной дозы, при этом суточная доза содержит по меньшей мере 50 мкмоль, предпочтительно по меньшей мере 100 мкмоль, наиболее предпочтительно по меньшей мере 250 мкмоль флавоноидного агликона и по меньшей мере 50 мкмоль, предпочтительно по меньшей мере 100 мкмоль, наиболее предпочтительно по меньшей мере 250 мкмоль флавоноидного моноглюкозида.
Композиция по изобретению может быть в форме упакованного напитка, содержащего не более чем 99,95% мас./мас. воды. Она также может быть в форме сухого порошка, содержащегося в саше, при этом сухой порошок пригоден для добавления к питанию.
Во втором аспекте изобретения предоставлен способ уменьшения постпрандиальной пиковой ам- 1 029002
плитуды глюкозы в крови или гликемического ответа у не больного диабетом индивидуума, при этом способ содержит этапы:
(a) пероральное введение композиции по первому аспекту изобретения не больному диабетом индивидууму; и
(b) пероральное введение сахарида не больному диабетом индивидууму;
где этап (а) происходит одновременно, предшествует на от 0 до 90, предпочтительно от 0 до 60 мин, или следует через от 0 до 30 мин за этапом (Ь) и
где сахарид содержит или является глюкозой.
В третьем аспекте изобретения предоставлен способ лечения индивидуума, нуждающегося в этом, от диабета 2-го типа, при этом способ содержит этапы:
(a) пероральное введение композиции по первому аспекту изобретения индивидууму, нуждающемуся в этом; и
(b) пероральное введение сахарида индивидууму, нуждающемуся в этом;
где этап (а) происходит одновременно, предшествует на от 0 до 90, предпочтительно от 0 до 60 мин, или следует через от 0 до 30 мин за этапом (Ь) и
где сахарид содержит или является глюкозой.
Сахарид может быть выбран из группы, состоящей из полисахарида, олигосахарида, дисахарида, моносахарида и их смеси.
В четвертом аспекте изобретения предоставлена композиция в соответствии с первым аспектом изобретения для применения для уменьшения постпрандиальной пиковой амплитуды глюкозы в крови или гликемического ответа у не больного диабетом индивидуума.
В пятом аспекте изобретения предоставлена композиция в соответствии с первым аспектом изобретения для применения в лечении диабета 2-го типа.
В шестом аспекте изобретения предоставлено применение композиции в соответствии с первым аспектом изобретения для получения лекарственного средства для уменьшения постпрандиальной пиковой амплитуды глюкозы в крови или гликемического ответа у не больного диабетом индивидуума.
В седьмом аспекте изобретения предоставлено применение композиции в соответствии с первым аспектом изобретения для получения лекарственного средства для лечения диабета 2-го типа.
Краткое описание фигур
Изобретение проиллюстрировано с помощью фигур, которые демонстрируют следующее: фиг. 1 - временный модель концентрации глюкозы во время приема пищи;
фиг. 2 - общий кумулятивный транспорт глюкозы (мкМ) через дифференцированные монослои Сасо-2 в присутствии или отсутствии ингибитора 8СЬТ1 (300 мкМ флоридзина (Ρζ)) в течение первых 15 мин в 5 мМ Ό-глюкозы и затем в присутствии или отсутствии ингибитора ОЬИТ2 (125 мкМ флоретина (Ρΐ)) в 25 мМ Ό-глюкозе в течение остальных 45 мин (ОК = носитель отрицательный контроль);
фиг. 3 - общий кумулятивный транспорт глюкозы (мкМ) через дифференцированные монослои Сасо-2 в присутствии или отсутствии ингибитора 8СЬТ1 (300 мкМ лютеолин-7-глюкозид (Ь7С)) в течение первых 15 мин в 5 мМ Ό-глюкозе и затем в присутствии или отсутствии ингибитора СЬиТ2 (50 мкМ генистеина (С)) в 25 мМ Ό-глюкозе в течение остальных 45 мин (ОК = носитель - отрицательный контроль);
фиг. 4 - общий кумулятивный транспорт глюкозы (мкМ) через дифференцированные монослои Сасо-2 в присутствии или отсутствии ингибитора 8СЬТ1 (300 мкМ апигенин-8-С-глюкозид (А8С)) в течение первых 15 мин в 5 мМ Ό-глюкозе и затем в присутствии или отсутствии ингибитора СЬИТ2 (50 мкМ генистеина (С)) в 25 мМ Ό-глюкозе в течение остальных 45 мин (ОК = носитель - отрицательный контроль);
фиг. 5 - общий кумулятивный транспорт глюкозы (мкМ) через дифференцированные монослои Сасо-2 в присутствии или отсутствии ингибитора 8СЬТ1 (300 мкМ кверцетин-3-глюкозид (Ц3С)) в течение первых 15 мин в 5 мМ Ό-глюкозе и затем в присутствии или отсутствии ингибитора СЬИТ2 (100 мкМ гесперетина (Н)) в 25 мМ Ό-глюкозе в течение остальных 45 мин (ОК = носитель - отрицательный контроль);
фиг. 6 - общий кумулятивный транспорт глюкозы (мкМ) через дифференцированные монослои Сасо-2 в присутствии или отсутствии ингибитора 8СЬТ1 (300 мкМ кверцетин-3-глюкозид (Ц3С)) в течение первых 15 мин в 5 мМ Ό-глюкозе и затем в присутствии или отсутствии ингибитора СЬИТ2 (50 мкМ лютеолина (Ь)) в 25 мМ Ό-глюкозе в течение остальных 45 мин (ОК = носитель - отрицательный контроль);
фиг. 7 - общий кумулятивный транспорт глюкозы (мкМ) через дифференцированные монослои Сасо-2 в присутствии или отсутствии ингибитора 8СЬТ1 (300 мкМ кемпферол-3-глюкозид (К3С)) в течение первых 15 мин в 5 мМ Ό-глюкозе и затем в присутствии или отсутствии ингибитора СЬИТ2 (50 мкМ гесперетин (Н)) в 25 мМ Ό-глюкозе в течение остальных 45 мин (ОК = носитель - отрицательный контроль);
фиг. 8 - общий кумулятивный транспорт глюкозы (мкМ) через дифференцированные монослои Сасо-2 в присутствии или отсутствии ингибитора 8СЬТ1 (300 мкМ кверцетин-3-глюкозид (Ц3С)) в течение
- 2 029002
первых 15 мин в 5 мМ Ό-глюкозе и впоследствии в присутствии или отсутствии ингибитора ОЬИТ2 (50 мкМ нарингенин (Ν)) в 25 мМ Ό-глюкозе в течение остальных 45 мин (ОК = носитель - отрицательный контроль);
фиг. 9 - общий кумулятивный транспорт глюкозы (мкМ) через дифференцированные монослои Сасо-2 в присутствии или отсутствии ингибитора 8ОЬТ1 (300 мкМ нарингенин-7-глюкозид (N70)) в течение первых 15 мин в 5 мМ Ό-глюкозе и затем в присутствии или отсутствии ингибитора ОЬИТ2 (50 мкМ апигенин (А)) в 25 мМ Ό-глюкозе в течение остальных 45 мин (ОК = носитель - отрицательный контроль);
фиг. 10 - общий кумулятивный транспорт глюкозы (мкМ) через дифференцированные монослои Сасо-2 в присутствии или отсутствии ингибитора 80ЬТ1 (300 мкМ дельфинидин-3-глюкозид (Ό30)) в течение первых 15 мин в 5 мМ Ό-глюкозе и затем в присутствии или отсутствии ингибитора ОЬИТ2 (50 мкМ генистеин (О)) в 25 мМ Ό-глюкозе в течение остальных 45 мин (ОК = носитель - отрицательный контроль).
