EA026410B1 - Композиции этанерцепта, стабилизированные комбинациями сахаров и полиолов - Google Patents

Композиции этанерцепта, стабилизированные комбинациями сахаров и полиолов Download PDF

Info

Publication number
EA026410B1
EA026410B1 EA201490801A EA201490801A EA026410B1 EA 026410 B1 EA026410 B1 EA 026410B1 EA 201490801 A EA201490801 A EA 201490801A EA 201490801 A EA201490801 A EA 201490801A EA 026410 B1 EA026410 B1 EA 026410B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
etanercept
composition
present
arginine
approximately
Prior art date
Application number
EA201490801A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201490801A1 (ru
Inventor
Марк Мэннинг
Брайан Мерфи
Original Assignee
Кохерус Байосайенсис, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Кохерус Байосайенсис, Инк. filed Critical Кохерус Байосайенсис, Инк.
Publication of EA201490801A1 publication Critical patent/EA201490801A1/ru
Publication of EA026410B1 publication Critical patent/EA026410B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A61K38/1793—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/191—Tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin [LT], i.e. TNF-beta
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A61K9/0021—Intradermal administration, e.g. through microneedle arrays, needleless injectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/715—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • C07K14/7151—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons for tumor necrosis factor [TNF], for lymphotoxin [LT]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/81—Protease inhibitors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)

Abstract

Изобретение относится к стабильной водной фармацевтической композиции, содержащей 25-75 мг/мл этанерцепта в комбинации со стабилизатором для уменьшения нестабильности, агрегационного нарушения пространственной конфигурации и/или фрагментирования этанерцепта при хранении препарата, причем указанный стабилизатор состоит из 1-10 мас.% сахара, 1-30 мМ фосфата натрия и до 10 мас.% полиола, где указанная композиция свободна от аргинина. Стабильные водные фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению вызывают повышение стабильности при длительном хранении.

Description

Изобретение относится к водным фармацевтическим композициям, стабилизированным комбинациями сахаров и полиолов для длительного хранения этанерцепта, к способам изготовления указанных композиций, к способам их введения и содержащим их наборам. Настоящее изобретение включает композиции этанерцепта, которые не требуют аргинина для стабилизации.
Предпосылки создания изобретения
Полипептиды часто должны некоторое время храниться перед их применением. Когда их хранят в течение длительного периода, полипептиды в растворе часто оказываются нестабильными (Маишид е! а1., 1989, РЬагт. Кез. 6:903-918). Для продления срока их хранения разработаны дополнительные стадии обработки, такие как высушивание (например, лиофилизация). Однако лиофилизированные фармацевтические композиции менее удобны для применения.
Как правило, практически улучшить стабильность полипептидов можно, изменяя концентрацию составных элементов в препарате или добавляя эксципиенты для модифицирования препарата (см., например, патенты США № 5580856 и 6171586). Однако и в результате применения добавочных компонентов полипептиды все же могут инактивироваться. Кроме того, в случае лиофилизации в результате стадии регидратации полипептид может инактивироваться вследствие, например, агрегации или денатурации (Нога е! а1., 1992, РЬагт. Кез., 9:33-36; Ьщ е! а1., 1991, Вю1есЬио1. Вюеид., 37:177-184). Агрегация полипептидов нежелательна, поскольку она может приводить к иммуногенности (С1е1аиб е! а1., 1993, СтЪ. Кеу. ТЬетареийс Эгид Сатег 8уз!етз, 10:307-377; и КоЬЫиз е! а1., 1987, О1аЬе!ез, 36:838-845).
Другим способом улучшить стабильность полипептидов является применение специфических концентраций Ь-аргинина (патент США № 7648702).
Одним из полипептидов, которые перед применением хранят в течение срока, достигающего двух лет, является этанерцепт (ЕиЬте1® (Энбрел) 1ттипех СотрогаЬои), который представляет собой димерный гибридный полипептид, состоящий из связывающей лиганды внеклеточной части человеческого рецептора фактора некроза опухолей (ΤΝΕΚ) с молекулярной массой 75 кДа (р75), конъюгированной с Рс-участком человеческого 1дО1. Он состоит из 934 аминокислот и имеет эффективную молекулярную массу приблизительно 150 кДа (РЬузШаиз Эезк КеГегеисе, 2002, Мебюа1 Есоиотюз Сотрапу 1пс.). Рскомпонент этанерцепта содержит второй и третий константные домены тяжелой цепи (СН2 и СН3 соответственно) и шарнирный участок, но не содержит первого константного домена (СН1) человеческого 1дО1. Домен Рс может содержать только один из вышеописанных доменов, или он может содержать сразу все указанные домены. Этанерцепт обычно производят по технологии рекомбинантных ДНК в клетках яичников самок китайского хомячка (СЫиезе Ьатз!ег оуату, СНО) в системе экспрессии клеток млекопитающих.
Настоящее изобретение предоставляет новые стабильные жидкие препараты этанерцепта, способные храниться в течение длительного времени.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение представляет собой стабилизированную водную фармацевтическую композицию, содержащую этанерцепт в комбинации со стабилизаторами для уменьшения нестабильности, агрегационного нарушения пространственной конфигурации и/или фрагментирования этанерцепта при хранении препарата, причем указанный стабилизатор содержит комбинацию сахара и полиола.
Определения различных технических терминов, используемых в нижеследующем обсуждении, даны ниже в разделе Определения и в остальном тексте описания изобретения.
Стабилизированные препараты этанерцепта согласно настоящему изобретению, которые необязательно, но предпочтительно, являются свободными от аргинина, вызывают повышение стабильности при длительном хранении, что характеризуется по меньшей мере одним из следующих признаков:
(1) согласно анализу, проведенному посредством эксклюзионной хроматографии (8ЕС) в условиях М3 или Т2 или Т4, содержание мономера превышает приблизительно 90%, содержание агрегатов составляет приблизительно менее 3 мас.% и содержание фрагмента 3 составляет приблизительно менее 5 мас.%;
(2) согласно анализу, проведенному с использованием гидрофобной хроматографии (Н1С) в условиях М3 или Т2 или Т4, количество композиции, представленной пиком 1 на Н1С-хроматограмме, составляет приблизительно менее 3 мас.%, количество композиции, представленной пиком 2 на Н1Схроматограмме, превышает 80 мас.%, а количество композиции, представленной пиком 3 на Н1Схроматограмме, составляет приблизительно менее 20 мас.%.
В предпочтительных аспектах стабилизированных композиций указанные композиции повышают стабильность при долгосрочном хранении, что характеризуется следующими признаками: согласно Н1Санализу в условиях М3 или Т2 или Т4, количество композиции, представленной пиком 2 на Н1Схроматограмме, составляет приблизительно не менее 95 мас.% и, если на Н1С-хроматограмме имеется пик 3, количество композиции, представленной пиком 3, составляет приблизительно не более 3 мас.%.
Стабилизированная композиция этанерцепта, как описано выше, необязательно, но предпочтительно не содержит аргинина или является по существу свободной от аргинина.
Композиции согласно настоящему изобретению обладают превосходной стабильностью, как опре- 1 026410 делено посредством анализа, проведенного с использованием §ЕС (эксклюзионной хроматографии) и Н1С (гидрофобной хроматографии) после одного, двух или трех месяцев хранения при 5°С. Эти препараты сравнимы с коммерчески доступным препаратом этанерцепта, в котором требуемым компонентом является аргинин, или даже превосходят его. Соответственно, настоящее изобретение, кроме того, направлено на композиции стабилизированного этанерцепта, как описано выше, которые не содержат аргинина или являются существенно свободными от аргинина и в которых композиция, оцениваемая при М3 или Т2 или Т4, вызывает повышение стабильности при длительном хранении, что удовлетворяет одному или обоим следующим критериям: (А) стабильность, сравнимая или лучшая, чем у коммерчески доступного этанерцепта, представленного на рынке под торговым наименованием Энбрел (ЕиЪге1®), как измерено посредством (ί) §ЕС-анализа количеств агрегата (одного или более), мономера и фрагмента 3 в композиции (как определено в спецификации) и (ίί) Н1С-анализа количеств материала в композиции, соответствующего пикам 1, 2 и 3 на Н1С-хроматограмме (как определено в спецификации); и (В) Н1Схроматограмма, в которой (ί) пик 3 отсутствует или практически отсутствует и (ίί) пик 2 представляет приблизительно более 95% от массы композиции; §ЕС-хроматограмма, практически не содержащая никаких пиков, соответствующих агрегату (одному или более); и §ЕС-хроматограмма, на которой содержание мономера составляет, по меньшей мере, приблизительно 95% от массы композиции.
В одном предпочтительном аспекте композиция согласно настоящему изобретению содержит приблизительно 25-75 мг/мл этанерцепта, приблизительно 1-10 мас.% сахарозы, трегалозы или декстрозы, приблизительно до 10 мас.% маннита или сорбита, приблизительно 1-30 мМ фосфата натрия, причем указанная композиция имеет рН 6,0-6,6, и где указанная композиция характеризуется §ЕС-анализом, проведенным в условиях М3 или Т2 или Т4, согласно которому содержание мономера превышает приблизительно 80 мас.%, содержание агрегатов составляет приблизительно менее 3 мас.%, а содержание фрагмента 3 составляет приблизительно менее 10 мас.%. Композиции, удовлетворяющие этим аналитическим критериям, не требуют аргинина.
В следующем предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения стабилизированная композиция этанерцепта дополнительно характеризуется посредством (а) 8ЕС-анализа при М3 или Т2 или Т4, согласно которому содержание мономера превышает приблизительно 90 мас.%, а содержание агрегатов (одного или более) составляет приблизительно менее 3 мас.%, и (Ъ) Н1С-анализа при М3 или Т2 или Т4, согласно которому количество композиции, представленной пиком 1 на Н1Схроматограмме, составляет приблизительно менее 4 мас.%, количество композиции, представленной пиком 2 на Н1С-хроматограмме, превышает приблизительно 80 мас.%, а количество композиции, представленной пиком 3 на Н1С-хроматограмме, составляет приблизительно менее 20 мас.%. Композиции, удовлетворяющие этим аналитическим критериям, не требуют аргинина.
Композиции этанерцепта согласно настоящему изобретению, кроме того, дают возможность предоставлять препараты, которые содержат приемлемые уровни частиц, невидимых невооруженным глазом. Соответственно, настоящее изобретение дополнительно направлено на стабилизированные препараты этанерцепта и имеющие (при М3 или Т2 или Т4) в одном миллилитре, в среднем, приблизительно не более 10000 частиц, невидимых невооруженным глазом, с размером более 5 мкм.
Стабилизированная композиция этанерцепта по настоящему изобретению дополнительно характеризуется посредством (а) 8ЕС-анализа при М3 или Т2 или Т4, согласно которому содержание мономера превышает приблизительно 90 мас.%, а содержание агрегатов (одного или более) составляет приблизительно менее 3 мас.%, и (Ъ) Н1С-анализа при М3 или Т2 или Т4, согласно которому количество композиции, представленной пиком 1 на Н1С-хроматограмме, составляет приблизительно менее 3 мас.%, количество композиции, представленной пиком 2 на Н1С-хроматограмме, превышает 80 мас.%, а количество композиции, представленной пиком 3 на Н1С-хроматограмме, составляет приблизительно менее 20 мас.%, причем указанные препараты являются свободными или по существу свободными от аргинина. Композиции, удовлетворяющие этим аналитическим критериям, не требуют аргинина.
Стабильность указанных препаратов можно, кроме того, охарактеризовать тем, что композиции (необязательно, свободные или по существу свободные от аргинина) демонстрируют результаты Н1Санализа при М3 или Т2 или Т4, согласно которым количество композиции, представленной пиком 1 на Н1С-хроматограмме, составляет приблизительно менее 1%, количество композиции, представленной пиком 2 на Н1С-хроматограмме, превышает приблизительно 95 мас.%, а количество композиции, представленной пиком 3 на Н1С-хроматограмме, составляет приблизительно менее 3 мас.%. Препараты, удовлетворяющие этим аналитическим критериям, не требуют аргинина.
Предпочтительные стабилизированные композиции согласно настоящему изобретению (предпочтительно свободные или по существу свободные от аргинина) демонстрируют результаты Н1С-анализа при М3 или Т2 или Т4, согласно которым количество композиции, представленной пиком 1 на Н1Схроматограмме, составляет приблизительно менее 2% (предпочтительно приблизительно менее 1%), количество композиции, представленной пиком 2 на Н1С-хроматограмме, превышает приблизительно 95 мас.% (предпочтительно превышает приблизительно 97%), а количество композиции, представленной пиком 3 на Н1С-хроматограмме, составляет приблизительно менее 1 мас.% (предпочтительно 0-1%). Препараты, удовлетворяющие этим аналитическим критериям, не требуют аргинина.
- 2 026410
В отличие от коммерчески доступного этанерцепта, предоставляемого в препарате, содержащем аргинин, авторы настоящего изобретения неожиданно (в свете патента США № 7648702) обнаружили, что варианты осуществления препаратов этанерцепта, описанных и проиллюстрированных в настоящем документе, не требуют аргинина для длительной стабилизации, хотя при желании в них можно добавлять и аргинин. Способность предоставлять препараты этанерцепта, стабилизированные без аргинина, является потенциально значительно выгодным обстоятельством для системы здравоохранения благодаря тому, что пациентам и учреждениям здравоохранения предоставляются альтернативные препараты этанерцепта, которые могут стать доступными по более низким ценам по сравнению с коммерческим препаратом этанерцепта, имеющимся в настоящее время (т.е. по сравнению с Эмбрелом), для стабилизации которых требуется аргинин.
Термин нестабильность, используемый в настоящем документе (или ему подобные термины) отмечает тенденцию мономера этанерцепта к подверженности разнообразным нежелательным преобразованиям при хранении. К таким преобразованиям относятся образование олигомеров и агрегатов (одного или более) с высокой молекулярной массой (далее в настоящем документе называемых просто агрегат (агрегаты)), в которых множество копий существенно интактного мономера этанерцепта становятся необратимо ассоциированными друг с другом посредством множества нековалентных взаимодействий (например, электростатических взаимодействий). Нежелательные преобразования при хранении могут также включать в себя разложение мономера этанерцепта на более мелкие фрагменты и/или усеченные формы. В идеальном случае препарат этанерцепта должен до максимально возможной степени минимизировать склонность этого препарата образовывать при хранении агрегаты, неправильно свернутый белок, олигомеры и/или фрагменты этанерцепта. Важным преимуществом, которое представляет собой результат способности уменьшать образование нежелательных агрегатов или фрагментов, является уменьшение возможной токсичности и/или иммуногенности данного лекарственного средства.
Композиция этанерцепта согласно настоящему изобретению необязательно, но предпочтительно является свободной или по существу свободной от аргинина. Термин по существу свободная от аргинина должен означать, что аргинин, даже если он присутствует, в такой степени не влияет на стабилизацию мономера этанерцепта в композиции, что квалифицированный специалист в данной области техники не сможет сделать вывод о том, что его присутствие благоприятно или необходимо для стабилизации.
Эти и другие аспекты настоящего изобретения станут очевидными из нижеследующего описания, хотя в нем возможны и некоторые вариации и модификации, не отклоняющиеся от сущности и не выходящие за пределы объема новых концепций настоящего раскрытия.
Следует понимать, что как предшествующее общее описание, так и нижеследующее подробное описание представляют собой только разъясняющие примеры, не ограничивающие настоящее изобретение, заявленное в его формуле.
Подробное описание изобретения
В данном разделе подробно описаны различные варианты осуществления настоящего изобретения. При использовании в описании изобретения и во всех пунктах формулы изобретения единственного числа подразумевается множественное число, если контекст явным образом не указывает иное. Некоторые термины, использованные в настоящей спецификации, ниже дополнительно определены более конкретно.
Определения.
Термины, используемые в описании изобретения, как правило, имеют свои обычные значения, принятые в данной области техники как в контексте настоящего изобретения, так и в том конкретном контексте, где используют каждый термин. Определенные термины, использованные для описания настоящего изобретения, обсуждаются ниже или в иных местах описания изобретения (в качестве дополнительных руководящих указаний, предоставляемых практическому специалисту, изучающему описание настоящего изобретения). Для некоторых терминов даны синонимы. Использование одного или более синонимов не исключает применения других синонимов. Использование примеров в любом разделе описания изобретения, включая примеры любых терминов, обсуждаемых в настоящем документе, является только иллюстративным и никак не ограничивает объем и сущность настоящего изобретения или любого приведенного термина. Настоящее изобретение не ограничивается теми разнообразными вариантами его осуществления, которые даны в настоящем описании.
Если не определено иначе, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют тот же смысл, что обычно понимает специалист с обычной квалификацией в той области техники, к которой относится настоящее изобретение. В случае конфликта справедливым будет признан настоящий документ, включая определения.
Как правило, термины около, примерно или приблизительно означают в пределах 20%, в пределах 10%, в пределах 5, 4, 3, 2 или 1% указанного значения или диапазона. Указываемые численные величины являются приблизительными, что означает, что можно подразумевать термины около, примерно или приблизительно, если они не даны явным образом.
Термины этанерцепт, или мономер этанерцепта, или мономер являются синонимами наименования Энбрел (ЕиЬте1®). Они относятся к полипептиду, который представляет собой димерный гиб- 3 026410 ридный полипептид, состоящий из связывающей лиганды внеклеточной части человеческого рецептора фактора некроза опухолей (ΤΝΤΚ) с молекулярной массой 75 кДа (р75), конъюгированной с Рс-участком человеческого 1дО1. Он состоит из 934 аминокислот и имеет эффективную молекулярную массу приблизительно 150 кДа. Для целей настоящего изобретения термин этанерцепт также охватывает этанерцепт с небольшими модификациями в аминокислотной структуре (включая делеции, добавления и/или замещения аминокислот), которые не оказывают существенного влияния на функцию, эффективность или авидность этанерцепта. Термин этанерцепт охватывает все формы и препараты Эмбрела®, включая, но не ограничиваясь ими, концентрированные препараты, готовые для применения инъекционные препараты, препараты, восстанавливаемые с водой, спиртом и/или другими ингредиентами, и др.
Термин сахар относится к моносахаридам, дисахаридам и полисахаридам. Примеры сахаров включают в себя, но не ограничиваются ими, сахарозу, трегалозу, декстрозу и другие.
Термин меглюмин относится к соединению с химической формулой Η3ΝΗΟΗ2(ΟΗΟΗ)4ΟΗ2ΟΗ, также известному как 1-дезокси-1-метиламиносорбит, Ν-метил-Э-глюкамин и 1-дезокси-1-метиламно-Эглюцитол.
Термин полиол относится к спирту, содержащему множественные гидроксильные группы. Примеры полиолов включают в себя, но не ограничиваются ими, маннит, сорбит и другие.
Подразумевается, что термин длительное хранение означает, что фармацевтическую композицию можно хранить в течение трех месяцев или более, в течение шести месяцев или более и, предпочтительно, в течение одного года или более. Также подразумевается, что длительное хранение означает, что указанную композицию хранят либо в виде жидкости при 2-8°С, либо в замороженном состоянии (например, при -20°С или при более низкой температуре). Кроме того, предполагается, что указанную композицию можно замораживать и оттаивать более одного раза.
Подразумевается, что термин стабильный или стабилизированный, использованный в отношении длительного хранения, означает, что этанерцепт, содержащийся в фармацевтической композиции, теряет не более 20%, или более предпочтительно 15%, или еще более предпочтительно 10% и наиболее предпочтительно 5% своей активности относительно активности композиции в начале хранения.
Термин млекопитающее включает в себя, но не ограничивается этим, человека.
Термин фармацевтически приемлемый носитель относится к нетоксичному твердому, полутвердому или жидкому наполнителю, разбавителю, инкапсулирующему материалу, вспомогательному веществу или эксципиенту традиционного типа. Фармацевтически приемлемый носитель является нетоксичным для реципиентов в применяемых дозах и концентрациях и является совместимым с другими ингредиентами препарата.
Термин композиция относится к смеси, которая обычно содержит носитель (такой как фармацевтически приемлемый носитель) или эксципиент, который является традиционным в данной области техники и который подходит для введения субъекту с терапевтическими, диагностическими или профилактическими целями. Она может включать в себя клеточную культуру, в клетках или в среде которой присутствует полипептид или полинуклеотид. Например, композиции для перорального введения могут образовывать растворы, суспензии, таблетки, пилюли, капсулы, препараты с замедленным высвобождением, ополаскиватели для полости рта или порошки.
Термины фармацевтическая композиция и препарат используются взаимозаменяемо.
Термин лечение относится к любому введению или применению лекарственных средств при заболевании млекопитающего и включает в себя торможение развития заболевания, его прекращение, облегчение заболевания (например, вызывая обратное развитие или восстанавливая утраченные, недостающие или дефектные функции, или стимулируя неэффективный процесс). Данный термин включает в себя получение желательного фармакологического и/или физиологического эффекта, охватывая любое лечение патологического состояния или расстройства у млекопитающего. Эффект может быть профилактическим (в смысле полного или частичного предупреждения расстройства или его симптома) и/или он может быть терапевтическим (в смысле частичного или полного излечения расстройства и/или неблагоприятного состояния, характерного для данного расстройства). Он включает в себя (1) предотвращение возникновения расстройства или его рецидива у субъекта, который может быть предрасположенным к данному расстройству, но пока еще остается бессимптомным, (2) торможение развития расстройства (например, его приостановление), (3) остановку или окончательное устранение расстройства или, по меньшей мере, ассоциированных с ним симптомов так, что пациент более не страдает от этого расстройства или его симптомов (например, вызывая обратное развитие расстройства или его симптомов, например, восстанавливая или исправляя утраченные, недостающие или дефектные функции или стимулируя неэффективный процесс), или (4) облегчение, смягчение или улучшение состояния при расстройстве или при симптомах, ассоциированных с ним, причем термин улучшение состояния используется в широком смысле для указания, по меньшей мере, на уменьшение величины некоторого параметра, такого как воспаление, боль и/или размер опухоли.
Термин заболевание относится к любому патологическому состоянию, инфекции, расстройству или синдрому, который требует медицинского вмешательства или для которого желательно медицинское вмешательство. Такое медицинское вмешательство может включать в себя лечение, постановку диагноза