Подробное описание изобретения
Пример 1. Идентификация ингибиторов §ОЬТ1 и ОЬИТ2.
Рутинное клеточное культивирование.
Человеческие эпителиальные клетки колоректальной аденокарциномы (Сасо-2) получали в Американской коллекции типовых культур (АТСС) и культивировали в среде для выращивания, состоящей из модифицированной по способу Дульбекко среды Игла (содержащей О1и1атах-1, 4,5 г/л Ό-глюкозы и 25 мМ 4-(2-гидрокиэтил)-1-пиперазин этансульфоновую кислоту (Нерез) (1иуЦгодеи)), 10% фетальной бычьей сыворотки (§1§та), 1% неосновных аминокислот (1иуЦгодеи) и 1 мМ пирувата натрия (§1§та). Клетки пересеивали стандартным образом при приблизительно 80% конфлюентности с использованием трипсиноподобного фермента ТтурЬЕ™ Е.хргезз §1аЫе ДиуЦтодеи) для открепления клеток и сеяли приблизительно 114 клеток в расчете на 1 мм2 в чистые колбы для культивирования тканей. Для экспериментов использовали только клетки между пересевами под номерами 45 и 49.
Приготовление дифференцированных клеточных монослоев Сасо-2.
96-луночные проницаемые вставные подложки Сотшид® НТ§ ТгаизуеП® (§1дта) являлись покрытыми коллагеном с 40 мкл 50 мкг/мл коллагена типа I из крысиного хвоста (ΒΌ Вюзаеисез) в 0,02 М уксусной кислоте в течение 1 ч при комнатной температуре в стерильных условиях. Вставки промывали два раза в забуференном фосфатом физиологическом растворе (ΡΒδ ДиуИгодеи)) и клетки Сасо-2 сеяли на вставки при 9,6х105 клеток/мл (75 мкл в расчете на вставку) в среде для выращивания и 30 мл среды для выращивания добавляли к питающему планшету снизу. Клетки оставляли для прикрепления коллагеновому матриксу и образования монослоев в течение 48 ч при 37°С, 5% СО2. И вставки, и питательный планшет промывали ΡΒδ и клетки инкубировали со средой для дифференцирования эритроцитов ΒΌ Еи1ето^Т1М™, содержащей раствор сывороточного наполнителя М1ТО+™ (оба ΒΌ Β^о8с^еисе8), 75 мкл в расчете на вставку и 30 мл в питающий планшет, в течение дополнительных 48 ч при 37°С, 5% СО2.
Клеточное скрининговое исследование ингибитора транспорта глюкозы.
Дифференцированные клеточные монослои аккуратно промывали забуференным фосфатом Дульбекко, содержащим СаС12 и МдС12 (ΡΒδ(+) (1иуЦгодеи)) и вставки переносили на новый 96-луночный приемный планшет Сотшид® ΠΡδ ТгаизуеП®- (δίβΐηη). Клетки инкубировали со свежим ΡΒδ(+) (75 мкл в расчете на вставку и 225 мкл в расчете на лунку) в течение 60 мин при 37°С, 5% СО2. ΡΒδ(+) аккуратно аспирировали и замещали 75 мкл в расчете на вставку или 5 мМ Ό-глюкозы ^1дта) ± тестируемое активное вещество, или 25 мМ Ό-глюкозы ± тестируемое активное вещество в трех повторах, и в каждую лунку быстро добавляли 225 мкл в расчете на лунку ΡΒδ(+). Лунки с 5 мМ глюкозы и лунки с 25 мМ глюкозы инкубировали при 37°С, 5% СО2 в течение 15 и 30 мин соответственно. Особенности всех тестируемых активных веществ приведены в табл. 1. Клеточные вставки переносили в новый приемный планшет, супернатант аккуратно аспирировали от клеток и замещали на 100 мкл 100 мкМ раствора Ьиа£ет Уе11о\у (δίβΐηη) для подтверждения целостности монослоев. В каждую лунку добавляли 225 мкл ΡΒδ(+) и инкубировали при 37°С, 5% СО2 в течение 1 ч. Затем клеточные вставки отбирали и проверяли проницаемость мембран к Ьисйет Уе11о\у измерением флуоресценции образцов при 485 нм (возбуждение) и 530 нм (эмиссия) на микропланшетном ридере флуоресценции δресΐ^атаx Оетий ЕМ.
Глюкозный анализ.
Количество глюкозы, перенесенное через клеточные монослои, измеряли с использованием глюкозного анализа на основе набора для анализа глюкоза/глюкозоксидаза 1иуйгодеи'8 Атр1ех Кеб. Кратко, 50 мкл каждого тестового образца переносили в 96-луночный планшет с черными сторонами/прозрачным дном (Отешет ΒΟ- Оие), в который добавляли 100 мкл реакционного буфера (0,5 мкл 10 мМ Атрййи Кеб, 1 мкл 10 пероксидазы хрена ЕД./мл, 1 мкл глюкозоксидазы 10 ЕД./мл и 97,5 мкл ΡΒδ (все δίβΐηη)). После 10 мин инкубирования при комнатной температуре, измеряли флуоресценцию образцов при 530 нм (возбуждение) и 590 нм (эмиссия) на флуоресцентном микропланшетном ридере δрес1татах Оетий ЕМ и концентрацию глюкозы экстраполировали по стандартной кривой.
Табл. 1 демонстрирует процент ингибирования каждым тестируемым активным веществом перено- 3 029002
са глюкозы через дифференцированный клеточный монослой Сасо-2. При более низкой концентрации Όглюкозы - 5 мМ, ранний перенос глюкозы через клеточный монослой происходит преимущественно посредством апикально экспрессированного, высокоаффинного, глюкозного транспортера с низкой емкостью - §СЬТ1. При более высоких концентрациях Ό-глюкозы §СЬТ1 транспортер становится насыщенным, и вследствие этого большая часть транспорта глюкозы через монослой совершается низкоаффинным транспортером с высокой емкостью - ОЬИТ2, который направляется к апикальной мембране только после первоначального §СЬТ1-зависимого переноса глюкозы. Клеточная модель скрининга, детально описанная в способах выше, разработана для использования преимуществ этих различий в оптимальных условиях для каждого транспортера для идентификации как §ОЬТ1, так и ОЬИТ2 специфичных ингибиторов. Хотя как §ОЬТ1, так и ОЬИТ2 на апикальной мембране переносят глюкозу внутрь энтероцита, ОЬИТ2 также экспрессируется на базолатеральной мембране, где он необходим для транспорта глюкозы из клетки. Следовательно, ОЬиТ2-специфичные ингибиторы будут не только блокировать апикальнонаправленные транспортеры при высоких концентрациях Ό-глюкозы (25 мМ), они также будут проникать в клетку и блокировать выход глюкозы из энтероцита при низких концентрациях Ό-глюкозы (5 мМ). Вследствие этого для дифференциации между ингибированием апикальных и базолатеральных транспортеров каждое активное вещество тестировали как при 5 мМ Ό-глюкозе в течение 15 мин, так и при 25 мМ Ό-глюкозе в течение 30 мин. Активные вещества классифицировали как §СЬТ1 ингибиторы, если они проявляли по меньшей мере на 20% ингибирование транспорта глюкозы при 5 мМ Ό-глюкозе и соответствующее не более чем 20% ингибированию при 25 мМ Ό-глюкозе. Активные вещества, которые были способны ингибировать транспорт глюкозы по меньшей мере на 20%, в обоих условиях классифицировали как ОЬиТ2-специфичные ингибиторы. Этот подход проверяли посредством применения хорошо известных специфичных ингибиторов как §СЬТ1, так и ОЬИТ2, а именно флоридзина и флоретина соответственно.