- 4 026410 и/или профилактическое мероприятие.
Термин терапевтически эффективное количество относится к количеству, которое, когда его вводят некоторому живому субъекту, обеспечивает достижение желательного эффекта у этого живого субъекта. Например, количество полипептида согласно настоящему изобретению, эффективное для введения живому субъекту, представляет собой то количество, которое предупреждает и/или лечит заболевание, опосредуемое интегрином ανβ3. Точное количество будет зависеть от цели воздействия и будет установлено квалифицированным специалистом в данной области техники с использованием известных технических приемов. Как известно в данной области, для выбора между системной или локальной доставкой может потребоваться учет возраста, массы тела, общего состояние здоровья, пола, режима питания, времени введения, взаимодействия с другими лекарственными средствами и тяжести патологического состояния, что можно осуществить на основании обычных экспериментов, выполняемых специалистами в данной области.
Термин Τι относится к моменту времени, когда препарат этанерцепта хранили в течение приблизительно одной недели при 40°С.
Термин Т2 относится к моменту времени, когда препарат этанерцепта хранили в течение приблизительно двух недель при 40°С.
Термин Т4 относится к моменту времени, когда препарат этанерцепта хранили в течение приблизительно четырех недель при 40°С.
Термин М3 относится, в собирательном смысле, к трем моментам времени и, в частности, к аналитическому результату, наблюдаемому для препарата этанерцепта после хранения в течение приблизительно одного, приблизительно двух или приблизительно трех месяцев при температуре 5°С. Например, в настоящем документе ссылку на анализ, проведенный при М3, следует понимать как означающую то, что такой анализ выполнен в момент времени, когда препарат этанерцепта находился на хранении в течение периода, выбранного из приблизительно одного, приблизительно двух или приблизительно трех месяцев. Таким образом, в настоящем документе заявление о том, что препарат этанерцепта является причиной получения некоторого определенного аналитического значения или результата измерения при М3, является истинным, если указанное значение наблюдали в момент времени, соответствующий, по меньшей мере, одному из следующих сроков хранения: приблизительно одному месяцу, приблизительно двум месяцам или приблизительно трем месяцам хранения при 5°С.
Термины пик 1, пик 2 и пик 3, когда они используются в настоящем документе при обсуждении результатов гидрофобной хроматографии, относятся к тем же самым пикам 1, 2 и 3, которые обсуждают в патенте США 7294481.
Варианты осуществления настоящего изобретения
Когда фармацевтические композиции, содержащие этанерцепт (Энбрел®), включая водные и лиофилизованные препараты этанерцепта, хранят на долгосрочной основе, активность этанерцепта может быть утрачена или уменьшена вследствие нестабильности мономера этанерцепта, обусловленной агрегированием и/или химическим разложением, включая образование фрагментов. В связи с этим настоящее изобретение предоставляет несколько вариантов осуществления водных препаратов этанерцепта, которые дают возможность для стабильного длительного хранения, так что этанерцепт будет стабильным в течение всего срока хранения как в жидком, так и в замороженном состоянии. Предоставляемые препараты включают, но не ограничиваются ими, препараты, которые не содержат аргинина и не требуют никаких дополнительных стадий, таких как регидратация.
Эти варианты осуществления настоящего изобретения более подробно объясняются ниже.
Этанерцепт.
Все композиции согласно настоящему изобретению содержат этанерцепт (Энбрел®). Как объясняется в разделе настоящего изобретения Предпосылки создания изобретения, этанерцепт представляет собой димерный гибридный полипептид, состоящий из связывающей лиганды внеклеточной части человеческого рецептора фактора некроза опухолей (ΤΝΤΚ) с молекулярной массой 75 кДа (р75), конъюгированной с Рс-участком человеческого 1§С1. Этанерцепт состоит из 934 аминокислот. Рс-компонент этанерцепта содержит второй и третий константные домены тяжелой цепи (СН2 и СН3 соответственно) и шарнирный участок человеческого 1§С1. Домен Рс может содержать только один из вышеописанных доменов или он может содержать сразу все указанные домены.
Этанерцепт, подходящий для хранения в фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению, можно продуцировать в живых клетках-хозяевах, которые экспрессируют этанерцепт, таких как гибридомы (в случае антител) или таких как клетки-хозяева, получаемые генно-инженерным путем для продуцирования полипептида (в случае гибридных полипептидов или антител). В данной области техники хорошо известны способы продуцирования полипептидов в генно-инженерных клетках. См., например, Аи8иЪе1 е! а1., еб8. (1990), Сиггеп! Рго!осок ίη Мо1еси1аг Вю1о§у (\УПеу. Νο\ν Уогк). Такие способы включают в себя введение нуклеиновых кислот, которые кодируют полипептид и дают возможность его экспрессировать в живых клетках-хозяевах. Эти клетки-хозяева могут представлять собой бактериальные клетки, грибковые клетки или, предпочтительно, животные клетки, выращиваемые в культу- 5 026410 ре. Бактериальные клетки-хозяева включают в себя, но не ограничиваются ими, клетки ЕксйепсЫа соП. Примеры подходящих штаммов Е.соБ включают в себя НВ101, 0Н5.а1рНа, СМ2929, 1М109, К\У251, ΝΜ538, ΝΜ539 и любой штамм Е.соП, который не расщепляет экзогенную ДНК. К применимым грибковым клеткам-хозяевам относятся, но не ограничиваются ими, клетки ЗассПатошусек сегетыае. РюЫа ракΐοτΐδ и АкретдШик. Примерами линий животных клеток, которые можно использовать, являются СНО, УЕКО, ВНК, НеЬа, Сок, МЭСК, 293, 3Т3 и ^138. Применяя способы, хорошо известные квалифицированным специалистам в данной области техники, можно создавать новые линии животных клеток (например, посредством трансформации, вирусной инфекции и/или селекции). Клетки-хозяева могут, необязательно, секретировать этанерцепт в среду.
Очистку экспрессированного этанерцепта можно проводить любым стандартным способом. Когда этанерцепт продуцируют внутриклеточно, корпускулярные остатки разрушенных клеток удаляют, например, центрифугированием или ультрафильтрацией. Когда этанерцепт секретируется в среду, супернатанты из такой системы экспрессии можно сначала сконцентрировать, используя стандартные фильтры, применяемые для концентрирования полипептидов. Для ингибирования протеолиза можно добавлять ингибиторы протеаз, а для предотвращения роста микроорганизмов можно включать антибиотики.
Этанерцепт можно очищать, используя, например, хроматографию на гидроксиапатите, гельэлектрофорез, диализ и аффинную хроматографию и любую комбинацию известных или пока еще не открытых технических приемов, включая, но не ограничиваясь ими, хроматографию на белке А, фракционирование на ионообменной колонке, осаждение этанолом, обращенно-фазовую ВЭЖХ, хроматографию на силикагеле, хроматографию на гепарине δΕΡΗΑΚΟδΕΤ®, хроматографию на анионообменных или катионообменных смолах (например, на колонке с полиаспарагиновой кислотой), хроматофокусирование, δΌδ-ΡΑΟΕ и осаждение сульфатом аммония.
Этанерцепт, стабилизированный комбинацией сахара и полиола.
В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет стабильный водный препарат, содержащий этанерцепт, сахар и полиол.
Полагают, что комбинация сахара и полиола ослабляет склонность этанерцепта к ассоциированию в нежелательные тройные или четвертичные комплексы, и поэтому она уменьшает агрегирование этанерцепта. Полагают, что сахара и полиолы действуют как конформационные стабилизаторы, уменьшая предрасположенность этанерцепта к агрегированию. Они способны стабилизировать водные фармацевтические композиции, содержащие этанерцепт, поскольку они являются исключенными из поверхности белка, результатом чего является общая конформационная стабилизация. Уменьшение агрегирования, как полагают, сохранится в течение длительного периода времени (например, два года или более). Таким образом, считают, что комбинация сахара и полиола способна стабилизировать водные фармацевтические композиции, содержащие этанерцепт. Без намерения иметь связь с какой-либо конкретной теорией, полагают, что комбинация сахара и полиола является синергетической для стабилизирования этанерцепта, поскольку даже исключенные растворенные вещества находятся, в среднем, не на поверхности белка, а в его объеме, и фактически будут иметь место взаимодействия между сахарами и полиолами, а также взаимодействие каждого эксципиента с белком. Возможно, эти взаимодействия между сахарами и низшими полиолами будут другими. Кроме того, при высоких концентрациях эти два дополнительных компонента будут изменять термодинамическую активность друг друга, тем самым приводя к появлению у раствора таких свойств, которые будут отличаться от тех свойств, которые наблюдались бы для каждого индивидуального компонента.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению можно изготавливать, комбинируя очищенный этанерцепт, сахар и полиол. Кроме того, при необходимости можно добавлять буфер, вещество, изменяющее тоничность, дополнительный эксципиент и другие обычно применяемые неактивные ингредиенты. Для простоты изложения, более подробно они обсуждаются ниже в настоящей спецификации. Специалист с обычной квалификацией в данной области техники поймет, что комбинирование различных компонентов, включаемых в композицию, можно выполнять в любом подходящем порядке. Специалист с обычной квалификацией в данной области техники также поймет, что некоторые из этих химических веществ в определенных комбинациях могут быть несовместимыми, и, соответственно, они легко могут быть заменены другими химическими веществами, имеющими сходные свойства, но совместимыми в соответствующей смеси.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения сахар и полиол могут действовать согласованно, как два металла, образующие сплав со свойствами, не характерными для каждого из них. Следует понимать, что такой же подход позволит использовать аминокислоты (такие как пролин, серин или глутамат) совместно с сахаром для получения лучшего профиля стабильности, чем профиль, который каждый из эксципиентов мог бы обеспечить сам по себе. Предпочтительное соотношение сахара и полиола (или аминокислоты) в такой смеси, как полагают, составляет от 5:1 до 1:5.
Считают, что наиболее предпочтительными сахарами являются сахароза, трегалоза, лактоза, рафиноза и мальтоза.
Считают, что наиболее предпочтительными полиолами являются сорбит, маннит, глицерин и пропиленгликоль.
- 6 026410
Считают, что наиболее предпочтительными аминокислотами являются пролин, серин, треонин и глутамат.
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения концентрация сахара в предоставляемых препаратах составляет предпочтительно приблизительно 0,1-40% (мас./об.), более предпочтительно приблизительно 1-20%, более предпочтительно приблизительно 2-10% и еще более предпочтительно приблизительно 5-9%.
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения концентрация полиола в предоставляемых препаратах составляет предпочтительно приблизительно 0,1-30%, более предпочтительно приблизительно 1-10% и еще более предпочтительно приблизительно 2-5%.
Сахара и полиолы доступны у коммерческих поставщиков.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения препарат согласно настоящему изобретению содержит приблизительно 25-75 мг/мл этанерцепта, приблизительно 1-10% сахарозы, приблизительно 1-5% маннита; приблизительно 10-50 мМ фосфата натрия и приблизительно 0-100 мМ №С1. при рН приблизительно 6,3-7,0.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения сахароза в препарате может быть заменена другим сахаром, таким как трегалоза (приблизительно 1-10%). В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения маннит в препарате может быть заменен другим полиолом, таким как сорбит (приблизительно 1-5%).
Хотя настоящее изобретение не исключает применения аргинина в препаратах этанерцепта, содержащих сахар и полиол (или аминокислоту) для стабилизации, предпочтительным является состав, свободный или по существу свободный от аргинина.
Дополнительные компоненты предоставляемой фармацевтической композиции.
Препараты согласно настоящему изобретению могут также включать в себя буферные вещества, вещества, изменяющие тоничность, эксципиенты, фармацевтически приемлемые носители и другие неактивные ингредиенты, обычно применяемые в фармацевтических композициях. Для простоты изложения их более полное обсуждение дается ниже в настоящей заявке.
Буферные вещества поддерживают рН в желательном диапазоне. К подходящим буферным веществам относятся гистидин, фосфат калия, цитрат натрия или калия, малеиновая кислота, ацетат аммония, трис-(гидроксиметил)-аминометан (Трис), различные формы ацетата и диэтаноламина. Концентрация буфера в препарате предпочтительно составляет приблизительно 1 мМ-1 М, более предпочтительно, приблизительно 10-200 мМ. Буферные вещества хорошо известны в данной области техники, их производят известными способами, и они доступны у коммерческих поставщиков.
Примерами подходящих буферных веществ являются фосфат, гистидин, цитрат, малеат, тартрат, сукцинат, ацетат, трис-(гидроксиметил)аминометан (Трис), бикарбонат.
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения буфером является фосфат натрия.
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения рН фармацевтической композиции находится на физиологических уровнях или около них. В частности, предпочтительно рН предоставляемой композиции составляет приблизительно 5,8-8,4, еще более предпочтительно, приблизительно 6,2-7,4. Специалисту с обычной квалификацией в данной области техники будет понятно, что рН можно регулировать так, как это необходимо для максимальной стабильности и растворимости этанерцепта в конкретном препарате. В частности, препараты этанерцепта при значениях рН за пределами физиологических диапазонов (но еще переносимых пациентом) также входят в объем настоящего изобретения.
Вещество, изменяющее тоничность, представляет собой молекулу, которая влияет на осмоляльность раствора. Осмоляльность фармацевтической композиции, предпочтительно, регулируют так, чтобы сделать максимальной стабильность активного ингредиента и/или чтобы сделать минимальным дискомфорт, ощущаемый пациентом после введения препарата. Как правило, предпочитают, чтобы фармацевтическая композиция была изотоничной сыворотке, т.е. имела бы такую же или сходную осмоляльность, для чего и добавляют вещество, изменяющее тоничность.
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения осмоляльность предоставляемых препаратов составляет приблизительно 180-420 мосмоль. Однако следует понимать, что осмоляльность может быть выше или ниже в зависимости от конкретных условий.
Примеры подходящих веществ, изменяющих тоничность, включают в себя, но не ограничиваются ими, аминокислоты (не включая аргинин) (например, цистеин, гистидин и глицин) и соли (например, хлорид натрия, хлорид калия и цитрат натрия).
Предпочтительными веществами, изменяющими тоничность, являются глицин, аланин, хлорид натрия, хлорид калия и сульфат натрия.
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения концентрация вещества, изменяющего тоничность в препарате предпочтительно составляет приблизительно 1 мМ-1 М, более предпочтительно приблизительно 10-200 мМ. Вещества, изменяющие тоничность, хорошо известны в данной области техники, их производят хорошо известными способами, и они доступны у коммерческих по- 7 026410 ставщиков.
В фармацевтическую композицию можно также добавлять эксципиенты (называемые также химическими добавками, совместно растворяемыми веществами, сорастворителями), которые стабилизируют полипептид в растворе (а также в высушенных или замороженных формах). Эксципиенты хорошо известны в данной области техники, их производят известными способами, и они доступны у коммерческих поставщиков.
Примеры подходящих эксципиентов включают в себя, но не ограничиваются ими, сахара/полиолы, такие как сахароза, лактоза, глицерин, ксилит, сорбит, маннит, мальтоза, инозит, трегалоза, глюкоза; полимеры, такие как сывороточный альбумин (бычий сывороточный альбумин (В8А), человеческий 8Л или рекомбинантный НА), декстран, поливиниловый спирт (РУА), гидроксипропилметилцеллюлоза (НРМС), полиэтиленимин, желатин, поливинилпирролидон (РУР), гидроксиэтилцеллюлоза (НЕС); неводные растворители, такие как многоатомные спирты (например, РЕС и глицерин) и диметилформамид (ΌΜΡ); аминокислоты, такие как пролин, Ь-серин, натриевая соль глутаминовой кислоты, аланин, глицин, гидрохлорид лизина, саркозин и гамма-аминомасляная кислота; поверхностно-активные средства, такие как Т\уссп®-8() (полисорбат 80), Т\уссп®-20 (полисорбат 20), 8Ό8, полисорбат, полоксамеры; и прочие эксципиенты, такие как фосфат калия, ацетат натрия, сульфат аммония, сульфат магния, сульфат натрия, Ν-оксид триметиламина, бетаин, ионы металлов (например, цинка, кальция и магния), СНАР8, монолаурат, 2-О-в-манноглицерат, или любую комбинацию вышеуказанных веществ.
Предпочтительными эксципиентами являются сахароза, лактоза, глицерин, ксилит, сорбит, маннит, мальтоза, инозит, трегалоза, глюкоза, бычий сывороточный альбумин (В8А), человеческий сывороточный альбумин (Н8А), рекомбинантный альбумин, декстран, РУА, гидроксипропилметилцеллюлоза (НРМС), полиэтиленимин, желатин, поливинилпирролидон (РУР), гидроксиэтилцеллюлоза (НЕС), полиэтиленгликоль, этиленгликоль, глицерин, аланин, глицин, гидрохлорид лизина, саркозин, 8Ό8, полисорбат 20, полисорбат 80, полоксамер 188, Ν-оксид триметиламина, бетаин, ионы цинка, ионы кальция, ионы магния, СНАР8, монолаурат сахарозы и 2-О-в-манноглицерат.
Концентрации одного или более эксципиентов в препарате согласно настоящему изобретению составляют предпочтительно приблизительно 0,001-5 мас.%, более предпочтительно приблизительно 0,1-2 мас.%.
Способы лечения.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет способ лечения млекопитающего, включающий в себя введение млекопитающему терапевтически эффективного количества фармацевтических композиций согласно настоящему изобретению, когда указанное млекопитающее имеет заболевание или расстройство, которые можно благоприятным образом лечить этанерцептом.
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения этанерцепт является произведенным из того же вида млекопитающего, что и млекопитающее, которое лечат указанной композицией.
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения указанное млекопитающее является человеком.
Заболевания или расстройства, которые можно лечить предоставляемыми композициями, включают, но не ограничиваются этим, ревматоидный артрит, псориатический артрит, анкилозирующий спондилоартрит, болезнь Вегенера (грануломатоз), болезнь Крона (или воспалительную болезнь кишечника), хроническое обструктивное заболевание легких (СОРЭ). гепатит С, эндометриоз, астму, кахексию, псориаз и атопический дерматит. Дополнительные заболевания или расстройства, которые можно лечить композициями согласно настоящему изобретению, включают в себя заболевания, описанные в АО 00/62790, АО 01/62272, заявке на патент США № 2001/0021380 и в патенте США 7648702 В2, соответствующие части которых включены в настоящий документ посредством ссылки.
Предоставляемые фармацевтические композиции можно вводить субъекту, нуждающемуся в лечении, посредством системной инъекции, такой как внутривенная инъекция, или посредством локальной инъекции или нанесением в соответствующее место (например, посредством прямой инъекции или прямого нанесения в соответствующее место, когда это место открыто при хирургической операции); или посредством местного применения.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет способ лечения и/или предупреждения ревматоидного артрита, который включает в себя введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества одной из предоставляемых композиций этанерцепта.
Терапевтически эффективное количество этанерцепта в предоставляемых композициях будет зависеть от конкретного состояния субъекта, нуждающегося в лечении, тяжести этого состояния, предшествующей терапии и клинического анамнеза пациента и реакции на данное терапевтическое средство. Соответствующую дозу можно отрегулировать в соответствии с заключением лечащего врача так, чтобы ее можно было вводить пациенту однократно или в виде серийного курса.
В одном варианте осуществления количество этанерцепта, эффективное для дозы, вводимой взрос- 8 026410 лому, составляет приблизительно 1-500 мг/м2, или приблизительно 1-200 мг/м2, или приблизительно 1-40 мг/м2, или приблизительно 5-25 мг/м2.
В качестве альтернативы, можно вводить фиксированную дозу, количество которой может быть в диапазоне 2-500 мг на дозу, 2-100 мг на дозу или приблизительно 10-80 мг на дозу.
Если дозу нужно вводить более одного раза в неделю, то типичная доза находится в том же диапазоне, что и вышеописанные диапазоны доз, или в диапазоне более низких доз, и, предпочтительно, ее вводят два или более раз в неделю, причем диапазон дозы составляет 25-100 мг на дозу.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения доза, приемлемая для введения посредством инъекции, содержит 80-100 мг на дозу или, в качестве альтернативы, 80 мг на дозу.
Дозу можно вводить один раз в неделю, один раз в две недели или с интервалом в несколько недель (например, от 2 до 8 недель).
В одном варианте осуществления настоящего изобретения этанерцепт вводят посредством единичной подкожной (8С) инъекции раствора с концентрацией 25-75 мг/мл.