Вышеупомянутая клеточная модель транспорта глюкозы, описанная Кс11с11 с1 а1. (ΌίαόοΙοδ. 54, 10, 3056-62 (2005)) и проиллюстрированная фиг. 1, была разработана для имитации локализованных изменений концентрации глюкозы в тонком кишечнике во время потребления богатого углеводом питания.
Перед приемом пищи концентрация свободной глюкозы в просвете кишечника является низкой (<5 мМ), и апикально экспрессируемый транспортер 8СЬТ1 интенсивно переносит любую доступную глюкозу внутрь энтероцита. Транспортеры 0ШТ2 также активны на базолатеральной мембране энтероцита, при этом перенося глюкозу из крови в клетку для поддержания клеточного метаболизма при необходимости. Во время приема пищи локальная концентрация глюкозы начинает повышаться (5-10 мМ) и переносится из кишечного просвета посредством §СЬТ1 и затем в системный кровоток посредством СЬиТ2. В результате этого первоначального транспорта глюкозы через энтероцит, внутриклеточные запасы СЬиТ2 мобилизуются и направляются к апикальной мембране. Кратко, после приема пищи имеют место очень высокие локальные концентрации глюкозы (25-100 мМ) по мере того, как содержащиеся в питании углеводы разлагаются на моносахариды альфа-глюкозидазными ферментами, расположенными на апикальной мембране энтероцита. При этих высоких уровнях глюкозы высокоаффинный транспортер §СЬТ1 с низкой емкостью становится насыщенным, и большая часть транспорта глюкозы через энтероцит происходит благодаря низкоаффинным транспортерам 0ШТ2 с высокой емкостью, в это время присутствующим в апикальной мембране.
Табл. 1 демонстрирует, что для ингибирования §СЬТ1 требуется флавоноидный моноглюкозид, как подтверждено посредством лютеолин-7-глюкозида, апигенин-7-глюкозида, апигенин-8-С-глюкозида, кемпферол-3-глюкозида, кемпферол-7-глюкозида, кверцетин-3-глюкозида, кверцетин-4-глюкозида, нарингенин-7-глюкозида, эридиктиол-7-глюкозида, даидзеин-8-С-глюкозида, даидзеин-7-глюкозида, цианидин-3-глюкозида, мальвидин-3-О-глюкозида, дельфинидин-3-глюкозида и пеларгонидин-3-глюкозида. Действительно, наличие дополнительной группы глюкозы в химической структуре нарушает это ингибиторное действие, как продемонстрировано с помощью кверцетин-3,4'-диглюкозида. Специфичность к глюкозиду подтверждается отсутствием ингибирующей §СЬТ1 активности у других тестированных флавоноидных гликозидов, включая цианидин-3-рутинозид и мальвидин-3-О-галактозид. В дополнение, недостаток ингибирующей §СЬТ1 активности, продемонстрированный посредством гидрохинонмоноглюкозида, арбутина, укрепляет важность флавоноидной структуры в молекуле глюкозида. Другие нефлавоноидные глюкозиды, которые, по утверждению ХУсйсН с1 а1. (ί. о£ ΝυΙτίΙίοη, 119, 11, 1698-704 (1989)), являются ингибиторами глюкозного транспортера, такие как хлорогеновая кислота, кофеиновая кислота и розмариновая кислота (сложный эфир кофеиновой кислоты), продемонстрировали отсутствие ингибиторной активности в этой клеточной модели как по отношению к §СЬТ1, так и по отношению к 0ШТ2ингибированию. Табл. 1 также демонстрирует, что было подтверждено, что все агликоны, тестируемые из каждого выбранного флавоноидного класса, за исключением антоцианидинов, являлись ингибиторами СЬиТ2.
Пример 2. Синергизм между ингибиторами §СЬТ1 и 0ШТ2.
Приготовление дифференцированного клеточного монослоя Сасо-2.
Клетки Сасо-2 культивировали и стандартным образом пересеивали, как описано в примере 1. Клетки Сасо-2 сеяли на фибриллярные коллагеновые мультилуночные вставки ВюСоа! НТ§ (ΒΌ Вю8С1- 4 029002
епсез) при 2,5х105 клеток/мл (500 мкл в расчете на вставку) в среде для выращивания, и 30 мл среды для выращивания добавляли на питающий планшет снизу. Клетки оставляли для прикрепления к коллагеновому матриксу и образования монослоев в течение 24 ч при 37°С, 5% СО2. Как вставки, так и питающий планшет в РВ8 и клетки инкубировали со средой для дифференциации энтероцитов ΒΌ Еп!его-8Т1М™, содержащей раствор сывороточного наполнителя М1ТО+™ (оба ΒΌ Вюзшепсез), 500 мкл в расчете на вставку и 30 мл в питающий планшет, в течение дополнительных 48 ч при 37°С, 5% СО2.
Таблица 1
Активные вещества, тестируемые на 8ОЬТ1 и ОЬиТ2 ингибирующую активность в клетках Сасо-2 с использованием 5 мМ Ό-глюкозы в течение 15 мин и 25 мМ Ό-глюкозы в течение 30 мин соответственно. Обозначенный класс транспортера, ингибируемый каждым активным веществом, основан на ингибиторах 8ОЬТ1, имеющих >20% ингибирования транспорта глюкозы при 5 мМ Ό-глюкозы и <20% ингибирования при 25 мМ Ό-глюкозе, и ОТНТ2 ингибиторах, имеющих >20% ингибирования как при 5 мМ, так
и при 25 мМ Ό-глюкозе
| Химическое семейство: | Тестируемое активное вещество3 | Растворитель | % ингибирования транспорта глюкозы | Классь | Поставщик | ||
| 5 мМ | 25 мМ | ||||||
| Халкон | Флоридзин | ЕДОН | 57,57 | 18,42 | 36ЬТ1 | ЗДдта | |
| Флоретин | ЕДОН | 86, 77 | 76, 14 | сьитг | ЗДдта | ||
| Флавоноиды: | | Флавоны | Апигении | ДМСО | 56, 83 | 49,28 | сьитг | 31дта |
| Лютеолин | ДМСО | 77,42 | 63,24 | сьитг | 31дта | ||
| Лютеолин-7-глюкозид | ДМСО | 44,09 | 17,03 | 36ЬТ1 | ЕхДгазупДНезе | ||
| Апигенин-7-глюкозид | ДМСО | 37,97 | 12,81 | 36ЬТ1 | ЕхДгазупДНезе | ||
| Апигенин-8-С-глюкозид | ДМСО | 33, 84 | 5,76 | 36ЬТ1 | ЕхДгазупДНезе | ||
| Кверцетин | ДМСО | 80,78 | 61,37 | сьитг | 31дта | ||
| Кемпферол | ДМСО | 25, 96 | 32,44 | сьитг | 31дта | ||
| Мирицетин | ДМСО | 76, 80 | 55, 04 | сьитг | Зтдта | ||
| Флавонолы | Кемпферол 7-0-глюкозид | ДМСО | 43, 89 | 14,42 | 36ЬТ1 | ЕхДгазупДНезе | |
| Кемпферол 3-0-глюкозид | ДМСО | 53, 89 | 19, 12 | 36ЬТ1 | ЕхДгазупДНезе | ||
| Кверцетин-3-глюкозид | ДМСО | 46,40 | 12,20 | 36ЬТ1 | Р1апДСНет | ||
| Кверцетин-4-глюкозид | ДМСО | 43,20 | 19, 05 | 36ЬТ1 | Р1апДСНет | ||
| Кверцетин-3,4'диглюкозид | ДМСО | 17,48 | НТ | Нет | Р1апДСНет | ||
| Нарингенин | ДМСО | 68,96 | 57,05 | сьитг | ЗДдта | ||
| Пиноцембрин | ДМСО | 47,72 | 48,07 | сьитг | 31дта | ||
| Флаваноны | Гесперетин | ДМСО | 72,34 | 74,43 | сьитг | 31дта | |
| Нарингенин-7-0-глюкозид | ДМСО | 29, 56 | 0, 06 | 36ЬТ1 | ЕхДгазупДНезе | ||
| Эридиктиол-7-0-глюкозид | ДМСО | 38,88 | 4,98 | 36ЬТ1 | ЕхДгазупДНезе | ||
| Генистеин | ДМСО | 56, 53 | 57,73 | сьитг | 31дта | ||
| Изофлавоны | Даидзеин-8-С-глюкозид | ДМСО | 20,31 | 12,88 | 36ЬТ1 | 31дта | |
| Даидзеин-7-глюкозид | ДМСО | 35, 03 | 7,23 | 56ЪТ1 | ЕхДгазупДНезе | ||
| Цианидин | ДМСО | 7,93 | 3,21 | Нет | СНгота Оех | ||
| Пеларгонидин | ДМСО | 4,07 | 16,48 | Нет | СНгота Оех | ||
| Мальвидин | ДМСО | 14,21 | 4,99 | Нет | СНгота Оех | ||
| Дельфининдин | ДМСО | 0, 01 | 15,86 | Нет | СНгота Оех | ||
| Антоцианидины | Цианидин-3-глюко зид | ДМСО | 42,48 | НО | ЗСДТ1 | ЕхДгазупДНезе | |
| Цианидин-3-рутинозид | ДМСО | 19, 42 | НО | Нет | ЕхДгазупДНезе | ||
| Мальвидин-3-0-глюкозид | ДМСО | 22,92 | 10, 91 | 36ЬТ1 | ЕхДгазупДНезе |
| Дельфинидин-3-глюкозид | ДМСО | 41,27 | 13,58 | 56ЪТ1 | ЕхДгазупДНезе | ||
| Пеларгонидин-3-глюкозид | ДМСО | 27,30 | НО | ЗСЬТ1 | ЕхДгазупДНезе | ||
| Мальвидин 3-0-Галактозид | ДМСО | 19, 05 | 10,41 | Нет | Зтдта |
а Все активные вещества тестировались в 150 мкМ и 300 мкМ для анализов ингибирования ОТНТ2 и ингибирования 8ОЬТ1 соответственно.
ь На основе ингибиторов 8ОЬТ1, имеющих >20% ингибирования при 5 мМ (глюкоза) и <20% ингибирования при 25 мМ, и ОТНТ2, имеющих >20% ингибирования и при 5 мМ и 25 мМ.
НО - не обнаружен.
НТ - не тестировался.
- 5 029002
Клеточная модель транспорта глюкозы.
Дифференцированные клеточные монослои аккуратно промывали в РВ§(+) и вставки переносили в новый стандартный 24-луночный планшет для культивирования тканей. Клетки инкубировали со свежим РВ§(+) (500 мкл в расчете на вставку и 1 мл в расчете на лунку) в течение 30 мин при 37°С 5% СО2. РВ§(+) аккуратно аспирировали и замещали на 250 мкл в расчете на вставку 5 мМ Ό-глюкозы ± тестируемое активное вещество, и 1 мл РВ§(+) быстро добавляли в каждую лунку снизу перед тем, как клетки помещали в инкубатор при 37°С 5% СО2. После 15 мин клеточные вставки переносили в новый 24луночный планшет, и затем добавляли 250 мкл 45 мМ Ό-глюкозы ± тестируемое активное вещество в каждую вставку (что привело в результате к конечной концентрации глюкозы 25 мМ) и еще раз в лунки добавляли 1 мл РВ§(+). После дополнительных 15 мин вставки еще раз переносили в новый 24-луночный планшет и в этот раз в лунки снизу добавляли только свежеприготовленный РВ§(+). Этот этап повторяли после еще 15 мин. Клеточные вставки переносили в новый 24-луночный планшет, супернатант аккуратно аспирировали от клеток и замещали 500 мкл 100 мкМ раствора ЬистСег Уе11о\у (§1§та) для подтверждения целостности монослоев. В каждую лунку добавляли 1 мл РВ§(+) и инкубировали при 37°С, 5% СО2 в течение 1 ч. Затем клеточные вставки удаляли и проницаемость мембран к ЬисгСег Уе11о\у проверяли измерением флуоресценции образцов при 485 нм (возбуждение) и 530 нм (эмиссия) на микропланшетном ридере флуоресценции §рес1татах Сетий ЕМ.
Глюкозный анализ.
После последней инкубации весь оставшийся РВ§(+) из каждого этапа (т.е. при 15, 30, 45 и 60 мин) подвергали исследованию уровней глюкозы, как описано в примере 1, и рассчитывали общий кумулятивный транспорт глюкозы.
Локализованные изменения концентрации глюкозы в просвете, описанные и проиллюстрированные в примере 1, имитировали ίη νίίτο посредством первоначального короткого инкубирования дифференцированных клеток Сасо-2 с низким уровнем Ό-глюкозы (5 мМ в течение 15 мин), за которым незамедлительно следовало длительное инкубирование с высоким уровнем Ό-глюкозы (конечная концентрация 25 мМ в течение 45 мин).
Фиг. 2 изображает общий кумулятивный транспорт глюкозы через дифференцированные монослои Сасо-2 в присутствии или отсутствии ингибитора §СЬТ1 в течение первых 15 мин в 5 мМ Ό-глюкозе и впоследствии в присутствии или отсутствии ингибитора СЬИТ2 в 25 мМ Ό-глюкозе в течение остальных 45 мин. Для подтверждения достоверности этой клеточной системы флоридзин (Р/) и флоретин (РА использовали в качестве общепризнанных специфичных ингибиторов §СЬТ1 и СЬИТ2 соответственно. §СЬТ1-специфичный ингибитор, флоридзин (Р/). демонстрирует снижение в общем кумулятивном переносе глюкозы (оКПГ), при добавлении сначала клеточной системы (Р/ ОК - столбик с горизонтальными полосками), при этом демострируя ингибирование 8СЬТ1, который является доминантным активным транспортером при низких уровнях глюкозы. Однако Р/ демонстрирует отсутствие ингибирования оКПГ при добавлении позже с высокой концентрацией Ό-глюкозы (ОК Р/ -столбик с точками), так как §СЬТ1транспортеры в этот момент являются насыщенными, и транспорт глюкозы в этот момент зависит от транспортеров СЬИТ2 с высокой емкостью. Специфичный ингибитор СЬиТ2, флоретин (Р1), демонстрирует значительное (р<0,05) снижение оКПГ при добавлении при высокой концентрации Ό-глюкозы, как и предполагалось (ОК Рί - столбики с диагональными полосками). Однако комбинация 300 мкМ Р/ при низких концентрациях глюкозы, за которой следует 125 мкМ Рί при высокой концентрации глюкозы, как оказалось, значительно (р<0,01) и синергетически ингибирует оКПГ. В этом синергизме используется требование первоначального переноса глюкозы внутрь энтероцита 8СЬТ1 перед тем, как высокоемкий СЬИТ2 может быть направлен к апикальной мембране. При использовании в комбинации как §СЬТ1, так и СЬИТ ингибиторы могут синергетически ингибировать локализованное всасывание глюкозы из кишечного просвета и, следовательно, снижают высокие "пики" постпрандиальной глюкозы в крови, связанные с началом диабета 2-го типа.