В некоторых случаях улучшение состояния пациента будет достигнуто посредством введения дозы, составляющей приблизительно до 100 мг фармацевтической композиции, от одного до трех раз в неделю в течение, по меньшей мере, трех недель. Достижение желаемой степени улучшения состояния может потребовать лечения в течение более длительных периодов. При неизлечимых хронических состояниях этот режим может продолжаться неопределенно долго. Для педиатрических пациентов (в возрасте 4-17 лет) подходящий режим может включать в себя введение дозы этанерцепта 0,4-5 мг/кг один или более раз в неделю.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения фармацевтические препараты согласно настоящему изобретению можно изготавливать в виде нерасфасованной массы, устанавливая при этом более высокий уровень компонентов фармацевтической композиции, чем требуется для введения в организм, и соответствующим образом разбавляя их перед введением.
Фармацевтические композиции можно вводить в виде монотерапевтического средства или, если необходимо, в комбинации с дополнительными терапевтическими средствами. В частности, в одном варианте осуществления настоящего изобретения предоставляемые способы лечения и/или предупреждения применяют в комбинации с введением терапевтически эффективного количества другого активного вещества. Другое активное вещество можно вводить ранее, одновременно или после введения фармацевтических композиций согласно настоящему изобретению. Другое активное вещество можно вводить либо в виде части предоставляемой композиции, либо, в качестве альтернативы, в виде отдельного препарата.
Введение предоставляемых фармацевтических композиций может быть выполнено разнообразными путями, включая парентеральное, пероральное, буккальное, сублингвальное, интраназальное, ректальное, внутрибрюшинное, внутрикожное, чрескожное, подкожное, внутривенное, внутриартериальное, внутрисердечное, внутрижелудочковое, внутричерепное, интратрахеальное введение, внутримышечную инъекцию, инъекцию в стекловидное тело и местное применение.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению особенно подходят для парентерального введения, т.е. подкожного, внутримышечного, внутривенного, внутрибрюшинного, интрацереброспинального, внутрисуставного, интрасиновиального, интравитреального и/или интратекального. Парентеральное введение может быть в виде болюсной инъекции или в виде непрерывной инфузии. Фармацевтические композиции для инъекции могут быть представлены в виде единичных дозированных форм (например, в ампулах или в многодозовых контейнерах с добавленным консервантом). В дополнение к этому, недавно был разработан ряд новых приемов доставки лекарственных средств, и фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению подходят для введения с использованием этих новых способов (например, 1и)ес1-еа8е®, Сеи)ес1®, ручки-инжекторы, такие как ОеиРеи®, и безыгольные устройства, такие как МеФ1ес1от® и Вю1ес1от®). Композицию согласно настоящему изобретению можно также адаптировать для способов введения, которые еще только будут разработаны. См. также Ьаидет, 1990, 8с1епсе, 249:1527-1533.
Предоставляемые фармацевтические композиции, кроме того, можно оформить в виде препаратадепо. Такие долгодействующие препараты можно вводить посредством имплантации (например, подкожно или внутримышечно) или посредством внутримышечной инъекции. Так, например, указанные препараты можно модифицировать подходящими полимерными или гидрофобными материалами (например, в виде эмульсии в приемлемом масле) или ионообменными смолами или изготовить их в виде слаборастворимых производных (например, в виде слаборастворимой соли).
Фармацевтические композиции можно, если желательно, представить во флаконе, в некоторой упаковке или в устройстве типа диспенсера, которые могут содержать одну или более единичных дозированных форм, содержащих активный ингредиент. В одном варианте осуществления настоящего изобретения указанное устройство в виде диспенсера может содержать шприц, имеющий единичную дозу жидкого препарата, готового для инъекции. Вместе с этим шприцем может быть инструкция по введению.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение направлено на предоставление некоторого набора (комплекта) или контейнера, которые содержат водную фармацевтическую композицию со- 9 026410 гласно настоящему изобретению. Концентрация полипептида в указанной водной фармацевтической композиции может варьировать в очень широком диапазоне, но обычно в диапазоне от приблизительно 0,05 до приблизительно 20000 мкг/мл водного препарата. Вместе с этим комплектом может быть инструкция по применению.
Настоящее изобретение более конкретно описано в нижеследующих примерах, которые предназначены только для иллюстрации, поскольку квалифицированным специалистам в данной области техники будут очевидны их многие модификации и вариации.
Пример 1. Этанерцепт, стабилизированный сахаром и полиолом.
Препараты этанерцепта, стабилизированные сахаром и полиолом (предпочтительно без аргинина), можно получать и испытывать, используя процедуры, в общем виде описанные ниже.
Каждый твердый компонент препарата отвешивают в количестве, требующемся для данного объема буфера для препарата. Эти компоненты соединяют в стакане или в сосуде, способном вместить и дающем возможность измерить данный объем буфера для препарата. В стакан добавляют деионизированную воду в количестве, равном приблизительно трем четвертям необходимого буфера для препарата, и затем растворяют компоненты. Значение рН буфера доводят до нужного значения рН препарата, используя 1 М гидроксид натрия и/или 1 М хлористо-водородную кислоту. Затем конечный объем буфера для препарата доводят до желаемого объема, добавляя деионизированную воду. Белковый раствор этанерцепта помещают в ячейку для диализа (такую как Тйегто δοίοηΙίΠο ЗИДс-Л-Бу/сг ΜΙΝΙ Όίαίνδίδ Ипй 10000 МХУС’О). где в течение 12 ч при 4°С осуществляют его контакт с необходимым буфером для препарата. Отношение объема буфера для препарата к объему раствора белка должно составлять не менее 1000:1. Диализную ячейку и белковый раствор, содержащийся в ней, затем помещают во второй (такой же, как первый) буфер для препарата на дополнительные 12 ч при 4°С. Белковый раствор, получаемый в результате этого, удаляют из диализной ячейки и с помощью ультрафиолетовой спектроскопии определяют концентрацию белка. Концентрацию белка доводят до желаемого уровня, используя центрифугирование (например, в центрифужных концентраторах Ат1соп ИЙга 10000 МХУС’О Сеп1гДида1 Сопсеп1га1ог8) и/или разбавляя буфером для препарата.
Композиции можно испытывать на долгосрочную стабильность посредством эксклюзионной хроматографии (ЗЕС), денатурирующей ЗЕС (Д8ЕС), гидрофобной хроматографии (Н1С), электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (8Ό8-ΡΑ0Ε), а также испытывать на связывание и биологическую активность в различные моменты времени. Биологическую активность можно измерять любым из хорошо известных аналитических способов.
Например, техника эксклюзионной хроматографии описана в публикации На\уе е! а1., Рйагт. Кек. 2011, 28:23 02 и/или уап Маггксйа1кетеегД е! а1., Еиг. 1. Рйагт. Вюрйагт. 2011, 78:213. Аналогично, методики денатурирующей эксклюзионной хроматографии, гидрофобной хроматографии и электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия также хорошо известны специалистам с обычной квалификацией в данной области техники.
Полагают, что композиция будет стабильной в течение двух лет или более. Композиции, примеры которых приведены ниже, не содержат аргинина.
Препарат Р1:5. _
Ингредиент Концентрация
Этанерцепт (активный ингредиент) 50 мг/мл
Трегалоза (неактивный ингредиент) 4% (масса/объем/)
Маннит (неактивный ингредиент) 2% (масса/объем/)
Препарат 1:10.
Ингредиент Концентрация
Этанерцепт (активный ингредиент) 50 мг/мл
Фосфат натрия, рН 6,32 (неактивный ингредиент) 25 мМ
Сахароза (неактивный ингредиент) 5% (масса/объем)
Маннит (неактивный ингредиент) 2% (масса/объем)
Этанерцепт, стабилизированный сахарозой и сорбитом.
Композиции этанерцепта, стабилизированные комбинацией сахарозы и сорбита, могут быть изготовлены и испытаны с использованием процедур, подобных процедурам, описанным в примере 1А. Препарат, представленный ниже, не содержит аргинина.
- 10 026410
Ингредиент Концентрация
Этанерцепт (активный ингредиент) 5 0 мг/мл
Сахароза (неактивный ингредиент) 4% (масса/объем)
Сорбит (неактивный ингредиент) 2% (масса/объем)
Фосфат натрия, рН б, 3 (неактивный ингредиент) 25 мМ
Так же, как обсуждается в примере 1, указанную композицию можно испытывать на стабильность при длительном хранении и на биоактивность.
Полагают, что указанная композиция будет стабильной в течение двух лет или более.
Пример 2. Получение этанерцепта.
Стадия 1. Выращивание клеток.
Применяя способ, известный в данной области техники, и используя клон клеток СНО, экспрессирующих гибридный белок этанерцепт, осуществляют выращивание клеток, необходимое для получения их числа, достаточного для инокулирования производственного биореактора. Продукт этого процесса выращивания (собранная клеточная культуральная жидкость) представляет собой смесь этанерцепта, обладающего правильной пространственной конфигурацией, и этанерцепта с неправильной пространственной конфигурацией и/или агрегированного этанерцепта, вместе с дополнительными загрязнениями. В собранной клеточной культуральной жидкости, содержащей такую белковую смесь, детергентами инактивируют вирусы.
Стадия 2. Аффинная хроматография.
Аффинную хроматографию проводят с собранной клеточной культурой, полученной на вышеописанной стадии 1, хорошо известным образом применяя обычную аффинную колонку с белком А. Выход продукта составляет приблизительно 85%. Полученный продукт представляет собой сложную белковую смесь, содержащую этанерцепт с правильной пространственной конфигурацией, этанерцепт с неправильной пространственной конфигурацией и/или агрегаты этанерцепта с правильной и/или неправильной конфигурацией или белковые фрагменты. Продукт, полученный на этой стадии очистки после аффинной колонки с белком А, доводят до рН 3,5 и затем в нем инактивируют вирусы. После инактивации вирусов этот продукт доводят до рН 5,5, дополнительно осветляют известным образом, используя капсульный фильтр, полученный коммерческим путем.
Стадия 3А. Катионообменная хроматография смешанного типа.
Для очистки продукта, полученного на вышеописанной стадии 2, используют упакованную хроматографическую колонку СЕ НеаЙНсаге Сар1о ММС объемом 31,8 л (диаметр 45 см, высота слоя 20 см). Перед использованием колонку уравновешивают двумя колоночными объемами (КО) 25 мМ раствора ацетата (рН 5,5), дезинфицируют двумя КО 0,1 Н раствора ЫаОН с 1 М ЫаС1 и нейтрализуют двумя КО 25 мМ раствора ацетата с 0,7 М ЫаС1 (рН 5,5). Затем колонку уравновешивают с 8-10 КО 25 мМ раствора ацетата (рН 5,5) до тех пор, пока значение рН вытекающего раствора не станет равным 5,5 (3,5 мсм/см). Материал, собранный с белка А на вышеописанной Стадии 2, разбавляют до <6 мсм/см водой для инъекций и наносят на колонку, загружая до 15 г/л среды для каждого цикла. Колонка работает при линейной скорости 200 см/ч, давая время пребывания 6 мин. После загрузки колонку промывают двумя КО 25 мМ раствора ацетата (рН 5,5). Затем продукт элюируют, используя 8,5 КО раствора с градиентом от 15% 25 мМ раствора ацетата (рН 5,5) до 85% 25 мМ раствора ацетата с 0,7 М №С1 (рН 5,5). Сбор продукта начинают при 0,15 ед. оптической плотности (А280, длина пути 1,0 см) и заканчивают при 50% максимума пика. Объем элюата составляет приблизительно 5 КО. Остатки продукта и примеси смывают с колонки двумя КО 10 мМ раствора Триса с 1 М ЫаС1 (рН 8,0) и выбрасывают. Продукт, полученный с колонки смешанного типа, фильтруют, используя капсульный фильтр Мййроте Орйеар ХЬ10, 0,22 мкм Эигароге (0,69 м2). Выход продукта на этой стадии соответствует приблизительно 70% материала, снятого с белка А на стадии 2.
Стадия 3В. Анионообменная хроматография смешанного типа.
Для очистки продукта, полученного на вышеописанной стадии 3А, используют упакованную хроматографическую колонку СЕ НеаЙНсаге СарЮ АйНеге объемом 27,0 л (диаметр 45 см, высота слоя 17 см). Перед использованием колонку уравновешивают двумя КО 25 мМ раствора Триса с рН 8,0, дезинфицируют двумя КО 0,1 Н раствора ЫаОН с 1 М ЫаС1, нейтрализуют и уравновешивают двумя КО 25 мМ раствора Триса с рН 8,0. Перед загрузкой продукта колонку уравновешивают тремя КО 10 мМ раствора Триса с рН 8,0. Материал, собранный с СарЮ ММС на вышеописанной стадии 3А, доводят до рН 8,1, добавляя к каждому его килограмму приблизительно 0,045 кг 1 М раствора Триса с рН 8,3. Продукт с вышеописанной стадии 3А разбавляют на линии водой для инъекций в соотношении 1:3,8, доводя его проводимость до 12,0 мСм/см (рН 8,0). Материал, полученный в результате этого, затем наносят на колонку, загружая до 15 г/л среды. Колонка работает при линейной скорости 170 см/ч, давая время пребывания 6 минут. После загрузки колонку промывают двумя КО 25 мМ раствора Триса (рН 8,0). Затем про- 11 026410 дукт элюируют, используя 10 КО раствора с градиентом от 20% 25 мМ раствора Триса (рН 8,0) до 90% 25 мМ раствора Триса с 1 М ЫаС1 (рН 8,0). Сбор продукта начинают при 0,15 ед. оптической плотности (А280, длина пути 1,0 см) и заканчивают при 25% максимума пика. Объем элюата составляет 4-6 КО. Элюированный продукт фильтруют, используя коммерчески доступный капсульный фильтр, а затем известным образом отфильтровывают вирусы и подвергают фильтрованию тангенциальным потоком. Общий выход продукта со стадии 3В (включая конечные стадии вирусной фильтрации и фильтрования тангенциальным потоком) составлял приблизительно 68%. Выход продукта, измеренный до проведения стадий фильтрования, составлял приблизительно 75%. Результаты Н1С, полученные с фракциями, элюированными на этой стадии, схематически представлены на фиг. 12.
Анализ. Конечный профильтрованный продукт, полученный в этом примере, как было найдено, имеет приблизительно более 90 мас.% этанерцепта с правильной пространственной конфигурацией (как определено посредством Н1С), менее 5 мас.% форм этанерцепта с неправильной пространственной конфигурацией (как определено посредством Н1С), приблизительно менее 3 мас.% расщепленного материала (по данным Н1С-анализа) (полагают, что это фрагменты этанерцепта, в которых отсечен участок ΤΝΡΚ), и общее количество этанерцепта с правильной и неправильной пространственной конфигурацией превышает 95 мас.% (как определено посредством эксклюзионной хроматографии).
Анализ препаратов этанерцепта.
A. Термостабильность при хранении.
После диализа и концентрирования образцы препаратов этанерцепта, примеры которых описаны выше, стерильно фильтровали в боксе биологической безопасности. Используя стерилизованные пипетки и автоклавированные наконечники пипеток, образцы препаратов этанерцепта переносили в помеченные и автоклавированные лиофилизационные флаконы объемом 1 мл. Флаконы закупоривали стерильными пробками из бутилкаучука и обжимали алюминиевыми колпачками. Все флаконы затем переносили в термостатируемые шкафы. Образцы подвергали двум режимам проверки термической стабильности: (1) две недели при 40°С и (2) четыре недели при 25°С. Во всем тексте настоящего описания эти два температурных режима обозначены как Т2 и Т4 соответственно.
B. Эксклюзионная хроматография (8ЕС).
Препараты этанерцепта, раскрытые в настоящем документе, анализировали, применяя хорошо известную технику эксклюзионной хроматографии (8ЕС) - методику высокоэффективной жидкостной хроматографии, в которой анализируемые компоненты разделяют по размеру (см. Кодиег, М. (2000). δί/с Ехс1икюи СЬготаФдгарЬу. Рго1еш Пдшб СЬготаФдгарЬу. М. КакШег. Атк1егбат, Е1ке\аег. 61:89-145.). Чтобы оценить термостабильность образцов этанерцепта, описанных выше, эти образцы исследовали по методике 8ЕС, основанной на литературных данных (уаи МаагксЬа1кегоеегб, А., О. 1. \Уо1Ыпк. е1 а1. (2011). Сотрапкои о! апа1уйса1 теОюбк 1о Ие1ес1 1П81аЫ1йу о! еНиегсер! бигшд 1Ьегта1 к!гекк 1екбид Еигореап 1оигиа1 о! РЬагтасеибск аиб Вюркагтасеибск 78(2):213-221). Готовили буфер подвижной фазы, содержащий 50 мМ моногидрата однозамещенного фосфата натрия и 150 мМ аргинина. Значение рН доводили до 6,5, добавляя 1 М НС1. Все разделения проводили, используя предохранительную колонку ТокоЬ Т8К-Ое1 8^x1 размером 6 ммх4 см (кат. № 8543), линейно присоединенную к колонке ТокоЬ Т8К-Ое1 04000 8^x1 размером 7,8 ммх30 см (кат. № 8542). Для проведения разделения колонки при комнатной температуре (23°С) уравновешивали с подвижной фазой при скорости потока 0,5 мл/мин. Используя автосэмплер, на колонку инъецировали 5 мкл препарата этанерцепта с концентрацией 50 мг/мл. Разделение осуществлялось в течение 30 мин при скорости потока 0,5 мл/мин. В течение этого времени элюент с колонки мониторировали при длине волны 280 нм.
C. Интегрирование хроматограмм эксклюзионной хроматографии.
Все процедуры интегрирования проводили, используя программу СЬготе1еои (Июиех). Перед интегрированием из всех хроматограмм вычитали 8ЕС-хроматограмму для буфера, не содержащего этанерцепта. Все интегрирование проводили в интервале времени удерживания 12-26 мин. Для определения пика использовали несколько параметров. Минимум площади детектируемого пика был установлен при 0,05 мАи-мин. Двухмерную чувствительность для детектирования пика устанавливали при 0,01 мАи и 75 с. Плечи пиков добавляли вручную, используя инструмент ручного интегрирования. Ручную доводку всех детектированных пиков осуществляли в две стадии.
Во-первых, базовые линии пиков (нижние границы пиков) выравнивали по горизонтали. Во-вторых, положения базовых линий пиков по вертикали смещали к уровню базовой линии хроматограммы. Базовую линию хроматограммы определяли как величину сигнала в отсутствие анализируемого вещества. Сигнал в отсутствие анализируемого вещества определяли как оптическую плотность (в мАи), зарегистрированную при времени удерживания 12 мин.
И. 8ЕС-фракции препаратов этанерцепта.
При 8ЕС-анализе препаратов этанерцепта, описанных выше, были идентифицированы и изучены три 8ЕС-хроматографические фракции. Проанализированные фракции были следующими (в порядке элюции с 8ЕС-колонки): (1) фракция с большой молекулярной массой, представляющая собой агрегаты интактного гибридного белка этанерцепта (ΤΝΡΚ:ΡΟ), вероятно, образованные посредством нековалент- 12 026410 ного электростатического взаимного притяжения молекул интактного этанерцепта (далее в настоящем документе они упоминаются просто как агрегат(ы) или в выражении содержание агрегата(ов)); (2) фракция мономера, представляющая собой интактный гибридный белок этанерцепта (Т№К:РС) (далее в настоящем документе эта фракция упоминаются просто как мономер или в выражении содержание мономера); (3) фракция, по-видимому, представляющая собой один фрагмент или популяцию фрагментов молекул этанерцепта, в которых одна часть гибридного белка ΤΝΡΚ с другой молекулой отщеплена от мономера с утратой участка РаЬ-фрагмента гибридного белка в шарнирной части молекулы. Наиболее многочисленные виды фрагментов или расщепленных форм, измеряемые посредством 8ЕС, обозначены как фрагмент 3. При проведении 8ЕС-анализа элюция агрегатов наблюдается первой, за ними следует мономер, после него фрагмент 3.
Нижеследующие таблицы показывают относительные количества агрегатов, мономера и фрагмента 3, определенные посредством 8ЕС-анализа, как описано выше.
Примечание: количества, указанные в табл. I, II и III, даны в процентах по массе.
Т0 - препарат, содержавшийся при 5°С и проанализированный не позднее 24 ч после изготовления. Т1 - препарат, хранившийся в течение одной недели при 40°С.
Т2 - препарат, хранившийся в течение двух недель при 40°С.
Таблица I
8ЕС-анализ мономера
Препарат № Ьх с2
Коммерческий Энбрел (сравнительный) [1:2] 98,81 92,58 87, 64
1:5 98,38 91, 65 86, 89
1:10 98,25 91, 84 84,51
Таблица II
8ЕС-анализ агрегатов
Препарат № ^2
Коммерч е с кий Энбрел (сравнительный) 0,09 0,59 1,02
1:5 0,23 0, 63 1,01
1:10 0,26 0, 68 0,82
Таблица III
Анализ фрагмента 3
Препарат № Ъо Ьх Ьг
Коммерческий Энбрел (сравнительный) 0, 00 3, 30 6,29
1: 5 0, 00 4, 43 6, 64
1:10 0, 00 3, 78 8,04
ШС-анализ препаратов этанерцепта.
ШС-хроматографию можно проводить по методике, известной в данной области техники и в общем виде описанной в патенте США 7294481, включенном в настоящий документ посредством ссылки. Образцы оценивали при 1о (не позднее 24 ч после изготовления при 5°С) и еще раз либо после двух недель хранения при 25°С (12), либо после 4 недель хранения при 25°С. Как полагают, пик 1 на ШСхроматограмме представляет собой или включает в себя фрагмент 3, который идентифицирован и количественно определен с использованием 8ЕС, как указано выше при обсуждении данных 8ЕС; пик 2 представляет собой мономер этанерцепта, как указано выше при обсуждении данных 8ЕС; а пик 3 включает в себя агрегат(ы), как указано выше при обсуждении данных 8ЕС. Кроме того, следует понимать, что термины пик 1, пик 2 и пик 3, используемые в настоящем документе, также относятся и к ШСпику 1, пику 2 и пику 3, рассмотренным и раскрытым на фиг. 4 патента США 7294481, включенного в настоящий документ посредством ссылки.
Из анализа настоящей спецификации и практики применения настоящего изобретения, раскрытой в настоящем документе, квалифицированным специалистам в данной области будут очевидны и другие варианты его осуществления. Настоящая спецификация и примеры предназначены только для рассмотрения в качестве иллюстраций, а истинный объем и сущность настоящего изобретения указаны в нижеследующих пунктах формулы изобретения.