Следовательно, любой флавоноидный моноглюкозид, идентифицированный в примере 1 как специфичный ингибитор 8СЬТ1, может быть комбинирован с любым флавоноидным агликоном, идентифицированным в примере 1 в качестве специфичных СЬИТ2 ингибиторов для демонстрации для проявления синергетического ингибирования транспорта глюкозы через дифференцированный клеточный монослой Сасо-2, как подробно описано выше для комбинации Р/ и РР Это подтверждается комбинированием флавоновых моноглюкозидов лютеолин-7-глюкозида (Ь7С) и апигенин-8-С-глюкозида (А8С) с изофлавоновым агликон генистеином (фиг. 3 и 4 соответственно). Подобным образом, флавоноловые моноглюкозиды кверцетин-3-глюкозид (О3С) и кемпферол-3-глюкозид (К3С) могут быть комбинированы с флавоновым агликоном лютеолином и флаваноновыми агликонами гесперетина и нарингенина для демонстрации синергизма, как показано на фиг. 5, 6, 7 и 8. Более того, флаваноновый моноглюкозид - нарингенин-7-глюкозид (N70) демонстрирует ингибирование синергетического транспорта глюкозы при комбинировании с флавоновым агликоном апигенина (фиг. 9). В заключение, фиг. 10 демонстрирует синергетическое ингибирование транспорта глюкозы, демонстрируемое антоцианин дельфинидин-3-глюкозидом (Ό30) и изофлавоновым агликоном генистеина.
- 6 029002
Пример 3. Устойчивость флавоноидных глюкозидов к расщеплению человеческой лактазафлоридзингидролазой (ЙБРН).
Приготовление экстракта человеческой лактаза-флоридзингидролазы (БРН).
Человеческие эпителиальные клетки колоректальной аденокарциномы (Сасо-2) получали в Американской коллекции типовых культур (АТСС) и культивировали в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (ΌΜΕΜ) (с СЗШаМАХ™ I, 4500 мг/л И-глюкозы, 25 мМ НЕРБ5, 1пуйго§еп) +10% фетальная телячья сыворотка (РС5) (Зщша), неосновные аминокислоты ΜΕΜ (Пзйег 8с1епййс ИК Б1б,) и 1,0 мМ пирувата натрия (5ΙΟΜΑ) при конфлюентности в течение 21 дня перед экстракцией набором для экстракции трансмембранного белка Ыоуадеп ΡτοϊΌοΕχΐταΗΤΜ с использованием "Реагента А" (мягкий экстракционный реагент для регенерации хрупких белковых комплексов) и коктейля ингибиторов протеаз (включен в набор). Получали 200 мкл экстракта из каждой колбы Т175 см2. Экстракты хранили при -80°С в 50 мкл аликвотах. Перед применением экстракты частично очищали, удаляя низкомолекулярные интерферирующие компоненты пропусканием через маленькую спин-колонку С-25 Зерйабех 50-100 мкл (Косйе или ТйегтоПзйег ЗСепййс).
ЙБРН ферментный анализ.
10 мкл частично очищенного БРН экстракта добавляли к 90 мкл глюкозида (1,0 мМ конечная концентрация) в 0,1 М малеатном (51§ша) буфере, рН 6,0 и инкубировали в течение 60 мин при 37°С. Реакцию прекращали добавлением 200 мкл 2М Трис (51§ша), рН 8,0. Соответствующие холостые опыты осуществляли для каждого глюкозида (1,0 мМ) при 37°С в течение 60 мин добавлением Трис 2 М и затем БРН экстракта только в конце. 200 мкл получающейся в результате реакционной смеси пропускали через маленькую колонку С-18 (5ер-Рак® БщЫ С18 картридж 55-105 мкм, Аа!егз Б1б.), приготовленную с (метанолом степени очистки НРБС (У^К) и малеатным буфером)х5 раз для удаления потенциально интерферирующего гидрофобного БРН экстракта, субстрата (глюкозид) и компонентов продукта реакции (агликон). Это позволяло полную регенерацию глюкозы, что измеряли с использованием анализа глюкоза/глюкозоксидаза Атр1ех® Кеб. Кратко, 100 мкл реакционного реагента (0,5% 10 мМ Атрййи Кеб; 1,0% пероксидазы хрена 10 ЕД./мл и 1,0% глюкозоксидазы 100 ЕД./мл в забуференном фосфатом физиологическом растворе (РВ8), все реагенты от 8ΙΘΜΑ) добавляли к 50 мкл образца и инкубировали при комнатной температуре на орбитальном встряхивателе в течение 20 мин. Флуоресценцию считывали на планшетном ридере δресί^аΜаχ Сет1ш ΕΜ δΝ (Μο1еси1а^ Иеуюез) (возбуждение 530 нм и эмиссия при 590 нм).
Таблица 2
Глюкозидный гидролиз с БРН и устойчивость по сравнению с ^4С. Глюкозиды (1,0 мМ) смешивали с 10% БРН экстракта (клеточная линия Сасо2) в течение 1 ч при 37°С. Степень БРН гидролиза оценивали измерением продукта глюкозной реакции с использованием анализа глюкоза/глюкозоксидаза Атр1ех® Кеб. В таблице приведены глюкозиды, демонстрирующие большую устойчивость к гидролизу БРН, чем
94С
| Субстраты (1,0 мМ) | мкМ гидролизированного | Устойчивость к гидролизу- | Поставщик |
| субстрата/ч | % от 04с | ||
| Ω3Ο Кверцетин-3глюкозид | 0, 178 | 94,26 | 5 ЮМА |
| кзс Кемпферол-3глюкозид | 0,224 | 92,78 | ЕхДгазупДЬезе |
| ΡΣΖ Флоридзин | 0,507 | 83, 64 | 31СМА |
| ϋδο Даидзеин-8глюкозид | 0,552 | 82,19 | 31СМА |
| К7С Кемпферол-7глюкозид | 0, 618 | 80,05 | ЕхДгазупДЬезе |
- 7 029002
| А8С Апигенин-8глюкозид | 0, 685 | 77,90 | 3Ι6ΜΑ |
| Ь7С Лютеолин-7глюкозид | 0, 814 | 73,72 | ЕхЕгазупЕНезе |
| РЗО Пеларгонидин-3глюкозид | 1,272 | 58,94 | Ро1урЬепо1з |
| N70 Нарингенин-7глюкозид | 1,564 | 49, 52 | ЕхЕгазупЕНезе |
| Ω4Ο Кверцетин-4глюкозид | 3, 098 | 3Ι6ΜΑ |
Табл. 2 демонстрирует изменение в скорости расщепления различных флавоноидных глюкозидов посредством ББРН. В то время как 940 демонстрирует наибольшую степень расщепления посредством ББРН, оказалось, что 930 является на приблизительно 95% более устойчивым к НБРН в этом анализе, чем 940. Подобным образом, все другие восемь глюкозидов демонстрируют повышенную устойчивость к НБРН по сравнению с 940, которая варьируется от 49,5% для N70 до 92,8% для К3О. Вследствие этого, эти глюкозиды будут менее подверженными гидролизу НБРН в кишечнике во время приема пищи и таким образом потенциально продлевают ее активность в качестве ингибитора 50БТ1. Вследствие этого выбор флавоноидных глюкозидов с по меньшей мере на 20% повышенной устойчивостью к НБРН, чем у 940, будет благоприятным для продлевания любой глюкозид-специфичной активности ΐη νίνο.