Claims (6)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Стабильная водная фармацевтическая композиция, содержащая 25-75 мг/мл этанерцепта в комбинации со стабилизатором для уменьшения нестабильности, агрегационного нарушения пространственной конфигурации и/или фрагментирования этанерцепта при хранении препарата, причем указанный стабилизатор состоит из 1-10 мас.% сахара, 1-30 мМ фосфата натрия и до 10 мас.% полиола, где указанная композиция свободна от аргинина.
  2. 2. Композиция по п.1, проявляющая повышенную стабильность при длительном хранении, характеризующаяся согласно 8ЕС-анализу при Т2 тем, что содержание мономера превышает 90%, содержание агрегатов составляет менее 3 мас.%, а содержание фрагмента 3 составляет менее 5 мас.%.
  3. 3. Композиция по п.1, содержащая 25-75 мг/мл этанерцепта, 1-10 мас.% сахарозы, трегалозы или декстрозы, до 10 мас.% маннита или сорбита, 1-30 мМ фосфата натрия, причем указанная композиция имеет ρΗ 6,0-6,6, где указанная композиция характеризуется §ЕС-анализом при Т2, согласно которому содержание мономера превышает 80 мас.%, содержание агрегатов составляет менее 3 мас.%, а содержание фрагмента 3 составляет менее 10 мас.%.
  4. 4. Композиция по п.3, вызывающая повышение стабильности при длительном хранении, характеризующаяся тем, что согласно 8ЕС-анализу при Т2 содержание мономера превышает 90 мас.%, а содержание агрегата (агрегатов) составляет менее 3 мас.%.
  5. 5. Композиция по п.2, содержащая 50 мг/мл этанерцепта, 1-5 мас.% сахарозы, трегалозы или декстрозы, 1-2 мас.% маннита или сорбита, 10-30 мМ фосфата натрия, причем указанная композиция имеет ρΗ 6,3-6,5.
  6. 6. Композиция по п.2, в 1 мл которой при Т2 имеется в среднем не более чем 10000 частиц, не видимых невооруженным глазом и имеющих размер более 5 мкм.
EA201490801A 2011-10-18 2012-10-18 Композиции этанерцепта, стабилизированные комбинациями сахаров и полиолов EA026410B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161548518P 2011-10-18 2011-10-18
US201261669480P 2012-07-09 2012-07-09
PCT/US2012/060748 WO2013059412A1 (en) 2011-10-18 2012-10-18 Etanercept formulations stabilized with combinations of sugars and polyols

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201490801A1 EA201490801A1 (ru) 2014-09-30
EA026410B1 true EA026410B1 (ru) 2017-04-28

Family

ID=48136153

Family Applications (6)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201490801A EA026410B1 (ru) 2011-10-18 2012-10-18 Композиции этанерцепта, стабилизированные комбинациями сахаров и полиолов
EA201490803A EA027325B1 (ru) 2011-10-18 2012-10-18 Составы этанерцепта, стабилизированные ксилитом
EA201490802A EA028520B1 (ru) 2011-10-18 2012-10-18 Препараты этанерцепта, стабилизированные меглюмином
EA201490815A EA025267B1 (ru) 2011-10-18 2012-10-18 Водная фармацевтическая композиция этанерцепта, стабилизированная глутаматом
EA201490817A EA025663B1 (ru) 2011-10-18 2012-10-18 Композиции этанерцепта, стабилизированные ионами металлов
EA201490804A EA201490804A1 (ru) 2011-10-18 2012-10-18 Препараты этанерцепта, стабилизированные хлоридом натрия

Family Applications After (5)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201490803A EA027325B1 (ru) 2011-10-18 2012-10-18 Составы этанерцепта, стабилизированные ксилитом
EA201490802A EA028520B1 (ru) 2011-10-18 2012-10-18 Препараты этанерцепта, стабилизированные меглюмином
EA201490815A EA025267B1 (ru) 2011-10-18 2012-10-18 Водная фармацевтическая композиция этанерцепта, стабилизированная глутаматом
EA201490817A EA025663B1 (ru) 2011-10-18 2012-10-18 Композиции этанерцепта, стабилизированные ионами металлов
EA201490804A EA201490804A1 (ru) 2011-10-18 2012-10-18 Препараты этанерцепта, стабилизированные хлоридом натрия

Country Status (27)