Пример 4. Бутилированная вода.
Сухой порошок, содержащий 200 мг кверцетин-3-глюкозида в расчете на 1 г и 125 мг лютеолина в расчете на 1 г и также содержащий ароматизаторы, добавляли к воде до концентрации 2 г сухого порошка в расчете на 1 л воды. Состав разливали в 250-мл бутылки и запечатывали. Каждую бутылку помечали "1 в день" или словами для этого эффекта. Следовательно, каждая бутылка доставляет суточную дозу 100 мг кверцетин-3-глюкозида и 62,5 мг лютеолина.
Пример 5. Саше для добавления к питанию.
Сухой порошок, содержащий 100 мг лютеолин-7-глюкозида в расчете на 1 г и 60 мг генистеина в расчете на 1 г и также содержащий ароматизаторы, рассыпали в саше с концентрацией 1 г в расчете на саше и запечатывали. Каждое саше помечали "1 в день" или словами для этого эффекта.
Claims (15)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Съедобная композиция для замедления всасывания глюкозы в кишечнике, содержащаяпо меньшей мере 5%, в расчете на сухую массу, ингибитора транспортера глюкозы 2 (0БИТ2), где в качестве указанного ингибитора 0БИТ2 указанная композиция содержит по меньшей мере один флавоноидный агликон, ипо меньшей мере 5%, в расчете на сухую массу, ингибитора натрий-глюкозного котранспортера 1 (50БТ1), где в качестве указанного ингибитора 50БТ1 указанная композиция содержит по меньшей мере один флавоноидный моноглюкозид,где указанный флавоноидный моноглюкозид выбран с обеспечением скорости его гидролиза лактаза-флоридзингидролазой менее 2,4784 мкМ/ч при измерении с использованием 1,0 мМ флавоноидного моноглюкозида и 10% экстракта лактаза-флоридзингидролазы (линии клеток Сасо-2) по прошествии 1 ч при 37°С.
- 2. Композиция по п.1, где флавоноидный агликон выбран из группы, состоящей из флавоновых агликонов, флаваноловых агликонов, флаваноновых агликонов, изофлавоновых агликонов и их смесей.
- 3. Композиция по п.2, где флавоноидный агликон выбран из группы, состоящей из апигенина, лютеолина, кверцетина, кемпферола, мирицетина, нарингенина, пиноцембрина, гесперетина, генистеина и их смесей.
- 4. Композиция по любому из предшествующих пунктов, где флавоноидный моноглюкозид выбран из группы, состоящей из лютеолин-7-глюкозида, апигенин-8-С-глюкозида, кемпферол-7-О-глюкозида, кемпферол-3 -О-глюкозида, нарингеноин-7-О-глюкозида, даидзеин-8-глюкозида, цианидин-3 -глюкозида, кверцетин-3-глюкозида, пелагонидин-3-глюкозида, мальвидин-3-глюкозида, дельфинидин-3-глюкозида и их смесей.
- 5. Композиция по любому из предшествующих пунктов, где молярное отношение флавоноидного- 8 029002агликона к флавоноидному моноглюкозиду находится в диапазоне от 4:1 до 1:4, предпочтительно от 3:1 до 1:3, наиболее предпочтительно от 2:1 до 1:2.
- 6. Композиция по любому из предшествующих пунктов, где указанная композиция содержит не более чем 50%, предпочтительно не более чем 10% по массе флавоноидного агликона.
- 7. Композиция по любому из предшествующих пунктов, где указанная композиция содержит не более чем 50%, предпочтительно не более чем 10% по массе флавоноидного моноглюкозида.
- 8. Композиция по любому из предшествующих пунктов в форме суточной дозы, при этом указанная суточная доза содержит по меньшей мере 50 мкмоль, предпочтительно по меньшей мере 100 мкмоль, наиболее предпочтительно по меньшей мере 250 мкмоль флавоноидного агликона и по меньшей мере 50 мкмоль, предпочтительно по меньшей мере 100 мкмоль, наиболее предпочтительно по меньшей мере 250 мкмоль флавоноидного моноглюкозида.
- 9. Композиция по любому из пп.1-8 для уменьшения постпрандиальной пиковой амплитуды глюкозы в крови или гликемического ответа у индивидуума, который не болен диабетом.
- 10. Композиция по любому из пп.1-8 для лечения диабета 2-го типа.
- 11. Способ уменьшения постпрандиальной пиковой амплитуды глюкозы в крови или гликемического ответа у индивидуума, который не болен диабетом, включающий следующие этапы:(a) пероральное введение композиции по пп.1-9 указанному индивидууму;(b) пероральное введение сахарида указанному индивидууму,где этап (а) происходит одновременно, предшествует на время от 0 до 90 мин или следует через 030 мин за этапом (Ь) игде указанный сахарид содержит глюкозу или является глюкозой.
- 12. Способ лечения диабета 2-го типа, включающий следующие этапы:(a) пероральное введение композиции по любому из пп.1-8 индивидууму, нуждающемуся в этом; и(b) пероральное введение сахарида индивидууму, нуждающемуся в этом,где этап (а) происходит одновременно, предшествует на время от 0 до 90 мин или следует через 030 мин за этапом (Ь) игде указанный сахарид содержит глюкозу или является глюкозой.
- 13. Способ по п.11 или 12, где указанный сахарид может быть выбран из группы, состоящей из полисахарида, олигосахарида, дисахарида, моносахарида и их смесей.
- 14. Применение композиции по любому из пп.1-8 для получения лекарственного средства для уменьшения постпрандиальной пиковой амплитуды глюкозы в крови или гликемического ответа у индивидуума, который не болен диабетом.