Country Link
US (21) US10293049B2 (ru)
EP (6) EP2768533A4 (ru)
JP (6) JP6110393B2 (ru)
KR (7) KR20140091705A (ru)
CN (6) CN104010657A (ru)
AR (6) AR088381A1 (ru)
AU (6) AU2012326084B2 (ru)
BR (6) BR112014009087A2 (ru)
CA (6) CA2851646A1 (ru)
CY (1) CY1121843T1 (ru)
DK (1) DK2768525T3 (ru)
EA (6) EA026410B1 (ru)
ES (1) ES2734070T3 (ru)
HK (6) HK1200719A1 (ru)
HR (1) HRP20191215T1 (ru)
HU (1) HUE045624T2 (ru)
IL (6) IL231826A0 (ru)
IN (3) IN2014CN02591A (ru)
LT (1) LT2768525T (ru)
MX (7) MX367054B (ru)
PL (1) PL2768525T3 (ru)
PT (1) PT2768525T (ru)
RS (1) RS59179B1 (ru)
SG (6) SG11201401562RA (ru)
SI (1) SI2768525T1 (ru)
TW (6) TWI619504B (ru)
WO (6) WO2013059408A1 (ru)

Families Citing this family (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2610839C (en) 2005-06-14 2019-06-25 Amgen Inc. Self-buffering protein formulations
US10493151B2 (en) 2011-10-18 2019-12-03 Coherus Biosciences, Inc. Etanercept formulations stabilized with sodium chloride
SG11201401562RA (en) 2011-10-18 2014-09-26 Coherus Biosciences Inc Etanercept formulations stabilized with sodium chloride
BR112015000203A2 (pt) * 2012-07-09 2017-06-27 Coherus Biosciences Inc formulações de etanercept que exibem redução marcada em partículas sub-visíveis
SG11201501460RA (en) 2012-09-11 2015-04-29 Coherus Biosciences Inc Correctly folded etanercept in high purity and excellent yield
AU2014261477A1 (en) * 2013-05-02 2015-11-19 Mabxience, S.A. Alternative formulations for TNFR: Fc fusion polypeptides
WO2015056613A1 (ja) * 2013-10-15 2015-04-23 Ｍｅｉｊｉ Ｓｅｉｋａファルマ株式会社 安定化されたポリペプチド水性製剤
AU2014339984B2 (en) * 2013-10-24 2020-04-09 Astrazeneca Ab Stable, aqueous antibody formulations
AU2014354384B2 (en) * 2013-11-29 2018-11-08 Ares Trading S.A. A liquid formulation of a fusion protein comprising TNFR and Fc region
IS3008B (is) * 2014-05-14 2018-12-15 Calor ehf Stöðgandi lausnir fyrir prótín og peptíð
US20160074515A1 (en) 2014-06-20 2016-03-17 Reform Biologics, Llc Viscosity-reducing excipient compounds for protein formulations
US10478498B2 (en) 2014-06-20 2019-11-19 Reform Biologics, Llc Excipient compounds for biopolymer formulations
US11357857B2 (en) 2014-06-20 2022-06-14 Comera Life Sciences, Inc. Excipient compounds for protein processing
WO2016080367A1 (ja) * 2014-11-18 2016-05-26 塩野義製薬株式会社 安定化されたペプチド組成物
CA2970577A1 (en) * 2014-12-22 2016-06-30 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical composition
US20180256717A1 (en) * 2014-12-23 2018-09-13 Drug Discovery Laboratory As Protein compositions and use thereof
EP3241849A4 (en) * 2014-12-31 2018-06-20 LG Chem, Ltd. Method for producing tnfr-fc fusion protein containing target content of impurities
CN104694355B (zh) * 2015-03-20 2016-09-28 吉林大学 葛根护肝保健酒及其制备方法
MX2015010517A (es) * 2015-08-13 2017-02-13 Landsteiner Scient S A De C V Composicion de estabilidad mejorada de etanercept.
JP5938762B1 (ja) * 2015-09-01 2016-06-22 日揮株式会社 マイクロカプセル製剤及びその製造方法
CN105748414A (zh) * 2016-03-02 2016-07-13 张光泉 抗感染米卡芬净冻干组合物及其制备方法
JPWO2017179683A1 (ja) * 2016-04-15 2019-02-21 Ｍｅｉｊｉ Ｓｅｉｋａファルマ株式会社 ミカファンギンの安定化された医薬組成物
MX2019004580A (es) * 2016-10-21 2019-08-12 Amgen Inc Formulaciones farmaceuticas y metodos para prepararlas.
EP3533441A4 (en) * 2016-10-28 2019-12-04 Celltrion Inc. STABLE PHARMACEUTICAL FORMULATION
MX2017013995A (es) * 2017-10-31 2019-05-01 Probiomed S A De C V Formulacion farmaceutica estable de una proteina de fusion.
JP2021504482A (ja) * 2017-11-30 2021-02-15 バイオ−テラ ソリュ−ションズ，エルティーディー． Ｉｌ‐６関連疾患を治療するためのヒト化抗体の液体製剤
US20200390693A1 (en) * 2017-12-22 2020-12-17 Samsung Bioepis Co., Ltd. Liquid composition comprising vegf antagonist
US11253569B2 (en) 2018-05-03 2022-02-22 Seattle Children's Hospital Methods of treating Kawasaki Disease
CN111228225B (zh) * 2018-11-28 2022-08-26 鲁南制药集团股份有限公司 一种重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白冻干制剂
GB201911461D0 (en) 2019-08-09 2019-09-25 Arecor Ltd Novel composition
JP2023502777A (ja) * 2019-11-26 2023-01-25 コメラ ライフ サイエンシズ，インコーポレイテッド バイオポリマー製剤のための賦形剤化合物
AU2022223669A1 (en) 2021-02-17 2023-08-03 Arecor Limited Aqueous composition of an engineered protein construct comprising an fc domain
CN114788809B (zh) * 2022-01-25 2023-04-14 江苏广承药业有限公司 一种氯雷他定液体制剂

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030180287A1 (en) * 2002-02-27 2003-09-25 Immunex Corporation Polypeptide formulation

Family Cites Families (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5605690A (en) 1989-09-05 1997-02-25 Immunex Corporation Methods of lowering active TNF-α levels in mammals using tumor necrosis factor receptor
IT1240314B (it) 1989-09-28 1993-12-07 Immunobiology Research Institutes, Inc. Formulazioni acquose stabilizzate di piccoli peptidi.
AU670125B2 (en) 1992-09-15 1996-07-04 Immunex Corporation Method of treating tnf-dependent inflammation using tumor necrosis factor antagonists
US5580856A (en) 1994-07-15 1996-12-03 Prestrelski; Steven J. Formulation of a reconstituted protein, and method and kit for the production thereof
US5656730A (en) 1995-04-07 1997-08-12 Enzon, Inc. Stabilized monomeric protein compositions
EP0852951A1 (de) 1996-11-19 1998-07-15 Roche Diagnostics GmbH Stabile lyophilisierte pharmazeutische Zubereitungen von mono- oder polyklonalen Antikörpern
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
US7294481B1 (en) * 1999-01-05 2007-11-13 Immunex Corporation Method for producing recombinant proteins
US6677326B2 (en) * 1999-03-15 2004-01-13 Arakis, Ltd. Corticosteroid formulation comprising less than 2.5 mg prednisolone for once daily administration
US20010021380A1 (en) 1999-04-19 2001-09-13 Pluenneke John D. Soluble tumor necrosis factor receptor treatment of medical disorders
EP1171148A2 (en) 1999-04-19 2002-01-16 Immunex Corporation Soluble tumor necrosis factor receptor treatment of medical desorders
US20040220103A1 (en) 1999-04-19 2004-11-04 Immunex Corporation Soluble tumor necrosis factor receptor treatment of medical disorders
CN1406132A (zh) 2000-02-10 2003-03-26 惠氏公司 处理或抑制细胞损伤或细胞死亡的方法
ES2477996T3 (es) 2000-08-11 2014-07-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Preparaciones estabilizadas que contienen un anticuerpo
US6936437B2 (en) * 2001-02-23 2005-08-30 Lucia Irene Gonzalez-Villasenor Methods and compositions for production of recombinant peptides
ES2304602T3 (es) * 2003-02-28 2008-10-16 Ares Trading S.A. Formulaciones liquidas de la proteina de union al factor de necrosis tumoral tbp-1.
JPWO2004082715A1 (ja) 2003-03-20 2006-06-22 エーザイ株式会社 炎症性腸疾患治療剤としての併用医薬
US7276477B2 (en) * 2003-08-01 2007-10-02 Amgen Inc. Crystals of etanercept and methods of making thereof
WO2005037214A2 (en) 2003-10-14 2005-04-28 Intermune, Inc. Macrocyclic carboxylic acids and acylsulfonamides as inhibitors of hcv replication
WO2005082377A1 (ja) 2004-03-01 2005-09-09 Ajinomoto Co., Inc. 抗ヒトTNF-α抗体活性低下抑制剤
WO2005095578A1 (en) 2004-03-05 2005-10-13 Dsm Ip Assets B.V. Process for cell culturing by continuous perfusion and alternating tangential flow
US20070196364A1 (en) 2004-07-27 2007-08-23 Human Genome Sciences, Inc. Pharmaceutical Formulation and Process
US7597884B2 (en) * 2004-08-09 2009-10-06 Alios Biopharma, Inc. Hyperglycosylated polypeptide variants and methods of use
US7300773B2 (en) 2004-08-27 2007-11-27 Wyeth Research Ireland Limited Production of TNFR-Ig
AU2006244014B2 (en) 2005-05-10 2011-03-17 Biogen Ma Inc. Treating and evaluating inflammatory disorders
KR101367544B1 (ko) 2005-06-10 2014-02-26 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 메글루민을 함유하는 단백질 제제의 안정화제, 및 그의이용
CA2610839C (en) * 2005-06-14 2019-06-25 Amgen Inc. Self-buffering protein formulations
PT1962886E (pt) 2005-12-20 2014-01-07 Bristol Myers Squibb Co Formulações de proteína estáveis
BRPI0620316A2 (pt) 2005-12-21 2011-11-08 Wyeth Corp formulações de proteìnas com viscosidades reduzida e seus usos
US20080071063A1 (en) 2006-02-03 2008-03-20 Medimmune, Inc. Protein Formulations
JP5374359B2 (ja) * 2006-03-17 2013-12-25 バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド 安定化されたポリペプチド化合物
US20100016677A1 (en) 2006-03-21 2010-01-21 Eugen Oetringer Devices for and Methods of Analyzing a Physiological Condition of a Physiological Subject Based on A Workload Related Property
CA2649538C (en) 2006-04-21 2014-06-03 Yatin Gokarn Buffering agents for biopharmaceutical formulations
AU2007321877B2 (en) * 2006-08-01 2011-11-03 Kineta Two, Llc Pharmaceutical manufacturing methods
AU2007307107B2 (en) * 2006-10-06 2011-11-03 Amgen Inc. Stable antibody formulations
EP2094247B1 (en) * 2006-10-20 2022-06-29 Amgen Inc. Stable polypeptide formulations
CA2666317C (en) 2006-11-03 2013-08-06 Wyeth Glycolysis-inhibiting substances in cell culture
MX2009006594A (es) 2006-12-21 2009-08-12 Amgen Inc Formulaciones de ph regulado y estables que contienen polipeptidos.
US9012180B2 (en) 2007-03-02 2015-04-21 Wyeth Llc Use of copper and glutamate in cell culture for production of polypeptides
EP2014760A1 (en) 2007-06-13 2009-01-14 CMC Biopharmaceuticals A/S A method for producing a biopolymer (e.g. polypeptide) in a continuous fermentation process
LT2170390T (lt) 2007-06-14 2019-01-10 Biogen Ma Inc. Natalizumabo antikūnų kompozicijos
KR20150080038A (ko) 2007-11-30 2015-07-08 애브비 바이오테크놀로지 리미티드 단백질 제형 및 이의 제조방법
CA2711984A1 (en) * 2008-01-15 2009-07-23 Abbott Gmbh & Co. Kg Powdered protein compositions and methods of making same
MX2010009398A (es) 2008-02-29 2010-11-12 Biogen Idec Inc Proteinas de fusion de inmunoglobulinas purificadas y los metodos para su purificacion.
WO2011015926A1 (en) 2009-08-03 2011-02-10 Avesthagen Limited A process of fermentation, purification and production of recombinant soluble tumour necrosis factor alfa receptor (tnfr) - human igg fc fusion protein
PT2464725T (pt) 2009-08-11 2020-05-21 Hoffmann La Roche Produção de proteínas em meios de cultura celular isentos de glutamina
WO2011049798A1 (en) 2009-10-20 2011-04-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Use of mixed mode chromatography for the capture and purification of basic antibody products
WO2011079308A2 (en) * 2009-12-23 2011-06-30 Emergent Product Development Seattle, Llc Compositions comprising tnf-alpha and il-6 antagonists and methods of use thereof
WO2011134920A1 (en) 2010-04-26 2011-11-03 Novartis Ag Improved cell culture medium
EP2568960B1 (en) * 2010-05-10 2018-06-06 Intas Pharmaceuticals Ltd. Liquid formulation of polypeptides containing an fc domain of an immunoglobulin
US20130209465A1 (en) * 2010-07-30 2013-08-15 Arecor Ltd. Stabilized Aqueous Antibody Compositions
JP2013535981A (ja) 2010-08-20 2013-09-19 ワイス・エルエルシー 成長因子不含適合細胞の細胞培養
CN103097516B (zh) 2010-08-31 2015-09-09 菲仕兰品牌公司 真核细胞培养基
EP2627425A4 (en) 2010-10-11 2014-11-05 Abbvie Inc METHODS OF PURIFYING PROTEINS
EP2699265B1 (en) 2011-04-20 2019-10-16 Sandoz AG STABLE PHARMACEUTICAL LIQUID FORMULATIONS OF THE FUSION PROTEIN TNFR:Fc
UY34105A (es) 2011-06-03 2012-07-31 Lg Life Sciences Ltd Formulación líquida estable de etanercept
CA2840626A1 (en) 2011-06-29 2013-01-03 Insite Vision Incorporated Methods of treating recurrent meibomian glands disorder and thereby decreasing the frequency of recurrence
CN103930124B (zh) * 2011-07-01 2021-05-11 生物基因Ma公司 无精氨酸的tnfr：fc-融合多肽组合物及使用方法
BR112013033730B1 (pt) 2011-07-01 2022-01-25 Amgen Inc Método para cultivar células de mamíferos expressando proteína recombinante
US9781540B2 (en) * 2011-07-07 2017-10-03 Qualcomm Incorporated Application relevance determination based on social context
CN103814044A (zh) 2011-07-08 2014-05-21 默沙东公司 纯化fc-融合蛋白的方法
EP2753634B1 (en) 2011-08-17 2017-11-01 Ares Trading S.A. Method for preparing active form of tnfr-fc fusion protein
SG11201401562RA (en) * 2011-10-18 2014-09-26 Coherus Biosciences Inc Etanercept formulations stabilized with sodium chloride
SG11201501460RA (en) 2012-09-11 2015-04-29 Coherus Biosciences Inc Correctly folded etanercept in high purity and excellent yield