- 15. Применение композиции по любому из пп.1-8 для получения лекарственного средства для лечения диабета 2-го типа.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP11168797 | 2011-06-06 | ||
| PCT/EP2012/059956 WO2012168108A1 (en) | 2011-06-06 | 2012-05-29 | An edible composition |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201391803A1 EA201391803A1 (ru) | 2014-03-31 |
| EA029002B1 true EA029002B1 (ru) | 2018-01-31 |
| EA029002B9 EA029002B9 (ru) | 2019-02-28 |
Family
ID=44588275
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA201391803A EA029002B9 (ru) | 2011-06-06 | 2012-05-29 | Съедобная композиция |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9387219B2 (ru) |
| EP (1) | EP2717721B1 (ru) |
| CN (1) | CN103813723B (ru) |
| AU (1) | AU2012266581B2 (ru) |
| BR (1) | BR112013030171B1 (ru) |
| CA (1) | CA2835753C (ru) |
| EA (1) | EA029002B9 (ru) |
| WO (1) | WO2012168108A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA201308549B (ru) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2944311A1 (de) * | 2014-05-16 | 2015-11-18 | BioActive Food GmbH | Kombination von biologisch aktiven Substanzen zur Behandlung von hyperglykämischen Erkrankungen |
| EA032673B1 (ru) * | 2015-09-03 | 2019-06-28 | Юнилевер Н.В. | Съедобная композиция |
| CN108882742A (zh) * | 2016-02-10 | 2018-11-23 | Pm国际股份公司 | 用以减少和/或阻止肠道葡萄糖吸收的含有番石榴苷的组合物、膳食补充剂、组合物的用途和膳食补充剂的制备方法 |
| WO2019002498A1 (en) * | 2017-06-30 | 2019-01-03 | Unilever Plc | EDIBLE COMPOSITION |
| CN111973580B (zh) * | 2020-09-15 | 2023-01-24 | 河南大学 | 咖啡酸在制备促进葡萄糖吸收药物方面的应用 |
| CN115645431B (zh) * | 2022-12-12 | 2023-03-21 | 汤臣倍健股份有限公司 | 一种组合物及其应用 |
Citations (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000025795A1 (en) * | 1998-10-29 | 2000-05-11 | Merck Patent Gmbh | Compositions comprising a mixture of bioflavonols |
| JP2002080362A (ja) * | 2000-06-21 | 2002-03-19 | Kao Corp | Ｐｐａｒ依存的遺伝子転写活性化剤 |
| JP2004182685A (ja) * | 2002-12-05 | 2004-07-02 | Go Ri | 苦蕎麦を原料とするアルドース還元酵素阻害剤及びソルビトール降下剤 |
| US20040131749A1 (en) * | 2002-08-29 | 2004-07-08 | Archer-Daniels-Midland Company | Phytochemicals from edible bean process streams |
| JP2004229615A (ja) * | 2003-01-31 | 2004-08-19 | New Industry Research Organization | ケルセチン組成物、食品保存剤及びその製造方法 |
| WO2005070441A1 (de) * | 2004-01-27 | 2005-08-04 | Lichtwer Healthcare Gmbh & Co. Kg | Zwiebelextrakte |
| EP1576893A1 (en) * | 2002-12-24 | 2005-09-21 | Fuji Oil Company, Ltd. | Composition containing isoflavone of high purity at high concentration and process for producing the same |
| WO2006031293A2 (en) * | 2004-07-29 | 2006-03-23 | Michigan State University | Methods and compositions for the treatment of obesity, insulin related diseases and hypercholesterolemia |
| WO2006097660A2 (fr) * | 2005-03-14 | 2006-09-21 | Scalime Nutrition | Utilisation d'un extrait d'oignon pour la fabrication d'une composition pour controler la prise de poids |
| WO2008135643A1 (fr) * | 2007-05-04 | 2008-11-13 | Nutraceutic Et Business Consulting | Composition a activité lipolytique, son procédé d'obtention et utilisation de la composition. |
| KR20090125918A (ko) * | 2008-06-03 | 2009-12-08 | (주)에스에스사이언스 | 항당뇨성 조성물 및 그 제조방법 |
| FR2935096A1 (fr) * | 2008-08-21 | 2010-02-26 | Cooperative Agricole D Elle Et | Compositions riches en acide chlorogenique, leur procede d'obtention et leur utilisation |
| JP2011140457A (ja) * | 2010-01-06 | 2011-07-21 | Kobe Univ | 筋肉の糖取り込み促進剤 |
Family Cites Families (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3806210A1 (de) | 1988-02-26 | 1989-09-07 | Robugen Gmbh | Kamille |
| DE10053496A1 (de) | 2000-10-27 | 2002-05-08 | Peter Fuerst | Zusammensetzungen enthaltend Flavonoide und Phloridzin oder Phloretin |
| DE60232140D1 (de) | 2001-03-23 | 2009-06-10 | Nutricia Nv | Zusammensetzung zur prävention und/oder behandlung von verändertem knochenmetabolismus |
| FR2836336B1 (fr) | 2002-02-26 | 2004-08-27 | Diana Ingredients | Utilisation dans un traitement cosmetique d'une fraction phenolique riche en dihydrochalcones |
| WO2006074278A2 (en) | 2005-01-05 | 2006-07-13 | Mitsunori Ono | Compositions for treating diabetes or obesity |
| TW200637488A (en) | 2005-01-21 | 2006-11-01 | Western Holdings Llc | Compositions containing botanical extracts rich in phlorizin and methods for using such compositions in blood glucose modification and to affect aging |
| US20060172012A1 (en) | 2005-01-28 | 2006-08-03 | Finley John W | Anti-inflammatory supplement compositions and regimens to reduce cardiovascular disease risks |
| US20070009615A1 (en) | 2005-04-29 | 2007-01-11 | Litao Zhong | Compositions and methods for controlling glucose uptake |
| US20070036874A1 (en) | 2005-08-05 | 2007-02-15 | Litao Zhong | Compositions and methods for controlling glucose and lipid uptake from foods |
| FR2889955B1 (fr) | 2005-08-31 | 2008-12-19 | Cooperative Agricole Elle Et V | Procede d'obtention d'un extrait vegetal de fruits a pepins, extrait vegetal ainsi obtenu et ses utilisations |
| US20080096825A1 (en) | 2006-04-21 | 2008-04-24 | Ehrenkranz Joel R L | Preparation and Use of Phlorizin Compositions |
| EP2040708B1 (en) | 2006-07-17 | 2018-03-14 | Thomas Christian Lines | Quercetin-containing compositions |
| MX2009009996A (es) | 2007-03-19 | 2010-01-20 | Atm Metabolics Lllp | Composicion y metodo para tratar diabetes y trastornos metabolicos. |
| WO2008124105A1 (en) | 2007-04-04 | 2008-10-16 | Naturegen, Inc. | Compositions and methods for obesity, diabetes and metabolic syndrome control and management |
| WO2009066303A2 (en) | 2007-11-22 | 2009-05-28 | Ganga Raju Gokaraju | New synergistic phytochemical composition for the treatment of obesity |
| IT1392101B1 (it) | 2008-12-12 | 2012-02-09 | Zuccari Societa A Responsabilita Limitata In Breve Zuccari S R L | Composizione comprendente isoflavoni |
| CN101991593A (zh) * | 2009-08-14 | 2011-03-30 | 张景元 | 槲皮苷在制药中的应用 |
-
2012
- 2012-05-29 EA EA201391803A patent/EA029002B9/ru not_active IP Right Cessation
- 2012-05-29 BR BR112013030171-6A patent/BR112013030171B1/pt active IP Right Grant
- 2012-05-29 US US14/122,355 patent/US9387219B2/en active Active
- 2012-05-29 WO PCT/EP2012/059956 patent/WO2012168108A1/en active Application Filing
- 2012-05-29 CA CA2835753A patent/CA2835753C/en active Active
- 2012-05-29 CN CN201280027352.5A patent/CN103813723B/zh active Active
- 2012-05-29 EP EP12725369.8A patent/EP2717721B1/en active Active
- 2012-05-29 AU AU2012266581A patent/AU2012266581B2/en active Active
-
2013
- 2013-11-13 ZA ZA2013/08549A patent/ZA201308549B/en unknown
Patent Citations (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000025795A1 (en) * | 1998-10-29 | 2000-05-11 | Merck Patent Gmbh | Compositions comprising a mixture of bioflavonols |
| JP2002080362A (ja) * | 2000-06-21 | 2002-03-19 | Kao Corp | Ｐｐａｒ依存的遺伝子転写活性化剤 |
| US20040131749A1 (en) * | 2002-08-29 | 2004-07-08 | Archer-Daniels-Midland Company | Phytochemicals from edible bean process streams |
| JP2004182685A (ja) * | 2002-12-05 | 2004-07-02 | Go Ri | 苦蕎麦を原料とするアルドース還元酵素阻害剤及びソルビトール降下剤 |
| EP1576893A1 (en) * | 2002-12-24 | 2005-09-21 | Fuji Oil Company, Ltd. | Composition containing isoflavone of high purity at high concentration and process for producing the same |
| JP2004229615A (ja) * | 2003-01-31 | 2004-08-19 | New Industry Research Organization | ケルセチン組成物、食品保存剤及びその製造方法 |
| WO2005070441A1 (de) * | 2004-01-27 | 2005-08-04 | Lichtwer Healthcare Gmbh & Co. Kg | Zwiebelextrakte |
| WO2006031293A2 (en) * | 2004-07-29 | 2006-03-23 | Michigan State University | Methods and compositions for the treatment of obesity, insulin related diseases and hypercholesterolemia |
| WO2006097660A2 (fr) * | 2005-03-14 | 2006-09-21 | Scalime Nutrition | Utilisation d'un extrait d'oignon pour la fabrication d'une composition pour controler la prise de poids |
| WO2008135643A1 (fr) * | 2007-05-04 | 2008-11-13 | Nutraceutic Et Business Consulting | Composition a activité lipolytique, son procédé d'obtention et utilisation de la composition. |
| KR20090125918A (ko) * | 2008-06-03 | 2009-12-08 | (주)에스에스사이언스 | 항당뇨성 조성물 및 그 제조방법 |
| FR2935096A1 (fr) * | 2008-08-21 | 2010-02-26 | Cooperative Agricole D Elle Et | Compositions riches en acide chlorogenique, leur procede d'obtention et leur utilisation |
| JP2011140457A (ja) * | 2010-01-06 | 2011-07-21 | Kobe Univ | 筋肉の糖取り込み促進剤 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| HODA M EID, LOUIS C MARTINEAU, AMMAR SALEEM, ASIM MUHAMMAD, DIANE VALLERAND, ALI BENHADDOU-ANDALOUSSI, LIDIA NISTOR, ARVIND AFSHAR: "Stimulation of AMP-activated protein kinase and enhancement of basal glucose uptake in muscle cells by quercetin and quercetin glycosides, active principles of the antidiabetic medicinal plant Vaccinium vitis-idaea", MOLECULAR NUTRITION & FOOD RESEARCH, WILEY - VCH VERLAG, WEINHEIM, DE, vol. 54, no. 7, 1 July 2010 (2010-07-01), DE, pages 991 - 1003, XP002659611, ISSN: 1613-4125, DOI: 10.1002/mnfr.200900218 * |
| JACKSON C-J C; DINI J P; LAVANDIER C; RUPASINGHE H P V; FAULKNER H; POYSA V; BUZZELL D; DEGRANDIS S: "Effects of processing on the content and composition of isoflavones during manufacturing of soy beverage and tofu", PROCESS BIOCHEMISTRY, ELSEVIER SCIENCE PUBLISHERS LTD, GB, vol. 37, no. 10, 1 May 2002 (2002-05-01), GB, pages 1117 - 1123, XP002659610, ISSN: 0032-9592, DOI: 10.1016/S0032-9592(01)00323-5 * |
| WPI / Thomson Week 200242, 19 March 2002 Derwent World Patents Index; XP002659613, HASE T; MURASE T; TOKIMITSU I: "Peroxisome proliferator activated receptor (PPAR) dependent gene transcription activators" * |
| WPI / Thomson Week 200447, 2 July 2004 Derwent World Patents Index; XP002659612, RI G: "Aldose reductase inhibitor for treating diabetes, contains nigasoba component, obtained by crushing and alcohol extracting nigasoba-plant parts containing outer layer of fruit, as active ingredient" * |
| WPI / Thomson Week 200458, 19 August 2004 Derwent World Patents Index; XP002659614, ISHIMURA F; KANAZAWA K: "Composition used in foodstuff preservative, contains quercetin, quercetin glycoside and protocatechuic acid" * |
| WPI / THOMSON Week 201042, 8 December 2009 Derwent World Patents Index; XP002682623, OH C; PARK D: "Antidiabetic composition comprises isoquercetin and one or more of rutin, quercetin, quercetinin and quercetin glycoside" * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BR112013030171B1 (pt) | 2021-10-05 |
| WO2012168108A1 (en) | 2012-12-13 |
| CN103813723A (zh) | 2014-05-21 |
| ZA201308549B (en) | 2015-02-25 |
| EP2717721A1 (en) | 2014-04-16 |
| CA2835753A1 (en) | 2012-12-13 |
| EP2717721B1 (en) | 2017-07-12 |
| AU2012266581B2 (en) | 2014-10-30 |
| EA029002B9 (ru) | 2019-02-28 |
| BR112013030171A2 (pt) | 2016-08-09 |
| US9387219B2 (en) | 2016-07-12 |
| CN103813723B (zh) | 2017-03-15 |
| CA2835753C (en) | 2020-03-10 |
| EA201391803A1 (ru) | 2014-03-31 |
| AU2012266581A1 (en) | 2013-11-21 |
| US20140107052A1 (en) | 2014-04-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US9943535B2 (en) | Edible composition comprising resveratrol and flavonoid monoglucoside | |
| Hakimuddin et al. | Selective cytotoxicity of a red grape wine flavonoid fraction against MCF-7 cells | |
| EA029002B1 (ru) | Съедобная композиция | |
| Cermak et al. | Quercetin glucosides inhibit glucose uptake into brush-border-membrane vesicles of porcine jejunum | |
| Schulze et al. | Inhibition of the intestinal sodium‐coupled glucose transporter 1 (SGLT1) by extracts and polyphenols from apple reduces postprandial blood glucose levels in mice and humans | |
| Day et al. | Absorption of quercetin-3-glucoside and quercetin-4′-glucoside in the rat small intestine: the role of lactase phlorizin hydrolase and the sodium-dependent glucose transporter | |
| Manach et al. | Pharmacokinetics and metabolism of dietary flavonoids in humans | |
| US20090075908A1 (en) | Agent For Strengthening Calcium Containing Tissue and Use Thereof | |
| CA2573510C (en) | Insulin secretion by anthocyanins and anthocyanidins | |
| US10806744B2 (en) | Edible composition | |
| Calhau et al. | Interaction of polyphenols with the intestinal and placental absorption of some nutrients and other compounds | |
| Chen et al. | Are there age-related changes in flavonoid bioavailability | |
| JP2007314446A (ja) | Ａｍｐｋ活性化剤 | |
| Day et al. | Absorption of quercetin glycosides | |
| US20110274679A1 (en) | Compositions and Methods of SIRT Activation | |
| JP2004323469A (ja) | Ｉｉ型糖尿病の予防、治療用の医薬組成物および食品 | |
| Ranjbar | Influence of lactase on the in vitro and in vivo antiglycaemic effects of onion flavonoids | |
| Pyner | The chronic and acute effects of (poly) phenols on sucrase isomaltase using the Caco-2/TC7 cell model | |
| Edwards | Biological activity of anthocyanins and their phenolic degradation products and metabolites in human vascular endothelial cells | |
| Walle et al. | and Jaya b. Vaidyanathan Medical University of South Carolina Charleston, South Carolina, USA | |
| Kren | 12.7 Glycoside vs. Aglycon: The Role of Glycosidic Re-sidue in Biological Activity |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM |
|
| TH4A | Publication of the corrected specification to eurasian patent |