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030180287A1 (en) * 2002-02-27 2003-09-25 Immunex Corporation Polypeptide formulation

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Methods for characterization of size-exclusion chromatography media for preparative purification of DNA restriction fragments. Article [online]. Springer Link. 2012 [retrieved on 2012-12-03]. Retrieved from the internet: <URL:http://link.springer.com/article/10.1023%2FA%3A1008932407733?LI=true> entire document *

Also Published As

Publication number Publication date
CA2851635A1 (en) 2013-04-25
CN104010654A (zh) 2014-08-27
TWI619504B (zh) 2018-04-01
EA025267B1 (ru) 2016-12-30
EP2768531A4 (en) 2015-03-11
BR112014009031A2 (pt) 2017-05-09
JP2014530864A (ja) 2014-11-20
EA201490817A1 (ru) 2014-09-30
EP2768525A4 (en) 2015-07-15
CN104011073B (zh) 2017-08-25
CN103998060B (zh) 2016-12-21
JP6113176B2 (ja) 2017-04-12
IL231825A0 (en) 2014-05-28
US20190216930A1 (en) 2019-07-18
US11129876B2 (en) 2021-09-28
JP6199298B2 (ja) 2017-09-20
US9943601B2 (en) 2018-04-17
MX2014004725A (es) 2015-02-05
AU2012326080A1 (en) 2014-04-24
EP2768535A1 (en) 2014-08-27
US20190290768A1 (en) 2019-09-26
PT2768525T (pt) 2019-07-17
AU2012326084B2 (en) 2016-12-15
KR20140091707A (ko) 2014-07-22
WO2013059408A1 (en) 2013-04-25
JP2014530254A (ja) 2014-11-17
TW201325607A (zh) 2013-07-01
CY1121843T1 (el) 2020-07-31
IN2014CN02527A (ru) 2015-06-26
AR088381A1 (es) 2014-05-28
HK1200721A1 (en) 2015-08-14
CA2851639A1 (en) 2013-04-25
WO2013059407A1 (en) 2013-04-25
AU2012326082A1 (en) 2014-04-24
AU2012326170A1 (en) 2014-04-24
AR088460A1 (es) 2014-06-11
EA201490804A1 (ru) 2014-09-30
HK1200722A1 (en) 2015-08-14
CN104010658A (zh) 2014-08-27
EP2768532A4 (en) 2015-03-11
AU2012326171A1 (en) 2014-04-24
MX2014004732A (es) 2015-05-15
US20180125982A1 (en) 2018-05-10
US20190298837A1 (en) 2019-10-03
KR20140091706A (ko) 2014-07-22
JP2014530256A (ja) 2014-11-17
SG11201401562RA (en) 2014-09-26
JP6110393B2 (ja) 2017-04-05
KR20140079491A (ko) 2014-06-26
SG11201401576WA (en) 2014-10-30
US20200405865A1 (en) 2020-12-31
EA027325B1 (ru) 2017-07-31
TW201325609A (zh) 2013-07-01
US20130101640A1 (en) 2013-04-25
US10213508B2 (en) 2019-02-26
MX367054B (es) 2019-08-02
AR088379A1 (es) 2014-05-28
US10888619B2 (en) 2021-01-12
AU2012326168A1 (en) 2014-04-24
CN103998061A (zh) 2014-08-20
JP6104922B2 (ja) 2017-03-29
MX2014004728A (es) 2015-05-15
BR112014009073A2 (pt) 2017-05-09
US20180028668A1 (en) 2018-02-01
IL231827A0 (en) 2014-05-28
AR088383A1 (es) 2014-05-28
US20190328875A1 (en) 2019-10-31
WO2013059405A1 (en) 2013-04-25
US20130108632A1 (en) 2013-05-02
US9770510B2 (en) 2017-09-26
MX2014004733A (es) 2015-05-15
EP2768854A1 (en) 2014-08-27
AU2012326080B2 (en) 2017-02-16
EP2768854A4 (en) 2015-03-11
US20160199489A1 (en) 2016-07-14
EA201490802A1 (ru) 2014-08-29
MX2019009176A (es) 2019-10-07
BR112014009146A8 (pt) 2017-06-20
US20190314499A1 (en) 2019-10-17
WO2013059412A1 (en) 2013-04-25
EA201490815A1 (ru) 2014-09-30
IL231824A0 (en) 2014-05-28
SG11201401563SA (en) 2014-09-26
WO2013059406A1 (en) 2013-04-25
RS59179B1 (sr) 2019-10-31
HRP20191215T1 (hr) 2019-10-04
HUE045624T2 (hu) 2020-01-28
WO2013059410A1 (en) 2013-04-25
AU2012326171B2 (en) 2017-03-09
KR102068462B1 (ko) 2020-01-22
US20190184017A1 (en) 2019-06-20
CA2851646A1 (en) 2013-04-25
AU2012326168B2 (en) 2016-12-15
US20160317667A1 (en) 2016-11-03
BR112014009087A2 (pt) 2017-04-18
PL2768525T3 (pl) 2019-10-31
TW201325606A (zh) 2013-07-01
CA2851628A1 (en) 2013-04-25
EP2768533A4 (en) 2015-03-11
MX2014004726A (es) 2015-05-15
US20180193463A1 (en) 2018-07-12
SI2768525T1 (sl) 2019-10-30
AU2012326170B2 (en) 2016-12-22
TWI595883B (zh) 2017-08-21
EP2768525A1 (en) 2014-08-27
EP2768535A4 (en) 2015-03-11
TW201325611A (zh) 2013-07-01
BR112014009131A8 (pt) 2017-06-20
HK1200720A1 (en) 2015-08-14
CA2851651A1 (en) 2013-04-25
BR112014009146A2 (pt) 2017-06-13
EP2768525B1 (en) 2019-06-19
US20130101584A1 (en) 2013-04-25
CN104010657A (zh) 2014-08-27
US20190290766A1 (en) 2019-09-26
IL231828A0 (en) 2014-05-28
US20190290765A1 (en) 2019-09-26
JP2014530255A (ja) 2014-11-17
LT2768525T (lt) 2019-09-25
SG11201401519RA (en) 2014-07-30
MX2014004734A (es) 2015-05-15
AU2012326084A1 (en) 2014-04-17
TW201325608A (zh) 2013-07-01
US10376588B2 (en) 2019-08-13
JP6220789B2 (ja) 2017-10-25
DK2768525T3 (da) 2019-07-22
US20190314498A1 (en) 2019-10-17
AR088382A1 (es) 2014-05-28
US11135267B2 (en) 2021-10-05
SG11201401517VA (en) 2014-09-26
BR112014009131A2 (pt) 2017-06-13
EA201490803A1 (ru) 2014-09-30
CA2851642A1 (en) 2013-04-25
US20190314500A1 (en) 2019-10-17
BR112014009022A2 (pt) 2017-05-02
EP2768531A1 (en) 2014-08-27
TWI644681B (zh) 2018-12-21
HK1200851A1 (en) 2015-08-14
EA025663B1 (ru) 2017-01-30
JP2014530863A (ja) 2014-11-20
CN104011073A (zh) 2014-08-27
EA028520B1 (ru) 2017-11-30
US10772963B2 (en) 2020-09-15
US10980884B2 (en) 2021-04-20
IL231826A0 (en) 2014-05-28
US20130108633A1 (en) 2013-05-02
US20190290767A1 (en) 2019-09-26
US9801942B2 (en) 2017-10-31
KR102163150B1 (ko) 2020-10-08
IL231829A0 (en) 2014-05-28
CA2851639C (en) 2020-12-29
AR088380A1 (es) 2014-05-28
US9302002B2 (en) 2016-04-05
EA201490801A1 (ru) 2014-09-30
KR20200008021A (ko) 2020-01-22
ES2734070T3 (es) 2019-12-04
CN103998060A (zh) 2014-08-20
EP2768532A1 (en) 2014-08-27
CN104010654B (zh) 2017-10-27
US10980885B2 (en) 2021-04-20
SG11201401567YA (en) 2014-07-30
KR20140091705A (ko) 2014-07-22
KR20140083037A (ko) 2014-07-03
US10293049B2 (en) 2019-05-21
US9393305B2 (en) 2016-07-19
EP2768533A1 (en) 2014-08-27
AU2012326082B2 (en) 2016-12-15
IN2014CN02592A (ru) 2015-09-04
HK1200719A1 (en) 2015-08-14
IN2014CN02591A (ru) 2015-06-26
JP6220788B2 (ja) 2017-10-25
HK1200718A1 (en) 2015-08-14
TW201325610A (zh) 2013-07-01
JP2014530862A (ja) 2014-11-20
KR20140097184A (ko) 2014-08-06
US10987405B2 (en) 2021-04-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10980885B2 (en) Method of reducing formation of etanercept aggregates or fragments
US11000588B2 (en) Etanercept formulations stabilized with sodium chloride

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU